KR20130010102A - 환상 포스파티딘산 나트륨의 제조방법 및 조성물 - Google Patents
환상 포스파티딘산 나트륨의 제조방법 및 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
온화하고 간편한 방법으로 환상 포스파티딘산 나트륨을 고수율 및 고순도로 제조하는 방법을 제공한다. 유기용매 및/또는 물을 포함하는 계에서, 리조형 인지질(단, 수소첨가물을 제외한다)에 포스포리파제 D를 작용시켜 수득한 반응물에 나트륨염을 첨가한 후, 반응물로부터 용매를 제거하는 것을 포함하는 환상 포스파티딘산 나트륨의 제조방법.
Description
본 발명은 환상 포스파티딘산 나트륨의 제조방법, 및 상기 제조방법에 의해 수득된 환상 포스파티딘산 나트륨을 함유하는 조성물에 관한 것이다.
환상 포스파티딘산(이하, "cPA"라 약하기도 한다)은 암세포의 전이 및 침윤을 저해하는 등의 생리활성을 가지는 것으로 알려져(비특허문헌 1), 항종양제를 포함하는 의약품이나 기능성 식품으로서의 용도가 기대되고, 또한 생체내의 히알루론산 합성 촉진작용을 가져 화장품에 첨가되고 있다,
종래 이와 같은 환상 포스파티딘산의 제조방법으로서는, 화학적으로 합성하는 방법(비특허문헌 1 및 2)이나, 리조형(lyso form) 인지질에 포스포리파제 D를 작용시키는 효소반응을 이용하는 방법(특허문헌 3 및 4)이 알려져 있다. 환상 포스파티딘산은 지질이며 물에 용해되지 않기 때문에, 나트륨염 등의 수용성 염으로 만드는 것이 필요하여, 화학적으로 합성한 환상 포스파티딘산을 수소화 나트륨이나 수산화 나트륨 등의 강염기로 처리하여, 나트륨염으로 변환하는 방법으로 환상 포스파티딘산 나트륨이 제조되고 있다,
선행기술문헌
특허문헌
특허문헌 1: 특개평 6-228169호 공보
특허문헌 2: 특개평 7-258278호 공보
특허문헌 3: 특개 2001-178489호 공보
특허문헌 4: 특개 2008-222643호 공보
비특허문헌
Biochemica et Biophysica Acta 15288(2002), p. 1-7
환상 포스파티딘산은 불안정하기 때문에, 상술한 화학적 합성법에 기재된 바와 같은 강염기를 사용하는 방법은 바람직하지 않고, 또한 화학적 합성법으로는 환상 포스파티딘산을 고수율 및 고순도로 수득하는 것은 곤란하여, 온화하고 간편한 방법으로 환상 포스파티딘산 나트륨을 고수율 및 고순도로 제조하는 방법이 요구되었다.
본 발명자들은 환상 포스파티딘산 나트륨의 제조방법에 대하여 예의 검토한 결과, 유기용매 및/또는 물을 포함하는 계에서 리조형(lyso form) 인지질(단, 수소첨가물을 제외한다)에 포스포리파제 D를 작용시켜 수득한 반응물에, 염화 나트륨을 첨가한 후, 반응물로부터 용매를 제거함으로써, 지극히 온화한 조건하에서 간편한 방법으로 고수율 및 고순도로 환상 포스파티딘산 나트륨을 제조할 수 있음을 알게 되었다. 본 발명은 이러한 지견에 기반하여 안출하게 된 것이다.
다시 말해, 본 발명에 따르면, 이하의 발명이 제공된다,
(1) 유기용매 및/또는 물을 포함하는 계에서, 리조형(lyso form) 인지질(단, 수소첨가물을 제외한다)에 포스포리파제 D를 작용시켜 수득한 반응물에, 나트륨 염을 첨가한 후, 반응물로부터 용매를 제거하는 것을 포함하는 환상 포스파티딘산 나트륨의 제조방법.
(2) 나트륨염은 염화 나트륨인 (1)항 기재의 환상 포스파티딘산 나트륨의 제조방법.
(3) 유기용매 및/또는 물을 포함하는 계에서, 리조형 인지질에 포스포리파제 D를 작용시켜 수득한 반응물에, 킬레이트제의 존재하에 나트륨염을 첨가하는 (1) 또는 (2)항 기재의 환상 포스파티딘산 나트륨의 제조방법.
(4) 킬레이트제는 EDTA인 (3)항 기재의 환상 포스파티딘산 나트륨의 제조방법.
