KR20130099058A

KR20130099058A - 파울로우닌 및/또는 파울로우니아 추출물을 포함하는 조성물 및 이의 용도

Info

Publication number: KR20130099058A
Application number: KR1020137006879A
Authority: KR
Inventors: 시마르나 카우르; 충 진 로이; 칼리드 마흐무드; 클로드 살리우; 마이클 사우솔
Original assignee: 존슨 앤드 존슨 컨수머 캄파니즈, 인코포레이티드
Priority date: 2010-08-19
Filing date: 2011-08-17
Publication date: 2013-09-05
Also published as: AU2011292076A1; CN103260706A; ES2573792T3; WO2012024392A3; CA2808197A1; RU2013112010A; WO2012024394A3; WO2012024403A2; HK1186680A1; WO2012024399A2; AU2011292069B2; RU2013112013A; AU2011292069A1; CA2808195A1; CN103260706B; EP2605748B1; AU2011292071B2; MX2013001979A; RU2571075C2; CA2807782A1

Abstract

파울로우니아(Paulownia) 속의 소정의 종으로부터의 식물 추출물을 포함하는 조성물, 이를 이용한 피부의 라이트닝(lightening) 방법 및 이의 다른 용도가 제공된다. 파울로우닌(paulownin) 화합물을 포함하는 조성물, 이를 이용한 피부의 라이트닝 방법 및 이의 다른 용도가 또한 제공된다.

Description

파울로우닌 및/또는 파울로우니아 추출물을 포함하는 조성물 및 이의 용도{COMPOSITIONS COMPRISING PAULOWNIN AND/OR PAULOWNIA EXTRACTS AND USES THEREOF}

본 발명은 피부 상에 사용하기 위한, 파울로우닌(paulownin) 및/또는 식물 추출물을 포함하는 조성물에 관한 것이다.

더 구체적으로, 본 발명은 피부 상에서의 다양한 용도를 위한, 다양한 천연 또는 합성 공급원들 중 임의의 것으로부터의 파울로우닌을 포함하고/하거나 파울로우니아(Paulownia) 속의 소정 식물의 추출물을 포함하는 조성물에 관한 것이다.

파울로우니아는 아시아가 기원이고 유럽 및 미국으로 점차적으로 퍼져 나간 식물의 속이다. 파울로우니아속으로부터의 종은 일반적으로 그 목재에 있어서 광범위한 공예적 응용 및 생태적 응용을 갖는 장식용 나무로 간주된다. 예를 들어, 그러한 나무의 목재는 일본, 중국 및 한국에서 현악기의 공명판의 제조용으로 인기가 있다. 또한 이것은 가구 제조 사용용으로 재목 상인에게 인기가 있다. 파울로우니아 나무는 생태적 용도를 가지며 식물 조정제(phyto-remediator)로 간주되고, 즉, 상기 나무는 그의 관다발계를 통하여 산업적 오염물질을 처리하여 토지를 깨끗하게 하고 개간하는 것을 도울 수 있다.

일본에서, 파울로우니아는 "참오동나무(Princess Tree)"로도 불리는 한 가지 종, 파울로우니아 토멘토사(Paulownia tomentosa)를 구체적으로 말하는 키리(Kiri)로 불린다. 일반적으로 사용되는 다른 명칭으로는 "여왕나무(empress tree)", "폭스글러브 트리(Foxglove Tree)", "왕실 파울로우니아(Royal Paulownia)", "파오 통(Pao tong)" (중국에서) 및 "오동나무(Odong-Namoo)" (한국에서)가 있다. 학명은 "파울로우니아 토멘토사"이며, 이때 다수의 이명, 즉 "파울로우니아 임페리알리스(Paulownia imperialis)", "파울로우니아 레쿠르바(Paulownia recurva)" 및 "비그노니아 토멘토사(Bignonia tomentosa)"가 다양한 문헌에 보고되어있다. 파울로우니아 토멘토사는 "오동나무과(family Paulowniaceae)"에 속하거나 또는 때로 "현삼과(Scrophulariaceae)"로 칭해진다. 미국 농무부(plants.USDA.gov) 식물 데이터베이스에서는 파울로우니아 토멘토사 및 파울로우니아 임페리알리스를 이명으로 하여 참오동나무를 고유 상징 "PATO2"로 확인된다.

파울로우니아 토멘토사의 화정유(flower oil)는 잘 연구되어 있으며, 다른 종과 비교하여 아로마가 더욱 풍부한 것으로 밝혀져 있다. 다수의 생활성, 예를 들어 꽃 추출물로부터의 항암 성분, 불특정 추출물로부터의 구충 활성, 열매 및 꽃 추출물로부터의 항균 활성, 꽃 추출물로부터의 산화방지제 활성, 및 줄기 수피로부터의 항바이러스 특성은 파울로우니아 토멘토사의 다양한 부분의 추출물과 결부된다. 파울로우니아 토멘토사의 잎 추출물은 발모 및 육모 특성에 대하여 기재되어 있다.

파울로우니아 포르투네이(Paulownia fortunei)도 "오동나무"과에 속한다. 파울로우니아 포르투네이의 꽃, 잎, 껍질, 뿌리 및 열매는 의학적으로 가치가 있으며, 감염, 염증 및 상해의 치료에서의, 항종양 크림에서의 사용용으로 보고되어 있다. 상기 수피는 정형외과적 질환, 치질 및 발냄새의 치료에서의 사용용으로 보고되어 있으며, 상기 열매의 외과피는 항미생물 활성용으로 보고되어 있다. 상기 잎은 화농성 감염을 사라지게 하는 데 사용하기 위한 것으로 그리고 육모에서의 사용용으로 보고되어 있다.

아이소파울로우닌 또는 네오파울로우닌으로도 공지된 파울로우닌은 다양한 식물의 지상부로부터 단리된 리그난이다. 그 화학 구조는 하기와 같이 주어질 수 있다:

본 발명은 파울로우니아 목재의 추출물, 더 구체적으로는 파울로우니아 토멘토사, 파울로우니아 포르투네이, 파울로우니아 엘롱가타(Paulownia elongata) 및 파울로우니아 카와카미이(Paulownia kawakamii)의 목재의 추출물이 피부 상의 조성물에서의 사용용으로 유익하며 이는 유의한 그리고 예기치 못한 피부 라이트닝(lightening) 및 다른 특성을 나타내는 경향이 있다는 본 출원인의 발견에 관한 것이다. 또한 본 발명은 파울로우닌 화합물이 유의한 그리고 예기치 못한 피부 라이트닝 및 다른 특성을 나타낸다는 본 출원인의 발견에 관한 것이다.

일 태양에서, 본 발명은 담체와, 파울로우니아 포르투네이 목재 추출물, 파울로우니아 엘롱가타 목재 추출물, 파울로우니아 카와카미이 목재 추출물 및 이들의 둘 이상의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 추출물을 포함하는 조성물에 관한 것이다.

다른 태양에서, 본 발명은 피부 라이트닝 처리를 필요로 하는 피부에 파울로우니아 포르투네이 목재 추출물, 파울로우니아 엘롱가타 목재 추출물, 파울로우니아 카와카미이 목재 추출물 및 이들의 둘 이상의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 추출물을 적용하는 단계를 포함하는 피부 라이트닝 방법에 관한 것이다.

또 다른 태양에서, 본 발명은 피부 라이트닝 처리를 필요로 하는 피부에 파울로우닌 및 담체를 포함하는 조성물을 적용하는 단계를 포함하는 피부 라이트닝 방법에 관한 것이다.

상기에 나타낸 바와 같이, 본 출원인은 예기치 않게도 파울로우닌, 및/또는 파울로우니아 토멘토사, 파울로우니아 포르투네이, 파울로우니아 엘롱가타 및 파울로우니아 카와카미이 목재의 추출물이 조성물, 바람직하게는 피부 케어 조성물에서, 그리고 피부 라이트닝을 포함하지만 이에 한정되지 않는 사용 방법에 사용될 수 있음을 발견하였다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "피부 라이트닝"은 일반적으로 피부톤, 피부색, 및/또는 피부 음영을 라이트닝함, 환하게 함, 미백 및/또는 고르게 함, 및/또는 누르스름함의 감소, 및/또는 착색 반점, 멜라닌 반점, 노화 반점, 일광 반점, 노인성 흑자(senile lentigo), 주근깨, 단순 흑자, 착색된 일광 각화증, 지루성 각화증, 기미, 여드름 자국, 염증후 색소과다침착, 흑자, 모반, 이들의 둘 이상의 조합 등을 포함하지만 이에 한정되지 않는 색소과다침착된 자국 및/또는 병변을 라이트닝 및/또는 페이딩하는 것을 말한다. 소정의 실시 형태에서, "피부 라이트닝"은 또한, 증가된 피부 광채, 홍조, 반투명도 및/또는 발광, 및/또는 더욱 광채가 나거나, 홍조를 띄거나, 반투명하거나 빛이 나는 피부톤 외양 또는 덜 노랗거나 누르스름한 피부톤을 수득하는 것을 말한다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, "피부 라이트닝"은 피부톤을 밝고 고르게 하고, 피부 광채를 증가시키고/시키거나 노화 반점을 밝게 하는 것을 말한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, 어구 "피부 라이트닝 처리를 필요로 하는 피부"는 일반적으로 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 특성을 나타내는 피부를 말한다: 본 명세서에 참고로 포함되고 하기에 추가로 기재된, 2007년에 출간된 문헌[COLIPA GUIDELINE: GUIDELINE FOR THE COLORIMETRIC DETERMINATION OF SKIN COLOUR TYPING AND PREDICTION OF THE MINIMAL ERYTHEMAL DOSE (MED) WITHOUT UV EXPOSURE]에 따라 측정된 바와 같이 41 미만의 측정된 개인 타이폴로지 앵글(Individual Typology Angle; ITA)을 갖는 피부, UV에 의해 어두워진 피부를 포함하는 어둡고/어둡거나 누르께한 피부, 고르지 못한 피부톤을 갖는 피부, 또는 착색된 반점, 멜라닌 반점, 노화 반점, 일광 반점, 노인성 흑자, 주근깨, 단순 흑자, 착색된 일광 각화증, 지루 각화증, 기미, 여드름 자국, 염증후 색소과다침착, 흑자, 모반, 이들의 둘 이상의 조합을 포함하지만 이에 한정되지 않는 하나 이상의 색소과다침착된 자국 및/또는 병변을 갖는 피부 등. COLIPA 가이드라인에서, 피부색은 하기와 같이 ITA 값의 함수로서 정의된다: 매우 밝은 피부: >55; 밝은 피부: 41-55, 중간: 28-41, 및 황갈색 피부: <28. 소정의 바람직한 실시 형태에서, "피부 라이트닝이 필요한 피부"는 ITA 값이 41 미만, 예컨대 약 40 이하, 약 35 이하, 약 30 이하이거나, 보다 바람직하게는 약 28 이하인 피부를 가진 개인을 말한다. 소정의 다른 바람직한 실시 형태에서, 본 발명은 누르스름한 피부 및/또는 어두운 피부로부터 선택되는, 피부 라이트닝 처리를 필요로 하는 피부 상에 사용하기 위한 조성물 및 방법에 관한 것이다. 소정의 다른 바람직한 실시 형태에서, 본 발명은 노화 반점, 주근깨, 여드름 후에 남겨지는 자국, 및 이들의 둘 이상의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 피부 라이트닝 처리를 필요로 하는 피부 상에 사용하기 위한 조성물 및 방법에 관한 것이다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "노화 징후의 개선을 필요로 하는 피부"는 처진 피부, 느슨해진 피부, 이완된 피부, 거친 피부, 주름진 피부, 얇아진 피부 및 고르지 못한 피부인 그러나 이에 한정되지 않는 피부를 의미한다. 노화 징후의 개선은 피부 견고함의 개선, 피부결의 개선, 피부에서의 주름살 출현의 개선, 피부톤 개선, 또는 피부에서의 외부 공격의 처리를 의미한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, 피부 견고함의 개선"은 피부의 견고함 또는 탄력성의 증진, 피부의 견고함 또는 탄력성 손실의 예방, 또는 처지고 이완되고 느슨한 피부의 예방 또는 처리를 의미한다. 피부의 견고함 또는 탄력성은 피부 탄력 측정기(cutometer)의 사용에 의해 측정될 수 있다. 문헌[Handbook of Non-Invasive Methods and the Skin, eds. J. Serup, G. Jemec & G. Grove, Chapter 66.1 (2006)]을 참조하라. 피부 탄력성 또는 견고함의 손실은 노화, 환경적 손상, 또는 화장품의 피부에의 적용의 결과를 포함하지만 이에 한정되지 않는 많은 요인의 결과일 수 있다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "피부결의 개선"은 피부 표면 상의 범프(bump) 또는 크레바스(crevass) 중 어느 하나를 제거하기 위해 피부 표면을 매끄럽게 하는 것을 의미한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "피부에서의 주름살의 출현의 개선"은 피부에서의 주름살 및 잔주름 형성 과정의 예방, 지연, 저지, 또는 역행을 의미한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "피부에서의 외부 공격의 처리"는 피부에서의 외부 공격으로 인한 손상을 감소 또는 예방하는 것을 의미한다. 외부 공격의 예에는 세정제(예를 들어, 계면활성제를 함유하는 국소 세정제)의 사용, 화장, 면도로 인한 피부에의 손상, 뿐만 아니라 UV 광과 같은 환경적 손상(예를 들어, 햇빛으로부터의 손상 또는 UV 램프 및 태양 시뮬레이터와 같은 비-천연 공급원으로부터의 손상), 오존, 배기가스, 공해, 염소 및 염소 함유 화합물, 및 담배 연기로부터의 손상이 포함되지만, 이에 한정되지 않는다. 피부에 대한 외부 공격의 효과는 지질, 탄수화물, 펩타이드, 단백질, 핵산 및 비타민에 대한 개질 및 이에 대한 산화적 및/또는 질산화적 손상을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 피부에 대한 외부 공격의 효과는 또한, 세포 생존성의 손실, 세포 기능의 손실 또는 변경, 및 유전자 및/또는 단백질 발현의 변화를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "피부톤의 개선"은 피부 외양의 라이트닝 (예를 들어, 착색된 자국 또는 병변의 라이트닝, 피부의 누르스름함의 감소 및/또는 피부색을 고르게 함)을 의미한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "피부 염증 감소를 필요로 하는 피부"는 발적 또는 홍반, 부종을 나타내거나, 또는 외부 요소에 대하여 반응성이거나 또는 민감성인 피부를 의미한다. 외부 요소는 태양광선(UV, 가시선, IR), 미생물, 대기 오염물질, 예를 들어 오존, 배기가스 오염물질, 염소 및 염소 발생 화합물, 담배 연기, 저온, 열, 비누 및 세제, 화장품, 보석류를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 본 발명의 조성물의 사용에 의해 치료 또는 예방될 수 있는 염증성 장애 및 관련 병태에는 하기가 포함되지만 이에 한정되지 않는다: 관절염, 기관지염, 접촉성 피부염, 아토피성 피부염, 건선, 지루성 피부염, 옻나무 및 옻오크(poison oak) 피부염, 습진, 알러지성 피부염, 다형 광발진, 염증성 피부병, 모낭염, 탈모증, 옻, 곤충 교상, 여드름 염증, 화학물질, 외상, 오염물질(예를 들어, 담배 연기) 및 일광 노출을 포함하지만 이에 한정되지 않는 외인성 요인에 의해 유도되는 자극, 건조증, 과각화증, 소양증, 염증후 색소과다침착, 흉터 등을 포함하지만 이에 한정되지 않는 염증으로부터 발생된 이차 병태. 바람직하게는, 본 발명의 방법을 이용하여 치료 또는 예방될 수 있는 염증성 장애 및 관련 병태는 관절염, 염증성 피부병, 접촉성 피부염, 알러지성 피부염, 아토피성 피부염, 다형 광발진, 외인성 요인에 의해 유도되는 홍반을 포함한 자극, 여드름 염증, 건선, 지루성 피부염, 습진, 옻, 옻오크, 옻나무, 곤충 교상, 모낭염, 탈모증, 및 이차 병태 등이다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, 달리 특정되지 않는 한, 조성물 중의 성분의 모든 백분율은 조성물의 총 중량을 기준으로 하는 활성물/고형물 성분의 중량%이다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, 소정 성분이 "본질적으로 없는" 조성물은, 그 성분을 조성물의 총 중량을 기준으로 약 2 중량% 이하의 양으로 갖는 조성물을 의미한다. 바람직하게는, 소정 성분이 본질적으로 없는 조성물은 조성물의 총 중량을 기준으로 약 1 중량% 이하, 보다 바람직하게는 약 0.5 중량% 이하, 보다 바람직하게는 약 0.1 중량% 이하, 보다 바람직하게는 약 0.05 이하, 보다 바람직하게는 약 0.01 중량% 이하의 그 성분을 갖는다. 소정의 더욱 바람직한 실시 형태에서, 소정 성분이 본질적으로 없는 조성물은 그 성분이 없고, 즉, 조성물 중에 그 성분을 갖지 않는다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "화장품용으로/피부학적으로 허용가능한"은 이러한 용어가 설명하는 성분이 지나친 독성, 불상용성, 불안정성, 자극, 알러지 반응 등이 없이 조직 (예를 들어, 피부 또는 모발)과 접촉하여 사용하기에 적합함을 의미한다.

파울로우니아 목재, 예를 들어 파울로우니아 토멘토사, 파울로우니아 포르투네이, 파울로우니아 엘롱가타 및/또는 파울로우니아 카와카미이 목재의 임의의 적합한 추출물이 본 발명에 따라 사용될 수 있다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 추출물은 파울로우니아 포르투네이, 파울로우니아 엘롱가타 및/또는 파울로우니아 카와카미이 목재의 추출물이다. 소정의 특히 바람직한 실시 형태에서, 추출물은 파울로우니아 토멘토사 목재의 추출물이다. 일반적으로, 파울로우니아 나무의 목재는 줄기, 가지, 또는 이들 둘 모두의 조합으로부터의 목재를 포함한다. 파울로우니아 토멘토사 목재의 적합한 추출물은 우드 칩(wood chip), 우드 더스트(wood dust) 및/또는 작은 절단체(cutting) 등으로부터 유래될 수 있다.

