KR20070084270A

KR20070084270A - 안정한 정제 제형물

Info

Publication number: KR20070084270A
Application number: KR1020077011104A
Authority: KR
Inventors: 스티븐 정글스; 마크 헨델슨; 빅토리아 슬루즈키; 로버트 바피
Original assignee: 바이오마린 파머수티컬 인크.
Priority date: 2004-11-17
Filing date: 2005-11-16
Publication date: 2007-08-24
Also published as: AU2005306686A1; BRPI0517088A; US7566462B2; EP1845952A2; TW200624120A; CA2581814A1; CN101132776A; MX2007005039A; JP2008520574A; AR052238A1; JP2014012740A; US20070270581A1; CA2581814C; WO2006055511A2; US20080207626A1; MY142120A; PE20061294A1; IL182161A0; IL182161A; WO2006055511A3

Abstract

본 발명은 테트라히드로비오프테린의 안정한 고체 제형물, 그것의 제조 방법, 및 그러한 제형물을 이용하는 치료 방법에 관한 것이다.

테트라히드로비오프테린

Description

안정한 정제 제형물 {Stable Tablet Formulation}

본 발명은 일반적으로 인간의 치료를 위한, 테트라히드로비오프테린, 또는 그것의 전구체, 유도체 또는 유사체의 안정한 정제 제형물에 관한 것이다.

테트라히드로비오프테린(경우에 따라, BH4로 칭해짐)은 페닐알라닌 히드록실라제(PAH), 티로신 히드록실라제, 트립토판 히드록실라제 및 산화질소 신타제를 비롯한 수많은 상이한 효소들의 보조인자인 자연 발생적 프테린 계열의 생물속생 아민이다. 프테린은 생리학적 유체(체액) 및 조직 내에 환원 및 산화된 형태로 존재하나, 단지 5,6,7,8-테트라히드로비오프테린만이 생물학적으로 활성이다. 그것은 키랄 분자이고, 보조인자의 6R 거울상 이성질체가 생물학적으로 활성인 거울상 이성질체인 것으로 알려져 있다. BH4의 합성 및 장애에 대한 상세한 검토에 대해, [Blau 등, 2001(Disorders of tetrahydrobiopterin and related biogenic amines. In: Scriver CR, Beaudet AL, Sly WS, Valle D, Childs B, Vogelstein B, 편저, The Metabolic and Molecular Bases of Inherited Disease. 제8판. New York: McGraw-Hill, 2001: 1275-1776)]을 참고한다.

PAH 효소의 부재 또는 변이화로 인한 PAH 활성의 결핍, 또는 그것의 보조인자 BH4의 결핍은 가장 온화한 형태의 고페닐알라닌혈증(HPA), 또는 보통 또는 심한 형태의 페닐케톤뇨증(PKU)으로 알려져 있는 아미노산 페닐알라닌(Phe)의 과다를 나타낸다. PAH 결핍은 또한 신경전달물질의 합성을 위한 전구체인 아미노산 티로신의 결핍을 유발한다. 티로신 히드록실라제 또는 트립토판 히드록실라제 활성의 결핍은 신경전달물질 생산의 결핍으로서 나타날 수 있다.

페닐케톤뇨증에 있어 BH4 결핍의 역할을 밝혀 냄에도 불구하고, BH4를 이용한 처리는 아직 제시되지 않은 바, 그 이유는 그러한 치료가 페닐알라닌-제한 식이 치료법은 $6,000인 것에 비해 청소년 또는 성인의 경우 연간 $30,000에 달해 매우 고가이기 때문이다(Hanley, N. Engl . J. Med 348(17): 1723, 2003). BH4에 있어 또 다른 중요 문제는 이 화합물이 불안정하고, 실온에서 호기성 산화를 잘 겪고(Davis 등, Eur . J. Biochem ., Vol. 173, 345-351, 1988; U.S. 특허 No. 4,701,455), 저장 수명이 실온에서 8시간 미만이라는 것(Berneggar 및 Blau, Mol . Genet . Metabol . 77:304-313, 2002)이다.

시중 입수가능한 다른 테트라히드로비오프테린 제품은 특별히 포장되거나 냉동 유지될 필요가 있다. 예를 들어, 쉬르크스 라보라토리(Schirck's Laboratory)에 의해 시판되는 정제에 있는 표지는, 정제가 냉동 보관되어야 함을 명시하고, 제품이 실온에서 단지 2달의 저장 수명을 가진다고 언급한다. 비오프텐(BIOPTEN)(테트라히드로비오프테린 과립)은 실온 안정성을 유지하기 위해 고가의 밀봉 봉지된 호일 포장을 필요로 한다. 그러한 BH4 조성물의 불안정성은 상업적으로 바람직하지 않고, 부적절한 저장으로 인한 상당한 분해는 환자의 치료를 방해할 수 있다.

약물 물질의 다형체 형태는, 흡습성, 입자 형상, 밀도, 유동성 및 압착 성(compactibility)을 비롯한 상이한 물리적 및 기계적 성질을 나타낼 수 있고, 이는 다시 약물 물질의 가공 및/또는 약물 제품의 제조에 영향을 미칠 수 있다. 약제 가공에 있어 다형체의 영향은 또한 제형 및 제조 공정에 의존한다. 약물 물질의 다형체 형태는 일정 범위의 제조 공정, 예컨대 건조, 밀링, 마이크론화, 습식 과립화, 분무 건조 및 압착에 노출될 때 상 변화를 겪을 수 있다. 습도 및 온도와 같은 환경적 조건에 노출됨은 또한 다형체 전환을 유도할 수 있다. 전환 정도는 일반적으로 다형체, 상 전이를 위한 역학적 배리어, 및 인가된 응력에 의존한다. [FDA Center for Drug Evaluation and Research(CDER) Draft Guidance for Industry ANDAs: Pharmaceutical Solid Polymorphism Chemistry, Manufacturing, and Controls Information, December 2004]를 참고한다.

따라서, 테트라히드로비오프테린의 안정한 고체 제형물, 및 그러한 안정한 제형물의 제조 방법이 여전히 필요하다. 본 발명은 그러한 필요를 해소하기 위한 것이다.

발명의 개요

본 발명은 테트라히드로비오프테린의 안정한 고체 제형물, 특히 안정한 정제, 그러한 제형물의 제조 방법, 및 그러한 제형물을 이용하는 처리 방법에 관한 것이다.

본 발명은 연장된 시간 동안 안정성을 유지하는, 테트라히드로비오프테린, 또는 그것의 전구체, 유도체 또는 유사체의 안정한 고체 제형물을 제공한다. 본 발명의 조성물은 8 시간 초과 동안 실온에서 안정한, 결정성 형태의 BH4, 및 약제학적으로 허용가능한 담체, 희석제 또는 부형제를 포함할 수 있다. 본 발명의 예시적 안정한 정제는 건식 정제 공정을 이용하여 제조되었고, 실온에서 적어도 6 내지 9개월의 저장 수명을 가지는 것으로 나타났다.

본 발명의 또 다른 측면은 테트라히드로비오프테린, 또는 그것의 전구체, 유도체 또는 유사체를 물 첨가 없이, 또 다른 약제학적 담체, 희석제 또는 부형제와 혼합하는 단계를 포함하는, 안정한 고체 제형물을 제조하기 위한 건식 제형 공정을 제공한다.

한 예시적 실시양태에서, 활성 약제학적 성분 및 부형제를 건조 배합하고, 압착한다. 정제를, 습도가 약 65%(±5%) 이하로 유지되는 습도 조절 실에서 가공한다. 일단 가공되면, 정제를 플라스틱 백의 외부 2개 층 사이에 라이닝된 제습성 받이(pillow)가 있는 삼중 플라스틱으로 라이닝된 내수성 용기에 저장한다. 따라서, 본 발명은 초기량의, (6R)-L-에리트로-테트라히드로비오프테린의 결정성 다형체, 바람직하게는 다형체 B, 및 하나 이상의 약제학적으로 허용가능한 부형제를 혼합하는 단계, 및 혼합물로부터 정제를 형성하는 단계를 포함하는 건식 제형 방법으로서, 단계들에 액체 물을 첨가하는 것이 포함되지 않는 방법을 포함한다. 예시적 입자 크기에는, 예컨대 약 0.2 μm 내지 약 500 μm, 약 1 μm 내지 약 250 μm, 또는 약 2 μm 내지 약 200μm, 또는 예컨대 약 500 μm 초과, 약 600 μm 초과, 약 700 μm 초과, 또는 약 850 μm 미만이 포함된다.

예시적 실시양태들에서, 정제는 하기 "다형체 B"로 기재된 (6R)-5,6,7,8-테트라히드로비오프테린의 안정한 결정성 형태를 이용하여 초기에 제조되고, 3개월, 6개월 또는 9개월, 또는 바람직하게는 12개월 이상, 예컨대 15개월, 18개월, 21개월, 2년, 2.5년, 3년, 또는 그 이상 후에 실온에서 활성 약제학적 성분(API)의 약 95% 이상을 보유한다. 바람직하게, 정제는 상기 시간 동안 실온에서 저장된 후, API의 적어도 약 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 99.5%을 보유한다. 정제는 또한 바람직하게 상기 시간 후에, 2% 이하, 또는 1.5% 이하, 또는 1% 이하, 또는 0.9% 이하, 또는 0.8% 이하, 또는 0.7% 이하, 또는 0.6% 이하의 건조 시 손실율을 나타낸다. 테트라히드로비오프테린 활성 약제학적 성분의 초기량이 약 25 mg, 50 mg, 75 mg, 100 mg, 125 mg, 150 mg, 175 mg, 200 mg, 250 mg, 300 mg, 350 mg, 400 mg, 450 mg, 500 mg, 550 mg, 600 mg, 650 mg, 700 mg, 750 mg, 800 mg, 850 mg, 900 mg, 또는 그 이상의 용량인 예시적 정제가 제조될 수 있다. 바람직한 정제는 또한 투여 시 급속 붕해, 예컨대, 3분 이하 이내의 붕해를 나타내어, 투여 용이성을 향상시킨다.

따라서, 본 발명은 초기량의, (6R)-L-에리트로-테트라히드로비오프테린의 결정성 다형체, 표시된 다형체 B, 및 약제학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는 안정한 정제 제형물로서, 실온 및 약 60% 습도에서 6개월 후에, 안정한 정제 제형물이 (6R)-L-에리트로-테트라히드로비오프테린의 초기량의 약 95% 이상을 보유하고, 상기 결정성 다형체가 히드로클로라이드 염으로서 d-값(Å)로 표시되는 하기 특징적 피크를 갖는 X-선 분말 회절 패턴을 나타내는 안정한 정제 제형물을 제공한다: 8.7 (vs), 5.63 (m), 4.76(m), 4.40 (m), 4.00 (s), 3.23 (s), 3.11 (vs), 바람직하게는 8.7 (vs), 6.9 (w), 5.90 (vw), 5.63 (m), 5.07 (m), 4.76 (m), 4.40 (m), 4.15 (w), 4.00 (s), 3.95 (m), 3.52 (m), 3.44 (w), 3.32 (m), 3.23 (s), 3.17 (w), 3.11 (vs), 3.06 (w), 2.99 (w), 2.96 (w), 2.94 (m), 2.87 (w), 2.84 (s), 2.82 (m), 2.69 (w), 2.59 (w) 및 2.44 (w). 바람직하게, 정제는 (6R)-L-에리트로-테트라히드로비오프테린의 초기량의 적어도 약 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 99.5%를 보유한다.

안정한 고체 제형물은 바람직하게 제형물의 안정성 또는 기타 특성을 향상시키는 하기 부가적 성분들 중 하나 이상을 함유한다: 결합제, 붕해제, 산성 산화방지제 또는 윤활제, 또는 이들의 조합물. 한 예시적 바람직한 조성물은 무수 이염기성 인산칼슘, 크로스포비돈, 아스코르브산 및 푸마르산스테아릴을 포함하고, 임의적으로 만니톨 및 리보플라빈을 포함한다. 안정한 고체 제형물은 임의적으로 피치료 상태에 적당한 기타 치료제, 예컨대 엽산염 전구체, 엽산 또는 엽산염 유도체를 포함한 엽산염; 및/또는 비타민 C 및/또는 비타민 B12와 같은 비타민; 및/또는 L-도파 또는 카르비도파와 같은 신경전달물질 전구체; 및/또는 5-히드록시트립토판; 및/또는 아르기닌을 포함할 수 있다. 테트라히드로비오프테린(또는 전구체 또는 유도체 또는 유사체) 및 엽산염을 포함하고, 임의적으로 아르기닌을 추가로 포함하는 조성물이 특히 구상된다.

