KR20090064436A - 세포 결합 분자들과 디소라졸 및 이의 유도체의 접합체, 신규한 디소라졸 유도체, 이의 제조 방법 및 용도 - Google Patents

세포 결합 분자들과 디소라졸 및 이의 유도체의 접합체, 신규한 디소라졸 유도체, 이의 제조 방법 및 용도 Download PDF

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Abstract

본 발명은, 예를 들면, 펩티드나 단백질, 호르몬, 혈액 단백질 및 항체와 같은 세포결합분자들과 디소라졸 및 이의 유도체의 접합체를 제공한다. 또한, 본 발명은 신규한 디소라졸 유도체와 이의 접합체 및 디소라졸 유도체의 제조방법을 제공한다. 이 화합물들은 포유류에서 생리학적 및/또는 병리생리학적 상태의 치료를 위한 약제, 특히 다양한 종양의 치료를 위한 약제로 이용될 수 있다.
Figure P1020097007093
디소라졸, 디소라졸 유도체, 세포결합분자, 종양의 치료

Description

세포 결합 분자들과 디소라졸 및 이의 유도체의 접합체, 신규한 디소라졸 유도체, 이의 제조 방법 및 용도{Conjugates of disorazoles and their derivatives with cell-binding molecules, novel disorazole derivatives, processes of manufacturing and uses thereof}
설명
본 발명은, 예를 들면, 펩티드나 단백질과 같은 세포결합분자들과 디소라졸 및 이의 유도체의 접합체, 및 신규한 디소라졸 유도체 및 이의 제조방법에 관한 것이다. 이런 화합물들은 특히, 다양한 종양의 치료용 약제로서 사용될 수 있다.
앞으로 수년간, 종양증(oncoses) 및 종양과 관련된 사망의 사례가 급격히 증가할 것으로 세계적으로 예측된다. 2001년에는, 세계적으로 대략 천만명의 사람들이 암으로 투병중이며, 6만명이 넘는 사람들이 이 질병으로 사망했다. 종양의 발생은 식물계, 동물계 및 인간계에서의 고등생물의 근본적인 질병이다. 발암의 일반적으로 인정된 다단식 모델은 각 세포에서 다수의 돌연변이의 축적의 결과로서, 이의 증식 및 분화 작용에서 변성되어 결국, 양성 중간단계를 통해 전이에 의해 악성상 태에 도달한다고 추정된다.
용어 암 또는 종양은 200개를 초과하는 다양한 개별 질병에 의한 임상양상을 내포한다. 종양증은 양성 또는 악성 상태로 진행될 수 있다. 가장 중요한 종양은 폐, 유방, 위, 자궁경부, 전립샘, 두경부, 대장 및 소장, 간 및 혈액계의 종양이다. 경과, 예후 및 치료행태에 관해서는 큰 차이가 있다. 90%가 초과되는 승인된 사례는 특히, 진행악화기 또는 전이에서 치료하기 어렵거나 치료 불가능한 고형종양과 관련되어 있다. 암 조절의 세 가지 필러(pillars)는 여전히 외과적 절제, 방사선 조사 및 화학요법이다. 의약 분야의 엄청난 진보에도 불구하고, 만연한 고형종양에서 현저한 생존기간 연장이나 심지어 완전한 치료를 가져올 수 있는 약제의 발달은 아직까지 불가능했다. 따라서, 암의 관리를 위한 신규한 약제를 개발하는 것은 의미있는 일이다.
천연물질은 약제학적 연구에서 신규한 선두 구조를 위한 중요한 자원이며, 몇몇 사례들에서 또한 신규한 약제의 개발을 위해 직접적으로도 적합하다[참조: Shu Y, J. Nat. Prod. 1998, 61:1053-1071]. 다수의 천연물질은 강한 세포독성작용을 가진다고 공지되었다[참조: Ram VJ et al., Drug News Perspect 2001, 14(8):465-482].
디소라졸을 포함하는 그룹의 천연물질은 균주 소란지움 셀룰로숨 소 세12(Sorangium cellulosum So ce12)의 박테리아로부터 분리되었다[참조: Jansen R et al., Liebigs Ann. Chem. 1994,(8):757-773].
통틀어, 29개의 디소라졸이 분리되고 물리화학적 특성이 연구되었다. 디소라 졸 A1에 대해, 이는 세포모델에서 항증식성 작용을 가진다고 보고됐다[참조: Irschik H et al., J. Antibiotics 1995, 48(1):31-35; Elnakady YA, Dissertation 2001, Technische Universitat Carolo-Wilhelmina zu Braunschweig]. 그러나 종양증 치료를 위한 용도는 교시되거나 시사되지 않았다. 다른 디소라졸의 생물학적 연구는 수행되지 않았다.
WO2004/024149는 특히, 디소라졸 E1 및 D1은 다양한 인간 종양 세포주에서 세포독성작용을 지님을 보고했다. 나노 및 피코 몰농도에서, 특히 난소암종, 전립선암종, 아교모세포종, 폐암종 및 유방암 세포의 분열이 억제됐다. 디소라졸 E1 및 D1의 작용은 이 사례에서 세포주기-의존적이다. 심지어 나노 몰농도에서, 세포주기는 G2/M기에 유지되고 암세포는 세포자멸사하도록 강요된다.
WO2004/024149는 디소라졸의 항증식 작용은 특히 튜블린 중합반응(tublin polymerization)의 효과적인 억제를 기본으로 함을 추가로 보여준다. 또한, 디소라졸 E1은 파클리탁셀-내성 세포주 및 빈데신-내성 세포주에 대항하여 활성을 가진다. 이런 물질들, 특히, 디소라졸 A1은 이후 세포증식 억제제로서의 용도에 부적절하다[참조: Hoefle G, Annual Report 1999/2000 of the Gesellschaft fur Biotechnologische Forschung(GBF), pages 101/103].
윕프(Wipf) 및 동료들은 디소라졸 C의 세포활성과 8개의 이의 유사체의 구조-활성 관련성을 연구하였다[참조: Wipf et al., Chem. Biol. Drug Des. 2006, 67(1):66-73].
디소라졸 A1 및 C1의 합성을 위한 총합성계획(Total Synthesis strategies) 이 연구되고 완전히 기술되었다[참조: Hillier MC et al., J. Org. Chem. 2001, 66:6037-6045; Hartung IV et al., Organic Letters 2002, 4(19):3239-3242; Wipf P et al., J. Am. Chem. Soc. 2004, 126(47):15346-15347].
디소라졸 A1은 추가로 확인되었다. 이 물질은 튜블린 중합반응에서 항유사분열제로 작용하며, 포유동물 세포에서 세포자멸을 유도함을 보여준다[참조: Elnakady YA et al., Biochem. Pharmacol. 2004, 67(5):927-935]. 또한, 디소라졸 A1의 메탄분해 생성물은 산출되고, 이의 잠재력있는 항증식 활성이 연구되었다[참조: Hearn BR et al., J. Nat. Prod. 2006, 69(1):148-150].
다음의 선행 기술 문서들은 디소라졸 또는 관련화합물의 생합성이 지시되었다. WO2004/053065는 디소라졸 폴리케티드 합성효소를 암호화하는 폴리누클레오타이드를 기술한다. 숩(Schupp) 및 동료들은 마크로리드 항생제 소라펜 A(macrolide antibiotic Soraphen A)의 생합성을 위해 소란지운 셀룰로숨 유전자 클러스터(Sorangium cellulosum gene cluster)를 확인하였다[참조:Schupp T et al., Journal of Bacteriology 1995, 177:3673-3679]. 디소라졸 생합성을 위한 생합성유전자는 카발로 및 동료들[참조:Carvalho R et al., Gene 2005,359:91-98], 콥 및 동료들[참조:Kopp M et al., Chembiochem. 2005, 6(7):1277-1286] 및 WO2006/075013에 의해 또한 확인되었다.
그러나, 상기 선행 기술 문헌들 중 어느 것도 디소라졸의 접합체를 교시하거나 시사하지 않았다.
US 제6,214,969호는 세포독성 잔기진 황체형성분비호르몬(LHRH) 유사체들을 기술했다. 이러한 잔기들은 D-/L-Mel(4-[비스(2-클로로에틸)아미노]-D/L-페닐알라닌일), 사이클로프로판알카노일, 이지리딘-2-카보닐, 에폭시알킬, 1,4-나프토퀴논-5-옥시카보닐-에틸, 독소루비시닐(독소루비신, DOX), 미토마이시닐(미토마이신 C), 에스페라마이시닐 또는 메토트렉소일일 수 있다.
그러나, 튜블린 중합반응 억제제이며 세포자멸을 유도하는 디소라졸은 언급되지 않았으며, 이들의 용도도 분명하게 제시하지 않았다.
US 제5,843,903호는 세포독성 안트라사이클린 유사체, 특히, 독소루비신(DOX) 또는 이의 다우노사민 변성된 유도체에 관한 것이다. 이러한 세포독성 잔기들은, 예를 들면, LHRH, 봄베신 및 성장억제 호르몬 및 이의 유사체 같은 펩티드 호르몬에 접합한다.
샬리(Schally)와 나기(Nagy)는 다양한 암에 대한 신규한 치료법을 검토하였는데, 이 치료법은 독소루비신(DOX) 또는 2-피롤리노-독스(DOX)를 포함하는 LHRH, 봄베신 및 성장억제 호르몬의 목표된 세포독성 유사체의 사용을 포함한다[참조: Schally AV et al., Life Sciences 2003, 72:2305-2320; Nagy A et al., Current Pharmaceutical Design 2005, 11:1167-1180].
상기 세 가지 문헌에서, 디소라졸은 교시되거나 시사되지 않았다.
세포독성제 함유 접합체를 다루는 다른 선행 기술 문헌들은, 암치료에서 사용하기 위한 항체-세포독성제 접합체[참조: Chen J et al.,Expert Opin. Drug Deliv. 2005, 2(5):873-890], 종양학에서 사용하기 위한 항체-약물 접합체[참조: Hamann PR, Expert Opin. Drug Deliv. 2005, 15(9):1087-1103], 종양 타겟팅에서 사용하기 위한 다부류-항암-약물 접합체[참조: Jaracz S et al., Bioorganic & Medicinal Chemistry 2005, 13:5043-5054], 전립선암 및/또는 전립선 비대증의 치료를 위한 빈카 알칼로이드 세포독성제-올리고펩타이드 접합체(WO97/12624, WO98/10651 및 WO99/02175), 전립선암 치료를 위한 전구약물 빈블라스틴-펩티딜 접합체[참조: Brady SF et al., J. Med. Chem. 2002, 45:4706-4715], 선택적인 항암치료를 위한 효소 활성 전구약물 및 양성자 활성 전구약물[참조: Tietze LF et al., Current Pharmaceutical Design 2003, 9:2155-2175] 및 항체-지정효소 전구약물 요법(antibody-directed enzyme prodrug therapy)에서 사용하기 위한 천연 안트라사이클린의 전구약물[참조: Michel S et al., Studies in Natural Products Chemistry 2000, 21:157-180]을 포함한다.
또한, 모든 상기 문헌에서, 튜블린 중합반응 억제제이며 세포자멸을 유도하는 디소라졸은 언급되지 않았으며, 이의 용도에 대해서도 시사되지 않았다.
본 발명은 세포결합분자와 디소라졸 및 이의 유도체의 접합체를 제공하는 것이 목적이다. 신규한 디소라졸 유도체를 제공하는 것이 본 발명의 또 다른 목적이다. 또한, 본 발명의 추가의 목적은 이의 제조 방법을 제공하는 것이다. 본 발명의 또 다른 목적은, 특히, 다양한 종양의 치료용 약제로서 사용될 수 있는 세포결합물질과 디소라졸 및 이의 유도체의 접합체 및 신규한 디소라졸 유도체를 제공하는 것이다.
본 발명의 목적은 놀랍게도 한 측면에서 화학식 I의 화합물을 제공함에 의해 성취되었다.
C1-B1-A-B2-C2
상기 화학식 I에서,
A는 화학식 II에 따른 디소라졸 잔기이고,
B1, B2는 서로 독립적인 링커(linker)이며, A를 C1 및/또는 C2와 공유결합에 의해 연결하고;
C1, C2는 "펩티드, 펩티드 호르몬, 단백질, 단백질 호르몬, 수용체 리간드, 혈장 단백질, 혈청 단백질, 항체, 항체 단편"으로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택된 세포결합분자이다.
Figure 112009020722141-PCT00001
상기 화학식 II에서,
Ran, Rbn, Rcn, Rdn, Rem, Rfm, Rgm, Rhm, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10, R11, R12, R13, R14, R15, R16, R17, R18, R19, R20, R21, R22, R23, R24는 "수소, 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-알킬, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 아릴-알킬설포닐, 할로겐, 하이드록실, 카보닐, 아세틸, 카복실, 카복실에스테르, 아미드, 카보네이트, 카바메이트, 알파-아미노산 잔기, 베타-아미노산 잔기, 알콕실, 아미노, 이미노, 하이드록실아미노, 모노-알킬아미노, 디-알킬아미노, 하이드라지닐, 시아노, 알킬-시아노, 설프하이드릴, 디설피딜알킬 및/또는 알킬-설피딜"로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택되고; 상기 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-알킬, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 아릴-알킬설포닐, 카보닐, 아세틸, 카복실, 카복실에스테르, 아미드, 카보네이트, 카바메이트, 알콕실, 모노-알킬아미노, 디-알킬아미노, 알킬-시아노, 디설피딜알킬 및/또는 알킬-설피딜 그룹은 "알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-알킬, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 아릴-알킬설포닐, 할로겐, -F, -Cl, -Br, -I, -N3, -NO2, =O, =S, =S(O)2, 하이드록실, 카보닐, 아세틸, 카복실, 카복실에스테르, -C(O)OH, -C(O)NH2, 아미드, 카보네이트, 카바메이트, 알파-아미노산 잔기, 베타-아미노산 잔기, 알콕실, 아미노, 이미노, 하이드록실아미노, 모노-알킬아미노, 디-알킬아미노, 하이드라지닐, 시아노, 알킬- 시아노, 설프하이드릴, 디설피딜알킬 및/또는 알킬-설피딜"로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 임의로 치환되고;
임의로, 라디칼 Ran, Rbn, Rcn, Rdn, Rem, Rfm, Rgm, Rhm, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10, R11, R12, R13, R14, R15, R16, R17, R18, R19, R20, R21, R22, R23, R24 중 임의의 인접한 두 개의 라디칼 R은 이중결합을 형성하기 위해 원자결합을 할 수 있거나 상기 두 개의 라디칼 R은 에폭시드(옥시란), 아지란(아지리딘), 알킬-, 사이클로알킬-, 사이클로알킬-알킬-, 헤테로아릴-, 아릴-알킬-, 헤테로아릴-알킬-, 헤테로사이클릴- 및/또는 헤테로사이클릴-알킬-치환된 아지란(아지리딘), 티이란 및/또는 티이란-S-옥시드 그룹을 형성할 수 있고;
n은 0, 1, 2, 3이고;
m은 0, 1, 2, 3이다.
불확실함을 피하기 위해, 상기 화학식 I 및 Ⅱ의 화합물뿐 아니라 하기 화학식 III 내지 Ⅵ의 화합물은, 예를 들면, "순수한" E-이성질체 또는 Z-이성질체 또는 이들 이중결합 이성질체들의 혼합물과 같은 모든 가능한 이중결합 이성질체의 형태로 존재할 수 있다.
또한, 상기 화학식 II뿐 아니라 하기 화학식 III 내지 Ⅵ와 관련하여, n/o=0은 왼편의 옥사졸 환과 오른편의 카복실 그룹과의 사이에 오직 6개의 탄소 원자가 있음을 의미한다. n/o=1, 2, 3에 대해서는, 이는 8, 10 또는 12개 탄소 원자가 포함되어 있음을 의미한다. 유사하게, 상기와 동일한 사항이 m/p=0, 1, 2, 3에 적용 되며, 이때 각각 6, 8, 10 또는 12개의 탄소 원자가 오른편의 옥사졸 환과 왼편의 카복실 그룹과의 사이에 포함되어 있음을 의미한다.
바람직한 양태에서, A가 화합물 Ⅲ의 디소라졸 잔기인, 상기 화학식 Ⅰ과 Ⅱ의 화합물이 제공된다.
Figure 112009020722141-PCT00002
상기 화학식 III에서,
Rio, Rjo, Rkp, Rlp, Rmp, Rnp, R25, R26, R27, R28, R29, R30, R31, R32, R33, R34, R35, R36, R37, R38, R39, R40, R41, R42, R43, R44는 "수소, 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-알킬, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 아릴-알킬설포닐, 할로겐, 하이드록실, 카보닐, 아세틸, 카복실, 카복실에스테르, 아미드, 카보네이트, 카바메이트, 알파-아미노산 잔기, 베타-아미노산 잔기, 알콕시, 아미노, 이미노, 하이드록실아미노, 모노-알킬아미노, 디-알킬아미노, 하이드라지닐, 시아노, 알킬-시아노, 설프하이드릴, 디설피딜알킬 및/또는 알킬-설피딜"로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택되고; 상기 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-알킬, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 아릴-알킬설포닐, 카보닐, 아세틸, 카복실, 카복실에스테르, 아미드, 카보네이트, 카바메이트, 알콕실, 모노-알킬아미노, 디-알킬아미노, 알킬-시아노, 디설피딜알킬 및/또는 알킬-설피딜 그룹은 "알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-알킬, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 아릴-알킬설포닐, 할로겐, -F, -Cl, -Br, -I, -N3, -NO2, =O, =S, =S(O)2, 하이드록실, 카보닐, 아세틸, 카복실, 카복실에스테르, -C(O)OH, -C(O)NH2, 아미드, 카보네이트, 카바메이트, 알파-아미노산 잔기, 베타-아미노산 잔기, 알콕실, 아미노, 이미노, 하이드록실아미노, 모노-알킬아미노, 디-알킬아미노, 하이드라지닐, 시아노, 알킬-시아노, 설프하이드릴, 디설피딜알킬 및/또는 알킬-설피딜"로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 임의로 치환되고;
임의로, 라디칼 Rio, Rjo, Rkp, Rlp, Rmp, Rnp, R25, R26, R27, R28, R29, R30, R31, R32, R33, R34, R35, R36, R37, R38, R39, R40, R41, R42, R43, R44 중 임의의 인접한 두 개의 라디칼 R은 이중결합을 형성하기 위해 원자결합을 할 수 있거나 상기 두 개의 라디칼 R은 에폭시드(옥시란), 아지란(아지리딘), 알킬-, 사이클로알킬-, 사이클로알킬-알킬-, 헤테로아릴-, 아릴-알킬-, 헤테로아릴-알킬-, 헤 테로사이클릴- 및/또는 헤테로사이클릴-알킬-치환된 아지란(아지리딘), 티이란 및/또는 티이란-S-옥시드 그룹을 형성할 수 있으며;
o는 0, 1, 2, 3이고;
p는 0, 1, 2, 3이다.
또 다른 바람직한 양태에서, 링커 B1, B2가 다음의 링커들로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택되는 상기 화학식 I, Ⅱ 및 Ⅲ 및 상기 양태에 따른 화합물이 제공된다: "효소에 의해 절단되는 링커, 단백질 분해에 의해 절단되는 링커, 자가-희생적 링커, 산-불안정 링커, 디설피드(교환)링커, 가수분해에 불안정한 링커, 이관능성(bifunctional) 링커, 다관능성 링커, 에스테르 링커, 펩티드 링커, 1, 2, 3, 4 또는 5개의 아미노산 잔기를 가진 링커, 디펩티드 링커, 테트라펩티드 링커, 히드라존 링커, 하이드라지드 링커, 디탄소산 잔기 링커, 폴리-에틸렌글리콜(PEG) 링커.
또 다른 바람직한 양태에서, 링커 B1, B2가,
"X1-알킬-X2, X3-사이클로알킬-X4, X5-사이클로알킬-알킬-X6, X7-알킬-사이클로알킬-알킬-X8, X9-아릴-X10, X11-아릴-알킬-X12, X13-알킬-아릴-알킬-X14, X15-헤테로아릴-X16, X17-헤테로아릴-알킬-X18, X19-알킬-헤테로아릴-알킬-X20, X21-헤테로사이클릴-X22, X23-헤테로사이클릴-알킬-X24, X25-알킬-헤테로사이클릴-알킬-X26이며(여기서, X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7, X8, X9, X10, X11, X12, X13, X14, X15, X16, X17, X18, X19, X20, X21, X22, X23, X24, X25, X26은 "O-, S-, S-S-, C(O)O-, C(O)-, OC(O)O-, C(O)NH-, OC(O)NH-, NHC(O)-, NHC(O)O-, NH-, NY1-, C(O)NY2-, OC(O)NY3-, NY4C(O)-, NY5C(O)O-, C=N-NH-, NH-N=C-, C=N-NY6-, NY7-N=C-"로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택되며, 여기서 Y1, Y2, Y3, Y4, Y5, Y6, Y7은 "알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-알킬, 할로겐, -F, -Cl, -Br, -I, -N3, -NO2, 하이드록실, 알콕실, 아미노, 이미노, 하이드록실아미노, 하이드라지닐, 시아노, 알킬-시아노, 설프하이드릴"로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택된다);
옥살릴, 말로닐, 석시닐, 글루타릴, 아디피닐, 말레이닐, 푸마릴; 및
다음 분자들을 기본으로 하는 링커들:
Gly-Phe-Leu-Gly, Phe-Lys, Val-Cit(시트룰린);
1,4-비스(아미노메틸-)-사이클로헥산, 1,4-비스(아미노메틸-)-사이클로헵탄, 1,3-비스(아미노메틸-)-사이클로펜탄, 1-아미노-4-(아미노메틸)-사이클로헥산, 1,4-디아미노사이클로헥산, 1,4-비스(아미노메틸)바이사이클[2.2.2]옥탄, 감마-말레이미도카프로일히드라지드, 4-하이드라지노설포닐벤조산, SMCC 이관능성 링커, MDS(메틸디설파닐), PEG2, PEG3, PEG7;
릴리 링커(Lilly linker):
Figure 112009020722141-PCT00003
;
릴리 밤메 링커(Lilly BAMME Linker):
Figure 112009020722141-PCT00004
;
릴리 밥 링커(Lilly BAP linker):
Figure 112009020722141-PCT00005
;
시스-아코니틱 링커:
Figure 112009020722141-PCT00006
;
PABC1 링커:
Figure 112009020722141-PCT00007
;
PABC2 링커:
Figure 112009020722141-PCT00008
;
PABC3 링커:
Figure 112009020722141-PCT00009
;
PABC4 링커:
Figure 112009020722141-PCT00010
;
PABC5 링커:
Figure 112009020722141-PCT00011
;
PABC6 링커:
Figure 112009020722141-PCT00012
;
로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택되는, 상기 화학식 I, Ⅱ 및 Ⅲ 및 상기 양태에 따른 화합물이 제공된다.