(5) 리조형 인지질이 대두 유래의 인지질 또는 난황 유래의 인지질 또는 옥 수수 유래의 인지질에 포스포리파제 A2를 작용시켜 수득한 리조형 인지질인 (1) 내지 (4)의 어느 한 항 기재의 환상 포스파티딘산 나트륨의 제조방법.
(6) 리조형 인지질이 대두 유래의 인지질 또는 난황 유래의 인지질 또는 옥 수수 유래의 인지질에 포스포리파제 A2를 작용시켜 수득한 반응물로부터 리조형 인지질을 단리, 정제하지 않고, 유기용매 및/또는 물을 포함하는 계에 용해하고 포스포리파제 D를 작용시키는 (1) 내지 (4)항의 어느 한 항 기재의 환상 포스파티딘산 나트륨의 제조방법.
(7) (1) 내지 (6)항의 어느 한 항에 기재된 환상 포스파티딘산 나트륨의 제조방법에 의해 수득되는, 40% 이상의 순도를 가지는 환상 포스파티딘산 나트륨 함유 조성물.
(8) (1) 내지 (6)항의 어느 한 항에 기재된 환상 포스파티딘산 나트륨의 제조방법에 의해 수득되는, 1mg/ml 이상의 환상 포스파티딘산 나트륨을 함유하는 용액.
(9) 환상 포스파티딘산 나트륨을 함유하는 용액이 수용액인 (8)항 기재의 용액.
본 발명에 따르면, 유기용매 및/또는 물을 포함하는 계에서, 리조형 인지질에 포스포리파제 D를 작용시켜, 지극히 온화하고 간편한 방법으로 고수율 및 고순도로 환상 포스파티딘산 나트륨을 제조할 수 있다. 본 발명에 의하면, 반응물을 나트륨염으로 처리하는 것만으로, 환상 포스파티딘산을 단리, 정제하지 않고, 환상 포스파티딘산 나트륨을 제조할 수 있으므로, 대두 등의 천연물을 원료로 한 환상 포스파티딘산 나트륨의 제조방법으로 특히 유용하다. 본 발명의 제조조건에 의해 수득되는 환상 포스파티딘산 나트륨은 특히, 대두 유래의 인지질 또는 난황 유래의 인지질 또는 옥수수 유래의 인지질을 원료로 하는 경우, 실온에서의 수용성이 높고, 특히 정제하지 않고 수용액을 제조하는 것이 가능하다.
이하에서는, 본 발명에 대하여 보다 상세히 설명한다.
본 발명은 유기용매 및/또는 물을 포함하는 계에서, 리조형(lyso form) 인지질(단, 수소첨가물을 제외한다)에 포스포리파제 D를 작용시켜 수득한 반응물에, 염화 나트륨을 첨가한 후, 반응물로부터 용매를 제거하는 것을 특징으로 한다.
환상 포스파티딘산 나트륨의 제조에 관하여는, 수소첨가 대두 유래 리조 포스파티딜콜린을 물에 용해하고, 초산 나트륨 완충액 및 2M의 염화 나트륨을 첨가하여 포스포리파제 D와 반응시킨 후, 수산화나트륨 수용액으로 중화하고 클로로포름/메탄올로 추출한 다음, 유기용매층을 회수하여 용매를 제거하고, 환상 포스파티딘산 나트륨을 수득하는 방법이 기재되어 있으나(특허문헌 4), 수득된 물질의 지방산 조성이 기재되어 있을 뿐, 나트륨 함유량 등의 기재가 없고, 환상 포스파티딘산 나트륨인 것이 명확히 나타내어 있지 않다.
본 발명자들은 포스포리파제 D의 효소반응은 칼슘이온이 존재하지 않아도 충분히 진행하며, 염화나트륨은 효소반응을 저해한다는 것을 알아내었다. 구체적으로, 리조형 인지질을 유기용매 및/또는 물을 포함하는 계에 용해하고, 초산 완충액을 첨가하고 pH를 5.5 내지 6.5로 조정하여 포스포리파제 D의 효소반응을 행함으로써 반응을 효율적으로 진행시킴과 동시에, 반응종료 후에 나트륨염의 수용액을 첨가함으로써 환상 포스파티딘산 나트륨을 고수율로 제조하는데 성공하였다. 또한, 대두 유래의 인지질 또는 난황 유래의 인지질 또는 옥수수 유래의 인지질을 원료로 하여 포스포리파제 A2를 작용시켜 수득한 리조형 인지질을 단리,정제하지 않고 연속하여 포스포리파제 D의 반응을 행하는 경우, 반응액 중에 소량의 칼슘이온이 잔존하여 환상 포스파티딘산의 칼슘염이 정제되지만, 반응종료 후에 나트륨 이온과 함께 킬레이트제를 병용함으로써, 고순도의 환상 포스파티딘산 나트륨을 수득할 수 있다.
본 발명에 있어서 이용되는 나트륨염으로서는, 염화 나트륨, 황산 나트륨, 초산 나트륨, 질산 나트륨 등이나, 바람직하게는 염화 나트륨, 황산 나트륨, 보다 바람직하게는 염화 나트륨이다. 바람직하게 사용할 수 있는 염화 나트륨 농도는 0.5 내지 3M이나, 바람직하게는 2 내지 3M이다.
본 발명에 있어서 이용할 수 있는 킬레이트제로서는, 에틸렌디아민 4초산 나트륨(EDTA), 디에틸렌트리아민 5초산, 글리콜에테르디아민 4초산, 구연산, 주석산, 피드산(phytic acid) 등이나, 바람직하게는 에틸렌디아민 4초산 나트륨(EDTA), 디에틸렌트리아민 5초산, 글리콜에테르디아민 4초산, 가장 바람직하게는 EDTA이다.
본 발명에 있어서 이용할 수 있는 유기용매로서는, 클로로포름, 메틸렌클로라이드, 톨루엔, 에틸에테르, 초산에틸, 헥산 등이나, 바람직하게는 클로로포름, 메틸렌클로라이드, 톨루엔, 보다 바람직하게는 클로로포름, 톨루엔이다.
본 발명에 있어서 이용할 수 있는 리소형 인지질은 포스포리파제 D의 기질 특이성을 고려하면, 리조포스포파티딜콜린(LPC)이 바람직하고, 대두유래의 인지질 또는 난황 유래의 인지질 또는 옥수수 유래의 인지질을 원료로 하고, 포스포리파제 A2를 작용시켜 수득하는 LPC가 가장 바람직하다. 본 발명에 이용할 수 있는 리소형 인지질로서는, 수소 첨가 리소형 인지질은 제외되고, 수소 미첨가 리소형 인지질이 사용된다,
본 발명에 있어서 이용할 수 있는 포스포리파제 D는, 상기 리소형 인지질에 작용시키는 경우, cPA를 생성하는 것이라면 특히 한정되는 것은 아니나, 스트렙토마이세스 속(Streptomyces sp.) 또는 액티노모듈라 속(Actinomodula sp.)으로부터 유래하는 포스포리파제 D가 특히 바람직하게 이용된다.
리소형 인지질과 포스포리파제 D와의 반응은 효소가 활성을 발현할 수 있는 조건이라면 특히 한정되지 않으나, 바람직하게는 리소형 인지질을 클로로포름 등의 유기용매에 용해하고, 초산 완충용액을 첨가하여 pH를 5.0 내지 7.0으로 조정한 다음, 10 내지 100 단위/ml의 포스포리파제 D를 첨가하고 25℃ 내지 50℃로 가온하여 연속적으로 교반해 가면서 5 내지 30시간 정도 반응시킨다. 반응종료 후 2 내지 3M의 염화나트륨, 0.1 내지 0.3M의 EDTA를 첨가하여 연속적으로 교반한다, 반응물의 원심분리(3,000회전, 5분간)를 통해 유기용매층을 회수하여 용매를 제거하면, 포스파티딘산 나트륨을 분말 고형물로서 얻을 수 있다. 반응종료 후 필요에 따라서는 메탄올 등 유기용매를 첨가하여 유기용매층을 회수하여도 좋다. 또한, 고순도의 환상 포스파티딘산 나트륨을 수득하는 경우에는, 실리카겔이나 흡착수지 등을 이용하여 정제하여도 좋다.
본 발명에 따르면, 상술한 본 발명의 환상 포스파티딘산 나트륨의 제조방법에 의해 수득되는, 40% 이상의 순도를 가지는 환상 포스파티딘산 나트륨 함유 조성물이 제공된다, 순도는 바람직하게는 45% 이상, 보다 바람직하게는 50% 이상이다. 본 발명에서 순도는 표준품(97% 순도)을 콘트롤로 하여 박층 크로마토그래피의 점적(spot)을 덴시토메터에 의해 측정하여 면적비로 정량한 결과로서 얻어지는 순도이다. 표준품(97% 순도)은 실시예 3에서 얻어진 고순도 환상 포스파티딘산 나트륨을 다시 크로마토그래피 정제한 것이고, 실시예 5에 기재된 지방산 조성을 가지는 것이다.