파울로우니아 목재의 적합한 추출물은 분쇄, 냉침, 가압, 스퀴징, 매싱, 원심분리, 및/또는 콜드 퍼콜레이션(cold percolation), 교반/증류와 같은 과정에 의해 목재로부터 물질을 직접 추출하는 방법, 마이크로파 보조 추출, 초음파 처리, 극성 개질제가 있거나 또는 없는 상태에서의 초임계/미임계 CO₂ 압축 가스 추출, 가압 용매 추출, 가속 용매 추출, 가압 또는 정상 열수 추출, 계면활성제 보조 가압 열수 추출, 오일 추출, 막 추출, 속슬레(Soxhlet) 추출, 골드 핑거 증류/추출 및/또는 예를 들어, 인테그레이티드 보태니컬 테크놀로지스, 엘엘씨(Integrated Botanical Technologies, LLC)의 미국 특허 제7442391호, 제7473435호, 및 제7537791호에서 개시된 과정 등을 포함하지만 이에 한정되지 않는 통상의 방법을 사용하여, 또는 용매 추출과 같은 다른 방법 등에 의해 수득될 수 있다. 추출물은 본 명세서에 개시된 것과 같은 임의의 방법을 통하여 파울로우니아 목재로부터 추출된 물질의 분획물, 또는 상기 물질의 하나 이상의 분획물들의 조합일 수 있거나 또는 이로부터 만들어질 수 있다. 극성 용매, 비극성 용매, 또는 이들의 둘 이상의 조합을 포함하는 다양한 용매 중 임의의 용매가 용매 추출을 포함하는 방법에서 사용될 수 있다. 적합한 극성 용매는 물 등과 같은 극성 무기 용매, 알코올 및 상응하는 유기 산, 예를 들어 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올 등을 포함한 C₁-C₈ 알코올 및 아세트산, 포름산, 프로판산 등을 포함한 유기 산과 같은 극성 유기 용매, C₁-C₈ 폴리올/글리콜 등을 포함한 폴리올 및 글리콜, 및 이들의 둘 이상의 조합을 포함한다. 적합한 비극성 용매는 C₁-C₈ 알칸을 포함한 알칸, C₁-C₈ 알칸을 포함한 사이클로알칸, C₁-C₈ 알킬 에테르를 포함한 알킬 에테르, 석유 에테르, C₁-C₈ 케톤을 포함한 케톤, 메틸렌 클로라이드, 에틸 아세테이트, 자일렌, 톨루엔, 클로로포름, 식물유, 광유 등과 같은 비극성 유기 용매를 포함한다. 또 다른 실시 형태에서, 추출은 C₁-C₈ 알코올, 물, C₁-C₈폴리올/글리콜 또는 C₁-C₈ 유기 산과 같은 극성 개질제와 함께 또는 극성 개질제 없이 초임계 유체 추출 또는 상기 기재된 비극성 용매에 의해 수득될 수 있다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 본 발명의 추출물은 목재를 미분화하고, 20℃에서 1 내지 100의 유전 상수 값, 바람직하게는 20℃에서 4 내지 60의 유전 상수 값, 더욱 바람직하게는 20℃에서 4 내지 50의 유전 상수 값, 및 더욱 더욱 바람직하게는 20℃에서 4 내지 40의 유전 상수 값을 갖는 극성 용매를 사용하여 추출함으로써 제조된 극성 추출물이다. 바람직한 극성 용매의 예는 20℃에서 1 내지 100, 바람직하게는 4 내지 60, 및 더욱 바람직하게는 5 내지 40의 유전 상수 값을 갖는 C₁-C₈ 알코올, C₁-C₈ 폴리올/글리콜, C₁-C₈유기 산, 물 및 이들의 둘 이상의 조합을 포함하며, 이에는 본 명세서에 참고로 포함된 문헌["Dielectric Constants of Some Organic Solvent-Water Mixtures at Various Temperatures," Akerlof, Gosta; JACS , Vol. 54, No. 11 (Nov. 1932), pp. 4125-4139]에서 개시된 바와 같은 원하는 유전 상수 값을 갖는 그러한 용매 및 용매의 조합이 포함되지만 이에 한정되지 않는다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 극성 추출물은 하나 이상의 C₁-C₈ 알코올, C₁-C₈ 폴리올, C₁-C₈ 글리콜, 및 그의 둘 이상의 조합물을 사용해 추출된다. 특정한 더욱 바람직한 실시 형태에서, 추출물은 하나 이상의 C₁-C₄ 알코올, C₁-C₄ 폴리올, 및/또는 C₁-C₄ 글리콜을 사용해 추출된다. 특정한 더욱 바람직한 실시 형태에서, 추출물은 물의 존재 또는 부재 하에 메탄올, 에탄올, 또는 그의 조합물을 포함하는 용매를 사용해 제조된다. 더욱 바람직한 실시 형태에서, 추출물은 무수 알코올 또는 시약 등급 변성 알코올(reagent grade denatured alcohol)을 사용하여 제조되고, 실온에서 3일 동안 진탕하면서 키리 우드 더스트를 건조시킨다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 추출물은 추가로, 목탄(활성탄이라고도 함) 처리에 의해 제련될 수 있다.

소정의 실시 형태에서, 파울로우니아 목재 추출물은 소정의 물질이 본질적으로 없도록 제조될 수 있다. 한 실시 형태에서, 추출물에는 본질적으로 우르솔릭산(Ursolic acid), 베타-시토스테롤(beta-Sitosterol), 또는 둘 모두가 없다.

소정의 실시 형태에서, 조성물은 추가로, 파울로우니아 나무의 다른 부분, 예를 들어 수피, 잎, 뿌리, 열매, 씨앗 또는 꽃 중 하나 이상으로부터의 추출물을 포함할 수 있다. 다른 실시 형태에서, 조성물에는 본질적으로 파울로우니아 나무의 다른 비-목재 부분의 추출물이 없다.

소정의 실시 형태에서, 조성물은 파울로우니아속의 식물, 예를 들어 파울로우니아 토멘토사, 파울로우니아 포르투네이, 파울로우니아 엘롱가타, 및/또는 파울로우니아 카와카미이의 세포 배양물로부터의 추출물을 포함할 수 있다.

임의의 적합한 양의 파울로우니아 목재 추출물이 본 발명의 조성물에서 사용될 수 있다. 바람직하게는, 본 조성물은 안전하고 유효한 양의 파울로우니아 목재 추출물을 포함한다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, "안전하고 유효한 양"은 원하는 효과를 유발하기에 충분하지만 세포독성 등을 포함하는 심각한 부작용을 피하기에 충분히 낮은 추출물의 양 또는 조성물의 양을 의미한다. 조성물의 피부 라이트닝 용도를 포함하는 실시 형태에 있어서, "피부 라이트닝에 유효한 양"은 하기에 기재된 바와 같이 피부 라이트닝 시험 (ΔL)으로서 피부 표피 등가물 모델에 있어서 0보다 큰 ΔL 값을 성취하기에 효과적인 추출물의 양을 의미한다. 특정한 바람직한 실시 형태에서, 피부 라이트닝 유효량은 약 1 이상의 ΔL 값을 성취하기에 효과적인 양이다.

피부에서의 노화 징후 개선에 있어서의 조성물의 용도에 관련된 본 발명의 실시 형태에 있어서, "노화 징후의 개선에 유효한 양"은 하기 실시예 11의 UV-유도 MMP 유도 절차의 억제에 따라 측정할 경우 0보다 큰 MMP-1 또는 MMP-9 생성 억제율 (%)을 제공하는 양을 의미한다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 노화 징후 개선에 유효한 양은 하기 실시예 11의 UV-유도 MMP 유도 절차의 억제에 따라 측정할 경우 약 10% 이상인 MMP-1 또는 MMP-9 생성 억제율 (%)을 제공하는 양이다.

염증 감소에 있어서의 조성물의 용도에 관련된 본 발명의 실시 형태에 있어서, "염증 감소에 유효한 양"은 하기 실시예 7의 IL-8에 있어서의 재구성된 표피 상에서의 UV-유도된 전염증성 매개자의 방출에 대한 항염증 효과에 대한 절차에 따라 측정할 경우 0보다 큰 피부 염증 (IL-8)의 억제율 (%)을 제공하는 양을 의미한다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 노화 징후를 개선하는 데 유효한 양은 하기 실시예 7의 IL-8에 있어서의 재구성된 표피 상에서의 UV-유도된 전염증성 매개자의 방출에 대한 항염증 효과에 대한 절차에 따라 측정할 경우 약 10% 이상인 큰 피부 염증 (IL-8)의 억제율 (%)을 제공하는 양이다.

소정의 바람직한 실시 형태에서, 본 조성물은 0 초과 내지 약 20%의 파울로우니아 목재 추출물을 포함한다. 소정의 다른 바람직한 실시 형태에서, 본 조성물은 약 0.0001 내지 약 20%, 약 0.001 내지 약 10%, 약 0.01 내지 약 5%, 약 0.1 내지 약 5%, 또는 약 0.2 내지 약 2%의 파울로우니아 목재 추출물을 포함한다. 소정의 다른 바람직한 실시 형태에서, 본 조성물은 0 초과 내지 약 1%, 약 0.0001 내지 약 1%, 약 0.001 내지 약 1%, 또는 약 0.01 내지 약 1%의 파울로우니아 목재 추출물을 포함한다. 소정의 다른 바람직한 실시 형태에서, 본 조성물은 약 1 내지 약 5%, 바람직하게는 약 2 내지 약 5%의 파울로우니아 목재 추출물을 포함한다.

임의의 적합한 담체가 본 발명의 조성물에 사용될 수 있다. 바람직하게는, 피부 케어 조성물의 경우, 담체는 화장품용으로 허용가능한 담체이다. 본 기술 분야의 숙련자들에게 인식될 바와 같이, 화장품용으로 허용가능한 담체는 지나친 독성, 불상용성, 불안정성, 자극, 알러지 반응 등이 없이 신체, 특히 피부 미백 적용을 위한 피부에 접촉하여 사용하기에 적합한 담체를 포함한다. 담체의 안전하고 유효한 양은 조성물의 약 50% 내지 약 99.999%, 바람직하게는 약 80% 내지 약 99.9%, 보다 바람직하게는 약 99.9% 내지 약 95%, 가장 바람직하게는 약 99.8% 내지 약 98%이다. 담체는 다양한 형태로 존재할 수 있다. 예를 들어, 수중유, 유중수, 수중유중수 및 실리콘중수중유 에멀젼이 포함되지만 이에 한정되지 않는 에멀젼 담체가 본 발명에서 유용하다. 이러한 에멀젼은 예를 들어 약 100 cp 내지 약 200,000 cp의 다양한 점도 범위를 포함할 수 있다. 화장품용으로 허용가능한 적합한 담체의 예에는 화장품용으로 허용가능한 용매 및 화장품용 용액, 현탁액, 로션, 크림, 세럼, 에센스, 겔, 토너, 스틱, 스프레이, 연고, 액상 워시 및 비누 바(bar), 샴푸, 헤어 컨디셔너, 페이스트, 폼, 무스, 분말, 면도용 크림, 와이프, 패치, 스트립, 분말화된 패치, 미세바늘 패치, 붕대, 하이드로겔, 필름 형성 제품, 페이셜 및 스킨 마스크, 메이크업, 리퀴드 드롭 등을 위한 물질이 포함된다. 이러한 제품 유형은 용액, 현탁액, 에멀젼, 예컨대 마이크로에멀젼 및 나노에멀젼, 겔, 고체, 리포솜, 다른 캡슐화 기술 등이 포함되지만 이로 제한되지 않는 다양한 유형의 화장품용으로 허용가능한 담체를 함유할 수 있다. 다음은 이러한 담체의 비제한적 예이다. 다른 담체는 당업자에 의해 제형화될 수 있다.

일 실시 형태에서, 담체는 물을 함유한다. 추가의 실시 형태에서, 담체는 또한 하나 이상의 수성 용매 또는 유기 용매를 함유할 수 있다. 유기 용매의 예에는 다이메틸 아이소소르비드; 아이소프로필미리스테이트; 양이온성, 음이온성 및 비이온성 성질의 계면활성제; 식물유; 광유; 왁스; 검; 합성 및 천연 겔화제; 알칸올; 글리콜; 및 폴리올이 포함되지만, 이에 한정되지 않는다. 글리콜의 예에는 글리세린, 프로필렌 글리콜, 부틸렌 글리콜, 펜탈렌 글리콜, 헥실렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 폴리프로필렌 글리콜, 다이에틸렌 글리콜, 트라이에틸렌 글리콜, 카프릴 글리콜, 글리세롤, 부탄다이올 및 헥산트라이올, 및 이들의 공중합체 또는 혼합물이 포함되지만 이에 한정되지 않는다. 알칸올의 예에는 약 2개의 탄소 원자 내지 약 12개의 탄소 원자 (예를 들어, 약 2개의 탄소 원자 내지 약 4개의 탄소 원자)를 갖는 것들, 예를 들어, 아이소프로판올 및 에탄올이 포함되지만 이에 한정되지 않는다. 폴리올의 예에는 약 2개의 탄소 원자 내지 약 15개의 탄소 원자 (예를 들어, 약 2개의 탄소 원자 내지 약 10개의 탄소 원자)를 갖는 것들, 예를 들어, 프로필렌 글리콜이 포함되지만 이에 한정되지 않는다. 유기 용매는 담체의 총 중량을 기준으로 약 1% 내지 약 99.99% (예를 들어, 약 20% 내지 약 50%)의 양으로 담체 중에 존재할 수 있다. 물은 담체의 총 중량을 기준으로 약 5% 내지 약 95% (예를 들어, 약 50% 내지 약 90%)의 양으로 (사용 전) 담체 중에 존재할 수 있다. 용액은 약 40 내지 약 99.99%를 포함하는 임의의 적합한 양의 용매를 함유할 수 있다. 소정의 바람직한 용액은 약 50 내지 약 99.9%, 약 60 내지 약 99%, 약 70 내지 약 99%, 약 80 내지 약 99%, 또는 약 90 내지 99%를 함유한다.

로션은 그러한 용액으로부터 제조될 수 있다. 로션은 전형적으로 용매 이외에 적어도 하나의 연화제를 함유한다. 로션은 약 1% 내지 약 20% (예를 들어, 약 5% 내지 약 10%)의 연화제(들) 및 약 50% 내지 약 90% (예를 들어, 약 60% 내지 약 80%)의 물을 포함할 수 있다.

용액으로부터 제형화될 수 있는 또 다른 유형의 제품은 크림이다. 크림은 전형적으로 약 5% 내지 약 50% (예를 들어, 약 10% 내지 약 20%)의 연화제(들) 및 약 45% 내지 약 85% (예를 들어, 약 50% 내지 약 75%)의 물을 함유한다.

용액으로부터 제형화될 수 있는 또 다른 유형의 제품은 연고이다. 연고는 동물유, 식물유 또는 합성유 또는 반고체 탄화수소의 단순한 베이스를 함유할 수 있다. 연고는 약 2% 내지 약 10%의 연화제(들) + 약 0.1% 내지 약 2%의 증점제(들)를 함유할 수 있다.

본 발명에 유용한 조성물은 또한 에멀젼으로 제형화될 수 있다. 담체가 에멀젼일 경우, 담체의 약 1% 내지 약 10% (예를 들어, 약 2% 내지 약 5%)가 유화제(들)를 함유한다. 유화제는 비이온성, 음이온성 또는 양이온성일 수 있다.

로션 및 크림은 에멀젼으로서 제형화될 수 있다. 전형적으로 그러한 로션은 0.5% 내지 약 5%의 유화제(들)를 함유하는 반면, 그러한 크림은 전형적으로 약 1% 내지 약 20% (예를 들어, 약 5% 내지 약 10%)의 연화제(들); 약 20% 내지 약 80% (예컨대, 30% 내지 약 70%)의 물; 및 약 1% 내지 약 10% (예컨대, 약 2% 내지 약 5%)의 유화제(들)를 함유할 것이다.

단일 에멀젼 피부 케어 제제, 예컨대 수중유 유형 및 유중수 유형의 로션 및 크림은 본 기술 분야에 널리 알려져 있으며, 본 발명에서 유용하다. 다상(multiphase) 에멀젼 조성물, 예컨대 수중유중수 유형 또는 유중수중유 유형이 또한 본 발명에 유용하다. 일반적으로, 그러한 단일 또는 다상 에멀젼은 물, 연화제, 및 유화제를 필수 성분으로서 함유한다.

본 발명의 조성물은 또한 겔 (예를 들어, 적합한 겔화제(들)를 사용하여 수성,

알코올, 알코올/물, 또는 오일 겔)로 제형화될 수 있다. 수성 및/또는 알코올성 겔에 적합한 겔화제에는 천연 고무, 아크릴산 및 아크릴레이트 중합체 및 공중합체, 및 셀룰로스 유도체(예를 들어, 하이드록시메틸 셀룰로스 및 하이드록시프로필 셀룰로스)가 포함되지만, 이에 한정되지 않는다. 오일(예컨대 광유)에 적합한 겔화제에는 수소화된 부틸렌/에틸렌/스티렌 공중합체 및 수소화된 에틸렌/프로필렌/스티렌 공중합체가 포함되지만, 이에 한정되지 않는다. 그러한 겔은 전형적으로 그러한 겔화제를 약 0.1 중량% 내지 5 중량% 함유한다.

본 발명의 조성물은 또한 고체 제형 (예를 들어, 왁스-기재 스틱, 비누 조성물, 분말 또는 와이프)으로 제형화될 수 있다. 본 발명의 조성물은 또한 고체, 반고체 또는 용해성 기재 (예를 들어, 와이프, 마스크, 패드, 글러브 또는 스트립)와 조합될 수 있다.

또한 본 발명의 조성물은 구강용으로 사용되는 제형, 예를 들어 크림형 치약, 겔, 린스, 용액, 패치 등으로 제형화될 수 있다. 또한 본 조성물은 눈에서의 사용용으로, 예를 들어 드롭 또는 워시 등으로 사용되는 용액, 에멀젼, 현탁액의 형태로 제형화될 수 있거나, 또는 겔, 로션, 윤활제 등을 통하는 것과 같이 질점막에서의 사용용으로 제형화될 수 있다.

본 발명의 조성물은 임의의 다양한 부가적인 화장용 활성제를 추가로 포함할 수 있다. 적합한 부가적인 활성제의 예에는 부가적인 피부 라이트닝제, 다크닝제, 부가적인 노화 방지제, 트로포엘라스틴 촉진제, 콜라겐 촉진제, 항여드름제, 광택 제어제, 항미생물제, 예컨대 항효모제, 항진균제, 및 항균제, 항염증제, 항기생충제, 외용 진통제, 썬스크린, 광차단제, 산화방지제, 각질용해제, 세제/계면활성제, 보습제, 영양제, 비타민, 에너지 증강제, 발한방지제, 수렴제, 탈취제, 제모제, 발모 증강제, 발모 지연제, 퍼밍제(firming agent), 보습 부스터, 효능 부스터, 굳은살 방지제(anti-callous agent), 피부 컨디셔닝을 위한 제제, 항셀룰라이트제, 플루오라이드, 치아 미백제, 항플라크제, 플라크 용해제, 냄새 제어제, 예를 들어 냄새 차폐제 또는 pH 변화제 등이 포함된다. 다양한 적합한 부가적인 화장품용으로 허용가능한 활성제의 예에는 하이드록시산, 벤조일 퍼옥사이드, D-판텐올, UV 필터, 예컨대 아보벤존(파르솔(Parsol) 1789), 비스다이설리졸 다이소듐 (네오 헬리오판(Neo Heliopan) AP), 다이에틸아미노 하이드록시벤조일 헥실 벤조에이트 (우비눌 A 플러스(Uvinul A Plus)), 에캄술 (멕소릴(Mexoryl) SX), 메틸 안트라닐레이트, 4-아미노벤조산 (PABA), 시녹세이트, 에틸헥실 트라이아존 (우비눌(Uvinul) T 150), 호모살레이트, 4-메틸벤질리덴 캄포르 (파르솔 5000), 옥틸 메톡시신나메이트 (옥티녹세이트(Octinoxate)), 옥틸 살리실레이트 (옥티살레이트(Octisalate)), 파디메이트 O (에스칼롤(Escalol) 507), 페닐벤즈이미다졸 설폰산 (엔설리졸(Ensulizole)), 폴리실리콘-15 (파르솔 SLX), 트롤라민 살리실레이트, 베모트라이지놀 (티노소르브(Tinosorb) S), 벤조페논 1-12, 다이옥시벤존, 드로메트라이졸 트라이실록산 (멕소릴 XL), 이스코트라이지놀 (우바소르브(Uvasorb) HEB), 옥토크릴렌, 옥시벤존 (에우솔렉스(Eusolex) 4360), 설리소벤존, 비속트라이졸 (티노소르브 M), 이산화티타늄, 산화아연, 카로테노이드, 자유 라디칼 제거제, 스핀 트랩(spin trap), 레티노이드 및 레티노이드 전구체, 예컨대 레티놀, 레틴산 및 레티닐 팔미테이트, 세라마이드, 다중불포화 지방산, 필수 지방산, 효소, 효소 억제제, 미네랄, 호르몬, 예컨대 에스트로겐, 스테로이드, 예컨대 하이드로코르티손, 2-다이메틸아미노에탄올, 구리 염, 예컨대 염화구리, 구리 함유 펩타이드, 예컨대 Cu:Gly-His-Lys, 조효소 Q10, 아미노산, 예컨대 프롤린, 비타민, 락토비온산, 아세틸-조효소 A, 니아신, 리보플라빈, 티아민, 리보스, 전자 수송체, 예컨대 NADH 및 FADH2, 쌀 단백질 및 다른 식물 추출물, 예컨대, 귀리, 알로에 베라, 피버퓨(Feverfew), 대두, 표고 버섯 추출물, 및 이들의 유도체 및 혼합물이 포함되지만 이로 제한되는 것은 아니다.

