KR20100118999A

KR20100118999A - ３-인다졸릴-４-피리딜이소티아졸

Info

Publication number: KR20100118999A
Application number: KR1020107022020A
Authority: KR
Inventors: 토마스 찰스 브리튼; 베로니크 델린져; 아담 마이클 피버쉬; 션 패트릭 홀린셰드; 벤자민 폴 보키츠
Original assignee: 일라이 릴리 앤드 캄파니
Priority date: 2008-04-04
Filing date: 2009-03-18
Publication date: 2010-11-08
Also published as: EA201071168A1; CY1112118T1; EP2276759A1; JP2011516481A; PE20091681A1; EP2276759B1; PT2276759E; WO2009123855A1; ATE529422T1; CN101959883A; CN101959883B; HRP20110784T1; KR101247010B1; DK2276759T3; JO2775B1; AR070986A1; AU2009232263B2; BRPI0910692A2; US7932274B2; SI2276759T1

Abstract

본 발명은 하기 화학식의 3-인다졸릴-4-피리딜이소티아졸 또는 그의 제약상 허용되는 염, 그의 제약 조성물, 및 그의 사용 방법 뿐만 아니라 그의 제조 방법 및 그의 중간체를 제공한다.

Description

３-인다졸릴-４-피리딜이소티아졸{3-INDAZOLYL-4-PYRIDYLISOTHIAZOLES}

본 발명은 특정한 3-인다졸릴-4-피리딜이소티아졸, 특히 특정한 N-아실화 5-아미노-3-인다졸릴-4-피리딜이소티아졸 유도체, 그의 제약 조성물, 그의 사용 방법, 그의 제조 방법 및 그의 중간체를 제공한다.

L-글루타메이트는 중추 신경계에서 주요 흥분 신경전달물질이고 흥분 아미노산이라 일컬어진다. 글루타메이트 수용체는 2개의 주된 아형으로 구성된다: 리간드-작동성 이온-채널 이온성 수용체, 및 G-단백질-결합된 7개-막횡단-도메인 대사성 수용체(mGluR)이다. 대사성 계통은 8개의 요소를 포함하고 서열 유사성, 시그날 변환 및 약리학을 기준으로 하여 3개의 군으로 세분된다. 군 I 수용체 (mGluR₁ 및 mGluR₅, 및 그들의 스플라이스 변형체)는 이노시톨 포스페이트 가수분해 및 세포내 칼슘 시그날의 생성에 적극적으로 결부된다. 군 II 수용체 (mGluR₂ 및 mGluR₃) 및 군 III 수용체 (mGluR₄, mGluR₆, mGluR₇ 및 mGluR₈)는 아데닐릴 시클라제에 소극적으로 결부되고 아데닐릴 시클라제 활성을 간접적으로 억제함으로써 시클릭 AMP 수준을 조절한다. mGlu 수용체 아형은 중추 신경계에서 특유의 발현 패턴을 갖고, 이것은 새롭고 선택적인 약제로 표적화될 수 있다. 예를 들어, mGluR₅ 길항제가 스트레스에 관련된 동물 모델에서 (항)불안 제로서 유용함을 설명하고 있는 문헌 [Slassi, A. et al., Current Topics in Medicinal Chemistry (2005), 5, 897-911]을 참조한다. 또한, mGluR₅ 길항제는 염증 및 신경병증 통증 모델뿐만 아니라 알콜 자기-투여를 포함한 물질 의존성 및 금단 증상 모델에서 유용한 것으로 밝혀졌다.

본 발명의 화합물은 특히 mGluR₂, mGluR₃ 및 mGluR₄에 비하여 군 I 대사성 수용체, 특히 mGluR₅ 수용체 (mGluR₅)의 선택적 길항제이고; 이들은 mGluR₁에 대해 선택적일 수도 있다. 그 자체로 이들은 대사성 글루타메이트 수용체와 관련된 상태, 예컨대 범 불안 장애를 포함한 불안, 주요 우울 장애를 포함한 우울 뿐만 아니라 주요 우울 장애와 동시-이환되는 범 불안 장애를 포함한 우울과 동시-이환되는 불안 (혼합 불안 우울 장애)의 치료를 위해 유용한 것으로 생각된다.

따라서, 본 발명은 mGluR₅의 길항제인 신규 화합물을 제공하고, 그 자체로 상기 언급된 질환의 치료에서 유용한 것으로 생각된다. 이러한 신규의 화합물은 부작용을 수반하지 않으면서 상기 수용체와 관련된 상태의 안전하고 효과적인 치료의 요구를 해결할 수 있다.

본 발명은 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.

<화학식 I>

[상기 식에서,

R¹은 H 또는 C₁-C₃ 알킬이고;

R²은 H, C₁-C₃ 알킬, C₃-C₅ 시클로알킬, C₁-C₃ 플루오로알킬, NR⁴R⁵, C₁-C₃ 알콕시 또는 C₁-C₃ 알콕시메틸이고;

R³은 H 또는 메틸이고;

R⁴ 및 R⁵은 독립적으로 H 또는 C₁-C₃ 알킬이다]

또한, 본 발명은 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 제약상 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 제약 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 치료에 사용하기 위한 화학식 I의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.

또한, 본 발명은 불안 치료용 약제를 제조하기 위한 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도를 제공한다.

또한, 본 발명은 유효 량의 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 그것을 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 불안의 치료 방법을 제공한다.

또한, 본 발명은 불안 치료에 사용하기 위한 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.

용어 "C₁-C₃ 플루오로알킬"은 1 내지 3개 불소 원자로 치환된 1 내지 3개 탄소 원자를 갖는 직쇄 또는 분지쇄 알킬 사슬을 가리키고, 플루오로메틸, 디플루오로메틸 및 1-플루오로-1-메틸-에틸을 포함한다.

화학식 I의 특정한 화합물은 R¹이 C₁-C₃ 알킬인 것이다. 화학식 I의 특정한 화합물은 R²가 C₁-C₃ 알킬인 것이다.

화학식 I의 특정한 화합물은 R¹이 C₁-C₃ 알킬이고; R²가 C₁-C₃ 알킬, C₃-C₅ 시클로알킬 또는 C₁-C₃ 플루오로알킬이고, R³이 메틸인 것이다.

화학식 I의 특정한 화합물은 R¹이 C₁-C₃ 알킬이고; R²가 C₁-C₃ 알킬이고; R³이 메틸인 것이다.

화학식 I의 특정한 화합물은

R¹이 H, 메틸 또는 에틸이고;

R²이 H, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 플루오로메틸, 디플루오로메틸, 1-플루오로-1-메틸-에틸, 메틸아미노, 디메틸아미노, 메톡시 또는 메톡시메틸이고; R³이 H 또는 메틸인 것이다.

화학식 I의 더욱 특별한 화합물은 R¹이 메틸인 것이다.

화학식 I의 더욱 특별한 화합물은 R²이 에틸인 것이다.

화학식 I의 더욱 특별한 화합물은 R²이 이소프로필인 것이다.

화학식 I의 더욱 특별한 화합물은 R³이 메틸인 것이다.

화학식 I의 바람직한 화합물은 (1R,2R)-2-메틸-시클로프로판카르복실산 [4-(6-에틸-피리딘-2-일)-3-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-이소티아졸-5-일]아미드 또는 그의 제약상 허용되는 염이다.

화학식 I의 바람직한 화합물은 (1R,2R)-2-메틸-시클로프로판카르복실산 [4-(6-에틸-피리딘-2-일)-3-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-이소티아졸-5-일]아미드 히드로클로라이드이다.

화학식 I의 더욱 바람직한 화합물은 (1R,2R)-2-메틸-시클로프로판카르복실산 [4-(6-이소프로필-피리딘-2-일)-3-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-이소티아졸-5-일]아미드 또는 그의 제약상 허용되는 염이다.

화학식 I의 더욱 더 바람직한 화합물은 (1R,2R)-2-메틸-시클로프로판카르복실산 [4-(6-이소프로필-피리딘-2-일)-3-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-이소티아졸-5-일]아미드이다.

본 발명의 추가의 구현양태는,

A) R¹이 C₁-C₃ 알킬인 화학식 I의 화합물의 경우,

<화학식 I>

[상기 식에서, R¹은 C₁-C₃ 알킬이다]

R¹이 C₁-C₃ 알킬인 화학식 II의 화합물을 2-Q'-피리딜 (여기에서, Q'는 트리-n-부틸스탄나닐 또는 트리메틸스탄나닐이다)과 결합시키고;

<화학식 II>

[상기 식에서, R¹은 C₁-C₃ 알킬이다]

2-Q'-피리딜 (여기에서 Q'는 트리-n-부틸스탄나닐 또는 트리메틸스탄나닐이다)

B) R¹이 H인 화학식 I의 화합물의 경우,

<화학식 I>

[상기 식에서, R¹은 H이다]

P가 t-부틸옥시카르보닐인 화학식 IV의 화합물을 탈보호시키고;

<화학식 IV>

[상기 식에서, P는 t-부틸옥시카르보닐이다]

그 후에, 화학식 I의 화합물의 제약상 허용되는 염이 요구될 때, 화학식 I의 염기성 화합물을 생리학적으로 허용되는 산과 반응시키거나 또는 임의의 다른 통상적인 절차에 의해 이것을 수득하는 것을 포함하는,

화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 제조 방법을 포함한다.

본 발명의 추가의 구현양태는 화학식 I의 화합물의 제조를 위해 유용한 중간체 화합물을 제공한다. 더욱 구체적으로, 본 발명은 화학식 II의 화합물을 제공한다.

<화학식 II>

[상기 식에서,

R¹은 H 또는 C₁-C₃ 알킬이고;

R³은 H 또는 메틸이다]

화학식 II의 특별한 화합물은 R¹이 메틸인 것이다.

화학식 II의 특별한 화합물은 R³이 메틸인 것이다.

화학식 II의 바람직한 화합물은 (1R,2R)-2-메틸-시클로프로판카르복실산 [4-브로모-3-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-이소티아졸-5-일]아미드이다.

본 발명의 화합물은 입체이성질체로서 존재할 수도 있는 것으로 이해된다. 모든 거울상이성질체, 부분입체이성질체 및 이들의 혼합물이 본 발명 내에서 의도되지만, 바람직한 구현양태는 단일 부분입체이성질체이고, 더욱 바람직한 구현양태는 단일 거울상이성질체이다. R³이 H인 본 발명의 화합물의 경우, 이소티아졸의 5 위치에 부착된 시클로프로판카르복실산 아미드 기는 비-키랄인 것으로 이해된다.

본 발명의 화합물의 특정한 거울상이성질체는, 이소티아졸의 5 위치에서 부착된 기가 (1R,2R)-2-메틸-시클로프로판-카르복실산 아미드인 것이다.

본 발명의 화합물은 호변이성질체 형태로서 존재할 수도 있는 것으로 이해된다. 호변이성질체 형태가 존재할 때, 각각의 형태 및 이들의 혼합물이 본 발명에서 의도된다. 예를 들어, 기 R¹이 수소일 때, 화학식 I의 화합물은 호변이성질체 형태 I 및 II로 존재할 수도 있다. 그 자체로, 호변이성질체 형태 I로서 R¹이 수소인 화학식 I의 화합물에 대한 언급은 호변이성질체 형태 II 뿐만 아니라 형태 I 및 II의 혼합물을 포함하는 것으로 이해된다.

