KR20030034825A - 오가피 추출물 및 이를 포함하는 성장기 뼈 형성 촉진 및 골다공증 예방 또는 치료용 약학적 조성물 - Google Patents
오가피 추출물 및 이를 포함하는 성장기 뼈 형성 촉진 및 골다공증 예방 또는 치료용 약학적 조성물 Download PDFInfo
- Publication number
- KR20030034825A KR20030034825A KR1020010066583A KR20010066583A KR20030034825A KR 20030034825 A KR20030034825 A KR 20030034825A KR 1020010066583 A KR1020010066583 A KR 1020010066583A KR 20010066583 A KR20010066583 A KR 20010066583A KR 20030034825 A KR20030034825 A KR 20030034825A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- extract
- ogapi
- osteoporosis
- bone
- present
- Prior art date
Links
- 239000000284 extract Substances 0.000 title claims abstract description 115
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 title claims abstract description 41
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims abstract description 19
- 230000002265 prevention Effects 0.000 title claims abstract description 13
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 10
- 241000208343 Panax Species 0.000 title description 2
- 235000002791 Panax Nutrition 0.000 title description 2
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 claims abstract description 39
- 210000002997 osteoclast Anatomy 0.000 claims abstract description 31
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 25
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 claims abstract description 25
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims abstract description 18
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 15
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract description 10
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 claims abstract description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 18
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 12
- 206010063409 Acarodermatitis Diseases 0.000 claims description 7
- 241000447727 Scabies Species 0.000 claims description 7
- 208000005687 scabies Diseases 0.000 claims description 7
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 42
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 abstract description 25
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 6
- 241001632410 Eleutherococcus senticosus Species 0.000 abstract description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 abstract description 2
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 abstract description 2
- 235000017615 Acanthopanax sessiliflorus Nutrition 0.000 abstract 1
- 241001505454 Eleutherococcus sessiliflorus Species 0.000 abstract 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 33
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 15
- 102100022919 Tartrate-resistant acid phosphatase type 5 Human genes 0.000 description 14
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 13
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 11
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 11
- 102000008108 Osteoprotegerin Human genes 0.000 description 9
- 108010035042 Osteoprotegerin Proteins 0.000 description 9
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 9
- 210000001930 leg bone Anatomy 0.000 description 9
- XXUPLYBCNPLTIW-UHFFFAOYSA-N octadec-7-ynoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCC#CCCCCCC(O)=O XXUPLYBCNPLTIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 9
- 102000004067 Osteocalcin Human genes 0.000 description 8
- 108090000573 Osteocalcin Proteins 0.000 description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 8
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 7
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 7
- 102000004264 Osteopontin Human genes 0.000 description 7
- 108010081689 Osteopontin Proteins 0.000 description 7
- 230000008859 change Effects 0.000 description 7
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 7
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 7
- 238000002271 resection Methods 0.000 description 7
- 210000002303 tibia Anatomy 0.000 description 7
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 6
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 6
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 6
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 6
- 229960005069 calcium Drugs 0.000 description 6
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 6
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 6
- 235000001465 calcium Nutrition 0.000 description 6
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 6
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 6
- 208000006386 Bone Resorption Diseases 0.000 description 5
- 230000024279 bone resorption Effects 0.000 description 5
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 5
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 5
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 5
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 5
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 5
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 5
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 5
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 5
- XZKIHKMTEMTJQX-UHFFFAOYSA-N 4-Nitrophenyl Phosphate Chemical compound OP(O)(=O)OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 XZKIHKMTEMTJQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 4
- 102000045595 Phosphoprotein Phosphatases Human genes 0.000 description 4
- 108700019535 Phosphoprotein Phosphatases Proteins 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 238000005282 brightening Methods 0.000 description 4
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 4
- 230000001054 cortical effect Effects 0.000 description 4
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 4
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 4
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 230000011164 ossification Effects 0.000 description 4
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 4
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 3
- 208000020084 Bone disease Diseases 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 231100000111 LD50 Toxicity 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 3
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 3
- 230000009245 menopause Effects 0.000 description 3
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 210000005088 multinucleated cell Anatomy 0.000 description 3
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 235000020083 shōchū Nutrition 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 2
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 2
- 241000208340 Araliaceae Species 0.000 description 2
- 102000055006 Calcitonin Human genes 0.000 description 2
- 108060001064 Calcitonin Proteins 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 206010017076 Fracture Diseases 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- DHCLVCXQIBBOPH-UHFFFAOYSA-N Glycerol 2-phosphate Chemical compound OCC(CO)OP(O)(O)=O DHCLVCXQIBBOPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100021592 Interleukin-7 Human genes 0.000 description 2
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 description 2
- YQEZLKZALYSWHR-UHFFFAOYSA-N Ketamine Chemical compound C=1C=CC=C(Cl)C=1C1(NC)CCCCC1=O YQEZLKZALYSWHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 2
- 235000005035 Panax pseudoginseng ssp. pseudoginseng Nutrition 0.000 description 2
- 235000003140 Panax quinquefolius Nutrition 0.000 description 2
- 102000007591 Tartrate-Resistant Acid Phosphatase Human genes 0.000 description 2
- 108010032050 Tartrate-Resistant Acid Phosphatase Proteins 0.000 description 2
- 229930003316 Vitamin D Natural products 0.000 description 2
- QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N Vitamin D3 Natural products C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C/C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N 0.000 description 2
- 238000002679 ablation Methods 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 2
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 235000014121 butter Nutrition 0.000 description 2
- 229960004015 calcitonin Drugs 0.000 description 2
- BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N calcitonin Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(N)=O)C(C)C)C(=O)[C@@H]1CSSC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1 BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 2
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 2
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 2
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 2
- 239000002223 garnet Substances 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 235000008434 ginseng Nutrition 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 description 2
- 238000001794 hormone therapy Methods 0.000 description 2
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 2
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 2
- 229940100994 interleukin-7 Drugs 0.000 description 2
- 229960003299 ketamine Drugs 0.000 description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 2
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 2
- 201000008968 osteosarcoma Diseases 0.000 description 2
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 2
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 2
- 231100000820 toxicity test Toxicity 0.000 description 2
- 235000019166 vitamin D Nutrition 0.000 description 2
- 239000011710 vitamin D Substances 0.000 description 2
- 150000003710 vitamin D derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 229940046008 vitamin d Drugs 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 2
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 2
- WEKCEGQSIIQPAQ-IRBNZIFYSA-N (+)-syringaresinol beta-D-glucoside Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2[C@@H]3[C@@H]([C@H](OC3)C=3C=C(OC)C(O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)=C(OC)C=3)CO2)=C1 WEKCEGQSIIQPAQ-IRBNZIFYSA-N 0.000 description 1
- CPKVUHPKYQGHMW-UHFFFAOYSA-N 1-ethenylpyrrolidin-2-one;molecular iodine Chemical compound II.C=CN1CCCC1=O CPKVUHPKYQGHMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 229940122361 Bisphosphonate Drugs 0.000 description 1
- 208000010392 Bone Fractures Diseases 0.000 description 1
- 206010065687 Bone loss Diseases 0.000 description 1
- 229940078581 Bone resorption inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 235000008733 Citrus aurantifolia Nutrition 0.000 description 1
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 1