본 발명은 또한 유사한 안정성 성질을 갖는, 캡슐, 환약 또는 트로키제와 같은, 경구 투여용의 기타 안정한 고체 제형물을 구상한다.

본 발명의 또 다른 측면은 그러한 안정한 고체 제형물을 이용하는 처리 방법을 제공한다. 본 발명은 본 발명의 상기 제형물이 대사 장애, 특히 아미노산 대사 관련 장애에 개입하는데 유용함을 구상한다. 보다 특히, 안정한 제형물은 상승된 페닐알라닌 수준 또는 감소된 티로신 수준을 나타내는 대상, 예를 들어 고페닐알라닌혈증, 온화한 페닐케톤뇨증 또는 고전적 중한 페닐케톤뇨증을 앓는 대상의 치료; 및 혈관성 질병, 허혈성 또는 염증성 질병, 당뇨병, 또는 인슐린 내성을 포함한, 산화질소 신타제 활성의 증진으로부터 이익을 얻게 되는 상태를 앓는 대상의 치료에 사용될 수 있다. 각 처리에 필요한 총 용량은 다중 투약 또는 단일 투약으로 투여될 수 있다. 안정한 제형물은 매일, 또는 일부 기타 간격으로, 예컨대 수일마다 또는 매주 투여될 수 있다.

안정한 제형물은 단독으로, 또는 기저 질병 또는 임상적 증상을 포함한, 피치료 장애에 적당한 다른 치료와 함께 사용될 수 있다. 예를 들어, HPA의 경우, 본 발명의 안정한 제형물은 단백질-제한 식이법, 예컨대 대상이 일일 단백질 약 600 mg 이하, 또는 약 300 mg 이하로 제한되고, 임의적으로 보충적 아미노산, 예컨대 티로신, 발린, 이소류신 및 류신으로 제한되는 식이법과 조합되어 투여될 수 있다. 안정한 제형물은 또한 엽산염, 아르기닌, 비타민 또는 신경전달물질 전구체와 조합되어 투여될 수 있다. 또 다른 예로서, 혈관성 질병, 당뇨병 또는 인슐린 내성에 대해, 본 발명의 안정한 제형물은 항고혈압제, 항혈소판제, 콜레스테롤-저하제, 인슐린 또는 경구 저혈당제와 같은 다른 치료제와 함께 투여될 수 있다.

본 발명의 다른 특성 및 이점은 하기 발명의 상세한 설명을 통해 명백해질 것이다. 그러나, 발명의 상세한 설명 및 특정 실시예는 본 발명의 바람직한 실시양태들을 설명하면서, 본 발명의 사상 및 범주 내에 각종 변화 및 변형이 이 발명의 상세한 설명으로부터 당업자에게 명백해지게 되므로, 단지 예시를 위한 목적으로 제공된 것이다.

도 1은 (6R)-5,6,7,8-테트라히드로비오프테린 디히드로클로라이드의 결정성 다형체 B에 대한 특징적 X-선 분말 회절 패턴을 나타낸다.

발명의 상세한 설명

본 발명은 활성 성분의 안정한 결정성 다형체를 유지하는 안정한 제형물을 제공한다. 다형체 B1에서와 같이 하기 기술되는, 대기 산소 및 정상적 습도에 대해 실온에서 안정한, (6R)-5,6,7,8-테트라히드로비오프테린 디히드로클로라이드의 무수 다형체가 확인되었다. 그러나, 상대 습도(%)가 80%에 접근할 때, 다형체 B는 더욱 더 많은 물을 흡수하는 것으로 보이며, 그것의 결정성 형태가 손실되며, 산화에 대해 불안정하게 된다.

건식 제형 공정을 이용함으로써, 이 다형체의 안정한 결정성 구조가 마무리된 생성물에서 유지된다. 대조적으로, 테트라히드로비오프테린 조성물의 다른 제조 방법은 본 발명의 방법에 비해 덜 안정한 생성물을 수득케 한다.

건식 제형 공정으로 다형체 B를 이용하여 본 발명의 안정한 정제 제형물을 제조하였고, 이는 정상적 실온 및 습도에서, 또한 가속화된 시험 조건 하에서 적어도 6 또는 9개월 동안 초기 (6R)-5,6,7,8-테트라히드로비오프테린의 99% 이상을 보유하는 것으로 나타났다. 가속화된 시험 조건, 즉 보다 높은 온도 및 습도 하에 서, 관찰된 안정성은 정제 제형물이 정상적 실온 및 습도에서 6 또는 9개월보다 훨씬 더 긴 기간 동안 안정하게 됨을 가리킨다.

본원에 사용되는 "저장 수명"은 약제학적 제형물 내의 활성 약제학적 성분(API)이, 약제학적 제형물을 특정 저장 조건, 예를 들어 정상적 습도 하에서의 실온에서 저장할 때, 최소의 분해(예컨대, 약 5% 이하의 분해)를 가지게 되는 저장 기간을 의미한다.

본 발명의 안정한 제형물의 저장 수명은 하기와 같이 측정될 수 있다. 시험할 제형물을 하나 이상의 상이한 배치로 나누어, 전형적인 저장 조건 하, 예컨대 4℃(냉동기) 또는 25℃(실온)에서 저장할 수 있다. 약제학적 제형물 내의 API의 분해는 또한 약물 물질의 분해 속도를 증가시키도록 고안된 과장된 저장 조건 하에서 가속화된 서험을 이용하여 검출될 수 있다. 예를 들어, 배치는 45℃의 온도 및 75% 습도가 유지되는 체임버 내에 둘 때) "스트레스를 받을" 수 있다. 이어서, 제형물의 각 배치의 샘플을 상이한 시점(예컨대, 시간 0, 2주, 1개월, 3개월, 6개월, 9개월, 1년, 1.5년, 2년, 2.5년, 3년 이상)에서 제형물 내에 여전히 존재하는 API의 양에 대해 분석한다. 제형물 내의 API의 분석을 고성능 액체 크로마토그래피, 결정 또는 분말 X-선 회절, 적외선 또는 라만 스펙트럼 연구, 현미경 관찰, 시차 주사 열량계, 열중량측정 분석, 고온 단계 현미경 관찰, 및 고상 핵자기 공명을 포함한 각종 검출법들을 이용하여 수행한다. 특별한 다형체 형태의 유지는 예컨대, 분말 또는 결정 X-선 회절 연구, 또는 초기에 다형체를 분석하는데 사용된 동일한 기법들 중 임의의 기법을 수행함으로써 결정될 수 있다.

I. 테트라히드로비오프테린 , 전구체, 유도체 및 유사체의 합성

테트라히드로비오프테린, 전구체, 유도체 및 유사체의 합성을 위한 각종 방법들이 당업계에 공지되어 있다. U.S. 특허 No. 5,698,408; No. 2,601,215; No. 3,505,329; No. 4,540,783; No. 4,550,109; No. 4,587,340; No. 4,595,752; No. 4,649,197; No. 4,665,182; No. 4,701,455; No. 4,713,454; No. 4,937,342; No. 5,037,981; No. 5,198,547; No. 5,350,851; No. 5,401,844; No. 5,698,408, 캐나다 특허출원 CA 2420374, 유럽 특허 No. EP 079 574, EP 191 335 및 산토리(Suntory) 일본 특허출원 공개 JP 4-082888, JP 59-021685 및 JP 9-157270, 및 [Sugimoto 및 Matsuura, Bull . Chem . Soc . Japan , 48(12): 3767-3768 (1975)], [Sugimoto 및 Matsuura, Bull . Chem . Soc . Japan, 52(1): 181-183 (1979)], [Matsuura 등, Chem. Lett. (Japan), 735-738 (1984)], [Matsuura 등, Heterocycles, Vol. 23, No. 12, 3115-3120, 1985] 및 [Whiteley 등, Anal Biochem . 37(2): 394-6 (1984)](이들 각각은 본원에 참고로 이용됨)은 각기 본 발명의 조성물로서 이용될 수 있는 디히드로비오프테린, BH4 및 그것의 유도체의 제조 방법을 기재하고 있다.

본원에 전체적으로 참고로 인용되는, 국제출원 공개 No. WO2005049614, U.S. 특허 No. 4,540,783, 일본 특허 No. 59-021685, Schircks 등, Helv . Chim . Acta, 60: 211 (1977), Sugimoto 등, Bull . Chem . Soc . Jp, 52(1): 181 (1979), Sugimoto 등, Bull . Chem . Soc . Jp, 48(12): 3767 (1975), Visontini 등, Helv . Chim . Acta, 52: 1225 (1969), 및 Matsuura 등, Chem . Lett ., p 735 (1984)는 BH4의 합성 방법을 기재하고 있다.

본원에 기재된 조성물 및 방법에 사용하기 위한 유사체의 비제한적 예에는 프테리딘, 프테린, 네오프테린, 비오프테린, 7,8-디히드로비오프테린, 6-메틸테트라히드로프테린 및 기타 6-치환 테트라히드로프테린 및 기타 6-치환 테트라히드로프테린, 세피아프테린, 6,7-디메틸테트라히드로프테린, 6-메틸비오프테린 및 기타 6-치환 비오프테린, 및 당업계에 기재된 기타 유사체가 포함된다. 본원에 기재된 조성물 및 방법에 사용하기 위한 유도체의 비제한적 예에는, 개시 내용이 본원에 참고로 인용되는, U.S. 특허 Nos. 4,758,571; 4,774,244; 6,162,806; 5,902, 810; 2,955,110; 2,541,717; 2,603,643; 및 4,371,514에 기재된 유도체들이 포함된다.

임의의 그러한 방법 또는 당업계에 공지된 기타 방법을 사용하여, 본 발명의 안정한 제형물 및 치료 방법에 사용하기 위한 BH4, 또는 전구체, 유도체 또는 유사체를 생성시킬 수 있다.

II . 6R- 테트라히드로비오프테린 히드로클로라이드의 결정 다형체

BH4, 및 특히, BH4의 디히드로클로라이드는 결정 다형체를 나타냄이 밝혀졌다. BH4의 구조가 이하에 나와 있다:

BH4의 (6R) 형태는 공지된 생물학적 활성 형태이나, BH4는 상온에서 불안정한 것으로 알려져 있다.

BH4는 취급이 어렵고, 따라서 흡습 성질 및 산화에 대한 민감성으로 인해 그 물질이 분해되는 것으로 방지하기 위해 질소 하에 밀봉된 앰플 내에 그것의 디히드로클로라이드 염으로 제조되어 제공된다(쉬르크스 라보라토리즈(Schircks Laboratories)(스위스 요나 소재)). U.S. 특허 No. 4,649,197은, (6R)- 및 6(S)-L-에리트로-테트라히드로비오프테린 디히드로클로라이드를, 6(R.S)-L-에리트로-테트라히드로비오프테린 디히드로클로라이드의 불량한 결정성으로 인해, 그것의 부분입체이성질체로 분리하는 것이 어렵다는 것을 개시하고 있다. 유럽 특허 No. 0 079 574는 고체 테트라히드로비오프테린 디히드로클로라이드가 중간체로 수득되는, 테트라히드로비오프테린의 제조를 기재하고 있다. [S. Matsuura 등]은 [Chemistry Letters 1984, p. 735-738] 및 [Heterocycles, Vol. 23, No. 12, 1985 p. 3115-3120]에서, [J. Biochem. 98, 1341-1348 (1985)]에 개시된 X-선 분석에 의해 특징화되는, 무색 침상 형태의 결정성 고체로서의 6(R)-테트라히드로비오프테린 디히드로클로라이드를 기재하고 있다. 6.81°의 광학 회전은, EP-A2-0 191 335의 실시예 6에서의 백색 결정 형태의 결정성 고체에 대해 보고된 6.51°의 광학 회전과 매우 유사한 결정성 생성물인 것으로 나타났다.

(6R)-L-에리트로-테트라히드로비오프테린 디히드로클로라이드의 개발 중에 수득된 결과는, 화합물이 다형체 형태 및 용매화물을 비롯한 상이한 형태들로 존재할 수 있음을 가리켰다. BH4의 한 결정 다형체는 더욱 안정하고, 주변 조건 하에서 분해에 대해 안정하다는 것이 밝혀졌다.

다형체 형태 B

가장 안정한 것으로 나타난 결정 다형체는, 본원에서 "형태 B" 또는 대안적으로 "다형체 B"로 일컬어진다.

