KR20100121637A - 화합물 - Google Patents

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앤드류 베일리
리차드 제임스 불
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앤드류 스튜어트 리스터
앤드류 제임스 로빈스
마이클 존 스톡스
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Abstract

본 발명은 폐 장애의 치료를 위한 무스카린성-수용체 길항제 및 베타-아드레날린 수용체 효능제로서의 디아자스피로 [5.5]운데칸 유도체 및 관련 화합물에 관한 것이다.
<화학식 I>

Description

화합물 {COMPOUNDS}
본 발명은 스피로시클릭 아미드 유도체, 그의 제조 방법, 그를 함유하는 제약 조성물, 이러한 제약 조성물의 제조 방법, 요법에서의 그의 용도 및 그의 제조에 사용하기 위한 중간체에 관한 것이다.
만성 폐쇄성 폐 질환 (COPD) 및 천식을 비롯한 다양한 폐 장애를 위한 제1선의 치료법은 기관지확장제의 사용에 의한다. 무스카린성-수용체 길항제 (항-콜린작용제)는 COPD에서 기도 수축의 가역적인 주성분인 미주신경의 콜린성 긴장을 감소시켜서 효능을 발휘하는 기관지확장제이다. β-아드레날린 수용체 효능제는 또한 아세틸콜린을 비롯한 소정 범위의 매개자에 대한 기관지수축제 반응을 기능적으로 길항하는 능력으로 인한 기관지확장제이기도 하다.
이들 작용제는 폐 기능의 개선 뿐만이 아니라 호흡장애 (호흡곤란), 삶의 질, 운동 허용력을 개선시키고, 악화를 감소시킨다. 수많은 임상 연구에서, 항-콜린작용성 및 β2-수용체 효능제의 조합 투여가 상기 개개의 성분 각각보다 더 효능이 있는 것이 입증된 바 있다 [van Noord, J.A., Aumann, J-L., Janssens, E., Smeets, J.J., Verhaert, J., Disse, B., Mueller, A. ＆ Cornelissen, P.J.G., 2005. "Comparison of tiotropium once daily, formoterol twice daily and both combined once daily in patients with COPD", Eur. Respir. J., vol 26, pp 214-222.]. 무스카린성 및 β2-수용체 (MABA)에서의 활성을 보유하는 단일 분자는 효능 및 부작용 프로파일의 측면에서 단일 작용제에 비해 COPD 환자에게 추가적인 이점을 제공할 수 있다. 추가로, 이중 활성을 갖는 분자는 또한 사용의 용이성 및 환자 순응도의 측면에서 단일 요법제들의 공동 투여에 비해 이점을 제공할 수도 있다. 단일 작용제는 2개의 별개의 화합물과 비교할 때 제제화의 관점에서도 유익할 수 있고, 또한 3중 작용 요법을 위한 또다른 치료제와 조합되는 경우에 잠재력을 제공한다.
본 발명의 제1 측면에 따라, 본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 및 그의 제약상 허용가능한 염을 제공한다.
<화학식 I>
Figure pct00001
상기 식에서,
Ar은 β-아드레날린 수용체 결합기를 나타내고,
L은 최대 15개의 탄소 원자의 선형 또는 분지형 히드로카르빌 쇄를 포함하는 링커를 나타내고,
여기서의 쇄 중 최대 3개의 탄소 원자는 할로겐, S(O)0-2R56, NR57R58, S(O)2NR59R60, C(O)NR61R62, C(O)OR63, NR64S(O)2R65, NR66C(O)R67, NR68C(O)OR69, NR70C(O)NR71R72, OR73, C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 최대 4개의 치환기로 임의로 치환되고, 여기서의 C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬은 할로겐, 히드록실 및 C1 - 6알콕시로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고,
여기서의 쇄 중 최대 5개의 탄소 원자는 O, NR45, S, S(O), S(O)2, C(O)O, OC(O), NR46C(O), C(O)NR47, NR48S(O)2, S(O)2NR49, NR50C(O)NR51, NR52S(O)2NR53, OC(O)NR54 및 NR55C(O)O로부터 독립적으로 선택된 기로 대체될 수 있지만, 단 상기 쇄의 임의의 이러한 기는 2개 이상의 탄소 원자에 의해 분리되며,
여기서의 쇄 중 최대 6개의 탄소 원자는 N, O 또는 S로부터 독립적으로 선택된 최대 4개의 헤테로원자를 갖는 모노시클릭 또는 바이시클릭 지방족, 헤테로지방족, 방향족 또는 헤테로방향족 고리의 일부를 형성할 수 있고, 상기 고리는 최대 10개의 고리 원자를 포함하며, 여기서의 고리는 할로겐, S(O)0-2R56, NR57R58, S(O)2NR59R60, C(O)NR61R62, C(O)OR63, NR64S(O)2R65, NR66C(O)R67, NR68C(O)OR69, NR70C(O)NR71R72, OR73, C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환되고, 여기서의 C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬은 할로겐, 히드록실 및 C1 - 6알콕시로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고,
상기 쇄는 각각 독립적으로 선택된 이러한 고리를 최대 3개 포함할 수 있고,
이때의 R56, R65 및 R69는 각각 독립적으로 C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬을 나타내고, 여기서의 C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬은 할로겐, 히드록실 및 C1 - 6알콕시로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고,
R45, R46, R47, R48, R49, R50, R51, R52, R53, R54, R55, R57, R58, R59, R60, R61, R62, R63, R64, R66, R67, R68 , R70, R71, R72 및 R73은 각각 독립적으로 수소, C1 - 6알킬 또는 C3 -6시클로알킬을 나타내고, 여기서의 C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬은 할로겐, 히드록실 및 C1 - 6알콕시로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있거나, 또는 R57과 R58, R59와 R60, R61과 R62 또는 R71과 R72 중 임의의 것은 이것들이 모두 부착된 질소 원자와 함께 4원 내지 8원의 지방족 헤테로시클릭 고리를 형성할 수 있고, 여기서의 헤테로시클릭 고리는 N, O 및 S로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 헤테로원자를 포함할 수 있고, 여기서의 고리는 할로겐, 히드록실, C1 -6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고, 여기서의 C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬은 할로겐, 히드록실 및 C1 - 6알콕시로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고,
여기서의 쇄는 최대 3개의 탄소-탄소 이중 결합을 추가로 포함할 수 있고,
여기서의 쇄는 최대 3개의 탄소-탄소 삼중 결합을 추가로 포함할 수 있고,
L1 및 L2는 독립적으로 수소, C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬을 나타내고,
L3 및 L4는 독립적으로 수소, C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬을 나타내고, 여기서의 C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬은 할로겐, 히드록실 및 C1 - 6알콕시로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고,
추가로, L1 및/또는 L3은 링커 L의 히드로카르빌 쇄의 탄소 원자에 연결되어 최대 6개 고리 원자의 지방족 고리를 형성할 수 있고, 여기서의 각각의 고리는 N, O 및 S로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 헤테로원자를 포함할 수 있고,
R1은 페닐 고리, 4원 내지 8원의 헤테로지방족 고리, 3원 내지 8원의 지방족 고리 또는 5원 내지 6원의 헤테로아릴 고리 (각각은 N, O 또는 S로부터 독립적으로 선택된 최대 4개의 헤테로원자를 가짐)를 나타내고, 여기서의 고리 각각은 할로겐, 시아노, 니트로, SH, S(O)0-2R5, NR6R7, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, NR13S(O)2R14, NR15C(O)R16, NR17C(O)OR18, NR19C(O)NR20R21, OR22, C1 - 7알킬 또는 C3 - 8시클로알킬 (여기서의 각각의 C1 - 7알킬 및 C3 - 8시클로알킬은 할로겐, 시아노, 니트로, SH, S(O)0-2R5, NR6R7, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, NR13S(O)2R14, NR15C(O)R16, NR17C(O)OR18, NR19C(O)NR20R21 또는 OR22로부터 독립적으로 선택된 최대 6개의 치환기로 임의로 치환될 수 있음), 페닐 고리, 4원 내지 8원의 헤테로지방족 고리, 5원 내지 6원의 헤테로아릴 고리 (각각은 N, O 또는 S로부터 독립적으로 선택된 최대 4개의 헤테로원자를 가짐)로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고, 여기서의 페닐 고리, 4원 내지 8원의 헤테로지방족 고리, 3원 내지 8원의 지방족 고리 또는 5원 내지 6원의 헤테로아릴 고리 각각은 할로겐, 시아노, 니트로, SH, S(O)0-2R5, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, OR22, C1 - 6알킬 또는 C3 -6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고, 여기서의 C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬은 할로겐, 히드록실, C1 - 6알콕시, 시아노, 니트로, NH2, NH(C1 - 6알킬) 및 N(C1 - 6알킬)2로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있거나, 또는
R1은 N, O 또는 S로부터 독립적으로 선택된 최대 4개의 헤테로원자를 갖는 최대 10개 원자의 융합된 지방족, 융합된 헤테로지방족, 융합된 방향족 또는 융합된 헤테로아릴 고리를 나타내고, 여기서의 고리 각각은 할로겐, 시아노, 니트로, SH, S(O)0-2R5, NR6R7, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, NR13S(O)2R14, NR15C(O)R16, NR17C(O)OR18, NR19C(O)NR20R21, OR22, C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고, 여기서의 C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬은 할로겐, 히드록실, C1 - 6알콕시, NH2, NH(C1 - 6알킬) 및 N(C1 - 6알킬)2로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있거나, 또는
R1은 1개 또는 2개의 탄소 원자가 O, S 또는 N으로 대체될 수 있는 C1 - 6알킬쇄를 추가로 나타내고,
여기서의 R1은 최대 3개의 C1 - 3알킬쇄로 치환될 수 있고, 이러한 쇄 2개는 연결되어 C3 - 8시클로알킬쇄를 형성할 수 있고, 여기서의 C1 - 3알킬쇄 및 C3 - 8시클로알킬쇄는 할로겐, 시아노, 니트로, SH, S(O)0-2R5, NR6R7, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, NR13S(O)2R14, NR15C(O)R16, NR17C(O)OR18, NR19C(O)NR20R21 및 OR22로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고,
여기서의 C1 - 6알킬쇄는 할로겐, 시아노, 니트로, SH, S(O)0-2R5, NR6R7, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, NR13S(O)2R14, NR15C(O)R16, NR17C(O)OR18, NR19C(O)NR20R21, OR22, 페닐 고리, 4원 내지 8원의 헤테로지방족 고리, 3원 내지 8원의 지방족 고리, 5원 내지 6원의 헤테로아릴 고리 (각각은 N, O 또는 S로부터 독립적으로 선택된 최대 4개의 헤테로원자를 가짐)로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 추가로 임의로 치환되고, 여기서의 각각의 고리는 할로겐, 시아노, 니트로, S(O)0-2R5, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, OR22, C1 - 7알킬 또는 C3 - 7시클로알킬 (여기서의 각각의 C1 - 7알킬 및 C3 - 7시클로알킬은 할로겐, 시아노, 니트로, SH, S(O)0-2R5, NR6R7, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, NR13S(O)2R14, NR15C(O)R16, NR17C(O)OR18, NR19C(O)NR20R21 또는 OR22로부터 독립적으로 선택된 최대 6개의 치환기로 임의로 치환될 수 있음), 페닐 고리, 4원 내지 8원의 헤테로지방족 고리, 3원 내지 8원의 지방족 고리, 5원 내지 6원의 헤테로아릴 고리 (각각은 N, O 또는 S로부터 독립적으로 선택된 최대 4개의 헤테로원자를 가짐)로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환되고, 여기서의 페닐 고리, 4원 내지 8원의 헤테로지방족 고리, 3원 내지 8원의 지방족 고리 또는 5원 내지 6원의 헤테로아릴 고리 각각은 할로겐, 시아노, 니트로, S(O)0-2R5, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, OR22, C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고, 여기서의 C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬은 각각 할로겐, 히드록실, C1 - 6알콕시, NH2, NH(C1 - 6알킬) 및 N(C1 - 6알킬)2로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있거나, 또는
C1 - 6알킬쇄는 N, O 또는 S로부터 독립적으로 선택된 최대 4개의 헤테로원자를 갖는 최대 10개 원자의 융합된 지방족, 융합된 헤테로지방족, 융합된 방향족 또는 융합된 헤테로아릴 고리로 치환될 수 있고, 여기서의 고리 각각은 할로겐, 시아노, 니트로, SH, S(O)0-2R5, NR6R7, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, NR13S(O)2R14, NR15C(O)R16, NR17C(O)OR18, NR19C(O)NR20R21, OR22, C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고, 여기서의 C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬은 할로겐, 히드록실, C1 - 6알콕시, NH2, NH(C1 - 6알킬) 및 N(C1 - 6알킬)2로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고,
R5, R14 및 R18은 독립적으로 C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬을 나타내고, 여기서의 C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬은 할로겐, 히드록실, C1 - 6알콕시, NH2, NH(C1 - 6알킬) 및 N(C1 - 6알킬)2로부터 독립적으로 선택된 1개 이상의 치환기로 임의로 치환될 수 있고,
R6, R7, R8, R9, R10, R11, R12, R13, R15, R16, R17, R19, R20, R21 및 R22는 각각 독립적으로 수소, C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬을 나타내고, 여기서의 C1 - 6알킬 또는 C3-6시클로알킬은 할로겐, 히드록실, C1 - 6알콕시, NH2, NH(C1 - 6알킬) 및 N(C1 - 6알킬)2로부터 독립적으로 선택된 1개 이상의 치환기로 임의로 치환될 수 있거나, 또는 R6과 R7, R8과 R9, R10과 R11 또는 R20과 R21 중 임의의 것은 이것들이 모두 부착된 질소 원자와 함께 4원 내지 8원의 지방족 헤테로시클릭 고리를 형성할 수 있고, 여기서의 헤테로시클릭 고리는 할로겐, 히드록실, C1 - 6알킬, C1 - 6시클로알킬 및 C1 - 6알콕시로부터 독립적으로 선택된 1개 이상의 치환기로 임의로 치환될 수 있고, 여기서의 C1-6알킬, C1 - 6시클로알킬 또는 C1 - 6알콕시는 할로겐, 히드록실 및 C1 - 6알콕시, NH2, NH(C1-6알킬) 및 N(C1 - 6알킬)2로부터 독립적으로 선택된 1개 이상의 치환기로 임의로 치환될 수 있고,
X는 O, S, S(O)o 또는 CR25R26을 나타내고,
m = 0, 1, 2 또는 3이고,
n = 1, 2, 3 또는 4이지만, 단 m + n은 2 이상이고,
o = 1 또는 2이고,
W는 CR27R28CR29R30 또는 CR31R32CR33R34CR35R36을 나타내고,
V 및 Z는 독립적으로 결합, CR37R38 또는 CR39R40CR41R42를 나타내지만, 단 X가 O, S 또는 S(O)o를 나타내는 경우에는 m, V 및 Z는 고리 중의 모든 헤테로원자가 2개 이상의 탄소 원자에 의해 분리되도록 하고 (예를 들어, V가 결합인 경우에는 m은 0이 아니고 Z는 결합이 아님),
Y는 CO, CONR43, SO2 또는 SO2NR44를 나타내고,
R25, R26, R27, R28, R29, R30, R31, R32, R33, R34, R35, R36, R37, R38, R39, R40, R41 및 R42는 각각 독립적으로 수소, 불소 또는 C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬을 나타내고, 이것들이 수소 또는 불소를 나타내지 않는 경우에는 R25와 R26, R27과 R28, R29와 R30, R31과 R32, R33과 R34, R35와 R36, R37과 R38, R39와 R40 또는 R41과 R42는 이것들이 둘다 부착된 탄소 원자와 함께 3원 내지 6원의 지방족 고리를 추가로 형성할 수 있으며,
R43 및 R44는 각각 독립적으로 수소, C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬을 나타낸다.
"β-아드레날린 수용체 결합기"는, 예를 들어 해설논문 ["β-adrenergic receptors in Comprehensive Medicinal Chemistry," 1990, B.E. Main, p187 (Pergamon Press)]에 약술된 바와 같이 β-아드레날린 수용체와 결합할 수 있는 기를 의미한다. 이러한 기는 또한, 예를 들어 WO/2005092841, US/20050215542, WO/2005070872, WO/2006023460, WO/2006051373, WO/2006087315, WO/2006032627에도 공지되어 있다.
편리한 β-아드레날린 수용체 결합기의 예에는 다음이 포함된다.
Figure pct00002
여기서,
M1은 S, C(O), NA5, CA6A7, CH2CH2, CH=CH, CH2O 또는 OCH2이고,
M2는 S, C(O), NA5, CA6A7, CH2CH2, CH=CH, CH2O 또는 OCH2이고,
A1, A2, A3 및 A4는 독립적으로 수소, 할로겐, 트리플루오로메틸, 시아노, 카르복시, 히드록시, 니트로, S(O)2A8, NA9S(O)2A10, C(O)NA11A12, NA13C(O)A14, C1 - 6알킬, C1 - 6알콕시, C(O)(C1 - 6알킬) 또는 C(O)OC1- 6알킬이고,
A3은 또한 CH2OH, NHCHO, NHS(O)2NA15A16 또는 NHSO2A17일 수 있고,
A5, A6, A7, A9, A11, A12, A13, A14, A15 또는 A16은 독립적으로 수소 또는 C1 - 6알킬이며,
A8, A10 및 A17은 독립적으로 C1 - 6알킬이다.
더욱 편리하게는, β 아드레날린 수용체 결합기 Ar이 다음으로부터 선택된다.
Figure pct00003
여기서,
M1은 S, CH=CH, CH2O 또는 OCH2이고,
M2는 S, CH=CH, CH2O 또는 OCH2이고,
A1, A2 및 A4는 독립적으로 수소, 할로겐, C1 - 6알킬, C1 - 6알콕시이고,
A3은 또한 CH2OH, NHCHO, NHS(O)2NA15A16 또는 NHSO2A17일 수 있고,
A15 또는 A16은 수소, C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬로부터 독립적으로 선택되며,
A17은 C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬이다.
C1 - 6알킬의 예에는 C1 - 4알킬 및 C1 - 2알킬이 포함된다.
C3 - 6시클로알킬의 예에는 C3 - 5시클로알킬 및 C3 - 4시클로알킬이 포함된다.
C1 - 6알콕시의 예에는 C1 - 4알콕시 및 C1 - 2알콕시가 포함된다.
더욱 편리하게는, β 아드레날린 수용체 결합기 Ar이 다음으로부터 선택된다.
Figure pct00004
여기서, A1, A2 및 A4는 모두 수소이고, A3은 CH2OH 또는 NHCHO이고, M1은 S, CH=CH 또는 OCH2이며, M2는 S, CH=CH 또는 OCH2이다.
더욱 편리하게는, β 아드레날린 수용체 결합기 Ar이 다음으로부터 선택되고,
Figure pct00005
편리하게는, L이 최대 12개의 탄소 원자 또는 최대 10개의 탄소 원자 또는 최대 8개의 탄소 원자의 선형 또는 분지형 히드로카르빌 쇄를 포함하는 링커를 나타내고,
여기서의 쇄 중 최대 2개의 탄소 원자가 할로겐, S(O)0-2R56, NR57R58, S(O)2NR59R60, C(O)NR61R62, C(O)OR63, NR64S(O)2R65, NR66C(O)R67, NR68C(O)OR69, NR70C(O)NR71R72, OR73, C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 최대 4개의 치환기로 임의로 치환되고, 여기서의 C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬이 할로겐, 히드록실 및 C1 - 6알콕시로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고,
편리하게는, 상기 쇄의 최대 2개의 탄소 원자가 O, NR45, S, S(O), S(O)2, C(O)O, OC(O), NR46C(O), C(O)NR47, NR48S(O)2, S(O)2NR49, NR50C(O)NR51 및 NR52S(O)2NR53으로부터 독립적으로 선택된 기 또는 O, S, S(O), S(O)2, NR46C(O) 및 C(O)NR47로부터 독립적으로 선택된 기로 대체될 수 있지만, 단 각 경우에 상기 쇄의 임의의 이러한 기가 2개 이상의 탄소 원자에 의해 분리되고,
편리하게는, 상기 쇄의 최대 4개의 탄소 원자가 N, O 또는 S로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 헤테로원자를 갖는 모노시클릭 또는 바이시클릭 지방족, 헤테로지방족, 방향족 또는 헤테로방향족 고리의 일부를 형성할 수 있고, 상기 고리가 최대 10개의 고리 원자를 포함하며, 여기서의 고리가 할로겐, S(O)0-2R56, NR57R58, S(O)2NR59R60, C(O)NR61R62, C(O)OR63, NR64S(O)2R65, NR66C(O)R67, NR68C(O)OR69, NR70C(O)NR71R72, OR73, C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환되고, 여기서의 C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬이 할로겐, 히드록실 및 C1 - 6알콕시로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고,
편리하게는, 상기 쇄가 각각 독립적으로 선택된 최대 2개 또는 1개의 이러한 고리를 포함할 수 있고,
편리하게는, R56, R65 및 R69가 각각 독립적으로 C1 - 4알킬 또는 C3 - 6시클로알킬을 나타내고, 여기서의 C1 - 4알킬 및 C3 - 6시클로알킬이 할로겐, 히드록실 및 C1 - 4알콕시로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고,
편리하게는, R45, R46, R47, R48, R49, R50, R51, R52, R53, R54, R55, R57, R58, R59, R60, R61, R62, R63, R64, R66, R67, R68, R70, R71, R72 및 R73이 각각 독립적으로 수소, C1-4알킬 또는 C3 - 6시클로알킬을 나타내고, 여기서의 C1 - 4알킬 및 C3 - 6시클로알킬이 할로겐, 히드록실 및 C1 - 4알콕시로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있거나, 또는 R57과 R58, R59와 R60, R61과 R62 또는 R71과 R72 중 임의의 것이 이것들이 모두 부착된 질소 원자와 함께 4원 내지 8원의 지방족 헤테로시클릭 고리를 형성할 수 있고, 여기서의 헤테로시클릭 고리가 할로겐, 히드록실 및 C1-4알킬 또는 C3 - 6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고, 여기서의 C1 - 4알킬 및 C3 - 6시클로알킬이 할로겐, 히드록실 및 C1 - 4알콕시로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있으며,
히드로카르빌 링커의 일부로 제시될 수 있는 편리한 고리계의 예에는 다음이 포함되고,
Figure pct00006
여기서,
헤테로시클릴 고리는 치환되지 않거나, 또는 할로겐, C1 - 4알킬 (OR121, NR122R123 또는 NR124C(O)R125에 의해 임의로 치환됨), OR126, NR127R128, C(O)NR129R130, NR131C(O)R132, CN, S(O)2R133 또는 S(O)2NR134R135로부터 독립적으로 선택된 1개 또는 2개의 치환기로 치환되고,
R133은 C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬을 나타내고, 여기서의 C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬은 할로겐, 히드록실 및 C1 - 6알콕시로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고,
R121, R122, R123, R124, R125, R126, R127, R128, R129, R130, R131, R132, R134, R135 및 R136은 각각 독립적으로 수소, C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬을 나타내고, 여기서의 C1-6알킬 및 C3 - 6시클로알킬은 할로겐, 히드록실 및 C1 - 6알콕시로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있거나, 또는 R122와 R123, R127과 R128, R129와 R130 또는 R134와 R135 중 임의의 것은 이것들이 모두 부착된 질소 원자와 함께 4원 내지 8원의 지방족 헤테로시클릭 고리를 형성할 수 있고, 여기서의 헤테로시클릭 고리는 할로겐, 히드록실, C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고, 여기서의 C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬은 할로겐 및 히드록실로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있으며,
편리하게는, 상기 쇄가 최대 2개의 탄소-탄소 이중 결합 또는 단일 탄소-탄소 이중 결합을 추가로 포함할 수 있고,
편리하게는, 상기 쇄가 최대 2개의 탄소-탄소 삼중 결합 또는 단일 탄소-탄소 삼중 결합을 추가로 포함할 수 있고,
편리하게는, 각각의 L1, L2, L3 및 L4가 독립적으로 수소, C1 - 4알킬기 또는 C3-6시클로알킬기를 나타내고, 여기서의 C1 - 4알킬 및 C3 - 6시클로알킬이 할로겐 및 히드록실로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고, 추가로, L1 및/또는 L3이 링커 L의 히드로카르빌 쇄의 탄소 원자에 연결되어 최대 6개 고리 원자의 지방족 고리를 형성할 수 있고, 여기서의 각각의 고리가 N, O 및 S로부터 독립적으로 선택된 최대 2개의 헤테로원자를 포함할 수 있고,
상기 쇄의 4개의 탄소 원자가 N, O 또는 S로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 헤테로원자를 갖는 모노시클릭 또는 바이시클릭 지방족, 헤테로지방족, 방향족 또는 헤테로방향족 고리의 일부를 형성하는 경우, 상기 고리가 지방족 고리계인 경우에는 이것이 각각 독립적으로 선택된 최대 10개, 9개, 8개, 7개, 6개, 5개, 4개 또는 3개의 고리 원자를 포함할 수 있고, 상기 고리가 방향족 고리계인 경우에는 이것이 각각 독립적으로 선택된 10개, 9개, 6개 또는 5개의 고리 원자를 포함할 수 있고,
R1이 각각 N, O 또는 S로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 헤테로원자를 갖는 페닐 고리 또는 5원 내지 6원의 헤테로아릴 고리를 나타내거나, 또는 R1이 N, O 또는 S로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 헤테로원자를 갖는 최대 10개 원자의 융합된 지방족, 융합된 헤테로지방족, 융합된 방향족 또는 융합된 헤테로아릴 고리를 나타내고,
여기서의 각각의 고리가 할로겐, 시아노, 니트로, SH, S(O)0-2R5, NR6R7, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, NR13S(O)2R14, NR15C(O)R16, NR17C(O)OR18, NR19C(O)NR20R21, OR22, C1 - 7알킬 또는 C3 - 8시클로알킬 (여기서의 각각의 C1 - 7알킬 및 C3 - 8시클로알킬이 할로겐, 시아노, 니트로, SH, S(O)0-2R5, NR6R7, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, NR13S(O)2R14, NR15C(O)R16, NR17C(O)OR18, NR19C(O)NR20R21 또는 OR22로부터 독립적으로 선택된 최대 6개의 치환기로 임의로 치환될 수 있음), 페닐 고리 (할로겐, 시아노, 니트로, SH, S(O)0-2R5, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, OR22, C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환됨)로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고, 여기서의 C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬이 할로겐, 히드록실, C1 - 6알콕시, 시아노, 니트로, NH2, NH(C1 - 6알킬) 및 N(C1 - 6알킬)2로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고,
R5, R14 및 R18이 할로겐, 히드록실 또는 C1 - 6알콕시로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환된 C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬을 나타내고,
R8, R9, R10, R11, R12 및 R22가 각각 독립적으로 수소 또는 C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬을 나타내고, 여기서의 C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬이 할로겐, 히드록실 및 C1 - 6알콕시로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있거나, 또는 R8과 R9 또는 R10과 R11 중 임의의 것이 이것들이 모두 부착된 질소 원자와 함께 4원 내지 6원의 지방족 헤테로시클릭 고리를 형성할 수 있고, 여기서의 헤테로시클릭 고리가 할로겐, 히드록실, C1 - 6알콕시 및 C1 - 6알킬로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고,
X가 O, S 또는 S(O)2를 나타내고,
m = 0, 1, 2 또는 3이고,
n = 1, 2 또는 3이고,
W가 CR27R28CR29R30 또는 CR31R32CR33R34CR35R36을 나타내고,
V 및 Z가 독립적으로 결합, CR37R38 또는 CR39R40CR41R42를 나타내고,
X가 O, S 또는 S(O)2를 나타내는 경우에는 m, V 및 Z가 고리 중의 모든 헤테로원자가 2개 이상의 탄소 원자에 의해 분리되도록 하고 (예를 들어, V가 결합인 경우에는 m이 0이 아니고 Z가 결합이 아님),
Y가 CO, CONR43 또는 SO2를 나타내고,
R27, R28, R29, R30, R31, R32, R33, R34, R35, R36, R37, R38, R39, R40, R41 및 R42가 각각 독립적으로 수소, 불소, C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬을 나타내고,
이것들이 수소 또는 불소를 나타내지 않는 경우에는 R27과 R28, R29와 R30, R31과 R32, R33과 R34, R35와 R36, R37과 R38, R39와 R40 또는 R41과 R42가 이것들이 둘다 부착된 탄소 원자와 함께 3원 내지 6원의 지방족 고리를 형성할 수 있으며,
R43이 각각 독립적으로 수소, C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬을 나타낸다.
더욱 편리하게는,
L이 최대 8개의 탄소 원자, 예컨대 최대 7개, 6개, 5개 또는 4개의 탄소 원자의 선형 또는 분지형 히드로카르빌 쇄를 포함하는 링커를 나타낸다. 이러한 쇄의 예에는 4-7, 4-6, 4-5, 5-7, 6-7 및 5-6 탄소 원자의 쇄가 포함되며,
L이 최대 4개 (예컨대 최대 3개, 2개 또는 1개)의 불소 또는 메틸기로 임의로 치환된 C4 - 8알킬쇄를 나타내고,
편리하게는, 상기 쇄의 최대 2개의 탄소 원자가 O, S, S(O)2, NR46C(O), C(O)NR47, NR48S(O)2 및 S(O)2NR49로부터 독립적으로 선택된 기로 대체될 수 있지만, 단 각 경우에 상기 쇄의 임의의 이러한 기가 2개 이상의 탄소 원자에 의해 분리되고,
편리하게는, 상기 쇄의 최대 4개의 탄소 원자, 예컨대 최대 3개 또는 최대 2개의 탄소 원자가 N, O 또는 S로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 헤테로원자를 갖는 모노시클릭 또는 바이시클릭 방향족 또는 헤테로방향족 고리의 일부를 형성할 수 있고, 상기 고리가 최대 10개의 고리 원자를 포함하며, 여기서의 고리가 할로겐, S(O)0-2R56, S(O)2NR59R60, C(O)NR61R62, OR73, C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환되고, 여기서의 C1 - 6알킬 및 C3-6시클로알킬이 할로겐, 히드록실 및 C1 - 6알콕시로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고,
편리하게는, 상기 쇄가 이러한 고리 중 하나를 포함할 수 있고,
편리하게는, R56이 C1 - 4알킬 또는 C3 - 6시클로알킬을 나타내고, 여기서의 C1 - 4알킬 및 C3 - 6시클로알킬이 할로겐, 히드록실 및 C1 - 4알콕시로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있으며,
편리하게는, R46, R47, R48, R49, R59, R60, R61, R62 및 R73이 각각 독립적으로 수소, C1 - 4알킬 또는 C3 - 6시클로알킬을 나타내고, 여기서의 C1 - 4알킬 및 C3 - 6시클로알킬이 할로겐, 히드록실 및 C1 - 4알콕시로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있거나, 또는
R59와 R60 또는 R61과 R62 중 임의의 것이 이것들이 모두 부착된 질소 원자와 함께 4원 내지 6원의 지방족 헤테로시클릭 고리를 형성할 수 있고, 여기서의 헤테로시클릭 고리가 할로겐, 히드록실 및 C1 - 4알킬 또는 C3 - 6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 최대 2개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고, 여기서의 C1 - 4알킬 및 C3 - 6시클로알킬이 할로겐, 히드록실 및 C1 - 4알콕시로부터 독립적으로 선택된 1개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고,
L1, L2, L3 및 L4가 독립적으로 수소 또는 메틸을 나타내고,
R1이 N, O 또는 S로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 헤테로원자를 갖는 페닐 또는 5원 내지 6원의 헤테로아릴 고리를 나타내고, 여기서의 고리 각각이 할로겐, 시아노, 니트로, C(O)OR12, OR22, C1 - 7알킬 또는 C3 - 8시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고, 여기서의 C1 - 7알킬 및 C3-8시클로알킬이 할로겐, 시아노, 히드록실 또는 C1 - 3알콕시로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있거나, 또는
R1이 N, O 또는 S로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 헤테로원자를 갖는 최대 10개 원자의 융합된 방향족 또는 융합된 헤테로아릴 고리를 나타내고, 여기서의 고리 각각이 할로겐, 시아노, 니트로, C(O)OR12, OR22, C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고, 여기서의 C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬이 할로겐, 시아노, 히드록실 또는 C1 - 3알콕시로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있으며,
R12 및 R22가 각각 독립적으로 수소, C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬을 나타내고, 여기서의 C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬이 할로겐, 히드록실 또는 C1 - 3알콕시로부터 선택된 1개의 치환기로 임의로 치환될 수 있다.
더욱 편리한 고리 치환기에는 할로겐, 예를 들어 불소, 예를 들어 염소가 포함된다.
더욱 편리하게는, -L- 종은 다음으로 표시된다.
Figure pct00007
상기 식에서,
고리 D는 페닐, 티오펜, 푸란 또는 티아졸 고리를 나타내고,
R은 H, F, Cl, C1 - 4알킬 및 CF3으로부터 각각 독립적으로 선택된 최대 3개의 고리 치환기를 나타내고,
t = 0 또는 1이고,
G = O, CR43R44 또는 S이고,
G = O 또는 S인 경우에는 v = 1 또는 2이고, G = C인 경우에는 v = 0, 1 또는 2이며,
상기 -L- 종은 인접한 원자에 임의의 방향으로 부착된다.
더욱 편리하게는, -L- 종은 하기로부터 선택된다:
-(펜-1,4-일렌)OCH2- (여기서, 페닐은 3개, 2개 또는 1개의 메틸기로 임의로 치환됨),
-(펜-1,4-일렌)OCH2CH2-,
-CH2(펜-1,4-일렌)OCH2- (여기서, 페닐은 3개, 2개 또는 1개의 Cl 또는 F (독립적으로 선택됨)로 임의로 치환됨),
-CH2(펜-1,4-일렌)-,
CH2(펜-1,4-일렌)CH2-,
-(CH2)7-,
-CH2(펜-1,3-일렌)- (여기서, 페닐 고리는 최대 3개의 C1 - 3알킬, F, Cl 및 CF3 (독립적으로 선택됨)으로 임의로 치환됨),
-CH2(티엔-2,5-일렌)CH2-,
-CH2(티엔-2,5-일렌)-,
-CH2(티엔-3,5-일렌)-,
-CH2(티엔-2,4-일렌)-,
-CH2O(펜-1,3-일렌)- 및
-CH2S(펜-1,3-일렌)-.
추가의 편리한 링커에는 다음이 포함된다:
-(나프트-1,5-일렌)-,
-C(CH3)2-(페닐-1,3-일렌)-,
-(펜-1,3-일렌)OCH2CH2-,
-(펜-1,3-일렌)-,
-C(CH3)2-(CH2)4-,
-C(CH3)2-(CH2)6-,
-CH2(펜-1,3-일렌)OCH2- 및
-CH2S(CH2)5-.
각각의 상기 링커는 단독으로 본 발명의 독립적인 측면을 나타낸다.
더욱 편리하게는, -L- 종은 하기로부터 선택된다:
-CH2(티엔-2,5-일렌)-,
-CH2(펜-1,3-일렌)- (여기서, 페닐은 F로 일치환될 수 있음),
-CH2(티엔-2,4-일렌)- 및
-CH2(티엔-3,5-일렌)-.
더욱 편리하게는, L1, L2, L3 및 L4 = H이다.
더욱 편리하게는,
R1이 후술하는 실시예에서 제공되는 바와 같이 개개의 종 중 임의의 하나로부터 선택되고,
X가 O 또는 S를 나타내고,
m = 1 또는 2이고,
n = 1 또는 2이고,
W가 CR27R28CR29R30 또는 CR31R32CR33R34CR35R36을 나타내고,
V 및 Z가 독립적으로 결합 또는 CR37R38을 나타내고,
V 및 Z가 고리 중의 모든 헤테로원자가 2개 이상의 탄소 원자에 의해 분리되도록 하고 (예를 들어, V가 결합인 경우에는 Z가 CR37R38임),
Y가 CO, CONR43, SO2, 예컨대 CO 또는 SO2, 예를 들어 CO를 나타내고,
R27, R28, R29, R30, R31, R32, R33, R34, R35, R36, R37 및 R38이 각각 독립적으로 수소, 불소 또는 C1 - 3알킬 또는 C3시클로알킬을 나타내고,
이것들이 수소 또는 불소를 나타내지 않는 경우에는 R27과 R28, R29와 R30, R31과 R32, R33과 R34, R35와 R36 또는 R37과 R38이 이것들이 둘다 부착된 탄소 원자와 함께 3원 내지 6원의 지방족 고리를 형성할 수 있으며,
R43이 각각 독립적으로 수소 또는 C1 - 3알킬 또는 C3시클로알킬을 나타낸다.
더욱 편리하게는, -N-(^)m-C-V-X-W-N(Y-R1)-Z-(C)-(^)n-을 포함하는 바이시클릭 고리계에 포함되는 스피로사이클은 다음과 같다:
(i) m 및 n = 2, v = 결합, Z = CH2, X = O 및 W = CH2CH2
(ii) m 및 n = 2, v = 결합, Z = CH2, X = O 및 W = CF2CH2
(iii) m 및 n = 1, v = 결합, Z = CH2, X = O 및 W = CH2CH2
(iv) m 및 n = 2, v = 결합, Z = CH2CH2, X = O 및 W = CH2CH2.
더욱 편리하게는, 상기 스피로사이클이 상기한 (i) 및 (ii)로부터 선택된다.
더욱 편리하게는, R1이 1개 또는 2개의 치환기로 각각 임의로 치환된 티오펜, 티아졸 또는 벤조푸란으로부터 선택된다. 편리하게는, 임의의 치환기 중 하나가 H, Cl, F 및 C1 - 3알킬로부터 선택된다. 다른 임의의 치환기는 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, CF3, CH2CF3, CH(CH3)2, CH(CH2CH3)2, CH(CH3)CH2, CH3, CH2CH(CH3)2, C(CH3)3, 시클로프로필, 시클로부틸 및 시클로펜틸로부터 선택된다.
본 발명의 각각의 예시된 화합물은 본 발명의 특별하고 독립적인 측면을 나타낸다.
본 발명의 편리한 화합물은 실시예 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 11, 12, 14, 15, 19, 22, 23, 25, 26, 27, 28, 29, 36, 37, 38, 40, 42, 44, 45, 47, 48, 52, 56, 57, 58, 66, 67, 70, 71, 75, 76, 82, 83, 84, 86, 87, 88, 91, 93, 99, 105, 109, 111, 115, 265, 266, 278 및 280의 화합물을 포함한다.
본 발명의 편리한 화합물은 실시예 22, 23, 36, 40, 42, 44, 47, 48, 57, 66, 82, 83, 84, 86, 87, 99, 265 및 266의 화합물을 포함한다.
본 발명의 편리한 화합물은 실시예 40, 42, 47, 48, 82, 84, 99 및 278의 화합물을 포함한다.
본 발명의 특정 화합물이 용매화된 (예컨대, 수화된) 형태, 뿐만 아니라 비용매화된 형태로 존재할 수 있다는 것을 이해할 것이다. 본 발명이 이러한 모든 용매화된 형태를 포함한다는 것을 이해해야 한다. 화학식 I의 특정 화합물은 입체이성질체 형태로 존재할 수 있다. 본 발명이 화학식 I의 화합물의 모든 기하학적 이성질체 및 광학 이성질체, 및 라세미체를 비롯한 이들의 혼합물을 포함한다는 것을 이해할 것이다. 호변이성질체 및 이들의 혼합물 또한 본 발명의 측면을 형성한다.
편리하게는, β-아드레날린 수용체 결합기에 인접한 히드록시-치환된 탄소 원자에서의 키랄 중심은 R-입체화학을 갖는다.
또한, 본 발명이 임의의 4차 탄소, 보다 구체적으로는 스피로시클릭계에 존재하는 4차 탄소가 규소 원자로 대체되는 것 (예를 들어, 문헌 ["Silicon switches of Marketed Drugs: Mini-reviews in Med. Chem.", 2006, 6, 1169-1177]에 개시되어 있는 바와 같음)을 포함한다는 것을 이해해야 한다.
본 명세서의 맥락에서, 용어 '헤테로방향족'은 5 내지 14개의 고리 원자, 바람직하게는 5 내지 10 고리 원자 (여기서, 고리 원자 중 최대 4개는 탄소 이외의 원소(들), 예컨대 질소, 산소 또는 황임)의 임의로 치환된 방향족 모노시클릭 또는 멀티시클릭 유기 잔기를 포함하는 기 또는 기의 일부를 나타낸다. 이러한 기의 예에는 벤즈이미다졸릴, 벤족사졸릴, 벤조티아졸릴, 벤조푸라닐, 벤조티에닐, 푸릴, 이미다졸릴, 인돌릴, 인돌리지닐, 이속사졸릴, 이소퀴놀리닐, 이소티아졸릴, 옥사졸릴, 옥사디아졸릴, 피라지닐, 피리다지닐, 피라졸릴, 피리딜, 피리미디닐, 피롤릴, 퀴나졸리닐, 퀴놀리닐, 테트라졸릴, 1,3,4-티아디아졸릴, 티아졸릴, 티에닐 및 트리아졸릴 기가 포함된다. 헤테로아릴기는 하나 이상의 치환기로 치환될 수 있다. 헤테로아릴기는 임의의 이용가능한 탄소 또는 질소 원자에 의해 본 발명의 화합물의 나머지 부분에 부착될 수 있다.
용어 '지방족 헤테로시클릭 고리'는 질소, 산소 및 황으로 이르어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 헤테로 원자를 포함하는 비-방향족 고리를 나타낸다. 본 발명에 따른 4원 내지 8원의 지방족 헤테로시클릭 고리의 예에는 피롤리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 모르폴리닐, 호모피페라지닐, 호모피페리디닐 및 아제티디닐이 포함된다.
달리 언급하지 않는 한, 본 명세서의 문맥에서, 알킬기 및 잔기는 직쇄 또는 분지쇄일 수 있으며, 예를 들어 메틸, 에틸, n-프로필, 이소-프로필, n-부틸, 이소-부틸 또는 tert-부틸을 포함한다. 시클로알킬기는 모노시클릭, 예를 들어 시클로펜틸 또는 시클로헥실이다. 할로겐은 예를 들어, 플루오라이드, 클로라이드 또는 브로마이드이다.
본 명세서의 문맥에서, 기가 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있다고 언급되어 있는 경우, 상기 기는 비치환되거나, 또는 치환될 수 있으며; 치환된 경우에 상기 기는 일반적으로 1, 2 또는 3개의 치환기로 치환될 것이다. 일반적으로, 히드록실 잔기는 질소 원자에 인접한 탄소 원자, 또다른 산소 원자 또는 황 원자에 부착되지 않을 것이다.
본 발명은 또한
(a) L1이 수소를 나타내는 경우, 염기 (예컨대, 탄산칼륨, 트리에틸아민 또는 디이소프로필에틸아민)의 존재하에 하기 화학식 II의 화합물 또는 그의 적합한 염을 하기 화학식 III의 화합물 또는 그의 적합한 염 (예컨대, 히드로브로마이드, 아세테이트 또는 히드로클로라이드)과 반응시킨 후, (예를 들어, 플루오르화수소산-피리딘 복합체를 사용하여) 보호기를 제거하거나; 또는
<화학식 II>
Figure pct00008
(상기 식에서, LG1은 이탈기 (예컨대, 클로라이드, 브로마이드, 요오다이드, 메탄술포네이트 또는 파라-톨루엔술포네이트)를 나타내고, L, L2, L3, L4, R1, m, n, V, W, X, Y 및 Z는 화학식 I에서 정의한 바와 같음)
<화학식 III>
Figure pct00009
(상기 식에서, Ar은 화학식 I에서 정의한 바와 같고, P1은 수소 또는 보호기 (예컨대, tert-부틸디메틸 실릴)임)
(b) L1이 수소를 나타내는 경우, 적합한 환원제 (예컨대, 나트륨 시아노보로하이드라이드, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드, 또는 적합한 탄소상 팔라듐 또는 산화백금 촉매의 존재하의 수소)의 존재하에 하기 화학식 IV의 화합물 또는 그의 적합한 염을 화학식 III의 화합물 또는 그의 적합한 염과 반응시키거나; 또는
<화학식 IV>
Figure pct00010
(상기 식에서, L, L2, L3, L4, R1, m, n, V, W, X, Y 및 Z는 화학식 I에서 정의한 바와 같음)
(c) 염기 (예를 들어, P3이 수소인 경우 탄산칼륨, 트리에틸아민, 디이소프로필에틸아민, 그리고 P3이 3-니트로페닐술포닐인 경우 수소화나트륨 또는 리튬 디-이소-프로필아미드)의 존재하에 하기 화학식 V의 화합물 또는 그의 적합한 염을 하기 화학식 VI의 화합물 또는 그의 적합한 염과 반응시킨 후, (예를 들어, 플루오르화수소산-피리딘 복합체, 티오페놀, 티오아세트산을 사용하여) 보호기를 제거하거나; 또는
<화학식 V>
Figure pct00011
(상기 식에서, L, L1, L2, L3, L4, R1, m, n, V, W, X, Y 및 Z는 화학식 I에서 정의한 바와 같고, P3은 수소 또는 활성화기 (예컨대, 3-니트로페닐술포닐)를 나타냄)
<화학식 VI>
Figure pct00012
(상기 식에서, Ar은 화학식 I에서 정의한 바와 같고, LG2는 이탈기 (예컨대, 클로라이드, 브로마이드, 요오다이드, 메탄술포네이트 또는 파라-톨루엔술포네이트)를 나타내고, P1은 화학식 III에서 정의한 바와 같음)
염기 (예를 들어, P3이 수소인 경우 탄산칼륨, 트리에틸아민, 디이소프로필에틸아민, 그리고 P3이 3-니트로페닐술포닐인 경우 수소화나트륨 또는 리튬 디-이소-프로필아미드)의 존재하에 화학식 V의 화합물 또는 그의 적합한 염을 하기 화학식 VII의 화합물 또는 그의 적합한 염과 반응시킨 후, 보호기를 제거하거나 (예를 들어, 트리플루오로아세트산, 티오페놀, 티오아세트산); 또는
<화학식 VII>
Figure pct00013
(상기 식에서, Ar은 화학식 I에서 정의한 바와 같음)
염기 (예를 들어, P3이 수소인 경우 탄산칼륨, 트리에틸아민, 디이소프로필에틸아민, 그리고 P3이 3-니트로페닐술포닐인 경우 수소화나트륨 또는 리튬 디-이소-프로필아미드)의 존재하에 화학식 V의 화합물 또는 그의 적합한 염을 하기 화학식 VIII의 화합물 또는 그의 적합한 염과 반응시킨 후, (예를 들어, 수소화붕소나트륨 또는 보란/키랄 촉매 복합체를 사용하여) 케톤을 환원시키고, 이어서 보호기를 제거하거나 (예를 들어, 트리플루오로아세트산, 티오페놀, 티오아세트산); 또는
<화학식 VIII>
Figure pct00014
(상기 식에서, Ar은 화학식 I에서 정의한 바와 같고, LG2는 이탈기 (예컨대, 클로라이드, 브로마이드, 요오다이드, 메탄술포네이트 또는 파라-톨루엔술포네이트)를 나타냄)
(d) L3 및 L4가 각각 수소를 나타내는 경우, 적합한 환원제 (예컨대, 나트륨 시아노보로하이드라이드, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드, 또는 적합한 탄소상 팔라듐 또는 산화백금 촉매의 존재하의 수소)의 존재 하에 하기 화학식 IX의 화합물 또는 그의 적합한 염을 하기 화학식 X의 화합물 또는 그의 적합한 염과 반응시킨 후, 보호기를 제거하거나 (예를 들어, 염산 또는 트리플루오로아세트산 티오페놀, 티오아세트산으로 처리); 또는
<화학식 IX>
Figure pct00015
(상기 식에서, Ar, L, L1 및 L2는 화학식 I에서 정의한 바와 같고, P1은 화학식 III에서 정의한 바와 같고, P3은 보호기 (예컨대, tert-부틸카르바메이트 또는 3-니트로페닐술포닐)을 나타냄)
<화학식 X>
Figure pct00016
(상기 식에서, R1, m, n, V, W, X, Y 및 Z는 화학식 I에서 정의한 바와 같음)
(e) L3 및 L4 중 하나 또는 모두가 수소를 나타내는 경우, 염기 (예컨대, 탄산칼륨, 트리에틸아민, 디이소프로필에틸아민)의 존재하에 하기 화학식 XI의 화합물 또는 그의 적합한 염을 화학식 X의 화합물 또는 그의 적합한 염과 반응시킨 후, 보호기를 제거하거나 (예를 들어, 트리플루오로아세트산, 티오페놀, 티오아세트산); 또는
<화학식 XI>
Figure pct00017
(상기 식에서, Ar, L, L1 및 L2는 화학식 I에서 정의한 바와 같고, P1은 화학식 III에서 정의한 바와 같고, P3은 보호기 (예컨대, tert-부틸카르보닐 또는 3-니트로페닐술포노일)를 나타내고, LG3은 이탈기 (예컨대, 클로라이드, 브로마이드, 요오다이드, 메탄술포네이트 또는 파라-톨루엔술포네이트)를 나타냄)
(f) L1 및 L2가 각각 수소를 나타내는 경우, 하기 화학식 XII의 화합물 또는 그의 적합한 염을 적합한 환원제 (예컨대, 보란 테트라히드로푸란 복합체)와 반응시킨 후, (예를 들어, 플루오르화수소산-피리딘 복합체를 사용하여) 보호기를 제거하고, 하기 화학식 XIII의 화합물 또는 그의 적합한 염과 반응시킨 후, (예를 들어, 플루오르화수소산-피리딘 복합체, 염산 또는 트리플루오로아세트산을 사용하여) 보호기를 제거하는 것
<화학식 XII>
Figure pct00018
(상기 식에서, Ar, L, L3, L4, m, n, V, W, X, Y 및 Z는 화학식 I에서 정의한 바와 같고, P1은 화학식 III에서 정의한 바와 같고, P4는 적합한 질소 보호기 (예컨대, tert-부틸카르보네이트)임)
<화학식 XIII>
Figure pct00019
(상기 식에서, R1 및 Y는 화학식 I에서 정의한 바와 같고, LG4는 히드록실 또는 이탈기 (예컨대, 할로겐화물, 클로라이드)를 나타냄)
을 포함하는, 상기 정의한 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 제조 방법을 제공한다.
LG4가 히드록실을 나타내는 경우, 반응은 활성화 시약, 예를 들어 카르보닐디이미다졸, 1-프로판포스폰산 시클릭 무수물 (T3P) 또는 O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄헥사플루오로포스페이트 (HATU)의 존재하에, 유기 용매 (예컨대, N,N-디메틸포름아미드 또는 디클로로메탄) 중에서, 임의로 염기 (예컨대, 트리에틸아민)의 존재하에, 예를 들어 0 내지 60 ℃ 범위의 온도에서 편리하게 수행되며,
LG4가 할로겐화물 (예컨대, 클로라이드)을 나타내는 경우, 반응은 염기, 예를 들어 트리에틸아민, 디이소프로필에틸아민 또는 피리딘의 존재하에, 유기 용매 (예컨대, 디클로로메탄 또는 테트라히드로푸란) 중에서, 예를 들어 0 내지 25 ℃ 범위의 온도에서 편리하게 수행되고;
임의로, (a), (b), (c), (d), (e) 또는 (f) 이후에 하기 중 하나 이상을 수행한다.
- 수득한 화합물을 추가의 본 발명의 화합물로 전환시킴.
- 화합물의 제약상 허용되는 염을 형성함.
방법 (a), (c) 및 (e)에서, 반응은 유기 용매 (예컨대, N,N-디메틸포름아미드, 에탄올, n-부탄올 또는 디메틸 술폭사이드) 중에서, 예를 들어 50 내지 140 ℃ 범위의 온도에서 편리하게 수행될 수 있다.
방법 (b) 및 (d)에서, 반응은 10 중량 ％ 이하의 물 및 아세트산을 함유하는 유기 용매 (예컨대, 메탄올, 에탄올, 디클로로메탄, 아세트산 N-메틸피롤리디논 또는 N,N-디메틸포름아미드) 중에서 편리하게 수행될 수 있다.
방법 (f)에서, 반응은 유기 용매 (예컨대, 테트라히드로푸란) 중에서, 예를 들어 0 내지 80 ℃ 범위의 온도에서 편리하게 수행될 수 있다.
별법으로, 화학식 I의 화합물 (하기 반응식에 화학식 A, B 및 C로 표시함)을 하기와 같이 제조할 수 있다.
경로 A
Figure pct00020
별법의 화합물 A의 제조 방법
Figure pct00021
별법의 화합물 B의 제조 방법
Figure pct00022
별법의 화합물 B의 제조 방법
Figure pct00023
LG 9 가 Cl 또는 Br 인 화합물 C의 제조 방법
Figure pct00024
경로 B
Figure pct00025
경로 C
Figure pct00026
유기 용매 (예컨대 테트라히드로푸란 또는 에테르) 중에서, 예를 들어 0 내지 60 ℃의 온도에서 하기 화학식 XIV의 화합물 또는 그의 적합한 염을 하기 화학식 XV의 화합물 (예컨대, 메틸 리튬, 메틸 마그네슘 브로마이드, 수소화리튬알루미늄, 수소화붕소나트륨)과 반응시킨 후, 생성된 히드록실 기를 적합한 이탈기 (예컨대, 클로라이드, 브로마이드, 요오다이드, 메탄술포네이트 또는 파라-톨루엔술포네이트)로 전환시킴으로써, 화학식 II의 화합물을 제조할 수 있다.
<화학식 XIV>
Figure pct00027
(상기 식에서, L, L3, L4, R1, m, n, V, W, X, Y 및 Z는 화학식 II에서 정의한 바와 같음)
<화학식 XV>
Figure pct00028
(상기 식에서, L2는 화학식 II에서 정의한 바와 같고, Mt는 금속, 예를 들어 리튬 또는 마그네슘, 또는 알루미늄 또는 붕소를 나타냄)
유기 용매 (예컨대, 테트라히드로푸란 또는 에테르) 중에서, 예를 들어 -10 내지 60 ℃ 범위의 온도에서 화학식 XIV의 화합물을 화학식 XV의 화합물과 반응시킨 후, 유기 용매 (예컨대, 디클로로메탄, N,N-디메틸포름아미드 또는 디메틸술폭사이드) 중에서, 예를 들어 -78 내지 60 ℃ 범위의 온도에서 적합한 산화제 (예컨대, 스원 (Swern) 시약, 데스-마틴 (Dess-Martin) 시약 또는 피리디늄 클로로크로메이트)를 사용하여 생성된 히드록실 기를 산화시킴으로써, 화학식 IV의 화합물을 제조할 수 있다.
L1이 수소를 나타내고, L, L2, L3, L4, P3, R1, m, n, V, W, X, Y 및 Z가 화학식 V에서 정의한 바와 같은 화학식 V의 화합물은
a) 유기 용매 (예컨대, 테트라히드로푸란, N,N-디메틸포름아미드 또는 디메틸술폭사이드) 중에서, 예를 들어 25 내지 85 ℃ 범위의 온도에서 화학식 II의 화합물을 나트륨 아지드와 반응시키고, 이어서 유기 용매, 예컨대 테트라히드로푸란 및 물 중에서 적합한 환원제 (예컨대, 트리페닐포스핀)을 사용하여 생성된 아지도 화합물을 환원시킨 후, 최종적으로 생성된 아민을 보호하거나 (예를 들어, 피리딘과 같은 염기의 존해하에 3-니트로페닐술포닐 클로라이드로 처리); 또는
b) 화학식 IV의 화합물을 아민 (예컨대, 벤질아민, α-메틸 벤질아민, 4-메톡시벤질아민 또는 2,4-메톡시벤질아민)과 반응시킨 후, 10 중량 ％의 물 및 아세트산을 함유하는 유기 용매 (예컨대, 메탄올, 에탄올, 디클로로메탄, 아세트산, N-메틸피롤리디논 또는 N,N-디메틸포름아미드) 중에서 적합한 환원제 (예컨대, 나트륨 시아노보로하이드라이드 또는 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드)를 사용하여 생성된 이민을 환원시키고, 이어서 유기 용매 (예컨대, 에탄올, 메탄올, 테트라히드로푸란, 디클로로메탄, 아세토니트릴, 물 또는 이들의 혼합물) 중에서, 25 내지 80 ℃ 범위의 온도에서 적절한 시약 (예컨대, 수소 및 적합한 촉매 (탄소상 팔라듐 또는 수산화팔라듐), 2,3-디클로로-5,6-디시아노벤조퀴논 (DDQ), 또는 질산암모늄세륨 (CAN))을 사용하여 생성된 벤질 보호기를 제거한 후, 최종적으로 생성된 아민을 보호하여 (예를 들어, 피리딘과 같은 염기의 존재하에 3-니트로페닐술포닐 클로라이드로 처리)
제조할 수 있다.
L, L1, L2, L3, L4, P3, R1, m, n, V, W, X, Y 및 Z가 화학식 V에서 정의한 바와 같은 화학식 V의 화합물은 하기 화학식 XVI의 화합물 또는 그의 적합한 염을, LG5가 히드록실인 경우에 아민 (예컨대, 트리에틸아민)의 존재하에, 유기 용매 (예컨대, tert-부탄올, 테트라히드로푸란, 디클로로메탄, 물, 또는 이들의 혼합물) 중에서, 25 내지 100 ℃ 범위의 온도에서 시약, 예컨대 디페닐포스폰산 아지드와 반응시키거나, 또는 LG5가 염소인 경우에 유기 용매 (예컨대, 에테르, tert-부탄올, 테트라히드로푸란, 물 또는 이들의 혼합물) 중에서, 25 내지 100 ℃ 범위의 온도에서 시약, 예컨대 나트륨 아지드와 반응시킨 후 (문헌 [Angewandte Chemie, 2005, 54, 5188]), 최종적으로 생성된 아민을 보호함으로써 (예컨대, 피리딘과 같은 염기의 존재하에 3-니트로페닐술포닐 클로라이드로 처리) 제조할 수 있다.
<화학식 XVI>
Figure pct00029
(상기 식에서, LG5는 이탈기 (예컨대, 히드록실 또는 염소)이고, L, L1, L2, L3, L4, R1, m, n, V, W, X, Y 및 Z는 화학식 V에서 정의한 바와 같음)
화학식 III, VI, VII, VIII, XIII 및 XV의 화합물은 문헌에 공지되어 있거나, 또는 공지되어 있는 기술을 이용하여 제조할 수 있다.
화학식 IX의 화합물은
a) 염기 (예컨대, P3이 수소인 경우에 탄산칼륨, 트리에틸아민 또는 디이소프로필에틸아민, 그리고 P3이 3-니트로페닐술포닐인 경우에 수소화나트륨 또는 리튬 디-이소-프로필아미드)의 존재하에, 유기 용매 (예컨대, N,N-디메틸포름아미드, N-메틸피롤리디논, 테트라히드로푸란, 에탄올, n-부탄올 또는 디메틸 술폭사이드) 중에서, 예를 들어 50 내지 140 ℃ 범위의 온도에서 하기 화학식 XVII의 화합물 또는 그의 적합한 염을 화학식 VI, VII 또는 VIII의 화합물, 또는 그의 적합한 염과 반응시키거나 [화학식 VIII의 화합물을 사용하여 반응을 수행하는 경우, 케톤을 환원시키는 것 (예컨대, 수소화붕소나트륨 또는 보란/키랄 촉매 복합체를 사용)을 포함하는 제2 단계가 필요하다. 보호기를 적절하게 선택적으로 제거하고 (예컨대, 플루오르화수소산-피리딘 복합체, 테트라부틸암모늄 플루오라이드, 묽은 염산 또는 메탄올 중 앰버리스트-15 수지), 적합한 산화제 (피리디늄 클로로크로메이트, 데스-마틴 시약 또는 스원 시약)를 사용하여 생성된 알코올을 상응하는 알데히드로 산화킴으로써, 화학식 IX의 화합물을 유도한다]; 또는
<화학식 XVII>
Figure pct00030
(상기 식에서, P5는 수소 또는 보호기 (예컨대, tert-부틸디메틸실릴, 테트라히드로피란)이고, P3, L, L1 및 L2는 화학식 IX에서 정의한 바와 같음)
b) 염기 (예컨대, P3이 수소인 경우에 탄산칼륨, 트리에틸아민 또는 디이소프로필에틸아민, 그리고 P3이 3-니트로페닐술포닐인 경우에 수소화나트륨 또는 리튬 디-이소-프로필아미드)의 존재하에, 유기 용매 (예컨대, N,N-디메틸포름아미드, N-메틸피롤리디논, 테트라히드로푸란, 에탄올, n-부탄올 또는 디메틸 술폭사이드) 중에서, 예를 들어 50 내지 140 ℃ 범위의 온도에서 하기 화학식 XVIII의 화합물 또는 그의 적합한 염을 화학식 VI, VII 또는 VIII의 화합물, 또는 그의 적합한 염과 반응시키거나 [화학식 VIII의 화합물과 반응하는 경우, 이어서 (예컨대, 수소화붕소나트륨 또는 보란/키랄 촉매 복합체를 사용하여) 케톤을 환원시킨다. 보호기를 제거하여 (예컨대, 묽은 염산 또는 메탄올 중 앰버리스트-15 수지), 화학식 IX의 화합물을 유도한다]; 또는
<화학식 XVIII>
Figure pct00031
(상기 식에서, P6 및 P7은 바이시클릭 또는 시클릭 카르보닐 보호기 (예컨대, 디메톡시 또는 디에톡시 아세탈, 1,3-디옥솔란 또는 1,3-디옥산)을 나타내고, L, L1, L2 및 P3은 화학식 IX에서 정의한 바와 같음)
c) L1이 수소를 나타내는 경우, 적합한 환원제 (예컨대, 나트륨 시아노보로하이드라이드, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드, 또는 적합한 탄소상 팔라듐 또는 산화백금 촉매의 존재하의 수소)의 존재하에, 10 중량 ％ 이하의 물 및 아세트산을 함유하는 유기 용매 (예컨대, 메탄올, 에탄올, 디클로로메탄, 아세트산, N-메틸피롤리디논 또는 N,N-디메틸포름아미드) 중에서 하기 화학식 XIX의 화합물 또는 그의 적합한 염을 화학식 III의 화합물 또는 그의 적합한 염과 반응시킨 후, 보호기를 적절하게 선택적으로 제거하고 (예컨대, 플루오르화수소산-피리딘 복합체, 테트라부틸암모늄 플루오라이드, 묽은 염산 또는 메탄올 중 앰버리스트-15 수지), 적합한 산화제 (피리디늄 클로로크로메이트, 데스-마틴 시약 또는 스원 시약)를 사용하여 생성된 알코올을 상응하는 알데히드로 산화시키거나; 또는
<화학식 XIX>
Figure pct00032
(상기 식에서, P5는 수소 또는 보호기 (예컨대, tert-부틸디메틸실릴, 테트라히드로피란)이고, L 및 L2는 화학식 IX에서 정의한 바와 같음)
d) L1이 수소를 나타내는 경우, 적합한 환원제 (예컨대, 나트륨 시아노보로하이드라이드, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드, 또는 적합한 탄소상 팔라듐 또는 산화백금 촉매의 존재하의 수소)의 존재하에, 10 중량 ％ 이하의 물 및 아세트산을 함유하는 유기 용매 (예컨대, 메탄올, 에탄올, 디클로로메탄, 아세트산, N-메틸피롤리디논 또는 N,N-디메틸포름아미드) 중에서 하기 화학식 XX의 화합물 또는 그의 적합한 염을 화학식 III의 화합물 또는 그의 적합한 염과 반응시킨 후, 보호기를 제거하여 (예컨대, 묽은 염산 또는 메탄올 중 앰버리스트-15 수지)
<화학식 XX>
Figure pct00033
(상기 식에서, P6 및 P7은 바이시클릭 또는 시클릭 카르보닐 보호기 (예컨대, 디메톡시 또는 디에톡시 아세탈, 1,3-디옥솔란 또는 1,3-디옥산)를 나타내고, L 및 L2는 화학식 IX에서 정의한 바와 같음)
제조할 수 있다.
적절한 반응 순서를 선택하여 상기 기재된 바와 같은 화학식 IX의 화합물, 또는 화학식 IX의 화합물에 대한 전구체를 전환함으로써, 예를 들어 알데히드를 알코올로 환원시키고 (예컨대, 수소화붕소나트륨), 보호기를 적절하게 선택적으로 제거하고 (예컨대, 플루오르화수소산-피리딘 복합체, 테트라부틸암모늄 플루오라이드, 묽은 염산 또는 메탄올 중 앰버리스트-15 수지), 알코올을 적합한 이탈기 (예컨대, 클로라이드, 브로마이드, 요오다이드, 메탄술포네이트 또는 파라-톨루엔술포네트)로 전환함으로써, 화학식 XI의 화합물을 제조할 수 있거나; 또는
하기 화학식 XXI의 화합물 또는 그의 적합한 염을 화학식 III의 화합물 또는 그의 적합한 염과 반응시켜, 화학식 XII의 화합물을 제조할 수 있는데,
<화학식 XXI>
Figure pct00034
(상기 식에서, L, L3, L4, P4, m, n, V, W, X 및 Z는 화학식 XII에서 정의한 바와 같고, LG6은 히드록실 또는 이탈기 (예컨대, 염소)를 나타냄)
LG6이 히드록실을 나타내는 경우, 반응은 활성화 시약, 예컨대 카르보닐디이미다졸, 1-프로판포스폰산 시클릭 무수물 (T3P) 또는 O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄헥사플루오로포스페이트 (HATU)의 존재하에, 유기 용매 (예컨대, N,N-디메틸포름아미드 또는 디클로로메탄) 중에서, 임의로 염기 (예컨대, 트리에틸아민)의 존재하에, 예를 들어 0 내지 60 ℃ 범위의 온도에서 편리하게 수행될 수 있고,
LG6이 염소를 나타내는 경우, 반응은 염기, 예컨대 트리에틸아민 또는 디이소프로필에틸아민의 존재하에, 유기 용매 (예컨대, 디클로로메탄 또는 테트라히드로푸란) 중에서, 예를 들어 0 내지 25 ℃의 온도에서 편리하게 수행될 수 있다.
R1, Y가 화학식 I에서 정의한 바와 같고, LG4가 히드록실 또는 이탈기 (예컨대, 할로겐화물, 클로라이드)를 나타내는 화학식 XIII의 화합물 또는 그의 적합한 염과 하기 화학식 XXII의 화합물 또는 그의 적합한 염의 일반적인 커플링 반응을 통해 화학식 V, X, XIV, XVI 및 XXI의 화합물에 접근할 수 있는데,
LG4가 히드록실을 나타내는 경우, 반응은 활성화 시약, 예를 들어 카르보닐디이미다졸, 1-프로판포스폰산 시클릭 무수물 (T3P) 또는 O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄헥사플루오로포스페이트 (HATU)의 존재하에, 유기 용매 (예컨대, N,N-디메틸포름아미드 또는 디클로로메탄) 중에서, 임의로 염기 (예컨대, 트리에틸아민)의 존재하에, 예를 들어 0 내지 60 ℃ 범위의 온도에서 편리하게 수행될 수 있거나; 또는
LG4가 할로겐화물 (예컨대, 클로라이드)을 나타내는 경우, 반응은 염기 (예컨대, 트리에틸아민, 디이소프로필에틸아민 또는 피리딘)의 존재하에, 유기 용매 (예컨대, 디클로로메탄 또는 테트라히드로푸란) 중에서, 예를 들어 0 내지 25 ℃ 범위의 온도에서 편리하게 수행될 수 있다.
<화학식 XXII>
Figure pct00035
상기 식에서,
m, n, V, W, X, Y 및 Z는 화학식 I에서 정의한 바와 같고,
- 화학식 V의 화합물에 대해, P9는
Figure pct00036
(여기서, L, L1, L2, L3, L4 및 P3은 화학식 V에서 정의한 바와 같음)를 나타내거나;
- 화학식 X의 화합물에 대해, P9는 적절한 질소 보호기, 예컨대 tert-부톡시카르보닐을 나타내거나;
- 화학식 XIV의 화합물에 대해, P9는
Figure pct00037
(여기서, L, L3 및 L4는 화학식 XIV에서 정의한 바와 같고, P11 및 P12는 비시클릭 또는 시클릭 카르보닐 보호기 (예컨대, 디메톡시 또는 디에톡시 아세탈, 1,3-디옥솔란 또는 1,3-디옥산)을 나타냄)을 나타내거나 [후속으로 적합하게 탈보호시킴 (예컨대, 묽은 염산 또는 메탄올 중 앰버리스트-15 수지)];
- 화학식 XVI의 화합물에 대해, P9는
Figure pct00038
(여기서, L, L1, L2, L3 및 L4는 화학식 XVI에서 정의한 바와 같고, P14는 산 보호기 (예컨대, 메틸, 에틸 또는 tert-부틸)를 나타냄)를 나타내거나 [후속으로 적합하게 탈보호시킴 (예컨대, 수산화리튬 또는 수산화나트륨, 트리플루오로아세트산, 염산)];
- 화학식 XXI의 화합물에 대해, P9는
Figure pct00039
(여기서, L, L3 및 L4는 화학식 XXI에서 정의한 바와 같고, P14는 산 보호기 (예컨대, tert-부틸)를 나타냄)를 나타낸다 [후속으로 적합하게 탈보호시킴 (예컨대, 트리플루오로아세트산, 염산)].
V가 결합을 나타내고, X가 O를 나타내고, W가 CR27R28CR29R30을 나타내고, Z가 CR37R38을 나타내고, R27, R28, R29, R30, R37, R38이 각각 수소를 나타내고, P9가 적절한 질소 보호기, 예컨대 tert-부톡시카르보닐을 나타내는 화학식 XXII의 화합물은 하기 화학식 XXIII의 화합물로부터, 적합한 용매, 예컨대 테트라히드로푸란 중에서, 30 내지 70 ℃에서 적합한 환원제, 예컨대 보란-THF 복합체로 처리하고, 생성된 붕소 복합체를 메탄올 중에서, 60 내지 90 ℃에서 적합한 아민, 예컨대 N1,N2-디메틸렌아민-1,2-디아민으로 분해함으로써 제조할 수 있다.
<화학식 XXIII>
Figure pct00040
상기 식에서,
P9, m 및 n은 화학식 XXII의 화합물에서 정의한 바와 같다.
화학식 XXIII의 화합물은 하기 화학식 XXIV의 화합물로부터, 적합한 용매, 예컨대 테트라히드로푸란 중에서, 50 내지 90 ℃에서 적합한 염기, 예컨대 칼륨 tert-부톡시드로 처리함으로써 제조할 수 있다.
<화학식 XXIV>
Figure pct00041
상기 식에서,
LG7은 적합한 이탈기, 예컨대 할로겐 또는 토실레이트이고,
P9, m 및 n은 화학식 XXIII의 화합물에서 정의한 바와 같다.
화학식 XXIV의 화합물은 하기 화학식 XXV의 화합물을 하기 화학식 XXVI의 화합물과 반응시킴으로써 제조할 수 있는데;
<화학식 XXV>
Figure pct00042
<화학식 XXVI>
Figure pct00043
(상기 식에서, LG8은 히드록실 또는 할로겐기, 예컨대 클로라이드를 나타내고, P9, m, n 및 LG7은 화학식 XXIV 화합물에서 정의한 바와 같음)
LG8이 히드록실을 나타내는 경우에, 반응은 활성화 시약, 예컨대 카르보닐디이미다졸, 1-프로판포스폰산 시클릭 무수물 (T3P) 또는 O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄헥사플루오로포스페이트 (HATU)의 존재하에, 유기 용매 (예컨대, N,N-디메틸포름아미드 또는 디클로로메탄) 중에서, 임의로 염기 (예컨대, 트리에틸아민)의 존재하에, 예를 들어 0 내지 60 ℃ 범위의 온도에서 편리하게 수행되고;
LG8이 클로라이드를 나타내는 경우에, 반응은 염기, 예를 들어 트리에틸아민 또는 디이소프로필에틸아민의 존재하에 유기 용매 (예컨대, 디클로로메탄 또는 테트라히드로푸란) 중에서, 예를 들어 0 내지 25 ℃ 범위의 온도에서 편리하게 수행되며;
화학식 XXV의 화합물은 적합한 용매, 예컨대 메탄올 중에서, 20 내지 60 ℃ 범위의 온도에서 하기 화학식 XXVII의 화합물을 암모니아와 반응시킴으로써 제조할 수 있고;
<화학식 XXVII>
Figure pct00044
(상기 식에서, P9, m 및 n은 화학식 XXV의 화합물에서 정의한 바와 같음)
화학식 XXVII의 화합물은 적합한 염기, 예컨대 수소화나트륨 또는 칼륨 tert-부톡시드의 존재하에, 적합한 용매, 예컨대 디메틸술폭사이드 중에서, 0 내지 20 ℃ 범위의 온도에서 하기 화학식 XXVIII의 화합물을 트리메틸 술폭소늄 요오다이드와 반응시킴으로써 제조할 수 있으며;
<화학식 XXVIII>
Figure pct00045
(상기 식에서, P9, m 및 n은 화학식 XXVII 화합물에서 정의한 바와 같음)
또한, 상기 방법은 간단한 산화 및 환원 단계를 참조하며, 이는 문헌에 잘 확립되어 있는 표준 조건하에 수행된다 (예컨대, 데스-마틴, 스원, 피리디늄 클로로크로메이트, 피리디늄 황 트리옥사이드 복합체 산화제). 이는 유기 용매, 예컨대 디클로로메탄 중에서, -78 내지 50 ℃ 범위의 온도에서 편리하게 수행될 수 있다 (문헌 [Annual Reports on the Progress of Chemistry, Section B: Organic Chemistry, 2004, 100, 51-70]).
V가 결합을 나타내고, X가 O를 나타내고, W가 CR27R28CR29R30을 나타내고, Z가 CR37R38을 나타내고, R27, R28, R29, R30, R37, R38이 각각 수소를 나타내고, P9가 적절한 질소 보호기를 나타내는 화학식 XXII의 화합물은 적합한 반응 조건 (예컨대, 강산)하에 하기 화학식 XXIX의 화합물로부터 제조할 수 있고;
<화학식 XXIX>
Figure pct00046
화학식 XXIX의 화합물은 화학식 XXVII의 화합물을 에탄올아민과 반응시킴으로써 제조할 수 있다.
V가 결합을 나타내고, X가 O를 나타내고, W가 CR27R28CR29R30을 나타내고, Z가 CR37R38을 나타내고, R27, R28, R29, R30, R37, R38이 각각 수소를 나타내고, P9가 적절한 질소 보호기를 나타내는 화학식 XXII의 화합물은 LG11이 적합한 이탈기, 예컨대 할로겐, OMs 또는 OTs인 하기 화학식 XXX의 화합물로부터 제조할 수 있다.
<화학식 XXX>
Figure pct00047
화학식 XXX의 화합물은 적절한 조건하에 화학식 XXIX의 화합물로부터 형성될 수 있다.
화학식 XIV의 화합물은 CH2L5가 L이고, R200이 알킬, 또는 디알킬아민으로 치환된 알킬인 하기 화학식 XXXI의 화합물로부터, 산성 조건 (예컨대, 포름산) 하에 처리함으로써 제조할 수 있다.
<화학식 XXXI>
Figure pct00048
화학식 XXXI의 화합물은 하기 화학식 XXXII의 화합물로부터, 하기 화학식 XXXIII의 화합물로 처리함으로써 제조할 수 있다.
<화학식 XXXII>
Figure pct00049
<화학식 XXXIII>
Figure pct00050
화학식 IV 또는 XIV의 화합물은 하기 화학식 XXXII의 화합물로부터, 적합한 조건하에, 예를 들어 적합한 용매, 예컨대 트리플루오로아세트산을 함유하는 디클로로메탄 중에서 데스-마틴 시약을 사용하여 알코올을 산화시킴으로써 제조할 수 있다.
<화학식 XXXII>
Figure pct00051
화학식 XXXII의 화합물은 염기 (예컨대, 탄산칼륨, 트리에틸아민, 디이소프로필에틸아민)의 존재하에 P18이 수소 또는 적합한 보호기이고, LG12가 이탈기 (예컨대, 클로라이드, 브로마이드, 요오다이드, 메탄술포네이트 또는 파라-톨루엔술포네이트)를 나타내는 하기 화학식 XXXIII의 화합물을 화학식 X의 화합물 또는 그의 적합한 염과 반응시킨 후, 보호기를 제거함으로써 (예컨대, 트리플루오로아세트산, 티오페놀, 티오아세트산) 제조할 수 있다.
<화학식 XXXIII>
Figure pct00052
화학식 XXXII의 화합물은 적합한 환원제 (예컨대, 나트륨 시아노보로하이드라이드, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드, 또는 적합한 탄소상 팔라듐 또는 산화백금 촉매의 존재하의 수소)의 존재하에 P18이 수소 또는 적합한 보호기를 나타내는 하기 화학식 XXXIV의 화합물을 화학식 X의 화합물 또는 그의 적합한 염과 반응시킨 후, 보호기를 제거함으로써 (예컨대, 염산 또는 트리플루오로아세트산 티오페놀, 티오아세트산으로 처리) 제조할 수 있다.
<화학식 XXXIV>
Figure pct00053
화학식 XXXI의 화합물은 염기 (예컨대, 탄산칼륨, 트리에틸아민, 디이소프로필에틸아민)의 존재하에 CH2L5가 L이고, R200이 알킬, 또는 디알킬아민으로 치환된 알킬이고, LG13이 이탈기 (예컨대, 클로라이드, 브로마이드, 요오다이드, 메탄술포네이트 또는 파라-톨루엔술포네이트)를 나타내는 하기 화학식 XXXV의 화합물을 화학식 X의 화합물 또는 그의 적합한 염과 반응시킨 후, 보호기를 제거함으로써 (예컨대, 트리플루오로아세트산, 티오페놀, 티오아세트산) 제조할 수 있다.
<화학식 XXXV>
Figure pct00054
화학식 XXXI의 화합물은 적합한 환원제 (예컨대, 나트륨 시아노보로하이드라이드, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드, 또는 적합한 탄소상 팔라듐 또는 산화백금 촉매의 존재하의 수소)의 존재하에 CH2L5가 L이고, R200이 알킬, 또는 디알킬아민으로 치환된 알킬인 하기 화학식 XXXVI의 화합물을 화학식 X의 화합물 또는 그의 적합한 염과 반응시킨 후, 보호기를 제거함으로써 (예컨대, 염산 또는 트리플루오로아세트산 티오페놀, 티오아세트산으로 처리) 제조할 수 있다.
<화학식 XXXVI>
Figure pct00055
편리한 화학식 IV의 화합물은 m 및 n이 2이고, V가 결합이고, Z가 CH2이고, X가 O이고, W가 CH2CH2이고, Y가 CO이고, R1이 티아졸의 2-위치에서 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, CF3, CH2CF3, CH(CH3)2, CH(CH2CH3)2, CH(CH3)CH2, CH3, CH2CH(CH3)2, C(CH3)3, 시클로프로필, 시클로부틸 및 시클로펜틸로 임의로 치환된 4-티아졸이거나; 또는 R1이 티오펜의 5-위치에서 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, CF3, CH2CF3, CH(CH3)2, CH(CH2CH3)2, CH(CH3)CH2, CH3, CH2CH(CH3)2, C(CH3)3, 시클로프로필, 시클로부틸 및 시클로펜틸로 임의로 치환된 3-티오펜인 것을 포함하며;
하기 XXXVII는 4-티아졸 및 3-티오펜인 R1을 나타낸다.
<화학식 XXXVII>
Figure pct00056
편리한 화학식 X의 화합물 및 적합하게는 질소 보호된 유사체는 m 및 n이 2이고, V가 결합이고, Z가 CH2이고, X가 O이고, W가 CH2CH2이고, Y가 CO이고, R1이 티아졸의 2-위치에서 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, CF3, CH2CF3, CH(CH3)2, CH(CH2CH3)2, CH(CH3)CH2, CH3, CH2CH(CH3)2, C(CH3)3, 시클로프로필, 시클로부틸 및 시클로펜틸로 임의로 치환된 4-티아졸이거나; 또는 R1이 티오펜의 5-위치에서 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, CF3, CH2CF3, CH(CH3)2, CH(CH2CH3)2, CH(CH3)CH2, CH3, CH2CH(CH3)2, C(CH3)3, 시클로프로필, 시클로부틸 및 시클로펜틸로 임의로 치환된 3-티오펜인 것을 포함하며;
4-티아졸 및 3-티오펜인 R1은 화학식 XXXVII에 나타낸 바와 같다.
편리한 화학식 XIV의 화합물은 m 및 n이 2이고, V가 결합이고, Z가 CH2이고, X가 O이고, W가 CH2CH2이고, Y가 CO이고, R1이 티아졸의 2-위치에서 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, CF3, CH2CF3, CH(CH3)2, CH(CH2CH3)2, CH(CH3)CH2, CH3, CH2CH(CH3)2, C(CH3)3, 시클로프로필, 시클로부틸 및 시클로펜틸으로 임의로 치환된 4-티아졸이거나; 또는 R1이 티오펜의 5-위치에서 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, CF3, CH2CF3, CH(CH3)2, CH(CH2CH3)2, CH(CH3)CH2, CH3, CH2CH(CH3)2, C(CH3)3, 시클로프로필, 시클로부틸 및 시클로펜틸로 임의로 치환된 3-티오펜인 것을 포함하며;
4-티아졸 및 3-티오펜인 R1은 화학식 XXXVII에 나타낸 바와 같다.
편리한 화학식 XXXI의 화합물은 m 및 n이 2이고, V가 결합이고, Z가 CH2이고, X가 O이고, W가 CH2CH2이고, Y가 CO이고, R1이 티아졸의 2-위치에서 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, CF3, CH2CF3, CH(CH3)2, CH(CH2CH3)2, CH(CH3)CH2, CH3, CH2CH(CH3)2, C(CH3)3, 시클로프로필, 시클로부틸 및 시클로펜틸으로 임의로 치환된 4-티아졸이거나; 또는 R1이 티오펜의 5-위치에서 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, CF3, CH2CF3, CH(CH3)2, CH(CH2CH3)2, CH(CH3)CH2, CH3, CH2CH(CH3)2, C(CH3)3, 시클로프로필, 시클로부틸 및 시클로펜틸으로 임의로 치환된 3-티오펜인 것을 포함하며;
4-티아졸 및 3-티오펜인 R1은 화학식 XXXVII에 나타낸 바와 같다.
편리한 화학식 XXXII의 화합물은 m 및 n이 2이고, V가 결합이고, Z가 CH2이고, X가 O이고, W가 CH2CH2이고, Y가 CO이고, R1이 티아졸의 2-위치에서 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, CF3, CH2CF3, CH(CH3)2, CH(CH2CH3)2, CH(CH3)CH2, CH3, CH2CH(CH3)2, C(CH3)3, 시클로프로필, 시클로부틸 및 시클로펜틸로 임의로 치환된 4-티아졸이거나; 또는 R1이 티오펜의 5-위치에서 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, CF3, CH2CF3, CH(CH3)2, CH(CH2CH3)2, CH(CH3)CH2, CH3, CH2CH(CH3)2, C(CH3)3, 시클로프로필, 시클로부틸 및 시클로펜틸로 임의로 치환된 3-티오펜인 것을 포함하며;
4-티아졸 및 3-티오펜인 R1은 화학식 XXXVII에 나타낸 바와 같다.
화학식 VI, VII, VIII, XIII, XV, XVII, XVIII, XIX, XX, XXVI 및 XXVIII의 화합물은 상업적으로 입수가능하거나, 문헌에 공지되어 있거나, 또는 상기 기재된 방법 중 하나를 이용하거나 공지되어 있는 기술을 이용하여 당업자에 의해 손쉽게 제조될 수 있다.
다른 중간체 화합물은 신규하며, 본 발명의 독립적 측면을 나타낸다. 특히, 본원에 기재된 수많은 신규한 중간체 화합물은 M3 무스카린성 수용체의 차단을 일으킬 수 있는 화합물이다. 무스카린성 길항제로서의 활성을 갖는 본 발명의 중간체 화합물에는
(9-(2-(4-(히드록시메틸)페녹시)에틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논;
(9-(9-히드록시노닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논;
(9-(2-(4-(2-히드록시에틸)페녹시)에틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논;
(9-(2-(5-(2-히드록시에틸)티오펜-2-일)에틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논;
(9-(4-(2-히드록시에틸)페네틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논;
9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논;
(9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-메틸티오펜-2-일)메타논;
및 이들의 제약상 허용되는 염이 포함된다.
당업자들은 본 발명의 방법에서, 시약 내의 특정 관능기, 예컨대 히드록실 또는 아미노 기가 보호기로 보호될 필요가 있을 수 있다는 것을 인지할 것이다. 따라서, 화학식 I의 화합물의 제조는 적절한 단계에서 하나 이상의 보호기를 첨가하거나 제거하는 것을 포함할 수 있다.
관능기의 보호 및 탈보호는 문헌 ['Protective Groups in Organic Chemistry', edited by J.W.F. McOmie, Plenum Press (1973)] 및 ['Protective Groups in Organic Synthesis', 3rd edition, T.W. Greene and P.G.M. Wuts, Wiley-Interscience (1999)]에 기재되어 있다.
화학식 I의 화합물은 표준 절차를 이용하여 추가의 화학식 I의 화합물로 전환될 수 있다.
화학식 I의 화합물은 약제로서의 활성, 특히 무스카린성 수용체 (M1, M2 및 M3) 길항제, 특히 M3 길항제를 비롯한 이중 아드레날린성 β 수용체 효능제 및 항콜린작용제로서의 활성을 갖는다. 화학식 I의 화합물 및 그의 제약상 허용되는 염으로 치료할 수 있는 질환 및 질병에는 다음이 포함된다:
1. 기도: 기도의 폐쇄성 질환, 예를 들어 천식, 예컨대 기관지 천식, 알레르기성 천식, 내인성 천식, 외인성 천식, 운동-유발된 천식, 약물-유발된 천식 (아스피린 및 NSAID-유도된 천식 포함) 및 먼지-유발된 천식 (간헐성 및 지속성 천식 및 모든 중증도의 천식 포함), 및 기타 원인의 기도 과민반응; 만성 폐쇄성 폐 질환 (COPD); 기관지염, 예컨대 감염성 및 호산구성 기관지염; 기종; 기관지확장증; 낭포성 섬유증; 유육종증; 농부 폐 및 관련 질환; 과민성 폐렴; 폐 섬유증, 예컨대 잠재성 섬유성 폐포염, 특발성 간질성 폐렴, 항-신생물 요법의 합병증으로 나타나는 섬유증, 및 만성 감염, 예컨대 결핵 및 국균증, 및 기타 진균성 감염; 폐 이식의 합병증; 폐 혈관의 혈관염성 및 혈전성 장애, 및 폐 고혈압; 진해 활성, 예컨대 기도의 염증성 및 분비성 질병과 관련된 만성 기침, 및 의인성 기침의 치료; 급성 및 만성 비염, 예컨대 약물성 비염 및 혈관운동성 비염; 다년성 및 계절성 알레르기성 비염, 예컨대 신경성 비염 (건초열); 비강 폴립증; 급성 바이러스 감염, 예컨대 통상적인 감기, 및 호흡기 합포체 바이러스, 인플루엔자, 코로나바이러스 (SARS 포함) 또는 아데노바이러스에 의한 감염; 또는 호산구성 식도염,
2. 골 및 관절: 골관절염/골관절증과 관련되거나 이를 포함하는 관절염 (원발성 및 속발성 모두 포함), 예를 들어 선천성 고관절 이형성증; 자궁경부 및 요추 척추염, 및 요통 및 경부통; 골다공증; 류마티스성 관절염 및 스틸병; 혈청반응음성 척추관절증, 예컨대 강직성 척추염, 건선성 관절염, 반응성 관절염 및 미분화된 척추관절증; 패혈성 관절염 및 기타 감염-관련 관절증, 및 골 장애, 예를 들어 결핵, 예컨대 포츠병 및 폰셋 증후군; 급성 및 만성 결정-유도된 활막염, 예컨대 요산염 통풍, 칼슘 피로포스페이트 침착 질환, 및 칼슘 아파타이트 관련 힘줄, 점액낭 및 활액 염증; 베체트병; 원발성 및 속발성 쇼그렌 증후군; 전신성 경화증 및 제한성 경피증; 전신성 홍반성 루푸스, 혼합 결합 조직 질환, 및 미분화된 결합 조직 질환; 염증성 근증, 예컨대 피부근염 및 다발성 근염; 측두 관절염; 연소성 관절염, 예컨대 특발성 염증성 관절염 (관절 분포 및 관련 증후군에 상관없이 모두 포함), 및 류마티스열 및 그의 전신 합병증; 혈관염, 예컨대 거대 세포 동맥염, 다까야수 동맥염, 처크-스트라우스 증후군, 결절성 다발동맥염, 미세 다발동맥염, 및 바이러스 감염, 과민성 반응, 한성글로불린 및 파라프로테인과 관련된 혈관염; 요통; 가족성 지중해열, 머클-웰즈 증후군, 및 가족성 아일랜드 열, 키쿠치병; 약물-유발된 관절통, 건염 및 근증,
3. 손상 [예를 들어, 운동 손상] 또는 질환에 의한 근골격 장애의 통증 및 결합 조직 재형성: 관절염 (예를 들어, 류마티스성 관절염, 골관절염, 통풍 또는 결정성 관절병증), 기타 관절 질환 (예컨대, 추간판 변성 또는 측두하악 관절 변성), 골 재형성 질환 (예컨대, 골다공증, 파젯병 또는 골괴사), 다발연골염, 경피증, 혼합 결합 조직 장애, 척추관절증 또는 치주 질환 (예컨대, 치주염),
4. 피부: 건선, 아토피성 피부염, 접촉성 피부염 또는 기타 습진성 피부병, 및 지연형 과민성 반응; 식물성피부염 및 광선피부염; 지루성 피부염, 포진상 피부염, 편평태선, 위축성 경화 태선, 괴저성 농피증, 피부 유육종, 원판상 홍반성 루푸스, 천포창, 유천포창, 수포성 표피박리증, 두드러기, 혈관부종, 혈관염, 독성 홍반, 피부 호산구증다증, 원형 탈모증, 남성형 탈모, 스위트 증후군, 웨버-크리스찬 증후군, 다형 홍반; 봉와직염 (감염성 및 비-감염성 둘다); 지방층염; 피부 림프종, 비-흑색종 피부암 및 기타 이형성 병소; 약물-유발된 장애, 예컨대 고정 약진,
5. 눈: 안검염; 결막염, 예컨대 다년성 및 춘계 알레르기성 결막염; 홍채염; 전포도막염 및 후포도막염; 맥락막염; 자가면역; 망막에 영향을 미치는 퇴행성 또는 염증성 장애; 안염, 예컨대 교감성 안염; 유육종증; 감염, 예컨대 바이러스, 진균 및 박테리아 감염,
6. 위장관: 설염, 치은염, 치주염; 식도염, 예컨대 역류성 식도염; 호산구성 위장염, 비만세포증, 크론병, 대장염, 예컨대 궤양성 대장염, 직장염, 항문 소양증; 소아 지방변증, 과민성 대장 증후군, 및 장으로부터 멀리 떨어져 영향을 미칠 수 있는 음식물-관련 알러지 (예를 들어, 편두통, 비염 또는 습진),
7. 복부: 간염, 예컨대 자가면역 간염, 알코올성 간염 및 바이러스성 간염; 간의 섬유증 및 경변증; 담낭염; 췌장염 (급성 및 만성 둘다),
8. 비뇨생식기: 신염, 예컨대 간질성 및 사구체 신염; 신장 증후군; 방광염, 예컨대 급성 및 만성 (간질성) 방광염 및 휴너 궤양; 급성 및 만성 요도염, 전립선염, 부고환염, 난소염 및 난관염; 외음질염; 페이로니병; 발기 부전 (남성 및 여성 모두),
9. 동종이계이식 거부반응: 예를 들어 신장, 심장, 간, 폐, 골수, 피부 또는 각막의 이식 또는 수혈에 따른 급성 및 만성 거부반응; 또는 만성 이식편 대 숙주 질환,
10. CNS: 알쯔하이머병 및 기타 치매 장애, 예컨대 CJD 및 nvCJD; 아밀로이드증; 다발성 경화증 및 기타 탈수초성 증후군; 뇌 아테롬성경화증 및 혈관염; 측두 동맥염; 중증 근무력증; 급성 및 만성 통증 (중추 또는 말초 기원에 상관없이 급성, 간헐성 또는 지속성 통증 모두 포함), 예컨대 내장통, 두통, 편두통, 삼차 신경통, 비전형적 안면통, 관절통 및 골 통증, 암 및 종양 침윤으로 인한 통증, 신경병증 통증 증후군, 예컨대 당뇨병성, 포진후 및 HIV-관련 신경병증; 신경유육종증; 악성, 감염성 또는 자가면역 과정의 중추 신경계 및 말초 신경계 합병증,
11. 기타 자가면역 및 알레르기성 장애, 예컨대 하시모토 갑상선염, 그레이브스병, 애디슨병, 진성 당뇨병, 특발성 혈소판감소 자반병, 호산구성 근막염, 과다-IgE 증후군, 항-인지질 증후군,
12. 염증성 또는 면역학적 요소와 관련된 기타 장애, 예컨대 후천성 면역 결핍 증후군 (AIDS), 나병, 세자리 증후군 및 방종양성 증후군,
13. 심혈관: 관상 및 말초 순환에 영향을 미치는 아테롬성경화증; 심막염; 심근염, 염증성 및 자가면역 심근증, 예컨대 심근성 유육종; 허혈성 재관류 손상; 심내막염, 판막염 및 대동맥염, 예를 들어 감염성 (예컨대 매독성 포함); 혈관염; 정맥염 및 혈전증을 비롯한 근위 정맥 및 말초 정맥의 장애, 예컨대 심정맥 혈전증, 및 정맥류의 합병증,
14. 종양: 전립선, 유방, 폐, 난소, 췌장, 장 및 결장, 위, 피부 및 뇌 종양, 및 골수 (백혈병 포함) 및 림프계 증식 계통에 영향을 미치는 악성 종양, 예컨대 호지킨 림프종 및 비-호지킨 림프종 등을 비롯한 통상적인 암의 치료; 전이성 질환 및 종양 재발, 및 방종양성 증후군의 예방 및 치료 포함, 및
15. 위장관: 소아 지방변증, 직장염, 호산구성 위장염, 비만세포증, 크론병, 궤양성 대장염, 미세 대장염, 미정 대장염, 과민성 대장 장애, 과민성 대장 증후군, 비-염증성 설사, 및 장으로부터 멀리 떨어져 영향을 미치는 음식물-관련 알러지, 예를 들어 편두통, 비염 또는 습진.
따라서, 본 발명은 요법에 사용하기 위한 상기 정의한 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 제공한다.
추가의 측면에서, 본 발명은 요법에 사용하기 위한 의약의 제조에 있어서의 상기 정의한 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염의 용도를 제공한다.
본 명세서의 문맥에서, 용어 "요법"은 또한 달리 구체적으로 나타내지 않는 한 "예방"을 포함한다. 용어 "치료의" 및 "치료적"도 이와 마찬가지로 해석되어야 한다.
예방은 해당 질환 또는 질병의 사전 에피소드를 경험하였거나, 다르게는 해당 질환 또는 질병에 걸릴 위험이 증가한 것으로 여겨지는 사람의 치료에 특히 적절할 것으로 예상된다. 특정 질환 또는 질병이 발병할 위험이 있는 사람은 일반적으로 그 질환 또는 질병의 가족력이 있는 사람 또는 유전자 시험 또는 스크리닝에 의해 그 질환 또는 질병의 발병에 특별한 감수성이 있는 것으로 확인된 사람을 포함한다.
본 발명은 또한 염증성 질환 또는 질병 (가역 폐쇄성 기도 질환 또는 질병 포함)을 치료하거나 그 위험도를 감소시키는 것이 필요한 환자에게 치료 유효량의 상기 정의한 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 투여하는 것을 포함하는, 염증성 질환 또는 질병 (가역 폐쇄성 기도 질환 또는 질병 포함)을 치료하거나 그 위험도를 감소시키는 방법도 추가로 제공한다.
특히, 본 발명의 화합물은 성인 호흡 곤란 증후군 (ARDS), 폐 기종, 기관지염, 기관지확장증, 만성 폐쇄성 폐 질환 (COPD), 천식 및 비염의 치료에 사용될 수 있다.
상기 언급된 치료 용도를 위해, 투여되는 투여량은 물론 사용되는 화합물, 투여 방식, 원하는 치료 및 해당 장애에 따라 달라질 것이다. 예를 들어, 본 발명의 화합물의 1일 투여량은 흡입되는 경우에는 체중 1 kg 당 0.05 ㎍ (㎍/kg) 내지 체중 1 kg 당 100 ㎍ (㎍/kg)의 범위일 수 있다. 별법으로, 화합물이 경구 투여되는 경우, 본 발명의 화합물의 1일 투여량은 체중 1 kg 당 0.01 ㎍ (㎍/kg) 내지 체중 1 kg 당 100 mg (mg/kg)의 범위일 수 있다.
화학식 I의 화합물 및 그의 제약상 허용가능한 염은 그 자체로 사용될 수 있으나, 일반적으로는 화학식 I의 화합물/염 (활성 성분)을 제약상 허용가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 함께 포함하는 제약 조성물의 형태로 투여될 것이다. 적합한 제약 제제의 선택 및 제조에 대한 통상적인 절차는, 예를 들어 문헌 ["Pharmaceuticals - The Science of Dosage Form Designs", M.E. Aulton, Churchill Livingstone, 1988]에 기재되어 있다.
투여 방식에 따라, 제약 조성물은 바람직하게는 0.05 내지 99 중량 ％ (중량 백분율), 더욱 바람직하게는 0.05 내지 80 중량 ％, 보다 더욱 바람직하게는 0.10 내지 70 중량 ％, 훨씬 더욱 바람직하게는 0.10 내지 50 중량 ％의 활성 성분 (모든 중량 백분율은 전체 조성물을 기준으로 함)을 포함할 것이다.
본 발명은 또한 상기 정의한 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 제약상 허용가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 함께 포함하는 제약 조성물을 제공한다.
본 발명은 상기 정의한 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 제약상 허용가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 혼합하는 단계를 포함하는, 본 발명의 제약 조성물의 제조 방법을 추가로 제공한다.
제약 조성물은, 예를 들어 크림, 용액, 현탁액, 히드로플루오로알칸 (HFA) 에어로졸 및 건조 분말 제제, 예를 들어 터부할러 (Turbuhaler, 등록상표)로 공지된 흡입 장치 내의 제제의 형태로 (예를 들어, 피부 또는 폐 및/또는 기도에) 국소 투여할 수도 있고, 또는 예를 들어 정제, 캡슐, 시럽, 분말 또는 과립 형태로의 경구 투여, 또는 용액제 또는 현탁액제 형태로의 비경구 투여, 또는 피하 투여, 또는 좌제 형태로의 직장 투여 또는 경피 투여에 의해 전신 투여할 수도 있다.
본 발명의 화합물의 건조 분말 제제 및 가압 HFA 에어로졸제는 경구 또는 비강 흡입에 의해 투여될 수 있다. 흡입의 경우, 화합물은 미분되는 것이 바람직하다. 미분된 화합물은 바람직하게는 질량 중앙 직경이 10 ㎛ 미만이며, 분산제, 예컨대 C8-C20 지방산 또는 그의 염 (예컨대, 올레산), 담즙산 염, 인지질, 알킬 사카라이드, 과플루오르화되거나 폴리에톡실화된 계면활성제, 또는 다른 제약상 허용가능한 분산제의 보조하에 추진제 혼합물에 현탁시킬 수 있다.
본 발명의 화합물은 또한 건조 분말 흡입기를 통해 투여될 수도 있다. 흡입기는 단일 또는 다중 투여 흡입기일 수 있으며, 호흡 구동 건조 분말 흡입기일 수 있다.
한가지 가능성은 본 발명의 미분된 화합물을 담체 물질, 예를 들어 단당류, 이당류 또는 다당류, 당 알코올 또는 또다른 폴리올과 함께 혼합하는 것이다. 적합한 담체는 당, 예를 들어 락토스, 글루코스, 라피노스, 멜레지토스, 락티톨, 말티톨, 트레할로스, 수크로스, 만니톨 및 전분이다. 별법으로, 미분된 화합물을 또다른 물질로 코팅할 수 있다. 분말 혼합물은 또한 원하는 투여량의 활성 화합물을 함유하는 각각의 경질 젤라틴 캡슐에 분산시킬 수도 있다.
또다른 가능성은 미분된 분말을 흡입 절차 동안 파괴되는 구형 물질로 가공하는 것이다. 이들 구형화된 분말을 투여 단위가 원하는 투여량을 계량한 후에 환자에 의해 흡입되는 다중투여 흡입기, 예를 들어 터부할러 (등록상표)로 공지되어 있는 흡입기의 약물 저장소에 충전할 수 있다. 상기 시스템과 관련하여 활성 성분은 담체 물질과 함께 또는 담체 물질 없이 환자에게 전달된다.
경구 투여의 경우, 본 발명의 화합물은 보조제 또는 담체, 예를 들어 락토스, 사카로스, 소르비톨, 만니톨; 전분, 예를 들어 감자 전분, 옥수수 전분 또는 아밀로펙틴; 셀룰로스 유도체; 결합제, 예를 들어 젤라틴 또는 폴리비닐피롤리돈; 및/또는 윤활제, 예를 들어 마그네슘 스테아레이트, 칼슘 스테아레이트, 폴리에틸렌 글리콜, 왁스, 파라핀 등과 혼합한 후에 정제로 압착시킬 수 있다. 코팅된 정제가 요구되는 경우, 상기한 바와 같이 제조한 코어를, 예를 들어 아라비아 고무, 젤라틴, 탈크 및 이산화티타늄을 함유할 수 있는 농축된 당 용액으로 코팅할 수 있다. 별법으로, 정제는 쉽게 휘발될 수 있는 유기 용매 중에 용해시킨 적합한 중합체로 코팅할 수 있다.
연질 젤라틴 캡슐제를 제조하는 경우, 본 발명의 화합물을 예를 들어 식물성 오일 또는 폴리에틸렌 글리콜과 혼합할 수 있다. 경질 젤라틴 캡슐은 상기 언급한 정제용 부형제를 사용한 화합물의 과립을 함유할 수 있다. 또한, 본 발명의 화합물의 액체 또는 반고체 제제를 경질 젤라틴 캡슐에 충전할 수 있다.
경구 적용을 위한 액체 제제는 시럽 또는 현탁액, 예를 들어 본 발명의 화합물을 함유하는 용액의 형태일 수 있다 (나머지는 당, 및 에탄올, 물, 글리세롤 및 프로필렌 글리콜의 혼합물임). 임의로, 이러한 액체 제제는 착색제, 향미제, 사카린 및/또는 증점제로서의 카르복시메틸셀룰로스 또는 당업자에게 공지되어 있는 다른 부형제를 함유할 수 있다.
특히, 본 발명의 화합물 및 그의 염은 염증성 질환, 예컨대 류마티스성 관절염, 골관절염, 천식, 알레르기성 비염, 만성 폐쇄성 폐 질환 (COPD), 건선 및 염증성 장 질환 (이들로 한정되지는 않음)의 치료에 사용할 수 있고, 본 발명의 화합물을 하기 작용제와 조합할 수 있다: 비-스테로이드성 소염제 (이하, NSAID), 예컨대 비-선택적 시클로-옥시게나제 COX-1/COX-2 억제제 (국소 또는 전신 적용됨) (예컨대, 피록시캄, 디클로페낙, 프로피온산, 예컨대 나프록센, 플루르비프로펜, 페노프로펜, 케토프로펜 및 이부프로펜, 페나메이트, 예컨대 메페남산, 인도메타신, 술린닥, 아자프로파존, 피라졸론, 예컨대 페닐부타존, 살리실레이트, 예컨대 아스피린); 선택적 COX-2 억제제 (예컨대, 멜록시캄, 셀레콕시브, 로페콕시브, 발데콕시브, 루마로콕시브, 파레콕시브 및 에토리콕시브); 시클로-옥시게나제 억제 산화질소 공여자 (CINOD); 글루코코르티코스테로이드 (국소, 경구, 근육내, 정맥내 또는 관절내 경로로 투여됨); 메토트렉세이트; 레플루노미드; 히드록시클로로퀸; d-페니실라민; 아우라노핀 또는 다른 비경구 또는 경구 금 제제; 진통제; 디아세레인; 관절내 요법제, 예컨대 히알루론산 유도체; 및 영양 보충제, 예컨대 글루코사민.
본 발명의 화합물은 또한 상기 질병의 치료에 사용되는 다른 화합물과 함께 투여될 수 있다.
따라서, 본 발명은 또한 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염, 또는 본 발명의 화합물을 포함하는 제약 조성물 또는 제제가 동시에 또는 순차적으로 투여되거나, 또는 상기 열거된 질병들 중 하나 이상을 치료하기 위한 또다른 치료제(들)과의 조합 제제로 투여되는 조합 요법에 관한 것이다.
본 발명은 또한 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염과 사이토킨, 또는 사이토킨 기능의 효능제 또는 길항제 (SOCS 시스템의 조절제와 같이 사이토킨 신호전달 경로에 작용하는 작용제 포함), 예컨대 알파-, 베타- 및 감마-인터페론; 인슐린-유사 성장 인자 제I형 (IGF-1); 인터류킨 (IL), 예컨대 IL1 내지 IL17, 및 인터류킨 길항제 또는 억제제, 예컨대 아나킨라; 종양 괴사 인자 알파 (TNF-α) 억제제, 예컨대 항-TNF 모노클로날 항체 (예컨대, 인플릭시맙, 아달리무맙 및 CDP-870) 및 TNF 수용체 길항제, 예컨대 이뮤노글로불린 분자 (예컨대, 에타너셉트) 및 저분자량 작용제, 예컨대 펜톡시필린의 조합물에 관한 것이다.
추가로, 본 발명은 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염과 B-림프구를 표적화하는 모노클로날 항체 (예컨대, CD20 (리툭시맙), MRA-aIL16R) 또는 T-림프구를 표적화하는 모노클로날 항체 (CTLA4-Ig, HuMax Il-15)의 조합물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염과 케모카인 수용체 기능 조절제, 예컨대 CCR1, CCR2, CCR2A, CCR2B, CCR3, CCR4, CCR5, CCR6, CCR7, CCR8, CCR9, CCR10 및 CCR11 (C-C 부류의 경우); CXCR1, CXCR2, CXCR3, CXCR4 및 CXCR5 (C-X-C 부류의 경우) 및 CX3CR1 (C-X3-C 부류의 경우)의 길항제의 조합물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염과 매트릭스 메탈로프로테아제 (MMP)의 억제제, 즉 스트로멜리신, 콜라게나제 및 겔라티나제, 뿐만 아니라 아그레카나제; 특히 콜라게나제-1 (MMP-1), 콜라게나제-2 (MMP-8), 콜라게나제-3 (MMP-13), 스트로멜리신-1 (MMP-3), 스트로멜리신-2 (MMP-10) 및 스트로멜리신-3 (MMP-11), 및 MMP-9 및 MMP-12의 억제제 (독시사이클린과 같은 작용제 포함)의 조합물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염과 류코트리엔 생합성 억제제, 5-리폭시게나제 (5-LO) 억제제 또는 5-리폭시게나제 활성화 단백질 (FLAP) 길항제, 예컨대 질레우톤; ABT-761; 펜레우톤; 테폭살린; 애보트 (Abbott)-79175; 애보트-85761; N-(5-치환된)-티오펜-2-알킬술폰아미드; 2,6-디-tert-부틸페놀히드라존; 메톡시테트라히드로피란, 예컨대 제네카 (Zeneca) ZD-2138; 화합물 SB-210661; 피리디닐-치환된 2-시아노나프탈렌 화합물, 예컨대 L-739,010; 2-시아노퀴놀린 화합물, 예컨대 L-746,530; 또는 인돌 또는 퀴놀린 화합물, 예컨대 MK-591, MK-886 및 BAY x 1005의 조합물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염과 페노티아진-3-1s, 예컨대 L-651,392; 아미디노 화합물, 예컨대 CGS-25019c; 벤즈옥살아민, 예컨대 온타졸라스트; 벤젠카르복스이미다미드, 예컨대 BIIL 284/260; 및 자피르루카스트, 아브루카스트, 몬테루카스트, 프란루카스트, 베르루카스트 (MK-679), RG-12525, Ro-245913, 이라루카스트 (CGP 45715A) 및 BAY x 7195와 같은 화합물로 이루어진 군으로부터 선택된 류코트리엔 (LT) B4, LTC4, LTD4 및 LTE4에 대한 수용체 길항제의 조합물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염과 포스포디에스테라제 (PDE) 억제제, 예를 들어 메틸크산타닌, 예컨대 테오필린 및 아미노필린; 선택적 PDE 동위효소 억제제, 예컨대 PDE4 억제제 (이소형 PDE4D의 억제제) 또는 PDE5 억제제의 조합물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염과 히스타민 제1형 수용체 길항제, 예를 들어 세티리진, 로라타딘, 데슬로라타딘, 펙소페나딘, 아크리바스틴, 테르페나딘, 아스테미졸, 아젤라스틴, 레보카바스틴, 클로르페니라민, 프로메타진, 시클리진 또는 미졸라스틴 (경구, 국소 또는 비경구 적용됨)의 조합물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염과 양성자 펌프 억제제 (예컨대 오메프라졸) 또는 위보호성 히스타민 제2형 수용체 길항제의 조합물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염과 히스타민 제4형 수용체의 길항제의 조합물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염과 알파-1/알파-2 아드레날린 수용체 효능제 혈관수축 교감신경흥분제, 예컨대 프로필헥세드린, 페닐에프린, 페닐프로파놀아민, 에페드린, 슈도에페드린, 나파졸린 히드로클로라이드, 옥시메타졸린 히드로클로라이드, 테트라히드로졸린 히드로클로라이드, 크실로메타졸린 히드로클로라이드, 트라마졸린 히드로클로라이드 또는 에틸노르에피네프린 히드로클로라이드의 조합물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염과 크로몬, 예컨대 나트륨 크로모글리케이트 또는 네도크로밀 나트륨의 조합물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염과 글루코코르티코이드, 예컨대 플루니솔리드, 트리암시놀론 아세토니드, 베클로메타손 디프로피오네이트, 부데소니드, 플루티카손 프로피오네이트, 시클레소니드 또는 모메타손 푸로에이트의 조합물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염과 핵 호르몬 수용체, 예컨대 PPAR을 조절하는 작용제의 조합물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염과 이뮤노글로불린 (Ig) 또는 Ig 제제, 또는 Ig 기능을 조절하는 길항제 또는 항체, 예컨대 항-IgE (예를 들어, 오말리주맙)의 조합물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염과 또다른 전신 또는 국소-적용 소염제, 예컨대 탈리도미드 또는 그의 유도체, 레티노이드, 디트라놀 또는 칼시포트리올의 조합물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염과 아미노살리실레이트 및 술파피리딘, 예컨대 술파살라진, 메살라진, 발살라지드 및 올살라진의 조합물; 및 면역조절제, 예컨대 티오퓨린, 및 코르티코스테로이드, 예컨대 부데소니드의 조합물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염과 항박테리아제, 예컨대 페니실린 유도체, 테트라사이클린, 마크롤리드, 베타-락탐, 플루오로퀴놀론, 메트로니다졸, 흡입용 아미노글리코시드; 항바이러스제, 예컨대 아시클로비르, 팜시클로비르, 발라시클로비르, 간시클로비르, 시도포비르, 아만타딘, 리만타딘, 리바비린, 자나마비르 및 오셀타마비르; 프로테아제 억제제, 예컨대 인디나비르, 넬피나비르, 리토나비르 및 사퀴나비르; 뉴클레오시드 역전사효소 억제제, 예컨대 디다노신, 라미부딘, 스타부딘, 잘시타빈 또는 지도부딘; 또는 비-뉴클레오시드 역전사효소 억제제, 예컨대 네비라핀 또는 에파비렌즈의 조합물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염과 심혈관 작용제, 예컨대 칼슘 채널 차단제, 베타-아드레날린 수용체 차단제, 안지오텐신-전환 효소 (ACE) 억제제, 안지오텐신-2 수용체 길항제; 지질 저하제, 예컨대 스타틴 또는 피브레이트; 혈액 세포 형태 조절제, 예컨대 펜톡시필린; 혈전용해제 또는 항응고제, 예컨대 혈소판 응집 억제제의 조합물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염과 CNS 작용제, 예를 들어 항우울제 (예컨대, 세르트랄린), 항-파킨슨병 약물 (예컨대, 데프레닐, L-도파, 로피니롤, 프라미펙솔, MAOB 억제제, 예컨대 셀레진 및 라사길린, comP 억제제, 예컨대 타스마르, A-2 억제제, 도파민 재흡수 억제제, NMDA 길항제, 니코틴 효능제, 도파민 효능제 또는 뉴런성 산화질소 신타제의 억제제), 또는 항-알쯔하이머 약물, 예컨대 도네페질, 리바스티그민, 타크린, COX-2 억제제, 프로펜토필린 또는 메트리포네이트의 조합물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염과 중추-작용 또는 말초-작용 진통제 (예를 들어, 아편양제제 또는 그의 유도체), 카르밤아제핀, 페니토인, 나트륨 발프로에이트, 아미트립틸린 또는 다른 항-우울제, 파라세타몰 또는 비-스테로이드성 소염제와 같은 급성 또는 만성 통증 치료용 작용제의 조합물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염과 리그노카인 또는 그의 유도체와 같은 비경구 또는 국소-적용되는 (흡입 포함) 국부 마취제의 조합물에 관한 것이다.
본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염은 랄록시펜과 같은 호르몬 작용제 또는 알렌드로네이트와 같은 비포스포네이트를 비롯한 항-골다공증 작용제와 조합하여 사용될 수도 있다.
본 발명은 또한 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염과 (i) 트립타제 억제제, (ii) 혈소판 활성화 인자 (PAF) 길항제, (iii) 인터루킨 전환 효소 (ICE) 억제제, (iv) IMPDH 억제제, (v) 부착 분자 억제제, 예를 들어 VLA-4 길항제, (vi) 카텝신, (vii) 키나제 억제제, 예를 들어 티로신 키나제 억제제 (예컨대, Btk, Itk, Jak3 또는 MAP, 예를 들어 게피티닙 (Gefitinib) 또는 이마티닙 (Imatinib) 메실레이트), 세린/트레오닌 키나제의 억제제 (예를 들어 MAP 키나제의 억제제, 예컨대 p38, JNK, 단백질 키나제 A, B 또는 C, 또는 IKK의 억제제), 또는 세포 주기 조절과 관련된 키나제 (예컨대, 사일린 의존성 키나제)의 억제제, (viii) 글루코스-6 포스페이트 데히드로게나제 억제제, (ix) 키닌-B.sub1.- 또는 B.sub2.-수용체 길항제, (x) 항-통풍제, 예를 들어 콜히친, (xi) 크산틴 옥시다제 억제제, 예를 들어 알로퓨리놀, (xii) 요산뇨유인제, 예를 들어 프로베네시드, 술핀피라존 또는 벤즈브로마론, (xiii) 성장 호르몬 분비촉진제, (xiv) 형질전환 성장 인자 (TGFβ), (xv) 혈소판-유래의 성장 인자 (PDGF), (xvi) 섬유아세포 성장 인자, 예를 들어 염기성 섬유아세포 성장 인자 (bFGF), (xvii) 과립구 대식세포 콜로니 자극 인자 (GM-CSF), (xviii) 캡사이신 크림, (xix) 타치키닌 NK.sub1. 또는 NK.sub3. 수용체 길항제, 예를 들어 NKP-608C, SB-233412 (탈네탄트) 또는 D-4418, (xx) 엘라스타제 억제제, 예를 들어 UT-77 또는 ZD-0892, (xxi) TNF-알파 전환 효소 억제제 (TACE), (xxii) 유도된 산화질소 신타제 (iNOS) 억제제, (xxiii) TH2 세포에서 발현되는 화학주성인자 수용체-상동성 분자 (예컨대, CRTH2 길항제), (xxiv) P38의 억제제, (xxv) Toll-유사 수용체 (TLR)의 기능 조절제, (xxvi) P2X7과 같은 퓨린 작용성 수용체의 활성 조절제, (xxvii) 전사 인자 활성화 억제제, 예를 들어 NFkB, API 또는 STATS, 또는 (xxviii) 글루코코르티코이드 수용체 (GR-수용체) 효능제의 조합물에 관한 것이다.
추가의 측면에서, 본 발명은 화학식 I의 화합물 및 하기를 포함하는 목록으로부터 선택된 하나 이상의 작용제의 (예컨대, COPD, 천식 또는 알레르기성 비염의 치료를 위한) 조합물을 제공한다:
● 비-스테로이드성 글루코코르티코이드 수용체 (GR-수용체) 효능제;
● 이소형 PDE4D의 억제제를 비롯한 PDE4 억제제;
● 케모카인 수용체 기능의 조절제 (예컨대, CCR1 수용체 길항제);
● 스테로이드 (예컨대, 부데소니드); 및
● p38 키나제 기능의 억제제.
본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염은 또한 기존의 암 치료용 치료제와 함께 사용될 수 있으며, 예를 들어 적합한 작용제에는 하기가 포함된다.
(i) 의학적 종양학에 사용되는 것과 같은 항증식/항신생물성 약물 또는 이들의 조합물, 예컨대 알킬화제 (예를 들어, 시스-플라틴, 카르보플라틴, 시클로포스파미드, 질소 머스타드, 멜팔란, 클로르암부실, 부술판 또는 니트로소우레아); 항대사물질 (예를 들어, 안티폴레이트, 예컨대 5-플루오로우라실 또는 테가푸르와 같은 플루오로피리미딘, 랄티트렉세드, 메토트렉세이트, 시토신 아라비노시드, 히드록시우레아, 겜시타빈 또는 파클리탁셀); 항종양 항생제 (예를 들어, 안트라사이클린, 예컨대 아드리아마이신, 블레오마이신, 독소루비신, 다우노마이신, 에피루비신, 이다루비신, 미토마이신-C, 닥티노마이신 또는 미트라마이신); 항-유사분열 작용제 (예를 들어, 빈카 알칼로이드, 예컨대 빈크리스틴, 빈블라스틴, 빈데신 또는 비노렐빈, 또는 탁소이드, 예컨대 탁솔 또는 탁소테레); 또는 토포이소머라제 억제제 (예를 들어, 에피포도필로톡신, 예컨대 에토포시드, 테니포시드, 암사크린, 토포테칸 또는 캄프토테신),
(ii) 세포 증식 억제제, 예컨대 항에스트로겐 (예를 들어, 타목시펜, 토레미펜, 랄록시펜, 드롤록시펜 또는 요오드옥시펜), 에스트로겐 수용체 하향 조절제 (예를 들어, 풀베스트란트), 항안드로겐 (예를 들어, 비칼루트아미드, 플루트아미드, 닐루트아미드 또는 시프로테론 아세테이트), LHRH 길항제 또는 LHRH 효능제 (예를 들어, 고세렐린, 류프로렐린 또는 부세릴린), 프로게스토겐 (예를 들어, 메게스트롤 아세테이트), 아로마타제 억제제 (예를 들어, 아나스트로졸, 레트로졸, 보라졸 또는 엑세메스탄) 또는 5α-리덕타제의 억제제, 예컨대 피나스테리드,
(iii) 암 세포 침윤을 억제하는 작용제 (예를 들어, 마리마스타트와 같은 메탈로프로테이나제 억제제 또는 유로키나제 플라스미노겐 활성화인자 수용체 기능의 억제제),
(iv) 성장 인자 기능 억제제, 예를 들어 성장 인자 항체 (예를 들어, 항-erbb2 항체 트라스투주맙, 또는 항-erbb1 항체 세툭시맙 [C225]), 파르네실 트랜스퍼라제 억제제, 티로신 키나제 억제제 또는 세린/트레오닌 키나제 억제제, 상피 성장 인자 부류의 억제제 (예를 들어, EGFR류 티로신 키나제 억제제, 예컨대 N-(3-클로로-4-플루오로페닐)-7-메톡시-6-(3-모르폴리노프로폭시)퀴나졸린-4-아민 (게피티닙, AZD1839), N-(3-에티닐페닐)-6,7-비스(2-메톡시에톡시)퀴나졸린-4-아민 (에를로티닙, OSI-774) 또는 6-아크릴아미도-N-(3-클로로-4-플루오로페닐)-7-(3-모르폴리노프로폭시)퀴나졸린-4-아민 (CI 1033)), 혈소판-유래 성장 인자 부류의 억제제 또는 간세포 성장 인자 부류의 억제제,
(v) 항-혈관신생제, 예컨대 혈관 내피 성장 인자의 효과를 억제하는 것 (예를 들어, 항-혈관 내피 세포 성장 인자 항체 베바시주맙, WO 97/22596, WO 97/30035, WO 97/32856 또는 WO 98/13354에 개시된 화합물), 또는 또다른 메카니즘으로 작용하는 화합물 (예를 들어, 리노미드, 인테그린 αvβ3 기능 억제제 또는 안지오스타틴),
(vi) 혈관 손상 작용제, 예컨대 콤브레타스타틴 A4, 또는 WO 99/02166, 제WO 00/40529, WO 00/41669, WO 01/92224, WO 02/04434 또는 WO 02/08213에 개시된 화합물,
(vii) 안티센스 요법에 사용되는 작용제, 예를 들어 상기 열거된 표적 중 어느 하나에 대해 지시된 것, 예컨대 ISIS 2503, 항-ras 안티센스,
(viii) 유전자 요법 접근법에 사용되는 작용제, 예를 들어 비정상적인 유전자, 예컨대 비정상적인 p53 또는 비정상적인 BRCA1 또는 BRCA2를 대체하기 위한 접근법, GDEPT (유전자-지시된 효소 전구약물 요법) 접근법, 예컨대 시토신 데아미나제, 티미딘 키나제 또는 박테리아 니트로리덕타제 효소를 사용하는 접근법, 및 화학요법 또는 방사선요법에 대한 환자 허용성을 증가시키는 접근법, 예컨대 다중-약물 내성 유전자 요법에 사용되는 작용제, 또는
(ix) 면역치료 접근법에 사용되는 작용제, 예를 들어 환자 종양 세포의 면역원성을 증가시키는 생체외 및 생체내 접근법, 예컨대 인터루킨 2, 인터루킨 4 또는 과립구-대식세포 콜로니 자극 인자와 같은 사이토킨으로의 형질감염, T-세포 무반응을 감소시키기 위한 접근법, 사이토킨-형질감염된 수상돌기 세포와 같은 형질감염된 면역 세포를 사용하는 접근법, 사이토킨-형질감염된 종양 세포주를 사용하는 접근법 및 항-이디오타입 (idiotype) 항체를 사용하는 접근법에 사용되는 작용제.
상기 화학식 I의 화합물은 그의 제약상 허용되는 염, 예를 들어 산 부가염, 예컨대 히드로클로라이드 (예컨대, 디히드로클로라이드), 히드로브로마이드 (예컨대, 디히드로브로마이드), 트리플루오로아세테이트 (예컨대, 디-트리플루오로아세테이트), 술페이트, 포스페이트, 아세테이트, 푸마레이트, 말레에이트, 타르트레이트, 락테이트, 시트레이트, 피루베이트, 숙시네이트, 옥살레이트, 메탄술포네이트 또는 p-톨루엔술포네이트로 전환될 수 있다.
이제 하기 실시예를 참조로 (그에 제한하지는 않음) 본 발명을 설명할 것이며, 여기서 하기 일반적 방법을 이용하였다.
일반적 방법
1H NMR 스펙트럼은 배리언 이노바 (Varian Inova) 400 MHz 또는 배리언 머큐리-VX (Varian Mercury-VX) 300 MHz 기기 상에 기록되었다. 클로로포름-d (δH 7.27 ppm), 디메틸술폭사이드-d6 (δH 2.50 ppm), 아세토니트릴-d3 (δH 1.95 ppm) 또는 메탄올-d4 (δH 3.31 ppm)의 중앙 피크를 내부 참조로 사용하였다. 실리카겔 [피셔 사이언티픽 (Fisher Scientific) 실리카 60A, 입도 35 내지 70 ㎛, 다비실 (Davisil, 등록상표) 또는 0.040 내지 0.63 mm, 예비-패킹된 바이오티지 (Biotage) KP-Sil 카트리지]을 사용하여 컬럼 크로마토그래피를 수행하였다. 달리 언급하지 않는 한, 출발 물질은 상업적으로 입수 가능하였다. 모든 용매 및 상업적 시약은 실험 등급의 것이었고, 입수한 그대로 사용하였다.
LC/MS 분석을 위해 하기 방법을 이용하였다:
인스트루먼트 애질런트 (Instrument Agilent) 1100; 컬럼 워터스 시메트리 (Waters Symmetry) C18, 2.1 x 50 mm; 질량 APCI 또는 멀티모드 (APCl + ESI; 유속 1 ml/분; 파장 220 nm; 용매 A: 물 + 0.1 ％ TFA; 용매 B: 아세토니트릴 + 0.1 ％ TFA; 구배: 8분에 걸쳐 5→95 ％/B.
정제용 역상 HPLC에 의한 정제는 0.2 ％ TFA 수용액 또는 0.1 ％ 수성 포름산 중 아세토니트릴 또는 메탄올의 구배로 선파이어 (SunFire, 상표명) 정제용 C8 OBD (상표명) 5 ㎛ 30 x 100 mm 컬럼 (워터스 코포레이션) (유속: 35 ml/분)을 이용하거나, 또는 0.1 ％ 암모늄 아세테이트 수용액 또는 0.1 ％ 수성 포름산 중 아세토니트릴 또는 메탄올의 구배로 엑스브릿지 (Xbridge, 등록상표) 50 x 19 mm 컬럼 (워터스 코포레이션) (유속: 18.5 ml/분)을 이용하여 수행하였다.
실시예 101 내지 115, 및 279 내지 285를 위한 일반적 방법
LC/MS 분석을 위해 하기 방법을 이용하였다:
최종 화합물은 MS3을 이용하여 분석하였고, 중간체는 MS4를 이용하여 분석하였다.
MS3: 휴렛 패커드 (Hewlett Packard) HP1100 LC 시스템에 연결된 인스트루먼트 워터스 마이크로매스 (Instrument Waters Micromass) ZQ 4중극자 (quadrupole) 질량 분석계. 샘플 주입은 길슨 (Gilson) 215 오토샘플러로 수행하였다. 분광계는 양성 및 음성 이온 모드로 작동하는 전자분무 공급원을 갖는다. 세덱스 (Sedex) 55 증기화 광산란 검출기를 이용하여 추가 검출을 달성하였다. 유속 1 ml/분; 파장 254 nm; 용매 A: 물 + 0.1 ％ 포름산; 용매 B: 아세토니트릴 + 0.1 ％ 포름산 ; 구배: 20분에 걸쳐 5→95 ％B.
MS4: UV 다이오드 어레이 검출기 및 오토샘플러가 장착된, 휴렛 패커드 1050 LC 시스템에 연결된 인스트루먼트 핀니간 (Instrument Finnigan) AQA 단일 4중극자 질량 분석계. 분광계는 양성 이온 모드로 작동하는 전자분무 공급원을 갖는다. 세덱스 65 증기화 광산란 검출기를 이용하여 추가 검출을 달성하였다. 유속 1 ml/분; 파장 254 nm; 용매 A: 물 + 0.1 ％ 포름산; 용매 B: 아세토니트릴 + 0.1 ％ 포름산; 구배: 5분에 걸쳐 5→95 ％ B.
NMR 스펙트럼은 하기 3개의 기기 중 하나에서 기록하였다:
1H에 대하여 400 MHz에서 작동하고, 1H, 13C, 31P의 검출을 위해 5 mm 역검출 삼중 공명 프로브를 구비하며, 9.4 테슬라 옥스포드 (Tesla Oxford) 기기 초전도 자석에 의해 제공되는 자기장 및 호스트로서의 썬 마이크로시스템즈 썬블래이드 (Sun Microsystems SunBlade) 1000 워크스테이션을 이용하는 배리언 유나이티 이노바 (Varian Unity Inova) 400 분광계;
1H에 대해 400 MHz에서 작동하고, 1H, 13C, 15N의 검출을 위해 5 mm 역검출 삼중 공명 TXI 프로브를 구비하며, 9.4 테슬라 옥스포드 기기 초전도 자석에 의해 제공되는 자기장 및 호스트 컴퓨터로서의 윈도우 XP (Windows XP)하에 작동되며 WIN-NMR 소프트웨어를 구비한 HP 워크스테이션 wx5000을 이용하는 브루커 아반스 (Bruker Avance) DRX 400 분광계;
1H에 대해 300 MHz에서 작동하고, 1H 및 13C의 검출을 위해 표준 5 mm 이중 주파수 프로브를 구비하며, 7.05 테슬라 브루커 초전도 자석에 의해 제공되는 자기장 및 호스트 컴퓨터로서의 윈도우 2000하에 작동되며 브루커 XWIN-NMR 소프트웨어를 구비한 HP 워크스테이션을 이용하는 브루커 아반스 DPX 300 분광계.
실리카겔을 사용하여 컬럼 크로마토그래피를 수행하였다: 플루카 (Fluka) 실리카겔 60, 입도 35 내지 70 ㎛, 예비-패킹된 텔레다인 이스코 인코포레이티드 (Teledyne Isco, Inc.) 레디세프 (RediSep, 등록상표) Rf 카트리지 또는 예비-패킹된 이솔루트 플래쉬 Si II SPE 카트리지. 모든 용매 및 상업적 시약은 실험 등급의 것이었고, 입수한 그대로 사용하였다.
고정상으로서 18 ml/분의 유속으로 페노메넥스 제미니 (Phenomenex Gemini, 등록상표) C18 컬럼 (250 x 21.2 mm, 5 ㎛)를 이용하여 0.1 ％ TFA 수용액 또는 0.1 ％ 수성 포름산 중 아세토니트릴의 구배로 정제용 역상 HPLC에 의한 정제를 수행하였다.
실시예에 사용된 약어 또는 용어는 다음 의미를 갖는다:
SCX: 강한 양이온 교환
- 술폰산 흡수제를 사용하여 실리카 기재의 고체상 추출
HPLC: 고성능 액체 크로마토그래피
DCM: 디클로로메탄
DMF: N,N-디메틸포름아미드
NMP: 1-메틸피롤리딘-2-온
THF: 테트라히드로푸란
TFA: 트리플루오로아세트산
DMSO: 디메틸술폭사이드
aq: 수성
h: 시간
min: 분
g: 그람
mL: 밀리리터
RT: 실온
MP-TsOH65: 바이오티지에 의해 제공되는 거대다공성 중합체 결합된
이온 교환 수지
HATU: O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄
헥사플루오로포스페이트
NBS: N-브로모숙신이미드
T3P: 프로판 포스폰산 무수물
TBAF: 테트라부틸암모늄 플루오라이드
CDI: 1,1'-카르보닐디이미다졸
MTBE: 메틸 tert-부틸 에테르
MCPBA: 메타-클로로퍼벤조산
배리언 본드 일루트 NH2 카트리지: 강한 음이온 교환
- NH2 흡수제를 사용하여 실리카 기재의 고체 상 추출.
tert-부틸 1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 히드로클로라이드 염은 우시 파마 테크 (WuXi Pharma Tech)로부터 구입하였다.
7-[(1R)-2-아미노-1-히드록시-에틸]-4-히드록시-3H-벤조티아졸-2-온 아세테이트 또는 HCl 염 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d)은 86 내지 94 ％ ee였다.
(R)-5-(2-아미노-1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (WO2004106333)은 92 내지 96 ％ ee였다.
표제/부제 화합물에 대한 명명 패키지:
캠브릿지소프트 코포레이션 (CambridgeSoft Corporation)으로부터의 스트럭트=네임 (Struct=Name) 9.0.7
실시예 1
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(4-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00057
a) 7-(2-클로로-아세틸)-4-히드록시-3H-벤조티아졸-2-온
Figure pct00058
에탄올 (1500 mL)을 오버헤드 교반기가 장착된 플라스크 내의 7-아세틸-4-히드록시-3H-벤조티아졸-2-온 (150 g) (WO2004/016578)과 벤질트리메틸암모늄 디클로로요오데이트 (374 g)의 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 78 ℃로 1시간 동안 가열하고, 밤새 방치시켜 실온으로 냉각시켰다. 혼합물을 물 (2 ℓ)에 붓고, 침전물을 여과에 의해 수집하고, 물로 세척하고, 여과하여 거의 건조상태로 만들고, 에틸 아세테이트 중에 현탁시켰다. 혼합물을 환류 온도로 가열하고, 교반하면서 실온으로 냉각시켰다. 고체를 여과에 의해 수집하고, 차가운 에틸 아세테이트 (200 mL)로 세척한 후, 디에틸 에테르 (1 ℓ) 중에 재현탁시켰다. 고체를 수집하고, 다시 여과하고, 에테르 (200 mL)로 세척하고, 진공하에 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 164 g.
Figure pct00059
b) 7-(2-아지도-아세틸)-4-히드록시-3H-벤조티아졸-2-온
Figure pct00060
7-(2-클로로-아세틸)-4-히드록시-3H-벤조티아졸-2-온 (실시예 1, 단계 a) (331 g)을 N,N-디메틸포름아미드 (1800 mL) 중에 용해시키고, 얼음 배스에서 10분 동안 교반하였다. 나트륨 아지드 (88.3 g)를 15분에 걸쳐 조금씩 첨가하였다. 반응물을 72시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 3개의 동일한 양으로 나누고, 각각 얼음 및 물 (2.5 ℓ)로 개별적으로 켄칭하였다. 고체를 여과하고, 물 (1 ℓ)로 세척하고, 아세토니트릴 (1.5 ℓ) 중에 재현탁시켰다. 용매를 증발시키고, 추가량의 아세토니트릴 (1 ℓ)을 첨가하고, 용매를 다시 증발시켜, 생성물을 건조시켰다. 디에틸 에테르 (1.5 ℓ)를 첨가하고, 혼합물을 교반하여, 균일 현탁액을 수득하였다. 고체를 수집하고, 35 ℃ 진공하에 24시간 동안 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 285 g.
Figure pct00061
c) 7-[(1R)-2-아지도-1-히드록시-에틸]-4-히드록시-3H-벤조티아졸-2-온
Figure pct00062
20 내지 25 ℃의 온도를 유지하면서 (1R,2S)-(+)-시스-1-아미노-2-인다놀 (149 g)을 보란-테트라히드로푸란 복합체 (테트라히드로푸란 중 1 M, 2997 mL)에 25분에 걸쳐 조금씩 첨가하였다. 혼합물을 20 ℃에서 추가로 30분 동안 교반하고, 0 ℃로 냉각시키고, 0 내지 5 ℃의 온도를 유지하면서 7-(2-아지도-아세틸)-4-히드록시-3H-벤조티아졸-2-온 (실시예 1, 단계 b) (250 g)을 조금씩 첨가하였다. 반응 혼합물을 0 ℃에서 추가로 1시간 동안 교반한 후, 메탄올 (350 g, 442 mL)을 적가하여 켄칭하였다 (거품발생 주의!). 발열하여 온도가 17 ℃로 올라갔다. 반응물을 갈색 포말로 증발시키고, 에틸 아세테이트 (1.2 ℓ) 중에 재현탁시켰다. 수성 염산 (물 1.2 ℓ 중 진한 HCl 87 mL)을 첨가하고, 혼합물을 30분 동안 격렬하게 교반하였다. 수성층을 분리하고, 신선한 에틸 아세테이트 (600 mL씩 2회)로 세척하였다. 합한 유기 용액을 물 (1.2 ℓ)로 세척하였다. 수성층을 셀라이트를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트 (600 mL)로 추출하였다. 에틸 아세테이트 용액을 합하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 생성된 고체를 5 ％ 에탄올/디클로로메탄 (2 ℓ) 중에 현탁시키고, 3시간 동안 교반하고, 여과하고, 진공하에 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 213 g.
Figure pct00063
d) 7-[(1R)-2-아미노-1-히드록시-에틸]-4-히드록시-3H-벤조티아졸-2-온, 아세테이트 염
Figure pct00064
탄소상 5 ％ 팔라듐 유형 87L 페이스트 (22 g)를 에탄올 (3 ℓ) 중에 용해된 7-[(1R)-2-아지도-1-히드록시-에틸]-4-히드록시-3H-벤조티아졸-2-온 (실시예 1, 단계 c) (225 g)에 첨가하였다. 반응물을 수소하에 (3 bar) 48시간 동안 교반하였다. 추가로 10 g의 촉매를 첨가하고, 추가로 5일 동안 수소화를 계속하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 고체 (생성물 + 촉매)를 에탄올 (2.5 ℓ) 중에 현탁시킨 후, 아세트산 (150 mL)을 첨가하고, 전체를 밤새 교반하였다. 혼합물을 다시 여과하여, 탄소상 팔라듐 촉매를 제거하였다. 용액을 증발 건조시키고, 톨루엔 (1 ℓ씩 2회)과 함께 공비시켰다. 고체를 테트라히드로푸란 (1 ℓ) 중에서 4시간 동안 슬러리화시키고, 여과하고, 40 ℃에서 진공하에 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 57 g.
Figure pct00065
e) tert-부틸 4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트
Figure pct00066
1-프로판포스폰산 시클릭 무수물 (THF 중 1.57 M 용액, 4.18 mL)을 DMF (70 mL) 중 tert-부틸 1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 히드로클로라이드 (우시 파마테크) (1.92 g), 2-메틸티아졸-4-카르복실산 (0.94 g) 및 트리에틸아민 (5.48 mL)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (500 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트 (200 mL씩 3회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 물 (100 mL씩 2회) 및 염수 (100 mL)로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였다. 수득량 2.30 g.
Figure pct00067
f) (2-메틸티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 히드로클로라이드
Figure pct00068
0 ℃에서, 트리플루오로아세트산 (10 mL)을 DCM (50 mL) 중 tert-부틸 4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 (실시예 1, 단계 e) (2.3 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 16시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시켰다. 톨루엔 (50 mL)을 첨가하고, 혼합물을 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (20 mL) 중에 용해시키고, 메탄올로 예비-습윤된 SCX 카트리지에 적용하였다. 카트리지를 메탄올 (250 mL)로 세척하고, 메탄올 중 3 M 암모니아 용액 (150 mL)으로 용출시켰다. 용리액을 진공하에 증발시키고, 잔류물을 MeCN (100 mL) 중에 용해시켰다. HCl (디에틸 에테르 중 1 M 용액, 10 mL)을 첨가하고, 용매를 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. 수득량 1.90 g.
Figure pct00069
g) [4-(2,2-디에톡시-에톡시)-페닐]-메탄올
Figure pct00070
탄산세슘 (39.4 g)을 DMF (200 mL) 중 4-히드록시메틸-페놀 (10 g) 및 2-브로모-1,1-디에톡시에탄 (12.73 mL)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 90 ℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 물 (500 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트 (250 mL씩 3회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 물 (250 mL) 및 염수 (250 mL)로 세척한 후, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 이소헥산 → 디에틸 에테르 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 9.5 g.
Figure pct00071
h) 2-(4-(히드록시메틸)페녹시)아세트알데히드
Figure pct00072
2 M HCl (4 mL)을 아세톤 (20 mL) 중 (4-(2,2-디에톡시에톡시)페닐)메탄올 (실시예 1, 단계 g) (0.9 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 진공하에 농축시키고, 생성된 수용액을 에틸 아세테이트 (20 mL씩 3회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 검으로서 수득하였고, 이를 다음 단계에 직접 사용하였다. 수득량 0.50 g.
i) (9-(2-(4-(히드록시메틸)페녹시)에틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논
Figure pct00073
(2-메틸티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 히드로클로라이드 (실시예 1, 단계 f) (0.38 g)를 NMP (10 mL) 및 아세트산 (0.06 mL) 중 2-(4-(히드록시메틸)페녹시)아세트알데히드 (실시예 1, 단계 h) (0.17 g)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 30분 동안 교반한 후, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.32 g)를 첨가하고, 반응물을 실온으로 가온하고, 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 메탄올 (30 mL)로 희석하고, 메탄올로 예비-습윤된 SCX 카트리지에 적용하였다. 카트리지를 메탄올 (250 mL)로 세척하고, 메탄올 중 3 M 암모니아 용액 (150 mL)으로 용출시켰다. 용리액을 진공하에 증발시키고, 95:5의 에틸 아세테이트:트리에틸아민으로 용출시키는 컬럼 크로마토그래피로 잔류물을 정제하여, 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 0.32 g.
