KR20210000685A - 유백피 및 산수유 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 골질환 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents

유백피 및 산수유 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 골질환 예방 또는 치료용 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR20210000685A
KR20210000685A KR1020200077588A KR20200077588A KR20210000685A KR 20210000685 A KR20210000685 A KR 20210000685A KR 1020200077588 A KR1020200077588 A KR 1020200077588A KR 20200077588 A KR20200077588 A KR 20200077588A KR 20210000685 A KR20210000685 A KR 20210000685A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
milk
cornus
extract
preventing
bone
Prior art date
Application number
KR1020200077588A
Other languages
English (en)
Other versions
KR102415187B1 (ko
Inventor
정선용
박은국
Original Assignee
아주대학교산학협력단
주식회사 나인비
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 아주대학교산학협력단, 주식회사 나인비 filed Critical 아주대학교산학협력단
Publication of KR20210000685A publication Critical patent/KR20210000685A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102415187B1 publication Critical patent/KR102415187B1/ko

Links

Images

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185Magnoliopsida (dicotyledons)
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/40Cornaceae (Dogwood family)
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00Function of food ingredients
    • A23V2200/30Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
    • A23V2200/306Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on bone mass, e.g. osteoporosis prevention
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)

Abstract

본 발은 유백피 및 산수유 혼합추출물을 유효성분으로 함유하는 골질환 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 상기 유백피 및 산수유 혼합추출물은 세포실험과 동물실험에서 골다공증과 골관절염 개선에 큰 효과가 있는 것으로 확인됨에 따라, 본 발명의 유백피산수유 혼합추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 골다공증과 골관절염의 2가지 질환을 예방할 수 있으며, 효과적으로 증상을 완화시켜 골다공증 또는 골관절염을 치료하기 위한 약학적 제제 또는 건강기능식품으로 제공될 수 있다.