소정의 바람직한 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은 파울로우니아 목재의 추출물 및 적어도 하나의 부가적인 피부 라이트닝 활성제를 포함하는 피부 케어 조성물이다. 적합한 부가적인 피부 라이트닝 활성제의 예에는 타이로시나아제 억제제, 멜라닌 분해제, PAR-2 길항제를 포함하는 멜라노솜 이전 억제제, 박피제(exfoliant), 썬스크린, 레티노이드, 산화방지제, 트라넥삼산, 트라넥삼산 세틸 에스테르 염산염, 피부 표백제, 리놀레산, 리놀렌산, 올레산, 아데노신 모노포스페이트 다이소듐 염, 카모밀라(Chamomilla) 추출물, 알란토인, 불투명화제, 활석 및 실리카, 아연 염 등, 및 문헌[Solano et al. Pigment Cell Res. 19 (550-571)] 및 문헌[Ando et al. Int J Mol Sci 11 (2566-2575)]에 기재된 다른 제제를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

적합한 타이로시나아제 억제제의 예에는 비타민 C 및 이의 유도체, 비타민 E 및 이의 유도체, 코직산, 아르뷰틴, 레소르시놀, 하이드로퀴논, 플라본, 예를 들어 감초(Licorice) 플라보노이드, 감초 뿌리 추출물, 뽕나무(Mulberry) 뿌리 추출물, 디오스코레아 코포시타(Dioscorea Coposita) 뿌리 추출물, 바위취(Saxifraga) 추출물 등, 엘라그산, 살리실레이트 및 유도체, 글루코사민 및 유도체, 풀러렌(Fullerene), 히노키티올(Hinokitiol), 다이오익산, 아세틸 글루코사민, 5,5'-다이프로필-바이페닐-2,2'-다이올(마그노리그난(Magnolignan)), 4-(4-하이드록시페닐)-2-부탄올(4-HPB), 이들의 둘 이상의 조합 등이 포함되지만 이에 한정되지 않는다. 비타민 C 유도체의 예에는 아스코르브산 및 염, 아스코르브산-2-글루코시드, 소듐 아스코르빌 포스페이트, 마그네슘 아스코르빌 포스페이트, 및 비타민 C가 풍부한 천연 추출물이 포함되지만, 이에 한정되지 않는다. 비타민 E 유도체의 예에는 알파-토코페롤, 베타-토코페롤, 감마-토코페롤, 델타-토코페롤, 알파-토코트라이에놀, 베타-토코트라이에놀, 감마-토코트라이에놀, 델타-토코트라이에놀 및 그들의 혼합물, 토코페롤 아세테이트, 토코페롤 포스페이트 및 비타민 E 유도체가 풍부한 천연 추출물이 포함되지만, 이에 한정되지 않는다. 레소르시놀 유도체의 예에는 레소르시놀, 4-치환된 레소르시놀, 예를 들어 4-알킬레소르시놀, 예컨대 4-부티레소르시놀 (루시놀), 4-헥실레소르시놀(시노베아(Synovea) HR, 시테온(Sytheon)), 페닐에틸 레소르시놀(심화이트(Symwhite), 심라이즈(Symrise)), 1-(2,4-다이하이드록시페닐)-3-(2,4-다이메톡시-3-메틸페닐)-프로판(니비톨, 우니겐(Unigen)) 등 및 레소르시놀이 풍부한 천연 추출물이 포함되지만 이에 한정되지 않는다. 살리실레이트의 예에는 4-메톡시 포타슘 살리실레이트, 살리실산, 아세틸살리실산, 4-메톡시살리실산 및 그 염이 포함되지만, 이에 한정되지 않는다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 타이로시나아제 억제제에는 4-치환된 레소르시놀, 비타민 C 유도체, 또는 비타민 E 유도체가 포함된다. 보다 바람직한 실시 형태에서, 타이로시나아제 억제제에는 페닐에틸 레소르시놀, 4-헥실 레소르시놀, 또는 아스코르빌-2-글루코시드가 포함된다.

적합한 멜라닌 분해제의 예에는 과산화물 및 효소, 예컨대 퍼옥시다아즈 및 리그니나아제가 포함되지만, 이에 한정되지 않는다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 멜라닌-억제제에는 과산화물 또는 리그니나아제가 포함된다.

적합한 멜라노솜 이동 억제제의 예에는 PAR-2 길항제, 예컨대 콩 트립신 억제제 또는 보우만-버크(Bowman-Birk) 억제제, 비타민 B3 및 유도체, 예컨대 나이아신아미드, 에센셜 소이(Essential soy), 홀 소이(Whole Soy), 콩 추출물이 포함된다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 멜라노솜 이동 억제제에는 콩 추출물 또는 나이아신아미드가 포함된다.

박피제의 예에는 알파-하이드록시산, 예컨대 락트산, 글리콜산, 말산, 타르타르산, 시트르산, 또는 임의의 상기 물질의 임의의 조합, 베타-하이드록시산, 예컨대 살리실산, 폴리하이드록시산, 예컨대 락토비온산 및 글루콘산, 및 기계적 박피, 예컨대 미세박피가 포함되지만, 이에 한정되지 않는다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 박피제에는 글리콜산 또는 살리실산이 포함된다.

선스크린제의 예에는 아보벤존 (파르솔 1789), 비스다이설리졸 다이소듐 (네오 헬리오판 AP), 다이에틸아미노 하이드록시벤조일 헥실 벤조에이트 (우비눌 A 플러스), 에캄술 (멕소릴 SX), 메틸 안트라닐레이트, 4-아미노벤조산 (PABA), 시녹세이트, 에틸헥실 트라이아존 (우비눌 T 150), 호모살레이트, 4-메틸벤질리덴 캄포르 (파르솔 5000), 옥틸 메톡시신나메이트 (옥티녹세이트), 옥틸 살리실레이트 (옥티살레이트), 파디메이트 O (에스칼롤 507), 페닐벤즈이미다졸 설폰산 (엔설리졸), 폴리실리콘-15 (파르솔 SLX), 트롤라민 살리실레이트, 베모트라이지놀 (티노소르브 S), 벤조페논 1-12, 다이옥시벤존, 드로메트라이졸 트라이실록산 (멕소릴 XL), 이스코트라이지놀 (우바소르브 HEB), 옥토크릴렌, 옥시벤존 (에우솔렉스 4360), 설리소벤존, 비소크트라이졸 (티노소르브 M), 이산화티타늄, 산화아연 등이 포함되지만, 이에 한정되지 않는다.

레티노이드의 예에는 레티놀(비타민 A 알코올), 레티날(비타민 A 알데히드), 레티닐 아세테이트, 레티닐 프로피오네이트, 레티닐 리놀레에이트, 레틴산, 레티닐 팔미테이트, 아이소트레티노인, 타자로텐, 벡사로텐, 아다팔렌(Adapalene), 이들의 둘 이상의 조합 등이 포함되지만, 이에 한정되지 않는다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 레티노이드는 레티놀, 레티날, 레티닐 아세테이트, 레티닐 프로피오네이트, 레티닐 리놀레에이트, 및 이들의 둘 이상의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 소정의 더 바람직한 실시 형태에서, 레티노이드는 레티놀이다.

산화방지제의 예에는 수용성 산화방지제, 예컨대 설프하이드릴 화합물 및 그의 유도체 (예를 들어, 소듐 메타바이설파이트 및 N-아세틸-시스테인, 글루타티온), 리포산 및 다이하이드로리포산, 스틸베노이드, 예컨대 레스베라트롤 및 유도체, 락토페린, 철 및 구리 킬레이트제 및 아스코르브산 및 아스코르브산 유도체 (예를 들어, 아스코빌-2-글루코시드, 아스코르빌 팔미테이트 및 아스코르빌 폴리펩티드)가 포함되지만 이에 한정되지 않는다. 본 발명의 조성물에 사용하기에 적합한 유용성 산화방지제에는 부틸화 하이드록시톨루엔, 레티노이드 (예를 들어, 레티놀 및 레티닐 팔미테이트), 토코페롤 (예를 들어, 토코페롤 아세테이트), 토코트라이에놀 및 유비퀴논이 포함되지만 이에 한정되지 않는다. 본 발명의 조성물에 사용되기에 적합한 산화방지제를 함유하는 천연 추출물에는 플라보노이드 및 아이소플라보노이드 및 그들의 유도체(예를 들어, 게니스테인 및 다이아드제인)를 함유하는 추출물, 레스베라트롤을 함유하는 추출물 등이 포함되지만, 이에 한정되지 않는다. 그러한 천연 추출물의 예에는 포도씨, 녹차, 홍차, 백차, 소나무 껍질, 피버퓨, 파테놀리드(parthenolide) 무함유 피버퓨, 귀리 추출물, 블랙베리 추출물, 코티너스(cotinus) 추출물, 대두 추출물, 포멜로(pomelo) 추출물, 맥아 추출물, 헤스페레딘(Hesperedin), 그레이프(Grape) 추출물, 쇠비름속(Portulaca) 추출물, 리코칼콘, 칼콘, 2,2'-다이하이드록시칼콘, 2'-하이드록시-2,3,5'-트라이메톡시칼콘, 프리물라(Primula) 추출물, 프로폴리스 등이 포함된다.

부가적인 화장품용 활성제는 임의의 적합한 양으로, 예를 들어 조성물의 약 0.0001 중량% 내지 약 20 중량%, 예를 들어, 약 0.001 중량% 내지 약 10 중량%, 예컨대 약 0.01 중량% 내지 약 5 중량%의 양으로 조성물 중에 존재할 수 있다. 소정의 바람직한 실시 형태에서는 0.1% 내지 5%의 양으로 존재하며 다른 바람직한 실시 형태에서는 1% 내지 2%로 존재한다.

소정의 바람직한 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은 파울로우니아 목재의 추출물 및 적어도 하나의 부가적인 항염증제를 포함하는 피부 케어 조성물이다. 적합한 부가적인 항염증 활성제에는 하기에 개시된 항염증성 분석에서 인터류킨-2에 대하여 IC50 (화합물이 50%의 염증 억제율을 성취하는 농도)이 100 ㎍/ml 이하인 화합물이 포함되지만, 이에 한정되지 않는다. 바람직한 실시 형태에서, 제2 항염증 화합물의 IC50은 약 70 ㎍/ml 미만, 더 바람직하게는 약 50 ㎍/ml 미만, 더 바람직하게는 약 40 ㎍/ml 미만, 더 바람직하게는 약 30 ㎍/ml 미만이다.

항염증 분석법은 T-세포 수용체(TCR) 활성화제 피토헤마글루티닌(PHA)에 의해 자극된 인간 림프구에 의한 사이토카인의 생성을 제제가 감소시키는 능력을 평가하며, 이는 하기 방식으로 행해진다. 인간 백혈구를 건강한 성인 남자로부터 백혈구 성분 채집(leukopheresis)을 통하여 수집하고, 무혈청 림프구 성장 배지 (엑스비보(ExVivo-15), 미국 메릴랜드주 워커스빌 소재의 바이오휘태커(Biowhittaker)) 중 1×10⁶개의 세포/mL의 밀도로 조정한다. 공개된 방법에 따라 시험 샘플의 존재 또는 부재 하에 PBL을 10 ㎍/mL의 PHA로 자극한다 (문헌[Hamamoto Y., et al. Exp Dermatol 2:231-235, 1993]). 37℃, 5% CO₂에서 48시간 인큐베이션 후, 상청액을 제거하고 , 구매가능한 다중 사이토카인 검출 키트를 이용하여 사이토카인 함량에 대해 평가한다.

적합한 항염증제의 예에는 치환된 레소르시놀, (E)-3-(4-메틸페닐설포닐)-2-프로펜니트릴(예를 들어 "베이(Bay) 11-7082", 미국 미주리주 세인트루이스 소재의 시그마-알드리치(Sigma-Aldrich)로부터 구매가능함), 테트라하이드로커큐미노이드(예를 들어 테트라하이드로커큐미노이드 CG, 미국 뉴저지주 피스카타웨이 소재의 사빈사 코포레이션(Sabinsa Corporation)으로부터 입수가능함), 및 하기로부터 유래된 추출물 및 물질이 포함된다:

펠로덴드론 아무렌세 피질 추출물(Phellodendron Amurense Cortex Extract; PCE)

비-변성 대두(글라이신 맥스(Glycine max))

피버퓨(타나세툼 파르테늄(Tanacetum parthenium))

생강(진기베르 오피시날레(Zingiber officinale))

은행(긴코 빌로바(Ginko Biloba))

마데카소사이드(센텔라 아시아티카(Centella asiatica) 추출물 성분)

코티너스(코티너스 코기그리아(Cotinus coggygria))

머위 추출물(페타시테스 하이브리두스(Petasites hybridus))

구기자(라이시움 바르바룸(Lycium barbarum))

밀크시슬 추출물(실리붐 마리아눔(Silybum marianum))

인동덩굴(로니세라 자포니카(Lonicera japonica))

발삼 오브 페루(Basalm of Peru)(마이록실론 페레이라에(Myroxylon pereirae))

세이지(살비아 오피시날리스(Salvia officinalis))

크랜베리 추출물(바시늄 옥시코코스(Vaccinium oxycoccos))

아마란스유(아마란투스 크루엔투스(Amaranthus cruentus))

석류(푸니카 그라나툼(Punica granatum))

예르베 마테(일렉스 파라구아리엔시스(Ilex paraguariensis) 잎 추출물)

화이트 릴리 꽃 추출물(릴리움 칸디둠(Lilium Candidum))

화일 릴리 구근 추출물(릴리움 칸디둠)

올리브 잎 추출물 (올레아 유로파에아(Olea europaea))

플로레틴(사과 추출물)

귀리 가루(아비나 사티바(Aveena Sativa))

리페놀(홉(Hop): 후물루스 루풀루스(Humulus lupulus)) 추출물

부그란(Bugrane) P(오노니스 스피노사(Ononis spinosa))

리코칼콘(감초: 글라이시리자 인플레이트(Glycyrrhiza inflate) 추출물 성분)

심릴리프(Symrelief)(비스아볼올 및 생강 추출물)

쌀 추출물

이들의 둘 이상의 조합 등.

레소르시놀은 하기 구조를 갖는 다이하이드록시 페놀 화합물(즉, 1,3 다이하이드록시벤젠)이다:

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "치환된 레소르시놀"은 2, 4, 5, 또는 6 위치에 적어도 하나의 치환체를 포함하는 레소르시놀을 의미한다. 따라서, 치환된 레소르시놀은 1개 내지 4개의 치환체를 가질 수 있다. 상기에 나타낸 바와 같이, 치환된 레소르시놀의 위치 1 및 위치 3은 -OH 기를 포함한다.

치환된 레소르시놀이 항염증용으로 사용되는 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀의 모든 치환체에 페닐(-C₆H₅ 방향족) 부분이 없는 것이 고도로 바람직하다. 소정의 실시 형태에서, 모든 치환체에는 방향족 부분(헤테로원자가 있거나 없음)이 없다. 특정한 이러한 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀의 모든 치환체에는 케톤 작용기(2개의 다른 탄소 원자에 결합된 카르보닐)가 없다는 것이 바람직하다. 특정한 다른 이러한 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀의 모든 치환체에는 페닐 작용기 및 케톤 작용기 둘 모두가 없다. 특정한 다른 이러한 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀은 5 내지 11개의 탄소 원자, 바람직하게는 5 내지 10개의 탄소 원자, 더욱 바람직하게는 5 내지 9개의 탄소 원자, 가장 바람직하게는 5 내지 8개의 탄소 원자를 포함하는 적어도 하나의 치환체를 포함한다. 특정한 다른 이러한 실시 형태에서, 적어도 하나의 치환체는 상기 기재된 탄소 원자의 수를 갖는 것과 같은 알킬기를 포함한다. 알킬기는 바람직하게는 불포화된다.

소정의 실시 형태에서, 레소르시놀의 4 위치는 치환되고, 소정의 실시 형태에서, 4 위치만 치환된다. 다른 실시 형태에서, 4 위치는 알킬기로 치환된다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀은 알킬기를 포함하는, 4 위치에서 단일 치환체를 포함한다. 소정의 다른 바람직한 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀은 벤젠 고리에 직접 결합된 알킬기로 이루어진, 4 위치에서 단일 치환체를 포함한다.

항염증제에 특히 적합한 치환된 레소르시놀은 4-헥실 레소르시놀 및 4-옥틸레소르시놀, 특히 4-헥실 레소르시놀을 포함한다. 4-헥실레소르시놀 및 4-옥틸레소르시놀의 구조는 하기에서 보여진다:

4-헥실 레소르시놀

4-옥틸레소르시놀

4-헥실 레소르시놀은 미국 뉴저지주 링컨 파크 소재의 시테온으로부터 시노베아(SYNOVEA) HR로 구매가능하다. 4-옥틸레조르시놀은 코네티컷주 웨스트 하벤 소재의 시티 케미칼 엘엘씨(City Chemical LLC)로부터 구매가능하다.

소정의 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀은 2, 4, 5, 또는 6 위치에서 적어도 2개의 치환체를 포함한다. 그러한 치환체는 임의로 연결되어 고리, 예컨대, 황 또는 산소와 같은 헤테로원자를 임의로 포함하는 환형 지방족 탄화수소를 형성할 수 있다. 그러한 연결된 치환체는 5 내지 10개의 탄소 원자, 예를 들어, 8 내지 10개의 탄소 원자를 포함할 수 있고, 임의로 1 내지 3개의 헤테로원자를 포함한다. 2 및 3 위치를 결합시키는 환형 지방족 치환체를 포함하는 적합한 치환된 레소르시놀의 예는 제아랄라논(Zearalanone) 및 β-제아랄라놀(β-Zearalanol)을 포함한다:

제아랄라논(Zearalanone)

β-제아랄라놀(Zearalanol)

제아르알라논 및 β-제아르알라놀은 미국 미주리주 세인트 루이스 소재의 시그마 케미칼스(Sigma Chemicals)로부터 구매가능하다.

특정 다른 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀은 할라이드-함유 및/또는 니트로소-함유 치환체를 포함한다. 적합한 예는 벤젠 고리에 직접 결합된 -Cl 또는 -N=O를 함유한다. 이들 치환체는 예를 들어, 2 및 4, 2 및 6, 또는 4 및 6 위치에서 존재할 수 있다. 다이할라이드-치환된 레소르시놀의 예는 2,6-다이클로로레소르시놀이다. 다이니트로소-치환된 레소르시놀의 예는 2,4-다이니트로소소르시놀이다:

2,4-다이니트로레소르시놀

2,6-다이클로로레소르시놀 및 2,4-다이니트로레소르시놀은 미국 코네티컷주 웨스트 헤이븐 소재의 시티 케미칼 엘엘씨로부터 입수가능하다.

치환된 레소르시놀은 당업계에 알려진 수단에 의해, 예를 들어, 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함된 미국 특허 제4,337,370호에서 기재된 기술을 사용해 제조된다.

치환된 레소르시놀은 임의의 적합한 분자량을 가질 수 있다. 소정의 실시 형태에서, 치환된 레소르시놀의 분자량의 범위는 약 175 내지 약 300이다.

"피버퓨의 추출물"은, 발명의 명칭이 피버퓨(타나세툼 파르테늄)로부터의 파르테놀라이드 무함유 생활성 성분 및 이의 제조 방법(PARTHENOLIDE FREE BIOACTIVE INGREDIENTS FROM FEVERFEW (TANACETUM PARTHENIUM) AND PROCESSES FOR THEIR PRODUCTION)인 미국 특허 공개 제2007/0196523호에 개시된 상세한 내용에 따라 제조될 수 있는 것과 같은, 식물 "타나세툼 파르테늄"의 추출물을 의미한다. 하나의 특히 적합한 피버퓨 추출물은 미국 뉴욕주 오시닝 소재의 인테그레이티드 보태니컬 테크놀로지즈(Integrated Botanical Technologies)로부터 약 20% 활성 피버퓨로서 구매가능하다.

