KR20060020700A - 안지오텐신 전환효소 활성 억제제를 함유하는 해조식물추출물 및 이를 포함하는 식품 - Google Patents

안지오텐신 전환효소 활성 억제제를 함유하는 해조식물추출물 및 이를 포함하는 식품 Download PDF

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Abstract

본 발명은 안지오텐신 전환효소 활성 억제제를 함유하는 해조식물 추출물 및 이를 함유하는 식품에 관한 것으로, 좀 더 구체적으로 해조류로부터 분리한 디벤조-p-디옥신(dibenzo-p-dioxine) 유도체를 유효성분으로 하는 안지오텐신 전환효소(Angiotensin Converting Enzyme, ACE) 활성 억제 특성을 갖는 해조식물 추출물 및 이를 함유하는 식품에 관한 것이다.
본 발명의 해조식물 추출물은 경제적이며 효율적으로 해양 식용 식물로부터 분리한 안지오텐신 전환효소의 활성을 억제하는 유효성분을 함유하여 혈관 수축을 막아 혈압 강하 효과를 나타내므로 고혈압 치료에 사용할 수 있으며, 인체에 대한 독성이 없어 약물 또는 식품의 형태로 장기간 섭취가 가능한 장점이 있어, 혈압 조절 및 고혈압 합병증을 예방할 수 있는 등 그 활용 범위가 다양할 것으로 기대된다.
고혈압, 디벤조-p-디옥신, 폴리페놀, 안지오텐신 전환효소 저해제, 레닌-엔지오텐신 시스템, SHR

Description

안지오텐신 전환효소 활성 억제제를 함유하는 해조식물 추출물 및 이를 포함하는 식품{Compound extracted from marin plants containing inhibitors of angiotensin converting enzyme activity and foods comprising thereof}
도 1은 감태 및 대황 혼합물의 조 추출물의 고속 액체 크로마토그램을 나타내는 그래프이다.
본 발명은 안지오텐신 전환효소 활성 억제제를 함유하는 해조식물 추출물 및 이를 포함하는 식품에 관한 것으로, 좀 더 구체적으로 안지오텐신 전환효소 억제 활성을 갖는 디벤조-p-디옥실 유도체를 포함하는 해조식물 추출물 및 이를 포함하는 식품에 관한 것이다.
고혈압은 순환기 계통의 만성퇴행성 질환으로서 혈압조절 및 전해질 균형의 조절에 중요한 역할을 하는 레닌-엔지오텐신 시스템(Renin-Angiotensin System, RAS)의 생리화학적 기전으로 설명된다. 특히 안지오텐신 I 전환효소(angiotensin converting enzyme, ACE)는 데카펩타이드(decapeptide)인 안지오텐신 I으로부터 다이펩타이드(dipeptide, His-Leu)를 절단함으로서 혈관 수축 작용을 갖는 안지오텐 신 II로 전환시키는 역할을 하는 효소이다. 안지오텐신 II의 증가는 강한 혈압 상승작용과 항이뇨 호르몬인 알도스테론(aldosterone)의 분비를 촉진하고 물과 나트륨의 배설을 억제하여 순환 혈액 양을 증가시킴으로서 고혈압을 일으키게 한다. 또한 ACE는 혈관 이완작용을 하는 브레디키닌(bradykinin)을 분해하여 불활성화 시킴으로써 결과적으로 혈압상승을 유발하는 역할을 한다. 그러므로 ACE 저해제는 ACE의 작용을 억제함으로써 혈관 수축을 막아 혈압 강하효과를 나타낼 수 있기에 고혈압 개선에 획기적인 전기를 마련해 준 약물이다.
ACE 작용 활성검색은 동물의 고혈압 상태를 이용하는 검색법과 ACE와 특수 기질을 이용하는 인 비트로(in vitro) 실험법이 사용되고 있다. 대표적인 ACE 억제제로서는 화학 합성제인 캡토프릴(captopril)이 개발되어 고혈압 개선제로서 이용되고 있으나, 마른기침, 두통, 식욕부진, 미각이상, 발진, 백혈구 감소 등 부작용이 많아 최근의 연구 방향은 부작용이 없는 천연물에서의 ACE 저해제 개발에 집중되고 있다.
