KR20020063562A

KR20020063562A - 유로키나제와 혈관 형성의 비공유적 억제제

Info

Publication number: KR20020063562A
Application number: KR1020027004637A
Authority: KR
Inventors: 오딜 에스터 레비; 에드윈 엘. 매디슨; 조셉 에드워드 셈플; 아미르 피. 타미즈; 마이클 아이. 웨인하우스
Original assignee: 코르바스 인터내셔날, 인코포레이티드
Priority date: 2000-08-11
Filing date: 2001-08-10
Publication date: 2002-08-03
Also published as: DE60034447T2; IL149042A; EP1808440A1; DE60034447D1; ES2285989T3; ATE360028T1; US20020037857A1; KR100879673B1; ATE517910T1; ZA200202825B; EP1808440B1; US6586405B2; EP1182207A3; EP1182207B1; EP1182207A2

Abstract

유로키나제의 비공유적 억제제로서 활성을 가지며 혈관 형성을 감소 또는 억제시키는 활성을 갖는 새로운 화합물이 제공된다. 이들 화합물은 P1에서 아미디노 또는 구아니디노 부분 또는 이들의 유도체를 갖는 기를 갖는다. 이들 화합물은 시험관내에서 플라스미노겐 활성화제 수준을 모니터링하는데 유용하고 생체내에서 유로키나제의 억제 또는 이것의 감소된 활성에 의해 개선되는 상태의 치료 및 혈관 형성이 병리적 상태와 관련이 있는 병리적 상태를 치료하는데 유용하다.

Description

유로키나제와 혈관 형성의 비공유적 억제제 {NON-COVALENT INHIBITORS OF UROKINASE AND BLOOD VESSEL FORMATION}

발명의 분야

유로키나제는 종양세포의 전이, 혈관신생, 및 기타 다른 활성과 관련된 효소이다. 본 발명의 목적은 유로키나제의 활성을 억제하여 이것의 유해한 효과를 경감시키는데 사용될 수 있는, 유로키나제 억제제로서의 활성을 지닌 신규한 화합물을 제공하는 것이다. 본 발명의 다른 목적은 혈관형성, 특히 병리학적 질환과 관련된 혈관 형성을 억제하는 신규한 화합물을 제공하는 것이다.

발명의 배경 및 도입

비뇨기형(urinary-type) 플라스미노겐 활성화제(uPA: 유로키나제)는 트립신/키모트립신 계열에 속하는 세린 프로테아제이다. 생리학적으로, uPA는 3가지 형태로 발견된다: 단일 가닥 프로-uPA, 두 가닥 uPA 및 저분자량 uPA (N-말단 도메인 결핍). 프로-uPA인 자이모겐(zymogen)은 K158-I159에서 펩티드 결합의 절단에 의해 u-PA로 전환된다. 생성된 두 가닥 uPA는 이황화 브릿지에 의해 연결되고, 약 50kD의 M_r을 가지며, C-말단 세린 프로테아제 도메인을 갖는다.

uPA의 활성은 이것의 수용체인 uPAR과 결합시 세포 표면에 집중된다. uPAR은 단일 가닥 글리코실 포스파티딜 이노시톨(GPI)-결합된 막 수용체이다. uPAR의 N-말단의 92개 아미노산은 uPA 및 프로-uPA와의 결합에 중요한 역할을 한다. uPA에 대한 수용체는, T-세포, NK 세포, 단구, 호중구, 혈관내피세포, 섬유아세포, 평활근 세포, 각질세포, 태반 영양모세포, 간세포(hepatocyte), 및 다양한 유형의 종양세포 상에 위치한다.

프로-uPA로부터 uPA로의 전환은 세포 표면상의 uPAR에서 주로 일어나며, 이러한 전환 후 uPA는 플라스미노겐을 플라스민으로 활성화시킨다. 활성화는 사람의 플라스미노겐의 경우 PGR-VV 잔기에서의 절단, 또는 소의 플라스미노겐의 경우 SGR-IV 잔기에서의 절단시 일어난다. 플라스미노겐이 또한 세포 표면에 존재하기 때문에, 이러한 활성화 캐스케이드는 원형질막상에서 u-PA 및 플라스민의 활성화를 집중시킨다. 플라스민은 추가의 uPA 및 다른 효소의 활성화, 피브린의 소화 및 세포외 기질(ECM)의 구성성분의 소화를 포함하여 많은 기능을 갖는다. 종양 주위의 ECM의 분해는 전이 세포에 대한 물리적 장벽으로서의 ECM을 제거하여, 전이 세포가 자유롭게 일차 종양을 떠나 이차적 부위로 침투한다. 암 전이에서 uPA/uPAR의 작용에 대한 고찰은 문헌["The Urokinase-type Plasminogen Activator System in Cancer Metastasis: A Review", Anderasen et al., Int. J. Canc. 72:1-22 (1997)]에 제공되어 있다.

고수준의 uPA와 높은 전이율간의 상관관계 및 예후 불량은 특정 종양, 특히 유방암과 관련하여 언급된 바 있다[Quax et al., J. Cell Biol. 115:191-199 (1991); Duffy et al., Cancer Res. 50:6827-6829 (1990)]. 예를 들어, 폐종양[Oka et al., Cancer Res. 51:3522-3525 (1991)], 방광종양[Hasui et al., Int. J. Cancer 50:871-873 (1992)], 위종양[Nekarda et al., Lancet 343:117 (1994)], 자궁경부암[Kobayashi et al., Cancer Res. 54:6539-6548 (1994)], 난소 종양[Kuhn et al., Gynecol. Oncol. 55:401-409 (1994)], 신장 종양[Hofmann et al., Cancer 78:487-492 (1996)], 뇌종양[Bindahl et al., J. Neuro-Oncol. 22:101-110 (1994)], 및 연조직 육종[Choong et al., Int. J. Cancer (Pred. Oncol.) 69:2687-272 (1996)] 등은 고수준의 uPA 및/또는 uPA 활성 및 높은 전이율을 나타내었다. uPA의 과다생성은 생체내에서 전립선암 세포에 의한 증가된 골격 전이(skeletal metastasis)를 초래하는 것으로 보고되었다[Achbarou et al., Cancer Res. 54: 2372-2377 (1944)].

uPA 활성의 억제 또는 저하, 또는 uPA와 이것의 수용체(uPAR)의 상호작용의 중단/억제가 세포외 기질의 유지에 대해서 긍정적인 효과를 가지며, 전이에 대해서는 억제 효과를 갖는 것으로 나타났다[Ossowski and Reich, Cell 35:611-619 (1983); Ossowski, Cell 52;321-328 (1988); Ossowski, J. Cell Biol. 107:2437-2445 (1988); Wilhelm et al., Clin. Exp. Metastasis 13:296-302 (1995); Acharou et al., Cancer Res. 54:2372-2377 (1994); Crowley et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:5021-5025 (1993); Kook et al., EMBO J. 13:3983-3991 (1994)]. 이러한 실험적인 연구 결과는, uPA-촉매된 플라스미노겐 활성화가 종양 진행, 국소 종양 침투 및/또는 원격 전이 형성에 대한 속도를 조절함을 시사한다.

세포 이동 및 침투에 대한 uPA 시스템의 효과는, 세포외 기질의 플라스민-매개 분해의 단백분해 효과 및 uPA 수용체와 세포외 기질 구성성분간의 직접적인 상호작용 둘 모두에 기인하는 것으로 간주된다. 세포외 기질의 분해는, 전이 세포가 기질에 침투하도록 허용하는 반면, uPA 수용체와 기질 그 자체 사이의 상호작용은 이동중인 세포를 보조한다. 세포 표면에 대한 uPA/플라스민 시스템의 국소화, 또는 전이 세포의 선도연(leading edge)은, 전이에서 가정되었던 uPA의 작용과 일치한다[Plesner et al., Stem Cells 15: 398-408 (1997)].

세포외 기질의 구성성분인 비트로넥틴(vitronectin)과 uPAR의 상호작용은 세포 유착(cell adhesion)을 매개하고, uPAR이 uPA와 결합하는 경우 증진될 수 있다. 세포 표면 유착 분자인 인테그린, 특히 베타-1 및 베타-2 인테그린이 또한 이러한 유착 작용에 관여하는 것으로 보인다[Paysant et al., Br. J. Haematol. 100:45-51 (1998); Simon et al., Blood 88:3185-3194 (1996)]. CD11b/CD18 인테그린은 uPA-uPAR 복합체와 관련될 수 있으며, 이들 수용체를 함유하는 세포, 예를 들어 호중구, 백혈구의 유착을 촉진시킬 수 있다.

uPA/uPAR 시스템은 또한 신규 혈관계의 형성, 또는 혈관신생과 관련된다.

신규 혈관계의 형성은 일차 및 전이성 종양 성장의 유지에 필수적이다. 병리학적 혈관신생은 또한 망막 질환, 루베오시스 홍채염(reubeosis iritis), 증식유리체망막증(proliferative vitreo retinopathy), 염증성 질환, 당뇨성 망막증, 만성 포도막염, 푸크 홍채이색홍채모양체염(Fuch's heterochromic iridocyclitis), 신생혈관 녹내장 (neovascular glaucoma), 각막 또는 시신경 혈관신생, 맥관계 질환, 익상편, 녹내장 수술 수포 부전(glaucoma surgery bleb failure), 과각화증,켈로이드 및 폴립 형성의 특징을 이룬다[유럽 특허 제 451,130호]. 바람직하지 않은 혈관생성은 하기 질환에서 발생하거나, 하기 활성의 결과일 수 있다: 미국 특허 제 5,712,291호에 인용된 것으로서, 근육퇴행, 미숙아 망막증(retinopathy of prematurity), 각막 이식 거부, 수정체후부 섬유증식증(retrolental fibroplasia), 유행성 각결막염(epidemic keratoconjunctivitis), 비타민 A 결핍증, 콘텍트렌즈 과도착용 증후군, 아토피성 각막염, 상윤부 각막염(superior limbic keratitis), 익상편 건성 각막염, 소그렌스(sogrens) 질환, 주사성 여드름(acne rosacea), 파일렉테눌로시스(phylectenulosis), 매독, 나병을 제외한 마이코박테리아 감염, 지질 변성, 화학적 화상, 세균 및 곰팡이성 궤양, 단순 포진 또는 대상 포진 감염, 원충류 질환, 카포시 육종, 무렌(mooren) 궤양, 테리엔 변연각막변성(Terrien's marginal degeneration), 변연각질융해증(marginal keratolysis), 외상, 류마티스 관절염, 전신 루프스, 다발성동맥염(polyarteritis), 베게너 유육종증(Wegeners sarcoidosis), 공막홍채염(scleritis), 스티븐스 존슨 질환, 방사상 각막절개(radial keratotomy), 겸상 적혈구 빈혈(sickle cell anemia), 유육종(sarcoid), 탄성섬유가황색종(pseudoxanthoma elasticum), 파제트병, 정맥 또는 동맥 폐쇄, 경동맥 폐쇄성 질환, 만성 포도막염, 만성 유리체염, 라임병 (Lyme's disease), 일스병(Eales' disease), 베체트병(Bechet's Disease), 근시, 시와(optic pits), 스타르가르트병(Stargart's disease), 주변포도막염(pars planitis), 만성 망막 박리, 고점도 증후군(hyperviscosity syndrome), 톡소플라스마증(toxoplasmosis), 레이저후 합병증, 섬유혈관조직의 이상 증식,혈관종(hemangiomas), 오슬러-웨버-랑뒤병(osler-weber-rendu disease), 고형 종양, 혈액 기원 종양(blood borne tumors), 에이즈(AIDS), 안구 혈관신생 질환, 골관절염(osteoarthritis), 만성 염증, 크론병(crohn's disease), 궤양성 대장염(ulcerative colitis), 횡문근육종(tumors of rhabdomyosarcoma tumors), 망막모세포종(tumors of retinoblastoma), 백혈병, 건선(psoriasis), 죽상경화증 (atherosclerosis), 유천포창(pemphigoid) 등.

uPA/uPAR 결합의 길항제(IgG의 Fc와 융합된 uPA의 EGF 유사 도메인)는 혈관신생 및 쥐과동물 B16 흑색종의 증식을 억제하는 것으로 알려졌다[Min et al., Cancer Res. 56:2428-2433 (1996)]. 유방 암에서 모세혈관(microvessel) 밀도, 혈관 침투, 및 uPA 수준간의 상관관계는 이러한 발견과 일치한다[Hildenbrand et al., Brit. J. Cancer 72:818-823 (1995)]. 또한, 공지된 uPA 억제제인 아밀로라이드(amiloride)는 다양한 유형의 병적 혈관신생을 억제하는 것으로 알려졌다 [Glaser et al., EP 451,130; Avery et al., Arch. Ophthalmol. 108:1474-1476 (1990)].

2개의 주요한 uPA 억제제인 PAI-1 및 PAI-2는, 세르핀계 프로테이나제 억제제의 일종이다. 세르핀과 이들이 인식하는 프로테아제와의 결합은 세르핀 반응성 루프중의 아미노산[PAI-1의 경우 Ser-Ala-Arg-Met-Ala(서열번호: 1), PAI-2의 경우 Thr-Gly-Arg-Thr-Gly(서열번호: 2)]을 포함하여 각 단백질의 아미노산 간의 수많은 상호작용을 포함한다. 실험 동물에 외인성 PAI-2의 도입은 폐 전이율을 억제시키는 것으로 보고되었다[Evans and Lin, Amer. Surg. 61:692-697 (1995); Mueller etal., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 92:205-209 (1995)]. PAI-1의 전이 억제 능력은 아직 일관되게 제시된 바 없다. PAI-1의 유전자 및 이것의 재조합 발현 방법이 로스쿠토프(Loskotoff) 등의 미국 특허 제 54,952,512호에 기재되어 있다. 재조합 및 천연 사람의 PAI-2는 스티븐스(Stephens) 등의 미국 특허 제 5,422,090호에 기재되어 있다.

가장 널리 연구된 uPA 억제제는 4-치환된 벤조[b]티오펜-2-카르복사미딘 계열의 억제제이며, B428 (4-요오도-벤조[b]티오펜-2-카르복사미딘) 및 B623이 이것의 일원이다[Towle et al., Cancer Res. 53:2553-2559 (1993); Bridges et al., Bioorg. Med. Chem 1:403-410 (1993); Bridges et al., U.S. Patent No. 5,340,833]. 종양 세포가 접종된 실험용 랫트에서 B428의 주입이, uPAR 유전자발현을 억제하고 일차 종양의 용적을 감소시키며 전이를 감소시키는 것으로 알려졌다 [Xing et al., Cancer Res. 57:3585-3593 (1997)]. 종양을 지닌 마우스에 B428 또는 B623을 매일 복강내로 투여하면, 근육 및 지방으로의 전이를 억제하지만 종양-유도된 혈관생성을 억제하지 못하거나 자발적인 폐 전이율을 감소시키지 못하는 것으로 알려졌다. 실제로, B623은 폐 전이의 형성을 증대시켰다[Alonso et al., Breast Cancer Res. Treat. 40:209-223 (1996)]. 동일유전자계열의 랫트 전립선암 모델에서 B428의 주입은 일차 종양의 용적 및 종양 중량의 감소, 및 전이의 감소를 가져왔다[Rabbani et al., Int. J. Cancer 63:840-845 (1995)].

다른 공지된 uPA 억제제는 uPA의 경쟁적 억제제인 p-아미노벤즈아미딘 및 아밀로라이드를 포함한다. 두개의 화합물 모두는 실험 동물에서 종양의 크기를 감소시킨 것으로 나타났다[Jankan et al., Cancer Res. 57:559-563 (1997); Billstrom et al., Int. J. Cancer 61:542-547 (1995)]. 최근에, 녹차에 존재하는 폴리페놀인 에피갈로-카테신-3 갈레이트(EGCG)이 uPA와 결합하여 이것의 활성을 억제하는 것으로 밝혀졌다[Jankun et al., Nature 387:561 (1997)]. 이들 연구자들은 EGCG가 아밀로라이드 보다 약한 억제제라고 결론지었으나, EGCG가 독성 효과 없이 아밀로라이드 보다 고용량으로 사용될 수 있음을 제시했다. uPA의 경쟁적 억제제인 α-N-벤질술포닐-p-아미노페닐알라닌은 파이에(Pye) 등의 미국 특허 제 4,165,258호에 개시되어 있다.

uPA/uPAR 시스템을 억제하는 것에 대한 다른 연구는, 시험관내에서 uPA를 억제하고 uPAR과 결합하는 것으로 알려진, uPA 및 PAI-2의 uPAR-결합 도메인을 구성하는 이작용성 하이브리드 분자의 개발을 포함한다[Ballance et al., Eur. J. Biochem. 207: 177-183 (1992)]. uPA에 대해 상보성인 안티센스 올리고누클레오티드[Wilhelm et al., Clin. Exp. Metast. 13:296-302 (1995); Iversen and Scholar, U.S. Patent No. 5,552,390]를 가진 것으로서, uPAR의 길항제가 또한 연구되었다 [Doyle and Rosenberg, U.S. Patent No. 5,656,726; Min et al., Cancer Res. 56:2428-2433 (1996)]. uPA와 uPAR의 결합을 억제하는 것으로 알려진, uPAR에 대한 항체가 다노(Dano) 등의 미국 특허 제 5,519,120호에 개시되어 있다. 다른 다양한 세린 프로테아제와 함께 유로키나제를 억제하는 것으로 알려진 저분자가 개시되어 있다[Abe et al., U.S. Patent No. 5,508,385, U.S. Patent No. 5,153,176, and Takano et al., J. Pharmacol. Exp. Therapeut. 271:1027-1033 (1994)].

u-PA와 uPAR의 결합을 직접적으로 억제하기 위한 화합물이 개발되었다 [Crowley et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:5021-5025 (1993); Goodson et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91:7129-7133 (1994); Kobayashi et al., Brit. J. Cancer 67:537-544 (1993), and Int. J. Cancer 57:727-733 (1994), and J. Biol. Chem. 270:8361-8366 (1995); Lu et al., FEBS Lett. 356:56-59 (1994) and FEBS Lett. 380:21-24 (1996)].

또한, 세포 이동 자극 단백질인 프로-간세포 성장 인자(HGF)가 uPA의 기질이다[Naldinie et al., EMBO J. 11:4825-4833 (1992)]. uPA에 의한 66kDa의 세포외 기질 단백질 및 피브로넥틴의 직접적인 절단이 또한 보고되었으며, 이것은 세포 이동을 촉진하는데 있어서의 uPA의 보다 더 직접적인 작용을 제시한다[Quigley et al., Proc. Natl. Acad. Sci. 84:2776-2780 (1987)]. 이와 같이, uPA의 억제는 이들 활성에 영향을 줄 수 있다.

발명의 요약

본 발명은 새로운 펩티드성 비공유적 유로키나제 억제제에 관한 것이다. 화합물은 P1에서 아르기닌 모방물을 갖는다. 이들 화합물은 유로키나제의 효과적인 억제제로서 활성을 가지므로, 이것의 유해한 효과를 감소시키는데 유용하다. 본 발명의 화합물은 혈관 형성, 특히 병리적 과정과 관련이 있는 혈관 형성을 억제하는데 유효하다.

따라서, 한 측면에서, 본 발명은 하기 화학식(I)의 화합물 및 이들의 약제학적으로 허용되는 염에 관한 것이다:

상기 식에서,

(a) X는 -S(O)₂-, -N(R')-S(O)₂-, -(C=O)-, -OC(=O)-, -NH-C(=O)-, -P(O)(R')-, 및 직접 연결기로 구성된 군으로부터 선택되고, 여기서 R'는 독립적으로 수소, 1 내지 약 4개 탄소 원자의 알킬, 약 6 내지 약 14개 탄소 원자의 아릴 또는 약 7 내지 약 16개 탄소 원자의 아르알킬이며, 단 X가 -P(O)(R')-인 경우 R'는 수소가 아니고;

(b) R₁은 하기 기로 구성된 군으로부터 선택되며:

(1) Y₁및 Y₂로 구성된 군으로부터 선택된 1 또는 2개의 치환기로 치환되거나 치환되지 않은 1 내지 약 4개 탄소 원자의 알킬,

(2) Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 치환되거나 치환되지 않은 약 3 내지 약 8개 탄소 원자의 시클로알킬로 치환된 1 내지 약 3개 탄소 원자의 알킬,

(3) 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 3 내지 약 15개탄소 원자의 시클로알킬,

(4) 산소, 질소, 및 S(O)_i(여기서 i는 0, 1 또는 2임)로 구성된 군으로부터 선택된 헤테로원자 및 탄소로부터 선택된 고리 원자를 갖는 4 내지 약 10개 고리 원자의 헤테로시클로알킬로서, 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 헤테로시클로알킬,

(5) 고리 탄소상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 3 내지 6개 고리 탄소 원자를 갖는 5 내지 7원 헤테로사이클인(여기서, V는 -CH₂-, -O-, -S(=O)-, -S(O)₂- 또는 -S-임)을 포함하여, 산소, 질소, 및 S(O)_i(여기서 i는 0, 1 또는 2임)로 구성된 군으로부터 선택된 헤테로원자 및 탄소로부터 선택된 고리 원자를 갖는 4 내지 약 10개 고리 원자의 헤테로시클로,

(6) 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 약 3 내지 약 8개 탄소 원자의 시클로알킬로 치환되거나 치환되지 않은 2 내지 약 6개 탄소 원자의 알케닐,

(7) Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 약 6 내지 약 14개 탄소 원자의 아릴,

(8) 산소, 질소, 및 황으로부터 선택된 헤테로원자 및 탄소로부터 선택된 고리 원자를 갖는 약 5 내지 약 14개 고리 원자의 헤테로아릴로서, Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 헤테로아릴,

(9) 알킬 사슬상에서 히드록시 또는 할로겐으로 치환되거나 치환되지 않으며, 아릴 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 약 7 내지 약 15개 탄소 원자의 아르알킬,

(10) 산소, 질소 및 황으로부터 선택된 헤테로원자 및 탄소로부터 선택된 고리 원자를 갖는 약 5 내지 약 14개 고리 원자의 헤테로아르알킬로서, 알킬 사슬상에서 히드록시 또는 할로겐으로 치환되거나 치환되지 않으며 고리상에서 치환되지 않거나 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환된 헤테로아르알킬,

(11) 아릴 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 약 8 내지 약 16개 탄소 원자의 아르알케닐,

(12) 산소, 질소 및 황으로부터 선택된 헤테로원자 및 탄소로부터 선택된 고리 원자를 갖는 약 5 내지 약 14개 고리 원자의 헤테로아르알케닐로서, 고리 탄소상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 헤테로아르알케닐,

(17) 약 9 내지 약 15개 탄소 원자의 융합된 카르보시클릭 알킬,

(18) 디플루오로메틸 또는 1 내지 약 12개 탄소 원자의 퍼플루오로알킬,

(19) 약 6 내지 약 14개 탄소 원자의 퍼플루오로알킬,

(20) 약 7 내지 약 15개 탄소 원자의 퍼플루오로아르알킬, 및

(21) X가 직접 연결기인 경우 수소;

여기서, 각각 Y₁, Y₂, 및 Y₃는 독립적으로 선택되며,

(ⅰ) 할로겐, 시아노, 니트로, 테트라졸릴, 구아니디노, 아미디노, 메틸구아니디노, -CF₃, -CF₂CF₃, -CH(CF₃)₂-, -C(OH)(CF₃)₂, -OCF₃, -OCF₂H, -OCF₂CF₃, -OC(O)NH₂, -OC(O)NHZ₁, -OC(O)NZ₁Z₂, -NHC(O)Z₁, -NHC(O)NH₂, -NHC(O)NZ₁, -NHC(O)NZ₁Z₂, -C(O)OH, -C(O)OZ₁, -C(O)NH₂, -C(O)NHZ₁, -C(O)NZ₁Z₂, -P(O)₃H₂, -P(O)₃(Z₁)₂, -S(O)₃H, -S(O)_mZ₁, -Z₁, -OZ₁, -OH, -NH₂, -NHZ₁, -NZ₁Z₂, -C(=NH)NH₂, -C(=NOH)NH₂, -N-모르폴리노, 및 -S(O)_m(CF₂)_qCF₃로 구성된 군으로부터 선택되거나(여기서, m은 0, 1 또는 2이며, q는 0 내지 5의 정수이고, Z₁및 Z₂는 독립적으로 1 내지 약 12개 탄소 원자의 알킬, 약 6 내지 약 14개 탄소 원자의 아릴, 약 5 내지 약 14개 고리 원자의 헤테로아릴, 약 7 내지 약 15개 탄소 원자의 아르알킬, 및 약 5 내지 약 14개 고리 원자의 헤테로아르알킬로 구성된 군으로부터 선택됨); 또는

(ⅱ) Y₁및 Y₂가 함께 -O[C(Z₃)(Z₄)]_rO- 또는 -O[C(Z₃)(Z₄)]_r+1-이 되도록 선택되고(여기서, r은 1 내지 4의 정수이고 Z₃및 Z₄는 독립적으로 수소, 1 내지 약 12개 탄소 원자의 알킬, 약 6 내지 약 14개 탄소 원자의 아릴, 약 5 내지 약 14개 고리 원자의 헤테로아릴, 약 7 내지 약 15개 탄소 원자의 아르알킬, 및 약 5 내지 약 14개 고리 원자의 헤테로아르알킬로 구성된 군으로부터 선택됨);

(c) R₂는 -CH₃, -C₂H₅, -(CH₂)₂OH, -(CH₂)₂OA₁, -CH(R₅)OH, -CH(R₅)OA₁, 및 -CH₂NH-X'-R₆으로 구성된 군으로부터 선택되고, 여기서 A₁은 -C(=O)OR₆, -C(=O)R₆또는 -C(=O)NR₅R₆이고; X'는 -S(O)₂-, -S(O)₂-N(R'')-, -(C=O)-, -C(=O)-O-, -C(=O)-NH-, -P(O)(R'')-, 및 직접 연결기로 구성된 군으로부터 선택되며, 여기서 R''는 수소, 1 내지 약 4개 탄소 원자의 알킬, 약 6 내지 약 14개 탄소 원자의 아릴 또는 약 7 내지 약 16개 탄소 원자의 아르알킬이며, 단 X'가 -P(O)(R'')-인 경우 R''는 수소가 아니고; R₅는 하기 기로 구성된 군으로부터 선택되며:

(1) Y₁및 Y₂로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 2개의 치환기로 치환되거나 치환되지 않은 1 내지 약 4개 탄소 원자의 알킬,

(2) 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 일치환, 이치환 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 약 3 내지 약 6개 탄소 원자의 시클로알킬로 치환된 1 내지 약 3개 탄소 원자의 알킬,

(3) 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 3 내지 약 6개 탄소 원자의 시클로알킬,

(4) 산소, 질소, 및 S(O)_i(여기서 i는 0, 1 또는 2임)로 구성된 군으로부터 선택된 헤테로원자 및 탄소로부터 선택된 고리 원자를 갖는 4 내지 약 6개 고리 원자의 헤테로시클로알킬로서, 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 헤테로시클로알킬,

(5) 고리 탄소상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 3 내지 6개 고리 탄소 원자를 갖는 5 내지 7원 헤테로사이클인(여기서, V는 -CH₂-, -O-, -S(=O)-, -S(O)₂- 또는 -S-임)을 포함하여, 산소, 질소, 및 S(O)_i(여기서 i는 0, 1 또는 2임)로 구성된 군으로부터 선택된 헤테로원자 및 탄소로부터 선택된 고리 원자를 갖는 4 내지 약 6개 고리 원자의 헤테로시클로,

(6) 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 약 3 내지 약 6개 탄소 원자의 시클로알킬로 치환되거나 치환되지 않은 2 내지 약 6개 탄소 원자의 알케닐,

(7) Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 페닐,

(8) 산소, 질소, 및 황으로부터 선택된 헤테로원자 및 탄소로부터 선택된 고리 원자를 갖는 약 5 내지 약 6개 고리 원자의 헤테로아릴로서, Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 헤테로아릴,

(9) 페닐로 치환된 1 내지 약 4개 탄소 원자의 알킬로서, 페닐 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 알킬,

(10) 산소, 질소 및 황으로부터 선택된 헤테로원자 및 탄소로부터 선택된 고리 원자를 갖는 약 5 내지 약 6개 고리 원자의 헤테로아르알킬로서, 알킬 사슬상에서 히드록시 또는 할로겐으로 치환되거나 치환되지 않으며 고리상에서 치환되지 않거나 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환된 헤테로아르알킬,

(11) 아릴 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 약 8 내지 약 12개 탄소 원자의 아르알케닐,

(12) 산소, 질소 및 황으로부터 선택된 헤테로원자 및 탄소로부터 선택된 고리 원자를 갖는 약 5 내지 약 6개 고리 원자의 헤테로아르알케닐로서, 고리 탄소상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 헤테로아르알케닐,

(13) 수소;

R₆는 하기 기로 구성된 군으로부터 선택되며:

(1) Y₁및 Y₂로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 2개의 치환기로 치환되거나 치환되지 않은 1 내지 약 12개 탄소 원자의 알킬,

(2) 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 일치환, 이치환 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 약 3 내지 약 8개 탄소원자의 시클로알킬로 치환된 1 내지 약 3개 탄소 원자의 알킬,

(3) 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 3 내지 약 15개 탄소 원자의 시클로알킬,

(6) Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 약 6 내지 약 14개 탄소 원자의 아릴,

(7) 산소, 질소, 및 황으로부터 선택된 헤테로원자 및 탄소로부터 선택된 고리 원자를 갖는 약 5 내지 약 14개 고리 원자의 헤테로아릴로서, Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 헤테로아릴,

(8) 알킬 사슬상에서 히드록시 또는 할로겐으로 치환되거나 치환되지 않으며, 아릴 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 약 7 내지 약 15개 탄소 원자의 아르알킬,

(9) 산소, 질소 및 황으로부터 선택된 헤테로원자 및 탄소로부터 선택된 고리 원자를 갖는 약 5 내지 약 14개 고리 원자의 헤테로아르알킬로서, 알킬 사슬상에서 히드록시 또는 할로겐으로 치환되거나 치환되지 않으며 고리상에서 치환되지 않거나 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환된 헤테로아르알킬,

(10) 수소, 단 A₁이 -C(=O)OR₆인 경우 R₆는 수소가 아니고;

(d) R₃는 H 또는 메틸로부터 선택되거나, R₃및 R_4a및 R_4b가 함께 (f)에 기재된 바와 같이 선택되며;

(e) (ⅰ) R_4a가 S 배열 상태이고 H, -CH₂-S-CH₃-, -CH₂OH, -CH₂CN, 1 내지 약 3개 탄소 원자의 저급 알킬, -CH₂C ≡CH, -CH₂CH=CH₂및 -CH=CH₂로 구성된 군으로부터 선택되며, R_4b는 수소이고;

(ⅱ) R_4a및 R_4b가 독립적으로 1 내지 3개 탄소 원자의 저급 알킬이며;

(ⅲ) R_4a및 R_4b가 함께 선택되고 -(CH₂)_k-(여기서, k는 스피로시클로알킬기를 제공하도록 5 또는 6임)이거나;

(ⅳ) R₃및 R_4a및 R_4b가 함께 하기 (f)에 기재된 바와 같이 선택되며;

(f) 대안적으로, R₃및 R₄는 S 배열 상태가 되고 P2에서 프롤릴, 피페콜릴, 아제티딘-2-카르보닐, 4-히드록시프롤릴, 3-히드록시프롤릴, 4-아미노프롤릴, 4-(-CH₂NH₂)-프롤릴, 3,4-메타노프로필 및 3,4-데히드로프롤릴로 구성된 군으로부터 선택된 기를 제공하도록 함께 선택되고 R_4b는 수소이며;

(g) R₇은 수소이거나 1 내지 약 4개 탄소 원자의 알킬이고;

(h) E는 Q-T이며,

여기서 (ⅰ) Q는 -C(R₁₃R₁₄)_t-, R₈및 R₉로 치환된 페닐, R₈또는 R₈및 R₉로 치환된 1 내지 2개 헤테로원자를 갖는 5원 또는 6원 헤테로시클릭 고리, 및 R₈및 R₉로 치환된 1 내지 2개 헤테로원자를 갖는 9원 또는 10원 헤테로시클릭 고리로 구성된 군으로부터 선택되고, 여기서 헤테로 원자는 질소 및 황으로부터 선택되며;

(ⅱ) T는 -C(=NR₁₀)NHR₁₁, -NH-C(=NR₁₀)NHR₁₁및 -NHR₁₅로 구성된 군으로부터 선택되고;

여기서, R₈및 R₉는 독립적으로 수소, 히드록시, 할로겐, 1 내지 약 4개 탄소 원자의 알킬, 1 내지 약 4개 탄소 원자의 알콕시로 치환된 1 내지 약 4개 탄소 원자의 알킬, 1 내지 약 6개 탄소 원자의 알콕시, 및 트리플루오로메틸로 구성된 군으로부터 선택되며; R₁₀및 R₁₁은 독립적으로 수소, 히드록시, 1 내지 약 3개 탄소 원자의 알콕시, 3 내지 약 16개 탄소 원자의 트리히드로카르빌실릴, 1 내지 약 3개 탄소 원자의 알킬 또는 -C(=O)R₁₂이며, 단 R₁₀및 R₁₁은 둘 모두 히드록시 또는 알콕시가 아니고; R₁₂는 수소, 1 내지 약 6개 탄소 원자의 알킬, 1 내지 약 6개 탄소 원자의 알콕시 또는 (CF₂)_jCF₃(여기서, j는 0, 1, 2, 또는 3임)이고; R₁₃및 R₁₄는 각각 독립적으로 수소, 1 내지 약 3개 탄소 원자의 저급 알킬로 구성된 된으로부터 선택되며; R₁₅는 수소, 1 내지 약 6개 탄소 원자의 알킬, 및 -(CF₂)_hCF₃(여기서, h는 0, 1, 2, 또는 3임)로 구성된 군으로부터 선택되고, t는 0 내지 6의 정수이다.