호변이성질체 형태 I

호변이성질체 형태 II

용어 "제약상 허용되는 염"은 화학식 I의 화합물의 기본 부위와 함께 존재하는 산 부가 염을 포함한다. 이러한 염은 문헌 [HANDBOOK OF PHARMACEUTICAL SALTS: PROPERTIES, SELECTION AND USE, P.H.Stahl and C.G.Wermuth (Eds.), Wiley-VCH, New York, 2002] (당업자에게 공지됨)에 기재된 제약상 허용되는 염을 포함한다.

제약상 허용되는 염에 추가로, 본 발명에 다른 염이 포함된다. 이들은 화합물의 정제에서 또는 다른 제약상 허용되는 염의 제조에서 중간체로서 역할을 하거나, 또는 동정, 특징화 또는 정제를 위해 유용하다.

본 발명의 화합물은 mGluR₅ 수용체의 길항작용이 나타날 때는 언제라도 유용한 것으로 예상된다. 특히, 본 발명의 화합물은 범불안 장애를 포함한 불안, 주요 우울 장애를 포함한 우울 뿐만 아니라 우울과 동시-이환되는 불안 (혼합 불안 우울)의 치료를 위해 유용한 것으로 예상된다. 따라서, 본 발명의 하나의 특별한 측면은 주요 우울 장애와 동시-이환되는 범불안 장애를 포함하는 혼합 불안 우울 장애의 치료이다.

여기에서 사용된 바와 같이, 용어 "환자"는 포유동물과 같은 온혈 동물을 가리키고 인간을 포함한다.

또한, 당업자라면 증상을 현재 나타내는 환자를 유효 량의 화학식 I의 화합물로 치료함으로써 불안 장애에 영향을 미칠 수 있는 것으로 이해된다. 따라서, 용어 "치료" 및 "치료하는"이란 장애 및/또는 그의 증상의 발전을 느리게하거나, 방해하거나, 저지하거나, 제어하거나 중지시킬 수도 있는 모든 과정을 가리키는 것으로 해석되지만, 반드시 모든 증상의 완전한 제거를 나타내지는 않는다.

또한, 당업자라면 화학식 I의 화합물의 유효 량으로 미래 증상의 위험을 가진 환자를 치료함으로써 불안 장애에 영향을 미칠 수 있는 것으로 이해되며 이것의 예방적 치료를 포함하는 것으로 해석된다.

여기에서 사용된 용어 화학식 I의 화합물 "유효 량"이란 여기에 기재된 불안 장애를 치료하는데 효과적인 투여량, 즉 양을 가리킨다.

당업자로서 주치 진단의라면 통상적인 기술의 사용에 의해 그리고 유사 상황 하에서 수득되는 결과를 관찰함으로써 유효량을 쉽게 결정할 수 있을 것이다. 화학식 I의 화합물의 투여량인 유효 량을 결정함에 있어서, 이에 한정되지 않지만 투여되는 화학식 I의 화합물, 사용된다면 다른 약제의 공동-투여; 포유동물의 종; 그의 크기, 연령 및 일반적 건강; 연관성 정도 또는 불안의 심각성; 개개 환자의 반응; 투여 방식; 투여되는 제제의 생체이용성 특징; 선택된 투여 요법; 다른 동반 약제의 사용; 및 기타 관련 상황을 포함하여, 주치 진단의에 의해 여러 가지 요인이 고려된다.

화학식 I의 화합물의 유효 량은 1일 당 체중 kg 당 약 0.01 밀리그램 (mg/kg/일) 내지 약 5 mg/kg/일로 다양한 것으로 기대된다. 바람직한 양은 당업자에 의해 결정될 수도 있다.

본 발명의 화합물은 단독으로 또는 제약 조성물의 형태로, 다시 말해서 제약상 허용되는 담체 또는 부형제와 조합하여 투여될 수 있고, 그의 비율 및 특성은 선택된 화합물의 용해도 및 안정성을 포함한 화학 성질, 선택된 투여 경로, 및 표준 제약 관행을 포함하는 화학적 성질에 의해 결정된다. 본 발명의 화합물은, 그 자체로도 효과적이긴 하지만, 결정화의 편의성, 증가된 용해성 등을 위하여 제약상 허용되는 염의 형태로 제형되고 투여될 수도 있다.

따라서, 본 발명은 화학식 I의 화합물 및 제약상 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 제약 조성물을 제공한다.

제형의 제조 기술의 숙련가라면, 선택된 화합물의 특징, 치료되는 장애 또는 상태, 장애 또는 상태의 단계, 및 기타 관련된 상황에 의존하여 적절한 형태 및 투여 방식을 쉽게 선택할 수 있다 [REMINGTON: THE SCIENCE AND PRACTICE OF PHARMACY, 19th Edition, Mack Publishing Co. (1995)].

실시예 A

인간 mGluR₅ 및 mGluR₁ 수용체에서 기능성 시험관내 활성

GTP-결합 단백질 알파 q (Gq 단백질)에 결합된 G-단백질 결합 수용체 (GPCR)의 활성화는 세포내 칼슘 농도에서의 변화를 가져온다. 이러한 기능성 반응은 칼슘-민감성 염료를 사용한 동역학적 분석 및 FLIPR (MDS 분석 기술, 미국 캘리포니아주 서니베일)로서 공지된 표준 기술을 사용한 형광 영상화 평판 판독기에서 측정될 수 있다. 안정한 세포주 제조 및 분석 기술은 문헌 [Kingston, A.E., et al. (1995) Neuropharmacology, 34: 887-894]로부터 적용된다.

간략하게, 재조합 인간 mGluR_5a 및 mGluR₁ _α 수용체를 발현하는 클론 세포주를, 래트 EAAT1 글루타메이트 운반체를 함유하는 AV-12 세포 (아메리칸 타입 컬쳐 콜렉션, 미국 버지니아주 마나사스)로 형질감염시킨다. 세포를 5％ 태아 소 혈청, 1mM L-글루타민, 1mM 소듐 피루베이트, 10mM HEPES (4-(2-히드록시에틸)-1-피페라진에탄술폰산), 0.75 mg/ml 게네티신, 및 0.3 mg/ml 히그로마이신 B로 보충된 둘베코의 변형 이글 배지에서 37 ℃에서 95％ 상대습도 및 5％ CO₂를 가진 배양기에서 생육시킨다. 융합 배양액을 격주로 계대접종한다.

기능성 분석을 위하여, 96-웰, 검은색/투명 바닥, 폴리-D-리신 코팅된 마이크로평판 내로 웰 당 65K의 밀도로 선택 항생물질이 결여된 생육 배지에 세포를 접종하고 실험 전에 18 내지 20 시간 동안 배양한다. 배지를 제거한 후에, 세포를 20 mM HEPES로 보충된 행크스 밸런스 염 용액으로 구성된 분석 완충액에서 25 ℃에서 1.5시간 동안 8 μM 플루오-3으로 염료-부하한다. 화합물을 DMSO로 연속적으로 희석한 다음 분석 완충액으로 다시 한번 희석하고; 분석에서 최종 DMSO 농도는 0.625％이다. 각각의 실험 이전에, EC₉₀ 반응을 유도하는데 필요한 작용질의 양을 평가하기 위하여, 작용질 글루타메이트를 위한 11-점 용량 반응 곡선을 생성하는 단일-첨가 FLIPR 분석을 수행한다. 피크 형광 반응을 화합물의 존재 및 부재 하에서 작용질 글루타메이트에 비교함으로써, 화합물의 길항제 효과를 10-점 용량 곡선에서 FLIPR 장치에서 정량화한다. 구체적으로, 화합물 효과를, 글루타메이트의 부재 하에서 측정된 기본 형광에 대해 보정된 상대 형광 단위에서 최대 - 최소 피크 높이로서 측정한다. 4-매개변수 기호논리학 곡선 일치 프로그램을 사용하여, 인간 mGluR₅ 및 mGluR₁ 수용체에서 활성 데이터를 상대 IC₅₀ 값으로서 계산한다 (활성베이스® v5.3.1.22).

상기 분석에서, 여기에 예시된 화합물은 mGluR₅에서 75 nM 미만의 IC₅₀을 나타낸다. 예를 들어, 실시예 2의 화합물은 mGluR₅에서 측정된 9.5 nM의 IC₅₀을 갖는다. 이것은, 본 발명의 화합물이 강력한 mGluR₅ 길항제임을 증명한다.

실시예 B

래트에서 스트레스-유도된 고열의 경감

심부 체온의 상승인 고열은 인간을 포함한 많은 포유동물에서 스트레스에 대한 반응으로 확실히 나타나는 일반적인 현상이다. 많은 불안 장애에서, 고열은 병변의 일부로서 발생하고 질병의 증상으로 간주된다. 동물에서 스트레스-유도 고열을 경감시키는 화합물은 인간에서 불안 장애를 치료하는데 유용한 것으로 생각된다.

스트레스-유도 고열을 분석하기 위해 통상적이고 최소-침습 방법은, 직장내 체온계를 통해 체온 및 스트레스-유도된 체온 증가를 측정하는 것이다. 275 내지 350 g의 수컷 피셔 F-344 래트 (하를란, 미국 인디애나 인디아나폴리스)를 시험한다. 모든 동물을 원하는 대로 먹이 및 자동화 물을 이용할 수 있도록 하면서 개별로 살게 하고, 12 시간 명/암 주기 (6:00에 불을 켬)로 유지시킨다. 동물을 실험 전에 대략 12 내지 18시간 동안 단식시키고, 이것을 명 단계 동안 수행한다. 0.3, 1, 3 및 10 mg/kg의 범위 (1％ 카르복시메틸셀룰로스, 0.25％ 폴리소르베이트 80, 0.05％ 발포방지제에 현탁됨)의 시험 화합물을 래트에게 1 mL/kg의 용량 부피에서 p.o. 투여한다. 임상전 모델에서 강력한 불안완화 활성을 나타내는 mGluR₅ 길항제 MTEP (3-[(2-메틸-1,3-티아졸-4-일)에티닐]피리딘)은 양성 대조로서 사용된다 (10 mg/kg, p.o., 물에 용해됨). 투여 직후에 래트를 우리로 돌려 보내고, 실험자가 불을 끄고 방에서 나간다. 투여 실을 나머지 60분의 예비처리 기간 동안 어둡게 만든다.

예비처리 기간 후에, 환하게 밝혀진 인접한 방에 래트를 개별적으로 넣고, 이곳에서 광물 유로 윤활된 직장 프로브의 삽입에 의해 기준선 체온을 결정한다. PHYSITEMP RET-2® 래트 직장 프로브를 가진 PHYSITEMP BAT-12®마이크로프로브 온도계 (미국 뉴저지주 클리프톤, 피지템프 인스트루먼트 인코포레이티드)를 사용하여 체온을 평가한다. 심부 체온을 측정하기 위하여 프로브를 직장 안으로 대략 2 cm 삽입한다 (이것은 기준선 체온 T1이다 (섭씨)). 10분 후에, 두 번째 체온 측정을 기록한다 (T2). 체온의 차이 (T2-T1)을 스트레스-유도 고열 반응으로 정의한다. 부형제 반응에 비하여 화합물이 스트레스-유도된 고열 반응의 35％ 감소를 일으키는 투여량을 T35 투여량으로 정의한다. 상기 분석에서, 실시예 2의 화합물은 T35 투여량 = 3.0 mg/kg에서 스트레스-유도 고열의 감소를 일으킨다. 이것은, 본 발명의 화합물이 불안의 생체내 모델에서 유용함을 나타낸다.

