KR20030015536A

KR20030015536A - 넓패 추출물을 함유하는 미백 화장료

Info

Publication number: KR20030015536A
Application number: KR1020010049309A
Authority: KR
Inventors: 이봉호; 최병욱; 신현철; 강기정
Original assignee: 벤트리 주식회사; 한국해양수산개발원
Priority date: 2001-08-16
Filing date: 2001-08-16
Publication date: 2003-02-25

Abstract

본 발명은 넓패(Ishige sinicola) 추출물을 함유하는 미백 화장료에 관한 것으로, 좀 더 상세하게는 건조 및 분쇄된 넓패에 추출용매를 첨가하고, 침적하여 추출물을 얻은 다음, 감압증류를 통해 농축하여 얻어진 넓패 추출물을 함유하는 미백 화장료에 관한 것이다. 본 발명에 따른 넓패 추출물을 함유하는 미백 화장료는 뛰어난 티로시나아제 활성의 저해효과를 나타내어 미백에 매우 효과적이다.

Description

넓패 추출물을 함유하는 미백 화장료 {Whitening cosmetics containing extracts from Ishige sinicola}

본 발명은 넓패(Ishige sinicola) 추출물을 함유하는 미백 화장료에 관한 것으로, 좀 더 상세하게는 건조 및 분쇄된 넓패에 추출용매를 첨가하고, 침적하여 추출물을 얻은 다음, 감압증류를 통해 농축하여 얻어진 넓패 추출물을 함유하는 미백 화장료에 관한 것이다.

일반적으로 사람의 피부가 검게 변화되는 원인에는 여러가지 요인이 있지만, 주된 원인은 자외선이다. 자외선에 피부가 노출되면, 피부세포의 일종인 멜라노사이트(Melanocyte)내에 멜라닌(Melanin)이 합성되고 방출되어 피부 표피가 검게 변하게 된다. 이 과정은 티로시나아제(Tyrosinase)라는 효소가 세포내의 티로신(Tyrosine)에 작용하여 도파퀴논(DOPAquinone)을 생성시키며, 상기 도파퀴논의 자발적인 반응과 일련의 효소반응을 거쳐 공중합체 흑색색소인 멜라닌이 생성되게 된다.

따라서 피부가 검게 되는 것을 막기 위해서는 멜라닌 생성 과정 중의 일부 반응을 저해함으로써 멜라닌의 생성을 감소시켜 주는 방법이 가장 간단하면서도 일반적이다. 이를 위해 종래에는 아스콜빈산(Ascorbic acid), 코직산(Kojic acid), 알부틴(Arbutin), 히드로퀴논(Hydroquinone) 및 상백피 추출물 등 각종 식물 추출물이 사용되어 왔다. 상기 물질 중 코직산은 티로시나아제의 활성 부위에 존재하는 구리 이온을 킬레이트시켜 효소활동을 저해하는 작용을 하는데, 성능이 우수한 반면 화장품에 배합시 안정성에 문제점이 높아 화장료로서 적당하지 않다. 한편, 히드로퀴논은 피부에 대한 자극성이 높아 안전성 문제로 현재 화장료로 사용하지 못하고 있으며 국내 및 여러 나라에서 화장품 원료로서 사용이 금지되고 있는 실정이다. 또한, 아스콜빈산의 경우 물질 자체의 낮은 안정성과 미백효과의 미미함으로 미백제로서의 효용성에 결함을 갖고 있다. 한편, 여러 식물 추출물에서도 미백효과가 발견되고 있으나, 대부분의 식물 추출물의 경우 고농도에서만 비교적 높은 티로시나아제 활성 저해 효과를 나타내고, 저농도를 사용하면 저해 효과가 거의 나타나지 않기 때문에 원료의 경제적인 면에서 효율적이지 못하다.

이에 따라, 현재까지 개발된 미백물질의 문제점을 보완할 수 있는 강한 미백효과와 높은 안전성을 갖는 새로운 미백물질의 개발이 절실히 요구되고 있는 실정이다.

이에, 본 발명자들이 광범위한 연구를 수행한 결과, 넓패 추출물이 매우 뛰어난 티로시나아제 활성 저해 효과를 나타내었고, 이를 미백 화장료로 사용하였을 경우 높은 안정성과 뛰어난 미백 효과를 나타냄을 확인하였으며 이에 기초하여 본 발명을 완성하였다.

따라서, 본 발명의 목적은 강한 미백효과와 높은 안전성을 가지는 넓패 추출물을 포함하는 미백 화장료를 제공하는데 있다.