또한, 본 발명에 따르면, 상기 본 발명의 환상 포스파티딘산 나트륨의 제조방법에 의해 수득되는, 1mg/ml 이상의 환상 포스파티딘산 나트륨을 함유하는 용액이 제공된다. 환상 포스파티딘산 나트륨의 농도는 1mg/ml 이상이면 특별히 한정되지 않으나, 2mg/ml 이상, 3mg/ml 이상, 또는 5mg/ml 이상이어도 무방하다.
이하의 실시예에 의해 본 발명을 구체적으로 설명하는데, 본 발명은 실시예에 의해 한정되지 않는다.
실시예 1: 환상 포스파티딘산 나트륨의 제조방법
대두 인지질(레시틴 함량: 70%)(미수소첨가물) 10g을 0.3M 염화칼슘을 함유하는 100mL의 1M 초산 완충용액(pH 6.5)에 용해시킨 후, 6,000단위의 스트렙토마이세스 속 유래의 포스포리파제 A2를 첨가하고, 40℃에서 18시간 교반하여 반응시켰다. 반응액을 pH 2.5로 조정하여 효소를 실활시킨 후, 100mL의 클로로포름, 50mL의 메탄올을 첨가하여 충분히 교반혼합하여 지질성분을 추출하였다. 클로로포름층을 모아, 회전증발기(rorary evaporator)로 감압건조시켰다. 고형분에 100mL의 아세톤을 가하여 인지질을 침전시킨 유리 지방산을 제거하였다. 침전물 5g을 40ml의 클로로포름에 용해시켜 1M 초산 완충용액(pH 5.5) 10mL를 가하고, 다시 1,500 단위의 액티노모듈라 속(Actinomodula sp.) 유래의 포스포리파제 D를 첨가하여 40℃에서 18시간 교반하여 반응시켰다. 반응액에 20mL의 3M 염화 나트륨, 20mL의 0.1M EDTA 용액을 첨가하여, 40℃에서 1시간 교반을 행하였다. 이어, 20mL의 메탄올을 첨가하고 충분히 교반한 후, 3,000회전, 5분간 원심분리하여 클로로포름층을 얻었다. 이 용액을 회전증발기로 감압건조시켜 환상 포스파티딘산 나트륨염 3.8g을 수득하였다. 수율은 레시틴 함량 70%(10g 중 7g)로부터 환상 포스파티딘산 나트륨을 3.8g 얻었으므로, 54.3%였다. 환상 포스파티딘산 나트륨염의 순도분석은 실리카겔 플레이트를 이용하여 클로로포름:메탄올:초산:5% 이아황산 나트륨(100:40:12:5, v/v)로 전개한 후, 5%의 초산동:8% 인산:2% 황산 혼합액에 단시간 침지하여 풍건한 다음, 180℃에서 약 10분간 가열한 후, 생성된 점적(spot)을 스캐너(아도사제)법으로 행하였다. 즉, 표준품(97% 순도)을 콘트롤로 하여 박층 크로마토그래피의 점적을 덴시토메터에 의해 측정하여 면적비로 정량하였다. 상기 공정으로 얻어진 생성물 중 환상 포스파티딘산 나트륨 염의 순도는 54%였다.
