CN101578287A - 地索拉唑及其衍生物与细胞结合分子的轭合物,新的地索拉唑衍生物,其制备方法及其应用 - Google Patents
地索拉唑及其衍生物与细胞结合分子的轭合物,新的地索拉唑衍生物,其制备方法及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101578287A CN101578287A CNA2007800379251A CN200780037925A CN101578287A CN 101578287 A CN101578287 A CN 101578287A CN A2007800379251 A CNA2007800379251 A CN A2007800379251A CN 200780037925 A CN200780037925 A CN 200780037925A CN 101578287 A CN101578287 A CN 101578287A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- alkyl
- analog
- aryl
- registration number
- cas registration
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Landscapes
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
本发明提供了地索拉唑及其衍生物与细胞结合分子诸如肽类、蛋白质、激素、血液蛋白质和抗体的轭合物。本发明进一步提供了新的地索拉唑衍生物和制备这类轭合物和地索拉唑衍生物的方法。这些化合物可以用作治疗哺乳动物生理学情况和/或病理生理学情况的药物,特别是用作治疗各种肿瘤的药物。
Description
技术领域
本发明涉及地索拉唑(Disorazole)及其衍生物与细胞结合分子诸如肽类和蛋白质类的轭合物以及新的地索拉唑衍生物及其制备方法。这些化合物可以用作特别治疗各种肿瘤的药物。
背景技术
对于接下来的数年,在全世界范围内预期肿瘤病和与肿瘤相关的死亡病例会有显著增加。在2001年,全世界大约有1千万人患有癌症,并且超过6百万人死于该疾病。肿瘤的发生是植物界、动物界和人类中高等生物的重要疾病。一般公认的癌发生的多步模型推定作为个体细胞中多次突变累积的结果,所述细胞在增殖和分化行为方面发生改变,通过良性中间状态,最终达到伴有转移的恶性状态。
术语癌症或肿瘤包含了超过200种不同疾病的临床情况。肿瘤病可以以良性或恶性方式发生。最重要的肿瘤为肺、乳房,胃,子宫颈,前列腺,头颈,大和小肠,肝和血液系统的那些肿瘤。在病程,预后和治疗行为方面有很大差异。在确认的病例中超过90%涉及实体瘤,所述肿瘤特别是在晚期或转移时治疗困难或不可治疗。癌症控制的三个支柱仍然是手术切除,放射治疗和化疗。尽管已经取得了很大进展,但是尚未能开发出使存活时间显著延长或甚至完全治愈广泛散播的实体瘤的药物。因此,本发明的用于控制癌症的新药是很有意义的。
天然物质是药物研究中新型前导结构的重要来源,并且在某些情况中还直接适合于研发新的药物(Shu Y,J.Nat.Prod.1998,61:1053-1071)。已知许多天然物质具有强细胞毒性作用(Ram VJ等,DrugNews Perspect 2001,14(8):465-482)。
已知由地索拉唑构成的天然物质从纤维素堆囊菌(Sorangiumcellulosum)菌株So ce12的细菌(Jansen R等,Liebigs Ann.Chem.1994,(8):759-773)中分离。
总计已经分离并以物理化学方式表征了29种地索拉唑。其中,就地索拉唑A1而言,据报导它在细胞模型中具有抗增殖作用(Irschik H等,J.Antibiotics 1995,48(1):31-35;Elnakady YA,Dissertation2001,TechnischeCarolo-Wilhelmina zuBraunschweig)。然而,既未公开也未暗示其在治疗肿瘤病(oncoses)中的应用。对其它地索拉唑也未进行生物学研究。
WO 2004/024149中报导地索拉唑E1和D1特别对各种人肿瘤细胞系具有细胞毒性作用。以纳-和皮摩尔浓度抑制,特别是卵巢癌,前列腺癌,胶质母细胞瘤,肺癌和乳腺癌细胞分裂。地索拉唑E1和D1的作用在这种情况中为细胞周期依赖性的。甚至在纳摩尔浓度下,使细胞周期保持在G2/M期中并且促成癌细胞的细胞凋亡。
WO 2004/024149中进一步表明地索拉唑的抗增殖作用特别基于微管蛋白聚合的有效抑制。此外,地索拉唑E1有效抗紫杉醇-和长春地辛-抗性细胞系。这一结果是有原因的,特别是因为地索拉唑A1不适于作为细胞生长抑制剂(Hoefle G,Gesellschaft fürBiotechnologische Forschung(GBF)的年报1999/2000,101/103页)。
Wipf和合作者检验了地索拉唑C的细胞活性及其类似物中的8种的结构-活性相关性(Wipf等,Chem.Biol.Drug Des.2006,67(1):66-73)。
已经研究并且充分描述了用于合成地索拉唑A1和C1的总体合成策略(Hillier MC等,J.Org.Chem.2001,66:6037-6045;HartungIV等,Organic Letters 2002,4(19):3239-3242;Wipf P等,J.Am.Chem.Soc.2004,126(47):15346-15347)。
还进一步表征了地索拉唑A1:经证实它作为抗有丝分裂剂对微管蛋白聚合起作用并且诱导哺乳动物细胞中的细胞凋亡(Elnakady YA等,Biochem.Pharmacol.2004,67(5):927-935)。此外,产生了地索拉唑A1的甲醇分解产物并且研究了其潜在的抗增殖活性(HearnBR等,J.Nat.Prod.2006,69(1):148-150)。
下列现有技术对比文件涉及地索拉唑或相关化合物的生物合成:WO 2004/053065描述了编码地索拉唑聚酮化合物合酶的多核苷酸。Schupp和合作者表征了用于生物合成大环内酯类抗生素Soraphen A的纤维素堆囊菌基因簇(Schupp T等,Journal of Bacteriology 1995,177:3673-3679)。Carvalho R等(Carvalho R等,Gene 2005,359:91-98),Kopp和合作者(Kopp M等,Chembiochem.2005,6(7):1277-1286)和WO 2006/075013还表征了用于生物合成地索拉唑的生物合成基因。
然而,上述现有技术对比文件中无一披露或提示了地索拉唑轭合物。
US 6,214,969描述了带有细胞毒性部分的促黄体激素释放激素(LHRH)类似物。这类部分可以为D-/L-Mel(4-[双(2-氯乙基)氨基]-D/L-苯基丙氨酸),环丙烷烷酰基,吖丙啶-2-羰基,环氧烷基,1,4-萘醌-5-氧代羰基-乙基,多柔比星基(多柔比星,DOX),丝裂霉素基(丝裂霉素C),埃斯波霉素基或甲氨蝶呤基。
然而,作为微管蛋白聚合抑制剂并且诱导细胞凋亡的地索拉唑未被提及过,也未提及过明显赋予它们的应用。
US 5,843,903涉及细胞毒性蒽环类抗生素类似物,特别是多柔比星(DOX)或其柔胺修饰的衍生物。这类细胞毒性部分与肽激素诸如LHRH,铃蟾肽和生长抑素及其类似物轭合。
Schally和Nagy综述了用于各种癌症的新的治疗方式,由应用靶向的LHRH,铃蟾肽和生长抑素的细胞毒性类似物组成,它们包含多柔比星(DOX)或2-吡咯烷并-DOX(Schally AV等,Life Sciences 2003,72:2305-2320;Nagy A等,Current Pharmaceutical Design 2005,11:1167-1180)。
在所有三篇上述参考文献中既未披露也未提示地索拉唑。
涉及含轭合物的细胞毒性剂的其它现有技术对比文件包括用于癌症治疗的抗体-细胞毒性剂轭合物(Chen J等,Expert Opin.DrugDeliv.2005,2(5):873-890),用于肿瘤学的抗体-药物轭合物(HamannPR,Expert Opin.Drug Deliv.2005,15(9):1087-1103),用于肿瘤靶向的多级抗癌药物轭合物(Jaracz S等,Bioorganic & MedicinalChemistry 2005,13:5043-5054),用于治疗前列腺癌和/或良性前列腺增生的长春花生物碱细胞毒性剂-寡肽轭合物(WO 97/12624,WO 98/10651和WO 99/02175),用于治疗前列腺癌的前体药物长春碱-肽基轭合物(Brady SF等,J.Med.Chem.2002,45:4706-4715),用于可选择的抗癌治疗的酶-和质子-活化的前体药物(Tietze LF等,Current Pharmaceutical Design 2003,9:2155-2175)和用于抗体-定向的酶前体药物治疗的天然蒽环类前体药物(Michel S等,Studiesin Natural Products Chemistry 2000,21:157-180)。
此外,然而,在所有上述这些参考文献中,既未提及作为微管蛋白聚合抑制剂并且诱导细胞凋亡的地索拉唑,也未提示它们的应用。
发明内容
本发明具有提供地索拉唑及其衍生物与细胞结合分子的轭合物的目的。本发明的另一个目的在于提供新的地索拉唑衍生物。本发明的另一个目的在于提供其制备方法。本发明的再一个目的在于提供地索拉唑及其衍生物与细胞结合分子的轭合物和可以用作药物、特别是用于治疗各种肿瘤的新的地索拉唑衍生物。
在本发明的一个方面中通过提供式(I)的化合物令人意外地解决了本发明的目的
C1-B1-A-B2-C2 (I),
其中:
A为式(II)的地索拉唑部分
其中:
Ran,Rbn,Rcn,Rdn,Rem,Rfm,Rgm,Rhm,R1,R2,R3,R4,R5,R6,R7,R8,R9,R10,R11,R12,R13,R14,R15,R16,R17,R18,R19,R20,R21,R22,R23,R24彼此独立地选自“氢,烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基,杂环基-烷基,烷基磺酰基,芳基磺酰基,芳基-烷基磺酰基,卤素,羟基,羰基,乙酰基,羧基,羧基酯,酰胺,碳酸酯,氨基甲酸酯,α-氨基酸残基,β-氨基酸残基,烷氧基,氨基,亚氨基,羟基氨基,一-烷氨基,二-烷氨基,肼基,氰基,烷基-氰基,巯基,二硫烷基和/或烷基-硫基”,它们任选在烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基,杂环基-烷基,烷基磺酰基,芳基磺酰基,芳基-烷基磺酰基,羰基,乙酰基,羧基,羧基酯,酰胺,碳酸酯,氨基甲酸酯,烷氧基,一-烷氨基,二-烷氨基,烷基-氰基,二硫烷基和/或烷基-硫基上被1、2或3个取代基取代,所述的取代基彼此独立地选自“烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基,杂环基-烷基,烷基磺酰基,芳基磺酰基,芳基-烷基磺酰基,卤素,-F,-Cl,-Br,-I,-N3,-NO2,=O,=S,=S(O)2,羟基,羰基,乙酰基,羧基,羧基酯,-C(O)OH,-C(O)NH2,酰胺,碳酸酯,氨基甲酸酯,α-氨基酸残基,β-氨基酸残基,烷氧基,氨基,亚氨基,羟基氨基,一-烷氨基,二-烷氨基,肼基,氰基,烷基-氰基,巯基,二硫烷基和/或烷基-硫基”;
任选Ran,Rbn,Rcn,Rdn,Rem,Rfm,Rgm,Rhm,R1,R2,R3,R4,R5,R6,R7,R8,R9,R10,R11,R12,R13,R14,R15,R16,R17,R18,R19,R20,R21,R22,R23,R24基团中的任意两个相邻基团R可以构成原子键而生成双键或可以构成环氧化物(环氧乙烷),环氮乙烷(吖丙啶),烷基-,环烷基-,环烷基-烷基-,杂芳基-,芳基-烷基-,杂芳基-烷基-,杂环基-和/或杂环基-烷基-取代的环氮乙烷(吖丙啶),硫杂丙环和/或硫杂丙环-S-氧化物基团;
B1,B2彼此独立地为共价连接A与C1和/或C2的连接基;
C1,C2彼此独立地为选自“肽,肽激素,蛋白质,蛋白质激素,受体配体,血浆蛋白质,血清蛋白质,抗体,抗体片段的细胞结合分子”;
n为0,1,2,3;
m为0,1,2,3。
为了避免疑问,上述式(I)和(II)的化合物、以及如下列举的式(III)-(VI)的化合物,可以以所有可能的双键异构体的形式存在,诸如纯E-或Z-异构体或这些双键异构体的混合物。
此外,就上述式(II),而且还有如下列举的式(III)-(VI)而言,n/o=0意旨在左手侧上的噁唑环与右手侧上的羧基之间仅存在6个碳原子。就n/o=1,2,3而言,这意味着包括8,10或12个碳原子。类似地,同样的含义适用于m/p=0,1,2,3,其中在右手侧上的噁唑环与左手侧上的羧基之间分别包括6,8,10或12个碳原子。
在一个优选的实施方案中提供了上述式(I)和(II)的化合物,其中A为式(III)的地索拉唑部分
其中:
Rio,Rjo,Rkp,Rlp,Rmp,Rnp,R25,R26,R27,R28,R29,R30,R31,R32,R33,R34,R35,R36,R37,R38,R39,R40,R41,R42,R43,R44彼此独立地选自“氢,烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基,杂环基-烷基,烷基磺酰基,芳基磺酰基,芳基-烷基磺酰基,卤素,羟基,羰基,乙酰基,羧基,羧基酯,酰胺,碳酸酯,氨基甲酸酯,α-氨基酸残基,β-氨基酸残基,烷氧基,氨基,亚氨基,羟基氨基,一-烷氨基,二-烷氨基,肼基,氰基,烷基-氰基,巯基,二硫烷基和/或烷基-硫基”,它们任选在烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基,杂环基-烷基,烷基磺酰基,芳基磺酰基,芳基-烷基磺酰基,羰基,乙酰基,羧基,羧基酯,酰胺,碳酸酯,氨基甲酸酯,烷氧基,一-烷氨基,二-烷氨基,烷基-氰基,二硫烷基和/或烷基-硫基上被1、2或3个取代基取代,所述的取代基彼此独立地选自“烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基,杂环基-烷基,烷基磺酰基,芳基磺酰基,芳基-烷基磺酰基,卤素,-F,-Cl,-Br,-I,-N3,-NO2,=O,=S,=S(O)2,羟基,羰基,乙酰基,羧基,羧基酯,-C(O)OH,-C(O)NH2,酰胺,碳酸酯,氨基甲酸酯,α-氨基酸残基,β-氨基酸残基,烷氧基,氨基,亚氨基,羟基氨基,一-烷氨基,二-烷氨基,肼基,氰基,烷基-氰基,巯基,二硫烷基和/或烷基-硫基”;
任选Rio,Rjo,Rkp,Rlp,Rmp,Rnp,R25,R26,R27,R28,R29,R30,R31,R32,R33,R34,R35,R36,R37,R38,R39,R40,R41,R42,R43,R44基团中的任意两个相邻基团R可以构成原子键而生成双键或可以构成环氧化物(环氧乙烷),环氮乙烷(吖丙啶),烷基-,环烷基-,环烷基-烷基-,杂芳基-,芳基-烷基-,杂芳基-烷基-,杂环基-和/或杂环基-烷基-取代的环氮乙烷(吖丙啶),硫杂丙环和/或硫杂丙环-S-氧化物基团;
o为0,1,2,3;
p为0,1,2,3。
在另一个优选的实施方案中提供了上述式(I),(II)和(III)的化合物和上述实施方案,其中连接基B1,B2彼此独立地选自:“酶可裂解连接基,蛋白水解可裂解连接基,self-immolative连接基,对酸敏感的连接基,二硫化物(交换)连接基,水解不稳定连接基,双官能连接基,多官能连接基,酯连接基,肽连接基,带有1、2、3、4或5个氨基酸残基的连接基,二肽连接基,四肽连接基,腙连接基,酰肼连接基,二碳酸残基连接基,聚乙二醇(PEG)连接基”。
在另一个优选的实施方案中提供了上述式(I),(II)和(III)的化合物和上述实施方案,其中连接基B1,B2彼此独立地选自:
“X1-烷基-X2,X3-环烷基-X4,X5-环烷基-烷基-X6,X7-烷基-环烷基-烷基-X8,X9-芳基-X10,X11-芳基-烷基-X12,X13-烷基-芳基-烷基-X14,X15-杂芳基-X16,X17-杂芳基-烷基-X18,X19-烷基-杂芳基-烷基-X20,X21-杂环基-X22,X23-杂环基-烷基-X24,X25-烷基-杂环基-烷基-X26”,其中X1,X2,X 3,X4,X5,X6,X7,X8,X9,X10,X11,X12,X13,X14,X15,X16,X17,X18,X19,X20,X21,X22,X23,X24,X25,X26彼此独立地选自“O-,S-,S-S-,C(O)O-,C(O)-,OC(O)O-,C(O)NH-,OC(O)NH-,NHC(O)-,NHC(O)O-,NH-,NY1-,C(O)NY2-,OC(O)NY3-,NY4C(O)-,NY5C(O)O-,C=N-NH-,NH-N=C-,C=N-NY6-,NY7-N=C-”,其中Y1,Y2,Y3,Y4,Y5,Y6,Y7彼此独立地选自“烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基,杂环基-烷基,卤素,-F,-Cl,-Br,-I,-N3,-NO2,羟基,烷氧基,氨基,亚氨基,羟基氨基,肼基,氰基,烷基-氰基,巯基”;
草酰基,丙二酰基,琥珀酰基,戊二酰基,己二酰基,马来酰基,富马酰基;
和基于下列分子的连接基:
Gly-Phe-Leu-Gly,Phe-Lys,Val-Cit(瓜氨酸);
1,4-双(氨基甲基-)-环己烷,1,4-双(氨基甲基-)-环庚烷,1,3-双(氨基甲基-)-环戊烷,1-氨基-4-(氨基甲基)-环己烷,1,4-二氨基环己烷,1,4-双(氨基甲基)双环[2.2.2]辛烷,γ-马来酰亚胺基己酰基酰肼,4-肼基磺酰基苯甲酸,SMCC双官能连接基,MDS(甲基二硫烷基),PEG2,PEG3,PEG7;
Lilly连接基:
Lilly BAMME连接基:
Lilly BAP连接基:
顺式-乌头酸连接基:
PABC1连接基:
PABC2连接基:
PABC3连接基:
PABC4连接基:
PABC5连接基:
PABC6连接基:
在本发明范围内的术语“连接基”预期包括任何连接基,连接部分,间隔基和其它本领域技术人员公知的分子/部分,并且它们适合于连接地索拉唑部分A与细胞结合分子C1和/或C2。
在本领域技术人员知识范围内可以使用上述优选连接基分子的合适的活化形式和/或基团来生成最终的轭合物。
有关合适的连接基的相关现有技术文献包括,例如Michel S等,Studies in Natural Products Chemistry 2000,21:157-180;TietzeLF等,Current Pharmaceutical Design 2003,9:2155-2175;BradySF等,J.Med.Chem.2002,45:4706-4715;WO 99/02175;JaraczS等,Bioorganic & Medicinal Chemistry 2005,13:5043-5054;HamannPR,Expert Opin.Drug Deliv.2005,15(9):1087-1103;Chen J等,Expert Opin.Drug Deliv.2005,2(5):873-890;US 5,843,903,US 6,214,969。
在另一个优选的实施方案中提供了上述式(I),(II)和(III)的化合物和上述实施方案,其中细胞结合分子C1,C2彼此独立地选自:“八聚体肽,九聚体肽,十聚体肽,LHRH类似物,LHRH激动剂,LHRH拮抗剂,铃蟾肽,铃蟾肽类似物,铃蟾肽拮抗剂,生长抑素,生长抑素类似物,血清白蛋白,人血清白蛋白(HSA),加兰肽受体配体,GAL1受体配体,GAL2受体配体,加兰肽(CAS登记号119418-04-1)和类似物,生长抑素受体配体,sst1受体配体,sst2受体配体,sst4受体配体,sst5受体配体,生长抑素(CAS登记号38916-34-6)和类似物,奥曲肽(CAS登记号83150-76-9)和类似物,RC-121(D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys[环(2→7)二硫化物]-Thr-NH2;CAS登记号99660-13-6)和类似物,铃蟾肽受体配体,BB1受体配体,BB2受体配体,BB3受体配体,胃泌素释放肽受体(GRP-R)配体,铃蟾肽(Bn;CAS登记号31362-50-2)和类似物,胃泌素释放肽(GRP)和类似物,神经调节肽B(CAS登记号102577-19-5)和类似物,[D-Tyr6,β-Ala11,Phe13,Nle(正亮氨酸)14]-铃蟾肽(6-14)和类似物,RC-3095(H-D-Tpi-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-psi-Leu-NH2;CAS登记号138147-78-1;US 5,244,883;US 5,369,094)和类似物,Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Psi-Leu-Leu-NH2(US 5,843,903)和类似物,促性腺素释放激素受体(GnRH-R)配体,GnRH-R I型配体,GnRH-RII型配体,促黄体激素释放激素(LHRH;Glp-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2)和类似物,[D-Lys6]-LHRH,曲普瑞林([D-Trp6]-LHRH;CAS登记号57773-63-4)和类似物,组氨瑞林(6-[1-(苯基甲基)-D-组氨酸]-9-(N-乙基-L-脯氨酰胺)-10-脱甘氨酰胺-LHRH;CAS登记号76712-82-8)和类似物,布舍瑞林(6-[O-(1,1-二甲基乙基)-D-丝氨酸]-9-(N-乙基-L-脯氨酰胺)-10-脱甘氨酰胺-LHRH;CAS登记号57982-77-1)和类似物,亮丙瑞林(6-D-亮氨酸-9-(N-乙基-L-脯氨酰胺)-10-脱甘氨酰胺-LHRH;CAS登记号53714-56-0)和类似物,戈舍瑞林(6-[O-(1,1-二甲基乙基)-D-丝氨酸]-LHRH-2-(氨基羰基)酰肼;CAS登记号65807-02-5)和类似物,那法瑞林(6-[3-(2-萘基)-D-丙氨酸]-LHRH;CAS登记号76932-56-4)和类似物,LHRH-II(Pyr-His-Trp-Ser-His-Gly-Trp-Tyr-Pro-Gly-NH2)和类似物,西曲瑞克(CAS登记号120287-85-6)和类似物,替维瑞克/安雷利克斯(CAS登记号144743-92-0)和类似物,奥扎瑞克(D-63153;CAS登记号295350-45-7)和类似物,阿巴瑞克(CAS登记号183552-38-7)和类似物,地加瑞克(CAS登记号214766-78-6)和类似物,地肽瑞里(CAS登记号89662-30-6)和类似物,加尼瑞克(CAS登记号124904-93-4)和类似物,伊妥瑞克/安肽(CAS登记号112568-12-4)和类似物,GPR54受体配体,Kisspeptins和类似物,Kisspeptin-10/Kp-10(CAS登记号374675-21-5)和类似物,Kisspeptin-13/Kp-13(CAS登记号374675-18-0)和类似物,Metastin(CAS登记号388138-21-4)和类似物,神经激肽受体配体,NK1/NKA受体配体,NK2/NKB受体配体,NK3受体配体,物质P(H-Arg-Pro-Lys-Pro-Gln-Gln-Phe-Phe-Gly-Leu-Met-NH2;CAS登记号33507-63-0)和类似物,H-Asp-Ser-Phe-Val-Gly-Leu-Nle-NH2和类似物,[Sar9,Met(O2)11]-物质P和类似物,[Nle10]-神经激肽A(4-10)和类似物,[MePhe7]-神经激肽B和类似物,[β-Ala8]-神经激肽A(4-10)和类似物,缓激肽受体配体,B1受体配体,B2受体配体,缓激肽(H-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Phe-Arg-OH;CAS登记号58-82-2)和类似物,desArg9[Leu8]-缓激肽和类似物,desArg9-缓激肽和类似物,LysdesArg9-缓激肽和类似物,LysdesArg9[Leu8]-缓激肽和类似物,[Hyp3,Tyr(Me)8]-缓激肽和类似物,D-Arg[Hyp3,D-Phe7,Leu8]-缓激肽和类似物,BKM 718(CAS登记号259883-69-7)和类似物,BKM 822(CAS登记号259884-10-1)和类似物,BKM 570(CAS登记号259885-54-6)和类似物,BKM-638(CAS登记号259885-81-9)和类似物,GHS受体配体,葛瑞林(CAS登记号304853-26-7)和类似物,海沙瑞林(CAS登记号140703-51-1)和类似物,GHRP-1(CAS登记号141925-59-9)和类似物,GHRP-2(CAS登记号158861-67-7)和类似物,GHRP-6(His-D-Trp-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2;CAS登记号87616-84-0)和类似物,D-Lys3-GHRP-6和类似物,EP-1572(CAS登记号381231-18-1)和类似物,脱-辛酰基葛瑞林和类似物,松弛素受体配体,LGR7受体配体,LGR8受体配体,松弛素(CAS登记号9002-69-1)和类似物,胰岛素样3肽(INSL3;CAS登记号166515-61-3)和类似物,胰高血糖素样肽1受体配体,胰高血糖素受体配体,胰高血糖素样肽-1(GLP-1;CAS登记号89750-14-1)和类似物,胰高血糖素样肽-2(GLP-2;CAS登记号116469-36-4)和类似物,缩胆囊素受体配体,CCK1/CCKA受体配体,CCK2/CCKB受体配体,CCKC受体配体,缩胆囊素(CAS登记号9011-97-6)和类似物,神经肽Y(NPY)受体配体,NPY1受体配体,NPY2受体配体,NPY3受体配体,神经肽Y(NPY;CAS登记号82785-45-3)和类似物,[Leu31,Pro34]NPY和类似物,NPY-(13-36)和类似物,肽yy(CAS登记号106388-42-5)和类似物,内皮素受体配体,ETA受体配体,ETB受体配体,内皮素1(CAS登记号123626-67-5)和类似物,内皮素2(CAS登记号122879-69-0)和类似物,内皮素3(CAS登记号125692-40-2)和类似物,血管活性肠肽受体(VPAC1,VIP1)配体,VPAC2/VIP2受体配体,PAC1/PACAP受体配体,PACAP(1-27)(CAS登记号137061-48-4)和类似物,PACAP(1-38)(CAS登记号137061-48-4)和类似物,PACAP(6-27)(CAS登记号137061-48-4)和类似物,PACAP(6-38)(CAS登记号137061-48-4)和类似物,血管活性肠多肽(VIP)(CAS登记号37221-79-7)和类似物,VIP(6-28)(CAS登记号37221-79-7)和类似物,[(Ac-His1,D-Phe2,Lys15,Arg16,Leu27)-VIP(1-7)-GRF(8-27)]和类似物,[Lys1,Pro2,5,Arg3,4,Tyr6]-VIP和类似物,VEGF受体配体,NP-1受体配体,神经纤毛蛋白-1受体配体,血管内皮生长因子(VEGF;CAS登记号127464-60-2)和类似物,成纤维细胞生长因子受体配体,成纤维细胞生长因子(FGF;CAS登记号62031-54-3)和类似物”,且优选选自:“八聚体肽,九聚体肽,十聚体肽,促黄体激素释放激素(LHRH),[D-Lys6]-LHRH,LHRH类似物,LHRH激动剂,曲普瑞林([D-Trp6]-LHRH),LHRH拮抗剂,铃蟾肽,铃蟾肽类似物,铃蟾肽拮抗剂,生长抑素,生长抑素类似物,血清白蛋白,人血清白蛋白(HSA)”。
所有这些细胞结合分子及其类似物均为现有技术中众所周知的。根据需要,给出了CAS登记号。然而,并非将细胞结合分子的范围仅限于给出了相应CAS登记号的那些。所谓术语细胞结合分子预期包括任意可能的结构和/或功能变化形式/家族成员。
涉及细胞结合分子的术语“类似物”意旨任意结构和/或功能相关的本领域技术人员从现有技术中已知的细胞结合分子类似物,将它们指定为属于本发明的范围。其非限制性实例为,例如LHRH的类似物,诸如曲普瑞林,西曲瑞克等。
涉及细胞结合分子的术语“类似物”还预期包括(如果应用)所述细胞结合分子的激动剂和拮抗剂,即术语LHRH类似物在本发明范围内一定包括LHRH激动剂和LHRH拮抗剂。
在本发明另一个优选的实施方案中提供了上述式(I),(II)和(III)的化合物和上述实施方案,其中连接基B1和B2相同且细胞结合分子C1和C2相同。
在本发明另一个优选的实施方案中提供了上述式(I),(II)和(III)的化合物和上述实施方案,其中式(IV)中连接基B2和细胞结合分子C2不存在。
C1-B1-A (IV)。
在本发明另一个优选的实施方案中提供了上述式(I),(II)和(III)的化合物和上述实施方案,其中:
A为式(III)的地索拉唑部分;
Rio,Rjo,Rkp,Rmp,R28,R30,R31,R32,R33,R34,R35,R36,R38,R40,R41,R42,R43,R44为氢;
Rlp,Rnp一起形成双键或独立地选自“氢,烷氧基”;
R27,R29一起形成双键或环氧化物(环氧乙烷);
R37,R39一起形成双键或环氧化物(环氧乙烷);
R25,R26彼此独立地选自:任选在烷基上被1、2或3个取代基取代的“烷基”,所述的取代基彼此独立地选自“烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基,杂环基-烷基,烷基磺酰基,芳基磺酰基,芳基-烷基磺酰基,卤素,-F,-Cl,-Br,-I,-N3,-NO2,=O,=S,=S(O)2,羟基,羰基,乙酰基,羧基,羧基酯,酰胺,碳酸酯,氨基甲酸酯,α-氨基酸残基,β-氨基酸残基,烷氧基,氨基,亚氨基,羟基氨基,一-烷氨基,二-烷氨基,肼基,氰基,烷基-氰基,巯基,二硫烷基和/或烷基-硫基”;
B1和/或B2彼此独立地选自“二碳酸残基连接基,琥珀酰基,戊二酰基”;
C1和/或C2彼此独立地选自“LHRH,[D-Lys6]-LHRH,生长抑素,生长抑素类似物,人血清白蛋白(HSA)”;
o为1或2;
p为1或2。
在另一个优选的实施方案中,n或o为1,m或p为1。在另一个优选的实施方案中,n或o为2,m或p为2。
在另一个优选的实施方案中,该化合物选自:
“地索拉唑A1-琥珀酰基-[D-Lys
6
]LHRH”(区域异构体化合物11
和12):
“地索拉唑E1-琥珀酰基-[D-Lys
6
]LHRH”(区域异构体化合物13
和14):
“地索拉唑A1-(琥珀酰基-[D-Lys
6
]LHRH)
2
”(化合物15):
“地索拉唑Z-琥珀酰基-[D-Lys
6
]LHRH”(化合物16):
“地索拉唑Z-(戊二酰基-[D-Lys
6
]LHRH)
2
”(化合物17):
“地索拉唑Z-琥珀酰基-生长抑素”(化合物18):
在另一个方面中,本发明的目的令人意外地通过提供式(V)的地索拉唑化合物得以解决。
其中:
Zan,Zbn,Zcn,Zdn,Zem,Zfm,Zgm,Zhm,Z1,Z2,Z3,Z4,Z5,Z6,Z7,Z8,Z9,Z10,Z11,Z12,Z13,Z14,Z15,Z16,Z17,Z18,Z19,Z20,Z21,Z22,Z23,Z24彼此独立地选自“氢,烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基,杂环基-烷基,烷基磺酰基,芳基磺酰基,芳基-烷基磺酰基,卤素,羟基,羰基,乙酰基,羧基,羧基酯,酰胺,碳酸酯,氨基甲酸酯,α-氨基酸残基,β-氨基酸残基,烷氧基,氨基,亚氨基,羟基氨基,一-烷氨基,二-烷氨基,肼基,氰基,烷基-氰基,巯基,二硫烷基和/或烷基-硫基”,它们任选在烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基,杂环基-烷基,烷基磺酰基,芳基磺酰基,芳基-烷基磺酰基,羰基,乙酰基,羧基,羧基酯,酰胺,碳酸酯,氨基甲酸酯,烷氧基,一-烷氨基,二-烷氨基,烷基-氰基,二硫烷基和/或烷基-硫基上被1、2或3个取代基取代,所述的取代基彼此独立地选自“烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基,杂环基-烷基,烷基磺酰基,芳基磺酰基,芳基-烷基磺酰基,卤素,-F,-Cl,-Br,-I,-N3,-NO2,=O,=S,=S(O)2,羟基,羰基,乙酰基,羧基,羧基酯,-C(O)OH,-C(O)NH2,酰胺,碳酸酯,氨基甲酸酯,α-氨基酸残基,β-氨基酸残基,烷氧基,氨基,亚氨基,羟基氨基,一-烷氨基,二-烷氨基,肼基,氰基,烷基-氰基,巯基,二硫烷基和/或烷基-硫基”;
条件是Zan,Zbn,Zcn,Zdn,Zem,Zfm,Zgm,Zhm,Z1,Z2,Z3,Z4,Z5,Z6,Z7,Z8,Z9,Z10,Z11,Z12,Z13,Z14,Z15,Z16,Z17,Z18,Z19,Z20,Z21,Z22,Z23,Z24基团中的至少一个独立地选自“羧基酯,酰胺,碳酸酯,氨基甲酸酯,α-氨基酸残基,β-氨基酸残基”;
额外的条件是从“羧基酯”中排除乙酰基;
任选Zan,Zbn,Zcn,Zdn,Zem,Zfm,Zgm,Zhm,Z1,Z2,Z3,Z4,Z5,Z6,Z7,Z8,Z9,Z10,Z11,Z12,Z13,Z14,Z15,Z16,Z17,Z18,Z19,Z20,Z21,Z22,Z23,Z24基团中的任意两个相邻基团Z可以构成原子键而生成双键或可以构成环氧化物(环氧乙烷),环氮乙烷(吖丙啶),烷基-,环烷基-,环烷基-烷基-,杂芳基-,芳基-烷基-,杂芳基-烷基-,杂环基-和/或杂环基-烷基-取代的环氮乙烷(吖丙啶),硫杂丙环和/或硫杂丙环-S-氧化物基团;
n为0,1,2,3;
m为0,1,2,3。
在本发明的一个优选的实施方案中提供了下式(VI)的地索拉唑化合物,
其中:
Zio,Zjo,Zkp,Zlp,Zmp,Znp,Z25,Z26,Z27,Z28,Z29,Z30,Z31,Z32,Z33,Z34,Z35,Z36,Z37,Z38,Z39,Z40,Z41,Z42,Z43,Z44彼此独立地选自“氢,烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基,杂环基-烷基,烷基磺酰基,芳基磺酰基,芳基-烷基磺酰基,卤素,羟基,羰基,乙酰基,羧基,羧基酯,酰胺,碳酸酯,氨基甲酸酯,α-氨基酸残基,β-氨基酸残基,烷氧基,氨基,亚氨基,羟基氨基,一-烷氨基,二-烷氨基,肼基,氰基,烷基-氰基,巯基,二硫烷基和/或烷基-硫基”,它们任选在烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基,杂环基-烷基,烷基磺酰基,芳基磺酰基,芳基-烷基磺酰基,羰基,乙酰基,羧基,羧基酯,酰胺,碳酸酯,氨基甲酸酯,烷氧基,一-烷氨基,二-烷氨基,烷基-氰基,二硫烷基和/或烷基-硫基上被1、2或3个取代基取代,所述的取代基彼此独立地选自“烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基,杂环基-烷基,烷基磺酰基,芳基磺酰基,芳基-烷基磺酰基,卤素,-F,-Cl,-Br,-I,-N3,-NO2,=O,=S,=S(O)2,羟基,羰基,乙酰基,羧基,羧基酯,-C(O)OH,-C(O)NH2,酰胺,碳酸酯,氨基甲酸酯,α-氨基酸残基,β-氨基酸残基,烷氧基,氨基,亚氨基,羟基氨基,一-烷氨基,二-烷氨基,肼基,氰基,烷基-氰基,巯基,二硫烷基和/或烷基-硫基”;
条件是Zio,Zjo,Zkp,Zlp,Zmp,Znp,Z25,Z26,Z27,Z28,Z29,Z30,Z31,Z32,Z33,Z34,Z35,Z36,Z37,Z38,Z39,Z40,Z41,Z42,Z43,Z44基团中的至少一个独立地选自“羧基酯,酰胺,碳酸酯,氨基甲酸酯,α-氨基酸残基,β-氨基酸残基”;
额外的条件是从“羧基酯”中排除乙酰基;
任选Zio,Zjo,Zkp,Zlp,Zmp,Znp,Z25,Z26,Z27,Z28,Z29,Z30,Z31,Z32,Z33,Z34,Z35,Z36,Z37,Z38,Z39,Z40,Z41,Z42,Z43,Z44基团中的任意两个相邻基团Z可以构成原子键而生成双键或可以构成环氧化物(环氧乙烷),环氮乙烷(吖丙啶),烷基-,环烷基-,环烷基-烷基-,杂芳基-,芳基-烷基-,杂芳基-烷基-,杂环基-和/或杂环基-烷基-取代的环氮乙烷(吖丙啶),硫杂丙环和/或硫杂丙环-S-氧化物基团;
o为0,1,2,3;
p为0,1,2,3。
在另一个优选的实施方案中提供了式(V)和(VI)的地索拉唑化合物,其中n或o为1且m或p为1。在另一个优选的实施方案中提供了式(V)和(VI)的地索拉唑化合物,其中n或o为2,m或p为2。
在另一个优选的实施方案中,地索拉唑衍生物选自:
区域异构体化合物1和2:
化合物3:
化合物4:
异构体化合物5和6:
化合物7:
化合物9:
化合物10:
化合物19:
化合物20:
化合物21:
本文一般[上述式(I)-(VI)和不同的R基团]和清楚地列举的所有化合物,即地索拉唑轭合物和地索拉唑衍生物在下文中称作(本)发明的化合物。
除非在本说明书或权利要求中另有陈述,否则用于解释本发明上述化合物表示的术语具有如下含义:
术语″取代的″意旨相应的基或基团带有一个或多个取代基。如果基团带有多个取代基并且指定了不同取代基的选择,那么取代基彼此独立地选择并且不一定相同。术语“未取代的”意旨相应的基团不带有取代基。术语“任选取代的”意旨相应的基团未被取代或被一个或多个取代基取代。术语“被至多3个取代基取代”意旨相应的基或基团被一个或两个或三个取代基取代。
术语“烷基”就本发明的目的而言包括具有C1-C12个碳原子的无环饱和,部分不饱和或不饱和烃类,它们可以为直链或支链的并且可以包含一个或多个双键和/或一个或多个三键。术语“烷基”优选表示1-8个、特别优选1-6个碳原子的烷基。合适的烷基的实例为甲基,乙基,正-丙基,异丙基,正-丁基,异丁基,仲-丁基,叔丁基,正-戊基,异-戊基,新-戊基,叔戊基,2-或3-甲基-戊基,正-己基,2-己基,异己基,正-庚基,正-辛基,正-壬基,正-癸基,正-十一基,正-十二烷基,正-十四烷基,正-十六烷基,正-十八基,正-二十碳烷基,正-二十二烷基,乙烯基(ethylenyl)(乙烯基(vinyl)),丙烯基(-CH2CH=CH2;-CH=CH-CH3,-C(=CH2)-CH3),丁烯基,戊烯基,己烯基,庚烯基,辛烯基,辛二烯基,十八烯基,十八-9-烯基,二十碳烯基,二十-11-烯基,(Z)-二十-11-烯基,二十二烯基,二十二-13-烯基,(Z)-二十二-13-烯基,乙炔基,丙炔基(-CH2-C≡CH,-C≡C-CH3),丁炔基,戊炔基,己炔基,庚炔基和辛炔基。
术语“环烷基”表示饱和或部分不饱和的非-芳族环状烃基/基团,其含1、2或3个环,包括单环烷基,双环烷基和三环烷基,并且包含构成环的总计3-20个碳原子,优选3-10,最优选(C3-C8)-环烷基。合适的环烷基的实例为环丙基,环丁基,环戊基,环己基,环庚基,环辛基,环癸基,环己烯基,环戊烯基,环辛二烯基。
术语“环烷基-烷基”意旨以下基团,其中环烷基通过烷基连接,其中烷基和环烷基具有本文定义的含义,优选(C3-C8)-环烷基-(C1-C4)-烷基。其实例为环丙基甲基,环己基甲基,环戊基乙基,环己烯基乙基。
术语“芳基”意旨具有3-14,优选5-14个碳原子的芳族烃系。术语“芳基”还包括系统,其中芳族环为双-或多环饱和、部分不饱和和/或芳族系统的组成部分,诸如为芳族环与如本文定义的“芳基”,“环烷基”,“杂芳基”或“杂环基”通过芳基的任意期望的和可能的环成员稠合。这类“芳基”可以通过任意环成员连接。“芳基”的实例特别为苯基,联苯基,萘基和蒽基,还有茚满基,茚基或1,2,3,4-四氢萘基。
术语“杂芳基”意旨包含至少1个、如果合适也可以包含2,3,4或5个杂原子,优选氮、氧和/或硫的5-,6-或7-元环状芳族基团,其中杂原子相同或不同。氮原子数量优选为0,1、2或3,且氧和硫原子数量独立地为0或1。术语“杂芳基”还包括系统,其中芳族环为双-或多环饱和,部分不饱和和/或芳族系统的组成部分,诸如为芳族环与如本文定义的“芳基”,“环烷基”,“杂芳基”或“杂环基”通过杂芳基的任意期望和可能的环成员稠合。这类“杂芳基”可以通过任意的环成员连接。“杂芳基”的实例包括吡咯基,噻吩基,呋喃基,咪唑基,噻唑基,异噻唑基,噁唑基,噁二唑基,异噁唑基,吡唑基,吡啶基,嘧啶基,吡嗪基,吲哚基,喹啉基,异喹啉基,咪唑基,三唑基,四唑基,哒嗪基,酞嗪基,吲唑基,吲嗪基,喹喔啉基,喹唑啉基,蝶啶基,咔唑基,吩嗪基,吩噁嗪基,吩噻嗪基,吖啶基。
术语“芳基-烷基”和“杂芳基-烷基”意旨以下基团,其中芳基或杂芳基通过烷基连接,其中烷基,芳基和杂芳基具有本文定义的含义。优选的“芳基-烷基”为苯基-(C1-C4)-烷基,优选苄基或苯乙基。优选的“杂芳基-烷基”为吲哚基-(C1-C4)-烷基,优选1H-吲哚-3-基-甲基或2-(1H-吲哚-3-基)-乙基。
术语“杂环基”意旨3-20,优选5或6-14环原子的单-或多环系,其包含碳原子和1、2、3、4或5个杂原子,特别是氮、氧和/或硫,它们相同或不同。该环系可以为饱和的,单-或多环不饱和的,但不可以为芳族的。就由至少两个环组成的环系而言,这些环可以为稠合的或螺,否则就是连接的。这类“杂环基”可以通过任意的环成员连接。术语“杂环基”还包括系统,其中杂环为双-或多环饱和、部分不饱和和/或芳族系统的组成部分,诸如其中杂环与如本文定义的“芳基”,“环烷基”,“杂芳基”或“杂环基”通过任意期望和可能的杂环基的环成员稠合。“杂环基”的实例包括吡咯烷基,噻吡咯烷基(thiapyrrolidinyl),哌啶基,哌嗪基,噁哌嗪基,噁哌啶基,噁二唑基,四氢呋喃基,咪唑烷基,噻唑烷基,四氢吡喃基,吗啉基,四氢噻吩基,二氢吡喃基。
术语“杂环基烷基”意旨以下基团,其中杂环基通过烷基连接,其中烷基和杂环基具有本文定义的含义。优选杂环基-(C1-C4)-烷基。
术语“烷基磺酰基”,“芳基磺酰基”和“芳基-烷基磺酰基”意旨以下基团,其中烷基,芳基或芳基-烷基通过-SO2-基团连接,其中烷基,芳基和芳基-烷基具有本文定义的含义。实例为甲磺酰基和苯磺酰基。
术语“卤素”,“卤原子”或“卤素取代基”(Hal-)意旨一个或(如果合适)多个氟(F,氟),溴(Br,溴),氯(Cl,氯)或碘(I,碘)原子。命名“二卤代”,“三卤代”和“全卤代”分别意旨两个,三个和四个取代基,其中每个取代基可以独立地选自氟,氯,溴和碘。“卤素”优选意旨氟,氯或溴原子。
术语“羰基”意旨以下基团,其中烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基和/或杂环基-烷基通过-C(O)-基团连接,其中烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基和/或杂环基-烷基具有本文定义的含义。实例为-C(O)-CH3,-C(O)-CH2CH3,-C(O)-异丙基和-C(O)-tBu(tBu=叔丁基)。
术语“羧基”意旨以下基团,其中烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基和/或杂环基-烷基通过-C(O)O-基团连接,其中烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基和/或杂环基-烷基具有本文定义的含义。实例为-C(O)O-CH3和-C(O)O-苯基。
术语“羧基酯”意旨以下基团,其中烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基和/或杂环基-烷基通过-OC(O)-基团连接,其中烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基和/或杂环基-烷基具有本文定义的含义。实例为乙酰基,-OC(O)-苯基等。
术语“碳酸酯”意旨以下基团,其中烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基和/或杂环基-烷基通过-OC(O)O-基团连接,其中烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基和/或杂环基-烷基具有本文定义的含义。实例为-OC(O)O-CH3和-OC(O)O-苯基。
术语“氨基甲酸酯”意旨以下基团,其中烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基和/或杂环基-烷基通过-OC(O)NH-基团,-NHC(O)O-基团,-OC(O)NR-基团或-NRC(O)O-基团连接,其中R独立地选自:“烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基,杂环基-烷基,卤素,-F,-Cl,-Br,-I,-N3,-NO2,羟基,烷氧基,氨基,亚氨基,羟基氨基,肼基,氰基,烷基-氰基,巯基”,其中烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基,杂环基-烷基,烷氧基,肼基和/或烷基-氰基具有本文定义的含义。
术语“α-氨基酸残基”就本发明的目的而言意旨所有已知的20种蛋白质来源的α-氨基酸以及天然存在的(即在任何生物系统中的)α-氨基酸,例如硒基半胱氨酸,吡咯赖氨酸,瓜氨酸,鸟氨酸,高半胱氨酸,N-甲基精氨酸,N-乙酰赖氨酸,γ-羧基谷氨酸,5-羟赖氨酸,3-甲基组氨酸和/或N,N,N,-三甲基赖氨酸。在此,“残基”意旨完整的氨基酸部分,包括α-碳原子连接的侧链和骨架。术语“α-氨基酸残基”就本发明的目的而言,还意旨所有已知的非蛋白质来源的α-氨基酸,它们已知也不是天然存在的(即在任何生物系统中)。实例为正亮氨酸,环己基甘氨酸,2-萘基丙氨酸,取代的α-氨基酸(例如卤素取代的Tyr或Phe)和被保护的α-氨基酸侧链,其中保护基,诸如Fmoc,Boc,Cbz,Aloc,三苯甲基,乙酰基和/或苄基直接连接官能基(例如氨基,羟基和/或羧基残基)/与之反应。在此,“残基”意旨完整的氨基酸部分,包括α-碳原子连接的侧链和骨架。
因此术语“β-氨基酸残基”就本发明的目的而言,意旨所有已知的β-氨基酸,它们非蛋白质来源,也非已知的天然存在的(即在任何生物系统中)。在这方面,“残基”意旨完整的氨基酸部分,包括β-碳原子连接的侧链和骨架。
术语“烷氧基”意旨以下基团,其中“烷基”,“环烷基”,“环烷基-烷基”,“芳基”,“芳基-烷基”,“杂芳基”,“杂芳基-烷基”,“杂环基”和/或“杂环基-烷基”通过氧原子(-O-基)连接,其中“烷基”,“环烷基”,“环烷基-烷基”,“芳基”,“芳基-烷基”,“杂芳基”,“杂芳基-烷基”,“杂环基”和“杂环基-烷基”具有本文定义的含义。
术语“一-烷氨基”和“二-烷氨基”意旨以下基团,其中一个或两个烷基分别通过氮原子连接,其中烷基具有本文定义的含义。实例为乙氨基,二甲氨基和异丙基乙氨基。
术语“肼基”意旨C=N-NH-,NH-N=C-,C=N-NR-和/或NR-N=C-基团,其中R独立地选自“烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基,杂环基-烷基,卤素,-F,-Cl,-Br,-I,-N3,-NO2,羟基,烷氧基,氨基,亚氨基,羟基氨基,肼基,氰基,烷基-氰基,巯基”,其中烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基,杂环基-烷基,烷氧基,肼基和/或烷基-氰基具有本文定义的含义。
术语“烷基-氰基”意旨以下基团,其中烷基通过氰基连接,其中烷基具有本文定义的含义。实例为甲基氰基和正-丙基氰基。
术语“二硫烷基”意旨以下基团,其中烷基通过-S-S-基团连接,其中烷基具有本文定义的含义。
术语“烷基-硫基”意旨以下基团,其中烷基通过硫原子连接,其中烷基具有本文定义的含义。
关注本发明的所有立体异构体,无论是混合物形式还是纯和或基本上纯的形式。本发明的化合物可以在任意碳原子上,包括取代基中的任何一个碳原子上具有不对称中心。因此,本发明的化合物可以以其外消旋物形式、纯的对映体和/或非对映体形式或这些对映体和/或非对映体的混合物形式存在。这些混合物可以具有任意期望混合比例的立体异构体。所有这些不同的立体化学形式和混合物均属于本发明的范围。
因此,例如,可以通过本身公知的方法将具有一个或多个手性中心并且作为外消旋物或非对映体混合物存在的本发明化合物分级分离成其光学纯的异构体,即对映体或非对映体。本发明化合物的分离可以通过使用手性或非手性相的柱分离、或者通过从任选的光学活性溶剂中重结晶、或者使用光学活性酸或碱或者通过使用光学活性试剂例如光学活性醇衍生、且随后除去该基团来进行。
为了避免疑问,本发明的化合物可以以所有可能的双键异构体形式存在,诸如“纯”E-或Z-异构体或这些双键异构体的混合物。
如果可能,本发明的化合物可以以互变体形式存在。
同样可能的情况是本发明的化合物为任意期望的前体药物,例如酯类,碳酸酯类,氨基甲酸酯类,脲类,酰胺类或磷酸酯类形式,其中实际生物活性形式仅通过代谢释放。可以在体内被转化成生物活性剂(即本发明的化合物)的任意的化合物为属于本发明范围和精神的前体药物。
各种形式的前体药物为本领域众所周知的并且描述在如下文献中,例如:
(i)The Practice of Medicinal Chemistry(Wermuth CG等,Chapter 31,Academic Press 1996);
(ii)Design of Prodrugs(editor:Bundgaard H,Elsevier 1985);和
(iii)A Textbook of Drug Design and Development(Krogsgaard-Larson P和Bundgaard H,eds.,Chapter 5:113-191,Harwood Academic Publishers 1991)。
将所述参考文献引入本文作为参考。
进一步已知化学物质可以在体内被转化成代谢物,如果合适,这些代谢物同样引起期望的生物作用-在某些情况中甚至是以更显著的形式。
本发明的任意化合物在体内可以通过代谢转化成任意生物活性化合物,它们均属于本发明范围和精神的代谢物。
本发明的化合物如果具有足够的碱性基团,例如伯,仲或叔胺,那么可以使用无机酸或有机酸将它们转化成盐。本发明化合物的药学上可接受的盐优选与盐酸,氢溴酸,碘酸,硫酸,磷酸,甲磺酸,对甲苯磺酸,碳酸,甲酸,乙酸,磺基乙酸,三氟甲磺酸,草酸,丙二酸,马来酸,琥珀酸,酒石酸,外消旋酸,苹果酸,扑酸,扁桃酸,富马酸,乳酸,柠檬酸,牛磺胆酸,戊二酸,硬脂酸,谷氨酸或天冬氨酸形成。形成的盐特别为盐酸盐,氯化物,氢溴酸盐,溴化物,碘化物,硫酸盐,磷酸盐,甲磺酸盐,甲苯磺酸盐,碳酸盐,碳酸氢盐,甲酸盐,乙酸盐,磺基乙酸盐,三氟甲磺酸盐,草酸盐,丙二酸盐,马来酸盐,琥珀酸盐,酒石酸盐,苹果酸盐,双羟萘酸盐,扁桃酸盐,富马酸盐,乳酸盐,柠檬酸盐,戊二酸盐,硬脂酸盐,天冬氨酸盐和谷氨酸盐类。由本发明化合物形成的盐的化学计量也可以为1的整数或非整数倍。
本发明的化合物如果包含足够的酸性基团,例如羧基,磺酸,磷酸或酚基,那么可以用无机碱和有机碱将它们转化成其生理学可耐受的盐。合适的无机碱的实例为铵,氢氧化钠,氢氧化钾,氢氧化钙,且合适的有机碱为乙醇胺,二乙醇胺,三乙醇胺,乙二胺,叔丁胺,叔辛胺,去氢枞胺,环己胺,二苄基乙二胺和赖氨酸。由本发明化合物形成的盐的化学计量还可以为1的整数或非整数倍。
同样可能的情况是本发明的化合物为其溶剂合物形式,且特别是例如可以通过从溶剂或水溶液中结晶的水合物。另外可能的情况是一个,两个,三个或任意数量的溶剂化物或水分子与本发明的化合物合并成溶剂合物和水合物。
已知化学物质形成以不同有序状态存在的固体,称作多晶型物或修饰物。多晶型物的各种修饰物在其物理特性方面明显不同。本发明的化合物可以以各种多晶型物形式存在并且某些修饰物还可以为相对稳定的。本发明化合物的所有这些多晶型物均被视为属于本发明的范围。
本发明的化合物的特征有利地在于强生物作用。就本发明的地索拉唑轭合物而言,它们因增加的内在功效而优于现有技术的轭合物。此外,特别地,双-取代的C1-B1-A-B2-C2轭合物在释放细胞毒性地索拉唑部分前令人意外地展示出较高的特异性和降低的毒性。
利用本发明轭合物的特异性来靶向所关注的(肿瘤)组织是可能的,例如通过使用所需的受体-配体作为使所述轭合物定向于表达这类受体(肿瘤)的组织的细胞结合分子。此外,特异性靶向有利地导致所述轭合物在原位(在肿瘤部位)具有高局部浓度,导致功效明显增加。这些优点可以转化为在临床上给予的可能药物的剂量降低和不良药物副作用较少或没有。
在另一个方面中,通过提供制备本发明化合物的方法令人意外地解决了本发明的目的。
在一个优选的实施方案中,提供了制备本发明化合物的方法,包括下列步骤:
a)使地索拉唑化合物与连接基、优选与连接基酸酐反应而得到单-和/或双官能化地索拉唑-连接基部分,
b)任选从反应离析物和副产物中分离(纯化)单-和/或双官能化地索拉唑-连接基部分,
c)使任选分离(纯化)的单-和/或双官能化地索拉唑-连接基部分与细胞结合分子偶联而得到式(I)C1-B1-A-B2-C2和/或式(IV)C1-B1-A的地索拉唑轭合物,
d)任选从反应离析物和副产物中分离(纯化)式(I)C1-B1-A-B2-C2和/或式(IV)C1-B1-A的地索拉唑轭合物。
可以将本发明的化合物给予各种哺乳动物种类,包括人,以治疗或预防生理学和/或病理生理学情况。
就本发明的目的而言,将所有哺乳动物种类视为包括的范围。优选这类哺乳动物选自“人,家养动物,牛,家畜类,宠物,母牛,绵羊,猪,山羊,矮种马,驴,驴骡(hinny),骡子(mule),骡,野兔,家兔,猫,狗,豚鼠,仓鼠,大鼠,小鼠”。更优选这类哺乳动物为人。
在另一个方面中,通过提供用于制备药物的本发明的化合物而令人意外地解决了本发明的目的。
在另一个方面中,令人意外地通过提供用于制备治疗和/或预防如下疾病的药物的本发明化合物解决了本发明的目的:“急性白血病,腺癌,基底细胞癌,良性肿瘤,膀胱癌,肠癌,脑瘤,乳腺癌,支气管癌,类癌,癌,宫颈癌,宫颈癌,慢性白血病,结肠癌,结肠癌,结肠直肠癌,结缔组织癌,子宫体癌,子宫内膜癌,食管癌,尤因肉瘤,胃泌素瘤,胶质母细胞瘤,神经胶质瘤,妇科肿瘤,头和/或颈癌,肝胚细胞瘤,肝细胞瘤,增生,过度增生性疾病,眼内黑素瘤,卡波西肉瘤,喉癌,喉癌,平滑肌瘤(leimoyoma),白血病,肝肿瘤,肺癌,非小细胞肺癌,淋巴瘤,恶性肿瘤,乳癌,髓母细胞瘤,黑素瘤,多发性骨髓瘤,肾母细胞瘤,神经母细胞瘤,神经内分泌瘤,骨肉瘤,卵巢癌,胰腺癌,前列腺癌,前列腺癌,直肠癌,肾癌,肾细胞癌,眼癌,杆状瘤,肉瘤,皮肤癌,软组织肉瘤,实体瘤,骨髓癌(spinalioma),胃癌,睾丸癌,胸腺瘤,甲状腺癌,从脑和/或神经系统和/或脑膜开始的肿瘤(WO 99/01764),尿道癌和/或子宫癌。”
在另一个方面中,通过提供用于制备药物的本发明的化合物令人意外地解决了本发明的目的,其中所述的药物还包含至少一种额外的药物活性物质。
在另一个方面中,通过提供用于制备药物的本发明的化合物令人意外地解决了本发明的目的,其中在使用至少一种额外的药理活性物质治疗之前和/或治疗过程中和/或治疗之后施用该药物。
在另一个方面中,通过提供用于制备药物的本发明的化合物令人意外地解决了本发明的目的,其中在放射治疗和/或手术治疗之前和/或过程中和/或之后给予该药物。
在本发明的过程中,本发明的化合物由此可以作为单一物质给药或与所有已知药理活性物质在联合治疗过程中联合给药。
在一个优选的实施方案中,提供了用于上述例举的应用的本发明化合物,其中额外的药理学活性物质选自:“DNA拓扑异构酶I和/或II抑制剂,DNA嵌入剂,烷化剂,微管去稳定剂,激素-和/或生长因子受体激动剂和/或拮抗剂,信号传导抑制剂,针对生长因子及其受体的抗体,激酶抑制剂,抗代谢药”。
在一个优选的实施方案中,提供了用于上述例举的应用的本发明化合物,其中额外的药理学活性物质选自:“放线菌素D,氨鲁米特,天冬酰胺酶,阿伐他汀,硫唑嘌呤,BCNU(卡莫司汀),博来霉素,白消安,卡铂,CCNU(洛莫司汀),苯丁酸氮芥,顺铂,门冬酰胺酶,环磷酰胺,阿糖胞苷,更生霉素,柔红霉素,己烯雌酚,多西他赛,多柔比星(阿霉素),DTIC(达卡巴嗪(dacarbacin)),表柔比星,埃坡霉素,艾比特思,赤羟基壬基腺嘌呤,炔雌醇,依托泊苷,磷酸氟达拉滨,氟甲睾酮,氟他胺,吉西他滨,格列卫(gleevec)/格列卫(glivec),赫赛汀,六甲蜜胺,羟基脲,己酸羟孕酮,伊达比星,异环磷酰胺,干扰素,伊丽沙,伊立替康,L-天冬酰胺酶,亚叶酸(钙),氮芥,醋酸甲羟孕酮,醋酸甲地孕酮,美法仑,美司钠,甲氨蝶呤,丝裂霉素C,米托坦,米托蒽醌,磷乙天冬氨酸(PALA),奥沙利铂,紫杉醇,喷司他丁,普利霉素,泼尼松龙,泼尼松,丙卡巴肼,雷洛昔芬,雷帕霉素,司莫司汀,索拉非尼,链佐星,他莫昔芬,塔西法,泰素帝,替尼泊苷,丙酸睾酮,硫鸟嘌呤,塞替派,托泊替康,三羟甲密胺(trimethylemelamine),尿苷,长春碱,长春新碱,长春地辛,长春瑞滨,2′,2′-二氟脱氧胞苷,5-氟脱氧尿苷单磷酸,5-氮胞苷克拉屈滨,5-氟脱氧尿苷,5-氟尿嘧啶(5-FU),6-巯嘌呤”。
可以按照公知方式给予本发明的化合物。给药途径由此可以为任意途径,它将活性化合物有效地转运至适当或期望的作用部位,例如通过非口服或口服方式,特别是通过静脉内,局部,透皮,肺,直肠,阴道内,鼻部或非肠道或通过植入给药。优选静脉内给药。
将本发明的化合物转化成可以给药的形式并且如果合适可与药学上可接受的载体或稀释剂混合。合适的赋形剂和载体描述在例如Ullman′s Encyclopedia of Technical Chemistry,Vol.4,(1953),1-39;Journal of Pharmaceutical Sciences,Vol.52(1963),918,参见下文;H.v.Czetsch-Lindenwald,“Hilfsstoffe für Pharmazieand angrenzende Gebiete”;Pharm.Ind.2,1961,72 et seq.;Dr.H.P.Fiedler,“Lexikon der Hilfsstoffe für Pharmazie,Kosmetikand angrenzende Gebiete”,Cantor KG,Aulendorf in Württemberg,1971中。
非口服给药例如可以通过静脉内、皮下、肌内注射无菌水溶液或油溶液、混悬液或乳剂,通过植入物或软膏剂、霜剂或栓剂进行。如果合适,缓释制剂给药也是可能的。植入物可以包含惰性材料,例如生物可降解聚合物或合成硅氧烷,例如硅橡胶。阴道内给药也是可能的,例如通过阴道环。子宫内给药也是可能的,例如通过子宫帽或其它合适的子宫内装置。还提供了透皮给药,特别是通过适合于该目的的制剂和/或合适的方式,例如贴剂。
口服给药例如可以以固体形式进行,如片剂,胶囊,凝胶胶囊,包衣片,颗粒或粉末,也可以为可饮用溶液形式。为了口服给药,可以将本发明的化合物与已知和常用的生理可耐受的赋形剂和载体合并,例如阿拉伯胶,滑石粉,淀粉,糖,例如甘露糖醇,甲基纤维素,乳糖,明胶,表面活性剂,硬脂酸镁,环糊精,含水或无水载体,稀释剂,分散剂,软化剂,润滑剂,防腐剂和矫味剂(例如精油)。还可以将本发明的化合物分散于微粒,例如纳米粒组合物中。
如上所述,还可以将本发明的化合物与其它活性药物组分合并。就联合治疗的目的而言,能够同时或分别给予各活性组分,特别是通过相同途径(例如静脉内)或通过分开的途径(例如静脉内和作为口服施用)。它们可以存在并且以相同或不同用量在单位剂量中给予。如果存在适当,那么还能够使用特定的剂量方案。在这种方式中,还能够彼此合并多种具有通式的本发明的新化合物。
剂量可以在宽范围内改变,这取决于生理学和/或病理生理学情况的类型和/或严重性、给药方式、所治疗受试者的年龄、性别、体重、和敏感性。在本领域技术人员范围内可以确定本发明化合物和/或额外药理学活性物质的“药理学有效量”。给药可以以单剂量或多个单独剂量进行。
合适的单位剂量为,例如每kg患者体重0.0001mg-100mg活性组分,即本发明的至少一种化合物,且如果合适,至少一种额外的药理学活性物质。
本发明在另一个方面中涉及药物组合物,其包含药理学活性用量的至少一种本发明的化合物,特别是“地索拉唑A1-琥珀酰基-[D-Lys6]LHRH(区域异构体化合物11和12),地索拉唑E1-琥珀酰基-[D-Lys6]LHRH(区域异构体化合物13和14),地索拉唑A1-(琥珀酰基-[D-Lys6]LHRH)2(化合物15),地索拉唑Z-琥珀酰基-[D-Lys6]LHRH(化合物16),地索拉唑Z-(戊二酰基-[D-Lys6]LHRH)2(化合物17),地索拉唑Z-琥珀酰基-生长抑素(化合物18),区域异构体化合物1和2,化合物3,化合物4,区域异构体化合物5和6,化合物7,化合物9,化合物10,化合物19,化合物20,化合物21”。
在另一个方面,这类药物组合物还可以包含至少一种药学上可接受的载体和/或赋形剂和/或可以包含至少一种额外的药理学活性物质。
在一个优选的实施方案中,这类额外的药理学活性物质选自:“DNA拓扑异构酶I和/或II抑制剂,DNA嵌入剂,烷化剂,微管去稳定剂,激素-和/或生长因子-受体-激动剂和/或-拮抗剂,信号传导抑制剂,针对生长因子及其受体的抗体,激酶抑制剂,抗代谢药”。
在另一个优选的实施方案中,这类额外的药理学活性物质选自:“放线菌素D,氨鲁米特,天冬酰胺酶,阿伐他汀,硫唑嘌呤,BCNU(卡莫司汀),博来霉素,白消安,卡铂,CCNU(洛莫司汀),苯丁酸氮芥,顺铂,门冬酰胺酶,环磷酰胺,阿糖胞苷,更生霉素,柔红霉素,己烯雌酚,多西他赛,多柔比星(阿霉素),DTIC(达卡巴嗪),表柔比星,埃坡霉素,艾比特思,赤羟基壬基腺嘌呤,炔雌醇,依托泊苷,磷酸氟达拉滨,氟甲睾酮,氟他胺,吉西他滨,格列卫(gleevec)/格列卫(glivec),赫赛汀,六甲蜜胺,羟基脲,己酸羟孕酮,伊达比星,异环磷酰胺,干扰素,伊丽沙,伊立替康,L-天冬酰胺酶,亚叶酸,氮芥,醋酸甲羟孕酮,醋酸甲地孕酮,美法仑,美司钠,甲氨蝶呤,丝裂霉素C,米托坦,米托蒽醌,磷乙天冬氨酸(PALA),奥沙利铂,紫杉醇,喷司他丁,普利霉素,泼尼松龙,泼尼松,丙卡巴肼,雷洛昔芬,雷帕霉素,司莫司汀,索拉非尼,链佐星,他莫昔芬,塔西法,泰素帝,替尼泊苷,丙酸睾酮,硫鸟嘌呤,塞替派,托泊替康,三羟甲密胺,尿苷,长春碱,长春新碱,长春地辛,长春瑞滨,2′,2′-二氟脱氧胞苷,5-氟脱氧尿苷单磷酸,5-氮胞苷克拉屈滨,5-氟脱氧尿苷,5-氟尿嘧啶(5-FU),6-巯嘌呤”。
就本发明的药物组合物而言,本发明的至少一种化合物以药理学有效用量存在,优选单位剂量,例如上述单位剂量,特别是和优选能够进行静脉内给药的给药形式。此外,组合物的其它方面参考与所述本发明化合物的可能应用和给药有关的内容。
在另一个方面中,通过提供试剂盒令人意外地解决了本发明的目的,所述的试剂盒包含药理学活性用量的本发明至少一种化合物和药理学活性用量的如上述所定义的至少一种额外的药物活性物质。
化学合成:
用于制备式(I)C1-B1-A-B2-C2和(IV)C1-B1-A的地索拉唑轭合物的一般合成方法在本部分中给出。
用于获得地索拉唑的总体合成和/或分离策略为现有技术中公知的并且例如描述在下列现有技术对比文件中:Jansen R等,LiebigsAnn.Chem.1994,(8):759-773;WO 2004/024149;Wipf等,Chem.Biol.Drug Des.2006,67(1):66-73);Hillier MC等,J.Org.Chem.2001,66:6037-6045;Hartung IV等,Organic Letters 2002,4(19):3239-3242;Wipf P等,J.Am.Chem.Soc.2004,126(47):15346-15347;Carvalho R等,Gene 2005,359:91-98;Kopp M等,Chembiochem.2005,6(7):1277-1286;WO 2006/075013。
地索拉唑Z
可以完全通过化学方式按照上述现有技术的描述合成,或通过实施例部分的II)中例举的发酵产生。
本发明的轭合物的合成通过基于有机化学的常用溶液进行。
A.通过使用有机酸酐,酯化衍生地索拉唑的仲羟基
在典型的反应中,将固体地索拉唑溶解于不含水的吡啶,预先用分子筛(40nm)干燥。在氮气气氛中,加入对不同地索拉唑分子内可利用的2个仲OH-基团的单或双-酯化所计算的1-2.5mol当量DMAP和1.5-10mol当量有机酸酐(戊二酸酐,琥珀酸酐)。任选向反应体系中加入分子筛以确保整个过程不含水的状态。就相应期望的衍生物而言,任选在室温或60℃浴温下将该混合物搅拌6h-5d。通过分析型HPLC-UV监测酯化。
典型分析型HPLC-条件:
洗脱液A: 20mM NH4OAc,5%(v/v)AcN,0.2%(v/v)HOAc
洗脱液B: 95%(v/v)AcN,5%(v/v)H2O
柱: Merck LiChrosphere 100 C18,5μm,250×4mm
流速: 1ml/min
检测: UV-DAD,220-380nm
梯度: 40%-100%B,18min内,100%B,5min,100%-40%B,
2min内
通过自动化快速液相色谱法,使用Isco Companion系统或通过制备型HPLC对单或双-酯化的地索拉唑进行纯化。因此,在减压下除去反应混合物中过量的吡啶并且用10%乙酸将油残余物酸化至pH 4-6。为了通过全自动快速分离(Companion)进行纯化,用乙酸乙酯将酸化的水相萃取几次,合并有机萃取物,用硫酸钠干燥并且在减压下吸附在RP载体材料上。将快速色谱法用于纯化双-酯化的地索拉唑并且在反相条件下使用5%AcN(v/v),0.1%HOAc作为洗脱液A和95%AcN作为洗脱液B进行。
就制备型HPLC而言,用起始洗脱液(50%B)稀释酸化的含水混合物,通过注射器式滤膜过滤并且注入制备型HPLC系统。
典型制备型HPLC-条件:
洗脱液A: 20mM NH4OAc,5%(v/v)AcN,0.2%(v/v)HOAc
洗脱液B: 95%(v/v)AcN,5%(v/v)H2O
柱: Macherey & Nagel VarioPrep Nucleodur 100 C18,7μm,
250×21mm
流速: 20ml/min
检测: UV
梯度: 50%B,5min,50%-100%B,25min内,100%B,10min
通过分析型HPLC分析含期望产物的LC级分,在减压下使其从AcN和HOAc中游离并且冻干含水浓缩物而得到相应的酯类,为固体化合物。
B.地索拉唑一和双半-羧酸酯与肽类的酰胺偶联
使单和双官能化的地索拉唑羧酸衍生物与肽类通过传统的酰胺偶联策略偶联。简言之,使用3-6mol当量的DIPEA将羧酸地索拉唑化合物溶解于干DMF并且通过添加1.1-1.5mol当量的HATU/游离羧基残基活化,且随后在环境温度下搅拌15分钟。然后以稍微摩尔过量的量(1.1-1.3eq)加入带有游离氨基的肽化合物,并且将该反应混合物在室温下搅拌0.5-12h。通过分析型HPLC(上述方法)监测偶联效率。
就制备型HPLC而言,用10%HOAc将DMF溶液酸化至pH 5-6并且用4-6个体积的起始洗脱液(40-50%B)稀释。如上所述使用相同的典型制备型HPLC方法。对相应级分进行分析型HPLC评价,在减压下除去AcN和HOAc,随后冻干含水浓缩物,获得纯的轭合物。
C.地索拉唑双半-羧酸酯类与血清白蛋白的酰胺偶联
使用NHS/DCC方法使官能化地索拉唑衍生物与较大的蛋白质诸如血清白蛋白偶联。将不同摩尔比的蛋白质和地索拉唑化合物用于获得不同荷载比例的地索拉唑和载体蛋白质。在典型的反应中,将血清白蛋白以20mg/ml的初始浓度溶解于10mM PBS pH7.4。随后用DMF按照1∶1(v/v)稀释得到澄清血清白蛋白溶液,其终浓度为10mg/ml。将地索拉唑双或单-半羧酸酯类溶解于DMF,加入1.2-5当量的DCC和2-10当量的NHS并搅拌20min,以形成活化的NHS-酯。通过分析型HPLC(使用上文所述的典型方法)评估活化效率。滴加不同等分部分的该溶液并且在剧烈搅拌下滴加到血清白蛋白缓冲液/DMF溶液中。根据不同荷载比例,基于经验数据选择地索拉唑-NHS酯与血清白蛋白的比例。进行含水酰胺偶联或在环境温度下进行20分钟。然后通过SteriCup过滤器(Milipore,微孔过滤器)对轻度混浊的反应混合物进行真空过滤并且用去离子水洗涤滤膜。然后用去离子水稀释滤液,且通过超滤法分离低分子量化合物。因此,将稀释的SteriCup滤液放入具有30.000Da出口大小的AmiconUltra(微孔过滤器)过滤装置并且以4.000×g离心15min。用去离子水将浓缩的保留蛋白质溶液洗涤3次并且离心以除去所有过量的盐、DMF和未结合的地索拉唑和DCC/NHS。随后冻干纯化的血清白蛋白地索拉唑轭合物溶液而得到淡黄色结晶。通过分析型HPLC,使用上述典型方法分析超滤液的未结合的地索拉唑,以估计每个血清白蛋白的平均地索拉唑荷载比例。
D.使用Dess-Martin Periodinane氧化试剂氧化地索拉唑
将地索拉唑(例如,A1,E1或Z)溶解于二氯甲烷。加入12mol当量的吡啶并且将该混合物在冰浴上冷却至低于5℃。分几部分加入3mol当量的Dess-Martin Periodinane试剂(Triacetoxyperiodinane),并且将该反应体系在冰浴上搅拌15分钟。将该混合物加热至室温并且持续搅拌30分钟(使用二氯甲烷/甲醇95∶5作为TLC对照)。用乙酸乙酯稀释该反应混合物并且倾倒在0.5N盐酸上。用盐水将有机相洗涤至几乎呈中性(pH 6),用硫酸钠干燥并且在真空中减少。随后进行使用二氯甲烷/甲醇的快速色谱而得到地索拉唑-酮衍生物。
E. 缩写
5-FU 5-氟尿嘧啶
AcN 乙腈
Ala 丙氨酸(基)
Aloc 烯丙氧羰基
Arg 精氨酸(基)
Asn 天冬酰胺(基)
BCNU 卡莫司汀
Boc 叔丁氧羰基
Cbz 苄氧羰基羰基
CCNU 洛莫司汀
Cit 瓜氨酸
DCC N,N′-二环己基碳二亚胺
DCM 二氯甲烷
DIPEA 二异丙基乙胺
DMAP N,N′-4-二甲氨基吡啶
DMEM Dulbecco改进的Eagles培养基
DMF N,N′-二甲基甲酰胺
DMSO 二甲亚砜
Dox 多柔比星
DTIC 达卡巴嗪
e.g. 给出的实例
EDTA 乙二胺四乙酸
ELISA 酶联免疫吸附测定
Fmoc 9-芴基甲氧羰基
Gln 谷氨酰胺(基)
Glp 焦谷氨酸(基)
h 小时
HATU N,N,N′,N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲
六氟磷酸盐
HEPES N-(2-羟乙基)哌嗪-N′-2-乙磺酸
HOAc 乙酸
HOBt 1-羟基苯并三唑
HSA 人血清白蛋白
hTyr 高-酪氨酸(基)
Hyp 羟脯氨酸
Ile 异亮氨酸(基)
IPA 异丙醇
Leu 亮氨酸(基)
LH 促黄体激素
LHRH(GnRH) 促黄体激素释放激素
LHRH-R 促黄体激素释放激素受体
Lys 赖氨酸(基)
MDS 甲基二硫烷基
Me 甲基
D-/L-Mel (4-[双(2-氯乙基)氨基]-D/L-苯基丙氨酸)
MeOH 甲醇
min 分钟
ml 毫升
NHS N-羟基琥珀酰亚胺
Nle 正亮氨酸
PALA 磷乙天冬氨酸
PEG2 由2个乙二醇部分组成的聚乙二醇
PEG3 由3个乙二醇部分组成的聚乙二醇
PEG7 由7个乙二醇部分组成的聚乙二醇
PMS N-甲基二苯并吡嗪甲基硫酸酯(盐)
Pyr 焦谷氨酸(基)
RIA 放射性免疫测定
RT 室温
Sar 肌氨酸
tBu 叔丁基
TEA 三乙胺
TFA 三氟乙酸
THF 四氢呋喃
TLC 薄层色谱法
Tpi 咔啉-3-甲酸
trityl 三苯基羰基
Tyr 酪氨酸(基)
Val 缬氨酸(基)
XTT 3′-[1-(苯基氨基羰基)-3,4-四唑鎓]-双(4-甲氧
基-6-硝基)苯磺酸钠
附图说明
图1-17表示经测定的本发明选择的化合物的H-NMR光谱:化合物1/2,3,4,5/6,7,8,9,10,11/12,13/14,15,16,17,18,19,20,21。
将所有引述的参考文献和专利的内容引入本文作为参考。通过下述实施例更详细地解释本发明,不过,并不限于它们。
实施例
I)本发明化合物的合成
实施例1:
地索拉唑E1单半-琥珀酸盐,区域异构体(1)和(2)
按照A中所列的一般合成操作,将30mg地索拉唑E1、12mg DMAP和150mg琥珀酸酐溶解于2ml干吡啶并且在RT(室温)下和氮气环境中搅拌4天。TLC-对照:DCM-MeOH 9∶1/DCM-IPA 9∶1+分析型HPLC。将该反应混合物倾倒在冷盐水/0.5M HCl上并且用乙酸乙酯萃取,用盐水洗涤至pH 4,用Na2SO4干燥并且在减压下除去过量溶剂。通过LC,经Isco Companion使用DCM/MeOH梯度对原料产物进行纯化。获得13mg纯产物,为区域异构体1和2的1∶1混合物(合并产率:39%)。
LC-MS:[M+H]+875.6
计算的质量:874
H-NMR:参见图1
实施例2:
地索拉唑E1双半戊二酸盐(3)
按照A中所列的一般合成操作,将100mg地索拉唑E1、30mg DMAP和150mg戊二酸酐溶解于3ml干吡啶并且加入100μl TEA并且在RT下和氮气环境中搅拌4天。TLC-对照:DCM-MeOH 9∶1/DCM-IPA 9∶1+分析型HPLC。将该反应混合物倾倒在冷盐水/0.5M HCl并且用乙酸乙酯萃取,用盐水洗涤至pH4,用Na2SO4干燥并且在减压下除去过量溶剂。通过LC,经Isco Companion使用DCM/MeOH梯度纯化原料产物。获得35mg纯产物(产率:24%)。
LC-MS:[M+H]+1003.7
计算的质量:1002
H-NMR:参见图2
实施例3:
地索拉唑E1双半琥珀酸盐(4)
按照A中所列的一般合成操作,将138mg地索拉唑E1、70mg DMAP和730mg琥珀酸酐溶解于10ml干吡啶,加入一刮刀尖分子筛(4A)并且在RT下和氮气环境中将该反应体系搅拌4天。TLC-对照:DCM-MeOH9∶1/DCM-IPA 9∶1和分析型HPLC。用乙酸乙酯稀释该反应混合物,倾倒在冰冷盐水/HCl pH 3-4上,用乙酸乙酯萃取,用盐水洗涤有机相至pH 4-5,用Na2SO4干燥并且在减压下除去过量溶剂。通过LC,经Isco Companion使用DCM/MeOH梯度进行纯化而得到80mg固体产物(产率:39%)。
LC-MS:[M+H]+975.5
计算的质量:974
H-NMR:参见图3
实施例4:
地索拉唑A1单半琥珀酸盐,区域异构体(5)和(6)
按照A中所列的一般合成操作,将30mg地索拉唑A1、15mg DMAP和160mg琥珀酸酐溶解于2ml干吡啶并且将该反应体系在RT下和氮气环境中搅拌4天。TLC-对照:DCM-MeOH 9∶1/DCM-IPA 9∶1和分析型HPLC。用乙酸乙酯稀释该反应混合物,倾倒在冰冷盐水/HCl pH 3-4上,用乙酸乙酯萃取,用盐水将有机相洗涤至pH 4-5,用Na2SO4干燥并且在减压下除去过量溶剂。通过LC,经Isco Companion与DCM/MeOH梯度进行纯化而得到5.3mg固体产物,为含1∶1比例的两种区域异构体(合并产率:15%)。
LC-MS:[M+H]+859.6
计算的质量:858
H-NMR:参见图4
实施例5:
地索拉唑A1双半琥珀酸盐(7)
按照A中所列的一般合成操作,将138mg地索拉唑A1、70mg DMAP和730mg琥珀酸酐溶解于10ml干吡啶,加入一刮刀尖分子筛(4A)并且将该反应体系在RT下和氮气环境中搅拌4天。TLC-对照:DCM-MeOH9∶1/DCM-IPA 9∶1。用乙酸乙酯稀释该反应混合物,倾倒在冰冷盐水/HCl pH 3-4上,用乙酸乙酯萃取,用盐水将有机相洗涤至pH 4-5,用Na2SO4干燥并且在减压下除去过量溶剂。通过LC,经Isco Companion与DCM/MeOH梯度进行纯化而得到37mg固体产物7(产率:20%)。
LC-MS:[M+H]+959.4
计算的质量:958
H-NMR:参见图5
实施例6:
地索拉唑Z单半琥珀酸盐(8)
按照A中所列的一般合成操作,将80mg地索拉唑Z、16mg DMAP和13mg琥珀酸酐溶解于1.5ml吡啶并且向该反应体系中加入一小部分4A分子筛。将该混合物加热至60℃(油浴温)并且搅拌24h。通过HPLC-UV监测该反应体系。在冷却至室温后,加入乙酸乙酯并且过滤出分子筛。在减压下将滤液蒸干,将残余物再溶解于5ml 40%溶剂B混合物(A:20mM NH4AcO,5%AcN,0.2%HOAc pH 4.5;B:95%AcN,5%水)。在通过Luer Lock滤膜过滤后,将该溶液注入制备型HPLC(40%B-->85%B,25min内)。收集半半一琥珀酸盐峰并且冻干级分而得到31mg纯产物8,为淡棕色固体(35%)。
LC-MS:[M+H]+847.0
计算的质量:846
H-NMR:参见图6
实施例7:
地索拉唑Z双半琥珀酸盐(9)
按照A中所列的一般合成操作,将188mg地索拉唑Z、31mg DMAP和500mg琥珀酸酐溶解于4ml吡啶并且向该反应体系中加入一小部分4A分子筛。将该混合物加热至40℃(油浴温)并且搅拌72h。通过HPLC-UV和TLC(DCM/MeOH 9∶1)监测该反应体系。用DCM稀释该反应体系,转入蒸发烧瓶并且在减压下除去溶剂。将粗油再溶解于DCM,使其与RP18硅胶吸附,分离成两种类似级分并且用于通过使用12g RP柱的Isco Companion LC的RP-快速色谱(乙腈/水/0.1%乙酸)。收集来自试验序号1的级分#12-14和来自试验序号2的级分#2-3并且在减压/冻干下除去溶剂。得到105mg淡棕色产物(45%)。
LC-MS:[M+H]+947.3
计算的质量:946
H-NMR:参见图7
实施例8:
地索拉唑Z双半戊二酸盐(10)
按照A中所列的一般合成操作,将183mg地索拉唑Z、30mg 4-DMAP和560mg戊二酸酐溶解于4ml吡啶并且向该反应体系中加入一小部分4A分子筛。将该混合物加热至40℃(油浴温)并且搅拌72h。通过HPLC-UV和TLC(DCM/MeOH 9∶1)监测该反应体系。用DCM稀释该反应体系,转入蒸发烧瓶并且在减压下除去溶剂。然后将粗油溶解于乙酸乙酯并且倾倒在冰冷盐水/HCl上,用盐水/水洗涤至pH 4-5,用Na2SO4干燥并且在减压除去溶剂。将残余物溶解于DCM并且使其与RP18硅胶吸附,从而用于通过Isco Companion LC的RP-快速色谱(乙腈/水/0.1%乙酸)。在减压下除去AcN/乙酸并且冻干含水浓缩物后获得75mg(32%)纯的上述化合物10,为淡棕色固体。
LC-MS:[M+H]+975.3
计算的质量:974
H-NMR:参见图8
实施例9:
地索拉唑A1单半琥珀酰基[D-Lys6]LHRH,区域异构体(11)和(12)
按照B中所列的一般合成操作,将6mg地索拉唑A1单半琥珀酸盐(两种区域异构体的1∶1混合物)和3.2mg HATU溶解于0.25ml DMF。加入5μl DIPEA并且在r.t.(室温)下搅拌20min,以形成活化的酯复合物。将10.1mg[D-Lys6]LHRH肽溶解于0.25ml DMF,加入到所述混合物中并且将该反应体系在环境温度下搅拌1.5h。通过HPLC-UV监测该反应体系且随后将该混合物进行制备型HPLC。因此,用1.5ml的40%溶剂B混合物(A:20mM NH4AcO,5%AcN,0.2%HOAc pH 4.5;B:95%AcN,5%水)稀释该反应混合物。用约0.1ml 10%HOAc将该溶液酸化至pH 6。在通过Luer Lock滤膜过滤后,将该溶液注入制备型HPLC(40%B-->85%B,在25min内)。收集主峰并且冻干级分而得到5mg的上述化合物11和12,为淡棕色薄片状物(1∶1比例,合并产率:35%)。
HR-ESI-MS:(电荷状态+2)1048.0
计算的质量:2092
H-NMR:参见图9
实施例10:
地索拉唑E1单半琥珀酰基[D-Lys6]LHRH,区域异构体(13)和(14)
按照B中所列的一般合成操作,将40mg地索拉唑E1单半琥珀酸盐(两种区域异构体的1∶1混合物)和18mg HATU溶解于1ml DMF。加入25μl DIPEA并且在r.t.下搅拌15min,以形成活化的酯复合物。将54mg[D-Lys6]LHRH肽溶解于1ml DMF,加入到所述混合物中并且将该反应体系在环境温度下搅拌2h。通过HPLC-UV监测该反应体系且随后将该混合物进行制备型HPLC。因此,用3.5ml的40%溶剂B混合物(A:20mM NH4AcO,5%AcN,0.2%HOAc pH 4.5;B:95%AcN,5%水)稀释该反应混合物。用约0.5ml 10%HOAc将该溶液酸化至pH 6。在通过Luer Lock滤膜过滤后,将该溶液注入制备型HPLC(40%B-->85%B,在25min内)。收集主峰并且冻干级分而得到29mg的上述化合物13和14,为淡棕色薄片状物(1∶1比例,合并产率:36%)。
HR-ESI-MS:(电荷状态+2)1056.0
计算的质量:2108
H-NMR:参见图10
实施例11:
地索拉唑A1双半琥珀酰基[D-Lys6]LHRH(15)
按照B中所列的一般合成操作,将15.7mg地索拉唑A1双半琥珀酸盐和7.5mg HATU溶解于1ml DMF。加入11μl DIPEA并且在r.t.下搅拌20min,以形成活化的酯复合物。将23.6mg[D-Lys6]LHRH肽溶解于1ml DMF,加入到所述混合物中并且将该反应体系在环境温度下搅拌2h。通过HPLC-UV监测该反应体系且随后将该混合物进行制备型HPLC。因此,用4.5ml的40%溶剂B混合物(A:20mM NH4AcO,5%AcN,0.2%HOAc pH 4.5;B:95%AcN,5%水)稀释该反应混合物。用约0.5ml 10%HOAc将该溶液酸化至pH 6。在通过Luer Lock滤膜过滤后,将该溶液注入制备型HPLC(40%B-->85%B,在25min内)。收集主峰并且冻干级分而得到18mg的上述化合物15,为白色薄片状物(产率:32%)。
HR-ESI-MS:(电荷状态+4)858.4
计算的质量:3426
H-NMR:参见图11
实施例12:
地索拉唑Z单半琥珀酰基[D-Lys6]LHRH(16)
按照B中所列的一般合成操作,将45mg地索拉唑Z单半琥珀酸盐和24mg HATU溶解于1ml DMF。加入37μl DIPEA并且在r.t.下搅拌20min,以形成活化的酯复合物。将76mg[D-Lys6]LHRH肽溶解于1mlDMF,加入到所述混合物中并且将该反应体系在环境温度下搅拌1.5h。通过HPLC-UV监测该反应体系且随后使该混合物进行制备型HPLC。因此,用4.5ml的40%溶剂B混合物(A:20mM NH4AcO,5%AcN,0.2%HOAcpH 4.5;B:95%AcN,5%水)稀释该反应混合物。用约0.75ml 10%HOAc将该溶液酸化至pH 6。在通过Luer Lock滤膜过滤后,将该溶液注入制备型HPLC(40%B-->85%B,在25min内)。收集主峰并且冻干级分而得到42mg的上述化合物16,为淡棕色薄片状物(产率:38%)。
HR-ESI-MS:(电荷状态+2)1042.0
计算的质量:2080
H-NMR:参见图12
实施例13:
地索拉唑Z双半戊二酰基[D-Lys6]LHRH(17)
按照B中所列的一般合成操作,将35mg地索拉唑Z双半戊二酸盐和34mg HATU溶解于1ml DMF。加入54μl DIPEA并且在r.t.下搅拌20min,以形成活化的酯复合物。将128mg[D-Lys6]LHRH肽溶解于1mlDMF,加入到所述混合物中并且将该反应体系在环境温度下搅拌2h。通过HPLC-UV监测该反应体系且随后使该混合物进行制备型HPLC。因此,用4.5ml的40%溶剂B混合物(A:20mM NH4AcO,5%AcN,0.2%HOAcpH 4.5;B:95%AcN,5%水)稀释该反应混合物。用约1ml 10%HOAc将该溶液酸化至pH6。在通过Luer Lock滤膜过滤后,将该溶液注入制备型HPLC(40%B-->85%B,25min内)。收集主峰并且冻干级分而得到39mg的上述化合物17,为白色薄片状物(产率:33%)。
HR-ESI-MS:(电荷状态+4)862.4
计算的质量:3442
H-NMR:参见图13
实施例14:
地索拉唑Z单半琥珀酰基生长抑素(18)
按照B中所列的一般合成操作,将20mg地索拉唑Z单半琥珀酸盐和21mg HATU溶解于1ml DMF。加入15μl DIPEA并且在r.t.下搅拌15min,以形成活化的酯复合物。将25mg合成的肽H-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys(Fmoc)-Val-Cys-Thr-NH2×HCl(二硫化物桥连的)溶解于1ml DMF,加入到所述混合物中并且将该反应体系在环境温度下搅拌4h。通过HPLC-UV监测该反应体系,用2ml DMF稀释粗反应混合物并且加入哌啶至终浓度为10%(v/v)。在r.t.下搅拌5min后,将该混合物直接注入制备型HPLC。因此,用4.5ml的50%溶剂B混合物(A:20mM NH4AcO,5%AcN,0.2%HOAc pH 4.5;B:95%AcN,5%水)稀释该反应混合物。用约1.5ml 10%HOAc将该溶液酸化至pH 6。在通过Luer Lock滤膜过滤后,将该溶液注入制备型HPLC(50%B-->100%B,在25min内)。收集主峰并且冻干级分而得到12mg的化合物18,为浅褐色薄片状物(产率:33%)。
HR-ESI-MS:(电荷状态+2)937.4
计算的质量:1873
H-NMR:参见图14
实施例15
化合物19:
按照D中所列的一般合成操作氧化20mg地索拉唑E1,以得到10mg二酮产物(56%)。
LC-MS:[M+H]+:771.5
计算的质量:770
H-NMR:参见图15
实施例16
化合物20:
按照D中所列的一般合成操作氧化25mg地索拉唑A1,以得到17mg二酮产物(67%)。
LC-MS:[M+H]+:755.6
计算的质量:754
H-NMR:参见图16
实施例17
(化合物21):
按照D中所列的一般合成操作氧化44mg地索拉唑Z,以得到15mg二酮产物(29%)。
LC-MS:[M+H]+:743.3
计算的质量:742
H-NMR:参见图17
II)通过发酵生产地索拉唑Z
通过发酵来自粘丝菌纤维素堆囊菌的菌株Soce 1875(在登记号DSM53600中的DSMZ下购得),生产地索拉唑Z。
为了给发酵罐接种,优选在摇瓶中培养起始培养物。发酵过程按照例如分批或补料分批进行。
作为起始培养物,使用包含如下成分的培养基:0.8%可溶性淀粉(Merck 1.01252),0.2%酵母提取物,0.2%脱脂大豆粉,0.1%CaCl2×2H2O,0.1%MgSO4×7H2O,8mg/L Na-Fe-EDTA,1%HEPES缓冲液,0.2%葡萄糖,1%XAD树脂,其中开始培养时的pH为7.4。可以在30℃下通过160rpm搅拌孵育起始培养物摇瓶。为了发酵,使用高压灭菌前与起始培养物相同但不含HEPES缓冲液的pH7.9的70升培养基分批发酵。加入1%(vol/vol)XAD(Amberlite XAD 16,Rohm和Haas)以吸附地索拉唑Z。
给发酵罐接种1升起始培养物。培养在30℃温度下进行,以5.5L/min通气,搅拌器速度为80rpm。如果必要,通过在发酵过程中添加5%KOH使pH保持恒定或在6.8以上。通过碘反应控制残留淀粉。例如使用试纸(Roche)监测葡萄糖浓度。
当葡萄糖和淀粉基本上代谢并且当地索拉唑Z的浓度达到稳定水平时,准备收集生产培养物。在总计12天后,终止发酵并且通过用筛收集XAD树脂来采集。在随后的提取和纯化步骤中包括附着在XAD上的细胞。
为了分析目的,将来自发酵培养基的等分部分用于收集XAD树脂和细胞群,随后用甲醇、甲醇∶乙醇∶异丙醇(80∶15∶5)提取并且使用丙酮进行最终步骤。合并提取物,浓缩并且通过HPLC-MS分析。
当使用可选择的纤维素堆囊菌菌株、优选Soce 427(列在登记号DSM53419中的DSMZ下)时,下列培养基可以用于起始培养物:0.3%淀粉(Cerestar SF 12618,Cerestar Deutschland,Krefeld),0.2%脱脂大豆粉(Soyamine 50T,Lucas Meyer,Hamburg),0.1%酵母提取物(Marcor),0.1%硫酸镁(Roth,P027.2),0.05%氯化钙(Merck,1.02382),8mg/L乙二胺四乙酸钠-铁盐(Na-Fe-EDTA)(Merck,108413)和0.9%HEPES缓冲液(Roth,9105.3),pH为7.5。在高压灭菌后,加入20%葡萄糖溶液(Riedel-de16301)至最终为0.3%葡萄糖。为了发酵,在高压灭菌前,使用相同的培养基但不包括HEPES缓冲液,pH为7.9。
在按照上述描述发酵后,用3L甲醇的一部分提取通过离心70L纤维素堆囊菌菌株So ce427的发酵肉汤而收集的湿细胞群和XAD树脂。蒸发合并的滤液至得到残留的含水混合物。如果必要,加入水至得到1.2-1.5L,用3部分1.2L二氯甲烷提取。用无水硫酸钠干燥合并的有机溶液且然后蒸干。将残余物再溶解于1L甲醇水溶液(97%)并且使用3部分庚烷分配。蒸发甲醇层,用甲苯稀释并且蒸干。通过使用甲醇的凝胶色谱法在Sephadex LH-20(Pharmacia)上分离残余物而得到富含地索拉唑Z的级分,通过使用甲醇-水(65/35)的RP-MPLC(ODS-AQ,120S16μm)纯化而得到纯化的地索拉唑Z。
III)对各种肿瘤细胞系的抗增殖作用
在增殖试验中研究本发明选择的化合物对建立的肿瘤细胞系的抗增殖作用。
所用的试验测定了细胞脱氢酶活性并且使得测定细胞存活率和间接测定细胞计数成为可能。
所用的细胞系为人宫颈癌细胞系KB/HeLa(ATCC CCL17),卵巢腺癌细胞系SKOV-3(ATCC HTB77),人胶质母细胞瘤细胞系SF-268(NCI503138)和肺癌细胞系NCI-H460(NCI 503473)。此外,为了研究本发明化合物的细胞周期-特异性作用,使用RKOp27细胞系统(Schmidt M等Oncogene 2000,19(20):2423-2429)。RKO为人结肠癌细胞系(ATCCCRL-2577),其中表达了通过蜕皮激素表达系统诱导的细胞周期抑制剂p27kipl并且它可以导致尤其是G2中的细胞周期停滞。非特异性作用物质抑制增殖,与RKO细胞是否在G1或G2中得到抑制无关。然而,如果细胞未受到抑制且细胞周期通过,那么细胞周期特异性物质,例如微管蛋白抑制剂仅为细胞毒性的。
用于细胞脱氢酶活性的XTT试验
在37℃,5%CO2和95%大气湿度下和孵育器中在标准条件下培养粘附生长的肿瘤细胞系KB/HeLa,SKOV-3,SF-268和NCI-H460。在实验的第1天,使用胰蛋白酶/EDTA分离细胞并且通过离心沉淀。随后将细胞沉淀以相应的细胞计数重新悬浮于相应培养基中,并且在96-孔微量滴定板中反应。然后在孵育器中将平板培养过夜。将测试物质制备成在DMSO中的1mg/ml原液并且在实验的第2天使用培养基稀释至适当浓度。然后将在培养基中的物质加入到细胞中并且在孵育器中孵育45h。作为对照组,使用不使用测试物质处理的细胞。就XTT测定而言,将1mg/ml XTT(3′-[1-(苯基氨基羰基)-3,4-四唑鎓]-双(4-甲氧基-6-硝基)苯磺酸钠)溶解于不含酚红的RPMI-1640培养基中。另外,制备在磷酸缓冲盐水溶液(PBS)中的0.383mg/ml PMS(N-甲基二苯并吡嗪甲基硫酸酯)溶液。在实验的第4天,将75μl/孔的XTT-PMS混合物吸移在细胞平板上,同时与测试物质一起孵育45h。就此而言,在使用前即刻将XTT溶液与PMS溶液按照50∶1(vol∶vol)的比例混合。然后将细胞平板在孵育器中再孵育3h并且用光度计测定光密度(OD490nm)。根据测定的OD490nm,计算与对照组相比的抑制百分比并且以浓度-作用曲线形式绘制半对数图。通过从浓度-作用曲线上的回归分析,使用程序Graphpad Prism计算IC50。
通过RKOp27模型的细胞周期分析
在96-孔平板中进行分析。通过p27kipl的诱导型表达,细胞在生长中得到完全抑制,但未死亡。通过比较对诱导和未诱导细胞的活性,可以描绘出有关治疗剂作用机制(细胞周期特异性)的结论。接种约3倍以上的细胞计数的未诱导细胞,因为与未诱导细胞相比在测定过程中分裂不再发生(诱导的20000个细胞/孔,未诱导的6250细胞/孔)。对照组为未处理的细胞(+/-诱导)。使用3μM幕黎甾酮A进行诱导。在第1天时,使细胞暴露(+/-幕黎甾酮A)并且在37℃下孵育24h。在第2天时,加入测试物质(对照组DMSO)并且在37℃再持续孵育45h,此后进行标准XTT分析。
在表1中,在与细胞毒性部分多柔比星,现有技术的轭合物AN-152,和地索拉唑部分地索拉唑A1、E1和Z以及如下本发明选择的化合物(地索拉唑Z-(戊二酰基-[D-Lys6]LHRH)2-化合物17;地索拉唑Z-琥珀酰基-[D-Lys6]LHRH-化合物16;地索拉唑E1-琥珀酰基-[D-Lys6]LHRH-化合物13/14;地索拉唑A1-琥珀酰基-[D-Lys6]LHRH-化合物11/12;地索拉唑A1-(琥珀酰基-[D-Lys6]LHRH)2-化合物15)相比较中,证实了使用/不使用p27kipl表达的本发明选择的化合物的细胞毒性和/或生长抑制活性。
测试的化合物在p27kipl诱导状态下未表现出细胞毒性活性。结果表明本发明选择的化合物对所选的肿瘤细胞系的增殖具有极有效的抑制作用。此外,测试的轭合物与游离的未轭合的地索拉唑部分相比表现出明显的减毒性作用。
表1
IV)GnRH-受体依赖性增殖测定
研究了本发明选择的化合物对细胞增殖的剂量依赖性受体介导的抑制作用。
为了研究这些作用,使用人GnRH受体(hGnRH-R)阳性细胞系(5C6;Beckers等,Eur.J.Biochem.1995,231:535-543)和hGnRH-R阴性细胞系(LTK-;ECACC No.85011432)。
使各细胞在24孔多滴定板(MTP)中接触1ml培养基,其中细胞数量为15000个细胞/孔。按照这类方式调整细胞数量,在测试5天后,未处理的对照组细胞仍然处于指数生长期。
在100μL体积中的4小时初步生长(粘附)后将测试化合物给予培养的细胞至表2中给出的终浓度。
在37℃下孵育30min后,抽吸整个培养基并且用不含测试化合物的培养基将细胞洗涤两次。在洗涤后,将细胞放入孵育器(在37℃,5%CO2和95%大气湿度下)中再孵育4天。
为了测定孵育后的细胞数量,使用胰蛋白酶/EDTA分离细胞并且离心。使用Vi-Cell Analyzer细胞分析仪(Beckman Coulter)计数活细胞数量和总细胞数量。
将活细胞数量与未处理的对照组细胞(=100%)进行对比分析。仅考虑细胞组(各孔),其中总细胞存活率大于90%,即可以排除非特异性毒性对细胞增殖的抑制。
在表2中,展示了在有和没有不同浓度测试化合物存在下hGnRH-R阳性和阴性细胞96小时孵育后的增殖状态。将96小时后未处理的对照组细胞的增殖状态设定为100%。所用的测试化合物为现有技术的轭合物AN-152和下列本发明选择的化合物:地索拉唑Z-(戊二酰基-[D-Lys6]LHRH)2-化合物17;地索拉唑Z-琥珀酰基-[D-Lys6]LHRH-化合物16;地索拉唑E1-琥珀酰基-[D-Lys6]LHRH-化合物13/14;地索拉唑A1-琥珀酰基-[D-Lys6]LHRH-化合物11/12;地索拉唑A1-(琥珀酰基-[D-Lys6]LHRH)2-化合物15。
本发明的所有测试化合物在96小时研究期内均表现出对细胞增殖的剂量依赖性抑制作用。这种抑制作用是特异性的,正如可以从使用hGnRH-R阴性细胞系LTK-的结果中观察到的。
表2
V)化合物16的体内GnRH-受体依赖性抗增殖作用
给30CD 1nu/nu裸鼠经皮下接种GnRH受体阳性人卵巢癌细胞系OVCAR-3(5百万个细胞/动物)。在形成实体瘤后开始本实验。每个剂量组使用5只动物。
在实验的第0天时,通过触诊测定各肿瘤体积并且设定为100%。并随后在实验的第0天将测试化合物注射入测试动物的尾静脉。
仅在实验的第0天时将含所需浓度的测试化合物的10ml 0.9%盐水/kg(200μl/20g小鼠)标准体积给予一次。
在实验的第18天时通过触诊再次测定肿瘤大小。
当出现额外的肿瘤时,加入该体积。
在整个实验过程中未记录到毒性作用,如体重减轻。
组 | 对照组(盐水) | 地索拉唑Z(0.16mg/kg=215nmol/kg) | 化合物16(0.5mg/kg=215nmol/kg) | 化合物16(0.1mg/kg=43nmol/kg) |
第0天时的平均肿瘤大小 | 86 | 92 | 74 | 79 |
第0天时的标准偏差 | 15 | 34 | 59 | 21 |
第18天时的平均肿瘤大小 | 206 | 146 | 40 | 76 |
第18天时的标准偏差 | 165 | 97 | 26 | 64 |
结果表明未经处理的肿瘤继续生长,单独的地索拉唑Z对肿瘤生长有中度抑制作用,而通过地索拉唑Z与[D-Lys6]-LHRH轭合获得了剂量依赖性的明显改善的抗增殖功效。
Claims (32)
1.式(I)的化合物
C1-B1-A-B2-C2 (I),
其中:
A为式(II)的地索拉唑部分
其中:
Ran,Rbn,Rcn,Rdn,Rem,Rfm,Rgm,Rhm,R1,R2,R 3,R4,R5,R6,R7,R8,R9,R10,R11,R12,R13,R14,R15,R16,R17,R18,R19,R20,R21,R22,R23,R24彼此独立地选自“氢,烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基,杂环基-烷基,烷基磺酰基,芳基磺酰基,芳基-烷基磺酰基,卤素,羟基,羰基,乙酰基,羧基,羧基酯,酰胺,碳酸酯,氨基甲酸酯,α-氨基酸残基,β-氨基酸残基,烷氧基,氨基,亚氨基,羟基氨基,一-烷氨基,二-烷氨基,肼基,氰基,烷基-氰基,巯基,二硫烷基和/或烷基-硫基”,它们任选在烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基,杂环基-烷基,烷基磺酰基,芳基磺酰基,芳基-烷基磺酰基,羰基,乙酰基,羧基,羧基酯,酰胺,碳酸酯,氨基甲酸酯,烷氧基,一-烷氨基,二-烷氨基,烷基-氰基,二硫烷基和/或烷基-硫基上被1、2或3个取代基取代,所述的取代基彼此独立地选自“烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基,杂环基-烷基,烷基磺酰基,芳基磺酰基,芳基-烷基磺酰基,卤素,-F,-Cl,-Br,-I,-N3,-NO2,=O,=S,=S(O)2,羟基,羰基,乙酰基,羧基,羧基酯,-C(O)OH,-C(O)NH2,酰胺,碳酸酯,氨基甲酸酯,α-氨基酸残基,β-氨基酸残基,烷氧基,氨基,亚氨基,羟基氨基,一-烷氨基,二-烷氨基,肼基,氰基,烷基-氰基,巯基,二硫烷基和/或烷基-硫基”;
任选Ran,Rbn,Rcn,Rdn,Rem,Rfm,Rgm,Rhm,R1,R2,R3,R4,R5,R6,R7,R8,R9,R10,R11,R12,R13,R14,R15,R16,R17,R18,R19,R20,R21,R22,R23,R24基团中的任意两个相邻基团R可以构成原子键而生成双键或可以构成环氧化物(环氧乙烷),环氮乙烷(吖丙啶),烷基-,环烷基-,环烷基-烷基-,杂芳基-,芳基-烷基-,杂芳基-烷基-,杂环基-和/或杂环基-烷基-取代的环氮乙烷(吖丙啶),硫杂丙环和/或硫杂丙环-S-氧化物基团;
B1,B2彼此独立地为共价连接A与C1和/或C2的连接基;
C1,C2彼此独立地为选自“肽,肽激素,蛋白质,蛋白质激素,受体配体,血浆蛋白质,血清蛋白质,抗体,抗体片段”的细胞结合分子;
n为0,1,2,3;
m为0,1,2,3。
2.如权利要求1所述的化合物,其中A为式(III)的地索拉唑部分
其中:
Rio,Rjo,Rkp,Rlp,Rmp,Rnp,R25,R26,R27,R28,R29,R 30,R31,R32,R33,R34,R35,R36,R37,R38,R39,R40,R41,R42,R43,R44彼此独立地选自“氢,烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基,杂环基-烷基,烷基磺酰基,芳基磺酰基,芳基-烷基磺酰基,卤素,羟基,羰基,乙酰基,羧基,羧基酯,酰胺,碳酸酯,氨基甲酸酯,α-氨基酸残基,β-氨基酸残基,烷氧基,氨基,亚氨基,羟基氨基,一-烷氨基,二-烷氨基,肼基,氰基,烷基-氰基,巯基,二硫烷基和/或烷基-硫基”,它们任选在烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基,杂环基-烷基,烷基磺酰基,芳基磺酰基,芳基-烷基磺酰基,羰基,乙酰基,羧基,羧基酯,酰胺,碳酸酯,氨基甲酸酯,烷氧基,一-烷氨基,二-烷氨基,烷基-氰基,二硫烷基和/或烷基-硫基上被1、2或3个取代基取代,所述的取代基彼此独立地选自“烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基,杂环基-烷基,烷基磺酰基,芳基磺酰基,芳基-烷基磺酰基,卤素,-F,-Cl,-Br,-I,-N3,-NO2,=O,=S,=S(O)2,羟基,羰基,乙酰基,羧基,羧基酯,-C(O)OH,-C(O)NH2,酰胺,碳酸酯,氨基甲酸酯,α-氨基酸残基,β-氨基酸残基,烷氧基,氨基,亚氨基,羟基氨基,一-烷氨基,二-烷氨基,肼基,氰基,烷基-氰基,巯基,二硫烷基和/或烷基-硫基”;
任选Rio,Rjo,Rkp,Rlp,Rmp,Rnp,R25,R26,R27,R28,R29,R30,R31,R32,R33,R34,R35,R36,R37,R38,R39,R40,R41,R42,R43,R44基团中的任意两个相邻基团R可以构成原子键而生成双键或可以构成环氧化物(环氧乙烷),环氮乙烷(吖丙啶),烷基-,环烷基-,环烷基-烷基-,杂芳基-,芳基-烷基-,杂芳基-烷基-,杂环基-和/或杂环基-烷基-取代的环氮乙烷(吖丙啶),硫杂丙环和/或硫杂丙环-S-氧化物基团;
o为0,1,2,3;
p为0,1,2,3。
3.如权利要求1-2任一项所述的化合物,其中连接基B1,B2彼此独立地选自:
“酶可裂解连接基,蛋白水解可裂解连接基,self-immolative连接基,对酸敏感的连接基,二硫化物(交换)连接基,水解不稳定连接基,双官能连接基,多官能连接基,酯连接基,肽连接基,带有1、2、3、4或5个氨基酸残基的连接基,二肽连接基,四肽连接基,腙连接基,酰肼连接基,二碳酸残基连接基,聚乙二醇(PEG)连接基”。
4.如权利要求3所述的化合物,其中连接基B1,B2彼此独立地选自:
“X1-烷基-X2,X3-环烷基-X4,X5-环烷基-烷基-X6,X7-烷基-环烷基-烷基-X8,X9-芳基-X10,X11-芳基-烷基-X12,X13-烷基-芳基-烷基-X14,X15-杂芳基-X16,X17-杂芳基-烷基-X18,X19-烷基-杂芳基-烷基-X20,X21-杂环基-X22,X23-杂环基-烷基-X24,X25-烷基-杂环基-烷基-X26”,其中X1,X2,X 3,X4,X5,X6,X7,X8,X9,X10,X11,X12,X13,X14,X15,X16,X17,X18,X19,X20,X21,X22,X23,X24,X25,X26彼此独立地选自“O-,S-,S-S-,C(O)O-,C(O)-,OC(O)O-,C(O)NH-,OC(O)NH-,NHC(O)-,NHC(O)O-,NH-,NY1-,C(O)NY2-,OC(O)NY3-,NY4C(O)-,NY5C(O)O-,C=N-NH-,NH-N=C-,C=N-NY6-,NY7-N=C-”,其中Y1,Y2,Y3,Y4,Y5,Y6,Y7彼此独立地选自“烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基,杂环基-烷基,卤素,-F,-Cl,-Br,-I,-N3,-NO2,羟基,烷氧基,氨基,亚氨基,羟基氨基,肼基,氰基,烷基-氰基,巯基”;
草酰基,丙二酰基,琥珀酰基,戊二酰基,己二酰基,马来酰基,富马酰基;
和基于下列分子的连接基:
Gly-Phe-Leu-Gly,Phe-Lys,Val-Cit(瓜氨酸);
1,4-双(氨基甲基-)-环己烷,1,4-双(氨基甲基-)-环庚烷,1,3-双(氨基甲基-)-环戊烷,1-氨基-4-(氨基甲基)-环己烷,1,4-二氨基环己烷,1,4-双(氨基甲基)双环[2.2.2]辛烷,γ-马来酰亚胺基己酰基酰肼,4-肼基磺酰基苯甲酸,SMCC双官能连接基,MDS(甲基二硫烷基),PEG2,PEG 3,PEG7;
Lilly连接基:
Lilly BAMME连接基:
Lilly BAP连接基:
顺式-乌头酸连接基:
PABC1连接基:
PABC2连接基:
PABC3连接基:
PABC4连接基:
PABC5连接基:
PABC6连接基:
5.如权利要求1-4任一项所述的化合物,其中细胞结合分子Cl,C2彼此独立地选自:“八聚体肽,九聚体肽,十聚体肽,LHRH类似物,LHRH激动剂,LHRH拮抗剂,铃蟾肽,铃蟾肽类似物,铃蟾肽拮抗剂,生长抑素,生长抑素类似物,血清白蛋白,人血清白蛋白(HSA),加兰肽受体配体,GAL1受体配体,GAL2受体配体,加兰肽(CAS登记号119418-04-1)和类似物,生长抑素受体配体,sst1受体配体,sst2受体配体,sst4受体配体,sst5受体配体,生长抑素(CAS登记号38916-34-6)和类似物,奥曲肽(CAS登记号83150-76-9)和类似物,RC-121(D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys[环(2→7)二硫化物]-Thr-NH2;CAS登记号99660-13-6)和类似物,铃蟾肽受体配体,BB1受体配体,BB2受体配体,BB3受体配体,胃泌素释放肽受体(GRP-R)配体,铃蟾肽(Bn;CAS登记号31362-50-2)和类似物,胃泌素释放肽(GRP)和类似物,神经调节肽B(CAS登记号102577-19-5)和类似物,[D-Tyr6,β-Ala11,Phe13,Nle(正亮氨酸)14]-铃蟾肽(6-14)和类似物,RC-3095(H-D-Tpi-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-psi-Leu-NH2;CAS登记号138147-78-1;US 5,244,883;US 5,369,094)和类似物,Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Psi-Leu-Leu-NH2(US 5,843,903)和类似物,促性腺素释放激素受体(GnRH-R)配体,GnRH-RI型配体,GnRH-RII型配体,促黄体激素释放激素(LHRH;Glp-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2)和类似物,[D-Lys6]-LHRH,曲普瑞林([D-Trp6]-LHRH;CAS登记号57773-63-4)和类似物,组氨瑞林(6-[1-(苯基甲基)-D-组氨酸]-9-(N-乙基-L-脯氨酰胺)-10-脱甘氨酰胺-LHRH;CAS登记号76712-82-8)和类似物,布舍瑞林(6-[O-(1,1-二甲基乙基)-D-丝氨酸]-9-(N-乙基-L-脯氨酰胺)-10-脱甘氨酰胺-LHRH;CAS登记号57982-77-1)和类似物,亮丙瑞林(6-D-亮氨酸-9-(N-乙基-L-脯氨酰胺)-10-脱甘氨酰胺-LHRH;CAS登记号53714-56-0)和类似物,戈舍瑞林(6-[O-(1,1-二甲基乙基)-D-丝氨酸]-LHRH-2-(氨基羰基)酰肼;CAS登记号65807-02-5)和类似物,那法瑞林(6-[3-(2-萘基)-D-丙氨酸]-LHRH;CAS登记号76932-56-4)和类似物,LHRH-II(Pyr-His-Trp-Ser-His-Gly-Trp-Tyr-Pro-Gly-NH2)和类似物,西曲瑞克(CAS登记号120287-85-6)和类似物,替维瑞克/安雷利克斯(CAS登记号144743-92-0)和类似物,奥扎瑞克(D-63153;CAS登记号295350-45-7)和类似物,阿巴瑞克(CAS登记号183552-38-7)和类似物,地加瑞克(CAS登记号214766-78-6)和类似物,地肽瑞里(CAS登记号89662-30-6)和类似物,加尼瑞克(CAS登记号124904-93-4)和类似物,伊妥瑞克/安肽(CAS登记号112568-12-4)和类似物,GPR54受体配体,Kisspeptins和类似物,Kisspeptin-10/Kp-10(CAS登记号374675-21-5)和类似物,Kisspeptin-13/Kp-13(CAS登记号374675-18-0)和类似物,Metastin(CAS登记号388138-21-4)和类似物,神经激肽受体配体,NK1/NKA受体配体,NK2/NKB受体配体,NK3受体配体,物质P(H-Arg-Pro-Lys-Pro-Gln-Gln-Phe-Phe-Gly-Leu-Met-NH2;CAS登记号33507-63-0)和类似物,H-Asp-Ser-Phe-Val-Gly-Leu-Nle-NH2和类似物,[Sar9,Met(O2)11]-物质P和类似物,[Nle10]-神经激肽A(4-10)和类似物,[MePhe7]-神经激肽B和类似物,[β-Ala8]-神经激肽A(4-10)和类似物,缓激肽受体配体,B1受体配体,B2受体配体,缓激肽(H-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Phe-Arg-OH;CAS登记号58-82-2)和类似物,desArg9[Leu8]-缓激肽和类似物,desArg9-缓激肽和类似物,LysdesArg9-缓激肽和类似物,LysdesArg9[Leu8]-缓激肽和类似物,[Hyp3,Tyr(Me)8]-缓激肽和类似物,D-Arg[Hyp3,D-Phe7,Leu8]-缓激肽和类似物,BKM 718(CAS登记号259883-69-7)和类似物,BKM 822(CAS登记号259884-10-1)和类似物,BKM 570(CAS登记号259885-54-6)和类似物,BKM-638(CAS登记号259885-81-9)和类似物,GHS受体配体,葛瑞林(CAS登记号304853-26-7)和类似物,海沙瑞林(CAS登记号140703-51-1)和类似物,GHRP-1(CAS登记号141925-59-9)和类似物,GHRP-2(CAS登记号158861-67-7)和类似物,GHRP-6(His-D-Trp-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2;CAS登记号87616-84-0)和类似物,D-Lys3-GHRP-6和类似物,EP-1572(CAS登记号381231-18-1)和类似物,脱-辛酰基葛瑞林和类似物,松弛素受体配体,LGR7受体配体,LGR8受体配体,松弛素(CAS登记号9002-69-1)和类似物,胰岛素样3肽(INSL3;CAS登记号166515-61-3)和类似物,胰高血糖素样肽1受体配体,胰高血糖素受体配体,胰高血糖素样肽-1(GLP-1;CAS登记号89750-14-1)和类似物,胰高血糖素样肽-2(GLP-2;CAS登记号116469-36-4)和类似物,缩胆囊素受体配体,CCK1/CCKA受体配体,CCK2/CCKB受体配体,CCKC受体配体,缩胆囊素(CAS登记号9011-97-6)和类似物,神经肽Y(NPY)受体配体,NPY1受体配体,NPY2受体配体,NPY3受体配体,神经肽Y(NPY;CAS登记号82785-45-3)和类似物,[Leu31,Pro34]NPY和类似物,NPY-(13-36)和类似物,肽yy(CAS登记号106388-42-5)和类似物,内皮素受体配体,ETA受体配体,ETB受体配体,内皮素1(CAS登记号123626-67-5)和类似物,内皮素2(CAS登记号122879-69-0)和类似物,内皮素3(CAS登记号125692-40-2)和类似物,血管活性肠肽受体(VPAC1,VIP1)配体,VPAC2/VIP2受体配体,PAC1/PACAP受体配体,PACAP(1-27)(CAS登记号137061-48-4)和类似物,PACAP(1-38)(CAS登记号137061-48-4)和类似物,PACAP(6-27)(CAS登记号137061-48-4)和类似物,PACAP(6-38)(CAS登记号137061-48-4)和类似物,血管活性肠多肽(VIP)(CAS登记号37221-79-7)和类似物,VIP(6-28)(CAS登记号37221-79-7)和类似物,[(Ac-His1,D-Phe2,Lys15,Arg16,Leu27)-VIP(1-7)-GRF(8-27)]和类似物,[Lys1,Pro2,5,Arg3,4,Tyr6]-VIP和类似物,VEGF受体配体,NP-1受体配体,神经纤毛蛋白-1受体配体,血管内皮生长因子(VEGF;CAS登记号127464-60-2)和类似物,成纤维细胞生长因子受体配体,成纤维细胞生长因子(FGF;CAS登记号62031-54-3)和类似物”,且优选选自:“八聚体肽,九聚体肽,十聚体肽,促黄体激素释放激素(LHRH),[D-Lys6]-LHRH,LHRH类似物,LHRH激动剂,曲普瑞林([D-Trp6]-LHRH),LHRH拮抗剂,铃蟾肽,铃蟾肽类似物,铃蟾肽拮抗剂,生长抑素,生长抑素类似物,血清白蛋白,人血清白蛋白(HSA)”。
6.如权利要求1-5任一项所述的化合物,其中连接基B1和B2相同且细胞结合分子C1和C2相同。
7.如权利要求1-5任一项所述的化合物,其中连接基B2和细胞结合分子C2是不存在的,其具有式(IV)的结构
C1-B1-A (IV)。
8.如权利要求1-7任一项所述的化合物,其中:
A为式(III)的地索拉唑部分;
Rio,Rjo,Rkp,Rmp,R28,R30,R31,R32,R33,R34,R35,R36,R38,R40,R41,R42,R43,R44为氢;
R1p,Rnp一起形成双键或独立地选自“氢,烷氧基”;
R27,R29一起形成双键或环氧化物(环氧乙烷);
R37,R39一起形成双键或环氧化物(环氧乙烷);
R25,R26彼此独立地选自:任选在烷基上被1、2或3个取代基取代的“烷基”,所述的取代基彼此独立地选自“烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基,杂环基-烷基,烷基磺酰基,芳基磺酰基,芳基-烷基磺酰基,卤素,-F,-Cl,-Br,-I,-N3,-NO2,=O,=S,=S(O)2,羟基,羰基,乙酰基,羧基,羧基酯,酰胺,碳酸酯,氨基甲酸酯,α-氨基酸残基,β-氨基酸残基,烷氧基,氨基,亚氨基,羟基氨基,一-烷氨基,二-烷氨基,肼基,氰基,烷基-氰基,巯基,二硫烷基和/或烷基-硫基”;
B1和/或B2彼此独立地选自“二碳酸残基连接基,琥珀酰基,戊二酰基”;
C1和/或C2彼此独立地选自“LHRH,[D-Lys6]-LHRH,生长抑素,生长抑素类似物,人血清白蛋白(HSA)”;
o为1或2;
p为1或2。
9.如权利要求1-8任一项所述的化合物,其中:
n或o为1;
m或p为1。
10.如权利要求1-8任一项所述的化合物,其中:
n或o为2;
m或p为2。
12.式(V)的地索拉唑化合物
其中:
Zan,Zbn,Zcn,Zdn,Zem,Zfm,Zgm,Zhm,Z1,Z2,Z 3,Z4,Z5,Z6,Z7,Z8,Z9,Z10,Z11,Z12,Z13,Z14,Z15,Z16,Z17,Z18,Z19,Z20,Z21,Z22,Z23,Z24彼此独立地选自“氢,烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基,杂环基-烷基,烷基磺酰基,芳基磺酰基,芳基-烷基磺酰基,卤素,羟基,羰基,乙酰基,羧基,羧基酯,酰胺,碳酸酯,氨基甲酸酯,α-氨基酸残基,β-氨基酸残基,烷氧基,氨基,亚氨基,羟基氨基,一-烷氨基,二-烷氨基,肼基,氰基,烷基-氰基,巯基,二硫烷基和/或烷基-硫基”,它们任选在烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基,杂环基-烷基,烷基磺酰基,芳基磺酰基,芳基-烷基磺酰基,羰基,乙酰基,羧基,羧基酯,酰胺,碳酸酯,氨基甲酸酯,烷氧基,一-烷氨基,二-烷氨基,烷基-氰基,二硫烷基和/或烷基-硫基上被1、2或3个取代基取代,所述的取代基彼此独立地选自“烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基,杂环基-烷基,烷基磺酰基,芳基磺酰基,芳基-烷基磺酰基,卤素,-F,-Cl,-Br,-I,-N3,-NO2,=O,=S,=S(O)2,羟基,羰基,乙酰基,羧基,羧基酯,-C(O)OH,-C(O)NH2,酰胺,碳酸酯,氨基甲酸酯,α-氨基酸残基,β-氨基酸残基,烷氧基,氨基,亚氨基,羟基氨基,一-烷氨基,二-烷氨基,肼基,氰基,烷基-氰基,巯基,二硫烷基和/或烷基-硫基”;
条件是Zan,Zbn,Zcn,Zdn,Zem,Zfm,Zgm,Zhm,Z1,Z2,Z3,Z4,Z5,Z6,Z7,Z8,Z9,Z10,Z11,Z12,Z13,Z14,Z15,Z16,Z17,Z18,Z19,Z20,Z21,Z22,Z23,Z24基团中的至少一个独立地选自“羧基酯,酰胺,碳酸酯,氨基甲酸酯,α-氨基酸残基,β-氨基酸残基”;
额外的条件是从“羧基酯”中排除乙酰基;
任选Zan,Zbn,Zcn,Zdn,Zem,Zfm,Zgm,Zhm,Z1,Z2,Z3,Z4,Z5,Z6,Z7,Z8,Z9,Z10,Z11,Z12,Z13,Z14,Z15,Z16,Z17,Z18,Z19,Z20,Z21,Z22,Z23,Z24基团中的任意两个相邻基团Z可以构成原子键而生成双键或可以构成环氧化物(环氧乙烷),环氮乙烷(吖丙啶),烷基-,环烷基-,环烷基-烷基-,杂芳基-,芳基-烷基-,杂芳基-烷基-,杂环基-和/或杂环基-烷基-取代的环氮乙烷(吖丙啶),硫杂丙环和/或硫杂丙环-S-氧化物基团;
n为0,1,2,3;
m为0,1,2,3。
13.如权利要求12所述的地索拉唑化合物,其具有式(VI)的结构
其中:
Zio,Zjo,Zkp,Zlp,Zmp,Znp,Z25,Z26,Z27,Z28,Z29,Z30,Z31,Z32,Z33,Z34,Z35,Z36,Z37,Z38,Z39,Z40,Z41,Z42,Z43,Z44彼此独立地选自“氢,烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基,杂环基-烷基,烷基磺酰基,芳基磺酰基,芳基-烷基磺酰基,卤素,羟基,羰基,乙酰基,羧基,羧基酯,酰胺,碳酸酯,氨基甲酸酯,α-氨基酸残基,β-氨基酸残基,烷氧基,氨基,亚氨基,羟基氨基,一-烷氨基,二-烷氨基,肼基,氰基,烷基-氰基,巯基,二硫烷基和/或烷基-硫基”,它们任选在烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基,杂环基-烷基,烷基磺酰基,芳基磺酰基,芳基-烷基磺酰基,羰基,乙酰基,羧基,羧基酯,酰胺,碳酸酯,氨基甲酸酯,烷氧基,一-烷氨基,二-烷氨基,烷基-氰基,二硫烷基和/或烷基-硫基上被1、2或3个取代基取代,所述的取代基彼此独立地选自“烷基,环烷基,环烷基-烷基,芳基,杂芳基,芳基-烷基,杂芳基-烷基,杂环基,杂环基-烷基,烷基磺酰基,芳基磺酰基,芳基-烷基磺酰基,卤素,-F,-Cl,-Br,-I,-N3,-NO2,=O,=S,=S(O)2,羟基,羰基,乙酰基,羧基,羧基酯,-C(O)OH,-C(O)NH2,酰胺,碳酸酯,氨基甲酸酯,α-氨基酸残基,β-氨基酸残基,烷氧基,氨基,亚氨基,羟基氨基,一-烷氨基,二-烷氨基,肼基,氰基,烷基-氰基,巯基,二硫烷基和/或烷基-硫基”;
条件是Zio,Zjo,Zkp,Zlp,Zmp,Znp,Z25,Z26,Z27,Z28,Z29,Z30,Z31,Z32,Z33,Z34,Z35,Z36,Z37,Z38,Z39,Z40,Z41,Z42,Z43,Z44基团中的至少一个独立地选自“羧基酯,酰胺,碳酸酯,氨基甲酸酯,α-氨基酸残基,β-氨基酸残基”;
额外的条件是从“羧基酯”中排除乙酰基;
任选Zio,Zjo,Zkp,Zlp,Zmp,Znp,Z25,Z26,Z27,Z28,Z29,Z30,Z31,Z32,Z33,Z34,Z35,Z36,Z37,Z38,Z39,Z40,Z41,Z42,Z43,Z44基团中的任意两个相邻基团Z可以构成原子键而生成双键或可以构成环氧化物(环氧乙烷),环氮乙烷(吖丙啶),烷基-,环烷基-,环烷基-烷基-,杂芳基-,芳基-烷基-,杂芳基-烷基-,杂环基-和/或杂环基-烷基-取代的环氮乙烷(吖丙啶),硫杂丙环和/或硫杂丙环-S-氧化物基团;
o为0,1,2,3;
p为0,1,2,3。
14.如权利要求12-13任一项所述的化合物,其中:
n或o为1;
m或p为1。
15.如权利要求12-13任一项所述的化合物,其中:
n或o为2;
m或p为2。
17.制备如权利要求1-16任一项所述的化合物的方法。
18.制备如权利要求1-11任一项所述的化合物的方法,包括下列步骤:
a)使地索拉唑化合物与连接基,优选与连接基酸酐反应而生成单-和/或双官能化地索拉唑-连接基部分,
b)任选地从反应离析物和副产物中分离(纯化)单-和/或双官能化地索拉唑-连接基部分,
c)使任选分离(纯化的)单-和/或双官能化地索拉唑-连接基部分与细胞结合分子偶联而得到式(I)C1-B1-A-B2-C2和/或式(IV)C1-B1-A的地索拉唑轭合物,
d)任选地从反应离析物和副产物中分离(纯化)式(I)C1-B1-A-B2-C2和/或式(IV)C1-B1-A的地索拉唑轭合物。
19.药物组合物,包含药理学活性用量的如权利要求1-16任一项所述的至少一种化合物。
20.如权利要求19所述的药物组合物,其中所述至少一种化合物以0.0001mg-100mg/kg患者体重的单位剂量存在。
21.如权利要求19-20任一项所述的药物组合物,其中该组合物还包含至少一种药学上可接受的载体和/或赋形剂。
22.如权利要求19-21任一项所述的药物组合物,其中该组合物包含至少一种额外的药理学活性物质。
23.如权利要求22所述的药物组合物,其中所述额外的药理学活性物质选自:“DNA拓扑异构酶I和/或II抑制剂,DNA嵌入剂,烷化剂,微管去稳定剂,激素-和/或生长因子-受体-激动剂和/或-拮抗剂,信号传导抑制剂,针对生长因子及其受体的抗体,激酶抑制剂,抗代谢药”。
24.如权利要求22-23任一项所述的药物组合物,其中所述额外的药理学活性物质选自:“放线菌素D,氨鲁米特,天冬酰胺酶,阿伐他汀,硫唑嘌呤,BCNU(卡莫司汀),博来霉素,白消安,卡铂,CCNU(洛莫司汀),苯丁酸氮芥,顺铂,门冬酰胺酶,环磷酰胺,阿糖胞苷,更生霉素,柔红霉素,己烯雌酚,多西他赛,多柔比星(阿霉素),DTIC(达卡巴嗪),表柔比星,埃坡霉素,艾比特思,赤羟基壬基腺嘌呤,炔雌醇,依托泊苷,磷酸氟达拉滨,氟甲睾酮,氟他胺,吉西他滨,格列卫(gleevec)/格列卫(glivec),赫赛汀,六甲蜜胺,羟基脲,己酸羟孕酮,伊达比星,异环磷酰胺,干扰素,伊丽沙,伊立替康,L-天冬酰胺酶,亚叶酸,氮芥,醋酸甲羟孕酮,醋酸甲地孕酮,美法仑,美司钠,甲氨蝶呤,丝裂霉素C,米托坦,米托蒽醌,磷乙天冬氨酸(PALA),奥沙利铂,紫杉醇,喷司他丁,普利霉素,泼尼松龙,泼尼松,丙卡巴肼,雷洛昔芬,雷帕霉素,司莫司汀,索拉非尼,链佐星,他莫昔芬,塔西法,泰素帝,替尼泊苷,丙酸睾酮,硫鸟嘌呤,塞替派,托泊替康,三羟甲密胺,尿苷,长春碱,长春新碱,长春地辛,长春瑞滨,2′,2′-二氟脱氧胞苷,5-氟脱氧尿苷单磷酸,5-氮胞苷克拉屈滨,5-氟脱氧尿苷,5-氟尿嘧啶(5-FU),6-巯嘌呤”。
25.如权利要求1-16任一项所述的化合物在制备药物中的应用。
26.如权利要求1-15任一项所述的化合物在制备用于治疗和/或预防如下疾病的药物中的应用:“急性白血病,腺癌,基底细胞癌,良性肿瘤,膀胱癌,肠癌,脑瘤,乳腺癌,支气管癌,类癌,癌,宫颈癌,宫颈癌,慢性白血病,结肠癌,结肠癌,结肠直肠癌,结缔组织癌,子宫体癌,子宫内膜癌,食管癌,尤因肉瘤,胃泌素瘤,胶质母细胞瘤,神经胶质瘤,妇科肿瘤,头和/或颈癌,肝胚细胞瘤,肝细胞瘤,增生,过度增生性疾病,眼内黑素瘤,卡波西肉瘤,喉癌,喉癌,平滑肌瘤,白血病,肝肿瘤,肺癌,非小细胞肺癌,淋巴瘤,恶性肿瘤,乳癌,髓母细胞瘤,黑素瘤,多发性骨髓瘤,肾母细胞瘤,神经母细胞瘤,神经内分泌瘤,骨肉瘤,卵巢癌,胰腺癌,前列腺癌,前列腺癌,直肠癌,肾癌,肾细胞癌,眼癌,杆状瘤,肉瘤,皮肤癌,软组织肉瘤,实体瘤,脊髓癌,胃癌,睾丸癌,胸腺瘤,甲状腺癌,从脑和/或神经系统和/或脑膜开始的肿瘤,尿道癌和/或子宫癌。”
27.如权利要求25-26任一项所述的应用,其中所述药物进一步包含至少一种额外的药理学活性物质。
28.如权利要求25-27任一项所述的应用,其中在使用至少一种额外的药理学活性物质治疗之前和/或治疗过程中和/或治疗之后施用所述药物。
29.如权利要求27-28任一项所述的应用,其中所述额外的药理学活性物质选自:“DNA拓扑异构酶I和/或II抑制剂,DNA嵌入剂,烷化剂,微管去稳定剂,激素-和/或生长因子-受体-激动剂和/或-拮抗剂,信号传导抑制剂,针对生长因子及其受体的抗体,激酶抑制剂,抗代谢药”。
30.如权利要求27-29任一项所述的应用,其中所述额外的药理学活性物质选自:“放线菌素D,氨鲁米特,天冬酰胺酶,阿伐他汀,硫唑嘌呤,BCNU(卡莫司汀),博来霉素,白消安,卡铂,CCNU(洛莫司汀),苯丁酸氮芥,顺铂,门冬酰胺酶,环磷酰胺,阿糖胞苷,更生霉素,柔红霉素,己烯雌酚,多西他赛,多柔比星(阿霉素),DTIC(达卡巴嗪),表柔比星,埃坡霉素,艾比特思,赤羟基壬基腺嘌呤,炔雌醇,依托泊苷,磷酸氟达拉滨,氟甲睾酮,氟他胺,吉西他滨,格列卫(gleevec)/格列卫(glivec),赫赛汀,六甲蜜胺,羟基脲,己酸羟孕酮,伊达比星,异环磷酰胺,干扰素,伊丽沙,伊立替康,L-天冬酰胺酶,亚叶酸,氮芥,醋酸甲羟孕酮,醋酸甲地孕酮,美法仑,美司钠,甲氨蝶呤,丝裂霉素C,米托坦,米托蒽醌,磷乙天冬氨酸(PALA),奥沙利铂,紫杉醇,喷司他丁,普利霉素,泼尼松龙,泼尼松,丙卡巴肼,雷洛昔芬,雷帕霉素,司莫司汀,索拉非尼,链佐星,他莫昔芬,塔西法,泰素帝,替尼泊苷,丙酸睾酮,硫鸟嘌呤,塞替派,托泊替康,三羟甲密胺,尿苷,长春碱,长春新碱,长春地辛,长春瑞滨,2′,2′-二氟脱氧胞苷,5-氟脱氧尿苷单磷酸,5-氮胞苷克拉屈滨,5-氟脱氧尿苷,5-氟尿嘧啶(5-FU),6-巯嘌呤”。
31.如权利要求25-30任一项所述的应用,其中在放射治疗和/或手术治疗之前和/或过程中和/或之后给予所述药物。
32.试剂盒,包含药理学活性用量的如权利要求1-16任一项所述的至少一种化合物和药理学活性用量的如权利要求27-30任一项所述的至少一种额外的药理学活性物质。
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US84235706P | 2006-09-06 | 2006-09-06 | |
US60/842,357 | 2006-09-06 | ||
EP06018750.7 | 2006-09-07 | ||
EP06018750A EP1900742A1 (en) | 2006-09-07 | 2006-09-07 | Conjugates of disorazoles and their derivatives with cell-binding molecules, novel disorazole derivatives, processes of manufacturing and uses thereof |
PCT/EP2007/059310 WO2008028934A1 (en) | 2006-09-06 | 2007-09-06 | Conjugates of disorazoles and their derivatives with cell-binding molecules, novel disorazole derivatives, processes of manufacturing and uses thereof |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN101578287A true CN101578287A (zh) | 2009-11-11 |
CN101578287B CN101578287B (zh) | 2012-09-05 |
Family
ID=41272787
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN2007800379251A Expired - Fee Related CN101578287B (zh) | 2006-09-06 | 2007-09-06 | 地索拉唑及其衍生物与细胞结合分子的轭合物,新的地索拉唑衍生物,其制备方法及其应用 |
Country Status (3)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN101578287B (zh) |
BR (1) | BRPI0716190A2 (zh) |
ZA (1) | ZA200901177B (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110133296A (zh) * | 2012-03-18 | 2019-08-16 | 株式会社资生堂 | 疾病样品分析装置、分析系统及分析方法 |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AR042617A1 (es) * | 2002-08-24 | 2005-06-29 | Zentaris Gmbh | Disorazoles y sus derivados, utiles para el tratamiento de enfermedades tumorales benignas y malignas, y el uso de dichos compuestos para la preparacion de medicamentos. |
CA2564076C (en) * | 2004-05-19 | 2014-02-18 | Medarex, Inc. | Chemical linkers and conjugates thereof |
WO2006135371A1 (en) * | 2005-06-09 | 2006-12-21 | Kosan Biosciences Incorporated | Conjugates with reduced adverse systemic effects |
EP1743897A1 (en) * | 2005-07-15 | 2007-01-17 | Gesellschaft für Biotechnologische Forschung mbH | Biologically active compounds obtainable from Sorangium cellulosum |
-
2007
- 2007-09-06 CN CN2007800379251A patent/CN101578287B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2007-09-06 BR BRPI0716190-5A2A patent/BRPI0716190A2/pt not_active IP Right Cessation
-
2009
- 2009-02-18 ZA ZA200901177A patent/ZA200901177B/xx unknown
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110133296A (zh) * | 2012-03-18 | 2019-08-16 | 株式会社资生堂 | 疾病样品分析装置、分析系统及分析方法 |
CN110133296B (zh) * | 2012-03-18 | 2022-03-25 | 镜株式会社 | 疾病样品分析装置、分析系统及分析方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
ZA200901177B (en) | 2009-11-25 |
BRPI0716190A2 (pt) | 2013-11-12 |
CN101578287B (zh) | 2012-09-05 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP7299372B2 (ja) | シラノールベースの治療用ペイロード | |
KR101532966B1 (ko) | 세포 결합 분자들과 디소라졸 및 이의 유도체의 접합체, 신규한 디소라졸 유도체, 이의 제조 방법 및 용도 | |
CN103764667B (zh) | N‑羧烷基耳他汀类及其应用 | |
CN107108694A (zh) | 含叔胺药物物质的靶向递送 | |
CN102365094A (zh) | 用于预防或者治疗肝炎感染的环孢菌素类似物 | |
NO20024421L (no) | Polyglutaminsyre-camptothecin-konjugater og fremgangsmÕte for fremstilling av disse | |
CN101495482A (zh) | 氮杂环丙基-埃坡霉素化合物 | |
US11834482B2 (en) | Agents modulating beta-catenin functions and methods thereof | |
JP2001515010A (ja) | ドラスタチン15誘導体 | |
CN102348718A (zh) | 去氧阿肽加定衍生物 | |
WO2021164765A1 (zh) | 靶向递送和激活的免疫刺激性偶联复合物的制备和用途 | |
WO2021051720A1 (zh) | 一类抗人egfr抗体药物偶联物及其制备方法与应用 | |
JPH08510260A (ja) | Lhrh拮抗剤 | |
CN101578287A (zh) | 地索拉唑及其衍生物与细胞结合分子的轭合物,新的地索拉唑衍生物,其制备方法及其应用 | |
JP5340155B2 (ja) | 細胞結合分子を有するジソラゾールのコンジュゲート及びそれらの誘導体、新規ジソラゾール誘導体、それらの製法ならびに使用 | |
ZA200207248B (en) | Novel LHRH antagonist, their preparation and use as medicaments. | |
RU2473562C2 (ru) | Конъюгаты дисоразолов, фармацевтическая композиция на их основе, названные конъюгаты для изготовления лекарственного средства, набор и способ их получения | |
WO2023061482A1 (zh) | EphA2的双环肽配体及其缀合物 | |
WO2023066314A1 (zh) | Nectin-4的双环肽配体及其用途 | |
WO2023122945A1 (zh) | 环状多肽化合物及其用途 | |
WO2023208168A1 (zh) | 一种包含亲水性糖结构的配体-药物偶联物 | |
WO2023088236A1 (zh) | Mt1-mmp的双环肽配体及其缀合物 | |
CN115192732A (zh) | 一种dna毒性二聚体化合物及其偶联物 | |
CN118103388A (zh) | EphA2的双环肽配体及其缀合物 | |
CN101754969A (zh) | 制备埃坡霉素化合物和类似物的方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
REG | Reference to a national code |
Ref country code: HK Ref legal event code: DE Ref document number: 1134812 Country of ref document: HK |
|
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
REG | Reference to a national code |
Ref country code: HK Ref legal event code: GR Ref document number: 1134812 Country of ref document: HK |
|
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20120905 Termination date: 20170906 |
|
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |