KR20050086939A - Ｎ-이소프로필아크릴아미드를 포함하는 조성물 및 표면상에단백질 흡착을 억제하기 위한 방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 의료 용구의 표면상의 단백질 침착물의 형성을 예방하거나 감소시키기 위한 NIPAM 중합체의 용도에 관한 것이다. 본 발명은 특히 콘택트 렌즈 및 기타 의료용 인공 기관(prosthetics)의 표면상의 단백질 흡착의 감소에 관한 것이다.

Description

Ｎ-이소프로필아크릴아미드를 포함하는 조성물 및 표면상에 단백질 흡착을 억제하기 위한 방법{COMPOSITIONS COMPRISING N-ISOPROPYLACRYLAMIDE AND METHODS FOR INHIBITING PROTEIN ADSORPTION ON SURFACES}

본 발명은 표면상의 단백질 침착의 감소에 관한 것이다. 본 발명은 의료 용구, 특히 생체의학 및 인공 기관 용구의 표면상의 단백질의 침착을 억제하기 위한 조성물 및 방법을 제공한다. 본 발명은 단량체 n-이소프로필아크릴아미드(NIPAM)을 포함하는 특정한 중합체 및 이와 관련된 공중합체가 콘택트 렌즈의 표면상의 단백질 침착을 현저하게 억제시킨다는 발견을 기초로 한다.

단백질은 거의 모든 표면에 흡착되고 단백질 흡착의 최소화 또는 제거는 문헌 [Lee, et al., in J. Biomed. Materials Res., vol. 23, pages 351-368(1989)]로 공표된 바와 같이 수많은 연구의 주제였다. 센서, 크로마토그래피 서포트(chromatographic support), 면역 분석법, 단리를 위한 막, 생체의학적 임플란트(implant), 인공 기관 용구(예컨대, 콘택트 렌즈) 및 많은 기타 용구 또는 사물이 단백질 흡착에 의해 불리하게 영향을 받을 수 있다. 그러므로, 단백질 침착물을 예방하거나 감소시키기 위한 이러한 사물의 표면을 처리하기 위한 방법 및/또는 수단이 매우 유리할 것이다.

표면을 변형시키고 유리 및 실리콘 기면상의 단백질 침착물을 조정하기 위한 NIPAM 함유 중합체의 용도는 이전에 기재되어 왔다. 하기의 간행물은 이러한 변형에 관한 추가의 예비 지식을 제공한다:

1. 문헌 [Kidoki, et al., Langmuir, 17, pp. 2402-2407(2001]

2. 문헌 [Bohanon, et al., J. Biomater. Sci. Polymer Edn., Vol. 8, No. 1, pp.19-39(1996)]

3. 문헌 [International(PCT) Patent Publication No. WO 02/30571 A2(Sudor);

4. 미국 특허 제 6,447,897호(Liang, et al.);

5. 미국 특허 제 6,270,903호(Feng, et al.); 및

6. 문헌 [Huber, et al., Science, Vol. 301, pp.352-354, July 18, 2003].

상기 확인된 간행물은 NIPAM 함유 중합체가 콘택트 렌즈와 같은 의료용 용구의 표면을 변형시키고, 단백질 침착을 조정하고 이러한 표면상에서 방출시키는데 사용될 수 있음을 기술하거나 암시하지 않는다.

콘택트 렌즈에 대한 용어 "소프트" 및 "하드"는 일반적으로 렌즈의 각각의 유형의 상대적 경도뿐만 아니라 렌즈가 형성되는 중합체의 유형과도 관련이 있다. 용어 "소프트"는 일반적으로 히드록시에틸 메타크릴레이트(또는 "HEMA")와 같은 친수성 중합체 물질로부터 형성되는 콘택트 렌즈를 의미하는 반면, 용어 "하드"는 일반적으로 폴리메틸메타크릴레이트(또는 "PMMA")와 같은 소수성 중합체 물질로부터 형성되는 콘택트 렌즈를 의미한다. 소프트 렌즈는 통상적으로 많은 양의 물을 함유하고, 매우 다공성이고, 렌즈의 노출된 표면상에 이온 전하를 지니는 반면, 하드 렌즈는 상당히 덜 다공성이고 일반적으로 표면 이온 전하를 지니지 않는다.

