KR20050086863A

KR20050086863A - 안정화된 안트라사이클린계 화합물의 동결 건조 제제

Info

Publication number: KR20050086863A
Application number: KR1020057009501A
Authority: KR
Inventors: 하지무 히로후지; 호타카 하시모토
Original assignee: 스미또모 세이야꾸 가부시키가이샤
Priority date: 2002-11-29
Filing date: 2003-11-27
Publication date: 2005-08-30
Also published as: US8445653B2; JP4594736B2; JPWO2004050098A1; EP1570849A1; CA2509449C; CN101926780B; EP1570849A4; TW200507859A; CA2509449A1; US20060003949A1; CN101926780A; TWI311484B; AU2003284478A1; US20110021452A1; KR101059715B1; CN1741804A; WO2004050098A1

Abstract

암루비신의 동결 건조 제제이고, L-시스테인 또는 그 염을 함유하며, 또한 제제 중의 수분이 0∼약 4중량%인, 장기 보존시에도 안정된 동결 건조 제제, 및 당해 제제의 제조방법을 제공한다. 당해 제제는 암 화학 요법제로서 유용하다.

Description

안정화된 안트라사이클린계 화합물의 동결 건조 제제{FREEZE-DRIED PREPARATION OF STABILIZED ANTHRACYCLINE COMPOUND}

본 발명은, 암 화학 요법제로서 유용한 암루비신 또는 그 염의 안정화된 제제에 관한 것이다.

하기 식(1) :

로 표시되는 (7S, 9S)-9-아세틸-9-아미노-7-[(2-데옥시-β-D-에리스로-펜토피라노실)옥시]-7,8,9,10-테트라히드로-6,11-디히드록시-5,12-나프타센디온 (이하, 암루비신이라 칭한다) 및 그 염은, 암 화학 요법제로서 유용한 것으로 알려져 있다 (예를 들어 일본 특허공보 평3-5397호 (대응 미국 특허 4,673,668호)참조). 이러한 암루비신의 히드로클로라이드에는 여러 종류의 결정형이 있지만, 그 중 이의 특정한 결정이 열안정성이 우수한 것도 알려져 있다 (예를 들어 일본 특허 제2975018호 (대응 미국 특허 4,952,566호) 참조).

암루비신 등의 안트라사이클린계 화합물은 용액 중에서 불안정하지만, 이와 같은 화합물을 주사제로서 제제화하는 경우에는, 보통 분말 또는 용해시켜 사용하는 동결 건조물의 형태로 제제화한다.

암루비신의 안정화된 제제로서, L-시스테인 또는 그 염을 함유하는 제제가 알려져 있다 (예를 들어 일본 특허 제2603480호 (대응 미국 특허 6,376,469호)참조).

도 1 은 여러가지 양의 수분을 함유하는 암루비신 동결 건조 제제를 40℃ 에서의 안정성 시험 (실험예 2 및 3) 에 사용했을 때의, 분해 생성물의 하나인 탈당 화합물 (2)의 생성량을 나타낸다. 가로축은 경과시간/월을 나타내고 있다. 각각의 꺾임선은 각각 이하의 제제의 데이터를 나타낸다.

● : 실험예 2 의 수분 첨가 제제 B (개시시 수분=5.0%)

○ : 실험예 2 의 수분 첨가 제제 A (개시시 수분=3.5%)

△ : 실험예 2 의 블랭크 (수분 무첨가 제제) (개시시 수분=1.3%)

× : 실시예 2 에서 얻어진 제제 (개시시 수분=0.7%)

◆ : 실시예 3 에서 얻어진 제제 (개시시 수분=0.6%)

발명을 실시하기 위한 최선의 형태

이하에 본 발명을 더욱 상세히 설명한다.

본 명세서에 있어서, 특별히 기재한 경우를 제외하고, 제제 중의「수분 함량」이란 동결 건조 분말 중량에 대한 중량% 를 나타낸다. 탈당 화합물 (2) 및 탈아미노 화합물 (3)의 함량은, 암루비신에 대한 중량% 를 나타낸다.

제제 중의 수분 함량은 0∼약 4중량%, 바람직하게는 0∼약 3.5중량%, 보다 바람직하게는 약 0.5∼약 3.5중량%, 더욱 바람직하게는 약 0.5∼약 2.0중량% 가 효과적이다.

암루비신의 염에 이용할 수 있는 산으로는 염산 외에 브롬화수소산, 시트르산, 타르타르산, 락트산, 푸마르산, 말레산, 메탄술폰산 등을 들 수 있다. 암루비신 히드로클로라이드의 경우에는, 보다 안정된 결정형인, β형 결정성 암루비신 히드로클로라이드 (분말 X선 회절도에 있어서 회절각 (2θ) : 6.3±0.3, 10.1±0.3, 20.3±0.3, 26.5±0.3 및 26.9±0.3도에 주피크를 나타내는 결정성 암루비신 히드로클로라이드 ; 특허 제2975018호) 을 사용하는 것이 보다 바람직하다. 분말 X선 회절패턴은, 리가쿠전기(주) 의 X선 회절장치 RINT2500V 에 의해 Cu·Kα의 1.541Å 를 사용하여 측정할 수 있다.

L-시스테인의 염으로는 통상적으로는 히드로클로라이드이 사용되고, 그 밖의 염으로서는 황산염 등을 들 수 있다. L-시스테인 또는 그 염은, 그 수화물 등의 용매 화합물이어도 된다. 예를 들어 바람직한 것으로서 L-시스테인히드로클로라이드1수화물을 들 수 있다.

L-시스테인 또는 그 염의 첨가량 및 첨가방법으로는 특별히 한정되지 않지만, 암루비신의 안정화도 또는 첨가물의 약리활성 등의 관계로부터, 예를 들어 암루비신 히드로클로라이드 100㎎ (력가) 에 대하여 약 0.5∼약 250㎎, 바람직하게는 약 3∼약 80㎎, 더욱 바람직하게는 약 3∼약 45㎎ 이 적당하다. 특히 바람직하게는, 암루비신 히드로클로라이드 100㎎ 력가에 대하여, L-시스테인을 약 5∼약 20㎎ 의 범위에서, 또는 그것에 상당하는 양의 L-시스테인염을 첨가하는 것이 적당하다. 여기서, 「그것에 상당하는 양의 L-시스테인염」이란 함유되는 L-시스테인의 양이 상기 정의된 L-시스테인의 양과 동량인 것을 나타낸다. 예를 들어, L-시스테인 121.2㎎ 에「상당하는 양의」 L-시스테인히드로클로라이드은 157.6㎎ 이고, 동일하게 「상당하는 양의」 L-시스테인히드로클로라이드1수화물은 175.6㎎ 이다. L-시스테인염으로서 L-시스테인히드로클로라이드1수화물을 사용하는 경우, 「약 5∼약 20㎎ 의 범위의 L-시스테인」에 상당하는 양이란 L-시스테인히드로클로라이드1수화물 약 7.2-약 29㎎ 이다.

pH 는 암루비신의 특성을 고려하면, pH 약 2∼약 5 의 사이에 조정되어 있는 것이 바람직하고, 보다 바람직하게는 pH 약 2.0∼약 3.5 의 부근이고, 더욱 바람직하게는 pH 약 2.2∼약 3.0, 특히 바람직하게는 pH 약 2.4∼약 3.0 의 범위를 들 수 있다. 이 경우에, pH 조절제로서 염기, 및/또는 산을 첨가해도 된다.

여기서, 본 발명에 있어서 pH 조절제로서 사용할 수 있는 염기로서는, 예를 들어 알칼리 금속 (예를 들어 나트륨, 칼륨 등) 의 수산화물, 알칼리토류 금속 (예를 들어 마그네슘, 칼슘 등) 의 수산화물, 약산의 알칼리금속염 등을 들 수 있다. 약산의 알칼리 금속염으로는 예를 들어, 탄산염, 탄산수소염, 인산염, 인산수소염, 인산2수소염, 시트르산염, 시트르산수소염, 시트르산2수소염 등을 들 수 있다. 이들은 수화물이어도 되고, 또한, 임의의 2개 또는 그 이상을 혼합하여 사용할 수도 있다.

pH 조절제로서 사용할 수 있는 염기의 구체예로서는 예를 들어 수산화나트륨, 수산화칼륨, 탄산나트륨, 탄산수소나트륨, 탄산칼륨, 탄산수소칼륨, 인산수소나트륨, 인산수소칼륨, 인산나트륨, 시트르산나트륨, 시트르산2수소나트륨, 수산화칼슘, 또는 이들의 수화물, 또한 이들의 혼합물 등을 들 수 있다. 바람직한 염기의 예로서는 수산화나트륨, 수산화칼륨, 탄산나트륨, 탄산수소나트륨, 탄산칼륨 등을 들 수 있다. 더욱 바람직하게는 수산화나트륨 또는 수산화칼륨을 들 수 있다.

본 발명에 있어서 pH 조절제로서 사용할 수 있는 산으로서는 예를 들어 염산, 황산 등을 들 수 있다.

본 발명의 동결 건조 제제에 있어서, 필요하면 통상의 제제성분으로서 첨가될 수 있는 부형제 등의 첨가물을 첨가해도 된다. 부형제로서는 예를 들어, 젖당, 자당, 파라티노오스, 포도당, 말토오스, 과당, 만니톨, 에리트리톨, 자일리톨, 말티톨, 이노시톨, 덱스트란, 소르비톨, 알부민 및 이들 혼합물 등을 들 수 있다. 바람직한 부형제로서는, 젖당, 자당, 포도당, 말토오스, 과당, 만니톨, 자일리톨, 이노시톨, 덱스트란 및 이들 혼합물 등을 들 수 있다. 더욱 바람직하게는, 젖당, 만니톨 및 이들의 혼합물을 들 수 있다.

동결 건조 제제의 제법은, 예를 들어 암루비신 또는 그 염, L-시스테인 또는그 염, 및 필요에 따라 부형제 등을 주사용 증류수에 용해하여, 미량의 염기 및/또는 산으로 수득된 용액의 pH 값을 조정한 후, 무균 여과한 액을 바이알병에 충전하여 동결 건조를 실시하여 분말 제제를 수득하는 것이다. 주사용으로, 상기 분말 제제는 이 상태로 보존되고,사용시 물에 용해되어 투여에 사용된다. 이 때, 용액상태에서의 분해를 억제하기 위해, 용해부터 동결 건조 직전까지의 공정은, 바람직하게는 약 15℃ 이하에서, 더욱 바람직하게는 약 10℃ 이하에서 실시하는 것이 바람직하다.

본 발명의 암루비신 또는 그 염을 함유하는 안정화된 동결 건조 제제는, 암 화학 요법제로서, 여러 가지의 암 질환의 치료에 사용할 수 있다. 치료대상이 되는 암은, 특별히 제한되지 않지만, 혈액암 및 고형암 등을 포함하는 암 질환을 들 수 있다. 인간의 치료에 사용하는 경우의 투여량으로서는, 정맥내투여의 경우, 예를 들어 인간의 체표면적 ㎡ 당 1일 5∼300㎎, 바람직하게는 20∼250㎎, 더욱 바람직하게는 35∼160㎎ 의 범위에서 연속 점적 투여하여 처치할 수 있다. 투여 스케줄로서는 예를 들어 단회 투여, 1일 1회 3일간 연일투여 등을 들 수 있다.

일방에서, 암루비신의 대표적인 분해 생성물로서, 하기 식 (2) :

로 표시되는 탈당 화합물 (이하, 탈당 화합물 (2) 라고 한다) 이나 하기 식(3) :

로 표시되는 탈아미노 화합물 (이하, 탈아미노 화합물 (3) 이라 한다)이 있고, 이들 분해 생성물은, 암루비신 제제의 제조공정이나 보존 과정에서 증가되는 경향이 관찰되었다. 의약품의 품질 보증이라는 관점에서, 장기에 걸쳐 이들 분해 생성물의 증가를 가능한 한 억제하는 것은 매우 중요하고, 암루비신 제제를 더욱 안정화하는 방법의 개발이 요망되고 있었다.

또, 암루비신 이외에도, 임상적으로 사용되고 있는 안트라사이클린계 항암제가 존재한다. 암루비신 이외의 시판되는 안트라사이클린계 항암제는, 이하에 나타내는 바와 같이, 안트라사이클린 핵의 9 위치에 수산기를 갖는 구조인 반면, 암루비신은 9 위치에 아미노기를 가져 암루비신과 다른 안트라사이클린 항암제과의 구조상의 상이함이 있다. 따라서, 분해 생성물로서 탈아미노 화합물 (3) 을 생성하는 것은 암루비신뿐이고, 이것이 다른 안트라사이클린계 항암제와의 안정성의 상이함과 밀접한 관계를 갖고 있다.

실제로, 일본 내에서 판매되고 있는 안트라사이클린계 항암제 (모두 주사용 제제)를 주사용액 또는 생리식염수에 용해하였을 때의 pH 는 이하와 같다 (일본의약정보센터편, 「의료약 일본의약품집 (제24판)」, 2001년 판).

아크라루비신 히드로클로라이드 5.0∼6.5

아이다루비신 히드로클로라이드 5.0∼7.0

에피루비신 히드로클로라이드 4.5∼6.0

다우노루비신 히드로클로라이드 5.0∼6.5

독소루비신 히드로클로라이드 5.0∼6.0

피라루비신 히드로클로라이드 5.0∼6.5

반대로, 암루비신 히드로클로라이드의 경우는, pH 3.5 이상에서 탈아미노 화합물 (3)의 생성이 증가되는 경향이어서, 상기 안트라사이클린계 항암제에서 보이는 높은 pH에서는 불안정하고, 임상투여용 암루비신 히드로클로라이드 동결 건조 제제를 생리식염수 또는 5% 포도당 주사액에 용해하였을 때의 pH 는 2.4∼3.0 이다.

즉, 다른 안트라사이클린계 항암제와 비교하여, 암루비신 히드로클로라이드의 안정된 pH는 산성측으로 기울어 있고, 안정된 pH 범위도 좁다. 이와 같이, 암루비신의 안정성이 다른 안트라사이클린계 항암제와 다르기 때문에, 암루비신 제제의 안정화방법의 개발에 있어서는, 다른 안트라사이클린계 항암제와는 다른, 암루비신 특유의 조건을 검토할 필요가 있다.

암루비신 제제의 안정화방법으로서, 전술한 바와 같이, 제제 중에 L-시스테인 또는 그 염을 첨가하는 방법이 알려져 있다. 이 방법에 의해, 탈아미노 화합물 (3) 의 생성은 억제할 수 있지만, 조건에 따라서는 탈당 화합물 (2) 의 생성이 증가되는 경우가 있었다.

암루비신 제제의 제품을 시장에 내놓기 위해, 산업적 제조방법을 실시하는 데에 있어서 검토할 필요가 생겼다. 그래서, 본 발명자들은 당해 L-시스테인 함유 암루비신 제제의 더한 안정화 방법에 관해서 예의검토를 계속한 결과, 놀랄만한 이하의 지견을 발견하고, 본 발명을 완성하였다.

(1) 암루비신 동결 건조 제제 중에 함유되는 수분이 탈당 화합물 (2) 의 생성에 크게 영향을 줘, 수분을 일정 범위내에 컨트롤하면, 탈당 화합물 (2) 의 생성이 억제되어, 장기보존시에도 안정된 동결 건조 제제가 얻어진다.

(2) 또한, 동결 건조 제제의 제조공정에 있어서, 용액상태에서의 공정의 온도가 분해 생성물 (주로 탈아미노 화합물(3))의 생성에 영향을 주어, 충분히 저온에서 당해 공정을 실시함으로써, 당해 공정에서의 그 분해 생성물의 생성이 억제되어, 결과적으로, 동결 건조 제제의 장기보존 후의 최종적인 분해 생성물 (탈당 화합물 (2) 및 탈아미노 화합물 (3))의 함유량을 억제할 수 있다.

즉, 본 발명은 이하와 같다.

[1] 암루비신 또는 그 염을 함유하는 동결 건조 제제이고, 이하의 특징을 갖는 안정화 제제 :

(1) L-시스테인 또는 그 염을 함유하고 ; 또한

(2) 제제 중의 수분 함량이 동결 건조 분말 중량에 대하여 0∼약 4중량% 이다.

[2] 제제 중의 수분 함량이 동결 건조 분말 중량에 대하여 0∼약 3.5중량% 인 항 [1]에 따른 안정화 제제.

[3] 제제 중의 수분 함량이 동결 건조 분말 중량에 대하여 약 0.5∼약 3.5중량% 인 항 [1]에 따른 안정화 제제.

[4] 제제 중의 수분 함량이 동결 건조 분말 중량에 대하여 약 0.5∼약 2.0중량% 인 항 [1]에 따른 안정화 제제.

[5] L-시스테인 또는 그 염의 함유량이, 암루비신 또는 그 염 100mg 력가(potency) 에 대하여 약 0.5∼약 250㎎ 인 항 [1]∼[4] 의 어느 하나에 따른 안정화 제제.

[6] L-시스테인 또는 그 염의 함유량이, 암루비신 또는 그 염 100㎎ 력가에 대하여 약 3∼약 45㎎ 인 항 [1]∼[4] 의 어느 하나에 따른 안정화 제제.

[7] 암루비신의 염이 그의 히드로클로라이드인 항 [1]∼[6] 의 어느 하나에 따른 안정화 제제.

[8] L-시스테인의 염이 그의 히드로클로라이드인 항 [1]∼[7] 의 어느 하나에 따른 안정화 제제.

[9] L-시스테인 또는 그 염이, 암루비신 히드로클로라이드 100mg 력가에 대하여, (1) 약 5∼약 20㎎ 범위의 L-시스테인, 또는 (2) 그것에 상당하는 양의 L-시스테인염인 항 [1]∼[8] 의 어느 하나에 따른 안정화 제제.

[10] 추가로 부형제를 함유하는, 항 [1]∼[9] 의 어느 하나에 따른 안정화 제제.

[11] 부형제가 젖당인, 항 [10] 에 따른 안정화 제제.

[12] 암루비신의 염이, 분말 X선 회절도에 있어서 회절각 (2θ):6.3±0.3, 10.1±0.3, 20.3±0.3, 26.5±0.3 및 26.9±0.3도에 주피크를 나타내는 결정성 암루비신 히드로클로라이드인 항 [1]∼[11] 의 어느 하나에 따른 안정화 제제.

[13] (a) 암루비신 또는 그 염, 및 (b) L-시스테인 또는 그 염을 함유하는 수용액을 제조하여, 그 수용액을 무균 여과하고, 다시 동결 건조하는 것을 포함하는, 항 [1]∼[12] 의 어느 하나에 따른 안정화 제제를 제조하는 방법.

[14] 하기 공정 (1)∼(4) 를 포함하는, 항 [1]∼[12] 의 어느 하나에 따른 안정화 제제의 제조방법 :

(1) (a) 암루비신 또는 그 염, 및 (b) L-시스테인 또는 그 염을 물에 용해하여 수용액을 제조하는 단계.

(2) (1) 의 수용액의 pH 를 약 2∼약 5 로 조정하는 단계.

(3) (2) 의 수용액을 무균 여과하는 단계.

(4) (3) 에서 얻어진 수용액을 동결 건조하는 단계.

[15] 암루비신의 염이 히드로클로라이드인 항 [14]에 따른 제조방법.

[16] L-시스테인의 염이 히드로클로라이드인 항 [14] 또는 [15]에 따른 제조방법.

[17] 공정(2) 에 있어서 pH 를 약 2.0∼약 3.5 로 조정하는, 항 [14]∼[16] 의 어느 하나에 따른 제조방법.

[18] 공정 (2) 에 있어서 pH 를 약 2.2∼약 3.0 으로 조정하는 항 [14]∼[16] 의 어느 하나에 따른 제조방법.

[19] 공정 (1) 내지 (3) 을 약 15℃ 이하에서 실시하는 것을 특징으로 하는 항 [14]∼[18] 의 어느 하나에 따른 제조방법.

[20] 공정 (1) 내지 (3) 을 약 10℃ 이하에서 실시하는 것을 특징으로 하는 항 [14]∼[18] 의 어느 하나에 따른 제조방법.

[21] 암루비신의 염이, 분말 X선 회절도에 있어서 회절각 (2θ) : 6.3±0.3, 10.1±0.3, 20.3±0.3, 26.5±0.3 및 26.9±0.3도에 주피크를 나타내는 결정성 암루비신 히드로클로라이드인, 항 [14]∼[20] 의 어느 하나에 따른 제조방법.

[22] 하기 공정 (1)∼(4) 를 포함하는, 암루비신의 안정된 동결 건조 제제의 제조방법 :

(1) 암루비신 히드로클로라이드, 암루비신 히드로클로라이드 100㎎ 력가에 대하여 약 5∼약 20㎎ 의 범위의 L-시스테인 (또는 그것에 상당하는 양의 L-시스테인염), 및 부형제를 함유하는 수용액을 제조하는 단계.

(2) (1) 의 수용액의 pH 를 약 2.0∼약 3.5 으로 조정하는 단계.

(3) (2) 의 수용액을 무균 여과하는 단계.

(4) (3) 에서 얻어진 수용액을 동결 건조하여, 제제 중의 수분이 동결 건조 분말 중량에 대하여 0∼약 4중량% 인 동결 건조 제제를 얻는 단계.

[23] 부형제가 젖당인, 항 [22] 에 따른 제조방법.

[24] 항 [1]∼[12] 의 어느 하나에 따른 안정화 제제를 함유하는 암 화학 요법제.

[25] 항 [13]∼[23] 의 어느 하나에 따른 제조방법에 의해 제조된 동결 건조 제제를 함유하는 암 화학 요법제.

이하에 실시예를 들어 본 발명을 설명하는데, 본 발명은 이들에 한정되는 것이 아니다. 또, 이하의 실시예, 실험예에 있어서는, 특허 제2975018호에 따른 방법에 의해 제조된 β형 결정성 암루비신 히드로클로라이드를 사용하였다.

동결 건조 제제의 수분 함량은, 동결 건조시의 진공도, 온도 및 건조시간 등의 조건에 따라 다르지만, 실험예, 실시예에 나타내는 바와 같이 이들을 조절함으로써 수분 함량을 조절할 수 있다.

실시예 1

암루비신 히드로클로라이드 20㎎ 력가에 대하여 L-시스테인히드로클로라이드1수화물 3.2㎎ 및 부형제로서 락토오스 (젖당) 50㎎ 을 첨가하고 생성물을 암루비신 히드로클로라이드의 농도가 5㎎/㎖ 가 되도록 주사용 증류수에 용해시켰다. 미량의 수산화나트륨 및 염산으로 pH 약 3 으로 미조정하여 무균 여과하여, 18㎖ 용량 바이알에 10㎖ 충전하였다. 이것을 동결 건조기에 넣어, 충분히 동결한 후, 온도와 진공도를 제어하면서 동결 건조 케이크가 융해되지 않도록 바이알 내의 수분을 20℃, 49시간으로 승화 및 건조시킨 후, 바이알을 고무마개 및 캡으로 봉하여 안정된 동결 건조 제제를 얻었다 (수분 함량 ; 0.9%).

실시예 2

암루비신 히드로클로라이드 20㎎ 력가에 대하여 L-시스테인히드로클로라이드1수화물 3.2㎎ 및 부형제로서 락토오스(젖당) 50㎎ 을 첨가하고 생성물을 암루비신 히드로클로라이드의 농도가 5㎎/㎖ 가 되도록 주사용 증류수에 용해시켰다. 미량의 수산화나트륨 및 염산으로 pH 약 3 으로 미조정하여 무균 여과하여, 18㎖ 용량 바이알에 4㎖ 충전하였다. 이것을 동결 건조기에 넣어, 충분히 동결한 후, 온도와 진공도를 제어하면서 동결 건조 케이크가 융해되지 않도록 바이알 내의 수분을 20℃, 24시간으로 승화 및 건조시킨 후 다시 40℃, 8시간 건조시켜, 바이알을 고무마개 및 캡으로 봉하여 안정된 동결 건조 제제를 얻었다. (수분 ; 0.7%)

실시예 3

암루비신 히드로클로라이드 20㎎ 력가에 대하여 L-시스테인히드로클로라이드1수화물 3.2㎎ 및 부형제로서 락토오스(젖당) 50㎎ 을 첨가하고 생성물을 암루비신 히드로클로라이드의 농도가 5㎎/㎖ 가 되도록 주사용 증류수에 용해시켰다. 미량의 수산화나트륨 및 염산으로 pH 약 3 으로 미조정하여 무균 여과하여, 18㎖ 용량 바이알에 10㎖ 충전하였다. 이것을 동결 건조기에 넣어, 충분히 동결한 후, 온도와 진공도를 제어하면서 동결 건조 케이크가 융해되지 않도록 바이알 내의 수분을 20℃, 37시간으로 승화 및 건조시킨 후 다시 40℃, 12시간 건조시켜, 바이알을 고무마개 및 캡으로 봉하여 안정된 동결 건조 제제를 얻었다. (수분 ; 0.6%)

실험예 1

암루비신 히드로클로라이드 20㎎ 력가에 대하여 L-시스테인히드로클로라이드1수화물 3.2㎎ 및 부형제로서 락토오스(젖당) 50㎎ 을 첨가하고, 생성물을 주사용 증류수에 용해하여, 미량의 수산화나트륨 및 염산으로 pH 약 3 으로 미조정하여 무균 여과하여, 18㎖ 용량바이알에 충전하였다. 이것을 동결 건조기에 넣어, 충분히 동결한 후, 온도와 진공도를 제어하면서 동결 건조 케이크가 융해되지 않도록 7시간에 걸쳐 수분을 승화 및 건조시킨 후, 고무마개를 하여 캡으로 봉하여 동결 건조 제제 A를 얻었다. 또한, 바이알 충전 및 동결까지 상기 서술한 것과 동일하게 실시한 후, 온도와 진공도를 제어하면서 동결 건조 케이크가 융해되지 않도록 34시간에 걸쳐 수분을 승화 및 충분히 건조시킨 후, 고무마개, 캡으로 봉한 동결 건조 제제 B 를 얻었다. 이 양 동결 건조 제제에 관해서 수분 (칼피셔(Karl Fischer)법에 의해 측정) 및 분해 생성물 (HPLC 법에 의해 측정) 에 관해서 측정한 결과를 표 1 에 나타낸다.

	동결 건조 제제 A	동결 건조 제제 B
동결 건조 조건	20℃, 20㎩, 7시간 건조	20℃, 20㎩, 15시간 건조 후 다시 20℃, 4㎩, 19시간 건조
수분	12.50%	0.74%
탈당 화합물(2)	0.25%	0.27%
탈아미노 화합물(3)	0.04%	0.04%

상기 데이터에 보이는 바와 같이 탈당 화합물(2) 나 탈아미노 화합물 (3) 등 분해 생성물의 생성량은 건조시간에 따라 변화하지 않지만 수분 함량은 건조시간에 따라 크게 다른 것이 확인되었다.

실험예 2

암루비신 히드로클로라이드 20㎎ 력가에 대하여 L-시스테인히드로클로라이드1수화물 3.2㎎ 및 부형제로서 락토오스(젖당) 50㎎ 을 첨가하고 생성물을 주사용 증류수에 용해시켰다. 미량의 수산화나트륨 및 염산으로 pH 약 3 으로 미조정하여 무균 여과하여, 18㎖ 용량 바이알에 충전하였다. 이것을 동결 건조기에 넣어, 충분히 동결한 후, 온도와 진공도를 제어하면서 동결 건조 케이크가 융해되지 않도록 수분을 승화시켜, 그 후 충분히 건조시킨 후, 고무마개를 캡으로 봉하여 동결 건조 제제를 얻었다 (수분 ; 1.3%, 탈당 화합물 (2) ; 0.63%, 탈아미노 화합물 (3) ; 0.12%). 얻어진 동결 건조 제제를, 각각, 약 3.5% (수분 첨가 제제 A) 및 약 5% (수분 첨가 제제 B) 의 수분이 되도록 조습 (수분 첨가) 한 후, 40℃-3개월, 6개월의 보존안정성시험을 하여, 수분 (컬피셔법에 의해 측정) 및 분해 생성물 (HPLC 법에 의해 측정) 을 측정한 결과를 표 2 에 나타낸다.

	평가항목	개시시	40℃-3개월	40℃-6개월
블랭크(수분 무첨가 제제)	수분	1.3	1.9	2.0
	탈당 화합물 (2)	0.63	2.62	4.57
	탈아미노 화합물 (3)	0.12	0.29	0.38
수분 첨가 제제 A	수분	3.5	3.4	3.7
	탈당 화합물 (2)	0.63	3.30	5.20
	탈아미노 화합물 (3)	0.12	0.24	0.28
수분 첨가 제제 B	수분	5.0	4.8	4.9
	탈당 화합물 (2)	0.63	10.7	16.9
	탈아미노 화합물 (3)	0.12	0.18	0.15

(단위 : %)

실험예 3

실시예 2 및 실시예 3 에서 얻어진 동결 건조 제제에 관해서, 40℃-3개월, 6개월의 보존안정성시험을 하여, 수분 (컬피셔법에 의해 측정) 및 분해 생성물 (HPLC 법에 의해 측정) 을 측정한 결과를 표 3 에 나타낸다.

	평가항목	개시시	40℃-3개월	40℃-6개월
실시예 2	수분	0.7	-	2.2
	탈당 화합물 (2)	0.37	2.36	3.73
	탈아미노 화합물 (3)	0.03	0.18	0.22
실시예 3	수분	0.6	-	1.4
	탈당 화합물 (2)	0.47	2.78	3.66
	탈아미노 화합물 (3)	0.03	0.18	0.22

실험예 2 및 실험예 3 의 결과를 합쳐서 도 1 및 도 2 에 도시하였다.

상기 안정성 데이터에 보이는 바와 같이 장기보존시의 탈당 화합물 (2) 의 생성량은, 안정성시험 개시시의 수분에 의존하고, 제제 중의 수분을 0∼약 4중량%의 범위내로 조절된 동결 건조 제제는, 수분이 많은 제제에 비교하여 현저한 안정성의 향상, 특히 탈당 화합물 (2) 생성의 억제가 관찰되고, 따라서 장기보존시에도 충분히 안정된 동결 건조 제제인 것이 확인되었다. 또한, 탈아미노 화합물 (3) 의 생성량에는 큰 차는 없지만, 수분이 적어지면 약간 증가되는 경향이 보였다.

실험예 4

유리 비커에 암루비신 히드로클로라이드 20㎎ 력가에 대하여 L-시스테인히드로클로라이드1수화물 3.2㎎ 및 부형제로서 락토오스(젖당) 50㎎ 을 첨가하고 생성물을 주사용 증류수에 용해시켰다. 미량의 수산화나트륨 및 염산으로 용액의 pH를 약 3 으로 미조정하였고, 생성 용액을 각각 5℃, 10℃, 15℃, 및 25℃ 의 항온조에 넣었다. 개시시, 6시간 경과후, 및 24시간 경과 후에 용액을 샘플링하여, HPLC 법에 의해 분해 생성물을 정량하였다. 탈당 화합물 (2) 및 탈아미노 화합물 (3) 의, 개시시에 대한 증가량을 표 4 에 나타낸다.

No.	용액온도	탈당 화합물 (2) 의 증가량/%			탈아미노 화합물 (3) 의 증가량/%
No.	용액온도	0시간	6시간	24시간	0시간	6시간	24시간
1	5℃	0.00	-0.01	0.02	0.00	0.00	0.04
2	10℃	0.00	0.01	0.01	0.00	0.00	0.09
3	15℃	0.00	0.00	-0.01	0.00	0.07	0.24
4	25℃	0.00	0.05	0.18	0.00	0.19*	0.60

탈아미노 화합물 (3) 가 약 1% 이상 존재하면, 암루비신 동결 건조 제제로부터 주사용 용액을 제조할 때의 탁함의 원인이 되기 때문에, 그 생성은 매우 미량으로 억제할 필요가 있다. 또한, 실험예 2 및 실험예 3 으로부터도 알 수 있는 바와 같이 동결 건조 제제의 장기보존시에도 탈아미노 화합물 (3) 는 약간씩 증가되기 때문에, 탈아미노 화합물 (3) 의 생성량을 억제하는 데에 있어서, 용액상태에서의 제제공정에서의 생성량을 억제하는 것은 매우 중요하다.

표 4 에 나타내는 바와 같이, 암루비신 히드로클로라이드를 용액상태로 방치하였을 때, 탈아미노 화합물 (3) 의 생성량은 용액의 온도에 의존한다. 따라서, 용액상태에서의 제제공정에서의 생성량을 억제하여, 최종적으로「장기보존 후의 탈아미노 화합물 (3) 의 함유량」을 억제하기 위해서는, 제제 제조 공정 중에서, 용액상태에서의 제제공정 (예를 들어, 상기 항 [13] 에 있어서의 공정 (1) 내지 (3)) 을, 바람직하게는 약 15℃ 이하에서, 더욱 바람직하게는 약 10℃ 이하에서 실시하는 것이 바람직하다.

다른 안트라사이클린계 항암제는, 암루비신과 달리, 안트라사이클린 핵의 9 위치에 아미노기를 가지지 않는 점에서, 상기 탈아미노 화합물의 생성에 관해서 고려할 필요가 없고, 제제공정에 있어서는 탈당 화합물만을 고려하면 된다.

상기 제조 조건에 의해, 암루비신 동결 건조 제제의 대량 제조가 가능하게 되었다.

본 발명에 의해, 암 화학 요법제로서 유용한 암루비신의, 장기보존시에도 충분히 안정된 동결 건조 제제를 얻을 수 있다.

Claims

암루비신 또는 그 염을 함유하는 동결 건조 제제이고, 이하의 특징을 갖는 안정화 제제 :

(1) L-시스테인 또는 그 염을 함유하고,

(2) 제제 중의 수분의 양이 동결 건조 분말 중량에 대하여 0∼약 4중량% 이다.
제 1 항에 있어서, 제제 중의 수분 함량이 동결 건조 분말 중량에 대하여 0∼약 3.5중량% 인 안정화 제제.
제 1 항에 있어서, 제제 중의 수분 함량이 동결 건조 분말 중량에 대하여 약0.5∼약 2.0중량% 인 안정화 제제.
제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서, L-시스테인 또는 그 염의 함유량이, 암루비신 또는 그 염 100mg (력가) 에 대하여 약 0.5∼약 250㎎ 인 안정화 제제.
제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서, L-시스테인 또는 그 염의 함유량이, 암루비신 또는 그 염 100㎎ (력가) 에 대하여 약 3∼약 45㎎ 인 안정화 제제.
제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항에 있어서, 암루비신의 염이 그의 히드로클로라이드인 안정화 제제.
제 1 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항에 있어서, L-시스테인의 염이 그의 히드로클로라이드인 안정화 제제.
제 1 항 내지 제 7 항 중 어느 한 항에 있어서, L-시스테인 또는 그 염이, 암루비신 히드로클로라이드 100mg 력가에 대하여, (1) 약 5∼약 20㎎ 범위의 L-시스테인, 또는 (2) 그것에 상당하는 양의 L-시스테인염인 안정화 제제.
제 1 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항에 있어서, 추가로 부형제를 함유하는 안정화 제제.
제 9 항에 있어서, 부형제가 젖당인 안정화 제제.
제 1 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서, 암루비신의 염이, 분말 X선 회절도에 있어서 회절각 (2θ) : 6.3±0.3, 10.1±0.3, 20.3±0.3, 26.5±0.3 및 26.9±0.3도에 주피크를 나타내는 결정성 암루비신 히드로클로라이드인 안정화 제제.
(a) 암루비신 또는 그 염, 및 (b) L-시스테인 또는 그 염을 함유하는 수용액을 제조하여, 그 수용액을 무균 여과하고, 생성물을 동결 건조함으로써, 제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 따른 안정화 제제를 제조하는 방법.
하기 공정 (1)∼(4) 를 포함하는, 제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 따른 제제의 제조방법 :

(1) (a) 암루비신 또는 그 염, 및 (b) L-시스테인 또는 그 염을 물에 용해하여 수용액을 제조하는 단계.

(2) (1) 의 수용액의 pH 를 약 2∼약 5 로 조정하는 단계.

(3) (2) 의 수용액을 무균 여과하는 단계.

(4) (3) 에서 얻어진 수용액을 동결 건조시키는 단계.
제 13 항에 있어서, 암루비신의 염이 그의 히드로클로라이드인 제조방법.
제 13 항 또는 제 14 항에 있어서, L-시스테인의 염이 그의 히드로클로라이드인 제조방법.
제 13 항 내지 제 15 항 중 어느 한 항에 있어서, 공정(2) 에 있어서 pH 를 약 2.0∼약 3.5 로 조정하는 제조방법.
제 13 항 내지 제 16 항 중 어느 한 항에 있어서, 공정 (1) 내지 (3) 을 약 15℃ 이하에서 실시하는 것을 특징으로 하는 제조방법.
제 13 항 내지 제 16 항 중 어느 한 항에 있어서, 공정 (1) 내지 (3) 을 약 10℃ 이하에서 실시하는 것을 특징으로 하는 제조방법.
제 13 항 내지 제 18 항 중 어느 한 항에 있어서, 암루비신의 염이, 분말 X선 회절도에 있어서 회절각 (2θ) : 6.3±0.3, 10.1±0.3, 20.3±0.3, 26.5±0.3 및 26.9±0.3도에 주피크를 나타내는 결정성 암루비신 히드로클로라이드인 제조방법.
하기 공정 (1)∼(4) 를 포함하는, 암루비신의 안정된 동결 건조 제제의 제조방법 :

(1) 암루비신 히드로클로라이드, 암루비신 히드로클로라이드 100㎎ 력가에 대하여 약 5∼약 20㎎ 의 범위의 L-시스테인 (또는 그것에 상당하는 양의 L-시스테인염), 및 부형제를 함유하는 수용액을 제조하는 단계.

(2) (1) 의 수용액의 pH 를 약 2.0∼약 3.5 으로 조정하는 단계.

(3) (2) 의 수용액을 무균 여과하는 단계.

(4) (3) 에서 얻어진 수용액을 동결 건조하여, 제제 중의 수분 함량이 동결 건조 분말 중량에 대하여 0∼약 4중량% 인 동결 건조 제제를 얻는 단계.