본 발명의 화합물은 하기 화학식(Ia)에 제시된 P₁, P₂, P₃, P₄로 지정한 부분으로 나눌 수 있다:

(Ia)

상기 식에서, X, R₁, R₂, R₃, R₄, R₇및 E는 화학식(I)에 관해 정의된 바와 같다. 따라서, P₁또는 P1으로 지칭되는 화학식(I)의 화합물의 부분은 하기 부분이다:

P₂또는 P2로 지칭되는 화학식(I)의 화합물의 부분은 하기 부분이다:

P₃또는 P3로 지칭되는 화학식(I)의 화합물의 부분은 하기 부분이다:

다른 요소들 중에서, 특히 본 발명은 본 발명의 신규 화합물이 유로키나제의 억제제로서 활성이 있다는 발견에 기초한다. 본 발명의 화합물은 혈관생성을 억제하는 활성을 나타낸다.

다른 측면에서, 본 발명은 치료학적으로 유효량의 본 발명의 화합물 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 유로키나제를 억제시키기 위하여 본 발명의 화합물 및 약제학적 조성물을 사용하는 방법에 관한 것이다.

정의

본 발명에 따라 그리고 본원에 따라, 하기 용어는 분명히 다르게 지시되지 않는 한 하기 의미로 정의된다:

용어 "알케닐"은 하나 이상의 이중 결합을 가진 불포화 지방족 기를 의미한다.

용어 "알키닐"은 직쇄, 분지쇄 및 고리형(폴리시클릭을 포함) 기를 포함하는 포화 지방족 기를 의미한다.

용어 "알콕시" 및 "알콕실"은 화학식 R-O-(여기에서, R은 알킬기임)를 갖는 기를 나타낸다.

용어 "알콕시카르보닐"은 -C(O)OR(여기에서, R은 알킬임)을 나타낸다.

용어 "아르알케닐"은 아릴기로 치환된 알케닐기를 의미한다. 바람직하게는, 알케닐기는 2 내지 약 6개의 탄소 원자를 갖는다.

용어 "아르알킬"은 아릴기로 치환된 알킬기를 의미한다. 적당한 아르알킬기로는 벤질, 페네틸 등이 있으며, 이들 모두는 임의로 치환될 수 있다. 바람직하게는, 알킬기는 1 내지 약 6개의 탄소 원자를 갖는다.

용어 "아릴"은 공액 파이(pi) 전자계를 가진 하나 이상의 고리를 갖는 방향족 기를 의미하며, 이것에는 카르보시클릭 아릴, 헤테로시클릭 아릴 및 비아릴(biaryl) 기가 있으며, 이들 모두는 임의로 치환될 수 있다.

용어 "아릴옥시"는 화학식 R-O-(여기에서, R은 아릴기임)를 가진 기를 의미한다.

용어 "아르알콕시"는 화학식 R-O-(여기에서, R은 아르알킬임)를 가진 기를 의미한다.

용어 "아미노산"은 그 구조가 입체이성질체를 허용하는 경우, D형 및 L형 입체이성질체의 천연, 비천연 아미노산 및 그 유사체 모두를 의미한다. 천연 아미노산으로는 알라닌(Ala), 아르기닌(Arg), 아스파라긴(Asn), 아스파르트산(Asp), 시스테인(Cys), 글루타민(Gln), 글루탐산(Glu), 글리신(Gly), 히시티딘(His), 이소류신(Ile), 류신(Leu), 리신(Lys), 메티오닌(Met), 페닐알라닌(Phe), 프롤린(Pro), 세린(Ser), 트레오닌(Thr), 트립토판(Trp), 티로신(Tyr) 및 발린(Val)이 있다. 비천연 아미노산으로는 아제티딘카르복실산, 2-아미노아디프산, 3-아미노아디프산, 베타-알라닌, 아미노프로피온산, 2-아미노부티르산, 4-아미노부티르산, 6-아미노카프로산, 2-아미노헵탄산, 2-아미노이소부티르산, 3-아미노이소부티르산, 2-아미노피멜산, 2,4-디아미노이소부티르산, 데모신, 2,2'-디아미노피멜산, 2,3-디아미노프로피온산, N-에틸글리신, N-에틸아스파라긴, 히드록실리신, 알로-히드록실리신, 3-히드록시프롤린, 4-히드록시프롤린, 이소데스모신, 알로-이소류신, N-메틸글리신, N-메틸이소류신, N-메틸발린, 노르발린, 노르류신, 오르니틴 및 피페콜산이 있으나, 이에 한정되지 않는다. 아미노산 유사체로는 N-말단 아미노기 또는 측쇄기 상에서 가역적 또는 비가역적으로 화학적으로 차단되거나, 개질된 천연 및 비천연 아미노산이 있으며, 예를 들어 메티오닌 술폭시드, 메티오닌 술폰, S-(카르복시메틸)-시스테인, S-(카르복시메틸)-시스테인 술폭시드 및 S-(카르복시메틸)-시스테인 술폰이 있다.

용어 "아미노산 유사체"는 C-말단 카르복시기, N-말단 아미노기 또는 측쇄 작용기가 다른 작용기로 화학적으로 개질된 아미노산을 의미한다. 예를 들어, 아스파르트산-(베타-메틸 에스테르)는 아스파르트산의 아미노산 유사체이고; N-에틸글리신은 글리신의 아미노산 유사체이며: 또는 알라닌 카르복스아미드는 알라닌의 아미노산 유사체이다.

용어 "아미노산 잔기"는 다음 구조의 라디칼을 의미한다: (1) -C(O)-R-NH- (여기에서, R은 통상 -CH(R')-이고, R'은 H 또는 치환체를 가진 탄소임); 또는 (2)(여기에서, p는 1, 2 또는 3으로서 각각 아제티딘카르복실산, 프롤린 또는 피페콜린산 잔기를 나타냄).

용어 "비아릴'은 페닐 고리의 부착점에 대해 오르토, 메타 또는 파라 위치에서 본원에 정의된 카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아릴로 치환된 페닐을 의미한다.

용어 "염수"는 염화나트륨의 포화 수용액을 의미한다.

용어 "카르보시클릭 아릴'은 방향족 고리상의 고리 원자가 탄소 원자인 방향족 기를 의미한다. 카르보시클릭 아릴기로는 모노시클릭 카르보시클릭 아릴기 및 나프틸기가 있으며, 이들 모두는 임의로 치환될 수 있다. 적당한 카르보시클릭 알릴기로는 페닐 및 나프틸이 있다. 적당한 치환된 카르보시클릭 아릴기로는 하나이상의 치환체, 유리하게는 저급 알킬, 히드록시, 저급 알콕시, 저급 알콕시카르보닐, 할로겐, 트리플루오로메틸, 디플루오로메틸, 니트로 및 시아노로 치환된 인덴 및 페닐이 있다. 치환된 나프틸은 나프틸, 더욱 바람직하게는 상기 화학식 (Ⅰ)에 정의된 Y₁, Y₂, 및/또는 Y₃로 치환된 1- 또는 2-나프틸을 의미한다.

용어 "시클로알케닐"은 고리형 알케닐기를 의미한다. 적당한 시클로알케닐기로는 예를 들어, 시클로펜테닐 및 시클로헥세닐이 있다.

용어 "시클로알킬"은 하나 이상의 고리를 가진 시클릭 알킬기로서, 융합된 고리 시클릭 알킬기를 포함하는 폴리시클릭기를 포함한다. 적당한 시클로알킬기로는 예를 들어, 시클로헥실, 시클로프로필, 시클로펜틸 및 시클로헵틸이 있다.

용어 "시클로헥실메틸"은 CH₂에 부착된 시클로헥실기를 의미한다.

용어 "융합된 카르보시클릭"은 방향족 및 비방향족 고리를 모두 가진 멀티시클릭 융합된 카르보시클릭 고리를 의미한다. 적당한 융합된 카르보시클릭 고리로는 플루오레닐, 테트랄린 등이 있다.

용어 "융합된 카르보시클릭 알킬"은 융합된 카르보시클릭 고리 부분, 바람직하게는 방향족 및 비방향족 고리를 모두 포함하는 멀티시클릭 융합된 카르보시클릭 고리로 치환된 알킬기를 의미한다. 적당한 융합된 카르보시클릭 알킬기로는 플루오레닐메틸 등이 있다.

용어 "할로겐"은 플루오르, 염소, 브롬 및 요오드를 의미한다.

용어 "헤테로아르알케닐"은 헤테로아릴로 치환된 알케닐기를 의미하고, 참고문헌["Handbook of Chemistry and Physics", 49th edition, 1986, R.C. Weast, editor; The Chemical Rubber Co., Cleveland, OH. 특히, Section C, Rules for Naming Organic Compounds, B. Fundamental Heterocyclic Systems]에 기술된 헤테로시클릭 시스템을 포함한다. 바람직하게는, 알케닐기는 2 내지 약 5개의 탄소 원자를 갖는다.

용어 "헤테로알랄킬"은 피콜릴과 같은 헤테로아릴로 치환된 알킬기를 의미하고, 상기 참고문헌["Handbook of Chemistry and Physics", 49th edition, 1986, R.C. Weast, editor; The Chemical Rubber Co., Cleveland, OH. 특히, Section C, Rules for Naming Organic Compounds, B. Fundamental Heterocyclic Systems]에 기술된 헤테로시클릭 시스템을 포함한다. 바람직하게는, 알킬기는 1 내지 약 6개의 탄소 원자를 갖는다.

용어 "헤테로아릴"은 1 내지 14개의 탄소 원자를 갖는 방향족 기로서, 고리 원자의 나머지가 헤테로원자이며, 참고문헌["Handbook of Chemistry and Physics", 49th edition, 1986, R.C. Weast, editor; The Chemical Rubber Co., Cleveland, OH. 특히, Section C, Rules for Naming Organic Compounds, B. Fundamental Heterocyclic Systems]에 기술된 헤테로시클릭 시스템을 포함한다. 적당한 헤테로원자로는 산소, 질소, 및 S(O)_i(여기에서 i는 0, 1 또는 2임)가 있으며, 적당한 헤테로시클릭 아릴로는 푸라닐, 티에닐, 피리딜, 피롤릴, 피리미딜, 피라지닐, 이미다졸릴 등이 있다.

용어 "헤테로시클로"는 탄소, 질소, 산소 및/또는 황 원자로 이루어진 환원된 헤테로시클릭 고리 시스템을 의미하고, 참고문헌["Handbook of Chemistry and Physics", 49th edition, 1986, R.C. Weast, editor; The Chemical Rubber Co., Cleveland, OH. 특히, Section C, Rules for Naming Organic Compounds, B. Fundamental Heterocyclic Systems]에 기술된 헤테로시클릭 시스템을 포함한다.

용어 "헤테로시클로알킬'은 헤테로시클로기로 치환된 알킬기를 의미하며, 참고문헌["Handbook of Chemistry and Physics", 49th edition, 1986, R.C. Weast, editor; The Chemical Rubber Co., Cleveland, OH. 특히, Section C, Rules for Naming Organic Compounds, B. Fundamental Heterocyclic Systems]에 기술된 헤테로시클릭 시스템을 포함한다. 바람직하게는, 알킬기는 약 1 내지 약 6개의 탄소 원자를 포함한다.

본원에서 유기 라디칼 또는 기와 관련하여 언급된 용어 "저급"은 1 내지 5개의 탄소 원자, 바람직하게는 1 내지 4개의 탄소 원자, 유리하게는 1개 또는 2개의 탄소 원자를 가진 라디칼 또는 기를 의미한다. 그러한 라디칼 또는 기는 직쇄 또는 분지쇄일 수 있다.

용어 "퍼플루오로알킬"은 모든 수소가 플루오르로 치환된 알킬기를 의미한다.

용어 "퍼플루오로아릴"은 모든 수소가 플루오르로 치환된 아릴기를 의미한다.

용어 "퍼플루오로아릴알킬'은 아릴 부분상의 모든 수소가 플루오르로 치환된아르알킬을 의미한다.

용어 "약제학적으로 허용되는 염"은 본 발명의 화합물과 유기 또는 무기산의 조합으로부터 유도된 본 발명의 화합물의 염을 포함한다. 사실, 염 형태의 사용은 염기 형태의 사용과 같다. 본 발명의 화합물은 유리 염기 및 염 형태 모두 유용하고, 두 형태 모두 본 발명의 범주에 속하는 것으로 간주된다.

"AcN", "CH₃CN" 또는 "MeCN"은 아세토니트릴을 의미한다.

"AIBN"은 2,2'-아조비스이소부티로니트릴을 의미한다.

"Bn"은 벤질을 의미한다.

"Boc"은 t-부톡시카르보닐을 의미한다.

"Boc₂O"은 Boc 무수물(디-3차-부틸카르보네이트)을 의미한다.

"BOC-ON"은 2-(3차-부톡시카르보닐옥시아미노)-2-페닐아세토니트릴을 의미한다.

"BzlSO₂"은 벤질술포닐을 의미한다.

"Cbz" 또는 "CBz"는 벤질옥시카르보닐을 의미한다.

"CNNH₂" 또는 "H₂NCN"은 시안아미드를 의미한다.

"CsCO₃"은 세슘 카르보네이트를 의미한다.

"DCA"은 디클로로아세트산을 의미한다.

"DCC"는 N,N'-디시클로헥실카르보디이미드를 의미한다.

"DCM" 또는 "CH₂Cl₂"는 디클로로메탄을 의미한다.

"DIEA"는 디이소프로필에틸아민을 의미한다.

"DMF"는 N,N-디메틸포름아미드를 의미한다.

"DMSO"는 디메틸 술폭시드를 의미한다.

"DMAP"는 4-N,N-디메틸아미노피리딘을 의미한다.

"EDC"는 1-에틸-3-(3-디메틸아미노-프로필)카르보디이미드 히드로클로라이드를 의미한다.

"Et₃N" 또는 "TEA'는 트리에틸아민을 의미한다.

"EtOAc"는 에틸 아세테이트를 의미한다.

"EtOH"는 에탄올을 의미한다.

"HATU"는 O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로뮴 헥사플루오로포스페이트를 의미한다.

"HBTU"는 2-(1H-벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로뮴 헥사플루오로포스페이트를 의미한다.

"HCl"은 염산을 의미한다.

"HOAc"는 아세트산을 의미한다.

"HOAt" 또는 "HOAT"는 1-히드록시-7-아자벤조트리아졸을 의미한다.

"HOBt"는 1-히드록시벤조트리아졸 모노히드레이트를 의미한다.

"i-BuOCOCl"은 이소부틸클로로포르메이트를 의미한다.

"HPLC"는 고압 액체 크로마토그래피를 의미한다.

"LiAlH₄"는 리튬 알루미늄 하이드리드를 의미한다.

"LiAlH₂(OEt)₂"는 리튬 알루미늄 하이드리드 디에톡시드를 의미한다.

"Me"는 메틸을 의미한다.

"MeOH"는 메탄올을 의미한다.

"NMM"은 N-메틸모르폴린을 의미한다.

"NBS"는 N-브로모숙신이미드를 의미한다.

"PhB(OH)₂"는 페닐보론산을 의미한다.

"Ph₃P" 또는 "PPh₃"는 트리페닐포스핀을 의미한다.

"PyBOP"는 벤조트리아졸-일-옥시-트리스-피롤리디노-포스포늄 헥사플루오로포스페이트를 의미한다.

"RP-HPLC"는 역상 고압 액체 크로마토그래피를 의미한다.

"TFA"는 트리플루오로아세트산을 의미한다.

"THF"는 테트라히드로푸란을 의미한다.

"TLC"는 박층 크로마토그래피를 의미한다.

도면의 간단한 설명

도 1은 본 발명의 화합물을 합성하는 데 유용한 중간체의 용액상 합성을 위한 반응 개략도이다. 화합물(1-1)은 N-α-Cbz-D-세린(O-t-부틸)이고, 화합물(1-2)는 알라닌 메틸 에스테르 히드로클로라이드 염이다. 도면에서, "ⅰ" 내지 "ⅳ"는다음과 같이 정의된다: ⅰ) EDS, 1-히드록시벤조트리아졸 및 아세토니트릴, 디이소프로필에틸아민으로 Cbz-D-Ser (O-t-부틸)-Ala-OMe 수득; (ⅱ) 에탄올/아세트산/물 (4:1:1), 10% 탄소상 Pd, 2시간 동안 45psi H₂, 작업 후 95% 수율; ⅲ) 아세토니트릴, 벤젠술포닐 클로라이드, 디이소프로필에틸아민, 작업 후 43% 수율; 및 ⅳ) 메탄올, 1.0M 수산화리튬, DOWEX 이온 교환 수지상에서의 산성화, 메탄올/물로 용리, 작업 후 95% 수율. 실시예 60 내지 62를 참조하라.

도 2는 본 발명의 화합물의 제조에 유용한 중간체를 제조하는 데 사용될 수 있는 용액상 합성 경로를 나타내는 반응 개략도이다. 도면에서, "ⅰ" 내지 "ⅲ"은 다음과 같이 정의된다: ⅰ) 이소부틸 클로로포르메이트, 탄산나트륨, 물, 작업 후 99.5% 수율; ⅱ) 아세토니트릴 중의 알라닌 t-부틸 에스테르 히드로클로라이드 염, EDC, 및 히드록시벤조트리아졸; 디이소프로필에틸아민, 작업 후 정량적 수율; 및 ⅲ) TFA, DCM, 작업 후 정량적 수율. 실시예 74 내지 76 참조.

도 3은 본 발명의 화합물의 제조에 사용될 수 있는 중간체의 합성에 대한 반응 개략도이다. 도면에서, "ⅰ" 내지 "ⅹⅰ"은 다음과 같이 정의된다: ⅰ) CuCN, DMF, 환류(4시간); ⅱ) EtOAc, 10% NaCN 수용액; ⅲ) N-브로모숙신이미드, 2,2'-아조-비스이소부티로니트릴, CCl₄, 환류(5시간); ⅳ) NaN₃, DMF; ⅴ) 트리페닐포스핀, THF, 물, O℃, 교반(10시간); ⅵ) K₂CO₃, Boc₂O, 물, 디옥산; ⅶ) 히드록실아민 HCl, NMM, MeOH; ⅷ) 10% Pd/C, MeOH, 45psi H₂(10시간); ⅸ) 디옥산 중 4M HCl;ⅹ) CsCO₃, DMF 중의 요오도프로판; 및 ⅹⅰ) 4M HCl, 디옥산, 3시간, 실온.

도 4는 본 발명의 화합물의 제조에 사용될 수 있는 중간체의 합성을 위한 반응 개략도이다. 도면에서, "ⅰ" 내지 "ⅳ"는 다음과 같이 정의된다: ⅰ) NaN₃, DMF; ⅱ) 10% Pd/C, EtOAc, 45psi H₂(11시간); ⅲ) 히드록실아민 HCl, NMM, MeOH; 및 ⅳ) 10% Pd/C, MeOH, 45psi H₂(48시간).

도 5는 본 발명의 화합물의 제조에 사용될 수 있는 중간체의 합성을 위한 반응 개략도이다. 도면에서, "ⅰ" 내지 "ⅶ"은 다음과 같이 정의된다: ⅰ) Cu(Ⅰ)CN, DMF; ⅱ) NBS, 벤조일퍼옥시드, CCl₄, 80℃ (14시간); ⅲ) NaN₃, DMF, 교반(20시간); ⅳ) 히드록실아민 HCl, NMM, MeOH, 교반(3일); ⅴ) CsCO₃, 요오도프로판, DMF, 50℃(20시간); ⅵ) 트리페닐포스핀, THF, 교반(20시간); 및 ⅶ) 3M NaOH로 pH 14까지.

도 6은 실시예 9의 화합물을 중간체로서 사용하여 본 발명의 화합물(여기에서, R₂는 -CH₂OA₁이고 A₁은 -C(=O)R₆임)을 합성하기 위한 반응 개략도이다. 도면에서, "ⅰ"는 다음과 같다: ⅰ) 피리딘, R₆COCl.

도 7은 본 발명의 특정 화합물의 합성을 위한 반응 개략도이다. 도면에서, "ⅰ" 내지 "ⅵ"은 다음과 같다: ⅰ) 트리플루오로아세트산 무수물, 0℃, 밤새 교반; 얼음, CH₂Cl₂, Na₂SO₄; ⅱ) MeOH 중의 Pd/C(10%) (밤새); ⅲ) N-N'-디-Boc-N"-트리플루오로메탄술포닐-구아니딘, TEA, CH₂Cl₂, 6시간; HCl, 염수, Na₂SO₂; 칼럼 크로마토그래피(CH₂Cl₂/MeOH 99:1); ⅳ) 탄산칼륨, H₂O/MeOH(2:15), 밤새; CH₂Cl₂/MeOH (9:1), Na₂SO₄; ⅴ) 벤질술포닐-D-세린-L-알라닌 카르복실레이트, HATU, HOAT, DIEA, 아세토니트릴, 밤새; EtOAc, HCl, NaHCO₃, 염수; HPLC(CH₃CN, H₂O, 0.1% TFA); ⅵ) CH₂Cl₂/TFA(1:1), 90분; HPLC(CH₃CN, H₂O, 0.1% TFA).

도 8은 본 발명의 특정 화합물의 합성을 위한 반응 개략도이다. 도면에서, "ⅰ" 내지 "ⅴ"는 다음과 같다: ⅰ) 트리플루오로아세트산 무수물, 밤새 교반; 얼음, CH₂Cl₂, Na₂SO₄; ⅱ) MeOH 중의 Pd/C (10%) (밤새); ⅲ) N-N'-Boc-N"-트리플루오로메탄술포닐-구아니딘, TEA, CH₂Cl₂, 24시간; HCl, 염수, Na₂SO₄; 칼럼 크로마토그래피(CH₂Cl₂/MeOH 98:2); ⅳ) 탄산칼륨, H₂O/MeOH(1:1), 밤새; H₂O, CH₂Cl₂/MeOH (9:1), Na₂SO₄; 및 ⅴ) 벤질술포닐-D-세린-L-알라닌 카르복실레이트, HATU, HOAT, DIEA, 아세토니트릴 중, 실온, 밤새; EtOAc, HCl, NaHCO₃, 염수; CH₂Cl₂/TFA(1:1), 실온, 2시간, HPLC(CH₃CN, H₂O, 0.1% TFA).

도 9는 본 발명의 화합물의 합성을 위한 반응 개략도이다. 도면에서, "ⅰ" 내지 "ⅵ"은 다음과 같다: ⅰ) 트리플루오로아세트산 무수물, 0℃, 1시간; ⅱ) KNO₃, -20℃, 밤새 교반; CH₂Cl₂, Na₂SO₄, 칼럼 크로마토그래피; ⅲ) MeOH 중의 HCl,0℃, SnCl₂, 30분간 교반, NaHCO₃, CH₂Cl₂, Na₂SO₄; ⅳ) N₁N'-디-Boc-N"-트리플루오로메탄술포닐-구아니딘, TEA, CH₂Cl₃, 24시간 교반; HCl(1M), 염수, Na₂SO₄, 칼럼 크로마토그래피; ⅴ) K₂CO₃, H₂O/MeOH(1:1), 밤새 교반; H₂O, CH₂Cl₂/MeOH(95:5), Na₂SO₄; 및 ⅵ) 벤질술포닐-D-세린-L-알라닌 카르복실레이트, HATU, HOAT, DIEA, AcN, 밤새 교반; EtOAc, HCl(1M), 수성 NaHCO₃, 염수, Na₂SO₄, HPLC.

도 10a 내지 10f는 본 발명의 특정 바람직한 화합물을 도시한 것이다.

도 11은 본 발명의 화합물의 합성을 위한 반응 개략도이다. 도면에서, "ⅰ" 내지 "ⅹⅱ"는 다음과 같다: ⅰ) CCl₄, N-브로모숙신이미드; N₂, AIBN, 교반, 플래쉬 크로마토그래피; ⅱ) DMF, NaN₃, 밤새 교반, 디에틸에테르, 물, 염수, MgSO₄, 여과; ⅲ) MeOH, TEA, 65℃, 4시간; EtOAc, H₂O, 염수, MgSO₄; ⅳ) THF/물, Ph₃P, 밤새 교반; 1N HCl, H₂O, DCM, ph~9; ⅴ) 디옥산/물, K₂CO₃, Boc₂O, 밤새 교반; EtOAc, 수성 NaHCO₃, 염수, Na₂SO₄, 플래쉬 칼럼 크로마토그래피; ⅵ) DMF, 2-요오도프로판, CsCO₃; EtOAc, 수성 NaHCO₃, 플래쉬 칼럼 크로마토그래피; ⅶ) 디옥산, 디옥산 중의 4N HCl, 용매 제거; ⅷ) AcN, DIEA; Boc-알라닌, EDC, HOBt, 밤새 교반; EtOAc, 수성 NaHCO₃, 염수, Na₂SO₄, 플래쉬 칼럼 크로마토그래피; ⅸ) 디옥산, 디옥산 중의 4N HCl, 용매 제거; ⅹ) AcN, DIEA, BnSO₂-dSer(tBu)-OH, EDC, HOBt, 밤새 교반;EtOAc, 수성 NaHCO₃, 염수, Na₂SO₄, RP-HPLC; xc) DCM, TFA; RP-HPLC; 및 ⅹⅱ) H₂O, HOAc, Zn 더스트; RP-HPLC.

도 12는 본 발명의 화합물의 합성을 위한 반응 개략도이다. 도면에서, "ⅰ" 내지 "ⅵ"는 다음과 같다: ⅰ) EDC, HOBt, DIEA 및 CH₃CN; ⅱ) TFA, CH₂Cl₂; ⅲ) BNSO₂-dSer(tBu)-OH, EDC, HOBt, 2,4,6-콜리딘, CH₃CN; ⅳ) 히드록실아민 히드로클로라이드; ⅴ) Zn/아세트산; 및 ⅵ) TFA, CH₂Cl₂.

도 13a 내지 13c는 본 발명의 특정 바람직한 화합물을 도시한 것이다.

도 14는 본 발명의 화합물의 합성을 위한 반응 개략도이다. 도면에서, "ⅰ" 내지 "ⅴ"는 다음과 같다: ⅰ) BH₃, THF, 78% 수율; ⅱ) BOC-ON, 95% 수율; ⅲ) Pd/C, H₂, 81% 수율; ⅳ) CNBr, NaHCO₃, CH₃CN, H₂O; ⅴ) TFA, CH₂Cl₂; 및 ⅵ) 벤질술포닐-D-세린-L-알라닌 카르복실레이트, HATU, HOAT, DIEA, CH₃CN.

도 15는 본 발명의 화합물의 합성을 위한 반응 개략도이다. 도면에서, "ⅰ" 내지 "ⅲ"은 다음과 같다: ⅰ) 티오닐 클로라이드, MeOH; ⅱ) Na/Hg (5%), CNNH₂, 환류, 62% 수율; 및 ⅲ) 벤질술포닐-D-세린-L-알라닌 카르복실레이트, HATU, HOAT, DIEA, CH₃CN.

도 16은 본 발명의 화합물의 합성을 위한 반응 개략도이다. 도면에서, "ⅰ" 내지 "ⅵ"은 다음과 같다: ⅰ) BH₃, THF; ⅱ) Cl/디옥산, 정량적 수율; ⅲ) BOC-ON,THF; ⅳ) TEA, CH₂Cl₂; ⅴ) TFA/CH₂Cl₂; 및 ⅵ) 벤질술포닐-D-세린-L-알라닌 카르복실레이트, HATU, HOAT, DIEA, CH₃CN.

도 17은 본 발명의 화합물의 합성을 위한 반응 개략도이다. 도면에서, "ⅰ" 내지 "ⅵ"은 다음과 같다: ⅰ) BH₃, THF; ⅱ) HCl, 정량적 수율; ⅲ) BOC-ON, THF; ⅳ) TEA, CH₂Cl₂; ⅴ) TFA, CH₂Cl₂; 및 ⅵ) 벤질술포닐-D-세린-L-알라닌 카르복실레이트, HATU, HOAT, DIEA, CH₃CN.

발명의 상세한 설명

하기 화학식(I)의 화합물 및 이들의 약제학적으로 허용되는 염:

상기 식에서,

(b) R₁은 하기 기로 구성된 군으로부터 선택되며:

(5) 고리 탄소상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 3 내지 6개 고리 탄소 원자를 갖는 5 내지 7원 헤테로사이클인(여기서, V는 -CH₂-, -O-,-S(=O)-, -S(O)₂- 또는 -S-임)을 포함하여, 산소, 질소, 및 S(O)_i(여기서 i는 0, 1 또는 2임)로 구성된 군으로부터 선택된 헤테로원자 및 탄소로부터 선택된 고리 원자를 갖는 4 내지 약 10개 고리 원자의 헤테로시클로,

(19) 약 6 내지 약 14개 탄소 원자의 퍼플루오로알킬,

(20) 약 7 내지 약 15개 탄소 원자의 퍼플루오로아르알킬, 및

(21) X가 직접 연결기인 경우 수소;

여기서, 각각 Y₁, Y₂, 및 Y₃는 독립적으로 선택되며,

(c) R₂는 -CH₃, -C₂H₅, -(CH₂)₂OH, -(CH₂)₂OA₁, -CH(R₅)OH, -CH(R₅)OA₁, 및 -CH₂NH-X'-R₆으로 구성된 군으로부터 선택되고, 여기서 A₁은 -C(=O)OR₆, -C(=O)R₆또는 -C(=O)NR₅R₆이고; X'는 -S(O)₂-, -S(O)₂-N(R'')-, -(C=O)-, -C(=O)-O-, -C(=O)-NH-, -P(O)(R'')-, 및 직접 연결기로 구성된 군으로부터 선택되며, 여기서 R''는수소, 1 내지 약 4개 탄소 원자의 알킬, 약 6 내지 약 14개 탄소 원자의 아릴 또는 약 7 내지 약 16개 탄소 원자의 아르알킬이며, 단 X'가 -P(O)(R'')-인 경우 R''는 수소가 아니고; R₅는 하기 기로 구성된 군으로부터 선택되며:

(5) 고리 탄소상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 3 내지 6개고리 탄소 원자를 갖는 5 내지 7원 헤테로사이클인(여기서, V는 -CH₂-, -O-, -S(=O)-, -S(O)₂- 또는 -S-임)을 포함하여, 산소, 질소, 및 S(O)_i(여기서 i는 0, 1 또는 2임)로 구성된 군으로부터 선택된 헤테로원자 및 탄소로부터 선택된 고리 원자를 갖는 4 내지 약 6개 고리 원자의 헤테로시클로,

(10) 산소, 질소 및 황으로부터 선택된 헤테로원자 및 탄소로부터 선택된고리 원자를 갖는 약 5 내지 약 6개 고리 원자의 헤테로아르알킬로서, 알킬 사슬상에서 히드록시 또는 할로겐으로 치환되거나 치환되지 않으며 고리상에서 치환되지 않거나 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환된 헤테로아르알킬,

(13) 수소;

R₆는 하기 기로 구성된 군으로부터 선택되며:

(2) 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 일치환, 이치환 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 약 3 내지 약 8개 탄소 원자의 시클로알킬로 치환된 1 내지 약 3개 탄소 원자의 알킬,

(7) 산소, 질소, 및 황으로부터 선택된 헤테로원자 및 탄소로부터 선택된고리 원자를 갖는 약 5 내지 약 14개 고리 원자의 헤테로아릴로서, Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 헤테로아릴,

(10) 수소, 단 A₁이 -C(=O)OR₆인 경우 R₆는 수소가 아니고;

(g) R₇은 수소이거나 1 내지 약 4개 탄소 원자의 알킬이고;

(h) E는 Q-T이며,

여기서, R₈및 R₉는 독립적으로 수소, 히드록시, 할로겐, 1 내지 약 4개 탄소원자의 알킬, 1 내지 약 4개 탄소 원자의 알콕시로 치환된 1 내지 약 4개 탄소 원자의 알킬, 1 내지 약 6개 탄소 원자의 알콕시, 및 트리플루오로메틸로 구성된 군으로부터 선택되며; R₁₀및 R₁₁은 독립적으로 수소, 히드록시, 1 내지 약 3개 탄소 원자의 알콕시, 3 내지 약 16개 탄소 원자의 트리히드로카르빌실릴, 1 내지 약 3개 탄소 원자의 알킬 또는 -C(=O)R₁₂이며, 단 R₁₀및 R₁₁은 둘 모두 히드록시 또는 알콕시가 아니고; R₁₂는 수소, 1 내지 약 6개 탄소 원자의 알킬, 1 내지 약 6개 탄소 원자의 알콕시 또는 (CF₂)_jCF₃(여기서, j는 0, 1, 2, 또는 3임)이고; R₁₃및 R₁₄는 각각 독립적으로 수소, 1 내지 약 3개 탄소 원자의 저급 알킬로 구성된 된으로부터 선택되며; R₁₅는 수소, 1 내지 약 6개 탄소 원자의 알킬, 및 -(CF₂)_hCF₃(여기서, h는 0, 1, 2, 또는 3임)로 구성된 군으로부터 선택되고, t는 0 내지 6의 정수이다.

본 발명의 다른 측면에 따르면, 바람직한 화합물로는 화학식(I)의 화합물(단, E가 -C(R₁₃R₁₄)_t- 인 경우, T는 -NHR₁₅이 아님)이 있다. 한 가지 더욱 바람직한 측면에 따르면, 화학식(I)의 바람직한 화합물로는 Q가 R₈및 R₉로 치환된 페닐, R₈로 치환되거나 R₈및 R₉로 치환된 1개 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 5원 또는 6원 헤테로시클릭 고리 및 1개 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 9원 또는 10원 헤테로시클릭 고리로 구성된 군으로부터 선택되며 헤테로원자가 질소 및 황으로 구성된 군으로부터 선택되는 화합물이 있다. 더욱 바람직하게는, Q는 R₈및 R₉로 치환된 페닐이다. 더욱 바람직하게는, T는 -C(=NR₁₀)NHR₁₁또는 -NHC(=NR₁₀)NHR₁₁이다.

본 발명의 한 측면에 따르면, E는 하기 기들로 구성된 군으로부터 선택되는화학식(I)의 화합물이 바람직하다:

바람직한 X기로는 -S(O)₂-, -OC(=O)-, -NH-C(=O)- 및 직접 결합이 있다. 특히 바람직한 것은 -S(O)₂- 및 -OC(=O)- 이다.

바람직한 R₁기로는 알킬, 특히 이소부틸, 2-에틸헥실, 메틸, n-부틸, 이소프로필, 시클로헥실메틸, 및 시클로헥실프로필; 시클로알킬, 특히 (-)멘틸, (+)멘틸,및 시클로헥실; 아릴, 특히 나프틸 및 페닐; 아르알킬, 특히 벤질, 3-페닐프로필, 및 2-페닐에틸; 및 융합된 카르보시클릭 알킬, 특히 플루오레닐메틸이 있다. 특히 바람직한 R₁기로는 페닐, 벤질, 2-페닐에틸, 이소부틸, n-부틸 및 3-페닐프로필이 있다.

R₁-X-의 바람직한 조합으로는 페닐-S(O)₂-, 벤질-S(O)₂-, 2-페닐에틸-S(O)₂-, 3-페닐프로필-S(O)₂-, n-부틸-S(O)₂-, 벤질-OC(=O)-, 및 이소부틸-OC(=O)-가 있다.

바람직한 R₂기로는 -CH₃, -C₂H₅, -CH₂NH-X'-R₅및 -CH(R₅)OH이 있으며, 여기서, R₅는 수소, 알킬, 특히 메틸 또는 아르알킬이다. 알파 탄소에서의 바람직한 키랄성은 R이다. 키랄인 경우, 베타 탄소에서의 바람직한 키랄성은 R이다. 바람직한 R₂기는 P₃위치를 d-세릴[-CH(R₅)OH(여기서, R₅는 H임)], (R,R)d-알로트레오닐[(-CH(R₅)OH(여기서, R₅는 메틸임)], d-2-아미노부티릴, N-β-메틸옥시카르보닐-d-2,3-디아미노프로피오닐[-CH₂NH-X'-R₅(여기서, R₅는 CH₃이고 X'는 (-C=O)O- 임)], N-β-(2-페닐에틸카르보닐)-d-2,3-디아미노프로피오닐[-CH₂NH-X'-R₅(여기서, R₅는 2-페닐에틸이고 X'는 -(C=O)-임)], N-β-벤질옥시카르보닐-d-2,3-디아미노프로피오닐[-CH₂NH-X'-R₅(여기서, R₅는 벤질이고 X'는 -(C=O)O- 임)], 및 d-알라닐 (-CH₂)로서 규정하는 기이다. 특히 바람직한 R₂기는 P₃을 d-세릴(R₅가 H) 또는 (R,R)d-알로트레오닐(R⁵가 메틸)로서 규정하는 기이다.

대안적인 바람직한 R₂기로는 -(CH₂)₂OA₁및 -CH(R₅)OA₁, 더욱 바람직하게는 -CH(R₅)OA₁이며; 바람직하게는 R₅는 H이다. 더욱 바람직하게는, R₂는 P₃가 d-세릴의 아실 또는 카르보네이트 에스테르로서 규정되도록 선택된다. R₂가 -(CH₂)₂OA₁또는 -CH(R₅)OA₁인 화합물은 전구약물로서 작용할 수 있다.

바람직한 R₃기는, R₃및 R₄가 함께 선택되지 않는 경우, 수소이다. 바람직한 R₄기는, R₃및 R₄가 함께 선택되지 않는 경우, 메틸, 비닐, 알릴 또는 프로파길이다. R₃및 R₄가 함께 선택되는 경우, 프롤릴, 3-히드록시-프롤릴, 4-히드록시프롤릴, 3,4-데히드로프롤릴, 3,4-메타노프롤릴, 및 아제티딘-2-카르보닐-이 P2에서 소정의 기를 규정하기 위한 바람직한 선택기이다.

바람직한 R₇기로는 수소가 있다.

바람직한 E기로는, Q가 R₈및 R₉로 치환된 페닐, R₈및 R₉로 치환된 피리딜 또는 R₈로 치환된 티에닐이고 T가 -C(=NR₁₀)NHR₁₁또는 -NH-C(=NR₁₀)NHR₁₁인 기가 있다.

바람직한 E기로는 4-아미디노페닐, 4-구아니디노페닐, 3-아미디노프로필, 및 5-(2-아미디노-티에닐)이 있다. 특히 바람직한 E기로는 4-아미디노페닐 및 4-구아니디노페닐이 있다.

본 발명의 화합물 중에서, 바람직한 화합물로는 화합물의 P3 위치에서 d-세린 또는 d-알로트레오닌 또는 이들의 아실 또는 카르보네이트 에스테르를 규정하고 P1에서 아미디노페닐, 구아니디노페닐 또는 아미디노티에닐기를 규정하는 R₂엘리먼트를 지닌 화합물이 있다. 특히 바람직한 화합물은 또한 i) R₃에서 수소를 지니고 R₄에서 메틸을 지니거나(P2는 알라닌임), ii) P2가 프롤릴, 아제티딘-2-카르보닐, 3,4-메타노프롤릴 또는 3,4-데히드로프롤릴이 되도록 함께 선택된 R₃와 R₄를 지닌 화합물이다.

본 발명의 바람직한 화합물은 도 10a 내지 10f 및 도 13a 내지 13c에 도시된 화합물을 포함한다. 특히 바람직한 화합물은 도 10a 내지 10f의 화합물 D, F, I, J, K, L, O, R, T, U, V, AE, AH, AJ, AN 및 AV, 및 도 13a 내지 13c의 화합물 BG, BJ, BK 및 BQ이다.

또한 특히 바람직한 화합물은 하기 화학식(I)의 화합물이다: 화합물 AX (X=S(O)₂, R₁=4-클로로벤질, R₂=-CH₂OH, R₃=H, R₄=CH₃, R₇=H 및 E=4-아미디노페닐), AY (X=SO₂, R₁=3-클로로벤질, R₂=-CH₂OH, R₃=H, R₄=CH₃, R₇=H 및 E=4-아미디노페닐) 및 AZ (X=SO₂, R₁=2-플루오로벤질, R₂=-CH₂OH, R₃=H, R₄=CH₃, R₇=H 및 E=4-아미디노페닐).

2.바람직한 화합물의 제조

도 1 내지 도 5는 본 발명의 특정 화합물의 제조에 사용될 수 있는 중간체의합성을 위한 합성 반응식을 도시한다.

도 1은 본 발명의 화합물을 제조하는 데에 유용한 중간체의 용액상 합성을 도시한다. 실시예 60 내지 62 참조. 또한 실시예 95 내지 97 참조.

실시예 63 내지 66, 67 내지 70 및 71 내지 73은 본 발명의 화합물을 합성하는 데에 유용한 중간체의 용액상 합성을 설명한다.

도 2는 용액상 합성을 사용하여 본 발명의 화합물을 제조하는 데에 유용한 중간체를 제조하기 위한 대안적인 합성 경로를 도시한다. 또한 실시예 74 내지 76 참조.

도 6은 P3에서 에스테르화된 히드록실을 지닌 본 발명의 화합물을 제조하기 위한 반응식을 도시한다.

도 7은 P1에서 4-구아니디노페닐을 지닌 본 발명의 화합물을 제조하기 위한 반응식을 도시한다.

도 8은 P1에서 3-구아니디노페닐을 지닌 본 발명의 화합물을 제조하기 위한 반응식을 도시한다.

도 9는 P1에서 2-구아니디노티오페닐을 지닌 본 발명의 화합물을 제조하기 위한 반응식을 도시한다.

도 11은 P1에서 3-아미디노피리딜을 지닌 본 발명의 화합물을 제조하기 위한 반응식을 도시한다.

도 12는 P1에서 4-아미디노페닐을 지닌 본 발명의 화합물을 합성하기 위한 반응식을 도시한다.

도 14는 P1에서 비시클릭 헤테로시클릭기를 지닌 본 발명의 화합물을 합성하기 위한 반응식을 도시한다.

도 15는 P1에서 아미노이미다졸릴기를 지닌 본 발명의 화합물을 합성하기 위한 반응식을 도시한다.

도 16은 P1에서 2-클로로-4-구아니디노페닐기를 지닌 본 발명의 화합물을 합성하기 위한 반응식을 도시한다.

도 17은 P1에서 구아니디노피리딜기를 지닌 본 발명의 화합물을 합성하기 위한 반응식을 도시한다.

화학적으로 커플링시키는 바람직한 수단(예를 들어, 아미노 결합 작용기)은 당 분야에 공지된 통상의 커플링 시약을 사용하여 펩티드 결합을 형성시키는 것을 포함한다[Bodanszky, N.Peptide Chemistry, pp. 55-73, Springer-Verlag, New York (1988) and references cited therein]. 화학적 커플링은 1-단계 또는 2-단계 커플링에 의해 이루어질 수 있다. 1-단계 커플링의 경우, 2개의 커플링 파트너가 직접 커플링된다. 커플링 파트너의 1-단계 커플링에 바람직한 커플링 시약은 DCC와 HOBt, EDC와 HOBt, EDC와 HOAt, HBTU 또는 TBTU를 포함한다. 2-단계 커플링의 경우, 나머지 커플링 파트너에 커플링되기 전에, 하나의 커플링 파트너의 C-말단 카르복시기의 활성화된 에스테르 또는 무수물이 형성된다.

수소화 민감성 치환기를 지닌 특정 화합물을 제조하는 경우, 수소 기체를 탄소상 팔라듐과 함께 사용하는 것을 피하는 것이 바람직하다. 할로겐, 시아노, 니트로 또는 -S-Z₁으로 치환된 알케닐 또는 아릴 잔기와 같은 수소화 민감성 기를 함유하는 본 발명의 화합물을 제조하기 위한 또 다른 바람직한 방법은 보론 트리스(트리플루오로아세테이트)인 B(OCOCF₃)₃를 사용하여 아르기닌기의 N^g-니트로를 절단하는 것이다. 시약은 0℃에서 디클로로메탄에서 BBr₃및 CF₃COOH를 반응시킴으로써 제조된다. 시약은 또한 시판된다. 일반적으로, N^g-니트로 화합물을 0℃에서 트리플루오로아세트산중의 보론 트리스(트리플루오로아세테이트)로 처리한다[Fieser, M. and Fieser, L. F.,Reagents for Organic Synthesis, p. 46, John Wiley & Sons, New York (1974); Press, J., and Bauer, W.Angew. Chem.,Internat. Ed., 12, 147 (1973)].

또한, 선택적 니트로기 절단을 위한 또 다른 바람직한 시약은 티타늄 트리클로라이드이다. 이 시약은 시판된다. N^g니트로 화합물을 암모늄 아세테이트 완충액을 함유하는 수성 메탄올중의 티타늄 트리클로라이드로 처리한 후, 반응 혼합물을 공기 또는 디메틸 술폭시드에 노출시킨다[Freidinger, R.M., Hirschmann, R., and Veber, D.F.,J. Org. Chem., 43, 4800 (1978)].

도 6은 R₂가 -CH₂OA₁이고 A₁이 -C(=O)R₆인 본 발명의 화합물을 합성하기 위한반응식을 도시한다:

화합물(6-1)(실시예 9의 화합물)과 같은 중간체는 피리딘과 같은 염기의 존재하에서 산 염화물 R₆COCl과 반응한다. R₂가 -(CH₂)₂OA₁또는 -CH(R₅)OA₁(여기서, A₁는 -C(=O)R₆임)인 화합물은, 바람직하게는 피리딘과 같은 염기의 존재하에서, 화합물(6-1)에 상응하는 적합한 중간체를 적합한 산 염화물 유도체 R₆COCl과 반응시킴으로써 편리하게 제조할 수 있다.

R₂가 -(CH₂)₂OA₁또는 -CH(R₅)OA₁(여기서, A₁는 -C(=O)OR₆임)인 화합물은 R₂가 -(CH₂)₂OH 또는 -CH(R₅)OH인 상응하는 화합물을 적합한 클로로포르메이트 유도체로 처리함으로써 편리하게 제조할 수 있다. P₁에서 아미디노기 또는 구아니디노기를 지닌 화합물을 제조하는 경우, 아미노기 또는 구아디노기를 탈보호시키기 전에 P3 히드록실을 카르보네이트기로 캡핑하는 것이 바람직할 수 있다. 따라서, 상응하는 중간체를 클로로포르메이트 유도체로 처리하는 것이 바람직하다 (실시예 8 참조). 그 후, 생성물을 수소화시키고, 임의로 가수분해 조건하에서 처리하여 생성물을 수득한다(실시예 16, 21, 28, 35 및 40 참조).

3.바람직한 화합물의 선택

본 발명의 한 측면에 따르면, 본 발명의 바람직한 화합물은 세린 프로테아제, 특히 유로키나제의 억제에 대한 이들의 효능 및 선택성과 관련하여 선택된다. 이러한 평가는 예를 들어 실시예 A에 기재된 과정을 따라 시험관내에서 통상적으로 수행된다. 상기 실시예에 기재되고 일반적으로 알려진 바와 같이, 표적 세린 프로테아제 및 이의 기질을, 프로테아제와 이의 기질간의 반응이 허용되는 검정 조건하에서 혼합시킨다. 검정을 시험 화합물의 부재하에서 및 시험 화합물의 농도를 증가시키면서 수행한다. 시험 화합물에 의해 세린 프로테아제 활성의 50%가 억제되는 시험 화합물의 농도는 이 화합물에 대한 IC₅₀값(억제 농도) 또는 EC₅₀값(유효 농도)이다. 시험 화합물 계열 또는 군내에서, 낮은 IC₅₀또는 EC₅₀값을 지닌 화합물은 높은 IC₅₀또는 EC₅₀값을 지닌 화합물 보다 더욱 효능있는 세린 프로테아제의 억제제로 간주된다. IC₅₀측정은 보다 간단한 검정의 경우에 종종 사용되는 반면, EC₅₀은 세포를 사용하는 검정과 같은 보다 복잡한 검정의 경우에 종종 사용된다. K_i는 IC₅₀으로부터 계산된다.

본 발명의 이러한 측면에 따른 바람직한 화합물은 유로키나제 활성의 억제에 대한 시험관내 검정에서 측정하여 100nM 이하의 K_i값을 지닌다. 특히 바람직한 화합물은 30nM 미만의 K_i값을 지닌다.

또한, 시험 화합물을 세린 프로테아제에 대한 선택성에 대해 평가한다. 실시예에 기재되고 일반적으로 알려진 바와 같이, 시험 화합물을 세린 프로테아제 및 그 밖의 효소의 패널에 대한 이의 효능에 대해 검정하고, IC₅₀값 또는 EC₅₀값을 각각의 검정 시스템에서 각각의 시험 화합물에 대해 결정한다. 표적 효소, 예를 들어 유로키나제에 대한 낮은 IC₅₀값 또는 EC₅₀값 또는 상응하는 낮은 K_i값, 및 시험 패널(예를 들어, 조직 플라스미노겐 활성화제, 트롬빈, 인자 Xa)내의 그 밖의 효소에 대한 높은 IC₅₀값 또는 EC₅₀값을 나타내는 화합물은 표적 효소에 대해 선택적인 것으로 간주된다. 일반적으로, 표적 효소 검정에서 화합물의 IC₅₀값 또는 EC₅₀값 (또는 K_i값)이 효소의 선택성 패널에서 측정된 두번째로 작은 IC₅₀값 또는 EC₅₀값 보다 10배 이상 작은 경우, 화합물은 선택적인 것으로 간주된다.

본 발명의 바람직한 화합물은 유로키나제 활성의 억제에 대해 시험관내 검정으로 측정하여 100nM 이하의 K_i값을 지닌다. 특히 바람직한 화합물은 시험관내 유로키나제 억제 검정에서의 K_i값이 시험관내 tPA 억제 검정으로 측정된 IC₅₀값 보다 10배 이상 작다. 100 보다 큰 IC₅₀tPA 검정 대 K_i유로키나제 검정의 선택성 비를 지닌 화합물이 특히 바람직하다.

또한, 본 발명의 화합물을 생체내 활성에 대해 평가한다. 시험 화합물의 평가를 위해 선택된 검정의 타입은 화합물을 사용하여 치료하거나 예방하려는 병리학적 질환 뿐만 아니라 시험 화합물에 대해 평가하려는 투여 경로에 좌우될 것이다.

예를 들어, 유로키나제의 억제를 통해 종양 성장을 감소시키는 본 발명의 화합물의 활성을 평가하기 위해, PAI-1을 평가하기 위한 잔쿤(Jankun) 등의 문헌 [Canc. Res.57:559-563, 1997]에 기재된 과정이 사용될 수 있다. 요약하면, 고수준의 uPA를 발현하는 ATCC 세포주 DU145, 및 uPA를 발현하지 않는 LnCaP를 SCID 마우스내로 주입한다. 종양이 형성된 후, 마우스에 시험 화합물을 화합물의 시험관내 특성으로부터 결정된 투여 방식에 따라 투여한다. 잔쿤 등의 문헌의 경우, 화합물은 물에 함유되어 투여되었다. 종양 부피 측정은 약 5주 동안 매주 2회 수행한다. 화합물을 투여받은 동물이 적합한 대조 화합물을 투여받은 동물과 비교하여 감소된 종양 부피를 나타낸 경우, 화합물은 활성인 것으로 간주된다. 또한, DU145 세포 대 LnCaP 세포가 주입된 동물에서 화합물의 효과를 비교하여 화합물의 효과가 유로키나제의 억제로 인한 것인지 여부를 알 수 있다.

종양 부피 감소에 대한 유로키나제 억제 화합물인 것으로 알려진 p-아미노벤즈아미딘의 효과를 평가하도록 고안된 또 다른 생체내 실험 모델이 빌스트룀 (Billstroem) 등의 문헌[Int. J. Cancer61:542-547, 1995]에 기술되어 있다.

전이의 발생을 감소시키거나 억제시킬 수 있는 본 발명의 화합물의 능력을 평가하기 위해, 고바야시(Kobayashi) 등의 문헌[Int. J. Canc.57:727-733d, 1994]에 기재된 과정이 사용될 수 있다. 요약하면, 높은 폐 콜로니화 잠재성에 대해 선택된 쥐과동물 이종이식편을 C57B1/6 마우스에 정맥내 주입하거나(실험적 전이), 복부벽에 피하 주입한다(자발적 전이). 다양한 농도의 시험하려는 화합물을, 주입 전에 매트리겔(Matrigel)에서 종양 세포와 혼합할 수 있다. 시험 화합물의 매일 복강내 주입은 종양 접종 후 1일 내지 6일째 또는 7일 내지 13일째에 실시한다.동물을 종양 접종 후 약 3주 내지 4주째에 치사시키고, 폐 종양 콜로니를 계수한다. 얻어진 데이터를 평가하여 시험 화합물의 효능, 최적 투여량 및 투여 경로를 결정할 수 있다.

감소하는 종양 부피 및 전이에 대한 본 발명의 화합물의 활성은 이들의 억제제를 평가하기 위해 라바니(Rabbani) 등의 문헌[Int. J. Cancer63:840-845, 1995]에 기재된 모델로 평가할 수 있다. 상기 문헌에서, uPA를 과발현하는 Mat LyLu 종양 세포를 코펜하겐 랫트의 측복부에 주입하였다. 동물에게 삼투성 미니펌프를 이식하여 3주까지 다양한 용량의 시험 화합물을 계속 투여하였다. 실험 동물 및 대조 동물의 종양 질량 및 부피를 실험 동안 평가하였고, 전이성 성장도 마찬가지로 평가하였다. 얻어진 데이터를 평가하여 시험 화합물의 효능, 최적 투여량 및 투여 경로를 결정할 수 있다. 상기 문헌의 저자 중 일부는 싱(Xing) 등의 문헌[Canc. Res.57:3585-3593, 1997]에서 관련 프로토콜을 기술하였다.

혈관신생에 대한 본 발명의 화합물의 억제 활성을 평가하기 위해, 토끼 각막 혈관신생 모델을 사용할 수 있다. 애버리(Avery) 등의 문헌[Arch. Ophthalmol.108:1474-1475, 1990]에는 뉴질랜드 알비노 토끼를 마취시킨 후 중심 각막 절개를 수행하고 방사상 각막 포켓을 형성하는 것이 기재되어 있다. 지효성 프로스타글란딘 펠렛을 포켓에 넣어 혈관신생을 유도시켰다. 시험 화합물을 5일간 복강내 투여하고, 이 시점에서 동물을 치사시켰다. 혈관신생 반응의 면적을 계산하여 윤부 혈관신생을 계산하는 데에 사용될 수 있는 주기적인 윤부 촬영 사진을 관찰함으로써 시험 화합물의 효과를 평가한다. 적합한 대조군과 비교하여 감소된 혈관신생 면적은 시험 화합물이 혈관신생을 감소시키거나 억제하는 데에 효과적이었음을 나타낸다.

혈관생성을 억제함에 있어서 시험 화합물의 효과를 평가하기 위해 사용되는 혈관생성 모델은 민(Min) 등의 문헌[Canc. Res.56:2428-2433, 1996]에 기재되어 있다. C57BL6 마우스에게 시험 화합물의 존재 및 부재하에 혈관생성 유도제로서 bFGF를 함유하는 매트리겔 혼합물을 피하 주입한다. 5일 후, 동물을 치사시키고, 혈관신생이 가시화될 수 있는 매트리겔 플러그를 사진 촬영한다. 매트리겔 및 유효량의 시험 화합물을 투여받은 실험 동물은, 대조 동물 또는 덜 효과적이거나 효과적이지 않은 양의 화합물을 투여받은 실험 동물 보다 혈관신생을 덜 나타낼 것이다.

일차 종양의 확산을 억제할 수 있는 능력에 대해 화합물을 시험하기 위해 고안된 생체내 시스템은 크로울리(Crowley) 등의 문헌[Proc. Natl. Acad. Sci.90:5021-5025, 1993]에 기재되어 있다. 누드 마우스에게 CAT(클로람페니콜 아세틸트랜스퍼라제)를 발현하도록 조작된 종양 세포(PC3)를 주입한다. 세포는 대량의 uPA를 분비하고, 세포 표면상의 uPAR에 결합된 포화량의 uPA 활성을 나타낸다. 종양 크기 및/또는 전이를 감소시킬 수 있는 능력에 대해 시험하려는 화합물을 동물에게 투여하고, 후속하여 종양 크기 및/또는 전이성 성장을 측정한다. 또한, 다양한 기관에서 검출된 CAT의 수준은 전이를 억제할 수 있는 시험 화합물의 능력을 나타내며; 대조 동물에 비해 처리된 동물의 조직에서 CAT가 덜 검출되는 것은 그 조직에 CAT 발현 세포가 덜 이동했음을 나타낸다.

매우 침입성인 것으로 일컬어지는 종양 세포주 F3II를 사용하여 시험 화합물의 유로키나제 억제 가능성을 평가하기 위해 고안된 생체내 실험 모델은 알론소(Alonso) 등의 문헌[Breast Canc. Res. Treat.40:209-223, 1996]에 기재되어 있다. 이 그룹은 독성 측정, 종양 성장, 침입성, 자발적 전이, 실험적 폐 전이 및 혈관생성 검정에 대한 생체내 실험을 기술한다.

1998년에 엘. 오소우스키(L. Ossowski)의 문헌[J. Cell Biol.107:2437-2445, 1988]에 최초로 기재된 CAM 모델(계태아 융모요막 모델)은 시험 화합물의 유로키나제 활성을 평가하기 위한 또 다른 방법을 제공한다. CAM 모델의 경우, 융모요막을 통한 종양 세포의 침입은 촉매적으로 활성인 uPA의 존재에 좌우된다. 유로키나제 억제제의 존재하에서 CAM을 종양 세포와 접촉시키면 막을 통한 종양 세포의 침입이 적게 일어나거나 일어나지 않는다. 따라서, CAM 검정은 다양한 농도의 시험 화합물의 존재 및 부재하에서 CAM과 종양 세포를 사용하여 수행된다. 종양 세포의 침입성은 화합물의 유로키나제 억제 활성을 나타내는 조건하에서 측정된다. 유로키나제 억제 활성을 지닌 화합물은 보다 적은 종양 침입성과 서로 관련이 있다.

CAM 모델은 혈관생성의 표준 검정(즉, 신생 혈관의 형성에 대한 효과)에서도 사용된다[Brooks, P.C.; Montgomery, A.M.P.; and Cheresh, D.A., Methods in Molecular Biology129: 257-269 (1999)]. 이 모델에 따르면, 염기성 섬유아세포 성장 인자(bFGF)와 같은 혈관생성 유도제를 함유하는 필터 디스크를 CAM에 정위시킨다. CAM내로의 사이토카인의 확산은 국소적 혈관생성을 유도하며, 이는 필터 디스크 바로 아래의 CAM내의 혈관 분지점의 수를 계수하는 것과 같은 다수의 방법으로 측정될 수 있다. 사이토카인 유도된 혈관생성을 억제할 수 있는 본 발명의 화합물의 능력은 이러한 모델을 사용하여 시험할 수 있다. 시험 화합물을, 혈관생성 유도제를 함유하는 필터 디스크에 첨가하거나, 막에 직접 정위시키거나, 전신적으로 투여할 수 있다. 시험 화합물의 존재 및/또는 부재하에서 신생 혈관 형성의 정도는 이러한 모델을 사용하여 비교할 수 있다. 시험 화합물의 존재하에서 보다 적은 신생 혈관 형성은 혈관생성 방지 활성을 나타낸다. 본 발명의 화합물 중의 몇몇은 유로키나제의 억제제로서 활성이 있으므로, 이러한 화합물의 혈관생성 방지 활성은 유로키나제가 혈관생성에 있어서 중요한 역할을 한다는 것을 제시한다.

4.약제학적 조성물

또 다른 일면에 있어서, 본 발명은 약제학적으로 허용되는 담체에 치료적 유효량의 본 발명의 화합물을 포함하는, 저장용 또는 투여용으로 제조된 약제학적 조성물을 포함한다.

본 발명의 화합물의 치료적 유효량은 투여 경로, 치료할 포유동물의 타입, 및 고려중인 특정 포유동물의 신체적 특성에 좌우된다. 이러한 인자들 및 상기량의 측정과 관련된 이들의 관계는 의료 분야의 당업자에게 잘 알려져 있다. 상기량 및 투여 방법은 최적 효능을 달성하도록 맞춤화될 수 있지만, 체중, 식이, 병용 약물과 같은 인자들 및 의료 분야의 당업자가 인식하는 그 밖의 인자에 좌우된다.

본 발명의 화합물의 치료적 유효량은 원하는 효과 및 치료 적응증에 따라 광범위하게 변할 수 있다. 전형적으로, 투여량은 체중 1kg 당 약 0.01㎎ 내지 100㎎, 바람직하게는 체중 1kg 당 약 0.01㎎ 내지 10㎎ 이다.

치료적으로 사용하기 위해 약제학적으로 허용되는 담체는 약제 분야에 널리 공지되어 있으며, 예를 들어 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co. (A.R. Gennaro edit. 1985)]에 기재되어 있다. 예를 들어, 생리적 pH의 멸균 식염수 및 포스페이트 완충 식염수가 사용될 수 있다. 방부제, 안정화제, 염료 및 착향제가 약제학적 조성물에 제공될 수 있다. 예를 들어, 소듐 벤조에이트, 소르브산 및 p-히드록시벤조산의 에스테르가 방부제로서 첨가될 수 있다(상기 문헌의 1449 참조). 또한, 산화방지제 및 현탁화제가 사용될 수 있다(상기 문헌 참조).