화학식 I의 화합물은 구조적으로 유사한 화합물의 제조를 위해 화학 기술에서 공지된 방법을 포함하는 방법에 의해 또는 여기에 기재된 신규의 방법에 의해 제조될 수 있다. 여기에 기재된 신규의 방법은 본 발명의 다른 측면을 제공한다. 화학식 I의 화합물의 제조 방법 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 화학식 I의 화합물의 제조를 위한 신규의 중간체는 본 발명의 추가의 특징을 제공하고, 하기 절차에 의해 예증되며, 여기에서 달리 규정되지 않는 한 일반적인 라디칼의 의미는 상기 기재된 것과 같다.

일반적으로, 화학식 III의 화합물로부터 화학식 I의 화합물을 제조할 수도 있다 (반응식 1). 더욱 구체적으로, R¹이 C₁-C₃ 알킬인 화학식 II의 화합물을 결합 촉매의 존재 하에서 2-Q'-피리딜 (여기에서, Q'가 적절한 결합 기를 나타낸다)와 결합시켜 R¹이 C₁-C₃ 알킬인 화학식 I의 화합물을 제공한다. 결합 기 Q'의 적합성은 사용되는 반응 조건에 의해 좌우된다. 스즈끼(Suzuki) 조건을 사용하는 반응을 위하여, Q'의 값은 붕소 에스테르 및 산 유도체를 포함하는 반면, 스틸(Stille) 조건을 사용할 때 Q'의 값은 트리알킬스탄나닐 유도체를 포함한다. 추가의 결합 반응은 Q'의 값이 브롬화 아연과 같은 할로겐화 아연을 포함하는 네기시(Negishi) 조건을 사용하는 것을 포함한다. 결합 촉매는 팔라듐 유도체와 같은 전이 금속 시약을 포함한다.

화학식 II의 화합물은 화학식 III의 화합물로부터 제조될 수도 있다. 더욱 구체적으로, 화학식 III의 화합물을 결합 촉매의 존재 하에 5-Q"-인다졸릴 (여기에서 R¹은 C₁-C₃ 알킬이고 Q"는 적절한 결합제이다)과 결합시켜 R¹이 C₁-C₃ 알킬인 화학식 II의 화합물을 제공한다. 결합 기 Q"의 적합성은 사용되는 반응 조건에 의하여 좌우된다. 스즈끼 조건을 사용하는 반응을 위하여, Q"의 값은 붕소 에스테르 및 산 유도체를 포함하는 반면, 스틸 조건을 사용할 때 Q"의 값은 트리알킬스탄나닐 유도체를 포함한다. 결합 촉매는 팔라듐 유도체와 같은 전이 금속 시약을 포함한다.

<반응식 1>

일반적으로, R¹이 H인 화학식 I의 화합물은 화학식 III의 화합물로부터 제조될 수도 있다 (반응식 2). 더욱 구체적으로, P가 적절한 아미노 보호 기, 예컨대 t-부틸옥시카르보닐인 화학식 IV의 화합물을 염산과 같은 산과 반응시켜 R¹이 H인 화학식 I의 화합물을 제공한다. P가 아미노 보호기인 화학식 IV의 화합물은 화학식 V의 화합물로부터 제조될 수도 있다. 더욱 구체적으로, 화학식 V의 화합물을 결합 촉매의 존재 하에서 2-Q'-피리딜 (식에서, Q'는 적절한 결합 기를 나타낸다)과 결합시켜 P가 아미노 보호기인 화학식 IV의 화합물을 제공한다. 결합 기 Q'의 적합성은 사용되는 반응 조건에 의해 좌우된다. 스즈끼 조건을 사용하는 반응을 위하여, Q'의 값은 붕소 에스테르 및 산 유도체를 포함하는 반면, 스틸 조건을 사용할 때 Q'의 값은 트리알킬스탄나닐 유도체를 포함한다. 결합 촉매는 팔라듐 유도체와 같은 전이 금속 시약을 포함한다. 화학식 III의 화합물을 결합 촉매의 존재 하에서 5-Q"-인다졸릴 (식에서, P는 아미노 보호 기이고, Q"는 적절한 결합 기를 나타낸다)과 결합시켜 P가 아미노 보호 기인 화학식 V의 화합물을 제공함으로써 화학식 V의 화합물을 제조할 수도 있다. 결합 기 Q"의 적합성은 사용된 반응 조건에 의해 좌우된다. 스즈끼 조건을 사용하는 반응을 위하여, Q"의 값은 붕소 에스테르 및 산 유도체를 포함하는 반면, 스틸 조건을 사용할 때 Q"의 값은 트리알킬스탄나닐 유도체를 포함한다. 결합 촉매는 팔라듐 유도체와 같은 전이 금속 시약을 포함한다.

<반응식 2>

하기 도시한 제조 및 예에서, 전체적으로 하기 의미 및 약어가 사용된다:

DMSO, 디메틸 술폭시드 (NMR을 위한다면 중수소화 [-d₆]); MS, 질량 스펙트럼; EtOAc, 에틸 아세테이트; THF, 테트라히드로푸란; min, 분; HPLC, 고압 액체 크로마토그래피; LC-MS, HPLC-질량 분광분석법; GC, 기체 크로마토그래피, MeOH, 메탄올; MTBE, 메틸 t-부틸 에테르; SCX-2, 양이온 교환 수지; mp, 융점; 및 NMR, 핵 자기 공명 분광법 또는 스펙트럼. 각종 통상적인 원료로부터 시약이 수득되었다. 용매는 일반적으로 감압하에 제거된다 (증발). 일부 제조에서, 나타낸 수율은 증발 또는 여과에 의해 단리되고 추가의 정제없이 직접 사용되는 생성물을 위해 대표적인 조 수율이다.

제조 1

5- 브로모 -2- 메틸 -2H- 인다졸의 합성

에틸 아세테이트(3.04 L, 31.06 몰) 중의 5-브로모-1H-인다졸 (199.6 g, 1.01 몰)의 혼합물에 질소 하에 실온에서 트리메틸옥소늄 테트라플루오로보레이트 (229.34 g, 1.52 몰)을 적가하고, 2.5시간 동안 교반하고, 여과하여 백색 고체를 수득한다. 회수된 고체를 에틸 아세테이트 (500 mL)로 2회 세척한 다음 빙욕에서 2M 수산화나트륨 (3.80 L, 7.60 몰)의 냉각된 수용액에 적가한다. 혼합물을 1시간 동안 교반하고, 15분 동안 초음파처리하고 여과하고 회수된 고체를 물 (200 mL)로 2회 세척한다. 고체를 진공 하에 밤새 건조시키고, 디클로로메탄 (1 L) 중에서 슬러리화하고 여과한다. 여액을 농축하고 디클로로메탄으로 용출시키는 실리카겔 크로마토그래피에 의해 정제하여 황색 고체로서 표제 화합물을 수득한다 (149.77 g, 70％). MS (m/z): 211, 213 (M+1).

필수적으로 제조 1에 기재된 것과 같이 하기 화합물을 제조한다.

제조 3

2- 메틸 -5-(4,4,5,5- 테트라메틸 -[1,3,2] 디옥사보롤란 -2-일)-2H- 인다졸의 합성

1,4-디옥산 (1.62 L) 중의 5-브로모-2-메틸-2H-인다졸 (148.5 g, 0.703 몰) 및 비스(피나콜라토)디보론 (196.54 g, 0.77 몰)의 교반 용액에 아세트산칼륨 (207.16 g, 2.11 몰)을 한번 분량으로 첨가한다. 현탁액을 통해 20분 동안 질소를 기포화하고, (1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센)팔라듐(II) 클로라이드:디클로로메탄 (17.24 g, 21.11 밀리몰)을 한번 분량으로 첨가하고, 100 ℃에서 1.5시간 동안 가열한다. 냉각하고, 에틸 아세테이트(1 L)를 사용하여 셀라이트®를 통해 여과하고, 농축한다. 잔류물을 n-헥산:메틸 t-부틸 에테르를 사용한 50:50 내지 20:80의 구배 용출로 실리카겔 크로마토그래피에 의해 정제하여 황색 고체로서 표제 화합물을 수득하고 (124.79 g, 64％), 이것을 추가의 정제없이 사용한다. 불순 분획을 농축하고 회수된 고체를 n-헵탄으로 분쇄하여 추가 량의 표제 화합물을 백색 고체로서 수득한다 (32.36 g, 12％).

제조 4

2- 메틸 -5- 트리메틸스탄나닐 -2H- 인다졸의 합성

1,4-디옥산 (5 mL) 중의 5-브로모-2-메틸-2H-인다졸 (0.94 g, 4.43 밀리몰) 및 헥사메틸디주석 (1.02 mL, 4.88 밀리몰)의 혼합물에 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐 (0.26 g, 0.22 밀리몰)을 첨가한다. 질소로 분출시키고 마이크로파에서 110 ℃에서 15분 동안 가열한다. 각각 1,4-디옥산 (5 mL) 중의 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐 (0.29 g, 0.25 밀리몰), 5-브로모-2-메틸-2H-인다졸 (1.07 g, 5.07 밀리몰), 헥사메틸디주석 (1.16 mL, 5.58 밀리몰), 및 1,4-디옥산 (5 mL) 중의 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐 (0.25 g, 0.22 밀리몰), 5-브로모-2-메틸-2H-인다졸 (0.92 g, 4.36 밀리몰), 헥사메틸디주석 (1.00 mL, 4.80 밀리몰)로부터 유사하게 2 개의 다른 회분을 제조한다. 3 개의 회분을 합하고, 에틸 아세테이트:이소-헥산을 사용한 15:85 내지 80:20의 구배 용출로 실리카겔 크로마토그래피에 의해 정제한 다음, 에틸 아세테이트:이소-헥산을 사용한 15:85 내지 30:70의 구배 용출로 두 번째 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 추가로 정제하여 정치 시에 결정화되는 오일로서 표제 화합물을 수득한다 (1.68 g, 41％).

필수적으로 제조 4에 기재된 것과 같이 하기 화합물을 제조한다.

제조 6

5- 브로모 - 인다졸 -1- 카르복실산 tert -부틸 에스테르의 합성

아세토니트릴 (170 mL) 중의 5-브로모-1H-인다졸 (10 g, 50.75 밀리몰)의 용액에 트리에틸아민 (7.1 mL, 50.75 밀리몰), 디-tert-부틸 디카르보네이트 (17.12 g, 76.13 밀리몰) 및 디메틸아미노피리딘 (0.62 g, 5.08 밀리몰)을 연속하여 첨가하고 3시간 동안 교반한다. 농축하고, 에틸 아세테이트:헥산을 사용한 10:90 내지 20:80의 구배 용출로 실리카겔 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 수득한다 (14.93 g, 99％).

제조 7

5- 트리메틸스탄나닐 - 인다졸 -1- 카르복실산 tert -부틸 에스테르의 합성

톨루엔 (43.7 mL)에 5-브로모-인다졸-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르 (6.5 g, 21.87 밀리몰)를 용해시키고 질소 블랭킷 하에 헥사메틸디주석 (10 g, 30.6 밀리몰)을 첨가한다. 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(1.26 g, 1.09 밀리몰)을 첨가하고, 80 ℃에서 18시간 동안 가열하고, 농축하고, 에틸 아세테이트:헥산을 사용한 10:90 내지 20:80의 구배 용출로 실리카겔 크로마토그래피에 의해 잔류물을 정제하여 표제 화합물을 수득한다 (9.33 g, 94％).