Description

유백피 및 산수유 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 골질환 예방 또는 치료용 조성물{Composition for preventing or treating bone disease comprising a extract mixture of ulmus bark and cornus officinalis}
본 발명은 유백피 및 산수유 혼합추출물을 유효성분으로 함유하는 골다공증 또는 골관절염 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
골 조직은 골세포와 골세포 주위의 딱딱한 칼슘조직으로 둘러싸인 밀집된 결합조직으로, 지지와 근 부착의 기계적 기능을 하며, 이러한 골 조직에 의해서 뼈가 이루어져 인체의 골격을 형성한다. 또한, 생체기관 및 골수를 보호하는 기능과 칼슘과 인 이온의 항상성 유지를 위해 이들을 보존하는 기능을 담당한다. 이러한 골 조직은 교원질, 당단백질과 같은 세포 기질과 조골세포(osteoblast), 파골세포(osteoclast) 및 골세포(osteocyte) 등 여러 종류의 세포들로 구성된다. 골수 내 간질세포 (bone marrow stromal cell)로부터 유래한 조골세포는 골 형성에 주된 역할을 담당하며, 조혈모세포로부터 유래되는 파골세포는 파괴되어 노화된 골 흡수를 담당하는데, 이러한 조골세포와 파골세포에 의한 골 형성과 골 흡수의 균형 있는 작용을 통하여 골의 재형성(remodeling)을 유지하게 된다.
골 재형성 유지에 주요 역할을 담당하는 조골세포와 파골세포 간의 평형에 이상이 생겼을 때 골 대사성 질환이 발생한다. 골 대사성 질환의 대표적인 예로써 골다공증이 있는데, 골다공증은 조골세포에 의한 골 형성에 비하여 파골세포의 골 흡수 활성이 증가함으로써 결과적으로 총 골량(total bone mass)이 감소하게 되어 경미한 충격에도 골절이 유발되는 질환을 말한다. 현재까지 골다공증 완치를 위한 효과적인 치료법은 없으며 예방이 강조되고 있는 실정이다. 현재 세계적으로 가장 많이 사용되는 골다공증 치료제로는 비스포스네이트 등의 약제가 있으나, 부작용이 많아 장기 투여가 어려우며, 새로운 뼈 생성에 의한 골밀도 증가에는 큰 역할을 하지 않는다는 단점이 있다.
골관절염(퇴행성관절염)은 점진적이고 비가역적으로 일어나 삶의 질을 떨어뜨리는 퇴행성 질환으로서 노년층 여성들에게 가장 흔한 퇴행성질환 중의 하나이며, 특히, 퇴행성관절염은 통증과 일상생활의 활동장애 및 운동장애를 유발하여 삶의 질을 저하시키고 치료 등에 많은 사회적 비용을 소비하는 대표적인 퇴행성 질환이다. 골관절염 치료제로는 통증완화를 목표로 하는 진통소염제, 히알루론산 치료제, 자가 세포치료제, 줄기세포치료제, 유전자세포 치료제, 인공관절 등이 있으며, 인공관절 수술 이외에 근본적인 치료제가 없는 실정이다.
이들 두 질환의 특성상 장기복용이 필요하기 때문에 부작용이 많은 약물 보다는 천연물 유래의 건강기능식품 및 천연물의약품의 개발이 필요하다. 특히, 여성 장노년층에서 골다공증과 골관절염을 함께 앓고 있는 환자가 많아 이들 두 질환을 동시에 예방, 개선, 치료할 수 있는 건강기능식품, 천연물의약품의 개발이 필요하다.
대한민국공개특허 제10-2010-0004331호 (2010.01.13. 공개)
본 발명은 장노년기 여성에 환자가 많은 골다공증과 골관절염을 동시에 예방, 개선 및 치료에 효과가 있는 혼합추출물과 이를 유효성분으로 포함하는 조성물을 제공하기 위한 것이다.
본 발명은 유백피 및 산수유 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 골질환 예방 또는 치료용 약학조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 유백피 및 산수유 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 골질환 예방 또는 개선용 건강식품을 제공한다.
본 발병에 따르면 유백피 및 산수유 혼합추출물은 세포실험과 동물실험에서 골다공증과 골관절염 개선에 큰 효과가 있는 것으로 확인됨에 따라, 본 발명의 유백피산수유 혼합추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 골다공증과 골관절염의 2가지 질환을 예방할 수 있으며, 효과적으로 증상을 완화시켜 골다공증 또는 골관절염을 치료하기 위한 약학적 제제 또는 건강기능식품으로 제공될 수 있다.
도 1은 원료표준화된 산수유 및 유백피 추출물 및 5:5, 7:3 또는 8:2 비율의 산수유 및 유백피 복합 추출물의 조골세포 분화촉진 효과를 확인한 결과로, Control: 분화유도 없음, Mock: 조골세포 분화유도이다.
도 2는 원료표준화된 산수유 및 유백피 추출물 및 5:5, 7:3 또는 8:2 비율의 산수유 및 유백피 복합 추출물의 파골세포 분화억제 효과를 확인한 결과로, Control: 분화유도 없음, Mock: 파골세포 분화유도이다.