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 1
- ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N D-erythro-ascorbic acid Natural products OCC1OC(=O)C(O)=C1O ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000008924 Femoral Fractures Diseases 0.000 description 1
- 239000004606 Fillers/Extenders Substances 0.000 description 1
- 108060003393 Granulin Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011887 Necropsy Methods 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 208000025966 Neurological disease Diseases 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100040557 Osteopontin Human genes 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 206010067268 Post procedural infection Diseases 0.000 description 1
- 229920000153 Povidone-iodine Polymers 0.000 description 1
- 239000012083 RIPA buffer Substances 0.000 description 1
- 238000010802 RNA extraction kit Methods 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 244000299461 Theobroma cacao Species 0.000 description 1
- 235000005764 Theobroma cacao ssp. cacao Nutrition 0.000 description 1
- 235000005767 Theobroma cacao ssp. sphaerocarpum Nutrition 0.000 description 1
- 235000011941 Tilia x europaea Nutrition 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 241000218220 Ulmaceae Species 0.000 description 1
- 229930003268 Vitamin C Natural products 0.000 description 1
- 235000010724 Wisteria floribunda Nutrition 0.000 description 1
- HUXIAXQSTATULQ-UHFFFAOYSA-N [6-bromo-3-[(2-methoxyphenyl)carbamoyl]naphthalen-2-yl] dihydrogen phosphate Chemical compound COC1=CC=CC=C1NC(=O)C1=CC2=CC(Br)=CC=C2C=C1OP(O)(O)=O HUXIAXQSTATULQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 1
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 229930192007 acanthoside Natural products 0.000 description 1
- PXKVPZNSQPPOGU-LFCYPEIASA-N acanthoside B Natural products COc1cc(cc(O)c1O[C@@H]2O[C@H](CO[C@@H]3O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]3O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]2O)[C@@H]4OC[C@H]5[C@@H]4CO[C@@H]5c6cc(OC)c(O[C@@H]7O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]7O)c(OC)c6 PXKVPZNSQPPOGU-LFCYPEIASA-N 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- DFZDUIMLXKMWAM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;formaldehyde;2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid Chemical compound O=C.CC(O)=O.OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O DFZDUIMLXKMWAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 231100000215 acute (single dose) toxicity testing Toxicity 0.000 description 1
- 231100000403 acute toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000007059 acute toxicity Effects 0.000 description 1
- 238000011047 acute toxicity test Methods 0.000 description 1
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 1
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 1
- 108010029483 alpha 1 Chain Collagen Type I Proteins 0.000 description 1
- 229910052586 apatite Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 238000011888 autopsy Methods 0.000 description 1
- 238000000376 autoradiography Methods 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 238000010876 biochemical test Methods 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 150000004663 bisphosphonates Chemical class 0.000 description 1
- 235000019658 bitter taste Nutrition 0.000 description 1
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 1
- 230000037182 bone density Effects 0.000 description 1
- 230000008468 bone growth Effects 0.000 description 1
- 210000002805 bone matrix Anatomy 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 235000001046 cacaotero Nutrition 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229960001714 calcium phosphate Drugs 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 229940069978 calcium supplement Drugs 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- MLYYVTUWGNIJIB-BXKDBHETSA-N cefazolin Chemical compound S1C(C)=NN=C1SCC1=C(C(O)=O)N2C(=O)[C@@H](NC(=O)CN3N=NN=C3)[C@H]2SC1 MLYYVTUWGNIJIB-BXKDBHETSA-N 0.000 description 1
- 229960001139 cefazolin Drugs 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 1
- 229930182483 coumarin glycoside Natural products 0.000 description 1
- 150000008140 coumarin glycosides Chemical class 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 230000002354 daily effect Effects 0.000 description 1
- 229960003964 deoxycholic acid Drugs 0.000 description 1
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000012137 double-staining Methods 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- WEKCEGQSIIQPAQ-UHFFFAOYSA-N eleutheroside E2 Natural products COC1=C(O)C(OC)=CC(C2C3C(C(OC3)C=3C=C(OC)C(OC4C(C(O)C(O)C(CO)O4)O)=C(OC)C=3)CO2)=C1 WEKCEGQSIIQPAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008393 encapsulating agent Substances 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- -1 ethyl oleate Chemical class 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 210000002454 frontal bone Anatomy 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 238000002695 general anesthesia Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 239000007986 glycine-NaOH buffer Substances 0.000 description 1
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 1
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 230000009422 growth inhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000012676 herbal extract Substances 0.000 description 1
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 1
- 230000002962 histologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 235000019604 hot taste sensations Nutrition 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M hydroxide Chemical compound [OH-] XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910052588 hydroxylapatite Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000004941 influx Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 235000015110 jellies Nutrition 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- VMPHSYLJUKZBJJ-UHFFFAOYSA-N lauric acid triglyceride Natural products CCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCCCCC VMPHSYLJUKZBJJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002414 leg Anatomy 0.000 description 1
- 239000004571 lime Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 210000004705 lumbosacral region Anatomy 0.000 description 1
- 229960003511 macrogol Drugs 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010025482 malaise Diseases 0.000 description 1
- 230000006371 metabolic abnormality Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 239000007758 minimum essential medium Substances 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 238000009806 oophorectomy Methods 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 238000000399 optical microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000005813 organ abnormality Effects 0.000 description 1
- 229940124595 oriental medicine Drugs 0.000 description 1
- 230000004072 osteoblast differentiation Effects 0.000 description 1
- 125000000636 p-nitrophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1*)[N+]([O-])=O 0.000 description 1
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 210000003455 parietal bone Anatomy 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- VSIIXMUUUJUKCM-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;fluoride;triphosphate Chemical compound [F-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O VSIIXMUUUJUKCM-UHFFFAOYSA-D 0.000 description 1
- XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;hydroxide;triphosphate Chemical compound [OH-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 239000002574 poison Substances 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229960001621 povidone-iodine Drugs 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000002250 progressing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 229940069575 rompun Drugs 0.000 description 1
- 239000012723 sample buffer Substances 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 230000000391 smoking effect Effects 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 1
- 206010041569 spinal fracture Diseases 0.000 description 1
- 238000012453 sprague-dawley rat model Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 1
- 235000013616 tea Nutrition 0.000 description 1
- WJCNZQLZVWNLKY-UHFFFAOYSA-N thiabendazole Chemical compound S1C=NC(C=2NC3=CC=CC=C3N=2)=C1 WJCNZQLZVWNLKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000115 thoracic cavity Anatomy 0.000 description 1
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N triton Chemical compound [3H+] GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 description 1
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 description 1
- BPICBUSOMSTKRF-UHFFFAOYSA-N xylazine Chemical compound CC1=CC=CC(C)=C1NC1=NCCCS1 BPICBUSOMSTKRF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001600 xylazine Drugs 0.000 description 1
- QYEFBJRXKKSABU-UHFFFAOYSA-N xylazine hydrochloride Chemical compound Cl.CC1=CC=CC(C)=C1NC1=NCCCS1 QYEFBJRXKKSABU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/25—Araliaceae (Ginseng family), e.g. ivy, aralia, schefflera or tetrapanax
- A61K36/254—Acanthopanax or Eleutherococcus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
- A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/306—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on bone mass, e.g. osteoporosis prevention
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Botany (AREA)
- Mycology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Abstract
본 발명은 오가피에 물 또는 알콜 수용액을 첨가하여 추출한 오가피 추출물 및 상기 오가피 추출물을 유효성분으로 함유하는 골다공증 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 오가피에 물 또는 알콜 수용액을 첨가하여 추출한 조골세포 증식 및 파골세포 증식 억제 활성을 갖는 오가피 추출물 및 상기 오가피 추출물을 유효성분으로 함유하는 골다공증 예방 또는 치료용 약학적 조성물 또는 건강식품에 관한 것이다. 본 발명의 오가피 추출물은 골다공증, 퇴행성골질환 및 류마티스 관절염과 같은 골질환 등의 예방 또는 치료에 유용하게 사용될 수 있다.
Description
본 발명은 오가피에 물 또는 알콜 수용액을 첨가하여 추출한 오가피 추출물 및 상기 오가피 추출물을 유효성분으로 함유하는 골다공증 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 오가피에 물 또는 알콜 수용액을 첨가하여 추출한 조골세포 증식 및 파골세포 증식 억제 활성을 갖는 오가피 추출물 및 상기 오가피 추출물을 유효성분으로 함유하는 골다공증 예방 또는 치료용 약학적 조성물 또는 건강식품에 관한 것이다.
골조직은 조골세포에 의해 형성되고 파골세포에 의해 파괴 흡수가 끊임없이 반복되는 동적인 조직이다. 골다공증(osteoporosis)은 골흡수와 골형성의 균형이 무너져 발생하는 것으로 골형성보다 과다하게 골흡수가 진행되는데 기인한 질환으로, 골다공증은 골 조직의 석회가 감소되어 뼈의 치밀질이 엷어지고 그로 인해 골수강(骨髓腔)이 넓어지고, 증세가 진전됨에 따라 뼈가 약해지기 때문에 작은 충격에도 골절되기 쉽다.