본 발명의 조성물은 화장품용으로 유효한 양의 하나 이상의 추가의 항염증성 화합물을 포함할 수 있다. 조성물은 바람직하게는 활성물 기준으로 약 0.1% 내지 약 10%, 더 바람직하게는 약 0.5% 내지 약 5%의 추가의 항염증성 화합물을 포함한다.

본 발명의 조성물에서, 부가적인 항염증성 화합물에 대한 파울로우니아 목재 추출물의 농도비는 변할 수 있다. 예를 들어, 상기 추출물 및 항염증성 화합물은 약 0.001 내지 약 100, 바람직하게는 약 0.01 내지 약 10, 더욱 바람직하게는 약 0.25 내지 약 2의 중량 기준 농도비(이는 건조 추출물의 중량 기준 농도를 부가적인 항염증성 화합물의 중량 기준 농도로 나누어서 결정됨)로 존재할 수 있다.

소정의 바람직한 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은 파울로우니아 목재의 추출물 및 노화 징후를 개선시키는 적어도 하나의 부가적인 제제를 포함하는 피부 케어 조성물이다. 노화 징후를 개선시키는, 적합한 부가적인 제제의 예에는 트로포엘라스틴 촉진제, 콜라겐 촉진제, 레티노이드, 하이알루론산, 다이메틸아미노에탄올, N,N,N',N'-테트라키스(2-하이드록시프로필)에틸렌다이아민, 알파 하이드록스산, 폴리하이드록시산, 및 이들의 둘 이상의 조합이 포함되지만, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "트로포엘라스틴 촉진제"는 트로포엘라스틴의 생성을 향상시키는 생물학적 활성을 보유한 화합물 부류를 말한다. 본 발명에 따른 트로포엘라스틴 촉진제는 인체에서 트로포엘라스틴의 생성을 향상시킬 수 있는 모든 천연 또는 합성 화합물을 포함한다.

적합한 트로포엘라스틴 촉진제는 예를 들어 트로포엘라스틴 촉진제 분석을 이용하여 결정될 수 있다. 트로포엘라스틴 촉진제 분석은 다음과 같이 실시된다. 쥐 심장 근육모세포 H9C2 (예를 들어, 미국 버지니아주 마나사스 소재의 ATCC로부터 구매할 수 있음)를 사용한다. 10% 소 태아 혈청, 2 mM 글루타민, 100 유닛/ml의 페니실린, 및 50 ㎍/ml의 스트렙토마이신(미국 캘리포니아주 칼스배드 소재의 인비트로겐 라이프 테크놀로지스(Invitrogen LifeTechnologies))으로 보충된, 둘베코 변형 이글 배지 (DMEM, 미국 캘리포니아주 칼스배드 소재의 인비트로겐 라이프 테크놀로지스)에서 배양물을 유지한다. 엘라스틴 프로모터-루시퍼라아제 리포터 제작물(Elp2.2, 미국 위스콘신주 매디슨 소재의 프로메가(Promega)로부터 획득될 수 있는, 반딧불이 루시퍼라아제 유전자를 구동하는, nt -2267 내지 nt +2의 2.2 kb 엘라스틴 프로모터 단편)을 사용하여 세포 배양물을 일시적으로 트랜스펙팅한다. DNA는 퀴아젠 맥시(Qiagen Maxi) 컬럼 (미국 캘리포니아주 발렌시아 소재의 퀴아젠(Qiagen))에 의해 제조한다. 모든 트랜스펙션에서, 타이미딘 키나아제 프로모터 및 레닐라(Renilla) 루시퍼라아제 리포터 유전자(pRL-TK, 미국 위스콘신주 매디슨 소재의 프로메가)를 갖는 제작물이 내부 대조군으로서 포함된다. 전형적으로, 48웰 플레이트에서 성장된 세포를, 리포펙타민(Lipofectamine) 2000 (미국 캘리포니아주 칼스배드 소재의 인비트로겐 라이프 테크놀로지스)을 사용하여, 웰당 0.45 ㎍의 총 DNA로 트랜스펙션시킨다. 트랜스펙션 1일 후에, 대략 24시간 동안 세포를 표시된 농도의 제제로 처리한 후, 제조업자의 프로토콜에 따라 프로메가(미국 위스콘신 주 매디슨)로부터의 이중 루시퍼라아제 리포터 시스템(Dual-Luciferase Reporter System)을 사용하는 루시퍼라아제 분석을 위해 이를 용해한다. 몰레큘러 디바이시즈(Molecular Devices; 미국 캘리포니아주 서니베일)로부터의 발광측정기 LMAX를 사용하여, 반딧불이 루시퍼라아제 활성(엘라스틴 프로모터 활성을 나타냄)을 우선 측정한 다음, 레닐라 루시퍼라아제(내부 대조군)를 측정한다. 이들 둘의 루시퍼라아제 활성의 비(RLU)를 사용하여 트로포엘라스틴 촉진제 활성을 평가한다.

바람직하게는 트로포엘라스틴 촉진제는 0.5 마이크로그램/밀리리터 내지 2.5 밀리그램/밀리리터 (활성물 기준)의 범위 중 적어도 하나의 농도에서, 그리고 바람직하게는 1.0 마이크로그램/밀리리터 내지 2.5 밀리그램/밀리리터 (활성물 기준)의 범위 중 적어도 하나의 농도에서, 트로포엘라스틴 촉진제의 활성이 적어도 1.1, 바람직하게는 적어도 1.25, 더욱 바람직하게는 적어도 1.3, 그리고 가장 바람직하게는 적어도 1.5이다.

적합한 트로포엘라스틴 촉진제의 예에는, 블랙베리 추출물, 코티너스 추출물, 피버퓨 추출물, 필란투스 니루리(Phyllanthus niruri) 추출물, 및 구리 및/또는 아연 구성성분을 갖는 2금속 복합물이 포함되지만 이에 한정되지 않는다. 구리 및/또는 아연 구성성분을 갖는 2금속 복합물은 예를 들어 구리-아연 시트레이트, 구리-아연 옥살레이트, 구리-아연 타르타레이트, 구리-아연 말레이트, 구리-아연 석시네이트, 구리-아연 말로네이트, 구리-아연 말레에이트, 구리-아연 아스파르테이트, 구리-아연 글루타메이트, 구리-아연 글루타레이트, 구리-아연 푸마레이트, 구리-아연 글루카레이트, 구리-아연 폴리아크릴산, 구리-아연 아디페이트, 구리-아연 피멜레이트, 구리-아연 수버레이트, 구리-아연 아질레이트, 구리-아연 세바케이트, 구리-아연 도데카노에이트, 또는 이들의 조합일 수 있다. 바람직한 실시 형태에서, 트로포엘라스틴 촉진제는 블랙베리 추출물, 코티너스 추출물, 피버퓨 추출물, 및 이들의 조합으로부터 선택된다. 특히 바람직한 실시 형태에서, 트로포엘라스틴 촉진제는 블랙베리 추출물, 피버퓨 추출물, 및 이들의 조합으로부터 선택된다.

"코티너스 추출물"은 코티너스 코기그리아(Cotinus coggygria)"의 잎의 추출물, 예를 들어, 이의 물 추출물 - 불가리아 소피아 소재의 빌코쿠프(Bilkokoop)로부터 입수가능 - 을 의미한다.

"블랙베리 추출물"은 루브스(Rubus) 속의 식물, 바람직하게는 루부스 프루티코수스(Rubus fruticosus)로부터 단리된 화합물의 블렌드를 의미한다. 일 실시 형태에서, 화합물은 식물의 꽃으로부터 단리된다. 추가 실시 형태에서, 화합물은 식물의 건조된 꽃으로부터 단리된다. 이러한 화합물은 식물의 하나 이상의 부분 (예를 들어, 전체 식물, 식물의 꽃, 종자, 뿌리, 근경, 줄기, 열매 및/또는 잎)으로부터 단리될 수 있다. 바람직한 실시 형태에서, 블랙베리 추출물은 블랙베리 잎 추출물이다.

추출 공정은 그러한 식물의 조각을 물리적으로 떼어내는 것, 그리고 예를 들어, 이를 분쇄하는 것을 포함할 수 있다. 적합한 화합물의 추가적인 추출은 또한 본 기술분야에 잘 알려진 추출 절차(예를 들어, 유기 용매, 예컨대 저급 C1-C8 알코올, C1-C8 알킬 폴리올, C1-C8 알킬 케톤, C1-C8 알킬 에테르, 아세트산 C1-C8 알킬 에스테르, 및 클로로포름, 및/또는 무기 용매, 예컨대 물, 무기 산, 예컨대 염산, 및 무기 염기, 예컨대 수산화나트륨의 사용)를 이용하여 식물로부터 단리될 수 있다.

예를 들어, 블랙베리 잎 추출물은 용매로서 물, 알코올, 예를 들어 에탄올, 또는 이들의 배합물을 사용한 추출에 의해 제조될 수 있다. 그러나, 에탄올 및 물 둘 모두를 포함하는 용매를 사용하여 제조된 추출물이 바람직하다.

블랙베리 잎은 바람직하게는 추출 전에 건조된다. 블랙베리 식물의 잎만을 추출을 위해 사용하는 것이 또한 바람직하며, 다른 식물 부분, 예를 들어, 블랙베리의 열매(베리) 또는 그 가지 및 뿌리는 또한 사용하지 않는 것이 바람직하다.

일 실시 형태에서, 블랙베리 잎 추출물의 제조를 위한 추출 공정은 하기 단계들을 포함한다: a) 메탄올, 에탄올, n-프로판올, 아이소프로판올로 이루어진 군으로부터 선택된 알코올을 함유하는 용매에 블랙베리 잎을 첨가하는 단계, b) 용매를 사용하여 최대 72시간 동안 블랙베리 잎을 추출하는 단계.

적합한 블랙베리 잎 추출물을 제조하는 상세한 절차는, 개시가 본 명세서에 전체적으로 포함된 미국 특허 공개 제2008/0095719호에 개시되어 있다.

하나의 특히 적합한 블랙베리 추출물은 루부스 프루티코수스의 잎을 물과 에탄올의 혼합물로 추출하여 제조되며, 말토덱스트린 매트릭스와 약 5% 내지 약 10%의 활성으로 배합되고, 미국 뉴저지주 테테르보로 소재의 심라이즈 인크.(Symrise Inc.)로부터 구매가능하며, 명칭 "심매트릭스(SymMatrix)"로 판매된다."

"필란투스 니루리"의 추출물은 전체 식물로서 수확 및 사용될 수 있거나, 또는 선택적으로 식물의 하나 이상의 부분(예를 들어, 식물의 꽃, 종자, 뿌리, 근경, 줄기, 열매 및/또는 잎)이 사용될 수 있다. 필란투스 니루리 식물 또는 그 부분은, 예를 들어, 분쇄 또는 밀링에 의해서 분말로 미분될 수 있다. 적합한 밀링된 형태의 필란투스 니루리는 미국 네바다주 칼슨 시티 소재의 레인트리 뉴트리션, 인크.(Raintree Nutrition, Inc.)로부터 구매가능하다. 바람직하게는, 필란투스 니루리의 저분자량 단편, 예를 들어, 분자량이 약 100,000 달톤을 초과하는 분자종이 실질적으로 없는 필란투스 니루리의 단편이 사용된다. 바람직하게는, 이러한 저분자량 단편은 필란투스 니루리 식물로부터 물 추출가능하다.

본 발명의 조성물은 전술된 것들과 같은, 화장품용으로 유효한 양의 하나 이상의 트로포엘라스틴 촉진제를 포함할 수 있다. 조성물은 바람직하게는, 활성물 기준으로, 약 0.1% 내지 약 10%의 트로포엘라스틴 촉진제, 더욱 바람직하게는 약 0.5% 내지 약 5%의 트로포엘라스틴 촉진제, 가장 바람직하게는 약 0.5% 내지 약 2%의 트로포엘라스틴 촉진제를 포함한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "콜라겐 촉진제"는 콜라겐의 생성을 향상시키는 생물학적 활성을 보유한 화합물을 말한다. 본 발명에 따르면, "비-레티노이드 콜라겐 촉진제"는 레티노이드가 아니거나, 또는 레티노이드로부터 유래되며, 인체에서 콜라겐의 생성을 향상시킬 수 있는 모든 천연 또는 합성 화합물을 포함한다.

적합한 콜라겐 촉진제는, 예를 들어, 콜라겐 촉진제 분석(COLLAGEN PROMOTER ASSAY)을 사용하여 결정될 수 있다. 콜라겐 촉진제 분석은 다음과 같이 실시된다. ATCC(미국 버지니아주 매너서스 소재)로부터 구매될 수 있는, 쥐 심장 근육모세포 H9C2를 사용한다. 10% 소 태아 혈청, 2 mM 글루타민, 100 유닛/ml의 페니실린, 및 50 ㎍/ml의 스트렙토마이신(미국 캘리포니아주 칼스배드 소재의 인비트로겐 라이프 테크놀로지스)으로 보충된, 둘베코 변형 이글 배지 (DMEM, 미국 캘리포니아주 칼스배드 소재의 인비트로겐 라이프 테크놀로지스)에서 배양물을 유지한다.

예를 들어, 프레마스 바이오테크 피브이티. 리미티드(PREMAS Biotech Pvt.Ltd)(인도, 하리아나)로부터 입수할 수 있는, 반딧불이 루시퍼라아제 유전자를 구동하는, 콜라겐 1A 프로모터-루시퍼라아제 리포터 제작물을 사용하여 세포 배양물을 일시적으로 트랜스펙팅한다. 모든 트랜스펙션에서, 타이미딘 키나제 프로모터 및 레닐라 루시퍼라아제 리포터 유전자(pRL-TK, 미국 위스콘신주 매디슨 소재의 프로메가)를 갖는 제작물이 내부 대조군으로서 포함된다. 48웰 플레이트에서 성장된 세포를, 리포펙타민 2000 (미국 캘리포니아주 칼스배드 소재의 인비트로겐 라이프 테크놀로지스)을 사용하여 웰당 0.45 ㎍의 총 DNA로 트랜스펙션시킨다. 트랜스펙션 1일 후에, 대략 24시간 동안 세포를 표시된 농도의 제제로 처리한 후, 제조업자의 프로토콜에 따라 프로메가(미국 위스콘신 주 매디슨)로부터의 이중 루시퍼라아제 리포터 시스템을 사용하는 루시퍼라아제 분석을 위해 용해한다. 몰레큘러 디바이시즈(미국 캘리포니아주 서니베일)로부터의 발광측정기 LMAX를 사용하여, 반딧불이 루시퍼라아제 활성(콜라겐 촉진제 활성을 나타냄)을 우선 측정한 다음, 레닐라 루시퍼라아제(내부 대조군)를 측정한다. 이들 둘의 루시퍼라아제 활성의 비(RLU)를 사용하여 각각의 촉진제의 활성을 평가한다.

바람직하게는 적합한 콜라겐 촉진제는 0.5 마이크로그램/밀리리터 내지 2.5 밀리그램/밀리리터 (활성물 기준)의 범위 중 적어도 하나의 농도에서, 바람직하게는 1.0 마이크로그램/밀리리터 내지 2.5 밀리그램/밀리리터 (활성물 기준)의 범위 중 적어도 하나의 농도에서 콜라겐 촉진제의 활성이 적어도 1.2, 바람직하게는 적어도 1.25, 더욱 바람직하게는 적어도 1.3이다.

적합한 비-레티노이드 콜라겐 촉진제의 예에는 다음이 포함되지만 이에 한정되지 않는다: 피버퓨 (타나세툼 파르테늄)의 추출물, 센텔라 아시아티카의 추출물, 시에게스벡키아 오리엔탈리스(Siegesbeckia orientalis)의 추출물; 대두의 추출물; 콜라겐 촉진 펩티드; 우르솔산; 및 아시아티코시드.

리유니온 섬에서는 바이올렛 마로네(Violette marronne), 인도에서는 고투 콜라(Gotu Kola) 또는 인디언 페니워트(Indian pennywort), 북미에서는 센텔라 레판다(Centella repanda), 그리고, 마다가스카에서는 탈라페트라카(Talapetraka)라고도 알려져 있는, 센텔라 아시아티카는 다형태 허브(polymorphous herb)이며 움벨리페라에 (Umbelliferae) (아피아세아에(Apiaceae)) 과에 속하며, 특히, 하이드로코틸레(Hydrocotyle) 아과에 속한다. 이것은 열대지방 전반에 야생에서 자라며 해발 고도 약 600 내지 1200 미터의 습하고 그늘진 지역을 선호한다. 센텔라 아시아티카는 3가지 변종, 즉 타이피카(Typica), 아비시니카(Abyssinica) 및 플로리다나(Floridana)를 갖는다. 이 허브는 그의 치유, 진정, 진통, 항우울, 항바이러스 및 항미생물 특성에 대해 알려져 있으며 사용된다. 이 허브의 생물학적 활성은 허브 내에 트라이테르펜 분자가 존재하기 때문인 것으로 여겨진다. 적합한 센텔라 아시아티카의 추출물은 스위스 바젤 소재의 바이엘 컨슈머 헬스케어(Bayer Consumer HealthCare)로부터 TECA로 입수가능하다.

"시에게스벡키아 오리엔탈리스의 추출물"은 세더마(Sederma)(미국 뉴저지주 에디슨 소재의 크로다 인터내셔널 그룹(Croda International Group))로부터 입수가능한 다루토사이드(Darutoside)를 포함하여 식물 시에게스벡키아 오리엔탈리스의 임의의 다양한 추출물을 의미한다.