Figure pct00074
j) 4-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤즈알데히드
Figure pct00075
이산화망간 (0.65 g)을 DCM (20 mL) 중 (9-(2-(4-(히드록시메틸)페녹시)에틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논 (0.32 g) (실시예 1, 단계 i)의 용액에 첨가하고, 생성된 흑색 현탁액을 환류하에 1시간 동안 가열하였다. 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 통과시켰다. 패드를 DCM (30 mL씩 2회)으로 세척하고, 합한 여과액 및 세척액을 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 0.25 g.
Figure pct00076
k) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(4-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00077
HCl (에테르 중 2 M 용액, 0.29 mL)을 NMP (1 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 아세테이트 (실시예 1, 단계 d) (0.17 g)의 용액에 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 생성된 용액을 NMP (4 mL) 중 4-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤즈알데히드 (실시예 1, 단계 j) (0.25 g)의 용액에 첨가하고, 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 0 ℃로 냉각시키고, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.19 g)를 조금씩 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온으로 가온하고, 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 pH 7.2의 포스페이트 완충액 (50 mL)과 에틸 아세테이트 (50 mL) 사이에 분배하였다. 층을 분리하고, 수성층을 에틸 아세테이트 (50 mL씩 2회)로 추출하였다. 중탄산나트륨을 사용하여 수성상을 염기성화시키고, 에틸 아세테이트 (50 mL씩 3회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 아세토니트릴 (50 mL) 중에 재용해시키고, 트리플루오로아세트산 (1 mL)을 사용하여 산성화시켰다. 톨루엔 (50 mL)을 첨가하고, 혼합물을 진공하에 증발시켰다. 생성된 검을 아세토니트릴과 물의 혼합물 (1:1, 10 mL) 중에 용해시키고, 여과하였다. 정제용 HPLC (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→30 ％ 아세토니트릴)로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시키고, 잔류물을 에테르 중에서 분쇄하고, 진공하에 증발시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.35 g.
Figure pct00078
실시예 2
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(9-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)노닐아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00079
a) (9-(9-히드록시노닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논
Figure pct00080
9-브로모노난-1-올 (0.29 g)을 트리에틸아민 (0.41 mL)과 아세토니트릴 (10 mL)의 혼합물 중 (2-메틸티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 히드로클로라이드 (실시예 1, 단계 f) (0.4 g)의 현탁액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50 ℃에서 16시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트 (30 mL)와 포화 중탄산나트륨 용액 (30 mL) 사이에 분배하였다. 층을 분리하고, 수성층을 에틸 아세테이트 (30 mL씩 2회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (30 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (10 mL)에 용해시키고, 메탄올로 예비-습윤된 SCX 카트리지에 적용하였다. 카트리지를 메탄올 (10 mL)로 세척하고, 메탄올 중 3 M 암모니아 용액 (100 mL)으로 용출시켰다. 용리액을 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.32 g.
Figure pct00081
b) 9-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)노나날
Figure pct00082
DMSO (0.32 mL) 및 트리에틸아민 (0.32 mL)을 디클로로메탄 (5 mL) 중 (9-(9-히드록시노닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논 (실시예 2, 단계 a) (0.32 g)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 얼음-염 배스에서 냉각시키고, 피리딘 황 트리옥사이드 (0.36 g)를 첨가하였다. 반응물을 -10 ℃에서 1시간 동안 교반한 후, 실온으로 가온하고, 추가로 3시간 동안 교반하였다. 반응물을 DCM (20 mL)으로 희석한 후, 염수 (20 mL)에 부었다. 층을 분리하고, 유기층을 염수 (20 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 47.5:47.5:5의 이소헥산:에틸 아세테이트:트리에틸아민 → 95:5의 에틸 아세테이트:트리에틸아민 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였여, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.25 g.
Figure pct00083
c) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(9-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)노닐아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00084
(R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.17 g)를 메탄올 (15 mL) 중 9-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)노나날 (실시예 2, 단계 b) (0.23 g) 및 아세트산 (0.03 mL)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 10분 동안 교반하고, 0 ℃로 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.17 g)를 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 진공하에 농축시키고, 잔류물을 물과 아세토니트릴의 혼합물 (1:1, 5 mL) 중에 용해시켰다. 정제용 HPLC (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→30 ％ 아세토니트릴)로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 에테르 중에서 분쇄하고, 증발시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.15 g.
Figure pct00085
실시예 3
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(4-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디히드로클로라이드
Figure pct00086
a) 2-(4-(2,2-디에톡시에톡시)페닐)에탄올
Figure pct00087
탄산세슘 (28.3 g)을 DMF (150 mL) 중 4-(2-히드록시에틸)페놀 (10 g) 및 2-브로모-1,1-디에톡시에탄 (11.79 mL)의 용액에 첨가하였다. 생성된 현탁액을 90 ℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응물을 물 (500 mL)에 부었다. 수성상을 에틸 아세테이트 (200 mL씩 3회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 물 (200 mL) 및 염수 (200 mL)로 세척한 후, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 이소헥산 → 1:1 에틸 아세테이트:이소헥산 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 10 g.
Figure pct00088
b) 2-(4-(2-히드록시에틸)페녹시)아세트알데히드
Figure pct00089
진한 염산 (5 mL)을 1,4-디옥산 (10 mL) 중 2-(4-(2,2-디에톡시에톡시)페닐)에탄올 (실시예 3, 단계 a) (0.76 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 물 (50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (50 mL씩 3회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 물 (50 mL) 및 염수 (50 mL)로 세척한 후, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 수득하였고, 이를 직접 사용하였다. 수득량 0.35 g.
c) (9-(2-(4-(2-히드록시에틸)페녹시)에틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논
Figure pct00090
(2-메틸티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 히드로클로라이드 (실시예 1, 단계 f) (0.63 g)를 NMP (10 mL)와 아세트산 (0.11 mL)의 혼합물 중 2-(4-(2-히드록시에틸)페녹시)아세트알데히드 (실시예 3, 단계 b) (0.541 g)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반한 후, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.64 g)를 첨가하고, 반응물을 실온으로 가온하고, 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 메탄올 (30 mL)로 희석하고, 메탄올로 예비-습윤된 SCX 카트리지에 적용하였다. 카트리지를 메탄올 (100 mL)로 세척하고, 메탄올 중 3 M 암모니아 용액 (100 mL)으로 용출시켰다. 용리액을 진공하에 증발시키고, 잔류물을 95:5의 에틸 아세테이트:트리에틸아민으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 갈색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.74 g.
Figure pct00091
d) 2-(4-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)페닐)아세트알데히드
Figure pct00092
트리플루오로아세트산 (0.04 mL)을 DCM (3 mL) 중 9-(2-(4-(2-히드록시에틸)페녹시)에틸)-4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4-아자-9-아조니아스피로[5.5]운데칸 (실시예 3, 단계 c) (0.22 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 이어서, 데스-마틴 페리오디난 (0.31 g)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 이어서, 포화 티오황산나트륨 용액 (0.5 mL), 중탄산나트륨 용액 (0.5 mL) 및 에테르 (5 mL)의 혼합물을 첨가하고, 생성된 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 유기층을 분리하고, 중탄산나트륨 용액 (1 mL) 및 물 (1 mL)로 세척한 후, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였고, 이를 즉시 사용하였다. 수득량 0.19 g.
e) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(4-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디히드로클로라이드
Figure pct00093
(R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.10 g)를 메탄올 (1 mL) 중 2-(4-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)페닐)아세트알데히드 (실시예 3, 단계 d) (0.14 g) 및 아세트산 (0.02 mL)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 이어서, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.103 g)를 첨가하고, 반응물을 10분 동안 교반하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 아세토니트릴과 물의 혼합물 (1:1, 5 mL) 중에 용해시켰다. 정제용 HPLC (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→50 ％ 아세토니트릴)로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 아세토니트릴 (5 mL) 중에 용해시키고, 에테르 중 HCl (1 M, 2 mL)을 첨가한 후, 용매를 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 에테르 중에서 분쇄하고, 진공하에 증발시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.075 g.
Figure pct00094
실시예 4
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(2-(5-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에틸)티오펜-2-일)에틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00095
a) tert-부틸디메틸(2-(티오펜-2-일)에톡시)실란
Figure pct00096
tert-부틸디메틸실릴 클로라이드 (12.66 g)를 DMF (35 mL) 중 2-(2-티에닐)에탄올 (9.0 g) 및 이미다졸 (5.7 g)에 조금씩 첨가하였다. 생성된 용액을 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트와 물 사이에 분배하였다. 유기층을 물로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 용매를 진공하에 증발시켰다. 99:1 → 96:4 에틸 아세테이트:이소헥산으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였다. 수득량 16 g.
Figure pct00097
b) 5-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-카르브알데히드
Figure pct00098
-78 ℃에서, n-부틸리튬 (헥산 중 2.5 M, 30 mL)을 테트라히드로푸란 (250 mL) 중 tert-부틸디메틸(2-(티오펜-2-일)에톡시)실란 (실시예 4, 단계 a) (16 g)의 용액에 적가하였다. 반응 혼합물을 0 ℃로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응물을 -78 ℃로 냉각시키고, DMF (34 mL)를 10분에 걸쳐 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물과 에틸 아세테이트 사이에 분배하였다. 유기층을 분리하고, 물로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 진공하에 증발시켰다. 93:7 이소헥산:에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다. 수득량 15.4 g.
Figure pct00099
c) (5-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-일)메탄올
Figure pct00100
0 ℃에서, 수소화붕소나트륨 (1.74 g)을 에탄올 (120 mL) 중 5-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-카르브알데히드 (12.4 g) (실시예 4, 단계 b)의 용액에 첨가하였다. 생성된 용액을 0 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 염수와 에틸 아세테이트 사이에 분배하였다. 유기층을 분리하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 12.1 g.
Figure pct00101
d) 2-(5-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-일)아세토니트릴
Figure pct00102
0 ℃에서, 트리페닐포스핀 (13.04 g) 및 사브롬화탄소 (15.71 g)를 DCM (20 mL) 중 (5-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-일)메탄올 (실시예 4, 단계 c) (10.94 g)의 용액에 한 번에 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0 ℃로 냉각시키고, 테트라에틸암모늄 시아나이드 (8.96 g)를 첨가하였다. 혼합물을 디클로로메탄 (10 mL)으로 희석하고, 실온에서 40분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄과 염수 사이에 분배하였다. 유기층을 분리하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 진공하에 증발시켰다. 95:5 → 94:6 이소헥산:에틸 아세테이트 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 7.6 g.
Figure pct00103
e) 2-(5-(2-히드록시에틸)티오펜-2-일)아세트산
Figure pct00104
에탄올 (30 mL) 중 2-(5-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-일)아세토니트릴 (실시예 4, 단계 d) (3 g)의 용액을 물 (30 mL) 중 수산화칼륨 (1.20 g)의 교반 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 100 ℃에서 4시간 동안 교반하였다. 반응물을 진공하에 농축시키고, 생성된 혼합물을 염수와 에틸 아세테이트 사이에 분배하였다. 수성층을 얼음으로 냉각시키고, 진한 염산을 적가하여 산성화시키고, 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. 수득량 1.75 g.
Figure pct00105
f) 2-(5-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-일)에탄올
Figure pct00106
tert-부틸디메틸실릴 클로라이드 (6.63 g)를 DMF (50 mL) 중 이미다졸 (2.99 g) 및 2-(5-(2-히드록시에틸)티오펜-2-일)아세트산 (3.9 g) (실시예 4, 단계 e)의 용액에 20분에 걸쳐 조금씩 첨가하였다. 생성된 용액을 1시간 동안 교반하였다. 이어서, THF (50 mL)를 첨가하고, 반응물을 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 물 (50 mL) 중 탄산칼륨 (4.05 g)의 용액을 첨가하고, 혼합물을 20분 동안 교반하였다. 반응물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하였다. 유기층을 분리하고, 염수로 2회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 THF (80 mL) 중에 용해시키고, 보란 테트라히드로푸란 복합체 (THF 중 1 M 용액, 62.8 mL)를 적가하였다. 생성된 용액을 2시간 동안 교반하고, 메탄올 (30 mL)을 적가하여 켄칭하였다. 이어서, 용매를 진공하에 증발시켰다. 83:17 이소헥산:에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 황색 액체로서 수득하였다. 수득량 4.6 g.
Figure pct00107
g) 2-(5-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-일)아세트알데히드
Figure pct00108
데스-마틴 페리오디난 (0.38 g)을 디클로로메탄 (5 mL) 중 2-(5-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-일)에탄올 (실시예 4, 단계 f) (0.22 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물 30분 동안 교반하였다. 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (25 mL)의 혼합물을 첨가하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 유기층을 분리하고, 포화 중탄산나트륨 용액 (10 mL) 및 염수 (10 mL)로 세척한 후, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였고, 이를 즉시 사용하였다. 수득량 0.21 g.
Figure pct00109
h) (2-메틸티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트
Figure pct00110
1-프로판포스폰산 시클릭 무수물 (THF 중 1.57 M 용액, 2.49 mL)을 DMF (30 mL) 중 tert-부틸 1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 히드로클로라이드 (우시 파마테크) (1 g), 2-메틸티아졸-4-카르복실산 (0.56 g) 및 트리에틸아민 (3.26 mL)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 물 (500 mL)과 에틸 아세테이트 (200 mL) 사이에 분배하였다. 층을 분리하고, 수성층을 에틸 아세테이트 (150 mL씩 2회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 물 (100 mL씩 2회) 및 염수 (100 mL)로 세척한 후, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성된 오일을 디클로로메탄 (30 mL) 중에 용해시키고, 트리플루오로아세트산 (3 mL)을 적가하였다. 이어서, 이를 1시간 동안 교반하고, 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 톨루엔 (20 mL)과 함께 2회 공비시켰다. 생성된 검을 에테르 중에서 분쇄하여, 부제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 1.20 g.
Figure pct00111
i) (9-(2-(5-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-일)에틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논
Figure pct00112
(2-메틸티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 4, 단계 h) (0.25 g)를 NMP (5 mL)와 아세트산 (0.04 mL)의 혼합물 중 2-(5-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-일)아세트알데히드 (0.2 g) (실시예 4, 단계 g)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.22 g)를 첨가하였다. 혼합물을 1시간 동안 교반하고, pH 7.2의 완충액 (50 mL)에 부었다. 수성상을 에틸 아세테이트 (50 mL씩 3회)로 추출하였다. 합한 유기물을 pH 7.2의 완충액 (50 mL) 및 염수 (50 mL)로 세척한 후, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 4:1:0.05 이소헥산:에틸 아세테이트:트리에틸아민 → 95:5의 에틸 아세테이트:트리에틸아민으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.23 g.
Figure pct00113
j) (9-(2-(5-(2-히드록시에틸)티오펜-2-일)에틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논
Figure pct00114
진한 염산 (0.5 mL)을 메탄올 (5 mL) 중 (9-(2-(5-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-일)에틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논 (실시예 4, 단계 i) (0.235 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 용액을 1시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시키고, 잔류물을 톨루엔과 함께 공비시키고, 메탄올 (약 2 mL) 중에 재용해시켰다. 잔류물을 메탄올 (10 mL) 중에 용해시키고, 메탄올로 예비-습윤된 SCX 카트리지에 적용하였다. 카트리지를 메탄올 (100 mL)로 세척하고, 메탄올 중 1 M 암모니아 용액 (100 mL)으로 용출시켰다. 용리액을 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.12 g.
k) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(2-(5-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에틸)티오펜-2-일)에틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00116
0 ℃에서, 트리플루오로아세트산 (0.02 mL)을 DCM (5 mL) 중 (9-(2-(5-(2-히드록시에틸)티오펜-2-일)에틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논 (실시예 4, 단계 j) (0.128 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 이어서, 데스-마틴 페리오디난 (0.15 g)을 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (25 mL)의 혼합물을 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 포화 중탄산나트륨 용액 (10 mL) 및 염수 (10 mL)로 세척한 후, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 MeOH (1 mL) 중에 재용해시켰다. 아세트산 (0.04 mL)을 첨가한 후, (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.19 g)를 첨가하고, 혼합물을 0 ℃로 냉각시켰다. 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.157 g)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 1시간 동안 교반한 후, 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 아세토니트릴과 물의 혼합물 (1:1, 5 mL) 중에 용해시켰다. 정제용 HPLC (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→50 ％ 아세토니트릴)로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 잔류물을 에테르 중에서 분쇄하고, 진공하에 증발시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.04 g.
Figure pct00117
실시예 5
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(4-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에틸)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00118
a) 2,2'-(1,4-페닐렌)디에탄올
Figure pct00119
보란-메틸 술파이드 복합체 (테트라히드로푸란 중 2 M 용액, 80 mL)를 얼음 배스에서 냉각시킨 테트라히드로푸란 (100 mL) 중 2,2'-(1,4-페닐렌)디아세트산 (10.20 g)의 교반 용액에 20분에 걸쳐 첨가하였다. 16시간 후, 반응 혼합물을 메탄올 (40 mL)로 조심스럽게 켄칭하였다. 용액을 진공하에 증발시키고, 생성된 검을 에틸 아세테이트와 포화 수성 염화암모늄 사이에 분배하였다. 에틸 아세테이트 용액을 분리하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 8.64 g.
Figure pct00120
b) 2-{4-[2-(tert-부틸-디메틸-실라닐옥시)-에틸]-페닐}-에탄올
Figure pct00121
tert-부틸디메틸클로로실란 (9.68 mL)을 얼음 배스에서 냉각시킨 무수 DMF (100 mL) 중 2,2'-(1,4-페닐렌)디에탄올 (실시예 5, 단계 a) (8.64 g) 및 이미다졸 (10.21 g)의 용액에 첨가하였다. 45분 후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 3회 세척하고, 진공하에 증발시켰다. 5:1 이소헥산:에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다. 수득량 6.20 g.
Figure pct00122
c) 2-(4-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)페닐)아세트알데히드
Figure pct00123
데스-마틴 페리오디난 (0.38 g)을 디클로로메탄 (5 mL) 중 2-(4-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)페닐)에탄올 (실시예 5, 단계 b) (0.21 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물 30분 동안 교반하였다. 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (25 mL)의 혼합물을 첨가하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 유기상을 분리하고, 포화 중탄산나트륨 용액 (10 mL씩 2회) 및 염수 (10 mL)로 세척한 후, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였고, 이를 즉시 사용하였다. 수득량 0.20 g.
Figure pct00124
d) (9-(4-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)페네틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논
Figure pct00125
(2-메틸티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 4, 단계 h) (0.26 g)를 NMP (5 mL) 중 2-(4-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)페닐)아세트알데히드 (실시예 5, 단계 c) (0.2 g) 및 아세트산 (0.04 mL)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.23 g)를 첨가하였다. 혼합물을 1시간 동안 교반하고, pH 7.2의 완충액 (50 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트 (50 mL씩 3회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 pH 7.2의 완충액 (50 mL) 및 염수 (50 mL)로 세척한 후, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 80:15:5의 이소헥산:에틸 아세테이트:트리에틸아민 → 95:5의 에틸 아세테이트:트리에틸아민으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.30 g.
Figure pct00126
e) (9-(4-(2-히드록시에틸)페네틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논
Figure pct00127
진한 염산 (0.5 mL)을 메탄올 (5 mL) 중 (9-(4-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)페네틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논 (실시예 5, 단계 d) (0.3 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 용액을 1시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시키고, 잔류물을 톨루엔과 함께 공비시키고, 메탄올 (약 2 mL) 중에 재용해시켰다. 잔류물을 메탄올 (10 mL)로 희석하고, 메탄올로 예비-습윤된 SCX 카트리지에 적용하였다. 카트리지를 메탄올 (100 mL)로 세척하고, 메탄올 중 1 M 암모니아 용액 (100 mL)으로 용출시켰다. 용리액을 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였다. 수득량 0.2 g.
Figure pct00128
f) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(4-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에틸)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00129
0 ℃에서, 트리플루오로아세트산 (0.04 mL)을 DCM (5 mL) 중 (9-(4-(2-히드록시에틸)페네틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논 (실시예 5, 단계 e) (0.21 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 이어서, 데스-마틴 페리오디난 (0.25 g)을 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (25 mL)의 혼합물을 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 포화 중탄산나트륨 용액 (10 mL) 및 염수 (10 mL)로 세척한 후, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 MeOH (1 mL) 중에 재용해시켰다. 아세트산 (0.04 mL)을 첨가한 후, (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.19 g)를 첨가하고, 혼합물을 0 ℃로 냉각시켰다. 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.157 g)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 1시간 동안 교반한 후, 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 아세토니트릴과 물의 혼합물 (1:1, 5 mL) 중에 용해시켰다. 정제용 HPLC (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→50 ％ 아세토니트릴)로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 잔류물을 에테르 중에서 분쇄하고, 진공하에 증발시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.17 g.
Figure pct00130
실시예 6
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(3-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00131
a) 2-(3-(브로모메틸)페닐)에탄올
Figure pct00132
0 ℃에서, 보란 디메틸술파이드 복합체 (THF 중 2 M 용액, 5.78 mL)를 THF (10 mL) 중 2-(3-(브로모메틸)페닐)아세트산 (1.06 g)의 용액에 적가하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 이어서, 반응물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 이어서, 메탄올 (5 mL)을 첨가하고, 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 이소헥산 → 디에틸 에테르 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 1 g.
Figure pct00133
b) 9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논
Figure pct00134
2-(3-(브로모메틸)페닐)에탄올 (실시예 6, 단계 a) (0.11 g)을 아세토니트릴 (5 mL) 중 (2-메틸티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 4, 단계 h) (0.2 g) 및 트리에틸아민 (0.17 mL)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트 (25 mL)와 포화 중탄산나트륨 용액 (25 mL) 사이에 분배하였다. 수성층을 분리하고, 에틸 아세테이트 (25 mL씩 2회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (25 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 80:15:5 이소헥산:에틸 아세테이트:트리에틸아민 → 95:5의 에틸 아세테이트:트리에틸아민 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.15 g.
Figure pct00135
c) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(3-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00136
0 ℃에서, 트리플루오로아세트산 (0.03 mL)을 DCM (5 mL) 중 (9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논 (실시예 6, 단계 b) (0.17 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 이어서, 데스-마틴 페리오디난 (0.21 g)을 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (25 mL)의 혼합물을 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 포화 중탄산나트륨 용액 (10 mL) 및 염수 (10 mL)로 세척한 후, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (25 mL) 중에 재용해시켰다. 아세트산 (0.04 mL)을 첨가하고, 이어서 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.16 g)를 첨가하고, 혼합물을 얼음 배스에서 0 ℃로 냉각시킨 후, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.16 g)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 1시간 동안 교반하고, 농축시켰다. 잔류물을 아세토니트릴과 물의 혼합물 (1:1, 5 mL) 중에 용해시켰다. 정제용 HPLC (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→50 ％ 아세토니트릴)로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 잔류물을 에테르 중에서 분쇄하고, 진공하에 증발시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.125 g.
Figure pct00137
실시예 7
(R)-8-히드록시-5-(1-히드록시-2-(3-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00138
0 ℃에서, 트리플루오로아세트산 (0.02 mL)을 DCM (5 mL) 중 (9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논 (실시예 6, 단계 b) (0.11 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 이어서, 데스-마틴 페리오디난 (0.14 g)을 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (25 mL)의 혼합물을 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 수성층을 분리하고, 에틸 아세테이트 (20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 포화 중탄산나트륨 용액 (10 mL), 염수 (10 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (25 mL) 중에 재용해시켰다. 아세트산 (0.02 mL)에 이어서 (R)-5-(2-아미노-1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (WO2004106333) (0.09 g)을 첨가하고, 혼합물을 얼음 배스에서 0 ℃로 냉각시킨 후, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.08 g)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 1시간 동안 교반하고, 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트 (50 mL)와 pH 7.2의 완충액 (50 mL) 사이에 분배하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (50 mL씩 2회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (20 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 95:5:0.5 → 92:8:0.8의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시키고, THF (1 mL) 중에 용해시켰다. 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (0.05 mL)를 첨가하고, 혼합물을 밤새 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시키고, 잔류물을 아세토니트릴과 물의 혼합물 (1:1, 5 mL) 중에 용해시켰다. 정제용 HPLC (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→50 ％ 아세토니트릴)로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 잔류물을 에테르 중에서 분쇄하고, 진공하에 증발시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.06 g.
Figure pct00139
실시예 8
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(4-(3-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)프로폭시)벤질아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00140
a) 4-(3-브로모프로폭시)벤즈알데히드
Figure pct00141
1,3-디브로모프로판 (20.0 g)을 아세톤 (80 mL) 중 4-히드록시벤즈알데히드 (4.0 g) 및 탄산칼륨 (7.0 g)의 교반 현탁액에 첨가하였다. 16시간 후, 혼합물을 환류하에 추가로 2시간 동안 가열하고, 냉각시키고, 여과하여 무기물을 제거하고, 용액을 진공하에 증발시켰다. 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여 1,3-디브로모프로판을 제거 (이소헥산으로 용출)한 후, 부제 화합물을 수집하였다 (디클로로메탄:이소헥산 (2:1)으로 용출). 수득량 3.45 g.
Figure pct00142
b) 4-(3-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)프로폭시)벤즈알데히드
Figure pct00143
MeCN (2 mL) 중 (2-메틸티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 4, 단계 h) (0.244 g), 4-(3-브로모프로폭시)벤즈알데히드 (실시예 8, 단계 a) (0.15 g) 및 트리에틸아민 (0.344 mL)의 혼합물을 60 ℃에서 가열하였다. 16시간 후, 반응 혼합물을 진공하에 증발시켰다. 에틸 아세테이트:트리에틸아민 (10:1)으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 오일로서 수득하였다. 수득량 0.24 g.
Figure pct00144
c) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(4-(3-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)프로폭시)벤질아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00145
염화수소 (디에틸 에테르 중 1 M 용액 0.4 mL)를 MeOH (15 mL) 중 4-(3-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)프로폭시)벤즈알데히드 (실시예 8, 단계 b) (0.15 g) 및 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 아세테이트 (실시예 1, 단계 d) (0.15 g)의 교반 용액에 첨가하였다. 5분 후, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.05 g)를 첨가하였다. 16시간 후, 용액을 약 2 mL로 농축시키고, 이어서 에틸 아세테이트와 pH 7.2의 포스페이트 완충액 (20 mL) 사이에 분배하였다. 에틸 아세테이트 용액을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 아세토니트릴과 물의 혼합물 (1:1, 5 mL) 중에 용해시켰다. 정제용 HPLC (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→35 ％ 아세토니트릴)로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 잔류물을 에테르 중에서 분쇄하고, 진공하에 증발시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.045 g.
Figure pct00146
실시예 9
(R)-8-히드록시-5-(1-히드록시-2-(3-((4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00147
a) tert-부틸 4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트
Figure pct00148
1-프로판포스폰산 시클릭 무수물 (THF 중 1.57 M 용액, 0.64 mL)을 DMF (8 mL) 중 tert-부틸 1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 히드로클로라이드 (우시 파마테크) (0.26 g), 5-메틸티오펜-2-카르복실산 (0.142 g) 및 트리에틸아민 (0.84 mL)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (100 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트 (200 mL씩 3회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 물 (100 mL씩 2회) 및 염수 (100 mL)로 세척한 후, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 에틸 아세테이트:이소헥산 (1:1)으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였다. 수득량 0.32 g.
Figure pct00149
b) (5-메틸티오펜-2-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트
Figure pct00150
DCM (3 mL) 중 tert-부틸 4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 (실시예 9, 단계 a) (0.32 g)를 트리플루오로아세트산 (1.0 g)으로 처리하였다. 2시간 후, 반응 혼합물을 진공하에 증발시키고, 톨루엔과 함께 2회 공비시켜, 부제 화합물을 수득하였고, 이를 직접 사용하였다. 수득량 0.32 g.
c) (9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-메틸티오펜-2-일)메타논
Figure pct00151
2-(3-(브로모메틸)페닐)에탄올 (실시예 6, 단계 a) (0.136 g)을 MeCN (5 mL) 중 (5-메틸티오펜-2-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 9, 단계 b) (0.250 g) 및 트리에틸아민 (0.278 mL)의 교반 용액에 첨가하였다. 1시간 후, 반응 혼합물을 농축시키고, 에틸 아세테이트:트리에틸아민 (95:5)으로 용출시키는 실리카겔 컬럼에 적용시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.24 g.
Figure pct00152
d) 2-(3-((4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)아세트알데히드
Figure pct00153
데스-마틴 페리오디난 (0.16 g)을 질소하에 DCM (4 mL) 중 (9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-메틸티오펜-2-일)메타논 (0.13 g) (실시예 9, 단계 c) 및 트리플루오로아세트산 (0.036 g)의 교반 용액에 첨가하였다. 0.5시간 후, 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL) 및 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 합한 유기 추출물을 포화 중탄산나트륨 및 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.13 g. 직접 사용하였다.
e) (R)-8-히드록시-5-(1-히드록시-2-(3-((4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00154
(R)-5-(2-아미노-1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (WO2004106333) (0.179 g)을 MeOH (5 mL) 중 2-(3-((4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)아세트알데히드 (실시예 9, 단계 d) (0.13 g) 및 아세트산 (0.031 mL)의 교반 용액에 첨가하였다. 5분 후, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.114 g)를 첨가하였다. 추가로 15분 후, 에틸 아세테이트 (30 mL)를 첨가하고, 반응 혼합물을 pH 7의 완충액 (30 mL)으로 세척하고, 진공하에 증발시켰다. 92:7:1의 DCM:MeOH:'880' 수성 암모니아로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 실릴화된 중간체를 수득하였다. 상기 중간체를 THF (2 mL) 중에 용해시키고, 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (0.062 mL)를 첨가하였다. 16시간 후, 반응물을 진공하에 증발시키고, 톨루엔 (150 mL)을 첨가하고, 혼합물을 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 아세토니트릴과 물의 혼합물 (1:1, 5 mL) 중에 용해시켰다. 정제용 HPLC (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→50 ％ 아세토니트릴)로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 잔류물을 디에틸 에테르 중에서 분쇄하고, 진공하에 증발시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.05 g.
Figure pct00155
실시예 10
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(3-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00156
a) 2-(3-포르밀페녹시)에틸 메탄술포네이트
Figure pct00157
2-브로모에탄올 (10.23 g) 및 탄산칼륨 (11.32 g)을 아세토니트릴 (100 mL) 중 3-히드록시벤즈알데히드 (5 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 환류 온도에서 72시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 에틸 아세테이트와 빙냉 묽은 수성 수산화나트륨 사이에 분배하였다. 유기층을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 진공하에 제거하였다. 잔류물을 DCM (30 mL) 중에 용해시키고, 트리에틸아민 (3.44 mL)을 첨가하였다. 용액을 0 ℃로 냉각시키고, 메탄술포닐 클로라이드 (1.89 mL)로 적가 처리하였다. 반응 혼합물을 0 ℃에서 10분 동안 교반한 후, 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 염수로 2회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 진공하에 증발시켰다. 6:4의 에틸 아세테이트:이소헥산으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다. 수득량 3.50 g.
Figure pct00158
b) 3-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤즈알데히드
Figure pct00159
2-(3-포르밀페녹시)에틸 메탄술포네이트 (실시예 10, 단계 a) (0.38 g)를 아세토니트릴 (5 mL) 중 (2-메틸티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 4, 단계 h) (0.62 g) 및 트리에틸아민 (0.55 mL)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물 65 ℃에서 16시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트 (25 mL)와 포화 중탄산나트륨 용액 (25 mL) 사이에 분배하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (25 mL씩 2회)로 추출하였다. 유기상을 합하고, 염수 (25 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 47.5:47.5:5의 이소헥산:에틸 아세테이트:트리에틸아민 → 95:5의 에틸 아세테이트:트리에틸아민 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.48 g.
Figure pct00160
c) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(3-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00161
3-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤즈알데히드 (실시예 10, 단계 b) (0.24 g)를 메탄올 (2 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.15 g) 및 아세트산 (0.032 mL)의 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 교반한 후, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.18 g)를 첨가하고, 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트 (50 mL)와 pH 7.2의 포스페이트 완충액 (50 mL) 사이에 분배하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (50 mL씩 2회)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수 (20 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 정제용 HPLC (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→50 ％ 아세토니트릴)로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 잔류물을 에테르 중에서 분쇄하고, 진공하에 증발시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.21 g.
Figure pct00162
실시예 11
5-히드록시-8-(1-히드록시-2-(3-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)-2H-벤조[b][1,4]옥사진-3(4H)-온 디트리플루오로아세테이트, 이성질체 1
Figure pct00163
a) 1-(2,4-디히드록시-3-니트로페닐)에타논
Figure pct00164
2-니트로벤젠-1,3-디올 (24.5 g)을 니트로벤젠 (325 mL) 중 염화알루미늄 (46.3 g)의 격렬하게 교반된 용액에 15분에 걸쳐 조금씩 첨가하였다. 이어서, 아세트산 무수물 (15.7 mL)을 추가로 15분에 걸쳐 혼합물에 적가한 후, 혼합물을 100 ℃에서 5시간 동안 가열하였다. 반응물을 주위 온도로 냉각시키고, 빙냉 2 M 염산 (300 mL)으로 조심스럽게 켄칭하였다. 혼합물을 디에틸 에테르 (500 mL씩 2회)로 추출하고, 디에틸 에테르 추출물을 합하고, 이어서 2 M 수성 수산화나트륨 (400 mL씩 2회)으로 추출하였다. 합한 염기성 추출물을 디에틸 에테르 (500 mL씩 4회)로 세척한 후, 2 M 염산 (700 mL)을 사용하여 pH 1로 산성화시켰다. 생성된 침전물을 여과하고, 물로 세척하고, 40 ℃에서 진공하에 건조시켜, 부제 화합물을 황색빛-갈색 고체로서 수득하였다. 수득량 29.5 g.
Figure pct00165
b) 1-(4-(벤질옥시)-2-히드록시-3-니트로페닐)에타논
Figure pct00166
질소하에 내부 온도를 30 ℃ 미만으로 유지하면서 리튬 tert-부톡시드 (4.06 g)를 DMF (100 mL) 중 1-(2,4-디히드록시-3-니트로페닐)에타논 (실시예 11, 단계 a) (10 g)의 교반 용액에 첨가하였다. 주위 온도에서 추가로 10분 동안 교반한 후, 벤질 브로마이드 (6.03 mL)를 첨가하고, 혼합물을 추가로 20시간 동안 교반하였다. 추가의 벤질 브로마이드 (3 mL)를 첨가하고, 혼합물을 24시간 동안 교반하였다. 반응물을 물 (300 mL)로 켄칭하고, 1 M 수성 수산화나트륨 (50 mL)을 첨가하고, 혼합물을 디에틸 에테르 (300 mL씩 2회)로 세척하고, 셀라이트를 통해 여과하여 분리를 보조하였다. 염기성 용액을 얼음/물 중에서 냉각시키고, 빙냉 2 M 염산 (200 mL)을 사용하여 산성화시키고, 생성된 침전물을 여과하고, 물로 세척하고, 건조시켜, 밝은 갈색 고체를 수득하였다. 고체를 에탄올 (100 mL)로 1시간 동안 슬러리화시키고, 고체를 여과하고, 차가운 에탄올 (20 mL)로 세척하고, 40 ℃에서 진공하에 건조시켜, 부제 화합물을 밝은 갈색 고체로서 수득하였다. 수득량 6.8 g.
Figure pct00167
c) 1-(3-아미노-4-(벤질옥시)-2-히드록시페닐)에타논
Figure pct00168
얼음 배스를 이용하여 내부 온도를 40 ℃ 미만으로 유지하면서 아연 가루 (5.5 g)를 아세트산 (55 mL) 중 1-(4-(벤질옥시)-2-히드록시-3-니트로페닐)에타논 (실시예 11, 단계 b) (5.5 g)의 현탁액에 15분에 걸쳐 조금씩 첨가하였다. 혼합물을 주위 온도에 이르게 하고, 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고 (주의: 뜨거워짐 - 건조해지게 하지 말것), 아세트산으로 세척하고, 여과액을 얼음/물 (500 mL)에 부었다. 생성된 침전물을 여과하고, 물로 세척하고, 40 ℃에서 진공하에 건조시켜, 부제 화합물을 밝은 갈색 고체로서 수득하였다. 수득량 4.8 g.
Figure pct00169
d) 8-아세틸-5-(벤질옥시)-2H-벤조[b][1,4]옥사진-3(4H)-온
Figure pct00170
2-클로로아세틸 클로라이드 (1.8 mL)를 DMF (30 mL) 중 1-(3-아미노-4-(벤질옥시)-2-히드록시페닐)에타논 (실시예 11, 단계 c) (5.2 g) 및 탄산수소나트륨 (3.74 g)의 교반 혼합물에 적가한 후, 2시간 동안 교반하였다. 탄산세슘 (7.90 g)을 첨가하고, 혼합물을 100 ℃에서 20시간 동안 가열하였다. 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, 물 (500 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (200 mL씩 2회)로 추출하고, 물 (300 mL씩 3회) 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 고체 잔류물을 디에틸 에테르로 처리하고, 여과하고, 건조시켜, 부제 화합물을 베이지색 고체로서 수득하였다. 수득량 5.7 g.
Figure pct00171
e) 5-(벤질옥시)-8-(2-클로로아세틸)-2H-벤조[b][1,4]옥사진-3(4H)-온
Figure pct00172
벤질트리메틸암모늄 디클로로요오데이트 (14.17 g)를 디클로로메탄 (100 mL), 아세트산 (33 mL) 및 물 (5.5 mL)의 혼합물 중 8-아세틸-5-(벤질옥시)-2H-벤조[b][1,4]옥사진-3(4H)-온 (실시예 11, 단계 d) (5.5 g)의 교반 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 65 ℃에서 20시간 동안 교반하였다. 반응물을 주위 온도로 냉각시키고, 수성 중아황산나트륨 (100 mL 중 5.78 g)으로 처리하고, 추가로 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 디에틸 에테르 (200 mL)로 희석하고, 생성된 고체를 여과에 의해 수집하고, 물 및 디에틸 에테르로 세척하고, 40 ℃에서 진공하에 건조시켜, 부제 화합물을 밝은 갈색 고체로서 수득하였다. 수득량 5.6 g.
Figure pct00173
f) 8-(2-아지도아세틸)-5-(벤질옥시)-2H-벤조[b][1,4]옥사진-3(4H)-온
Figure pct00174
나트륨 아지드 (1.176 g)를 DMF (50 mL) 중 5-(벤질옥시)-8-(2-클로로아세틸)-2H-벤조[b][1,4]옥사진-3(4H)-온 (실시예 11, 단계 e) (4.8 g)의 현탁액에 첨가하고, 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 얼음/물에 붓고, 생성된 고체를 여과에 의해 수집하고, 물로 세척하고, 40 ℃에서 진공하에 건조시켜, 부제 화합물을 밝은 갈색 고체로서 수득하였다. 수득량 4.6 g.
Figure pct00175
g) 8-(2-아지도-1-히드록시에틸)-5-(벤질옥시)-2H-벤조[b][1,4]옥사진-3(4H)-온, 이성질체 1
Figure pct00176
에탄올 (80 mL) 중 8-(2-아지도아세틸)-5-(벤질옥시)-2H-벤조[b][1,4]옥사진-3(4H)-온 (실시예 11, 단계 f) (2 g)의 현탁액을 수소화붕소나트륨 (0.224 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하고, 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 고체를 아세톤 (20 mL) 중에서 분쇄하여, 라세미체 생성물 1.6 g을 수득하였다.
라세미체 혼합물의 분리:
라세미체 8-(2-아지도-1-히드록시에틸)-5-(벤질옥시)-2H-벤조[b][1,4]옥사진-3(4H)-온 (2.5 g)을 10 mg/mL의 농도로 메탄올 중에 용해시키고, 키랄팩 (Chiralpak, 등록상표) AS (250 x 50 mm ID, 20 ㎛ 입도) 컬럼을 이용하여 키랄 HPLC로 분리하였다 (에탄올로 용출). 1차 용출 이성질체를 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 농축시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.67 g.
Figure pct00177
h) 8-(2-아미노-1-히드록시에틸)-5-히드록시-2H-벤조[b][1,4]옥사진-3(4H)-온 아세테이트, 이성질체 1
Figure pct00178
탄소상 10 ％ 팔라듐 촉매 (0.210 g)를 함유하는 에탄올 (30 mL) 중 8-(2-아지도-1-히드록시에틸)-5-(벤질옥시)-2H-벤조[b][1,4]옥사진-3(4H)-온, 이성질체 1 (실시예 11, 단계 g) (0.67 g)의 혼합물을 4 bar의 수소압하에 18시간 동안 격렬하게 교반하였다. 촉매를 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 아세트산 (15 mL) 및 에탄올 (15 mL) 중에 용해시키고, 혼합물을 탄소상 10 ％ 팔라듐 촉매 (0.210 g)와 함께 4 bar의 수소압하에 18시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 신선한 탄소상 10 ％ 팔라듐 촉매 (0.210 g)를 첨가하고, 4 bar의 수소압하에 18시간 동안 계속 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 신선한 탄소상 10 ％ 팔라듐 촉매 (0.210 g)를 첨가하고, 4 bar의 수소압하에 18시간 동안 계속 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 아세토니트릴 (30 mL) 중에서 분쇄하여, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.33 g.
Figure pct00179
i) 5-히드록시-8-(1-히드록시-2-(3-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)-2H-벤조[b][1,4]옥사진-3(4H)-온 디트리플루오로아세테이트, 이성질체 1
Figure pct00180
DCM (7 mL) 중 (9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논 (실시예 6, 단계 b) (0.198 g)의 용액을 얼음 배스에서 냉각시키고, 트리플루오로아세트산 (0.037 mL)에 이어서 데스-마틴 페리오디난 (303 mg)으로 처리하였다. 혼합물을 20 ℃에서 30분 동안 교반하였다. 추가의 데스-마틴 페리오디난 (303 mg)을 첨가하고, 추가로 30분 동안 계속 교반하였다. 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (7 mL) 및 포화 중탄산나트륨 용액 (7 mL)으로 처리하고, 전체를 10분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (2 mL) 중에 용해시키고, 0 ℃로 냉각시킨 메탄올 (5 mL) 중 8-(2-아미노-1-히드록시에틸)-5-히드록시-2H-벤조[b][1,4]옥사진-3(4H)-온 아세테이트, 이성질체 1 (실시예 11, 단계 h) (110 mg)의 용액에 적가하고, 아세트산 (0.022 mL)에 이어서 HCl (에테르 중 1 M, 0.387 mL)로 처리한 후, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (37 mg)로 처리하였다. 반응 혼합물을 20 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 3 mL 이상의 부피로 증발시키고, 에틸 아세테이트 (30 mL)와 수성 포스페이트 완충액 (pH = 7.2) (50 mL) 사이에 분배하였다. 아세트산을 첨가하여 수성층을 산성화시키고, 10 g SCX 카트리지를 통해 통과시켰다. 컬럼을 물로 세척한 후, 메탄올 중 7 N 암모니아로 플러싱하여 생성물을 용출시켰다. 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 메탄올에 용해시키고, 아세트산 (0.5 mL)으로 처리하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→35 ％ 아세토니트릴). 바람직한 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.059 g.
Figure pct00181
실시예 12
(R)-5-(2-(3-((4-(5-에틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00182
a) tert-부틸 3-옥소-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트
Figure pct00183
클로로아세틸 클로라이드 (4.88 mL)를 물 (78 mL) 중 탄산칼륨 (17.43 g)과 에틸 아세테이트 (92 mL) 중 tert-부틸 4-(아미노메틸)-4-히드록시피페리딘-1-카르복실레이트 (10.4 g)의 격렬하게 교반된 혼합물 (0 ℃)에 적가하였다. 0 ℃에서 30분 후, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 THF (200 mL) 중에 용해시키고, 질소하에 교반 용액에 3시간에 걸쳐 적가하고, 칼륨 tert-부톡시드 (tert-부탄올 중 1 M, 75 mL)와 THF (250 mL)의 환류 온도에서 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 18시간 동안 교반하였다. 대부분의 용매를 감압하에 제거하고, 잔류물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하고, 수성층을 에틸 아세테이트로 재추출하고, 합한 유기물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 에테르 (30 mL)와 이소헥산 (20 mL)의 혼합물 중에서 분쇄하여, 부제 생성물을 수득하였다. 수득량 8.20 g.
Figure pct00184
b) tert-부틸 1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트
Figure pct00185
THF (100 mL) 중 tert-부틸 3-옥소-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 (실시예 12, 단계 a) (8.2 g)의 용액을 보란 THF 복합체 (THF 중 1 M, 91 mL)로 적가 처리하고, 생성된 혼합물 55 ℃에서 2시간 동안 가열하였다. 보란 디메틸술파이드 복합체 (THF 2 M, 15.17 mL)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 55 ℃에서 2시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 메탄올로 켄칭한 후, 용매를 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (250 mL) 중에 용해시키고, 용액을 N1,N2-디메틸에탄-1,2-디아민 (10 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 환류 온도에서 6시간 동안 가열하였다. 추가의 N1,N2-디메틸에탄-1,2-디아민 (3 g)을 첨가하고, 환류 온도에서 6시간 동안 계속 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 용매를 감압하에 증발시키고, 잔류물을 디클로로메탄 중 5 ％ 메탄올 및 1 ％ 트리에틸아민으로 용출시키는 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 7.40 g.
Figure pct00186
c) tert-부틸 4-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트
Figure pct00187
DCM (3 mL) 중에 용해된 트리플루오로아세트산 무수물 (0.496 mL)의 용액을 DCM (20 mL) 중 트리에틸아민 (0.538 mL) 및 tert-부틸 1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 (실시예 12, 단계 b) (0.9 g)의 교반 용액에 0 ℃에서 질소하에 5분의 기간에 걸쳐 적가하였다. 생성된 용액을 0 ℃에서 30분 동안 교반하였다. 물 (20 mL)을 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 격렬하게 교반하였다. 유기층을 분리하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 이소헥산 중 40 ％ 에틸 아세테이트로 용출시키는 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 1 g. 정제없이 직접 사용하였다.
d) 2,2,2-트리플루오로-1-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)에타논 트리플루오로아세테이트
Figure pct00188
20 ℃에서, 트리플루오로아세트산 (15 mL)을 DCM (15 mL) 중 tert-부틸 4-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 (실시예 12, 단계 c) (1 g)의 교반 용액에 첨가하였다. 생성된 용액을 20 ℃에서 10분 동안 교반하였다. 톨루엔 (50 mL)을 첨가하고, 용매를 감압하에 증발시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 1.4 g.
Figure pct00189
e) 2,2,2-트리플루오로-1-(9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)에타논
Figure pct00190
아세토니트릴 (1 mL) 중에 용해된 2-(3-(브로모메틸)페닐)에탄올 (실시예 6, 단계 a) (0.223 g)의 용액을 아세토니트릴 (2 mL) 중 트리에틸아민 (0.318 mL) 및 2,2,2-트리플루오로-1-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)에타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 12, 단계 d) (0.38 g)의 교반 용액에 20 ℃에서 2분의 기간에 걸쳐 적가하였다. 생성된 혼합물을 20 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 디클로로메탄과 물 사이에 분배하고, 수성층을 DCM으로 2회 재추출하고, 합한 유기물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 디클로로메탄 중 6 ％ 메탄올 및 1 ％ 트리에틸아민으로 용출시키는 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.260 g.
Figure pct00191
f) (R)-5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(3-((4-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온
Figure pct00192
20 ℃에서, 트리플루오로아세트산 (0.052 mL)을 디클로로메탄 (7.0 mL) 중 2,2,2-트리플루오로-1-(9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)에타논 (실시예 12, 단계 e) (0.26 g)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 데스-마틴 페리오디난 (0.428 g)으로 처리하고, 20 ℃에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (7.0 mL) 및 포화 중탄산나트륨 용액 (7.0 mL)으로 처리하고, 혼합물을 10분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기상을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (7.0 mL) 중에 용해시키고, (R)-5-(2-아미노-1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (WO2004106333) (0.225 g) 및 아세트산 (0.039 mL)을 0 ℃에서 냉각시킨 혼합물에 첨가하였다. 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.214 g)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 90분 동안 교반하였다. 대부분의 메탄올을 증발시키고, 나머지를 에틸 아세테이트와 수성 포스페이트 완충액 (pH = 7.2) 사이에 분배하고, 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 디클로로메탄 중 1 ％ 진한 수성 암모니아 및 10 ％ 메탄올로 용출시키는 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.144 g.
g) (R)-tert-부틸 2-히드록시-2-(8-히드록시-2-옥소-1,2-디히드로퀴놀린-5-일)에틸(3-((4-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸)카르바메이트
Figure pct00194
20 ℃에서, 메탄올 (1 mL) 중에 용해된 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (0.044 mL)의 용액을 THF (4 mL) 중 (R)-5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(3-((4-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (실시예 12, 단계 f) (0.140 g)의 교반 용액에 첨가하였다. 생성된 용액을 20 ℃에서 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 트리에틸아민 (0.111 mL)으로 처리한 후, 메탄올 (1 mL) 중 디-tert-부틸 디카르보네이트 (0.048 mL)의 용액으로 처리하였다. 혼합물을 20 ℃에서 3시간 동안 교반한 후, 용매를 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 디클로로메탄 중 1 ％ "880" 수성 암모니아 및 10 ％ 메탄올로 용출시키는 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.100 g.
Figure pct00195
h) (R)-tert-부틸 3-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일메틸)페네틸(2-히드록시-2-(8-히드록시-2-옥소-1,2-디히드로퀴놀린-5-일)에틸)카르바메이트
Figure pct00196
메탄올 (5.0 mL) 중 (R)-tert-부틸 2-히드록시-2-(8-히드록시-2-옥소-1,2-디히드로퀴놀린-5-일)에틸(3-((4-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸)카르바메이트 (실시예 12, 단계 g) (0.100 g)의 용액을 물 (5.0 mL) 중 탄산칼륨 (0.035 g)의 용액으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 5시간 동안 교반하였다. 메탄올을 질소 스트림하에 증발시키고, 추가의 물 (5.0 mL)을 첨가하였다. 아세트산을 첨가하여 용액을 산성화시킨 후, C18 실리카의 10 g 카트리지를 통해 통과시켰다. 카트리지를 물로 세척한 후, 메탄올로 플러싱하여 생성물을 얻었다. 용매를 감압하에 증발시켜, 아세트산 염 0.090 g을 수득하였다. 상기 고체를 메탄올 (2 mL) 중에 용해시키고, 0.700 g의 배리언 본드 일루트 (VARIAN Bond Elut) NH2 수지를 통해 통과시키고, 용매를 감압하에 증발시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.074 g.
Figure pct00197
i) (R)-5-(2-(3-((4-(5-에틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00198
DMF (2.0 mL) 중 (R)-tert-부틸 3-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일메틸)페네틸(2-히드록시-2-(8-히드록시-2-옥소-1,2-디히드로퀴놀린-5-일)에틸)카르바메이트 (실시예 12, 단계 h) (0.068 g)의 용액을 트리에틸아민 (0.048 mL)에 이어서 5-에틸티오펜-2-카르복실산 (0.018 g)으로 처리한 후, HATU (0.057 g)로 처리하였다. 혼합물을 20 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. "880" 수성 암모니아 (4 방울)를 첨가하고, 1시간 동안 계속 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하고, 유기층을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 디클로로메탄 (1 mL) 중에 용해시키고, 용액을 트리플루오로아세트산 (1 mL)으로 처리하였다. 용액을 20 ℃에서 10분 동안 방치하고, 톨루엔 (20 mL)을 첨가하고, 용매를 감압하에 증발시키고, 잔류물을 아세토니트릴과 함께 2회 공비시켰다. 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.039 g.
Figure pct00199
실시예 13
5-히드록시-8-(1-히드록시-2-(3-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)-2H-벤조[b][1,4]옥사진-3(4H)-온 디트리플루오로아세테이트, 이성질체 2
Figure pct00200
a) 8-(2-아지도-1-히드록시에틸)-5-(벤질옥시)-2H-벤조[b][1,4]옥사진-3(4H)-온, 이성질체 2
Figure pct00201
이성질체 2를 실시예 11의 단계 g에 상술되어 있는 키랄 HPLC 분리로부터의 2차 용출 이성질체로서 수득하였다. 2차 용출 이성질체를 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 농축시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.72 g.
Figure pct00202
b) (S)-8-(2-아미노-1-히드록시에틸)-5-히드록시-2H-벤조[b][1,4]옥사진-3(4H)-온 아세테이트, 이성질체 2
Figure pct00203
아세트산 (10 mL)과 에탄올 (10 mL)의 혼합물 중 8-(2-아지도-1-히드록시에틸)-5-(벤질옥시)-2H-벤조[b][1,4]옥사진-3(4H)-온, 이성질체 2 (실시예 13, 단계 a) (0.72 g)의 용액을 탄소상 10 ％ 팔라듐 촉매 (0.225 g)와 함께 4 bar의 수소압하에 18시간 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 신선한 탄소상 10 ％ 팔라듐 촉매 (0.225 g)를 첨가하고, 4 bar의 수소압하에 18시간 동안 계속 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 신선한 탄소상 10 ％ 팔라듐 촉매 (0.225 g)를 첨가하고, 4 bar의 수소압하에 18시간 동안 계속 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 아세토니트릴 (30 mL) 중에서 분쇄하여, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.28 g.
Figure pct00204
c) 5-히드록시-8-(1-히드록시-2-(3-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)-2H-벤조[b][1,4]옥사진-3(4H)-온 디트리플루오로아세테이트, 이성질체 2
Figure pct00205
DCM (7.0 mL) 중 (9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논 (실시예 6, 단계 b) (0.163 g)의 용액을 얼음 배스에서 냉각시키고, 트리플루오로아세트산 (0.030 mL)에 이어서 데스-마틴 페리오디난 (0.246 g)으로 처리하였다. 혼합물을 20 ℃에서 30분 동안 교반하고, 추가의 데스-마틴 페리오디난 (0.246 g)으로 처리하고, 20 ℃에서 추가로 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (7.0 mL) 및 포화 중탄산나트륨 용액 (7.0 mL)으로 처리하고, 10분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (2.0 mL) 중에 용해시키고, 0 ℃로 냉각시킨 메탄올 (5.0 mL) 중 8-(2-아미노-1-히드록시에틸)-5-히드록시-2H-벤조[b][1,4]옥사진-3(4H)-온 아세테이트, 이성질체 2 (실시예 13, 단계 b) (0.090 g)의 용액에 적가하고, 아세트산 (0.018 mL)에 이어서 HCl (에테르 중 1 M, 0.32 mL)로 처리한 후, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.030 g)로 처리하였다. 혼합물을 20 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 3 mL 이상의 부피로 증발시키고, 에틸 아세테이트 (30 mL)와 수성 포스페이트 완충액 (pH = 7.2) (50 mL) 사이에 분배하였다. 아세트산을 첨가하여 수성층을 산성화시키고, 10 g SCX 카트리지를 통해 통과시켰다. 컬럼을 물로 세척한 후, 메탄올 중 7 N 암모니아로 플러싱하여 생성물을 용출시켰다. 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 메탄올에 용해시키고, 아세트산 (0.5 mL)으로 처리하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→35 ％ 아세토니트릴). 바람직한 생성물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.053 g.
Figure pct00206
실시예 14
(R)-8-히드록시-5-(1-히드록시-2-(2-(5-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)티오펜-2-일)에틸아미노)에틸)퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00207
a) 5-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-카르브알데히드
Figure pct00208
tert-부틸디메틸실릴클로라이드 (2.82 g)를 DMF (20 mL) 중 2-(티오펜-2-일)에탄올 (2 g) 및 이미다졸 (1.275 g)의 교반 용액에 20 ℃에서 20분에 걸쳐 조금씩 첨가하였다. 혼합물을 20 ℃에서 18시간 동안 교반한 후, 에틸 아세테이트와 물 사이에 분배하고, 유기층을 물로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다 (용리 구배: 이소헥산 중 1→4 ％ 에틸 아세테이트). 잔류물 (2.7 g)을 THF (50 mL) 중에 용해시키고, 용액을 -78 ℃로 냉각시키고, n-부틸리튬 (헥산 중 2.5 M, 5.06 mL)을 10분에 걸쳐 적가하고, 생성된 혼합물을 0 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 -78 ℃로 냉각시키고, DMF (5.7 mL)를 5분에 걸쳐 적가하였다. 혼합물을 20 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물과 에틸 아세테이트 사이에 분배하고, 유기층을 물로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 용매를 감압하에 제거하였다. 조 생성물을 이소헥산 중 7 ％ 에틸 아세테이트로 용출시키는 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 2.3 g.
Figure pct00209
b) (9-((5-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논
Figure pct00210
아세트산 (0.036 mL)을 함유하는 NMP (5 mL) 중 (2-메틸티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 4, 단계 h) (0.25 g) 및 5-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-카르브알데히드 (실시예 14, 단계 a) (0.171 g)의 용액을 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.201 g)로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 18시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 포화 중탄산나트륨 용액 사이에 분배하고, 유기층을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.3 g.
Figure pct00211
c) (9-((5-(2-히드록시에틸)티오펜-2-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논
Figure pct00212
THF (5 mL) 중 (9-((5-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논 (실시예 14, 단계 b) (0.3 g)의 용액을 테트라부틸암모늄 플루오라이드의 용액 (THF 중 1 M, 0.672 mL)으로 적가 처리하였다. 혼합물을 20 ℃에서 30분 동안 방치하였다. 질소 스트림을 이용하여 용매를 증발시키고, 잔류물을 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다 (용리 구배: 디클로로메탄 중 1 ％ 트리에틸아민 및 2.5 ％ 메탄올). 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.187 g.
Figure pct00213
d) (R)-5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(2-(5-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)티오펜-2-일)에틸아미노)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온
Figure pct00214
20 ℃에서, 디클로로메탄 (10 mL) 중 (9-((5-(2-히드록시에틸)티오펜-2-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논 (실시예 14, 단계 c) (0.18 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (0.033 mL)에 이어서 데스-마틴 페리오디난 (0.254 g)으로 처리하고, 혼합물을 20 ℃에서 90분 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (10 mL) 및 포화 중탄산나트륨 용액 (10 mL)으로 처리하고, 10분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (2 mL) 중에 용해시키고, 메탄올 (7 mL) 중 (R)-5-(2-아미노-1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (WO2004106333) (0.143 g) 및 아세트산 (0.024 mL)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 얼음 배스에서 냉각시키고, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.136 g)를 첨가하였다. 얼음 배스를 제거하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 대부분의 메탄올을 증발시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트와 포화 중탄산나트륨 용액 사이에 분배하고, 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 디클로로메탄 중 9 ％ 메탄올 및 1 ％ '880' 수성 암모니아로 용출시키는 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.078 g.
Figure pct00215
e) (R)-8-히드록시-5-(1-히드록시-2-(2-(5-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)티오펜-2-일)에틸아미노)에틸)퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00216
THF (4 mL)와 메탄올 (1 mL)의 혼합물 중 (R)-5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(2-(5-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)티오펜-2-일)에틸아미노)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (실시예 14, 단계 d) (0.078 g)의 용액을 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (0.022 mL)로 처리하고, 혼합물을 20 ℃에서 18시간 동안 방치하였다. 용매를 감압하에 증발시키고, 잔류물을 톨루엔과 함께 공비시켰다. 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→30 ％ 아세토니트릴). 바람직한 생성물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.021 g.
Figure pct00217
실시예 15
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(3-((4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 트리플루오로아세테이트
Figure pct00218
염화수소 (디에틸 에테르 중 2 M, 0.504 mL)를 메탄올 (10 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 아세테이트 (실시예 1, 단계 d) (0.222 g) 및 2-(3-((4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)아세트알데히드 (실시예 9, 단계 d) (0.320 g)의 교반 용액에 첨가하였다. 5분 후, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.100 g)를 첨가하고, 반응 혼합물을 밤새 교반하였다. 용액을 3 mL로 농축시키고, pH 7.2의 완충액 (80 mL)과 에틸 아세테이트 사이에 분배하였다. 포화 중탄산나트륨 용액을 수성층에 첨가한 후, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 에틸 아세테이트 용액을 합하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발 건조시켰다. 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 25→65 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발 건조시켰다. 아세토니트릴을 첨가하고, 용액을 진공하에 증발시키고, 상기 방법을 반복하였다. 디에틸 에테르를 첨가하고, 검을 분쇄하여, 표제 화합물을 고체로서 수득하였다. 수득량 0.017 g.
Figure pct00219
실시예 16
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(4-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00220
a) 2-(4-(브로모메틸)페닐)에탄올
Figure pct00221
20 ℃에서, 보란 디메틸술파이드 복합체 (THF 중 2 M, 4.37 mL)를 THF (20 mL) 중 2-(4-(브로모메틸)페닐)아세트산 (1.0 g)의 용액에 적가하고, 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 버블링이 중지될 때까지 메탄올을 적가하고, 용매를 진공하에 증발시켰다. 이소헥산 중 30 ％ 에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 백색 결정질 고체로서 수득하였다. 수득량 0.86 g.
Figure pct00222
b) (9-(4-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논
Figure pct00223
아세토니트릴 (10 mL) 중 (2-메틸티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 4, 단계 h) (0.791 g) 및 트리에틸아민 (0.697 mL)의 용액에 2-(4-(브로모메틸)페닐)에탄올 (실시예 16, 단계 a)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 밤새 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트 (25 mL)와 포화 중탄산나트륨 용액 (25 mL) 사이에 분배하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (25 mL씩 2회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (25 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.76 g.
Figure pct00224
c) 2-(4-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)아세트알데히드
Figure pct00225
0 ℃에서, TFA (0.030 mL)를 DCM (5 mL) 중 (9-(4-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논 (실시예 16, 단계 b) (0.16 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 데스-마틴 페리오디난 (0.245 g)을 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 45분 동안 교반하였다. 이어서, 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (20 mL)의 혼합물을 첨가하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수로 세척하였다. 이어서, AcOH (0.1 mL)를 첨가하고, 혼합물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였고, 이를 즉시 사용하였다. 수득량 0.16 g.
d) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(4-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00226
메탄올 (2 mL) 중 2-(4-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)아세트알데히드 (실시예 16, 단계 c) (0.08 g)의 용액을 메탄올 (0.5 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.076 g) 및 아세트산 (0.017 mL)의 혼합물에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 0 ℃로 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.012 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 C18 카트리지 (배리언 10 g)에 적용하였다. 카트리지를 물 (50 mL)로 세척하고, 메탄올 (50 mL)로 용출시켰다. 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→50 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 잔류물을 에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.66 g.
Figure pct00227
실시예 17
(R)-8-히드록시-5-(1-히드록시-2-(4-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00228
메탄올 (2 mL) 중 2-(4-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)아세트알데히드 (실시예 16, 단계 c) (0.08 g)의 용액을 메탄올 (0.5 mL) 중 (R)-5-(2-아미노-1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (WO02004106333) (0.097 g) 및 아세트산 (0.017 mL)의 혼합물에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 0 ℃로 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.018 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 C18 카트리지 (배리언 10 g)에 적용하였다. 카트리지를 물 (50 mL)로 세척하고, 메탄올 (50 mL)로 용출시켰다. 분획을 합하고, 증발시키고, 95:5:0.5 → 89:10:1의 DCM:메탄올:'880' 암모니아 용액으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 잔류물을 THF (2 mL) 중에 용해시키고, 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (0.047 mL)를 첨가하고, 혼합물을 밤새 교반하였다. 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→50 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 잔류물을 에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.07 g.
Figure pct00229
실시예 18
(R)-7-(2-(2,5-디메틸-4-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00230
a) 4-히드록시-2,5-디메틸벤조산
Figure pct00231
-78 ℃에서, 삼브롬화붕소 용액 (DCM 중 1 M, 7.21 mL)을 DCM (5 mL) 중 4-메톡시-2,5-디메틸벤조산 (1 g)의 현탁액에 적가하였다. 반응물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 반응물을 -78 ℃로 냉각시키고, 삼브롬화붕소 용액 (DCM 중 1 M, 7.21 mL)을 첨가하였다. 반응물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 반응물을 얼음 (약 50 mL) 상에 조심스럽게 부었다. 생성된 수용액을 DCM (50 mL씩 5회)으로 추출하였다. 유기 용액을 합하고, 염수 (50 mL)로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜, 부제 화합물을 황갈색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.75 g.
Figure pct00232
b) 메틸 4-히드록시-2,5-디메틸벤조에이트
Figure pct00233
아세틸 클로라이드 (0.107 mL)를 메탄올 (15 mL) 중 4-히드록시-2,5-디메틸벤조산 (실시예 18, 단계 a) (0.249 g)의 용액에 적가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 72시간 동안 교반하였다. 이어서, 아세틸 클로라이드 (0.107 mL)를 첨가하고, 반응물을 50 ℃로 가열하고, 상기 온도에서 밤새 교반하였다. 반응물을 농축시키고, 잔류물을 1:1 이소헥산:에틸 아세테이트 → 100 ％ 에틸 아세테이트 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.25 g.
Figure pct00234
c) 메틸 4-(2,2-디에톡시에톡시)-2,5-디메틸벤조에이트
Figure pct00235
2-브로모-1,1-디에톡시에탄 (0.31 mL)을 DMF (20 mL) 중 메틸 4-히드록시-2,5-디메틸벤조에이트 (실시예 18, 단계 b) (0.25 g) 및 탄산세슘 (0.68 g)의 혼합물에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 85 ℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 물 (200 mL)과 에틸 아세테이트 (100 mL) 사이에 분배하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (100 mL씩 2회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 물 (100 mL씩 2회) 및 염수 (100 mL)로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 이소헥산 → 10:1 이소헥산:에틸 아세테이트 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였다. 수득량 0.26 g.
Figure pct00236
d) (4-(2,2-디에톡시에톡시)-2,5-디메틸페닐)메탄올
Figure pct00237
0 ℃에서, 수소화리튬알루미늄 용액 (THF 중 1 M, 1.17 mL)을 THF (20 mL) 중 메틸 4-(2,2-디에톡시에톡시)-2,5-디메틸벤조에이트 (실시예 18, 단계 c) (0.231 g)의 용액에 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 에탄올 (0.5 mL)을 조심스럽게 첨가하고, 반응물을 농축시켰다. 잔류물을 1 M NaOH (50 mL)와 에틸 아세테이트 (100 mL) 사이에 분배하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (50 mL씩 2회)로 추출하였다. 합한 유기물을 염수 (50 mL)로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였다. 수득량 0.20 g.
Figure pct00238
e) (9-(2-(4-(히드록시메틸)-2,5-디메틸페녹시)에틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논
Figure pct00239
아세트산 (5 mL)과 물 (5 mL)의 혼합물 중 (4-(2,2-디에톡시에톡시)-2,5-디메틸페닐)메탄올 (실시예 18, 단계 d) (0.2 g)의 용액을 65 ℃에서 1시간 동안 가열하고, 실온으로 냉각시켰다. 반응 혼합물을 포화 중탄산나트륨 용액 (50 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트 (25 mL씩 3회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (25 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (5 mL) 중에 재용해시키고, 아세트산 (5 mL)을 첨가하고, 이어서 (2-메틸티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 4, 단계 h) (0.35 g)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 15분 동안 교반한 후, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.07 g)을 첨가하고, 혼합물을 밤새 교반하였다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트 (50 mL)와 포화 중탄산나트륨 용액 (20 mL) 사이에 분배하였다. 층을 분리하고, 수성상을 에틸 아세테이트 (30 mL씩 2회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (20 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 47.5:47.5:5의 에틸 아세테이트:이소헥산:트리에틸아민 → 95:5의 에틸 아세테이트:트리에틸아민 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.12 g.
Figure pct00240
f) 2,5-디메틸-4-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤즈알데히드
Figure pct00241
이산화망간 (0.32 g)을 DCM (10 mL) 중 (9-(2-(4-(히드록시메틸)-2,5-디메틸페녹시)에틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논 (실시예 18, 단계 e) (0.17 g)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 환류 온도에서 4시간 동안 가열하였다. 반응물을 셀라이트를 통해 여과하고, 필터 패드를 DCM (50 mL씩 2회)으로 세척하였다. 모액 및 세척액을 합하고, 증발시켜, 부제 화합물을 황색 검으로서 수득하였다. 수득량 0.17 g.
Figure pct00242
g) (R)-7-(2-(2,5-디메틸-4-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00243
2,5-디메틸-4-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤즈알데히드 (실시예 18, 단계 f) (0.08 g)를 메탄올 (2 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.07 g) 및 아세트산 (0.010 mL)의 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 교반한 후, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.016 g)를 첨가하고, 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트 (50 mL)와 pH 7.2의 포스페이트 완충액 (50 mL) 사이에 분배하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (50 mL씩 2회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (20 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 95:5:0.5 → 92:8:0.8 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켰다. 추가로 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→50 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 잔류물을 에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.069 g.
Figure pct00244
실시예 19
(R)-7-(2-(3-플루오로-5-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00245
a) 2-(3-(브로모메틸)-5-플루오로페닐)아세트산
Figure pct00246
벤조일 퍼옥사이드 (0.05 g)를 DCM (10 mL) 중 2-(3-플루오로-5-메틸페닐)아세트산 (0.518 g) 및 N-브로모숙신이미드 (0.6 g)의 혼합물에 첨가하였다. 반응물을 1시간 동안 환류하에 가열하였다. DCM (10 mL) 및 물 (20 mL)을 첨가하고, 유기상을 분리하였다. 유기층을 염수 (20 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 톨루엔 중에서 분쇄하고, 생성된 백색 고체를 여과에 의해 제거하였다. 모액을 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 백색 고체로서 수득하였고, 이를 다음 단계에서 추가 정제없이 사용하였다. 수득량 0.38 g.
b) (9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논
Figure pct00247
0 ℃에서, 보란 디메틸술파이드 복합체의 용액 (THF 중 2 M, 3.85 mL)을 THF (10 mL) 중 2-(3-(브로모메틸)-5-플루오로페닐)아세트산 (실시예 19, 단계 a) (0.38 g)의 용액에 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 0 ℃로 냉각시키고, 버블링이 중지될 때까지 메탄올 (1 mL)을 적가하였다. 용매를 진공하에 증발시키고, 잔류물을 MeCN (10 mL) 중에 재용해시켰다. 이어서, (2-메틸티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 4, 단계 h) (0.61 g)를 첨가한 후, 트리에틸아민 (0.54 mL)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 70시간 동안 교반하였다. 이어서, 용매를 진공하에 증발시켰다. 99:1:0.1 → 94.5:5:0.5의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 황색 포말로서 수득하였다. 수득량 0.57 g.
Figure pct00248
c) 2-(3-플루오로-5-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)아세트알데히드
Figure pct00249
0 ℃에서, TFA (0.08 mL)를 DCM (5 mL) 중 (9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논 (실시예 19, 단계 b) (0.46 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 이어서, 데스-마틴 페리오디난 (0.68 g)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 45분 동안 교반하였다. 이어서, 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (20 mL)를 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수로 세척하고, 아세트산 (0.1 mL)을 사용하여 산성화시키고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 황색 검으로서 수득하였다. 수득량 0.4 g.
Figure pct00250
d) (R)-7-(2-(3-플루오로-5-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00251
메탄올 (3 mL) 중 2-(3-플루오로-5-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)아세트알데히드 (실시예 19, 단계 c) (0.2 g)의 용액을 메탄올 (0.5 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.18 g) 및 아세트산 (0.04 mL)의 혼합물에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 0 ℃로 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.03 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시키고, 95:5:0.5 → 89:10:1의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→50 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 잔류물을 에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.018 g.
Figure pct00252
실시예 20
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(3-(2-(4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에틸)벤질아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00253
a) 2-(3-(히드록시메틸)페닐)에탄올
Figure pct00254
수소화리튬알루미늄 (디에틸 에테르 중 1 M, 5.55 mL)을 얼음 배스에서 냉각시킨 테트라히드로푸란 (15 mL) 중 메틸 3-(2-히드록시에틸)벤조에이트 (1.0 g)의 교반 용액에 5분에 걸쳐 적가하였다. 1시간 후, 반응 혼합물을 메탄올로 켄칭하고, 진공하에 증발시켰다. 에틸 아세테이트:이소헥산 (2:1)에 이어서 에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 0.5 g.
Figure pct00255
b) 3-(2-히드록시에틸)벤즈알데히드
Figure pct00256
실온에서, 이산화망간 (IV) (2.0 g)을 DCM (10 mL) 중 2-(3-(히드록시메틸)페닐)에탄올 (실시예 20, 단계 a) (0.50 g)의 교반 용액에 첨가하였다. 6시간 후, 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하였다 (DCM으로 용출). 용액을 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 직접 사용하였다. 수득량 0.46 g.
c) 2-(3-(디에톡시메틸)페닐)에탄올
Figure pct00257
염화암모늄 (0.08 g)을 EtOH (8 mL) 중 3-(2-히드록시에틸)벤즈알데히드 (실시예 20, 단계 b) (0.45 g) 및 트리에톡시메탄 (0.55 g)의 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 70 ℃에서 3시간 동안 가열하였다. 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트와 포화 중탄산나트륨 용액 사이에 분배하였다. 에틸 아세테이트 용액을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 0.24 g.
Figure pct00258
d) 3-(디에톡시메틸)페네틸 메탄술포네이트
Figure pct00259
디클로로메탄 (0.2 mL) 중 메탄술포닐 클로라이드 (0.18 g)를 얼음 배스에서 냉각시킨 디클로로메탄 (2.5 mL) 중 2-(3-(디에톡시메틸)페닐)에탄올 (실시예 20, 단계 c) (0.23 g) 및 트리에틸아민 (0.429 mL)의 교반 용액에 첨가하였다. 1시간 후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트와 포화 중탄산나트륨 용액 사이에 분배하였다. 에틸 아세테이트 층을 포화 중탄산나트륨 용액 및 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 0.28 g.
Figure pct00260
e) (9-(3-(디에톡시메틸)페네틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-메틸티오펜-2-일)메타논
Figure pct00261
아세토니트릴 (1.5 mL) 중 3-(디에톡시메틸)페네틸 메탄술포네이트 (실시예 20, 단계 d) (0.30 g)를 아세토니트릴 (1.5 mL) 중 (5-메틸티오펜-2-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 9, 단계 b) (0.391 g) 및 트리에틸아민 (0.415 mL)의 교반 용액에 첨가하고, 용액을 70 ℃에서 48시간 동안 가열하였다. 냉각시킨 후, 용액을 진공하에 증발시키고, 정제를 위해 에틸 아세테이트:이소헥산:트리에틸아민 (60:40:5)으로 용출시키는 실리카겔 컬럼에 적용하여, 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 0.2 g.
Figure pct00262
f) 3-(2-(4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에틸)벤즈알데히드
Figure pct00263
포름산 (2 mL)을 얼음 배스에서 냉각시킨 물 (1 mL) 및 테트라히드로푸란 (3 mL) 중 (9-(3-(디에톡시메틸)페네틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-메틸티오펜-2-일)메타논 (실시예 20, 단계 e) (0.20 g)의 교반 용액에 첨가하였다. 10분 후, 반응 혼합물을 진공하에 증발시키고, 톨루엔을 첨가하고, 반응 혼합물을 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 아세토니트릴 중에 용해시킨 후, 진공하에 증발시키고, 상기 방법을 반복하여, 부제 화합물을 오일로서 수득하였고, 이를 직접 사용하였다. 수득량 0.16 g.
Figure pct00264
g) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(3-(2-(4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에틸)벤질아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00265
아세트산 (0.033 mL)을 메탄올 (10 mL) 중 3-(2-(4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에틸)벤즈알데히드 (실시예 20, 단계 f) (0.17 g) 및 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.15 g)의 교반 용액에 첨가하였다. 2분 후, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.10 g)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 메탄올 용액을 약 3 mL로 농축시키고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 검성 (gummy) 침전물이 형성되었다. 에틸 아세테이트를 경사분리하고, 포화 중탄산나트륨 용액 및 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 검을 소량의 메탄올 중에 용해시키고, 에틸 아세테이트에 첨가하였다. 에틸 아세테이트를 여과하고, 진공하에 증발시켜, 백색 고체를 수득하였다. 고체를 메탄올 중에 용해시키고, 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 15→50 ％ 아세토니트릴). 순수한 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발 건조시켰다. 디에틸 에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.11 g.
Figure pct00266
실시예 21
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-((5-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에틸)티오펜-2-일)메틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00267
a) 5-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-카르브알데히드
Figure pct00268
tert-부틸디메틸실릴클로라이드 (2.82 g)를 DMF (20 mL) 중 2-(티오펜-2-일)에탄올 (2 g) 및 이미다졸 (1.275 g)의 교반 용액에 20 ℃에서 20분의 기간에 걸쳐 조금씩 첨가하였다. 혼합물을 20 ℃에서 18시간 동안 교반한 후, 에틸 아세테이트와 물 사이에 분배하고, 유기층을 물로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다 (용리 구배: 이소헥산 중 1→4 ％ 에틸 아세테이트). 잔류물 (2.7 g)을 THF (50 mL) 중에 용해시키고, 용액을 -78 ℃로 냉각시키고, n-부틸리튬 (헥산 중 2.5 M, 5.06 mL)을 10분에 걸쳐 적가하고, 생성된 혼합물을 0 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 -78 ℃로 냉각시키고, DMF (5.7 mL)를 5분에 걸쳐 적가하였다. 혼합물을 20 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물과 에틸 아세테이트 사이에 분배하고, 유기층을 물로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 용매를 감압하에 제거하였다. 조 생성물을 이소헥산 중 7 ％ 에틸 아세테이트로 용출시키는 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 2.3 g.
Figure pct00269
b) 2-(5-(디에톡시메틸)티오펜-2-일)에탄올
Figure pct00270
에탄올 (15 mL) 중 5-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-카르브알데히드 (실시예 21, 단계 a) (1.37 g) 및 염화암모늄 (0.135 g) 및 트리에틸 오르토포르메이트 (0.928 mL)의 혼합물을 환류 온도에서 질소하에 3시간 동안 가열하였다. 대부분의 에탄올을 감압하에 제거하고, 나머지 혼합물을 에틸 아세테이트와 포화 중탄산나트륨 용액 사이에 분배하고, 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 THF (20 mL) 중에 용해시키고, 테트라부틸암모늄 플루오라이드 (THF 중 1 M, 5.07 mL)를 1분에 걸쳐 적가하였다. 혼합물을 실온에서 30분 동안 방치하였다. 용매를 감압하에 제거하고, 잔류물을 이소헥산 중 25 ％ 에틸 아세테이트로 용출시키는 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.940 g.
Figure pct00271
c) 5-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에틸)티오펜-2-카르브알데히드
Figure pct00272
디클로로메탄 (20 mL) 중 2-(5-(디에톡시메틸)티오펜-2-일)에탄올 (실시예 21, 단계 b) (0.54 g)의 용액을 트리에틸아민 (0.359 mL)으로 처리하고, 혼합물을 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 디클로로메탄 (3 mL) 중 메탄술포닐 클로라이드 (0.183 mL)의 용액을 2분에 걸쳐 적가하고, 반응 혼합물을 0 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물로 세척하고, 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 아세토니트릴 (7 mL)과 DMF (1 mL)의 혼합물 중에 용해시키고, 트리에틸아민 (0.654 mL)에 이어서 (2-메틸티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 4, 단계 h) (0.5 g)를 첨가하고, 70 ℃에서 10시간 동안 가열하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 포화 중탄산나트륨 용액 사이에 분배하고, 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 THF (5 mL) 중에 용해시키고, 얼음 배스에서 냉각시키고, 포름산 (4 mL)에 이어서 물 (1 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 0 ℃에서 10분 동안 방치하였다. 용매를 감압하에 제거하고, 잔류물을 톨루엔과 함께 2회 공비시키고, 아세토니트릴과 함께 2회 공비시켰다. 조 생성물을 용매로서 디클로로메탄 중 1 ％ 트리에틸아민 및 2 ％ 메탄올을 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.52 g.
Figure pct00273
d) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-((5-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에틸)티오펜-2-일)메틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00274
메탄올 (8 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.22 g)의 용액을 아세트산 (0.041 mL)으로 처리하고, 이어서 메탄올 (2 mL) 중 5-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에틸)티오펜-2-카르브알데히드 (실시예 21, 단계 c) (0.3 g)의 용액으로 처리하였다. 혼합물을 얼음 배스에서 냉각시키고, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.067 g)로 처리하였다. 이어서, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 대부분의 메탄올을 감압하에 증발시키고, 나머지를 THF (50 mL), 염수 (10 mL) 및 포화 중탄산나트륨 용액 (1 mL) 사이에 분배하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 생성물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.08 g.
Figure pct00275
실시예 22
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00276
a) tert-부틸 4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트
Figure pct00277
DMF (30 mL) 중 2-이소프로필티아졸-4-카르복실산 (1 g) 및 tert-부틸 1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 히드로클로라이드 (우시 파마테크) (1.71 g)의 용액을 얼음 배스에서 냉각시키고, 트리에틸아민 (2.442 mL)으로 처리하고, 이어서 HATU (2.89 g)로 처리하였다. 얼음 배스를 제거하고, 혼합물을 20 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하고, 유기층을 염수로 2회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 용매로서 이소헥산 중 70 ％ 에틸 아세테이트를 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 2 g.
Figure pct00278
b) (2-이소프로필티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트
Figure pct00279
디클로로메탄 (40 mL)과 트리플루오로아세트산 (10 mL)의 혼합물 중 tert-부틸 4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 (실시예 22, 단계 a) (2.3 g)의 용액을 20 ℃에서 30분 동안 방치하였다. 톨루엔 (50 mL)을 첨가하고, 용매를 증발시킨 후, 추가의 톨루엔 (50 mL)을 사용하여 상기 방법을 반복하였다. 잔류물을 에테르 중에서 분쇄하였다. 이어서, 검을 아세토니트릴 중에 용해시키고, 용매를 증발시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 1.64 g.
Figure pct00280
c) (9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct00281
20 ℃에서, 아세토니트릴 (10 mL) 중 (2-이소프로필티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 22, 단계 b) (0.85 g) 및 2-(3-(브로모메틸)페닐)에탄올 (실시예 6, 단계 a) (0.432 g)의 혼합물을 트리에틸아민 (0.616 mL)으로 처리하고, 이어서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 증발시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하고, 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다 (용리 구배: 디클로로메탄 중 1 ％ 트리에틸아민 및 3 ％ 메탄올). 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.71 g.
Figure pct00282
d) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00283
디클로로메탄 (10 mL) 중 (9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 22, 단계 c) (0.3 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (0.052 mL)에 이어서 데스-마틴 페리오디난 (0.402 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (10 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (10 mL) 및 에틸 아세테이트 (10 mL)로 처리하고, 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 아세트산 (0.039 mL)으로 처리하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (2 mL) 중에 용해시키고, 0 ℃에서 메탄올 (10 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.2 g) 및 아세트산 (0.039 mL)의 용액에 첨가하였다. 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.064 g)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 대부분의 메탄올을 감압하에 증발시키고, 나머지를 THF (50 mL), 염수 (10 mL) 및 포화 중탄산나트륨 용액 (1 mL) 사이에 분배하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 생성물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.170 g.
Figure pct00284
실시예 23
(R)-8-히드록시-5-(1-히드록시-2-(3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00285
a) (R)-5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온
Figure pct00286
DCM (10 mL) 중 (9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 22, 단계 c) (0.159 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (0.028 mL)에 이어서 데스-마틴 페리오디난 (0.213 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (10 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (10 mL) 및 에틸 아세테이트 (10 mL)로 처리하고, 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 아세트산 (0.039 mL)으로 처리하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (2 mL) 중에 용해시키고, 메탄올 (10 mL) 중 (R)-5-(2-아미노-1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (WO2004106333) (0.12 g) 및 아세트산 (0.021 mL)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 얼음 배스에서 냉각시키고, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.114 g)로 처리한 후, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 메탄올을 감압하에 제거하고, 잔류물을 포화 중탄산나트륨 용액과 에틸 아세테이트 사이에 분배하고, 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 조 생성물을 용매로서 디클로로메탄 중 1 ％ '880' 수성 암모니아 및 8 ％ 메탄올을 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.127 g.
Figure pct00287
b) (R)-8-히드록시-5-(1-히드록시-2-(3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00288
THF (4 mL) 중 (R)-5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (실시예 23, 단계 a) (0.127 g)의 용액을 메탄올 (1 mL) 중 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (0.035 mL)의 용액으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 18시간 동안 방치하였다. 용매를 감압하에 제거하고, 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.085 g.
