JP5017107B2 - ポリペプチド等と反応し得る官能基を含むリビングラジカル重合開始剤、それを用いて得られる櫛形ポリマー、それから得られるポリペプチド複合体及び薬剤 - Google Patents
ポリペプチド等と反応し得る官能基を含むリビングラジカル重合開始剤、それを用いて得られる櫛形ポリマー、それから得られるポリペプチド複合体及び薬剤 Download PDFInfo
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- 0 CCC(C)(*)C(ON(C(CC1)=O)C1=O)=O Chemical compound CCC(C)(*)C(ON(C(CC1)=O)C1=O)=O 0.000 description 1
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Description
ン基に結合される。これらの例としては、スクシンイミジルスクシネート、ヒドロキシスクシンアミド及びヒドロキシスクシンアミドエステル、例えばプロピオンアルデヒド及びアセトアルデヒドのようなアルデヒド誘導体、スクシンイミジルのプロピオネート及びスクシンイミジルのブタノエート誘導体、ベンゾトリアゾールカルボネート、p−ニトロフェニルカルボネート、トリクロロフェニルカルボネート及びカルボニルイミダゾールが挙げられる。トレシレート(tresylate)のような化合物は、求核攻撃によりタンパク質と結合することが既知である。タンパク質又はポリペプチド上のシステイン残基と反応し得る多数の化合物も存在する。これらの例としては、マレイミド、ビニルスルホン、ピリジルスルフィド及びヨードアセトアミドが挙げられる。さらにスクシンイミジルカルボネートも、PEG又はその他のポリマーを、タンパク質又はポリペプチド内のアラニン又はヒスチジンアミノ酸に結合するための官能基として用いられ得る。すでに示されたように、このような官能化された基の反応は、Roberts、Kinsler及びChapmanによる論文中に示されたように、そして実際に、例えばShearwaterカタログ(2001)に示されているように、すでに十分に特徴付けられている。
(a)
(i)線状、分枝状又は星形の、置換又は非置換の、好ましくは2、特に3〜10
の炭素原子を含み、且つ付加重合を受け得るオレフィン性不飽和部分を有する複数のモノマーであって、
(ii)均等開裂可能な結合を含む開始剤化合物、
(iii)上記モノマーの重合を触媒し得る触媒、
を準備する工程と、
(b)上記櫛形ポリマーを生成するために、上記開始剤と組合せて、上記触媒に上記複数のモノマーの重合を触媒させる工程と、
を含み、上記開始剤化合物(ii)が、上記櫛形ポリマーに結合したときに、生物学的物質と結合し得る部分を含むことを特徴とする櫛形ポリマーの製造方法を提供する。
arwaterから入手可能である。ポリテトラヒドロフランも、商業的供給元、例えばAldrich(Gillingham, Dorset, UK)から入手され得る。
97/01589、WO 99/28352及びWO 01/94424に記載されているように、実際のフリーラジカルは、いくつかの触媒を用いて生成されるようには見えないと考えられる。これは、系において別個のフリーラジカル種の生成を伴わずに、モノマーが結合中に挿入される協奏的方法で起こる、と考えられる。即ち、成長中、これは、フリーラジカル生成を伴わずに新規の炭素−炭素結合及び新規の炭素−ハロゲン結合の形成を生じる。不対電子を有する原子又は原子の基であり、相互作用を伴わない別個の存在物であるフリーラジカルは、開始剤化合物とそれが相互作用するモノマーとの相互作用により生成されない。
A−S−C(O)−R、A−S−C(S)−O−R、R−S−C(O)−A、R−S−C(S)−O−A(ここで、RはC1〜C20の置換又は非置換の、直鎖、分枝鎖、環状、複素環式又は芳香族のアルキルである);
A−B−X;
ンカーは、メチル、エチル、プロピル、ブチル又はペンチルである。
MY
(式中、Mは、一形式酸化状態により酸化され得る酸化状態を有する遷移金属であり、Yは、一価、二価又は多価の対イオンである)
を含み得る。
[MLm]n+An-
(式中、Mは一形式酸化状態により酸化され得る酸化状態を有する遷移金属、
Lはジイミンの窒素のうちの少なくとも1つが芳香族環の一部にないオルガノジイミン、
Aは陰イオン、
nは1〜3の整数、
mは1〜2の整数)
A−B−X;
A−(D)d−(E)e−(F)f
(式中、Aは、存在しても存在しなくてもよく、存在する場合、タンパク質又はポリペプチドと結合し得る部分であり;
Dは、存在する場合、Eに記載されない1つ又は複数のオレフィン性不飽和モノマーの付加的重合により得られ;
Eは、線状、分枝状又は星形の置換又は非置換であり、且つオレフィン性不飽和部分を有する複数のモノマーの付加的重合により得られ;
Fは、存在する場合、Eに記載されない1つ又は複数のオレフィン性不飽和モノマーの付加的重合により得られ;
d及びfは0〜500、特に0〜300又は0〜100の整数であり;
eは0〜1,000、特に0〜10、50、100、200、300、400、500、600、700、800又は900の整数であって;
Aが存在する場合、D、E及びFのうちの少なくとも1つが存在する)
を有する櫛形ポリマーを提供する。
シエチル)フタルイミド(Aldrich、99%)(19.12g、0.1mol)を溶解した。フラスコを氷浴で0℃に冷却した後、臭化2−ブロモイソブチリル(13.9mL、0.11mol)を滴下した。混合物を45分間撹拌し、室温に達しさせた。その後、反応混合物を余分量の冷水中に注ぎ入れ、ジエチルエーテル(3×50mL)で抽出した。有機層をNa2CO3の飽和水溶液(3×50mL)、酸性化水(pH=4.5、3×50mL)、再びNa2CO3の飽和水溶液(3×50mL)で洗浄した。有機層を無水MgSO4上で乾燥し、濾過した。最後に、ロータリーエバポレーターを用いて減圧下で溶媒を除去して、表題化合物を帯黄色個体として単離した(30.6g、収率90%)。
(Ccycl=O), 1728 (C=0); 1H NMR (CDCl3, 298 K, 300 MHz) δ 2.08 (s, 6H, C(CH3)2Br), 2.87 (s, 4H, CH2)。 13C NMR(CDCl3, 298 K, 75 MHz) δ 26.03 (2C, CH2), 31.09(2C, C(CH3)2Br), 51.60 (1C, C(CH3)2Br), 167.89 (1C, C=0), 169.02 (2C, Ccycl=O); MS (+EI), (m/z)
266, 265, 156, 151, 149, 123, 121, 116,
115, 91, 87, 70, 69。 C8H10NO4Brに関する分析計算値(Anal.Calcd for C8H10NO4Br): C = 36.39; H 3.82; N = 5.30, Br = 30.26。実測値(Found): C=36.35; H = 3.82; N = 5.03; Br=30.17。
cm-1.
主要異性体 1H NMR (d6−DMSO, 298K, 300 MHz) δ 3.94 (s, 3H, CH3); 6 .79 (d, J = 8.8 Hz, 2H, CH Ar), 7.48 (d, J = 8.8 Hz, 2H, CH Ar), 9.40 (s, 1H, OH), 10.46 (s, 1H, NH); 13C{1H} NMR (d6−DMSO, 298K, 75 MHz) δ 55.52 (1C, OCH3); 115.46 (2C, CH Ar), 123.91 (2C, CH Ar), 129.49 (1C, C Ar), 154.44 (1C, C Ar), 164.81 (1C,C Ar), 169.57 (1C, C Ar), ,171.23 (1C, C Ar)。
非主要異性体 1H NMR (d6−DMSO, 298K, 300 MHz) δ 3.96 (s, 3H, OCH3); 6.79 (d, J = 8.9 Hz,
2H, CH Ar), 7.39 (d, J= 8.9 Hz, 2H, CH Ar), 9.42 (bs, 1H, OH), 10.10.32 (s, 1H,
NH); 13C{1H} NMR (d6−DMSO, 298 K, 75 MHz)
δ 55.10 (1C, OCH3); 115.46 (2C, CH Ar),
123.03 (2C, CH Ar), 129.26 (1C, C Ar), 154.76 (1C, C Ar), 165.20(1C, C Ar), 170.48 (1C, C Ar), 170.64 (1C, C Ar); C10H9ClN4O2に関する分析計算値(Anal.Calcd for C10H9ClN4O2):
C = 47.54, H = 3.59, N = 22.18, Cl = 14.03, 実測値(Found): C = 47.57, H = 3.55, N = 22.10, Cl = 14.8。
主要異性体: 1H NMR (d6−DMSO, 298 K, 400 MHz) δ
2.05 (s, 6H, C(CH3)2Br), 3.96 (s, 3H, OCH3), 7.17 (d,J = 8.9 Hz, 2H, CH Ar), 7.77 (d,J = 8.9 Hz, 2H, CH Ar), 10.78 (s, 1H, NH); 13C{1H} NMR(d6−DMSO, 298 K, 100.6 MHz) δ 30.42 (2C, CH3), 55.75 (bs, 1C, OCH3), 57.29 (1C, C(CH3)2Br), 121.96 (2C, CH Ar), 122.12 (2C, CH Ar), 136.29 (1C, C Ar), 146.61 (bs, 1C, C Ar), 165.10 (bs, 1C, C Ar), 169.89 (bs, 1C, C Ar),, 170.16 (1C, C=O), 171.33 (bs, 1C, C Ar)。
非主要異性体: 1H NMR (d6−DMSO, 298 K, 400 MHz) δ 2.05 (s, 6H, C(CH3)2Br), 3.96 (s, 3H, OCH3), 7.17 (d,J = 8.9 Hz,2H, CH Ar), 7.69 (d,J = 8.9 Hz,2H, CH Ar), 10.66(s, 1H,
NH); 13C{1H} NMR(d6−DMSO, 298 K, 100.6 MHz) δ 30.42 (2C, CH3), 55.75 (bs, 1C, OCH3), 57.29 (1C, C(CH3)2Br), 121.96(2C, CH Ar), 122.73 (2C, CH Ar), 136.29 (1C, C Ar), 146.61 (bs, 1C, C Ar), 165.10 (bs, 1C, C Ar), 169.89 (bs, 1C, C Ar),, 170.16 (1C, C=O), 171.33 (bs,1C,C Ar).
CuBr(0.134g、0.934mmol)を、オーブン乾燥したシュレンク管中に入れた。管にゴム隔壁を取り付けて、ドライN2を排気し、流し込むことを3回行なった。メチルメタクリレート(10mL、93.4mmol)及びキシレン(20mL)を脱気した注射器を用いて管に移した。混合物を窒素下で迅速に撹拌し、N−(n−プロピル)−2−ピリジルメタンイミン(NMPI)(0.408g、1.86mmol)を付加すると、これは溶液に深赤色/褐色を付与した。適切な開始剤(0.934mmol)を付加し、その結果生じた溶液を3回の凍結ポンプ解凍循環により脱気した。その結果生じた混合物を90℃の熱安定性制御油浴中に入れた。転化及び分子量分析のために、試料を定期的に採取した。70℃の真空炉中で一定重量に乾燥することにより、重量測定により転化を測定した。SECの前に活性化塩基性アルミナのカラムに通すことにより、試料から触媒を除去した(図1参照)。
CuBr(0.055g、0.38mmol)を、炉乾燥シュレンク管中に入れた。管にゴム隔壁を取り付けて、ドライN2を排気し、流し込むことを3回行なった。スチレン(10mL、96mmol)を脱気した注射器を用いて管に移した。混合物を窒素下で迅速に撹拌し、4,4’−ジ(5−ノニル)−2,2’−ビピリジル(dNbpy)(0.314g、0.768mmol)を付加し、溶液に深赤色/褐色を付与した。開始剤1(0.035g、0.048mmol、0.192mmolの開始部位)を付加し、その結果生じた溶液を3回の凍結ポンプ解凍循環により脱気した。その結果生じた混合物を110℃の熱安定性制御油浴中に4.5時間入れた。SECの前に活性化塩基性アルミナのカラムに通すことにより、試料から触媒を除去した。
転化及び分子量分析のために、脱気注射器を用いて定期的に試料を取り出し、液体窒素中で急冷した。Bruker DPX300でのNMRにより、転化を測定した。開始剤6により開始されたリビングラジカル重合に関しては、塩基性アルミナカラム上に試料を通して、次に0.22μmの疎水性フィルターを装備した注射器で濾過した後、分子量試験を実施した。開始剤7により開始されたLRPの場合、試料をTHFで希釈し、それを一晩放置して触媒残渣を沈殿させることにより、分子量を定量した。次に上部液を0.22μm疎水性フィルターで濾過した。N−ヒドロキシスクシンイミド官能化ポリマーに関しては、これらのポリマーは塩基性アルミナ上を通過することができないので、この方法を選択した。
使用前に30分間ドライ窒素でバブリングすることにより、ポリ(エチレングリコール)メチルエーテルメタクリレート(Mn=約475、Aldrich、99%)及び無水トルエンを脱気した。上記と同様に1、リガンドN−(n−プロピル)−2−ピリジルメタンイミンを調製した。ケラー(Keller)及びウィコフ(Wycoff)2の方法を基礎にした方法により、必要に応じて臭化銅(I)(Avocado、98%)を精製した。その他の試薬は全ての市販製品であり、さらなる精製なしに用いた。
臭化銅(I)/N−(n−プロピル)−2−ピリジルメタンイミンで媒介させて、30℃で重合を実行した。代表的重合配合は、トルエン中の33%v/vモノマーをもとにする。開始剤/Cu(I)Br/リガンドの比は、モル比基準で1/1/2.1である。乾燥シュレンク管にCu(I)Br(0.3099g、2.16×10-3mol)、NHS−Br(1)(0.5704g、2.16×10-3mol)及び磁気棒を投入した後、窒素及び真空間を3回循環することにより酸素を除去した。次にフラスコにPEGMA(10ml、2.27×10-2mol)及びトルエン(20ml)を付加した。混合物を直ちに3回の凍結ポンプ解凍循環に付した。最後にN−(n−プロピル)−2−ピリジルメタンイミン(0.707ml、4.54×10-3mol)を付加し、フラスコを30℃に熱制御した油浴中に入れた。
転化及び分子量分析のために、脱気注射器を用いて定期的に試料を取り出し、液体窒素中で急冷した。Bruker DPX300MHzでのNMRにより、転化を測定した。
試料をトルエンで希釈し、それを一晩放置して銅錯体を除去することにより、分子量を確定した。次に上部液を0.22μm疎水性フィルターで濾過した。塩基性アルミナカラム上をポリマーが通過するには困難が生じるため、この方法を選択した。5mmガードカラム、2つのPolymer Labs混合Eカラム、示差屈折率検出器及び自動試料採取器を装備した系で、サイズ排除クロマトグラフィー(SEC)により、数平均分子量(Mn)を定量した。系を1mL/分の速度でTHFで溶離した。トルエンを流動マーカーとして用いた。
ジエチルエーテル中のトルエン溶液からの2連続精製により、N−ヒドロキシスクシンイミド官能化ポリ(PEGMA)を精製した。
(a)D.M. Haddleton, M.C. Crossman, B.H. Dana, D.J. Duncalf, A.M. Henning, D.Kukulj and A.J. Shooter, Macromolecules, 1999, 32, 2110.
(b)R.N. Keller and W.D. Wycoff, Inorg. Synth., 1947, 2, 1.
30℃での80%トルエン溶液(AJ U2−27a)中の[PEG]/[I]/[Cu]/[L]=19.2/1/1/2
N−ヒドロキシスクシンイミド開始剤(0.05g、0.189mmol)、Cu(I)Br(0.027g、0.189mmol、1当量)及びメトキシポリエチレングリコールメタクリレート(PEG)(平均分子量=2,080、7.55g、3.63mmol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥したシュレンク管中に入れた。シュレンク管にド
ライN2を排気し、流し込むことを3回行なった。酸素が除去されたトルエン(28mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素して、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.05g、0.38mmol)を付加した。反応物を30℃(t=0)の熱安定制御油浴中に入れて、転化及び分子量分析のために定期的に試料を取り出した。1H NMR分光分析により転化を追跡調査し、SECにより分子量分析を実施した。
N−ヒドロキシスクシンイミド開始剤(0.05g、0.189mmol)、Cu(I)Br(0.027g、0.189mmol、1当量)及びメトキシポリエチレングリコールメタクリレート(PEG)(平均分子量=2,080、7.55g、3.63mmol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥したシュレンク管中に入れた。シュレンク管にドライ窒素を排気し、流し込むことを3回行なった。酸素を除去したトルエン(28mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素して、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.05g、0.38mmol)を付加した。反応物を50℃(t=0)の熱安定制御油浴中に入れて、転化及び分子量分析のために定期的に試料を取り出した。1H NMR分光分析により転化を追跡調査し、SECにより分子量分析を実施した。
N−ヒドロキシスクシンイミド開始剤(0.05g、0.189mmol)、Cu(I)Br(0.027g、0.189mmol、1当量)及びメトキシポリエチレングリコールメタクリレート(PEG)(平均分子量=2,080、7.55g、3.63mmol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥したシュレンク管中に入れた。シュレンク管にドライ窒素を排気し、流し込むことを3回行なった。酸素が除去されたトルエン(28mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素して、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.05g、0.38mmol)を付加した。反応物を90℃(t=0)の熱安定制御油浴中に入れて、転化及び分子量分析のために定期的に試料を取り出した。1H NMR分光分析により転化を追跡調査し、SECにより分子量分析を実施した。
グリコールメタクリレートの50%水溶液)を凍結乾燥した。
N−ヒドロキシスクシンイミド開始剤(2.5g、9.47mmol)、Cu(I)Br(1.35g、9.47mmol、1当量)及びメトキシポリエチレングリコールメタクリレート(PEG)(平均分子量=628,142.0g、0.226mol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥したシュレンク管中に入れた。シュレンク管に窒素で排気し、流し込むことを3回行なった。酸素が除去されたトルエン(261mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素して、次に脱気N−プロピル−2−ピリジルメタンイミン(2.80g、0.019mol)を付加した。反応物を90℃(t=0)の熱安定制御油浴中に入れて、転化及び分子量分析のために定期的に試料を取り出した。1H NMR分光分析により転化を追跡調査し、SECにより分子量分析を実施した。
90℃での66%トルエン溶液(AJ U2−13)中の[PEG]/[I]/[Cu]/[L]=13.9/1/1/2
N−ヒドロキシスクシンイミド開始剤(0.526g、1.99mmol)、Cu(I)Br(0.29g、2.02mmol、1当量)及びメトキシポリエチレングリコールメタクリレート(PEG)(平均分子量=1,080、29.62g、0.027mol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥したシュレンク管中に入れた。シュレンク管にドライ窒素を排気し、流し込むということを3回行なった。酸素が除去されたトルエン(60mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素して、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.51g、3.96mol)を付加した。反応物を90℃(t=0)の熱安定制御油浴中に入れて、転化及び分子量分析のために定期的に試料を取り出した。1H NMR分光分析により転化を追跡調査し、SECにより分子量分析を実施した。
により、ポリマーを精製した。その結果生じた油をジエチルエーテル(3×1,000mL)で洗浄した後、真空乾燥した。
N−ヒドロキシスクシンイミド開始剤(0.5g、1.89mmol)、Cu(I)Br(0.27g、1.89mmol、1当量)及びメトキシポリエチレングリコールメタクリレート(PEG)(平均分子量=1,080、18.90g、0.018mol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥したシュレンク管中に入れた。シュレンク管にドライ窒素を排気し、流し込むということを3回行なった。酸素が除去されたトルエン(35mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素して、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.51g、3.79mmol)を付加した。反応物を90℃(t=0)の熱安定制御油浴中に入れて、転化及び分子量分析のために定期的に試料を取り出した。1H NMR分光分析により転化を追跡調査し、SECにより分子量分析を実施した。
30℃での66%トルエン溶液(AJ U2−31a)中の[PEG]/[I]/[Cu]/[L]=6.4/1/1/2
N−ヒドロキシスクシンイミド開始剤(0.5g、1.89mmol)、Cu(I)Br(0.27g、1.89mmol、1当量)及びメトキシポリエチレングリコールメタクリレート(PEG)(平均分子量=628,7.57g、0.012mol)、並びに
磁気ホロワをオーブン乾燥したシュレンク管中に入れた。シュレンク管にドライ窒素を排気し、流し込むということを3回行なった。酸素が除去されたトルエン(14mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素して、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.51g、3.79mmol)を付加した。反応物を30℃(t=0)の熱安定制御油浴中に入れて、転化及び分子量分析のために定期的に試料を取り出した。1H NMR分光分析により転化を追跡調査し、SECにより分子量分析を実施した。
N−ヒドロキシスクシンイミド開始剤(0.5g、1.89mmol)、Cu(I)Br(0.27g、1.89mmol、1当量)及びメトキシポリエチレングリコールメタクリレート(PEG)(平均分子量=628,7.57g、0.012mol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥したシュレンク管中に入れた。シュレンク管にドライ窒素を排気し、流し込むということを3回行なった。酸素が除去されたトルエン(14mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素して、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.51g、3.79mmol)を付加した。反応物を50℃(t=0)の熱安定制御油浴中に入れて、転化及び分子量分析のために定期的に試料を取り出した。1H NMR分光分析により転化を追跡調査し、SECにより分子量分析を実施した。
<実験>
以下のすべての重合に関して、1H NMR分光分析により転化データを、そしてPMMA標準を用いたSECにより分子量データ(Mn及びPDi)を得た。
以下の表は、メトキシポリエチレングリコールメタクリレートを重合するために用いられる機能性開始剤を列挙する。
以下の表は、メトキシポリエチレングリコールメタクリレート及び表1に示した開始剤を用いて調製される機能性ポリマーを列挙する。これらのポリマーを用いて、有用な生体分子と直接反応し得るし、或いは有用な生体分子と反応する新規の高分子に簡単に転化し得る。
開始剤8の調製
N−ヒドロキシスクシンイミド−2−ブロモプロピオネート
= 7.03 Hz). 13C NMR (CDCl3) δ(ppm) 21.67
(1C, CH(CH3)Br) 25.74 (2C, Ccycl), 34.97 (1C, CH(CH3)Br), 166.17 (1C, C=O), 168.69 (2C, Ccycl=O), IR(固体、ATRセル)ν(cm-1) 1808, 1781 (Ccycl=O),1729 (C=O). 質量分光分析 (+EI, m/z) 248.964. 元素分析: C7H8NO4Brに関する理論値: C = 33.62, H = 3.22, N = 5.60, 実測値: C = 33.47, H = 3.16, N =5.46.
N−ヒドロキシスクシンイミド−2−ブロモ−2−メチルプロピオネート
mL、 0.11 mol)を滴下した。次に混合物を45分間撹拌して、室温に到達させた。この反応混合物を余分量の冷水中に注ぎ入れた後、ジエチルエーテル(3×50
mL)で抽出した。有機層をその後、炭酸ナトリウムの飽和水溶液(3×50 mL)で、酸性化水(pH=4.5, 3×50 mL1)で、そして再び炭酸ナトリウムの飽和水溶液(3×50 mL)で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過した。最後に、表題化合物を白色固体として定量的収量で単離するために、回転蒸発器を用いて減圧下で溶媒を除去した。1H NMR(CDCl3)δ(ppm) 2.08(s, 6H, C(CH3)2Br),2.87(s, 4H, Hcycl). 13C NMR (CDCl3) δ(ppm) 26.03 (2C, Ccycl), 31.09 (2C, C(CH3)2Br), 51.60 (1C, C(CH3)2Br), 167.89 (1C, C=O), 169.02 (2C, Ccycl=O). IR(固体、ATRセル)ν(cm-1) 1803, 1772 (Ccycl=O),1728 (C=O),1394,1359,1197,1121,1071,996,924,856,811,731,648. 質量分光分析 (+EI, m/z) 266,265,156,151,149,123,121,116,115,91,87,70,69. 元素分析: C8H10NO4Brに関する理論値: C = 36.39, H = 3.82, N = 5.30, Br =30.26. 実測値: C = 36.35, H = 3.82, N =5.03, Br = 30.17.融点72〜74℃。
2,4−ジクロロ−6−メトキシ−1,3,5−トリアジン
H = 1.84, N =23.25, Cl =39.19.
2H, CH Ar), 7.48 (d, J= 8.8 Hz, 2H, CH Ar), 9.40 (s, 1H, OH), 10.46 (s, 1H, NH). 13C NMR (DMSO d6) δ=55.52 (1C, OCH3); 115.46 (2C, CH Ar), 123.91 (2C, CH Ar), 129.49 (1C, C Ar), 154.44 (1C, C Ar), 164.81(1C, C Ar), 169.57 (1C, C Ar), 171.23
(1C, C Ar)。非主要異性体: 1H NMR (DMSO d6) δ=3.96 (s, 3H, OCH3); 6.79 (d, J = 8.9 Hz, 2H, CH Ar), 7.39 (d, J= 8.9 Hz, 2H, CH Ar), 9.42 (bs, 1H, OH), 10.10.32 (s, 1H, NH): 13C NMR (DMSO d6) δ=55.10 (1C, OCH3); 115.46 (2C, CH Ar), 123.03 (2C, CH Ar), 129.26 (1C, C Ar), 154.76 (1C, C Ar), 165.20(1C, C Ar), 170.48 (1C, C Ar), 170
.64 (1C, C Ar)。
ν(C=O)1747 cm-1.主要異性体: 1H NMR (DMSO d6) δ=2.05 (s, 6H, C(CH3)2Br), 3.96 (s, 3H, OCH3), 7.17 (d,J = 8.9 Hz, 2H, CH Ar), 7.77 (d,J = 8.9 Hz, 2H, CH Ar), 10.78 (s, 1H,
NH); 13C{1H} NMR(DMSO d6) δ=30.42 (2C, CH3), 55.75 (bs, 1C, OCH3), 57.29 (1C, C(CH3)2Br), 121.96 (2C, CH Ar), 122.12 (2C, CH Ar), 136.29 (1C, C Ar), 146.61 (bs, 1C, C Ar), 165.10 (bs, 1C, C Ar), 169.89 (bs, 1C, C Ar), 170.16 (1C, OC(O)C(CH3)2Br), 171.33 (bs, 1C, C Ar)。非主要異性体: 1H NMR
(DMSO d6) δ=2.05 (s, 6H, C(CH3)2Br), 3.96 (s, 3H, OCH3), 7.17 (d,J = 8.9 Hz,2H, CH Ar), 7.69 (d,J = 8.9 Hz,2H, CH Ar), 10.66(s, 1H, NH)。 13C NMR(DMSO d6) δ=30.42
(2C, CH3), 55.75 (bs, 1C, OCH3), 57.29 (1C, C(CH3)2Br), 121.96(2C, CH Ar), 122.73
(2C, CH Ar), 136.29 (1C, C Ar), 146.61
(bs, 1C, C Ar), 165.10 (bs, 1C, C Ar), 169.89 (bs, 1C, C Ar), 170.16 (1C, OC(O)C(CH3)2Br), 171.33 (bs,1C,C Ar).
2−ヒドロキシエチル−2−ブロモ−2−メチルプロピオネート
(CDCl3) δ=1.97 (s, 6H, CH3), 3.89 (t, J=4.6 Hz;2H, OCH2CH2OH); 4.33 (t, J=4.6 Hz;2H, OCH2CH2OH)。 13C NMR(CDCl3) δ=30.45 (2C, CH3), 55.55 (1C, C(CH3)2Br); 60.66 (1C,
OCH2CH2OH);65.90(1C, OCH2CH2OH); 171.69 (1C, C=O)。
2−フタルイミドエチル−2−ブロモ−2−メチルプロピオネート
トリチルチオールエーテルプロパノール
mL)を、磁気ホロワを含有し且つ均圧滴下漏斗を装備した3首丸底フラスコ中に入れた。フラスコを氷浴の使用により冷却し、臭化2−ブロモイソブチリル(27.8 mL, 0.225 mol)を滴下漏斗に付加した。撹拌しながら臭化2−ブロモイソブチリルを1滴ずつ冷却溶液に付加し、溶液を一晩撹拌放置した。次に混合物を濾過してトリエチルアミン塩酸塩を除去した後、ジクロロメタン(500 mL)を付加し、その後、希塩酸(2×300 mL)、希水酸化ナトリウム(2×300 mL)そして最後に蒸留水(3×300 mL)で洗浄した。有機層を分離し、生成物を溶媒のフラッシュ蒸発により単離して、次に生成物をヘキサンで粉砕して、濾過し、生成物を定量的収量で収集した。1H NMR(CDCl3)δ(ppm) 7.4−7.1(m, 15H, Haro),4.02(t, 2H, CH2CO2),2.15(t, 2H, SCH2),1.78(s, 3H, C(CH3)2Br),1.63(q, 2H, CH2CH2CH2).
4−(2−ブロモ−2−メチルプロピオネート)ベンズアルデヒド
(CDCl3)δ(ppm) 10.00(s, 1H, CHO), 7.94(d,
J = 4.6 Hz, 2H, Haro),7.31(d, J = 4.8 Hz, 2H, Haro),2.06(s, 6H, C(CH3)2Br). 13C NMR
(CDCl3) δ(ppm) 190.59, 169.33, 155.08, 134.07, 131.02, 121.71, 54.94, 30.25. IR(固体、ATRセル) 2984, 2820, 2730(O=C−H),1746(C=O), 1693(H−C=O), 1590, 1500, 1374, 1262, 1207, 1153, 1132, 1099, 1009, 932, 881, 808, 658:+EI MS(m/z) 273, 271(質量ピーク),
210, 193, 163, 151, 149, 140, 123, 121,
102. 元素分析: H11O3Brに関する理論値: C = 48.73, H
= 4.09; 実測値: C = 48.63, H = 4.03.
2−(2,2−ジメトキシ−エトキシ)−エタノール
3.55(d, J = 5.3 Hz, 2H, CHCH2), 3.63−3.61(m, J = 4.0 Hz, OCH2),3.74−3.72(m, J =
4.0 Hz,2H, CH2OH),4.52(t,1H, CH(OCH3)2. 13C{1H} NMR (100.59 MHz, CDCl3, 298 K) δ=54.12(2C, CH3), 61.82(1C, CH2OH), 70.78(1C, CHCH2O), 73.00 (1C, OCH2CH2), 102.73(1C, CH). C6H14O4に関する分析計算値: C = 47.99, H = 9.40; 実測値: C = 45.02, H = 8.74.
NMR (100.59 MHz, CDCl3, 298 K) δ=30.90(2C, C(CH3)2),54.13(2C, CH3O), 55.79(1C, BrC(CH3)2), 65.24 (1C, CH2OC(=O)), 69.21(1C, CHCH2O), 71.18(1C, OCH2CH2), 102.83(1C, CH).
3−(2,5−ジオキソ−2,5−ジヒドロ−ピロール−1−イル)−プロピオン酸
CH2Cl2/酢酸エチル 9:1)により橙色残渣を精製して、生成物を白色固体(3.86 g, 0.0228 mol, 41%)として得た。融点105〜107℃。
IR(neat):3092, 2883, 2537, 1695, 1445, 1411, 1373, 1337, 1305, 1230, 1151, 1081, 1043, 924, 830, 773, 694, 618 cm-1. 1H NMR (400.03 MHz, CDCl3, 298K) δ=2.69(t, J=7.3 Hz, 2H, CH2), 3.82(t, J=7.3Hz, 2H, CH2), 6.71(s, 2H, CHヒ゛ニル), 10.07(bs, 1H, COOH). 13C{1H} NMR (100.59 MHz, CDCl3, 298
K) δ=32.62(1C, CH2),33.36(1C, CH2), 134.38(2C, CHヒ゛ニル), 170.48 (1C, C), 176.64(2C, C). 元素分析: C7H7NO4に関する理論値: C = 49.71, H
= 4.17, N =8.28. 実測値: C = 49.35, H = 4.19; N =7.95.
33.46(1C, (CO)2N−CH2), 55.45(1C, C(CH3)2Br), 62.04(1C, CH2−COO−CH2), 63.35(1C, CH2−OOC−C(CH3)2Br), 134.25(2C, OC−CH=CH−CO),
170.29 (1C, C=Oエステル), 170.40 (1C, C=Oエステル), 171.39(2C, O=C−N(CH2)−C=O). IR(固体、ATRセル)ν(cm-1) 1769 (ν(C=O,イミト゛)),1736(ν(C=O,酸)),
1707(ν(C=O,イミト゛)).
2−ブロモ−2−メチル−プロピオン酸3−tert−ブトキシカルボニルアミノ−プロピルエステル
mol)の溶液を0℃に冷却し、THF(50 mL)中のBoc2O(8.56 g, 0.0322 mol)を滴下した(約20分)。次に溶液を室温に温めて、3時間撹拌した。TLC分析(SiO2, 100%Et2O)は、アミノアルコール出発物質(Rf=0)の完全消失及び予測N−Boc−保護化アミノアルコール中間体(Rf=0.25)の存在を明示した。次に混合物を0℃に冷却し、Et3N(6.0 mL, 0.0431 mol)を注射器により付加した。THF(50 mL)中の臭化2−ブロモイソブチリル(4.85 mL, 0.0392 mol)の溶液を、約30分で滴下し、その結果生じた白色懸濁液を0℃で1時間、室温でさらに2時間撹拌した。次に混合物をEt2O(200 mL)で希釈し、アンモニウム塩を濾し取って、3×50 mLのEt2Oで洗浄した。無色溶液を3×100 mLの水で洗浄し、MgSO4上で乾燥した。減圧下での溶媒の除去により、生成物を無色油として得て、これをフラッシュクロマトグラフィー(CC, SiO2, 石油エーテル/Et2O 8:1)により精製した。10.42 g(0.0321 mol, 82%)の(1)を無色油として得た。 IR(neat):3295, 2976, 1734, 1713, 1695, 1517, 1463, 1391, 1366, 1273, 1163, 1109, 1013, 633 cm-1. 1H NMR (400.03 MHz, CDCl3, 298K) δ=1.43(s, 9H, CH3),1.88(quint., J=6.3 Hz, 2H, CH2), 1.93(s, 6H, CH3), 3.23(q, J=6.0 Hz, 2H, CH2), 4.24(q, J=6.0 Hz, 2H, CH2), 4.77(bs, 1H, NH). 13C{1H} NMR (100.59
MHz, CDCl3, 298 K) δ=28.54(3C, CH3),28.99(1C, CH2), 30.88(2C, CH3),37.57(1C, CH2), 55.95(1C, C), 63.86(1C, CH2), 156.03(1C, C), 171.89(1C, C). 元素分析: C12H22BrNO4に関する理論値: C = 44.46, H = 6.84, N =4.32, Br =24.65; 実測値: C = 44.48, H = 6.91; N =4.33, Br =24.91.
4,10−ジオキサ−トリシクロ[5.2.1.02,6]デク−8−エン−3,5−ジオン
57, 1780, 1309, 1282, 1211, 1145, 1083, 1019, 947, 920, 902, 877, 847, 800, 732,
690, 674, 633, 575 cm-1. 1H NMR (400.03 MHz, CDCl3, 298K) δ=3.17(s, 2H, CH), 5.45(t, J=1.0 Hz, 2H, CHO), 6.57(t, J=1.0 Hz, 2H, CHヒ゛ニル); 13C{1H} NMR (100.59 MHz, CDCl3, 298 K) δ=48.85(2C, CH),82.35(2H, CHO), 137.12(2C, CHヒ゛ニル), 170.04 (2C, CO). 元素分析: C8H6O4に関する理論値: C = 57.84, H = 3.64; 実測値: C = 57.74, H = 3.68.
1681, 1435, 1405, 1335, 1269, 1168, 1100, 1053, 1013, 959, 916, 875, 850, 807, 722, 705, 654 cm-1. 1H NMR (400.03 MHz, CDCl3, 298K) δ=1.90(bs, 1H, OH); 2.90(s, 2H, CH), 3.69−3.72(m, 2H, CH2), 3.76−3.78(m, 2H, CH2), 5.28(t, J=0.9 Hz, 2H, CH), 6.52(t, J=0.9 Hz, 2H, CHヒ゛ニル); 13C{1H} NMR (100.59 MHz, CDCl3, 298 K) δ=41.77(2C, NCH2), 60.18(2C, OCH2), 47.50(2C, CH),
81.04(2C, CH), 136.60(2C, CHヒ゛ニル), 176.97 (2C, C). 元素分析: C10H11NO4に関する理論値: C = 57.41, H = 5.30, N =6.70. 実測値: C = 57.16, H = 5.37, N =6.62.
アザ−トリシクロ[5.2.1.02,6]デク−8−エン−4−イル)−エチルエステル
mol)の溶液を滴下した(30分)。白色懸濁物を0℃で3時間、次に室温で一晩撹拌した。アンモニウム塩を濾し取り、溶媒を減圧下で除去して、淡黄色残渣を生じ、これをフラッシュクロマトグラフィー(CC, SiO2, 石油エーテル/酢酸エチル 1:1, Rf(7)=0.23)により精製した。3.54 g(9.88×10-3 mol, 収率93%)の開始剤15を白色固体として得た。融点83〜85℃。 IR(neat): 1733, 1695, 1419, 1395, 1336, 1278,
1157, 1106, 1015, 874, 852, 824, 724, 706, 654, 603 cm-1. 1H NMR (400.03 MHz, CDCl3, 298K) δ=1.86(s, 6H, CH3),2.84(s, 2H,
CH), 3.78(t, J=5.3 Hz, 2H, NCH2), 4.30(t, J=5.3 Hz, 2H, OCH2); 5.23(t, J=1.0 Hz, 2H, CHO), 6.49(t, J=1.0 Hz, 2H, CHヒ゛ニル). 13C{1H} NMR (100.59 MHz, CDCl3, 298 K) δ=30.65(2C, CH2),37.65(2C, NCH2), 47.56(2C, CH),55.80(1C, C(CH3)2Br), 62.26(OCH2),
80.91(2H, CHO), 136.62(2C, CHヒ゛ニル), 171.46(1C, COエステル).175.95(2C, COイミト゛). 元素分析: C14H16NO5に関する理論値: C = 46.95, H = 4.50, N
=3.91, Br =22.31; 実測値: C = 46.88, H = 4.55; N =3.79, Br =22.22.
開始剤8を用いた重合
30℃での50v/v%トルエン溶液中の[PEG]/[I]/[Cu]/[L]=10/1/1/2
Cu(I)Br(0.326g, 2.27×10-3mol)、開始剤 8(0.569 g, 2.27×10-3mol)及び磁気ホロワを乾燥シュレンク管中に入れた後、窒素と真空を3回反復して、脱酸素化した。MPEG(395)MA(10 mL, 22.74×10-3mol)、N−(n−エチル)−2−ピリジルメタンイミン(0.64
mL, 4.54×10-3mol)及びトルエン(10 mL)を第二シュレンク管に付加した。混合物を直ちに、5回の凍結−ポンプ−解凍脱気サイクルに付した。次にこの溶液を、カニューレを介して、開始剤及びCu(I)Brを含有するシュレンク管に移した。その結果生じた褐色溶液を、30℃で撹拌した。転化及び分子量分析のために、試料を脱気注射器を用いて定期的に取り出し、液体窒素中で急冷した。
50/70℃での73w/v%トルエン溶液中の[PEG]/[I]/[Cu]/[L]=6.37/1/1/2
開始剤 8(0.10 g, 0.400 mmol)、Cu(I)Br(0.057g, 0.400 mmol, 1当量)及びMPEG(550)MA(1.60 g,
2.55 mmol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(5.90 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を、1時間窒素を発泡させることにより脱酸素化し、次に脱気N−プロピル−2−ピリジルメタンイミン(0.114 g, 0.797 mmol)を付加した。反応物を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入
れ(t=0)、転化及び分子量分析のために、試料を定期的に取り出した。5時間32分後に、温度を70℃に増大した。
開始剤 8(0.10 g, 0.400 mmol)、Cu(I)Br(0.057g, 0.400 mmol, 1当量)及びMPEG(550)MA(1.60 g,
2.341 mmol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(5.90 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を、1時間窒素を発泡させることにより脱酸素化し、次に脱気N−プロピル−2−ピリジルメタンイミン(0.114 g,
0.797 mmol)を付加した。反応物を90℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために、試料を定期的に取り出した。
開始剤8(0.10 g, 0.40 mmol)、Cu(I)Br(0.0574g, 0.40 mmol, 1当量)及びMPEG(550)MA(8.0 g, 12.7 mmol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(14.7 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を、3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素化し、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.107 g, 0.80 mmol)を付加した。反応物を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために、試料を定期的に取り出した。真空で溶媒を除去するとともに、酸性水(pH〜4)を用いて残渣を透析することにより、ポリマーを精製した
。その後、凍結乾燥して、生成物を単離した。
開始剤8(0.10 g, 0.40 mmol)、Cu(I)Br(0.0574g, 0.40 mmol, 1当量)及びMPEG(550)MA(1.60 g, 2.55 mmol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(3.0 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を、3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素化し、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.107 g, 0.80 mmol)を付加した。反応物を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために、試料を定期的に取り出した。
開始剤8(0.10 g, 0.40 mmol)、Cu(I)Br(0.0545g, 0.38 mmol, 0.95当量)、Cu(II)Br(0.0045g, 0.02 mmol, 0.05当量)及びMPEG(550)MA(1.60 g, 2.55 mmol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(3.0 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を、3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素化し、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.107 g, 0.80 mmol)を付加した。反応物を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために、試料を定期的に取り出した。
開始剤8(0.10 g, 0.40 mmol)、Cu(I)Br(0.0574g, 0.40 mmol, 1当量)及びMPEG(550)MA(1.60 g, 2.55 mmol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(3.0 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を、3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素化し、次に脱気N−プロピル−2−ピリジルメタンイミン(0.119 g, 0.80 mmol)を付加した。反応物を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために、試料を定期的に取り出した。
開始剤8(0.10 g, 0.40 mmol)、Cu(I)Br(0.0574g, 0.40 mmol, 1当量)及びMPEG(550)MA(1.60 g, 2.55 mmol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(3.0 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を、3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素化し、次に脱気N−オクチル−2−ピリジルメタンイミン(0.175 g, 0.80 mmol)を付加した。反応物を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために、試料を定期的に取り出した。
開始剤8(0.10 g, 0.40 mmol)、Cu(I)Br(0.0574g, 0.40 mmol, 1当量)及びMPEG(550)MA(1.60 g, 2.55 mmol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(3.0 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を、3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素化し、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.107 g, 0.80 mmol)を付加した。反応物を70℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために、試料を定期的に取り出した。
開始剤8(6.0 g, 24 mmol)、Cu(I)Br(3.44 g, 24
mmol, 1当量)及びMPEG(550)MA(96 g, 0.153 mmol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(176 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を、1時間窒素を発泡させることにより脱酸素化し、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(6.44 g, 48 mmol)を付加した。反応物を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために、試料を定期的に取り出した。真空で溶媒を除去するとともに、酸性水(pH〜4)を用いて残渣を透析することにより、ポリマーを精製した。その後、凍結乾燥して、生成物を単離した。
50℃での80w/v%トルエン溶液中の[PEG]/[I]/[Cu]/[L]=23.2/1/1/2
開始剤8(0.10 g, 0.40 mmol)、Cu(I)Br(0.0574g, 0.40 mmol, 1当量)及びMPEG(1000)MA(10.0 g, 9.3 mmol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(40 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を、1時間窒素を発泡させることにより脱酸素化し、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.107 g, 0.80 mmol)を付加した。反応物を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために、試料を定期的に取り出した。真空で溶媒を除去するとともに、酸性水(pH〜4)を用いて残渣を透析することにより、ポリマーを精製した。その後、凍結乾燥して、生成物を単離した。
開始剤8(0.10 g, 0.40 mmol)、Cu(I)Br(0.0574g, 0.40 mmol, 1当量)及びMPEG(1000)MA(20.0 g, 18.5 mmol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(80 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を、1時間窒素を発泡させることにより脱酸素化し、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.107 g, 0.80
mmol)を付加した。反応物を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために、試料を定期的に取り出した。真空で溶媒を除去するとともに、酸性水(pH〜4)を用いて残渣を透析することにより、ポリマーを精製した。
その後、凍結乾燥して、生成物を単離した。
開始剤8(1.0 g, 4.0 mmol)、Cu(I)Br(0.574g, 4.0 mmol, 1当量)及びMPEG(1000)MA(100 g, 93.0 mmol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(200 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を、1時間窒素を発泡させることにより脱酸素化し、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(1.07 g, 8.0 mmol)を付加した。反応物を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために、試料を定期的に取り出した。真空で溶媒を除去するとともに、酸性水(pH〜4)を用いて残渣を透析することにより、ポリマーを精製した。その後、凍結乾燥して、生成物を単離した。
30℃での50v/v%トルエン溶液中の[PEG]/[I]/[Cu]/[L]=1
0/1/1/2
Cu(I)Br(0.326g, 2.27 mmol)、開始剤 7(0.601 g, 2.27 mmol)及び磁気ホロワを乾燥シュレンク管中に入れた後、窒素と真空を3回反復して、脱酸素化した。MPEG(395)MA(10 mL, 22.74
mmol)、N−(n−プロピル)−2−ピリジルメタンイミン(0.71 mL, 4.54 mmol)及びトルエン(10 mL)を第二シュレンク管に付加した。混合物を直ちに、5回の凍結−ポンプ−解凍脱気サイクルに付した。次にこの溶液を、カニューレを介して、開始剤及びCu(I)Brを含有するシュレンク管に移した。その結果生じた褐色溶液を、30℃で撹拌した。転化及び分子量分析のために、試料を脱気注射器を用いて定期的に取り出し、液体窒素中で急冷した。
Cu(I)Br(0.326g, 2.27 mmol)、開始剤 7(0.601 g, 2.27 mmol)及び磁気ホロワを乾燥シュレンク管中に入れた後、窒素と真空を3回反復して、脱酸素化した。MPEG(395)MA(10 mL, 22.74
mmol)、N−(n−エチル)−2−ピリジルメタンイミン(0.64 mL, 4.54 mmol)及びアニソール(10 mL)を第二シュレンク管に付加した。混合物を直ちに、5回の凍結−ポンプ−解凍脱気サイクルに付した。次にこの溶液を、カニューレを介して、開始剤及びCu(I)Brを含有するシュレンク管に移した。その結果生じた褐色溶液を、30℃で撹拌した。転化及び分子量分析のために、試料を脱気注射器を用いて定期的に取り出し、液体窒素中で急冷した。
Cu(I)Br(0.326g, 2.27 mmol)、開始剤 7(0.601 g, 2.27 mmol)及び磁気ホロワを乾燥シュレンク管中に入れた後、窒素と真空を3回反復して、脱酸素化した。MPEG(395)MA(10 mL, 22.74
mmol)、N−(n−プロピル)−2−ピリジルメタンイミン(0.71 mL, 4.54 mmol)及びアニソール(10 mL)を第二シュレンク管に付加した。混合物を直ちに、5回の凍結−ポンプ−解凍脱気サイクルに付した。次にこの溶液を、カニューレを介して、開始剤及びCu(I)Brを含有するシュレンク管に移した。その結果生じた褐色溶液を、30℃で撹拌した。転化及び分子量分析のために、試料を脱気注射器を用いて定期的に取り出し、液体窒素中で急冷した。
30℃での66w/v%トルエン溶液中の[PEG]/[I]/[Cu]/[L]=6.4/1/1/2
開始剤 7(0.5 g, 1.89 mmol)、Cu(I)Br(0.27g, 1.89 mmol, 1当量)及びMPEG(550)MA(7.57 g, 0.012 mol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(14 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素化し、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.51 g, 3.79 mmol)を付加した。反応物を30℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化
及び分子量分析のために、試料を定期的に取り出した。
開始剤 7(0.5 g, 1.89 mmol)、Cu(I)Br(0.27g, 1.89 mmol, 1当量)及びMPEG(550)MA(7.57g, 0.012 mol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(15 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素化し、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.51 g, 3.79 mmol)を付加した。反応物を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために、試料を定期的に取り出した。
開始剤 7(2.5 g, 9.47 mmol)、Cu(I)Br(1.35g, 9.47 mmol, 1当量)及びMPEG(550)MA(142.0 g, 0.226 mol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(261 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素化し、次に脱気N−プロピル−2−ピリジルメタンイミン(2.80 g, 0.019
mol)を付加した。反応物を90℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)
、転化及び分子量分析のために、試料を定期的に取り出した。反応溶液をジエチルエーテルの激しく撹拌した溶液(1000 mL)に滴下することにより、ポリマーを精製した。その結果生じた油をジエチルエーテル(3×1000 mL)で洗浄し、次に真空乾燥した。
開始剤 7(10.0 g, 0.038 mol)、Cu(I)Br(5.41g,
0.038 mol, 1当量)及びMPEG(550)MA(151.0g, 0.240 mol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(302 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を、1時間窒素を発泡させることにより脱酸素化し、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(10.2 g, 0.0761
mol)を付加した。反応物を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入れた(t=0)。転化を1H NMR分光分析により、そして分子量分析をSECにより追跡調査した。
開始剤 7(2.95 g, 1.119×10-2 mol)、Cu(I)Br(1.60g, 1.119×10-2 mol)及びMPEG(550)MA(45.42g,
7.23×10-2 mol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。次にトルエン(73 mL)をシュレンク管に付加し、混合物を、3回連続凍結、ポンプ、解凍サイクルにより脱気した。完了時に、脱酸素化N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(3.16 mL, 2.24×10-2 mol)を付加し、シュレンク管を50℃のサーモスタット制御油浴中
に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のためにサンプリングした。ジエチルエーテルで洗浄するとともに、その後、酸性化水(pH〜4)中で透析することにより、ポリマーを単離した。
開始剤 7(0.05 g, 0.189 mmol)、Cu(I)Br(0.027g, 0.189 mmol, 1当量)、2,2’−ビピリジル(0.059 g, 0.378 mmol)、MPEG(550)MA(2.84g, 4.52 mmol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(5.68 mL)をシュレンク管に付加し、その結果生じた溶液を3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素化した。反応物を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために、試料を定期的に取り出した。
開始剤 7(0.05 g, 0.189 mmol)、Cu(I)Br(0.027g, 0.189 mmol, 1当量)、4,4’−ジノニル−2,2’−ジピリジル(0.1545 g, 0.378 mmol)、MPEG(550)MA(2.84g, 4.52 mmol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(5.68 mL)をシュレンク管に付加し、その結果生じた溶液を3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素化した。反応物を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために、試料を定期的に取り出した。
開始剤 7(0.05 g, 0.189 mmol)、Cu(I)Br(0.027g, 0.189 mmol, 1当量)、1,1,4,7,10,10−ヘキサメチルトリエチレンテトラアミン(0.0435 g, 0.189 mmol)、MPEG(550)MA(2.84g, 4.52 mmol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(5.68 mL)をシュレンク管に付加し、その結果生じた溶液を3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素化した。反応物を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために、試料を定期的に取り出した。
開始剤 7(0.05 g, 0.189 mmol)、Cu(I)Br(0.027g, 0.189 mmol, 1当量)、N,N,N’,N”,N”−ペンタメチルジエチレントリアミン(0.0328 g, 0.189 mmol)、MPEG(550)MA(2.84g, 4.52 mmol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(5.68 mL)をシュレンク管に付加し、その結果生じた溶液を3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素化した。反応物を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために、試料を定期的に取り出した。
90℃での66w/v%トルエン溶液中の[PEG]/[I]/[Cu]/[L]=13.9/1/1/2
開始剤 7(0.526 g, 1.99 mmol)、Cu(I)Br(0.29g, 2.02 mmol, 1当量)及びMPEG(1000)MA(29.62 g,
0.027 mol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(60 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素化し、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.51 g, 3.96
mol)を付加した。反応物を90℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために、試料を定期的に取り出した。反応溶液をジエチルエーテルの激しく撹拌した溶液(1000 mL)に滴下することにより、ポリマーを精製した。その結果生じた油をジエチルエーテル(3×1000 mL)で洗浄し、次に真空乾燥した。
開始剤 7(5.0 g, 0.019 mol)、Cu(I)Br(0.66g, 4.61 mmol, 0.24当量)及びMPEG(1000)MA(185.0g,
0.171 mol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(740 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を、1時間窒素を発泡させることにより脱酸素化し、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(1.24 g, 9.24 mmol)を付加した。反応物を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために、試料を定期的に取り出した。
開始剤 7(1.0 g, 3.79 mmol)、Cu(I)Br(0.54g, 3.79 mmol, 1当量)及びMPEG(1000)MA(151.4g, 0.140 mol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(608 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を、1時間窒素を発泡させることにより脱酸素化し、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(1.02 g, 7.57 mmol)を付加した。反応物を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために、試料を定期的に取り出した。
開始剤 7(2.0 g, 7.57 mmol)、Cu(I)Br(1.08g, 7.57 mmol, 1当量)及びMPEG(1000)MA(151.47g, 0.140 mol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(606 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を、1時間窒素を発泡させることにより脱酸素化し、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(2.03 g, 0.015
mol)を付加した。反応物を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために、試料を定期的に取り出した。
30℃での80w/v%トルエン溶液中の[PEG]/[I]/[Cu]/[L]=19.2/1/1/2
開始剤 7(0.05 g, 0.189 mmol)、Cu(I)Br(0.027g, 0.189 mmol, 1当量)及び(MPEG(2000)MA)(7.55
g, 3.63 mmol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(28 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素化し、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.05 g, 0.38 mmol)を付加した。反応物を30℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために、試料を定期的に取り出した。反応溶液をジエチルエーテルの激しく撹拌した溶液(400 mL)に滴下することにより、ポリマーを精製した。その結果生じた白色粉末を濾過し、トルエン(20 mL)中に溶解し、ジエチルエーテル(400 mL)中で沈殿させた。この手法を3回反復した。
開始剤 7(0.05 g, 0.189 mmol)、Cu(I)Br(0.027g, 0.189 mmol, 1当量)及びMPEG(2000)MA(7.55 g, 3.63 mmol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(28 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素化し、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.05 g, 0.38 mmol)を付加した。反応物を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために、試料を定期的に取り出した。反応溶液をジエチルエーテルの激しく撹拌した溶液(400 mL)に滴下することにより、ポリマーを精製した。その結果生じた白色粉末を濾過し、トルエン(20 mL)中に溶解し、ジエチルエーテル(400 mL)中で沈殿させた。この手法を3回反復した。
開始剤 7(0.05 g, 0.189 mmol)、Cu(I)Br(0.027g, 0.189 mmol, 1当量)及びMPEG(2000)MA(7.55 g, 3.63 mmol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(28 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素化し、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.05 g, 0.38 mmol)を付加した。反応物を90℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために、試料を定期的に取り出した。反応溶液をジエチルエーテルの激しく撹拌した溶液(400 mL)に滴下することにより、ポリマーを精製した。その結果生じた白色粉末を濾過し、トルエン(20 mL)中に溶解し、ジエチルエーテル(400 mL)中で沈殿させた。この手法を3回反復した。
開始剤 7(0.5 g, 1.89 mmol)、Cu(I)Br(0.27g, 1.89 mmol, 1当量)及びMPEG(1000)MA(18.90 g, 0.018 mol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(35 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素化し、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.51 g, 3.79 mmol)を付加した。反応物を90℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、
転化及び分子量分析のために、試料を定期的に取り出した。
開始剤 7(0.67 g, 2.53 mmol)、Cu(I)Br(0.36g,
2.53 mmol, 1当量)及びMPEG(2000)MA(101.24 g,
0.049 mol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(405 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素化し、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.68 g, 5.07 mmol)を付加した。反応物を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために、試料を定期的に取り出した。45時間15分後に、温度を70℃に上げた。
開始剤 7(0.66 g, 2.5×10-3 mol)、Cu(I)Br(0.36g, 2.5×10-3 mol)及びMPEG(2000)MA(100.0 g, 4.81×10-2 mol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。次にトルエン(300 mL)をシュレンク管に付加し、混合物を、窒素で1時間パージすることにより脱酸素化した。次に脱酸素化N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.706 mL, 5.0×10-3 mol)を付加し、シュレンク管を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入れた(t=0)。24時間後に、温度を70℃に上げた。ジエチルエーテルで洗浄するとともに、その後、酸性化水(pH〜4)中で透析することにより、ポリマーを単離した。
開始剤 7(0.44 g, 1.67×10-3 mol)、Cu(I)Br(0.24g, 1.67×10-3 mol)及びMPEG(2000)MA(100.0 g,
4.81×10-2 mol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。次にトルエン(300 mL)をシュレンク管に付加し、混合物を、窒素で1時間パージすることにより脱酸素化した。次に脱酸素化N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.47 mL, 3.33×10-3 mol)を付加し、シュレンク管を50℃Cでのサーモスタット制御油浴中に入れた(t=0)。24時間後に、温度を70℃に上げた。ジエチルエーテルで洗浄するとともに、その後、酸性化水(pH〜4)中で透析することにより、ポリマーを単離した。
50/90℃での75w/v%トルエン溶液中の[PEG]/[I]/[Cu]/[L]=64/1/1/2
開始剤 5(0.25 g, 0.622 mmol)、Cu(I)Br(0.089g, 0.622 mmol, 1当量)及びMPEG(550)MA(24.90 g, 0.040 mol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。
シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(100 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を、1時間窒素を発泡させることにより脱酸素化し、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.167 g, 1.245 mmol)を付加した。反応物を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために、試料を定期的に取り出した。3時間15分後に、温度を90℃に上げた。
50℃での75w/v%トルエン溶液中の[PEG]/[I]/[Cu]/[L]=37/1/1/2
開始剤 5(0.125 g, 0.031 mmol)、Cu(I)Br(0.044g, 0.031 mmol, 1当量)及びMPEG(1000)MA(12.45
g, 0.012 mol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(50 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を、1時間窒素を発泡させることにより脱酸素化し、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.083 g, 0.062 mmol)を付加した。反応物を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために、試料を定期的に取り出した。
50℃での67w/v%アセトン溶液中の[PEG]/[I]/[Cu]/[L]=28.8:1/1/2
開始剤 9(0.035 g, 1.667×10-4 mol)、Cu(I)Br(0.024g, 1.667×10-4 mol)及びMPEG(2000)MA(10 g, 4.81×10-3 mol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。次にアセトン(20 mL)をシュレンク管に付加し、混合物を3回連続凍結、ポンプ、解凍サイクルにより脱気した。完了時に、脱酸素化N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.05 mL, 3.54×10-4 mol)を付加し、シュレンク管を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために、試料を定期的に取り出した。
30℃での67w/v%トルエン溶液中の[PEG]/[I]/[Cu]/[L]=1
4.4/1/1/2
開始剤 6(0.119 g, 3.333×10-4 mol)、Cu(I)Br(0.048g, 3.333×10-4 mol)及びMPEG(2000)MA(10 g, 4.81×10-3 mol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。次にトルエン(20 mL)をシュレンク管に付加し、混合物を3回連続凍結、ポンプ、解凍サイクルにより脱気した。完了時に、脱酸素化N−n−プロピル−2−ピリジルメタンイミン(0.10 mL, 6.667×10-4 mol)を付加し、シュレンク管を30℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のためにサンプリングした。
開始剤 6(0.079 g, 2.222×10-4 mol)、Cu(I)Br(0.031g, 2.222×10-4 mol)及びPEG(2000)MA(10 g,
4.81×10-3 mol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。次にトルエン(20 mL)をシュレンク管に付加し、混合物を3回連続凍結、ポンプ、解凍サイクルにより脱気した。完了時に、脱酸素化N−n−プロピル−2−ピリジルメタンイミン(0.066 mL, 4.444×10-4 mol)を付加し、シュレンク管を30℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のためにサンプリングした。
開始剤 6(0.059 g, 1.667×10-4 mol)、Cu(I)Br(0.024g, 1.667×10-4 mol)及びMPEG(2000)MA(10 g, 4.81×10-3 mol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。次にトルエン(20 mL)をシュレンク管に付加し、混合物を3回連続凍結、ポンプ、解凍サイクルにより脱気した。完了時に、脱酸素化N−n−プロピル−2−ピリジルメタンイミン(0.049 mL, 1.667×10-4 mol)を付加し、シュレンク管を30℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のためにサンプリングした。
50℃での67w/v%トルエン中の[PEG]/[I]/[Cu]/[L]=25/1/1/2
開始剤 10(0.81 g, 1.68×10-3 mol)、Cu(I)Br(0.24g, 1.68×10-3 mol)及びMPEG(395)MA(20.0 g, 4.21×10-2 mol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。次にトルエン(41 mL)をシュレンク管に付加し、混合物を、1時間窒素でパージすることにより脱酸素化した。次に脱酸素化N−n−プロピル−2−ピリジルメタンイミン(0.53 mL, 3.37×10-3 mol)を付加し、シュレンク管を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のためにサンプリングした。
50℃での67v/v%トルエン溶液中の[PEG]/[I]/[Cu]/[L]=6.4/1/1/2
開始剤 11(0.103 g, 0.380 mmol)、Cu(I)Br(0.054g, 0.380 mmol, 1当量)及びMPEG(550)MA(1.51 g, 2.41 mmol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(2.78 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素化し、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.10 g, 0.758 mmol)を付加した。反応物を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために試料を定期的に取り出した。
開始剤 11(3.0 g, 11.1 mmol)、Cu(I)Br(1.584g, 11.1 mmol, 1当量)及びMPEG(550)MA(44.27 g, 70.5 mmol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(81.3 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を、1時間窒素を発泡することにより脱酸素化し、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(2.97 g, 22.2
mmol)を付加した。反応物を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために試料を定期的に取り出した。溶媒を真空で除去するとともに、酸性水(pH〜4)を用いて残渣を透析することにより、ポリマーを精製した。その後、凍結乾燥して、生成物を単離した。
50/70℃での80w/v%トルエン溶液中の[PEG]/[I]/[Cu]/[L]=12/1/1/2
開始剤 11(0.1 g, 0.369 mmol)、Cu(I)Br(0.053g, 0.369 mmol, 1当量)及びMPEG(2000)MA(9.24 g, 4.44 mmol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(37 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を、1時間窒素を発泡することにより脱酸素化し、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.10 g, 0.758 mmol)を付加した。反応物を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために試料を定期的に取り出した。113時間後、温度を70℃に上げた。溶媒を真空で除去するとともに、酸性水(pH〜4)を用いて残渣を透析することにより、ポリマーを精製した。その後、凍結乾燥して、生成物を単離した。
開始剤 11(0.1 g, 0.369 mmol)、Cu(I)Br(0.053g, 0.369 mmol, 1当量)及びMPEG(2000)MA(18.48 g, 8.88 mmol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(74 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を、1時間窒素を発泡することにより脱酸素化し、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.10 g, 0.758 mmol)を付加した。反応物を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために試料を定期的に取り出した。113時間後、温度を70℃に上げた。溶媒を真空で除去するとともに、酸性水(pH〜4)を用いて残渣を透
析することにより、ポリマーを精製した。その後、凍結乾燥して、生成物を単離した。
70℃での66v/v%トルエン溶液中の[PEG]/[I]/[Cu]/[L]=5/1/1/2
N−(エチル)−2−ピリジルメタンイミンリガンド(1.41 mL, 10.92
mmol)、開始剤 12(1.633 g, 5.46 mmol)及びMPEG(1000)MA(27.3 mL, 30 g, 27.3 mmol)を、溶媒としてのトルエン(60 mL)及び内部標準としてのメシチレン(1 mL)とともに、乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管をゴム隔壁で密封して、3回の凍結、ポンプ、解凍サイクルに付した。次にこの溶液を、予め排気し、窒素を充填した、Cu(I)Cl(0.543 g, 5.46 mmol)及び磁気ホロワを含有する別のシュレンク管中に窒素下でカニューレ挿入した。その後、褐色溶液を絶えず撹拌しながら70℃に加熱した(t=0)。分子量及び転化分析のために、脱気注射器を用いて試料を定期的に取り出した。48時間後、混合物をトルエン 50 mLで希釈し、空気を6時間発泡させて、緑色懸濁液を0℃で一晩保持した。短い中性アルミナカラムを通して濾過して銅塩を除去後、ジエチルエーテルからポリマーを沈殿させた。濾過によりポリマーを収集し、真空炉(40℃)中で一晩乾燥した。
N−(エチル)−2−ピリジルメタンイミンリガンド(0.35 mL, 2.73 mmol)、開始剤 12(0.41 g, 1.37 mmol)、PEG(1000)MA(27.3 mL, 30 g, 27.3 mmol)を、溶媒としてのトルエン(60 mL)及び内部標準としてのメシチレン(1 mL)とともに、乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管をゴム隔壁で密封して、3回の凍結、ポンプ、解凍サイクルに付した。次にこの溶液を、予め排気し、窒素を充填した、Cu(I)Br(0.197 g, 1.37 mmol)及び磁気ホロワを含有する別のシュレンク管中に窒素下でカニューレ挿入した。その後、褐色溶液を絶えず撹拌しながら50℃に加熱した(t=0)。分子量及び転化分析のために、脱気注射器を用いて試料を定期的に取り出した。転化が66%になったときに、乾燥カニューレを用いて反応溶液を半分取り出し、空気を6時間発泡させて、短い中性アルミナカラム上を通して、銅塩を除去した。溶媒を真空下で除去し、非反応モノマーを透析により除去して、ポリマーを白色粉末として得た。48時間後、残りの反応混合物をトルエン 50 mLで希釈し、空気を6時間発泡させて、緑色懸濁液を0℃で一晩保持した。短い中性アルミナカラムを通して濾過して銅塩を除去後、ジエチルエーテルからポリマーを沈殿させた。濾過によりポリマーを収集し、真空炉(40℃)中で一晩乾燥した。
30℃での67w/v%トルエン溶液中の[PEG]/[I]/[Cu]/[L]=15.9/1/1/2
開始剤 13(0.10 g, 0.28 mmol)、Cu(I)Br(0.039g, 0.28 mmol, 1当量)及びMPEG(550)MA(2.76 g, 4.39 mmol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(5.5 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素化し、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.074 g, 0.56 mmol)を付加した。反応物を30℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために試料を定期的に取り出した。
開始剤 13(0.10 g, 0.28 mmol)、Cu(I)Br(0.039g, 0.28 mmol, 1当量)及びMPEG(550)MA(1.38 g, 2.20 mmol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(2.75 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素化し、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.074 g, 0.56 mmol)を付加した。反応物を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために試料を定期的に取り出した。
開始剤 13(0.10 g, 0.28 mmol)、Cu(I)Br(0.039g, 0.28 mmol, 1当量)及びMPEG(550)MA(2.76 g, 4.39 mmol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(5.5 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素化し、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.074 g, 0.56 mmol)を付加した。反応物を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために試料を定期的に取り出した。
開始剤 13(0.10 g, 0.28 mmol)、Cu(I)Br(0.039g, 0.28 mmol, 1当量)及びMPEG(550)MA(5.51 g, 8.77 mmol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(11.0 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素化し、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.074 g, 0.56 mmol)を付加した。反応物を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために試料を定期的に取り出した。
開始剤 13(0.10 g, 0.28 mmol)、Cu(I)Br(0.039g, 0.28 mmol, 1当量)及びMPEG(550)MA(2.76 g, 4.39 mmol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(5.5 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素化し、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.074 g, 0.56 mmol)を付加した。反応物を70℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために試料を定期的に取り出した。
開始剤 13(0.10 g, 0.28 mmol)、Cu(I)Cl(0.0273g, 0.28 mmol, 1当量)及びMPEG(550)MA(2.76 g,
4.39 mmol)、並びに磁気ホロワをオーブン乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管を排気し、ドライ窒素で3回洗い流した。脱酸素化トルエン(5.5 mL)をシュレンク管に付加した。その結果生じた溶液を3回の凍結ポンプ解凍サイクルにより脱酸素化し、次に脱気N−エチル−2−ピリジルメタンイミン(0.074 g, 0.56 mmol)を付加した。反応物を50℃でのサーモスタット制御油浴中に入れ(t=0)、転化及び分子量分析のために試料を定期的に取り出した。163時間後、温度を90℃に上げた。
40℃での50v/v%トルエン溶液中の[PEG]/[I]/[Cu]/[L]=6/1/1/2
N−(エチル)−2−ピリジルメタンイミンリガンド(1.07 mL, 1.017
g, 7.58×10-3mol)、開始剤 14(1.229 g, 3.79×10-3 mol)及びMPEG(395)MA(10.80 g, 22.70×10-3 mol)を、溶媒(50%v/v)としてのトルエン(10 mL)とともに、乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管をゴム隔壁で密封して、3回の凍結、ポンプ、解凍サイクルに付した。次にこの溶液を、予め排気し、窒素を充填した、Cu(I)Br(0.544 g, 3.79×10-3 mol)及び磁気ホロワを含有する別のシュレンク管中に窒素下でカニューレ挿入した。その後、褐色溶液を絶えず撹拌しながら40℃に加熱した(t=0)。分子量及び転化分析のために、脱気注射器を用いて試料を定期的に取り出した。48時間後、混合物をトルエン 50 mLで希釈し、空気を6時間発泡させて、緑色懸濁液を0℃で一晩保持した。セライト(登録商標)パッドを通して濾過後、溶媒を減圧下で除去して、黄褐色油を得て、これを水(250 mL)中に溶解し、透析(Millipore, 再生セルロース、MWCO 1 kDa、濾過面積 0.23 m2)により精製して、予測ポリマーを淡黄色油として得た。
N−(エチル)−2−ピリジルメタンイミンリガンド(1.07 mL, 1.017
g, 7.58×10-3mol)、開始剤 14(0.263 g, 0.812×10-3 mol)及びMPEG(395)MA(10.80 g, 22.70×10-3 mol)を、溶媒(50%v/v)としてのトルエン(10 mL)とともに、乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管をゴム隔壁で密封して、3回の凍結、ポンプ、解凍サイクルに付した。次にこの溶液を、予め排気し、窒素を充填した、Cu(I)Br(0.116 g, 0.812×10-3 mol)及び磁気ホロワを含有する別のシュレンク管中に窒素下でカニューレ挿入した。その後、褐色溶液を絶えず撹拌しながら40℃に加熱した(t=0)。分子量及び転化分析のために、脱気注射器を用いて試料を定期的に取り出した。48時間後、混合物をトルエン 50 mLで希釈し、空気を6時間発泡させて、緑色懸濁液を0℃で一晩保持した。セライト(登録商標)パッドを通して濾過後、溶媒を減圧下で除去して、黄褐色油を得て、これを水(250 mL)中に溶解し、透析(Millipore, 再生セルロース、MWCO 1 kDa、濾過面積 0.23 m2)により精製して、予測ポリマーを淡黄色油として得た。
N−(エチル)−2−ピリジルメタンイミンリガンド(1.07 mL, 1.02 g, 7.58×10-3mol)、開始剤 14(0.263 g, 0.812×10-3 mol)及びMPEG(395)MA(10.80 g, 22.70×10-3 mol)を、溶媒(50%v/v)としてのトルエン(10 mL)とともに、乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管をゴム隔壁で密封して、3回の凍結、ポンプ、解凍サイクルに付した。次にこの溶液を、予め排気し、窒素を充填した、Cu(I)Br(0.116 g, 0.812×10-3 mol)及び磁気ホロワを含有する別のシュレンク管中に窒素下でカニューレ挿入した。その後、褐色溶液を絶えず撹拌しながら60℃に加熱した(t=0)。分子量及び転化分析のために、脱気注射器を用いて試料を定期的に取り出した。48時間後、混合物をトルエン 50 mLで希釈し、空気を6時間発泡させて、緑色懸濁液を0℃で一晩保持した。セライト(登録商標)パッドを通して濾過後、溶媒を減圧下で除去して、黄褐色油を得て、これを水(250 mL)中に溶解し、透析(Millipore, 再生セルロース、MWCO 1 kDa、濾過面積 0.23 m2)により精製して、予測ポリマーを淡黄色油として得た。
N−(n−オクチル)−2−ピリジルメタンイミンリガンド(0.052 mL, 0.050 g, 0.228×10-3mol)、開始剤 14(0.037 g, 0.114×10-3 mol)及びMPEG(395)MA(0.050 mL, 0.540 g, 1.14×10-3 mol)を、溶媒(50%v/v)としてのd8−トルエン(0.50 mL)とともに、乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管をゴム隔壁で密封して、3回の凍結、ポンプ、解凍サイクルに付した。次にこの溶液を、予め排気し、窒素を充填した、Cu(I)Br(0.016 g, 0.114×10-3 mol)を含有するNMR管中に窒素下でカニューレ挿入した。次に管を40℃に加熱し、1H NMRスペクトルを15分毎に記録した。
30℃での50v/v%トルエン溶液中の[PEG]/[I]/[Cu]/[L]=8/1/1/2
N−(エチル)−2−ピリジルメタンイミンリガンド(0.80 mL, 0.76 g, 5.68×10-3mol)、開始剤 15(2.03 g, 5.68×10-3 mol)及びMPEG(395)MA(20.0 mL, 21.6 g, 45.50×10-3 mol)を、溶媒(50%v/v)としてのトルエン(20 mL)とともに、乾燥シュレンク管中に入れた。シュレンク管をゴム隔壁で密封して、3回の凍結、ポンプ、解凍サイクルに付した。次にこの溶液を、予め排気し、窒素を充填した、Cu(I)Br(0.41 g, 2.84×10-3 mol)及び磁気ホロワを含有する別のシュレンク管中に窒素下でカニューレ挿入した(t=0)。その後、褐色溶液を30℃で撹拌した。分子量及び転化分析のために、脱気注射器を用いて試料を定期的に取り出した。7時間後、混合物をトルエン 50 mLで希釈し、空気を6時間発泡させて、緑色懸濁液を0℃で一晩保持した。セライト(登録商標)パッドを通して濾過後、溶媒を減圧下で除去して、黄褐色油を得て、これを水(250 mL)中に溶解し、透析(Millipore, 再生セルロース、MWCO 1 kDa、濾過面積 0.23 m2)により精製して、予測ポリマーを淡黄色油として得た。
開始剤8から調製されるポリPEGポリマーの反応
8により開始されるポリPEGポリマーのスクシンイミド末端基の加水分解安定度
各々異なる緩衝液を用いて、オンライン1H NMR実験を実行した。N−スクシンイミジル(開始剤8)を末端に有するポリ(MPEG(395)MA(Mn=6400 g/mol, PDI=1.09)(50 mg, 0.00781×10-3 mol)をNMR管中に導入し、0.5 mLの適切なリン酸塩緩衝液(pH=8, C=100 mM又は200 mM)中に溶解した。NMRスペクトルを定期的に記録した。
