KR20040011542A

KR20040011542A - 제약 제제

Info

Publication number: KR20040011542A
Application number: KR10-2003-7016620A
Authority: KR
Inventors: 신시아 가이크-림쿠; 헬레나 구스타프손
Original assignee: 아스트라제네카 아베
Priority date: 2001-06-21
Filing date: 2002-06-19
Publication date: 2004-02-05
Also published as: IL159217A; CO5550466A2; MY130332A; AU2002345463B2; ES2254699T3; EE200400028A; PL366432A1; CZ20033491A3; MXPA03011546A; US20040242536A1; SK15912003A3; EP1401502B1; AR034517A1; SI1401502T1; NO20035627D0; WO2003000293A1; UA77959C2; SK286238B6; US7700582B2; BR0210489A

Abstract

아이오타-카라게난 (iota-carrageenan), 1종 이상의 중성 겔화 중합체 및 염기성 제약상 활성 성분을 포함하며, 산성 pH에서 상기 염기성 제약상 활성 성분의 방출을 억제하는 경구용 제약 제제, 이 제제의 제조 방법, 및 의학에서 상기 제제의 용도에 관한 것이다.

Description

제약 제제 {Pharmaceutical Formulation}

본 발명은 pH-의존 용해성인 염기성 제약상 활성 성분을 포함하며, 산성 pH (바람직하게는 pH 3 미만)에서 상기 염기성 제약상 활성 성분의 방출을 억제하는, 바람직하게는 위장관내 넓은 pH 범위에서 실질적으로 pH와 독립적으로 상기 제약상 활성 성분을 조절 방출하는 신규 경구용 제약 제제, 이 제제의 제조 방법 및 의학에서 상기 제제의 용도에 관한 것이다.

효과적인 조절 방출성 제약 제제는 약물 요법을 최적화하며, 투여 빈도를 감소시키고 바람직하지 않은 부작용을 최소화하기 때문에 바람직한 약제 생성물이다. 그러나, 이러한 조절 방출성 시스템의 설계는, 특히 약물 제제가 경구 투여용이어서 무엇보다도 길이에 따라 큰 pH 변화 특성을 나타내는 위장관을 통과해야 하는 경우에는 단순한 문제가 아니다.

염기성 특성을 나타내는 많은 약물은 낮은 pH에서 이온화하며, 이 pH 영역에서 보다 중성인 환경에 비해 상당히 더 가용성으로 된다. 위장관내에서 이러한 pH-의존적인 용해도가 나타나기 때문에 유사한 생체내 생체이용성 문제와 함께 변동있는 약물 방출 프로필을 나타낼 수 있다.

염기성 약물의 pH-의존 용해성 문제를 극복하기 위한 여러 시도가 있어 왔다. 이러한 전략은 낮은 pH에서 불용성인 장용 (enteric) 중합체를 사용하여 낮은pH 환경에서 약물 방출을 지연시키는 것 [예를 들어, 미국 특허 제4,968,508호 및 문헌 [A. Streubel et al. J. Controlled Release, 67,101-110 (2000)] 참조], 또는 저분자량 유기산을 혼입시켜 제제의 기질 내부에서 미소환경적 산성 pH를 형성시킴으로써 약물의 용해성을 일정하게 유지시키는 것 [예를 들어, 문헌 [K. E. Gabr., Eur. J. Pharm. Biopharm., 38 (6), 199-202 (1992), and V. K. Thoma and Th. Zimmer, Pharm. Ind. 51(1), 98-101 (1989)] 참조]을 포함한다. pH-의존 용해성을 나타내는 음이온성 중합체 (예를 들어, 알긴산 나트륨)를, 중성 중합체를 또한 포함하는 약물 제제에 혼입시키자 낮은 pH에서 불용성 겔화 특성이 나타났으며, 낮은 pH에서 약물 방출을 지연시키는 주요 메카니즘인 것으로 이론화된 강한 확산 차단층이 형성되었다 [미국 특허 제4,792,452호; 및 P. Timmins et al. Pharmaceutical Development and Technology, 2(1), 25-31(1997)]. 다른 방법들은 하전된 중합체를 사용하여 약물과의 이온 상호작용에 의해 약물 방출에 영향을 주거나 [문헌 [C. Caramella et al. Pharm. Res. 14 (11), 531 (1997), H. Y. Park et al. Drug Delivery, 5 13-18 (1998), N. Caram-Lelham, Ph. D. thesis, Uppsala University (1996)] 참조] 또는 상기 중합체의 겔화 특성 및 팽윤 특성에 영향을 줌으로써 [문헌 [K. M. Picker, Drug Dev. and Ind. Pharmacy, 25 (3) 339-346 (1999)] 참조] 약물 방출에 영향을 미치는 것을 포함한다. 상기 문헌에 사용된 제제는 일반적으로 한가지 유형의 중합체를 기초로 하였다.

바베자 (Baveja) 등의 문헌 [Int J. Pharmaceutics 39,39-45 (1987)]은 비이온성 중합체 (HPMC)를 음이온성 중합체 (NaCMC)와 혼합하는 경우 방출이 지연된다는 사실을 개시한다. 랭거 라오 (Ranga Rao) 등의 문헌 [Drug Dev Ind Pharmacy, 14, 2299 (1988)]은 서로 다른 방출 프로필을 제공하는 메틸 셀룰로스 및 NaCMC의 혼합물을 개시한다. WO99/21586에는 람다-카라게난 (lambda-carrageenan) 및 활성 성분의 혼합물이 개시되어 있다.

pH-독립성 방출 프로필을 제공하는 전략들을 병행하는 것에 대하여는 문헌들 [WO 96/26717, WO 99/29305 및 WO 99/39698 참조]에 보고되어 있다. 이들 3개의 문헌은 모두 전형적으로 서로 다른 수용해도 및 팽윤 특성을 갖는 3가지 중합체를 포함하는 3 성분계 기질 제제를 개시하며, 이 제제의 조성을 달리하여 상기 특성들을 조절함으로써 조절가능한 방출 속도를 제공할 수 있다. 상기 성분들 중 2가지는 충분한 pH-의존 용해성을 나타내는 겔화 중합체, 예를 들어 알긴산 나트륨, 및 낮거나 불충분한 pH-의존 용해성을 나타내는 겔화 중합체, 예를 들어 히드록시프로필메틸 셀룰로스 (HPMC) 또는 폴리에틸렌 옥시드를 포함한다. 제3 성분은 장용 코팅 중합체, 예를 들어 메타크릴산 공중합체 (WO 96/26717) [유드라지트 (EUDRAGIT, 등록상표) L 또는 S, 이들은 특정 유형의 메타크릴산 중합체임 (WO 99/29305)] 또는 수불용성 중합체, 예를 들어 에틸 셀룰로스 (WO 99/39698)를 포함한다. 그러나, 이러한 전략들은 일반적으로 염기성 약물을 특이적으로 표적화하지 않으며, 적어도 부분적으로는 낮은 pH 환경에서 약물 방출을 지연시키는 장용 코팅-유형 또는 수불용성 중합체, 예를 들어 메타크릴산 중합체, 또는 pH-의존성 겔화 중합체, 예를 들어 알긴산 나트륨에 의존한다.

본 발명은 아이오타-카라게난 (iota-carrageenan), 1종 이상의 중성 겔화 중합체 및 염기성 제약상 활성 성분을 포함하며, 산성 pH (바람직하게는 pH 3 미만, 특히 약 pH 1)에서 상기 염기성 제약 활성 성분의 방출을 억제하는 경구용 제약 제제를 제공한다.

실질적으로 pH 독립성 방출은 방출 속도가 pH 1에서 상당히 지연되며 pH 6.8에서는 약간 증가하거나 영향을 받지 않아 어떤 한 시점에서 방출되는 염기성 제약상 활성 성분의 양이 pH에 덜 의존하게 됨을 의미한다.

본 발명은 또한 아이오타-카라게난, 1종 이상의 중성 겔화 중합체 및 염기성 제약상 활성 성분을 포함하는 경구용 제약 제제를 제공한다.

아이오타-카라게난은 바람직하게는 본 발명의 제제 중에 15 중량％를 넘는 수준으로 존재한다. 아이오타-카라게난은 천연 기원의 것이 바람직하다. 제약 등급의 아이오타-카라게난의 한 유형 (FMC 바이오폴리머 (Biopolymer)사에서 시판함)은 5 센티푸아즈 (cps) 이상, 바람직하게는 5 cps 내지 10 cps 범위의 점도를 갖는다 (1.5％ 용액의 경우 82 ℃로 가온한 후, 30 rpm의 속도로 작동하는 #1 스핀들 (spindle)을 장착한 브룩필드 (Brookfield) LV 점도계를 사용하여 75 ℃에서 점도를 측정함). 공업 등급의 아이오타-카라게난 (플루카 바이오케미카 (Fluka Biochemica)사에서 시판함)의 한 유형은 바람직하게는 14 mPaㆍS 이상의 점도를 가지며, 0.3％ 수용액의 경우 20 ℃로 가온한 후, 로다 (Lauda) 자동 온도조절 장치 C3 및 하케 메스-시스템 (Hakke Mess-System) III과 함께 사용되는 하케형 하강-구 (falling-ball) 점도계, 및 금으로 코팅된 밀도 7.8 g/cm³의 스테인레스강 구를 사용하여 점도를 측정하였다.

중성 겔화 중합체는 겔화 특성 및 실질적으로 pH-독립 용해성을 갖는 중성의 침식가능한 1종의 중합체 또는 이들 2종 이상의 혼합물이다. 중성 겔화 중합체는 바람직하게는 제제 중에 10 중량％ 초과의 수준으로 존재하지만, 바람직하게는 20 중량％ 초과의 수준으로 존재한다 {"침식가능한" 및 "침식"은 용해나 붕해를 각각 가리키거나 이들 모두를 가리킨다. 용해는 혼합에 의해 증가될 수 있으며, 붕해는 고체 물질과의 기계적 상호작용에 의해 증가될 수 있다}.

적합한 중성 겔화 중합체는 폴리에틸렌 옥시드 (PEO), PEO 군의 구성원 및 유도체를 포함한다 (예를 들어, 바람직하게는 천연에서 고체 상태로 존재하는 적합한 분자량 또는 점도의 폴리에틸렌 글리콜 (PEG)). 따라서, 중성 겔화 중합체는 예를 들어 폴리에틸렌 옥시드 또는 폴리에틸렌 글리콜이다.

PEO는 단일 중성 겔화 중합체로 사용되는 경우, 바람직하게는 1,650 mPaㆍs 내지 5,500 mPaㆍs (또는 1,650 cps 내지 5,500 cps; 1％ 수용액의 경우 25 ℃에서 2 rpm의 2번 스핀들을 장착한 브룩필드 (Brookfield) RVF 점도계를 사용하여 측정함)의 수용액 점도 범위에 상응하는 4 백만 (4 M) 이상 (예를 들어, 4 백만 내지 8 백만)의 MW를 갖는다. 적합한 PEO의 다른 예로는 5,500 mPaㆍs 내지 7,500 mPaㆍs의 수용액 점도 범위에 상응하는 약 5 백만 (5 M)의 MW를 갖는 PEO 또는 10,000 mPaㆍs 내지 15,000 mPaㆍs의 수용액 점도 범위에 상응하는 약 8 백만 (8 M)의 MW를 갖는 PEO가 포함된다. 이러한 범위는 문헌 [USP 24/NF 19, 2000 edition, pp. 2285-2286]에서 이 중합체에 대해 인용되는, 25 ℃에서 측정된 전형적인 용액 점도(cps 단위)에 대한 값을 포함한다. 따라서, PEO는 4 백만 내지 8 백만의 MW를 가질 수 있다.

PEG가 단일한 중성 겔화 중합체로 사용되는 경우, PEG는 바람직하게는 20 ℃에서 모세관 점도계 (우벨로드 (Ubbelohde) 또는 등가물)로 50％ 수용액 (w/w)을 사용하여 측정한 2,700 mPaㆍs 내지 3,500 mPaㆍs (또는 2,700 cps 내지 3,500 cps)의 점도 범위에 상응하는 높은 분자량, 예를 들어 약 20,000의 MW를 갖는다 [문헌 [European Pharmacopoeia 3rd Ed., 2000, Supplement, pp. 908-909] 참조].

적합한 다른 겔화 중합체로는 적합하게 높은 점도 (예를 들어, "HPMC 10,000 cps", "HPMC cps", "HEC 유형 HH" 또는 "HEC 유형 H")를 갖는 셀룰로스 유도체, 예를 들어 히드록시프로필메틸 셀룰로스 (HPMC) 또는 히드록시에틸 셀룰로스 (HEC)(바람직하게는 HPMC)가 포함된다. 단일 중성 중합체로서 사용되는 경우, "HPMC 10,000 cps" 및 "HPMC 15,000 cps"와 유사한 히드록시프로필메틸 셀룰로스 중합체는 20 ℃에서 모세관 점도계 (우벨로드 또는 등가물)로 2％ (w/w) 수용액을 사용하여 측정하는 경우, 건조 물질에 대하여 계산된 각각 7,500 mPaㆍs 내지 14,000 mPaㆍs (또는 7,500 cps 내지 14,000 cps), 및 11,250 mPaㆍs 내지 21,000 mPaㆍs (또는 11,250 cps 내지 21,000 cps)의 겉보기 점도를 갖는다. 한가지 유형의 히드록시에틸셀룰로스 중합체, 예를 들어 허큘레스 인코포레이티드 (Hercules Incorporated (Aqualon))에서 시판하는 "나트로졸 (Natrosol) 250 파마 (Pharma), 유형 HH"는 통상적으로 1％ 용액 농도, 4번 스핀들, 스핀들 속도 30 rpm, 인자 200, 25 ℃의 조건에서 브룩필드 싱크로-렉트릭 모델 (Synchro-Lectric Model) LVF기기를 사용하여 측정된 약 20,000 mPaㆍs의 브룩필드 점도를 나타낸다 [문헌 [Natrosol Physical and Chemical Properties booklet, 33.007-E6 (1993), p.21] 참조].

중성 겔화 중합체의 혼합물을 사용하는 경우, 혼합물은 예를 들어 2종 이상의 PEO, 2종 이상의 HPMC, PEO 및 HPMC, 또는 PEO 및 PEG의 혼합물 또는 블렌드를 포함할 수 있다. 예를 들어, MW 4 백만, 5 백만 또는 8 백만의 PEO를, MW 1 백만의 PEO, MW 400,000의 PEO, MW 100,000의 PEO 또는 MW 6,000의 PEG와 혼합할 수 있다.

또는, 중성 겔화 중합체 (예를 들어, PEO)는 비-겔화 중성 중합체 (예를 들어, 낮은 MW의 PEG, 예를 들어 MW 10,000 미만의 PEG)와 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 조합에서 낮은 MW의 PEG의 예로는 MW 8,000 (260 mPaㆍs 내지 510 mPaㆍs의 점도 범위에 상응함)의 PEG 또는 MW 6,000 (200 mPaㆍs 내지 270 mPaㆍs의 점도 범위에 상응함)의 PEG가 포함된다.

2종 이상의 HPMC 등급의 혼합물 또는 블렌드는 낮은 점도 (비-겔화) 등급 및 높은 점도 (겔화) 등급을 둘 다 포함할 수 있다. 예를 들어, 상기 정의된 방법에 따라 각각 40 mPaㆍs 내지 60 mPaㆍs, 11.3 mPaㆍs 내지 21.0 mPaㆍs, 및 4.8 mPaㆍs 내지 7.2 mPaㆍs의 겉보기 점도를 갖는 "HPMC 50 cps", "HPMC 15 cps" 및 "HPMC 6 cps"를 "HPMC 10,000 cps" 또는 "HPMC 15,000 cps"와의 블렌드로 사용할 수 있다.

종류는 같지만 MW가 상이한 2종 이상의 중합체의 블렌드는 본 발명의 제제가정제 형태인 경우 더 우수한 침식 조절을 제공한다. 단독으로 또는 혼합물로 사용되는 PEO는 분자량이 높을수록 본 발명에 다른 제제를 제조하는 데 있어서 적게 요구된다.

본 발명의 제제의 정확도는 선택된 겔화 중합체의 분자량 및 분자량 분포, 및 사용된 각 중합체의 품질에 의존한다.

본 발명의 학 측면에서, 중성 겔화 중합체는 MW 약 4 백만 이상의 PEO, MW 약 20,000 이상의 PEG, 또는 겉보기 점도 약 7,500 cps 이상의 셀룰로스 유도체이다 (상기와 같이 측정함).

중성 겔화 중합체 (예를 들어, PEO, PEG 또는 HPMC; 특히 PEO 또는 HPMC; 또는 이들 서로의 혼합물 또는 2종 이상의 PEO 또는 HPMC의 혼합물) 대 아이오타-카라게난의 비율은 바람직하게는 20:80 내지 80:20 (특히 약 40:60 내지 60:40, 예를 들어 약 50:50)의 범위이다.

염기성 제약상 활성 성분은 바람직하게는 1 내지 12 (예를 들어, 1 내지 10 (특히 1 내지 7))의 pKa를 갖는 1개 이상의 염기성 기, 임의로는 10 초과의 pKa를 갖는 1개 이상의 염기성 기를 갖는다. 따라서, 염기성 제약상 활성 성분은 한가지 이상의 pKa 값을 가질 수 있지만, 적어도 하나는 바람직하게는 1 내지 12 (예를 들어, 1 내지 10 (특히 1 내지 7))이다. pKa 값 1 내지 12 (예를 들어, 1 내지 10)의 상기 염기성 제약상 활성 성분의 염기성 기의 예로는 히드록시아미딘, 2급 아민 또는 3급 아민, 또는 1급 아미드 및 2급 아미드가 포함된다.

적합한 염기성 제약상 활성 성분은 바람직하게는 낮은 수용해도 내지 중간수용해도 (예를 들어, 25 ℃, pH 7.0에서 50 mg/ml 이하 (특히 0.001 mg/ml 내지 20 mg/ml)의 수용해도)를 가지며, 낮은 pH (예들 들어, pH 1 내지 6 (특히 pH 1 내지 2))에서 (제약상 활성 성분의 염기성 기의 수 및 pKa에 따라) 하나 이상의 양전하에 의해 양으로 하전된다.

적합한 염기성 제약상 활성 성분은 예를 들어 심혈관 활성을 갖는 화합물 (예를 들어, 펩티드, 또는 펩티드와 유사한 트롬빈 저해제)이다. 펩티드 트롬빈 저해제는 1,000 미만의 분자량을 갖고, 1개, 2개, 3개 또는 4개의 펩티드 결합을 가지며, pH 의존 용해성을 나타낸다. 이들은 총칭적으로 기재된 펩티드 트롬빈 저해제 (및 그의 프로드러그), 보다 구체적으로는 리뷰 논문 [Claesson in Blood Coagul. Fibrin. 5, 411, (1994)], 및 미국 특허 제4,346,078호; 국제 특허 출원 공개 WO 97/23499, WO 97/02284, W097/46577, WO98/01422, WO 93/05069, W093/11152, WO 95/23609, W095/35309, WO 96/25426, WO 94/29336, WO 93/18060 및 WO95/01168; 및 유럽 특허 제623 596호, 동 제648 780호, 동 제468 231호, 동 제559 046호, 동 제641 779호, 동 제185 390호, 동 제526 877호, 동 제542 525호, 동 제195 212호, 동 제362 002호, 동 제364 344호, 동 제530 167호, 동 제293 881호, 동 제686 642호, 동 제669 317호 및 동 제601 459호에 기재된 것들을 포함한다. 펩티드 트롬빈 저해제 (또는 그의 프로드러그)는 특히 이노가트란, 멜라가트란 {HOOC-CH₂-RCgl-Aze-Pab-H; 글리신, N-[2-[2-[[[[4(아미노이미노메틸)페닐]메틸]아미노]카르보닐]-1-아제티디닐]-1-시클로헥실-2-옥소에틸]-, [2R-[2S]]-)} 및H376/95 {지멜라가트란 (ximelagatran); EtO₂C-CH₂-RCgl-Aze-Pab-OH; WO 97/23499의 실시예 17 참조; 글리신, N-[1-시클로헥실-2-[2-[[[[4-(히드록시이미노)아미노메틸]페닐]메틸]아미노]카르보닐]-1-아제티디닐]-2-옥소에틸]-, 에틸 에스테르, [S-(R^*,S^*)]-}를 포함한다.

다른 측면에서, 펩티드 트롬빈 저해제 (또는 그의 프로드러그)는 이노가트란, 멜라가트란, H376/95, Ph(3-Cl)(5-OCH₂CH₂F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe) 및 Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe)를 포함한다.

다른 측면에서, 본 발명은 염기성 제약상 활성 성분이 하기와 같은 본원에 기재된 제제를 제공한다:

화합물 G는 화합물 F 및 H의 제조에 대해 하기 기재된 방법과 유사한 방법에 의해 제조할 수 있다.

다른 측면에서, 본 발명은 염기성 제약상 활성 성분이 하기와 같은 제약 제제를 제공한다:

1. 4-({3-[7-(3,3-디메틸-2-옥소부틸)-9-옥사-3,7-디아자비시클로[3.3.1]논-3-일]프로필}아미노)벤조니트릴 (이하, 이 화합물을 화합물 B라 함);

2. tert-부틸 2-{7-[3-(4-시아노아닐리노)프로필]-9-옥사-3,7-디아자비시클로-[3.3.1]논-3-일}에틸카르바메이트;

3. tert-부틸 2-{7-[4-(4-시아노페닐)부틸]-9-옥사-3,7-디아자비시클로-[3.3.1]논-3-일}에틸카르바메이트; 또는

4. tert-부틸 2-{7-[(2S)-3-(4-시아노페녹시)-2-히드록시프로필]-9-옥사-3,7 디아자비시클로[3.3.1]논-3-일}에틸카르바메이트 (이하, 이 화합물을 화합물 C라 함);

상기 화합물들은 WO01/28992에 기재되어 있다.

다른 측면에서, 염기성 제약상 활성 성분은 메토프롤롤 (metoprolol) 또는 그의 염 (예를 들어, 그의 숙시네이트 또는 타르트레이트)이다.

본 발명의 제제는 제약 제제 중에 통상적으로 사용되는 가공 첨가제, 안정화제, 가소제, 착색제, 윤활제 (예를 들어, 소듐 스테아릴 푸마레이트), 결합제, 충전제, 계면활성제 또는 기타 부형제를 포함할 수 있다.

한가지 특정 측면에서, 본 발명의 제제는 윤활제 (예를 들어, 소듐 스테아릴 푸마레이트)를 포함한다.

본 발명의 다른 측면에서, 아이오타-카라게난 대 염기성 제약상 활성 성분의 몰 비율은 3:1 내지 1:3의 범위이다.

다른 측면에서, 본 발명의 제약 제제는 아이오타-카라게난을 15％ 내지 80％ 포함한다.

다른 측면에서, 본 발명의 제약 제제는 1종 이상의 중성 겔화 중합체를 15％ 내지 80％ 포함한다.

다른 측면에서, 본 발명의 제약 제제는 염기성 제약상 활성 성분을 1％ 내지 50％ 포함한다.

또 다른 측면에서, 본 발명의 제약 제제는 제약 제제 중에 통상적으로 사용되는 가공 첨가제, 안정화제, 가소제, 착색제, 윤활제, 결합제, 충전제 또는 기타 부형제를 0％ 내지 10％ (특히 1％ 내지 10％) 포함한다.

산성 pH에서 제제로부터 염기성 제약상 활성 성분의 방출을 억제하는 (특히, 실질적으로 pH와 독립적으로 방출을 조절하는) 메카니즘은 다음과 같이 생각된다. 낮은 pH에서 염기성 제약상 활성 성분 약물은 강하게 이온화된 상태에서와 같이 비교적 높은 용해도를 가질 것으로 예상되며, 따라서 임의의 중성 기질로부터 빠른 방출 프로필을 나타낼 것으로 예상된다. 산성 pH에서 아이오타-카라게난의 존재하에 음으로 하전된 아이오타-카라게난과 양으로 하전된 약물 사이에 이온성 상호작용이 존재하여, 이 상호작용이 약물 방출을 지연시키고, 따라서 보다 일정한 방출 프로필에 기여하는 것으로 이론화된다. 높은 pH에서는 약물이 덜 강하게 이온화되거나 전혀 이온화되지 않아, 이에 따라 임의의 중성 기질로부터 느린 방출 프로필이 나타날 것으로 예상되는 경우, 상기 제안된 이온성 상호작용은 덜 중요해지며 방출 프로필은 제제 중에 사용된 중성 겔화 중합체와 음이온성 중합체인 아이오타-카라게난의 조합된 팽윤, 겔화 및 침식 프로필에 의해 주로 조절된다.

본 발명의 제제의 최종 팽윤, 겔화 및 침식 특성은 겔화 중합체 및 음이온성중합체의 분자량 및 분자량 분포와 같은 특성과 관련되며, 또한 음이온성 중합체의 pH 의존성 가수분해 속도와도 관련된다. 따라서, 염기성 제약상 활성 성분의 다른 방출 속도는 겔화 중합체의 특성 (예를 들어, 분자량 또는 분자량 분포), 제제 중 존재하는 아이오타-카라게난의 양 및(또는) 겔화 중합체 대 아이오타-카라게난의 비율을 조절하여 얻을 수 있다.

본 발명의 제제는 고상 투여 형태 (예를 들어, 정제, 캅셀제, 펠릿제 또는 적합한 용기내에 분산된 분말제, 또는 복합 제제 형태 (예를 들어, 정제, 캅셀제 또는 사세제로 투여되는 코팅된 펠릿제))로 제공될 수 있다.

본 발명의 한 측면은 염기성 제약상 활성 성분 (예를 들어, H376/95; 또는 화합물 A, B 또는 C) 20 mg 내지 500 mg (특히 40 mg 내지 60 mg)을 포함하는 정제를 제공한다.

본 발명의 제약 제제가 정제로 제공되는 경우, 정제는 바람직하게는 모든 염기성 제약상 활성 성분이 약 20시간, 예를 들어 18시간 내지 22시간 (또는 20시간 내지 26시간)에 걸쳐 위장관의 각 부위에서 pH에 따라 방출되거나, 이온화되거나, 또는 이온화되지 않도록 제조된다.

또 다른 측면에서, 아이오타-카라게난, 1종 이상의 중성 겔화 중합체 및 염기성 제약상 활성 성분을 혼합하고, 임의로 상기 혼합물을 (바람직하게는 윤활제 (예를 들어, 상표명 프루브 (PRUV, 등록상표)로 판매되는 소듐 스테아릴 푸마레이트)의 존재하에) 압착시켜 정제를 형성하는 것을 포함하는, 본 발명의 제제의 제조 방법이 제공된다.

정제 제제는 예를 들어 직접 압착 또는 습윤 과립화 기술로 제조할 수 있다.

직접 압착 기술의 경우, 염기성 제약상 활성 성분을 겔화 중합체, 아이오타-카라게난, 및 필요에 따라 추가의 부형제와 함께 완전히 혼합한다. 윤활제 (예를 들어, 소듐 스테아릴 푸마레이트)를 체로 걸러 아이오타-카라게난 혼합물에 첨가한 다음, 추가로 혼합한다. 이후, 생성된 혼합물을 정제로 압착한다.

습윤 과립화 기술의 경우, 염기성 제약상 활성 성분을 겔화 중합체 및 아이오타-카라게난과 완전히 혼합한다. 이후, 생성된 혼합물을 적합한 결합제의 용액 (예를 들어, 적합한 용매 (예를 들어, 에탄올 또는 물)에 용해된 폴리비닐피롤리돈 (PVP))이나 적합한 용매 (예를 들어, 에탄올 또는 물)로 습윤화할 수 있으며; 생성된 블렌드를 표준 또는 변형 과립화 방법 (예를 들어, 분무-과립화)을 이용하여 과립화한다. 생성된 과립을, 예를 들어 오븐에서 적합한 온도 (예를 들어, 약 50 ℃)에서 적합한 기간 (예를 들어, 20시간 내지 24시간) 동안 건조한 후, 과립을 분쇄 (예를 들어, 건조- 또는 습윤-분쇄)하고, 윤활제 (예를 들어, 소듐 스테아릴 푸마레이트, 스테아르산 마그네슘 또는 탈크)와 혼합하고, 생성된 조성물을 정제로 압착한다. 건조된 과립을 사용하여 캅셀 (예를 들어, 젤라틴으로 제조된 캅셀)을 충전할 수 있다.

다른 측면에서, 본 발명은 상기 기재된 제제의 제조 방법을 제공한다.

트롬빈 활성 화합물 및 그의 프로드러그는 인간을 포함하는 동물의 혈액 및(또는) 조직에서 혈전증 및 응고항진 (hypercoagulability)의 치료 및(또는) 예방에사용될 수 있다. 응고항진은 혈전색전성 질병을 일으킬 수 있는 것으로 알려져 있다. 언급될 수 있는 응고항진 및 혈전색전성 질병과 관련된 증상은 유전성 또는 후천성 활성화 단백질 C 내성, 예를 들어 인자 V-돌연변이 (인자 V 라이덴 (Leiden)), 및 유전성 또는 후천성 항-트롬빈 III, 단백질 C, 단백질 S, 헤파린-보조인자 II 결핍증을 포함한다. 응고항진 및 혈전색전성 질병과 관련된 것으로 알려진 다른 증상으로는 순환성 항-인지질 항체 (루푸스 항응고제), 호모시스틴혈증, 헤파린 유도성 혈소판감소증, 섬유소용해 결함, 응고 증후군 (예를 들어, 파종성 혈관내 응고증 (DIC)) 및 일반적인 혈관 손상 (예를 들어, 수술로 인한 손상)이 포함된다.

다른 측면에서, 본 발명은 상기 기재된 제제를 치료 (치유 및 예방 모두)에 사용하기 위해, 예를 들어 약물 (예를 들어, 심혈관계 질환용 약물, 예컨대 혈전색전증용 약물)로서 제공한다.

본 발명의 제제는 치료에 사용하기 위한 약물에 제조에 있어서 유용하다.

다른 측면에서, 본 발명은 심혈관계 질환 (예를 들어, 혈전색전증)의 치료를 요하는 온혈 동물에게 치료 유효량의 본 발명의 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 상기 질환으로 고통받거나 또는 상기 질환의 위험이 있는 온혈 동물의 치료 방법을 제공한다.

여러 펩티드 트롬빈 저해제 또는 프로드러그는 하기 기재된 방법에 의해 제조할 수 있다.

일반적인 방법

TLC는 실리카 겔 상에서 수행하였다. 키랄 HPLC 분석은 5 cm 가드 (guard) 컬럼이 구비된 46 mm ×250 mm 키랄셀 (Chiralcel) OD 컬럼을 사용하여 수행하였다. 컬럼 온도를 35 ℃에서 유지하였다. 1.0 mL/분의 유속을 사용하였다. 길슨 (Gilson) 115 UV 검출기를 228 nm에서 사용하였다. 이동상은 헥산, 에탄올 및 트리플루오로아세트산으로 구성되었으며, 각 화합물에 대해 적절한 비율이 기재되어 있다. 통상적으로, 생성물을 최소량의 에탄올에 용해시키고, 이를 이동상으로 희석시켰다.

하기 제조에서, CTC-PAL 인젝터 (injector) 및 5 Tm, 4 ×100 mm 써모퀘스트 (ThermoQuest), 하이퍼실 (Hypersil) BDS-C18 컬럼을 장착한 HP-1100 기기를 사용하여 LC-MS/MS를 수행하였다. API-3000 (Sciex) MS 검출기를 사용하였다. 유속은 1.2 mL/분이었으며, 이동상 (농도구배)은 10-90％ 아세토니트릴과 함께 90-10％의 4 mM 수성 암모늄 아세테이트로 구성되었으며, 이들 모두 0.2％ 포름산을 포함하였다. 다른 방법으로, 마이크로매스 (Micromass) ZQ 분광계를 ESI posneg 스위칭 이온 모드 (질량 범위 m/z 100-800)로 사용하여 저 해상도 질량 스펙트럼 (LRMS)을 기록하였으며, 마이크로매스 LCT 분광계를 내부 질량 표준으로 루이신 엔케팔린 (Leucine Enkephalin)(C₂₈H₃₇N₅0₇)과 함께 ES 음성 이온화 모드 (질량 범위 m/z 100-1000)로 사용하여 고 해상도 질량 스펙트럼 (HRMS)을 기록하였다.

내부 표준으로 테트라메틸실란을 사용하여¹H NMR 스펙트럼을 기록하였다.

Ph(3-Cl)(5-OCHF ₂ )-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(OMe){화합물 A}의 제조

(i)3-클로로-5-메톡시벤즈알데히드

THF (200 mL) 중 3,5-디클로로아니솔 (74.0 g, 419 mmol)을 25 ℃에서 THF (100 mL) 중 금속 마그네슘 (14.2 g, 585 mmol, 0.5 N HCl로 예비 세척)에 적가하였다. 첨가 후, 1,2-디브로모에탄 (3.9 g, 20.8 mmol)을 적가하였다. 생성된 암갈색 혼합물을 3시간 동안 가열 환류하였다. 혼합물을 0 ℃로 냉각시키고, N,N-디메틸포름아미드 (60 mL)를 한번에 가하였다. 혼합물을 디에틸 에테르 (3 ×400 mL) 및 6 N HCl (500 mL)로 분배하였다. 유기 추출물을 모아 염수 (300 mL)로 세척하고, 건조 (Na₂S0₄)하고, 여과하고, 감압 농축하여 오일을 얻었다. Hex:EtOAc (4:1)로 용출하는 실리카 겔 상 플래쉬 크로마토그래피 (2×)에 의해 황색 오일인 하위 표제 화합물 (38.9 g, 54％)을 얻었다.

(ii)3-클로로-5-히드록시벤즈알데히드

CH₂Cl₂(250 mL) 중 3-클로로-5-메톡시벤즈알데히드 (22.8 g, 134 mmol; 상기 단계 (i) 참조)의 용액을 0 ℃로 냉각시켰다. 삼브롬화 붕소 (15.8 mL, 167 mmol)를 15분에 걸쳐 적가하였다. 교반 후, 2시간 동안 반응 혼합물에 H₂0 (50 mL)를 천천히 가하였다. 이어서, 용액을 Et₂O (2 ×100 mL)로 추출하였다. 유기층을 모아 건조 (Na₂SO₄)하고, 여과 및 감압 농축하였다. Hex:EtOAc (4:1)로 용출하는 실리카 겔 상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 하위 표제 화합물 (5.2 g, 25％)을 얻었다.

(iii)3-클로로-5-디플루오로메톡시벤즈알데히드

2-프로판올 (250 mL) 및 30％ KOH (100 mL) 중 3-클로로-5-히드록시벤즈알데히드 (7.5 g, 48 mmol; 상기 단계 (ii) 참조)의 용액을 가열 환류하였다. 교반하면서, CHClF₂를 2시간 동안 반응 혼합물에 버블링하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 1 N HCl로 산성화하고, EtOAc (2 ×100 mL)로 추출하였다. 유기물을 염수 (100 mL)로 세척하고, 건조 (Na₂S0₄)하고, 여과하여 감압 농축하였다. Hex:EtOAc (4:1)로 용출하는 실리카 겔 상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 하위 표제 화합물 (4.6 g, 46％)을 얻었다.

(iv)Ph(3-Cl)(5-OCHF ₂ )-(R,S)CH(OTMS)CN

CH₂Cl₂(200 mL) 중 3-클로로-5-디플루오로메톡시벤즈알데히드 (4.6 g, 22.3mmol; 상기 단계 (iii) 참조)의 용액을 0 ℃로 냉각시켰다. ZnI₂(1.8 g, 5.6 mmol) 및 트리메틸실릴 시아나이드 (2.8 g, 27.9 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 15시간 동안 교반하였다. 혼합물을 부분적으로 감압 농축하여 액체인 하위 표제 화합물을 얻고, 이를 추가의 정제 또는 특성화 없이 하기 단계 (v)에서 직접 사용하였다.

(v)Ph(3-Cl)(5-OCHF ₂ )-(R,S)CH(OH)C(NH)OEt

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R,S)CH(OTMS)CN (6.82 g, 22.3 mmol 추정; 상기 단계 (iv) 참조)을 HCl/EtOH (500 mL)에 적가하였다. 반응 혼합물을 15시간 동안 교반한 다음, 부분적으로 감압 농축하여 액체인 하위 표제 화합물을 얻고, 이를 추가의 정제 또는 특성화 없이 단계 (vi)에서 사용하였다.

(vi)Ph(3-Cl)(5-OCHF ₂ )-(R,S)CH(OH)C(O)OEt

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R,S)CH(OH)C(NH)OEt (6.24 g, 22.3 mmol 추정; 상기 단계 (v) 참조)를 THF (250 mL) 중에 용해시키고, 0.5 M H₂SO₄(400 mL)를 가하고, 반응물을 40 ℃에서 65시간 동안 교반한 다음, 부분적으로 감압 농축하여 THF의 대부분을 제거하였다. 이후, 반응 혼합물을 Et₂O (3 ×100 mL)로 추출하고, 건조 (Na₂S0₄)하고, 여과 및 감압 농축하여 고체인 하위 표제 화합물을 얻고, 이를 추가의 정제 또는 특성화 없이 단계 (vii)에서 사용하였다.

(vii)Ph(3-Cl)(5-OCHF ₂ )-(R,S)CH(OH)C(O)OH

2-프로판올 (175 mL) 및 20％ KOH (350 mL) 중 Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R,S)CH(OH)C(O)OEt (6.25 g, 22.3 mmol 추정; 상기 단계 (vi) 참조)의 용액을 실온에서 15시간 동안 교반하였다. 이후, 반응물을 부분적으로 감압 농축하여 2-프로판올의 대부분을 제거하였다. 남은 혼합물을 1 M H₂SO₄로 산성화하고, Et₂0 (3 ×100 mL)로 추출하고, 건조 (Na₂S0₄)하고, 감압 농축하여 고체를 얻었다. CHCl₃:MeOH:농축 NH₄0H (6:3:1)로 용출하는 실리카 겔 상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 하위 표제 화합물의 암모늄 염을 얻었다. 이후, 암모늄 염을 EtOAc (75 mL) 및 H₂0 (75 mL)의 혼합물 중에 용해시키고, 2 N HCl로 산성화하였다. 유기층을 분리하여 염수 (50 mL)로 세척하고, 건조 (Na₂S0₄)하고, 감압 농축하여 하위 표제 화합물 (단계 (iv) 내지 (vii)로부터 3.2 g, 57％)을 얻었다.

(viii)Ph(3-Cl)(5-OCHF ₂ )-(R)CH(OH)C(O)OH (a) 및 Ph(3-Cl)(5-OCHF ₂ )-(S)CH(OAc)C(O)OH (b)

비닐 아세테이트 (125 mL) 및 MTBE (125 mL) 중 Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R,S)CH(OH)C(O)OH (3.2 g, 12.7 mmol; 상기 단계 (vii) 참조) 및 리파제 (Lipase) PS "Amano" (약 2.0 g)의 혼합물을 48시간 동안 가열 환류하였다. 반응 혼합물을냉각하고, 셀리트 (Celite, 등록상표)를 통해 여과하고, 필터 케이크를 EtOAc로 세척하였다. 여액을 감압 농축하고, CHCl₃:MeOH:농축 NH₄0H (6:3:1)로 용출하는 실리카 겔 상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 처리하여 하위 표제 화합물 (a) 및 (b)의 암모늄 염을 얻었다. 염인 화합물 (a)를 H₂O에 용해시키고, 2 N HCl로 산성화하고, EtOAc로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 건조 (Na₂S0₄)하고, 여과하고, 감압 농축하여 하위 표제 화합물 (a) (1.2 g, 37％)를 얻었다.

하위 표제 화합물 (a)의 경우

(ix)Ph(3-Cl)(5-OCHF ₂ )-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)

0 ℃에서 DMF (50 mL) 중 Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)OH (1.1 g, 4.4 mmol; 상기 단계 (viii) 참조) 및 H-Aze-Pab(Teoc) (국제 특허 출원 공개 제WO 00/42059호 참조, 2.6 g, 5.7 mmol)의 용액에 PyBOP (2.8 g, 5.3 mmol) 및 콜리딘 (1.3 g, 10.6 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 0 ℃에서 2시간 동안 및 실온에서 추가로 15시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 농축하고, 먼저 CHCl₃:EtOH (9:1)에 이어서 EtOAc:EtOH (20:1) 이후, 마지막으로 CH₂Cl₂:CH₃0H (95:5)로 용출하는 실리카 겔 (3×) 상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 처리하여 백색 고체인 하위표제 화합물 (1.0 g, 37％)을 얻었다.

(x)Ph(3-Cl)(5-OCHF ₂ )-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe,Teoc)

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc) (0.40 g, 0.65 mmol; 상기 단계 (ix) 참조)를 아세토니트릴 20 mL 중에 용해시키고, O-메틸 히드록실아민 하이드로클로라이드 0.50 g (6.0 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 70 ℃에서 2시간 동안 가열하였다. 용매를 증발시키고, 잔사를 물과 에틸 아세테이트 사이에 분배시켰다. 수상을 에틸 아세테이트로 2회 더 추출하고, 유기상을 모아 물, 염수로 세척하고, 건조 (Na₂SO₄)하고, 여과하여 증발시켰다. 수율: 0.41 g (91％).

(xi)Ph(3-Cl)(5-OCHF ₂ )-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(OMe)

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe, Teoc) (0.40 g, 0.62 mmol; 상기 단계 (x) 참조)를 TFA 5 mL 중에 용해시키고, 30분 동안 반응시켰다. TFA를 증발시키고, 잔사를 에틸 아세테이트와 NaHCO₃(수성) 사이에 분배시켰다. 수상을 에틸 아세테이트로 2회 더 추출하고, 유기상을 모아 물, 염수로 세척하고, 건조(Na₂S0₄)하고, 여과하고, 증발시켰다. 생성물을 물/아세토니트릴로부터 동결 건조하였다. 정제는 필요하지 않았다. 수율: 0.28 g (85％).

C₂₂H₂₃ClF₂N₄O₅(M-H)^-에 대한 HRMS 이론치 495.1242, 실측치 495.1247

화합물 D (Ph(3-Cl)(5-OCHF ₂ )-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(2,6-디F)(OMe))의 제조

(i)2,6-디플루오로-4[(메틸술피닐)(메틸티오)메틸]벤조니트릴

(메틸술피닐)(메틸티오)메탄 (7.26 g, 0.0584 mol)을 아르곤하에 무수 THF 100 mL 중에 용해시키고, -78 ℃로 냉각시켰다. 헥산 중 부틸리튬 (16 mL 1.6 M, 0.0256 mol)을 교반하면서 적가하였다. 혼합물을 15분 동안 교반하였다. 이 동안, 무수 THF 100 mL 중 3,4,5-트리플루오로벤조니트릴 (4.0 g, 0.025 mmol)의 용액을 아르곤하에 -78 ℃로 냉각시키고, 전자 용액을 캐뉼라 (cannula)를 통해 후자 용액에 35분의 기간에 걸쳐 가하였다. 30분 후, 냉각 조를 제거하고, 반응물이 실온에 도달했을 때, 이를 물 400 mL에 부었다. THF를 증발시키고, 남은 수층을 디에틸 에테르로 3회 추출하였다. 에테르 상을 모아 물로 세척하고, 건조 (Na₂S0₄)하고, 증발시켰다. 수율: 2.0 g (30％).

(ii)2,6-디플루오로-4-포르밀벤조니트릴

2,6-디플루오로-4[(메틸술피닐)(메틸티오)메틸]벤조니트릴 (2.17 g, 8.32 mmol; 상기 단계 (i) 참조)을 THF 90 mL 중에 용해시키고, 농축 황산 3.5 mL를 가하였다. 혼합물을 실온에서 3일 동안 방치한 다음, 물 450 mL에 부었다. EtOAc로 3회 추출한 다음, 에테르 상을 모아 수성 중탄산 나트륨 및 염수로 2회 세척하고, 건조 (Na₂S0₄)하고, 증발시켰다. 수율: 1.36 g (98％). 포르밀 기의 위치를¹³C NMR에 의해 정하였다. 162.7 ppm에서 플루오르화 탄소로부터의 신호는 플루오르 원자로부터의 입소 (ipso) 및 메타 (meta) 커플링에 각각 상응하는 약 260 Hz 및 6.3 Hz의 두 커플링 상수를 갖는 예상된 커플링 패턴을 나타내었다.

(iii)2,6-디플루오로-4-히드록시메틸벤조니트릴

2,6-디플루오로-4-포르밀벤조니트릴 (1.36 g, 8.13 mmol; 상기 단계 (ii) 참조)을 메탄올 25 mL 중에 용해시키고, 얼음 조 상에서 냉각시켰다. 붕소수소화 나트륨 (0.307 g, 8.12 mmol)을 교반하면서 나누어 첨가하고, 반응물을 65분 동안 방치하였다. 용매를 증발시키고, 잔사를 디에틸 에테르와 수성 중탄산 나트륨 사이에 분배시켰다. 에테르 상을 수성 중탄산 나트륨 및 염수로 더 세척하고, 건조(Na₂S0₄)하고, 증발시켰다. 조 생성물은 곧 결정화되었으며, 추가의 정제 없이 사용할 수 있었다. 수율: 1.24 g (90％).

(iv)4-시아노-2,6-디플루오로벤질 메탄술포네이트

염화 메틸렌 60 mL 중 2,6-디플루오로-4-히드록시메틸벤조니트릴 (1.24 g, 7.32 mmol; 상기 단계 (iii) 참조) 및 메탄술포닐 클로라이드 (0.93 g, 8.1 mmol)의 빙냉 용액에 트리에틸아민 (0.81 g, 8.1 mmol)을 교반하면서 첨가하였다. 0 ℃에서 3시간 후, 혼합물을 1 M HCl로 2회 및 물로 1회 세척하고, 건조 (Na₂S0₄)하고, 증발시켰다. 생성물을 추가의 정제 없이 사용할 수 있었다. 수율: 1.61 g (89％).

(v)4-아지도메틸-2,6-디플루오로벤조니트릴

물 10 mL 및 DMF 20 mL 중 4-시아노-2,6-디플루오로벤질 메탄술포네이트 (1.61 g, 6.51 mmol; 상기 단계 (iv) 참조) 및 아지드화 나트륨 (0.72 g, 0.0111 mol)의 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 이후, 생성물을 물 200 mL에 붓고, 디에틸 에테르로 3회 추출하였다. 에테르 상을 모아 물로 5회 세척하고, 건조 (Na₂S0₄)하고, 증발시켰다. 작은 샘플을 NMR 목적으로 증발시키고, 생성물을 결정화하였다. 나머지는 주의하면서 증발시키되, 완전히 건조시키지는 않았다. 수율 (이론치 1.26 g)은 NMR 및 분석 HPLC를 기준으로 거의 정량적인 것으로 추정되었다.

(vi)4-아미노메틸-2,6-디플루오로벤조니트릴

이 반응은 문헌 [J. Chem. Res. (M) (1992) 3128]에 기재된 방법에 따라 수행하였다. 물 20 mL 중 10％ Pd/C (수분 50％) 520 mg의 현탁액에 물 20 mL 중 붕소수소화 나트륨 (0.834 g, 0.0221 mol)의 용액을 가하였다. 약간의 가스가 배출되었다. 4-아지도메틸-2,6-디플루오로벤조니트릴 (1.26 g, 6.49 mmol; 상기 단계 (v) 참조)을 THF 50 mL 중에 용해시키고, 얼음 조에서 15분에 걸쳐 수성 혼합물에 가하였다. 혼합물을 4시간 동안 교반한 다음, 2 M HCl 20 mL를 가하고, 혼합물을 셀리트를 통해 여과하였다. 셀리트를 물로 더 씻어내고, 수상을 모아 EtOAc로 세척한 다음, 2 M NaOH를 사용하여 알칼리성으로 만들었다. 염화 메틸렌으로 3회 추출하고, 유기상을 모아 물로 세척하고, 건조 (Na₂S0₄)하고, 증발시켰다. 수율: 0.87 g (80％).

(vii)2,6-디플루오로-4-tert-부톡시카르보닐아미노메틸벤조니트릴

4-아미노메틸-2,6-디플루오로벤조니트릴 (0.876 g, 5.21 mmol; 상기 단계 (vi) 참조)의 용액을 THF 50 mL 중에 용해시키고, THF 10 mL 중 디-tert-부틸 디카르보네이트 (1.14 g, 5.22 mmol)를 가하였다. 혼합물을 3.5시간 동안 교반하였다. THF를 증발시키고, 잔사를 물과 EtOAc 사이에 분배시켰다. 유기층을 0.5 M HCl 및물로 3회 세척하고, 건조 (Na₂S0₄)하고, 증발시켰다. 생성물을 추가의 정제 없이 사용할 수 있었다. 수율: 1.38 g (99％).

(viii)Boc-Pab(2,6-디F)(OH)

에탄올 20 mL 중 2,6-디플루오로-4-tert-부톡시카르보닐아미노메틸벤조니트릴 (1.38 g, 5.16 mmol; 상기 단계 (vii) 참조), 히드록실아민 하이드로클로라이드 (1.08 g, 0.0155 mol) 및 트리에틸아민 (1.57 g, 0.0155 mol)의 혼합물을 실온에서 36시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시키고, 잔사를 물과 염화 메틸렌 사이에 분배시켰다. 유기층을 물로 세척하고, 건조 (Na₂SO₄)하고, 증발시켰다. 생성물을 추가의 정제 없이 사용할 수 있었다. 수율: 1.43 g (92％).

(ix)Boc-Pab(2,6-디F) ×HOAc

이 반응은 문헌 [Judkins et al, Synth. Comm. (1998) 4351]에 기재된 방법에 따라 수행하였다. 아세트산 100 mL 중 Boc-Pab(2,6-디F)(OH) (1.32 g, 4.37 mmol; 상기 단계 (viii) 참조), 아세트산 무수물 (0.477 g, 4.68 mmol) 및 10％ Pd/C (수분 50％) 442 mg을 5기압의 압력으로 3.5시간 동안 수소화하였다. 혼합물을 셀리트를 통해 여과하고, 에탄올로 씻어내고, 증발시켰다. 잔사를 아세토니트릴, 물 및 몇방울의 에탄올로부터 동결-건조하였다. 하위 표제 생성물을 추가의정제 없이 사용할 수 있었다. 수율: 1.49 g (99％).

(x)Boc-Pab(2,6-디F)(Teoc)

THF 100 mL 및 물 1 mL 중 Boc-Pab(2,6-디F) ×HOAc (1.56 g, 5.49 mmol; 상기 단계 (ix) 참조)의 용액에 2-(트리메틸실릴)에틸 p-니트로페닐 카르보네이트 (1.67 g, 5.89 mmol)를 첨가하였다. 물 20 mL 중 탄산칼륨 (1.57 g, 0.0114 mol)의 용액을 5분에 걸쳐 적가하였다. 혼합물을 밤새 교반하였다. THF를 증발시키고, 잔사를 물과 염화 메틸렌 사이에 분배시켰다. 수층을 염화 메틸렌으로 추출하고, 유기상을 모아 수성 중탄산 나트륨으로 2회 세척하고, 건조 (Na₂SO₄)하고, 증발시켰다. 헵탄/EtOAc = 2/1을 이용하는 실리카 겔 상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 순수한 화합물 1.71 g (73％)을 얻었다.

(xi)Boc-Aze-Pab(2,6-디F)(Teoc)

Boc-Pab(2,6-디F)(Teoc) (1.009 g, 2.35 mmol; 상기 단계 (x) 참조)를 HCl (g)로 포화된 EtOAc 50 mL 중에 용해시켰다. 혼합물을 10분 동안 방치하고, 증발시키고, DMF 18 mL 중에 용해시킨 다음, 얼음 조 상에서 냉각시켰다. Boc-Aze-OH (0.450 g, 2.24 mmol), PyBOP (1.24 g, 2.35 mmol) 및 마지막으로 디이소프로필에틸 아민 (1.158 g, 8.96 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 교반한 다음, 물 350 mL 중에 붓고, EtOAc로 3회 추출하였다. 유기상을 모아 염수로 세척하고, 건조 (Na₂S0₄)하고, 증발시켰다. 헵탄:EtOAc (1:3)를 사용하는 실리카 겔 상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 목적 화합물 1.097 g (96％)을 얻었다.

(xii)Ph(3-Cl)(5-OCHF ₂ )-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(2,6-디F)(Teoc)

Boc-Aze-Pab(2,6-디F)(Teoc) (0.256 g, 0.500 mmol; 상기 단계 (xi) 참조)를 HCl (g)로 포화된 EtOAc 20 mL 중에 용해시켰다. 혼합물을 10분 동안 방치하고, 증발시키고, DMF 5 mL 중에 용해시켰다. Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)OH (0.120 g, 0.475 mmol; 상기 제조 A (viii) 참조), PyBOP (0.263 g, 0.498 mmol) 및 마지막으로 디이소프로필에틸 아민 (0.245 g, 1.89 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 교반한 다음, 물 350 mL에 붓고, EtOAc로 3회 추출하였다. 유기상을 모아 염수로 세척하고, 건조 (Na₂S0₄)하고, 증발시켰다. EtOAc를 사용하는 실리카 겔 상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 처리하여 목적하는 하위 표제 화합물 0.184 g (60％)을 얻었다.

(xiii)Ph(3-Cl)(5-OCHF ₂ )-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(2,6-디F)(OMe,Teoc)

아세토니트릴 4 mL 중 Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(2,6-디F)(Teoc) (64 mg, 0.099 mmol; 상기 단계 (xii) 참조) 및 O-메틸 히드록실아민 하이드로클로라이드 (50 mg, 0.60 mmol)의 혼합물을 70 ℃에서 3시간 동안 가열하였다. 용매를 증발시키고, 잔사를 물과 EtOAc 사이에 분배시켰다. 수층을 EtOAc로 2회 추출하고, 유기상을 모아 물로 세척하고, 건조 (Na₂S0₄)하고, 증발시켰다. 생성물은 추가의 정제 없이 사용할 수 있었다. 수율: 58 mg (87％).

(xiv)Ph(3-Cl)(5-OCHF ₂ )-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(2,6-디F)(OMe)

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(2,6-디F)(OMe,Teoc) (58 mg, 0.086 mmol; 상기 단계 (xiii) 참조)를 TFA 3 mL 중에 용해시키고, 얼음 조 상에서 냉각시키고, 2시간 동안 반응시켰다. TFA를 증발시키고, 잔사를 EtOAc 중에 용해시켰다. 유기층을 수성 탄산 나트륨 및 물로 2회 세척하고, 건조 (Na₂S0₄)하고, 증발시켰다. 잔사를 물 및 아세토니트릴로부터 동결 건조하여 표제 화합물 42 mg(92％)을 얻었다.

화합물 E (Ph(3-Cl)(5-OCH ₂ CH ₂ F)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(OMe))의 제조

(i)(2-모노플루오로에틸)메탄술포네이트

0 ℃에서 질소하에 CH₂Cl₂(90 mL) 중 2-플루오로에탄올 (5.0 g, 78.0 mmol)의 자기 교반 용액에 트리에틸아민 (23.7 g, 234 mmol) 및 메탄술포닐 클로라이드 (10.7 g, 93.7 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 0 ℃에서 1.5시간 동안 교반하고, CH₂Cl₂(100 mL)로 희석시키고, 2 N HCl (100 mL)로 세척하였다. 수층을 CH₂Cl₂(50 mL)로 추출하고, 유기 추출물을 모아 염수 (75 mL)로 세척하고, 건조 (Na₂SO₄)하고, 여과 및 감압 농축하여 황색 오일인 하위 표제 화합물 (9.7 g, 88％)을 얻고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

(ii)3-클로로-5-모노플루오로에톡시벤즈알데히드

질소하에 DMF (10 mL) 중 3-클로로-5-히드록시벤즈알데히드 (8.2 g, 52.5 mmol; 상기 제조 A (ii) 참조) 및 탄산칼륨 (9.4 g, 68.2 mmol)의 용액에 실온에서 DMF (120 mL) 중 (2-모노플루오로에틸)메탄술포네이트 (9.7 g, 68.2 mmol; 상기 단계 (i) 참조)의 용액을 적가하였다. 혼합물을 100 ℃로 5시간 동안 가열한 다음, 실온에서 밤새 교반하였다. 반응물을 0 ℃로 냉각시키고, 빙냉된 2 N HCl에 붓고, EtOAc로 추출하였다. 유기 추출물을 모아 염수로 세척하고, 건조 (Na₂S0₄)하고, 여과하고, 감압 농축하였다. 갈색 오일을 Hex:EtOAc (4:1)로 용출하는 실리카 겔 상 크로마토그래피로 처리하여 황색 오일인 하위 표제 화합물 (7.6 g, 71％)을 얻었다.

(iii)Ph(3-Cl)(5-OCH ₂ CH ₂ F)-(R,S)CH(OTMS)CN

CH₂Cl₂(310 mL) 중 3-클로로-5-모노플루오로에톡시벤즈알데히드 (7.6 g, 37.5 mmol; 상기 단계 (ii) 참조) 및 요오드화 아연 (3.0 g, 9.38 mmol)의 용액에 0 ℃에서 질소하에 트리메틸실릴 시아나이드 (7.4 g, 75.0 mmol)를 적가하였다. 혼합물을 0 ℃에서 3시간 동안 및 실온에서 밤새 교반하였다. 반응물을 H₂0 (300 mL)로 희석시키고, 유기층을 분리하고, 건조 (Na₂S0₄)하고, 여과 및 감압 농축하여 갈색 오일인 하위 표제 화합물 (10.6 g, 94％)을 얻고, 추가의 정제 또는 특성화 없이 사용하였다.

(iv)Ph(3-Cl)(5-OCH ₂ CH ₂ F)-(R,S)CH(OH)C(O)OH

농축 염산 (100 mL)을 Ph(3-Cl)(5-OCH₂CH₂F)-(R,S)CH(OTMS)CN (10.6 g, 5.8mmol; 상기 단계 (iii) 참조)에 가하고, 용액을 100 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응액을 0 ℃로 더 냉각시키고, 3 N NaOH (약 300 mL)로 천천히 염기성화하고, Et₂O (3 ×200 mL)로 세척하였다. 수층을 2N HCl (80 mL)로 산성화하고, EtOAc (3 ×300 mL)로 추출하였다. EtOAc 추출물을 모아 건조 (Na₂S0₄)하고, 여과 및 감압 농축하여 연황색 고체인 하위 표제 화합물 (8.6 g, 98％)을 얻고, 추가의 정제 없이 사용하였다.

(v)Ph(3-Cl)(5-OCH ₂ CH ₂ F)-(S)CH(OAc)C(O)OH (a) 및 Ph(3-Cl)(5-OCH ₂ CH ₂ F)-(R)CH(OH)C(O)OH (b)

비닐 아세테이트 (250 mL) 및 MTBE (250 mL) 중 Ph(3-Cl)(5-OCH₂CH₂F)-(R,S)CH(OH)C(O)OH (8.6 g, 34.5 mmol; 상기 단계 (iv) 참조) 및 리파제 (Lipase) PS "Amano" (4.0 g)의 용액을 질소하에 70 ℃에서 3일 동안 가열하였다. 반응물을 실온으로 냉각시키고, 셀리트 (등록상표)를 통한 여과에 의해 효소를 제거하였다. 필터 케이크를 EtOAc로 세척하고, 여액을 감압 농축하였다. CHCl₃:MeOH:Et₃N (90:8:2)으로 용출하는 실리카 겔 상 크로마토그래피에 의해 황색 오일인 하위 표제 화합물 (a)의 트리에틸아민 염을 얻었다. 또한, 하위 표제 화합물 (b) 트리에틸아민 염 (4.0 g)을 얻었다. 하위 표제 화합물 (b)의 염을 H₂0 (250 mL)에 용해시키고, 2 N HCl로 산성화하고, EtOAc (3 ×200 mL)로 추출하였다. 유기 추출물을 모아 건조 (Na₂SO₄)하고, 여과하고, 감압 농축하여 황색 오일인 하위 표제 화합물 (b) (2.8 g, 32％)를 얻었다.

하위 표제 화합물 (b)에 대한 데이타:

(vi)Ph(3-Cl)(5-OCH ₂ CH ₂ F)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(OMe)

0 ℃에서 질소하에 DMF (30 mL) 중 Ph(3-Cl)(5-OCH₂CH₂F)-(R)CH(OH)C(O)OH (818 mg, 3.29 mmol; 상기 단계 (v) 참조)의 용액에 HAze-Pab(OMe)ㆍ2HCl (1.43 g, 4.27 mmol, 국제 특허 출원 공개 제WO 00/42059호 참조), PyBOP (1.89 g, 3.68 mmol) 및 DIPEA (1.06 g, 8.23 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 0 ℃에서 2시간에 이어서 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 감압 농축하고, 잔사를 먼저 CHCl₃:EtOH (15:1)로 용출하고, 이어서 EtOAc:EtOH (20:1)로 용출하는 실리카 겔 상 크로마토그래피로 2회 처리하여 표제 화합물 (880 mg, 54％)을 얻었다.

화합물 F (Ph(3-Cl)(5-OCHF ₂ )-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OH))의 제조

(i)Ph(3-Cl)(5-OCHF ₂ )-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OH,Teoc)

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc) (0.148 g, 0.24 mmol; 상기 제조 D 단계 (ix) 참조)를 아세토니트릴 9 mL 중에 용해시키고, 히드록실아민 하이드로클로라이드 0.101 g (1.45 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 70 ℃에서 2.5시간 동안 가열하고, 셀리트 (등록상표)를 통해 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물 (0.145 g; 순도 75％)을 추가의 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용하였다.

(ii)Ph(3-Cl)(5-OCHF ₂ )-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OH)

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OH,Teoc) (0.145 g, 0.23 mmol; 상기 단계 (i) 참조)를 CH₂Cl₂0.5 mL 및 TFA 9 mL 중에 용해시켰다. 반응을 60분 동안 진행시켰다. TFA를 증발시키고, 잔사를 분취용 (preparative) HPLC를 이용하여 정제하였다. 대상물 분액을 푸울링하고, 동결 건조시켜 (2×), 표제 화합물 72 mg (2 단계로 수율 62％)을 얻었다.

화합물 H (Ph(3-Cl)(5-OCH ₂ CHF ₂ )-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OH))의 제조

(i)Ph(3-Cl)(5-OCH ₂ CHF ₂ )-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Z)

Boc-Aze-Pab(Z) (국제 특허 출원 공개 제WO 97/02284호 참조, 92 mg, 0.197 mmol)를 HCl(g)로 포화된 EtOAc 10 mL 중에 용해시키고, 10분 동안 반응시켰다. 용매를 증발시키고, 잔사를 DMF 2 ml 중 Ph(3-Cl)(5-OCH₂CHF₂)-(R)CH(OH)C(O)OH (50 mg, 0.188 mmol), PyBOP (109 mg, 0.209 mmol) 및 마지막으로 디이소프로필에틸 아민 (96 mg, 0.75 mmol)과 혼합하였다. 혼합물을 2시간 동안 교반한 다음, 물 50 mL에 붓고, EtOAc로 3회 추출하였다. 유기상을 모아 물로 세척하고, 건조 (Na₂S0₄)하고, 증발시켰다. 조 생성물을 EtOAc:MeOH (9:1)로 실리카 겔 상 플래쉬 크로마토그래피하였다. 수율: 100 mg (87％).

(ii)Ph(3-Cl)(5-OCH ₂ CHF ₂ )-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OH)

히드록실아민 하이드로클로라이드 (65 mg, 0.94 mmol) 및 트리에틸아민 (0.319 g, 3.16 mmol)을 THF 8 mL 중에서 혼합하고, 40 ℃에서 1시간 동안 초음파처리하였다. Ph(3-Cl)(5-OCH₂CHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Z) (96 mg, 0.156 mmol; 상기 단계 (i) 참조)를 THF 8 mL와 함께 추가로 첨가하였다. 혼합물을 40 ℃에서 4.5일 동안 교반하였다. 용매를 증발시키고, 조 생성물을 CH₃CN:0.1 M NH₄0Ac(40:60)를 사용하는 분취용 RPLC에 의해 정제하였다. 수율: 30 mg (38％). 순도: 99％.

약어

Ac = 아세틸

APCI = 대기압하 화학적 이온화 (MS와 관련)

API = 대기압하 이온화 (MS와 관련)

aq. = 수성

Aze (&(S)-Aze) = (S)-아제티딘-2-카르복실레이트 (달리 지시되지 않는다면)

Boc = tert-부틸옥시카르보닐

br = 브로드 (NMR과 관련)

CI = 화학적 이온화 (MS와 관련)

d = 일

d = 이중선 (NMR과 관련)

DCC = 디시클로헥실 카르보디이미드

dd = 이중선들의 이중선 (NMR과 관련)

DIBAL-H = 디-이소부틸알루미늄 하이드라이드

DIPEA = 디이소프로필에틸아민

DMAP = 4-(N,N-디메틸아미노)피리딘

DMF = N,N-디메틸포름아미드

DMSO = 디메틸술폭시드

DSC = 시차 주사 열량측정

DVT = 심부 정맥 혈전증

EDC = 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 하이드로클로라이드

eq. = 당량

ES = 전자분무

ESI = 전자분무 인터페이스

Et = 에틸

에테르 = 디에틸 에테르

EtOAc = 에틸 아세테이트

EtOH = 에탄올

Et₂O = 디에틸 에테르

HATU = O-(아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트

HBTU = [N,N,N',N'-테트라메틸-O-(벤조트리아졸-1-일)우로늄 헥사플루오로포스페이트]

HCl = 염산, 염화 수소 가스 또는 하이드로클로라이드 염 (상황에 따라)

Hex = 헥산

HOAc = 아세트산

HPLC = 고성능 액체 크로마토그래피

LC = 액체 크로마토그래피

m = 다중선(NMR과 관련)

Me = 메틸

MeOH = 메탄올

min. = 분

MS = 질량 분광법

MTBE = 메틸 tert-부틸 에테르

NMR = 핵 자기 공명

OAc = 아세테이트

Pab = 파라-아미디노벤질아미노

H-Pab = 파라-아미디노벤질아민

Pd/C = 탄소 상 팔라듐

Ph = 페닐

PyBOP = (벤조트리아졸-1-일옥시)트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트

q = 사중선 (NMR과 관련)

QF = 테트라부틸암모늄 플루오라이드

rt/RT = 실온

s = 단일선 (NMR과 관련)

t = 삼중선 (NMR과 관련)

TBTU = [N,N,N',N'-테트라메틸-O-(벤조트리아졸-1-일)우로늄 테트라플루오로보레이트]

TEA = 트리에틸아민

Teoc = 2-(트리메틸실릴)에톡시카르보닐

TEMPO = 2,2,6,6-테트라메틸-1-피페리디닐옥시 자유 라디칼

TFA = 트리플루오로아세트산

TGA = 열중량분석

THF = 테트라히드로푸란

TLC = 박막 크로마토그래피

UV = 자외선

접두사 n-, s-, i-, t- 및 tert-는 이들의 일반적인 의미, 즉 normal, secondary, iso 및 tertiary의 의미를 갖는다.

실시예 1-5 및 8-14는 본 발명을 설명한다. 실시예 6 및 7은 단지 비교 목적으로 제시된 것이며, 본 발명의 일부를 형성하지 않는다. 실시예 및 도면에서 괄호안에 주어진 비율은 중성 겔화 중합체 대 아이오타-카라게난의 중량 (％) 비율을 의미하며, 염기성 제약상 활성 성분 또는 존재할 수 있는 임의의 다른 성분을 고려하지 않는다. 첨부된 도면에서:

도 1: 다양한 조성 비율의 아이오타-카라게난 및 PEO, 4 M을 포함하는 블렌드로부터 H376/95의 방출. 정제를 pH 1에서 2시간 동안, 나머지 시간 동안은 pH 6.8에서 분석하였다.

도 2: 여러 분자량의 PEO 및 아이오타-카라게난을 조성 비율 (20:80)으로 포함하는 블렌드로부터 H376/95의 방출. 정제를 pH 1에서 2시간 동안, 나머지 시간 동안은 pH 6.8에서 분석하였다.

도 3: 여러 분자량의 PEO 및 아이오타-카라게난을 조성 비율 (80:20)으로 포함하는 블렌드로부터 H376/95의 방출. 정제를 pH 1에서 2시간 동안, 나머지 시간 동안은 pH 6.8에서 분석하였다.

도 4: 아이오타-카라게난 및 HPMC, 10 000 cps를 다양한 조성 비율로 포함하는 블렌드로부터 H376/95의 방출. 정제를 pH 1에서 2시간 동안, 나머지 시간 동안은 pH 6.8에서 분석하였다.

도 5: PEO, 4 M 및 아이오타-카라게난을 조성 비율 (50:50)으로 포함하는 블렌드로부터 H376/95의 방출. 정제를 24시간 동안 여러 인공 매질에서 분석하였다.

도 6: 여러 인공 매질에서 분석된, 중성 겔화 중합체 PEO 4 M으로부터 H376/95의 방출.

도 7: 여러 인공 매질에서 분석된, 음이온성 중합체 아이오타-카라게난으로부터 H376/95의 방출.

도 8: pH 1 및 6.8에서 아이오타-카라게난 및 PEO, 4 M을 조성 비율 (50:50)으로 포함하는 블렌드로부터의 화합물 A의 방출. 정제를 여러 인공 매질에서 24시간 동안 분석하였다.

도 9: pH 1 및 6.8에서 아이오타-카라게난 및 HPMC, 10,000 cps를 조성 비율 (50:50)으로 포함하는 블렌드로부터의 화합물 A의 방출. 정제를 여러 인공 매질에서 24시간 동안 분석하였다.

도 10: 중성 중합체 PEO, 4 M과 (50:50) 및 (80:20)의 비율로 혼합된 아이오타-카라게난으로부터 화합물 B의 방출. 정제를 pH 1에서 2시간 동안, 나머지 시간 동안은 pH 6.8에서 분석하였다.

도 11: 중성 중합체 HPMC, 10 000 cps와 (50:50)의 비율로 혼합된 아이오타-카라게난으로부터 화합물 B의 방출. 정제를 pH 1에서 2시간 동안, 나머지 시간 동안은 pH 6.8에서 분석하였다.

실시예 1

이 실시예는 다양한 조성 비율의 PEO, 4 M 및 아이오타-카라게난을 포함하는 블렌드로부터 H376/95의 방출을 나타낸다. 정제를 pH 1에서 2시간 동안, 나머지시간 동안은 pH 6.8에서 분석하였다.

정제를 직접 압착에 의해 제조하였다. 활성 성분, PEO 4 M 및 아이오타-카라게난을 완전히 혼합하고, 윤활제인 소듐 스테아릴 푸마레이트를 0.7 mm 체로 걸러 첨가하였다. 최종 혼합을 추가로 수행하고, 혼합물을 단일-펀치 (punch) 정제 프레스에서 9 mm 펀치로 압착하였다. 정제를, 0.1 M HCl (pH 1)을 포함하는 용해 조 UPS II (50 rpm, 37 ℃, 인공 매질)에서 2시간 동안 분석하였다. 이후, 정제를 0.1 M 인산염 완충액 (pH 6.8)을 포함하는 용해 조로 옮기고, 추가로 분석하였다. 분석 결과는 도 1에 제시되어 있다. (50:50) 제제는 pH 1 내지 6.8의 범위에서 본질적으로 pH-독립적인 방출 프로필을 나타낸다. 또한, 다른 비율의 음이온성 중합체, 아이오타-카라게난 및 중성 겔화 중합체 PEO 4 M을 혼합하는 경우, 다른 pH를 갖는 매질 중 방출 속도는 바뀔 수 있는 것으로 결론지을 수 있다.

실시예 2

이 실시예는 여러 분자량의 PEO 및 아이오타-카라게난을 조성 비율 (20:80)으로 포함하는 블렌드로부터 H376/95의 방출을 나타낸다. 정제를 pH 1에서 2시간동안, 나머지 시간 동안은 pH 6.8에서 분석하였다.

정제를 제조하여 실시예 1에 따라 분석하였다. 분석 결과는 도 2에 제시되어 있으며, 이는 높은 분자량의 중성 겔화 중합체를 사용하면 중성 pH에서 더 느린 방출 속도가 얻어짐을 보여준다. 제제 중에는 충분량의 음이온성 중합체가 포함되기 때문에, 낮은 pH 영역에서의 방출 속도는 영향을 받지 않는다.

실시예 3

이 실시예는 여러 분자량의 PEO 대 아이오타-카라게난을 조성 비율 (80:20)으로 포함하는 블렌드로부터 H376/95의 방출을 나타낸다. 정제를 pH 1에서 2시간 동안, 나머지 시간 동안은 pH 6.8에서 분석하였다.

정제를 제조하여 실시예 1에 따라 분석하였다. 도 3은 고 분자량의 겔화 중합체를 사용하면 중성 pH에서 방출 속도를 감소시킬 수 있음을 보여준다. 동시에, pH 1에서의 방출 지연 효과는 도 2에 나타낸 예에 비해 소량의 아이오타-카라게난이 사용되었기 때문에 덜 뚜렷하다.

실시예 4

이 실시예는 아이오타-카라게난 및 HPMC, 10 000 cps를 다양한 조성 비율로 포함하는 블렌드로부터 H376/95의 방출을 나타낸다. 정제를 pH 1에서 2시간 동안, 나머지 시간 동안은 pH 6.8에서 분석하였다.

정제를 제조하여 실시예 1에 따라 분석하였다. 여러 용해 매질에서의 분석 결과는 도 4에 제시되어 있다. (50:50) 제제는 또한 pH 범위 1 내지 6.8에서 본질적으로 pH 독립적 방출 프로필을 나타낸다. 또한, 방출 속도는 여러가지 비율의 다양한 다른 중성 겔화 중합체, 이 경우 HPMC, 10 000 cps를 음이온성 중합체인 아이오타-카라게난과 혼합함으로써 변경시킬 수 있는 것으로 결론지을 수 있다.

실시예 5

이 실시예는 PEO, 4 M 및 아이오타-카라게난을 조성 비율 (50:50)으로 포함하는 혼합물로부터 H376/95의 방출을 나타낸다. 정제를 24시간 동안 여러 매질에서 분석하였다.

정제를 실시예 1에 따라 직접 압착에 의해 제조하였다. 분석은 용해 조 (흐름 스트림을 따라 바스켓¹에 위치한 정제를 포함하는 USP 장치 2)에서 수행하였으며, 여기서 3개의 정제를 각 매질, 즉 약물의 용해도를 향상시키기 위해 첨가된 5％ 에탄올 (EtOH)을 포함하는 0.1 M HCl 및 0.1 M 인산염 완충액 (pH 6.8)에서 24시간 동안 분석하였다. 도 5에 제시된 결과는 PEO, 4 M 및 아이오타-카라게난을 동일한 부 (part)로 포함하는 조성물을 사용하는 경우 pH 독립적 방출 프로필을 갖는 정제를 제조할 수 있음을 분명하게 보여준다.

[망상 철사 소재로 특별 제작된 4각형 바스켓¹. 그의 상부의 좁은 측면의 하나에서 스틸 로드 (steel rod)의 단부로 결합되어 있음. 로드는 용해 용기의 덮개를 통과하며 용기의 중심부로부터 3.2 cm에서 2개의 테플론 (Teflon) 너트에 의해 고정되어 있음. 바스켓 바닥의 아래쪽 연부는 패들 (paddle) 위쪽 1 cm로 조정함. 바스켓은 시험에서 그의 연부 상의 정제와 함께 흐름 스트림을 따라 지시됨.]

실시예 6

이 실시예는 아이오타-카라게난의 부재하에 여러 인공 매질에서 분석된, 중성 겔화 중합체 PEO 4 M으로부터 H376/95의 방출을 나타낸다.

정제를 실시예 1에 따라 직접 압착에 의해 제조하였다. 분석은 다른 용해 조에서 별도로 수행하였다. 0.1 M HCl을 포함하는 용기 중 정제를 2시간 동안 분석하였다. 0.1 M 인산염 완충액 (pH 6.8)을 용해 매질로 사용하는 경우, 정제를 20시간 동안 분석하였다. 도 6의 결과는 pH 1에서의 방출 속도가 pH 6.8에서의 방출 속도보다 상당히 더 빠름을 나태내며, 이는 중성 중합체만을 사용하는 것이 pH 의존 용해성을 나타내는 염기성 약물에 대해 pH 독립적 방출 프로필을 제공하는 데 충분하지 않음을 암시한다.

실시예 7

이 실시예는 중성 겔화 중합체의 부재하에 여러 인공 매질에서 분석된, 음이온성 중합체 아이오타-카라게난으로부터 H376/95의 방출을 나타낸다.

정제를 실시예 1에 따라 직접 압착에 의해 제조하였다. 분석은 실시예 6과 유사하게 다른 용해 조에서 별도로 수행하였다. 도 7은 pH 1에서의 방출 속도가 pH 6.8에서의 방출 속도에 비해 얼마나 느린지를 나타낸다. 이러한 효과는 본 발명자들이 기질 중합체로서 시험한 임의의 다른 단독중합체를 사용하는 경우에는 나타나지 않는다.

실시예 8

이 실시예는 PEO 4 M 및 아이오타-카라게난을 조성 비율 (50:50)으로 포함하는 혼합물로부터 화합물 A의 방출을 나타낸다. 정제를 여러 매질에서 24시간 동안 분석하였다.

활성 성분을 중합체 및 윤활제와 수동 혼합하였다. 혼합물을 정제로 직접 압착하였다.

실시예 9

이 실시예는 HPMC, 10,000 cps 및 아이오타-카라게난을 조성 비율 (50:50)으로 포함하는 혼합물로부터 화합물 A의 방출을 나타낸다. 정제를 여러 매질에서 24시간 동안 분석하였다.

실시예 8 및 9의 정제로부터 화합물 A의 누적 방출량의 평가

2개의 정제 각각을 37 ℃에서 50 rpm의 USP 용해 장치 2 (패들 + 바스켓¹)를 사용하여 900 ml 매질에서 약물 방출에 대하여 시험하였다. 사용된 용해 매질은 약물 용해도를 향상시키기 위해 부가된 5％ 에탄올을 포함하는 0.1 M 염산 (pH 1) 및 0.1 M 인산 나트륨 완충액 (pH 6.8)이었다. 에탄올의 부가는 상기 조성물의 방출 속도에 유의한 영향을 주지 않는 것으로 확인되었다. 0.1 M HCl을 용해 매질로 사용한 경우 235 nm를 분석 파장으로 사용하고, 변경된 인산염 완충액 (pH 6.8)을 용해 매질로 사용한 경우 250 nm를 분석 파장으로 사용하는 C 테크놀러지스 (Technologies) 섬유 광학 시스템을 이용하여 인-라인 (in-line) 정량을 수행하였다. 상기 2가지 매질에서 350 nm를 기준 파장으로 사용하였다.

[망상 철사 소재로 특별 제작된 4각형 바스켓¹. 그의 상부의 좁은 측면의 하나에서 스틸 로드의 단부로 결합되어 있음. 로드는 용해 용기의 덮개를 통과하며 용기의 중심부로부터 3.2 cm에서 2개의 테플론 너트에 의해 고정되어 있음. 바스켓 바닥의 아래쪽 연부는 패들 위쪽 1 cm로 조정함. 바스켓은 시험에서 그의 연부 상의 정제와 함께 흐름 스트림을 따라 지시됨.]

실시예 10

이 실시예는 PEO 4 M 및 아이오타-카라게난을 조성 비율 (50:50)으로 포함하는 혼합물로부터 화합물 B의 방출을 나타낸다.

정제는 실시예 9에 따라 제조하였다. 방출 데이타는 도 10에 나타나 있다.

실시예 11

이 실시예는 PEO 4M 및 아이오타-카라게난을 조성 비율 (80:20)으로 포함하는 혼합물로부터 화합물 B의 방출을 나타낸다.

실시예 12

이 실시예는 HPMC, 10 000 cps 및 아이오타-카라게난을 조성 비율 (50:50)으로 포함하는 혼합물로부터 화합물 B의 방출을 나타낸다.

정제는 실시예 9에 따라 제조하였다. 방출 데이타는 도 11에 나타나 있다.

실시예 13

화합물 C와 HPMC 10 000 cps의 직접 압착

활성 물질 및 부형제 물질을 비팅 배트 (beeting vat)에서 혼합하였다. 혼합물을 소듐 스테아릴 푸마레이트를 사용하여 윤활처리하고, 익스엔터프레스 (exenterpress)를 사용하여 정제로 압착하였다.

화합물 C와 HPMC 10 000 cps 및 아이오타-카라게난 (비율 50:50)의 직접 압착

활성 물질 및 부형제 물질을 비팅 배트에서 혼합하였다. 혼합물을 소듐 스테아릴 푸마레이트를 사용하여 윤활처리하고, 익스엔터프레스를 사용하여 정제로 압착하였다.

방출 속도는 다음과 같이 결정하였다. 3개의 정제 각각을 50 rpm 및 37 ℃에서 USP 용해 장치 2 (패들 + 바스켓¹)를 사용하여 900 ml 매질에서 약물 방출에 대하여 시험하였다. 사용된 용해 매질은 0.1 M 염산 (pH 1) 및 0.1 M 인산 나트륨 완충액 (pH 6.8)이었다. 0.1 M HCl을 용해 매질로 사용한 경우 220 nm를 분석 파장으로 사용하고, 인산염 완충액 (pH 6.8)을 용해 매질로 사용한 경우 260 nm를 분석 파장으로 사용하는 C 테크놀러지스 섬유 광학 시스템을 이용하여 인-라인 정량을 수행하였다. 상기 두 매질에서 350 nm를 기준 파장으로 사용하였다. 분석에서 처음 2시간 동안은 방출 값을 15분 마다 측정하고, 이후 나머지 분석 동안에는 매시간 마다 측정하였다.

실시예 14

이 제제는 실시예 13에 기재된 바와 같이 제조할 수 있다.

Claims

아이오타-카라게난 (iota-carrageenan), 1종 이상의 중성 겔화 중합체 및 염기성 제약상 활성 성분을 포함하며, 산성 pH에서 상기 염기성 제약상 활성 성분의 방출을 억제하는 경구용 제약 제제.
제1항에 있어서, 염기성 제약상 활성 성분의 염기성 기의 pKa가 1 내지 10인 제제.
제1항 또는 제2항에 있어서, 염기성 제약상 활성 성분이 지멜라가트란 (ximelagatran); Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(OMe); Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(2,6-디F)(OMe); 또는 Ph(3-Cl)(5-OCH₂CH₂F)-(R)CH(OH)C(O)-(S)Aze-Pab(OMe)인 제제.
제1항에 있어서, 염기성 제약상 활성 성분이

4-({3-[7-(3,3-디메틸-2-옥소부틸)-9-옥사-3,7-디아자비시클로[3.3.1]논-3-일]프로필}아미노)벤조니트릴;

tert-부틸 2-{7-[3-(4-시아노아닐리노)프로필]-9-옥사-3,7-디아자비시클로-[3.3.1]논-3-일}에틸카르바메이트;

tert-부틸 2-{7-[4-(4-시아노페닐)부틸]-9-옥사-3,7-디아자비시클로-[3.3.1]논-3-일}에틸카르바메이트; 또는

tert-부틸 2-{7-[(2S)-3-(4-시아노페녹시)-2-히드록시프로필]-9-옥사-3,7-디아자비시클로[3.3.1]논-3-일}에틸카르바메이트인 제제.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 중성 겔화 중합체가 폴리에틸렌 옥시드, 폴리에틸렌 글리콜, 또는 2종 이상의 다른 폴리에틸렌 옥시드의 혼합물인 제제.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 중성 겔화 중합체가 히드록시프로필메틸 셀룰로스, 또는 2종 이상의 다른 히드록시프로필메틸 셀룰로스의 혼합물인 제제.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 중성 겔화 중합체가 히드록시프로필메틸 셀룰로스 및 폴리에틸렌 옥시드의 혼합물인 제제.
제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 중성 겔화 중합체 대 아이오타-카라게난의 비율이 20:80 내지 80:20의 범위인 제제.
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 염기성 제약상 활성 성분이 메토프롤롤 (metoprolol)인 제제.
아이오타-카라게난, 1종 이상의 중성 겔화 중합체 및 염기성 제약상 활성 성분을 혼합하는 것을 포함하는, 제1항에 청구된 제제의 제조 방법.
제1항에 청구된 제제의 약물로서의 용도.
제1항에 청구된 제제의, 심혈관계 질환의 치료용 약물의 제조에 있어서의 용도.
심혈관계 질환을 앓거나 이 질환의 위험이 있는 환자에게 치료 유효량의 제1항의 제약 제제를 투여하는 것을 포함하는, 상기 환자의 심혈관계 질환의 치료 방법.