KR20120022777A

KR20120022777A - 포유동물 부형제를 포함하지 않는, 단백질 안정화용 제제

Info

Publication number: KR20120022777A
Application number: KR1020117024336A
Authority: KR
Inventors: 해롤드 테일러; 마르쿠스 부르거; 게르트 요트 만데르
Original assignee: 메르츠 파마 게엠베하 운트 코. 카가아
Priority date: 2009-04-17
Filing date: 2010-04-16
Publication date: 2012-03-12
Also published as: EP2248518A1; US9198856B2; AU2010237270B2; CN107789620A; KR101708952B1; CA2758754A1; EP2419089B1; RU2539388C2; HK1248556A1; RU2011146541A; BRPI1014034A2; CN102387791A; JP2012524035A; AU2010237270A1; EP2248518B1; US20160184413A1; WO2010118888A1; MX2011010801A; IN2011KN04251A; ES2606567T3

Abstract

본 발명은 친수성 중합체, 폴리알콜 대 당의 중량비가 2:1 내지 5:1 (중량%)인 폴리알콜과 당의 혼합물, 계면활성제를 포함하는 제제에 관한 것으로서, 상기 제제는 안정화 단백질을 포함하지 않는다.

Description

포유동물 부형제를 포함하지 않는, 단백질 안정화용 제제{FORMULATION FOR STABILIZING PROTEINS, WHICH IS FREE OF MAMMALIAN EXCIPIENTS}

본 발명은 포유동물 부형제를 포함하지 않는 단백질 안정화용 제제에 관한 것이다. 특히, 친수성 중합체, 폴리알콜 대 당의 중량비가 2:1 내지 5:1 (중량%)인 폴리알콜과 당의 혼합물, 계면활성제를 포함하는 제제에 관한 것으로서, 상기 제제는 안정화 단백질을 포함하지 않는다. 일 구체예에서, 본 발명은 상기 제제/조성물을 포함하는 하나 이상의 용기, 사용 설명서 및 경우에 따라서 약학적으로 허용되는 멸균 용매를 포함하는 키트에 관한 것이다.

안정화 단백질을 포함하지 않는 단백질 제제가 당업계에 공지되어 있다. WO 2006/020208호는 보툴리늄(Botulinum) 독소 및 비단백질계 안정화제를 포함하고, 수용액 중에서 보툴리늄 독소의 활성을 유지하는 약학 조성물에 관한 것이다.

WO 2006/005910호는 보툴리늄 독소 복합체 또는 고 순도의 보툴리늄 독소와 계면활성제를 포함하는 고상 또는 액상 약학 조성물에 관한 것이다. 이 조성물 내에서는 23℃?27℃에서 최대 6개월간 안정하다고 보고되어 있다.

WO 2007/041664호는 보툴리늄 독소 및 폴리비닐피롤리돈(PVP)과 경우에 따라 이당류를 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다.

WO 2004/006954호는 안정화된 보툴리늄 독소와, 인간 환자 피부의 투과성을 증진시켜 상기 환자로의 보툴리늄 독소의 경피 전달을 촉진하는 1종 이상의 증진제를 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다.

WO 01/58472호는 보툴리늄 독소 및 다당류를 포함하는, 인간 환자에게 주사하기에 적합한 약학 조성물을 개시한다. 이 문헌은 또한 신경독소 및 하이드록시에틸 전분을 포함하는 약학 조성물을 개시한다.

WO 2006/079722호는 단백질을 안정화시키기 위해서 단백질의 동결 건조 방법을 실시하기 위한 액상 조성물의 용도에 관한 것으로서, 상기 조성물은 붕괴(collapse) 온도가 -18℃?0℃인 충전제, 안정화제, 완충 용액 및 경우에 따라서 비이온성 계면활성제를 포함한다.

발명의 목적

본 발명의 목적은 안정화 단백질을 포함하지 않는 단백질 안정화용의 신규 제제를 제공하는 것이다. 그러한 제제는 종래의 제제와 비교하여 단백질에 대한 안정성이 양호하도록 제형화될 수 있다.

상기 목적 및 다른 목적은 본 특허출원의 대상인 제제에 의해 실현된다.

발명의 개요

본 발명의 목적은 본 특허출원의 대상인 제제에 의해 실현된다. 본 발명은 친수성 중합체, 폴리알콜 대 당의 중량비가 [2:1] 내지 [5:1] (중량%), 예컨대 [2:1], [2.5:1], [3:1], [3.5:1], [4:1], [4.5:1], [5:1]인 폴리알콜과 당의 혼합물, 계면활성제를 포함하는 제제에 관한 것으로서, 상기 제제는 안정화 단백질을 포함하지 않는다. 하나의 다른 구체예에서, 본 발명은 상기 제제와 천연 또는 변형/인공인 펩티드, 단백질 또는 이의 혼합물을 포함하는 조성물에 관한 것이다.

하나의 다른 구체예에서, 본 발명의 조성물은 동결건조된다.

본 발명의 추가 측면은 의약, 화장품, 의료용화장품(cosmoceutical) 또는 진단 제품으로서 사용하기 위한, 본원에 정의된 바와 같은 펩티드 또는 단백질, 또는 이의 혼합물을 포함하는 조성물에 관한 것이다.

본 발명의 하나의 다른 측면은 환자의 근육 또는 외분비선의 콜린성 신경지배 항진(hyperactive cholinergic innervation)에 의해 유발되거나 또는 이와 관련된 질병 또는 병태의 치료에 사용하기 위한 상기 조성물에 관한 것이다.

본 발명의 추가 측면은 상기 제제/조성물을 포함하는 하나 이상의 용기 및 상기 제제의 사용 설명서와, 경우에 따라서 약학적으로 허용되는 멸균 용매를 포함하는 키트에 관한 것이다.

발명의 상세한 설명

본 발명은 친수성 중합체, 폴리알콜 대 당의 중량비가 [2:1] 내지 [5:1] (중량%), 예컨대 [2:1], [2.5:1], [3:1], [3.5:1], [4:1], [4.5:1], [5:1]인 폴리알콜과 당의 혼합물, 계면활성제를 포함하는 제제에 관한 것으로서, 상기 제제는 안정화 단백질을 포함하지 않는다.

본 명세서에 사용된 용어 "제제"는 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 혼합물을 의미하는 것으로서, 액체, 고체, 반고체, 콜로이드 및 당업자에게 알려진 모든 다른 형태를 포함한다. 본원에서 상기 제제에는 안정화 단백질이 없다.

본 발명에 사용된 용어 "조성물"은 펩티드, 단백질 또는 이의 혼합물을 추가로 포함하는, 본원에서 청구하는 제제를 의미한다.

본 발명의 제제는 친수성 중합체를 포함한다.

본원에서 사용된 용어 "중합체"는 반복 단위를 포함하는 구조를 의미한다. 본 발명의 범위 내에서 용어 "중합체"는 단독중합체 및 공중합체 둘다에 대해서 사용된다.

본원에 사용된 용어 "친수성"은 물에 의해 습윤가능한 물질, 재료, 부형제 또는 약학적 활성 성분을 의미한다.

본 발명의 일 구체예에서, 친수성 중합체는 히알루론산, 폴리비닐피롤리돈(PVP), N-비닐피롤리돈의 공중합체, 셀룰로스 유도체, 폴리에틸렌글리콜(PEG), PEG/PPG 블록 공중합체, 아크릴산 및 메타크릴산의 단독중합체 및 공중합체, 폴리우레탄, 폴리비닐 알콜(PVA), 폴리비닐에테르, 말레산 무수물계 공중합체, 폴리에스테르, 비닐아민, 폴리에틸렌이민, 폴리에틸렌옥사이드, 폴리(카르복실산), 폴리아미드, 폴리무수물, 폴리포스파젠 및 이의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된다.