적합한 콜라겐 촉진 펩티드는 다음을 포함한다:

(1) 세더마(미국 뉴저지주 에디슨 소재의 크로다 인터내셔널 그룹)로부터 매트릭실(MATRIXYL)로 입수가능한, 팔미토일 펜타펩티드, 특히, Pal-Lys-Thr-Thr-Lys-Ser-OH를 포함한, 마트리킨(matrikine) 펩티드 (즉, 세포외 기질 단백질- 콜라겐, 엘라스틴, 또는 프로테오글리칸의 분해로부터 유도된 펩티드);

(2) 미국 펜실베이니아주 몽고메리빌 소재의 포토메덱스(Photomedex)로부터 프로사이트(PROCYTE)로 입수가능한 GHK 구리 펩티드;

(3) 세더마(미국 뉴저지주 에디슨 소재의 크로다 인터내셔널 그룹)로부터 바이오포엡티드(Biopoeptide) CL로 구매가능한 팔미토일 GHK 펩티드;

(4) 유럽 특허 제1775306 B1호에 개시되며, 하기 화학식 I, 화학식 II 및 화학식 III으로 기재된, 펩티드 VFTRN, TRNDKL 또는 이의 화장품용으로 허용가능한 염:

[화학식 I]

(여기서, 화학식 I은 적어도 6개의 아미노산 잔기를 함유하고;

A1은 Val, Ala, Leu, Met이거나 또는 부재하고;

A2는 Arg, Lys이거나 또는 부재하고;

A3은 Phe, Tyr이거나 또는 부재하고;

A4는 Thr, Ser, Ala, 또는 Lys이고;

A5는 Arg 또는 Lys이고;

A6은 Asn, Asp, Gly, 또는 Gln이고;

A7은 Asp, Asn, Glu이거나 또는 부재하고;

A8은 Lys, Arg이거나 또는 부재하고;

A9는 Leu, Met, Val, Ile, Phe이거나 또는 부재하고;

단, A3은 A2가 부재할 경우 부재할 수 있을 뿐이며, A2는 A1이 부재할 경우 부재할 수 있을 뿐이며, A7은 A8이 부재할 경우에만 부재할 수 있으며, A8은 A9가 부재할 경우 부재할 수 있을 뿐이고;

각각의 R1 및 R2는 독립적으로, H, C1-12 알킬, C7-10 페닐알킬, 또는 C(=O)E1이고, 여기서, E 1은 C1-12 알킬, C3-14 알케닐, C3- 14 알키닐, 페닐, 3,4-다이하이드록시페닐알킬, 나프틸, 또는 C 7-10 페닐알킬이고; 단, R1 또는 R2 중 어느 하나가 C(=O)E1일 때 다른 하나는 H이어야 하고; R3은 OH, NH2, C1-12 알콕시, C7-10 페닐알콕시, C11-14 나프틸알콕시, C1-12 알킬아미노, C7-10 페닐알킬아미노, 또는 C11-14 나프틸알킬아미노임)

[화학식 II]

(여기서, 화학식 II는 적어도 6개의 아미노산 잔기를 함유하고;

A'1은 Val, Ala, Leu 또는 Met이고;

A'2는 Arg 또는 Lys이고;

A'3은 Phe 또는 Tyr이고;

A'4는 Leu, Met, Val, Ile 또는 Phe이고;

A'5는 His, Tyr 또는 Phe이고;

A'6은 Ser, Thr, Ala 또는 Lys이고;

A'7은 Tyr 또는 Phe이고;

A'8은 Asp, Asn 또는 Glu이고;

A'9는 Leu, Met, Val, Ile 또는 Phe이고;

A'10은 Lys 또는 Arg이고;

A'11은 Asn, Asp, Gly 또는 Gln이고;

R1, R2, 및 R3은 화학식 I에서 정의된 것들과 동일함)

[화학식 III]

(여기서, 화학식 III은 적어도 6개의 아미노산 잔기를 함유하고;

A"1은 Cys 또는 Ser이고;

A"2는 His, Tyr 또는 Phe이고;

A"3은 Lys 또는 Arg이고;

A"4는 Leu, Met, Val, Ile 또는 Phe이고;

A"5는 Leu, Met, Val, Ile 또는 Phe이고;

A"6은 His, Tyr 또는 Phe이고;

A"7은 Asn, Asp, Gly 또는 Gln이고;

A"8은 Val, Ala, Leu 또는 Met이고;

A"9는 Asn, Asp, Gly 또는 Gln이고;

A"10은 Lys 또는 Arg이고;

R1, R2, 및 R3은 화학식 I에서 정의된 것들과 동일함)

(5) 바이오미메틱 테트라펩티드, 예를 들어, 캐나다 퀘백주 소재의 유니펙스(Unipex)로부터 크로놀린 트라이 펩티드(Chronoline Tri Peptide and)로 입수가능한 것들; 및

(6) 스위스 바젤 소재의 디에스엠(DSM)으로부터 신-콜(Syn-Coll)로 입수가능한, 팔미토일 트라이펩티드.

우르솔산은 펜타사이클릭 트라이테르펜산, 프루놀(Prunol), 말롤(Malol), 우르손(Urson),

베타-우르솔산 및 3-베타-하이드록시-우르스-12-엔-28-오익 산으로도 알려져 있다. 이것은, 예를 들어, 미국 미주리주 세인트 루이스 소재의 시그마-알드리치로부터 구매가능하다.

화학적으로 [6-[[3,4-다이하이드록시-6-(하이드록시메틸)-5-(3,4,5-트라이하이드록시-6-메틸옥산-2-일)옥시옥산-2-일]옥시메틸]-3,4,5-트라이하이드록시옥산-2-일] 10,11-다이하이드록시-9-(하이드록시메틸)-1,2,6a,6b,9,12a-헥사메틸-2,3,4,5,6,6a,7,8,8a,10,11,12,13,14b-테트라데카하이드로-1H-피센-4a-카르복실레이트)로도 알려져 있는 아시아티코사이드는, 예를 들어, 프랑스 쌩-오엔 93400 블러바드 빅토르 휴고 69 소재의 바이엘 상테 파밀리에 디비젼 세덱스(Bayer

Familiale Division Serdex)로부터 구매가능하다.

본 발명의 조성물은 화장품용으로 유효한 양의 하나 이상의 콜라겐 촉진제를 포함할 수 있다. 조성물은 바람직하게는, 활성물 기준으로, 약 0.1% 내지 약 10%의 콜라겐 촉진제, 더욱 바람직하게는 약 0.5% 내지 약 5%의 콜라겐 촉진제, 그리고 가장 바람직하게는 약 0.5% 내지 약 2%의 콜라겐 촉진제를 포함한다.

다양한 다른 물질이 또한 본 발명의 조성물 중에 존재할 수 있다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 본 조성물은 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 물질을 포함하는 피부 케어 조성물이다: 계면활성제, 킬레이팅제, 연화제, 휴멕턴트, 컨디셔너, 방부제, 불투명화제, 방향제 등.

연화제가 의미하는 것은 (예를 들어 윤활제로 작용하도록 피부 표면 상에 또는 피부 각질층 내에 남아있음으로써) 부드럽고 매끄럽고 유연한 피부 외양을 유지하는 것을 돕는 화합물이다. 적합한 연화제의 예에는 문헌[Chapter 35, pages 399-415 (Skin Feel Agents, by G Zocchi), Handbook of Cosmetic Science and Technology (edited by A. Barel, M. Paye and H. Maibach, Published in 2001 by Marcel Dekker, Inc New York, NY)]에서 발견되는 것들이 포함되며, 바셀린, 헥실데실 스테아레이트, 및 식물유, 견과유, 및 야채유, 예를 들어 마카다미아 너트유, 미강유, 포도씨유, 야자유, 프림로즈유(primrose oil), 수소화 땅콩유 및 아보카도유가 포함되지만, 이에 한정되지 않는다.

휴멕턴트가 의미하는 것은 피부의 상부 층의 수분 함량을 증가시키도록 의도된 화합물(예를 들어, 흡습성 화합물)이다. 적합한 휴멕턴트의 예에는 문헌[Chapter 35, pages 399-415 (Skin Feel Agents, by G Zocchi), Handbook of Cosmetic Science and Technology (edited by A. Barel, M. Paye and H. Maibach, Published in 2001 by Marcel Dekker, Inc New York, NY)]에서 발견되는 것들이 포함되며, 글리세린, 소르비톨 또는 트레할로스 (예를 들어, α,α- 트레할로스, β,β-트레할로스, α,β-트레할로스) 또는 이의 염 또는 에스테르 (예를 들어, 트레할로스 6-포스페이트)가 포함되지만 이에 한정되지 않는다.

계면활성제가 의미하는 것은 클렌징하도록 또는 유화시키도록 의도된 표면 활성제이다. 적합한 계면활성제의 예에는 문헌[Chapter 37, pages 431-450 (Classification of surfactants, by L. Oldenhove de Guertechin), Handbook of Cosmetic Science and Technology (edited by A. Barel, M. Paye and H. Maibach, Published in 2001 by Marcel Dekker, Inc New York, NY)]에서 발견되는 것들이 포함되며, 음이온성 계면활성제, 예를 들어 황산염, 양이온성 계면활성제, 예를 들어 베타인, 양쪽성 계면활성제, 예를 들어 소듐 코코 글리시네이트, 비이온성 계면활성제, 예를 들어 알킬 폴리글루코시드가 포함되지만, 이에 한정되지 않는다.

적합한 킬레이팅제의 예에는 본 발명의 조성물을 보호 및 보존할 수 있는 것이 포함된다. 바람직하게는, 킬레이팅제는 에틸렌다이아민 테트라세트산("EDTA")이며, 더 바람직하게는 테트라소듐 EDTA이고, 이는 미국 미시간주 미들랜드 소재의 다우 케미칼 컴퍼니(Dow Chemical Company)로부터 상표명 "베르센(Versene) 100XL"로 구매가능하다.

적합한 방부제는 예를 들어 파라벤, 4차 암모늄 화학종, 페녹시에탄올, 벤조에이트, DMDM 하이단토인, 유기 산을 포함하며, 조성물의 총 중량을 기준으로 약 0 내지 약 1% 또는 약 0.05% 내지 약 0.5%의 양으로 조성물에 존재한다.

모발에 광택과 같은 추가적인 특질을 부여하는 임의의 다양한 컨디셔너가 본 발명에서 사용하기에 적합하다.

예에는 대기압 비점이 약 220℃ 미만인 휘발성 실리콘 컨디셔닝제가 포함되지만, 이에 한정되지 않는다. 적합한 휘발성 실리콘의 예에는 비배타적으로 폴리다이메틸실록산, 폴리다이메틸사이클로실록산, 헥사메틸다이실록산, 사이클로메티콘 유체, 예를 들어 미국 미시간주 미들랜드 소재의 다우 코닝 코포레이션(Dow Corning Corporation)으로부터 상표명 "DC-345"로 구매가능한 폴리다이메틸사이클로실록산 및 이들의 혼합물이 포함되며, 바람직하게는 사이클로메티콘 유체가 포함된다. 다른 적합한 컨디셔너는 양이온성 중합체를 포함하며, 이는 폴리쿼터늄, 양이온성 구아 등을 포함한다.

임의의 다양한 구매가능한 진주 광택제 또는 불투명화제가 본 발명에서 사용하기에 적합하다. 적합한 진주 광택제 또는 불투명화제의 예에는 (a) 약 16개 내지 약 22개의 탄소 원자를 갖는 지방산 및 (b) 에틸렌 또는 프로필렌 글리콜의 모노 또는 다이에스테르; (a) 약 16개 내지 약 22개의 탄소 원자를 갖는 지방산과 (b) 화학식 HO-(JO)_a-H (여기서, J는 약 2개 내지 약 3개의 탄소 원자를 갖는 알킬렌기이며; a는 2 또는 3임)의 폴리알킬렌 글리콜의 모노 또는 다이에스테르; 약 16개 내지 약 22개의 탄소 원자를 포함하는 지방 알코올; 화학식 KCOOCH₂L (여기서, K 및 L은 독립적으로 약 15개 내지 약 21개의 탄소 원자를 포함함)의 지방 에스테르; 샴푸 조성물에 불용성인 무기 고형물; 및 이들의 혼합물이 포함되지만, 이에 한정되지 않는다.

피부 상에 사용하기에 적합하고 피부 케어 조성물에 바람직한 임의의 방향제 조성물이 본 발명에 따라 사용될 수 있다.

소정의 바람직한 실시 형태에서, 본 발명은 본 발명의 조성물을 포함하는 기재의 형태로 존재할 수 있다. 임의의 적합한 기재가 본 발명에서 사용될 수 있다. 적합한 기재 및 기재 물질의 예는 예를 들어, 이들의 전부가 참고로 본원에 삽입되어 있는 미국 특허 공고 제2005/0226834호 및 제2009/0241242호에 개시되어 있다.

소정의 바람직한 실시 형태에서, 기재는 와이프, 글러브 또는 페이셜 마스크이다. 바람직하게는, 이러한 실시 형태는 상기 참고 문헌에 정의되어 있는 바와 같은 수불용성 기재를 포함할 수 있다. 특정 실시 형태의 경우, 수불용성 기재는, 이것이 인간 사용자의 얼굴을 피복하여 마스크 기재로서 수불용성 기재를 사용자의 얼굴 주변에 놓기 편하도록 하기 위한 크기 및 형상을 가질 수 있다. 예를 들어, 수불용성 마스크 기재는 사용자의 입, 코, 및/또는 눈을 위한 개구부를 가질 수 있다. 대안적으로, 수불용성 기재는 이러한 개구부를 가지지 않을 수 있다. 개구부가 없는 이러한 구성은, 수불용성 기재를 얼굴이 아닌 피부 영역을 덮으려는 본 발명의 실시 형태에서 또는 수불용성 기재를 와이프로서 사용할 경우의 본 발명의 실시 형태에서 유용할 수 있다. 수불용성 기재는 다양한 형상, 예컨대 각진 형상 (예를 들어, 직사각형) 또는 아치형 형상, 예컨대 환형 또는 타원형일 수 있다. 소정의 실시 형태에 있어서, 기재는 전체적으로 본 명세서에 포함된 미국 특허 공개 제2006/0141014호에 기재된 것과 같은 글러브이다.

본 발명의 일 실시 형태에서, 제품은 상이한 형상의 복수의 수불용성 기재를 포함한다. 본 발명의 일 실시 형태에서, 제품은 제1 수불용성 기재 및 제2 수불용성 기재를 포함한다. 제1 수불용성 기재는 이마 상에 적용하기 위해 형상화되고, 제2 수불용성 기재는 입 주변, 예컨대 입술 위 및/또는 아래, 턱, 및/또는 뺨에 적용하기 위해서 형상화된다. 본 발명의 일 실시 형태에서, 제1 수불용성 기재는 또한 얼굴의 코 영역에 적용된다. 제1 수불용성 기재는 표면적이 약 100 ㎠ 내지 약 200 ㎠, 예컨대 약 120 ㎠ 내지 약 160 ㎠일 수 있고, 제2 수불용성 기재는 표면적이 약 100 ㎠ 내지 약 300 ㎠, 예컨대 약 150 ㎠ 내지 약 250 ㎠이다. 본 발명의 일 실시 형태에서, 수불용성 기재는, 그것이 예를 들어 사용자의 얼굴 또는 다른 신체 부위에 쉽게 순응하거나 또는 그 위를 덮을 수 있도록 낮은 강성도(stiffness)를 갖는다.

본 발명은 피부 라이트닝 처리를 필요로 하는 피부에 파울로우니아 목재의 추출물을 적용함으로써 피부를 라이트닝하는 방법을 추가로 포함하며, 이러한 추출물 및 이의 실시 형태는 상기에 기재된 바와 같다. 소정의 실시 형태에서, 본 방법은 파울로우니아 목재의 추출물, 예를 들어 파울로우니아 토멘토사 목재 추출물, 또는 파울로우니아 포르투네이 목재 추출물, 파울로우니아 엘롱가타 목재 추출물, 파울로우니아 카와카미이 목재 추출물 또는 이들의 둘 이상의 조합을 포함하는 본 발명의 조성물을 피부 라이트닝 처리를 필요로 하는 피부에 적용하는 단계를 포함한다.

바람직하게는, 본 발명의 방법은 피부 라이트닝에 유효한 양의, 바람직하게는 안전하고 유효한 양의 파울로우니아 목재 추출물을 피부에 적용하는 단계를 포함한다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 본 방법은 0 초과 내지 약 20%의 파울로우니아 목재 추출물을 필요로 하는 피부에 적용하는 단계를 포함한다. 소정의 다른 바람직한 실시 형태에서, 본 방법은 약 0.0001 내지 약 20%, 약 0.001 내지 약 10%, 약 0.01 내지 약 5%, 약 0.1 내지 약 5%, 또는 약 0.2 내지 약 2%의 파울로우니아 목재 추출물을 필요한 피부에 적용하는 단계를 포함한다. 소정의 다른 바람직한 실시 형태에서, 본 방법은 피부에 대하여 0 초과 내지 약 1%, 약 0.0001 내지 약 1%, 약 0.001 내지 약 1%, 또는 약 0.01 내지 약 1%의 파울로우니아 목재 추출물을 포함한다. 소정의 다른 바람직한 실시 형태에서, 본 방법은 약 1 내지 약 5%, 바람직하게는 약 2 내지 약 5%의 파울로우니아 목재 추출물을 피부에 적용하는 단계를 포함한다.

필요한 피부에 추출물을 적용하는 임의의 적합한 방법을 본 발명에 따라서 사용할 수 있다. 예를 들어, 추출물은 패키지로부터 직접 필요한 피부에, 손으로 필요한 피부에 적용될 수 있거나, 또는 와이프 또는 마스크 또는 이들의 둘 이상의 조합과 같은 기재로부터 전달될 수 있다. 다른 실시 형태에서, 추출물은 드롭퍼(dropper), 튜브, 롤러, 스프레이, 패치를 통해 적용될 수 있거나, 또는 욕조 또는 달리 피부에 적용될 물 등에 첨가될 수 있다.

소정의 실시 형태에서, 본 발명의 방법은 파울로우니아 목재 추출물을 소정 기간 동안 피부와 접촉하도록 남겨두는 단계를 추가로 포함한다. 예를 들어, 소정의 바람직한 실시 형태에서, 적용 후, 추출물은 약 15분 이상 동안 피부와 접촉하도록 남겨진다. 소정의 더욱 바람직한 실시 형태에서, 추출물은 약 20분 이상, 보다 바람직하게는 약 1시간 이상 동안 피부와 접촉하도록 남겨진다.

소정의 실시 형태에서, 본 발명의 방법은 파울로우니아 목재 추출물을 선택된 기간에 걸쳐 피부에 다회 적용하는 것을 포함하는 요법을 포함한다. 예를 들어, 소정의 실시 형태에서, 본 발명은 피부 라이트닝을 필요로 하는 피부에 파울로우니아 목재 추출물을 포함하는 조성물을 적어도 12주 동안, 바람직하게는 적어도 8주 동안, 그리고 더욱 바람직하게는 적어도 2주 동안, 일일 1회 또는 2회 적용하는 단계를 포함하는 피부 라이트닝 방법을 제공한다.

소정의 바람직한 실시 형태에서, 본 발명의 방법은 파울로우니아 목재 추출물을 포함하는 적어도 2가지의 상이한 조성물 또는 제품을 피부에 적용하는 단계를 포함한다. 예를 들어, 본 방법은 파울로우니아 목재 추출물을 포함하는 제1 조성물을 피부 라이트닝을 필요로 하는 피부에 적용한 후, 파울로우니아 목재 추출물을 포함하지만 달리는 제1 조성물과 상이한 제2 조성물을 피부 라이트닝을 필요로 하는 피부에 적용하는 단계를 포함할 수 있다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 제1 조성물 및 제2 조성물은 로션, 클렌저, 마스크, 와이프, 크림, 세럼, 겔 등으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택될 수 있다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 제1 조성물 및 제2 조성물 중 적어도 하나는 클렌저, 로션, 크림, 에센스, 또는 세럼이고, 다른 것은 페이셜 마스크 또는 와이프이다. 소정의 다른 바람직한 실시 형태에서, 제1 조성물 및 제2 조성물 중 적어도 하나는 클렌저이고, 다른 것은 로션 또는 크림이다.

소정의 다른 바람직한 실시 형태에서, 본 방법은

파울로우니아 목재 추출물을 포함하는 적어도 3가지의 제품을 피부 라이트닝을 필요로 하는 피부에 적용하는 단계를 포함한다. 바람직하게는, 이러한 3개의 제품은 클렌저, 로션, 크림, 에센스, 및 페이셜 마스크로 이루어진 군으로부터 선택된다.

본 발명은 노화 징후 개선을 필요로 하는 피부에 파울로우니아 목재의 추출물 - 이들의 이러한 추출물 및 조성물은 상기에 기재된 바와 같음 - 을 적용하는 단계를 포함하는 피부 노화 징후 개선 방법과, 피부 염증 감소를 필요로 하는 피부에 파울로우니아 목재의 추출물 - 이들의 이러한 추출물 및 조성물은 상기에 기재된 바와 같음 - 을 적용하는 단계를 포함하는 피부 염증 감소 방법을 추가로 포함한다.

본 발명은 신체 상에 치료가 필요한 임의의 피부에 적용하는 것을 포함할 수 있다. 예를 들어, 얼굴, 입술, 목, 흉부, 등, 팔, 겨드랑이, 손, 발 및/또는 다리의 피부 중 임의의 하나 이상에 적용이 이루어질 수 있다.

