KR20110084280A - 종양 항원의 생물 활성을 특이적으로 차단하는 항체 - Google Patents

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KR20110084280A
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질 버나드 트렘블리
마리오 필리온
트라이안 수리
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알레시아 바이오쎄라퓨틱스 인코포레이티드
내셔날 리서치 카운실 오브 캐나다
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Abstract

KAAG1에 특이적으로 결합하는 신규한 단일클론 항체에 관한 것이다. 일부 구현예로, 항체는 KAAG1의 생물 활성을 차단하며, 특정 암, 특히 난소암, 신장암, 폐암, 대장암, 유방암, 뇌암 및 전립선암 뿐만 아니라 흑색종과 같이 세포 표면에서의 KAAG1의 발현이 증가된 암에 대한 조성물로 유용하다. 또한, 본 발명은 인간화된 항체 및 키메라 항체와 같이 단일클론 항체 및 항원 결합 단편을 발현하는 세포에 관한 것이다. 또한, 항체를 이용한 암의 검출 및 치료 방법도 기술되어 있다.

Description

종양 항원의 생물 활성을 특이적으로 차단하는 항체{ANTIBODIES THAT SPECIFICALLY BLOCK THE BIOLOGICAL ACTIVITY OF A TUMOR ANTIGEN}
본 발명은, KAAG1에 특이적으로 결합하는 단일클론 항체 및 이의 항원 결합 단편과, 난소암 관련 악성 종양의 진단, 예방 및 치료 등의 특정 질환의 치료를 위한 이의 용도에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 다양한 암 타입을 진단, 예방 및 치료하기 위한 이들 항체의 용도에 관한 것이다.
미국에서 부인과 악성 종양 중에서 난소암은 여성에서 가장 높은 암 관련 사망 원인이다(Jemal et al., 2005). 또한, 이 질환은 미국 여성에서 암 관련 사망 원인의 4위를 차지하고 있다(Menon et al., 2005). 미국 암 학회에서는 2005년 신규 발병 건수를 총 22,220건으로 추정하였으며, 이 질환으로 인한 사망자는 16,210명인 것으로 추산하였다(Bonome et al., 2005). 과거 30년간, 통계치는 거의 동일하게 유지되었는데, 난소암이 발병한 여성 대부분은 이 질환으로 사망한다(Chambers and Vanderhyden, 2006). 이 질환의 수명 위험도는 1:70이며, 사망률은 >60%이다(Chambers and Vanderhyden, 2006). 사망율이 높은 것은 악성 종양이 이미 난소 외부로 퍼지고 있을 때에는 난소암을 조기 검출하기 어렵기 때문이다. 실제, 환자의 >80%는 진행기 질환(단계 III 또는 IV)으로 진단받는다(Bonome et al., 2005). 이러한 환자는, 처음에 80% 내지 90%가 화학요법에 반응하지만, 5년 생존율은 <45%로, 예후가 좋지 않다(Berek et al., 2000). 과거 5년 생존율이 20%인데 비해 이렇듯 높아진 성공율은, 적어도 부분적으로는, 종양 조직이 난소로 한정되었을 때 적절하게 일부 잘라낼 수 있는 역량으로 인한 것인데, 이러한 방법은 난소암에 대한 유의한 예후 인자이다(Bristow R. E., 2000; Brown et al., 2004). 초기 단계(단계 I)로 진단받은 환자의 경우, 5년 생존율은 >90이다(Chambers and Vanderhyden, 2006).
난소암은 난소의 표면 상피나 표면 봉입체(surface inclusion)에서 생기는 이질적인 종양 그룹으로 구성된다. 이는, 장액성, 점액소, 자궁내막양( endometrioid), 투명 세포, 및 여성 생식기 장기의 여러가지 타입의 상피에 해당되는 브레너(과도기) 타입들로 분류된다(Shih and Kurman, 2005). 이러한 타입들 중에서, 진단된 난소암 사례의 약 60%는 장액성 종양이다. 각각의 조직학적 하위 범주로, 임상적인 행태에 따라, 3가지 그룹, 양성, 중성(경계 종양 또는 저 악성도(LMP)) 및 악성으로 분류된다(Seidman et al., 2002). 장액성 타입으로 진단된 종양은 10% 내지 15%가 LMP인데, LMP는 비전형적인 핵 구조와 전이 행태를 나타내기 때문에 다루기 어렵지만, 높은 등급의 장액성 종양 보다는 덜 공격적인 것으로 간주된다. LMP 종양을 가진 환자의 5년 생존율은 95%이지만, 진행된 높은 등급 단계의 경우에는 같은 기간의 생존율은 <45%에 불과하다(Berek et al., 2000).
현재, 난소암의 진단은, 부분적으로는, 환자 병력에 대한 일상적인 분석과, 신체 검사, 초음파 검사, X-레이 검사 및 혈액 스크리닝을 통해 이루어지고 있다. 혈청 바이오마커를 조기에 혈액학적으로 검출하는, 2가지 선택 전략들이 보고되어 있다. 한가지 방법은, 질량 스펙트로메트리로 혈청 샘플을 분석하여, 암 존재 또는 부재를 검출하는 미확인 물질의 단백질 또는 단백질 단편을 찾는 방법이다(Mor et al., 2005; Kozak et al., 2003). 그러나, 이 방법은 비용이 많이 들며 널리 적용할 수 없다. 다른 예로, 공지 단백질/펩타이드의 혈청내 부재나 존재를 항체 마이크로어레이, ELISA 또는 그외 유사한 방법으로 검출하는 것이다. CA-125(암 항원-125)라고 하는 단백질 바이오마커에 대한 혈청 검사가 난소암의 마커로서 널리 오랫동안 수행되어 오고 있다. 그러나, 난소암 세포는 이러한 단백질 분자를 과잉 생산할 수 있지만, 나팔관 암 또는 자궁내막암(자궁 라이닝(lining) 암) 등의 다른 일부 암, 췌장암 환자의 60%, 그리고 다른 악성 종양 환자의 20%-25%에서도 CA-125의 수준은 높다. CA-125 테스트는, I 단계 난소암 환자에서 진양성 결과가 나타날 가능성은 단지 약 50%에 불과하고, II, III 및 IV 단계의 난소암 환자의 경우 진양성 결과일 가능성은 80%이다. 나머지 20%의 난소암 환자에서는 CA-125의 농도 증가는 전혀 나타나지 않는다. 또한, CA-125의 농도 증가 테스트는 월경, 임신 또는 자궁내막증과 같이 암과는 관련없는 다른 양성 활성을 나타낼 수도 있다. 결론적으로, 이 테스트는 아직 치료가능한, 초기 단계의 질병을 검출하는데에는 임상적 적용이 매우 제한적이며, 양성 예상치(PPV)가 <10%에 불과하다. CA-125을 초음파 스크리닝과 조합하더라도, PPV는 약 20%로 향상될 뿐이다(Kozak et al., 2003). 따라서, 이 테스트는 효과적인 스크리닝 테스트가 아니다.
질병의 병인, 적극적인 세포감축 수술법과 현대의 조합 화학요법에 대한 지식 향상에도 불구하고, 사망율에는 매우 일부 변화만 있을 뿐이다. 성과가 좋지 않은 이유는, (1) 초기 질병 검출을 위한 적합한 스크리닝 검사의 부족과 현 단계에서는 파악하기 어려운 정도의 희미한 증상 - 진단은 암이 복막으로 퍼져, 효과적인 치료에 한계가 있는, 말기 단계로 진행된 후에만 진단이 빈번하게 이루어짐 -, 그리고 (2) 환자의 5년 생존율 개선을 제한하는, 표준 화학치료 전략에 대한 잦은 내성 발생으로 인한 것이다. 난소암에 대한 초기 화학치료 요법은 카르보플라틴(파라플라틴) 및 파클리탁셀(탁솔)을 조합한 치료이다. 수년간의 임상 실험을 통해, 이러한 조합이 효과적인 수술을 시술한 후에 가장 효과적인 것으로 입증 - 난소암으로 신규 진단받은 여성의 약 80%에서 종양 체적이 축소되며, 40% 내지 50%는 완전 관해(complete regression)됨- 되었지만, 이를 개선시키기 위한 방법은 계속 탐색 중에 있다. 최근, 접근하기 어려운 세포를 표적으로 하는 화학요법제를 복막 주입과 정맥내 전달로 조합한 방법이 효과가 좋았다. 그러나, 대게는 심각한 부작용으로 인해 불완전한 치료 코스로 이어진다. 일부 다른 화학요법제로는, 독소루비신, 시스플라틴, 사이클로포스파미드, 블레오마이신, 에토포시드, 빈블라스틴, 토포테칸 하이드로클로라이드, 이포스파미드, 5-플루오로우라신 및 멜팔란이 있다. 최근에는, 임상 실험에서, 시스플라틴의 복막내 투여가 전신 정맥내 화학요법에 비해 생존에 유리한 것으로 입증되었다(Cannistra and McGuire, 2007). 화학치료제를 복용하는 초기 질병 단계의 여성에서 생존율이 우수한 것으로 나타나, 난소암 검출을 개선하기 위한 전략 개발에 대한 연구 노력에 강력한 근거를 제시한다. 더욱이, 새로운 난소암-관련 바이오마커의 발견은 미래 난소암 치료에 부작용이 최소화된 보다 효과적인 치료 전략의 개발로 이어진다.
이렇듯 난소암에 대한 이해 및 치료에 있어서의 최근의 진보에도 불구하고, 화학요법의 사용은 언제나 심각한 부정적인 반응들과 관련되어 있어, 이의 사용은 제한된다. 따라서, 항원 조직 특이성과 단일클론 항체의 선택성을 조합하는 것과 같은 보다 특이적인 전략의 필요성은, 관련된 부적절한 부작용을 현저하게 감소시킬 수 있어야 한다. 난소암의 치료에 있어서의 단일클론 항체의 사용은 진행 중인 임상 실험의 수적 증가로 부각되기 시작하고 있다(Oei et al., 2008; Nicodemus and berek, 2005). 이러한 실험 대부분은 이리듐-90과 같은 방사성 동위원소가 접합된 단일클론 항체나, 또는 다른 타입의 암에서 이미 동정된 종양 항원을 표적하는 항체의 사용을 실험하고 있다. 이러한 예로는, 혈관 내피 성장인자를 표적하는 베바시주맵을 사용하는 경우가 있다(Burger, 2007). 단일클론 항체의 치료학적 표적으로서, 현재 조사 중에 있는 난소암 특이적인 항원의 수는 극소수에 불과하다. 일부 예로는 B7-H4로 칭해지는 단백질(Simon et al., 2006)과, 보다 최근에는 폴레이트 수용체-알파(Ebel et al., 2007)를 사용하는 경우가 있으며, 후자는 현재 II상 임상 실험에 도입한 상태이다.
신장과 관련된 항원 1(KAAG1)은 본래 세포독성 T 림프구에게 제시되는 항원성 펩타이드로서, 조직적합성 백혈구 항원-B7 신장 암종 세포주로부터 유래된 cDNA 라이브러리에서 클로닝되었다(Van den Eynde et al., 1999; Genebank accesssion no. Q9UBP8). KAAG1이 포함된 위치(locus)는 반대 가닥에서 양방향으로 전사되는 2개의 유전자를 코딩하는 것으로 확인되었다. 센스 가닥은 DCDC2라고 하는 단백질을 코딩하는 전사체를 코딩하는 것으로 확인되었다. 이들 저자는, 발현 실험을 통해, KAAG1 안티센스 전사체가 종양 특이적이고, 정상 조직에서 거의 발현되지 않지만, DCDC2 센스 전사체는 도처에서 발현됨을 확인하였다(Van den Eynde et al., 1999). 암에서, 특히 난소암, 신장암, 폐암, 대장암, 유방암 및 흑색종에서의 KAAG1 전사체의 발현은 공개된 특허출원 PCT/CA2007/001134에 기술되어 있다. 또한, Van den Eynde 등은 신장암, 결장직장암, 흑색종, 육종, 백혈병, 뇌종양, 갑상선 종양, 유방암, 전립선암, 식도암, 방광암, 폐암 및 두경부암에서의 RNA 발현을 관찰하였다. 최근에는, 연관 불균형(linkage disequilibrium) 실험을 통해 수득한 강력한 유전적 증거를 통해, VMP / DCDC2 / KAAG1 위치가 난독증과 관련있는 것으로 밝혀졌다(Schumacher et al., 2006; Cope et al., 2005). 이러한 보고들 중 한가지는, 피질 뉴런 이동에서 DCDC2 단백질의 기능은 종종 비정상적인 뉴런 이동과 성숙화를 보이는 환자들의 증상과 일치되기 때문에, 난독증 환자에서의 DCDC2 마커는 원인으로 지적되었다(Schumacher et al., 2006).
Jemal A, Murray T, Ward E, Samuels A, Tiwari RC, Ghafoor A, Feuer EJ and Thun MJ. Cancer statistics, 2005. CA Cancer J Clin 2005; 55: 10-30. Menon U, Skates SJ, Lewis S, Rosenthal AN, Rufford B, Sibley K, Macdonald N, Dawnay A, Jeyarajah A, Bast RC Jr, Oram D and Jacobs IJ. Prospective study using the risk of ovarian cancer algorithm to screen for ovarian cancer. J Clin Oncol. 2005; 23(31):7919-26. Bonome T, Lee JY, Park DC, Radonovich M, Pise-Masison C, Brady J, Gardner GJ, Hao K, Wong WH, Barrett JC, Lu KH, Sood AK, Gershenson DM, Mok SC and Birrer MJ. Expression profiling of serous low malignancy potential, low grade, and high-grade tumors of the ovary. Cancer Res 2005; 65: 10602-10612. Chambers, A and Vanderhyden, B. Ovarian Cancer Biomarkers in Urine. Clin Cancer Res 2006; 12(2): 323-327. Berek et al. Cancer Medicine. 5th ed. London: B.C. Decker, Inc.; 2000. pp. 1687-1720. Bristow R.E. Surgical standards in the management of ovarian cancer. Curr Opin Oncol 2000; 12: 474-480. Brown E, Stewart M, Rye T, Al-Nafussi A, Williams AR, Bradburn M, Smyth J and Gabra H. Carcinosarcoma of the ovary: 19 years of prospective data from a single center. Cancer 2004; 100: 2148-2153. Shih L-M and Kurman RJ. Molecular Pathogenesis of Ovarian Borderline Tumors: New Insights and Old Challenges. Clin Cancer Res 2005; 11(20): 7273-7279. Seidman JD, Russell P, Kurman RJ. Surface epithelial tumors of the ovary. In: Kurman RJ, editor. Blaustein's pathology of the female genital tract. 5th ed. New York: Springer-Verlag; 2002. pp. 791-904. Cannistra SA and McGuire WP. Progress in the management of gynecologic cancer. J. Clin. Oncol. 2007; 25(20): 2865-2866. Oei AL, Sweep FC, Thomas CM, Boerman OC, Massuger LF. The use of monoclonal antibodies for the treatment of epithelial ovarian cancer. Int. J. Oncol. 2008; 32(6): 1145-1157. Nicodemus CF and Berek JS. Monoclonal antibody therapy of ovarian cancer. Expert Rev. Anticancer Ther. 2005; 5(1): 87-96. Burger RA. Experience with bevacizumab in the management of epithelial ovarian cancer. J. Clin. Oncol. 2007; 25(20): 2902-2908. Simon I, Zhuo S, Corral L, Diamandis EP, Sarno MJ, Wolfert RL, Kim NW. B7-H4 is a novel membrane-bound protein and a candidate serum and tissue biomerker for ovarian cancer. Cancer Res. 2006; 66(3): 1570-1575. Ebel W, Routhier EL, Foley B, Jacob S, McDonough JM, Patel RK, Turchin HA, Chao Q, Kline JB, Old LJ, Phillips MD, Nicolaides NC, Sass PM, Grasso L. Preclinical evaluation of MORab-003, a humanized monoclonal antibody antagonizing folate receptor-alpha. Cancer Immun. 2007; 7: 6-13. Van den Eynde BJ, Gaugler B, Probst-Kepper M, Michaux L, Devuyst O, Lorge F, Weynants P, Boon T. A new antigen recognized by cytotoxic T lymphocytes on a human kidney tumor results from reverse strand transcription. J. Exp. Med. 1999; 190(12): 1793-1799. Sooknanan R, Tremblay GB, Filion M. Polynucleotides and polypeptide sequences involved in cancer. 2007; PCT/CA2007/001134. Schumacher J, Anthoni H, Dahdouh F, Konig IR, Hillmer AM, Kluck N, Manthey M, Plume E, Warnke A, Remschmidt H, Hulsmann J, Cichon S, Lindgren CM, Propping P, Zucchelli M, Ziegler A, Peyrard-Janvid M, Schulte-Korne G, Nothen MM, Kere J. Strong genetic evidence of DCDC2 as a susceptibility gene for dyslexia. Am. J. Hum. Genet. 2006; 78: 52-62. Cope N, Harold D, Hill G, Moskvina V, Stevenson J, Holmans P, Owen MJ, O'Donovan MC, Williams J. Strong evidence that KIAA0319 on chromosome 6p is a susceptibility gene for developmental dyslexia. Am. J. Hum. Genet. 2005; 76: 581-591. Mor G, Visintin I, Lai Y, Zhao H, Schwartz P, Rutherford T, Yue L, Bray-Ward P and Ward DC Serum protein markers for early detection of ovarian cancer. PNAS 2005; 102: 7677-7682. Kozak KR, Amneus MW, Pusey SM, Su F, Luong MN, Luong SA, Reddy ST and Farias-Eisner R. Identification of biomarkers for ovarian cancer using strong anion-exchange ProteinChips: potential use in diagnosis and prognosis. PNAS 2003; 100: 12343-12348. Benoit MH, Hudson TJ, Maire G, Squire JA, Arcand SL, Provencher D, Mes-Masson AM, Tonin PN. Global analysis of chromosome X gene expression in primary cultures of normal ovarian surface epithelial cells and epithelial ovarian cancer cell lines. Int. J. Oncol. 2007; 30(1): 5-17. Cody NA, Zietarska M, Filali-Mouhim A, Provencher DM, Mes-Masson AM, Tonin PN. Influence of monolayer, spheroid, and tumor growth conditions on chromosome 3 gene expression in tumorigenic epithelial ovarian cancer cell lines. BMC Med. Genomics 2008; 1(1) :34. Buechler J, Valkirs G, Gray J. Polyvalent display libraries.2000; U.S. 6,057,098. Durocher Y, Kamen A, Perret S, Pham PL. Enhanced production of recombinant proteins by transient transfection of suspension-growing mammalian cells. 2002; Canadian patent application No. CA 2446185. Durocher Y. Expression vectors for enhanced transient gene expression and mammalian cells expressing them.2004; U.S. patent application No. 60/662,392.
본 발명은 종양 세포에서의 KAAG1의 발현에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 특이적인 항-KAAG1 항체, 항원 결합 단편, 및 암 치료, 검출 및 진단에 유용한 키트에 관한 것이다. 항체 및 항원 결합 단편은, 특히 종양 세포가 KAAG1을 발현하는 암, 예컨대 난소암, 피부암, 신장암, 결장직장암, 육종, 백혈병, 뇌암, 갑상선암, 유방암, 전립선암, 식도암, 방광암, 폐암 및 두경부암의 치료, 검출 및 진단에 유용할 수 있다.
본 발명은, 일 측면에서, 신장 관련 항원 1(서열번호 2의 KAAG1) 또는 KAAG1 변이체에 특이적으로 결합할 수 있는, 분리된 또는 실질적으로 정제된 항체 또는 항원 결합 단편을 제공한다.
보다 구체적으로, 본 발명의 구현예에서, 항체 또는 항원 결합 단편은 KAAG1의 아미노산 30번에서 아미노산 84번 사이에 위치된 도메인에 결합할 수 있다.
본 발명의 다른 구현예에서, 항체 또는 항원 결합 단편은 KAAG1의 아미노산 1 - 35번 이내로 구성된 에피토프에 결합할 수 있다.
본 발명의 다른 구현예에서, 항체 또는 항원 결합 단편은 KAAG1의 아미노산 36 - 60번 이내로 구성된 에피토프에 결합할 수 있다.
본 발명의 또다른 구현예에서, 항체 또는 항원 결합 단편은 KAAG1의 아미노산 61 - 84번 이내로 구성된 에피토프에 결합할 수 있다.
본 발명의 항체 또는 항원 결합 단편은 특히 KAAG1의 분비된 형태, 즉 KAAG1에서 신호 펩타이드가 절단된 형태에 특이적으로 결합할 수 있다.
본 발명의 항체 또는 항원 결합 단편은 KAAG1의 세포외 영역에 특히 결합할 수 있다.
이와 같이, 본 발명은 KAAG1의 분비형 또는 KAAG1의 세포외 영역에 대한 특이성을 가지고 있는, 진단학적 및/또는 치료학적 항체 또는 항원 결합 단편을 포함한다. 또한, 본 발명에는, 본 발명의 항원으로서 동일한 에피토프 특이성을 가진 항체 또는 항원 결합 단편이 포함된다. 후보 항체는, 본원에 기술된 항체가 에피토프에 결합할 것인지를 확인하거나 및/또는 에피토프에 결합하는 것으로 알려진 항체 또는 항원 결합 단편을 이용한 경쟁적인 분석을 수행함으로써, 동정할 수 있다.
따라서, 다른 측면에서, 본 발명은 본원에 기술된 항체 또는 항원 결합 단편과 경쟁할 수 있는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편을 제공한다.
본 발명의 분리된 항체 또는 항원 결합 단편은 KAAG1-발현성 종양 세포 또는 KAAG1 변이체-발현성 종양 세포의 사멸(제거, 파괴, 세포용해)을 (예, ADCC-의존적인 방식으로) 유도할 수 있는 것을 포함한다.
또한, 본 발명의 분리된 항체 또는 항원 결합 단편은 KAAG1-발현성 종양 세포의 전파를 감소시킬 수 있는 능력을 특징으로 하는 것들을 포함하며, 또한 KAAG1-발현성 종양의 형성을 감소시키거나 손상시키는 능력을 특징으로 하는 것들을 포함한다.
항체 또는 항원 결합 단편은 특히 KAAG1이 KAAG1-발현성 종양 세포의 표면에서 발현되는 경우에 특히 효과적일 수 있으며, 고정(anchorage)-비의존적인 증식이 특징인 KAAG1-발현성 종양 세포를 표적으로 하는데 특히 유용할 수 있다.
본 발명은 (분리된) 단일클론 항체, 다클론 항체, 키메라 항체, 인간화된 항체 및 인간 항체 뿐만 아니라 본원에 기술된 특징들을 가지는 항원 결합 단편에 관한 것이다. 또한, 단일클론 항체, 키메라 항체, 인간화된 항체 또는 인간 항체 간의 경쇄 및/또는 중쇄의 치환(permutation)을 포함하는, 항체 또는 항원 결합 단편도, 본원에 포함된다.
따라서, 본 발명의 항체 또는 항원 결합 단편은 인간 항체의 인간 불변부 아미노산 및/또는 프래임워크 아미노산을 포함할 수 있다.
용어 "항체"는 완전한(intact) 항체, 단일클론 항체 또는 다클론 항체를 지칭한다. 또한, 용어 "항체"는 2 특이성 항체 등의 다중 특이성의 항체도 포함한다. 인간 항체는 2개의 경쇄와 2개의 중쇄로 통상 구성되며, 각각에는 가변부와 불변부가 포함되어 있다. 경쇄 가변부에는 3개의 CDR이 프래임워크 영역 측면에 포함되어 있는데, 이는 CDRL1, CDRL2 및 CDRL3으로 구분된다. 중쇄 가변부에는, 프래임워크 영역 측면에, CDRH1, CDRH2 및 CDRH3으로 구분되는, 3개의 CDR이 포함되어 있다.
용어 "항원 결합 단편"은 본원에서 항원(예, KAAG1, KAAG1의 분비형 또는 이의 변이체) 결합력을 유지하고 있는 항체의 하나 이상의 단편을 지칭한다. 항체의 항원 결합 기능은 온전한 항체의 단편들에 의해 수행될 수 있는 것으로 확인되었다. 항체의 "항원 결합 단편" 용어에 포함되는 결합 단편의 예로는, (i) VL, VH, CL 및 CH1 도메인으로 구성되는 1가 단편인, Fab 단편; (ii) 힌지 영역에서 이황화 결합으로 연결된 2개의 Fab 단편으로 구성된 2가 단편인, F(ab')2 단편; (iii) VH 및 CH1 도메인으로 구성된 Fd 단편; (iv) 항체의 단일 암(single arm)의 VL 및 VH 도메인으로 구성된 Fv 단편; (v) VH 도메인으로 구성된 dAb 단편(Ward et al., (1989) Nature 341:544-546); 및 (vi) 분리된 상보성 결정부(CDR), 예, VH CDR3가 있다. 또한, Fv 단편의 2개의 도메인, VL 및 VH은 개별 유전자에 의해 코딩되지만, 이 도메인들은, VL 및 VH 영역을 짝지워 1가 분자(단쇄 Fv (scFv); 예로, Bird et al. (1988) Science 242:423-426; 및 Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883 참조)를 단일 폴리펩타이드 체인으로 만들 수 있는, 합성 링커에 의해, 재조합 방법을 이용하여 연결할 수 있다. 이러한 단쇄 항체는 또한 항체의 "항원 결합 단편" 용어에 포함되는 의미로 사용된다. 또한, 항원 결합 단편은, (i) 면역글로불린 힌지 영역 폴리펩타이드에 융합되어 있는, 결합 도메인 폴리펩타이드(예, 중쇄 가변부, 경쇄 가변부 또는 링커 펩타이드를 통해 경쇄 가변부가 융합된 중쇄 가변부), (ii) 힌지 영역에 융합된 면역글로불린 중쇄 CH2 불변부, 및 (iii) CH2 불변부에 융합된 면역글로불린 중쇄 CH3 불변부를 포함하는, 결합 도메인 면역글로불린 융합 단백질을 포함한다. 상기 힌지 영역은 이량체화 되지 않도록, 시스테인 잔기 하나 이상을 세린 잔기로 치환하여 변형시킬 수 있다. 이러한 결합 도메인 면역글로불린 융합 단백질들은 또한 US 2003/0118592 및 US 2003/0133939에 기재되어 있다. 이들 항체 단편은 당해 기술 분야의 당업자에게 공지된 통상적인 기법을 이용하여 수득하며, 단편은 온전한 항체와 동일한 방식으로 유용성을 스크리닝한다.
전형적인 항원 결합부는 경쇄 면역글로불린과 중쇄 면역글로불린을 짝 지워 제조한 가변부로 구성된다. 항체 가변부의 구조는 불변성이 높으며, 매우 비슷한 구조를 나타낸다. 이들 가변부는 전형적으로 상보성 결정부(CDR)라고 하는 3개의 과가변부 사이에 위치한 상대적으로 상동적인 프래임워크 영역(FR)들로 구성된다. 항원 결합 단편의 전체 결합 활성은 대게 CDR들의 서열에 의해 결정된다. FR은 흔히 최적의 항원 결합을 위한 CDR들의 적절한 위치 설정(positioning)과 3차 구조 정렬에 중요한 역할을 한다.
본 발명의 항체 및/또는 항원 결합 단편들은, 예컨대 마우스, 랫 또는 임의의 다른 포유류로부터, 또는 재조합 DNA 기법을 통해서와 같이 다른 소스로부터 기원할 수 있다.
본 발명의 추가적인 범위, 적용성 및 이점은 하기에 기술된 비제한적인 상세한 설명을 통해 명확해 질 것이다. 그러나, 이러한 상세한 설명은, 첨부된 도면을 참조하여, 본 발명의 예시적인 구현예를 나타내고 있지만, 단순한 예시로 제공되는 것으로 이해되어야 한다.
도 1A는 20종 이상의 난소암, 양성(악성 가능성 낮음) 종양, 난소암 세포주 및 30 종 이상의 조직으로부터 유래된 RNA 샘플에서 발현되는 KAAG1 mRNA 발현 수준을 측정하기 위한, 반정량적 RT-PCR 반응을 이용한 발현 프로파일링 분석 결과를 나타낸 것이다. 대조군 패널은, 각 RT-PCR 반응에서 출발 물질의 양을 비교하기 위해 사용된, 하우스키핑 유전자인 GAPDH의 발현을 나타낸다.
도 1B는 KAAG1 mRNA가 난소암 세포주, 특히 복수로부터 유래된 세포에서 발현되는 것으로 확인되는, 반정량적인 RT-PCR 실험을 나타낸 것이다.
도 1C는 난소암 세포주의 회전타원체라고 하는 3D 구조를 형성하는 능력을 나타낸 다이아그램이다. 좌측 패널은 혈청이 결핍된 배지에서 배양된 세포를 나타내며, 5% 혈청은 회전타원체의 구조 형성을 자극한다.
도 1D는 난소암 세포주에서 회전타원체가 형성되는 동안에 KAAG1 mRNA가 고도로 유도됨을 나타낸, 반정량적인 RT-PCR 실험을 나타낸 것이다.
도 2A는 사전에 정해진 기간 동안 노출된(denuded) 영역으로의 세포주의 이동력을 측정하는, 세포성 분석인, 상처 또는 스크래치 분석을 나타낸, 다이아그램을 나타낸 것이다. KAAG1 shRNA를 가지고 있는 TOV-21G는 노출된 영역의 충진력 감소를 보인다.
도 2B는 콜로니 생존 분석이라고도 하는 클론 형성 분석을 설명한 것이다. 이는 수일간 희석된 세포의 생존을 측정한다. KAAG1 shRNA를 포함하고 있는 TOV-21G 세포는 생존이 감소되었다.
도 3A는 코마시 블루로 염색한 폴리아크릴아미드 겔로, 일시적으로 형질감염된 293E 세포에서 생산된 Fc-KAAG1 융합 단백질의 정제 샘플(10 ㎍)이 함유되어 있다.
도 3B는 항-KAAG1 Fab가 함유되어 있는 Omniclonal 라이브러리 #3에서 선별된 개별 단일클론 항체가 들어 있는 96웰 플레이트들 중 하나에 대한 ELISA 결과를 나타낸 것이다. 그 결과, 48(회색으로 강조함)개의 Fab가 KAAG1과 매우 효과적으로 상호작용하는 것으로 나타났다. 굵은 글씨체의 숫자로 표시된 웰들에는 단일클론의 예, 3D3, 3G10 및 3C4가 포함되어 있다.
도 4A는 코마시 블루로 염색한 폴리아크릴아미드 겔로, 일시적으로 형질감염된 293E 세포에서 생산된 Fc-KAAG1 융합 단백질의 정제 샘플(10 ㎍)(레인 1), 아미노산 1-60으로 이루어진 절단형 KAAG1 변이체(레인 2), 및 아미노산 1-35로 이루어진 다른 절단형 KAAG1 변이체(레인 3)이 포함되어 있다. 단백질 모두 Fc 융합 단백질이었다.
도 4B는 에피토프 맵핑 실험으로 제조된 절단형 KAAG1 변이체를 도시한 것이다.
도 4C는 Omniclonal 라이브러리 #3에 포함된 항-KAAG1 항체에 결합되는 에피토프를 맵핑하기 위한 ELISA 분석 결과를 나타낸 도이다. 결과에서, 대부분의 단일클론 항체들은 KAAG1의 가운데 영역과 상호작용하고, 특정 항체는 KAAG1의 아미노-말단 또는 카르복시-말단에 결합하는 것으로 나타났다.
도 5는 마우스 Fab가 IgG1 마우스-인간 키메라 mAb로 변환되는 단계를 나타낸 도식도이다.
도 6은 예시적인 항체인 3D3, 3G10 및 3C4에 대해, 마우스 항-KAAG1 Fab의 결합을 대응되는 IgG1 키메라 단일클론 항체의 결합과 비교하여 나타낸 것이다. 그 결과, Fab 가변부의 상대적인 결합성은 전장 인간 IgG1 스캐폴드로 전이되었을 때 유지됨을 나타낸다.
도 7은 키메라 IgG1 항-KAAG1 단일클론 항체의 존재 중에 TOV-21G 및 OV-90 난소암 세포주를 이용한 회전타원체 형성의 실험 결과를 나타낸 것이다. 느슨하게 팩킹된 구조는 저 침습성의 암 세포주이다. 결과는 예시적인 항-KAAG1 항체인 3D3, 3G10, 또는 3C4가 처리된 회전타원체를 보여준다.
도 8A는 난소암 환자로부터 수득한 약 70가지의 생검 샘플이 들어 있는 조직 마이크로어레이의 스캔 결과를 나타낸 것이다. 샘플은 3D3 항-KAAG1 항체로 블롯팅하였으며, 대부분의 난소 종양이 KAAG1 항원을 높은 수준으로 발현하고 있는 것으로 나타났다.
도 8B는 조직 마이크로어레이 실험으로 입수한 고배율 사진이다. 화살 표시는 장액성 난소 종양에서 세포의 상피층 정단 표면에 KAAG1이 막에 위치화됨을 나타낸다.
도 8C는 KAAG1이 모든 타입의 난소암에서 다량 발현됨을 보여주는 다른 면역조직화학적 실험 결과를 나타낸 것이다. 조직타입은 장액성, 점액소성 및 자궁내막성 타입이다.
도 9A, 9B 및 9C는 ClustalW2 프로그램을 이용하여 선별된 CDRL1, CDRL2 또는 CDRL3에 대한 정렬 결과를 종합한 것으로, "*"은 컬럼내 잔기가 모든 정렬에서 모든 서열과 동일함을 의미하며, ":"은 보존적인 치환이 관찰되었음을 의미하며, "."은 반-보존적인 치환이 관찰되었음을 의미한다. 컨센서스 CDR은 ClustalW 프로그램을 이용하여 제작하였다(Larkin M.A., et al., (2007) ClustalW and ClustalX version 2. Bioinformatics 2007 23(21): 2947-2948).
도 10A, 10B 및 10C는 ClustalW2 프로그램을 이용하여 선별한 CDRH1, CDRH2 또는 CDRH3의 정렬 결과를 종합한 것으로, "*"은 컬럼내 잔기가 모든 정렬에서 모든 서열과 동일함을 의미하며, ":"은 보존적인 치환이 관찰되었음을 의미하며, "."은 반-보존적인 치환이 관찰되었음을 의미한다. 컨센서스 CDR은 ClustalW 프로그램을 이용하여 제작하였다(Larkin M.A., et al., (2007) ClustalW and ClustalX version 2. Bioinformatics 2007 23(21): 2947-2948).
도 11은 제조되는 각각의 경쇄 가변부와, 서열번호 16, 20, 24 또는 105로 구분되는 대표적인 경쇄 가변부 간의 서열을 비교한 것이다. 서열 동일성%과 서열 유사성%은 본원에 기술된 Blast2 서열 프로그램을 이용하여 측정하였다.
도 12는 제조되는 각각의 중쇄 가변부와, 서열번호 18, 22, 26 또는 132로 구분되는 대표적인 중쇄 가변부 간의 서열을 비교한 것이다. 서열 동일성%과 서열 유사성%은 본원에 기술된 Blast2 서열 프로그램을 이용하여 측정하였다.
도 13은 KAAG1을 표적하는 IgG1 항체가 시험관내에서 ADCC 활성을 효과적으로 매개함을 나타낸 것이다. PBMNC(AllCells, LLC, Emoryville, CA)를 3D3와 함께 30분간 인큐베이션한 다음, OVCAR-3 또는 WIL2-S 세포 중 어느 하나와 1:25의 비율로 혼합하였다. 세포들은 37℃에서 4시간 인큐베이션하고, 세포 용해는 배지에서 LDH 수준을 측정하여 확인하였다. 세포의 세포독성은 다음과 같이 계산하였다: 세포독성 % = (실험 - 자발적인 작동자 - 자발적인 표적) x 100 / (표적 최대 - 자발적인 표적).
도 14는 항-KAAG1 mAb가 생체내에서 TOV-112D 난소 종양의 확산을 방지함을 나타낸 것이다. 세포를 1 x 106로 SCID 마우스의 복강에 200 ㎕ 이식하였다. 2일 후, PBS에 희석한 항체 또는 PBS 중 한가지를 용량 25 mg/kg qwk으로 처리하였다. 복부 촉진으로 종양이 검출되면 즉시 마우스를 희생시켰다. 종양의 수를 시각적으로 측정(B)하였고, 패널 A의 데이타는 마우스 당 평균 종양 수 ± SE로 표시하였다.
도 15는 편평 세포암과 흑색종에서 분리된 몇 개의 단편의 인간 피부 종양 조직 마이크로어레이(Pantomics Inc., Richmond, CA) 상에서의 항-KAAG1 항체로 수행한 면역조직화학 결과를 나타낸 것이다.
도 16은 키메라 3D3 항체의 존재 또는 부재 하에, 흑색종 세포주(A375 및 SK-MEL5)와 신장 세포암 세포주(A498 및 786-O)의 회전타원체 형성을 나타낸 것이다.
도 17A는 세포 비투과 조건 하에 고정시킨 세포주 (OV-90, TOV-21G 및 SKOV-3)에 대한 3C4, 3D3 및 3G10 항체의 결합성을 항체 농도 증가에 따라 나타낸 그래프이다.
도 17B는 SKOV-3 세포주에서 3D3 항체를 이용하여 수행한 유세포 측정의 결과를 나타낸 그래프이다.
도 18A는 3D3 항체 모델의 구조를 도식적으로 나타낸 것이다.
도 18B는 3C4 항체 모델의 구조를 나타낸 것이다.
도 19A는 재조합 KAAG1에 대한, 키메라 3D3 항체와 인간화된 3D3 항체의 결합성을 농도 증가에 따라 비교한 것이다.
도 19B는 인간화된 3D3 항체, 키메라 3D3 항체 및 상기 키메라 또는 인간화된 항체의 경쇄와 중쇄의 치환을 포함하는 하이브리드 항체의 카이네틱스 파라미터를 종합한 표이다.
도 19C는 인간화된 3D3 항체, 키메라 3D3 항체 또는 완충액이나 대조군 IgG의 존재 하에, SKOV-3 난소암 세포의 회전타원체 형성을 나타낸 것이다.
도 20A는 단일클론 3D3 경쇄 가변부(서열번호 16) 및 인간화된 3D3 경쇄 가변부(서열번호 178)의 서열을 정렬한 것이다. 인간화된 3D3 경쇄 가변부는 단일클론 3D3 경쇄 가변부에 대해 86% 동일(서열 유사성 94%)하며, 이의 3개의 CDR은 100%(굵은 글씨체로 표시됨)이다.
도 20B는 단일클론 3D3 중쇄 가변부(서열번호 18) 및 인간화된 3D3 중쇄 가변부(서열번호 179)의 서열을 정렬한 것이다. 인간화된 3D3 중쇄 가변부는 단일클론 3D3 중쇄 가변부와 82% 동일(서열 유사성 91%)하고, 이의 3개의 CDR은 100% (굵은 글씨체로 표시됨) 동일하다.
도 21A는 단일클론 3C4 경쇄 가변부(서열번호 24) 및 인간화된 3C4 경쇄 가변부(서열번호 182)의 서열을 정렬한 것이다. 인간화된 3C4 경쇄 가변부는 단일클론 3C4 경쇄 가변부와 85% 동일(서열 유사성 93%)하고, 이의 3개의 CDR은 100% (굵은 글씨체로 표시됨) 동일하다.
도 21B는 단일클론 3C4 중쇄 가변부(서열번호 26) 및 인간화된 3C4 중쇄 가변부(서열번호 183)의 서열을 정렬한 것이다. 인간화된 3C4 중쇄 가변부는 단일클론 3C4 중쇄 가변부와 86% 동일(서열 유사성 93%)하고, 이의 3개의 CDR은 100% (굵은 글씨체로 표시됨) 동일하다.
암 세포에서의 KAAG1 의 발현 및 생물 활성
본 발명은 다양한 유형의 암, 특히 난소암에서 발견되는 종양을 표적하기 위한 항체의 용도에 관한 것이다. 종양에 대해 항체를 유도하기 위해, 암세포의 세포 표면에서 발현되는 종양 특이적인 항원을 동정하여야 한다. 종양 특이적인 항원 동정에 이용가능한 몇가지 기법들이 있으며, STAR(Subtractive Transcription-based Amplification of mRNA)이라고 하는, 난소 종양에서 KAAG1을 동정하기 위해 사용되는 방법은 공개된 특허 출원 PCT/CA2007/001134에 기술되어 있다.
난소암 STAR 라이브러리 분석을 통해 분비형 단백질과 세포 표면 단백질을 코딩하는 다수의 유전자들을 확보하였다. 이들 증, AB-0447이라고 하는 것은, 서열번호 2에 해당되는, 84개의 아미노산으로 이루어진 폴리펩타이드를 코딩하는 오픈 리딩 프래임을 포함하고 있으며, 상기 서열번호 2는 서열번호 1에 나타낸 뉴클레오티드 서열을 가진 885 염기쌍의 cDNA에 의해 코딩된다. 공개적으로 이용가능한 데이타베이스 검색을 통해, AB-0447 뉴클레오티드 서열이 KAAG1이라고 하는 유전자의 서열과 동일한 것으로 확인되었다. 바이오인포메틱 분석으로, 이것은 세포외 구획으로 이의 기능성 도메인을 내밀고 있는 막-고정된 단백질인 것으로 예측되었다. KAAG1은 본래 신장암 라이브러리에서 세포 표면 항원으로서 클로닝되었으며, 이의 막 위치성이 확인되었다. 또한, 본 발명에 따른 연구를 통해, 단백질이 이의 아미노-말단에서 가공되는 것으로 확인되었는데, 기능성 신호 펩타이드가 아미노산 30번과 34번에서 또는 그 사이에서 절단되는 경우와 일치되었다. 아울러, 전장 cDNA의 일시적인 발현시 배양 배지에서 절단된 KAAG1이 검출되었다. 이러한 사실은, 막-고정 단백질이 높은 수준으로 발현되었을 때 세포에서 방출될 수 있다는 것을 의미한다. 반면, KAAG1의 아미노-절단된 돌연변이의 절단은 단백질을 세포내 체류시켰다. 본 발명에 기술된 바와 같이, 종래에 입증된 적이 없는, KAAG1의 난소암에서의 기능이나 과다-발현에 대해 조금이라도 언급하고 있는 공개된 보고는 현재까지 없다.
이에, 본 발명자들은 항체-기반의 진단제 및 치료제에 KAAG1을 사용할 수 있는지를 조사하였다.
몇가지 난소암 세포-기반의 모델, 예컨대 TOV-21G, TOV-112D, OV-90 등이 확립되어 있으며, 이는 당해 기술 분야의 당업자에게 친숙한 것이다. 이들 세포는 난소 종양 환자나 또는 복수 체액으로부터 유래된 인간 난소암 세포주의 채집물의 일부이다. 이들 세포주는 인간 난소암에 대한 탁월한 세포-기반의 모델을 제시하는 마이크로어레이 상에서, 글로벌 유전자 발현 패턴을 비롯한 심층 분석을 거쳤다. 증식 특성, 유전자 발현 패턴 및 화학치료제에 대한 반응에서, 이들 세포주들이 생체내 난소 종양 행태와 매우 비슷한 것으로 확인되었다(Benoit et al., 2007). 이들 난소암 세포주로부터 분리된 총 RNA의 RT-PCR 분석에서는, KAAG1 전사체가 원발성 종양 유래의 세포주에서는 약하게 발현되는 것으로 나타났다. 반면, 복수 유래 세포주에서는 KAAG1 발현 수준이 높았다. 복수 체액 유래 세포에서의 KAAG1 발현 증가는, 세포의 환경이 KAAG1 유전자 조절에 영향을 미친다는 것을 시사한다. 복수 세포는 진행된 질환과 관련 있으며, 이러한 발현 패턴은 KAAG1 수준 증가가 고정-비의존적인 증식과 관련 있음을 내포한다. 이러한 후자에서 제안된 바와 일치되게, KAAG1 발현은 원발성 종양 유래 세포주를 3D 배양에서 회전타원체로 배양하였을 때 유의하게 증가되는 것으로 확인되었다. 이러한 회전타원체는 폭 넓게 특정화되어 있으며, 생체내에서 종양과 관련된 많은 특징들을 보이는 것으로 확인되었다(Cody et al., 2008). 따라서, KAAG1의 발현은 종양 진행을 모방하는 모델들에서 특히 난소암이 진행되는 동안에 현저하게 증가되는 것으로 나타났다.