본 발명의 범위에서, 용어 "링커"는 디소라졸 잔기 A를 세포결합 분자 C1 및/또는 C2에 연결하기에 적당한 임의의 링커, 연결 잔기(linking moiety), 스페이서(spacer) 및 당업자에게 공지된 다른 분자/잔기들을 함유한다.
최종 접합체를 형성하기 위한 상기의 바람직한 링커 분자의 적절히 활성화된 형태 및/또는 라디칼의 사용은 당업자의 지식에 속한다.
적당한 링커에 대한 관련 선행 기술 문헌은 다음의 예들을 포함한다[참조: Michel S et al., Studies in Natural Products Chemistry 2000, 21 : 157-180; Tietze LF et al., Current Pharmaceutical Design 2003, 9: 2155-2175; Brady SF et al., J. Med. Chem. 2002, 45: 4706-4715; WO 99/02175; Jaracz S et al., Bioorganic & Medicinal Chemistry 2005, 13: 5043-5054; Hamann PR, Expert Opin. Drug DeNv. 2005, 15(9): 1087-1 103; Chen J et al., Expert Opin. Drug DeNv. 2005, 2(5): 873-890; US 제5,843,903호, US 제6,214,969호].
또 다른 바람직한 양태에서, 세포결합 분자 C1, C2가 다음 물질로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택되는 상기 화학식 Ⅰ, Ⅱ 및 Ⅲ 및 상기 양태에 따른 화합물이 제공된다: 팔량체(octamer) 펩티드, 구량체(nonamer) 펩티드, 십량체(decamer) 펩티드, LHRH 유사체, LHRH 작용제, LHRH 길항제, 봄베신, 봄베신 유사체, 봄베신 길항제, 성장억제 호르몬, 성장억제 호르몬 유사체, 혈청 알부민, 인간 혈청 알부민(HSA), 갈라닌 수용체 리간드, GAL1 수용체 리간드, GAL2 수용체 리간드, 갈라닌(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버(Chemical Abstract Services Registry No.) 119418-04-1) 및 유사체, 성장억제 호르몬 수용체 리간드, sst1 수용체 리간드, sst2 수용체 리간드, sst4 수용체 리간드, sst5 수용체 리간드, 성장억제 호르몬(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 38916-34-6) 및 유사체, 옥트레오타이드(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 83150-76-9) 및 유사체, RC-121(D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys[사이클릭(2→7)디설피드]-Thr-NH2; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 99660-13-6) 및 유사체, 봄베신 수용체 리간드, BB1 수용체 리간드, BB2 수용체 리간드, BB3 수용체 리간드, 가스트린-분비-펩티드-수용체(GRP-R) 리간드, 봄베신(Bn; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 31362-50-2) 및 유사체, 가스트린-분비-펩티드(GRP) 및 유사 체, 뉴로메딘B(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 102577-19-5) 및 유사체, [D-Tyr6,베타-Ala11,Phe13,Nle(노르류신)14]-봄베신(6-14) 및 유사체, RC-3095(H-D-Tpi-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-psi-Leu-NH2; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 138147-78-1; US 제5,244,883호; US 제5,369,094호) 및 유사체, Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Psi-Leu-Leu-NH2(US 제5,843,903호) 및 유사체, 생식샘자극호르몬-분비-호르몬 수용체(GnRH-R) 리간드, GnRH-R 타입I 리간드, GnRH-R 타입Ⅱ 리간드, 황체형성 호르몬 분비 호르몬(LHRH; Glp-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2) 및 유사체, [D-Lys6]-LHRH, 트립토렐린([D-Trp6]-LHRH; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 57773-63-4) 및 유사체, 히스트렐린(6-[1-(페닐메틸)-D-히스티딘]-9-(N-에틸-L-프롤린아미드)-10-데글리신아미드-LHRH; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 76712-82-8) 및 유사체, 부세렐린(6-[O-(1,1-디메틸에틸)-D-세린]-9-(N-에틸-L-프롤린아미드)-10-데글리신아미드-LHRH; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 57982-77-1) 및 유사체, 류프로렐린(6-D-류신-9-(N-에틸-L-프롤린아미드)-10-데글리신아미드-LHRH; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 53714-56-0) 및 유사체, 고세렐린(6-[O-(1,1-디메틸에틸)-D-세린]-LHRH-2-(아미노카보닐)하이드라지드; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 65807-02-5) 및 유사체, 나파렐린(6-[3-(2-나프탈레닐)-D-알라닌]-LHRH; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 76932-56-4) 및 유사체, LHRH-Ⅱ(Pyr-His-Trp- Ser-His-Gly-Trp-Tyr-Pro-Gly-NH2) 및 유사체, 세트로레릭스(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 120287-85-6) 및 유사체, 테베레릭스/안타레릭스(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 144743-92-0) 및 유사체, 오자레릭스(D-63153; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 295350-45-7) 및 유사체, 아바레릭(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 183552-38-7) 및 유사체, 데가레릭(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 214766-78-6) 및 유사체, 데티레릭(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 89662-30-6) 및 유사체, 가니레릭(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 124904-93-4) 및 유사체, 이투레릭스/안티드(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 112568-12-4) 및 유사체, GPR54 수용체 리간드, 키스펩틴 및 유사체, 키스펩틴-10/Kp-10(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 374675-21-5) 및 유사체, 키스펩틴-13/Kp-13(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 374675-18-0) 및 유사체, 메타스틴(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 388138-21-4) 및 유사체, 뉴로키닌 수용체 리간드, NK1/NKA 수용체 리간드, NK2/NKB 수용체 리간드, NK3 수용체 리간드, 물질 P(H-Arg-Pro-Lys-Pro-Gln-Gln-Phe-Phe-Gly-Leu-Met-NH2; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 33507-63-0) 및 유사체, H-Asp-Ser-Phe-Val-Gly-Leu-Nle-NH2 및 유사체, [Sar9,Met(O2)11]-물질 P 및 유사체, [Nle10]-뉴로키닌 A(4-10) 및 유사체, [MePhe7]-뉴로키닌 B 및 유사체, [베타-Ala8]- 뉴로키닌 A(4-10) 및 유사체, 브라디키닌 수용체 리간드, B1 수용체 리간드, B2 수용체 리간드, 브라디키닌(H-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Phe-Arg-OH; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 58-82-2) 및 유사체, 데스Arg9[Leu8]-브라디키닌 및 유사체, 데스Arg9-브라디키닌 및 유사체, Lys데스Arg9-브라디키닌 및 유사체, Lys데스Arg9[Leu8]-브라디키닌 및 유사체, [Hyp3,Tyr(Me)8]-브라디키닌 및 유사체, D-Arg[Hyp3,D-Phe7, Leu8]-브라디키닌 및 유사체, BKM 718(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 259883-69-7) 및 유사체, BKM 822(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 259884-10-1) 및 유사체, BKM 570(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 259885-54-6) 및 유사체, BKM-638(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 259885-81-9) 및 유사체, GHS 수용체 리간드, 그렐린(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 304853-26-7) 및 유사체, 헥사렐린(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 140703-51-1) 및 유사체, GHRP-1(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 141925-59-9) 및 유사체, GHRP-2(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 158861-67-7) 및 유사체, GHRP-6(His-D-Trp-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 87616-84-0) 및 유사체, D-Lys3-GHRP-6 및 유사체, EP-1572(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 381231-18-1) 및 유사체, 데스-옥타노일 그렐린 및 유사체, 릴렉신 수용체 리간드, LGR7 수용체 리간드, LGR8 수용체 리간드, 릴렉신(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 9002- 69-1) 및 유사체, 인슐린-유사(like)3 펩티드(INSL3; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 166515-61-3) 및 유사체, 글루카곤-유사 펩티드1 수용체 리간드, 글루카곤 수용체 리간드, 글루카곤 유사 펩티드-1(GLP-1; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 89750-14-1) 및 유사체, 글루카곤 유사 펩티드-2(GLP-2; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 116469-36-4) 및 유사체, 콜레사이스토키닌 수용체 리간드, CCK1/CCKA 수용체 리간드, CCK2/CCKB 수용체 리간드, CCKC 수용체 리간드, 콜레사이스토키닌(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 9011-97-6) 및 유사체, 뉴로펩티드 Y(NPY) 수용체 리간드, NPY1 수용체 리간드, NPY2 수용체 리간드, NPY3 수용체 리간드, 뉴로펩티드 Y(NPY; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 82785-45-3) 및 유사체, [Leu31,Pro34]NPY 및 유사체, NPY-(13-36) 및 유사체, 펩티드 yy(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 106388-42-5) 및 유사체, 엔도텔린 수용체 리간드, ETA 수용체 리간드, ETB 수용체 리간드, 엔도텔린1(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 123626-67-5) 및 유사체, 엔도텔린2(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 122879-69-0) 및 유사체, 엔도텔린3(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 125692-40-2) 및 유사체, 혈관작용성 장 펩티드 수용체(VPAC1, VIP1) 리간드, VPAC2/VIP2 수용체 리간드, PAC1/PACAP 수용체 리간드, PACAP(1-27)(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 137061-48-4) 및 유사체, PACAP(1-38)(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 137061-48-4) 및 유사체, PACAP(6-27)(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레 지스트리 넘버 137061-48-4) 및 유사체, PACAP(6-38)(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 137061-48-4) 및 유사체, 혈관작용성 장 폴리펩티드(VIP)(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 37221-79-7) 및 유사체, VIP(6-28)(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 37221-79-7) 및 유사체, [(Ac-His1,D-Phe2,Lys15,Arg16,Leu27)-VIP(1-7)-GRF(8-27)] 및 유사체, [Lys1, Pro2 ,5,Arg3 ,4,Tyr6]-VIP 및 유사체, VEGF 수용체 리간드, NP-1 수용체 리간드, 뉴로필린-1 수용체 리간드, 혈관내피 성장인자(VEGF; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 127464-60-2) 및 유사체, 섬유모세포 성장인자 수용체 리간드, 섬유모세포 성장인자(FGF; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 62031-54-3) 및 유사체"로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택되고, 바람직하게는 "팔량체 펩티드, 구량체 펩티드, 십량체 펩티드, 황체화호르몬 분비 호르몬(LHRH), [D-Lys6]-LHRH, LHRH 유사체, LHRH 작용제, 트립토렐린([D-Trp6]-LHRH), LHRH 길항제, 봄베신, 봄베신 유사체, 봄베신 길항제, 성장억제 호르몬, 성장억제 호르몬 유사체, 혈청 알부민, 인간 혈청 알부민(HSA)"으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
모든 상기 세포결합 분자들 및 그 유사체들은 선행 기술에 익히 공지되었다. 가능한 경우, 케미칼 앱스트렉트 서비시즈(CAS) 레지스트리 넘버(Chemical Abstract Services(CAS) Registry Numbers)가 주어졌다. 그러나, 세포결합 분자들의 범위를 각 CAS 레지스트리 넘버로 언급된 것들로만 한정하는 것은 아니다. 이는 임의의 가능한 구조적 및/또는 기능적인 변체/패밀리 멤버가 포함되도록 의도되는 세포결합 분자 용어에 의해 이루어진다.
세포결합 분자에 대해 언급되는 용어 "유사체"에 의해, 선행 기술로부터 당업자에게 공지된 구조적으로 및/또는 기능적으로 관련된 세포결합 물질 유사체가 본 발명의 범위에 속하는 것으로 의도된다. 제한되지 않는 예시들은, 예를 들면, 트리포렐린, 세트로레릭스 등과 같은 LHRH의 유사체이다.
또한, 세포결합 분자에 대해 언급되는 용어 유사체는, 가능한 경우, 해당되는 세포결합 분자의 작용제 및 길항제를 포함하는 것으로 의도되며, 즉 용어 LHRH 유사체는 본 발명의 범위에서 LHRH 작용제 및 LHRH 길항제를 포함한다.
본 발명의 또 다른 바람직한 양태에서, 링커 B1과 B2가 동일하고 세포결합 분자 C1과 C2가 동일한 상기 화학식 I, Ⅱ 및 Ⅲ 및 상기 양태에 따른 화합물이 제공된다.
본 발명의 또 다른 바람직한 양태에서, 링커 B2 및 세포결합 분자 C2가 존재하지 않는 상기 화학식 I, Ⅱ 및 Ⅲ 및 상기 양태에 따른 화합물이 화학식 Ⅳ의 화합물로서 제공된다.
C1 - B1 - A
본 발명에 따른 또 다른 바람직한 양태에서, 아래와 같은 라디칼 정의를 갖는 상기 화학식 I, Ⅱ 및 Ⅲ 및 상기 양태의 화합물이 제공된다:
A는 화학식 III의 디소라졸 잔기이고;
Ri0, Rj0, Rkp, Rmp, R28, R30, R31, R32, R33, R34, R35, R36, R38, R40, R41, R42, R43, R44는 수소이며;
Rlp, Rnp는 함께 이중결합을 형성하거나 "수소, 알콕실"로 이루어진 그룹에서 독립적으로 선택되고;
R27, R29는 함께 이중결합을 형성하거나 에폭시드(옥시란)을 형성하고,;
R37, R39는 함께 이중결합을 형성하거나 에폭시드(옥시란)을 형성하고;
R25, R26은 "알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-알킬, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 아릴-알킬설포닐, 할로겐, -F, -Cl, -Br, -I, -N3, -NO2, =0, =S, =S(0)2, 하이드록실, 카보닐, 아세틸, 카복실, 카복실에스테르, 아미드, 카보네이트, 카바메이트, 알파-아미노산 잔기, 베타-아미노산 잔기, 알콕실, 아미노, 이미노, 하이드록실아미노, 모노-알킬아미노, 디-알킬아미노, 하이드라지닐, 시아노, 알킬-시아노, 설프하이드릴, 디설피딜알킬 및/또는 알킬-설피딜"로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 알킬 그룹에서 임의로 치환된 "알킬"로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택되고,
B1 및/또는 B2는 "디탄소산 잔기 링커, 석시닐, 글루타릴"로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택되고;
C1 및/또는 C2는 "LHRH, [D-Lys6]-LHRH, 성장억제 호르몬, 성장억제 호르몬 유사체, 인간 혈청 알부민(HSA)"으로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택되고;
o는 1 또는 2이고;
p는 1 또는 2이다.
추가의 바람직한 양태에서, n 또는 o는 1이고, m 또는 p는 1이다. 또 다른 바람직한 양태에서, n 또는 o는 2이고, m 또는 p는 2이다.
추가의 바람직한 양태에서, 본 발명의 화합물들은 아래의 화합물들로 이루어진 그룹들로부터 선택된다:
"디소라졸 A1 - 석시닐 -[D- Lys 6 ] LHRH " ( 위치이성질체 화합물 11 및 12):
Figure 112009020722141-PCT00013
"디소라졸 E1 - 석시닐 -[D- Lys 6 ] LHRH" ( 위치이성질체 화합물 13 및 14):
Figure 112009020722141-PCT00014
"디소라졸 A1 - ( 석시닐 -[D- Lys 6 ] LHRH ) 2 " (화합물 15):
Figure 112009020722141-PCT00015
"디소라졸 Z - 석시닐 -[D- Lys 6 ] LHRH" (화합물 16):
Figure 112009020722141-PCT00016
"디소라졸 Z - ( 글루타릴 -[D- Lys 6 ] LHRH ) 2 "(화합물 17):
Figure 112009020722141-PCT00017
" 디소라졸 Z - 석시닐 -성장억제 호르몬" (화합물 18):
Figure 112009020722141-PCT00018
또 다른 측면에서, 본 발명의 목적은 화학식 V의 디소라졸 화합물을 제공함으로써 놀랍게도 성취되었다.
Figure 112009020722141-PCT00019
상기 화학식 V에서,
Zan, Zbn, Zcn, Zdn, Zem, Zfm, Zgm, Zhm, Z1 , Z2, Z3, Z4, Z5, Z6, Z7, Z8, Z9, Z10, Z11, Z12, Z13, Z14, Z15, Z16, Z17, Z18, Z19, Z20, Z21, Z22, Z23, Z24는 "수소, 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-알킬, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 아릴-알킬설포닐, 할로겐, 하이드록실, 카보닐, 아세틸, 카복실, 카복실에스테르, 아미드, 카보네이트, 카바메이트, 알파-아미노산 잔기, 베타-아미노산 잔기, 알콕실, 아미노, 이미노, 하이드록실-아미노, 모노-알킬아미노, 디-알킬아미노, 하이드라지닐, 시아노, 알킬-시아노, 설프하이드릴, 디설피딜알킬 및/또는 알킬-설피딜"로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택되고; 상기 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-알킬, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 아릴-알킬설포닐, 카보닐, 아 세틸, 카복실, 카복실에스테르, 아미드, 카보네이트, 카바메이트, 알콕실, 모노-알킬아미노, 디-알킬아미노, 알킬-시아노, 디설피딜알킬 및/또는 알킬-설피딜 그룹은 "알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-알킬, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 아릴-알킬설포닐, 할로겐, -F, -Cl, -Br, -I, -N3, -NO2, =0, =S, =S(O)2, 하이드록실, 카보닐, 아세틸, 카복실, 카복실에스테르, -C(O)OH, -C(O)NH2, 아미드, 카보네이트, 카바메이트, 알파-아미노산 잔기, 베타-아미노산 잔기, 알콕실, 아미노, 이미노, 하이드록실아미노, 모노-알킬아미노, 디-알킬아미노, 하이드라지닐, 시아노, 알킬-시아노, 설프하이드릴, 디설피딜알킬 및/또는 알킬-설피딜"로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 임의로 치환되고;
단, 라디칼 Zan, Zbn, Zcn, Zdn, Zem, Zfm, Zgm, Zhm, Z1, Z2, Z3, Z4, Z5, Z6, Z7, Z8, Z9, Z10, Z11, Z12, Z13, Z14, Z15, Z16, Z17, Z18, Z19, Z20, Z21, Z22, Z23, Z24 중의 적어도 하나는 "카복실에스테르, 아미드, 카보네이트, 카바메이트, 알파-아미노산 잔기, 베타-아미노산 잔기"로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택되며;
단, 아세틸은 카복실에스테르로부터 배제되며;
임의로, 라디칼 Zan, Zbn, Zcn, Zdn, Zem, Zfm, Zgm, Zhm, Z1, Z2, Z3, Z4, Z5, Z6, Z7, Z8, Z9, Z10, Z11, Z12, Z13, Z14, Z15, Z16, Z17, Z18, Z19, Z20, Z21, Z22, Z23, Z24 중의 임의의 인접한 두 개의 라디칼 Z는 이중결합을 형성하기 위해 원자 결합을 형성할 수 있거나 상기 두 개의 라디칼 Z는 에폭시드(옥시란), 아지란(아지리딘), 알킬-, 사이클로알킬-, 사이클로알킬-알킬-, 헤테로아릴-, 아릴-알킬-, 헤테로아릴-알킬-, 헤테로사이클릴- 및/또는 헤테로사이클릴-알킬-치환된 아지란(아지리딘), 티이란 및/또는 티이란-S-옥시드 그룹을 형성할 수 있고;
n은 0, 1, 2, 3이고;
m은 0, 1, 2, 3이다.
본 발명의 바람직한 양태에서, 하기 화학식 VI의 디소라졸 화합물이 제공된다.
Figure 112009020722141-PCT00020
상기 화학식 VI에서,
Zi0, Zj0, Zkp, Zlp, Zmp, Znp, Z25, Z26, Z27, Z28, Z29, Z30, Z31 , Z32, Z33, Z34, Z35, Z36, Z37, Z38, Z39, Z40, Z41, Z42, Z43, Z44는 "수소, 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-알킬, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 아릴-알킬설포닐, 할로겐, 하이드록실, 카보닐, 아세틸, 카복실, 카복실에스테르, 아미드, 카보네이트, 카바메이트, 알파-아미노산 잔기, 베타-아미노산 잔기, 알콕실, 아미노, 이미노, 하이드록실아미노, 모노-알킬아미노, 디-알킬아미노, 하이드라지닐, 시아노, 알킬-시아노, 설프하이드릴, 디설피딜알킬 및/또는 알킬-설피딜"로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택되고; 상기 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-알킬, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 아릴-알킬설포닐, 카보닐, 아세틸, 카복실, 카복실에스테르, 아미드, 카보네이트, 카바메이트, 알콕실, 모노-알킬아미노, 디-알킬아미노, 알킬-시아노, 디설피딜알킬 및/또는 알킬-설피딜 그룹은 "알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-알킬, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 아릴-알킬설포닐, 할로겐, -F, -Cl, -Br, -I, -N3, -NO2, =0, =S, =S(0)2, 하이드록실, 카보닐, 아세틸, 카복실, 카복실에스테르, -C(O)OH, - C(O)NH2, 아미드, 카보네이트, 카바메이트, 알파-아미노산 잔기, 베타-아미노산 잔기, 알콕실, 아미노, 이미노, 하이드록실아미노, 모노-알킬아미노, 디-알킬아미노, 하이드라지닐, 시아노, 알킬-시아노, 설프하이드릴, 디설피딜알킬 및/또는 알킬-설피딜"로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 임의로 치환되고;
단, 라디칼 Zi0, Zj0, Zkp, Zlp, Zmp, Znp, Z25, Z26, Z27, Z28, Z29, Z30, Z31, Z32, Z33, Z34, Z35, Z36, Z37, Z38, Z39, Z40, Z41, Z42, Z43, Z44 중의 적어도 하나는 "카복실에스테르, 아미드, 카보네이트, 카바메이트, 알파-아미노산 잔기, 베타-아미노산 잔기"로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택되고,
단, 아세틸은 카복실에스테르로부터 배제되며;
임의로, 라디칼 Zi0, Zj0, Zkp, Zlp, Zmp, Znp, Z25, Z26, Z27, Z28, Z29, Z30, Z31, Z32, Z33, Z34, Z35, Z36, Z37, Z38, Z39, Z40, Z41, Z42, Z43, Z44 중의 임의의 인접한 두 개의 라디칼 Z는 이중결합을 형성하기 위해 원자 결합을 형성할 수 있거나 상기 두 개의 라디칼 Z는 에폭시드(옥시란), 아지란(아지리딘), 알킬-, 사이클로알킬-, 사이클로알킬-알킬-, 헤테로아릴-, 아릴-알킬-, 헤테로아릴-알킬-, 헤테로사이클릴- 및/또는 헤테로사이클릴-알킬-치환된 아지란(아지리딘), 티이란 및/또는 티이란-S-옥시드 그룹을 형성할 수 있고;
o는 0, 1, 2, 3이고;
p는 0, 1, 2, 3이다.
추가의 바람직한 양태에서, n 또는 o는 1이거나 m 또는 p는 1인 화학식 V 및 Ⅵ의 디소라졸 화합물이 제공된다. 다른 바람직한 양태에서, n 또는 o는 2이거나 m 또는 p는 2인 화학식 V 및 Ⅵ의 디소라졸 화합물이 제공된다.
추가의 바람직한 양태에서, 디소라졸 유도체는 하기 화합물들로 이루어진 그룹으로부터 선택된다:
위치이성질체 화합물 1 및 2:
Figure 112009020722141-PCT00021
화합물 3:
Figure 112009020722141-PCT00022
화합물 4:
Figure 112009020722141-PCT00023
위치이성질체 화합물 5 및 6:
Figure 112009020722141-PCT00024
화합물 7:
Figure 112009020722141-PCT00025
화합물 9:
Figure 112009020722141-PCT00026
화합물 10:
Figure 112009020722141-PCT00027
화합물 19:
Figure 112009020722141-PCT00028
화합물 20:
Figure 112009020722141-PCT00029
화합물 21:
Figure 112009020722141-PCT00030
본원 명세서에서 예시된 모든 화합물들, 즉 디소라졸 접합체 및 디소라졸 유도체는 아래에서 일반적으로(상기 화학식 Ⅰ 내지 Ⅵ 및 다른 R 라디칼에 의해) 그리고 명백히 본 발명의 화합물로서 언급된다.
본 발명의 상기 화합물들은 설명하기 위해 지칭되는 용어들은 발명에 대한 설명 및 청구의 범위에서 달리 언급되지 않는 한, 항상 하기의 의미를 갖는다:
용어 "치환된"은 대응 라디칼 또는 그룹이 한 개 이상의 치환기를 가짐을 의미한다. 여기에 라디칼은 다수의 치환기들을 가지며, 다양한 치환기들의 선택은 상술되었으며, 각 치환기들은 서로 독립적으로 선택되고, 동일할 필요는 없다. 용어 "비치환된"은 상응하는 그룹이 치환기를 가지지 않음을 의미한다. 용어 "임의로 치환된"은 상응하는 그룹이 비치환 되었거나 한 개 이상의 치환기에 의해 치환된 것을 의미한다. 용어 "3개까지의 치환기에 의해 치환된"은 상응하는 라디칼 또는 그룹이 1개 또는 2개 또는 3개의 치환기에 의해 치환되었음을 의미한다.
용어 "알킬"은 본 발명의 목적을 위해 직체인 또는 분지체인일 수 있는 C1-C12 탄소원자를 가지는 비환식의 포화된, 부분적으로 불포화된 또는 불포화된 탄화수소를 포함하며, 한 개 이상의 이중 결합 및/또는 한 개 이상의 삼중 결합을 포함할 수 있다. 용어 "알킬"은 바람직하게 1 내지 8의 알킬 체인, 특히 바람직하게 1 내지 6의 알킬 체인을 나타낸다. 적절한 알킬 라디칼의 예는, 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, 2급 부틸, 3급 부틸, n-펜틸, 이소펜틸, 네오-펜틸, 3급 펜틸, 2-메틸-펜틸 또는 3-메틸-펜틸, n-헥실, 2-헥실, 이소헥실, n-헵틸, n-옥틸, n-노닐, n-데실, n-운데실, n-도데실, n-테트라데실, n-헥사데실, n-옥타데실, n-이코사닐, n-도코사닐, 에틸레닐(비닐), 프로페닐(-CH2CH=CH2; -CH=CH-CH3, -C(=CH2)-CH3), 부테닐, 펜테닐, 헥세닐, 헵테닐, 옥테닐, 옥타디에닐, 옥타데 세닐, 옥타데크-9-에닐, 이코세닐, 이코스-11-에닐, (Z)-이코스-11-에닐, 도코스닐, 도코스-13-에닐, (Z)-도코스-13-에닐, 에티닐, 프로피닐(-CH2-C≡CH, -C≡C-CH3), 부티닐, 펜티닐, 헥시닐, 헵티닐 및 옥티닐이다.
용어 "사이클로알킬"은 포화된 또는 부분적으로 포화된 비방향족 환 탄화수소 그룹/라디칼을 나타내며, 이는 1, 2 및 3개의 환들을 포함하며, 모노사이클릭 알킬, 바이사이클릭 알킬 및 트리사이클릭 알킬을 포함하고, 환을 형성하는 총 3개 내지 20개의 탄소 원자, 바람직하게는 3개 내지 10개의 탄소 원자, 가장 바람직하게는 (C3-C8)-사이클로알킬을 포함한다. 적절한 사이클로알킬 라디칼의 예는, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로헵틸, 사이클로옥틸, 사이클로데실, 사이클로헥세닐, 사이클로펜테닐, 사이클로옥타디에닐이다.
용어 "사이클로알킬-알킬"은 사이클로알킬 그룹이 한 개의 알킬 그룹을 통해 연결된 라디칼을 지칭하며, 알킬 및 사이클로알킬 그룹은 본원 명세서에서 정의된 의미를 가지며, 바람직하게 (C3-C8)-사이클로알킬-(C1-C4)-알킬 라디칼이다. 이의 예는, 사이클로프로필메틸, 사이클로헥실메틸, 사이클로펜틸에틸, 사이클로헥세닐에틸이다.
용어 "아릴"은 3개 내지 14개, 바람직하게 5개 내지 14개의 탄소 원자를 가지는 방향족의 탄화수소 시스템을 지칭한다. 용어 "아릴"은 방향족 환이 비사이클릭 또는 폴리사이클릭의 포화된, 부분적으로 불포화된 및/또는 방향족 시스템의 일부인 시스템을 포함하며, 예를 들면, 상기 방향족 환이 상기 아릴 라디칼의 임의의 목적하는 그리고 가능한 환 구성원을 통해, 본원 명세서에 정의된, "아릴", "사이클로알킬", "헤테로아릴" 또는 "헤테로사이클릴"에 융합된다. 이러한 "아릴" 라디칼은 임의의 환 구성원을 통해 연결될 수 있다. 아릴의 예는, 특히, 페닐, 비페닐, 나프틸 및 안트라세닐 뿐만 아니라 인다닐, 인데닐, 또는 1,2,3,4-테트라히드로나프틸이다.
용어 "헤테로아릴"은 5, 6 또는 7원 사이클릭 방향족 라디칼을 지칭하며, 이 라디칼은 적어도 하나의, 적절하게는 2, 3, 4 또는 5개의 헤테로원자, 바람직하게는 질소, 산소 및/또는 황으로 구성되며, 헤테로원자는 동일하거나 또는 상이하다. 질소 원자의 수는 바람직하게 0, 1, 2 또는 3개이며, 산소와 황 원자의 수는 각각 0개 또는 1개이다. 용어 "헤테로아릴"은 방향족 환이 비사이클릭 또는 폴리사이클릭 포화된, 부분적으로 불포화된 및/또는 방향족 시스템의 일부인 시스템을 포함하며, 예를 들면, 상기 방향족 환은 헤테로아릴 라디칼의 임의의 목적하는 그리고 가능한 환 구성원을 통해, 본원 명세서에서 정의된, 아릴, 사이클로알킬, 헤테로아릴 또는 헤테로사이클릴에 융합된다. 이러한 "헤테로아릴" 라디칼은 임의의 환 구성원을 통해 연결될 수 있다. 헤테로아릴의 예는, 피롤릴, 티에닐, 푸릴, 이미다졸릴, 티아졸릴, 이소티아졸릴, 옥사졸릴, 옥사디아졸릴, 이속사졸릴, 피라졸릴, 피리디닐, 피리미디닐, 피라지닐, 인돌릴, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 이미다졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 피리다지닐, 프탈라지닐, 인다졸릴, 인돌리지닐, 퀴녹살리닐, 퀴나졸리닐, 프테리디닐, 카바졸릴, 페나지닐, 페녹사지닐, 페노티아지닐, 아크리디닐을 포함한다.
용어 "아릴-알킬" 및 "헤테로아릴-알킬"은 아릴 또는 헤테로 라디칼이 알킬 그룹을 통해 연결되어 있는 라디칼을 지칭하며, 알킬, 아릴 및 헤테로아릴 그룹은 본원 명세서에서 정의하는 의미를 가진다. 바람직한 "아릴-알킬" 그룹은 페닐-(C1-C4)-알킬 라디칼, 바람직하게는 벤질 또는 페닐에틸 라디칼이다. 바람직한 "헤테로아릴-알킬" 그룹은 인돌릴-(C1-C4)-알킬 라디칼, 바람직하게는 1H-인돌-3-일-메틸 또는 2-(1H-인돌-3-일)-에틸이다.
용어 "헤테로사이클릴"은 탄소 원자들 및 동일하거나 상이한 1, 2, 3, 4 또는 5개의 헤테로원자, 특히 질소, 산소 및/또는 황을 포함하는 3개 내지 20개, 바람직하게는 5개 또는 6개 내지 14개 환 원자를 갖는 모노사이클릭 또는 폴리사이클릭 시스템을 지칭한다. 환 시스템은 포화되거나 단일 불포화 또는 다중 불포화될 수 있으며 방향족은 아닐 수 있다. 적어도 두 개의 환을 포함하는 환 시스템의 경우, 이 환들은 융합되거나 또는 스피로-(spiro-) 연결되거나 다른 방법으로 연결될 수 있다. 이러한 "헤테로사이클릴" 라디칼은 임의의 환 구성원을 통해 연결될 수 있다. 용어 "헤테로사이클릴"은 헤테로사이클이 비사이클릭 또는 폴리사이클릭의 포화된, 부분적으로 불포화된 및/또는 방향족 시스템의 일부분인 시스템을 포함하며, 예를 들면, 상기 헤테로사이클은 헤테로사이클릴 라디칼의 임의의 목적하는 그리고 가능한 환 구성원을 통해, 본원 명세서에서 정의하는 아릴, 사이클로알킬, 헤테로아릴 또는 헤테로사이클릴 그룹에 융합된다. 헤테로사이클릴의 예는 피롤리디닐, 티아피롤리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 옥사피페라지닐, 옥사피페리디닐, 옥사디아졸릴, 테트라히드로퓨릴, 이미다졸리디닐, 티아졸리디닐, 테트라히드로피라닐, 모폴리닐, 테트라히드로티오페닐, 디히드로피라닐을 포함한다.
용어 "헤테로사이클릴알킬"은 헤테로사이클릴 그룹이 한 개의 알킬 그룹을 통하여 연결되어 있는 라디칼을 지칭하며, 알킬 및 헤테로사이클릴 그룹은 본원 명세서에서 정의된 의미를 가진다. 바람직하게는 헤테로사이클릴-(C1-C4)-알킬 라디칼이다.
용어 "알킬설포닐", "아릴설포닐" 및 "아릴-알킬설포닐"은 알킬, 아릴 또는 아릴-알킬 그룹이 -SO2- 그룹을 통해 연결되어 있는 라디칼을 지칭하며, 알킬, 아릴 및 아릴-알킬 그룹은 본원 명세서에서 정의된 의미를 가진다. 상기의 예는 메틸설포닐 및 페닐설포닐이다.
용어 "할로겐", "할로겐 원자" 및 "할로겐 치환기" (Hal-)는 한 개, 적절한 곳에서는, 다수의 불소 (F, 플루오로), 브롬(Br, 브로모), 염소(Cl, 클로로), 및 요오드(I, 요오도) 원자를 지칭한다. 명칭 "디할로겐", "트리할로겐" 및 "퍼할로겐"은 각각 2, 3 및 4개의 치환기를 지칭하며, 각 치환기는 불소, 염소, 브롬 및 요오드로 이루어진 그룹에서 독립적으로 선택될 수 있다. "할로겐"은 바람직하게 한 개의 불소, 염소 또는 브롬 원자를 의미한다.
용어 "카보닐"은 한 개의 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴 및/또는 헤테로사이클릴-알킬 그룹이 -C(O)- 그룹을 통해 연결되어 있는 라디칼을 지칭하며, 알킬, 사이클 로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴 및/또는 헤테로사이클릴-알킬 그룹은 본원 명세서에서 정의된 의미를 가진다. 상기 예시는 -C(O)-CH3, -C(O)-CH2CH3, -C(0)-이소프로필 및 -C(O)-tBu (tBu = 3급 부틸)이다.
용어 "카복실"은 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴 및/또는 헤테로사이클릴-알킬 그룹이 -C(O)O- 그룹을 통해 연결되어 있는 라디칼을 지칭하며, 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴 및/또는 헤테로사이클릴-알킬 그룹은 본원 명세서에서 정의된 의미를 가진다. 상기 예는 -C(O)O-CH3 및 -C(O)O-페닐이다.
용어 "카복실에스테르"는 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴 및/또는 헤테로사이클릴-알킬 그룹이 -OC(O)- 그룹을 통해 연결되어 있는 라디칼을 지칭하며, 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴 및/또는 헤테로사이클릴-알킬 그룹은 본원 명세서에서 정의된 의미를 가진다. 상기 예는 아세틸, -OC(O)-페닐 등이다.
용어 "카보네이트"는 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴 및/또는 헤테로사이클릴-알킬 그룹이 -OC(O)O- 그룹을 통해 연결된 라디칼을 지칭하며, 알킬, 사이클로알킬, 사 이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴 및/또는 헤테로사이클릴-알킬 그룹은 본원 명세서에서 정의된 의미를 가진다. 상기 예는 -OC(O)O-CH3 및 -OC(O)O-페닐이다.
용어 "카바메이트"는 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴 및/또는 헤테로사이클릴-알킬 그룹이 -OC(O)NH- 그룹, -NHC(O)O- 그룹, -OC(O)NR- 그룹 및 -NRC(O)O- 그룹을 통해 연결된 라디칼을 지칭하며, 여기서 R은 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-알킬, 할로겐, -F, -Cl, -Br, -I, -N3, -NO2, 하이드록실, 알콕실, 아미노, 이미노, 하이드록실아미노, 하이드라지닐, 시아노, 알킬-시아노, 설프하이드릴로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택되고, 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-알킬, 알콕실, 하이드라지닐 및/또는 알킬-시아노 그룹은 본원 명세서에서 정의된 의미를 가진다.
용어 "알파-아미노산 잔기"는 본 발명의 목적에서, 천연적으로 발생하는 (즉, 임의의 생물학적 시스템에서의) 알파-아미노산들, 예를 들면, 셀레노시스테인, 피로라이신, 시트룰린, 오르니틴, 호모시스테인, N-메틸아르기닌, N-아세틸라이신, 감마-카복시글루타메이트, 5-하이드록시라이신, 3-메틸히스티딘 및/또는 N,N,N-트리메틸라이신과 동시에 모든 공지된 20개의 프로테이노제닉 알파-아미노산 들(proteinogenic alpha-amino acids)을 지칭한다. 이 연결에서, "잔기"는 측체인 및 주체인에 결합된 알파-탄소 원자를 포함하는 전체 아미노산 잔기를 지칭한다. 용어 "알파-아미노산 잔기"는 본 발명의 목적에서, 또한 프로테이노제닉이 아니거나 천연적으로 발생(즉, 임의의 생물학적 시스템에서의)하는 것으로 알려지지 않은 모든 공지된 알파-아미노산들을 지칭한다. 상기 예는, Fmoc, Boc, Cbz, Aloc, trityl, 아세틸 및/또는 벤질과 같은 보호 그룹이 관능 그룹(예를 들면, 아미노, 하이드록시 및/또는 카복실 잔기)에 직접 결합/반응한 보호된 알파-아미노산 측쇄, 및 노르류신, 사이클로헥실글리신, 2-나프틸알라닌, 치환된 알파-아미노산들 (예를 들면, 할로겐 치환된 타이로신 또는 페닐알라닌)이다. 이와 관련하여, "잔기"는 측체인 및 주체인에 결합된 알파-탄소 원소를 포함하는 전체 아미노산 잔기를 지칭한다.
따라서, 용어 "베타-아미노산 잔기"는 본 발명의 목적에서, 프로테이노제닉 이거나 천연적으로 발생(즉, 임의의 생물학적 시스템에서의)하는 것으로 알려지지 않은 모든 공지된 베타-아미노산들을 지칭한다. 이와 관련하여, "잔기"는 측체인 및 주체인에 결합된 베타-탄소 원소를 포함하는 전체 아미노산 잔기를 지칭한다.
용어 "알콕실"은 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴 및/또는 헤테로사이클릴-알킬 그룹이 산소 원자(-O- 그룹)을 통해 연결된 라디칼을 지칭하며, 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴 및 헤테로사이클릴-알킬은 본원 명세서에서 정의된 의미를 가진다.
용어 "모노-알킬아미노" 및 "디-알킬아미노"는 1개 또는 2개의 알킬 그룹들이 질소 원자를 통해 각각 연결된 라디칼을 지칭하며, 알킬 그룹은 본원 명세서에서 정의된 의미를 가진다. 상기 예는, 에틸아미노, 디메틸아미노 및 이소프필에틸아미노이다.
용어 "하이드라지닐"은 C=N-NH-, NH-N=C-, C=N-NR- 및/또는 NR-N=C- 그룹을 지칭하며, 여기서 R은 "알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-알킬, 할로겐, -F, -Cl, -Br, -I, -N3, -NO2, 하이드록실, 알콕실, 아미노, 이미노, 하이드록실아미노, 하이드라지닐, 시아노, 알킬-시아노, 설프하이드릴"로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택되고, 상기 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-알킬, 알콕실, 하이드라지닐 및/또는 알킬-시아노 그룹은 본원 명세서에서 정의된 의미를 가진다.
용어 "알킬-시아노"는 알킬 그룹이 한 개의 시아노 그룹을 통해 연결된 라디칼을 지칭하며 알킬 그룹은 본원 명세서에서 정의된 의미를 가진다. 상기 예는, 메틸시아노 및 n-프로필시아노이다.
용어 "디설피드알킬"은 알킬 그룹이 -S-S- 그룹을 통해 연결된 라디칼을 지칭하며, 알킬 그룹은 본원 명세서에서 정의된 의미를 가진다.
용어 "알킬-설피딜"은 알킬 그룹이 황 원자를 통해 연결된 라디칼을 지칭하 며, 알킬 그룹은 본원 명세서에서 정의된 의미를 가진다.
본 발명의 화합물의 모든 입체이성질체는 혼합물이거나 순수한 형태 또는 부분적으로 순수한 형태로 의도된다. 본 발명의 화합물은 치환되는 라디칼들 중 임의의 하나를 포함하는 임의의 탄소 원자에서 비대칭 중심을 가질 수 있다. 따라서, 본 발명의 화합물은 이들의 라세미체 형태, 순수한 거울상체 및/또는 부분입체이성질체 또는 이런 거울상체들 및/또는 부분입체이성질체들의 혼합물 형태로 존재할 수 있다. 이런 혼합물들은 입체이성질체들의 임의의 목적하는 혼합비를 가질 수 있다. 모든 이런 상이한 입체화학 형태나 혼합물은 본 발명의 범위 내에 속한다.
따라서, 예를 들면, 한 개 이상의 키랄 중심을 가지며, 라세미체 또는 부분입체이성질체 혼합물로서 나타나는 본 발명의 화합물들은 그 자체로 공지된 방법에 의해 이들의 순수한 광학 이성체들, 즉, 거울상체 또는 부분입체이성질체로 분별될 수 있다. 본 발명의 화합물의 분리는, 키랄 또는 비키랄 상(phase)에서 컬럼 분리하거나 또는 임의로 광학적으로 활성인 용매로부터 또는 광학적으로 활성인 산 또는 염기를 사용하여 재결정화시키거나, 예를 들면, 광학적으로 활성인 알콜과 같은 광학적으로 활성인 시약으로 유도체화하고 후속적으로 라디칼을 제거하여 수행할 수 있다.
불확실함을 피하기 위해, 본 발명의 화합물들은 모든 가능한 이중결합 이성체, 예를 들면, 순수한 E-이성체 또는 Z-이성체 또는 이들 이중결합 이성체들의 혼합물의 형태로 존재할 수 있다.
경우에 따라, 본 발명의 화합물은 토오토머(tautomer)의 형태일 수 있다.
마찬가지로, 본 발명의 화합물은 임의의 목적하는 전구약물, 예를 들면, 에스테르, 카보네이트, 카바메이트, 유레아, 아미드 및 인산염의 형태일 수 있으며, 이 경우 실제로 생물학적 활성인 형태는 오직 대사를 통해 방출된다. 생체 활성제(즉, 본 발명의 화합물)를 제공하기 위해 생체 내에서 전환되는 임의의 화합물은 본 발명의 범위 및 정신에 포함되는 전구 약물이다.
다양한 형태의 전구약물이 당해 선행 기술에서 잘 알려졌으며 하기의 문헌에서 기술되었다:
(i) 의약화학의 실습(The Practice of Medicinal Chemistry)[참조 : Wermuth CG et al., Chapter 31 , Academic Press 1996];
(ⅱ) 전구약물의 디자인(Design of Prodrugs)[참조: 편집자:Bundgaard H, Elsevier 1985]; 및
(ⅲ) 약물 디자인 및 개발에 대한 교본(A Textbook of Drug Design and Development)[참고:Krogsgaard-Larson P and Bund- gaard H, eds., Chapter 5: 1 13 - 191 , Harwood Academic Publishers 1991]
상기 참고 문헌들은 본원에서 인용된다.
또한, 화학 물질은 생체 내에서 대사물질로 전환되고, 이는 경우에 따라, 몇몇 환경, 심지어 더 명백한 형태로 목적하는 생물학적 효과를 유도할 수 있다.
본 발명의 임의의 화합물로부터 생체 내에서 대사에 의해 전환되는 임의의 생물학적 활성 화합물은 본 발명의 범위 및 정신에 포함되는 대사물질이다.
본 발명의 화합물은 충분한 염기 그룹, 예를 들면, 1급, 2급 및 3급 아민을 가지고 있다면 무기 및 유기산에 의해 염으로 전환될 수 있다. 본 발명의 화합물 중 약제학적으로 허용되는 염은 바람직하게는 염산, 브롬화수소산, 요오드산, 황산, 인산, 메탄설포닌산, p-톨루엔설포닌산, 탄산, 포름산, 아세트산, 설포아세트산, 트리플루오로아세트산, 옥살산, 말론산, 말레산, 숙신산, 타르타르산, 라세미산, 말산, 엠본산, 만델산, 푸마르산, 락트산, 시트르산, 타우로콜린산, 글루타르산, 스테아린산, 글루타민산 및 아스파르트산에 의해 형성된다. 형성된 염은 특히, 염화수소염, 염화물, 브롬화수소염, 브롬화물, 요오드화물, 황산염, 인산염, 메탄설포네이트, 토실레이트, 카보네이트, 비카보네이트, 포르메이트, 아세테이트, 설포아세테이트, 트리플레이트, 옥살레이트, 말로네이트, 말레에이트, 숙시네이트, 타르트레이트, 말레이트, 엠보네이트, 만델레이트, 푸마레이트, 락테이트, 시트레이트, 글루타레이트, 스테아레이트, 아스파테이트 및 글루타메이트이다. 또는, 본 발명의 화합물로부터 형성된 염의 화학량론은 1의 정수 배수 또는 비정수 배수일 것이다.
본 발명의 화합물은 이들이 충분한 산성 그룹, 예를 들면, 카복시, 설폰산, 인산 또는 페놀그룹을 포함한다면, 무기 및 유기 염기에 의해 이들은 생리학적으로 견딜 수 있는 염으로 전환될 수 있다. 무기 염기의 적절한 예는, 암모늄, 수산화나트륨, 수산화칼륨, 수산화칼슘이며, 유기 염기의 적절한 예는, 에탄올아민, 디에탄올아민, 트리에탄올아민, 에틸렌디아민, t-부틸아민, t-옥틸아민, 디하이드로아비에틸아민, 사이클로헥실아민, 디벤질에틸렌디아민 및 라이신이다. 또한, 본 발명의 화합물로부터 형성된 염의 화학양론은 1의 정수 배수 또는 비정수 배수일 것이다.
마찬가지로, 본 발명의 화합물은 이들의 용매화물, 특히, 예를 들면, 용매 또는 수용액으로부터 결정화를 거쳐 얻어지는 수화물의 형태로 존재할 가능성이 있다. 또한, 1, 2, 3 또는 임의의 개수의 용매 또는 물 분자는 본 발명의 화합물과 결합하여 용매화물 및 수화물을 생성할 가능성이 있다.
화학 물질은 다형성(polymorphic) 형태 또는 변형물(modification)로 언급된 다른 질서 상태로 존재하는 고형체를 형성한다고 공지되었다. 한 개의 다형성 물질의 다양한 변형물은 이들의 물리적 성질이 매우 다를 것이다. 본 발명의 화합물은 다양한 다형성 형태로 존재할 수 있으며, 더욱이, 어떤 변형물들은 준안정성일 수 있다. 본 발명의 화합물들의 이런 모든 다형성 형태들은 본 발명에 포함되는 것으로 간주된다.
본 발명의 화합물은 강한 생물학적 작용에 의해 유리하게 특징지워진다. 본 발명의 디소라졸 접합체들과 관련하여, 이들은 증가된 고유의 효능 때문에 이들은 선행 기술 접합체보다 우수하다. 더욱이, 특히 비스-치환된 C1-B1-A-B2-C2 접합체들은 놀랍게도 더 높은 특이성을 보였으며, 세포독성 디소라졸 잔기를 방출하기 전에 감소된 독성을 나타낸다.
본 발명의 접합체에 의해, 관심있는 (종양)세포에 대한 특이 타겟팅이 가능하며, 예를 들면, 본 발명의 접합체가 하기 수용체-발현 (종양)세포로 향하게 하는 세포결합 분자로서, 목적하는 수용체-리간드를 사용함을 통하여 가능하다. 또한, 특이 타겟팅은 원위치에서(종양 위치에서) 접합체들의 높은 국부 농도를 유리하게 초래하며, 이는 상당히 증가된 효능을 유도한다. 이러한 이점들은 약물 부작용이 적거나 없을 뿐 아니라, 임상에서 투여될 약제 가능 약물의 용량 감소로 해석될 수 있다.
또 다른 측면에서, 본 발명의 목적은 본 발명의 화합물의 제조 방법을 제공함에 의해 놀랍게도 성취된다.
바람직한 양태에서, 하기 단계를 포함하는 본 발명의 화합물의 제조 방법이 제공된다:
a) 디소라졸 화합물을 링커, 바람직하게는 링커 무수물과 반응시켜 일관능성 및/또는 이관능성 디소라졸-링커 잔기를 형성하는 단계,
b) 임의로, 반응 유리체 및 부산물로부터 상기 일관능성 및/또는 이관능성 디소라졸-링커 잔기를 분리(정제)하는 단계,
c) 상기 임의로 분리된(정제된) 일관능화 및/또는 이관능화 디소라졸-링커 잔기를 세포결합 분자와 커플링(coupling)시켜서 화학식 I, C1-B1-A-B2-C2 및/또는 화학식 Ⅳ, C1-B1-A의 디소라졸 접합체를 형성하는 단계,
d) 임의로, 반응 유리체 및 부산물로부터 화학식 I, C1-B1-A-B2-C2 및/또는 화학식 Ⅳ, C1-B1-A의 디소라졸 접합체의 분리(정제)하는 단계.
본 발명의 화합물은 생리학적 및/또는 병리생리학적 상태의 치료 또는 예방을 위해, 인간을 포함한 다양한 포유류에 투여될 수 있다.
본 발명의 목적을 위해, 모든 포유류가 포함되는 것으로 여겨진다. 바람직하게, 이러한 포유동물들은 "인간, 가축, 소, 가축류, 애완동물, 소, 양, 돼지, 염소, 말, 조랑말, 당나귀, 버새, 노새, 산토끼, 토끼, 고양이, 개, 기니 돼지, 햄스 터, 쥐, 생쥐"로 이루어진 그룹으로부터 선택되다. 더 바람직하게, 이러한 포유동물은 인간이다.
또 다른 측면에서, 본 발명의 목적은 약제의 제조를 위해 본 발명의 화합물을 제공함에 의해 놀랍게도 성취된다.
또 다른 측면에서, 본 발명의 목적은 다음 질병의 치료 및/또는 예방을 위한 약제의 제조를 위해 본 발명의 화합물을 제공함에 의해 놀랍게도 성취되며, 해당 질병은 급성 백혈병, 샘암종, 기저 세포암, 양성 종양, 방광암, 대장암, 뇌종양, 유방암, 기관지암종, 유암종들, 암종들, 자궁경부암, 자궁경부암종, 만성 백혈병, 결장암, 결장암종, 결장직장암, 결합조직암, 자궁체부암종, 자궁내막암, 식도암, 유잉-육종(Ewing-Sarcoma), 가스트린종, 교모세포종, 신경아교종, 부인과 종양들, 뇌 및/또는 목암, 간모세포종, 간암, 증식증, 과증식병(hyperproliferative disease), 안구 흑색종, 카포시-육종, 후두암종, 후두암, 레이모요마(leimoyoma), 백혈병, 간종양, 폐암, 비소세포 폐암, 림프종, 악성 종양, 유방암종, 수모세포종, 흑색종, 다발골수종, 신장모세포종, 신경모세포종, 신경내분비 종양, 골육종, 난소암, 췌장 종양, 전립선암, 전립선암종, 신장암, 신장세포암종, 망막모세포종, 간상 종양, 육종, 피부암, 연부 육종, 고형종양, 스피날리오마(spinalioma), 위암, 고환암, 흉선종, 갑상선암, 뇌 및/또는 신경계에서 시작되는 종양 및/또는 뇌척수막(WO 99/01764), 비뇨기암 및/또는 자궁암이다.
또 다른 측면에서, 본 발명의 목적은 약제의 제조를 위해 본 발명의 화합물을 제공함에 의해 놀랍게도 성취되며, 여기서 약제는 또한 한 개 이상의 추가의 약 제학적 활성물질을 추가로 포함한다.
또 다른 측면에서, 본 발명의 목적은 약제의 제조를 위해 본 발명의 화합물을 제공함에 의해 놀랍게도 성취되며, 여기서 약제는 적어도 하나의 추가의 약리학적 활성 물질에 의한 치료 전 및/또는 치료 중 및/또는 치료 후에 적용된다.
또 다른 측면에서, 본 발명의 목적은 약제의 제조를 위해 본 발명의 화합물을 제공함에 의해 놀랍게도 성취되며, 여기서 약제는 방사선치료 및/또는 수술 전 및/또는 수술중 및/또는 수술후에 도입된다.
본 발명의 과정에서, 본 발명의 화합물은 설명된 바와 같이 단일물질로서, 또는 병용 치료의 과정에서 모든 공지된 약리학적 활성 물질과 병용하여 투여될 수 있다.
바람직한 양태에서, 본 발명의 화합물은 상기 설명된 용도로 사용되며, 여기서 추가의 약리학적 활성 물질은 다음으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다: "DNA 토포아이소머라제 I 및/또는 Ⅱ 억제제, DNA 인터칼레이터(intercalator), 알킬화제, 미세관 불안정화제(microtuble destabilisator), 호르몬- 및/또는 성장-인자-수용체-작용제 및/또는 -길항제, 신호 전달 억제제, 성장 인자 및 이의 수용체에 대한 항체들, 키나제 억제제, 항대사물질".
바람직한 양태에서, 본 발명의 화합물은 상기 설명된 용도를 위해 제공되며, 여기서 추가의 약리학적 활성 물질은 다음 물질로 이루어진 그룹으로부터 선택된다: "악티노마이신 D, 아미노글루테티미드, 아스파라기나아제, 아바스틴, 아자티오프린, BCNU(카무스틴), 블레오마이신, 부설판, 카보플라틴, CCNU(로무스틴), 클로 람부실, 시스플라틴, 콜라스파제, 사이클로포스파미드, 사이타라빈, 닥티노마이신, 다우노루비신, 디에틸스틸베스트롤, 도세탁셀, 독소루비신(아드리아마이신), DTIC(다카바신), 에피루비신, 에포틸론, 어비툭스, 에리트로하이드록시노닐아데닌, 에티닐에스트라디올, 에토포사이드, 플루다라빈 포스페이트, 플루옥시메스테론, 플루타미드, 젬시타빈 글리벡/글라이벡(gleevec/glivec), 허셉틴, 헥사메틸멜라민, 히드록수레아, 하이드록시프로게스테론 카프로에이트, 이다루비신, 이포스파미드, 인터페론, 이레사, 이리노테칸, L-아스파라기나제, 류코보린, 메클로레타민, 메드록시프로게스테론 아세테이트, 메게스트롤 아세테이트, 멜팔란, 메스나, 메토트렉세이트, 미토마이신 C, 미토탄, 미토크산트론, N-포스포노아세틸-L-아스파테이트(PALA), 옥살리플라틴, 파클리탁셀, 펜토스타틴, 플리카마이신, 프레드니솔론, 프레드니손, 프로카바진, 랄록시펜, 라파마이신, 세무스틴, 소라페니브, 스트렙토조신, 타목시펜, 타세바, 택소테어, 테니포시드, 테스토스테론 프로피오네이트, 티오구아닌, 티오테파, 토포테칸, 트리메틸멜라민, 우리딘, 빈블라스틴, 빈크리스틴, 빈데신, 비노렐빈, 2',2'-디플루오로데옥시사이티딘, 5-플루오로데옥시우리딘 모노포스페이트, 5-아자사이티딘 클라드리빈, 5-플루오로데옥시우리딘, 5-플루오로우라실(5-FU), 6-머캅토푸린".
본 발명의 화합물은 공지된 방식으로 투여될 수 있다. 따라서, 투여 경로는 활성 화합물을 적절한 또는 목적하는 작용 위치에 효과적으로 수송할 수 있는 임의의 경로, 예를 들면, 비경구적 또는 경구적, 특히, 정맥, 국소성, 경피, 폐, 직장, 질내, 코 또는 비경구 또는 이식에 의한 경로일 수 있다. 정맥 내 투여가 바람직하 다.
본 발명의 화합물은, 투여될 수 있으며 경우에 따라 약제학적으로 수용되는 담체 또는 희석제와 혼합된 형태로 전환된다. 적당한 부형제 및 담체는 다음의 예에서 기술된다[참조:Ullman's Encyclopedia of Technical Chemistry, Vol. 4, (1953), 1-39; Journal of Pharmaceutical Sciences, Vol. 52 (1963), 918 et seq.; H. v. Czetsch-Lindenwald, "Hilfsstoffe fur Pharmazie and angrenzende Gebiete"; Pharm. Ind. 2, 1961, 72 et seq.; Dr. H. P. Fiedler, "Lexikon der Hilfsstoffe fur Pharmazie, Kosmetik and angrenzende Gebiete", Cantor KG, Aulendorf in Wurttemberg, 1971].
비경구성 투여는 예를 들면, 무균된 수용액 또는 유액, 유현탁 또는 유탁액의 정맥 내, 피하, 근육 내 주사에 의해, 또는 이식에 의해 또는 연고, 크림 및 좌약에 의해 일어난다. 또한, 경우에 따라 지연 방출 형태로 가능하다. 이식은 불활성 물질, 예를 들면, 생분해성 중합체 또는 합성 실리콘, 예를 들면, 실리콘 고무를 포함할 것이다. 질 내 투여는, 예를 들면, 바지날 링(vaginal ring)의 방법에 의해 가능하다. 자궁 내 투여는, 예를 들면, 다이아프램(diaphragm) 또는 다른 적당한 자궁 내 장치에 의해 가능하다. 경피 투여는 특히, 본 목적에 적당한 제형 및/또는 적당한 방법, 예를 들면, 패치에 의해 추가적으로 제공된다.
경구 투여는, 예를 들면, 고체 형태, 예를 들면, 정제, 캡슐제, 겔 캡슐제, 제피정, 과립 또는 산제 외에도 마실 수 있는 용액의 형태로 일어날 수 있다. 본 발명의 화합물은 경구 투여를 위해, 알려지고 보통 사용되는, 생리학적으로 견딜 수 있는 부형제 및 담체, 예를 들면, 아라비아 껌, 활석, 전분, 당, 예를 들면, 만니톨, 메틸셀룰로즈, 락토즈, 젤라틴, 표면-활성제, 스테아린산 마그네슘, 사이클로덱스트린, 수용성 또는 비수용성 담체, 희석제, 분산제(dispersant), 유화제, 윤활제, 보존제 및 향미료(예:에센셜 오일)와 결합할 수 있다. 또한, 본 발명의 화합물은 마이크로미립자(microparticulate)구조, 예를 들면, 나노미립자 구조로 분산될 수 있다.
이미 상기에서 설명했듯이, 본 발명의 화합물은 또한 다른 약제학적 활성 성분과 병용할 수 있다. 병용 치료의 목적으로 개별의 활성 성분들을 동시에 또는 개별적으로, 특히, 같은 경로(예: 정맥 내에) 또는 분리된 경로(예:정맥 내 및 경구 투여법으로)로 투여하는 것이 가능하다. 이들은 단위 용량으로 동일하거나 상이한 양으로 존재하고 투여될 수 있다. 특정 용량 요법이 적절하게 여겨지면 이를 사용하는 것이 가능하다. 또한, 상기 화학식들의 본 발명의 다수의 신규 화합물들은 이러한 방식으로 서로 배합될 수 있다.
용량은 치료되는 환자의 생리학적 및/또는 병리학적 상태의 유형 및/또는 중증도, 투여 방식, 나이, 성별, 체중 및 민감도에 따라 다양한 범위 내에 있다. 본 발명의 화합물 및/또는 추가의 약리학적 활성 물질의 약리학적 유효량을 결정하는 것은 당업자의 역량 내에 있다. 투여는 단일 용량 또는 다수의 개별적인 용량으로 일어난다.
적절한 단위 용량은, 예를 들면, 환자의 체중 kg 당 활성 성분, 즉, 적어도 하나의 본 발명의 화합물, 및 경우에 따라, 적어도 하나의 추가의 약리학적 활성 성분 0.0001 mg 내지 100 mg이다.
또 다른 측면에서, 본 발명은, 본 발명의 적어도 하나의 화합물, 특히, 디소라졸 A1-석시닐-[D-Lys6]LHRH(위치이성질체 화합물 11 및 12), 디소라졸 E1-석시닐-[D-Lys6]LHRH(위치이성질체 화합물 13 및 14), 디소라졸 A1-(석시닐-[D-Lys6]LHRH)2(화합물 15), 디소라졸 Z-석시닐-[D-Lys6]LHRH(화합물 16), 디소라졸 Z-(글루타릴-[D-Lys6]LHRH)2(화합물 17), 디소라졸 Z-석시닐-성장억제 호르몬(화합물 18), 위치이성질체 화합물 1 및 2, 화합물 3, 화합물 4, 위치이성질체 화합물 5 및 6, 화합물 7, 화합물 9, 화합물 10, 화합물 19, 화합물 20, 화합물 21의 약리학적 유효량을 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다.
또 다른 측면에서, 이런 약제학적 조성은 추가적으로 적어도 하나의 약제학적으로 수용되는 담체 및/또는 부형제 및/또는 추가로 적어도 하나의 약리학적 활성 물질을 포함할 것이다.
바람직한 양태에서, 또한, 이러한 약리학적 활성 물질은 다음으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다: "DNA 토포아이소머라제 I 및/또는 Ⅱ 억제제, DNA 인터칼레이터, 알킬화제, 미세관 불안정화제, 호르몬- 및/또는 성장-인자-수용체-작용제 및/또는 -길항제, 신호 전달 억제제, 성장 인자 및 이의 수용체에 대한 항체들, 키나제 억제제, 항대사물질".
또 다른 바람직한 양태에서, 또한, 이러한 생리학적 활성 물질은 다음으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다: "악티노마이신 D, 아미노글루테티미드, 아스파라기나아제, 아바스틴, 아자티오프린, BCNU(카무스틴), 블레오마이신, 부설판, 카보플라틴, CCNU(로무스틴), 클로람부실, 시스플라틴, 콜라스파제, 사이클로포스파미드, 사이타라빈, 닥티노마이신, 다우노루비신, 디에틸스틸베스트롤, 도세탁셀, 독소루비신(아드리아마이신), DTIC(다카바신), 에피루비신, 에포틸론, 어비툭스, 에리트로하이드록시노닐아데닌, 에티닐에스트라디올, 에토포사이드, 플루다라빈 포스페이트, 플루옥시메스테론, 플루타미드, 젬시타빈 글리벡/글라이벡, 허셉틴, 헥사메틸멜라민, 히드록수레아, 하이드록시프로게스테론 카프로에이트, 이다루비신, 이포스파미드, 인터페론, 이레사, 이리노테칸, L-아스파라기나제, 류코보린, 메클로레타민, 메드록시프로게스테론 아세테이트, 메게스트롤 아세테이트, 멜팔란, 메스나, 메토트렉세이트, 미토마이신 C, 미토탄, 미토크산트론, N-포스포노아세틸-L-아스파테이트(PALA), 옥살리플라틴, 파클리탁셀, 펜토스타틴, 플리카마이신, 프레드니솔론, 프레드니손, 프로카바진, 랄록시펜, 라파마이신, 세무스틴, 소라페니브, 스트렙토조신, 타목시펜, 타세바, 택소테어, 테니포시드, 테스토스테론, 프로피오네이트, 티오구아닌, 티오테파, 토포테칸, 트리메틸멜라민, 우리딘, 빈블라스틴, 빈크리스틴, 빈데신, 비노렐빈, 2',2'-디플루오로데옥시사이티딘, 5-플루오로데옥시우리딘 모노포스페이트, 5-아자사이티딘 클라드리빈, 5-플루오로데옥시우리딘, 5-플루오로우라실(5-FU), 6-머캅토푸린".
본 발명의 약제학적 조성물과 관련하여, 적어도 하나의 본 발명의 화합물이 약리학적 유효량, 바람직하게 단위 용량, 예를 들면, 정맥 내에 투여를 가능하게 하는 투여 형태로, 특이하고 바람직하게, 상술한 단위 용량으로 존재한다. 또한, 본 발명의 화합물의 가능한 용량 및 투여와 관련하여 이미 상술한 것이 언급이 될 수 있다.
또 다른 측면에서, 본 발명의 목적은 적어도 하나의 본 발명의 화합물의 생리학적 유효량 및 상기에서 한정된 적어도 하나의 추가의 약제학적 활성 물질의 생리학적 유효량을 포함하는 키트(kit)를 제공함에 의해 놀랍게도 성취된다.
화학적 합성
화학식 I C1-B1-A-B2-C2 및 Ⅳ C1-B1-A인 디소라졸 접합체의 형성을 위한 일반적인 합성 방법이 이 파트에서 제공된다.
디소라졸 수득을 위한 전체 합성 및/또는 분리 전략은 선행 기술에서 공지되었으며, 예를 들면, 다음 선행 기술 문서들에서 기술된다: Jansen R et al., Liebigs Ann. Chem. 1994, (8): 759-773; WO 2004/024149; Wipf et al., Chem. Biol. Drug Des. 2006, 67(1 ): 66-73); Hillier MC et al., J. Org. Chem. 2001 , 66: 6037-6045; Hartung IV et al., Organic Letters 2002, 4(19): 3239-3242; Wipf P et al., J. Am. Chem. Soc. 2004, 126(47): 15346-15347; Carvalho R et al., Gene 2005, 359: 91 - 98; Kopp M et al., Chembiochem. 2005, 6(7): 1277-1286; WO 2006/075013.
디소라졸 Z
Figure 112009020722141-PCT00031
디소라졸 Z는 상기에 등재된 선행 기술의 기술에 따라 완전히 화학적으로 합성될 수 있으며, 실시예 Ⅱ 파트에서 기술된 발효 작용에 의해 생성될 수 있다.
본 발명에 따른 접합체의 합성은 유기 화학에 기본을 둔 일반 용액을 통해 수행되었다.
A. 유기 무수물과 에스테르화를 통한 디소라졸 2급 하이드록시 그룹의 유도체화
통상적인 반응에서, 고체 디소라졸을 몰레큘러시브(molecular sieve, 40 nm)하에 이미 건조된 무수 피리딘에 용해시켰다. 질소 대기 하에 1 내지 2.5 몰당량 DMAP 및 1.5 내지 10 몰당량의 유기 무수물(글루타르산 무수물, 숙신산 무수물)은 다른 디소라졸 분자 내에서 가능한, 2개의 2급 OH-그룹의 모노에스테르화 또는 비스에스테르화에 대해 계산됨으로서 첨가됐다. 몰레큘러시브는 항시 수분이 없는 상태를 유지하기 위해, 반응에 임의적으로 첨가되었다. 혼합물을 각각의 원하는 유도체에 대해 임의로 실온이나 또는 60℃ 욕 온도에서 6시간 내지 5일간 교반했다. 에스테르화는 분석용 HPLC-UV에 의해 모니터링되었다.
통상적인 분석용 HPLC - UV -조건:
이동상 A : 20 mM NH4OAc, 5%(v/v) AcN, 0.2%(v/v) HOAc
이동상 B : 95%(v/v) AcN, 5%(v/v) H2O
컬 럼 : 머크 리크로스피어(Merck LiChrosphere) 100 C18, 5 ㎛, 250 × 4 mm
유 속 : 1 ml/min
검 출 : UV-DAD, 220-380 nm
구 배 : 40% 내지 100% B, 18분 내, 100% B, 5분, 100% 내지 40% B, 2분
모노-에스테르화 또는 비스-에스테르화된 디소라졸의 정제는 이스코 컴페니온 시스템(Isco Companion system)을 사용하여, 자동화된 플래쉬 액체 크로마토그래피에 의해 수행되거나 제조용 HPLC에 의해 수행되었다. 따라서, 반응 혼합물 중 과량의 피리딘은 감압하에 제거되고 유성(oily) 잔류물이 10% 아세트산으로 pH 4 내지 6이 되도록 산성화했다. 컴페니온 정제를 위해, 산성화된 액상은 에틸아세테이트로 몇 번 추출되고, 유기 추출물이 결합되며, 황산나트륨 상에서 건조시킨 후, 감압하에 RP 담체 물질로 흡수되었다. 플래쉬 크로마토그래피는 비스-에스테르화 디소라졸의 정제용으로 사용되며, 이동상 A로서 5% AcN(v/v), 0.1% HOAc 및 이동상 B로서 95% AcN의 역상 조건 하에서 수행되었다.
제조용 HPLC를 위해, 산성화된 수용액 혼합물은 초기 이동상(50% B)으로 희석되고, 실린지 필터 멤브레인(syringe filter membrane)을 통해 여과된 후 제조용 HPLC 시스템에 접종되었다.
통상적인 제조용 HPLC-조건:
이동상 A : 20 mM NH4OAc, 5%(v/v) AcN, 0.2%(v/v) HOAc
이동상 B : 95%(v/v) AcN, 5%(v/v) H2O
컬 럼 : 마커레이 & 나젤 베리오프렙 누클레오도르(Macherey & Nagel VarioPrep Nucleodur)
유 속 : 20 ml/min
검 출 : UV
구 배 : 50% B, 5분, 50% 내지 100% B, 25분 내, 100% B, 10분
목적하는 생성물을 포함하는 액체크로마토그래피 분획물은 분석용 HPLC에 의해 분석되고, 감압 하에 AcN 및 HOAc을 제거한 후, 농축액을 감압하에 동결건조하여 고체 화합물로서 개별의 에스테르를 제공했다.
B. 펩티드와 디소라졸 모노 헤미-카복실릭 에스테르 및 비스 헤미-카복실릭 에스테르의 아미드 커플링(coupling)
디소라졸의 일관능성 및 이관능성 카복실릭 유도체는 통상적인 아미드 커플링 전략을 통해 펩티드에 커플링되었다. 간략히, 카복실릭 디소라졸 화합물은 3 내지 6 몰당량의 DIPEA와 무수 DMF에 용해시킨 후 유리된 카복실 잔류물 당 1.1 내지 1.5 몰당량의 HATU을 첨가하여 활성화시키고, 이후, 대기 온도에서 15분간 교반하였다. 유리된 아미노 그룹을 가지는 펩티드 화합물을 약간 과량의 몰(1.1 내지 1.3 당량)로 첨가되고 반응 혼합물은 실온에서 0.5 내지 12 시간 동안 교반되었다. 커플링 효율은 분석용 HPLC (상기에서 서술한 방법)를 통하여 모니터링했다.
제조용 HPLC 정제를 위해, DMF 용액은 10% HOAc과 함께 pH 5 내지 6으로 산성화하고 초기 이동상 (40 내지 50% B)의 4 내지 6배 용량과 함께 희석되었다. 상기 기술된 방법과 같이 동일하고 통상적인 제조용 HPLC 방법이 적용되었다. 순수한 접합체는 개별 분획물의 분석용 HPLC로 평가 후에 수득되고, 감압 하에서 AcN 및 HOAc을 제거한 후, 농축액을 감압 하에서 동결건조한 후에 얻어졌다.
C. 혈청 알부민과 디소라졸 비스 헤미-카복실릭 에스테르의 아미드 커플링
혈청 알부민과 같은 거대한 단백질에 관능화된 디소라졸 유도체의 커플링은 NHS/DCC 방법을 사용하여 수행했다. 단백질 및 디소라졸 화합물의 다른 몰 비는 디소라졸 및 담체 단백질의 다양한 로딩율(loading rate)을 성취하는데 사용됐다. 통상적인 반응에서, 혈청 알부민은 초기 농도 20mg/ml에서 10mM PBS pH 7.4에 용해되었다. 이후, DMF와 1:1(v/v) 희석액을 최종 농도가 10 mg/ml인 투명한 혈청 알부민 용액에 제공했다. 디소라졸 비스 또는 모노 헤미 카복실릭 에스테르는 DMF에 용해시키고, 1.2 내지 5 당량의 DCC 및 2 내지 10 당량의 NHS를 첨가한 후, 20분간 교반하여 활성화된 NHS-에스테르를 형성시켰다. 활성화의 효율은 분석용 HPLC(상기의 통상적인 방법)에 의해 측정되었다. 이 용액의 별개의 분취액(aliquot)들은 혈청 알부민 완충액/DMF 용액에 점적(drop wise)으로 격렬한 교반 조건 하에서 첨가되었다. 디소라졸-NHS 에스테르 및 혈청 알부민의 비는 경험적인 데이타를 기본으로 다른 로딩율을 고려하여 선택되었다. 수용성 아미드 커플링은 대기온도에서 20분간 수행되었다. 이후, 약간 흐린 반응 혼합물이 스테리컵 필터(SteriCup Filter, 제조사:Milipore)를 통해 진공-여과되고, 필터는 탈이온수로 세척했다. 여과액은 다시 탈이온수로 희석되고 저분자 화합물은 초여과법(ultrafiltration)에 의해 분리되었다. 따라서, 희석된 스테리컵(SteriCup) 여과액은 30,000 Da의 배제 크기(exclusion size)를 가진 아미콘울트라(AmiconUltra, 제조사:milipore) 여과 유니트에 넣고 4,000 x g에서 15분간 원심분리한다. 농축되고, 유지된 단백질 용액은 탈이온수로 3번 세척되고, 과량의 모든 염, DMF 및 비결합 디소라졸 및 DCC/NHS를 제거하기 위해 원심분리했다. 정제된 혈청 알부민 디소라졸 접합체 용액은 옅은 황색 결정체를 생성하기 위해, 이후 감압 하에서 동결건조했다. 초여과액은 혈청 알부민 분자당 디소라졸의 평균 로딩율을 측정하기 위해 상기의 통상적인 방법을 사용하여 비결합 디소라졸에 대해 분석용 HPLC에 의해 분석되었다.
D. 데스-마틴 페리오디네인 시약(Dess-Martin periodinane reagent)과 함께 디소라졸의 산화
디소라졸 (예:A1, E1 또는 Z)은 디클로로메탄에 용해되었다. 12 몰당량의 피리딘이 첨가되고, 이 혼합물은 냉욕에서 5℃ 미만의 온도로 냉각되었다. 3 몰당량의 데스-마틴 페리오디네인 시약이 여러 개의 분획물에 첨가되고, 반응은 15분간 냉욕에서 교반되었다. 혼합물은 실온에서 가온되고, 교반은 30분간 계속되었다(TLC 조건은 디클로로메탄/메탄올 95:5). 반응 혼합물은 초산에틸로 희석되고, 0.5N 염산을 첨가하였다. 유기상은 거의 중성(pH 6)까지 식염수로 세척하고, 황산나트륨 하에서 건조한 후, 진공에서 감압하였다. 이후, 디클로로메탄/메탄올과 함께 플래 쉬 크로마토그래피는 디소라졸-케톤 유도체를 제공하였다.
E. 약어
5-FU 5-플루오로우라실
AcN 아세토니트릴
Ala 알라닌(일)
Aloc 알릴옥시카보닐
Arg 아르기닌(일)
Asn 아스파라진(일)
BCNU 카무스틴
Boc 3급 부틸옥시카보닐
Cbz 카보벤족시카보닐
CCNU 로무스틴
Cit 시트룰린
DCC N,N'-디사이클로헥실카보디이미드
DCM 디클로로메탄
DIPEA 디이소프로필에틸 아민
DMAP N,N'-디메틸아미노 피리딘
DMEM 둘베코스 변성된 이글스 배지(Dulbecco's Modified Eagles Medium)
DMF N,N'-디메틸포름아미드
DMSO 디메틸설폭시드
Dox 독소루비신
DTIC 다카르바신
e.g. 주어진 예
EDTA 에틸렌디아민-테트라아세트산
ELISA 효소면역측정법(Enzyme Linked Immunosorbent Assay)
Fmoc 9-플루오렌일메톡시카보닐
Gln 글루타민(일)
Glp 피로글루타메이트(일)
h 시간
HATU N,N,N',N'-테트라메틸-O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)우로늄 헥사플루오로포스페이트
HEPES N-(2-하이드록시에틸)피페라진-N'-2-에탄설폰산
HOAc 아세트산
HOBt 1-하이드록시벤조트리아졸
HSA 인간 혈청 알부민
hTyr 호모-타이로신(일)
Hyp 하이드록시프롤린
Ile 이소류신(일)
IPA 이소프로필 알코올
Leu 류신(일)
LH 황체화호르몬
LHRH(GnRH) 황체화호르몬 분비 호르몬
LHRH-R 황체화호르몬 분비 호르몬 수용체
Lys 라이신(일)
MDS 메틸디설파닐
Me 메틸
D-/L-Mel (4-[비스(2-클로로에틸)아미노]-D/L-페닐알라닌)
MeOH 메탄올
min 분
ml 밀리리터
NHS N-하이드록시석신이미드
Nle 노르류신
PALA N-포스포노아세틸-L-아스파테이트
PEG2 2개의 에틸렌 글리콜 잔기로 이루어진 폴리에틸렌글리콜
PEG3 3개의 에틸렌 글리콜 잔기로 이루어진 폴리에틸렌글리콜
PEG7 7개의 에틸렌 글리콜 잔기로 이루어진 폴리에틸렌글리콜
PMS N-메틸디벤조피라진메틸설페이트
Pyr 피로글루타메이트(일)
RIA 방사성 면역 측정법(Radio lmmuno Assay)
RT 실온
Sar 사르코신
tBu 3급 부틸
TEA 트리에틸 아민
TFA 트리플루오로 아세트산
THF 테트라하이드로퓨란
TLC 박층크로마토그래피
Tpi 테트라하이드로노르하만-3-카복실산
trityl 트리페닐카보닐
Tyr 타이로신(일)
Val 발린(일)
XTT 나트륨 3'-[1-(페닐알미노카보닐)-3,4-테트라졸륨]-비스(4-메톡시-6-니트로)벤젠설폰산
도 1 내지 도 17은 본 발명의 선택된 화합물들에 대해 측정된 H-NMR을 도시한 것이다: 화합물 1/2, 3, 4, 5/6, 7, 8, 9, 10, 11/12, 13/14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21.
본원 명세서에서, 인용된 모든 참조 문헌 및 특허의 내용은 참고로 인용된다. 본 발명은 하기에 제한되지 않고, 하기 예시의 수단에 의해 더 자세히 설명된 다.
I) 본 발명의 화합물의 합성
실시예 1:
디소라졸 E1 모노 헤미-석시네이트, 둘다 위치이성질체인 (1) & (2)
Figure 112009020722141-PCT00032
위에서 합성과 관련하여 A. 항목하에 기재된 일반 합성 과정에 따라, 항목하에 기재된 일반 합성 과정에 따라, 30mg의 디소라졸 E1, 12mg DMAP 및 150mg 무수 석시닌을 2ml의 건조한 피리딘에 용해시키고 질소 하 실온에서 4일간 교반했다. TLC-조건: DCM-MeOH 9:1/ DCM-IPA 9:1 및 분석용 HPLC. 반응 혼합물에 냉식염수/0.5M HCl을 붓고 초산에틸로 추출, pH 4가 되도록 식염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조한 후, 감압하에서 과량의 용매를 제거했다. 원료 생성물의 정제는 DCM/MeOH 구배를 사용하여 이스코 컴패니온(Isco Companion)을 통해 액체크로마토그래피에 의해 수행되었다. 13mg의 순수한 생성물이 위치이성질체 1 및 2의 1:1 혼합물로 수득되었다(혼합 수율: 39%).
LC - MS : [M+H]+ 875.6
계산된 질량: 874
H-NMR: 도 1 참고
실시예 2:
디소라졸 E1 비스 헤미 글루타레이트 (3)
Figure 112009020722141-PCT00033
위에서 합성과 관련하여 A. 항목하에 기재된 일반 합성 과정에 따라, 100mg의 디소라졸 E1, 30mg의 DMAP 및 150mg의 글루타르산 무수물을 3ml의 무수 피리딘에 용해시키고 100㎕ TEA를 첨가한 후, 질소 하 실온에서 4일간 교반했다. TLC-조건: DCM-MeOH 9:1/ DCM-IPA 9:1 및 분석용 HPLC. 반응 혼합물에 냉식염수/0.5M HCl를 넣고 초산에틸로 추출, pH 4가 되도록 식염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조한 후, 감압하에서 과량의 용매를 제거했다. 원료 생성물의 정제는 DCM/MeOH 구배를 사용하여 이스코 컴패니온(Isco Companion)을 통해 액체크로마토그래피에 의해 수행되었다. 35mg의 순수한 생성물이 수득되었다(수율: 24%).
LC - MS: [M+H]+ 1003.7
계산된 질량: 1002
H-NMR: 도 2 참조
실시예 3:
디소라졸 E1 비스 헤미 석시네이트 (4)
Figure 112009020722141-PCT00034
위에서 합성과 관련하여 A. 항목하에 기재된 일반 합성 과정에 따라, 138mg의 디소라졸 E1, 70mg의 DMAP 및 730mg의 석신산 무수물을 10ml의 무수 피리딘에 용해시키고, 스파츌라 팁(spatula tip)의 몰레큘러시브(4A)를 첨가한 후, 질소 하 실온에서 4일간 교반하였다. TLC-조건: DCM-MeOH 9:1/ DCM-IPA 9:1 및 분석용 HPLC. 반응 혼합물은 초산에틸로 희석되고, 냉식염수/HCl pH 3 내지 4에 붓고 초산에틸로 추출, pH 4 내지 5까지 유기상을 식염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조한 후, 감압하에서 과량의 용매를 제거하였다. 정제는 DCM/MeOH 구배를 사용하여 이스코 컴패니온(Isco Companion)을 통해 액체크로마토그래피에 의해 수행되며, 80mg의 고체 생성물이 수득되었다(수율: 39%).
LC - MS: [M+H]+ 975.5
계산된 질량: 974
H-NMR: 도 3 참조
실시예 4:
디소라졸 A1 모노 헤미 석시네이트, 둘다 위치이성질체들인 (5) & (6)
Figure 112009020722141-PCT00035
위에서 합성과 관련하여 A. 항목하에 기재된 일반 합성 과정에 따라, 30mg의 디소라졸 A1, 15mg의 DMAP 및 160mg의 석신산 무수물을 2ml의 무수 피리딘에 용해시키고 질소 하 실온에서 4일간 교반하였다. TLC-조건: DCM-MeOH 9:1/ DCM-IPA 9:1 및 분석용 HPLC. 반응 혼합물을 초산에틸로 희석하고, 냉식염수/HCl pH 3 내지 4에 붓고, 초산에틸로 추출, pH 4 내지 5까지 유기상을 식염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조한 후, 감압하에서 과량의 용매를 제거한다. 정제는 DCM/MeOH 구배를 사용하여 이스코 컴패니온(Isco Companion)을 통해 액체크로마토그래피에 의해 수행되며, 5.3mg의 두 위치이성질체를 1:1 비율로 포함하는 고체 생성물이 수득되었다(수율: 15%).
LC - MS: [M+H]+ 859.6
계산된 질량: 858
H-NMR: 도 4 참조
실시예 5:
디소라졸 A1 비스 헤미 석시네이트 (7)
Figure 112009020722141-PCT00036
위에서 합성과 관련하여 A. 항목하에 기재된 일반 합성 과정에 따라, 138mg의 디소라졸 A1, 70mg의 DMAP 및 730mg의 석신산 무수물을 10ml의 무수 피리딘에 용해시키고 스파츌라 팁(spatula tip)의 몰레큘러시브(4A)를 첨가한 후, 질소 하 실온에서 4일간 교반했다. TLC-조건: DCM-MeOH 9:1/ DCM-IPA 9:1. 반응 혼합물은 초산에틸로 희석되고, 냉식염수/HCl pH 3 내지 4에 붓고, 초산에틸로 추출, pH 4 내지 5까지 유기상을 식염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조한 후, 감압하에서 과량의 용매를 제거했다. 정제는 DCM/MeOH 구배를 사용하여 이스코 컴패니온을 통해 액체크로마토그래피에 의해 수행되며, 37mg의 고체 생성물 화학식 7이 수득되었다(수율: 20%).
LC - MS: [M+H]+ 959.4
계산된 질량: 958
H-NMR: 도 5 참조
실시예 6:
디소라졸 Z 모노 헤미 석시네이트 (8)
Figure 112009020722141-PCT00037
위에서 합성과 관련하여 A. 항목하에 기재된 일반 합성 과정에 따라, 80mg의 디소라졸 Z, 16mg의 DMAP 및 13mg의 석신산 무수물을 1.5ml의 피리딘에 용해시키고 소량의 4A 몰레큘러시브를 반응물에 첨가했다. 이 혼합물은 60℃(오일욕 온도)에서 가열되고, 24시간 동안 교반했다. 이 반응은 HPLC-UV를 통해 모니터링했다. 실온에서 냉각한 후, 초산에틸을 첨가하고, 몰레큘러시브를 여과하여 제거했다. 여액을 감압하에 증발시켜 건조시키고, 잔기은 40%의 용매B 혼합물 (A: 20mM NH4AcO, 5% AcN, 0.2% HOAc pH 4.5; B: 95% AcN, 5% 물) 5ml에 용해시켰다. 루에 록 멤브레인 필터(luer lock membrane filter)로 여과한 후, 제조용 HPLC(40% B --> 85% B, 25분 내)로 주입했다. 헤미 헤미 모노 석시네이트 피크(peak)가 수집되고, 분획물은 동결건조되어 밝은 갈색 고체로서 31mg의 순수한 생성물 화학식 8이 수득되었다(35%).
LC - MS: [M+H]+ 847.0
계산된 질량: 846
H-NMR: 도 6 참조
실시예 7:
디소라졸 Z 비스 헤미 석시네이트 (9)
Figure 112009020722141-PCT00038
위에서 합성과 관련하여 A. 항목하에 기재된 일반 합성 과정에 따라, 188mg의 디소라졸 Z, 31mg의 DMAP 및 500mg의 석신산 무수물을 4ml의 피리딘에 용해시키고 소량의 4A 몰레큘러시브를 반응물에 첨가했다. 이 혼합물은 40℃(오일욕 온도)에서 가열되고, 72시간 동안 교반했다. 이 반응은 HPLC-UV 및 TLC(DCM/MeOH 9:1)를 통해 모니터링했다. 반응물은 DCM으로 희석되고, 증류관으로 옮긴 후, 감압하에서 용매를 제거했다. 정제되지 않은 오일은 DCM에 다시 용해시키고, RP18 실리카겔에 흡착시킨 후, 두 개의 유사한 분획으로 분리되고 이스코 컴페니온 LC(아세토니트릴/물/0.1% 아세트산)를 통해 12g의 RP 컬럼을 이용하여 RP-플래쉬 크로마토그래피가 사용되었다. 런 넘버(run number)1로부터 분획물 #12 내지 14 및 런 넘버(run number)2로부터 분획물 #2 내지 3을 수집하고, 합친 후 감압/동결건조로 용매를 제거한다. 105mg의 옅은 갈색 생성물이 얻어진다(45%).
LC - MS: [M+H]+ 947.3
계산된 질량: 946
H-NMR: 도 7 참조
실시예 8:
디소라졸 Z 비스 헤미 글루타레이트 (10)
Figure 112009020722141-PCT00039
위에서 합성과 관련하여 A. 항목하에 기재된 일반 합성 과정에 따라, 183mg의 디소라졸 Z, 30mg의 4-DMAP 및 560mg의 글루타르산 무수물을 4ml의 피리딘에 용해시키고, 소량의 4A 몰레큘러시브를 반응물에 첨가했다. 이 혼합물은 40℃(오일욕 온도)에서 가열되고, 72시간 동안 교반했다. 이 반응은 HPLC-UV 및 TLC(DCM/MeOH 9:1)를 통해 모니터링했다. 반응물은 DCM으로 희석되고, 증류관으로 옮긴 후, 감압하에서 용매를 제거했다. 정제되지 않은 오일은 초산에틸에 용해시키고, 냉식염수/HCl을 첨가한 후, 식염수/물로 pH 4 내지 5가 되도록 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조 후 감압하에서 용매를 제거했다. 잔기를 DCM에 용해시키고 이스코 컴페니온 LC(아세토니트릴/물/0.1% 아세트산)를 통한 RP-플래쉬 크로마토그래피를 위해, RP18 실리카겔에 흡착시켰다. 농축액의 감압 및 동결건조 하에 AcN/아세트산을 제거한 후 75mg (32%)의 옅은 갈색 고체의 순수한 화학식 10이 수득되었다.
LC - MS: [M+H]+ 975.3
계산된 질량: 974
H-NMR: 도 8 참조
실시예 9:
디소라졸 A1 모노 헤미 석시닐[D-Lys6]LHRH, 둘다 위치이성질체들인 (11) & (12)
Figure 112009020722141-PCT00040
위에서 합성과 관련하여 B. 항목하에 기재된 일반 합성 과정에 따라, 6mg의 디소라졸 A1 모노 헤미 석시네이트(위치이성질체들의 1:1 혼합) 및 3.2mg의 HATU를 0.25ml의 DMF에 용해시켰다. 5㎕의 DIPEA를 첨가하고, 실온에서 20분간 교반하여, 활성화된 에스테르 결합을 형성했다. 10.1mg의 [D-Lys6]LHRH 펩티드를 0.25ml의 DMF에 용해시키고 혼합물에 첨가한 후, 대기 온도에서 1.5시간 동안 교반했다. 이 반응물은 HPLC-UV에 의해 모니터링되고, 이 혼합물은 제조용 HPLC로 이동했다. 이후, 반응 혼합물은 1.5ml의 40% 용매B 혼합물(A: 20 mM NH4AcO, 5% AcN, 0.2% HOAc pH 4.5;B: 95% AcN, 5% 물)로 희석됐다. 이 용액은 대략 0.1ml의 10% HOAc와 함께 pH 6이 되도록 산성화되었다. 루에 록 멤브레인 필터로 여과한 후, 이 용액은 제조용 HPLC(40% B --> 85% B, 25분 내)에 주입되었다. 주요 피크는 수집되고, 분획물은 동결건조되어, 5mg (32%)의 밝은 갈색 플레이크(flake), 화학식 11 및 12가 수득되었다(1:1 비율, 혼합된 수율: 35%).
HR - ESI - MS: (전하 상태 +2) 1048.0
계산된 질량: 2092
H-NMR: 도 9 참조
실시예 10:
디소라졸 E1 모노 헤미 석시닐[D-Lys6]LHRH, 둘다 위치이성질체들인 (13) & (14)
Figure 112009020722141-PCT00041
위에서 합성과 관련하여 B. 항목하에 기재된 일반 합성 과정에 따라, 40mg의 디소라졸 E1 모노 헤미 석시네이트(위치이성질체들의 1:1 혼합) 및 18mg의 HATU를 1ml의 DMF에 용해시켰다. 25㎕의 DIPEA를 첨가하고 실온에서 15분간 교반하여, 활성화된 에스테르 결합을 형성했다. 54mg의 [D-Lys6]LHRH 펩티드를 1ml의 DMF에 용해시키고 혼합물에 첨가한 후, 대기 온도에서 2시간 동안 교반했다. 이 반응은 HPLC-UV에 의해 모니터링되고, 이 혼합물은 제조용 HPLC로 이동했다. 이후, 반응 혼합물은 3.5ml의 40% 용매B 혼합물(A: 20mM NH4AcO, 5% AcN, 0.2% HOAc pH 4.5;B: 95% AcN, 5% 물)로 희석됐다. 이 용액은 대략 0.5ml의 10% HOAc와 함께 pH 6이 되도록 산성화됐다. 루에 록 멤브레인 필터로 여과한 후, 이 용액은 제조용 HPLC(40% B --> 85% B, 25분 내)에 주입되었다. 주요 피크는 수집되고, 분획물은 동결건조되어, 29mg의 밝은 갈색 플레이크(flake), 화학식 13 및 14가 수득되었다(1:1 비율, 혼합된 수율: 36%).
HR - ESI - MS: (전하 상태 +2) 1056.0
계산된 질량: 2108
H-NMR: 도 10 참조
실시예 11:
디소라졸 A1 비스 헤미 석시닐[D-Lys6]LHRH (15)
Figure 112009020722141-PCT00042
위에서 합성과 관련하여 B. 항목하에 기재된 일반 합성 과정에 따라, 15.7mg의 디소라졸 A1 비스 헤미 석시네이트 및 7.5mg의 HATU를 1ml의 DMF에 용해시켰다. 11㎕의 DIPEA를 첨가하고, 실온에서 20분간 교반하여, 활성화된 에스테르 결합을 형성했다. 23.6mg의 [D-Lys6]LHRH 펩티드를 1ml의 DMF에 용해시키고, 혼합물에 첨가한 후, 대기 온도에서 2시간 동안 교반했다. 이 반응물은 HPLC-UV에 의해 모니터링되고, 이 혼합물은 제조용 HPLC로 이동했다. 이후, 반응 혼합은 4.5ml의 40% 용매B 혼합물(A: 20mM NH4AcO, 5% AcN, 0.2% HOAc pH 4.5;B: 95% AcN, 5% 물)로 희석되었다. 이 용액은 대략 0.5ml의 10% HOAc로 pH 6이 되로록 산성화되었다. 루에 록 멤브레인 필터로 여과한 후, 이 용액은 제조용 HPLC(40% B --> 85% B, 25분 내)에 주입되었다. 주요 피크는 수집되고, 분획물은 동결건조되어, 18mg의 백색 플레이크(flake), 화학식 15가 수득되었다(수율: 32%).
HR - ESI - MS: (전하 상태 +4) 858.4
계산된 질량: 3426
H-NMR: 도 11 참조
실시예 12:
디소라졸 Z 모노 헤미 석시닐[D-Lys6]LHRH(16)
Figure 112009020722141-PCT00043
위에서 합성과 관련하여 B. 항목하에 기재된 일반 합성 과정에 따라, 45mg의 디소라졸 Z 모노 헤미 석시네이트 및 24mg의 HATU를 1ml의 DMF에 용해시켰다. 37㎕의 DIPEA를 첨가하고, 실온에서 20분간 교반하여, 활성화된 에스테르 결합을 형성했다. 76mg의 [D-Lys6]LHRH 펩티드를 1ml의 DMF에 용해시키고, 혼합물에 첨가한 후, 대기 온도에서 1.5시간 동안 교반했다. 이 반응물은 HPLC-UV에 의해 모니터링되고, 이 혼합물은 제조용 HPLC로 이동했다. 이후, 반응 혼합물은 4.5ml의 40% 용매B 혼합물(A: 20mM NH4AcO, 5% AcN, 0.2% HOAc pH 4.5;B: 95% AcN, 5% 물)로 희석되었다. 이 용액은 대략 0.75ml의 10% HOAc로 pH 6이 되도록 산성화되었다. 루에 록 멤브레인 필터로 여과한 후, 이 용액은 제조용 HPLC(40% B --> 85% B, 25분 내)에 주입되었다. 주요 피크는 수집되고, 분획물은 동결건조되어, 42mg의 밝은 갈색 플레이크(flake), 화학식 16이 수득되었다(수율: 38%).
HR - ESI - MS: (전하 상태 +2) 1042.0
계산된 질량: 2080
H-NMR: 도 12 참조
실시예 13:
디소라졸 Z 비스 헤미 글루타릴[D-Lys6]LHRH(17)
Figure 112009020722141-PCT00044
위에서 합성과 관련하여 B. 항목하에 기재된 일반 합성 과정에 따라, 35mg의 디소라졸 Z 비스 헤미 글루타레이트 및 34mg의 HATU를 1ml의 DMF에 용해시켰다. 54㎕의 DIPEA를 첨가하고 실온에서 20분간 교반하여, 활성화된 에스테르 결합을 형성했다. 128mg의 [D-Lys6]LHRH 펩티드를 1ml의 DMF에 용해시키고, 혼합물에 첨가한 후, 대기 온도에서 2시간 동안 교반했다. 이 반응물은 HPLC-UV에 의해 모니터링되고, 이 혼합물은 제조용 HPLC로 이동했다. 이후, 반응 혼합물은 4.5ml의 40% 용매B 혼합물(A: 20mM NH4AcO, 5% AcN, 0.2% HOAc pH 4.5; B: 95% AcN, 5% 물)로 희석되었다. 이 용액은 대략 1ml의 10% HOAc로 pH 6으로 산성화되었다. 루에 록 멤브레인 필터로 여과한 후, 이 용액은 제조용 HPLC(40% B --> 85% B, 25분 내)에 주입되었다. 주요 피크는 수집되고, 분획물은 동결건조되어, 39mg의 백색 플레이크(flake), 화학식 17이 수득되었다(수율: 33%).
HR - ESI - MS: (전하 상태 +4) 862.4
계산된 질량: 3442
H-NMR: 도 13 참조
실시예 14:
디소라졸 Z 모노 헤미 석시닐 성장억제 호르몬(18)
Figure 112009020722141-PCT00045
위에서 합성과 관련하여 B. 항목하에 기재된 일반 합성 과정에 따라, 20mg의 디소라졸 Z 모노 헤미 석시네이트 및 21mg의 HATU를 1ml의 DMF에 용해시켰다. 15㎕의 DIPEA를 첨가하고 실온에서 15분간 교반하여, 활성화된 에스테르 결합을 형성했다. 25mg의 합성 펩티드 H-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys(Fmoc)-Val-Cys-Thr-NH2 x HCl(디설피드로 연결된)를 1ml의 DMF에 용해시키고, 혼합물에 첨가한 후, 대기 온도에서 4시간 동안 교반하였다. 이 반응물은 HPLC-UV에 의해 모니터링되었다. 정제되지 않은 반응 혼합물은 2ml의 DMF에 용해시키고 피페리딘을 10%(v/v)의 최종농도로 첨가하였다. 실온에서 5분간 교반한 후, 혼합물은 바로 제조용 HPLC로 이동하였다. 이후, 반응 혼합은 4.5ml의 50% 용매B 혼합물(A: 20mM NH4AcO, 5% AcN, 0.2% HOAc pH 4.5; B: 95% AcN, 5% 물)로 희석되었다. 이 용액은 대략 1.5ml의 10% HOAc로 pH 6이 되도록 산성화되었다. 루에 록 멤브레인 필터로 여과한 후, 이 용액은 제조용 HPLC(50% B --> 100% B, 25분 내)에 주입되었다. 주요 피크는 수집되고, 분획물은 동결건조되어, 12mg의 플레이크(flake), 화학식 18이 수득되었다(수율: 33%).
HR - ESI - MS: (전하 상태 +2) 937.4
계산된 질량: 1873
H-NMR: 도 14 참조
실시예 15:
화합물 19:
Figure 112009020722141-PCT00046
위에서 합성과 관련하여 D. 항목하에 기재된 일반 합성 과정에 따라, 20mg의 디소라졸 E1은 산화되어 10mg의 디케톤 생성물을 수득되었다(56%).
LC - MS: [M+H]+ 771.5
계산된 질량: 770
H-NMR: 도 15 참조
실시예 16:
화합물 20:
Figure 112009020722141-PCT00047
위에서 합성과 관련하여 D. 항목하에 기재된 일반 합성 과정에 따라, 25mg의 디소라졸 A1은 산화되어 17mg의 디케톤 생성물을 수득되었다(67%).
LC - MS: [M+H]+ 755.6
계산된 질량: 754
H-NMR: 도 16 참조
실시예 17:
화합물 21:
Figure 112009020722141-PCT00048
위에서 합성과 관련하여 D. 항목하에 기재된 일반 합성 과정에 따라, 44mg의 디소라졸 Z는 산화되어 15mg의 디케톤 생성물을 수득되었다(29%).
LC - MS: [M+H]+ 743.3
계산된 질량: 742
H-NMR: 도 17 참조
Ⅱ) 발효에 의한 디소라졸 Z의 제조
디소라졸 Z는 점액세균 소란지움 셀룰로숨(Sorangium cellulosum) 생산자 균주 소세(Soce) 1875(도서수납번호 DSM53600 하에 DSMZ에서 가능)의 발효에 의해 생성된다.
발효조의 접종을 위해, 쉐이크 플라스크(shake flask)에서 배양되는 초기 배양이 바람직하다. 발효 과정은, 예를 들면, 배치 또는 페드-배치(fed-batch)로 수행된다.
초기 배양으로, 다음 성분들을 함유하는 배지가 사용되었다: 0.8%의 가용성 전분(제조사: Merck 1.01252), 0.2% 효모 추출물, 0.2% 유지가 제거된 소이 밀(soy meal), 0.1% CaCl2 x 2H2O, 0.1% MgSO4x7H2O, 8mg/L Na-Fe-EDTA, 1% HEPES buffer, 0.2% 포도당, 배양의 초기에 pH 7.4인 1% XAD 레진. 초기 배양 쉐이크 플라스크는 160rpm의 교반 및 30℃의 온도 조건에서 배양될 수 있다. 발효를 위해, 70리터 배지의 배치 발효가 사용되었으며, 여기서 배지는 오토클레이브(autoclave) 전에 pH 7.9에서 HEPES 완충액이 없는 초기 배양액과 동일한 것이다. 1%(vol/vol) XAD (제품명: Amberlite XAD 16, 제조사: Rohm and Haas)가 첨가되어, 디소라졸 Z를 흡착한다.
발효조는 1L의 초기 배양에서 배양된다. 배양은, 30℃ 온도, 5.5L/min에서 통기(aeration), 80rpm의 교반속도에서 일어난다. 가능하다면, 발효 과정 동안 5% KOH 용액을 첨가하여, pH는 6.8 이상에서 일정하게 유지됐다. 잔류하는 전분은 요오드 반응에 의해 조절되었다. 포도당의 농도는 주어진 예에서, 검사띠(test stripe, 제조사: Roche)를 사용하여 모니터링되었다.
배양 생산액은 포도당 및 전분이 필수적으로 대사될 때와 디소라졸 Z의 농도가 평행에 도달할 때 수거될 준비를 한다. 총 12일 후에, 발효를 중단하고 분급(sieving)에 의해 XAD 레진을 모아서 수거된다. XAD에 결합된 셀은 이후 추출 및 정제 단계에 포함된다.
분석적 목적을 위해, 발효 배양으로부터 분배액은 XAD 레진 및 셀 매스(cell mass)의 수거를 위해 사용되며, 이후, 메탄올, 메탄올:에탄올:이소프로판올(80:15:5)을 사용하여 추출하고 아세톤을 사용하여 마지막 단계가 진행된다. 추출물이 합쳐지고, 농축되어 HPLC-MS에 의해 분석된다.
대안적인 소란지움 셀룰로숨 균주가 사용될 때, 소세 427(도서 수납 번호 DSM53419 하에 DSMZ에 등재된)이 바람직하다. 다음 배지는 초기 배양에 사용된다: 0.3% 전분(상품명: Cerestar SF 12618, 제조사: Cerestar Deutschland, Krefeld), 0.2% 유지가 제거된 소이 밀(soy meal, 상품명: Soyamine 5OT, 제조사: Lucas Meyer, Hamburg), 0.1% 효모 추출물(제조사: Marcor), 0.1% 황산마그네슘(제조사: Roth, P027.2), 0.05% 염화칼슘(제조사: Merck, 1.02382), 8mg/ml 에틸렌디아민테트라아세트산의 나트륨-철 염 (Na-Fe-EDTA) (제조사: Merck, 108413) 및 pH 7.5의 HEPES 완충액(제조사: Roth, 9105.3). 오토클레이브(autoclave) 후, 20% 포도당 용액을 최종 0.3% 포도당이 되도록 첨가한다. 발효를 위해, 오토클레이브(autoclave) 전에 HEPES 완충액을 제외한 동일한 배지가 pH 7.9에서 사용된다.
상기 기술에 따른 발효에 따라, 소란지움 셀루로숨, 균주 소 세427의 발효 배양액 70L를 원심분리하여 수거되고, 젖은 셀 매스 및 XAD 레진은 3L의 메탄올 분획물로 추출한다. 잔류하는 수용성 혼합액을 얻기 위해 결합된 여과액을 증발시킨다. 필요하다면, 물을 첨가하여 1.2 내지 1.5 L로 맞추고, 이는 1.2 L 디클로로메탄 삼분획물로 추출한다. 결합된 유기 용액은 무수황산나트륨으로 건조되고, 이후, 증발시켜 건조한다. 잔기은 1 L의 수용성 메탄올(97%)에 다시 용해시키고, 헵탄의 3 분획물로 분배한다. 메탄올 층은 증발되고, 톨루엔으로 희석한 후, 증발시켜 건조한다. 잔기은 메탄올과 함께 세파덱스(Sephadex) LH-20 (제조사: Pharmacia)에서 겔 크로마토그래피에 의해 분리되며, 디소라졸 Z의 농축된 분획물을 생성하며, 이는 메탄올-물 (65/35)와 함께 RP-MPLC (ODS-AQ, 120 A, S 16 ㎛)에서 정제되어 순수한 디소라졸 Z를 생성한다.
Ⅲ) 다양한 종양 세포주에서 항증식성 작용
본 발명의 선택된 화합물은 확립 종양 세포주에서 증식 시험을 통해 이의 항증식성 활성이 연구되었다.
사용된 시험는 세포의 데하이드로게나제 활성을 측정하고 세포 생존도 및 간접적으로 세포수를 결정할 수 있다.
사용된 세포주는 인간 자궁경부 암종 세포주 KB/HeLa(ATCC CCL17), 난소 선암 세포주 SKOV-3(ATCC HTB77), 인간 아교모세포종 세포주 SF-268(NCI 503138) 및 폐 암종 세포주 NCI-H460(NCI 503473)이다. 또한, 본 발명의 화합물의 세포 주기-특이 작용의 연구를 위해, RKOp27 세포 시스템이 사용되었다[참조:Schmidt M et al. Oncogene 2000, 19(20): 2423-2429]. RKO는 인간 결장 암종 세포주 (ATCC CRL-2577)이며, 여기서, 엑디손 발현 시스템에서 유도된 세포 주기 억제제 p27kip1가 발현되고, 특이하게 G2에서 세포주기 정지를 유도할 수 있다. 비특이 작용물질은 RKO 세포가 G1 또는 G2에서 정지 여부와 상관없이 독립적으로 증식을 억제한다. 그러나, 세포 주기-특이 물질, 예를 들면, 튜불린 억제제는 세포가 정지되지 않거나 세포주기가 통과될 경우 오직 세포독성이 있다.
세포의 데하이드로게나제 활성을 위한 XXT 시험
유착성의 성장 종양 세포주 KB/HeLa, SKOV-3, SF-268 및 NCI-H460은 37℃, 5% CO2 및 95% 대기 습도에서 배양기에 표준 조건 하에 배양되었다. 실험 첫째 날, 트립신/EDTA를 사용하여 세포를 분리하고 원심분리로 침전시킨다. 이후, 세포 침전물은 상응하는 세포수에서 각각의 배양 배지에 재현탁하고, 96-웰 미량역가 플레이트에서 반응시킨다. 이후, 이 플레이트는 배양기에서 밤새도록 배양된다. 시험 물질은 DMSO에 1 mg/ml의 원액으로 제조하고, 시험 둘째 날에 배양 배지를 사용하여 적절한 농도로 희석한다. 이후, 배양 배지에 상기 물질은 세포에 첨가되고, 배양기 에서 45 시간 동안 배양된다. 대조액으로, 시험 물질로 처리되지 않은 세포가 사용된다. XTT 분석을 위해, 1 mg/ml의 XTT(나트륨 3'-[1-(페닐아미노카보닐)-3,4-테트라졸리움]-비스(4-메톡시-6-니트로)벤젠설폰산)를 페놀 레드 없이 RPMI-1640 배지에 용해시킨다. 추가적으로, 인산완충식염수 용액(PBS)에서 0.383mg/ml의 PMS(N-메틸디벤조피라진 메틸설페이트) 용액을 제조한다. 실험 넷째 날, 75㎕/웰의 XTT-PMS 혼합물을 세포 플레이트에 피펫으로 옮기고, 동시에, 45시간 동안 시험 물질과 배양시킨다. 이를 위해, 사용 바로 직전에, XTT 용액을 PMS 용액과 50:1(vol:vol)의 비로 혼합한다. 세포 플레이트는 배양기에서 3시간 더 배양하고, 흡광도(OD490nm)를 광도계에서 측정한다. 결정된 OD490nm의 방법에 의해, 퍼센트 억제가 대조액과 비교하여 계산되고, 농도-작용 곡선의 형태로 반대수적으로(semilogarithmically) 플로팅(plot)한다. IC50은 프로그램 그래프패드 프리즘(program Graphpad Prism)을 사용하여 농도-작용 곡선으로부터 회귀 분석의 방법에 의해 계산된다.
RKOp27 모델의 방법에 의한 세포 주기 분석
분석은 96-웰 플레이트에서 수행된다. p27kip1의 유도성의 발현에 의해, 세포들은 성장이 완전히 정지되며, 사멸되지는 않는다. 유도되거나 되지 않은 세포에 활성의 비교를 통해, 치료학의 작용 메카니즘 (세포 주기 특이성)의 결과가 도출될 수 있다. 비유도된 세포와 비교하여 분석하는 동안 분열이 더 이상 발생하지 않기 때문에, 비유도된 세포는 대략 3배 높은 세포수에서 접종된다(유도된 20000 세포/웰, 유도되지 않은 6250 세포/웰). 대조액은 처리되지 않은 세포이다(+/- 유도). 유도는 3μM 무리스테론 A로 수행된다. 첫째 날, 세포가 노출되고(+/- 무리스테론 A) 37℃에서 24시간 동안 배양되었다. 둘째 날, 시험 물질이 첨가되고 (대조액 DMSO), 표준 XTT 분석이 수행되기 전에 배양은 37℃에서 45시간 더 계속된다.
표 1에서, p27kip1의 발현이 있든 없든 본 발명의 선택된 화합물들의 세포독성 및/또는 성장-억제 활성은 세포독성 잔기 독소루비신, 선행 기술 접합체 AN-152 및 다음의 화합물을 포함하는 디소라졸 잔기 디소라졸 A1, E1 및 Z, 및 본 발명의 선택된 화합물들과 비교하여 보여준다: 디소라졸 Z-(글루타릴-[D-Lys6]LHRH)2-화합물 17; 디소라졸 Z-석시닐-[D-Lys6]LHRH-화합물 16; 디소라졸 E1-석시닐-[D-Lys6]LHRH-화합물 13/14; 디소라졸 A1-석시닐-[D-Lys6]LHRH-화합물 11/12; 디소라졸 A1-(석시닐-[D-Lys6]LHRH)2-화합물 15.
시험된 화합물들은 p27kip1의 유도된 상태에서 세포독성 활성을 보여주지 않았다. 이런 결과는 본 발명의 선택된 화합물들에 의한 선택된 종양 세포주의 증식의 매우 강력한 억제를 보여준다. 따라서, 시험된 접합체들은 유리되고 접합되지 않은 디소라졸 잔기와 비교하여, 세포 독성의 분명한 감소를 나타낸다.
Figure 112009020722141-PCT00049
IV) GnRH-수용체 의존성 증식 분석
본 발명의 선택된 화합물들의 세포 증식의 용량-의존성 수용체-매개된 억제가 연구되었다.
이런 효과들을 연구하기 위해, 인간 GnRH 수용체(hGnRH-R) 양성 세포주[참조: 5C6; Beckers et al., Eur. J. Biochem. 1995, 231 : 535-543] 및 hGnRH-R 음성 세포주(LTK; ECACC No. 85011432)가 사용되었다.
각 세포는 24웰 미량역가 플레이트(MTPs)에서 웰당 15000 세포수로 1mL 배양배지에 노출되었다. 세포수는, 처리되지 않은 대조액을 시험하고 5일 후에, 이 세포들은 여전히 대수증식기에 있는 것을 보여주는 방식으로 조절되었다.
시험 화합물은 표 2에서 주어진 최종 농도를 산출하기 위해, 100㎕의 용량에서 초기 성장의 4시간 후에 배양된 세포에 주어졌다.
37℃에서 30분의 배양 후에, 전체 배양 배지를 제거하고, 세포들은 시험 화합물이 없는 배양 배지로 2번 세척한다. 세척 후, 세포들을 배양기(37℃, 5% CO2 및 95% 대기습도)에 넣고 4일 더 배양한다.
세포 배양 후에 세포수를 결정하기 위해, 세포들은 트립신/EDTA를 사용하여 제거되고 원심분리한다. 생존 세포수 및 총 세포수는 Vi-세포 아날라이저(제조사: Beckman Coulter)를 사용하여 계산되었다.
생존 세포수는 처리되지않은 대조세포들(=100%)과 비교하여 분석되었다. 총 세포 생존도는 90% 이상인 세포 그룹(각 웰들)만이 고려되었으며, 즉, 비특이적 세포독성에 의한 세포 증식의 억제는 제외될 수 있다.
표 2에서, 시험 화합물의 다른 농도의 존재 및 부재에서 hGnRH-R 양성 및 음성 세포의 96 시간 배양 후에 증식 상태를 보여준다. 96시간 후에 처리되지 않은 대조 세포의 증식 상태는 100%로 세팅한다. 사용된 시험 화합물은 선행 기술 접합체 AN-152 및 다음 화합물들로부터 선택된 본 발명의 화합물들이다: 디소라졸 Z-(글루타릴-[D-Lys6]LHRH)2-화합물 17; 디소라졸 Z-석시닐-[D-Lys6]LHRH-화합물 16; 디소라졸 E1-석시닐-[D-Lys6]LHRH-화합물 13/14; 디소라졸 A1-석시닐-[D-Lys6]LHRH-화합물 11/12; 디소라졸 A1-(석시닐-[D-Lys6]LHRH)2-화합물 15.
시험된 모든 본 발명의 화합물은 96시간의 연구기간을 통해 세포 증식의 용량-의존성 억제를 나타낸다. 이런 억제 효과는 hGnRH-R 음성 세포주 LTK에 대한 결과로부터 확인될 수 있는 것처럼 특이적이다.
Figure 112009020722141-PCT00050
Ⅴ) 생체 내 화합물 16의 GnRH-수용체 의존성 항증식 작용
30 CD 1nu/nu 누드 생쥐에 GnRH 수용체 양성, 인간 난소 암종 세포주 OVCAR-3(동물당 5만개의 세포)을 피하에 접종하였다. 실험은 고형 종양의 형성 후에 시작되었다. 복용량 그룹당 5마리의 동물이 사용되었다.
실험 당일, 개별 종양 체적은 촉진(palpation)에 의해 측정되고 100%로 세팅되었다. 이후, 시험 화합물은 실험 당일에 시험 동물의 꼬리 정맥에 접종에 의해 투여되었다.
요구되는 농도에서 시험 화합물을 포함하는 kg 당 0.9% 식염수의 표준 용량 10 ml(20g 쥐당 200㎕)가 실험 당일에 한 번 투여되었다.
종양 크기는 실험 18일째에 촉진에 의해 다시 측정되었다. 추가의 종양이 출현하는 경우, 개별 종양 체적들이 추가되었다.
실험을 통해 독성 효과, 예를 들면, 무게 감소가 기록되지 않았다.
Figure 112009020722141-PCT00051
이런 결과들은 처리되지 않은 종양의 성장, 디소라졸 Z 단독에 의한 종양 성장의 적절한 억제, 및 [D-Lys6]-LHRH에 대한, 디소라졸 Z의 접합체에 의해 얻어진 용량 의존성의, 분명히 향상된 항증식 효능을 설명하고 있다.

Claims (32)

  1. 화학식 I의 화합물.
    화학식 I
    C1 - B1 - A - B2 - C2
    상기 화학식 I에서,
    A는 하기 화학식 II의 디소라졸 잔기이고,
    B1, B2는 서로 독립적인 링커(linker)이며, A를 C1 및/또는 C2와 공유결합에 의해 연결하고,
    C1, C2는 서로 독립적으로, "펩티드, 펩티드 호르몬, 단백질, 단백질 호르몬, 수용체 리간드, 혈장 단백질, 혈청 단백질, 항체, 항체 단편"으로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택되는 세포결합분자이다.
    화학식 II
    Figure 112009020722141-PCT00052
    상기 화학식 II에서,
    Ran, Rbn, Rcn, Rdn, Rem, Rfm, Rgm, Rhm, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10, R11, R12, R13, R14, R15, R16, R17, R18, R19, R20, R21, R22, R23, R24는 "수소, 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-알킬, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 아릴-알킬설포닐, 할로겐, 하이드록실, 카보닐, 아세틸, 카복실, 카복실에스테르, 아미드, 카보네이트, 카바메이트, 알파-아미노산 잔기, 베타-아미노산 잔기, 알콕실, 아미노, 이미노, 하이드록실아미노, 모노-알킬아미노, 디-알킬아미노, 하이드라지닐, 시아노, 알킬-시아노, 설프하이드릴, 디설피딜알킬 및/또는 알킬-설피딜"로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택되고; 상기 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-알킬, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 아릴-알킬설포닐, 카보닐, 아세틸, 카복실, 카복실에스테르, 아미드, 카보네이트, 카바메이트, 알콕실, 모노-알킬아미노, 디-알킬아미노, 알킬-시아노, 디설피딜알킬 및/또는 알킬-설피딜 그룹은 "알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-알킬, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 아릴-알킬설포닐, 할로겐, -F, -Cl, -Br, -I, -N3, -NO2, =O, =S, =S(O)2, 하이드록실, 카보닐, 아세틸, 카복실, 카복실에스테르, -C(O)OH, -C(O)NH2, 아미드, 카보네이트, 카바메이트, 알파-아미노산 잔기, 베타-아미노산 잔기, 알콕실, 아미노, 이미노, 하이드록실아미노, 모노-알킬아미노, 디-알킬아미노, 하이드라지닐, 시아노, 알킬- 시아노, 설프하이드릴, 디설피딜알킬 및/또는 알킬-설피딜"로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택되는 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 임의로 치환되고,
    임의로, 라디칼 Ran, Rbn, Rcn, Rdn, Rem, Rfm, Rgm, Rhm, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10, R11, R12, R13, R14, R15, R16, R17, R18, R19, R20, R21, R22, R23, R24 중 임의의 인접한 두 개의 라디칼 R은 이중결합을 형성하기 위해 원자결합을 할 수 있거나 상기 두 개의 라디칼 R은 에폭시드(옥시란), 아지란(아지리딘), 알킬-, 사이클로알킬-, 사이클로알킬-알킬-, 헤테로아릴-, 아릴-알킬-, 헤테로아릴-알킬-, 헤테로사이클릴- 및/또는 헤테로사이클릴-알킬-치환된 아지란(아지리딘), 티이란 및/또는 티이란-S-옥시드 그룹을 형성할 수 있으며,
    n은 0, 1, 2, 3이고,
    m은 0, 1, 2, 3이다.
  2. 제1항에 있어서, A가 화학식 III의 디소라졸 잔기인, 화학식 I의 화합물.
    화학식 III
    Figure 112009020722141-PCT00053
    상기 화학식 III에서,
    Rio, Rjo, Rkp, Rlp, Rmp, Rnp, R25, R26, R27, R28, R29, R30, R31, R32, R33, R34, R35, R36, R37, R38, R39, R40, R41, R42, R43, R44는 "수소, 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-알킬, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 아릴-알킬설포닐, 할로겐, 하이드록실, 카보닐, 아세틸, 카복실, 카복실에스테르, 아미드, 카보네이트, 카바메이트, 알파-아미노산 잔기, 베타-아미노산 잔기, 알콕시, 아미노, 이미노, 하이드록실아미노, 모노-알킬아미노, 디-알킬아미노, 하이드라지닐, 시아노, 알킬-시아노, 설프하이드릴, 디설피딜알킬 및/또는 알킬-설피딜"로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택되고; 상기 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-알킬, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 아릴-알킬설포닐, 카보닐, 아세틸, 카복실, 카복실에스테르, 아미드, 카보네이트, 카바메이트, 알콕실, 모노-알킬아미노, 디- 알킬아미노, 알킬-시아노, 디설피딜알킬 및/또는 알킬-설피딜 그룹은 "알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-알킬, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 아릴-알킬설포닐, 할로겐, -F, -Cl, -Br, -I, -N3, -NO2, =O, =S, =S(O)2, 하이드록실, 카보닐, 아세틸, 카복실, 카복실에스테르, -C(O)OH, -C(O)NH2, 아미드, 카보네이트, 카바메이트, 알파-아미노산 잔기, 베타-아미노산 잔기, 알콕실, 아미노, 이미노, 하이드록실아미노, 모노-알킬아미노, 디-알킬아미노, 하이드라지닐, 시아노, 알킬-시아노, 설프하이드릴, 디설피딜알킬 및/또는 알킬-설피딜"로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택되는 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 임의로 치환되고,
    임의로, 라디칼 Rio, Rjo, Rkp, Rlp, Rmp, Rnp, R25, R26, R27, R28, R29, R30, R31, R32, R33, R34, R35, R36, R37, R38, R39, R40, R41, R42, R43, R44 중 임의의 인접한 두 개의 라디칼 R은 이중결합을 형성하기 위해 원자결합을 할 수 있거나 상기 두 개의 라디칼 R은 에폭시드(옥시란), 아지란(아지리딘), 알킬-, 사이클로알킬-, 사이클로알킬-알킬-, 헤테로아릴-, 아릴-알킬-, 헤테로아릴-알킬-, 헤테로사이클릴- 및/또는 헤테로사이클릴-알킬-치환된 아지란(아지리딘), 티이란 및/또는 티이란-S-옥시드 그룹을 형성할 수 있으며,
    o는 0, 1, 2, 3이고,
    p는 0, 1, 2, 3이다.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 링커 B1, B2가,
    "효소에 의해 절단되는 링커, 단백질 분해에 의해 절단되는 링커, 자가-희생적 링커, 산-불안정 링커, 디설피드(교환)링커, 가수분해에 불안정한 링커, 이관능성(bifunctional) 링커, 다관능성 링커, 에스테르 링커, 펩티드 링커, 1, 2, 3, 4 또는 5개의 아미노산 잔기를 가진 링커, 디펩티드 링커, 테트라펩티드 링커, 히드라존 링커, 하이드라지드 링커, 디탄소산 잔기 링커, 폴리-에틸렌글리콜(PEG) 링커"로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택되는, 화학식 I의 화합물.
  4. 제3항에 있어서, 링커 B1, B2가,
    "X1-알킬-X2, X3-사이클로알킬-X4, X5-사이클로알킬-알킬-X6, X7-알킬-사이클로알킬-알킬-X8, X9-아릴-X10, X11-아릴-알킬-X12, X13-알킬-아릴-알킬-X14, X15-헤테로아릴-X16, X17-헤테로아릴-알킬-X18, X19-알킬-헤테로아릴-알킬-X20, X21-헤테로사이클릴-X22, X23-헤테로사이클릴-알킬-X24, X25-알킬-헤테로사이클릴-알킬-X26(여기서, X1, X2, X3, X4, X5, X6, X7, X8, X9, X10, X11, X12, X13, X14, X15, X16, X17, X18, X19, X20, X21, X22, X23, X24, X25, X26은 "O-, S-, S-S-, C(O)O-, C(O)-, OC(O)O-, C(O)NH-, OC(O)NH-, NHC(O)-, NHC(O)O-, NH-, NY1-, C(O)NY2-, OC(O)NY3-, NY4C(O)-, NY5C(O)O-, C=N-NH-, NH-N=C-, C=N-NY6-, NY7-N=C-"로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택되며, 여기서 Y1, Y2, Y3, Y4, Y5, Y6, Y7은 "알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-알킬, 할로겐, -F, -Cl, -Br, -I, -N3, -NO2, 하이드록실, 알콕실, 아미노, 이미노, 하이드록실아미노, 하이드라지닐, 시아노, 알킬-시아노, 설프하이드릴"로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택된다);
    옥살릴, 말로닐, 석시닐, 글루타릴, 아디피닐, 말레이닐, 푸마릴; 및
    다음 분자들을 기본으로 하는 링커들:
    Gly-Phe-Leu-Gly, Phe-Lys, Val-Cit(시트룰린),
    1,4-비스(아미노메틸-)-사이클로헥산, 1,4-비스(아미노메틸-)-사이클로헵탄, 1,3-비스(아미노메틸-)-사이클로펜탄, 1-아미노-4-(아미노메틸)-사이클로헥산, 1,4-디아미노사이클로헥산, 1,4-비스(아미노메틸)비사이클[2.2.2]옥탄, 감마-말레이미도카프로일히드라지드, 4-하이드라지노설포닐벤조산, SMCC 이관능성 링커, MDS(메틸디설파닐), PEG2, PEG3, PEG7,
    릴리 링커(Lilly linker):
    Figure 112009020722141-PCT00054
    ,
    릴리 밤메 링커(Lilly BAMME Linker):
    Figure 112009020722141-PCT00055
    ,
    릴리 밥 링커(Lilly BAP linker):
    Figure 112009020722141-PCT00056
    ,
    시스-아코니틱 링커:
    Figure 112009020722141-PCT00057
    ,
    PABC1 링커:
    Figure 112009020722141-PCT00058
    ,
    PABC2 링커:
    Figure 112009020722141-PCT00059
    ,
    PABC3 링커:
    Figure 112009020722141-PCT00060
    ,
    PABC4 링커:
    Figure 112009020722141-PCT00061
    ,
    PABC5 링커:
    Figure 112009020722141-PCT00062
    ,
    PABC6 링커:
    Figure 112009020722141-PCT00063
    로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택되는, 화학식 I의 화합물.
  5. 제1항 내지 제4항 중의 어느 한 항에 있어서, 세포결합 분자 C1, C2가,
    "팔량체(octamer) 펩티드, 구량체(nonamer) 펩티드, 십량체(decamer) 펩티드, LHRH 유사체, LHRH 작용제, LHRH 길항제, 봄베신, 봄베신 유사체, 봄베신 길항제, 성장억제 호르몬, 성장억제 호르몬 유사체, 혈청 알부민, 인간 혈청 알부민(HSA), 갈라닌 수용체 리간드, GAL1 수용체 리간드, GAL2 수용체 리간드, 갈라닌(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버(Chemical Abstract Services Registry No. 119418-04-1) 및 유사체, 성장억제 호르몬 수용체 리간드, sst1 수용체 리간드, sst2 수용체 리간드 , sst4 수용체 리간드, sst5 수용체 리간드, 성장억제 호르몬(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 38916-34-6) 및 유사체, 옥트레오타이드(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 83150-76-9) 및 유사체, RC-121(D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys[사이클릭(2→7)디설피드]-Thr-NH2; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 99660-13-6) 및 유사체, 봄베신 수용체 리간드, BB1 수용체 리간드, BB2 수용체 리간드, BB3 수용체 리간드, 가스트린-분비-펩티드-수용체(GRP-R) 리간드, 봄베신(Bn; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 31362-50-2) 및 유사체, 가스트린-분비-펩티드(GRP) 및 유사체, 뉴로메딘B(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 102577-19-5) 및 유사체, [D-Tyr6,베타-Ala11,Phe13,Nle(노르류신)14]-봄베신(6-14) 및 유사체, RC-3095(H-D-Tpi-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-psi-Leu-NH2; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 138147-78-1; US 제5,244,883호; US 제5,369,094호) 및 유사체, Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Psi-Leu-Leu-NH2(US 제5,843,903호) 및 유사체, 생식샘자극호르몬-분비-호르몬 수용체(GnRH-R) 리간드, GnRH-R 타입I 리간드, GnRH-R 타입Ⅱ 리간드, 황체형성 호르몬 분비 호르몬(LHRH; Glp-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2) 및 유사체, [D-Lys6]-LHRH, 트립토렐린([D-Trp6]-LHRH; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 57773-63-4) 및 유사체, 히스트렐린(6-[1-(페닐메틸)-D-히스티딘]-9-(N-에틸-L-프롤린아미드)-10-데글리신아미드-LHRH; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 76712-82-8) 및 유사체, 부세레린(6-[O-(1,1-디메틸에틸)-D-세린]-9-(N-에틸-L-프롤린아미드)-10-데글리신아미드-LHRH; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 57982-77-1) 및 유사체, 류프로렐린(6-D-류신-9-(N-에틸-L-프롤린아미드)-10-데글리신아미드-LHRH; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 53714-56-0) 및 유사체, 고세렐린(6-[O-(1,1-디메틸에틸)-D-세린]-LHRH-2-(아 미노카보닐)하이드라지드; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 65807-02-5) 및 유사체, 나파렐린(6-[3-(2-나프탈레닐)-D-알라닌]-LHRH; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 76932-56-4) 및 유사체, LHRH-Ⅱ(Pyr-His-Trp-Ser-His-Gly-Trp-Tyr-Pro-Gly-NH2) 및 유사체, 세트로레릭스(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 120287-85-6) 및 유사체, 테베레릭스/안타레릭스(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 144743-92-0) 및 유사체, 오자레릭스(D-63153; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 295350-45-7) 및 유사체, 아바레릭스(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 183552-38-7) 및 유사체, 데가레릭스(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 214766-78-6) 및 유사체, 데티레릭스(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 89662-30-6) 및 유사체, 가니레릭스(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 124904-93-4) 및 유사체, 이투레릭스/안티드(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 112568-12-4) 및 유사체, GPR54 수용체 리간드, 키스펩틴 및 유사체, 키스펩틴-10/Kp-10(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 374675-21-5) 및 유사체, 키스펩틴-13/Kp-13(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 374675-18-0) 및 유사체, 메타스틴(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 388138-21-4) 및 유사체, 뉴로키닌 수용체 리간드, NK1/NKA 수용체 리간드, NK2/NKB 수용체 리간드, NK3 수용체 리간드, 물질 P (H-Arg-Pro-Lys-Pro-Gln-Gln-Phe-Phe-Gly-Leu-Met-NH2; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 33507-63-0) 및 유사체, H-Asp-Ser-Phe-Val-Gly-Leu-Nle-NH2 및 유사 체, [Sar9,Met(O2)11]-물질 P 및 유사체, [Nle10]-뉴로키닌 A(4-10) 및 유사체, [MePhe7]-뉴로키닌 B 및 유사체, [베타-Ala8]- 뉴로키닌 A(4-10) 및 유사체, 브라디키닌 수용체 리간드, B1 수용체 리간드, B2 수용체 리간드, 브라디키닌(H-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Phe-Arg-OH; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 58-82-2) 및 유사체, 데스Arg9[Leu8]-브라디키닌 및 유사체, 데스Arg9-브라디키닌 및 유사체, Lys데스Arg9-브라디키닌 및 유사체, Lys데스Arg9[Leu8]-브라디키닌 및 유사체, [Hyp3,Tyr(Me)8]-브라디키닌 및 유사체, D-Arg[Hyp3,D-Phe7, Leu8]-브라디키닌 및 유사체, BKM 718(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 259883-69-7) 및 유사체, BKM 822(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 259884-10-1) 및 유사체, BKM 570(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 259885-54-6) 및 유사체, BKM-638(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 259885-81-9) 및 유사체, GHS 수용체 리간드, 그렐린(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 304853-26-7) 및 유사체, 헥사렐린(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 140703-51-1) 및 유사체, GHRP-1(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 141925-59-9) 및 유사체, GHRP-2(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 158861-67-7) 및 유사체, GHRP-6(His-D-Trp-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 87616-84-0) 및 유사체, D-Lys3-GHRP-6 및 유사체, EP-1572(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 381231-18-1) 및 유사체, 데스-옥타노일 그렐린 및 유사체, 릴렉신 수용체 리간드, LGR7 수용체 리간드, LGR8 수용체 리간드, 릴렉신(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 9002-69-1) 및 유사체, 인슐린-유사(like)3 펩티드(INSL3; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 166515-61-3) 및 유사체, 글루카곤-유사 펩티드1 수용체 리간드, 글루카곤 수용체 리간드, 글루카곤 유사 펩티드-1(GLP-1; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 89750-14-1) 및 유사체, 글루카곤 유사 펩티드-2(GLP-2; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 116469-36-4) 및 유사체, 콜레시스토키닌 수용체 리간드, CCK1/CCKA 수용체 리간드, CCK2/CCKB 수용체 리간드, CCKC 수용체 리간드, 콜레시스토키닌(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 9011-97-6) 및 유사체, 뉴로펩티드Y(NPY) 수용체 리간드, NPY1 수용체 리간드, NPY2 수용체 리간드, NPY3 수용체 리간드, 뉴로펩티드Y(NPY; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 82785-45-3) 및 유사체, [Leu31,Pro34]NPY 및 유사체, NPY-(13-36) 및 유사체, 펩티드 yy(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 106388-42-5) 및 유사체, 엔도텔린 수용체 리간드, ETA 수용체 리간드, ETB 수용체 리간드, 엔도텔린1(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 123626-67-5) 및 유사체, 엔도텔린2(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 122879-69-0) 및 유사체, 엔도텔린3(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 125692-40-2) 및 유사체, 혈관작용성 장 펩티드 수용체(VPAC1, VIP1) 리간드, VPAC2/VIP2 수용체 리간드, PAC1/PACAP 수용체 리간드, PACAP(1-27)(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 137061-48-4) 및 유사체, PACAP(1-38)(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 137061-48-4) 및 유사체, PACAP(6-27)(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 137061-48-4) 및 유사체, PACAP(6-38)(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 137061-48-4) 및 유사체, 혈관작용성 장 폴리펩티드(VIP)(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 37221-79-7) 및 유사체, VIP(6-28)(케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 37221-79-7) 및 유사체, [(Ac-His1,D-Phe2,Lys15,Arg16,Leu27)-VIP(1-7)-GRF(8-27)] 및 유사체, [Lys1, Pro2,5,Arg3,4,Tyr6]-VIP 및 유사체, VEGF 수용체 리간드, NP-1 수용체 리간드, 뉴로필린-1 수용체 리간드, 혈관내피 성장인자(VEGF; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 127464-60-2) 및 유사체, 섬유모세포 성장인자 수용체 리간드, 섬유모세포 성장인자(FGF; 케미칼 앱스트렉트 서비시즈 레지스트리 넘버 62031-54-3) 및 유사체"로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택되고, 바람직하게는; "팔량체 펩티드, 구량체 펩티드, 십량체 펩티드, 황체화호르몬 분비 호르몬 (LHRH), [D-Lys6]-LHRH, LHRH 유사체, LHRH 작용제, 트립토렐린([D-Trp6]-LHRH), LHRH 길항제, 봄베신, 봄베신 유사체, 봄베신 길항제, 성장억제 호르몬, 성장억제 호르몬 유사체, 혈청 알부민, 인간 혈청 알부민(HSA)"으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 화학식 I의 화합물.
  6. 제1항 내지 제5항 중의 어느 한 항에 있어서, 링커 B1 및 B2가 동일하고 세포결합 물질 C1 및 C2가 동일한 화학식 I의 화합물.
  7. 제1항 내지 제5항 중의 어느 한 항에 있어서, 링커 B2 및 세포결합 분자 C2가 존재하지 않는 화학식 Ⅳ의 화합물.
    화학식 Ⅳ
    C1-B1-A
  8. 제1항 내지 제7항 중의 어느 한 항에 있어서,
    A는 화학식 III의 디소라졸 잔기이고,
    Ri0, Rj0, Rkp, Rmp, R28, R30, R31, R32, R33, R34, R35, R36, R38, R40, R41, R42, R43, R44는 수소이며,
    Rlp, Rnp는 함께 이중결합을 형성하거나 "수소, 알콕실"로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택되고,
    R27, R29는 함께 이중결합을 형성하거나 에폭시드(옥시란)을 형성하고,
    R37, R39는 함께 이중결합을 형성하거나 에폭시드(옥시란)을 형성하고,
    R25, R26은 "알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-알킬, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 아릴-알킬설포닐, 할로겐, -F, -Cl, -Br, -I, -N3, -NO2, =0, =S, =S(0)2, 하이드록실, 카보닐, 아세틸, 카복실, 카복실에스테르, 아미드, 카보네이트, 카바메이트, 알파-아미노산 잔기, 베타-아미노산 잔기, 알콕실, 아미노, 이미노, 하이드록실아미노, 모노-알킬아미노, 디-알킬아미노, 하이드라지닐, 시아노, 알킬-시아노, 설프하이드릴, 디설피딜알킬 및/또는 알킬-설피딜"로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 알킬 그룹에서 임의로 치환된 "알킬"로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택되고,
    B1 및/또는 B2는 "디탄소산 잔기 링커, 석시닐, 글루타릴"로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택되고,
    C1 및/또는 C2는 "LHRH, [D-Lys6]-LHRH, 성장억제 호르몬, 성장억제 호르몬 유사체, 인간 혈청 알부민(HSA)"으로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택되고,
    o는 1 또는 2이고,
    p는 1 또는 2인 화합물.
  9. 제1항 내지 제8항 중의 어느 한 항에 있어서,
    n 또는 o는 1이고,
    m 또는 p는 1인 화합물.
  10. 제1항 내지 제8항 중의 어느 한 항에 있어서,
    n 또는 o는 2이고,
    m 또는 p는 2인 화합물.
  11. 제1항 내지 제10항 중의 어느 한 항에 있어서,
    " 디소라졸 A1 - 석시닐 -[D- Lys 6 ] LHRH " ( 위치이성질체 화합물 11 및 12):
    Figure 112009020722141-PCT00064
    " 디소라졸 E1 - 석시닐 -[D- Lys 6 ] LHRH" ( 위치이성질체 화합물 13 및 14):
    Figure 112009020722141-PCT00065
    " 디소라졸 A1 - ( 석시닐 -[D- Lys 6 ] LHRH ) 2 " (화합물 15):
    Figure 112009020722141-PCT00066
    " 디소라졸 Z - 석시닐 -[D- Lys 6 ] LHRH" (화합물 16):
    Figure 112009020722141-PCT00067
    " 디소라졸 Z - ( 글루타릴 -[D- Lys 6 ] LHRH ) 2 " (화합물 17):
    Figure 112009020722141-PCT00068
    " 디소라졸 Z - 석시닐 -성장억제 호르몬" (화합물 18):
    Figure 112009020722141-PCT00069
    로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 화합물
  12. 화학식 V의 디소라졸 화합물.
    화학식 V
    Figure 112009020722141-PCT00070
    상기 화학식 V에서,
    Zan, Zbn, Zcn, Zdn, Zem, Zfm, Zgm, Zhm, Z1, Z2, Z3, Z4, Z5, Z6, Z7, Z8, Z9, Z10, Z11, Z12, Z13, Z14, Z15, Z16, Z17, Z18, Z19, Z20, Z21, Z22, Z23, Z24는 "수소, 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-알킬, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 아릴-알킬설포닐, 할로겐, 하이드록실, 카보닐, 아세틸, 카복실, 카복실에스테르, 아미드, 카보네이트, 카바메이트, 알파-아미노산 잔기, 베타-아미노산 잔기, 알콕실, 아미노, 이미노, 하이드록실-아미노, 모노-알킬아미노, 디-알킬아미노, 하이드라지닐, 시아노, 알킬-시아노, 설프하이드릴, 디설피딜알킬 및/또는 알킬-설피딜"로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택되고; 상기 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-알킬, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 아릴-알킬설포닐, 카보닐, 아세틸, 카복실, 카복실에스테르, 아미드, 카보네이트, 카바메이트, 알콕실, 모노-알 킬아미노, 디-알킬아미노, 알킬-시아노, 디설피딜알킬 및/또는 알킬-설피딜 그룹은 "알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-알킬, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 아릴-알킬설포닐, 할로겐, -F, -Cl, -Br, -I, -N3, -NO2, =0, =S, =S(O)2, 하이드록실, 카보닐, 아세틸, 카복실, 카복실에스테르, -C(O)OH, -C(O)NH2, 아미드, 카보네이트, 카바메이트, 알파-아미노산 잔기, 베타-아미노산 잔기, 알콕실, 아미노, 이미노, 하이드록실아미노, 모노-알킬아미노, 디-알킬아미노, 하이드라지닐, 시아노, 알킬-시아노, 설프하이드릴, 디설피딜알킬 및/또는 알킬-설피딜"로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 임의로 치환되고,
    단, 라디칼 Zan, Zbn, Zcn, Zdn, Zem, Zfm, Zgm, Zhm, Z1, Z2, Z3, Z4, Z5, Z6, Z7, Z8, Z9, Z10, Z11, Z12, Z13, Z14, Z15, Z16, Z17, Z18, Z19, Z20, Z21, Z22, Z23, Z24 중의 적어도 하나는 "카복실에스테르, 아미드, 카보네이트, 카바메이트, 알파-아미노산 잔기, 베타-아미노산 잔기"로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택 되며,
    단, 아세틸은 카복실에스테르로부터 배제되며,
    임의로, 라디칼 Zan, Zbn, Zcn, Zdn, Zem, Zfm, Zgm, Zhm, Z1, Z2, Z3, Z4, Z5, Z6, Z7, Z8, Z9, Z10, Z11, Z12, Z13, Z14, Z15, Z16, Z17, Z18, Z19, Z20, Z21, Z22, Z23, Z24 중의 임의의 인접한 두 개의 라디칼 Z는 이중결합을 형성하기 위해 원자 결합을 형성할 수 있거나 상기 두 개의 라디칼 Z는 에폭시드(옥시란), 아지 란(아지리딘), 알킬-, 사이클로알킬-, 사이클로알킬-알킬-, 헤테로아릴-, 아릴-알킬-, 헤테로아릴-알킬-, 헤테로사이클릴- 및/또는 헤테로사이클릴-알킬-치환된 아지란(아지리딘), 티이란 및/또는 티이란-S-옥시드 그룹을 형성할 수 있고,
    n은 0, 1, 2, 3이고,
    m은 0, 1, 2, 3이다.
  13. 제12항에 있어서, 화학식 VI의 디소라졸 화합물.
    화학식 VI
    Figure 112009020722141-PCT00071
    상기 화학식 VI에서,
    Zi0, Zj0, Zkp, Zlp, Zmp, Znp, Z25, Z26, Z27, Z28, Z29, Z30, Z31 , Z32, Z33, Z34, Z35, Z36, Z37, Z38, Z39, Z40, Z41, Z42, Z43, Z44는 "수소, 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-알킬, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 아릴-알킬설포닐, 할로겐, 하이드록실, 카보닐, 아세틸, 카복실, 카복실에스테르, 아미드, 카보네이트, 카바메이트, 알파-아미노산 잔기, 베타-아미노산 잔기, 알콕실, 아미노, 이미노, 하이드록실아미노, 모노-알킬아미노, 디-알킬아미노, 하이드라지닐, 시아노, 알킬-시아노, 설프하이드릴, 디설피딜알킬 및/또는 알킬-설피딜"로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택되고; 상기 알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-알킬, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 아릴-알킬설포닐, 카보닐, 아세틸, 카복실, 카복실에스테르, 아미드, 카보네이트, 카바메이트, 알콕실, 모노-알킬아미노, 디-알킬아미노, 알킬-시아노, 디설피딜알킬 및/또는 알킬-설피딜 그룹은 "알킬, 사이클로알킬, 사이클로알킬-알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-알킬, 헤테로아릴-알킬, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴-알킬, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 아릴-알킬설포닐, 할로겐, -F, -Cl, -Br, -I, -N3, -NO2, =0, =S, =S(0)2, 하이드록실, 카보닐, 아세틸, 카복실, 카복실에스테르, -C(O)OH, - C(O)NH2, 아미드, 카보네이트, 카바메이트, 알파-아미노산 잔기, 베타-아미노산 잔기, 알콕실, 아미노, 이미노, 하이드록실아미노, 모노-알킬아미노, 디-알킬아미노, 하이드라지닐, 시아노, 알킬-시아노, 설프하이드릴, 디설피딜알킬 및/또는 알킬-설피딜"로 이루어진 그룹으로부터 서로 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 임의로 치환되고,
    단, 라디칼 Zi0, Zj0, Zkp, Zlp, Zmp, Znp, Z25, Z26, Z27, Z28, Z29, Z30, Z31, Z32, Z33, Z34, Z35, Z36, Z37, Z38, Z39, Z40, Z41, Z42, Z43, Z44 중의 적 어도 하나는 "카복실에스테르, 아미드, 카보네이트, 카바메이트, 알파-아미노산 잔기, 베타-아미노산 잔기로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택되고,
    단, 아세틸은 카복실에스테르로부터 배제되며,
    임의로, 라디칼 Zi0, Zj0, Zkp, Zlp, Zmp, Znp, Z25, Z26, Z27, Z28, Z29, Z30, Z31, Z32, Z33, Z34, Z35, Z36, Z37, Z38, Z39, Z40, Z41, Z42, Z43, Z44 중의 임의의 인접한 두 개의 라디칼 Z는 이중결합을 형성하기 위해 원자 결합을 형성할 수 있거나 상기 두 개의 라디칼 Z는 에폭시드(옥시란), 아지란(아지리딘), 알킬-, 사이클로알킬-, 사이클로알킬-알킬-, 헤테로아릴-, 아릴-알킬-, 헤테로아릴-알킬-, 헤테로사이클릴- 및/또는 헤테로사이클릴-알킬-치환된 아지란(아지리딘), 티이란 및/또는 티이란-S-옥시드 그룹을 형성할 수 있고,
    o는 0, 1, 2, 3이고,
    p는 0, 1, 2, 3이다.
  14. 제12항 또는 제13에 있어서,
    n 또는 o는 1이고,
    m 또는 p는 1인 화합물.
  15. 제12항 또는 제13항에 있어서,
    n 또는 o는 2이고,
    m 또는 p는 2인 화합물.
  16. "위치이성질체 화합물 1 및 2:
    Figure 112009020722141-PCT00072
    화합물 3:
    Figure 112009020722141-PCT00073
    화합물 4:
    Figure 112009020722141-PCT00074
    위치이성질체 화합물 5 및 6:
    Figure 112009020722141-PCT00075
    화합물 7:
    Figure 112009020722141-PCT00076
    화합물 9:
    Figure 112009020722141-PCT00077
    화합물 10:
    Figure 112009020722141-PCT00078
    화합물 19:
    Figure 112009020722141-PCT00079
    화합물 20:
    Figure 112009020722141-PCT00080
    화합물 21:
    Figure 112009020722141-PCT00081
    "
    로 이루어진 그룹으로부터 선택된 디소라졸 유도체.
  17. 제1항 내지 제16항 중의 어느 한 항에서 청구된 화합물의 제조방법.
  18. a) 디소라졸 화합물을 링커, 바람직하게는 링커 무수물과 반응시켜 일관능성 및/또는 이관능성 디소라졸-링커 잔기를 형성하는 단계,
    b) 임의로, 반응 유리체 및 부산물로부터 상기 일관능성 및/또는 이관능성 디소라졸-링커 잔기를 분리(정제)하는 단계,
    c) 상기 임의로 분리된(정제된) 일관능화 및/또는 이관능화 디소라졸-링커 잔기를 세포결합 분자와 커플링(coupling)시켜서 화학식 I, C1-B1-A-B2-C2 및/또는 화학식 Ⅳ, C1-B1-A의 디소라졸 접합체를 형성하는 단계,
    d) 임의로, 반응 유리체 및 부산물로부터 화학식 I, C1-B1-A-B2-C2 및/또는 화학식 Ⅳ, C1-B1-A의 디소라졸 접합체의 분리(정제)하는 단계를 포함하는, 제1항 내지 제11항 중의 어는 한 항에서 청구된 디소라졸 화합물의 제조방법.
  19. 제1항 내지 제16항 중의 어는 한 항에서 청구된 적어도 하나의 화합물을 약리학적 활성량으로 포함하는 약제약적 조성물.
  20. 제19항에 있어서, 적어도 하나의 화합물이 환자의 체중 kg 당 0.0001mg 내지 100mg의 단위 용량으로 존재하는, 약제약적 조성물.
  21. 제19항 또는 제20항에 있어서, 조성물이 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 담체 및/또는 부형제를 추가로 포함하는, 약제학적 조성물.
  22. 제19항 내지 제21항 중의 어느 한 항에 있어서, 조성물이 적어도 하나의 추가의 약리학적 활성 물질을 포함하는, 약제학적 조성물.
  23. 제22항에 있어서, 추가의 약리학적 활성 물질이,
    "DNA 토포아이소머라제 I 및/또는 Ⅱ 억제제, DNA 인터칼레이터(intercalator), 알킬화제, 미세관 불안정화제(microtuble destabilisator), 호르몬- 및/또는 성장-인자-수용체-작용제 및/또는 -길항제, 신호 전달 억제제, 성장 인자 및 이의 수용체에 대한 항체들, 키나제 억제제, 항대사물질"로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 약제학적 조성물.
  24. 제22항 또는 제23항에 있어서, 추가의 약리학적 활성 물질이, "악티노마이신 D, 아미노글루테티미드, 아스파라기나아제, 아바스틴, 아자티오프린, BCNU(카무스틴), 블레오마이신, 부설판, 카보플라틴, CCNU(로무스틴), 클로람부실, 시스플라틴, 콜라스파제, 사이클로포스파미드, 사이타라빈, 닥티노마이신, 다우노루비신, 디에틸스틸베스트롤, 도세탁셀, 독소루비신(아드리아마이신), DTIC(다카바신), 에피루비신, 에포틸론, 어비툭스, 에리트로하이드록시노닐아데닌, 에티닐에스트라디올, 에토포사이드, 플루다라빈 포스페이트, 플루옥시메스테론, 플루타미드, 젬시타빈 글리벡/글라이벡(gleevec/glivec), 허셉틴, 헥사메틸멜라민, 히드록수레아, 하이드록시프로게스테론 카프로에이트, 이다루비신, 이포스파미드, 인터페론, 이레사, 이리노테칸, L-아스파라기나제, 류코보린, 메클로레타민, 메드록시프로게스테론 아세테이트, 메게스트롤 아세테이트, 멜팔란, 메스나, 메토트렉세이트, 미토마이신 C, 미토탄, 미토크산트론, N-포스포노아세틸-L-아스파테이트(PALA), 옥살리플라틴, 파클리탁셀, 펜토스타틴, 플리카마이신, 프레드니솔론, 프레드니손, 프로카바진, 랄록시펜, 라파마이신, 세무스틴, 소라페니브, 스트렙토조신, 타목시펜, 타세바, 택소테어, 테니포시드, 테스토스테론 프로피오네이트, 티오구아닌, 티오테파, 토포테칸, 트리메틸멜라민, 우리딘, 빈블라스틴, 빈크리스틴, 빈데신, 비노렐빈, 2',2'-디플루오로데옥시사이티딘, 5-플루오로데옥시우리딘 모노포스페이트, 5-아자사이티딘 클라드리빈, 5-플루오로데옥시우리딘, 5-플루오로우라실(5-FU), 6-머캅토푸린"으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 약제학적 조성물.
  25. 약제의 제조를 위한 제1항 내지 제16항 중의 어느 한 항에서 청구된 화합물 의 용도.
  26. "급성 백혈병, 샘암종, 기저 세포암, 양성 종양, 방광암, 대장암, 뇌종양, 유방암, 기관지암종, 유암종들, 암종들, 자궁경부암, 자궁경부암종, 만성 백혈병, 결장암, 결장암종, 결장직장암, 결합조직암, 자궁체부암종, 자궁내막암, 식도암, 유잉-육종(Ewing-Sarcoma), 가스트린종, 교모세포종, 신경아교종, 부인과 종양들, 뇌 및/또는 목암, 간모세포종, 간암, 증식증, 과증식병, 안구 흑색종, 카포시-육종, 후두암종, 후두암, 레이모요마(leimoyoma), 백혈병, 간종양, 폐암, 비소세포 폐암, 림프종, 악성 종양, 유방암종, 수모세포종, 흑색종, 다발골수종, 신장모세포종, 신경모세포종, 신경내분비 종양, 골육종, 난소암, 췌장 종양, 전립선암, 전립선암종, 신장암, 신장세포암종, 망막모세포종, 간상 종양, 육종, 피부암, 연부 육종, 고형종양, 스피날리오마(spinalioma), 위암, 고환암, 흉선종, 갑상선암, 뇌 및/또는 신경계에서 시작되는 종양 및/또는 뇌척수막, 비뇨기암 및/또는 자궁암"의 치료 및/또는 예방용 약제를 제조하기 위한, 제1항 내지 제15항 중의 어느 한 항에서 청구된 화합물의 용도.
  27. 제25항 또는 제26항에 있어서, 약제가, 적어도 하나의 추가의 약제학적 활성 물질을 추가로 함유하는 용도.
  28. 제25항 내지 제27항 중의 어느 한 항에 있어서, 약제가, 적어도 하나의 추가 의 약리학적 활성 물질로 치료하기 전 및/또는 치료하는 중 및/또는 치료한 후에 적용되는 용도.
  29. 제27항 또는 제28항에 있어서, 추가의 약리학적 활성물질이
    "DNA 토포아이소머라제 I 및/또는 Ⅱ 억제제, DNA 인터칼레이터, 알킬화제, 미세관 불안정화제, 호르몬- 및/또는 성장-인자-수용체-작용제 및/또는 -길항제, 신호 전달 억제제, 성장 인자 및 이의 수용체에 대한 항체들, 키나제 억제제, 항대사물질"로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 용도.
  30. 제27항 내지 제29항 중의 어느 한 항에 있어서, 추가의 약리학적 활성물질이 "악티노마이신 D, 아미노글루테티미드, 아스파라기나아제, 아바스틴, 아자티오프린, BCNU(카무스틴), 블레오마이신, 부설판, 카보플라틴, CCNU(로무스틴), 클로람부실, 시스플라틴, 콜라스파제, 사이클로포스파미드, 사이타라빈, 닥티노마이신, 다우노루비신, 디에틸스틸베스트롤, 도세탁셀, 독소루비신(아드리아마이신), DTIC(다카바신), 에피루비신, 에포틸론, 어비툭스, 에리트로하이드록시노닐아데닌, 에티닐에스트라디올, 에토포사이드, 플루다라빈 포스페이트, 플루옥시메스테론, 플루타미드, 젬시타빈 글리벡/글라이벡, 허셉틴, 헥사메틸멜라민, 히드록수레아, 하이드록시프로게스테론 카프로에이트, 이다루비신, 이포스파미드, 인터페론, 이레사, 이리노테칸, L-아스파라기나제, 류코보린, 메클로레타민, 메드록시프로게스테론 아세테이트, 메게스트롤 아세테이트, 멜팔란, 메스나, 메토트렉세이트, 미토마 이신 C, 미토탄, 미토크산트론, N-포스포노아세틸-L-아스파테이트(PALA), 옥살리플라틴, 파클리탁셀, 펜토스타틴, 플리카마이신, 프레드니솔론, 프레드니손, 프로카바진, 랄록시펜, 라파마이신, 세무스틴, 소라페니브, 스트렙토조신, 타목시펜, 타세바, 택소테어, 테니포시드, 테스토스테론 프로피오네이트, 티오구아닌, 티오테파, 토포테칸, 트리메틸멜라민, 우리딘, 빈블라스틴, 빈크리스틴, 빈데신, 비노렐빈, 2',2'-디플루오로데옥시사이티딘, 5-플루오로데옥시우리딘 모노포스페이트, 5-아자사이티딘 클라드리빈, 5-플루오로데옥시우리딘, 5-플루오로우라실(5-FU), 6-머캅토푸린"으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 용도.
  31. 제25항 내지 제30항 중의 어느 한 항에 있어서, 약제가 방사선 치료 처리 및/또는 수술전 및/또는 수술중 및/또는 수술후에 투여되는 용도.
  32. 제1항 내지 제16항 중의 어느 한 항에서 청구된 적어도 하나의 화합물의 약리학적 활성량 및 제27항 내지 제30항 중의 어느 한 항에서 청구된 적어도 하나의 추가의 약제학적 활성 물질의 약리학적 활성량을 포함하는 키트(kit).
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