본 발명의 약제학적 조성물은 경구 투여용 정제, 캡슐 또는 엘릭실; 직장 투여용 좌제; 주사용 멸균 용액 및 현탁액 등으로 제형화되어 사용될 수 있다. 용량 및 투여 방법은 최적 효능을 달성하도록 맞춤화될 수 있지만, 체중, 식이, 병용 약물 및 의료 분야의 당업자가 인식하는 그 밖의 인자에 좌우된다.

매일 정맥 주사하는 것과 같이 투여가 비경구적으로 이루어지는 경우, 주사용 약제학적 조성물은 통상적인 형태, 즉 액체 용액 또는 현탁액, 주사전 액체중에 용해 또는 현탁하기에 적합한 고체 형태, 또는 에멀션으로서 제조될 수 있다. 적합한 부형제는, 예를 들어 물, 식염수, 덱스트로스, 만니톨, 락토스, 레시틴, 알부민, 소듐 글루타메이트 등이다. 또한, 소망에 따라, 주사용 약제학적 조성물은 소량의 비독성 보조 물질, 예를 들어 습윤제, pH 완충제 등을 함유할 수 있다. 소망에 따라, 흡수 증강제(예를 들어, 리포솜)가 사용될 수 있다.

5.유용성

유로키나제 억제 활성 및/또는 혈관생성 및 혈관신생을 포함한 혈관 형성을 감소시키거나 억제시키는 활성을 지닌 본 발명의 화합물은 많은 용도로 시험관내 및 생체내 둘 모두에서 사용될 수 있으며, 상기 용도 중 일부가 하기 기술된다.

본 발명의 화합물은 유로키나제의 억제제로서 활성이 있고, 유로키나제와 특이적으로 결합한다. 따라서, 고체/겔 지지체에 결합하기에 적합한 부위를 함유하는 이러한 화합물은 통상적인 친화성 크로마토그래피 과정을 사용하여 샘플로부터 유로키나제를 정제하거나 샘플로부터 유로키나제를 제거하기 위해 친화성 크로마토그래피와 관련하여 시험관내에서 사용될 수 있다. 이러한 화합물은 통상적인 방법을 사용하여 친화성 크로마토그래피에 직접적으로 또는 적합한 링커 지지제를 통해 부착되거나 커플링된다[Current Protocols in Protein Science, John Wiley & Sons (J.E. Coligan et al., eds, 1997) and Protein Purification Protocols, Humana Press (S. Doonan, ed., 1966) and references therein].

유로키나제 억제 활성을 지닌 본 발명의 화합물은 샘플에서 tPA 활성을 측정하기 위한 시험관내 검정에서 유용하다. 혈액 샘플에서 전체 플라스미노겐 활성화 활성을 측정하는 검정의 경우, 유로키나제 억제 활성을 지닌 본 발명의 화합물은 uPA에 기인하는 플라스미노겐 활성화의 부분을 녹아웃시키며, 이는 tPA 활성으로 인한 전체 플라스미노겐 활성화의 부분 뿐만 아니라 uPA 활성으로 인한 부분을 계산할 수 있게 해준다. tPA 활성을 모니터링하기 위해 이러한 검정을 사용하는 것은 tPA를 투여받는 환자와 관련하여 더 나은 용량 조절을 가능하게 한다. 또한,이러한 검정을 사용하여, 예를 들어 생검으로부터의 조직 샘플 중의 uPA 활성 수준을 모니터링하거나 플라스미노겐 활성화 활성의 측정이 도움이 되는 임의의 임상적 상황의 경우에 uPA/tPA 활성을 모니터링할 수 있다. 또한, 이러한 검정을 사용하여 스트렙토키나제 및 스태필로키나제와 같은 플라스미노겐 활성화제 활성을 지닌 비내인성 화합물로 환자를 치료하는 경우에 플라스미노겐 활성화제 활성을 모니터링할 수 있다.

본 발명의 화합물은 감소된 유로키나제 활성에 의해 개선되는 병리학적 질환의 치료와 관련하여 생체내에서 유용하다. 예를 들어, 이러한 화합물은 활액에서의 uPA-플라스민 캐스케이드에 의한 메탈로프로테아제의 활성화를 억제하므로, 관절염의 치료에 사용될 수 있다.

이러한 화합물은 종양 및 그 밖의 신생물에서 전이, 혈관신생 및 세포외 기질의 분해를 감소시키거나 억제하는 데에 유용한 것으로 생각된다. 이러한 화합물은 망막 질환, 망막증과 같은 병리학적 혈관신생을 특징으로 하는 질환 및 본원에서 발명의 배경 및 도입 부분에 기술된 질환을 포함하는 그 밖의 질환을 치료하는 데에 있어서 치료제로서 유용하다.

유로키나제 억제 활성을 지닌 본 발명의 화합물의 또 다른 용도는 너무 많은 외인성 유로키나제가 이와 관련된 목적을 위해, 예를 들어 혈병을 용해시키기 위해 환자에게 투여된 경우의 해독제로서의 용도이다.

본 발명의 화합물은 유로키나제의 억제로부터, 항염증 효과에 의해, 세포 유착 또는 이동의 매개물질을 방해함으로써, 염증을 특징으로 하는 질환을 치료하는데에 사용될 수 있다. 이러한 항염증 용도는 기관 이식편의 합병증 및 뇌졸중의 치료를 포함한다.

본 발명은 포유동물에게 치료적 유효량의 본 발명의 화합물 또는 약제학적 조성물을 투여하는 것을 포함하여, 유로키나제 활성의 억제에 의해 약화되는 질환에 걸린 것으로 추정되는 포유동물의 질환을 예방하거나 치료하는 방법을 포함한다.

본 발명의 화합물 또는 약제학적 조성물은 보통 포유동물, 바람직하게는 사람에게 생체내 투여된다. 생체내에서 사용하는 경우, 상기 화합물 또는 약제학적 조성물은 다양한 제형을 사용하여 경구, 비경구, 정맥내, 피하, 근내, 결장, 직장, 경비 또는 복강내를 포함하는 다양한 경로로 포유동물에게 투여될 수 있다. 투여는, 예를 들어 매일 복용되는 정제, 캡슐 또는 엘릭실에 의해 경구적으로 이루어지는 것이 바람직하다.

본 발명의 방법을 실시하는 경우, 본 발명의 화합물 또는 약제학적 조성물은 단독으로 투여되거나 서로 배합되어 투여되거나 그 밖의 치료제 또는 생체내 진단제와 함께 투여된다.

의료 분야의 당업자에게 명백한 바와 같이, 본 발명의 화합물 또는 약제학적 조성물의 "치료적 유효량"은 연령, 체중 및 치료하려는 포유동물 종, 사용되는 특정 화합물, 특정 투여 방식 및 원하는 효과 및 치료 적응증에 따라 달라진다. 이러한 인자 및 상기량을 결정하는 데에 있어서의 이들의 관계는 의료 분야에 잘 알려져 있으므로, 치료적 유효 용량 수준, 즉, uPA 활성을 억제하는 원하는 결과를달성하는 데에 필요한 양을 결정하는 것은 당 분야의 숙련자의 지식 범위에 속한다. 전형적으로, 본 발명의 화합물 또는 약제학적 조성물의 투여는 낮은 용량 수준에서 출발하고, 용량 수준이 uPA 활성을 원하는 정도로 억제하는 원하는 효과가 달성될 때까지 증가하며, 이는 치료적 유효량을 규정한다. 단독 또는 약제학적 조성물의 일부로서의 본 발명의 화합물의 경우, 이러한 용량은 체중 1kg 당 약 0.01㎎ 내지 100㎎, 바람직하게는 체중 1kg 당 약 0.01㎎ 내지 10㎎이다.

이해를 돕기 위해, 본 발명은 하기 실시예에 의해 추가로 예시될 것이다. 본 발명과 관련된 이러한 실시예는 물론 본 발명을 확실하게 한정하는 것으로 해석되지 않아야 하고, 당업자의 지식범위에 속하는 현재 알려져 있거나 앞으로 개발될 본 발명의 변형물은 본 명세서에 기재되고 하기 청구의 범위에 기재된 본 발명의 범위에 속하는 것으로 간주된다.

실시예

A. 본 발명의 특정 화합물의 합성

실시예 1

n-부틸술포닐-D-세린(3차-부틸에테르)-메틸 에스테르(1)의 제조

테트라히드로푸란(38㎖)중의 HCl·H-dSer(tBu)-OMe(2g, 9.44mmol) 및 n-부틸술포닐 클로라이드(1.1㎖) 용액을 실온에서 10분간 교반시켰다. 다음, 디이소프로필에틸아민(5.75㎖, 33.07mmol)을 첨가하고 탁한 황색 용액을 실온에서 밤새 교반시켰다. 다음, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(200㎖)로 희석시키고 1N HCl로 세척한 후 염수로 세척하였다(각각 20㎖). 무수 황산나트륨으로 건조시킨 후 용매를 진공하에서 제거하였다. 편상 황색 분말(1.56g, 62%)은 tlc(헥산중의 5% 에틸아세테이트)에 의해 순수한 것으로 판정되었다.

실시예 2

n-부틸술포닐-D-세린(3차-부틸에테르)(2)의 제조

디옥산(32.95㎖)중의 화합물(1)(1.46g, 4.94mmol) 용액에 2.0N LiOH(5.44㎖, 10.87mmol)을 적가하였다. 탁한 황색 용액을 실온에서 밤새 교반시켰다. tlc(5% 에틸 아세테이트/헥산)에서 출발 물질이 확인되지 않았을 때, 과잉 디옥산을 진공하에서 제거하였다. 반응 혼합물을 물 및 메탄올의 1:1 혼합물로 희석시키고 사전-세척된 DOWEX(50×8-400) 이온 교환 수지(30㎖)를 통과시켰다. 수지를 메탄올 및 물을 통과시켜 완전히 세정하였다. 여과물을 합치고 감압하에서 농축하여 정량적 수율의 표제 화합물 1.44g을 크림상 고형물로서 수득하였다.

실시예 3

n-부틸술포닐-D-세린(3차-부틸에테르)-알라닌 3차-부틸에테르

실시예 2의 화합물(0.50g, 1.79mmol), 알라닌 3차-부틸에스테르 히드로클로라이드 염(0.65g, 3.58mmol), EDC(0.68g, 3.57mmol), N-히드록시벤조트리아졸 (0.27g, 1.79mmol) 및 디이소프로필에틸아민(1.56㎖, 8.94mmol) 용액을 실온에서 아세토니트릴(18ml)중에서 교반시켰다. 18시간 후에, 용매를 감압하에서 제거하고 생성된 잔류물을 에틸 아세테이트(50㎖) 및 1N HCl(10㎖)중에 재현탁시켰다. 에틸 아세테이트층은 1N HCl(10㎖), 포화 중탄산나트륨(2×15㎖) 및 염수(15㎖)로 세척하고 다음, 황산나트륨으로 건조시켰다. 용매를 감압하에서 제거하고 미정제 생성물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 50% 에틸 아세테이트/헥산으로 용리시켜 정제하여 생성물 429㎎(59%)을 수득하였다. 생성물은 역상 (C₁₈) HPLC에 의해 단일 피크를 나타내었다(5-90% 수성 아세토니트릴중의 0.1% 트리플르오로아세트산으로 20분에 걸쳐 용리, t_R= 9분).

실시예 4

n-부틸술포닐-D-세린-알라닌(4)의 제조

디클로로메탄(4.2㎖) 중의 실시예 3의 화합물(0.42g, 1.02mmol) 용액에 트리플르오로아세트산(4.2㎖)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반시켰다. 반응 혼합물을 50㎖의 n-헵탄으로 희석시키고 진공하에서 농축하였다. 잔류물을 10㎖의 아세토니트릴 및 50㎖의 n-헵탄에 재현탁시키고 진공하에서 농축하여 410mg의 생성물을 수득하였다.

실시예 5

α-아지도-4-시아노톨루엔(5)의 제조

소듐 아지드(Aldrich, 3.5g, 54mmol)를 DMF(100㎖)중의 α-브로모톨루엔니트릴(Aldrich, 10g, 51mmol) 용액에 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반시켰다. 그 다음, 반응 혼합물을 물(350㎖)로 희석시키고 에테르(2×100㎖)로추출하였다. 유기층을 합치고 염수로 세척하고 건조하였다(MgSO₄). 용매를 제거하여 표제 화합물(8g, 96%)을 수득하였다.

실시예 6

4-(아미노메틸)벤질니트릴(6)의 제조

10% 탄소상 팔라듐(Aldrich, 800㎎) 촉매를 EtOAc(150㎖)중의 α-아지도-4-시아노톨루엔(화합물 5, 8g, 51mmol) 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 11시간 동안 파르(Parr) 장치에서 수소화시켰다 (H₂, 45psi). 촉매를 여과하고 용매를 진공하에서 제거하여 표제 화합물(6.3g, 93%)을 수득하였다.

실시예 7

n-부틸술포닐-D-세린-알라닌-4-시아노벤질아미드(7)의 제조

아세토니트릴(5.1㎖)중의 화합물(4)(150mg, 0.51mmol), 4-(아미노메틸)벤질니트릴(화합물 6, 171㎎, 1.02mmol), EDC(195㎎, 1.02mmol) 및 N-히드록시벤조트리아졸(78㎎, 0.51mmol) 용액을 실온에서 10분 동안 교반시켰다. 그 다음, 2,4,6-콜리딘(0.34㎖, 2.54mmol)을 첨가하고 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시켰다. 용매를 감압하에서 제거하고 생성된 잔류물을 에틸 아세테이트(100㎖) 및 0.5M HCl(10㎖)에서 재현탁시켰다. 에틸 아세테이트층을 물로 세척한 후, 0.5M HCl(10㎖), 포화 중탄산나트륨(2×10㎖) 및 염수로 세척하고 황산나트륨으로 건조시켰다. 용매를 감압하에서 제거하여 생성물 237㎎를 수득하였다. 생성물은 5-75%의 수성 아세토니트릴중의 0.1% 트리플루오로아세트산으로 20분에 걸친 역상 (C₁₈) HPLC에 의해 9.5분에서 용리되었다.

실시예 8

n-부틸술포닐-D-세린-알라닌-4-히드록시아미디노벤질아미드(8)의 제조

메탄올 1.14㎖중의 실시예 7의 생성물(117㎎, 0.285mmol) 용액에 히드록실아민 히드로클로라이드(33.7㎎, 0.485mmol)를 첨가한 후 N-메틸모르폴린(53㎕, 0.485mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시킨 다음, 6시간 동안 50℃에서 교반시켰다. 반응 혼합물을 진공하에서 농축하였다. 미정제 생성물에 대해서 추가의 정제 없이 다음 단계(실시예 9)에서 이용하였다. 생성물은 5-50%의 수성 아세토니트릴중의 0.1% 트리플루오로아세트산으로 20분에 걸친 역상 (C₁₈) HPLC에 의해 6.5분에 용리되었다.

실시예 9

n-부틸술포닐-D-세린-알라닌-4-아미디노벤질아미드(9)의 제조

아세트산(2.85㎖) 및 물(0.28㎖)중의 실시예 8의 생성물(126㎎, 0.285mmol)에 활성화 아연 더스트 185㎎를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시켰다. 아연 더스트를 유리 깔대기를 사용하여 여과하고 여과물을 제조용 HPLC로 정제하였다. 생성물을 함유한 분획을, 0.1% TFA를 함유한 5-20% 수성 아세토니트릴 로 용리시키고, 푸울링하고 동결건조하여 표제 화합물 35㎎을 백색 분말로서 수득하였다. 생성물은 5-50%의 수성 아세토니트릴중의 0.1% 트리플루오로아세트산으로 20분에 걸친 역상 (C₁₈) HPLC에 의해 6.0분에 용리되었다.

실시예 10

벤질술포닐-D-세린(3차-부틸에테르)-메틸 에스테르(10)의 제조

아세토니트릴(19㎖)중의 HCl·H-dSer(tBu)-OMe(1g, 4.72mmol) 및 페네틸술포닐 클로라이드(1.45g, 7.08mmol) 용액을 실온에서 10분간 교반시켰다. 그 다음, 디이소프로필에틸아민(1.53㎖, 11.81mmol)을 첨가하고 투명한 황색 용액을 실온에서 18시간 동안 교반시켰다. 그 다음, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(100㎖)로 희석시키고 1N HCl로 세척한 다음 염수로 세척하였다(각각 10㎖). 무수 황산나트륨으로 건조시킨 후, 용매를 진공하에서 제거하였다. 미정제 생성물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 디클로로메탄으로 용리시킨 후, 디클로로메탄 중의 1 내지 5% 에틸 아세테이트로 이루어진 농도구배로 용리시켜 정제하여 840㎎(52%)의 생성물을 수득하였다. 디클로로메탄 중의 5% 에틸 아세테이트로 최종 생성물을 tlc에 전개시켰을 때 0.52 Rf값을 갖는 단일 스폿을 나타내었다.

실시예 11

벤질술포닐-D-세린(3차-부틸에테르)(11)의 제조

디옥산(20㎖)중의 실시예 10의 화합물(1.0g, 3.03mmol) 용액에 2.0N LiOH (3.33㎖, 6.67mmol)을 적가하였다. 상기 용액을 실온에서 밤새 교반시켰다. 과잉 디옥산을 진공하에서 제거하였다. 반응 혼합물을 물 및 메탄올의 1:1 혼합물로 희석시키고 사전-세척된 DOWE (50×8-400) 이온 교환 수지(30㎖)을 통과시켰다. 수지에 메탄올 및 물을 통과시켜 세정하였다. 여과물을 합치고 감압하에서 농축하여 표제 화합물 1.10g을 황색 글루(glue)로 수득하였다.

실시예 12

3차-부틸옥시카르보닐-3,4-데히드로프롤린 p-시아노벤질아미드(12)의 제조

아세토니트릴(7.5㎖) 중의 3차-부틸옥시카르보닐-3,4-데히드로프롤린(0.4g, 1.88mmol), 4-(아미노메틸)벤질니트릴(화합물 6, 0.47g, 2.82mmol), EDC(0.54g,2.82mmol), N-히드록시벤조트리아졸(0.29g, 1.88mmol) 및 디이소프로필에틸아민 (1.64㎖, 9.39mmol) 용액을 실온에서 밤새 교반시켰다. 용매를 감압하에서 제거하고 생성된 잔류물을 에틸 아세테이트(25㎖) 및 0.5M HCl(5㎖)중에 재현탁시켰다. 에틸 아세테이트 층을 물로 세척한 뒤, 0.5M HCl(5㎖), 포화 중탄산나트륨(2×5㎖) 및 염수(10 ㎖)로 세척한 후, 황산나트륨으로 건조시켰다. 용매를 감압하에서 제거하고 미정제 생성물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 4/1 에틸 아세테이트/ 헥산으로 용리시켜 정제하여 561㎎의 순수한 생성물(91.3%)을 수득하였다. 생성물은 5-75%의 수성 아세토니트릴중의 0.1% 트리플루오로아세트산으로 20분에 걸친 역상 (C₁₈) HPLC에 의해 10.5분에 용리되었다.

실시예 13

3,4-데히드로프롤린-4-시아노벤질아미드 히드로클로라이드 염(13)의 제조

에틸 아세테이트(5.7㎖) 중의 실시예 12의 화합물(0.47g, 1.44mmol)의 용액에 에틸 아세테이트(1.44㎖) 중의 5M 무수 HCl을 첨가하고 실온에서 밤새 교반하여 반응시켰다. 반응 혼합물을 진공하에서 농축시켜 백색 분말 363㎎(95%)를 수득하였다.

실시예 14

벤질술포닐-D-세린(3차-부틸에테르)-프롤린(데히드로)-4-시아노벤질아미드(14)의 제조

실시예 11의 화합물(0.10g, 0.32mmol), 실시예 13의 화합물(0.092g, 0.34mmol), EDC(0.091g, 0.48mmol) 및 N-히드록시벤조트리아졸(0.053g, 0.35mmol) 용액을 아세토니트릴(1.2㎖) 중에서 10분간 교반시켰다. 그 다음, 2,4,6-콜리딘 (0.209㎖, 1.58mmol)을 첨가하고 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시켰다. 용매를 감압하에서 제거하였다. 생성된 잔류물을 에틸 아세테이트(50㎖) 및 1N HCl (10㎖)에 재현탁시켰다. 에틸 아세테이트 층을 1N HCl(10㎖), 포화 중탄산나트륨 (2×15㎖) 및 염수(15㎖)로 세척하고 황산나트륨으로 건조시켜 황색 시럽(160㎎, 94%)을 수득하였다. 생성물은 역상 (C₁₈) HPLC에 의해 단일 피크를 나타내었다(5-90% 수성 아세토니트릴중의 0.1% 트리플르오로아세트산으로 20분에 걸쳐 용리, t_R= 11분).

실시예 15

벤질술포닐-D-세린-3,4-데히드로프롤린-4-시아노벤질아미드(15)의 제조

디클로로메탄(0.6㎖) 중의 실시예 14의 화합물(0.16g, 0.30mmol) 용액에 트리플루오로아세트산(0.6㎖)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 10㎖의 n-나프탄으로 희석시키고 진공하에서 농축시켰다. 잔류물을 5㎖의 아세토니트릴 및 10㎖의 n-나프탄에 재현탁시키고 진공하에서 농축시켜 183㎎의 생성물을 수득하였다.

실시예 16

벤질술포닐-D-세린-3,4-데히드로프롤린-4-히드록시아미디노벤질아미드(16)의 제조

1.22㎖ 메탄올 중의 실시예 15의 화합물(143g, 0.305mmol) 용액에 히드록실아민 히드로클로라이드(0.036㎎, 0.519mmol)를 첨가하고 N-메틸모르폴린(57㎕, 0.519mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시켰다. 분석 HPLC 결과 반응이 완료되지 않은 것으로 나타났다. 추가의 히드록실아민 히드로클로라이드(0.036㎎, 0.519mmol) 및 N-메틸모르폴린(57㎖, 0.519mmol)를 첨가하고 실온에서 밤새 계속하여 교반시켰다. 반응 혼합물을 진공하에서 농축시키고 미정제 생성물을 제조용 HPLC로 정제하였다. 생성물을 함유한 분획을, 0.1% TFA 용액을 함유한 5-20% 수성 아세토니트릴로 용리시키고 푸울링하고 동결건조하여 표제 화합물 16㎎를 백색 분말로서 수득하였다.

실시예 17

벤질술포닐-D-세린-3,4-데히드로프롤린-p-아미디노벤질아미드(17)의 제조

아세트산(0.30㎖) 및 물(0.03㎖)중의 실시예 16의 생성물에 19㎎의 활성화 아연 더스트를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시켰다. 아연 더스트를 유리 깔대기를 이용하여 여과하고 여과물을 제조용 HPLC로 정제하였다. 생성물을 함유한 분획을, 0.1% TFA를 함유한 수성 5-20% 아세토니트릴로 용리시키고 푸울링하고 동결건조하여 표제 화합물 7㎎를 백색 분말로서 수득하였다. 생성물은 5-50%의 수성 아세토니트릴중의 0.1% 트리플루오로아세트산으로 20분에 걸친 역상 (C₁₈) HPLC에 의해 분에 용리되었다.

실시예 18

비스(벤질옥시카르보닐)구아니딘(18)의 제조

표제 생성물의 합성은 문헌[tetrahedron Letters, vol. 35, No.7, pp.977-980, 1994]에 인용된 바와 같이 실시하였고 하기와 같다:

메탄올(5.5ml) 중의 1N 무수 암모니아 중의 N,N'-비스(벤질옥시카르보닐)-S-메틸이소티오우레아(1g, 2.79mmol) 용액을 실온에서 밤새 교반시켰다. 반응 혼합물을 농축시키고 잔류물을 에틸 아세테이트(10㎖)로 희석시켰다. 유기층을 포화 중탄산나트륨로 2회, 염수로 1회 세척하였다(각각 10㎖씩). 황산나트륨으로 건조시킨 후 미정제 생성물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 3/2 에틸 아세테이트/헥산으로 용리시켜 백색 분말 0.87g를 수득하였다. 그 다음, 생성물을 1:1 에틸아세테이트:헥산 용매로 재결정화하여 순수한 생성물 337㎎(37%)(mp=151℃)를 수득하였다.

실시예 19

3차-부틸옥시카르보닐-4-아미노-1-부탄올(19)의 제조

테트라히드로푸란(45㎖)중의 4-아미노-1-부탄올(1g, 11.22mmol) 용액에 Boc-무수물(2.20g, 10.10mmol) 및 트리에틸아민(2.84g, 28.04mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하고 잔류물을 에틸 아세테이트(250㎖) 및 1M HCl(50㎖)로 희석시켰다. 층을 분리시키고 유기층을 1N HCl, 물 및 염수(각각 50㎖)로 세척하였다. 황산나트륨로 건조시킨 후, 생성물 1.9g(99%)을 투명한 오일로서 수득하였다.

실시예 20

g-N,N'-비스(벤질옥시카르보닐)아그마틴트리플르오로아세테이트 염(20)의 합성

질소하에서 건조 톨루엔(6.6㎖) 중의 화합물 18(실시예 18의 생성물)(0.2g, 0.61mmol) 및 트리페닐포스핀(0.12g, 0.46mmol) 용액에 주사기를 통하여 화합물 19 (실시예 19의 생성물)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃로 냉각시키고 디에틸아조디카르복실레이트(0.080g, 0.46mmol)을 15분 동안 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였고, 이 때 3/2 에틸 아세테이트/헥산으로 tlc하여 반응의 종료를 확인하였다. 물 5적을 첨가하고 용매를 진공하에서 증발시켰다. 미정제 생성물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 9/1 헥산/에틸 아세테이트로 용리시킨 후, 3/2 헥산/에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여 순수한 생성물 83㎎(74%)를 수득하였다. 그 다음, 생성물을 실온에서 1시간 동안 디클로로메탄 및 트리플르오로아세트산(각각 1㎖)으로 처리하였다. 진공하에서 용매를 제거하여 80㎎의 생성물(20)을 수득하였다.

실시예 21

n-부틸술포닐-D-세린-알라닌-아그마틴-g-N,N-비스(벤질옥시카르보닐)(21)의제조

실시예 4의 화합물(0.05g, 0.17mmol) 및 실시예 20의 화합물(0.065g, 0.17mmol), EDC(0.065g, 0.34mmol) 및 히드록시벤조트리아졸(0.026g, 0.17mmol) 용액을 아세토니트릴(0.67㎖)중에서 10분 동안 교반시켰다. 그 다음, 2,4,6-콜리딘 (0.11㎖, 0.84mmol)을 첨가하고 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시켰다. 용매를 감압하에서 제거하고 잔류물을 에틸 아세테이트 및 1N HCl(각각 5㎖)에 재현탁시켰다. 에틸 아세테이트층을 1N HCl(5㎖), 포화 중탄산나트륨(2×5㎖) 및 염수(5㎖)로 세척한 후, 황산나트륨으로 건조시켜 고형물(114㎎, 94%)로서 수득하였다.

실시예 22

n-부틸술포닐-D-세린-알라닌-아그마틴(22)의 제조

실시예 21의 화합물(114㎎, 0.17mmol)을 메탄올(15㎖)에 용해시키고, 목탄상 팔라듐 15㎎의 존재하에 파르 진탕기에서 40psi로 밤새 수소화시켰다. 촉매를 여과하여 제거하였다. 반응 혼합물에 물을 첨가하여 35㎖로 희석시키고 제조용 HPLC에 의해 정제하였다. 생성물을 함유한 분획을, 0.1% TFA를 함유한 0-25% 수성 아세토니트릴로 용리시키고, 푸울링하고 동결건조하여 16㎎의 표제 화합물을 백색 분말로서 수득하였다.

실시예 23

2-시아노-5-메틸티오펜(23)의 제조

DMF(10㎖) 중의 2-브로모-5-메틸티오펜(TCI chemicals, 5g, 28mmol) 및 시안화구리(I)(Aldrich, 2.53g, 28mmol) 용액을 4시간 동안 환류 온도에서 가열시켰다. 실온으로 냉각시킨 후, 에틸 아세테이트(500㎖) 및 10% NaCN 수용액(500㎖)을 첨가하였다. 분리 후에, 수층을 에틸 아세테이트(300㎖)로 추출하고 유기층을 합치고 농축하여 오일을 수득하였다. 또한, 오일을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트)로 정제하여 표제 화합물(3.03g, 87%)을 수득하였다.

실시예 24

2-시아노-5-(브로모메틸)티오펜(24)의 제조

CCl₄(Aldrich, 60㎖) 중의 2-시아노-5-메틸티오펜(화합물 23, 3.0g,24mmol), N-브로모숙신이미드(Aldrich, 4.8g, 27mmol) 및 2,2'-아조비스이소부티로니트릴(Aldrich, 0.4g, 2.4mmol) 용액을 환류 온도에서 5시간 동안 가열시켰다. 실온로 냉각시킨 후, 용매를 진공하에서 제거하여 황색 오일을 수득하였다. 오일을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피(1:1 헥산/에틸 아세테이트)로 정제하여 표제 화합물(4.6g, 91%)을 수득하였다.

실시예 25

2-시아노-5-(아지도메틸)티오펜(25)의 제조

DMF(Aldrich, 60㎖) 중의 2-시아노-5-(브로모메틸)티오펜(화합물 24, 3.5g, 17.3mmol) 및 소듐 아지드(Aldrich, 1.7g, 26mmol) 용액을 실온에서 10시간 동안 교반시켰다. 플래쉬 칼럼 크로마토그래피(헥산 중의 20% 에틸 아세테이트)에 의해 표제 화합물(2.35g, 83%)을 수득하였다.

실시예 26

2-시아노-5-(아미노메틸)티오펜(26)의 제조

트리페닐포스핀(Aldrich, 5.7g)을 THF(Aldrich, 40㎖) 및 물(10㎖)중의 2-시아노-5-(아지도메틸)티오펜(화합물 25, 2.5g, 10mmol)에 0℃에서 첨가했다. 생성된 용액을 실온으로 가온시키고 실온에서 10시간 동안 교반시켰다.

RP HPLC 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(2.3g, 94%). MS(전기분무): 139(M+1);¹HNMR (CDCl₃): δ4.01(s, 2H), 4.75(br s, 2H, NH₂), 6.82(d, 1H, J=3.5Hz), 7.08(d, 1H, J=3.5Hz).

실시예 27

n-부틸술포닐-D-세린-알라닌-2-시아노-5-(메틸아미드)티오펜(27)의 제조

실시예 4의 화합물(4, 860mg, 2.9mmol), 및 실시예 26의 화합물(26, 400mg, 2.9mmol), EDC(556mg, 2.9mmol), N-히드록시벤조트리아졸(488mg, 3.19mmol) 및 디이소프로필에틸아민(1.5ml, 8.7mmol)의 용액을 실온에서 밤새 교반시켰다. 상기 용매를 감압하에 제거하고 생성된 잔류물을 에틸 아세테이트(50ml) 및 1N 중황산나트륨(10ml)중에 재현탁시켰다. 에틸 아세테이트층을 1N 중황산나트륨(10ml), 포화 중탄산나트륨(2 x 15ml) 및 염수(15ml)로 세척한 다음, 황산나트륨으로 건조시켜황색 오일을 수득하였다. 미정제 생성물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 4/5/1비의 에틸 아세테이트/헥산/메탄올로 용리시켰다. 상기 생성물은 역상 (C18) HPLC(30분에 걸쳐 5-75% 수성 아세토니트릴중의 0.1% 트리플루오로아세트산으로 용리, t_R= 8.5분)에 의해 부분입체이성질체의 3:1 혼합물이었다. 저분해능 질량 분광법으로 목적하는 질량을 확인하였다(MH⁺417).