KAAG1 발현이 난소암 세포에서 조절된다는 증거로, 난소암 세포 행태에서의 이 유전자의 기능을 세포 분석으로 조사하였다. 이를 위해, RNA 간섭(RNAi)을 이용하여 난소암 세포주에서의 내인성 KAAG1 유전자의 발현을 낫-다운시켰으며, 상처 치유(또는 스크레치) 분석에 의해 예시되는 바와 같이, 표준 세포 운동성 분석에서 확인된 결과에 따라, KAAG1의 발현 감소는 세포의 이동을 크게 감소시키는 것으로 나타났다. 이러한 유형의 분석은, 세포가 컨플루언트 단일층에 노출된 영역(denuded area)을 채우는 속도를 측정한다. KAAG1의 발현 감소는, 콜로니 생존 분석과 같은 콜론 형성 분석으로 측정한 경우, 난소암 세포주의 생존을 감소시켰다. 당해 기술분야의 당업자는 암 세포, 특히 난소암 세포의 행태에서의 KAAG1의 요건을 평가하기 위해 다른 방법들을 사용할 수도 있다.
높은 비율의 난소 종양에서의 KAAG1의 발현, 정상 조직에서의 이의 제한적인 발현, 발현 수준과 악성 증가 간의 일치성 및 난소암 세포주 행태에서 추정되는 KAAG1의 생물학적 역할을 토대로, KAAG1을 난소암의 검출, 예방 및 치료용 항체 개발의 치료학적 표적으로 선정하였다. 또한, 난소암이 아닌 다른 암에서도 KAAG1이 발현되어, 출원인은 다른 암 증상에 대한 치료학적 또는 진단학적 항체로 평가하게끔 하였다.
따라서, KAAG1 표적화에 유용한, 다양한 항-KAAG1 항체 및 이의 항원 결합 단편, 예컨대 단일클론 항체, 다클론 항체, 키메라 항체, 인간화된 항체(인간화된 단일클론 항체가 포함됨), 항체 단편, 단쇄 항체, 도메인 항체 및 항원 결합부를 가진 폴리펩타이드를 제공한다.
항원으로서의 KAAG1 및 KAAG1 유래 에피토프
출원인은, KAAG1이 여러가지 종양 타입들에서 발현되며, 또한 환자의 혈액과 복수 체액에서도 발견된다는 것을 예기치 않게 발견하게 되었다. 이 항원은 따라서 생체내에서 항원을 발현하는 종양 세포를 표적하고, 시험관내 또는 생체내에서 종양 관련 항원을 측정하기 위한 검출 분석법 개발에 유용할 수 있다. 혈액에서 순환하는 KAAG1 항원에는 신호 펩타이드가 없다.
따라서, 본 발명은 KAAG1의 순환형 및/또는 종양-발현성 KAAG1에 특이적인 항체 제조에 유용한 KAAG1 항원을 제공한다. KAAG1 항원(즉, 에피토프)은 KAAG1의 아미노산 10개 이상(최대 84개)으로 이루어진 단편을 포함할 수 있으며, 특히 KAAG1의 세포외 영역에 결합할 수 있다.
예시적인 항원은 전체 KAAG1 단백질 또는 서열번호 2와 서열 동일성이 80% 이상인 변이체, 또는 이의 단편이다.
KAAG1 유래의 다른 예시적인 항원은, 신호 펩타이드가 결여된 분비형 또는 순환형 KAAG1, 또는 KAAG1의 세포외 영역이다. 이러한 항원은 특히 KAAG1의 아미노산들 중 아미노산 1 - 25, 1 - 26, 1 - 27, 1 - 28, 1 - 29, 1 - 30, 1 - 31, 1 - 32, 1 - 33, 1 - 34, 1 - 35 또는 1 - 36이 없을 수 있다.
본원에 기술된 항원 또는 에피토프는, 항체 또는 항원 결합 단편을 제조하기 위해, 키홀 임페트(KHL), 소혈청 알부민(BSA), 오발부민(OVA) 등의 담체와 융합될 수 있다.
또한, 본 발명은 본원에 기술된 항체 및 항원 결합 단편을 제조하기 위해 서열번호 2의 아미노산 1-35 이내, 서열번호 2의 아미노산 36 - 60 이내, 또는 서열번호 2의 아미노산 61 - 84 이내로 구성된 에피토프를 제공한다. 본 발명은 또한 분비형 또는 순환형 KAAG1 또는 KAAG1의 세포외 영역에 대한 항체를 제조하기 위한 조성물을 제공하며, 이 조성물은 서열번호 2의 아미노산 30 - 84 이내의 아미노산으로 구성된 KAAG1의 에피토프와 담체를 포함할 수 있다. 에피토프는 특히 KAAG1의 아미노산들 중 적어도 10개의 아미노산을 포함할 수 있다.
조성물의 예시적인 구현예는, 분비형 KAAG1, 순환형 KAAG1 또는 KAAG1의 세포외 영역에 대한 항체를 제조하기 위한 약학 조성물이다. 약학 조성물은 서열번호 2의 아미노산 30 - 84 이내로 구성된 KAAG1 에피토프와 제약학적으로 허용가능한 담체를 포함할 수 있다.
또다른 측면에서, 본 발명은 분비형 KAAG1 또는 순환형 KAAG1에 대한 항체의 제조 방법을 제공한다. 이러한 방법은 서열번호 2의 아미노산 30 -84 이내로 구성되며, KAAG1 신호 펩타이드가 결여된, KAAG1 에피토프를 포함하는 폴리펩타이드를 투여하는 단계를 포함할 수 있다.
다른 구현예로, 상기 방법은 신호 펩타이드를 포함하는 에피토프를 투여하는 단계 및 상기 단백질의 분비형 또는 세포외 영역에만 결합하는 항체를 선별하는 단계를 포함할 수 있다.
추가적인 측면에서, 본 발명은 분비형 KAAG1 또는 순환형 KAAG1에 대한 항체를 제조하기 위한, 서열번호 2의 아미노산 30 -84 이내로 구성된 KAAG1 에피토프의 용도를 제공한다.
KAAG1 에 결합하는 항체 및 항원 결합 단편
항체는 먼저 대상 항원에 대한 특이성에 대해 Fab 라이브러리로부터 분리하였다. 항체의 경쇄 가변 도메인 또는 중쇄 가변 도메인의 아미노산 서열 비교에서 가장 많은 특징들이 확인되어, CDR 내부와 가변부 내부에서 컨센서스 서열을 유추할 수 있었다. CDR의 컨센서스는 서열번호 74 - 90으로 제공된다.
본 발명의 가변부를 원하는 종의 불변부와 융합시켜, 원하는 종의 작동자 세포에 의한 항체 인지가 가능하게 할 수 있다. 불변부는 예컨대 IgG1, IgG2, IgG3, 또는 IgG4 서브타입으로부터 기원할 수 있다. 가변부와 인 프래임으로 불변부를 클로닝하거나 합성하는 것은 당해 기술 분야의 당업자 범주에서는 자명하며, 예를 들어 재조합 DNA 기법으로 수행할 수 있다.
본 발명의 특정 구현예에서, KAAG1에 결합하는 항체는 IgG1, IgG2, IgG3, 또는 IgG4 서브타입의 항체일 수 있다. 보다 구체적인 구현예로, 본 발명은 IgG1 서브타입의 항체에 관한 것이다. 항체는 세포 매개의 세포독성(ADCC) 매개, 보체-매개 세포독성(CMC) 매개 또는 면역 컴플렉스와 조합된 매개에서 생물 활성을 나타내는, IgG1 서브타입의 인간화된 항체일 수 있다. 전형적인 ADCC는 자연 살상(NK) 세포의 활성화에 관여하며, NK 세포의 표면에 있는 Fc 수용체에 의한 항체-코팅된 세포의 인지에 의존한다. Fc 수용체는, 타겟 세포, 특히 KAAG1과 같은 항원을 발현하는 암성 세포의 표면에 결합하는, IgG1에 존재하는 것과 같은 항체의 Fc 도메인을 인지한다. IgG의 Fc 수용체에 결합하면, NK 세포는 사이토카인과 세포독성 그래뉼을 방출하는데, 이것은 타겟 세포로 유입되어 세포자살을 일으켜 세포 사멸을 조장한다.
일부 경우들에서, 항체 3D3와 실질적으로 동일한 경쇄 가변부와 중쇄 가변부를 가진 항-KAAG1 항체는, 포괄적으로 KAAG1의 아미노산 36 - 60에 걸쳐 있는 에피토프와 상호작용할 것이다. 다른 예로, 항체 3G10과 실질적으로 동일한 경쇄 가변부와 중쇄 가변부를 가진 항-KAAG1 항체는, 포괄적으로 KAAG1의 아미노산 61 - 84에 걸쳐 있는 에피토프와 상호작용할 것이다. 또다른 예로, 항체 3C4와 실질적으로 동일한 경쇄 가변부와 중쇄 가변부를 가진 항-KAAG1 항체는, 포괄적으로 KAAG1의 아미노산 1 - 35에 걸쳐 있는 에피토프와 상호작용할 것이다.
본 발명은 KAAG1에 결합하는 항체 콜렉션을 기술한다. 특정 구현예에서, 항체는 다클론 항체, 키메라 또는 인간화된 항체 등의 단일클론 항체, 항원 결합 단편과 같은 항체 단편, 단쇄 항체, 도메인 항체 및 항원 결합부를 포함하는 폴리펩타이드로 이루어진 군으로부터 선택할 수 있다.
본 발명의 일 측면에서, 본 발명의 분리된 항체 또는 항원 결합 단편은 KAAG1-발현성 종양 세포 또는 KAAG1 변이체-발현성 종양 세포의 사멸(제거, 파괴, 세포 용해)를 (예컨대 ADCC-의존적인 방식으로) 유도할 수 있다.
본 발명의 다른 측면에서, 본 발명의 분리된 항체 또는 항원 결합 단편은 특히 KAAG1-발현성 종양 세포의 전파를 감소시킬 수 있는 능력이 특징적일 수 있다.
본 발명의 다른 측면에서, 본 발명의 분리된 항체 또는 항원 결합 단편은 KAAG1-발현성 종양의 형성을 낮추거나 해치는 능력이 특징적일 수 있다.
본 발명의 구현예에 따라, 항체 또는 항원 결합 단편은 특히 KAAG1이 KAAG1-발현성 종양 세포의 표면에서 발현될 때 유효할 수 있다.
또한, 본 발명에서, 항체 또는 항원 결합 단편은 특히 고정-비의존적인 증식이 특징인 KAAG1-발현성 종양 세포를 표적하는데 특히 유용할 수 있다.
다른 측면에서, 본 발명은 KAAG1을 발현하는 종양 세포를 포함한 암의 치료에 사용하기 위한 분리된 항체 또는 항원 결합 단편에 관한 것이다.
또다른 측면에서, 본 발명은 KAAG1을 발현하는 종양 세포를 포함한 암의 검출에 사용하기 위한 분리된 항체 또는 항원 결합 단편에 관한 것이다.
본 발명의 예시적인 구현예에서, 분리된 항체 또는 항원 결합 단편은 예컨대 인간 항체로부터 기원할 수 있는 불변부의 아미노산을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 분리된 항체 또는 항원 결합 단편은 인간 항체의 프래임워크 아미노산을 포함할 수 있다.
본원에 제시된 예시적인 구현예들로 제한되지 않으며, 출원인은 본원에 기술된 목적으로 이용할 수 있는 특이적인 항체 및 항원 결합 단편을 제작하였다.
이에, 본 발명은 예시적인 구현예로 하기 a, b 또는 c를 가지는 경쇄 가변 도메인을 포함하는, 분리된 항체 또는 항원 결합 단편을 제공한다:
a. 서열번호 74 및 서열번호 75로 이루어진 군으로부터 선택되는 CDRL1 서열;
b. 서열번호 76, 서열번호 77 및 서열번호 78로 이루어진 군으로부터 선택되는 CDRL2 서열; 또는
c. 서열번호 79, 서열번호 80 및 서열번호 81로 이루어진 군으로부터 선택되는 CDRL3 서열.
또한, 분리된 항체 또는 항원 결합 단편은 하기 a, b 또는 c를 가지는 중쇄 가변 도메인을 포함할 수도 있다:
a. 서열번호 82의 CDRH1 서열;
b. 서열번호 83, 서열번호 84, 서열번호 85, 서열번호 86 및 서열번호 87로 이루어진 군으로부터 선택되는 CDRH2 서열;
c. 서열번호 88, 서열번호 89 및 서열번호 90으로 이루어진 군으로부터 선택되는 CDRH3 서열.
예시적인 구현예로, 항체 또는 항원 결합 단편은 경쇄 가변부의 임의의 각각의 CDR을 포함하거나, 또는 경쇄 가변부의 CDR1, CDR2 및/또는 CDR3의 조합을 포함할 수 있다. 특히 CDR3이 선택될 수 있다. 조합은, 예컨대 CDRL1 및 CDRL3; CDRL1 및 CDRL2; CDRL2 및 CDRL3; CDRL1, CDRL2 및 CDRL3일 수 있다.
다른 예시적인 구현예에서, 항체 또는 항원 결합 단편은 중쇄 가변부의 임의의 각각의 CDR을 포함하거나, 또는 중쇄 가변부의 CDR1, CDR2 및/또는 CDR3의 조합을 포함할 수 있다. 특히 CDR3이 선택될 수 있다. 조합은 예컨대, CDRH1 및 CDRH3; CDRH1 및 CDRH2; CDRH2 및 CDRH3; CDRH1, CDRH2 및 CDRH3일 수 있다.
본 발명에서, 항체 또는 항원 결합 단편은 CDRL1, CDRL2 또는 CDRL3 중 2가지 이상의 CDR을 포함할 수 있다.
또한, 본 발명에서, 항체 또는 항원 결합 단편은 CDRL1 하나, CDRL2 하나, 그리고 CDRL3 하나를 포함할 수 있다.
나아가, 본 발명에서, 항체 또는 항원 결합 단편은,
a. CDRL1, CDRL2 또는 CDRL3 중 2가지 이상의 CDR 및;
b. CDRH1, CDRH2 또는 CDRH3 중 2가지 이상의 CDR을 포함할 수 있다.
항체 또는 항원 결합 단편은 보다 바람직하게는 CDRL1 하나, CDRL2 하나, 그리고 CDRL3 하나를 포함할 수 있다.
또한, 항체 또는 항원 결합 단편은 보다 바람직하게는 CDRH1 하나, CDRH2 하나, 그리고 CDRH3 하나를 포함할 수 있다.
본 발명에 대한 다른 예시적인 구현예는 a, b, 또는 c를 가지는 중쇄 가변 도메인을 포함하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편에 관한 것이다:
a. 서열번호 82를 포함하는 CDRH1 서열;
b. 서열번호 83, 서열번호 84, 서열번호 85, 서열번호 86 및 서열번호 87로 이루어진 군으로부터 선택되는 CDRH2 서열, 또는
c. 서열번호 88, 서열번호 89 및 서열번호 90으로 이루어진 군으로부터 선택되는 CDRH3 서열.
본 발명에서, 항체 또는 항원 결합 단편은 CDRH1 하나, CDRH2 하나, 또는 CDRH3 하나를 포함할 수 있다.
본 발명에서, 항체 또는 항원 결합 단편은 또한 CDRH1 하나, CDRH2 하나, 그리고 CDRH3 하나를 포함할 수 있다.
경쇄 가변 도메인 또는 중쇄 가변 도메인 중 오직 하나만 이용할 수 있는 경우, 항체 또는 항원 결합 단편은 당해 기술 분야에 공지된 방법을 이용하여 상보적인 가변 도메인 라이브러리를 스크리닝하여 재구성할 수 있다(Portolano et al. The Journal of Immunology (1993) 150:880-887, Clarkson et al., Nature (1991) 352:624-628).
또한, 본 발명은 본원에 기술된 CDR들 중 적어도 하나에 하나 이상의 보존적인 아미노산 치환(오리지날 CDR과 비교됨)이 있는 가변 체인을 포함하는 폴리펩타이드 또는 항체를 포함한다.
또한, 본 발명은 CDR들 중 적어도 2개에 하나 이상의 보존적인 아미노산 치환(오리지날 CDR과 비교됨)이 있는 가변 체인을 포함하는 폴리펩타이드 또는 항체를 포함한다.
또한, 본 발명은 3개의 CDR에 하나 이상의 보존적인 아미노산 치환(오리지날 CDR과 비교됨)이 있는 가변 체인을 포함하는 폴리펩타이드 또는 항체를 포함한다.
또한, 본 발명은 CDR들 중 적어도 하나에 2 이상의 보존적인 아미노산 치환(오리지날 CDR과 비교됨)이 있는 가변 체인을 포함하는 폴리펩타이드 또는 항체를 포함한다.
또한, 본 발명은 CDR들 중 적어도 2개에 2 이상의 보존적인 아미노산 치환(오리지날 CDR과 비교됨)이 있는 가변 체인을 포함하는 폴리펩타이드 또는 항체를 포함한다.
또한, 본 발명은 3개의 CDR에 2 이상의 보존적인 아미노산 치환(오리지날 CDR과 비교됨)이 있는 가변 체인을 포함하는 폴리펩타이드 또는 항체를 포함한다.
다른 측면에서, 본 발명은, 본원에 기술된 항체 또는 항원 결합 단편 중 하나에 대한, 경쇄 가변 도메인의 상보성 결정부 하나 이상과 중쇄 가변 도메인의 상보성 결정부 하나 이상을 (단일 폴리펩타이드 체인으로 또는 분리된 폴리펩타이드 체인들로) 포함하는, 폴리펩타이드, 항체 또는 항원 결합 단편에 관한 것이다.
이에 대한 다른 측면으로, 본 발명은 본원에 기술된 항체 또는 항원 결합 단편의 6개의 상보성 결정부(CDR) 모두를 (단일 폴리펩타이드 체인으로 또는 분리된 폴리펩타이드 체인들로) 포함할 수 있는, 항-KAAG1 항체에 관한 것이다.
본 발명의 항체 또는 항원 결합 단편은 추가적으로 CDR의 아미노 부위 및/또는 카르복시 부위의 옆에 부가적인 아미노산을 더 포함할 수 있다. 이러한 부가적인 아미노산은 표 A 또는 B에 나타낸 바와 같을 수 있으며, 또는 예컨대 보존적인 아미노산 치환을 포함할 수 있다.
본 발명에서 항체는 식: X1aSSX2aSLLX3aX4aX5aX6aX7aX8aX9aX10aLX11a (서열번호 74)을 포함하거나 이루어진 CDRL1 서열을 포함할 수 있다.
상기에서 X1a는 염기성 아미노산일 수 있으며;
상기에서 X2a는 염기성 아미노산일 수 있으며;
상기에서 X3a는 H, Y 또는 N일 수 있으며;
상기에서 X4a는 S, T, N 또는 R일 수 있으며;
상기에서 X5a는 생략되거나, S 또는 N일 수 있으며;
상기에서 X6a는 D, F 또는 N일 수 있으며;
상기에서 X7a는 G 또는 Q일 수 있으며;
상기에서 X8a는 K, L 또는 N일 수 있으며;
상기에서 X9a는 T 또는 N일 수 있으며;
상기에서 X10a는 방향족 아미노산일 수 있으며; 및
상기에서 X11a는 A, N, E 또는 Y일 수 있다.
본 발명의 예시적인 구현예에서, X1a는 K 또는 R일 수 있다.
본 발명의 다른 구현예에서, X2a는 Q 또는 K일 수 있다.
본 발명의 또다른 구현예에서, X3a는 N 또는 H일 수 있다.
본 발명의 추가적인 구현예에서, X10a는 Y 또는 F일 수 있다.
본 발명의 보다 구체적인 구현예는, X1a = K; X2a = Q; X3a = N; X3a = H; X4a = S; X4a = T; X5a = S; X5a = 생략; X6a = N; X7a = Q; X7a = G; X8a = K; X9a = N; X9a = T; X10a = Y; 또는 X11a = A인, 서열번호 74의 CDRL1을 포함한다.
본 발명에서, 항체는 식: KASQDX1bX2bX3bX4bX5bX6b (서열번호 75)을 포함하거나 이루어진 CDRL1 서열을 포함할 수 있다.
상기에서 X1b는 소수성 아미노산일 수 있으며;
상기에서 X2b는 G 또는 H일 수 있으며;
상기에서 X3b는 T, N 또는 R일 수 있으며;
상기에서 X4b는 F, Y 또는 A일 수 있으며;
상기에서 X5b는 소수성 아미노산일 수 있으며; 및
상기에서 X6b는 N 또는 A일 수 있다.
본 발명의 예시적인 구현예에서, X1b는 V 또는 I일 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, X5b는 V 또는 L일 수 있다.
본 발명의 보다 구체적인 구현예는, X1b = I; X2b = H; X3b = T; X3b = N; X4b = Y; X4b = F; X5b = L 또는 X6b = N인, 서열번호 75의 CDRL1을 포함한다.
본 발명에서, 항체는 식: FX1cSTX2cX3cS (서열번호 76)을 포함하거나 이루어진 CDRL2 서열을 포함할 수 있다.
상기에서 X1c는 A 또는 G이고;
상기에서 X2c는 R 또는 T이고; 및
상기에서 X3c는 E, K 또는 A이다.
본 발명의 예시적인 구현예에서, X1c는 A이고, X2c는 T일 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, X1c는 A이고, X2c는 R일 수 있다.
본 발명의 다른 구체적인 구현예는, X1c = A; X2c = R 또는 X3c = E인, 서열번호 76의 CDRL2를 포함한다.
본 발명에서, 항체는 식: X1dVSX2dX3dX4dS (서열번호 77)을 포함하거나 이루어진 CDRL2 서열을 포함할 수 있다.
상기에서 X1d는 L 또는 K일 수 있으며;
상기에서 X2d는 염기성 아미노산일 수 있으며;
상기에서 X3d는 L 또는 R일 수 있으며; 및
상기에서 X4d는 D 또는 F일 수 있다.
본 발명의 예시적인 구현예에서, X2d는 K 또는 N일 수 있다.
본 발명의 다른 구체적인 구현예는 X1d = L; X2d = K; X3d = L 또는 X4d = D인 서열번호 77의 CDRL2를 포함한다.
본 발명에서, 항체는 식: X1eANRLVX2e (서열번호 78)을 포함하거나 이루어진 CDRL2 서열을 포함할 수 있다.
상기에서 X1e는 염기성 아미노산일 수 있으며; 및
상기에서 X2e는 D 또는 A일 수 있다.
본 발명의 예시적인 구현예에서, X1e는 R 또는 H일 수 있다.
본 발명의 다른 구체적인 구현예는 X1e = R 또는 X2e = D인 서열번호 78의 CDRL2를 포함한다.
본 발명에서, 항체는 식: X1fQX2fX3fX4fX5fPLT (서열번호 79)을 포함하거나 이루어진 CDRL3서열을 포함할 수 있다.
상기에서 X1f는 Q 또는 L일 수 있으며;
상기에서 X2f는 방향족 아미노산 일 수 있으며;
상기에서 X3f는 D, F 또는 Y일 수 있으며;
상기에서 X4f는 E, A, N 또는 S일 수 있으며; 및
상기에서 X5f는 I, F 또는 T일 수 있다.
본 발명의 예시적인 구현예에서, X2f는 Y 또는 H일 수 있다
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, X3f는 Y 또는 D일 수 있다.
본 발명의 또다른 예시적인 구현예에서, X5f는 I 또는 T일 수 있다.
본 발명의 다른 구체적인 구현예는 X1f = Q; X2f = H; X3f = D; X3f = Y; X4f = S; X4f = E; X4f = A; X5f = T, 또는 X5f = I인, 서열번호 79의 CDRL3을 포함한다.
본 발명에서, 항체는 식: QQHX1gX2gX3gPLT (서열번호 80)을 포함하거나 이루어진 CDRL3 서열을 포함할 수 있다.
상기에서 X1g는 방향족 아미노산 일 수 있으며;
상기에서 X2g는 N 또는 S일 수 있으며; 및
상기에서 X3g는 I 또는 T일 수 있다.
본 발명의 예시적인 구현예에서, X1g는 F 또는 Y일 수 있다.
본 발명의 다른 구체적인 구현예는 X2g = S 또는 X3g = T인, 서열번호 80의 CDRL3을 포함한다.
본 발명에서, 항체는 식: X1hQGX2hHX3hPX4hT (서열번호 81)을 포함하거나 이루어진 CDRL3 서열을 포함할 수 있다.
상기에서 X1h는 방향족 아미노산일 수 있으며;
상기에서 X2h는 중성의 친수성 아미노산일 수 있으며;
상기에서 X3h는 F 또는 V일 수 있으며; 및
상기에서 X4h는 R 또는 L일 수 있다.
본 발명의 예시적인 구현예에서, X1h는 W 또는 F일 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, X2h는 S 또는 T일 수 있다.
본 발명의 다른 구체적인 구현예는 X2h = T; X3h = F, 또는 X4h = R인, 서열번호 81의 CDRL3을 포함한다.
본 발명에서, 항체는 식: GYX1iFX2iX3iYX4iX5iH (서열번호 82)을 포함하거나 이루어진 CDRH1 서열을 포함할 수 있다.
상기에서 X1i는 T, I 또는 K일 수 있으며;
상기에서 X2i는 중성 친수성 아미노산일 수 있으며;
상기에서 X3i는 산성 아미노산일 수 있으며;
상기에서 X4i는 E, N 또는 D일 수 있으며; 및
상기에서 X5i는 소수성 아미노산일 수 있다.
본 발명의 예시적인 구현예에서, X2i는 T 또는 S일 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, X3i는 D 또는 E일 수 있다.
본 발명의 또다른 예시적인 구현예에서, X4i는 N 또는 E일 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, X5i는 M, I 또는 v일 수 있다.
본 발명의 다른 구체적인 구현예는 X2i = T; X3i = D; X4i = E; X5i = I 또는 X5i = M인, 서열번호 82의 CDRH1을 포함한다.
본 발명에서, 항체는 식: X1jX2jDPX3jTGX4jTX5j (서열번호 83)을 포함하거나 이루어진 CDRH2 서열을 포함할 수 있다.
상기에서 X1j는 V 또는 G일 수 있으며;
상기에서 X2j는 소수성 아미노산일 수 있으며;
상기에서 X3j는 A, G 또는 E일 수 있으며;
상기에서 X4j는 R, G, D, A, S, N 또는 V일 수 있으며; 및
상기에서 X5j는 소수성 아미노산일 수 있다.
본 발명의 예시적인 구현예에서, X2j는 I 또는 L일 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, X5j는 A 또는 V일 수 있다.
본 발명의 다른 구체적인 구현예는 X1j = V; X2j = I; X3j = E; X4j = D 또는 X5j = A인, 서열번호 83의 CDRH2를 포함한다.
본 발명에서, 항체는 식: VX1kDPX2kTGX3kTA (서열번호 84)을 포함하거나 이루어진 CDRH2 서열을 포함할 수 있다.
상기에서 X1k는 소수성 아미노산일 수 있으며;
상기에서 X2k는 A, E 또는 G일 수 있으며;
상기에서 X3k는 R, G, A, S, N V 또는 D일 수 있다.
본 발명의 예시적인 구현예에서, X1k는 L 또는 I일 수 있다.
본 발명의 다른 구체적인 구현예는 X1k = I; X2k = E, 또는 X3k = D인, 서열번호 84의 CDRH2를 포함한다.
본 발명에서, 항체는 식: YIX1lX2lX3lGX4lX5lX6l (서열번호 85)을 포함하거나 이루어진 CDRH2 서열을 포함할 수 있다.
상기에서 X1l은 S 또는 N일 수 있으며;
상기에서 X2l은 방향족 아미노산일 수 있으며
상기에서 X3l은 D, E 또는 N일 수 있으며;
상기에서 X4l은 a D 또는 H일 수 있으며;
상기에서 X5l은 Y, S 또는 N일 수 있으며; 및
상기에서 X6l은 D, E 또는 N일 수 있다.
본 발명의 예시적인 구현예에서, X3l은 D 또는 N일 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, X6l은 D 또는 N일 수 있다.
본 발명의 다른 구체적인 구현예는 X2l = F 또는 Y, X3l = N, X4l = D 또는 X6l = N인, 서열번호 86의 CDRH2를 포함한다.
본 발명에서, 항체는 식: X1mINPYNX2mVTE (서열번호 86)를 포함하거나 이루어진 CDRH2 서열을 포함할 수 있다.
상기에서 X1m은 N 또는 Y일 수 있으며; 및
상기에서 X2m은 E, D 또는 N일 수 있다.
본 발명의 예시적인 구현예에서, X2m은 D 또는 N일 수 있다.
본 발명의 다른 구체적인 구현예는 X1m = N 또는 X2m = D인 서열번호 86의 CDRH2를 포함한다.
본 발명에서, 항체는 식: DINPX1nYGX2nX3nT (서열번호 87)을 포함하거나 이루어진 CDRH2 서열을 포함할 수 있다.
상기에서 X1n은 N 또는 Y일 수 있으며;
상기에서 X2n은 G 또는 T일 수 있으며; 및
상기에서 X3n은 I 또는 T일 수 있다.
본 발명에서, 항체는 식: MX1oX2oX3oDY (서열번호 88)을 포함하거나 이루어진 CDRH3 서열을 포함할 수 있다.
상기에서 X1o는 G 또는 S일 수 있으며;
상기에서 X2o는 Y 또는 H일 수 있으며; 및
상기에서 X3o는 A 또는 S일 수 있다.
본 발명의 다른 구체적인 구현예는 X1o = G; X2o = Y 또는 X3o = S인 서열번호 88의 CDRH3을 포함한다.
본 발명에서, 항체는 식: IX1pYAX2pDY (서열번호 89)을 포함하거나 이루어진 CDRH3 서열을 포함할 수 있다.
상기에서 X1p는 G 또는 S일 수 있으며; 및
상기에서 X2p는 생략되거나 또는 M일 수 있다.
본 발명의 다른 구체적인 구현예는 X1p = S 또는 X2p = M인 서열번호 89의 CDRH3을 포함한다.
본 발명에서, 항체는 식: AX1qX2qGLRX3q (서열번호 90)을 포함하거나 이루어진 CDRH3 서열을 포함할 수 있다.
상기에서 X1q는 R 또는 W일 수 있으며;
상기에서 X2q는 방향족 아미노산일 수 있으며; 및
상기에서 X3q는 염기성 아미노산일 수 있다.
본 발명의 예시적인 구현예에서, X2q는 W 또는 F일 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, X3q는 Q 또는 N일 수 있다.
본 발명의 다른 구체적인 구현예는 X1q = R; X2q = W 또는 X3q = N인 서열번호 90의 CDRH3을 포함한다.
본 발명에 기술된 중쇄 및/또는 경쇄의 프래임워크 영역은 표 A 및 B에 나타낸 프래임워크 영역 하나 이상으로부터 유래될 수 있다. 따라서, 항체 또는 항원 결합 단편은 본원에 기술된 하나 이상의 CDR(예, 특이적인 CDR 또는 서열번호 74 - 90의 컨센서스 CDR로부터 선택됨), 및 표 A 및 B에 기재된 것으로부터 기원되는 프래임워크 영역을 포함할 수 있다. 표 A 및 B에서, 예상되는 CDR은 굵은 글씨체로 나타내며, 프래임워크 영역은 그렇게 하지 않았다.
표 1은 항-KAAG1 항체들의 특정 예의 완전한 경쇄 및 중쇄 면역글로불린에 대응되는 뉴클레오티드와 아미노산 서열을 나타낸다.
KAAG1에 결합하는 경쇄 및 중쇄 면역글로불린의 전체 서열
항체 명칭 체인의 타입 뉴클레오티드 서열 (서열번호 ) 아미노산 서열 (서열번호 )
3D3 경쇄 (L) 3 4
3D3 중쇄 (H) 5 6
3G10 경쇄 7 8
3G10 중쇄 9 10
3C4 경쇄 11 12
3C4 중쇄 13 14
KAAG1에 결합할 수 있는 항체 또는 항원 결합 단편은 표 1에 열거된 임의의 하나의 L 체인과 임의의 하나의 H 체인을 포함할 수 있다. 특정 구현예에서, 항체 3D3의 경쇄는 3D3의 중쇄 또는 3G10의 중쇄와 조합되어, KAAG1-결합 활성을 가진 완전한 항체를 형성할 수 있다. 본 발명의 예시적인 구현예에서, 3D3 L 체인은 3D3 H 체인과 조합될 수 있으며, 3G10 L 체인은 3G10 H 체인과 조합될 수 있으며, 또는 3C4 L 체인은 3C4 H 체인과 조합될 수 있다. 부가적으로, 항체 또는 항원 결합 단편의 일부 예들은 표 2에 열거된 항체 리스트에서 유래된 2개의 L 체인과 임의의 2개의 H 체인의 임의 조합으로 구성될 수 있다.
항체 3D3의 경쇄 및 중쇄 면역글로불린의 완전한 뉴클레오티드 서열은 각각 서열번호 3과 5로 나타내며, 항체 3D3의 경쇄 및 중쇄 면역글로불린의 대응되는 아미노산 서열은 서열번호 4와 6으로 각각 나타낸다. 즉, 예시적인 구현예에서, KAAG1에 결합하는 항체는 서열번호 4에 나타낸 경쇄 아미노산과 서열번호 6에 나타낸 중쇄 아미노산 서열을 조합하여 포함할 수 있다. 다른 구현예에서, 항체는 서열번호 4를 포함하는 2개의 동일한 3D3 경쇄와 서열번호 6을 포함하는 2개의 동일한 3D3 중쇄를 포함할 수 있다.
항체 3G10의 경쇄 및 중쇄 면역글로불린의 완전한 뉴클레오티드 서열은 각각 서열번호 7과 9로 나타내며, 항체 3G10의 경쇄 및 중쇄 면역글로불린의 대응되는 아미노산 서열은 서열번호 8과 10으로 각각 나타낸다. 즉, 예시적인 구현예에서, KAAG1에 결합하는 항체는 서열번호 8에 나타낸 경쇄 아미노산과 서열번호 10에 나타낸 중쇄 아미노산 서열을 조합하여 포함할 수 있다. 다른 구현예에서, 항체는 서열번호 8을 포함하는 2개의 동일한 3G10 경쇄와 서열번호 10을 포함하는 2개의 동일한 3G10 중쇄를 포함할 수 있다.
항체 3C4의 경쇄 및 중쇄 면역글로불린의 완전한 뉴클레오티드 서열은 각각 서열번호 11과 13으로 나타내며, 항체 3C4의 경쇄 및 중쇄 면역글로불린의 대응되는 아미노산 서열은 서열번호 12와 14로 각각 나타낸다. 즉, 예시적인 구현예에서, KAAG1에 결합하는 항체는 서열번호 12에 나타낸 경쇄 아미노산과 서열번호 14에 나타낸 중쇄 아미노산 서열을 조합하여 포함할 수 있다. 다른 구현예에서, 항체는 서열번호 12를 포함하는 2개의 동일한 3C4 경쇄와 서열번호 14를 포함하는 2개의 동일한 3C4 중쇄를 포함할 수 있다.
각각 독립적으로 표 2에 열거된 아미노산 서열과 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 97%, 또는 99%의 동일성을 가질 수 있는, 경쇄 및/또는 중쇄 면역글로불린의 조합에 의해 생성되는 다른 항-KAAG1 항체 또는 항원 결합 단편의 변이체도 제공한다. 특정 구현예에서, 항체 변이체는 적어도 하나의 경쇄와 하나의 중쇄를 포함할 수 있다. 다른 예로, 항체 변이체는 2개의 동일한 경쇄와 2개의 동일한 중쇄를 포함할 수 있다. 본 발명에서, 변이 영역은 불변부 또는 가변부에 위치할 수 있다. 또한, 본 발명에서, 변이 영역은 프래임워크 영역내에 위치할 수 있다.
또한, 본 발명은 표 A에 나타낸 가변부 중 하나를 포함하는 경쇄와 표 B에 나타낸 가변부 중 하나를 포함하는 중쇄를 포함하는, 항체를 포함한다. 경쇄와 중쇄는 불변 도메인을 포함할 수 있다. 표1, 표 A 및 표 B의 경쇄 및 중쇄의 조합 역시 본 발명에 포함된다.
또한, 본 발명은 경쇄 및 중쇄 가변부를 포함하는 항체 또는 항원 결합 단편을 제공한다. 또한, 특정 구현예들은 이들 경쇄 및 중쇄 가변부의, 항원 결합 단편, 변이체 및 유도체를 포함한다.
본 발명의 또다른 예시적인 구현예는, 서열번호 2, 서열번호 2의 세포외 영역 또는 서열번호 2의 분비된 형태, 또는 이들의 변이체에 특이적으로 결합할 수 있는 분비된 항체 또는 항원 결합 단편을 포함하며, 상기 항체는 하기를 포함한다:
a. 서열번호 16에 명시된 경쇄 가변 도메인 및 서열번호 18에 명시된 중쇄 가변 도메인,
b. 서열번호 20에 명시된 경쇄 가변 도메인 및 서열번호 22에 명시된 중쇄 가변 도메인;
c. 서열번호 24에 명시된 경쇄 가변 도메인 및 서열번호 26에 명시된 중쇄 가변 도메인
d. 서열번호 105에 명시된 경쇄 가변 도메인 및 서열번호 132에 명시된 중쇄 가변 도메인,
e. 서열번호 106에 명시된 경쇄 가변 도메인 및 서열번호 133에 명시된 중쇄 가변 도메인,
f. 서열번호 107에 명시된 경쇄 가변 도메인 및 서열번호 134에 명시된 중쇄 가변 도메인,
g. 서열번호 108에 명시된 경쇄 가변 도메인 및 서열번호 154에 명시된 중쇄 가변 도메인,
h. 서열번호 109에 명시된 경쇄 가변 도메인 및 서열번호 153에 명시된 중쇄 가변 도메인,
i. 서열번호 110에 명시된 경쇄 가변 도메인 및 서열번호 135에 명시된 중쇄 가변 도메인,
j. 서열번호 111에 명시된 경쇄 가변 도메인 및 서열번호 136에 명시된 중쇄 가변 도메인,
k. 서열번호 112에 명시된 경쇄 가변 도메인 및 서열번호 149에 명시된 중쇄 가변 도메인,
l. 서열번호 113에 명시된 경쇄 가변 도메인 및 서열번호 137에 명시된 중쇄 가변 도메인,
m. 서열번호 114에 명시된 경쇄 가변 도메인 및 서열번호 140에 명시된 중쇄 가변 도메인,
n. 서열번호 115에 명시된 경쇄 가변 도메인 및 서열번호 141에 명시된 중쇄 가변 도메인,
o. 서열번호 116에 명시된 경쇄 가변 도메인 및 서열번호 142에 명시된 중쇄 가변 도메인,
p. 서열번호 117에 명시된 경쇄 가변 도메인 및 서열번호 139에 명시된 중쇄 가변 도메인,
q. 서열번호 119에 명시된 경쇄 가변 도메인 및 서열번호 143에 명시된 중쇄 가변 도메인,
r. 서열번호 120에 명시된 경쇄 가변 도메인 및 서열번호 152에 명시된 중쇄 가변 도메인,
s. 서열번호 121에 명시된 경쇄 가변 도메인 및 서열번호 146에 명시된 중쇄 가변 도메인,
t. 서열번호 122에 명시된 경쇄 가변 도메인 및 서열번호 138에 명시된 중쇄 가변 도메인,
u. 서열번호 123에 명시된 경쇄 가변 도메인 및 서열번호 150에 명시된 중쇄 가변 도메인,
v. 서열번호 124에 명시된 경쇄 가변 도메인 및 서열번호 144에 명시된 중쇄 가변 도메인,
w. 서열번호 126에 명시된 경쇄 가변 도메인 및 서열번호 145에 명시된 중쇄 가변 도메인,
x. 서열번호 127에 명시된 경쇄 가변 도메인 및 서열번호 157에 명시된 중쇄 가변 도메인,
y. 서열번호 128에 명시된 경쇄 가변 도메인 및 서열번호 155에 명시된 중쇄 가변 도메인,
z. 서열번호 129에 명시된 경쇄 가변 도메인 및 서열번호 156에 명시된 중쇄 가변 도메인; 또는
aa. 서열번호 130에 명시된 경쇄 가변 도메인 및 서열번호 151에 명시된 중쇄 가변 도메인.
또한, 상기 제시된 특정 조합에서 경쇄 가변부는 임의의 다른 경쇄 가변부로 바꿀 수 있는 것으로 이해된다. 마찬가지로, 상기 제시된 특정 조합에서 중쇄 가변부는 임의의 다른 중쇄 가변부로 바꿀 수 있다.
이러한 경쇄 및 중쇄 가변부에 존재하는 서열의 구체적인 예는 표 2에 나타낸다.
KAAG1에 결합하는 경쇄 가변부와 중쇄 가변부의 서열들
항체 명칭 가변부의 유형 뉴클레오티드 서열 (서열번호 ) 아미노산 서열 (서열번호 )
3D3 경쇄 (VL) 15 16
3D3 중쇄 (VH) 17 18
3G10 경쇄 19 20
3G10 중쇄 21 22
3C4 경쇄 23 24
3C4 중쇄 25 26
3z1A02 경쇄 105
3z1A02 중쇄 132
3z1E10 경쇄 109
3z1E10 중쇄 153
3z1G12L 경쇄 126
3z1G12H 중쇄 145
따라서, KAAG1에 결합하는 항체 및 항원 결합 단편은 동일한 지정된 항체의 경쇄 가변부 하나와 중쇄 가변부 하나를 포함하거나, 임의 조합일 수 있다. 예를 들면, 예시적인 구현예에서, 항-KAAG1 항체 또는 단편은 3D3 경쇄 가변부 (서열번호 16) 및 3D3 중쇄 가변부 (서열번호 18)를 포함할 수 있다. 다른 구현예로, 항-KAAG1 항체 또는 단편은 3D3 경쇄 가변부 (서열번호 16)와 3G10 중쇄 가변부(서열번호 22)를 포함할 수 있다. 다른 구현예에서, 항-KAAG1 항체는 2개의 동일한 경쇄 가변부와 2개의 동일한 중쇄 영역을 포함할 수 있다. 또다른 구현예에서, 항-KAAG1 항체는 2개의 상이한 경쇄 가변부와 2개의 상이한 중쇄 영역을 포함할 수 있다.
표 2에 열거된 아미노산 서열과, 각각 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 97%, 또는 99%의 동일성을 가지는, 경쇄 가변부 및/또는 중쇄 가변부를 조합하여, 생성되는 그외 항-KAAG1 항체의 변이체도 제공된다. 당해 기술 분야의 당업자라면, 항-KAAG1 항체 변이체들이 표 2에 열거된 경쇄 가변부 및/또는 중쇄 가변부의 아미노산 서열에 보존적인 아미노산 변화들, 아미노산 치환, 결손 또는 부가를 포함할 수 있음을 인지할 것이다.
본 발명에서, 변이 영역은 가변부의 프래임워크 영역내에 위치될 수 있다.
경쇄 및 중쇄의 CDR 서열
항체 명칭 체인의 유형 CDR 서열번호 아미노산 서열
3D3 경쇄 (L) CDR l1 27 KSSQSLLNSNFQKNFLA
3D3 경쇄 CDR l2 28 FASTRES
3D3 경쇄 CDR l3 29 QQHYSTPLT
3D3 중쇄(H) CDR h1 30 GYIFTDYEIH
3D3 중쇄 CDR h2 31 VIDPETGNTA
3D3 중쇄 CDR h3 32 MGYSDY
3G10 경쇄 CDR l1 33 RSSQSLLHSNGNTYLE
3G10 경쇄 CDR l2 34 KVSNRFS
3G10 경쇄 CDR l3 35 FQGSHVPLT
3G10 중쇄 CDR h1 36 GYTFTDNYMN
3G10 중쇄 CDR h2 37 DINPYYGTTT
3G10 중쇄 CDR h3 38 ARDDWFDY
3C4 경쇄 CDR l1 39 KASQDIHNFLN
3C4 경쇄 CDR l2 40 RANRLVD
3C4 경쇄 CDR l3 41 LQYDEIPLT
3C4 중쇄 CDR h1 42 GFSITSGYGWH
3C4 중쇄 CDR h2 43 YINYDGHND
3C4 중쇄 CDR h3 44 ASSYDGLFAY
3z1A02 경쇄 CDR l1 158 KSSQSLLHSDGKTYLN
3z1A02 경쇄 CDR l2 159 LVSKLDS
3z1A02 경쇄 CDR l3 160 WQGTHFPRT
3z1A02 중쇄 CDR h1 161 GYTFTD YNMH
3z1A02 중쇄 CDR h2 162 YINPYNDVTE
3z1A02 중쇄 CDR h3 163 AWFGL RQ
3z1E10 경쇄 CDR l1 164 RSSKSLLHSNGN TYLY
3z1E10 경쇄 CDR l2 165 RMSNLAS
3z1E10 경쇄 CDR l3 166 MQHLEYPYT
3z1E10 중쇄 CDR h1 167 GDTFTD YYMN
3z1E10 중쇄 CDR h2 168 DINPNYGGIT
3z1E10 중쇄 CDR h3 169 QAYYRNS DY
3z1G12L 경쇄 CDR l1 170 KASQDVGTAVA
3z1G12L 경쇄 CDR l2 171 WTSTRHT
3z1G12L 경쇄 CDR l3 172 QQHYSIPLT
3z1G12H 중쇄 CDR h1 173 GYIFTDYEIH
3z1G12H 중쇄 CDR h2 174 VIDPETGNTA
3z1G12H 중쇄 CDR h3 175 MGYSDY
본 발명의 특정 구현예에서, 항-KAAG1 항체 또는 항원 결합 단편은 표 3에 나타낸 CDR 서열을 포함할 수 있거나 또는 표 3의 CDR 서열과 실질적인 서열 동일성을 가질 수 있다. 예시적인 구현예에서, 3D3 항-KAAG1 항체는 각각 서열번호 27, 28 및 29에 의해 코딩되는 CDR1, 2 및 3을 포함하는 경쇄 가변부, 및/또는 각각 서열번호 30, 31 및 32로 코딩되는 CDR 1, 2 및 3을 포함하는 중쇄 가변부를 포함할 수 있다. 다른 구현예에서, CDR3 영역은 항원 결합을 제공하는데 충분할 수 있다. 이러한 CDR3l 또는 CDR3, 또는 CDR3l과 CDR3 둘다를 포함하는 폴리펩타이드는 본 발명에 포함된다.