상기 셀룰로스 유도체는 하이드록시프로필 메틸 셀룰로스, 하이드록시프로필 셀룰로스, 하이드록시에틸 셀룰로스, 메틸 셀룰로스, 카르복시메틸 셀룰로스, 덱스트란, 및 이의 혼합물로 이루어진 군에서 선택될 수 있다.

본원에 사용된 용어 "폴리비닐피롤리돈"은 단량체 N-비닐피롤리돈으로 이루어진 수용성 중합체를 의미한다. 용어 및 약어 "PVP, 포비돈, 폴리비돈, 크로스포비돈, 콜리돈(Kollidon)"은 동의어로 사용된다.

상기 폴리비닐피롤리돈(PVP)은 콜리돈 12 PF, 콜리돈 17 PF, 콜리돈 25, 콜리돈 30, 콜리돈 90 F, 포비돈, 크로스포비돈, 콜리돈 VA 64 및 코포비돈 또는 이의 혼합물일 수 있다.

본 발명에 있어서 용어 "히알루론산"은 비황산화 글리코스아미노글리칸을 의미한다. 일 구체예에서, 히알루론산은 분자량이 0.8?1.2 x 10⁶ Da이다. 또한, 본 발명에 있어서 가교된 히알루론산을 또한 사용할 수 있다. 용어 "히알루론산"은 용어 "히알루로난"과 동의어로 사용된다. 본 발명에 있어서 용어 "히알루론산"은 또한 히알루론산의 유도체, 예를 들어 이의 염, 예컨대 나트륨, 칼륨, 마그네슘 및 칼슘 염을 포함한다. 또한 용어 "히알루론산"은 이의 모든 천연 및 합성 유도체를 포함한다. 이것은 전형적인 분자량이 1O kDa 내지 4.5 x 10⁶ Da인 분자이다.

본 발명의 제제는 [2:1] 내지 [5:1](중량%) 중량비의 폴리알콜과 당의 혼합물을 포함한다.

본원에서 사용된 용어 "폴리알콜"은 단백질이 불안정하지 않도록 보호하는데 사용되는 일군의 탄수화물계 성분을 의미한다. 용어 "폴리올" 및 "당알콜"은 동의어로 사용된다.

본원에서 사용된 용어 "당"은 임의의 단당류, 이당류 및 다당류를 의미한다. 본원에서 사용된 용어 "단당류"는 탄수화물의 기본 단위를 의미한다. 본 발명의 범위 내의 용어 "이당류"는 2개의 단당류로 구성된 탄수화물을 의미한다. 본원에서 사용된 용어 "다당류"는 단당류의 반복 단위들로서, 단당류들이 글리코시드 결합에 의해 결합된다.

본원에서 사용된 용어 "혼합물"은 균일 또는 불균일 성질의 조성물을 의미하는 것으로서, 동일하거나 상이한 복합재 또는 구조의 2종 이상의 물질이 당업자에게 공지된 방법 및 장치를 이용하여 혼합된 것이다. 본 발명의 범위 내의 용어 "혼합물"은 고체, 액체 및 반고체 형태의 혼합물을 포함한다.

본원에서 사용된 용어 "혼합"은 각종 비율로 2종 이상의 활성 또는 불활성 성분을 배합하는 것을 의미한다. 혼합은 동일한 군 또는 상이한 군으로부터의 2종 이상의 상이한 활성 또는 불활성 물질을 임의의 연속 순서로 배합하는 임의의 절차 또는 작용을 의미한다. 용어 "혼합"은 또한 임의의 활성 성분과 임의의 부형제를 배합하는 임의의 절차 또는 작용을 나타내는 것이다.

본 발명의 일 구체예에서, 폴리알콜은 만니톨, 이노시톨, 락티톨, 이소말트, 크실리톨, 에리트리톨 및 소르비톨로 이루어진 군에서 선택된다.

본 발명의 하나의 추가의 구체예에서, 당은 단당류로 이루어진 군에서 선택되며, 상기 단당류는 글루코스, 티오글루코스, 티오만노스, 티오프럭토스, 프럭토스 및 갈락토스일 수 있다. 또 다른 구체예에서, 당은 이당류로서, 상기 이당류는 트레할로스, 수크로스, 옥타-O-아세틸-티오트레할로스, 티오수크로스, 티오말토스, 말토스 및 말티톨일 수 있다. 하나의 추가 구체예에서, 당은 다당류이며, 상기 다당류는 알기네이트, 하이드록시에틸 전분 및 하이드록시프로필 전분일 수 있다.

본 발명은 폴리알콜과 당을 혼합하여 [2:1] 내지 [5:1]의 중량비의 폴리알콜과 당의 혼합물을 얻은 제제를 청구한다. 또 다른 구체예에서, 상기 폴리알콜과 당의 혼합물은 중량비가 [2:1] 내지 [3:1], 예컨대 [2:1], [2.5:1], [3:1]이다. 또 다른 구체예에서, 상기 폴리알콜과 당의 혼합물은 중량비가 [3:1]이다.

본 발명의 하나의 구체예에 따르면, 폴리알콜과 당의 혼합물은 만니톨과 수크로스를 [2:1] 내지 [5:1], 예컨대 [2:1], [2.5:1], [3:1], [3.5:1], [4:1], [4.5:1], [5:1]의 중량비로 포함한다. 본 발명의 하나의 추가의 구체예에서, 폴리알콜과 당의 혼합물은 만니톨과 수크로스를 [3:1]의 중량비로 포함한다.

상기 폴리알콜과 상기 당은 V-블랜더(트윈 쉘 블렌더), 회전식 드럼 혼합기, 더블 리본 블랜더, 플라우(plow) 믹서, 패들 믹서, 더블 콘 블랜더를 사용하여 혼합할 수 있다. 당업자는 벤치탑 스케일 또는 하이 스케일에 따라서 맞는 믹서를 선택할 수 있을 것이다. 혼합 시간은 배치 크기, 부형제 품질, 예컨대 분말의 입도, 및 믹서 유형에 따라서 달라질 것이다.

본 발명의 제제는 또한 계면활성제를 포함한다.

본원에 사용된 용어 "계면활성제"는, 제제 내의 약학적 활성 성분 또는 다른 부형제일 수 있는, 또 다른 물질을 용해 또는 안정화시키는데 사용되는 임의의 물질을 의미한다. 상기 계면활성제는 입체구조적으로 또는 정전기적으로 상기 단백질 또는 펩티드를 안정화시킬 수 있다. 용어 "계면활성제(detergent)"는 용어 "계면활성제(surfactant)" 또는 "표면 활성제"와 동의어로 사용된다.

본 발명의 일 구체예에서 계면활성제는 비이온성 계면활성제로 이루어진 군에서 선택된다.

본 발명에 있어서 용어 "비이온성 계면활성제"는 양전하 또는 음전하를 띄지 않는 계면활성제를 의미한다.

일 측면에 따르면, 상기 비이온성 계면활성제는 소르비탄 에스테르(소르비탄 모노라우레이트, 소르비탄 모노팔미테이트, 소르비탄 모노스테아레이트, 소르비탄 트리스테아레이트, 소르비탄 모노올레이트, 소르비탄 트리올레이트), 폴리소르베이트(폴리옥시에틸렌 (20) 소르비탄 모노라우레이트 (폴리소르베이트 20), 폴리옥시에틸렌 (20) 소르비탄 모노팔미테이트, 폴리옥시에틸렌 (20) 소르비탄 모노스테아레이트, 폴리옥시에틸렌 (20) 소르비탄 트리스테아레이트, 폴리옥시에틸렌 (20) 소르비탄 트리올레이트, 폴리옥시에틸렌 (20)-소르비탄-모노올레이트(트윈 80 / 폴리소르베이트 80)), 폴록사머(폴록사머 407, 폴록사머 188), 크레모퍼, 및 이의 혼합물일 수 있다.