다형체 B는 약 20℃ 초과의 가장 높은 열역학 안정성을 갖는, 약간 흡습성인 무수화물이다. 또한, 형태 B는 그것의 열 안정성, 표적화 조건에 의한 제조 가능성, 적당한 형태 및 입자 크기로 인해 용이하게 가공되고 취급될 수 있다. 융점은 260℃(ΔHf>140 J/g) 부근이나, 용융 전 또는 중의 분해로 인해 명확한 융점이 검출될 수 없다. 이 현저한 성질은 다형체 형태 B를 종종 상승된 온도에서 제조되는 약제학적 용도를 위해 특히 적합하게 한다. 다형체 B는 0.2 μm 내지 500 μm 범위일 수 있는 입자 크기의 미세 분말로서 수득될 수 있다.

형태 B는 하기에서 d-값(Å)으로 표현되는 X-선 분말 회절 패턴을 나타낸다: 8.7 (vs), 6.9 (w), 5.90 (vw), 5.63 (m), 5.07 (m), 4.76 (m), 4.40 (m), 4.15 (w), 4.00 (s), 3.95 (m), 3.52 (m), 3.44 (w), 3.32 (m), 3.23 (s), 3.17 (w), 3.11 (vs), 3.06 (w), 2.09 (w), 2.96 (w), 2.94 (m), 2.87 (w), 2.84 (s), 2.82 (m), 2.69 (w), 2.59 (w), 2.44 (w). 도 1은 (6R)-L-에리트로-테트라히드로비오프테린 디히드로클로라이드의 형태 B에 의해 표시되는 특징적 X-선 회절 패턴의 그래프이다. 본원에 사용되는, 괄호 내의 하기 약어는 이하를 의미한다: (vs)=매우 강한 강도; (s)=강한 강도; (m)=중간 강도; (w)=약한 강도; 및 (vw)=매우 약한 강도.

형태 B는 매우 다량(예컨대, 100 킬로 규모)으로 제조될 수 있고, 연장된 시간에 걸쳐 저장될 수 있다.

결정 형태 B를 비롯한, 모든 결정 형태들(다형체, 수화물 및 용매화물)이 가 장 안정한 다형체 B의 제조를 위해 사용될 수 있다. 다형체 B는 적당한 극성 및 비수성 용매 중에서, 비정형 또는 기타 형태의 현탁의 상 평형화에 의해 수득될 수 있다.

BH4의 기타 형태는, 실온에서 용매 중 BH4의 다른 형태를 분산시키고, 다형체 형태 B를 생성시키기에 충분한 시간 동안 상온에서 현탁액을 교반한 후, 결정성 형태 B를 단리하고, 단리된 형태 B로부터 용매를 제거함으로써, 형태 B로 전환될 수 있다. 본원에 사용되는 "상온"은 0℃ 내지 60℃, 바람직하게는 15℃ 내지 40℃ 범위의 온도를 의미한다. 적용된 온도는 온도를 단계별로 또는 연속적으로 감소시킴으로써 처리 및 교반 하에 변화될 수 있다. 다른 형태에서 형태 B로 전환시키는데 적당한 용매에는 메탄올, 에탄올, 이소프로판올, 기타 C3- 및 C4-알코올, 아세트산, 아세토니트릴, 테트라히드로푸란, 메틸-t-부틸 에테르, 1,4-디옥산, 에틸 아세테이트, 이소프로필 아세테이트, 다른 C3-C6-아세테이트, 메틸 에틸 케톤, 및 기타 메틸-C3-C5 알킬-케톤이 포함되나, 이에 제한되지 않는다. 상 평형화를 완성하기 위한 시간은 30시간 이하, 바람직하게는 20시간 이하 또는 20시간 미만일 수 있다.

다형체 B는 또한 약 5% 이하의 물, 특히 에탄올, 아세트산 및 물의 혼합물을 함유하는 용매 혼합물로부터 결정화함으로써 수득될 수 있다. (6R)-L-에리트로-테트라히드로비오프테린 디히드로클로라이드의 다형체 형태 B는 임의적으로 상승된 온도에서, 바람직하게 (6R)-L-에리트로-테트라히드로비오프테린 디히드로클로라이드의 형태 B, 또는 형태 B보다 낮은 에너지의 고체 형태를 에탄올, 아세트산 및 물 을 포함하는 용매 혼합물 중에 용해시키고, 결정종을 용매에 첨가하고, 수득된 현탁액을 냉각시키며, 형성된 결정을 단리함으로써 제조될 수 있다. 용해는 실온에서, 또는 70℃ 이하, 바람직하게는 50℃ 이하에서 수행될 수 있다. 용해를 위해 최종 용매 혼합물이 사용될 수 있거나, 출발 물질을 먼저 물 내에 용해시키고, 이어서 다른 용매를 함께 또는 차례로 첨가할 수 있다. 용매 혼합물의 조성은 물:아세트산:테트라히드로푸란의 체적비가 1:3:2 내지 1:9:4, 바람직하게는 1:5:4일 수 있다. 용액을 바람직하게 교반한다. 냉각은 온도가 -40℃ 내지 0℃, 바람직하게는 10℃ 내지 30℃로 저하됨을 의미할 수 있다. 적당한 결정종은 또 다른 배치로부터의 다형체 형태 B, 또는 유사하거나 동일한 형태를 갖는 결정이다. 단리 후, 결정성 형태 B를 비용매, 예컨대 아세톤 또는 테트라히드로푸란으로 세정하고, 통상의 방식으로 건조시킬 수 있다.

다형체 B를 또한 메탄올, 에탄올 및 아세트산과 같은 비용매를 첨가함으로써 수용액으로부터 결정화하여 수득할 수 있다. 결정화 및 단리 절차를 유리하게 용액을 냉각하지 않은 채, 실온에서 수행할 수 있다. 그러므로 이 공정은 산업적 규모로 수행하기에 매우 적당하다.

본원에 기재된 조성물 및 방법의 한 실시양태에서, (6R)-L-에리트로-테트라히드로비오프테린 디히드로클로라이드의 다형체 형태 B를 포함하는 조성물을, 상온에서 물 중 (6R)-L-에리트로-테트라히드로비오프테린 디히드로클로라이드의 형태 B 외의 고체 형태 또는 형태 B를 용해시키고, 현탁액을 형성하기에 충분한 양으로 비용매를 첨가하고, 특정 시간 동안 현탁액을 임의적으로 교반한 후, 형성된 결정을 단리함으로써 제조한다. 조성물을 하기 기재된 바와 같이 약제학적 조성물로 추가로 변형시킨다.

수용액 중 (6R)-L-에리트로-테트라히드로비오프테린 디히드로클로라이드의 농도는 용액에 대해 10 내지 80 중량%, 더욱 바람직하게는 20 내지 60 중량%일 수 있다. 바람직한 비용매(즉, BH4의 현택액을 제조하는데 유용한 용매)는 메탄올, 에탄올 및 아세트산이다. 비용매가 수용액에 첨가될 수 있다. 더욱 바람직하게는, 수용액을 비용매에 첨가한다. 현탁액 형성 후의 교반 시간은 30시간 이하, 바람직하게는 20시간 이하 또는 20시간 미만일 수 있다. 여과 및 건조에 의한 단리는 상기 기재된 바와 같은 공지된 방식으로 수행된다.

다형체 형태 B는, 용이하게 여과되어 건조되며, 약제학적 제형물에 요망되는 입자 크기로 분쇄될 수 있는 매우 안정한 결정성 형태이다. 이 현저한 성질은 다형체 형태 B를 약제학적 용도를 위해 특히 적합하도록 한다.

III. 안정한 약제학적 제형물

약제학적 제형물은 초기에 약제학적으로 허용가능한 담체와 함께 테트라히드로비오프테린, 또는 그것의 전구체 또는 유도체 또는 유사체의 안정한 결정성 형태를 포함할 수 있다. 본 발명의 안정한 제형물은 바람직하게 제형물의 안정성 또는 기타 특성을 향상시키는 하기 부가적 성분들 중 하나 이상을 함유한다: 결합제, 붕해제, 산성 산화방지제 또는 윤활제, 또는 이들의 조합물. 바람직하게, 안정한 정제 제형물은 결합제 및 붕해제를, 임의적으로 산성 산화방지제와 함께, 임의적으로는 윤활제를 추가로 포함하여 포함한다.

제형물을 제조하는데 사용되는, (6R)-L-에리트로-테트라히드로비오프테린의 결정성 다형체의 초기량은 예를 들어, 제형물의 약 30 중량% 내지 약 40 중량% 범위, 또는 약 32 중량% 내지 약 35 중량% 범위, 또는 약 33 중량%일 수 있다.

결합제는 정제 제형물을 유지하는 것을 보조한다. 일부 경우들에서, 무수 결합제를 사용하여 다형체 B의 무수 상태를 보존한다. 일부 경우들에서, 결합제는 건조제로서 작용할 수 있다. 예시적 결합제에는 무수 이염기성 인산칼슘 및 그것의 모노수화물이 포함된다.

본 발명의 안정한 정제 제형물 중 결합제의 예시적 농도는 약 1 중량% 내지 약 5 중량%이다. 특히 구상되는 농도는 약 1.5 내지 3 중량%이다. 또한, 적어도 약 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 2.0, 2.1, 2.2, 2.3, 2.4, 2.5, 2.6, 2.7, 2.8, 2.9, 및 3.0 중량%의 결합제 농도, 또는 약 3.1, 3.2, 3.3, 3.4, 3.5, 3.6, 3.7, 3.8, 3.9, 4.0, 4.1, 4.2, 4.3, 4.4, 4.5, 4.6, 4.7, 4.8, 4.9, 및 5.0 중량% 이하의 농도가 구상된다. 본 발명의 안정한 정제 제형물 내 결합제:테트라히드로비오프테린의 중량비는 예를 들어, 약 1:10 내지 약 1:20 범위 내이다. 또한, 약 1:10.25, 1:10.5, 1:10.75, 1:11, 1:11.25, 1:11.5, 1:11.75, 1:12, 1:12.25, 1:12.5, 1:12.75, 1:13, 1:13.25, 1:13.5, 1:13.75, 1:14, 1:14.25, 1:14.5, 1:14.75, 1:15, 1:15.25, 1:15.5, 1:15.75, 1:16, 1:16.25, 1:16.5, 1:16.75, 1:17, 1:17.25, 1:17.5, 1:17.75, 1:18, 1:18.25, 1:18.5, 1:18.75, 1:19, 1:19.25, 1:19.5, 및 1:19.75의 중량비가 구상된다.

붕해제는 물을 흡수하고 팽창함으로써 고체 제형물의 급속 붕해를 보조한다. 예시적 붕해제에는 폴리비닐피롤리돈(예컨대 상표명 포비돈(POVIDONE)으로 시판되는 PVP), 포비돈의 가교결합 형태(예컨대 상표명 크로스포비돈(CROSPOVIDONE)으로 시판되는 CPVP), 나트륨 카르복시메틸셀룰로스의 가교결합 형태(예컨대 상표명 AC-DI-SOL로 시판되는 NaCMC), 기타 변성 셀룰로스, 및 변성 전분이 포함된다. CPVP로 제형된 정제는 PVP로 제형된 정제보다 더욱 급속한 붕해를 나타냈다.

본 발명의 안정한 정제 제형물 중 붕해제의 예시적 농도는 약 1 중량% 내지 약 20 중량%이다. 특히 구상되는 농도는 약 3 중량% 내지 약 10 중량%이다. 또한, 적어도 약 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 2.0, 2.1, 2.2, 2.3, 2.4, 2.5, 2.6, 2.7, 2.8, 2.9, 및 3.0 중량%의 붕해제의 농도, 또는 약 4.0, 4.1, 4.2, 4.3, 4.4, 4.5, 4.6, 4.7, 4.8, 4.9, 5.0, 5.2, 5.4, 5.6, 5.7, 5.8, 6.0, 6.25, 6.5, 6.75, 8.0, 8.25, 8.5, 8.75, 9.0, 9.25, 9.5, 9.75, 및 10.0 중량% 이하의 농도가 구상된다. 본 발명의 안정한 정제 제형물 내 붕해제:테트라히드로비오프테린의 중량비는 예를 들어, 약 1:5 내지 약 1:10 범위 내이다. 또한, 약 1:5.25, 1:5.5, 1:5.75, 1:6.0, 1:6.25, 1:6.5, 1:6.75, 1:7.0, 1:7.25, 1:7.5, 1:7.75, 1:8.0, 1:8.25, 1:8.5, 1:8.75, 1:9.0, 1:9.25, 1:9.5, 및 1:9.75의 중량비가 구상된다.

산화방지제가 포함될 수 있고, 이는 특히 용해 후에, 테트라히드로비오프테린 생성물의 안정화를 돕는다. API의 낮은 pH 수용액은 높은 pH에서의 용액보다 더 안정하다. 예시적 산성 산화방지제의 예에는 아스코르브산, 아스코르브산의 지방산 에스테르, 예컨대 팔미트산아스코르빌 및 스테아르산아스코르빌, 및 아스코르 브산의 염, 예컨대 나트륨, 칼슘 또는 칼륨 아스크로브산염이 포함된다. 비산성 산화방지제는 또한 안정한 정제 제형물에 사용될 수 있다. 비산성 산화방지제의 비제한적 예는 베타-카르틴, 알파-토코페롤이 포함된다. 시트르산 또는 말산을 포함한, 산성 첨가제를 첨가하여, 정제 제형물의 안정성을 증진시킬 수 있다.

본 발명의 안정한 정제 제형물 중 산화방지제의 예시적 농도는 약 1 중량% 내지 약 3 중량%이다. 특히 구상되는 농도는 적어도 약 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 및 2.0 중량%, 또는 약 2.1, 2.2, 2.3, 2.4, 2.5, 2.6, 2.7, 2.8, 2.9, 및 3.0 중량% 이하의 농도이다. 본 발명의 안정한 정제 제형물 중 산화방지제:테트라히드로비오프테린의 중량비는 예를 들어 약 1:5 내지 1:30 범위 내이다. 또한 약 1:5.5, 1:6, 1:6.5, 1:7, 1:7.5, 1:8, 1:8.5, 1:9, 1:9.5, 1:10, 1:10.5, 1:11, 1:11.5, 1:12, 1:12.5, 1:13, 1:13.5, 1:14, 1:14.5, 1:15, 1:15.5, 1:16, 1:16.5, 1:17, 1:17.5, 1:18, 1:18.5, 1:19, 1:19.5, 1:20, 1:20.5, 1:21, 1:21.5, 1:22, 1:22.5, 1:23, 1:23.5, 1:24, 1:24.5, 1:25, 1:25.5, 1:26, 1:26.5, 1:27, 1:27.5, 1:28, 1:28.5, 1:29, 및 1:29.5의 중량비가 구상된다.

쉬크스 라보라토리(Schirk's Laboratory) 정제에서, 아스코르브산은 BH4에 대해 1:1의 비로 존재한다. 대조적으로, 본 발명의 안정한 제형물 중 아스코르브산의 농도는 훨씬 더 낮고, 예컨대 아스코르브산:BH4의 중량비(mg/mg)는 1:20이다. 따라서, 본 발명은 또한 1:1 미만, 예컨대 1:2, 1:3, 1:4, 1:5, 1:6, 1:7, 1:8, 1:9, 1:10, 1:11, 1:12, 1:13, 1:14, 1:15, 1:16, 1:17, 1:18 또는 1:19, 바람직하게는 1:10 미만의 비의 BH4에 대한 비로 아스크로브산을 포함하는 제형물을 구상한 다.

윤활제는 고체 제형물의 안정성, 경도 및 균일성을 향상시킨다. 예시적 윤활제에는 푸마르산스테아릴 및 스테아르산망간이 포함된다.

본 발명의 안정한 정제 제형물 중 윤활제의 예시적 농도는 약 0.1 중량% 내지 약 2 중량%이다. 특히 구상되는 농도는 약 0.5 내지 1 중량%이다. 또한, 적어도 약 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9, 및 1.0 중량%의 윤활제의 농도, 또는 약 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 및 2.0 중량% 이하의 농도가 구상된다. 본 발명의 안정한 정제 제형물 중 윤활제:테트라히드로비오프테린의 중량비는 예를 들어, 약 1:25 내지 1:65 범위 내이다. 또한 약 1:26, 1:27, 1:28, 1:29, 1:30, 1:31, 1:32, 1:33, 1:34, 1:35, 1:36, 1:37, 1:38, 1:39, 1:40, 1:41, 1:42, 1:43, 1:44, 1:45, 1:46, 1:47, 1:48, 1:49, 1:50, 1:51, 1:52, 1:53, 1:54, 1:55, 1:56, 1:57, 1:58, 1:59, 1:60, 1:61, 1:62, 1:63, 1:64, 및 1:65의 중량비가 포함된다.

안정한 고체 제형물은 임의적으로 피치료 상태에 적당한 다른 치료제, 예컨대 엽산염 전구체, 엽산 또는 엽산염 유도체를 비롯한 엽산염; 및/또는 아르기닌; 및/또는 비타민, 예컨대 비타민 C 및/또는 비타민 B2(리보플라빈) 및/또는 비타민 B12; 및/또는 신경전달물질 전구체, 예컨대 L-도파 또는 카르비도파; 및/또는 5-히드록시트립토판을 포함할 수 있다.

엽산염 전구체, 엽산 또는 엽산염 유도체를 비롯한 예시적 엽산염은 U.S. 특허 No. 6,011,040 및 No. 6,544,994(양자 모두 본원에 참고로 인용됨)에 개시되어 있고, 이에는 엽산(프테로일모노글루타메이트), 디히드로엽산, 테트라히드로엽산, 5-메틸테트라히드로엽산, 5,10-메틸렌테트라히드로엽산, 5,10-메테닐테트라히드로엽산, 5,10-포름이미노테트라히드로엽산, 5-포르밀테트라히드로엽산(류코보린), 10-포르밀테트라히드로엽산, 10-메틸테트라히드로엽산, 하나 이상의 폴릴(folyl)폴리글루타메이트, 엽산의 프테린 부분 또는 폴릴폴리글루타메이트의 피라진 환이 환원되어 디히드로엽산염 또는 테트라히드로엽산염을 생성하는 화합물, 또는 N-5 또는 N-10 위치는 각 산화 수준에서 하나의 탄소 단위를 갖는 상기 모든 화합물들의 유도체, 또는 이들의 약제학적으로 상용가능한 염, 또는 이들 중 2종 이상의 조합물이 포함된다. 예시적 테트라히드로엽산염에는 5-포르밀-(6S)-테트라히드로엽산, 5-메틸-(6S)-테트라히드로엽산, 5,10-메틸렌-(6R)-테트라히드로엽산, 5,10-메테닐-(6R)-테트라히드로엽산, 10-포르밀-(6R)-테트라히드로엽산, 5-포름이미노-(6S)-테트라히드로엽산 또는 (6S)-테트라히드로엽산, 및 이들의 약제학적으로 허용가능한 염이 포함된다. 예시적 염에는 나트륨, 칼륨, 칼슘 또는 암모늄 염이 포함된다.

BH4:엽산염:아르기닌의 예시적 상대 중량비는 약 1:10:10 내지 약 10:1:1일 수 있다.

임의적으로 본 발명의 안정한 제형물은 또한 다른 부형제, 예컨대 만니톨, 히드록실 프로필 셀룰로스, 미세결정성 셀룰로스, 또는 기타 비환원당, 예컨대 수크로스, 트레할로스, 멜레지토스, 플란테오스 및 라피노스를 포함할 수 있다. 환원당은 BH4와 반응할 수 있다.

경구 투여용 고체 제형물을 제조하기 위한 약제학적으로 허용가능한 성분이, 예를 들어 성분을 혼합하고, 임의적으로 미세 분할한 후, 경질 또는 연질 젤라틴으로 된 캡슐에 충전하고, 정제, 환약 또는 트로키제로 압착함으로써 혼입될 수 있다. 압착 후에 코팅을 적용하여, 환약을 형성할 수 있다.

약제학적으로 허용가능한 성분은 각종 유형의 제형물들에 대해 공지되어 있고, 이는 예를 들어 결합제, 예컨대 천연 또는 합성 중합체, 부형제, 윤활제, 계면활성제, 감미 및 향미제, 코팅 물질, 보존제, 염료, 증점제, 보조제, 항미생물제, 산화방지제, 및 각종 제형물 유형을 위한 담체일 수 있다. 본원에 기재된 조성물에 유용한 결합제의 비제한적 예에는 검 트라카간트, 아카시아, 전분, 젤라틴, 및 생물학적 분해성 중합체, 예컨대 디카르복실산의 호모- 또는 코-폴리에스테르, 알킬렌 글리콜, 폴리알킬렌 글리콜 및/또는 지방족 히드록실 카르복실산; 디카르복실산의 호모- 또는 코-폴리아미드, 알킬렌 디아민, 및/또는 지방족 아미노 카르복실산; 상응하는 폴리에스테르-폴리아미드-공-중합체, 폴리안하이드라이드, 폴리오르토에스테르, 폴리포스파젠, 및 폴리카르보네이트가 포함된다. 생물학적 분해성 중합체는 선형, 분지형 또는 가교형일 수 있다. 구체예는 폴리-글리콜산, 폴리-락트산, 및 폴리-d,l-락타이드/글리콜라이드가 포함된다. 중합체의 다른 예는 수용성 중합체, 예컨대 폴리옥사알킬렌(폴리옥사에틸렌, 폴리옥사프로필렌 및 이들의 혼합 중합체, 폴리-아크릴아미드 및 히드록실알킬화 폴리아크릴아미드, 폴리-말레산 및 이의 에스테르 또는 -아미드, 폴리-아크릴산 및 이의 에스테르 또는 -아미드, 폴리-비닐알코올 및 이의 에스테르 또는 -에테르, 폴리-비닐이미다졸, 폴리-비닐피롤리돈, 및 키톤산과 같은 천연 중합체이다.

본원에 기재된 조성물에 유용한 부형제의 비제한적 예에는 인산이칼슘과 같은 인산염이 포함된다. 본원에 기재된 조성물에 유용한 윤활제의 비제한적 예에는 천연 또는 합성 오일, 지방, 왁스, 또는 지방산 염, 예컨대 스테아르산마그네슘이 포함된다.

본원에 기재된 조성물에 유용한 계면활성제의 비제한적 예는 음이온성, 양이온성, 양쪽이온성 또는 중성일 수 있다. 본원에 기재된 조성물에 유용한 계면활성제의 비제한적 예에는 레시틴, 인지질, 옥틸 술페이트, 데실 술페이트, 도데실 술페이트, 테트라데실 술페이트, 헥사데실 술페이트 및 옥타데실 술페이트, Na 올레에이트 또는 Na 카프레이트, 1-아크릴아미노에탄-2-술폰산, 예컨대 1-옥타노일아미노에탄-2-술폰산, 1-데카노일아미노에탄-2-술폰산, 1-도데카노일아미노에탄-2-술폰산, 1-테트라데카노일아미노에탄-2-술폰산, 1-헥사데카노일아미노에탄-2-술폰산, 및 1-옥타데카노일아미노에탄-2-술폰산, 및 타우로콜산 및 타우로데옥시콜산, 담즙산 및 이들의 염, 예컨대 콜산, 데옥시콜산 및 나트륨 클리콜레이트, 나트륨 카프레이트 또는 나트륨 라우레이트, 나트륨 올레에이트, 나트륨 라우릴 술페이트, 나트륨 세틸 술페이트, 술페이트화 캐스터 오일 및 나트륨 디옥틸술포숙시네이트, 코카미도프로필베타인 및 라우릴베타인, 지방 알코올, 콜레스테롤, 글리세롤 모노- 또는 -디스테아레이트, 글리세롤 모노- 또는 -디올레에이트 및 글리세롤 모노- 또는 -디팔미테이트, 및 폴리옥시에틸렌 스테아레이트가 포함된다.

본원에 기재된 조성물에 유용한 감미제의 비제한적 예에는 수크로스, 프룩토스, 락토스 또는 아스파탐이 포함된다. 본원에 기재된 조성물에 유용한 향미제의 비제한적 예에는 페퍼민트, 노루발풀의 오일, 또는 과일 향, 예컨대 체리 또는 오렌지 향이 포함된다. 본원에 기재된 조성물에 유용한 코팅 물질의 비제한적 예에는 젤라틴, 왁스, 쉘락, 당, 또는 기타 생물학적 분해성 중합체가 포함된다. 본원에 기재된 조성물에 유용한 보존제의 비제한적 예에는 메틸 또는 프로필파라벤, 소르브산, 클로로부탄올, 페놀 및 티메로살이 포함된다.

본원에 기재된 다형체는 또한 수성 환경에서 붕해되어, 드링크 용액을 제공하는 발포성(effervescent) 정제 또는 분말로 제형될 수 있다. 서방성 제형물이 또한 본원에 기재된 다형체로부터 제조되어, 위장관 내 체액과 접촉하는 활성제의 제어된 방출을 달성할 수 있고, 혈장 내 활성제의 상당한 일정하고 효과적인 수준을 제공할 수 있다. 결정 형태는 상기 목적을 위해 생물학적 분해성 중합체, 수용성 중합체 또는 이 양자의 혼합물, 및 임의적으로 적당한 계면활성제의 중합체 기질 내에 삽입될 수 있다. 삽입(embedding)은 본 맥락에서 중합체 기질에 마이크로입자를 혼입하는 것을 의미할 수 있다. 제어 방출성 제형물은 또한 공지된 분산 또는 유화 코팅 기술을 통해 분산 마이크로입자 또는 유화 마이크로소적을 캡슐화함으로써 수득된다.

본원에 기재된 조성물에 사용되는 BH4는 바람직하게 디히드로클로라이드 염으로 제형되나, BH4의 다른 염 형태가 원하는 생물학적 활성을 가지고, 결과적으로 BH4의 다른 염 형태가 사용될 수 있다. 구체적으로, 무기 또는 유기산과의 BH4 염이 바람직하다. 대안적 BH4 염의 비제한적 예에는 아세트산, 시트르산, 옥살산, 타르타르산, 푸마르산, 및 만델산의 BH4 염이 포함된다.

약제학적으로 허용가능한 염기 부가 염이 금속 또는 아민, 예컨대 알칼리 및 알칼리성 토금속 또는 유기 아민을 이용하여 형성될 수 있다. 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염은 또한, 약제학적으로 허용가능한 양이온을 이용하여 형성될 수 있다. 적당한 약제학적으로 허용가능한 양이온이 당업자에게 공지되어 있고, 이에는 알칼리성, 알칼리성 토금속, 암모늄 및 4차 암모늄 양이온이 포함된다. 탄산염 또는 탄산수소도 또한 가능하다. 양이온으로 사용되는 금속의 예는 나트륨, 칼륨, 마그네슘, 암모늄, 칼슘 또는 철 등이다. 적당한 아민의 예에는 이소프로필아민, 트리메틸아민, 히스티딘, N,N'-디벤질에틸렌디아민, 클로로프로카인, 콜린, 디에탄올아민, 디시클로헥실아민, 에틸렌디아민, N-메틸글루카민 및 프로카인이 포함된다.

약제학적으로 허용가능한 산 부가 염에는 무기 또는 유기산 염이 포함된다. 적당한 산 염의 예에는 염산염, 아세트산염, 시트르산염, 살리실산염, 질산염, 인산염이 포함된다. 다른 적당한 약제학적으로 허용가능한 염이 당업자에게 공지되어 있고, 이에는 예를 들어, 아세트산, 시트르산, 옥살산, 타르타르산 또는 만델산, 염산, 브롬화수소산, 황산 또는 인산과의 염; 유기 카르복실산, 술폰산, 술포산 또는 포스포산, 또는 N-치환 술팜산, 예를 들어 아세트산, 프로피온산, 글리콜산, 숙신산, 말레산, 히드록시말레산, 메틸말레산, 푸마르산, 말산, 타르타르산, 락트산, 옥살산, 글루콘산, 글루타르산, 글루쿠론산, 시트르산, 벤조산, 신남산, 만델산, 살리실산, 4 아미노살리실산, 2 페녹시벤조산, 2 아세톡시벤조산, 엠본산, 니코틴산 또는 이소니코틴산과의 염; 및 아미노산, 예컨대 천연 단백질의 합성과 관련된 20가지 알파 아미노산, 예를 들어 글루탐산 또는 아스파르트산과의 염, 및 페닐아세트산, 메탄술폰산, 에탄술폰산, 2 히드록시에탄술폰산, 에탄 1,2-디술폰산, 벤젠술폰산, 4 메틸벤젠술폰산, 나프탈렌 2 술폰산, 나프탈렌, 1,5-디술폰산, 2 또는 3 포스포글리세레이트, 글루코스 6 포스페트, N 시클로헥실술폰산(시클라메이트가 형성됨)과의 염, 또는 기타 산 유기 화합물, 예컨대 아스코르브산과의 염이 포함된다.

본 발명의 안정한 제형물은 예컨대 정제 또는 환약, 또는 제습성 캡슐 또는 파우치가 제공된 HDPE 병 내의 캡슐로 제공될 수 있거나; 상업적으로 바람직한 경우, 호일-상-호일 블리스터 포장 내, 또는 안을 볼 수 있는 중합체 필름으로 된 블리스터 포장 내에 제공될 수 있다.

문구 "약제학적으로 또는 약물학적으로 허용가능한"이란, 동물 또는 인간에게 투여될 때, 부반응, 앨러지 반응 또는 기타 바람직하지 못한 반응을 생성시키지 않는 분자 실체 및 조성물을 가리킨다. 본원에 사용되는 "약제학적으로 허용가능한 담체"에는 임의 또한 모든 용매, 분산 매질, 코팅물, 항세균 및 항진균제, 등장 및 흡수 지연제 등이 포함된다. 그러한 매질 및 약제학적으로 활성인 물질을 위한 제제의 사용이 당업계에 공지되어 있다. 임의의 통상적 매질 또는 제제가 치료 조성물과 상용적이지 않은 경우를 제외하고는, 그것의 치료 조성물에서의 사용이 구상된다. 보충적 활성 성분도 또한 조성물에 혼입될 수 있다.

본원에 사용되는 "약제학적으로 허용가능한 담체"에는 임의 또한 모든 용매, 분산 매질, 코팅물, 항세균 및 항진균제, 등장 및 흡수 지연제 등이 포함된다. 그 러한 매질 및 약제학적으로 활성인 물질을 위한 제제의 사용이 당업계에 공지되어 있다. 임의의 통상적 매질 또는 제제가 치료 조성물과 상용적이지 않은 경우를 제외하고는, 그것의 치료 조성물에서의 사용이 구상된다. 보충적 활성 성분도 또한 조성물에 혼입될 수 있다.

본 발명의 약제학적 조성물 및 치료 방법은 인간 의약 및 수의 동물 의약의 분야에 유용할 수 있음이 인지될 것이다. 따라서, 피치료 대상은 포유동물, 바람직하게는 인간 또는 다른 동물일 수 있다. 수의적 목적 상, 대상에는 예를 들어, 소, 양, 돼지, 말 및 염소를 비롯한 농장 동물, 개 및 고양이와 같은 반려 동물, 외래 및/또는 동물원 동물, 마우스, 래빗, 기니어피크, 햄스터를 비롯한 실험실 동물; 닭, 칠면조 및 거위와 같은 가금류가 포함된다.

IV. 안정한 제형물을 이용한 치료 방법

본 발명의 안정한 제형물은 예를 들어, 감소된 페닐알라닌 히드록실라제, 티로신 히드록실라제, 또는 트립토판 히드록실라제 활성에 의해 유발될 수 있는, 상승된 페닐알라닌 수준 또는 감소된 티로신 또는 트립토판 수준과 연관된 상태의 치료를 위해 사용될 수 있다. 상승된 페닐알라닌 수준과 관련된 상태에는 구체적으로 본원에 기재된 온화하고 통상적인 페닐케톤뇨증, 및 고페닐알라닌혈증이 포함되고, 예시적 환자 집단에는 본원에 기재된 환자 하위군, 및 정상 수준을 초과하는 페닐알라닌 수준을 나타내는 임의의 다른 환자가 포함된다. 감소된 티로신 또는 트립토판 수준과 연관된 상태에는 신경전달물질 결핍, 신경학적 및 정신학적 장애, 예컨대 파키슨씨병, 이긴장증, 척수소뇌성 변성, 통증, 피로, 우울증, 다른 정동 장애 및 정신분열증이 포함된다.

안정한 제형물은 또한 예컨대 도파-반응성 이긴장증(DRD), 세피아프테린 리덕타제(SR) 결핍, 또는 디히드로프테리딘 리덕타제(DHPR) 결핍을 포함하나 이에 제한되지 않는, 합성 경로에서의 결함으로 인해, BH4 결핍을 앓는 환자를 치료하기 위해 사용될 수 있다.

본 발명의 안정한 제형물을 이용하여 치료하기에 적당한 대상에는, 치료제 부재 하에서의 상승된 혈장 Phe 농도, 예컨대 1800 μM/L 초과, 또는 1600 μM, 1400 μM 초과, 1200 μM 초과, 1000 μM 초과, 800 μM 초과, 또는 600 μM 초과, 420 μM 초과, 300 μM 초과, 200 μM 초과, 또는 180 μM 초과를 갖는 대상이 포함된다. 온화한 PKU는 일반적으로 600 μM/L 이하의 혈장 Phe 농도로 분류되고, 중간 정도의 PKU는 600 μM/L 내지 약 1200 μM/L의 혈장 Phe 농도로 분류되며, 통상적 또는 중한 PKU는 1200 μM/L 초과의 혈장 Phe 농도로 분류된다. 바람직하게 단독, 또는 단백질-제한 식이법과 병행되는 안정한 제형물을 이용한 처리는 대상의 혈장 페닐알라닌 농도를 600 μM 미만, 또는 500 μM 미만, 360 μM±15 μM 이하, 또는 200 μM 미만, 또는 100 μM 미만으로 감소시킨다. 다른 적당한 대상에는 감소된 페닐알라닌 히드록실라제(PAH) 활성을 갖는 것으로 진단된 대상이 포함된다. 감소된 PAH 활성은 예를 들어 PAH 효소의 변이, 예를 들어 PAH의 촉매 도메인의 변이, 또는 F39L, L48S, I65T, R68S, A1C4D, S110C. D129G, E178G, V190A, P211T, R241C, R261Q, A300S, L308F, A313T, K320N, A373T, V388M E390G, A395P, P407S, 및 Y414C로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 변이; 또는 임신 여성, 임신 을 유도하는 임신 가능 기간의 여성, 또는 0 내지 3살, 또는 0 내지 2, 0 내지 1.5 또는 0 내지 1살의 유아; 또는 단일 투약 BH4 로딩 시험 또는 다중 투약 로딩 시험, 예컨대 4-투약 또는 7-일 로딩 시험에 대해 24시간 내에 비반응성인 것으로 진단된 대상으로부터 비롯될 수 있다. 예시적 환자 집단 및 예시적 BH4 로딩 시험이, 본원에 전체적으로 참고로 인용되는, 국제 특허출원 공보 WO 2005/049000에 기재되어 있다.

U.S. 특허 No. 4,752,573; No. 4,758,571; No. 4,774,244; No. 4,920,122; No. 5,753,656; No. 5,922,713; No. 5,874,433; No. 5,945,452; No. 6,274,581; No. 6,410,535; No. 6,441,038; No. 6,544,994; 및 U.S. 특허출원 공개 US 20020187958; US 20020106645; US 2002/0076782; US 20030032616(각기 본원에 참고로 인용됨)은 각기 비-PKU 치료를 위해 BH4 조성물을 투여하는 방법을 기재하고 있다. 각 특허는 본원에 기재된 치료를 위해 채택될 수 있는, 당업자에게 공지된 BH4 조성물을 투여하는 방법을 일반적으로 교시하고 있는 것으로 본원에 참고로 인용된다.

개별 요건이 다양하나, 각 성분의 유효량의 최적 범위의 결정은 당업계 기술 내에 속한다. 전형적 BH4 투약량은 약 1 내지 약 20 mg/kg 체중/일 범위 내이며, 이는 주로 약 5(1 mg/kg×5 kg 체중) 내지 3000 mg/일(30 mg/kg×100 kg 체중)에 상당한다. 연속적 일일 투여가 구상되나, HPA의 경우, Phe 수준의 증상이 특정 역치 수준 미만으로 감소될 때 BH4 치료를 중단하는 것이 바람직할 수 있다. 물론, 치료는 Phe 수준이 다시 상승할 때 재개시될 수 있다. 적당한 투약량은 관련 용량 반응 데이터와 함께 혈중 Phe 수준을 결정하기 위한 확립된 검정법의 사용을 통해 확인될 수 있다.

바람직한 실시양태들에서, 본 발명의 방법은 당해 치료가 필요한 환자에게 약 10 mg/kg 내지 약 20 mg/kg의 BH4의 일일 용량을 제공할 것으로 구상된다. 물론, 당업자는 이 용량을 투여에 의해 달성되는 효능에 따라 상향 또는 하향으로 조정할 수 있다. 일일 투약량은 단일 투약으로 투여되거나, 대안적으로 편의적으로 떨어진 간격으로 다중 투약으로 투여될 수 있다. 예시적 실시양태들에서, 일일 용량은 1 mg/kg, 2 mg/kg, 3 mg/kg, 4 mg/kg, 5 mg/kg, 6 mg/kg, 7 mg/kg, 8 mg/kg, 9 mg/kg, 10 mg/kg, 11 mg/kg, 12 mg/kg, 13 mg/kg, 14 mg/kg, 15 mg/kg, 16 mg/kg, 17 mg/kg, 18 mg/kg, 19 mg/kg, 20 mg/kg, 22 mg/kg, 24 mg/kg, 26 mg/kg, 28 mg/kg, 30 mg/kg, 32 mg/kg, 34 mg/kg, 36 mg/kg, 38 mg/kg, 40 mg/kg, 42 mg/kg, 44 mg/kg, 46 mg/kg, 48 mg/kg, 50 mg/kg, 또는 그 이상일 수 있다.

본 발명은 또한, 본 발명의 안정한 제형물이 산화질소 신타제 활성의 증진으로부터 이익을 얻을 상태를 앓는 대상, 및 혈관성 질병, 허혈성 또는 염증성 질병, 또는 인슐린 내성을 갖는 환자를 치료하는데 사용될 수 있음을 구상한다. 치료는, 예를 들어 산화질소 신타제 활성의 결핍을 경감시킬 수 있거나, 예를 들어 정상 수준을 초과한 산화질소 신타제 활성의 증가를 제공할 수 있다. 엽산염 전구체, 엽산, 또는 엽산염 유도체를 비롯한 엽산염을 이용한 병용 치료로부터 이익을 얻게 됨이 제안되었다.

산화질소는 혈압 및 혈관성 긴장의 제어에 핵심적인 생리학적 역할을 하는 곳인 혈관성 내피 세포에 의해 구성적으로 생성된다. 산화질소 생활성의 결핍은 혈관성 기능장애의 병원원성, 예컨대 심장동맥병, 동맥의 죽상경화증, 예컨대 심장, 경동맥, 뇌 또는 말초혈관성 동맥, 허혈-재관류 상해, 고혈압, 당뇨병, 당뇨 맥관장애, 심장혈관성 질병, 말초혈관성 질병, 또는 허혈 및/또는 염증으로부터 비롯되는 신경퇴행성 상태, 예컨대 뇌졸중과 관련됨과, 그러한 병원원성에는 손상된 내피, 기관 및 조직으로의 불충분한 산소 유동, 상승된 계통적 혈관성 내성(고혈압), 혈관성 민무늬근 증식, 혈관성 협착증(협착)의 진행 및 염증이 포함됨이 제안되었다. 따라서, 임의의 이러한 상태의 치료가 본 발명의 방법에 따라 구상된다.

또한, 본원에 참고로 인용되는, U.S. 특허 No. 6,410,535에 기재된 바와 같이, 산화질소 신타제 활성의 증진은 또한 상승된 수퍼옥시드 수준의 감소, 증가된 인슐린 감도, 및 인슐린 내성과 연관된 혈관성 기능장애의 감소를 초래함이 제안되었다. 따라서, 당뇨병(I형 또는 II형), 고인슐린혈증 또는 인슐린 내성의 치료가 본 발명에 따라 구상된다. 인슐린 내성과 연관된 혈관성 기능장애를 갖는 질병에는 인슐린 내성에 의해 유발되거나 인슐린 내성에 의해 악화되는 질병, 또는 인슐린 내성에 의해 치료가 지연되는 질병, 예컨대 고혈압, 고지질혈증, 동맥경화증, 혈관수축성 협심증, 운동성 협심증, 뇌혈관성 수축성 병변, 뇌혈관성 부전증, 뇌 혈관경련, 말초 순환 장애, 경피적 관상동맥 성형술(PTCA) 또는 관상동맥우회술(CABG) 후의 심장 동맥재협착, 비만, 인슐린-비의존성 당뇨병, 고인슐린혈증, 지질 대사 이상증, 심장 동맥경화성 심장병 등이 포함되고, 단 그것은 인슐린 내성과 연관되어야 한다. BH4는 이 질병을 앓는 환자에 투여될 때, NOS의 기능을 활성화 하고, NO 생성을 증가시키며, 활성 산소종의 생성을 억제함으로써 혈관성 내피 세포의 장애를 개선함으로써 상기 질병을 예방 또는 치료할 수 있음이 구상된다.

본 발명에 따른 조성물의 적당한 용량은 피투여자의 연령, 건강 및 체중, 병행 치료가 있는 경우, 병용 치료의 종류, 치료 빈도, 및 원하는 효과의 성질(즉, 원하는 혈장 Phe 농도의 감소량)에 의존할 것으로 이해되어진다. 투약 빈도는 또한 Phe 수준에 대한 약동학적 영향에 의존한다. 효과가 단일 투약으로부터 24시간 동안 지속되나, 가장 바람직한 투약량은, 부당한 실험없이도 당업자에 의해 이해되어지고 결정가능한 바와 같이, 개별 대상에 맞춰 조정될 수 있다. 이는 전형적으로 표준 용량의 조정, 예컨대 환자의 체중이 적은 경우에 있어 용량의 감소를 포함한다.

BH4의 투약 빈도는 제제의 약역학적 파라미터, 및 투여 경로에 의존할 것이다. 최적의 약제학적 제형물은 투여 경로 및 원하는 투약량에 따라 당업자에 의해 결정될 것이다. 예를 들어, 본원에 참고로 인용되는 [Remington's Pharmaceutical Sciences, 제18판(1990, Mack Publ. Co, Easton PA 18042) pp 1435-1712]를 참고한다. 그러한 제형물은 신체적 상태, 안정성 체내 방출 속도, 및 투여된 제제의 체내 소거 속도에 영향을 줄 수 있다. 투여 경로에 따라, 적당한 투약량이 체중, 체면적 또는 기관 크기에 따라 계산될 수 있다. 적당한 처리 용량을 결정하는데 필요한 계산을 더욱 개선함은, 특히 본원에 개시된 투약량 정보 및 검정, 및 동물 또는 인간 임상 실험에서 관찰되는 약역학적 데이터의 측면에서, 부당한 실험없이 당업자에 의해 통상적으로 이루어진다.

최종 투약량 처방은, 약물의 작용을 변형시키는 인자, 예컨대 약물의 특이적 활성, 손상의 중도 및 환자의 반응성, 환자의 연령, 상태, 체중, 성별 및 식이법, 임의의 감염의 중도, 투여 시간 및 기타 임상적 인자들을 고려하여, 참관 의사에 의해 결정될 것이다. 연구가 수행됨에 따라, 특정 질병 및 상태에 대한 적당한 투약량 수준 및 처리 기간을 고려하여 추가 정보가 제공될 것이다.

V. 조합 치료

본 발명의 특정 방법은 본 발명의 안정한 제형물 및 하나 이상의 다른 치료제의 조합 사용을 포함한다.

그러한 조합 치료에서, 본 발명의 안정한 제형물의 투여는 동시에 일어나거나, 제2 치료제의 투여 전 또는 후에, 예컨대 수분 내지 수분 범위의 간격으로 행해질 수 있으며, 단 양 제제는 중첩 기간에 치료 효과를 발휘할 수 있어야 한다. 따라서, 본 발명은 제2 치료제와 함께 사용하기 위한 본 발명의 안정한 제형물을 구상한다. 본 발명은 또한 본 발명의 안정한 테트라히드로비오프테린, 전구체, 유도체 또는 유사체 제형물과 함께 투여하기 위한 의약품의 제조에 있어 제2 치료제의 용도를 구상한다.

테트라히드로비오프테린 치료는 각종 형태의 HPA를 이용하여 환자에 있어 치료적 성과를 발휘함에 있어 식이 단백질 제한과 조합될 수 있다. 예를 들어, 원하는 치료 성과(즉, 혈장 Phe 농도 저하, 및/또는 혈장 Phe 농도의 증가를 수반하지 않는, 보다 많은 양의 Phe/단백질의 흡수를 견디는 능력)를 생성하기에 효과적인 조합량의, BH4 조성물 및 저-페닐알라닌 의약 단백질 조성물을 대상에게 투여할 수 있다. 이 공정은 BH4 조성물 및 식이 단백질 치료 조성물을 동시에 투여하는 것을 포함할 수 있다. 이는 식이 단백질 요건 모두를 포함하고, 또한 상기 단백질 제형물 내에 BH4를 포함하는 약물학적 단백질 제형물, 또는 단일 조성물을 투여함으로써 달성될 수 있다. 대안적으로, 식이 단백질(보충물 또는 정상 단백질 식사)는 BH4의 약물학적 제형물(정제, 주사제 또는 드링크제)로서 대략 동시에 섭취된다.

다른 대안예들에서, BH4 치료는 수분 내지 수시간 범위의 간격으로 식이 단백질 전 또는 후에 행해질 수 있다. 단백질 및 BH4 조성물이 따로 투여되는 실시양태들에서, 일반적으로 각 전달 시간 간에 상당한 시간이 만료되지 않아, BH4가 환자에게 유리한 영향을 줄 수 있도록 확실히 할 것이다. 그러한 예들에서, 식이 단백질 섭취 전 또는 후로 약 2 내지 6시간 내에 BH4를 투여하며, 이 때 단지 약 1 시간의 지연 시간이 가장 바람직함이 구상된다. 특정 실시양태들에서, BH4 치료가 BH4의 일일 투약량이 무한정으로 환자에게 투여되는 연속 치료일 것임이 구상된다. 다른 상황들에서, 예컨대 PKU 및 HPA의 보다 온화한 형태만을 갖는 임신한 여성에서는, BH4 치료가 단지 여성이 임신하는 동안 및/또는 수유기 동안 지속될 수 있다.

또한, BH4의 전달 및 식이 단백질 조절에 단지 기초한 치료에 부가하여, 본 발명의 방법은 또한 HPA의 증상들 중 하나 이상을 특이적으로 표적화하는 제2 조성물과의 조합 치료이다. 예를 들어, HPA에 의해 유발되는 티로신의 결핍은 신경전달물질인 도파민 및 세로토닌의 결핍을 초래하는 것으로 알려져 있다. 따라서, 본 발명의 맥락에서, BH4 및 식이 단백질에 기초한 방법이 L-도파, 카르비도파 및 5- 히드록시트립토판 신경전달물질의 투여와 추가로 조합되어, 식이법에서 감소된 양의 티로신으로부터 비롯되는 결함을 보정할 수 있음이 구상된다.

또한, PAH(Christensen 등, Mol . Gent. And Metabol . 76: 313-318, 2002; Christensen 등, Gene Therapy, 7:1971 1978, 2000) 및 페닐알라닌 암모니아-라이아제(PAL Liu 등, Arts: Cells. Blood. Subs and Immob , Biotech. 30(4)243-257, 2002) 모두를 이용한 유전자 치료가 당업자에 의해 구상되었다. 그러한 유전자 치료 기법은 본 발명의 조합된 BH4/식이 단백질 제한에 기초한 치료와 조합되어 사용될 수 있다. 추가 조합 치료들에서, 환자에 있어 보다 낮은 Phe 농도를 해소하기 위해 주사가능한 효소로서 페닐라제가 제공될 수 있음이 구상된다. 페닐라제의 투여는 (PAH 투여와 달리) 티로신을 발생시키지 않을 것이므로, 그러한 처리는 여전히 그러한 환자에게 필수적인 아미노산인 티로신을 초래하게 됨이 구상된다. 그러므로 티로신 함유 식이 보충물은 BH4 치료와 조합되어 페닐라제를 투여받는 환자에게 바람직할 수 있다.

VII. 실시예

하기 실시예는 본 발명의 바람직한 실시양태들을 입증하기 위해 포함된다. 하기 실시예에 개시된 기법은 본 발명의 수행에 잘 작용하도록 본 발명자에 의해 발견된 기법을 나타내며, 이에 따라 본 발명의 수행에 바람직한 양태를 구성하도록 구성될 수 있음이 당업자에 의해 인지될 것이다. 그러나, 당업자는, 본 개시 내용의 견지에서, 개시된 특정 실시양태들에서 많은 변화들이 이루어질 수 있음을 인지 할 것이고, 여전히 본 발명의 사상 및 범주를 벗어나지 않는 한, 동일하거나 유사한 결과를 여전히 수득할 수 있을 것이다.

실시예 1

BH4 의 안정화된 결정화 형태의 제조

본원에 전체적으로 참고로 인용되는 국제 특허출원 공개 WO 2005/065018은, BH4의 수화물 또는 용매화물을 포함한 다형체, 및 다형체가 제조될 수 있도록 하는 예시적 결정화 조건을 특징화하기 위한 X선 및 라만 스펙트럼 연구를 기재하고 있다. 본원에 전체적으로 참고로 인용되는 국제 특허출원 공개 No. WO 2005/049000는, BH4 치료가 적당한 각종 환자 집단을 기재하고 있고, 그러한 대상을 BH4로 치료하는 방법을 기재하고 있다. 본원에 전체적으로 참고로 인용되는 국제 특허출원 공개 WO2005/049614는 BH4의 합성 방법을 기재하고 있다.

본원 전반에 인용된 참고 문헌 모두는, 그것이 예시적 절차, 또는 본원에 나와 있는 것들에 대한 보충적인 예시적 절차상 또는 기타 상세 내용을 제공하는 정도로, 본원에 참고로 특별히 인용된다.

실시예 2

테트라히드로비오프테린의 안정한 정제 제형물

하기 상세히 기재된 바와 같이, 표 I에 나와 있는 성분들을 혼합함으로써 3가지 정제 제형물을 제조하였다.

성분	제형물 I (중량%)	제형물 II (중량%)	제형물 III (중량%)
6R-L-에리트로-5,6,7,8-테트라히드로비오프테린 디히드로클로라이드 염, 다형체 B (활성 성분)	33.33	33.33	33.33
D-만니톨 (미각 차폐)	57.56	57.56	57.56
이염기성 인산칼슘, 무수 (결합제)	2.18	2.18	2.18
히드록시프로필 셀룰로스 (붕해제)	3.63	4.5
폴리비닐피롤리돈 (붕해제)	0.87		4.50
아스코르브산 (안정화제)	1.67	1.67	1.67
리보플라빈 (착색제)	0.01	0.01	0.01
스테아릴푸마르산나트륨 (윤활제)	0.75	0.75	0.75

표 I에서의 각 제형물에 대해, 4 kg의 6R-L-에리트로-5,6,7,8-테트라히드로비오프테린 디히드로클로라이드 염(다이이찌 산토리 파마 주식회사(Daiichi Suntory Phama Co., Ltd.)로부터 입수가능한 사프로프테린 히드로클로라이드(SAPROPTERIN Hydrochloride))를 블렌더에 먼저 충전하고, BH4를 25 분당회전수(RPM)으로 10분 동안 배합함으로써, 12 kg 배치를 제조하였다. 이어서, 6.91 kg의 D-만니톨(로퀘트 아메리카 인코포레이티드(Roquette America, Inc.)(미국 아이오와주 커쿡 소재)로부터 입수가능한 퍼얼리톨(PEARLITOL))을 블렌더에 첨가하여, 그 혼합물을 25 RPM에서 부가적 10분 동안 배합시켰다. 이어서, 260 g의 무수 이염기성 인산칼슘(말린크로트 베이커 인코포레이티드(Mallinckrodt Baker, Inc.)(미국 뉴저지주 필립스버그 소재)), 및 (a) 제형물 I에서는, 436 g의 히드록시프로필 셀룰로스 및 104 g을 블렌더에 첨가하였고, (b) 제형물 II에서는, 540 g의 히드록시프로필 셀룰로스를 블렌더에 첨가하였으며; (c) 제형물 III에서는, 540 g의 폴리비닐피롤리돈(바스프 코포레이션(BASF Corporation)(미국 뉴저지주 플로함 파크 소재)으로부터 입수가능한 콜리돈 CL(KOLLIDON CL))을 첨가하였고, 그 혼합물을 25 RPM에서 부가적 10분 동안 배합시켰다. 블렌더에, 200 g의 아스코르브산 및 120 g의 리보플라빈(Ribofloavin)을 첨가하였고, 그 혼합물을 25 RPM에서 3분 동안 배합시켰다. 스테아릴푸마르산나트륨 윤활제(펜웨스트 파마슈티칼즈 컴퍼니(Penwest Pharmaceuticals Co.)(미국 코넥티컷주 댄버리 소재)로부터 입수가능한 PRUV)를 25 메쉬 스테인레스강 스크린을 통해 여과하여 백에 넣은 후, 블렌더에 9 kg의 스크리닝된 스테아릴푸마르산나트륨을 충전하였으며, 수득되는 혼합물을 25 RPM에서 5분 동안 배합시켰다.

이어서, 각 제형물의 배합된 혼합물을 블렌더에서 제거하여, 각 제형물의 3가지 샘플을 수집하여, 150 mg, 300 mg, 및 600 mg 정제를 제조하였다. 각 제형물에 대해, 정제 샘플(150 mg, 300 mg, 및 600 mg)을 정제 프레스(젠-치앙 머쉬너리(주)(Jenn-Chiang Machinery Co., Ltd.)(Taiwan, R.O.C.)에 두었고, 여기에서 정제 프레스의 파라미터는 4.5 내지 5.5 밀리미터 범위의 두께, 및 7 KP의 표적 경도를 갖는 정제를 제공하도록 설정되었다.

이어서, 수득되는 정제를 분석하여, 제형물의 안정성을 결정하였다. 제형물의 안정성을, 미국 약전 추천 no. 701을 이용하는 제형물의 붕해에 대해, 또한 제형물의 성분을 분석함에 의해 화학적 변화에 대해, 상이한 간격으로 시각적으로 조사함으로써 경시적 외관 변화에 대해 연구하였다. 안정성 시험의 결과가 하기 표 II에 요약되어 있다.

안정성 시험은 정제 제형물 III이 다른 BH4 제형물보다 더 안정하다는 것을 보여준다. 각 약제학적 제제는 BH4의 전달에 유용한 제제이다. 제형물 III은 제형물 I 및 II보다 더 양호한 안정성을 나타냈다. 따라서,한 바람직한 실시양태에서, 안정화된 정제 제형물은 최적의 붕해제, 예를 들어 크로스포비돈 또는, 히드록시프로필셀룰로스보다 폴리비닐피롤리돈에 보다 유사한 붕해제를 포함한다. 바람직한 제형물은 제형물 III이다. 다른 적당한 정제 제형물은 0.01 중량% 이상, 또는 0.05중량% 이상, 또는 0.1 중량% 이상의 농도로 적어도 아스코르브산을 포함할 수 있다.

실시예 3

원하는 초기량의 다형체 B를 이용하고, 하기 건식 정제 제조 공정을 이용하여 하기 표 III에 나와 있는 상대량의 다른 성분들과 혼합함으로써, 100 mg 테트라히드로비오프테린을 함유하는 300 mg의 정제를 제조한다. 다른 원하는 양의 테트라히드로비오프테린을 함유하는 정제를 유사한 방식으로 제조할 수 있다.

6R-L-에리트로-5,6,7,8-테트라히드로비오프테린 및 D-만니톨을 20 메쉬 스크린(크기가 ~850 μm 초과인 입자를 여과 제거하도록 고안됨)을 이용하여 핸드 스크리닝하였다. 혼합물을 21 RPM에서 10분 동안 배합하였다. 그 다음, 무수 이염기성 인산칼슘 및 크로포비돈을 20 메쉬 스크린으로 핸드 스크리닝하고, BH4 및 D-만니톨과 21 RPM에서 10분 동안 배합하였다. 20 메쉬 스크린으로 핸드 스크리닝한 후에 아스코르브산 및 리보플라빈을 블렌더에 첨가하였고, 수득되는 혼합물을 21 RPM에서 10분 동안 배합하였다. 그 다음, 40 메쉬 스크린으로 핸드 스크리닝한 후에, 스테아릴푸마르산나트륨을 블렌더에 첨가하였고, 21 RPM에서 5분 동안 배합하였다. 이어서, 배합된 혼합물을 백에 충전하여, 정제로 압착하기 전에 균일성에 대해 시험하였다.

성분	(중량%)	(mg)
6R-L-에리트로-5,6,7,8-테트라히드로비오프테린 디히드로클로라이드 염 (활성 성분)	33.33	100.0
D-만니톨 (미각 차폐)	57.56	172.68
이염기성 인산칼슘, 무수 (결합제)	2.18	6.54
크로스포비돈 (붕해제)	4.50	13.50
아스코르브산 (산성 산화방지제)	1.67	5.00
리보플라빈 (착색제)	0.01	0.03
푸마르산스테아릴 (윤활제)	0.75	2.25

호일 블리스터-팩, 또는 HDPE 병에, 병 당 45개 정제가 들어가는 양으로 정제들을 포장하였다. 각 유형의 포장된 정제를 2가지 배치로 나누었다. 한 배치는 실온, 25±2℃, 및 60±5% 상대 습도에서 저장하였다. 다른 배치를 40±2℃ 및 75±5% 상대 습도에서 가속화 시험 조건 하에 저장하였다. 규칙적 간격으로, 정제를 저장고에서 제거하여, 활성 약제학적 성분, 즉 6R-L-에리트로-5,6,7,8-테트라히드로비오프테린의 보유에 대해 시험하였다. 300 mg 정제에 대한 예시적 결과가 하기 표 IV, V, VI 및 VII에 나와 있다. 실온 또는 가속화 시험 조건 하에서 6개월 저장한 후, 4개의 배치 각각은 HPLC 검정에 의해 6R-L-에리트로-5,6,7,8-테트라히드로비오프테린의 초기량의 99% 이상의 보유율, 1% 미만의 건조 시 손실율, 및 3분 이하의 급속 붕해를 나타냈다.

사프로프테린 디히드로클로라이드 약물 제품(300-MG 정제, 호일 블리스터-팩) 저장 조건: 25±2℃/60±5% RH

시험/검정	안정성 규격	시점(개월)
시험/검정	안정성 규격	0	1	3	6	9
시각 조사에 의한 외관	백색 내지 담황색의 압착 정제	정합	정합	정합	정합	정합
건조 시 손실율	보고 결과	0.3%	0.3%	0.9%	0.7%	0.9%
붕해	≤3분	1분 30초	2분 7초	2분 2초	2분 35초	1분 48초
HPLC 검정	90-110%	101%	100%	100%	100%	101%
관련 물질에 대한 HPLC	≤0.1% 미확인 개별 물질	0.05%	0.04% (RRT 1.28)	0.05% (RRT 0.72) 0.08% (RRT 0.83) 0.05% (RRT 1.32)	0.09% (RRT 0.81) 0.04% (RRT 0.83) 0.06% (RRT 1.24)	0.03% (RRT 0.69) 0.01% (RRT 0.73) 0.07% (RRT 0.81) 0.03% (RRT 0.83) 0.02% (RRT 1.21) 0.04% (RRT 1.44)
	≤0.5% 미확인 총 물질	0.05%	0.04%	0.18%	0.22%	0.20%
	≤2.0% 총 관련 물질	0.05%	0.04%	0.18%	0.22%	0.20%

ND=검출되지 않음

사프로프테린 디히드로클로라이드 약물 제품(300-MG 정제, 호일 블리스터-팩) 저장 조건: 40±2℃/75±5% RH

시험/검정	안정성 규격	시점(개월)
시험/검정	안정성 규격	0	1	3	6
시각 조사에 의한 외관	백색 내지 담황색의 압착 정제	정합	정합	정합	정합
건조 시 손실율	보고 결과	0.3%	0.3%	0.8%	0.7%
붕해	≤3분	1분 30초	2분 16초	2분 47초	2분 11초
HPLC 검정	90-110%	101%	100%	101%	99%
관련 물질에 대한 HPLC	≤0.1% 미확인 개별 물질	0.05%	0.04% (RRT 1.28)	0.06% (RRT 0.64) 0.07% (RRT 0.72) 0.04% (RRT 0.83) 0.06% (RRT 1.31)	0.07% (RRT 0.74) 0.15% (RRT 0.83) 0.04% (RRT 0.83) 0.06% (RRT 1.24)
	≤0.5% 미확인 총 물질	0.05%	0.04%	0.23%	0.32%
	≤2.0% 총 관련 물질	0.05%	0.04%	0.23%	0.32%