부가적으로, 항-KAAG1 항체 또는 항원 결합 단편은 표 3에 열거된 CDR들의 임의 조합을 포함할 수 있다. 예컨대, 항체 또는 항원 결합 단편은 경쇄 CDR3 및 중쇄 CDR3을 포함할 수 있다. 항-KAAG1 항체 또는 항원 결합 단편에 포함되는 CDR은 표 3에 제시된 CDR 서열들과 80%, 85%, 90%, 또는 95%의 서열 동일성을 가진 변이체 CDR일 수 있다. 또한, 당해 기술 분야의 당업자는, 변이체가 표 3에 열거된 CDR 서열내의 보존적인 아미노산 변화, 아미노산 치환, 결손 또는 부가를 포함할 수 있다는 것을 알 것이다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예는 서열번호 2에 특이적으로 결합할 수 있는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편, 서열번호 2의 세포외 영역, 서열번호 2의 분리된 형태, 또는 이의 변이체를 포함하며, 이 항체는 하기를 포함한다:
a. 서열번호 16에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및/또는 서열번호 18에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR,
b. 서열번호 20에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및/또는 서열번호 22에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR;
c. 서열번호 24에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및/또는 서열번호 26에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR;
d. 서열번호 105에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및/또는 서열번호 132에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR,
e. 서열번호 106에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및/또는 서열번호 133에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR,
f. 서열번호 107에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및/또는 서열번호 134에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR,
g. 서열번호 108에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및/또는 서열번호 154에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR,
h. 서열번호 109에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및/또는 서열번호 153에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR,
i. 서열번호 110에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및/또는 서열번호 135에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR,
j. 서열번호 111에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및/또는 서열번호 136에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR,
k. 서열번호 112에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및/또는 서열번호 149에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR,
l. 서열번호 113에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및/또는 서열번호 137에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR,
m. 서열번호 114에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및/또는 서열번호 140에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR,
n. 서열번호 115에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및/또는 서열번호 141에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR,
o. 서열번호 116에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및/또는 서열번호 142에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR,
p. 서열번호 117에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및/또는 서열번호 139에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR,
q. 서열번호 119에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및/또는 서열번호 143에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR,
r. 서열번호 120에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및/또는 서열번호 152에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR,
s. 서열번호 121에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및/또는 서열번호 146에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR,
t. 서열번호 122에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및/또는 서열번호 138에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR,
u. 서열번호 123에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및/또는 서열번호 150에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR,
v. 서열번호 124에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및/또는 서열번호 144에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR,
w. 서열번호 126에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및/또는 서열번호 145에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR,
x. 서열번호 127에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및/또는 서열번호 157에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR,
y. 서열번호 128에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및/또는 서열번호 155에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR,
z. 서열번호 129에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및/또는 서열번호 156에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR; 또는
aa. 서열번호 130에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및/또는 서열번호 151에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR.
즉, 상기 제시된 특정 조합에서 경쇄 가변부는 본원에 기술된 임의의 다른 경쇄 가변부로 바뀔 수 있다. 마찬가지로, 상기 제시된 특정 조합에서 중쇄 가변부는 본원에 기술된 임의의 다른 중쇄 가변부로 바뀔 수 있다.
변이체 항체 및 항원 결합 단편
또한, 본 발명은 본원에 기술된 항체 또는 항원 결합 단편의 변이체를 포함한다. 포함되는 변이체 항체 또는 항원 결합 단편은 아미노산 서열에 변이를 가진 것이다. 예컨대, 포함되는 변이체 항체 또는 항원 결합 단편은, 하나 이상의 변이체 CDR(2, 3, 4, 5 또는 6개의 변이체 CDR 또는 심지어 12개의 변이체 CDR), 변이체 경쇄 가변 도메인, 변이체 중쇄 가변 도메인, 변이체 중쇄 및/또는 변이체 경쇄를 가지는 것이다. 본 발명에 포함되는 변이체 항체 또는 항원 결합 단편은 오리지날 항체 또는 항원 결합 단편과 비교하여 예컨대 유사한 또는 개선된 결합 친화성을 가지고 있는 것이다.
본원에서, 용어 "변이체"는 본원에 기술된 서열들 중 임의의 서열에 적용되며, 예로, 변이체 CDR(CDRL1, CDRL2, CDRL3, CDRH1, CDRH2 및/또는 CDRH3 중 어느 하나), 변이체 경쇄 가변 도메인, 변이체 중쇄 가변 도메인, 변이체 경쇄, 변이체 중쇄, 변이체 항원, 변이체 항원 결합 단편 및 KAAG1 변이체를 포함한다.
본 발명에 포함되는 변이체 항체 또는 항원 결합 단편은 삽입, 결손 또는 아미노산 치환(보존적이거나 비보존적인)을 포함할 수 있는 것이다. 이들 변이체는 제거되는 서열에 하나 이상의 아미노산 잔기를 가질 수 있으며, 그 위치에 다른 잔기가 삽입될 수 있다.
치환에 의한 돌연변이화에 가장 괜찮은 부위는 과가변부(CDR)를 포함하지만, 프래임워크 영역 또는 심지어 불변부에서의 변형도 고려된다. 보존적인 치환은 (CDR, 가변성 체인, 항체 등의) 아미노산이 하기 열거된 그룹들(그룹 1-6) 중 하나에서 동일 그룹의 다른 아미노산으로 교체하여 제조할 수 있다.
보존적인 치환에 대한 다른 예시적인 구현예는 표제 "바람직한 치환"의 표 4에 나타나 있다. 이러한 치환으로 원하지 않은 특성이 나타난다면, 표 4에 "치환 예"로 표시되거나 또는 아미노산 클래스에 대해 하기에 추가로 언급된, 보다 실질적인 변화를 도입하여, 산물을 스크리닝할 수 있다.
당해 기술 분야에서는, 변이체는 치환에 의한 돌연변이화에 의해 제조할 수 있으며, 본 발명의 폴리펩타이드가 생물 활성을 유지할 수 있음은 공지된 것이다. 이러한 변이체는 제거되는 아미노산 서열에 하나 이상의 아미노산 잔기를 가질 수 있으며, 그 위치에 다른 잔기가 삽입될 수 있다. 예컨대, 치환에 의해 돌연변이화에 괜찮은 부위는 다양한 종으로부터 수득되는 특정 잔기들이 동일한 부위를 포함할 수 있다. "보존적인 치환"으로 명시되는 치환의 예는 표 4에 나타나 있다. 이러한 치환으로 원하지 않는 변화가 이루어진다면, 표 4에 "치환 예"로 표시되거나 또는 아미노산 클래스에 대한 본원에 추가로 기술된 다른 타입의 치환을 도입하고, 산물을 스크리닝한다.
기능 또는 면역학적 실체(identity)에 대한 실질적인 변형은, (a) 시트 또는 나선 구조와 같이, 치환 영역에서 폴리펩타이드의 벡본 구조, (b) 표적 부위에서의 분자의 전하 또는 소수성, 또는 (c) 측쇄의 벌크(bulk)를 유지하는데 이의 효과가 상당히 다른 치환을 선택함으로써 달성한다. 천연적으로 형성되는 잔기는 공통적인 측쇄 특징을 기준으로 그룹으로 분류된다:
(그룹 1) 소수성: 노르루신, 메티오닌(Met), 알라닌(Ala), 발린(Val), 루신(Leu), 이소루신(Ile)
(그룹 2) 중성 친수성: 시스테인(Cys), 세린(Ser), 트레오닌(Thr)
(그룹 3) 산성: 아스파르트산(Asp), 글루탐산(Glu)
(그룹 4) 염기성: 아스파라긴(Asn), 글루타민(Gln), 히스티딘(His), 라이신(Lys), 아르기닌(Arg)
(그룹 5) 체인 배치(orientation)에 영향을 주는 잔기: 글리신(Gly), 프롤린(Pro); 및
(그룹 6) 방향족: 트립토판(Trp), 타이로신(Tyr), 페닐알라닌(Phe)
비보존적인 치환은 이들 클래스들 중 하나의 클래스의 구성원을 다른 클래스의 것으로 교환함으로써 이루어질 것이다.
아미노산 치환
원 잔기 치환 예 보존적인 치환
Ala (A) Val, Leu, Ile Val
Arg (R) Lys, Gln, Asn Lys
Asn (N) Gln, His, Lys, Arg, Asp Gln
Asp (D) Glu, Asn Glu
Cys (C) Ser, Ala Ser
Gln (Q) Asn; Glu Asn
Glu (E) Asp, Gln Asp
Gly (G) Ala Ala
His (H) Asn, Gln, Lys, Arg, Arg
Ile (I) Leu, Val, Met, Ala, Phe, 노르루신 Leu
Leu (L) 노르루신, Ile, Val, Met, Ala, Phe Ile
Lys (K) Arg, Gln, Asn Arg
Met (M) Leu, Phe, Ile Leu
Phe (F) Leu, Val, Ile, Ala, Tyr Tyr
Pro (P) Ala Ala
Ser (S) Thr Thr
Thr (T) Ser Ser
Trp (W) Tyr, Phe Tyr
Tyr (Y) Trp, Phe, Thr, Ser Phe
Val (V) Ile, Leu, Met, Phe, Ala, 노르루신 Leu
변이체 항체 또는 항원 결합 단편의 아미노산 서열 변이는 아미노산 부가, 결손, 삽입, 치환 등, 하나 이상의 아미노산의 벡본 또는 측쇄에서의 하나 이상의 변형, 또는 하나 이상의 아미노산(측쇄 또는 벡본)에 기 또는 다른 분자의 추가를 포함할 수 있다.
변이체 항체 또는 항원 결합 단편은 오리지날 항체 또는 항원 결합 단편 아미노산 서열과 비교하여 아미노산 서열에 실질적으로 서열 유사성 및/또는 서열 동일성이 있을 수 있다. 2개의 서열 간의 유사성 정도는 동일성 %(동일한 아미노산) 및 보존적인 치환율을 기초로 한다.
일반적으로, 가변성 체인들 간의 유사성 및 동일성 정도는 Blast2 서열 프로그램을 이용하여 디폴트 세팅, 즉 blastp 프로그램, BLOSUM62 매트릭스(오픈 갭 11 및 연장 갭 패널티 1; gapx 감소(dropoff) 50, 익스펙트(expect) 10.0, 문자 크기 3) 및 활성화된 필터(activated filter)에서 본원에서 정한다(Tatiana A. Tatusova, Thomas L. Madden (1999), "Blast 2 sequences - a new tool for comparing protein and nucleotide sequences", FEMS Microbiol Lett. 174:247-250).
따라서, 동일성%는 오리지날 펩타이드와 비교하여 동일한 아미노산과, 동일하거나 유사한 위치를 점유할 수 있는, 아미노산을 의미할 것이다.
유사성%는 동일한 아미노산과, 오리지날 펩타이드와 비교하여 동일하거나 유사한 위치에서 보존적인 아미노산 치환으로 교체된 아미노산을 가르킬 것이다.
따라서, 본 발명의 변이체는, 오리지날 서열 또는 오리지날 서열의 일부분과 적어도 70%, 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 서열 동일성을 가질 수 있는 것을 포함한다.
예시적인 변이체 구현예는 본원에 기술되 서열과의 서열 동일성이 81% 이상인 것, 오리지날 서열 또는 오리지날 서열의 일부분과 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 서열 유사성을 갖는 것이다.
다른 예시적인 변이체의 예는, 본원에 기술된 서열과의 서열 상동성이 82%인 것, 오리지날 서열 또는 오리지날 서열의 일부분과의 서열 유사성이 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%인 것이다.
다른 예시적인 변이체 구현예는 본원에 기술된 서열과의 서열 동일성이 90% 이상인 것, 오리지날 서열 또는 오리지날 서열의 일부분과의 서열 유사성이 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%인 것이다.
추가적으로 예시적인 변이체의 구현예는 본원에 기술된 서열과의 서열 동일성이 95% 이상인 것, 오리지날 서열 또는 오리지날 서열의 일부분과의 서열 유사성이 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%인 것이다.
또다른 추가적으로 예시적인 변이체의 구현예는 본원에 기술되 서열과의 서열 동일성이 97% 이상인 것, 오리지날 서열 또는 오리지날 서열의 일부분과의 서열 유사성이 97%, 98%, 99% 또는 100%인 것이다.
간결하게 하기 위해, 본 출원인은 본 발명에 포함되는 개별 변이체들의 구현예들이 열거되고 특정한 서열 동일성% 및 서열 유사성%이 포함된 표 5를 제공한다. 각 "X"는 해당 변이체를 정의하는 것으로 이해된다.
서열 동일성 백분율(%)
서열 유사성 백분율(%) 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100
80 x
81 x x
82 x x x
83 x x x x
84 x x x x x
85 x x x x x x
86 x x x x x x x
87 x x x x x x x x
88 x x x x x x x x x
89 x x x x x x x x x x
90 x x x x x x x x x x x
91 x x x x x x x x x x x x
92 x x x x x x x x x x x x x
93 x x x x x x x x x x x x x x
94 x x x x x x x x x x x x x x x
95 x x x x x x x x x x x x x x x x
96 x x x x x x x x x x x x x x x x x
97 x x x x x x x x x x x x x x x x x x
98 x x x x x x x x x x x x x x x x x x x
99 x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x
100 x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x
본 발명은 본원에 기술된 서열과의 동일성이 80% 이상인, CDR, 경쇄 가변 도메인, 중쇄 가변 도메인, 경쇄, 중쇄, 항체 및/또는 항원 결합 단편을 포함한다.
본 발명의 예시적인 항체 또는 항원 결합 단편의 구현예는, 서열번호 16과 적어도 70%, 75%, 80% 이상 동일한 서열, 서열번호 20과 적어도 70%, 75%, 80% 이상 동일한 서열, 서열번호 24와 적어도 70%, 75%, 80% 이상 동일한 서열, 서열번호 105와 적어도 70%, 75%, 80% 이상 동일한 서열, 서열번호 109와 적어도 70%, 75%, 80% 이상 동일한 서열 및 서열번호 126과 적어도 70%, 75%, 80% 이상 동일한 서열로 이루어진 군으로부터 선택되는 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함하는 것이다.
이들 경쇄 가변 도메인은 서열번호 27과 80% 이상 동일한 CDRL1 서열, 서열번호 28과 80% 이상 동일한 CDRL2 서열 및 서열번호 29와 80% 이상 동일한 CDRL3 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 27과 90% 이상 동일할 수 있는 CDRL1 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 27과 100% 동일할 수 있는 CDRL1 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 28과 90% 이상 동일할 수 있는 CDRL2 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 28과 100% 동일할 수 있는 CDRL2 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 29와 90% 이상 동일할 수 있는 CDRL3 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 29와 100% 동일할 수 있는 CDRL3 서열을 포함할 수 있다.
상기에 열거된 경쇄 가변 도메인은 서열번호 33과 80% 이상 동일한 CDRL1 서열, 서열번호 34와 80% 이상 동일한 CDRL2 서열 및 서열번호 35와 80% 이상 동일한 CDRL3 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 33과 90% 이상 동일할 수 있는 CDRL1 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 33과 100% 동일할 수 있는 CDRL1 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 또다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 34와 90% 이상 동일할 수 있는 CDRL2 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 34와 100% 동일할 수 있는 CDRL2 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 35와 90% 이상 동일할 수 있는 CDRL3 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 또다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 35와 100% 동일할 수 있는 CDRL3 서열을 포함할 수 있다.
상기에 열거된 경쇄 가변 도메인은 서열번호 39와 80% 이상 동일한 CDRL1 서열, 서열번호 40과 80% 이상 동일한 CDRL2 서열 및 서열번호 41과 80% 이상 동일한 CDRL3 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 39와 90% 이상 동일할 수 있는 CDRL1 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 부가적인 예시 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 39와 100% 동일할 수 있는 CDRL1 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 40과 90% 이상 동일할 수 있는 CDRL2 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 40과 100% 동일할 수 있는 CDRL2 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 부가적인 예시 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 41과 90% 이상 동일할 수 있는 CDRL3 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 41과 100% 동일할 수 있는 CDRL3 서열을 포함할 수 있다.
상기 열거된 경쇄 가변 도메인은 서열번호 158과 80% 이상 동일한 CDRL1 서열, 서열번호 159와 80% 이상 동일한 CDRL2 및 서열번호 160과 80% 이상 동일한 CDRL3 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 158과 90% 이상 동일할 수 있는 CDRL1 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 158과 100% 동일할 수 있는 CDRL1 서열을 포함할 수 있다..
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 159와 90% 이상 동일할 수 있는 CDRL2 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 또다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 159와 100% 동일할 수 있는 CDRL2 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 160과 90% 이상 동일할 수 있는 CDRL3 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 또다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 160과 100% 동일할 수 있는 CDRL3 서열을 포함할 수 있다.
상기 열거된 경쇄 가변 도메인은 서열번호 164와 80% 이상 동일한 CDRL1 서열, 서열번호 165와 80% 이상 동일한 CDRL2 및 서열번호 166과 80% 이상 동일한 CDRL3 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 164와 90% 이상 동일할 수 있는 CDRL1 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 164와 100% 동일할 수 있는 CDRL1 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 부가적인 예시 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 165와 90% 이상 동일할 수 있는 CDRL2 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 165와 100% 동일할 수 있는 CDRL2 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 또다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 166과 90% 이상 동일할 수 있는 CDRL3 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 166과 100% 동일할 수 있는 CDRL3 서열을 포함할 수 있다.
상기 열거된 경쇄 가변 도메인은 서열번호 170과 80% 이상 동일한 CDRL1 서열, 서열번호 171과 80% 이상 동일한 CDRL2 서열 및 서열번호 172와 80% 이상 동일한 CDRL3 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 170과 90% 이상 동일할 수 있는 CDRL1 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 부가적인 예시 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 170과 100% 동일할 수 있는 CDRL1 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 171과 90% 이상 동일할 수 있는 CDRL2 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 또다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 171과 100% 동일할 수 있는 CDRL2 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 172와 90% 이상 동일할 수 있는 CDRL3 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 172와 100% 동일할 수 있는 CDRL3 서열을 포함할 수 있다.
변이체 항체 경쇄 가변부에 대한 예시적인 구현예는, 서열번호 16의 CDR 아미노산과 100% 동일한 CDR 아미노산 서열을 가지며 서열번호 16의 프래임워크 영역과 비교하여 이의 프래임워크 영역에 최대 22개의 아미노산 변형(예, 보존적 또는 비보존적인 아미노산 치환)이 있는, 경쇄 가변부를 포함한다. 서열번호 16의 변이체는 서열번호 178로 제공된다.
변이체 항체 경쇄 가변부에 대한 예시적인 구현예는, 서열번호 20의 CDR 아미노산과 100% 동일한 CDR 아미노산 서열을 가지며 서열번호 20의 프래임워크 영역과 비교하여 이의 프래임워크 영역에 최대 22개의 아미노산 변형(예, 보존적 또는 비보존적인 아미노산 치환)이 있는, 경쇄 가변부를 포함한다.
변이체 항체 경쇄 가변부에 대한 예시적인 구현예는, 서열번호 24의 CDR 아미노산과 100% 동일한 CDR 아미노산 서열을 가지며 서열번호 24의 프래임워크 영역과 비교하여 이의 프래임워크 영역에 최대 21개의 아미노산 변형(예, 보존적 또는 비보존적인 아미노산 치환)이 있는, 경쇄 가변부를 포함한다. 서열번호 24의 변이체는 서열번호 182로 제공된다.
변이체 항체 경쇄 가변부에 대한 예시적인 구현예는, 서열번호 105의 CDR 아미노산과 100% 동일한 CDR 아미노산 서열을 가지며 서열번호 105의 프래임워크 영역과 비교하여 이의 프래임워크 영역에 최대 22개의 아미노산 변형(예, 보존적 또는 비보존적인 아미노산 치환)이 있는, 경쇄 가변부를 포함한다.
변이체 항체 경쇄 가변부에 대한 예시적인 구현예는, 서열번호 109의 CDR 아미노산과 100% 동일한 CDR 아미노산 서열을 가지며 서열번호 109의 프래임워크 영역과 비교하여 이의 프래임워크 영역에 최대 22개의 아미노산 변형(예, 보존적 또는 비보존적인 아미노산 치환)이 있는, 경쇄 가변부를 포함한다.
변이체 항체 경쇄 가변부에 대한 예시적인 구현예는, 서열번호 126의 CDR 아미노산과 100% 동일한 CDR 아미노산 서열을 가지며 서열번호 126의 프래임워크 영역과 비교하여 이의 프래임워크 영역에 최대 21개의 아미노산 변형(예, 보존적 또는 비보존적인 아미노산 치환)이 있는, 경쇄 가변부를 포함한다.
일부 경우들에서, 변이체 항체 경쇄 가변부는 아미노산 결손 또는 부가를 (아미노산 치환과 조합하여 또는 조합하지 않고) 포함할 수 있다. 흔히 1, 2, 3, 4 또는 5개의 아미노산 결손 또는 부가가 용인될 수 있다.
예시적인 구현예에서, 항체 또는 항원 결합 단편은 서열번호 18과 80% 이상 동일한 서열, 서열번호 22와 적어도 70%, 75%, 80% 이상 동일한 서열, 서열번호 26과 적어도 70%, 75%, 80% 이상 동일한 서열, 서열번호 132와 적어도 70%, 75%, 80% 이상 동일한 서열, 서열번호 145와 적어도 70%, 75%, 80% 이상 동일한 서열, 및 서열번호 153과 적어도 70%, 75%, 80% 이상 동일한 서열로 이루어진 군으로부터 선택되는 서열을 포함하는, 중쇄 가변 도메인을 포함할 수 있다.
이들 중쇄 가변 도메인은 서열번호 30과 80% 이상 동일한 CDRH1 서열, 서열번호 31과 80% 이상 동일한 CDRH2 서열 및 서열번호 32와 80% 이상 동일한 CDRH3 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 30과 90% 이상 동일할 수 있는 CDRH1 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 30과 100% 동일할 수 있는 CDRH1 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 또다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 31과 90% 이상 동일할 수 있는 CDRH2 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 31과 100% 동일할 수 있는 CDRH2 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 또다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 32와 90% 이상 동일할 수 있는 CDRH3 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 부가적인 예시 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 32와 100% 동일할 수 있는 CDRH3 서열을 포함할 수 있다.
상기 열거된 중쇄 가변 도메인은 서열번호 36과 80% 이상 동일한 CDRH1 서열, 서열번호 37과 80% 이상 동일한 CDRH2 서열 및 서열번호 38과 80% 이상 동일한 CDRH3 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 항체 또는 항원 결합 단편을 포함할 수 있다.
본 발명의 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 36과 90% 이상 동일할 수 있는 CDRH1 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 36과 100% 동일할 수 있는 CDRH1 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 부가적인 예시 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 37과 90% 이상 동일할 수 있는 CDRH2 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 37과 100% 동일할 수 있는 CDRH2 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 38과 90% 이상 동일할 수 있는 CDRH3 서열을 포함할 수 있다..
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번 38과 100% 동일할 수 있는 CDRH3 서열을 포함할 수 있다.
상기 열거된 중쇄 가변 도메인은 서열번호 42와 80% 이상 동일한 CDRH1 서열, 서열번호 43과 80% 이상 동일한 CDRH2 서열 및 서열번호 44와 80% 이상 동일한 CDRH3 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 42와 90% 이상 동일할 수 있는 CDRH1 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 부가적인 예시 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 42와 100% 동일할 수 있는 CDRH1 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 43과 90% 이상 동일할 수 있는 CDRH2 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 43과 100% 동일할 수 있는 CDRH2 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 또다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 44와 90% 이상 동일할 수 있는 CDRH3 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 부가적인 예시 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 44와 100% 동일할 수 있는 CDRH3 서열을 포함할 수 있다.
상기 열거된 중쇄 가변 도메인은 서열번호 161과 80% 이상 동일한 CDRH1 서열, 서열번호 162와 80% 이상 동일한 CDRH2 서열 및 서열번호 162과 80% 이상 동일한 CDRH3 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 161과 90% 이상 동일할 수 있는 CDRH1 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 161과 100% 동일할 수 있는 CDRH1 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 162와 90% 이상 동일할 수 있는 CDRH2 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 부가적인 예시 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 162와 100% 동일할 수 있는 CDRH2 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 163과 90% 이상 동일할 수 있는 CDRH3 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 또다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 163과 100% 동일할 수 있는 CDRH3 서열을 포함할 수 있다.
상기 열거된 중쇄 가변 도메인은 서열번호 167과 80% 이상 동일한 CDRH1 서열, 서열번호 168과 80% 이상 동일한 CDRH2 서열 및 서열번호 169와 80% 이상 동일한 CDRH3 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 166과 90% 이상 동일할 수 있는 CDRH1 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 166과 100% 동일할 수 있는 CDRH1 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 부가적인 예시 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 168과 90% 이상 동일할 수 있는 CDRH2 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 168과 100% 동일할 수 있는 CDRH2 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 부가적인 예시 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 169와 90% 이상 동일할 수 있는 CDRH3 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 169와 100% 동일할 수 있는 CDRH3 서열을 포함할 수 있다.
상기 열거된 중쇄 가변 도메인은 서열번호 173과 80% 이상 동일한 CDRH1 서열, 서열번호 174와 80% 이상 동일한 CDRH2 서열 및 서열번호 175와 80% 이상 동일한 CDRH3 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 173과 90% 이상 동일할 수 있는 CDRH1 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 173과 100% 동일할 수 있는 CDRH1 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 부가적인 예시 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 174와 90% 이상 동일할 수 있는 CDRH2 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 174와 100% 동일할 수 있는 CDRH2 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 175와 90% 이상 동일할 수 있는 CDRH3 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 또다른 예시적인 구현예에서, 본원에 제공되는 임의의 항체는 서열번호 175와 100% 동일할 수 있는 CDRH3 서열을 포함할 수 있다.
변이체 항체 중쇄 가변부에 대한 예시적인 구현예는, 서열번호 18의 CDR 아미노산과 100% 동일한 CDR 아미노산 서열을 가지며 서열번호 18의 프래임워크 영역과 비교하여 이의 프래임워크 영역에 최대 22개의 아미노산 변형(예, 보존적 또는 비보존적인 아미노산 치환)이 있는, 중쇄 가변부를 포함한다. 서열번호 18의 변이체는 서열번호 179에 제공된다.
변이체 항체 중쇄 가변부에 대한 예시적인 구현예는, 서열번호 22의 CDR 아미노산과 100% 동일한 CDR 아미노산 서열을 가지며 서열번호 22의 프래임워크 영역과 비교하여 이의 프래임워크 영역에 최대 23개의 아미노산 변형(예, 보존적 또는 비보존적인 아미노산 치환)이 있는, 중쇄 가변부를 포함한다.
변이체 항체 중쇄 가변부에 대한 예시적인 구현예는, 서열번호 26의 CDR 아미노산과 100% 동일한 CDR 아미노산 서열을 가지며 서열번호 26의 프래임워크 영역과 비교하여 이의 프래임워크 영역에 최대 23개의 아미노산 변형(예, 보존적 또는 비보존적인 아미노산 치환)이 있는, 중쇄 가변부를 포함한다. 서열번호 26의 변이체는 서열번호 183으로 제공된다.
변이체 항체 중쇄 가변부에 대한 예시적인 구현예는, 서열번호 132의 CDR 아미노산과 100% 동일한 CDR 아미노산 서열을 가지며 서열번호 132의 프래임워크 영역과 비교하여 이의 프래임워크 영역에 최대 23개의 아미노산 변형(예, 보존적 또는 비보존적인 아미노산 치환)이 있는, 중쇄 가변부를 포함한다.
변이체 항체 중쇄 가변부에 대한 예시적인 구현예는, 서열번호 153의 CDR 아미노산과 100% 동일한 CDR 아미노산 서열을 가지며 서열번호 153의 프래임워크 영역과 비교하여 이의 프래임워크 영역에 최대 23개의 아미노산 변형(예, 보존적 또는 비보존적인 아미노산 치환)이 있는, 중쇄 가변부를 포함한다.
변이체 항체 중쇄 가변부에 대한 예시적인 구현예는, 서열번호 145의 CDR 아미노산과 100% 동일한 CDR 아미노산 서열을 가지며 서열번호 145의 프래임워크 영역과 비교하여 이의 프래임워크 영역에 최대 22개의 아미노산 변형(예, 보존적 또는 비보존적인 아미노산 치환)이 있는, 중쇄 가변부를 포함한다.
일부 경우들에서, 변이체 항체 중쇄 가변부는 아미노산 결손 또는 부가를 (아미노산 치환과 조합하여 또는 조합하지 않고) 포함할 수 있다. 흔히 1, 2, 3, 4 또는 5개의 아미노산 결손 또는 부가가 용인될 수 있다.
세포에서의 항체 생산
본원에 기술된 항-KAAG1 항체는 하이브리도마 방법과 같이 당해 기술 분야의 당업자에게 익숙한 여러가지 방법들에 의해 또는 재조합 DNA 방법에 의해 제조할 수 있다.
본 발명의 예시적인 구현예에서, 항-KAAG1 항체는 마우스를 항원으로 면역화한 다음, 비장 세포를 분리하여 이를 HGPRT 발현이 없는 골수종 세포와 융합시킨 후, 하이폭산틴, 아미노프테린 및 티민(HAT) 함유성 배지에서 하이브리드 세포를 선별하는, 통상적인 하이브리도마 기법으로 제조할 수 있다.
본 발명의 추가적인 예시 구현예에서, 항-KAAG1 항체는 재조합 DNA 방법으로 제조할 수 있다.
항-KAAG1 항체를 발현시키기 위해, 본원에 기술된 경쇄 및 중쇄 면역글로불린 증 임의의 한가지를 실현시킬 수 있는 뉴클레오티드 서열 또는 임의의 다른 것을 발현 벡터, 즉 특정 숙주에서 삽입된 코딩 서열의 전사 및 번역 조절을 위한 인자들이 포함된 벡터에 삽입할 수 있다. 이러한 인자는 조절 서열, 예컨대 인핸서, 구성적인(constitutive) 프로모터, 유도성 프로모터, 5'-비번역부 및 3'-비번역부를 포함할 수 있다. 당해 기술 분야의 당업자에게 잘 알려져 있는 방법들을 이용하여 이러한 발현 벡터를 구축할 수 있다. 이러한 방법들로는 시험관내 재조합 DNA 기법, 합성 기법 및 생체내 유전자 재조합을 포함한다.
당해 기술 분야의 당업자에게 공지된 다양한 발현 벡터/숙주 세포 시스템을 이용하여 본원에 기술된 경쇄 및 중쇄 면역글로불린 중 임의의 하나를 코딩할 수 있는 뉴클레오티드 서열로부터 유래된 폴리펩타이드나 RNA를 발현시킬 수 있다. 이러한 것으로는, 비제한적으로, 미생물, 예컨대 재조합 박테리오파지, 플라스미드 또는 코스미드 DNA 발현 벡터로 형질전환된 박테리아; 효모 발현 벡터로 형질전환된 효모; 베큘로바이러스 벡터로 감염된 곤충 세포 시스템; 바이러스 또는 박테리아 발현 벡터로 형질감염된 식물 세포 시스템; 또는 동물 세포 시스템이 있다. 포유류 시스템에서 재조합 단백질을 장기간 생산하기 위해서는, 세포주에서의 안정적인 발현이 이루어져야 할 수 있다. 예를 들어, 본원에 기술된 경쇄 및 중쇄 면역글로불린 중 어느 하나를 코딩할 수 있는 뉴클레오티드 서열을, 복제 오리진 및/또는 내인성 발현 인자들, 그리고 동일하거나 상이한 벡터 상에 있는 선별 마커나 가시적인 마커를 포함할 수 있는 발현 벡터를 이용하여, 세포주에 형질전환시킬 수 있다. 본 발명은 사용되는 벡터나 숙주 세포를 한정하지 않는다. 본 발명의 특정 구현예에서, 본원에 기술된 경쇄 및 중쇄 면역글로불린 중 임의의 하나를 코딩할 수 있는 뉴클레오티드 서열은 각각 분리된 발현 벡터에 삽입하여 각각의 체인을 개별적으로 발현시킬 수 있다. 다른 구현예에서, 본원에 기술된 경쇄 및 중쇄 면역글로불린 중 임의의 하나를 코딩할 수 있는 경쇄와 중쇄 둘다를 단일 발현 벡터에 삽입하여, 동시에 발현시킬 수 있다.
다른 구현예에서, RNA 및/또는 폴리펩타이드는 시험관내 전사 시스템 또는 커플링된 시험관내 전사/번역 시스템을 각각 이용하여, 본원에 기술된 경쇄 및 중쇄 면역글로불린 중 임의의 하나를 코딩할 수 있는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 벡터로부터 발현시킬 수 있다.
대게, 본원에 기술된 경쇄 및 중쇄 면역글로불린 중 임의의 하나를 코딩할 수 있는 뉴클레오티드 서열을 포함하며 및/또는 본원에 기술된 경쇄 및 중쇄 면역글로불린 중 임의의 하나를 코딩할 수 있는 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 폴리펩타이드 또는 이의 일부분을 발현하는, 숙주 세포는 당해 기술 분야의 당업자에게 공지된 다양한 방법으로 동정할 수 있다. 이러한 방법들로는, DNA/DNA 또는 DNA/RNA 혼성화, PCR 증폭 및 핵산이나 아미노산 서열을 검출 및/또는 정량하기 위한 막, 용액 또는 칩을 이용한 기법을 포함하는, 단백질 생분석이나 면역분석 기법이 있으나, 이들로 한정되는 것은 아니다. 특이적인 다클론 또는 단일클론 항체 중 어느 하나를 이용하여 폴리펩타이드의 발현을 검출 및 측정하기 위한 면역학적 방법들은 당해 기술 분야에 공지되어 있다. 이러한 기법의 예로는 효소-연계된 면역흡착 분석(ELISA), 방사능 면역 분석(RIA) 및 형광 활성화된 세포 분류(FACS)가 있다. 당해 기술 분야의 당업자는 본 발명에 이들 방법들을 쉽게 적용할 수 있다.
본원에 기술된 경쇄 및 중쇄 면역글로불린 중 임의의 하나를 코딩할 수 있는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 숙주 세포는, 따라서, 세포 배양에서 대응되는 RNA(mRNA, siRNA, shRNA 등)의 전사 및/또는 폴리펩타이드의 발현을 위한 조건 하에 배양할 수 있다. 세포에 의해 생산되는 폴리펩타이드는 사용되는 서열 및/또는 벡터에 따라서 분비되거나 세포내에 잔류할 수 있다. 예시적인 구현예에서, 본원에 기술된 경쇄 및 중쇄 면역글로불린 중 임의의 하나를 코딩할 수 있는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 발현 벡터는, 원색 또는 진핵 생물의 세포막을 통해 폴리펩타이드의 분비를 지시하는 신호 서열을 포함하게 설계될 수 있다.
유전자 코드의 고유한 축퇴(degeneracy)로 인해, 동일한, 실질적으로 동일한 또는 기능적으로 등가의 아미노산 서열을 코딩하는 다른 DNA 서열을, 예컨대 본원에 기술된 경쇄 및 중쇄 면역글로불린 중 임의의 하나를 코딩할 수 있는 뉴클레오티드 서열에 의해 코딩되는 폴리펩타이드를 발현하기 위해, 제조하여 사용할 수 있다. 본 발명의 뉴클레오티드 서열은 본원에 기술된 경쇄 및 중쇄 면역글로불린 중 임의의 하나를 코딩할 수 있다. 본 발명의 뉴클레오티드 서열은, 비제한적으로 유전자 산물의 클로닝, 프로세싱 및/또는 발현의 변형 등의 다양한 목적으로 뉴클레오티드 서열을 변형시키기 위해, 당해 기술 분야에 일반적으로 공지된 방법을 이용하여 조작할 수 있다. 랜덤 분절화(fragmentation) 및 유전자 단편들과 합성 올리고뉴클레오티드의 PCR 재조립에 의한 DNA 셔플링(shuffling)을 이용하여 뉴클레오티드 서열을 조작할 수 있다. 예컨대, 올리고뉴클레오티드-매개 부위 특이적인 돌연변이화를 이용하여 새로운 제한 효소 부위 생성, 당화 패턴 변형, 코돈 선호성 변화, 스플라이스 변이체 생산 등을 발생시키는 돌연변이를 도입할 수 있다.
또한, 삽입된 서열의 발현을 조절하거나 또는 발현되는 폴리펩타이드는 원하는 방식으로 가공할 수 있는 능력으로 숙주 세포 균주를 선택할 수 있다. 이러한 폴리펩타이드의 변형은 아세틸화, 카르복실화, 당화, 인산화, 지질화(lipidation) 및 아실화를 포함하나, 이것으로만 한정되는 것은 아니다. 예시적인 구현예에서, 특정 당화 구조 또는 패턴을 포함하는 항-KAAG1 항체가 바람직할 수 있다. 폴리펩타이드의 "프리프로" 형태를 잘라내는, 번역 후 가공도 사용하여 단백질 표적성, 폴딩 및/또는 활성을 특정화할 수 있다. 번역 후 작용에 위한 특이적인 세포 기구 및 특정 기전을 가지는 여러가지 숙주 세포(예, CHO, HeLa, MDCK, HEK293, 및 W138)들은 상업적으로 이용가능하며, 미국 세포주 은행(ATCC)로부터 입수할 수 있으며, 발현되는 폴리펩타이드의 정확한 변형 및 가공이 이루어지도록 선택할 수 있다.
당해 기술 분야의 당업자는, 천연, 변형된 또는 재조합 핵산 서열을 이종 서열과 연결하여, 전술한 임의의 숙주 시스템에서 이종 폴리펩타이드 모이어티를 포함하는 융합 폴리펩타이드가 번역되게 할 수 있다. 이러한 이종 폴리펩타이드 모이어티는 상업적으로 이용가능한 친화성 매트릭스를 이용하여 융합 폴리펩타이드의 정제를 쉽게 해 줄 수 있다. 이러한 모이어티로는, 글루타티온 S-트랜스퍼라제(GST), 말토스 결합 단백질, 티오레독신, 칼모듈린 결합 펩타이드, 6-His(His), FLAG, c-myc, 햄어글루티닌(HA) 및 단일클론 항체 에피토프와 같은 항체 에피토프가 있으나, 이로 한정되는 것은 아니다.
다른 추가적인 측면에서, 본 발명은 융합 단백질을 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 포함할 수 있는 폴리뉴클레오티드에 관한 것이다. 상기 융합 단백질은 본원에 언급된 폴리펩타이드(예, 완전한 경쇄, 완전한 중쇄, 가변부, CDR 등)에 융합되는 융합 파트너(예, HA, Fc 등)를 포함할 수 있다.
또한, 당해 기술 분야의 당업자는, 핵산 및 폴리펩타이드 서열을 전부 또는 일부를 당해 기술 분야에 공지된 화학적 또는 효소적 방법을 이용하여 합성할 수 있다는 것을 쉽게 알 것이다. 예컨대, 펩타이드 합성은 다양한 고상 기법을 이용하여 수행할 수 있으며, ABI 431A 펩타이드 합성기(PE Biosystems)와 같은 장치를 이용하여 합성을 자동화할 수 있다. 필요에 따라, 아미노산 서열은 변이체 단백질을 제조하기 위해 합성하는 동안에 변형을 가하거나 및/또는 다른 단백질 유래의 서열과 조합할 수 있다.
항체 접합체
본 발명의 항체 또는 항원 결합 단편은 검출성 모이어티(즉, 검출 또는 진단 목적) 또는 치료학적 모이어티(치료 목적)와 접합시킬 수 있다.
"검출성 모이어티"는 분광 분석, 광화학, 생화학, 면역화학, 화학 및/또는 그외 물리적 수단에 의해 검출할 수 있는 모이어티이다. 검출성 모이어티는 당해 기술 분야에 잘 알려진 방법을 이용하여 본 발명의 항체 및 이의 항원 결합 단편에 직접 및/또는 간접(예컨대, 비제한적으로 DOTA 또는 NHS 연결과 같은 연결을 통해)적으로 커플링시킬 수 있다. 매우 다양한 검출성 모이어티를 필수 민감도, 접합 용이성, 안정성 요건 및 이용가능한 기기에 따라 선택적으로 사용할 수 있다. 적합한 검출성 모이어티로는, 형광 표지, 방사성 표지(예, 비제한적으로, 125I, In111, Tc99, I131, PET 스캐너용 양전자 방출 동위원소가 포함됨), 핵 자기 공명 활성 표지, 발광 표지, 화학발광 표지, 발색단 표지, 표소 표지(예, 서양고추냉이 퍼옥시다제, 알카리 포스파타제 등이 비제한적으로 포함됨), 양자 도트 및/또는 나노입자가 있으나, 이로 한정되는 것은 아니다. 검출성 모이어티는 검출성 신호를 야기 및/또는 발생시킬 수 있어, 검출성 모이어티로부터의 신호 검출이 가능하다.
본 발명의 다른 예시적인 구현예에서, 항체 또는 항원 결합 단편은 치료학적 모이어티(예, 약물, 세포독성 모이어티)와 커플링(변형)시킬 수 있다.
예시적인 구현예에서, 항-KAAG1 항체 및 항원 결합 단편은 화학치료제 또는 세포독성제를 포함할 수 있다. 예컨대, 항체 및 항원 결합 단편은 화학치료제 또는 세포독성제와 접합시킬 수 있다. 이러한 화학치료제 또는 세포독성제로는, 이트륨-90, 스칸듐-47, 레늄-186, 요오드-131, 요오드-125, 및 당해 기술 분야의 당업자가 인지하는 다른 다수의 물질(예, 루테튬(예, Lu177), 비스무스(예, Bi213), 구리(예, Cu67))을 포함하나, 이것으로 한정되는 것은 아니다. 다른 예로, 화학치료제 또는 세포독성제는 당해 기술 분야의 당업자에게 공지된 그외 물질들 중에서도, 5-플루오로우라실, 아드리아마이신, 이리노테칸, 탁산, 슈도모나스 엔도톡신, 리신 및 그외 독소들로 구성될 수 있다.
다른 구현예에서, 본 발명의 방법을 당해 기술 분야에 공지된 바와 같이 수행하기 위해, 본 발명의 (접합되거나 접합되지 않은) 항체 또는 항원 결합 단편은, 본 발명의 항체 또는 항원 결합 단편에 특이적으로 결합시킬 수 있으며, 바람직한 검출가능한 모이어티, 진단 모이어티 또는 치료학적 모이어티를 수송(carry)할 수 있는, 제2 분자와 조합하여 사용할 수 있다.
항체의 약학 조성물 및 이의 용도
(접합되거나 접합되지 않은) 항-KAAG1 항체의 약학 조성물도 본 발명에 포함된다. 약학 조성물은 항-KAAG1 항체 또는 항원 결합 단편을 포함할 수 있으며, 또한 제약학적으로 허용가능한 담체를 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 측면은 본원에 기술된 항체 또는 항원 결합 단편 및 담체를 포함할 수 있는 조성물에 관한 것이다.
또한, 본 발명은 본원에 기술되 항체 또는 항원 결합 단편과 제약학적으로 허용가능한 담체를 포함할 수 있는, 약학 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 또다른 측면은 난소암의 치료 또는 진단에서 본원에 기술된 분리된 항체 또는 항원 결합 단편의 용도에 관한 것이다.
약학 조성물은, 활성 성분 외에도, 물, PBS, 염 용액, 젤라틴, 오일, 알코올 및 그외 부형제를 포함하여 약학적으로 허용가능한 담체와 활성 화합물을 제약학적으로 사용할 수 있는 조제물로의 가공을 쉽게 하는 보조제를 포함할 수 있다. 다른 예로, 이러한 조제물은 멸균할 수 있다.