또 다른 구체예에서, 상기 계면활성제는 음이온성 계면활성제이다.

본 발명에 있어서 용어 "음이온성 계면활성제"는 음이온 친수성기를 포함하는 계면활성제를 의미한다.

일측면에 따르면, 상기 음이온성 계면활성제는 테트라데실트리메틸암모늄 브로마이드, 도데실트리메틸암모늄 브로마이드, 나트륨 라우레스 설페이트, 나트륨 도데실 설페이트(SDS), 세트리미드, 헥사데실트리메틸암모늄 브로마이드, 및 이의 혼합물일 수 있다.

추가의 일 구체예에서, 상기 계면활성제는 양이온성 계면활성제이다.

본 발명에 있어서 용어 "양이온성 계면활성제"는 양이온 친수성기를 포함하는 계면활성제를 포함한다.

일 측면에 따르면, 상기 양이온성 계면활성제는 벤잘코늄 클로라이드, 세틸 트리메틸암모늄 브로마이드(CTAB), 세틸피리디늄 클로라이드(CPC), 벤제토늄 클로라이드(BZT), 및 이의 혼합물일 수 있다.

본 발명의 일 구체예에서, 계면활성제의 농도는 제조 용량 조성물의 총 중량, 즉 본 발명의 제제, 안정화시키고자 하는 펩티드 또는 단백질 및 주사용으로 첨가되는 멸균 용매, 통상 물 또는 등장성 염 용액의 총량을 기준으로 0.5 mg/g 이하이다. 본 발명의 추가의 일 구체예에서, 계면활성제의 농도는 제조 용량 조성물의 총 중량을 기준으로 0.1 mg/g 내지 0.3 mg/g이다. 본 발명의 또 다른 구체예에서, 사용된 계면활성제는 폴리소르베이트 80이며 이의 농도는 제조 용량 조성물의 총 중량을 기준으로 0.2 mg/g이다.

본원에서 사용된 바와 같은 용어 "제조 용량 조성물(production bulk composition)"은 각 투약 단위로 조성물을 충전하기 전에 존재하는 조성물을 의미한다.

본 발명의 일 구체예에서, 사용되는 친수성 중합체는 히알루론산이며 사용되는 계면활성제는 폴리소르베이트 80이다.

본 발명의 추가의 일 구체예에서, 사용되는 친수성 중합체는 히알루론산이며 사용되는 계면활성제는 폴리소르베이트 20이다.

본 발명의 추가의 일 구체예에서, 사용되는 친수성 중합체는 폴리비닐피롤리돈(PVP)이며 사용되는 계면활성제는 폴리소르베이트 80이다.

본 발명의 제제는 안정화 단백질을 포함하지 않는다.

본 발명에 있어서 용어 "안정화 단백질을 포함하지 않는"은 제제가 활성 펩티드 또는 단백질을 안정화시키는 펩티드 또는 단백질을 포함하지 않는 것을 의미한다. 그러한 부형제의 예는 인간 혈청 알부민(HSA), 젤라틴, 아미노산, 예컨대 히스티딘, 리신, 메티오닌 또는 면역글로불린이 있지만, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 제제는 단백질, 펩티드 또는 이의 혼합물의 안정화에 사용된다.

본 발명은 또한, 상기 제제와 천연 또는 변형/인공의 단백질, 펩티드 또는 이의 혼합물일 수 있는 활성제를 포함하는 조성물에 관한 것이다.

본원에서 사용된 용어 "안정한 조성물"이란, 단백질 또는 펩티드가 실온, 60% RH에서 4주 이상 동안 저장시 그 물리적 및 화학적 안정성과 온전성을, 동결건조 후, 즉 저장 전에 측정된 값과 비교하여 최대 50%, 60%, 70%, 80% 및 90% 유지하는 조성물을 의미한다.

추가의 구체예에서, 본 발명의 조성물은 단백질 또는 펩티드가 실온, 60% RH에서 6개월 이상 동안 저장시 그 물리적 및 화학적 안정성과 온전성을, 동결건조 후, 즉 저장 전에 측정된 값과 비교하여 최대 50%, 60%, 70%, 80% 및 90% 유지하도록 이루어진다.

또 다른 추가의 구체예에서, 본 발명의 조성물은 단백질 또는 펩티드가 실온, 60% RH에서 12개월 이상 동안 저장시 그 물리적 및 화학적 안정성과 온전성을, 동결건조 후, 즉 저장 전에 측정된 값과 비교하여 최대 50%, 60%, 70%, 80% 및 90% 유지하도록 이루어진다.

생물학적 활성에 대하여, "안정한 조성물"이란 약학 조성물의 재구성 또는 수성 용액 내의 신경독소 성분이 약학 조성물로 도입되기 전에 생물학적 활성 신경독소 성분이 가졌던 독성의 약 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 초과, 및 최대 약 100%인 조성물을 의미한다.

본 발명에 있어서 RT(또는 상온)로서도 표시되는 용어 "실온"은 또한 미국 약전의 정의에서와 같이 20℃?25℃[68?77℉]의 온도를 의미한다.

본 발명에서 RH로서 표시되기도 하는 용어 "상대 습도"는 특정 온도에서 공기 중의 수증기의 양과 공기가 그 온도에서 유지할 수 있는 최대량의 비율을 백분율로서 표시한 것이다.

본 발명의 일 측면에서, 본원의 조성물은 동결건조 형태로 25℃ 및 60% RH에서 7개월 동안 안정하다. 본 발명의 또 다른 측면에서, 상기 조성물은 동결건조 형태로 25℃ 및 60% RH에서 3개월 동안 안정하다. 본 발명의 추가의 일 측면에서, 상기 조성물은 동결건조 형태로 25℃ 및 60% RH에서 2개월 동안 안정하다. 본 발명의 또 다른 일 측면에서, 상기 조성물은 동결건조 형태로 25℃ 및 60% RH에서 1개월 동안 안정하다.

본 발명의 또 다른 일 측면에서, 상기 조성물은 동결건조 형태로 40℃ 및 75% RH에서 7개월 동안 안정하다. 본 발명의 또 다른 일 측면에서, 상기 조성물은 동결건조 형태로 40℃ 및 75% RH에서 3개월 동안 안정하다. 본 발명의 추가의 일 측면에서, 상기 조성물은 동결건조 형태로 40℃ 및 75% RH에서 2개월 동안 안정하다. 본 발명의 추가의 일 측면에서, 상기 조성물은 동결건조 형태로 40℃ 및 75% RH에서 1개월 동안 안정하다.

본 발명의 일 구체예에서, 단백질 안정성의 지표로서 시간에 따른 응집도를 측정하여 안정성을 측정한다. 또 다른 구체예에서, 단백질 조성물의 안정성은 온전한 단백질의 %를 측정하는 당업자에게 공지된 분석 방법, 예컨대 단백질분해에 의한 절단, 세포계 분석을 이용하여 측정할 수 있다. 추가의 일 구체예에서, 단백질 조성물의 안정성은 마우스-편측횡경막 분석(HDA 분석)을 사용하여 측정하였다. 본 발명의 일 구체예에서, HDA 분석을 이용하여 본원에서 청구하는 조성물의 안정성을 측정하였다. 결과는 HDA 분석에서 측정된 효능으로서 나타내었다.

HDA 분석은 Goeschel 등의 문헌["Botulinum Toxin Therapy: Neutralizing and Nonneutralizing Antibodies - Therapeutic Consequences" Experimental Neurology, 1997; 147: 96-102]에 정의된 바와 같이 실시하였다.