바람직하게는, 본 발명의 방법은 안전하고 유효한 양의 파울로우니아 목재 추출물을 피부에 적용하는 단계를 포함한다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 본 방법은 0 초과 내지 약 20%의 파울로우니아 목재 추출물을 필요로 하는 피부에 적용하는 단계를 포함한다. 소정의 다른 바람직한 실시 형태에서, 본 방법은 약 0.0001 내지 약 20%, 약 0.001 내지 약 10%, 약 0.01 내지 약 5%, 약 0.1 내지 약 5%, 또는 약 0.2 내지 약 2%의 파울로우니아 목재 추출물을 필요한 피부에 적용하는 단계를 포함한다. 소정의 다른 바람직한 실시 형태에서, 본 방법은 피부에 대하여 0 초과 내지 약 1%, 약 0.0001 내지 약 1%, 약 0.001 내지 약 1%, 또는 약 0.01 내지 약 1%의 파울로우니아 목재 추출물을 포함한다. 소정의 다른 바람직한 실시 형태에서, 본 방법은 약 1 내지 약 5%, 바람직하게는 약 2 내지 약 5%의 파울로우니아 목재 추출물을 피부에 적용하는 단계를 포함한다.

필요한 피부에 추출물을 적용하는 임의의 적합한 방법을 본 발명에 따라서 사용할 수 있다. 예를 들어, 추출물은 패키지로부터 직접 필요한 피부에, 손으로 필요한 피부에 적용될 수 있거나, 또는 와이프 또는 마스크 또는 이들의 둘 이상의 조합과 같은 기재로부터 전달될 수 있다. 다른 실시 형태에서, 추출물은 드롭퍼(dropper), 튜브, 롤러 스프레이, 패치를 통해 적용될 수 있거나, 또는 욕조 또는 달리 피부에 적용될 물 등에 첨가될 수 있다.

소정의 실시 형태에서, 본 발명의 방법은 파울로우니아 목재 추출물을 선택된 기간에 걸쳐 피부에 다회 적용하는 것을 포함하는 요법을 포함한다. 예를 들어, 소정의 실시 형태에서, 본 발명은 필요로 하는 피부에 파울로우니아 목재 추출물을 포함하는 조성물을 적어도 12주 동안, 바람직하게는 적어도 8주 동안, 그리고 더욱 바람직하게는 적어도 2주 동안, 일일 1회 또는 2회 적용하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다.

소정의 바람직한 실시 형태에서, 본 발명의 방법은 파울로우니아 목재 추출물을 포함하는 적어도 2가지의 상이한 조성물 또는 제품을 피부에 적용하는 단계를 포함한다. 예를 들어, 본 방법은 파울로우니아 목재 추출물을 포함하는 제1 조성물을 필요로 하는 피부에 적용한 후, 파울로우니아 목재 추출물을 포함하지만 달리는 제1 조성물과 상이한 제2 조성물을 필요로 하는 그러한 피부에 적용하는 단계를 포함할 수 있다.

본 발명의 조성물은 다양한 다른 용도에 적합할 수 있다.

예를 들어, 본 발명의 조성물은 건성 피부의 클렌징 및/또는 보습, 노화 징후 처리 및/또는 염증후 색소과다침착을 포함하는 염증 치료, 모공 크기 감소, 여드름 치료, 피지 생성 감소, 흉터 완화 및 임신선 출현 감소, 셀룰라이트 출현 또는 오렌지필(orange peel) 출현의 감소에 유용할 수 있다. 소정의 다른 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은 미세 박피술 처리와 같은 기계적 또는 물리적 박리제, 또는 살리실산과 같은 각질 용해제 또는 화학적 박리제와 동시에 또는 이의 수 시간 내에 적용될 수 있다. 소정의 다른 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은 점막 또는 다른 조직, 예를 들어, 질, 구강, 또는 눈의 조직에 도포된다. 소정의 다른 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은 치유를 촉진하기 위해 가벼운 상처 또는 수술후 부위에, 벌레 물린 데, 옻 오른 데, 또는 유사한 피부 상태에, 또는 일반적으로 가려움을 완화하기 위해 도포된다. 소정의 다른 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은 피부 자극을 완화시키기 위하여 도포된다. 자극은 피부 케어 제품 및 화장품 중 성분, 예를 들어 레티노이드 및 그 유도체, 벤조일 퍼옥사이드, 알파 하이드록시산 및 이의 유도체, 살리실산, 계면활성제, 천연 식물 추출물, 썬스크린 활성제, 우레아 및 방부제 등에 의해 야기되는 외부 기원의 것일 수 있다. 자극은 일광, 바람 또는 면도와 같은 다른 외부 기원의 것일 수 있다. 또한 자극은 여드름, 주사, 아토피성 피부염 및 기타 질환 상태와 같은 내재적 질환 상태에 의해 야기될 수 있다. 다른 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은 잇몸 발적 감소에 유용할 수 있다. 본 추출물은 말초 혈관 확장증 또는 거미상 정맥 출현의 감소, 주사, 피부의 얼룩덜룩함 및 피부 잡티 출현의 감소에서 사용하기에 또한 적합할 수 있다. 소정의 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은 모발 건강 향상을 위하여, 발모 촉진 또는 모발 손실 지연을 위하여, 비듬의 예방 또는 치료를 위하여, 지루, 지루성 두피염의 예방 또는 치료를 위하여 그리고 두피의 건강 및 보습의 향상을 위하여 모발, 두피 또는 이들 둘 모두에 적용된다. 다른 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은 잇몸의 발적 또는 과민증의 예방 또는 치료를 위하여, 치주염의 감소를 위하여, 치은염의 치료 또는 예방을 위하여, 구강 건조 증상 또는 구강 건조 느낌의 감소를 위하여 구강 내에 잇몸에 적용된다. 또 다른 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은 눈 충혈 또는 자극된 눈의 출현의 치료, 예방 또는 감소를 위하여, 결막염의 예방 또는 치료를 위하여, 눈의 수분의 개선을 위하여, 안구 건조 느낌의 감소를 위하여 눈에 적용된다. 다른 실시 형태에서, 본 발명의 조성물은 탄력성 손실, 자극 또는 건조 징후의 예방 또는 치료를 위하여 질 점막에 적용된다.

본 발명은 파울로우닌을 포함하는 피부 케어 조성물과, 피부 처리 방법, 예를 들어 피부 라이트닝 방법, 하나 이상의 피부 노화 징후의 처리 방법, 염증의 치료 방법 등을 추가로 포함하며, 이는 파울로우닌, 즉 하기 화학식의 화합물을 포함하는 조성물을 피부 라이트닝 처리를 필요로 하는 피부에 적용함에 의한 것이다:

파울로우닌

본 발명에서 사용하기 위한 파울로우닌은 식물로부터의 추출물과 같이 임의의 다양한 천연 공급원을 통하여 유래될 수 있거나, 또는 공지된 합성법을 이용하여 합성될 수 있다 (예를 들어, 문헌[Stereoselective Synthesis of 3-Alkyl-2-aryltetrahydrofuran-4-ols: Total Synthesis of (±)-Paulownin. Angle, Steven R.; Choi, Inchang; Tham, Fook S. Department of Chemistry. Wright State University, Dayton, OH, USA. Journal of Organic Chemistry (2008), 73(16), 6268-6278]; 및 문헌[Total synthesis of (+)-paulownin. Okazaki, Momotoshi; Ishibashi, Fumito; Shuto, Yoshihiro; Taniguchi, Eiji. Faculty Agric., Ehime Univ., Matsuyama, Japan. Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry (1997), 61(4), 743-745)] 참조). 소정의 바람직한 실시 형태에서, 파울로우닌은 식물로부터 추출된다. 적합한 식물의 예에는 파울로우니아속의 식물, 예를 들어 파울로우니아 토멘토사, 파울로우니아 포르투네이, 파울로우니아 엘롱가타, 파울로우니아 카와카미이와, 다른 식물, 예를 들어 아마노아 오블롱기폴리아(Amanoa oblongifolia), 아마노아 오블롱기폴리아(Amanoa oblongifolia), 돌리찬드로네 크리스파(Dolichandrone crispa), 피르미아나 플라타니폴리아(Firmiana platanifolia), 그멜리나 아르보레아(Gmelina arborea), 그멜리나 아시아티카(Gmelina asiatica), 그멜리나 비티엔시스(Gmelina vitiensis), 이소돈 파르비폴리우스(Isodon parvifolius), 키겔리아 핀나타(Kigelia pinnata), 마르캄미아 플라타이칼릭스(Markhamia platycalyx), 마르캄미아 스티풀라테(Markhamia stipulate), 밀링그토니아 호르텐시스(Millingtonia hortensis), 올레아(olea)종의 식물, 필라르트론 코모렌세(Phyllarthron comorense), 타베부이아 인카나(Tabebuia incana), 비텍스 트리폴리아(Vitex trifolia), 프라시움 마주스(Prasium majus), 이들의 둘 이상의 조합 등이 포함된다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 파울로우닌은 파울로우니아 토멘토사, 파울로우니아 포르투네이, 파울로우니아 엘롱가타, 및/또는 파울로우니아 카와카미이의 목재로부터 추출된다.

소정의 실시 형태에서, 파울로우닌은 파울로우니아속의 식물, 예를 들어 파울로우니아 토멘토사, 파울로우니아 포르투네이, 파울로우니아 엘롱가타, 및/또는 파울로우니아 카와카미이의 세포 배양물을 비롯하여 다양한 식물의 세포 배양물의 추출을 통하여 수득될 수 있다. 본 발명에서 사용하기 위한 추출물/파울로우닌을 수득하기 위하여 추출되는 세포 배양물은 현탁 세포 배양물 등을 비롯하여 임의의 형태의 것일 수 있다.

본 발명의 조성물은 상기에 기재된 바와 같이 임의의 적합한 선택적 화장품 성분을 포함할 수 있으며, 상기에 기재된 바와 같이 임의의 적합한 화장품 형태 (예를 들어, 용액, 현탁액, 바, 클렌저, 로션, 크림, 에센스, 페이셜 마스크 등)로 존재할 수 있다. 게다가, 본 발명의 조성물은 하나 이상의 추가의 피부 라이트닝제, 항염증제, 콜라겐 촉진제 및/또는 트로포엘라스틴 촉진제를 포함할 수 있으며, 이는 상기에 기재된 바와 같다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 본 조성물은 하나 이상의 추가의 피부 라이트닝제를 포함한다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 본 조성물은 하나 이상의 추가의 항염증제를 포함한다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 본 조성물은 하나 이상의 추가의 콜라겐 촉진제를 포함한다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 본 조성물은 하나 이상의 추가의 트로포엘라스틴 촉진제를 포함한다.

소정의 실시 형태에서, 본 발명의 방법은 처리를 필요로 하는 (예를 들어, 피부 라이트닝 등을 필요로 하는) 피부에 식물 추출물을 포함하는 조성물을 적용하는 단계를 포함하며, 여기서 추출물은 약 20 중량% 이상의 파울로우닌을 포함한다. 소정의 더 바람직한 실시 형태에서, 본 방법은 약 40 중량% 이상의 파울로우닌, 예를 들어 약 50 중량% 이상, 약 60 중량% 이상, 약 70 중량% 이상, 또는 80 중량% 이상의 파울로우닌을 포함하는 식물 추출물을 포함하는 조성물을 적용하는 단계를 포함한다.

파울로우닌을 포함하는 추출물은 본 명세서에 기재된 추출법들 중 임의의 것을 통하여 파울로우니아 목재로부터 유래되는 물질의 하나 이상의 분획물일 수 있거나, 또는 상기 분획물로 만들어질 수 있다. 소정의 실시 형태에서, 본 추출물은 파울로우니아 목재로부터 유래된 하나의 분획물, 또는 둘 이상의 분획물들의 조합을 포함한다.

소정의 실시 형태에서, 본 발명의 방법은 처리를 필요로 하는 피부에 90% 이상이 되도록 단리되고/되거나 정제된 파울로우닌을 포함하는 조성물을 적용하는 단계를 포함한다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 본 조성물에는 90%보다 많이 순수한 파울로우닌인 파울로우닌 물질이 혼입되거나 또는 첨가된다.

소정의 실시 형태에서, 단리된 파울로우닌 및/또는 파울로우닌을 포함하는 조성물은 소정의 물질이 본질적으로 없도록 제조될 수 있다. 일 실시 형태에서, 파울로우닌 물질, 파울로우닌 물질을 포함하는 조성물 또는 이들 둘 모두에는 우르솔산, 베타-시토스테롤 또는 이들 둘 모두가 본질적으로 없다.

바람직하게는, 본 발명의 방법은 유효한 양, 바람직하게는 안전하고 유효한 양의 파울로우닌을 피부에 적용하는 단계를 포함한다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 본 방법은 필요로 하는 피부에 0 초과 내지 약 20%의 파울로우닌을 적용하는 단계를 포함한다. 소정의 다른 바람직한 실시 형태에서, 본 방법은 필요로 하는 피부에 약 0.0001 내지 약 20%, 약 0.001 내지 약 10%, 약 0.01 내지 약 5%, 약 0.1 내지 약 5%, 또는 약 0.2 내지 약 2%의 파울로우닌을 적용하는 단계를 포함한다. 소정의 다른 바람직한 실시 형태에서, 본 방법은 피부에 대하여 0 초과 내지 약 1%, 약 0.0001 내지 약 1%, 약 0.001 내지 약 1%, 또는 약 0.01 내지 약 1%의 파울로우닌을 포함한다. 소정의 다른 바람직한 실시 형태에서, 본 방법은 피부에 약 1 내지 약 5%, 바람직하게는 약 2 내지 약 5%의 파울로우닌을 적용하는 단계를 포함한다.

필요로 하는 피부에 파울로우닌을 포함하는 조성물을 적용하는 임의의 적합한 방법이 본 발명에 따라 사용될 수 있다. 예를 들어, 추출물은 패키지로부터 직접 필요한 피부에, 손으로 필요한 피부에 적용될 수 있거나, 또는 와이프 또는 마스크 또는 이들의 둘 이상의 조합과 같은 기재로부터 전달될 수 있다. 다른 실시 형태에서, 추출물은 드롭퍼(dropper), 튜브, 롤러 스프레이, 패치를 통해 적용될 수 있거나, 또는 욕조 또는 달리 피부에 적용될 물 등에 첨가될 수 있다.

소정의 실시 형태에서, 본 발명의 방법은 파울로우닌을 소정의 기간 동안 피부와 접촉하도록 남겨두는 단계를 추가로 포함한다. 예를 들어, 소정의 바람직한 실시 형태에서, 적용 후, 추출물은 약 15분 이상 동안 피부와 접촉하도록 남겨진다. 소정의 더욱 바람직한 실시 형태에서, 추출물은 약 20분 이상, 보다 바람직하게는 약 1시간 이상 동안 피부와 접촉하도록 남겨진다.

소정의 실시 형태에서, 본 발명의 방법은 파울로우닌을 선택된 기간에 걸쳐 피부에 다회 적용하는 것을 포함하는 요법을 포함한다. 예를 들어, 소정의 실시 형태에서, 본 발명은 필요로 하는 피부에 파울로우닌을 포함하는 조성물을 적어도 12주 동안, 바람직하게는 적어도 8주 동안, 그리고 더욱 바람직하게는 적어도 2주 동안, 일일 1회 또는 2회 적용하는 단계를 포함하는, 피부 라이트닝 방법 또는 다른 처리 방법을 제공한다.

소정의 바람직한 실시 형태에서, 본 발명의 방법은 파울로우닌을 포함하는 적어도 2가지의 상이한 조성물 또는 제품을 피부에 적용하는 단계를 포함한다. 예를 들어, 본 방법은 파울로우닌을 포함하는 제1 조성물을 피부 라이트닝 또는 다른 처리를 필요로 하는 피부에 적용한 후, 파울로우닌을 포함하지만 달리는 제1 조성물과 상이한 제2 조성물을 피부 라이트닝 또는 다른 처리를 필요로 하는 피부에 적용하는 단계를 포함할 수 있다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 제1 조성물 및 제2 조성물은 로션, 클렌저, 마스크, 와이프, 크림, 세럼, 겔 등으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택될 수 있다. 소정의 바람직한 실시 형태에서, 제1 조성물 및 제2 조성물 중 적어도 하나는 클렌저, 로션, 크림, 에센스, 또는 세럼이고, 다른 것은 페이셜 마스크 또는 와이프이다. 소정의 다른 바람직한 실시 형태에서, 제1 조성물 및 제2 조성물 중 적어도 하나는 클렌저이고, 다른 것은 로션 또는 크림이다.

소정의 다른 바람직한 실시 형태에서, 본 방법은

파울로우닌을 포함하는 적어도 3가지의 제품을 피부 라이트닝 또는 다른 처리를 필요로 하는 피부에 적용하는 단계를 포함한다. 바람직하게는, 이러한 3개의 제품은 클렌저, 로션, 크림, 에센스, 및 페이셜 마스크로 이루어진 군으로부터 선택된다.

실시예

실시예에서 하기 시험 방법을 사용하였다:

멜라닌 합성 억제 시험

B16(F10) 쥐과 흑색종 세포의 대조군 샘플을 하기에 언급된 바와 같이 제조하고, 수확하였으며, 임의의 시험 샘플을 첨가하지 않고, UVB에 노출하지 않았다 (비처리된 대조군). 다른 대조군 샘플을 하기에 언급된 바와 같이 제조하고, 수확하였으며, 시험 샘플을 첨가하지 않고, 하기에 기재된 바와 같이 UVB에 노출하였다 (처리된 대조군). B16(F10) 세포의 하나 이상의 샘플을 제조하고, 각각을 하기에 기재된 바와 같이 시험 샘플 (예를 들어, E1)로 예비-처리한 후 UVB에 노출시켰다. 처리 시, 세포 내에서의 UVB 자극된 멜라닌형성 및 시험 화합물을, 멜라닌형성을 억제하거나 속도를 늦추는 능력을 기준으로 평가하였다. 595 ㎚에서의 단백질 측정 및 470 ㎚에서의 멜라닌 함량을 위해서 세포를 용해하였다. 시험 화합물에 의해서 성취된 억제율 (%)을, 처리된 대조군과 비교하여, 시험 화합물의 효능을 측정하였다.

시험 절차:

제1일에, 쥐과 흑색종 B16(F10) 세포를, 플레이트 당 약 1백만 개의 세포 밀도로 60 ㎜ 플레이트에 접종하고, 48시간 동안 37℃, 5% CO₂에서 인큐베이팅하였다. 제2일에, 컨플루언시 비율이 90 내지 100%인 세포를 2시간 동안 소정의 농도 (예를 들어 25 ㎍/mL)에서 시험 화합물로 처리하고 (시험 화합물 샘플의 경우에만), 이어서 UVB 200 mJ/㎠에 노출하였다 (시험 샘플 및 처리된 대조군의 경우). 제3일에 (시험 샘플 및 처리된 대조군의 경우 UVB 조사 후 24시간) 세포를 수확하고, 단백질 용해 완충액 (50 mM 트리스(Tris), pH 8, 2 mM EDTA, 150 mM NaCl, 및 1% 트리톤(Triton) X 100 - 바이오라드(BioRad)로부터 구매한 비이온성 계면활성제, 카탈로그 번호: 161-0407)에서 용해시키고, 원심분리하였다. 생성된 상청액을 단백질 염료 분석제 (바이오-라드 단백질 분석 시약)와 잘 혼합하고, 분광 광도계 (몰레큘러 디바이시즈(Molecular Devices)의 VERSAmax)를 사용하여 595 ㎚에서의 샘플의 광학 밀도 (단백질 분석 OD)를 측정하였다. 상청액을 제거한 후 남은 세포 펠렛을 알칼리성 DMSO 완충액 중에 용해하고, 생성된 용액을 470 ㎚에서 멜라닌 흡수도 분석을 위해 사용하여 멜라닌 분석 OD를 측정하였다.

비처리된 대조군, 처리된 대조군, 및 각각의 시험 샘플의 3개의 샘플을 각각 제조하고, 각각에 대해서 멜라닌 및 단백질 OD를 측정하였다. 하기 수학식으로, 비처리된 대조군 (3개 샘플), 처리된 대조군 (3개 샘플) 및 시험 샘플 (각각의 시험 화합물에 대한 3개 샘플) 각각에 대한 정규화된 멜라닌을 계산하였다:

정규화된 멜라닌 = 멜라닌 분석 OD/단백질 분석 OD.