본원에서, "약학 조성물"은 치료학적 유효량의 제제 및 제약학적으로 허용가능한 희석제, 보존제, 가용화제, 유화제, 보강제 및/또는 담체를 의미한다. 본원에서 "치료학적 유효량"은 주어진 조건 및 투여 요법에서 치료 효과를 제공하는 양을 지칭한다. 이러한 조성물은 액체이거나, 동결건조되거나 건조된 제형이며, 다양한 완충제 함량의 희석액(예, Tris-HCl, 아세테이트, 포스페이트), pH 및 이온 세기, 표면으로의 흡착을 예방하기 위한 알부민 또는 젤라틴과 같은 첨가제, 디터전트(예, 트윈20, 트윈80, Pluronic F68, 담즙산염)를 포함한다. 가용화제(예, 글리세롤, 폴리에틸렌 글리세롤), 항산화제(예, 아스코르브산, 소듐 메타비설파이트), 보존제(예, 티메로살, 벤질 알코올, 파라벤), 팽화(bulking) 물질 또는 삼투성 조절제(Tonicity modifier)(예, 락토스, 만니톨), 단백질에 폴리에틸렌 글리콜과 같은 폴리머의 공유 결합, 금속 이온과의 착물, 또는 폴리락트산, 폴리글리콜산, 하이드로겔 등의 폴리머 화합물의 입자 조제물내에 또는 상에, 또는 리포좀, 마이크로에멀젼, 마이셀, 단층 또는 다층 베지클, 적혈구 고스트 또는 구상 원시세포(Spheroplast) 내에 또는 상에, 물질의 병합. 이러한 조성물들은 물리적 상태, 용해성, 안정성, 생체내 방출율 및 생체내 소거율을 간섭하게 될 것이다. 조절형 방출 또는 서방형 조성물은 친지성 데포트(depot)(예, 지방산, 왁스, 오일) 제형을 포함한다. 또한, 본 발명은 폴리머(예, 폴록사머 또는 폴록사민)로 코팅된 입자 조성물을 포함한다. 본 발명의 조성물에 대한 다른 구현예는, 입자 형태, 보호 코팅제, 프로테아제 저해제 또는 비경구, 폐, 코, 구강, 질, 직장 경로 등의 다양한 투여 경로를 위한 투과 증강제를 포함한다. 일 구현예에서, 약학 조성물은 비경구로, 암 주변으로(paracancer) , 경점막으로, 경피로, 근육내로, 정맥내로, 진피내로, 피하로, 복막내로, 실내로(intraventricularly), 뇌내로 및 종양내로 투여된다.
나아가, 본원에서, "제약학적으로 허용가능한 담체" 또는 "제약학적 담체"는 당해 기술 분야에 공지되어 있으며, 비제한적으로 0.01-0.1 M 또는 0.05 M의 포스페이트 완충제 또는 0.8 % 염수를 포함한다. 아울러, 이들 제약학적으로 허용가능한 담체는 수성 또는 비수성 용액, 현탁액 및 에멀젼일 수 있다. 비수성 용매의 예는 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 식물성 오일, 예컨대 올리브 오일, 및 주사용 유기 에스테르, 예컨대 에틸 올레이트가 있다. 수성 담체로는 물, 알코올성/수성 용매, 에멀젼 또는 현탁액, 예컨대 염수 및 완충화된 매질이 있다. 비경구 비히클로는 소듐 클로라이드 용액, 링거 덱스트로스, 덱스트로스 및 소듐 클로라이드, 락테이트 처리된 링거 오일 또는 고정유를 포함한다. 정맥내 비히클로는 체액 및 영양분 보충제, 전해질 보총제, 예컨대 링거 덱스트로스를 기본 성분으로 한 것 등을 포함한다. 또한, 보존제 및 그외 첨가제, 예컨대 항균제, 항산화제, 대조제, 불활성 기체 등도 포함될 수 있다.
임의의 화합물에 대한, 치료학적 유효량은 세포 배양 분석이나 또는 마우스, 랫, 토끼, 개 또는 돼지와 같은 동물 모델에서 먼저 추산할 수 있다. 또한, 동물 모델을 사용하여 농도 범위와 투여 경로를 정할 수 있다. 이러한 정보는 이후에 사용하여 인간에 대한 사용가능한 투여량과 투여 경로를 정할 수 있다. 이러한 기법들은 당해 기술 분야의 당업자들에게 잘 알려져 있으며, 치료학적 유효량은 활성 성분이 증상 또는 병태를 완화시키는 양을 지칭한다. 치료 효능과 독성은 세포 배양의 표준적인 약리학적 절차에 의해 결정하거나, 또는 실험 동물을 이용하여, 예컨대 ED50(집단 50%에 치료학적으로 유효한 용량) 및 LD50(집단 50%에 치사 효과를 나타내는 용량) 통계치를 계산하고 대조하여, 정할 수 있다. 상기에 언급되는 임의의 치료 조성물들은 비제한적으로 개, 고양이, 소, 말, 토끼, 원숭이 및 인간 등의 포유류를 비롯하여, 그러한 치료가 필요한 임의의 개체에게 적용할 수 있다.
본 발명에 사용되는 약학 조성물은 비제한적으로 경구, 정맥내, 근육내, 동맥내, 수질내(intramedullary), 수막강내(intrathecal), 심실내, 경피, 피하, 복막내, 비강내, 장, 국소, 설하 또는 직장 수단을 비롯한 임의의 다수의 경로를 통해 투여될 수 있다.
본원에 기술된 목적에서, 용어 "치료"는, 개체에서 표적화된 병증 증상이나 장애가 예방되거나 약화(완화)되는, 치료학적 치료와 예방학적 또는 예방적 조치 둘다를 의미한다. 치료가 필요한 개체로는 장애에 이미 걸린 개체 뿐만 아니라 장애에 걸리기 쉬운 개체 또는 장애가 예방되어야 하는 개체를 포함한다.
항-KAAG1 항체 및 이의 항원 결합 단편은 난소암, 신장암, 대장암, 폐암, 흑색종 등의 다양한 타입의 암의 치료에 치료학적 용도를 가질 수 있다. 예시적인 구현예에서, 항체 및 단편은 난소암에 대해 치료학적 용도를 가질다. 특정 예로, 항-KAAG1 항체 및 단편은 KAAG1을 발현하는 암 세포와 상호작용하여, ADCC를 매개하여 면역학적 반응을 유도할 수 있다. 다른 예로, 항-KAAG1 항체 및 단편은 KAAG1과 이의 단백질 파트너 간의 상호작용을 차단할 수 있다.
항-KAAG1 항체 및 이의 항원 결합 단편은 다양한 타입의 난소암의 치료에 치료학적 용도를 가질 수 있다. 몇가지 상이한 세포 타입들은 상이한 난소암 조직형을 발생시킬 수 있다. 난소암의 가장 흔한 형태는 난소 또는 나팔관의 상피 세포층에서 기원한 종양으로 구성된다. 이러한 상피 난소암으로는 장액성 종양, 자궁내막성(endometrioid) 종양, 점액성 종양, 투명 세포 종양 및 경계선 종양을 포함한다. 다른 구현예에서, 항-KAAG1 항체 및 이의 항원 결합 단편은 생식세포(germ line) 또는 성삭(sex cord) 난소암과 같은 다른 타입의 난소암의 치료에 사용된다.
특정 예에서, 항-KAAG1 항체 및 이의 항원 결합 단편은 동일한 병태에 대해 제공되는 다른 치료와 조합하여 동시에 투여할 수 있다. 이와 같이, 항체는 세포분열 저해제(anti-mitotic, 예 탁산), 플라티늄-기반의 제제(예, 시스플라스틴), DNA 손상 유발제(예, 독소루비신) 및 당해 기술 분야의 당업자에게 공지된 그외 항암제와 함께 투여할 수 있다. 다른 예로, 항-KAAG1 항체 및 이의 항원 결합 단편은 다른 치료 항체들과 함께 투여할 수 있다. 이러한 것으로는, EGFR, CD-20 및 Her2를 표적하는 항체들이 있지만, 이들로 한정되는 것은 아니다.
본 발명은, 또다른 측면에서, 본원에 기재된 항체 또는 항원 결합 단편을 유효량으로 세포에 접촉시키는 단계를 포함할 수 있는, KAAG1-발현 세포의 증식을 저해하는 방법에 관한 것이다.
또한, 본 발명은, 본원에 기술된 항체 또는 항원 결합 단편을 필요한 포유류에게 투여하는 단계를 포함할 수 있는, 포유류에서 KAAG1-발현 세포의 증식을 저해하거나 암을 치료하는 방법을 포함한다.
다른 측면에서, 본 발명은, 본 발명의 항체 또는 항원 결합 단편을 이용한 치료 방법, 진단 방법 및 검출 방법과, 그러한 목적의 약학 조성물 또는 약제의 제조에 있어서의 이들 항체 또는 항원 결합 단편의 용도를 제공한다.
본 발명에 포함되는 치료 방법은, 본원의 항체 또는 항원 결합 단편을 필요로 하는 포유류에게, 특히 암 환자나 암에 걸리기 쉬운 환자에게 투여하는 단계를 포함한다.
또한, 본 발명은, 분리된 항체 또는 항원 결합 단편을 필요로 하는 포유류에게 투여하는 단계를 포함할 수 있는, 종양 전파, 종양 침투, 종양 형성을 감소시키거나 또는 종양의 세포 용해(lysis)를 유도하는 방법을 제공한다.
따라서, 본 발명은 암 치료, 종양 전파, 종양 침투, 종양 형성을 감소시키거나 또는 KAAG1-발현성 종양 세포의 종양 세포 용해(lysis)를 유도(또는 이를 위한 약학 조성물의 제조)하는데 있어서의, 본원의 분리된 항체의 용도에 관한 것이다.
항체 또는 항원 결합 단편은 예컨대 전이 능력을 가지는 악성 종양 및/또는 고정-비의존적인 증식이 특징인 종양 세포를 비롯한, 악성 종양에 특히 적용할 수 있다. 또한, 본 발명의 항체 또는 항원 결합 단편은 암 진단에도 사용할 수 있다. 암 진단은 본 발명의 항체 또는 항원 결합 단편을 암 환자나 암 환자로 의심되는 포유류에게 투여함으로써, 생체내에서 이루어질 수 있다. 또한, 진단은 포유류로부터 수득한 샘플에 항체 또는 항원 결합 단편을 접촉시킨 다음, KAAG1 발현 세포(종양 세포)의 존재 또는 부재를 결정함으로써, 생체외에서 수행할 수 있다.
또한, 본 발명은, 본원의 항체 또는 항원 결합 단편을 필요로 하는 포유류에게 투여하는 단계를 포함할 수 있는, 포유류에서 KAAG1 발현 세포를 검출하거나 암을 검출하는 방법을 포함한다.
본 발명은, 다른 측면에서, 본원에 기술된 항체 또는 항원 결합 단편을 세포에 접촉하는 단계 및 상기 항체와 KAAG1-발현성 세포에 의해 형성된 복합체를 검출하는 단계를 포함할 수 있는, KAAG1-발현성 세포의 검출 방법에 관한 것이다. 검출 방법에 사용되는 항체 또는 항원 결합 단편의 예시적인 구현예는 KAAG1의 세포외 영역에 결합할 수 있는 것이 있다.
검출 방법에 사용되는 항체 또는 항원 결합 단편에 대한 다른 예시적인 구현예로는, 종양 세포의 표면에서 발현되는 KAAG1에 결합하는 것이다.
본원에 기술된 치료, 검출 또는 진단 방법이 유익할 수 있는 환자는, (예, 장액성, 자궁내막형, 투명 세포 또는 점액성) 난소암, 피부암(예, 흑색종, 편평 세포 암종), 신장암(예, 유두상 세포암, 투명 세포암), 대장암(예, 대장 암종), 육종, 백혈병, 뇌종양, 갑상선 종양, 유방암(예, 유선 암종), 전립선암(예, 전립선 암종), 식도 종양, 방광 종양, 폐 종양(예, 폐 암종) 또는 두경부 종양에 걸린 환자나 의심되는 환자이며, 특히 암이 악성인 것으로 특정되거나 및/또는 KAAG1-발현성 세포가 고정-비의존적인 증식으로 특정되는, 환자나 의심되는 환자이다.
특히 본 발명은 난소암(예, 장액성, 자궁내막성, 투명세포 또는 점액성 난소암), 피부암(예, 흑색종, 편평 세포 암종) 또는 신장암(예, 유두상 세포 암종)에 걸린 환자나 의심 환자, 특히 암이 악성인 것으로 특정되는 경우 및/또는 KAAG1-발현성 세포가 고정-비의존적인 증식으로 특정되는, 경우를 포함한다.
본 발명의 다른 측면은, KAAG1(서열번호 2), 서열번호 2와 서열 동일성이 80% 이상인 KAAG1 변이체, 또는 KAAG1 또는 KAAG1 변이체의 분비형이나 순환형을 검출하는 방법에 관한 것으로, 이 방법은 KAAG1 또는 KAAG1 변이체를 발현하는 세포 또는 KAAG1 또는 KAAG1 변이체를 포함하거나 포함하는 것으로 의심되는 샘플(생검, 혈청, 혈장, 뇨 등)에 본원에 기술된 항체 또는 항원 결합 단편을 접촉시키는 단계 및 결합을 측정하는 단계를 포함할 수 있다. 상기 샘플은 암(예, 난소암)을 가지고 있을 수 있거나, 또는 암(예, 난소암)이 의심될 수 있는 포유류(예, 인간)으로부터 기원할 수 있다. 샘플은 포유류로부터 수득한 조직 샘플이거나 세포 배양 상층물일 수 있다.
본 발명에서, 샘플은 포유류로부터 수득되는 혈청 샘플, 혈장 샘플, 혈액 샘플 또는 복수 체액일 수 있다. 본원에 기술된 항체 또는 항원 결합 단편은 KAAG1의 분비형 또는 순환형(혈액에서 순환되는 형태)를 검출하는데 유익할 수 있다.
본 발명은 KAAG1 또는 KAAG1 변이체에 항체 또는 항원 결합 단편 결합에 의해 형성되는 복합체를 정량하는 단계를 포함할 수도 있다.
항원에 항체의 결합은 항원의 기대 분자량 증가를 야기할 것이다. 따라서, 물리적 변화는 항체 또는 항원 결합 단편과 항원의 특이적인 결합시에 이루어진다.
이러한 변화는, 예컨대 전기 영동 후 웨스턴 블롯 및 겔 또는 블롯의 착색, 질량 분광측정, 컴퓨터와 연결된 HPLC 등을 이용하여 검출할 수 있다. 분자량 변화를 컴퓨터로 처리할 수 있는 장치는 당해 기술 분야에 공지되어 있으며, 그 예로 PhosphorimagerTM가 있다.
항체가 예컨대 검출성 표지를 포함하고 있는 경우, 항원-항체 복합체는 표지에 의해 방출되는 형광, 표지의 방사선 방사, 이의 기질을 이용하여 제공되는 표지의 효소 활성에 의해 검출할 수 있다.
항체 또는 항원 결합 단편과 항원 간의 결합을 검출 및/또는 측정하는 것은 당해 기술 분야에 공지된 다양한 방법들로 수행할 수 있다. 항체 또는 항원 결합 단편과 항원 간의 결합은 검출성 표지에 의해 방출되는 신호(방사선 방출, 형광 또는 색 변화 등)를 검출할 수 있는 장치로 모니터링할 수 있다. 그러한 장치들은 이루어진 결합을 보여주는 데이타를 제공하며, 또한 항원에 결합된 항원의 양에 대한 표시를 제공할 수도 있다. 또한, 장치는 (일반적으로 컴퓨터와 커플링되어) 백그라운드 신호(예, 항원-항체 결합이 없는 상태에서 수득되는 신호) 또는 백그라운드 노이즈와 특이적인 항원-항체 결합시에 수득되는 신호 사이의 차이를 계산할 수 있다. 이러한 장치들은 따라서 워항원이 검출되었는지 또는 그렇지 않은지에 대한 표시와 결론을 사용자에게 제공할 수 있다.
본 발명의 추가적인 측면은 본원에 기술된 하나 이상의 항체 또는 항원 결합 단편이 들어있는 하나 이상의 용기를 포함할 수 있는 키트에 관한 것이다.
핵산, 벡터 및 세포
항체는 일반적으로 경쇄 및 중쇄를 코딩하는 핵산 서열을 포함하는 벡터(들)에서 발현되는 경쇄와 중쇄의 발현이 가능한 세포에서 만들어진다.
이에, 본 발명은 본원에 기술된, 임의의, CDR, 경쇄 가변 도메인, 중쇄 가변 도메인, 경쇄, 중쇄를 코딩할 수 있는 핵산을 포함한다.
따라서, 본 발명은, 다른 측면에서, KAAG1에 특이적으로 결합할 수 있는 항체의 경쇄 가변 도메인 및/또는 중쇄 가변 도메인을 코딩하는 핵산에 관한 것이다.
본 발명의 일 구현예에서, 핵산은 KAAG1-발현성 종양 세포의 사멸(제거, 파괴, 세포 용해)을 유도할 수도 있는 항체의 경쇄 가변 도메인 및/또는 중쇄 가변 도메인을 특히 코딩할 수 있다.
본 발명의 다른 구현예에서, 핵산은 특히 KAAG1-발현성 종양 세포의 전파를 낮출 수 있는 항체의 경쇄 가변 도메인 및/또는 중쇄 가변 도메인을 코딩할 수 있다.
본 발명의 또다른 구현예에서, 핵산은 특히 KAAG1-발현성 종양의 형성을 낮추거나 해칠 수 있는 항체의 경쇄 가변 도메인 및/또는 중쇄 가변 도메인을 코딩할 수 있다.
본 발명의 핵산에 대한 예시적인 구현예는, 하기를 포함하는 경쇄 가변 도메인을 코딩하는 핵산을 포함한다:
a. 서열번호 74 및 서열번호 75로 이루어진 군으로부터 선택되는 CDRL1 서열;
b. 서열번호 76, 서열번호 77 및 서열번호 78로 이루어진 군으로부터 선택되는 CDRL2 서열; 또는
c. 서열번호 79, 서열번호 80 및 서열번호 81로 이루어진 군으로부터 선택되는 CDRL3 서열.
본 발명에서, 핵산은 CDRL1, CDRL2 또는 CDRL3 중 2종 이상의 CDR을 포함할 수 있는 경쇄 가변 도메인을 코딩할 수 있다.
또한, 본 발명에서, 핵산은 CDRL1 하나, CDRL2 하나 및 CDRL3 하나를 포함할 수 있는 경쇄 가변 도메인을 코딩할 수 있다.
또한, 본 발명은 하기를 포함하는 중쇄 가변 도메인을 코딩하는 핵산에 관한 것이다:
a. 서열번호 82의 CDRH1 서열;
b. 서열번호 83, 서열번호 84, 서열번호 85, 서열번호 86 및 서열번호 87로 이루어진 군으로부터 선택되는 CDRH2 서열;
c. 서열번호 88, 서열번호 89 및 서열번호 90으로 이루어진 군으로부터 선택되는 CDRH3 서열.
본 발명에서, 핵산은 CDRH1, CDRH2 또는 CDRH3 중 2종 이상의 CDR을 포함할 수 있는 중쇄 가변 도메인을 코딩할 수 있다.
또한, 본 발명에서, 핵산은 CDRH1 하나, CDRH2 하나 및 CDRH3 하나를 포함할 수 있는 중쇄 가변 도메인을 코딩할 수 있다.
또한, 본 발명은 하나 이상의 보존적인 아미노산 치환을 가지는 항체 변이체를 코딩하는 핵산을 포함한다.
본 발명에서, 핵산은 하나 이상의 보존적인 아미노산 치환을 가지는 CDR을 코딩할 수 있다.
본 발명에서, 핵산은 2개 이상의 CDR에 하나 이상의 보존적인 아미노산 치환을 포함하는 CDR을 코딩할 수 있다.
본 발명에서, 핵산은 3개의 CDR에서 하나 이상의 보존적인 아미노산 치환을 포함하는 CDR을 코딩할 수 있다.
본 발명에서, 핵산은 하나 이상의 CDR에서 2개 이상의 보존적인 아미노산 치환을 포함하는 CDR을 코딩할 수 있다.
본 발명에서, 핵산은 2 이상의 CDR에서 2개 이상의 보존적인 아미노산 치환을 포함하는 CDR을 코딩할 수 있다.
본 발명에서, 핵산은 3가지 CDR에서 2개 이상의 보존적인 아미노산 치환을 포함하는 CDR을 코딩할 수 있다.
본 발명의 다른 측면은, 서열번호 16, 서열번호 20, 서열번호 24, 서열번호 105, 서열번호 106, 서열번호 107, 서열번호 108, 서열번호 109, 서열번호 110, 서열번호 111, 서열번호 112, 서열번호 113, 서열번호 114, 서열번호 115, 서열번호 116, 서열번호 117, 서열번호 118, 서열번호 119, 서열번호 120, 서열번호 121, 서열번호 122, 서열번호 123, 서열번호 124, 서열번호 125, 서열번호 126, 서열번호 127. 서열번호 128, 서열번호 129, 서열번호 130 및 서열번호 131로 이루어진 군으로부터 선택되는 서열과, 적어도 70%, 75%, 80% 이상의 서열 동일성을 가지는, 경쇄 가변 도메인을 코딩하는 핵산에 관한 것이다.
본 발명의 또다른 측면은, 서열번호 18, 서열번호 22, 서열번호 26, 서열번호 132, 서열번호 133, 서열번호 134, 서열번호 135, 서열번호 136, 서열번호 137, 서열번호 138, 서열번호 139, 서열번호 140, 서열번호 141, 서열번호 142, 서열번호 143, 서열번호 144, 서열번호 145, 서열번호 146, 서열번호 147, 서열번호 148, 서열번호 149, 서열번호 150, 서열번호 151, 서열번호 152, 서열번호 153, 서열번호 154, 서열번호 155, 서열번호 156, 서열번호 157로 이루어진 군으로부터 선택되는 서열과, 적어도 70%, 75%, 80% 이상의 서열 동일성을 가지는, 중쇄 가변 도메인을 코딩하는 핵산에 관한 것이다. 본 발명의 다른 측면은, KAAG1을 발현하는 종양 세포의 이동 또는 생존에 손상을 주기 위한, 서열번호 1, 서열번호 1의 10에서 884까지의 뉴클레오티드로 구성된 단편, 및 이들 중 임의의 것의 상보체로 이루어진 군으로부터 선택되는 핵산의 용도에 관한 것이다. 이들 핵산에 대한 예시적인 구현예들은 siRNA, 안티센스, 리보자임 등을 포함한다.
또다른 측면에서, 본 발명은 본원에 기술된 핵산을 포함하는 벡터에 관한 것이다.
본 발명에서, 벡터는 발현 벡터일 수 있다.
특정 숙주에서 삽입된 코딩 서열에 대한 전사 및 번역 조절을 위한 인자들을 포함하는 벡터들은 당해 기술 분야에 공지되어 있다. 이들 인자들로는 조절 서열, 예컨대 인핸서, 구성적인 프로모터, 유도성 프로모터, 5' 비번역부 및 3' 비번역부를 포함할 수 있다. 당해 기술 분야의 당업자들에게 널리 공지되어 있는 방법들을 이용하여 이러한 발현 벡터들을 구축할 수 있다. 이러한 방법들로는 시헌관내 재조합 DNA 기법, 합성 기법 및 생체내 유전자 재조합이 있다.
본 발명의 다른 측면은 본원에 기술된 핵산을 포함할 수 있는 분리된 세포에 관한 것이다.
분리된 세포는 분리된 벡터들 또는 동일한 벡터 중 어느 하나에 경쇄 가변 도메인을 코딩하는 핵산과 중쇄 가변 도메인을 코딩하는 핵산을 포함할 수 있다. 또한, 분리된 세포는 분리된 벡터들 또는 동일한 벡터 중 어느 하나에 경쇄를 코딩하는 핵산과 중쇄를 코딩하는 핵산을 포함할 수 있다.
본 발명에서, 세포는 항체 또는 항원 결합 단편을 발현, 조립 및/또는 분비할 수 있다.
다른 측면에서, 본 발명은 본원에 기술된 항체를 포함하거나 및/또는 발현할 수 있는 세포를 제공한다.
본 발명에서, 세포는 경쇄 가변 도메인을 코딩하는 핵산과 중쇄 가변 도메인을 코딩하는 핵산을 포함할 수 있다.
상기 세포는 항체 또는 항원 결합 단편을 발현, 조립 및/또는 분비할 수 있다.
하기 실시예들은 본 발명에 대한 보다 상세한 특징 설명을 위해 제시된다.
실시예들
실시예 1
본 실시예는 난소 종양과 난소암 세포주에서 KAAG1 유전자의 발현 패턴을 설명한다.
KAAG1을 코딩하는 mRNA를 발현하는 난소 종양(도에서 AB-0447로 표시됨)의 백분율을 확인하기 위해, PCR 분석을 수행하였다. 그 결과, KAAG1 유전자는 질병의 모든 단계에서는 난소 종양의 85% 이상에서 발현되고, 말기 단계의 종양에서는 100% 발현되었다. LMP 샘플에서의 KAAG1의 발현은 보다 낮거나 감출가능한 수준이었다(참조: 도 1A). 각 샘플에서, 증폭된 RNA 1 ㎍을 Thermoscript RT (Invitrogen)를 이용하여 랜덤 헥사머로 역전사하였다. cDNA를 희석하고, 반응물의 1/200을 각각 표기한 유전자-특이적인 프라이머를 이용한 PCR 반응용 주형으로 사용하였다. KAAG1 mRNA 증폭에 사용한 프라이머에는 서열번호 45 및 46에 나타낸 서열이 포함된다. PCR 반응은 96웰 플레이트에서 수행하였고, 25 ml의 반을 1% 아가로스겔에서 전기영동하였다. 겔을 가시화한 다음 겔 수집 시스템(BioRad)으로 사진을 촬영하였다. 도 1A의 상단 패널은 LMP 샘플 6종과 난소 종양 22종 및 난소암 세포주 6종(우측 끝에서 6개 라인, OVC)에 대한 결과를 나타낸 것이다. 도 1의 하단 패널은 표시된 바와 같이 테스트한 30종의 정상 조직의 RNA 샘플을 나타낸다.
KAAG1의 발현은 몇가지 정상 조직들에서는 약하게 검출되었지만, 나팔관과 췌장에서는 mRNA가 명확하게 확인되었다(참조: 도 1A). 이러한 반응에 사용된 총 RNA 양은 하우스키핑 유전자인 글리세르알데하이드-3-포스페이트 데하이드로게나제(GAPDH)를 함께 PCR 증폭시켜, 대조하였으며, 그 결과 각 샘플에 동등한 출발 물질이 존재된 것으로 확인되었다(참조: 도 1A). GAPDH 유전자 증폭에 사용된 프라이머에는 서열번호 47 및 48에 나타낸 서열이 포함되어 있다. 즉, KAAG1 유전자의 증폭은 중요한 선별 기준을 충족시킨다: 높은 비율의 난소 종양에서 과다 발현되지만, 대부분의 정상 조직에서는 발현이 보다 낮거나 없다. 이러한 데이타는, KAAG1에 대한 고친화성 단일클론 항체로 난소 종양을 특이적으로 표적화할 수 있음을 의미한다.
초기 단계의 암 또는 종양은 분화 수준이 높은 세포로 구성되는 경향이 있지만, 종양이 보다 공격적인 침습적인 상태로 진행됨에 따라, 암 세포는 점점 미분화된 상태가 되게 된다. 이러한 변이에 기여하는 인자를 동정하여, 이러한 단백질들을 치료제 개발의 타겟으로 이용할 필요가 있다. 몇가지 난소암 세포주들은 원발성 종양으로부터 유래된 것으로 이용할 수 있으며, 이들은 기능 연구에 우수한 모델로 제공된다. KAAG1의 발현을 이러한 세포주에서 조사하였다. 4종의 세포주, 즉 TOV-21G, TOV-112D, TOV-1946 및 TOV-2223G를 원발성 종양으로부터 확립하였으며, 한편으로 진행된 난소암 환자의 복수 체액에 함유되어 있는 세포로부터 OV-90와 OV-1946 세포주를 확립하였다. 원발성 종양으로부터 확립된 세포(도 1B, 레인 1, TOV-21G; 2, TOV-112D; 5, TOV-1946; 6, TOV-2223G)와 복수내 세포로부터 확립된 세포(레인 3, OV-90; 4, OV-1946)의 총 RNA를 역전사 효소를 이용하여 cDNA로 변환하여, KAAG1-특이 프라이머(서열번호 45 및 46)를 이용한 PCR 반응에 주형으로 사용하였다. 음성 대조군으로, 정상적인 난소의 총 RNA를 이용하여 반응을 수행하였다. 병행한 GAPDH에 대한 PCR 반응(서열번호 47 및 48)으로 확인된 바와 같이 동량의 출발 물질을 이용하였다. PCR 반응의 샘플을 아가로스 겔에서 전기영동하고, 에티듐 브로마이드로 가시화하였다. 도 1B에서 알 수 있는 바와 같이, KAAG1은 원발성 종양 유래의 세포주에서 검출되었지만 약하게 발현되었으며, 사이클 수를 좀더 늘여 수행한 PCR 반응에서는 이들 세포주 4종 모두에서 KAAG1 전사체가 확인되었다. 반면, 복수 체액 세포로부터 확립된 세포주 2종 모두에서는 KAAG1 전사체의 수준이 높게 나타났다. 복수 체액 유래 세포에서의 발현 증가는 세포의 환경이 KAAG1 유전자 조절에 영향을 미침을 의미한다.
복수 세포는 진행된 질환과 관련있는데, 도 1B에 나타낸 발현 패턴은, KAAG1 수준 증가가 고정-비의존적인 증식과 관련 있음을 암시한다. 이러한 의문은 단일층으로 배양되는 경우와 같이 페트리 디쉬에 세포가 부착되는 것을 방지하는 조건인 행잉 드롭(hanging droplet)으로 세포를 배양하여 해결하였다. 이러한 소위 3차원 배양으로 세포가 조합되어 회전 타원체의 형성이 관찰되었다(참조: 도 1C). 회전 타원체는 다음과 같은 배양하였다: TOV-112D, OV-90, 또는 TOV-21G 세포(15 ㎕에 4000)를 4일간 5% FBS 부재(좌측 패널, 도 1C) 또는 존재(우측 패널, 도 1C, +5% 혈청) 하에 배지에서 인큐레이션하였다. 영상의 배율을 100X로 설정하였다. 이러한 회전 타원체들이 광범위하게 특정되었으며, 마이크로어레이-기반의 발현 프로파일링에 의해 측정되는 바와 같이, 이들은 형태 및 기능적 특성 뿐만 아니라 분자적 특징을 비롯하여 원발성 종양에서 발견되는 많은 특징들을 나타내었다.
총 RNA를 회전 타원체 조제물로부터 분리하였고, 도 1A에서와 같이 RT-PCR을 수행하였다. TOV-21G, TOV-112D, OV-90 세포를 회전 타원체가 형성되는 조건 하에 도 1C에 대한 설명부에 기술된 바와 같이 접종하였다. 4일 후, 총 RNA를 분리하여 KAAG1 특이적인 프라이머(서열번호 45 및 46)로 RT-PCR 반응을 수행하였다. PCR 반응물을 아가로스 겔 상에 전기영동하였다. GAPDH (서열번호 47 및 48)를 증폭시키기 위한 병행 반응을 수행하여, 각 샘플에 동량의 출발 물질이 존재한다는 것을 검증하였다. 하기 두문자어를 도 1D에 사용한다: Ce ., 단일층으로 배양된 세포; Sph ., 회전 타원체로 배양된 세포. TOV-21G 및 TOV-112D를 회전 타원체로 배양하였을 때, KAAG1 발현이 크게 상향 조절되었다(참조: 도 1D). OV-90 세포의 경우, KAAG1 유전자의 발현 수준은 변화가 없었으며, 매우 높게 유지되었다. 추측컨대, 복수 체액 유래 세포주에서 달성된 발현 수준은, OV-90 세포와 OV-1946 세포에 의해 예시된 바와 같이(참조: 도 1A) 최대치였다.
이들 결과들은 복수 체액 유래 세포주에서의 높은 발현을 보여주는 기존 데이타와 관련이 있었으며, KAAG1의 발현이 암 세포의 미세환경에 영향을 받는다는 것을 뒷받침한다. 부가적으로, 회전 타원체에서 관찰되었던 KAAG1 전사의 상향 조절은, 악성 난소암에 KAAG1이 높은 수준으로 존재함을 의미한다.
실시예 2
본 실시예는 난소암 세포의 생존에서의 KAAG1의 결정적인 역할을 시사해주는 시험관내 결과를 설명한다.
KAAG1의 발현이 난소암 세포에서 조절된다는 사실과 더불어, 이들 세포에서의 이 유전자의 기능을 조사하였다. 이러한 의문을 해결하기 위해, 이 단백질이 암 세포의 증식, 이동 및/또는 생존에 역할을 수행하는지를 결정하기 위한, 시험관내 분석을 실시하였다. RNAi를 이용하여 TOV-21G 난소암 세포주에서 내인성 KAAG1 유전자의 발현을 낫-다운시켰다. 2개의 분리된 짧은-헤어핀 RNA(shRNA) 서열을 당해 기술 분야의 당업자라면 자유롭게 이용할 수 있는 웹 기반의 소프트웨어(Qiagen 등)를 이용하여 설계하였다. 통상 19-mer인 이러한 선정한 서열들에는 shRNA에 대한 주형을 형성하는 2개의 상보적인 올리고뉴클레오티드, 즉, 19nt 센스 서열, 9 nt 링커 영역(루프), 19 nt 안티센스 서열, 그 다음에 오는 RNA 중합효소 III 중지를 위한 5-6개의 폴리-T 영역이 포함되게 하였다. KAAG1의 발현을 낫 다운시키기 위해 사용한 19 mer 서열은 서열번호 49 및 50에 나타나 있다. 이들 올리고뉴클레오티드 말단들에 적절한 제한효소 부위를 삽입하여, 전사 개시점이 hU6 프로모터 하류의 정확한 위치에 있도록 하는 적절한 삽입체의 위치 선정이 용이하게 이루어지도록 하였다. 모든 RNA 간섭 실험들에 사용한 플라스미드, pSilencer 2.0 (서열번호 51)은 상업적인 공급사(Ambion, Austin, TX)로부터 구입하였다. RNAi 효과를 관찰할 기회와 표현형 관찰 결과의 특이성을 높이기 위해, 2가지의 상이한 shRNA 발현 벡터를 제작하였다. TOV-21G 세포를 6웰 플레이트에 접종한 다음 24시간 후 pSil-shRNA 벡터 1 ㎍을 형질감염시켰다. sh.1 및 sh.2로 KAAG1 유전자를 표적하는 2종의 상이한 shRNA 서열을 명명하였다. 5-7일간 안정적인 형질감염체를 선별하고, 증식시키고, 컨플루언스로 배양하였다. KAAG1에 특이적인 shRNA를 포함하는 안정적으로 형질감염된 세포부를 이용하여, 하기 나타낸 시험관내 세포성 분석들을 모두 수행하였다.
세포의 이동과 가동성을 표준적인 세포 운동성 분석에서 측정하였다. 스크래치 분석이라고 하는 분석으로 컨플루언트 단일층으로 노출된 영역(denuded area)을 세포가 채우는 속도를 측정한다. 도 2A에 나타낸 바와 같이, 스크램블형 shRNA를 포함하고 있는 TOV-21G 세포는, 대조군 무처리 세포와 비교하여 24시간 후에 거의 상처(wound)를 채웠다(가운데-좌측 패널과 좌측 패널을 비교). 대조적으로, KAAG1 shRNA를 발현하는 TOV-21G 세포의 노출된 영역을 채우는 능력은 크게 감소되었다. 실제, KAAG1 shRNA의 존재 하에 노출된 영역을 채우고 있는 세포의 수는 0h 시간의 세포 수와 매우 비슷하였다(좌측 패널과 우측 패널 비교).
난소암 세포에서 KAAG1의 발현 감소가 미치는 장기 효과를 조사하기 위해, 세포를 폭넓게 희석하여, 콜로니 생존 분석으로 10일간 배양하였다. TOV-21G 세포를 12웰 플레이트에 50,000 세포/웰의 밀도로 접종한 다음, 24시간 후에 1 ㎍의 pSil-shRNA 벡터를 형질감염시켰다. 동일한 유전자를 표적으로 하는 2개의 상이한 shRNA 서열을 sh-1 및 sh-2로 명명하였다. 다음날, 2 ㎍/ml 푸로마이신이 포함된 신선한 배지를 적용하고, 3일간 세포 선별을 수행하였다. 세포를 헹구고, 푸로마이신이 무첨가된 신선한 배지를 첨가하여 다시 5일간 계속 배양하였다. 잔류하는 콜로니를 가시화하기 위해. 세포를 PBS에서 헹구고, 고정한 다음 동시에 15분간 실온에서 PBS 중의 1% 크리스탈 바이올렛/10% 에탄올로 염색하였다. PBS에서 잘 헹군 다음, 건조시킨 플레이트를 사진 분석을 위해 스캐닝하였다. 암 세포주의 현저한 생존성 감소가 관찰되었으며, 대표적인 실험 결과는 도 2B에 나타낸다. 동일한 결과는 shRNA를 다른 난소암 세포주 TOV-112D에 형질감염시켰을때 관찰되었다.
따라서, 이를 종합하면, 난소암 세포의 이동과 생존에 있어서의 이 유전자의 필요 조건과 연결되는, 탈착된 세포에서의 KAAG1의 발현 조절은 난소암 세포에서의 KAAG1의 중요한 역할을 뒷받침한다. 나아가, 이들 실험은, 단일클론 항체와 같은 KAAG1 단백질의 길항제가 침투성을 감소시키고 종양 생존성을 낮출 것임을 제안한다.
실시예 3
본 실시예는 KAAG1에 결합하는 단일클론 항체 패밀리에 대한 상세한 설명을 제공한다.
KAAG1에 결합하는 항체를 바이오사이트 파지 디스플레이 기법을 이용하여 제작하였다. 이러한 항체 제조 기법 및 방법에 대한 상세할 설명은 미국 특허 6,057,098에서 볼 수 있다. 간략하게는, 기법은 항원 결합 단편(Fab)을 표시하는 파지 라이브러리의 엄격한 패닝(stringent panning)을 이용한다. 몇 차례의 패닝 후, 매우 높은 친화성 및 특이성으로, KAAG1에 결합되는 경쇄 및 중쇄 가변부를 포함하는 재조합 Fab가 농화된, Omniclonal라고 하는 라이브러리를 수득하였다. 이들 라이브러리, 보다 정확하게는 Omniclonal AL0003Z1로부터, 재조합 단일클론 Fab를 E. coli에서 생산하여 KAAG1 결합에 대해 테스트하였다.
각각의 개별 단일클론 항체의 상대적인 결합성을 측정하기 위해, 재조합 인간 KAAG1을 293E 세포에서 대규모 일시적인 형질감염 기법을 이용하여 생산하였다(Durocher et al., 2002; Durocher, 2004). KAAG1 cDNA의 전체 코딩부를 BamHI 제한효소 부위가 병합된 정방향 프라이머(서열번호 52)와 HindIII 제한효소 부위가 병합된 역방향 프라이머(서열번호 53)을 이용하여 PCR로 증폭하였다. 제조되는 PCR 산물은 276 bp로 측정되었으며, BamHI와 HindIII로 절단한 후, 단편을 동일한 제한 효소로 동일하게 절단한 발현 벡터 pYD5(서열번호 54)에 연결하였다. pYD5 발현 플라스미드는 융합 단백질이 제조되게 하는 인간 Fc 도메인에 대한 코딩 서열과 융합 단백질을 배양 배지로의 분비시킬 수 있는 IgG1 신호 펩타이드를 코딩하는 서열을 포함한다. 세포 각 ml에 대해, 1 ㎍의 발현 벡터, 즉 pYD5-0447을 1.5 - 2.0 x 106 세포/ml의 밀도로 현탁 배양한 293E 세포에 형질감염시켰다. 사용한 형질감염 시약은 폴리에틸렌이민(PEI)(linear, MW 25,000, Cat# 23966 Polysciences, Inc., Warrington, PA)이며, DNA:PEI를 1:3의 비율로 사용하였다. 세포의 증식을 5일간 계속한 다음 재조합 Fc-KAAG1 융합 단백질을 정제하기 위해 배양 배지를 회수하였다. 단백질은 제조사 (Sigma-Aldrich Canada Ltd., Oakville, ON)의 지침에 따라 단백질-A 아가로스를 이용하여 정제하였다. 정제된 Fc-KAAG1 샘플(Fc-0447로 표기됨)을 보여주는 폴리아크릴아미드 겔 예를 도 3A에 나타낸다.
단일클론 조제물의 96웰 마스터 플레이트에 각 웰에 정제된 항-KAAG1 Fab를 상이한 농도로 넣었다. Fab를, ELISA로 모든 희석물을 측정하여, 최종 농도 10 ㎍/ml로 희석하여, 제2 스톡 마스터 플레이트를 제조하였다. Fc-KAAG1-단일클론 제조물의 결합을 수행하기 위해, Fc-KAAG1에 NHS-바이오틴(Pierce, Rockford, IL)을 접합시키고, 10 ng/well로 스트렙타빈 96웰 플레이트에 코팅하였다. 각 Fab 단일클론 조제물 1 ng을 각 웰에 첨가하여, 실온에서 30분간 인큐베이션하였다. 결합된 항체는 HRP-접합된 마우스 항-kappa 경쇄 항체를 이용하여 TMB 액체 기질(Sigma-Aldrich Canada Ltd., Oakville, ON)의 존재 하에 검출하였고, 마이크로타이터 플레이트 리더에서 450 nm에서 수치를 판독하였다. 이러한 분석에서, 도 3B에 나타낸 바와 같이, 전체 48(회색으로 강조)가지의 단일클론 항체에서 유의한 결합성이 확인되었다(>0.1 OD450 AU(arbitrary unit)). 항체를 고의로 1 ng/웰로 희석하여, KAAG1에 대해 가장 높은 친화성을 보이는 항체의 결합을 드러내었다. 대조군에서는 항체는 바이오틴화된 Fc 도메인에 결합하지 않았다. 이들 데이타에서는, 또한, 항체의 결합은 웰 마다 달라, KAAG1에 대해 상이한 친화성이 있는 것으로 나타났다.
실시예 4
본 실시예에서는 KAAG1 항체가 결합하는 영역을 정하기 위한 에피토프 맵핑 연구를 설명한다.
단일클론 항체에 결합되는 KAAG1의 영역을 더욱 명확하게 알기 위해, KAAG1의 절단형 돌연변이를 발현시켜 ELISA에 사용하였다. 전장 KAAG1에서와 같이, 절단형 버전을 PCR로 증폭시키고, BamHI/HindIII로 자른 pYD5에 연결하였다. 사용한 프라이머는 서열번호 52에 나타낸 서열을 가진 정방향 올리고뉴클레오티드를 서열번호 55 및 56의 프라이머와 조합하여, KAAG1에서 각각 60개 및 35개의 아미노산을 코딩하는 Fc-융합된 단편들을 제조하였다. 이들 돌연변이들은 전장 Fc-KAAG1에 대한 전술한 바와 같이 발현시키고, 단백질-A 아가로스로 정제하였다. ELISA에 사용된 단백질 조제물의 겔 예는 도 4A에 나타내며, 에피토프 맵핑에 사용한 돌연변이 단백질의 도식도는 도 4B로 나타낸다.
결과들은, 라이브러리가 대충 파악된 KAAG1 영역들 각각에 결합할 수 있는 항체로 구성되어 있음을 나타낸다. 특히, 1차 ELISA에서 KAAG1에 결합한 48종의 mAb 중에서, 9종(웰 A2, A12, C2, C4, D1, E10, F1, H3 및 H8)이 KAAG1의 처음 35개의 아미노산들과 상호작용하는 것으로 확인되었고, 5종(D12, E8, F5, G10 및 H5)은 KAAG1의 뒤에서 25개의 아미노산들과 상호작용하는 것으로 확인되었다. 따라서, 나머지 34종의 항체들은 아미노산 36 - 59의 KAAG1 영역과 상호작용하였다. 이러한 결과는, 24종의 예시적인 경쇄 및 중쇄 가변부에 대한 서열 분석 결과와 일치되었다. 실제, 이들 서열들의 정렬을 통해, 항체들이 이의 각 CDR에 대한 동일성%를 기준으로 3가지 그룹으로 군집되어 있다는 것이 확인되었다. 각 클러스터에 포함된 항체들 모두 KAAG1의 동일 영역과 상호작용하였다.
따라서, mAb의 상대적인 결합 친화성, 차별적인 에피토프 상호작용 특징들과 가변성 도메인 서열 차이를 기초로, 실시예 3에 나타낸 플레이트에 예시된 항-KAAG1 단일클론 항체로서의 추가적인 분석을 위해 3가지 항체를 선별하였다.
