KR20030038812A - 암 치료 방법 - Google Patents

Abstract

카르니틴 및 다른 근육 보호제들은 아플리딘 및 아플리딘 동족체들의 부작용을 방지하는데 유용하다.

Description

암 치료 방법{TREATMENT OF CANCERS}

암은 진료소에서 관찰되는 사례들 중 대다수를 포함하는 암종과, 백혈병, 림프종, 중추 신경계 종양 및 육종을 포함한 다른 덜 빈번한 암의 2 가지 범주로 나눌 수 있는 일단의 악성 종양을 포함한다. 암종은 기원이 상피 조직인 반면 육종은 결합 조직 및 중배엽 조직에서 기원하는 조직으로부터 발생한다. 육종은 예를 들어 근육이나 뼈를 침범할 수 있으며, 뼈, 방광, 신장, 간, 폐, 이하선 또는 비장에서 발생할 수 있다.

암은 침습성이고 새로운 부위로 전이하는 경향이 있다. 상기는 주변 조직으로 직접 퍼지며 또한 림프계와 순환계를 통해 확산될 수 있다. 수술 및 편재된 질병에 대한 방사선 및 약물을 포함한 많은 치료를 암에 이용할 수 있다. 그러나, 다수의 암 유형들에 대해 이용 가능한 치료 효능은 제한적이며, 임상적인 이점을 나타내는 새롭고 개선된 형태의 치료 방법이 요구된다. 이는 진행되고/되거나전이성인 질병이 나타난 환자들에 대해서 특히 사실이다. 이는 확립된 요법으로 이전에 치료받은 후 동일한 요법에 의한 추가의 치료가 내성의 획득으로 인해 거의 비효과적이거나 또는 관련 독성으로 인해 상기 요법의 투여가 제한적인 진행성 질병이 재발된 환자의 경우에도 또한 사실이다.

화학요법은 원격 전이로 진행된 암의 치료에 요구되고 종종 수술 전 종양의 감소에 도움이 되므로 암 치료에 상당부분 이용되며, 많은 항암 약물들이 다양한 작용 방식을 근거로 개발되었다.

현재 아플리딘으로서 공지된 데하이드로디뎀닌 B는 WO91/04985의 주제이다. 상기는 디뎀닌으로서 공지된 화합물과 관련이 있으며 하기의 화학식을 갖는다:

(디뎀닌의 코어/[α-(α-하이드록시이소발레릴)프로피오닐]/(이소스타틴)/피루빌)

(아플리딘)

아플리딘에 대한 추가의 정보를 예를 들어 하기의 문헌들에서 찾을 수 있다:

[Jimeno, J., "해양성 미생물과 무척추 동물에 대한 연구: 해양 기원의 항암 약물", IBC Conf Discov Drugs from Nat Novel Approaches New Sources(Dec 8-9, London) 1994, 1994;

Faircloth, G. et al., "실험적인 종양 모델에 대해 활성을 갖는 새로운 해양성 항암제(MDA)인 데하이드로디뎀닌 B(DDM)", 9th NCI-EORTC Symp New Drugs Cancer Ther(March 12-15, Amsterdam) 1996, Abst 111;

Sakai, R. et al., "디뎀닌의 구조-활성 관계", Journal of Medicinal Chemistry 1996, 39(14):2819;

Urdiales, J.L. et al., "지중해의 피막동물로부터 단리된 뎁시펩티드인 데하이드로디뎀닌 B(DDB)의 증식억제 효과", Cancer Letters 1996, 102(1-2):31;

Faircloth, G. et al., "새로운 해양성 항암 뎁시펩티드(MADEP)인 아플리딘(APD)의 임상 전 특성화", Proc Amer Assoc Cancer Res 1997, 38:Abst 692;

Depenbrock, H. et al., "새로이 외식된 클론원성 인간 종양 세포 및 조혈성 전구체 세포에 대한, 새로운 해양성 항암 화합물인 아플리딘의 생체 외 활성", British Journal of Cancer 1998, 78(6): 739;

Faircloth, G. et al., "아플리딘은 생체 내 항종양 활성을 갖는 신규의 해양성 뎁시펩티드이다", Proc Amer Assoc Cancer Res 1998, 39:Abst 1551;

Faircloth, G. et al., "효능있는 항종양 활성을 갖는 새로운 해양성 약제인아플리딘의 임상 전 개발", 10th NCI-EORTIC Symp New Drugs Cancer Ther(June 16-19, Amsterdam) 1998, Abst 129;

Mastbergen, S.C. et al., "생체 외 분석을 사용하여 평가된 새로운 해양성 항암제인 아플리딘의 세포독성 및 신경세포독성", 10th NCI-EORTIC Symp New Drugs Cancer Ther(June 16-19, Amsterdam) 1998, Abst 131].

임상 전 연구에서, 아플리딘은 2 가지 상피 형 세포 주 CT-1 및 CT-2, 및 인간 결장암 세포 주 HT-29에 대해 용량 의존성 세포독성 활성을 가졌다. 가장 증식성인 세포 주 CT-2가 아플리딘에 가장 감수성이었다. 또한 상기 화합물은 상기 3 개의 세포주 모두에서 오르니틴 데카복실라제 활성을 감소시켰다(Lobo C, Garcia-Pozo SG, et al., 인간 결장 암종 세포 주에 대한 데하이드로디뎀닌 B의 효과. Anticancer Research. 17:333-336, Jan-Feb 1997). 유사한 연구에서, 아플리딘 50 nmol/ℓ는 유방암 세포 주 MDA-MB231 및 MCF-7의 성장을 각각 17 및 47%까지 억제하였다. 처리된 세포에서 스페르미딘과 스페르민의 상당한 증가가 관찰되었다(Gomezfabre PM, Depedro E, et al., 세포독성제인 클로르페니라민과 데하이드로디뎀닌 B로 처리된 인간 유방암 세포의 폴리아민 함량. Cancer Letters. 113:141-144, 26 Feb 1997). 유식 세포 측정 분석은 아플리딘이 임의의 분명한 세포 주기 난관 통기를 유도하지 않았음을 입증하였다(Erba E, Balconi G, et al. 신규의 천연 해양성 화합물에 의해 유도된 세포 주기 단계 난관 통기. Annals of Oncology. 7(Suppl. 1): 82, 1996). 마우스에서, 아플리딘은 이식된 P388 백혈병 및 B16 흑색종에 대해 최적 용량 160 마이크로/㎏으로 활성이었다. 디뎀닌 B와 달리, 아플리딘은 피하 이식된 루이스 폐 암종에서 활성이었다(Faircloth G, Rinehart K, et al. 실험적인 종양 모델에 대해 활성이 있는 새로운 해양성 항암제인 데하이드로디뎀닌 B. Annals of Oncology. 7(Suppl. 1):34, 1996).

저 농도의 아플리딘에 대한 연속 노출로 비 호지킨 림프종, 흑색종 및 유방, 흑색종, 난소 및 비 소 세포 폐암을 포함한 다수의 종양 세포 주의 성장이 억제되었다. 상기 효과의 크기는 노출 시간에 따라 변하였으며, 비 골수독성 농도에서 성취될 수 있는 것으로 나타났다. 비 소 세포 폐암, 유방암 및 흑색종 세포 주는 ≥0.001 마이크로몰/ℓ 농도의 아플리딘에 대한 연속적인 노출에 감수성이었다. 아플리딘은 클론원성 조혈 간 세포에 대해 독소루비신과 유사한 독성을 가졌다(Depenbrock H, Peter R, et al. 새로이 외식된 클론원성 인간 종양 세포 및 조혈성 전구체 세포에 대한 새로운 해양성 항암 화합물인 아플리딘의 생체 외 활성. British Journal of Cancer. 78:739-744, No. 6, Sep 1998).

아플리딘은 인간 암 이종이식편을 갖는 마우스에 대해 상당한 활성을 가졌다. 2.1 ㎎/㎏의 최대 허용 용량에서, 아플리딘은 몇몇 동물에서 9%의 처리/대조(T/C) 종양 비로 거의 완전한 경감을 생성시켰다. 1.25 ㎎/㎏에서, 상당한 활성이 위 종양(T/C 14%)에 대해 나타났으며 전립선 종양 성장 억제가 또한 관찰되었다(T/C 25%)(Faircloth G, Grant W, et al. 효능있는 항종양 활성을 갖는 새로운 해양성 약제인 아플리딘의 임상 전 개발. Annals of Oncology. 9(Suppl. 2):34, 1998).

아플리딘은 암에 대해 잠재적인 용도를 갖는 다른 화합물들, 특히 디뎀닌과관련이 있다. 아플리딘 자체가 데하이드로디뎀닌이다.

관련된 디뎀닌 및 다른 상기와 같은 화합물(본 출원인들은 일반적으로 아플리딘 동족체로서 지칭한다)의 예를 하기의 문헌들에서 찾을 수 있다:

a) [Rinehart KL, Kishore V, Bible KC, Sakai R, Sullins DW, Li KM. 디뎀닌 및 투니클로린: 해양성 피막동물인 트리디뎀눔 솔리둠으로부터의 신규의 천연 산물. J Nat Prod. 1988 Jan-Feb; 51(1):1-21(J Nat Prod 1998 May-Jun; 51(3):624의 오류)]

b) [Rinehart KL Jr, Gloer JB, Wilson GR, Hughes RG Jr, Li LH, Renis HE, McGovren JP. 피막동물로부터의 항바이러스 및 항종양 화합물. Fed Proc. 1983 Jan; 42(1):87-90]

c) [Rinehart KL Jr, Gloer JB, Hughes RG Jr, Renis HE, McGovren JP, Swynenberg EB, Stringfellow DA, Kuentzel SL, Li LH. 디뎀닌: 카리브해 피막동물로부터의 항바이러스 및 항종양 뎁시펩티드. Science. 1981 May 22; 212(4497):933-5.]

d) [Vervoort H, Fenical W, Epifanio RA, 타만다린 A 및 B: 디뎀니다에 과의 브라질 해초속으로부터의 신규의 세포독성 뎁시펩티드. J Org Chem. 2000 Feb 11; 65(3):782-92]

e) PCT/GB01/02901(출원일 2001년 7월 2일). 아플리딘 및 신규의 항종양 유도체의 합성 방법.

상기 d) 항은 타만다린, 특히 하기 화학식의 타만다린 A 및 타만다린 B라 지칭되는 아플리딘 동족체에 관한 것이다:

발명의 요약

본 출원인들은 L-카르니틴과 같은 근육 보호제를 사용하여 아플리딘 화합물로 인간 환자를 치료하는 개선된 치료 방법을 개발하였다. 상기 아플리딘 화합물은 아플리딘 자체와 아플리딘 동족체들을 포함한다.

본 발명은 아플리딘 또는 아플리딘 동족체인 관련 화합물을 사용하는 암의 치료 방법에 관한 것이다.

도 1 및 2는 아플리딘 및 L-카르니틴의 투여와 관련하여 2 명의 환자에 대한근육 효소 변화와의 관계를 나타낸다.

도 3은 아플리딘 및 아플리딘-카르니틴에 대한 아실카르니틴의 방출을 나타낸다.

본 발명은 암에 걸린 임의의 포유동물, 특히 인간에게 치료 유효량의 아플리딘 화합물(아플리딘 자체 또는 아플리딘 동족체) 또는 그의 약학 조성물, 및 골격근 보호제를 투여함을 포함하는, 상기 암에 걸린 개인의 치료 방법을 제공한다.

상기 아플리딘 화합물 및 근육 보호제를 대개는 상이한 투여 섭생으로 별도의 조성물로서 투여한다.

본 발명은 또한 L-카르니틴과 같은 근육 보호제를 투여함을 수반하는, 아플리딘 화합물의 부작용을 감소시키는 방법을 제공한다. 또한 근육 보호제를 투여함을 수반하는, 아플리딘 화합물의 권장 용량을 높이는 방법을 제공한다.

본 발명은 또한 아플리딘 화합물 및 골격근 보호제를 별도로 또는 함께 함유하는 복합적인 약학 제제뿐만 아니라, 그의 제조 방법에 관한 것이다. 상기 복합 제제는 동시적이거나 또는 순차적으로 사용된다.

보다 특히, 본 발명은 아플리딘 또는 아플리딘 동족체 및 골격근 보호제의 투여에 의한 암 치료용 약제의 제조에서 아플리딘 화합물의 용도; 아플리딘 또는 아플리딘 동족체 및 골격근 보호제의 투여에 의한 암 치료용 약제의 제조에서 골격근 보호제의 용도; 및 아플리딘 또는 아플리딘 동족체 및 골격근 보호제의 투여에 의한 암 치료용 약제의 제조에서 아플리딘 화합물과 골격근 보호제의 용도를 제공한다.

약학 조성물 또는 약제의 예로는 정맥 내 투여에 적합한 조성을 갖는 액체(용액, 현탁액 또는 유화액)가 있으며, 이들은 순수한 화합물을 함유하거나 또는 임의의 담체 또는 다른 약리학적으로 활성인 화합물들을 함께 함유할 수도 있다.

본 발명의 아플리딘 화합물 또는 아플리딘 조성물의 투여는 바람직하게는 정맥 내 주입에 의한 투여 프로토콜을 기본으로 한다. 바람직하게는 72 시간 이하, 보다 바람직하게는 1 내지 24 시간, 가장 바람직하게는 약 1, 약 3 또는 약 24 시간의 주입 시간을 사용한다. 병원에서 밤새 머무를 필요 없이 치료를 수행할 수 있게 하는 짧은 주입 시간이 특히 바람직하다. 그러나, 주입은 대충 24 시간 또는 경우에 따라 훨씬 더 길 수 있다. 주입을 다양한 패턴의 적합한 간격으로, 예시적으로는 일주일에 한 번, 일주일에 두 번, 또는 주 당 보다 빈번하게, 임의로 전형적으로는 일주일 간격으로 매주 반복하여 주입을 수행할 수 있다.

카르니틴의 유무에 따른 투여 섭생의 예를 하기 표에 나타낸다.

스케줄	최대 허용 용량, MTD	용량 제한 독성	권장 용량, RD
3주간, 1주일 쉬고, 매주 24시간 아플리딘 주입	4500	근육/간	3750
3주간, 1주일 쉬고, 매주 1 시간 아플리딘 주입	3600	근육	3250
매 2주마다 24 시간 아플리딘 주입	6000	근육	5000
매 2주마다 24 시간 아플리딘 주입, L-카르니틴 매일 주입	8000	인플루엔자와 같은 증후군	7000
매 3 주마다 5일 연속해서 1 시간 아플리딘 주입	1500x5	근육/오래 지속되는 구토	1350x5

상기 화합물의 정확한 용량은 특정 제형, 적용 방식, 및 치료하려는 특정 위치, 숙주 및 종양에 따라 변할 것이다. 연령, 체중, 성별, 식이요법, 투여 시간, 분비 속도, 숙주의 조건, 약물 조합, 반응 민감도 및 질병의 중증도와 같은 다른 인자들도 고려될 것이다. 투여를 최대 허용 용량 내에서 연속적으로 또는 주기적으로 수행할 수 있다.

바람직한 아플리딘 화합물은 아플리딘이지만, 본 발명을 도입부에서 언급한 문헌 (a) 내지 (e)에 개시된 것들과 같은 아플리딘 동족체들의 투여에 사용할 수 있다. 상기 문헌들은 본 발명에 참고로 구체적으로 인용되어 있다. 아플리딘 동족체의 예에는 디뎀닌 A, 디뎀닌 B, 디뎀닌 C, 디뎀닌 D 및 디뎀닌 E뿐만 아니라 PCT/GB01/02901에서 제조된 모든 화합물들이 포함된다.

바람직한 근육 보호제는 L-카르니틴이나, L-카르니틴의 라세미 카르미틴, 전구체 및 유도체들도 사용될 수 있다. 전구체 및 유도체의 예로는 아세틸카르니틴 및 카르니틴의 다른 에스테르, 및 지방산 또는 다른 유기산이 있다. 적합한 용량은 하루에 L-카르니틴 0.05 내지 0.2 g/㎏, 보다 적합하게는 0.075 내지 0.15 g/㎏, 바람직하게는 약 0.1 g/㎏이다. 이들 용량을 다른 근육 보호제에 적합하게 변화시킬 수 있다. 다른 투여 섭생들을 사용할 수 있지만, L-카르니틴 또는 다른 근육 보호제를 3 회의 분할 용량으로 투여하는 것이 편리하다. 하나의 본 발명의 바람직한 과정에서, L-카르니틴의 용량은 하루에 3.5 g 이상, 예를 들어 하루에 1.5 g 3 회이다.

근육 보호제를 투여할뿐만 아니라, 본 발명의 아플리딘 화합물 및 조성물을 복합 요법을 제공하는 다른 약물과도 함께 사용할 수 있다. 상기 다른 약물은 아플리딘과 동일한 조성물의 일부를 형성하거나, 또는 동시에 또는 상이하게 투여되는 별도의 조성물로서 제공될 수도 있다. 상기 다른 약물의 정체를 특별히 제한하지는 않으며, 적합한 후보로는 하기의 것들이 있다:

a) 유사분열억제 효과를 갖는 약물, 특히 골격근 요소들을 표적으로 하는 약물, 예를 들어 미소관 조절제, 예를 들어 탁산 약물(예: 탁솔, 패클리탁셀, 탁소테레, 도세탁셀), 포도필로톡신 또는 빈카 알칼로이드(빈크리스틴, 빈블라스틴);

b) 대사길항 약물(예: 5-플루오로우라실, 시타라빈, 젬시타빈, 퓨린 동족체, 예를 들어 펜토스타틴, 메토트렉세이트);

c) 알킬화제 또는 질소 겨자(예: 니트로소우레아, 사이클로포스파미드 또는 이포스파미드);

d) DNA를 표적으로 하는 약물, 예를 들어 안트라사이클린 약물 아드리아마이신, 독소루비신, 파모루비신 또는 에피루비신;

e) 국소이성화효소를 표적으로 하는 약물, 예를 들어 에토포시드;

f) 호르몬 및 호르몬 작용물질 또는 길항물질, 예를 들어 에스트로겐, 항에스트로겐(타목시펜 및 관련 화합물) 및 안드로겐, 플루타미드, 류프로렐린, 고세렐린, 시프로트론 또는 옥트레오티드;

g) 항체 유도체를 포함한 종양 세포에서 신호 변환을 표적으로 하는 약물, 예를 들어 헤르셉틴;

h) 알킬화 약물, 예를 들어 백금 약물(시스 플라틴, 카르보플라틴, 옥살리플라틴, 파라플리디니아틴) 또는 니트로소우레아;

i) 종양의 전이에 잠재적으로 영향을 미치는 약물, 예를 들어 기질 메탈로프로테이나제 억제제;

j) 유전자 요법 및 안티센스 약제;

k) 항체 요법제;

l) 해양성의 다른 생물활성 화합물, 특히 카할라리드 F 또는 엑테이나시딘, 예를 들어 et-743;

m) 아플리딘의 부작용과 대적하는 다른 약물들, 예를 들어 구토억제제;

o) 아플리딘을 권장 용량으로 투여할 수 있게 하고 독성을 조정하는 보다 일반적인 약물들.

본 출원인들은 아플리딘이 혈관 내피 세포 성장 인자(VEGF)의 수용체를 암호화하는 유전자(FLT1)의 발현을 억제함을 추가로 발견하였다. 또한, 아플리딘은 종양 세포에 의한 상기 VEGF 단백질 자체의 생산을 심하게 억제하는 것으로 밝혀졌다.

세포 덩어리, 특히 종양 세포 덩어리에 의한 VEGF 분비는 새로운 혈관신생(혈관형성)을 일으켜 상기 세포 덩어리를 향해 새로운 혈관을 형성시키고 그의 지속적인 증식을 위해 관개를 공급할 수 있는 모세관 네트워크를 확립시킨다. 이러한 효과, 특히 종양 세포에 의한 VEGF 생산의 입증된 폐지는 종양 세포가 혈관형성을 발생시키는 능력을 심하게 억제할 것으로 예상된다. 또한, VEGF는 일부 조혈 종양 세포(예를 들어 MOLT4 인간 백혈병 세포)에 의해 성장 인자로서 직접적으로 요구된다.

따라서 아플리딘은 성장하는 1 차 종양의 새로운 혈관신생 또는 전이에 대한 억제 효과, 따라서 성장을 위해서 혈관신생이 요구되는 것으로 알려진 종양의 성장을 억제하는 효과를 가짐을 예견할 수 있다. 아플리딘은 또한 조혈성 종양에 대해 활성이어야 한다.

방광 종양은 상피 세포 성장 인자(EGF)에 대한 수용체를 과 발현하는 종양의 한 유형이며, 이에 의해 VEGF 및 VEGF 수용체가 상향 조절된다. VEGF의 그의 수용체에 대한 결합은 다른 신호화 기전들 중에서도 일시적인 국소 칼슘 이온 변화에 의해 세포 성장을 자극하는 것으로 여겨진다. VEGF 작용을 억제하는 화합물은 상기와 같은 종양에 대해 억제성인 것으로 예상된다.

실험적으로, 아플리딘은 예견에 따르면 인간 방광암에 대해 대단히 높은 활성을 갖는 것으로 밝혀졌다(일부 동물 모델에서 완전한 경감이 제공된다).

아플리딘은 다수의 종양들에 대한 그의 효과로 인해 광범위한 항종양 활성을 갖는 것으로 예견될 수 있다.

VEGF의 효과는 새로운 혈관의 억제를 수반하기 때문에 보다 적절하다. 혈관에 대한 효과 이외에, 몇몇 종양들은 세포 성장에 VEGF를 직접 필요로 하였다(즉, 백혈병, 림프종, 방광종양 및 난소 종양).

아플리딘을 사용한 임상 시험에서 암 환자들의 반응이 관찰되었으며, 이는 상기 치료 방법의 유용성을 입증하였다.

단계 I의 임상 연구 및 약동학적 분석은 아플리딘이 암 환자의 치료에 있어서 임상 효능에 필요한 용량 범위의 제어하기 쉬운 독성을 갖는 양성 치료 창을 제공함을 입증한다. 특히, 본 발명은 특히 신장암, 흑색종, 골수성 갑상선 암종, 폐 신경 내분비 종양, 비 호지킨 림프종, 결장직장암, 비 소 세포 폐암에 대한 치료 이점을 갖는 것으로 예상된다.

상기 방법은 다른 치료제와 함께 또는 상기 없이, 근육 보호제의 투여와 함께, 권장 용량 수준(RD)으로 72 시간 이하의 기간에 걸쳐 정맥 내 주입에 의해 투여되는 약물의 투여로 이루어진다.

아플리딘은 치료용으로 적합한 제형 중의 아플리딘 및 부형제로 이루어지는, 멸균 동결건조된 제품으로서 공급되고 보관된다.

용해된 아플리딘은 열 및 빛 강제 시험 조건 하에서 상당한 분해를 보이며, 동결건조된 투여형이 개발되었다(본 발명에 참고로 인용된 WO99/42125 참조). 본발명의 바람직한 실시태양에서 동결건조를 충전제로서 D-만니톨 25 ㎎/㎖을 함유하는 주사용 수(WfI) 중의 40%(v/v) 3 급 부탄올 중의 아플리딘 용액 500 ㎎/㎖로부터 수행하였다. 바이알 당 아플리딘 500 ㎎ 및 충전제로서 D-만니톨 25 ㎎을 함유하는 기본형이 임상 연구에서 용해도, 동결건조 주기의 길이 및 용량 요건의 면에서 최적의 제형인 것으로 밝혀졌다. 최적의 재 조성 용액은 15/15/70%(v/v/v)의 크레마포어 EL/에탄올/WfI(CEW)인 것으로 밝혀졌다. 재 조성된 제품 및 통상적인 염수에 의한 상기 재 조성된 제품의 희석액(1:100 v/v 이하)은 모두 제조 후 최소한 24 시간 동안 안정한 것으로 나타났다. 여태까지 유효한 저장 수명 데이터는 상기 제형이 암실에서 4 ℃에서 보관 시 최소한 1 년 동안 안정함을 보인다.

상기 주입 액의 제조를 또한 각 환자에 대해 계산된 용량에 상응하는 재 조성된 용액 분량을 회수하고, 상기 필요한 재 조성된 용액 분량을 100 내지 1000 ㎖의 0.9% 염화 나트륨을 함유하는 주입 주머니 또는 병에 서서히 주입한 후에 상기 전체를 손으로 서서히 흔들어 균질화시킴으로써 무균 조건 하에서 수행한다.

상기 아플리딘 주입 액을 제조 후 48 시간 이내에 가능한 한 빨리 정맥 내로 투여해야 한다. PVC 및 폴리에틸렌 주입 시스템뿐만 아니라 투명 유리가 용기 및 도관 재료로서 바람직하다.

투여를 주기적으로 수행하며, 바람직한 적용 방법에서, 아플리딘의 정맥 내 주입을 환자에게 각 주기의 첫 번째 주에 제공하며, 상기 환자는 상기 주기의 나머지 기간 동안 회복하게 된다. 각 주기의 바람직한 지속 기간은 3 또는 4 주이며; 경우에 따라 수 회의 주기를 제공할 수 있다. 약물을 또한 각 주기의 제 1 일에투여할 수 있다. 투여 지체 및/또는 용량 감소 및 스케줄 조정은 경우에 따라 개별적인 환자의 치료 허용성에 따라 수행되며, 특히 용량 감소는 정상보다 높은 간 트랜스아미나제 또는 알칼리 포스파타제, 또는 빌루빈의 혈청 수준을 갖는 환자에 대해 권장된다.

권장 용량(RD)은 국립 암 연구소(USA)에 의해 확립된 통상적인 독성 기준에 따라 허용성이고, 제어하기 용이하며, 가역적인 독성을 생성시키는, 환자에게 안전하게 투여될 수 있는 최고의 용량으로, 이때 6 명의 환자 중 2 명 이하에서 임의의 용량 제한 독성(DLT)이 나타난다. 암 치료 지침은 흔히 최대의 효능을 성취하기 위해서 독성의 제어가 쉬운 최대 안전 용량의 화학요법제의 투여를 요구한다(DeVita, V.T. Jr., Hellman, S. and Rosenberg, S.A., Cancer: Principles and Practice of Oncology, 3rd ed., 1989, Lipincott, Philadelphia).

상기 치료 방법을 사용하는 아플리딘의 DLT를 임상 연구에서 측정하였다. 상기 연구는 상이한 종류의 투여 프로토콜에 대해 권장 용량 수준을 확립시켰다.

아플리딘을 상기 권장 용량(RD) 이하의 용량 수준으로 안전하게 투여할 수 있다.

하기의 섭생을 포함한 전형적인 섭생에 의한 주입이 일반적으로 바람직한 과정이다:

수주일, 예를 들면 3 주간 매주 24 시간 주입, 이어서 한 주 쉼;

격주로 24 시간 주입;

매 4주마다 3 주간 매주 1 시간 주입;

매일의 주입, 예를 들면 1 시간 x 5 일/3 주; 및

격주로 3 시간의 주입.

특히, 본 출원과 동시 계류중인 WO 0135974의 실시예 및 관련 논의를 참고로 하시오.

이전에 아플리딘의 투여에 대해 보고된 주요한 생물학적 반응들이 동물 또는 생체 외 모델에서 관찰되었으며, 이는 인간 환자 또는 유효하고 안전한 치료 방법을 이용할 수 없는 실험적 배경(사용되는 용량이 권장 용량보다 현저하게 높은 독성 용량이거나 또는 투여 스케줄이 적합하지 않은) 하의 인간 환자에서 반응이 예견되는 유용성과 관련하여 대단히 부정확한 것으로 공지되었다.

본 발명의 방법을 사용하는 임상 시험에서, 적합한 혈장 수준이 RD로 환자에서 달성되었으며, 가장 중요하게는 객관적으로 측정 가능한 반응들이 환자에게 임상적으로 유익하다는 증거를 입증하였다.

환자 독성에 대한 정의들은 WHO 기준 및 WHO 반응 기준에 따라 측정된 반응들로부터 채택된다.

객관적인 반응들이 선행 치료로 치료될 수 없는 진행되고/되거나 전이성인 암에 걸린 환자들에서 얻어졌다.

특히 본 발명의 방법에 의한 치료는 이전에 확립된 요법으로 치료받은 후에 진행성 질병을 나타낸 진행되고/되거나 전이성인 질병에 걸린 암 환자에서 반응을 나타내었다.

보다 일반적으로, 본 발명은 아플리딘 요법과 함께 근육 보호제의 사용을 포함한다. 본 출원인들은 특히 카르니틴이 실험 약물인 아플리딘을 사용하는 화학요법과 관련된 근육독성의 치료에 유리함을 발견하였다. 아플리딘을 매주 4500 mcg/㎡, 이어서 격주로 6000 mcg/㎡으로 24 시간 주입하는 I 단계 시험에서, 일부 환자들은 근육 경련, 통증 및 근질환성 허약을 특징으로 하는 일부 형태의 근육 및 골격 독성을 경험하였다. 이들은 또한 근육 쇠약 및 손상을 가리키는 혈청 크레아틴 키나제의 측정 가능한 증가를 보였다. L-카르니틴 4.5 g/일(하루에 1.5 g 3 회 용량) 또는 0.1 ㎎/㎏(하루에 0.033 ㎎ 3 회 용량)을 상기 요법에 첨가하는 경우, 환자들은 격주로 6000 mcg/㎡ 이하의 아플리딘 용량을 견딜 수 있었다. 정상적인 크레아틴 키나제 값에서 보이는 바와 같이 유리한 효과가 13 주 이상의 연구 기간 전체에 걸쳐 지속되었다. 따라서, L-카르니틴과 같은 근육 보호제는 아플리딘 또는 아플리딘 동족체로 치료하는 환자에게 유용한 근육 보호제이다.

따라서 본 발명의 바람직한 방법은 암 치료를 받은 암 환자, 특히 화학요법을 받은 환자를 식별하고 상기 환자를 아플리딘 화합물, 특히 아플리딘으로 치료함을 포함한다.

본 PCT 출원은 선행 특허 출원들에 대한 우선권을 주장한다. 본 출원인들은 상기 출원들, 특히 본 명세서로 이월되지 않은 내용이 존재하고 상기 내용이 본 발명과 관련될 수도 있는 출원들을 본 발명에 참고로 인용한다.

실시예 1

충실성 종양 및 비 호지킨 림프종 환자에게 24 시간 연속 주입으로서 격주로 제공된 아플리딘의 I 단계 및 약동학적 연구.

환자 특징

환자 수: 43

평균 연령(세, 범위): 52(18-71)

ECOG 수행된 상태

0 → 19

1 → 21

2 → 2

선행 방사선 요법 → 27

선행 화학 요법(섭생 수)

1 → 7

2 → 5

≥3 → 29

종양 유형		종양 유형
폐	6	갑상선	3
결장직장	8	뼈	1
신장	5	흑색종	1
유방	4	전립선	1
췌장	4	자궁	1
림프종	3	중피종	1
난소	2	위	1
기타	2

환자 증가 및 용량 확대
용량 수준	용량(mcg/㎡/2주)	환자 수	주기 수(범위)
I	200	3	5(1-3)
II	400	3	6(2-2)
III	800	3	9(2-4)
IV	1600	6	11(1-2)
V	3200	3	5(1-2)
VI	4000	3	8(2-4)
VII	5000	3	6(2-2)
VIII	6000	12	26(1-6+)
IX	7000	7	12(1-4+)
총계
*주기 정의: 격주 주입

환자 당 최악의 독성
용량 수준	200	400	800	1600	3200	4000	5000	6000	7000
환자 수	3	3	3	6	3	3	3	12	7
오심/구토 G2(G3)	2	1	-	4	(1)	2	1	2	1
홍조 G1	-	-	1	-	1	1	-	-	1
무력증 G2(G3)	-	2	-	2(1)	1	1	(1)	6	2
근육 경련 G1+G2	-	-	2	1	2	2	2	1	-
근육 통증 G1(G2)	-	-	-	-	(1)	2	1	1(2)	1
근육 허약 G1(G2)	-	-	-	-	-	-	1	1(1)	-
CPK 상승 G2(G3)[G4]	-	-	-	-	-	-	(1)[1]	1(1)	1
트랜스아민염 G2(G3)	1	-	-	(1)	-	-	1	-	1
고혈압 G2	-	1	-	-	-	-	-	-	-
호중구 감소증 G4	-	-	-	-	-	-	-	-	1
중추 카테터 통증 G2	-	-	-	-	-	2	-	-	-

근육 독성(DLT)의 특성화

환자 #27 - 매주 6000 ㎍/㎡으로 치료받은 골수성 갑상선 암종이 있는 남성환자는 G2 근육 통증과 함께 징후적인 G3 CPK를 나타내었다. 치료 중단 후 3 주 안에 독성이 다시 나타났다.

3 명의 환자(5000 및 6000 ㎍/㎡)는 약간의 CPK의 상승(≥G2)을 경험하였으며, 이는 SPK MB(심장)의 현저한 상승 없이 CPK MM(근육)의 증가로 이루어졌다. 알돌라제 수준의 평행한 상승이 관찰되었다. 골격근 보호제로서 카르니틴 보충에 의한 개선의 징후가 보고되고 있다. 근육 생검법을 2 명의 환자에서 수행하였으며; E/M: 마이오신의 두꺼운 필라멘트가 부분적으로 사라졌다.

약동학적 데이터

아플리딘은 용량-1 차 PK 프로파일(작은 샘플 크기에 의해 부과된 구속 내에서)을 갖는 것으로 보인다.

비교적 높은 혈장 CL: 중간(4 분위수) 값 252(192-415 ㎖/분/㎡)

높은 환자 간 CL 변이성(CL 62%의 변이 계수)

23.8(15.7-35.0 h)의 중간(4 분위수) 값을 갖는 중간 내지 긴 t½

너비 분포, 413(274-638 ℓ/㎡)의 중간(4 분위수) Vss

예비 구획 분석: 혈장 프로파일이 신속한 초기(중간 반감기 0.64 h)와 보다 긴 말기 단계(중간 반감기 25.8 h)를 갖는 1 차 2-구획 모델에 의해 가장 잘 들어맞는다.

아플리딘 근육독성의 약동학과의 관계

근육 독성은 오직 높은 용량과 24 시간 주입 후 노출 시에만 나타났다.

1 시간 주입 후 Cmax 값은 이미 24 시간 주입 후의 값보다 높다. 따라서 Cmax 관계를 배제시킬 수 있다.

근육독성을 갖는 환자에서 AUC 값은 높지만 최대는 아니다.

상기는 높고 지속적인 아플리딘 혈장 농도를 갖는 환자에게 영향을 미친다. 분명한 근육독성을 갖는 3 명의 환자는 24 시간 주입 후 25.8 시간의 중간 t½에 비해 44 시간을 초과하는 t½을 가졌다.

결론

용량 수준 번호 III 이후(1800 mcg/㎡ 내지 5000 mcg/㎡)로부터 보고된, 약물 유발된 근육 변화(용량 제한 독성인 것으로 예상됨)는 6000 mcg/㎡(1/9 pts)에서 용량 제한 독성이다. 항종양 활성이 또한 NHL 및 신장 암종을 갖는 환자에서 주목되었다.

이제 연구는 골격근 보호제로서 카르니틴 보충을 사용함으로써 격주로 6000 내지 7000 mcg/㎡의 실행 가능성을 조사한다.

실시예 2

아플리딘의 I 단계 연구는 아플리딘 근육독성을 밝혔다.

임상적 특징

표시는 환자마다 가변적이다. 온화한 사례는 근육 경련(매 2 주마다 3200mcg/㎡의 용량에서)을 갖는 반면, 보다 심한 사례에서는 증상들이 3 등급에 달하는 크레아틴-키나제(CK)의 가역적인 증가와 관련된다. 용량 제한 사례에서, 허약이 인접 분포된다. 상기 효과는 발병을 지연시키며, 3 내지 8 회(중간 4 회)의 약물 주입 후에 나타난다.

병리학적 특징

광 현미경: 단지 미미한 괴사 또는 전혀 변화 없음(대부분의 생검 환자에서) 또는 II 형 섬유 위축(위 선암에 걸리고 동시에 프레드니손 10 ㎎/일이 장기적으로 투여된 환자에서).

전자 현미경: 글리코겐 및 자가탐식 액포의 불특정한 축적, 가장 중요한 변화는 두꺼운 필라멘트의 소멸이다.

노출에 대한 관계

근육독성의 암시가 발견되기 전에, 1 시간 주입 후 관찰된 최대 농도(Cmax)는 근육독성과 관련된 용량인 24 시간 주입 후보다 더 높았으며, 이는 Cmax 관계를 배제시킨다. 근육독성이 있는 환자에서 곡선(AUC) 값 아래의 면적이 높아지는 경향이 있으나 균일하지도 최대이지도 않다. 용량 제한 근육독성을 갖는 환자는 단지 2 회의 아플리딘을 주입한, 즉 근육독성을 평가하기에는 너무 짧은 치료를 받은 환자를 제외하고 가장 긴 말기 반감기를 가졌다. 근육독성을 가진 또 다른 환자는 짧은 반감기를 가졌다. 추정 상 근육독성이 있는 일부 환자에서 비교적 높은 AUC는 긴 반감기를 반영하였다. 따라서, 아플리딘 근육독성은 고 용량의 노출 또는 농도보다는 오히려 연장된 노출과 관련되는 듯 하다.

근육 효소 변화

아플리딘과 L-카르니틴 투여에 대한 관계의 예를 도 1 및 2에 나타낸다. 상기 두 도면에서, 아플리딘을 제 1 일에 시작하여 매 14 일마다 제공하였다. 도 1의 경우에, 화살표는 생략된 아플리딘 투여를 가리킨다.

보정 측정

하루에 1.5 g 3 회 용량 또는 하루에 0.33 g/㎏ 3 회 용량의 L-카르니틴을 연구 APL-A-003-98의 모든 환자들에게 투여하기 시작하였다. 상기 연구에서, 앞서 골격근 독성이 나타난 4 명의 환자를 골격근 징후 없이 단지 일시적인 CK의 1 등급 증가로 계속해서 치료할 수 있었다. 상기 연구에서 애초부터 L-카르니틴 예방된 11 명의 환자들 중에서 단지 무 증후성의 CK의 G1 증가만이 있었다. 2 명의 환자는 감소된 용량으로 치료 후(각각 관리 상 문제 및 불규칙적인 좋지 않은 순응으로 인해 한 주에 1 g) CK의 징후적인 증가(각각 허약과 관련된 등급 3 & 무력증과 관련된 등급 1)가 있었다.

본 연구에서 사용된 용량의 L-카르니틴은 잘 허용된다. 지금까지 보고된 유일한 독성은 등급 1의 복부 불쾌감 및 설사의 존재이다. 상기 용량을 감소시켜 상기 부작용을 관리할 수 있다. L-카르니틴을 감소시킨 후에 CK가 증가한 환자의 초기 그래프 분석은 상기 용량을 하루에 3.5 g 이하로 감소시켜서는 안됨을 시사한다.

모든 진행중인 연구에서 예방적인 L-카르니틴을 포함하지 않는(오직 치료 기준으로 허용되는 것만) 최대 허용 용량(MTD) 및 권장 용량(RD)이 한정될 것이다. 상기 연구의 후기에, 전신적인 L-카르니틴 예방이 시작될 것이며 새로운 MTD 및 RD가 한정될 것이다.

L-카르니틴에 의한 종양 보호 가능성을 25 개의 인간 종양 세포 주 패널을 사용하여 평가하였다. 초기의 결과는 아플리딘의 항종양 활성에 대한 L-카르니틴 효과의 결여와 모순되지 않는다.

도 3은 아실카르니틴의 방출을 나타내며, 여기에서 굵은 선은 각 변수에 대한 정규 집단의 95% CI를 나타낸다.

아실카르니틴 프로파일

상기를 L-카르니틴 보호 하에서 속행되는 기준선, 독성이 존재하는 동안 및 아플리딘 처리 후에 분명한 독성(경련 + 증가된 CK + 허약)을 갖는 환자의 나란한 혈장에서의 질량 분광측정에 의해 측정하였다. 기준선에서, 유리 L-카르니틴이 감소하였고, 팔미토일 및 스테아로일카르니틴은 증가하였다. 근육 독성이 있는 동안 아플리딘 단독에 대해 유리 L-카르니틴이 감소된 반면 팔미토일카르니틴은 증가하였으며, 스테아로일카르니틴은 팔미토일카르니틴이 감소하는 동안 혈청 유리 카르니틴이 통상적이지 않은 값으로 증가된 안정한 L-카르니틴이었다. 스테아로일카르니틴은 안정하였다. 장쇄 아실카르니틴에 대한 값은 CPT-II 결핍에 대한진단적 컷오프의 1/2 미만이었다. 따라서, 이는 상기 환자에서 존재하는 근원적인 분자 결함이 아니었다(또는 최소한 유일한 결함은 아니었다).

결론

4 회의 I 단계 시험에서 아플리딘에 대한 용량 제한 인자는 골격근 독성이었다. L-카르니틴이 환자에 사용하기 위해서 근육보호제로서 평가되었다. 입수할 수 있는 임상 데이터는 L-카르니틴 예방이 아플리딘 MTD-RD를 격주의 24 시간 주입 연구에서 각각 33% 및 40%까지 증가시킬 수 있음을 입증하며, 이는 새로운 용량 제한 인자가 비 근육성임을 입증한다.

II 단계 연구를 아플리딘 7 ㎎/㎡의 RD 및 3 회 분취량으로 분할한 0.1 g/㎏/일의 초기 용량의 L-카르니틴을 사용하여 개시할 것이다.

Claims (10)

1. 아플리딘 화합물을 근육 보호제와 함께 투여함을 포함하는, 환자의 암 치료 방법.
2. 제 1 항에 있어서, 아플리딘 화합물 및 근육 보호제를 상이한 투여 섭생으로 별도의 조성물로서 투여하는 방법.
3. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 아플리딘 화합물이 아플리딘인 방법.
4. 제 3 항에 있어서, 아플리딘의 투여를 하기의 프로토콜들 중 하나에 따라 수행하는 방법:

   3 주간 매주 24 시간 주입, 이어서 한 주 쉼;

   격주로 24 시간 주입;

   매 4주마다 3 주간 매주 1 시간 주입;

   매일 1 시간 정맥 내 주입 x 5 일/3 주; 및

   격주로 3 시간 주입.
5. 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 하나의 항에 있어서, 근육 보호제가 L-카르니틴인 방법.
6. 제 5 항에 있어서, L-카르니틴을 분할 용량으로 매일 투여하는 방법.
7. 제 1 항 내지 제 6 항 중 어느 하나의 항에 있어서, 환자가 암 질환의 치료를 이미 받았고 종양이 난치성인 방법.
8. 아플리딘 또는 아플리딘 동족체 및 골격근 보호제의 투여에 의한 암 치료용 약제의 제조에서 아플리딘 화합물의 용도.
9. 아플리딘 또는 아플리딘 동족체 및 골격근 보호제의 투여에 의한 암 치료용 약제의 제조에서 골격근 보호제의 용도.
10. 아플리딘 또는 아플리딘 동족체 및 골격근 보호제의 투여에 의한 암 치료용 약제의 제조에서 아플리딘 화합물과 골격근 보호제의 용도.