본 발명은 추가로 상기 제제와, 천연 또는 변형/인공의 펩티드, 단백질, 또는 이의 혼합물을 포함하는 조성물에 관한 것이다. 변형은, 예컨대 단백질의 흡수 또는 안정성에 유리할 수 있는, 화학적 변형, 예컨대 글리코실화, 아세틸화, 아실화 등을 포함한다. 그러나, 대안적으로 또는 병행하여 하나 이상의 아미노산 잔기의 부가, 치환 또는 결실에 의해 단백질의 폴리펩티드 사슬을 변형시킬 수 있다.

본 발명에 있어서 용어 "펩티드"는 정의된 순서로 알파-아미노의 결합에 의해 형성되는 짧은 중합체를 의미한다.

본원에 사용된 용어 "단백질"은 직쇄로 배열되고 인접 아미노산 잔기의 아미노기와 카르복실기 사이의 펩티드 결합에 의해 함께 연결된 아미노산 화합물을 의미한다. 용어 "단백질"은 용어 "폴리펩티드"와 동의어로 사용된다. 본 발명에 따른 단백질은 인공 또는 천연의 것일 수 있다.

본원에서 청구하는 제제 내의 활성 단백질 또는 펩티드는 인공/변형 또는 천연의 것일 수 있다.

본 발명에 있어서 용어 "인공 단백질"은 변형 단백질을 의미한다. 용어 "변형 단백질"은 당업자에게 공지된 모든 가능한 변형, 예컨대 화학적 변형, 결실을 포함한다.

본 발명에 있어서 용어 "천연"은 포유로 유기체에서 자연적으로 발견되는 단백질 또는 펩티드를 의미한다.

본 발명의 일 구체예에서, 상기 단백질은 독소, 콘트로이틴, 엘라스틴, 액틴, 마이오신, 아프로티닌, 성장 호르몬, 성장 호르몬 방출 인자, 부갑상선 호르몬, 갑상선 자극 호르몬, 리포단백질(LDL, IDL, VLDL, VHDL, HDL), 아포리포단백질(ApoA-1, ApoA-II, ApoA-IV, ApoC-I, ApoC-II, ApoC-III, ApoD, ApoE), α-1 안티트립신, 인슐린, 프로인슐린, 난포 자극 호르몬, 칼시토닌, 옥시토신, 바소프레신, 류프롤라이드 아세테이트, 소마토스타틴, 황체형성 호르몬, 글루카곤, 응고 인자, 항-응고 인자, 플라스미노겐 활성화인자, 인간 대식세포 염증성 단백질, 혈관 내피 성장 인자(VEGF), 류마토이드 인자, 뼈 유래의 신경영양 인자(BDNF), 신경 성장 인자-β(NGF-β), 혈소판 유래 성장 인자(PDGF), 섬유아세포 성장 인자(FGF), 상피 성장 인자(EGF), 트랜스포밍 성장 인자(TGF-β1, TGF-β2, TGF-β3, TGF-β4, TGF-β5), 에리트로포이에틴, 인터루킨(IL-1 내지 IL-10), 골형성 단백질(BMP) 부갑상선 호르몬, DNAse, 양이온성 페리틴, 인터페론(α, β, γ) 및 이의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된다.

본 발명의 또 다른 구체예에서, 상기 단백질은 독소이다. 본 발명의 추가의 일 구체예에서, 상기 독소는 보툴리늄 독소, 디프테리아 독소 또는 파상풍 독소, 또는 이의 2종 이상의 혼합물이다.

본 발명의 일 구체예에서, 상기 조성물 중의 단백질은 보툴리늄 독소이다.

본 발명의 추가의 일 구체예에서, 상기 보툴리늄 독소는 유형 A, B, C, C₁, D, E, F 및 G로 이루어진 군에서 선택된다. 본 발명의 또 다른 구체예에서, 상기 보툴리늄 독소는 A형이다. 본 발명의 또 다른 일 구체예에서, 상기 단백질은 보툴리늄 독소 A형의 신경독소 성분이다.

본 명세서 전반에 걸쳐 사용된 용어 "보툴리늄 독소"는 임의의 다른 클로스트리디움 단백질이 없는 신경독소 성분을 의미하지만, "보툴리늄 독소 복합체"도 포함한다. 용어 "보툴리늄 독소"는 본원에서 독소 복합체와 신경독소 성분의 구별이 필요하지 않거나 원하지 않는 경우에 사용된다. "BoNT" 또는 "NT"는 범용되는 약어이다.

보툴리늄 독소 복합체의 "신경독소 성분"은 혈청형 A의 경우에 분자량이 약 150 kDa인 단일 폴리펩티드 사슬로서 초기에 형성된다. 다른 혈청형에서 신경독소 성분은, 박테리아 공급원에 따라서 약 145?약 170 kDa으로 다양한 것으로 관찰되었다. 혈청형 A의 경우에, 예를 들어 폴리펩티드의 단백질분해 프로세싱으로 중쇄 및 경쇄로 구성되고 이황화 결합에 의해 연결되는 이중사슬 폴리펩티드 형태의 활성화된 폴리펩티드가 형성된다. 인간에서, 중쇄는 시냅스전 콜린성 신경 말단에의 결합과 독소의 세포로의 내면화를 매개한다. 용어 "신경독소 성분"은 또한 클로스트리디움 보튤리늄(Clostridium botulinum)의 다른 혈청형에서도 발견되는 기능성 상동체를 포함한다. 본 발명의 일 구체예에서, 신경독소 성분은 신경독소 성분과 잠재적으로 회합될 수 있는 임의의 다른 C. 보툴리늄 단백질, 예를 들어 RNA가 없다. 신경독소 성분은 15O kDa의 단일쇄 전구체 단백질이거나 또는, 하나 이상의 이황화 결합에 의해 연결될 수 있는, 약 50 kDa의 경쇄(Lc) 및 약 100 kDa의 중쇄(Hc)를 포함하는, 단백질분해 처리된 신경독소 성분일 수 있다(리뷰를 위해, 예컨대 문헌[Simpson LL, Ann Rev Pharmacol Toxicol. 2004; 44:167-93] 참조). 인간에서, 중쇄는 시냅스전 콜린성 신경 말단에의 결합과 독소의 세포로의 내면화를 매개한다. 경쇄는 독성 효과를 담당하고, 아연-엔도펩티다제로서 작용하고 막 융합(SNARE 복합체)을 담당하는 특정 단백질을 분해하는 것으로 생각된다(예컨대, Montecucco C, Shiavo G., Rosetto O: The mechanism of action of tetanus and Botulinum neurotoxins. Arch Toxicol. 1996; 18 (Suppl.): 342-354 참조).

보툴리늄 독소 복합체의 신경독소 서브유닛은 이 문헌에 "신경독소 성분" 또는 "복합 단백질이 없는 신경독소 성분"으로 언급되어 있다. 보툴리늄 독소 A형 및 B형의 신경독소 성분의 생산은, 예를 들어 국제 특허 출원 WO 00/74703호에 개시되어 있다.

추가의 구체예에서, 보툴리늄 독소는 보툴리늄 독소 A형이다. 일 구체예에서, 상기 보툴리늄 독소는 임의의 복합 단백질(신경독소 성분)이 없다. 추가의 일 구체예에서, 상기 독소는 순수한 신경독소 성분 혈청형 A이다. 이 외에, 각각의 돌연변이, 결실 등을 포함하는 보툴리늄 독소의 변형은 물론 재조합 생성된 신경독소 성분도 본 발명의 범위 내에 포함된다. 적절한 돌연변이체에 대해서는, 본원에 그 전문이 참고로 포함되는 WO 2006/027207 A1, WO 2009/015840 A1 , WO 2006/114308 A1 및 EP 08015287.9호를 참조한다. 또한, 본 발명에 있어서 각종 혈청형 혼합물(신경독소 성분 또는 재조합 형태 또는 이들 둘다의 형태, 예컨대 A형 및 B형의 보툴리늄 신경독소의 혼합물)을 사용할 수 있다. 그러나, 본 발명은 또한 페그화, 글리코실화, 황산화, 인산화 또는 임의의 다른 변형, 특히 하나 이상의 표면 또는 용매 노출된 아미노산(들)의 변형에 의해 화학적으로 변형된 독소, 예컨대 보툴리늄 독소에 관한 것이다. 그러한 보툴리늄 독소는 예컨대 EP 08015288.7 및 그 문헌 내에 개시된 종래 기술문헌에 개시되어 있다.