실시예 28

n-부틸술포닐-D-세린-알라닌-2-히드록시아미디노-5-(메틸아미드)티오펜(28)의 합성

5ml의 메탄올중의 실시예 27의 생성물(220mg, 0.53mmol)의 용액에 히드록실아민 히드로클로라이드(184mg, 2.64mmol)에 이어 N-메틸모르폴린(290㎕, 2.64mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시켰다. 메탄올 혼합물을 진공하에 농축시키고 남아있는 잔류물을 에틸 아세테이트로 희석하고 포화 중탄산나트륨 및 염수(각각 10ml)로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고 진공하에서 농축시켜 황색 오일을 수득하였다(120mg, 50%). 생성물은 역상 (C18) HPLC(20분에 걸쳐 5-75% 수성 아세토니트릴중의 0.1% 트리플루오로아세트산으로 용리, t_R=5분)에 의해 부분입체이성질체의 3:1 혼합물이었다. 저분해능 질량 분광법으로 목적하는 질량을 확인하였다(MH⁺450.5).

실시예 29

n-부틸술포닐-D-세린-알라닌-2-아미디노-5-(메틸아미드)티오펜(29)의 합성

아세트산(1.3ml) 및 물(0.13ml)중의 실시예 28의 생성물(60mg, 0.13mmol)에 87mg의 활성화 아연 더스트를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 아연 더스트를 유리 깔때기를 사용하여 여과시키고 여과물을 제조용 HPLC에 의해 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 0.1% TFA를 함유하는 0-20% 수성 아세토니트릴로 용리시켰다. 이들을 푸울링시키고 동결건조시켜 표제 화합물 7mg을 백색 분말로서 수득하였다. 생성물의 3:2 부분입체이성질체 혼합물은 5-50% 수성 아세토니트릴중의 0.1% 트리플루오로아세트산으로 20분에 걸친 역상 (C18) HPLC에 의해 13분에 용리되었다. 저분해능 질량 분광법으로 목적하는 질량을 확인하였다 (MH⁺434).

실시예 30

3차-부틸옥시카르보닐-3,4-메타노프롤린(30)의 합성

(하기 단계 A 내지 단계 E)

단계 A. N-벤질-3,4-메타노프롤리놀(b)의 합성

벤질리덴 출발 물질(a)[J. Org. Chem. 1999, 64(2), 547](4.6g, 21.4mmol) 및 리튬 알루미늄 하이드리드(THF중의 1.0M, 64ml, 64mmol)를 5시간 동안 가열 환류시켰다. 0℃로 냉각시킨 후에, 남아있는 알루미늄 하이드리드를 15분 이상 동안 포화된 수성 황산나트륨(5ml)을 적가하여 조심스럽게 켄칭하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(200ml)로 희석한 다음, 셀라이트를 통해 여과시켰다. 여과물을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과시키고 농축시켜 미정제 N-벤질 아미노알콜(3.45g)을 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.

단계 B. N-벤질옥시카르보닐-3,4-메타노프롤리놀의 합성

10% Pd/C(300mg)를 함유한 진한 HCl(1.5ml) 및 메탄올(120ml)중의 미정제 N-벤질-3,4-메타노프로리놀(단계 A, (b))(3g, 14.76mmol)의 용액을 16시간 동안 50 psi에서 수소화시켰다. 반응 혼합물을 여과하여 탄소-기재 촉매를 제거하고 여과물을 농축시켰다. 잔류물을 물/디옥산(100ml)중에 용해시키고 디이소프로필에틸아민(3.2ml)을 첨가하였다. 벤질 클로로포르메이트(2.76ml, 16.2mmol)를 첨가하고 반응 혼합물을 밤새 교반시켰다. 반응 혼합물을 농축하고, 1M HCl(100ml)중에 용해시키고 에틸 아세테이트(3 x 200ml)로 추출하였다. 유기층을 합치고 황산마그네슘으로 건조하고 여과시키고 농축하였다. 잔류물을 1:3 에틸 아세테이트/헥산을 사용하여 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 N-Cbz-3,4-메타노프롤리놀(2.4g)을 수득하였다.

단계 C. N-벤질옥시카르보닐-3,4-메타노프롤린의 합성

0℃에서 교반중인, 아세톤(68ml)중의 N-벤질옥시카르보닐-3,4-메타노프롤리놀(2.2g, 8.90mmol)의 용액에 5분에 걸쳐 존스(Jones) 시약(6.6ml)을 적가하였다[존스 시약: 삼산화크롬(13.4g) 및 진한 황산(11.5ml)을 50ml의 전체 부피까지 물로 희석시켜 제조]. 3시간 동안 0℃에서 교반시킨 후에, 이소프로판올(11ml)을 첨가하고 추가로 10분 동안 교반을 계속하였다. 반응 혼합물을 물(400ml)로 희석하고 에틸 아세테이트(3 x 500ml)로 추출하였다. 유기층을 합치고 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과시키고, 농축시켜 N-Cbz-3,4-메타노프롤린(2.25g, 96%)을 수득하였다.

단계 D. 3,4-메타노프롤린 히드로클로라이드 염의 합성

에탄올(47ml) 및 0.5M HCl(9.42ml)중의 N-벤질옥시카르보닐-3,4-메타노프롤린(상기 단계 C에서 수득)(1.23g, 4.71mmol)의 용액에 10% 탄소상 팔라듐 촉매를 첨가하였다. 반응 혼합물을 대기압에서 밤새 수소화시켰다. 촉매를 여과하고 여과물을 진공하에서 농축시켜 767mg의 순수한 생성물을 수득하였다. 생성물은 5-75% 수성 아세토니트릴중의 0.1% 트리플루오로아세트산으로 20분에 걸친 역상 (C18) HPLC에 의해 14분에 용리되었다.

단계 E. 3차-부틸옥시카르보닐-3,4-메타노프롤린의 제조

디옥산 및 물(각각 25ml)중의 3,4-메타노프롤린 히드로클로라이드 염(상기 단계 D로부터 수득)(1.04g, 6.38mmol)에 탄산칼륨(1.76g, 12.76mmol) 및 Boc-무수물(2.78g, 12.76mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 디옥산을 진공하에서 제거하고 남아있는 잔류물을 디에틸 에테르로 희석하였다. 층을 분리하고 수층을 디에틸 에테르(1 x 25ml)로 추출하였다. 수층을 1N 염산을 사용하여 pH < 3으로 산성화시키고 에틸 아세테이트(3 x 25ml)를 사용하여 추출하였다. 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고 경사분리하고 감압하에 농축시켜 생성물 745mg(50%)을 수득하였다. 생성물은 5-75% 수성 아세토니트릴중의 0.1% 트리플루오로아세트산으로 20분에 걸친 역상 (C18) HPLC에 의해 12.5분에 용리되었다.

실시예 31

3차-부틸옥시카르보닐-3,4-메타노프롤린-4-시아노벤질아미드(31)의 제조

실시예 30(단계 E)의 화합물(0.70g, 3.082mmol), p-시아노벤질아민 히드로클로라이드 염(0.784g, 4.62mmol), EDC(0.88g, 4.62mmol), N-히드록시벤조트리아졸 (0.47g, 3.082mmol) 및 디이소프로필에틸아민(2.68ml, 15.41mmol)을 실온에서 아세토니트릴(12ml)중에 교반시켰다. 18시간 후에, 용매를 감압하에 제거하고 남아있는 잔류물을 에틸 아세테이트(150ml)중에 재현탁시키고 0.5M HCl(2 x 15ml), 염수(1 x 15ml), 포화 중탄산나트륨(2 x 15ml) 및 염수(1 x 15ml)로 연속하여 세척하였다. 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 경사분리하고, 진공하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 4/1 에틸 아세테이트/헥산으로 용리시켜 정제하여 생성물 822mg(70%)을 수득하였다.

실시예 32

3,4-메타노프롤린-4-시아노벤질아미드 히드로클로라이드 염(32)의 제조

에틸 아세테이트(11.7ml)중의 실시예 31의 화합물(1g, 2.93mmol)의 용액에 에틸 아세테이트(2.93ml)중의 5M 무수 HCl을 첨가하고 반응물을 실온에서 밤새 교반시켰다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켜 백색 고형물 645mg(79%)을 수득하였다.

실시예 33

벤질술포닐-D-세린(3차-부틸에테르)-3,4-메타노프롤린-4-시아노벤질아미드 (33)의 제조

실시예 11의 화합물(0.10g, 0.32mmol), 실시예 32의 화합물(0.105g, 0.38mmol), EDC(0.073g, 0.38mmol), N-히드록시벤조트리아졸(0.049g, 0.32mmol), 및 디이소프로필에틸아민(0.28ml, 1.59mmol)을 실온에서 밤새 교반시켰다. 용매를 감압하에 제거하고 생성된 잔류물을 에틸 아세테이트(50ml) 및 1N HCl(10ml)중에 재현탁시켰다. 에틸 아세테이트 층을 1N HCl(10ml), 포화 중탄산나트륨(2 x 15ml) 및 염수(15ml)로 세척한 다음, 황산나트륨으로 건조시켰다. 유기층을 경사분리시키고 감압하에 농축시켜 171mg의 생성물을 수득하였다.

실시예 34

벤질술포닐-D-세린-3,4-메타노프롤린-4-시아노벤질아미드(34)의 제조

디클로로메탄(4ml)중의 실시예 33의 화합물(0.17g, 0.32mmol)의 용액에 트리플루오로아세트산(4ml)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반시켰다. 반응 혼합물을 10ml의 n-헵탄으로 희석시키고 진공하에 농축시켰다. 잔류물을 5ml의 아세토니트릴 및 10ml의 n-헵탄중에 재현탁시키고 진공하에 농축시켜 154mg의 생성물을 수득하였다.

실시예 35

벤질술포닐-D-3,4-메타노프롤린-4-히드록시아미디노벤질아미드(35)의 제조

1.3ml의 메탄올중의 실시예 34의 생성물(154mg, 0.32mmol)의 용액에 히드록실아민 히드로클로라이드(0.11g, 1.58mmol)에 이어서 N-메틸모르폴린(209㎕, 1.902mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시켰다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 25% 아세토니트릴 수용액에 재현탁시키고 제조용 HPLC에 의해 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을, 0.1% TFA를 함유하는 0-20% 수성 아세토니트릴로 용리시키고 푸울링시키고 동결건조시켜 표제 화합물 19.5mg을 백색 분말로서 수득하였다. 저분해능 질량 분광법으로 목적하는 질량을 확인하였다(MH⁺516).

실시예 36

벤질술포닐-D-세린-3,4-메타노프롤린-p-아미디노벤질아미드(36)의 제조

아세트산(0.41ml) 및 물(0.041ml)중의 실시예 35의 생성물(19.5mg, 0.041mmol)에 27mg의 활성화 아연 더스트를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시켰다. 아연 더스트를 유리 깔때기를 사용하여 여과시키고 여과물을 제조용 HPLC에 의해 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을, 0.1% TFA를 함유하는 0-20% 수성 아세토니트릴로 용리시키고 푸울링시키고 동결건조시켜 표제 화합물 15mg을 백색 분말로서 수득하였다. 생성물은 5-50% 수성 아세토니트릴중의 0.1% 트리플루오로아세트산으로 20분에 걸친 역상 (C18) HPLC에 의해 10.5분에 용리되었다. 저분해능 질량 분광법으로 목적하는 질량을 확인하였다(MH⁺500).

실시예 37

4-트리플루오르아세트아미도메틸아닐린(7-2)의 제조

4-니트로벤질아민(7-1)(4.0g, 21mmol)을 트리플루오로아세트산 무수물에 나누어 첨가하면서 혼합물을 얼음상에서 냉각시켰다. 혼합물을 실온으로 가온시키고 밤새 교반시켰다. 현탁액을 얼음(약 200g)위에 붓고, 탁한 현탁액을 CH₂Cl₂(2 x 100ml)로 추출하고 Na₂SO₄으로 건조시키고 용매를 제거하여 투명한 오일을 수득하였다. 이 오일을 MeOH(50ml)중의 Pd/C(10%, 300mg)와 함께 파르 플라스크에서 밤새 진탕시켰다. 고형물을 여과에 의해 제거하고 용매를 진공하에 제거하여 표제 화합물(7-2)(4.5g, 정량적 수율)에 상응하는 백색 고형물을 수득하였다.

실시예 38

N-[(4-트리플루오르아세트아미도메틸)페닐]-N'-N''-비스(3차-부톡시카르보닐)구아니딘(7-3)의 제조

4-트리플루오르아세트아미도메틸아닐린(7-2)(279mg, 1.28mmol)을 CH₂Cl₂(10ml)중의 N-N'-디-Boc-N''-트리플루오로메탄술포닐-구아니딘(문헌[J. Org. Chem. 1998, 63, 3804-3805]에 기술된 제법에 따라 제조)(500mg, 1.28mmol), TEA(108㎕, 1.28mmol)의 교반 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 6시간 동안 교반시켰다. 반응물을 CH₂Cl₂(30ml)로 희석하고 HCl(1M, 20ml), 염수(20ml)로 세척하고, Na₂SO₄으로 건조시키고 용매를 진공하에 제거하여 고형물을 수득하였다. 칼럼 크로마토그래피(CH₂Cl₂/MeOH, 99:1)로 표제 화합물(350mg, 52%)에 상응하는 백색 고형물을 수득하였다.

실시예 39

N-[(4-아미노메틸)페닐]-N'-3차-부톡시카르보닐구아니딘(7-4)의 제조

탄산칼륨(500mg)을 H₂O/MeOH(2:15, 17ml)중의 N-[(4-트리플루오르아세트아미도메틸)페닐]-N'-N''-비스(3차-부톡시카르보닐) 구아니딘(7-3)(300mg, 0.833mmol)의 교반 용액에 첨가하고 혼합물을 밤새 교반시켰다. 용매를 진공하에 제거하고, 남아있는 잔류물을 H₂O(10ml)에 용해시키고 CH₂Cl₂/MeOH(9:1, 3 x 10ml)로 추출하였다. 유기층을 Na₂SO₄으로 건조시키고 진공하에 제거하여 표제 화합물(150mg, 68%)에 상응하는 백색 고형물을 수득하였다.

실시예 40

벤질술포닐-D-세린-L-알라닌-(4-(N-3차-부톡시카르보닐구아니디노)벤질아미드 (7-5)

아세토니트릴(2.0ml)중의 N-[(4-아미노메틸)페닐]-N'-3차-부톡시카르보닐구아니딘(7-4)(36mg, 0.14mmol), 벤질술포닐-D-세린-L-알라닌 카르복실레이트(50mg, 0.13mmol), HATU(74mg, 0.20mmol), HOAT(27mg, 0.20mmol), 및 DIEA(68㎕, 0.39mmol)의 용액을 실온에서 밤새 교반시켰다. 용액을 EtOAc(20ml)로 희석시키고 HCl(1M, 10ml), NaHCO₃(포화, 10ml), 염수(10ml)로 세척하고, 진공하에 제거하여 오일을 수득하였다. HPLC 정제(CH₃CN, H₂O, 0.1% TFA)로 표제 화합물(35mg, 45%)로서 솜털모양의 백색 고형물을 수득하였다. MS(전기분무) 577 (M + 1).

실시예 41

벤질술포닐-D-세린-L-알라닌-4-구아니디노벤질아미드(7-6)의 제조

CH₂Cl₂/TFA의 혼합물(1:1, 600㎕) 중의 벤질술포닐-D-세린-L-알라닌-(4-(N-3차-부톡시카르보닐구아니디노)벤질아미드(7-5)(9.0mg, 0.016mmol) 용액을 90분 동안 실온에서 교반시켰다. 용매를 진공하에 제거하여 투명한 오일을 수득하였다. HPLC 정제(CH₃CN, H₂O, 0.1% TFA)로 표제 화합물(5.0mg, 66%)로서 솜털모양의 백색 고형물을 수득하였다. MS(전기분무) 477 (M + 1).

실시예 42

3-트리플루오르아세트아미도메틸아닐린(8-2)의 제조

교반중인 트리플루오로아세트산 무수물(30ml)에 3-니트로벤질아민(8-1) (3.0g, 16mmol)을 나누어 첨가하면서 혼합물을 얼음위에서 냉각시키고, 혼합물을 밤새 교반시켰다. 현탁액을 얼음(약 200g)위에 붓고 탁한 현탁액을 CH₂Cl₂(2 x 100ml)로 추출하고 Na₂SO₄으로 건조시키고 용매를 제거하여 투명한 오일을 수득하였다. 이 오일을 MeOH(30ml)중의 Pd/C(10%, 300mg)와 함께 파르 플라스크에서 밤새 진탕시켰다. 고형물을 여과에 의해 제거하고 용매를 진공하에 제거하여 표제 화합물(3.3g, 95%)에 상응하는 백색 고형물을 수득하였다.

실시예 43

N-[(3-트리플루오르아세트아미도메틸)페닐]-N'-N''-비스(3차-부톡시카르보닐)구아니딘(8-3)의 제조

3-트리플루오르아세트아미도메틸아닐린(8-2)(실시예 42의 생성물)(500mg,2.29mmol)을 CH₂Cl₂(10ml)중의 N-N'-디-Boc-N''-트리플루오로메탄술포닐-구아니딘(문헌[J. Org. chem. 1998, 63, 3804-3805]에 기술된 제법에 따라 제조)(986mg, 2.52mmol), TEA(642㎕, 4.58mmol)에 첨가하고, 혼합물을 24시간 동안 교반시켰다. 혼합물을 HCl(1M, 10ml), 염수(10ml)로 세척하고 Na₂SO₄으로 건조시키고 용매를 진공하에 제거하여 고형물을 수득하였다. 칼럼 크로마토그래피(CH₂Cl₂/MeOH, 98:2)로 표제 화합물(479mg, 55%)에 상응하는 백색 고형물을 수득하였다. MS(전기분무) 461 (M + 1).

실시예 44

N-[(3-아미노메틸)페닐]-N'-3차-부톡시카르보닐구아니딘(8-4)의 제조

탄산칼륨(1.0g)을 H₂O/MeOH(1:1, 4ml)중의 N-[(3-트리플루오르아세트아미도메틸)페닐]-N'-N''-비스(3차-부톡시카르보닐)구아니딘(8-3)(실시예 43의 생성물) (450mg, 0.978mmol)의 교반 용액에 첨가하고 혼합물을 밤새 교반하였다. 용매를 진공하에 제거하고, 남아있는 잔류물을 H₂O(10ml)중에 용해시키고 CH₂Cl₂/MeOH(9:1, 3 x 10ml)로 추출하였다. 유기층을 Na₂SO₄으로 건조시키고 진공하에 제거하여 표제 화합물(232mg, 90%)에 상응하는 백색 고형물을 수득하였다.

실시예 45

벤질술포닐-D-세린-L-알라닌-3-구아니디노벤질아미드(8-5)의 제조

아세토니트릴(2.0ml)중의 N-[(3-아미노메틸)페닐]-N'-3차-부톡시카르보닐구아니딘(8-4)(실시예 44의 생성물)(130mg, 0.492mmol), 벤질술포닐-D-세린-L-알라닌 카르복실레이트(190mg, 0.492mmol), HATU(380mg, 0.739mmol), HOAT(136mg, 0.739mmol) 및 DIEA(258㎕, 1.48mmol)의 용액을 실온에서 밤새 교반시켰다. 용액을 EtOAc(20ml)로 희석시키고, HCl(1M, 10ml), NaHCO₃(포화, 10ml), 염수(10ml)로 세척하고, 진공하에 제거하여 오일을 수득하였다. 상기 오일을 CH₂Cl₂/TFA의 혼합물(1:1, 3ml)로 처리하고 실온에서 2시간 동안 교반시켰다. 용매를 진공하에 제거하여 투명한 오일을 수득하였다. HPLC 정제(CH₃CN, H₂O, 0.1% TFA)로 표제 화합물(80mg, 34%)로서 솜털모양의 백색 고형물을 수득하였다. MS(전기분무) 477 (M + 1).

실시예 46

2-니트로-5-(4-트리플루오르아세트아미도메틸)-티오펜(9-2)의 제조

교반중인 트리플루오로아세트산 무수물(20ml)에 2-아미노메틸티오펜(9-1)(5.0g, 44mmol)을 나누어 첨가하면서 혼합물을 얼음위에서 냉각시키고, 혼합물을 1시간 동안 교반시켰다. 이 용액에 KNO₃(8.9g, 88mmol)을 -20℃에서 나누어 첨가하였다. 균질한 용액을 실온까지 가온시키고 밤새 교반시켰다. 생성된 현탁액을 얼음(약 200g)위에 붓고, CH₂Cl₂(2 x 100ml)로 추출하고, Na₂SO₄으로 건조시키고, 용매를 제거하여 고형물을 수득하였다. 칼럼 크로마토그래피(CH₂Cl₂)로 표제 화합물 (3.3g, 29%)에 상응하는 백색 고형물을 수득하였다. MS(전기분무): 255(M + 1).

실시예 47

N-[2-(5-트리플루오르아세트아미도메틸)티오페닐]-N'-N''-(비스-3차-부톡시카르보닐) 구아니딘(9-3)의 제조

2-니트로-5-(4-트리플루오르아세트아미도메틸)-티오펜(9-2)(1.0g, 3.9mmol)을 0℃에서 MeOH중의 HCl 포화 용액에 첨가하였다. SnCl₂(4.4g)을 15분에 걸쳐 나누어 첨가하고 혼합물을 30분 동안 교반시켰다. 용액을 농축시킨 다음,NaHCO₃(10ml)로 희석하였다. 상기 용액을 CH₂Cl₂(2 x 20ml)로 추출하고, Na₂SO₄으로 건조시키고 용매를 진공하에 제거하여 2-아미노-5-(4-트리플루오르아세트아미도메틸)-티오펜(NMR에 의해 순도 >95%, 0.80g, 95%)을 황색 오일로서 수득하였다. 상기 화합물을 추가 정제 없이 다음 단계에 바로 사용하였다.

2-아미노-5-(4-트리플루오르아세트아미도메틸)-티오펜(0.80g, 3.6mmol)을 CH₂Cl₂(20ml)중의 N-N'-디-Boc-N''-트리플루오로메탄술포닐-구아니딘(1.5g, 3.8mmol) 및 TEA(1.1ml, 7.8mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 혼합물을 24시간 동안 교반시켰다. 혼합물을 CH₂Cl₂(20ml)로 희석하고 HCl(1M, 20ml), 염수(20ml)로 세척하고, Na₂SO₄으로 건조시켰다. 용매를 진공하에 제거하여 오일을 수득하였다. 칼럼 크로마토그래피(CH₂Cl₂/MeOH, 98:2)로 표제 화합물(9-3)(150mg, 9%)에 상응하는 오일을 수득하였다. MS(전기분무): 467 (M + 1).

실시예 48

N-[5-(4-아미노메틸)티오페닐]-N'-(3차-부톡시카르보닐) 구아니딘(9-4)의 제조

탄산칼륨(500mg)을 H₂O/MeOH(1:1, 4ml)중의 N-[2-(5-트리플루오르아세트아미도메틸)티오페닐]-N'-N''-(비스-3차-부톡시카르보닐)구아니딘(9-3)(150mg,0.322mmol)의 교반 용액에 첨가하고 혼합물을 밤새 교반시켰다. 용매를 진공하에 제거하였다. 남아있는 잔류물을 H₂O(10ml)중에 용해시키고 CH₂Cl₂/MeOH(95:5, 3 x 10ml)로 추출하였다. 유기층을 Na₂SO₄으로 건조시켰다. 용매를 진공하에 제거하여 표제 화합물(150mg, 68%)에 상응하는 황색 고형물을 수득하였다.

실시예 49

벤질술포닐-D-세린-L-알라닌-[5-(2-구아니디노)티오펜]( 9-5 )의 제조

아세토니트릴(3.0㎖)중의 N-[5-(4-아미노메틸)티오파닐-N'-(t-부톡시카르보닐)구아니딘(9-4)(77mg, 0.29mmol), 벤질술포닐-D-세린-L-알라닌 카르복실레이트 (110mg, 0.285mmol), HATU(162mg, 0.427mmol), HOAT(58mg, 0.42mmol) 및 DIEA(199㎕, 1.13mol)의 용액을 실온에서 밤새 교반시켰다. 상기 용액을 EtOAc(20㎖)로 희석시키고 나서, HCl(1M, 10㎖), NaHCO₃(포화, 10㎖) 및 염수(10㎖)로 세척하였다. 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고, 용매를 진공하에 제거하여 오일을 수득하였다. 이 오일에 TFA/CH₂Cl₂(1:1, 2㎖)를 첨가시키고, 혼합물을 3시간 동안 교반시켰다. HPLC 정제(CH₃CN, H₂O, 0.1% THF)로 표제 화합물(3mg)에 상응하는 솜털모양의 백색 고형물을 수득하였다: MS(전기분무): 483(M+1).

실시예 50

6-브로모메틸니코티노니트릴( 11-2 )의 제조

사염화탄소(300㎖)중의 6-메틸니코티노니트릴(11-1)(Lancaster)(15g, 127mmol)의 용액에 N-브로모숙신이미드(27.12g, 152.4mmol)를 첨가시켰다. 생성된 용액을 탈기시키고 질소로 퍼징시킨 후에, AIBN(2,2'-아조비스이소부틸니트릴) (2.08g, 12.6mmol)을 첨가시켰다. 85℃에서 7시간 후에, 또다른 배치의 AIBN(1.04g)를 첨가시키고, 1시간 동안 더 교반시켰다. 용매를 제거시킨 후에, 미정제 생성물을 에틸 아세테이트/헥산의 플래쉬 칼럼 크로마토그래피로 처리하여 10g의 순물질(40%)을 수득하였다.

실시예 51

6-아지도메틸니코티노니트릴( 11-3 )의 제조

DMF(100㎖)중의 6-브로모메틸니코티노니트릴(11-2)(8.0g, 40.6mmol) 용액에소듐 아지드(3.17g, 48.8mmol)를 첨가시켰다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시켰다. 반응 혼합물을 400㎖의 디에틸 에테르 및 100㎖의 물로 희석시키고, 층을 분리시켰다. 수층을 디에틸 에테르(2 ×100㎖)로 재추출하였다. 에테르 추출물을 합치고 염수(2 ×100㎖)로 세척한 다음, MgSO₄로 건조시키고 여과하여 6.53g의 생성물을 백색 고형물로서 수득하였다.

실시예 52

3-히드록시아미디노-6-아지도메틸피리딘( 11-4 )의 제조

메탄올(100㎖)중에 실시예 51의 아지드(11-3)(6.46g, 40.6mmol) 용액에 히드록실아민 히드로클로라이드(3.95g, 56.84mmol), 이어서 트리에틸아민(9.6㎖)을 첨가시켰다. 용액을 4시간 동안 65℃로 가열시켰다. 용매를 감압하에서 제거시키고, 남아있는 잔류물을 에틸 아세테이트(300㎖) 및 물(100㎖)로 추출하였다. 수층을 에틸아세테이트(2 ×200㎖)로 재추출하였다. 유기 추출물을 합치고 염수(2 ×100㎖)로 세척하고, NaSO₄로 건조하여 증발시켜 표제 생성물(11-4)(7.8g)을 수득하였다.

실시예 53

3-히드록시아미디노-6-아미노메틸피리딘( 11-5 )의 제조

THF/물(80㎖/5㎖)중의 실시예 52의 아지드(11-4)(7.8g, 40.6mmol) 용액에 트리페닐포스핀(12.8g, 48.72mmol)을 첨가시켰다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시켰다. 용매를 제거하여 건조시키고, 남아있는 잔류물을 100㎖의 1N HCl 및 100㎖의 물로 희석하였다. 수층을 디클로로메탄으로 수회 추출하였다. 수층을 알칼리성 수지(Bio Rad AG 1-X8)를 사용하여 염기성화하였다(pH∼9). 수지를 여과시키고, 물로 완전히 세척하였다. 세척물을 합치고 감압하에서 건조시켜 백색 고형물(6.60g)을 수득하였다.

실시예 54

3-히드록시아미디노-6-아미노메틸(Boc)피리딘( 11-6 )의 제조

디옥산 및 물(각각 6㎖)중의 실시예 53의 생성물(11-5)(0.5g, 3.01mmol) 용액에 탄산칼륨(832mg, 6.02mmol), 이어서 Boc-무수물(0.66g, 3.01mmol)을 첨가시켰다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시켰다. 반응 혼합물을 농축시키고, 남아있는 잔류물을 에틸 아세테이트에 용해시키고 포화 중탄산나트륨 및 염수로 세척시켰다. 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 8/2의 에틸아세테이트/헥산, 이어서 에틸아세테이트 및 9/1의 디클로로메탄/메탄올로 플래쉬 칼럼 크로마토그래피를 실시하여, 0.43g의 생성물을 백색 고형물로서 수득하였다.

실시예 55

3-이소프로필옥시아미디노-6-아미노메틸(Boc)피리딘( 11-7 )의 제조

디메틸포름아미드(5㎖)중의 실시예 54의 생성물(11-6)(0.43g, 1.39mmol) 용액에 2-요오도프로판(210㎕, 2.1mmol), 이어서 세슘 카르보네이트(0.68g, 2.1mmol)을 첨가시켰다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시켰다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석시키고, 포화 중탄산나트륨으로 세척시켰다. 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 농축시켜 유기 오일을 수득하였다. 1/1의 에틸 아세테이트/헥산, 이어서 에틸 아세테이트로 플래쉬 칼럼 크로마토그래피를 실시하여,229mg(53%)의 생성물을 결정성 고형물로서 수득하였다.

실시예 56

Boc-Ala-3-이소프로필옥시아미디노-6-아미노메틸피리딘( 11-8 )의 제조

실시예 55의 화합물(11-7)(229mg, 0.74mmol)을 디옥산(1㎖)에 용해시키고, 디옥산(1㎖)중의 4N HCl 용액으로 실온에서 1시간 동안 처리하였다. 감압하에서 용매를 제거하여 290mg의 백색 고형물을 수득하였다. 그 다음, 이 생성물을 아세토니트릴(4.12㎖)중에 용해시키고, 디이소프로필에틸아민(538㎕, 3.09mmol)로 중화시킨 다음, 커플링 시약으로서 EDC(197mg, 1.03mmol) 및 HOBt(157.6mg, 1.03mmol)를 사용하여 Boc-알라닌(195mg, 1.03mmol)과 커플링시켰다. 실온에서 밤새 교반시킨 후에, 용매를 감압하에 제거시키고, 남아있는 잔류물을 에틸 아세테이트로 희석시켰다. 유기층을 포화 중탄산나트륨 및 염수로 수회 세척시키고, 황산나트륨으로 건조시킨 다음, 여과하고 농축시켜 황색 오일을 수득하였다. 9/1의 에틸아세테이트/헥산, 이어서 에틸아세테이트로 플래쉬 칼럼 크로마토그래피를 실시하여, 181mg의 백색 오일(46%)을 수득하였다.

실시예 57

벤질술포닐-dSer(tBu)-Ala-3-이소프로필옥시아미디노-6-아미노메틸피리딘( 11-9 )의 제조

실시예 56의 화합물(11-8)(181mg, 0.48mmol)을 디옥산(1㎖)중에 용해시키고, 디옥산(1㎖)중의 4N HCl로 실온에서 1시간 30분 동안 처리하였다. 감압하에서 용매를 제거하여 200mg의 백색 고형물을 수득하였다. 그 다음, 이 생성물을 아세토니트릴(5㎖)중에 용해시키고, 커플링 시약으로서 디이소프로필에틸아민(298㎕, 1.71mmol)으로 중화시킨 다음, EDC(109mg, 0.57mmol) 및 HOBt(96mg, 0.63mmol)을 사용하여 BnSO₂-dSer(tBu)-OH(180mg, 0.57mmol)과 커플링시켰다. 실온에서 밤새 교반시킨 후에, 용매를 감압하에서 제거시키고, 남아있는 잔류물을 에틸아세테이트로희석시켰다. 유기층을 포화 중탄산나트륨 및 염수로 수회 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 농축시켜 고형물(250mg, 76%)을 수득하였다. 생성물은 5-75%의 수성 아세토니트릴중의 0.1% 트리플루오로아세트산으로 20분에 걸친 역상(C18) HPLC에 의해 11.5분에 용출되었다: MS(전기분무): 577(M+1).

실시예 58

벤질술포닐-dSer-Ala-3-이소프로필옥시아미디노-6-아미노메틸피리딘( 11-10 )의 제조

실시예 57의 화합물(11-9)(137mg, 0.24mmol)을 각각 2㎖의 디클로로메탄과 트리플루오로아세트산으로 실온에서 1시간 동안 처리하였다. 감압하에서 용매를 제거하여, 169mg의 유기 오일을 수득하였다. 생성물은 5-90%의 수성 아세토니트릴중의 0.1% 트리플루오로아세트산으로 20분에 걸친 역상(C18) HPLC에 의해 9분에 용리되었다.

실시예 59

벤질술포닐-dSer-Ala-3-아미디노-6-아미노메틸피리딘( 11-11 )의 제조

물(8㎖) 및 아세트산(0.8㎖)중의 실시예 58의 생성물(11-10)(74mg, 0.14mmol)을 활성화 아연 더스트(91mg)으로 45분 동안 처리하였다. 용액을 여과시키고, 여과물을 역상 HPLC(C18)로 정제하였다. 생성물은 5-25%의 수성 아세토니트릴중의 0.1% 트리플루오로아세트산으로 20분에 걸친 역상(C18) HPLC에 의해 11분에 용리되었다.

B.특정 중간체 화합물의 합성경로

(i) 실시예 60 내지 97에는 본 발명의 화합물의 제조시에 사용된 특정 중간체의 합성이 기재되어 있다. 도 1 내지 5 참조.

실시예 60

D-Ser(O-t-Bu)-Ala-OMe 아세테이트 염( 1-3 )의 합성법

N-α-Cbz-D-세린(1-1)(Bachem, 4.97g, 16.8mmol), 알라닌 메틸 에스테르 히드로클로라이드 염(1-2)(Novabiochem, 4.7g, 33.7mmol), EDC(6.5g, 33.7mmol) 및1-히드록시벤조트리아졸(2.6g, 16.8mmol)을 혼합시키고, 아세토니트릴(67㎖)을 첨가시켰다. 슬러리로서 10분 동안 교반시킨 후에, 디이소프로필에틸아민(14.4㎖, 84mmol)을 첨가시키고, 생성되는 투명 혼합물을 18시간 동안 더 교반시켰다. 용매를 감압하에서 제거하고, 잔류물을 에틸 아세테이트(500㎖)중에 현탁시켰다. 용액을 0.5M HCl(2 ×100㎖), 이어서 포화 중탄산나트륨(2 ×100㎖) 및 염수(100㎖)로 세척하였다. 그 다음, 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고 용매를 진공에서 제거하고, 정량적 수율의 Cbz-D-Ser(O-t-Bu)-Ala-OMe를, 5-75%의 수성 아세토니트릴중의 0.1% 트리플루오로아세트산으로 20분에 걸친 역상(C18) HPLC에 의해 t_R= 16.9에서 단일 피크로서 수득하였다.

그 다음, Cbz-D-Ser(O-t-Bu)-Ala-OMe을 에탄올/아세트산/물(4:1:1 혼합물, 150㎖)중에 용해시켰다. 플라스크를 질소로 충전시키고, 10% 탄소상 팔라듐(1.5g)을 첨가시켰다. 이 혼합물을 45psi에서 2시간 동안 수소화시켰다. 팔라듐 촉매를 여과시키고 감압하에서 용매를 제거하고, 95% 수율의 표제 화합물 4.58g을 역상(C18) HPLC(5-75%의 수성 아세토니트릴중의 0.1% 트리플루오로아세트산으로 20분에 걸쳐 용리, t_R= 8.0분)에 의해 단일 피크로서 수득하였다: MS(M +H = 247.2).

실시예 61

벤젠술포닐-D-Ser(O-t-Bu)-Ala-OMe(1-4)의 제조

아세토니트릴(13㎖)중의 실시예 60의 화합물(1-3)(1.0g, 3.3mmol)의 교반 슬러리에 벤젠술포닐 클로라이드(0.87g, 4.9mmol)을 첨가시켰다. 이 혼합물에 디이소프로필에틸아민(1.67㎖, 9.8mmol)을 다섯으로 나누어 1시간에 걸쳐서 첨가시켰다. 혼합물을 1시간 추가로 교반시켰다. 용매를 감압하에서 제거시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트(100㎖)중에 현탁시켰다. 용액을 0.5M HCl(2 ×10㎖), 이어서 포화 중탄산나트륨(2 ×10㎖) 및 염수(1 ×10㎖)로 세척하였다. 그 다음, 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 용매를 감압하에서 제거하였다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 50% 헥산/에틸 아세테이트로 용리시켜 정제하여, 0.54g, 1.4mmol의 생성물을 43%의 수율로 수득하였다. 생성물은 역상 (C18) HPLC(5-75% 수성 아세토니트릴중의 0.1% 트리플루오로아세트산으로 20분에 걸쳐 용리, t_R= 20.2분)에 의해 단일 피크로 표시되었다.

실시예 62

벤젠술포닐-D-Ser(O-t-Bu)-Ala-OH( 1-5 )의 제조

메탄올(9㎖)중의 실시예 61의 화합물(1-4)(0.53g, 1.4mmol)에 1.0M 수산화리튬(3.0㎖, 3mmol)을 첨가시켰다. 18시간 동안 교반시킨 후에, 반응 혼합물을 10㎖의 DOWEX(50 ×8 ~ 400) 이온 교환 수지에 붓고, 메탄올/물(1:1 혼합물, 60㎖)로 용리시켰다. 메탄올을 감압하에서 펌핑시키고 남아있는 물을 동결건조시키고, 0.49g 1.3mmol(95%)의 표제 화합물을 역상 (C18) HPLC(5-75% 수성 아세토니트릴중의 0.1% 트리플루오로아세트산으로 20분에 걸쳐 용리, t_R= 13.5분)에 의해 단일 피크로서 수득하였다.

실시예 63

벤질술포닐-D-Ser(O-t-Bu)-OMe의 제조

아세토니트릴(39㎖)중의 D-세린(O-t-Bu)메틸 에스테르 히드로클로라이드 염(2.07g, 9.8mmol)의 교반 용액에 α-톨루엔술포닐 클로라이드(1.86g, 9.8mmol)을 첨가시켰다. 이 혼합물에 디이소프로필에틸아민(3.7㎖, 21.5mmol)을 다섯으로 나누어 1시간에 걸쳐서 첨가시켰다. 혼합물을 1시간 추가로 교반시켰다. 용매를 감압하에서 제거시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트(100㎖)중에 현탁시켰다. 용액을 0.5M HCl(2 ×10㎖), 이어서 포화 중탄산나트륨(2 ×10㎖) 및 염수(1 ×10㎖)로 세척하였다. 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 용매를 진공하에 제거하여, 2.84g의 표제 화합물을 88%의 수율로 수득하였다. R_f= 0.4(4:1 에틸 아세테이트:헥산).

실시예 64

벤질술포닐-D-Ser(O-t-Bu)-OH의 제조

메탄올(54㎖)중의 실시예 63의 화합물(2.66g, 8.1mmol)의 교반 용액에 1.0M 수산화리튬(17.8㎖, 17.8mmol)을 첨가시켰다. 반응 혼합물을 18시간 동안 교반시킨 다음, 10㎖의 DOWEX(50 ×8 ~ 400) 이온 교환 수지 칼럼에 붓고, 메탄올/물(1:1 혼합물, 60㎖)로 용리시켰다. 메탄올을 감압하에 제거시키고 남아있는 수용액을 동결건조시켜, 2.47g의 표제 화합물을 97%의 수율로 수득하였다. t_R= 14.8분(5-75% 수성 아세토니트릴중의 0.1% 트리플루오로아세트산으로 20분에 걸쳐 용리).

실시예 65

벤질술포닐-D-Ser(O-t-Bu)-Ala-OMe의 제조

실시예 64의 화합물(1.0g, 3.2mmol), 알라닌 메틸 에스테르 히드로클로라이드 염(Novabiochem, 0.89g, 6.3mmol), EDC(1.22g, 6.3mmol) 및 1-히드록시벤조트리아졸(0.49g, 3.2mmol)을 혼합시키고, 아세토니트릴(13㎖)을 첨가시켰다. 생성된 슬러리를 10분 동안 교반시킨 후에, 디이소프로필에틸아민(2.71㎖, 15.8mmol)을 첨가시키고, 생성된 투명한 혼합물을 18시간 동안 추가로 교반시켰다. 용매를 감압하에 제거시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트(100㎖)중에 현탁시켰다. 용액을 0.5M HCl(2 ×10㎖), 이어서 포화 중탄산나트륨(2 ×10㎖) 및 염수(1 ×10㎖)로 세척하였다. 그 다음, 유기층을 황산나트륨으로 건조시키고, 용매를 진공에서 제거하여 1.22g의 표제 화합물을 97%의 수율로 수득하였다. t_R= 16.2분(5-75% 수성 아세토니트릴중의 0.1% 트리플루오로아세트산으로 20분에 걸쳐 용리).

실시예 66

벤질술포닐-D-Ser(O-t-Bu)-Ala-OH의 제조

메탄올(22㎖)중의 실시예 65의 화합물(1.22g, 3.1mmol)에 1M 수산화리튬(7.2㎖, 7.2mmol)을 첨가시켰다. 18시간 동안 교반시킨 후에, 반응 혼합물을 10㎖의 DOWEX(50 ×8 ~ 400) 이온 교환 수지 칼럼에 붓고, 메탄올/물(1:1 혼합물, 60㎖)로 용리시켰다. 메탄올을 감압하에 제거시키고 수용액을 동결건조시켜, 1.16g의 표제 화합물을 91%의 수율로 수득하였다. t_R= 13.2분(5-75% 수성 아세토니트릴중의 0.1% 트리플루오로아세트산으로 20분에 걸쳐 용리).

실시예 67

i-부톡시카르보닐-D-Ser(O-t-Bu)-OMe의 제조

테트라히드로푸란(200㎖)중의 HCl-D-Ser(O-t-Bu)-OMe(15g, 71mmol, Bachem)의 균일한 교반 용액에 포화 중탄산나트륨(80㎖), 이어서 이소부틸클로로포르메이트(19.45g, 142mmol)를 첨가시켰다. 층을 분리시키고 수층을 에틸 아세테이트(50㎖)로 세척하였다. 유기상을 합치고, 용매를 감압하에 제거하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트(100㎖)중에 현탁시키고, 1M HCl(100㎖), 포화 중탄산나트륨(100㎖) 및 염수(100㎖)로 세척하였다. 유기층을 황산마그네슘으로 건조시키고, 탈색 목탄(decoloring charcoal)(예를 들어, 다르코(Darco)라는 제품명으로 시판)으로 처리한 다음 여과시키고 용매를 감압하에서 제거하여, 표제 화합물을 정량적 수율로 수득하였다. R_f= 0.3(20% 에틸 아세테이트/헥산).

실시예 68

i-부톡시카르보닐-D-Ser(O-t-Bu)-OH의 제조

테트라히드로푸란(78㎖)중의 실시예 67의 화합물(19.51g, 70mmol)의 교반 용액에 수산화리튬(78mmol, 3.28g)을 첨가시켰다. 반응 혼합물을 TLC(20% 에틸 아세테이트/헥산)에 의해 출발 물질이 전혀 확인되지 않을 때까지 3시간 동안 강하게 교반시켰다. 용액을 진한 HCl을 사용하여 pH ~2로 산성화시키고, 용매를 감압하에 제거하였다. 미정제 생성물을 에틸 아세테이트중에 현탁시키고, 포화 중탄산나트륨(2X, 75㎖)으로 추출시켰다. 중탄산나트륨 세척물을 합치고 6M HCl로 산성화시키고, 분리된 오일을 에틸 아세테이트(2 ×100㎖)로 추출하였다. 유기층을 합치고 황산마그네슘으로 건조시킨 다음 다르코로 처리 및 여과하고 용매를 감압하에 제거시켜 정량적 수율의 표제 화합물을 수득하였다. R_f= 0.01(헥산 중의 20% 아세테이트).

실시예 69

i-부톡시카르보닐-D-Ser(O-t-Bu)-Ala-OMe의 제조

0℃에서 아세토니트릴(280ml)중의 실시예 68의 화합물(16.5g, 63mmol), HCl-Ala-OMe(10.6g, 76mmol), 1-히드록시벤조트리아졸(10.2g, 76mmol) 및 EDC(16.33g, 85mmol)의 용액에 4-메틸모르폴린(35㎖, 315mmol)을 첨가시켰다. 이 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반시킨 다음, 실온에서 72시간 동안 교반시켰다. 용매를 감압하에 제거시키고, 생성된 잔류물을 에틸 아세테이트(300㎖) 및 1M HCl(350㎖)중에 현탁시켰다. 수층을 분리시키고, 에틸 아세테이트(300㎖)로 세척하였다. 에틸 아세테이트층을 합치고, 1M HCl(300㎖), 포화 중탄산나트륨(400㎖) 및 염수(200㎖)로 세척하였다. 유기층을 황산나트륨로 건조시키고, 다르코 탈색 목탄으로 처리하고 여과시켰다. 용매를 감압하에 제거하여 21.48g의 표제 화합물(98% 수율)을 수득하였다.

실시예 70

i-부톡시카르보닐-D-Ser-Ala-OH의 제조

실시예 69의 화합물(21g, 58mmol)을 트리플루오로아세트산(110ml)중에 용해시켰다; 생성된 혼합물을 35분 동안 교반시켰다. 상기 용액을 빙욕으로 냉각시키고, 포화 중탄산나트륨(630ml)을 첨가하고, 고형 중탄산나트륨(70g)을 45분에 걸쳐 첨가하여 pH가 7이 되게 하였다. 수용액을 에틸 아세테이트(3x250ml)로 추출하였다. 유기 추출물을 합치고, 황산마그네슘으로 건조시키고, 다르코 탈색 목탄으로 처리하고, 여과시켰다. 용매를 진공하에 제거하여, 정량적 수율의 i-부톡시카르보닐-D-Ser-Ala-OMe를 수득하였다.

테트라히드로푸란(68ml)중의 미정제 잔류물의 교반 용액에 물(17ml)중의 수산화리튬(2.7g, 64mmol, 1.1당량)를 첨가하였다. 출발 물질이 TLC(9:1 디클로로메탄/이소프로판올)에 의해 확인되지 않을 때까지 반응 혼합물을 0.5시간 동안 강하게 교반시켰다. 6M HCl(13ml)로 상기 용액을 pH~2로 산성화시키고, 용매를 감압하에 제거하였다. 상기 미정제 생성물을 에틸 아세테이트(400ml) 및 물(50ml)중에 현탁시켰다. 수층을 에틸 아세테이트(200ml)로 추출하였다. 유기층을 합치고 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과시키고, 진공하에 용매를 제거하여 13.94g의 표제 화합물(86% 수율)을 수득하였다. R_f= 0.3(90:30:5 클로로포름/메탄올/아세트산)

실시예 71

N-α-(3-페닐프로필)-D-세린-t-부틸에테르 메틸 에스테르의 제조

세린 O-t-부틸 에테르 메틸 에스테르(1.50g, 7.1mmol), 히드로신남알데히드(1.40ml, 10.6mmol), 및 트리에틸아민(1.18ml, 8.5mmol)을 테트라히드로푸란(70ml)중에서 4시간 동안 환류시켰다. 용액을 실온으로 냉각시킨 후, 소듐 보로하이드리드(0.46g, 12mmol)를 교반 용액에 둘로 나누어 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다; 용액을 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트와 1.0M HCl간에 분배시켰다. 유기층을 1.0N HCl로 세척하였다. 수층을 40% NaOH를 사용하여 pH 10으로 염기성화시키고, 에틸 아세테이트(2X)로 추출하였다. 유기층을 합치고 황산나트륨으로 건조시키고, 용매를 진공하에 제거하였다. 잔류물을 실리카겔상의 플래쉬 크로마토그래피(1 x 6 인치 칼럼)에 의해 10-30% 에틸 아세테이트/헥산으로 용리시켜 정제하여 표제 화합물 150mg(7% 수율)을 수득하였다. R_f= 0.60(50% 에틸 아세테이트/헥산).

실시예 72

N-α-t-부톡시카르보닐-N-α-(3-페닐프로필)-D-세린-t-부틸에테르 메틸 에스테르의 제조

실시예 71의 화합물(150mg, 0.51mmol), 디-t-부틸디카르보네이트(167mg, 0.77mmol) 및 디이소프로필에틸아민(0.13ml, 0.77mmol)을 테트라히드로푸란(2ml)중에서 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트(20ml)로 희석시키고, 연속적으로 1.0N HCl(2X), 포화 중탄산나트륨(2X) 및 염수(1X)로 세척하였다. 용매를 진공하에 제거하여 정량적 수율의 표제 화합물 206mg을 수득하였다. R_f= 0.74(50% 에틸 아세테이트/헥산).

실시예 73

N-α-t-부톡시카르보닐-N-α-(3-페닐프로필)-D-세린-t-부틸에테르의 제조

메탄올(3.5ml)중의 실시예 72의 화합물(206mg, 0.52mmol) 용액에 1.0N LiOH(0.63ml, 0.63mmol)를 적가하였다. 상기 용액은 탁해진 후, 5분 내에 균질화되었다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시켰다. 추가로, 1.0N LiOH(1.47ml)를첨가하였다. 2시간 후, 추가로 1.0N LiOH(1.0ml)를 첨가하였다. TLC(50% 에틸 아세테이트/헥산)에 의해 출발 물질이 확인되지 않을 때, DOWEX(50 X 8-400) 이온 교환 수지로 반응 혼합물을 pH 4로 산성화시켰다. 상기 용액을 여과시키고, 메탄올에 이어서 물로 세정하였다. 상기 용액을 감압하에 농축시킨 후, 동결건조시켜 95% 수율의 189mg의 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. R_f= 0.04(50% 에틸 아세테이트/헥산).

실시예 74

i-부톡시카르보닐-D-Ser(O-t-부틸)-OH(2-2)의 제조

물(51ml)중의 D-세린-O-t-부틸 에테르(2-1)(10.5g, 65.3mmol)에 탄산나트륨(20.1g, 196.2mmol)을 첨가하고, 이소부틸 클로로포르메이트(9.8ml, 75.2mmol)를 첨가하였다. 3시간 후, 상기 혼합물은 탁해졌고, 추가로 3시간 동안 교반시켰다. 6시간 후, 상기 용액을 6M HCl(~50ml)로 산성화시켰다. 그 후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 200ml)로 추출하였다. 초기 추출 후, 수층을 염화나트륨으로 포화시키고, 에틸 아세테이트(2 x 200ml)로 추출시켰다. 에틸 아세테이트층을 합치고, 황산나트륨으로 건조시키고, 진공하에 용매를 제거하여, 표제 화합물 17.0g(99.5% 수율)을 백색 고형물로서 수득하였다. HPLC: 4.6 x 250mm, 5마이크론 입자, 100옹스트롬 포어, C18 칼럼상에서, 0.1% 수성 TFA 완충액중의 5-75% 아세토니트릴 구배로, 1ml/분 유속에서 t=18.5분. NMR(CDCl₃): 5.5ppm(m, 1H), 4.45ppm(bs, 1H), 3.82-3.95ppm(m, 3H), 3.52-3.6ppm(m, 1H), 1.85-1.97ppm(m, 1H), 1.2ppm(s, 9H), 0.9ppm(d, 6H).

실시예 75

i-부톡시카르보닐-D-Ser(t-Bu)-L-Ala-O-t-Bu(2-3)의 제조

아세토니트릴(153ml)중의 실시예 74의 화합물(2-2)(10g, 38.3mmol), L-알라닌 t-부틸 에스테르 HCl 염(10.43g, 57.4mmol), EDC(11.05g, 57mmol) 및 히드록시벤조트리아졸(5.85g, 38.3mmol)을 실온에서 15분 동안 교반하였다. 디이소프로필에틸아민(32.7ml, 191mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 18시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 제거하였다. 생성된 잔류물을 에틸 아세테이트(1000ml) 및 1M HCl(100ml)에 재현탁시켰다. 에틸 아세테이트층을 0.5M HCl(100ml)로 세척하고, 중탄산나트륨(2 x 100ml) 및 염수(100ml)로 포화시켰다. 에틸 아세테이트층을 황산나트륨으로 건조시키고, 용매를 진공하에 제거하여, 정량적 수율의 표제 화합물을 수득하였다. HPLC: 4.6 x 250mm, 5마이크론 입자, 100옹스트롬 포어, C18 칼럼상에서, 0.1% 수성 TFA 완충액중의 5-90% 아세토니트릴 구배로, 1ml/분 유속에서,t_r=18.7분. NMR(CDCl₃): 7.15ppm(bs, 1H), 5.6ppm(bs, 1H), 4.4-4.5ppm(m, 1H), 4.2ppm(bs, 1H), 3.87-3.95ppm(m, 3H), 3.3-3.4ppm(m, 1H), 1.85-1.95ppm(m, 1H), 1.45ppm(s, 9H), 1.39ppm(d, 3H), 1.2ppm(s, 9H), 0.9ppm(d, 6H).

실시예 76

i-부톡시카르보닐-D-Ser-L-Ala-OH(2-4)의 제조

디클로로메탄(35ml)중의 실시예 75의 화합물(2-3)(7.15g, 18.4mmol) 용액에 트리플루오로아세트산(35ml)을 첨가하였다. 이 혼합물을 2시간 동안 교반시키고, 용매를 감압하에 제거하였다. 톨루엔을 첨가하고, 용매를 진공하에 제거하여 트리플루오로아세트산을 제거하였다. 점성 황색 오일의 정량적 수율의 표제 화합물을 다음 단계에 사용하였다. 4.6 x 250mm, 5마이크론 입자, 100옹스트롬 포어, C18 칼럼상에서, 0.1% 수성 TFA 완충액중의 5-90% 아세토니트릴 구배로, 1ml/분 유속에서, t_r=10.5분.

실시예 77

2-시아노-5-메틸티오펜(3-2)의 제조

DMF(10ml)중의 2-브로모-5-메틸티오펜(3-1)(TCI chemicals, 5g, 28mmol) 및시안화구리(I)(Aldrich, 2.53g, 28mmol)를 4시간 동안 가열 환류시켰다. 실온으로 냉각시킨 후, 에틸 아세테이트(500ml) 및 10% NaCN 수용액(500ml)을 첨가하였다. 수층 및 유기층을 분리시킨 후, 수층을 에틸 아세테이트(300ml)로 추출하였다. 유기층을 합쳐서 오일로 농축시키고, 이를 추가로 플래쉬 칼럼 크로마토그래피(에틸 아세테이트)로 정제하여 표제 화합물(3.03g, 87%)을 수득하였다. TLC: Rf 0.30(1:1 헥산/에틸 아세테이트);¹H NMR(CDCl₃): δ 2.55(m, 3H), 6.76(d, 1H, J=3.6Hz), 7.42(d, 1H, J=3.6Hz).

실시예 78

2-시아노-5-(브로모메틸)티오펜(3-3)의 제조

CCl₄(Aldrich, 60ml)중의 2-시아노-5-메틸티오펜(화합물 3-2, 3.0g, 24mmol), N-브로모숙신이미드(Aldrich, 4.8g, 27mmol) 및 2,2'-아조비스이소부티로니트릴(Aldrich, 0.4g, 2.4mmol)을 5시간 동안 가열 환류시켰다. 실온으로 냉각시킨 후, 용매를 진공하에 제거하여 황색 오일을 수득하였다. 상기 오일을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피(1:1 헥산/에틸 아세테이트)로 정제하여, 표제 화합물(4.5g, 91%)을 수득하였다. TLC: Rf 0.91(1:1 헥산/에틸 아세테이트);¹H NMR(CDCl₃): δ 4.66(s, 2H), 7.10(d, 1H, J=3.8Hz), 7.48(d, 1H, J=3.8Hz)

실시예 79

2-시아노-5-(아지도메틸)티오펜(3-4)의 제조

DMF(Aldrich, 60ml)중의 2-시아노-5-(브로모메틸)티오펜(화합물 3-3, 3.5g, 17.3mmol) 및 소듐 아지드(Aldrich, 1.7g, 26mmol)의 용액을 실온에서 10시간 동안 교반시켰다. 플래쉬 칼럼 크로마토그래피(헥산중의 20% 에틸 아세테이트)에 의해 표제 화합물(2.35g, 83%)을 수득하였다. TLC: Rf 0.48(헥산중의 20% 에틸 아세테이트);¹H NMR(CDCl₃): δ 4.56(s, 2H), 7.01(d, 1H, J=3.7Hz), 7.55(d, 1H, J=3.7Hz).

실시예 80

2-시아노-5-(아미노메틸)티오펜(3-5)의 제조

THF(Aldrich, 40ml) 및 물(10ml)중의 2-시아노-5-(아지도메틸)티오펜(화합물 3-4, 2.5g, 10mmol)의 용액에 트리페닐포스핀(Aldrich, 5.7g)을 0℃에서 첨가하였다. 상기 용액을 실온으로 가온시키고, 실온에서 10시간 동안 교반하였다. RP-HPLC 정제로 표제 화합물(2.3g, 94%)을 수득하였다. MS(전기분무): 139(M+1);¹H NMR(CDCl₃): δ 4.01(s, 2H), 4.75(br s, 2H, NH₂), 6.82(d, 1H, J=3.5Hz), 7.08(d,1H, J=3.5Hz).

실시예 81

2-시아노-5-(t-부톡시카르보닐아미노메틸)티오펜(3-6)의 제조

물(4ml) 및 1,4-디옥산(Aldrich)중의 2-시아노-5-(아미노메틸)티오펜(화합물 3-5, 0.6g, 4mmol) 및 Boc₂O(Fluka, 0.95g, 4mmol) 용액에 탄산칼륨(Aldrich, 2g)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 플래쉬 크로마토그래피(1:1 헥산/에틸 아세테이트)로 표제 화합물(0.58g, 56%)을 수득하였다. MS(전기분무): 239(M+1);¹H NMR(CDCl₃): δ 1.44(s, 9H), 4.55(s, 2H), 4.90(br s, 1H, NH), 6.88(d, 1H, J=3.6Hz), 7.07(d, 1H, J=3.6Hz).

실시예 82

2-(N-히드록시아미디닐)-5-(t-부톡시카르보닐아미노메틸)티오펜(3-7)의 제조

메탄올(5ml)중의 2-시아노-5-(t-부톡시카르보닐메틸)티오펜(화합물 3-6, 560mg, 2.44mmol), 히드록실아민 히드로클로라이드(Aldrich, 330mg, 4.8mmol) 및 4-메틸모르폴린(Aldrich, 1ml, 9.1mmol)의 용액을 실온에서 12시간 동안 교반시켰다. 플래쉬 크로마토그래피(5:95:1 이소프로필 알코올/메틸렌 클로라이드/트리에틸아민)로 표제 화합물(550mg, 86%)을 수득하였다. MS(전기분무): 272(M+1).

실시예 83

2-아미디닐-5-(아미노메틸)티오펜(3-8)의 제조

메탄올(10ml)중의 2-(N-히드록시아미디닐)-5-(t-부톡시카르보닐아미노메틸)티오펜(화합물 3-7, 900mg, 3.3mmol) 용액에 10% Pd/C(Aldrich, 100mg)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 10시간 동안 파르 장치에서 수소화시켰다(H₂, 45psi). 촉매를 여과에 의해 제거하고, 용매를 진공하에 증발시켜 Boc 보호된 중간체[900mg, 94%, MS(전기분무) 256(M+1)]를 수득하였고, 이를 실온에서 3시간 동안 1,4-디옥산(Aldrich, 5ml)중의 4M HCl로 처리하여 표제 화합물(460mg, 84%)을 수득하였다. MS(전기분무): 56(M+1);¹H NMR(CD₃OD): δ4.43(s, 2H), 7.42(d, 1H, J=3.5Hz), 7.78(d, 1H, J=3.5Hz).

실시예 84

2-[N-(프로필옥시)아미디닐)-5-(아미노메틸)티오펜(3-9)의 제조

DMF중의 2-(N-히드록시아미디닐)-5-(t-부톡시카르보닐아미노메틸)티오펜(화합물 3-7, 271mg, 1.0mmol) 및 요오도프로판(Aldrich, 200mg, 1.2mmol) 용액에CsCO₃(Aldrich, 0.5g)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온하에 10시간 동안 교반하였다. 플래쉬 크로마토그래피(5:95:1 이소프로필 알코올/메틸렌 클로라이드/트리에틸아민)로 Boc 보호된 중간체[MS(전기분무) 314(M+1)]를 수득하였고, 이를 실온에서 3시간 동안 1,4-디옥산(Aldrich)중의 4M HCl로 처리하여 표제 화합물(201mg, 81%)을 수득하였다. MS(전기분무): 214(M+1);¹H NMR(CDCl₃): δ0.95(t, 3H, J=7.5Hz), 1.55(br s, 2H, NH₂), 1.70(m, 2H), 4.00(t, 2H, J=7.5Hz), 4.01(d, 2H, J=7.5Hz), 4.70(br s, 2H, NH₂), 6.80(d, 1H, J=3.6Hz), 7.08(d, 1H, J=3.6Hz),

실시예 85

α-아지도-4-시아노톨루엔(4-2)의 제조

DMF(100ml)중의 p-시아노벤질 브로마이드(Aldrich, 10g, 51mmol) 용액에 소듐 아지드(Aldrich, 3.5g, 54mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 그 후, 반응 혼합물을 물(350ml)로 희석하고, 에테르(2 x 100ml)로 추출하였다. 유기층을 합치고 염수로 세척하고, 건조시켰다(MgSO₄). 용매를 제거하여 표제 화합물(8g, 96%)을 수득하였다.¹H NMR(CDCl₃): δ4.42 (s, 2H),7.41(d, 2H, J=8.1Hz), 7.65(d, 2H, J=8.1Hz).

실시예 86

p-시아노벤질아민(4-3)의 제조

EtOAc(150ml)중의 α-아지도-4-시아노톨루엔(화합물 4-2, 8g, 51mmol) 용액에 10% Pd/C(Aldrich, 800mg) 촉매를 첨가하였다. 반응 혼합물을 파르 장치에서 11시간 동안 수소화시켰다(H₂, 45psi). 촉매를 여과에 의해 제거하고, 용매를 진공하에 제거하여 표제 화합물(6.3g, 93%)을 수득하였다.¹H NMR(CDCl₃): δ3.85(s,2H), 7.45(d, 2H, J=8.1), 7.60(d, 2H, J=8.1Hz), 7.78(s, 2H, NH₂)

실시예 87

4-(아미노메틸)페닐-N-히드록시아미딘(4-4)의 제조

메탄올(100ml)중의 화합물 4-3(7g) 및 NMM(4ml) 용액에 히드록실아민 히드로클로라이드(7g)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 3일 동안 교반하였다. 상기 화합물을 RP HPLC 정제하여 표제 화합물(7g, 89%)을 수득하였다. MS(전기분무): 166(M+1).

실시예 88

4-(아미노메틸)페닐아미딘(4-5)의 제조

메탄올(150ml)중의 4-(아미노메틸)페닐-N-히드록시아미딘(화합물 4-4, 7g) 용액에 10% Pd/C(Aldrich, 800mg)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 파르 장치에서 48시간 동안 수소화시켰다(H₂, 45psi). 촉매를 여과에 의해 제거하고, 용매를 진공하에 제거하여 표제 화합물(6.3g, 99%)을 수득하였다. MS(전기분무): 150(M+1).

실시예 89

2-플루오로-4-시아노톨루엔(5-2)의 제조

DMF(60ml)중의 4-브로모-2-플루오로톨루엔(Aldrich, 5g, 27mmol) 용액에 시안화구리(I)(Aldrich, 3.6g, 40mmol)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 150℃에서 11시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 상기 혼합물을 물과 EtOAc(각각 500ml)간에 분배시켰다. 유기층을 건조시키고(MgSO₄), 용매를 진공하에 제거하여 표제 화합물(2.08, 58%)을 수득하였다.¹H NMR(CDCl₃): δ2.36(s, 3H), 7.30(m, 3H), 7.35(d, 1H, J=8.1Hz).

실시예 90

3-플루오로-4-(브로모메틸)벤조니트릴(5-3)의 제조

CCl₄중의 2-플루오로-4-시아노톨루엔(화합물 5-2, 2.08g 15mmol) 용액에 NBS(Aldrich, 3.02g, 17mmol) 및 벤조일퍼옥시드(Aldrich, 0.37g, 1.5mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 80℃에서 14시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 혼합물을 에테르(100ml)로 희석시키고, 수성 Na₂S₃O₃로 세척하고, 건조시켰다(MgSO₄). 진공하에 용매를 제거하여 황색 오일을 수득하였으며, 이를 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 부산물 3-플루오로-4-(브로모메틸)벤조니트릴(5-4)(1.0g, 30%)과 함께 표제 화합물(5-3)(1.4g, 42%)을 수득하였다. 표제 화합물(5-3):¹H NMR(CDCl₃): δ 4.46(s, 2H), 7.35(d, 1H, J=8.0Hz), 7.42(d, 1H,J=8.0Hz), 7.52(t, 1H, J=8.0Hz). 부산물(5-4):¹H NMR(CDCl₃): δ 6.90(s, 1H), 7.35(d, 1H, J=8.0Hz), 7.55(d, 1H, J=8.0Hz), 7.96(t, 1H, J=8.0Hz).

실시예 91

3-플루오로-4-(아지도메틸)벤조니트릴(5-5)의 제조

DMF(15ml)중의 3-플루오로-4-(브로모메틸)벤조니트릴(화합물 5-3, 1.4g, 6.5mmol) 용액에 소듐 아지드(Aldrich, 0.63g, 9.8mmol)를 첨가하였다. 실온에서 20시간 동안 교반시킨 후, 반응 혼합물을 EtOAc 및 물(각각 100ml)간에 분배시켰다. 유기층을 건조시키고(MgSO₄), 용매를 진공하에 제거하여 표제 화합물(0.995g, 86%)을 수득하였다.¹H NMR(CDCl₃): δ 4.50(s, 2H), 7.38(d, 2H, J=8.1Hz) 7.52(m, 2H).

실시예 92

3-플루오로-4-(아지도메틸)페닐-N-히드록시아미딘(5-6)의 제조

메탄올(25ml)중의 NMM(2ml) 및 3-플루오로-4-(아지도메틸)벤조니트릴(화합물 5-5, 1.2g, 6.8mmol) 용액에 히드록실아민 히드로클로라이드(Aldrich, 800mg, 11.6mmol)를 첨가하였다. 실온에서 3일 동안 교반시킨 후, 반응 혼합물을 EtOAc로 희석시키고, 염수로 세척하였다. 진공하에 용매를 제거하여, 표제 화합물(1.38, 82%)을 수득하였다.¹H NMR(CD₃OD): δ4.41(s, 2H), 7.45(m, 3H).

실시예 93

3-플루오로-4-(아지도메틸)페닐(-N-프로필옥시)아미딘(5-7)의 제조

DMF(20ml)중의 요오도프로판(1ml, 10mmol) 및 3-플루오로-4-(아지도메틸)페닐-N-히드록시아미딘(화합물 5-6, 1.38g, 6.6mmol) 용액에 세슘 카보네이트(Aldrich, 3.2g, 9.9mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 50℃에서 20시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 물을 첨가하고, 생성된 혼합물을 에테르로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 건조시켰다(MgSO₄). 플래쉬 크로마토그래피로 표제 화합물(1.03g, 62%)을 수득하였다.¹H NMR(CDCl₃): δ 0.99(t, 3H, J=7.5Hz), 1.75(m, 2H), 4.08(t, 2H, J=7.5Hz), 4.40(s, 2H), 4.78(br s, 2H), 7.40(m, 3H).

실시예 94

3-플루오로-4-(아미노메틸)페닐(-N-프로필옥시)아미딘(5-8)의 제조

THF(15ml)중의 3-플루오로-4-(아지도메틸)페닐(-N-프로필옥시)아미딘(화합물 5-7, 1.03g, 4.1mmol) 용액에 트리페닐포스핀(Aldrich, 1.6g, 6.2mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 20시간 동안 교반하였다. NaOH(3M)을 pH가 14가 될 때까지 반응 혼합물에 첨가하였다. 생성된 용액을 EtOAc(2 x 100ml)로 추출하였다. 유기층을 합치고 염수로 세척하고, 건조시켰다(MgSO₄). 진공하에 용매를 제거하여 표제 화합물(825mg, 77%)을 수득하였다.¹H NMR(CD₃OD): δ0.98(t, 3H, J=7.5Hz), 1.72(m, 2H), 3.82(s, 2H), 3.95(t, 2H, J=7.5Hz), 7.35(d, 1H, J=8.0Hz), 7.40(m, 2H)

실시예 95

N-α-벤질옥시카르보닐-D-Ser(O-t-부틸)-L-Ala t-부틸 에스테르의 제조

아세토니트릴(100ml)중의 N-α-Cbz-D-세린 t-부틸 에테르(5.02g, 17mmol) 용액에 EDC(4.90g, 25.5mmol, 1.5당량) 및 1-히드록시벤조트리아졸(2.60g, 17mmol)을 첨가하였다. 45분 동안 교반시킨 후, 알라닌 t-부틸 에스테르 HCl 염(3.55g, 19.6mmol, 1.15당량) 및 4-메틸모르폴린(7.5ml, 68mmol, 4당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 1.5시간 동안 교반하였다. TLC가 반응이 완결되었음을 나타내었다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트(100ml)중에 용해시키고, 연속적으로 1N HCl, 포화 중탄산나트륨, 물 및 염수(각각 25ml)로 세척하였다. 용매를 진공하에 제거하여, 오일을 수득하였으며, 이를 방치하여 결정화시켰다. 표제 화합물(6.95g)을 연황색 고형물로서 97%의 수율로 수득하였다. R_f=0.63(디클로로메탄중의 5% 이소프로판올)

실시예 96

D-Ser(O-t-부틸)-L-Ala t-부틸 에스테르의 제조

메탄올중의 실시예 95의 화합물(1.14g, 2.69mmol) 용액을 팔라듐 히드록시드(110mg)상에서 벌룬 압력(balloon pressure)에서 1.5시간 동안 수소화시켰다. 반응 혼합물을 셀라이트(celite)로 여과시키고, 용매를 진공하에 제거하여 정량적 수율의 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. R_f=0.44(디클로로메탄중의 5% 메탄올).

실시예 97

페네틸술포닐-D-Ser(O-t-부틸)-L-Ala t-부틸 에스테르의 제조

빙욕으로 냉각된 아세토니트릴(100ml) 중의 실시예 96의 화합물(4.2g, 14.6mmol) 및 페네틸술포닐 클로라이드(3.58g, 17.5mmol, 1.2당량)의 교반된 용액에 2,4,6-콜리딘(4.8ml, 36.5mmol, 2.5당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온시킨 후, 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트(80ml)에 용해시키고; 생성된 용액을 연속적으로 1.0N HCl, 포화 중탄산나트륨, 물 및 염수로 세척한 후, 황산나트륨으로 건조시켰다. 용매를 진공 하에 제거하였다. 잔류물을 0-60% 에틸 아세테이트/헥산으로 용리시켜 실리카 겔을 통해 크로마토그래피하였다. 상기 표제 화합물을 황색 오일로서 89%의 수율로 분리시켰다. R_f= 0.84(디클로로메탄 중의 5% 메탄올).

C.P3에 아실 또는 카르보네이트 에스테르를 갖는 화합물에 대한 합성 경로

실시예 98

n-부틸술포닐-D-(이소프로필옥시카르보닐)세린-알라닌-4-아미디노벤질아미드의 제조

빙욕으로 냉각된 피리딘(100ml) 중의 실시예 9의 화합물(2.32g, 4.3mmol)의 용액에 이소프로필 클로로포르메이트(톨루엔 중의 1M 용액 21ml, 21mmol, 5당량)을 첨가하였다. 분석용 HPLC에 의해 반응이 완료된 것으로 측정될 때까지 반응을 모니터링하였다. 반응 혼합물을 톨루엔(300ml)으로 희석시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔류물을 아세토니트릴(400ml)에 용해시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔류물을 아세토니트릴(30ml) 및 에틸 아세테이트(30ml)에 용해시켰다.에테르를 첨가하고, 침전물을 분리시켰다. 고형물을 에테르로 세척한 후, 진공 하에 건조시켰다. 고형물을 에테르와 에틸 아세테이트(1:1 혼합물, 2 X 200ml)로 세척한 후, 진공 하에 건조시켜 상기 표제 화합물을 수득하였다.

실시예 99

실시예 98의 프로토콜에 따르되, 이소프로필 클로로포르메이트를 대체하여 하기 화합물을 제조하였다:

화합물명	실시예 99의 대체물
n-부틸술포닐-D-[(+)-멘틸옥시카르보닐]-세린-알라닌-4-아미디노벤질아미드	(+)-멘틸 클로로포르메이트
n-부틸술포닐-D-(페녹시카르보닐)-세린-알라닌-4-아미디노벤질아미드	페닐 클로로포르메이트

실시예 100

(4-아미노-3-니트로-벤질)-카르밤산 3차-부틸 에스테르의 제조

THF(1M, 40ml) 중의 BH₃일부를 10분에 걸쳐 THF(20ml) 중의 4-아미노-3-니트로-5-벤조니트릴(1.5g, 9.2mmol) 교반 용액에 적가하면서 빙욕으로 냉각시켰다. 생성된 황색 혼합물을 실온까지 가온시키고, 2시간 동안 교반하고, 0℃에서 HCl(6M, 20ml)로 켄칭켰다. 용매를 진공 하에 제거시키고, 잔류물을 H₂O로 희석시키고, pH를 NaOH(1M)을 사용하여 약 10으로 조절하였다. 수층을 CH₂Cl₂(3x50ml)로 추출하였다. 유기층을 합쳐 Na₂SO₄상에서 건조시켰다. 용매를 제거하여 황색 고형물 1.2g(78%)을 수득하고, 이를 추가의 분리 과정 없이 다음 합성 단계에서 사용하였다.

상기 고형물(500mg, 3.0mmol)을 THF(10ml) 중의 BOC-ON(754mg, 3.0mmol)의 균일한 혼합물에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 혼합물을 NaHCO₃수용액으로 희석하고, CH₂Cl₂(3x50ml)로 추출하였다. 유기층을 합쳐 Na₂SO₄상에서 건조시켰다. 용매를 진공 하에 제거하여 오일을 수득하였다. 칼럼 크로마토그래피(CH₂Cl₂/MeOH, 99:1)하여 상기 표제 화합물을 황색 고형물로서 수득하고 방치하여 고화시켰다(760mg, 95%), MS(전기분무) 268(M+1).

실시예 101

(3,4-디아미노-벤질)-카르밤산 3차-부틸 에스테르)의 제조

MeOH(10ml) 중의 (4-아미노-3-니트로-벤질)-카르밤산 3차-부틸 에스테르(500mg, 1.87mmol) 및 Pd(탄소 상의 10%, 100mg)의 혼합물을 H₂(40psi)하에서 3시간 동안 진탕시켰다. 촉매를 여과에 의해 제거하고, 용매를 진공 하에 제거하여 오일을 수득하고, 이를 즉시 다음 단계(실시예 102)에 사용하였다.

실시예 102

(2-아미노-1 H -벤조이미다졸-5-일메틸)-카르밤산 3차-부틸 에스테르의 제조

(3,4-디아미노-벤질)-카르밤산 3차-부틸 에스테르(500mg, 2.10mmol)을 CH₃CN/H₂O(1:1, 10ml) 중의 CNBr(267mg, 2.52mmol) 및 NaHCO₃(354mg, 4.2mmol)의 교반 용액에 첨가하고, 이 혼합물을 48시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하여 백색 고형물을 수득하고 추가의 분리 과정 없이 다음 합성 단계에서 사용하였다. MS(전기분무) 263(M+1).

실시예 103

벤질술포닐-D-세린-L-알라닌-5-(2-아미노벤즈이미다졸릴)메틸아미드의 제조

(2-아미노-1H-벤조이미다졸-5-일메틸)-카르밤산 3차-부틸 에스테르(50mg, 0.3703mmol)을, 아세토니트릴(1.0ml) 중의 벤질술포닐-D-세린-L-알라닌 카르복실레이트(111mg, 0.337mmol), HATU(192mg, 0.506mmol), HOAT(69mg, 0.506mmol) 및 DIEA(174㎕, 1.01mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. HPLC 정제(CH₃CN, H₂O, 0.1% TFA)하여 상기 표제 화합물로서 솜털모양의백색 고형물(25mg, 24%)을 수득하였다. MS(전기분무) 475(M+1).

실시예 104

벤질술포닐-D-세린-L-알라닌-4-(2-아미노벤즈이미다졸릴)-프로필아미드의 제조

문헌(Olofson et al.J. Org. Chem.1998,63, 1248)의 절차에 따라 제조된 4-(2-아미노이미다졸릴)-프로필아민 HCl(50mg, 0.236mmol)을 아세토니트릴(1.0ml) 중의 벤질술포닐-D-세린-L-알라닌 카르복실레이트(78mg, 0.236mmol), HATU(179mg, 0.472mmol), HOAT(64mg, 0.472mmol) 및 DIEA(164㎕, 0.943mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. HPLC 정제(CH₃CN, H₂O, 0.1% TFA)하여 상기 표제 화합물로서 솜털모양의 백색 고형물을 수득하였다. MS(전기분무) 453(M+1).

실시예 105

(4-아미노-2-클로로-벤질)-카르밤산 3차-부틸 에스테르의 제조

THF(1M, 36ml) 중의 BH₃일부를 10분에 걸쳐 THF(10ml) 중의 4-아미노-2-클로로-5-벤조니트릴(2.0g, 13mmol) 교반 용액에 적가하면서 빙욕으로 냉각시켰다. 생성된 황색 혼합물을 실온까지 가온시키고, 2시간 동안 교반하고, 0℃에서 HCl(6M, 20ml)로 켄칭시켰다. 용매를 진공 하에 제거하였다. 잔류물을 H₂O로 희석시키고, pH를 NaOH(1M)을 사용하여 약 10으로 조절하였다. 수층을 CH₂Cl₂(3x50ml)로 추출하고, 유기층을 합쳐 Na₂SO₄상에서 건조시켰다. 용매를 제거하여 황색 오일(2.5g, 100%)을 수득하고, 이를 추가의 분리 과정없이 다음 합성 단계에서 사용하였다.

상기 오일(500mg, 2.6mmol)(전단계로부터의)을 THF(10ml) 중의 BOC-ON(664mg, 2.7mmol)의 균일한 혼합물에 첨가하고, 생성된 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 혼합물을 NaHCO₃수용액으로 희석하고, CH₂Cl₂(3x50ml)로 추출하였다. 유기층을 합쳐 Na₂SO₄상에서 건조시켰다. 용매를 진공 하에 제거하여 무색 오일을 수득하였다. 칼럼 크로마토그래피(CH₂Cl₂/MeOH, 99:1)하여 상기 표제 화합물을 황색 고형물로서 수득하고 방치하여 고화시켰다. MS(전기분무) 257(M+1).

실시예 106

[(4-BOC-아미노마테오메틸)-3-클로로페닐]-N'-N''-비스(3차-부톡시카르보닐)구아니딘의 제조

(4-아미노-2-클로로-벤질)-카르밤산 3차-부틸 에스테르(250mg, 0.978mmol)을, CH₂Cl₂(5ml) 중의 N-N'-디-Boc-N''-트리플루오로메탄술포닐-구아니딘(343mg, 0.879mmol), TEA(108㎕, 1.28mmol)의 교반 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 24시간 동안 교반하였다. 혼합물을 CH₂Cl₂(20ml)로 희석하고, HCl(1M, 20ml) 및 염수(10ml)로 세척하였다. 유기층을 Na₂SO₄상에서 건조시켰다. 용매를 진공 하에 제거하여 고형물을 수득하였다. 칼럼 크로마토그래피(CH₂Cl₂/MeOH, 99:1)하여 표제 화합물에 상응하는 오일(150mg, 34%)을 수득하였다.

실시예 107

벤질술포닐-D-세린-L-알라닌-4-구아니디노-2-클로로벤질아미드의 제조

CH₂Cl₂/TFA(1:1, 2ml) 혼합물 중의 [(4-BOC-아미노마테오메틸)-3-클로로페닐]-N'-N''-비스(3차-부톡시카르보닐) 구아니딘(100mg, 0.201mmol) 용액을 90분 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하여 투명한 오일을 수득하고, 이를 추가의 처리 없이 다음 합성 단계에서 사용하였다.

상기 오일(전단계로부터의)을, 아세토니트릴(5.0ml) 중의 벤질술포닐-D-세린-L-알라닌 카르복실레이트(69mg, 0.209mmol), HATU(157mg, 0.418mmol), HOAT(57mg, 0.418mmol) 및 DIEA(145㎕, 0.836mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. HPLC 정제(CH₃CN, H₂O, 0.1% TFA)하여 솜털모양의 백색 고형물로서 상기 표제 화합물(25mg, 24%)을 수득하였다. MS(전기분무) 511(M+1).

실시예 108

(6-아미노-피리딘-3-일메틸)-카르밤산 3차-부틸 에스테르의 제조

THF(1M, 40ml) 중의 BH₃일부를 10분에 걸쳐 THF(5ml) 중의 4-아미노-2-클로로-5-벤조니트릴(2.0g, 14mmol) 교반 용액에 적가하면서 빙욕으로 냉각시켰다. 생성된 황색 혼합물을 실온까지 가온시키고, 2시간 동안 교반하고, 0℃에서 HCl(6M, 20ml)로 켄칭시켰다. 용매를 진공 하에 제거하였다. 잔류물을 H₂O로 희석시키고, pH를 NaOH(1M)을 사용하여 약 10으로 조절하였다. 수층을 CH₂Cl₂(3x50ml)로 추출하고, 유기층을 합쳐 Na₂SO₄상에서 건조시키고, 용매를 제거하여 고형물(2.8g, 100%)을 수득하였다.

상기 고형물(2.0g, 13mmol)을 CH₃CN(10ml) 중의 BOC-ON(3.4mg, 14mmol)의 균일한 혼합물에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 NaHCO₃수용액으로 희석하고, CH₂Cl₂(3x50ml)로 추출하였다. 유기층을 합쳐 Na₂SO₄상에서 건조시켰다. 용매를 진공 하에 제거하여 무색 오일을 수득하였다. 칼럼 크로마토그래피(CH₂Cl₂/MeOH, 99:1)하여 상기 표제 화합물을 오일로서 수득하고 방치하여 고화시켰다. MS(전기분무) 226(M+1).

실시예 109

[(3-BOC-아미노마테오메틸)-피리디닐]-N'-N''-비스(3차-부톡시카르보닐) 구아니딘의 제조

(6-아미노-피리딘-3-일메틸)-카르밤산 3차-부틸 에스테르(400mg, 1.78mmol)중 일부를, CH₂Cl₂(5ml) 중의 N-N'-디-Boc-N''-트리플루오로메탄술포닐-구아니딘 (765mg, 1.96mmol) 및 TEA(385ml, 2.67mmol)의 교반 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 24시간 동안 교반하였다. 혼합물을 CH₂Cl₂(20ml)로 희석하고, HCl(1M, 20ml) 및염수(10ml)로 세척하였다. 유기층을 Na₂SO₄상에서 건조시키고, 용매를 진공 하에 제거하여 고형물을 수득하였다. 칼럼 크로마토그래피(CH₂Cl₂/MeOH, 99:1)하여 표제 화합물에 상응하는 오일을 수득하였다. MS(전기분무) 466(M+1).

실시예 110

벤질술포닐-D-세린-L-알라닌-4-구아니디노-(2-피리디닐)메틸아미드

CH₂Cl₂/TFA(1:1, 2ml) 혼합물 중의 [(3-BOC-아미노마테오메틸)-피리디닐]-N'-N''-비스(3차-부톡시카르보닐) 구아니딘(100mg, 0.215mmol) 용액을 90분 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하여 투명한 오일을 수득하였다. 이 오일을, 아세토니트릴(1.0ml) 중의 벤질술포닐-D-세린-L-알라닌 카르복실레이트(63mg, 0.194mmol), HATU(147mg, 0.387mmol), HOAT(52mg, 0.387mmol) 및 DIEA(135㎕, 0.774mmol)의 교반 용액에 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. HPLC 정제(CH₃CN, H₂O, 0.1% TFA)하여 솜털모양의 백색 고형물로서 상기 표제 화합물(15mg, 16%)을 수득하였다. MS(전기분무) 478(M+1).

실시예 A

특이성 측정을 위한 시험관내 효소 검정

본 발명의 화합물의 유로키나제 촉매 활성의 선택적 억제제로서의 작용능을,이 효소의 활성을 50% 억제시키는 시험 화합물의 농도(IC₅₀)를 측정하고, 이 값을 관련 세린 프로테아제인, 재조합 조직 플라스미노겐 활성화제(rt-PA), 플라스민, 활성화 단백질 C, 키모트립신, 인자 Xa, 트롬빈 및 트립신 전부 또는 일부에 대해 측정된 값과 비교함으로써 검정하였다.

모든 검정에 사용된 완충액은 HBSA(10mM HEPES, pH 7.5, 150mM 염화나트륨, 0.1% 우혈청 알부민)이었다.

IC₅₀측정을 위한 검정은 코닝(Corning) 마이크로타이터 플레이트 (microtiter plate)의 적합한 웰에 HBSA 50㎕, HBSA로 희석된 특정 농도(광범위한 농도 범위를 포함)의 시험 화합물(또는 V₀(억제되지 않은 속도) 측정을 위에서는 HBSA 단독)50㎕, 및 HBSA로 희석된 효소 50㎕를 혼합하여 수행하였다. 실온에서 30분간 인큐베이션한 후에, 하기 명시된 농도의 50㎕의 기질을 웰에 첨가하여 최종 총부피를 200㎕(약 4배 Km)로 하였다. 색원성 기질 가수분해의 초기 속도를, 5분에 걸쳐 더모 맥스^®(Thermo Max^®) 키네틱 마이크로플레이트 리더(Kinetic Microplate Reader)를 사용하여 405nm에서의 흡광도 변화에 의해 측정하였으며, 이때 5% 미만의 첨가 기질이 사용되었다. 초기 가수분해 속도의 50% 감소를 유발하는 첨가된 억제제의 농도를 IC₅₀값으로서 정의하였다. K_i는 IC₅₀값으로부터 계산될 수 있다.

유로키나제 검정

유로키나제 촉매 활성을 디아파마 그룹, 인코포레이티드(DiaPharma Group, Inc.)로부터 입수한 색원성 기질 150mM S-2444(L-피로글루타밀-글리실-L-아르기닌-p-니트로아닐린 히드로클로라이드)를 사용하여 측정하였다. 아보트 래보러토리스(Abbott Laboratories)사에 의해 제조된 유로키나제(아보키나제 (Abbokinase))를 프라이어러티 파마슈티컬스(Priority Pharmaceuticals)로부터 입수하고, 사용전에 HBSA 검정 완충액으로 750pM으로 희석하였다. 검정 완충액은 0.1% BSA를 함유하는 HBS(10mM HEPES, 150mM 염화나트륨, pH 7.4)였다. K_i는 IC₅₀값을 사용하여 계산하였다.

트롬빈(fIIa) 검정

효소 활성을 색원성 기질인 페파크롬(Pefachrome) t-PA(펜타팜 리미티드(Pentapharm Ltd.)로부터 입수한 CH₃SO₂-D-헥사히드로티로신-글리실-L-아르기닌-p-니트로아닐린)를 사용하여 측정하였다. 기질을 사용전에 탈이온수로 재구성하였다. 정제된 사람의 α-트롬빈을 엔자임 리서치 래보러토리스, 인코포레이티드(Enzyme Research Laboratories, Inc.)로부터 입수하였다. 모든 검정에 대해 사용된 완충액은 HBSA(10mM HEPES, pH 7.5, 150mM 염화나트륨, 0.1% 우혈청 알부민)였다.

HBSA(50㎕), α-트롬빈(50㎕)(최종 효소 농도는 0.5nM임) 및 억제제(50㎕)(광범위한 농도 범위를 포함)를 적합한 웰에서 혼합하고, 기질 페파크롬-t-PA(50㎕) (기질의 최종 농도는 250μM임, 약 5배 Km)를 첨가하기 전에 실온에서 30분 동안인큐베이션시켜, IC₅₀을 측정하였다. 페파크롬 t-PA 가수분해의 초기 속도를, 5분에 걸쳐 더모 맥스^®(Thermo Max^®) 키네틱 마이크로플레이트 리더를 사용하여 405nm에서의 흡광도 변화에 의해 측정하였으며, 이 때 5% 미만의 첨가 기질이 사용되었다. 초기 가수분해 속도의 50% 감소를 유발하는 첨가된 억제제의 농도를 IC₅₀값으로서 정의하였다.

인자 Xa

인자 Xa 촉매 활성을 디아파마 그룹(DiaPharma Group, Franklin, OH)으로부터 입수한 색원성 기질 S-2765(N-벤질옥시카르보닐-D-아르기닌-L-글리신-L-아르기닌-p-니트로아닐린)을 사용하여 측정하였다. 모든 기질을 사용하기 전에 탈이온수로 재구성하였다. S-2765의 최종 농도는 250μM(약 5배 Km)이었다. 정제된 사람 의 인자 X를 엔자임 리서치 래보러토리스, 인코포레이티드(Enzyme Reserach Laboratories, Inc., South Bend, IN)로부터 입수하였고, 이로부터 문헌[Bock, P.E., Craig, P.A., Olson, S.T., and Singh, P., Arch. Biochem. Biophys.273:375-388(1989)]에 기술된 바와 같이 인자 Xa(FXa)를 활성화시키고, 제조하였다. 효소를 검정 전에 HBSA로 희석하였으며, 이 때 최종 농도는 0.25nM이었다.

재조합 조직 플라스미노겐 활성화제(rt-PA) 검정

rt-PA 촉매 활성을 기질 페파크롬 t-PA(펜타팜 리미티드(Pentapharm Ltd.)로부터 입수한 CH₃SO₂-D-헥사히드로티로신-글리실-L-아르기닌-p-니트로아닐린)를 사용하여 측정하였다. 기질은 탈이온수로 조제한 후에 검정하기 전에 HBSA로 희석하였으며, 이 때 최종 농도는 500μM(약 3배 Km)이었다. 사람의 rt-PA (악티바제^®(Activase^®))를 지넨테크 인코포레이티드(Genentech Inc.)로부터 입수하였다. 효소를 탈이온수로 재구성하고, 검정 전에 HBSA로 희석하였으며, 이때 최종 농도는 1.0nM이었다.

플라스민 검정

플라스민 촉매 활성을 디아파마 그룹으로부터 입수한 색원성 기질, S-2366[L-피로글루타밀-L-프로릴-L-아르기닌-p-니트로아닐린 히드로클로라이드]를 사용하여 측정하였다. 기질을 탈이온수로 조제한 후, 검정하기 전에 HBSA로 희석하였으며, 이때 최종 농도는 300μM(약 2.5배 Km)이었다. 정제된 사람의 플라스민을 엔자임 리서치 래보러토리스, 인코포레이티드로부터 입수하였다. 이 효소를 검정 전에 HBSA로 희석하였으며, 이 때 최종 농도는 1.0nM이었다.

활성화 단백질 C (aPC) 검정

aPC 촉매 활성을, 디아파마 그룹으로부터 입수한 색원성 기질인 페파크롬(Pefachrome PC)(델타-카르보벤질옥시-D-리신-L-프롤릴-L-아르기닌-p-니트로아닐린 디히드로클로라이드)를 사용하여 측정하였다. 기질을 탈이온수로 조제한 후, 검정하기 전에 HBSA로 희석하였으며, 이 때 최종 농도는 400μM(약 3배 Km)이었다. 정제된 사람 aPC를 헤마톨로직 테크놀로지스, 인코포레이티드 (Hematologic Technologies, Inc.)로부터 입수하였다. 이 효소를 검정 전에 HBSA로 희석하였으며, 이 때 최종 농도는 1.0nM이었다.

키모트립신 검정

키모트립신 촉매 활성을 디아파마 그룹으로부터 입수한 색원성 기질인 S-2586(메톡시-숙시닐-L-아르기닌-L-프롤릴-L-티로실-p-니트로아닐리드)을 사용하여 측정하였다. 기질을 탈이온수로 조제한 후 검정 전에 HBSA로 희석하였으며, 이 때 최종 농도는 100μM(약 9배 Km)이었다. 정제된(3X-결정화; CDI) 우췌장 α-키모트립신을 워팅톤 바이오케미칼 코포레이션(Worthington Biochemical Corp.)으로부터 입수하였다. 효소를 탈이온수로 재구성시키고, 검정 전에 HBSA로 희석시켰으며, 이때 최종 농도는 0.5nM이었다.

트립신 검정

트립신 촉매 활성을 디아파마 그룹으로부터 입수한 색원성 기질인 S-2222(벤조일-L-이소류신-L-글루탐산-[감마-메틸 에스테르]-L-아르기닌-p-니트로아닐리드)를 사용하여 측정하였다. 기질을 탈이온수로 조제한 후 검정 전에 HBSA로 희석하였으며, 이 때 최종 농도는 250μM(약 4배 Km)이었다. 정제된(3X-결정화; TRL3) 우췌장 트립신을 워팅톤 바이오케미칼 코포레이션으로부터 입수하였다. 효소를 탈이온수로 재구성시키고, 검정 전에 HBSA로 희석시켰으며, 이때 최종 농도는 0.5nM이었다.

표 IA 및 IB

표 IA 및 IB는 다른 세린 프로테아제와 비교하여 유로키나제의 억제에 대한 높은 특이성을 입증하는, 본 발명의 화합물에 대한 상기 특정 효소에 대해 결정된K_i또는 IC₅₀값을 기재한 것이다.

표 IA

실시예 B

생체내 혈관생성 억제제로서의 시험 화합물의 평가

표준 혈관생성 검정인 병아리 CAM(계태아 융모요막) 모델을 사용하여, 시험 화합물의 혈관생성 억제능을 평가하였다. 이 모델은 새로운 혈관의 형성에 영향을 미치는 시험 화합물의 능력을 평가하기 위해 확립된 모델이다.

염기성 섬유아세포 성장 인자(bFGF)의 0.5㎍/ml 용액으로 포화된 필터 디스크를 10일령 계태아의 CAM 상에 두어 혈관생성을 유도하였다. 24시간 후, 총부피 100㎕ 의 살균된 PBS 중의 0 내지 1㎍의 시험 화합물을 계태아에 정맥내 주입하였다. 약 48시간 후, 계태아를 희생시키고, 필터 디스크 및 주위의 CAM 조직을 분석용으로 절제하였다. 필터의 정해진 영역내에서 혈관 분지점의 수를 계수함으로써 혈관생성을 정량화하였다[Brooks, P.C., et al, Methods in Molecular Biology120:257-269(1999)]. 혈관생성 지수는 실험군과 비처리된 대조 태아 간의 혈관 분지점 수의 차이로서 정의된다. 각각의 실험군은 8 내지 10개의 계태아를 포함할 것이다.

실시예 C

계태아 모델에서 사람 종양 세포의 성장을 억제하는 시험 화합물의 평가

계태아 모델을 사용하여, 생체내에서 사람 종양 세포의 성장을 억제하는 시험 화합물의 활성을 평가하였다. 총부피 40㎕에 4 X 10⁵개의 세포를 함유하는 사람 섬유육종 세포(HT 1080)의 단일 세포 현탁액을 문헌["Brooks, P.C., et al, "Integrin α_νβ₃Antagonists Promote Tumor Regression by Inducing Apoptosis of Angiogenic Blood Vessels", Cell79:1157-1164(1994)]에 기재된 바와 같이 10일령 계태아에 도포하였다. 24시간 후, 0 내지 10㎍의 시험 화합물을 계태아에 정맥내 주입하였다. 이와 같이 화합물을 단회 투여한 후, 대조 태아 및 처리된 태아를 총 7일 동안 인큐베이션시키고, 희생시켰다. 종양을 절제하고, 주위의 CAM 조직이 없도록 다듬고, 칭량하였다. 이 실험에서 절제시킨 종양의 습윤 중량을 도표화하였다. 각각의 실험군은 10 내지 12개의 계태아를 포함할 것이다.

Claims

화학식(I)의 화합물 또는 이들의 약제학적으로 허용되는 염:

상기 식에서,

(a) X는 -S(O)₂-, -N(R')-S(O)₂-, -(C=O)-, -OC(=O)-, -NH-C(=O)-, -P(O)(R')-, 및 직접 연결기로 구성된 군으로부터 선택되고, 여기서 R'는 독립적으로 수소, 1 내지 약 4개 탄소 원자의 알킬, 약 6 내지 약 14개 탄소 원자의 아릴 또는 약 7 내지 약 16개 탄소 원자의 아르알킬이며, 단 X가 -P(O)(R')-인 경우 R'는 수소가 아니고;

(b) R₁은 하기 기로 구성된 군으로부터 선택되며:

(1) Y₁및 Y₂로 구성된 군으로부터 선택된 1 또는 2개의 치환기로 치환되거나 치환되지 않은 1 내지 약 4개 탄소 원자의 알킬,

(2) Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 치환되거나 치환되지 않은 약 3 내지 약 8개 탄소 원자의 시클로알킬로 치환된 1 내지 약 3개 탄소 원자의 알킬,

(3) 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 3 내지 약 15개 탄소 원자의 시클로알킬,

(4) 산소, 질소, 및 S(O)_i(여기서 i는 0, 1 또는 2임)로 구성된 군으로부터 선택된 헤테로원자 및 탄소로부터 선택된 고리 원자를 갖는 4 내지 약 10개 고리 원자의 헤테로시클로알킬로서, 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 헤테로시클로알킬,

(5) 고리 탄소상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 3 내지 6개 고리 탄소 원자를 갖는 5 내지 7원 헤테로사이클인(여기서, V는 -CH₂-, -O-, -S(=O)-, -S(O)₂- 또는 -S-임)을 포함하여, 산소, 질소, 및 S(O)_i(여기서 i는 0, 1 또는 2임)로 구성된 군으로부터 선택된 헤테로원자 및 탄소로부터 선택된 고리 원자를 갖는 4 내지 약 10개 고리 원자의 헤테로시클로,

(6) 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 약 3 내지 약 8개 탄소 원자의 시클로알킬로 치환되거나 치환되지 않은 2 내지 약 6개 탄소 원자의 알케닐,

(7) Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 약 6 내지 약 14개 탄소 원자의 아릴,

(8) 산소, 질소, 및 황으로부터 선택된 헤테로원자 및 탄소로부터 선택된 고리 원자를 갖는 약 5 내지 약 14개 고리 원자의 헤테로아릴로서, Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 헤테로아릴,

(9) 알킬 사슬상에서 히드록시 또는 할로겐으로 치환되거나 치환되지 않으며, 아릴 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 약 7 내지 약 15개 탄소 원자의 아르알킬,

(10) 산소, 질소 및 황으로부터 선택된 헤테로원자 및 탄소로부터 선택된 고리 원자를 갖는 약 5 내지 약 14개 고리 원자의 헤테로아르알킬로서, 알킬 사슬상에서 히드록시 또는 할로겐으로 치환되거나 치환되지 않으며 고리상에서 치환되지 않거나 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환된 헤테로아르알킬,

(11) 아릴 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 약 8 내지약 16개 탄소 원자의 아르알케닐,

(12) 산소, 질소 및 황으로부터 선택된 헤테로원자 및 탄소로부터 선택된 고리 원자를 갖는 약 5 내지 약 14개 고리 원자의 헤테로아르알케닐로서, 고리 탄소상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 헤테로아르알케닐,

(17) 약 9 내지 약 15개 탄소 원자의 융합된 카르보시클릭 알킬,

(18) 디플루오로메틸 또는 1 내지 약 12개 탄소 원자의 퍼플루오로알킬,

(19) 약 6 내지 약 14개 탄소 원자의 퍼플루오로알킬,

(20) 약 7 내지 약 15개 탄소 원자의 퍼플루오로아르알킬, 및

(21) X가 직접 연결기인 경우 수소;

여기서, 각각 Y₁, Y₂, 및 Y₃는 독립적으로 선택되며,

(ⅰ) 할로겐, 시아노, 니트로, 테트라졸릴, 구아니디노, 아미디노, 메틸구아니디노, -CF₃, -CF₂CF₃, -CH(CF₃)₂-, -C(OH)(CF₃)₂, -OCF₃, -OCF₂H, -OCF₂CF₃, -OC(O)NH₂, -OC(O)NHZ₁, -OC(O)NZ₁Z₂, -NHC(O)Z₁, -NHC(O)NH₂, -NHC(O)NZ₁, -NHC(O)NZ₁Z₂, -C(O)OH, -C(O)OZ₁, -C(O)NH₂, -C(O)NHZ₁, -C(O)NZ₁Z₂, -P(O)₃H₂, -P(O)₃(Z₁)₂, -S(O)₃H, -S(O)_mZ₁, -Z₁, -OZ₁, -OH, -NH₂, -NHZ₁, -NZ₁Z₂, -C(=NH)NH₂, -C(=NOH)NH₂, -N-모르폴리노, 및 -S(O)_m(CF₂)_qCF₃로 구성된 군으로부터 선택되거나(여기서, m은 0, 1 또는 2이며, q는 0 내지 5의 정수이고, Z₁및 Z₂는 독립적으로 1 내지 약 12개 탄소 원자의 알킬, 약 6 내지 약 14개 탄소 원자의 아릴, 약 5 내지 약 14개 고리 원자의 헤테로아릴, 약 7 내지 약 15개 탄소 원자의 아르알킬, 및 약 5 내지 약 14개 고리 원자의 헤테로아르알킬로 구성된 군으로부터 선택됨); 또는

(ⅱ) Y₁및 Y₂가 함께 -O[C(Z₃)(Z₄)]_rO- 또는 -O[C(Z₃)(Z₄)]_r+1-이 되도록 선택되고(여기서, r은 1 내지 4의 정수이고 Z₃및 Z₄는 독립적으로 수소, 1 내지 약 12개 탄소 원자의 알킬, 약 6 내지 약 14개 탄소 원자의 아릴, 약 5 내지 약 14개 고리 원자의 헤테로아릴, 약 7 내지 약 15개 탄소 원자의 아르알킬, 및 약 5 내지 약 14개 고리 원자의 헤테로아르알킬로 구성된 군으로부터 선택됨);

(c) R₂는 -CH₃, -C₂H₅, -(CH₂)₂OH, -(CH₂)₂OA₁, -CH(R₅)OH, -CH(R₅)OA₁, 및 -CH₂NH-X'-R₆으로 구성된 군으로부터 선택되고, 여기서 A₁은 -C(=O)OR₆, -C(=O)R₆또는 -C(=O)NR₅R₆이고; X'는 -S(O)₂-, -S(O)₂-N(R'')-, -(C=O)-, -C(=O)-O-, -C(=O)-NH-, -P(O)(R'')-, 및 직접 연결기로 구성된 군으로부터 선택되며, 여기서 R''는 수소, 1 내지 약 4개 탄소 원자의 알킬, 약 6 내지 약 14개 탄소 원자의 아릴 또는 약 7 내지 약 16개 탄소 원자의 아르알킬이며, 단 X'가 -P(O)(R'')-인 경우 R''는 수소가 아니고; R₅는 하기 기로 구성된 군으로부터 선택되며:

(1) Y₁및 Y₂로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 2개의 치환기로 치환되거나 치환되지 않은 1 내지 약 4개 탄소 원자의 알킬,

(2) 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 일치환, 이치환 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 약 3 내지 약 6개 탄소 원자의 시클로알킬로 치환된 1 내지 약 3개 탄소 원자의 알킬,

(3) 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 3 내지 약 6개 탄소 원자의 시클로알킬,

(4) 산소, 질소, 및 S(O)_i(여기서 i는 0, 1 또는 2임)로 구성된 군으로부터 선택된 헤테로원자 및 탄소로부터 선택된 고리 원자를 갖는 4 내지 약 6개 고리원자의 헤테로시클로알킬로서, 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 헤테로시클로알킬,

(5) 고리 탄소상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 3 내지 6개 고리 탄소 원자를 갖는 5 내지 7원 헤테로사이클인(여기서, V는 -CH₂-, -O-, -S(=O)-, -S(O)₂- 또는 -S-임)을 포함하여, 산소, 질소, 및 S(O)_i(여기서 i는 0, 1 또는 2임)로 구성된 군으로부터 선택된 헤테로원자 및 탄소로부터 선택된 고리 원자를 갖는 4 내지 약 6개 고리 원자의 헤테로시클로,

(6) 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 약 3 내지 약 6개 탄소 원자의 시클로알킬로 치환되거나 치환되지 않은 2 내지 약 6개 탄소 원자의 알케닐,

(7) Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 페닐,

(8) 산소, 질소, 및 황으로부터 선택된 헤테로원자 및 탄소로부터 선택된 고리 원자를 갖는 약 5 내지 약 6개 고리 원자의 헤테로아릴로서, Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 헤테로아릴,

(9) 페닐로 치환된 1 내지 약 4개 탄소 원자의 알킬로서, 페닐 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 알킬,

(10) 산소, 질소 및 황으로부터 선택된 헤테로원자 및 탄소로부터 선택된 고리 원자를 갖는 약 5 내지 약 6개 고리 원자의 헤테로아르알킬로서, 알킬 사슬상에서 히드록시 또는 할로겐으로 치환되거나 치환되지 않으며 고리상에서 치환되지 않거나 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환된 헤테로아르알킬,

(11) 아릴 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 약 8 내지 약 12개 탄소 원자의 아르알케닐,

(12) 산소, 질소 및 황으로부터 선택된 헤테로원자 및 탄소로부터 선택된 고리 원자를 갖는 약 5 내지 약 6개 고리 원자의 헤테로아르알케닐로서, 고리 탄소상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 헤테로아르알케닐,

(13) 수소;

R₆는 하기 기로 구성된 군으로부터 선택되며:

(1) Y₁및 Y₂로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 2개의 치환기로 치환되거나 치환되지 않은 1 내지 약 12개 탄소 원자의 알킬,

(2) 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 일치환, 이치환 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 약 3 내지 약 8개 탄소 원자의 시클로알킬로 치환된 1 내지 약 3개 탄소 원자의 알킬,

(3) 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 3 내지 약 15개 탄소 원자의 시클로알킬,

(4) 산소, 질소, 및 S(O)_i(여기서 i는 0, 1 또는 2임)로 구성된 군으로부터 선택된 헤테로원자 및 탄소로부터 선택된 고리 원자를 갖는 4 내지 약 10개 고리 원자의 헤테로시클로알킬로서, 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 헤테로시클로알킬,

(5) 고리 탄소상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 3 내지 6개 고리 탄소 원자를 갖는 5 내지 7원 헤테로사이클인(여기서, V는 -CH₂-, -O-, -S(=O)-, -S(O)₂- 또는 -S-임)을 포함하여, 산소, 질소, 및 S(O)_i(여기서 i는 0, 1또는 2임)로 구성된 군으로부터 선택된 헤테로원자 및 탄소로부터 선택된 고리 원자를 갖는 4 내지 약 10개 고리 원자의 헤테로시클로,

(6) Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 약 6 내지 약 14개 탄소 원자의 아릴,

(7) 산소, 질소, 및 황으로부터 선택된 헤테로원자 및 탄소로부터 선택된 고리 원자를 갖는 약 5 내지 약 14개 고리 원자의 헤테로아릴로서, Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 헤테로아릴,

(8) 알킬 사슬상에서 히드록시 또는 할로겐으로 치환되거나 치환되지 않으며, 아릴 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환되거나 치환되지 않은 약 7 내지 약 15개 탄소 원자의 아르알킬,

(9) 산소, 질소 및 황으로부터 선택된 헤테로원자 및 탄소로부터 선택된 고리 원자를 갖는 약 5 내지 약 14개 고리 원자의 헤테로아르알킬로서, 알킬 사슬상에서 히드록시 또는 할로겐으로 치환되거나 치환되지 않으며 고리상에서 치환되지 않거나 고리상에서 Y₁, Y₂, 및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기에 의해 일치환, 이치환, 또는 삼치환된 헤테로아르알킬,

(10) 수소, 단 A₁이 -C(=O)OR₆인 경우 R₆는 수소가 아니고;

(d) R₃는 H 또는 메틸로부터 선택되거나, R₃및 R_4a및 R_4b가 함께 (f)에 기재된 바와 같이 선택되며;

(e) (ⅰ) R_4a가 S 배열 상태이고 H, -CH₂-S-CH₃-, -CH₂OH, -CH₂CN, 1 내지 약 3개 탄소 원자의 저급 알킬, -CH₂C ≡CH, -CH₂CH=CH₂및 -CH=CH₂로 구성된 군으로부터 선택되며, R_4b는 수소이고;

(ⅱ) R_4a및 R_4b가 독립적으로 1 내지 3개 탄소 원자의 저급 알킬이며;

(ⅲ) R_4a및 R_4b가 함께 선택되고 -(CH₂)_k-(여기서, k는 스피로시클로알킬기를 제공하도록 5 또는 6임)이거나;

(ⅳ) R₃및 R_4a및 R_4b가 함께 하기 (f)에 기재된 바와 같이 선택되며;

(f) 대안적으로, R₃및 R₄는 S 배열 상태가 되고 P2에서 프롤릴, 피페콜릴, 아제티딘-2-카르보닐, 4-히드록시프롤릴, 3-히드록시프롤릴, 4-아미노프롤릴, 4-(-CH₂NH₂)-프롤릴, 3,4-메타노프로필 및 3,4-데히드로프롤릴로 구성된 군으로부터 선택된 기를 제공하도록 함께 선택되고 R_4b는 수소이며;

(g) R₇은 수소이거나 1 내지 약 4개 탄소 원자의 알킬이고;

(h) E는 Q-T이며,

여기서 (ⅰ) Q는 -C(R₁₃R₁₄)_t-, R₈및 R₉로 치환된 페닐, R₈또는 R₈및 R₉로 치환된 1 내지 2개 헤테로원자를 갖는 5원 또는 6원 헤테로시클릭 고리, 및 R₈및 R₉로 치환된 1 내지 2개 헤테로원자를 갖는 9원 또는 10원 헤테로시클릭 고리로 구성된 군으로부터 선택되고, 여기서 헤테로 원자는 질소 및 황으로부터 선택되며;

(ⅱ) T는 -C(=NR₁₀)NHR₁₁, -NH-C(=NR₁₀)NHR₁₁및 -NHR₁₅로 구성된 군으로부터 선택되고;

여기서, R₈및 R₉는 독립적으로 수소, 히드록시, 할로겐, 1 내지 약 4개 탄소 원자의 알킬, 1 내지 약 4개 탄소 원자의 알콕시로 치환된 1 내지 약 4개 탄소 원자의 알킬, 1 내지 약 6개 탄소 원자의 알콕시, 및 트리플루오로메틸로 구성된 군으로부터 선택되며; R₁₀및 R₁₁은 독립적으로 수소, 히드록시, 1 내지 약 3개 탄소 원자의 알콕시, 3 내지 약 16개 탄소 원자의 트리히드로카르빌실릴, 1 내지 약 3개 탄소 원자의 알킬 또는 -C(=O)R₁₂이며, 단 R₁₀및 R₁₁은 둘 모두 히드록시 또는 알콕시가 아니고; R₁₂는 수소, 1 내지 약 6개 탄소 원자의 알킬, 1 내지 약 6개 탄소 원자의 알콕시 또는 (CF₂)_jCF₃(여기서, j는 0, 1, 2, 또는 3임)이고; R₁₃및 R₁₄는 각각 독립적으로 수소, 1 내지 약 3개 탄소 원자의 저급 알킬로 구성된 된으로부터 선택되며; R₁₅는 수소, 1 내지 약 6개 탄소 원자의 알킬, 및 -(CF₂)_hCF₃(여기서, h는 0, 1, 2, 또는 3임)로 구성된 군으로부터 선택되고, t는 0 내지 6의 정수이다.
제 1항에 있어서, E가 하기 기로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물:
제 1항에 있어서, E가 하기 기로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로하는 화합물:
제 3항에 있어서, X가 -S(O)₂- 또는 -O-C(=O)-인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 4항에 있어서, R₂가 -CH₃또는 -CH(R₅)OH인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 5항에 있어서, R₅가 수소, 치환되지 않은 알킬 또는 Y₁으로 치환된 알킬인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 6항에 있어서, R₂가 -CH₂OH 또는 -CH(CH₃)OH인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 7항에 있어서, R₂가 -CH(CH₃)OH이고 R 배열을 갖는 것을 특징으로 하는 화합물.
제 7항에 있어서, R₃가 수소인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 9항에 있어서, R₄가 메틸 또는 프로파길이고 R_4b가 수소인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 7항에 있어서, R₃및 R_4a가 P₂에서 프롤릴, 피페콜릴, 아제티딘-2-카르보닐, 4-히드록시프롤릴, 3-히드록시프롤릴, 3,4-메타노프로릴 및 3,4-데히드로프롤릴로 구성된 군으로부터 선택된 기를 제공하도록 함께 선택되고, R_4b가 수소인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 11항에 있어서, R₃및 R_4a가 P₂에서 프롤릴, 4-시스-히드록시프롤릴, 3,4-데히드로프롤릴, 3,4-메타노프로필 및 아제티딘-2-카르보닐로 구성된 군으로부터 선택된 기를 제공하도록 함께 선택되고, R_4b가 수소인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 5항에 있어서, R₅가 H인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 3항에 있어서, X가 -S(O)₂-, -OC(=O)-, -NH-C(=O)- 및 직접 연결기로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
제 14항에 있어서, X가 -S(O)₂- 또는 -OC(=O)-인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 15항에 있어서, R₁이 페닐, 벤질, 2-페닐에틸, 이소부틸, n-부틸, 3-페닐프로필, 4-클로로벤질, 3-클로로벤질 및 2-플루오로벤질로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
제 16항에 있어서, R₁-X-가 페닐-S(O)₂-, 벤질-S(O)₂-, 2-페닐에틸-S(O)₂-,3-페닐프로필-S(O)₂-, n-부틸-S(O)₂-, 벤질-OC(=O)-, 및 이소부틸-OC(=O)-, 4-클로로벤질-S(O)₂-, 3-클로로벤질-S(O)₂-, 및 2-플루오로벤질-S(O)₂-로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
제 17항에 있어서, R₂가 P3에서 D-세릴기를 제공하도록 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
제 18항에 있어서, E가 4-아미디노페닐, 4-구아니디노페닐 또는 5-(2-아미디노-티에닐)인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 19항에 있어서, (i) R₃및 R_4a가 P₂에서 프롤릴, 아제티딘-2-카르보닐, 3,4-메타노프롤릴 및 3,4-데히드로프롤릴로 구성된 군으로부터 선택된 기를 제공하도록 함께 선택되거나, (ii) R₃가 수소이고 R_4a가 메틸이고, R_4b가 수소인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 17항에 있어서, E가 4-아미디노페닐, 4-구아니디노페닐 또는 5-(2-아미디노-티에닐)인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 21항에 있어서, (i) R₃및 R_4a가 P₂에서 프롤릴, 아제티딘-2-카르보닐, 3,4-메타노프롤릴 및 3,4-데히드로프롤릴로 구성된 군으로부터 선택된 기를 제공하도록 함께 선택되거나, (ii) R₃가 수소이고 R_4a가 메틸이고, R_4b가 수소인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 17항에 있어서, (i) R₃및 R_4a가 P₂에서 프롤릴, 아제티딘-2-카르보닐, 3,4-메타노프롤릴 및 3,4-데히드로프롤릴로 구성된 군으로부터 선택된 기를 제공하도록 함께 선택되거나, (ii) R₃가 수소이고 R_4a가 메틸이고, R_4b가 수소인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 1항에 있어서, R₂가 -CH₂NH-X'-R₆및 -CH(R₅)OH로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
제 24항에 있어서, R₅가 수소, 치환되지 않은 알킬, Y₁으로 치환된 알킬 및 치환되지 않은 페닐 또는 Y₁, Y₂및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 일치환, 이치환 또는 삼치환된 페닐기로 치환된 1 내지 4개 탄소 원자의 알킬로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
제 25항에 있어서, R₂가 P3에서 D-세릴, (R,R) D-알로트레오닐, D-2-아미노부티릴, N-β-메틸옥시카르보닐-D-2,3-디아미노프로피오닐, N-β-(2-페닐에틸카르보닐)-D-2,3-디아미노프로피오닐, 및 N-β-벤질옥시카르보닐-D-2,3-디아미노프로피오닐로 구성된 군으로부터 선택된 기를 제공하도록 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
제 26항에 있어서, P3가 D-세릴 또는 (R,R) D-알로트레오닐인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 1항에 있어서, R₃이 수소인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 1항에 있어서, R_4a가 메틸, 비닐, 알릴 또는 프로파길이고 R_4b가 수소인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 1항에 있어서, R₃및 R_4a가 P2에서 프롤릴, 피페콜릴, 아제티딘-2-카르보닐, 4-히드록시프롤릴, 3-히드록시프롤릴, 3,4-메타노프로릴 및 3,4-데히드로프롤릴로 구성된 군으로부터 선택된 기를 제공하도록 함께 선택되고, R_4b가 수소인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 30항에 있어서, R₃및 R_4a가 P2에서 프롤릴, 4-시스-히드록시프롤릴, 3,4-데히드로프롤릴, 3,4-메타노프롤릴 및 아제티딘-2-카르보닐로 구성된 군으로부터 선택된 기를 제공하도록 함께 선택되고, R_4b가 수소인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 31항에 있어서, R₂가 P3에서 D-세릴 및 (R,R) D-알로트레오닐로 구성된 군으로부터 선택된 기를 제공하도록 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
제 1항에 있어서, R₂가 P3에서 D-세릴 및 (R,R) D-알로트레오닐로 구성된 군으로부터 선택된 기를 제공하도록 선택되고, R₃이 수소이고, R_4a가 메틸이며 R_4b가 수소인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 1항에 있어서, R₃및 R_4a가 P₂에서 프롤릴, 아제티딘-2-카르보닐, 3,4-메타노프롤릴 및 3,4-데히드로프롤릴로 구성된 군으로부터 선택된 기를 제공하도록 함께 선택되고, R_4b가 수소인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 7항에 있어서, R₂가 -CH₂OH이고 R 배열을 갖는 것을 특징으로 하는 화합물.
제 1항에 있어서, R₂가 -(CH₂)₂OA₁또는 -CH(R₅)OA₁인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 36항에 있어서, R₂가 -CH(R₅)OA₁인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 37항에 있어서, R₅가 수소, 치환되지 않은 알킬, Y₁으로 치환된 알킬 및 치환되지 않은 페닐 또는 Y₁, Y₂및 Y₃로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 일치환, 이치환 또는 삼치환된 페닐기로 치환된 1 내지 4개 탄소 원자의 알킬로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
제 37항에 있어서, R₂가 P3에서 D-세릴의 아실 및 카르보닐 에스테르로 구성된 군으로부터 선택된 기를 제공하도록 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
제 39항에 있어서, R₃가 수소인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 40항에 있어서, R_4a가 메틸, 비닐, 알릴 또는 프로파길이고 R_4b가 수소인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 39항에 있어서, R₃및 R₄가 P2에서 프롤릴, 피페콜릴, 아제티딘-2-카르보닐, 4-히드록시프롤릴, 3-히드록시프롤릴, 3,4-메타노프로릴 및 3,4-데히드로프롤릴로 구성된 군으로부터 선택된 기를 제공하도록 함께 선택되고, R_4b가 수소인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 1항에 있어서, R₂가 P3에서 D-세릴의 아실 및 카르보닐 에스테르로 구성된 군으로부터 선택된 기를 제공하도록 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
제 43항에 있어서, R₃가 수소이고, R_4a가 메틸이며, R_4b가 수소인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 43항에 있어서, R₃및 R_4a가 P2에서 프롤릴, 아제티딘-2-카르보닐, 3,4-메타노프롤릴, 및 3,4-데히드로프롤릴로 구성된 군으로부터 선택된 기를 제공하도록 함께 선택되고, R_4b가 수소인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 1항에 있어서, R₂가 P3에서 D-세릴의 아실 및 카르보닐 에스테르로 구성된 군으로부터 선택된 기를 제공하도록 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
제 1항에 있어서, 도 10a 내지 10f에 도시된 화합물, 화합물 AX, 화합물 AY 및 화합물 AZ으로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
제 1항에 있어서, 도 13a 내지 13c에 도시된 화합물로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
제 48항에 있어서, 화합물 BG, 화합물 BJ 및 화합물 BK로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
제 48항에 있어서, 화합물 BQ인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 1항에 있어서, Q가 R₈및 R₉로 치환된 페닐 또는 R₈및 R₉로 치환된 피리딜인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 51항에 있어서, T가 -C(=NR₁₀)NHR₁₁또는 -NH-C(=NR₁₀)NHR₁₁인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 52항에 있어서, T가 Q의 4-위치에 있는 것을 특징으로 하는 화합물.
제 53항에 있어서, Q가 R₈및 R₉로 치환된 페닐인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 54항에 있어서, T가 -NH-C(=NR₁₀)NHR₁₁인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 53항에 있어서, Q가 R₈및 R₉로 치환된 피리딜인 것을 특징으로 하는 화합물.
제 56항에 있어서, T가 -NH-C(=NR₁₀)NHR₁₁인 것을 특징으로 하는 화합물.
약제학적으로 허용되는 담체 및 치료적 유효량의 제 1항의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물.
약제학적으로 허용되는 담체 및 치료적 유효량의 제 6항의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물.
약제학적으로 허용되는 담체 및 치료적 유효량의 제 17항의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물.
약제학적으로 허용되는 담체 및 치료적 유효량의 제 27항의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물.
약제학적으로 허용되는 담체 및 치료적 유효량의 제 30항의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물.
약제학적으로 허용되는 담체 및 치료적 유효량의 제 39항의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물.
약제학적으로 허용되는 담체 및 치료적 유효량의 제 41항의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물.
약제학적으로 허용되는 담체 및 치료적 유효량의 제 42항의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물.
약제학적으로 허용되는 담체 및 치료적 유효량의 제 44항의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물.
약제학적으로 허용되는 담체 및 치료적 유효량의 제 45항의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물.
약제학적으로 허용되는 담체 및 치료적 유효량의 제 47항의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물.
약제학적으로 허용되는 담체 및 치료적 유효량의 제 48항의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물.
약제학적으로 허용되는 담체 및 치료적 유효량의 제 49항의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물.
치료적 유효량의 제 1항의 화합물을 포유동물에게 투여하는 것을 포함하여, 치료를 필요로 하는 포유동물에서 유로키나제 활성을 억제 또는 감소시킴으로써 개선되는 질환을 치료하는 방법.
치료적 유효량의 제 6항의 화합물을 포유동물에게 투여하는 것을 포함하여, 치료를 필요로 하는 포유동물에서 유로키나제 활성을 억제 또는 감소시킴으로써 개선되는 질환을 치료하는 방법.
치료적 유효량의 제 17항의 화합물을 포유동물에게 투여하는 것을 포함하여,치료를 필요로 하는 포유동물에서 유로키나제 활성을 억제 또는 감소시킴으로써 개선되는 질환을 치료하는 방법.
치료적 유효량의 제 27항의 화합물을 포유동물에게 투여하는 것을 포함하여, 치료를 필요로 하는 포유동물에서 유로키나제 활성을 억제 또는 감소시킴으로써 개선되는 질환을 치료하는 방법.
치료적 유효량의 제 32항의 화합물을 포유동물에게 투여하는 것을 포함하여, 치료를 필요로 하는 포유동물에서 유로키나제 활성을 억제 또는 감소시킴으로써 개선되는 질환을 치료하는 방법.
치료적 유효량의 제 39항의 화합물을 포유동물에게 투여하는 것을 포함하여, 치료를 필요로 하는 포유동물에서 유로키나제 활성을 억제 또는 감소시킴으로써 개선되는 질환을 치료하는 방법.
치료적 유효량의 제 41항의 화합물을 포유동물에게 투여하는 것을 포함하여, 치료를 필요로 하는 포유동물에서 유로키나제 활성을 억제 또는 감소시킴으로써 개선되는 질환을 치료하는 방법.
치료적 유효량의 제 42항의 화합물을 포유동물에게 투여하는 것을 포함하여,치료를 필요로 하는 포유동물에서 유로키나제 활성을 억제 또는 감소시킴으로써 개선되는 질환을 치료하는 방법.
치료적 유효량의 제 44항의 화합물을 포유동물에게 투여하는 것을 포함하여, 치료를 필요로 하는 포유동물에서 유로키나제 활성을 억제 또는 감소시킴으로써 개선되는 질환을 치료하는 방법.
치료적 유효량의 제 45항의 화합물을 포유동물에게 투여하는 것을 포함하여, 치료를 필요로 하는 포유동물에서 유로키나제 활성을 억제 또는 감소시킴으로써 개선되는 질환을 치료하는 방법.
치료적 유효량의 제 47항의 화합물을 포유동물에게 투여하는 것을 포함하여, 치료를 필요로 하는 포유동물에서 유로키나제 활성을 억제 또는 감소시킴으로써 개선되는 질환을 치료하는 방법.
치료적 유효량의 제 48항의 화합물을 포유동물에게 투여하는 것을 포함하여, 치료를 필요로 하는 포유동물에서 유로키나제 활성을 억제 또는 감소시킴으로써 개선되는 질환을 치료하는 방법.
치료적 유효량의 제 49항의 화합물을 포유동물에게 투여하는 것을 포함하여,치료를 필요로 하는 포유동물에서 유로키나제 활성을 억제 또는 감소시킴으로써 개선되는 질환을 치료하는 방법.
치료적 유효량의 제 47항의 화합물을 포유동물에게 투여하는 것을 포함하여, 치료를 필요로 하는 포유동물에서 유로키나제 활성을 억제 또는 감소시킴으로써 개선되는 질환을 치료하는 방법.
제 84항에 있어서, 혈관 형성이 병리적 질환과 관련되어 있는 것을 특징으로 하는 방법.
치료적 유효량의 제 48항의 화합물을 포유동물에게 투여하는 것을 포함하여, 치료를 필요로 하는 포유동물에서 혈관 형성을 감소 또는 억제하는 방법.
제 86항에 있어서, 혈관 형성이 병리적 질환과 관련되어 있는 것을 특징으로 하는 방법.