ACE 저해작용을 나타내는 물질은 펩타이드성 물질과 폴리페놀성 물질로 대별되는데, 펩타이드성 저해물질은 뱀독으로부터 처음 분리되어 보고된 이래, 다랑어, 정어리, 고등어, 전갱이, 가다랭이, 새우, 가리비 등의 어패류의 효소 가수 분해물, 우유단백질인 케이신(casein), 달걀의 알부민(albumin), 젤라틴(gelatin), 동물의 혈장 등에서 분리한 펩타이드 등이 보고되었다(G. Oshima, et al., Biochimica et Biophysica Acta, 566, 128, 1979; S. Maruyama, et al., Agric. Biol. Chem., 46(5), 1393, 1982; S. Maruyama, et al., Agric. Biol. Chem., 51(6), 1581, 1987; M. Kohmura, et al., Agric. Biol. Chem., 54(4), 1101, 1990; Yasuo Ariyoshi, Trends in Food Sci. Tech., 4, 139, 1993; Song, K. B., et al., Biotech. Tech., 10(7), 479, 1996; Song, K. B., et al., Agric. Chem. Biotech., 40(1), 39, 1997).
한편, 폴리페놀성 물질로는 감나무잎, 밀감 등의 추출물, 녹차의 탄닌, 알로에 아세틸만닌, 키토산 올리고당, 양파 조미액, 밀감 피층에서 얻은 탄닌류가 ACE 저해효과를 갖는 것으로 밝혀졌다(Matsubara, Y., et al., Agric. Biol. Chem., 49(4), 909, 1985; Cho, Y., et al., Korean J. Food Sci. Tech., 25(3), 238, 1993; Ryu, I. W., et al., Korean J. Food Sci. Tech., 29(1), 1269, 1997; Hong, S. P., et al., Korean J. Food Sci. Tech., 30(6), 1476, 1998; Park, E. J., et al., Food Sci. Biotech., 9(3), 163, 2000). 국내에서도 된장, 쌀, 오징어, 도축혈액의 혈장, 해초류, 버섯 등에서 유래하는 ACE 저해 펩타이드에 관한 연구가 있어 왔다.(Yang, H. C., et al., Agric. Chem. Biotech., 37(6), 441, 1994; Shin, J. I., et al., J. Food Sci. Tech., 27(2), 230, 1995; Ko, Y. S., et al., J. Korean Fish. Soc., 32(4), 427, 1999; Song, K. B., et al., 한국등록특허 제215090호; Song, K. B., et al., 한국등록특허 제215091호; Suh, H. J., et al., Food Res. Int., 34, 177, 2001).
그러나, 지금까지 천연물로부터 ACE 저해제를 분리하는 연구는 주로 식품 단백질을 펩신, 트립신 등의 단백질분해효소(protease)로 가수분해하여 얻어진 가수분해물로 부터 ACE 저해효과를 갖는 기능성 펩타이드를 제조하고자 하는 것이 많 았는데, 식품단백질의 가수분해물로부터 제조된 기능성 펩타이드는 구조적, 기능적, 생리적 해석에 관한 논란이 있어 왔으며, 분리 정제시 수율이 매우 낮을 뿐만 아니라 높은 제조경비 등의 경제적인 문제로 산업적으로 이용이 용이하지 않은 단점이 있었다.
따라서, 본 발명에서는 상술한 문제를 해결하기 위한 연구를 수행한 결과, 해양 식용 식물인 갈조류에 존재하는 디벤조-p-디옥신(dibenzo-p-dioxine)을 기본 골격으로 이루어진 폴리페놀성 물질이 안지오텐신 전환효소의 활성을 억제하여 SHR(Spontaneously Hypertensive Rats)에서 혈압의 감소를 유도하고, 고혈압 환자의 혈압을 저하시키는 개선 효과가 있음을 확인하였으며, 본 발명은 이를 기초로 완성되었다.
따라서, 본 발명의 목적은 해양 식용 식물인 갈조류로부터 경제적이고 효율적으로 분리한 안지오텐신 전환 효소의 활성 억제능을 갖는 디벤조-p-디옥신 유도체를 포함하는 해조식물 추출물을 제공하는 데 있다.
본 발명의 다른 목적은 상기 본 발명의 해조식물 추출물을 포함하는 제품을 제공하는 데 있다.
상기 본 발명의 목적을 달성하기 위한 본 발명의 안지오텐신 전환효소 활성 억제제를 함유하는 해조식물 추출물은 해조류로부터 분리한 안지오텐신 전환 효소의 억제 활성을 갖는 하기 화학식 1 내지 10으로 표시되는 화합물로부터 하나 또는 그 이상 선택된 디벤조-p-디옥신 유도체를 0.1 내지 100중량%로 함유한다.