실시예 5
본 실시예는 Fab를 전장 IgG1 키메라 단일클론 항체로 변환하기 위한 사용 방법을 설명한다. 이 방법의 개요를 도 5에 나타낸다.
Fab 단일클론 및 KAAG1 단백질 간의 상호작용 연구의 수행 가능성과는 별도로, 항원의 생물 기능을 검증하기 위한 의미있는 시험관내 및 생체내 연구 수행에, Fab의 사용은 제한적이다. 이에, Fab에 포함된 경쇄 및 중쇄 가변부를 전체 항체 스캐폴드로 옮켜, 마우스-인간 키메라 IgG1들을 제조할 필요가 있었다. i) Fab 발현 벡터의 상류에 있는 박테리아의 오리지날 신호 펩타이드 서열은 포유류 신호 펩타이드로 치환되고, ii) 마우스 항체내 중쇄 및 경쇄 불변부가 인간 불변부로 치환된, 경쇄 및 중쇄 면역글로불린 둘다에 대한 발현 벡터를 구축하였다. 이러한 이동을 달성하기 위한 방법에 당해 기술 분야의 당업자에게 친숙한 표준적인 분자 생물 기법을 이용하였다. 이 방법에 대한 간략한 전체 내용은 본원에 기술되어 있다(참조: 도 5).
경쇄 발현 벡터 - 기존 포유류 발현 벡터, 즉 pTTVH8G (Durocher et al., 2002)는 일시적인 293E 형질감염 시스템에 사용되도록 고안된 것으로, 이에 마우스 경쇄 가변부를 수용하도록 변형시켰다. 제조되는 마우스-인간 키메라 경쇄에는 인간 카파 불변 도메인 앞에 마우스 가변부가 포함되어 있다. 인간 카파 불변 도메인을 코딩하는 cDNA를 프라이머 OGS1773 및 OGS1774 (각각 서열번호 57 및 58)을 이용한 PCR로 증폭시켰다. 인간 카파 불변부에 대한 뉴클레오티드 서열과 해당되는 아미노산 서열은 각각 서열번호 59와 60에 나타낸다. 제조되는 321 bp의 PCR 산물을 pTTVH8G에 인간 VEGF A (NM_003376) 신호 펩타이드 서열 바로 다음에 연결하였다. 또한, 본 클로닝 단계에서는, 마우스 경쇄 가변부를 코딩하는 cDNA가 정확하게 위치시키게 하는 고유한 제한효소 엔도뉴클레아제 부위들도 배치하였다. 최종 발현 플라스미드, 즉 pTTVK1의 서열은 서열번호 61에 나타낸다. 표 2에 기술된 서열을 토대로, 항체 3D3, 3G10 및 3C4 의 경쇄 가변부(각각 서열번호 15, 19 및 23)에 특이적인 PCR 프라이머를 프라이머에는 VEGF 신호 펩타이드의 뒷쪽 20개의 염기쌍과 동일한 서열이 5'-말단에 병합되도록 설계하였다. 이들 프라이머의 서열들은 서열번호 62, 63 및 64에 나타낸다. 3'-말단이 동일하기 때문에, 3가지 경쇄 가변부들 증폭에, 동일한 역방향 프라이머를 사용하였다. 이 프라이머(서열번호 65)에는, 3'-말단에 인간 카파 불변 도메인의 앞에서 20개의 염기쌍과 동일한 서열이 병합되어 있다. PCR 단편들과 잘린 pTTVK1 둘다에 T4 DNA 중합효소의 3' - 5' 엑소뉴클레아제 활성을 작용시켜, 어닐링에 의해 연결된 상보적인 말단을 형성시켰다. 어닐링 반응물을 컴피턴트 E. coli에 형질전환하고, 플라스미드의 발현을 서열분석으로 검증하여, 마우스 경쇄 가변부가 pTTVK1 발현 벡터에 적절하게 삽입되었음을 확인하였다. 당해 기술 분야의 당업자라면, 경쇄 발현 플라스미드의 구축에 사용된 방법이 오리지날 Fab 라이브러리에 포함된 모든 항-KAAG1 항체에 적용된다는 것을 쉽게 인지할 것이다.
중쇄 발현 벡터 - 중쇄 면역글로불린을 생산하는 발현 벡터는 경쇄 면역글로불린 생산에 대한 전술한 pTTVK1와 유사한 방식으로 설계하였다. 인간 IgGK 신호 펩타이드 서열과, IgG1의 인간 Fc 도메인의 CH2와 CH3 영역을 포함하고 있는, 플라스미드 pYD11(Durocher et al., 2002)에, 인간 불변 CH1 영역을 코딩하는 cDNA 서열을 삽입하여, 변형시켰다. 고유한 제한효소 엔도뉴클레아제 부위를 포함하도록 제작된 PCR 프라이머 OGS1769와 OGS1770 (서열번호 66 및 67)을 사용하여, 서열번호 68 및 69에 나타낸, 뉴클레토이드 서열 및 이의 아미노산 서열을 포함하는 인간 IgG1 CH1 영역을 증폭하였다. 인간 CH1의 309 bp를 IgGK 신호 펩타이드 서열 바로 다음에 삽입하여, 변형된 플라스미드(서열번호 70)을 pYD15로 칭하였다. 선택된 중쇄 가변부가 이 벡터에 삽입되면, 제조되는 플라스미드는 인간 불변부를 가진 전장 IgG1 중쇄 면역글로불린을 코딩하게 된다. 표 2에 나타낸 서열을 토대로, 항체 3D3, 3G10 및 3C4의 중쇄 가변부(각각 서열번호 17, 21 및 25)에 특이적인 PCR 프라이머를, 이의 5'-말단에, IgGK 신호 펩타이드의 뒤쪽 20 bp와 동일한 서열이 병합된 형태로 제작하였다. 이들 프라이머들의 서열은 서열번호 71 (3D3 및 3G10은 동일한 5'-말단 서열을 가짐) 및 72에 나타낸다. 3'말단이 동일하기 때문에, 3종의 중쇄 가변부들을 모두 증폭시키는데, 동일한 역방향 프라이머를 사용하였다. 3'-말단에, 인간 CH1 불변 도메인의 앞에서 20 bp와 동일한 서열을, 이 프라이머(서열번호 73)에 병합하였다. PCR 단편들과 잘린 pYD15 둘다에 T4 DNA 중합효소의 3' - 5' 엑소뉴클레아제 활성을 작용시켜, 어닐링에 의해 연결된 상보적인 말단을 형성시켰다. 어닐링 반응물을 컴피턴트 E. coli에 형질전환하고, 플라스미드의 발현을 서열분석으로 검증하여, 마우스 중쇄 가변부가 pYD15 발현 벡터에 적절하게 삽입되었음을 확인하였다. 당해 기술 분야의 당업자라면, 중쇄 발현 플라스미드의 구축에 사용된 방법이 오리지날 Fab 라이브러리에 포함된 모든 항-KAAG1 항체에 적용된다는 것을 쉽게 인지할 것이다.
293E 세포에서의 인간 IgG1 의 발현 - 상기에서 제작한, 경쇄 및 중쇄 면역글로불린을 코딩하는, 발현 벡터들을, 293E 세포에서 일시적인 형질감염 시스템을 이용하여 발현시켰다(Durocher et al., 2002). 경쇄 발현 벡터와 중쇄 발현 벡터를 공동-형질감염시키기 위해 사용한 방법은 실시예 3에 설명되어 있다. 경쇄 : 중쇄의 비율은, 조직 배양 배지에서 최대의 항체 수율을 달성하도록 최적화하였는데, 그 비율은 9:1(L:H)로 확인되었다. 키메라 항-KAAG1 단일클론 항체가 재조합 Fc-KAAG1에 결합하는 능력을 ELISA로 측정하여, 오리지날 마우스 Fab와 비교하였다. 이 방법은 실시예 3에 설명되었다. 도 6에 나타낸 바와 같이, 3D3 및 3G10 키메라 IgG1 단일클론 항체의 결합성은 Fab와 매우 유사하였다. 3C4의 경우, 키메라 항체의 결합 활성은 Fab 보다 약간 낮았다. 그럼에도 불구하고, 이러한 결과는, 마우스 Fab에서 인간 IgG1 벡본으로의 가변 도메인의 이동이 경쇄 및 중쇄 가변부의 KAAG1 결합성 부여 능력에 크게 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다.
실시예 6
본 실시예는 난소암 세포모델에서 KAAG1의 활성을 차단하는데 있어 항-KAAG1 항체의 용도를 설명한다.
실시예 2에서는, KAAG1이 난소암 세포의 행태에 중요한 역할을 함을 보여주는 RNAi 실험들을 설명하였다. 전술한 단일클론 항체들을 이용하여, KAAG1을 세포 표면에서 표적화함으로써 이러한 결과를 재현할 수 있는 지를 확인하였다. TOV-21G와 OV-90 세포를 회전 타원체가 형성되는 조건에서 배양하였고, 10 ㎍/ml의 3D3, 3G10 또는 3C4 힝-KAAG1 키메라 단일클론 항체를 처리하였다. 도 7에 나타낸 바와 같이, 이들 2종의 세포주 모두, 좌측 무처리시(모 세포주) 또는 항체 희석 완충액(대조군) 처리시, 효과적으로 회전 타원체를 형성하였다. 그러나, 항-KAAG1 항체의 존재시에는, 느슨하게 밀집된 구조체들이 나타났고, 어떤 경우에는, 세포들은 회전 타원체로 조합될 수 없었다. 이러한 결과는 이전의 관찰된 결과들을 뒷받침하는 것으로, 항-KAAG1 단일클론 항체들이 회전 타원체 형성 시기에 KAAG1의 활성을 조절할 수 있다는 것을 시사한다. 암 세포주에 의한 회전 타원체의 형성은 시험관내 종양 형성 모델이기 때문에, 이 결과는 또한 KAAG1의 차단이 생체내 종양 형성 감소로 이어질 수 있음을 시사한다.
실시예 7
본 실시예는 난소 종양에서 KAAG1의 발현을 검출하기 위한 항-KAAG1 항체의 용도를 설명한다.
난소암 종양에서의 KAAG1 단백질의 발현을 검증하기 위한 수단으로서, 그리고 유전자의 발현이 이 단백질의 존재와 상호 관련 있는지를 보기 위해, 면역조직화학적 방법을 수행하였다. 환자 생검으로 준비한 난소 종양 샘플 12개가 포함된, 조직 마이크로어레이를 수득하였다. 파라핀-포매한 상피 난소 종양 샘플을 유리 슬라이드 위에 놓고, 15분간 50℃에서 고정시켰다. 여기에 크실렌을 2번 처리한 다음 100%, 80% 및 70% 에탄올에서 연속하여 5분 탈수시켜, 탈파라핀화를 수행하였다. 슬라이드를 PBS 중에서 5분간 2번 헹구고, 여기에 항원을 노출시키기 위해 항원 복원 용액(사이트레이트-EDTA)을 처리하였다. 슬라이드를 메탄올 중에서 H2O2와 함께 인큐베이션하여, 내인성 퍼옥사이드 반응성 종들을 제거하고, 슬라이드를 혈청 결핍성 블롯킹 용액(Dakocytomation)에서 20분간 실온에서 인큐베이션하여 블롯킹을 수행하였다. 일차 mAb (항-KAAG1 3D3)를 실온에서 첨가하여 1시간 두었다. 이를 바이오틴-접합된 마우스 항-카파와 인큐베이션한 다음, 스트렙타비딘-HRP 3차 항체와 인큐베이션하여, KAAG1-반응성 항원을 검출하였다. 슬라이드에 DAB-하이드로겐 퍼옥사이드 기질을 5분 안되게 처리한 다음 헤마톡실린으로 대조 염색하여, 양성 염색을 확인하였다. KAAG1 단백질은 난소 종양 샘플들 대부분에서 매우 높은 수준으로 발현된 것으로 나타났다. 70개의 종양이 든 어레이의 예를 도 8A에 도시한다. RT-PCR로 수행된 발현 프로파일링 실험에 의해 입증된 바와 같이, KAAG1 전사체는 분석된 난소 종양 샘플들 중 > 85% 샘플들에 존재하였다. 분명히, 난소암에서, KAAG1 유전자의 전사와 단백질의 존재 간에 상당한 상관 관계가 있다. 일부 샘플들은 세포가 KAAG1 단백질을 발현하는 지를 확인하기 위해 보다 높은 배율로 검사하였다. 도 8B에 나타낸 바와 같이, KAAG1은 난소 종양의 표면 상피에서 주로 발현된다. 또한, 이들 상피 세포의 정단측에서는 높은 밀도가 관찰되었다(도 8B에서 화살 표시 참조, 배율: 20x). 마지막으로, 면역조직화합법을 상이한 조직형으로부터 기원한 난소 종양 샘플을 대상으로 반복 실시하였다. 앞에서 설명된 바와 같이, 상피 난소암을 4가지 주류 조직형, 장액성, 자궁내막성, 투명 세포 및 점액성으로 분류할 수 있다. KAAG1의 발현은 상피 난소암의 모든 타입들에서, 특히 장액성 조직형과 자궁내막성 조직형에서 검출되었다(참조: 도 8C).
종합하여, 이들 면역조직화학적 방법은 단일클론 항체를 이용한 난소암에서의 KAAG1 검출 유용성을 예시한다.
실시예 8
KAAG1 에 대한 IgG 1 항체는 ADCC 를 매개할 수 있다
항체-의존적인 세포의 세포독성(ADCC)은 작동자 세포, 전형적으로 면역계의 천연 살상(NK) 세포는 특이적인 항체에 결합된 타겟 세포를 적극적으로 용해시키는, 세포-매개의 면역 기전이다. NK 세포와 항체 상의 상호작용은 항체의 불변 Fc 도메인과 NK 세포의 표면 상의 고친화성 Fcg 수용체를 통해 이루어진다. IgG1은 Fc 수용체에 대해 가장 높은 친화성을 가지며, IgG2 mAb는 매우 낮은 친화성을 가진다. 이러한 이유로, KAAG1을 표적으로 하는 키메라 항체는 IgG1이라고 한다. 이러한 방식으로 매개되는 이러한 타입의 작동자 기능은 흔히 이의 세포 표면 상에 항원을 고수준으로 발현하는 암 세포의 선별적인 사멸을 유도할 수 있다.
항-KAAG1 IgG1 키메라 항체의 ADCC 활성을 측정하는 시험관내 분석은, WIL2-S라고 하는 림프종 세포주의 존재 하에 항-CD29 리툭산의 ADCC 활성을 측정하는 이전에 공개된 방법을 개작하였다(Idusogie et al ., (2000) J. Immunol. 164, 4178-4184). 3D3 키메라 IgG1 항체가 증가된 농도로 존재하는 조건에서 활성화되는 NK 세포의 소스로 인간 말초 혈액 단핵구 세포(PBMNC)를 사용하였다(참조: 도 12). 타겟 세포를 활성화된 PBMNC와 1 -25의 비율로 함께 인큐베이션하였다. 나타낸 바와 같이, 세포 사멸은 OVCAR-3와 림프종 세포주의 존재 모두 하에 농도-의존적인 방식으로 증가되었으며, 림프종 세포는 RT-PCR에서 KAAG1을 발현하는 것으로 나타났다(미기재). 양성 대조군으로서, WIL2-S 세포의 존재 하에 리툭산에 대해 매우 높은 수준의 ADCC 수준가 수득되는, 공개된 방법으로부터의 결과가 재현되었다.
또한, ADCC는 비교적 KAAG1을 고수준으로 발현하는 다른 난소암 세포주에서도 관찰되었다. 이러한 결과들은, KAAG1에 특이적인 IgG1 항체, 예컨대 3D3는 세포 표면 상에서 항원을 발현하는 암 세포의 용해를 증대시킬 수 있다.
실시예 9
KAAG1에 대한 항체는 난소 종양의 침습성을 감소시킬 수 있다
난소암이 발병된 환자는 전형적으로 난소의 상피층 또는 일부 예로 나팔관의 상피 층에서의, 세포의 통제되지 않은 증식으로 시작되는 병변을 가지고 있다. 초기에 검출되면, 원발성 종양은 수술로 제거하며, 제1선의 화학요법으로 매우 높은 반응율이 나타날 수 있으며 총 생존율을 향상시킬 수 있다. 공교롭게도, 환자의 70%에서는 재발하여, 복강에 미세-전이성 종양 수백개가 퍼지게 된다. 제2선의 치료법이 효과적일 수도 있지만, 대게는 환자들에서의 반응은 불량하거나 또는 종양이 화학내성으로 진행될 수 있다. 처리 옵션은 제한적이어서, 세포독성 약물에 내성을 피할 수 있는 새로운 치료제의 개발이 시급이 요구된다.
생체내에서 항-KAAG1 항체의 효능을 테스트하기 위해, 인간에서의 질병의 임상적인 증상과 매우 비슷하게 나타내는 난소암 동물 모델을 사용하였다. TOV-112D 세포주는 자궁내막성(endometrioid) 기원으로 RT-PCR로 측정시 KAAG1 항원을 발현한다. 이전의 IHC 실험에서, 자궁내막과 비슷한 조직 타입의 난소 종양이 KAAG1을 강하게 발현하는 것으로 확인되어, 112D 세포주를 항-KAAG1 항체 테스트에서 적합하게 선별하였다.
SCID 마우스에 TOV-112D 세포주를 복막내 접종하면, 인간에서 관찰되는 것과 매우 비슷한 수십개의 미소-전이성 종양이 이식되었다. 마우스에, PBS 조사에 포함시킨 항체 희석물을 동물 당 평균 25-30개의 종양을 처리하였다(도 13A 및 B). 일부 경우들에서, 종양의 수가 이들 마우스의 복강에서 매우 많아, 종양의 수는 쉽게 결정할 수 없었으며; 통계 분석에서 이 마우스들은 제외시켰다. 마우스에 3C4 및 3D3 항체를 처리하였을 때, 미소-전이성 종양의 수는 급격하게 감소되었다. 또한, 항-KAAG1을 처리한 그룹 당, 종양이 보이지 않는 동물의 수는 1마리 이상이었다. TOV-112D 종양 다수개(>50/동물)를 포함하고 있는 마우스를 대상으로 2차 실험을 수행하였으며, 매우 유사한 결과를 수득하였다. 또한, 3C4 처리한 그룹과 3D3 항체 처리 그룹 사이에는 거의 차이가 없었다. 그러나, 이러한 생체내 실험에서의 경향과 세포성 분석에서 수득한 결과에서, 3D3 항체가 약간 더 효능이 우수한 것으로 보인다. 이는, 3D3이 3C4에 비해 에피토프 접근성이 보다 용이하거나, 또는 항원에 대한 친화성이 보다 높기 때문이다. 이러한 2가지 실험의 결과들은, 난소암 세포의 표면 상의 KAAG1을 표적으로 하면, 생체내 종양의 전파를 현저하게 낮출 수 있음을 입증한다.
또한, 이러한 사실들은 세포성 분석에서 행해진 결과와도 완전히 일치된다. 예컨대, 회전 타원체에서의 KAAG1 mRNA의 발현이 단일층으로 배양된 세포중 보다 높고, KAAG1 shRNA의 존재 하에 세포 이동이 감소되고, KAAG1 항체 처리시 세포주의 회전 타원체를 형성하는 능력이 감소되고, 마지막으로, 항-KAAG1 IgG1에 의한 ADCC가 강화된다. 이를 종합하면, 결과들은 항체를 이용한 KAAG1의 표적화가 재발된 난소암에 대해 치료학적 잠재성을 가진다는 것을 강하게 제시한다.
실시예 10
KAAG1 은 피부 종양과 신장 세포 암종에서 발현되며, 이러한 증상의 치료 타겟이 된다.
수행된 mRNA 프로파일링 연구를 통해, KAAG1을 코딩하는 전사체가 흑색종 샘플과 신장 암종에서 유래되는 세포주에서 높게 발현된다는 것이 확인되었다. 이러한 결과들은 Sooknanan et al., 2007에 기술되어 있다. 이러한 암 타입들에서의 KAAG1 유전자의 전사 조절을 검증하기 위해, 편평 세포 암종과 흑색종에서 분리된 몇개의 섹션이 함유되어 있는 인간 피부 종양 조직 마이크로어레이(Pantomics Inc., Richmond, CA) 상에서 항-KAAG1 항체를 이용하여 면역조직화학을 수행하였다. 이 어레이의 분석에서, 편평 세포 암종과 흑색종에서 분리된 생검은 매우 강하게 염색되었다(도 14, 상단 패널). 이들 타입들 2종 모두 가장 흔한 피부암 형태이며, 흥미롭게도, 편평 세포 암종이 가장 전이성이 높아, KAAG1의 발현 - 침투성 표현형과 다시 연결된다. 이전의 관찰 결과와 같이, 어레이에 포함된 3종의 정상 피부 샘플에서는 KAAG1의 존재성은 매우 약하거나 존재하지 않았다. 마찬가지로, 신장암 어레이에 포함된 많은 샘플들에서 KAAG1이 검출되었다. 대부분의 양성 샘플들은 주로 유두상 세포 암종 타입이었으며, 몇 종의 투명세포 암종은 KAAG1을 발현하였다. 유두상 암종은 신장암 사례의 약 20%이었다.
이러한 타입들의 암에서의 KAAG1의 기능이 난소암에서의 기능과 비교하여 동일한지를 테스트하기 위해, 흑색종 및 신장 세포 암종으로부터 세포주들을 수득하여, 회전 타원체 배양 분석으로 테스트하였다(실시예 1 및 6 참조). 2종의 악성 흑색종 세포주인 A375 및 SK-MEL5 세포주들을 5% FBA의 존재 하에 회전 타원체가 형성되게 하는 조건에서 배양하였다. 배양물을 항-KAAG1 키메라 3D3 항체 5 ㎍/ml을 첨가하거나 첨가하지 않고 배양하였다. 도 15에 나타낸 바와 같이, 배양물내 3D3 항체를 포함시키면 흑색종 세포주가 회전 타원체 구조체로 적절하게 조립되는 것이 방지되었다. 이러한 결과는, KAAG1이 난소암에서와 같이 흑색종에서도 유사한 기능을 수행한다는 것을 시사한다. 또한, 신장 세포 암종 유래의 세포주들도 테스트하였다. A-498 세포주는 신장의 유두상 세포 암종 세포주이고, 786-0은 신장 투명 세포 암종이다. 도 15에 나타낸 바와 같이, A-498 회전 타원체는 3D3 항-KAAG1 항체의 존재에 의해 영향을 받지만, 786-0 세포주는 본 분석에서 영향을 받지 않았다. 이들 결과들은 상기 나타낸 면역조직화학 결과와 일치되며, 회전 타원제 형성 저해는 유두상 신장 암에서 주로 유래된 신장 암세포주의 표면 상의 KAAG1의 존재에 의해 결정된다. 그러나, 항-KAAG1 항체는 신장 투명 세포 암종에 대한 다른 유형의 분석에서도 작용할 가능성이 있다.
종합하면, 이러한 데이타는 흑색종 및 신장 암에서 KAAG1의 역할에 있어서의 결정적인 기능을 강하게 뒷받침하며, 이러한 증상에서의 항체를 이용한 KAAG1 차단이 치료학적 잠재력이 있음을 보여준다.
실시예 11
KAAG1은 난소암 세포의 표면에서 발현된다.
KAAG1을 코딩하는 cDNA의 일차 구조에 대한 바이오인포메틱스 분석, 생화학 연구 및 상피 세포에서 단백질을 검출하는 면역조직화학법에서 수득한 결과들을 조합하면, KAAG1 항체는 세포 표면상에 위치되는 것으로 나타났다. 그러나, KAAG1이 실제 막-결합 단백질임을 입증해주는 보다 직접적인 증거가 필요하였다. 한가지 방법으로, KAAG1을 발현하는 것으로 확인된 난소암 세포주들을 마이크로-타이터 플레이트에 접종하고, 세포가 투과하지 않는 조건 하에 고정한 다음, 항-KAAG1 키메라 항체를 농도를 증가시키면서 인큐베이션하였다. 세포를 잘 헹군 다음, HRP-접합된 항-인간 IgG를 이차 항체로 변형된 세포성 ELISA에 사용하여 결합된 항체를 검출하였다(도 16A). 이러한 실험으로부터 알 수 있었는 처음 결과들은, 항체가 세포에 의해 특이적으로 포착될 수 있다는 것이며, 이는 KAAG1이 세포 표면에 존재한다는 것을 시사한다. 이차로, 결합 양은 SKOV-3 세포에서 가장 높았고, TOV-21G 세포가 가장 약한 결합을 나타내었다. 이는, KAAG1 mRNA가 이들 세포주에서 비슷한 비율로 발현됨(미기재)을 보여주는 RT-PCR 데이타와 완전하게 일치되었다. 부가적으로, 에피토프가 3D3 항체에 의해 표적화됨을 암시하는 가장 강력한 신호를 발생시키는 3D3 항체가 본 분석에서 가장 접근성이 좋았다. 3G10는 AB-0447을 가장 높은 수준으로 발현하는 세포주(SKOV-3 세포, 도 16A의 우측 패널)에서만 KAAG1을 검출할 수 있었다. 2번째 방법에서는 유세포 측정을 사용하였다. 이 경우에서, 마우스 3D3 항-KAAG1 항체를 SKOV-3 난소암 세포와 포화 조건으로 인큐베이션하고, 잘 헹군 다음, 결합된 3D3 항-KAAG1 항체를 유세포 측정기에서 FITC가 접합된 항-마우스 IgG로 검출하였다. 도 16B에서 보여지는 바와 같이, SKOV-3세포의 표면에서의 신호는 음성 대조군인 비-포유류성의 무관련 단백질에 특이적인 항-KLH(Keyhole limpet hemocyanin) 항체로 표지된 동일한 세포에 비해 훨씬 높았으며, 음성 대조군의 형광 수준은 백그라운드 수준과 동일하였다. 종합하면, 이러한 결과들은, KAAG1이 세포의 표면에 위치됨을 의미한다.
실시예 12
인간화된-KAAG1 항체의 이용 방법
시험관내 결과와 예비적인 생체내 결과 2가지를 토대로, 3D3 및 3C4로 명기되는, 2가지 항-KAAG1 항체 후보체를, 당해 기술 분야의 당업자에게 익숙한 방법으로 인 실리코(in silico) 모델링을 이용하여 인간화하기 위해 선정하였다. 간략하게는, 뮤라인 항체의 가변부를, 높은 서열 상동성과 비슷한 CDR 루프 길이를 가진, 이용가능한 마우스, 인간화된 및 전장 인간 가변부 결정 구조를 토대로 3D로 모델링하였다. CDR은 항원 결합을 담당하는 아미노산 서열로, 각 항체 체인에 3개의 CDR이 있다. 또한, CDR 사이에 있는 아미노산 서열인 프래임워크 영역은, 마우스와 인간 항체 서열 간의 표준적인 상동성 비교에 의해 변형시켜, '베스트-핏' 인간 서열을 만들었다. 이러한 변형은, CDR 루프들의 적절한 위치 선정이 인간화된 구조에 최대 항원 결합성이 확보되도록 유지될 뿐만 아니라 잠재적인 N-및 O-연결된 당화 부위를 보존시킴을 보장하였다. 인간화된(h) 3D3 및 3G4내 중쇄 가변부와 경쇄 가변부 둘다의 서열은 각각 96% 및 94% 인간화되었다. 각 항체에 대한 3D3 및 3C4 모델들의 구조는 각각 도 17A와 17B에 나타낸다. 이들 구조들에 예시된 바와 같이, 3D3는 CDR에 대한 이의 근접성으로 인해 3개의 특별한 아미노산 서열(도 17A, 중쇄의 Met93 및 Gly94, 경쇄의 Ser57)이 필요하였다. 모델링에서, 이들 마우스 아미노산의 인간 등가체로의 교체가 항체의 KAAG1 항원 결합성을 약화시킬 수 있다. 3C4의 경우, 아미노산 6개는 특별하게 여겨졌다(도 17B, 중쇄에서 Glu1, Gln72 및 Ser98, 경쇄에서 Thr46, Phe49 및 Ser87). 도 2개에서, 경쇄 CDR에서 CDR1, CDR2 및 CDR3은 각각 L1, L2 및 L3으로 표시되어 있으며, 중쇄 CDR에서 CDR1, CDR2 및 CDR3은 각각 H1, H2 및 H3으로 표시되어 있다.
완전한 항-KAAG1 3D3 면역글로불린 경쇄 및 중쇄를 코딩하는 서열은 각각 서열번호 176 및 177로 나타낸다. 인간화된 3D3 경쇄의 가변부는 서열번호 176의 아미노산 21-133 사이에 포함되며, 이는 서열번호 178로 나타낸다. 인간화된 3D3 중쇄의 가변부는 서열번호 177의 아미노산 20-132 사이에 포함되어 있으며, 이는 서열번호 179로 나타낸다. 완전한 항-KAAG1 3C4 면역글로불린 경쇄 및 중쇄를 코딩하는 서열은 각각 서열번호 180 및 181로 나타낸다. 인간화된 3C4 경쇄의 가변부는 서열번호 180의 아미노산 21-127 사이에 포함되며, 이는 서열번호 182로 나타낸다. 인간화된 3C4 중쇄의 가변부는 서열번호 181의 아미노산 19-136 사이에 포함되어 있으며, 이는 서열번호 183으로 나타낸다.
발현 벡터를 조립하여 형질감염된 포유류 세포에서 h3D3를 생산한 후(실시예 5), 몇가지 분석을 수행하여, 인간화 공정의 생물학적 등가성(bio-equivalence)을 입증하였다. 작동자 기능을 가지고 있는 항체가 필요하여, h3D3를 인간 IgG1으로 조립하였다. ELISA 기반의 분석을 수행하여 h3D3의 재조합 KAAG1에 대한 능력을 직접 비교하였다. 이러한 테스트 수행에 사용된 방법들은 재조합 Fc-KAAG1을 이용하여 실시예 3과 같이 수행하였다. 도 18A에 나타낸 바와 같이, h3D3의 결합 활성은 키메라 3D3의 결합 활성과 동일하였다.
표면 플라스몬 공명(SPR)을 이용하여 바이어코어 장치로 보다 정확한 측정을 수행하였다. 카이넥틱 분석을 이용하여 키메라 3D3를 h3D3 뿐만 아니라 여러가지 경쇄 및 중쇄 변형을 포함하는 하이브리드 항체와 친화성을 비교하였다(도 18B 참조). 간략하게는, 항-인간 Fc를 바이어코어 센서 칩에 고정한 다음, 키메라 또는 h3D3를 칩에 포착하였다. 단량체 재조합 KAAG1을 여러가지 농도로 주입하고, 데이타를 단순한 1:1 모델에 전체적으로 피팅하여, 상호작용 카이네틱 파라미터를 측정하였다. 키메라 3D3의 카이네틱 파라미터는 도 18B (m3D3)에 표로 나타내었다. 키메라 3D3의 평균 KD는 2.35 x 10-10 M이었다. 비교시, 모든 키메라(C)/인간화된(H) 변형은 매우 비슷한 카이네틱 파라미터들을 보였다. 키메라 중쇄(도 18B에서, 'CC'로 표시됨)와 함께 발현되는 키메라 경쇄의 평균 KD는 2.71 x 10-10 M이었으며, 키메라 중쇄(도 18B에서 'HC'로 표시됨)와 함께 발현되는 인간화된 경쇄의 평균 KD는 3.09 x 10-10 M이었으며, 인간화된 중쇄(도 18B에서 'CH'로 표시됨)와 함께 발현되는 키메라 중쇄의 평균 KD는 5.05 x 10-10 M이었으며, 인간화된 중쇄(도 18B에서 'HH'로 표시됨)와 함께 발현되는 인간화된 경쇄의 평균 KD는 4.39 x 10-10 M이었다. 분석에서, 3D3의 인간화에서 오리지날 마우스 항체의 결합 활성이 보존되는 것으로 나타났다.
h3D3의 생물학적 기능을 회전 타원체 배양 분석으로 평가하였다(실시예 6 참조). SKOV-3 난소암 세포를 h3D3 또는 비-KAAG1 결합성 이소형 대조군 항체의 존재 하에 5% FBS가 첨가된 조건에서 배양하였다. 그 결과(도 18C), 완충제 또는 무관한 IgG 중 어느 하나의 처리도 컴팩트 3-D 구조 형성을 저해하지 않는 것으로 나타났다. 이와는 반대로, 키메라 3D3와 인간화된 3D3 둘다 회전 타원체 형성을 방지하였다. 그 결과는 도 2개(좌측 및 우측 패널)로 나타낸다. 이들 결과는, 키메라 3D3의 생물학적 활성이 인간화된 3D3에 보존되어 있음을 나타내며, h3D3도 동일한 방식으로 작용할 것임을 시사한다.