비처리된 대조군의 정규화된 멜라닌 평균값을 계산하였고 (3개의 계산 값의 합/3), 처리된 대조군의 정규화된 멜라닌 평균값을 유사하게 계산하였다.

하기 수학식에 의해서, 대조군의 유도 값을 계산하였다:

대조군의 유도 값 = 처리된 대조군의 정규화된 멜라닌 평균값 - 비처리된 대조군의 정규화된 멜라닌 평균값.

이어서, 시험 샘플 각각의 유도 값을 하기 수학식에 의해 계산하였다:

시험 샘플의 유도 값 = 시험 샘플의 정규화된 멜라닌 - 비처리된 대조군의 정규화된 멜라닌 평균값.

이어서, 하기 수학식에 의해서, 시험 샘플 각각의 억제율 %를 계산하였다:

100 x [(대조군의 유도 값 - 시험 샘플에 의한 유도 값)/대조군의 유도 값]. 평균 억제율 %는 각각의 시험 샘플의 생성된 3개의 억제율 % 값들의 합을 3으로 나눈 것으로 계산한다.

억제율에 대한 계산 순서가 이론적인 예에 의해서 설명되어 있으며, 하기 표가 참고가 된다.

피부 라이트닝 시험 (ΔL)으로서의 피부 표피 등가물 모델

피부 표피 등가물 조직은 맷텍의 멜라노덤 시스템(MatTek's MelanoDerm™ System)으로부터 상업적으로 입수되며, 하기 시험에 사용하였다. 맷텍의 멜라노덤 시스템은 정상의 인간-유래 표피 케라티노사이트 (NHEK) 및 멜라노사이트 (NHM)로 구성되며, 이것은 배양되어 다층의 고도로 분화된 인간 표피 모델을 형성한다. 구체적으로, 직경이 각각 9 ㎜인 MEL-300-B 조직을 하기 시험에서 사용하였다.

적절한 비히클 및 시험 농도에서 제조된 시험 물질을 피부 모델에 매일 국소 도포하였고, 실험을 8일 동안 지속하였다. 제9일에 측정을 수행하였다.

디지털 카메라로 사진을 찍어서, 거시적 및 미시적 시각으로 조직 다크닝 종점을 측정하였다. 조직 각각에 대한 라이트닝 정도 (L- 값)를 분광 광도계 (코니카 미놀타(Konica Minolta) CM-2600d)를 사용하여 측정하였다. 시험 샘플 각각에 대한 ΔL (대조군과 비교한 라이트닝 정도)은 하기 수학식으로 계산된다:

ΔL = (처리된 샘플의 L-값) - (대조군 샘플의 L-값).

세포 생존율 시험

하기에 기재된 MTT 분석을 사용하여, 시험 동안 조직의 세포 생존율을 평가하였다. MTT 조직 생존율 분석은, 살아있는 세포의 미토콘드리아에 의해서 황색 메틸티아졸릴다이페닐-테트라졸륨 브로마이드 (MTT)가 불용성 자색 생성물로 환원되는 것을 측정하는 비색 분석 시스템이다.

각각의 시험 물질 및 비처리된 조직에 대한 라이트닝 정도를 측정하는데 이미 사용된 피부 표피 조직을 사용하여, 시험 마지막에 남아있는 살아있는 세포 %를 측정하였다. 라이트닝 정도 시험 후의 피부 표피 조직을 MTT 시약과 함께 3시간 동안 인큐베이팅하였다. 인큐베이션 후, 추출 완충액을 첨가하여 세포를 용해하고 밤새 방치하였다. 플레이트 리더를 사용하여 570 ㎚ 파장에서 샘플을 리딩하고, 비처리된 대조군과 비교하여, 대조군의 것에 대한 %세포 생존율을 표현하였다. 대조군의 것에 대한 30% 이하의 세포 생존율의 감소는 시험 물질에 의해 야기되는 세포독성이 유의하게 나타나는 것으로 간주된다. 생성된 자색의 양이 살아있는 세포의 수에 정비례한다.

하기 실시예는 파울로우니아 목재 추출물의 제조 및 효능을 예시한다.

실시예 1

파울로우니아 토멘토사의, 각각 20 ㎎ 이상의 4가지의 추출물을, 한국 생명 공학 연구원(Korea Research Institute of Biosciences & Biotechnologies)의 식물 추출물 은행으로부터 획득하였으며, 이는 상기 식물의 부분들의 조합 또는 상기 식물의 개별적인 부분들을 대표한다. 이들은 줄기/수피/가지의 조합(E1), 잎(C1), 수피(C2) 및 줄기(E2)로부터 유래되었다. 모든 추출물을 50℃에서 초음파 처리 하에 메탄올을 사용하여 제조하였다.

실시예 2

하기 실시예는 본 발명의 소정의 실시 형태에 따른 파울로우니아 토멘토사 목재 추출물(E3)의 제조를 예시한다.

파울로우니아 토멘토사 목재 분말을 일본 키타카타시 소재의 쿠로사와 키리 우드 서플라이 숍(Kurosawa Kiri Wood Supply Shop)으로부터 획득하였다. 십 그램(10 g)의 건조 목재 분말을 250 mL의 시약 등급 에탄올에 현탁시키고, 실온에서 72시간 동안 교반시켰다. 생성된 현탁액을 여과시키고, 여과액을 30℃에서 회전 증발기를 사용하여 낮은 압력 하에 건조시켰다. 건조 조 추출물을 3.5% 수율(350 ㎎)로 수득하였다. 조 추출물을 1%의 농도로 메탄올에 용해시키고, 실온에서 5분 동안 활성탄(700 ㎎)으로 처리하였다. 현탁액을 0.45 마이크로미터의 여과지를 통하여 여과시켰다. 여과액을 건조시켜 시각적으로 더욱 밝은 색의 물질, E3, 210 ㎎ (조 추출물로부터의 수율: 60%)을 얻었다.

실시예 3

하기 실시예는 β-시토스테롤 및 우르솔산이 본질적으로 없는 파울로우니아 토멘토사 목재 추출물(E4)의 제조를 예시한다.

탈이온화된 등급의 물 (2.4 mL)을 상기 실시예 1로부터의 파울로우니아 토멘토사 줄기/수피/가지 추출물 (E1, 24 ㎎)에 첨가하고, 실온에서 5분 동안 초음파 처리하였다. 생성된 현탁액을 0.45μ 필터 카트리지를 통하여 여과시키고, 여과액을 동결 건조시킴으로써 건조시켜 수용성 성분 (E4; 10.3 ㎎)을 43%의 수율로 수득하였다. HPLC 분석은 상기 조성물에는 β-시토스테롤 및 우르솔산이 본질적으로 없음을 나타낸다. 상기 화합물들 중 어느 하나의 화합물의 검출가능한 양은 E4에서 존재하지 않는다. β-시토스테롤의 검출 한계치(limit of detection; lod 값)는 9 ppm (w/v)이며, 우르솔산의 경우에는 0.5 ppm (w/v)이었다.

실시예 4

하기 실시예는 파울로우니아 토멘토사 추출물 E1-E5 및 비교예 C1-C2의 피부 라이트닝 특성을 예시한다.

모든 7가지의 추출물은 상기에 기재된 바와 같이 피부 라이트닝 시험 (ΔL)으로서 피부 표피 등가물 모델을 통하여 (표 1에 열거된 바와 같이) 최대 2%의 상이한 농도로 시험하였다.

모든 추출물에 대해서 MTT 분석으로 세포독성 잠재력을 측정하였고, 대조군과 비교하여 세포 생존율의 % 감소율을 계산하였으며, 여기서 >30%의 세포 생존율의 감소는 유의한 세포독성 문제를 나타낸다. 그 결과가 하기 표 1에 나타나 있다.

실온에서 용매로서 물만을 이용한 목재 분말의 간단한 1단계 추출을 또한 행하였으며 (E5) 이는 피부 라이트닝 시험에서 활성으로 이어지지 않았다. 더욱 철저한 추출(추가의 가열, 교반 등)이 활성을 생성할 수 있을 것으로 여겨진다.

[표 1]

실시예 5

하기 실시예는 파울로우니아 토멘토사 목재 추출물과 결부된 멜라닌 합성 억제 특성을 예시한다.

줄기/수피/가지 추출물(E1) 및 목재 분말 추출물(E3)을 상기에 기재된 멜라닌 합성 억제 시험에 따라 멜라닌 합성 억제에 대하여 그리고 또한 타이로시나아제 억제에 대하여 시험하였다. 생성된 측정치는, E1 및 E3의 피부 라이트닝 효과가 적어도 부분적으로 멜라닌 형성 억제와 결부되지만 타이로시나아제 억제와는 결부되지 않음을 나타냈다. 추출물 E1 및 E3의 IC50 값은 멜라닌 형성 억제의 경우 30 및 40 ㎍/mL이며, 이때 어느 하나의 추출물로부터의 타이로시나아제 효소 억제는 없다.

실시예 6

NF -κB 억제 분석

NF-κB 촉진제 분석을 하기와 같이 행한다: 쥐 심근아세포 H9C2 세포를 ATCC (미국 버지니아주 매너서스 소재)로부터 구매하였다. 10% 소 태아 혈청, 100 단위/ml의 페니실린, 및 50 ㎍/ml의 스트렙토마이신 (미국 캘리포니아주 칼스배드 소재의 인비트로겐 라이프 테크놀로지스)이 보충된 둘베코 변형 이글 배지(DMEM, 미국 캘리포니아주 칼스배드 소재의 인비트로겐 라이프 테크놀로지스)에서 배양물을 유지하였다. 전형적으로, 96웰 플레이트에서 성장시킨 1x10⁴개의 세포를, 리포펙타민(Lipofectamine) 2000 (미국 캘리포니아주 칼스배드 소재의 인비트로겐 라이프 테크놀로지스)을 사용하여, 웰 당 0.45 ㎍의 총 DNA로 일시적으로 트랜스펙션시켰다. 모든 트랜스펙션에서, 루시퍼라아제 프로모터에 더하여, 티미딘 키나아제 프로모터 및 레닐라 루시퍼라아제 리포터 유전자를 갖는 제작물(pRL-TK, 미국 위스콘신주 매디슨 소재의 프로메가)을 내부 대조군으로서 포함시켰다. 트랜스펙션한지 1일 후, 세포를 지시된 농도의 추출물로 처리하고, 100 ng/mL의 종양 괴사 인자-α (TNFα, 미국 미주리주 세인트 루이스 소재의 시그마-알드리치)로 대략적으로 24시간 동안 자극한 후, 제조업자의 프로토콜에 따라 프로메가 (미국 위스콘신주 매디슨 소재)로부터의 이중-루시퍼라아제 리포터 시스템(Dual-Luciferase Reporter System)을 이용하여 루시퍼라아제 분석용으로 세포를 용해시켰다. 간략하게는, 몰레큘러 디바이시즈(미국 캘리포니아주 서니베일)로부터의 발광측정기 LMAX를 사용하여, 먼저 반딧불이 루시퍼라아제 활성(NF-κB 프로모터 활성을 대표함), 이어서 레닐라 루시퍼라아제(내부 대조군)를 측정하였다. 이들 둘의 루시퍼라아제 활성의 비(RLU)를 사용하여 각각의 프로모터의 활성을 평가하였다.

NF-κB 억제율 = [1-( RLU_샘플 /RLU_대조군)] * 100

여기서, RLU_샘플 및 RLU_대조군은 각각 샘플 및 대조군의 정규화된 루시퍼라아제 활성 비이다.

상기에 기재된 NF-κB 억제 분석을 다양한 양의 추출물 E3 및 E5에 대하여 실시하였다. 표 2a 및 2b에, 정규화된 NF-κB 유전자 리포터 활성 및 NF-κB 억제율 (%)가 보고되어 있다.

[표 2a]

[표 2b]

실시예 7

재구성된 표피에서의 UV -유도된 전염증 매개자의 방출에 대한 항염증 효과

파울로우니아 토멘토사 추출물(E3)의 효과를 인간 표피 등가물에서의 국소적 항염증 활성에 대하여 평가하였다. 정상 인간 표피 케라티노사이트로 이루어진 다층의 그리고 분화된 표피인 표피 등가물 (EPI 200 HCF)을 맷텍(MatTek) (미국 매사추세츠주 애쉬랜드)으로부터 구매하였다. 수용시에, 표피 등가물을 하이드로코르티손을 포함하지 않는 유지 배지에서 24시간 동안 37℃에서 인큐베이션하였다. 등가물을 70% 에탄올/30% 프로필렌 글리콜 중 파울로우니아 토멘토사 추출물로 국소 처리하고 (2 ㎎/㎠), 2시간 후 태양 자외광 (1-㎜ 쇼트(Schott) WG 320 필터를 갖춘 1000W-오리엘(Oriel) 태양 시뮬레이터(solar simulator); 인가한 UV 선량: 360 ㎚에서 측정할 때 70 kJ/㎡)에 노출시켰다. 등가물을 유지 배지를 이용하여 24시간 동안 37℃에서 인큐베이션한 후 상청액을 구매가능한 키트(미국 매사추세츠주 빌레리카 소재의 밀리포어 코포레이션(Millipore Corp.))를 이용하여 IL-8 및 IL-1α 사이토카인 방출에 대하여 분석하였다.

[표 3]

[표 4]

상기 실시예를 바탕으로 하면, 파울로우니아 토멘토사 추출물의 국소 적용은 염증 매개자의 UV-촉진된 방출을 유의하게 감소시킬 수 있었다. 따라서, 파울로우니아 토멘토사 추출물은 피부에 적용될 때 효과적인 항염증 효과를 제공할 것으로 예상된다.

실시예 8

재구성된 표피에서의 반응성 산소 화학종 형성의 억제 UV-유도된 과산화수소 형성을 문헌[Martin et al., Arch Dermatol Res . (2008) 300:69-80]의 방법을 변경한 것을 이용하여 재구성 표피 및 인간 상피 세포주, KB에서 결정하였다. 정상 인간 표피 케라티노사이트로 이루어진 다층의 그리고 분화된 표피인 표피 등가물 (EPI 200 HCF)을 맷텍(MatTek) (미국 매사추세츠주 애쉬랜드)으로부터 구매하였다. 수용시에, 표피 등가물을 하이드로코르티손을 포함하지 않는 유지 배지에서 24시간 동안 37℃에서 인큐베이션하였다. 24시간 후, 조직을 5 μM의 과산화수소-민감성 형광 프로브 5-(및-6)-클로로메틸-2',7'-다이클로로다이하이드로-플루오레세인 다이아세테이트, 아세틸 에스테르 (CM-H2DCFDA) (미국 캘리포니아주 칼스배드 소재의 인비트로겐 코포레이션)와 함께 30분 동안 인큐베이션하였다. 인큐베이션 후, 플레이트를 헹구어 여분의 프로브를 제거하고, 등가물을 70% 에탄올/30% 프로필렌 글리콜 비히클 중 파울로우니아 토멘토사 추출물(E3)로 국소적으로 처리하였다 (2 ㎎/㎠). 485 ㎚ 여기/530 ㎚ 방사 파장으로 설정한 형광 플레이트 판독기에서 플레이트를 즉각적으로 판독하여 기저 과산화물 형성을 탐지하였다. 이어서 플레이트를 UV (1 ㎜ 쇼트 WG 320 필터를 갖춘 1000W-오리엘 태양 시뮬레이터; 인가한 UV 선량: 360 ㎚에서 측정할 때 4.2 kJ/㎡)에 노출시켰다. 플레이트를 UV 노출 후 60분에 판독하였다.

[표 5]

상기 실시예를 바탕으로 하면, 파울로우니아 토멘토사 추출물의 국소 적용은 재구성된 표피에서 ROS의 UV-촉진된 생성을 유의하게 감소시킬 수 있었다. 따라서, 피부에 적용될 때, 파울로우니아 토멘토사 추출물은 태양광 조사로부터의 ROS의 유도에 대한 보호를 제공할 것으로 예상된다.

실시예 9

인간 상피 세포에서의 반응성 산소 화학종 형성의 억제

ATCC (ATCC#CCL-17, 미국 버지니아주 매너서스 소재)로부터 획득한 KB 세포를, 10% 소 태아 혈청이 보충된 둘베코 변형 이글 배지(DMEM) (미국 캘리포니아주 샌디에고 소재의 인비트로겐 코포레이션) 중 5000개의 세포/웰의 밀도로 96웰 조직 배양물 처리 플레이트에 도말하였다. 48시간 후, 세포를 5 μM의 과산화수소-민감성 형광 프로브 5-(및-6)-클로로메틸-2',7'-다이클로로다이하이드로-플루오레세인 다이아세테이트, 아세틸 에스테르 (CM-H2DCFDA) (미국 캘리포니아주 칼스배드 소재의 인비트로겐 코포레이션)와 함께 30분 동안 인큐베이션하였다. 인큐베이션 후, 플레이트를 헹구어 여분의 프로브를 제거하고, 파울로우니아 토멘토사 추출물(E3)을 지시된 농도로 첨가하였다. 485 ㎚ 여기/530 ㎚ 방사 파장으로 설정한 형광 플레이트 판독기에서 플레이트를 즉각적으로 판독하여 기저 과산화물 형성을 탐지하였다. 이어서 플레이트를 UV (1 ㎜ 쇼트 WG 320 필터를 갖춘 1000W-오리엘 태양 시뮬레이터; 인가한 UV 선량: 360 ㎚에서 측정할 때 4.2 kJ/㎡)에 노출시켰다. 플레이트를 UV 노출 후 60분에 판독하였다.

[표 6]

상기 실시예를 바탕으로 하면, 파울로우니아 토멘토사 추출물을 이용한 처리는 인간 상피 세포에서 ROS의 UV-촉진된 생성을 유의하게 감소시킬 수 있었다. 따라서, 피부에 적용될 때, 파울로우니아 토멘토사 추출물은 태양광 조사로부터의 ROS의 유도에 대한 보호를 제공할 것으로 예상된다.

실시예 10

엘라스타아제 분해로부터의 보호

인간 백혈구 엘라스타아제 (HLE)는 시그마(Sigma) (미국 미주리주 세인트루이스)로부터 구매하였으며, 인산염 완충된 염수(PBS, 미국 캘리포니아주 칼스바드 소재의 인비트로겐 라이프 테크놀로지스( Invitrogen life Technologies))에서 1 단위/mL로 재구성하였다. 바디피(BODIPY) FL 염료로 표지된 용해성 소 목 인대 엘라스틴을 몰레큘라 프로브스, 인크(Molecular Probes, Inc.) (미국 오레곤주 유진 소재)로부터 구매하여, 공액체에서 형광을 켄칭하였으며, 이는 엘라스타아제 분해시에 활성화될 수 있었다 인간 백혈구 엘라스타아제(0.0625 U/ml), 엘라스틴 기질 (25 ㎍/ml), 및 증가하는 농도의 시험 재료를 2시간 동안 37℃에서 인큐베이션하였다. 몰레큘러 디바이시즈 (미국 캘리포니아주 서니베일 소재)로부터의 형광 플레이트 판독기 제미니(Gemini)를 사용하여 490 ㎚에서의 여기 및 520 ㎚에서의 방사에서 형광을 측정하였다. 기질 단독의 배경 형광을 각각의 측정치로부터 차감하였다. 파울로우니아 토멘토사 추출물(E3)을 10 ㎎/ml의 원액 농도로 DMSO에서 제조하여 연속적으로 희석시켰다. 파울로우니아 토멘토사 추출물은 표 7에 나타낸 바와 같이 용량 의존적 방식으로 HLE 활성을 억제하였다.

[표 7]

이 실시예는 파울로우니아 토멘토사 추출물이 엘라스틴 섬유를 손상 및 분해로부터 보호할 수 있음을 입증한다.

