JP2008520557A - ソマトスタチンレセプターのアゴニストおよびアンタゴニスト - Google Patents

Abstract

本発明は、置換β３−Ｐｈｅ−Ｔｒｐ−β３−Ｌｙｓ−β−トリペプチドおよびその誘導体、それらの製造方法、ソマトスタチンレセプターのアゴニスト／アンタゴニストであるこれら化合物を、本発明の化合物によりソマトスタチンレセプター活性、特にソマトスタチンレセプターＳＳｔ_４活性の調節により影響を受け得る障害の処置のための有効成分として含有する医薬品に関する。

Description

本発明は、置換β^３−Ｐｈｅ−Ｔｒｐ−β^３−Ｌｙｓ−β−トリペプチドおよびその誘導体、それらの製造法、ソマトスタチンレセプターのアゴニスト／アンタゴニストであるこれら化合物を、本発明の化合物によりソマトスタチンレセプター活性、特にソマトスタチンレセプターＳＳｔ_４活性の調節により影響を受け得る障害の処置のための有効成分として含有する医薬品に関する。

ソマトスタチン（ＳＲＩＦ）は、Ｇタンパク質共役型レセプターとともに様々な細胞プロセスに影響を与えるホルモンである。ソマトスタチンは通常、テトラデカペプチド型と２８アミノ酸型の２つの主要な環状形態で存在する。ソマトスタチンは細胞増殖に影響を及ぼすこと、また、とりわけカテコールアミン、インスリン、成長ホルモン(growth homon)、グレリン、グルカゴン、ガストリン、セクレチンおよび胆汁などのホルモンおよび神経伝達物質の分泌を阻害することが知られている。ＳＲＩＦのこれらの多様な生物活性は、ＳＲＩＦが低ピコモル域で同じように強く結合する５つの異なるレセプターｓｓｔ_１〜ｓｓｔ_５のファミリーにより媒介される。しかしながら、これら種々のソマトスタチンレセプター間の機能的冗長度はまだ分かっていない。

ソマトスタチンは現在、脳と、消化管、膵臓および肺をはじめとする末梢の双方において、ホルモン／伝達物質の放出調節に主要な役割を果たすと考えられている。結果として、このペプチドは、増殖および恒常性などの全身機能に多面発現作用を有し、種々のメディエーターの分泌に影響を及ぼす。脳においては、例えば、ソマトスタチンは視床下部−下垂体系を調節し、成長ホルモンの放出を遮断する。

ソマトスタチンが分泌を制御する分子機構については、次のように詳細が分かっている。ソマトスタチンは、７ＴＭ Ｇタンパク質共役型レセプターｓｓｔ_１〜ｓｓｔ_５のファミリーのリガンドであり、このｓｓｔ_１〜ｓｓｔ_５はその分布とそれらが共役する経路が異なっている。これらのレセプターはＧタンパク質を介して、アデニル酸シクラーゼ（ＡＣ）およびｃＡＭＰシグナル伝達の阻害、ならびにタンパク質チロシンホスファターゼ、ＰＬＤおよびＰＬＡの活性化をはじめとする、いくつかの経路に影響を及ぼす。これらのレセプターはまた、Ｋ、ＣａおよびＮａチャネル機能ならびに細胞内Ｃａの可動化にも影響を及ぼす。これらの機構により、ソマトスタチンによるホルモン分泌および増殖作用の阻害が可能となる。具体的には、ｓｓｔ_４はＧタンパク質を介して、ｃＡＭＰシグナル伝達を阻害すること、ＰＬＤおよびＰＬＡ２を活性化すること、Ｃａ／Ｈチャネル活性を変更すること、Ｎａ／Ｋ交換体ＮＨＩ１を阻害すること、ならびにＭＡＰＫ経路を活性化するが知られている。これらの経路は、ＧＡＢＡやグルタミン酸塩放出をはじめとするシナプス残渣や顆粒のエキソサイトーシスの阻害、ならびに増殖の促進をもたらす。

ソマトスタチンの多面発現作用を考えると、特定の作用を、できれば特定の組織で選択的に誘導できることが望ましい。ＳＲＩＦレセプターのサブタイプが分子クローニングおよび薬理学によって同定されているが、個々のサブタイプの選択的リガンドが利用可能なのはまだ比較的限られた範囲である。ＳＲＩＦの最初の合成ペプチド類似体、例えば、オクトレオチドは、２以上のレセプターサブタイプと同等の親和性で結合する。しかしながら、最近、Rivier et al. (2003)は、ｓｓｔ_４レセプターに対して高い選択的親和性を有するオクタペプチドが開発された。これらのペプチドのうちあるものは臨床上有用であることが分かり、例えば、先端巨大症(acgromegaly)、膵臓癌および他の胃腸機能障害の処置に指示されている。これらのペプチドソマトスタチンアゴニストのほとんどは、プロテアーゼ分解のためにin vivoでかなり不安定である。さらに、これまでにいくつか報告されているｓｓｔアゴニストの副作用として、胃腸障害およびコレステロール胆石の形成がある。

ラットにおける（ヒトと同様）ｓｓｔ_４発現は脳、消化管および膵臓で見られる。また、ｓｓｔ_４は肺で発現する唯一のソマトスタチンレセプターでもある。脳においては、ｓｓｔ_４がｓｓｔ_２と細胞体樹状突起上に同時局在する皮質で、また、局在がｓｓｔ_２と異なり、ｓｓｔ_２と離れている海馬で、また、視床下部および下垂体で強くはないが広い領域に発現が見られる。これらの各器官においてｓｓｔ_４が果たす特定の役割は知られておらず、他のｓｓｔの存在により複雑なものとなっている。

もっと最近では、サブタイプ選択性を有し、かつ、高いレセプター親和性を有する一連の非ペプチドアゴニストが、５種類の各ヒトＳＲＩＦレセプターサブタイプで報告されている（総説としては、Weckbecker et al. 2003参照）。ＳＲＩＦ類似体を合成する際には、ＳＲＩＦの核残基Ｄ−Ｔｒｐ^８−Ｌｙｓ^９が保存されていることが、完全なレセプター認識および生物活性の絶対必要条件であると考えられている。Grace et al. (2003)が最近行った研究では、このペプチドの主鎖のコンフォメーションはｓｓｔ_４レセプターとの結合には重要ではないが、本質的に重要な残基、すなわち、８番のインドール、９番のアミノアルキル官能基、および効果的なレセプターリガンド結合のためのそれぞれの位置の芳香環からなる側鎖を配向するためのスキャフォールドを形成する。

Liu et al (1998)は、ソマトスタチンのＴｒｐ^８残基を模倣する新規なチオ尿素スキャフォールド、Ｐｈｅ^７を模倣する非複素芳香核、およびＬｙｓ^９残基を模倣する第一級アミンまたは他の基本プローブを利用した非ペプチドソマトスタチン誘導体ＮＮＣ２６−９１００を記載し、その結果、Ｋ_Ｄ＝６ｎＭという親和性を得ている。緑内障の処置に可能性のある治療薬を評価するための研究が現在進行中である。

Souers et al. (2000)は、ｓｓｔ_４レセプターに対して最大Ｋ_Ｄ＝４１ｎＭの親和性を有する９員の複素環式スキャフォールドにコンフォメーション制限を組み込みことによって作製したサブタイプ選択性ソマトスタチンミメティックを記載している。

Hirschmann et al. (2003)は、グルコースに基づくペプチドミメティックアプローチを用い、結合親和性Ｋ_Ｄ＝５３ｎＭと高い水溶性を備えたソマトスタチン類似体を得た。

Rohrer et al. (1998)は、ソマトスタチンファーマコアの分子モデリングにより、コンビナトリアルライブラリーからｓｓｔ_４レセプター選択性化合物を単離した。結合および機能アッセイでは、Ｌ−８０３，０８７がｈｓｓｔ_４レセプターアゴニスト（Ｋ_Ｄ＝０．７ｎＭ）であることが分かった。Ｌ−８０３，０８７は成長ホルモン、インスリンまたはグルカゴンの分泌を阻害しなかった。

生体分子（ペプチド、ヌクレオチドまたはステロイドなど）は体内で寛容性があり、生物標的種に高い親和性を示す場合が多いが、経口バイオアベイラビリティの基準を満たさないことが多い。その意味では、生体分子は低い吸収および浸透性しかないことがうかがえ、創薬の候補としてはあまり魅力がない。さらに、α−アミノ酸に基づくペプチドの最初のタンパク質分解によりin vivo半減期が極めて短くなることもまた、天然型ソマトスタチンの作用の大きな欠点となる。

これらの問題を克服するため、生体分子の類似体、例えば、ｈｓｓｔ_４レセプターに対して高い親和性と選択性を有するβ−ペプチドが開発された(Seebach et al., 2001, Gademann et al., 2001)。しかしながら、これらのβ−ペプチドはそこそこの経口バイオアベイラビリティしか持たない。

よって、本発明の目的は、特に経口投与に関して高いバイオアベイラビリティを有する新規なｓｓｔ_４レセプター結合化合物を提供することであった。驚くことに、α／β^３−テトラペプチドに基づくソマトスタチン類似体の混合物の脂肪酸コンジュゲートが、既知のｓｓｔ_４レセプターアゴニストに比べ、ｓｓｔ_４レセプターに対するより高い親和性と改良された薬理特性、例えば、改良されたバイオアベイラビリティを有することが見出された。本発明の化合物は、ｈｓｓｔ４−レセプターサブタイプ選択性とタンパク質分解に対する耐性とを組み合わせることにより、有望な新規ソマトスタチンアゴニスト種として登場したものである。

本発明は、一般式Ｉ：

［式中、Ｒ^１＝ＣＯＲ^７またはＲ^７であり、Ｒ^７は、直鎖もしくは分枝Ｃ_１−Ｃ_１２アルキル基、直鎖もしくは分枝Ｃ_２−Ｃ_１２アルケニル基、直鎖もしくは分枝Ｃ_２−Ｃ_１２アルキニル基、または飽和／不飽和、芳香族もしくは複素芳香族単環式もしくは多環式基であり、
ここで、前記アルキル、アルケニルまたはアルキニル基は、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ_１−Ｃ_４アルコキシ、カルボキシ、Ｃ_１−Ｃ_４アルコキシカルボニル、アミノ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルアミノ、ジ−（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）アミノ、シアノ、カルボキシアミド、カルボキシ−（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）アミノ、カルボキシ−ジ（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）アミノ、スルホ、スルフィド（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）、スルホキシド（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）、スルホノ（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）、チオまたは飽和、不飽和、芳香族もしくは複素芳香族、単環式もしくは多環式基で一置換または多置換されていてもよく、
ここで、前記環式基は、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ_１−Ｃ_４−アルコキシ、カルボキシＣ_１−Ｃ_４アルコキシカルボニル、アミノ、Ｃ_１−Ｃ_４−アルキルアミノ、ジ（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）アミノ、シアノ、カルボキシアミド、カルボキシ（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）アミド、カルボキシ−ジ（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）アミド、スルホ、スルフィド（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）、スルホキシド（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）、スルホノ（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）、チオ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル、Ｃ_２−Ｃ_４アルケニルまたはＣ_２−Ｃ_４アルキニルで一置換または多置換されていてもよく、
Ｒ^２は水素またはＣ_１−Ｃ_４アルキルであり、
Ｒ^３は水素、または飽和、不飽和、芳香族もしくは複素芳香族、単環式もしくは多環式基で置換されていてもよいＣ_１−Ｃ_４アルキルであり、
Ｒ^４は水素またはＣ_１−Ｃ_４アルキルであり、
Ｒ^５は水素またはＣ_１−Ｃ_４アルキルであり、かつ
Ｒ^６＝（Ｙ）_ｎ（−ＮＲ^８Ｒ^９）_ｍであり、ここで、Ｙは、アミノカルボン酸、特にβ−アミノカルボン酸の残基であり、Ｙは環式基を形成していてもよく、
ｎ＝０または１、
ｍ＝０または１、
Ｒ^８およびＲ^９は独立に水素、直鎖もしくは分枝Ｃ_１−Ｃ_１２アルキル基、直鎖もしくは分枝Ｃ_２−Ｃ_１２アルケニル基、直鎖もしくは分枝Ｃ_２−Ｃ_１２アルキニル(alkenyl)基、または飽和、不飽和、芳香族もしくは複素芳香族単環式もしくは多環式基であり、
ここで、前記アルキル、アルケニルまたはアルキニル基は、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ_１−Ｃ_４アルコキシ、カルボキシ、Ｃ_１−Ｃ_４アルコキシカルボニル、アミノ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルアミノ、ジ−（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）アミノ、シアノ、カルボキシアミド、カルボキシ−（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）アミノ、カルボキシ−ジ（Ｃ_１−Ｃ−_４−アルキル）アミノ、スルホ、スルフィド（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）、スルホキシド（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）、スルホノ（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）、チオまたは飽和、不飽和、芳香族もしくは複素芳香族、単環式もしくは多環式基で一置換または多置換されていてもよく、
ここで、前記環式基は、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ_１−Ｃ_４−アルコキシ、カルボキシＣ_１−Ｃ_４アルコキシカルボニル、アミノ、Ｃ_１−Ｃ_４−アルキルアミノ、ジ（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）アミノ、シアノ、カルボキシアミド、カルボキシ（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）アミド、カルボキシ−ジ（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）アミド、スルホ、スルフィド（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）、スルホキシド（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）、スルホノ（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）、チオ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル、Ｃ_２−Ｃ_４アルケニルまたはＣ_２−Ｃ_４アルキニルで一置換または多置換されていてもよく；
あるいは、Ｒ^８およびＲ^９は一緒に環式基、好ましくは、５員または６員環式基を形成する］
で示される、個々のエナンチオマー、ジアステレオマーもしくはその混合物の形態の、化合物、またはその塩もしくは誘導体に関する。

