KR100359996B1

KR100359996B1 - 감태 추출물을 함유하는 미백 화장료

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Publication number: KR100359996B1
Application number: KR1020000048933A
Authority: KR
Inventors: 이봉호; 최병욱; 유건식; 신현철; 강기정; 김정하; 정해용
Original assignee: 벤트리 주식회사; 주식회사 클라젠
Priority date: 2000-08-23
Filing date: 2000-08-23
Publication date: 2002-11-07
Anticipated expiration: 2020-08-23
Also published as: JP2002080339A; US20020044915A1; KR20020015816A

Abstract

본 발명은 감태(Ecklonia cava) 추출물을 함유하는 미백 화장료에 관한 것으로, 좀 더 자세하게는 건조 및 분쇄된 감태에 추출용매를 첨가하고, 침적하여 추출용액을 얻은 다음, 감압 증류하여 얻어진 감태 추출물을 함유하는 미백 화장료에 관한 것이다. 본 발명의 감태 추출물을 함유하는 미백 화장료는 뛰어난 티로시나아제 활성 저해 효과를 나타내므로 미백에 매우 효과적이다.

Description

감태 추출물을 함유하는 미백 화장료{Whitening cosmetics containing extracts from Ecklonia cava}

본 발명은 감태(Ecklonia cava) 추출물을 함유하는 미백 화장료에 관한 것으로, 좀 더 자세하게는 건조 및 분쇄된 감태에 추출용매를 첨가하고, 침적하여 추출용액을 얻은 다음, 감압 증류하여 얻어진 감태 추출물을 함유하는 미백 화장료에 관한 것이다.

일반적으로 사람의 피부가 검게 변화되는 원인에는 여러가지 요인이 있지만, 주된 원인은 자외선이다. 자외선에 피부가 노출되면, 피부세포의 일종인 멜라노사이트(Melanocyte)내에 멜라닌(Melanin)이 합성되고, 방출되어 피부 표피가 검게 변하게 되는데, 이 과정은 티로시나아제(Tyrosinase)라는 효소가 세포내의 티로신(Tyrosine)에 작용하여 도파퀴논(DOPAquinone)을 생성시키며, 상기 도파퀴논의 자발적인 반응과 일련의 효소반응을 거쳐 공중합체 흑색색소인 멜라닌이 생성되게 된다.

피부가 검게되는 것을 막기 위해서는 멜라닌 생성 과정 중의 일부 반응을 저해함으로써 멜라닌의 생성을 감소시켜 주는 방법이 가장 간단하며 일반적인데, 이를 위해 기존에는 아스콜빈산(Ascorbic acid), 코직산(Kojic acid), 알부틴(Arbutin), 히드로퀴논(Hydroquinone) 및 상백피 추출물 등 각종 식물 추출물이 사용되어 왔다. 상기 물질 중 코직산은 티로시나아제의 활성 부위에 존재하는 구리 이온을 킬레이트시켜 효소활동을 저해하는 작용을 하는데, 성능이 우수한 반면 화장품에 배합시 안정성에 문제점이 높아 화장료로서 적당하지 않다. 한편, 히드로퀴논은 피부에 대한 자극성이 높아 안전성 문제로 현재 화장료로 사용하지 못하고 있으며 국내 및 여러 나라에서 화장품 원료로서 사용이 금지되고 있는 실정이며, 아스코르빅산의 경우 물질 자체의 낮은 안정성과 미백효과의 미미함으로 미백제로서의 효용성에 결함을 갖고 있다. 여러 가지 식물 추출물도 미백효과를 나타내고 있으나 대부분의 식물 추출물의 경우 고농도에서만 비교적 높은 티로시나아제 활성 저해 효과를 나타내고 기존 저농도에서는 저해 효과가 거의 나타나지 않기 때문에 원료의 경제적인 면에서 효율적이지 못하다.

이에 따라, 현재까지 개발된 미백물질의 문제점을 보완할 수 있는 강한 미백효과와 높은 안전성을 가지는 새로운 미백물질의 개발이 절실히 요구되고 있는 실정이다.