실시예 11

UV-유도된 MMP 유도의 억제

파울로우니아 토멘토사 추출물(E3)이 UV 유도된 매트릭스 메탈로프로테이나아제-1 및 -9 (MMP-1 및 -9)를 억제하는 능력을 정상 인간 표피 케라티노사이트로부터 유래된 표피 등가물에서 평가하였다. MMP는 세포외 매트릭스의 생리학적 리모델링 및 병리학적 파괴에서 중요한 역할을 하는 효소 패밀리이다. 홍반 유발 광량 미만의 용량의 UV 광은 인간 피부에 있어서 MMP 분비를 유도하고, 이는 다시 세포외 매트릭스를 분해하여 광노화 주름 형성과 견고성 및 탄력성의 손실에 있어서 상당한 역할을 한다는 것은 잘 확립되어 있다. 문헌[G. J. Fisher, et al., J Investig Dermatol. Symposium Proceedings. 14(1): 20-24 (2009)]을 참조하라.

파울로우니아 토멘토사 추출물이 UV 유도된 MMP를 억제하는 능력을 평가하기 위하여, 정상 인간 표피 케라티노사이트로 이루어진 다층형의 그리고 분화된 표피, 표피 등가물(EPI 200 HCF)을 맷텍 (미국 매사추세츠주 애쉬랜드 소재)으로부터 구매하였다. 수용시에, 표피 등가물을 하이드로코르티손을 포함하지 않는 유지 배지에서 24시간 동안 37℃에서 인큐베이션하였다. 등가물을 70% 에탄올/30% 프로필렌 글리콜 중 파울로우니아 토멘토사 추출물(E3)로 국소 처리하고 (2 ㎎/㎠), 2시간 후 태양 자외광 (1-㎜ 쇼트 WG 320 필터를 갖춘 1000W-오리엘 태양 시뮬레이터; 인가한 UV 선량: 360 ㎚에서 측정할 때 70 kJ/㎡)에 노출시켰다. 등가물을 유지 배지를 이용하여 48시간 동안 37℃에서 인큐베이션한 후 상청액을 구매가능한 키트 (미국 미네소타주 미니애폴리스 소재의 알앤디 시스템즈(R&D Systems))를 이용하여 MMP-1 및 -9에 대하여 분석하였다. 표 8의 데이터는 2개의 독립 실험의 평균을 나타내며, 각각의 실험 조건을 이중의 조직을 이용하여 수행한다.

[표 8]

[표 9]

상기 실시예를 바탕으로 하면, 파울로우니아 토멘토사 추출물의 국소 적용은 MMP-1 및 -9의 UV-촉진된 방출을 유의하게 감소시킬 수 있었다. 따라서, 피부에 적용될 때, 파울로우니아 토멘토사 추출물은 태양광 조사 후 MMP-1 및 -9의 유도에 대한 보호를 제공할 것으로 예상된다.

실시예 12

TNF-α -유도된 MMP 유도의 억제

파울로우니아 토멘토사 추출물(E3)이 TNF-α 유도된 MMP를 억제하는 능력을 평가하기 위하여, 정상 인간 표피 케라티노사이트로 이루어진 다층형의 그리고 분화된 표피, 표피 등가물(EPI 200 HCF)을 맷텍 (미국 매사추세츠주 애쉬랜드 소재)으로부터 구매하였다. 수용시에, 표피 등가물을 하이드로코르티손을 포함하지 않는 유지 배지에서 24시간 동안 37℃에서 인큐베이션하였다. TNF-α (100ng/mL)로 처리하기 2시간 전에 70% 에탄올/30% 프로필렌 글리콜 비히클 중 파울로우니아 토멘토사 추출물(E3)로 등가물을 국소적으로 처리하였다 (2 ㎎/㎠). 등가물을 유지 배지를 이용하여 48시간 동안 37℃에서 인큐베이션한 후 상청액을 구매가능한 키트 (미국 미네소타주 미니애폴리스 소재의 알앤디 시스템즈(R&D Systems))를 이용하여 MMP-1 및 -9에 대하여 분석하였다.

[표 10]

[표 11]

상기 실시예를 바탕으로 하면, 파울로우니아 토멘토사 추출물의 국소 적용은 MMP-1 및 -9의 TNF-α-촉진된 방출을 유의하게 감소시킬 수 있었다. 따라서, 피부에 적용될 때, 파울로우니아 토멘토사 추출물은 MMP-1 및 -9의 유도에 대한 보호를 제공할 것으로 예상된다.

실시예 13

트로포엘라스틴 촉진제 분석을 타나세툼 파르테늄(미국 뉴욕주 오시닝 소재의 인테그레이티드 보태니컬 테크놀로지즈로부터의 파르테놀라이드 무함유 피버퓨 추출물)을 사용하여 수행하였다.

타나세툼 파르테늄을 세포 배양 배지(미국 캘리포니아주 샌디에고 소재의 인비트로젠의 DMEM 배지)에서 희석시키고, 파울로우니아 토멘토사를 하기 표 12에 지시된 "활성물"의 농도가 되도록 DMSO에서 희석시켰다. 화합물을 트랜스펙팅된 H9C2 세포에 첨가하고 24시간 동안 인큐베이팅하였다. 시험 샘플들을 각각의 대조군과 비교하였다. 그 결과를 하기 표 12에 나타낸다.

[표 12]

표 12에 나타낸 결과로부터 알 수 있는 바와 같이, 파울로우니아 토멘토사 및 타나세툼 파르테늄은 각각의 대조군에 대하여 각각 32% 및 2%의 트로포엘라스틴 촉진 변화율 (%)을 보여주었다. 이와는 대조적으로, 파울로우니아 토멘토사 및 타나세툼 파르테늄 둘 모두의 조합은 비히클 대조군에 대하여 55%의 트로포엘라스틴 촉진 향상을 보여주었다. 이는 성능에 있어서 단순한 부가 효과보다 훨씬 큰 것이었다.

타나세툼 파르테늄의 농도를 0.002%로부터 0.005%로 상승시켰을 때 유사한 상승작용적 효과가 관찰되었다. 또한 더 높은 농도의 타나세툼 파르테늄은 트로포엘라스틴 촉진에 있어서 대조군에 대하여 2%의 변화율 (%)을 나타냈으며, 반면 파울로우니아 토멘토사와 타나세툼 파르테늄의 조합은 트로포엘라스틴 촉진에 있어서 비히클 대조군에 대하여 62%의 변화율 (%)을 달성하였다.

이러한 데이터는 (파울로우니아 토멘토사와 트로포엘라스틴 촉진제(타나세툼 파르테늄)의 조합이 트로포엘라스틴 촉진 활성에 있어서 놀랍고도 상승작용적인 증가를 생성함을 입증한다.

실시예 14

하기 피부 케어 조성물을 본 발명에 따라 표 13에 나타낸 성분들을 이용하여 제조하였다.

[표 13]

상기 조성물을 하기와 같이 제조하였다: 부드럽게 교반하면서 20-40℃의 온도의 주 탱크에 정제수를 첨가하였다. 이어서 베르센 NA (다이소듐 EDTA)를 주 탱크에 첨가하였다. 탱크에서의 교반을 중지하고, 울트레즈 10 (카보머)을 상기 수 혼합물의 상부를 고르게 코팅함으로써 첨가하였다. 상기 혼합물을 침지시키고, 교반 및 가열을 시작하였다. 상기 혼합물을 가열하여 55-60℃에서 유지하고, 추가로 15분 동안 또는 균질해질 때까지 혼합하였다.

오일 상은 핀솔브 TN (C12-15 알킬 벤조에이트)을 청결한 적합한 상 용기에 첨가함으로써 제조하였으며, 이때 교반하고 55-60℃가 성취되도록 가열하였다. 그러한 온도가 성취된 후 브리즈 72 및 721 (각각 스테아레트-2, -21), 미글리올 (카프릴릭/카프릭 트라이글리세라이드), 에메리 917 (글리세린), 및 펜레코 스노우 화이트(바셀린)를 첨가하고, 주 탱크로 첨가할 때까지 55-60℃에서 혼합하였다.

교반을 증가시키면서 오일 상을 주 탱크에 첨가하고, 가열을 중지하였다. 생성된 혼합물을 고속으로 10-20분 동안 혼합하였다. 50℃ 이하에서, 다이메티콘 (다우 코닝 실리콘 유체)을 첨가하였다. 이어서 상기 배치 혼합물을 40℃로 냉각시키고, 페노닙(Phenonip) XB (방부제 믹스)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 추가로 10분 동안 또는 균일해질 때까지 혼합하였다. 수산화나트륨을 추가로 10분 동안 또는 균일한 pH가 성취될 때까지 혼합하면서 빠르게 첨가하였다 (목표 pH = 5.4).

활성물 프리믹스는 트랜스큐톨 CG, 부틸렌 글리콜, 시트르산, 및

참오동나무 추출물을 별도의 비커에 첨가하고 균일해질 때까지 잘 혼합함으로써 만들었다.

상기 활성물 프리믹스를 주 탱크의 주 상에 첨가하고,

완전히 용해되도록 또는 균일해질 때까지 추가로 10-20분 동안 혼합함으로써 최종 제형을 만들었다. 물로 최종 부피가 되게 하고, 제형을 10분 동안 혼합하고, pH를 기록하였다.

조성물의 샘플들을 50℃ 오븐 내에 2주 동안 두었으며, 이는 일차적인 우수한 안정성을 나타냈다.

실시예 15

하기 피부 케어 조성물을 본 발명에 따라 표 14에 나타낸 성분들을 이용하여 제조하였다.

[표 14]

상기 조성물을 하기와 같이 제조하였다: 정제수를 주 탱크에 첨가한 후, 다이소듐 EDTA를 첨가하고, EDTA가 용해될 때까지 혼합하였다. 암모늄 아크릴로일다이메틸타우레이트/VP 공중합체를 내부에 뿌리고, 생성된 혼합물을 70-75℃로 가열하였다. 설정한 온도가 성취된 후, 상기 혼합물을 설정된 온도에서 5분 동안 교반하면서 세테아릴 올리베이트/소르비탄 올리베이트 및 스테아르산을 첨가하였다.

활성물 프리믹스는 별도의 용기에서 40-50℃에서 참오동나무 추출물을 부틸렌 글리콜에 용해시킴으로써 제조하였다. 폴리아크릴레이트 13 및 폴리아이소부텐 및 폴리소르베이트 20을 참오동나무 믹스에 첨가하고, 이어서 균일해질 때까지 혼합하였다. 온도를 35-40℃로 낮추고, 주 탱크에 첨가할 준비가 될 때까지 따로 두었다.

클로로페네신 프리믹스는 별도의 용기에서 클로로페헤신을 부틸렌 글리콜에 첨가하고 35℃로 가열한 후 메틸아이소티아졸리논을 첨가함으로써 제조하였다. 생성된 혼합물을 50-55℃로 가열하고, 주 탱크 내로 혼합할 준비가 될 때까지 상기 온도를 유지하였다.

오일 상은 별도의 용기에서 혼합하면서 사이클로펜타실록산 및 다이메티콘 가교중합체를 사이클로펜타실록산 및 사이클로헥사실록산에 첨가하고 균일해질 때까지 55-60℃로 가열함으로써 제조하였다. 이어서 에틸헥실글리세린을 첨가하고, 균일해질 때까지 혼합한 후 스테아르산을 첨가하였으며, 이때 온도를 55-60℃ 사이에서 유지하였다.

이어서 오일 상을 70-75℃의 온도에서 격렬하게 교반하면서 서서히 주 탱크에 첨가하였다. 다이메티코놀 및 다이메티콘을 주 배치에 첨가하고, 생성된 혼합물을 20분 동안 또는 균일해질 때까지 교반하고, 그 후 가열을 중지하였다. 주 pH를 수산화나트륨을 이용하여 5.0-5.5 사이로 조정하였다. 클로로페네신 상을 교반을 유지하면서 50-55℃에서 서서히 첨가하였다. 상기 혼합물을 35-40℃로 냉각시키고, 방향제, FD&C 레드 및 D&C 옐로우를 첨가하고, 상기 온도를 유지하면서 잘 혼합하였다.

활성물 프리믹스를 온화하게 혼합하면서 주 탱크에 서서히 첨가함으로써 최종 제형을 성취하였다. 상기 혼합물을 균일해질 때까지 추가로 10-20 동안 혼합하였다. 물로 최종 부피가 되게 하고, 제형을 10분 동안 혼합하고, pH를 기록하였다.

실시예 16

하기의 일반 방법은 본 발명의 소정의 실시 형태에 따른 파울로우니아 종으로부터의 파울로우니아 목재 추출물의 제조를 예시한다.

파울로우니아 엘롱가타의 목재를 미국 29160 사우스캐롤라이나주 스완시 소재의 더 파울로우니아 반, 엘엘씨(The Paulownia Barn, LLC)로부터 대팻밥으로서; 또는 미국 21740 메릴랜드주 해거스타운 소재의 마운트 호프 팜즈(Mount Hope Farms)로부터 신선 절단 목재로 획득하였다. 파울로우니아 포르투네이, 파울로우니아 토멘토사, 및 파울로우니아 카와카미이의 목재 샘플을 마운트 호프 팜즈로부터 신선 절단 목재로 획득하였다. 각각의 목재로부터의 십 그램(10 g)의 건조 대팻밥을 유리 용기에서 각각 250 mL의 시약 등급 에탄올을 이용하여 별도로 현탁시켰으며, 내용물을 가끔 혼합하면서 실온에서 72시간 동안 유지하였다. 생성된 현탁물을 여과시키고, 여과액을 30℃에서 회전 증발기를 사용하여 낮은 압력 하에 건조시켰다. 건조 조 추출물을 3-5% 수율로 수득하였다.

[표 15]

실시예 17

하기 실시예는 파울로우니아 spp . 추출물 E6-E9의 피부 라이트닝 특성을 예시한다.

모든 4가지의 추출물은 상기에 기재된 바와 같이 피부 라이트닝 시험 (ΔL)으로서 피부 표피 등가물 모델을 통하여 최대 2%의 상이한 농도로 시험하였다 (데이터를 표 16에 나타냄).

모든 추출물에 대해서 MTT 분석으로 세포독성 잠재력을 측정하였고, 대조군과 비교하여 세포 생존율의 % 감소율을 계산하였으며, 여기서 30% 이상의 세포 생존율의 감소는 시험 물질에 의한 유의한 세포독성 문제를 구성한다. 생성된 자색의 양이 살아있는 세포의 수에 정비례한다. 이 실험에서, 시험 농도의 추출물들 중 어떠한 것도 임의의 유의한 세포 생존율 문제를 나타내지 않았다.

[표 16]

실시예 18: 파울로우닌의 단리 및 확인

파울로우니아 토멘토사 추출물로부터의 주 성분(파울로우닌)의 단리는 분별 단계와 예비 HPLC 단계의 조합을 이용하여 달성하였다. 90% 초과의 순도의 추출물의 주 신호의 것과 동일한 체류 시간 및 UV 스펙트럼을 갖는 170 ㎎의 샘플을 수득하였다. 분광법적 연구에 의하면 파울로우닌으로 그 아이덴티티(identity)가 확인되었다.

실시예 19

파울로우닌은 상기에 기재된 바와 같이 피부 라이트닝 시험 (ΔL)으로서 피부 표피 등가물 모델을 통하여 최대 2%의 상이한 농도로 시험하였다 (데이터를 표 17에 나타냄).

세포독성 잠재력을 상기에 기재된 바와 같이 MTT 분석에 의해 결정하였다. 파울로우닌은 시험 농도에서 어떠한 유의한 세포독성도 나타내지 않았다.

[표 17]

실시예 20

하기 실시예는 파울로우니아 spp. 추출물 E6-E9에 있어서의 NF-κB 억제 특성을 추출물 E6-E9의 피부 라이트닝 특성을 예시한다.

상기에 기재된 NF-κB 억제 분석을 추출물 E6-E9에 대하여 그리고 또한 90% 초과의 순도의 파울로우닌 샘플에 대하여 실시하였다. 이들의 NF-κB 억제성을 각각 표 18 및 표 19에 IC50 값으로 보고한다.

[표 18]

[표 19]

실시예 21

파울로우닌 풍부 분획물의 제조 및 시험

키리 목재 추출물로부터의 파울로우닌 풍부 분획물을 하기와 같이 제조하였다:

키리 목재 분말(1 g)을 충분한 메탄올에 용해시키고, 역상 실리카 겔 (2 g)에 로딩하였다. 물(100%), 물/메탄올 혼합물(1:1) 및 메탄올(100%)을 이용한 순차적 용출은 상기 추출물의 상이한 분획물들을 제공한다. 메탄올(100%)을 이용하여 수득한 용출액을 합하고 건조시켜 파울로우닌 주 성분(>50%)이 풍부한 분획물의 샘플을 수득하였다.

파울로우닌 풍부 분획물을 상기에 기재된 바와 같이 피부 라이트닝 시험 (ΔL)으로서 피부 표피 등가물 모델을 통하여 최대 0.5%의 상이한 농도로 시험하였다 (데이터를 하기 표 20에 나타냄). 세포독성 잠재력을 상기에 기재된 바와 같이 MTT 분석에 의해 결정하였다. 파울로우닌 풍부 분획물은 시험 농도에서 유의한 세포독성을 나타내지 않았다.

[표 20]

Claims

약 20 중량% 이상의 파울로우닌(paulownin)을 포함하는 식물 또는 세포 배양 추출물과 화장품용으로 허용가능한 담체를 포함하는, 피부 케어 조성물.
제1항에 있어서, 상기 추출물은 약 40 중량% 이상의 파울로우닌을 포함하는, 피부 케어 조성물.
제1항에 있어서, 상기 추출물은 약 60 중량% 이상의 파울로우닌을 포함하는, 피부 케어 조성물.
제1항에 있어서, 상기 추출물은 약 70 중량% 이상의 파울로우닌을 포함하는, 피부 케어 조성물.
제1항에 있어서, 상기 추출물은 90 중량% 이상의 파울로우닌을 포함하는, 피부 케어 조성물.
제1항에 있어서, 상기 조성물은 용액, 현탁액, 로션, 크림, 세럼, 겔, 스틱, 스프레이, 연고, 액상 워시, 비누 바(bar), 샴푸, 헤어 컨디셔너, 페이스트, 폼, 분말, 무스, 면도용 크림, 하이드로겔 또는 막-형성 제품의 형태인, 피부 케어 조성물.
제1항에 있어서, 추가의 피부 라이트닝제(lightening agent)를 추가로 포함하는, 피부 케어 조성물.
제7항에 있어서, 상기 추가의 피부 라이트닝제는 페닐에틸 레소르시놀, 4-헥실 레소르시놀, α-아르뷰틴, 코직산(Kojic acid), 니비톨(Nivitol), 아스코르빌-2-글루코시드, 대두 추출물, 니아신아미드 및 이들의 둘 이상의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 피부 케어 조성물.
제1항에 있어서, 상기 조성물은 추가의 항염증제를 추가로 포함하는, 피부 케어 조성물.
제9항에 있어서, 상기 추가의 항염증제는 치환된 레소르시놀을 포함하는, 피부 케어 조성물.
제1항에 있어서, 상기 조성물은 트로포엘라스틴 촉진제를 추가로 포함하는, 피부 케어 조성물.
제11항에 있어서, 상기 트로포엘라스틴 촉진제는 블랙베리(blackberry) 추출물, 코티너스(cotinus) 추출물, 피버퓨(feverfew) 추출물, 필란투스 니루리(Phyllanthus niruri) 추출물 및 이들의 둘 이상의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 피부 케어 조성물.
제1항에 있어서, 상기 조성물은 콜라겐 촉진제를 추가로 포함하는, 피부 케어 조성물.
제13항에 있어서, 상기 콜라겐 촉진제는 비-레티노이드 콜라겐 촉진제인, 피부 케어 조성물.
제1항에 있어서, 상기 파울로우닌은 파울로우니아(Paulownia)속 식물 또는 파울로우니아속 식물의 세포 배양물로부터 추출되는, 피부 케어 조성물.
제1항에 있어서, 상기 파울로우닌은 파울로우니아 토멘토사(Paulownia tomentosa) 목재로부터 추출되는, 피부 케어 조성물.
마스크 기재와 제1항의 조성물을 포함하는 페이셜 마스크(facial mask).