골다공증은 그 증세 자체보다는 골의 약화에 따라 용이하게 초래되는 각종 골절, 특히 대퇴골 골절 또는 척추골절 등이 장기간 활동을 제한하여 건강한 생활을 영위할 수 없고, 결과적으로 노인층 사망의 15%에 대한 원인제공을 하는 것으로 알려져 있다. 골량은 유전적 요인, 영양 섭취, 호르몬의 변화, 운동 및 생활 습관의 차이 등 여러 가지 요인들에 의해 영향을 받으며, 골다공증의 원인으로는 노령, 운동 부족, 저체중, 흡연, 저칼슘 식이, 폐경, 난소 절제 등이 알려져 있다. 한편 개인차는 있지만 백인보다는 흑인이 골 재흡수 수준(bone resorption level)이 낮아 골량이 더 높으며, 대개 골량은 14∼18세에 가장 높고 노후에는 1년에 약 1%씩 감소한다. 특히 여성의 경우 30세 이후부터 골 감소가 지속적으로 진행되며, 폐경기에 이르면 호르몬 변화에 의해 골 감소가 급격히 진행된다. 즉, 폐경기에 이르면 에스트로젠 농도가 급속히 감소하는데, 이 때 IL-7(interleukin-7)에 의한 것처럼 B-임파구(B-lymphocyte)가 다량 생성되어 골수(bone marrow)에 B 세포 전구체(pre-B cell)가 축적되고 이로 인해 IL-6의 양이 증가하여 파골 세포의 활성을 증가시키므로 결국 골량이 감하게 된다.
이와 같이 골다공증은 정도에 차이는 있으나 노년층, 특히 폐경기 이후의 여성에게 있어서는 피할 수 없는 증상으로, 선진국에서는 인구가 노령화됨에 따라 골다공증 및 그 치료제에 대한 관심이 점차 증가되고 있다. 또한 전세계적으로 골질환 치료와 관련되어 약 1300억 달러의 시장이 형성되어 있는 것으로 알려져 있으며 앞으로 더 증가할 것으로 예상되기 때문에, 세계적인 각 연구 기관과 제약회사에서는 골질환 치료제 개발에 많은 투자를 하고 있고 현재 골흡수 억제제의 개발이 활발히 진행되고 있다.
골다공증(Osteoporosis)과 관련하여 과거에는 주로 골의 무기질, 즉 칼슘과 인의 대사이상을 중심으로 그 연구가 진행되어 왔으며, 이의 발병 기전 규명에는 큰 진전을 보지 못하였다. 그러나, 최근 골 형성에 중요한 무기질뿐만 아니라 골기질 단백질의 대사에 관한 연구의 중요성이 새로이 부각되고 있다. 골다공증의 치료 및 예방을 위하여 의사들은 대개 칼슘이 함유된 식이요법을 권하고 폐경기의 여성들에게는 에스트로젠을 투여하여 골다공증을 예방하기 위한 비타민 D를 투여한다. 골다공증 치료제로 널리 사용되는 칼슘 보강 제재가 최근에 그 효과가 유의하지 못함이 보고되었으며, 에스트로젠이나 칼시토닌을 이용한 호르몬 요법에 있어서도 역시 치료효과가 유의하지 못함이 보고되고 있다. 특히 에스트로젠이나 칼시토닌을 이용한 호르몬 요법에 있어서 효과가 유의하지 않을 뿐 아니라 간, 난소, 유방 등에 종양을 일으키는 부작용을 일으키기도 한다. 비스포스포네이트는 새로운 대체 치료제로 주목받고 있으나 근본적인 골다공증 치료제는 아닌 것으로 알려져 있다.
따라서, 새로운 작용 및 골격구조를 가지면서 독성 및 부작용이 적어 골다공증의 예방 및 치료에 효과적인 신물질의 개발이 절실히 요구되고 있다. 또한, 이러한 신물질은 민간요법으로 예로부터 적용되어온 천연물에서 발견될 가능성이 매우 높기 때문에 천연물, 특히 생약으로부터 신약을 창출하려는 시도가 활발히 진행되고 있다.
오가피는 한방에서 약재로 사용하며, 맛이 맵고 쓰며 따뜻한 성질을 갖고 있고, 간경(肝經), 신경(神經)에 작용하여 풍습을 없애고 기를 돋우며 정수를 불러준다고 알려져 있다. 또한 오로(오장이 허약하여 생기는 허로병)와 칠상(남자가 허약해서 생기는 일곱 가지 증상)을 보해 주며 다리를 잘 쓰지 못하는 데에 쓰였으며, 이를 장복하면 신체의 기(氣)를 높여주고 위를 보해 주고 정력을 좋게 해주며 정신을 맑게 하고 의지력을 높게 하며 몸이 가벼워지고 늙는 것을 방지하고 몸 안의 나쁜 피를 맑고 깨끗이 다스려 준다고 알려져 있고, 허리 척추가 쑤시는 통증, 남자 음위증, 낭습, 여자음양증 등의 여러 가지 증상을 치료해준다고 알려져 있다.
이에, 본 발명자들은 오가피의 다양한 생리활성 연구를 수행하던 중, 오가피의 추출물이 독성이 없을 뿐만 아니라 조골세포를 증식시키고 파골세포의 증식을 억제하는 활성을 나타내어 부작용 없이 골다공증을 예방하고 치료하는데 효과적임을 밝힘으로써 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 조골세포 증식 및 파골세포 증식 억제 활성을 갖는 오가피 추출물, 그의 제조방법 및 상기 오가피 추출물을 유효성분으로 함유하는 골다공증 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강식품을 제공하는 것이다.
도 1은 본 발명의 오가피 추출물을 여러 농도로 조골세포주 HOS, ROS17/2.8 및 RCC에 처리하였을 때 세포가 증식된 정도를 오가피 추출물을 처리하지 않은 대조군과 비교하여 나타낸 그래프이고,
도 2는 본 발명의 오가피 추출물을 ROS 세포에 처리하였을 때 염기성 인산분해효소의 활성을 오가피 추출물을 처리하지 않은 대조군과 비교하여 나타낸 그래프이고,
도 3은 본 발명의 오가피 추출물 1 ㎕/㎖를 HOS 세포에 처리하였을 때 콜라젠(collagen), 염기성 인산분해효소, 오스테오폰틴(osteopontin) 및 오스테오칼신(osteocalcin) mRNA의 발현을 대조군과 비교하여 나타낸 그래프이고,
COL : 콜라젠, ALP : 염기성 인산분해효소,
OPN : 오스테오폰틴, OC : 오스테오칼신
도 4는 본 발명의 오가피 추출물을 조골세포에 처리하였을 때 OPG(osteoprotegerin) 단백질의 발현을 웨스턴 블럿으로 분석한 사진이고,
도 5는 본 발명의 오가피 추출물을 파골세포의 전구세포에 처리하였을 때 TRAP의 활성을 오가피 추출물을 처리하지 않은 대조군과 비교한 그래프이고,
도 6은 본 발명의 오가피 추출물을 수산화 인회석으로 피막된 플레이트에서 배양한 파골세포의 전구세포에 처리하였을 때 TRAP(+) 다핵세포의 수를 오가피 추출물을 처리하지 않은 대조군과 비교하여 나타낸 그래프이고,
도 7은 본 발명의 오가피 추출물을 투여한 백서의 척추뼈 단면을 오가피를 투여하지 않은 대조군과 비교한 사진이고,
A : 오가피 추출물을 투여하지 않은 백서의 척추뼈 단면,
B : 오가피 추출물을 투여한 백서의 척추뼈 단면,
도 8은 본 발명의 오가피 추출물을 투여한 백서의 다리뼈 단면을 오가피를 투여하지 않은 대조군과 비교한 사진이고,
A : 오가피 추출물을 투여하지 않은 백서의 다리뼈 단면,
B : 오가피 추출물을 투여한 백서의 다리뼈 단면,
도 9는 본 발명의 오가피 추출물을 골다공증이 유도되는 백서에 투여하였을 때 다리뼈 단면을 나타낸 사진이고,
A : 오가피 추출물을 투여하지 않은 백서의 다리뼈 단면,
B : 오가피 추출물을 투여한 백서의 다리뼈 단면,
도 10은 본 발명의 오가피 추출물을 골다공증이 발생한 백서에 투여하였을 때 다리뼈 단면을 나타낸 사진이다.