Figure 112006007291391-PAT00001
Figure 112006007291391-PAT00002
Figure 112006007291391-PAT00003
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Figure 112006007291391-PAT00009
Figure 112006007291391-PAT00010
상기 화학식에서, R은 수소, 탄소수 1 내지 10의 알킬, 탄소수 2 내지 10의 알케닐, 페닐, 탄소수 7 내지 10의 페닐알킬, 탄소수 1 내지 10의 알카노일, 히드록시 페닐 또는 디히드록시페닐 기이다.
상기 본 발명의 다른 목적을 달성하기 위한 안지오텐신 전환효소 활성 억제제를 함유하는 해조식물 추출물을 포함하는 제품은 식품의 형태로 제공된다.
이하 본 발명을 좀 더 구체적으로 살펴보면 다음과 같다.
전술한 바와 같이, 본 발명에서는 해양 식용 갈조류에서 분리한 디벤조-p-디옥신(dibenzo-p-dioxine) 유도체가 안지오텐신 전환효소의 활성을 억제할 수 있음을 발견하였으며, 상기 디벤조-p-디옥신 유도체를 포함하는 해조식물 추출물이 SHR (Spontaneously Hypertensive Rats)에서 혈압 감소를 유도하고, 고혈압 환자의 혈압이 개선되는 효과를 갖고 있음을 확인하였다.
본 발명의 안지오텐신 전환 효소 활성 억제능을 갖는 해양 식용 갈조류로부터 분리된 디벤조-p-디옥신 유도체는 하기 화학식 1 내지 10으로 표시된다.
화학식 1
Figure 112006007291391-PAT00011
화학식 2
Figure 112006007291391-PAT00012
화학식 3
Figure 112006007291391-PAT00013
화학식 4
Figure 112006007291391-PAT00014
화학식 5
Figure 112006007291391-PAT00015
화학식 6
Figure 112006007291391-PAT00016
화학식 7
Figure 112006007291391-PAT00017
화학식 8
Figure 112006007291391-PAT00018
화학식 9
Figure 112006007291391-PAT00019
화학식 10
Figure 112006007291391-PAT00020
상기 화학식에서, R은 수소, 탄소수 1 내지 10의 알킬, 탄소수 2 내지 10의 알케닐, 페닐, 탄소수 7 내지 10의 페닐알킬, 탄소수 1 내지 10의 알카노일, 히드록시 페닐 또는 디히드록시페닐 기이며, 바람직하게 R은 수소이다.
상기 화학식 1 내지 10으로 표시되는 디벤조-p-디옥신 유도체는 본 발명의 해조식물 추출물에서 최소 하나 또는 두개 이상의 혼합물로 0.1 내지 100중량%로 포함될 수 있다. 바람직하게는 화학식 1로 표시되는 디벤조-p-디옥신 유도체는 0.1 내지 6중량%, 화학식 2로 표시되는 디벤조-p-디옥신 유도체는 5 내지 60중량%, 화학식 3으로 표시되는 디벤조-p-디옥신 유도체는 1 내지 30중량%, 화학식 4으로 표시되는 디벤조-p-디옥신 유도체는 0.5 내지 20중량%, 화학식 5로 표시되는 디벤조-p-디옥신 유도체는 0.1 내지 10중량%, 화학식 6으로 표시되는 디벤조-p-디옥신 유도체는 0.5 내지 15중량%, 화학식 7로 표시되는 디벤조-p-디옥신 유도체는 0.1 내지 5중량%, 화학식 8로 표시되는 디벤조-p-디옥신 유도체는 0.1 내지 5중량%, 화학 식 9로 표시되는 디벤조-p-디옥신 유도체는 0.1 내지 10중량%, 화학식 10으로 표시되는 디벤조-p-디옥신 유도체는 0.1 내지 12중량% 또는 이들의 혼합물이다. 상기 함량은 각각의 디벤조-p-디옥신 유도체가 갖는 안지오텐신 전환효소에 대한 억제 활성을 나타내는 유효 용량을 고려한 범위이며 상기 범위를 벗어날 경우 안지오텐신 전환효소에 대한 억제 효과가 감소되는 경향이 있다.