실시예 2: 킬레이트제를 이용하지 않은 환상 포스파티딘산 나트륨의 제조방법
대두 인지질(레시틴 함량: 70%)(미수소첨가물) 10g을 0.3M 염화칼슘을 함유하는 100mL의 1M 초산 완충용액(pH 6.5)에 용해시킨 후, 6,000단위의 스트렙토마이세스 속 유래의 포스포리파제 A2를 첨가하고, 40℃에서 18시간 교반하여 반응시켰다. 반응액을 pH 2.5로 조정하여 효소를 실활시킨 후, 100mL의 클로로포름, 50mL의 메탄올을 첨가하여 충분히 교반 혼합하여 지질성분을 추출하였다. 클로로포름층을 모아, 회전증발기로 감압건조시켰다. 고형분에 100mL의 아세톤을 가하여 인지질을 침전시켜 유리 지방산을 제거하였다. 침전물 5g을 40mL의 클로로포름에 용해시켜 1M 초산 완충용액(pH 5.5) 10mL를 가하고, 다시 1,500 단위의 액티노모듈라 속 유래의 포스포리파제 D를 첨가하여 40℃에서 18시간 교반하여 반응시켰다. 반응액에 20mL의 3M 염화 나트륨을 첨가하여 40℃에서 1시간 교반을 행하였다. 다시 20mL의 메탄올을 첨가하고 충분히 교반한 후, 3,000회전, 5분간 원심분리하여 클로로포름층을 모았다. 이 용액을 회전증발기로 감압건조시켜 환상 포스파티딘산 나트륨염 3.7g을 수득하였다. 수율은 레시틴 함량 70%(10g 중 7g)로부터 환상 포스파티딘산 나트륨을 3.7g 얻었으므로, 52.9%였다. 환상 포스파티딘산 나트륨염의 순도분석은 실시예 1에 기재된 방법으로 행하였다. 본 공정으로 얻어진 생성물 중 환상 포스파티딘산 나트륨 염의 순도는 53%였다.
실시예 3: 고순도 환상 포스파티딘산 나트륨 염의 제조방법
실시예 1에서 수득한 환상 포스파티딘산 나트륨 염 500g을 5mL의 10% 메탄올을 포함하는 클로로포름에 용해시켜 실리카겔 컬럼에 걸어 동일 용매로 전개하고, 다시 20% 메탄올을 포함하는 클로로포름으로 전개하여 10mL의 획분으로 분취하였다. 실시예 1에 기재된 TLC법에 의해 환상 포스파티딘산 나트륨 염을 함유하는 획분을 확인하여 모으고, 회전증발기로 감압건조시켜 환상 포스파티딘산 나트륨 염의 분말 320mg을 수득하였다. 본 시료의 환상 포스파티딘산 나트륨 염의 순도는 95%였다.
실시예 4: 이온 크로마토그래피법에 의한 나트륨 함량의 분석
실시예 1 및 실시예 2에서 수득한 환상 포스파티딘산 나트륨 염에 대하여, 이온 크로마토그래피법에 의해 나트륨 함량을 측정하였다. 컬럼법은 IonPac CS14(일본다이오넥스사제), 이동상은 10mM 메탄술폰산 수용액을 이용하여, 유속 1.0mL/분, 컬럼 온도는 30℃, 주입량은 10㎕로 하고, 검출은 전기도전도 검출기로 행하였다. 표준용액은 양이온 혼합표준액 II(Li+ 0.5mg/L, Na+ 2mg/L, NH4 + 2mg/L, K+ 5mg/L, Ca2 + 5mg/L, Mg2 + 5mg/L)를 이용하였다. 컬럼온도는 30℃, 주입량은 10㎕로 하였다. 분석결과, 환상 포스파티딘산과 같은 몰의 나트륨을 검출한 것으로 부터 1나트륨 염인 것을 확인하였다.
실시예 5:
실시예 3에서 수득한 고순도 환상 포스파티딘산 나트륨의 지방산 조성을 가스크로마토그래피법으로 분석하였다. 시료 20mg/mL이 되도록 염산 메탄올에 용해시키고 65℃에서 30분간 가온하였다. 실온에 방치한 후, 동량의 물, 이어서 동량의 헥산을 가하여 충분히 교반혼합하였다. 3,000회전, 5분간 원심분리하여 헥산층 2㎕을 캐필러리 컬럼에 주입하여 분석하였다. 분석결과는 다음과 같다:
지방산
함량(%)
팔미틴산 23.9
스테아린산 5.4
올레인산 8.6
리놀산 53.4
리놀렌산 4.9
기타 지방산 3.8
실시예 6: 환상 포스파티딘산 나트륨 수용액의 상태
실시예 1 및 실시예 2에서 수득한 환상 포스파티딘산 나트륨 1mg/ml의 수용액을 제조하여 660nm에서 흡광도를 측정하였다. 실시예 1에서 수득한 시료의 흡광도는 0.05, 실시예 2에서 수득한 시료의 흡광도는 0.15였다. 실시예 1에서 수득한 시료는 킬레이트제를 이용한 제조방법으로 수득한 시료이므로, 칼슘염이 존재하지 않고 투명하였다.