Figure pct00289
실시예 24
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(3-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00290
a) 2-(3-(2,2-디에톡시에톡시)페닐)에탄올
Figure pct00291
탄산세슘 (8.84 g)을 DMF (50 mL) 중 3-(2-히드록시에틸)페놀 (2.5 g) 및 2-브로모-1,1-디에톡시에탄 (3.74 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 90 ℃에서 밤새 교반한 후, 냉각시켰다. 혼합물을 물에 붓고, 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합한 추출물을 물과 염수로 세척한 후, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 실리카 상에서 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 (이소헥산 중 디에틸 에테르의 구배로 용출), 부제 화합물을을 연한 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 3.0 g.
Figure pct00292
b) 2-(3-(2-히드록시에틸)페녹시)아세트알데히드
Figure pct00293
진한 염산 (1.5 mL)을 1,4-디옥산 (3 mL) 중 2-(3-(2,2-디에톡시에톡시)페닐)에탄올 (실시예 24 단계 a) (0.256 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 1.5시간 동안 교반하였다. 이어서, 용액을 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 합한 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 부제 화합물을 백색 포말로서 수득하였다. 수득량 0.150 g.
Figure pct00294
c) (9-(2-(3-(2-히드록시에틸)페녹시)에틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논
Figure pct00295
메탄올 (10 mL) 중 2-(3-(2-히드록시에틸)페녹시)아세트알데히드 (실시예 24, 단계 b) (0.143 g) 및 (2-메틸티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 4, 단계 h) (0.314 g)의 현탁액을 아세트산 (0.045 mL)으로 처리하고, 실온에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 얼음-물 중에서 냉각시키고, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.254 g)로 처리하고, 얼음 배스를 배기시키면서 3일에 걸쳐 교반하였다. 생성된 용액을 실리카 상에서 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 (1:15:84의 트리에틸아민:메탄올:디클로로메탄으로 용출), 조 생성물 (0.243 g)을 수득하였다. 실리카 상에서 플래쉬 크로마토그래피로 2차 정제하여 (1:5:94의 트리에틸아민:메탄올:디클로로메탄으로 용출), 약간 순수하지 않은 부제 화합물을 갈색 검으로서 수득하였다. 수득량 0.122 g.
Figure pct00296
d) 2-(3-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)페닐)아세트알데히드
Figure pct00297
DCM (5 mL) 중 (9-(2-(3-(2-히드록시에틸)페녹시)에틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논 (실시예 24, 단계 c) (0.152 g)의 용액을 얼음-물 중에서 냉각시키고, 트리플루오로아세트산 (0.039 mL)으로 처리하고, 5분 동안 교반하였다. 데스-마틴 페리오디난 (0.221 g)을 첨가하고, 혼합물을 냉각 배스로부터 꺼내고, 실온에서 25분 동안 교반하였다. 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (5 mL)를 첨가하여 반응물을 켄칭하고, 생성된 2-상 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기 추출물을 염수로 세척하였다. 아세트산 (0.1 mL)을 첨가한 후, 산성화된 추출물을 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 부제 화합물을 갈색 검으로서 수득하였다. 수득량 0.118 g.
Figure pct00298
e) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(3-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00299
메탄올 (2 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.105 g)의 용액을 아세트산 (0.023 mL)으로 처리하고, 5분 동안 교반하였다. 이어서, 메탄올 (3 mL) 중 2-(3-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)페닐)아세트알데히드 (실시예 24, 단계 d) (0.117 g)의 용액을 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반한 후, 얼음-물 중에서 냉각시키고, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.085 g)로 처리하였다. 혼합물을 얼음 중에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 추가의 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.086 g)를 첨가하였다. 혼합물을 얼음 중에서 1시간 동안 교반한 후, 추가의 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.169 g)를 첨가하고, 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 추가의 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.506 g)을 첨가하고, 혼합물을 이를 실온으로 서서히 가온하면서 이를 밤새 교반하였다. 다음 날, 혼합물을 다시 얼음-물 중에서 냉각시키고, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.254 g)로 처리하고, 얼음-물 중에서 45분 동안 교반한 후, 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 아세토니트릴 (3 mL)과 물 (1.5 mL)의 혼합물 중에 용해시키고, 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→50 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 진공하에 농축시키고, 아세토니트릴로부터 2회 공동-증발시켜, 무색 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 디에틸 에테르 중에서 분쇄하여, 고체를 수득하였고, 이를 여과에 의해 수집하고, 디에틸 에테르로 세척하고, 진공하에 실온에서 건조시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.011 g.
Figure pct00300
실시예 25
(R)-8-히드록시-5-(1-히드록시-2-(3-((4-(2-(트리플루오로메틸)티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00301
a) 1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일(2-(트리플루오로메틸)티아졸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트
Figure pct00302
DMF (10 mL) 중 tert-부틸 1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 히드로클로라이드 (우시 파마테크) (0.594 g) 및 2-(트리플루오로메틸)티아졸-4-카르복실산 (0.4 g)의 용액을 트리에틸아민 (0.848 mL)으로 처리하고, 0 ℃로 냉각시켰다. HATU (1.003 g)를 첨가하고, 혼합물을 20 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하고, 유기층을 염수로 2회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 이소헥산 중 40 ％ 에틸 아세테이트로 용출시키는 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하여, 생성물을 유리 염기로서 수득하였다. 이를 디클로로메탄 (40 mL) 중에 용해시키고, 트리플루오로아세트산 (10 mL)으로 처리한 후, 혼합물을 20 ℃에서 1시간 동안 방치하였다. 톨루엔 (60 mL)을 첨가하고, 용매를 감압하에 제거하여, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.740 g.
Figure pct00303
b) (9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-(트리플루오로메틸)티아졸-4-일)메타논
Figure pct00304
2-(3-(브로모메틸)페닐)에탄올 (실시예 6, 단계 a) (0.354 g)을 아세토니트릴 (15 mL) 중 1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일(2-(트리플루오로메틸)티아졸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 25, 단계 a) (0.74 g) 및 트리에틸아민 (0.689 mL)의 용액에 첨가하고, 혼합물을 20 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 증발시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트와 포화 중탄산나트륨 용액 사이에 분배하고, 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 용매로서 디클로로메탄 중 1 ％ 트리에틸아민 및 3 ％ 메탄올을 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.640 g.
Figure pct00305
c) (R)-5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(3-((4-(2-(트리플루오로메틸)티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온
Figure pct00306
디클로로메탄 (10 mL) 중 (9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-(트리플루오로메틸)티아졸-4-일)메타논 (실시예 25, 단계 b) (0.211 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (0.035 mL)에 이어서 데스-마틴 페리오디난 (0.266 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (10 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (10 mL) 및 에틸 아세테이트 (10 mL)로 처리하고, 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 아세트산 (0.026 mL)으로 처리하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (2 mL) 중에 용해시키고, 메탄올 (10 mL) 중 (R)-5-(2-아미노-1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (WO2004106333) (0.150 g) 및 아세트산 (0.026 mL)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 얼음 배스에서 냉각시키고, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.143 g)로 처리한 후, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 메탄올을 감압하에 제거하고, 잔류물을 포화 중탄산나트륨 용액과 에틸 아세테이트 사이에 분배하고, 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 조 생성물을 용매로서 디클로로메탄 중 1 ％ '880' 수성 암모니아 및 8 ％ 메탄올을 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.11 g.
Figure pct00307
d) (R)-8-히드록시-5-(1-히드록시-2-(3-((4-(2-(트리플루오로메틸)티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00308
메탄올 (1 mL) 중 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (0.030 mL)를 THF (4 mL) 중 (R)-5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(3-((4-(2-(트리플루오로메틸)티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (실시예 25, 단계 c) (0.11 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 용액을 20 ℃에서 18시간 동안 방치하였다. 용매를 감압하에 제거하고, 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물 0.075 g을 수득하였다.
Figure pct00309
실시예 26
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(3-((4-(2-(트리플루오로메틸)티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00310
디클로로메탄 (10 mL) 중 (9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-(트리플루오로메틸)티아졸-4-일)메타논 (실시예 25, 단계 b) (0.268 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (0.044 mL)에 이어서 데스-마틴 페리오디난 (0.339 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (10 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (10 mL) 및 에틸 아세테이트 (10 mL)로 처리하고, 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 아세트산 (0.033 mL)으로 처리하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (2 mL) 중에 용해시키고, 메탄올 (10 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.15 g) 및 아세트산 (0.033 mL)의 용액 (0 ℃)에 첨가하였다. 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.054 g)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 대부분의 메탄올을 감압하에 증발시키고, 나머지를 THF (50 mL), 염수 (10 mL) 및 포화 중탄산나트륨 용액 (1 mL) 사이에 분배하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.13 g.
Figure pct00311
실시예 27
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(2-(5-((4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)티오펜-3-일)에틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00312
a) tert-부틸디메틸(2-(티오펜-3-일)에톡시)실란
Figure pct00313
tert-부틸클로로디메틸실란 (3.88 g)을 얼음 배스에서 냉각시킨 DMF (30 mL) 중 2-(티오펜-3-일)에탄올 (3.00 g) 및 1H-이미다졸 (4.78 g)의 교반 용액에 첨가하였다. 16시간 후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 (300 mL)로 희석하고 물 (150 mL씩 3회)로 세척하고, 진공하에 증발시켰다. 이소헥산에 이어서 1:5의 에틸 아세테이트:이소헥산으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 오일로서 수집하였다. 수득량 5.2 g.
Figure pct00314
b) 4-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-카르브알데히드와 3-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-카르브알데히드의 혼합물
Figure pct00315
n-부틸리튬 (헥산 중 1.6 M, 7 mL)을 -78 ℃에서 냉각시킨 테트라히드로푸란 (60 mL) 중 tert-부틸디메틸(2-(티오펜-3-일)에톡시)실란 (실시예 27, 단계 a) (2.210 g)의 교반 용액에 적가하였다. 첨가 후, 반응 혼합물을 얼음 배스에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 -78 ℃로 냉각시켰다. N,N-디메틸포름아미드 (9.00 g)를 5분에 걸쳐 적가하고, 추가로 10분 후에 냉각 배스를 제거하였다. 1시간 후, 반응 혼합물을 물과 에틸 아세테이트 사이에 분배하고, 에틸 아세테이트 용액을 물로 2회, 염수로 1회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 1:20의 에틸 아세테이트:이소헥산으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 4-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-카르브알데히드와 3-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-카르브알데히드의 4:1 혼합물 (1H NMR에 의함)을 오일로서 수득하였다. 수득량 1.3 g.
4-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-카르브알데히드:
Figure pct00316
3-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-카르브알데히드:
Figure pct00317
c) (9-((4-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-메틸티오펜-2-일)메타논
Figure pct00318
(5-메틸티오펜-2-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 9, 단계 b) (0.230 g)를 N-메틸-2-피롤리디논 (3 mL) 중 4-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-카르브알데히드와 3-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-카르브알데히드 (실시예 27, 단계 b)의 4:1 혼합물 (0.20 g) 및 AcOH (0.033 mL)의 교반 용액에 첨가하였다. 5분 후, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.35 g)를 첨가하였다. 16시간 후, 물을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 에틸 아세테이트 층을 물로 3회 세척하고, 진공하에 증발시켰다. 20:80:5의 에틸 아세테이트:이소헥산:트리에틸아민으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하고, 2개의 이성질체 생성물을 분리하여, 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 0.21 g.
Figure pct00319
d) (9-((4-(2-히드록시에틸)티오펜-2-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-메틸티오펜-2-일)메타논
Figure pct00320
테트라부틸암모늄 플루오라이드 (테트라히드로푸란 중 1 M, 2 mL)를 테트라히드로푸란 (7 mL) 중 (9-((4-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-메틸티오펜-2-일)메타논 (실시예 27, 단계 c) (0.65 g)의 용액에 첨가하였다. 1시간 후, 용액을 진공하에 증발시켰다. 20:1의 에틸 아세테이트:트리에틸아민으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 0.45 g.
Figure pct00321
e) 2-(5-((4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)티오펜-3-일)아세트알데히드
Figure pct00322
데스-마틴 페리오디난 (0.35 g)을 DCM (5 mL) 중 (9-((4-(2-히드록시에틸)티오펜-2-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-메틸티오펜-2-일)메타논 (실시예 27, 단계 d) (0.19 g) 및 트리플루오로아세트산 (0.052 mL)의 교반 용액에 첨가하였다. 1시간 후, 에틸 아세테이트 (30 mL)를 첨가하고, 이어서 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL)과 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL)의 혼합물을 첨가하였다. 반응 혼합물을 잘 진탕하고, 분리하였다. 에틸 아세테이트 용액을 포화 중탄산나트륨 용액, 물 및 염수로 세척하였다. 아세트산 (0.07 mL)을 첨가하고, 용액을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켜 (배스 온도 약 30 ℃), 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 0.19 g. 직접 사용하였다.
f) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(2-(5-((4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)티오펜-3-일)에틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00323
아세트산 (0.039 g)을 MeOH (10 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.17 g) 및 2-(5-((4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)티오펜-3-일)아세트알데히드 (실시예 27, 단계 e) (0.19 g)의 교반 용액에 첨가하였다. 1분 후, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.10 g)를 첨가하였다. 3시간 후, 반응 혼합물을 진공하에 약 2 mL로 농축시키고, THF (20 mL)를 첨가하고, 용액을 염수 (10 mL)와 포화 중탄산나트륨 용액 (2 mL)의 혼합물로 세척하였다. 유기 용액을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 고체를 메탄올에 용해시키고, 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발 건조시켰다. 아세토니트릴을 첨가하고, 용액 진공하에 증발시키고, 상기 방법을 반복하였다. 디에틸 에테르를 첨가하고, 검을 분쇄하여, 표제 화합물을 고체로서 수득하였다. 수득량 0.097 g.
Figure pct00324
실시예 28
(R)-5-(2-(3-플루오로-5-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00325
메탄올 (3 mL) 중 2-(3-플루오로-5-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)아세트알데히드 (실시예 19, 단계 c) (0.2 g)의 용액을 메탄올 (3 mL) 중 (R)-5-(2-아미노-1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (WO2004106333) (0.23 g) 및 아세트산 (0.027 mL)의 혼합물에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 0 ℃로 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.044 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시키고, 95:5:0.5 → 89:10:1의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 THF (3 mL) 중에 용해시키고, 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (0.11 mL)를 첨가하고, 혼합물을 밤새 교반하였다. 반응물을 진공하에 농축시켰다. 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→50 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.021 g.
Figure pct00326
실시예 29
(R)-7-(2-(4-플루오로-3-((4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00327
a) 2-(4-플루오로-3-메틸페닐)아세트산
Figure pct00328
2-(4-플루오로-3-메틸페닐)아세토니트릴 (1 g) 및 수산화나트륨 (0.8 g)을 메탄올 (10 mL)과 물 (3 mL)의 혼합물 중에서 합하였다. 이어서, 생성된 혼합물을 환류 온도에서 밤새 가열하였다. 반응물을 진공하에 농축시키고, 잔류물을 물 (25 mL) 중에 용해시켰다. 수성상을 에테르 (25 mL씩 2회)로 세척하고, 진한 염산을 사용하여 산성화시키고, 에테르 (25 mL씩 3회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 1.1 g.
Figure pct00329
b) (9-(2-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-메틸티오펜-2-일)메타논
Figure pct00330
벤조일 퍼옥사이드 (0.058 g)를 DCM (10 mL) 중 2-(4-플루오로-3-메틸페닐)아세트산 (0.6 g) (실시예 29, 단계 a) 및 N-브로모숙신이미드 (0.7 g)의 혼합물에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 환류 온도에서 4시간 동안 가열하였다. DCM (10 mL) 및 물 (20 mL)을 첨가하고, 유기상을 분리하였다. 유기상을 염수 (20 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 THF (10 mL) 중에 재용해시키고, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 보란 디메틸 술파이드의 용액 (THF 중 2 M, 4.46 mL)을 적가하고, 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 메탄올 (2 mL)을 조심스럽게 첨가하고, 버블링이 중지되는 대로 용매를 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 아세토니트릴 (10 mL) 중에 재용해시키고, (5-메틸티오펜-2-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 9, 단계 b) (0.7 g)에 이어서 트리에틸아민 (1.49 mL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 밤새 교반하한 후, 진공하에 농축시켰다. 99:1:0.1 → 97:3:0.3의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜, 부제 화합물을 포말로서 수득하였다. 수득량 0.46 g.
Figure pct00331
c) (R)-7-(2-(4-플루오로-3-((4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00332
0 ℃에서, TFA (0.032 mL)를 DCM (5 mL) 중 (9-(2-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-메틸티오펜-2-일)메타논 (실시예 29, 단계 b) (0.18 g)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난 (0.27 g)을 첨가하였다. 생성된 황색 용액을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (25 mL)의 혼합물을 첨가하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 격렬하게 교반하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (25 mL)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수로 세척하고, 아세트산 몇 방울을 사용하여 산성화시키고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (5 mL) 중에 용해시키고, 이어서 아세트산 (0.012 mL) 및 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.17 g)를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.039 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시켰다. 94.5:5:0.5 → 89:10:1의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켰다. 추가로 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→30 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 잔류물을 디에틸 에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.11 g.
Figure pct00333
실시예 30
(R)-메틸 5-(9-(3-(2-(2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸아미노)에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-카르보닐)티오펜-2-카르복실레이트 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00334
a) tert-부틸 4-(5-(메톡시카르보닐)티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트
Figure pct00335
DMF (10 mL) 중 tert-부틸 1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 히드로클로라이드 (우시 파마테크) (0.6 g) 및 티오펜-2,5-디카르복실산 (1.7 g)의 용액을 트리에틸아민 (2.75 mL)으로 처리하고, 0 ℃로 냉각시켰다. HATU (1.013 g)를 첨가하고, 혼합물을 20 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 아세트산 (2 mL)을 함유하는 염수와 에틸 아세테이트 사이에 혼합물을 분배하고, 유기층을 염수로 2회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 용매로서 에틸 아세테이트 중 1 ％ 아세트산을 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 상기 물질을 THF (30 mL) 중에 용해시키고, 카르보닐디이미다졸 (0.332 g)로 처리하고, 혼합물을 45 ℃에서 1시간 동안 방치하였다. 메탄올 (20 mL)을 첨가하고, 반응물을 50 ℃에서 30분 동안 가열하였다. 용매를 감압하에 제거하고, 잔류물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 용매로서 이소헥산 중 40 ％ 에틸 아세테이트를 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.45 g.
Figure pct00336
b) 메틸 5-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-카르보닐)티오펜-2-카르복실레이트 트리플루오로아세테이트
Figure pct00337
트리플루오로아세트산 (10 mL)을 디클로로메탄 (40 mL) 중 tert-부틸 4-(5-(메톡시카르보닐)티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 (실시예 30, 단계 a) (0.45 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 1시간 동안 방치하였다. 톨루엔 (50 mL)을 첨가하고, 용매를 감압하에 제거하여, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.46 g.
Figure pct00338
c) 메틸 5-(9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-카르보닐)티오펜-2-카르복실레이트
Figure pct00339
아세토니트릴 (10 mL) 중 메틸 5-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-카르보닐)티오펜-2-카르복실레이트 트리플루오로아세테이트 (실시예 30, 단계 b) (0.46 g) 및 2-(3-(브로모메틸)페닐)에탄올 (실시예 6, 단계 a) (0.226 g)의 용액을 트리에틸아민 (0.44 mL)으로 처리하고, 혼합물을 20 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 증발시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트와 포화 중탄산나트륨 용액 사이에 분배하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 용매로서 디클로로메탄 중 1 ％ 트리에틸아민 및 3 ％ 메탄올을 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.41 g.
Figure pct00340
d) (R)-메틸 5-(9-(3-(2-(2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸아미노)에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-카르보닐)티오펜-2-카르복실레이트 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00341
디클로로메탄 (10 mL) 중 메틸 5-(9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-카르보닐)티오펜-2-카르복실레이트 (실시예 30, 단계 c) (0.262 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (0.044 mL)에 이어서 데스-마틴 페리오디난 (0.339 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (10 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (10 mL) 및 에틸 아세테이트 (10 mL)로 처리하고, 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 아세트산 (0.033 mL)으로 처리하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (2 mL) 중에 용해시키고, 메탄올 (10 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.15 g) 및 아세트산 (0.033 mL)의 용액 (0 ℃)에 첨가하였다. 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.054 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 대부분의 메탄올을 감압하에 증발시키고, 나머지를 THF (50 mL), 염수 (10 mL) 및 포화 중탄산나트륨 용액 (1 mL) 사이에 분배하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.175 g.
Figure pct00342
실시예 31
(R)-메틸 5-(9-(3-(2-(2-히드록시-2-(8-히드록시-2-옥소-1,2-디히드로퀴놀린-5-일)에틸아미노)에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-카르보닐)티오펜-2-카르복실레이트 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00343
a) (R)-메틸 5-(9-(3-(2-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(8-히드록시-2-옥소-1,2-디히드로퀴놀린-5-일)에틸아미노)에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-카르보닐)티오펜-2-카르복실레이트
Figure pct00344
디클로로메탄 (10 mL) 중 메틸 5-(9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-카르보닐)티오펜-2-카르복실레이트 (실시예 30, 단계 c) (0.137 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (0.023 mL)에 이어서 데스-마틴 페리오디난 (0.178 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (10 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (10 mL) 및 에틸 아세테이트 (10 mL)로 처리하고, 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 아세트산 (0.017 mL)으로 처리하고, 용매를 감압하에 증발시켜, 조 중간체 알데히드 (0.13 g)를 수득하였다. 알데히드를 메탄올 (2 mL) 중에 용해시키고, 메탄올 (10 mL) 중 (R)-5-(2-아미노-1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (WO2004106333) (0.10 g) 및 아세트산 (0.017 mL)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 얼음 배스에서 냉각시키고, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.095 g)로 처리한 후, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 메탄올을 감압하에 제거하고, 잔류물을 포화 중탄산나트륨 용액과 에틸 아세테이트 사이에 분배하고, 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 조 생성물을 용매로서 디클로로메탄 중 1 ％ '880' 수성 암모니아 및 9 ％ 메탄올을 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.108 g.
Figure pct00345
b) (R)-메틸 5-(9-(3-(2-(2-히드록시-2-(8-히드록시-2-옥소-1,2-디히드로퀴놀린-5-일)에틸아미노)에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-카르보닐)티오펜-2-카르복실레이트 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00346
THF (4 mL) 중 (R)-메틸 5-(9-(3-(2-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(8-히드록시-2-옥소-1,2-디히드로퀴놀린-5-일)에틸아미노)에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-카르보닐)티오펜-2-카르복실레이트 (실시예 31, 단계 a) (0.108 g)를 메탄올 (1 mL) 중 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (0.029 mL)로 처리하고, 용액을 20 ℃에서 18시간 동안 방치하였다. 용매를 감압하에 제거하고, 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.055 g.
Figure pct00347
실시예 32
(R)-7-(2-(3,4-디플루오로-5-((4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00348
a) 2-(3,4-디플루오로페닐)에탄올
Figure pct00349
0 ℃에서, 보란 디메틸 술파이드의 용액 (THF 중 2 M, 18.30 mL)을 THF (20 mL) 중 2-(3,4-디플루오로페닐)아세트산 (2.1 g)의 용액에 조심스럽게 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 얼음 배스에서 냉각시키고, 메탄올 (5 mL)을 적가하였다. 버블링이 중지될 때까지 반응물을 교반하고, 용매를 진공하에 증발시켰다. 이소헥산 → 4:1의 이소헥산:에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였다. 수득량 1.92 g.
Figure pct00350
b) 2,3-디플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤즈알데히드
Figure pct00351
-70 ℃에서, 2,2,6,6-테트라메틸피페리딘 (6.15 mL)을 헥산 중 n-부틸리튬 의 용액 (1.6 M, 22.8 mL)에 첨가하였다. THF (25 mL) 중 2-(3,4-디플루오로페닐)에탄올 (실시예 32, 단계 a) (1.92 g)의 용액을 적가하였다. THF (25 mL)을 첨가하고, 혼합물을 -70 ℃에서 6시간 동안 교반하였다. 이어서, DMF (4.7 mL)를 첨가하고, 혼합물을 -70 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 실온으로 가온하고, 70시간 동안 교반하였다. HCl 수용액 (2 M, 10 mL)에 이어서 에틸 아세테이트 (20 mL)를 첨가하고, 층을 분리하였다. 수성상을 에틸 아세테이트 (20 mL씩 2회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (20 mL)로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 4:1 → 2:1 이소헥산:디에틸 에테르 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 1.9 g.
Figure pct00352
c) (9-(2,3-디플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-메틸티오펜-2-일)메타논
Figure pct00353
(5-메틸티오펜-2-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 9, 단계 b) (0.53 g)를 메탄올 (5 mL) 중 2,3-디플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤즈알데히드 (실시예 32, 단계 b) (0.25 g) 및 아세트산 (0.08 mL)의 용액에 첨가하였다. 반응물을 30분 동안 교반하고, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.13 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 18시간 동안 교반하였다. 반응물을 진공하에 농축시켰다. 99:1:0.1 → 97:3:0.3의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 0.08 g.
Figure pct00354
d) (R)-7-(2-(3,4-디플루오로-5-((4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00355
0 ℃에서, TFA (0.013 mL)를 DCM (2 mL) 중 (9-(2,3-디플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-메틸티오펜-2-일)메타논 (실시예 32, 단계 c) (0.077 g)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난 (0.11 g)을 첨가하였다. 생성된 황색 용액을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 포화 티오황산나트륨 용액 (1 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (1 mL) 및 에틸 아세테이트 (5 mL)의 혼합물을 첨가하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 격렬하게 교반하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (25 mL)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수로 세척하고, 아세트산 몇 방울을 사용하여 산성화시키고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (5 mL) 중에 용해시키고, 이어서 아세트산 (0.005 mL) 및 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.045 g)를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.016 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시켰다. 94.5:5:0.5 → 89:10:1의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켰다. 추가로 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→30 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 잔류물을 에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.052 g.
Figure pct00356
실시예 33
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(3-((8-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-5-옥사-2,8-디아자스피로[3.5]노난-2-일)메틸)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00357
a) 1-벤즈히드릴아제티딘-3-온
Figure pct00358
트리에틸아민 (24.7 mL)을 DMSO (25 mL) 중 1-벤즈히드릴아제티딘-3-올 (5 g)의 용액에 첨가하였다. DMSO (65 mL) 중 피리딘 황 트리옥사이드 (18 g)의 용액을 적가하고, 혼합물을 20 ℃에서 90분 동안 교반하였다. 혼합물을 얼음/물에 붓고, 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 염수로 3회 세척한 후, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 조 생성물을 용매로서 이소헥산 중 2 ％ 트리에틸아민을 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 2.9 g.
Figure pct00359
b) 1-벤즈히드릴-3-(트리메틸실릴옥시)아제티딘-3-카르보니트릴
Figure pct00360
디클로로메탄 (50 mL) 중 테트라부틸암모늄 시아나이드 (0.283 g)를 디클로로메탄 (50 mL) 중 1-벤즈히드릴아제티딘-3-온 (실시예 33, 단계 a) (2.5 g) 및 트리메틸실릴 시아나이드 (2.82 mL)의 교반 용액에 20 ℃에서 질소하에 15분에 걸쳐 적가하였다. 혼합물을 20 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 세척하고, 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 3.5 g. 정제없이 직접 사용하였다.
c) 3-(아미노메틸)-1-벤즈히드릴아제티딘-3-올
THF (50 mL) 중 1-벤즈히드릴-3-(트리메틸실릴옥시)아제티딘-3-카르보니트릴 (실시예 33, 단계 b) (3.5 g)의 용액을 보란 메틸술파이드 복합체 (THF 중 2 M, 20.8 mL)로 처리하고, 생성된 혼합물을 70 ℃에서 질소하에 1시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 메탄올 (50 mL)로 조심스럽게 켄칭한 후, 에틸렌디아민 (2.81 mL)으로 처리하였다. 상기 혼합물을 20 ℃에서 1시간 동안 교반한 후, 55 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 테트라부틸암모늄 플루오라이드 (THF 중 1 M, 15.6 mL)로 처리하고, 이어서 실온에서 40분 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 증발시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다 (용리 구배: 1 ％ 트리에틸아민을 함유하는 디클로로메탄 중 6 → 7 ％ 메탄올). 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 1.95 g.
Figure pct00362
d) N-((1-벤즈히드릴-3-히드록시아제티딘-3-일)메틸)-2-클로로아세트아미드
Figure pct00363
클로로아세틸 클로라이드 (0.846 mL)를 에틸 아세테이트 (100 mL) 중 3-(아미노메틸)-1-벤즈히드릴아제티딘-3-올 (실시예 33, 단계 c) (2.1 g)과 물 (100 mL) 중 탄산칼륨 (3.03 g)의 격렬하게 교반된 혼합물에 0 ℃에서 30분에 걸쳐 적가하였다. 혼합물을 0 ℃에서 추가로 30분 동안 교반한 후, 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 2.6 g.
Figure pct00364
e) 2-벤즈히드릴-5-옥사-2,8-디아자스피로[3.5]노난-7-온
Figure pct00365
질소하에, THF (50 mL) 중 N-((1-벤즈히드릴-3-히드록시아제티딘-3-일)메틸)-2-클로로아세트아미드 (실시예 33, 단계 d) (2.6 g)를 칼륨 tert-부톡시드 (tert-부탄올 중 1 M, 15.08 mL) 및 THF (150 mL)의 격렬하게 교반된 용액 (75 ℃)에 90분에 걸쳐 적가하였다. 첨가를 완료한 후, 혼합물을 75 ℃에서 10분 동안 교반하하고, 이어서 실온으로 냉각시켰다. 용매를 감압하에 제거하고, 잔류물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하여, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 2.05 g.
Figure pct00366
f) 2-벤즈히드릴-5-옥사-2,8-디아자스피로[3.5]노난
Figure pct00367
보란 메틸 술파이드 복합체 (THF 중 2 M, 10.7 mL)를 무수 THF (40 mL) 중 2-벤즈히드릴-5-옥사-2,8-디아자스피로[3.5]노난-7-온 (실시예 33, 단계 e) (2 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 용액을 70 ℃에서 질소하에 50분 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 메탄올 (40 mL)에 이어서 N1,N2-디메틸에탄-1,2-디아민 (3.43 g)으로 적가 처리하였다. 혼합물을 70 ℃에서 6시간 동안 가열하였다. 용매를 감압하에 제거하고, 잔류물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 용매로서 디클로로메탄 중 1 ％ 트리에틸아민 및 5 ％ 메탄올을 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 1.35 g.
Figure pct00368
g) (2-벤즈히드릴-5-옥사-2,8-디아자스피로[3.5]노난-8-일)(5-메틸티오펜-2-일)메타논
Figure pct00369
0 ℃에서, HATU (2.267 g)를 DMF (20 mL) 중 5-메틸티오펜-2-카르복실산 (0.652 g) 및 2-벤즈히드릴-5-옥사-2,8-디아자스피로[3.5]노난 (실시예 33, 단계 f) (1.35 g) 및 트리에틸아민 (1.917 mL)의 용액에 한 번에 첨가하였다. 냉각 배스를 제거하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하고, 유기층을 염수로 2회 세척한 후, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 조 생성물을 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다 (용리 구배: 디클로로메탄 중 0.4 → 5 ％ 메탄올. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 1.5 g.
Figure pct00370
h) (5-메틸티오펜-2-일)(5-옥사-2,8-디아자스피로[3.5]노난-8-일)메타논 히드로클로라이드
Figure pct00371
0 ℃에서, 1-클로로에틸 클로로포르메이트 (0.508 mL)를 아세토니트릴 (30 mL) 중 (2-벤즈히드릴-5-옥사-2,8-디아자스피로[3.5]노난-8-일)(5-메틸티오펜-2-일)메타논 (실시예 33, 단계 g) (1.5 g)의 용액에 적가하였다. 이어서, 혼합물을 질소하에 1시간 동안 환류 온도에서 가열하였다. 용매를 감압하에 제거하고, 잔류물을 메탄올 (50 mL) 중에 용해시켰다. 상기 용액을 환류 온도에서 질소하에 30분 동안 가열하였다. 용매를 감압하에 제거하고, 잔류물을 에틸 아세테이트 (40 mL) 중에서 분쇄한 후, 아세토니트릴 (7 mL) 중에서 분쇄하여, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.29 g.
Figure pct00372
i) (2-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-5-옥사-2,8-디아자스피로[3.5]노난-8-일)(5-메틸티오펜-2-일)메타논
Figure pct00373
20 ℃에서, 2-(3-(브로모메틸)페닐)에탄올 (실시예 6, 단계 a) (0.281 g)을 아세토니트릴 (15 mL) 중 (5-메틸티오펜-2-일)(5-옥사-2,8-디아자스피로[3.5]노난-8-일)메타논 히드로클로라이드 (실시예 33, 단계 h) (0.29 g) 및 트리에틸아민 (0.42 mL)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 제거하고, 잔류물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 조 생성물을 용매로서 디클로로메탄 (1 ％ 트리에틸아민 함유) 중 3 ％ 메탄올을 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.32 g.
Figure pct00374
j) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(3-((8-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-5-옥사-2,8-디아자스피로[3.5]노난-2-일)메틸)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00375
디클로로메탄 (10 mL) 중 (2-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-5-옥사-2,8-디아자스피로[3.5]노난-8-일)(5-메틸티오펜-2-일)메타논 (실시예 33, 단계 i) (0.16 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (0.032 mL)에 이어서 데스-마틴 페리오디난 (0.246 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (10 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (10 mL) 및 에틸 아세테이트 (10 mL)로 처리하고, 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 아세트산 (0.024 mL)으로 처리하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (2 mL) 중에 용해시키고, 메탄올 (10 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.15 g) 및 아세트산 (0.024 mL)의 용액 (0 ℃)에 첨가하였다. 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.039 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 대부분의 메탄올을 감압하에 증발시키고, 나머지를 THF (50 mL), 염수 (10 mL) 및 포화 중탄산나트륨 용액 (1 mL) 사이에 분배하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.13 g.
Figure pct00376
실시예 34
(R)-7-(2-(2,6-디플루오로-3-((4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00377
a) (9-(2,4-디플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-메틸티오펜-2-일)메타논
Figure pct00378
디벤조일 퍼옥사이드 (0.03 g)를 DCM (10 mL) 중 NBS (0.53 g) 및 2-(2,6-디플루오로-3-메틸페닐)아세트산 (0.5 g)의 혼합물에 첨가하였다. 반응물을 환류 온도에서 4시간 동안 가열하였다. DCM (10 mL) 및 물 (20 mL)을 첨가하고, 유기상을 분리하였다. 유기상을 염수 (20 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 THF (10 mL) 중에 재용해시키고, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 보란 디메틸 술파이드 복합체의 용액 (THF 중 2 M, 4 mL)을 적가하고, 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 메탄올 (2 mL)을 조심스럽게 적가하고, 버블링이 중지되는 대로 용매를 증발시켰다. 잔류물을 아세토니트릴 (10 mL) 중에 재용해시키고, (5-메틸티오펜-2-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 9, 단계 b) (0.8 g)에 이어서 트리에틸아민 (1.12 mL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 밤새 교반하고, 증발시키고, 99:1:0.1 → 97:3:0.3의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 투명한 포말로서 수득하였다. 수득량 0.37 g.
Figure pct00379
b) 2-(2,6-디플루오로-3-((4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)아세트알데히드
Figure pct00380
0 ℃에서, TFA (0.05 mL)를 DCM (5 mL) 중 (9-(2,4-디플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-메틸티오펜-2-일)메타논 (실시예 34, 단계 a) (0.27 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 이어서, 데스-마틴 페리오디난 (0.38 g)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 45분 동안 교반하였다. 이어서, 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (20 mL)를 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 격렬하게 교반하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (20 mL)로 세척하고, 아세트산 몇 방울을 사용하여 산성화시키고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 검으로서 수득하였다. 수득량 0.27 g.
Figure pct00381
c) (R)-7-(2-(2,6-디플루오로-3-((4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00382
메탄올 (3 mL) 중 2-(2,6-디플루오로-3-((4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)아세트알데히드 (실시예 34, 단계 b) (0.135 g)의 용액을 메탄올 (0.5 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.11 g) 및 아세트산 (0.015 mL)의 혼합물에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 0 ℃로 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.025 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 농축시키고, 95:5:0.5 → 89:10:1의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시키고 정제용 HPLC로 정제하여 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→50 ％ 아세토니트릴), 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.1 g.
Figure pct00383
실시예 35
(R)-5-(2-(2,6-디플루오로-3-((4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00384
메탄올 (3 mL) 중 2-(2,6-디플루오로-3-((4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)아세트알데히드 (실시예 34, 단계 b) (0.135 g)의 용액을 메탄올 (3 mL) 중 (R)-5-(2-아미노-1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (WO2004106333) (0.12 g) 및 아세트산 (0.017 mL)의 혼합물에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 0 ℃로 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.028 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 농축시키고, 잔류물을 95:5:0.5 → 89:10:1의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시키고, 잔류물을 THF (3 mL) 중에 용해시키고, 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (0.074 mL)을 첨가하고, 혼합물을 밤새 교반하였다. 반응물을 농축시키고, 잔류물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→50 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.12 g.
Figure pct00385
실시예 36
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(2-(5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)티오펜-3-일)에틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00386
a) (9-((4-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct00387
(2-이소프로필티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 22, 단계 b) (0.50 g)를 N-메틸-2-피롤리디논 (6 mL) 중 4-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-카르브알데히드와 3-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-카르브알데히드 (실시예 27, 단계 b) (0.40 g)의 4:1 혼합물 및 AcOH (0.085 mL)의 교반 용액에 첨가하였다. 5분 후, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.48 g)을 첨가하였다. 16시간 후 물을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 에틸 아세테이트 층을 물로 3회 세척하고, 진공하에 증발시켰다. 에틸 아세테이트:이소헥산:트리에틸아민 (20:80:5)으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하고, 두 이성질체 생성물을 분리하여, 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 0.27 g.
Figure pct00388
b) (9-((4-(2-히드록시에틸)티오펜-2-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct00389
테트라부틸암모늄 플루오라이드 (테트라히드로푸란 중 1 M, 2 mL)를 테트라히드로푸란 (4 mL) 중 (9-((4-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 36, 단계 a) (0.27 g)의 용액에 첨가하였다. 1시간 후, 용액을 진공하에 증발시켰다. 에틸 아세테이트:트리에틸아민 (20:1)으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 0.18 g.
Figure pct00390
c) 2-(5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)티오펜-3-일)아세트알데히드
Figure pct00391
데스-마틴 페리오디난 (0.25 g)을 DCM (5 mL) 중 (9-((4-(2-히드록시에틸)티오펜-2-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 36, 단계 b) (0.17 g) 및 트리플루오로아세트산 (0.07 mL)의 교반 용액에 첨가하였다. 1시간 후, 에틸 아세테이트 (30 mL)에 이어서 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL)과 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL)의 혼합물을 첨가하였다. 반응 혼합물을 잘 진탕하고, 분리하였다. 에틸 아세테이트 용액을 포화 중탄산나트륨 용액, 물 및 염수로 세척하였다. 아세트산 (0.07 mL)을 첨가하고, 용액을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켜 (배스 온도 약 30 ℃), 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 0.19 g. 직접 사용하였다.
d) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(2-(5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)티오펜-3-일)에틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00392
아세트산 (0.037 mL)을 메탄올 (8 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.170 g) 및 2-(5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)티오펜-3-일)아세트알데히드 (실시예 36, 단계 c) (0.170 g)의 교반 용액에 첨가하였다. 1분 후, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.08 g)을 첨가하였다. 3시간 후, 반응 혼합물을 진공하에 약 2 mL로 농축시키고, THF (20 mL) 첨가하고, 용액을 염수 (10 mL)와 포화 중탄산나트륨 용액 (2 mL)의 혼합물로 세척하였다. 유기 용액을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 고체를 메탄올에 용해시키고, 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 순수한 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발 건조시켰다. 디에틸 에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.026 g.
Figure pct00393
실시예 37
(R)-5-(2-(3-((2,2-디플루오로-4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00394
a) tert-부틸 4-((2-브로모-2,2-디플루오로아세트아미도)메틸)-4-히드록시피페리딘-1-카르복실레이트
Figure pct00395
20 ℃에서, DMF (20 mL) 중 tert-부틸 4-(아미노메틸)-4-히드록시피페리딘-1-카르복실레이트 (1.702 g)의 용액을 에틸 2-브로모-2,2-디플루오로아세테이트 (1.5 g)로 처리하고, 혼합물을 20 ℃에서 질소하에 90분 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하고, 유기층을 염수로 2회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 2.5 g.
Figure pct00396
b) tert-부틸 2,2-디플루오로-3-옥소-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트
Figure pct00397
THF (40 mL) 중 tert-부틸 4-((2-브로모-2,2-디플루오로아세트아미도)메틸)-4-히드록시피페리딘-1-카르복실레이트 (실시예 37, 단계 a) (3.2 g)의 용액을 칼륨 tert-부톡시드 (t-부탄올 중 1 M, 16.53 mL) 및 THF (60 mL)의 교반 용액에 70 ℃에서 질소하에 15분에 걸쳐 적가하였다. 첨가의 말미에, 혼합물을 추가로 10분 동안 가열한 후, 실온으로 냉각시켰다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하고, 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 에틸 아세테이트 중 30 ％ 이소헥산을 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.55 g.
Figure pct00398
c) tert-부틸 2,2-디플루오로-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트
Figure pct00399
보란 메틸 술파이드 복합체 (THF 중 2 M, 2.69 mL)를 THF (15 mL) 중 tert-부틸 2,2-디플루오로-3-옥소-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 (실시예 37, 단계 b) (0.55 g)의 용액에 적가하였다. 반응 혼합물을 55 ℃에서 질소하에 25분 동안 가열한 후, 실온으로 냉각시켰다. 메탄올 (5 mL)을 조심스럽게 적가하여 혼합물을 켄칭하였다. 이어서, N1,N2-디메틸에탄-1,2-디아민 (0.633 g)을 첨가하고, 혼합물을 70 ℃에서 40분 동안 가열하였다. 용매를 감압하에 제거하고, 잔류물을 용매로서 디클로로메탄 (1 ％ 트리에틸아민 함유) 중 4 ％ 메탄올을 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.32 g. 직접 사용하였다.
d) tert-부틸 2,2-디플루오로-4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트
Figure pct00400
HATU (0.541 g)를 DMF (20 mL) 중 tert-부틸 2,2-디플루오로-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 (실시예 37, 단계 c) (0.32 g) 및 5-메틸티오펜-2-카르복실산 (0.171 g) 및 트리에틸아민 (0.458 mL)의 교반 용액 (0 ℃)에 한 번에 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 20 ℃에서 7시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하고, 유기층을 염수로 2회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다 (용리 구배: 디클로로메탄 중 0.5 → 5 ％ 메탄올). 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.4 g.
Figure pct00401
e) (2,2-디플루오로-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-메틸티오펜-2-일)메타논 트리플루오로아세테이트
Figure pct00402
20 ℃에서, 트리플루오로아세트산 (5 mL)을 디클로로메탄 (20 mL) 중 tert-부틸 2,2-디플루오로-4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 (실시예 37, 단계 d) (0.4 g)의 용액에 첨가하였다. 용액을 20 ℃에서 25분 동안 방치하였다. 톨루엔 (40 mL)을 첨가하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 아세토니트릴과 함께 2회 증발시켰다. 생성된 검을 에테르 중에서 분쇄하여, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.39 g.
Figure pct00403
f) (2,2-디플루오로-9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-메틸티오펜-2-일)메타논
Figure pct00404
2-(3-(브로모메틸)페닐)에탄올 (실시예 6, 단계 a) (0.095 g)을 아세토니트릴 (10 mL) 중 (2,2-디플루오로-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-메틸티오펜-2-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 37, 단계 e) (0.19 g) 및 트리에틸아민 (0.185 mL)의 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 20 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 증발시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하고, 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 용매로서 디클로로메탄 (1 ％ 트리에틸아민 함유) 중 2.5 ％ 메탄올을 사용하여 조 생성물을 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.188 g.
Figure pct00405
g) (R)-5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(3-((2,2-디플루오로-4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온
Figure pct00406
디클로로메탄 (10 mL) 중 (2,2-디플루오로-9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-메틸티오펜-2-일)메타논 (실시예 37, 단계 f) (0.188 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (0.032 mL)에 이어서 데스-마틴 페리오디난 (0.248 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (10 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (10 mL) 및 에틸 아세테이트 (10 mL)로 처리하고, 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 아세트산 (0.024 mL)으로 처리하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (2 mL) 중에 용해시키고, 메탄올 (10 mL) 중 (R)-5-(2-아미노-1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (WO2004106333) (0.14 g) 및 아세트산 (0.024 mL)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 얼음 배스에서 냉각시키고, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.133 g)로 처리하고, 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 메탄올을 감압하에 제거하고, 잔류물을 포화 중탄산나트륨 용액과 에틸 아세테이트 사이에 분배하고, 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 조 생성물을 디클로로메탄 중 1 ％ '880' 수성 암모니아 및 8 ％ 메탄올을 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.114 g.
h) (R)-5-(2-(3-((2,2-디플루오로-4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00408
메탄올 (1 mL) 중 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (0.03 mL)를 THF (4 mL) 중 (R)-5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(3-((2,2-디플루오로-4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (실시예 37, 단계 g) (0.114 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 용액을 20 ℃에서 18시간 동안 방치하였다. 용매를 감압하에 제거하고, 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.080 g.
Figure pct00409
실시예 38
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(2-(3-((4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페녹시)에틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00410
a) (3-(2,2-디에톡시에톡시)페닐)메탄올
Figure pct00411
탄산세슘 (7.87 g)을 DMF (40 mL) 중 3-(히드록시메틸)페놀 (2.5 g) 및 2-브로모-1,1-디에톡시에탄 (3.97 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 90 ℃에서 18시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하고, 유기층을 염수로 2회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 용매로서 이소헥산 중 30 ％ 에틸 아세테이트를 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 1.9 g.
Figure pct00412
b) (9-(3-(2,2-디에톡시에톡시)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-메틸티오펜-2-일)메타논
Figure pct00413
메탄술포닐 클로라이드 (0.1 mL)를 디클로로메탄 (30 mL) 중 (3-(2,2-디에톡시에톡시)페닐)메탄올 (실시예 38, 단계 a) (0.307 g) 및 트리에틸아민 (0.178 mL)의 교반 용액 (0 ℃)에 적가하였다. 생성된 혼합물을 20 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물로 세척하고, 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 아세토니트릴 (30 mL) 중에 용해시키고, 트리에틸아민 (1 mL)에 이어서 (5-메틸티오펜-2-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 9, 단계 b) (0.42 g)로 처리하였다. 혼합물을 20 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 제거하고, 잔류물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하고, 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 조 생성물을 용매로서 디클로로메탄 (1 ％ 트리에틸아민 함유) 중 3 ％ 메탄올을 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.45 g.
Figure pct00414
c) 2-(3-((4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페녹시)아세트알데히드
Figure pct00415
아세트산 (25 mL)과 물 (25 mL)의 혼합물 중 (9-(3-(2,2-디에톡시에톡시)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-메틸티오펜-2-일)메타논 (실시예 38, 단계 b) (0.45 g)의 용액을 65 ℃에서 질소하에 16시간 동안 가열하였다. 대부분의 용매를 감압하에 제거하고, 잔류물을 에틸 아세테이트와 과량의 포화 중탄산나트륨 용액 사이에 분배하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 아세트산 (0.051 mL)을 첨가하고, 용매를 감압하에 제거하여, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.38 g. 직접 사용하였다.
d) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(2-(3-((4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페녹시)에틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00416
나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.084 g)를 메탄올 (12 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.303 g), 2-(3-((4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페녹시)아세트알데히드 (실시예 38, 단계 c) (0.38 g) 및 아세트산 (0.051 mL)의 교반 용액 (20 ℃)에 첨가하였다. 반응 혼합물을 20 ℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압하에 3 mL의 부피로 증발시킨 후, 에틸 아세테이트 (20 mL)와 물 (20 mL) 사이에 분배하였다. 수성층을 포화 중탄산나트륨 용액 (3 mL)으로 처리하였다. 이어서, 수성 혼합물을 고체 염화나트륨으로 처리하여, 포화 용액을 수득하였고, 이를 THF (20 mL)로 추출하였다. THF 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.1 g.
Figure pct00417
실시예 39
7-((1R)-2-(2-플루오로-2-(3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)에틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00418
a) 에틸 2-(3-브로모페닐)-2-플루오로아세테이트
Figure pct00419
THF (4 mL) 중 에틸 2-(3-브로모페닐)아세테이트 (1.00 g) 및 tert-부틸디메틸클로로실란 (0.749 g)의 용액을 질소 분위기하에 -78 ℃로 냉각시키고, 리튬 비스(트리메틸실릴)아미드 (THF 중 1 M, 4.6 mL)로 처리하였다 (10분에 걸쳐 적가함). 용액을 -78 ℃에서 5분 동안 교반한 후, 냉각 배스로부터 꺼내고, 30분에 걸쳐 실온으로 가온하였다. 용액을 진공하에 농축시키고, 잔류물을 이소헥산 중에 현탁시키고, 여과하여 침전된 염화리튬을 제거하였다. 여과액을 진공하에 농축시켜, 오일 (1.49 g)을 수득하였고, 이를 아세토니트릴 (2 mL) 중에 용해시키고, 실온에서 아세토니트릴 (17 mL) 중 셀렉트플루오르 (Selectfluor, 상표명) 플루오르화 시약 (1.93 g)의 교반 현탁액에 적가하고, 아세토니트릴 (1 mL씩 3회)의 첨가를 완료하였다. 생성된 혼합물을 1.5시간 동안 교반한 후, 실리카 상에서 농축시키고, 실리카 상에서 플래쉬 크로마토그래피 (이소헥산 중 10 ％ 디에틸 에테르로 용출)로 정제하여, 출발 물질로 오염된 부제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.884 g.
Figure pct00420
b) 2-(3-브로모페닐)-2-플루오로에탄올
Figure pct00421
수소화리튬알루미늄 (THF 중 1 M, 13.0 mL)을 얼음-물 중에서 예냉시킨 THF (35 mL) 중 에틸 2-(3-브로모페닐)-2-플루오로아세테이트 (실시예 39, 단계 a) (2.94 g)의 용액에 7분에 걸쳐 조금씩 첨가하였다. 생성된 혼합물을 얼음-물 중에서 30분 동안 교반한 후, 메탄올 (5 mL)을 조심스럽게 첨가하여 켄칭하였다 (30분에 걸쳐 조금씩 첨가함). 혼합물을 2 몰 수성 HCl에 붓고, 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 실리카 상에서 플래쉬 크로마토그래피 (이소 헥산 중 25 ％ 디에틸 에테르로 용출)로 정제하여, 부제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다. 수득량 1.39 g.
Figure pct00422
c) (2-(3-브로모페닐)-2-플루오로에톡시)(tert-부틸)디메틸실란
Figure pct00423
DMF (14 mL) 중 2-(3-브로모페닐)-2-플루오로에탄올 (실시예 39, 단계 b) (1.38 g) 및 이미다졸 (1.29 g)의 용액을 얼음-물 중에서 냉각시키고, tert-부틸디메틸클로로실란 (1.049 g)으로 처리한 후, 냉각 배스로부터 꺼내고, 실온에서 밤새 교반하였다. 용액을 물에 붓고, 디에틸 에테르로 2회 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물로 2회, 염수로 1회 세척한 후, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 실리카 상에서 플래쉬 크로마토그래피 (이소헥산 중 10 ％ 디클로로메탄으로 용출)로 정제하여, 부제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다. 수득량 1.94 g.
Figure pct00424
d) 3-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-1-플루오로에틸)벤즈알데히드
Figure pct00425
THF (36 mL) 중 (2-(3-브로모페닐)-2-플루오로에톡시)(tert-부틸)디메틸실란 (실시예 39, 단계 c) (1.8 g)의 용액을 질소 분위기하에 -78 ℃로 냉각시키고, 부틸리튬 (헥산 중 1.8 M, 3.3 mL)으로 처리하였다 (5분에 걸쳐 적가함). 용액을 -78 ℃에서 30분 동안 교반하고, N,N-디메틸포름아미드 (0.63 mL)로 처리하고, -78 ℃에서 추가로 30분 동안 교반한 후, 냉각 배스로부터 꺼내고, 140분에 걸쳐 실온으로 가온하였다. 10 ％ 수성 염화암모늄을 첨가하여 용액을 켄칭하고, 생성된 혼합물을 디에틸 에테르로 2회 추출하였다. 합한 유기상을 염수로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 실리카 상에서 플래쉬 크로마토그래피 (이소헥산 중 50 ％ 디클로로메탄으로 용출)로 정제하여, 부제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다. 수득량 1.26 g.
Figure pct00426
e) (9-(3-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-1-플루오로에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct00427
MeOH (4 mL) 중 3-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-1-플루오로에틸)벤즈알데히드 (실시예 39, 단계 d) (0.329 g)의 용액을 아세트산 (0.055 mL)에 이어서 (2-이소프로필티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 22, 단계 b) (0.408 g)로 처리하고, 실온에서 5분 동안 교반하였다. 용액을 얼음-물 배스 중에서 냉각시키고, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.309 g)로 처리하고, 얼음-물 중에서 135분 동안 교반한 후, 냉각 배스로부터 꺼내고, 실온에서 추가로 65분 동안 교반하였다. 용액을 얼음-물 중에서 다시 냉각시키고, 추가의 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.310 g)로 처리하고, 얼음-물 중에서 75분 동안 교반하였다. 추가의 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.312 g)을 첨가하고, 혼합물을 70분 동안 교반하였다. 추가의 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.619 g)을 첨가하고, 냉각 배스를 서서히 배기시키면서 혼합물을 밤새 교반하였다. 다음 날, 추가의 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.307 g)을 첨가하고, 혼합물을 70분 동안 교반하였다. 추가의 아세트산 (0.055 mL)을 첨가하고, 혼합물을 80분 동안 교반하였다. 혼합물을 40 ℃로 가온하고, 상기 온도에서 25분 동안 교반한 후, 이를 플래쉬 실리카 상에서 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 상에서 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 (디클로로메탄 중 5 ％ 메탄올로 용출), 부제 화합물을 점착성 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.344 g.
Figure pct00428
f) (9-(3-(1-플루오로-2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct00429
THF (5 mL) 중 (9-(3-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-1-플루오로에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 39, 단계 e) (0.33 g)의 용액을 테트라부틸암모늄 플루오라이드 (THF 중 1 M, 0.69 mL)로 처리하고, 실온에서 50분 동안 교반하였다. 추가의 테트라부틸암모늄 플루오라이드 (THF 중 1 M, 0.69 mL)를 첨가하고, 혼합물을 추가로 80분 동안 교반하였다. 이어서, 용액을 플래쉬 실리카 상에서 농축시키고, 잔류물을 실리카 상에서 플래쉬 크로마토그래피 (디클로로메탄 중 7.5 ％ 메탄올로 용출)로 정제하여, 부제 화합물을 백색 포말로서 수득하였다. 수득량 0.221 g.
Figure pct00430
g) 2-플루오로-2-(3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)아세트알데히드
Figure pct00431
DCM (5 mL) 중 (9-(3-(1-플루오로-2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 39, 단계 f) (0.213 g)의 용액을 얼음-물 중에서 냉각시키고, 트리플루오로아세트산 (0.053 mL)으로 처리하고, 5분 동안 교반하였다. 데스-마틴 페리오디난 (0.296 g)을 첨가하고, 혼합물을 냉각 배스로부터 꺼내고, 실온에서 20분 동안 교반하였다. 추가의 데스-마틴 페리오디난 (0.295 g)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 추가로 30분 동안 교반하였다. 이어서, 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (5 mL)을 첨가하여 반응물을 켄칭하고, 생성된 2-상 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기 추출물 염수로 세척하였다. 아세트산 (0.1 mL)을 첨가한 후, 산성화된 추출물을 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 조 부제 생성물을 회백색 포말로서 수득하였다. 수득량 0.240 g.
Figure pct00432
h) 7-((1R)-2-(2-플루오로-2-(3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)에틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00433
메탄올 (3 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1 단계 d) (0.182 g)의 용액을 아세트산 (0.039 mL)으로 처리하고, 5분 동안 교반하였다. 이어서, 메탄올 (4 mL) 중 2-플루오로-2-(3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)아세트알데히드 (실시예 39, 단계 g) (0.239 g)의 용액을 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 5분 동안 교반한 후, 얼음-물 중에서 냉각시키고, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.146 g)로 처리하였다. 혼합물을 얼음 중에서 25분 동안 교반한 후, 추가의 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.444 g)을 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 실온으로 서서히 가온하면서 이를 주말에 걸쳐 교반하였다. 다음 월요일에, 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 메탄올 (3 mL)과 물 (1.5 mL)의 혼합물 중에 용해시키고, 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 15→50 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 진공하에 농축시키고, 아세토니트릴로부터 3회 공동-증발시켜, 무색 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 디에틸 에테르 중에서 분쇄하여, 고체를 수득하였고, 이를 여과에 의해 제거하고, 디에틸 에테르로 세척하고, 진공하에 실온에서 건조시켜, 표제 생성물을 백색 고체 (0.03 g)로서 수득하였다
Figure pct00434
실시예 40
(R)-7-(2-(4-플루오로-3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00435
a) 2-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤즈알데히드
Figure pct00436
-78 ℃에서, 2,2,6,6-테트라메틸피페리딘 (3.0 g)을 무수 테트라히드로푸란 (12 mL) 중 n-부틸리튬 (헥산 중 1.6 M, 13 mL)의 교반 용액에 적가하였다. 10분 후, 2-(4-플루오로페닐)에탄올 (1.00 g)을 적가하였다. 반응 혼합물을 -78 ℃에서 5시간 동안 교반한 후, 무수 DMF (3.18 mL)를 5분에 걸쳐 적가하였다. 냉각 배스를 제거하고, 반응 혼합물을 실온으로 밤새 가온하였다. 에틸 아세테이트 및 수성 HCl (2 M)을 첨가하고, 용액을 분리하였다. 에틸 아세테이트 층을 물, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 에틸 아세테이트:이소헥산 (1:1)으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 오일로서 수득하였다. 수득량 0.43 g.
Figure pct00437
b) (9-(2-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct00438
나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.339 g)를 NMP (7 mL) 중 2-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤즈알데히드 (실시예 40, 단계 a) (0.135 g), (2-이소프로필티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 22, 단계 b) (0.339 g) 및 아세트산 (0.046 mL)의 교반 용액에 첨가하였다. 16시간 후, 추가의 2-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤즈알데히드 (실시예 40, 단계 a) (0.135 g)에 이어서 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.339 g)를 첨가하였다. 2시간 후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 (60 mL)로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액 (30 mL)으로 세척하였다. 수성층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 에틸 아세테이트 용액을 진공하에 증발시켰다. 에틸 아세테이트:트리에틸아민 (10:1)으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 NMP를 함유하는 검으로서 수득하였다. 검을 10 g SCX 카트리지 (메탄올로 1차 용출시킨 후, 메탄올 중 20 ％ '880' 수성 암모니아로 용출)에 적용하여 NMP를 제거함으로써, 부제 화합물을 수집하였다. 용액을 증발 건조시키고, 생성된 검을 에틸 아세테이트:트리에틸아민 (10:1)으로 용출시키는 실리카겔 컬럼에 적용하여, 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 0.31 g.
Figure pct00439
c) 2-(4-플루오로-3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)아세트알데히드
Figure pct00440
데스-마틴 페리오디난 (0.284 g)을 DCM (5 mL) 중 (9-(2-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 40, 단계 b) (0.21 g) 및 트리플루오로아세트산 (0.046 mL)의 교반 용액에 첨가하였다. 1시간 후, 에틸 아세테이트 (30 mL)에 이어서 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL)과 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL)의 혼합물을 첨가하였다. 반응 혼합물을 잘 진탕하고, 분리하였다. 에틸 아세테이트 용액을 포화 중탄산나트륨 용액, 물 및 염수로 세척하였다. 아세트산 (0.07 mL)을 첨가하고, 용액을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켜 (배스 온도 약 30 ℃), 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 0.2 g. 직접 사용하였다.
Figure pct00441
d) (R)-7-(2-(4-플루오로-3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00442
아세트산 (0.037 mL)을 메탄올 (8 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.17 g) 및 2-(4-플루오로-3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)아세트알데히드 (실시예 40, 단계 c) (0.20 g)의 교반 용액에 첨가하였다. 1분 후, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.10 g)를 첨가하였다. 3시간 후, 반응 혼합물을 진공하에 약 2 mL로 농축시키고, THF (20 mL)를 첨가하고, 용액을 염수 (10 mL)와 포화 중탄산나트륨 용액 (2 mL)의 혼합물로 세척하였다. 수성층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. THF 및 에틸 아세테이트 용액을 합하고, 진공하에 증발시켰다. 검을 메탄올 중에 용해시키고, 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→35 ％ 아세토니트릴). 순수한 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발 건조시켰다. 디에틸 에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.126 g.
Figure pct00443
실시예 41
(R)-7-(2-(3-플루오로-5-((4-(2-페닐티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00444
a) 2-(3-(브로모메틸)-5-플루오로페닐)아세트산
Figure pct00445
벤조일 퍼옥사이드 (0.5 g)를 디클로로메탄 (100 mL) 중 2-(3-플루오로-5-메틸페닐)아세트산 (5.19 g) 및 NBS (6.04 g)의 교반 혼합물에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 환류 온도에서 5시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 후, 물로 2회 세척하고, 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 용매로서 이소헥산 중 1 ％ 아세트산 및 17 ％ 에틸 아세테이트를 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 4.3 g.
Figure pct00446
b) 2-(3-(브로모메틸)-5-플루오로페닐)에탄올
Figure pct00447
0 ℃에서, 보란-메틸 술파이드 복합체 (THF 중 2 M, 17.4 mL)를 THF (60 mL) 중 2-(3-(브로모메틸)-5-플루오로페닐)아세트산 (실시예 41, 단계 a) (4.3 g)의 용액에 10분에 걸쳐 적가하였다. 혼합물을 0 ℃에서 10분 동안 교반한 후, 20 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 메탄올을 적가하여 반응 혼합물을 켄칭하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 조 생성물을 용매로서 이소헥산 중 30 ％ 에틸 아세테이트를 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 3.7 g.
Figure pct00448
c) 2,2,2-트리플루오로-1-(9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)에타논
Figure pct00449
아세토니트릴 (80 mL) 중 2-(3-(브로모메틸)-5-플루오로페닐)에탄올 (실시예 41, 단계 b) (3.6 g) 및 2,2,2-트리플루오로-1-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)에타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 12, 단계 d) (5.66 g)의 용액을 트리에틸아민 (5.38 mL)으로 처리하고, 혼합물을 20 ℃에서 20시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 증발시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 조 생성물을 용매로서 디클로로메탄 (1 ％ 트리에틸아민 함유) 중 2.5 ％ 메탄올을 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 4.9 g.
Figure pct00450
d) (9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-페닐티아졸-4-일)메타논
Figure pct00451
메탄올 (3 mL) 중 2,2,2-트리플루오로-1-(9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)에타논 (실시예 41, 단계 c) (0.21 g)의 용액을 암모니아 (35 ％ 수용액, 15 mL)에 첨가하고, 반응 혼합물을 20 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 감압하에 증발 건조시키고, 잔류물을 아세토니트릴과 함께 3회 공비시켰다. 잔류물을 DMF (7 mL) 중에 용해시키고, 2-페닐티아졸-4-카르복실산 (0.117 g)에 이어서 트리에틸아민 (0.29 mL)으로 처리한 후, HATU (0.257 g)로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하고, 유기층을 염수로 2회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.27 g.
Figure pct00452
e) (R)-7-(2-(3-플루오로-5-((4-(2-페닐티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00453
디클로로메탄 (20 mL) 중 (9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-페닐티아졸-4-일)메타논 (실시예 41, 단계 d) (0.25 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (0.039 mL)에 이어서 데스-마틴 페리오디난 (0.278 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 40분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (20 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (20 mL) 및 에틸 아세테이트 (30 mL)로 처리하고, 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하였다. 아세트산 (0.029 mL)을 상기 용액에 첨가한 후, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 메탄올 (3 mL) 중에 용해시키고, 메탄올 (15 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.199 g) 및 아세트산 (0.029 mL)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 얼음 배스에서 냉각시키고, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.063 g)로 처리하였다. 냉각 배스를 제거하고, 혼합물을 20 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 3 mL의 부피로 증발시키고, THF (20 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 염수 (10 mL)와 포화 중탄산나트륨 용액 (1 mL)의 혼합물로 세척하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 아세토니트릴과 함께 2회 공비시켰다. 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.19 g.
Figure pct00454
실시예 42
(R)-7-(2-(3-플루오로-5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00455
a) (9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct00456
메탄올 (3 mL) 중 2,2,2-트리플루오로-1-(9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)에타논 (실시예 41, 단계 d) (0.21 g)의 용액을 암모니아 (35 ％ 수용액, 15 mL)에 첨가하고, 반응 혼합물을 20 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 감압하에 증발 건조시키고, 잔류물을 아세토니트릴과 함께 3회 공비시켰다. 잔류물을 DMF (7 mL) 중에 용해시키고, 2-이소프로필티아졸-4-카르복실산 (0.098 g)에 이어서 트리에틸아민 (0.290 mL)으로 처리한 후, HATU (0.257 g)로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하고, 유기층을 염수로 2회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.25 g.
Figure pct00457
b) (R)-7-(2-(3-플루오로-5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00458
DCM (20 mL) 중 (9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 42, 단계 a) (0.23 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (0.038 mL)에 이어서 데스-마틴 페리오디난 (0.275 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 40분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (20 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (20 mL) 및 에틸 아세테이트 (30 mL)로 처리하고, 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하였다. 아세트산 (0.029 mL)을 상기 용액에 첨가한 후, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 메탄올 (3 mL) 중에 용해시키고, 메탄올 (15 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.196 g) 및 아세트산 (0.029 mL)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 얼음 배스에서 냉각시키고, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.063 g)로 처리하였다. 냉각 배스를 제거하고, 혼합물을 20 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 3 mL의 부피로 증발시키고, THF (20 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 포화 염수 (10 mL)와 포화 중탄산나트륨 용액 (1 mL)의 혼합물로 세척하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 아세토니트릴과 함께 2회 공비시켰다. 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.15 g.
Figure pct00459
실시예 43
(R)-7-(2-(2-(5-((4-(2-tert-부틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)티오펜-3-일)에틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00460
a) 1-(9-((4-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)-2,2,2-트리플루오로에타논
Figure pct00461
2,2,2-트리플루오로-1-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)에타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 12, 단계 d) (1.084 g)를 N-메틸-2-피롤리디논 (15 mL) 중 4-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-카르브알데히드와 3-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-카르브알데히드 (실시예 27, 단계 b) (1.0 g)의 4:1 혼합물 및 AcOH (0.16 mL)의 교반 용액에 첨가하였다. 5분 후, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (1.57 g)를 첨가하였다. 16시간 후, 물을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 에틸 아세테이트 층을 물로 3회 세척하고, 진공하에 증발시켰다. 에틸 아세테이트:이소헥산:트리에틸아민 (1:20:1)으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하고, 두 이성질체 생성물을 분리하여, 부제 화합물을 오일로서 수득하였다. 수득량 1.04 g.
Figure pct00462
b) 9-((4-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸
Figure pct00463
'880' 수성 암모니아 (1.5 mL)를 메탄올 (5 mL) 중 1-(9-((4-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)-2,2,2-트리플루오로에타논 (실시예 43, 단계 a) (1.0 g)의 교반 용액에 첨가하였다. 16시간 후 반응 혼합물을 증발 건조시켰다. 아세토니트릴을 첨가하고, 용액을 진공하에 증발 건조시키고, 상기 방법을 3회 반복하여, 부제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.78 g.
Figure pct00464
c) (9-((4-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-tert-부틸티아졸-4-일)메타논
Figure pct00465
HATU (0.306 g)를 DMF (3 mL) 중 2-tert-부틸티아졸-4-카르복실산 (0.16 g), 9-((4-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸 (실시예 43, 단계 b) (0.300 g) 및 트리에틸아민 (0.41 mL)의 교반 용액에 첨가하였다. 1시간 후, 반응 혼합물을 물과 에틸 아세테이트 사이에 분배하였다. 에틸 아세테이트 층을 물 (2회) 및 염수로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 에틸 아세테이트:이소헥산:트리에틸아민 (12:90:10)으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 0.3 g.
Figure pct00466
d) (2-tert-부틸티아졸-4-일)(9-((4-(2-히드록시에틸)티오펜-2-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논
Figure pct00467
TBAF (THF 중 1 M 용액 1.5 mL)를 THF (3 mL) 중 (9-((4-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-tert-부틸티아졸-4-일)메타논 (실시예 43, 단계 c) (0.300 g)의 교반 용액에 첨가하였다. 1시간 후 반응물을 검으로 증발시켰다. 에틸 아세테이트:트리에틸아민 (20:1)으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 0.22 g.
Figure pct00468
e) 2-(5-((4-(2-tert-부틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)티오펜-3-일)아세트알데히드
Figure pct00469
데스-마틴 페리오디난 (0.316 g)을 DCM (5 mL) 중 (2-tert-부틸티아졸-4-일)(9-((4-(2-히드록시에틸)티오펜-2-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 (실시예 43, 단계 d) (0.23 g) 및 TFA (0.05 mL)의 교반 용액에 첨가하였다. 40분 후, 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 수용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (30 mL)로 처리하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 아세트산 (0.08 mL)을 첨가한 후, 용액을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 이어서 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.23 g. 직접 사용하였다.
Figure pct00470
f) (R)-7-(2-(2-(5-((4-(2-tert-부틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)티오펜-3-일)에틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00471
아세트산 (0.039 mL)을 MeOH (8 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.180 g) 및 2-(5-((4-(2-tert-부틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)티오펜-3-일)아세트알데히드 (실시예 43, 단계 e) (0.230 g)의 교반 용액에 첨가하였다. 1분 후, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.125 g)를 첨가하였다. 3시간 후, 반응 혼합물을 여과하고, 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→35 ％ 아세토니트릴). 순수한 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발 건조시켰다. 디에틸 에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.14 g.
Figure pct00472
실시예 44
(R)-5-(2-(3-((2,2-디플루오로-4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00473
a) tert-부틸 2,2-디플루오로-4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트
Figure pct00474
20 ℃에서, HATU (1.184 g)를 DMF (12 mL) 중 tert-부틸 2,2-디플루오로-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 (실시예 37, 단계 c) (0.7 g) 및 2-이소프로필티아졸-4-카르복실산 (0.41 g) 및 트리에틸아민 (1 mL)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하고, 유기층을 염수로 2회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 용매로서 이소헥산 중 30 ％ 에틸 아세테이트를 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.78 g.
Figure pct00475
b) (2,2-디플루오로-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트
Figure pct00476
DCM (20 mL) 중 tert-부틸-2,2-디플루오로-4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 (실시예 44, 단계 a) (0.78 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (5 mL)으로 처리하고, 반응 혼합물을 20 ℃에서 30분 동안 방치하였다. 톨루엔 (40 mL)을 첨가하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 아세토니트릴과 함께 2회 공비시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.8 g.
Figure pct00477
c) (2,2-디플루오로-9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct00478
2-(3-(브로모메틸)페닐)에탄올 (실시예 6, 단계 a) (0.21 g)을 아세토니트릴 (15 mL) 중 (2,2-디플루오로-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 44, 단계 b) (0.40 g) 및 트리에틸아민 (0.37 mL)의 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 20 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 증발시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하고, 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 용매로서 디클로로메탄 (1 ％ 트리에틸아민 함유) 중 2.5 ％ 메탄올을 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.40 g.
Figure pct00479
d) (R)-5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(3-((2,2-디플루오로-4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온
Figure pct00480
DCM (20 mL) 중 (2,2-디플루오로-9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 44, 단계 c) (0.38 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (0.061 mL)에 이어서 데스-마틴 페리오디난 (0.437 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 40분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (20 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (20 mL) 및 에틸 아세테이트 (30 mL)로 처리하고, 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하였다. 아세트산 (0.045 mL)을 상기 용액에 첨가한 후, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 메탄올 (3 mL) 중에 용해시키고, 메탄올 (15 mL) 중 (R)-5-(2-아미노-1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (WO2004106333) (0.345 g)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 0 ℃로 냉각시키고, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.252 g)를 한 번에 첨가하였다. 반응 혼합물을 20 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 제거하고, 잔류물을 에틸 아세테이트와 포화 중탄산나트륨 용액 사이에 분배하고, 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 조 생성물을 용매로서 디클로로메탄 (1 ％ "880" 수성 암모니아 함유) 중 10 ％ 메탄올을 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.32 g.
Figure pct00481
e) (R)-5-(2-(3-((2,2-디플루오로-4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00482
메탄올 (2 mL) 중 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (0.082 mL)를 THF (8 mL) 중 (R)-5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(3-((2,2-디플루오로-4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (실시예 44, 단계 d) (0.32 g)의 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 20 ℃에서 18시간 동안 방치하였다. 용매를 감압하에 제거하고, 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.21 g.
Figure pct00483
실시예 45
(R)-7-(2-(2,6-디플루오로-3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00484
a) 2-(2,6-디플루오로페닐)에탄올
Figure pct00485
0 ℃에서, 보란 디메틸 술파이드 복합체의 용액 (THF 중 2 M, 26 mL)을 THF (50 mL) 중 2-(2,6-디플루오로페닐)아세트산 (3 g)의 용액에 조심스럽게 첨가하였다. 이어서, 반응물을 실온으로 가온하고, 3시간 동안 교반하였다. 반응물을 얼음 배스에서 냉각시키고, 메탄올 (10 mL)로 조심스럽게 켄칭하였다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 9:1 → 4:1의 이소헥산:에틸 아세테이트 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였다. 수득량 2.2 g.
Figure pct00486
b) 2,4-디플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤즈알데히드
Figure pct00487
-70 ℃에서, 2,2,6,6-테트라메틸피페리딘 (5 mL)을 THF (25 mL) 중 부틸리튬 (헥산 중 1.6 M, 19 mL)의 용액에 첨가하였다. THF (25 mL) 중 2-(2,6-디플루오로페닐)에탄올 (실시예 45, 단계 a) (1.6 g)의 용액을 적가하고, 생성된 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 이어서, DMF (3.9 mL)를 첨가하고, 혼합물을 -70 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 실온으로 가온하고, 70시간 동안 교반하였다. 반응물을 HCl 용액 (2 M, 50 mL)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (100 mL)로 희석하고, 층을 분리하였다. 수성상을 에틸 아세테이트 (50 mL씩 2회)로 추출하였다. 합한 유기물을 염수 (100 mL)로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 4:1 → 2:1의 이소헥산:에테르 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켰다. 생성된 오일을 에틸 아세테이트 (50 mL) 중에 용해시키고, HCl 용액 (2 M, 30 mL), 염수 (30 mL)로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였다. 수득량 1.1 g.
Figure pct00488
c) (9-(2,4-디플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct00489
2,4-디플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤즈알데히드 (실시예 45, 단계 b) (0.35 g)를 N-메틸-2-피롤리디논 (1 mL) 중 (2-이소프로필티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 22, 단계 b) (0.67 g) 및 아세트산 (0.09 mL)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 1시간 동안 교반한 후, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.335 g)를 5분에 걸쳐 조금씩 첨가하여 켄칭하였다. 생성된 혼합물을 밤새 교반하고, 아세토니트릴 (20 mL)로 희석하고, SCX 카트리지 (10 g 배리언, 아세토니트릴 (50 mL)로 예비-습윤)에 적용하였다. 카트리지를 아세토니트릴 (50 mL)로 세척하고, 아세토니트릴 중 10 ％ '880' 암모니아 수용액 (50 mL)으로 용출시켰다. 용리액을 증발시키고, 톨루엔과 함께 공비시키고, 77.5:17.5:5의 이소헥산:에틸 아세테이트:트리에틸아민 → 95:5의 에틸 아세테이트:트리에틸아민 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 황색 검으로서 수득하였다. 수득량 0.74 g.
Figure pct00490
d) 2-(2,6-디플루오로-3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)아세트알데히드
Figure pct00491
0 ℃에서, TFA (0.11 mL)를 DCM (5 mL) 중 (9-(2,4-디플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 45, 단계 c) (0.7 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 이어서, 데스-마틴 페리오디난 (0.93 g)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 45분 동안 교반하였다. 이어서, 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (20 mL)를 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 수성층을 분리하고, 에틸 아세테이트 (20 mL)로 추출하였다. 합한 유기물을 염수로 세척하고, 아세트산 몇 방울을 사용하여 산성화시키고, 혼합물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 검으로서 수득하였다. 수득량 0.64 g.
Figure pct00492
e) (R)-7-(2-(2,6-디플루오로-3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00493
메탄올 (3 mL) 중 2-(2,6-디플루오로-3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)아세트알데히드 (실시예 45, 단계 d) (0.323 g)의 용액을 메탄올 (2 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.23 g) 및 아세트산 (0.034 mL)의 혼합물에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 0 ℃로 냉각시켰다. 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.057 g)을 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 95:5:0.5 → 89:10:1의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시키고 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→50 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시키고, 에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.21 g.
Figure pct00494
실시예 46
(R)-5-(2-(2,6-디플루오로-3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00495
메탄올 (3 mL) 중 2-(2,6-디플루오로-3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)아세트알데히드 (실시예 45, 단계 d) (0.29 g)의 용액을 메탄올 (3 mL) 중 (R)-5-(2-아미노-1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (WO2004106333) (0.20 g) 및 아세트산 (0.034 mL)의 혼합물에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 0 ℃로 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.057 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 95:5:0.5 → 89:10:1의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켰다. 잔류물을 THF (3 mL) 중에 용해시키고, 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (0.29 mL)를 첨가하고, 혼합물을 밤새 교반하였다. 반응물을 농축시키고, 잔류물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→50 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시키고, 디에틸에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.23 g.
Figure pct00496
실시예 47
(R)-7-(2-(2-플루오로-5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00497
a) 2-(5-(브로모메틸)-2-플루오로페닐)에탄올
Figure pct00498
디벤조일 퍼옥사이드 (0.14 g)를 DCM (50 mL) 중 NBS (1.53 g) 및 2-(2-플루오로-5-메틸페닐)아세트산 (1.45 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 환류 온도에서 12시간 동안 가열하였다. 용매를 증발시키고, 백색 고체를 에틸 아세테이트 (100 mL)와 10 ％ 염화나트륨 용액 (50 mL) 사이에 분배하였다. 층을 분리하고, 유기상을 10 ％ 염화나트륨 용액 (50 mL)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 수득한 백색 고체를 테트라히드로푸란 (25 mL) 중에 재용해시키고, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 보란 디메틸 술파이드 복합체의 용액 (THF 중 2 M, 13 mL)을 조심스럽게 첨가한 후, 혼합물을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 얼음 배스에서 냉각시키고, 메탄올로 조심스럽게 켄칭하였다. 버블링이 중지되는 대로 용매를 증발시키고, 잔류물을 9:1 → 4:1의 에틸 아세테이트:이소헥산 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였다. 수득량 1.35 g.
Figure pct00499
b) (9-(4-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct00500
2-(5-(브로모메틸)-2-플루오로페닐)에탄올 (실시예 47, 단계 a) (0.16 g)을 아세토니트릴 (10 mL) 중 (2-이소프로필티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 22, 단계 b) (0.3 g) 및 트리에틸아민 (0.3 mL)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 밤새 교반하고, 아세토니트릴 (20 mL)로 희석하고, SCX 카트리지 (10 g 배리언, 아세토니트릴 (50 mL)로 예비-습윤)에 적용하였다. 카트리지를 아세토니트릴 (50 mL)로 세척하고, 아세토니트릴 중 10 ％ '880' 암모니아 수용액 (50 mL)으로 용출시켰다. 용리액을 증발시키고, 톨루엔과 함께 공비시키고, 77.5:17.5:5의 이소헥산:에틸 아세테이트:트리에틸아민 → 95:5의 에틸 아세테이트:트리에틸아민 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜, 부제 화합물을 황색 검으로서 수득하였다. 수득량 0.22 g.
Figure pct00501
c) (R)-7-(2-(2-플루오로-5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00502
0 ℃에서, 트리플루오로아세트산 (0.033 mL)을 DCM (5 mL) 중 (9-(4-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 47, 단계 b) (0.2 g)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난 (0.28 g)을 첨가하였다. 생성된 황색 용액을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 포화 티오황산나트륨 용액 (1 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (1 mL) 및 에틸 아세테이트 (5 mL)의 혼합물을 첨가하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 격렬하게 교반하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (5 mL)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (5 mL)로 세척하고, 아세트산 몇 방울을 사용하여 산성화시키고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (2 mL) 중에 용해시킨 후, 아세트산 (0.025 mL) 및 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.17 g)를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.04 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시켰다. 94.5:5:0.5 → 89:10:1의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켰다. 추가로 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→30 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 잔류물을 디에틸에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.14 g.