Ｒ^７が非置換もしくは置換Ｃ_１−Ｃ_１０アルキル残基、または非置換もしくは置換環式基のいずれかである式Ｉの化合物が好ましい。メチル、エチル、ブチル、ノニル、シクロヘキシル、フェニル、エチルフェニルおよびアダマンチルが特に好ましい。

Ｒ^２は好ましくは、水素またはメチルである。Ｒ^３は好ましくは、水素、メチル、フェニルまたはエチルである。好ましくは、Ｒ^４およびＲ^５は独立に水素およびメチル残基である。より好ましくは、Ｒ^４およびＲ^５は水素である。

置換基数ｎは０または１であり得る。ｎ＝１のとき、Ｙは好ましくはβ−アミノ酸残基であり、なお、Ｒ^８は非置換もしくは置換Ｃ_１−Ｃ_１０、特に、Ｃ_２−Ｃ_８アルキル基、または非置換もしくは置換環式基、例えば、ラクトン基を形成していてもよいβ−トレオニン残基もしくはβ−バリン残基またはβ−アミノ酸誘導体、特に、β−アミノ酸アミド、例えば、場合により置換されていてもよいβ−トレオニンアミドもしくはβ−バリンアミドである。

置換基数ｍは好ましくは１であり、すなわち、例えば、上記に示されているようなアミド基として存在する。好ましくは、Ｒ^８およびＲ^９の少なくとも一方は、非置換もしくは置換Ｃ_１−Ｃ_１０、特に、Ｃ_２−Ｃ_８アルキル基、または非置換もしくは置換環式基である。

Ｒ^８はより好ましくは、エチル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、エチルフェニルまたはシクロペンチルである。Ｒ^９が水素以外であるとき、非置換Ｃ_１−Ｃ_２アルキル基、例えば、メチルまたはエチルであるのが好ましい。

本発明の化合物の特定の例としては、好ましくは、Ｒ^１がＣＯＲ^７を表し、Ｒ^６がβ−トレオニンアミドを表す式Ｉの化合物が挙げられる。これらは本発明の式Ｉａ：

（式中、Ｒ_７、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５、Ｒ_８およびＲ_９は上記定義の通りである）
の化合物である。

本発明の化合物のさらなる好ましい例としては、Ｒ^１＝ＣＯＲ^７であって、Ｒ^６がトレオニンラクトンを表す式Ｉの化合物がある。これらは本発明の式１ｂ：

（式中、Ｒ_７、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５は上記定義の通りである）
の化合物である。

本発明の化合物の好ましい例としては、Ｒ^１＝ＣＯＲ^７であって、Ｒ^６がβ−バリン−アミドを表す式Ｉの化合物がある。これらは本発明の式１ｃ：

（式中、Ｒ_７、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５、Ｒ_８およびＲ_９は上記定義の通りである）
の化合物である。

本発明の化合物のさらなる好ましい例としては、Ｒ^１＝ＣＯＲ^７、かつ、Ｒ^６＝ＮＲ^８Ｒ^９である式Ｉの化合物がある。これらは本発明の式１ｄ：

（式中、Ｒ_７、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５、Ｒ_８およびＲ_９は上記定義の通りである）
の化合物である。

本発明はまた、式Ｉの化合物の生理学的に許容される塩および誘導体に関する。

生理学的に許容される塩は、酸を無機または有機塩基で中和することにより常法にて得ることができる。好適な無機酸の例としては、塩酸、硫酸、リン酸または臭化水素酸があり、好適な有機酸の例としては、カルボン酸またはスルホン酸、例えば、酢酸、酒石酸、乳酸、プロピオン酸、グリコール酸、マロン酸、マレイン酸、フマル酸、タンニン酸、コハク酸、アルギン酸、安息香酸、２−フェノキシ安息香酸、２−アセトキシ安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、クエン酸、リンゴ酸、サリチル酸、３−アミノサリチル酸、アスコルビン酸、エンボン酸、ニコチン酸、イソニコチン酸、シュウ酸、アミノ酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、エタン−１，２−ジスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、４−メチルベンゼンスルホン酸またはナフタレン−２−スルホン酸がある。好適な無機塩基の例としては、水酸化ナトリウム溶液、水酸化カリウム溶液、アンモニアがあり、好適な有機塩基としてはアミンがあるが、好ましくは、トリメチルアミン、トリエチルアミンなどの第三級アミン、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン、キノリン、イソキノリン、α−ピコリン、β−ピコリン、γ−ピコリン、キナルジンまたはピリミジンがある。

さらに、式Ｉの化合物の生理学的に許容される塩は、第三級アミノ基を有する誘導体を、それ自体公知の方法で第四級化剤を用いて第四級アンモニウム塩に変換することにより得ることができる。好適な第四級化剤の例としては、ヨウ化メチル、臭化エチルおよび塩化ｎ−プロピルなどのハロゲン化アルキルがあるが、塩化ベンジルまたは臭化２−フェニルエチルなどのハロゲン化アリールアルキルも挙げられる。

本発明はまた、好ましくは、生理条件下で式Ｉの化合物に変換される、例えば、加水分解される、または式Ｉの化合物が生理条件下でそれに代謝される化合物である式Ｉの化合物の誘導体に関する。

本発明はさらに、不斉炭素原子を含む式Ｉの化合物の光学的エナンチオマーまたはジアステレオマーまたは混合物、また、複数の不斉炭素原子が存在する場合には、ジアステレオマー形態にも関する。不斉炭素原子を含み、通常ラセミ化合物として生じる式Ｉの化合物は、それ自体公知の方法で、例えば光学的に活性な酸を用いて光学的に活性な異性体へと分割することができる。しかしながら、最初から光学的に活性な出発物質を使用することもでき、その場合には、対応する光学的に活性な、またはジアステレオマーの化合物が最終生成物として得られる。

本発明の化合物は、治療に使用できる薬理学上重要な特性を有することが分かっている。式Ｉの化合物は単独で使用することもできるし、互いに組み合わせることもできるし、他の有効成分と組み合わせることもできる。

本発明の化合物は、ヒトソマトスタチンレセプター、特に、ｈｓｓｔ_４レセプターに対する高い親和性と高いバイオアベイラビリティを有するβ−ペプチド誘導体である。好ましくは、Ｋ_Ｄは約２μＭ以下、より好ましくは、Ｋ_Ｄは２００ｎＭ以上、最も好ましくは、Ｋ_Ｄは５０ｎＭ以下である。よって、本発明の一態様において、式Ｉの化合物またはその塩は、ｈｓｓｔ_４シグナル伝達の調節が有益である障害の処置に使用することができる。この調節は、式Ｉの化合物に応答した示差的遺伝子発現への作用を含む。これにはカルシウムレギュレーター、ナトリウムチャネル、カルシウムチャネルおよびカリウムチャネル、ＭＡＰキナーゼ、ホスファターゼ、ならびにｃＡＭＰシグナル伝達など、ｓｓｔ_４活性の既知の分子機構／シグナル伝達に関する遺伝子群が含まれる。これらの機構を介してｓｓｔ_４は成長、代謝、ホルモン調節およびホルモン分泌に影響を及ぼす。例えば、ｓｓｔ_４シグナル伝達は、ＭＡＰＫシグナル伝達、ＥＲＫ、ｐ５３およびＲｂおよびホスファターゼを介して増殖に影響を及ぼす(Patel, 1999; Weckbecker et al. 2003)。ｓｓｔ_４レセプターはまた、ｃＡＭＰ／Ｃａ^２＋シグナルの阻害を介して、または、ホスファリパーゼを介するホスフォチジルイノシトールシグナル伝達上のＣａ／Ｋチャネルの調節を介して分泌に影響を及ぼし得る。また、ＶＥＧＦ(Mentelein et al., 2001)およびグルタミン酸塩(Moneta et al., 2002)などの神経伝達物質／ホルモンもｓｓｔ_４活性に関連している。

本発明の化合物のようなｓｓｔ４レセプターアゴニストによって処置可能な障害および疾病の例はＷＯ２００５０８２８４４に報告されており、その教示は出典明示により本明細書の一部とする。このｓｓｔ_４レセプター活性から起こる障害としては、中枢神経系の障害、特に癲癇、記憶・学習障害または注意欠陥障害などの行動障害、および慢性疼痛を含む疼痛が挙げられる。可能性のあるさらなる使用としては、神経変性疾患などの神経疾患、特に、アルツハイマー病、パーキンソン病および多発性硬化症を患う患者の処置がある。

本発明の化合物は、過増殖性障害、特に内分泌および固形腫瘍の処置、例えば、先端巨大症、黒色腫、乳癌、前立腺腺腫および前立腺癌、肺癌、腸癌、皮膚癌ならびに白血病の処置にも同様に使用可能である。

本発明の化合物は、再狭窄などの血管リモデリングに関連する疾患の処置、または慢性移植拒絶症の処置に使用することができる。また、本発明の化合物は、脳動脈瘤および術後血管再狭窄などの術後症状の処置にも使用することができる。本発明の化合物は、創傷の処置、創傷治癒の促進または組織修復にも使用可能である。

本発明の化合物は、下痢、および化学療法誘発性およびＡＩＤＳ関連下痢などの胃腸障害の処置、ならびに急性静脈瘤出血の処置のために使用することができる。本発明の化合物は、関節炎および関節リウマチ、およびリウマチ性脊椎炎などの他の関節障害を含む関節の炎症をはじめとする炎症性障害の処置に使用することができる。また、乾癬、グレーブス病および炎症性腸疾患の処置も可能である。

本発明の化合物の可能性のあるさらなる使用としては、同種異系移植片拒絶の処置がある。また、本発明の化合物は、糖尿病性網膜症および腎症および糖尿病性血管障害の処置に使用することができる。

本発明の化合物は、眼科障害、例えば、加齢性黄斑変性および緑内障、糖尿病性網膜症の処置に使用することができる。また、本発明の化合物は、良性前立腺肥大の処置にも使用可能である。

本発明の化合物はまた、標識して診断、例えば、ＳＲＩＦレセプター発現腫瘍の放射能診断および／または放射線療法、ならびに他の治療には不応性の腫瘍の退縮に使用することができる。

これらの医薬品は、有効量の本発明の化合物またはその塩に加えて通常のアジュバント、担体および添加剤を用いて製造される。有効成分の用量は投与経路、患者の年齢および体重、処置する障害の性質および重篤度および類似の因子によって異なる。一日量は１日１回投与する単回量としても、１日２回以上の用量に分割してもよいが、通常、０．００１〜１００ｍｇである。一日量０．１〜５０ｍｇが特に好ましい。

投与形としては、経口製剤、非経口製剤、静脈製剤、経皮製剤、局所製剤、吸入製剤および鼻腔製剤が好適である。本発明の化合物の局所製剤、吸入製剤および鼻腔製剤が特に好ましい。錠剤、被覆錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、水溶液、水性または油性懸濁液、シロップ剤、溶液または滴剤などの医薬剤形が用いられる。