이하, 본 발명을 좀 더 구체적으로 설명하면 다음과 같다.

본 발명에서 사용된 넓패 추출물은 티로시나아제 활성 저해 효과가 뛰어나 미백 화장료로 사용할 수 있다. 넓패(Ishige sinicola)는 일본을 비롯한 한국 근해에서 쉽게 접할 수 있는 해조물로서, 통상적으로 조간대 중부의 바위에서 서식하며, 5∼20cm 정도의 길이 및 0.3∼2cm 정도의 직경을 갖는다. 상기 넓패는 공지에 다양한 용도로 사용되어 왔으나, 그 추출물을 미백물질로 사용한 예는 없었으며, 본 발명의 넓패 추출물을 함유하는 미백 화장료는 미백효과 및 안정성이 뛰어나다.

본 발명에 따른 넓패 추출물의 제조방법을 살펴보면,

먼저, 제주도 근해에서 채취한 넓패 전체를 깨끗한 물로 세척하고 음지에서 건조시킨 후 이를 2∼3cm의 작은 입자로 분쇄한다. 분쇄된 넓패에 추출용매를 가하여 유효성분을 포함한 추출물을 추출해낸다. 상기 추출용매는 물 및/또는 유기용매로 이루어지며, 상기 유기용매는 메탄올, 에탄올, 부탄올, 아세톤, 에틸 아세테이트, 및 1,3-부틸렌 글리콜로 이루어진 군으로부터 하나 또는 그 이상으로 선택하여 사용하는 것이 바람직하다.

또한, 상기 추출용매의 사용량은 분쇄된 넓패의 건조중량에 대하여 1∼15배, 바람직하게는 5∼10배를 사용한다. 상기 추출용매의 사용량이 넓패의 건조중량에 대해 1배 미만이면 추출용매에 넓패가 충분히 접하지 못하여 추출수율이 떨어지는문제가 있고 15배를 초과하면 추출용매의 양이 많아져서 처리부피가 커지는 문제가 있다. 필요에 따라 수득율을 높이기 위해서는 상기 추출과정을 2회 이상 반복하여 실시할 수 있으며, 이 때 반복 단계마다 다른 유기용매를 사용할 수도 있다. 또한, 상기 추출시에 바람직하게는 침적의 방법이 사용되는데 그 외에 교반 등의 다른 공지의 방법을 사용하는 것도 가능하다.

본 발명에 따른 추출물을 얻기 위한 침적 조건은 5∼65℃에서 1시간∼24시간 이며, 바람직하게는 15∼25℃에서 12∼24시간이다. 이 때, 상기 침적 온도가 5℃ 미만으로 추출온도가 낮으면 추출수율이 저하되는 문제가 있고 65℃를 초과하면 활성물질의 변성이 우려되는 문제가 있으며, 침적시간이 1시간 미만이면 물질이 충분히 추출되지 못하는 문제가 있고 24시간을 초과하면 불필요한 부분까지도 함께 추출되는 문제가 있다.

전술한 방법으로 얻은 추출물은 냉각 콘덴서가 달린 증류장치를 이용하여 감압증류함으로써 농축하여 본 발명에 사용될 넓패 추출물을 얻는다.

추출된 물질 내에 함유된 잔사 및 용매를 제거하기 위하여 예를 들면, 원심분리기 및 회전증발 농축기와 같은 분리, 농축수단을 이용할 수 있다. 상기 과정을 거친 추출물을 직접 다양한 응용분야에 사용할 수 있으며, 이러한 경우에는 별도의 추가공정을 요하지 않기 때문에 경제적으로 유리한 장점을 갖는다.

본 발명에 따른 넓패 추출물을 함유하는 화장료로는 기초제품 화장료(화장수, 크림, 에센스, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 보디 오일), 색조제품 화장료(화운데이션, 립스틱, 마스카라, 메이크업 베이스), 두발제품 화장료(샴푸, 린스, 헤어콘디셔너, 헤어젤) 등이 있으며, 상기 미백 화장료는 하기 처방예의 조성으로 통상의 화장료 제조방법에 의해 제조될 수 있다.

본 발명의 미백 화장료는 상기 넓패 추출물을 0.001∼5중량%, 바람직하게는 0.01∼1.0중량% 함유하며, 0.001중량% 미만일 경우에는 그 효과가 미미하며, 5.0중량%를 초과할 경우에는 경제적으로 비효율적이다.

이하, 실시예 및 비교예를 통하여 본 발명을 좀 더 구체적으로 살펴보지만, 이에 본 발명의 범주가 한정되는 것은 아니다.

실시예 1

정제수로 세척하고 건조시킨 다음 2∼3㎝의 입자로 분쇄한 넓패시료 조각 1 ㎏을 에탄올 9ℓ에 넣고 25℃에서 24시간 동안 추출한 후 와트만 5번 여과지로 여과하였다. 상기 추출물은 냉각 콘덴서가 달린 증류장치(Buich, 스위스)를 이용하여 40℃에서 감압증류하여 10, 20, 50ug/ml의 농도로 나누어 농축시켜 건조 넓패 추출물 62g(건조중량)을 얻었다.

실시예 2

정제수로 세척하고 건조시킨 다음 2∼3㎝의 입자로 분쇄한 넓패시료 조각 1 ㎏을 90% 에탄올 9ℓ에 넣고 25℃에서 24시간 동안 추출한 후 와트만 5번 여과지로 여과하였다. 상기 추출물은 냉각 콘덴서가 달린 증류장치(Buich, 스위스)를 이용하여 40℃에서 감압증류하여 10, 20, 50ug/ml의 농도로 나누어 농축시켜 건조 넓패 추출물 310g(건조중량)을 얻었다.

실시예 3

정제수로 세척하고 건조시킨 다음 2∼3㎝의 입자로 분쇄한 넓패시료 조각 1 ㎏을 50% 에탄올 9ℓ에 넣고 25℃에서 24시간 동안 추출한 후 와트만 5번 여과지로 여과하였다. 상기 추출물은 냉각 콘덴서가 달린 증류장치(Buich, 스위스)를 이용하여 40℃에서 감압증류하여 10, 20, 50ug/ml의 농도로 나누어 농축시켜 건조 넓패 추출물 370g(건조중량)을 얻었다.

실험예 1 : 넓패 추출물의 티로시나아제 활성저해 효과 측정

티로시나아제는 버섯에서 분리 및 정제된 것으로 시그마사(Sigma, 미국)에서 구입하여 사용하였다. 기질인 티로신(tyrosin)은 0.05M 인산나트륨 완충용액(pH 6.8)에 녹여 0.1㎎/㎖의 농도로 사용하였다.

상기 티로신 용액 0.5㎖를 시험관에 넣고 여기에 추출물 시료액 0.5㎖를 가한 다음 37℃ 항온기에서 10분간 방치한 후 250U/㎖ 티로시나아제 용액 0.5㎖를 넣고 다시 37℃에서 10분간 반응시켰다. 이 때, 대조군은 상기 각 추출물 시료액 대신 완충용액을 0.5㎖ 넣고 동일한 반응을 수행하였다. 반응이 종료된 후 상기 시험관을 얼음 위에 놓아 급냉시켜 효소 반응을 완전히 중지시키고 분광광도계(Spectrophotometer)로 파장 475㎚에서의 흡광도를 측정하였다.

상기 추출물의 티로시나아제 활성 저해 효과는 하기 수학식 1로 구하였고, 그 결과는 하기 표 1에 나타내었다.

추출물	저해효과(%)
	10ug/ml	20ug/ml	50ug/ml
실시예 1	47.21	60.12	87.26
실시예 2	46.18	59.94	88.99
실시예 3	35.42	48.24	65.85

비교예 1 내지 6 : 종래 미백 물질과의 티로시나아제 저해 효과 비교

종래부터 식물 추출물로서 미백효과가 입증된 상백피(비교예 1), 감초(비교예 2), 오미자(비교예 3)을 이용하여 상기 실시에 1과 동일한 방법으로 추출하여 건조하였다. 또한, 종래의 화합물질 미백제로서 알부틴(비교예 4), 아스콜빈산(비교예 5)을 이용하였다.

상기 비교예 1 내지 5의 미백물질에 따른 티로시나제 활성 저해효과를 상기 실험예 1과 동일하게 실시하여 그 결과를 IC₅₀값으로 비교하여 하기 표 2에 나타내었다. 이 때 IC₅₀는 티로시나제 활성을 50%로 억제하기 위해 필요한 시료의 농도를 의미한다.

	IC₅₀(ug/ml)
실시예 2	12.78
비교예 1	17.87
비교예 2	52.28
비교예 3	29.04
비교예 4	68.32
비교예 5	70.65

상기 표 2에 나타난 바와 같이, 본 발명에서 사용되는 넓패 추출물이 조추출물(crude extract)임에도 불구하고 종래의 미백물질들보다 매우 높은 티로시나아제 활성 저해 효과를 나타냄을 확인하였다.

실험예 2 : 넓패추출물의 멜라닌 생성 억제 효과

멜라노사이트(Melanocyte)는 마우스 유래 B-16 멜라노마(ATCC CRL 6323) 세포주를 구입하여 사용하였다.

멜라노마 세포주를 포도당 4.5g/ℓ, 10% 혈청, 1% 항생제가 함유된 DMEM 배지에 접종하여 50㎖ T-플라스크에 37℃에서 배양하였다. 5% CO₂, 37℃ 조건하에서 24시간 배양한 후, 0.02% EDTA가 함유된 0.05% 트립신(Trypsin)을 처리하여 세포를 분리한 후, 50㎖ T-플라스크에 접종하여 48시간 배양하였다. 이 때 세포수는 4.88×10⁶이다. 여기에 적당 농도(50, 100, 150, 200ug/ml)의 넓패추출물을 DMEM 배지에 희석시켜 배양된 멜라노마 세포에 처리하여 37℃에서 3일간 배양하였다. 배양 후 배지를 모두 제거하고, 0.02% EDTA와 0.05% 트립신을 함유한 살린-포스페이트(saline-phosphate) 완충용액(PBS)을 1㎖ 처리하여 세포를 분리시킨 후, 5분간 원심분리하여 세포만을 수집하였다. 5% 트리클로로아세테이트(TCA)를 처리하여 교반하고 원심분리하여 침전된 멜라닌을 살린-포스페이트 완충용액으로 세척하였다. 침전된 멜라닌에 1N NaOH를 처리하여 용해시킨 후 475㎚에서 흡광도를 측정하였다. 멜라닌 농도는 합성 멜라닌(SIGMA Co., USA)의 표준 농도 곡선으로부터 결정하였다. 추출물 농도에 따른 넓패추출물의 멜라민 생성억제 효과는 하기 표 3과 같다.

추출물 농도(㎍/㎖)	멜라닌 생성 저해율(%)
50	80
100	89
150	94
200	98

상기 표 3과 같이, 본 발명에 따른 넓패추출물이 매우 강력한 멜라닌 생성 억제 효과를 나타냄을 알 수 있다.

처방예 1

넓패추출물을 함유한 화장료 중 유연 화장수의 처방예는 다음과 같다.

성 분	함량 (중량%)
넓패추출물	0.1
1,3-부틸렌 글리콜	6.0
소듐 히아루로네이트	2.0
글리세린	4.0
피이지 4000	1.0
폴리 솔베이트 20	0.5
에탄올	10.0
방부제	적량
벤조페논-9	0.05
향	적량
정제수	적량
합 계	100

처방예 2

넓패추출물을 함유한 화장료중 밀크 로션의 처방예는 다음과 같다.

성 분	함량(중량%)
넓패추출물	0.1
스테아린산	0.4
1,3-부틸렌 글리콜	6.0
세토스테아릴 알콜	1.2
글리세린	4.0
글리세릴 스테아레이트	1.0
트리에탄올아민	0.25
토코페릴 아세테이트	3.0
유동 파라핀	5.0
스쿠알란	3.0
마카다미아 너트 오일	2.0
폴리 솔베이트 60	1.5
솔비탄 세스퀴올레이트	0.6
카르복시비닐 폴리머	0.15
방부제	적량
향	적량
정제수	잔량
합 계	100

처방예 3

넓패추출물을 함유한 화장료중 영양 크림의 처방예는 다음과 같다.

성 분	함량(중량%)
넓패추출물	0.1
바셀린	7.0
세토스테아릴 알콜	2.5
글리세릴 스테아레이트	2.0
스테아린산	1.5
유동 파라핀	10.0
밀납	2.0
폴리 솔베이트 60	1.5
솔비탄 세스퀴올레이트	0.8
스쿠알란	3.0
1,3-부틸렌 글리콜	6.0
글리세린	4.0
트리에탄올아민	0.5
토코페릴 아세테이트	0.1
방부제	적량
향	적량
정제수	잔량
합 계	100

처방예 4

넓패추출물을 함유한 화장료 중 에센스의 처방예는 다음과 같다.

성 분	함량(중량%)
넓패추출물	0.1
글리세린	10.0
피이지 1500	2.0
알란토인	0.1
판테놀	0.3
EDTA	0.02
벤조페논-9	0.04
히드록시 에틸 셀룰로오스,	0.1
소듐 히아루로네이트	8.0
카르복시비닐 폴리머	0.2
트리에탄올아민	0.18
옥틸도데세스-25	0.6
에탄올	6.0
방부제, 향, 색소	미량
정제수	잔량
합 계	100

처방예 5

넓패추출물을 함유한 화장료중 맛사지 크림의 처방예는 다음과 같다.

성 분	함량(중량%)
넓패추출물	0.1
글리세릴 스테아레이트	2.0
세토스테아릴 알콜	2.5
스테아린산	1.0
폴리솔베이트 60	1.5
솔비탄 스테아레이트	0.6
이소스테아릴 이소스테아레이트	5.0
스쿠알렌	5.0
광물유	35.0
디메치콘	1.0
산탄검	0.1
히드록시에틸 셀룰로오스	0.12
글리세린	6.0
트리에탄올 아민	0.5
방부제, 향, 색소	적량
정제수	잔량
합 계	100

처방예 6

넓패추출물을 함유한 화장료중 팩 처방예는 다음과 같다.

성 분	함량(중량%)
넓패추출물	0.1
폴리비닐 알콜	15.0
셀룰로오스 검	0.15
글리세린	3.0
피이지 1500	2.0
판테놀	0.4
알란토인	0.1
에탄올	6.0
피이지 40 경화 피마자유	0.3
방부제, 향, 색소	미량
정제수	잔량
합 계	100

실험예 3 : 상기 처방예들로 제조된 화장료들의 미백효능의 평가

본 발명의 넓패 추출물 화장료의 미백효과를 임상시험을 통하여 평가하였다.

40명의 20∼35세 여성을 무작위로 2개군으로 나누어 넓패 추출물 0.1중량%를 함유하고 있는 처방예 3의 영양 크림과 처방예 3에서 넓패 추출물 만을 제외한 성분만으로 제조된 영양 크림 적당량을 각각 매일 아침, 저녁 2회씩 팔의 상박부에 1개월간 바르게 하였다. 컬러메터(Colorimeter)를 이용하여 시험 전과 시험 후의 피부 밝기 변화를 측정하였고, 그 결과를 하기 표 10에 나타내었다.

시험물질	ΔL
넓패 추출물 함유 화장료	3.6
넓패 추출물이 함유되지 않은 화장료	0.8

ΔL= 시험후 피부 밝기 - 시험전 피부 밝기

결과적으로 넓패 추출물은 뚜렷한 미백효과를 나타냄을 확인하였다.

이상과 같이, 본 발명에 따른 넓패추출물을 미백화장료를 예시 및 이해를 돕기 위해 구체적으로 설명하였지만, 이에 한정되지 않는다. 또한, 본 발명의 단순한 변형 내지 변경은 모두 본 발명의 영역에 속하는 것으로 본 발명의 구체적인 보호범위는 첨부된 특허청구범위에 의하여 명확해질 것이다.

상기 실시예 및 비교예를 통해 알 수 있는 바와 같이, 본 발명의 넓패 추출물을 함유하는 미백 화장료는 뛰어난 티로시나아제 활성 저해 효과 및 멜라민 생성 억제효과를 나타내므로 미백에 매우 효과적이므로 현재 화장품 산업에 사용되고 있는 미백제를 대체할 수 있으며, 효용가치가 낮은 해조류의 부가가치를 높일 수 있다.

Claims

넓패(Ishige sinicola) 추출물을 함유하는 미백 화장료.
제1항에 있어서, 상기 넓패 추출물은 건조 및 분쇄된 넓패에 상기 넓패 건조중량에 대해 1∼15배의 물 및/또는 유기용매로 이루어진 추출용매를 첨가하고, 5∼65℃에서 1∼24시간동안 침적시켜 추출물을 얻은 다음, 감압증류를 통해 농축하여 얻어지는 것을 특징으로 하는 넓패 추출물을 함유하는 미백 화장료.
제1항에 있어서, 상기 유기용매는 메탄올, 에탄올, 부탄올, 아세톤, 에틸 아세테이트 및 1,3-부틸렌 글리콜로 이루어진 군으로부터 하나 또는 그 이상으로 선택하는 것을 특징으로 하는 넓패 추출물을 함유하는 미백 화장료.
제1항에 있어서, 상기 넓패 추출물은 화장료의 건조중량에 대하여 0.001∼5.0중량%로 함유되는 것을 특징으로 하는 넓패 추출물을 함유하는 미백 화장료.