비교예 1: 환상 포스파티딘산 나트륨 수용액의 상태
실시예 1에 기재된 대두 인지질 대신에 수소첨가 대두 인지질을 이용하여 실시예 1에 기재된 것과 같은 조작을 행하여, 환상 포스파티딘산 나트륨을 수득하였다. 이 환상 포스파티딘산 나트륨 1mg/ml의 수용액을 제조하고, 660nm에서 흡광도를 측정하였다. 흡광도는 0.33였다.
실시예 7: 환상 포스파티딘산 나트륨 염의 제조방법
대두 인지질(레시틴 함량: 70%)(미수소첨가물) 10g을 0.3M 염화칼슘을 함유하는 100mL의 1M 초산 완충용액(pH 6.5)에 용해시킨 후, 6,000단위의 스트렙토마이세스 속 유래의 포스포리파제 A2를 첨가하고, 40℃에서 18시간 교반하여 반응시켰다. 반응액을 pH 2.5로 조정하여 효소를 실활시킨 후, pH를 5.5로 조정하였다. 이어, 이 반응액에 1,500 단위의 액티노모듈라 속 유래의 포스포리파제 D를 첨가하여, 40℃에서 18시간 교반하면서 반응을 진행시켰다. 이 반응액에 헥산 100mL을 첨가하여 실온에서 30분간 교반추출을 행하였다. 원심분리에 의하여 헥산층을 모으고, 여기에 10mM의 EDTA, 0.1M 초산 완충액 pH 6.5, 0.5M 염화나트륨으로 구성된 수용액 50mL을 가하여 실온에서 30분간 교반한 후, 원심분리에 의해 헥산층을 모으고, 회전증발기로 농축하였다. 여기에 아세톤 50mL를 가하여 충분히 교반하고 원심분리에 의해 아세톤 층을 제거하였다. 이런 조작을 2회 반복하여 유리 지방산을 제거하였다. 아세톤 불용물을 모아 감압건조하여, 환상 포스파티딘산 나트륨 3.6g을 수득하였다.
Claims (9)
- 유기용매 및/또는 물을 포함하는 계에서, 리조형(lyso form) 인지질(단, 수소첨가물을 제외한다)에 포스포리파제 D를 작용시켜 수득한 반응물에 나트륨염을 첨가한 후, 반응물로부터 용매를 제거하는 것을 포함하는 환상 포스파티딘산 나트륨의 제조방법.
- 제 1항에 있어서,
나트륨염은 염화 나트륨인 것을 특징으로 하는
환상 포스파티딘산 나트륨의 제조방법.
- 제 1항 또는 제 2항에 있어서,
유기용매 및/또는 물을 포함하는 계에서, 리조형 인지질에 포스포리파제
D를 작용시켜 수득한 반응물에, 킬레이트제의 존재하에 나트륨염을 첨가
하는 것을 특징으로 하는
환상 포스파티딘산 나트륨의 제조방법.
- 제 3항에 있어서,
킬레이트제는 EDTA인 것을 특징으로 하는
환상 포스파티딘산 나트륨의 제조방법.
- 제 1항 내지 제 4항의 어느 한 항에 있어서,
리조형 인지질이 대두 유래의 인지질 또는 난황 유래의 인지질 또는 옥수수 유래의 인지질에 포스포리파제 A2를 작용시켜 수득한 리조형 인지질인 것을 특징으로 하는
환상 포스파티딘산 나트륨의 제조방법.
- 제 1항 내지 제 5항의 어느 한 항에 있어서,
리조형 인지질이 대두 유래의 인지질 또는 난황 유래의 인지질 또는 옥수수 유래의 인지질에 포스포리파제 A2를 작용시켜 수득한 반응물로부터
리조형 인지질을 단리, 정제하지 않고, 유기용매 및/또는 물을 포함하는
계에 용해하고 포스포리파제 D를 작용시키는 것을 특징으로 하는
환상 포스파티딘산 나트륨의 제조방법.
- 제 1항 내지 제 6항의 어느 한 항에 기재된 환상 포스파티딘산 나트륨의 제조방법에 의해 수득되는, 40% 이상의 순도를 가지는 환상 포스파티딘산 나트륨 함유 조성물.
- 제 1항 내지 제 6항의 어느 한 항에 기재된 환상 포스파티딘산 나트륨의 제조방법에 의해 수득되는, 1mg/ml 이상의 환상 포스파티딘산 나트륨을 함유하는 용액.
- 제 8항에 있어서,
환상 포스파티딘산 나트륨을 함유하는 용액이 수용액인 것을 특징으로
하는
용액.
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