이에, 본 발명자들이 광범위한 연구를 수행한 결과 감태 추출물이 매우 뛰어난 티로시나아제 활성 저해 효과를 나타내었고, 이를 미백 화장료로 사용하였을 경우 높은 안정성과 뛰어난 미백 효과를 나타냄을 확인하였으며 이에 기초하여 본 발명을 완성하였다.

따라서, 본 발명의 목적은 강한 미백효과와 높은 안전성을 가지는 감태 추출물을 포함하는 미백 화장료를 제공하는데 있다.

이하, 본 발명을 좀 더 구체적으로 설명하면 다음과 같다.

본 발명에서 사용된 감태 추출물은 티로시나아제 활성 저해 효과가 뛰어나 주로 미백 화장료로 사용할 수 있다.

상기 감태 추출물은 하기의 방법으로 얻는다.

먼저, 제주도 근해에서 채취한 감태의 전부분을 깨끗한 물로 세척하고 음지에서 건조시킨 후 이를 분쇄한다. 분쇄된 감태에 추출용매를 가하여 유효성분을 포함한 추출물을 추출한다. 상기 추출용매로는 물, 메탄올, 에탄올, 부탄올, 에틸 아세테이트, 아세토니트릴, 아세톤, 1,3-부틸렌 글리콜, 및 물과 이들의 혼합물로 이루어진 군으로 부터 하나 또는 그 이상을 선택하여 사용하는 것이 바람직하다. 추출용매의 사용량은 상기 분쇄된 감태의 건조 중량에 대하여 1∼15배, 바람직하게는 5∼10배를 사용한다. 필요에 따라, 수득율을 높이기 위하여 상기 추출과정을 2회 이상 반복하여 실시할 수 있으며, 이때 반복 단계마다 다른 유기용매를 사용할 수도 있다. 상기 추출시에 바람직하게는 침적의 방법이 사용되는데 그 외에 교반 등의 다른 공지의 방법을 사용하는 것도 가능하다. 상기 침적의 조건은 10∼50℃에서 1시간∼15일간인데, 바람직하게는 15∼35℃에서 12∼24시간이다. 전술한 방법으로 얻은 추출용액을 냉각 콘덴서가 달린 증류장치를 이용한 감압 농축을 하여 본 발명에 사용될 감태 추출물을 얻는다.

추출된 물질 내에 함유된 잔사 및 용매를 제거하기 위하여 예를 들면, 원심분리기 및 회전증발 농축기와 같은 분리, 농축수단을 이용할 수 있다. 상기 과정을 거친 추출물을 직접 다양한 응용분야에 사용할 수 있으며, 이러한 경우에는 별도의 추가공정을 요하지 않기 때문에 경제적으로 유리한 장점을 갖는다.

본 발명에서 사용한 감태(Ecklonia cava)는 다년생 해조류로 우리나라 남해안 및 제주도 근해 및 일본에 분포하며, 봄에 가장 성숙한다. 감태의 줄기는 원주상이며 충분히 자란 것은 1 m 이상되는 것도 있다. 중앙부가 다소 굵고 어릴 때는 다실질이나 후에는 중앙부가 다소 중공으로 된다. 점액강도는 줄기의 피층하에 환상으로 1층 배열되어 있다. 줄기의 상부는 점차 편평하게 되고 양측에서 우상엽이 나고 여기서 다시 호생한 우상의 소엽편이 난다. 중앙엽은 좀 두터워서 3∼5 ㎜가 된다. 엽면에는 주름이 없다. 색은 갈색인데 건조하면 흑색으로 되고 질은 혁질이다. 점심대의 깊은 곳에 생육하며, 유체는 봄에 나타나고 초년의 몸은 줄기 5∼10 ㎝, 지름 5 ㎜, 중앙엽의 길이는 20∼30 ㎝, 폭은 4 ㎝ 정도 되며, 2년째의 가을에서 겨울 동안 중앙엽에 형성된 자낭군에서 포자를 방출한 후로는 중앙엽이 소실되고 일단 줄기만으로 되었다가 곧 줄기의 꼭대기에서 원래 구엽이었던 자리에 있던 중앙엽은 새로운 중앙엽으로 바뀌어진다. 따라서, 감태가 충분히 생장하기 위해서는 2, 3년의 기간이 필요하다.

상기 감태는 공지에 다양한 용도로 사용되어 왔으나, 그 추출물을 미백물질로 사용한 예는 없었으며, 본 발명의 감태 추출물을 함유하는 미백 화장료는 미백효과 및 안정성이 뛰어나다.

본 발명의 감태 추출물을 함유하는 화장료로는 기초제품 화장료(화장수, 크림, 에센스, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 보디 오일), 색조제품 화장료(화운데이션, 립스틱, 마스카라, 메이크업 베이스), 두발제품 화장료(샴푸, 린스, 헤어콘디셔너, 헤어젤) 등이 있으며, 상기 미백 화장료는 하기 처방예의 조성으로 통상의 화장료 제조 방법에 의해 제조될 수 있다.

본 발명의 미백 화장료는 상기 감태 추출물을 0.001∼5중량%, 바람직하게는 0.005∼1중량% 함유하며, 0.001중량% 미만일 경우에는 그 효과가 미미하며, 5중량%를 초과할 경우에는 경제적으로 비효율적이다.

이하, 실시예, 실험예, 비교예 및 처방예를 통하여 본 발명을 좀 더 구체적으로 살펴보지만, 이에 본 발명의 범주가 한정되는 것은 아니다.

실시예 1

정제수로 세척하고 건조시킨 다음 2∼3 ㎝의 입자로 분쇄한 감태시료 조각 1 ㎏을 물 9 ℓ에 넣고 15∼25℃에서 12∼24시간 동안 추출한 후 와트만 5번 여과지로 여과하였다. 상기 추출물은 냉각 콘덴서가 달린 증류장치(Buich, 스위스)를 이용하여 30∼40℃에서 감압 농축하여 건조된 감태 추출물 387g(건조중량)을 얻었다.

실시예 2∼15

각각 하기 표 1에 기재된 추출용매를 사용한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일한 방법으로 건조시킨 감태를 얻었으며, 건조 중량은 하기 표 1에 나타내었다.

구분	용 매	건조중량(g)
실시예 1	물	387
실시예 2	10% 에탄올	362
실시예 3	20% 에탄올	325
실시예 4	30% 에탄올	350
실시예 5	40% 에탄올	337
실시예 6	50% 에탄올	350
실시예 7	60% 에탄올	312
실시예 8	70% 에탄올	300
실시예 9	80% 에탄올	238
실시예 10	90% 에탄올	263
실시예 11	100% 에탄올	51
실시예 12	100% 메탄올	178
실시예 13	아세톤	14
실시예 14	에틸아세테이트	10
실시예 15	부탄올	15

실험예 1

본 발명에 따른 감태 추출물의 티로시나아제 활성 저해 효과 측정

티로시나아제는 버섯에서 분리 및 정제된 것으로 시그마사(Sigma, 미국)에서 구입하여 사용하였다. 기질인 티로신(tyrosin)은 0.05 M 인산나트륨 완충용액(pH 6.8)에 녹여 0.1 ㎎/㎖의 농도로 사용하였다.

실시예 1∼15에서 얻은 건조된 감태 추출물을 각각 1,3-부틸렌글리콜 수용액에 고농도로 용해시킨 다음, 다시 인산나트륨 완충용액에 각각 30, 60, 150, 및 300 ㎍/㎖ 농도로 희석하여 추출물 시료액으로 사용하였다. 상기 티로신 용액 0.5 ㎖를 시험관에 넣고 여기에 추출물 시료액 0.5 ㎖를 가한 다음 37℃ 항온기에서 10분간 방치한 후 250 U/㎖ 티로시나아제 용액 0.5 ㎖를 넣고 다시 37℃에서 10분간 반응시켰다. 대조군의 경우 상기 각 추출물 시료액 대신 완충용액을 0.5 ㎖ 넣고 동일한 반응을 수행하였다. 반응이 종료된 후 상기 시험관을 얼음 위에 놓아 급냉시켜 효소 반응을 완전히 중지시키고 분광광도계(Spectrophotometer)로 파장 475㎚에서의 흡광도를 측정하였다.

상기 추출물의 티로시나아제 활성 저해 효과는 하기 수학식 1로 구하였고, 그 결과는 하기 표 2에 나타내었다.

사용 추출물	저해효과(%)
사용 추출물	10 (㎍/㎖)	20 (㎍/㎖)	50 (㎍/㎖)	100 (㎍/㎖)
실시예 1	12.34	14.56	15.82	39.56
실시예 2	11.39	16.46	26.27	35.13
실시예 3	16.60	31.58	47.37	61.94
실시예 4	27.12	35.88	56.21	72.32
실시예 5	30.06	45.57	61.39	74.37
실시예 6	35.44	50.32	70.25	82.00
실시예 7	18.04	36.71	58.86	72.47
실시예 8	39.23	48.34	67.96	82.04
실시예 9	40.88	50.28	66.30	78.45
실시예 10	43.65	56.637	73.76	82.87
실시예 11	38.67	58.56	77.07	88.12
실시예 12	29.79	47.61	64.63	81.38
실시예 13	53.72	63.30	78.99	87.50
실시예 14	31.91	48.94	54.52	66.49
실시예 15	23.94	47.61	58.24	72.87

상기 표 2에 나타난 바와 같이, 감태 추출물은 높은 티로시나아제 활성 저해 효과를 나타내었음을 확인할 수 있다.

비교예 1

감태 추출물과 기존 미백 물질의 티로시나아제 저해 효과 비교

감태 추출물 및 기존 미백 물질의 티로시나아제 활성 저해효과를 실험예 1과 동일한 방법으로 각각 측정하였으며 IC₅₀값으로 결과를 비교하였다. 그 결과는 하기 표 3에 나타내었다. 여기서 IC₅₀값은 티로시나아제 활성을 50% 억제하기 위해 필요한 시료의 농도를 말한다. 본 발명에서 사용하는 감태 추출물과의 활성 비교를 위한 식물 추출물로는 실시예 1과 동일한 방법으로 얻은 상백피(비교예 1), 감초(비교예 2), 및 오미자(비교예 3)의 추출물을 사용하였으며, 기존의 화학 물질로는 알부틴(Albutin : 비교예 4), 코직산(Kojic acid : 비교예 5), 및 아스코르빅산(Ascorbic acid : 비교예 6)을 사용하였다.

사용한 미백물질	IC₅₀(㎍/㎖)
감태 추출물(실시예10)	14.89
상백피 추출물(비교예1)	17.87
감초 추출물(비교예2)	52.28
오미자 추출물(비교예3)	29.04
알부틴(비교예4)	68.32
코직산(비교예5)	6.21
아스코르빅산(비교예6)	70.65

표 3에 나타난 바와 같이, 본 발명에서 사용되는 감태 추출물이 조추출물(crude extract)임에도 불구하고 기존의 미백물질들보다 매우 높은 티로시나아제 활성 저해 효과를 나타냄을 확인하였다.

실험예 2

감태 추출물의 멜라닌 생성 억제 효과

멜라노사이트로는 마우스 유래 B-16 멜라노마(ATCC CRL 6323) 세포주를 사용하였다.

50 ㎖ T-플라스크 상에서 포도당 4.5 g/ℓ, 10% 혈청, 1 % 항생제가 함유된 DMEM 배지에 상기 멜라노마 세포를 접종한 다음, 5% CO₂, 37℃ 조건하에서 24시간 동안 배양하였다. 상기 배양이 끝난 후 0.02% EDTA와 0.05% 트립신을 함유한 인산완충용액(PBS) 1 ㎖을 첨가하여 세포를 분리하고, 50 ㎖ T-플라스크에서 상기와 동일한 배지에 접종하여 48시간 배양하였다. 세포수가 4.88 × 10⁶에 도달하면 DMEM 배지에 희석시킨 감태 추출물을 각각 50, 100, 150, 및 200 ㎍/㎖ 농도로 세포에 처리한 다음 5% CO₂, 37℃에서 3일간 배양하였다. 배양 후 배양 배지를 모두 제거하고, 상기와 동일한 방법으로 세포를 분리시킨 후, 5분간 원심분리하여 세포만을 모았다. 모은 세포에 5% 트리클로로아세테이트(TCA)를 처리하여 교반하고 원심분리한 다음 침전된 멜라닌을 인산완충용액으로 세척하였다. 침전된 멜라닌에 1N NaOH를 처리하여 용해시킨 후 475 ㎚에서 흡광도를 측정하였고, 멜라닌 농도는 합성 멜라닌(SIGMA Co., USA)의 표준 농도 곡선을 기준으로 결정하였으며, 그 결과는 하기 표 4에 나타내었다.

감태추출물 사용농도(㎍/㎖)	멜라닌 생성 저해율(%)
50	74.8
100	87.9
150	92.6
200	94.3

표 4에 나타난 바와 같이, 본 발명의 감태 추출물은 매우 강력한 멜라닌 생성 억제 효과를 나타냄을 확인하였다.

처방예 1

감태 추출물을 함유한 화장료 중 유연 화장수의 처방예는 하기 표 5와 같다.

성 분	함량 (중량%)
감태 추출물	0.1
1,3-부틸렌 글리콜	6.0
소듐 히아루로네이트	2.0
글리세린	4.0
피이지 4000	1.0
폴리 솔베이트 20	0.5
에탄올	10.0
방부제	적량
벤조페논-9	0.05
향	적량
정제수	적량
합 계	100

처방예 2

감태 추출물을 함유한 화장료 중 밀크 로션의 처방예는 하기 표 6과 같다.

성 분	함량(중량%)
감태 추출물	0.1
스테아린산	0.4
1,3-부틸렌 글리콜	6.0
세토스테아릴 알콜	1.2
글리세린	4.0
글리세릴 스테아레이트	1.0
트리에탄올아민	0.25
토코페릴 아세테이트	3.0
유동 파라핀	5.0
스쿠알란	3.0
마카다미아 너트 오일	2.0
폴리 솔베이트 60	1.5
솔비탄 세스퀴올레이트	0.6
카르복시비닐 폴리머	0.15
방부제	적량
향	적량
정제수	잔량
합 계	100

처방예 3

감태 추출물을 함유한 화장료중 영양 크림의 처방예는 하기 표 7과 같다.

성 분	함량(중량 %)
감태 추출물	0.1
바셀린	7.0
세토스테아릴 알콜	2.5
글리세릴 스테아레이트	2.0
스테아린산	1.5
유동 파라핀	10.0
밀납	2.0
폴리 솔베이트 60	1.5
솔비탄 세스퀴올레이트	0.8
스쿠알란	3.0
1,3-부틸렌 글리콜	6.0
글리세린	4.0
트리에탄올아민	0.5
토코페릴 아세테이트	0.1
방부제	적량
향	적량
정제수	잔량
합 계	100

처방예 4

감태 추출물을 함유한 화장료 중 에센스의 처방예는 하기 표 8과 같다.

성 분	함량 (중량%)
감태 추출물	0.1
글리세린	10.0
피이지 1500	2.0
알란토인	0.1
판테놀	0.3
이.디.티이.에이(EDTA)	0.02
벤조페논-9	0.04
히드록시 에틸 셀룰로오스,	0.1
소듐 히아루로네이트	8.0
카르복시비닐 폴리머	0.2
트리에탄올아민	0.18
옥틸도데세스-25	0.6
에탄올	6.0
방부제, 향, 색소	미량
정제수	잔량
합 계	100

처방예 5

감태 추출물을 함유한 화장료중 맛사지 크림의 처방예는 하기 표 9와 같다.

성 분	함량 (중량%)
감태 추출물	0.1
글리세릴 스테아레이트	2.0
세토스테아릴 알콜	2.5
스테아린산	1.0
폴리솔베이트 60	1.5
솔비탄 스테아레이트	0.6
이소스테아릴 이소스테아레이트	5.0
스쿠알렌	5.0
광물유	35.0
디메치콘	1.0
산탄검	0.1
히드록시에틸 셀룰로오스	0.12
글리세린	6.0
트리에탄올 아민	0.5
방부제, 향, 색소	적량
정제수	잔량
합 계	100

처방예 6

감태 추출물을 함유한 화장료중 팩 처방예는 하기 표 10과 같다.

성 분	함량 (중량%)
감태 추출물	0.1
폴리비닐 알콜	15.0
셀룰로오스 검	0.15
글리세린	3.0
피이지 1500	2.0
판테놀	0.4
알란토인	0.1
에탄올	6.0
피이지 40 경화 피마자유	0.3
방부제, 향, 색소	미량
정제수	잔량
합 계	100

실험예 3

본 발명 화장료의 미백효능 평가

본 발명의 감태 추출물 화장료의 미백효과를 임상시험을 통하여 평가하였다.

40명의 20∼35세 여성을 무작위로 2개군으로 나누어 감태 추출물 0.1중량%를함유하고 있는 처방예 3의 영양 크림과 처방예 3에서 감태 추출물 만을 제외한 성분만으로 제조된 영양 크림 적당량을 각각 매일 아침, 저녁 2회씩 팔의 상박부에 1개월간 바르게 하였다. 컬러메터(Colorimeter)를 이용하여 시험 전과 시험 후의 피부 밝기 변화를 측정하였고, 그 결과를 하기 표 11에 나타내었다.

감태 추출물 함유 화장료의 미백효과

시험물질	ΔL
감태 추출물 함유 화장료	3.6
감태 추출물이 함유되지 않은 화장료	0.8

ΔL= 시험후 피부 밝기 - 시험전 피부 밝기

결과적으로 감태 추출물은 뚜렷한 미백효과를 나타냄을 확인하였다.

실시예에서 본 바와 같이, 본 발명의 감태 추출물을 함유하는 미백 화장료는 뛰어난 티로시나아제 활성 저해 효과를 나타내므로 미백에 매우 효과적이다.

Claims

감태(Ecklonia cava) 추출물을 함유하는 미백 화장료.
제1항에 있어서, 상기 감태 추출물은 건조 및 분쇄된 감태에 상기 감태 건조중량에 대해 1∼15배의 물 및/또는 유기 추출용매를 첨가하고, 10∼50℃에서 1시간∼15일간 침적 또는 교반하여 추출용액을 얻은 다음, 감압 증류하여 얻어지는 것을 특징으로 하는 감태 추출물을 함유하는 미백 화장료.
제1항에 있어서, 상기 추출용매는 물, 메탄올, 에탄올, 부탄올, 에틸 아세테이트, 아세토니트릴, 아세톤, 1,3-부틸렌 글리콜, 및 물과 이들의 혼합물로 이루어진 군으로 부터 하나 또는 그 이상을 선택하여 사용하는 것을 특징으로 하는 감태 추출물을 함유하는 미백 화장료.
제1항에 있어서, 상기 감태 추출물은 화장료의 건조중량에 대하여 0.001∼5중량%로 함유되는 것을 특징으로 하는 감태 추출물을 함유하는 미백 화장료.
제4항에 있어서, 상기 감태 추출물은 화장료의 건조중량에 대하여 0.001∼1 중량%로 함유되는 것을 특징으로 하는 감태 추출물을 함유하는 미백 화장료.