제조 8

2- 시아노 -3-옥소- 티오부티르아미드의 합성

0 ℃로 냉각된, 피리딘 (2.60 L) 중의 2-시아노-티오아세트아미드 (1016 g, 9.84 몰)의 교반 용액에, 20 ℃ 미만의 반응 온도를 유지하면서 2시간에 걸쳐 아세틸 클로라이드 (785 mL, 11.03 몰)를 첨가한다. 1시간에 걸쳐 실온으로 가온하고 물 (4 L)을 첨가하고 모든 고체가 용해될 때까지 교반한다. 산성 (pH=1)까지 12M 염산 수용액 (HCl, 250 mL)을 첨가하여 적-갈색 침전물을 수득한다. 0 ℃에서 1시간 동안 교반하고, 수집된 고체를 진공 하에 건조시켜 오렌지색 고체로서 표제 화합물을 수득한다 (926 g, 66％). 12 M 수용액 (500 mL)을 첨가함으로써 모액으로부터 두 번째 수득물을 회수할 수 있고 표제 화합물을 수득한다 (353 g, 25％).

제조 9

1-(5-아미노-3- 브로모 - 이소티아졸 -4-일) 에타논의 합성

40 ℃에서 빙초산 (5.80 L) 중의 2-시아노-3-옥소-티오부티르아미드 (550 g, 3.86 몰)의 가열 용액에 10분에 걸쳐 브롬 (195 mL, 3.81 몰)을 첨가하고 실온에서 15시간 동안 교반한다. 반응 혼합물을 여과하고 수집된 고체를 물로 세척하고 진공 하에 밤새 건조시켜 암적색 고체 (1151 g)를 수득한다. 중탄산나트륨 포화 수용액(8 L)에서 30분 동안 교반하면서 고체를 슬러리화하고 여과한다. 수집된 고체를 물로 세척하고 진공 하에 밤새 건조시켜 암적색 고체 (1022 g)를 수득한다. 1시간에 걸쳐 메틸 t-부틸 에테르(5.90 L)로 교반하면서 고체를 슬러리화하고, 여과하고 여액을 유지시킨다. 각각의 추출 후에 여액을 남기는 회수된 고체 위에서 상기 메틸 t-부틸 에테르 추출 공정을 2번 반복한다. 여액을 합하고 농축하여 황색 고체로서 표제 화합물을 수득하고 이것을 추가의 정제없이 사용한다 (598 g, 72％).

제조 10

(1R,2R)-2- 메틸 - 시클로프로판카르복실산의 합성

문헌 [Organic Process Research & Development (2007) 11, 689-692]에 기재된 바와 같이 제조된 (1R,2R)-2-메틸-시클로프로판카르복실산, 디시클로헥실암모늄 염 (1.65 kg, 5.86 몰)의 물 (6.60 L)중 현탁액에 메틸 tert-부틸 에테르 (13.2 L)를 첨가하고, 5분간 격렬히 교반하여 2상 용액을 수득한다. 10분에 걸쳐 황산 (200 mL)을 적가하고, 15분에 걸쳐 격렬히 교반하고 층을 분리한다. 수성 층을 메틸 tert-부틸 에테르로 추출한다. 유기 상을 합하고, 황산마그네슘 위에서 건조시키고, 여과하고 농축하여 담황색 오일로서 표제 화합물을 수득하고 (560 g, 95％) 추가의 정제없이 사용한다.

제조 11

(1R,2R)-2- 메틸 - 시클로프로판카르보닐 클로라이드의 합성

0 ℃에서 디클로로메탄 (2.80 L) 및 디메틸포름아미드 (2.16 mL, 28.0 밀리몰) 중의 (1R,2R)-2-메틸-시클로프로판카르복실산 (560 g, 5.59 몰)의 냉각된 용액에 옥살릴 클로라이드 (490.23 mL, 5.54 몰)를 20분에 걸쳐 적가한다. 30분에 걸쳐 실온으로 가온하고, 40 ℃에서 30분 동안 가열하고 실온에서 냉각하여 연한 오렌지색 용액을 수득하고 이것을 다음의 합성 단계에서 직접 사용한다.

제조 12

(1R,2R)-2- 메틸 - 시클로프로판카르복실산 (4-아세틸-3- 브로모이소티아졸 -5-일)아미드의 합성

실온에서 디클로로메탄 (5.86 L) 중의 1-(5-아미노-3-브로모-이소티아졸-4-일)-에타논 (1.17 kg, 4.93 몰) 및 트리에틸아민 (859 mL, 6.16 몰)의 현탁액에 15분에 걸쳐 디클로로메탄 중의 (1R,2R)-2-메틸-시클로프로판카르보닐 클로라이드 (5.52 몰)의 새로 제조된 1.93M 용액을 첨가하고 4시간 동안 교반한다. 반응을 물 (1 L)로 중지시키고 층을 분리한다. 황산마그네슘 위에서 유기 층을 건조시키고 여과하고 농축하고 n-헥산 및 에틸 아세테이트를 사용한 100:0 내지 40:60의 구배 용출로 짧은 컬럼 실리카겔 크로마토그래피 (3500 g의 SiO₂)에 의해 잔류물을 정제하여, 백색 고체로서 표제 화합물을 수득한다 (1230 g, 82％).

제조 13

시클로프로판카르복실산 (4-아세틸-3- 브로모 - 이소티아졸 -5-일)-아미드의 합성

0 ℃에서 질소 하에 디클로로메탄 (2.79 L, 43.53 몰) 중의 1-(5-아미노-3-브로모-이소티아졸-4-일)-에타논 (310 g, 1.40 몰)의 냉각된 현탁액에 트리에틸아민 (234.5 mL, 1.68 몰)을 첨가하고, 0 ℃에서 1시간에 걸쳐 디클로로메탄 (310 mL, 4.84 몰) 중의 시클로프로판카르보닐 클로라이드 (137.5 mL, 1.47 몰)의 용액을 서서히 첨가한다. 2시간에 걸쳐 16 ℃로 가온한 다음 10 ℃로 냉각하고 물(1 L)을 첨가하고 층을 분리한다. 수성 층을 디클로로메탄 (500 mL)으로 한번 추출한다. 유기 층을 합하고, 농축하고 n-헥산:디클로로메탄 30:70으로 용출하는 실리카겔 크로마토그래피에 의해 정제한다. 회수된 고체를 헥산으로 분쇄하여 표제 화합물을 백색 고체로서 수득한다 (256.1 g, 60％).

제조 14

(1R,2R)-2- 메틸 - 시클로프로판카르복실산 (3,4- 디브로모 - 이소티아졸 -5-일)-아미드의 합성

-10 ℃에서, 냉각된 수산화나트륨 수용액 (4.6M, 3.84L, 17.8 몰)에 45분에 걸쳐 브롬 (114 mL, 2.2 몰)을 적가하고, 0.5시간 동안 교반하여 황색 용액을 수득한다. 이 용액을 1,4-디옥산 (2 L) 중의 (1R,2R)-2-메틸-시클로프로판카르복실산 (4-아세틸-3-브로모-이소티아졸-5-일)-아미드 (150 g, 495 밀리몰)의 미리 냉각된 -5 ℃ 용액에 적가하고 5 ℃ 내지 10 ℃에서 45분 동안 교반한다. 이아황산나트륨의 40％ (wt/wt) 수용액 (47.5 mL)를 5분에 걸쳐 첨가하면서 10 ℃에서 냉각을 유지하고, 5분간 교반하고, 산성 (pH=2)까지 15분에 걸쳐 12M 염산 (대략 500 mL)을 서서히 첨가한다. 에틸 아세테이트(2 L)로 희석하고 층을 분리한다. 수성 층을 에틸 아세테이트(1 L)로 2번 추출한다. 유기 층을 합하고 황산마그네슘 위에서 건조시키고 여과하고 농축한다. 잔류물을 디클로로메탄(600 mL)에 용해시키고, n-헥산(3 L)으로 희석하고, 5 ℃에서 밤새 냉각한다. 여과하고, 회수된 고체를 4회 분량의 n-헥산 (125 mL)으로 세척하여 백색 고체로서 표제 화합물을 수득한다 (92.6g, 55％). 원한다면, 표제 화합물의 두 번째 수득물 (50.97 g, 30％)을 모액으로부터 회수할 수 있다.

제조 15

시클로프로판카르복실산 (3,4- 디브로모 - 이소티아졸 -5-일)아미드의 합성

0 ℃에서, 냉각된 수산화나트륨 수용액 (3.77M, 2.44 L, 9.21 몰)에 1시간에 걸쳐 브롬 (118.3 mL, 2.30 몰)을 적가하고, 15분 동안 교반한다. 온도를 5 ℃ 미만으로 유지하면서, 이 용액에, 1,4-디옥산 (856.3 mL, 10.03 몰) 중의 시클로프로판카르복실산 (4-아세틸-3-브로모-이소티아졸-5-일)-아미드 (155.7 g, 0.51 몰)의 용액을 100분에 걸쳐 첨가한다. 내부 온도를 10 ℃ 미만으로 유지하면서 1.5시간 동안 교반한다. 이아황산나트륨 수용액 (77.8 mL, 0.377 몰)을 첨가하고, 5분에 걸쳐 교반하고 온도를 25 ℃ 미만으로 유지하면서 12M 염산 (390.1 mL, 4.60 몰)을 15분에 걸쳐 첨가한다. 혼합물을 10분간 교반하지 않은 채로 유지한 다음 상층액을 제거하고 나머지 현탁액을 여과하고 회수된 고체를 물 (200 mL)로 2회 세척하고 진공 하에 건조시켜 황색 고체로서 표제 화합물을 수득한다 (91.21 g, 55％).

제조 16

(1R,2R)-2- 메틸 - 시클로프로판 카르복실산 [4- 브로모 -3-(2- 메틸 -2H- 인다졸 -5-일)- 이소티아졸 -5-일]-아미드의 합성

HPLC 등급 1,2-디메톡시에탄 (1.21 L) 중의 (1R,2R)-2-메틸-시클로프로판카르복실산 (3,4-디브로모-이소티아졸-5-일)-아미드 (148.1 g, 0.404 몰) 및 2-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-[1,3,2]디옥사보롤란-2-일)-2H-인다졸 (123.40 g, 0.444 몰)의 교반 혼합물에 2M 탄산나트륨 수용액 (606.3 mL, 1.21 몰)을 첨가하고, 진공 및 질소를 사용하여 탈기시킨다. 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 디클로라이드 (56.77 g, 80.84 밀리몰)를 한번 분량으로 첨가하고, 83 ℃에서 10시간 동안 가열하고 실온으로 냉각하고 에틸 아세테이트를 사용하여 셀라이트®의 패드를 통해 여과하여 2상 용액을 수득한다. 층을 분리하고 수성 층을 디클로로메탄(200 mL)으로 3회 추출한다. 모든 유기 층을 합하고, 염수(200 mL)로 세척하고 대략 400 mL의 부피로 농축한다. 2개의 분량으로 나누고 각각을 n-헥산:에틸 아세테이트의 50:50 내지 10:90 구배 용출로 실리카겔 크로마토그래피에 의해 정제하여, 표제 화합물을 담갈색 고체로서 수득한다 (107.32 g, 51％).

(1R,2R)-2-메틸-시클로프로판카르복실산 [4-브로모-3-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-이소티아졸-5-일]-아미드의 대안적인 합성 방법.