본 발명의 교시 내용에 따르면, 의약은 신경독소 성분 이외에 보툴리늄 독소 복합체에서 발견되는 단백질을 포함하지 않는 것이 포함된다.

보툴리늄 독소, 바람직하게는 본원에서 언급하는 신경독소 성분은 단독의 활성 성분이거나, 또는 추가의 약학적 활성 성분을 포함할 수 있다.

일 구체예에서, 조성물은 동결건조된다.

본 발명의 일 구체예에서, 액상 조성물을 동결건조용 바이얼에 충전한 후 동결건조할 수 있다. 샘플의 동결건조는, -35℃?-65℃ 온도에서 1?10 시간 동안, 예컨대 5?10 시간 동안 샘플을 동결하여 실시한다. 이 단계 후에 -30℃?10℃, 예컨대 -20℃ 내지 10℃ 또는 5℃ 내지 10℃의 선반 온도에서 100 mTorr 내지 200 mTorr의 압력 하에 10 시간 내지 25 시간 동안 1차 건조한다. 최종적으로, 샘플을 동결건조 공정의 마지막 단계인 2차 건조로 진입시키는데, 상기 건조는 15℃?25℃의 선반 온도에서 5 시간 내지 15 시간 동안 실시한다. 동결건조용 바이얼의 샘플 용적은 0.1?5 ml, 예컨대 0.2?1 ml 또는 0.4?0.6 ml, 또는 0.5 ml로 다양한다. 일 구체예에서, 샘플 용적은 2 ml?4 ml이다.

본 발명의 추가의 일 구체예에서, 동결건조 공정은, 약 2 시간 동안 -45℃의 선반 온도에서 샘플을 동결한 다음 -25℃의 선반 온도 및 90 mTorr에서 12 시간 동안 1차 건조한 후, 25℃의 선반 온도에서 12.5 시간 동안 2차 건조하여 실시할 수 있다.

일 구체예에서, 상기 조성물을 포함하는 주사용 용액을 청구한다.

본원에서 청구되는 주사용 용액은 2?8℃의 온도에서 24 시간 동안 안정하다.

일 구체예에서, 상기 주사용 용액은 포유동물에게 투여하기 전에 약학적으로 허용되는 멸균 용매로 상기 동결건조 조성물을 재구성하여 얻는다.

추가의 일 구체예에서, 본 발명은 포유동물에의 정맥내, 피하, 근육내, 관절내, 복강내, 뇌척수액내, 심장내, 척수강내, 방광내, 골내, 유리체강내, 경막외, 활액막내 주사를 위해 고안된 상기 주사용 용액의 제조 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 본원에서 청구되는 바와 같은 상기 동결건조된 조성물을 투여 전에 약학적으로 허용되는 멸균 용매 내에 용해시키는 단계를 포함한다.

본 발명의 또 다른 구체예에서, 상기 주사용 용액은 다른 투여 경로를 통해 또한 투여된다. 그러한 투여 경로는 흡입, 경구 및 비강 경로이나, 이에 한정되는 것은 아니다. 그러한 적용예는 예를 들어 본원에서 청구되는 주사용 용액의 형태의 COPD 환자에 의한 α-1 안티트립신의 흡입이지만, 이에 한정되는 것은 아니다.

본원에서 청구되는 조성물은 의약, 화장품, 의료용화장품 또는 진단 제품으로서 사용하기 위한 것이다.

본원에서 사용되는 용어 "의약"은 제품 또는 제품 혼합물로서, 상기 제품은 투여 전에 혼합되거나, 또는 연속하여 사용될 수 있으며, 투여되는 포유동물에 대한 치료 및/또는 진단 결과를 나타낼 수 있는 것이다.

본원에서 사용된 용어 "화장품"은 화장 용도로 사용되는 제품을 의미한다. 본원에서 사용되는 용어 "화장품"은 FD&C Act sec 201 (i)(연방 식품 의약품 화장품 법, FDA)에서 "외관을 세정하거나, 아름답게 하거나, 매력을 증가시키거나, 또는 변경하기 위해 인체에 문지르거나, 붓거나, 뿌리거나 또는 분무하거나, 도입하거나, 또는 다른 방식으로 적용하려는 것"으로 정의되는 제품을 의미한다.

본원에서 사용되는 용어 "진단 제품"은 환자에서의 진단 시험 또는 분석을 실시하기 위해서 환자에게 전달되는 임의의 화합물 또는 화합물들을 포함하는 임의의 제품을 의미한다.

본원에서 사용되는 용어 "의료용화장품"은 의약 또는 약물과 같은 장점을 또한 나타내는 비처방 화장품을 의미한다.

본 발명의 일 구체예에서, 본원에서 청구되는 제제는 완충제를 포함할 수 있다.

본원에서 사용되는 용어 "완충제"는 약산과 이의 짝염기 또는 약염기와 이의 짝산의 혼합물로 이루어지는 수용액을 의미한다.

본 발명의 추가의 일 구체예에서, 완충제는 포스페이트 완충제, 아세테이트 완충제, 시트레이트 완충제, 포르메이트 완충제, 벤조에이트 완충제, TRIS(트리스(하이드록시메틸)-아미노메탄) 및 말레에이트 완충제로 이루어진 군에서 선택된다. 상기 완충제는 USP(미국 약전), EP(유럽 약전) 및 JP(일본 약전)의 규격에 따라서 약전에 맞는 부형제를 사용하여 제조한다. 완충제 농도는 최종 생성물의 pH에 따라서 결정한다.

본원의 제제에 사용되는 부형제 및 활성제(펩티드 및/또는 단백질)는 약학적으로 허용가능하다.

본원에 사용되는 용어 "약학적으로 허용되는"은 포유 동물이 임의 종류의 부작용을 피하면서 치료학적 유효 농도로 상기 조성물을 섭취할 수 있게 하는 임의의 부형제, 약학적 활성 성분을 의미한다.

일 측면에서 본 발명은 제제/조성물을 포함하는 하나 이상의 용기와 제제/조성물의 사용 설명서, 및 경우에 따라서 약학적으로 허용되는 멸균 용매를 포함하는 키트에 관한 것이다.

본원에서 사용되는 용어 "용매"는 임의의 다른 물질 또는 물질 혼합물 또는 생성물을 용해 또는 희석하는데 도움이 되는 임의의 액체를 의미한다. 본 발명에 있어서 용어 "용매"는 또한 용매의 혼합물을 포함할 수 있다.

상기 공정에 사용하고자 하는 약학적으로 허용되는 멸균 용매는 주사용수(WFI), 등장성 염 용액, 링거액, pH 완충액, 5% 글루코스 수용액이 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 추가 측면은 멸균 조성물에 관한 것이다.

본원에서 사용되는 용어 "멸균"은 바람직하지 않은 미생물의 부재를 의미하며, USP(미국 약전), EP(유럽 약전) 및 JP(일본 약전)에 정의된 표준을 의미한다.

일 구체예에서, 조성물은 비발열원성으로서, 예컨대 용량당 <1 EU(내독소 단위, 표적 척도), 바람직하게는 용량당 < 0.1 EU를 함유한다. 추가의 일 구체예에서, 상기 주사용 용액은 또한 멸균성 및 비발열원성이다.

본 발명의 일 구체예에서, 상기 조성물은 척추동물, 예컨대 포유동물에서 사용하기 위한 것이다.

용어 "척추동물"은 등뼈 또는 척추를 갖는 척추동물아문, 척삭동물의 임의의 구성원으로서 본원에서 정의된다. 따라서, 용어 "척추동물"은 인간, 포유동물, 유대류, 파충류, 조류, 양서류 및 어류를 포함한다.

본 문헌에서 용어 "포유동물"은 젖분비선을 포함하는 한선의 존재와, 털, 청각에 이용되는 3개의 중이 골과, 뇌의 신피질 영역의 존재를 특징으로 하는 임의의 온혈 척추동물로서 정의된다. 따라서 웅성 및 자성의 인간, 개, 고양이, 돼지, 소, 말, 당나귀, 양, 염소 및 사슴도 포유동물의 정의 내에 포함된다.

용어 "유대류"는 암컷이 통상적으로 초기 유아기 동안 어린 새끼를 기르는 주머니를 가지는 포유동물로서 본원에서 정의된다. 이들은 번식 특성이 태반형 포유동물과는 다르다.

용어 "파충류"는 털 또는 깃털과 대조적으로 비늘에 덮힌 피부를 가지는 임의의 공기로 호흡하는 변온 척추동물로서 본원에서 정의된다.

용어 "조류"는 알을 낳는 임의의 2발의 온혈 척추동물로서 본원에 정의된다.

용어 "양서류"는 양막성 알을 갖지 않으며, 변온동물이고, 일반적으로 대부분을 땅에서 지내는 모든 살아있는 4발 동물(다리가 네개인 척추동물)로서 본원에서 정의된다.

용어 "어류"는 일반적으로 변온동물이고, 비늘로 덮혀있으며, 2세트의 쌍을 이루는 지느러미와 몇개의 쌍을 이루지 않는 지느러미가 있는 수생 척추동물로서 본원에 정의된다.

본원에서의 농도 값은 "대략" 값으로 표시된다.

본원에서 사용된 용어 "약"은 이 용어가 붙은 값의 20% 편차를 반영하려는 것이다.

또한 본 발명은 상기 조성물이 수성 조성물로서 제조된 후 동결건조되는 것을 특징으로 하는 상기 조성물의 제조 방법에 관한 것이다.

동결건조 전에, 친수성 중합체, 폴리알콜과 당의 혼합물, 계면활성제에 의해 안정화되는 수용액에 단백질 또는 펩티드를 용해시킨다. 용액 중의 단백질의 안정화는, 단백질이 친수성 중합체, 계면활성제 및 폴리알콜과 당의 혼합물로 이루어진 구조체에 의해 둘러싸이는 것을 의미한다.

계면활성제를 사용하여, 친수성 중합체의 양을 줄일 수 있다. 일구체예에서 트윈 80을 사용하여 PVP의 농도를 제조 용량 조성물의 총 중량을 기준으로 150 mg/g에서 80 mg/g으로 감소시킬 수 있다. 이러한 효과로 인해, 본원의 조성물의 산업적 제조가 향상된다.

본 발명의 일 구체예에서, 본원의 조성물은 제조 용량 조성물 1 g당 약 2 pg?50 ng의 양으로 보툴리늄 독소의 신경독소 성분을 포함한다. 바람직한 양의 범위는 각각 제조 용량 조성물 1 g당, 물 1 g을 기준으로 2 pg?200 pg, 200 pg?400 pg, 400 pg?600 pg, 600 pg?800 pg, 800 pg?1 ng, 1 ng?1.5 ng, 1.5 ng?2 ng, 2 ng?2.5 ng, 2.5 ng?3 ng, 3?3.5 ng, 3.5?4 ng, 4 ng?4.5 ng, 및 4.5?5 ng 범위이다. 본 발명의 구체예에서, 신경독소 성분은 마우스 LD₅₀ 분석으로 측정시 신경독소 성분 1 ng당 생물학적 활성이 50?250 LD₅₀ 단위이다. 추가의 일 구체예에서, 신경독소 성분은 신경독소 성분 1 ng당 생물학적 활성이 약 150 LD₅₀이다.

하기는 본원에 정의된 바와 같은 안정한 조성물의 일부 구체예를 나타내며, 여기서 특정된 성분의 양은 모두 1 g 제조 용량 조성물에 대한 것이다.

본 발명의 추가의 일 구체예에서, 본원에서 청구되는 조성물은 ≤ 1.6 ng의 보툴리늄 독소의 신경독소 성분, 약 0.5 mg의 히알루론산, 약 15.0 mg의 만니톨, 약 5.0 mg의 수크로스 및 약 0.1 mg의 폴리소르베이트 80을 포함한다.

본 발명의 또 다른 구체예에서, 본원에서 청구되는 조성물은 ≤ 1.6 ng의 보툴리늄 독소의 신경독소 성분, 약 1.0 mg의 히알루론산, 약 30.0 mg의 만니톨, 약 10.0 mg의 수크로스 및 약 0.2 mg의 폴리소르베이트 80을 포함한다.

본 발명의 또 다른 구체예에서, 본원에서 청구되는 조성물은 ≤ 1.6 ng의 보툴리늄 독소의 신경독소 성분, 약 2.0 mg의 히알루론산, 약 40.0 mg의 만니톨, 약 10.0 mg의 수크로스 및 약 0.5 mg의 폴리소르베이트 80을 포함한다.

본 발명의 또 다른 구체예에서, 본원에서 청구되는 조성물은 ≤ 1.6 ng의 보툴리늄 독소의 신경독소 성분, 약 2.0 mg의 히알루론산, 약 40.0 mg의 만니톨, 약 10.0 mg의 수크로스 및 약 0.2 mg의 폴리소르베이트 80을 포함한다.

본 발명의 추가의 일구체예에서, 본원에서 청구되는 조성물은 ≤ 1.6 ng의 보툴리늄 독소의 신경독소 성분, 약 1.0 mg의 히알루론산, 약 40.0 mg의 만니톨, 약 10.0 mg의 수크로스 및 약 0.5 mg의 폴리소르베이트 80을 포함한다.

본 발명의 추가의 일구체예에서, 본원에서 청구되는 조성물은 ≤ 1.6 ng의 보툴리늄 독소의 신경독소 성분, 약 1.0 mg의 히알루론산, 약 10.0 mg의 수크로스 및 약 0.2 mg의 폴리소르베이트 80을 포함한다.

본 발명의 추가의 일구체예에서, 본원에서 청구되는 조성물은 ≤ 1.6 ng의 보툴리늄 독소의 신경독소 성분, 약 80.0 mg의 폴리비닐피롤리돈(PVP), 약 50.0 mg의 만니톨 및 약 0.2 mg의 폴리소르베이트 80을 포함한다.

본 발명의 추가의 일구체예에서, 본원에서 청구되는 조성물은 ≤ 1.6 ng의 보툴리늄 독소의 신경독소 성분, 약 80.0 mg의 폴리비닐피롤리돈(PVP), 약 50.0 mg의 만니톨 및 약 0.5 mg의 폴리소르베이트 80을 포함한다.

본 발명의 추가의 일구체예에서, 본원에서 청구되는 조성물은 ≤ 1.6 ng의 보툴리늄 독소의 신경독소 성분, 약 100.0 mg의 폴리비닐피롤리돈(PVP), 약 30.0 mg의 만니톨, 약 10.0 mg의 수크로스 및 약 0.2 mg의 폴리소르베이트 80을 포함한다.

본 발명의 추가의 일구체예에서, 본원에서 청구되는 조성물은 ≤ 1.6 ng의 보툴리늄 독소의 신경독소 성분, 약 80.0 mg의 폴리비닐피롤리돈(PVP), 약 30.0 mg의 만니톨, 약 10.0 mg의 수크로스 및 약 0.2 mg의 폴리소르베이트 80을 포함한다.

본 발명의 추가의 일구체예에서, 본원에서 청구되는 조성물은 ≤ 1.6 ng의 보툴리늄 독소의 신경독소 성분, 약 80.0 mg의 폴리비닐피롤리돈(PVP), 약 30.0 mg의 만니톨, 약 10.0 mg의 수크로스, 약 0.2 mg의 폴리소르베이트 80 및 약 10 mM 포스페이트 완충제(pH 7.4)를 포함한다.

본 발명의 추가의 일구체예에서, 본원에서 청구되는 조성물은 ≤ 1.6 ng의 보툴리늄 독소의 신경독소 성분, 약 50.0 mg의 폴리비닐피롤리돈(PVP), 약 30.0 mg의 만니톨, 약 10.0 mg의 수크로스, 약 0.2 mg의 폴리소르베이트 80 및 약 10 mM 포스페이트 완충제(pH 7.4)를 포함한다.

본 발명의 추가의 일구체예에서, 본원에서 청구되는 조성물은 ≤ 1.6 ng의 보툴리늄 독소의 신경독소 성분, 약 100.0 mg의 폴리비닐피롤리돈(PVP), 약 30.0 mg의 만니톨, 약 10.0 mg의 수크로스 및 약 0.5 mg의 폴리소르베이트 80을 포함한다.

본 발명의 추가의 일구체예에서, 본원에서 청구되는 조성물은 ≤ 1.6 ng의 보툴리늄 독소의 신경독소 성분, 약 100.0 mg의 폴리비닐피롤리돈(PVP), 약 50.0 mg의 만니톨 및 약 0.2 mg의 폴리소르베이트 80을 포함한다.

본 발명의 추가의 일구체예에서, 본원에서 청구되는 조성물은 ≤ 1.6 ng의 보툴리늄 독소의 신경독소 성분, 약 100.0 mg의 폴리비닐피롤리돈(PVP), 약 50.0 mg의 만니톨 및 약 0.5 mg의 폴리소르베이트 80을 포함한다.

본 발명의 추가의 일구체예에서, 본원에서 청구되는 조성물은 ≤ 1.6 ng의 보툴리늄 독소의 신경독소 성분, 약 150.0 mg의 폴리비닐피롤리돈(PVP), 약 30.0 mg의 만니톨, 약 10.0 mg의 수크로스 및 약 0.2 mg의 폴리소르베이트 80을 포함한다.

본원에서 청구되는 바와 같은 조성물은 환자의 외분비선 또는 근육의 콜린성 신경지배 항진에 의해 유발되거나 또는 이와 관련된 질병 또는 병태의 치료를 위한 것으로서, 신경독소 성분이 아세틸콜린의 시냅스 간극으로의 분비를 차단한다. 따라서, 본 발명에 의해 청구되는 조성물은 임의의 하기 적응증의 치료를 위한 것일 수 있으며, 이중 대부분은 문헌[Dressler D(2000) (Botulinum Toxin Therapy. Thieme Verlag, Stuttgart, New York)]에 개시되어 있다:

근긴장이상

두개 근긴장이상

안검경련

구강하악 근긴장이상

개구형

폐쇄형

이갈이

메이지 증후군

설 근긴장이상

눈뜨기 행위상실증

경부 근긴장이상

전측사경(antecollis)

후측사경(retrocollis)

측서사경(laterocollis)

사경(torticollis)

인두 근긴장이상

후두 근긴장이상

연축성 발성장애/내전근 타입

연축성 발성장애/외전근 타입

연축성 호흡장애

사지 근긴장이상

팔 근긴장이상

작업 연관성 근긴장이상

서경

음악가 경련

골퍼 경련

다리 근긴장이상

대퇴부 내전, 대퇴부 외전

무릎 굴곡, 무릎 신전

발목 굴곡, 발목 신전

첨내반족 변형

발 긴장이상

굽혀진 발가락(striatal toe)

발가락 굴곡

발가락 신전

축상 근긴장이상

피사 증후군

밸리 댄서 근긴장이상

분절성 근긴장이상

편측근긴장이상

전신성 근긴장이상

루박(lubag)의 근긴장이상

기저피질 퇴화의 근긴장이상

루박의 근긴장이상

지연성 근긴장이상

척수소뇌성 운동실조증의 근긴장이상

파킨슨병의 근긴장이상

헌팅톤병의 근긴장이상

할러포르텐-스파츠병의 근긴장이상

도파 유도성 운동장애/도파 유도성 근긴장이상

지연성 운동장애/지연성 근긴장이상

발작성 운동장애/근긴장이상

운동성

비운동성

활동 유도

구개 간대성근경련

간대성근경련

근파동

강직

양성 근경련

유전성 턱 진전

역설적 턱근육 활동

반측저작연축

비후성 기관지 근병증

교근 비대증

전경골근 비대증

안진

동요시

핵상안구운동마비

지속성 부분적 간질

연축사경 수술 계획

외전근 성대 마비

난변성 발성장애

상부 식도 괄약근 기능장애

성대주름 육아종

구음장애

질드라투렛 증후군

중이 간대성근경련

보호성 후두 폐색(protective larynx closure)

후두전적출후 발성장애

보호성 안검하수증

안검내반

오디 괄약근 기능장애

식도이완불능증

비식도이완불능 식도 운동 장애

질경련

수술후 고정

진전

방광 기능장애

배뇨근 괄약근 근실조

방광 괄약근 연축

반측안면 연축

재신경지배 운동장애

미용 용도

눈가주름(craw's feet)

찡그림

안면 비대칭

이근 딤플

전신근강직증후군

파상풍

전립선 비대증

비만 치료

영아성 뇌성마비

사시

혼합형

마비성

수반성

망막 박리 수술후

백내장 수술후

무수정체안

근염성 사시

근병성 사시

해리수직편위

사시 수술에 대한 부속으로서

내사시

외사시

이완불능증

치열

외분비선 항진

프로이 증후군

악어 눈물 증후군

다한증

겨드랑이

손바닥

발바닥

비루

상대적 타액분비 항진

뇌줄중에서

파킨슨병에서

근위축성 측삭 경화증에서

강직 상태

뇌염 및 척수염에서

자가면역 과정

다발성 경화증

횡단성 척추염

데빅 증후군

바이러스 감염

박테리아 감염

기생충 감염

진균류 감염

유전성 강직성 반신마비

뇌졸중후 증후군

대뇌반구 경색

뇌간 경색

마이엘론 경색

중추 신경계 외상에서

대뇌반구 병변

뇌간 병변

마이엘론 병변

중추신경계 출혈에서

뇌내 출혈

지주막하 출혈

경막하 출혈

척수내 출혈

신생물에서

대뇌반구 종양

뇌간 종양

마이엘론 종양

또 다른 구체예에서, 본 발명은 본원에서 청구하고 있는 제제/조성물을 포함하는 용기 하나 이상, 상기 제제/조성물을 재구성하기 위한 설명서 및, 경우에 따라 약학적으로 허용되는 멸균 용매를 포함하는 키트에 관한 것이다. 적절한 용기는 싱글 바이얼, 더블 챔버 바이얼, 싱글 어플리케이션 주사기 또는 더블 챔버 주사기를 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 이들 용기는 의약, 진단제, 화장품 또는 의료용화장품 투여에 적합한 유리 또는 플라스틱과 같은 각종 소재로 제조할 수 있다.

이하, 하기 실시예를 참조하여 본 발명을 개시한다. 이들 실시예는 단지 예시를 목적으로 한 것으로서, 본 발명이 이들 실시예에 한정되는 것으로 이해해서는 안되며, 그 보다는 본원에 제공된 교시내용의 결과로서 자명한 임의의 모든 변형예를 포괄하는 것으로 해석해야 한다. 하기 재료 및 방법은 후속 실시예와 관련하여 제시된 것이지만, 본 발명에 의해 포함되는 다수의 재료 및 방법을 제한하려는 것은 아니다.

실시예

실시예:

보툴리늄 독소 A형의 안정화 조성물을 찾기 위한 연구를 실시하였다. 각 조성물은 보툴리늄 독소 A형의 신경독소 성분 ≤ 1.6 ng을 포함하였다. 스크리닝 제제의 조성을 하기 표에 요약하였으며, 양은 제조 용량 조성물 1 g당 mg으로 제시된다.

제제의 안정성은 Goeschel 등("Botulinum Toxin Therapy: Neutralizing and Nonneutralizing Antibodies - Therapeutic Consequences" Experimental Neurology, 1997; 147:96-102)에 의해 정의되는 바와 같이 HDA 분석을 사용하여 결정하였다. 출발 값은 동결건조후에 측정하였다. 4회 모든 실험의 평균을 산출하고 기준 물질에 의해 형성된 데이터와 비교한다. 저장 시간에 따른 마비 시간의 변화가 신경독소 제제의 안정성을 나타낸다: 본래 값과 비교한 샘플의 마비 시간의 증가는 신경독소 활성 손실을 나타낸다.

결과는 초기 근육 집중력의 1/2에 도달하는데 필요한 시간(분)으로 표시된다. 시간이 짧을 수록 활성 독소의 양이 많다는 것을 나타낸다. 결과는 하기와 같이 해석할 수 있다: 원칙적으로 본 발명에 따른 제제는, 필요한 구성성분 중 하나가 빠진 비교 제제와 비교하여 더욱 안정한다.

비교예 1로부터, 수크로스의 부재 하에, 활성 독소를 포함하는 제제를 제조할 수 있지만, 그 활성이 급격히 상실되어 40℃ 및 75% RH에서 3개월 내에 독소의 활성이 유의적으로 감소되는 것이 분명해진다. 비교예 2는, 동결건조 후에 직접 측정한 출발 값이 138 min으로 높은 것으로부터 분명해지는 바와 같이, 계면활성제의 부재 하에, 독소가 제조 과정 동안 이미 활성을 유의적으로 상실한다는 것을 보여준다. 비교예 3은, 출발값이 96으로 높은 것으로부터 분명해지는 바와 같이, 독소가 제조 동안 이미 활성을 유의적으로 상실한다는 것을 보여준다.

Claims

(a) 친수성 중합체,
(b) 폴리알콜 대 당의 중량비가 2:1 내지 5:1(중량%)인 폴리알콜과 당의 혼합물,
(c) 계면활성제를 포함하는 제제로서, 상기 제제는 안정화 단백질을 포함하지 않는 것인 제제.
제1항에 있어서, 상기 친수성 중합체는 히알루론산, 폴리비닐피롤리돈(PVP), N-비닐피롤리돈의 공중합체, 셀룰로스 유도체, 폴리에틸렌글리콜(PEG), PEG/PPG 블록 공중합체, 아크릴산 및 메타크릴산의 단독중합체 및 공중합체, 폴리우레탄, 폴리비닐 알콜, 폴리비닐에테르, 말레산 무수물계 공중합체, 폴리에스테르, 비닐아민, 폴리에틸렌이민, 폴리에틸렌옥사이드, 폴리(카르복실산), 폴리아미드, 폴리무수물, 폴리포스파젠 및 이의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되고, 상기 셀룰로스 유도체는 하이드록시프로필 메틸 셀룰로스, 하이드록시프로필 셀룰로스, 하이드록시에틸 셀룰로스, 메틸 셀룰로스, 카르복시메틸 셀룰로스, 덱스트란으로 이루어진 군에서 선택되는 제제.
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 폴리알콜은 만니톨, 이노시톨, 락티톨, 이소말트, 크실리톨, 에리트리톨, 소르비톨 및 이의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되는 제제.
제1항 내지 제3항 중 어느 하나의 항에 있어서, 상기 당이 단당류, 이당류, 다당류 및 이의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되는 제제.
제1항 내지 제4항 중 어느 하나의 항에 있어서, 상기 계면활성제는 비이온성 계면활성제, 음이온성 계면활성제 및 양이온성 계면활성제로 이루어진 군에서 선택되는 제제.
단백질, 펩티드 또는 이의 혼합물을 안정화시키기 위한, 제1항 내지 제5항 중 어느 하나의 항의 제제의 용도.
제1항 내지 제6항 중 어느 하나의 항의 제제를 포함하고, 펩티드, 단백질 또는 이의 혼합물을 추가로 포함하는 조성물.
제7항에 있어서, 동결건조된 조성물.
제7항 또는 제8항에 있어서, 상기 단백질은 독소, 콘트로이틴, 엘라스틴, 액틴, 마이오신, 아프로티닌, 성장 호르몬, 성장 호르몬 방출 인자, 부갑상선 호르몬, 갑상선 자극 호르몬, 리포단백질(LDL, IDL, VLDL, VHDL, HDL), 아포리포단백질(ApoA-1, ApoA-II, ApoA-IV, ApoC-I, ApoC-II, ApoC-III, ApoD, ApoE), α-1 안티트립신, 인슐린, 프로인슐린, 난포 자극 호르몬, 칼시토닌, 옥시토신, 바소프레신, 류프롤라이드 아세테이트, 소마토스타틴, 황체형성 호르몬, 글루카곤, 응고 인자, 항-응고 인자, 플라스미노겐 활성화인자, 인간 대식세포 염증성 단백질, 혈관 내피세포 성장 인자(VEGF), 류마토이드 인자, 뼈 유래의 신경영양 인자(BDNF), 신경 성장 인자-β(NGF-β), 혈소판 유래 성장 인자(PDGF), 섬유아세포 성장 인자(FGF), 상피 성장 인자(EGF), 트랜스포밍 성장 인자(TGF-β1, TGF-β2, TGF-β3, TGF-β4, TGF-β5), 에리트로포이에틴, 인터루킨(IL-1 내지 IL-10), 골형성 단백질(BMP) 부갑상선 호르몬, DNAse, 양이온성 페리틴, 인터페론(α, β, γ) 및 이의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되는 조성물.
제9항에 있어서, 상기 단백질은 보툴리늄 독소, 디프테리아 독소, 파상풍 독소 및 이의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되는 조성물.
제7항 내지 제10항 중 어느 하나의 항에 있어서, 보툴리늄 독소, 히알루론산, 만니톨, 수크로스, 폴리소르베이트 80 및 경우에 따라 주사용수를 포함하는 조성물.
제7항 내지 제11항 중 어느 하나의 항의 조성물을 포함하는 주사용 용액.
제7항 내지 제12항 중 어느 하나의 항에 있어서, 의약, 화장품, 의료용화장품(cosmoceutical product) 또는 진단 제품으로서 사용하기 위한 조성물.
제7항 내지 제13항 중 어느 하나의 항에 있어서, 환자의 외분비선 또는 근육의 콜린성 신경지배 항진(hyperactive cholinergic innervation)에 의해 유발되거나 또는 이와 관련된 질병 또는 병태의 치료를 위한 조성물.
(a) 제1항 내지 제14항 중 어느 하나의 항의 제제/조성물을 포함하는 하나 이상의 용기, 및
(b) 상기 제제의 사용 설명서와, 경우에 따라서
(c) 약학적으로 허용되는 멸균 용매를 포함하는 키트.