서열번호 1
GAGGGGCATCAATCACACCGAGAAGTCACAGCCCCTCAACCACTGAGGTGTGGGGGGGTAGGGATCTGCATTTCTTCATATCAACCCCACACTATAGGGCACCTAAATGGGTGGGCGGTGGGGGAGACCGACTCACTTGAGTTTCTTGAAGGCTTCCTGGCCTCCAGCCACGTAATTGCCCCCGCTCTGGATCTGGTCTAGCTTCCGGATTCGGTGGCCAGTCCGCGGGGTGTAGATGTTCCTGACGGCCCCAAAGGGTGCCTGAACGCCGCCGGTCACCTCCTTCAGGAAGACTTCGAAGCTGGACACCTTCTTCTCATGGATGACGACGCGGCGCCCCGCGTAGAAGGGGTCCCCGTTGCGGTACACAAGCACGCTCTTCACGACGGGCTGAGACAGGTGGCTGGACCTGGCGCTGCTGCCGCTCATCTTCCCCGCTGGCCGCCGCCTCAGCTCGCTGCTTCGCGTCGGGAGGCACCTCCGCTGTCCCAGCGGCCTCACCGCACCCAGGGCGCGGGATCGCCTCCTGAAACGAACGAGAAACTGACGAATCCACAGGTGAAAGAGAAGTAACGGCCGTGCGCCTAGGCGTCCACCCAGAGGAGACACTAGGAGCTTGCAGGACTCGGAGTAGACGCTCAAGTTTTTCACCGTGGCGTGCACAGCCAATCAGGACCCGCAGTGCGCGCACCACACCAGGTTCACCTGCTACGGGCAGAATCAAGGTGGACAGCTTCTGAGCAGGAGCCGGAAACGCGCGGGGCCTTCAAACAGGCACGCCTAGTGAGGGCAGGAGAGAGGAGGACGCACACACACACACACACACAAATATGGTGAAACCCAATTTCTTACATCATATCTGTGCTACCCTTTCCAAACAGCCTA
서열번호 2
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서열번호 3
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서열번호 4
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서열번호 54
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서열번호 55
GTAAGCAAGCTTAGGCCGCTGGGACAGCGGAGGTGC
서열번호 56
GTAAGCAAGCTTGGCAGCAGCGCCAGGTCCAGC
서열번호 57
GTAAGCAGCGCTGTGGCTGCACCATCTGTCTTC
서열번호 58
GTAAGCGCTAGCCTAACACTCTCCCCTGTTGAAGC
서열번호 59
GCTGTGGCTGCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTCTATCCCAGAGAGGCCAAAGTACAGTGGAAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGGAGAGTGTCACAGAGCAGGACAGCAAGGACAGCACCTACAGCCTCAGCAGCACCCTGACGCTGAGCAAAGCAGACTACGAGAAACACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCACCCATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAACAGGGGAGAGTGTTAG
서열번호 60
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서열번호 61
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서열번호 62
ATGCCAAGTGGTCCCAGGCTGACATTGTGATGACCCAGTCTCC
서열번호 63
ATGCCAAGTGGTCCCAGGCTGATGTTTTGATGACCCAAACTCC
서열번호 64
ATGCCAAGTGGTCCCAGGCTGACATCGTTATGTCTCAGTCTCC
서열번호 65
GGGAAGATGAAGACAGATGGTGCAGCCACAGC
서열번호 66
GTAAGCGCTAGCGCCTCAACGAAGGGCCCATCTGTCTTTCCCCTGGCCCC
서열번호 67
GTAAGCGAATTCACAAGATTTGGGCTCAACTTTCTTG
서열번호 68
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서열번호 69
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서열번호 70
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CGCCCCGTTGACGCAAATGGGCGGTAGGCGTGTACGGTGGGAGGTCTATATAAGCAGAGCTCGTTTAGTGAACCGTCAGATCCTCACTCTCTTCCGCATCGCTGTCTGCGAGGGCCAGCTGTTGGGCTCGCGGTTGAGGACAAACTCTTCGCGGTCTTTCCAGTACTCTTGGATCGGAAACCCGTCGGCCTCCGAACGGTACTCCGCCACCGAGGGACCTGAGCGAGTCCGCATCGACCGGATCGGAAAACCTCTCGAGAAAGGCGTCTAACCAGTCACAGTCGCAAGGTAGGCTGAGCACCGTGGCGGGCGGCAGCGGGTGGCGGTCGGGGTTGTTTCTGGCGGAGGTGCTGCTGATGATGTAATTAAAGTAGGCGGT
서열번호 71
GGGTTCCAGGTTCCACTGGCGAGGTTCAGCTGCAGCAGTCTGT
서열번호 72
GGGTTCCAGGTTCCACTGGCGAGGTGCAGCTTCAGGAGTCAGG
서열번호 73
GGGGCCAGGGGAAAGACAGATGGGCCCTTCGTTGAGGC
서열번호 91: CDRL1의 예시적인 구현예
K-S-S-Q-S-L-L-N/H-S/T-S/N/D-N/G-Q/N/K-K/L-N-Y-L-A
서열번호 92: CDRL1의 예시적인 구현예
K-A-S-Q-D-I-H-N/T-Y/F-L-N
서열번호 93: CDRL2의 예시적인 구현예
F-A-S-T-R-E-S
서열번호 94: CDRL2의 예시적인 구현예
L-V-S-K-L-D-S
서열번호 95: CDRL2의 예시적인 구현예
R-A-N-R-L-V-D
서열번호 96: CDRL3의 예시적인 구현예
Q-Q-H-Y-S-T-P-L-T
서열번호 97: CDRL3의 예시적인 구현예
W/L-Q-Y/G-D/T-A/E/H-F-P-R-T
서열번호 98: CDRH1 1의 예시적인 구현예
G-Y-T/I-F-T-D/E-Y-E/N-M/I/V-H
서열번호 99: CDRH1의 예시적인 구현예
G-F-T/S-I-T-S-G-Y-G-W-H
서열번호 100: CDRH2의 예시적인 구현예
V/N/G-I/L-D-P-E/A/G-T/Y-G-X-T-A
서열번호 101: CDRH2의 예시적인 구현예
Y-I-N/S-F/Y-N/D-G
서열번호 102: CDRH3의 예시적인 구현예
M-G-Y-S/A-D-Y
서열번호 103: CDRH3의 예시적인 구현예
A-S-S-Y-D-G-F-L-A-Y
서열번호 104: CDRH3의 예시적인 구현예
A-R/W-W/F-G-L-R-Q/N
서열번호 158
KSSQSLLHSDGKTYLN
서열번호 159
LVSKLDS
서열번호 160
WQGTHFPRT
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Figure pct00001
Figure pct00002
SEQUENCE LISTING <110> Alethia Biotherapeutics Inc. TREMBLAY, Gilles Bernard FILION, Mario SULEA, Trian <120> ANTIBODIES THAT SPECIFICALLY BLOCK THE BIOLOGICAL ACTIVITY OF A TUMOR ANTIGEN <130> 280317.43 <150> US61/193,184 <151> 2008-11-03 <150> US61/213,666 <151> 2009-06-30 <160> 183 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 885 <212> DNA <213> Homo sapiens <300> <301> Van Den Eynde,B.J. et al., <302> A new antigen recognized by cytolytic T lymphocytes on a human kidney tumor results from reverse strand transcription <303> J. Exp. 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Med. <304> 190 <305> 12 <306> 1793-1800 <307> 1999 <400> 2 Met Asp Asp Asp Ala Ala Pro Arg Val Glu Gly Val Pro Val Ala Val 1 5 10 15 His Lys His Ala Leu His Asp Gly Leu Arg Gln Val Ala Gly Pro Gly 20 25 30 Ala Ala Ala Ala His Leu Pro Arg Trp Pro Pro Pro Gln Leu Ala Ala 35 40 45 Ser Arg Arg Glu Ala Pro Pro Leu Ser Gln Arg Pro His Arg Thr Gln 50 55 60 Gly Ala Gly Ser Pro Pro Glu Thr Asn Glu Lys Leu Thr Asn Pro Gln 65 70 75 80 Val Lys Glu Lys <210> 3 <211> 657 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Nucleotide sequence of the 3D3 antibody light chain <400> 3 gacattgtga tgacccagtc tccatcctcc ctggctgtgt caataggaca gaaggtcact 60 atgaactgca agtccagtca gagcctttta aatagtaact ttcaaaagaa ctttttggcc 120 tggtaccagc agaaaccagg ccagtctcct aaacttctga tatactttgc atccactcgg 180 gaatctagta tccctgatcg cttcataggc agtggatctg ggacagattt cactcttacc 240 atcagcagtg tgcaggctga agacctggca gattacttct gtcagcaaca ttatagcact 300 ccgctcacgt tcggtgctgg gaccaagctg gagctgaaag ctgtggctgc accatctgtc 360 ttcatcttcc 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gttgtgtgcc tgctgaataa cttctatccc 420 agagaggcca aagtacagtg gaaggtggat aacgccctcc aatcgggtaa ctcccaggag 480 agtgtcacag agcaggacag caaggacagc acctacagcc tcagcagcac cctgacgctg 540 agcaaagcag actacgagaa acacaaagtc tacgcctgcg aagtcaccca tcagggcctg 600 agctcgcccg tcacaaagag cttcaacagg ggagagtgt 639 <210> 12 <211> 213 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3C4 antibody light chain <400> 12 Asp Ile Val Met Ser Gln Ser Pro Ser Ser Met Tyr Ala Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile His Asn Phe 20 25 30 Leu Asn Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Lys Thr Leu Ile 35 40 45 Phe Arg Ala Asn Arg Leu Val Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Gln Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Phe 65 70 75 80 Glu Asp Leu Gly Ile Tyr Ser Cys Leu Gln Tyr Asp Glu Ile Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Arg Ala Val Ala Ala Pro 100 105 110 Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 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<220> <223> Primer to amplify GAPDH gene <400> 47 tgaaggtcgg agtcaacgga tttggt 26 <210> 48 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Primer to amplify GAPDH gene <400> 48 catgtgggcc atgaggtcca ccac 24 <210> 49 <211> 19 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> 19-mer used to generate KAAG1-specific shRNA <400> 49 ggcctccagc cacgtaatt 19 <210> 50 <211> 19 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> 19-mer used to generate KAAG1-specific shRNA <400> 50 ggcgctgctg ccgctcatc 19 <210> 51 <211> 4455 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> pSilencer 2.0 plasmid <400> 51 tcgcgcgttt cggtgatgac ggtgaaaacc tctgacacat gcagctcccg gagacggtca 60 cagcttgtct gtaagcggat gccgggagca gacaagcccg tcagggcgcg tcagcgggtg 120 ttggcgggtg tcggggctgg cttaactatg cggcatcaga gcagattgta ctgagagtgc 180 accatatgcg gtgtgaaata ccgcacagat gcgtaaggag aaaataccgc atcaggcgcc 240 attcgccatt caggctgcgc aactgttggg aagggcgatc ggtgcgggcc tcttcgctat 300 tacgccagct ggcgaaaggg ggatgtgctg caaggcgatt aagttgggta acgccagggt 360 tttcccagtc acgacgttgt aaaacgacgg ccagtgccaa gcttttccaa aaaactaccg 420 ttgttatagg tgtctcttga acacctataa caacggtagt ggatcccgcg tcctttccac 480 aagatatata aacccaagaa atcgaaatac tttcaagtta cggtaagcat atgatagtcc 540 attttaaaac ataattttaa aactgcaaac tacccaagaa attattactt tctacgtcac 600 gtattttgta ctaatatctt tgtgtttaca gtcaaattaa ttctaattat ctctctaaca 660 gccttgtatc gtatatgcaa atatgaagga atcatgggaa ataggccctc ttcctgcccg 720 accttggcgc gcgctcggcg cgcggtcacg ctccgtcacg tggtgcgttt tgcctgcgcg 780 tctttccact ggggaattca tgcttctcct ccctttagtg agggtaattc tctctctctc 840 cctatagtga gtcgtattaa ttccttctct tctatagtgt cacctaaatc gttgcaattc 900 gtaatcatgt catagctgtt tcctgtgtga aattgttatc cgctcacaat tccacacaac 960 atacgagccg gaagcataaa gtgtaaagcc tggggtgcct aatgagtgag ctaactcaca 1020 ttaattgcgt tgcgctcact gcccgctttc cagtcgggaa acctgtcgtg ccagctgcat 1080 taatgaatcg gccaacgcgc ggggagaggc ggtttgcgta ttgggcgctc ttccgcttcc 1140 tcgctcactg actcgctgcg ctcggtcgtt cggctgcggc gagcggtatc agctcactca 1200 aaggcggtaa tacggttatc cacagaatca ggggataacg caggaaagaa catgtgagca 1260 aaaggccagc aaaaggccag gaaccgtaaa aaggccgcgt tgctggcgtt tttccatagg 1320 ctccgccccc ctgacgagca tcacaaaaat cgacgctcaa gtcagaggtg gcgaaacccg 1380 acaggactat aaagatacca ggcgtttccc cctggaagct ccctcgtgcg ctctcctgtt 1440 ccgaccctgc cgcttaccgg atacctgtcc gcctttctcc cttcgggaag cgtggcgctt 1500 tctcatagct cacgctgtag gtatctcagt tcggtgtagg tcgttcgctc caagctgggc 1560 tgtgtgcacg aaccccccgt tcagcccgac cgctgcgcct tatccggtaa ctatcgtctt 1620 gagtccaacc cggtaagaca cgacttatcg ccactggcag cagccactgg taacaggatt 1680 agcagagcga ggtatgtagg cggtgctaca gagttcttga agtggtggcc taactacggc 1740 tacactagaa gaacagtatt tggtatctgc gctctgctga agccagttac cttcggaaaa 1800 agagttggta gctcttgatc cggcaaaaaa accaccgctg gtagcggtgg tttttttgtt 1860 tgcaagcagc agattacgcg cagaaaaaaa ggatctcaag aagatccttt gatcttttct 1920 acggggtctg acgctcagtg gaacgaaaac tcacgttaag ggattttggt catgagatta 1980 tcaaaaagga tcttcaccta gatcctttta aattaaaaat gaagttttaa atcaatctaa 2040 agtatatatg agtaaacttg gtctgacagt taccaatgct taatcagtga ggcacctatc 2100 tcagcgatct gtctatttcg ttcatccata gttgcctgac tccccgtcgt gtagataact 2160 acgatacggg agggcttacc atctggcccc agtgctgcaa tgataccgcg agacccacgc 2220 tcaccggctc cagatttatc agcaataaac cagccagccg gaagggccga gcgcagaagt 2280 ggtcctgcaa ctttatccgc ctccatccag tctattaatt gttgccggga agctagagta 2340 agtagttcgc cagttaatag tttgcgcaac gttgttgcca ttgctacagg catcgtggtg 2400 tcacgctcgt cgtttggtat ggcttcattc agctccggtt cccaacgatc aaggcgagtt 2460 acatgatccc ccatgttgtg caaaaaagcg gttagctcct tcggtcctcc gatcgttgtc 2520 agaagtaagt tggccgcagt gttatcactc atggttatgg cagcactgca taattctctt 2580 actgtcatgc catccgtaag atgcttttct gtgactggtg agtactcaac caagtcattc 2640 tgagaatagt gtatgcggcg accgagttgc tcttgcccgg cgtcaatacg ggataatacc 2700 gcgccacata gcagaacttt aaaagtgctc atcattggaa aacgttcttc ggggcgaaaa 2760 ctctcaagga tcttaccgct gttgagatcc agttcgatgt aacccactcg tgcacccaac 2820 tgatcttcag catcttttac tttcaccagc gtttctgggt gagcaaaaac aggaaggcaa 2880 aatgccgcaa aaaagggaat aagggcgaca cggaaatgtt gaatactcat actcttcctt 2940 tttcaatatt attgaagcat ttatcagggt tattgtctca tgagcggata catatttgaa 3000 tgtatttaga aaaataaaca aataggggtt ccgcgcacat ttccccgaaa agtgccacct 3060 attggtgtgg aaagtcccca ggctccccag caggcagaag tatgcaaagc atgcatctca 3120 attagtcagc aaccaggtgt ggaaagtccc caggctcccc agcaggcaga agtatgcaaa 3180 gcatgcatct caattagtca gcaaccatag tcccgcccct aactccgccc atcccgcccc 3240 taactccgcc cagttccgcc cattctccgc cccatggctg actaattttt tttatttatg 3300 cagaggccga ggccgcctcg gcctctgagc tattccagaa gtagtgagga ggcttttttg 3360 gaggcctagg cttttgcaaa aagctagctt gcatgcctgc aggtcggccg ccacgaccgg 3420 tgccgccacc atcccctgac ccacgcccct gacccctcac aaggagacga ccttccatga 3480 ccgagtacaa gcccacggtg cgcctcgcca cccgcgacga cgtcccccgg gccgtacgca 3540 ccctcgccgc cgcgttcgcc gactaccccg ccacgcgcca caccgtcgac ccggaccgcc 3600 acatcgagcg ggtcaccgag ctgcaagaac tcttcctcac gcgcgtcggg ctcgacatcg 3660 gcaaggtgtg ggtcgcggac gacggcgccg cggtggcggt ctggaccacg ccggagagcg 3720 tcgaagcggg ggcggtgttc gccgagatcg gcccgcgcat ggccgagttg agcggttccc 3780 ggctggccgc gcagcaacag atggaaggcc tcctggcgcc gcaccggccc aaggagcccg 3840 cgtggttcct ggccaccgtc ggcgtctcgc ccgaccacca gggcaagggt ctgggcagcg 3900 ccgtcgtgct ccccggagtg gaggcggccg agcgcgccgg ggtgcccgcc ttcctggaga 3960 cctccgcgcc ccgcaacctc cccttctacg agcggctcgg cttcaccgtc accgccgacg 4020 tcgaggtgcc cgaaggaccg cgcacctggt gcatgacccg caagcccggt gcctgacgcc 4080 cgccccacga cccgcagcgc ccgaccgaaa ggagcgcacg accccatggc tccgaccgaa 4140 gccacccggg gcggccccgc cgaccccgca cccgcccccg aggcccaccg actctagagg 4200 atcataatca gccataccac atttgtagag gttttacttg ctttaaaaaa cctcccacac 4260 ctccccctga acctgaaaca taaaatgaat gcaattgttg ttgttaactt gtttattgca 4320 gcttataatg gttacaaata aagcaatagc atcacaaatt tcacaaataa agcatttttt 4380 tcactgcaat ctaagaaacc attattatca tgacattaac ctataaaaat aggcgtatca 4440 cgaggccctt tcgtc 4455 <210> 52 <211> 33 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> forward primer containing BamHI site to amplify KAAG1 cDNA <400> 52 gtaagcggat ccatggatga cgacgcggcg ccc 33 <210> 53 <211> 33 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer containing HindIII site to amplify KAAG1 cDNA <400> 53 gtaagcaagc ttcttctctt tcacctgtgg att 33 <210> 54 <211> 5138 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> pYD5 vector <400> 54 gtacatttat attggctcat gtccaatatg accgccatgt tgacattgat tattgactag 60 ttattaatag taatcaatta cggggtcatt agttcatagc ccatatatgg agttccgcgt 120 tacataactt acggtaaatg gcccgcctgg ctgaccgccc aacgaccccc gcccattgac 180 gtcaataatg acgtatgttc ccatagtaac gccaataggg actttccatt gacgtcaatg 240 ggtggagtat ttacggtaaa ctgcccactt ggcagtacat caagtgtatc atatgccaag 300 tccgccccct attgacgtca atgacggtaa atggcccgcc tggcattatg cccagtacat 360 gaccttacgg gactttccta cttggcagta catctacgta ttagtcatcg ctattaccat 420 ggtgatgcgg ttttggcagt acaccaatgg gcgtggatag cggtttgact cacggggatt 480 tccaagtctc caccccattg acgtcaatgg gagtttgttt tggcaccaaa atcaacggga 540 ctttccaaaa tgtcgtaata accccgcccc gttgacgcaa atgggcggta ggcgtgtacg 600 gtgggaggtc tatataagca gagctcgttt agtgaaccgt cagatcctca ctctcttccg 660 catcgctgtc tgcgagggcc agctgttggg ctcgcggttg aggacaaact cttcgcggtc 720 tttccagtac tcttggatcg gaaacccgtc ggcctccgaa cggtactccg ccaccgaggg 780 acctgagcca gtccgcatcg accggatcgg aaaacctctc gagaaaggcg tctaaccagt 840 cacagtcgca aggtaggctg agcaccgtgg cgggcggcag cgggtggcgg tcggggttgt 900 ttctggcgga ggtgctgctg atgatgtaat taaagtaggc ggtcttgagc cggcggatgg 960 tcgaggtgag gtgtggcagg cttgagatcc agctgttggg gtgagtactc cctctcaaaa 1020 gcgggcatga cttctgcgct aagattgtca gtttccaaaa acgaggagga tttgatattc 1080 acctggcccg atctggccat acacttgagt gacaatgaca tccactttgc ctttctctcc 1140 acaggtgtcc actcccaggt ccaagtttgc cgccaccatg gagacagaca cactcctgct 1200 atgggtactg ctgctctggg ttccaggttc cactggcgcc ggatcaactc acacatgccc 1260 accgtgccca gcacctgaac tcctgggggg accgtcagtc ttcctcttcc ccccaaaacc 1320 caaggacacc ctcatgatct cccggacccc tgaggtcaca tgcgtggtgg tggacgtgag 1380 ccacgaagac cctgaggtca agttcaactg gtacgtggac ggcgtggagg tgcataatgc 1440 caagacaaag ccgcgggagg agcagtacaa cagcacgtac cgtgtggtca gcgtcctcac 1500 cgtcctgcac caggactggc tgaatggcaa ggagtacaag tgcaaggtct ccaacaaagc 1560 cctcccagcc cccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa gggcagcccc gagaaccaca 1620 ggtgtacacc ctgcccccat cccgggatga gctgaccaag aaccaggtca gcctgacctg 1680 cctggtcaaa ggcttctatc ccagcgacat cgccgtggag tgggagagca atgggcagcc 1740 ggagaacaac tacaagacca cgcctcccgt gttggactcc gacggctcct tcttcctcta 1800 cagcaagctc accgtggaca agagcaggtg gcagcagggg aacgtcttct catgctccgt 1860 gatgcatgag gctctgcaca accactacac gcagaagagc ctctccctgt ctcccgggaa 1920 agctagcgga gccggaagca caaccgaaaa cctgtatttt cagggcggat ccgaattcaa 1980 gcttgatatc tgatcccccg acctcgacct ctggctaata aaggaaattt attttcattg 2040 caatagtgtg ttggaatttt ttgtgtctct cactcggaag gacatatggg agggcaaatc 2100 atttggtcga gatccctcgg agatctctag ctagagcccc gccgccggac gaactaaacc 2160 tgactacggc atctctgccc cttcttcgcg gggcagtgca tgtaatccct tcagttggtt 2220 ggtacaactt gccaactgaa ccctaaacgg gtagcatatg cttcccgggt agtagtatat 2280 actatccaga ctaaccctaa ttcaatagca tatgttaccc aacgggaagc atatgctatc 2340 gaattagggt tagtaaaagg gtcctaagga acagcgatgt aggtgggcgg gccaagatag 2400 gggcgcgatt gctgcgatct ggaggacaaa ttacacacac ttgcgcctga gcgccaagca 2460 cagggttgtt ggtcctcata ttcacgaggt cgctgagagc acggtgggct aatgttgcca 2520 tgggtagcat atactaccca aatatctgga tagcatatgc tatcctaatc tatatctggg 2580 tagcataggc tatcctaatc tatatctggg tagcatatgc tatcctaatc tatatctggg 2640 tagtatatgc tatcctaatt tatatctggg tagcataggc tatcctaatc tatatctggg 2700 tagcatatgc tatcctaatc tatatctggg tagtatatgc tatcctaatc tgtatccggg 2760 tagcatatgc tatcctaata gagattaggg tagtatatgc tatcctaatt tatatctggg 2820 tagcatatac tacccaaata tctggatagc atatgctatc ctaatctata tctgggtagc 2880 atatgctatc ctaatctata tctgggtagc ataggctatc ctaatctata tctgggtagc 2940 atatgctatc ctaatctata tctgggtagt atatgctatc ctaatttata tctgggtagc 3000 ataggctatc ctaatctata tctgggtagc atatgctatc ctaatctata tctgggtagt 3060 atatgctatc ctaatctgta tccgggtagc atatgctatc ctcacgatga taagctgtca 3120 aacatgagaa ttaattcttg aagacgaaag ggcctcgtga tacgcctatt tttataggtt 3180 aatgtcatga taataatggt ttcttagacg tcaggtggca cttttcgggg aaatgtgcgc 3240 ggaaccccta tttgtttatt tttctaaata cattcaaata tgtatccgct catgagacaa 3300 taaccctgat aaatgcttca ataatattga aaaaggaaga gtatgagtat tcaacatttc 3360 cgtgtcgccc ttattccctt ttttgcggca ttttgccttc ctgtttttgc tcacccagaa 3420 acgctggtga aagtaaaaga tgctgaagat cagttgggtg cacgagtggg ttacatcgaa 3480 ctggatctca acagcggtaa gatccttgag agttttcgcc ccgaagaacg ttttccaatg 3540 atgagcactt ttaaagttct gctatgtggc gcggtattat cccgtgttga cgccgggcaa 3600 gagcaactcg gtcgccgcat acactattct cagaatgact tggttgagta ctcaccagtc 3660 acagaaaagc atcttacgga tggcatgaca gtaagagaat tatgcagtgc tgccataacc 3720 atgagtgata acactgcggc caacttactt ctgacaacga tcggaggacc gaaggagcta 3780 accgcttttt tgcacaacat gggggatcat gtaactcgcc ttgatcgttg ggaaccggag 3840 ctgaatgaag ccataccaaa cgacgagcgt gacaccacga tgcctgcagc aatggcaaca 3900 acgttgcgca aactattaac tggcgaacta cttactctag cttcccggca acaattaata 3960 gactggatgg aggcggataa agttgcagga ccacttctgc gctcggccct tccggctggc 4020 tggtttattg ctgataaatc tggagccggt gagcgtgggt ctcgcggtat cattgcagca 4080 ctggggccag atggtaagcc ctcccgtatc gtagttatct acacgacggg gagtcaggca 4140 actatggatg aacgaaatag acagatcgct gagataggtg cctcactgat taagcattgg 4200 taactgtcag accaagttta ctcatatata ctttagattg atttaaaact tcatttttaa 4260 tttaaaagga tctaggtgaa gatccttttt gataatctca tgaccaaaat cccttaacgt 4320 gagttttcgt tccactgagc gtcagacccc gtagaaaaga tcaaaggatc ttcttgagat 4380 cctttttttc tgcgcgtaat ctgctgcttg caaacaaaaa aaccaccgct accagcggtg 4440 gtttgtttgc cggatcaaga gctaccaact ctttttccga aggtaactgg cttcagcaga 4500 gcgcagatac caaatactgt ccttctagtg tagccgtagt taggccacca cttcaagaac 4560 tctgtagcac cgcctacata cctcgctctg ctaatcctgt taccagtggc tgctgccagt 4620 ggcgataagt cgtgtcttac cgggttggac tcaagacgat agttaccgga taaggcgcag 4680 cggtcgggct gaacgggggg ttcgtgcaca cagcccagct tggagcgaac gacctacacc 4740 gaactgagat acctacagcg tgagcattga gaaagcgcca cgcttcccga agggagaaag 4800 gcggacaggt atccggtaag cggcagggtc ggaacaggag agcgcacgag ggagcttcca 4860 gggggaaacg cctggtatct ttatagtcct gtcgggtttc gccacctctg acttgagcgt 4920 cgatttttgt gatgctcgtc aggggggcgg agcctatgga aaaacgccag caacgcggcc 4980 tttttacggt tcctggcctt ttgctggcct tttgctcaca tgttctttcc tgcgttatcc 5040 cctgattctg tggataaccg tattaccgcc tttgagtgag ctgataccgc tcgccgcagc 5100 cgaacgaccg agcgcagcga gtcagtgagc gaggaagc 5138 <210> 55 <211> 36 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer used to generate Fc-fused KAAG1 fragment <400> 55 gtaagcaagc ttaggccgct gggacagcgg aggtgc 36 <210> 56 <211> 33 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer used to generate Fc-fused KAAG1 fragment <400> 56 gtaagcaagc ttggcagcag cgccaggtcc agc 33 <210> 57 <211> 33 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> OGS1773 primer <400> 57 gtaagcagcg ctgtggctgc accatctgtc ttc 33 <210> 58 <211> 35 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> OGS1774 primer <400> 58 gtaagcgcta gcctaacact 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<210> 61 <211> 6385 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> pTTVK1 expression plasmid <400> 61 cttgagccgg cggatggtcg aggtgaggtg tggcaggctt gagatccagc tgttggggtg 60 agtactccct ctcaaaagcg ggcattactt ctgcgctaag attgtcagtt tccaaaaacg 120 aggaggattt gatattcacc tggcccgatc tggccataca cttgagtgac aatgacatcc 180 actttgcctt tctctccaca ggtgtccact cccaggtcca agtttaaacg gatctctagc 240 gaattcatga actttctgct gtcttgggtg cattggagcc ttgccttgct gctctacctc 300 caccatgcca agtggtccca ggcttgagac ggagcttaca gcgctgtggc tgcaccatct 360 gtcttcatct tcccgccatc tgatgagcag ttgaaatctg gaactgcctc tgttgtgtgc 420 ctgctgaata acttctatcc cagagaggcc aaagtacagt ggaaggtgga taacgccctc 480 caatcgggta actcccagga gagtgtcaca gagcaggaca gcaaggacag cacctacagc 540 ctcagcagca ccctgacgct gagcaaagca gactacgaga aacacaaagt ctacgcctgc 600 gaagtcaccc atcagggcct gagctcgccc gtcacaaaga gcttcaacag gggagagtgt 660 tagggtaccg cggccgcttc gaatgagatc ccccgacctc gacctctggc taataaagga 720 aatttatttt cattgcaata gtgtgttgga attttttgtg tctctcactc ggaaggacat 780 atgggagggc aaatcatttg gtcgagatcc ctcggagatc tctagctaga gccccgccgc 840 cggacgaact aaacctgact acggcatctc tgccccttct tcgcggggca gtgcatgtaa 900 tcccttcagt tggttggtac aacttgccaa ctgggccctg ttccacatgt gacacggggg 960 gggaccaaac acaaaggggt tctctgactg tagttgacat ccttataaat ggatgtgcac 1020 atttgccaac actgagtggc tttcatcctg gagcagactt tgcagtctgt ggactgcaac 1080 acaacattgc ctttatgtgt aactcttggc tgaagctctt acaccaatgc tgggggacat 1140 gtacctccca ggggcccagg aagactacgg gaggctacac caacgtcaat cagaggggcc 1200 tgtgtagcta ccgataagcg gaccctcaag agggcattag caatagtgtt tataaggccc 1260 ccttgttaac cctaaacggg tagcatatgc ttcccgggta gtagtatata ctatccagac 1320 taaccctaat tcaatagcat atgttaccca acgggaagca tatgctatcg aattagggtt 1380 agtaaaaggg tcctaaggaa cagcgatatc tcccacccca tgagctgtca cggttttatt 1440 tacatggggt caggattcca cgagggtagt gaaccatttt agtcacaagg gcagtggctg 1500 aagatcaagg agcgggcagt gaactctcct gaatcttcgc ctgcttcttc attctccttc 1560 gtttagctaa tagaataact gctgagttgt gaacagtaag gtgtatgtga ggtgctcgaa 1620 aacaaggttt caggtgacgc ccccagaata aaatttggac ggggggttca gtggtggcat 1680 tgtgctatga caccaatata accctcacaa accccttggg caataaatac tagtgtagga 1740 atgaaacatt ctgaatatct ttaacaatag aaatccatgg ggtggggaca agccgtaaag 1800 actggatgtc catctcacac gaatttatgg ctatgggcaa cacataatcc tagtgcaata 1860 tgatactggg gttattaaga tgtgtcccag gcagggacca agacaggtga accatgttgt 1920 tacactctat ttgtaacaag gggaaagaga gtggacgccg acagcagcgg actccactgg 1980 ttgtctctaa cacccccgaa aattaaacgg ggctccacgc caatggggcc cataaacaaa 2040 gacaagtggc cactcttttt tttgaaattg tggagtgggg gcacgcgtca gcccccacac 2100 gccgccctgc ggttttggac tgtaaaataa gggtgtaata acttggctga ttgtaacccc 2160 gctaaccact gcggtcaaac cacttgccca caaaaccact aatggcaccc cggggaatac 2220 ctgcataagt aggtgggcgg gccaagatag gggcgcgatt gctgcgatct ggaggacaaa 2280 ttacacacac ttgcgcctga gcgccaagca cagggttgtt ggtcctcata ttcacgaggt 2340 cgctgagagc acggtgggct aatgttgcca tgggtagcat atactaccca aatatctgga 2400 tagcatatgc tatcctaatc tatatctggg tagcataggc tatcctaatc tatatctggg 2460 tagcatatgc tatcctaatc tatatctggg tagtatatgc tatcctaatt tatatctggg 2520 tagcataggc tatcctaatc tatatctggg tagcatatgc tatcctaatc tatatctggg 2580 tagtatatgc tatcctaatc tgtatccggg tagcatatgc tatcctaata gagattaggg 2640 tagtatatgc tatcctaatt tatatctggg tagcatatac tacccaaata tctggatagc 2700 atatgctatc ctaatctata tctgggtagc atatgctatc ctaatctata tctgggtagc 2760 ataggctatc ctaatctata tctgggtagc atatgctatc ctaatctata tctgggtagt 2820 atatgctatc ctaatttata tctgggtagc ataggctatc ctaatctata tctgggtagc 2880 atatgctatc ctaatctata tctgggtagt atatgctatc ctaatctgta tccgggtagc 2940 atatgctatc ctcacgatga taagctgtca aacatgagaa ttaattcttg aagacgaaag 3000 ggcctcgtga tacgcctatt tttataggtt aatgtcatga taataatggt ttcttagacg 3060 tcaggtggca cttttcgggg aaatgtgcgc ggaaccccta tttgtttatt tttctaaata 3120 cattcaaata tgtatccgct catgagacaa taaccctgat aaatgcttca ataatattga 3180 aaaaggaaga gtatgagtat tcaacatttc cgtgtcgccc ttattccctt ttttgcggca 3240 ttttgccttc ctgtttttgc tcacccagaa acgctggtga aagtaaaaga tgctgaagat 3300 cagttgggtg cacgagtggg ttacatcgaa ctggatctca acagcggtaa gatccttgag 3360 agttttcgcc ccgaagaacg ttttccaatg atgagcactt ttaaagttct gctatgtggc 3420 gcggtattat cccgtgttga cgccgggcaa gagcaactcg gtcgccgcat acactattct 3480 cagaatgact tggttgagta ctcaccagtc acagaaaagc atcttacgga tggcatgaca 3540 gtaagagaat tatgcagtgc tgccataacc atgagtgata acactgcggc caacttactt 3600 ctgacaacga tcggaggacc gaaggagcta accgcttttt tgcacaacat gggggatcat 3660 gtaactcgcc ttgatcgttg ggaaccggag ctgaatgaag ccataccaaa cgacgagcgt 3720 gacaccacga tgcctgcagc aatggcaaca acgttgcgca aactattaac tggcgaacta 3780 cttactctag cttcccggca acaattaata gactggatgg aggcggataa agttgcagga 3840 ccacttctgc gctcggccct tccggctggc tggtttattg ctgataaatc tggagccggt 3900 gagcgtgggt ctcgcggtat cattgcagca ctggggccag atggtaagcc ctcccgtatc 3960 gtagttatct acacgacggg gagtcaggca actatggatg aacgaaatag acagatcgct 4020 gagataggtg cctcactgat taagcattgg taactgtcag accaagttta ctcatatata 4080 ctttagattg atttaaaact tcatttttaa tttaaaagga tctaggtgaa gatccttttt 4140 gataatctca tgaccaaaat cccttaacgt gagttttcgt tccactgagc gtcagacccc 4200 gtagaaaaga tcaaaggatc ttcttgagat cctttttttc tgcgcgtaat ctgctgcttg 4260 caaacaaaaa aaccaccgct accagcggtg gtttgtttgc cggatcaaga gctaccaact 4320 ctttttccga aggtaactgg cttcagcaga gcgcagatac caaatactgt ccttctagtg 4380 tagccgtagt taggccacca cttcaagaac tctgtagcac cgcctacata cctcgctctg 4440 ctaatcctgt taccagtggc tgctgccagt ggcgataagt cgtgtcttac cgggttggac 4500 tcaagacgat agttaccgga taaggcgcag cggtcgggct gaacgggggg ttcgtgcaca 4560 cagcccagct tggagcgaac gacctacacc gaactgagat acctacagcg tgagcattga 4620 gaaagcgcca cgcttcccga agggagaaag gcggacaggt atccggtaag cggcagggtc 4680 ggaacaggag agcgcacgag ggagcttcca gggggaaacg cctggtatct ttatagtcct 4740 gtcgggtttc gccacctctg acttgagcgt cgatttttgt gatgctcgtc aggggggcgg 4800 agcctatgga aaaacgccag caacgcggcc tttttacggt tcctggcctt ttgctggcct 4860 tttgctcaca tgttctttcc tgcgttatcc cctgattctg tggataaccg tattaccgcc 4920 tttgagtgag ctgataccgc tcgccgcagc cgaacgaccg agcgcagcga gtcagtgagc 4980 gaggaagcgg aagagcgccc aatacgcaaa ccgcctctcc ccgcgcgttg gccgattcat 5040 taatgcagct ggcacgacag gtttcccgac tggaaagcgg gcagtgagcg caacgcaatt 5100 aatgtgagtt agctcactca ttaggcaccc caggctttac actttatgct tccggctcgt 5160 atgttgtgtg gaattgtgag cggataacaa tttcacacag gaaacagcta tgaccatgat 5220 tacgccaagc tctagctaga ggtcgaccaa ttctcatgtt tgacagctta tcatcgcaga 5280 tccgggcaac gttgttgcat tgctgcaggc gcagaactgg taggtatggc agatctatac 5340 attgaatcaa tattggcaat tagccatatt agtcattggt tatatagcat aaatcaatat 5400 tggctattgg ccattgcata cgttgtatct atatcataat atgtacattt atattggctc 5460 atgtccaata tgaccgccat gttgacattg attattgact agttattaat agtaatcaat 5520 tacggggtca ttagttcata gcccatatat ggagttccgc gttacataac ttacggtaaa 5580 tggcccgcct ggctgaccgc ccaacgaccc ccgcccattg acgtcaataa tgacgtatgt 5640 tcccatagta acgccaatag ggactttcca ttgacgtcaa tgggtggagt atttacggta 5700 aactgcccac ttggcagtac atcaagtgta tcatatgcca agtccgcccc ctattgacgt 5760 caatgacggt aaatggcccg cctggcatta tgcccagtac atgaccttac gggactttcc 5820 tacttggcag tacatctacg tattagtcat cgctattacc atggtgatgc ggttttggca 5880 gtacaccaat gggcgtggat agcggtttga ctcacgggga tttccaagtc tccaccccat 5940 tgacgtcaat gggagtttgt tttggcacca aaatcaacgg gactttccaa aatgtcgtaa 6000 taaccccgcc ccgttgacgc aaatgggcgg taggcgtgta cggtgggagg tctatataag 6060 cagagctcgt ttagtgaacc gtcagatcct cactctcttc cgcatcgctg tctgcgaggg 6120 ccagctgttg ggctcgcggt tgaggacaaa ctcttcgcgg tctttccagt actcttggat 6180 cggaaacccg tcggcctccg aacggtactc cgccaccgag ggacctgagc gagtccgcat 6240 cgaccggatc ggaaaacctc tcgagaaagg cgtctaacca gtcacagtcg caaggtaggc 6300 tgagcaccgt ggcgggcggc agcgggtggc ggtcggggtt gtttctggcg gaggtgctgc 6360 tgatgatgta attaaagtag gcggt 6385 <210> 62 <211> 43 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Primer specific for the light chain variable region of the 3D3 antibody <400> 62 atgccaagtg gtcccaggct gacattgtga tgacccagtc tcc 43 <210> 63 <211> 43 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Primer specific for the light chain variable region of the 3G10 antibody <400> 63 atgccaagtg gtcccaggct gatgttttga tgacccaaac tcc 43 <210> 64 <211> 43 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Primer specific for the light chain variable region of the 3C4 antibody <400> 64 atgccaagtg gtcccaggct gacatcgtta tgtctcagtc tcc 43 <210> 65 <211> 32 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer to amplify the 3D3, 3G10 and 3C4 antibody light chains <400> 65 gggaagatga agacagatgg tgcagccaca gc 32 <210> 66 <211> 50 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> OGS1769 primer <400> 66 gtaagcgcta gcgcctcaac gaagggccca tctgtctttc ccctggcccc 50 <210> 67 <211> 37 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> OGS1770 primer <400> 67 gtaagcgaat tcacaagatt tgggctcaac tttcttg 37 <210> 68 <211> 309 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 68 gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcaccct cctccaagag cacctctggg 60 ggcacagcag ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 120 tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 180 ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacccagacc 240 tacatctgca acgtgaatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagaa agttgagccc 300 aaatcttgt 309 <210> 69 <211> 103 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 69 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys 1 5 10 15 Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr 65 70 75 80 Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 100 <210> 70 <211> 5379 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> pYD15 plasmid <400> 70 cttgagccgg cggatggtcg aggtgaggtg tggcaggctt gagatccagc tgttggggtg 60 agtactccct ctcaaaagcg ggcattactt ctgcgctaag attgtcagtt tccaaaaacg 120 aggaggattt gatattcacc tggcccgatc tggccataca cttgagtgac aatgacatcc 180 actttgcctt tctctccaca ggtgtccact cccaggtcca agtttgccgc caccatggag 240 acagacacac tcctgctatg ggtactgctg ctctgggttc caggttccac tggcggagac 300 ggagcttacg ggcccatctg tctttcccct ggccccctcc tccaagagca cctctggggg 360 cacagcggcc ctgggctgcc tggtcaagga ctacttcccc gaaccggtga cggtgtcgtg 420 gaactcaggc gccctgacca gcggcgtgca caccttcccg gctgtcctac agtcctcagg 480 actctactcc ctcagcagcg tggtgaccgt gccctccagc agcttgggca cccagaccta 540 catctgcaac gtgaatcaca agcccagcaa caccaaggtg gacaagaaag ttgagcccaa 600 atcttgtgaa ttcactcaca catgcccacc gtgcccagca cctgaactcc tggggggacc 660 gtcagtcttc ctcttccccc caaaacccaa ggacaccctc atgatctccc ggacccctga 720 ggtcacatgc gtggtggtgg acgtgagcca cgaagaccct gaggtcaagt tcaactggta 780 cgtggacggc gtggaggtgc ataatgccaa gacaaagccg cgggaggagc agtacaacag 840 cacgtaccgt gtggtcagcg tcctcaccgt cctgcaccag gactggctga atggcaagga 900 gtacaagtgc aaggtctcca acaaagccct cccagccccc atcgagaaaa ccatctccaa 960 agccaaaggg cagccccgag aaccacaggt gtacaccctg cccccatccc gggatgagct 1020 gaccaagaac caggtcagcc tgacctgcct ggtcaaaggc ttctatccca gcgacatcgc 1080 cgtggagtgg gagagcaatg ggcagccgga gaacaactac aagaccacgc ctcccgtgct 1140 ggactccgac ggctccttct tcctctacag caagctcacc gtggacaaga gcaggtggca 1200 gcaggggaac gtcttctcat gctccgtgat gcatgaggct ctgcacaacc actacacgca 1260 gaagagcctc tccctgtctc ccgggaaatg atcccccgac ctcgacctct ggctaataaa 1320 ggaaatttat tttcattgca atagtgtgtt ggaatttttt gtgtctctca ctcggaagga 1380 catatgggag ggcaaatcat ttggtcgaga tccctcggag atctctagct agagccccgc 1440 cgccggacga actaaacctg actacggcat ctctgcccct tcttcgcggg gcagtgcatg 1500 taatcccttc agttggttgg tacaacttgc caactgaacc ctaaacgggt agcatatgct 1560 tcccgggtag tagtatatac tatccagact aaccctaatt caatagcata tgttacccaa 1620 cgggaagcat atgctatcga attagggtta gtaaaagggt cctaaggaac agcgatgtag 1680 gtgggcgggc caagataggg gcgcgattgc tgcgatctgg aggacaaatt acacacactt 1740 gcgcctgagc gccaagcaca gggttgttgg tcctcatatt cacgaggtcg ctgagagcac 1800 ggtgggctaa tgttgccatg ggtagcatat actacccaaa tatctggata gcatatgcta 1860 tcctaatcta tatctgggta gcataggcta tcctaatcta tatctgggta gcatatgcta 1920 tcctaatcta tatctgggta gtatatgcta tcctaattta tatctgggta gcataggcta 1980 tcctaatcta tatctgggta gcatatgcta tcctaatcta tatctgggta gtatatgcta 2040 tcctaatctg tatccgggta gcatatgcta tcctaataga gattagggta gtatatgcta 2100 tcctaattta tatctgggta gcatatacta cccaaatatc tggatagcat atgctatcct 2160 aatctatatc tgggtagcat atgctatcct aatctatatc tgggtagcat aggctatcct 2220 aatctatatc tgggtagcat atgctatcct aatctatatc tgggtagtat atgctatcct 2280 aatttatatc tgggtagcat aggctatcct aatctatatc tgggtagcat atgctatcct 2340 aatctatatc tgggtagtat atgctatcct aatctgtatc cgggtagcat atgctatcct 2400 cacgatgata agctgtcaaa catgagaatt aattcttgaa gacgaaaggg cctcgtgata 2460 cgcctatttt tataggttaa tgtcatgata ataatggttt cttagacgtc aggtggcact 2520 tttcggggaa atgtgcgcgg aacccctatt tgtttatttt tctaaataca ttcaaatatg 2580 tatccgctca tgagacaata accctgataa atgcttcaat aatattgaaa aaggaagagt 2640 atgagtattc aacatttccg tgtcgccctt attccctttt ttgcggcatt ttgccttcct 2700 gtttttgctc acccagaaac gctggtgaaa gtaaaagatg ctgaagatca gttgggtgca 2760 cgagtgggtt acatcgaact ggatctcaac agcggtaaga tccttgagag ttttcgcccc 2820 gaagaacgtt ttccaatgat gagcactttt aaagttctgc tatgtggcgc ggtattatcc 2880 cgtgttgacg ccgggcaaga gcaactcggt cgccgcatac actattctca gaatgacttg 2940 gttgagtact caccagtcac agaaaagcat cttacggatg gcatgacagt aagagaatta 3000 tgcagtgctg ccataaccat gagtgataac actgcggcca acttacttct gacaacgatc 3060 ggaggaccga aggagctaac cgcttttttg cacaacatgg gggatcatgt aactcgcctt 3120 gatcgttggg aaccggagct gaatgaagcc ataccaaacg acgagcgtga caccacgatg 3180 cctgcagcaa tggcaacaac gttgcgcaaa ctattaactg gcgaactact tactctagct 3240 tcccggcaac aattaataga ctggatggag gcggataaag ttgcaggacc acttctgcgc 3300 tcggcccttc cggctggctg gtttattgct gataaatctg gagccggtga gcgtgggtct 3360 cgcggtatca ttgcagcact ggggccagat ggtaagccct cccgtatcgt agttatctac 3420 acgacgggga gtcaggcaac tatggatgaa cgaaatagac agatcgctga gataggtgcc 3480 tcactgatta agcattggta actgtcagac caagtttact catatatact ttagattgat 3540 ttaaaacttc atttttaatt taaaaggatc taggtgaaga tcctttttga taatctcatg 3600 accaaaatcc cttaacgtga gttttcgttc cactgagcgt cagaccccgt agaaaagatc 3660 aaaggatctt cttgagatcc tttttttctg cgcgtaatct gctgcttgca aacaaaaaaa 3720 ccaccgctac cagcggtggt ttgtttgccg gatcaagagc taccaactct ttttccgaag 3780 gtaactggct tcagcagagc gcagatacca aatactgtcc ttctagtgta gccgtagtta 3840 ggccaccact tcaagaactc tgtagcaccg cctacatacc tcgctctgct aatcctgtta 3900 ccagtggctg ctgccagtgg cgataagtcg tgtcttaccg ggttggactc aagacgatag 3960 ttaccggata aggcgcagcg gtcgggctga acggggggtt cgtgcacaca gcccagcttg 4020 gagcgaacga cctacaccga actgagatac ctacagcgtg agcattgaga aagcgccacg 4080 cttcccgaag ggagaaaggc ggacaggtat ccggtaagcg gcagggtcgg aacaggagag 4140 cgcacgaggg agcttccagg gggaaacgcc tggtatcttt atagtcctgt cgggtttcgc 4200 cacctctgac ttgagcgtcg atttttgtga tgctcgtcag gggggcggag cctatggaaa 4260 aacgccagca acgcggcctt tttacggttc ctggcctttt gctggccttt tgctcacatg 4320 ttctttcctg cgttatcccc tgattctgtg gataaccgta ttaccgcctt tgagtgagct 4380 gataccgctc gccgcagccg aacgaccgag cgcagcgagt cagtgagcga ggaagcgtac 4440 atttatattg gctcatgtcc aatatgaccg ccatgttgac attgattatt gactagttat 4500 taatagtaat caattacggg gtcattagtt catagcccat atatggagtt ccgcgttaca 4560 taacttacgg taaatggccc gcctggctga ccgcccaacg acccccgccc attgacgtca 4620 ataatgacgt atgttcccat agtaacgcca atagggactt tccattgacg tcaatgggtg 4680 gagtatttac ggtaaactgc ccacttggca gtacatcaag tgtatcatat gccaagtccg 4740 ccccctattg acgtcaatga cggtaaatgg cccgcctggc attatgccca gtacatgacc 4800 ttacgggact ttcctacttg gcagtacatc tacgtattag tcatcgctat taccatggtg 4860 atgcggtttt ggcagtacac caatgggcgt ggatagcggt ttgactcacg gggatttcca 4920 agtctccacc ccattgacgt caatgggagt ttgttttggc accaaaatca acgggacttt 4980 ccaaaatgtc gtaataaccc cgccccgttg acgcaaatgg gcggtaggcg tgtacggtgg 5040 gaggtctata taagcagagc tcgtttagtg aaccgtcaga tcctcactct cttccgcatc 5100 gctgtctgcg agggccagct gttgggctcg cggttgagga caaactcttc gcggtctttc 5160 cagtactctt ggatcggaaa cccgtcggcc tccgaacggt actccgccac cgagggacct 5220 gagcgagtcc gcatcgaccg gatcggaaaa cctctcgaga aaggcgtcta accagtcaca 5280 gtcgcaaggt aggctgagca ccgtggcggg cggcagcggg tggcggtcgg ggttgtttct 5340 ggcggaggtg ctgctgatga tgtaattaaa gtaggcggt 5379 <210> 71 <211> 43 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Primer specific for the heavy chain variable region of the 3D3 and 3G10 antibodies <400> 71 gggttccagg ttccactggc gaggttcagc tgcagcagtc tgt 43 <210> 72 <211> 43 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Primer specific for the heavy chain variable region of the 3C4 antibody <400> 72 gggttccagg ttccactggc gaggtgcagc ttcaggagtc agg 43 <210> 73 <211> 38 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> reverse primer to amplify the 3D3, 3G10 and 3C4 antibody heavy chains <400> 73 ggggccaggg gaaagacaga tgggcccttc gttgaggc 38 <210> 74 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> light chain CDR1 consensus version 1 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa is a basic amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa is a basic amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> Xaa is His, Tyr or Asn <220> <221> MISC_FEATURE <222> (9)..(9) <223> Xaa is Ser, Thr, Asn or Arg <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Xaa is absent, Ser or Asn <220> <221> MISC_FEATURE <222> (11)..(11) <223> Xaa is Asp, Phe or Asn <220> <221> MISC_FEATURE <222> (12)..(12) <223> Xaa is Gly or Gln <220> <221> MISC_FEATURE <222> (13)..(13) <223> Xaa is Lys, Leu or Asn <220> <221> MISC_FEATURE <222> (14)..(14) <223> Xaa is Thr or Asn <220> <221> MISC_FEATURE <222> (15)..(15) <223> Xaa is an aromatic amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (17)..(17) <223> Xaa is Ala, Asn, Glu or Tyr <400> 74 Xaa Ser Ser Xaa Ser Leu Leu Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Leu 1 5 10 15 Xaa <210> 75 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> light chain CDR1 consensus version 2 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> Xaa is an hydrophobic amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> Xaa is Gly or His <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> Xaa is Thr, Asn or Arg <220> <221> MISC_FEATURE <222> (9)..(9) <223> Xaa is Phe, Tyr or Ala <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Xaa is an hydrophobic amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (11)..(11) <223> Xaa is Asn or Ala <400> 75 Lys Ala Ser Gln Asp Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5 10 <210> 76 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> light chain CDR2 consensus version 1 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa is Ala or Gly <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa is Arg or Thr <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> Xaa is Glu, Lys or Ala <400> 76 Phe Xaa Ser Thr Xaa Xaa Ser 1 5 <210> 77 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> light chain CDR2 consensus version 2 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa is Leu or Lys <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa is a basic amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa is Leu or Arg <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> Xaa is Asp or Phe <400> 77 Xaa Val Ser Xaa Xaa Xaa Ser 1 5 <210> 78 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> light chain CDR2 consensus version 3 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa is a basic amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> Xaa is Asp or Ala <400> 78 Xaa Ala Asn Arg Leu Val Xaa 1 5 <210> 79 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> light chain CDR3 consensus version 1 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa is Gln or Leu <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa is an aromatic amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa is Asp, Phe or Tyr <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa is Glu, Ala, Asn or Ser <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> Xaa is Ile, Phe or Thr <400> 79 Xaa Gln Xaa Xaa Xaa Xaa Pro Leu Thr 1 5 <210> 80 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> light chain CDR3 consensus version 2 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa is an aromatic amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa is Asn or Ser <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> Xaa is Ile or Thr <400> 80 Gln Gln His Xaa Xaa Xaa Pro Leu Thr 1 5 <210> 81 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> light chain CDR3 consensus version 3 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa is an aromatic amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa is a neutral hydrophilic amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> Xaa is Phe or Val <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> Xaa is Arg or Leu <400> 81 Xaa Gln Gly Xaa His Xaa Pro Xaa Thr 1 5 <210> 82 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> heavy chain CDR1 consensus <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa is Thr, Ile or Lys <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa is a neutral hydrophilic amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> Xaa is an acidic amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> Xaa is Glu, Asn or Asp <220> <221> MISC_FEATURE <222> (9)..(9) <223> Xaa is an hydrophobic amino acid <400> 82 Gly Tyr Xaa Phe Xaa Xaa Tyr Xaa Xaa His 1 5 10 <210> 83 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> heavy chain CDR2 consensus version 1 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa is Val or Gly <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa is an hydrophobic amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa is Ala, Gly or Glu <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> Xaa is Arg, Gly, Asp, Ala, Ser, Asn or Val <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Xaa is an hydrophobic amino acid <400> 83 Xaa Xaa Asp Pro Xaa Thr Gly Xaa Thr Xaa 1 5 10 <210> 84 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> heavy chain CDR2 consensus version 2 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa is an hydrophobic amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa is Ala, Glu or Gly <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> Xaa is Arg, Gly, Ala, Ser, Asn, Val or Asp <400> 84 Val Xaa Asp Pro Xaa Thr Gly Xaa Thr Ala 1 5 10 <210> 85 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> heavy chain CDR2 consensus version 3 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa is Ser or Asn <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa is an aromatic amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa is Asp, Glu or Asn <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> Xaa is Asp or His <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> Xaa is Tyr, Ser or Asn <220> <221> MISC_FEATURE <222> (9)..(9) <223> Xaa is Asp, Glu or Asn <400> 85 Tyr Ile Xaa Xaa Xaa Gly Xaa Xaa Xaa 1 5 <210> 86 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> heavy chain CDR2 consensus version 4 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa is Asn or Tyr <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> Xaa is Glu, Asp or Asn <400> 86 Xaa Ile Asn Pro Tyr Asn Xaa Val Thr Glu 1 5 10 <210> 87 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> heavy chain CDR2 consensus version 5 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa is Asn or Tyr <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> Xaa is Gly or Thr <220> <221> MISC_FEATURE <222> (9)..(9) <223> Xaa is Ile or Thr <400> 87 Asp Ile Asn Pro Xaa Tyr Gly Xaa Xaa Thr 1 5 10 <210> 88 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> heavy chain CDR3 consensus version 1 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa is Gly or Ser <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa is Tyr or His <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa is Ala or Ser <400> 88 Met Xaa Xaa Xaa Asp Tyr 1 5 <210> 89 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> heavy chain CDR3 consensus version 2 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa is Gly or Ser <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa is absent or Met <400> 89 Ile Xaa Tyr Ala Xaa Asp Tyr 1 5 <210> 90 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> heavy chain CDR3 consensus version 3 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa is Arg or Trp <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa is an aromatic amino acid <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> Xaa is a basic amino acid <400> 90 Ala Xaa Xaa Gly Leu Arg Xaa 1 5 <210> 91 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Exemplary embodiment of a light chain CDR1 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> Xaa is Asn or His <220> <221> MISC_FEATURE <222> (9)..(9) <223> Xaa is Ser or Thr <220> <221> MISC_FEATURE <222> (10)..(10) <223> Xaa is Ser, Asn or Asp <220> <221> MISC_FEATURE <222> (11)..(11) <223> Xaa is Asn or Gly <220> <221> MISC_FEATURE <222> (12)..(12) <223> Xaa is Gln, Asn or Lys <220> <221> MISC_FEATURE <222> (13)..(13) <223> Xaa is Lys or Leu <400> 91 Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Asn Tyr Leu 1 5 10 15 Ala <210> 92 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Exemplary embodiment of a light chain CDR1 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> Xaa is Asn or Thr <220> <221> MISC_FEATURE <222> (9)..(9) <223> Xaa is Tyr or Phe <400> 92 Lys Ala Ser Gln Asp Ile His Xaa Xaa Leu Asn 1 5 10 <210> 93 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Exemplary embodiment of a light chain CDR2 <400> 93 Phe Ala Ser Thr Arg Glu Ser 1 5 <210> 94 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Exemplary embodiment of a light chain CDR2 <400> 94 Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser 1 5 <210> 95 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Exemplary embodiment of a light chain CDR2 <400> 95 Arg Ala Asn Arg Leu Val Asp 1 5 <210> 96 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Exemplary embodiment of a light chain CDR3 <400> 96 Gln Gln His Tyr Ser Thr Pro Leu Thr 1 5 <210> 97 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Exemplary embodiment of a light chain CDR3 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa is Trp or Leu <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa is Tyr or Gly <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa is Asp or Thr <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa is Ala, Glu or His <400> 97 Xaa Gln Xaa Xaa Xaa Phe Pro Arg Thr 1 5 <210> 98 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Exemplary embodiment of a heavy chain CDR1 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa is The or Ile <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> Xaa is Asp or Glu <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8) <223> Xaa is Glu or Asn <220> <221> MISC_FEATURE <222> (9)..(9) <223> Xaa is Met, Ile or Val <400> 98 Gly Tyr Xaa Phe Thr Xaa Tyr Xaa Xaa His 1 5 10 <210> 99 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Exemplary embodiment of a heavy chain CDR1 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa is Thr or Ser <400> 99 Gly Phe Xaa Ile Thr Ser Gly Tyr Gly Trp His 1 5 10 <210> 100 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Exemplary embodiment of a heavy chain CDR2 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (1)..(1) <223> Xaa is Val, Asn or Gly <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa is Ile or Leu <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa is Glu, Ala or Gly <220> <221> MISC_FEATURE <222> (6)..(6) <223> Xaa is Thr or Tyr <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa can be any naturally occurring amino acid <400> 100 Xaa Xaa Asp Pro Xaa Xaa Gly Xaa Thr Ala 1 5 10 <210> 101 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Exemplary embodiment of a heavy chain CDR2 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa is Asn or Ser <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa is Phe or Tyr <220> <221> MISC_FEATURE <222> (5)..(5) <223> Xaa is Asn or Asp <400> 101 Tyr Ile Xaa Xaa Xaa Gly 1 5 <210> 102 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Exemplary embodiment of a heavy chain CDR3 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (4)..(4) <223> Xaa is Ser or Ala <400> 102 Met Gly Tyr Xaa Asp Tyr 1 5 <210> 103 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Exemplary embodiment of a heavy chain CDR3 <400> 103 Ala Ser Ser Tyr Asp Gly Phe Leu Ala Tyr 1 5 10 <210> 104 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Exemplary embodiment of a heavy chain CDR3 <220> <221> MISC_FEATURE <222> (2)..(2) <223> Xaa is Arg or Trp <220> <221> MISC_FEATURE <222> (3)..(3) <223> Xaa is Trp or Phe <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> Xaa is Gln or Asn <400> 104 Ala Xaa Xaa Gly Leu Arg Xaa 1 5 <210> 105 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1A02 light chain <400> 105 Asp Ala Val Met Thr Gln Ile Pro Leu Thr Leu Ser Val Thr Ile Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Leu Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser 20 25 30 Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Lys Arg Leu Ile Ser Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Leu Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Phe Pro Arg Thr Phe Ala Gly Gly Thr Asn Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 106 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1F06 light chain <400> 106 Ser Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Leu Ser Val Thr Ile Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Thr Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser 20 25 30 Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Lys Arg Leu Ile Ser Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Gly Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Phe Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 107 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1E08 light chain <400> 107 Asp Ala Val Met Thr Gln Ile Pro Leu Thr Leu Ser Val Thr Ile Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser 20 25 30 Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Phe Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 108 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1G10 light chain <400> 108 Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Arg Ser Leu Ser Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser 20 25 30 Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Pro 35 40 45 Pro Lys Val Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Gly Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly 85 90 95 Ser His Val Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys 100 105 110 <210> 109 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1E10 light chain <400> 109 Asp Ile Val Met Thr Gln Ala Ala Pro Ser Val Pro Val Thr Pro Gly 1 5 10 15 Glu Ser Val Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Lys Ser Leu Leu His Ser 20 25 30 Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Tyr Trp Phe Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Arg Met Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Ala Phe Thr Leu Arg Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln His 85 90 95 Leu Glu Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 110 <211> 113 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1A09 light chain <400> 110 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ala Met Ser Leu Gly 1 5 10 15 Gln Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser 20 25 30 Asn Asn Gln Leu Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln 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sequence of the 3z1G08 light chain <400> 115 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ala Met Ser Val Gly 1 5 10 15 Gln Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser 20 25 30 Ser Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln 35 40 45 Ser Pro Lys Leu Leu Val Tyr Phe Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val 50 55 60 Pro Asp Arg Phe Ile Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 65 70 75 80 Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Asp Tyr Phe Cys Gln Gln 85 90 95 His Tyr Ser Thr Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu 100 105 110 Lys <210> 116 <211> 113 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1F07 light chain <400> 116 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ala Met Ser Val Gly 1 5 10 15 Gln Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser 20 25 30 Ser Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln 35 40 45 Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Phe Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val 50 55 60 Pro Asp Arg Phe 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110 Ser Ser <210> 137 <211> 114 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1B02 heavy chain <400> 137 His Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly 1 5 10 15 Ala Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp 20 25 30 Tyr Glu Ile His Trp Val Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp 35 40 45 Ile Gly Val Ile Asp Pro Glu Thr Gly Ala Thr Ala Tyr Asn Gln Lys 50 55 60 Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala 65 70 75 80 Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr 85 90 95 Cys Met Gly Tyr Ser Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 138 <211> 114 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1F04 heavy chain <400> 138 His Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly 1 5 10 15 Ala Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp 20 25 30 Tyr Glu Ile His Trp Val Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp 35 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Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1B08 heavy chain <400> 140 His Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly 1 5 10 15 Ala Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp 20 25 30 Tyr Glu Ile His Trp Val Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp 35 40 45 Ile Gly Val Ile Asp Pro Glu Thr Gly Asp Thr Ala Tyr Asn Gln Asn 50 55 60 Phe Thr Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala 65 70 75 80 Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr 85 90 95 Cys Met Gly Tyr Ala Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 141 <211> 114 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1G08 heavy chain <400> 141 His Gln Val Gln Leu Lys Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly 1 5 10 15 Ala Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp 20 25 30 Tyr Glu Val His Trp Val Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp 35 40 45 Ile Gly Val Ile Asp Pro Ala Thr Gly Asp 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sequence of the 3z1E12 heavy chain <400> 143 His Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Glu Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly 1 5 10 15 Ala Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp 20 25 30 Tyr Glu Ile His Trp Val Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp 35 40 45 Ile Gly Val Ile Asp Pro Glu Thr Gly Asp Thr Ala Tyr Asn Gln Lys 50 55 60 Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala 65 70 75 80 Tyr Met Glu Leu Ser Arg Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr 85 90 95 Cys Met Gly His Ser Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 144 <211> 114 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1D03 heavy chain <400> 144 His Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Val Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly 1 5 10 15 Ala Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe Thr Asp 20 25 30 Tyr Glu Ile His Trp Val Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp 35 40 45 Ile Gly Val Ile Asp Pro Glu Thr Gly Asn Thr Ala Phe Asn Gln Lys 50 55 60 Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Ile Ser Ser Ser Thr Ala 65 70 75 80 Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr 85 90 95 Cys Met Gly Tyr Ser Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 145 <211> 114 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1G12 heavy chain <400> 145 His Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Val Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly 1 5 10 15 Ala Ser Val Thr Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe Thr Asp 20 25 30 Tyr Glu Ile His Trp Val Lys Gln Thr Pro Ala His Gly Leu Glu Trp 35 40 45 Ile Gly Val Ile Asp Pro Glu Thr Gly Asn Thr Ala Phe Asn Gln Lys 50 55 60 Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Ile Ser Ser Ser Thr Ala 65 70 75 80 Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr 85 90 95 Cys Met Gly Tyr Ser Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 146 <211> 114 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1F10 heavy chain <400> 146 His Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Val Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly 1 5 10 15 Ala Pro Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp 20 25 30 Tyr Glu Val His Trp Val Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp 35 40 45 Ile Gly Val Ile Asp Pro Glu Thr Gly Ala Thr Ala Tyr Asn Gln Lys 50 55 60 Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Ala Ala 65 70 75 80 Tyr Met Glu Leu Ser Arg Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr 85 90 95 Cys Met Ser Tyr Ser Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 147 <211> 114 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1C03 heavy chain <400> 147 His Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Val Ala Glu Val Val Arg Pro Gly 1 5 10 15 Ala Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp 20 25 30 Tyr Glu Ile His Trp Val Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp 35 40 45 Ile Gly Val Ile Asp Pro Glu Thr Gly Val Thr Ala Tyr Asn Gln Arg 50 55 60 Phe Arg Asp Lys Ala Thr Leu Thr Thr Asp Lys Ser Ser Ser Thr 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Arg Pro Gly 1 5 10 15 Ala Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp 20 25 30 Tyr Glu Ile His Trp Val Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp 35 40 45 Ile Gly Val Leu Asp Pro Gly Thr Gly Arg Thr Ala Tyr Asn Gln Lys 50 55 60 Phe Lys Asp Lys Ala Thr Leu Ser Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala 65 70 75 80 Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr 85 90 95 Cys Met Ser Tyr Ser Asp Tyr Trp Gly Pro Gly Thr Thr Leu Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 150 <211> 114 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1B11 heavy chain <400> 150 His Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Val Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly 1 5 10 15 Ala Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp 20 25 30 Tyr Glu Met His Trp Val Lys Gln Thr Pro Val Arg Gly Leu Glu Trp 35 40 45 Ile Gly Val Ile Asp Pro Ala Thr Gly Asp Thr Ala Tyr Asn Gln Lys 50 55 60 Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Ala Ala 65 70 75 80 Phe Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr 85 90 95 Cys Met Gly Tyr Ser Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 151 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1E06 heavy chain <400> 151 His Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly 1 5 10 15 Ala Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Asp 20 25 30 Tyr Glu Met His Trp Val Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp 35 40 45 Ile Gly Gly Ile Asp Pro Glu Thr Gly Asp Thr Val Tyr Asn Gln Lys 50 55 60 Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala 65 70 75 80 Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr 85 90 95 Cys Ile Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 152 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 4z1A02 heavy chain <400> 152 His Gln Val Lys Leu Gln Gln Ser Gly Thr Glu Leu Val Arg Pro Gly 1 5 10 15 Ala Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Lys Phe Thr Asp 20 25 30 Tyr Glu Met His Trp Val Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp 35 40 45 Ile Gly Gly Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Lys 50 55 60 Phe Lys Gly Lys Ala Ile Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Thr Thr Ala 65 70 75 80 Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr 85 90 95 Cys Ile Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 153 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1E10 heavy chain <400> 153 His Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly 1 5 10 15 Ala Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Asp Thr Phe Thr Asp 20 25 30 Tyr Tyr Met Asn Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp 35 40 45 Ile Gly Asp Ile Asn Pro Asn Tyr Gly Gly Ile Thr Tyr Asn Gln Lys 50 55 60 Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala 65 70 75 80 Tyr Met Glu Leu Arg Gly Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr 85 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Val Thr Gly Phe Ser Ile Thr Ser 20 25 30 Gly Tyr Gly Trp His Trp Ile Arg Gln Phe Pro Gly Asp Lys Leu Glu 35 40 45 Trp Met Gly Tyr Ile Ser Phe Asn Gly Asp Tyr Asn Tyr Asn Pro Ser 50 55 60 Leu Lys Ser Arg Ile Ser Ile Thr Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe 65 70 75 80 Phe Leu Gln Leu Ser Ser Val Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr 85 90 95 Cys Ala Ser Ser Tyr Asp Gly Leu Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ala 115 <210> 156 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1C02 heavy chain <400> 156 His Asp Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Asp Leu Val Lys Pro Ser 1 5 10 15 Gln Ser Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Thr Gly Phe Ser Ile Thr Ser 20 25 30 Gly Tyr Gly Trp His Trp Ile Arg Gln Phe Pro Gly Asn Lys Leu Glu 35 40 45 Trp Met Gly Tyr Ile Ser Phe Asn Gly Asp Ser Asn Tyr Asn Pro Ser 50 55 60 Leu Lys Ser Arg Ile Ser Ile Thr Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe 65 70 75 80 Phe Leu Gln Leu Asn Ser Val Thr Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr 85 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<212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1A02 light chain CDR2 <400> 159 Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser 1 5 <210> 160 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1A02 light chain CDR3 <400> 160 Trp Gln Gly Thr His Phe Pro Arg Thr 1 5 <210> 161 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1A02 heavy chain CDR1 <400> 161 Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Asn Met His 1 5 10 <210> 162 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1A02 heavy chain CDR2 <400> 162 Tyr Ile Asn Pro Tyr Asn Asp Val Thr Glu 1 5 10 <210> 163 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1A02 heavy chain CDR3 <400> 163 Ala Trp Phe Gly Leu Arg Gln 1 5 <210> 164 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1E10 light chain CDR1 <400> 164 Arg Ser Ser Lys Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Tyr 1 5 10 15 <210> 165 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1E10 light chain CDR2 <400> 165 Arg Met Ser Asn Leu Ala Ser 1 5 <210> 166 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1E10 light chain CDR3 <400> 166 Met Gln His Leu Glu Tyr Pro Tyr Thr 1 5 <210> 167 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1E10 heavy chain CDR1 <400> 167 Gly Asp Thr Phe Thr Asp Tyr Tyr Met Asn 1 5 10 <210> 168 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1E10 heavy chain CDR2 <400> 168 Asp Ile Asn Pro Asn Tyr Gly Gly Ile Thr 1 5 10 <210> 169 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1E10 heavy chain CDR3 <400> 169 Gln Ala Tyr Tyr Arg Asn Ser Asp Tyr 1 5 <210> 170 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1G12 light chain CDR1 <400> 170 Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala Val Ala 1 5 10 <210> 171 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1G12 light chain CDR2 <400> 171 Trp Thr Ser Thr Arg His Thr 1 5 <210> 172 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1G12 light chain CDR3 <400> 172 Gln Gln His Tyr Ser Ile Pro Leu Thr 1 5 <210> 173 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1G12 heavy chain CDR1 <400> 173 Gly Tyr Ile Phe Thr Asp Tyr Glu Ile His 1 5 10 <210> 174 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1G12 heavy chain CDR2 <400> 174 Val Ile Asp Pro Glu Thr Gly Asn Thr Ala 1 5 10 <210> 175 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acid sequence of the 3z1G12 heavy chain CDR3 <400> 175 Met Gly Tyr Ser Asp Tyr 1 5 <210> 176 <211> 240 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized 3D3 antibody light chain <400> 176 Met Val Leu Gln Thr Gln Val Phe Ile Ser Leu Leu Leu Trp Ile Ser 1 5 10 15 Gly Ala Tyr Gly Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala 20 25 30 Val Ser Leu Gly Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser 35 40 45 Leu Leu Asn Ser Asn Phe Gln Lys Asn Phe Leu Ala Trp Tyr Gln Gln 50 55 60 Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Phe Ala Ser Thr Arg 65 70 75 80 Glu Ser Ser Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp 85 90 95 Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr 100 105 110 Tyr Cys Gln Gln His Tyr Ser Thr Pro Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr 115 120 125 Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe 130 135 140 Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys 145 150 155 160 Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val 165 170 175 Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln 180 185 190 Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser 195 200 205 Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His 210 215 220 Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 240 <210> 177 <211> 462 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized 3D3 antibody heavy chain <400> 177 Met Asp Trp Thr Trp Arg Ile Leu Phe Leu Val Ala Ala Ala Thr Gly 1 5 10 15 Thr His Ala Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys 20 25 30 Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe 35 40 45 Thr Asp Tyr Glu Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Met Gly Val Ile Asp Pro Glu Thr Gly Asn Thr Ala Phe Asn 65 70 75 80 Gln Lys Phe Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Thr Ser Thr Ser 85 90 95 Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Met Gly Tyr Ser Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 115 120 125 Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala 130 135 140 Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu 145 150 155 160 Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly 165 170 175 Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser 180 185 190 Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu 195 200 205 Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr 210 215 220 Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr 225 230 235 240 Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe 245 250 255 Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro 260 265 270 Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val 275 280 285 Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr 290 295 300 Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 305 310 315 320 Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 325 330 335 Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser 340 345 350 Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro 355 360 365 Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val 370 375 380 Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 385 390 395 400 Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp 405 410 415 Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 420 425 430 Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 435 440 445 Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 450 455 460 <210> 178 <211> 113 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized 3D3 antibody light chain variable region <400> 178 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser 20 25 30 Asn Phe Gln Lys Asn Phe Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln 35 40 45 Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Phe Ala Ser Thr Arg Glu Ser Ser Val 50 55 60 Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 65 70 75 80 Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln 85 90 95 His Tyr Ser Thr Pro Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile 100 105 110 Lys <210> 179 <211> 113 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized 3D3 antibody heavy chain variable region <400> 179 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Glu Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Val Ile Asp Pro Glu Thr Gly Asn Thr Ala Phe Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Met Gly Tyr Ser Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser 100 105 110 Ser <210> 180 <211> 234 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized 3C4 antibody light chain <400> 180 Met Val Leu Gln Thr Gln Val Phe Ile Ser Leu Leu Leu Trp Ile Ser 1 5 10 15 Gly Ala Tyr Gly Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser 20 25 30 Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp 35 40 45 Ile His Asn Phe Leu Asn Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro 50 55 60 Lys Thr Leu Ile Phe Arg Ala Asn Arg Leu Val Asp Gly Val Pro Ser 65 70 75 80 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser 85 90 95 Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Ser Cys Leu Gln Tyr Asp 100 105 110 Glu Ile Pro Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg 115 120 125 Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln 130 135 140 Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr 145 150 155 160 Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser 165 170 175 Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr 180 185 190 Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys 195 200 205 His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro 210 215 220 Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 <210> 181 <211> 466 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized 3C4 antibody heavy chain <400> 181 Met Asp Trp Thr Trp Arg Ile Leu Phe Leu Val Ala Ala Ala Thr Gly 1 5 10 15 Thr His Ala Glu Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys 20 25 30 Pro Ser Gln Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Ile 35 40 45 Thr Ser Gly Tyr Gly Trp His Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly 50 55 60 Leu Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Asn Tyr Asp Gly His Asn Asp Tyr Asn 65 70 75 80 Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Gln Asp Thr Ser Lys Asn 85 90 95 Gln Phe Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Ser Ser Tyr Asp Gly Leu Phe Ala Tyr Trp Gly Gln 115 120 125 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 130 135 140 Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala 145 150 155 160 Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 165 170 175 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 180 185 190 Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 195 200 205 Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys 210 215 220 Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp 225 230 235 240 Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly 245 250 255 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 260 265 270 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 275 280 285 Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 290 295 300 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 305 310 315 320 Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 325 330 335 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 340 345 350 Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 355 360 365 Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 370 375 380 Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 385 390 395 400 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 405 410 415 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp 420 425 430 Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 435 440 445 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 450 455 460 Gly Lys 465 <210> 182 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized 3C4 antibody light chain variable region <400> 182 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile His Asn Phe 20 25 30 Leu Asn Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Thr Leu Ile 35 40 45 Phe Arg Ala Asn Arg Leu Val Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Ser Cys Leu Gln Tyr Asp Glu Ile Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 183 <211> 116 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized 3C4 antibody heavy chain variable region <400> 183 Glu Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Ile Thr Ser Gly 20 25 30 Tyr Gly Trp His Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp 35 40 45 Ile Gly Tyr Ile Asn Tyr Asp Gly His Asn Asp Tyr Asn Pro Ser Leu 50 55 60 Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Gln Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser 65 70 75 80 Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Ser Ser Tyr Asp Gly Leu Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser 115

Claims (199)

  1. KAAG1(서열번호 2) 또는 서열번호 2와의 서열 동일성이 80% 이상인 KAAG1 변이체에 특이적으로 결합할 수 있는, 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  2. 제1항에 있어서, 상기 항체는 KAAG1의 분비된 형태 또는 KAAG1의 세포외 영역에 특이적으로 결합할 수 있는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  3. 제2항에 있어서, 상기 항체는 서열번호 2의 30번 아미노산에서 84번 아미노산 사이에 위치된 도메인에 결합하는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  4. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 항체는 서열번호 2의 아미노산 1 - 35번 이내의 아미노산을 포함하는 에피토프에 결합할 수 있는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  5. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 항체는 서열번호 2의 아미노산 36 - 60번 이내의 아미노산을 포함하는 에피토프에 결합할 수 있는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  6. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 항체는 서열번호 2의 61 - 84번 아미노산 이내의 아미노산을 포함하는 에피토프에 결합할 수 있는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  7. 제1항 내지 제6항 중 임의의 어느 한항에 있어서, 상기 항체는 서열번호 16과 80% 이상 동일한 서열, 서열번호 20과 80% 이상 동일한 서열, 서열번호 24와 80% 이상 동일한 서열, 서열번호 105과 80% 이상 동일한 서열, 서열번호 109와 80% 이상 동일한 서열 및 서열번호 126과 80% 이상 동일한 서열로 이루어진 군으로부터 선택되는 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  8. 제7항에 있어서, 상기 경쇄 가변 도메인은 서열번호 27과 80% 이상 동일한 CDRL1 서열, 서열번호 28과 80% 이상 동일한 CDRL2 서열 및 서열번호 29와 80% 이상 동일한 CDRL3 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  9. 제8항에 있어서, 상기 CDRL1 서열은 서열번호 27과 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  10. 제9항에 있어서, 상기 CDRL1 서열은 서열번호 27과 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  11. 제8항 내지 제10항 중 어느 한항에 있어서, 상기 CDRL2 서열은 서열번호 28과 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  12. 제11항에 있어서, 상기 CDRL2 서열은 서열번호 28과 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  13. 제8항 내지 제12항 중 어느 한항에 있어서, 상기 CDRL3 서열은 서열번호 29와 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  14. 제13항에 있어서, 상기 CDRL3 서열은 서열번호 29와 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  15. 제7항에 있어서, 상기 경쇄 가변 도메인은 서열번호 33과 80% 이상 동일한 CDRL1 서열, 서열번호 34와 80% 이상 동일한 CDRL2 서열 및 서열번호 35와 80% 이상 동일한 CDRL3 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  16. 제15항에 있어서, 상기 CDRL1 서열은 서열번호 33과 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  17. 제16항에 있어서, 상기 CDRL1 서열은 서열번호 33과 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  18. 제15항 내지 제17항 중 어느 한항에 있어서, 상기 CDRL2 서열은 서열번호 34와 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  19. 제18항에 있어서, 상기 CDRL2 서열은 서열번호 34와 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  20. 제15항 내지 제19항 중 어느 한항에 있어서, 상기 CDRL3 서열은 서열번호 35와 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  21. 제20항에 있어서, 상기 CDRL3 서열은 서열번호 35와 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  22. 제7항에 있어서, 상기 경쇄 가변 도메인은 서열번호 39와 80% 이상 동일한 CDRL1 서열, 서열번호 40과 80% 이상 동일한 CDRL2 서열 및 서열번호 41과 80% 이상 동일한 CDRL3 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  23. 제22항에 있어서, 상기 CDRL1 서열은 서열번호 39와 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  24. 제23항에 있어서, 상기 CDRL1 서열은 서열번호 39와 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  25. 제22항 내지 제24항 중 어느 한항에 있어서, 상기 CDRL2 서열은 서열번호 40과 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  26. 제25항에 있어서, 상기 CDRL2 서열은 서열번호 40과 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  27. 제22항 내지 제26항 중 어느 한항에 있어서, 상기 CDRL3 서열은 서열번호 41과 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  28. 제27항에 있어서, 상기 CDRL3 서열은 서열번호 41과 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  29. 제7항에 있어서, 상기 경쇄 가변 도메인은 서열번호 158과 80% 이상 동일한 CDRL1 서열, 서열번호 159와 80% 이상 동일한 CDRL2 서열 및 서열번호 160과 80% 이상 동일한 CDRL3 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  30. 제29항에 있어서, 상기 CDRL1 서열은 서열번호 158과 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  31. 제30항에 있어서, 상기 CDRL1 서열은 서열번호 158과 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  32. 제29항 내지 제31항 중 어느 한항에 있어서, 상기 CDRL2 서열은 서열번호 159와 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  33. 제32항에 있어서, 상기 CDRL2 서열은 서열번호 159와 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  34. 제29항 내지 제33항 중 어느 한항에 있어서, 상기 CDRL3 서열은 서열번호 160과 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  35. 제34항에 있어서, 상기 CDRL3 서열은 서열번호 160과 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  36. 제7항에 있어서, 상기 경쇄 가변 도메인은 서열번호 164와 80% 이상 동일한 CDRL1 서열, 서열번호 165와 80% 이상 동일한 CDRL2 서열 및 서열번호 166과 80% 이상 동일한 CDRL3 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  37. 제36항에 있어서, 상기 CDRL1 서열은 서열번호 164와 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  38. 제37항에 있어서, 상기 CDRL1 서열은 서열번호 164와 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  39. 제36항 내지 제38항 중 어느 한항에 있어서, 상기 CDRL2 서열은 서열번호 165와 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  40. 제39항에 있어서, 상기 CDRL2 서열은 서열번호 165와 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  41. 제36항 내지 제40항 중 어느 한항에 있어서, 상기 CDRL3 서열은 서열번호 166과 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  42. 제41항에 있어서, 상기 CDRL3 서열은 서열번호 166과 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  43. 제7항에 있어서, 상기 경쇄 가변 도메인은 서열번호 170과 80% 이상 동일한 CDRL1 서열, 서열번호 171과 80% 이상 동일한 CDRL2 서열 및 서열번호 172와 80% 이상 동일한 CDRL3 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  44. 제43항에 있어서, 상기 CDRL1 서열은 서열번호 170과 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  45. 제44항에 있어서, 상기 CDRL1 서열은 서열번호 170과 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  46. 제43항 내지 제45항 중 어느 한항에 있어서, 상기 CDRL2 서열은 서열번호 171과 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  47. 제46항에 있어서, 상기 CDRL2 서열은 서열번호 171과 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  48. 제43항 내지 제47항 중 어느 한항에 있어서, 상기 CDRL3 서열은 서열번호 172와 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  49. 제48항에 있어서, 상기 CDRL3 서열은 서열번호 172와 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  50. 제1항 내지 제49항 중 어느 한항에 있어서, 상기 항체는 서열번호 18과 80% 이상 동일한 서열, 서열번호 22와 80% 이상 동일한 서열, 서열번호 26과 80% 이상 동일한 서열, 서열번호 132와 80% 이상 동일한 서열, 서열번호 145와 80% 이상 동일한 서열 및 서열번호 153과 80% 이상 동일한 서열로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  51. 제50항에 있어서, 상기 중쇄 가변 도메인은 서열번호 30과 80% 이상 동일한 CDRH1 서열, 서열번호 31과 80% 이상 동일한 CDRH2 서열 및 서열번호 32와 80% 이상 동일한 CDRH3 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  52. 제51항에 있어서, 상기 CDRH1 서열은 서열번호 30과 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  53. 제52항에 있어서, 상기 CDRH1 서열은 서열번호 30과 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  54. 제51항 내지 제53항 중 어느 한항에 있어서, 상기 CDRH2 서열은 서열번호 31과 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  55. 제54항에 있어서, 상기 CDRH2 서열은 서열번호 31과 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  56. 제51항 내지 제55항 중 어느 한항에 있어서, 상기 CDRH3 서열은 서열번호 32와 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  57. 제56항에 있어서, 상기 CDRH3 서열은 서열번호 32와 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  58. 제50항에 있어서, 상기 중쇄 가변 도메인은 서열번호 36과 80% 이상 동일한 CDRH1 서열, 서열번호 37과 80% 이상 동일한 CDRH2 서열 및 서열번호 38과 80% 이상 동일한 CDRH3 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  59. 제58항에 있어서, 상기 CDRH1 서열은 서열번호 36과 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  60. 제59항에 있어서, 상기 CDRH1 서열은 서열번호 36과 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  61. 제58항 내지 제60항 중 어느 한항에 있어서, 상기 CDRH2 서열은 서열번호 37과 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  62. 제61항에 있어서, 상기 CDRH2 서열은 서열번호 37과 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  63. 제58항 내지 제62항 중 어느 한항에 있어서, 상기 CDRH3 서열은 서열번호 38과 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  64. 제63항에 있어서, 상기 CDRH3 서열은 서열번호 38과 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  65. 제50항에 있어서, 상기 중쇄 가변 도메인은 서열번호 42와 80% 이상 동일한 CDRH1 서열, 서열번호 43과 80% 이상 동일한 CDRH2 서열 및 서열번호 44와 80% 이상 동일한 CDRH3 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 항체 또는 항원 결합 단편.
  66. 제65항에 있어서, 상기 CDRH1 서열은 서열번호 42와 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  67. 제66항에 있어서, 상기 CDRH1 서열은 서열번호 42와 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  68. 제65항 내지 제67항 중 어느 한항에 있어서, 상기 CDRH2 서열은 서열번호 43과 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  69. 제68항에 있어서, 상기 CDRH2 서열은 서열번호 43과 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  70. 제65항 내지 제69항 중 어느 한항에 있어서, 상기 CDRH3 서열은 서열번호 44와 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  71. 제70항에 있어서, 상기 CDRH3 서열은 서열번호 44와 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  72. 제50항에 있어서, 상기 중쇄 가변 도메인은 서열번호 161과 80% 이상 동일한 CDRH1 서열, 서열번호 162와 80% 이상 동일한 CDRH2 서열 및 서열번호 163과 80% 이상 동일한 CDRH3 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 항체 또는 항원 결합 단편.
  73. 제72항에 있어서, 상기 CDRH1 서열은 서열번호 161과 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  74. 제73항에 있어서, 상기 CDRH1 서열은 서열번호 161과 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  75. 제72항 내지 제74항 중 어느 한항에 있어서, 상기 CDRH2 서열은 서열번호 162와 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  76. 제75항에 있어서, 상기 CDRH2 서열은 서열번호 162와 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  77. 제72항 내지 제76항 중 어느 한항에 있어서, 상기 CDRH3 서열은 서열번호 163과 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  78. 제77항에 있어서, 상기 CDRH3 서열은 서열번호 163과 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  79. 제50항에 있어서, 상기 중쇄 가변 도메인은 서열번호 167과 80% 이상 동일한 CDRH1 서열, 서열번호 168과 80% 이상 동일한 CDRH2 서열 및 서열번호 169와 80% 이상 동일한 CDRH3 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 항체 또는 항원 결합 단편.
  80. 제79항에 있어서, 상기 CDRH1 서열은 서열번호 166과 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  81. 제80항에 있어서, 상기 CDRH1 서열은 서열번호 166과 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  82. 제79항 내지 제81항 중 어느 한항에 있어서, 상기 CDRH2 서열은 서열번호 168과 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  83. 제82항에 있어서, 상기 CDRH2 서열은 서열번호 168과 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  84. 제79항 내지 제83항 중 어느 한항에 있어서, 상기 CDRH3 서열은 서열번호 169와 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  85. 제84항에 있어서, 상기 CDRH3 서열은 서열번호 169와 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  86. 제50항에 있어서, 상기 중쇄 가변 도메인은 서열번호 173과 80% 이상 동일한 CDRH1 서열, 서열번호 174와 80% 이상 동일한 CDRH2 서열 및 서열번호 175와 80% 이상 동일한 CDRH3 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 항체 또는 항원 결합 단편.
  87. 제86항에 있어서, 상기 CDRH1 서열은 서열번호 173과 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  88. 제87항에 있어서, 상기 CDRH1 서열은 서열번호 173과 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  89. 제87항 또는 제88항에 있어서, 상기 CDRH2 서열은 서열번호 174와 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  90. 제89항에 있어서, 상기 CDRH2 서열은 서열번호 174와 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  91. 제87항 내지 제90항 중 어느 한항에 있어서, 상기 CDRH3 서열은 서열번호 175와 90% 이상 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  92. 제91항에 있어서, 상기 CDRH3 서열은 서열번호 175와 100% 동일한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  93. 하기 a, b 및 c로 이루어진 군으로부터 선택되는 CDR을 가진 경쇄 가변 도메인을 포함하는, 분리된 항체 또는 항원 결합 단편:
    a. 서열번호 74 및 서열번호 75로 이루어진 군으로부터 선택되는 CDRL1 서열;
    b. 서열번호 76, 서열번호 77 및 서열번호 78로 이루어진 군으로부터 선택되는 CDRL2 서열; 및
    c. 서열번호 79, 서열번호 80 및 서열번호 81로 이루어진 군으로부터 선택되는 CDRL3 서열.
  94. 제93항에 있어서, 상기 항체는 하기 a, b 및 c로 이루어진 군으로부터 선택되는 CDR을 가지는 중쇄 가변 도메인을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편:
    a. 서열번호 82를 포함하는 CDRH1 서열;
    b. 서열번호 83, 서열번호 84, 서열번호 85, 서열번호 86 및 서열번호 87로 이루어진 군으로부터 선택되는 CDRH2 서열; 및
    c. 서열번호 88, 서열번호 89 및 서열번호 90으로 이루어진 군으로부터 선택되는 CDRH3 서열.
  95. 제93항 내지 제94항에 있어서, 상기 항체는 CDRL1, CDRL2 또는 CDRL3 중 2종 이상의 CDR을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  96. 제95항에 있어서, 상기 항체는 CDRL1 1개, CDRL2 1개 및 CDRL3 1개를 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  97. 제94항에 있어서, 상기 항체는 하기를 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편:
    a. CDRL1, CDRL2 또는 CDRL3 중 2종 이상의 CDR; 및
    b. CDRH1, CDRH2 또는 CDRH3 중 2종 이상의 CDR.
  98. 제97항에 있어서, 상기 항체는 CDRL1 1개, CDRL2 1개 및 CDRL3 1개를 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  99. 제97항 또는 제98항에 있어서, 상기 항체는 CDRH1 1개, CDRH2 1개 및 CDRH3 1개를 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  100. 하기 a, b 및 c로 이루어진 군으로부터 선택되는 CDR을 가진 중쇄 가변 도메인을 포함하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편:
    a. 서열번호 82를 포함하는 CDRH1 서열;
    b. 서열번호 83, 서열번호 84, 서열번호 85, 서열번호 86 및 서열번호 87로 이루어진 군으로부터 선택되는 CDRH2 서열; 및
    c. 서열번호 88, 서열번호 89 및 서열번호 90으로 이루어진 군으로부터 선택되는 CDRH3 서열.
  101. 제100항에 있어서, 상기 항체는 CDRH1 1개, CDRH2 1개 또는 CDRH3 1개를 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  102. 제100항에 있어서, 상기 항체는 CDRH1 1개, CDRH2 1개 및 CDRH3 1개를 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  103. 제7항 내지 제102항 중 어느 한항에 있어서, 하나 이상의 CDR에 하나 이상의 보존적인 아미노산 치환을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  104. 제7항 내지 제102항 중 어느 한항에 있어서, 2 이상의 CDR에 하나 이상의 보존적인 아미노산 치환을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  105. 제7항 내지 제102항 중 어느 한항에 있어서, 3 이상의 CDR에 하나 이상의 보존적인 아미노산 치환을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  106. 제7항 내지 제102항 중 어느 한항에 있어서, 하나 이상의 CDR에 2 이상의 보존적인 아미노산 치환을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  107. 제7항 내지 제102항 중 어느 한항에 있어서, 2 이상의 CDR에 2 이상의 보존적인 아미노산 치환을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  108. 제7항 내지 제102항 중 어느 한항에 있어서, 3개의 CDR에 2 이상의 보존적인 아미노산 치환을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  109. 하기를 포함하는, KAAG1, KAAG1의 분리된 형태, KAAG1의 세포외 영역 또는 그것의 변이체에 특이적으로 결합할 수 있는, 분리된 항체 또는 항원 결합 단편:
    a. 서열번호 16에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및 서열번호 18에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR,
    b. 서열번호 20에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및 서열번호 22에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR;
    c. 서열번호 24에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및 서열번호 26에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR;
    d. 서열번호 105에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및 서열번호 132에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR;
    e. 서열번호 106에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및 서열번호 133에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR;
    f. 서열번호 107에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및 서열번호 134에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR;
    g. 서열번호 108에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및 서열번호 154에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR;
    h. 서열번호 109에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및 서열번호 153에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR;
    i. 서열번호 110에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및 서열번호 135에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR;
    j. 서열번호 111에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및 서열번호 136에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR;
    k. 서열번호 112에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및 서열번호 149에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR;
    l. 서열번호 113에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및 서열번호 137에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR;
    m. 서열번호 114에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및 서열번호 140에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR;
    n. 서열번호 115에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및 서열번호 141에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR;
    o. 서열번호 116에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및 서열번호 142에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR;
    p. 서열번호 117에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및 서열번호 139에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR;
    q. 서열번호 119에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및 서열번호 143에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR;
    r. 서열번호 120에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및 서열번호 152에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR;
    s. 서열번호 121에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및 서열번호 146에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR;
    t. 서열번호 122에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및 서열번호 138에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR;
    u. 서열번호 123에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및 서열번호 150에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR;
    v. 서열번호 124에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및 서열번호 144에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR;
    w. 서열번호 126에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및 서열번호 145에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR;
    x. 서열번호 127에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및 서열번호 157에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR;
    y. 서열번호 128에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및 서열번호 155에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR;
    z. 서열번호 129에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및 서열번호 156에 명시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR; 또는
    aa. 서열번호 130에 명시된 경쇄 가변 도메인의 3개의 CDR 및 서열번호 151시된 중쇄 가변 도메인의 3개의 CDR.
  110. 제1항 내지 제109항 중 어느 한항에 있어서, KAAG1-발현성 종양 세포의 세포용해(lysis)를 유도할 수 있는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  111. 제110항에 있어서, 상기 KAAG1은 KAAG1-발현성 종양 세포의 표면에서 발현되는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  112. 제1항 내지 제109항 중 어느 한항에 있어서, KAAG1-발현성 종양 세포의 전파를 감소시킬 수 있는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  113. 제112항에 있어서, KAAG1은 KAAG1-발현성 종양 세포의 표면에서 발현되는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  114. 제112항에 있어서, 상기 KAAG1-발현성 종양 세포는 고정(anchorage)-비의존적인 증식을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  115. 제1항 내지 제109항 중 어느 한항에 있어서, KAAG1-발현성 종양의 형성을 감소시키거나 손상시킬 수 있는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  116. 제115항에 있어서, 상기 KAAG1은 KAAG1-발현성 종양 세포의 표면에서 발현되는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  117. 제1항 내지 제109항 중 어느 한항에 있어서, KAAG1을 발현하는 종양 세포를 포함하는 암의 치료에 사용하기 위한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  118. 제117항에 있어서, 상기 KAAG1은 KAAG1을 발현하는 종양 세포의 표면에서 발현되는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  119. 제1항 내지 제109항 중 어느 한항에 있어서, KAAG1을 발현하는 종양 세포를 포함하는 암의 검출에 사용하기 위한 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  120. 제119항에 있어서, 상기 KAAG1은 KAAG1을 발현하는 종양 세포의 표면에서 발현되는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  121. 제1항 내지 제120항 중 어느 한항에 있어서, 상기 항체는 불변부의 아미노산을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  122. 제121항에 있어서, 상기 불변부의 아미노산은 인간 항체로부터 유래된 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  123. 제1항 내지 제122항 중 어느 한항에 있어서, 인간 항체의 프래임워크 아미노산을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  124. 제1항 내지 제123항 중 어느 한항에 있어서, 상기 항원 결합 단편은 scFv, Fab, Fab' 또는 (Fab')2인 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  125. 제1항 내지 제124항 중 어느 한항에 있어서, 상기 항체는 단일클론 항체, 다클론 항체, 키메라 항체 및 인간화된 항체 또는 그것의 항원 결합 단편으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  126. 제125항에 있어서, 상기 항체는 단일클론 항체, 키메라 항체, 인간화된 항체 또는 그것의 항원 결합 단편인 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  127. 제1항 내지 제126항 중 어느 한항의 항체 또는 항원 결합 단편과 경쟁할 수 있는, 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  128. 제1항 내지 제127항 중 어느 한항에 있어서, 상기 항체는 검출성 모이어티 또는 세포독성 모이어티와 접합되는 것을 특징으로 하는 분리된 항체 또는 항원 결합 단편.
  129. KAAG1에 특이적으로 결합할 수 있는 항체의 경쇄 가변 도메인 또는 중쇄 가변 도메인을 코딩하는 핵산.
  130. 제129항에 있어서, 상기 항체는 KAAG1-발현성 종양 세포의 사멸을 유도할 수 있는 것을 특징으로 하는 핵산.
  131. 제129항에 있어서, 상기 항체는 KAAG1-발현성 종양 세포의 전파를 감소시킬 수 있는 것을 특징으로 하는 핵산.
  132. 제129항에 있어서, 상기 항체는 KAAG1-발현성 종양의 형성을 감소 또는 손상시킬 수 있는 것을 특징으로 하는 핵산.
  133. 하기 a, b 또는 c를 포함하는 경쇄 가변 도메인을 코딩하는 핵산:
    a. 서열번호 74 및 서열번호 75로 이루어진 군으로부터 선택되는 CDRL1 서열;
    b. 서열번호 76, 서열번호 77 및 서열번호 78로 이루어진 군으로부터 선택되는 CDRL2 서열; 또는
    c. 서열번호 79, 서열번호 80 및 서열번호 81로 이루어진 군으로부터 선택되는 CDRL3 서열.
  134. 제133항에 있어서, 상기 경쇄 가변 도메인은 CDRL1, CDRL2 또는 CDRL3 중 2종 이상의 CDR을 포함하는 것을 특징으로 하는 핵산.
  135. 제134항에 있어서, 상기 경쇄 가변 도메인은 CDRL1 1개, CDRL2 1개 및 CDRL3 1개를 포함하는 것을 특징으로 하는 핵산.
  136. 하기 a, b 또는 c를 포함하는 중쇄 가변 도메인을 코딩하는 핵산:
    a. 서열번호 82를 포함하는 CDRH1 서열
    b. 서열번호 83, 서열번호 84, 서열번호 85, 서열번호 86 및 서열번호 87로 이루어진 군으로부터 선택되는 CDRH2 서열; 또는
    c. 서열번호 88, 서열번호 89 및 서열번호 90으로 이루어진 군으로부터 선택되는 CDRH3 서열.
  137. 제136항에 있어서, 상기 중쇄 가변 도메인은 CDRH1, CDRH2 또는 CDRH3 중 2종 이상의 CDR을 포함하는 것을 특징으로 하는 핵산.
  138. 제137항에 있어서, 상기 중쇄 가변 도메인은 CDRH1 1개, CDRH2 1개 및 CDRH3 1개를 포함하는 것을 특징으로 하는 핵산.
  139. 제133항 내지 제138항 중 어느 한항에 있어서, 하나 이상의 보존적인 아미노산 치환을 포함하는 CDR을 코딩하는 것을 특징으로 하는 핵산.
  140. 제133항 내지 제138항 중 어느 한항에 있어서, 2 이상의 CDR에 하나 이상의 보존적인 아미노산 치환을 포함하는 CDR을 코딩하는 것을 특징으로 하는 핵산.
  141. 제133항 내지 제138항 중 어느 한항에 있어서, 3개의 CDR에 하나 이상의 보존적인 아미노산 치환을 포함하는 CDR을 코딩하는 것을 특징으로 하는 핵산.
  142. 제133항 내지 제138항 중 어느 한항에 있어서, 하나 이상의 CDR에 2개 이상의 보존적인 아미노산 치환을 포함하는 CDR을 코딩하는 것을 특징으로 하는 핵산.
  143. 제133항 내지 제138항 중 어느 한항에 있어서, 2 이상의 CDR에 2개 이상의 보존적인 아미노산 치환을 포함하는 CDR을 코딩하는 것을 특징으로 하는 핵산.
  144. 제133항 내지 제138항 중 어느 한항에 있어서, 3개의 CDR에 2개 이상의 보존적인 아미노산 치환을 포함하는 CDR을 코딩하는 것을 특징으로 하는 핵산.