둥근 바닥 플라스크를 1,4-디옥산 (19.2 mL) 중의 (1R,2R)-2-메틸-시클로프로판카르복실산 (3,4-디브로모-이소티아졸-5-일)-아미드 (2.55 g, 7.49 밀리몰), 2-메틸-5-트리메틸스탄나닐-2H-인다졸 (2.21 g, 7.49 밀리몰) 및 리튬 클로라이드 (0.95 g, 22.48 밀리몰)로 채운다. 20분 동안 질소로 정화하고, 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐 (1.31 g, 1.12 밀리몰)을 첨가하고 105 ℃에서 48시간 동안 가열한다. 반응 혼합물을 실리카겔 컬럼에 직접 부하하고 0:100 내지 100:0 에틸 아세테이트:이소-헥산의 구배 용출로 정제하여 표제 화합물을 수득한다 (1.25 g, 43％).

2-에틸-5-트리메틸스탄나닐-2H-인다졸을 사용하여 필수적으로 제조 16의 대안적인 방법에 기재된 바와 같이 하기 화합물을 제조한다.

제조 18

5-{4- 브로모 -5-[((1R,2R)-2- 메틸 - 시클로프로판카르보닐 )-아미노]- 이소티아졸 -3-일}- 인다졸 -1- 카르복실산 tert -부틸 에스테르의 합성

(1R,2R)-2-메틸-시클로프로판카르복실산 (3,4-디브로모-이소티아졸-5-일)-아미드 (3.0 g, 8.82 밀리몰)를 무수 1,4-디옥산(88 mL)에 용해시키고, 5-트리메틸스탄나닐-인다졸-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르 (4.11 g, 9.70 밀리몰)를 첨가한다. 질소 대기 하에, 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 클로라이드 (0.62 g, 0.88 밀리몰)를 첨가하고, 4일 동안 85 ℃로 가열한다. 농축하고, 잔류물을 20:80 내지 40:60 에틸 아세테이트:헥산 구배 용출로 실리카겔 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물을 수득하고 (1.04 g, 70％ 순도 wt/wt, 17％) 이것을 추가의 정제없이 사용한다.

제조 19

시클로프로판카르복실산 [4- 브로모 -3-(2- 메틸 -2H- 인다졸 -5-일)- 이소티아졸 -5-일]-아미드의 합성

1,4-디옥산(16 mL) 중의 시클로프로판카르복실산 (3,4-디브로모-이소티아졸-5-일)-아미드 (1.04 g, 3.19 밀리몰) 및 2-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-[1,3,2]디옥사보롤란-2-일)-2H-인다졸 (1.29 g, 3.51 밀리몰) 및 2M 탄산나트륨 수용액 (7.98 mL)의 혼합물을 통해 10분간 질소를 기포화시켜 탈기한다. 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 클로라이드 (448 mg, 0.64 밀리몰)을 첨가하고, 12시간 동안 80 ℃로 가열한다. 냉각하고, 염수 및 에틸 아세테이트로 희석하고, 층을 분리한다. 수성 상을 에틸 아세테이트로 2회 추출한다. 합한 유기 상을 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고, 농축하고, 에틸 아세테이트:헥산을 사용한 40:60 내지 100:0 구배 용출로 실리카겔 크로마토그래피에 의해 정제하여, 고체로서 표제 화합물을 수득한다 (0.6 g, 1.59 밀리몰, 50％).

제조 20

2- 브로모 -6- 시클로펜틸 -피리딘의 합성

무수 테트라히드로푸란 (40 mL) 중의 요오드화 구리(I) (1.48 g, 7.77 밀리몰), 2,6-디브로모피리딘 (8 g, 33.77 밀리몰) 및 (1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센)팔라듐(II) 클로라이드 (2.90 g, 3.55 밀리몰)의 용액을 통해 5분 동안 질소를 기포화한다. 테트라히드로푸란 (79.70 mL, 39.85 밀리몰) 중의 시클로펜틸 아연 브로마이드의 0.5M 용액을 한번 분량으로 첨가하고 밤새 교반한다. 헥산 (800 mL)으로 희석하고 에틸 아세테이트:헥산 (10:90)의 용액을 사용하여 실리카겔 플러그를 통해 여과하여 투명한 용액을 수득한다. 농축하고, 물 (w/1％의 트리플루오로아세트산):아세토니트릴의 구배를 사용한 역상 크로마토그래피에 의해 정제하고, 순수한 생성물을 함유하는 분획을 합한다. 염기성화될 때까지 중탄산나트륨 포화수용액을 합한 분획에 첨가하고 6회 분량의 헥산 (150 mL)으로 추출한다. 황산나트륨 위에서 헥산 층을 건조하고 여과하고 농축하여 투명 액으로서 표제 화합물을 수득한다 (3.75 g, 49％).

시클로부틸 아연 브로마이드 또는 시클로프로필 아연 브로마이드를 각각 사용하여 필수적으로 제조 20에 기재된 것과 같이 하기 화합물을 제조한다.

제조 23

2- 브로모 -6-에틸-피리딘의 합성

질소 하에서 헥산 중의 2.5M n-부틸리튬 용액 (186.74 mL, 0.467 몰)을 41분에 걸쳐 테트라히드로푸란 (745 mL, 9.16 몰) 중의 디이소프로필아민 (68.7 mL, 0.488 몰)의 용액에 -78℃ (드라이아이스/아세톤 욕)에서 첨가한다. 15분 동안 교반하고 22분에 걸쳐 2-브로모-6-메틸피리딘 (49.3 mL, 0.424 몰)을 적가한다. 15분 교반하고, 요오드화메틸 (52.87 mL, 0.848 몰)을 1시간에 걸쳐 적가한 다음 1.5시간에 걸쳐 실온으로 가온한다. 드라이아이스/아세톤 욕으로 냉각하면서 물 (250 mL)을 첨가하고 층을 분리한다. 수성 상을 에틸 아세테이트 (300 mL)로 2회 추출한다. 유기 상을 합하고, 농축하고 헥산:에틸 아세테이트를 사용한 100:0 내지 80:20 구배 용출로 실리카겔 크로마토그래피에 의해 정제하여 황색 오일로서 표제 화합물을 수득한다 (59.74 g, 75％).

필수적으로 제조 23에 기재된 것과 같이 하기 화합물을 제조한다.

제조 26

2- 브로모 -6- 메톡시메틸 -피리딘의 합성

질소 하에서 0 내지 5 ℃로 냉각된 무수 테트라히드로푸란 (96 mL) 중의 수소화나트륨 (오일 중의 60％ 분산액, 2.45 g, 61 밀리몰)의 교반 현탁액에 무수 테트라히드로푸란 (29 mL) 중의 (6-브로모-피리딘-2-일)-메탄올 (9.6 g, 51 밀리몰)의 용액을 적가한다. 기체 발생이 중단된 후에, 요오드화메틸 (10.9 mL, 77 밀리몰)을 적가하고 1시간에 걸쳐 실온으로 가온한다. 빙수(100 mL)를 첨가하고, 염수(100 mL) 및 에틸 아세테이트(200 mL)로 희석한다. 층을 분리한다. 유기 층을 염수(100 mL)로 한번 추출하고, 황산나트륨 위에서 건조시키고 액체를 따라 버린다. 담황색 오일 (11.1 g)로 농축하고 쿠겔러 장치를 사용하여 증류하여 무색 액체로서 표제 화합물을 수득한다 (10.1 g, b.p.=140 내지 150 ℃, 2.4 mbar, 93％).

제조 27

(6- 브로모 -피리딘-2-일)-디메틸- 아민의 합성

에탄올 (75 mL) 중의 2,6-디브로모피리딘 (15 g, 63 밀리몰) 및 디메틸아민 (40％ 수용액, 21.4 mL, 190 밀리몰, 3 당량)의 교반 혼합물을 70 ℃에서 3일 동안 가열한다. 황색 용액을 감소된 부피로 증발시키고 에틸 아세테이트 (100 mL)로 희석한다. 물 (40 mL), 염수 (40 mL)로 세척하고 황산나트륨 위에서 건조시킨다. 액체를 따라버리고 증발시켜 담황색 오일(13.8 g)을 수득한다. 쿠겔러 장치를 사용하여 증류하여 무색 액체로서 표제 화합물을 수득한다 (12.4 g, b.p.=100 내지 140 ℃, 0.1 mbar).

제조 28

(6- 브로모 -피리딘-2-일)- 메틸 - 아민의 합성

테트라히드로푸란 중의 2M 메틸아민 용액 (33.6 mL, 67.12 밀리몰)을 2,6-디브로모피리딘 (5.3 g, 22.37 밀리몰)에 첨가하고 밀봉된 관에서 110 ℃에서 밤새 가열한다. 농축하고, 0:100 내지 20:80의 에틸 아세테이트:이소-헥산의 구배 용출로 실리카겔 크로마토그래피에 의해 정제하여 정치 시에 결정화하는 담황색 오일로서 표제 화합물을 수득한다 (0.345 g, 8％).

제조 29

2- 브로모 -6- 디플루오로메틸 -피리딘의 합성

0 ℃에서 디클로로메탄 (600 mL)중의 6-브로모-피리딘-2-카르브알데히드 (30.40 g, 0.158 몰)의 교반 냉각 용액에 20분에 걸쳐 디에틸아미노황 트리플루오라이드 (31.5 mL, 0.238 몰)을 적가하고, 밤새 실온으로 가온한다. 반응 혼합물을 용이한 처리를 위하여 동일한 부피의 2회 회분으로 나눈다. 매우 주의하면서, 30분에 걸쳐 중탄산나트륨 포화수용액을 서서히 첨가한다. 디클로로메탄으로 수성 층을 한번 세척한다. 합한 유기 층을 황산나트륨 위에서 건조시키고 여과하고 농축한다. 얻어진 조 물질을 에틸 아세테이트:이소-헥산을 사용한 1:99 내지 10:90 구배 용출로 실리카겔 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물 (22.60 g, 68％) 및 두 번째 분획 (9.4 g, 90％ wt/wt 순도, 26％)을 수득하고 이것을 추가의 정제없이 사용한다.

필수적으로 제조 29에 기재된 바와 같이 하기 화합물을 제조한다.

제조 31

2-(6- 브로모 -피리딘-2-일)-프로판-2-올의 합성

무수 테트라히드로푸란 (48.5 mL) 중의 1-(6-브로모-피리딘-2-일)-에타논 (5 g, 24.25 밀리몰)의 냉각된 용액에, 0 ℃에서 20분에 걸쳐 테트라히드로푸란 중의 메틸 마그네슘 브로마이드 (3.0M, 9.7 mL, 29.09 밀리몰)의 용액을 적가한다. 반응의 완결 시에, 물을 첨가하고 (발열), 에틸 아세테이트(50 mL)로 희석하고 층을 분리한다. 수성 층을 에틸 아세테이트 (50 mL)로 한번 추출한다. 합한 유기 층을 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고, 농축하여 담황색 액체로서 표제 화합물을 수득하고 (5.69 g, 98％) 이것을 추가의 정제 없이 사용한다.