A : 오가피 추출물을 투여하지 않은 백서의 다리뼈 단면,
B : 오가피 추출물을 투여한 백서의 다리뼈 단면.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 조골세포 증식 및 파골세포 증식 억제 활성을 갖는 오가피 추출물을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 오가피 추출물을 유효성분으로 포함하는 골다공증 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강식품을 제공한다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명은 조골세포 증식 및 파골세포 증식 억제 활성을 갖는 오가피 추출물을 제공한다.
본 발명은 오가피에 물 또는 알콜 수용액을 첨가하여 추출한 조골세포 증식 및 파골세포 증식 억제 활성을 갖는 오가피 추출물을 제공한다. 상기에서 오가피는 가시오가피, 일반오가피, 향오가피를 포함하며, 가시오가피를 사용하는 것이 바람직하다.
본 발명은 오가피에 물을 첨가하여 열수추출하고 감압건조한 추출물을 제공한다.
또한, 본 발명은 오가피에 알콜 수용액을 첨가하여 추출하고 감압건조한 추출물을 제공한다. 상기에서 알콜 수용액은 5 내지 100%의 에틸알콜(ethyl alcohol) 및 5 내지 100%의 메틸알콜(methyl alcohol)로 구성된 군으로부터 선택되어 사용될 수 있다.
오가피(Acantho panax)는 오가과 목본식물로서 오가피 즉 오갈피 나무는 생김새와 생태가 산삼을 닮았다. 민간아니 한방에서 중풍이나 허약체질을 다스리는 약으로 썼으며, 특히 가시오가피는 방사능을 비롯한 갖가지 화학 물질의 독을 풀어주고 혈액 속의 콜레스테롤을 낮추며, 혈당치를 낮추고, 신경장애를 치교하고, 지구력과 집중력을 키워주고, 뇌의 피로를 풀어주며, 모든 신체의 기능에 활력을 준다고 알려져 있다. 오가피에는 오가피 배당체인 아칸토사이드(Acanthoside B, D)와 면역성을 높혀 주는 수용성 다당체가 있다. 잎에는 지사노사이드(Chiisanoside)가 있어 약리적 기능을 갖고 있으며, 뿌리에서는 오가피 배당체 뿐만 아니라 지링긴(Sylrgin), 쿠마린 배당체 등이 있다.
오가피의 종류로는 가시오가피, 일반오가피 향오가피가 있고, 가시오가피(Eleutherococcus Senticosus,Acanthopanax senticosus)는 인삼과 같은 두릅나무과에 속하는 낙엽성 활엽관목으로, 한방에서 독성과 부작용이 없다는 상약으로 분류하여 뿌리와 껍질을 약제로 사용한다.
본 발명의 오가피 추출물을 조골세포에 투여하면 오가피를 투여하지 않은 세포에 비해 세포 증식이 증가하고, 조골세포의 표지 효소인 염기성 인산분해효소(alkaline phosphatase)의 활성도 증가한다(도 1및도 2참조). 또한, 본 발명의 오가피 추출물은 조골세포가 생산하는 오스티오칼신(osteocalcin), 오스티오폰틴(osteopontin), 염기성 인산분해효소 및 콜라젠 mRNA의 발현을 현저히 촉진시킨다(도 3참조). 따라서 본 발명의 오가피 추출물은 조골세포의 증식 및 분화를 촉진시킨다는 것을 알 수 있다.
본 발명의 오가피 추출물은 조골세포에서 파골세포 생성을 억제하는 OPG(osteoprotegerin) 단백질의 발현을 촉진시킨다(도 4참조). 또한, 파골세포의 성장 및 활성에 미치는 영향을 알아본 결과, 파골세포의 표지효소인 TRAP(Tartrate-resistant acid phosphatase, 이하 "TRAP"라 약칭한다) 활성을 감소시키고, 파골세포에 의한 골흡수를 감소시키는 기능을 하고(도 5참조), 오가피 추출물에 의해 TRAP(+) 세포수도 감소한다(도 6참조). 본 발명의 오가피 추출물은 파골세포의 성장 억제 작용을 한다는 것을 알 수 있다.
또한, 본 발명의 오가피 추출물이 골다공증이 유도된 백서와 같은 동물모델에 미치는 영향을 살펴본 결과, 오가피 추출물이 골 형성을 촉진시킬 뿐만 아니라 골 흡수를 감소시켜 골밀도에 영향을 주는 것을 알 수 있었다(도 7,도 8,도 9및도 10참조). 따라서 본 발명의 오가피 추출물은 조골세포를 증식시키고 파골세포의 성장을 억제시켜 골다공증의 예방 및 치료에 유용하게 사용될 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 오가피 추출물을 유효성분으로 함유하는 골다공증 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 골다공증 예방 또는 치료용 약학조성물은 상기 오가피 추출물을 유효 성분으로 함유한다. 상기 오가피 추출물은 임상 투여 시에 경구 또는 비경구로 투여가 가능하며 일반적인 의약품 제제의 형태로 사용될 수 있다. 즉, 본 발명의 오가피 추출물은 실제 임상 투여 시에 경구 및 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있는데, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제 및 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구 투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제 및 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 혼합 생약재 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스, 락토오스 및 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 및 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제 및 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제 및 좌제가 포함된다. 비수성용제와 현탁용제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤 및 젤라틴 등이 사용될 수 있다.
투약 단위는, 예를 들면 개별 투약량의 1, 2, 3 또는 4배를 함유하거나 또는 1/2, 1/3 또는 1/4배를 함유할 수 있다. 개별 투약량은 바람직하기로는 유효 약물이 1회에 투여되는 양을 함유하며, 이는 통상 1일 투여량의 전부, 1/2, 1/3 또는 1/4배에 해당한다.
오가피 추출물의 유효용량은 70 내지 700 ㎎/㎏이고, 바람직하기로는 150 내지 250 mg/kg이며, 하루 1-6 회 투여될 수 있다.
본 발명의 오가피 추출물을 랫트에 경구 투여, 복강 내 투여시 및 피하 주사시의 독성 실험을 수행한 결과, 경구 투여 독성시험에 의한 50% 치사량(LD50)은 적어도 물 추출물 50 g/kg 이상인 안전한 물질로 판명되었다.
또한, 본 발명은 상기 오가피 추출물을 유효성분으로 함유하는 골다공증 예방 또는 치료용 건강식품을 제공한다.
오가피 추출물을 함유하는 건강 식품으로는 오가피 추출물을 주성분으로 만든 즙, 티, 젤리, 쥬스 등의 건강식품 및 기호품을 들 수 있고, 또한, 오가피 추출물에 비타민 C, 비타민 D, 칼슘제재 및 기타 생약성분을 혼합하여 구성된 건강식품은 골다공증 예방 및 치료 효능을 보이며, 골밀도 저하를 방지할 수 있고 혈장내로의 과다한 칼슘 분비 또한 조절할 수 있다.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다.
단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1> 오가피 추출물의 제조 1
가시오가피 200 g을 3 ℓ 플라스크에 넣고 1,500 ㎖ 증류수를 첨가하여 4시간 동안 열수 추출하였다. 상기 과정을 3회 반복한 후 얻어진 용액을 거름종이로 여과하여 그 추출액을 진공감압하여 농축시켜 오가피 추출물을 제조하였다.
<실시예 2> 오가피 추출물의 제조 2
가시오가피 200 g을 70% 에탄올 수용액 1.500 ㎖에 첨가하여 실온에서 2일 동안 교반시켰다. 교반 과정을 거쳐 얻어진 용액을 거름종이로 여과한 후 감압 농축하여 에탄올을 제거한 뒤 동결 건조하여 수분을 제거하여 오가피 추출물을 제조하였다.
<실험예 1> 오가피 추출물에 의한 조골세포 증식 효능 분석
<1-1> 조골세포의 증식과 세포 활성도 분석
본 발명자들은 오가피 추출물이 조골세포 증식과 세포 활성도에 미치는 영향을 알아보기 위하여, 하기와 같은 실험을 수행하였다.
구체적으로, 본 발명의 오가피 추출물이 조골세포의 증식에 미치는 영향을 평가하기 위하여 4 가지의 세포를 사용하였다. 인간 세포로는 인간 골육종에서 유래된 2 가지 세포주인 MG-63 및 HOS 세포주와 백서(Sprague-Dawley)의 골육종에서 유래된 ROS 17/2.8 세포주를 각각 ATCC(American Type Culture Collection, Rockville, USA)에서 구입하여 사용하였으며, 10% FBS(fetal bovine serum)을 함유하는 DMEM(Dulbecco's modified Eagle's medium) 배지에서 배양하여 사용하였다. 또한 일차배양 세포로는 백서 두개관에서 얻어진 조골세포군(RCC)을 사용하였다. 상기 세포는 태생 19일째 백서의 두개관에서 전두골과 두정골을 적출한 다음 0.1% 콜라제나제(collagenase), 0.05% 트립신(trypsin) 및 0.5 mM EDTA로 구성된 효소용액으로 37℃에서 각각 10분, 10분, 10분, 20분, 20분간씩 연속적으로 처리하여 I-V군의 세포를 분리하고, 이중 조골세포의 특성을 가진 세포가 주로 존재하는 IV-V군의 세포를 혼합하여 10% FBS가 함유된 DMEM에서 일차 배양한 후 트립신-EDTA 용액으로 세포를 수집하고 세포수를 측정하여 각 실험에 이용하였다.
다음으로, 본 발명자들은 오가피 추출물이 독성을 나타내는지 간접적으로 평가하고, 또한 조골세포의 증식에 대한 오가피 추출물의 영향을 알아보기 위하여, 상기에서 배양한 MG-63 조골세포를 이용하여 세포 증식시 세포의 DNA 안으로 유입된3H-사이미딘(thymidine)의 양을 측정하였다. 구체적으로, 조골세포를 24-웰 플레이트에 웰당 2 x 104개의 세포가 되도록 분주하고, 다음날 1% FBS가 함유된 DMEM으로 교체하였다. 교체된 배양액 내에, 오가피 추출물을 1X10-4내지 1 ㎕/㎖의 농도로 희석하여 농도별로 첨가하고 48시간 동안 배양하였다. 마지막 4시간 동안 3 μCi/웰의3H-사이미딘을 첨가하여 배양한 후 세포를 PBS(phosphate buffered saline) 버퍼로 세척하고 4℃의 5% TCA(trichloroacetic acid)로 처리하여 TCA-불용성인 분획을 분리한 후 0.1 M NaOH로 용해하였다. 이중 일정 분획을 취하여 액체 신틸레이션 카운터(liquid scintillation counter)에서 방사활성(radioactivity)을 측정함으로써3H-사이미딘의 유입도를 측정하였다.
그 결과, 본 발명의 오가피 추출물을 첨가한 세포는 오가피 추출물을 첨가하지 않은 대조군에 비해 약 120-130% 이상의 세포 증식 효과를 나타냈다(도 1). 상기 결과로부터 본 발명의 오가피 추출물이 조골세포 증식에 효과가 있다는 것을 확인하였다.
<1-2> 조골세포 표지효소인 염기성 인산분해효소(alkaline phosphatase) 활성 측정
본 발명자들은 오가피 추출물이 조골세포의 활성에 미치는 영향을 평가하기 위하여, 상기 실험예 <1-1>에서 배양한 HOS 조골세포를 96-웰 플레이트에 각 웰 당 5 X 103세포가 되도록 분주하고, 단층으로 증식한 후 오가피 추출물을 1X10-4내지 1 ㎕/㎖의 농도로 배양액에 첨가하였으며 2% FBS가 포함된 DMEM으로 96-웰 플레이트에서 48시간 동안 배양한 후에 세포를 0.1% 트리톤(Triton) X-100/생리식염수(saline)로 37℃에서 30분 동안 처리하였다. 세포 처리액의 일정량을 기질인 100 mM의 PNPP(p-nitrophenylphosphate) 존재하에 0.1 N 글리신(glycine)-NaOH 버퍼(pH 10.4)와 함께 37℃에서 30분간 반응시켜 기질인 PNPP로부터 유리되어 나온 PNP(p-nitrophenyl)의 양을 405 nm에서 비색정량하였다.
그 결과, 본 발명의 오가피 추출물을 첨가한 세포는 오가피 추출물을 첨가하지 않은 대조군에 비해 염기성 인산분해효소의 활성이 110-150% 정도 증가하였다(도 2). 상기 결과로부터, 본 발명의 오가피 추출물이 조골세포의 표지 효소인 염기성 인산분해효소에 우수한 활성을 나타내므로 조골세포 증식에 효과가 있다는 것을 확인하였다.
<1-3> 조골세포가 생산하는 오스티오칼신(Osteocalcin), 오스티오폰틴(Osteopontin), 염기성 인산분해효소 및 콜라젠의 RNA 발현 측정
본 발명자들은 오가피 추출물이 조골세포의 분화에 미치는 영향을 평가하기 위하여, 상기 실험예 <1-1>에서 배양한 백서 두개관 조골세포를 준비하여 배양한 후 1차 계대배양한 세포를 수집하고 63 x 104/디쉬의 밀도로 60 ㎜ 조직배양 접시에 분주하였다. 세포는 10% FBS가 함유된 α-최소 기본 배지(minimum essential medium)에서 배양하며, 배양 3일째부터 50 ㎍/㎖ 아스코르브산(ascorbic acid)과 10 mM의 β-글리세로포스페이트(glycerophosphate)를 첨가하여 조골세포의 분화를 유도하였다. 배양 시작 다음날부터 일정 농도의 오가피 추출물을 배양액에 첨가하였으며, 2일에 한번씩 배양액을 교체할 때마다 신선한 추출물을 첨가하여 석회화 결절이 생성되는 12-15일까지 배양하였다. 오가피 추출물의 효과를 보기 위하여 배양 3일, 7일 및 배양이 완료된 후, 이지 블루 전체 RNA 분리 킷트(Easy BlueTMtotal RNA isolation kit)를 이용하여 전체 RNA를 분리하였다. 이중 25 ㎍의 전체 RNA를 1.2% 아가로스/포름알데히드 변성 젤에서 전기영동을 시행하고 나일론 필터(nylon filter, Hybond-N)로 이동시킨 후, 익스프레스하이브 혼성화 용액(ExpressHybTMhybridization solution)에서 전혼성화(prehybridization)를 수행하였다. 그 후 메가프라임 DNA 표지 킷트(megaprime DNA labelling kit)를 이용하여32P-dCTP로 표지된 프로-α1(I)-콜라젠(pro-α1(I)-collagen), 염기성 인산분해효소, 오스테오칼신(osteocalcin), 또는 오스테오폰틴(osteopontin) 프로브가 함유된 혼성화 용액에서 1시간 동안 혼성화시키고, 세척 용액 1(2X SSC, 0.05% SDS)로 2회 세척하고, 세척 용액 2(0.1X SSC, 0.1% SDS)에서 1회 세척한 후 자기방사기록법(autoradiography)을 수행하였으며 발현정도의 비교는 이미지 분석기(Fuji Bas 1500 image analyzer, Fuji 사)를 이용하여 분석하였다.
그 결과, 본 발명의 오가피 추출물을 첨가한 세포는 배양 14일째에 콜라젠, 염기성 인산분해효소 및 오스테오폰틴의 mRNA 발현을 현저히 증가하였다(도 3). 따라서 본 발명의 오가피 추출물은 조골세포가 만들어내는 단백질들인 오스테오칼신, 오스테오폰틴, 염기성 인산분해효소 및 콜라젠 등의 발현을 현저히 촉진시킴으로서 조골세포의 증식을 촉진한다는 것을 확인하였다.