도 3은 산수유 및 유백피 복합추출물의 골관절 염증인자인 COX-2, MMP-3 및 MMP-13의 발현억제 효과를 확인한 결과로, Control: 염증유발 없음, Mock: 염증유발-음성대조군이다.
도 4는 산수유 및 유백피 복합추출물이 투여된 골다공증 동물모델의 골밀도를 확인한 결과로, Sham: 난소 미절제군, Control: 난소절제군-OVX이다.
도 5는 산수유 및 유백피 복합추출물이 투여된 골다공증 동물모델의 뼈 미세구조를 촬영한 결과로, Sham: 난소 미절제군, Control: 난소절제군-OVX이다.
도 6은 산수유 및 유백피 복합추출물이 투여된 골다공증 동물모델의 뼈 미세구조를 분석한 그래프로, Sham: 난소 미절제군, Control: 난소절제군-OVX이다.
도 7은 산수유 및 유백피 복합추출물이 투여된 골다공증 동물모델의 ICRS grade, Safranin O 염색 및 뼈 미세구조를 분석한 결과로, Sham: 내측반월 불안정화 유도 없음, Control: 내측반월 불안정화 유도-MSM이다.
이하, 본 발명을 보다 상세하게 설명한다.
폐경 후에 나타나는 여성호르몬인 에스트로겐의 급격한 감소로 인한 다양한 갱년기 증상이 나타나며, 특히, 골다공증과 골관절염은 지속적인 치료가 필요한 질환이기 때문에 삶의 질과 직접적으로 연관되어 있다. 최근의 급격한 고려화 진전으로 인해 이들 퇴행성 질환 환자도 크게 증가하고 있는 실정이다. 골다공증은 치료제가 있으나 부작용으로 장기적 사용이 안된다는 단점이 있고, 골과절염은 통증제어 이외의 근본적인 치료제가 없는 실정이다. 따라서, 본 발명의 발명자들은 두 질환 모두 장기복용이 가능한 천연물 유래의 건강기능식품 및 천연물의약품을 제공하기 위해 본 발명을 완성하였다.
본 발명은 유백피 및 산수유 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 골질환 예방 또는 치료용 약학조성물을 제공할 수 있다.
상기 유백피 및 산수유 복합추출물은 유백피 및 산수유가 2:8 내지 8:2 중량비로 혼합되는 것일 수 있으며, 보다 상세하게는 5:5, 7:3 또는 8:2 중량비로 혼합될 수 있으며, 보다 바람직하게는 5:5 중량비로 혼합되는 복합추출물일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 유백피 및 산수유 복합추출물은 물, C1 내지 C4의 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출되는 것일 수 있다.
상기 골질환은 골다공증 및 골관절염으로 이루어진 군에서 하나 이상 선택되는 것일 수 있다.
상기 유백피 및 산수유 복합추출물은 조골세포의 분화를 촉진시키고, 파골세포의 분화를 억제하는 것일 수 있으며 또한, 상기 유백피 및 산수유 복합추출물은 염증인자인 COX-2, MMP-3 및 MMP-13 발현을 억제하는 것일 수 있다.
본 발명의 한 구체예에서, 상기 유백피 및 산수유 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 골질환 예방 또는 치료용 약학조성물은 통상적인 방법에 따라 주사제, 과립제, 산제, 정제, 환제, 캡슐제, 좌제, 겔, 현탁제, 유제, 점적제 또는 액제로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 제형을 사용할 수 있다.
본 발명의 다른 구체예에서, 유백피 및 산수유 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 골질환 예방 또는 치료용 약학조성물은 약학조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제, 붕해제, 감미제, 피복제, 팽창제, 활택제, 향미제, 항산화제, 완충액, 정균제, 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 첨가제를 추가로 포함할 수 있다.
구체적으로 담체, 부형제 및 희석제는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 사용할 수 있으며, 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트, 수크로스 또는 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제할 수 있다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용할 수 있다. 경구를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 있으며 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제 등이 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기재로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 일실시예에 따르면 상기 약학 조성물은 정맥내, 동맥내, 복강내, 근육내, 흉골내, 경피, 비측내, 흡입, 국소, 직장, 경구, 안구내 또는 피내 경로를 통해 통상적인 방식으로 대상체로 투여할 수 있다.