제조 32

2- 브로모 -6-(1- 플루오로 -1- 메틸 -에틸)-피리딘의 합성

-78 ℃에서, 디클로로메탄 (46.3 mL) 중의 2-(6-브로모-피리딘-2-일)-프로판-2-올 (2 g, 9.26 밀리몰)의 냉각된 용액에 (비스(2-메톡시에틸)아미노)황 트리플루오라이드 (2.05 mL, 11.11 밀리몰)을 적가한다. 첨가 시에, 실온으로 가온하고 밤새 교반한다. 중탄산나트륨 포화 수용액을 첨가하고 기체 발생이 중단될 때까지 교반한다. 50 mL 소수성 IST 상 분리기 프릿®을 통해 여과하고, 농축하고, 디클로로메탄:이소-헥산을 사용한 3:97 내지 5:95, 이어서 10:90까지의 구배 용출로 실리카겔 크로마토그래피에 의해 정제하여 무색 액체로서 표제 화합물을 수득한다 (5.13 g, 71％).

제조 33

2-에틸-6- 트리부틸스탄나닐 -피리딘의 합성

-78 ℃에서, 무수 디에틸 에테르 (101.9 mL) 중의 2-브로모-6-에틸-피리딘 (10.19 g, 54.77 밀리몰)의 냉각된 용액에, 내부 반응 온도가 -75 ℃를 넘지 않도록 하는 속도로 1시간에 걸쳐, 펜탄 중의 tert-부틸리튬 용액 (1.5M, 80.3 mL, 120.5 밀리몰)의 용액을 적가한다. 15분 동안 교반하고, 트리-n-부틸주석 클로라이드 (16.25 mL, 57.51 밀리몰)를 내부 반응 온도가 -70 ℃를 넘지 않도록 하는 속도로 적가한다. 실온으로 가온하고, 물을 첨가하고 층을 분리한다. 수성 상을 디에틸 에테르로 한번 추출한다. 합한 유기 층을 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고, 농축하여 담황색 액체로서 표제 화합물을 수득하고 (24.05 g, 94％), 이후에 추가의 정제 없이 사용한다.

2-브로모-6-이소프로필-피리딘 및 2-브로모-6-디플루오로메틸-피리딘을 사용하여 필수적으로 제조 33에 기재된 것과 같이 하기 화합물들을 제조한다.

제조 36

디메틸-(6- 트리부틸스탄나닐 -피리딘-2-일)- 아민의 합성

-75 ℃에서 질소 하에, 무수 테트라히드로푸란 (160 mL) 중에서 헥산 중의 n-부틸리튬의 교반 냉각 용액 (2.5 M, 19.1 mL, 47.7 밀리몰)에, 내부 반응 온도가 -70 ℃를 넘지 않도록 하는 속도로, 무수 테트라히드로푸란(10 mL) 중의 (6-브로모-피리딘-2-일)-디메틸-아민 (8 g, 39.8 밀리몰)의 용액을 적가한다. -75 ℃에서 1시간 후에, 트리-n-부틸주석 클로라이드 (13 g, 39.8 밀리몰)을 적가하고, 30분 동안 교반하고 0 ℃로 가온한다. 물 (200 mL)을 첨가하고, 중탄산나트륨 포화수용액 (50 mL) 및 디에틸 에테르 (200 mL)로 희석하고 층을 분리한다. 유기 층을 염수(200 mL)로 한번 추출하고, 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하고 농축하여 액체 (25.4 g)를 수득한다. 이소-헥산:에틸 아세테이트:트리에틸아민 90:9:1로 용출되는 실리카겔 크로마토그래피에 의해 정제하여, 무색 액체로서 표제 화합물을 수득한다 (8.16 g, 50％).

실시예 1

(1R,2R)-2- 메틸 - 시클로프로판카르복실산 [4-(6-에틸-피리딘-2-일)-3-(2- 메틸 -2H-인다졸-5-일)- 이소티아졸 -5-일]-아미드의 합성

(1R,2R)-2-메틸-시클로프로판카르복실산 [4-브로모-3-(2-메틸-2H-인다졸릴-5-일)-이소티아졸-5-일]-아미드 (288 g, 0.736 몰)을 THF (2.9 L)에 용해시키고, 2-에틸-6-(트리부틸스타닐)피리딘 (498.8 g, 1.10 몰)을 첨가하고, 부-표면 질소 흐름으로 10분간 살포하였다. 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 클로라이드 (26.4 g, 36.8 밀리몰)를 첨가하고 5분 동안 계속 살포하였다. 살포를 질소 정화로 바꾸고 혼합물을 가열 환류시켰다. 56.5 시간 후에, 플라스크 내용물을 주변 온도로 냉각하고, 감압하에서 용액을 농축한다. 얻어진 슬러리를 톨루엔(6 L)에 용해시키고 1N HCl(3 L)을 첨가한다. 2상 혼합물을 와트만® GFF 종이를 통해 여과하고 여액을 바닥 출구 플라스크로 옮긴다. 층을 분리하고 유기물을 1N HCl (3 L)로 역-추출한다. 수성 층을 합하고 톨루엔 (6 L)으로 세척한다. 수성 층에, 5N NaOH를 pH 9로 첨가한다. 층을 분리하고 유기물을 염수(3 L)으로 세척한다. 유기물을 MgSO₄ 위에서 건조시키고, 와트만®GFF 종이를 통해 여과하고 감압하에 농축하여 잔류물을 수득한다. 아세토니트릴:헵탄:메틸렌 클로라이드 (20:30:50)로 용출되는 실리카겔 플러그 크로마토그래피를 사용하여 잔류물을 정제한다. 적절한 분획을 합하고, 감압 하에 농축하여 비결정성 발포체로서 표제 화합물을 수득한다.

(1R,2R)-2- 메틸 - 시클로프로판카르복실산 [4-(6-에틸-피리딘-2-일)-3-(2- 메틸 -2H-인다졸-5-일)- 이소티아졸 -5-일]-아미드의 결정화

교반하고 서서히 가온하면서, (1R,2R)-2-메틸-시클로프로판카르복실산 [4-(6-에틸-피리딘-2-일)-3-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-이소티아졸-5-일]-아미드 (113 mg, 270.6 마이크로몰)을 에틸 아세테이트 (226 ㎕)에 용해시킨다. 헥산 (339 ㎕)을 따뜻한 용액에 첨가하고, 주변 온도로 자가-냉각하면서 얻어진 혼합물을 정치시킨다. 얻어진 결정을 여과하고 헥산(0.5 mL)으로 헹군다. 물질을 35 ℃에서 진공 건조시켜 백색 결정성 고체로서 표제 화합물을 수득한다.

(1R,2R)-2- 메틸 - 시클로프로판카르복실산 [4-(6-에틸-피리딘-2-일)-3-(2- 메틸 -2H-인다졸-5-일)- 이소티아졸 -5-일]-아미드의 합성을 위한 대안적인 방법

무수 1,2-디메톡시에탄 (52 mL) 중의 (1R,2R)-2-메틸-시클로프로판카르복실산 [4-브로모-3-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-이소티아졸-5-일]-아미드 (6.04 g, 13.28 밀리몰) 및 2-에틸-6-트리부틸스탄나닐-피리딘 (9.28 g, 19.91 밀리몰)의 용액을 질소 하에 30분간 정화하고, 비스(트리-t-부틸포스핀)팔라듐(0) (0.35 g, 0.66 밀리몰)을 첨가하고 100 ℃에서 질소 하에 4일 동안 가열한다. 농축하고, 잔류물을 에틸 아세테이트에 용해시키고 에틸 아세테이트를 사용하여 셀라이트®의 습윤 패드를 통해 여과한다. 농축하고, 에틸 아세테이트:이소-헥산의 60:40 내지 70:30, 이어서 90:10의 구배 용출 및 이어서 순수한 에틸 아세테이트로의 용출로 실리카겔 크로마토그래피에 의해 정제한다. 농축하고, 에틸 아세테이트 (50 mL)에 용해시키고 여과한다. 디에틸 에테르(6 mL) 중의 2M 염화수소 용액을 질소 하에 여액에 적가하고, 30분 동안 교반한다. 여과하고, 회수된 고체를 에틸 아세테이트 (10 mL)로 세척하고 밤새 건조시킨다. 메탄올 (100 mL) 중에 용해시키고, 동일한 부피의 3개 분획으로 나누고 각각의 분획을 메탄올로 미리 세척된 이솔루트(Isolute)® SCX-2 컬럼 (20 g, 바이오티지 AB) 위에 부하한다. 메탄올 (3개 컬럼 부피)로 세척하고, 메탄올 중의 2M 암모니아 용액 (1컬럼 부피)로 용출하고, 합하고 농축한다. 주입 용매 [18 mL, 1.5 mL/주입의 측량된 주입 부피 (230 mg 물질/주입), 3.5 g/h의 산출량을 수득하기 위해 매 4분 마다 주입]로서 메탄올을 사용하여 SFC [2-에틸피리딘 컬럼 (프린스톤 크로마토그래피 인코포레이티드), 60A, 7μ 입자 크기, 이동상 15％ 메탄올 (w/0.2％ 디에틸메틸아민): 85％ 이산화탄소, 출구 압력 100 바아]에 의해 추가로 정제하여 표제 화합물 (1.77 g, 32％)을 수득한다.

하기 프로토콜을 사용하여 미량의 중금속을 상기 정제된 표제 화합물로부터 제거할 수도 있다. CR20 디아이온(Diaion)® 수지 (28.86 g, 레진디온-미쓰비시 케미칼)를 교반하면서 톨루엔 (577.2 mL)중의 표제 화합물 (14.62 g, 34.56 밀리몰)의 용액에 첨가하고, 60 ℃에서 15시간 동안 가열한다. 실온으로 냉각하고, 여과하고, 회수된 수지를 톨루엔으로 세척한다. 여액에 새로운 CR20 디아이온® 수지 (28.86 g)를 첨가하고 60 ℃에서 7시간 교반한다. 실온으로 냉각하고, 여과하고, 회수된 수지를 톨루엔으로 세척하고 농축하여 황색 고체 (14.7 g)를 수득한다. 고체를 메틸 t-부틸 에테르 (735 mL)에 용해시키고, 플루오르화칼륨 (43％ wt/wt 용액)의 포화 수용액으로 10분 동안 2회 세척하고, 황산마그네슘 위에서 건조시키고, 여과하고 농축한다. 잔류물을 여과와 함께 헥산(294 mL)으로 2회 분쇄하고 진공 하에 건조시켜 백색 고체로서 표제 화합물을 수득한다.

실시예 2

(1R,2R)-2- 메틸 - 시클로프로판카르복실산 [4-(6-에틸피리딘-2-일)-3-(2- 메틸 -2H-인다졸-5-일)- 이소티아졸 -5-일]-아미드 히드로클로라이드의 합성

실온에서 에틸 아세테이트 (135.30 mL) 중의 (1R,2R)-2-메틸-시클로프로판카르복실산 [4-(6-에틸-피리딘-2-일)-3-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-이소티아졸-5-일]-아미드 (11 g, 25.92 밀리몰)의 교반 용액에, 디에틸 에테르 (25.92 mL, 25.92 밀리몰) 중의 1M 염화수소 용액을 주사기를 통해 서서히 첨가하여 현탁액을 수득한다. 10분 후에, 농축하고 고 진공 하에 3일 간 더욱 건조하여 백색 고체로서 표제 화합물을 수득한다 (11.92 g, 99％).