본 발명에서 디벤조-p-디옥신 유도체를 추출하기 위해 사용하는 상기 갈조류는 아이세니아 바시클리스(Eisenia bicyclis), 아이세니아 아르보레아(Eisenia arborea), 아이세니아 데스마레스티오데스(Eisenia desmarestioides), 아이세니아 갈라파제니스(Eisenia galapagensis), 아이세니아 매소니(Eisenia masonii), 에클로니아 쿠로메(Ecklonia kurome), 에클로니아 카바(Ecklonia cava), 에클로니아 스톨로니페라(Ecklonia stolonifera), 에클로니아 맥시마(Ecklonia maxima), 에클로니아 라디아타(Ecklonia radiata), 에클로니아 바이시클리스(Ecklonia bicyclis), 에클로니아 바이런시네이트(Ecklonia biruncinate), 에클로니아 부시날리스(Ecklonia buccinalis), 에클로니아 카에파에스팁스(Ecklonia caepaestipes), 에클로니아 엑사스퍼타(Ecklonia exasperta), 에클로니아 파스티기아타(Ecklonia fastigiata), 에클로니아 브레빕스(Ecklonia brevipes), 에클로니아 아라보레아(Ecklonia arborea), 에클로니아 라티폴리아(Ecklonia latifolia), 에클로니아 무라티(Ecklonia muratii), 에클로니아 라디코사(Ecklonia radicosa), 에클로니아 리타디아나(Ecklonia richardiana), 및 에클로니아 라이티(Ecklonia wrightii)이며, 바람직하게는 아이세니아 바이시클리스(Eisenia bicyclis), 에클로니아 카바 (Ecklonia cava), 에클로니아 쿠로메(Ecklonia kurome) 및 에클로니아 스톨로니페라(Ecklonia stolonifera)이다.
상기 갈조류로부터 디벤조-p-디옥신을 추출하는 방법은 통상적인 유기 용매 추출법으로 수행된다. 상기 유기용매는 메탄올, 에탄올, 에틸 아세테이트, 아세토니트릴, 아세톤, 물, 및 이들의 혼합물이며, 바람직하게는 물/에탄올이다. 선택적으로, 수득율을 높이기 위해 추출과정을 2회 이상 반복하여 실시할 수 있다. 추출물에 함유된 잔사 및 용매는 원심분리기 및 회전증발 농축기와 같은 통상적인 분리, 농축 수단을 이용하여 제거하며, 보다 순도 높은 형태가 요구될 경우 추가적인 분리 정제과정을 거칠 수도 있으나, 별도의 추가공정 없이도 상기 추출물을 사용할 수 있어 경제적으로 유리한 장점이 있다.
본 발명의 해조식물 추출물은 의약품 및 식품의 형태로 제조될 수 있다. 이때, 본 발명의 해조식물 추출물은 약학적 유효량으로 함유되며, 바람직하게는 20 내지 70 중량%이다.
본 발명의 추출물을 의약품으로 제조 시 약제학적으로 허용가능한 모든 형태로 제조되며, 약제학적 분야의 통상적인 방법에 따라 주사제, 액상제, 환제, 정제, 캅셀제, 산제 및 현탁제 등의 제제로 제형화시킬 수 있으며, 바람직하게는 정제, 캅셀제, 또는 액상제이다.
또한 본 발명의 추출물은 인체에 대한 독성이 전혀 없어 장기적으로 섭취 가능하므로 건강보조식품으로도 사용될 수 있다. 건강보조식품으로 제조되는 경우 음료나 제빵 류에 포함된 형태가 가능하나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 추출물은 매일 1㎎ 내지 10g/㎏, 바람직하게는 1 내지 100㎎/㎏씩 섭취하는 것이 효과적이며, 섭취방법은 특별히 한정되는 것은 아니나, 경구투여가 바람직하다.
이하 실시예를 통해 본 발명을 좀 더 구체적으로 설명하나, 이에 본 발명의 범주가 한정되는 것은 아니다.