固形剤形としては、例えば、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、リン酸ナトリウム、ラクトース、デンプン、マンニトール、アルギン酸塩、ゼラチン、グアーガム、ステアリン酸マグネシウムもしくはステアリン酸アルミニウム、メチルセルロース、タルク、コロイドシリカ、シリコーン油、高分子量脂肪酸（ステアリン酸など）、寒天または植物性もしくは動物性油脂、固形高分子量ポリマー（ポリエチレングリコールなど）といった不活性成分および担体を含んでよく、経口投与に好適な製剤は所望により付加的な香味剤および／または甘味剤を含んでもよい。

液体剤形は滅菌可能であり、かつ／または、保存剤、安定剤、湿潤剤、浸透剤、乳化剤、分散剤、可溶化剤、浸透圧制御または緩衝のための塩類、糖類もしくは糖アルコール類、および／または粘度調節剤といった賦形剤を適宜含むことができる。

このような添加剤の例としては、酒石酸バッファーおよびクエン酸バッファー、エタノール、錯化剤（エチレンジアミン四酢酸およびその無毒な塩など）が挙げられる。粘度調節に好適なものとしては、例えば、液体ポリエチレンオキシド、微晶質セルロース、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、デキストランまたはゼラチンなどの高分子量ポリマーがある。固形担体の例としては、デンプン、ラクトース、マンニトール、メチルセルロース、タルク、コロイドシリカ、高分子量脂肪酸（ステアリン酸など）、ゼラチン、寒天、リン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、動物性および植物性脂肪、ポリエチレングリコールなどの固形高分子量ポリマーが挙げられる。

非経口用または局所用の油性懸濁剤は、例えば、液体脂肪酸エステル（各場合、脂肪酸鎖に８〜２２個のＣ原子を有する）、例えば、パルミチン酸、ラウリン酸、トリデシクル酸、マルガリン酸、ステアリン酸、アラキン酸、ミリスチン酸、ベヘン酸、ペンタデシクル酸、リノール酸、エライジン酸、ブラシジン酸、エルシン酸またはオレイン酸などの植物性、合成または半合成油であってよく、これらは例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、ペンタノールもしくはその異性体、グリコールまたはグリセロールなど、１〜６個のＣ原子を有する一価または三価アルコールでエステル化される。このような脂肪酸エステルの例としては、とりわけ、市販のミグリオール、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸イソプロピル、ＰＥＧ６−カプリン酸、飽和脂肪アルコールのカプリル酸／カプリン酸エステル、ポリオキシエチレングリセロールトリオレエート、オレイン酸エチル、人工カモ(duch)尾腺脂肪などの蝋状脂肪酸エステル、ココ脂肪酸、イソプロピルエステル、オレイン酸オレイル、オレイン酸デシル、酪酸エチル、フタル酸ジブチル、アジピン酸ジイソプロピル、ポリオール脂肪酸エステルが挙げられる。また、様々な粘度のシリコーン油、またはイソトリデシルアルコール、２−オクチルドデカノール、セチルステアリルアルコールもしくはオレイルアルコールなどの脂肪アルコール、例えばオレイン酸などの脂肪酸も好適である。また、ヒマシ油、アーモンド油、オリーブ油、ゴマ油、綿実油、落花生油または大豆油などの植物油も使用可能である。

好適な溶媒、ゲル形成剤および可溶化剤は、水または水混和性溶媒である。好適な例としては、例えば、エタノールまたはイソプロピルアルコール、ベンジルアルコール、２−オクチルドデカノールなどのアルコール類、ポリエチレングリコール類、フタル酸塩、アジピン酸塩、プロピレングリコール(gylcol)、グリセロール、ジ−もしくはトリプロピレングリコール(gylcol)、ワックス類、メチルセロソルブ、セロソルブ、エステル類、モルホリン類、ジオキサン、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、シクロヘキサニン(cyclohexanine)などがある。

使用可能なフィルム形成剤としては、水にも有機溶媒にも溶解または膨潤可能なセルロースエーテル、例えばヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロースまたは可溶性デンプンなどがある。

ゲル形成剤およびフィルム形成剤の併用型も可能である。この目的では、特に、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリル酸、ポリメチルアクリル酸およびその塩、アミロペクチンセミグリコール酸ナトリウム、アルギン酸もしくはナトリウム塩としてのプロピレングリコールアルギン酸塩、アラビアガム、キサンタンガム、グアーガムまたはカラギーナンなどのイオン性高分子が使用される。

使用可能なさらなる配合補助剤としては、グリセロール、様々な粘度のパラフィン、トリエタノールアミン、コラーゲン、アラントイン、ノバンチソル酸(novantisolic acid) がある。

また、調剤に、例えば、ラウリル硫酸ナトリウム、硫酸脂肪アルコールエーテル、ジ−Ｎａ−Ｎ−ラウリル−β−イミノジプロピネート、ポリエトキシル化ヒマシ油またはモノオレイン酸ソルビタン、モノステアリン酸ソルビタン、ポリソルベート（例えば、Ｔｗｅｅｎ）、セチルアルコール、レシチン、モノステアリン酸グリセリル、ステアリン酸ポリオキシエチレン、アルキルフェノールポリグリコールエーテル、塩化セチルトリメチルアンモニウムまたはモノ／ジアルキルポリグリコールエーテルオルトリン酸モノエタノールアミン塩などの界面活性剤、乳化剤または湿潤剤の使用が必要な場合もある。

モンモリロナイトもしくはコロイドシリカなど、エマルションを安定化させるための安定剤、または抗酸化剤、例えば、トコフェロールもしくはブチル化ヒドロキシアニソールなど、有効物質の分解を防ぐための安定剤、またはｐ−ヒドロキシ安息香酸エステルなどの保存剤も同様に、所望の処方物を調製するために適宜必要な場合がある。

非経口投与用製剤は、例えばアンプルまたはバイアルなどの個別の単位投与形で提供してもよい。有効成分の溶液、好ましくは水溶液、特に等張溶液を用いるのが好ましいが、懸濁液もまた好ましい。これらの注射形は最終製品として製造することもできるし、あるいは有効化合物、使用直前に、例えば凍結乾燥物をさらなる固形担体ととともに所望の溶媒または沈殿防止剤と適宜混合することによって調製することもできる。

鼻腔製剤は水性もしくは油性溶液、または水性もしくは油性懸濁液の形態であってよい。鼻腔製剤はまた、使用前に好適な溶媒または沈殿防止剤を用いて調製する凍結乾燥物の形態であってもよい。

これらの製品の製造、瓶詰めおよび密封は通常の抗菌条件および無菌条件下で行う。

本発明はさらに、本発明の化合物の製造方法に関する（図１）。

本発明によれば、一般式Ｉの化合物は、従前に示したＲ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８およびＲ^９の定義に従い、その合成プロトコールが、同じ化学試薬を用いる３つの効果的なペプチドカップリング工程と１，４−ジオキサン中ＨＣｌを用いる３つのＢｏｃ−開裂反応を含むようにして製造される。この５環ラクトンは強いカルボン酸活性化剤で処理しても開環に極めて安定であることが示されているので、この合成素子は全てのペプチドカップリング工程で保護基を用いずに使用することができる。この成長中のペプチド鎖によって、溶解度が主な問題点となる。最終的なＮ−Ｂｏｃ保護α／β^３−テトラペプチド混合物は、ペプチド化学に用いられる標準的な溶媒群に潜在的に不溶であることが分かっている。限られたものではあるが、ジクロロメタン中のスキャフォールド分子の部分的溶解性で、液体／液体抽出による中間体化合物の精製には十分である。精製は最終的には、完全にプロトン化された生成物分子（弱塩基）が水相と有機相の間で分液されないように、クエン酸水溶液で確立した弱酸性条件下での抽出によって達成される。

並行合成法で脂肪酸類似体を用い（α／β^３）−テトラペプチド混合スキャフォールドのＮ末端を誘導体化した後、Ｃｂｚ−保護基の脱保護を、酸性条件下、ＤＭＡ中での水素化分解（Ｐｄ／活性炭）によって行った。溶媒にトリフルオロ酢酸を添加すると、この水素化過程が加速される。さらに、このようにして生じた第一級アミンはすぐにプロトン化されるので、隣接するＣ末端５環ラクトンへの（あり得る）求核攻撃が阻害された。よって、大環状ラクタムの形成は防ぐことができた。その後、最終生成物をＲＰ−クロマトグラフィーにより精製したところ、ＨＰＬＣ、ＨＲ−ＭＳ、ＭＳ、ＬＣ−ＭＳ、１Ｄ−および２Ｄ−ＮＭＲ分光法で測定して９５％を超える純度が得られた。

Ｃ末端５環ラクトンは、それらに対応する開鎖アミド類似体と交換することができる。これは脂肪酸誘導体化（α／β^３）−テトラペプチドをメタノール中、アンモニアと反応させることにより果たせた。テトラペプチドを含むこれらのβ−アミノ酸の折りたたみおよび独自の構造特性のため、最初の反応時間は２４時間（ノナノイル誘導体、表１の化合物１６および１７）〜３６日間（シクロヘキシル誘導体、化合物２６）の範囲である。しかしながら、この反応時間は、テトラペプチドを含むラクトンをＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）に溶解した後、メタノール中アンモニアを添加することにより加速化することができる。変換率は一般に１００％近く（＞９８％）であり、生じるＣ末端アミドが高純度（ＲＰ−ＨＰＬＣにより測定すれば＞９５％）であるため、さらに精製する必要がない。

次に続く一連のペプチドでは、完全に保護されたＣ末端β^３−アミノ酸（Ｎ_α−Ｂｏｃ−Ｎ_ω−Ｚ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓおよびＢｏｃ−（Ｒ）−β^３−ロイシン）を、カルボニルジイミダゾール活性化化学を用いて反応させた後、脱保護、次いでカップリングを行うことにより、このペプチドに第一級または第二級アミン構成単位を導入する。

３個のアミノ酸（２個のβ^３と１個のα）だけからなる二重コンジュゲート生体分子（式Ｉｄ、Ｒ^６＝ＮＲ^８Ｒ^９）は、有機溶媒中ではるかに良好な溶解度を示し、分離の難しいエマルションを回避することにより、後処理手順を加速化することができる。同じことがアミド主鎖においてＮ−アルキル化基でキャップする場合のβ−ペプチドにおいても見られる。

化合物の生物活性
得られたペプチドを、チャイニーズハムスター肺繊維芽細胞（ＣＣＬ３９）細胞で発現したヒトＳＲＩＦレセプターとの結合に対する親和性に関して試験した。これを、放射性リガンド結合アッセイ、すなわち、特異的に結合した放射性リガンド（［^１２５Ｉ］ＬＴＴ−ＳＲＩＦ_２８）の５０％を置換するのに必要な物質の濃度を測定する置換実験にて行う。特異的結合は、レセプター特異的放射性リガンドの全結合から非標識ＳＲＩＦ−１４の存在下で結合した放射性リガンドの量（１００ｎＭ、非特異的結合）を差し引いたものとして測定される。

表１
スキャフォールドＩに基づく全供試化合物の化合物番号対照表

表２
スキャフォールドＩに基づく全供試化合物の化合物番号対照表

表１および２に示された化合物は、クローン化ｈｓｓｔ４レセプターに対して中〜高度の結合親和性および選択性を有する。表１の第１行と第２行の化合物群については、個々のＫ_Ｄ値として示される活性は、より強力なＣ末端（Ｒ）−４−アミノ−５−（Ｒ）−メチル−ジヒドロ−フラン−２−オン（β−ホモトレオニン−ラクトン）分子では６０ｎＭ（化合物７〜９）〜１２０２ｎＭ（化合物５）の範囲であり、Ｃ末端β−ホモトレオニン−アミド誘導体では１７０ｎＭ（化合物１〜３）〜６１６６ｎＭ（化合物１８）の範囲である。図１から分かるように、選択性は種々の化合物群内で様々である。結合親和性が低いと、結果的にレセプターサブタイプ選択性も低くなる。しかしながら、ほとんど全ての場合でｈｓｓｔ４レセプターに対して最高の結合親和性が見られた。

図面の簡単な説明
図１ ペプチド類似体のｈｓｓｔ４の選択性を証明する、最初の化合物群の結合データを示す。
図２ 確立された二重コンジュゲート生体分子の構造−活性関係を示す。Ｒ_１およびＲ_２位に関しては表１を参照。
図３ 最良の親油化位置の生物学的スクリーニングを示す。
図４ Ｃ末端修飾化合物の結合親和性と選択性を示す。
図５ 確立された二重コンジュゲート生体分子の構造−活性関係を示す。
図６ Ｃ末端Ｎ−メチル化化合物に対する結合親和性を示す。
図７ ＲＰ−クロマトグラフィー保持時間とＣｌｏｇＰ値との相関を示す。
図８ ＲＰ−クロマトグラフィー保持時間とＨＴ−ＬｏｇＰ ｏ／ｗ値との相関を示す。
図９ ＨＴ−ｌｏｇＰ ｏ／ｗとＣｌｏｇ Ｐ値との相関を示す。
図１０ ｐＨ６．８で測定したハイスループット溶解度データＳ_ｗ(Wang-J et al, 2000, Linpinsky et al., 1997)を示す。
図１１ ｐＨ６．８で測定したハイスループット透過性データｌｏｇ Ｐ_ｅ（Ｐ_６はｃｍ／ｓ）を示す。

より強力なＣ末端β−ホモトレオニン−ラクトンのコレクション（表１の第２行参照）内のＮ−Ｍｅ−インドール修飾（Ｒ）−トリプトファン（スキャフォールドＩにおいてＲ^４＝Ｍｅ）を（Ｒ）−トリプトファンに置き換えると、ｈｓｓｔ４結合親和性が低下したリガンドとなる。これらの化合物（２０、１９および２１）の効力はどうにか、β−ホモトレオニン−ラクトンの効力とβ−ホモトレオニン−アミドの効力との間に収まり（図３の薄黄色の円柱参照）Ｋ_Ｄ値は７０８ｎＭ（化合物１９）〜２９５１ｎＭ（化合物２０）である。このアプローチでは、膜透過性と溶解度に予測される有意な変化は見られない。

β−ホモトレオニンアミドの代わりにＣ末端修飾β−ロイシン−メチル−フェネチル−アミド（表１の化合物２５、２７および２３）またはβ−ロイシン−ジエチル−アミド（表１の化合物２２および２４）を有する延長型の類似体は、ｈｓｓｔ４レセプターに対して、同等の結合親和性（化合物２２では１６６ｎＭ）、また、いくつかのものはいっそう高い結合親和性（化合物２５では１１５ｎＭ）と選択性を示す（図２および３参照）。Ｎ末端位置の変化はＣ末端位置の変化よりも顕著であり、直鎖（非分枝）脂質残基のみが有用なＮ末端親油化タグとしての変化を持ち得ることが示唆される。

β−ホモトレオニンアミド、β−ロイシンアミドおよび４−アミノ−５−メチル−ジヒドロ−フラン−２−オン（β−ホモトレオニンラクトン）を用いたこれらの研究は、いくつかの官能基は、ｈｓｓｔ４レセプターに対する高親和性結合のために必ずしも重要ではないことを明らかに示す。例えば、β−ホモトレオニンのヒドロキシ基は、結合親和性を失うことなく単純なメチル残基に置き換えることができる（化合物２２と化合物１〜３のＫ_Ｄ値を比較）。これらラクトンに基づく化合物７〜９は、対応する開鎖アミド（化合物１〜３、２２および２５）のいずれよりもはるかに高い結合親和性を示すので、このアミノ官能基は明らかに有意な結合機能を持たない。この生物学的データからは、配列Ａｃ−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−（Ｒ）−４−アミノ−（Ｒ）−５−メチル−ジヒドロ−フラン−２−オンにおいて形成されるβターンが、Gademann et al (2001)が文献に記載しているように、分子内水素結合によって安定化されるかどうかは明らかでない。特にＣ末端カルボニル官能基（ラクトン７〜９に対し、アミド１〜３、２５）は、構造配置に著しい違いがある。このことから、分子内水素結合の関与は明らかでない。

確立されたＣ末端シクロペンチルβ−ホモリシンアミド（表１の第５行参照）の試験では、β−ホモトレオニンラクトンがＣ末端の位置にある化合物コレクションから得られた生物学的データとの厳密な一致が得られる。比較としては、例えば、ｈｓｓｔ４に対するリガンド６０ｎＭの化合物７〜９と、同じレセプターに対してＫ_Ｄ値６２ｎＭを示す化合物３０を参照。このアセチル基と分枝型類似体とのＮ末端交換は、結合親和性の低下、ならびにメンバーによっては選択性の低下がもたらされる（図４参照）。

例えば、塩化ヒドロシンネモイルで誘導体化すると、ＳＲＩＦ−１レセプターファミリー全体と緩やかな結合親和性を有するリガンドが得られる（化合物３２）。このリガンドの効力（４１７ｎＭ）はＮ−アセチルコンジナー（６２ｎＭ）と比べて低いが、万能結合特性を有するβ−ペプチドに基づくさらなるソマトスタチン類似体の合成の十分な出発点となり得る。

直鎖親油化タグはＮ末端ペプチド位置で最も良く許容される。Ｎ末端テールを相同延長すると活性は若干低下する。Ｎ末端をプロピオニル残基でキャップした際に最大の結合親和性を示すという例外がいくつかあるものの、これはほとんどの供試化合物に当てはまる（図５参照）。

化合物５９（（Ｓ）−β^３ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−ＮＨ_２）の非修飾スキャフォールド構造のＣ末端を直鎖（非分枝）親油化タグで修飾すると（図４および５参照）、より活性の高い化合物が得られる。これらの修飾は活性の向上した化合物（例えば、化合物５２ではＫ_Ｄ＝１６ｎＭ、化合物４４および４５ではＫ_Ｄ＝１０ｎＭ）をもたらすだけでなく、物理化学的特性、特に全体的な疎水性にプラスの影響を持つ。「リピンスキーの５の法則」に従う、確立されたコンジュゲート生体分子のin silicoプロファイリングは、水素結合供与体の数が１つの主要な違反事項であるが、薬物様の特性を示す。

化合物４３、４２または４７、４８、４９および４１を得るＣ末端（Ｓ）−β−ホモリシン−ブチルおよびペンチルアミドへの単純なメチル基の導入は、結合特性と完全に一致し、全ての場合で結合親和性の増強（例えば、化合物４８および４９ではＫ_０＝７）と高い選択性（図５および６参照）が得られる。

水素原子とメチル基とのＮ末端交換は、結合親和性の低いリガンドをもたらす。これはＮ−アシル化およびＮ−プロピオニル化化合物（例えば、化合物３９および４６）ならびに非アシル化Ｎ−アミノメチル−（Ｓ）−β−ホモフェニルアラニン類似体（化合物３８）にも当てはまる。

（Ｒ）−トリプトファン部分の第一級アミン官能基上のアミノ酸のモノメチル化（表２のスキャフォールドＩＩに基づく化合物参照）およびその後のそのペプチド内の特定の位置への組み込みにより、５７ｎＭ（化合物６５）〜３５ｎＭ（化合物７０）の範囲の結合親和性を有するｈｓｓｔ４選択性リガンドが得られる。Ｃ末端残基に応じ、主鎖におけるこのわずかな修飾によって、他のｈｓｓｔレセプターの最大１０００倍の著しい選択性を有するペプチドが得られる（例えば、化合物４０）。さらに、同じ位置でのＮ−モノベンジル化により、１４ｎＭといった低いＫ_Ｄ値を有するはるかに高い結合親和性（化合物６６および６７）が達成できる。これらのリガンドはｈｓｓｔ１レセプターに対する選択性は低いが、他のｈｓｓｔレセプターに対してはなお１００倍の選択性を有する。

従って、α／β^３−ペプチド混合物のｈｓｓｔ４選択性は、適当なＣ末端アミド残基の選択性を、スキャフォールドＩＩに関して強調されているようなＮ−アミノアルキル化（Ｒ）−トリプトファン構成単位と組み合わせて制御される（表１参照）。このことは、化合物５９（（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−ＮＨ_２）の基本スキャフォールド（表１に示される）をＳＲＩＦファミリーのレセプターの全てに対して極めて低い親和性しか持たない（例えば、ｈｓｓｔ４に対して１５１４ｎＭ）が、Ｃ末端、Ｎ末端および主鎖の位置における種々の構造操作により極めて強力、かつ、ｈｓｓｔ４選択性のリガンドへと形質転換することができるという全般的な知見と良く相関している。

化合物の物理化学的特性
ある分子が治療標的部位に到達するためには、細胞膜によって形成されている多くの天然障壁を透過しなければならない。これらの細胞膜はリン脂質二重層、すなわち、電荷を有する、または極性の高い分子の通過を著しく妨げる油性障壁からなる。これは最初のタンパク質分解を伴うので、ペプチド構造に基づく薬剤の最大の問題点である。

薬物を受動拡散によって吸収および移行させるには、膜の脂質コアを透過するよう十分な親油性であるが、そこに保持および蓄積されるほどの親油性はないものでなければならない。化合物の親油性はオクタノール／水分配係数(partition coefficient or distribution coefficient)によって表される。物質の極性の最初の最大値は、コンピューター計算でＣｌｏｇ Ｐ値を得るか、またはハイスループットアッセイにおける分配係数の測定（ＨＴ−ｌｏｇ Ｐ ｏ／ｗ）によって得ることができる(Faller et al., 2004; Wohnsland et al., 2001)。

物理化学的特性の測定のためにいくつかのハイスループットアッセイが確立されている。これらの研究のいくつかは特に、オクタノール／水分配係数（ｌｏｇ Ｐ）および分配係数の厳密かつ再現性のある値が得られるハイスループット試験系の開発に特に着目したものである。これらのアプローチから得られた値は、化合物の親油性および極性の評価に有用なパラメーターであることが分かっている。

本発明のリポペプチドのオクタノール／水分配係数計算値は、ＲＰ−クロマトグラフィー保持時間と良く相関している（図７参照）。

物質全体としての極性は主として導入された親油性残基によるものである。巨大なＮ末端残基（アダマンタン、ノナノイル）とＣ末端の親油化β−アミノ酸構成単位との組合せ（例えば、化合物２３、２４または２７参照）により保持時間が長くなり、ＣｌｏｇＰ値が最大７となる。極性スケール上の他の極大値は、実施時間がもっと短く、ＣｌｏｇＰ値が２以下である化合物５９および７２の非置換トリペプチドスキャフォールド構造によって表される。Ｎ末端スキャフォールド位置に小さな直鎖キャッピング基を導入すると（例えば、化合物６０および６１）、Ｃｌｏｇ Ｐ値が若干大きくなり、保持時間が若干長くなる。同じことがＣ末端修飾についても当てはまるが、β−ホモトレオニンアミドによる主鎖修飾（化合物３６または２参照）または４−アミノ−５−メチル−ジヒドロフラン２−オンによる主鎖修飾（化合物２９または７）は前全体としての極性の低下に有意には寄与しない。

オクタノール／水分配係数は、人工液体膜透過性に基づくハイスループットアッセイで測定される。これらの測定値と計算値を比較したところ、低い相関しか存在しないか、または相関が全くないことが明らかに示された（図８参照）。計算値のほとんどは測定値を有意に上回るものである。このことは、計算が直鎖断片の増分に基づくものであって、二次的ペプチド構造への折りたたみを考慮しないものであることに起因すると考えられる。ｌｏｇ Ｐ値を計算するための多くのアプローチは、ある特定の断片のパラメーター化が行われていないためになお制限を受け、構造の複雑性の増大に関係する分子量増加のために上手くいかない。同じような問題および不都合がｌｏｇ Ｐのクロマトグラフィー測定でも見られ、ペプチドが固定相との相互作用による構造変化を受けてしまうことがある。従って、固定相と折りたたみがはずれた(defolded)検体の決定的な相互作用はまた、直鎖ペプチド配列に基づくものである。このため、固定相を用いるクロマトグラフィーアッセイに基づくＨＴ−ｌｏｇ Ｐ ｏ／ｗ測定値では、誤った結果が導き出されることがある。

図９から、親油性残基の選択が薬剤様分子に関して提案されている（ｌｏｇ Ｐ＝２．５〜４．５）(Comer, 2003)範囲全体に理想的な分布を与えることが分かる。極性の高い化合物（２、７、３６、５８、５９、６０および６１）の分配係数は、人工膜に基づくハイスループットアッセイ（基本アッセイ）では測定することができないが、これは適正な精度でのｌｏｇ Ｐ値の測定がこの特定の試験設定では２を超える値に限定されるためである。分配係数計算値（Ｃｌｏｇ Ｐ）は１〜２に間の数値となり、対応するＨＴ−ｌｏｇＰ／Ｃｌｏｇ Ｐ相関図（図９）の一般傾向ラインによれば、これらの化合物のｌｏｇ Ｐ値は０に近いか、０以下でさえあるものと見積もることができる。

極性の高い化合物のｌｏｇ Ｐ値の実際の測定値を得るためには、ＧＬｐＫａ装置を用いたｐＨ測定滴定技術(Box et al. 2003)によって、化合物１〜３（Ｃ末端Ｌ−β−ホモトレオニンアミド）および化合物７〜９（Ｃ末端４−アミノ−５−メチル−ジヒドロ−フラン−２−オン）の個々の値を測定する。これら２種類のα／β^３−テトラペプチド混合物の高い極性は、Ｎ末端への親油化タグの導入によって制御することができる。脂肪酸類似体とコンジュゲートすると、薬剤様極性を有する化合物（５、６、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８および２６）が得られる。この最初のコンジュゲート生体分子群の中では極めて少数のもの（例えば、化合物１３）だけが、許容される透過性特性を伴う良好な水溶性を示す（図１０および１１参照）。

より極性の高いα／β^３−テトラペプチドＮ末端修飾β−ホモトレオニンアミド混合物に基づく群（化合物１〜３）は、あまり満足な物理化学的特性を示さない。これは、溶解度は化合物の極性または親油性だけに依存するのではなく、水素結合供与体および／または物質の受容体の数によっても強く影響を受けることの証明と考えられる。水素結合受容体および／または供与体の数が増えるにつれ、ますます強い分子間相互作用が起こり、その結果、化合物凝集の増大が見られるに違いない。このことは、Ｃ末端β−ホモトレオニンラクトン（化合物７〜９）（個々の誘導体５、６、１０、１１、１２、１３）に基づく群からＣ末端β−ホモトレオニンアミドに基づく誘導体（１４、１５、１６、１７、１８、２６）となることで、溶解度の全般的な低下が見られたということによく一致している。

水素結合供与体および受容体の数をさらに引き下げるトリプトファンインドールにおけるＮ−メチル化により物質１９、２０および２１が得られるが、このようなＮ−メチル化は、溶解度または透過性に関する向上はもたらさなかった。この興味深い知見の理由は、全ての供与体または受容体が物理化学的特徴に同じ影響を持つわけではないということであろう。

２２〜２５および２７の化合物群では、Ｃ末端β−ホモトレオニンアミドはβ−ロイシンアミドに置換されている。この第二級アミドの導入は、水素結合供与体の減少をもたらし、全体としての親油化を伴う。この戦略は生物学的試験の結果によく一致するが（そこを参照）、誘導体化によって分子量がさらに増加しても、透過性は向上しない。高い極性表面積の他、大きな分子量も化合物の細胞透過のもう１つの制限因子となる。これらの親油性の高いコンジュゲート生体分子の水溶解性は低い。

最初の構造活性関係（ＳＡＲ）研究では、多数の水素結合供与体および受容体に寄与する基のいくつかはｈｓｓｔレセプター結合認識に関与せず（詳細については生物学的試験結果を参照）、従って、例えば、Ｃ末端ジヒドロ−フラン−２−オン単位を模倣するためのシクロペンチル環の導入により、他の構造モチーフに置換することができる。

得られた化合物群（３０〜３４、４６、５６、５７および６２）は水素結合受容体がより少ないという利点があり、１２から１０に減らすことができる。結果として溶解度は、これらの物質のほとんどで中程度〜良好の範囲となる（図１０参照）。さらに、分子量が小さくなり、また、極性表面積が小さくなると、中程度の膜透過性なるものと見込まれた。

Ｃ末端シクロペンチル断片は、他の直鎖親油化タグと交換可能である。この二重のコンジュゲーションにより、ペプチドのＮ末端の位置からもＣ末端の位置からもｌｏｇＰ値を調節する機会が得られ、最もよいのは、透過性と溶解度の間に適正な平衡状態が見出せることである。これら２つの決定的な物理化学的特徴の間の最適なバランスは、特に中枢神経系（ＣＮＳ）における作用様式を持つ薬剤に着目した場合、２．８〜３．８の間のｌｏｇＰ値を有する化合物に見出すことができる。図６から分かるように、これらの二重コンジュゲート生体分子（化合物４４、４５、５０、５１、５２、５３、５４および５５参照）は全て、薬剤様分子に望ましいｌｏｇＰ範囲に相当する。Ｃ末端シクロペンチル類似体と同様に、わずかながら例外（すなわち、化合物５４と５５）はあるものの、溶解度の範囲は中程度〜良好であり、これはこれらのＮ−ブチロイル化化合物の高い親油性に起因するものかもしれない。さらに、これらの物質の膜透過性程度もまた、これまでの化合物群に比べてはるかに満足度の高いものである。

上記化合物の水素結合供与体の数はまだ７の値であり、従って、薬剤様分子の５の法則の基準（≦５ＨＢＤ）に違反しているので、さらなる改良を行うことができる。その次のアミド主鎖のメチルスキャンにより、ｈｓｓｔ４レセプターに対してなお高い結合親和性値を有するが、上記の基準を満たす物質が示される。５〜６個の水素結合供与体しか持たない代表的化合物が優れた溶解度を持つ。これは、水素結合供与体（５または６）と受容体（１０）との間の不均衡性の高まりによるものとも考えられる。供与体数の減少による水素結合供与体と受容体との間に不均衡を作り出せば溶解度が高まることは、理論的計算(Abraham et al., 1999)といくつかの実際の実験(Faller, 2003)により示されている。実際、このことは、他の全ての物質の中で最大の溶解度を有する供試Ｎ−メチル化二重コンジュゲート生体分子（４１；４２；４３；４７；４８；４９、６３、６４、６５および７０）の全てのものに当てはまった。化合物６６、６７および６８、６９（Ｎ−ベンジル化二重コンジュゲート生体分子）は例外である。水素結合供与体および受容体の基準を満たすものの、高いｌｏｇＰ 値を示したこれらの化合物の親油性は、良好な水溶性を見込めるものではない。膜の透過性についても同じことが見られ、この膜の透過性はこれらの２つの物質の大きな分子量により強く関連するものと思われる。Ｎ−メチル化コンジュゲート生体分子（例えば、６３、６４、６５、７０および４８、４９）は、中程度の透過性を示した（図１１参照）。

一般試験手順
本発明の全ての化合物の合成には、下記の一般試験手順を用いた。

典型的な精製手順：
分取ＬＣ／ＭＳ系：
分取ＨＰＬＣ／ＭＳ系は、Ｗａｔｅｒｓ ６００クォータナリーポンプ、Ｇｉｌｓｏｎ製２３３ ＸＬインジェクター、Ｇｉｌｓｏｎ製２１５フラクションコレクターおよびＷａｔｅｒｓ製２４８７ＵＶ検出器からなった。分取カラムとしては、Ｘｔｅｒｒａ ＭＳ Ｃ１８ ５μｍ、１９×１００ｍｍカラムであった。移動相Ａ：水（０．１％ＴＦＡ）、Ｂ：アセトニトリル（０．１％ＴＦＡ）。典型的な勾配は、２％Ｂが１．０分、次いで９５％Ｂが８分、９５％Ｂが１分、その後、２％Ｂに戻した。総実施時間１０分。ＵＶシグナル、２１４ｎＭ。流速は実施の最初の１分内は１５ｍｌ／分〜３０ｍｌ／分。温度：周囲温度。ＭＳシグナルは、Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ製のプラットフォーム（ＺＭＤ質量検出器）で測定した。ＥＳＩ^＋モードでの作動条件は次の通りとした：ソースブロック温度、１２０℃；脱溶媒和温度、２００℃；イオンエネルギー、１．０Ｖ；キャピラリー電圧３．５ｋＶ；コーン電圧、２０Ｖ；抽出器、３Ｖ。サンプルはＤＭＡ／（水／ＴＦＡ＝４／１）＝４／１に溶解し、９００μｌ量の溶液を注入した。

分取ＬＣ／ＵＶ系：
分取ＬＣ／ＵＶ系は、ＳｅｐＴｅｃｈ製分取ポンプ、Ｌａｂｏｍａｔｉｃ製ＵＶ分光光度計およびＧｉｌｓｏｎ製Ａｓｔｅｄ ＸＬフラクションコレクターからなった。分取カラムは、Ｍａｃｈｅｒｅｙ−Ｎａｇｅｌ製Ｎｕｃｌｅｏｄｕｒ １００−１０ Ｃ１８カラムであった。移動相：アセトニトリル０．１％ＴＦＡ／水０．１％ＴＦＡ。勾配は９０％水で始め、１５分以内で９０％アセトニトリルで終わるようにした。検出：ＵＶ ２１５ｎＭ。サンプルをＤＭＳＯに溶解し、１ｍｌ量の溶液を注入した。

分析的ＨＰＬＣは一般に次の系で行った。系Ｉ(Merck Hitachi)：溶媒Ａを水（０．１％ＴＦＡ）とし、溶媒Ｂをアセトニトリル（０．１％ＴＦＡ）とした。勾配は１０分以内で５％Ｂ〜９５％Ｂ、９５％Ｂで２分、その後、すぐに５％Ｂに戻し、９５％Ａで３分平衡化した。総実施時間：流速０．８ｍｌ／分で１５分。カラム：ＭＮ Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ（Ｍａｃｈｅｒｅｙ ａｎｄ Ｎａｇｅｌ製の１００−３、ＲＰ−Ｃ−１８）。温度：４０℃。ＵＶ検出、２２０ｎＭ。サンプルはＡＣＮ（０．１％ＴＦＡ）／水（０．１％ＴＦＡ）＝７５／２５に溶解し、１０μｌ量の溶液を注入した。

系ＩＩ（Ｗａｔｅｒｓ Ａｌｌｉａｎｃｅ ２７９５）：溶媒Ａを水（０．１％ＴＦＡ）とし、溶媒Ｂをアセトニトリル（０．１％ＴＦＡ）とした。勾配は１０分以内で５％Ｂ〜１００％Ｂとし、１００％Ｂで０．５分、その後、すぐに５％Ｂに戻し、９５％Ａで１．５分平衡化した。総実施時間：流速０．８ｍｌ／分で１２分。カラム：ＭＮ Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ（Ｍａｃｈｅｒｅｙ ａｎｄ Ｎａｇｅｌ製１００−３、ＲＰ−Ｃ−１８）。温度：４０℃、ＵＶ−ＤＡＤ検出、２２０ｎＭ、２５４ｎＭ。ＰＤＡ Ｍａｘ Ｐｌｏｔ（２１０ｎＭ〜４００ｎＭ）。サンプルはＡＣＮ（０．１％ＴＦＡ）／水０．１％ＴＦＡ）＝７５／２５に溶解し、１０μｌ量の溶液を注入した。

一般手順：
β−アミノ酸とＴＢＴＵおよびＨＯＡｔ／ＨＯＯＢｔのカップリングのための一般手順(Gademann et al., 2000)：
アルゴン下、室温で、無水ジクロロメタンと無水ジメチルホルムアミドの混合物（３／１）（０．２Ｍ）に、アミノ断片とＢｏｃ保護断片の塩酸塩（１当量）を懸濁させた。０℃まで冷却（氷／水）した後、ＴＥＡ（５当量）を加え、得られた混合物をアルゴン下、０℃で１５分間攪拌した。次に、ＨＯＡｔまたはＨＯＯＢｔ（１．２当量）を加え、１５分間攪拌を続けた。最後に、ＴＢＴＵ（１．２当量）を加え、混合物を室温で１２時間攪拌した。ＤＣＭで希釈した後、ＮａＨＣＯ_３／ＮａＣｌ溶液（５％）および飽和ＮａＣｌ、次いで１Ｍクエン酸で、そして最後に再び飽和ＮａＣｌで抽出した。有機層を乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下で除去し、得られた固体残渣をさらに精製することなく次の工程に用いた。Ｎ−Ｍｅβアミノ酸は非メチル化類似体よりもはるかに溶解度が高かった。

β−アミノ酸とＨＡＴＵおよびＨＯＡｔのカップリングのための一般手順：
アルゴン下、室温で、無水ジクロロメタンと無水ジメチルホルムアミドの混合物（３／１）（０．２Ｍ）に、アミノ断片とＢｏｃ保護断片の塩酸塩（１当量）を懸濁させた。０℃まで冷却（氷／水）した後、ｓｙｍ−コリジン（１０当量）を加え、得られた混合物をアルゴン下、０℃で１５分間攪拌した。次に、ＨＯＡｔ（１．２当量）を加え、１５分間攪拌を続けた。最後に、ＨＡＴＵ（１．２当量）を加え、混合物を室温で１６時間攪拌した。ＤＣＭで希釈した後、１Ｍクエン酸および飽和ＮａＣｌ、次いでＮａＨＣＯ_３／ＮａＣｌで、そして最後に再び飽和ＮａＣｌで抽出した。減圧下で溶媒を除去し、得られた固体残渣をさらに精製することなく次の工程に用いた。

アミノ酸のＢｏｃ保護の一般手順(Levy et al., 1998)：
アミノ酸を乾燥ＤＭＦ（１ｇ／１０ｍｌ）に溶解し、トリエチルアミン（３当量）を加えた後、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（１．２当量）を加えた。この反応混合物を室温で１５時間攪拌した後、濃縮乾固し、残渣をＥｔＯＡｃに溶解した。得られた混合物を飽和ＮａＨＣＯ_３で洗浄した。合わせた水性抽出液を６Ｎ ＨＣｌでｐＨ＝３（ｐＨ試験紙）まで酸性化し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。合わせた有機抽出液を無水ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、濃縮して目的生成物を得た。この生成物をさらに精製することなく次の工程に用いた。

１，４−ジオキサン中ＨＣｌによるＢｏｃ脱保護：
Ｂｏｃ保護化合物を１，４−ジオキサン（０．２Ｍ）に懸濁させ、１，４−ジオキサン（４０当量）中、塩化水素の溶液で処理した。得られた溶液を室温で９０分間攪拌した。減圧下で揮発性成分を除去し、得られた残渣を高真空下で乾燥させ、さらに精製することなく次の工程に用いた。

ギ酸によるＢｏｃ脱保護：
Ｂｏｃ保護化合物をギ酸（２００当量）に溶解し、室温で４５分攪拌した（ＬＣ／ＭＳ対照）。反応が完了に達した直後に、この生成物溶液をトルエンで希釈し、真空下で溶媒を除去した。この手順を３回繰り返し、残渣を高真空下で乾燥させ、目的生成物のギ酸塩を得た。このギ酸を除去するため（アミノ断片のギ酸塩を用いた場合、次のカップリング工程で部分的ホルミル化が見られた）、この粗生成物をＤＣＭに懸濁させ、予め活性化した（ＤＣＭ中６％のＴＥＡ中で放置（３×３０分）することにより活性化）、アミノメチルリンカー（負荷量：１００μｍｏｌ／ランタン）を含有するＤ−系ランタン（Ｍｉｍｏｔｏｐｅが供給、www.mimotopes.com）を加えた。次に、この混合物を室温で１２時間軽く攪拌した。その後、ランタンを除去し、ＤＣＭおよびＭｅＯＨで数回洗浄した。溶媒を真空除去し、生成物を高真空下で乾燥させ、ギ酸不含生成物を得た。

水素化分解による、Ｐｄが触媒するＺの脱保護：
Ｚ保護化合物を、ＤＭＡ中ＴＦＡ（１０％）の溶液に懸濁させた（０．２５Ｍ）。パラジウム／活性炭（１０％）（３０ｍｇ／０．１ｍｍｏｌ）を加え、得られた反応混合物を水素（１バルーン）（１バルーン／基質０．３ｍｍｏｌ）下、室温で５時間攪拌した。粗反応混合物をＨＰＬＣフィルター（Ｇｅｌｍａｎ Ａｃｒｏｄｉｓｃ ＰＴＦＥ膜０．２μｍ）で濾過することで活性炭を除去し、揮発性成分を真空除去した。次に、固体残渣を逆相クロマトグラフィーにより精製した（一般手順を参照）。

Ｂｏｃ−β−ホモフェニルアラニンのＮ−メチル化(Gademann et al., 2000)：
Ｂｏｃ−Ｌ−β−ホモフェニルアラニン（５００ｍｇ；１．７９ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１８ｍｌ；０．１Ｍ）に溶解し、ＭｅＩ（９００μｌ、８当量）を加え、この溶液を０℃まで冷却し、ＮａＨ（６０％油性懸濁液、２１５ｍｇ；３当量）を何回かに分けて加えた。この混合物を室温まで温め、２２時間攪拌した後、−１０℃まで冷却し、過剰量のＮａＨを氷で加水分解した。溶媒を蒸発させ、残渣を水（２０ｍｌ）に溶解した。水相をジエチルエーテル（１５ｍｌ）で洗浄し（ｐＨを飽和ＫＨＳＯ_４水溶液数滴でおよそ２に調整した）、ジエチルエーテルで抽出した（３×２０ｍｌ）。有機相を０．５Ｍ ＨＣｌ溶液（３×１０ｍｌ）で洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ_４）。減圧下で溶媒を除去してＢｏｃ保護Ｎ−メチル−β−ホモフェニルアラニン（４６８ｍｇ、８９％）を得、これをさらに精製することなく用いた。

Ｎ−Ｂｏｃ−１−Ｍｅ−（Ｒ）−トリプトファンのＮ−メチル化：
Ｂｏｃ−１−Ｍｅ−（Ｒ）−トリプトファン（３８０ｍｇ；１．１９ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１２ｍｌ）に溶解し、ＭｅＩ（５９４μｌ、８当量）を加え、この溶液を０℃まで冷却し、ＮａＨ（１４９ｍｇ；３当量）を何回かに分けて加えた。この混合物を室温まで温め、２２時間攪拌した後、−１０℃まで冷却し、過剰量のＮａＨを氷で加水分解した。溶媒を蒸発させ、残渣を水（２０ｍｌ）に溶解した。水相をジエチルエーテル（１５ｍｌ）で洗浄し（ｐＨを飽和ＫＨＳＯ_４水溶液数滴でおよそ２に調整した）、ジエチルエーテルで抽出した（３×２０ｍｌ）。有機相を０．５Ｍ ＨＣｌ溶液（３×１０ｍｌ）で洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ_４）。減圧下で溶媒を除去してＢｏｃ−Ｎ−メチル−１−メチル−（Ｒ）−トリプトファン（３５０ｍｇ；８８％）を得、これをさらに精製することなく次に工程に用いた。

Ｎ−Ｂｏｃ−１−Ｂｏｃ−（Ｒ）−トリプトファンのＮ−メチル：
Ｎ−Ｂｏｃ−１−Ｂｏｃ−（Ｒ）−トリプトファン（２ｇ；４．９４ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２５ｍｌ）に溶解し、ＭｅＩ（２．４６ｍｌ、８当量）を加え、この溶液を０℃まで冷却した。次に、ＮａＨ（３５６ｍｇ、６０％油性懸濁液；３当量）を何回かに分けて加えた。この混合物を室温まで温め、窒素下で３６時間攪拌した。その後、酢酸エチル（２０ｍｌ）、次いで水を加えた。溶媒を蒸発させて乾固し、油性残渣をエーテル（２×２５ｍｌ）と水（１００ｍｌ）とで分液した。エーテル層を水性ＮａＨＣＯ_３（２×２５ｍｌ）で洗浄し、合わせた水性抽出物を飽和ＫＨＳＯ_４水溶液（およそ６０ｍｌ）でｐＨ３まで酸性化した。生成物を酢酸エチル（３×３０ｍｌ）で抽出し、有機層を水（２×３０ｍｌ）、５％チオ硫酸ナトリウム水溶液（２×３０ｍｌ；ヨウ素を除去するため）、水（３０ｍｌ）で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させた。減圧下で溶媒を除去し、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｎ−メチル−１−Ｂｏｃ−Ｒ−トリプトファン（１．５ｇ、粗生成物として７２％）を黄色がかった油状物として得、これを酢酸エチルから再結晶させたが、さらにカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１０／１；シリカ：１５０ｇ）により精製したところ白色粉末が得られた（１．０１ｇ；分析的逆相ＨＰＬＣにより測定したところ２つの生成物の７５：２５混合物）。従って、この混合物を次に、分取逆相クロマトグラフィー（Ａｇｉｌｅｎｔ １１００系分取装置、カラム：Ｗａｔｅｒｓ、Ｘｔｅｒｒａ ｐｒｅｐ ＲＰｉ_８ ＯＢＤカラム、５μｍ、１９×５０ｍｍ。Ａ：水（０．１％ＴＦＡ）、Ｂ：アセトニトリル（０．１％ＴＦＡ）。勾配：１．５分間３０％Ｂ〜７分内で１００％Ｂ、１００％Ｂで１分間、３０％Ｂに戻す。総実施時間：１０分。ＵＶ−ＤＡＤシグナル、２２０ｎＭ。流速２０ｍｌ／分。温度：室温）により精製し、純粋な非晶質白色粉末を得た（７５０ｍｇ、純度＞９９％）。

Ｄ−トリプトファンのＮ−ベンジル化(Quitte et al. 1963)：
（Ｒ）−トリプトファン（１ｇ；４．９ｍｍｏｌ）を２Ｎ ＮａＯＨ（２５ｍｌ）に懸濁させ、絶えず攪拌しながらベンズアルデヒド（５００μｌ；４．９０ｍｍｏｌ）と混合した。得られた溶液を室温で３０分間攪拌した後、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（９２ｍｇ；１．４７ｍｍｏｌ）で処理した。温度を１５℃以下に維持するため、添加は少量ずつ行った。添加が完了した後、得られた懸濁液を室温でさらに３０分間攪拌し、この全手順（ベンズアルデヒド、シアノ水素化ホウ素ナトリウム）を繰り返した。得られた混合物を室温で一晩（１６時間）攪拌した。翌日、出発材料がまだいくらか残っていたので、同じ量のベンズアルデヒドとシアノ水素化ホウ素ナトリウムを用いてこの手順を繰り返した。その後、この混合物を室温でさらに１６時間攪拌した。この反応混合物をジエチルエーテルで洗浄し、激しく攪拌しながら１Ｎ ＨＣｌで中和した（ｐＨ６〜７）。ベンジルアミノ酸がすぐに沈殿し、これを濾過し、水（３×２０ｍｌ）で洗浄し、真空乾燥させ、やや黄色がかった非晶質固体（７５０ｍｇ；５２％）を得た。この生成物をさらに精製することなく次の工程に用いた。

化合物リスト
本発明の次の化合物は当業者に既知の前記実験法を用いて製造および分析したものである。以下、収率、ＬＣ−ＭＳ−ＵＶ逆相分析法で測定した純度、保持時間（Ｒｔ）およびＨＲＭＳデータを各化合物について示す。化合物は適宜、^１Ｈおよび^１３Ｃ−ＮＭＲで分析した。

Ａｃ−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−（Ｒ），（Ｒ）−ＨＴｈｒ−ＮＨ_２（化合物２）
１５ｍｇ、純度＞９４％、Rt=5.22、HRMS [M+H]⁺ 664.3816 (理論値664.3817)。

シクロヘキサノイル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−（Ｒ）−４−アミノ−（Ｒ）−５−メチル−ジヒドロ−フラン−２−オン（化合物５）
１３ｍｇ、純度＞９９％、Rt=6.70、HRMS [M+H]⁺ 715.4180 (理論値715.4178)。

ベンゾイル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−（Ｒ）−４−アミノ−（Ｒ）−５−メチル−ジヒドロ−フラン−２−オン（化合物６）
２２ｍｇ、純度＞９１％、Rt=6.39、HRMS [M+H]⁺ 709.3710 (理論値709.3708)、NMR (¹H; ¹³C)。

Ａｃ−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−（Ｒ）−４−アミノ−（Ｒ）−５−メチル−ジヒドロ−フラン−２−オン（化合物７）
２５ｍｇ、純度＞９９％、Rt=5.65、HRMS [M+H]⁺ 647.3550 (理論値647.3552)、NMR (¹H; ¹³C)。

ジヒドロシンネモイル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−（Ｒ）−４−アミノ−（Ｒ）−５−メチル−ジヒドロ−フラン−２−オン（化合物１０）
１３ｍｇ、純度＞９９％、Rt=6.77、HRMS [M+H]⁺ 737.4022 (理論値737.4021)、NMR (¹H; ¹³C)。

ノナノイル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−（Ｒ）−４−アミノ−（Ｒ）−５−メチル−ジヒドロ−フラン−２−オン（化合物１２）
７ｍｇ、純度＞％９９、Rt=7.83、HRMS [M+H]⁺ 745.4648 (理論値745.4647)。

アダマントイル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−（Ｒ）−４−アミノ−（Ｒ）−５−メチル−ジヒドロ−フラン−２−オン（化合物１３）
３０ｍｇ、純度＞９９％、Rt=7.34, HRMS [M+H]⁺ 767.4496 (理論値767.4491 )、NMR (¹H; ¹³C)。

ベンゾイル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−（Ｒ），（Ｒ）−ＨＴｈｒ−ＮＨ_２（化合物１４）
１５ｍｇ、純度＞９３％、Rt=6.04, HRMS [M+H]⁺ 726.3973 (理論値726.3974)、NMR (¹H; ¹³C)。

ジヒドロシンネモイル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−（Ｒ），（Ｒ）−ＨＴｈｒ−ＮＨ_２（化合物１５）
１４ｍｇ、純度＞９７％、Rt=6.33、HRMS [M+H]⁺ 754.4289 (理論値754.4287)、NMR (¹H; ¹³C)。

ノナノイル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−（Ｒ），（Ｒ）−ＨＴｈｒ−ＮＨ_２（化合物１７）
１０．５ｍｇ、純度＞９７％、Rt=7.47、HRMS [M+H]⁺ 762.4909 (理論値762.4913)、NMR (¹Hi ¹³C)。

アダマントイル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−（Ｒ），（Ｒ）−ＨＴｈｒ−ＮＨ_２（化合物１８）
２２．５ｍｇ、純度＞８７％、Rt=7.00、HRMS [M+H]⁺ 784.4762 (理論値784.4756)、NMR (¹H; ¹³C)。

ジヒドロシンネモイル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−１−Ｍｅ−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−（Ｒ）−４−アミノ−（Ｒ）−５−メチル−ジヒドロ−フラン−２−オン（化合物１９）
１７ｍｇ、純度９６％、Rt=7.12、HRMS [M+H]⁺ 751.41829 (理論値751.41831)、NMR (¹H; ¹³C)。

アダマントイル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−１−Ｍｅ−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−（Ｒ）−４−アミノ−（Ｒ）−５−メチル−ジヒドロ−フラン−２−オン（化合物２０）
２１ｍｇ、純度＞９９％、Rt=7.73, HRMS [M+H]⁺ 781.46524 (理論値781.46525)、NMR (¹H; ¹³C)。

Ａｃ−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−１−Ｍｅ−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−（Ｒ）−４−アミノ−（Ｒ）−５−メチル−ジヒドロ−フラン−２−オン（化合物３１）
１０ｍｇ、純度＞９９％、Rt=6.02, HRMS [M+H]⁺ 661.37143 (理論値661.37136)、NMR (¹H; ¹³C)。

Ａｃ−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−（Ｒ）−β^３−Ｌｅｕ−ジエチル−アミド（化合物２２）
９．６ｍｇ、純度＞９４％、Rt=6.44、HRMS [M+H]⁺ 718.46574 (理論値718.46559)。

ジヒドロシンネモイル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−（Ｒ）−β^３−Ｌｅｕ−メチル−フェネチル−アミド（化合物２３）
１４ｍｇ、純度＞９３％、Rt=8.09、HRMS [M+H]⁺ 870.5292 (理論値870.5282)。

ジヒドロシンネモイル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−（Ｒ）−β^３−Ｌｅｕ−ジエチル−アミド（化合物２４）
８ｍｇ、純度＞９９％、Rt=7.51 、HRMS [M+H]⁺ 808.51248 (理論値808.51254)。

Ａｃ−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−（Ｒ）−β^３−Ｌｅｕ−メチル−フェネチル−アミド（化合物２５）
１４ｍｇ、純度＞９９％、Rt=7.19、HRMS [M+H]⁺ 780.48124 (理論値780.48124)、NMR (¹H; ¹³C)。

シクロヘキサノイル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−（Ｒ），（Ｒ）−ＨＴｈｒ−ＮＨ_２（化合物２６）
１３．７ｍｇ、純度＞８９％、Rt=6.33、HRMS [M+H]⁺ 732.44501 (理論値732.44485)、NMR (¹H; ¹³C)。

アダマントイル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−（Ｒ）−β^３−Ｌｅｕ−メチル−フェネチル−アミド（化合物２７）
１０ｍｇ、純度＞８０％、Rt=8.65、HRMS [M+H]⁺ 900.5751 (理論値900.5751)。

（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−（Ｒ）−４−アミノ−（Ｒ）−５−メチル−ジヒドロ−フラン−２−オン（化合物２８）
３５ｍｇ、純度＞９９％、Rt=4.95、HRMS [M+H]⁺ 605.34524 (理論値605.34514)。

Ａｃ−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−シクロペンチル−アミド（化合物３１）
３９．１ｍｇ、純度＞９９％、Rt=6.23, MS [M+H]⁺ 617.7、HRMS [M+H]⁺ 617.3809 (理論値617.3810)、[M+Na]⁺ 639.3630 (理論値639.3629)。

ジヒドロシンネモイル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−シクロペンチル−アミド（化合物３２）
１３．２ｍｇ、純度＞９６％、Rt=7.28、MS [M+H]⁺ 707.7、HRMS [M+H]⁺ 707.4281 (理論値707.4279)、[M+Na]⁺ 729.4099 (理論値729.4099)。

アダマントイル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−シクロペンチル−アミド（化合物３４）
２３．４ｍｇ、純度＞９９％、Rt=7.88、MS [M+H]⁺ 737.6、HRMS [M+H]⁺ 737.4750 (理論値737.4749)、[M+Na]⁺ 759.4569 (理論値759.4568)。

（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−（Ｒ），（Ｒ）−ＨＴｈｒ−ＮＨ_２（化合物３６）
１４ｍｇ、純度＞９９％、Rt=4.82、MS [M+H]⁺ 622.6、[M+2H)²⁺ 312.0。

Ａｃ−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｎ−Ｍｅ−１−Ｍｅ−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−（Ｒ）−４−アミノ−（Ｒ）−５−メチル−ジヒドロ−フラン−２−オン（化合物３７）
２９．８ｍｇ、純度＞９９％、Rt=6.05（系Ｉを用いて測定）、Rt=4.95（系ＩＩを用いて測定）、MS [M+H]⁺ 675.8、HRMS [M+H]⁺ 675.3862 (理論値675.3862), [M+Na]⁺ 697.3683 (理論値697.3684)。

Ｎ−Ｍｅ−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−（Ｒ）−４−アミノ−（Ｒ）−５−メチル−ジヒドロ−フラン−２−オン（化合物３８）
６６ｍｇ、純度＞９９％、Rt=4.96（系Ｉを用いて測定）、Rt=3.71（系ＩＩを用いて測定）、MS [M+H]⁺ 619.8、[M+2H]²⁺ 310.5、HRMS [M+H]⁺ 619.3601 (理論値619.3603)、[M+Na]⁺ 641.3422 (理論値641.3422)。

Ａｃ−Ｎ−Ｍｅ−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−（Ｒ）−４−アミノ−（Ｒ）−５−メチル−ジヒドロ−フラン−２−オン（化合物３９） ２７ｍｇ、純度＞９９％、Rt=5.67（系Ｉを用いて測定）、Rt=4.48（系ＩＩを用いて測定）、MS [M+H]⁺ 661.7、HRMS [M+H]⁺ 661.3708 (理論値661.3708)、[M+Na]⁺ 683.3529 (理論値683.3528)。

Ａｃ−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｎ−Ｍｅ−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−（Ｒ）−４−アミノ−（Ｒ）−５−メチル−ジヒドロ−フラン−２−オン（化合物４０） １２ｍｇ、純度＞９９％、Rt=5.67（系Ｉを用いて測定）、Rt=4.53（系ＩＩを用いて測定）、MS [M+H]⁺ 661.8、HRMS [M+H]⁺ 661.3709 (理論値661.3708)、[M+Na]⁺ 683.3530 (理論値683.3528)。

ブチロイル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−メチル−ペンチル−アミド（化合物４１）
４４．６ｍｇ、純度＞９９％、Rt=7.15、MS [M+H]⁺ 661.8、HRMS [M+H]⁺ 661.4436 (理論値661.4436)。

ブチロイル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−メチル−ブチル−アミド（化合物４２）
３８．３ｍｇ、純度＞９９％、Rt=6.83、MS [M+H]⁺ 647.8、HRMS [M+H]⁺ 647.4280 (理論値647.4279)。

プロピオニル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−メチル−ブチル−アミド（化合物４３）
３５．１ｍｇ、純度＞９７％、Rt=6.73、MS [M+H]⁺ 633.9、HRMS [M+H]⁺ 633.4123 (理論値633.4123)。

Ａｃｅ−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−ペンチル−アミド（化合物４５）
２３．５ｍｇ、純度＞９９％、Rt=6.52、MS [M+H]⁺ 619.7、HRMS [M+H]⁺ 619.3964 (理論値619.3966)、[M+Na]⁺ 641.3786 (理論値641.3786)。

プロピオニル−Ｎ−Ｍｅ−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−シクロペンチル−アミド（化合物４６）
３６．９ｍｇ、純度＞９９％、Rt=6.52、MS [M+H]⁺ 645.9、HRMS [M+H]⁺ 645.4122 (理論値645.4123)。

Ａｃｅ−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）＝β^３−ＨＬｙｓ−メチル−ペンチル−アミド（化合物４７）
１３．８ｍｇ、純度＞９９％、Rt=6.70、MS [M+H]⁺ 634.0、HRMS [M+H]⁺ 633.4120 (理論値633.4123)、[M+Na]⁺ 655.3942 (理論値655.3942)。

プロピオニル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−メチル−ペンチル−アミド（化合物４９）
１１．９ｍｇ、純度＞９９％、Rt=6.97、MS [M+H]⁺ 647.2、[M-H]^- 645.3、[M+TFA]^- 759.2、HRMS [M+H]⁺ 647.4277 (理論値647.4279)。

プロピオニル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−ペンチル−アミド（化合物５１）
１４．３ｍｇ、純度＞９９％、Rt=6.71、MS [M+H]⁺ 633.4、HRMS [M+H]⁺ 633.4122 (理論値633.4123)、[M+Na]⁺ 655.3943 (理論値655.3942)。

Ａｃｅ−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−ブチル−アミド（化合物５２）
３０．３ｍｇ、純度＞９７％、Rt=6.20、MS [M+H]⁺ 605.5、HRMS [M+H]⁺ 605.3810 (理論値605.3810)、[M+Na]⁺ 627.3630 (理論値627.3629)。

プロピオニル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−ブチル−アミド（化合物５３）
３６．５ｍｇ、純度＞９９％、Rt=6.43、MS [M+H]⁺ 619.5、HRMS [M+H]⁺ 619.3966 (理論値619.3966)、[M+Na]⁺ 641.3787 (理論値641.3786)。

ブチロイル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−ブチル−アミド（化合物５４）
３８．３ｍｇ、純度＞９９％、Rt=6.80、MS [M+H]⁺ 633.5、HRMS [M+H]⁺ 633.4126 (理論値633.4123)、[M+Na]⁺ 655.3943 (理論値655.3942)。

ブチロイル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−ペンチル−アミド（化合物５５）
１９．２ｍｇ、純度＞９９％、Rt=6.91、MS [M+H]⁺ 647.8、HRMS [M+H]⁺ 647.4278 (理論値647.4279)、[M+Na]⁺ 669.4099 (理論値669.4099)。

ブチロイル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−シクロペンチル−アミド（化合物５６）
２４．７ｍｇ、純度＞９９％、Rt=6.65、MS [M+H]⁺ 644.9、HRMS [M+H]⁺ 645.4123 (理論値645.4123)、[M+Na]⁺ 667.3946 (理論値667.3942)。

プロピオニル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−シクロペンチル−アミド（化合物５７）
１９．１ｍｇ、純度＞９６％、Rt=6.4、MS [M+H]⁺ 631.6、HRMS [M+H]⁺ 631.3966 (理論値631.3966)、[M+Na]⁺ 653.3785 (理論値653.3786)。

Ａｃｅ−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−ＮＨ_２（化合物５８）
２８．２ｍｇ、純度＞９９％、Rt=5.36、MS [M+H]⁺ 548.7、HRMS [M+H]⁺ 549.3182 (理論値549.3184)、[M+Na]⁺ 571.3003 (理論値571.3003)。

（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−ＮＨ_２（化合物５９）
２６ｍｇ、純度＞９９％、Rt=4.69、MS [M+H]⁺ 507.5、[M+2H]²⁺ 254.5、HRMS [M+H]⁺ 507.3079 (理論値507.3078)、[M+Na]⁺ 529.2900 (理論値529.2898)。

プロピオニル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−ＮＨ_２（化合物６０）
２２ｍｇ、純度＞９７％、Rt=5.52、MS [M+H]⁺ 563.6、[M+2H]²⁺ 282.5。

ブチロイル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−ＮＨ_２（化合物６１）
２３ｍｇ、純度＞９６％、Rt=5.77、MS [M+H]⁺ 577.5、[M+2H]²⁺ 289.6、HRMS [M+H]⁺ 577.3496 (理論値577.3497)、[M+Na]⁺ 599.3315 (理論値599.3316)。

（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−シクロペンチル−アミド（化合物６２）
４７ｍｇ、純度＞９６％、Rt=5.49、MS [M+H]⁺ 575.6、[M+2H]²⁺ 288.6、HRMS [M+H]⁺ 575.3706 (理論値575.3704)、[M+Na]⁺ 597.3527 (理論値597.3524)。

プロピオニル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｎ−Ｍｅ−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−メチル−ペンチル−アミド（化合物６３）
３６ｍｇ、純度＞９９％、Rt=7.30、MS [M+H]⁺ 661.2、MS [M-H]^- 659.2、[M+TFA]^- 773.2、HRMS [M+H]⁺ 661.4435 (理論値661.4436)、[M+Na]⁺ 683.4258 (理論値683.4255)。

プロピオニル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｎ−Ｍｅ−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−メチル−ヘキシル−アミド（化合物６５）
２５ｍｇ、純度＞９９％、Rt=7.60、MS [M+H]⁺ 675.7、HRMS [M+H]⁺ 675.4593 (理論値675.4592)、[M+Na]⁺ 697.4412 (理論値697.4412)。

プロピオニル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｎ−ベンジル−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−メチル−ペンチル−アミド（化合物６６）
２０ｍｇ、純度＞９８％、Rt=8.10、MS [M+H]⁺ 737.8、[M+2H]²⁺ 369.8、[M-H]- 735.2、[M+TFA]- 849.2、HRMS [M+H]⁺ 737.4743 (理論値737.4749)、[M+Na]⁺ 759.4569 (理論値759.4568)。

プロピオニル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｎ−ベンジル−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−メチル−ヘキシル−アミド（化合物６９）
２２ｍｇ、純度＞９９％、Rt=8.40、MS [M+H]⁺ 751.9、HRMS [M+H]⁺ 751.4903 (理論値751.4905)、[M+Na]⁺ 773.4724 (理論値773.4725)。

プロピオニル−（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｎ−Ｍｅ−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−ペンチル−アミド（化合物７０）
７０ｍｇ、純度＞９５％、Rt=7.14、MS [M+H]⁺ 647.2、[M+2H]²⁺ 324.7、[M-H]^- 645.3, [M+TFA]^- 759.2、HRMS [M+H]⁺ 647.4277 (理論値647.4279)。

（Ｓ）−β^３−ＨＰｈｅ−（Ｒ）−Ｎ−Ｍｅ−Ｔｒｐ−（Ｓ）−β^３−ＨＬｙｓ−ＮＨ_２（化合物７２）
３０ｍｇ、純度＞９９％、Rt=5.28、MS [M+H]⁺ 521.8、[M+2H]²⁺ 261.6、HRMS [M+H]⁺ 521.3236 (理論値521.3235)、[M+Na]⁺ 543.3057 (理論値543.3054)。

これら命名した化合物の物理化学的特性の概要を表３に示す。

参照文献

ペプチド類似体のｈｓｓｔ４の選択性を証明する、最初の化合物群の結合データを示す。 確立された二重コンジュゲート生体分子の構造−活性関係を示す。Ｒ_１およびＲ_２位に関しては表１を参照。 最良の親油化位置の生物学的スクリーニングを示す。 Ｃ末端修飾化合物の結合親和性と選択性を示す。 確立された二重コンジュゲート生体分子の構造−活性関係を示す。 Ｃ末端Ｎ−メチル化化合物に対する結合親和性を示す。 ＲＰ−クロマトグラフィー保持時間とＣｌｏｇＰ値との相関を示す。 ＲＰ−クロマトグラフィー保持時間とＨＴ−ＬｏｇＰ ｏ／ｗ値との相関を示す。 ＨＴ−ｌｏｇＰ ｏ／ｗとＣｌｏｇ Ｐ値との相関を示す。 ｐＨ６．８で測定したハイスループット溶解度データＳ_ｗ(Wang-J et al, 2000, Linpinsky et al., 1997)を示す。 ｐＨ６．８で測定したハイスループット透過性データｌｏｇ Ｐ_ｅ（Ｐ_６はｃｍ／ｓ）を示す。

Claims (32)

1. 式Ｉ：
   

   

   ［式中、Ｒ^１＝ＣＯＲ^７またはＲ^７であり、Ｒ^７は、直鎖もしくは分枝Ｃ_１−Ｃ_１２アルキル基、直鎖もしくは分枝Ｃ_２−Ｃ_１２アルケニル基、直鎖もしくは分枝Ｃ_２−Ｃ_１２アルキニル基、または飽和／不飽和、芳香族もしくは複素芳香族単環式もしくは多環式基であり、
   ここで、前記アルキル、アルケニルまたはアルキニル基は、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ_１−Ｃ_４アルコキシ、カルボキシ、Ｃ_１−Ｃ_４アルコキシカルボニル、アミノ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルアミノ、ジ−（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）アミノ、シアノ、カルボキシアミド、カルボキシ−（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）アミノ、カルボキシ−ジ（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）アミノ、スルホ、スルフィド（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）、スルホキシド（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）、スルホノ（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）、チオまたは飽和、不飽和、芳香族もしくは複素芳香族、単環式もしくは多環式基で一置換または多置換されていてもよく、
   ここで、前記環式基は、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ_１−Ｃ_４−アルコキシ、カルボキシＣ_１−Ｃ_４アルコキシカルボニル、アミノ、Ｃ_１−Ｃ_４−アルキルアミノ、ジ（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）アミノ、シアノ、カルボキシアミド、カルボキシ（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）アミド、カルボキシ−ジ（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）アミド、スルホ、スルフィド（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）、スルホキシド（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）、スルホノ（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）、チオ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル、Ｃ_２−Ｃ_４アルケニルまたはＣ_２−Ｃ_４アルキニルで一置換または多置換されていてもよく、
   Ｒ^２は水素またはＣ_１−Ｃ_４アルキルであり、
   Ｒ^３は水素、または飽和、不飽和、芳香族もしくは複素芳香族、単環式もしくは多環式基で置換されていてもよいＣ_１−Ｃ_４アルキルであり、
   Ｒ^４は水素またはＣ_１−Ｃ_４アルキルであり、
   Ｒ^５は水素またはＣ_１−Ｃ_４アルキルであり、かつ
   Ｒ^６＝（Ｙ）_ｎ（−ＮＲ^８Ｒ^９）_ｍであり、ここで、Ｙは、アミノカルボン酸、特にβ−アミノカルボン酸の残基であり、Ｙは環式基を形成していてもよく、
   ｎ＝０または１、
   ｍ＝０または１、
   Ｒ^８およびＲ^９は独立に水素、直鎖もしくは分枝Ｃ_１−Ｃ_１２アルキル基、直鎖もしくは分枝Ｃ_２−Ｃ_１２アルケニル基、直鎖もしくは分枝Ｃ_２−Ｃ_１２アルキニル(alkenyl)基、または飽和、不飽和、芳香族もしくは複素芳香族単環式もしくは多環式基であり、
   ここで、前記アルキル、アルケニルまたはアルキニル基は、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ_１−Ｃ_４アルコキシ、カルボキシ、Ｃ_１−Ｃ_４アルコキシカルボニル、アミノ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルアミノ、ジ−（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）アミノ、シアノ、カルボキシアミド、カルボキシ−（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）アミノ、カルボキシ−ジ（Ｃ_１−Ｃ−_４−アルキル）アミノ、スルホ、スルフィド（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）、スルホキシド（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）、スルホノ（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）、チオまたは飽和、不飽和、芳香族もしくは複素芳香族、単環式もしくは多環式基で一置換または多置換されていてもよく、
   ここで、前記環式基は、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ_１−Ｃ_４−アルコキシ、カルボキシＣ_１−Ｃ_４アルコキシカルボニル、アミノ、Ｃ_１−Ｃ_４−アルキルアミノ、ジ（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）アミノ、シアノ、カルボキシアミド、カルボキシ（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）アミド、カルボキシ−ジ（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）アミド、スルホ、スルフィド（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）、スルホキシド（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）、スルホノ（Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル）、チオ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル、Ｃ_２−Ｃ_４アルケニルまたはＣ_２−Ｃ_４アルキニルで一置換または多置換されていてもよく；
   あるいは、Ｒ^８およびＲ^９は一緒に環式基、好ましくは、５員または６員環式基を形成する］
   で示される、個々のエナンチオマー、ジアステレオマーもしくはその混合物の形態の、化合物、またはその塩もしくは誘導体。
2. Ｒ^７が場合により置換されていてもよいＣ_１−Ｃ_１０アルキルまたは場合により置換されていてもよい環式基である、請求項１に記載の化合物。
3. Ｒ^７がメチル、エチル、ブチル、ノニル、フェニル、エチルフェニル、シクロヘキシルまたはアダマンチルである、請求項２に記載の化合物。
4. Ｒ^２が水素またはメチルである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
5. Ｒ^３が水素、メチルまたはエチルフェニルである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
6. Ｒ^４が水素またはメチルである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
7. Ｒ^５が水素またはメチルである、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物。
8. ｎ＝０である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物。
9. ｎ＝１である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物。
10. Ｒ^６が、ラクトン基を形成し得るβ−トレオニン残基またはβ−トレオニンアミド残基である、請求項９に記載の化合物。
11. Ｒ^６がβ−バリン残基またはβ−バリンアミド残基である、請求項９に記載の化合物。
12. Ｒ^８が場合により置換されていてもよいＣ_１−Ｃ_１０、特にＣ_２−Ｃ_８アルキル基、または場合により置換されていてもよい環式基である、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の化合物。
13. Ｒ^８がエチル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、エチルフェニルまたはシクロペンチルである、請求項１２に記載の化合物。
14. Ｒ^９が水素またはＣ_１−Ｃ_２アルキルである、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の化合物。
15. ソマトスタチンレセプターと結合する、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の化合物。
16. ソマトスタチンレセプターｓｓｔ４と選択的に結合する、請求項１５に記載の化合物。
17. ｓｓｔ４レセプターに対するＫ_Ｄ親和性が５０ｎＭ以下である、請求項１６に記載の化合物。
18. 有効成分として請求項１〜１７のいずれか一項に記載の化合物またはその生理学的に許容される塩もしくは誘導体を含む、医薬組成物。
19. 治療用の請求項１８に記載の組成物。
20. 診断用の請求項１８に記載の組成物。
21. ソマトスタチン機能不全に関連する障害を予防または処置する方法であって、医薬上有効量の請求項１〜１７のいずれか一項に記載の化合物を、それを必要とする対象に投与することを含む、方法。
22. 対象が哺乳類である、請求項２１に記載の方法。
23. 対象がヒトである、請求項２２に記載の方法。
24. 中枢神経系の障害、特に、癲癇、行動障害、記憶・学習障害、注意欠陥障害、および疼痛、神経疾患（例えば神経変性疾患、特にアルツハイマー病、パーキンソン病および多発性硬化症）の処置のための医薬組成物の製造における、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の化合物の使用。
25. 過増殖性障害、特に内分泌の過増殖性障害、および固形腫瘍の処置、例えば、先端巨大症、黒色腫、乳癌、前立腺腺腫および前立腺癌、肺癌、腸癌、皮膚癌および白血病の処置のための医薬組成物の製造における、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の化合物の使用。
26. 再狭窄などの血管リモデリングに関連する疾患の処置または慢性移植拒絶症の処置のための医薬組成物の製造における、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の化合物の使用。
27. 脳動脈瘤などの術後症状および術後血管再狭窄の処置のための医薬組成物の製造における、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の化合物の使用。
28. 下痢、および化学療法誘発性およびＡＩＤＳ関連下痢などの胃腸障害の処置、ならびに急性静脈瘤出血の処置のための医薬組成物の製造における、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の化合物の使用。
29. 関節炎および関節リウマチ、およびリウマチ性脊椎炎などの他の関節障害を含む関節の炎症をはじめとする炎症性障害の処置のための医薬組成物の製造における、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の化合物の使用。
30. 乾癬、アトピー性皮膚炎、喘息の処置のための医薬組成物の製造における、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の化合物の使用。
31. グレーブス病、炎症性腸疾患、糖尿病性網膜症、腎症、糖尿病性血管障害および虚血性疾患、良性前立腺肥大の処置のための医薬組成物の製造における、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の化合物の使用。
32. 眼性疾患、例えば、加齢性黄斑変性および緑内障、糖尿病性網膜症の処置のための医薬組成物の製造における、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の化合物の使用。

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