<1-4> 조골세포에서 파골세포 생성을 억제하는 OPG(osteoprotegerin)의 발현 측정
상기 실험예 <1-1>에서 배양한 MG63 세포주를 60 ㎜ 조직배양접시에 융합(confluent)하게 배양한 다음, 여러 농도의 약용 천연물시료가 포함된 혈청이 없는 DMEM 2 ㎖를 첨가하여 16시간 배양한 후 상청액을 얻었다. TCA(trichloroacetic acid)로 배양상청액을 농축시킨 후, SDS-PAGE 샘플 버퍼로 용해하여 항-OPG 항체를 이용한 웨스턴 블럿 분석을 수행하였다.
그 결과, 본 발명의 오가피 추출물을 첨가한 세포는 조골세포에서 파골세포의 생성을 억제하는 물질인 OPG(osteoprotegerin) 단백질의 발현이 증가하였다(도 4). 상기 결과로부터, 본 발명의 오가피 추출물이 조골세포에서 파골세포 생장을 억제하는 OPG를 발현시켜 파골세포의 생성을 억제하는 기능을 한다는 것을 확인하였다.
<실험예 2> 오가피 추출물에 의한 파골세포의 증식 억제 분석
본 발명자들은 오가피 추출물이 파골세포의 성장 및 활성에 어떠한 영향을 주는지 알아보기 위하여, 수산화 인회석으로 피막된 플레이트(OAAS, OCT Inc.)에 파골세포 전구세포를 배양하여 파골세포의 표지효소인 TRAP(Tartrate-resistant acid phosphatase, 이하 "TRAP"라 약칭한다) 활성 및 흡수활성(Resorption activity)을 분석하였다.
<2-1> TRAP 활성 분석
배양 6일 후 세포를 냉 PBS용액으로 2회 세척한 후 RIPA 버퍼(1% NP-40, 0.5% sodium deoxycholate, 0.1% SDS in PBS, pH 8.0)에서 용해시켜 준비한 세포용해액에서의 TRAP 효소활성을 20 mM 소듐 타르트리트(sodium tartreate)의 존재하에서 15 mM PNPP(p-nitrophenylphosphate)를 기질로 하여 측정하였다. 이 때 0.05 M 소듐 시트레이트(sodium citrate) 완충용액(pH 4.8)을 사용하여 37℃에서 30분간 반응시킨 후 2배 부피의 1N NaOH 용액을 넣어 반응을 종료시키고 410 nm에서의 흡광도를 측정하여 TRAP 효소활성을 결정하였다.
그 결과, 오가피 추출물을 첨가하였을 때 오가피 추출물을 첨가하지 않은 대조군에 비하여 TRAP 활성이 감소되는 것으로 나타났다(도 5).
<2-2> TRAP(+)인 다핵세포 형성 측정
파골세포의 형성 측정은 파골세포 전구세포를 칼슘-포스페이트로 코팅된 플레이트 상에서 배양한 후 TRAP(+)를 보이는 다핵세포의 수로 관찰하였다. 구체적으로, 세포배양 후 부착세포를 PBS로 세척한 다음 시트레이트-아세테이트-포름알데히드(citrate-acetate-formaldehyde)로 5분 동안 고정시키고 나프톨(naphthol) AS-BI 포스페이트(phosphate), 패스트 가르넷(fast Garnet) GBC 용액과 7 mM 타르타레이트 버퍼(tartrate buffer, pH 5)를 함유하는 37℃ 아세테이트 버퍼(pH 5.0)에 1시간 동안 배양하여 TRAP 염색을 수행하였다. 3개 이상의 핵을 가지는 TRAP(+) 다핵세포들을 파골세포로 간주하였다.
그 결과, 오가피 추출물을 첨가하였을 때 오가피 추출물을 첨가하지 않은 대조군에 비하여 TRAP(+) 세포의 수가 현저히 감소하는 것으로 나타났다(도 6).
상기 결과로부터, 본 발명의 오가피 추출물이 파골세포의 성장 억제 작용을 한다는 것을 확인하였다.
<실험예 3> 동물모델을 이용한 오가피 추출물 임상조직실험
본 발명자들은 난소절제술(Ovariectomy)을 시행하여 골다공증이 유도된 자성 백서(female rat)를 실험모델로 이용하여 본 발명의 오가피 추출물이 골다공증의치료 및 예방에 어떠한 영향을 미치는지 알아보기 위하여, 난소절제 백서에 오가피 추출물을 투여한 후 척추(L5) 및 경골을 절단하여 조직관찰을 수행하였다.
<3-1> 난소 절제술
100 ㎎/㎏의 케타민(Ketamine, Ketara)과 2% 자이라진(Xylazine; Rompun 0.15 ㎖/㎏)로 전신마취 후 통상의 방법에 따라 제모 및 술전 무균처리(10% povidone-iodine scrub followed by a 70% alcohol wipe)를 수행하였다.
백서 복측 중앙에 1 ㎝ 가량을 절개한 뒤 횡격막이나 간 등 주요 장기에 손상이 가해지지 않도록 주의를 하며 자궁을 따라 난소를 확인하였다. 봉합용 실로 난소를 결찰한 뒤 난소 절제를 양측으로 수행하였다. 난소 절제 후 각 장기를 복강 내로 재위치 시킨 후 봉합용 실로 층별 봉합을 수행하였다. 수술 후 감염방지를 위해 50 ㎖/㎏의 항생제 세파졸린(cefazolin)을 주사하였다.
<3-2> 오가피 추출물 투여
자성백서 한 마리에 대한 약물 투여량은 몸무게 250 g를 기준으로 시행하였다. 구체적으로, 대조군 백서는 고형사료와 마리 당 30 ㎖의 물만을 투여하였으며, 실험군 백서는 마리 당 오가피 추출물 220 ㎕를 물 30 ㎖에 섞어 경구투여 하였고, 매일 아침마다 하루 분량만큼의 약물을 제조하고 남은 양은 버리지 않고 남은 양에 상관없이 원액을 마리 수에 따라 넣고 물은 항상 마리 수 기준으로 채웠다. 물병은 바뀌지 않도록 주의하며 매일 마리 수를 확인하고 마리 수에 따라 약물을 제조하였다.
상기와 같은 방법으로 약물을 투여하였으며 크게 치료효과와 예방효과를 알아보기 위해 난소절제를 시행한 후 4주 동안 동일 조건 하에서 고형사료로 사육하고 골다공증의 변화를 확인한 후 상기 약물 투여 방법과 동일한 방법으로 약물을 4주간 투여하였다. 약물 투여 4주 후 실험군 16마리와 대조군 4마리를 표본으로 추출하였다. 그리고 백서의 몸무게 변화를 측정하고 경골(Tibia) 조직편과 5번 척추 뼈의 조직편을 고정, 탈수, 명화, 염색 후 조직학적 관찰을 수행하였다.
<3-3> 조직 표본의 광학 현미경 관찰
상기 실험예 <3-2>에서 추출된 조직표본은 고정액(Bouin's solution)으로 약 24시간 동안 고정하였다. 그 후 이들 조직으로부터 칼슘을 제거하여 조직을 박절하기 적합한 정도로 연화시키기 위해 5% 니트릭산(Nitric acid)으로 약 60시간 동안 탈회과정(Decalcification)을 수행하였다. 이 후 흐르는 물로 12시간 수세하고 70% 알코올로부터 상승 농도 순으로 각 2시간, 100% 알코올에서 2시간씩 3회 탈수를 시킨 다음 자일렌(Xylene)으로 명화 과정을 2시간씩 각 3회 실시하였다. 그리고 파라핀 침투를 위해 액상 파라핀에서 2시간씩 3회 처리한 후 시료를 파라핀으로 포매하였다.
파라핀 블록 제작 후 표본제작은 로터리 마이크로톰(rotary microtome)을 이용하여 4 ㎛ 두께로 박절편을 만들어 폴리-L-라이신(Poly-L-lysin)으로 코팅된 슬라이드글라스에 부착시켜 신전기(40±3℃)를 이용하여 건조시켰다. 완전히 건조된슬라이드는 자일렌을 이용하여 파라핀을 제거하고 알코올을 통하여 탈수시킨 후 헤마톡실린-에오신(Hematoxylin-Eosin) 이중염색을 하거나 고모리 염색(Gomori's trichrome stain)을 수행하였다. 염색한 조직은 다시 알코올과 자일렌을 통과 시켜 봉입제로 슬라이드를 봉입하고 60℃ 배양기에서 하루 동안 건조시킨 후 광학현미경으로 검경 및 촬영을 수행하였다.