상기 유백피 및 산수유 복합추출물의 바람직한 투여량은 대상체의 상태 및 체중, 질환의 종류 및 정도, 약물 형태, 투여경로 및 기간에 따라 달라질 수 있으며 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 본 발명의 일실시예에 따르면 이에 제한되는 것은 아니지만 1일 투여량이 0.01 내지 200 mg/kg, 구체적으로는 0.1 내지 200 mg/kg, 보다 구체적으로는 0.1 내지 100 mg/kg 일 수 있다. 투여는 하루에 한 번 투여할 수도 있고 수회로 나누어 투여할 수도 있으며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서, 상기 '대상체'는 인간을 포함하는 포유동물일 수 있으나, 이들 예에 한정되는 것은 아니다.
또한, 본 발명은 유백피 및 산수유 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 골질환 예방 또는 개선용 건강식품을 제공할 수 있다.
상기 건강식품은 상기 유백피 및 산수유 복합추출물 이외에 다른 식품 또는 식품 첨가물과 함께 사용되고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 혼합양은 그의 사용 목적 예를 들어 예방, 건강 또는 치료적 처치에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
상기 건강식품에 함유된 화합물의 유효용량은 상기 치료제의 유효용량에 준해서 사용할 수 있으나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 범위 이하일 수 있으며, 유효성분은 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있음은 확실하다.
상기 건강식품의 종류에는 특별한 제한이 없고, 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제등을 들 수 있다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예를 들어 상세하게 설명하기로 한다. 다만 하기의 실시예는 본 발명의 내용을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 범위가 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 실시예는 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.
<실시예 1> 유백피 및 산수유 복합추출물 제조
유백피 및 산수유를 30% 에탄올 수용액으로 80℃에서 4시간 동안 추출한 후, 약 20 시간 방치한 다음 여과지로 여과하였다. 여과액을 동결 건조의 방법으로 각각의 추출물 분말을 제조하였다. 유백피 및 산수유의 혼합 추출물은 유백피 추출 분말과 산수유 추출분말을 5:5의 중량 비율로 혼합하여 제조하였다.
<실시예 2> in vitro에서 유백피 및 산수유 복합추출물의 골다공증 및 골관절염 개선 효과 확인
1. 골다공증 및 골관절염에 대한 유백피 및 산수유 복합추출물의 효능 확인
골세포의 기원 세포인 조골모세포(MC3T3-E1)의 조골세포로의 분화능(ALP 활성도)에 대한 유백피 및 산수유 복합추출물의 분화 효과를 확인하기 위해, 원료표준화된 산수유 및 유백피 단독 또는 비율별 복합추출물 (5:5, 7:3, 8:2)을 각각 10 ㎍/㎖ 농도로 조골모세포주 MC3T3-E1에 처리하고 3일 후 ALP 활성 분석을 수행하여 조골세포 분화도 변화를 확인하였다.
그 결과, 도 1과 같이 조골 전구세포인 MC3T3-E1 세포에 유백피 및 산수유 복합추출물이 처리된 세포군에서 단독 추출물이 처리된 비교군과 비교하여 향상된 조골세포의 분화 촉진이 확인되었다.
또한, 파골세포의 기원세포인 단핵세포 (monocyte)의 파골세포로의 분화능에 대한 유백피 및 산수유 복합추출물의 파골세포 분화 효과를 확인하기 위해, 6주령 마우스 골수로부터 파골세포의 근원세포인 primary monocyte를 분리 배양한 후, 파골세포 분화유도를 위해 M-CSF(30 ng/ml)와 RANKL(50 ng/ml)를 3일간 처리하였다.
이후 원료표준화된 유백피 및 산수유 단독 또는 비율별 복합추출물 (5:5, 7:3, 8:2)을 10 ㎍/㎖ 농도로 분화유도된 primary monocyte에 처리하여 6일 후 TRAP 활성 분석을 수행하여 파골세포 분화 억제효과를 확인하였다.
그 결과, 도 2와 같이 유백피 및 산수유 복합추출물이 처리된 primary monocyte 세포군에서 단독 추출물이 처리된 비교군과 비교하여 향상된 파골세포 분화 억제 효과가 확인되었다.
2. 골관절염 모델에서 분리된 연골세포에서 유백피 및 산수유 복합추출물의 효능 확인