Figure pct00503
실시예 47A
(R)-7-(2-(2-플루오로-5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온
a) 2-(5-(브로모메틸)-2-플루오로페닐)에탄올
Figure pct00504
디벤조일 퍼옥사이드 (1 g)를 DCM (250 mL) 중 NBS (10.6 g) 및 2-(2-플루오로-5-메틸페닐)아세트산 (10 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 환류하에 12시간 동안 가열하였다. 용매를 증발시키고, 백색 고체를 에틸 아세테이트 (250 mL)와 10 ％ 염화나트륨 용액 (500 mL) 사이에 분배하였다. 층을 분리하고, 유기상을 10 ％ 염화나트륨 용액 (500 mL)으로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 수득한 백색 고체를 테트라히드로푸란 (150 mL) 중에 재용해시키고, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 보란 디메틸 술파이드 복합체의 용액 (THF 중 2 M, 89 mL)을 조심스럽게 첨가한 후, 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 반응물을 얼음 배스에서 냉각시키고, 메탄올로 조심스럽게 켄칭하였다. 버블링이 중지되는 대로 용매를 증발시키고, 잔류물을 이소-헥산과 에테르의 4:1 혼합물 중에서 분쇄하였다. 9:1 → 4:1 에틸 아세테이트:이소헥산 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였다. 수득량 6.5 g.
Figure pct00505
b) (9-(4-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
2-(5-(브로모메틸)-2-플루오로페닐)에탄올 (실시예 47A, 단계 a) (5.2 g)을 에탄올 (75 mL) 중 (2-이소프로필티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 22, 단계 b) (9.4 g) 및 탄산칼륨 (6.8 g)의 현탁액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 밤새 교반하고, 여과하였다. 필터 케이크를 에탄올 (50 mL)로 세척하고, 합한 여과액 및 세척액을 증발시켰다. 잔류물을 물 (100 mL)과 에틸 아세테이트 (250 mL) 사이에 분배하고, 층을 분리하고, 유기 염수 (100 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 95:5의 에틸 아세테이트:트리에틸아민 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜, 부제 화합물을 황색 검으로서 수득하였다. 수득량 7.9 g.
Figure pct00507
c) (R)-7-(2-(2-플루오로-5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온
0 ℃에서, 트리플루오로아세트산 (1.32 mL)을 DCM (200 mL) 중 (9-(4-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 47A, 단계 b) (7.9 g)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난 (12.3 g)을 첨가하였다. 생성된 황색 용액을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 포화 티오황산나트륨 용액 (100 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (100 mL) 및 에틸 아세테이트 (500 mL)의 혼합물을 첨가하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 격렬하게 교반하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (100 mL)로 세척하고, 아세트산 (2 mL)을 사용하여 산성화시키고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (140 mL) 중에 용해시키고, 이어서 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (4.5 g)를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (1.6 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시키고, THF (100mL) 및 염수와 포화 중탄산나트륨 용액의 혼합물 (10:1, 100mL) 사이에 분배하였다. 층을 분리하고, 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시키고, 잔류물을 아세토니트릴과 함께 공비시켰다. 94.5:5:0.5 → 89:10:1의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 4.1 g.
Figure pct00508
실시예 47B
(R)-7-(2-(2-플루오로-5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디(1S)-(+)-10-캄포술폰산 염
1S-(+)-캄포술폰산 (41 mg)을 에탄올 (5 mL) 중 (R)-7-(2-(2-플루오로-5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 (실시예 47A) (59 mg)의 용액에 첨가하고, 생성된 투명 용액을 증발 건조시켜, (R)-7-(2-(2-플루오로-5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디캄포술폰산 염을 무정형 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.1 g.
이소-프로판올 (1 mL)을 (R)-7-(2-(2-플루오로-5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디캄포술폰산 염 (20 mg)에 첨가하고, 생성된 투명 용액을 2일 동안 교반하였다. 백색 고체가 형성되었고, 현탁액을 추가로 5일 동안 교반하였다. 고체를 원심분리 여과에 의해 단리하고, 고진공하에 건조시켜, (R)-7-(2-(2-플루오로-5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디캄포술폰산 염을 백색 결정질 고체로서 수득하였다. 수득량 5 mg.
(R)-7-(2-(2-플루오로-5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 (4.3 g, 6.42 mmol) (실시예 47A), (1S)-(+)-10-캄포술폰산 (2.98 g, 12.84 mmol) 및 이소-프로판올 (300 mL)의 혼합물을 투명 용액이 형성될 때까지 50 ℃에서 가열하고, 시딩하고, 실온으로 냉각시키고, 4일 동안 교반하였다. 고체를 여과에 의해 단리시키고, 이소-프로판올 (100 mL), 에테르 (200 mL씩 2회)로 세척하고, 흡수 건조시켜, 표제 화합물을 백색 결정질 고체로서 수득하였다. 수득량 5.1 g.
거울상이성질체 과량의 표제 화합물이 실시예 47A에서 수득한 화합물보다 순수했다 (실시예 47A = 86 ％ ee, 표제 화합물 > 96 ％ ee)
분석적 키랄 방법: 키랄셀 (Chiralcel) OJ-H 4.6x250 mm, 80:20 이소헥산:에탄올 + 0.1 ％ 에틸렌디아민, 1 ml/분, 35C, 225 +-10 nm (30분에 걸쳐).
R 거울상이성질체에 대한 체류 시간 = 15.91분
S 거울상이성질체에 대한 체류 시간 = 22.85분
Figure pct00509
디(1S)-(+)-10-캄포술폰산 염 변형 A의 XRPD 패턴을 도 1에 나타냈다.
변형 A의 일부 특징적인 피크
Figure pct00510
실시예 47C
(R)-7-(2-(2-플루오로-5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 푸마레이트 변형 A
메탄올 (0.75 mL) 중 (R)-7-(2-(2-플루오로-5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 (13 mg) (실시예 47D, 단계 a) 및 푸마르산 (2 mg)의 용액을 실온에서 7일 동안 교반하였다. 생성된 백색 고체를 여과에 의해 단리하고, 고진공하에 건조시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 5 mg.
푸마레이트 염 변형 A의 XRPD 패턴을 도 2에 나타냈다.
푸마레이트 염 변형 A의 일부 특징적인 피크
Figure pct00512
실시예 47D
(R)-7-(2-(2-플루오로-5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 모노 푸마레이트 변형 B
a) (R)-7-(2-(2-플루오로-5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온
(R)-7-(2-(2-플루오로-5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디(1S)-(+)-10-캄포술폰산 염 (실시예 47B) (4.1 g)을 신선하게 증류한 2-메틸-THF (100 mL)와 포화 중탄산나트륨 용액 (100 mL) 사이에 분배하였다. 층을 분리하고, 유기층을 포화 중탄산나트륨 용액 (100 mL), 염수 (100 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 생성된 유리질 고체를 에테르 중에서 3회 분쇄하여, 부제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 2.6 g.
b) (R)-7-(2-(2-플루오로-5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 모노 푸마레이트 변형 B
50 ℃에서, (R)-7-(2-(2-플루오로-5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 (2.4 g)을 에탄올 (240 mL) 중에 용해시켰다. 푸마르산 (0.416 g)을 첨가하고, 투명 용액이 형성될 때까지 혼합물을 환류하에 가열하였다. 생성된 용액을 60 ℃로 냉각시키고, 변형 A (실시예 47C) (50 mg)로 시딩하였다. 생성된 혼합물을 50 ℃에서 밤새 교반한 후, 3시간에 걸쳐 실온으로 냉각시켰다. 생성된 백색 고체를 여과에 의해 단리시키고, 에탄올 (50 mL), 에테르 (200 mL씩 2회)로 세척하고, 흡수 건조시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 2.3g.
Figure pct00513
푸마레이트 염 변형 B의 XRPD 패턴을 도 3에 나타냈다.
푸마레이트 염 변형 B에 대한 일부 특징적인 피크
Figure pct00514
XRPD - 패널리티컬 큐빅스 프로 ( PANalytical CubiX PRO )
0.02°증분 당 100-초 노출시키는 2°내지 40°2θ 스캔 범위에 걸친 θ-2θ 구성의 패널리티컬 큐빅스 프로 기기를 이용하여 XRPD 데이터를 수집하였다. 45 kV 및 40 mA에서 작동되는 구리 롱-파인 (long-fine) 초점 튜브로 X-선을 발생시켰다. 구리 X-선의 파장은 1.5418 Å이었다. 약 2 mg의 화합물을 놓은 제로 배경 (zero background) 홀더에서 데이터를 수집하였다. 홀더는, 비-회절 면을 따라 절단한 후 광학적 플랫 처리로 연마한 단일 결정의 규소로부터 제조되었다. 상기 표면 상의 X-선 투사는 브래그 소멸 (Bragg extinction)에 의해 무효화되었다.
실시예 47E
(R)-7-(2-(2-플루오로-5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온
a) tert-부틸 4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트
Figure pct00515
tert-부틸 1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 히드로클로라이드 (제한 시약) 및 2-이소프로필티아졸-4-카르복실산 (1.1 몰 당량)의 혼합물을 2-MeTHF (10 부피) 중에 현탁시키고, 10 내지 15 ℃로 냉각시켰다. 트리에틸아민 (7.2 몰 당량)을 10 내지 15 ℃에서 일부분씩 첨가하였다. 점성의 현탁액을 5 내지 10 ℃로 냉각시키고, T3P (1.3 몰 당량의 THF 중 1.57 M 용액)를 5 내지 10 ℃에서 0.5시간에 걸쳐 적가하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 가온하고 (35분), 2.5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물 (10 부피, 5 ℃ 발열)로 희석하고, 혼합물을 격렬하게 교반하고; 수성상 (pH 10)을 분리하고, 2-MeTHF (2 부피씩 2회)로 추출하였다. 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 수용액 (2 부피) 및 물 (2 부피씩 2회)로 세척하였다. 유기상을 증발시키고, MeCN (2 부피씩 2회)과 함께 공비시켜, 갈색 검을 수득하였고, 이를 35 ℃에서 진공하에 24시간 동안 건조시켰다. 수율: 이론상 89 ％.
Figure pct00516
b) (2-이소프로필티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논, 트리플루오로아세테이트 염
Figure pct00517
DCM (5 부피) 중 tert-부틸 4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 (제한 시약) (단계 a)의 용액에 트리플루오로아세트산 (13.4 몰 당량)을 10 내지 15 ℃에서 일부분씩 첨가하였다. 용액을 주위 온도로 가온하고, 16시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 디에틸 에테르 (10 부피) 중에 용해시켰다. 용액을 얼음 중에서 냉각시키고, 긁어내어 침전물을 수득하였고; 슬러리를 0 ℃ 내지 10 ℃에서 0.5시간 동안 교반한 후, 냉각 여과하였다. 케이크를 디에틸 에테르 (5 부피)로 세척하고, 35 ℃에서 진공하에 건조시켜, 베이지색 분말을 수득하였다. 수율: 이론상 91 ％.
Figure pct00518
c) 4-브로모-1-플루오로-2-(2-메톡시비닐)벤젠 (시스 및 트랜스 이성질체의 혼합물)
Figure pct00519
칼륨 tert-부톡시드 (1.2 몰 당량)를 THF (2.5 부피) 중 (메톡시메틸)트리페닐포스포늄 클로라이드 (1.3 몰 당량)의 교반 현탁액에 -3 ℃ (+ 또는 - 2 ℃)에서 30분에 걸쳐 조금씩 첨가하였다. 짙은 적색이 나타났다. 온도를 0.5시간에 걸쳐 18 ℃로 올리고, 반응물을 추가로 1.5시간 동안 교반하였다. 이어서, THF 중의 용액으로서의 5-브로모-2-플루오로벤즈알데히드 (제한 시약) (5 부피)를 반응물의 온도가 24 ℃를 초과하지 않도록 90분에 걸쳐 첨가하였다. 이어서, 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 염화암모늄 수용액 (10 부피)에 붓고, t-BME (2.5 부피씩 2회)로 추출하였다. 합한 추출물을 염수 (2 부피씩 3회)로 세척하고, 건조시키고 (Na2SO4), 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 오일성 잔류물을 이소-헥산 (0.5 부피씩 8회)으로 추출하였다. 합한 이소-헥산 추출물을 여과한 후, 빙초산 (2 부피) 및 물 중 50 ％ 빙초산 (2 부피)으로 세척하였다. 건조시키고 (Na2SO4), 여과한 후, 용매를 회전 증발기 상에서 제거하여, 연한 오렌지색 오일을 수득하였다. 수율은 이론산 90 ％였다.
Figure pct00520
d) 4-플루오로-3-(2-메톡시비닐)벤즈알데히드
Figure pct00521
4-브로모-1-플루오로-2-(2-메톡시비닐)벤젠 (제한 시약) (단계 c)을 2-메틸테트라히드로푸란 (5 부피) 중에 용해시키고, 용액을 -10 ℃로 냉각시켰다. 이소-프로필마그네슘 클로라이드 (0.37 몰 당량의 THF 중 2 M 용액)를 -7 ℃ (+ 또는 - 2 ℃)에서 온도를 유지하면서 약 30분에 걸쳐 적가하고, 이어서 부틸리튬 (0.74 몰 당량의 헥산 중 1.5 M 용액)을 -6 ℃ (+ 또는 - 2 ℃)에서 온도를 통제하면서 약 1시간에 걸쳐 적가하였다. 45분 동안 교반한 후, -5 ℃에서 2-메틸테트라히드로푸란 (7 부피) 중 4-포르밀모르폴린 (2 몰 당량)의 용액에 첨가하였다. 상기 첨가에 약 90분이 소요되었다. 이어서, 반응물을 1시간 동안 교반하였고, 상기 시간 동안 내부 온도가 5 ℃로 상승하였다. 반응 혼합물을 포화 염화암모늄 수용액 (10 부피)에 붓고, t-BME (3 부피씩 2회)로 추출하였다. 합한 추출물을 포화 수성 염화암모늄 (세척액의 pH가 대략 6이 될 때까지) (3 부피씩 2회), 물 (5 부피)로 세척하고, 건조시키고 (Na2SO4), 여과하고, 증발시켜, 변하기 쉬운 오렌지색 오일을 수득하였다.
오일을 용리액으로서 이소-헥산 중 5 ％ 에틸 아세테이트를 사용하여 실리카 상에서 크로마토그래피 처리하였다. 수득량은 이론상 80 ％였다.
Figure pct00522
e) (9-(4-플루오로-3-(2-메톡시비닐)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct00523
2-메틸테트라히드로푸란 (25 부피) 중 4-플루오로-3-(2-메톡시비닐)벤즈알데히드 (제한 시약) (단계 d) 및 (2-이소프로필티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (1.05 몰 당량) (단계 b)의 현탁액에 트리에틸아민 (1.73 몰 당량)을 한 번에 첨가하였다 (4 ℃ 발열). 혼합물을 0.5시간 동안 교반하고; 이어서 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (1.5 몰 당량)를 한 번에 첨가하고 (발열 없음), 생성된 용액을 16시간 동안 교반하였다.
포화 수성 NaHCO3 (25 부피)을 첨가하고, 혼합물을 격렬하게 교반하였다. 유기상을 분리하고, 수성상 (pH 8)을 2-MeTHF (100 mL)로 추출하고; 합한 유기물을 물 (50mL씩 2회)로 세척하고, 건조시키고 (Na2SO4), 여과하고, 증발시켜, 암색 오일을 수득하였다. 수율: 이론상 78 ％.
Figure pct00524
f) (R)-7-(2-(2-플루오로-5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온
Figure pct00525
THF (5 부피) 중 (9-(4-플루오로-3-(2-메톡시비닐)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (제한 시약) (단계 e)의 용액을 물 (2.5 부피)에 이어서 진한 염산 (6 몰 당량)으로 처리하였다. 용액을 55 내지 60 ℃에서 1.5시간 동안 가열하고; 용액을 주위 온도로 냉각시키고, 물 (2.5 부피)로 희석하였다. THF를 증발에 의해 제거하고, 수성 잔류물을 중탄산나트륨 (7 몰 당량), 물 (5 부피) 및 DCM (10 부피)의 교반 혼합물에 첨가하였다. 유기상을 분리하고, 수성상 (pH 8)을 DCM (5 부피)으로 추출하였다. 합한 유기상을 포화 NaHCO3 수용액 (5 부피), 물 (5 부피씩 2회)로 세척하고, 건조시키고 (황산나트륨), 여과하였다. 여과액을 MeOH (10 부피)로 희석하고, DCM을 35 ℃/405 mbar에서 증발시켰다. 알데히드의 메탄올 용액을 아세트산 (2 몰 당량)으로 처리하고, (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (1 몰 당량)에 한 번에 첨가하고; 혼합물을 0 내지 5 ℃로 냉각시키고, 5분 동안 교반하여, 용액을 수득하였다. 여기에, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (1.5 몰 당량)를 한 번에 첨가하고, 혼합물을 5 ℃에서 0.5시간 동안 교반한 후, 주위 온도로 가온하고, 0.5시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 2-MeTHF (10 부피)와 포화 NaHCO3 용액 (5 부피) 사이에 분배하고; 유기물을 20 ％ 염수 용액 (5 부피)으로 세척하고, 건조시키고 (Na2SO4), 여과하고, 증발시켰다. 황색 포말을 수득하였고, 이를 에틸 아세테이트 (13 부피) 중에 슬러리화시키고, 생성된 고체를 여과에 의해 수집하고, 진공하에 건조시켰다. 연한 황색 고체를 수득하였고, 이를 실리카 (조 반응 혼합물의 20배 중량) 상에서 정제하였다 (용리액: DCM/10→15 ％ MeOH/1→1.5 ％ 암모니아). 수율: 이론상 29 ％.
Figure pct00526
실시예 48
(R)-7-(2-(2-플루오로-3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00527
a) 2-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤즈알데히드
Figure pct00528
-70 ℃에서, 2,2,6,6-테트라메틸피페리딘 (10.8 mL)을 THF (40 mL) 중 부틸리튬 (헥산 중 1.6 M, 40.1 mL)의 용액에 첨가하였다. THF (40 mL) 중 2-(2-플루오로페닐)에탄올 (3 g)의 용액을 적가하고, 생성된 혼합물을 -70 ℃에서 6시간 동안 교반하였다. 이어서, DMF (8.29 mL)를 첨가하고, 혼합물을 -70 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 실온으로 가온하고, 70시간 동안 교반하였다. 반응물을 HCl 용액 (2 M, 50 mL)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (100 mL)로 희석하고, 층을 분리하였다. 수성상을 에틸 아세테이트 (100 mL씩 2회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 HCl 용액 (2 M, 50 mL), 염수 (20 mL)로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 4:1 → 2:1의 이소헥산:에틸 아세테이트 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 1.2 g.
Figure pct00529
b) (9-(2-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct00530
2-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤즈알데히드 (실시예 48, 단계 a) (0.19 g)를 N-메틸-2-피롤리디논 (5 mL) 중 (2-이소프로필티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 22, 단계 b) (0.32 g) 및 아세트산 (0.043 mL)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 1시간 동안 교반한 후, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.24 g)를 5분에 걸쳐 조금씩 첨가하였다. 생성된 혼합물을 밤새 교반하고, 아세토니트릴 (20 mL)로 희석하고, SCX 카트리지 (10 g 배리언, 아세토니트릴 (50 mL)로 예비-습윤)에 적용하였다. 카트리지를 아세토니트릴 (50 mL)로 세척하고, 아세토니트릴 중 10 ％ '880' 암모니아 수용액 (50 mL)으로 용출시켰다. 용리액을 증발시키고, 톨루엔과 함께 공비시키고, 77.5:17.5:5의 이소헥산:에틸 아세테이트:트리에틸아민 → 95:5의 에틸 아세테이트:트리에틸아민 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜, 부제 화합물을 황색 검으로서 수득하였다. 수득량 0.33 g.
Figure pct00531
c) (R)-7-(2-(2-플루오로-3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00532
0 ℃에서, TFA (0.044 mL)를 DCM (5 mL) 중 (9-(2-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 48, 단계 b) (0.3 g)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난 (0.37 g)을 첨가하였다. 생성된 황색 용액을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (20 mL)의 혼합물을 첨가하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 격렬하게 교반하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (5 mL)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (20 mL)로 세척하고, 아세트산 몇 방울을 사용하여 산성화시키고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (2 mL) 중에 용해시키고, 이어서 아세트산 (0.033 mL) 및 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.28 g)를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.054 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시켰다. 94.5:5:0.5 → 89:10:1의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켰다. 추가로 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→30 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 잔류물을 에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.14 g.
Figure pct00533
실시예 49
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(2-(5-((4-(2-메틸벤조[d]티아졸-5-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)티오펜-3-일)에틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00534
a) (9-((4-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸벤조[d]티아졸-5-일)메타논
Figure pct00535
HATU (0.333 g)를 DMF (3 mL) 중 2-메틸벤조[d]티아졸-5-카르복실산 (0.17 g), 9-((4-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸 (실시예 43, 단계 b) (0.3 g) 및 트리에틸아민 (0.407 mL)의 교반 용액에 첨가하였다. 1시간 후, 반응 혼합물을 물과 에틸 아세테이트 사이에 분배하였다. 에틸 아세테이트 층을 물로 2회, 염수로 1회 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 에틸 아세테이트:이소헥산:트리에틸아민 (2:8:1)으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 0.36 g.
Figure pct00536
b) (9-((4-(2-히드록시에틸)티오펜-2-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸벤조[d]티아졸-5-일)메타논
Figure pct00537
TBAF (THF 중 1 M 용액, 1.5 mL)를 THF (2 mL) 중 (9-((4-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸벤조[d]티아졸-5-일)메타논 (실시예 49, 단계 a) (0.36 g)의 교반 용액에 첨가하였다. 1시간 후, 반응물을 검으로 증발시켰다. 에틸 아세테이트:트리에틸아민 (20:1)으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 0.2 g.
Figure pct00538
c) 2-(5-((4-(2-메틸벤조[d]티아졸-5-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)티오펜-3-일)아세트알데히드
Figure pct00539
데스-마틴 페리오디난 (0.27 g)을 DCM (5 mL) 중 (9-((4-(2-히드록시에틸)티오펜-2-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸벤조[d]티아졸-5-일)메타논 (실시예 49, 단계 b) (0.20 g) 및 트리플루오로아세트산 (0.033 mL)의 교반 용액에 첨가하였다. 40분 후, 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 수용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (30 mL)로 처리하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 아세트산 (0.08 mL)을 첨가한 후, 용액을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 수득량 0.2 g. 다음 단계에 직접 사용하였다.
Figure pct00540
d) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(2-(5-((4-(2-메틸벤조[d]티아졸-5-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)티오펜-3-일)에틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00541
아세트산 (0.037 mL)을 MeOH (8 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.168 g) 및 2-(5-((4-(2-메틸벤조[d]티아졸-5-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)티오펜-3-일)아세트알데히드 (실시예 49, 단계 c) (0.200 g)의 교반 용액에 첨가하였다. 1분 후, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.107 g)을 첨가하였다. 3시간 후, 반응 혼합물을 여과하고, 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→35 ％ 아세토니트릴). 순수한 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발 건조시켰다. 디에틸 에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.15 g.
Figure pct00542
실시예 50
(R)-7-(2-(3-((4-(2-tert-부틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)-5-플루오로페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00543
a) (2-tert-부틸티아졸-4-일)(9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논
Figure pct00544
메탄올 (3 mL) 중 2,2,2-트리플루오로-1-(9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)에타논 (실시예 41, 단계 d) (0.21 g)의 용액을 암모니아 (35 ％ 수용액, 15 mL)에 첨가하고, 반응 혼합물을 20 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 감압하에 증발 건조시키고, 잔류물을 아세토니트릴과 함께 3회 공비시켰다. 잔류물을 DMF (7 mL) 중에 용해시키고, 2-tert-부틸티아졸-4-카르복실산 (0.096 g)에 이어서 트리에틸아민 (0.290 mL)으로 처리한 후, HATU (0.257 g)로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하고, 유기층을 염수로 2회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.22 g.
Figure pct00545
b) (R)-7-(2-(3-((4-(2-tert-부틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)-5-플루오로페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00546
DCM (20 mL) 중 (2-tert-부틸티아졸-4-일)(9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 (실시예 50, 단계 a) (0.22 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (0.036 mL)에 이어서 데스-마틴 페리오디난 (0.255 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 40분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (20 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (20 mL) 및 에틸 아세테이트 (30 mL)로 처리하고, 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하였다. 아세트산 (0.026 mL)을 상기 용액에 첨가한 후, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 메탄올 (3 mL) 중에 용해시키고, 메탄올 (15 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.182 g) 및 아세트산 (0.026 mL)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 얼음 배스에서 냉각시키고, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.058 g)로 처리하였다. 냉각 배스를 제거하고, 혼합물을 20 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 3 mL 이상의 부피로 증발시키고, THF (20 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 포화 염수 (10 mL)와 포화 중탄산나트륨 용액 (1 mL)의 혼합물로 세척하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 아세토니트릴과 함께 2회 공비시켰다. 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.135 g.
Figure pct00547
실시예 51
(R)-5-(2-(2-(5-((2,2-디플루오로-4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)티오펜-3-일)에틸아미노)-1-히드록시에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00548
a) (9-((4-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-일)메틸)-2,2-디플루오로-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct00549
(2,2-디플루오로-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 44, 단계 b) (0.40 g)를 N-메틸-2-피롤리디논 (5 mL) 중 4-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-카르브알데히드와 3-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-카르브알데히드 (실시예 27, 단계 b) (0.36 g)의 4:1 혼합물 및 AcOH (0.05 mL)의 교반 용액에 첨가하였다. 5분 후, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.28 g)을 첨가하였다. 16시간 후 물을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 에틸 아세테이트 층을 물로 3회 세척하고, 진공하에 증발시켰다. 20:80:5의 에틸 아세테이트:이소헥산:트리에틸아민으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하고, 두 이성질체 생성물을 분리하여, 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 0.24 g.
Figure pct00550
b) (2,2-디플루오로-9-((4-(2-히드록시에틸)티오펜-2-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct00551
TBAF (THF 중 1 M, 1.5 mL)를 THF (3 mL) 중 (9-((4-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-일)메틸)-2,2-디플루오로-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 51, 단계 a) (0.30 g)의 교반 용액에 첨가하였다. 1시간 후, 반응물을 진공하에 검으로 증발시켰다. 에틸 아세테이트:트리에틸아민 (20:1)으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 0.2 g.
Figure pct00552
c) 2-(5-((2,2-디플루오로-4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)티오펜-3-일)아세트알데히드
Figure pct00553
데스-마틴 페리오디난 (0.20 g)을 DCM (4 mL) 중 (2,2-디플루오로-9-((4-(2-히드록시에틸)티오펜-2-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 51, 단계 b) (0.15 g) 및 트리플루오로아세트산 (0.031 mL)의 교반 용액에 첨가하였다. 40분 후, 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 수용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (30 mL)로 처리하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 아세트산 (0.08 mL)을 첨가한 후, 용매를 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 수득량 0.19 g. 직접 사용하였다.
Figure pct00554
d) (R)-5-(2-(2-(5-((2,2-디플루오로-4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)티오펜-3-일)에틸아미노)-1-히드록시에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00555
(R)-5-(2-아미노-1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (WO2004106333) (0.156 g)을 메탄올 (8 mL) 중 2-(5-((2,2-디플루오로-4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)티오펜-3-일)아세트알데히드 (실시예 51, 단계 c) (0.15 g) 및 아세트산 (0.027 mL)의 교반 용액에 첨가하였다. 5분 후, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.078 g)를 첨가하였다. 3시간 후, 반응 혼합물을 진공하에 약 3 mL로 증발시키고, 에틸 아세테이트와 포화 중탄산나트륨 사이에 분배하였다. 에틸 아세테이트 용액을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 생성된 검을 THF (2 mL) 중에 용해시키고, 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (0.064 g)를 첨가하였다. 16시간 후, 톨루엔을 첨가하고, 용액을 진공하에 증발시켰다. 정제용 HPLC (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→35 ％ 아세토니트릴)로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발 건조시키고, MeCN과 함께 공비시킨 후, 디에틸 에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 고체로서 수득하였다. 수득량 0.14 g.
Figure pct00556
실시예 52
(R)-7-(2-(3-클로로-5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00557
a) 2-(3-(브로모메틸)-5-클로로페닐)아세트산
Figure pct00558
벤조일 퍼옥사이드 (0.112 g)를 DCM (15 mL) 중 2-(3-클로로-5-메틸페닐)아세트산 (0.752 g) 및 N-브로모숙신이미드 (0.801 g)의 현탁액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 50 ℃에서 질소하에 밤새 가열하였다. 혼합물을 진공하에 농축시켜 디클로로메탄을 제거하고, 잔류물을 에틸 아세테이트 (10 mL) 중에 용해시켰다. 용액을 85 ℃에서 질소하에 4시간 동안 가열한 후, 냉각시켰다. 용액을 물로 3회, 염수로 1회 세척하고, 이어서 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 실리카 상에서 플래쉬 크로마토그래피 (1:20:79의 아세트산:에틸 아세테이트:이소헥산으로 용출)로 정제하여, 조 부제 화합물을 연한 황색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.735 g.
Figure pct00559
b) 2-(3-(브로모메틸)-5-클로로페닐)에탄올
Figure pct00560
보란-메틸 술파이드 복합체의 용액 (THF 중 2 M, 2.8 mL)을 무수 THF (10 mL) 중 2-(3-(브로모메틸)-5-클로로페닐)아세트산 (실시예 52, 단계 a) (0.73 g)의 용액에 실온에서 5분에 걸쳐 조금씩 첨가하였다. 생성된 발포성 용액을 1시간 동안 교반한 후, 얼음-물 중에서 냉각시키고, 메탄올 (3 mL)을 5분에 걸쳐 조금씩 첨가하여 켄칭하였다. 용액을 실온에서 추가로 20분 동안 교반한 후, 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 상에서 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 (이소헥산 중 25 ％ 에틸 아세테이트로 용출), 조 부제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.46 g.
Figure pct00561
c) (9-(3-클로로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct00562
트리에틸아민 (0.18 mL)을 아세토니트릴 (5 mL) 중 (2-이소프로필티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 22, 단계 b) (0.217 g) 및 2-(3-(브로모메틸)-5-클로로페닐)에탄올 (실시예 52, 단계 b) (0.160 g)의 현탁액에 첨가하고, 생성된 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 이어서, 용액을 실리카 상에서 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 (1:5:94의 트리에틸아민:메탄올:디클로로메탄으로 용출), 검을 수득하였다. 검을 디클로로메탄 중에 용해시키고, 용액을 물로 3회 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 부제 화합물을 연한 황색 포말로서 수득하였다. 수득량 0.254 g.
Figure pct00563
d) 2-(3-클로로-5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)아세트알데히드
Figure pct00564
DCM (5 mL) 중 (9-(3-클로로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 52, 단계 c) (0.242 g)의 용액을 얼음-물 중에서 냉각시키고, 트리플루오로아세트산 (0.059 mL)으로 처리하고, 5분 동안 교반하였다. 데스-마틴 페리오디난 (0.323 g)을 첨가한 후, 혼합물을 냉각 배스로부터 꺼내고, 실온에서 30분 동안 교반하였다. 용액을 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (5 mL)로 희석하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 격렬하게 교반하였다. 이어서, 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기상을 염수로 세척하고, 아세트산 (0.1 mL)을 사용하여 산성화시키고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 조 부제 화합물을 황색 포말로서 수득하였다. 수득량 0.297 g.
Figure pct00565
e) (R)-7-(2-(3-클로로-5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00566
메탄올 (3 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.220 g)의 용액을 아세트산 (0.047 mL)으로 처리하고, 5분 동안 교반하였다. 이어서, 메탄올 (4 mL) 중 2-(3-클로로-5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)아세트알데히드 (실시예 52, 단계 d) (0.296 g)의 용액을 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 5분 동안 교반한 후, 얼음-물 중에서 냉각시키고, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.181 g)로 처리하였다. 혼합물을 얼음-물 중에서 10분 동안 교반하고, 이어서 실온에서 45분 동안 교반한 후, 얼음-물 중에서 냉각시키고, 추가의 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.533 g)로 처리하였다. 이어서, 혼합물을 실온으로 서서히 가온하면서, 이를 밤새 교반하였다. 다음날 아침, 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 메탄올 (1.5 mL), 아세토니트릴 (1.5 mL) 및 물 (1.5 mL)의 혼합물 중에 용해시키고, 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→50 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 진공하에 농축시키고, 아세토니트릴로부터 3회 공동-증발시켜, 무색 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 디에틸 에테르 중에서 분쇄하여, 고체를 수득하였고, 이를 여과에 의해 제거하고, 디에틸 에테르로 세척하고, 진공하에 실온에서 건조시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.092 g.
Figure pct00567
실시예 53
(R)-7-(2-(3-플루오로-5-((4-(4-이소프로필티아졸-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00568
a) 에틸 4-이소프로필티아졸-2-카르복실레이트
Figure pct00569
에탄올 (15 mL) 중 1-브로모-3-메틸부탄-2-온 (3.72 g)을 에탄올 (120 mL) 중 에틸 2-아미노-2-티옥소아세테이트 (3 g)의 환류 용액에 15분에 걸쳐 적가하였다. 혼합물을 2시간 동안 환류 온도에서 가열한 후, 실온으로 냉각시켰다. 용매를 감압하에 30 mL의 부피로 증발시키고, 상기 용액을 얼음/물 (200 mL)에 첨가하고, '880' 진한 수성 암모니아를 적가하여 혼합물을 중화시켰다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 이소헥산 중 20 ％ 에틸 아세테이트로 용출시키는 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 2.2 g.
Figure pct00570
b) 4-이소프로필티아졸-2-카르복실산
Figure pct00571
메탄올 (10 mL)과 THF (20 mL)의 혼합물 중 에틸 4-이소프로필티아졸-2-카르복실레이트 (실시예 53, 단계 a) (2.2 g)의 용액을 물 (20 mL) 중 수산화리튬 (0.264 g)의 용액으로 처리하였다. 반응 혼합물을 20 ℃에서 24시간 동안 교반하였다. 유기 용매를 감압하에 제거하고, 나머지 수성 혼합물을 에틸 아세테이트와 물 사이에 분배하였다. 2 M 염산을 사용하여 수성층을 산성화시키고, 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 시클로헥산 중에서 분쇄하여, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.93 g.
Figure pct00572
c) (9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(4-이소프로필티아졸-2-일)메타논
Figure pct00573
메탄올 (3 mL) 중 2,2,2-트리플루오로-1-(9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)에타논 (실시예 41, 단계 d) (0.21 g)의 용액을 암모니아 (35 ％ 수용액, 15 mL)에 첨가하고, 반응 혼합물을 20 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 감압하에 증발 건조시키고, 잔류물을 아세토니트릴과 함께 3회 공비시켰다. 잔류물을 DMF (7 mL) 중에 용해시키고, 4-이소프로필티아졸-2-카르복실산 (실시예 53, 단계 b) (0.089 g)에 이어서 트리에틸아민 (0.290 mL)으로 처리한 후, HATU (0.257 g)로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하고, 유기층을 염수로 2회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.325 g.
Figure pct00574
d) (R)-7-(2-(3-플루오로-5-((4-(4-이소프로필티아졸-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00575
DCM (20 mL) 중 (9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(4-이소프로필티아졸-2-일)메타논 (실시예 53, 단계 c) (0.23 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (0.038 mL)에 이어서 데스-마틴 페리오디난 (0.275 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 40분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (20 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (20 mL) 및 에틸 아세테이트 (30 mL)로 처리하고, 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하였다. 아세트산 (0.029 mL)을 상기 용액에 첨가한 후, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 메탄올 (3 mL) 중에 용해시키고, 메탄올 (15 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.196 g) 및 아세트산 (0.029 mL)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 얼음 배스에서 냉각시키고, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.063 g)로 처리하였다. 냉각 배스를 제거하고, 혼합물을 20 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 3 mL 이상의 부피로 증발시키고, THF (20 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 포화 염수 (10 mL)와 포화 중탄산나트륨 용액 (1 mL)의 혼합물로 세척하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 아세토니트릴과 함께 2회 공비시켰다. 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.140 g.
Figure pct00576
실시예 54
(R)-7-(2-(3-플루오로-5-((4-(5-이소프로필티아졸-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00577
a) 에틸 5-이소프로필티아졸-2-카르복실레이트
Figure pct00578
DCM (1.2 mL)과 디옥산 (0.3 mL)의 혼합물 중 브롬 (0.162 mL)의 용액을 DCM (1.6 mL)과 디옥산 (0.4 mL)의 혼합물 중 3-메틸부타날 (0.272 g)의 냉각 용액 (0 ℃)에 서서히 적가하였다. 혼합물을 5 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0 ℃로 냉각시키고, 용매를 질소 가스 스트림하에 제거하였다. 잔류물 (여전히 0 ℃)을 에틸 2-아미노-2-티옥소아세테이트 (0.42 g)로 조금씩 처리하였다. 생성된 혼합물을 질소하에 15분의 기간에 걸쳐 0 ℃로부터 70 ℃로 가열하였다. 상기 시간의 말미에, 혼합물을 얼음 배스에서 냉각시키고, 에틸 아세테이트 및 포화 중탄산나트륨 용액으로 처리하고, 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 조 생성물을 용매로서 이소헥산 중 30 ％ 에틸 아세테이트를 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.105 g.
Figure pct00579
b) 5-이소프로필티아졸-2-카르복실산
Figure pct00580
메탄올 (5 mL) 중 에틸 5-이소프로필티아졸-2-카르복실레이트 (실시예 54, 단계 a) (0.105 g)의 용액을 물 (3 mL) 중 수산화리튬 (0.025 g)의 용액으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 2시간 동안 격렬하게 교반하였다. 메탄올을 감압하에 증발시키고, 잔류 수용액을 염수 (10 mL)로 희석하였다. 수성층을 에테르로 세척한 후, 얼음 배스에서 냉각시키고, 진한 염산 수용액을 적가하여 산성화시켰다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 합한 에틸 아세테이트층을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.048 g.
Figure pct00581
c) (9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-이소프로필티아졸-2-일)메타논
Figure pct00582
메탄올 (3 mL) 중 2,2,2-트리플루오로-1-(9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)에타논 (실시예 41, 단계 d) (0.113 g)의 용액을 암모니아 (35 ％ 수용액, 15 mL)에 첨가하고, 반응 혼합물을 20 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 감압하에 증발 건조시키고, 잔류물을 아세토니트릴과 함께 3회 공비시켰다. 잔류물을 DMF (7 mL) 중에 용해시키고, 5-이소프로필티아졸-2-카르복실산 (실시예 54, 단계 b) (0.048 g)에 이어서 트리에틸아민 (0.156 mL)으로 처리한 후, HATU (0.139 g)로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하고, 유기층을 염수로 2회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 용매로서 디클로로메탄 (1 ％ 트리에틸아민 함유) 중 2.5 ％ 메탄올을 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 104 mg.
Figure pct00583
d) (R)-7-(2-(3-플루오로-5-((4-(5-이소프로필티아졸-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00584
DCM (20 mL) 중 (9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-이소프로필티아졸-2-일)메타논 (실시예 54, 단계 c) (0.104 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (0.017 mL)에 이어서 데스-마틴 페리오디난 (0.124 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 40분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (20 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (20 mL) 및 에틸 아세테이트 (30 mL)로 처리하고, 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하였다. 아세트산 (0.013 mL)을 상기 용액에 첨가한 후, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 메탄올 (3 mL) 중에 용해시키고, 메탄올 (15 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.089 g) 및 아세트산 (0.013 mL)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 얼음 배스에서 냉각시키고, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.028 g)로 처리하였다. 냉각 배스를 제거하고, 혼합물을 20 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 3 mL 이상의 부피로 증발시키고, THF (20 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 포화 염수 (10 mL)와 포화 중탄산나트륨 용액 (1 mL)의 혼합물로 세척하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 아세토니트릴과 함께 2회 공비시켰다. 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.045 mg.
Figure pct00585
실시예 55
(R)-7-(2-(3-플루오로-5-((4-(2-이소프로필티아졸-5-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00586
a) 에틸 2-이소프로필티아졸-5-카르복실레이트
Figure pct00587
아세톤 (50 mL) 중 2-메틸프로판티오아미드 (3.3 g) 및 에틸 2-클로로-3-옥소프로파노에이트 (4.82 g)의 혼합물을 환류 온도에서 질소하에 3시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 용매를 감압하에 제거하였다. 조 생성물을 용매로서 이소헥산 중 12 ％ 에틸 아세테이트를 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 1.6 g.
Figure pct00588
b) 2-이소프로필티아졸-5-카르복실산
Figure pct00589
메탄올 (6 mL) 중 에틸 2-이소프로필티아졸-5-카르복실레이트 (실시예 55, 단계 a) (0.33 g)의 용액을 물 (3 mL) 중 수산화리튬 (0.079 g)의 용액으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 메탄올을 감압하에 증발시키고, 잔류물을 에테르와 염수 사이에 분배하였다. 묽은 염산을 적가하여 수성층을 산성화시키고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.185 g.
Figure pct00590
c) 2-(3-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일메틸)-5-플루오로페닐)에탄올
Figure pct00591
'880' 암모니아 용액 (5 mL)을 메탄올 (25 mL) 중 2,2,2-트리플루오로-1-(9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)에타논 (실시예 41, 단계 d) (2.2 g)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 90분 동안 교반하고, 용매를 증발시켰다. 잔류물을 아세토니트릴과 함께 3회 공비시키고, 농축시켜, 부제 화합물을 투명한 검으로서 수득하였다. 수득량 1.96 g.
Figure pct00592
d) (9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-5-일)메타논
Figure pct00593
DMF (7 mL) 중 2-(3-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일메틸)-5-플루오로페닐)에탄올 (실시예 55, 단계 c) (0.153 g)의 용액을 트리에틸아민 (0.208 mL)에 이어서 2-이소프로필티아졸-5-카르복실산 (실시예 55, 단계 b) (0.085 g)으로 처리하였다. 혼합물을 0 ℃로 냉각시키고, HATU (0.245 g)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 20 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하고, 유기층을 염수로 2회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 용매로서 디클로로메탄 (1 ％ 트리에틸아민 함유) 중 2.5 ％ 메탄올을 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.130 g.
Figure pct00594
e) (R)-7-(2-(3-플루오로-5-((4-(2-이소프로필티아졸-5-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00595
DCM (20 mL) 중 (9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-5-일)메타논 (실시예 55, 단계 d) (0.13 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (0.022 mL)에 이어서 데스-마틴 페리오디난 (0.155 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 40분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (20 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (20 mL) 및 에틸 아세테이트 (30 mL)로 처리하고, 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하였다. 아세트산 (0.016 mL)을 상기 용액에 첨가한 후, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 메탄올 (3 mL) 중에 용해시키고, 메탄올 (15 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.111 g) 및 아세트산 (0.016 mL)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 얼음 배스에서 냉각시키고, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.035 g)로 처리하였다. 냉각 배스를 제거하고, 혼합물을 20 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 3 mL 이상의 부피로 증발시키고, THF (20 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 포화 염수 (10 mL)와 포화 중탄산나트륨 용액 (1 mL)의 혼합물로 세척하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 아세토니트릴과 함께 2회 공비시켰다. 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.1 g.
Figure pct00596
실시예 56
(R)-7-(2-(3-플루오로-5-((4-(2-프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00597
a) 에틸 2-부티르아미도-3-머캅토프로파노에이트
Figure pct00598
트리에틸아민 (4.5 mL)을 DCM (50 mL) 중 에틸 2-아미노-3-머캅토프로파노에이트 히드로클로라이드 (5 g)의 현탁액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 얼음/염 배스에서 냉각시키고, 부티릴 클로라이드 (3.3 mL)를 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 반응물을 포화 중탄산나트륨 용액 (50 mL)으로 켄칭하고, 층을 분리하였다. 수성상을 DCM (100 mL씩 2회)으로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (100 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 생성된 백색 고체를 4:1 → 1:1의 이소헥산:에틸 아세테이트 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜, 부제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 3 g.
Figure pct00599
b) 에틸 2-프로필티아졸-4-카르복실레이트
Figure pct00600
HCl의 용액 (1,4-디옥산 중 4 M, 20 mL)을 에탄올 (20 mL) 중 에틸 2-부티르아미도-3-머캅토프로파노에이트 (실시예 56, 단계 a) (3 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 밤새 교반하였다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 톨루엔과 함께 2회 공비시켰다. 잔류물을 아세토니트릴 (50 mL) 중에 재용해시키고, 이산화망간 (11.9 g)을 첨가하고, 혼합물을 환류 온도에서 밤새 가열하였다. 반응물을 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 필터 패드를 MeCN (100 mL씩 3회)으로 세척하였다. 합한 여과액 및 세척액을 증발시키고, 잔류물을 9:1의 이소헥산:에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였다. 수득량 0.24 g.
Figure pct00601
c) 2-프로필티아졸-4-카르복실산
Figure pct00602
수산화리튬 일수화물 (0.2 g)을 THF (4 mL)와 물 (1 mL)의 혼합물 중 에틸 2-프로필티아졸-4-카르복실레이트 (실시예 56, 단계 b) (0.24 g)의 용액에 첨가하였다. 생성된 현탁액을 실온에서 밤새 교반하였다. HCl 수용액 (2 M, 3 mL)을 사용하여 반응물을 산성화시키고, 증발시켰다. 잔류물을 염수 (5 mL)와 에틸 아세테이트 (20 mL) 사이에 분배하였다. 층을 분리하고, 수성상을 에틸 아세테이트 (20 mL씩 2회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜, 부제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.17 g.
Figure pct00603
d) (9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct00604
O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (0.25 g)를 DMF (7 mL) 중 2-(3-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일메틸)-5-플루오로페닐)에탄올 (실시예 55, 단계 c) (0.16 g), 2-프로필티아졸-4-카르복실산 (실시예 56, 단계 c) (0.09 g) 및 트리에틸아민 (0.29 mL)의 용액에 첨가하고, 생성된 황색 용액을 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트 (100 mL)와 염수 (100 mL) 사이에 분배하였다. 유기상을 분리하고, 염수 (100 mL씩 2회)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 증발시켰다. 생성된 검을 47.5:47.5:5의 이소헥산:에틸 아세테이트:트리에틸아민 → 95:5의 에틸 아세테이트:트리에틸아민 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 톨루엔 (200 mL)을 첨가하고, 혼합물을 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 검으로서 수득하였다. 수득량 0.14 g.
Figure pct00605
e) (R)-7-(2-(3-플루오로-5-((4-(2-프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00606
0 ℃에서, TFA (0.023 mL)를 DCM (5 mL) 중 (9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 56, 단계 d) (0.14 g)에 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난 (0.19 g)을 첨가하였다. 생성된 황색 용액을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (20 mL)의 혼합물을 첨가하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 격렬하게 교반하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (20 mL)로 세척하고, 아세트산 몇 방울을 사용하여 산성화시키고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (5 mL) 중에 용해시키고, 이어서 아세트산 (0.017 mL) 및 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.12 g)를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.029 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시켰다. 94.5:5:0.5 → 89:10:1의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켰다. 추가로 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→30 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 잔류물을 디에틸에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.077 g.
Figure pct00607
실시예 57
(R)-7-(2-(3-((4-(2-시클로프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)-5-플루오로페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00608
a) 에틸 2-(시클로프로판카르복스아미도)-3-머캅토프로파노에이트
Figure pct00609
0 ℃에서, 시클로프로판카르보닐 클로라이드 (3.1 mL)를 DCM (200 mL) 중 트리에틸아민 (4.68 mL) 및 에틸 2-아미노-3-머캅토프로파노에이트 히드로클로라이드 (5.2 g)의 현탁액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 반응물을 에탄올로 켄칭하고, 용매를 증발시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트 (200 mL) 중에 현탁시키고, 포화 중탄산나트륨 용액 (150 mL씩 2회), HCl 수용액 (2 M, 150 mL씩 2회) 및 염수 (150 mL)로 세척한 후, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 생성된 백색 고체를 4:1의 이소헥산:에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 5 g.
Figure pct00610
b) 에틸 2-시클로프로필티아졸-4-카르복실레이트
Figure pct00611
톨루엔 (100 mL) 중 에틸 2-(시클로프로판카르복스아미도)-3-머캅토프로파노에이트 (실시예 57, 단계 a) (5 g) 및 토식산 (tosic acid) (0.875 g)의 용액을 환류 온도에서 딘 앤 스타크 (Dean and Stark) 조건하에 밤새 가열하였다. 반응물을 냉각시키고, 톨루엔 용액을 포화 탄산수소나트륨 용액 (100 mL씩 3회)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 생성된 갈색 검을 아세토니트릴 (100 mL) 중에 재용해시켰다. 이산화망간 (40 g)을 첨가하고, 혼합물을 환류 온도에서 밤새 가열하였다. 반응물을 셀라이트를 통해 여과하고, 필터 패드를 MeCN (100 mL씩 3회)으로 세척하였다. 합한 여과액 및 세척액을 증발시키고, 잔류물을 9:1 → 4:1의 이소헥산:에틸 아세테이트 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였다. 수득량 0.15 g.
Figure pct00612
c) 2-시클로프로필티아졸-4-카르복실산
Figure pct00613
수산화리튬 일수화물 (0.13 g)을 THF (8 mL)와 물 (2 mL)의 혼합물 중 에틸 2-시클로프로필티아졸-4-카르복실레이트 (실시예 57, 단계 b) (0.15 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 밤새 교반하였다. 수성 HCl (2 M, 3 mL)을 사용하여 반응물을 산성화시키고, 용매를 증발시켰다. 잔류물을 염수 (20 mL)와 에틸 아세테이트 (30 mL) 사이에 분배하였다. 층을 분리하고, 수성상을 에틸 아세테이트 (30 mL씩 2회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜, 부제 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.12 g.
Figure pct00614
d) (2-시클로프로필티아졸-4-일)(9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논
Figure pct00615
O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (0.34 g)를 DMF (7 mL) 중 2-(3-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일메틸)-5-플루오로페닐)에탄올 (실시예 55, 단계 c) (0.21 g), 2-시클로프로필티아졸-4-카르복실산 (실시예 57, 단계 c) (0.12 g) 및 트리에틸아민 (0.38 mL)의 용액에 첨가하고, 생성된 황색 용액을 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 (100 mL) 사이에 분배하고, 유기층을 염수 (100 mL씩 2회)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 증발시켰다. 생성된 검을 47.5:47.5:5의 이소헥산:에틸 아세테이트:트리에틸아민 → 95:5의 에틸 아세테이트:트리에틸아민 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 톨루엔 (200 mL)을 첨가하고, 용매를 감압하에 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 검으로서 수득하였다. 수득량 0.15 g.
Figure pct00616
e) (R)-7-(2-(3-((4-(2-시클로프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)-5-플루오로페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00617
0 ℃에서, 트리플루오로아세트산 (0.025 mL)을 DCM (5 mL) 중 (2-시클로프로필티아졸-4-일)(9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 (실시예 57, 단계 d) (0.15 g)에 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난 (0.21 g)을 첨가하였다. 생성된 황색 용액을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (20 mL)의 혼합물을 첨가하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 격렬하게 교반하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (20 mL)로 세척하고, 아세트산 몇 방울을 사용하여 산성화시키고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (5 mL) 중에 용해시키고, 이어서 아세트산 (0.019 mL) 및 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.13 g)를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.031 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시켰다. 94.5:5:0.5 → 89:10:1의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켰다. 추가로 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→30 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 잔류물을 디에틸에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.085 g.
Figure pct00618
실시예 58
(R)-7-(2-(3-((4-(2-시클로부틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)-5-플루오로페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00619
a) 에틸 2-(시클로부탄카르복스아미도)-3-머캅토프로파노에이트
Figure pct00620
트리에틸아민 (15 mL)을 DMF (40 mL) 중 시클로부탄카르복실산 (2.57 mL) 및 에틸 2-아미노-3-머캅토프로파노에이트 히드로클로라이드 (5 g)의 현탁액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 얼음 배스에서 냉각시키고, T3P의 용액 (THF 중 1.57 M, 20.6 mL)을 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 반응물을 포화 중탄산나트륨 용액 (50 mL)으로 켄칭하고, 층을 분리하였다. 수성상을 DCM (100 mL씩 2회)으로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (100 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 생성된 백색 고체를 4:1 → 1:1의 이소헥산:에틸 아세테이트 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였다. 수득량 3.20 g.
Figure pct00621
b) 에틸 2-시클로부틸티아졸-4-카르복실레이트
Figure pct00622
HCl의 용액 (1,4-디옥산 중 4 M, 3.46 mL)을 에탄올 (20 mL) 중 에틸 2-(시클로부탄카르복스아미도)-3-머캅토프로파노에이트 (실시예 58, 단계 a) (3.2 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 밤새 교반하였다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 톨루엔과 함께 2회 공비시켰다. 잔류물을 아세토니트릴 (50 mL) 중에 재용해시키고, 이산화망간 (12 g)을 첨가하고, 혼합물을 환류 온도에서 밤새 가열하였다. 반응물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 이어서 MeCN (100 mL씩 3회)으로 세척하였다. 합한 여과액 및 세척액을 증발시키고, 잔류물을 9:1의 이소헥산:에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였다. 수득량 0.48 g.
Figure pct00623
c) 2-시클로부틸티아졸-4-카르복실산
Figure pct00624
수산화리튬 일수화물 (0.38 g)을 THF (8 mL)와 물 (2 mL)의 혼합물 중 에틸 2-시클로부틸티아졸-4-카르복실레이트 (실시예 58, 단계 b) (0.48 g)의 용액에 첨가하였다. 생성된 현탁액을 실온에서 밤새 교반하였다. HCl 수용액 (2 M, 5 mL)을 사용하여 반응물을 산성화시키고, 증발 건조시켰다. 잔류물을 염수 (5 mL)와 에틸 아세테이트 (20 mL) 사이에 분배하였다. 층을 분리하고, 수성상을 에틸 아세테이트 (20 mL씩 2회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜, 부제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.38 g.
Figure pct00625
d) (2-시클로부틸티아졸-4-일)(9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논
Figure pct00626
O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (0.32 g)를 DMF (7 mL) 중 2-(3-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일메틸)-5-플루오로페닐)에탄올 (실시예 55, 단계 c) (0.2 g), 2-시클로부틸티아졸-4-카르복실산 (실시예 58, 단계 c) (0.12 g) 및 트리에틸아민 (0.36 mL)의 용액에 첨가하고, 생성된 황색 용액을 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 (100 mL) 사이에 분배하고, 층을 분리하였다. 유기상을 염수 (100 mL씩 2회)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 증발시켰다. 생성된 검을 47.5:47.5:5의 이소헥산:에틸 아세테이트:트리에틸아민 → 95:5의 에틸 아세테이트:트리에틸아민 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 톨루엔 (200 mL)을 첨가하고, 용매를 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였다. 수득량 0.18 g.
Figure pct00627
e) (R)-7-(2-(3-((4-(2-시클로부틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)-5-플루오로페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00628
0 ℃에서, TFA (0.026 mL)를 DCM (5 mL) 중 (2-시클로부틸티아졸-4-일)(9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 (실시예 58, 단계 d) (0.16 g)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난 (0.22 g)을 첨가하였다. 생성된 황색 용액을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (20 mL)의 혼합물을 첨가하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 격렬하게 교반하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (20 mL)로 세척하고, 아세트산 몇 방울을 사용하여 산성화시키고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (5 mL) 중에 용해시키고, 이어서 아세트산 (0.019 mL) 및 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.13 g)를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.032 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시켰다. 94.5:5:0.5 → 89:10:1의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켰다. 추가로 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→30 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 잔류물을 디에틸에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.12 g.
Figure pct00629
실시예 59
(R)-7-(2-(3-((4-(2-시클로펜틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)-5-플루오로페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00630
a) 에틸 2-(시클로펜탄카르복스아미도)-3-머캅토프로파노에이트
Figure pct00631
CDI (8.5 g)를 DMF (40 mL) 중 시클로펜탄카르복실산 (5.2 mL)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 1시간 동안 교반하고, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 에틸 2-아미노-3-머캅토프로파노에이트 히드로클로라이드 (8.88 g)를 첨가하고, 이어서 트리에틸아민 (10 mL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 반응물을 포화 중탄산나트륨 용액 (50 mL)으로 켄칭하고, 층을 분리하였다. 수성상을 DCM (100 mL씩 2회)으로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (100 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 생성된 고체를 4:1 → 1:1의 이소헥산:에틸 아세테이트 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜, 부제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 7.7 g.
Figure pct00632
b) 에틸 2-시클로펜틸-4,5-디히드로티아졸-4-카르복실레이트
Figure pct00633
토식산 일수화물 (0.78 g)을 톨루엔 (40 mL) 중 에틸 2-(시클로펜탄카르복스아미도)-3-머캅토프로파노에이트 (실시예 59, 단계 a) (5 g)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 환류 온도에서 딘 앤 스타크 조건하에 6시간 동안 가열하였다. 반응물을 냉각시킨 후, 톨루엔 용액을 포화 중탄산나트륨 용액 (20 mL)으로 세척하고, 용매를 증발시켰다. 잔류물을 톨루엔과 함께 공비시켰다. 생성된 백색 고체를 9:1의 이소헥산:에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였다. 수득량 3.2 g.
Figure pct00634
c) 에틸 2-시클로펜틸티아졸-4-카르복실레이트
Figure pct00635
이산화망간 (24 g)을 아세토니트릴 (100 mL) 중 에틸 2-시클로펜틸-4,5-디히드로티아졸-4-카르복실레이트 (실시예 59, 단계 b) (3.2 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 환류 온도에서 밤새 가열하였다. 반응물을 냉각시키고, 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 필터 패드를 아세토니트릴 (100 mL씩 2회)로 세척하고, 합한 여과액 및 세척액을 증발시켰다. 잔류물을 9:1의 이소헥산:에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시키고, 에탄올 (20 mL) 중에 재용해시켰다. 물 (0.5 mL) 중 탄소상 팔라듐 (5 ％, 0.66 g)의 슬러리를 첨가하고, 생성된 현탁액을 5 bar 기압의 수소 분위기하에 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 이를 에탄올 (50 mL씩 3회)로 세척하였다. 합한 여과액 및 세척액을 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였다. 수득량 0.9 g.
Figure pct00636
d) 2-시클로펜틸티아졸-4-카르복실산
Figure pct00637
수산화리튬 일수화물 (0.67 g)을 THF (40 mL)와 물 (10 mL)의 혼합물 중 에틸 2-시클로펜틸티아졸-4-카르복실레이트 (실시예 59, 단계 c) (0.9 g)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 밤새 교반하였다. HCl 수용액 (2 M, 10 mL)을 사용하여 반응물을 산성화시키고, 용매를 증발시켰다. 잔류물을 염수 (50 mL)와 에틸 아세테이트 (50 mL) 사이에 분배하고, 층을 분리하였다. 수성상을 에틸 아세테이트 (50 mL씩 2회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜, 부제 화합물을 연한 황색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.77 g.
Figure pct00638
e) (2-시클로펜틸티아졸-4-일)(9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논
Figure pct00639
O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (0.33 g)를 DMF (7 mL) 중 2-(3-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일메틸)-5-플루오로페닐)에탄올 (실시예 55, 단계 c) (0.21 g), 2-시클로펜틸티아졸-4-카르복실산 (실시예 59, 단계 d) (0.13 g) 및 트리에틸아민 (0.38 mL)의 용액에 첨가하고, 생성된 황색 용액을 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 (100 mL) 사이에 분배하고, 유기상을 염수 (100 mL씩 2회)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 증발시켰다. 생성된 검을 47.5:47.5:5의 이소헥산:에틸 아세테이트:트리에틸아민 → 95:5의 에틸 아세테이트:트리에틸아민 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 톨루엔 (200 mL)을 첨가하고, 용매를 감압하에 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 검으로서 수득하였다. 수득량 0.19 g.
Figure pct00640
f) (R)-7-(2-(3-((4-(2-시클로펜틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)-5-플루오로페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00641
0 ℃에서, 트리플루오로아세트산 (0.028 mL)을 DCM (5 mL) 중 (2-시클로펜틸티아졸-4-일)(9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 (실시예 59, 단계 e) (0.18 g)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난 (0.23 g)을 첨가하였다. 생성된 황색 용액을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (20 mL)의 혼합물을 첨가하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 격렬하게 교반하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (20 mL)로 세척하고, 아세트산 몇 방울을 사용하여 산성화시키고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (5 mL) 중에 용해시키고, 이어서 아세트산 (0.021 mL) 및 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.14 g)를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.034 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시켰다. 94.5:5:0.5 → 89:10:1의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켰다. 추가로 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→30 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 잔류물을 디에틸에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.7 g.
Figure pct00642
실시예 60
(R)-7-(2-(3-플루오로-5-((4-(4-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00643
a) (9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(4-메틸티오펜-2-일)메타논
Figure pct00644
메탄올 (3 mL) 중 2,2,2-트리플루오로-1-(9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)에타논 (실시예 41, 단계 d) (0.17 g)의 용액을 암모니아 (35 ％ 수용액, 15 mL)에 첨가하고, 반응 혼합물을 20 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 감압하에 증발 건조시키고, 잔류물을 아세토니트릴과 함께 3회 공비시켰다. 잔류물을 DMF (6 mL) 중에 용해시키고, 4-메틸티오펜-2-카르복실산 (0.060 g)에 이어서 트리에틸아민 (0.176 mL)으로 처리한 후, HATU (0.208 g)로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하고, 유기층을 염수로 2회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 용매로서 디클로로메탄 (1 ％ 트리에틸아민 함유) 중 2.5 ％ 메탄올을 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.120 g.
Figure pct00645
b) (R)-7-(2-(3-플루오로-5-((4-(4-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00646
DCM (20 mL) 중 (9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(4-메틸티오펜-2-일)메타논 (실시예 60, 단계 a) (0.120 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (0.021 ml)에 이어서 데스 마틴 페리오디난 (0.153 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 40분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (20 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (20 mL) 및 에틸 아세테이트 (30 mL)로 처리하고, 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하였다. 아세트산 (0.016 mL)을 상기 용액에 첨가한 후, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 메탄올 (3 mL) 중에 용해시키고, 메탄올 (15 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.109 g) 및 아세트산 (0.016 ml)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 얼음 배스에서 냉각시키고, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.035 g)로 처리하였다. 냉각 배스를 제거하고, 혼합물을 20 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 3 mL 이상의 부피로 증발시키고, THF (20 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 포화 염수 (10 mL)와 포화 중탄산나트륨 용액 (1 mL)의 혼합물로 세척하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 아세토니트릴과 함께 2회 공비시켰다. 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.075 g.
Figure pct00647
실시예 61
(R)-7-(2-(4-클로로-3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00648
a) 5-(카르복시메틸)-2-클로로벤조산
Figure pct00649
물 (10 mL) 중 수산화칼륨 (0.969 g)을 에탄올 (10 mL) 중 2-클로로-5-(시아노메틸)벤조산 (1.25 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 환류 온도에서 2.25시간 동안 가열한 후, 냉각시켰다. 혼합물을 진공하에 농축시켜 에탄올을 제거한 후, 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 2회 세척하였다. 유기상을 폐기하였고, 한편으로는 진한 염산을 사용하여 수성상을 pH 1로 산성화시키고, 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 합한 추출물을 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 부제 화합물을 갈색 검으로서 수득하였다. 수득량 1.38 g.
Figure pct00650
b) 2-(4-클로로-3-(히드록시메틸)페닐)에탄올
Figure pct00651
실온에서, 보란-메틸 술파이드 복합체의 용액 (THF 중 2 M, 6.50 mL)을 무수 THF (20 mL) 중 5-(카르복시메틸)-2-클로로벤조산 (실시예 61, 단계 a) (1.37 g)의 용액에 5분에 걸쳐 조금씩 첨가하였다. 생성된 발포성 용액을 실온에서 1.5시간 동안 교반한 후, 1시간 동안 환류 온도로 가열하였다. 메탄올 (5 mL)을 5분에 걸쳐 조금씩 첨가하여 냉각시킨 혼합물을 켄칭하였다. 용액을 실온에서 2시간 동안 교반한 후, 실리카 상에서 플래쉬 크로마토그래피 (디클로로메탄 중 5 ％ 메탄올로 용출)로 정제하여, 부제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.933 g.
Figure pct00652
c) 2-클로로-5-(2-히드록시에틸)벤즈알데히드
Figure pct00653
이산화망간 (IV) (1.00 g)을 DCM (5 mL) 중 2-(4-클로로-3-(히드록시메틸)페닐)에탄올 (실시예 61, 단계 b) (0.200 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 현탁액을 실온에서 밤새 교반하였다. 이어서, 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 잔류물을 DCM으로 잘 세척하였다. 여과액 및 세척액을 진공하에 농축시켜, 부제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.197 g.
Figure pct00654
d) (9-(2-클로로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct00655
NMP (2 mL) 중 (2-이소프로필티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 22, 단계 b) (0.294 g)의 용액을 아세트산 (0.039 mL)으로 처리하고, 5분 동안 교반하였다. 이어서, NMP (3 mL) 중 2-클로로-5-(2-히드록시에틸)벤즈알데히드 (실시예 61, 단계 c) (0.189 g)의 용액을 첨가하고, 생성된 용액을 1시간 동안 교반한 후, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.217 g)로 처리하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후, 포화 중탄산나트륨에 붓고, 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 합한 추출물을 물로 3회, 염수로 1회 세척한 후, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 실리카 상에서 플래쉬 크로마토그래피 (1:2:97 트리에틸아민:메탄올:디클로로메탄으로 용출)로 정제하여, 부제 화합물을 무색 검으로서 수득하였다. 수득량 0.238 g.
Figure pct00656
e) 2-(4-클로로-3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)아세트알데히드
Figure pct00657
DCM (5 mL) 중 (9-(2-클로로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 61, 단계 d) (0.230 g)의 용액을 얼음-물 중에서 냉각시키고, 트리플루오로아세트산 (0.074 mL)으로 처리하고, 5분 동안 교반하였다. 데스-마틴 페리오디난 (0.313 g)을 첨가한 후, 혼합물을 냉각 배스로부터 꺼내고, 실온에서 40분 동안 교반하였다. 용액을 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (5 mL)로 희석하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 격렬하게 교반하였다. 이어서, 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기상을 염수로 세척하고, 아세트산 (0.1 mL)을 사용하여 산성화시키고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 조 부제 화합물 황색 포말로서 수득하였다. 수득량 0.274 g.
Figure pct00658
f) (R)-7-(2-(4-클로로-3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00659
메탄올 (3 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.225 g)의 용액을 아세트산 (0.029 mL)으로 처리하고, 5분 동안 교반하였다. 이어서, 메탄올 (4 mL) 중 2-(4-클로로-3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)아세트알데히드 (실시예 61, 단계 e) (0.274 g)의 용액을 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 5분 동안 교반한 후, 얼음-물 중에서 냉각시키고, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.051 g)로 처리하였다. 냉각 배스를 제거하고, 혼합물을 실온에서 140분 동안 교반한 후, 추가의 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.055 g)로 처리하였다. 이어서, 혼합물을 밤새 교반하였다. 다음날 아침, 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 메탄올 (1.5 mL), 아세토니트릴 (1.5 mL) 및 물 (1.5 mL)의 혼합물 중에 용해시키고, 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→50 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 진공하에 농축시키고, 아세토니트릴로부터 3회 공동-증발시켜, 무색 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 디에틸 에테르 중에서 분쇄하여, 고체를 수득하였고, 이를 여과에 의해 수집하고, 디에틸 에테르로 세척하고, 실온에서 진공하에 건조시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.062 g.
Figure pct00660
실시예 62
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-((5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)나프탈렌-1-일)메틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00661
a) (9-((5-(브로모메틸)나프탈렌-1-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct00662
트리에틸아민 (0.185 mL)을 아세토니트릴 (5 mL) 중 (2-이소프로필티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 22, 단계 b) (0.225 g)의 현탁액에 첨가하여, 무색 용액을 수득하였고, 이를 실온에서 밤새 교반한 다음, 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 NMP (5 mL) 중에 용해시키고, 추가의 트리에틸아민 (0.111 mL)으로 처리하였다. 그 동안, 아세토니트릴 (5 mL) 및 NMP (5 mL) 중 1,5-비스(브로모메틸)나프탈렌 (0.500 g)의 현탁액을 실온에서 밤새 교반한 후, 진공하에 농축시켜 아세토니트릴을 제거함으로써, 용액을 수득하였다. 이어서, 상기로부터의 아민 용액을 35분에 걸쳐 적가하고, 추가의 NMP (1 mL) 첨가를 완료하였다. 생성된 용액을 75분 동안 교반한 후, 물에 붓고, 디에틸 에테르로 3회 추출하였다. 합한 추출물을 물로 3회, 및 염수로 1회 세척한 후, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 실리카 상에서 플래쉬 크로마토그래피 (트리에틸아민:디클로로메탄:에틸 아세테이트 (1:49:50)로 용출)로 정제하여, 부제 화합물을 백색 포말로서 수득하였다. 수득량 0.132 g.
Figure pct00663
b) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-((5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)나프탈렌-1-일)메틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00664
트리에틸아민 (0.16 mL)을 메탄올 (5 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.188 g)의 용액에 첨가하여, 현탁액을 수득하였고, 이를 진공하에 농축시키고, NMP (4 mL) 중에 재용해시켰다. 추가의 트리에틸아민 (0.16 mL)을 NMP (3 mL) 중 (9-((5-(브로모메틸)나프탈렌-1-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 62, 단계 a) (0.126 g)의 용액과 함께 (30분에 걸쳐 적가함) 첨가하고, 추가의 NMP (1 mL) 첨가를 완료하였다. 생성된 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 이어서, 용액을 여과하고, 트리플루오로아세트산 (0.27 mL)을 사용하여 산성화시키고, 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→50 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 진공하에 농축시키고, 아세토니트릴로부터 1회, 메탄올로부터 2회 공동-증발시켰다. 잔류물을 디에틸 에테르 중에서 분쇄하여, 고체를 수득하였고, 이를 여과에 의해 제거하고, 디에틸 에테르로 세척하고, 실온에서 진공하에 건조시켜, 표제 화합물을 연한 황색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.056 g.
Figure pct00665
실시예 63
(R)-7-(2-(3-플루오로-5-((4-(5-메틸티오펜-2-일술포닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00666
a) 2-(3-플루오로-5-((4-(5-메틸티오펜-2-일술포닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)에탄올
Figure pct00667
DCM (3 mL) 중 5-메틸티오펜-2-술포닐 클로라이드 (0.15 g)의 용액을 DCM (20 mL) 중 2-(3-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일메틸)-5-플루오로페닐)에탄올 (실시예 55, 단계 c) (0.21 g) 및 N-에틸-N-이소프로필프로판-2-아민 (0.14 mL)의 용액에 적가하였다. 생성된 혼합물을 1시간 동안 교반하고, 용매를 증발시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트 (50 mL)와 포화 탄산수소나트륨 용액 (50 mL) 사이에 분배하였다. 층을 분리하고, 수성층을 에틸 아세테이트 (50 mL씩 2회)로 추출하였다. 합한 유기물을 염수 (50 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 47.5:47.5:5의 에틸 아세테이트:이소헥산:트리에틸아민 → 95:5의 에틸 아세테이트:트리에틸아민 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜, 부제 화합물을 황색 검으로서 수득하였다. 수득량 0.21 g.
Figure pct00668
b) (R)-7-(2-(3-플루오로-5-((4-(5-메틸티오펜-2-일술포닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00669
0 ℃에서, TFA (0.033 mL)를 DCM (5 mL) 중 2-(3-플루오로-5-((4-(5-메틸티오펜-2-일술포닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)에탄올 (실시예 63, 단계 a) (0.2 g)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난 (0.27 g)을 첨가하였다. 생성된 황색 용액을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (20 mL)의 혼합물을 첨가하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 격렬하게 교반하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (20 mL)로 세척하고, 아세트산 몇 방울을 사용하여 산성화시키고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (5 mL) 중에 용해시키고, 이어서 아세트산 (0.024 mL) 및 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.17 g)를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.04 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시켰다. 94.5:5:0.5 → 89:10:1의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켰다. 추가로 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→30 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 잔류물을 디에틸에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.7 g.
Figure pct00670
실시예 64
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(2-(3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페녹시)에틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00671
a) (9-(3-(2,2-디에톡시에톡시)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct00672
메탄술포닐 클로라이드 (0.110 mL)를 DCM (30 mL) 중 (3-(2,2-디에톡시에톡시)페닐)메탄올 (실시예 38, 단계 a) (0.307 g) 및 트리에틸아민 (0.196 mL)의 교반 용액 (0 ℃)에 적가하였다. 생성된 혼합물을 20 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물로 세척하고, 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 아세토니트릴 (30 mL) 중에 용해시키고, 트리에틸아민 (1 mL)에 이어서 (2-이소프로필티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 22, 단계 b) (0.400 g)로 처리하였다. 혼합물을 20 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 제거하고, 잔류물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 조 생성물을 용매로서 디클로로메탄 (1 ％ 트리에틸아민 함유) 중 2.5 ％ 메탄올을 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.360 g.
Figure pct00673
b) 2-(3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페녹시)아세트알데히드
Figure pct00674
아세트산 (20 mL) 중 (9-(3-(2,2-디에톡시에톡시)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 64, 단계 a) (0.36 g)의 용액을 물 (20 mL)로 처리한 후, 반응 혼합물을 65 ℃에서 질소하에 18시간 동안 가열하였다. 용매를 감압하에 증발시키고, 잔류물을 톨루엔과 함께 공비시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.31 g. 직접 사용하였다.
c) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(2-(3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페녹시)에틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00675
메탄올 (10 mL) 중 2-(3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페녹시)아세트알데히드 (실시예 64, 단계 b) (0.31 g)의 용액을 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.267 g)에 이어서 아세트산 (0.039 mL)으로 처리하고, 혼합물을 얼음 배스에서 냉각시켰다. 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.085 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 3 mL 이상의 부피로 증발시키고, THF (20 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 포화 염수 (10 mL)와 포화 중탄산나트륨 용액 (1 mL)의 혼합물로 세척하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 아세토니트릴과 함께 2회 공비시켰다. 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.2 g.
Figure pct00676
실시예 65
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(2-(3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐티오)에틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00677
a) 3-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸티오)벤조산
Figure pct00678
(2-브로모에톡시)(tert-부틸)디메틸실란 (1.48 mL)을 DMF (15 mL) 중 3-머캅토벤조산 (1.07 g) 및 탄산칼륨 (1.91 g)의 현탁액에 적가하였다. 생성된 현탁액을 2시간 동안 교반하였다. HCl 수용액 (2 M, 10 mL)을 적가하여 반응물을 조심스럽게 산성화시키고, 물 (100 mL)에 부었다. 생성된 수성상을 에틸 아세테이트 (100 mL씩 3회)로 추출하였다. 합한 유기물을 염수 (50 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였다. 수득량 2.8 g.
Figure pct00679
b) 2-(3-(히드록시메틸)페닐티오)에탄올
Figure pct00680
보란 디메틸 술파이드 복합체 (THF 중 2 M, 17.3 mL)를 THF (50 mL) 중 3-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸티오)벤조산 (실시예 65, 단계 a) (2.16 g)의 빙냉 용액에 적가하였다. 반응물을 실온으로 가온한 후, 2시간 동안 환류 온도에서 가열하였다. 반응물을 얼음 배스에서 냉각시키고, HCl 수용액 (2 M, 50 mL)을 적가하였다. 생성된 혼합물을 밤새 교반하였다. 반응물을 그의 원래 부피의 반으로 농축시키고, 생성된 수성상을 DCM으로 추출하였다 (100 mL씩 3회). 합한 유기물을 염수 (100 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 4:1의 이소헥산:에틸 아세테이트 → 100 ％ 에틸 아세테이트 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였다. 수득량 0.77 g.
Figure pct00681
c) 3-(2-히드록시에틸티오)벤즈알데히드
Figure pct00682
이산화망간 (1.36 g)을 DCM (10 mL) 중 2-(3-(히드록시메틸)페닐티오)에탄올 (실시예 65, 단계 b) (0.29 g)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 4시간 동안 환류 온도에서 가열하고, 냉각시키고, 셀라이트를 통해 여과하였다. 필터 패드를 DCM (20 mL씩 3회)으로 세척하였다. 여과액 및 세척액을 합하고, 증발시켜, 부제 화합물을 황색 검으로서 수득하였다. 수득량 0.2 g.
Figure pct00683
d) (9-(3-(2-히드록시에틸티오)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct00684
3-(2-히드록시에틸티오)벤즈알데히드 (실시예 65, 단계 c) (0.16 g)를 N-메틸-2-피롤리디논 (5 mL) 중 (2-이소프로필티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 22, 단계 b) (0.25 g) 및 아세트산 (0.046 mL)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 1시간 동안 교반하고, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.26 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 반응물을 중탄산나트륨 용액 (20 mL)과 물 (80 mL)의 혼합물에 부었다. 수성상을 에테르 (100 mL씩 3회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (100 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 95:5의 에틸 아세테이트:트리에틸아민로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.22 g.
Figure pct00685
e) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(2-(3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐티오)에틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00686
0 ℃에서, 트리플루오로아세트산 (0.033 mL)을 DCM (5 mL) 중 (9-(3-(2-히드록시에틸티오)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 65, 단계 d) (0.22 g)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난 (0.29 g)을 첨가하였다. 생성된 황색 용액을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (20 mL)의 혼합물을 첨가하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 격렬하게 교반하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (20 mL)로 세척하고, 아세트산 몇 방울을 사용하여 산성화시키고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (5 mL) 중에 용해시키고, 이어서 아세트산 (0.026 mL) 및 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.15 g)를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.044 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시켰다. 94.5:5:0.5 → 89:10:1의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켰다. 추가로 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→30 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 잔류물을 디에틸에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.54 g.
Figure pct00687
실시예 66
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(3-((4-(4-이소프로필티아졸-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00688
a) tert-부틸 4-(4-이소프로필티아졸-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트
Figure pct00689
HATU (0.924 g)를 DMF (12 mL) 중 4-이소프로필티아졸-2-카르복실산 (0.32 g) 및 tert-부틸 1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 (실시예 12, 단계 b) (0.547 g) 및 트리에틸아민 (0.781 mL)의 교반 용액 (0 ℃)에 한 번에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하고, 유기층을 염수로 2회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 용매로서 이소헥산 중 30 ％ 에틸 아세테이트를 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.54 g.
Figure pct00690
b) (4-이소프로필티아졸-2-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논
Figure pct00691
DCM (20 mL) 중 tert-부틸 4-(4-이소프로필티아졸-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 (실시예 66, 단계 a) (0.54 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (5 mL)으로 처리하고, 반응 혼합물을 20 ℃에서 20분 동안 방치하였다. 톨루엔 (40 mL)을 첨가하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 아세토니트릴과 함께 2회 공비시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.56 g.
Figure pct00692
c) (9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(4-이소프로필티아졸-2-일)메타논
Figure pct00693
아세토니트릴 (20 mL) 중 (4-이소프로필티아졸-2-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 (실시예 66, 단계 b) (0.28 g) 및 2-(3-(브로모메틸)페닐)에탄올 (실시예 6, 단계 a) (0.171 g)의 용액을 트리에틸아민 (0.276 mL)으로 처리하고, 반응 혼합물을 20 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 증발시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트와 포화 중탄산나트륨 용액 사이에 분배하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 조 생성물을 용매로서 디클로로메탄 (1 ％ 트리에틸아민 함유) 중 2.5 ％ 메탄올을 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.25 g.
Figure pct00694
d) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(3-((4-(4-이소프로필티아졸-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00695
DCM (20 mL) 중 (9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(4-이소프로필티아졸-2-일)메타논 (실시예 66, 단계 c) (0.25 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (0.043 mL)에 이어서 데스-마틴 페리오디난 (0.311 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 40분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (20 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (20 mL) 및 에틸 아세테이트 (30 mL)로 처리하고, 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하였다. 아세트산 (0.032 mL)을 상기 용액에 첨가한 후, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 메탄올 (3 mL) 중에 용해시키고, 메탄올 (20 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.222 g) 및 아세트산 (0.032 mL)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 얼음 배스에서 냉각시키고, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.071 g)로 처리하였다. 냉각 배스를 제거하고, 혼합물을 20 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 3 mL 이상의 부피로 증발시키고, THF (20 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 포화 염수 (10 mL)와 포화 중탄산나트륨 용액 (1 mL)의 혼합물로 세척하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 아세토니트릴과 함께 2회 공비시켰다. 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 생성물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.18 g
Figure pct00696
실시예 67
(R)-7-(2-(2-플루오로-3-((4-(2-(2,2,2-트리플루오로에틸)티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00697
a) 3,3,3-트리플루오로프로판아미드
Figure pct00698
0 ℃에서, 에테르 (150 mL) 중 3,3,3-트리플루오로프로판산 (4 g)의 용액을 오염화인 (6.06 g)으로 한 번에 처리하였다. 혼합물을 환류 온도에서 질소하에 2.5시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 추가의 에테르 (100 mL)를 첨가하고, 혼합물을 얼음 배스에서 냉각시켰다. 암모니아 기체를 상기 교반 혼합물을 통해 30분 동안 버블링시켰다. 용매를 감압하에 제거하고, 잔류물을 포화 중탄산나트륨 용액과 에틸 아세테이트 사이에 분배하였다. 수성층을 에틸 아세테이트로 2회 재추출하고, 합한 유기물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하여, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 3.9 g. 직접 사용하였다.
b) 3,3,3-트리플루오로프로판티오아미드
Figure pct00699
오황화인 (1.603 g)을 MTBE (150 mL) 중 3,3,3-트리플루오로프로판아미드 (실시예 67, 단계 a) (3.9 g)의 용액에 한 번에 첨가하였다. 반응 혼합물을 20 ℃에서 20시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 4 g. 생성물을 다음 단계에 직접 사용하였다.
c) 에틸 2-(2,2,2-트리플루오로에틸)티아졸-4-카르복실레이트
Figure pct00700
THF (120 mL) 중 3,3,3-트리플루오로프로판티오아미드 (실시예 67, 단계 b) (4 g) 및 에틸 3-브로모-2-옥소프로파노에이트 (5.45 g)의 용액을 2시간 동안 환류 온도에서 가열하였다. 용매를 감압하에 제거하고, 잔류물을 에틸 아세테이트와 포화 중탄산나트륨 용액 사이에 분배하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 용매로서 이소헥산 중 17 ％ 에틸 아세테이트를 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 1.9 g.
Figure pct00701
d) 2-(2,2,2-트리플루오로에틸)티아졸-4-카르복실산
Figure pct00702
진한 염산 (7 mL) 및 물 (7 mL) 중 에틸 2-(2,2,2-트리플루오로에틸)티아졸-4-카르복실레이트 (실시예 67, 단계 c) (0.3 g)의 혼합물을 80 ℃에서 질소하여 5시간 동안 가열하였다. 용매를 질소 스트림하에 증발시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트 (40 mL)와 염수 (3 mL) 사이에 분배하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.23 g.
Figure pct00703
e) 2,2,2-트리플루오로-1-(9-(2-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)에타논
Figure pct00704
2-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤즈알데히드 (실시예 48, 단계 a) (1.05 g)를 N-메틸-2-피롤리디논 (10 mL) 중 2,2,2-트리플루오로-1-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)에타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 12, 단계 d) (2.08 g) 및 아세트산 (0.33 mL)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 15분 동안 교반한 후, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (1.81 g)를 첨가하고, 혼합물을 밤새 교반하였다. 반응물을 포화 탄산수소나트륨 용액 (20 mL)과 물 (100 mL)의 혼합물에 부었다. 수성상을 에틸 아세테이트 (100 mL씩 3회)로 추출하였다. 합한 유기물을 물 (50 mL) 및 염수 (100 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 4:1의 이소헥산:에틸 아세테이트 + 5 ％ 트리에틸아민 → 에틸 아세테이트 + 5 ％ 트리에틸아민 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였다. 수득량 1.9 g. 즉시 사용하였다.
f) 2-(3-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일메틸)-2-플루오로페닐)에탄올
Figure pct00705
'880' 암모니아 수용액 (5 mL)을 메탄올 (25 mL) 중 2,2,2-트리플루오로-1-(9-(2-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)에타논 (실시예 67, 단계 e) (1.9 g)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 90분 동안 교반하고, 용매를 증발시켰다. 잔류물을 94.5:5:0.5 → 89:10:1의 DCM:메탄올:'880' 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜 검을 수득하였고, 이를 방치시켜 응고시켰다. 백색 고체를 이소헥산 중에서 분쇄하고, 황산나트륨 상에서 건조시켜, 부제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 1 g.
Figure pct00706
g) (9-(2-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-(2,2,2-트리플루오로에틸)티아졸-4-일)메타논
Figure pct00707
HATU (0.181 g)를 DMF (5 mL) 중 2-(2,2,2-트리플루오로에틸)티아졸-4-카르복실산 (실시예 67, 단계 d) (0.077 g) 및 2-(3-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일메틸)-2-플루오로페닐)에탄올 (실시예 67, 단계 f) (0.113 g) 및 트리에틸아민 (0.153 mL)의 교반 용액 (0 ℃)에 한 번에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하고, 유기층을 염수로 2회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.180 g.
Figure pct00708
h) (R)-7-(2-(2-플루오로-3-((4-(2-(2,2,2-트리플루오로에틸)티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00709
DCM (15 mL) 중 (9-(2-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-(2,2,2-트리플루오로에틸)티아졸-4-일)메타논 (실시예 67, 단계 g) (0.18 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (0.028 mL)에 이어서 데스-마틴 페리오디난 (0.198 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 40분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (20 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (20 mL) 및 에틸 아세테이트 (30 mL)로 처리하고, 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하였다. 아세트산 (0.021 mL)을 상기 용액에 첨가한 후, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 메탄올 (3 mL) 중에 용해시키고, 메탄올 (15.0 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.141 g) 및 아세트산 (0.021 mL)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 얼음 배스에서 냉각시키고, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.045 g)로 처리하였다. 냉각 배스를 제거하고, 혼합물을 20 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 3 mL 이상의 부피로 증발시키고, THF (20 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 포화 염수 (10 mL)와 포화 중탄산나트륨 용액 (1 mL)의 혼합물로 세척하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 아세토니트릴과 함께 2회 공비시켰다. 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.091 g.
Figure pct00710
실시예 68
(R)-7-(2-(3-((4-(벤조[b]티오펜-5-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)-2-플루오로페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00711