  145. 서열번호 16, 서열번호 20, 서열번호 24, 서열번호 105, 서열번호 106, 서열번호 107, 서열번호 108, 서열번호 109, 서열번호 110, 서열번호 111, 서열번호 112, 서열번호 113, 서열번호 114, 서열번호 115, 서열번호 116, 서열번호 117, 서열번호 118, 서열번호 119, 서열번호 120, 서열번호 121, 서열번호 122, 서열번호 123, 서열번호 124, 서열번호 125, 서열번호 126, 서열번호 127. 서열번호 128, 서열번호 129, 서열번호 130 및 서열번호 131로 이루어진 군으로부터 선택되는 서열과 80% 이상의 서열 동일성을 가지는 경쇄 가변 도메인을 코딩하는 핵산.
  146. 서열번호 18, 서열번호 22, 서열번호 26, 서열번호 132, 서열번호 133, 서열번호 134, 서열번호 135, 서열번호 136, 서열번호 137, 서열번호 138, 서열번호 139, 서열번호 140, 서열번호 141, 서열번호 142, 서열번호 143, 서열번호 144, 서열번호 145, 서열번호 146, 서열번호 147, 서열번호 148, 서열번호 149, 서열번호 150, 서열번호 151, 서열번호 152, 서열번호 153, 서열번호 154, 서열번호 155, 서열번호 156, 서열번호 157로 이루어진 군으로부터 선택되는 서열과 80% 이상의 서열 동일성을 가지는 중쇄 가변 도메인을 코딩하는 핵산.
  147. 제129항 내지 제146항 중 어느 한항의 핵산을 포함하는 벡터.
  148. 제147항에 있어서, 상기 벡터는 발현 벡터인 것을 특징으로 하는 벡터.
  149. 제129항 내지 제146항 중 어느 한항의 핵산을 포함하는 분리된 세포.
  150. 제149항에 있어서, 상기 세포는 중쇄 가변 도메인을 코딩하는 핵산과 중쇄 가변 도메인을 코딩하는 핵산을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 세포.
  151. 제150항에 있어서, 상기 세포는 항체나 그것의 항원 결합 단편을 발현, 조합 및/또는 분비할 수 있는 것을 특징으로 하는 분리된 세포.
  152. 제1항 내지 제128항 중 어느 한항의 항체 또는 항원 결합 단편을 포함하거나 발현하는 분리된 세포.
  153. 제152항에 있어서, 상기 세포는 경쇄 가변 도메인을 코딩하는 핵산과 중쇄 가변 도메인을 코딩하는 핵산을 포함하는 것을 특징으로 하는 분리된 세포.
  154. 제153항에 있어서, 상기 세포는 항체 또는 그것의 항원 결합 단편을 발현, 조합 및/또는 분비할 수 있는 것을 특징으로 하는 분리된 세포.
  155. 제1항 내지 제128항 중 어느 한항의 항체 또는 항원 결합 단편과 제약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학 조성물.
  156. 제1항 내지 제128항 중 어느 한항의 항체 또는 항원 결합 단편과 담체를 포함하는 조성물.
  157. KAAG1-발현성 세포를 포함하는 암의 치료에 있어서의, 제1항 내지 제128항 중 어느 한항에 따른 분리된 항체 또는 항원 결합 단편의 용도.
  158. 제157항에 있어서, 상기 암은 난소암, 피부암, 신장암, 대장암, 육종, 백혈병, 뇌종양, 갑상선 종양, 유방암, 전립선암, 식도 종양, 방광 종양, 폐 종양 및 두경부 종양으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 용도.
  159. 제158항에 있어서, 상기 암은 악성인 것을 특징으로 하는 용도.
  160. KAAG1-발현성 세포를 포함하는 암의 진단에 있어서의, 제1항 내지 제128항 중 어느 한항에 따른 분리된 항체 또는 항원 결합 단편의 용도.
  161. 제160항에 있어서, 상기 KAAG1-발현성 세포는 고정-비의존적인 증식이 특징인 것을 특징으로 하는 용도.
  162. 제160항에 있어서, 상기 암은 난소암, 피부암, 신장암, 대장암, 육종, 백혈병, 뇌종양, 갑상선 종양, 유방암, 전립선암, 식도 종양, 방광 종양, 폐 종양 및 두경부 종양으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 용도.
  163. 제162항에 있어서, 상기 암은 악성인 것을 특징으로 하는 용도.
  164. KAAG1-발현성 종양 세포의 검출에 있어서의, 제1항 내지 제128항 중 어느 한항에 따른 분리된 항체 또는 항원 결합 단편의 용도.
  165. 제164항에 있어서, 상기 KAAG1은 KAAG1-발현성 종양 세포의 표면에서 발현되는 것을 특징으로 하는 용도.
  166. 제164항에 있어서, 상기 종양 세포는 난소암 세포, 피부암 세포, 신장암 세포, 대장암 세포, 육종 세포, 백혈병 세포, 뇌종양 세포, 갑상선 종양 세포, 유방암 세포, 전립선암 세포, 식도 종양 세포, 방광 종양 세포, 폐 종양 세포 및 두경부 종양 세포로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 용도.
  167. 제166항에 있어서, 상기 암 세포는 악성인 것을 특징으로 하는 용도.
  168. 제166항에 있어서, 상기 암 세포는 고정-비의존적인 증식을 특징으로 하는 용도.
  169. 제1항 내지 제128항 중 어느 한항의 항체 또는 항원 결합 단편을 필요한 포유류에게 투여하는 단계를 포함하는, KAAG1-발현성 세포를 포함하는 암의 치료 방법.
  170. 제169항에 있어서, 상기 암은 난소암, 피부암, 신장암, 대장암, 육종, 백혈병, 뇌종양, 갑상선 종양, 유방암, 전립선암, 식도 종양, 방광 종양, 폐 종양 및 두경부 종양으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
  171. 제1항 내지 제128항 중 어느 한항의 항체 또는 항원 결합 단편을 필요한 포유류에게 투여하는 단계를 포함하는, KAAG1-발현성 세포를 포함하는 종양의 검출 방법.
  172. 제171항에 있어서, 상기 KAAG1은 KAAG1-발현성 세포의 표면에서 발현되는 것을 특징으로 하는 방법.
  173. 제172항에 있어서, 상기 암은 난소암, 피부암, 신장암, 대장암, 육종, 백혈병, 뇌종양, 갑상선 종양, 유방암, 전립선암, 식도 종양, 방광 종양, 폐 종양 및 두경부 종양으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
  174. KAAG1(서열번호 2) 또는 서열번호 2와의 서열 동일성이 80% 이상인 KAAG1 변이체를 발현하는 세포, 또는 상기 KAAG1 또는 KAAG1 변이체를 포함하거나 포함하는 것으로 의심되는 샘플에, 제1항 내지 제128항 중 어느 한항에 따른 항체 또는 항원 결합 단편을 접촉시키는 단계, 및 결합을 측정하는 단계를 포함하는, KAAG1(서열번호 2) 또는 서열번호 2와의 서열 동일성이 80% 이상인 KAAG1 변이체를 검출하는 방법.
  175. 제174항에 있어서, 상기 샘플은 포유류 유래인 것을 특징으로 하는 방법.
  176. 제175항에 있어서, 상기 포유류는 암에 걸렸거나 암으로 의심되는 것을 특징으로 하는 방법.
  177. 제174항 내지 제176항 중 어느 한항에 있어서, 상기 샘플은 포유류로부터 수득되는 혈청 샘플, 혈장 샘플 또는 혈액 샘플인 것을 특징으로 하는 방법.
  178. 제174항 내지 제176항 중 어느 한항에 있어서, 상기 샘플은 포유류로부터 수득되는 조직 샘플인 것을 특징으로 하는 방법.
  179. 제174항에 있어서, 상기 샘플은 세포 배양물 또는 상층물인 것을 특징으로 하는 방법.
  180. 제174항 내지 제179항 중 어느 한항에 있어서, KAAG1 또는 KAAG1 변이체에 결합된 항체의 양을 정량하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
  181. 제1항 내지 제129항 중 어느 한항의 항체를 포함하는 키트.
  182. 항체 생산에 있어서의, KAAG1의 분비된 형태 또는 KAAG1의 세포외 영역의 용도.
  183. 제182항에 있어서, 상기 KAAG1에는 신호 펩타이드가 결여된 것을 특징으로 하는 용도.
  184. 제182항에 있어서, 상기 KAAG1에는 아미노산 1-30이 결여된 것을 특징으로 하는 용도.
  185. 암을 진단 또는 치료하기 위한 항체를 제조하기 위한, 서열번호 2의 아미노산 10개 이상을 포함하는 에피토프의 용도.
  186. 제185항에 있어서, 상기 에피토프는 KAAG1의 세포외 영역으로부터 유래되는 것을 특징으로 하는 용도.
  187. 서열번호 2의 아미노산 30번 - 84번 이내로 구성된 KAAG1 에피토프와 담체를 포함하는, KAAG1의 분비된 형태 또는 KAAG1의 세포외 영역에 대한 항체를 제조하기 위한, 조성물.
  188. 서열번호 2의 아미노산 30번 - 84번 이내로 구성된 KAAG1 에피토프와 제약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는, KAAG1의 분비된 형태 또는 KAAG1의 세포외 영역에 대한 항체를 제조하기 위한, 약학 조성물.
  189. 서열번호 2의 아미노산 30번 - 84번 이내의 아미노산을 포함하며, KAAG1 신호 펩타이드가 결여된, KAAG1 에피토프를 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, KAAG1의 분비된 형태 또는 KAAG1의 세포외 영역에 대한 항체의 제조 방법.
  190. KAAG1의 분비된 형태 또는 KAAG1의 세포외 영역에 대한 항체를 제조하기 위한, 서열번호 2의 아미노산 30번 - 84번 이내의 아미노산을 포함하는 KAAG1 에피토프의 용도.
  191. KAAG1 또는 KAAG1 변이체를 발현하는 종양의 종양 전파, 종양 침투 또는 종양 형성을 감소시키거나, 또는 종양 세포용해(lysis)를 유도하기 위한, 제1항 내지 제128항 중 어느 한항에 따른 분리된 항체의 용도.
  192. 제191항에 있어서, 상기 종양은 악성 종양인 것을 특징으로 하는 용도.
  193. 제192항에 있어서, 상기 악성 종양은 전이력이 있는 것을 특징으로 하는 용도.
  194. 제191항에 있어서, 상기 종양은 고정-비의존적인 증식이 특징인 종양 세포를 포함하는 것을 특징으로 하는 용도.
  195. 포유류에게 제1항 내지 제128항 중 어느 한항에 따른 분리된 항체 또는 항원 결합 단편을 투여하는 단계를 포함하는, KAAG1 또는 KAAG1 변이체를 발현하는 종양의 종양 전파, 종양 침투 또는 종양 형성을 감소시키거나, 또는 종양 세포용해(lysis)를 유도하는 방법.
  196. 제195항에 있어서, 상기 포유류는 악성 종양을 가지고 있는 것을 특징으로 하는 방법.
  197. 제196항에 있어서, 상기 악성 종양은 전이력이 있는 것을 특징으로 하는 방법.
  198. KAAG1을 발현하는 종양 세포의 이동 또는 생존에 손상을 가하기 위한, 서열번호 1, 서열번호 1의 10에서 884번까지의 뉴클레오티드 단편 및 상보체로 이루어진 군으로부터 선택되는 핵산의 용도.
  199. 제198항에 있어서, 상기 KAAG1을 발현하는 종양 세포는 고정-비의존적인 증식이 특징인 용도.
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Families Citing this family (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK2032701T3 (da) * 2006-06-23 2014-02-10 Alethia Biotherapeutics Inc Polynukleotider og polypeptider, der er inddraget i cancer
US20120128661A1 (en) * 2006-06-23 2012-05-24 Alethia Biotherapeutics Inc. Polynucleotide and polypeptide sequences involved in cancer
MX336869B (es) 2008-11-03 2016-02-04 Alethia Biotherapeutics Inc Anticuerpos que bloquean espicificamente la actividad biologica de un antigeno de tumor.
WO2012125551A1 (en) 2011-03-11 2012-09-20 Advaxis Listeria-based adjuvants
HUE045943T2 (hu) * 2011-03-31 2020-02-28 Adc Therapeutics Sa Veseasszociált antigén 1 és antigénkötõ fragmensei elleni antitestek
AU2013209234B2 (en) 2012-01-09 2017-11-09 Adc Therapeutics Sa Method for treating breast cancer
PT2812443T (pt) * 2012-02-06 2019-09-05 Inhibrx Inc Anticorpos cd47 e métodos de utilização dos mesmos
CN104411327A (zh) 2012-03-12 2015-03-11 阿德瓦希斯公司 李斯特菌疫苗治疗以后的抑制细胞功能抑制
EP2844300B1 (en) * 2012-05-01 2018-10-17 Genentech, Inc. Anti-pmel17 antibodies and immunoconjugates
EP2888283B1 (en) 2012-08-24 2018-09-19 The Regents of The University of California Antibodies and vaccines for use in treating ror1 cancers and inhibiting metastasis
EP2935332B1 (en) * 2012-12-21 2021-11-10 MedImmune, LLC Anti-h7cr antibodies
EP3916103A1 (en) 2013-03-14 2021-12-01 Abbott Laboratories Hcv core lipid binding domain monoclonal antibodies
BR112015023355A8 (pt) 2013-03-14 2018-01-30 Abbott Lab antígenos recombinantes ns3 de hcv e mutantes dos mesmos para detecção de anticorpos aprimorada.
EP2968526A4 (en) 2013-03-14 2016-11-09 Abbott Lab ANTIGEN-ANTIBODY COMBINATION ASSAY OF HEPATITIS C VIRUS AND METHODS AND COMPOSITIONS FOR USE THEREWITH
WO2015031645A1 (en) * 2013-08-28 2015-03-05 Washington University Monoclonal antibodies to human 14-3-3 epsilon and human 14-3-3 epsilon sv
WO2015185478A1 (en) * 2014-06-02 2015-12-10 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Anti-neurotensin long fragment antibodies and uses thereof
ES2904573T3 (es) 2015-03-27 2022-04-05 Univ Southern California Terapia con células T dirigida a LHR para el tratamiento de tumores sólidos
CN107847601A (zh) 2015-06-04 2018-03-27 南加利福尼亚大学 Lym‑1和lym‑2靶向的car细胞免疫疗法
WO2017124050A1 (en) * 2016-01-14 2017-07-20 Bps Bioscience, Inc. Anti-pd-1 antibodies and uses thereof
US10688181B2 (en) 2016-06-27 2020-06-23 The Regents Of The University Of California Cancer treatment combinations
CN111257482B (zh) * 2018-11-30 2021-11-09 中国科学院大连化学物理研究所 一种细胞内mtdh结合代谢物的鉴定方法
KR20210118945A (ko) 2019-02-15 2021-10-01 유니버시티 오브 써던 캘리포니아 Lym-1 및 lym-2 항체 조성물 및 개선된 car 구성물
AU2020283742A1 (en) 2019-05-24 2021-09-16 Elixiron Immunotherapeutics (hong Kong) Limited Anti-CSF1R antibodies, IL10 fusion proteins, and uses thereof
WO2024044722A1 (en) * 2022-08-24 2024-02-29 City Of Hope Drip-antibodies and use thereof

Family Cites Families (192)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NZ207394A (en) * 1983-03-08 1987-03-06 Commw Serum Lab Commission Detecting or determining sequence of amino acids
US5075447A (en) 1984-09-17 1991-12-24 Hoffmann-La Roche Inc. Ruthenium complexes useful as carriers for immunologically active materials
DK365785A (da) 1984-09-17 1986-03-18 Hoffmann La Roche Metalcomplexer
GB8601646D0 (en) 1986-01-23 1986-02-26 Davidson R S Binding assay & reagent
US5585279A (en) 1986-01-23 1996-12-17 Davidson; Robert S. Time-resolved luminescence binding assays using a fluorescent transition metal label other than ruthenium
US6018030A (en) 1986-11-04 2000-01-25 Protein Polymer Technologies, Inc. Peptides comprising repetitive units of amino acids and DNA sequences encoding the same
RU2099335C1 (ru) 1989-12-28 1997-12-20 Дзе Апджон Компани Диароматические соединения
IL105325A (en) 1992-04-16 1996-11-14 Minnesota Mining & Mfg Immunogen/vaccine adjuvant composition
AU4017695A (en) 1994-10-28 1996-05-23 Procept, Inc. Ruthenium complexes and their use as immunosuppressive agents
US5708022A (en) 1994-10-28 1998-01-13 Procept, Inc. Method for inhibiting immune response
US5712127A (en) 1996-04-29 1998-01-27 Genescape Inc. Subtractive amplification
US5831003A (en) 1996-06-28 1998-11-03 Bayer Corporation Peptides which bind to prothrombin and thrombin
US6057098A (en) 1997-04-04 2000-05-02 Biosite Diagnostics, Inc. Polyvalent display libraries
JP2002511934A (ja) 1997-06-18 2002-04-16 ウルリッヒ・ジェイ・クルール 核酸バイオセンサ診断装置
WO1999031513A1 (en) 1997-12-15 1999-06-24 Lakowicz Joseph R Method and composition for characterizing a sample containing a sample lipid and an assay kit
US6759243B2 (en) 1998-01-20 2004-07-06 Board Of Trustees Of The University Of Illinois High affinity TCR proteins and methods
US6472367B1 (en) 1998-05-05 2002-10-29 Adherex Technologies, Inc. Compounds and methods for modulating OB-cadherin mediated cell adhesion
EP1077989A4 (en) 1998-05-13 2002-01-02 Ludwig Inst Cancer Res ANTIGEN WITH TUMOR ASSOCIATION ENCODED BY THE ANTISENSE STRAND OF A NEW GENE WITH UBIQUISTIC EXPRESSION
EP1078051B1 (en) 1998-05-13 2007-12-12 Domantis Limited Phage-display system for the selection of correctly folded proteins
US7037667B1 (en) 1998-06-01 2006-05-02 Agensys, Inc. Tumor antigen useful in diagnosis and therapy of prostate and colon cancer
US7521197B2 (en) 1998-06-05 2009-04-21 Alexis Biotech Limited Method for producing cytotoxic T-cells
US20020106678A1 (en) 1998-06-30 2002-08-08 Robishaw Janet D. cDNA clones encoding human G protein gamma subunits
US6562823B1 (en) 1998-07-02 2003-05-13 Merck & Co., Inc. Inhibitors of prenyl-protein transferase
US6288221B1 (en) 1998-08-20 2001-09-11 Duke University Methods of synthesis of halogen base-modified oligonucleotides and subsequent labeling with a metal-catalyzed reaction
AU6136599A (en) 1998-09-08 2000-03-27 University Of Maryland At Baltimore Low frequency modulation sensors using nanosecond fluorophores
US6806089B1 (en) 1998-09-08 2004-10-19 University Of Maryland, Baltimore Low frequency modulation sensors using nanosecond fluorophores
AU1223400A (en) 1998-10-22 2000-05-08 Phillip B. B. Moheno Novel pterin antineoplastic agents
EP1158984A4 (en) 1998-10-29 2003-05-21 Merck & Co Inc Inhibitors of prenyl protein transferase
JP2004500321A (ja) 1999-03-19 2004-01-08 アノーメッド　インコーポレイティド 金属錯体を含む薬学的組成物
US6872519B1 (en) 1999-04-27 2005-03-29 Mirus Bio Corporation In vitro process for selecting phage resistant to blood inactivation
US20090087878A9 (en) 1999-05-06 2009-04-02 La Rosa Thomas J Nucleic acid molecules associated with plants
GB9916529D0 (en) 1999-07-14 1999-09-15 Chiron Spa Antigenic peptides
TR200201413T2 (tr) 1999-09-17 2003-02-21 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Faktör Xa' nın inhibitörleri.
WO2001046209A1 (en) 1999-12-20 2001-06-28 Fluorrx, Inc. Fluorescent probes
US20030219806A1 (en) 2000-02-22 2003-11-27 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Novel 18607, 15603, 69318, 12303, 48000, 52920, 5433, 38554, 57301, 58324, 55063, 52991, 59914, 59921 and 33751 molecules and uses therefor
US7585839B2 (en) 2000-02-23 2009-09-08 Zealand Pharma A/S Medical uses of intercellular communication facilitating compounds
US20030215860A1 (en) 2000-02-29 2003-11-20 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Novel 18636, 2466, 43238, 1983, 52881, 2398, 45449, 50289, 52872 and 26908 molecules and uses therefor
AU4592601A (en) 2000-03-21 2001-10-03 Millennium Predictive Medicine Novel genes, compositions, kits, and method for identification, assessment, prevention, and therapy of ovarian cancer
US6436703B1 (en) 2000-03-31 2002-08-20 Hyseq, Inc. Nucleic acids and polypeptides
US7834146B2 (en) 2000-05-08 2010-11-16 Monsanto Technology Llc Recombinant polypeptides associated with plants
AU2001269836A1 (en) 2000-06-16 2002-01-02 Incyte Genomics, Inc. Proteases
WO2002006339A2 (en) 2000-07-03 2002-01-24 Curagen Corporation Proteins and nucleic acids encoding same
US20050053930A1 (en) 2000-07-18 2005-03-10 David Anderson Therapeutic polypeptides, nucleic acids encoding same, and methods of use
US6812339B1 (en) 2000-09-08 2004-11-02 Applera Corporation Polymorphisms in known genes associated with human disease, methods of detection and uses thereof
GB0023008D0 (en) 2000-09-20 2000-11-01 Glaxo Group Ltd Improvements in vaccination
US7754208B2 (en) 2001-01-17 2010-07-13 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Binding domain-immunoglobulin fusion proteins
US20030133939A1 (en) 2001-01-17 2003-07-17 Genecraft, Inc. Binding domain-immunoglobulin fusion proteins
US7320793B2 (en) 2001-01-19 2008-01-22 Cytos Biotechnology Ag Molecular antigen array
TW200526779A (en) 2001-02-08 2005-08-16 Wyeth Corp Modified and stabilized GDF propeptides and uses thereof
US6783969B1 (en) 2001-03-05 2004-08-31 Nuvelo, Inc. Cathepsin V-like polypeptides
US7030236B2 (en) 2001-03-09 2006-04-18 Mona Savitri Jhaveri Antisense oligonucleotides tarageting folate receptor alpha, and the use thereof
AU2002258518A1 (en) 2001-03-14 2002-09-24 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Nucleic acid molecules and proteins for the identification, assessment, prevention, and therapy of ovarian cancer
US20030065157A1 (en) 2001-04-04 2003-04-03 Lasek Amy W. Genes expressed in lung cancer
CA2443123A1 (en) 2001-04-10 2002-10-24 Agensys, Inc. Nuleic acids and corresponding proteins useful in the detection and treatment of various cancers
EP1463928A2 (en) 2001-04-18 2004-10-06 Protein Design Labs Methods of diagnosis of lung cancer, compositions and methods of screening for modulators of lung cancer
ATE389022T1 (de) 2001-05-07 2008-03-15 Ca Nat Research Council Verstärkte herstellung rekombinanter proteine mittels transienter transfektion von in suspension wachsenden säugerzellen
US20100056762A1 (en) 2001-05-11 2010-03-04 Old Lloyd J Specific binding proteins and uses thereof
WO2002102235A2 (en) 2001-06-18 2002-12-27 Eos Biotechnology Inc. Methods of diagnosis of ovarian cancer, compositions and methods of screening for modulators of ovarian cancer
US20040053824A1 (en) 2001-06-29 2004-03-18 Tang Y Tom Extracellular matrix and cell adhesion molecules
US20030099974A1 (en) 2001-07-18 2003-05-29 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Novel genes, compositions, kits and methods for identification, assessment, prevention, and therapy of breast cancer
DE60237902D1 (de) 2001-08-31 2010-11-18 Btg Int Ltd ANTIKREBS-CYCLOPENTAiG CHINAZOLINE-DERIVATE
WO2003020300A1 (en) 2001-08-31 2003-03-13 Btg International Limited Use of cyclopenta[g]quinazoline derivatives for treating cancer
US7622260B2 (en) 2001-09-05 2009-11-24 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Diagnostic and prognostic tests
US20030124579A1 (en) 2001-09-05 2003-07-03 Eos Biotechnology, Inc. Methods of diagnosis of ovarian cancer, compositions and methods of screening for modulators of ovarian cancer
AR045702A1 (es) 2001-10-03 2005-11-09 Chiron Corp Composiciones de adyuvantes.
US7338965B2 (en) 2001-11-19 2008-03-04 Pharmacia & Upjohn Company 3,4-disubstituted, 3,5-disubstituted and 3,4,5-substituted piperidines
WO2003047526A2 (en) 2001-11-30 2003-06-12 Incyte Genomics, Inc. Cell adhesion and extracellular matrix proteins
DE10162480A1 (de) 2001-12-19 2003-08-07 Ingmar Hoerr Die Applikation von mRNA für den Einsatz als Therapeutikum gegen Tumorerkrankungen
JP2005525096A (ja) 2002-01-09 2005-08-25 ユニバーシティ オブ ローザンヌ Ｊｎｋシグナル伝達経路の細胞浸透性ペプチドインヒビター
EP1465933B1 (en) 2002-01-16 2007-08-29 Biocompatibles UK Limited Polymer conjugates
US7501485B2 (en) 2002-01-28 2009-03-10 Keraplast Technologies, Ltd. Bioactive keratin peptides
US6962910B2 (en) 2002-02-01 2005-11-08 Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. Supramolecular complexes as photoactivated DNA cleavage agents
WO2003068054A2 (en) 2002-02-13 2003-08-21 The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary, Department Of Health Services Identification of ovarian cancer tumor markers and therapeutic targets
DE10206616A1 (de) 2002-02-15 2003-09-04 Qiagen Gmbh Verfahren zur Reduktion der Background-Kontamination nach Markierungsreaktionen
CA2477780A1 (en) 2002-03-05 2003-09-18 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods of enhancing immune induction involving mda-7
US20040101874A1 (en) 2002-04-12 2004-05-27 Mitokor Inc. Targets for therapeutic intervention identified in the mitochondrial proteome
MXPA04011550A (es) 2002-05-20 2005-02-17 Abgenix Inc Tratamiento de carcinoma renal utilizando anticuerpos contra el receptor del factor de crecimiento epidermico.
JP2006516089A (ja) 2002-10-02 2006-06-22 ジェネンテック・インコーポレーテッド 腫瘍の診断と治療のための組成物と方法
EP1422242A1 (en) 2002-11-22 2004-05-26 Emory University Plastic and elastic protein copolymers
EP1592791A2 (en) 2003-02-10 2005-11-09 National Institute of Advanced Industrial Science and Technology Regulation of gene expression by dna interference
WO2004087874A2 (en) 2003-03-28 2004-10-14 Nuvelo, Inc. Novel nucleic acids and polypeptides
CA2526069A1 (en) 2003-05-20 2004-12-02 Cellpep Sa Modified antiviral peptides with increased activity and cell membrane affinity
US20070274947A1 (en) 2003-05-21 2007-11-29 Young Aiping H Antisense Oligonucleotides Directed to Ribonucleotide Reductase R1 and Uses Thereof in the Treatment of Cancer
US20050008649A1 (en) * 2003-06-02 2005-01-13 University Of Miami Chimeric molecules and methods of use
US20070027075A1 (en) 2003-06-09 2007-02-01 Smithrud David B Compositions and methods for targeted drug delivery
US20060078941A1 (en) 2003-06-09 2006-04-13 Santin Alessandro D Gene expression profiling in primary ovarian serous papillary tumors and normal ovarian epithelium
GB0314472D0 (en) 2003-06-20 2003-07-23 Warwick Effect Polymers Ltd Polymer
GB0318096D0 (en) 2003-08-01 2003-09-03 Queen Mary & Westfield College Vaccine
DE10335833A1 (de) 2003-08-05 2005-03-03 Curevac Gmbh Transfektion von Blutzellen mit mRNA zur Immunstimulation und Gentherapie
US20070178458A1 (en) 2003-09-05 2007-08-02 O'brien Philippa Methods of diagnosis and prognosis of ovarian cancer II
US20050147621A1 (en) 2003-10-10 2005-07-07 Higgins Darren E. Use of bacterial 5' untranslated regions for nucleic acid expression
DE10347710B4 (de) 2003-10-14 2006-03-30 Johannes-Gutenberg-Universität Mainz Rekombinante Impfstoffe und deren Verwendung
US7202234B2 (en) 2003-10-24 2007-04-10 Eisai Co., Ltd. Compounds and methods for treating Toll-like receptor 2-related diseases and conditions
US20050153333A1 (en) 2003-12-02 2005-07-14 Sooknanan Roy R. Selective terminal tagging of nucleic acids
EP1550458A1 (en) 2003-12-23 2005-07-06 Vectron Therapeutics AG Synergistic liposomal adjuvants
EP1547581A1 (en) 2003-12-23 2005-06-29 Vectron Therapeutics AG Liposomal vaccine for the treatment of human hematological malignancies
WO2005070456A2 (en) 2004-01-09 2005-08-04 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Diagnosing and treating female reproductive tract or chilhood cancer with pmsa antibodies
CA2551064A1 (en) 2004-01-09 2005-07-21 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusale M Compounds, pharmaceutical compositions and therapeutic methods of preventing and treating diseases and disorders associated with amyloid fibril formation
EP1747284A4 (en) 2004-02-06 2009-03-11 Wyeth Corp DIAGNOSTICS AND THERAPEUTICS OF CANCER
EP1723428A2 (en) 2004-02-19 2006-11-22 Yale University Corporation Identification of cancer protein biomarkers using proteomic techniques
CA2558155A1 (en) 2004-03-01 2005-09-09 Zvi Sidelman Casein derived peptides and therapeutic uses thereof
JP5017107B2 (ja) 2004-07-06 2012-09-05 ワーウィック イフェクト ポリマーズ リミテッド ポリペプチド等と反応し得る官能基を含むリビングラジカル重合開始剤、それを用いて得られる櫛形ポリマー、それから得られるポリペプチド複合体及び薬剤
US7772271B2 (en) 2004-07-14 2010-08-10 Ptc Therapeutics, Inc. Methods for treating hepatitis C
WO2007084413A2 (en) 2004-07-14 2007-07-26 Ptc Therapeutics, Inc. Methods for treating hepatitis c
US7553944B2 (en) 2004-07-21 2009-06-30 The University Of Hong Kong Human virus causing respiratory tract infection and uses thereof
WO2006026569A2 (en) 2004-08-27 2006-03-09 Northeastern University Comprehensive characterization of complex proteins at trace levels
DE102004042546A1 (de) 2004-09-02 2006-03-09 Curevac Gmbh Kombinationstherapie zur Immunstimulation
WO2006027202A1 (en) 2004-09-06 2006-03-16 Unite De Recherche En Biotherapie Et Oncologie (Rubio) Generation of multiparent cell hybrids
AU2005282241B2 (en) 2004-09-08 2011-03-03 Chelsea Therapeutics, Inc. Quinazoline derivatives as metabolically inert antifolate compounds.
WO2006044335A2 (en) 2004-10-14 2006-04-27 The Board Of Trustees Of The University Of Arkansas Therapy with clostridium perfringens enterotoxin to treat ovarian and uterine cancer
EP1814573B1 (en) 2004-10-29 2016-03-09 ratiopharm GmbH Remodeling and glycopegylation of fibroblast growth factor (fgf)
JP2008526749A (ja) 2005-01-04 2008-07-24 ザ ブライハム アンド ウイメンズ ホスピタル， インコーポレイテッド 自己アセンブリするペプチドナノファイバーを用いたｐｄｇｆの徐放性の送達
US7531533B2 (en) 2005-01-27 2009-05-12 Asahi Kasei Pharma Corporation 6-Membered heterocyclic compound and use thereof
CN101133037B (zh) 2005-01-27 2012-05-09 旭化成制药株式会社 六元杂环化合物及其用途
JP2008532935A (ja) 2005-02-14 2008-08-21 エピトピックス，リミティド ライアビリティ カンパニー 黄色ブドウ球菌由来のポリペプチド及び使用方法
MX2007010349A (es) 2005-02-24 2008-04-09 Cemines Inc Composiciones y metodos para clasificar muestras biologicas.
US8551774B2 (en) 2005-03-17 2013-10-08 National Research Council Of Canada Expression vectors containing a truncated epstein barr nuclear antigen 1 lacking the Gly-Gly-Ala domain for enhanced transient gene expression
WO2006102097A2 (en) 2005-03-17 2006-09-28 President And Fellows Of Harvard College Synthesis of avrainvillamide, stephacidin b, and analogues thereof
FR2885525B1 (fr) 2005-05-13 2009-09-18 Urodelia Sa Medicament notamment anti-cancereux, destine a des traitements par immunotherapie, en particulier autologue
ES2421447T3 (es) 2005-06-13 2013-09-02 Cleveland Biolabs Inc Métodos para proteger frente a apoptosis usando lipopéptidos
US9006487B2 (en) 2005-06-15 2015-04-14 Massachusetts Institute Of Technology Amine-containing lipids and uses thereof
ES2525217T3 (es) 2005-06-27 2014-12-19 Exelixis Patent Company Llc Moduladores de LXR basados en imidazol
WO2007005249A2 (en) 2005-06-29 2007-01-11 Hyperbranch Medical Technology, Inc. Nanoparticles and dendritic-polymer-based hydrogels comprising them
US7494788B2 (en) 2005-07-11 2009-02-24 Molecular Kinetics, Inc. Entropic bristle domain sequences and their use in recombinant protein production
US7820790B2 (en) 2005-07-13 2010-10-26 Amgen Mountain View Inc. IL-6 binding proteins
US20090005268A1 (en) 2005-07-18 2009-01-01 Epigenomics Ag Compositions and Methods for Cancer Diagnostics Comprising Pan-Cancer Markers
GB0516058D0 (en) 2005-08-04 2005-09-14 Oxford Genome Sciences Uk Ltd New protein isoforms and uses thereof
GB0517293D0 (en) 2005-08-24 2005-10-05 Cancer Rec Tech Ltd Vectors and uses thereof
WO2007031080A1 (en) 2005-09-15 2007-03-22 Alk-Abelló A/S A method for quantification of allergens
WO2007044885A2 (en) 2005-10-11 2007-04-19 Chemocentryx, Inc. Piperidine derivatives and methods of use
CA2620248A1 (en) 2005-10-21 2007-04-26 Merz Pharma Gmbh & Co. Kgaa Chromenones and their use as modulators of metabotropic glutamate receptors
UA96139C2 (uk) 2005-11-08 2011-10-10 Дженентек, Інк. Антитіло до нейропіліну-1 (nrp1)
DK1954274T3 (da) 2005-11-10 2011-01-31 Chemocentryx Inc Substituerede quinoloner og fremgangsmåder til anvendelse
EP1954134B1 (en) 2005-11-23 2011-09-14 Merck Sharp & Dohme Corp. Process for synthesizing a 2-phenyl-1h-phenantrho[9,10-d]imidazole derivative
KR101049859B1 (ko) 2007-11-28 2011-07-19 대한민국 Ｎ-말단 ｐＩ 값 조절에 의한 수용성 재조합 단백질 생산방법
KR20080113223A (ko) 2006-03-06 2008-12-29 심포젠 에이/에스 호흡기세포 융합 바이러스 감염 치료용 재조합 폴리클로날 항체
EP2338898A1 (en) 2006-03-09 2011-06-29 The Board of Regents of the University of Texas System Compositions and methods related to profiling a plurality of cell lines based on peptide binding
EP1996629A2 (en) 2006-03-10 2008-12-03 Warwick Effect Polymers Ltd. Polymers
WO2007110755A1 (en) 2006-03-27 2007-10-04 Medical Therapies Limited Prophylaxis or treatment of cardiovascular inflammation
EP2014676B1 (en) 2006-04-20 2012-03-07 Kringle Pharma Inc. Hgf precursor protein mutant and activated form thereof
WO2007131191A2 (en) 2006-05-05 2007-11-15 Perkinelmer Life And Analytical Sciences Mass spectrometry methods for multiplexed quantification of protein kinases and phosphatases
CA2900402C (en) 2006-05-08 2018-01-16 Adaerata, Limited Partnership Pcsk9 polypeptide, ligand to said polypeptide, kits and methods using said ligands
US20120128661A1 (en) 2006-06-23 2012-05-24 Alethia Biotherapeutics Inc. Polynucleotide and polypeptide sequences involved in cancer
DK2032701T3 (da) 2006-06-23 2014-02-10 Alethia Biotherapeutics Inc Polynukleotider og polypeptider, der er inddraget i cancer
US20090297401A1 (en) 2006-06-28 2009-12-03 Rgb Technologies Ab Sensor kit and a system for detecting an analyte in a test environment
US8198046B2 (en) 2006-07-11 2012-06-12 Danisco Us Inc. KEX2 cleavage regions of recombinant fusion proteins
CN101516388B (zh) 2006-07-21 2012-10-31 诺和诺德公司 通过o-联糖基化序列的肽的糖基化
WO2008012362A2 (en) 2006-07-27 2008-01-31 Oxford Genome Sciences (Uk) Ltd New protein isoforms and uses thereof
EP2052088A2 (en) 2006-08-02 2009-04-29 Genizon Biosciences Genemap of the human genes associated with psoriasis
EP2057465A4 (en) 2006-08-09 2010-04-21 Homestead Clinical Corp SPECIFIC ORGAN PROTEINS AND METHODS OF USE
EP2066806A2 (fr) 2006-09-07 2009-06-10 Laurence Faure Test pharmaco diagnostique ciblant l'oncologie
WO2008033932A2 (en) 2006-09-13 2008-03-20 The Institutes For Pharmaceutical Discovery, Llc Biarylthiazole carboxylic acid derivatives as protein tyrosine phosphatase-ib inhibitors
WO2008054793A2 (en) 2006-10-30 2008-05-08 Sanrx Pharmaceuticals, Inc. Dipterinyl calcium pentahydrate (dcp) and therapeutic methods based thereon
DE102006051516A1 (de) 2006-10-31 2008-05-08 Curevac Gmbh (Basen-)modifizierte RNA zur Expressionssteigerung eines Proteins
AU2007333098A1 (en) 2006-12-14 2008-06-19 Medarex, Inc. Human antibodies that bind CD70 and uses thereof
WO2008082887A2 (en) 2006-12-28 2008-07-10 Abbott Laboratories Inhibitors of poly(adp-ribose)polymerase
DE102007001370A1 (de) 2007-01-09 2008-07-10 Curevac Gmbh RNA-kodierte Antikörper
NZ578928A (en) 2007-01-09 2013-03-28 Cleveland Biolabs Inc Methods to increase mobility of hematopoietic stem cells by use of a lipopeptide compound and treatment of associated diseases
WO2008104803A2 (en) 2007-02-26 2008-09-04 Oxford Genome Sciences (Uk) Limited Proteins
US20080311145A1 (en) 2007-04-04 2008-12-18 Specigen, Inc. Protein cage immunotherapeutics
WO2009009186A2 (en) 2007-04-13 2009-01-15 The Regents Of The University Of California Receptors useful for gas phase chemical sensing
US20090110662A1 (en) 2007-04-30 2009-04-30 Intezyne Technologies, Inc. Modification of biological targeting groups for the treatment of cancer
US20080306007A1 (en) 2007-04-30 2008-12-11 Newcastle Innovation Limited Agents for prophylaxis or treatment of neurological related diseases and conditions
US8143372B2 (en) 2007-05-21 2012-03-27 Children's Hospital & Research Center Oakland Synthetic regulators of ferritin protein nanocage pores and methods of use thereof
US20100093554A1 (en) 2007-06-01 2010-04-15 Keting Chu Methods for identifying biomarkers, autoantibody signatures, and stratifying subject groups using peptide arrays
WO2009004329A1 (en) 2007-07-02 2009-01-08 Cancer Research Technology Limited 9h-pyrimido[4,5-b]indoles, 9h-pyrido[4',3':4,5]pyrrolo[2,3-d]pyridines, and 9h-1,3,6,9-tetraaza-fluorenes as chk1 kinase function inhibitors
US9018138B2 (en) 2007-08-16 2015-04-28 The Johns Hopkins University Compositions and methods for generating and screening adenoviral libraries
WO2009030237A2 (en) 2007-09-07 2009-03-12 Symphogen A/S Methods for recombinant manufacturing of anti-rsv antibodies
EP2197908A2 (en) 2007-09-27 2010-06-23 Dako Denmark A/S Mhc multimers in tuberculosis diagnostics, vaccine and therapeutics
GB0719644D0 (en) 2007-10-05 2007-11-14 Cancer Rec Tech Ltd Therapeutic compounds and their use
EP2538221A3 (en) 2007-11-05 2013-04-24 Nordic Bioscience A/S Biochemical markers for CVD risk assessment
WO2009061681A2 (en) 2007-11-06 2009-05-14 Amira Pharmaceuticals, Inc Antagonists of pgd2 receptors
EP2071334A1 (en) 2007-12-14 2009-06-17 Transmedi SA Compositions and methods of detecting TIABS
WO2009111088A2 (en) 2008-01-02 2009-09-11 The Johns Hopkins University Antitumor immunization by liposomal delivery of vaccine to the spleen
WO2009114942A1 (en) 2008-03-20 2009-09-24 University Health Network Thymidylate kinase fusions and uses thereof
US8445648B2 (en) 2008-04-30 2013-05-21 University Of Vermont And State Agricultural College Methods and products relating to GSK3β regulation
CA2723824C (en) 2008-05-09 2022-12-06 Surmodics Pharmaceuticals, Inc. Biocompatible and biodegradable elastomeric polymers
ES2470644T3 (es) 2008-05-26 2014-06-24 Universitt Zrich Nanopart�culas de protamina/ARN para inmunoestimulaci�n
US20110144160A1 (en) 2008-07-03 2011-06-16 Amira Pharmaceuticals, Inc. Antagonists of Prostaglandin D2 Receptors
US8148088B2 (en) 2008-07-18 2012-04-03 Abgent Regulation of autophagy pathway phosphorylation and uses thereof
EP2309853A4 (en) 2008-08-01 2012-04-25 Lixte Biotechnology Inc METHOD FOR CELL MITITULATING BY INHIBITION OF SERIN / THREONINE PHOSPHATASE
WO2010017479A1 (en) 2008-08-08 2010-02-11 Synta Pharmaceuticals Corp. Triazole compounds that modulate hsp90 activity
EP2344200A2 (en) 2008-09-19 2011-07-20 Nektar Therapeutics Modified therapeutics peptides, methods of their preparation and use
MX2011003117A (es) 2008-09-19 2011-04-21 Nektar Therapeutics Conjugados polimericos de peptidos terapeuticos.
WO2010037408A1 (en) 2008-09-30 2010-04-08 Curevac Gmbh Composition comprising a complexed (m)rna and a naked mrna for providing or enhancing an immunostimulatory response in a mammal and uses thereof
MX336869B (es) 2008-11-03 2016-02-04 Alethia Biotherapeutics Inc Anticuerpos que bloquean espicificamente la actividad biologica de un antigeno de tumor.
RU2562865C2 (ru) 2009-07-10 2015-09-10 Иннэйт Фарма Tlr3 связывающие агенты
CA2807557C (en) 2009-08-06 2019-09-17 Partha S. Ray Diagnosis of primary and metastatic basal-like breast cancer and other cancer types
WO2011054112A1 (en) 2009-11-03 2011-05-12 Alethia Biotherapeutics Inc. Antibodies that specifically block the biological activity of kidney associated antigen 1
SG183532A1 (en) 2010-03-11 2012-09-27 Merrimack Pharmaceuticals Inc Use of erbb3 inhibitors in the treatment of triple negative and basal-like breast cancers
HUE045943T2 (hu) 2011-03-31 2020-02-28 Adc Therapeutics Sa Veseasszociált antigén 1 és antigénkötõ fragmensei elleni antitestek
AU2013209234B2 (en) 2012-01-09 2017-11-09 Adc Therapeutics Sa Method for treating breast cancer

Also Published As

Publication number Publication date
CA3050455A1 (en) 2010-06-03
ZA201104110B (en) 2016-01-27
AU2009321508A1 (en) 2010-06-03
AU2009321508B2 (en) 2015-03-12
EP3130674A1 (en) 2017-02-15
CN104829714A (zh) 2015-08-12
WO2010060186A8 (en) 2011-06-09
JP2015142592A (ja) 2015-08-06
EP2362908A4 (en) 2013-09-18
JP2012507266A (ja) 2012-03-29
JP5781932B2 (ja) 2015-09-24
IL212637A0 (en) 2011-07-31
EP2362908A1 (en) 2011-09-07
US20180369269A1 (en) 2018-12-27
NZ592432A (en) 2013-01-25
CN102245773B (zh) 2014-08-27
MX2011004684A (es) 2011-10-06
BRPI0921805A2 (pt) 2016-11-01
CA2740900A1 (en) 2010-06-03
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