골관절염 개선 효과를 확인하기 위해, 생후 5일된 마우스의 연골에서 primary 연골세포(chondrocyte)를 분리하여 세포 배양 후 인터루킨-1β(Interlukin-1β, IL-1β)를 처리하여 골관절염 세포 모델을 제작하였다.
골관절염 세포 모델에 유백피 및 산수유 복합추출물 (5:5)를 2, 10 및 50 ㎍/㎖ 농도로 처리하여 연골세포의 염증인자인 COX-2, MMP-3 및 MMP-13의 발현량의 변화를 실시간 RT-PCR 방법으로 정량하여 유백피 및 산수유 복합추출물의 골관절염 개선 효과를 확인하였다.
그 결과, 도 3과 같이 골관절염 염증인자의 발현량이 현저하게 억제된 것을 확인할 수 있었다.
상기 결과들로부터 유백피 및 산수유 복합추출물은 조골세포 분화를 촉진시키고, 파골세포 분화를 억제시켜 골다공증 개선 효과가 있으며, 골관절염을 유발시키는 염증인자의 발현량을 억제시켜 골관절염 개선에 효과가 있음이 확인되었다.
<실시예 3> in vivo에서 유백피 및 산수유 복합추출물의 골다공증 및 골관절염 개선 효과 확인
1. 골다공증 마우스 모델에서 유백피 및 산수유 복합추출물의 유효성 확인
골다공증 동물모델은 난소절제 ddY 암컷 마우스 (OVX: 개복 후 난소를 제거한 마우스)와 sham-operated ddY 암컷 마우스(Sham: 개복 후 난소절제를 하지 않은 마우스)에 유백피 및 산수유 복합추출물(5:5)을 100 및 200 mg/kg/day 용량으로 사료에 혼합하여 투여하였으며, 양성대조군으로 골다공증 개선 건강기능식품인 본밸런스 (150 mg/kg/day)를 투여하여 12주간 사육 후 골밀도(BMD)의 변화량을 조사하였다.
그 결과, 도 4와 같이 기존에 시판되고 있는 뼈 건강에 좋은 건기식 본벨런스와 시험물질인 유백피 및 산수유 복합추출물 (200 mg/kg/day)에서 골다공증 유발에 의한 골밀도 감소 억제 효과를 확인할 수 있었다.
또한, 기능성 원료가 뼈에 어떠한 영향을 미치는지 조사하기 위해 PIXI-mus bone densitometer 장비를 이용하여 마우스의 정강이(Femur)와 경골부(Tibia)에 대하여 골밀도(bone mineral density)를 확인하였으며, 모든 마우스 개체별 체중을 측정하여 그룹간에 통계적으로 유의한 체중 차이가 나타나지 않도록 군 분리를 수행하였다.
그 결과, 도 5 및 도 6과 같이 난소를 제거하지 않은 정상의 Shame 마우스와 비교하였을 때, 난소를 제거한 OVX 마우스의 뼈 대퇴부(Femur)를 12주 후의 micro-CT 촬영 사진 상의 뼈 미세구조 치밀도의 현저한 저하가 나타났으며, 뼈의 부피율, 해면골소주 두께, 해면골소주 수 또한 현저 하게 낮았고 해면골소주 공간은 높게 나타났다. 반면, 유백피 및 산수유 복합추출물(5:5) 200 mg/kg/day로 12주간 투여한 실험군에서는 폐경에 의해 발생되는 골밀도 감소와 뼈 미세 구조 치밀도 저하가 억제되고, 뼈의 부피율, 해면골소주 두께, 해면골 소주 수의 감소와 면골소주 공간의 증가도 모두 억제된 것을 확인할 수 있었다.
상기 결과로부터, 현재 시판중인 골다공증 개선 건강기능식품인 본밸런스에 비교하여 유백피 및 산수유 복합추출물(5:5)은 우수한 골다공증 개선 효과를 나타내는 것이 확인되었다.
2. 골관절염 마우스 모델에서 유백피 및 산수유 복합추출물의 유효성 확인
12주령 내측반월 불안정화 유도 골관절염 마우스(Destabilization of the medial meniscus-induced OA mouse; DMM)의 무릎관절(knee joint)에서 medial meniscus ligament를 micro surgery 방법으로 제거하여 연골의 불안정화를 유도해 퇴행성 관절염을 유도시킨 골관절염 마우스 모델을 준비하였다.
유백피 및 산수유 복합추출물(5:5)을 100 및 200 mg/kg/day 용량으로 사료에 혼합하여 투여하였으며, 양성대조군으로 현재 골관절염 개선 건강식품으로 시판되고 있는 MSM(150 mg/kg/day)를 투여하여 10주간 사육 후 micro-CT 촬영을 통한 관절의 연골 퇴행정도와 Safranin O 염색을 바탕으로 하여 ICRS grade 분석을 통해 연골 퇴행정도를 확인하였다. 또한, Sham 마우스에 대해 양성 및 음성 대조 실험을 동일하게 수행하였다.
그 결과, 도 7과 같이 연골의 불안정화를 유도한 마우스(DMM induced OA mouse; DMM)의 관절을 10주 후의 micro-CT 촬영 결과에서 연골 손상 및 파괴가 확인되었으며, 기존에 시판되고 있는 골관절염 개선에 좋은 건강기능식품 MSM과 유사한 수준으로 시험물질인 유백피 및 산수유 복합추출물(5:5) 200 mg/kg/day에서 퇴행성 골관절염 억제 효과가 확인되었다.
상기 결과들로부터 유백피 및 산수유 복합추출물은 뼈 및 관절을 보호하고 골다공증 및 관절염을 개선시킬 수 있는 기능성 원료 제공될 수 있음이 확인되었다.
이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims (7)

  1. 유백피 및 산수유 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 골질환 예방 또는 치료용 약학조성물.
  2. 청구항 1에 있어서, 상기 유백피 및 산수유는 2:8 내지 8:2 중량비로 혼합되는 것을 특징으로 하는 골질환 예방 또는 치료용 약학조성물.
  3. 청구항 1에 있어서, 상기 유백피 및 산수유 복합추출물은 물, C1 내지 C4의 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출되는 것을 특징으로 하는 골질환 예방 또는 치료용 약학조성물.
  4. 청구항 1에 있어서, 상기 골질환은 골다공증 및 골관절염으로 이루어진 군에서 하나 이상 선택되는 것을 특징으로 하는 골질환 예방 또는 치료용 약학조성물.
  5. 청구항 1에 있어서, 상기 유백피 및 산수유 복합추출물은 조골세포의 분화를 촉진시키고, 파골세포의 분화를 억제하는 것을 특징으로 하는 골질환 예방 또는 치료용 약학조성물.
  6. 청구항 1에 있어서, 상기 유백피 및 산수유 복합추출물은 염증인자인 COX-2, MMP-3 및 MMP-13 발현을 억제하는 것을 특징으로 하는 골질환 예방 또는 치료용 약학조성물.
  7. 유백피 및 산수유 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 골질환 예방 또는 개선용 건강식품.
KR1020200077588A 2019-06-25 2020-06-25 유백피 및 산수유 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 골질환 예방 또는 치료용 조성물 KR102415187B1 (ko)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020190075806 2019-06-25
KR20190075806 2019-06-25