a) 벤조[b]티오펜-5-일(9-(2-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논
Figure pct00712
HATU (0.181 g)를 DMF (5 mL) 중 벤조[b]티오펜-5-카르복실산 (0.065 g) 및 2-(3-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일메틸)-2-플루오로페닐)에탄올 (실시예 67, 단계 f) (0.113 g) 및 트리에틸아민 (0.153 mL)의 교반 용액 (0 ℃)에 한 번에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하고, 유기층을 염수로 2회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.160 g.
Figure pct00713
b) (R)-7-(2-(3-((4-(벤조[b]티오펜-5-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)-2-플루오로페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00714
DCM (15 mL) 중 벤조[b]티오펜-5-일(9-(2-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 (실시예 68, 단계 a) (0.160 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (0.026 mL)에 이어서 데스-마틴 페리오디난 (0.188 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 40분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (20 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (20 mL) 및 에틸 아세테이트 (30 mL)로 처리하고, 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하였다. 아세트산 (0.02 mL)을 상기 용액에 첨가한 후, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 메탄올 (3 mL) 중에 용해시키고, 메탄올 (15 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.135 g) 및 아세트산 (0.02 mL)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 얼음 배스에서 냉각시키고, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.043 mg)로 처리하였다. 냉각 배스를 제거하고, 혼합물을 20 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 3 mL 이상의 부피로 증발시키고, THF (20 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 포화 염수 (10 mL)와 포화 중탄산나트륨 용액 (1 mL)의 혼합물로 세척하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 아세토니트릴과 함께 2회 공비시켰다. 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.116 g.
Figure pct00715
실시예 69
(R)-7-(2-(2-플루오로-3-((4-(2-이소프로필-5-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00716
a) 메틸 2-이소프로필-5-메틸티아졸-4-카르복실레이트
Figure pct00717
THF (100 mL) 중 메틸 3-브로모-2-옥소부타노에이트 (4.6 g) 및 2-메틸프로판티오아미드 (2.5 g)의 혼합물을 환류 온도에서 18시간 동안 가열하였다. 용매를 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트와 포화 중탄산나트륨 용액 사이에 분배하고, 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 용매로서 이소헥산 중 17 ％ 에틸 아세테이트를 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 1.7 g.
Figure pct00718
b) 2-이소프로필-5-메틸티아졸-4-카르복실산
Figure pct00719
물 (3 mL) 중 수산화리튬 일수화물 (0.2 g)의 용액을 메탄올 (7 mL) 중 메틸 2-이소프로필-5-메틸티아졸-4-카르복실레이트 (실시예 69, 단계 a) (0.5 g)의 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 20 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 메탄올을 감압하에 제거하고, 나머지 수용액을 에틸 아세테이트로 세척하였다. 진한 수성 HCl을 적가하여 수성층을 산성화시키고, 상기 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 생성된 검을 방치하여 결정화시켰다. 이소헥산 (4 mL)과 에테르 (1 mL)의 혼합물 중에서 분쇄하여, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.160 g.
Figure pct00720
c) (9-(2-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필-5-메틸티아졸-4-일)메타논
Figure pct00721
HATU (0.175 g)를 DMF (5 mL) 중 2-이소프로필-5-메틸티아졸-4-카르복실산 (실시예 69, 단계 b) (0.066 mg) 및 2-(3-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일메틸)-2-플루오로페닐)에탄올 (실시예 67, 단계 f) (0.109 g) 및 트리에틸아민 (0.148 mL)의 교반 용액 (0 ℃)에 한 번에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하고, 유기층을 염수로 2회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.155 mg.
Figure pct00722
d) (R)-7-(2-(2-플루오로-3-((4-(2-이소프로필-5-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00723
DCM (15 mL) 중 (9-(2-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필-5-메틸티아졸-4-일)메타논 (실시예 69, 단계 c) (0.155 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (0.025 mL)에 이어서 데스-마틴 페리오디난 (0.180 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 40분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (20 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (20 mL) 및 에틸 아세테이트 (30 mL)로 처리하고, 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하였다. 아세트산 (0.019 mL)을 상기 용액에 첨가한 후, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 메탄올 (3 mL) 중에 용해시키고, 메탄올 (15.00 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.128 g) 및 아세트산 (0.019 mL)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 얼음 배스에서 냉각시키고, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (41 mg)로 처리하였다. 냉각 배스를 제거하고, 혼합물을 20 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 3 mL 이상의 부피로 증발시키고, THF (20 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 포화 염수 (10 mL)와 포화 중탄산나트륨 용액 (1 mL)의 혼합물로 세척하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 아세토니트릴과 함께 2회 공비시켰다. 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.12 g.
Figure pct00724
실시예 70
(R)-7-(2-(2-플루오로-3-((4-(5-이소프로필티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00725
a) (9-(2-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-이소프로필티오펜-3-일)메타논
Figure pct00726
HATU (0.183 g)를 DMF (5 mL) 중 5-이소프로필티오펜-3-카르복실산 (0.063 g) 및 2-(3-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일메틸)-2-플루오로페닐)에탄올 (실시예 67, 단계 f) (0.114 g) 및 트리에틸아민 (0.155 mL)의 교반 용액 (0 ℃)에 한 번에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하고, 유기층을 염수로 2회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 용매로서 디클로로메탄 (1 ％ 트리에틸아민 함유) 중 2.5 ％ 메탄올을 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.100 g.
Figure pct00727
b) (R)-7-(2-(2-플루오로-3-((4-(5-이소프로필티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00728
DCM (15 mL) 중 (9-(2-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-이소프로필티오펜-3-일)메타논 (실시예 70, 단계 a) (0.100 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (0.017 mL)에 이어서 데스-마틴 페리오디난 (0.120 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 40분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (20 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (20 mL) 및 에틸 아세테이트 (30 mL)로 처리하고, 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하였다. 아세트산 (0.012 mL)을 상기 용액에 첨가한 후, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 메탄올 (3 mL) 중에 용해시키고, 메탄올 (15.00 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.086 g) 및 아세트산 (0.012 mL)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 얼음 배스에서 냉각시키고, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.027 g)로 처리하였다. 냉각 배스를 제거하고, 혼합물을 20 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 3 mL 이상의 부피로 증발시키고, THF (20 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 포화 염수 (10 mL)와 포화 중탄산나트륨 용액 (1 mL)의 혼합물로 세척하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 아세토니트릴과 함께 2회 공비시켰다. 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.052 mg.
Figure pct00729
실시예 71
(R)-7-(2-(2-플루오로-3-((4-(2-(펜탄-3-일)티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00730
a) 2-에틸부탄아미드
Figure pct00731
2-에틸부타노일 클로라이드 (5 g)를 35 ％ 빙냉 수성 암모니아 (50 mL)에 조심스럽게 적가하고, 생성된 현탁액을 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM (100 mL씩 3회)으로 추출하였다. 합한 유기물을 염수 (100 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜, 부제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 3.4 g.
Figure pct00732
b) 2-에틸부탄티오아미드
Figure pct00733
오황화인 (1.54 g)을 MTBE (300 mL) 중 2-에틸부탄아미드 (실시예 71, 단계 a) (3.4 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 3시간 동안 교반하였다. 반응물을 셀라이트를 통해 여과하고, 필터 패드를 MTBE (100 mL)로 세척하였다. 합한 여과액 및 세척액을 증발시켜, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 3.8 g. 직접 사용하였다.
c) 에틸 2-(펜탄-3-일)티아졸-4-카르복실레이트
에틸 3-브로모-2-옥소프로파노에이트 (2.5 mL)를 에탄올 (100 mL) 중 2-에틸부탄티오아미드 (실시예 71, 단계 b) (3.8 g)의 용액에 적가하고, 생성된 혼합물을 환류 온도에서 밤새 가열하였다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트 (100 mL)와 포화 탄산수소나트륨 용액 (100 mL) 사이에 분배하였다. 층을 분리하고, 수성상을 에틸 아세테이트 (100 mL씩 2회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (100 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 20:1의 이소헥산:에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 2.8 g.
Figure pct00735
d) 2-(펜탄-3-일)티아졸-4-카르복실산
Figure pct00736
수산화리튬 일수화물 (2.07 g)을 THF (80 mL)와 물 (20 mL)의 혼합물 중 에틸 2-(펜탄-3-일)티아졸-4-카르복실레이트 (실시예 71, 단계 c) (2.8 g)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 밤새 교반하였다. 진한 염산 (6 mL)을 사용하여 반응물을 산성화시키고, 휘발성 물질을 증발시켰다. 생성된 수성 혼합물을 염화나트륨으로 포화시키고, 에틸 아세테이트 (100 mL씩 3회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜, 부제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 2.3 g.
Figure pct00737
e) (9-(2-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-(펜탄-3-일)티아졸-4-일)메타논
Figure pct00738
0 ℃에서, O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (0.2 g)를 DMF (7 mL) 중 2-(3-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일메틸)-2-플루오로페닐)에탄올 (실시예 67, 단계 f) (0.13 g), 2-(펜탄-3-일)티아졸-4-카르복실산 (실시예 71, 단계 d) (0.081 g) 및 트리에틸아민 (0.23 mL)의 용액에 첨가하였다. 생성된 황색 용액을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 (100 mL) 사이에 분배하고, 유기상을 염수 (100 mL씩 2회)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과한 다음, 증발시켰다. 생성된 검을 47.5:47.5:5의 이소헥산:에틸 아세테이트:트리에틸아민 → 95:5의 에틸 아세테이트:트리에틸아민 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 톨루엔 (200 mL)을 첨가하고, 용매를 감압하에 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 검으로서 수득하였다. 수득량 0.25 g.
Figure pct00739
f) (R)-7-(2-(2-플루오로-3-((4-(2-(펜탄-3-일)티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00740
0 ℃에서, 트리플루오로아세트산 (0.031 mL)을 DCM (5 mL) 중 (9-(2-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-(펜탄-3-일)티아졸-4-일)메타논 (실시예 71, 단계 e) (0.2 g)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난 (0.25 g)을 첨가하였다. 생성된 황색 용액을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (20 mL)의 혼합물을 첨가하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 격렬하게 교반하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (20 mL)로 세척하고, 아세트산 몇 방울을 사용하여 산성화시키고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (5 mL) 중에 용해시키고, 이어서 아세트산 (0.023 mL) 및 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.13 g)를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.038 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시켰다. 94.5:5:0.5 → 89:10:1의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켰다. 추가로 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→35 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 잔류물을 디에틸에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.17 g.
Figure pct00741
실시예 72
(R)-7-(2-(2-플루오로-3-((4-(2-이소부틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00742
a) 3-메틸부탄아미드
Figure pct00743
3-메틸부타노일 클로라이드 (10 mL)를 35 ％ 빙냉 수성 암모니아 (50 mL)에 조심스럽게 적가하고, 생성된 현탁액을 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM (100 mL씩 3회)으로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (100 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜, 부제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 5.6 g.
Figure pct00744
b) 3-메틸부탄티오아미드
Figure pct00745
오황화인 (2.9 g)을 MTBE (300 mL) 중 3-메틸부탄아미드 (실시예 72, 단계 a) (5.6 g)의 현탁액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 3시간 동안 교반하였다. 반응물을 셀라이트를 통해 여과하고, 필터 패드를 MTBE (100 mL)로 세척하였다. 합한 여과액 및 세척액을 증발시켜, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 5.6 g.
Figure pct00746
c) 에틸 2-이소부틸티아졸-4-카르복실레이트
Figure pct00747
에탄올 (100 mL) 중 3-메틸부탄티오아미드 (실시예 72, 단계 b) (5.6 g)의 용액에 에틸 3-브로모-2-옥소프로파노에이트 (6.7 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 다음, 환류 온도에서 5시간 동안 가열하였다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트 (250 mL)와 포화 탄산수소나트륨 용액 (100 mL) 사이에 분배하였다. 층을 분리하고, 유기상을 염수 (100 mL)로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 20:1 → 10:1의 이소헥산:에틸 아세테이트 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 5.2 g.
Figure pct00748
d) 2-이소부틸티아졸-4-카르복실산
Figure pct00749
수산화리튬 일수화물 (4.1 g)을 THF (80 mL)와 물 (20 mL)의 혼합물 중 에틸 2-이소부틸티아졸-4-카르복실레이트 (실시예 72, 단계 c) (5.2 g)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 밤새 교반하였다. 진한 염산 (10 mL)을 사용하여 반응물을 조심스럽게 산성화시키고, 휘발성 물질을 증발시켰다. 생성된 수성 혼합물을 염수 (50 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트 (100 mL씩 3회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (50 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜, 부제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 3.8 g.
Figure pct00750
e) (9-(2-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소부틸티아졸-4-일)메타논
Figure pct00751
0 ℃에서, O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (0.2 g)를 DMF (7 mL) 중 2-(3-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일메틸)-2-플루오로페닐)에탄올 (실시예 67, 단계 f) (0.13 g), 2-이소부틸티아졸-4-카르복실산 (실시예 72, 단계 d) (0.08 g) 및 트리에틸아민 (0.23 mL)의 용액에 첨가하고, 생성된 황색 용액 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 (100 mL) 사이에 분배하고, 유기상을 염수 (100 mL씩 2회)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과한 다음, 증발시켰다. 생성된 검을 47.5:47.5:5의 이소헥산:에틸 아세테이트:트리에틸아민 → 95:5의 에틸 아세테이트:트리에틸아민 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 톨루엔 (200 mL)을 첨가하고, 용매를 감압하에 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 검으로서 수득하였다. 수득량 0.24 g.
Figure pct00752
f) (R)-7-(2-(2-플루오로-3-((4-(2-이소부틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00753
0 ℃에서, 트리플루오로아세트산 (0.031 mL)을 DCM (5 mL) 중 (9-(2-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소부틸티아졸-4-일)메타논 (실시예 72, 단계 e) (0.19 g)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난 (0.25 g)을 첨가하였다. 생성된 황색 용액을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (20 mL)의 혼합물을 첨가하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 격렬하게 교반하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (20 mL)로 세척하고, 아세트산 몇 방울을 사용하여 산성화시키고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (5 mL) 중에 용해시키고, 이어서 아세트산 (0.023 mL) 및 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.13 g)를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.038 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시켰다. 94.5:5:0.5 → 89:10:1의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켰다. 추가로 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→35 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 잔류물을 디에틸에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.10 g.
Figure pct00754
실시예 73
(R)-7-(2-(2-플루오로-3-((4-(5-이소프로필티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00755
a) (9-(2-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-이소프로필티오펜-2-일)메타논
Figure pct00756
0 ℃에서, O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (0.2 g)를 DMF (7 mL) 중 2-(3-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일메틸)-2-플루오로페닐)에탄올 (실시예 67, 단계 f) (0.13 g), 5-이소프로필티오펜-2-카르복실산 (0.07 g) 및 트리에틸아민 (0.23 mL)의 용액에 첨가하였다. 생성된 황색 용액을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트 (100 mL)와 염수 (100 mL) 사이에 분배하고, 유기상을 염수 (100 mL씩 2회)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 증발시켰다. 생성된 검을 47.5:47.5:5의 이소헥산:에틸 아세테이트:트리에틸아민 → 95:5의 에틸 아세테이트:트리에틸아민 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 톨루엔 (200 mL)을 첨가하고, 용매를 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 검으로서 수득하였다. 수득량 0.23 g.
Figure pct00757
b) (R)-7-(2-(2-플루오로-3-((4-(5-이소프로필티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00758
0 ℃에서, 트리플루오로아세트산 (0.031 mL)을 DCM (5 mL) 중 (9-(2-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-이소프로필티오펜-2-일)메타논 (실시예 73, 단계 a) (0.18 g)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난 (0.25 g)을 첨가하였다. 생성된 황색 용액을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (20 mL)의 혼합물을 첨가하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 격렬하게 교반하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (20 mL)로 세척하고, 아세트산 몇 방울을 사용하여 산성화시키고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (5 mL) 중에 용해시키고, 이어서 아세트산 (0.023 mL) 및 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.13 g)를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.025 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시켰다. 94.5:5:0.5 → 89:10:1의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켰다. 추가로 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 잔류물을 디에틸에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.12 g.
Figure pct00759
실시예 74
(R)-7-(2-(2-플루오로-3-((4-(4-이소프로필티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00760
a) 1-(4-이소프로필티오펜-2-일)에타논
Figure pct00761
1-(티오펜-2-일)에타논 (5.4 mL)을 무수 클로로포름 (100 mL) 중 염화알루미늄 (33 g)의 빙냉 현탁액에 첨가하였다. 이어서, 2-브로모프로판 (5.2 mL)을 5분에 걸쳐 적가하였다. 반응물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 암색 현탁액을 조심스럽게 얼음에 붓고, 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 층을 분리하고, 수성상을 DCM (100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 수산화나트륨 용액 (2 M, 200 mL) 및 물 (200 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 이소헥산 중 2 ％ 에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜, 부제 화합물을을 밝은 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 5.4 g.
Figure pct00762
b) 4-이소프로필티오펜-2-카르복실산
Figure pct00763
60 ℃에서, 1,4-디옥산 (10 mL) 중 1-(4-이소프로필티오펜-2-일)에타논 (실시예 74, 단계 a) (1 g)의 용액을 수성 차아염소산나트륨 (8 ％, 50 mL) 중 수산화나트륨 (1.19 g)의 용액에 조심스럽게 첨가하였다. 생성된 혼합물을 75 ℃로 가열하고, 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 냉각시키고, 수성상을 DCM (50 mL)으로 세척하였다. 수성상을 수성 중아황산나트륨 용액 (10 ％, 20 mL)으로 처리하고, 진한 염산을 사용하여 조심스럽게 산성화시켰다. 생성된 혼합물을 DCM (50 mL씩 3회)으로 추출하였다. 합한 유기 용액을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜, 황색 오일을 수득하였다. 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→95 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시키고, 고진공하에 건조시켜, 부제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.5 g.
Figure pct00764
c) (9-(2-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(4-이소프로필티오펜-2-일)메타논
Figure pct00765
0 ℃에서, O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (0.2 g)를 DMF (7 mL) 중 2-(3-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일메틸)-2-플루오로페닐)에탄올 (실시예 67, 단계 f) (0.13 g), 4-이소프로필티오펜-2-카르복실산 (실시예 74, 단계 b) (0.07 g) 및 트리에틸아민 (0.23 mL)의 용액에 첨가하였다. 생성된 황색 용액을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트 (100 mL)와 염수 (100 mL) 사이에 분배하고, 유기층을 염수 (100 mL씩 2회)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 생성된 검을 47.5:47.5:5의 이소헥산:에틸 아세테이트:트리에틸아민 → 95:5의 에틸 아세테이트:트리에틸아민 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 톨루엔 (200 mL)을 첨가하고, 용매를 감압하에 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 검으로서 수득하였다. 수득량 0.23 g.
Figure pct00766
d) (R)-7-(2-(2-플루오로-3-((4-(4-이소프로필티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00767
0 ℃에서, 트리플루오로아세트산 (0.031 mL)을 DCM (5 mL) 중 (9-(2-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(4-이소프로필티오펜-2-일)메타논 (실시예 74, 단계 c) (0.18 g)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난 (0.25 g)을 첨가하였다. 생성된 황색 용액을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (20 mL)의 혼합물을 첨가하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 격렬하게 교반하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (20 mL)로 세척하고, 아세트산 몇 방울을 사용하여 산성화시키고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (5 mL) 중에 용해시키고, 이어서 아세트산 (0.023 mL) 및 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.13 g)를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.025 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시켰다. 94.5:5:0.5 → 89:10:1의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켰다. 추가로 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 잔류물을 디에틸에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.13 g.
Figure pct00768
실시예 75
(R)-7-(2-(2-클로로-5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00769
a) 3-(카르복시메틸)-4-클로로벤조산
Figure pct00770
물 (15 mL) 중 수산화칼륨 (1.549 g)을 에탄올 (15 mL) 중 4-클로로-3-(시아노메틸)벤조산 (2.07 g)의 현탁액에 첨가하고, 생성된 용액을 환류 온도에서 4시간 동안 가열한 후, 냉각시켰다. 혼합물을 진공하에 농축시켜 에탄올을 제거한 후, 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 2회 세척하였다. 유기상을 폐기하였고, 한편으로는 진한 염산을 사용하여 수성상을 pH 1로 산성화시키고, 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 합한 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 부제 화합물을 연한 갈색 고체로서 수득하였다. 수득량 2.06 g.
Figure pct00771
b) 2-(2-클로로-5-(히드록시메틸)페닐)에탄올
Figure pct00772
실온에서, 보란-메틸 술파이드 복합체의 용액 (THF 중 2 M, 12.0 mL)을 무수 THF (30 mL) 중 3-(카르복시메틸)-4-클로로벤조산 (실시예 75, 단계 a) (2.06 g)의 현탁액에 3분에 걸쳐 조금씩 첨가하였다. 생성된 발포성 농후 현탁액을 실온에서 1시간 동안 교반한 후, 1시간 동안 환류 온도로 가열하였다. 메탄올 (10 mL)을 2분에 걸쳐 적가하여 냉각시킨 혼합물을 켄칭하였다. 용액을 실온에서 30분 동안 교반한 후, 실리카 상에서 농축시키고, 실리카 상에서 플래쉬 크로마토그래피 (디클로로메탄 중 5 ％ 메탄올로 용출)로 정제하여, 부제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.983 g.
Figure pct00773
c) 4-클로로-3-(2-히드록시에틸)벤즈알데히드
Figure pct00774
이산화망간 (IV) (1.00 g)을 DCM (10 mL) 중 2-(2-클로로-5-(히드록시메틸)페닐)에탄올 (실시예 75, 단계 b) (0.205 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 현탁액을 실온에서 밤새 교반하였다. 이어서, 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 필터 패드를 DCM으로 잘 세척하였다. 여과액 및 세척액을 진공하에 농축시켜, 부제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.159 g.
Figure pct00775
d) (9-(4-클로로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct00776
NMP (2 mL) 중 (2-이소프로필티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 22, 단계 b) (0.178 g)의 용액을 아세트산 (0.032 mL)으로 처리하고, 5분 동안 교반하였다. 이어서, NMP (3 mL) 중 4-클로로-3-(2-히드록시에틸)벤즈알데히드 (실시예 75, 단계 c) (0.154 g)의 용액을 첨가하고, 생성된 용액을 1시간 동안 교반한 후, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.181 g)로 처리하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 추가의 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.404 g)을 첨가하고, 혼합물을 추가로 6시간 동안 교반한 후, 포화 중탄산나트륨에 붓고, 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 합한 추출물을 물로 3회, 염수로 1회 세척한 후, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 실리카 상에서 플래쉬 크로마토그래피 (1:2:97의 트리에틸아민:메탄올:디클로로메탄으로 용출)로 정제하여, 부제 화합물을 무색 검으로서 수득하였다. 수득량 0.157 g.
Figure pct00777
e) 2-(2-클로로-5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)아세트알데히드
Figure pct00778
DCM (5 mL) 중 (9-(4-클로로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 75, 단계 d) (0.152 g)의 용액을 얼음-물 중에서 냉각시키고, 트리플루오로아세트산 (0.049 mL)으로 처리하고, 5분 동안 교반하였다. 데스-마틴 페리오디난 (0.205 g)을 첨가한 후, 혼합물을 냉각 배스로부터 꺼내고, 실온에서 30분 동안 교반하였다. 용액을 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (5 mL)로 희석하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 격렬하게 교반하였다. 이어서, 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기상을 염수로 세척하고, 아세트산 (0.1 mL)을 사용하여 산성화시키고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 조 부제 화합물을 황색 검으로서 수득하였다. 수득량 0.197 g.
Figure pct00779
f) (R)-7-(2-(2-클로로-5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00780
메탄올 (2 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.145 g)의 용액을 아세트산 (0.024 mL)으로 처리하고, 5분 동안 교반하였다. 이어서, 메탄올 (3 mL) 중 2-(2-클로로-5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)아세트알데히드 (실시예 75, 단계 e) (0.197 g)의 용액을 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 5분 동안 교반한 후, 얼음-물 중에서 냉각시키고, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.039 g)로 처리하였다. 냉각 배스를 제거하고, 혼합물을 실온에서 140분 동안 교반한 후, 추가의 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.040 g)로 처리하였다. 이어서, 혼합물을 밤새 교반하였다. 다음날 아침, 혼합물을 물 한 방울로 켄칭하고, 용액을 여과하고, 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 15→35 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 진공하에 농축시키고, 아세토니트릴로부터 3회 공동-증발시켜, 무색 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 디에틸 에테르 중에서 분쇄하여, 고체를 수득하였고, 이를 여과에 의해 수집하고, 디에틸 에테르로 세척하고, 실온에서 진공하에 건조시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.077 g.
Figure pct00781
실시예 76
(R)-8-히드록시-5-(1-히드록시-2-(3-((4-(4-이소프로필티아졸-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00782
a) (R)-5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(3-((4-(4-이소프로필티아졸-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온
Figure pct00783
DCM (20 mL) 중 (9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(4-이소프로필티아졸-2-일)메타논 (실시예 66, 단계 c) (0.195 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (0.034 ml)에 이어서 데스-마틴 페리오디난 (0.242 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 40분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (20 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (20 mL) 및 에틸 아세테이트 (30 mL)로 처리하고, 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하였다. 아세트산 (0.025 ml)을 상기 용액에 첨가한 후, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 메탄올 (3 mL) 중에 용해시키고, 메탄올 (15 mL) 중 (R)-5-(2-아미노-1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (WO2004106333) (191 mg)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 0 ℃로 냉각시키고, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.140 g)를 한 번에 첨가하였다. 반응 혼합물을 20 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 제거하고, 잔류물을 에틸 아세테이트와 포화 중탄산나트륨 용액 사이에 분배하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 조 생성물을 용매로서 디클로로메탄 (1 ％ '880'수성 암모니아 함유) 중 9 ％ 메탄올을 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.133 g.
Figure pct00784
b) (R)-8-히드록시-5-(1-히드록시-2-(3-((4-(4-이소프로필티아졸-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00785
메탄올 (1 mL) 중 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (0.034 mL)를 THF (4 mL) 중 (R)-5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(3-((4-(4-이소프로필티아졸-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (실시예 76, 단계 a) (0.133 g)의 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 20 ℃에서 18시간 동안 방치하였다. 용매를 감압하에 제거하고, 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.090 g.
Figure pct00786
Figure pct00787
실시예 77
(R)-5-(2-(2,3-디플루오로-4-(2-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00788
a) 2-(2,3-디플루오로-4-히드록시페닐)아세트산
Figure pct00789
-78 ℃에서, 삼브롬화붕소의 용액 (DCM 중 1 M, 13.4 mL)을 DCM (5 mL) 중 2-(2,3-디플루오로-4-메톡시페닐)아세트산 (1.18 g)의 현탁액에 적가하였다. 반응물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 반응물을 -78 ℃로 냉각시키고, 삼브롬화붕소의 용액 (DCM 중 1 M, 13.4 mL)을 첨가하였다. 반응물을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 얼음에 부었다. 생성된 수용액을 DCM (50 mL씩 5회)으로 추출하였다. 이어서, 수성상을 에틸 아세테이트 (100 mL씩 3회)로 추출하였다. 유기 용액을 합하고, 염수 (50 mL)로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜, 부제 화합물을 황갈색 고체로서 수득하였다. 수득량 1.09 g.
Figure pct00790
b) 2,3-디플루오로-4-(2-히드록시에틸)페놀
Figure pct00791
0 ℃에서, 보란 디메틸술파이드 복합체의 용액 (THF 중 2 M, 14.4 mL)을 테트라히드로푸란 (25 mL) 중 2-(2,3-디플루오로-4-히드록시페닐)아세트산 (실시예 77, 단계 a) (1.08 g)의 용액에 적가하고, 생성된 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 반응물을 메탄올로 켄칭하고, 버블링이 중지되면, 용매를 증발시켰다. 잔류물을 4:1의 이소헥산:에틸 아세테이트 → 에틸 아세테이트 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜, 부제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.95 g.
Figure pct00792
c) 2-(4-(2,2-디에톡시에톡시)-2,3-디플루오로페닐)에탄올
Figure pct00793
탄산세슘 (0.99 g)을 DMF (10 mL) 중 2,3-디플루오로-4-(2-히드록시에틸)페놀 (실시예 77, 단계 b) (0.44 g) 및 2-브로모-1,1-디에톡시에탄 (0.4 mL)의 용액에 첨가하였다. 생성된 현탁액을 90 ℃에서 18시간 동안 가열하였다. 반응물을 냉각시키고, 물 (100 mL)에 부었다. 수성 혼합물을 디에틸에테르 (100 mL씩 3회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 물 (200 mL) 및 염수 (200 mL)로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 물질을 이소헥산 → 1:1의 에틸 아세테이트:이소헥산 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.49 g.
Figure pct00794
d) 2-(2,3-디플루오로-4-(2-히드록시에틸)페녹시)아세트알데히드
Figure pct00795
진한 염산 (5 mL)을 1,4-디옥산 (10 mL) 중 2-(4-(2,2-디에톡시에톡시)-2,3-디플루오로페닐)에탄올 (실시예 77, 단계 c) (0.49 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물 (50 mL)로 조심스럽게 희석하고, 에틸 아세테이트 (50 mL씩 3회)로 추출하였다. 합한 유기물을 물 (50 mL) 및 염수 (50 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜, 부제 화합물을 수득하였고, 이를 직접 사용하였다. 수득량 0.31 g.
e) (9-(2-(2,3-디플루오로-4-(2-히드록시에틸)페녹시)에틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct00796
(2-이소프로필티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 22, 단계 b) (0.5 g)를 N-메틸-2-피롤리디논 (10 mL) 및 아세트산 (0.07 mL) 중 2-(2,3-디플루오로-4-(2-히드록시에틸)페녹시)아세트알데히드 (실시예 77, 단계 d) (0.31 g)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 30분 동안 교반한 후, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.38 g)를 첨가하고, 반응물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 (100 mL)와 물 (100 mL) 사이에 분배하였다. 포화 탄산수소나트륨 용액을 사용하여 수성상을 염기성화시키고, 층을 분리하였다. 수성상을 에틸 아세테이트 (100 mL씩 2회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 물 (100 mL) 및 염수 (100 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 47.5:47.5:5의 이소헥산:에틸아세테이트:트리에틸아민 → 에틸 아세테이트 중 5 ％ 트리에틸아민으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 검으로서 수득하였다. 수득량 0.41 g.
Figure pct00797
f) (R)-5-(2-(2,3-디플루오로-4-(2-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00798
0 ℃에서, 트리플루오로아세트산 (0.03 mL)을 DCM (5 mL) 중 (9-(2-(2,3-디플루오로-4-(2-히드록시에틸)페녹시)에틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 77, 단계 e) (0.18 g)의 용액에 첨가하였다. 반응물을 5분 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난 (0.225 g)을 첨가하였다. 혼합물을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (20 mL)를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 층을 분리하고, 수성층을 에틸 아세테이트 (20 mL)로 추출하였다. 합한 유기물을 염수 (20 mL)로 세척하고, 아세트산 몇 방울을 사용하여 산성화시키고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (5 mL) 중에 재용해시키고, 아세트산 (0.02 mL) 및 (R)-5-(2-아미노-1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (WO2004106333) (0.12 g)을 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반하고, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.033 g)를 첨가하고, 반응물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 반응물을 농축시키고, 94.5:5:0.5 → 89:10:1의 DCM:메탄올:'880' 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켰다. 잔류물을 THF (5 mL) 중에 용해시키고, 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (0.17 mL)를 첨가하고, 혼합물을 밤새 교반하였다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 톨루엔과 함께 2회 공비시켰다. 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→30 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시키고 에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.11 g.
Figure pct00799
실시예 78
(R)-7-(2-(3-((4-(2-부틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)-2-플루오로페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00800
a) tert-부틸(2-플루오로페네톡시)디메틸실란
Figure pct00801
tert-부틸디메틸실릴 클로라이드 (6.45 g)를 얼음 배스에서 냉각시킨 무수 DMF (30 mL) 중 2-(2-플루오로페닐)에탄올 (5.00 g) 및 1H-이미다졸 (7.29 g)의 교반 용액에 첨가하였다. 45분 후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 3회 세척하고, 진공하에 증발시켰다. 생성된 검을 이소헥산 중에 용해시키고, 이소헥산에 이어서 1:3의 에틸 아세테이트:이소헥산으로 용출시키는 실리카겔 컬럼에 적용하여, 생성물을 오일로서 수집하였다. 수득량 9.0 g.
Figure pct00802
b) 3-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-2-플루오로벤즈알데히드
Figure pct00803
tert-부틸(2-플루오로페네톡시)디메틸실란 (실시예 78, 단계 a) (5.00 g)을 -78 ℃로 냉각시킨 THF (25 mL) 중 sec-부틸리튬 (시클로헥산 중 1.4 몰 용액, 14.0 mL) 및 N1-(2-(디메틸아미노)에틸)-N1,N2,N2-트리메틸에탄-1,2-디아민 (4.10 mL)의 교반 용액에 5분에 걸쳐 첨가하였다. 2시간 후, N,N-디메틸포름아미드 (10.06 g)을 첨가하고, 반응 혼합물을 -78 ℃에서 1시간 동안 교반한 후, 냉각 배스를 제거하였다. 추가로 0.5시간 후, 반응물을 물로 켄칭하였다. 에틸 아세테이트 (300 mL)를 첨가하고, 반응 혼합물을 물 (150 mL씩 3회), 2 M HCl (50 mL씩 2회), 물 (50 mL씩 2회), 염수로 세척한 후, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 오일로서 수득하였다. 수득량 5.3 g.
Figure pct00804
c) 1-(9-(3-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-2-플루오로벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)-2,2,2-트리플루오로에타논
Figure pct00805
3-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-2-플루오로벤즈알데히드 (실시예 78, 단계 b) (2.159 g)를 NMP (25 mL) 중 2,2,2-트리플루오로-1-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)에타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 12, 단계 d) (2.80 g) 및 아세트산 (0.438 mL)의 교반 용액에 첨가하였다. 5분 후, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (3.24 g)를 첨가하였다. 16시간 후, 물을 첨가하고, 혼합물을 물 (250 mL)과 에틸 아세테이트 (250 mL) 사이에 분배하였다. 에틸 아세테이트 용액을 물 (250 mL씩 3회) 및 염수로 세척한 후, 증발 건조시켰다. 20:1:1의 이소헥산:에틸 아세테이트:트리에틸아민으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 2.5 g.
Figure pct00806
d) 9-(3-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-2-플루오로벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸
Figure pct00807
'880' 수성 암모니아 (3.0 mL)를 MeOH (10 mL) 중 1-(9-(3-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-2-플루오로벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)-2,2,2-트리플루오로에타논 (실시예 78, 단계 c) (2.5 g)의 교반 용액에 첨가하였다. 1시간 후, 반응 혼합물을 증발 건조시켰다. 아세토니트릴을 첨가하고, 용액을 진공하에 증발 건조시키고, 상기 방법을 3회 반복하여, 부제 화합물을 오일로서 수득하였다. 수득량 2.07 g. 직접 사용하였다.
Figure pct00808
e) 펜탄티오아미드
Figure pct00809
오황화인 (5.56 g)을 메틸 tert-부틸 에테르 (300 mL) 중 펜탄아미드 (10.0 g)의 교반 현탁액에 첨가하였다. 16시간 후, 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 11.4 g.
Figure pct00810
f) 에틸 2-부틸티아졸-4-카르복실레이트
Figure pct00811
에틸 3-브로모-2-옥소프로파노에이트 (6.76 mL)를 에탄올 (100 mL) 중 펜탄티오아미드 (실시예 78, 단계 e) (6.30 g)의 교반 용액에 매우 조심스럽게 첨가하였다. 이어서, 용액을 환류 온도에서 16시간 동안 가열하였다. 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 진공하에 증발시켰다. 1:6의 에틸 아세테이트: 이소헥산으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 6.5 g.
Figure pct00812
g) 2-부틸티아졸-4-카르복실산
Figure pct00813
수산화리튬 (5.00 g)을 THF (80 mL) 및 물 (20 mL) 중 에틸 2-부틸티아졸-4-카르복실레이트 (실시예 78, 단계 f) (6.50 g)의 교반 혼합물에 첨가하였다. 16시간 후, 진한 염산 (10 mL)을 첨가하고, 용액을 약 40 mL로 농축시켰다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하였다. 수성층을 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합한 유기층을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다. 수득량 4.6 g.
Figure pct00814
h) (9-(3-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-2-플루오로벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-부틸티아졸-4-일)메타논
Figure pct00815
2-(3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피리딘-3-일)-1,1,3,3-테트라메틸이소우로늄 헥사플루오로포스페이트(V) (0.378 g)를 DMF (4 mL) 중 2-부틸티아졸-4-카르복실산 (실시예 78, 단계 g) (0.193 g), 9-(3-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-2-플루오로벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸 (실시예 78, 단계 d) (0.4 g) 및 트리에틸아민 (0.383 g)의 교반 용액에 첨가하였다. 1시간 후, 반응 혼합물을 물과 에틸 아세테이트 사이에 분배하였다. 에틸 아세테이트 층을 물 (2회) 및 염수로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 7:1:0.5의 이소헥산:에틸 아세테이트:트리에틸아민으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 0.35 g.
Figure pct00816
i) (2-부틸티아졸-4-일)(9-(2-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논
Figure pct00817
TBAF (THF 중 1 M 용액, 2.0 mL)를 THF (4 mL) 중 (9-(3-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-2-플루오로벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-부틸티아졸-4-일)메타논 (실시예 78, 단계 h) (0.350 g)의 용액에 첨가하였다. 0.5시간 후, 용액을 농축시켰다. 10:1의 에틸 아세테이트:트리에틸아민으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 0.24 g.
Figure pct00818
j) 2-(3-((4-(2-부틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)-2-플루오로페닐)아세트알데히드
Figure pct00819
데스-마틴 페리오디난 (0.278 g)을 DCM (5 mL) 중 (2-부틸티아졸-4-일)(9-(2-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 (실시예 78, 단계 i) (0.240 g) 및 트리플루오로아세트산 (0.058 mL)의 교반 용액에 첨가하였다. 1시간 후, 에틸 아세테이트 (30 mL)에 이어서 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL)과 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL)의 혼합물을 첨가하였다. 반응 혼합물을 잘 진탕하고, 분리하였다. 에틸 아세테이트 용액을 포화 중탄산나트륨 용액, 물 및 염수로 세척하였다. 아세트산 (0.08 mL)을 첨가하고, 용액을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켜 (배스 온도 약 30 ℃), 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 0.24 g. 직접 사용하였다.
Figure pct00820
k) (R)-7-(2-(3-((4-(2-부틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)-2-플루오로페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00821
아세트산 (0.044 mL)을 MeOH (10 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.200 g) 및 2-(3-((4-(2-부틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)-2-플루오로페닐)아세트알데히드 (실시예 78, 단계 j) (0.240 g)의 교반 용액에 첨가하였다. 1분 후, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.064 g)를 첨가하였다. 1.5시간 후, 반응 혼합물을 여과하고, 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 순수한 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켰다. 아세토니트릴 (200 mL)을 첨가하고, 용액을 진공하에 검으로 증발시켰다. 상기 방법을 2회 반복하였다. 디에틸 에테르를 첨가하고, 표제 화합물을 고체로서 수집하였다. 수득량 0.15 g.
Figure pct00822
실시예 79
(R)-7-(2-(3-((4-(벤조[b]티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)-2-플루오로페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00823
a) 벤조[b]티오펜-2-일(9-(3-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-2-플루오로벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논
Figure pct00824
2-(3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피리딘-3-일)-1,1,3,3-테트라메틸이소우로늄 헥사플루오로포스페이트(V) (0.378 g)를 DMF (4 mL) 중 벤조[b]티오펜-2-카르복실산 (0.186 g), 9-(3-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-2-플루오로벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸 (실시예 78, 단계 d) (0.40 g) 및 트리에틸아민 (0.383 g)의 교반 용액에 첨가하였다. 1시간 후, 반응 혼합물을 물과 에틸 아세테이트 사이에 분배하였다. 에틸 아세테이트 층을 물로 2회, 염수로 1회 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 7:1:0.5의 이소헥산:에틸 아세테이트:트리에틸아민으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 0.38 g.
Figure pct00825
b) 벤조[b]티오펜-2-일(9-(2-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논
Figure pct00826
TBAF (THF 중 1 M 용액, 2 mL)를 THF (4 mL) 중 벤조[b]티오펜-2-일(9-(3-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-2-플루오로벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 (실시예 79, 단계 a) (0.370 g)의 용액에 첨가하였다. 0.5시간 후, 용액을 농축시켰다. 10:1의 에틸 아세테이트:트리에틸아민으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 0.26 g.
Figure pct00827
c) 2-(3-((4-(벤조[b]티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)-2-플루오로페닐)아세트알데히드
Figure pct00828
데스-마틴 페리오디난 (0.282 g)을 DCM (5 mL) 중 벤조[b]티오펜-2-일(9-(2-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 (실시예 79, 단계 b) (0.240 g) 및 트리플루오로아세트산 (0.059 mL)의 교반 용액에 첨가하였다. 1시간 후, 에틸 아세테이트 (30 mL)에 이어서 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL)과 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL)의 혼합물을 첨가하였다. 반응 혼합물을 잘 진탕하고, 분리하였다. 에틸 아세테이트 용액을 포화 중탄산나트륨 용액, 물 및 염수로 세척하였다. 아세트산 (0.08 mL)을 첨가한 후, 용액을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켜 (배스 온도 약 30 ℃), 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 0.24 g. 직접 사용하였다.
Figure pct00829
d) (R)-7-(2-(3-((4-(벤조[b]티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)-2-플루오로페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00830
아세트산 (0.044 mL)을 MeOH (10 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.203 g) 및 2-(3-((4-(벤조[b]티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)-2-플루오로페닐)아세트알데히드 (실시예 79, 단계 c) (0.240 g)의 교반 용액에 첨가하였다. 1분 후, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.081 g)를 첨가하였다. 1.5시간 후, 반응 혼합물을 여과하고, 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 순수한 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켰다. 아세토니트릴 (200 mL)을 첨가하고, 용액을 진공하에 검으로 증발시켰다. 상기 방법을 2회 반복하였다. 디에틸 에테르를 첨가하고, 표제 화합물을 고체로서 수집하였다. 수득량 0.19 g.
Figure pct00831
실시예 80
(R)-7-(2-(2-클로로-3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00832
a) 2-클로로-3-(시아노메틸)벤조산
Figure pct00833
DMF (75 mL) 중 3-(브로모메틸)-2-클로로벤조산 (6.39 g)의 용액을 물 (25 mL) 중 시안화칼륨 (3.34 g)의 용액으로 처리하고, 생성된 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 유기상을 폐기하였고, 한편으로는 질소 스트림을 통해 표백 용액을 통과시켜 임의의 유리 HCN을 내보내면서 진한 염산 (25 mL)을 사용하여 수성상을 조심스럽게 산성화시켰다. 2시간 동안 교반한 후, 수성상을 에틸 아세테이트로 2회 더 추출하였다. 합한 유기상을 물로 3회, 염수로 1회 세척한 후, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 조 부제 화합물을 연한 갈색 고체로서 수득하였다. 수득량 4.12 g.
Figure pct00834
b) 3-(카르복시메틸)-2-클로로벤조산
Figure pct00835
물 (30 mL) 중 수산화칼륨 (2.976 g)을 에탄올 (30 mL) 중 2-클로로-3-(시아노메틸)벤조산 (실시예 80, 단계 a) (4.12 g)의 현탁액에 첨가하고, 생성된 용액을 2시간 동안 환류 온도에서 가열한 후, 밤새 냉각시켰다. 혼합물을 진공하에 농축시켜 에탄올을 제거한 후, 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 2회 세척하였다. 유기상을 폐기하였고, 한편으로는 진한 염산을 사용하여 수성상을 pH 1로 산성화시키고, 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합한 추출물을 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 조 부제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. 수득량 4.11 g. 직접 사용하였다.
c) 2-(2-클로로-3-(히드록시메틸)페닐)에탄올
Figure pct00836
실온에서, 보란-메틸 술파이드 복합체의 용액 (THF 중 2 M, 20 mL)을 무수 THF (100 mL) 중 3-(카르복시메틸)-2-클로로벤조산 (실시예 80, 단계 b) (4.11 g)의 현탁액을 5분에 걸쳐 조금씩 첨가하였다. 생성된 발포성 현탁액을 실온에서 30분 동안 교반한 후, 환류 온도로 60분 동안 가열하고, 실온으로 밤새 냉각시켰다. 메탄올 (15 mL)을 15분에 걸쳐 조금씩 첨가하여 혼합물을 켄칭하였다. 혼합물을 메탄올로 추가로 희석하여, 용액을 수득하였고, 이어서 이를 진공하에 농축시켜, 시럽을 수득하였다. 시럽을 실리카 상에서 플래쉬 크로마토그래피 (디클로로메탄 중 2 ％ 메탄올로 용출)로 정제하여, 조 부제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 1.44 g.
Figure pct00837
d) 2-클로로-3-(2-히드록시에틸)벤즈알데히드
Figure pct00838
이산화망간 (IV) (1.599 g)을 DCM (20 mL) 중 2-(2-클로로-3-(히드록시메틸)페닐)에탄올 (실시예 80, 단계 c) (0.342 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 현탁액을 실온에서 밤새 교반하였다. 이어서, 혼합물을 실리카 상에서 농축시키고, 실리카 상에서 플래쉬 크로마토그래피 (이소헥산 중 25 ％ 에틸 아세테이트)로 정제하여, 부제 화합물을 백색 결정질 고체로서 수득하였다. 수득량 0.223 g.
Figure pct00839
e) (9-(2-클로로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct00840
NMP (3 mL) 중 (2-이소프로필티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 22, 단계 b) (0.325 g)의 용액을 아세트산 (0.067 mL)으로 처리하고, 5분 동안 교반하였다. 이어서, NMP (4 mL) 중 2-클로로-3-(2-히드록시에틸)벤즈알데히드 (실시예 80, 단계 d) (0.217 g)의 용액을 첨가하고, 생성된 용액을 1시간 동안 교반한 후, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (1.025 g)로 처리하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후, 포화 중탄산나트륨에 붓고, 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 합한 추출물을 물로 3회, 염수로 1회 세척한 후, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 실리카 상에서 플래쉬 크로마토그래피 (1:2:97의 트리에틸아민:메탄올:디클로로메탄으로 용출)로 정제하여, 부제 화합물을 무색 검으로서 수득하였다. 수득량 0.411 g.
f) 2-(2-클로로-3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)아세트알데히드
Figure pct00842
DCM (5 mL) 중 (9-(2-클로로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 80, 단계 e) (0.386 g)의 용액을 얼음-물 중에서 냉각시키고, 트리플루오로아세트산 (0.125 mL)으로 처리하고, 5분 동안 교반하였다. 데스-마틴 페리오디난 (0.519 g)을 첨가한 후, 혼합물을 냉각 배스로부터 꺼내고, 실온에서 35분 동안 교반하였다. 용액을 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (5 mL)로 희석하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 격렬하게 교반하였다. 이어서, 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기상을 염수로 세척하고, 아세트산 (0.1 mL)을 사용하여 산성화시키고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켜, 조 부제 화합물을 연한 황색 검으로서 수득하였다. 수득량 0.494 g.
Figure pct00843
g) (R)-7-(2-(2-클로로-3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00844
메탄올 (2 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.181 g)의 용액을 아세트산 (0.030 mL)으로 처리하고, 10분 동안 교반하였다. 이어서, 메탄올 (3 mL) 중 2-(2-클로로-3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)아세트알데히드 (실시예 80, 단계 f) (0.247 g)의 용액을 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반한 후, 얼음-물 중에서 냉각시키고, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.102 g)로 처리하였다. 냉각 배스를 제거하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 다음 날, 추가의 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.099 g)를 첨가하고, 혼합물을 추가로 4시간 동안 교반하였다. 물 한 방울을 첨가하여 용액을 켄칭하고, 여과하고, 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→50 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 진공하에 농축시키고, 아세토니트릴로부터 3회 공동-증발시켜, 무색 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 디에틸 에테르 중에서 분쇄하여, 고체를 수득하였고, 이를 여과에 의해 수집하고, 디에틸 에테르로 세척하고, 실온에서 진공하에 건조시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.053 g.
Figure pct00845
실시예 81
(R)-5-(2-(2-클로로-3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00846
a) (R)-5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(2-클로로-3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온
Figure pct00847
메탄올 (2 mL) 중 (R)-5-(2-아미노-1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (WO2004106333) (0.261 g)의 용액을 아세트산 (0.030 mL)으로 처리하고, 10분 동안 교반하였다. 이어서, 메탄올 (3 mL) 중 2-(2-클로로-3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)아세트알데히드 (실시예 80, 단계 f) (0.247 g)의 용액을 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반한 후, 얼음-물 중에서 냉각시키고, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.102 g)로 처리하였다. 냉각 배스를 제거하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 추가의 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.101 g)를 첨가하고, 혼합물을 둘째날 밤에 걸쳐 교반하였다. 이어서, 용액을 플래쉬 실리카 상에서 진공하에 농축시키고, 생성된 분말을 실리카 상에서 플래쉬 크로마토그래피 (1:3:96 → 1:5:94의 트리에틸아민:메탄올:디클로로메탄으로 용출)로 정제하여, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.130 g.
Figure pct00848
b) (R)-5-(2-(2-클로로-3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00849
THF (5 mL) 중 (R)-5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(2-클로로-3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (실시예 81, 단계 a) (0.124 g) 및 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (0.051 mL)의 용액을 실온에서 밤새 교반한 후, 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 메탄올 (4 mL) 중에 용해시키고, 생성된 용액을 여과하고, 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→30 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 진공하에 농축시키고, 아세토니트릴로부터 3회 공동-증발시켜, 무색 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 디에틸 에테르 중에서 분쇄하여, 고체를 수득하였고, 이를 여과에 의해 수집하고, 디에틸 에테르로 세척하고, 실온에서 진공하에 건조시켜, 표제 화합물을 백색 분말로서 수득하였다. 수득량 0.076 g.
Figure pct00850
실시예 82
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(3-((4-(5-이소프로필티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00851
a) 2-(3-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일메틸)페닐)에탄올
Figure pct00852
'880' 암모니아 용액 (5 mL)을 메탄올 (25 mL) 중 2,2,2-트리플루오로-1-(9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)에타논 (실시예 12, 단계 e) (2.02 g)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 90분 동안 교반하고, 용매를 증발시켰다. 잔류물을 94.5:5:0.5 → 89:10:1의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였다. 수득량 1.44 g.
Figure pct00853
b) (9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-이소프로필티오펜-3-일)메타논
Figure pct00854
0 ℃에서, O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (0.55 g)를 DMF (7 mL) 중 2-(3-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일메틸)페닐)에탄올 (실시예 82, 단계 a) (0.32 g), 5-이소프로필티오펜-3-카르복실산 (0.19 g) 및 트리에틸아민 (0.61 mL)의 용액에 첨가하였다. 생성된 황색 용액을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트 (100 mL)와 염수 (100 mL) 사이에 분배하고, 유기상을 염수 (100 mL씩 2회)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 증발시켰다. 생성된 검을 47.5:47.5:5의 이소헥산:에틸 아세테이트:트리에틸아민 → 95:5의 에틸 아세테이트:트리에틸아민 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 톨루엔 (200 mL)을 첨가하고, 용매를 감압하에 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 검으로서 수득하였다. 수득량 0.4 g.
Figure pct00855
c) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(3-((4-(5-이소프로필티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00856
0 ℃에서, 트리플루오로아세트산 (0.035 mL)을 DCM (5 mL) 중 (9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-이소프로필티오펜-3-일)메타논 (실시예 82, 단계 b) (0.2 g)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난 (0.29 g)을 첨가하였다. 생성된 황색 용액을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (20 mL)의 혼합물을 첨가하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 격렬하게 교반하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (20 mL)로 세척하고, 아세트산 몇 방울을 사용하여 산성화시키고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (5 mL) 중에 용해시키고, 이어서 아세트산 (0.026 mL) 및 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.14 g)를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.043 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시켰다. 94.5:5:0.5 → 89:10:1의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켰다. 추가로 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 잔류물을 디에틸에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.07 g.
Figure pct00857
실시예 83
(R)-8-히드록시-5-(1-히드록시-2-(3-((4-(5-이소프로필티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00858
0 ℃에서, TFA (0.04 mL)를 DCM (5 mL) 중 (9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-이소프로필티오펜-3-일)메타논 (실시예 82, 단계 b) (0.2 g)의 용액에 첨가하였다. 반응물을 5분 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난 (0.29 g)을 첨가하였다. 혼합물을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (20 mL)를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 층을 분리하고, 수성층을 에틸 아세테이트 (20 mL)로 추출하였다. 합한 유기물을 염수 (20 mL)로 세척하고, 아세트산 몇 방울을 사용하여 산성화시키고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (5 mL) 중에 재용해시키고, 아세트산 (0.03 mL) 및 (R)-5-(2-아미노-1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (WO2004106333) (0.15 g)를 첨가한 후, 혼합물을 5분 동안 교반하고, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.043 g)를 첨가하고, 반응물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 반응물을 농축시키고, 94.5:5:0.5 → 89:10:1의 DCM:메탄올:'880' 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켰다. 잔류물을 THF (5 mL) 중에 용해시키고, 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (0.22 mL)을 첨가하고, 혼합물을 밤새 교반하였다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 톨루엔과 함께 2회 공비시켰다. 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→30 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시키고, 디에틸에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.06 g.
Figure pct00859
실시예 84
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(3-((4-(2-이소부틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00860
a) (9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소부틸티아졸-4-일)메타논
Figure pct00861
0 ℃에서, O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (0.34 g)를 DMF (7 mL) 중 2-(3-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일메틸)페닐)에탄올 (실시예 82, 단계 a) (0.2 g), 2-이소부틸티아졸-4-카르복실산 (0.13 g) 및 트리에틸아민 (0.38 mL)의 용액에 첨가하였다. 생성된 황색 용액을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트 (100 mL)와 염수 (100 mL) 사이에 분배하고, 유기상을 염수 (100 mL씩 2회)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 증발시켰다. 생성된 검을 47.5:47.5:5의 이소헥산:에틸 아세테이트:트리에틸아민 → 95:5의 에틸 아세테이트:트리에틸아민 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 톨루엔 (200 mL)을 첨가하고, 용매를 감압하에 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 검으로서 수득하였다. 수득량 0.2 g.
Figure pct00862
b) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(3-((4-(2-이소부틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00863
0 ℃에서, 트리플루오로아세트산 (0.032 mL)을 DCM (5 mL) 중 (9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소부틸티아졸-4-일)메타논 (실시예 84, 단계 a) (0.19 g)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난 (0.26 g)을 첨가하였다. 생성된 황색 용액을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (20 mL)의 혼합물을 첨가하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 격렬하게 교반하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (20 mL)로 세척하고, 아세트산 몇 방울을 사용하여 산성화시키고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (5 mL) 중에 용해시키고, 이어서 아세트산 (0.024 mL) 및 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.11 g)를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.04 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시켰다. 94.5:5:0.5 → 89:10:1의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켰다. 추가로 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→35 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 잔류물을 디에틸에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.1 g.
Figure pct00864
실시예 85
(R)-7-(2-(2-플루오로-3-((4-(6-이소프로필피콜리노일)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00865
a) 2-이소프로필피리딘
Figure pct00866
-70 ℃에서, 부틸리튬의 용액 (헥산 중 1.6 M, 50 mL)을 테트라히드로푸란 (50 mL) 중 2-에틸피리딘 (9.34 mL)의 용액에 20분에 걸쳐 적가하였다. 혼합물을 2시간 동안 교반한 후, 메틸 요오다이드 (5 mL)를 15분에 걸쳐 적가하였다. 생성된 오렌지색 슬러리를 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 디에틸에테르 (100 mL)로 희석하였다. 유기층을 물 (100 mL씩 2회) 및 염수 (100 mL)로 세척한 후, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 9.1 g.
Figure pct00867
b) 2-이소프로필피리딘 1-옥사이드
Figure pct00868
MCPBA (22.0 g)를 DCM (250 mL) 중 2-이소프로필피리딘 (실시예 85, 단계 a) (9.1 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 중탄산나트륨 용액 (100 mL씩 4회) 및 염수 (100 mL)로 세척한 후, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 에틸 아세테이트 → 에틸 아세테이트 중 10 ％ 메탄올 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 3.9 g.
Figure pct00869
c) 6-이소프로필피콜리노니트릴
Figure pct00870
트리메틸실릴 시아나이드 (1.53 mL)를 DCM (40 mL) 중 2-이소프로필피리딘 1-옥사이드 (실시예 85, 단계 b) (1.3 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 디에틸카르바모일 클로라이드 (1.2 mL)를 첨가하고, 혼합물을 3일 동안 교반하였다. 탄산칼륨의 수용액 (10 ％, 40 mL)을 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 층을 분리하고, 수성상을 DCM (40 mL씩 2회)으로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (40 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 3:1의 이소헥산:에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였다. 수득량 1.23 g.
Figure pct00871
d) 6-이소프로필피콜린산
Figure pct00872
진한 염산 (15 mL)을 메탄올 (30 mL) 중 6-이소프로필피콜리노니트릴 (실시예 85, 단계 c) (1.23 g)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 환류 온도에서 17시간 동안 가열하고, 실온으로 냉각시켰다. 혼합물을 수산화나트륨 용액 (10 M, 50 mL)에 조심스럽게 붓고, 실온에서 밤새 교반하였다. 반응물을 농축시키고, 2 M HCl 용액을 사용하여 pH를 5로 조정하였다. 수성 혼합물을 클로로포름 (100 mL씩 3회)으로 추출하였다. 유기 용액을 합하고, 염수 (100 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.94 g.
Figure pct00873
e) (9-(2-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(6-이소프로필피리딘-2-일)메타논
Figure pct00874
0 ℃에서, O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (0.20 g)를 DMF (7 mL) 중 9-(3-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-2-플루오로벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸 (실시예 78, 단계 d) (0.17 g), 6-이소프로필피콜린산 (실시예 85, 단계 d) (0.07 g) 및 트리에틸아민 (0.22 mL)의 용액에 첨가하였다. 생성된 황색 용액을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트 (100 mL)와 염수 (100 mL) 사이에 분배하였다. 유기상을 분리하고, 염수 (100 mL씩 2회)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 증발시켰다. 잔류물을 THF (10 mL) 중에 용해시키고, THF 중 TBAF의 용액 (1 M, 0.8 mL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 2시간 동안 교반하고, 용매를 증발시켰다. 47.5:47.5:5의 이소헥산:에틸 아세테이트:트리에틸아민 → 95:5의 에틸 아세테이트:트리에틸아민 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 톨루엔 (50 mL)을 첨가하고, 용매를 감압하에 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 검으로서 수득하였다. 수득량 0.2 g.
Figure pct00875
f) (R)-7-(2-(2-플루오로-3-((4-(6-이소프로필피콜리노일)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00876
0 ℃에서, TFA (0.034 mL)를 DCM (5 mL) 중 (9-(2-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(6-이소프로필피리딘-2-일)메타논 (실시예 85, 단계 e) (0.2 g)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난 (0.28 g)을 첨가하였다. 생성된 황색 용액을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (20 mL)의 혼합물을 첨가하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 격렬하게 교반하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (20 mL)로 세척하고, 아세트산 몇 방울을 사용하여 산성화시키고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (5 mL) 중에 용해시키고, 이어서 아세트산 (0.025 mL) 및 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.12 g)를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.04 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시켰다. 94.5:5:0.5 → 89:10:1의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켰다. 추가로 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→35 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 잔류물을 디에틸에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.057 g.
Figure pct00877
실시예 86
(R)-7-(2-(3-((4-(5-에틸티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00878
a) (5-에틸티오펜-3-일)(9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논
Figure pct00879
HATU (0.209 g)를 DMF (2 mL) 중 5-에틸티오펜-3-카르복실산 (0.086 g), 2-(3-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일메틸)페닐)에탄올 (실시예 82, 단계 a) (0.160 g) 및 트리에틸아민 (0.3 mL)의 교반 용액에 첨가하였다. 1시간 후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 (25 mL)로 희석하고, 염수 (25 mL씩 2회)로 세척하였다. 에틸 아세테이트 층을 진공하에 증발시켰다. 10:1의 에틸 아세테이트:트리에틸아민으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 0.18 g.
Figure pct00880
b) 2-(3-((4-(5-에틸티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)아세트알데히드
Figure pct00881
데스-마틴 페리오디난 (0.232 g)을 DCM (5 mL) 중 (5-에틸티오펜-3-일)(9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 (실시예 86, 단계 a) (0.180 g) 및 트리플루오로아세트산 (0.042 mL)의 교반 용액에 첨가하였다. 1시간 후, 에틸 아세테이트 (30 mL)에 이어서 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL)과 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL)의 혼합물을 첨가하였다. 반응 혼합물을 잘 진탕하고, 분리하였다. 에틸 아세테이트 용액을 포화 중탄산나트륨 용액, 물 및 염수로 세척하였다. 아세트산 (0.08 mL)을 첨가하고, 용액을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켜 (배스 온도 약 30 ℃), 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 0.17 g. 직접 사용하였다.
Figure pct00882
c) (R)-7-(2-(3-((4-(5-에틸티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00883
아세트산 (0.036 mL)을 메탄올 (8 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.166 g) 및 2-(3-((4-(5-에틸티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)아세트알데히드 (실시예 86, 단계 b) (0.180 g)의 교반 용액에 첨가하였다. 1분 후, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.080 g)를 첨가하였다. 1.5시간 후, 반응 혼합물을 여과하고, 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴. 순수한 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켰다. 아세토니트릴 (200 mL)을 첨가하고, 용액을 진공하에 증발시켜, 검을 수득하였다. 상기 방법을 2회 반복하였다. 디에틸 에테르를 첨가하고, 표제 화합물을 백색 고체로서 수집하였다. 수득량 0.13 g.
Figure pct00884
실시예 87
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(3-((4-(2-프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00885
a) 부탄티오아미드
Figure pct00886
오황화인 (3 g)을 MTBE (300 mL) 중 부티르아미드 (5 g)의 현탁액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 3시간 동안 교반하였다. 반응물을 셀라이트를 통해 여과하고, 필터 패드를 MTBE (100 mL)로 세척하였다. 합한 여과액 및 세척액을 증발시켜, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 5.2 g.
Figure pct00887
b) 에틸 2-프로필티아졸-4-카르복실레이트
Figure pct00888
에틸 3-브로모-2-옥소프로파노에이트 (6.32 mL)를 에탄올 (100 mL) 중 부탄티오아미드 (실시예 87, 단계 a) (5.2 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 환류 온도에서 밤새 가열하였다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트 (100 mL)와 포화 탄산수소나트륨 용액 (100 mL) 사이에 분배하였다. 층을 분리하고, 수성상을 에틸 아세테이트 (100 mL씩 2회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (100 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 10:1의 이소헥산:에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 5.24 g.
Figure pct00889
c) 2-프로필티아졸-4-카르복실산
Figure pct00890
수산화리튬 일수화물 (4.4 g)을 THF (80 mL)와 물 (20 mL)의 혼합물 중 에틸 2-프로필티아졸-4-카르복실레이트 (실시예 87, 단계 b) (5.24 g)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 밤새 교반하였다. 반응물을 진한 염산을 사용하여 산성화시키고, 휘발성 물질을 증발시켰다. 생성된 수성 혼합물을 염화나트륨으로 포화시키고, 에틸 아세테이트 (100 mL씩 3회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜, 부제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 2.5 g.
Figure pct00891
d) (9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct00892
0 ℃에서, O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (0.24 g)를 DMF (7 mL) 중 2-(3-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일메틸)페닐)에탄올 (실시예 82, 단계 a) (0.14 g), 2-프로필티아졸-4-카르복실산 (실시예 87, 단계 c) (0.084 g) 및 트리에틸아민 (0.27 mL)의 용액에 첨가하였다. 생성된 황색 용액을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트 (100 mL)와 염수 (100 mL) 사이에 분배하고, 유기상을 염수 (100 mL씩 2회)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 증발시켰다. 생성된 검을 47.5:47.5:5의 이소헥산:에틸 아세테이트:트리에틸아민 → 95:5의 에틸 아세테이트:트리에틸아민 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 톨루엔 (200 mL)을 첨가하고, 용매를 감압하에 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 검으로서 수득하였다. 수득량 0.14 g.
Figure pct00893
e) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(3-((4-(2-프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00894
0 ℃에서, TFA (0.023 mL)를 DCM (5 mL) 중 (9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 87, 단계 d) (0.13 g)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난 (0.19 g)을 첨가하였다. 생성된 황색 용액을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (20 mL)의 혼합물을 첨가하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 격렬하게 교반하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (20 mL)로 세척하고, 아세트산 몇 방울을 사용하여 산성화시키고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (5 mL) 중에 용해시키고, 이어서 아세트산 (0.017 mL) 및 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.077 g)를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.028 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시켰다. 94.5:5:0.5 → 89:10:1의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켰다. 추가로 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→35 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 잔류물을 디에틸에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.09 g.
Figure pct00895
실시예 88
(R)-7-(2-(3-(2-플루오로-3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)프로필아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00896
a) 3-(2-플루오로페닐)프로판-1-올
Figure pct00897
보란 디메틸술파이드 복합체의 용액 (THF 중 2 M, 27.6 mL)을 테트라히드로푸란 (25 mL) 중 3-(2-플루오로페닐)프로판산 (3.09 g)의 용액에 적가하고, 생성된 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 반응물을 메탄올로 켄칭하고, 버블링이 중지되면 증발시켰다. 4:1 → 1:1의 이소헥산:에틸 아세테이트 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였다. 수득량 2.72 g.
Figure pct00898
b) tert-부틸(3-(2-플루오로페닐)프로폭시)디메틸실란
Figure pct00899
tert-부틸디메틸실릴 클로라이드 (3.19 g)를 얼음 배스에서 냉각시킨 무수 DMF (30 mL) 중 이미다졸 (3.6 g) 및 3-(2-플루오로페닐)프로판-1-올 (실시예 88, 단계 a) (2.72 g)의 용액에 첨가하였다. 45분 후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 (100 mL)로 희석하고, 물 (100 mL씩 3회)로 세척하고, 증발시켰다. 생성된 검을 이소헥산으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였다. 수득량 4.4 g.
Figure pct00900
c) 3-(3-(tert-부틸디메틸실릴옥시)프로필)-2-플루오로벤즈알데히드
Figure pct00901
-78 ℃에서, tert-부틸(3-(2-플루오로페닐)프로폭시)디메틸실란 (실시예 88, 단계 b) (4.4 g)을 THF (25 mL) 중 sec-부틸리튬 (시클로헥산 중 1.4 M, 11.7 mL) 및 1,1,4,7,7-펜타메틸디에틸렌트리아민 (3.4 mL)의 용액에 5분에 걸쳐 적가하였다. 생성된 혼합물을 2시간 동안 교반한 다음, DMF (6.4 mL)를 조심스럽게 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 반응물을 물 (100 mL)로 켄칭한 후, 에틸 아세테이트 (250 mL)를 첨가하였다. 상을 분리하고 유기상을 물 (100 mL씩 2회), 2 M HCl 용액 (50 mL씩 2회) 및 염수 (100 mL)로 세척한 후, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 이소헥산 → 이소헥산 중 10 ％ 에테르 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였다. 수득량 1 g.
Figure pct00902
d) (9-(2-플루오로-3-(3-히드록시프로필)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct00903
3-(3-(tert-부틸디메틸실릴옥시)프로필)-2-플루오로벤즈알데히드 (실시예 88, 단계 c) (0.15 g)를 N-메틸-2-피롤리디논 (10 mL) 중 (2-이소프로필티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 22, 단계 b) (0.19 g) 및 아세트산 (0.03 mL)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 15분 동안 교반한 후, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.16 g)를 첨가하고, 혼합물을 밤새 교반하였다. 반응물을 포화 탄산수소나트륨 용액 (20 mL)과 물 (100 mL)의 혼합물에 부었다. 수성상을 에틸 아세테이트 (100 mL씩 3회)로 추출하였다. 합한 유기물을 물 (50 mL) 및 염수 (100 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 THF (10 mL) 중에 재용해시키고, TBAF의 용액 (THF 중 1 M, 1.52 mL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 2시간 동안 교반하고, 용매를 증발시켰다. 잔류물을 4:1의 이소헥산:에틸 아세테이트 + 5 ％ 트리에틸아민 → 에틸 아세테이트 + 5 ％ 트리에틸아민 구배로 용출시키는 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였다. 수득량 0.22 g.
Figure pct00904
e) (R)-7-(2-(3-(2-플루오로-3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)프로필아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00905
0 ℃에서, 트리플루오로아세트산 (0.032 mL)을 DCM (5 mL) 중 (9-(2-플루오로-3-(3-히드록시프로필)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 88, 단계 d) (0.2 g)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난 (0.27 g)을 첨가하였다. 생성된 황색 용액을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 포화 티오황산나트륨 용액 (5 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (20 mL)의 혼합물을 첨가하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 격렬하게 교반하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (20 mL)로 세척하고, 아세트산 몇 방울을 사용하여 산성화시키고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (5 mL) 중에 용해시키고, 이어서 아세트산 (0.024 mL) 및 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.11 g)를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.040 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시켰다. 94.5:5:0.5 → 89:10:1의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켰다. 추가로 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→35 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 잔류물을 디에틸에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.14 g.
Figure pct00906
실시예 89
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(3-((10-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-7-옥사-3,10-디아자스피로[5.6]도데칸-3-일)메틸)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00907
a) tert-부틸 4-(시아노메틸)-4-히드록시피페리딘-1-카르복실레이트
Figure pct00908
DMF (20 mL) 중 tert-부틸 1-옥사-6-아자스피로[2.5]옥탄-6-카르복실레이트 (2 g)의 용액을 시안화칼륨 (0.672 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 4일 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하고, 유기층을 염수로 2회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 용매로서 이소헥산 중 60 ％ 에틸 아세테이트를 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 1.18 g.
Figure pct00909
b) tert-부틸 4-(2-아미노에틸)-4-히드록시피페리딘-1-카르복실레이트
Figure pct00910
에탄올 (20 mL)과 아세트산 (20 mL)의 혼합물 중 tert-부틸 4-(시아노메틸)-4-히드록시피페리딘-1-카르복실레이트 (실시예 89, 단계 a) (1.4 g)의 용액을 4 기압의 수소 분위기에서 산화백금(IV) (0.25 g)의 존재하에 4시간 동안 수소화시켰다. 촉매를 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 수성 묽은 NaOH와 에틸 아세테이트 사이에 분배하고, 유기층 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 1.1 g. 직접 사용하였다.
c) tert-부틸 4-(2-(2-클로로아세트아미도)에틸)-4-히드록시피페리딘-1-카르복실레이트
Figure pct00911
클로로아세틸 클로라이드 (0.483 mL)를 에틸 아세테이트 (25 mL) 중 tert-부틸 4-(2-아미노에틸)-4-히드록시피페리딘-1-카르복실레이트 (실시예 89, 단계 b) (1.1 g)와 물 (20 mL) 중에 용해된 탄산칼륨 (1.77 g)의 격렬하게 교반된 혼합물 (0 ℃)에 10분에 걸쳐 적가하였다. 이어서, 혼합물을 0 ℃에서 45분 동안 교반한 후, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 에틸 아세테이트로 용출시키는 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.9 g.
Figure pct00912
d) tert-부틸 9-옥소-7-옥사-3,10-디아자스피로[5.6]도데칸-3-카르복실레이트
Figure pct00913
무수 THF (18 mL) 중 tert-부틸 4-(2-(2-클로로아세트아미도)에틸)-4-히드록시피페리딘-1-카르복실레이트 (실시예 89, 단계 c) (0.3 g)의 용액을 칼륨 tert-부톡시드 (tert-부탄올 중 1 M, 3 mL)와 무수 THF (60 mL)의 환류 혼합물에 6시간에 걸쳐 적가하였다. 첨가의 말미에, 혼합물을 환류 온도에서 추가로 15분 동안 가열한 후, 실온으로 냉각시켰다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 디에틸에테르 중에서 분쇄하여, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.117 g.
Figure pct00914
e) tert-부틸 7-옥사-3,10-디아자스피로[5.6]도데칸-3-카르복실레이트
Figure pct00915
보란-메틸 술파이드 복합체 (THF 중 2 M, 2.88 mL)를 무수 THF (40 mL) 중 tert-부틸 9-옥소-7-옥사-3,10-디아자스피로[5.6]도데칸-3-카르복실레이트 (실시예 89, 단계 d) (0.41 g)의 용액에 첨가한 후, 반응 혼합물을 70 ℃에서 질소하에 30분 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 메탄올로 켄칭하였다. 용매를 감압하에 제거하고, 잔류물을 메탄올 (100 mL) 중에 용해시켰다. N1,N2-디메틸에탄-1,2-디아민 (1.0 g)을 첨가하고, 혼합물을 환류 온도에서 질소하에 16시간 동안 가열하였다. 추가의 N1,N2-디메틸에탄-1,2-디아민 (1.0 g)을 첨가하고, 16시간 동안 환류를 계속하였다. 용매를 감압하에 증발시키고, 잔류물을 톨루엔과 함께 공비시켰다. 조 생성물을 용매로서 디클로로메탄 (1 ％ 트리에틸아민 함유) 중 6 ％ 메탄올을 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.176 g.
Figure pct00916
f) tert-부틸 10-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-7-옥사-3,10-디아자스피로[5.6]도데칸-3-카르복실레이트
Figure pct00917
HATU (0.322 g)를 DMF (10 mL) 중 tert-부틸 7-옥사-3,10-디아자스피로[5.6]도데칸-3-카르복실레이트 (실시예 89, 단계 e) (0.176 g) 및 2-메틸티아졸-4-카르복실산 (0.093 g) 및 트리에틸아민 (0.36 mL)의 용액 (0 ℃)에 한 번에 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 20 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하였다. 유기층을 염수로 2회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 에틸 아세테이트로 용출시키는 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 210 mg.
Figure pct00918
g) (2-메틸티아졸-4-일)(7-옥사-3,10-디아자스피로[5.6]도데칸-10-일)메타논 트리플루오로아세테이트
Figure pct00919
DCM (10 mL) 중 tert-부틸 10-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-7-옥사-3,10-디아자스피로[5.6]도데칸-3-카르복실레이트 (실시예 89, 단계 f) (0.21 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (10 mL)으로 처리하고, 용액을 20 ℃에서 25분 동안 방치하였다. 톨루엔 (40 mL)을 첨가하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 아세토니트릴과 함께 공비시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.21 g.
Figure pct00920
h) (3-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-7-옥사-3,10-디아자스피로[5.6]도데칸-10-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논
Figure pct00921
아세토니트릴 (15 mL) 중 (2-메틸티아졸-4-일)(7-옥사-3,10-디아자스피로[5.6]도데칸-10-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 89, 단계 g) (0.21 g)의 용액을 트리에틸아민 (0.214 mL)에 이어서 2-(3-(브로모메틸)페닐)에탄올 (실시예 6, 단계 a) (0.121 g)로 처리하였다. 반응 혼합물을 20 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 증발시키고, 잔류물을 DCM과 포화 중탄산나트륨 용액 사이에 분배하였다. 수성층을 DCM으로 2회 재추출하고, 합한 유기물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 조 생성물을 용매로서 디클로로메탄 (1 ％ 트리에틸아민 함유) 중 6 ％ 메탄올을 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.21 g.
Figure pct00922
i) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(3-((10-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-7-옥사-3,10-디아자스피로[5.6]도데칸-3-일)메틸)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00923
DCM (15 mL) 중 (3-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-7-옥사-3,10-디아자스피로[5.6]도데칸-10-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논 (실시예 89, 단계 h) (0.21 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (0.038 mL)에 이어서 데스-마틴 페리오디난 (0.311 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 40분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (20 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (20 mL) 및 에틸 아세테이트 (30 mL)로 처리하고, 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하였다. 아세트산 (0.028 mL)을 상기 용액에 첨가한 후, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 메탄올 (3 mL) 중에 용해시키고, 메탄올 (15 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.193 g) 및 아세트산 (0.028 mL)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 얼음 배스에서 냉각시키고, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.061 g)로 처리하였다. 냉각 배스를 제거하고, 혼합물을 20 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 3 mL 이상의 부피로 증발시키고, THF (20 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 포화 염수 (10 mL)와 포화 중탄산나트륨 용액 (1 mL)의 혼합물로 세척하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 아세토니트릴과 함께 2회 공비시켰다. 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.145 g.
Figure pct00924
실시예 90
(R)-7-(2-(2-(2-플루오로-3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)-2-메틸프로필아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00925
a) 메틸 2-(2-플루오로페닐)아세테이트
Figure pct00926
메탄올 (200 mL) 중 2-(2-플루오로페닐)아세트산 (9.6 g)의 용액을 트리메틸실릴 클로라이드 (10 mL)로 처리하고, 혼합물을 2시간 동안 환류 온도에서 가열하였다. 용매를 감압하에 제거하고, 잔류물을 에틸 아세테이트와 포화 중탄산나트륨 용액 사이에 분배하고, 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하여, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 9.7 g.
Figure pct00927
b) 메틸 2-(2-플루오로페닐)-2-메틸프로파노에이트
Figure pct00928
0 ℃에서, 무수 DMF (80 mL) 중 요오도메탄 (3.2 mL)의 용액에 수소화나트륨 (60 ％ 현탁액, 2 g)에 이어서 메틸 2-(2-플루오로페닐)아세테이트 (실시예 90, 단계 a) (2.75 g)를 첨가하였다. 혼합물을 실온으로 서서히 가온한 후, 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 포화 수성 염화암모늄 (120 mL)을 조심스럽게 첨가하여 반응물을 켄칭하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출하고, 합한 유기물을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 조 생성물을 용매로서 이소헥산 중 8 ％ 에틸 아세테이트를 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 2.6 g.
Figure pct00929
c) 2-(2-플루오로페닐)-2-메틸프로판산
Figure pct00930
물 (50 mL) 중 수산화나트륨 (1 g)의 용액을 메탄올 (50 mL) 및 THF (50 mL) 중 메틸 2-(2-플루오로페닐)-2-메틸프로파노에이트 (실시예 90, 단계 b) (2.6 g)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 40 ℃에서 40시간 동안 가열하였다. 유기물을 감압하에 제거하고, 나머지 수용액을 에틸 아세테이트로 세척하였다. 수성층을 냉각시키고, 진한 HCl을 첨가하여 산성화시켰다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기층을 염수로 세척한 후, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하여, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 1.5 g.
Figure pct00931
d) 2-(2-플루오로페닐)-2-메틸프로판-1-올
Figure pct00932
보란-메틸 술파이드 (THF 중 2 M, 12.35 mL)를 THF (30 mL) 중 2-(2-플루오로페닐)-2-메틸프로판산 (실시예 90, 단계 c) (1.5 g)의 용액에 적가하였다. 반응 혼합물을 20 ℃에서 8시간 동안 교반하였다. 가스 발생이 중지될 때까지 메탄올을 조심스럽게 첨가하여 혼합물을 켄칭하였다. 용매를 감압하에 제거하고, 잔류물을 톨루엔과 함께 공비시켰다. 조 생성물을 용매로서 이소헥산 중 30 ％ 에틸 아세테이트를 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 1.3 g.
Figure pct00933
e) tert-부틸(2-(2-플루오로페닐)-2-메틸프로폭시)디메틸실란
Figure pct00934
20 ℃에서, tert-부틸디메틸실릴 클로라이드 (1.4 g)를 DMF (7 mL) 중 2-(2-플루오로페닐)-2-메틸프로판-1-올 (실시예 90, 단계 d) (1.3 g) 및 이미다졸 (0.631 g)의 교반 용액에 조금씩 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반한 후, 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하였다. 유기층을 염수로 2회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다 (용리 구배: 100 ％ 이소헥산 → 이소헥산 중 1 ％ 디에틸 에테르). 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 1.4 g.
Figure pct00935
f) 3-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-플루오로벤즈알데히드
Figure pct00936
sec-부틸리튬 (시클로헥산 중 1.4 M, 3.54 mL)을 질소하에 무수 테트라히드로푸란 (10 mL)에 첨가하고, 용액을 -78 ℃로 냉각시켰다. N1-(2-(디메틸아미노)에틸)-N1,N2,N2-트리메틸에탄-1,2-디아민 (0.859 g)을 서서히 적가하였다. 이어서, 무수 테트라히드로푸란 (3 mL) 중 tert-부틸(2-(2-플루오로페닐)-2-메틸프로폭시)디메틸실란 (실시예 90, 단계 e) (1.4 g)의 용액을 5분에 걸쳐 적가하였다. 반응 혼합물을 -78 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. DMF (2.69 mL)를 5분에 걸쳐 적가하고, 혼합물을 -78 ℃에서 1시간 동안 교반한 후, 실온에서 45분 동안 교반하였다. 물을 첨가하여 반응 혼합물을 켄칭하였다. 에틸 아세테이트 (200 mL)를 첨가하고, 유기상을 물로 3회 세척한 후, 2 M HCl로 2회 그리고 물로 2회, 이어서 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다 (용리 구배: 이소헥산 중 1 → 5 ％ 에틸 아세테이트). 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.98 g.
Figure pct00937
g) (9-(2-플루오로-3-(1-히드록시-2-메틸프로판-2-일)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct00938
나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.502 g)를 NMP (20 mL) 중 (2-이소프로필티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 22, 단계 b) (0.668 g) 및 3-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-메틸프로판-2-일)-2-플루오로벤즈알데히드 (실시예 90, 단계 f) (0.49 g) 및 아세트산 (0.090 mL)의 교반 용액 (0 ℃)에 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 20 ℃에서 18시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 포화 중탄산나트륨 용액 사이에 분배하고, 유기층을 염수로 2회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 생성된 검을 THF (20 mL) 중에 용해시키고, 테트라부틸암모늄 플루오라이드 (THF 중 1 M, 3.16 mL)로 처리하였다. 용액을 20 ℃에서 8시간 동안 방치하였다. 용매를 감압하에 증발시키고, 조 생성물을 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다 (용리 구배: 디클로로메탄 (1 ％ 트리에틸아민 함유) 중 0 → 1 ％ 메탄올). 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.63 g.
Figure pct00939
h) (R)-7-(2-(2-(2-플루오로-3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)-2-메틸프로필아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00940
DCM (15 mL) 중 (9-(2-플루오로-3-(1-히드록시-2-메틸프로판-2-일)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 90, 단계 g) (0.21 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (0.033 mL)에 이어서 데스-마틴 페리오디난 (0.273 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 40분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (20 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (20 mL) 및 에틸 아세테이트 (30 mL)로 처리하고, 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하였다. 아세트산 (0.025 mL)을 상기 용액에 첨가한 후, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 메탄올 (3 mL) 중에 용해시키고, 메탄올 (15 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.169 g) 및 아세트산 (0.025 mL)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 얼음 배스에서 냉각시키고, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.054 g)로 처리하였다. 냉각 배스를 제거하고, 혼합물을 20 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 3 mL 이상의 부피로 증발시키고, THF (20 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 포화 염수 (10 mL)와 포화 중탄산나트륨 용액 (1 mL)의 혼합물로 세척하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 아세토니트릴과 함께 2회 공비시켰다. 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.125 g.
Figure pct00941
실시예 91
(R)-7-(2-(3-((4-(5-에틸티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)-2-플루오로페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00942
a) (5-에틸티오펜-3-일)(9-(2-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논
Figure pct00943
HATU (0.316 g)를 DMF (10 mL) 중 9-(3-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-2-플루오로벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸 (실시예 78, 단계 d) (0.271 g) 및 5-에틸티오펜-3-카르복실산 (0.1 g) 및 트리에틸아민 (0.36 mL)의 용액 (0 ℃)에 한 번에 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 20 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하고, 유기층을 염수로 2회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 THF (20 mL) 중에 용해시키고, 테트라부틸암모늄 플루오라이드 (THF 중 1 M, 1.921 mL)로 처리하였다. 반응 혼합물을 20 ℃에서 18시간 동안 방치한 후, 용매를 감압하에 제거하였다. 조 생성물을 용매로서 디클로로메탄 (1 ％ 트리에틸아민 함유) 중 2 ％ 메탄올을 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.12 g.
Figure pct00944
b) (R)-7-(2-(3-((4-(5-에틸티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)-2-플루오로페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00945
DCM (15 mL) 중 (5-에틸티오펜-3-일)(9-(2-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 (실시예 91, 단계 a) (0.12 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (0.021 mL)에 이어서 데스-마틴 페리오디난 (0.171 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 40분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (20 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (20 mL) 및 에틸 아세테이트 (30 mL)로 처리하고, 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하였다. 아세트산 (0.015 mL)을 상기 용액에 첨가한 후, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 메탄올 (3 mL) 중에 용해시키고, 메탄올 (15 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.106 g) 및 아세트산 (0.015 mL)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 얼음 배스에서 냉각시키고, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.034 g)로 처리하였다. 냉각 배스를 제거하고, 혼합물을 20 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 3 mL 이상의 부피로 증발시키고, THF (20 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 포화 염수 (10 mL)와 포화 중탄산나트륨 용액 (1 mL)의 혼합물로 세척하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 아세토니트릴과 함께 2회 공비시켰다. 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.095 g.
Figure pct00946
실시예 92
(R)-5-(2-(2-(2-플루오로-3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)-2-메틸프로필아미노)-1-히드록시에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00947
a) (R)-5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(2-(2-플루오로-3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)-2-메틸프로필아미노)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온
Figure pct00948
DCM (20 mL) 중 (9-(2-플루오로-3-(1-히드록시-2-메틸프로판-2-일)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 90, 단계 g) (0.21 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (0.033 mL)에 이어서 데스-마틴 페리오디난 (0.236 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 40분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (20 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (20 mL) 및 에틸 아세테이트 (30 mL)로 처리하고, 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하였다. 아세트산 (0.025 ml)을 상기 용액에 첨가한 후, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 메탄올 (3 mL) 중에 용해시키고, 메탄올 (15 mL) 중 (R)-5-(2-아미노-1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (WO2004106333) (0.186 g)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 0 ℃로 냉각시키고, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.136 g)를 한 번에 첨가하였다. 반응 혼합물을 20 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 제거하고, 잔류물을 에틸 아세테이트와 포화 중탄산나트륨 용액 사이에 분배하고, 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 조 생성물을 용매로서 디클로로메탄 (1 ％ '880' 수성 암모니아 함유) 중 9 ％ 메탄올을 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.28 g.
Figure pct00949
b) (R)-5-(2-(2-(2-플루오로-3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)-2-메틸프로필아미노)-1-히드록시에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00950
메탄올 (2 mL) 중 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (0.074 mL)를 THF (8 mL) 중 (R)-5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(2-(2-플루오로-3-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)-2-메틸프로필아미노)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (실시예 92, 단계 a) (0.28 g)의 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 20 ℃에서 18시간 동안 방치하였다. 용매를 감압하에 제거하고, 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.175 g.
Figure pct00951
실시예 93
(R)-7-(2-(3-((4-(5-에틸티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)-5-플루오로페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00952
a) (5-에틸티오펜-3-일)(9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논
Figure pct00953
HATU (0.449 g)를 DMF (10 mL) 중 2-(3-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일메틸)-5-플루오로페닐)에탄올 (실시예 55, 단계 c) (0.28 g) 및 5-에틸티오펜-3-카르복실산 (0.142 g) 및 트리에틸아민 (0.506 mL)의 용액 (0 ℃)에 한 번에 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 20 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하고, 유기층을 염수로 2회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 용매로서 디클로로메탄 (1 ％ 트리에틸아민 함유) 중 2 ％ 메탄올을 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.21 g.
Figure pct00954
b) (R)-7-(2-(3-((4-(5-에틸티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)-5-플루오로페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00955
DCM (15 mL) 중 (5-에틸티오펜-3-일)(9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 (실시예 93, 단계 a) (0.21 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (0.036 mL)에 이어서 데스-마틴 페리오디난 (0.299 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 40분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (20 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (20 mL) 및 에틸 아세테이트 (30 mL)로 처리하고, 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하였다. 아세트산 (0.027 mL)을 상기 용액에 첨가한 후, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 메탄올 (3 mL) 중에 용해시키고, 메탄올 (15 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.185 g) 및 아세트산 (0.027 mL)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 얼음 배스에서 냉각시키고, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.059 g)로 처리하였다. 냉각 배스를 제거하고, 혼합물을 20 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 3 mL 이상의 부피로 증발시키고, THF (20 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 포화 염수 (10 mL)와 포화 중탄산나트륨 용액 (1 mL)의 혼합물로 세척하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 아세토니트릴과 함께 2회 공비시켰다. 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.115 g.
Figure pct00956
실시예 94
(R)-8-히드록시-5-(1-히드록시-2-(3-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질아미노)에틸)퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00957
3-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤즈알데히드 (실시예 10, 단계 b) (0.24 g)를 메탄올 (2 mL) 중 (R)-5-(2-아미노-1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (WO2004106333) (0.187 g) 및 아세트산 (0.032 mL)의 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 교반한 후, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.178 g)를 첨가하고, 혼합물을 2시간 동안 교반하고, 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트 (50 mL)와 pH 7.2의 완충액 (50 mL) 사이에 분배하였다. 수성상을 분리하고, 에틸 아세테이트 (50 mL씩 2회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (20 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 95:5:0.5 → 92:8:0.8의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 테트라히드로푸란 (5 mL) 중에 용해시켰다. 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (0.091 mL)를 첨가하고, 혼합물을 밤새 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시키고, 잔류물을 아세토니트릴과 물의 혼합물 (1:1, 5 mL) 중에 용해시켰다. 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→50 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 잔류물을 디에틸에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.15 g.
Figure pct00958
실시예 95
(R)-8-히드록시-5-(1-히드록시-2-(3-(3-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)프로폭시)벤질아미노)에틸)퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00959
a) 3-(3-포르밀페녹시)프로필 메탄술포네이트
Figure pct00960
3-브로모-1-프로판올 (3.94 mL) 및 탄산칼륨 (6.22 g)을 아세토니트릴 (100 mL) 중 3-히드록시벤즈알데히드 (5 g)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 환류 온도에서 질소하에 5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 에틸 아세테이트와 빙냉 묽은 수성 수산화나트륨 사이에 분배하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 DCM (30 mL) 중에 용해시키고, 트리에틸아민 (5.7 mL)으로 처리하였다. 용액을 0 ℃로 냉각시키고, 메탄술포닐 클로라이드 (3.2 mL)로 적가 처리하였다. 반응 혼합물을 0 ℃에서 10분 동안 교반한 후, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 염수로 2회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 용매로서 이소헥산 중 33 ％ 에틸 아세테이트를 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 5.20 g.
Figure pct00961
b) 3-(3-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)프로폭시)벤즈알데히드
Figure pct00962
아세토니트릴 (10 mL) 중 3-(3-포르밀페녹시)프로필 메탄술포네이트 (실시예 95, 단계 a) (0.209 g) 및 (2-메틸티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 4, 단계 h) (0.32 g) 및 트리에틸아민 (0.282 mL)의 용액을 65 ℃에서 18시간 동안 가열하였다. 용매를 감압하에 증발시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 디클로로메탄 중 2 ％ 메탄올 및 1 ％ 트리에틸아민을 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.157 g.
Figure pct00963
c) (R)-5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(3-(3-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)프로폭시)벤질아미노)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온
Figure pct00964
나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.113 g)를 메탄올 (7 mL) 중 3-(3-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)프로폭시)벤즈알데히드 (실시예 95, 단계 b) (0.157 g), (R)-5-(2-아미노-1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (WO2004106333) (0.118 g) 및 아세트산 (0.020 mL)의 교반 용액 (0 ℃)에 한 번에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 20 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 대부분의 메탄올을 감압하에 증발시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트와 수성 포스페이트 완충액 (pH = 7.2) 사이에 분배하고, 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 용매로서 디클로로메탄 중 8 ％ 메탄올 및 1 ％ '880' 수성 암모니아를 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.160 g.
Figure pct00965
d) (R)-8-히드록시-5-(1-히드록시-2-(3-(3-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)프로폭시)벤질아미노)에틸)퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00966
THF (2 mL) 중 (R)-5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(3-(3-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)프로폭시)벤질아미노)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (실시예 95, 단계 c) (0.160 g)의 용액을 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (0.041 mL)로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 18시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시키고, 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→35 ％ 아세토니트릴). 바람직한 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.081 mg.
Figure pct00967
실시예 96
(R)-8-히드록시-5-(1-히드록시-2-(3-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)벤질아미노)에틸)퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00968
a) 3-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)벤즈알데히드
Figure pct00969
아세토니트릴 (10 mL) 중 (2-메틸티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 4, 단계 h) (0.408 g), 3-(브로모메틸)벤즈알데히드 (0.205 g) 및 트리에틸아민 (0.36 mL)의 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 용액을 진공하에 농축시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트와 포화 중탄산나트륨 사이에 분배하였다. 유기상을 물로 2회, 염수로 1회 세척한 후, 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 실리카 상에서 플래쉬 크로마토그래피 (디클로로메탄 중 5 ％ 메탄올로 용출)로 정제하여, 부제 화합물을 황색 검으로서 수득하였다. 수득량 0.325 g.
Figure pct00970
b) (R)-5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(3-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)벤질아미노)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온
Figure pct00971
메탄올 (5 mL) 중 3-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)벤즈알데히드 (실시예 96, 단계 a) (0.303 g), (R)-5-(2-아미노-1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (WO2004106333) (0.330 g) 및 아세트산 (0.043 mL)의 용액을 실온에서 30분 동안 교반한 후, 얼음-물 배스에서 질소하에 냉각시키고, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.243 g)로 한 번에 처리하였다. 혼합물을 얼음-물 중에서 2시간 동안 교반한 후, 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트와 포화 중탄산나트륨 용액 사이에 분배하고, 상을 분리하고, 수성상을 에틸 아세테이트로 2회 더 추출하였다. 임의의 불용성 검성 잔류물을 메탄올 중에 용해시켰다. 합한 에틸 아세테이트 상을 염수로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 메탄올 용액과 합하였다. 전체를 실리카 상에서 플래쉬 크로마토그래피 (1:7:92의 트리에틸아민:메탄올:디클로로메탄으로 용출)로 정제하여, 약간 순수하지 않은 부제 생성물을 황색 포말로서 수득하였다. 수득량 0.324 g.
Figure pct00972
c) (R)-8-히드록시-5-(1-히드록시-2-(3-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)벤질아미노)에틸)퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00973
THF (5 mL) 중 (R)-5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(3-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)벤질아미노)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (실시예 96, 단계 b) (0.320 g) 및 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (0.15 mL)의 용액을 실온에서 밤새 교반한 후, 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 아세토니트릴 (3 ml)과 물 (1 ml)의 혼합물 중에 용해시키고, 생성된 용액을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→50 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 진공하에 농축시키고, 아세토니트릴로부터 3회 공동-증발시켜, 백색 포말을 수득하였다. 포말을 디에틸 에테르 중에서 분쇄하여, 고체를 수득하였고, 이를 여과에 의해 제거하고, 디에틸 에테르로 세척하고, 실온에서 진공하에 건조시켜, 표제 화합물을 백색 분말로서 수득하였다. 수득량 0.264 g.
Figure pct00974
실시예 97
(R)-5-(2-(2,5-디메틸-4-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질아미노)-1-히드록시에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00975
2,5-디메틸-4-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤즈알데히드 (실시예 18, 단계 f) (0.08 g)를 메탄올 (2 mL) 중 (R)-5-(2-아미노-1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (WO2004106333) (0.088 g) 및 아세트산 (0.010 mL)의 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 교반한 후, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.016 g)를 첨가하고, 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 제거하고, 잔류물을 95:5:0.5 → 92:8:0.8의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 테트라히드로푸란 (5 mL) 중에 재용해시키고, 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (0.028 mL)를 첨가하고, 혼합물을 밤새 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시켰다. 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→50 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 잔류물을 디에틸 에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.07 g.
Figure pct00976
실시예 98
(R)-8-히드록시-5-(1-히드록시-2-((5-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에틸)티오펜-2-일)메틸아미노)에틸)퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00977
a) (R)-5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-((5-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에틸)티오펜-2-일)메틸아미노)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00978
메탄올 (10 mL) 중 5-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에틸)티오펜-2-카르브알데히드 (실시예 21, 단계 c) (0.188 g) 및 (R)-5-(2-아미노-1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (WO2004106333) (0.150 g)의 용액을 아세트산 (0.026 mL)에 이어서 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.143 g)로 처리하였다. 혼합물을 20 ℃에서 18시간 동안 교반하였다. 추가의 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.143 g)를 첨가하고, 20 ℃에서 2시간 동안 계속 교반하였다. 추가의 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (143 mg)를 첨가하고, 2시간 동안 계속 교반하였다. 메탄올을 감압하에 제거하고, 잔류물을 포화 중탄산나트륨 용액과 에틸 아세테이트 사이에 분배하고. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 조 생성물을 용매로서 디클로로메탄 중 1 ％ 진한 수성 암모니아 및 8 ％ 메탄올을 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.122 g.
Figure pct00979
b) (R)-8-히드록시-5-(1-히드록시-2-((5-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에틸)티오펜-2-일)메틸아미노)에틸)퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00980
THF (4 mL) 중 (R)-5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-((5-(2-(4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에틸)티오펜-2-일)메틸아미노)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (실시예 98, 단계 a) (0.122 g)의 용액을 메탄올 (1 mL) 중 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (0.035 mL)의 용액으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 18시간 동안 방치하였다. 용매를 감압하에 제거하고, 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.085 g.
Figure pct00981
실시예 99
(R)-7-(2-(5-((4-(5-에틸티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)-2-플루오로페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00982
a) (5-에틸티오펜-3-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트
Figure pct00983
HATU (1.15 g)를 DMF (10 mL) 중 tert-부틸 1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 히드로클로라이드 (우시 파마테크) (0.682 g) 및 5-에틸티오펜-3-카르복실산 (0.364 g) 및 트리에틸아민 (1.3 mL)의 용액 (0 ℃)에 한 번에 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 20 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하고, 유기층을 염수로 2회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 이소헥산 중 50 ％ 에틸 아세테이트를 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 'BOC' 보호된 중간체를 수득하였다. DCM (10 mL)에 이어서 트리플루오로아세트산 (10 mL)을 첨가하고, 생성된 용액을 20 ℃에서 25분 동안 방치하였다. 톨루엔 (30 mL)을 첨가하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 아세토니트릴과 함께 2회 공비시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.950 g.
Figure pct00984
b) (5-에틸티오펜-3-일)(9-(4-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논
Figure pct00985
2-(5-(브로모메틸)-2-플루오로페닐)에탄올 (실시예 47, 단계 a) (0.171 g)을 아세토니트릴 (15 mL) 중 (5-에틸티오펜-3-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 99, 단계 a) (0.3 g) 및 트리에틸아민 (0.410 ml)의 용액에 첨가하고, 혼합물을 20 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 증발시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트와 포화 중탄산나트륨 용액 사이에 분배하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 용매로서 디클로로메탄 중 1 ％ 트리에틸아민 및 2 ％ 메탄올을 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.2 g.
Figure pct00986
c) (R)-7-(2-(5-((4-(5-에틸티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)-2-플루오로페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00987
DCM (15 mL) 중 (5-에틸티오펜-3-일)(9-(4-플루오로-3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 (실시예 99, 단계 b) (0.2 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (0.035 ml)에 이어서 데스-마틴 페리오디난 (0.285 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 40분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (20 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (20 mL) 및 에틸 아세테이트 (30 mL)로 처리하고, 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하였다. 아세트산 (0.026 ml)을 상기 용액에 첨가한 후, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 메탄올 (3 mL) 중에 용해시키고, 메탄올 (15 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.176 g) 및 아세트산 (0.026 ml)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 얼음 배스에서 냉각시키고, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.056 g)로 처리하였다. 냉각 배스를 제거하고, 혼합물을 20 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 3 mL 이상의 부피로 증발시키고, THF (20 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 포화 염수 (10 mL)와 포화 중탄산나트륨 용액 (1 mL)의 혼합물로 세척하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 아세토니트릴과 함께 2회 공비시켰다. 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.14 g.
Figure pct00988
실시예 100
(R)-7-(2-(3-((4-(5-에틸티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)-4-플루오로페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00989
a) tert-부틸(4-플루오로페네톡시)디메틸실란
Figure pct00990
20 ℃에서, tert-부틸디메틸실릴 클로라이드 (0.903 g)를 DMF (20 mL) 중 2-(4-플루오로페닐)에탄올 (0.7 g) 및 이미다졸 (0.408 g)의 교반 용액에 조금씩 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반한 후, 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하였다. 유기층을 염수로 2회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 용매로서 이소헥산 중 2 ％ 에틸 아세테이트를 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.99 g.
Figure pct00991
b) 5-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-2-플루오로벤즈알데히드
Figure pct00992
sec-부틸리튬 (시클로헥산 중 1.4 M, 2.78 ml)을 질소하에 무수 테트라히드로푸란 (10 mL)에 첨가하고, 용액을 -78 ℃로 냉각시켰다. N1-(2-(디메틸아미노)에틸)-N1,N2,N2-트리메틸에탄-1,2-디아민 (0.674 g)을 서서히 적가하였다. 이어서, 무수 테트라히드로푸란 (3 mL) 중 tert-부틸(4-플루오로페네톡시)디메틸실란 (실시예 100, 단계 a) (0.99 g)의 용액을 5분에 걸쳐 적가하였다. 반응 혼합물을 -78 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. DMF (2.1 ml)를 5분에 걸쳐 적가하고, 혼합물을 -78 ℃에서 1시간 동안 교반한 후, 실온에서 45분 동안 교반하였다. 물을 첨가하여 반응 혼합물을 켄칭하였다. 에틸 아세테이트 (200 mL)을 첨가하고, 유기상을 물로 3회 세척한 후, 2 M HCl로 2회, 이어서 물로 2회 세척하였다. 유기 용액을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 용매로서 이소헥산 중 2 ％ 에틸 아세테이트를 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.5 g.
Figure pct00993
c) (5-에틸티오펜-3-일)(9-(2-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논
Figure pct00994
나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.225 g)를 NMP (20 mL) 중 (5-에틸티오펜-3-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 99, 단계 a) (0.289 g) 및 5-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-2-플루오로벤즈알데히드 (실시예 100, 단계 b) (0.2 g) 및 아세트산 (0.041 ml)의 교반 용액 (0 ℃)에 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 20 ℃에서 18시간 동안 교반하였다. 추가의 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.150 g)를 첨가하고, 4시간 동안 계속 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트와 포화 중탄산나트륨 용액 사이에 분배하고, 유기층을 염수로 2회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 생성된 검을 THF (20 mL) 중에 용해시키고, TBAF (THF 중 1 M, 1.4 ml)로 처리하였다. 용액을 20 ℃에서 8시간 동안 방치하였다. 용매를 감압하에 증발시키고, 조 생성물을 용매로서 디클로로메탄 (1 ％ 트리에틸아민 함유) 중 2 ％ 메탄올을 사용하여 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.18 g.
Figure pct00995
d) (R)-7-(2-(3-((4-(5-에틸티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)-4-플루오로페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct00996
DCM (15 mL) 중 (5-에틸티오펜-3-일)(9-(2-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 (실시예 100, 단계 c) (0.18 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (0.031 ml)에 이어서 데스-마틴 페리오디난 (0.256 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 40분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (20 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (20 mL) 및 에틸 아세테이트 (30 mL)로 처리하고, 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하였다. 아세트산 (0.023 ml)을 상기 용액에 첨가한 후, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 메탄올 (3 mL) 중에 용해시키고, 메탄올 (15 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.159 g) 및 아세트산 (0.023 ml)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 얼음 배스에서 냉각시키고, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.051 g)로 처리하였다. 냉각 배스를 제거하고, 혼합물을 20 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 3 mL 이상의 부피로 증발시키고, THF (20 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 포화 염수 (10 mL)와 포화 중탄산나트륨 용액 (1 mL)의 혼합물로 세척하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 아세토니트릴과 함께 2회 공비시켰다. 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 바람직한 화합물을 함유하는 분획을 증발 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.14 g.
Figure pct00997
실시예 101
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(2-(6-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)헥실티오)에틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct00998
a) 6-(2,2-디메톡시에틸티오)헥산-1-올
Figure pct00999
0 ℃에서 MeCN (30 mL) 중 6-머캅토-헥산-1-올 (2.5 mL)의 용액에 수소화나트륨 (광유 중 60 ％ 현탁액, 0.81 g)을 첨가하였다. 혼합물을 0 ℃에서 1시간 동안 교반한 후, 2-브로모-1,1-디메톡시-에탄 (2.4 mL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 20시간 동안 교반한 다음, 포화 중탄산나트륨 용액을 첨가하여 켄칭하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트 (3회)로 추출한 후, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액에 이어서 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 시클로헥산 중 25 ％ 에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 무색 액체로서 수득하였다. 수득량 1.85 g.
Figure pct01000
b) 2-(6-브로모헥실티오)아세트알데히드
Figure pct01001
0 ℃에서 N2 분위기하에, DCM (75 mL) 중 6-(2,2-디메톡시에틸티오)헥산-1-올 (실시예 101, 단계 a) (1.85 g)의 용액에 사브롬화탄소 (3.31 g)에 이어서 트리페닐포스핀 (2.62 g)을 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 1.25시간 동안 교반한 후, 진공하에 농축시켰다. 시클로헥산 중 0→50 ％ 에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 황색 액체로서 수득하였다. 수득량 1.31 g.
Figure pct01002
c) (R)-tert-부틸 2-(6-브로모헥실티오)에틸(2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸)카르바메이트
Figure pct01003
0 ℃에서 N2 하에, 아세트산 (0.287 mL) 및 3Å 분자체를 함유하는 DMF (20 mL) 중 2-(6-브로모헥실티오)아세트알데히드 (실시예 101, 단계 b) (1.2 g)의 용액에 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (1.45 g)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0 ℃에서 1시간 동안 교반한 후, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (1.6 g)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 디-tert-부틸 디카르보네이트 (1.1 g)를 첨가하고, 20시간 동안 계속 교반하였다. 포화 중탄산나트륨 용액 (40 mL)을 첨가하여 반응 혼합물을 켄칭한 후, 용액을 에틸 아세테이트 (3회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 시클로헥산 중 0→100 ％ 에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.56 g.
Figure pct01004
d) tert-부틸 4-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트
Figure pct01005
0 ℃에서, DCM (14 mL) 중 트리플루오로아세트산 무수물 (2.2 mL)의 용액을 DCM (90 mL) 중 tert-부틸 1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 히드로클로라이드 (우시 파마테크) (4.7 g) 및 트리에틸아민 (4.9 mL)의 용액에 20분에 걸쳐 적가하였다. 혼합물을 0 ℃에서 45분 동안 교반한 후, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 물 (90 mL)을 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 격렬하게 교반하였다. 층을 분리하고, 수성층을 DCM (50 mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 석유 에테르 (40 내지 60 ℃) 중 40→50 ％ EtOAc로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 2.73 g.
Figure pct01006
e) 2,2,2-트리플루오로-1-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)에타논 트리플루오로아세테이트
Figure pct01007
트리플루오로아세트산 (66 mL)을 DCM (66 mL) 중 tert-부틸 4-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 (실시예 101, 단계 d) (4.33 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반하였다. 톨루엔 (50 mL)을 첨가하고, 혼합물을 진공하에 증발시켜 (3회), 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 5.52 g.
Figure pct01008
f) (R)-tert-부틸 2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸(2-(6-(4-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)헥실티오)에틸)카르바메이트
Figure pct01009
(R)-tert-부틸 2-(6-브로모헥실티오)에틸(2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸)카르바메이트 (실시예 101, 단계 c) (0.55 g)를 아세토니트릴 (20 mL) 중 2,2,2-트리플루오로-1-(1-옥사-4,9-디아자-스피로[5.5]운데크-4-일)-에타논 트리플루오로아세트산 염 (실시예 101, 단계 e) (0.25 g) 및 트리에틸아민 (0.26 mL)과 합하고, 80 ℃에서 48시간 동안 가열하였다. 휘발성 물질을 진공하에 증발시켰다. DCM 중 10 ％ MeOH로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 황색 검으로서 수득하였다. 수득량 0.10 g 및 0.074 g (덜 순수).
Figure pct01010
g) (R)-tert-부틸 2-(6-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)헥실티오)에틸(2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸)카르바메이트
Figure pct01011
메탄올 (10 mL) 중 (R)-tert-부틸 2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸(2-(6-(4-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)헥실티오)에틸)카르바메이트 (실시예 101, 단계 f) (0.18 g)의 교반 용액에 물 (10 mL) 중 탄산칼륨 (0.06 g)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 17시간 동안 교반한 후, 메탄올을 질소 스트림하에 제거하였다. 용액을 염수로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3회)로 추출하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올에 용해시키고, 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 갈색 유리로서 수득하였다. 수득량 0.15 g.
Figure pct01012
h) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(2-(6-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)헥실티오)에틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01013
DMF (3 mL) 중 (R)-tert-부틸 2-(6-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)헥실티오)에틸(2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸)카르바메이트 (실시예 101, 단계 g) (0.093 g)의 용액에 트리에틸아민 (0.062 mL) 및 2-이소프로필-티아졸-4-카르복실산 (0.025 g)을 첨가하고, 이어서 O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (0.079 g)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반한 후, '880' 수성 암모니아 4방울을 첨가하고, 혼합물을 15분 동안 교반하였다. 염수 및 에틸 아세테이트를 용액에 첨가하고, 상을 분리한 후, 유기상을 에틸 아세테이트 (2회)로 추출하였다. 합한 유기상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 DCM (2 mL) 중에 용해시킨 후, 트리플루오로아세트산 (1 mL)을 첨가하였다. 용액을 실온에서 40분 동안 방치한 후, 톨루엔 (20 mL)을 첨가하고, 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 추가량의 톨루엔을 첨가하고, 혼합물을 다시 농축시킨 후, 물질을 아세토니트릴과 함께 공비시켰다. 정제용 HPLC로 정제하였다 (페노메넥스 제미니 (등록상표), 구배: 0.1 ％ 수성 포름산 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결 건조시켜, 표제 화합물을 무색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.016 g.
Figure pct01014
실시예 102
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(7-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)-2,2-디메틸헵틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01015
a) 에틸 7-브로모-2,2-디메틸헵타노에이트
Figure pct01016
0 ℃에서, THF (30 mL) 중 디이소프로필아민 (5.82 mL)의 용액에 n-부틸리튬 (헥산 중 2.5 M, 16.4 mL)을 첨가하고, 혼합물을 상기 온도에서 30분 동안 교반한 후, -78 ℃로 냉각시켰다. 에틸 이소부티레이트 (5 mL)를 적가하고, 생성된 혼합물을 -78 ℃에서 1시간 동안 교반한 후, 1,5-디브로모펜탄 (5.61 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 -78 ℃에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 실온에서 2.5시간 동안 교반한 후, 포화 염화암모늄 용액에 부었다. 용액을 에틸 아세테이트 (2회)로 추출한 후, 합한 유기물을 물로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 시클로헥산 중 0→25 ％ 에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 황색 액체로서 수득하였다. 수득량 4.45 g.
Figure pct01017
b) 7-브로모-2,2-디메틸헵탄-1-올
Figure pct01018
0 ℃에서 N2 하에, 무수 디에틸 에테르 (50 mL) 중 에틸 7-브로모-2,2-디메틸헵타노에이트 (실시예 102, 단계 a) (1.5 g)의 용액에 디이소부틸알루미늄 수소화물 (톨루엔 중 1 M, 12.5 mL)을 적가하였다. 반응 혼합물을 0 ℃에서 1시간 동안 교반한 후, 포화 칼륨 나트륨 타르트레이트 (150 mL)를 첨가하여 켄칭하였다. 혼합물을 1시간 동안 교반한 후, 에틸 아세테이트 (3회)로 추출하였다. 합한 유기물을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 시클로헥산 중 0→25 ％ 에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 무색 액체로서 수득하였다. 수득량 1.16 g.
Figure pct01019
c) (9-(7-히드록시-6,6-디메틸헵틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct01020
(2-이소프로필티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 22, 단계 b) (0.5 g)를 메탄올 중에 용해시키고, 메탄올로 예비-습윤된 SCX 카트리지에 적용하였다. 카트리지를 메탄올로 세척하고, 메탄올 중 2 M 암모니아 용액으로 용출시켰다. 용리액을 진공하에 증발시켜, 물질을 유리 염기 (0.29 g)로서 수득하였다. 상기 물질에 아세토니트릴 (10 mL) 중 7-브로모-2,2-디메틸헵탄-1-올 (실시예 102, 단계 b) (0.26 g)을 첨가하고, 이어서 트리에틸아민 (0.27 mL)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 60 ℃에서 17시간 동안 가열하였다. 휘발성 물질을 진공하에 증발시키고, 조 생성물을 DCM 중 0 ％ → 5 ％ → 10 ％ 메탄올로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 무색 검으로서 수득하였다. 수득량 0.29 g.
Figure pct01021
d) 7-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)-2,2-디메틸헵타날
Figure pct01022
0 ℃에서 아르곤하에, 트리플루오로아세트산 (0.048 mL)을 DCM (15 mL) 중 (9-(7-히드록시-6,6-디메틸헵틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 102, 단계 c) (0.28 g)의 용액에 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난 (0.39 g)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반한 후, 포화 중아황산나트륨 용액 (10 mL) 및 포화 중탄산나트륨 용액 (10 mL)을 첨가하여 켄칭하고, 이어서 에틸 아세테이트를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 층을 분리하고, 수용액을 에틸 아세테이트 (2회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하였다. 아세트산 (0.053 mL)을 유기상에 첨가한 후, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켜, 조 부제 화합물 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.33 g.
Figure pct01023
e) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(7-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)-2,2-디메틸헵틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01024
아세트산 (0.053 mL)을 무수 메탄올 (10 mL) 중 7-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)-2,2-디메틸헵타날 (실시예 102, 단계 d) (0.33 g) 및 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.25 g) (3Å 분자체 함유)의 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 0 ℃로 냉각시켰다. 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.13 g)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 16.5시간 동안 교반하였다. 용액을 여과한 후, 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 아세토니트릴과 물의 혼합물 중에 용해시키고, 정제용 HPLC로 정제하였다 (페노메넥스 제미니 (등록상표), 구배: 0.1 ％ 수성 포름산 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결-건조시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.1 g.
Figure pct01025
실시예 103
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(9-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)-2,2-디메틸노닐아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01026
a) 에틸 9-브로모-2,2-디메틸노나노에이트
Figure pct01027
0 ℃에서, THF (30 mL) 중 디이소프로필아민 (5.82 mL)의 용액에 n-부틸리튬 (헥산 중 2.5 M, 16.4 mL)을 첨가하고, 혼합물을 상기 온도에서 30분 동안 교반한 후, -78 ℃로 냉각시켰다. 에틸 이소부티레이트 (5 mL)를 적가하고, 생성된 혼합물을 -78 ℃에서 1시간 동안 교반한 후, 1,7-디브로모헵탄 (6.4 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 -78 ℃에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 실온에서 2시간 동안 교반한 후, 포화 염화암모늄 용액에 부었다. 용액을 에틸 아세테이트 (2회)로 추출한 후, 합한 유기물을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 시클로헥산 중 0→10 ％ 에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 무색 액체로서 수득하였다. 수득량 1.27 g.
Figure pct01028
b) 9-브로모-2,2-디메틸노난-1-올
Figure pct01029
0 ℃에서 N2 하에, 무수 디에틸 에테르 (40 mL) 중 에틸 9-브로모-2,2-디메틸노나노에이트 (실시예 103, 단계 a) (1.27 g)의 용액에 디이소부틸알루미늄 수소화물 (톨루엔 중 1 M, 9.5 mL)을 적가하였다. 반응 혼합물을 0 ℃에서 1.25시간 동안 교반한 후, 포화 칼륨 나트륨 타르트레이트 용액 (150 mL)을 첨가하여 켄칭하였다. 혼합물을 15분 동안 교반한 후, 에틸 아세테이트 (3회)로 추출하고, 이어서 합한 유기물을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 시클로헥산 중 0→25 ％ 에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 무색 액체로서 수득하였다. 수득량 0.56 g.
Figure pct01030
c) (9-(9-히드록시-8,8-디메틸노닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
2-이소프로필티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 22, 단계 b) (0.5 g)를 메탄올 중에 용해시키고, 메탄올로 예비-습윤된 SCX 카트리지에 적용하였다. 카트리지를 메탄올로 세척하고, 메탄올 중 2 M 암모니아 용액으로 용출시켰다. 용리액을 진공하에 증발시켜, 물질을 유리 염기 (0.26 g)로서 수득하였다. 상기 물질에 트리에틸아민 (0.23 mL) 및 아세토니트릴 (10 mL) 중 9-브로모-2,2-디메틸노난-1-올 (실시예 103, 단계 b) (0.25 g)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 60 ℃에서 15시간 동안 가열하였다. 휘발성 물질을 진공하에 증발시키고, 조 생성물을 DCM 중 0→10 ％ 메탄올로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 순수하지 않은 부제 화합물을 무색 검으로서 수득하였고, 이를 DCM 중 0→10 ％ 메탄올로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 재정제하여, 부제 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.37 g.
Figure pct01032
d) 9-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)-2,2-디메틸노나날
Figure pct01033
0 ℃에서 아르곤하에, 트리플루오로아세트산 (0.059 mL)을 DCM (20 mL) 중 (9-(9-히드록시-8,8-디메틸노닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 103, 단계 c) (0.37 g)의 용액에 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난 (0.49 g)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1.25시간 동안 교반하고, 이어서 포화 티오황산나트륨 용액 (20 mL) 및 포화 중탄산나트륨 용액 (20 mL)을 첨가하여 켄칭한 후, 에틸 아세테이트를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 상을 분리하고, 수성층을 에틸 아세테이트 (2회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하였다. 아세트산 (0.066 mL)을 유기상에 첨가한 후, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켜, 조 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.40 g.
Figure pct01034
e) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(9-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)-2,2-디메틸노닐아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01035
아세트산 (0.066 mL)을 무수 메탄올 (10 mL) 중 9-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)-2,2-디메틸노나날 (실시예 103, 단계 d) (0.4 g) 및 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.3 g) (3Å 분자체 함유)의 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 0 ℃로 냉각시켰다. 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.16 g)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 16.5시간 동안 교반하였다. 용액을 여과한 후, 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 아세토니트릴과 물의 혼합물 중에 용해시키고, 정제용 HPLC로 정제하였다 (페노메넥스 제미니 (등록상표), 구배: 0.1 ％ 수성 포름산 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결-건조시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.10 g.
Figure pct01036
실시예 104
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(4-(2-(4-(5-메틸티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01037
a) tert-부틸 4-(5-메틸티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트
Figure pct01038
O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (0.91 g)를 DMF (10 mL) 중 tert-부틸 1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 히드로클로라이드 (우시 파마테크) (0.5 g), 5-메틸-티오펜-3-카르복실산 (0.243 g) 및 트리에틸아민 (0.95 mL)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 염수 (40 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트 (50 mL씩 3회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 물 (150 mL), 염수 (150 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 디클로로메탄 중 0→10 ％ 메탄올로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였다. 수득량 0.34 g.
Figure pct01039
b) (5-메틸티오펜-3-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논
Figure pct01040
트리플루오로아세트산 (2.5 mL)를 DCM (10 mL) 중 tert-부틸 4-(5-메틸티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 (실시예 104, 단계 a) (0.34 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 45분 동안 교반하고, 밤새 방치하였다. 용매를 진공하에 증발시켰다. 톨루엔 (25 mL씩 3회)을 첨가하고, 혼합물을 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (20 mL) 중에 용해시키고, 메탄올로 예비-습윤된 SCX 카트리지에 적용하였다. 카트리지를 메탄올 (40 mL)로 세척하고, 메탄올 중 2 M 암모니아 용액 (20 mL)으로 용출시켰다. 용리액을 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.25 g.
Figure pct01041
c) (R)-tert-부틸 2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸(4-(2-(4-(5-메틸티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질)카르바메이트
Figure pct01042
트리에틸아민 (0.25 mL)을 아세토니트릴 (2.5 mL) 중 (5-메틸티오펜-3-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 (실시예 104, 단계 b) (0.195 g)의 용액에 첨가하였다. 상기 용액을 아세토니트릴 (2.5 mL) 중 (R)-2-(4-((tert-부톡시카르보닐(2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸)아미노)메틸)페녹시)에틸 메탄술포네이트 (실시예 108, 단계 c) (0.5 g)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80 ℃에서 48시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 진공하에 증발시켰다. 디클로로메탄 중 0→10 ％ 메탄올로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 크림색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.33 g.
Figure pct01043
d) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(4-(2-(4-(5-메틸티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01044
트리플루오로아세트산 (1.2 mL)을 DCM (5 mL) 중 (R)-tert-부틸 2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸(4-(2-(4-(5-메틸티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질)카르바메이트 (실시예 104, 단계 c) (0.33 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 톨루엔 (20 mL)을 첨가하고, 혼합물을 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 톨루엔 (20 mL씩 3회)과 함께 공비시켰다. 정제용 HPLC로 정제하였다 (페노메넥스 제미니 (등록상표), 구배: 0.1 ％ 수성 포름산 중 5→40 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결-건조시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.12 g.
Figure pct01045
실시예 105
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(9-(4-(5-메틸티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)노닐아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01046
a) (9-(9-히드록시노닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-메틸티오펜-3-일)메타논
Figure pct01047
아세토니트릴 (3 mL) 중 9-브로모-1-노나놀 (0.335 g)의 용액을 아세토니트릴 (7 mL) 중 (5-메틸티오펜-3-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 (실시예 104, 단계 b) (0.28 g) 및 트리에틸아민 (0.278 mL)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60 ℃에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 진공하에 증발시키고, 잔류물을 DCM (30 mL)에 녹이고, 염수 (15 mL씩 2회)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 디클로로메탄 중 0→10 ％ 메탄올로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.3 g.
Figure pct01048
b) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(9-(4-(5-메틸티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)노닐아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01049
0 ℃에서 아르곤하에, 트리플루오로아세트산 (0.055 mL)을 DCM (15 mL) 중 (9-(9-히드록시노닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-메틸티오펜-3-일)메타논 (실시예 105, 단계 a) (0.3 g)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난 (0.45 g)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반한 후, 포화 티오황산나트륨 용액 (14 mL) 및 포화 중탄산나트륨 용액 (14 mL)을 첨가하여 켄칭하고, 이어서 에틸 아세테이트 (30 mL)을 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 층을 분리하고, 수성층을 에틸 아세테이트 (40 mL씩 2회)로 추출하였다. 아세트산 (0.159 mL)을 합한 유기층에 첨가하고, 이를 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 황색 오일을 무수 메탄올 (15 mL) 중에 용해시켰다. (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.28 g)를 첨가하고, 이어서 아세트산 (0.061 mL) 및 3Å 분자체를 첨가하였다. 실온에서 5분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 0 ℃로 냉각시켰다. 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.15 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 용매를 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (페노메넥스 제미니 (등록상표), 구배: 0.1 ％ 수성 포름산 중 5→40 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결-건조시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.07 g.
Figure pct01050
실시예 106
(R)-7-(2-(4-(2-(4-(벤조[d]티아졸-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01051
a) tert-부틸 4-(벤조[d]티아졸-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트
Figure pct01052
O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (1.45 g)를 DMF (15 mL) 중 tert-부틸 1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 히드로클로라이드 (우시 파마테크) (0.8 g), 1,3-벤조티아졸-2-카르복실산 (0.588 g) 및 트리에틸아민 (1.51 mL)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 16시간 동안 교반하였다. 진공하에 DMF의 부피를 감소시키고, 반응 혼합물을 물 (30 mL)과 에틸 아세테이트 (30 mL) 사이에 분배하였다. 유기층을 물 (30 mL) 및 염수 (30 mL)로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 디클로로메탄 중 0→10 ％ 메탄올로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.83 g.
Figure pct01053
b) 벤조[d]티아졸-2-일(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논
Figure pct01054
트리플루오로아세트산 (5 mL)을 DCM (15 mL) 중 tert-부틸 4-(벤조[d]티아졸-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 (실시예 106, 단계 a) (0.83 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 25분 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 DCM:메탄올 (1:1) (5 mL) 중에 용해시키고, DCM:메탄올 (1:1)로 예비-습윤된 SCX 카트리지에 적용하였다. 카트리지를 메탄올 (60 mL)로 세척하고, 메탄올 중 2 M 암모니아 용액 (40 mL)으로 용출시켰다. 용리액을 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.57 g.
Figure pct01055
c) (R)-tert-부틸 4-(2-(4-(벤조[d]티아졸-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질(2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸)카르바메이트
Figure pct01056
트리에틸아민 (0.25 mL)을 아세토니트릴 (2.5 mL) 중 벤조[d]티아졸-2-일(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 (실시예 106, 단계 b) (0.22 g)의 용액에 첨가하였다. 상기 용액을 아세토니트릴 (2.5 mL) 중 (R)-2-(4-((tert-부톡시카르보닐(2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸)아미노)메틸)페녹시)에틸 메탄술포네이트 (실시예 108, 단계 c) (0.5 g)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80 ℃에서 48시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 진공하에 증발시켰다. 디클로로메탄 중 0→10 ％ 메탄올로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 크림색 포말로서 수득하였다. 수득량 0.34 g.
Figure pct01057
d) (R)-7-(2-(4-(2-(4-(벤조[d]티아졸-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01058
트리플루오로아세트산 (1.25 mL)을 DCM (4 mL) 중 (R)-tert-부틸 4-(2-(4-(벤조[d]티아졸-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질(2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸)카르바메이트 (실시예 106, 단계 c) (0.33 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 톨루엔 (20 mL)을 첨가하고, 혼합물을 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 톨루엔 (20 mL씩 3회)과 함께 공비시켰다. 정제용 HPLC로 정제하였다 (페노메넥스 제미니 (등록상표), 구배: 0.1 ％ 수성 포름산 중 5→40 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결-건조시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.096 g.
Figure pct01059
실시예 107
(R)-7-(2-(9-(4-(벤조[d]티아졸-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)노닐아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01060
a) 벤조[d]티아졸-2-일(9-(9-히드록시노닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논
Figure pct01061
아세토니트릴 (3 mL) 중 9-브로모-1-노나놀 (0.335 g)의 용액을 아세토니트릴 (7 mL) 중 벤조[d]티아졸-2-일(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 (실시예 106, 단계 b) (0.34 g) 및 트리에틸아민 (0.278 mL)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60 ℃에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 진공하에 증발시키고, 잔류물을 DCM (30 mL)에 녹이고, 염수 (15 mL씩 2회)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 디클로로메탄 중 0→10 ％ 메탄올로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.34 g.
Figure pct01062
b) (R)-7-(2-(9-(4-(벤조[d]티아졸-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)노닐아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01063
0 ℃에서 아르곤하에, 트리플루오로아세트산 (0.056 mL)을 DCM (15 mL) 중 벤조[d]티아졸-2-일(9-(9-히드록시노닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 (실시예 107, 단계 a) (0.33 g)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난 (0.46 g)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 포화 티오황산나트륨 용액 (14 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (14 mL) 및 EtOAc (30 mL)를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 층을 분리하고, 수성층을 EtOAc (40 mL씩 2회)로 추출하였다. 아세트산 (0.159 mL)을 합한 유기층에 첨가하고, 이를 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 황색 오일을 무수 MeOH (15 mL) 중에 용해시켰다. (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.28 g)를 첨가하고, 이어서 아세트산 (0.062 mL) 및 3Å 분자체를 첨가하였다. 실온에서 5분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 0 ℃로 냉각시켰다. 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.15 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 용매를 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 정제용 HPLC로 정제하였다 (페노메넥스 제미니 (등록상표), 구배: 0.1 ％ 수성 포름산 중 5→40 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결-건조시켜, 부제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.14 g.
Figure pct01064
실시예 108
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(4-(2-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01065
a) 4-(2-히드록시에톡시)벤즈알데히드
Figure pct01066
2-브로모에탄올 (5.8 mL) 및 탄산칼륨 (11.3 g)을 MeCN (100 mL) 중 4-히드록시벤즈알데히드 (5.0 g)의 용액에 연속적으로 첨가하였다. 생성된 혼합물을 교반하고, 환류 온도에서 아르곤하에 3일 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc (100 mL)와 1 M NaOH 수용액 (100 mL) 사이에 분배하였다. 유기층을 염수 (100 mL)로 세척하였다. 수성층을 합하고, EtOAc (50 mL)로 추출하였다. 유기층을 합하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 6.4 g.
Figure pct01067
b) 2-(4-포르밀페녹시)에틸 메탄술포네이트
Figure pct01068
0 ℃에서 아르곤하에, 메탄술포닐클로라이드 (3.3 mL)를 DCM (30 mL) 중 4-(2-히드록시에톡시)벤즈알데히드 (실시예 108, 단계 a) (6.4 g) 및 트리에틸아민 (6.4 mL)의 용액에 5분에 걸쳐 적가하였다. 생성된 혼합물을 0 ℃에서 10분 동안 교반하고, 이어서 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 염수 (30 mL씩 2회)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 석유 에테르 (40 내지 60 ℃) 중 40→50 ％ EtOAc로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 점성의 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 8.87 g.
Figure pct01069
c) (R)-2-(4-((tert-부톡시카르보닐(2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸)아미노)메틸)페녹시)에틸 메탄술포네이트
Figure pct01070
무수 DMF (40 mL) 중 2-(4-포르밀페녹시)에틸 메탄술포네이트 (실시예 108, 단계 b) (1.7 g), (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (2.0 g) 및 아세트산 (0.44 mL)의 혼합물을 4Å 분자체의 존재하에 실온에서 15분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0 ℃로 냉각시키고, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (2.2 g)를 2분 간격으로 4번으로 나누어 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 디-tert-부틸 디카르보네이트 (1.8 g)를 반응 혼합물에 첨가하고, 이를 2시간 동안 교반하였다. 포화 중탄산나트륨 용액 (100 mL) 및 EtOAc (100 mL)를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 층을 분리하고, 수성층을 EtOAc (4회)로 추출하였다. 합한 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 석유 에테르 (40 내지 60 ℃) 중 0→80 ％ EtOAc로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 2.25 g.
Figure pct01071
d) (R)-tert-부틸 2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸(4-(2-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질)카르바메이트
Figure pct01072
실온에서 아르곤하에, MeCN (1.1 mL) 중 (R)-2-(4-((tert-부톡시카르보닐(2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸)아미노)메틸)페녹시)에틸 메탄술포네이트 (실시예 108, 단계 c) (0.295 g)의 용액을 MeCN (1.1 mL) 중 (2-이소프로필티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 22, 단계 b) (0.150 g) 및 트리에틸아민 (0.11 mL)의 용액에 적가하였다. 생성된 혼합물을 60 ℃에서 아르곤하에 34시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 잔류물을 DCM에 녹이고, 염수 (2회)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 황색 고체를 DCM 중 0→5 ％ MeOH로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 녹색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.135 g.
Figure pct01073
e) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(4-(2-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01074
트리플루오로아세트산 (0.7 mL)을 DCM (1.5 mL) 중 (R)-tert-부틸 2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸(4-(2-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질)카르바메이트 (실시예 108, 단계 d) (0.122 g)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하였다. 톨루엔 (15 mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 MeCN과 함께 2회 공비시켰다. 점성의 황색 잔류물을 HPLC (페노메넥스 제미니 (등록상표), 구배: 0.1 ％ 수성 포름산 중 5→40 ％ 아세토니트릴)로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결 건조시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.052 g.
Figure pct01075
실시예 109
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(9-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)노닐아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01076
a) (9-(9-히드록시노닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct01077
MeCN (3 mL) 중 9-브로모-1-노나놀 (0.316 g)의 용액을 MeCN (7 mL) 중 (2-이소프로필티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 22, 단계 b) (0.40 g) 및 트리에틸아민 (0.395 mL)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60 ℃에서 아르곤하에 16시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 잔류물을 DCM에 녹이고, 염수 (2회)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 오렌지색 고체를 DCM 중 0→10 ％ MeOH로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.325 g.
Figure pct01078
b) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(9-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)노닐아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01079
0 ℃에서, 트리플루오로아세트산 (0.027 mL)을 DCM (6.3 mL) 중 (9-(9-히드록시노닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 109, 단계 a) (0.16 g)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난 (0.225 g)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 45분 동안 교반하였다. 포화 티오황산나트륨 용액 (6 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (6 mL) 및 EtOAc (36 mL)를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 층을 분리하고, 수성층을 EtOAc (40 mL씩 2회)로 추출하였다. 합한 유기층을 포화 중탄산나트륨 용액 (40 mL)으로 세척하고, 아세트산 (0.067 mL)으로 처리하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 점성의 오렌지색 오일을 무수 MeOH (6.6 mL) 중에 용해시키고, (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.138 g)를 첨가하고, 이어서 아세트산 (0.03 mL) 및 3Å 분자체를 첨가하였다. 실온에서 5분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 0 ℃로 냉각시키고, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.075 g)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반한 후, 추가량의 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.075 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 추가로 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 용매를 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 HPLC (페노메넥스 제미니 (등록상표), 구배: 0.1 ％ 수성 포름산 중 5→40 ％ 아세토니트릴)로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결-건조시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.060 g.
Figure pct01080
실시예 110
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(4-(2-(4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01081
a) (R)-tert-부틸 2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸(4-(2-(4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질)카르바메이트
Figure pct01082
실온에서 아르곤하에, MeCN (2 mL) 중 (R)-2-(4-((tert-부톡시카르보닐(2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸)아미노)메틸)페녹시)에틸 메탄술포네이트 (실시예 108, 단계 c) (0.426 g)의 용액을 MeCN (5 mL) 중 (5-메틸티오펜-2-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 9, 단계 b) (0.154 g) 및 트리에틸아민 (0.15 mL)의 용액에 적가하였다. 생성된 혼합물을 60 ℃에서 아르곤하에 16시간 동안 교반한 후, 80 ℃에서 추가로 3시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 잔류물을 DCM에 녹이고, 염수 및 물 (2회)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 갈색 고체를 DCM 중 0→10 ％ MeOH로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.246 g.
Figure pct01083
b) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(4-(2-(4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01084
트리플루오로아세트산 (0.75 mL)을 DCM (3 mL) 중 (R)-2-(4-((tert-부톡시카르보닐(2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸)아미노)메틸)페녹시)에틸 메탄술포네이트 (실시예 110, 단계 a) (0.243 g)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하였다. 톨루엔 (30 mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 진공하에 증발시켰다 (3회). 잔류물을 HPLC (페노메넥스 제미니 (등록상표), 구배: 0.1 ％ 수성 포름산 중 5→40 ％ 아세토니트릴)로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결 건조시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.65 g.
Figure pct01085
실시예 111
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(9-(4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)노닐아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01086
a) (9-(9-히드록시노닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-메틸티오펜-2-일)메타논
Figure pct01087
MeCN (3 mL) 중 9-브로모-1-노나놀 (0.314 g)의 용액을 MeCN (7 mL) 중 (5-메틸티오펜-2-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 9, 단계 b) (0.263 g) 및 트리에틸아민 (0.261 mL)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60 ℃에서 아르곤하에 16시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 잔류물을 DCM에 녹이고, 염수 (2회)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 백색 고체를 DCM 중 0→10 ％ MeOH로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.352 g.
Figure pct01088
b) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(9-(4-(5-메틸티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)노닐아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01089
0 ℃에서, 트리플루오로아세트산 (0.064 mL)을 DCM (15 mL) 중 (9-(9-히드록시노닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-메틸티오펜-2-일)메타논 (실시예 111, 단계 a) (0.350 g)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난 (0.527 g)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 포화 티오황산나트륨 용액 (14 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (14 mL) 및 EtOAc (30 mL)을 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 층을 분리하고, 수성층을 EtOAc (40 mL씩 2회)로 추출하였다. 합한 유기층을 포화 중탄산나트륨 용액 (40 mL)으로 세척하고, 아세트산 (0.159 mL)으로 처리하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 황색 오일을 무수 MeOH (15.6 mL) 중에 용해시키고, (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.327 g)를 첨가하고, 이어서 아세트산 (0.071 mL) 및 3Å 분자체를 첨가하였다. 실온에서 5분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 0 ℃로 냉각시키고, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.176 g)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 추가량의 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.075 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 17시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 용매를 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 HPLC (페노메넥스 제미니 (등록상표), 구배: 0.1 ％ 수성 포름산 중 5→40 ％ 아세토니트릴)로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결-건조시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.127 g.
Figure pct01090
실시예 112
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(4-(2-(4-(2-페닐티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct01091
a) tert-부틸 4-(2-페닐티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트
Figure pct01092
DMF (11 mL) 중 tert-부틸 1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 히드로클로라이드 (우시 파마테크) (0.60 g)의 용액을 트리에틸아민 (1.1 mL)으로 처리한 후, 2-페닐-1,3-티아졸-4-카르복실산 (0.421 g)에 이어서 O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (1.09 g)로 처리하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 7시간 동안 교반하였다. DMF를 진공하에 제거하였다. 잔류물을 EtOAc (50 mL)에 녹이고, 포화 중탄산나트륨 용액 (30 mL씩 2회), 물 (30 mL) 및 염수 (30 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 갈색 오일을 DCM 중 0→10 ％ MeOH로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 갈색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.857 g.
Figure pct01093
b) (2-페닐티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논
Figure pct01094
트리플루오로아세트산 (3.8 mL)을 DCM (15.2 mL) 중 tert-부틸 4-(2-페닐티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 (실시예 112, 단계 a) (0.85 mg)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 톨루엔 (30 mL)을 첨가하고, 혼합물을 진공하에 증발시켰다. 황색 잔류물을 MeOH 중에 용해시키고, MeOH로 예비-습윤된 SCX 카트리지에 적용하였다. 카트리지를 MeOH로 세척하고, MeOH 중 2 M 암모니아로 용출시켰다. 용리액을 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 갈색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.629 g.
Figure pct01095
c) (R)-tert-부틸 2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸(4-(2-(4-(2-페닐티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질)카르바메이트
Figure pct01096
실온에서 아르곤하에, MeCN (3 mL) 중 (R)-2-(4-((tert-부톡시카르보닐(2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸)아미노)메틸)페녹시)에틸 메탄술포네이트 (실시예 108, 단계 c) (0.619 g)의 용액을 MeCN (7.3 mL) 중 (2-페닐티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 (실시예 112, 단계 b) (0.274 g) 및 트리에틸아민 (0.22 mL)의 용액에 적가하였다. 생성된 혼합물을 80 ℃에서 아르곤하에 16시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 잔류물을 DCM에 녹이고, 염수 및 물로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 석유 에테르 (40 내지 60 ℃) 중 0→70 ％ EtOAc로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.42 g.
Figure pct01097
d) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(4-(2-(4-(2-페닐티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct01098
트리플루오로아세트산 (1.2 mL)을 DCM (4.7 mL) 중 (R)-tert-부틸 2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸(4-(2-(4-(2-페닐티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질)카르바메이트 (실시예 112, 단계 c) (0.415 g)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반하였다. 톨루엔 (40 mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 진공하에 증발시켰다 (2회). 잔류물을 HPLC (페노메넥스 제미니 (등록상표), 구배: 0.1 ％ 수성 포름산 중 5→40 ％ 아세토니트릴)로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결 건조시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.176 g.
Figure pct01099
실시예 113
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(9-(4-(2-페닐티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)노닐아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01100
a) (9-(9-히드록시노닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-페닐티아졸-4-일)메타논
Figure pct01101
MeCN (3 mL) 중 9-브로모-1-노나놀 (0.346 g)의 용액을 MeCN (7 mL) 중 (2-페닐티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 (실시예 112, 단계 b) (0.355 g) 및 트리에틸아민 (0.288 mL)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60 ℃에서 아르곤하에 17시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 잔류물을 DCM에 녹이고, 염수 (2회)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 황색 오일을 DCM 중 0→7 ％ MeOH로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.378 g.
Figure pct01102
b) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(9-(4-(2-페닐티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)노닐아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01103
0 ℃에서, 트리플루오로아세트산 (0.059 mL)을 DCM (14 mL) 중 (9-(9-히드록시노닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-페닐티아졸-4-일)메타논 (실시예 113, 단계 a) (0.373 g)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난 (0.489 g)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 포화 티오황산나트륨 용액 (14 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (14 mL) 및 EtOAc (30 mL)를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 층을 분리하고, 수성층을 EtOAc (30 mL씩 2회)로 추출하였다. 합한 유기층을 아세트산 (0.148 mL)으로 처리하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 황색 오일을 무수 MeOH (15 mL) 중에 용해시키고, (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.303 g)를 첨가하고, 이어서 아세트산 (0.066 mL) 및 3Å 분자체를 첨가하였다. 실온에서 5분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 0 ℃로 냉각시키고, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.163 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 용매를 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 HPLC (페노메넥스 제미니 (등록상표), 구배: 0.1 ％ 수성 포름산 중 5→40 ％ 아세토니트릴)로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결-건조시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.118 g.
Figure pct01104
실시예 114
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(4-(2-(4-(2-이소프로필티아졸-5-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct01105
a) tert-부틸 4-(2-이소프로필티아졸-5-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트
Figure pct01106
DMF (13 mL) 중 tert-부틸 1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 히드로클로라이드 (우시 파마테크) (0.694 g)의 용액을 트리에틸아민 (1.3 mL)으로 처리한 후, 2-이소프로필티아졸-5-카르복실산 (실시예 55, 단계 b) (0.406 g)에 이어서 O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (1.26 g)로 처리하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. DMF를 진공하에 제거하였다. 잔류물을 EtOAc (40 mL)에 녹이고, 포화 중탄산나트륨 용액 (40 mL씩 2회), 물 (40 mL) 및 염수 (40 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 점성의 오렌지색 오일을 DCM 중 0→7 ％ MeOH로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 점성의 오렌지색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.765 g.
Figure pct01107
b) (2-이소프로필티아졸-5-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논
Figure pct01108
트리플루오로아세트산 (3.9 mL)을 DCM (14.8 mL) 중 tert-부틸 4-(2-이소프로필티아졸-5-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-카르복실레이트 (실시예 113, 단계 a) (0.765 g)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 톨루엔 (30 mL)을 첨가하고, 혼합물을 진공하에 증발시켰다. 황색 잔류물을 MeOH 중에 용해시키고, MeOH로 예비-습윤된 SCX 카트리지에 적용하였다. 카트리지를 MeOH로 세척하고, MeOH 중 2 M 암모니아로 용출시켰다. 용리액을 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.552 g.
Figure pct01109
c) (R)-tert-부틸 2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸(4-(2-(4-(2-이소프로필티아졸-5-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질)카르바메이트
Figure pct01110
실온에서 아르곤하에, MeCN (3 mL) 중 (R)-2-(4-((tert-부톡시카르보닐(2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸)아미노)메틸)페녹시)에틸 메탄술포네이트 (실시예 108, 단계 c) (0.575 g)의 용액을 MeCN (7.3 mL) 중 (2-이소프로필티아졸-5-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 (실시예 114, 단계 b) (0.229 g) 및 트리에틸아민 (0.21 mL)의 용액에 적가하였다. 생성된 혼합물을 80 ℃에서 아르곤하에 16시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 잔류물을 DCM (25 mL)에 녹이고, 염수 (20 mL) 및 물 (20 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 DCM 중 0→8 ％ MeOH로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.395 g.
Figure pct01111
d) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(4-(2-(4-(2-이소프로필티아졸-5-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct01112
트리플루오로아세트산 (1.2 mL)을 DCM (4.7 mL) 중 (R)-tert-부틸 2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸(4-(2-(4-(2-이소프로필티아졸-5-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질)카르바메이트 (실시예 114, 단계 c) (0.39 g)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반하였다. 톨루엔 (30 mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 진공하에 증발시켰다 (3회). 잔류물을 HPLC (페노메넥스 제미니 (등록상표), 구배: 0.1 ％ 수성 트리플루오로아세트산 중 5→40 ％ 아세토니트릴)로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결 건조시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.201 g.
Figure pct01113
실시예 115
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(9-(4-(2-이소프로필티아졸-5-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)노닐아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01114
a) (9-(9-히드록시노닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-5-일)메타논
Figure pct01115
MeCN (3.9 mL) 중 9-브로모-1-노나놀 (0.446 g)의 용액을 MeCN (8.6 mL) 중 (2-이소프로필티아졸-5-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 (실시예 114, 단계 b) (0.395 g) 및 트리에틸아민 (0.36 mL)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60 ℃에서 아르곤하에 16시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 잔류물을 DCM (25 mL)에 녹이고, 염수 (20 mL) 및 물 (20 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 DCM 중 0→10 ％ MeOH로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.329 g.
Figure pct01116
b) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(9-(4-(2-이소프로필티아졸-5-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)노닐아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01117
0 ℃에서 아르곤하에, 트리플루오로아세트산 (0.055 mL)을 DCM (13 mL) 중 (9-(9-히드록시노닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-5-일)메타논 (실시예 115, 단계 a) (0.325 g)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난 (0.458 g)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1.5시간 동안 교반하였다. 포화 티오황산나트륨 용액 (14 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (14 mL) 및 EtOAc (28 mL)를 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 층을 분리하고, 수성층을 EtOAc (20 mL씩 2회)로 추출하였다. 합한 유기층을 아세트산 (0.16 mL)으로 처리하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 황색 오일을 무수 MeOH (15 mL) 중에 용해시키고, (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.284 g)를 첨가하고, 이어서 아세트산 (0.062 mL) 및 3Å 분자체를 첨가하였다. 실온에서 5분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 0 ℃로 냉각시키고, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.153 g)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 용매를 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 HPLC (페노메넥스 제미니 (등록상표), 구배: 0.1 ％ 수성 포름산 중 5→40 ％ 아세토니트릴)로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결-건조시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.090 mg.
Figure pct01118
pEC50 및 인성 활성. 내인성 활성을 각 실험에서 포르모테롤에 대해 측정된 최대 활성에 대한 분율로서 표시하였다.
실시예 116 내지 182
Figure pct01119
a) (R)-tert-부틸 3-플루오로-5-((4-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸(2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸)카르바메이트
Figure pct01120
20 ℃에서, 디클로로메탄 (50 mL) 중 2,2,2-트리플루오로-1-(9-(3-플루오로-5-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)에타논 (실시예 41, 단계 c) (0.8 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (0.152 mL)에 이어서 데스-마틴 페리오디난 (1.091 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 20 ℃에서 40분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 수성 티오황산나트륨 (20 mL), 포화 수성 중탄산나트륨 (20 mL) 및 에틸 아세테이트 (30 mL)로 처리하고, 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트 (2회)로 추출하고, 합한 유기물을 수성 중탄산나트륨으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 메탄올 (3 mL) 중에 용해시키고, 아세트산 (0.113 mL)을 함유하는 메탄올 (20 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온, HCl (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.780 g)의 용액에 첨가하였다. 상기 혼합물을 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.186 g)로 처리하고, 20 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 트리에틸아민 (0.69 mL)에 이어서 디-tert 부틸디카르보네이트 (0.689 mL)를 첨가하고, 20 ℃에서 2시간 동안 계속 교반하였다. 용매를 감압하에 제거하고, 잔류물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하였다. 조 생성물을 1 ％ 진한 수성 암모니아를 함유하는 디클로로메탄 중 10 ％ 메탄올로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.7 g.
Figure pct01121
b) (R)-tert-부틸 3-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일메틸)-5-플루오로페네틸(2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸)카르바메이트
Figure pct01122
35 ％ 암모니아 수용액 (15 mL) 중 (R)-tert-부틸 3-플루오로-5-((4-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸(2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸)카르바메이트 (실시예 116 내지 182, 단계 a) (0.7 g)의 용액을 20 ℃에서 40분 동안 방치하였다. 감압하에 반응 혼합물을 초기 부피의 반으로 증발시켰다. 물 (10 mL)을 첨가하고, 상기 용액을 10 g의 C18 실리카 카트리지 (물로 예비-습윤됨)를 통해 통과시켰다. 컬럼을 물 (20 mL)로 플러싱하였다. 이어서, 컬럼을 메탄올 (50 mL)로 플러싱하여, 생성물을 수득하였다. 용매를 감압하에 증발시키고, 잔류물을 아세토니트릴 (2회)과 함께 공비시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.580 g.
Figure pct01123
c) 평형 합성 - 실시예 116 내지 182의 제조
Figure pct01124
NMP (2.4 mL) 중 (R)-tert-부틸 3-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일메틸)-5-플루오로페네틸(2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸)카르바메이트 (실시예 116 내지 182, 단계 b) (496 mg) 및 트리에틸아민 (244 mg)의 용액을 총 부피 30 uL의 분취액으로 분배하였다. 각각의 분취액에 NMP (80 uL) 중 적절한 산 (0.01 mmol)의 용액을 첨가하고, 이어서 NMP (30 uL) 중 HATU (4.9 mg)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18시간 동안 방치하였다. 아세토니트릴 (800 uL)을 첨가하고, 용액을 '토식 (Tosic)-65' 수지 (350 mg)를 통해 통과시켰다. 수지를 아세토니트릴 (800 uL)로 세척하고, 합한 세척액을 수집하고, 다시 '토식-65' 수지를 통해 통과시켰다. 이어서, 수지를 아세토니트릴 (3 mL)로 세척하였다. 메탄올 중 암모니아의 용액 (3.5 M 용액 2.5 mL)을 수지를 통해 통과시키고, 생성된 세척액을 질소 가스 스트림하에 증발시켰다. 잔류물을 포름산 (250 uL) 중에 용해시키고, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 방치하였다. 아세토니트릴 (600 uL)을 첨가하고, 용액을 '토식-65' 수지 (350 mg)를 통해 통과시켰다. 수지를 아세토니트릴 (800 uL)로 세척하고, 합한 세척액을 수집하고, '토식-65' 수지를 통해 다시 통과시켰다. 이어서, 수지를 아세토니트릴 (3 mL)로 세척하였다. 메탄올 중 암모니아의 용액 (3.5 M 용액 2.5 mL)을 수지를 통해 통과시키고, 생성된 세척액을 질소 가스 스트림하에 증발시켰다. DMSO (200 uL)를 잔류물에 첨가하고, 정제를 위해 아세토니트릴 대 수성 0.1 ％ TFA의 초점 구배 용리를 사용하여 '선파이어' 정제용 C18 컬럼 (19x50 mm)을 통해 생성된 용액을 통과시켰다. 생성물을 함유하는 분획을 증발시켜, 표제 화합물을 수득하였다.
Figure pct01125
Figure pct01126
Figure pct01127
Figure pct01128
Figure pct01129
Figure pct01130
Figure pct01131
Figure pct01132
Figure pct01133
Figure pct01134
Figure pct01135
Figure pct01136
Figure pct01137
Figure pct01138
Figure pct01139
분석용 HPLC 조건: 선파이어 (상표명) C18 2.5 ㎛ 4.6x30 mm 컬럼 (워터스 코포레이션), MeCN/0.1 ％ 수성 TFA, 구배 5→95 ％ MeCN).
Figure pct01140
실시예 183 내지 222
Figure pct01141
a) 9-브로모노나날
Figure pct01142
실온에서 아르곤하에, N-에틸디이소프로필아민 (23 mL) 및 DMSO (9.7 mL)를 무수 DCM (230 mL) 중 9-브로모-1-노나놀 (10.0 g)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 -15 ℃로 냉각시키고, 황 트리옥사이드-피리딘 복합체 (21.4 g)를 5분 간격으로 4번에 나누어 첨가하였다. 첨가 완료 후, 혼합물을 15분 동안 교반하고, 이어서 물 (200 mL)을 첨가하고, 층을 분리하였다. 유기층을 1 M 중황산나트륨 수용액 (250 mL씩 4회), 포화 수성 탄산칼륨 (250 mL) 및 염수 (200 mL씩 2회)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 오렌지색 오일로서 수득하였다. 수득량 9.02 g.
Figure pct01143
b) (R)-tert-부틸 9-브로모노닐(2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸)카르바메이트
Figure pct01144
무수 DMF (91 mL) 중 9-브로모노나날 (실시예 183 내지 222, 단계 a) (3.48 g), (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1의 부분 d) (4.54 g) 및 아세트산 (0.99 mL)의 용액을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0 ℃로 냉각시키고, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (5.00 g)를 2분 간격으로 4번에 나누어 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0 ℃에서 5분 동안 교반한 후, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 디-tert-부틸 디카르보네이트 (4.12 g)를 반응 혼합물에 첨가하고, 이를 1.5시간 동안 교반한 후, 0 ℃로 냉각시키고, 포화 수성 중탄산나트륨 (220 mL)으로 켄칭하였다. 에틸 아세테이트 (200 mL)를 첨가하고, 혼합물을 15분 동안 격렬하게 교반하였다. 층을 분리하고, 수성층을 에틸 아세테이트 (150 mL씩 3회)로 추출하였다. 합한 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 0→70 ％ EtOAc/석유 에테르 (40/60 ℃)로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 1.68 g.
Figure pct01145
c) (R)-tert-부틸 2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸(9-(4-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)노닐)카르바메이트
Figure pct01146
MeCN (8 mL) 중 (R)-tert-부틸 9-브로모노닐(2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸)카르바메이트 (실시예 183 내지 222, 단계 b) (1.68 g)의 용액을 MeCN (8 mL) 중 2,2,2-트리플루오로-1-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)에타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 12, 단계 d) (1.18 g) 및 트리에틸아민 (0.81 mL)의 용액에 적가하였다. 생성된 혼합물을 80 ℃에서 18시간 동안 교반하였다. 반응물을 실온으로 냉각시키고, 용매를 진공하에 제거하였다. 갈색 잔류물을 DCM에 녹이고, 유기층을 물 (2회) 및 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 갈색 포말을 0→10 ％ MeOH/DCM으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 500 mg.
Figure pct01147
d) (R)-tert-부틸 9-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)노닐(2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸)카르바메이트
Figure pct01148
물 (24 mL) 중 탄산칼륨 (165 mg)의 용액을 MeOH (24 mL) 중 (R)-tert-부틸 2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸(9-(4-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)노닐)카르바메이트 (실시예 183 내지 222, 단계 c) (495 mg)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 30 ℃에서 유지하면서 메탄올을 질소 스트림하에 증발시켜 제거하였다. 물 (20 mL) 및 염수 (80 mL)를 첨가하고, 혼합물을 EtOAc (60 mL씩 5회)로 추출하였다. 합한 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 갈색 고체 잔류물을 0→20 ％ (MeOH 중 2 M NH3)/DCM으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. 수득량 323 mg.
Figure pct01149
e) 평형 화학 - 실시예 183 내지 222의 제조
Figure pct01150
NMP (1.14 mL) 중 (R)-tert-부틸 9-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)노닐(2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸)카르바메이트 (292 mg) 및 트리에틸아민 (실시예 183 내지 222, 단계 d) (0.20 mL)의 용액을 총 부피 30 uL의 분취액으로 분배하였다. 각각의 분취액에 NMP (80 uL) 중 적절한 산 (0.01 mmol)의 용액을 첨가하고, 이어서 NMP (30 uL) 중 HATU (4.0 mg)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 방치하였다. 아세토니트릴 (800 uL)을 첨가하고, 용액을 '토식-65' 수지 (350 mg)를 통해 통과시켰다. 수지를 아세토니트릴 (800 uL)로 세척하고, 합한 세척액을 수집하고, '토식-65' 수지를 통해 다시 통과시켰다. 이어서, 수지를 아세토니트릴 (3 mL)로 세척하였다. 암모니아 (메탄올 중 3.5 M, 2.4 mL)를 수지를 통해 통과시키고, 생성된 세척액을 질소 가스 스트림하에 증발시켰다. 잔류물을 포름산 (250 uL) 중에 용해시키고, 혼합물을 실온에서 밤새 방치하였다. 아세토니트릴 (600 uL)을 첨가하고, 용액을 '토식-65' 수지 (350 mg)를 통해 통과시켰다. 수지를 아세토니트릴 (800 uL)로 세척하고, 합한 세척액을 수집하고, '토식-65' 수지를 통해 다시 통과시켰다. 이어서, 수지를 아세토니트릴 (3 mL)로 세척하였다. 암모니아 (메탄올 중 3.5 M, 2.4 mL)를 수지를 통해 통과시키고, 생성된 세척액을 질소 가스 스트림하에 증발시켰다. DMSO (360 uL)를 잔류물에 첨가하고, 정제를 위해 아세토니트릴 대 수성 0.1 ％ TFA의 초점 구배 용리를 사용하여 '선파이어' 정제용 C18 컬럼 (19x50 mm)을 통해 생성된 용액을 통과시켰다. 생성물을 함유하는 분획을 증발시켜, 표제 화합물을 수득하였다.
Figure pct01151
Figure pct01152
Figure pct01153
Figure pct01154
Figure pct01155
Figure pct01156
Figure pct01157
Figure pct01158
* 분석용 HPLC 조건: 선파이어 (상표명) C18 2.5 ㎛ 4.6x30 mm 컬럼 (워터스 코포레이션), MeCN/0.1 ％ 수성 TFA, 구배 5→95 ％ MeCN).
Figure pct01159
실시예 223 내지 263
Figure pct01160
a) (R)-tert-부틸 2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸(4-(2-(4-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질)카르바메이트
Figure pct01161
실온에서 아르곤하에, MeCN (8.5 mL) 중 (R)-2-(4-((tert-부톡시카르보닐(2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸)아미노)메틸)페녹시)에틸 메탄술포네이트 (실시예 108, 단계 c) (2.20 g)의 용액을 MeCN (8.5 mL) 중 2,2,2-트리플루오로-1-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)에타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 12, 단계 d) (1.18 g) 및 트리에틸아민 (0.81 mL)의 용액에 적가하였다. 생성된 혼합물을 60 ℃에서 아르곤하에 25시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 용매를 진공하에 제거하였다. 갈색 잔류물을 DCM (35 mL)에 녹이고, 물 (35 mL씩 2회)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 황색 고체를 0→10 ％ MeOH/DCM으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. 수득량 729 mg.
Figure pct01162
b) (R)-tert-부틸 4-(2-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질(2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸)카르바메이트
Figure pct01163
물 (35 mL) 중 탄산칼륨 (240 mg)의 용액을 MeOH (35 mL) 중 (R)-tert-부틸 2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸(4-(2-(4-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질)카르바메이트 (실시예 223 내지 263, 단계 a) (725 mg)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 25 ℃에서 유지하면서 메탄올을 질소 스트림하에 증발시켜 제거하였다. 물 (20 mL) 및 염수 (30 mL)를 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트 (30 mL씩 7회)로 추출하였다. 합한 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 0→20 ％ (MeOH 중 2 M NH3)/DCM으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 385 mg.
Figure pct01164
c) 평형 화학 - 실시예 223 내지 263의 제조
Figure pct01165
NMP (1.24 mL) 중 (R)-tert-부틸 4-(2-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)벤질(2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸)카르바메이트 (실시예 223 내지 263, 단계 b)(297 mg) 및 트리에틸아민 (0.20 mL)의 용액을 총 부피 30 uL의 분취액으로 분배하였다. 각각의 분취액에 NMP (80 uL) 중 적절한 산 (0.01 mmol)의 용액을 첨가하고, 이어서 NMP (30 uL) 중 HATU (4.0 mg)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 방치하였다. 아세토니트릴 (800 uL)을 첨가하고, 용액을 '토식-65' 수지 (350 mg)를 통해 통과시켰다. 수지를 아세토니트릴 (800 uL)로 세척하고, 합한 세척액을 수집하고, '토식-65' 수지를 통해 다시 통과시켰다. 이어서, 수지를 아세토니트릴 (3 mL)로 세척하였다. 암모니아 (메탄올 중 3.5 M, 2.4 mL)를 수지를 통해 통과시키고, 생성된 세척액을 질소 가스 스트림하에 증발시켰다. 잔류물을 포름산 (250 uL) 중에 용해시키고, 혼합물을 실온에서 밤새 방치하였다. 아세토니트릴 (600 uL)을 첨가하고, 용액을 '토식-65' 수지 (350 mg)를 통해 통과시켰다. 수지를 아세토니트릴 (800 uL)로 세척하고, 합한 세척액을 수집하고, '토식-65' 수지를 통해 다시 통과시켰다. 이어서, 수지를 아세토니트릴 (3 mL)로 세척하였다. 암모니아 (메탄올 중 3.5 M, 2.4 mL)를 수지를 통해 통과시키고, 생성된 세척액을 질소 가스 스트림하에 증발시켰다. DMSO (360 uL)를 잔류물에 첨가하고, 정제를 위해 아세토니트릴 대 수성 0.1 ％ TFA의 초점 구배 용리를 사용하여 '선파이어' 정제용 C18 컬럼 (19x50 mm)을 통해 생성된 용액을 통과시켰다. 생성물을 함유하는 분획을 증발시켜, 표제 화합물을 수득하였다.
Figure pct01166
Figure pct01167
Figure pct01168
Figure pct01169
Figure pct01170
Figure pct01171
Figure pct01172
Figure pct01173
Figure pct01174
* 분석용 HPLC 조건: 선파이어 (상표명) C18 2.5 ㎛ 4.6x30 mm 컬럼 (워터스 코포레이션), MeCN/0.1 ％ 수성 TFA, 구배 5→95 ％ MeCN.
Figure pct01175
1개의 교환가능한 H가 관측되지 않음.
실시예 264
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(2-(5-((4-(5-이소프로필티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)티오펜-3-일)에틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct01176
a) 2,2,2-트리플루오로-1-(9-((4-(2-히드록시에틸)티오펜-2-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)에타논
Figure pct01177
TBAF (THF 중 1 M, 2.96 mL)를 THF (5 mL) 중 1-(9-((4-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-2-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)-2,2,2-트리플루오로에타논 (실시예 43, 단계 a) (1.500 g, 2.96 mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 1시간 후, 용액을 검으로 증발시켰다. 에틸 아세테이트:트리에틸아민 (10:1)으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 0.25 g.
Figure pct01178
b) 2-(5-((4-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)티오펜-3-일)아세트알데히드
Figure pct01179
부제 화합물을, 2,2,2-트리플루오로-1-(9-((4-(2-히드록시에틸)티오펜-2-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)에타논 (0.15 g) (실시예 264, 단계 a)를 사용하여 실시예 43의 단계 (e)에 기재한 것과 유사한 방법을 이용함으로써 제조하였다. 수득량 0.15 g.
Figure pct01180
c) (R)-tert-부틸 2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸(2-(5-((4-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)티오펜-3-일)에틸)카르바메이트
Figure pct01181
(R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온, HCl (1.020 g) (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d)을 MeOH (20 mL) 중 2-(5-((4-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)티오펜-3-일)아세트알데히드 (실시예 264, 단계 b) (0.9 g) 및 아세트산 (0.198 mL)의 교반 용액에 첨가하였다. 2분 후, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.290 g)를 첨가하였다. 2시간 후, 트리에틸아민 (1.1 mL)에 이어서 BOC-무수물 (0.845 g)을 첨가하였다. 1시간 후, 추가의 BOC 무수물 (0.4 g) 및 트리에틸아민 (0.5 mL)을 첨가하였다. 2시간 후, 용액을 약 5 mL로 농축시키고, 이어서 에틸 아세테이트와 포화 염수 사이에 분배하였다. 에틸 아세테이트 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 메탄올:디클로로메탄:880 암모니아 (10:90:1)로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 0.32 g.
Figure pct01182
d) (R)-tert-부틸 2-(5-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일메틸)티오펜-3-일)에틸(2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸)카르바메이트
Figure pct01183
35 ％ 수성 암모니아 (5 mL)를 (R)-tert-부틸 2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸(2-(5-((4-(2,2,2-트리플루오로아세틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)티오펜-3-일)에틸)카르바메이트 (실시예 264, 단계 c) (0.2 g)에 첨가하였다. 20 ℃에서 40분 후, 용액을 약 1 mL로 농축시키고, 슬러리를 C18 (10 g) 카트리지에 첨가하고, 물 (20 mL)로 세척하고, 이어서 생성물을 메탄올로 용출시켰다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켰다. 생성된 고체를 아세토니트릴 중에 용해시키고, 진공하에 증발시켰다. 수득량 0.11 g.
Figure pct01184
e) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(2-(5-((4-(5-이소프로필티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)티오펜-3-일)에틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct01185
HATU (0.075 g)를 DMF (2 mL) 중 (R)-tert-부틸 2-(5-(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일메틸)티오펜-3-일)에틸(2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸)카르바메이트 (실시예 264, 단계 d) (0.1 g), 5-이소프로필티오펜-3-카르복실산 (0.028 g) 및 트리에틸아민 (0.092 mL)의 교반 용액에 첨가하였다. 1시간 후, 반응 혼합물을 물과 에틸 아세테이트 사이에 분배하였다. 에틸 아세테이트 층을 물 (2회) 및 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 생성된 검을 포름산 (2 mL) 중에 용해시켰다. 16시간 후, 용액을 진공하에 증발시켰다. 아세토니트릴을 첨가하고, 혼합물을 진공하에 증발시켰다 (2회). 톨루엔을 첨가하고, 혼합물을 진공하에 증발시켰다. 혼합물을 메탄올 중에 용해시키고, 여과하고, 정제용 HPLC (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→40 ％ 아세토니트릴)로 정제하였다. 순수한 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켰다. 아세토니트릴 (200 mL)을 첨가하고, 용액을 진공하에 검으로 증발시켰다. 상기 방법을 2회 반복하였다. 디에틸 에테르를 첨가하고, 표제 화합물을 고체로서 수집하였다. 수득량 0.05 g.
Figure pct01186
실시예 265
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(3-((4-(2-(펜탄-3-일)티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct01187
a) (9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-(펜탄-3-일)티아졸-4-일)메타논
Figure pct01188
부제 화합물을, 2-(펜탄-3-일)티아졸-4-카르복실산 (0.12 g) (실시예 71, 단계 d)을 사용하여 실시예 82의 단계 (b)에 기재한 것과 유사한 방법을 이용함으로써 제조하였다. 수득량 0.18 g.
Figure pct01189
b) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(3-((4-(2-(펜탄-3-일)티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct01190
표제 화합물을, (9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-(펜탄-3-일)티아졸-4-일)메타논 (0.18 g) (실시예 265, 단계 a)을 사용하여 실시예 82의 단계 (c)에 기재한 것과 유사한 방법을 이용함으로써 제조하였다. 조 알데히드를 메탄올 보다는 DCM 중에 용해시켰다. 수득량 0.09 g.
Figure pct01191
실시예 266
(R)-7-(2-(3-((4-(벤조푸란-5-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세트산
Figure pct01192
a) 벤조푸란-5-일(9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논
Figure pct01193
부제 화합물을, 벤조푸란-5-카르복실산 (0.1 g)을 사용하여 실시예 82의 단계 (b)에 기재한 것과 유사한 방법을 이용함으로써 제조하였다. 수득량 0.16 g.
Figure pct01194
b) (R)-7-(2-(3-((4-(벤조푸란-5-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세트산
Figure pct01195
표제 화합물을, 벤조푸란-5-일(9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 (0.15 g) (실시예 266, 단계 a)을 사용하여 실시예 82의 단계 (c)에 기재한 것과 유사한 방법을 이용함으로써 제조하였다. 조 알데히드를 메탄올 보다는 DCM 중에 용해시켰다. 수득량 0.07 g.
Figure pct01196
실시예 267
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(3-((4-(5-프로필티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct01197
a) (9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-프로필티오펜-3-일)메타논
Figure pct01198
부제 화합물을, 5-프로필티오펜-3-카르복실산 (0.1 g)을 사용하여 실시예 82의 단계 (b)에 기재한 것과 유사한 방법을 이용함으로써 제조하였다. 수득량 0.15 g.
Figure pct01199
b) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(3-((4-(5-프로필티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct01200
표제 화합물을, (9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-프로필티오펜-3-일)메타논 (0.15 g) (실시예 267, 단계 a)을 사용하여 실시예 82의 단계 (c)에 기재한 것과 유사한 방법을 이용함으로써 제조하였다. 조 알데히드를 메탄올 보다는 DCM 중에 용해시켰다. 수득량 0.9 g.
Figure pct01201
실시예 268
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(3-((4-(5-이소프로필티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct01202
a) (9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-이소프로필티오펜-2-일)메타논
Figure pct01203
부제 화합물을, 5-이소프로필티오펜-2-카르복실산 (0.1 g)을 사용하여 실시예 82의 단계 (b)에 기재된 것과 유사한 방법을 이용함으로써 제조하였다. 수득량 0.18 g.
Figure pct01204
b) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(3-((4-(5-이소프로필티오펜-2-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct01205
표제 화합물을, (9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-이소프로필티오펜-2-일)메타논 (0.18 g) (실시예 268, 단계 a)을 사용하여 실시예 82의 단계 (c)에 기재된 것과 유사한 방법을 이용함으로써 제조하였다. 조 알데히드를 메탄올 보다는 DCM 중에 용해시켰다. 수득량 0.09 g
Figure pct01206
실시예 269
(R)-7-(2-(2,3-디플루오로-4-(2-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)에톡시)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct01207
표제 화합물을, (9-(2-(2,3-디플루오로-4-(2-히드록시에틸)페녹시)에틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (0.22 g) (실시예 77, 단계 e)을 사용하여 실시예 82의 단계 (c)에 기재된 것과 유사한 방법을 이용함으로써 제조하였다. 조 알데히드를 메탄올 보다는 DCM 중에 용해시켰다. 수득량 0.13 g.
Figure pct01208
실시예 270
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)-2-(트리플루오로메틸)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct01209
a) 2-(5-(브로모메틸)-2-(트리플루오로메틸)페닐)에탄올
Figure pct01210
벤조일 퍼옥사이드 (0.085 g)를 클로로벤젠 (18 mL) 중 2-(5-메틸-2-(트리플루오로메틸)페닐)아세트산 (1.12 g) 및 N-브로모숙신이미드 (1.101 g)의 현탁액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 100 ℃에서 질소하에 80분 동안 가열한 후, 냉각시켰다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 3회, 염수로 1회 세척한 후, 건조시키고 (MgSO4), 여과하고, 진공하에 농축시켜, 황색 오일을 수득하였다. 오일을 테트라히드로푸란 (11 mL) 중에 용해시키고, THF 중 보란-메틸 술파이드 복합체의 2몰 용액 (5.1 mL)으로 2분에 걸쳐 적가 처리하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 다음, 얼음-물 중에서 냉각시키고, 메탄올을 첨가하여 켄칭하였다. 발포성 혼합물을 냉각 배스로부터 꺼내고, 실온에서 70분 동안 교반한 후, 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 상에서 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 (이소헥산 중 15 ％ 에틸 아세테이트로 용출), 조 생성물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.919 g.
b) (9-(3-(2-히드록시에틸)-4-(트리플루오로메틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct01211
부제 화합물을, 아세토니트릴 중 2-(5-(브로모메틸)-2-(트리플루오로메틸)페닐)에탄올 (0.38 g) (실시예 270 단계 a)의 용액을 사용하여 실시예 6의 단계 (b)에 기재된 것과 유사한 방법을 이용함으로써 제조하고, 이를 (2-이소프로필티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 22의 단계 b)에 30분에 걸쳐 적가하였다. 에틸 아세테이트 중 5 ％ 트리에틸아민으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 수득량 0.32 g.
Figure pct01212
c) 2-(5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)-2-(트리플루오로메틸)페닐)아세트알데히드
Figure pct01213
부제 화합물을, (9-(3-(2-히드록시에틸)-4-(트리플루오로메틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (0.32 g) (실시예 270, 단계 b)를 사용하여 실시예 16의 단계 c)에 기재된 것과 유사한 방법을 이용함으로써 제조하였다. 데스-마틴 페리오디난을 첨가한 후, 혼합물을 90분 동안 교반하였다. 수득량 0.38 g.
d) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)-2-(트리플루오로메틸)페네틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct01214
표제 화합물을, 메탄올 (3 mL) 중 2-(5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)-2-(트리플루오로메틸)페닐)아세트알데히드 (0.3 g) (실시예 270, 단계 c)의 용액을 사용하여 실시예 18의 단계 g)에 기재된 것과 유사한 방법을 이용함으로써 제조하였다. 나트륨 시아노보로하이드라이드를 첨가한 후, 혼합물을 실온에서 3.75시간 동안 교반하였다. 용액을 약 3 mL의 부피로 농축시키고, THF로 희석하고, 염수와 포화 수성 중탄산나트륨의 혼합물로 세척하였다. 유기상을 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 아세토니트릴로부터 2회 공동-증발시킨 후, 아세토니트릴:물 (1:1) 중에 용해시키고, 여과하고, 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어, 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→50 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 농축시키고, 아세토니트릴로부터 3회 공동-증발시켜, 무색 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 디에틸 에테르 중에서 분쇄하여, 고체를 수득하였고, 이를 여과에 의해 제거하고, 디에틸 에테르로 세척하고, 실온에서 진공하에 건조시켜, 생성물 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.115 g.
Figure pct01215
실시예 271
(R)-7-(2-(3-((2,2-디메틸-4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct01216
a) 1-벤질-4-((2-메틸알릴아미노)메틸)피페리딘-4-올
Figure pct01217
에탄올 (30 mL) 중 6-벤질-1-옥사-6-아자스피로[2.5]옥탄 (2 g) 및 2-메틸프로프-2-엔-1-아민 HCl (2 g) 및 후니그 염기 (Hunig's Base) (3.44 mL)의 혼합물을 70 ℃에서 18시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 DCM과 염수 사이에 분배하고, 수성층을 신선한 DCM으로 재추출하고, 합한 유기물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 2.70 g.
Figure pct01218
b) tert-부틸 9-벤질-2,2-디메틸-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-카르복실레이트
Figure pct01219
진한 황산 (12 ml)을 1-벤질-4-((2-메틸알릴아미노)메틸)피페리딘-4-올 (실시예 271, 단계 a) (2.2 g)에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 방치하였다. 반응 혼합물을 얼음/물 (100 mL)로 처리하고, 이어서 혼합물이 염기성으로 될 때까지 고체 중탄산나트륨으로 조금씩 처리하였다. 아세토니트릴 (50 mL)에 이어서 BOC-무수물 (1.925 g)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 (2회)로 추출하고, 합한 유기물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 디클로로메탄 중 1 ％ 메탄올 → 디클로로메탄 (1 ％ 트리에틸아민 함유) 중 1 ％ 메탄올로 용출시키는 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.8 g.
Figure pct01220
c) tert-부틸 2,2-디메틸-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-카르복실레이트
Figure pct01221
에탄올 (50 mL) 및 탄소상 10 ％ 팔라듐 (0.5 g) 중에 용해된 tert-부틸 9-벤질-2,2-디메틸-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-카르복실레이트 (실시예 271, 단계 b) (0.8 g)의 혼합물을 암모늄 포르메이트 (0.8 g)로 처리하고, 반응 혼합물을 환류 온도에서 30분 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 규조토를 통해 여과하였다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 아세토니트릴 (2회)과 함께 공비시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.55 g.
Figure pct01222
d) tert-부틸 9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-2,2-디메틸-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-카르복실레이트
Figure pct01223
2-(3-(브로모메틸)페닐)에탄올 (0.416 g)을 아세토니트릴 (20 mL) 중 tert-부틸 2,2-디메틸-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-카르복실레이트 (실시예 271, 단계 c) (0.55 g) 및 트리에틸아민 (0.809 mL)의 용액에 1시간에 걸쳐 조금씩 첨가하였다. 혼합물을 20 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 증발시키고, 잔류물을 포화 중탄산나트륨 용액과 DCM 사이에 분배하고, 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 디클로로메탄 (1 ％ 트리에틸아민 함유) 중 2 ％ 메탄올로 용출시키는 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.78 g.
Figure pct01224
e) 2-(3-((2,2-디메틸-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)에탄올
Figure pct01225
트리플루오로아세트산 (5 mL)을 DCM (20 mL) 중 tert-부틸 9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-2,2-디메틸-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-카르복실레이트 (실시예 271, 단계 d) (0.78 g)의 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 20 ℃에서 30분 동안 방치하였다. 톨루엔 (40 mL)을 첨가하고, 용매를 감압하에 증발시키고, 잔류물을 아세토니트릴 (2회)과 함께 공비시켰다. 잔류물을 물 (30 mL) 중에 용해시키고, 에틸 아세테이트로 세척하고, 고체 탄산나트륨을 첨가하여 수성층을 염기성화시키고, 20 ℃에서 30분 동안 교반하였다. 이어서, 수성 혼합물을 DCM (6회)으로 추출하고, 합한 DCM 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.4 g.
Figure pct01226
f) (9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-2,2-디메틸-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논
Figure pct01227
부제 화합물을, 2-(3-((2,2-디메틸-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)에탄올 (0.2 g) (실시예 271, 단계 e) 및 2-메틸티아졸-4-카르복실산 (0.09 g)을 사용하여 실시예 22의 단계 (a)에 기재된 것과 유사한 방법을 이용함으로써 제조하였다. 반응 혼합물을 18시간 동안 교반하였고, 크로마토그래피에 대한 용리 용매는 디클로로메탄 (1 ％ 트리에틸아민 함유) 중 2 ％ 메탄올이었다. 수득량 0.16 g
Figure pct01228
g) (R)-7-(2-(3-((2,2-디메틸-4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct01229
표제 화합물을, (9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-2,2-디메틸-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논 (0.15 g) (실시예 271, 단계 f)을 사용하여 실시예 22의 단계 (d)에 기재된 것과 유사한 방법을 이용함으로써 제조하였다. 나트륨 시아노보로하이드라이드를 첨가한 후, 혼합물을 3시간 동안 교반하였고, THF 대신에 2-메틸테트라히드로푸란을 첨가하였다. 수득량 0.12 g.
Figure pct01230
실시예 272
(R)-5-(2-(3-((4-(5-에틸티오펜-3-카르보닐)-2,2-디메틸-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct01231
a) (5-에틸티오펜-3-일)(9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-2,2-디메틸-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논
Figure pct01232
부제 화합물을, 2-(3-((2,2-디메틸-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)에탄올 (0.2 g) (실시예 271, 단계 e) 및 5-에틸티오펜-3-카르복실산을 사용하여 실시예 271의 단계 (f)에 기재된 것과 유사한 방법을 이용함으로써 제조하였다. 수득량 0.22 g.
Figure pct01233
b) (R)-5-(2-(3-((4-(5-에틸티오펜-3-카르보닐)-2,2-디메틸-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)-1-히드록시에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct01234
표제 화합물을, (5-에틸티오펜-3-일)(9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-2,2-디메틸-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 (0.22 g) (실시예 272, 단계 a)을 사용하여 실시예 23에 기재된 것과 유사한 방법을 이용함으로써 제조하였다. 단계 a)에서 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드를 첨가한 후, 혼합물을 3시간 동안 교반하였다. 수득량 0.085 g.
Figure pct01235
실시예 273
(R)-8-히드록시-5-(1-히드록시-2-(5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)-2-(트리플루오로메틸)페네틸아미노)에틸)퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct01236
메탄올 (2 mL) 중 (R)-5-(2-아미노-1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (0.15 g) (WO2004106333)의 용액을 아세트산 (0.021 mL)으로 처리하고, 10분 동안 교반하였다. 이어서, 메탄올 (3 mL) 중 2-(5-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)-2-(트리플루오로메틸)페닐)아세트알데히드 (실시예 270, 단계 c) (0.190 g)의 용액을 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반한 후, 얼음-물 중에서 냉각시키고, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.038 g)로 처리하였다. 냉각 배스를 제거하고, 혼합물을 실온에서 2.75시간 동안 교반하였다. 용액을 약 3 mL의 부피로 농축시키고, THF (20 mL)로 희석하고, 염수 (10 mL)와 포화 수성 중탄산나트륨 (1 mL)의 혼합물로 세척하였다. 유기상을 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 아세토니트릴로부터 2회 공동-증발시키고, THF (10 mL) 중에 부분적으로 용해시키고, 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (0.12 mL)로 처리하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 진공하에 농축시키고, 잔류물을 아세토니트릴:물 (3:2, 10 mL) 중에 용해시키고, 여과하고, 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어, 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→50 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 진공하에 농축시키고, 아세토니트릴로부터 3회 공동-증발시켜, 무색 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 디에틸 에테르 중에서 분쇄하여, 고체를 수득하였고, 이를 여과에 의해 수집하고, 디에틸 에테르로 세척하고, 실온에서 진공하에 건조시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.133 g.
Figure pct01237
실시예 274
(R)-8-히드록시-5-(1-히드록시-2-(3-((4-(2-(펜탄-3-일)티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct01238
a) 2-(3-((4-(2-(펜탄-3-일)티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)아세트알데히드
Figure pct01239
부제 화합물을, (9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-(펜탄-3-일)티아졸-4-일)메타논 (0.16 g) (실시예 265, 단계 a)을 사용하여 실시예 16의 단계 c)에 기재된 것과 유사한 방법을 이용함으로써 제조하였다. 수득량 0.24 g.
Figure pct01240
b) (R)-8-히드록시-5-(1-히드록시-2-(3-((4-(2-(펜탄-3-일)티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네틸아미노)에틸)퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct01241
표제 화합물을, 2-(3-((4-(2-(펜탄-3-일)티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)아세트알데히드 (실시예 274, 단계 a)를 사용하여 실시예 273에 기재된 것과 유사한 방법을 이용함으로써 제조하였다. 수득량 0.097 g.
Figure pct01242
실시예 275
(R)-8-히드록시-5-(1-히드록시-2-(1-(3-((4-(5-이소프로필티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)-2-메틸프로판-2-일아미노)에틸)퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct01243
a) 3-(2-(tert-부톡시카르보닐아미노)-2-메틸프로필)벤조산
Figure pct01244
부제 화합물을, 메틸 3-(2-(tert-부톡시카르보닐아미노)-2-메틸프로필)벤조에이트를 사용하여 실시예 53의 단계 b)에 기재된 것과 유사한 방법을 이용함으로써 제조하였다. 반응 혼합물을 20 ℃에서 18시간 동안, 이어서 40 ℃에서 10시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물과 디에틸 에테르 사이에 분배하였고, 최종 분쇄는 필요하지 않았다.
Figure pct01245
b) tert-부틸 1-(3-(히드록시메틸)페닐)-2-메틸프로판-2-일카르바메이트
Figure pct01246
부제 화합물을, 3-(2-(tert-부톡시카르보닐아미노)-2-메틸프로필)벤조산 (2.68 g)을 사용하여 실시예 16의 단계 a)에 기재된 것과 유사한 방법을 이용함으로써 제조하였다. 첨가하는 동안 반응 혼합물을 얼음 배스에서 냉각시킨 후, 20 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 수득량 2.5 g.
Figure pct01247
c) (3-(2-아미노-2-메틸프로필)페닐)메탄올
Figure pct01248
트리플루오로아세트산 (5 mL)을 DCM (20 mL) 중 tert-부틸 1-(3-(히드록시메틸)페닐)-2-메틸프로판-2-일카르바메이트 (실시예 275, 단계 b) (0.7 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 용액을 20 ℃에서 30분 동안 방치하였다. 톨루엔 (40 mL)을 첨가하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 DCM과 1 M 수성 수산화나트륨 사이에 분배하고, 수성층을 DCM (2회)으로 추출하였다. 합한 유기물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하여, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.440 g.
Figure pct01249
d) (R)-8-(벤질옥시)-5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(1-(3-(히드록시메틸)페닐)-2-메틸프로판-2-일아미노)에틸)퀴놀린-2(1H)-온
Figure pct01250
아세토니트릴 (3 mL) 중 (R)-8-(벤질옥시)-5-(2-브로모-1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)퀴놀린-2(1H)-온 (0.518 g), (3-(2-아미노-2-메틸프로필)페닐)메탄올 (0.19 g) (실시예 275, 단계 c), 요오드화나트륨 (0.159 g) 및 후니그 염기 (0.555 mL)의 혼합물을 환류 온도에서 질소하에 2일 동안 가열하였다. 추가의 (3-(2-아미노-2-메틸프로필)페닐)메탄올 (0.19 g) 및 후니그 염기 (0.185 mL)를 첨가하고, 환류 온도에서 1일 동안 계속 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하고, 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 디클로로메탄 중 3 ％ 메탄올 및 1 ％ 트리에틸아민으로 용출시키는 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.44 g.
Figure pct01251
e) (R)-5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(1-(3-(히드록시메틸)페닐)-2-메틸프로판-2-일아미노)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온
Figure pct01252
에탄올 (30 mL) 중 (R)-8-(벤질옥시)-5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(1-(3-(히드록시메틸)페닐)-2-메틸프로판-2-일아미노)에틸)퀴놀린-2(1H)-온 (실시예 275, 단계 d) (0.44 g) 및 탄소상 팔라듐 (10 ％) (80 mg)의 혼합물을 5 bar의 수소압하에 3시간 동안 격렬하게 교반하였다. 촉매를 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.37 g.
Figure pct01253
f) (R)-tert-부틸 5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(1-(3-(히드록시메틸)페닐)-2-메틸프로판-2-일아미노)에틸)-2-옥소-1,2-디히드로퀴놀린-8-일 카르보네이트
Figure pct01254
에탄올 (20 mL) 중 (R)-5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(1-(3-(히드록시메틸)페닐)-2-메틸프로판-2-일아미노)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (실시예 275, 단계 e) (0.37 g), BOC-무수물 (0.163 g) 및 트리에틸아민 (0.208 mL)의 용액을 실온에서 18시간 동안 방치하였다. 용매를 감압하에 제거하여, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.44 g.
Figure pct01255
g) (R)-tert-부틸 5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(1-(3-포르밀페닐)-2-메틸프로판-2-일아미노)에틸)-2-옥소-1,2-디히드로퀴놀린-8-일 카르보네이트
Figure pct01256
이산화망간 (0.6 g)을 디클로로메탄 (30 mL) 중 (R)-tert-부틸 5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(1-(3-(히드록시메틸)페닐)-2-메틸프로판-2-일아미노)에틸)-2-옥소-1,2-디히드로퀴놀린-8-일 카르보네이트 (실시예 275, 단계 f) (0.44 g)의 용액에 첨가하고, 혼합물을 20 ℃에서 3시간 동안 격렬하게 교반하였다. 반응 혼합물을 규조토를 통해 여과하고, 용매를 감압하에 제거하여, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.42 g.
Figure pct01257
h) (R)-3-(2-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(8-히드록시-2-옥소-1,2-디히드로퀴놀린-5-일)에틸아미노)-2-메틸프로필)벤즈알데히드
Figure pct01258
메탄올 (15 mL) 중 (R)-tert-부틸 5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(1-(3-포르밀페닐)-2-메틸프로판-2-일아미노)에틸)-2-옥소-1,2-디히드로퀴놀린-8-일 카르보네이트 (실시예 275, 단계 g) (0.42 g)의 용액을 암모니아 (35 ％ 수성) (2 mL)로 처리하였다. 반응 혼합물을 20 ℃에서 3시간 동안 방치하였다. 용매를 질소 스트림하에 제거하고, 잔류물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하였다. 수성층을 에틸 아세테이트로 추출하고, 합한 유기물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.34 g.
Figure pct01259
i) (5-이소프로필티오펜-3-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논
Figure pct01260
부제 화합물을, 5-이소프로필티오펜-3-카르복실산을 사용하여 실시예 22의 단계 a) 및 b)에 기재된 것과 유사한 방법을 이용함으로써 제조하였다. 단계 b)에서, 잔류물을 크로마토그래피로 정제하지 않았다. 조 생성물을 아세토니트릴 (2회)과 함께 공비시켰다. 잔류물을 DCM과 1M 수성 수산화나트륨 사이에 분배하고, 수성층을 DCM (3회)으로 추출하고, 합한 유기물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 제거하여, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.4 g.
Figure pct01261
j) (R)-5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(1-(3-((4-(5-이소프로필티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)-2-메틸프로판-2-일아미노)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온
Figure pct01262
부제 화합물을, (R)-3-(2-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(8-히드록시-2-옥소-1,2-디히드로퀴놀린-5-일)에틸아미노)-2-메틸프로필)벤즈알데히드 (0.32 g) (실시예 275, 단계 h) 및 (5-이소프로필티오펜-3-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 (0.21 g) (실시예 275, 단계 i)을 사용하여 실시예 14의 단계 b)에 기재된 것과 유사한 방법을 이용함으로써 제조하였다. 조 생성물을 플래쉬 실리카 크로마토그래피 (1 ％ 880 수성 암모니아를 함유하는 디클로로메탄 중 8 ％ 메탄올)로 정제하였다. 순수한 분획을 증발 건조시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.31 g.
Figure pct01263
k) (R)-8-히드록시-5-(1-히드록시-2-(1-(3-((4-(5-이소프로필티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)-2-메틸프로판-2-일아미노)에틸)퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct01264
표제 화합물을, (R)-5-(1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(1-(3-((4-(5-이소프로필티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)-2-메틸프로판-2-일아미노)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (0.31 g) (실시예 275, 단계 j)을 사용하여 실시예 23의 단계 b)에 기재된 것과 유사한 방법을 이용함으로써 제조하였다. 수득량 0.18 g.
Figure pct01265
실시예 276
8-히드록시-5-((R)-1-히드록시-2-((R)-1-(3-((4-(5-이소프로필티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)프로판-2-일아미노)에틸)퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct01266
a) 1-(3-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)페닐)프로판-2-온
Figure pct01267
무수 톨루엔 (65 mL) 중 (3-브로모벤질옥시)(tert-부틸)디메틸실란 (16.72 g), 이소프로페닐 아세테이트 (9.2 mL), 트리-n-부틸주석 메톡시드 (24 mL), 팔라듐(II) 아세테이트 (0.625 g) 및 트리(o-톨릴)포스핀 (1.70 g)의 혼합물을 100 ℃에서 환류하에 5시간 동안 가열한 후, 냉각하에 밤새 방치하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트 (130 mL) 및 4몰의 수성 플루오르화칼륨 (80 mL)으로 희석하고, 20분 동안 격렬하게 교반하였다. 규조토를 첨가한 후, 현탁액을 규조토를 통해 여과하고, 잔류물을 에틸 아세테이트로 잘 세척하였다. 합한 여과액 및 세척액을 무수 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 진공하에 농축시키고, 실리카 상에서 이소헥산, 이소헥산 중 10 ％ 디클로로메탄 및 이소헥산 중 20 ％ 디에틸 에테르로 용출시키는 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 13.71 g.
Figure pct01268
b) (3-((R)-2-((R)-1-페닐에틸아미노)프로필)페닐)메탄올 히드로클로라이드
Figure pct01269
디클로로메탄 (240 mL) 중 1-(3-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)페닐)프로판-2-온 (실시예 276, 단계 a) (6.85 g)의 용액을 아세트산 (1.27 mL), (R)-(+)-1-페닐에틸아민 (2.83 mL) 및 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (7.09 g)로 처리하고, 생성된 현탁액을 실온에서 밤새 교반하였다. 포화 수성 중탄산나트륨 (120 mL)을 5분에 걸쳐 조금씩 첨가하여 혼합물을 켄칭하였다. 2-상 혼합물을 1.75시간 동안 격렬하게 교반한 후, 분리하였다. 수성상을 추가의 디클로로메탄으로 추출하고, 합한 유기상을 건조시키고 (MgSO4), 여과하고, 농축시켜, 오일을 수득하였다. 오일을 이소헥산 중 10 ％ 에탄올로 용출시키는 플래쉬 실리카 크로마토그래피로 정제하여, 실릴화된 알코올을 황색 오일 (7.21 g)로서 수득하였다. 오일을 HCl/메탄올 용액 (1 M, 20 mL) 중에 용해시키고, 실온에서 25분 동안 유지한 후, 진공하에 농축시켰다. 생성된 검을 메탄올/디에틸 에테르 중에서 분쇄하여, 결정질 슬러리를 수득하였고, 이를 30분 동안 교반하였다. 고체를 여과에 의해 제거하고, 디에틸 에테르로 잘 세척하고, 메탄올/디에틸 에테르로부터 3회 재결정화시켜, 부제 화합물을 백색 결정으로서 수득하였다. 수득량 1.9 g.
Figure pct01270
c) (R)-(3-(2-아미노프로필)페닐)메탄올
Figure pct01271
에탄올 (30 mL) 중 (3-((R)-2-((R)-1-페닐에틸아미노)프로필)페닐)메탄올 히드로클로라이드 (실시예 276, 단계 b) (1.92 g), 탄소 상 20 ％ 수산화팔라듐 (0.757 g) 및 암모늄 포르메이트 (2.28 g)의 혼합물을 75 ℃에서 1.5시간 동안 교반한 후, 냉각시켰다. 현탁액을 규조토를 통해 여과하고, 잔류물을 에탄올로 잘 세척하였다. 합한 여과액 및 세척액을 진공하에 농축시켜, 연한 황색 검을 바람직한 생성물과 데스-히드록시 유사체의 혼합물로서 수득하였다. 수득량 1.54 g. 직접 사용하였다.
d) (R)-tert-부틸 1-(3-(히드록시메틸)페닐)프로판-2-일카르바메이트
Figure pct01272
THF (5 mL) 중 디-tert-부틸 디카르보네이트 (2.034 g)의 용액을 THF (10 mL) 및 물 (10 mL) 중 순수하지 않은 (R)-(3-(2-아미노프로필)페닐)메탄올 (실시예 276, 단계 c) (1.54 g)의 용액에 20분에 걸쳐 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 주말에 걸쳐 교반한 후, 트리에틸아민 (3.90 mL)을 첨가하였다. 추가의 THF (5 mL) 중 디-tert-부틸 디카르보네이트 (2.013 g)를 30분에 걸쳐 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 다음, 진공하에 농축시켜 THF를 제거하였다. 생성된 오일성 수성상을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 합한 추출물을 건조시키고 (MgSO4), 여과하고, 플래쉬 실리카 상에서 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 상에서 이소헥산 중 35 ％ 에틸 아세테이트로 용출시키는 플래쉬 크로마토그래피로로 정제하여, 부제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.9 g.
Figure pct01273
e) 8-(벤질옥시)-5-((R)-1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-((R)-1-(3-(히드록시메틸)페닐)프로판-2-일아미노)에틸)퀴놀린-2(1H)-온
Figure pct01274
디클로로메탄 (20 mL) 중 (R)-tert-부틸 1-(3-(히드록시메틸)페닐)프로판-2-일카르바메이트 (실시예 276, 단계 d) (0.78 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (5 mL)으로 처리하고, 실온에서 40분 동안 교반하였다. 톨루엔을 첨가하고, 용액을 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 1 M 수성 NaOH와 DCM 사이에 분배하고, 상을 분리하였다. 수성상을 DCM으로 2회 더 추출한 후, 합한 유기 추출물을 건조시키고 (MgSO4), 진공하에 농축시켜, (R)-(3-(2-아미노프로필)페닐)메탄올을 무색 오일로서 수득하였고, 이는 정치시에 서서히 백색 고체로 결정화되었다 (0.442 g). 아세토니트릴 (3 mL) 중 (R)-(3-(2-아미노프로필)페닐)메탄올 (0.223 g), (R)-8-(벤질옥시)-5-(2-브로모-1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)퀴놀린-2(1H)-온 (0.72 g), 요오드화나트륨 (0.219 g) 및 후니그 염기 (0.77 mL)의 혼합물을 질소하에 환류 온도에서 밤새 가열하였다. 추가의 (R)-(3-(2-아미노프로필)페닐)메탄올 (0.219 g), 후니그 염기 (0.51 mL) 및 아세토니트릴 (2 mL)을 첨가하고, 혼합물을 환류 온도에서 둘째날 밤에 걸쳐 가열하였다. 냉각시킨 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물로 2회, 염수로 1회 세척하고, 이어서 건조시키고 (MgSO4), 플래쉬 실리카 상에서 진공하에 농축시켰다. 생성된 분말을 실리카 상에서 에틸 아세테이트 중 5 ％ 트리에틸아민으로 용출시키는 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 연한 황색 포말로서 수득하였다. 수득량 0.525 g.
Figure pct01275
f) 5-((R)-1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-((R)-1-(3-(히드록시메틸)페닐)프로판-2-일아미노)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온
Figure pct01276
에탄올 (36 mL) 중 8-(벤질옥시)-5-((R)-1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-((R)-1-(3-(히드록시메틸)페닐)프로판-2-일아미노)에틸)퀴놀린-2(1H)-온 (실시예 276, 단계 e) (0.52 g) 및 탄소상 10 ％ 팔라듐 촉매 (0.102 g)의 혼합물을 실온에서 5 bar의 수소압하에 1.5시간 동안 수소화시키고, 이어서 실온에서 1 bar의 수소압하에 밤새 수소화시켰다. 혼합물을 규조토를 통해 여과하고, 촉매를 에탄올로 잘 세척하고, 합한 여과액 및 세척액을 진공하에 농축시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.42 g. 물질을 다음 단계에 즉시 사용하였다.
Figure pct01277
g) tert-부틸 (R)-2-(8-(tert-부톡시카르보닐옥시)-2-옥소-1,2-디히드로퀴놀린-5-일)-2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸((R)-1-(3-(히드록시메틸)페닐)프로판-2-일)카르바메이트
Figure pct01278
5-((R)-1-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-((R)-1-(3-(히드록시메틸)페닐)프로판-2-일아미노)에틸)-8-히드록시퀴놀린-2(1H)-온 (실시예 276, 단계 f) (0.42 g)을 에탄올 (25 mL) 중에 용해시키고, 트리에틸아민 (0.26 mL) 및 디-tert-부틸 디카르보네이트 (0.201 g)로 처리하고, 실온에서 1.5시간 동안 교반하였다. 추가의 디-tert-부틸 디카르보네이트 (0.203 g) 및 트리에틸아민 (0.13 mL)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후, 이를 진공하에 농축시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.609 g. 물질을 다음 단계에 즉시 사용하였다.
Figure pct01279
h) tert-부틸 (R)-2-(8-(tert-부톡시카르보닐옥시)-2-옥소-1,2-디히드로퀴놀린-5-일)-2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸((R)-1-(3-포르밀페닐)프로판-2-일)카르바메이트
Figure pct01280
tert-부틸 (R)-2-(8-(tert-부톡시카르보닐옥시)-2-옥소-1,2-디히드로퀴놀린-5-일)-2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸((R)-1-(3-(히드록시메틸)페닐)프로판-2-일)카르바메이트 (실시예 276, 단계 g) (0.609 g)를 디클로로메탄 (30 mL) 중에 용해시키고, 산화망간 (IV) (0.791 g)으로 처리하고, 생성된 현탁액을 실온에서 주말에 걸쳐 교반하였다. 추가의 산화망간 (IV) (0.801 g)을 첨가하고, 현탁액을 추가로 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 규조토를 통해 여과하고, 잔류물을 DCM으로 잘 세척하고, 합한 여과액 및 세척액을 진공하에 농축시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.521 g. 물질을 다음 단계에 즉시 사용하였다.
Figure pct01281
i) tert-부틸 (R)-2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(8-히드록시-2-옥소-1,2-디히드로퀴놀린-5-일)에틸((R)-1-(3-포르밀페닐)프로판-2-일)카르바메이트
Figure pct01282
tert-부틸 (R)-2-(8-(tert-부톡시카르보닐옥시)-2-옥소-1,2-디히드로퀴놀린-5-일)-2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸((R)-1-(3-포르밀페닐)프로판-2-일)카르바메이트 (실시예 276, 단계 h) (0.521 g)를 메탄올 (20 mL) 중에 현탁시키고, '880' 수성 암모니아 (2.5 mL)로 처리하여, 현탁액을 수득하였고, 이를 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 질소 스트림을 취입시켜 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트, 물 및 염수 사이에 분배하고, 상을 분리하였다. 수성상을 에틸 아세테이트로 추출하고, 합한 유기상을 염수로 세척하고, 건조시키고 (MgSO4), 진공하에 농축시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.476 g. 물질을 다음 단계에 즉시 사용하였다.
Figure pct01283
j) tert-부틸 (R)-2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(8-히드록시-2-옥소-1,2-디히드로퀴놀린-5-일)에틸((R)-1-(3-((4-(5-이소프로필티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)프로판-2-일)카르바메이트
Figure pct01284
tert-부틸 (R)-2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(8-히드록시-2-옥소-1,2-디히드로퀴놀린-5-일)에틸((R)-1-(3-포르밀페닐)프로판-2-일)카르바메이트 (실시예 276, 단계 i) (0.476 g)를 (5-이소프로필티오펜-3-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 (실시예 275, 단계 i) (0.296 g), N-메틸-2-피롤리디논 (20 mL), 아세트산 (0.052 mL) 및 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.294 g)로 처리하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용액을 포화 중탄산나트륨 용액과 물의 혼합물에 붓고, 디에틸 에테르로 3회 추출하였다. 합한 추출물을 물과 염수로 세척하고, 건조시키고 (MgSO4), 진공하에 농축시킨 후, 실리카 상에서 플래쉬 크로마토그래피 (1:5:94의 NEt3:MeOH:DCM으로 용출)로 정제하여, 부제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.471 g.
Figure pct01285
k) 8-히드록시-5-((R)-1-히드록시-2-((R)-1-(3-((4-(5-이소프로필티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)프로판-2-일아미노)에틸)퀴놀린-2(1H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct01286
포름산 (25 mL) 중 tert-부틸 (R)-2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2-(8-히드록시-2-옥소-1,2-디히드로퀴놀린-5-일)에틸((R)-1-(3-((4-(5-이소프로필티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페닐)프로판-2-일)카르바메이트 (실시예 276, 단계 j) (0.465 g)의 용액을 실온에서 4시간 동안 교반한 후, 톨루엔으로 희석하고, 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 물과 아세토니트릴의 혼합물 (11 mL) 중에 용해시키고, 여과하고, 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어, 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→50 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 진공하에 농축시키고, 아세토니트릴로부터 3회 공동-증발시켜, 무색 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 디에틸 에테르 중에서 분쇄하여, 고체를 수득하였고, 이를 여과에 의해 수집하고, 디에틸 에테르로 세척하고, 실온에서 진공하에 건조시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.234 g.
Figure pct01287
실시예 277
(R)-N-시클로헥실-N-(2-(2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸아미노)에틸)-3-(3-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네톡시)프로판아미드 디트리플루오로아세테이트
Figure pct01288
a) tert-부틸 3-(3-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네톡시)프로파노에이트
Figure pct01289
트리톤-B (0.094 mL)를 톨루엔 (30 mL) 중 (9-(3-(2-히드록시에틸)벤질)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-메틸티아졸-4-일)메타논 (실시예 6, 단계 b) (1.72 g)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 진공하에 농축시키고, 0 ℃로 냉각시켰다. tert-부틸 아크릴레이트 (0.671 mL)를 1분에 걸쳐 첨가하고, 혼합물을 실온에서 20시간에 걸쳐 교반하였다. 반응물을 DCM (50 mL)으로 희석하고, 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액 (50 mL), 염수 (50 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 물질을 다음 단계에 직접 사용하였다.
b) 3-(3-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네톡시)프로판산
Figure pct01290
tert-부틸 3-(3-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네톡시)프로파노에이트 (실시예 277, 단계 a)를 DCM (10 mL) 중에 용해시키고, TFA (2 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 2시간 동안 교반한 후, 증발시켰다. 잔류물을 톨루엔과 함께 공비시키고, MeCN (10 mL) 중에 재용해시켰다. 이를 MeCN으로 예비-습윤된 SCX 카트리지 (50 g, 배리언)에 적용하였다. 카트리지를 MeCN (100 mL)으로 세척하고, MeCN 중 880 수성 암모니아 (1:4, 100 mL)로 용출시켰다. 용리액을 증발시켜, 부제 화합물을 수득하였다. 물질을 다음 단계에 직접 사용하였다.
c) N-시클로헥실-N-(2,2-디메톡시에틸)-3-(3-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네톡시)프로판아미드
Figure pct01291
3-(3-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네톡시)프로판산 (실시예 277, 단계 b)을 DMF (10 mL) 중에 용해시키고, N-(2,2-디메톡시에틸)시클로헥산아민 (WO2008075025) (0.93 g), 트리에틸아민 (2.88 mL) 및 T3P (3.95 mL)을 첨가하였다. 반응물을 밤새 교반하고, 물 (100 mL)과 에틸 아세테이트 (100 mL) 사이에 분배하였다. 층을 분리하고, 수성층을 에틸 아세테이트 (100 mL씩 2회)로 추출하였다. 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 용액 (100 mL), 염수 (100 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 47.5:47.5:5의 에틸 아세테이트:i-헥산:트리에틸아민 → 95:5의 에틸 아세테이트:트리에틸아민 구배로 용출시키는 플래쉬 실리카 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.9 g.
Figure pct01292
d) N-시클로헥실-3-(3-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네톡시)-N-(2-옥소에틸)프로판아미드
Figure pct01293
토식산 (1384 mg)을 DCM (10 mL) 중 N-시클로헥실-N-(2,2-디메톡시에틸)-3-(3-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네톡시)프로판아미드 (실시예 277, 단계 c) (683 mg)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 주위 온도에서 4시간 동안 교반하였다. 중탄산나트륨 용액 (포화, 10 mL)을 조심스럽게 첨가하고, 버블링이 중지될 때까지 (10분) 혼합물을 교반하였다. 반응물을 DCM (50 mL)으로 희석하고, 수성상을 분리하였다. 유기상을 포화 중탄산나트륨 용액 (20 mL씩 2회), 염수 (20 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜, 부제 화합물을 수득하였다.
Figure pct01294
e) (R)-N-시클로헥실-N-(2-(2-히드록시-2-(4-히드록시-2-옥소-2,3-디히드로벤조[d]티아졸-7-일)에틸아미노)에틸)-3-(3-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네톡시)프로판아미드 디트리플루오로아세테이트
Figure pct01295
메탄올 (3 mL) 중 N-시클로헥실-3-(3-((4-(2-메틸티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)페네톡시)-N-(2-옥소에틸)프로판아미드 (실시예 277, 단계 d) (0.122 g)의 용액을 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온, HCl (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.079 g) 및 아세트산 (0.011 mL)의 혼합물에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 0 ℃로 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.019 g)를 첨가하고, 혼합물을 주위 온도로 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 95:5:0.5 → 89:10:1의 DCM:MeOH:880 수성 암모니아로 용출시키는 플래쉬 실리카 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시키고, HPLC (선파이어, 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 5→40 ％ 아세토니트릴)로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시키고, 디에틸 에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.085 g.
Figure pct01296
실시예 278
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(2-(4-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)티오펜-2-일)에틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct01297
a) tert-부틸(2-(5-클로로티오펜-2-일)에톡시)디메틸실란
Figure pct01298
N-클로로숙신이미드 (0.83 g)를 클로로포름 (50 mL) 중 tert-부틸디메틸(2-(티오펜-2-일)에톡시)실란 (1.5 g) (실시예 4 단계 a)의 용액에 조금씩 첨가하고, 환류 온도로 3일 동안 가열하였다. 황색 용액을 DCM (100 mL)으로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 용액 (100 mL씩 2회), 염수 (100 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 잔류물을 이소-헥산으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였다. 수득량 1 g.
Figure pct01299
b) 5-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-2-클로로티오펜-3-카르브알데히드
Figure pct01300
-78 ℃에서, tert-부틸(2-(5-클로로티오펜-2-일)에톡시)디메틸실란 (0.8 g) (실시예 278, 단계 a)을 THF (25 mL) 중 부틸 리튬 (헥산 중 2.5 M, 1.7 mL) 및 2,2,6,6-테트라메틸피페리딘 (0.73 mL)의 교반 용액에 5분에 걸쳐 적가하였다. 생성된 혼합물을 2시간 동안 교반하고, DMF (0.67 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 추가로 1시간 동안 교반하고, 실온으로 가온하였다. 반응물을 HCl 용액 (0.5 M, 200 mL)에 조심스럽게 붓고, 에틸 아세테이트 (100 mL씩 3회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 물 (100 mL씩 2회), 염수 (100 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켰다. 생성된 오일을 이소-헥산 → 이소-헥산 중 5 ％ 에테르 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였다. 수득량 (0.8 g)
Figure pct01301
c) 5-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-3-카르브알데히드
Figure pct01302
탄소상 10 ％ 팔라듐 촉매 (0.28 g)를 함유하는 에탄올 (50 mL)과 트리에틸아민 (0.91 mL)의 혼합물 중 5-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)-2-클로로티오펜-3-카르브알데히드 (0.8 g) (실시예 278, 단계 b)를 4 bar의 수소압하에 18시간 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 필터 패드를 에탄올 (50 mL)로 세척하였다. 합한 여과액 및 세척액을 증발시키고, 톨루엔 (20 mL)과 함께 공비시켜, 황색 오일을 수득하였다. 오일을 DCM (100 mL) 중에 용해시키고, 이산화망간 (2.3 g)을 첨가하고, 생성된 현탁액을 밤새 환류하였다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 필터 패드를 DCM (50 mL)으로 세척하였다. 합한 여과액 및 세척액을 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.6 g.
Figure pct01303
d) (9-((5-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-3-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct01304
5-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-3-카르브알데히드 (0.6 g) (실시예 278, 단계 c)를 N-메틸-2-피롤리디논 (5 mL)과 아세트산 (0.13 mL)의 혼합물 중 (2-이소프로필티아졸-4-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 (0.94 g) (실시예 22, 단계 b)에 첨가하고, 30분 동안 교반하였다. 이어서, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.71 g)를 첨가하고, 혼합물을 밤새 교반하였다. 반응물을 물 (100 mL)에 붓고, 포화 중탄산나트륨 용액을 사용하여 pH를 8로 조정하고, 생성된 수용액을 에틸 아세테이트 (100 mL씩 3회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 물 (100 mL씩 3회), 염수 (100 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 77.5:17.5:5의 i-헥산:에틸 아세테이트:트리에틸아민 → 47.5:47.5:5의 i-헥산:에틸 아세테이트:트리에틸아민 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였다. 수득량 0.8 g.
Figure pct01305
e) (9-((5-(2-히드록시에틸)티오펜-3-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct01306
테트라부틸암모늄 플루오라이드 (테트라히드로푸란 중 1 M, 2.1 mL)를 테트라히드로푸란 (10 mL) 중 (9-((5-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)에틸)티오펜-3-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 278, 단계 d) (0.80 g)의 용액에 첨가하였다. 2시간 후, 용액을 진공하에 증발시키고, 잔류물을 포화 중탄산나트륨 용액 (50 mL)과 에틸 아세테이트 (50 mL) 사이에 분배하였다. 층을 분리하고, 수성상을 에틸 아세테이트 (50 mL씩 2회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수 (50 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 20:1의 에틸 아세테이트:트리에틸아민으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켜, 부제 화합물을 검으로서 수득하였다. 수득량 0.61 g.
Figure pct01307
f) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(2-(4-((4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)메틸)티오펜-2-일)에틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 디트리플루오로아세테이트
Figure pct01308
디클로로메탄 (10 mL) 중 (9-((5-(2-히드록시에틸)티오펜-3-일)메틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (0.35 g) (실시예 278, 단계 e)의 용액을 트리플루오로아세트산 (0.06 mL)에 이어서 데스-마틴 페리오디난 (0.56 g)으로 처리하고, 생성된 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 (10 mL), 포화 중탄산나트륨 용액 (10 mL) 및 에틸 아세테이트 (10 mL)로 처리하고, 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트 (30 mL씩 2회)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 아세트산 (0.09 mL)으로 처리하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (5 mL) 중에 용해시킨 후, (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.15 g)를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 얼음 배스에서 냉각시켰다. 이어서, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (0.07 g)를 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 용매를 진공하에 증발시켰다. 94.5:5:0.5 → 89:10:1의 DCM:메탄올:'880' 수성 암모니아 구배로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시켰다. 추가로 정제용 HPLC로 정제하였다 (선파이어 (상표명), 구배: 0.2 ％ 수성 TFA 중 10→30 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 진공하에 증발시키고, 아세토니트릴과 함께 공비시키고, 잔류물을 에테르 중에서 분쇄하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.10 g.
Figure pct01309
실시예 279
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(9-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)-3,3-디메틸노닐아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01310
a) 에틸 8-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2,2-디메틸옥타노에이트
Figure pct01311
n-부틸 리튬 (32.8 mL)을 0 ℃ 내지 5 ℃에서 15분에 걸쳐 THF (60 mL) 중 디이소프로필아민 (톨루엔 중 1 M, 11.64 mL)의 용액에 첨가하고, 상기 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 -78 ℃로 냉각시킨 후, 이소부티르산 에틸 에스테르 (10 mL)를 15분에 걸쳐 적가하였다. 혼합물을 -78 ℃에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 (6-브로모헥실옥시)-tert-부틸디메틸실란 (23 mL)을 적가하고, 반응 혼합물을 -78 ℃에서 추가로 60분 동안 교반하였다. 냉각 배스를 제거하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후, 염화암모늄의 포화 수용액 (300 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트 (300 mL씩 2회)로 추출하였다. 합한 유기층을 물 (250 mL)로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜, 조 생성물을 수득하였다. 시클로헥산 중 0→40 ％ 에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 연한 황갈색 액체로서 수득하였다. 수득량 20 g.
Figure pct01312
b) 8-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2,2-디메틸옥탄-1-올
Figure pct01313
질소하에, 무수 에테르 (300 mL) 중 에틸 8-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2,2-디메틸옥타노에이트 (실시예 279, 단계 a) (20 g)를 얼음 배스에서 0 ℃로 냉각시킨 후, 디이소부틸알루미늄 수소화물 (톨루엔 중 1 M, 133 mL)을 적가하였다. 반응 혼합물을 0 ℃에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 포화 수성 칼륨 나트륨 타르트레이트 (로셸 염 (Rochelle's salt), 400 mL)로 켄칭하고, 밤새 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트 (300 mL씩 3회)로 추출한 후, 합한 유기층을 염수로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 시클로헥산 중 0→20 ％ 에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 무색 액체로서 수득하였다. 수득량 10.11 g.
Figure pct01314
c) (E)-tert-부틸(9-메톡시-7,7-디메틸논-8-에닐옥시)디메틸실란과 (Z)-tert-부틸(9-메톡시-7,7-디메틸논-8-에닐옥시)디메틸실란의 혼합물
Figure pct01315
-70 ℃에서, 옥살릴 클로라이드 (5.9 mL)를 무수 디클로로메탄 (60 mL) 중 디메틸술폭사이드 (4.98 mL)의 용액에 첨가하고, 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 디클로로메탄 (20 mL) 중에 용해된 8-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-2,2-디메틸옥탄-1-올 (실시예 279, 단계 b) (10.11 g)을 적가하고, 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 트리에틸아민 (19.4 mL)을 첨가하고, 1시간 동안 계속 교반하였다. 냉각 배스를 제거하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 그 시점에 DCM (15 mL)을 첨가하였다. 1 N HCl을 적가하여 반응 혼합물에 존재하는 염을 용해시키고, 층을 분리하였다. 수성층을 DCM (250 mL씩 2회)으로 추출한 후, 합한 유기층을 포화 수성 탄산나트륨 (250 mL)으로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 농축시켜, 오렌지색 액체를 수득하였다. 잔류물을 용리액으로서 디에틸 에테르를 사용하여 짧은 실리카 플러그를 통해 여과함으로써, 8-(tert-부틸-디메틸-실라닐옥시)-2,2-디메틸-옥타날을 황색 액체로서 수득하였고, 이를 추가 정제없이 사용하였다.
무수 THF (350 mL) 중 칼륨 tert-부톡시드 (15.3 g) 및 (메톡시메틸)트리페닐포스포늄 클로라이드 (48 g)를 0 ℃로 냉각시키고, 30분 동안 교반하였다. 8-(tert-부틸-디메틸-실라닐옥시)-2,2-디메틸-옥타날 (10.03 g)을 무수 THF (150 mL) 중에 용해시키고, 반응 혼합물에 첨가하고, 이어서 0 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 가온하고, 30분 동안 교반한 후, 포화 중탄산나트륨 용액 (300 mL)을 첨가하고, 이어서 디에틸 에테르 (300 mL씩 3회)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수 (300 mL)로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켜, 조 생성물을 수득하였다.
시클로헥산 (300 mL)을 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 휘저었다. 용매를 경사분리하고, 상기 방법을 반복하였다. 시클로헥산 층을 증발시켜, 황색 액체 (약간의 백색 고체가 존재함)를 수득하였다. 고체를 여과에 의해 제거한 후, 여과액을 시클로헥산 중 0→40 ％ 에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하였다. 물질 (3.2 g)을 아세톤 (50 mL) 중에 용해시키고, 요오드화나트륨 (3.05 g)에 이어서 메리필드 (Merrifield) 수지 (6.4 g)로 처리하고, 혼합물을 주말에 걸쳐 교반함으로써 추가의 정제를 달성하였다. 수지를 여과하고, 아세톤 (100 mL), DCM (50 mL) 및 메탄올 (50 mL)로 세척하였다. 여과액을 증발시키고, DCM (200 mL)에 녹이고, 물 (60 mL씩 2회)로 세척하고, 유기층을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 감압하에 증발시켜, 부제 생성물을 시스/트랜스 이성질체의 혼합물로서의 연한 황색 액체로서 수득하였다. 수득량 2.6 g.
Figure pct01316
d) (E)-9-메톡시-7,7-디메틸논-8-엔-1-올과 (Z)-9-메톡시-7,7-디메틸논-8-엔-1-올의 혼합물
Figure pct01317
(E)-tert-부틸(9-메톡시-7,7-디메틸논-8-에닐옥시)디메틸실란 (실시예 279, 단계 c) (2.57 g)을 테트라히드로푸란 (60 mL) 중에 용해시키고, 테트라부틸암모늄 플루오라이드 (16.4 mL)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 켄칭하고, 디에틸 에테르 (100 mL씩 3회)로 추출하였다. 유기층을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 농축시켜, 부제 화합물을 시스/트랜스 이성질체의 혼합물로서의 연한 황색 액체로서 수득하였고, 이를 추가 정제없이 사용하였다. 수득량 1.2 g.
Figure pct01318
e) 7,7-디메틸-9-옥소노닐 메탄술포네이트
Figure pct01319
(E)-9-메톡시-7,7-디메틸논-8-엔-1-올 및 (Z)-9-메톡시-7,7-디메틸논-8-엔-1-올 (실시예 279, 단계 d) (1.6 g)의 혼합물을 디클로로메탄 (15 mL) 중에 용해시키고, 트리에틸아민 (1.33 mL)을 첨가한 후, 혼합물을 얼음 배스에서 아르곤하에 0 ℃로 냉각시켰다. 메탄술포닐 클로라이드 (0.68 mL)를 5분에 걸쳐 적가하고, 반응 혼합물을 0 ℃에서 15분 동안 교반한 후, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 염수 (30 mL씩 2회)로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공하에 증발시켜, 조 생성물을 수득하였다. 시클로헥산 중 0→100 ％ 에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다. 수득량 1.2 g.
Figure pct01320
f) 9-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)-3,3-디메틸노나날
Figure pct01321
(2-이소프로필-티아졸-4-일)-(1-옥사-4,9-디아자-스피로[5.5]운데크-4-일)-메타논 (0.262 g) (실시예 102의 단계 c에서와 같이 트리플루오로아세테이트 염으로부터 제조함)을 아세토니트릴 (4 mL) 중에 용해시키고, 트리에틸아민 (0.22 mL)을 첨가하였다. 이어서, 상기 용액을 아세토니트릴 (4 mL) 중 7,7-디메틸-9-옥소노닐 메탄술포네이트 (실시예 279, 단계 e) (0.291 g)의 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 80 ℃에서 밤새 가열하였다. 용매를 진공하에 제거하였다. DCM 중 0→10 ％ 메탄올로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.361 g.
Figure pct01322
g) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(9-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)-3,3-디메틸노닐아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온, 포르메이트
Figure pct01323
아세트산 (0.035 mL)을 메탄올 (10 mL) 중 9-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)-3,3-디메틸노나날 (실시예 279, 단계 f) (195 mg) 및 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (161 mg)의 교반 용액에 첨가하고, 1분 후, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (51 mg)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 1.5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축시킨 다음, THF (12 mL) 및 염수와 포화 중탄산나트륨 용액의 혼합물 (10:1, 12 mL) 사이에 분배하였다. 층을 분리하고, 유기상 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 생성된 물질을 정제용 HPLC로 정제하였다 (페노메넥스 제미니 (등록상표), 구배: 0.1 ％ 수성 포름산 중 5→40 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결-건조시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.038 g.
Figure pct01324
실시예 280
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(10-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)데칸-2-일아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01325
a) 10-브로모데칸-2-올
Figure pct01326
DCM (100 mL) 중 9-브로모-노나놀 (1.7 g)의 용액에 디이소프로필에틸아민 (3.91 mL)을 첨가하고, 이어서 DMSO (1.62 mL)를 첨가하고, 혼합물을 -14 ℃로 냉각시킨 후, 황 트리옥사이드 피리딘 복합체 (3.64 g)를 조금씩 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 교반한 후, 밤새 방치하였다. 물을 첨가하고, 상을 분리하였다. 유기층을 1 M 황산수소나트륨 (3회), 포화 중탄산나트륨 수용액 및 염수로 세척하였다. 유기상을 분리하고, 소수성 프릿 (frit)을 사용하여 건조시킨 후, 증발시켜, 알데히드를 황색 액체 (2.32 g)로서 수득하였다.
0 ℃에서, 무수 에테르 (20 mL) 중 알데히드 (750 mg)의 용액에 메틸 리튬 (에테르 중 1.6 M, 2.1 mL)을 적가하였다. 45분 후, 혼합물을 교반하면서 2 M 황산에 붓고, 상을 분리하였다. 유기층을 포화 중탄산나트륨 수용액으로 세척한 후, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 시클로헥산 중 0→30 ％ 에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 담황색 액체로서 수득하였다. 수득량 0.286 g.
Figure pct01327
b) (9-(9-히드록시데실)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct01328
(2-이소프로필-티아졸-4-일)-(1-옥사-4,9-디아자-스피로[5.5]운데크-4-일)-메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 22, 단계 b) (500 mg)를 메탄올 습윤된 SCX-2 카트리지에 적용하고, 메탄올로 세척한 후, 메탄올 중 2 N 암모니아를 사용하여 용출시키고, 증발시켜, 유리 염기 (276 mg)를 수득하였다. 상기 물질을 아세토니트릴 (10 mL) 중 10-브로모데칸-2-올 (실시예 280, 단계 a, 280 mg) 및 트리에틸아민 (0.247 mL)과 혼합하고, 60 ℃에서 18시간 동안 가열하였다. 용매를 증발에 의해 제거하고, 조 물질을 DCM 중 0→20 ％ 메탄올로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 수득하였다. 수득량 0.298 g.
Figure pct01329
c) 10-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)데칸-2-온
Figure pct01330
0 ℃에서 질소하에, DCM (10 mL) 중 (9-(9-히드록시데실)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 280, 단계 b) (287 mg)의 용액에 트리플루오로아세트산 (0.048 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난 (392 mg)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반한 후, 추가량의 데스-마틴 페리오디난 (392 mg)을 0 ℃에서 첨가하고, 이어서 실온에서 1.75시간 동안 교반하였다. 포화 티오황산나트륨 용액 (20 mL), 포화 중탄산나트륨 수용액 (20 mL) 및 에틸 아세테이트를 첨가하고, 혼합물을 교반한 후, 상을 분리하였다. 수성층을 에틸 아세테이트 (2회)로 추출하고, 합한 유기물을 포화 중탄산나트륨 수용액으로 세척하였다. 이어서, 아세트산 (0.053 mL)을 첨가한 후, 유기물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜, 표제 화합물을 황색 검으로서 수득하였다. 수득량 0.338 g.
Figure pct01331
d) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(10-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)데칸-2-일아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01332
실온에서 질소하에, 아세트산 (0.053 mL)을 3Å 분자체를 함유하는 무수 메탄올 중 10-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)데칸-2-온 (실시예 280, 단계 c) (335 mg) 및 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (243 mg)의 혼합물에 첨가하고, 5분 동안 교반하였다. 혼합물을 0 ℃로 냉각시키고, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (131 mg)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 교반하고, 실온으로 밤새 가온하였다. 혼합물을 여과하고, 증발시켰다. 정제용 HPLC로 정제하였다 (페노메넥스 제미니 (등록상표), 구배: 0.1 ％ 수성 포름산 중 10→40 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결-건조시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.032 g.
Figure pct01333
실시예 281
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(4-(3-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)프로필티오)부틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01334
a) 4-(2-(1,3-디옥솔란-2-일)에틸티오)부탄-1-올
Figure pct01335
무수 아세토니트릴 중 4-머캅토부탄올 (4.936 g)의 용액을 아르곤하에 0 ℃로 냉각시키고, 수소화나트륨 (광유 중 60 ％, 2.044 g)을 조금씩 첨가하였다. 혼합물을 0 ℃에서 1시간 동안 교반한 후, 2-(2-브로모에틸)-1,3-디옥솔란 (9.26 g)을 첨가하고, 생성된 회색 현탁액을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 포화 중탄산나트륨 수용액 (150 mL)을 첨가하여 반응물을 켄칭한 후, 에틸 아세테이트 (150 mL씩 3회)로 추출하였다. 유기물을 합하고, 염수 (150 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 건조시켜, 조 생성물을 수득하였다. 시클로헥산 중 0→50 ％ 에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. 수득량 7.3 g.
Figure pct01336
b) (9-(3-(4-히드록시부틸티오)프로필)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct01337
4-(2-(1,3-디옥솔란-2-일)에틸티오)부탄-1-올 (실시예 281, 단계 a) (500 mg)을 수성 포름산의 80 ％ 용액 (6 mL) 중에 용해시키고, 반응 혼합물을 실온에서 주말에 걸쳐 교반하였다. 혼합물을 물 (10 mL)로 희석하고, 에테르 (10 mL씩 3회)로 추출한 후, 유기물을 염수 (10 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜, 3-(4-히드록시-부틸술파닐)-프로피온알데히드를 오일로서 수득하였다. 이를 무수 메탄올 중에 용해시키고, (2-이소프로필-티아졸-4-일)-(1-옥사-4,9-디아자-스피로[5.5]운데크-4-일)-메타논 트리플루오로아세테이트 (실시예 22, 단계 b) (606 mg) 및 3Å 분자체를 첨가하였다. 아세트산 (0.2 mL)을 첨가하고, 혼합물을 아르곤하에 5분 동안 교반한 후, 0 ℃로 냉각시키고, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (633 mg)를 첨가하였다. 냉각 배스를 제거하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 이어서 SCX-2 카트리지에 직접 적용하고, 메탄올로 세척한 후, 생성물을 메탄올 중 2 N 암모니아로 용출시켰다. 추가로, DCM 중 10 ％ 메탄올로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 연한 녹색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.37 g.
Figure pct01338
c) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(4-(3-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)프로필티오)부틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01339
옥살릴 클로라이드 (0.068 mL)를 무수 DCM (2 mL) 중에 용해시키고, 용액을 -78 ℃로 냉각시켰다. DCM (0.03 mL) 중 DMSO (0.12 mL)를 적가하고, 혼합물을 교반하였다. 15분 후, DCM (1 mL) 중 (9-(3-(4-히드록시부틸티오)프로필)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 281, 단계 b) (290 mg)의 용액을 적가하고, 15분 동안 계속 교반한 후, 트리에틸아민 (0.44 mL)을 적가하였다. 냉각 배스를 제거하고, 반응물을 실온으로 가온하였다. 1시간 후, 반응 혼합물을 포화 수성 염화암모늄 (3 mL)에 붓고, DCM (3 mL)을 첨가하였다. 층을 분리하고, 수성상을 DCM (5 mL씩 2회)으로 추출하였다. 유기물을 합하고, 염수 (5 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 증발시켜, 조 알데히드를 수득하였다.
알데히드 (195 mg)를 무수 메탄올 (8 mL) 중 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (170 mg)와 함께 교반하고, 3Å 분자체 및 아세트산 (0.07 mL)을 첨가하였다. 5분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 0 ℃로 냉각시키고, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (200 mg)를 첨가하였다. 냉각 배스를 제거하고, 반응 혼합물을 실온에서 주말에 걸쳐 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 증발시켰다. 정제용 HPLC로 정제하였다 (페노메넥스 제미니 (등록상표), 구배: 0.1 ％ 수성 포름산 중 5→40 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결-건조시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.006 g.
Figure pct01340
실시예 282
4-히드록시-7-((1R)-1-히드록시-2-(4-(3-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)프로필술피닐)부틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01341
아르곤하에, 트리플루오로아세트산 (0.06 mL)을 무수 DCM (14 mL) 중 (9-(3-(4-히드록시부틸티오)프로필)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 281, 단계 b) (360 mg)의 용액에 첨가하였다. 용액을 0 ℃로 냉각시키고, 5분 동안 교반하에 방치한 후, 데스-마틴 페리오디난 (502 mg)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반한 후, 포화 티오황산나트륨 (14 mL) 및 포화 중탄산나트륨 수용액 (14 mL)을 첨가하여 켄칭하였다. 에틸 아세테이트 (30 mL)를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 상을 분리하였다. 수성층을 에틸 아세테이트 (30 mL씩 2회)로 추출하였다. 아세트산 (0.053 mL)을 합한 유기물에 첨가하고, 이어서, 이를 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜, 알데히드를 오일로서 수득하였다. 이를 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (311 mg)와 함께 무수 메탄올 (15 mL) 중에 용해시키고, 3Å 분자체 및 아세트산 (0.07 mL)을 첨가하였다. 5분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 0 ℃로 냉각시키고, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (200 mg)을 첨가하고, 실온에서 밤새 교반을 계속하였다. 혼합물을 여과하고, 증발시켰다. 정제용 HPLC로 정제하였다 (페노메넥스 제미니 (등록상표), 구배: 0.1 ％ 수성 포름산 중 5→40 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결-건조시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.018 g.
Figure pct01342
실시예 283
4-히드록시-7-((1R)-1-히드록시-2-(9-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)-2-메틸노닐아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01343
a) 9-브로모-2-메틸노난-1-올
Figure pct01344
0 ℃에서 아르곤하에, 무수 THF (30 mL) 중 디이소프로필아민 (5.42 mL)의 용액에 2.5 M n-부틸 리튬 (15.5 mL)을 서서히 (온도를 10 ℃ 미만으로 유지하면서) 첨가하였다. 용액을 0 ℃에서 30분 동안 교반한 후, -78 ℃로 냉각시켰다. 에틸 프로피오네이트 (4.01 mL)를 적가하고, 용액을 -78 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 1,7-디브로모헵탄 (6.63 mL)을 첨가하고, -78 ℃에서 1시간 동안 교반을 계속하고, 이어서 냉각 배스를 제거하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 포화 수성 염화암모늄 (30 mL)에 이어서 에틸 아세테이트 (30 mL)를 반응물에 첨가하였다. 층을 분리하고, 수성상을 에틸 아세테이트 (30 mL씩 2회)로 추출하였다. 유기물을 합하고, 포화 중탄산나트륨 수용액 (50 mL), 염수 (50 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 증발시켰다. 석유 에테르 (40 내지 60 ℃) 중 1→5 ％ 에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 에틸 9-브로모-2-메틸노나노에이트를 수득하였고, 이를 추가 정제없이 사용하였다.
상기 물질 (0.84 g)을 무수 에테르 (27 mL) 중에 용해시키고, 아르곤하에 0 ℃로 냉각시켰다. 디이소부틸알루미늄 수소화물 (톨루엔 중 1 M, 6.7 mL)을 적가하고, 반응물을 0 ℃에서 1시간 15분 동안 교반하였다. 포화 수성 칼륨 나트륨 타르트레이트를 첨가하여 반응물을 켄칭하고, 생성된 혼합물을 15분 동안 교반하였다. 에틸 아세테이트 (60 mL) 및 물 (20 mL)을 첨가하고, 상을 분리하였다. 수성층을 에틸 아세테이트 (30 mL씩 3회)로 추출한 후, 합한 유기물을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 시클로헥산 중 0→10 ％ 에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.23 g.
Figure pct01345
b) (9-(9-히드록시-8-메틸노닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct01346
(2-이소프로필-티아졸-4-일)-(1-옥사-4,9-디아자-스피로[5.5]운데크-4-일)-메타논 디트리플루오로아세테이트 (실시예 22, 단계 b) (500 mg)를 메탄올 습윤된 SCX-2 카트리지에 적용하고, 메탄올로 세척한 후, 메탄올 중 2 N 암모니아를 사용하여 용출시키고, 증발시켜, 유리 염기 (279 mg)를 수득하였다. 이를 9-브로모-2-메틸노난-1-올 (실시예 283, 단계 a) (220 mg)과 함께 아세토니트릴 (10 mL) 중에 용해시키고, 트리에틸아민 (0.223 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 60 ℃로 밤새 가열한 후, 농축시켰다. DCM 중 0→10 ％ 메탄올로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 연한 갈색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.38 g.
Figure pct01347
c) (9-(9-브로모-8-메틸노닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct01348
(9-(9-히드록시-8-메틸노닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 283, 단계 b) (100 mg), 사브롬화탄소 (143 mg) 및 이미다졸 (30 mg)을 DCM (5 mL) 중에 용해시켰다. 용액을 0 ℃로 냉각시키고, DCM (1 mL) 중 트리페닐포스핀 (85 mg)의 용액을 적가하였다. 반응 혼합물을 상기 온도에서 1시간 동안, 이어서 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 추가량의 사브롬화탄소 (150 mg)를 첨가하고, 혼합물을 0 ℃로 냉각시키고, DCM (1 mL) 중 트리페닐포스핀 (114 mg)을 적가하였다. 이어서, 실온에서 1시간 동안 교반한 후, 물을 첨가하고, 상을 분리하였다. 유기상을 증발시키고, 생성물을 DCM 중 0→10 ％ 메탄올로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 오렌지색 검으로서 수득하였다. 수득량 0.088 g.
Figure pct01349
d) 4-히드록시-7-((1R)-1-히드록시-2-(9-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)-2-메틸노닐아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01350
(R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (263 mg)를 메탄올 (10 mL) 중에 용해시키고, 나트륨 메톡시드 (54 mg)를 첨가하고, 혼합물을 25분 동안 교반하였다. 고체를 여과에 의해 수집하고, 메탄올로 세척하고, 공기 건조시켜, 유리 염기 (150 mg)를 수득하였다. 상기 물질의 일부 (61 mg)를 DMF (3.5 mL) 중에 용해시키고, (9-(9-브로모-8-메틸노닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 283, 단계 c) (71 mg) 및 디이소프로필에틸아민 (0.023 mL)과 혼합하였다. 반응 혼합물을 50 ℃로 밤새 가열한 후, 냉각시키고, 에틸 아세테이트 (10 mL)와 물 (10 mL) 사이에 분배하였다. 유기물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 정제용 HPLC로 정제하였다 (페노메넥스 제미니 (등록상표), 구배: 0.1 ％ 수성 포름산 중 5→40 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결-건조시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.002 g.
Figure pct01351
실시예 284
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(7-(4-(5-이소프로필티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)헵틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01352
a) (9-(7-히드록시헵틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-이소프로필티오펜-3-일)메타논
Figure pct01353
아세토니트릴 (3.9 mL) 중 7-브로모-1-헵타놀 (380 mg)의 용액을 아세토니트릴 (8.6 mL) 중 (5-이소프로필티오펜-3-일)(1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)메타논 (실시예 275, 단계 i) (400 mg) 및 트리에틸아민 (0.361 mL)의 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 60 ℃에서 16시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에 제거하고, 잔류물을 DCM (25 mL)에 녹이고, 염수 (25 mL) 및 물 (20 mL)로 세척한 후, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. DCM 중 0→10 ％ 메탄올로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 연한 갈색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.305 g.
Figure pct01354
b) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(7-(4-(5-이소프로필티오펜-3-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)헵틸아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01355
트리플루오로아세트산 (0.054 mL)을 DCM (7.5 mL) 중 (9-(7-히드록시헵틸)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(5-이소프로필티오펜-3-일)메타논 (실시예 284, 단계 a) (295 mg)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난 (503 mg)을 첨가하고, 1시간 50분 동안 계속 교반하였다. 포화 티오황산나트륨 용액 (4 mL) 및 포화 중탄산나트륨 수용액 (4 mL)을 첨가하여 반응 혼합물을 켄칭하였다. 에틸 아세테이트 (25 mL)를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 격렬하게 교반한 후, 상을 분리하였다. 수성층을 에틸 아세테이트 (5 mL)로 추출하였다. 유기물을 합하고, 염수 (5 mL)로 세척한 후, 아세트산 (0.080 mL)을 첨가하고, 용액을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜, 알데히드를 오일로서 (504 mg) 수득하였다. 이를 무수 메탄올 (5 mL) 중에 용해시키고, 이어서 (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (202 mg)를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0 ℃로 냉각시키고, 나트륨 시아노보로하이드라이드 (66 mg)를 첨가하고, 0 ℃에서 2시간 동안, 이어서 실온에서 밤새 교반을 계속하였다. 혼합물을 진공하에 농축시키고, THF (6 mL) 및 염수와 포화 중탄산나트륨 용액의 혼합물 (10:1, 6 mL) 사이에 분배하였다. 층을 분리하고, 유기상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시키고, 잔류물을 아세토니트릴과 함께 공비시켰다. 정제용 HPLC로 정제하였다 (페노메넥스 제미니 (등록상표), 구배: 0.1 ％ 수성 포름산 중 5→40 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결-건조시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.037 g.
Figure pct01356
실시예 285
(R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(9-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)-4,4-디메틸노닐아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01357
a) 2-(5-브로모펜틸옥시)테트라히드로-2H-피란
Figure pct01358
DCM (150 mL) 중 5-브로모펜탄올 (10 g)의 용액에 피리디늄 p-톨루엔술포네이트 (1.5 g)에 이어서 3,4-디히드로-2H-피란 (8.1 mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 질소하에 21시간 동안 교반하였다. 용액을 에테르로 희석하고, 이어서 묽은 염수 (1:1의 염수:물, 140 mL)로 세척한 후, 유기물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 시클로헥산 중 0→50 ％ 에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 무색 액체로서 수득하였다. 수득량 14.14 g.
Figure pct01359
b) 에틸 2,2-디메틸-7-(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)헵타노에이트
Figure pct01360
0 ℃에서 질소하에, 무수 THF (10 mL) 중 디이소프로필아민 (1.78 mL)의 용액을 n-부틸 리튬 (헥산 중 2.5 M, 5.09 mL)으로 적가 처리하여 연한 황색 용액을 생성하였고, 이를 0 ℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 -78 ℃로 냉각시키고, 에틸 이소부티레이트 (1.55 mL)로 적가 처리하였다. 용액을 -78 ℃에서 45분 동안 교반한 후, 무수 THF (1 mL) 중 2-(5-브로모펜틸옥시)테트라히드로-2H-피란 (실시예 285, 단계 a) (3.20 g)의 용액을 적가하였다. 반응 혼합물을 -78 ℃에서 10분 동안 교반한 후, 실온으로 밤새 가온하였다. 반응 혼합물을 0 ℃로 냉각시킨 후, 포화 염화암모늄 수용액 (3 mL)으로 처리하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 수성상을 에틸 아세테이트 (2회)로 추출하고, 합한 유기상을 물, 포화 중탄산나트륨 수용액 및 염수로 세척하고, 이어서 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 시클로헥산 중 0→5 ％ 에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 무색 액체로서 수득하였다. 수득량 2.22 g.
Figure pct01361
c) 2,2-디메틸-7-(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)헵탄-1-올
Figure pct01362
0 ℃에서 질소하에, 무수 에테르 (22 mL) 중 에틸 2,2-디메틸-7-(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)헵타노에이트 (실시예 285, 단계 b) (2.22 g)의 용액을 디이소부틸알루미늄 수소화물 (톨루엔 중 1 M, 17.1 mL)로 5분에 걸쳐 적가 처리하였다. 0 ℃에서 1시간 후, 반응 혼합물을 수성 칼륨 나트륨 타르트레이트로 조심스럽게 처리하고, 에테르로 희석하고, 생성된 혼합물을 1.5시간 동안 격렬하게 교반하였다. 상을 분리하고, 수성상을 에테르 (2회)로 추출하였다. 합한 유기상을 물과 염수로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 시클로헥산 중 0→50 ％ 에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다. 수득량 1.83 g.
Figure pct01363
d) (E)-에틸 4,4-디메틸-9-(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)논-2-에노에이트
Figure pct01364
-78 ℃에서, 무수 DCM (20 mL) 중 옥살릴 클로라이드 (0.78 mL)의 용액을 DCM (0.3 mL) 중 DMSO (1.26 mL)의 용액으로 적가 처리하였다. 15분 후, DCM (10 mL) 중 2,2-디메틸-7-(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)헵탄-1-올 (실시예 285, 단계 c) (1.73 g)의 용액을 적가하고, 15분 동안 교반을 계속한 후, 트리에틸아민 (4.93 mL)을 적가하였다. 냉각 배스를 제거하고, 반응물을 실온으로 가온하였다. 1시간 후, 반응 혼합물을 포화 염화암모늄 수용액으로 처리하고, 층을 분리하였다. 수성상을 DCM (2회)으로 추출하고, 합한 유기물을 염수로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜, 조 알데히드를 수득하였다. 이를 DCM에 녹이고, 물로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜, 알데히드를 무색 오일로서 수득하였고, 이를 직접 사용하였다.
아세토니트릴 (8 mL) 중 트리에틸 포스포노아세테이트 (1.62 mL)의 용액을 염화리튬 (0.43 g)으로 처리한 후, 0 ℃로 냉각시키고, 트리에틸아민 (1.23 mL)을 아세토니트릴 (2.5 mL) 중의 용액으로서 적가하였다. 반응 혼합물을 0 ℃에서 15분 동안 교반한 후, 아세토니트릴 (6 mL) 중 2,2-디메틸-7-(테트라히드로-피란-2-일옥시)-헵타날 (1.65 g)의 용액을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온으로 가온하고, 3시간 동안 교반한 후, 포화 염화암모늄 수용액, 에테르 및 물로 처리하였다. 층을 분리하고, 수성상을 에테르 (2회)로 추출하고, 합한 유기물을 염수로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜, 조 생성물을 수득하였다. 시클로헥산 중 0→40 ％ 에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.89 g.
Figure pct01365
e) 에틸 4,4-디메틸-9-(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)노나노에이트
Figure pct01366
IMS (상업적 변성 알코올) (10 mL) 중 (E)-에틸 4,4-디메틸-9-(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)논-2-에노에이트 (실시예 285, 단계 d) (0.89 g)의 용액을 질소하에 탄소상 팔라듐 (약수저 끝부분으로)으로 처리하고, 이어서 플라스크를 수소 (3회)로 퍼징한 후, 수소 분위기하에 밤새 교반하였다. 추가량의 탄소상 팔라듐을 첨가하고, 추가로 24시간 동안 수소화를 계속하였다. 촉매를 규조토를 통한 여과에 의해 제거하고, 여과액을 증발시켜, 부제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.86 g.
Figure pct01367
f) 에틸 9-히드록시-4,4-디메틸노나노에이트
Figure pct01368
메탄올 (10 mL) 중 에틸 4,4-디메틸-9-(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)노나노에이트 (실시예 285, 단계 e) (0.86 g)의 용액에 p-톨루엔술폰산 일수화물 (52 mg)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트 및 물로 희석하고, 상을 분리하였다. 수성층을 에틸 아세테이트 (2회)로 추출하고, 합한 유기상을 10 ％ 시트르산, 포화 중탄산나트륨 수용액 및 염수로 세척한 후, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 시클로헥산 중 0→50 ％ 에틸 아세테이트로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.44 g.
Figure pct01369
g) 에틸 9-브로모-4,4-디메틸노나노에이트
Figure pct01370
0 ℃에서, DCM (19 mL) 중 에틸 9-히드록시-4,4-디메틸노나노에이트 (실시예 285, 단계 f) (0.44 g)의 용액을 사브롬화탄소 (0.76 g)에 이어서 트리페닐포스핀 (0.60 g)으로 처리하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 추가량의 사브롬화탄소 (0.76 g) 및 트리페닐포스핀 (0.60 g)을 첨가하고, 3시간 동안 계속 교반하였다. 용매를 증발에 의해 제거한 후, 혼합물을 시클로헥산 중에서 분쇄하고, 생성된 고체를 여과에 의해 제거하였다. 고체를 시클로헥산으로 세척하고, 여과액을 약 15 mL로 농축시키고, 밤새 방치하였다. 용액에서 나온 고체를 여과에 의해 제거하고, 시클로헥산으로 세척하고, 여과액 증발시켜, 부제 화합물을 연한 갈색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.56 g.
Figure pct01371
h) 9-브로모-4,4-디메틸노난-1-올
Figure pct01372
질소하에 0 ℃에서, 무수 에테르 (19 mL) 중 에틸 9-브로모-4,4-디메틸노나노에이트 (실시예 285, 단계 g) (0.56 g)의 용액을 디이소부틸알루미늄 수소화물 (톨루엔 중 1 M, 4.20 mL)로 처리하고, 반응 혼합물을 0 ℃에서 1시간 15분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 수성 칼륨 나트륨 타르트레이트 용액으로 조심스럽게 처리하고, 1시간 동안 교반하였다. 상을 분리하고, 수성층을 에테르 (2회)로 추출한 후, 합한 유기상을 염수로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜, 부제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다. 수득량 0.42 g.
Figure pct01373
i) (9-(9-히드록시-6,6-디메틸노닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논
Figure pct01374
(2-이소프로필-티아졸-4-일)-(1-옥사-4,9-디아자-스피로[5.5]운데크-4-일)-메타논 디트리플루오로아세테이트 (실시예 22, 단계 b) (0.40 g)를 메탄올-습윤된 SCX-2 카트리지에 적용하고, 메탄올로 세척한 후, 메탄올 중 2 N 암모니아를 사용하여 용출시키고, 증발시켜, 유리 염기 (227 mg)를 수득하였다. 상기 물질을 아세토니트릴 (8.8 mL) 중 9-브로모-4,4-디메틸노난-1-올 (실시예 285, 단계 h) (0.11 g)에 이어서 트리에틸아민 (0.20 mL)으로 처리하였다. 혼합물을 60 ℃에서 21시간 동안 가열한 후, 용매를 증발에 의해 제거하였다. 5 ％ 트리에틸아민을 함유하는 시클로헥산 중 75 ％ 에틸 아세테이트 → 100 ％ 에틸 아세테이트 (5 ％ 트리에틸아민 함유)로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여, 부제 화합물을 무색 검으로서 수득하였다. 수득량 0.295 g.
Figure pct01375
j) (R)-4-히드록시-7-(1-히드록시-2-(9-(4-(2-이소프로필티아졸-4-카르보닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-9-일)-4,4-디메틸노닐아미노)에틸)벤조[d]티아졸-2(3H)-온 포르메이트
Figure pct01376
0 ℃에서 질소하에, DCM (5.3 mL) 중 (9-(9-히드록시-6,6-디메틸노닐)-1-옥사-4,9-디아자스피로[5.5]운데칸-4-일)(2-이소프로필티아졸-4-일)메타논 (실시예 285, 단계 i) (0.255 g)의 용액을 트리플루오로아세트산 (0.04 mL)으로 처리하고, 5분 동안 교반한 후, 데스-마틴 페리오디난 (0.339 g)을 첨가하였다. 용액을 실온에서 1시간 동안 교반한 후, 추가량의 데스-마틴 페리오디난 (0.113 g)을 첨가하고, 30분 동안 교반을 계속하였다. 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액 및 포화 중탄산나트륨 수용액 (1:1)으로 처리하고, DCM으로 희석하고, 10분 동안 교반하였다. 에틸 아세테이트를 첨가하고, 상을 분리하였다. 수성층을 에틸 아세테이트 (2회)로 추출하였다. 유기물을 합하고, 포화 중탄산나트륨 수용액으로 세척한 후, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 이어서 아세트산 (0.046 mL)을 첨가하고, 용액 증발시켜, 알데히드 (0.362 g)를 수득하였다. 이를 무수 메탄올 (9 mL) 중에 현탁시키고, (R)-7-(2-아미노-1-히드록시에틸)-4-히드록시벤조[d]티아졸-2(3H)-온 히드로클로라이드 (WO2007027134, 실시예 1, 단계 d) (0.210 g), 3Å 분자체 및 아세트산 (0.046 mL)으로 처리하고, 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0 ℃로 냉각시키고, 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (113 mg)를 첨가하고, 실온에서 24시간 동안 계속 교반하였다. 혼합물을 여과한 후, 진공하에 농축시켰다. DCM 중 5, 6, 7, 8, 9, 10 및 12 ％의 (메탄올 중 10 ％ 암모니아 수용액)으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하고, 이어서 정제용 HPLC로 정제하였다 (페노메넥스 제미니 (등록상표), 구배: 0.1 ％ 수성 포름산 중 5→40 ％ 아세토니트릴). 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결-건조시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. 수득량 0.024 g.
Figure pct01377
본 발명의 화합물은, 예를 들어 하기와 같이 당업계에 공지되어 있는 분석법을 이용하여 제약 활성에 대해 시험될 수 있다.
아드레날린성 β2 매개 cAMP 생성 분석
세포 준비
H292 세포를 37 ℃, 5 ％ CO2의 225 cm2 플라스크 인큐베이터에서 10 ％ (v/v) FBS (우태 혈청) 및 2 mM L-글루타민을 함유하는 RPMI 배지에서 성장시켰다.
실험 방법
아쿠타제 (Accutase, 상표명) 세포 박리 용액으로 15분 동안 처리하여, 부착된 H292 세포를 조직 배양 플라스크로부터 떼어냈다. 플라스크를 37 ℃, 5 ％ CO2의 가습 인큐베이터에서 15분 동안 인큐베이션하였다. 박리된 세포를 RPMI 배지 (10 ％ (v/v) FBS 및 2 mM L-글루타민 함유)에 0.1×106개 세포/mL로 재현탁시켰다. 100 ㎕ 중의 10000개 세포를 조직-배양-처리된 96-웰 플레이트의 각 웰에 첨가하고, 세포를 37 ℃, 5 ％ CO2의 가습 인큐베이터에서 밤새 인큐베이션하였다. 배양 배지를 제거하고, 세포를 분석 완충액 100 ㎕로 2회 세척하고, 분석 완충액 (10 mM HEPES (pH 7.4) 및 5 mM 글루코스를 함유하는 HBSS 용액) 50 ㎕로 교체하였다. 세포를 실온에서 20분 동안 휴지시킨 후, 롤리프람 (1.2 mM, 2.4 ％ (v/v) 디메틸술폭사이드를 함유하는 분석 완충액 중에 제조) 25 ㎕를 첨가하였다. 세포를 롤리프람과 함께 10분 동안 인큐베이션한 후, 시험 화합물을 첨가하고, 세포를 실온에서 60분 동안 인큐베이션하였다. 분석에서 최종 롤리프람 농도는 300 μM이었으며, 최종 비히클 농도는 1 ％ (v/v) 디메틸술폭사이드였다. 상등액을 제거하고, 분석 완충액 100 ㎕로 1회 세척하고, 용해 완충액 50 ㎕로 교체하여 반응을 중단시켰다. 세포 단일층을 -80 ℃에서 30분 동안 (또는 밤새) 동결시켰다.
알파스크린 ( AlphaScreen , 상표명) cAMP 검출
세포 용해물 중 cAMP (시클릭 아데노신 모노포스페이트)의 농도를 알파스크린 (상표명) 방법을 이용하여 측정하였다. 동결된 세포 플레이트를 플레이트 진탕기 상에서 20분 동안 해동시킨 후, 세포 용해물 10 ㎕를 96-웰 백색 플레이트로 옮겼다. 바이오티닐화된 cAMP와 함께 예비-인큐베이션한 혼합 알파스크린 (상표명) 검출 비드 40 ㎕를 각 웰에 첨가하고, 플레이트를 어두운 곳에서 3시간 동안 실온에서 인큐베이션하였다. 알파스크린 (상표명) 신호는 제조업체가 권장하는 설정조건에서 엔비젼 (EnVision) 분광광도계 (퍼킨-엘머 인코포레이티드 (Perkin-Elmer Inc.))를 이용하여 측정하였다. cAMP 농도는 표준 cAMP 농도를 사용한 동일 실험에서 결정된 보정 곡선을 참조하여 측정하였다. 효능제에 대한 농도 반응 곡선을 구축하고, 데이타를 4 파라미터 로지스틱 방정식에 적합화시켜, pEC50 및 내인성 활성 모두를 측정하였다. 내인성 활성은 각 실험에서 포르모테롤에 대해 측정된 최대 활성에 대한 분율로 표시하였다.
무스카린성 3 수용체 결합 분석
M3 수용체에 결합하는 화합물의 친화력 (pIC50)을 섬광 근접 검정법 (SPA) 형식에서 인간 무스카린성 아세틸콜린 M3 수용체 (M3-ACh)를 발현하는 CHO-K1 (차이니즈 햄스터 난소) 세포막에 대한 [3H]N-메틸 스코폴라민 (NMS)의 경쟁 결합에 의해 측정하였다.
SPA 비드를 막으로 미리 코팅한 후, 본 발명의 화합물의 연속 희석액, 0.1 nM, 1/4 Kd (실험상 측정된 해리 상수)의 [3H]NMS 및 분석 완충액 (5 mM MgCl2를 함유하는 20 mM HEPES, pH 7.4)과 함께 웰 당 2 mg의 비드로 인큐베이션하였다. 분석은 1 ％ (v/v) 디메틸 술폭사이드 (DMSO)의 존재하에 200 ㎕의 최종 부피로 수행되었다. [3H]NMS의 총 결합은 경쟁 화합물의 부재하에 측정하고, [3H]NMS의 비-특이적 결합은 1 μM 아트로핀의 존재하에 측정하였다. 플레이트를 16시간 동안 실온에서 인큐베이션한 후, 정규화된 3H 프로토콜을 이용하여 왈락 마이크로베타 (Wallac Microbeta, 상표명) 상에서 판독하였다. 특이적 [3H]NMS 결합의 50 ％ 감소에 필요한 화합물 몰 농도의 음의 로그로서 정의된 pIC50을 측정하였다.
상기 분석으로 본 발명의 화합물을 시험하였고, 하기 결과를 얻었다.
Figure pct01378
Figure pct01379
Figure pct01380
Figure pct01381
Figure pct01382
NV* = 3.2 μM의 시험 화합물의 최대 농도까지 불활성임.
하기 실험 절차를 이용하여, 실시예 116 내지 263의 화합물에 대해 1 μM에서의 베타-2 ％ 효과를 측정하였다.
아드레날린성 β2 매개 cAMP 생성
세포 준비
H292 세포를 37 ℃, 5 ％ CO2의 225 cm2 플라스크 인큐베이터에서 10 ％ (v/v) FBS (우태 혈청) 및 2 mM L-글루타민을 함유하는 RPMI 배지에서 성장시켰다.
실험 방법
DMSO로의 초기 제1 희석액으로 화합물을 제조하여, 1 mM 원액 농도를 얻었다. 이어서, 원액 농도를 1 대 10으로 희석하여 (10 ㎕ 원액 화합물 + 90 ㎕ DMSO), 0.1 mM 화합물을 수득하였다.
4 ％ 디메틸술폭사이드를 함유하는 분석 완충액 (10 mM HEPES (pH 7.4) 및 5 mM 글루코스를 함유하는 HBSS 용액)으로 추가로 1 대 25 희석액을 제조하여, 화합물 첨가 플레이트를 제조하였다. 분석에서 최종 화합물 농도는 1 μM이었다.
아쿠타제 (상표명) 세포 박리 용액으로 15분 동안 처리하여, 부착된 H292 세포를 조직 배양 플라스크로부터 떼어냈다. 플라스크를 37 ℃, 5 ％ CO2의 가습 인큐베이터에서 15분 동안 인큐베이션하였다. 박리된 세포를 RPMI 배지 (10 ％ (v/v) FBS 및 2 mM L-글루타민 함유)에 0.1×106개 세포/mL로 재현탁시켰다. 100 ㎕ 중의 10000개 세포를 조직-배양-처리된 96-웰 플레이트의 각 웰에 첨가하고, 세포를 37 ℃, 5 ％ CO2의 가습 인큐베이터에서 밤새 인큐베이션하였다. 배양 배지를 제거하고, 세포를 분석 완충액 100 ㎕로 2회 세척하고, 분석 완충액 (10 mM HEPES (pH 7.4) 및 5 mM 글루코스를 함유하는 HBSS 용액) 50 ㎕로 교체하였다. 세포를 실온에서 20분 동안 휴지시킨 후, 롤리프람 (1.2 mM, 분석 완충액 중에 제조) 25 ㎕를 첨가하였다. 세포를 롤리프람과 함께 10분 동안 인큐베이션한 후, 시험 화합물 25 ㎕를 첨가하고, 세포를 실온에서 60분 동안 인큐베이션하였다. 분석에서 최종 롤리프람 농도는 300 μM이었으며, 최종 비히클 농도는 1 ％ (v/v) 디메틸술폭사이드였다. 상등액을 제거하고, 분석 완충액 100 ㎕로 1회 세척하고, 용해 완충액 50 ㎕로 교체하여 반응을 중단시켰다. 세포 단일층을 -80 ℃에서 30분 동안 (또는 밤새) 동결시켰다.
알파스크린 (상표명) cAMP 검출
세포 용해물 중 cAMP (시클릭 아데노신 모노포스페이트)의 농도를 알파스크린 (상표명) 방법을 이용하여 측정하였다. 동결된 세포 플레이트를 플레이트 진탕기 상에서 20분 동안 해동시킨 후, 세포 용해물 10 ㎕를 96-웰 백색 플레이트로 옮겼다. 동일한 부피의 공여체 비드 (바이오티닐화된 cAMP와 함께 어두운 곳에서 30분 동안 예비-인큐베이션함) 및 수용체 비드를 함유하는 혼합 알파스크린 (상표명) 검출 비드 40 ㎕를 각 웰에 첨가하고, 플레이트를 어두운 곳에서 3시간 동안 실온에서 인큐베이션하였다. 알파스크린 (상표명) 신호는 제조업체가 권장하는 설정조건에서 엔비젼 분광광도계 (퍼킨-엘머 인코포레이티드)를 이용하여 측정하였다. 웰당 생산된 cAMP 농도는 동일 실험에서 결정된 cAMP 표준 곡선을 참조하여 계산하였고, 1E-07M 포르모테롤에 의해 발생된 최대 반응에 대한 백분율로 표시하였다.
하기 실험 절차를 이용하여, 실시예 116 내지 263의 화합물의 1 μM에서의 M3 억제율 (％)을 측정하였다.
무스카린성 3 수용체 결합 분석
M3 수용체에 대한 화합물의 활성 (특정 결합 억제율, ％)을 섬광 근접 검정법 (SPA) 형식에서 인간 무스카린성 아세틸콜린 M3 수용체 (M3-ACh)를 발현하는 CHO-K1 (차이니즈 햄스터 난소) 세포막에 대한 [3H]N-메틸 스코폴라민 (NMS)의 경쟁 결합에 의해 측정하였다.
SPA 비드를 막으로 미리 코팅한 후, 1 μM의 본 발명의 화합물, 0.1 nM, 1/4 Kd (실험상 측정된 해리 상수)의 [3H]NMS 및 분석 완충액 (5 mM MgCl2를 함유하는 20 mM HEPES, pH 7.4)과 함께 웰 당 2 mg의 비드로 인큐베이션하였다. 분석은 1 ％ (v/v) 디메틸 술폭사이드 (DMSO)의 존재하에 200 ㎕의 최종 부피로 수행되었다. [3H]NMS의 총 결합은 경쟁 화합물의 부재하에 측정하고, [3H]NMS의 비-특이적 결합은 1 μM 아트로핀의 존재하에 측정하였다. 플레이트를 16시간 동안 실온에서 인큐베이션한 후, 정규화된 3H 프로토콜을 이용하여 왈락 마이크로베타 (상표명) 상에서 판독하였다. 특이적 [3H]NMS 결합 억제율 (％)로서 정의된 1 μM에서의 화합물 활성을 측정하였다.
Figure pct01383
Figure pct01384
Figure pct01385
Figure pct01386
도면의 간단한 설명
도 1: 디(1S)-(+)-10-캄포술폰산 염 변형 A의 X-선 분말 회절 패턴 - 실시예 47B.
도 2: 푸마레이트 염 변형 A의 X-선 분말 회절 패턴 - 실시예 47C.
도 3: 푸마레이트 염 변형 B의 X-선 분말 회절 패턴 - 실시예 47D.

Claims (13)

  1. 하기 화학식 I의 화합물 및 그의 제약상 허용가능한 염.
    <화학식 I>
    Figure pct01387

    상기 식에서,
    Ar은 β-아드레날린 수용체 결합기를 나타내고,
    L은 최대 15개의 탄소 원자의 선형 또는 분지형 히드로카르빌 쇄를 포함하는 링커를 나타내고,
    여기서의 쇄 중 최대 3개의 탄소 원자는 할로겐, S(O)0-2R56, NR57R58, S(O)2NR59R60, C(O)NR61R62, C(O)OR63, NR64S(O)2R65, NR66C(O)R67, NR68C(O)OR69, NR70C(O)NR71R72, OR73, C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 최대 4개의 치환기로 임의로 치환되고, 여기서의 C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬은 할로겐, 히드록실 및 C1 - 6알콕시로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고,
    여기서의 쇄 중 최대 5개의 탄소 원자는 O, NR45, S, S(O), S(O)2, C(O)O, OC(O), NR46C(O), C(O)NR47, NR48S(O)2, S(O)2NR49, NR50C(O)NR51, NR52S(O)2NR53, OC(O)NR54 및 NR55C(O)O로부터 독립적으로 선택된 기로 대체될 수 있지만, 단 상기 쇄의 임의의 이러한 기는 2개 이상의 탄소 원자에 의해 분리되며,
    여기서의 쇄 중 최대 6개의 탄소 원자는 N, O 또는 S로부터 독립적으로 선택된 최대 4개의 헤테로원자를 갖는 모노시클릭 또는 바이시클릭 지방족, 헤테로지방족, 방향족 또는 헤테로방향족 고리의 일부를 형성할 수 있고, 상기 고리는 최대 10개의 고리 원자를 포함하며, 여기서의 고리는 할로겐, S(O)0-2R56, NR57R58, S(O)2NR59R60, C(O)NR61R62, C(O)OR63, NR64S(O)2R65, NR66C(O)R67, NR68C(O)OR69, NR70C(O)NR71R72, OR73, C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환되고, 여기서의 C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬은 할로겐, 히드록실 및 C1 - 6알콕시로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고,
    상기 쇄는 각각 독립적으로 선택된 이러한 고리를 최대 3개 포함할 수 있고,
    이때의 R56, R65 및 R69는 각각 독립적으로 C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬을 나타내고, 여기서의 C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬은 할로겐, 히드록실 및 C1 - 6알콕시로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고,
    R45, R46, R47, R48, R49, R50, R51, R52, R53, R54, R55, R57, R58, R59, R60, R61, R62, R63, R64, R66, R67, R68 , R70, R71, R72 및 R73은 각각 독립적으로 수소, C1 - 6알킬 또는 C3 -6시클로알킬을 나타내고, 여기서의 C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬은 할로겐, 히드록실 및 C1 - 6알콕시로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있거나, 또는 R57과 R58, R59와 R60, R61과 R62 또는 R71과 R72 중 임의의 것은 이것들이 모두 부착된 질소 원자와 함께 4원 내지 8원의 지방족 헤테로시클릭 고리를 형성할 수 있고, 여기서의 헤테로시클릭 고리는 N, O 및 S로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 헤테로원자를 포함할 수 있고, 여기서의 고리는 할로겐, 히드록실, C1 -6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고, 여기서의 C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬은 할로겐, 히드록실 및 C1-6알콕시로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고,
    여기서의 쇄는 최대 3개의 탄소-탄소 이중 결합을 추가로 포함할 수 있고,
    여기서의 쇄는 최대 3개의 탄소-탄소 삼중 결합을 추가로 포함할 수 있고,
    L1 및 L2는 독립적으로 수소, C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬을 나타내고,
    L3 및 L4는 독립적으로 수소, C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬을 나타내고, 여기서의 C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬은 할로겐, 히드록실 및 C1 - 6알콕시로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고,
    추가로, L1 및/또는 L3은 링커 L의 히드로카르빌 쇄의 탄소 원자에 연결되어 최대 6개 고리 원자의 지방족 고리를 형성할 수 있고, 여기서의 각각의 고리는 N, O 및 S로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 헤테로원자를 포함할 수 있고,
    R1은 페닐 고리, 4원 내지 8원의 헤테로지방족 고리, 3원 내지 8원의 지방족 고리 또는 5원 내지 6원의 헤테로아릴 고리 (각각은 N, O 또는 S로부터 독립적으로 선택된 최대 4개의 헤테로원자를 가짐)를 나타내고, 여기서의 고리 각각은 할로겐, 시아노, 니트로, SH, S(O)0-2R5, NR6R7, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, NR13S(O)2R14, NR15C(O)R16, NR17C(O)OR18, NR19C(O)NR20R21, OR22, C1 - 7알킬 또는 C3-8시클로알킬 (여기서의 각각의 C1 - 7알킬 및 C3 - 8시클로알킬은 할로겐, 시아노, 니트로, SH, S(O)0-2R5, NR6R7, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, NR13S(O)2R14, NR15C(O)R16, NR17C(O)OR18, NR19C(O)NR20R21 또는 OR22로부터 독립적으로 선택된 최대 6개의 치환기로 임의로 치환될 수 있음), 페닐 고리, 4원 내지 8원의 헤테로지방족 고리, 5원 내지 6원의 헤테로아릴 고리 (각각은 N, O 또는 S로부터 독립적으로 선택된 최대 4개의 헤테로원자를 가짐)로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고, 여기서의 페닐 고리, 4원 내지 8원의 헤테로지방족 고리, 3원 내지 8원의 지방족 고리 또는 5원 내지 6원의 헤테로아릴 고리 각각은 할로겐, 시아노, 니트로, SH, S(O)0-2R5, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, OR22, C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고, 여기서의 C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬은 할로겐, 히드록실, C1 - 6알콕시, 시아노, 니트로, NH2, NH(C1 - 6알킬) 및 N(C1 - 6알킬)2로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있거나, 또는
    R1은 N, O 또는 S로부터 독립적으로 선택된 최대 4개의 헤테로원자를 갖는 최대 10개 원자의 융합된 지방족, 융합된 헤테로지방족, 융합된 방향족 또는 융합된 헤테로아릴 고리를 나타내고, 여기서의 고리 각각은 할로겐, 시아노, 니트로, SH, S(O)0-2R5, NR6R7, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, NR13S(O)2R14, NR15C(O)R16, NR17C(O)OR18, NR19C(O)NR20R21, OR22, C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고, 여기서의 C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬은 할로겐, 히드록실, C1 - 6알콕시, NH2, NH(C1 - 6알킬) 및 N(C1 - 6알킬)2로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있거나, 또는
    R1은 1개 또는 2개의 탄소 원자가 O, S 또는 N으로 대체될 수 있는 C1 - 6알킬쇄를 추가로 나타내고,
    여기서의 R1은 최대 3개의 C1 - 3알킬쇄로 치환될 수 있고, 이러한 쇄 2개는 연결되어 C3 - 8시클로알킬쇄를 형성할 수 있고, 여기서의 C1 - 3알킬쇄 및 C3 - 8시클로알킬쇄는 할로겐, 시아노, 니트로, SH, S(O)0-2R5, NR6R7, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, NR13S(O)2R14, NR15C(O)R16, NR17C(O)OR18, NR19C(O)NR20R21 및 OR22로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고,
    여기서의 C1 - 6알킬쇄는 할로겐, 시아노, 니트로, SH, S(O)0-2R5, NR6R7, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, NR13S(O)2R14, NR15C(O)R16, NR17C(O)OR18, NR19C(O)NR20R21, OR22, 페닐 고리, 4원 내지 8원의 헤테로지방족 고리, 3원 내지 8원의 지방족 고리, 5원 내지 6원의 헤테로아릴 고리 (각각은 N, O 또는 S로부터 독립적으로 선택된 최대 4개의 헤테로원자를 가짐)로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 추가로 임의로 치환되고, 여기서의 각각의 고리는 할로겐, 시아노, 니트로, S(O)0-2R5, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, OR22, C1 - 7알킬 또는 C3 - 7시클로알킬 (여기서의 각각의 C1 - 7알킬 및 C3 - 7시클로알킬은 할로겐, 시아노, 니트로, SH, S(O)0-2R5, NR6R7, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, NR13S(O)2R14, NR15C(O)R16, NR17C(O)OR18, NR19C(O)NR20R21 또는 OR22로부터 독립적으로 선택된 최대 6개의 치환기로 임의로 치환될 수 있음), 페닐 고리, 4원 내지 8원의 헤테로지방족 고리, 3원 내지 8원의 지방족 고리, 5원 내지 6원의 헤테로아릴 고리 (각각은 N, O 또는 S로부터 독립적으로 선택된 최대 4개의 헤테로원자를 가짐)로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환되고, 여기서의 페닐 고리, 4원 내지 8원의 헤테로지방족 고리, 3원 내지 8원의 지방족 고리 또는 5원 내지 6원의 헤테로아릴 고리 각각은 할로겐, 시아노, 니트로, S(O)0-2R5, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, OR22, C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고, 여기서의 C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬은 각각 할로겐, 히드록실, C1 - 6알콕시, NH2, NH(C1 - 6알킬) 및 N(C1 - 6알킬)2로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있거나, 또는
    C1 - 6알킬쇄는 N, O 또는 S로부터 독립적으로 선택된 최대 4개의 헤테로원자를 갖는 최대 10개 원자의 융합된 지방족, 융합된 헤테로지방족, 융합된 방향족 또는 융합된 헤테로아릴 고리로 치환될 수 있고, 여기서의 고리 각각은 할로겐, 시아노, 니트로, SH, S(O)0-2R5, NR6R7, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, NR13S(O)2R14, NR15C(O)R16, NR17C(O)OR18, NR19C(O)NR20R21, OR22, C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고, 여기서의 C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬은 할로겐, 히드록실, C1 - 6알콕시, NH2, NH(C1 - 6알킬) 및 N(C1 - 6알킬)2로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있고,
    R5, R14 및 R18은 독립적으로 C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬을 나타내고, 여기서의 C1 - 6알킬 및 C3 - 6시클로알킬은 할로겐, 히드록실, C1 - 6알콕시, NH2, NH(C1 - 6알킬) 및 N(C1 - 6알킬)2로부터 독립적으로 선택된 1개 이상의 치환기로 임의로 치환될 수 있고,
    R6, R7, R8, R9, R10, R11, R12, R13, R15, R16, R17, R19, R20, R21 및 R22는 각각 독립적으로 수소, C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬을 나타내고, 여기서의 C1 - 6알킬 또는 C3-6시클로알킬은 할로겐, 히드록실, C1 - 6알콕시, NH2, NH(C1 - 6알킬) 및 N(C1 - 6알킬)2로부터 독립적으로 선택된 1개 이상의 치환기로 임의로 치환될 수 있거나, 또는 R6과 R7, R8과 R9, R10과 R11 또는 R20과 R21 중 임의의 것은 이것들이 모두 부착된 질소 원자와 함께 4원 내지 8원의 지방족 헤테로시클릭 고리를 형성할 수 있고, 여기서의 헤테로시클릭 고리는 할로겐, 히드록실, C1 - 6알킬, C1 - 6시클로알킬 및 C1 - 6알콕시로부터 독립적으로 선택된 1개 이상의 치환기로 임의로 치환될 수 있고, 여기서의 C1-6알킬, C1 - 6시클로알킬 또는 C1 - 6알콕시는 할로겐, 히드록실 및 C1 - 6알콕시, NH2, NH(C1-6알킬) 및 N(C1 - 6알킬)2로부터 독립적으로 선택된 1개 이상의 치환기로 임의로 치환될 수 있고,
    X는 O, S, S(O)o 또는 CR25R26을 나타내고,
    m = 0, 1, 2 또는 3이고,
    n = 1, 2, 3 또는 4이지만, 단 m + n은 2 이상이고,
    o = 1 또는 2이고,
    W는 CR27R28CR29R30 또는 CR31R32CR33R34CR35R36을 나타내고,
    V 및 Z는 독립적으로 결합, CR37R38 또는 CR39R40CR41R42를 나타내지만, 단 X가 O, S 또는 S(O)o를 나타내는 경우에는 m, V 및 Z는 고리 중의 모든 헤테로원자가 2개 이상의 탄소 원자에 의해 분리되도록 하고 (예를 들어, V가 결합인 경우에는 m은 0이 아니고 Z는 결합이 아님),
    Y는 CO, CONR43, SO2 또는 SO2NR44를 나타내고,
    R25, R26, R27, R28, R29, R30, R31, R32, R33, R34, R35, R36, R37, R38, R39, R40, R41 및 R42는 각각 독립적으로 수소, 불소 또는 C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬을 나타내고, 이것들이 수소 또는 불소를 나타내지 않는 경우에는 R25와 R26, R27과 R28, R29와 R30, R31과 R32, R33과 R34, R35와 R36, R37과 R38, R39와 R40 또는 R41과 R42는 이것들이 둘다 부착된 탄소 원자와 함께 3원 내지 6원의 지방족 고리를 추가로 형성할 수 있으며,
    R43 및 R44는 각각 독립적으로 수소, C1 - 6알킬 또는 C3 - 6시클로알킬을 나타낸다.
  2. 제1항에 있어서,
    Ar이
    Figure pct01388
    중 임의의 하나로부터 선택되고,
    M1이 S, C(O), NH, CH2, CH2CH2, CH=CH, CH2O 또는 OCH2이고,
    M2가 S, C(O), NH, CH2, CH2CH2, CH=CH, CH2O 또는 OCH2이고,
    A3이 또한 CH2OH, NHCHO, NHS(O)2NA15A16 또는 NHSO2A17일 수 있고,
    A15 또는 A16이 독립적으로 수소 또는 C1 - 6알킬이고,
    A17이 C1 - 6알킬인
    화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염.
  3. 제1항에 있어서, L이 최대 10개의 탄소 원자의 히드로카르빌 쇄를 포함하는 링커를 나타내는 것인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염.
  4. 제1항에 있어서,
    W가 CR27R28CR29R30 또는 CR31R32CR33R34CR35R36을 나타내고,
    V 및 Z가 독립적으로 결합, CR37R38 또는 CR39R40CR41R42를 나타내지만, 단 X가 O, S 또는 S(O)o를 나타내는 경우에는 m, V 및 Z가 고리 중의 모든 헤테로원자가 2개 이상의 탄소 원자에 의해 분리되도록 하고,
    m이 0, 1, 2 또는 3이고,
    o가 1 또는 2이고,
    R27, R28, R29, R30, R31, R32, R33, R34, R35, R36, R37, R38, R39, R40, R41 및 R42가 각각 독립적으로 수소, 메틸 또는 불소를 나타내는
    화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염.
  5. 제1항에 있어서,
    Y가 CO, CONR43, SO2 또는 SO2NR44를 나타내고,
    R43 및 R44가 각각 독립적으로 수소 또는 메틸을 나타내는
    화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염.
  6. 제1항에 있어서, R1이 C1 - 6알킬, C3 - 8시클로알킬, 페닐, 5원 내지 6원의 헤테로아릴 고리, 또는 N, O 또는 S로부터 독립적으로 선택된 최대 3개의 헤테로원자를 갖는 최대 10개 원자의 융합된 방향족 또는 헤테로아릴 고리를 나타내며, 여기서의 고리 각각이 제1항의 R1에 대해 언급한 바와 같은 최대 3개의 치환기로 임의로 치환될 수 있는 것인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염.
  7. (a) L1이 수소를 나타내는 경우, 염기의 존재하에 하기 화학식 II의 화합물 또는 그의 염을 하기 화학식 III의 화합물 또는 그의 염과 반응시킨 후, 보호기를 제거하거나; 또는
    <화학식 II>
    Figure pct01389

    (상기 식에서, LG1은 이탈기를 나타내고, L, L2, L3, L4, R1, m, n, V, W, X, Y 및 Z는 화학식 I에서 정의한 바와 같음)
    <화학식 III>
    Figure pct01390

    (상기 식에서, Ar은 화학식 I에서 정의한 바와 같고, P1은 수소 또는 보호기임)
    (b) L1이 수소를 나타내는 경우, 환원제의 존재하에 하기 화학식 IV의 화합물 또는 그의 염을 화학식 III의 화합물 또는 그의 염과 반응시키거나; 또는
    <화학식 IV>
    Figure pct01391

    (상기 식에서, L, L2, L3, L4, R1, m, n, V, W, X, Y 및 Z는 화학식 I에서 정의한 바와 같음)
    (c) 염기의 존재하에 하기 화학식 V의 화합물 또는 그의 염을 하기 화학식 VI의 화합물 또는 그의 염과 반응시킨 후, 보호기를 제거하거나;
    <화학식 V>
    Figure pct01392

    (상기 식에서, L, L1, L2, L3, L4, R1, m, n, V, W, X, Y 및 Z는 화학식 I에 정의한 바와 같고, P3은 수소 또는 활성화기를 나타냄)
    <화학식 VI>
    Figure pct01393

    (상기 식에서, Ar은 화학식 I에서 정의한 바와 같고, LG2는 이탈기를 나타내고, P1은 화학식 III에서 정의한 바와 같음)
    염기의 존재하에 화학식 V의 화합물 또는 그의 염을 하기 화학식 VII의 화합물 또는 그의 적합한 염과 반응시킨 후, 보호기를 제거하거나;
    <화학식 VII>
    Figure pct01394

    (상기 식에서, Ar은 화학식 I에서 정의한 바와 같음)
    염기의 존재하에 화학식 V의 화합물 또는 그의 염을 하기 화학식 VIII의 화합물 또는 그의 적합한 염과 반응시킨 후, 케톤을 환원시키고, 이어서 보호기를 제거하거나; 또는
    <화학식 VIII>
    Figure pct01395

    (상기 식에서, Ar은 화학식 I에서 정의한 바와 같고, LG2는 이탈기를 나타냄)
    (d) L3 및 L4가 각각 수소를 나타내는 경우, 환원제의 존재 하에 하기 화학식 IX의 화합물 또는 그의 적합한 염을 하기 화학식 X의 화합물 또는 그의 염과 반응시킨 후, 보호기를 제거하거나; 또는
    <화학식 IX>
    Figure pct01396

    (상기 식에서, Ar, L, L1 및 L2는 화학식 I에서 정의한 바와 같고, P1은 화학식 III에서 정의한 바와 같고, P3은 보호기를 나타냄)
    <화학식 X>
    Figure pct01397

    (상기 식에서, R1, m, n, V, W, X, Y 및 Z는 화학식 I에서 정의한 바와 같음)
    (e) L3 및 L4 중 하나 또는 모두가 수소를 나타내는 경우, 염기의 존재하에 하기 화학식 XI의 화합물 또는 그의 염을 화학식 X의 화합물 또는 그의 염과 반응시킨 후, 보호기를 제거하거나; 또는
    <화학식 XI>
    Figure pct01398

    (상기 식에서, Ar, L, L1 및 L2는 화학식 I에서 정의한 바와 같고, P1은 화학식 III에서 정의한 바와 같고, P3은 보호기를 나타내고, LG3은 이탈기를 나타냄)
    (f) L1 및 L2가 각각 수소를 나타내는 경우, 하기 화학식 XII의 화합물 또는 그의 염을 환원제와 반응시킨 후, 보호기를 제거하고, 하기 화학식 XIII의 화합물 또는 그의 염과 반응시키고, 이어서 보호기를 제거하고;
    <화학식 XII>
    Figure pct01399

    (상기 식에서, Ar, L, L3, L4, m, n, V, W, X, Y 및 Z는 화학식 I에서 정의한 바와 같고, P1은 화학식 III에서 정의한 바와 같고, P4는 질소 보호기임)
    <화학식 XIII>
    Figure pct01400

    (상기 식에서, R1 및 Y는 화학식 I에서 정의한 바와 같고, LG4는 히드록실 또는 이탈기를 나타냄)
    임의로 (a), (b), (c), (d), (e) 또는 (f) 이후에 수득한 화합물을 추가의 본 발명의 화합물로 전환시키고, 화합물의 제약상 허용되는 염을 형성하는 것 중 하나 이상을 수행하는 것을 포함하는, 제1항에서 청구하는 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 제조 방법.
  8. 제1항에서 정의한 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 제약상 허용가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 함께 포함하는 제약 조성물.
  9. 제1항에서 정의한 바와 같은 화학식 I의 화합물을 제약상 허용가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 혼합하는 것을 포함하는, 제8항에서 청구하는 바와 같은 제약 조성물의 제조 방법.
  10. 제1항에 있어서, 요법에 사용하기 위한 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염.
  11. 호흡기 질환 또는 질병의 치료에 사용하기 위한 의약의 제조에서의 제1항에서 정의한 바와 같은 화학식 I의 화합물의 용도.
  12. 제1항에서 정의한 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염인 제1 활성 성분, 및
    PDE4 억제제;
    케모카인 수용체 기능 조절제;
    p38 키나제 기능 억제제;
    글루코코르티코이드; 및
    비-스테로이드성 글루코코르티코이드 수용체 길항제
    로부터 선택된 제2 활성 성분을 함께 포함하는 제약 제품.
  13. 염증성 질환 또는 질병을 치료하거나 그 위험도를 감소시키는 것이 필요한 환자에게 치료 유효량의 제1항에서 청구하는 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 투여하는 것을 포함하는, 염증성 질환 또는 질병을 치료하거나 그 위험도를 감소시키는 방법.
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