各々が異なるポリマー/リゾチーム比を含有する3つの実験の1組を実行した。開始剤8から調製される低分子量スクシンイミジルエステルを末端に有するポリ(MPEG(395)MA)(Mn=6400 g/mol, PDI=1.11)比2/1に関しては(8.9 mg, 1.39×10-6mol)、比5/1に関しては(22.6 mg,
3.50×10-6mol)及び比20/1に関しては(89.5 mg, 13.99
×10-6mol)、並びにリゾチーム(10 mg, 0.699×10-6mol)を、10 mlの無水DMSO及び0.5 mLの無水TEA中に溶解し、窒素下で室温で撹拌した。試料を定期的に採取し、HPLCにより分析した。HPLC系にガードカラム、BioSep−SEC−S3000カラム及びUV検出器を取り付けて、215 nmで移動相の相対吸光度を継続的に測定した。系を、0.5 mL/分の速度で、水及びアセトニトリル(69/31 v/v)中の0.1%v/vトリフルオロ酢酸溶液で溶離した。30:1の比の場合、SDS−PAGE(ポリアクリルアミド解像ゲル架橋結合:15%;ランニング緩衝液:25 mM TRIS塩基、250 mM グリシン、0.1%
SDS、pH 8.7)により、粗製物を分析した。
7により開始されるポリPEGポリマーのスクシンイミド末端基の加水分解安定度
各々異なる緩衝液を用いて、オンライン1H NMR実験を実行した。N−スクシンイミジル(開始剤7)を末端に有するポリ(MPEG(395)MA(Mn=2700 g/mol, PDI=1.12)(50 mg, 0.0185×10-3 mol)をNMR管中に導入し、0.5 mLの適切な緩衝液(200 mMリン酸塩緩衝液(pH=6及びpH=8),100 mMリン酸塩緩衝液(pH=8)又は200 mMホウ酸塩緩衝液(pH=9.2))中に溶解した。NMRスペクトルを定期的に記録した。
エチレンジアミン(22.4 mL, 0.333 mol)及び磁気ホロワを、均圧滴下漏斗を装備した3首丸底フラスコ中に入れた。系を窒素で洗い流して、陽圧下に置いた。無水ジクロロメタン(12 mL)中に溶解したスクシンイミドを末端に有するポリ(MPEG(550)MA)[Mn 4590PDi 1.22](3.0 g, 9.38×10-4mol)の溶液を滴下漏斗に付加し、溶液を一滴ずつエチレンジアミンに付加した。溶液を16時間撹拌し続けた後、透析し、その後、凍結乾燥して、生成物を単離した。1H NMRスペクトルは、2.75 ppmでのスクシンイミドO=C−CH2−CH2−C=O共鳴の低減を示す。
エチレンジアミン(14.85 mL, 0.222 mol)及び磁気ホロワを、均圧滴下漏斗を装備した3首丸底フラスコ中に入れた。系を窒素で洗い流して、陽圧下に置
いた。水(20 mL)中に溶解したスクシンイミドを末端に有するポリ(MPEG(550)MA)[Mn 4590PDi 1.22](2.0 g, 6.25×10-4mol)の溶液を滴下漏斗に付加し、溶液を一滴ずつエチレンジアミンに付加した。溶液を16時間撹拌し続けた後、透析し、その後、凍結乾燥して、生成物を単離した。1H NMRスペクトルは、2.75 ppmでのスクシンイミドO=C−CH2−CH2−C=O共鳴の低減を示す。
エチレンジアミン(20.0 mL, 0.299 mol)、水(20mL)及び磁気ホロワを、均圧滴下漏斗を装備した3首丸底フラスコ中に入れ、溶液を氷浴中に入れることにより冷却した。系を窒素で洗い流して、陽圧下に置いた。水(50 mL)中に溶解したスクシンイミドを末端に有するポリ(MPEG(550)MA)[Mn 4590PDi 1.22](5.0 g, 1.56×10-3mol)の溶液を滴下漏斗に付加し、溶液を一滴ずつエチレンジアミンに付加した。溶液を24時間撹拌し続けた後、透析し、その後、凍結乾燥して、生成物を単離した。1H NMRスペクトルは、2.75 ppmでのスクシンイミドO=C−CH2−CH2−C=O共鳴の低減を示す。
エチレンジアミン(1.35 mL, 0.02 mol)、水(5mL)及び磁気ホロワを、均圧滴下漏斗を装備した3首丸底フラスコ中に入れ、溶液を氷浴中に入れることにより冷却した。系を窒素で洗い流して、陽圧下に置いた。水(25 mL)中に溶解したスクシンイミドを末端に有するポリ(MPEG(550)MA)[Mn 4590PDi 1.22](1.0 g, 3.13×10-4mol)の溶液を滴下漏斗に付加し、溶液を一滴ずつエチレンジアミンに付加した。溶液を3時間撹拌し続けた後、溶液を水 2Lに付加し、透析した。その後、透析溶液を凍結乾燥して、生成物を単離した。1H NMRスペクトルは、2.75 ppmでのスクシンイミドO=C−CH2−CH2−C=O共鳴の低減を示す。
エチレンジアミン(1.35 mL, 0.02 mol)、無水ジクロロメタン(5
mL)及び磁気ホロワを、均圧滴下漏斗を装備した3首丸底フラスコ中に入れ、溶液を氷浴中に入れることにより冷却した。系を窒素で洗い流して、陽圧下に置いた。無水ジクロロメタン(25 mL)中に溶解したスクシンイミドを末端に有するポリ(MPEG(550)MA)[Mn 4590PDi 1.22](1.0 g, 3.13×10-4mol)の溶液を滴下漏斗に付加し、溶液を一滴ずつエチレンジアミンに付加した。溶液を3時間撹拌し続けた後、溶液を水 2Lに付加し、透析した。その後、透析溶液を凍結乾燥して、生成物を単離した。1H NMRスペクトルは、2.75 ppmでのスクシンイミドO=C−CH2−CH2−C=O共鳴の低減を示す。
エチレンジアミン(2.68 mL, 0.04 mol)、水(10 mL)及び磁気ホロワを、均圧滴下漏斗を装備した3首丸底フラスコ中に入れ、溶液を氷浴中に入れることにより冷却した。系を窒素で洗い流して、陽圧下に置いた。水(50 mL)中に溶解したスクシンイミドを末端に有するポリ(MPEG(550)MA)[Mn 4590PDi 1.22](2.0 g, 6.25×10-4mol)の溶液を滴下漏斗に付加し、溶液を一滴ずつエチレンジアミンに付加した。溶液を5.5時間撹拌し続けた後、溶液を水 2Lに付加し、透析した。その後、透析溶液を凍結乾燥して、生成物を単離した。1H NMRスペクトルは、2.75 ppmでのスクシンイミドO=C−CH2−CH2−C=O共鳴の低減を示す。
エチレンジアミン(2.67 mL, 0.04 mol)、水(10 mL)及び磁気ホロワを、均圧滴下漏斗を装備した3首丸底フラスコ中に入れ、溶液を氷浴中に入れることにより冷却した。系を窒素で洗い流して、陽圧下に置いた。水(50 mL)中に溶解したスクシンイミドを末端に有するポリ(MPEG(550)MA)[Mn 4590PDi 1.22](2.0 g, 6.25×10-4mol)の溶液を滴下漏斗に付加し、溶液を一滴ずつエチレンジアミンに付加した。溶液を4時間撹拌し続けた後、溶液を2MのHClで中和し、その後、高真空を用いて水を除去した。ポリマーを透析し、次に凍結乾燥して、生成物を単離した。1H NMRスペクトルは、2.75 ppmでのスクシンイミドO=C−CH2−CH2−C=O共鳴の低減を示す。
エチレンジアミン(0.836 mL, 0.013 mol)、水(1 mL)及び磁気ホロワを、均圧滴下漏斗を装備した3首丸底フラスコ中に入れ、溶液を氷浴中に入れることにより冷却した。系を窒素で洗い流して、陽圧下に置いた。水(100 mL)中に溶解したスクシンイミドを末端に有するポリ(MPEG(2000)MA)[Mn 24600PDi 1.06](5.0 g, 2.03×10-4mol)の溶液を滴下漏斗に付加し、溶液を一滴ずつエチレンジアミンに付加した。溶液を4時間撹拌した後、溶液を2MのHClで中和し、その後、高真空を用いて水を除去した。ポリマーを透析し、次に凍結乾燥して、生成物を単離した。1H NMRスペクトルは、2.75 ppmでのスクシンイミドO=C−CH2−CH2−C=O共鳴の低減を示す。
エチレンジアミン(2.5 mL, 0.038 mol)、水(10 mL)及び磁気ホロワを、均圧滴下漏斗を装備した3首丸底フラスコ中に入れ、溶液を氷浴中に入れることにより冷却した。系を窒素で洗い流して、陽圧下に置いた。水(400 mL)中に溶解したスクシンイミドを末端に有するポリ(MPEG(2000)MA)[Mn 24600PDi 1.06](15.0 g, 7.5×10-4mol)の溶液を滴下漏斗に付加し、溶液を一滴ずつエチレンジアミンに付加した。溶液を4時間撹拌した後、溶液を2MのHClで中和し、その後、NaCl(140 g)を付加した後、ジクロロメタン(4×150 mL)中に抽出した。有機層を併合し、Na2SO4上で乾燥し、濾過し、次に蒸発乾燥した後、ジエチルエーテルで洗浄した。ポリマーを透析し、次に凍結乾燥して、生成物を単離した。1H NMRスペクトルは、2.75 ppmでのスクシンイミドO=C−CH2−CH2−C=O共鳴の低減を示す。
エチレンジアミン(5.60 mL, 0.08 mol)、水(10 mL)及び磁気ホロワを、均圧滴下漏斗を装備した3首丸底フラスコ中に入れ、溶液を氷浴中に入れることにより冷却した。系を窒素で洗い流して、陽圧下に置いた。水(500 mL)中に溶解したスクシンイミドを末端に有するポリ(MPEG(2000)MA)[Mn 21900PDi 1.21](33.5 g, 1.53×10-3mol)の溶液を滴下漏斗に付加し、溶液を一滴ずつエチレンジアミンに付加した。溶液を4時間撹拌した後、溶液を2MのHClで中和し、次にNaCl(140 g)を付加した後、ジクロロメタン(4×150 mL)中に抽出した。有機層を併合し、Na2SO4上で乾燥し、濾過し、次に蒸発乾燥した後、ジエチルエーテルで洗浄した。ポリマーを透析し、次に凍結乾燥して、生成物を単離した。1H NMRスペクトルは、2.75 ppmでのスクシンイミドO=C−CH2−CH2−C=O共鳴の低減を示す。
アミンを末端に有するポリ(MPEG(550)MA)[Mn 3200](0.5
g, 1.56×10-4mol)、飽和炭酸水素ナトリウム(2.5 mL)及び磁気ホロワを3首丸底フラスコ中に入れ、氷浴中に入れることにより冷却した。系を窒素で洗い流して、不活性大気下に置いた。この溶液に、N−メトキシカルボニルマレイミド(0.1 g, 6.45×10-4mol)を激しく撹拌しながら付加した。10分後、水(5
mL)を付加し、反応物をさらに45分間撹拌し続けた。次に、0.5 N硫酸でpHを3に調整して、NaCl(0.15g)を付加した。次にポリマーをジクロロメタン(3×50 mL)中に抽出し、抽出物を併合して、Na2SO4上で乾燥した後、濾過し、蒸発乾燥した。次にポリマーをジエチルエーテルで洗浄し、室温で真空下で乾燥した。1H NMRスペクトルは、〜5.9−6.4及び〜6.7 ppmでのマレイミド共鳴の出現を示す。
アミンを末端に有するポリ(MPEG(550)MA)[Mn 3200](1.0 g, 3.13×10-4mol)、飽和炭酸水素ナトリウム(5 mL)及び磁気ホロワを3首丸底フラスコ中に入れ、氷浴中に入れることにより冷却した。系を窒素で洗い流して、不活性大気下に置いた。この溶液に、N−メトキシカルボニルマレイミド(0.2 g, 1.29×10-3mol)を激しく撹拌しながら付加した。10分後、水(10 mL)を付加し、反応物をさらに45分間撹拌し続けた。次に、0.5 N硫酸でpHを3に調整して、NaCl(0.30g)を付加した。次にポリマーをジクロロメタン(3×50 mL)中に抽出し、抽出物を併合して、Na2SO4上で乾燥した後、濾過し、蒸発乾燥した。次にポリマーをジエチルエーテルで洗浄し、室温で真空下で乾燥した。1H
NMRスペクトルは、〜5.9−6.4及び〜6.7 ppmでのマレイミド共鳴の出現を示す。
アミンを末端に有するポリ(MPEG(550)MA)[Mn 3200](1.0 g, 3.13×10-4mol)、飽和炭酸水素ナトリウム(5 mL)及び磁気ホロワを3首丸底フラスコ中に入れ、氷浴中に入れることにより冷却した。系を窒素で洗い流して、不活性大気下に置いた。この溶液に、N−メトキシカルボニルマレイミド(0.20
g, 1.29×10-3mol)を激しく撹拌しながら付加した。10分後、水(10
mL)を付加し、反応物をさらに45分間撹拌し続けた。次に、0.5 N硫酸でpHを3に調整して、NaCl(3.75g)を付加した。次にポリマーをジクロロメタン(3×50 mL)中に抽出し、抽出物を併合して、Na2SO4上で乾燥した後、濾過し、蒸発乾燥した。次にポリマーをジエチルエーテルで洗浄し、室温で真空下で乾燥した。1H NMRスペクトルは、〜5.9−6.4及び〜6.7 ppmでのマレイミド共鳴の出現を示す。
アミンを末端に有するポリ(MPEG(2000)MA)[Mn 24600](5.0 g, 2.03×10-4mol)、飽和炭酸水素ナトリウム(15 mL)及び磁気ホロワを3首丸底フラスコ中に入れ、氷浴中に入れることにより冷却した。系を窒素で洗い流して、不活性大気下に置いた。この溶液に、N−メトキシカルボニルマレイミド(0.13 g, 8.13×10-4mol)を激しく撹拌しながら付加した。10分後、水(15 mL)を付加し、反応物をさらに45分間撹拌し続けた。次に0.5 N硫酸でpHを3に調整して、NaCl(7.5g)を付加した。次にポリマーをジクロロメタン(4×50 mL)中に抽出し、抽出物を併合して、Na2SO4上で乾燥した後、濾過し、蒸発乾燥した。次にポリマーをジエチルエーテルで洗浄し、室温で真空下で乾燥した。1H NMRスペクトルは、〜5.9−6.4及び〜6.7 ppmでのマレイミド共鳴の出現を示す。
アミンを末端に有するポリ(MPEG(2000)MA)[Mn 24600 PDi
1.06](15.0 g, 6.1×10-4mol)、飽和炭酸水素ナトリウム(45 mL)及び磁気ホロワを3首丸底フラスコ中に入れ、氷浴中に入れることにより冷却した。系を窒素で洗い流して、不活性大気下に置いた。この溶液に、N−メトキシカルボニルマレイミド(0.38 g, 2.44×10-3mol)を激しく撹拌しながら付加した。10分後、水(15 mL)を付加し、反応物をさらに45分間撹拌し続けた。次に0.5 N硫酸でpHを3に調整して、NaCl(7.5g)を付加した。次にポリマーをジクロロメタン(3×50 mL)中に抽出し、抽出物を併合して、Na2SO4上で乾燥した後、濾過し、蒸発乾燥した。次にポリマーをジエチルエーテルで洗浄し、室温で真空下で乾燥した後、透析により最終精製して、凍結乾燥により単離した。1H NMRスペクトルは、〜5.9−6.4及び〜6.7 ppmでのマレイミド共鳴の出現を示す。
各々が異なるポリマー/リゾチーム比を含有する3つの実験の1組を実行した。さらに実験の各組を、4時間又は20時間反応させた。開始剤7から調製される低分子量ポリ(MPEG(395)MA)(即ちスクシンイミドを末端に有する)(Mn=2700 g/mol, PDI=1.12)比5/1に関しては(41.6 mg, 15.4×10-3mol)、比10/1に関しては(83.2 mg, 30.8×10-3mol)及び比30/1に関しては(249.5 mg, 92.4×10-3mol)、並びにリゾチーム(50 mg, 3.08×10-3mol)を、10 mlの200 mMリン酸塩緩衝液(pH=8)中に溶解し、窒素下で4℃で4時間又は20時間撹拌した。ポリマー/リゾチーム比30/1の場合、HPLCにより反応を追跡調査した。HPLC系にガードカラム、BioSep−SEC−S3000カラム及びUV検出器を取り付けて、215 nmで移動相の相対吸光度を継続的に測定した。系を、0.5 mL/分の速度で、水及びアセトニトリル(69/31 v/v)中の0.1%v/vトリフルオロ酢酸溶液で溶離した。各々の場合、粗製物を透析袋(Spectra/Porl、 MWCO=6−8000 g/mol)中で精製し、SDS−PAGE(ポリアクリルアミド解像ゲル架橋結合:15%;ランニング緩衝液:25 mM TRIS塩基、250 mM グリシン、0.1% SDS、pH 8.7)により分析した。
ポリPEGのアセタル末端基のアルデヒド基への転化
アセタルを末端に有するポリマー(Mn 11000, PDi 1.15, 3.0
g, 0.27 mmol)を1:1トリフルオロ酢酸(TFA)/H2O溶液(100 mL)中に溶解し、溶液を室温で48時間撹拌した。酸のほとんどを減圧下で除去し、粗製物を水中に溶解し、透析により精製した。次に水溶液を凍結乾燥して、所望のアルデヒド末端ポリマー(2.8 g, 0.25 mmol, 93%)をオフホワイト固体として得た(Mn 〜11,000, PDi 1.13)。
アセタルを末端に有するポリマー(Mn 22,000, PDi 1.09, 3.0 g, 0.14 mmol)を1:1トリフルオロ酢酸(TFA)/H2O溶液(100 mL)中に溶解し、溶液を室温で48時間撹拌した。酸のほとんどを減圧下で除去し、粗製物を水中に溶解し、透析により精製した。次に水溶液を凍結乾燥して、所望のアルデヒド末端ポリマー(2.8 g, 1.3 mmol, 93%)をオフホワイト固体として得た(Mn 〜22,000, PDi 1.09)。
アセタルを末端に有するポリマー(Mn=32,000, PDi=1.09, 3.0 g, 0.094 mmol)を1:1トリフルオロ酢酸(TFA)/H2O溶液(100 mL)中に溶解し、溶液を室温で48時間撹拌した。酸のほとんどを減圧下で除去し、粗製物を水中に溶解し、透析により精製した。次に水溶液を凍結乾燥して、所望のアルデヒド末端ポリマー(2.7 g, 0.084 mmol, 90%)をオフホワイト固体として得た(Mn 〜32,000, PDi 1.11)。
アルデヒドを末端に有するポリPEGポリマーの生体結合
リゾチーム(6 mg, 4.2×10-4mmol)及びアルデヒドを末端に有するポリマー(Mn〜22,000, PDi 1.09, 110 mg, 0.01 mmol)を5 mLの酢酸塩/酢酸緩衝液(pH=5)中に溶解し、0.15 mLのNaCNBH3(水中0.25 mM)を滴下した。溶液を室温で撹拌し、試料を一定間隔で採取した。ガードカラム、BioSep−SEC−S3000カラム及びUV検出器を装備したHPLCにより、反応をモニタリングした。
リゾチーム(6 mg, 4.2×10-4mmol)及びアルデヒドを末端に有するポリマー(Mn〜22,000, PDi 1.09, 110 mg, 0.01 mmol)を5 mLのリン酸塩緩衝液(pH=6)中に溶解し、0.15 mLのNaCNBH3(水中0.25 mM溶液)を滴下した。溶液を室温で撹拌し、試料を一定間隔で採取した。ガードカラム、BioSep−SEC−S3000カラム及びUV検出器を装備したHPLCにより、反応をモニタリングした。
ポリPEGのBOC末端基のアミン基への転化
ポリPEGのフラン末端基のマレイミド基への転化
36 mmol)の溶液を加温還流し、反応物を、一定時間間隔で採取した試料に関する1H NMR分析によりモニタリングした。7時間後、溶媒を減圧下で除去して、マレイミドを末端に有するポリマーを淡橙色油として得た。マレイミドビニルシグナル及びPEG側鎖の末端OCH3の取込みの比較は、マレイミド機能が脱保護化ステップ中に分解しない、ということを確証した。
1. D.M. Haddleton, M.C. Crossman, B.H. Dane, D.J. Duncalf, A.M. Henning, D. Kukulj 及び A.J. Shooter, Macromolecules, 1999, 32, 2110.
2. R.N. Keller 及び W.D. Wycoff, Inorg. Synth., 1947, 2, 1.
3. James R. Dudley, Jack T. Thurston, Frederic C. Schaefer, Dagfrid Holm- Hansen, Clarence J. Hull, 及び Pierrepont Adams, J. Am. Chem. Soc., 1951, 73, 2986.
Claims (47)
- 櫛形ポリマーの製造方法であって、
(a)
(i)線状、分枝状又は星形の、置換又は非置換の、且つ付加重合を受け得るオレフィン性不飽和部分を有する複数の異なるモノマー、
(ii)均等開裂可能な結合を含む開始剤化合物、
(iii)前記モノマーの重合を触媒し得る触媒、
を準備する工程と、
(b)前記櫛形ポリマーを生成するために、前記開始剤と組合せて、前記触媒に前記複数のモノマーの重合を触媒させる工程と、を含み、
前記開始剤化合物(ii)が、前記櫛形ポリマーに結合したときに、タンパク質、ポリペプチド、核酸、炭水化物、又は脂質から選ばれる生物学的物質と共有結合し得る部分を含み、上記(i)中の前記複数の異なるモノマーがアルコキシポリエーテルを含むことを特徴とする、櫛形ポリマーの製造方法。 - 前記アルコキシポリエーテルがポリ(アルキレングリコール)又はポリテトラヒドロフランであることを特徴とする、請求項1に記載の方法。
- 前記生物学的物質がタンパク質又はポリペプチドであることを特徴とする、請求項1又は2に記載の方法。
- 前記生物学的物質は核酸又は炭水化物である、請求項1又は2に記載の方法。
- 前記触媒がリビングラジカル重合又はリビングフリーラジカル重合による前記モノマーの重合を触媒し得ることを特徴とする、請求項1〜4のいずれか一項に記載の方法。
- 遷移金属と成長中のポリマーラジカルとの間に直接結合が形成されないよう、δ−結合で前記遷移金属と配位結合し得る任意のN−、O−、P−又はS−含有化合物、又はπ−結合で前記遷移金属と配位結合し得る任意の炭素含有化合物であるリガンドを、前記触媒が含むことを特徴とする、請求項1〜5のいずれか一項に記載の方法。
- 前記触媒が
Mが一形式酸化状態により酸化され得る遷移金属であって、Cu + 、Cu2+、Fe2+、Fe3+、Ru2+、Ru3+、Cr2+、Cr3+、Mo2+、Mo3+、W2+、W3+、Mn3+、Mn4+、Rh3+、Rh4+、Re2+、Re3+、Co+、Co2+、V2+、V3+、Zn+、Zn2+、Au+、Au2+、Ag+及びAg2+ から選択される遷移金属であり、Yは一価又は二価の対イオンである、第一化合物MYと、
窒素のうちの少なくとも1つが芳香族環の一部にないオルガノジイミンとを含むことを特徴とする、請求項1〜6のいずれか一項に記載の方法。 - 前記触媒が次式で表される化合物:
[MLm]n+An-
(式中、Mは一形式酸化状態により酸化され得る遷移金属であって、Cu + 、Cu2+、Fe2+、Fe3+、Ru2+、Ru3+、Cr2+、Cr3+、Mo2+、Mo3+、W2+、W3+、Mn3+、Mn4+、Rh3+、Rh4+、Re2+、Re3+、Co+、Co2+、V2+、V3+、Zn+、Zn2+、Au+、Au2+、Ag+及びAg2+ から選択される遷移金属、
Aは陰イオン、
nは1〜3の整数、
mは1〜2の整数、
Lは窒素のうちの少なくとも1つが芳香族環の一部にないオルガノジイミン)
を含むことを特徴とする、請求項1〜6のいずれか一項に記載の方法。 - 前記ポリ(アルキレングリコール)がポリ(エチレングリコール)(PEG)又はポリ(プロピレングリコール)であることを特徴とする、請求項1〜8のいずれか一項に記載の方法。
- 前記モノマーのPEG部分の分子量が450〜20,000であることを特徴とする、請求項9に記載の方法。
- 前記開始剤がハロゲン原子との均等開裂可能な結合を含むことを特徴とする、請求項1〜10のいずれか一項に記載の方法。
- 前記Aが、スクシンイミジルスクシネート、N−ヒドロキシスクシンイミド、スクシンイミジルプロピオネート、スクシンイミジルブタノエート、トリアジン、ビニルスルホン、プロピオンアルデヒド、アセトアルデヒド、トレシレート(tresylate)、ベンゾトリアゾールカルボネート、マレイミド、ピリジルスルフィド、ヨードアセトアミド及びスクシンイミジルカルボネートから選択されることを特徴とする、請求項12に記載の方法。
- 前記リンカーが、存在する場合、C1〜C20の置換又は非置換の、直鎖、分枝鎖、環状、複素環式又は芳香族のアルキル基;−(CH2Z)aCH2−、−CH2ZCH2−、−(CH2CH2Z)nR、−(CH2CH(CH3)Z)nR、−(CH2)b−C(O)−NH−(CH2)c−、−N(R) 2 −;−S−;−N−R;又は−O−R(ここで、RはC1〜C
20の置換又は非置換の、直鎖、分枝鎖、環状、複素環式又は芳香族のアルキル、ZはO又はSであり、n、a、b及びcは独立して選択可能な1〜10の整数である)から選択されることを特徴とする、請求項12又は13に記載の方法。 - 前記オルガノジイミンが、
枝鎖又は環状の飽和アルキル、ヒドロキシアルキル、カルボキシアルキル、アリール、CH2Ar(ここで、Arはアリール又は置換アリールである)又はハロゲンから選択されてよく;
R3〜R9は独立して選択可能であり、H、直鎖、分枝鎖又は環状のアルキル、ヒドロキシアルキル、カルボキシアルキル、アリール、CH2Ar、ハロゲン、OCH2n+1(ここで、nは1〜20の整数である)、NO2、CN、O=CR(ここで、R=アルキル、アリール、置換アリール、ベンジルPhCH2又は置換ベンジル)から選択されてよい)から選択されることを特徴とする、請求項7〜17のいずれか一項に記載の方法。 - 前記触媒がビピリジン基を含むことを特徴とする、請求項1〜19のいずれか一項に記載の方法。
- 前記触媒が4,4'−ジ(5−ノニル)−2,2'−ビピリジル(dNbpy)であることを特徴とする、請求項20に記載の方法。
- 請求項1のパート(i)に記載された複数の異なるモノマーの使用を含むことを特徴と
する、請求項1〜21のいずれか一項に記載の方法。 - 請求項1のパート(i)に記載されたモノマーと、1つ又は複数の異なるオレフィン性不飽和モノマーとのブロックコポリマーを生成する工程をさらに含むことを特徴とする、請求項1〜22のいずれか一項に記載の方法。
- 前記1つ又は複数の異なるオレフィン性不飽和モノマーの付加の前に、前記請求項1のパート(i)に記載されたモノマーを含む前記櫛形ポリマーが、前記開始剤(ii)及び前記触媒(iii)で重合されることを特徴とする、請求項23に記載の方法。
- 請求項1のパート(i)に記載されたモノマーの重合の前に、前記1つ又は複数の異なるオレフィン性不飽和モノマーが前記開始剤(ii)及び前記触媒(iii)で重合されることを特徴とする、請求項23に記載の方法。
- 前記1つ又は複数の異なるオレフィン性不飽和モノマーが、メチルメタクリレート、ブチルメタクリレート、アクリレート、メタクリレート及びスチレンから選択されることを特徴とする、請求項23〜25のいずれか一項に記載の方法。
- 前記反応体が疎水性又は親水性溶媒中で反応されることを特徴とする、請求項1〜26のいずれか一項に記載の方法。
- 前記溶媒が水、プロピオニトリル、ヘキサン、ヘプタン、ジメトキシエタン、ジエトキシエタン、テトラヒドロフラン、エチルアセテート、ジエチルエーテル、N,N−ジメチルホルムアミド、アニソール、アセトニトリル、ジフェニルエーテル、メチルイソブチレート、ブタン−2−オン、トルエン及びキシレンから選択されることを特徴とする、請求項27に記載の方法。
- 前記重合反応が−20℃〜200℃で行なわれることを特徴とする、請求項1〜28のいずれか一項に記載の方法。
- 前記触媒が担持触媒であることを特徴とする、請求項1〜29のいずれか一項に記載の方法。
- 付加的重合を受け得る少なくとも1つの蛍光標識モノマーと共重合又はブロック重合する工程をさらに含むことを特徴とする、請求項1〜30のいずれか一項に記載の方法。
- 前記蛍光標識がクマリンであることを特徴とする、請求項31に記載の方法。
- 請求項1〜32のいずれか一項に記載の方法により得られる、タンパク質、ポリペプチド、核酸、炭水化物又は脂質から選ばれる、生物学的物質に結合出来る、櫛形ポリマー
- タンパク質又はポリペプチドと結合し得る、請求項33に記載の櫛形ポリマー。
- 一般式:
A−(D)d−(E)e−(F)f
(式中、Aは、タンパク質又はポリペプチドと結合し得る部分であり;
Dは、Eに記載されない1つ又は複数のオレフィン性不飽和モノマーの付加的重合により得られ;
Eは、線状、分枝状又は星形の置換又は非置換であり、且つオレフィン性不飽和部分を有する複数のモノマーの付加的重合により得られ;
Fは、存在する場合、Eに記載されない1つ又は複数のオレフィン性不飽和モノマーの付加的重合により得られ;
d及びfは0〜500の整数であり;
eは0〜1,000の整数)
を有する櫛形ポリマーであって、Eがアルコキシポリエーテルであり、D、E及びFのうちの少なくとも1つが存在することを特徴とする、2,000〜80,000の平均分子量を有することを特徴とする、櫛形ポリマー。 - 前記Eがポリ(アルキレン)グリコール又はポリテトラヒドロフランであることを特徴とする、請求項35に記載の櫛形ポリマー。
- 蛍光標識されることを特徴とする、請求項33〜36のいずれか一項に記載の櫛形ポリマー。
- クマリンで蛍光標識されることを特徴とする、請求項37に記載の櫛形ポリマー。
- ポリマーをタンパク質、ポリペプチド、核酸、炭水化物又は脂質から選ばれる化合物に結合させる方法であって、請求項33〜38のいずれか一項に記載の櫛形ポリマーを前記化合物と反応させることを包含する方法。
- 前記櫛形ポリマーに共有結合されたタンパク質、ポリペプチド、チオール、アミン及び/又はベンジルアミン含有化合物を生成するために、請求項33〜38のいずれか一項に記載の櫛形ポリマーとタンパク質、ポリペプチド、核酸、チオール、炭水化物、ジアミン及び/又はベンジルアミン含有化合物とを反応させて得られる化合物。
- タンパク質又はポリペプチド、チオール及び/又はベンジルアミン含有化合物であることを特徴とする、請求項40に記載の化合物。
- 生物学的に活性であることを特徴とする請求項41に記載の化合物。
- 薬剤であることを特徴とする請求項42に記載の化合物。
- 薬学的に許容可能な担体と組合せた請求項41〜43のいずれか一項に記載の化合物。
- 癌化学療法薬、抗生物質、抗真菌剤及び/又は免疫抑制剤であることを特徴とする、請求項41〜44のいずれか一項に記載の化合物。
- 化学療法剤、抗生物質、抗真菌剤及び/又は免疫抑制剤として使用するための、請求項45に記載の化合物。
- 化学療法剤、抗生物質、抗真菌剤及び/又は免疫抑制剤としての、請求項45に記載の化合物の使用。
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