실시예 1
근해에서 채취한 해조류인 감태(Ecklonia cava)와 대황(Eisenia bicyclis)을 먼저 증류수로 세척하여 이물질을 제거한 뒤 음지에서 건조한 후에 이를 파쇄한다. 상기 해조류로 이루어진 해조류 500g(감태 350g, 대황150g)을 함량 대비 20배량의 10% 알코올성 용매를 사용하여 활성물질을 용출시키기 위해 2시간 동안 환류 추출한다. 이러한 과정을 2회 반복하여 추출하였다. 그 다음, 잔사를 걸러서 제거하고 회전 증발농축기를 사용하여 용매 추출액을 감압 농축하였다. 농축액을 20배량의 증류수에 현탁하고, 동일량의 에틸아세테이트 용매를 사용, 3회 추출하여 에틸아세테이트 분획을 감압농축한다. 농축액을 15 배량의 실리카겔에 로딩한 후 에틸아세테이트/아세톤(부피비9/1)의 혼합용매를 사용하여 디벤조-p-디옥신 유도체를 유출시켜 농축하여 조추출물을 제조하였다.
상기 조추출물을 시료로 하여 엔지오텐신 전환효소 저해활성을 측정하였는데, Cushman과 Cheung의 방법에 따라 실시하였다(Cushman, D. W. and Cheung, H. S.. Biochem. Pharmacol., 20, 1637. 1971). ACE 저해 정도는 기질로서 히퓨릴히스티딜류신(hippuryl-L-histidyl-L-leucine, HHL)을 사용하였으며, HHL은 300mM NaCl 을 포함하는 50mM 소듐보레이트(sodium borate) 완충용액(pH 8.3)에 녹여 5mM HHL을 만들었다. 효소는 토끼 폐로부터 분리한 엔지오텐신 전환효소(ACE)를 사용하였다. 기질에 시료를 넣고 효소를 첨가한 반응액을 37℃에서 30분간 반응시킨 다음 1N 염산을 첨가하여 반응을 중지시켰다. 반응액에 에틸아세테이트를 넣어 30초 동안 혼합한 후 3000rpm에서 15분간 원심분리한 후 상등액인 에틸아세테이트 층만을 취하여 100℃에서 1시간 정도 건조시켰다. 건조 후 시험구에 남아있는 히퓨릭에시드(hippuric acid)에 증류수를 가해 완전히 녹인 다음 228㎚에서 흡광도를 측정하여 대조구와 비교하여 ACE 저해 정도를 계산하였다. 대조구는 시료 용액 대신 소듐보레이트 완충용액 50㎕를 가하였다.
상기와 같은 방법으로 추출물의 엔지오텐신 전환효소에 대한 저해활성을 측정해본 결과, 표 1에 나타낸 바와 같이 조추출물의 저해율은 IC50 =76㎍/㎖이었다.
실시예 2 내지 11
상기 실시예 1로부터 제조한 조추출물을 0.2㎛ 막여과지로 여과하여 고속 액체 크로마토그라피에 로딩(loading)하였다. 고속 액체 크로마토그라피에서는 컬럼은 HP ODS Hypersil 컬럼을, 용매로는 증류수와 메탄올을 사용하였으며, 용매의 공급은 1.0㎖/분의 유속으로 메탄올 15% 에서 70%까지 30분간에 걸쳐 선형구배 (linear gradient)를 걸어 ACE 저해 물질을 단일물로 분리하였다. 도 1에서 보여지는 것처럼 10개의 주요 피크로 분리 되었는데, 각 단일물에 대해 ACE 전환효소에 대한 저해활성을 측정하여 50%의 억제율을 보이는 농도를 구하여 IC50를 산출하였 다. 그 결과는 표 1과 같다.
실시예 12 내지 16
상기 실시예 2 내지 11의 시료를 혼합한 혼합물을 사용하여 ACE 전환효소에 대한 저해활성을 측정하여 50%의 억제율을 보이는 농도를 구하여 IC50를 산출하였다. 그 결과는 표 1과 같다.
실시예 17 내지 19
수소와 다른 작용기를 갖는 상기 실시예 2 내지 11의 화합물을 사용하여 ACE 전환효소에 대한 저해활성을 측정하여 50%의 억제율을 보이는 농도를 구하여 IC50를 산출하였다. 그 결과는 표 1과 같다.
비교예 1 내지 6
폴리페놀성 물질로 알려진 카테킨, 레스베라트롤, 녹차 추출물, 포도씨 추출물과 케르세틴, 이소플라본을 대조군으로 사용하여 ACE 전환효소에 대한 저해활성을 측정하여 50%의 억제율을 보이는 농도를 구하여 IC50를 산출하였다. 그 결과는 표 1과 같다.
추출물의 엔지오텐신 전환효소에 대한 저해활성
시료의 조성 IC50 (㎍/㎖)
실시예1 조추출물 76
실시예2 화학식1 (R=H), 99% 35
실시예3 화학식2 (R=H), 98% 28
실시예4 화학식3 (R=H), 99% 30
실시예5 화학식4 (R=H), 99% 22
실시예6 화학식5 (R=H), 99% 28
실시예7 화학식6 (R=H), 99% 71
실시예8 화학식7 (R=H), 99% 33
실시예9 화학식8 (R=H), 99% 31
실시예10 화학식9 (R=H), 99% 27
실시예11 화학식10 (R=H), 99% 6
실시예12 화학식2(R=H), 60% + 화학식3(R=H), 25% + 화학식4(R=H), 15% 30
실시예13 화학식4(R=H), 70% + 화학식5(R=H), 8% + 화학식6(R=H), 22% 38
실시예14 화학식4(R=H), 10% + 화학식10(R=H), 80% + 화학식7(R=H), 10% 35
실시예15 화학식1(R=H), 3% + 화학식2(R=H), 60%, + 화학식3(R=H), 10% + 화학식4(R=H), 12% + 화학식5(R=H), 5% + 화학식6(R=H), 10% 27
실시예16 화학식2(R=H), 60% + 화학식4(R=H), 20% + 화학식6(R=H), 15% +7(R=H), 5% 34
실시예17 화학식4(R=아세틸, H (3 : 7)) 76
실시예18 화학식2(R=올레오일, H (1 : 9)) 89
실시예19 화학식6(R=메틸, H (2 : 8)) 54
비교 1 카테킨(catechin) 84
비교 2 레스베라트롤(resveratrol) 122
비교 3 케르세틴(quercetin) 97
비교 4 이소플라본(isoflavone) 91
비교 5 녹차 추출물 310
비교 6 포도 씨 추출물 230
실시예 20
자발성 고혈압 쥐(Spontaneous Hypertensive Rat, SHR)의 혈압강하 유도효과
실험동물 및 추출물 투여: 수축기 혈압이 240mmHg 이상인 수컷 자발성 고혈압 쥐 (SHR: Spontaneous Hypertensive Rat)를 실험군(20마리) 및 대조군(20마리)으로 나누어 사용하였다. 사육실은 25±1℃의 통풍장치가 가동되고 12시간을 주기로 명암을 조절하였다. 사육시 물과 사료는 자유롭게 섭취하도록 하였다. 표 1의 실시예 12의 조성을 10% Tween 80에 용해시킨 것을 시험액으로 10% Tween80을 대조액으로 하고 실험군에는 시험액을, 대조군에는 대조액을 매일 1회씩 5일간 경구투여 하였다. 투여는 매일 오후 6:00~7:00에 실시하였다.
혈압측정: 혈압측정은 섭취 시작 일을 포함하여 7일간 매일 아침 9:00에 실시하였다. 꼬리 부분의 수축기 혈압을 모델 29 Pulse Amplifier를 사용하여 측정하였다. 그 결과는 표 2에 나타내었다.
데이터처리: 실험데이터의 통계분석은 Student T-test 를 이용하였으며, 유의수준은 P < 0.05로 하였다.
SHR의 혈압강하 효과
수축기 혈압(mmHg, 평균 ±SD) 이완기 혈압(mmHg, 평균 ±SD)
일 실험군 대조군 P 값 실험군 대조군 P 값
0 221 ±34 226 ±27 179 ±19 180 ±22
1 188 ±30 224 ±15 0.028 153 ±21 181 ±24 0.031
2 190 ±21 228 ±23 0.047 154 ±16 179 ±18 0.042
3 191 ±26 212 ±10 0.038 152 ±18 174 ±15 0.023
4 189 ±22 212 ±10 0.021 154 ±22 182 ±19 0.031
5 192 ±16 225 ±13 0.036 151 ±24 179 ±25 0.034
6 189 ±19 222 ±15 0.025 155 ±19 182 ±19 0.043
7 191 ±16 219 ±24 0.042 152 ±14 179 ±21 0.041
N = 20 : 실험군 및 대조군
본 시험의 결과, 7일간 반복 복용 후 대조군의 경우 수축기 및 이완기 혈압의 감소를 보이지 않았으나, 실험군의 경우 수축기혈압 13.5%(p=0.042), 이완기혈압 15.1%(p=0.041)의 감소 효과가 나타났다.
실시예 21
랫트에서의 4주간 반복투여 독성시험
시험물질의 반복 경구투여에 의한 독성을 조사하기 위하여 암수 공히 매체 대조군과 시험물질(실시예 15)을 각각 1000, 333 및 111㎎/㎏의 용량으로 10마리의 SD 계통 암수 랫트에 4주간 반복 경구투여하여 나타난 시험결과는 다음과 같았다.
(1) 시험물질의 투여와 관련된 사망동물은 관찰되지 않았다.
(2) 시험물질의 투여와 관련된 일반증상의 변화는 관찰되지 않았다.
(3) 체중변화에서는 암수 모두 시험물질투여와 관련된 변화는 관찰되지 않았다.
(4) 사료 및 물 섭취량에서도 암수의 모든 투여군에서 시험물질의 투여와 관련된 이상은 인정되지 않았다.
(5) 안검사에서는 암수의 모든 투여군에서 이상이 관찰되지 않았다.
(6) 요검사에서도 암수의 모든 투여군에서 시험물질 투여에 의한 독성학적인 이상은 관찰되지 않았다.
(7) 혈액학적 검사에서는 암수의 모든 투여군에서 시험물질 투여에 의한 독성학적인 변화는 관찰되지 않았다.
(8) 혈액생화학적 검사에서도 시험물질의 투여와 관련된 독성학적인 변화는 관찰되지 않았다.
(9) 부검소견에서는 암수의 모든 투여군에서 시험물질의 투여에 의한 이상소견이 관찰되지 않았다.
(10) 장기중량에서는 암수의 모든 투여군에서 유의한 변화는 관찰되지 않았다.
(11) 병리조직학적인 검사에서도 시험물질의 투여에 의한 어떠한 독성학적인 변화도 관찰되지 않았다.
이상의 결과로 보아 본 시험에서 랫트에서의 4주간 반복 경구투여에 의한 독성학적인 변화는 관찰되지 않았다. 따라서 본 시험물질의 무영향량(NOEL)은 1000㎎/㎏/day 이상으로 판단되었다.
실시예 22
본 발명의 성분이 함유된 식품을 이용한 인체에서의 혈압강하효과를 확인하기 위하여 표 3a의 조건으로 시험하였고, 그 결과는 표 3b 및 표3c에 나타내었다.
시험방법
시험 대상 최초 20명의 환자가 참여하여 17명이 4주간의 시험을 마쳤다. 3명은 4주 후 측정시 불참하여 제외함.
시험 샘플 실시예 15의 조성이 60% 함유된 캡슐
복용 방법 아침, 저녁으로 식후 2시간 후에 2캡슐씩
평가 방법 주당 1회 오전 9시에 수축시 혈압과 이완기 혈압을 측정.
통계 처리 student T-test를 이용하였으며, 유의 수준은 P < 0.05
* 측정된 값은 평균 ±SD(범위)를 나타낸다.
참가자들의 시험 전 측정치
나이 (세) 71.8 ± 5.6 (63 ∼ 82)
성별 남 7 (41.2%)
여 10 (58.8%)
신장 (㎝) 161.6 ±8.9 (149 ∼ 175)
체중 (㎏) 57.0 ±8.9 (45 ∼ 75)
수축기 혈압 152.2 ±14.2
이완기 혈압 118.6 ±13.4
시험 전후의 혈압 측정치 변화
수축기 혈압(mmHg, 평균 ±SD) 이완기 혈압(mmHg, 평균 ±SD)
주 실험군 P 값 실험군 P 값
0 152 ±14.2 118.6 ±13.4
1 136.1 ±13.4 0.041 111.3 ±11.7 0.039
2 134.5 ±16.1 0.030 110.5 ±15.2 0.054
3 132.8 ±12.8 0.022 109.6 ±12.4 0.031
4 132.6 ±17.2 0.043 108.3 ±11.3 0.048
본 시험의 결과, 4주간 반복 복용 후 수축기혈압 12.8%(p=0.043), 이완기혈압 8.7% (p=0.048)의 감소 효과가 나타났다.
상기 실시예의 결과에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따라 해양 식용 식물인 다양한 갈조류로부터 분리된 디벤조-p-디옥신 유도체들은 폴리페놀성 물질이며 인체에 무해하고, 안지오텐신 전환 효소의 활성을 억제하는 활성을 가지고 있어 경제적으로 ACE 저해제를 제조할 수 있는 공정의 개발과 이들 물질을 이용한 고혈압 개선용 기능성식품과 의약품의 개발이라는 효과가 있을 것으로 기대된다.

Claims (6)

  1. 안지오텐신 전환 효소의 억제 활성을 갖는 하기 화학식 1 내지 10으로 표시되는 화합물로부터 하나 또는 그 이상 선택된 디벤조-p-디옥신 유도체를 0.1 내지 100중량%로 함유하는 것을 특징으로 하는 해조식물 추출물
    화학식 1
    Figure 112006007291391-PAT00021
    화학식 2
    화학식 3
    Figure 112006007291391-PAT00023
    화학식 4
    Figure 112006007291391-PAT00024
    화학식 5
    Figure 112006007291391-PAT00025
    화학식 6
    Figure 112006007291391-PAT00026
    화학식 7
    Figure 112006007291391-PAT00027
    화학식 8
    Figure 112006007291391-PAT00028
    화학식 9
    Figure 112006007291391-PAT00029
    화학식 10
    Figure 112006007291391-PAT00030
    상기 화학식에서, R은 수소, 탄소수 1 내지 10의 알킬, 탄소수 2 내지 10의 알케닐, 페닐, 탄소수 7 내지 10의 페닐알킬, 탄소수 1 내지 10의 알카노일, 히드록시 페닐 또는 디히드록시페닐 기이다.
  2. 제1항에 있어서, 상기 화학식 1 내지 10으로 표시되는 화합물의 R은 수소인 것을 특징으로 하는 해조식물 추출물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 해조식물 추출물은 0.1 내지 6중량%의 화학식 1로 표시되는 디벤조-p-디옥신 유도체, 5 내지 60중량%의 화학식 2로 표시되는 디벤조-p-디옥신 유도체, 1 내지 30중량%의 화학식 3으로 표시되는 디벤조-p-디옥신 유도체, 0.5 내지 20중량%의 화학식 4로 표시되는 디벤조-p-디옥신 유도체, 0.1 내지 10중량%의 화학식 5로 표시되는 디벤조-p-디옥신 유도체 , 0.5 내지 15중량%의 화학식 6으로 표시되는 디벤조-p-디옥신 유도체, 0.1 내지 5중량%의 화학식 7로 표시되는 디벤조-p-디옥신 유도체, 0.1 내지 5중량%의 화학식 8로 표시되는 디벤조-p-디옥신 유도체, 0.1 내지 10중량%의 화학식 9로 표시되는 디벤조-p-디옥신 유도체, 0.1 내지 12중량%의 화학식 10으로 표시되는 디벤조-p-디옥신 유도체, 또는 이들의 혼합물을 포함하는 것을 특징으로 하는 해조식물 추출물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 해조식물은 아이세니아 바시클리스(Eisenia bicyclis), 아이세니아 아르보레아(Eisenia arborea), 아이세니아 데스마레스티오데스(Eisenia desmarestioides), 아이세니아 갈라파제니스(Eisenia galapagensis), 아이세니아 매소니(Eisenia masonii), 에클로니아 쿠로메(Ecklonia kurome), 에클로니아 카바(Ecklonia cava), 에클로니아 스톨로니페라(Ecklonia stolonifera), 에클로니아 맥시마(Ecklonia maxima), 에클로니아 라디아타(Ecklonia radiata), 에클로니아 바이시클리스(Ecklonia bicyclis), 에클로니아 바이런시네이트(Ecklonia biruncinate), 에클로니아 부시날리스(Ecklonia buccinalis), 에클로니아 카에파에스팁스(Ecklonia caepaestipes), 에클로니아 엑사스퍼타(Ecklonia exasperta), 에클로니아 파스티기아타(Ecklonia fastigiata), 에클로니아 브레빕스(Ecklonia brevipes), 에클로니아 아라보레아(Ecklonia arborea), 에클로니아 라티폴리아(Ecklonia latifolia), 에클로니아 무라티(Ecklonia muratii), 에클로니아 라디코사(Ecklonia radicosa), 에클로니아 리타디아나(Ecklonia richardiana) 및 에클로니아 라이티(Ecklonia wrightii)인 것을 특징으로 하는 해조식물 추출물.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따른 해조식물 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 식품.
  6. 제5항에 있어서, 상기 식품은 음료 또는 제빵 류인 것을 특징으로 하는 식품.
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