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20210000685A true KR20210000685A (ko) 2021-01-05
KR102415187B1 KR102415187B1 (ko) 2022-07-01

Family

ID=74140948

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020200077588A KR102415187B1 (ko) 2019-06-25 2020-06-25 유백피 및 산수유 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 골질환 예방 또는 치료용 조성물

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR102415187B1 (ko)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20240020959A (ko) 2022-08-09 2024-02-16 전남대학교산학협력단 황칠나무 잎의 유효성분을 포함하는 골질환 개선, 예방 또는 치료용 약학적 조성물

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20100004331A (ko) 2008-07-03 2010-01-13 전남대학교산학협력단 키토산을 포함하는 골아세포분화촉진조성물과 골다공증예방 및 치료조성물
KR20160134925A (ko) * 2015-05-13 2016-11-24 호서대학교 산학협력단 사자발약쑥 및 유백피 추출물을 유효성분으로 포함하는 골관절염의 예방 또는 치료용 조성물
KR20180028018A (ko) * 2016-09-07 2018-03-15 연세대학교 산학협력단 골질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20100004331A (ko) 2008-07-03 2010-01-13 전남대학교산학협력단 키토산을 포함하는 골아세포분화촉진조성물과 골다공증예방 및 치료조성물
KR20160134925A (ko) * 2015-05-13 2016-11-24 호서대학교 산학협력단 사자발약쑥 및 유백피 추출물을 유효성분으로 포함하는 골관절염의 예방 또는 치료용 조성물
KR20180028018A (ko) * 2016-09-07 2018-03-15 연세대학교 산학협력단 골질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물

Also Published As

Publication number Publication date
KR102415187B1 (ko) 2022-07-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR102049440B1 (ko) 호장근과 계심을 함유하는 여성갱년기 증상 예방 및 개선용 조성물
KR101152753B1 (ko) 하르파고피툼근 추출물을 유효 성분으로 포함하는 골 대사성 질환의 예방 및 치료용 약학 조성물
US10688144B2 (en) Composition for preventing or treating osteoarthritis containing an extract of Angelica gigas Nakai
KR101781060B1 (ko) 허혈성 뇌졸중의 치료 및 예방용 약학 조성물
KR102415187B1 (ko) 유백피 및 산수유 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 골질환 예방 또는 치료용 조성물
KR20070084832A (ko) 황기 추출물을 포함하는 혈관형성 촉진 및 골유합 효과를갖는 골절의 예방 및 치료용 조성물
KR101193540B1 (ko) 황기,계지 및 황백의 혼합생약재 추출물을 포함하는 골다공증 및 골질환 예방 및 치료용 조성물
KR102125454B1 (ko) 겐티아나 루테아 추출물을 포함하는 골 질환 예방 또는 치료용 조성물
JP2022522707A (ja) 骨障害の治療または予防に使用するためのマキベリー抽出物
EP3159003A2 (en) Composition for enhancing bone growth, preventing bone resorption disorders and for joint health
KR101249930B1 (ko) 마가목 및 현지초 추출물을 포함하는 파골세포 분화 억제용 또는 연골세포 분화 촉진용 조성물(sg-ⅱ)
WO2012134214A2 (ko) 지구자 추출물을 유효성분으로 함유하는 골 질환 예방 및 치료용 조성물
KR102160627B1 (ko) 헛개나무 가지 추출물을 함유하는 골 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
KR20150105561A (ko) 헛개나무 추출물을 함유하는 골 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
KR20140015083A (ko) 관중 추출물을 유효성분으로 함유하는 골질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강기능식품
KR101637344B1 (ko) 삼채뿌리 추출물을 유효성분으로 포함하는 골 성장 촉진용 조성물
KR101402922B1 (ko) 산천목 추출물을 유효성분으로 함유하는 골질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강기능식품
WO2021221457A1 (ko) 박하 추출물을 유효성분으로 함유하는 골질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물
KR20180034874A (ko) 카테킨 함유 녹차 추출물을 포함하는 손상 근육의 재생을 촉진하는 약학 조성물
KR101386323B1 (ko) 모자반 추출물을 유효성분으로 함유하는 폐경기후 골다공증의 완화, 예방 또는 치료용 약학조성물 및 이를 포함하는 건강기능식품
KR100760385B1 (ko) 독활 추출물을 포함하는 관절 연골 손상 및 관절염의 예방 및 치료용 조성물
KR101636348B1 (ko) 합다리나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈관신생 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강기능식품 조성물
AU2006345881A1 (en) Pinus pinea plant extracts for treating osteoporosis and the extraction process thereof
KR20220123622A (ko) 도인 추출물을 포함하는 골절 예방, 개선 또는 치료용 조성물
KR20160149664A (ko) 보스웰리아 세라타 추출물, 포도씨 추출물 및 주니퍼베리 추출물을 유효성분으로 함유하는 관절염의 예방, 개선 또는 치료용 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
E902 Notification of reason for refusal
E90F Notification of reason for final refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant