KR20040012426A - 인간 유래 β-디펜신 타입 2 및/또는 타입 3의 유도활성성분 및 상기 활성성분을 포함하는 화장품 또는약학적 조성물 - Google Patents

인간 유래 β-디펜신 타입 2 및/또는 타입 3의 유도활성성분 및 상기 활성성분을 포함하는 화장품 또는약학적 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 인간 유래의 β-디펜신 타입 2 및/또는 타입 3의 직접 혹은 간접 발현을 유도할 수 있는 활성성분에 관한 것이다.
따라서, 본 발명은 인간 유래의 β-디펜신 타입 2 및/또는 타입 3의 직접 혹은 간접 발현을 유도할 수 있는 활성성분을 제공하며, 상기 활성성분은 염증, 과민증 혹은 불내성 반응을 유발하지 않는 특징을 갖는다. 또한, 본 발명은 상기 활성성분을 선택하기 위한 선별방법을 제공한다.
본 발명은 상기 활성성분을 포함하는 화장품 혹은 약학적 조성물의 제조에 응용할 수 있다.

Description

인간 유래 β-디펜신 타입 2 및/또는 타입 3의 유도 활성성분 및 상기 활성성분을 포함하는 화장품 또는 약학적 조성물 {Active ingredients stimulating type 2 and/or type 3 human beta-defensins and cosmetic or pharmaceutical compositions containing such active ingredients}
본 발명는 인간 유래의 β-디펜신 타입 2 및/또는 타입 3의 직접 혹은 간접 발현을 유도할 수 있는 활성성분에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 이들 활성성분을 포함하는 화장품 혹은 약학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 상기 조성물을 이용한 치료방법에 관한 것이다. 본 발명은 상기 활성성분을 선택하기 위한 선별방법에 관한 것이다.
항생물질의 펩타이드는 미생물의 세포막을 침투하여 세균, 곰팡이 혹은 바이러스와 같은 미생물을 파괴할 수 있는 저분자 물질이다(10 내지 50개의 아미노산). 1981년 절지동물에서 그들을 발견한 이래, 상기 펩타이드를 포함하는 500 여개의 분자들이 보다 고등한 생물(식물, 곤충, 포유동물, 인간)에서 동정되었다. 항미생물질 펩타이드의 일반적인 특징으로는 양친매성 구조가 있다. 즉, 소수성 지역에서 떨어져 있는 양이온 지역에 아미노산을 분포하고 있다. 이러한 구조는 세균성세포막에 대한 그들의 활성 및 작용 특이성을 부여한다. 왜냐하면 세균막은 항생물질 펩타이드의 양이온 부위와 결합하는 다수의 음이온성 인지질을 포함하고 있기 때문이다(Zalsoff M. Antimicrobial peptides of multicellular organisms.Nature2002;415:389-395). 그들의 구조에 따라, 이들 펩타이드의 활성 범위는 매우 좁거거나 혹은 매우 넓어질 수 있다.
항생물질의 펩타이드는 동물계에서 주로 발견된다: 독류(전갈, 벌, 거미), 초파리 혹은 블루플라이, 소의 중성백혈구, 백혈구 및 돼지의 소장, 우유, 개구리, 지중해 담치 등. 식물계에서, 티오닌과 디펜신은 세균으로부터 식물의 종자 및 영양조직을 보호한다.
대부분의 항생물질 펩타이드는 일차면역장벽으로써 중요한 역할을 담당하는 동물의 상피조직에서 발견된다. 그들은 인간의 위와 호흡계 및 인간의 피부와 점막 뿐만 아니라 개구리와 쥐의 피부에서 발견되었다.
디펜신은 항생물질의 펩타이드 중 가장 연구가 많이 된 종류 중 하나이다. 이들은 3개의 이황화물(disulphide) 가교를 갖는 시스테인이 풍부한 분자로 구성되어 있다. 그들은 식물, 곤충 및 다양한 포유동물에서 발견된다. 인간에서는, 두 종류의 디펜신이 발견되며 6개의 시스테인 잔기 간의 배치와 결합이 서로 다르다:
α-디펜신(6종류의 타입): 중성백혈구(HNP1 ~ 4, 인간의 중성백혈구 펩타이드)와 위장관의 파네드 세포에서 분리함(α-디펜신 5 및 6);
β-디펜신: 점막 및 상피세포(피부, 기도, 혀, 편도, 타액...)에서 발현되는 보다 길고 강염기성으로써 3가지 형태로 발견됨:
ㆍ기본형: hBD1(인간의 β-디펜신 1): 신장에서 주로 발견되지만 췌장, 타액, 폐, 태반, 피부에서도 발견됨.
ㆍ2종류의 유도형: hBD2 및 hBD3(인간의 β-디펜신 2 및 3):
→hBD2는 피부, 기도 및 폐에서 발현됨; hBD2의 발현은 세균성 유도, TNFα(Tumour Necrosis Factor, Harder J. et al., A peptide antibiotic from human skin.Nature1997; 387:861), LPS(Lipopolysaccharides, Matthews E. et al., Production of beta-defensin antimicrobial peptides by the oral mucosa and salivary glands.infect Immun1999; 67:2740-2745), IL1α 및 IL1β(Interleukin 1, Liu AY et al., Human β-defensin 2 production in keratinocytes is regulated by interleukin-1, bacteria and the state of differentiation.J Invest Dermatol2002;118:275-281))에 의해 개시되며, 이들 물질들은 공통적으로 염증과정에 관련되어 있다. hBD2의 항균활성은 특히 대장균과 같은 그람 음성 세균을 겨냥하고 있다.
→hBD3는 근육조직 및 심장(Conejo Garcia et al., Identification of a novel multifunctional β-defensin(human βdefensin-3) with specific antimicrobial antivity.Cell tissue research2001; 257-264)뿐만 아니라 피부, 기도, 편도 및 혀에서 발견됨(Harder J. et al., Isolation and characterization of human β-defension-3, a nevel human inducible peptide antibiotic.J Biol Chem2001, 276:5707-5713). hBD3는 세균성 유도, TNFα 및 특히 염증과정에 관련된 물질들이 갖는 일반적인 특징을 가지고 있는 IFNγ(감마 인터페론)에 의해 유도된다. hBD3의 활성 범위는 hBD2 보다는 넓으며, 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus)와 같은 그람 양성 세균 및 그람 음성 세균을 용균할 수 있다.
피부에서 이들 디펜신의 유도는 병원미생물의 수적 증가에 따른 신체의 자체보호를 위한 일차방어선인 것이다. 게다가, hBD2는 미성숙 수상돌기 세포 및 기억성 T-림프구를 위한 주화성 특징들을 갖고 있어 면역반응, 염증 및 치료에 중요한 역할을 담당하는 것 같다(Yang d. et al., Betadefensins: linking innate and adaptative immunology through dendritic and T cell CCR6.Science1999; 286:525-528).
따라서, 인간 피부에서 β-디펜신의 함량 증가는 병원성일 수도 있는 특이 종의 과다한 침입을 막음으로써 피부보호 및 건강을 유지하면서도 피부 미생물의 생태계를 보존케 할 수 있다. 이를 위해서는, 두가지 전략을 세울 수 있다:
당업자에게는 이미 알려져 있는 항생물질의 펩타이드와 유사한 서열이나 구조를 갖는 합성 펩타이드를 국소투여하거나, 혹은
자연 분비세포에서 이들 펩타이드의 합성을 유도할 수 있는 활성성분을 국소적으로 혹은 경구적으로 투여하여 디펜신의 유도를 자극한다.
동물계에서, 소 신장의 상피세포주에서 hBD3의 발현을 유도하는 L-이소루신을 제외하고, β-디펜신을 유도할 수 있는 물질은 상기에서 인용한 사이토카인(TNFα, IFNγ, IL1)을 제외하고는 거의 없다(Fehlbaum P.et al., An essential amino acid induces epithelial β-defensin expression.PNAS2000;97:12723-12728;Patent WO0168085 Anderson M. et al., Method for stimlation of defensin production. 20-09-2001). 인간에서, 케라티노사이트의 분화가 hBD2의 생성을 유도함이 발견되었다(Liu AY et al., Human β-defensin-2 production in keratinocytes is regulated by interleukin-1, bacteria and the state of differentiation.J Invest Dermatol2002; 118:275-281).
피부에서 hBD2 및 hBD3 디펜신에 관한 연구들은 피부절단, 이식체 및 배양세포 혹은 재건피부에 수행되었다. 디펜신 함량의 증가는 많은 기술들에 의해 판독될 수 있지만 어느 기술도 아직까지 인간세포에서 hBD2 및 hBD3를 정량적으로 유도할 수 있는 활성성분을 선별하는 연구에는 적용된 바 없었다. 당업자들이 사용했던 종래 기술들은 사실상 당면 문제, 다른말로 정량적으로 증명된 방법으로 인간의 디펜신을 유도할 수 있는 활성성분을 찾는 데에는 사용될 수 없다(판매용 항체가 없어 ELISA 방법을 이용한 단백질의 정량분석을 실시할 수 없음; 정량적이기 보다는 정성적인 인 시튜 하이브리디제이션 타입의 분자생물학적 방법, 노던 트랜스퍼, RT-PCR; 선별방법에서 사용될 수 없는 매우 복잡한 3차원적 배양의 인간세포모델). 그러한 분석은 본 발명의 범위 내에서 개시될 것이다.
본 발명자의 목적은 염증반응을 유발하지 않고 그리고 예를 들어, 염증반응에서 보통 발현되는 물질의 분비를 과도하게 유도하지 않고 β-디펜신 타입 2 및/또는 타입 3의 발현을 유도할 수 있는 활성성분을 동정하는 것이다.
지금까지, 인간에서 디펜신을 유도할 수 있는 것으로 알려져 있는물질들(TNFα, IL1, LPS, 세균, IFNγ...)은 친염증성 특징을 가지고 있다. 그들은 IL1α, IL8 혹은 MIP3α와 같은 염증성 사이토카인을 유도한다.
따라서, 본 발명의 목적은 염증, 과민증 혹은 불내성 반응을 유발하지 않고 인간 유래의 β-디펜신 타입 2 및/또는 타입 3의 직접 혹은 간접 발현을 유도할 수 있는 활성성분을 제공하여 새로운 기술적 문제를 해결코자 한다.
본 발명의 목적은 염증과정 동안 보통 함께 발현되는 친염증 분자 혹은 물질의 직접 혹은 간접 합성을 감지할 수 있는 정도로 유도하지 않거나 혹은 자극하지 않으면서, 인간 유래의 β-디펜신 타입 2 및/또는 타입 3의 직접 혹은 간접 발현을 유도할 수 있는 활성성분을 제공하여 새로운 기술적 문제를 해결코자 한다.
따라서, 본 발명의 목적은 상기와 같은 활성성분을 적어도 하나 포함하는 조성물을 제공하여 새로운 기술적 문제를 해결코자 한다.
본 발명의 목적은 상기와 같은 활성성분을 선별할 수 있는 조직 혹은 세포 모델을 제공하여 새로운 기술적 문제를 해결코자 한다.
본 발명의 목적은 화장품 혹은 제약 분야에서 사용하기 위한 상기와 같은 활성성분을 포함하는 조성물을 제공하여 새로운 기술적 문제를 해결코자 한다.
이러한 용도는 반드시 살균활성 및/또는 살진균활성을 나타내도록, 바람직하게는, 조직, 예를들어 피부, 점막, 머리카락 및 손톱 혹은 두피에 국소투여하여 실시된다.
본 발명자는 선별되는 잠재적 활성성분을 언급할 때에는 "활성물질"을, 본발명의 활성성분에 의해 유도되는 디펜신을 언급할 때에는 β-디펜신 타입 2 및/또는 타입 3에 대해 "디펜신"을 사용하였다.
본 발명의 첫 번째 특징에 따르면, 본 발명은 염증, 과민증 혹은 불내성 반응을 유발하지 않으면서 인간 유래의 β-디펜신 타입 2 및/또는 타입 3의 직접 혹은 간접 발현을 유도할 수 있는 활성성분에 관한 것이다.
본 발명자가 인용한 "염증, 과민증 혹은 불내성 반응을 유발하지 않는"은 상기 활성성분을 사용하여도 활성성분을 사용한 자에게 어떠한 우려할 만한 역효과도 일으키지 않음을 의미하는 것이다. 본 발명자가 인용한 "우려할 만한"은 발진, 가려움, 자극, 피부민감도의 증가 등과 같은 반응을 의미한다.
유리하게는, 상기 활성성분은 염증과정 동안 보통 함께 발현되는 친염증성 분자 혹은 물질의 직접 혹은 간접 합성을 감지할 수 있는 정도로 유도하지 않거나 혹은 자극하지 않으면서 인간 유래의 β-디펜신 타입 2(hBD2) 및/또는 β-디펜신 타입 3(hBD3)의 직접 혹은 간접 발현을 유도할 수 있다.
본 발명자가 인용한 "염증과정 동안 보통 함께 발현되는 친염증성 분자 혹은 물질의 직접 혹은 간접 합성을 감지할 수 있는 정도로 유도하지 않거나 혹은 자극하지 않는"은 상기 활성성분이 염증과정 동안 보통 함께 발현되는 친염증성 분자 혹은 물질을 자극하지 않거나, 혹은 TNFα혹은 IFNγ에 의해 유도되는 것 보다 낮은 정도로, 바람직하게는, 동일한 온도, 접촉시간 및 작용조건에서 TNFα혹은 IFNγ에 의해 유도되는 최고 자극의 75% 이하로 유도하도록 그들을 유도할 때를 말한다.
유리하게는, 염증과정 동안 보통 함께 발현되는 상기 친염증성 분자 혹은 물질은 특히 MIP3α 혹은 IL8 혹은 IL1, 혹은 다른 인터루킨 혹은 히스타민, 트립타아제, 기질 P, 류코트리엔스 혹은 프로스타글란딘이다.
유리하게는, 상기 활성성분은 인간유래의 상피배양세포 특히 케라티노사이트 및/또는 각질배양세포, 혹은 생존상태의 인간피부생검, 혹은 세포 기질 혹은 탈표피성 진피에 구성되거나 혹은 그렇지 않은 재건표피모델 혹은 재건피부모델에서 염증과정 동안 보통 함께 발현되는 친염증성 분자 혹은 물질의 직접 혹은 간접 생성을 눈에띌 만큼 유도하지는 않는다. 상기 상피세포는 바람직하게는 "정상"이다.
본 발명자가 인용한 "정상"은 비영구세포주에서 유래한 것이 아니라 병리조직이나 유전적으로 변형된 세포 유래의 상피세포임을 의미한다.
유리하게는, 상기 활성성분은 쑥 뿌리, 망초, 딱총나무 껍질, 럽쳐워트(rupturewort), 파인애플 주스, 페퍼민트, 빈랑나무, 코코아, 퀴노아, 아르니카, 볼도, 사르사파릴라, 호두나무 잎, 히비스커스 꽃, 호박, 해바라기, 모란, 물레나물, 밤나무, 혹은 그들의 추출물, 자스몬산 혹은 비타민 A, 그것의 유도체 및 전구체, α-MSH 혹은 α-MSH를 구성하는 펩타이드 중 하나 혹은 상기 펩타이드 중 하나를 모방하는 화학 구조 즉 이소루신 에스테르, 칼슘 혹은 어떤 유기 혹은 무기 칼슘염에서 선택된다.
유리하게는, 식물 유래의 상기 활성성분은 추출로 얻으며, 바람직하게는 수용성 추출로 얻지만 다른 추출방법, 예를 들어 물/부틸렌 글리콜 혼합액(1/99 ~ 99/1 by w/w)에서와 같은 추출방법에 의해서도 얻을 수 있다. 자스몬산 혹은 비타민 A, 그것의 유도체 및 전구체, α-MSH 혹은 α-MSH를 구성하는 펩타이드 중 하나혹은 상기 펩타이드 중 하나를 모방하는 화학 구조 즉 이소루신 에스테르, 칼슘 혹은 어떤 유기 혹은 무기 칼슘염은 서술한 모델에 적합한 물 혹은 에탄올 혹은 다른 용매에 희석하여 사용한다.
본 발명의 두 번째 특징에 따르면, 본 발명은 상기의 활성성분을 적어도 하나 포함하는 조성물에 관한 것이다.
유리하게는, 상기 조성물은 상기 활성성분을 0.001% 내지 20%, 바람직하게는 0.01% 내지 10%의 농도로 포함한다. 특히 상기 비율을 중량 당 퍼센트로 분명히 언급하지 않을 경우, 이들 농도는 중량 당 퍼센트를 의미한다.
상기 농도는 활성성분이 염증과정 동안 보통 함께 발현되는 친염증성 분자 혹은 물질의 직접 혹은 간접 합성을 감지할 수 있는 정도로 유도하지 않거나 혹은자극하지 않으면서, 인간 유래의 β-디펜신 타입 2 및/또는 타입 3의 발현을 유도할 수 있는 최적 농도이다.
본 발명의 세 번째 특징에 따르면, 본 발명은 화장품 조성물의 제조를 위해 적어도 하나의 상기 활성성분을 사용하는 것에 관한 것으로, 상기 활성성분은 β-디펜신 타입 2 및/또는 타입 3의 발현을 유도할 수 있고 어떤 종류의 과민증이나 혹은 염증을 유도하지 않으면서, 특히 염증과정 동안 보통 함께 발현되는 적어도 하나의 친염증성 분자 혹은 물질의 직접 혹은 간접 합성을 감지할 수 있는 정도로 유도하지는 않거나 혹은 자극하지 않는 농도로 포함되며, 상기 활성성분은 화장품용으로 적합한 부형제와 혼합될 수 있다.
본 발명의 네 번째 특징에 따르면, 본 발명은 약학적 조성물의 제조를 위해 적어도 하나의 상기 활성성분을 사용하는 것에 관한 것으로, 상기 활성성분은 β-디펜신 타입 2 및/또는 타입 3의 발현을 유도할 수 있고 어떤 종류의 과민증 혹은 염증을 유도하지 않으면서, 특히 염증과정 동안 보통 함께 발현되는 적어도 하나의 친염증성 분자 혹은 물질의 직접 혹은 간접 합성을 감지할 수 있는 정도로 유도하지 않거나 혹은 자극하지 않는 농도로 포함되며, 상기 활성성분은 약학적으로 적합한 부형제와 혼합될 수 있다.
유리하게는, 상기 조성물은 살미생물제 및/또는 정미생물제를 적어도 하나 포함한다. 본 발명자는 세균에 대해 파괴효과가 있는 약제군을 "살미생물제"로 인용하였으며, 세균 증식에 대해 제한효과가 있는 약제군을 "정미생물제"로 인용하였다.
본 발명의 다섯 번째 특징에 따르면, 본 발명은 β-디펜신 타입 2 및/또는 타입 3의 발현을 유도할 수 있고 과민증 혹은 염증을 유도하지 않으면서, 특히 염증과정 동안 보통 함께 발현되는 적어도 하나의 친염증성 분자 혹은 물질의 직접 혹은 간접 합성을 감지할 수 있는 정도로 유도하지 않거나 혹은 자극하지 않는 적어도 하나의 활성성분을 선별할 수 있는 세포 혹은 조직 모델에 관한 것이다.
유리하게는, 상기 세포 혹은 조직 모델은 적당한 배양조건 하에서, 특히 0 ~ 100 mM, 바람직하게는 1.7 mM의 칼슘 함량 하에서 배양하기에 적합한 상피세포, 예를 들어, 케라티노사이트 및/또는 각질세포를 포함한다.
본 발명의 여섯 번째 특징에 따르면, 본 발명은 인간 유래의 β-디펜신 타입2 및/또는 타입 3의 직접 혹은 간접 발현을 유도할 수 있고 과민증 혹은 염증을 유도하지 않으면서, 특히 염증과정 동안 보통 함께 발현되는 적어도 하나의 친염증성 분자 혹은 물질의 직접 혹은 간접 합성을 감지할 수 있는 정도로 유도하지 않거나 혹은 자극하지 않는 활성성분의 다음 단계를 포함하는 선별방법에 관한 것이다(이들 활성성분을 본 발명에서는 "선별되는 잠재적 활성성분"으로 기재함):
a) 적당한 배양 조건 하에서 선별되는 다양한 잠재적 활성성분이 있는 상태에서 세포 혹은 조직 모델을 배양하는 단계; 상기 방법은 선별되는 적어도 하나의 잠재적 활성성분에 적용할 수 있지만 동시에 다수의 활성성분(혹은 "활성물질")을 시험하기에 보다 유리함;
b) 인간 유래의 β-디펜신 타입 2 및/또는 타입 3 발현의 유도 유무에 대한 직접 혹은 간접적 동정:
c) 염증과정 동안 보통 함께 발현되는 친염증성 분자 혹은 물질의 직접 혹은 간접 합성의 유도 없이 이들 활성성분의 무자극 및 비염증적 특징의 동정 단계.
유리하게는, 상기 선별방법은 인간 유래의 β-디펜신 타입 2 및/또는 타입 3의 직접 혹은 간접 발현을 유도할 수 있고 동시에 염증과정 동안 보통 함께 발현되는 친염증성 분자 혹은 물질의 직접 혹은 간접 합성을 감지할 수 있는 정도로 유도하지 않거나 혹은 자극하지 않으며 이러한 방식으로 시험되는 적어도 하나의 활성성분이 선택되는 d) 단계를 추가로 포함한다.
독자들은 본 발명자들이 본 발명을 단순히 본 발명의 선별 원리를 실시하기 위한 수단으로서의 분석방법으로 제한하지 않음을 명백히 알 것이다.
사실상, 향후 hBD2 및 hBD3를 인지하는 항체를 이용한 방법(ELISA 형 방법, 이뮤노블랏팅 등등)과 같은 다른 분석방법이 본 발명의 발명자가 사용한 방법을 대신할 수도 있을 것이다.
유리하게는, 상기 선별방법은 a) 단계에, 상피세포 혹은 생존상태의 인간피부생검 혹은 재건표원모델 혹은 상피세포, 예를 들어 적당한 배양조건 하에서 특히, 0 ~ 100 mM, 바람직하게는 1.7 mM의 칼슘 함량을 포함한 조건 하에서 배양하기에 적합한 케라티노사이트 및/또는 각질세포를 포함하는 재건피부모델을 포함한 세포 혹은 조직 모델을 포함하고 있다.
유리하게는, 상기 선별방법은 a) 단계에, 6 ~ 48시간 동안, 바람직하게는 약 16시간 동안(접촉시간) 세포 혹은 조직모델에 의해 선별되는 다양한 잠재적 활성성분의 첨가를 포함하고 있다.
유리하게는, 상기 선별방법은 b) 단계에, 상기 인간 유래의 β-디펜신 타입 2 및/또는 타입 3를 코딩하는 mRNA의 발현에 대한 RT-PCR 분석 및 총 RNA의 추출을 포함하고 있다.
유리하게는, 상기 선별방법은 b) 단계에, hBD2 및 hBD3를 코딩하는 mRNA의 증가는 액틴을 코딩하는 mRNA를 참조하므로 액틴(약하게 유도되는 리포터 유전자)에 대한 RT-PCR을 포함하고 있다.
유리하게는, 상기 선별방법은 b) 단계에, 자외선 하에서 판독할 수 있는 에티디움 브로마이드와 같은 핵산 삽입부를 포함하는 아가로오스 젤에 증폭된 mRNA를 로딩함을 포함한다.
유리하게는 상기 선별방법은 b) 단계에, 자외선 하에서 hBD2/액틴 및 hBD3/액틴 밴드의 강도 비를 비교함을 포함한다.
유리하게는, 상기 선별방법은 c) 단계에, 염증과정 동안 보통 함께 발현되는 친염증성 분자 혹은 물질을 분석하기 위한 ELISA-형 분석법을 포함한다.
유리하게는, 상기 선별방법은 d) 단계에, 염증과정 동안 보통 함께 발현되는 친염증성 분자 혹은 물질의 직접 혹은 간접 합성을 감지할 수 있는 정도로 유도하지 않거나 혹은 자극하지 않으면서 상기 인간 유래의 β-디펜신 타입 2 및/또는 타입 3를 코딩하는 mRNA의 발현을 유발할 수 있는 적어도 하나의 활성성분의 선택을 포함한다.
유리하게는, 상기 선별방법은 IL1, IL8 및 MIP3α와 같은 염증과정 동안 보통 함께 발현되는 적어도 하나의 친염증성 분자 혹은 적어도 하나의 물질을 감지할 수 있는 정도로 유도하지 않거나 혹은 자극하지 않으면서 상기 인간유래의 β-디펜신의 발현을 유도하는 활성성분의 선택을 포함한다.
유리하게는, 상기 선별방법은 다음의 단계를 포함한다:
칼슘이 풍부한 무혈청 특이 배지에서, 예를 들어 무처리 대조군과 두개의 양성 대조군(hBD2에 대해서는 TNFα, hBD3에 대해서는 IFNγ)을 동시에 준비하여 단층의 정상인간 유래의 케라노사이트와 선별되는 잠재적 활성성분이 접촉하는 단계;
총 RNA를 추출한 다음, 광학현미경을 이용하여 바람직하게는 260 내지 280 nm의 파장에서 분석하는 단계; 이때 필요하다면 상기 RNA를 희석할 수 있음;
초기 총 RNA(initial RNA)에 액틴, hBD2 및 hBD3에 대한 RT-PCR을 실시하는단계;
총 RNA를 역전사한 다음, 예를 들어 서모사이클러에서, 액틴, hBD2 및 hBD3에 대해 동일한 증폭 프로그램에 따라 역전사된 산물(cDNA)을 증폭하는 단계;
hBD2, hBD3 및 액틴 증폭 산물을 혼합하고 전하완충액과 물(2/3) 혼합액을 첨가한 다음 최종용액을 에티디움 브로마이드를 포함하는 미리 굳힌 아가로오스 젤 에 침적시킨다. 상기 시료를 이동시키고 자외선 하에서, 바람직하게는 암실에서 판독할 수 있는 기술을 사용하여 밴드를 확인한 다음 컴퓨터상으로 사진을 찍었다. 이때, 밴드의 강도를 정량하기 위해 분석한다. 기초량의 디펜신의 발현이 탐지되지 않기 때문에(무처리 대조군), hBD2/액틴 및 hBD3/액틴 밴드의 강도 비, 예를 들어 양성 대조군(hBD2에 대해서는 TNFα를, hBD3에 대해서는 IFNγ를 처리함)에서 얻은 결과와 비교하여 당해 β-디펜신의 발현 유도를 보여주는 단계.
유리하게는, 상기 선별방법은 다음 단계를 추가로 포함한다.
인간 유래 β-디펜신 타입 2 및/또는 타입 3의 발현에 효과를 나타내는 선별되는 잠재적 활성성분을 선택하는 단계. 이들 활성물질의 영향 하에서 배양배지에서 분비되는 MIP3α, IL1 및 IL8과 같은 친염증과정 동안 보통 함께 발현되는 물질의 함량을 측정하기 위해 활성물질에 해당하는 상등액을 시험한다. 예를 들어, 상기 농도는 서로 결과를 비교하기 위해 분석된 RNA 농도를 참조할 수 있다.
유리하게는, 상기 활성성분을 쑥 뿌리, 망초, 딱총나무 껍질, 럽쳐워트(rupturewort), 파인애플 주스, 페퍼민트, 빈랑나무, 코코아, 퀴노아, 아르니카, 볼도, 사르사파릴라, 호두나무 잎, 히비스커스 꽃, 호박, 해바라기, 모란,물레나물, 밤나무, 혹은 그들의 추출물, 자스몬산 혹은 비타민 A, 그것의 유도체 및 전구체, α-MSH 혹은 α-MSH를 구성하는 펩타이드 중 하나 혹은 상기 펩타이드 중 하나를 모방하는 화학 구조 즉 이소루신 에스테르, 칼슘 혹은 어떤 유기 혹은 무기 칼슘염으로부터 선택할 때, 상기 선별방법은 염증과정 동안 보통 함께 발현되는 친염증성 분자 혹은 물질의 직접 혹은 간접 합성을 자극하지 않거나 혹은 감지할 수 있는 정도로 유도하지 않음과 동시에, 인간 유래의 β-디펜신 타입 2 및/또는 타입 3의 직접 혹은 간접 발현을 유도할 수 있는 활성성분을 검출할 수 있다.
본 발명의 일곱 번째 특징에 따르면, 본 발명은 대상 조직, 특히 피부, 점막, 머리카락 및 손톱 혹은 두피에 대해 살균 및/또는 살진균 효과를 나타내는 화장품 조성물의 제조를 위한 활성성분의 용도에 관한 것이다. 두피의 경우, 상기 화장품용 조성물은 비듬을 예방하거나 혹은 치료하는 데 사용될 수 있다.
본 발명의 유리한 구체예에 따르면, 본 발명의 활성성분 제재는 피부 생태계에 해로운 환경 및/또는 기후(추위, 자외선...) 및/또는 클렌징 방법때문에 유발되는 노화과정 및/또는 스트레스로 인해 약화된 피부의 보호를 강화하기 위해 화장품용 다른 활성물질과 결합될 수 있다. 본 발명 조성물은 화장품에 사용되는 갈레닉 형, 특히 액상형, 즉 젤, 로숀타입 분산제, 복상 분산제, 물/오일 혹은 오일/물의 에멀젼, 삼중 에멀젼 혹은 소포형 분산제일 수 있다. 상기 조성물의 외관은 고체 혹은 약간 액상이거나 혹은 백색 혹은 채색 크림, 혈청제 혹은 무스일 수 있다. 분무제 혹은 스틱 형태로 피부에 사용할 수도 있다. 피부용 미용제품 및/또는 메이크업 제품 및/또는 피부, 점막, 머리카락 및 손톱 및 두피용 세정제품으로 사용될 수 있다. 또한, 본 발명의 조성물은 젤 제품, 활성제, 방부제, 오일, 용매, 항산화제, 방향제, 흥분제, 색소, 필터, 흡취제 및 염료와 같이 화장품에 사용할 수 있는 첨가제를 포함할 수 있다.
유리하게는, 살미생물제 및/또는 정미생물제를 적어도 하나 포함하는 상기 조성물은 이들 제제의 효과, 특히 화장품의 세균총을 제어하는 효과가 있는 화장품용 β-디펜신의 살균효과을 겸하고 있기 때문에 특히 화장품과 약학분야에서 사용할 수 있다.
본 발명의 여덟 번째 특징에 따르면, 본 발명은 대상 조직에 대해 살균 및/또는 살진균 효과 특히 여드름 및 세균성 혹은 진균성 피부염의 치료 및/또는 예방을 위한 약학적 조성물 제조용 활성성분의 용도에 관한 것이다.
유리하게는, 적어도 하나의 살미생물제 및/또는 정미생물제를 포함하는 상기 조성물은 이들 제제의 효과 특히 비듬, 여드름, 백반, 피부염 및 미생물 제제에 의해 유발되는 피부, 점막, 두피 및 손톱질환과 같은 미생물 제제와 관련된 다른 질병의 치료를 위한 화장품용 β-디펜신의 살균효과를 겸하고 있기 때문에 특히 약학분야에서 이용할 수 있다.
본 발명자는 염증과정 동안 보통 함께 발현되는 친염증성 분자 혹은 물질의 직접 혹은 간접 합성을 보여줌으로써 염증, 과민증 및 불내성 반응을 식별할 수 있는 분석방법을 사용하였다.
본 발명은 염증, 과민증 및 불내성 반응을 식별하기 위해 다른 방식으로 예를 들어, 대상 조직에 투여 시 느끼는 가려움, 불쾌함 및 팽팽한 느낌을 평가하여실시하였다.
이들 특징들 중 어느 하나에 적용할 수 있는 본 발명의 다른 유리한 특징들에 따르면, 활성성분은 인간 유래의 β-디펜신의 타입 2 및/또는 타입 3의 직접 혹은 간접 발현을 유도할 수 있고 염증과정 동안 보통 함께 발현되는 친염증성 분자 혹은 물질 예를 들어, IL1α, IL8 혹은 MIP3α와 같이 염증과정 동안 보통 함께 발현되는 사이토카인의 직접 혹은 간접 합성을 감지할 수 있는 정도로 유도하지 않거나 혹은 자극하지 않는 것으로 선택한다.
본 발명의 방법은 상기 활성성분이 염증, 과민증 혹은 불내성 반응을 유도하지 않거나 혹은 감지할 수 있는 정도로 유발하지 않음을 특징으로 하고, 상피세포에서 hBD2 및/또는 hBD3 디펜신의 mRNA의 함량을 증가시킬 수 있는 활성성분을 선별 및 동정하여 선택케 하는 효과가 있다.
선별방법은 다음 단계를 포함한다:
정상인간 유래의 상피세포, 바람직하게는 정상 인간의 케라티노사이트를 칼슘 농도 0 내지 100 mM, 바람직하게는 1.7 mM를 포함하는 무혈청의 특이 배지에서 단일층으로 배양한다. 75 내지 95%의 컨플루언스(confluence)에서, 바람직하게는 80%에서, 6 내지 48 시간 동안, 바람직하게는 16시간 동안 세포와 선별되는 잠재적 활성성분을 접촉시킨다. 적어도 하나의 무처리 대조군과 적어도 하나의 양성 대조군을 함께 세울 수 있으며, 선별을 수월하게 하기 위해 바람직하게는 같은 배양 플레이트에서 배양한다. 선별되는 활성성분을 대신하여 양성 대조군은 hBD2에 대해서는 TNFα, hBD3에 대해서는 IFNγ로 한다. 유리하게는, 그들 농도는 1 내지 500ng/mL, 바람직하게는 100 ng/mL로 한다. 상기와 같이 접촉시킨 후, 상등액을 수집하고 세포를 PBS(Phosphate Buffer Saline)로 세척한 후 예를 들어 -80℃에서 동결건조시킬 수 있다. 총 RNA를 추출하고 광학현미경법으로, 바람직하게는 260 과 280 nm 사이에서 분석하며, 바람직하게는 총 RNA를 2 내지 50 ng/mL, 바람직하게는 5 ng/mL의 농도로 희석한다. 액틴, hBD2 및 hBD3에 대해 정성분석인 RT-PCR을 실시한다. 사용한 프라이머는 문헌에서 얻었으며(hBD2:Harder J.et al., A peptide antibiotic from human skin.Nature1997; 387:861/ hBD3: Harder J. et al., Isolation and characterization of human β-defensin-3, a novel human inducible peptide antibiotic.J Biol Chem2001, 276:5707-6713) 다음과 같다:
액틴: 센스: 5'-GTGGGGCGCCCCAGGCACCA-3'(SEQ ID No. 1)
안티센스: 5'-CTCCTTAATGTCACGCACGATTTC-3'(SEQ ID No. 2)
hBD2: 센스: 5'-CCAGCCATCAGCCATGAGGGT-3'(SEQ ID No. 3)
안티센스: 5'-GGAGCCCTTTCTGAATCCGCA-3'(SEQ ID No. 4)
hBD3: 센스: 5'-AGCCTAGCAGCTATGAGGATC-3'(SEQ ID No. 5)
안티센스: 5'-CTTCGGCAGCATTTTCGGCCA-3'(SEQ ID No. 6)
RT-PCR에 사용된 프라이머 서열은 연구되어 있는 유전자에 특이하므로 인용된 것들과 다를 수 있다(액틴, hBD2, hBD3).
RT-PCR은 바람직하게는 10 내지 100 ng, 바람직하게는 50 ng의 초기 mRNA로 서모사이클러에서 동일한 프로그램에 따라 실시한다. 상기 단계는 초기 RNA를 증폭한다.
RT-PCR을 위한 온도 및 시간 변수는 사용된 프라이머 또는 물질(서모사이클러, RT-PCR 키트 서플라이어...)의 함수에 따라 변할 수 있다.
증폭 후, 최종 산물을 서로 혼합하고 전하/물(2/3) 완충액을 첨가한다. 최종 용액을 자외선 하에서 판독할 수 있는 핵산 삽입부(에티이움 브로마이드와 같은)를 예를 들어 2%로 포함하는 미리 굳힌 아가로오스 젤에 로딩한다. 상기 시료를 이동시키고 암실에서 자외선 하에서 판독하여 컴퓨터상에서 사진을 찍는다. 밴드 강도를 정량화 할 수 있는 이미지 프로세싱 소프트웨어에서 상기 젤 사진을 분석한다. 디펜신의 기초 발현이 검출되지 않기 때문에(무처리 대조군), hBD2/액틴 및 hBD3/액틴 밴드의 강도 비, 예를 들어 양성 대조군(hBD2에 대해서는 TNFα로 hBD3에 대해서는 IFNγ로 처리함)에서 얻은 것들과 비교할 수 있으며, 당해 β-디펜신의 발현 유도를 검출할 수 있다.
상기 제 1 단계 말에, β-디펜신의 발현에 효과를 나타내는 활성물질을 선택한다.
활성물질의 영향 하에서 배양배지로 분비되는 MIP3α, IL1 및 IL8의 함량을 측정하기 위해 이들 활성물질에 해당하는 상등액을 ELISA 키트를 사용하여 시험한다. 분석된 농도는 결과물을 서로 비교하기 위해 RNA 농도를 참조한다. MIP3α, IL1 및 IL8의 과다발현(TNFα혹은 IFNγ에 의해 최고 75% 이상으로 유도됨)을 유도하는 선별되는 잠재적 활성성분은 선별 시 제외된다.
밴드의 강도를 정량화하기 위해 이미지 프로세싱 소프트웨어로 젤을 분석한다. 삽입부의 타입과 RT-PCR의 최종산물은 다양할 수 있지만 약간의 포화 이하로유지하기 때문에, 밴드의 판독은 핵산 전기영동 시스템 상에서 명백하게 실시될 수 있다.
상기에서 얻은 결과가 타당한 지는 본 발명의 선별방법을 정량적인 RT-PCR를 이용한 "선량효과(dose-effect)" 연구에 적용하여 실시할 수 있으나, 당업자가 다른 적절한 방법을 고려할 수 있기 때문에 상기의 방법으로 한정되지는 않는다.
실제로 RT-PCR 기술은 mRNA 발현에 있어서 정량적인 차이를 나타내는 바람직한 방법이다.
세포독성 연구는 선택된 활성물질의 농도를 0.001 내지 10%로, 바람직하게는 0.01 내지 10%로 높여 실시한다. 생존능을 평가하며, 생존능은 바람직하게는 65% 이상, 보다 바람직하게는 75% 이상이다. 상기 생존능은 비독성 한계농도로 결정한다.
따라서, 상기에서 기재된 무혈청 특이 배지 하에서 단일층의 정상 상피세포에서, 바람직하게는 정상인간 유래의 케라티노사이트에서 몇몇 농도, 바람직하게는 0.001% 에서 비독성 한계농도까지 선별된 잠재적 활성성분을 시험하였다.
상등액을 모은 다음 PBS로 씻고 -80℃에서 동결건조할 수 있다. 총 RNA를 추출하고 상기와 같은 농도 범위로 희석한다. 희석된 RNA를 액틴, hBD2 및 hBD3에 대한 정량적인 RT-PCR에 사용한다.
상기 기술은 바람직하게는 상기에서 기재된 바와 같이, 초기 RNA와 같은 함량에서, 바람직하게는 SYBR?Green을 포함하는 원-스텝(one-step) 키트를 사용하여실시한다. 그러나, RT-PCR 키트는 유리하게는 상기와 동일한 프라이머를 사용하여 이미 기재한 프로그램과 동일한 증폭 프로그램을 실시하여 형광성 서모사이클러에서 Scorpion?, Molecular beacons?, TaqmanTM프로브 등과 같이 SYBR?Green 과는 다른 기술에 기반을 둘 수 있다.
융합 그래프에 대한 연구를 실시하여 증폭된 산물의 특이성을 확인할 수 있다. 사이클 수에 따른 형광강도 그래프로부터 형광 신호의 개시에 필요한 사이클 수에 해당하는 C(T) 값을 얻는다. 각 RNA의 Sgene=(1/2)C(T)값은 증폭 동안 복제 수(copy number)의 지수적 증가를 고려한다. Sgene hBD2/Sgene 액틴 및 Sgene hBD3/Sgene 액틴의 비를 무처리 대조군과 비교하여 유도율을 계산할 수 있다. 무처리 대조군은 본 발명에 따른 선별방법의 제 1 단계의 것과 동일할 수 있다.
디펜신 유도능이 입증된 선별되는 잠재적 활성성분의 상등액은 MIP3α, IL8 및 IL1α의 농도를 분석하기 위해 아마도 ELISA 키트를 사용하여 시험할 것이다.
바람직하게는, 이들 분석은 상등액에서 실시된다. 농도는 각 시료의 분석된 RNA의 농도와 비교한다. 따라서, 선별된 비염증성 활성물질을 확인할 수 있으며 또는 염증 물질의 분비를 유도함이 없이 디펜신을 유도하기 위한 최적농도를 찾을 수 있다.
또한, 본 발명자의 주요 목적이 상기 물질의 분비를 유도하지 않으면서 β-디펜신 타입 2 및/또는 타입 3의 발현을 유도할 수 있는 활성성분을 밝히는 데 있기때문에 본 발명은 상기 선별방법을 이용하여 활성성분을 시험코자 한다.
광학적 선별법에 있어서, 정상인간 유래의 상피세포의 배양, 바람직하게는 정상 케라티노사이트의 배양은 96-웰 플레이트에서 실시하는 것이 좋다. 미분화된 기저의 케라티노사이트의 경우, hBD2 및 hBD3 디펜신의 발현이 매우 낮으며, 도너(donor)와 샘플로 선택하는 세포 부위(cell sampling site)에 따라 다양하다. 특히, hBD2는 안면 피부 혹은 포피 샘플에서는 100% 발견되며, 복부 및 가슴에서 절개한 샘플에서는 50% 만이 발견된다(Ali RS et at., Expression of the peptides antibiotics hBD1 and hBD2 in normal human skin.J Invest Dermatol2001;117:106-111).
본 발명은 다양한 잠재적 활성물질을 시험할 수 있고 hBD2 및 hBD3 mRNA의 발현을 검출할 수 있는 재생모델을 제공하는 효과가 있다.
본 발명은 칼슘 특이 배지에서 케라티노사이트를 배양하기 위한 시스템에 관한 것이다. 이들 배양 조건 하에서 유도된 분화는 hBD2 및 hBD3 디펜신의 mRNA의 기초 발현을 증가시킬 수 있으며 그들의 유도를 검출할 수 있도록 한다.
96-웰에 배양된 배양세포는 예상 효과를 선별할 수 있도록 하는 모델이며 정성 및 정량적 분석들은 96-웰 포맷에 적합하였다.
정성적인 RT-PCR은 다양한 활성물질을 선별할 수 있도록 하며, 정량적인 RT-PCR에 의한 이들의 검증은 결과의 타당성 측면에서 필수 단계이다. 유도(stimulation)를 위해 세운 양성 대조군(hBD2에 대해서는 TNFα, hBD3에 대해서는 IFNγ)은 정량적인 RT-PCR 기술의 타당성을 부여할 뿐 아니라 참조값으로 사용함으로써 디펜신과 염증 물질에 대한 유도치를 제공한다.
염증에 대한 마커 물질의 분비 농도에 대한 상등액의 분석을 통해 비염증성 활성물질을 선별할 수 있다.
상기의 예상 활성은 상기 선별방법에 의해 다음의 활성성분에서 발견되었다: 쑥 뿌리, 망초, 딱총나무 껍질, 럽쳐워트, 파인애플 주스, 페퍼민트, 빈랑나무, 코코아, 퀴노아, 아르니카, 볼도, 사르사파릴라, 호두나무 잎, 히비스커스 꽃, 호박, 해바라기, 모란, 물레나물, 밤나무, 혹은 그들의 추출물, 자스몬산 혹은 비타민 A, 그것의 유도체 및 전구체, α-MSH 혹은 α-MSH를 구성하는 펩타이드 중 하나 혹은 상기 펩타이드 중 하나를 모방하는 화학 구조 즉 이소루신 에스테르, 칼슘 혹은 어떤 유기 혹은 무기 칼슘염.
실시예에서, 종래기술에 비해 신규함을 나타내는 특징은 본 발명의 필수부분이며 기능과 일반적인 특징들에서 권리의 보호를 찾을 수 있다.
게다가, 명세서 및 청구항에서, 모든 퍼센트는 중량 퍼센트로 나타내며 온도는 별다른 설명이 없다면 섭씨 온도를 말한다.
[실시예]
실시예 1 : 선별방법의 제 1 단계
96-웰 플레이트에 칼슘이 풍부한(최종 농도 1.7 mM) 무혈청 특이 배지를 넣고 배양한 단일층의 정상인간 유래의 케라티노사이트에서 1% 농도의 활성물질을 시험하였다.
80%의 컨플루언스에 도달했을 때, 상기 배양세포를 활성물질(웰 당 1개의 활성물질, 1 active/well)과 16시간 동안 접촉시켰다. 무처리 대조군과 2개의 양성대조군(hBD2에 대해서는 TNFα100 ng/mL, hBD3에 대해서는 IFNγ100 ng/mL)을 같은 배양 플레이트에서 함께 배양하였다. 16시간 후, 상등액을 모으고 세포를 PBS로 씻고 -80℃에서 동결건조하였다. 96-웰 추출용 키트를 사용하여 총 RNA를 추출하고 96-웰 광학현미경을 이용하여 260 nm 및 280 nm에서 분석하였다. RNA를 5 ng/mL로 희석하였다. 96-웰에서 50 ng의 초기 RNA을 사용하여 액틴, hBD2 및 hBD3에 대해 정성적인 원-스텝 RT-PCR을 실시하였다. 문헌에서 얻은 0.5 μM 농도의 프라이머를 사용하였다: hBD2: 센스: 5'-CCAGCCATCAGCCATGAGGGT-3'; 안티센스: 5'-GGAGCCCTTTCTGAATCCGCA-3'(Harder J.et al., A peptide antibiotic from human skin.Nature1997;387:861); hBD3: 센스: 5'-AGCCTAGCAGCTATGAGGATC-3'; 안티센스: 5'-CTTCGGCAGCATTTTCGGCCA-3'; 액틴: 센스: 5'-GTGGGGCGCCCCAGGCACCA-3'; 안티센스: 5'-CTCCTTAATGTCACGCACGATTTC-3'(Harder J. et al., Isolation and characterization of human β-defensin-3, a novel human inducible peptide antibiotic.J Biol Chem2001,276:5707-5713).
시료를 서모사이클러에 놓은 다음 동일한 증폭 프로그램에 따라 증폭하였다: 50℃, 30분; 94℃, 2분(94℃, 30초; 60℃, 30초; 68℃, 30초), 디펜신에 대해서는 32 사이클로, 액틴에 대해서는 30 사이클로; 72℃, 10분; 14℃에서 보관.
증폭 후, 최종산물을 3 ㎕의 액틴 증폭산물, 6 ㎕의 hBD2 증폭산물 및 6 ㎕의 hBD3 증폭산물을 혼합하였다. 5 ㎕의 전하완충액과 물 혼합액(2/3)을 첨가하고 최종적으로 20 ㎕을 미리 굳힌 2% 아가로오스 젤에 로딩하였다. 30분 동안 시료를 이동시키고 암실에서 자외선 하에서 밴드를 판독한 다음 컴퓨터상으로 사진촬영하였다.
밴드의 강도를 정량화하기 위해 젤 사진을 이미지 프로세싱 소프트웨어에서 분석하였다. 기초량의 디펜신의 발현을 검출할 수 없기 때문에(무처리 대조군), hBD2/액틴 및 hBD3/액틴의 강도 비, 예를 들어 양성 대조군(hBD2에 대해서는 TNFα, hBD3에 대해서는 IFNγ)에서 얻은 것과 서로 비교할 수 있으며 이는 당해 β-디펜신의 발현 유도를 뜻하는 것이다.
상기 1 단계 끝에, β-디펜신의 발현에 효과를 나타내는 활성물질을 선별하고 활성물질의 영향 하에서 배양 배지로 분비되는 MIP3α, IL1 및 IL8의 농도를 측정하기 위해 이들 활성물질에 해당하는 상등액을 ELISA 키트를 사용하여 시험하였다. 상기 농도는 그 결과를 서로 비교하기 위해 각각 분석된 RNA 농도를 참조한다.
기초량의 디펜신 발현은 일반적으로 검출되지 않기 때문에, hBD2 및 hBD3의 유도는 양성 대조군(hBD2에 대해서는 TNFα, hBD3에 대해서는 IFNγ)의 퍼센트로써 나타냈다. IL8 및 MIP3α 농도는 pg/mL/RNA 농도(ng/㎕)로 나타낸다.
hBD2 발현에 대한 활성성분의 효과
활성물질(1% 사용, w/w) hBD2 MIP3α IL8
대조군 0% 6.7 30.9
TNFα 100% 33 186
스피룰린(spirulin) 137% 28.8 87
퀴노아 가루 85% - -
쑥 뿌리 76% 7.2 30.2
딱총나무 껍질 65% 7.5 17.9
해바라기 58% 10.9 68.6
망초 50% 6.1 29.4
파인애플 주스 50% 7.6 39
럽춰워트 44% 7.8 55
코코아 39% 4.9 22.5+
호박 35% 5.2 33.1
페퍼민트 26% 1 4.8
사르사팔리아 뿌리 26% 4.7 15.4
빈랑나무 1% 0 25.7
아르니카 꽃 0% 3.9 27.8
모란 꽃 0% 0 2
물레나물 0% 2.81 19.37
밤나무 0% 0.6 36.7
볼도 0% 1.8 20.1
호두나무 잎 0% 1.4 19.4
히비스커스 꽃 0% 6.5 29.3
바질 잎 0% - -
홍차 0% - -
나무딸기 0% - -
L-이소루신 10㎍/mL 0% - -
D,L-이소루신 100 ㎍/mL 0% 5.6 30.6
이소루신 메틸 에스테르 100 ㎍/mL 16% 3.8 7.7
자스몬산 100 ㎍/mL 7% 6 25.3
hBD3 발현에 대한 활성성분의 효과
활성물질(1% 사용, w/w) hBD2 MIP3α IL8
대조군 0% 6.7 30.9
TNFα 100% 13.8 97
아르니카 꽃 460% 3.9 27.8
모란 꽃 192% 0 2
물레나물 126% 2.81 19.7
밤나무 103% 0.6 36.7
볼도 86% 1.8 20.1
럽춰워트 73% 7.8 55
히비스커스 꽃 50% 6.5 29.3
빈랑나무 45% 0 25.7
페퍼민트 40% 1 4.8
호두나무 잎 27% 1.4 19.4
코코아 15% 4.9 22.5
스피룰린 6% 28.8 87
바질 잎 0% - -
홍차 0% - -
나무딸기 0% - -
쑥 뿌리 0% 7.2 30.2
망초 0% 6.1 29.4
딱총나무 껍질 0% 7.5 17.9
파인애플 주스 0% 7.6 39
퀴노아 가루 0% 8 39
사르사파릴라 뿌리 0% 4.7 15.4
해바라기 0% 10.9 68.6
호박 0% 5.2 33.1
L-이소루신 10㎍/mL 0% - -
D,L-이소루신 100 ㎍/mL 0% 5.6 30.6
이소루신 메틸 에스테르 100 ㎍/mL 6% 3.8 7.7
자스몬산 100 ㎍/mL 0% 6 25.3
이들 활성물질 중, 제 1 단계의 기준을 만족시키는 것들, 즉 MIP3α 및 IL8 사이토카인의 발현을 유도하지 않으면서 hBD2 및/또는 hBD3를 유도하는 것들은 다음과 같다: 쑥 뿌리, 망초, 딱총나무 껍질, 럽쳐워트, 파인애플 주스, 페퍼민트, 빈랑나무, 코코아, 퀴노아, 아르니카, 볼도, 사르사파릴라, 호두나무 잎, 히비스커스 꽃, 호박, 해바라기, 모란, 물레나물, 밤나무, 혹은 그들의 추출물, 자스몬산 및 그것의 유도체 및 전구체, 이소루신 에스테르,
스피룰린은 hBD2를 강하게 유도하지만 IL8 혹은 MIP3α의 분비를 유도하므로 선택하지 않았다. 다른 활성물질은 디펜신을 유도하지 않았다. L-이소루신 및 많은 유도체들을 시험하였다: 정성적인 RT-PCR를 실시한 결과, 인간 유래의 디펜신 2 및 3의 유도치는 유의하지 않았다.
실시예 2: 선별방법의 제 2 단계
제 1 단계의 기준을 가장 만족시키는 활성물질에 대해 "선량효과" 분석을 실시하였다.
선택된 활성물질에 대한 세포독성 연구는 0.01% 내지 10%로 농도를 증가시키면서 실시하였다. 75%의 생존능을 비세포독성 농도의 한계치로 정하였다(최고 생존능 %).
활성물질을 칼슘이 풍부한(실시예 1과 동일한 농도임: CaCl21.7 mM) 무혈청 특이 배지에서 96-웰 배양 플레이트에 단일층으로 배양되는 정상인간 유래의 케라티노사이트를 4개의 세트(set)로 다섯 농도(0.001%에서 최고 생존능까지)를 시험하였다. 16시간 후, 상등액을 모으고 세포를 PBS로 세척한 다음 -80℃에서 동결건조하였다. 실리카겔 컬럼 상에서 96-웰 추출용 키트를 사용하여 총 RNA를 추출하고 260 nm 및 280 nm에서 96-웰 광학현미경을 이용하여 분석하였다. RNA는 5 ng/㎕로 희석하였다. 우선, Syrgreen 을 포함하는 원-스텝 키트를 사용하여 상기와 동일한 프라이머(0.5 μM)로 형광 서모사이클러에서 50 ng의 RNA로 96-웰에서 액틴, hBD2및 hBD3에 대한 정량적인 RT-PCR을 실시하였다. 증폭 프로그램은 다음과 같다: 50℃, 30분; 94℃, 15분; (94℃, 15초; 60℃, 30초; 72℃, 30초) x 50 사이클; 90℃, 1분; 30℃, 1분; 50℃ 에서 95℃ 까지(매 온도마다 10초간); 14℃에서 유지.
융합 그래프에 대한 연구를 통해 증폭 산물의 특이성을 확인할 수 있다. 사이클 수에 따른 형광강도 그래프로부터 형광 신호의 개시에 필요한 사이클 수에 해당하는 C(T) 값을 얻는다. mRNA가 많이 발현될 수 록, C(T) 값은 낮아진다. 각 RNA에 대한 Sgene=(1/2)C(T)는 증폭 동안 복제 수의 지수적 증가를 고려한다. Sgene hBD2/Sgene 액틴 및 Sgene hBD3/Sgene 액틴 비를 무처리 대조군과 비교함으로써 유도생성율을 구할 수 있다. 이미 입증된 디펜신 유도능을 갖는 활성물질의 상등액을 ELISA 키트를 사용하여 MIP3α, IL8 및 IL1α의 농도를 분석하였다. 동일한 상등액(200 ㎕)을 연속 희석(MIP3α및 IL8을 분석하기 위해서는 1.5 배로, IL1을 분석하기 위해서는 2배로)하여 이들 분석을 실시하였다. 그 결과를 서로 비교하기 위해, 각 웰에서 분석된 RNA 농도로써 농도를 고려하였다.
따라서, 본 발명자는 선택된 활성물질의 비염증성 특성을 확인하고 또한 염증 사이토카인의 분비를 유도하지 않으면서 디펜신을 유도하기에 적합한 양을 찾을 수 있었다.
정량적인 RT-PCR을 실시함으로써 무처리 대조군의 디펜신 발현에 있어서 기본 값을 얻을 수 있다. 따라서, 그 결과는 대조군의 퍼센트로써 나타낸다. IL8, IL1 및 MIP3α사이토카인의 농도는 pg/mL/RNA 농도(ng/㎕)로 나타내었다.
제 1 단계에서 선택된 활성물질의 선량효과
활성성분 농도 생존능 hBD2 hBD3 MIP3α IL8 IL1α
대조군 100% 100% 100% 5.6 47.4 26.9
TNFα 100 ng/mL - 1755% 774% 23.6 175 21.8
IFNγ 100 ng/mL - 472% 4631% 11.6 100.5 40.1
볼도 0.1%0.5%1% 84%87%76% 182%92%72% 168%213%703% 2.21.450.4 33.627.531.7 28.225.320.2
아르니카 0.01%0.1%0.3% 93%91%75% 117%128%138% 173%561%1830% 4.62.54.1 51.234.124.1 30.138.537.9
퀴노아 0.1%1%5%10% 83%91%90%92% 143%264%401%92% 102%112%237%438% 65.812.47.6 58.750.2150.2102.8 23.417.734.440.8
쑥 0.1%1%5%10% 87%75%78%83% 88%117%130%104% 103%116%452%3962% 3.22.93.22.3 36.93561.666.3 39.534.922.325.8
빈랑나무 0.1%1%2% 87%77%70% 88%35%98% 84%261%2781% 2.80.280 32.223.77.6 28.339.544.8
L-이소루신 ㎍/mL 3.1256.2512.525 ---- 110%107%95%110% 89%94%101%106% 5.24.95.94.5 36.933.642.235.1 2122.325.322.8
자스몬산 ㎍/mL 100500 -- 86%134% 477%26919% 4.613.6 37.9103.3 31.297.1
α-MSH ng/mL 1100 -- 198%186% 254%217% 4.53.9 34.641.7 24.726.1
따라서, 상기 정량적인 RT-PCR 기술을 통해 친염증성 사이토카인을 유도하지 않으면서, hBD3를 유도하는 볼도, 아르니카 및 빈랑나무의 효과를 확인할 수 있었다. 10%의 쑥은 친염증성 사이토카인의 분비를 의의있게 유도하지 않고 hBD3를 유도하며 퀴노아 씨 가루는 1%의 활성농도에서 hBD2를 유도하였다. 5% 농도에서는 hBD2 및 hBD3를 유도하였다. L-이소루신은 소의 디펜신-3를 유도할 수 있는 것으로 보고된 4 종류의 농도(3.125, 6.25, 12.5, 25 ㎍/mL)로 시험하였다(Fehlbaum P.et al., An essential amino acid induces epithelial β-defensin expression.PNAS2000; 97:12723-12728). 상기 아미노산은 정상인간의 케라티노사이트에서는 hBD2 및 hBD3를 유도할 수 없다고 알려져 있다. 또한, 100 ㎍/mL의 자스몬산 및 α-MSH 는 디펜신 2 및/또는 3를 유도할 수 있다.
이들 활성성분 중, 본 발명의 기준을 만족시키는 것들, 즉 MIP3α, IL8 혹은 IL1 사이토카인의 발현을 유도하지 않으면서 hBD2 및/또는 hBD3를 유도하는 것들은 다음과 같다: 볼도, 아르니카, 퀴노아, 쑥 혹은 그것의 추출물, 자스몬산 및 그것의 유도체 및 전구체, αMSH 혹은 α-MSH를 구성하는 펩타이드 중 하나 혹은 펩타이드들 중 하나를 모방하는 화학적 구조.
실시예 3:
실시예 2와 동일한 방법을 사용하여, 레티노산 및 레티놀의 hBD2 및/또는 hBD3 유도능을 시험하였다. 그 결과는 다음과 같다.
활성물질 농도 hBD2 hBD3
대조군 100% 100%
TNFα 100 ng/mL 1755% 774%
IFNγ 100 ng/mL 472% 4631%
레티노산 0.005% 26% 161%
레티놀 0.01% 168% 17562%
0.005%의 레티노산은 hBD3의 합성을 약하게 유도하며, 레티놀(혹은 비타민 A)은 hBD2를 약하게 유도하나 hBD3는 강하게 유도하였다.
이들 물질들이 과민증 혹은 불내성 반응을 유도하는 지를 알아보기 위해, 3개의 화장품용 제제를 실시예 4에 따라 다음의 다양한 종류들로 제조하였다:
ㆍ플라세보 크림(placebo cream) A: 제제에 어떠한 물질도 첨가하지 않음: 실시예에 기재되어 있는 "본 발명의 물질"을 제제에 첨가하지 않음.
ㆍ크림 B: 실시예에 따른 "본 발명의 물질"은 레티노산이며 0.005% 농도로 사용함.
ㆍ크림 C: 실시예에 따른 "본 발명의 물질"은 레티놀이며 0.01% 농도로 사용함.
상기 세 종류의 제제를 두가지 방식으로 시험하였다:
1) 제제의 일차 피부 과민증 지수를 측정하기 위해, 동물에 반복투여함.
2) 제제의 잠재적 과민성 혹은 민감도를 측정하기 위해, 인간 지원자에게 반복적으로 국소투여함.
상기 세 종류의 제제는 두 연구에서, 과민증이나 알레르기는 발견되지 않았으므로 레티노산과 레티놀(그들의 전구체 및 유도체뿐만 아니라)은 사용된 농도에서 어떠한 염증이나, 과민증 혹은 불내성 반응을 유도하지 않는 것으로 간주할 수 있다.
실시예 4: 주름방지크림
INCI 명 함량
물 100으로 채움
글리세린 5
카르보머(carbomer?) 0.2
테트라소듐 EDTA 0.1
차나무잎기름 2
수화된 폴리이소부텐 8
글리세릴 스테아레이트 에스이 2
디메티콘 1
글리세릴 스테아레이트 및 PEG-100 스테아레이트 1.5
트리에틸헥사노인 5
스테아르산 2
세틸 알콜 1
실리카 1
디카프릴릴 말레이트 6
글리세릴 스테아레이트 1
디메티콤 3.5
물 2.3
트리에탄올아민 0.5
페녹시에탄올, 메틸파라벤, 프로필파라벤, 부틸파라벤, 에틸파라벤 0.7
방향제 0.3
토코페롤 아세테이트 0.5
레티놀 0.1
소듐 하이알루로네이트 0.03
적성초 추출물 1
가수분해된 간장단백질 0.4
본 발명 물질 0.001 ~ 20
실시예 5: 기미방지씨럼
INCI 명 함량
물 100으로 채움
트리소듐 EDTA 0.1
하이드록시메틸셀룰로오스 0.1
크산틴검 0.3
페녹시에탄올, 메틸파라벤, 프로필파라벤, 부틸파라벤, 에틸파라벤 0.56
부틸렌 글리콜 5
폴리소르베이트 20 1
방향제 0.05
토코페롤 아세테이트 0.1
소듐 시트레이트 0.65
마그네슘 아스코르빌포스페이트 1
본 발명 물질 0.001 ~ 20
실시예 6: 파운데이숀
INCI 명 함량
물 100으로 채움
마그네슘 알루미늄 실리케이트 0.5
셀룰로오스검 0.35
글리세린 3
폴리비닐 피롤리돈 5
디프로필렌 글리콜 0.05
프로필렌 글리콜 2
페녹시에탄올, 메틸파라벤, 프로필파라벤, 부틸파라벤, 에틸파라벤 1
크산틴검 0.2
트리에탄올아민 0.7
이소프로필 팔미테이트 4
미네랄 오일 2
헥실데카놀 3
글리세릴 스테아레이트 2
스테아르산 2.4
올레산 0.5
폴리소르베이트 80 0.7
토코페롤 0.5
티타니움 디옥사이드 7
산화철 4
나일론-2 6
소듐 하이알루로네이트 0.01
방향제 0.05
프로필렌 글리콜 디카프릴레이트/디카프레이트 7.2
본 발명 물질 0.001 ~ 20
실시예 7: UVA/UVB 보호용 화이트닝 크림
INCI 명 함량
옥틸메톡시시나메이트 4
세틸 PEG/PPG-10/1디메티콘 3
Bis-PEG/PPG-14/14 디메티콘 3
디메티콘 6
사이클로메티콘 4
폴리데센 4
페녹시에탄올, 메틸파라벤, 프로필파라벤, 부틸파라벤, 에틸파라벤 0.65
토코페롤 0.5
방향제 0.8
PPG-3 미리스틸 에스테르 0.5
티타늄 디옥사이드 8
페녹시에탄올 0.35
소듐 시트레이트 0.65
마그네슘 아스코르빌 포스페이트 3
물 QSP 100
크산틴검 0.4
부틸렌 글리콜 2
본 발명 물질 0.001 ~ 20
실시예 8: 슬리밍 젤
INCI 명 함량
물 100 으로 채움
테트라소듐 EDTA 0.2
카르보머? 0.5
글리세린 3.0
폴리글리세릴메타크릴레이트 및 프로필렌 글리콜 5.0
디프로필렌 글리콜 3.0
부틸렌 글리콜 5.0
페녹시에탄올, 메틸파라벤, 프로필파라벤, 부틸파라벤, 에틸파라벤 0.65
트리에탄올아민 0.5
카페인 2
루스커스 아쿠레아투스 추출물 1
본 발명 물질 0.001 ~ 20
실시예 9: 모이스춰라이저 크림
INCI 명 함량
물 100 g으로 맞춤
카르보머? 0.35
테트라소듐 EDTA 0.1
폴리소르베이트 60 3
솔비탄 스테아레이트 2.6
이소프로필 팔미테이트 2.5
세틸 팔미테이트 4
에틸헥실 팔미테이트 5.1
스쿠알렌 1
세틸 알콜 2.5
사이클로메티콘 1
디메티콘 0.5
트리에탄올아민 0.53
부틸렌 글리콜 5
방향제 0.3
페녹시에탄올, 메틸파라벤, 프로필파라벤, 부틸파라벤, 에틸파라벤 0.65
토코페랄 아세테이트 0.5
소듐 하이알루로네이트 0.03
스위트 아몬드 오일 단백질 및 글리세린 2
폴리글리세릴메타크릴레이트 5
본 발명 물질 0.001 ~ 20
실시예 10: 샴푸
INCI 명 함량
물 100 g으로 채움
크산틴검 0.8
시트르산 0.8
소듐 로레트 설페이트 40
페녹시에탄올, 메틸파라벤, 프로필파라벤, 부틸파라벤, 에틸파라벤 2
본 발명 물질 0.001 ~ 20
상기 실시예를 통해 살펴본 바와 같이, 본 발명의 활성성분은 염증과정 동안 보통 함께 발현되는 친염증성 분자 혹은 물질의 직접 혹은 간접 합성을 감지할 수 있는 정도로 유도하지 않거나 혹은 자극하지 않으면서, 인간 유래 β-디펜신 타입 2(hBD2) 및/또는 인간 유래 β-디펜신 타입 3(hBD3)의 발현을 직접 혹은 간접적으로 유도할 수 있는 뛰어난 효과가 있다. 또한, 본 발명은 이들 활성성분을 포함하는 화장품 혹은 약학적 조성물을 제조할 수 있어 화장품 산업 및 약학산업상 유용한 발명인 것이다.

Claims (31)

  1. 염증, 과민증 혹은 불내성 반응을 유발시키지 않음을 특징으로 하는 인간 유래 β-디펜신 타입 2(hBD2) 및/또는 인간 유래 β-디펜신 타입 3(hBD3)의 발현을 직접 혹은 간접적으로 유도할 수 있는 활성성분.
  2. 염증과정 동안 보통 함께 발현되는 친염증성 분자 혹은 물질의 직접 혹은 간접 합성을 감지할 수 있는 정도로 유도하지 않거나 혹은 자극하지 않음을 특징으로 하는 인간 유래 β-디펜신 타입 2(hBD2) 및/또는 인간 유래 β-디펜신 타입 3(hBD3)의 발현을 직접 혹은 간접적으로 유도할 수 있는 활성성분.
  3. 제 1항 또는 제 2항에 있어서, 염증과정 동안 보통 함께 발현되는 상기 친염증성 분자 혹은 물질은 MIP α(대식세포 염증 단백질), IL8, IL1 혹은 다른 인터루킨, 히스타민, 트립타아제, 기질 P, 류코트리엔스, 혹은 프로스타글란딘임을 특징으로 하는 활성성분.
  4. 제 1항 내지 제 3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 활성성분은 인간 유래의 상피배양세포, 특히 케라티노사이트 및/또는 각질배양세포, 생존상태의 인간피부생검, 재건표피모델 혹은 재건피부모델에서 염증과정 동안 보통 함께 발현되는 친염증성 분자 혹은 물질의 직접 혹은 간접 생성을 감지할 수 있는 정도로 유도하지 않음을 특징으로 하는 활성성분.
  5. 제 1항 내지 제 4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 활성성분은 쑥 뿌리, 망초, 딱총나무 껍질, 럽쳐워트(rupturewort), 파인애플 주스, 페퍼민트, 빈랑나무, 코코아, 퀴노아, 아르니카, 볼도, 사르사파릴라, 호두나무 잎, 히비스커스 꽃, 호박, 해바라기, 모란, 물레나물, 밤나무, 혹은 그들의 추출물, 자스몬산 혹은 비타민 A, 그것의 유도체 및 전구체, α-MSH 혹은 α-MSH를 구성하는 펩타이드 중 하나 혹은 상기 펩타이드 중 하나를 모방하는 화학 구조 즉 이소루신 에스테르, 칼슘 혹은 어떤 유기 혹은 무기 칼슘염으로부터 선택됨을 특징으로 하는 활성성분.
  6. 제 1항 내지 제 5항에 기재된 활성성분을 적어도 하나 포함함을 특징으로 하는 조성물.
  7. 제 6항에 있어서, 상기 활성성분은 중량 당 0.001% 내지 20%의 농도로, 바람직하게는 0.01% 내지 10%로 포함됨을 특징으로 하는 조성물.
  8. β-디펜신 타입 2 및/또는 타입 3의 발현을 유도할 수 있고 염증과정 동안 보통 함께 발현되는 적어도 하나의 친염증성 분자 혹은 물질의 직접 혹은 간접 합성을 감지할 수 있는 정도로 유도하지 않거나 혹은 자극하지 않을 수 있는 농도로 있으며, 화장품용 부형제와 함께 혼합될 수 있음을 특징으로 하는 제 1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 기재된 적어도 하나의 활성성분이나 혹은 화장품 조성물의 제조를 위한 제 6항 내지 제 7항 중 어느 한 항에 기재된 조성물의 용도.
  9. β-디펜신 타입 2 및/또는 타입 3의 발현을 유도할 수 있고 염증과정 동안 보통 함께 발현되는 적어도 하나의 친염증성 분자 혹은 물질의 직접 혹은 간접 합성을 감지할 수 있는 정도로 유도하지 않거나 혹은 자극하지 않을 수 있는 농도로 있으며, 약제용 부형제와 함께 혼합될 수 있음을 특징으로 하는 제 1항 내지 제 5항 중 어느 한 항에 기재된 적어도 하나의 활성성분이나 혹은 약학적 조성물의 제조를 위한 제 6항 내지 제 7항 중 어느 한 항에 기재된 조성물의 용도.
  10. 화장품 혹은 약학적 조성물에 살미생물제 혹은 정미생물제를 적어도 하나 혼합함을 특징으로 하는 제 1항 내지 제 5항 중 어느 한 항에 기재된 적어도 하나의 활성성분의 용도.
  11. β-디펜신 타입 2 및/또는 타입 3의 발현을 유도할 수 있고 염증과정 동안 보통 함께 발현되는 적어도 하나의 친염증성 분자 혹은 물질의 직접 또는 간접 합성을 감지할 수 있는 정도로 유도하지 않거나 혹은 자극하지 않는 적어도 하나의 활성성분을 선별할 수 있는 특징을 갖는 세포 혹은 조직 모델.
  12. 제 11항에 있어서, 상기 세포 혹은 조직 모델은 상피세포, 예를 들어, 적절한 배양 조건 하에서 특히, 칼슘 함량이 0 ~ 100 mM인, 바람직하게는 1.7 mM의 농도에서 배양되기에 적합한 케라티노사이트를 포함함을 특징으로 하는 세포 혹은 조직 모델.
  13. a) 적절한 배양 조건 하에서 선별된 다양한 잠재적 활성성분을 첨가하여 세포 혹은 조직 모델을 배양하는 단계;
    b) 인간 유래의 β-디펜신 타입 2 및/또는 타입 3의 발현 유도의 유무를 직접 혹은 간접적으로 확인하는 단계; 및
    c) 염증과정 동안 보통 함께 발현되는 친염증성 분자 혹은 물질의 유도 유무를 직접 혹은 간접적으로 확인하는 단계를 포함함을 특징으로 하는 인간 유래의 β-디펜신 타입 2 및/또는 타입 3의 직접 혹은 간접 발현을 유도할 수 있고 염증과정 동안 보통 함께 발현되는 적어도 하나의 친염증성 분자 혹은 물질의 직접 또는 간접 합성을 감지할 수 있는 정도로 유도하지 않거나 혹은 자극하지 않을 수 있는 활성성분의 선별방법.
  14. 제 13항에 있어서, d)단계를 추가로 포함함을 특징으로 하는 활성성분의 선별방법:
    d) 인간 유래의 β-디펜신 타입 2 및/또는 타입 3의 직접 혹은 간접 발현을 유도할 수 있고 동시에 염증과정 동안 보통 함께 발현되는 친염증성 분자 혹은 물질의 직접 혹은 간접 합성을 감지할 수 있는 정도로 유도하지 않거나 혹은 자극하지 않을 수 있는 본 방법에서 시험된 적어도 하나의 활성성분을 선택하는 단계.
  15. 제 13항 또는 제 14항에 있어서, a)단계에서, 세포 혹은 조직 모델은 상피세포 혹은 생존상태의 피부생검 혹은 재건표피모델 혹은 재건피부모델을 포함하며, 상피세포는 예를 들어, 적절한 배양 조건 하에서 특히 칼슘 함량이 0 내지 100 mM로, 바람직하게는 1.7 mM의 농도에서 배양되기에 적합한 케라티노사이트 및/또는 각질세포를 포함함을 특징으로 하는 활성성분의 선별방법.
  16. 제 13항 내지 제 15항 중 어느 한 항에 있어서, a)단계에서, 6 내지 48시간동안, 바람직하게는 약 16시간 동안(접촉시간) 세포 혹은 조직 모델과 선별되는 다양한 잠재적 활성성분을 함께 배양함함을 특징으로 하는 활성성분의 선별방법.
  17. 제 13항 내지 제 16항 중 어느 한 항에 있어서, b)단계에, 총 RNA의 추출 및 분석을 포함함을 특징으로 하는 활성성분의 선별방법.
  18. 제 13항 내지 제 17항 중 어느 한 항에 있어서, b)단계에, 상기 인간 유래의 β-디펜신 타입 2 및/또는 타입 3를 코딩하는 mRNA의 분석을 포함함을 특징으로 하는 활성성분의 선별방법.
  19. 제 13항 내지 제 18항 중 어느 한 항에 있어서, b)단계에서, 액틴, hBD2 및hBD3에 대한 RT-PCR를 실시함을 포함하는 것을 특징으로 하는 활성성분의 선별방법.
  20. 제 13항 내지 제 19항 중 어느 한 항에 있어서, b)단계에서, 자외선 하에서 판독할 수 있는 핵산 삽입부를 포함하는 아가로오스 젤에 증폭 산물을 로딩함을 포함하는 것을 특징으로 하는 활성성분의 선별방법.
  21. 제 13항 내지 제 20항 중 어느 한 항에 있어서, b)단계에서, 자외선 하에서 hBD2/액틴 및 hBD3/액틴 밴드의 강도 비를 비교하는 것을 포함함을 특징으로 하는 활성성분의 선별방법.
  22. 제 13항 내지 제 21항 중 어느 한 항에 있어서, c)단계에서, 염증과정 동안 보통 함께 발현되는 친염증성 분자 혹은 물질을 분석하기 위해 ELISA 형 분석을 포함함을 특징으로 하는 활성성분의 선별방법.
  23. 제 13항 내지 제 22항 중 어느 한 항에 있어서, d)단계에서, 염증과정 동안 보통 함께 발현되는 친염증성 분자 혹은 물질의 직접 혹은 간접 합성을 자극하지 않거나 혹은 감지할 수 있는 정도로 유도함이 없이 상기 인간 유래의 β-디펜신 타입 2 및/또는 타입 3를 코딩하는 mRNA의 발현을 유도할 수 있는 적어도 하나의 활성성분을 선택하는 것을 포함함을 특징으로 하는 활성성분의 선별방법.
  24. 제 13항 내지 제 23항 중 어느 한 항에 있어서, IL1, IL8, MIP3α와 같은 염증과정 동안 보통 함께 발현되는 적어도 하나의 친염증성 분자 혹은 적어도 하나의 물질을 자극하지 않거나 혹은 감지할 수 있는 정도로 유도하지 않으면서 상기 인간 유래의 β-디펜신의 발현을 유도하는 활성성분을 선택하는 것을 포함함을 특징으로 하는 활성성분의 선별방법.
  25. 제 13항 내지 제 24항 중 어느 한 항에 있어서, 다음의 단계를 포함함을 특징으로 하는 활성성분의 선별방법:
    칼슘이 풍부한 무혈청 특이 배지에서, 예를 들어 무처리 대조군과 두개의 양성 대조군(hBD2에 대해서는 TNFα, hBD3에 대해서는 IFNγ)을 동시에 준비하여 단일층의 정상인간 유래의 케라노사이트와 선별되는 잠재적 활성성분이 접촉하는 단계;
    총 RNA를 추출한 다음, 광학현미경을 이용하여 바람직하게는 260 내지 280 nm의 파장에서 총 RNA를 분석하는 단계(이때 RNA를 희석할 수도 있음);
    초기 RNA(initial RNA)에서 액틴, hBD2 및 hBD3에 대한 RT-PCR을 실시하는 단계;
    예를 들어, 서모사이클러에서 액틴, hBD2 및 hBD3에 대해 동일한 증폭 프로그램에 따라 초기 RNA를 증폭하는 단계;
    hBD2, hBD3 및 액틴의 증폭 산물을 혼합하고 전하완충액과 물(2/3) 혼합액을첨가한 다음 최종용액을 미리 굳힌 아가로오스 젤에 침적시킨 후 시료를 이동시키고 자외선 하에서, 바람직하게는 암실에서 판독할 수 있는 기술을 사용하여 밴드를 확인한 다음 컴퓨터상으로 사진을 찍으며, 기초량의 디펜신의 발현이 탐지될 수 없기 때문에(무처리 대조군), hBD2/액틴 및 hBD3/액틴 밴드의 강도 비, 예를 들어 양성 대조군(hBD2에 대해서는 TNFα를, hBD3에 대해서는 IFNγ를 처리함)에서 얻은 결과와 비교하여 당해 β-디펜신의 발현 유도를 보여주는 단계.
  26. 제 13항 내지 제 25항 중 어느 한 항에 있어서, 다음의 단계를 추가적으로 포함함을 특징으로 하는 활성성분의 선별방법:
    인간 유래 β-디펜신 타입 2 및/또는 타입 3의 발현에 효과를 나타내는 선별되는 잠재적 활성성분을 선택하는 단계;
    활성성분에 해당하는 상등액을 시험하여 이들 활성물질의 영향 하에서 배양배지에 분비되는 MIP3α, IL1 및 IL8의 농도를 측정하는 단계; 예를 들어, 상기 농도는 서로 결과를 비교하기 위해 분석된 RNA 농도를 참조할 수 있음.
  27. 제 13항 내지 제 26항 중 어느 한 항에 있어서, 염증과정 동안 보통 함께 발현되는 친염증성 분자 혹은 물질의 직접 혹은 간접 합성을 자극하지 않거나 혹은 감지할 수 있는 정도로 유도하지 않으면서, 인간 유래의 β-디펜신 타입 2 및/또는 타입 3의 직접 혹은 간접 발현을 유도할 수 있는 활성성분을 동정할 수 있으며, 상기 활성성분은 쑥 뿌리, 망초, 딱총나무 껍질, 럽쳐워트, 파인애플 주스, 페퍼민트, 빈랑나무, 코코아, 퀴노아, 아르니카, 볼도, 사르사파릴라, 호두나무 잎, 히비스커스 꽃, 호박, 해바라기, 모란, 물레나물, 밤나무, 혹은 그들의 추출물, 자스몬산 혹은 비타민 A, 그것의 유도체 및 전구체, α-MSH 혹은 α-MSH를 구성하는 펩타이드 중 하나 혹은 상기 펩타이드 중 하나를 모방하는 화학 구조 즉 이소루신 에스테르, 칼슘 혹은 어떤 유기 혹은 무기 칼슘염으로부터 선택됨을 특징으로 하는 활성성분의 선별방법.
  28. 대상 조직, 특히 피부, 점막, 머리카락 및 손톱 혹은 두피에 대해 살균 및/또는 살진균 효과를 나타내는 화장품 조성물, 특히 두피의 경우 비듬을 예방하거나 혹은 치료하는 데 사용할 수 있는 화장품 조성물을 제조하기 위한 제 1항 내지 제 5항에 기재된 활성성분의 용도.
  29. 대상 조직에 대해 살균 및/또는 살진균 효과를 나타내기 위해, 특히 여드름 및 세균성 혹은 진균성 피부질환의 치료 및/또는 예방을 위해 사용되는 약학적 조성물을 제조하기 위한 제 1항 내지 제 5항에 기재된 활성성분의 용도.
  30. 제 29항에 있어서, 피부의 β-디펜신의 살균효과와 항미생물제의 효과를 겸하고, 특히 비듬, 여드름, 백반, 피부질환 및 다른 피부, 점막, 두피 및 머리카락 및 손톱과 같은 미생물 제제와 관련된 질환을 치료하기 위한 약학분야에서의 활성성분의 용도.
  31. 상피 및 재건피부의 구성 및 피부생검의 생존 시 β-디펜신의 살균효과를 이용하기 위한 조직재건분야에서의 제 1항 내지 제 5항에 기재된 활성성분의 용도.
KR1020020077561A 2002-08-02 2002-12-07 인간 유래 β-디펜신 타입 2 및/또는 타입 3의 유도활성성분 및 상기 활성성분을 포함하는 화장품 또는약학적 조성물 KR100697360B1 (ko)

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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102524684B1 (ko) * 2022-09-05 2023-04-21 주식회사 래디안 피부의 방어 기능을 증진시키는 화장료 조성물

Families Citing this family (46)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2843125B1 (fr) * 2002-08-02 2012-11-16 Coletica Principes actifs stimulant les beta-defensives humaines de type 2 et/ou de type 3, et compositions cosmetiques ou pharmaceutiques comprenant de tels principes actifs
CN1852708B (zh) * 2003-09-19 2010-09-22 大塚制药株式会社 人β防御素分泌促进剂
EP1731357A4 (en) * 2004-02-02 2009-03-04 Daihatsu Motor Co Ltd AUTOMOTIVE SEAT
FR2869541B1 (fr) 2004-04-30 2007-12-28 Expanscience Sa Lab Utilisation d'une composition comprenant du d-mannoheptulose et/ou du perseitol dans le traitement et la prevention des maladies liees a une modification de l'immunite innee
US7258878B2 (en) * 2004-12-20 2007-08-21 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Anti-microbial composition and methods of use thereof
US9284274B2 (en) 2005-12-07 2016-03-15 Ramot At Tel-Aviv University Ltd. Chemical derivatives of jasmonate, pharmaceutical compositions and methods of use thereof
EP2402321A3 (en) * 2005-12-07 2012-02-29 Ramot at Tel Aviv University, Ltd. Chemical derivatives of jasmonate, pharmaceutical compositions and methods of use thereof
IL176608A0 (en) * 2006-06-28 2006-10-31 Lycored Ltd Compositions and methods for treating and preventing gastro esophageal reflux disease
DE602007005664D1 (de) * 2006-09-18 2010-05-12 Seppic Sa Verwendung eines quinoa-extrakts als kosmetisches und pharmazeutisches schlankheitsmittel und/oder als mittel zur verhinderung der formierung neuer fette im menschlichen körper
FR2905861B1 (fr) * 2006-09-18 2008-10-17 Seppic Sa Utilisation d'un extrait de quinoa comme actif prevenant la formation de nouvelles graisses dans le corps humain
FR2905860B1 (fr) * 2006-09-18 2008-10-17 Seppic Sa Utilisation d'un extrait de quinoa comme actif cosmetique et pharmaceutique amincissant
NZ599605A (en) 2007-02-19 2013-11-29 Marinepolymer Tech Inc Hemostatic compositions and therapeutic regimens
FR2916634B1 (fr) * 2007-06-01 2009-10-02 Jean Noel Thorel Association synergique vis-a-vis de la flore microbienne de l'epiderme humain et applications cosmetiques et pharmaceutiques
FR2921254B1 (fr) * 2007-09-21 2009-11-13 Oreal Utilisation en depigmentation d'une association d'acide jasmonique et d'acide ascorbique
FR2929511B1 (fr) 2008-04-02 2010-12-31 Basf Beauty Care Solutions France Sas Nouveau principe actif stimulant la proliferation et/ou l'activite des fibroblastes.
KR100991293B1 (ko) 2008-08-11 2010-11-01 (주)바이오에프디엔씨 신규한 인간 베타 디펜신 유사 항균 펩타이드 및 이의 아토피 피부염 개선 소재로서의 활용
US8440237B2 (en) 2009-04-27 2013-05-14 Mary Kay Inc. Botanical anti-acne formulations
US9284252B2 (en) 2009-06-09 2016-03-15 Sepal Pharma Ltd. Use of jasmonate ester derivatives for treating benign hyperproliferative skin disorders
DE102009044970A1 (de) 2009-07-23 2011-01-27 Henkel Ag & Co. Kgaa Verwendung von humanem beta-Defensin zur Beeinflussung des natürlichen Pigmentierungsprozesses
DE102009029110A1 (de) * 2009-09-02 2011-03-03 Henkel Ag & Co. Kgaa Antimikrobielle Formulierung
GB0920846D0 (en) 2009-11-27 2010-01-13 Croda Int Plc Defenin inducing agent
FR2953722B1 (fr) 2009-12-16 2012-03-09 Expanscience Lab Composition comprenant au moins un sucre en c7 pour le traitement de l'alopecie, pour le traitement cosmetique des phaneres, et pour le soin des cheveux, cils ou ongles
JP2011168555A (ja) * 2010-02-22 2011-09-01 Pola Chemical Industries Inc 鑑別方法
NZ602909A (en) 2010-04-15 2015-01-30 Marinepolymer Tech Inc Anti-bacterial applications of poly -n-acetylglucosamine nanofibers
CN103025386B (zh) * 2010-05-24 2015-12-16 因德纳有限公司 用于治疗微生物感染的罗望子种子多糖
JP6266857B2 (ja) * 2010-09-21 2018-01-24 共栄化学工業株式会社 化粧料
WO2012110971A2 (en) * 2011-02-17 2012-08-23 Promed Exports Pvt. Ltd. Method and composition to retard sorption of preservatives to plastics
CA2832859C (en) 2011-04-15 2020-06-16 Marine Polymer Technologies, Inc. Treatment of disease with poly-n-acetylglucosamine nanofibers
RU2453321C1 (ru) * 2011-05-03 2012-06-20 Общество с ограниченной ответственностью "ЛЕКВЕТ" (ООО "ЛЕКВЕТ") Препарат для лечения животных с противовоспалительным и антибактериальным действиями
US20140242093A1 (en) * 2011-07-29 2014-08-28 Fred Hutchinson Cancer Research Center Methods and compositions for modulating the innate immune response and/or myogenesis in a mammalian subject
EP2793848B1 (en) 2011-12-19 2019-06-26 Mary Kay, Inc. Navy bean extract to whiten the skin and improve skin tone
JP2013010796A (ja) * 2012-10-15 2013-01-17 Kao Corp Ｓ１００ａ８発現調節剤
CN102988979B (zh) * 2012-12-13 2014-05-07 北京新华联协和药业有限责任公司 蒿属花粉变应原疫苗含片及其制备方法
US9511144B2 (en) 2013-03-14 2016-12-06 The Proctor & Gamble Company Cosmetic compositions and methods providing enhanced penetration of skin care actives
JP6364281B2 (ja) * 2013-09-10 2018-07-25 花王株式会社 皮膚老化予防又は改善剤
KR101620148B1 (ko) * 2013-12-19 2016-05-12 주식회사 바이오에프디엔씨 항균펩타이드 베타-디펜신 ３ 및 ３ｈ의 라우릭산 융합을 통한 장기지속형 유도체, 세포투과성 펩타이드 융합을 통한 피부투과형 유도체 개발과 이를 함유하는 화장료 조성물
FR3015898B1 (fr) 2013-12-31 2016-02-05 Virbac Sa Composition topique comprenant des extraits de boldo et de reine des pres, destinee a un animal, et ses applications
KR102323049B1 (ko) 2014-03-10 2021-11-05 마리 케이 인코포레이티드 피부 라이트닝 조성물
JP6407848B2 (ja) * 2015-01-14 2018-10-17 御木本製薬株式会社 ディフェンシン産生促進剤、カテリシジン産生促進剤、抗菌剤
EP3389620B1 (en) * 2015-12-15 2022-09-14 Medicell Technologies, LLC Stem cell stimulating compositions and methods of treating melasma
EP3834615A1 (en) * 2016-03-31 2021-06-16 Gojo Industries, Inc. Antimicrobial peptide stimulating sanitizing composition
AU2017240069B2 (en) 2016-03-31 2024-03-07 Gojo Industries, Inc. Sanitizer composition with probiotic/prebiotic active ingredient
US10806769B2 (en) 2016-03-31 2020-10-20 Gojo Industries, Inc. Antimicrobial peptide stimulating cleansing composition
US11564879B2 (en) 2016-11-23 2023-01-31 Gojo Industries, Inc. Sanitizer composition with probiotic/prebiotic active ingredient
JP7138496B2 (ja) * 2018-07-06 2022-09-16 花王株式会社 抗菌ペプチド発現促進剤
CN116251050B (zh) * 2023-05-09 2023-08-01 四平名居红酒庄园有限公司 一种葡萄籽红酒面膜泥的制备方法

Family Cites Families (48)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3062721A (en) * 1957-03-20 1962-11-06 Grate Lorene Grigsby Skin care lotion
US3961054A (en) * 1973-01-22 1976-06-01 Ciba-Geigy Corporation Combatting dandruff with mercapto quinoline N-oxides
LU81257A1 (fr) * 1979-05-15 1980-12-16 Oreal Composition cosmetique pour le traitement des cheveux et de la peau,contenant un extrait de salsepareille
ATE11217T1 (de) * 1979-10-12 1985-02-15 William James Cunliffe Antibiotische substanzen, verfahren zu deren herstellung und deren zusammensetzungen; stamm von staphylococcus epidermidis, welcher diese antibiotische substanz produziert und deren zusammensetzungen.
LU83173A1 (fr) * 1981-02-27 1981-06-05 Oreal Nouvelles compositions cosmetiques pour le traitement des cheveux et de la peau contenant une poudre resultant de la pulverisation d'au moins une plante et un agent de cohesion
HU190813B (en) * 1982-10-07 1986-11-28 Valyi,Gabriella,Hu Process for producing cosmetic for aftertreating seborrhoeic and acneic processes
US4581351A (en) * 1982-11-23 1986-04-08 Sutton Laboratories, Inc. Composition of matter containing imidazolidinyl urea and pyrithione and its derivatives
DE3319184A1 (de) 1983-05-27 1984-11-29 Henkel Kgaa Verfahren zur abtrennung von allergenen aus arnikablueten mittels co(pfeil abwaerts)2(pfeil abwaerts)-hochdruckextraktion
US4849214A (en) * 1985-02-12 1989-07-18 Ruiseco Mario G Oil based scalp treatment composition
JPS6253917A (ja) * 1985-09-02 1987-03-09 Shiseido Co Ltd 頭髪化粧料
JPS62148427A (ja) * 1985-12-23 1987-07-02 Kao Corp 皮膚外用剤
US5084270A (en) * 1988-04-22 1992-01-28 Revlon, Inc. Cosmetic compositions containing N-alkoxyalkylamides
US5093360A (en) * 1989-04-07 1992-03-03 Yu Ruey J Retinal, derivatives and their therapeutic use
US5053222A (en) * 1989-06-07 1991-10-01 Shiseido Company Ltd. Hair cosmetic composition
US6350784B1 (en) * 1996-02-12 2002-02-26 Meryl J. Squires Antimicrobial prevention and treatment of human immunedeficiency virus and other infectious diseases
JPH05331041A (ja) * 1992-05-29 1993-12-14 Tsuneo Nanba 美白化粧料
ES2289370T3 (es) * 1992-07-13 2008-02-01 Shiseido Company, Ltd. Composicion estabilizada para tratamiento cutaneo externo que comprende retinol.
JPH06227960A (ja) * 1993-02-01 1994-08-16 Yakult Honsha Co Ltd メラニン生成抑制剤および皮膚化粧料
FR2714602B1 (fr) * 1993-12-30 1996-02-09 Oreal Composition antiacnéique pour le traitement simultané des couches superficielles et profondes de la peau, son utilisation.
JP3922594B2 (ja) * 1996-03-19 2007-05-30 株式会社ノエビア 抗菌性低刺激化粧料
US6342208B1 (en) * 1996-08-02 2002-01-29 Plum Kerni Produktion A/S Oil-in-water emulsion containing C10-C24 fatty acid derivatives for treating skin of mammals
AUPO427596A0 (en) * 1996-12-20 1997-01-23 Cooperative Research Centre For Tropical Plant Pathology Anti-microbial protein
JP4309972B2 (ja) * 1997-03-26 2009-08-05 雪印乳業株式会社 静菌及び抗菌剤
FR2765109B1 (fr) * 1997-06-25 2001-02-09 Seppic Sa Composition comprenant un lipoaminoacide et les constituants d'un extrait de plantes riches en tanins et utilisation en cosmetique
JP4061675B2 (ja) * 1997-09-02 2008-03-19 王子製紙株式会社 天然物由来の抗菌剤
JPH11286496A (ja) * 1997-12-22 1999-10-19 Morinaga & Co Ltd 抗菌ペプチド誘導及び／又は増強因子
US6984622B2 (en) * 1998-03-25 2006-01-10 The Regents Of The University Of California Use of lipopolysaccharides to manage corneal infections and wounds
AU3547499A (en) * 1998-03-31 1999-10-18 Abbott Laboratories Bacterial or yeast extracts which stimulate the production of defensins and methods of use thereof
CA2332961A1 (en) * 1998-05-21 1999-11-25 Michael Zasloff A method for stimulation of defensin production by exposure to isoleucine
JP4132351B2 (ja) * 1999-02-10 2008-08-13 株式会社資生堂 抗プラスミン剤
US6887846B2 (en) * 1999-03-24 2005-05-03 Zengen, Inc. Antimicrobial amino acid sequences derived from alpha-melanocyte-stimulating hormone
JP2000336024A (ja) * 1999-05-27 2000-12-05 Ichimaru Pharcos Co Ltd 保湿性植物抽出物を含有する化粧料組成物
JP2001064192A (ja) * 1999-08-25 2001-03-13 Sunstar Inc ランゲルハンス細胞の遊走抑制剤及び抗原提示抑制剤
US6333180B1 (en) * 1999-12-21 2001-12-25 International Flavors & Fragrances Inc. Bioprocess for the high-yield production of food flavor-acceptable jasmonic acid and methyl jasmonate
JP2001220313A (ja) * 2000-02-09 2001-08-14 Ichimaru Pharcos Co Ltd 植物水蒸気蒸留水含有化粧料組成物
AU2001245726A1 (en) * 2000-03-15 2001-09-24 Genaera Corporation A method for stimulation of defensin production
FR2807319B1 (fr) 2000-04-07 2004-10-22 L M D Composition cosmetique ou en tant que medicament contenant une lactone sesquiterpenique pour traiter les hematomes, et procede de traitement
JP4814415B2 (ja) * 2000-05-29 2011-11-16 一丸ファルコス株式会社 化粧料組成物
AU2001275208A1 (en) * 2000-06-01 2001-12-11 University Of Iowa Research Foundation Human beta-defensin-3 (hbd-3), a highly cationic beta-defensin antimicrobial peptide
EP1209238B1 (en) * 2000-06-23 2005-10-19 SAKAI, Takuo Process for producing plant-origin antibacterial substance
RU2180210C1 (ru) * 2000-07-26 2002-03-10 Закрытое акционерное общество "Компания КОРА" Косметическое средство для ухода за волосами
JP2002186485A (ja) * 2000-12-22 2002-07-02 Shiseido Co Ltd エオタキシン、ＲＡＮＴＥＳ又はβ−ディフェンシン−２の核酸の測定方法及びそのための試薬、並びに抗炎症剤のスクリーニング方法
JP2002212009A (ja) * 2001-01-18 2002-07-31 Noevir Co Ltd 抗かび剤、及びこれを含有して成る抗菌性低刺激化粧料
JP2002226403A (ja) * 2001-02-01 2002-08-14 Mareyoshi Sawaguchi 口腔用及び皮膚科用剤の添加剤
JP2002241303A (ja) * 2001-02-13 2002-08-28 Hisamitsu Pharmaceut Co Inc Ｅｔｓ転写因子又はそれをコードする遺伝子からなる上皮細胞のｇｍ−ｃｓｆ、及び／又はディフェンシン蛋白質の発現調節剤。
DE10111288A1 (de) * 2001-03-09 2002-09-12 Wella Ag Antischuppenmittel
JP2002363065A (ja) * 2001-06-04 2002-12-18 Satoru Murakami 薬草化粧石鹸及びローション
FR2843125B1 (fr) * 2002-08-02 2012-11-16 Coletica Principes actifs stimulant les beta-defensives humaines de type 2 et/ou de type 3, et compositions cosmetiques ou pharmaceutiques comprenant de tels principes actifs

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102524684B1 (ko) * 2022-09-05 2023-04-21 주식회사 래디안 피부의 방어 기능을 증진시키는 화장료 조성물

Also Published As

Publication number Publication date
US20160361250A1 (en) 2016-12-15
FR2843125B1 (fr) 2012-11-16
JP5226257B2 (ja) 2013-07-03
GB2391476A (en) 2004-02-11
US20040091493A1 (en) 2004-05-13
JP2004067660A (ja) 2004-03-04
GB2391476B (en) 2006-12-20
DE10251709B4 (de) 2008-11-27
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