<3-4> 골다공증 예방 효과 1
몸무게 200g 내외의 자성 백서 20마리를 선택하여 실험군(16마리)과 대조군(4마리)으로 나누어 상기 실험예 <3-1>과 동일한 방법으로 난소 절제술을 수행한 후, 약물 투여 4주 동안 실험군과 대조군을 동일한 조건하에서 상기 실험예 <3-2>와 동일한 방법으로 약물을 투여하였다. 약물 투여 4주 후, 즉 난소 절제술이 시작된 지 4주가 된 실험군과 대조군의 표본을 추출하여 백서의 몸무게 변화를 측정하고 경골(Tibia)의 조직편과 5번 척추 뼈를 상기 실험예 <3-3>과 동일한 방법으로 고정, 탈수, 명화, 염색 후 조직학적 관찰을 수행하였다.
그 결과, 오가피 추출물을 투여하지 않은 대조군에서는 척추뼈의 가장 자리 피질고로가 내부의 소주골(trabecule bone)이 소실되었고(도 7의A), 오가피 추출물을 투여한 실험군에서는 소주골이 소실되지 않았다(도 7의B). 또한, 대조군에 비해 오가피 추출물을 투여한 실험군에서는 피질골고 소주골이 두터워졌고, 골수강 부분이 소주골로 채워진 경골(tibia) 횡단면이 관찰되었다(도 8의B).
<3-5> 골다공증 예방 효과 2
몸무게 200 g 내외의 자성 백서 20마리를 선택하여 실험군(16마리)과 대조군(4마리)으로 나누어 상기 실럼예 <3-2>와 동일한 방법으로 4주 동안 약물을 투여하였다. 4주간 약물을 투여한 백서는 상기 실험예 <3-1>과 동일한 방법으로 난소 절제술을 수행하고 다시 4주 동안 동일한 조건하에서 고형사료와 약물을 4주 동안 다시 투여하였다. 약물 투여 4주 후, 즉 실험이 시작된 지 8주가 된 실험군과 대조군의 표본을 추출하여 백서의 몸무게 변화를 측정하고 경골(Tibia)의 조직편과 5번 척추 뼈를 상기 실험예 <3-3>과 동일한 방법으로 고정, 탈수, 명화, 염색 후 조직학적 관찰을 시행하였다.
그 결과, 골다공증이 발생한 대조군에서는 피질골의 두께가 감소되어 있으며 골수강이 비어져 있었고(도 9의A), 오가피 추출물을 투여한 실험군에서는 피질골이 두터워졌고 골수강 부분이 소주골로 채워져 있는 것으로 관찰되었다(도 9의B). 따라서, 본 발명의 오가피 추출물이 골다공증 예방에 현저한 효과가 있다는 것을 확인하였다.
<3-6> 골다공증 치료 효과
난소절제를 시행한 후 4주 동안 동일 조건하에서 고형사료로 사육하고 골다공증의 변화를 확인한 후 상기 실험예 <3-2>와 동일한 방법으로 약물을 4주간 투여하였다. 약물 투여 4주 후 실험군 16마리와 대조군 4마리를 표본으로 추출하였다. 그리고 백서의 몸무게 변화를 측정하고 경골(Tibia) 조직편과 5번 척추 뼈의 조직편을 상기 실험예 <3-3>과 동일한 방법으로 고정, 탈수, 명화, 염색 후 조직학적 관찰을 수행하였다.
그 결과, 오가피 추출물을 투여하였을 경우 대조군에 비해 피질골이 두터워졌고, 골수강 부분이 소주골로 채워진 경골 횡단면을 관찰할 수 있었다(도 10). 상기 결과로부터 본 발명의 오가피 추출물이 골다공증 치료에 효과가 있다는 것을 확인할 수 있었다.
<실험예 4> 랫트에 대한 경구투여 급성 독성실험
6주령의 특정병원체부재(specific pathogen-free, SPF) SD계 랫트를 사용하여 급성독성실험을 실시하였다. 군당 2 마리씩의 동물에 본 발명의 오가피 추출물을 각각 0.5% 메틸셀룰로즈 용액에 현탁하여 1 g/㎏/㎖의 용량으로 1회 단회 경구투여 하였다. 시험물질 투여 후 동물의 폐사여부, 임상증상, 체중변화를 관찰하고 혈액학적 검사와 혈액생화학적검사를 실시하였으며, 부검하여 육안으로 복강장기와 흉강장기의 이상여부를 관찰하였다.
그 결과, 시험물질을 투여한 모든 동물에서 특기할 만한 임상증상이나 폐사된 동물은 없었으며, 체중변화, 혈액검사, 혈액생화학 검사, 부검소견 등에서도 독성변화는 관찰되지 않았다. 이상의 결과, 본 발명의 오가피 추출물은 모두 랫트에서 50 g 추출물/㎏까지도 독성변화를 나타내지 않으며 경구 투여 최소치사량(LD50)은 추출물 50 g/kg 이상인 안전한 물질로 판단되었다.
상기에서 살펴본 바와 같이, 본 발명의 오가피 추출물은 조골세포를 증식시키고 파골세포의 증식을 억제하는 활성을 갖기 때문에, 골다공증, 퇴행성골질환 및 류마티스 관절염과 같은 골질환 등의 예방 또는 치료에 유용하게 사용될 수 있다. 또한, 독성이 전혀 없으므로 건강 보조 식품으로도 널리 이용될 수 있다.
Claims (7)
- 오가피에 물 또는 알콜 수용액을 첨가하여 추출한 조골세포 증식 및 파골세포 증식 억제 활성을 갖는 추출물
- 제 1항에 있어서, 상기 오가피는 가시오가피, 일반오가피, 향오가피를 포함하는 것을 특징으로 하는 추출물.
- 제 1항에 있어서, 상기 오가피는 가시오가피인 것을 특징으로 하는 추출물.
- 제 1항에 있어서, 물을 첨가하여 열수추출하는 것을 특징으로 하는 추출물.
- 제 1항에 있어서, 알콜 수용액은 5 내지 100%의 에틸알콜(ethyl alcohol) 및 5 내지 100%의 메틸알콜(methyl alcohol)로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 추출물.
- 제 1항의 추출물을 유효성분으로 함유하는 골다공증 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제 1항의 추출물을 유효성분으로 함유하는 골다공증 예방 또는 치료용 건강식품.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR20010066583A KR100399374B1 (ko) | 2001-10-27 | 2001-10-27 | 오가피 추출물 및 이를 포함하는 성장기 뼈 형성 촉진 및 골다공증 예방 또는 치료용 약학적 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR20010066583A KR100399374B1 (ko) | 2001-10-27 | 2001-10-27 | 오가피 추출물 및 이를 포함하는 성장기 뼈 형성 촉진 및 골다공증 예방 또는 치료용 약학적 조성물 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20030034825A true KR20030034825A (ko) | 2003-05-09 |
| KR100399374B1 KR100399374B1 (ko) | 2003-10-01 |
Family
ID=29566710
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR20010066583A KR100399374B1 (ko) | 2001-10-27 | 2001-10-27 | 오가피 추출물 및 이를 포함하는 성장기 뼈 형성 촉진 및 골다공증 예방 또는 치료용 약학적 조성물 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR100399374B1 (ko) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20030086158A (ko) * | 2002-05-03 | 2003-11-07 | (주)메디엔스 | 성장촉진용 조성물 |
| JP2005330289A (ja) * | 2004-05-19 | 2005-12-02 | Oscotec Inc | 生薬材抽出物混合物および骨粗鬆症の予防または治療剤 |
| JP2008531552A (ja) * | 2005-02-23 | 2008-08-14 | オスコテック インク． | 熟地黄と五加皮の混合生薬材抽出物及びそれを有効成分とする骨粗鬆症予防及び治療用組成物 |
| KR100870893B1 (ko) * | 2007-04-25 | 2008-11-28 | 주식회사 동원에프앤비 | 엘루테로사이드 ｂ를 함유하는 골 질환의 예방 및 개선용건강기능식품 |
| US7811612B2 (en) * | 2005-01-20 | 2010-10-12 | Oscotec Inc. | Herbal mixture extract of notoginseng radix, rehmanniae radix preparata and acanthopanacis cortex and composition comprising the same for prevention and treatment of arthritis |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100661398B1 (ko) | 2005-02-18 | 2006-12-27 | 주식회사 오스코텍 | 큰느타리버섯, 오가피 및 삼칠근의 혼합 생약재 추출물 및이를 유효성분으로 함유하는 치주질환 예방 및 치료용 조성물 |
| KR100765813B1 (ko) * | 2005-06-28 | 2007-10-10 | 신준식 | 소염진통 및 관절염 치료, 골세포 증식의 효과가 있는 복합생약 조성물 |
| WO2012134214A2 (ko) | 2011-03-31 | 2012-10-04 | 연세대학교 산학협력단 | 지구자 추출물을 유효성분으로 함유하는 골 질환 예방 및 치료용 조성물 |
| KR101974501B1 (ko) | 2017-07-24 | 2019-05-03 | 주식회사 글루칸 | 동충하초로 고상발효된 오가피 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물의 제조방법 |
| KR20230056295A (ko) * | 2021-10-20 | 2023-04-27 | 파낙스바이오주식회사 | 가시오갈피 발효액을 포함하는 골다공증 예방 및 개선 효과를 갖는 식품 조성물 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100345752B1 (ko) * | 2000-06-03 | 2002-07-27 | 신준식 | 구성약제의 골다공증과 퇴행성 골질환 및 류마티스 관절염치료를 위한 물추출물 및 추출방법 |
-
2001
- 2001-10-27 KR KR20010066583A patent/KR100399374B1/ko active IP Right Grant
Cited By (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20030086158A (ko) * | 2002-05-03 | 2003-11-07 | (주)메디엔스 | 성장촉진용 조성물 |
| JP2005330289A (ja) * | 2004-05-19 | 2005-12-02 | Oscotec Inc | 生薬材抽出物混合物および骨粗鬆症の予防または治療剤 |
| KR100555904B1 (ko) * | 2004-05-19 | 2006-03-03 | 주식회사 오스코텍 | 큰느타리버섯과 오가피의 혼합 생약재 추출물 및 이를유효성분으로 하는 골다공증 예방 및 치료용 조성물 |
| JP2010132703A (ja) * | 2004-05-19 | 2010-06-17 | Oscotec Inc | 生薬材抽出物混合物および骨粗鬆症の予防または治療剤 |
| JP4496127B2 (ja) * | 2004-05-19 | 2010-07-07 | オスコテック株式会社 | 生薬材抽出物混合物および骨粗鬆症の予防または治療剤 |
| US7811612B2 (en) * | 2005-01-20 | 2010-10-12 | Oscotec Inc. | Herbal mixture extract of notoginseng radix, rehmanniae radix preparata and acanthopanacis cortex and composition comprising the same for prevention and treatment of arthritis |
| EP1845928A4 (en) * | 2005-01-20 | 2010-12-29 | Oscotec Inc | HERB MIXTURE EXTRACT FROM NOTOGINSENG RADIX, REHMANNIAE RADIX PREPARATA AND ACANTHOPANACIS CORTEX AND COMPOSITION THEREOF FOR THE PREVENTION AND TREATMENT OF ARTHRITIS |
| JP2008531552A (ja) * | 2005-02-23 | 2008-08-14 | オスコテック インク． | 熟地黄と五加皮の混合生薬材抽出物及びそれを有効成分とする骨粗鬆症予防及び治療用組成物 |
| US20080254151A1 (en) * | 2005-02-23 | 2008-10-16 | Jung-Keun Kim | herbal mixture extract of rehmanniae radix preparata and acanthopanacis cortex and a composition comprising the same for prevention and treatment of osteoporosis |
| US8333998B2 (en) * | 2005-02-23 | 2012-12-18 | Oscotec Inc. | Herbal mixture extract of rehmanniae radix preparata and acanthopanacis cortex and a composition comprising the same for prevention and treatment of osteoporosis |
| KR100870893B1 (ko) * | 2007-04-25 | 2008-11-28 | 주식회사 동원에프앤비 | 엘루테로사이드 ｂ를 함유하는 골 질환의 예방 및 개선용건강기능식품 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR100399374B1 (ko) | 2003-10-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR20030031418A (ko) | 혼합 생약재 추출물 및 이를 포함하는 골다공증 예방 또는치료용 약학적 조성물 | |
| KR100399374B1 (ko) | 오가피 추출물 및 이를 포함하는 성장기 뼈 형성 촉진 및 골다공증 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
| CN101966222A (zh) | 一种具有壮骨功效的药物组合物、制剂及其制备方法 | |
| KR101152753B1 (ko) | 하르파고피툼근 추출물을 유효 성분으로 포함하는 골 대사성 질환의 예방 및 치료용 약학 조성물 | |
| Zaid et al. | State of the art of diabetes treatment in Greco-Arab and islamic medicine | |
| KR100585445B1 (ko) | 혼합 생약재를 이용한 골질환 예방 및 치료용 약제 조성물 | |
| FI91877B (fi) | Menetelmä osseiini-hydroksiapatiittiyhdisteen valmistamiseksi | |
| CN102266415B (zh) | 一种复方中药在防治骨质疏松疾病中的应用 | |
| KR100394147B1 (ko) | 구성약제의 만성골다공증 및 류마티스 관절염 치료를 위한물추출물 및 추출방법 | |
| CN100348207C (zh) | 沙棘果油和果渣油在制备防治骨质疏松症药物中的应用 | |
| KR20150083622A (ko) | 오갈피나무와 뽕나무를 이용한 항비만 조성물 | |
| WO2008004118A2 (en) | Carthamus tinctoris plant extracts for treating osteoporosis and the extraction process thereof | |
| KR100510426B1 (ko) | 괴각 추출물을 유효성분으로 함유하는 골 대사성 질환의예방 및 개선용 식품 조성물 | |
| KR100680628B1 (ko) | 숙지황과 오가피의 혼합 생약재 추출물 및 이를 유효성분으로 하는 골다공증 예방 및 치료용 조성물 | |
| KR101790031B1 (ko) | 인삼 추출물, 작약 추출물, 감초 추출물 및 키토산을 유효성분으로 포함하는 폐경 또는 난소절제로 인한 여성 골다공증 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
| KR20050047579A (ko) | 혼합생약재를 이용한 골질환 예방 및 치료용 약제 조성물 | |
| KR100509682B1 (ko) | 괴각 추출물을 유효성분으로 함유하는 골 대사성 질환의 예방 및 치료용 약학적 조성물 | |
| KR100642286B1 (ko) | 골다공증 예방 및 치료용 삼칠근 추출물 | |
| KR20210000685A (ko) | 유백피 및 산수유 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 골질환 예방 또는 치료용 조성물 | |
| KR101637344B1 (ko) | 삼채뿌리 추출물을 유효성분으로 포함하는 골 성장 촉진용 조성물 | |
| WO2008084283A2 (en) | Andrographis paniculata plant extracts for treating osteoporosis and the extraction process thereof | |
| KR100554387B1 (ko) | 골다공증 예방 및 치료용 영지버섯 추출물 | |
| KR100572270B1 (ko) | 삼칠근 추출물을 포함하는 골다공증 예방용 건강식품 | |
| CN102552386B (zh) | 一种抗骨质疏松的中药制剂及其制备方法 | |
| KR20230002103A (ko) | 칡 추출물을 유효성분으로 포함하는 갱년기 증상 예방 또는 개선용 조성물, 이를 이용한 건강 기능 식품 및 이의 제조방법 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A201 | Request for examination | ||
| A302 | Request for accelerated examination | ||
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
| GRNT | Written decision to grant | ||
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20120917 Year of fee payment: 10 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20130830 Year of fee payment: 11 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20140903 Year of fee payment: 12 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20150902 Year of fee payment: 13 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20170901 Year of fee payment: 15 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20180912 Year of fee payment: 16 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20190829 Year of fee payment: 17 |