KR20020066476A - 펩타이드 유도체의 제조방법 - Google Patents

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KR20020066476A
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쥬가이 세이야쿠 가부시키가이샤
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Abstract

화학식 1의 펩타이드 유도체를 더욱 간편하고, 높은 수율로 제조할 수 있는 공업적으로 유용한 제조방법이 제공된다. 하기 화학식 1의 펩타이드 유도체는 모틸린 리셉터 안타고니스트 작용을 가지며 위, 장관질환의 약물로서 유용하다.
[화학식 1]
(상기식에서, R1은 수소원자, 또는 탄소수 1∼4의 직쇄 또는 분지쇄상의 알킬기를 나타내고, R2는 수소원자, 또는 메틸기를 나타내고, R3은 할로겐원자를 나타낸다.)

Description

펩타이드 유도체의 제조방법 {Preparation of peptide derivatives}
본 발명은 하기 화학식(1)로 표시되는 신규한 펩타이드 유도체의 새로운 제조방법에 관한 것이다.
(상기식에서, R1은 수소원자, 또는 탄소수 1∼4의 직쇄 또는 분지쇄상의 알킬기를 나타내고, R2는 수소원자, 또는 메틸기를 나타내고, R3은 할로겐원자를 나타낸다.)
국제 공개특허 제0044770호에는 상기 화학식 1의 화합물의 모틸린 리셉터 안타고니스트 작용 및 제조 방법에 대해 기술되어 있다.
국제 공개특허 제0044770호에서는, 상기 화학식 1 의 화합물은,3-tert-부틸-L-티로신 아마이드유도체에 아민 보호기로 보호된 N-메틸-L-발린 를 축합시키고 보호기를 제거하여 N-메틸-L-발린-3-tert-부틸-L-티로신 아마이드유도체를 얻고 다음으로 이 화합물과 아민 보호기로 보호된 N-메틸-L-페닐알라닌 유도체를 반응시키고 아민 보호기를 탈보호시킴으로써 화학식 1 의 화합물을 제조한다. 상기 방법에서는, N-메틸-L-발린과 N-메틸-L-페닐알라닌 유도체의 아미노 말단기를 각각 메틸화한 후, 아민 보호기로 보호시킨 화합물을 출발물질로 사용해야하는 비경제성과 동일한 반응을 반복해야하는 비효율성이 있다.
국제 공개특허 제0044770호에는, 화학식 (1)의 펩타이드 유도체의 제조방법이 예시되고 있으나, 더욱 간편하고, 높은 수율을 가지며, 공업적으로 유용한 제조방법이 요구되고 있다.
본 발명자들은 상기과제를 달성하기 위해 예의 연구를 거듭한 결과, 상업적으로 구입이 용이하고 비교적 값이 싼 출발물질인 L-발린 메틸 에스테르 염산염과 L-페닐알라닌유도체의 아미노기를 적당한 아민 보호기로 보호시킨 후, coupling Reagent를 사용하여 염기성 조건하에 반응시키면 아민 보호기로 보호된 L-페닐알라닐-L-발린 메틸 에스테르유도체가 얻어진다. 이 화합물에 메틸화 시약을 사용하여 염기성 조건하에 반응시키면 L-발린 및 L-페닐알라닌유도체의 각각의 아미노기 말단을 동시에 디메틸화(디메틸화)시킬 수 있는 특징이 있으므로 아민 보호기로 보호된 N-메틸-L-페닐알라닐-N-메틸-L-발린 메틸 에스테르유도체를 얻을 수 있었다. 이 화합물을 가수분해하면 아민 보호기로 보호된 N-메틸-L-페닐알라닐-N-메틸-L-발린유도체가 얻어지며, 이 화합물을 3-tert-부틸-L-티로신 아마이드유도체와 적절한 coupling Reagent를 사용하여 염기성 조건하에 반응시킨 후 탈보호시킴으로써, 목적하는 화학식 1 의 화합물을 간편하면서도 공업적으로 가능하고 경제성이 높은 수율로 제조할 수 있는 방법을 발견하여 본 발명을 완성시켰다.
본 발명은
(i) 하기 화학식(Ⅱ)의 화합물을 하기 화학식(Ⅲ)의 화합물과 반응시켜서 하기 화학식(4)의 화합물을 얻는 제 1의 축합공정,
(ii) 수득된 화학식(4)의 화합물을 N-메틸화하여 하기 화학식(5)의 화합물을 얻는 공정,
(iii) 하기 화학식(5)의 화합물과 화학식(6)의 화합물과 반응시켜서 화학식(7)의 화합물을 얻는 제 2의 축합공정, 및
(iv) 하기 화학식(7)의 화합물의 아미노 보호기의 탈보호공정을 포함하는 것을 특징으로 하는, 하기 화학식(1)로 표시되는 펩타이드 유도체를 제조하는 방법을 제공한다.
[화학식 1]
(상기식들에서, R1은 수소원자, 또는 탄소수 1∼4의 직쇄 또는 분지쇄상의 알킬기를 나타내고, R2는 수소원자, 또는 메틸기를 나타내고, R3은 할로겐원자를 나타내고, P는 아미노보호기를 나타낸다.)
바람직한 구현 양식의 하나로서, 본 발명의 방법은 하기와 같이 구성될 수도 있다:
(i) 제 1 축합공정에서, 화학식(10)의 화합물과 화학식(3)의 화합물을 1-(3-(디메틸아미노)프로필)-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드, 1-히드록시벤조트리아졸 히드레이트를 이용하여 축합시켜서 화학식(11)의 화합물을 얻고,
(ii) N-메틸화공정에서, 화학식(11)의 화합물의 2개의 아미노기를 동시에 메틸화한 후, 메틸 에스테르기의 메틸기를 제거하여 화학식(12)의 화합물을 얻고,
(iii) 제 2 축합공정에서, 화학식(12)의 화합물과 화학식(6)의 화합물을 1-(3-(디메틸아미노)프로필)-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드, 1-히드록시벤조트리아졸 히드레이트를 이용하여 축합시켜, 화학식(13)의 화합물을 얻고,
(iv) 제 2 탈보호공정에서, 화학식(13)의 화합물의 tert-부톡시카르보닐기를 제거한다.
(상기식들에서, R1, R2및 R3은 앞에서 정의된 바와 같고, Boc는 tert-부톡시카르보닐기를 나타낸다.)
화학식 (5)의 화합물은 화학식 (2)의 화합물로부터 제 1 축합 공정 및 N-메틸화 공정을 거쳐 제조되며, 이의 구체적인 반응 경로로서 다음과 같은 방법들이 예시된다:
[방법 1]
화학식(2)의 화합물을 염기 존재하에 에틸클로로포포르메이트와 반응시키고, 생성된 화합물을 L-발린과 반응시켜서 화학식(8)를 얻은 후, N-메틸화하여화학식(5)의 화합물을 얻는 방법 (하기 반응식 1 참조):
[방법 2]
화학식(4)의 화합물에서 메틸 에스테르기의 메틸기를 제거하여 화학식(8)의 화합물을 얻은 후 아미노기를 디메틸화하여 화학식(5)의 화합물을 얻는 방법 (하기 반응식 2의 경로 1 참조),
[방법 3]
화학식(4)의 화합물을 디메틸화하여 화학식(9)의 화합물을 얻은 후, LiOH와 물로 처리하여 화학식(5)의 화합물을 얻는 방법 (하기 반응식 2의 경로 3 참조),
[방법 4]
화학식(4)의 화합물을 디메틸화하고 THF/물로 처리하여 화학식(5)의 화합물을 얻는 방법 (하기 반응식 2의 경로 2 참조).
상기의 제조 방법 1~4 에 있어서, 화학식(1)에서 R1이 에틸기이고, R2가 수소원자이고, R3이 불소원자인 것이 바람직하다.
본 발명에 있어서 화학식(1)의 화합물은, 모틸린 리셉터 안타고니트작용을 가지며, 의약으로서 유용한 신규한 펩타이드유도체이다.
화학식(1)∼(13)의 화합물에 있어서, R1으로 표시되는 탄소수 1∼4의 직쇄 또는 분지쇄상의 알킬기들 중에서, 메틸기, 에틸기가 바람직하고 에틸기가 특히 바람직하다.
R2로서는 수소원자, 메틸기가 바람직하고 특히 수소원자가 바람직하다.
R3의 할로겐원자로서는 불소원자, 염소원자, 브롬원자가 사용되며, 불소원자, 염소원자가 바람직하고, 불소원자가 특히 바람직하다.
화학식(1)의 화합물에서 R1이 에틸기일때는 R2가 수소원자, R3이 불소원자인 것이 바람직하다.
본 발명의 화합물에 있어서, 카르복실 에스테르로서 메틸 에스테르를 주로 사용하지만, 다른 저급 알킬기, 또는 당업계에 통상적으로 사용되는 보호용 에스테르 형성기를 사용하는 것도 본 발명의 범주를 벗어나지 않는다.
P로 표시되는 아민 보호기로서는 당업계에 공지된 아민 보호기를 사용할 수 있으며, 그 예로서 벤질옥시카르보닐기, tert-부톡시카르보닐기, 9-플루오레닐메틸옥시카르보닐기, 아릴옥시카르보닐기, 벤조일기, 아세틸기, 트리플루오로아세틸기, 벤젠술포닐기, p-톨루엔술포닐기 등이 있고, 벤질옥시카르보닐기, tert-부톡시카르보닐기, 9-플르오레닐메틸옥시카르보닐기, 아릴옥시카르보닐기가 바람직하고, 벤질옥시카르보닐기, tert-부톡시카르보닐기가 특히 바람직하다.
본 발명의 반응경로를 반응식 1∼4 로서 아래에 표시하였다. 아래의 반응식 중에서 R1, R2, R3, P 및 Boc는 상기와 같은 의미를 나타낸다.
각각의 반응식에 대하여 아래와 같이 설명한다. 또한, 아래의 설명에 기재된 후처리란, 일반적인 유기합성 반응 후에 수행하는 유기용매에 의한 추출조작, 물, 산성 수용액, 염기성 수용액, 포화 식염수 등에 의한 추출액의 세정조작, 추출액의 건조조작, 불용물의 여과에 의한 제거조작, 용매의 감압하에 증류제거 조작 등, 각 반응에 따르는 일련의 반응 후의 처리과정을 나타낸다.
이하에, 방법 1~4에 대하여 상술한다.
[방법 1]
하기 반응식 1에 따르면, 화학식(2)의 화합물의 카르복실기를 활성화 에스테르로 만든 다음, 보호되지 않은 L-발린과 반응시켜서 화학식 (8)의 화합물을 수득하고, 이를 N-메틸화하여 화학식(5)의 화합물을 얻는다.
화학식(2)의 N-보호된 아미노산은 상업적으로 구입이 가능하다. 디펩티드화를 위해, 화학식(2)의 화합물의 카르복실기를 유기용매 중에서 트리에틸아민, 디이소프로필아민, N-메틸모르폴린 등의 염기 존재 하에 메틸 클로로포르메이트, 에틸 클로로포르메이트, 이소프로필 클로로포르메이트 등으로 활성화한 다음 4-니트로페놀 이나 1-히드록시벤조트리아졸 등을 가하여 활성화된 에스테르를 만드는 것이 가능하다. 유기용매로는 1,4-디옥산, 테트라히드로푸란, 에틸 아세테이트, tert-부틸 메틸 에테르, N,N-디메틸포름아미드, N,N-디메틸아세트아미드 등이 유용하다. 바람직하게는 에틸 아세테이트 용매에 N-메틸모르폴린과 에틸 클로로포르메이트를 사용하고 4-니트로페놀을 가하여 활성화된 에스테르를 만들고 L-발린을 축합시킨다. 이 반응에서, 에틸 클로로포르메이트의 사용량은 화학식(2)의 화합물에 대하여 1당량 내지 1.5당량이 좋고, N-메틸모르폴린의 사용량은 2당량 내지 2.5당량이 좋다. 4-니트로페놀의 사용량은 화학식(2)의 화합물에 대하여 1당량 내지 1.2당량이 좋고, L-발린의 사용량은 1당량 내지 1.2당량이 좋다. 반응온도는 -10℃에서 70℃가 바람직하고, 0℃에서 50℃가 더욱 바람직하다. 반응시간은, 반응온도나 각 화합물의 농도에 따라 다르지만, 1시간에서 10시간이 바람직하고, 2시간에서 5시간이 더욱 바람직하다.
화학식(8)의 화합물의 분리는 후처리 후 에틸 아세테이트와 n-헥산으로 재결정하여 얻을 수 있지만 더 이상 정제하지 않고 다음 반응에 사용하는 것이 가능하다.
[방법 2~4]
하기 반응식 2에 대하여, 화학식(2)의 화합물을 출발물질로 할 때 반응 경로(1), (2) 및 (3)의 세 경로를 통하여 화학식(5)의 화합물을 얻는다.
화학식(3)의 화합물은 상업적으로 구입이 가능한데 염산 염으로 시판되는 경우가 많다.
축합 반응에 대해서는, 아래에 나열한 방법중의 어느 것에 의해서, 화합물(2)의 카르보닐기를 활성화하여 축합하는 것이 가능하지만, 이런 방법에 한정하는 것은 아니다. 1,3-디이소프로필카르보디이미드를 사용하는 방법, 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드를 사용하는 방법, 디시클로헥실카르보디이미드를 사용하는 방법, 디페닐포스포릴 아자이드를 사용하는 방법, 2-클로로-1-메틸피리디늄 요도다이드를 사용하는 방법, 벤조트리아졸-1-일옥시트리스(디메틸아미노)포스포늄 헥사플루오로포스페이트를 사용하는 방법, 클로로-N,N,N',N'-비스(테트라메틸렌)포름아미디늄 헥사플루오로포스페이트를 사용하는 방법, 브로모트리스피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트를 사용하는 방법, 클로로트리스피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트를 사용하는 방법,O-(7-아자벤조트리아졸-1-yl)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트를 사용하는 방법, 이들 시약과 1-히드록시벤조트리아졸 혹은 N-히드록시숙신이미드를 병용해서 사용하는 방법, 이소부틸 클로로포르메이트를 사용하는 혼합산 무수물법, 또는 카르보닐기를 펜타플루오로페닐 에스테르 화 하는 방법, 카르보닐기를 N-히드록시 숙신이미드 에스테르화 하는 방법, 그리고 이들과 1-히드록시벤조트리아졸을 병용하는 방법 등이 있다. 이들 축합 방법 및 그 반응조건은 화학식(2)에 표기된 화합물의 아미노 보호기의 종류에 대해 상호 선택적이다.
화학식(2)의 화합물의 아미노 보호기(P)가 tert-부톡시카르보닐기일 때 바람직한 축합제는 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드와 1-히드록시벤조트리아졸의 혼합물, 2-클로로-1-메틸피리디늄 요도다이드 등이다. 여기서 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드는 염산염으로 사용되며, 1-히드록시벤조트리아졸은 1수화물로도 좋다. 이들 축합제의 사용량은 화학식(2)의 화합물에 대하여 1당량 내지 1.5당량이 좋으며 1.1당량 내지 1.2당량이 바람직하다. 1-히드록시벤조트리아졸 히드레이트의 사용량은 1당량 이하도 좋다.
화학식(2)의 화합물의 아미노 보호기(P)가 tert-부톡시카르보닐기일 때 비양자성 용매에 대해서는 1,4-디옥산, 테트라히드로푸란, 에틸 아세테이트, 에틸 에테르, tert-부틸 메틸 에테르, N,N-디메틸포름아미드, N,N-디메틸아세트아미드, N-메틸피페리돈, 디클로로메탄, 1,2-디클로로에탄, 아세토니트릴 등이 유용하다. 이 중에서도 테트라히드로푸란, 에틸 아세테이트 등이 바람직하다. 함수 용매로는 함수 테트라히드로푸란이 좋으며 테트라히드로푸란에 대해서 20%이하가 가능하며,10%이하가 바람직하다. 화학식(2)의 화합물의 아미노 보호기(P)가 tert-부톡시카르보닐기일 때 염기에 대해서는 트리에틸아민, 디이소프로필아민, N-메틸모르폴린, 피리딘, 4-(N,N-디메틸아미노)피리딘 등이 가능하며, 트리에틸아민을 사용하는 것이 더욱 바람직하다. 트리에틸아민의 사용량은 화학식(2)의 화합물에 대하여 1당량 내지 3당량이 좋으며 1.1당량 내지 2.5당량이 더욱 바람직하다. L-발린 메틸 에스테르 염산염의 사용량은 1당량 내지 1.5당량이 좋으며 1.0당량 내지 1.2당량이 더욱 바람직하다.
반응온도는 0℃에서 50℃가 바람직하고, 실온이 더욱 바람직하다. 반응시간은, 반응온도나 각 화합물의 농도에 따라 다르지만, 1시간에서 10시간이 바람직하고, 2시간에서 4시간이 더욱 바람직하다.
화학식(8)의 화합물의 분리는 후처리 후 에틸 아세테이트/n-헥산, 에틸 아세테이트/n-헵탄, 에틸 에테르/n-헥산 등으로 재결정하여 정제 분리하는 것이 가능하다.
상기 반응 경로 (1)에서, 가수분해를 하면 화학식(8) 의 화합물을 얻을 수 있고 이것을 N,N-디메틸화하면 화학식(5)의 화합물을 얻는다. 가수분해를 위해서, 메탄올, 에탄올, 이소프로필 알코올 등의 수용액 용매 중에서 수산화나트륨, 수산화칼륨, 수산화리튬, 또는 수산화리튬 수화물 등의 염기 존재 하에서 교반하면 화학식(8) 의 화합물을 얻을 수 있다. 수용액 용매로는 메탄올 수용액이 좋으며 메탄올에 대해서 50%이하가 가능하며, 35%이하가 바람직하다. 반응온도는 0℃에서 50℃가 바람직하고, 실온(20 - 30 ℃)이 더욱 바람직하다. 반응시간은, 반응온도나 각 화합물의 농도에 따라 다르지만, 10시간에서 24시간이 바람직하고, 12시간에서 20시간이 더욱 바람직하다. 화학식(8)의 화합물의 N,N-디메틸화 반응을 위해서, 비양자성용매인 1,4-디옥산, 테트라히드로푸란, tert-부틸 메틸 에테르, N,N-디메틸포름아미드, N,N-디메틸아세트아미드, N-메틸피페리돈 등에서 염기 존재 하에 요오도메탄, 디메틸술페이트, 메틸-p-톨루엔술포네이트로써 처리하면 화학식(5)의 화합물을 얻는다. 화학식(8)의 화합물의 아미노 보호기(P)가 tert-부톡시카르보닐기일 때 바람직한 용매는 무수 테트라히드로푸란이고 메틸화 시약은 요오도메탄과 메틸-p-톨루엔술포네이트가 바람직하다. 메틸화 시약의 사용량은 화학식(8)의 화합물에 대하여 3당량 내지 10당량이 좋으며 5당량 내지 8당량이 더욱 바람직하다. 염기로는 수소화나트륨 (NaH), 포타슘 tert-부톡사이드, 소듐 tert-부톡사이드 등이 바람직하다. 염기의 사용량은 화학식(8)의 화합물에 대하여 4당량 내지 8당량이 좋으며 5당량 내지 7당량이 더욱 바람직하다. 반응온도는 0℃에서 50℃가 바람직하고, 실온(20 - 30 ℃)이 더욱 바람직하다. 반응시간은, 반응온도나 각 화합물의 농도에 따라 다르지만, 10시간에서 26시간이 바람직하고, 18시간에서 24시간이 더욱 바람직하다.
상기 반응 경로 (2)에서, 가수분해와 동시에 N,N-디메틸화하면 화학식(5)의 화합물을 얻는다. 가수분해와 동시에 N,N-디메틸화를 하기 위해서, 1,4-디옥산, 테트라히드로푸란, tert-부틸 메틸 에테르, N,N-디메틸포름아미드, N,N-디메틸아세트아미드, N-메틸피페리돈 등의 비양자성 용매에 물을 가하고 염기 존재 하에 요오도메탄, 디메틸술페이트, 메틸-p-톨루엔술포네이트로써 처리하면 화학식(5)의 화합물을 얻는다. 화학식(4)의 화합물의 아미노 보호기(P)가 tert-부톡시카르보닐기일 때 바람직한 용매는 무수 테트라히드로푸란이고 메틸화 시약은 요오도메탄과 메틸-p-톨루엔술포네이트가 바람직하다. 메틸화 시약의 사용량은 화학식(4)의 화합물에 대하여 3당량 내지 10당량이 좋으며 5당량 내지 8당량이 더욱 바람직하다. 물의 사용량은 화학식(4)의 화합물에 대하여 1당량 내지 1.5당량이 좋으며 1당량 내지 1.2당량이 더욱 바람직하다. 염기로는 수소화나트륨 (NaH), 포타슘 tert-부톡사이드, 소듐 tert-부톡사이드 등이 바람직하다. 염기의 사용량은 화학식(4)의 화합물에 대하여 4당량 내지 8당량이 좋으며 5당량 내지 7당량이 더욱 바람직하다. 반응온도는 0℃에서 50℃가 바람직하고, 실온(20 - 30 ℃)이 더욱 바람직하다. 반응시간은, 반응온도나 각 화합물의 농도에 따라 다르지만, 10시간에서 28시간이 바람직하고, 20시간에서 26시간이 더욱 바람직하다.
상기 반응 경로 (3)에서, N,N-디메틸화하면 화학식(9)의 화합물을 얻을 수 있고 이것을 가수분해를 하면 화학식(5)의 화합물을 얻는다. 화학식(4)의 화합물의 N,N-디메틸화 반응을 위해서, 비양자성(aprotic) 용매인 1,4-디옥산, 테트라히드로푸란, tert-부틸 메틸 에테르, N,N-디메틸포름아미드, N,N-디메틸아세트아미드, N-메틸피페리돈 등의 단일 용매 또는 테트라히드로푸란/N,N-디메틸포름아미드, 테트라히드로푸란/N,N-디메틸아세트아미드 등의 혼합 용매에서 염기 존재 하에 요오도메탄, 디메틸술페이트, 메틸-p-톨루엔술포네이트로써 처리하면 화학식(5)의 화합물을 얻는다. 화학식(4)의 화합물의 아미노 보호기(P)가 tert-부톡시카르보닐기일 때 바람직한 용매는 무수 테트라히드로푸란/N,N-디메틸포름아미드의 혼합 용매이고 메틸화 시약은 요오도메탄과 메틸-p-톨루엔술포네이트가 바람직하다. 무수 테트라히드로푸란/N,N-디메틸포름아미드의 혼합 용매로는 테트라히드로푸란에 대해서 N,N-디메틸포름아미드가 50%이하가 가능하며, 35%이하가 바람직하다. 메틸화 시약의 사용량은 화학식(4)의 화합물에 대하여 3당량 내지 10당량이 좋으며 5당량 내지 8당량이 더욱 바람직하다. 염기로는 수소화나트륨 (NaH), 포타슘 tert-부톡사이드, 소듐 tert-부톡사이드 등이 바람직하다. 염기의 사용량은 화학식(4)의 화합물에 대하여 4당량 내지 8당량이 좋으며 5당량 내지 7당량이 더욱 바람직하다. 반응온도는 0℃에서 50℃가 바람직하고, 실온(20 - 30 ℃)이 더욱 바람직하다. 반응시간은, 반응온도나 각 화합물의 농도에 따라 다르지만, 10시간에서 26시간이 바람직하고, 18시간에서 24시간이 더욱 바람직하다. 가수분해를 위해서, 메탄올, 에탄올, 이소프로필 알코올 등의 수용액 용매 중에서 수산화나트륨, 수산화칼륨, 수산화리튬, 또는 수산화리튬 수화물 등의 염기 존재 하에서 교반하면 화학식(5) 의 화합물을 얻을 수 있다. 수용액 용매로는 메탄올 수용액이 좋으며 메탄올에 대해서 50%이하가 가능하며, 35%이하가 바람직하다. 반응온도는 0℃에서 50℃가 바람직하고, 실온(20 - 30 ℃)이 더욱 바람직하다. 반응시간은, 반응온도나 각 화합물의 농도에 따라 다르지만, 10시간에서 24시간이 바람직하고, 12시간에서 20시간이 더욱 바람직하다.
본원발명의 제 2 축합공정 및 탈보호공정은, 하기 반응식 3에 따라서, 화학식(5)의 화합물을 출발물질로 할 때 축합 반응과 탈보호화를 통하여 화학식(1)의 화합물을 얻는 것으로 구성된다.
반응식 3에 대하여, 화학식(5)의 화합물을 출발물질로 할 때 축합 반응과 탈보호화를 통하여 화학식(1)의 화합물을 얻는다. 화학식(6)의 화합물은 공지의 화합물로서 L-티로신으로부터 합성이 가능하다. 화학식(6)의 화합물과의 축합 반응에 대해서는, 아래에 나열한 방법중의 어느것에 의해서, 화합물(5)의 카르보닐기를 활성화하여 축합하는 것이 가능하지만, 이런 방법에 한정하는 것은 아니다. 1,3-디이소프로필카르보디이미드를 사용하는 방법, 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드를 사용하는 방법, 디시클로헥실카르보디이미드를 사용하는 방법, 디페닐포스포릴 아자이드를 사용하는 방법, 2-클로로-1-메틸피리디늄 요도다이드를 사용하는 방법, 벤조트리아졸-1-일옥시트리스(디메틸아미노)포스포늄 헥사플루오로포스페이트를 사용하는 방법, 클로로-N,N,N',N'-비스(테트라메틸렌)포름아미디늄 헥사플루오로포스페이트를 사용하는 방법, 브로모트리스피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트를 사용하는 방법, 클로로트리스피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트를 사용하는 방법,O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트를 사용하는 방법, 이들 시약과 1-히드록시벤조트리아졸 혹은 N-히드록시숙신이미드를 병용해서 사용하는 방법, 이소부틸 클로로포르메이트를 사용하는 혼합 산무수물법 (mixed acid anhydride법), 또는 카르보닐기를 펜타플루오로페닐 에스테르화 하는 방법, 카르보닐기를 N-히드록시 숙신이미드 에스테르화 하는 방법, 그리고 이들과 1-히드록시벤조트리아졸을 병용하는 방법 등이 있다. 이들 축합 방법 및 그 반응조건은 화학식(5)에 표기된 화합물의 아미노 보호기의 종류에 대해 상호 선택적이다.
화학식(5)의 화합물의 아미노 보호기(P)가 tert-부톡시카르보닐기일 때 바람직한 축합제는 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필) 카르보디이미드와 1-히드록시벤조트리아졸의 혼합물, 2-클로로-1-메틸피리디늄 요도다이드 등이다. 여기서 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드는 염산염으로 사용되며, 1-히드록시벤조트리아졸은 1수화물로도 좋다. 이들 축합제의 사용량은 화학식(5)의 화합물에 대하여 1당량 내지 1.5당량이 좋으며 1.1당량 내지 1.2당량이 바람직하다. 1-히드록시벤조트리아졸 히드레이트의 사용량은 1당량 내지 1.5당량이 좋다.
화학식(5)의 화합물의 아미노 보호기(P)가 tert-부톡시카르보닐기일 때 비양자성 용매에 대해서는 1,4-디옥산, 테트라히드로푸란, 에틸 아세테이트, 에틸 에테르, tert-부틸 메틸 에테르, N,N-디메틸포름아미드, N,N-디메틸아세트아미드, N-메틸피페리돈, 디클로로메탄, 1,2-디클로로에탄, 아세토니트릴 등이 유용하다. 이 중에서도 테트라히드로푸란, 에틸 아세테이트 등이 바람직하다. 화학식(5)의 화합물의 아미노 보호기(P)가 tert-부톡시카르보닐기일 때 염기에 대해서는 트리에틸아민, 디이소프로필아민, N-메틸모르폴린, 피리딘, 4-(N,N-디메틸아미노)피리딘 등이 가능하며, 트리에틸아민을 사용하는 것이 더욱 바람직하다. 트리에틸아민의 사용량은 화학식(5)의 화합물에 대하여 1당량 내지 3당량이 좋으며 1.1당량 내지 2.5당량이 더욱 바람직하다. 화학식(6)의 화합물의 사용량은 화학식(5)의 화합물에 대하여 1당량 내지 1.5당량이 좋으며 1 당량 내지 1.1당량이 더욱 바람직하다. 반응온도는 0℃에서 50℃가 바람직하고, 실온이 더욱 바람직하다. 반응시간은, 반응온도나 각 화합물의 농도에 따라 다르지만, 10시간에서 24시간이 바람직하고, 16시간에서 20시간이 더욱 바람직하다. 화학식(7)의 화합물의 분리는 후처리 후 더 이상 정제하지 않고 다음 반응에 사용하는 것이 가능하다.
화학식(7)의 화합물의 아미노 보호기(P)의 탈보호화 반응 조건은 아미노 보호기(P)의 종류에 따라 적절한 선택이 가능하다. 아미노 보호기(P)가 벤질옥시카르보닐기일 때 알코올 용매 또는 에틸 아세테이트중에 촉매량의 팔라듐/탄소, 수산화팔라듐/탄소 등을 사용하여 수소화 분해 방법이 가능하고, 아미노 보호기(P)가 tert-부톡시카르보닐기일 때 에틸 아세테이트, 아세토니트릴, 1,2-디메톡시에탄, 디클로로메탄 등의 극성 용매 중에 황산, 메탄술폰산, 염산, 트리플루오로아세트산 등의 산 처리 방법 등이 가능하다. 산의 사용량은 화학식(7)의 화합물에 대하여 1당량 내지 10당량이 좋으며 3당량 내지 7당량이 더욱 바람직하다. 반응온도는 0℃에서 50℃가 바람직하고, 0℃에서 실온이 더욱 바람직하다. 반응시간은 10분에서 10시간이 바람직하고, 30분에서 5시간이 더욱 바람직하다.
화학식(1)의 화합물의 분리는 후처리 후 얻어진 잔사를 알코올/물, 에틸 아세테이트/n-헥산, 디에틸 에테르/n-헥산, tert-부틸 메틸 에테르/n-헥산, 아세토니트릴/n-헥산, 1,2-디메톡시에탄/물 등의 용매 중에서 교반할 때 석출되는 고체를 여과하면 가능하다 (단 n-헥산 대신에 n-헵탄을 사용해도 가능하다).
[실시예]
본 발명은 하기 실시예에 의해 더욱 상세히 설명되지만, 이들로 본 발명이 한정되는 것은 아니다.
실시예 1 : N-(tert-부톡시카르보닐)-L-4-플루오로페닐알라닐-L-발린 메틸 에스테르의 합성
N-(tert-부톡시카르보닐)-L-(4-플루오로페닐)알라닌(14.17 g, 0.05 ㏖)과 L-발린 메틸 에스테르 히드로클로라이드 (9.22 g, 0.055 ㏖)를 테트라히드로푸란 (90 ㎖)와 물 (10 ㎖)에 녹이고 1-히드록시벤조트리아졸 히드레이트 (3.83 g, 0.025 ㏖), 트리에틸아민(8.3 ㎖, 0.06 ㏖)과 1-(3-(디메틸아미노)프로필)-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드 (11.50 g, 0.06 ㏖)를 얼음-물 중탕하에서 가하고 반응물을 실온에서 3시간 동안 교반했다. 반응물에 n-헥산 (60 ㎖)과 에틸 아세테이트 (60 ㎖)를 가하고 물 (40 ㎖), 10% 시트르산 (60 ㎖), 10% NaHCO3(60 ㎖)와 포화 소금물 (50 ㎖)로 각각 세척했다. 유기층을 무수 황산나트륨(30 g)로 건조시키고 여과후 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 에틸 아세테이트 (20 ㎖)와 n-헥산 (200 ㎖)으로 고체화하여 여과하고 건조 시켜서 목적화합물 18.75 g(94.6%)을 얻었다.
1H NMR(CDCl3, 300 M㎐) : δ 0.87(dd, 6H, J=7.11㎐ and 7.23㎐), 1.42(s,9H), 2.11(m, 1H), 3.04(d, 2H, J=7.23㎐), 3.7(s, 3H), 4.3(q, 1H, J=7.31㎐), 4.45(dd, 1H, J=5.32㎐ and 8.67㎐), 5.03(bs, 1H), 6.35(d, 1H, J=8.35㎐), 6.97(t, 2H, J=8.68㎐), 7.18(dd, 2H, J=5.32㎐ and 8.62㎐).
실시예 2 : N-(tert-부톡시카르보닐)-N-메틸-L-4-플루오로페닐알라닐-N-메틸-L-발린 메틸 에스테르의 합성
N-(tert-부톡시카르보닐)-L-4-플루오로페닐알라닐-L-발린 메틸 에스테르 (3.96 g, 0.01 ㏖)와 요오도메탄 (5.0 ㎖, 0.08 ㏖)을 무수 테트라히드로푸란 (60 ㎖)와 무수 N,N-디메틸포름아마이드 (20 ㎖)에 녹이고 60% 수소화나트륨 (1.6 g, 0.04 ㏖)를 n-헥산으로 세척하여 얼음-물 중탕하에서 천천히 가하고 반응물을 실온에서 3시간 동안 교반했다. 반응물에 n-헥산 (200 ㎖)를 가하고 20분간 교반했다. 불용성 고체를 여과하여 제거하고 여액을 물 (100 ㎖), 10% 탄산수소나트륨 (50 ㎖)와 포화소금물 (50 ㎖)로 각각 세척했다. 유기층을 무수 황산나트륨(30 g)으로 건조시키고 여과후 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 진공하에서 건조 시켜 목적화합물 4.12 g(97%)을 얻었다.
1H NMR(CDCl3, 300 M㎐) : (two Rotamers) δ 0.7-1.07(m, 6H), 1.28(dd, 9H, J=4.22㎐ and J=3.36㎐), 2.1-2.3(m, 1H), 2.68-3.00(m, 7H), 3.00-3.20(m, 1H), 3.68(q, 3H, J=2.65㎐), 4.06(d, 0.25H, J=10.3㎐), 4.21(d, 0.25H, J=10.6㎐), 4.81(q, 0.5 H, J=10.8㎐), 4.85-4.98(m, 0.5H), 5.20-5.34(m, 0.5H), 6.87-7.03(m, 2H), 7.06-7.25(m, 2H).
실시예 3 : N-(tert-부톡시카르보닐)-N-메틸-L-4-플루오로페닐알라닐-N-메틸-L-발린 의 합성
N-(tert-부톡시카르보닐)-N-메틸-L-4-플루오로페닐알라닐-N-메틸-L-발린 메틸 에스테르 (3.40 g, 8.0 m㏖)를 메탄올 (30 ㎖)와 물 (10 ㎖)의 혼합용매에 넣고 수산화리튬 (0.96 g, 40 m㏖)를 가하고 반응물을 실온에서 16시간 동안 교반했다. 반응물의 메탄올을 제거하기 위해 감압 하에서 농축시켰다. 잔사를 물 (50 ㎖)로 용해시키고 2N 염산용액(21 ㎖)을 서서히 가하여 pH 약 3.5까지 산성화시켰다. 그 혼합물에 에틸 아세테이트 (50 ㎖)와 n-헥산 (50 ㎖)을 가하여 추출했다. 유기층을 10% 시트르산 (40 ㎖), 물 (40 ㎖)과 포화소금물 (40 ㎖)로 각각 세척했다. 유기층을 무수 황산나트륨(20 g)으로 건조시키고 여과후 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 진공하에서 건조 시키고 디에틸 에테르 (10 ㎖)와 n-헥산 (150 ㎖)으로 고체화하여 여과하고 건조시켜 목적화합물 2.99 g(91%)을 얻었다.
1H NMR(CDCl3, 300 M㎐) : δ 0.65-1.10(m, 6H), 1.21-1.35(m, 9H), 2.15-2.35(m, 1H), 2.69-3.01(m, 7H), 3.01-3.23(m, 1H), 3.60-3.80(m, 0.6H), 4.02(d, 0.2H, J=9.9㎐), 4.30(d, 0.2H, J=9.8㎐), 4.54(d, 0.3H, J=10.6㎐), 4.72(d, 0.3H, J=10.7㎐), 4.88-4.97(m, 0.4H), 5.28(t, 0.5H, J=7.6㎐), 6.83-7.03(m, 2H), 7.06-7.25(m, 2H).
실시예 4 : N-(tert-부톡시카르보닐)-N-메틸-L-4-플루오로페닐알라닐-N-메틸-L-발린-3-tert-부틸-L-티로신 에틸아마이드의 합성
N-(tert-부톡시카르보닐)-N-메틸-L-4-플루오로페닐알라닐-N-메틸-L-발린 (2.87 g, 7.0 m㏖)과 3-tert-부틸-L-티로신 에틸아마이드 (1.85 g, 7.0 m㏖)를 무수 테트라히드로푸란 (14 ㎖)에 녹이고 1-히드록시벤조트리아졸 히드레이트 (1.07 g, 7.0 m㏖), 트리에틸아민(2.9 ㎖, 21 m㏖)과 1-(3-(디메틸아미노)프로필)-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드 (1.48 g, 7.7 m㏖)를 얼음-물 중탕하에서 가하고 반응물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 반응물을 n-헥산/에틸 아세테이트=1/1 혼합물 (100 ㎖)와 물 (50 ㎖)로 추출했다. 유기층을 물 (50 ㎖), 10% 시트르산 (50 ㎖), 물 (30 ㎖), 포화 탄산수소나트륨 (30 ㎖), 물 (30 ㎖), 그리고 포화 소금물 (30 ㎖)로 각각 세척했다. 유기층을 무수 황산나트륨(30 g)으로 건조시키고 여과 후 감압 하에서 농축시켰다. 잔사를 고진공하에서 건조시켜 목적 화합물 (4.02 g, 87%)을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 300 M㎐) : (two Rotamers)δ 0.54-1.03(m, 6H), 1.25(t, 3H, J=7.11㎐), 1.34(s, 9H), 2.08, 2.42, 2.69, 2.76 and 2.89(s, 6H), 2.10-2.29(m, 1H), 2.8-3.1(m, 2H), 3.10-3.29(m, 2H), 4.44(t, 0.5H, J=11.2㎐), 5.12(t, 0.5H, 11.9㎐), 4.7(q, 1H, J=5.42㎐), 5.58(t, 0.5H, J=5.36㎐), 5.84(t, 0.5H, 5.67㎐), 6.28(d, 0.5H, J=8.28㎐), 6.42(d, 0.5H, J=8.28㎐), 6.54-6.78(m, 2H), 6.82-7.27(m, 4H).
실시예 5 : N-메틸-L-4-플루오로페닐알라닐-N-메틸-L-발린-3-tert-부틸-L-티로신 에틸아마이드의 합성
N-(tert-부톡시카르보닐)-N-메틸-L-4-플루오로페닐알라닐-N-메틸-L-발린-3-tert-부틸-L-티로신 에틸아마이드 (4.0 g, 6.1 m㏖)를 디클로로메탄 (15 ㎖)에 녹이고 트리플루오로아세트산 (4.7 ㎖, 61 m㏖)를 얼음-물 중탕하에서 가하고 반응물을 10 ℃에서 10시간 동안 교반하였다. 반응물을 잘게 부서진 얼음(50 ㎖)에 넣고 탄산나트륨 (6.5 g, 61 m㏖)를 가하여 염기화했다. 그 혼합물을 디클로로메탄 (100 ㎖)과 물 (100 ㎖)로 추출했다. 유기층을 물 (50 ㎖), 포화 탄산수소나트륨 (30 ㎖), 물 (30 ㎖), 그리고 포화소금물 (30 ㎖)로 각각 세척했다. 유기층을 무수 황산나트륨(30 g)으로 건조시키고 여과 후 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 고진공하에서 건조시키고 디에틸 에테르 (20 ㎖)와 n-헥산 (100 ㎖)으로 재결정하여 목적화합물 (2.82 g, 83%)을 얻었다.
1H NMR(CDCl3, 300 M㎐) : (two Rotamers) δ 0.56, 0.78, 0.92, and 1.01(d and m, 9H, J=6.8㎐), 1.33 and 1.37(s, 9H), 2.05-2.40(m. 1H), 2.24, 2.39, 2.56 and 2.64(s, 6H), 2.67-3.25(m, 6H), 3.53-3.57(m, 0.5H), 3.66(t, 0.5H, J=6.8㎐), 3.82(d, 0.5H, J=10.9㎐), 4.40(q, 0.5H, J=7.1㎐), 4.50-4.59(m, 1H), 5.63(t, 0.5H, J=5.5㎐), 5.77(t, 0.5H, J=5.6㎐), 6.69(t, 1H, J=7.3㎐), 6.79-7.01(m, 5H), 7.10-7.26(m, 1.5H), 9.14(d, 0.5H, J=8.2㎐).
실시예 6 : N-(tert-부톡시카르보닐)-L-4-플루오로페닐알라닐-L-발린의 합성
방법 A)
N-(tert-부톡시카르보닐)-L-4-플루오로페닐알라닐-L-발린 메틸 에스테르(396 ㎎, 1 m㏖)를 테트라히드로푸란 (5 ㎖)과 물 (5 ㎖)에 녹이고 수산화리튬 (60 ㎎, 2.5 m㏖)를 가하고 실온에서 1.5시간 동안 교반하였다. 반응물을 1N 염산용액으으로 pH=3.5까지 산성화 한 후, 에틸 아세테이트 (30 ㎖)를 가하고 물 (30 ㎖)과 포화소금물 (30 ㎖)으로 각각 세척했다. 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고 여과 후 감압하에서 농축하여 목적화합물 (410 ㎎, 정량적 수율)을 얻었다.
1H NMR(CDCl3, 300 M㎐) : δ 0.91(t, 6H, J=6.6㎐), 1.34(s, 9H), 2.1-2.3(m, 1H), 3.91-3.10(m, 2H), 4.31-4.55(m, 2H), 5.39(bs, 1H), 6.73(bs, 1H), 6.95(t, 2H, H=8.7㎐), 7.16(dd, 2H, J=5.4 and 5.8㎐).
방법 B)
N-(tert-부톡시카르보닐)-L-(4-플루오로페닐)알라닌 (1.42 g, 5.0 m㏖)를 에틸 아세테이트 (15 ㎖)에 녹이고 N-메틸모르폴린 (1.37 ㎖, 12.5 m㏖)과 에틸 클로로포르메이트 (0.57 ㎖, 6.0 m㏖)를 얼음-물 중탕 하에서 가하고 반응물을 0 ℃에서 30분 동안 교반했다. 그 혼합물에 4-니트로페놀 (0.83 g, 6.0 m㏖)를 가하고 0 ℃에서 1시간동안 교반했다. 반응물에 물 (5 ㎖)과 소금물 (5 ㎖)를 가하고 20분간 교반후 유기층을 분리했다. 유기층을 물 (5 ㎖)와 포화소금물 (50 ㎖)로 각각 세척했다. 유기층을 무수 황산나트륨(30 g)으로 건조시키고 여과후 감압 하에서 농축시켰다.
잔사를 THF (15 ㎖)로 녹이고 물 (5 ㎖), L-발린 (0.64 g, 5.5 m㏖)과, 탄산나트륨 (1.06 g, 10 m㏖)를 가하고 상온에서 2시간 교반했다. 혼합물에 에틸 아세테이트 (50 ㎖)를 가하고 1N 염산용액(21 ㎖)을 서서히 가하여 산성화시키고 20분간 교반했다. 유기층을 분리하고 물 (30㎖)과 소금물 (20 ㎖)로 세척했다. 무수 황산나트륨으로 건조시키고 여과 후 감압하에서 농축하여 얻은 잔사를 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 (메틸렌 클로라이드 : 메탄올 =15:1)하여 목적화합물 (2.6 g, 94 %)을 얻었다.
실시예 7 : N-(tert-부톡시카르보닐)-N-메틸-L-4-플루오로페닐알라닐-N-메틸-L-발린 의 합성
N-(tert-부톡시카르보닐)-L-4-플루오로페닐알라닐-L-발린 (263 ㎎, 0.688 m㏖)을 무수 테트라히드로푸란 (10 ㎖)에 녹이고 요오도메탄 (428 ㎕, 6.88 m㏖)과 60% 수소화나트륨 (165 ㎎, 4.128 m㏖)를 냉각하에 가하고 반응물을 실온에서 22시간 동안 교반하였다. 반응물을 포화 시트르산으로 산성화 한 후, 에틸 아세테이트 (50 ㎖)를 가하고 물 (50 ㎖)과 포화소금물 (50 ㎖)로 각각 세척했다. 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고 여과 후 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(메틸렌 클로라이드: 메탄올 =15:1)하여 목적화합물 (196 ㎎, 79 %)을 얻었다.
실시예 8 : N-(tert-부톡시카르보닐)-N-메틸-L-4-플루오로페닐알라닐-N-메틸-L-발린의 합성
N-(tert-부톡시카르보닐)-L-4-플루오로페닐알라닐-L-발린 메틸 에스테르 (1.5 ㎎, 3.78 m㏖)를 무수 THF (40 ㎖)에 녹이고 물 (68 ㎕, 3.78 m㏖), 요오도메탄 (2.3 ㎖, 36.9 m㏖)과 60% 수소화나트륨 (908 ㎎, 22.68 m㏖)를 냉각하에 가하고 반응물을 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 반응물을 포화 시트르산으로 산성화 한 후, 에틸 아세테이트 (100 ㎖)를 가하고 소듐 티오술페이트 수용액(100 ㎖), 물 (100 ㎖)과 포화소금물 (50 ㎖)로 각각 세척했다. 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고 여과 후 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(메틸렌 클로라이드: 메탄올 =15:1)하여 목적화합물 (1.3 g, 84 %)을 얻었다.
실시예 9 : N-(벤질옥시카르보닐)-L-4-플루오로페닐알라닐-L-발린 메틸 에스테르 의 합성
N-(벤질옥시카르보닐)-L-4-플루오로페닐알라닌(2.7 g, 8.5 m㏖)과 L-발린 메틸 에스테르 히드로클로라이드 (1.43 g, 8.5 m㏖)를 무수 테트라히드로푸란 (300 ㎖)에 녹이고 1-히드록시벤조트리아졸 히드레이트 (1.3 g, 8.5 m㏖), 트리에틸아민 (3.6 ㎖, 25.5 m㏖) 그리고 1-(3-(디메틸아미노)프로필)-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드 (1.8 g, 9.4 m㏖)를 냉각하에 가하고 반응물을 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 반응물에 에틸 아세테이트 (300 ㎖)를 가하고 물 (200 ㎖)과 포화소금물 (200 ㎖)로 각각 세척했다. 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고 여과 후 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 (n-헥산:에틸 아세테이트 = 3:1)하여 목적화합물 (2.6 g, 71 %)을 얻었다.
1H NMR(CDCl3, 300 M㎐) : δ 0.81(dd, 6H, J=6.9㎐), 2.05-2.15(m, 1H), 3.03(d, 2H, J=7.16㎐), 3.7(s, 3H), 4.44(q, 1H, J=4.90㎐), 5.09 (s, 2H), 5.37 (brd, 1H), 6.39(brd, 1H), 6.94(t, 2H, J=8.68㎐), 7.14(dd, 2H, J=5.63㎐ and8.7㎐), 7.35(m, 5H).
실시예 10 : N-(벤질옥시카르보닐)-N-메틸-L-4-플루오로페닐알라닐-N-메틸-L-발린 메틸 에스테르의 합성
N-(벤질옥시카르보닐)-L-4-플루오로페닐알라닐-L-발린 메틸 에스테르 (1.58 g, 3.67 m㏖)를 무수 테트라히드로푸란 (24 ㎖)과 무수 N,N-디메틸포름아마이드 (8 ㎖)에 녹이고 요오도메탄 (1.83 ㎖, 29.4 m㏖)과 60% 수소화나트륨 (590 ㎎, 14.68 m㏖)를 냉각하에 가하고 반응물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응물에 에틸 아세테이트 (200 ㎖)를 가하고 물 (200 ㎖)과 포화소금물 (200 ㎖)로 각각 세척했다. 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고 여과 후 감압하에서 농축시켰다. 잔사를 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 (n-헥산:에틸 아세테이트=4:1)하여 목적화합물 (515 ㎎, 31 %)을 얻었다.
1H NMR(CDCl3, 300 M㎐) : δ 0.7-0.96(m, 6H), 2.05-2.15(m, 1H), 2.79(d, 3H, J=11.66㎐), 2.88(d, 3H, J=8.25㎐), 2.9-3.2(m, 2H), 3.46(s, 1.5H), 3.65(s, 1.5H), 4.65-4.74(m, 1H), 4.96-4.13(m, 2H), 5.22-5.34(m, 1H), 6.84-6.93(m, 2H), 7.0-7.4(m, 7H).
실시예 11 : N-(벤질옥시카르보닐)-N-메틸-L-4-플루오로페닐알라닐-N-메틸-L-발린의 합성
N-(벤질옥시카르보닐)-N-메틸-L-4-플루오로페닐알라닐-N-메틸-L-발린 메틸 에스테르 (500 ㎎, 1.09 m㏖)를 테트라히드로푸란 (10 ㎖)과 물 (5 ㎖)에 녹이고수산화리튬 (88 ㎎, 3.67 m㏖)를 가하고 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 반응물을 포화 시트르산으로 산성화 한 후, 에틸 아세테이트 (20 ㎖)를 가하고 물 (20 ㎖)과 포화 소금물 (20 ㎖)로 각각 세척했다. 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고 여과 후 감압하에서 농축하여 목적화합물 (484 ㎎, 정량적 수율)을 얻었다.
1H NMR(CDCl3, 300 M㎐) : δ 0.7-0.96(m, 6H), 2.15-2.30(m, 1H), 2.7(d, 3H, J=7.95㎐), 2.88(d, 3H, J=2.95㎐), 3.01-3.19(m, 2H), 4.3(d, 0.2H, J=10.48㎐), 4.45(d, 0.2H, J=10.49㎐), 4.6(d, 0.3H, J=10.52㎐), 4.75(d, 0.3H, J=10.52㎐), 4.91-5.05(m, 2H), 5.26-5.34(m, 1H), 6.85-6.96(m, 2H), 7.0-7.4(m, 7H).
본 발명에 따르면, 위, 장관질환에 유용한 의약으로서 모틸린 리셉터 안타고니스트 작용을 가지는 화학식 1의 펩타이드 유도체를, 상업적으로 구입이 용이하며 비교적 값이 싼 아미노산 유도체를 출발물질로 사용하여, 공정상 더욱 간편하면서도 높은 수율로 공업화가 가능한 제조방법이다.

Claims (7)

  1. 하기 단계 (i)~(iv)를 포함하는 것을 특징으로 하는, 하기 화학식(1)로 표시되는 펩타이드 유도체의 제조 방법:
    (i) 하기 화학식(Ⅱ)의 화합물을 하기 화학식(Ⅲ)의 화합물과 반응시켜서 하기 화학식(4)의 화합물을 얻는 제 1 축합공정,
    (ii) 하기 화학식(4)의 화합물을 디메틸화하여 하기 화학식(5)의 화합물을 얻는 공정,
    (iii) 하기 화학식(5)의 화합물과 화학식(6)의 화합물과 반응시켜서 화학식(7)의 화합물을 얻는 제 2 축합공정, 및
    (iv) 하기 화학식(7)의 화합물의 아미노보호기를 탈보호하는 공정.
    [화학식 1]
    [화학식 2]
    [화학식 3]
    [화학식 4]
    [화학식 5]
    [화학식 6]
    [화학식 7]
    (상기식들에서, R1은 수소원자, 또는 탄소수 1∼4의 직쇄 또는 분지쇄상의 알킬기를 나타내고, R2는 수소원자, 또는 메틸기를 나타내고, R3은 할로겐원자를 나타내고, P는 아미노보호기를 나타낸다.)
  2. 제 1 항에 있어서, 하기 단계를 포함하는 제조 방법:
    (i) 제 1 축합공정에서, 화학식(10)의 화합물과 화학식(3)의 화합물을 1-(3-(디메틸아미노)프로필)-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드, 1-히드록시벤조트리아졸 히드레이트를 이용하여 축합시켜서 화학식(11)의 화합물을 얻고,
    (ii) 화학식(11)의 화합물의 2개의 아미노기를 동시에 메틸화한 후, 메틸에스테르의 메틸기를 제거하여 화학식(12)의 화합물을 얻고,
    (iii) 제 2 축합공정에서, 화학식(12)의 화합물과 화학식(6)의 화합물을 1-(3-(디메틸아미노)프로필)-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드, 1-히드록시벤조트리아졸 히드레이트를 이용하여 축합시켜, 화학식(13)의 화합물을 얻고,
    (iv) 제 2 탈보호공정에서, 화학식(13)의 화합물의 tert-부톡시카르보닐기를 제거한다.
    [화학식 10]
    [화학식 11]
    [화학식 12]
    [화학식 13]
    (상기식들에서, R1, R2및 R3은 앞에서 정의된 바와 같고, Boc는 tert-부톡시카르보닐기를 나타낸다.)
  3. 제 1 또는 2 항에 있어서, 화학식(2)의 화합물을 염기 존재하에 에틸클로로포메이트 또는 메틸클로로포메이트와 반응시키고, 생성된 화합물을 L-발린과 반응시켜서 화학식(8)을 얻은 후 디메틸화하여 화학식(5)의 화합물을 얻는 공정을 특징으로 하는 제조방법.
    [화학식 8]
  4. 제 1 또는 2 항에 있어서, 화학식(4)의 화합물에서 메틸에스테르기의 메틸기를 제거하여 화학식(8)의 화합물을 얻은 후 디메틸화하여 화학식(5)의 화합물을 얻는 공정을 수행하는 것을 특징으로 하는 제조방법.
  5. 제 1 또는 2 항에 있어서, 화학식(4)의 화합물을 디메틸화하여 화학식(9)의 화합물을 얻은 후, LiOH와 물로 처리하여 화학식(5)의 화합물을 얻는 공정을 수행하는 것을 특징으로 하는 제조방법.
    [화학식 9]
  6. 제 1 또는 2 항에 있어서, 화학식(4)의 화합물을 디메틸화하고 THF/물로 처리하여 화학식(5)의 화합물을 얻는 공정을 수행하는 것을 특징으로 하는 제조방법.
  7. 제 1 또는 2 항에 있어서, 화학식(1)에서 R1이 에틸기이고, R2가 수소원자이고, R3이 불소원자인 화합물을 제조하는 것을 특징으로 하는 제조방법.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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DE4415998A1 (de) * 1994-05-06 1995-11-09 Basf Ag Neue Tetrapeptide, ihre Herstellung Verwendung
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