실시예 3

(1R,2R)-2- 메틸 - 시클로프로판카르복실산 [4-(6-이소프로필-피리딘-2-일)-3-(2-메틸-2H- 인다졸 -5-일)- 이소티아졸 -5-일]-아미드 히드로클로라이드의 합성

무수 1,2-디메톡시에탄 (50 mL) 중의 (1R,2R)-2-메틸-시클로프로판카르복실산 [4-브로모-3-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-이소티아졸-5-일]-아미드 (6.31 g, 12.26 밀리몰) 및 2-이소프로필-6-트리부틸스탄나닐-피리딘 (15.08 g, 18.38 밀리몰)의 용액을 질소 하에 60분간 정화하고 비스(트리-t-부틸포스핀)팔라듐(0) (0.32 g, 0.61 밀리몰)을 첨가한다. 질소 하에 3일 동안 100 ℃에서 교반하고 감소된 부피로 농축하고 에틸 아세테이트 (50 mL)로 희석한다. 셀라이트®의 패드를 통해 여과하고, 암갈색 오일로 농축하고, 에틸 아세테이트:이소-헥산을 사용한 60:40 내지 90:10 구배 용출로 실리카겔 크로마토그래피에 의해 정제하여 담갈색 오일 (7.3 g)을 수득한다. 에틸 아세테이트 (40 mL)에 용해시키고 디에틸 에테르 (4.5 mL, 9 밀리몰) 중의 2M 염화수소 용액을 첨가하여 침전물을 수득한다. 여과하여 크림색 고체를 수득한다 (4.14 g). 메탄올 (15 mL)에 용해시키고, 3회 분량으로 나누고 각각의 분량을 이솔루트 SCX-2® 컬럼 (20 g, 바이오티지 AB) 상에 부하한다. 메탄올 (컬럼 당 120 mL)로 세척하고 메탄올 중의 2M 암모니아 용액을 사용하여 컬럼으로부터 용출한다 (컬럼 당 100 mL). 황색 발포체로 농축하고 에틸 아세테이트:이소-헥산을 사용한 70:30 내지 80:20 구배 용출로 실리카겔 크로마토그래피에 의해 정제하여 황색 오일로서 표제 생성물의 유리 염기를 수득한다. 에틸 아세테이트 (40 mL)에 용해시키고, 디에틸 에테르 (4.5 mL, 9 밀리몰) 중의 2M 염화수소 용액을 첨가하여 즉각적인 침전물을 수득한다. 1시간 동안 정치시킨 다음 여과하여 백색 분말 고체로서 표제 화합물을 수득한다 (3.85 g, 65％).

필수적으로 실시예 3에 기재된 것과 같이 하기 화합물을 제조한다.

실시예 5

(1R,2R)-2- 메틸 - 시클로프로판카르복실산 [3-(2- 메틸 -2H- 인다졸 -5-일)-4-피리딘-2-일- 이소티아졸 -5-일]-아미드 히드로클로라이드의 합성

무수 1,2-디메톡시에탄 (5.00 mL) 중의 트리부틸-2-피리디닐주석 (244 ㎕, 0.70 밀리몰) 및 (1R,2R)-2-메틸-시클로프로판카르복실산 [4-브로모-3-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-이소티아졸-5-일]-아미드 (0.25 g, 0.64 밀리몰)의 혼합물을 통해 10분간 질소를 기포화함으로써 탈기시키고, 비스(트리-t-부틸포스핀)팔라듐(0) (0.02 g, 31.95 마이크로몰)을 첨가하고, 질소 하에 밤새 100 ℃에서 교반한다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 플루오르화칼륨 (3 mL)의 10％ 수용액을 첨가하고, 10분간 교반하고, 에틸 아세테이트로 추출한다. 유기 층을 염수로 세척하고 황산마그네슘 위에서 건조시키고 여과하고 농축 건조시킨다. 잔류물을 에틸 아세테이트:이소-헥산을 사용한 0:100 내지 100:0의 구배 용출로 실리카겔 크로마토그래피에 의해 정제한 다음, 이어서 역상 HPLC (물 w/중탄산암모늄 (pH=9)/아세토니트릴)에 의해 더욱 정제하여 무색 오일로서 자유 염기를 수득한다. 에틸 아세테이트 (1 mL)에 용해시키고 디에틸 에테르 (250 ㎕)중의 1M 염화수소 용액을 첨가하고 진공 하에 농축하여 백색 고체로서 표제 화합물을 수득한다 (111 mg).

(6-브로모-피리딘-2-일)-디메틸-아민 및 (1R,2R)-2-메틸-시클로프로판카르복실산 [4-브로모-3-(2-에틸-2H-인다졸-5-일)-이소티아졸-5-일]-아미드 또는 (1R,2R)-2-메틸-시클로프로판카르복실산 [4-브로모-3-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-이소티아졸-5-일]-아미드를 사용하여 필수적으로 실시예 5에 기재된 바와 같이 하기 화합물을 제조한다. 실시예 7은 염화수소로의 처리를 생략함으로써 자유 염기로서 제조된다.

실시예 8

(1R,2R)-2- 메틸 - 시클로프로판카르복실산 [3-(1H- 인다졸 -5-일)-4-(6-이소프로필-피리딘-2-일)- 이소티아졸 -5-일]-아미드 히드로클로라이드의 합성

무수 1,2-디메톡시에탄 (2.4 mL) 중의 5-{4-브로모-5-[((1R,2R)-2-메틸-시클로프로판카르보닐)-아미노]-이소티아졸-3-일}-인다졸-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르 (0.33 g, 0.48 밀리몰) 및 2-이소프로필-6-트리부틸스탄나닐-피리딘 (0.308 g, 0.64 밀리몰)의 교반 용액에 비스(트리-t-부틸포스핀)팔라듐(0) (7.4 mg, 0.01 밀리몰)을 질소 하에 첨가하고, 80 ℃에서 18시간 동안 가열한다. 반응 용액을 에틸 아세테이트:헥산을 사용한 20:80 내지 60:40 구배 용출로 실리카겔 크로마토그래피에 의해 직접 정제하여 표제 화합물의 자유 염기 (78 mg, 34％) 및 5-{4-(6-이소프로필-피리딘-2-일)-5-[((1R,2R)-2-메틸-시클로프로판 카르보닐)-아미노]-이소티아졸-3-일}-인다졸-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르 (85 mg, 29％)를 수득한다.

디클로로메탄(2 mL)에 단리된 5-{4-(6-이소프로필-피리딘-2-일)-5-[((1R,2R)-2-메틸-시클로프로판 카르보닐)-아미노]-이소티아졸-3-일}-인다졸-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르 (83 mg, 0.16 밀리몰)을 용해시키고, 트리플루오로아세트산(2 mL)을 첨가하고 2시간 동안 교반한다. 농축하고 에틸 아세테이트:(50:50 디클로로메탄/헥산)를 사용한 20:80 내지 30:70 구배 용출로 실리카겔 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물의 자유 염기를 수득한다 (47 mg).

표제 화합물의 자유 염기의 2개 회분을 합하고 (125 mg, 0.3 밀리몰), 디에틸 에테르 (4 mL)에서 슬러리화하고 메탄올을 첨가하여 용해시킨다. 디에틸 에테르 (0.3 mL, 0.3 밀리몰) 중의 1N 염화수소 용액을 첨가하고 농축한다. 진공 하에 건조시켜 표제 화합물을 수득한다 (92 mg, 2단계에 걸쳐 42％).

실시예 9

(1R,2R)-2- 메틸 - 시클로프로판카르복실산 [4-(6- 시클로부틸 -피리딘-2-일)-3-(2-메틸-2H- 인다졸 -5-일)- 이소티아졸 -5-일]-아미드 히드로클로라이드의 합성

마이크로파 용기에 2-브로모-6-시클로부틸-피리딘 (0.18 g, 0.84 밀리몰), 헥사메틸디주석 (0.18 mL, 0.84 밀리몰), 염화리튬 (97.5 mg, 2.30 밀리몰) 및 무수 1,4-디옥산 (2.5 mL)를 첨가하고 질소를 기포화함으로써 탈기시킨다. 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐 (44.3 mg, 38.33 마이크로몰)을 첨가하고, 마이크로파에서 110 ℃에서 5분간 교반하면서 가열하여 2-시클로부틸-6-트리부틸스탄나닐피리딘의 용액을 수득한다.

상기 용액에 무수 1,2-디메톡시에탄 (2.5 mL) 중의 (1R,2R)-2-메틸-시클로프로판카르복실산 [4-브로모-3-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-이소티아졸-5-일]-아미드 (0.30 g, 0.77 밀리몰)의 탈기된 용액 및 비스(트리-t-부틸포스핀)팔라듐(0) (0.05 g, 0.98 밀리몰)을 연속하여 첨가한다. 교반하면서 2시간 동안 100 ℃에서 마이크로파에서 가열한다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트:이소-헥산의 60:40 내지 100:0의 구배 용출로 실리카겔 크로마토그래피에 의해 직접 정제하고, 이어서 디클로로메탄:메탄올을 사용한 100:0 내지 97:3의 구배 용출로 두 번째 실리카겔 크로마토그래피에 의해 더욱 정제하여 표제 화합물의 자유 염기를 수득한다. 최소 량의 디클로로메탄에 용해시키고, 디에틸 에테르 중의 2M 염화수소 용액 (0.11 mL, 0.22 밀리몰)을 첨가하고 농축 건조하여 백색 고체로서 표제 화합물 (88.80 mg, 24％)을 수득한다.

(1R,2R)-2-메틸-시클로프로판카르복실산 [4-브로모-3-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-이소티아졸-5-일]-아미드 및 상응하는 2-브로모-6-치환된 피리딘으로부터 필수적으로 실시예 9에 기재된 바와 같이 하기 화합물을 제조한다.

(1R,2R)-2-메틸-시클로프로판카르복실산 [4-브로모-3-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-이소티아졸-5-일]-아미드 및 상응하는 2-브로모-6-치환된 피리딘으로부터 필수적으로 실시예 9에 기재된 바와 같이 하기 화합물을 제조하고 그들의 자유 염기로서 단리한다.

실시예 18

시클로프로판카르복실산 [4-(6-디메틸아미노-피리딘-2-일)-3-(2- 메틸 -2H- 인 다졸-5-일)- 이소티아졸 -5-일]-아미드 히드로클로라이드의 합성

1,2-디메톡시에탄 (3 mL) 중의 디메틸-(6-트리부틸스탄나닐-피리딘-2-일)-아민 (0.34 g, 0.84 밀리몰) 및 시클로프로판카르복실산 [4-브로모-3-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-이소티아졸-5-일]-아미드 (0.24 g, 0.64 밀리몰)의 혼합물을 통해 10분 동안 질소를 기포화함으로써 탈기시키고, 비스(트리-t-부틸포스핀)팔라듐(0) (0.02 g, 32.21 마이크로몰)를 첨가하고 질소 하에 100 ℃에서 밤새 교반한다. 실온으로 냉각하고, 플루오르화칼륨의 10％ 수용액 (3 mL)를 첨가하고 40분 동안 교반하고 에틸 아세테이트로 추출한다. 염수로 유기 층을 세척하고, 황산마그네슘 위에서 건조시키고 여과하고 농축한다. 실시예 3에 필수적으로 기재된 바와 같이 이솔루트 SCX-2® 컬럼 (10 g, 바이오티지 AB) 위에서 이온 교환 크로마토그래피에 의해 정제한 다음, 에틸 아세테이트:이소-헥산을 사용한 0:100 내지 80:20의 구배 용출로 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 더욱 정제하고 역상 HPLC (물 w/중탄산암모늄 (pH =9)/아세토니트릴)에 의해 더욱 정제하여 표제 화합물의 자유 염기를 수득한다. 메탄올에 용해시키고, 디에틸 에테르 (240 ㎕, 0.24 밀리몰) 중의 염화수소 1M 용액을 첨가하고 진공 하에 농축하여 담황색 고체로서 표제 화합물을 수득한다 (0.11 g, 0.24 밀리몰).

실시예 19

시클로프로판카르복실산 [4-(6-에틸-피리딘-2-일)-3-(2- 메틸 -2H- 인다졸 -5-일)- 이소티아졸 -5-일]-아미드 히드로클로라이드의 합성

무수 1,2-디메톡시에탄 (4 mL) 중의 시클로프로판카르복실산 [4-브로모-3-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-이소티아졸-5-일]아미드 (0.3 g, 0.79 밀리몰) 및 2-에틸-6-트리부틸스탄나닐-피리딘 (2.0 g, 5.05 밀리몰)의 혼합물을 통해 10분 동안 질소를 기포화함으로써 탈기시킨다. 비스(트리-t-부틸포스핀)팔라듐(0) (41 mg, 0.79 밀리몰)을 첨가하고, 80 ℃로 가열하고 20시간 동안 교반한다. 주변 온도로 냉각시키고 헥산:에틸 아세테이트를 사용한 50:50 내지 100:0 구배 용출로 실리카겔 크로마토그래피에 의해 직접 정제한 다음, 60분에 걸쳐 물 (w/0.1％ 트리플루오로아세트산)/아세토니트릴 (w/0.1％ 트리플루오로아세트산)을 사용하여 15:85 내지 80:20의 구배 용출로 역상 HPLC (크로마실(Kromasil)® KR100-10C18-250P2, 50.8 mm × 25 cm, 유량 60 mL/분)에 의해 더욱 정제한다. 분획을 합하고, 중탄산나트륨 포화 수용액으로 염기성으로 만들고 디클로로메탄으로 2회 추출하고 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고 여과하고 농축하여 고체를 수득한다 (0.132 g, 0.33 밀리몰). 디클로로메탄 (1.6 mL)에서 용해시키고, 0 ℃에서 냉각하고 교반하면서 디에틸 에테르중의 1M 염화수소 용액 (0.327 mL, 0.33 밀리몰)을 첨가한다. 10분 후에, 진공 하에 농축하고 디에틸 에테르로 잔류물을 2번 분쇄하고 진공 하에 건조시켜 고체로서 표제 화합물을 수득한다 (0.111 g, 0.25 밀리몰).

2-이소프로필-6-트리부틸스탄나닐-피리딘을 사용하여 필수적으로 실시예 19에 기재된 것과 같이 하기 화합물을 제조한다.

실시예 21

(1R,2R)-2- 메틸 - 시클로프로판카르복실산 [4-(6- 메톡시 -피리딘-2-일)-3-(2- 메 틸-2H- 인다졸 -5-일)- 이소티아졸 -5-일]-아미드의 합성

무수 1,2-디메톡시에탄 (3.1 mL) 중의 (1R,2R)-2-메틸-시클로프로판카르복실산 [4-브로모-3-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-이소티아졸-5-일]아미드 (0.24 g, 0.61 밀리몰)의 용액에 테트라히드로푸란 중의 6-메톡시-2-피리딜아연 브로마이드의 0.5M 용액 (6.13 mL, 3.07 밀리몰)을 첨가하고, 20분 동안 질소로 기포화함으로써 탈기시킨다. 비스(트리-t-부틸포스핀)팔라듐(0) (0.01 g, 12.27 마이크로몰)을 첨가하고, 실온에서 질소 하에 밤새 교반하고 55 ℃에서 48시간 동안 가열한다. 염수로 희석하고 에틸 아세테이트로 추출한다. 에틸 아세테이트 층을 황산마그네슘 위에서 건조시키고, 여과하고 농축한다. 에틸 아세테이트:클로로포름을 사용한 0:100 내지 30:70 구배 용출로 실리카겔 크로마토그래피에 의해 정제한 다음, 역상 HPLC (물 w/중탄산암모늄 (pH=9)/아세토니트릴)에 의해 더욱 정제하여 표제 화합물을 수득한다 (29.6 mg).

실시예 22

(1R,2R)-2- 메틸 - 시클로프로판카르복실산 [4-(6-에틸피리딘-2-일)-3-(2- 메틸 -2H-인다졸-5-일)- 이소티아졸 -5-일]-아미드의 결정화

(1R,2R)-2-메틸-시클로프로판카르복실산 [4-(6-에틸-피리딘-2-일)-3-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-이소티아졸-5-일]-아미드 (185 g, 0.44 몰)를 에틸 아세테이트 (555 mL)에 교반하면서 용해시킨다. 실시예 1의 종 결정 (200 mg)을 첨가한 다음 헥산(800 mL)을 첨가한다. 얻어진 혼합물을 주변 온도에서 30분 동안 교반한다. 얻어진 결정을 여과하고 헥산(50 mL)으로 헹군다. 고체를 진공 오븐에서 35 ℃에서 건조시켜 백색 결정성 고체로서 표제 화합물을 수득한다. MS(m/z): 418 (M+1); DSC (개시) mp=159.4 ℃.

실시예 23

(1R,2R)-2- 메틸 - 시클로프로판카르복실산 [4-(6-이소프로필-피리딘-2-일)-3-(2-메틸-2H- 인다졸 -5-일)- 이소티아졸 -5-일]-아미드의 합성

3L 3-목 둥근 바닥 플라스크에 오버헤드 교반, 열전쌍, 응축기, 가열 맨틀 및 질소 퍼어지를 장착한다. 플라스크를 (1R,2R)-2-메틸-시클로프로판카르복실산 [4-브로모-3-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-이소티아졸-5-일]-아미드 (96 g, 0.25 몰) 및 THF (1 L)로 충진한다. 2-이소프로필-6-(트리부틸스타닐)피리딘 (182 g, 0.44 몰)을 첨가하고 교반한다. 20분 동안 부-표면에서 질소로 살포한다. 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 클로라이드 (8.62 g, 0.012 몰)를 첨가하고 질소 살포를 5분간 계속한다. 살포를 질소 정화로 바꾸고 용기 내용물을 가열 환류시킨다.

반응 혼합물을 환류 조건에서 3일 동안 교반한다 (LCMS에 의해 남은 약 37％ 출발 물질). 반응 혼합물을 35 ℃로 냉각하고 15분 동안 탈기시키고 추가의 팔라듐 촉매 (1 몰％)를 첨가한다. 반응을 2일간 환류 조건에서 교반한다 (LC/MS에 의해 남은 22％ 출발 물질). 반응 혼합물을 35 ℃로 냉각하고, 15분 동안 탈기시키고 추가의 팔라듐 촉매 (4 몰％)를 첨가한다. 반응을 2일 동안 환류 하에 교반한다 (LC/MS에 의해 남은 13％ 출발 물질). 반응 혼합물을 35 ℃로 냉각하고, 15분 동안 탈기시키고 추가의 팔라듐 촉매 (5 몰％)를 첨가한다. 반응을 4.5시간 동안 환류 하에 교반한다 (LC/MS에 의해 남은 11％ 출발 물질). 반응 혼합물을 35 ℃로 냉각하고, 15분 동안 탈시키고 추가의 팔라듐 촉매 (5 몰％)를 첨가한다. 환류 하에서 15시간 동안 다시 한번 교반한다 (LC/MS에 의해 남은 약 6％ 출발 물질). 용액을 진공 하에 농축하여 용매를 제거한다. 얻어진 슬러리를 톨루엔(2 L) 및 1N HCl (1 L)를 처리한다. 셀라이트®를 통해 2상 혼합물을 여과한다. 층을 분리하고 유기 층을 1N HCl (1L × 3)로 역-추출한다. 수성 층을 합하고 톨루엔(1 L)으로 추출한다. 이어서, 수성 층을 톨루엔(2 L) 및 5N NaOH로 pH=11까지 처리한다. 층을 분리하고 수성 층을 톨루엔(1L × 2)으로 추출한다. 합한 유기 층을 염수 (700 mL)로 세척하고 황산나트륨 위에서 건조시키고 여과한다. 여액을 진공 하에 증발시켜 황색 오일로서 조 생성물을 수득한다 (78 g, 63％ 순도). 조 물질을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 에틸 아세테이트/헥산)에 의해 정제하여 표제 생성물을 제공한다. 에틸 아세테이트 및 헥산으로부터 결정화에 의해 더욱 정제한다. 로트를 합하고 톨루엔 (500 mL) 및 1N HCl (250 mL)로 처리한다. 층을 분리하고 1N HCl (3 × 250 mL)로 역-추출한다. 수성 층을 합하고 톨루엔 (300 mL)으로 추출한다. 수성 층을 톨루엔 (500 mL) 및 5N NaOH로 pH=11까지 처리한다. 층을 분리하고 수성 층을 톨루엔 (2 × 500 mL)으로 추출한다. 합한 유기 층을 염수 (200 mL)로 세척하고 황산나트륨 위에서 건조시키고 여과한다. 여액을 진공 하에 농축한다. 얻어진 잔류물을 에틸 아세테이트로부터 결정화하고 40 g의 표제 화합물을 백색 고체로서 제공한다.

Claims

하기 화학식의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.

[상기 식에서,
R¹은 H 또는 C₁-C₃ 알킬이고;
R²은 H, C₁-C₃ 알킬, C₃-C₅ 시클로알킬, C₁-C₃ 플루오로알킬, NR⁴R⁵, C₁-C₃ 알콕시 또는 C₁-C₃ 알콕시메틸이고;
R³은 H 또는 메틸이고;
R⁴ 및 R⁵은 독립적으로 H 또는 C₁-C₃ 알킬이다].
제1항에 있어서,
R¹이 C₁-C₃ 알킬이고;
R²가 C₁-C₃ 알킬, C₃-C₅ 시클로알킬 또는 C₁-C₃ 플루오로알킬이고;
R³이 메틸인, 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
제1항에 있어서,
R¹이 C₁-C₃ 알킬이고;
R²가 C₁-C₃ 알킬이고;
R³이 메틸인, 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
제1항에 있어서, R¹이 C₁-C₃ 알킬인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
제1항 또는 제4항에 있어서, R²가 C₁-C₃ 알킬인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
제1항, 제4항 및 제5항 중 어느 한 항에 있어서, R³은 메틸인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
제1항에 있어서,
R¹이 H, 메틸 또는 에틸이고;
R²가 H, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 플루오로메틸, 디플루오로메틸, 1-플루오로-1-메틸-에틸, 메틸아미노, 디메틸아미노, 메톡시 또는 메톡시메틸이고;
R³이 H 또는 메틸인, 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, (1R,2R)-2-메틸-시클로프로판카르복실산 [4-(6-에틸-피리딘-2-일)-3-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-이소티아졸-5-일]-아미드인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, (1R,2R)-2-메틸-시클로프로판카르복실산 [4-(6-이소프로필-피리딘-2-일)-3-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-이소티아졸-5-일]-아미드인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
제9항에 있어서, (1R,2R)-2-메틸-시클로프로판카르복실산 [4-(6-이소프로필-피리딘-2-일)-3-(2-메틸-2H-인다졸-5-일)-이소티아졸-5-일]-아미드인 화합물.
제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 제약상 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 제약 조성물.
제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 치료에 사용하기 위한 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 불안 치료용 약제를 제조하기 위한 용도.
제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 불안 치료에 사용하기 위한 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.