ND=검출되지 않음

사프로프테린 디히드로클로라이드 약물 제품(300-MG 정제, 45-정제 병) 저장 조건: 25±2℃/60±5% RH

시험/검정	안정성 규격	시점(개월)
시험/검정	안정성 규격	0	3	6
시각 조사에 의한 외관	백색 내지 담황색의 압착 정제	정합	정합	정합
건조 시 손실율	보고 결과	0.7%	0.8%	1.1%
붕해	≤3분	2분 57초	2분 3초	2분 50초
HPLC 검정	90-110%	102%	NT	103%
관련 물질에 대한 HPLC	≤0.1% 미확인 개별 물질	0.06%	NT	0.08% (RRT 0.56) 0.04% (RRT 0.61) 0.05% (RRT 0.65) 0.04% (RRT 0.81)
	≤0.5% 미확인 총 물질	0.15%	NT	0.21%
	≤2.0% 총 관련 물질	0.15%	NT	0.21%
	보고 결과(mg/정제)	5	NT	5
	총 호기성 미생물 계수≤1000 cfu/g	≤100 cfu/g	NR	NR
	에쉐리키아 콜라이에 대한 시험=부재	부재

ND=검출되지 않음

NT=시험되지 않음

NR=요구되지 않음

사프로프테린 디히드로클로라이드 약물 제품(300-MG 정제, 45-정제 병) 저장 조건: 40±2℃/75±5% RH

시험/검정	안정성 규격	시점(개월)
시험/검정	안정성 규격	0	3	6
시각 조사에 의한 외관	백색 내지 담황색의 압착 정제	정합	정합	정합
건조 시 손실율	보고 결과	0.7%	1.1%	1.1%
붕해	≤3분	2분 57초	2분 41초	2분 48초
HPLC 검정	90-110%	102%	NT	101%
관련 물질에 대한 HPLC	≤0.1% 미확인 개별 물질	0.06%	NT	0.13% (RRT 0.56) 0.03% (RRT 0.61) 0.10% (RRT 0.65) 0.04% (RRT 0.81)
	≤0.5% 미확인 총 물질	0.15%	NT	0.30%
	≤2.0% 총 관련 물질	0.15%	NT	0.30%
	보고 결과(mg/정제)	5	NT	5

ND=검출되지 않음

NT=시험되지 않음

NR=요구되지 않음

Claims

초기량의, (6R)-L-에리트로-테트라히드로비오프테린의 결정성 다형체, 표시된 다형체 B, 및 약제학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는 안정한 정제 제형물로서,

실온 및 약 60% 습도에서 6개월 후에, 안정한 정제 제형물이 (6R)-L-에리트로-테트라히드로비오프테린의 초기량의 약 95% 이상을 보유하고,

상기 결정성 다형체가 히드로클로라이드 염으로서 d-값(Å)로 표시되는 하기 특징적 피크를 갖는 X-선 분말 회절 패턴을 나타내는 안정한 정제 제형물:

8.7 (vs), 5.63 (m), 4.76(m), 4.40 (m), 4.00 (s), 3.23 (s), 3.11 (vs), 바람직하게는 8.7 (vs), 6.9 (w), 5.90 (vw), 5.63 (m), 5.07 (m), 4.76 (m), 4.40 (m), 4.15 (w), 4.00 (s), 3.95 (m), 3.52 (m), 3.44 (w), 3.32 (m), 3.23 (s), 3.17 (w), 3.11 (vs), 3.06 (w), 2.99 (w), 2.96 (w), 2.94 (m), 2.87 (w), 2.84 (s), 2.82 (m), 2.69 (w), 2.59 (w) 및 2.44 (w).
제1항에 있어서, 실온 및 약 60% 습도에서 9개월 경과한 후에 (6R)-L-에리트로-테트라히드로비오프테린의 초기량의 약 95% 이상을 보유하는 안정한 정제 제형물
제1항 또는 제2항에 있어서, (6R)-L-에리트로-테트라히드로비오프테린의 초 기량의 약 98% 이상을 보유하는 안정한 정제 제형물.
제1항에 있어서, 6R)-L-에리트로-테트라히드로비오프테린이 제형물의 초기량이 약 30 중량% 내지 약 40 중량% 범위 내인 안정한 정제 제형물.
제1항에 있어서, (6R)-L-에리트로-테트라히드로비오프테린의 초기량이 제형물의 약 32 중량% 내지 약 35 중량% 범위 내인 것인 안정한 정제 제형물.
제1항에 있어서, (6R)-L-에리트로-테트라히드로비오프테린의 초기량이 제형물의 약 33 중량% 범위 내인 것인 안정한 정제 제형물.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 각 정제 내의 (6R)-L-에리트로-테트라히드로비오프테린의 초기량이 약 100 mg인 것인 안정한 정제 제형물.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 각 정제 내의 (6R)-L-에리트로-테트라히드로비오프테린의 초기량이 약 200 mg인 것인 안정한 정제 제형물.
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 결합제를 추가로 포함하는 안정한 정제 제형물.
제9항에 있어서, 결합제가 무수 이염기성 인산칼슘인 것인 안정한 정제 제형물.
제9항 또는 제10항에 있어서, 결합제가 약 1 중량% 내지 약 5 중량% 범위 내인 것인 안정한 정제 제형물.
제9항 또는 제10항에 있어서, 결합제가 약 1.5 중량% 내지 약 3 중량% 범위 내인 것인 안정한 정제 제형물.
제9항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 결합제:테트라히드로비오프테린의 중량비가 약 1:10 내지 약 1:20 범위 내인 것인 안정한 정제 제형물.
제13항에 있어서, 결합제:테트라히드로비오프테린의 중량비가 약 1:15인 것인 안정한 정제 제형물.
제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 붕해제를 추가로 포함하는 안정한 정제 제형물.
제15항에 있어서, 붕해제가 크로스포비돈인 것인 안정한 정제 제형물.
제15항 또는 제16항에 있어서, 붕해제가 약 3 중량% 내지 약 10 중량% 범위 내인 것인 안정한 정제 제형물.
제17항에 있어서, 붕해제가 약 3 중량% 내지 약 5 중량% 범위 내인 것인 안정한 정제 제형물.
제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 붕해제:테트라히드로비오프테린의 중량비가 약 1:5 내지 약 1:10 범위 내인 것인 안정한 정제 제형물.
제19항에 있어서, 붕해제:테트라히드로비오프테린의 중량비가 약 1:7.5인 것인 안정한 정제 제형물.
제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 산성 산화방지제를 추가로 포함하는 안정한 정제 제형물.
제21항에 있어서, 산성 산화방지제가 아스코르브산인 것인 안정한 정제 제형물.
제21항 또는 제22항에 있어서, 산성 산화방지제가 약 1 중량% 내지 약 3 중량% 범위 내인 것인 안정한 정제 제형물.
제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, 산성 산화방지제:테트라히드로비오프테린의 중량비가 약 1:5 내지 1:30 범위 내인 것인 안정한 정제 제형물.
제24항에 있어서, 산성 산화방지제:테트라히드로비오프테린의 중량비가 약 1:20인 것인 안정한 정제 제형물.
제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, 윤활제를 추가로 포함하는 안정한 정제 제형물.
제26항에 있어서, 윤활제가 푸마르산스테아릴인 것인 안정한 정제 제형물.
제25항 또는 제26항에 있어서, 윤활제가 약 0.1 중량% 내지 약 2 중량% 범위 내인 것인 안정한 정제 제형물.
제28항에 있어서, 윤활제가 약 0.5 중량% 내지 약 1 중량% 범위 내인 것인 안정한 정제 제형물.
제1항 내지 제29항 중 어느 한 항에 있어서, 윤활제:테트라히드로비오프테린의 중량비가 약 1:25 내지 1:65 범위 내인 것인 안정한 정제 제형물.
제30항에 있어서, 윤활제:테트라히드로비오프테린의 중량비가 약 1:45인 것인 안정한 정제 제형물.
제1항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, 비타민 B2(리보플라빈)를 추가로 포함하는 안정한 정제 제형물.
제1항 내지 제32항 중 어느 한 항에 있어서, 비타민 B12를 추가로 포함하는 안정한 정제 제형물.
제1항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서, 엽산염을 추가로 포함하는 안정한 정제 제형물.
제1항 내지 제34항 중 어느 한 항에 있어서, 아르기닌을 추가로 포함하는 안정한 정제 제형물.
제34항에 있어서, 엽산염이 엽산(프테로일모노글루타메이트), 디히드로엽산, 테트라히드로엽산, 5-메틸테트라히드로엽산, 5,10-메틸렌테트라히드로엽산, 5,10-메테닐테트라히드로엽산, 5,10-포름이미노테트라히드로엽산, 5-포르밀테트라히드로엽산(류코보린), 10-포르밀테트라히드로엽산, 10-메틸테트라히드로엽산, 폴 릴(folyl)폴리글루타메이트, 디히드로엽산염, 테트라히드로엽산염, 5-포르밀-(6S)-테트라히드로엽산, 5-메틸-(6S)-테트라히드로엽산, 5,10-메틸렌-(6R)-테트라히드로엽산, 5,10-메테닐-(6R)-테트라히드로엽산, 10-포르밀-(6R)-테트라히드로엽산, 5-포름이미노-(6S)-테트라히드로엽산 또는 (6S)-테트라히드로엽산, 또는 그것의 약제학적으로 허용가능한 염인 것인 안정한 정제 제형물.
제형물의 약 32 중량% 내지 약 35 중량% 범위 내인 초기량의, (6R)-L-에리트로-테트라히드로비오프테린의 결정성 다형체, 약 3 중량% 내지 약 5 중량% 범위 내의 크로스포비돈, 약 1.5 중량% 내지 약 3 중량% 범위 내의 무수 이염기성 인산칼슘, 및 약 0.5 중량% 내지 약 1 중량% 범위 내의 푸마르산스테아릴을 포함하는, (6R)-L-에리트로-테트라히드로비오프테린의 안정한 정제 제형물로서,

상기 안정한 정제 제형물이 실온에서 6개월 이상의 저장 수명을 가지고,

상기 결정성 다형체가 히드로클로라이드 염으로서 d-값(Å)로 표시되는 하기 특징적 피크를 갖는 X-선 분말 회절 패턴을 나타내는 안정한 정제 제형물: 8.7 (vs), 5.63 (m), 4.76 (m), 4.40 (m), 4.00 (s), 3.23 (s), 3.11 (vs), 바람직하게는 8.7 (vs), 6.9 (w), 5.90 (vw), 5.63 (m), 5.07 (m), 4.76 (m), 4.40 (m), 4.15 (w), 4.00 (s), 3.95 (m), 3.52 (m), 3.44 (w), 3.32 (m), 3.23 (s), 3.17 (w), 3.11 (vs), 3.06 (w), 2.99 (w), 2.96 (w), 2.94 (m), 2.87 (w), 2.84 (s), 2.82 (m), 2.69 (w), 2.59 (w), 및 2.44 (w).
제37항에 있어서, 실온에서 9개월 이상의 저장 수명을 가지는 안정한 정제 제형물.
제37항 또는 제38항에 있어서, (6R)-L-에리트로-테트라히드로비오프테린의 상기 결정성 다형체의 초기량이 약 33 중량%이고, 크로스포비돈이 약 4.5 중량%이며, 무수 이염기성 인산칼슘이 약 2 중량%이고, 푸마르산스테아릴이 약 0.75 중량%인 것인 안정한 정제 제형물.
초기량의, (6R)-L-에리트로-테트라히드로비오프테린의 상기 결정성 다형체, 및 하나 이상의 약제학적으로 허용가능한 부형제를 혼합하고, 혼합물로부터 정제를 형성하는 단계를 포함하며, 단계들에 액체 물을 첨가하는 것이 포함되지 않는, 제1항 내지 제39항 중 어느 한 항에 따른 안정한 정제 제형물의 제조 방법.
제40항에 있어서, 하나 이상의 약제학적으로 허용가능한 부형제가 결합제를 포함하는 것인 방법.
제41항에 있어서, 결합제가 무수 이염기성 인산칼슘인 것인 방법.
제1항 내지 제42항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 약제학적으로 허용가능한 부형제가 붕해제를 포함하는 것인 방법.
제43항에 있어서, 붕해제가 크로스포비돈인 것인 방법.
제1항 내지 제44항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 약제학적으로 허용가능한 부형제가 산성 산화방지제를 포함하는 것인 방법.
제45항에 있어서, 산성 산화방지제가 아스코르브산인 것인 방법.
제1항 내지 제46항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 약제학적으로 허용가능한 부형제가 윤활제를 포함하는 것인 방법.
제47항에 있어서, 윤활제가 스테아르산포르밀인 것인 방법.