소프트 콘택트 렌즈의 이온성 표면 및 다공성 특성은 렌즈가 눈물막과 접촉하게 되는 경우 주로 단백질, 지질, 효소 및 다양한 전해질로 구성된 눈물막의 복잡한 조성으로 인해 중대한 문제를 일으킬 수 있다. 눈물의 성분은 알부민, 락토페린, 라이소자임 및 많은 면역글로불린을 포함한다. 눈물 유체로부터 렌즈로의 단백질의 흡수는 통상적인 문제이고 렌즈가 제조되는 물질의 특성을 포함하여 많은 요인에 좌우된다.

소프트 콘택트 렌즈는 단백질 침착 및 흡착에 대한 효과적인 기질로서 작용한다. 이러한 오염은 렌즈를 탈수시키고 눈물막을 불안정하게 하여, 착용자가 불편해하고 견디지 못하게 할 수 있다. 단백질의 흡착은 또한 박테리아의 군집형성을 촉진할 수 있고, 이는 시력을 위협하는 감염의 위험을 증가시킬 수 있다.

상기에서 논의한 바와 같이, 콘택트 렌즈의 잠재적 오염 및 이러한 오염에 의해 발생하는 문제의 견지에서, 콘택트 렌즈 세정이 환자의 렌즈 관리 방법의 정기적인 일부가 되어야 함이 일반적으로 받아들여진다. 많은 다양한 유형의 세정제가 이러한 목적을 위해 종래에 사용되어 왔다. 계면활성제와 같은 세정제 및 효소는 통상적으로 단백질 침착물을 제거하기 위해 콘택트 렌즈 관리 제품으로 통합되었다. 그러나, 이러한 작용제의 사용은 자극을 일으킬 수 있고, 마찰 및 세정 방법이 필요한 경우, 세정제가 적절하게 사용되지 않거나 렌즈가 손상되는 방식으로 사용될 가능성이 있다. 전술한 문제의 견지에서, 콘택트 렌즈의 표면이 표면에 대해 단백질의 흡착을 예방하거나 감소시키기 위해 변형될 수 있는 경우 유리해질 것이다.

콘택트 렌즈상의 단백질 침착물 형성을 감소시키기 위해 다양한 시도가 수행되어 왔다. 하기의 특허는 이러한 시도에 관한 추가의 예비 지식을 위해 인용될 수 있다:

미국 특허 제 4,411,932호에는 콘택트 렌즈상의 오손 침착물에 대한 예방제로서 폴리(에틸렌 글리콜), 폴리에틸렌 옥시드 및 폴리에틸렌 글리콜 메틸 에테르를 포함하는 중합체 알코올 및 중합체 에테르의 용도가 기재되어 있다.

미국 특허 제 6,274,133호(Hu et al.)에는 실리콘 하이드로겔 렌즈상의 지질 및 단백질의 형성을 예방하기 위한 양이온성 셀룰로오스 중합체의 용도가 기재되어 있다.

미국 특허 제 6,323,165호(Heiler, et al.)에는 친수성 콘택트 렌즈에 대한 단백질의 결합을 방지하기 위한 하전된 폴리쿼터니움 중합체의 용도가 기재되어 있다.

미국 특허 제 6,096,138호(Heiler, et al.)에는 렌즈에 대해 단백질성 물질의 결합을 방지하기 위해, 친수성 콘택트 렌즈 물질과 결합할 수 있는 비닐피롤리돈 및 비닐이미다졸리움 잔기의 혼합물인 Luviquat^®(BASF)와 같은 폴리쿼터니움 중합체의 용도가 기재되어 있다.

단백질 결합을 감소시키기 위한 종래의 시도는 결점을 지녔다. 예를들어, 양이온성 중합체는 고농도로 사용되는 경우 안구와의 접촉시에 자극제로 작용할 수 있다. 또한, 이들 거대분자의 양성의 전하 특성으로 인해, CLC 제품중의 음이온성 계면활성제 또는 기타 성분과의 복합체의 형성이 제형내에서 중대한 문제인 응집 및 상 분리를 유도할 수 있다. 따라서, 단백질 저항 표면을 제공하기 위한 새로운 접근법이 필요하다.

렌즈를 오래 착용하는 경향으로 인해, 콘택트 렌즈 착용자에게 오랜 기간 동안 환자의 안전에 영향을 주지 않으면서 단백질성 물질의 흡착을 억제하는 콘택트 렌즈 표면을 제공할 수 있는 것이 유용할 것이다. 중합체는 또한 환자가 보관, 살균 및/또는 세정을 원하는 경우에 콘택트 렌즈 관리 용액과 양립되어야 한다. 본 발명은 이러한 필요성을 만족시키는 것에 관한 것이다.

발명의 개요

본 발명은 수용액 내에서 표면 활성이고 온도 반응을 나타내는 중합체의 용도에 관한 것이다. 이러한 중합체 및 이와 관련된 중합체(예컨대, 공중합체)는 N-이소프로필아크릴아미드("NIPAM") 단량체로부터 형성된다.

본 발명은 NIPAM 중합체 및 이와 관련된 중합체가 하이드로겔 콘택트 렌즈의 표면상의 단백질 침착을 억제하기 위해 사용될 수 있다는 발견을 기초로 한다. NIPAM 중합체는 독특한 용액 특성을 제공하고, 단백질 저항 하이드로겔 표면이 요구되는 경우 제형내에서 이러한 특성들이 적용될 수 있음을 발견했다.

상기 논의된 바와 같이, 콘택트 렌즈의 표면상의 단백질 흡착을 변경하기 위한 개선된 접근법이 필요하다. 본 발명은 본원에 기재된 NIPAM 중합체가 이러한 목적에 독특하게 적합하다는 발견을 기초로 한다.

본원에 기재된 NIPAM 중합체는 콘택트 렌즈 표면 및 기타 의료 용구의 표면의 변형을 이루기 위해 다양한 방식으로 적용될 수 있다. 예를들어, 콘택트 렌즈는 착용되기 전에 NIPAM 중합체를 함유하는 용액내에 보관될 수 있다. 이러한 예방적 접근법은 소비자가 단백질을 함유하는 눈물막에 렌즈를 노출시키기 전에 중합체가 렌즈의 표면상의 보호막을 형성하도록 한다. NIPAM 중합체는 또한 날마다 콘택트 렌즈를 처리하기 위한 다목적 용액에 통합될 수 있다. NIPAM 중합체의 영구적 코팅을 형성하기 위한 표면상의 화학적 그래프팅(grafting)은 단백질 저항 표면을 제조하기 위한 또 다른 방법이다.

콘택트 렌즈 이외에, 본원에 기재된 표면 변형 기술은 안내 렌즈, 카테터, 심장 스텐트(stent), 인공 기관 및 인간 또는 기타 동물의 신체내 또는 신체상의 사용 동안 단백질에 오래 노출되는 기타 의료 용구와 같이 단백질 저항 표면이 필요한 다양한 의료 용구에 적용될 수 있다.

이론으로 한정시키고자 하는 것은 아니지만, 본원에 기재된 NIPAM 중합체는 이들 중합체가 우수한 단백질 억제성을 나타내도록 하는 일정한 범위의 고유의 물리적 특성(예컨대, 낮은 계면 자유에너지, 친수성-소수성 특성, 매우 낮은 독성, 동적 표면 이동도 및 입체 안정화)을 지닌다.

도 1은 실시예 1에 기재된 테스트의 결과를 나타내는 그래프이고,

도 2는 실시예 3에 기재된 테스트의 결과를 나타내는 그래프이다.

본 발명에 사용되는 NIPAM 중합체는 하기의 화학식을 지닌다:

상기 식에서, n은 10 내지 3,000의 정수이다.

본 발명에서 사용되는 NIPAM 중합체는 상기 기재된 단량체를 포함하는 다양한 유형의 중합체를 포함한다. 이러한 중합체는 전적으로 상기에서 확인된 NIPAM 단량체로부터 형성되거나, NIPAM 단량체를 아크릴산, 아크릴아미드, N-아세틸아크릴아미드, N,N-디메틸아크릴아미드 및 부틸 메타크릴레이트와 같은 기타 단량체와 공중합시킴으로써 중합체에 기타 단량체가 혼입될 수 있다. 게다가, NIPAM 단량체를 함유하는 변형된 중합체 또는 공중합체는 말단기의 기능화, 블록 공중합체의 제조 및 중합체의 가교에 의해 제조될 수 있다. 이러한 모든 중합체, 공중합체 또는 이들의 변형체는 본원에서 "NIPAM 중합체" 또는 "PNIPAM"으로 언급된다. 본 발명에서 사용되는 NIPAM 중합체는 통상적으로 1,000 내지 300,000 달톤의 분자량을 지닐 것이다. 중합체는 폴리머 소스 인코포레이티드(Polymer Source, Inc., Dorval, Quebec, Canada)에서 시판된다.

본 발명의 조성물 내에서 사용되는 PNIPAM의 양은 조성물의 형태 및 이의 사용 의도에 따라 다양하게 좌우될 것이다. 사용되는 PNIPAM의 농도는 일반적으로 실온(23℃)에서 미터 당 50 밀리뉴턴("mNm^-1") 미만의 액체 표면 장력을 수득하기에 충분한 양이 될 것이다.

상기 기재된 NIPAM 중합체는 표면 활성이고, 따라서 대부분 유형의 표면에 쉽게 흡착될 것이다. 표면의 유형(소수성 대 친수성), 온도, 완충제 및 부형제와 같은 요인은 중합체와 표면 사이의 상호작용 및 상호작용의 크기에 영향을 줄 것이다.

상기 기재된 PNIPAM 중합체는 레올로지(rheology) 개질제, 효소, 항균제, 계면활성제, 킬레이트화제 또는 이들의 조합물과 같은 콘택트 렌즈를 처리하기 위한 제품내에서 통상적으로 사용되는 기타 성분과 혼합될 수 있다. 바람직한 계면활성제는 RLM 100과 같은 음이온성 계면활성제, 상표명 "테트로닉(Tetronic^®)"으로 시판되는 폴록사민 및 상표명 "플루로닉(Pluronic^®)"으로 시판되는 폴록사머와 같은 비이온성 계면활성제를 포함한다. 더욱이, 붕산나트륨, 붕산, 시트르산 나트륨, 시트르산, 중탄산 나트륨, 인산염 완충제 및 이들의 조합물과 같은 다양한 완충제가 첨가될 수 있다.

CLC 제품으로 사용하기 위한 본 발명의 조성물은 조성물의 미생물 오염을 예방하기에 유효한 양("본원에서 "보존에 유효한 양"으로 언급됨) 또는 렌즈상에 존재하는 살아있는 미생물의 수를 실질적으로 감소시킴으로써 콘택트 렌즈를 소독시키기에 유효한 양(본원에서 "소독시키기에 유효한 양"으로 언급됨)으로 하나 이상의 안과적으로 허용되는 항균제을 함유할 수 있다.

안과용 조성물을 미생물 오염으로부터 보존하거나 콘택트 렌즈를 소독시키는데 필요한 항균 활성의 수준은 당업자에게 널리 공지되어 있고, 개인적 경험 및 미국 약전("USP")에 기술된 바와 같은 공지된 표준 및 기타 국가의 유사한 간행물 둘 모두를 기초로 한다.

본 발명은 사용될 수 있는 항균제의 유형에 관해 제한적이지 않다. 사용될 수 있는 항균제의 예는 공동 계류중인 미국 출원번호 제 09/581,952호 및 대응 국제(PCT)특허출원공개 WO 99/32158에 기재된 클로르헥시딘, 폴리헥사메틸렌 비구아니드 폴리머("PHMB"), 폴리쿼터니움-1 및 아미노 비구아니드를 포함하고, 이들 문헌의 전체 내용은 본 명세서에 대한 참조로서 본원에 통합된다.

바람직한 항균제는 미국 출원번호 제 09/581,952호 및 대응 국제(PCT)특허출원공개 WO 99/32158에 기재된 유형의 폴리쿼터니움-1 및 아미노 비구아니드이다. 가장 바람직한 아미노 비구아니드는 미국 특허 출원번호 제 09/581,952호에 "화합물 번호 1"로 확인된다. 이는 하기의 구조를 지닌다:

이는 코드 넘버 "AL-8496"으로 하기에 언급된다.

본 발명의 안과용 조성물은 일반적으로 멸균 수용액으로 제형화될 것이다. 조성물은 안 조직 및 콘택트 렌즈 물질과 양립할 수 있도록 제형화되어야 한다. 이러한 조성물은 일반적으로 물 킬로그램 당 약 200 내지 약 400 밀리오스몰("mOsm/㎏")의 삼투몰 농도 및 생리적으로 양립가능한 pH를 지닐 것이다.

본 발명의 조성물 및 콘택트 렌즈상의 단백질 흡착을 감소시키기 위한 이들 조성물의 능력은 하기의 실시예에서 추가로 예시된다. 변형되지 않은(즉, 비이온성) NIPAM 중합체 및 변형된(즉, -COOH기로 말단이 종결된) NIPAM 중합체는 콘택트 렌즈를 처리하기 위한 완충 다목적 용액의 성분으로 사용되는 경우 단백질 흡착을 감소시키기 위한 이들 중합체의 능력을 입증하기 위해 완충 용액에 적절하게 첨가된다. PNIPAM 변형 표면을 생성하기 위한 간단한 방법이 소비자에 의해 통상적으로 사용되는 콘택트 렌즈 소독/세정 방법을 의태하기 위해 사용된다.

실시예 1

하기에 기재된 테스트는 콘택트 렌즈 표면을 변형시키고 이로 인해 단백질 흡착의 감소시키기 위한 NIPAM 중합체의 능력을 평가하기 위해 수행했다.

재료/방법

평가에 사용한 재료 및 방법은 하기와 같다:

화학물질

라이소자임(Sigma, 계란 흰자, 등급 1, 3x 결정상), 트리플루오로아세트산 무수물(Sigma, 단백질 서열화 등급), 아세토니트릴(EM Science, HPLC 등급), 제1인산나트륨(모노하이드레이트)(Sigma, ACS 시약 등급), 제2인산나트륨(무수)(Sigma, ACS 시약 등급), 염화나트륨(Sigma, 초순수 등급), Unisol^®4(Alcon Laboratories, Inc., 세정을 위한 무보존제 pH-균형 염수 용액)

사용된 NIPAM 중합체는 하기의 표 1에서 확인된다. 이들 중합체는 폴리머 소스 인코포레이티드(Polymer Source, Inc.)에서 구입했고 추가의 정제 없이 사용했다.

표 1

렌즈

본 연구내의 기질로서 아큐브(Vistakon, a division of Johnson & Johnson Vision Products, Inc) 렌즈를 사용했다. 이러한 렌즈는 42%의 에타필콘 A(etafilcon A), 58%의 물, FDA 그룹Ⅳ 렌즈, 14.0㎜의 직경, 8.8㎜의 기저곡선, -2.00의 배율의 파라미터를 지녔다.

제형

표 1에서 확인된 NIPAM 및 NIPAM-COOH 중합체는 1.5%의 소르비톨, 0.6%의 붕산 및 0.32%의 NaCl을 함유하는 완충 비히클내의 pH 7.8에서 제형화했다. 비이커내에서, NIPAM 중합체를 제외한 모든 제형 화학물질의 무게를 달고 정제된 물을 첨가(95%가 되도록 충분한 양)했다. NaOH/HCl로 pH가 7.8이 되도록 조정했다. NIPAM 중합체의 무게를 달고 완충 용액에 첨가하고 중합체가 용해되도록 밤새 교반시켰다. 테스트 제형을 하기의 표 2에 나타냈고, 농도는 중량/부피 퍼센트("w/v%")로 나타냈다:

표 2

테스트 제형을 하기에 기재된 바와 같이 모델 단백질로서 라이소자임을 사용하여 이의 예방 작용에 대해 평가했다.

침착 용액의 제조

인산염 완충 식염수(PBS) - 1.311 g의 제1인산나트륨(모노하이드레이트), 5.74 g의 제2인산나트륨(무수) 및 9.0 g의 염화나트륨을 탈이온수에 용해시키고, 탈이온수로 부피를 1000 ㎖로 만들고 pH를 조정(필요시)했다. 인산나트륨 및 염화나트륨의 최종 농도는 각각 0.05 M 및 0.9%였다. 최종 pH는 7.4였다.

라이소자임 용액

pH가 7.4로 조정된 500 ㎖의 인산염 완충 식염수중에 750㎎의 라이소자임을 용해시킴으로써 1.5 ㎎/㎖의 라이소자임 용액을 제조하였다.

렌즈 추출 용액(ACN/TFA)

1.0 ㎖의 트리플루오로아세트산을 500 ㎖의 아세토니트릴 및 500 ㎖의 탈이온수와 혼합시킴으로써 렌즈 추출 용액을 제조하였다. 용액의 pH는 1.5 내지 2.0이었다.

렌즈 예비침지 과정

각각의 렌즈를 3 ㎖의 각각의 테스트 제형에 침지시키고 밤새 실온에서 그대로 두었다. 다음 아침에, 렌즈를 테스트 제형으로부터 꺼내어 타월상에 가볍게 두드렸다.

렌즈 침착 과정(생리적 침착 모델)

각각의 예비침지된 렌즈를 3 ㎖의 라이소자임 용액을 함유하는 휘턴 글래스 샘플 바이얼(Wheaton glass sample vial)내에 침지시켰다. 바이얼을 플라스틱 스냅 캡(snap cap)으로 폐쇄시키고 37℃에서 24시간 동안 항온 수욕내에서 인큐베이션시켰다. 침착된 라이소자임의 전체 양을 평가하기 위한 대조군으로 세개의 추가적 렌즈를 포함시켰다. 인큐베이션 후, 침착된 렌즈를 바이얼로부터 꺼내어 임의의 과량의 침착 용액을 제거하기 위해 200 ㎖의 Unisol^®4 또는 물을 함유하는 세개의 연속적인 비커로 침지시킴으로써 헹궜다.

추출 및 라이소자임 추출의 측정

렌즈를 스크류-캡핑된(screw-capped) 글래스 신틸레이션 바이얼내의 5㎖의 ACN/TFA 추출 용액으로 추출하였다. 추출은 2시간 이상(보통 하룻밤)동안 실온에서 회전식 진탕기(Red Rotor)로 바이얼을 진탕시켜 수행하였다.

라이소자임의 측정을 위한 계산

렌즈 추출물의 라이소자임의 정량적 측정은 오토샘플러(autosampler) 및 컴퓨터가 인터페이스로 연결된 형광 분광계로 수행하였다. 각 샘플 용액으로부터의 2㎖의 분취물(aliquot)의 형광 강도를 여기/발광 파장을 280 ㎚/346 ㎚로 세팅하고 여기/발광 슬릿을 각각 2.5 ㎚/10 ㎚로 하여 측정했고, 광전자증배기(photomultiplier)의 감도는 950 볼트로 세팅하였다.

렌즈 추출을 위한 ACN/TFA 추출 용액 및 침지액(soaking solution)을 위한 비히클을 사용하여 라이소자임 스톡 용액을 0 내지 40㎍/㎖의 범위의 농도로 희석시킴으로써 라이소자임 표준 곡선을 확립하였다. 형광 강도를 측정하기 위한 기계적 세팅은 렌즈 추출액 및 렌즈 침지액과 동일하게 하였다.

모든 샘플에 대한 라이소자임 농도는 직선의 라이소자임 표준 곡선으로부터 발생되는 기울기를 기초하여 계산하였다. 각 제형의 예방 %는 대조군 렌즈(전체 침착물)의 라이소자임의 양에서 렌즈 추출액 내의 라이소자임의 양을 감한 후, 전체 침착물로 나누고 100을 곱하여 계산하였다.

결과

도 1은 각각 46,380, 71,600 및 122,000의 분자량을 지니는 비이온성 NIPAM 중합체에 대한 PNIPAM 농도(g / 100 ㎖)의 함수로서 예방 %를 나타낸다.

도 1은 정의된 중합체 농도를 사용한 예방 %상에서 현저한 PNIPAM 분자량 의존도가 없음을 나타낸다. 0.2 g / 100 ㎖ 이하의 PNIPAM 농도는 약 30%의 예방 % 결과를 발생시켰다. 0.4 g / 100 ㎖ 내지 0.65 g / 100 ㎖의 중합체 농도를 사용하여 상기의 0.2 g / 100 ㎖ 보다 PNIPAM 농도를 증가시킴에 따라 예방 %는 50 % 내지 60 %로 증가될 수 있었다. 예방 %는 NIPAM 중합체의 분자량에 좌우되지 않는다.

실시예 2

NIPAM 중합체의 예방 특성을 3-일 주기 연구를 사용하여 추가로 평가했다. 두 세트의 렌즈를 준비했다. 한 세트는 라이소자임 용액에 적용시키기 전에 표 2에 나타낸 제형내에서 예비침지시키는 반면, 나머지 한 세트는 예비침지시키지 않았다. 이후 두 세트의 렌즈를 8시간(1일) 동안 라이소자임 용액에 넣었다. 하루의 종결에서, 모든 렌즈를 헹구고 밤새 침지시키기 위해 렌즈의 각각의 제형에 넣었다. 하루 후(2일)에, 렌즈를 다시 낮시간(8시간) 동안 라이소자임에 넣었다. 이를 완전한 3 주기(3일)로 반복했다. 실험의 종결에서, 모든 렌즈를 실시예 1에 기재된 과정에 따라 분석했다. 결과를 하기의 표 3에 나타냈다.

표 3

결과는 NIPAM 중합체(즉, P2991-NIPAM)를 함유하는 완충 용액이 예비침지 및 예비침지되지 않은 렌즈 둘 모두에서의 단백질 흡수의 감소에 있어서 효과적임을 입증한다. 예를들어, NIPAM 중합체를 0.034 % 및 0.017 %의 농도로 함유하는 용액으로 처리한 예비침지 렌즈는 각각 67.8 % 및 60.8 %의 예방값임을 입증했다. 예비침지되지 않은 렌즈의 경우, 예방값은 0.034 % 및 0.017 %의 농도에서 각각 45.9 % 및 41.9 %였다.

표 3에 기재된 결과는 단백질 노출 전의 렌즈의 NIPAM 중합체 용액 처리가 바람직하다는 것을 입증한다. 그러나, 결과는 또한 렌즈가 NIPAM 중합체 용액으로 최초 처리되기 전에 단백질에 이미 노출되는 경우에도, 렌즈가 이후에 NIPAM 중합체 용액으로 처리되면 단백질 흡수가 감소된다는 것을 나타낸다. 따라서, 본 연구의 결과는 본 발명의 조성물이 렌즈가 단백질 오염에 반복적으로 노출되는 경우에도 콘택트 렌즈상의 단백질 침착물 형성의 감소에 있어서 효과적인 것을 확증했다.

실시예 3

예방 연구를 변형되지 않은 NIPAM(비이온성) 및 변형된 NIPAM(COOH로 말단 작용기화됨) 중합체와 함께 항균제 AL-8496을 함유하는 제형으로 확장하였다. 평가된 제형을 하기의 표 4에 나타냈다:

표 4

콘택트 렌즈 소독제(AL-8496)를 함유하는 PNIPAM 제형의 미생물학적 평가를 위한 제형

사용된 방법은 실시예 1에 기재된 바와 동일하였다. 도 2는 각각 PNIPAM 제형내에서 예비침지된 렌즈로 밤새 침지된 모델을 사용하여 수득된 예방 데이터를 나타낸다.

도 2는 NIPAM 중합체의 예방 특성이 항균제 AL-8496 및 세정 성분(예컨대, 시트레이트 및 테트로닉^®1304)을 포함하는 기타 제형 성분의 존재하에서 유지됨을 나타낸다. 데이터는 변형되지 않은 NIPAM 및 변형된 NIPAM 중합체 둘 모두가 중합체의 예방 특성의 약화 없이 다목적 콘택트 렌즈 관리 제형에 혼입될 수 있음을 입증한다.

실시예 4

상기 표 4에 나타낸 제형의 살균 활성을 또한 평가했다. 결과를 하기의 표 5에 나타냈다.

표 5

AL-8496을 함유하는 PNIPAM 제형의 소독 특성

결과는 NIPAM 중합체가 항균제 AL-8496의 항균 활성에 불리하게 영향을 주지 않음을 입증한다.

실시예 5

PNIPAM의 예방 특성을 두 개의 널리 공지된 블록 공중합체인 테트로닉^®1107 및 플루로닉^®F127와 비교하기 위해 다양한 제형을 평가했다. 제형 성분 및 예방 결과를 하기의 표 6에 나타냈다.

실시예 1에 개괄된 바와 동일한 방법을 사용하여 평가를 수행했다. 대조군(10581-85J)으로 사용된 완충 용액은 어떠한 예방 특성도 나타내지 않았다. 그러나, 표 6에 나타난 바와 같이, 0.2 %(10581-85B) 및 0.4 %(10581-85C)의 농도로 PNIPAM을 함유하는 본 발명의 조성물은 각각 56.2 % 및 63 %의 예방 결과를 생성시켰다.

대조적으로, 0.8 % 이하의 농도로 테트로닉^®1107 및 플루로닉^®F127 블록 공중합체를 함유하는 용액은 어떠한 현저한 예방을 생성시키지 않았다.

표 6

Claims (4)

1. 의료 용구의 표면상의 단백질 흡착을 감소시키기 위한 NIPAM 중합체의 용도.
2. 콘택트 렌즈의 표면상의 단백질 흡착을 감소시키기 위한 NIPAM 중합체의 용도.
3. NIPAM 중합체를 유효한 양으로 포함하는, 의료 용구의 표면상의 단백질 침착물의 형성을 감소시키기 위한 조성물.
4. 제 3 항에 있어서, 조성물이 콘택트 렌즈의 처리에 적용됨을 특징으로 하는 조성물.