KR19980703588A - 선택된 용해성 히드록실 함유 인돌로카르바졸의 에스테르 - Google Patents

선택된 용해성 히드록실 함유 인돌로카르바졸의 에스테르

Info

Publication number
KR19980703588A
KR19980703588A KR1019970706993A KR19970706993A KR19980703588A KR 19980703588 A KR19980703588 A KR 19980703588A KR 1019970706993 A KR1019970706993 A KR 1019970706993A KR 19970706993 A KR19970706993 A KR 19970706993A KR 19980703588 A KR19980703588 A KR 19980703588A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
group
compound
formula
residue
hydroxyl
Prior art date
Application number
KR1019970706993A
Other languages
English (en)
Other versions
KR100429117B1 (ko
Inventor
존 피. 말라모
로버트 엘. 허드킨스
Original Assignee
바바라 에스. 쉴버그
세파론,인크.
오까 데쯔오
교와하꼬고교가부시끼가이샤
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from US08/417,611 external-priority patent/US5650407A/en
Application filed by 바바라 에스. 쉴버그, 세파론,인크., 오까 데쯔오, 교와하꼬고교가부시끼가이샤 filed Critical 바바라 에스. 쉴버그
Publication of KR19980703588A publication Critical patent/KR19980703588A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR100429117B1 publication Critical patent/KR100429117B1/ko

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/22—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains four or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/02—Drugs for disorders of the urinary system of urine or of the urinary tract, e.g. urine acidifiers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/044—Pyrrole radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H9/00—Compounds containing a hetero ring sharing at least two hetero atoms with a saccharide radical
    • C07H9/06—Compounds containing a hetero ring sharing at least two hetero atoms with a saccharide radical the hetero ring containing nitrogen as ring hetero atoms

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Indole Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Cosmetics (AREA)

Abstract

본 발명은 히드록실 함유 인돌로카르바졸과 선택된 용해화 기를 함유하는 산과의 에스테르를 제공한다. 또한, 인돌로카르바졸 에스테르를 함유하는 조성물 및 인돌로카르바졸 에스테르의 사용 방법을 제공한다.

Description

선택된 용해성 히드록실 함유 인돌로카르바졸의 에스테르
인돌로카르바졸은 잘 알려진 소분자 군이다. 동물 연구에서, 전립선의 병리학적 질환의 치료에서 치료제로 인돌로카르바졸의 활성은 증명되었다. 게다가, 인돌로카르바졸은 단백질 키나제 C, A 및 G, 미오신 경쇄 키나제, 및 신경영양에 의해 활성된 티로신 키나제의 억제제로 유용하다. 또한, 인돌로카르바졸을 활성 신경제인 것으로 나타났다.
미국 특허 제4,877,776호에는 단백질 키나제 C 억제 활성을 나타내는 인돌로카르바졸 유도체가 기술되어 있다. 미국 특허 제4,923,986호 및 PCT 특허 출원 제94/02488호에는 항종양 활성을 갖는 생리적으로 활성 인돌로카르바졸 유도체가 기술되어 있다. PCT 특허 출원 제94/27982호에는 포유동물의 전립선의 병리학적 질환을 치료하기 위한 인돌로카르바졸 유도체의 사용이 기술되어 있다. 일본 특허 제63-295588호에는 단백질 키나제 C의 억제제인 인돌로카르바졸 유도체가 기술되어 있다. PCT 특허 출원 제93/08809호에는 신경영양 활성을 가능하게 하는 인돌로카르바졸 유도체가 기술되어 있다. PCT 특허 출원 제94/06799에는 혈소판감소증을 위한 치료제로 인돌로카르바졸 유도체가 기술되어 있다.
치료 및 연구 시약으로 인돌로카르바졸의 유용성을 제한하는 중요한 문제는 수용액 중의 그의 불량한 용해도이다. 인돌로카르바졸의 중요하고 유용한 활성으로 인하여, 인돌로카르바졸의 유리한 효과를 성취하고 수 용해도를 증가시키는 신규의 인돌로카르바졸 유도체에 대한 요구가 있다. 이러한 화합물은 생체내에서 환자에게 추가의 문제를 일으키지 않고 인돌로카르바졸 함유 용액을 생체내 전달을 허용할 것이다. 본 발명은 상기 중요 목적에 관한 것이다.
<발명의 요약>
본 발명은 신규의 용해성 히드록시 함유 인돌로카르바졸의 에스테르를 제공한다. 또한 본 발명의 목적은 인돌로카르바졸 에스테르를 포함하는 조성물, 및 전립선의 병리학적 질환을 포함하는 질병의 치료에서 인돌로카르바졸 유도체의 사용 방법을 포함한다.
한 면에서, A는 용해화 기이고, L은 산소이며, Q는 하기 화학식 Ⅰ의 인돌로카르바졸 잔기인 화학식 Q-L-C(=O)-A를 갖는 화합물을 제공한다. 조성원 뿐 아니라 바람직한 조성원이 하기에 정의된다.
본 발명의 화합물은 다양한 응용에 유용하다. 예를 들어, 화합물은 예를 들어, 그로부터 유도된 치료적 이점의 역학적인 면을 이해하기 위한 연구 응용, 즉, 이들 소분자가 특정 암 종양에 대해 긍정적인 결과를 유효하게 하는 방법의 과학적인 이해를 개발하는데 사용할 수 있다. 게다가, 본 발명의 특히 바람직한 화합물을 스크린 도구로 이용하여, 시험관내 또는 생체내에서 중요한 질병 상태의 모델에 동일한 유효한 결과를 제공하는 다른 소분자를 개발할 수 있다.
임상적인 환경에서, 바람직하게는 청구범위의 화합물로 이루어지는 조성물이 전립선의 병리학적 질환, 예를 들어 양성 전립선 비대 또는 전립선 암을 치료하기 위한 치료제로 사용되고, 또한 청구범위의 발명으로 이루어지는 조성물은 신경계 질병의 치료를 위한 치료제로 유용하다.
이들 다른 특징의 화합물은 개시되는 바와 같이 확장된 형태로 개시될 것이다.
본 발명은 히드록실 함유 인돌로카르바졸과 선택된 용해화 기를 함유하는 산과의 에스테르, 인돌로카르바졸 에스테르를 함유하는 조성물, 및 전립선 질병을 포함하여 특정 질병의 설명 및 이해에서의 인돌로카르바졸 에스테르의 사용 방법에 관한 것이다.
도 1은 완충액 중의 인돌로카르바졸 에스테르의 용해도의 초기 스크린닝의 결과를 나타낸다.
도 2는 10 mM의 아세트산염 완충제, pH 3.6 중의 본 발명의 인돌로카르바졸 에스테르의 용해도를 나타낸다.
도 3, 4 및 5는 각각 실시예 14, 8 및 11의 에스테르에 대해 pH 함수로 Ⅰ-5로의 전환율을 나타낸다.
도 6은 인돌로카르바졸 에스테르의 첨가에 따른 쥐 혈장 중의 인돌로카르바졸 Ⅰ-5의 수준을 나타낸다.
도 7은 인돌로카르바졸 에스테르의 첨가에 따른 사람 혈장 중의 인돌로카르바졸 Ⅰ-5의 수준을 나타낸다.
도 8은 쥐 간 S-9 단편 중의 인돌로카르바졸 Ⅰ-5의 디메틸아미노부티레이트의 용해도를 나타낸다.
도 9는 쥐 간 S-9 단편 중의 인돌로카르바졸 Ⅰ-5의 β-알라니네이트의 용해도를 나타낸다.
도 10은 인돌로카르바졸 Ⅰ-5의 리실-β-알라니네이트의 첨가에 따른 쥐 간 S-9 단편 중의 인돌로카르바졸 Ⅰ-5 및 인돌로카르바졸 Ⅰ-5의 β-알라니네이트의 수준을 나타낸다.
도 11은 사람 간 S-9 단편 중의 인돌로카르바졸 Ⅰ-5의 디메틸아미노부티레이트의 용해도를 나타낸다.
도 12는 사람 간 S-9 단편 중의 인돌로카르바졸 Ⅰ-5의 β-알라니네이트의 용해도를 나타낸다.
도 13은 수컷 스프라그-다우레이 (Sprague-Dawley) 쥐 중의 인돌로카르바졸 Ⅰ-5의 디메틸아미노부티레이트의 정맥내 약물 동력학을 나타낸다.
도 14는 수컷 스프라그-다우레이 쥐 중의 인돌로카르바졸 Ⅰ-5의 β-알라니네이트의 정맥내 약물 동력학을 나타낸다.
도 15는 인돌로카르바졸 Ⅰ-5의 리실-β-알라니네이트를 피하 및 정맥내 투여 후, 혈장 중의 인돌로카르바졸 Ⅰ-5 수준의 비교를 나타낸다.
실시예 1A
인돌로카르바졸 Ⅰ-5의 제조
Ⅰ-5로 표 1에 개시된 인돌로카르바졸 (이후 "화합물 Ⅰ-5")의 제조는 하기와 같이 2 단계로 행할 수 있다.
1) 인돌로카르바졸 K-252a (R1, R2, R3, R4, W1및 W2= 수소, Y = 히드록실 및 X = 메톡시카르보닐인 화학식 Ⅰ)을 DMF 중의 메틸 요오다이드 및 수소화 나트륨으로 알킬화시켜 Y = 메톡실인 상당하는 화합물을 제공하는 것이 미국 특허 제4,877,776호에 기술되어 있다 (기준 실시예 1).
2) 단계 1의 화합물을 테트라히드로푸란 중의 수소화 붕소 나트륨으로 환원시켜 X = CH2OH 및 Y = 메톡실인 화합물 Ⅰ-5를 얻는다 (관련된 히드록시메틸 화합물의 제조를 위한 미국 특허 제4,877,776호 (실시예 6) 참조).
실시예 1B
(Ⅰ-5)-리시네이트 디히드로클로라이드
단계 1: 질소 대기하에 건조 THF (60 ㎖) 중의 화합물 Ⅰ-5 (900 ㎎, 2.0 mmol)의 용액에 한번에 디시클로헥실카르보디이미드 (DCC) (422 ㎎, 2.05 mmol)을 가하였다. 실온에서 15 분 동안 계속 교반시킨 다음, Boc-리신(Boc)-OH (727 ㎎, 2.1 mmol) 및 디메틸아미노피리딘 (DMAP) (25 ㎎)을 가하고 용액을 24 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 규조토 (등록상표, Celite)의 패드를 통하여 여과한 다음, 감압에서 농축시켰다. 생성물을 칼럼 크로마토그래피 (실리카 겔; EtOAc:hex = 2:1; Rf= 0.3)으로 정제하여 백색 고체 1.25 g (82 %)를 얻었다. 융점 140-146 ℃ (EtOAc, 헥산),1H NMR (DMSO-d6) δ 1.4 (s, 9H, tBu), 1.45 (s, 9H, tBu), C43H51N5O9·0.75 H2O에 대한 분석 계산치: C 64.93, H 6.65, N 8.81. 실측치: C 65.03, H 6.76, N 8.61.
단계 2: EtOAc (50 ㎖) 중의 실시예 1, 단계 1의 화합물 (650 ㎎, 0.85 mmol)을 EtOAc-HCl (g) 용액으로 적가 처리하였다. 용액을 40-50 ℃까지 15 분 동안 가온한 다음, -20 ℃까지 냉각시켰다. 침전된 물질을 수거하여 백색 고체로 생성물 470 ㎎ (90 %)를 얻었다. 융점 245 ℃ (분해) (MeOH, EtOAc), MS m/z = 582 (M+1)+, C33H34N5O5·2HCl 1.5 H2O에 대한 분석 계산치: C 58.15, H 5.92, N 10.21. 실측치: C 58.45, H 5.81, N 10.31.
실시예 2
(Ⅰ-5)-글리시네이트 히드로클로라이드
목적 에스테르를 화합물 Ⅰ-5 (300 ㎎, 0.66 mmol) 및 N-Boc-글리신 (128 ㎎, 0.73 mmol)을 사용하여 실시예 1, 단계 1과 동일한 일반적인 과정으로 제조하여 백색 고체로 N-Boc-아미노 에스테르 375 ㎎ (93 %)를 얻었다. 융점 305 ℃ (분해) (EtOAc-헥산), TLC (실리카 겔; EtOAc:hex = 2:1) Rf= 0.3,1H NMR (DMSO-d6) δ 1.38 (s, 9H, tBu), MS m/z = 611 (M+1)+.
실시예 2, 단계 1의 생성물 (300 ㎎, 0.492 mmol)을 EtOAc-HCl (g)으로 처리하여 백색 고체로 생성물 230 ㎎ (92 %)를 얻었다. 융점 275 ℃ (분해), MS m/z = 511 (M+1)+.
실시예 3
(Ⅰ-5)-알라니네이트 히드로클로라이드
목적 에스테르를 화합물 Ⅰ-5 (300 ㎎, 0.66 mmol) 및 Boc-알라닌 (138 ㎎, 0.73 mmol)을 사용하여 실시예 1, 단계 1과 동일한 일반적인 과정으로 제조하여 백색 고체로 375 ㎎ (91 %)를 얻었다. 융점 >250 ℃ (분해) (EtOAc-헥산), TLC (실리카 겔; EtOAc:hex = 2:1) Rf= 0.3,1H NMR (DMSO-d6) δ 1.4 (s, 9H, tBu), MS m/z = 623 (M+1)+.
실시예 3, 단계 1의 생성물 (100 ㎎, 0.19 mmol)을 EtOAc-HCl (g)으로 처리하여 백색 고체로 에스테르 65 ㎎ (65 %)를 얻었다. 융점 220 ℃ (분해), MS m/z = 526 (M+1)+.
실시예 4
(Ⅰ-5)-수소 숙시네이트
톨루엔 중의 화합물 Ⅰ-5 (300 ㎎, 0.66 mmol), 숙신산 무수물 (73 ㎎, 0.73 mmol) 및 DMAP (25 ㎎)의 혼합물을 환류에서 24 시간 동안 유지하였다. 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 고체 침전물을 여과하여 수거한 다음, MeOH로 연마시키고 재수거였다. 생성물을 THF-MeOH로부터 재결정하여 백색 고체로 에스테르 320 ㎎ (89 %)를 얻었다. 융점 271-273 ℃,1H NMR (DMSO-d6) δ 2.63 (m, 2H, CH2CO2H), 2.74 (m, 2H, CH2CO), 12.4 (s, 1H, COOH), MS m/z = 553 (M+).
실시예 5
(Ⅰ-5)-피리딘-3-카르복실레이트 히드로클로라이드
CH2Cl2(50 ㎖) 중의 화합물 Ⅰ-5 (300 ㎎, 0.66 mmol) 및 DCC (260 ㎎, 1.26 mmol)의 혼합물에 피리딘-3-카르복실산 (160 ㎎, 1.26 mmol) 및 DMAP (25 ㎎)을 가하였다. 용액을 주위 온도에서 질소하에 36 시간 동안 교반시킨 다음, 셀라이트 (등록상표 Celite)의 패드를 통하여 여과하고, 이를 물 (2 x 100 ㎖), NaCl 용액 (1 x 150 ㎖)로 추출하고, 건조시킨 다음 (MgSO4), 감압하에 농축시켰다. 생성된 고체를 EtAOc (40 ㎖) 중에 용해시키고 여과하였다. EtAOc 용액을 EtOAc-HCl (g) 용액으로 처리하고, -20 ℃까지 냉각시켰다. 생성물을 수거하여 황색 고체 에스테르 325 ㎎ (83 %)를 얻었다. 융점 200-201 ℃ (분해) (THF-Et2O),1H NMR (DMSO-d6) δ 7.22-7.4 (m, 3H), 7.45-7.52 (m, 2H), 7.78-7.85 (m, 2H), 7.96 (d, 1H, J = 8 Hz), 8.06 (d, 1H, J = 8 Hz), 8.62 (m, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.97 (d, 1H, J = 7.5 Hz), 9.22 (d, 1H, J = 8 Hz), 9.33 (s, 1H), MS m/z = 559 (M+1)+.
실시예 6
(Ⅰ-5)-피리딘-3-카르복실레이트 메티오다이드
아세톤 (25 ㎖) 중의 실시예 5의 생성물 (100 ㎎, 0.18 mmol) 및 CH3I (3 ㎖)의 용액을 환류하에 1 시간 동안 유지하였다. 용매를 감압하에 부피를 대략 반으로 농축시키고, EtOAc (20 ㎖)를 가하였다. 생성물을 수거하여 황색 고체로 에스테르 100 ㎎ (80 %)를 얻었다. 융점 >230-232 ℃,1H NMR (DMSO-d6) δ 3.4 (s, 3H, CH3N), 7.2-7.4 (m, 2H), 7.42-7.55 (m, 3H), 7.8 (d, 1H, J = 8 Hz), 7.98 (d, 1H, J = 8 Hz), 8.05 (d, 1H, J = 8 Hz), 8.35-8.4 (m, 1H), 8.65 (s, 1H), 9.1 (d, 1H), 9.2-9.3 (m, 2H), 9.6 (s, 1H), MS m/z = 702 (M+1)+.
실시예 7
(Ⅰ-5)-N,N-디메틸글리시네이트 히드로클로라이드
CH2Cl2(50 ㎖) 중의 화합물 Ⅰ-5 (300 ㎎, 0.66 mmol) 및 디시클로헥실카르보디이미드 (270 ㎎, 1.32 mmol)의 혼합물을 질소하에 15 분 동안 교반시키고, N,N-디메틸글리신 (135 ㎎, 1.32 mmol) 및 DMAP (25 ㎎)을 가하고, 혼합물을 주위 온도에서 36 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고, CH2Cl2(150 ㎖)를 가하고, 용액을 물 (2 x 200 ㎖)로 추출하고, 건조시켰다 (MgSO4). 용매를 감압하에 제거하고, 생성된 고체를 EtAOc (25 ㎖) 중에 용해시키고 여과하였다. EtOAc-HCl (g)을 적가하고, 생성물을 수거하여 백색 고체로 에스테르 310 ㎎ (82 %)를 얻었다. 융점 216-217 ℃ (MeOH-EtAOc),1H NMR (DMSO-d6) δ 2.95 (s, 3H, NMe), 2.98 (s, 3H, NMe), 4.5 (s, 2H, NCH2CO), MS m/z = 539 (M+1)+.
실시예 8
(Ⅰ-5)-디메틸아미노부티레이트 히드로클로라이드
CH2Cl2(50 ㎖) 중의 화합물 Ⅰ-5 (300 ㎎, 0.66 mmol) 및 디시클로헥실카르보디이미드 (270 ㎎, 1.32 mmol)의 혼합물을 질소하에 15 분 동안 교반시켰다. 3-디메틸아미노부티르산 히드로클로라이드 (185 ㎎, 1.1 mmol) 및 DMAP (25 ㎎)을 가하고, 혼합물을 주위 온도에서 12 시간 동안 교반시켰다. 용액을 여과하고, CH2Cl2(150 ㎖)를 가한 다음, 용액을 물 (2 x 200 ㎖), NaHCO3용액 (5 %, 2 x 100 ㎖) 및 NaCl 용액 (2 x 100 ㎖)로 추출하고, 건조시켰다 (MgSO4). 용액을 EtOAc-HCl (g) 용액으로 적가 처리하고, 용매를 감압하에 농축시켰다. 생성물을 MeOH-에테르로부터 재결정시켜 녹색을 띤 고체로 생성물 에스테르 375 ㎎ (94 %)를 얻었다. 융점 182-185 ℃ (분해),1H NMR (DMSO-d6) δ 3.6 (s, 6H, NMe2), 4.6 (s, 2H, CH2O), MS m/z = 567 (M+1)+.
실시예 9
(Ⅰ-5) 히스티디네이트 디히드로클로라이드
CH2Cl2/DMF (1:1, 2.4 ㎖) 중의 Boc-His(Boc)-OH (506 ㎎, 1.42 mmol), 화합물 Ⅰ-5 (418 ㎎, 0.92 mmol) 및 DCC (195 ㎎, 0.96 mmol)의 혼합물을 주위 온도에서 12 시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 (25 ㎖)로 희석하고 여과하였다. 에틸 아세테이트 층을 2 %의 NaHCO3용액 (2 x 20 ㎖) 및 NaCl 포화 용액 (1 x 20 ㎖)로 추출하고, 건조시켰다 (MgSO4). 석유 에테르를 가하고, 황색을 띤 녹색 침전물을 수거하였다. 칼럼 크로마토그래피 (실리카 겔; EtOAc; Rf= 0.4)으로 정제하여 백색 고체로 Boc-히스티딘(Boc) 에스테르 154 ㎎ (38 %)를 얻었다.1H NMR (DMSO-d6) δ 1.35 (s, 9H, tBu), 1.48 (s, 9H, tBu).
EtOAc (2 ㎖) 중의 실시예 9, 단계 1의 생성물 (144 ㎎)의 용액을 디옥산 (6 ㎖) 중의 4N의 HCl에 가하였다. 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반시키고, 물 (30 ㎖)로 희석하고 EtOAc (1 x 30 ㎖) 및 에테르 (1 x 30 ㎖)로 추출하였다. 수층을 동결 건조시켜 고체 생성물 에스테르 (105 ㎎, 86 %)를 얻었다. 융점 228 ℃ (분해), MS m/z = 592 (M+1)+.
실시예 10
(Ⅰ-5)-아르기니네이트 디히드로클로라이드
이 화합물은 CH2Cl2/DMF (1:1, 1.2 ㎖) 중의 화합물 Ⅰ-5 (250 ㎎, 0.55 mmol), Boc-아르기닌(Boc)-OH (380 ㎎, 1.01 mmol) 및 DCC (120 ㎎, 0.59 mmol)을 사용하여 실시예 9와 동일한 일반적인 과정으로 제조하여 조 (Ⅰ-5)-Boc-아르기닌(Boc) 에스테르 256 ㎎ (56 %)를 얻었다. 이 화합물 (210 ㎎, 0.3 mmol)을 디옥산 (8 ㎖) 중의 EtOAc (4 ㎖) 및 4 N의 HCl의 혼합물 중에 실온에서 2 시간 동안 교반시켰다. 침전물을 수거하고 1 N의 HCl 20 ㎖와 1 시간 동안 교반시켰다. 여액을 동결 건조시켜 고체로 생성물 에스테르 47 ㎎ (23 %)를 얻었다. 융점 271 ℃ (분해), MS m/z = 611 (M+1)+.
실시예 11
(Ⅰ-5)-β-알라니네이트 히드로클로라이드
이 화합물은 CH2Cl2/DMF (1:1, 5 ㎖) 중의 화합물 Ⅰ-5 (200 ㎎, 0.44 mmol), Boc-β-알라닌 (203 ㎎, 1.0 mmol), DMAP (40 ㎎) 및 DCC (202 ㎎, 1.0 mmol)을 사용하여 실시예 9와 동일한 일반적인 과정으로 제조하여 (Ⅰ-5)-Boc-β-알라닌 에스테르 256 ㎎ (91 %)를 얻었다. 융점 141 ℃ (분해),1H NMR (DMSO-d6) δ 1.38 (s, 9H, tBoc). 이 화합물 (250 ㎎, 0.4 mmol)을 HCl로 처리하여 고체로 생성물 에스테르 172 ㎎ (77 %)를 얻었다. 융점 279 ℃ (분해), MS m/z = 525 (M+1)+.
실시예 12
(Ⅰ-5)-α-아미노이소부티레이트 히드로클로라이드
이 화합물은 CH2Cl2/DMF (1:1, 4 ㎖) 중의 화합물 Ⅰ-5 (200 ㎎, 0.44 mmol), Boc-아미노이소부티르산 (203 ㎎, 1.0 mmol), DMAP (40 ㎎) 및 DCC (202 ㎎, 1.0 mmol)을 사용하여 실시예 9와 동일한 일반적인 과정으로 제조하여 (Ⅰ-5)-Boc-아미노이소부티르산 에스테르 260 ㎎ (93 %)를 얻었다. 이 화합물 (250 ㎎, 0.4 mmol)을 HCl로 처리하여 고체로 생성물 에스테르 170 ㎎ (74 %)를 얻었다. 융점 214 ℃ (분해), MS m/z = 539 (M+1)+.
실시예 13
(Ⅰ-5)-글루타메이트 히드로클로라이드
이 화합물은 CH2Cl2/DMF (1:1, 4 ㎖) 중의 화합물 Ⅰ-5 (200 ㎎, 0.44 mmol), Boc-glu(tBu)-OH (303 ㎎, 1.0 mmol), DMAP (40 ㎎) 및 DCC (202 ㎎, 1.0 mmol)을 사용하여 실시예 9와 동일한 일반적인 과정으로 제조하여 Boc-에스테르를 얻었다. 융점 170 ℃. 이 화합물을 HCl로 처리하여 고체로 생성물 에스테르 180 ㎎ (66 %)를 얻었다. 융점 235 ℃ (분해), MS m/z = 583 (M+1)+.
실시예 14
(Ⅰ-5)-리실-β-알라니네이트 디히드로클로라이드
방벙 A: CH2Cl2(100 ㎖) 중의 화합물 Ⅰ-5 (2.26 g, 5.0 mmol)의 혼합물에 Boc-Lys(Boc)-β-Ala-OH (1.83 g, 5.5 mmol), DCC (2.06 g, 10.0 mmol) 및 DMAP (100 ㎎)을 가하였다. 용액을 주위 온도에서 질소하에 4 시간 동안 교반시킨 다음, 여과하고, 용매를 감압하에 농축시켜 고체를 얻었다, 융점 160-165 ℃. EtOAc (250 ㎖)를 생성된 고체에 가하고 혼합물을 여과하였다. HCl (g)를 pH 3까지 가하고 용액을 60 ℃까지 가열한 다음, 1 시간 동안 실온까지 냉각시켰다. 침전물을 수거하고, EtOAc, 이어서 Et2O로 세척하고, 진공하에 건조시켜 (40 ℃, 48 시간) 담황색 고체로 생성물 에스테르 2.65 g (73 %)를 얻었다. 융점 205 ℃ (분해), MS m/z = 653 (M+1)+.
방법 B: DMF (2 ㎖) 중의 실시예 11의 에스테르 (57 ㎎, 0.1 mmol), Boc-Lys(Boc)-OH 디시클로헥실아민 염 (114 ㎎, 0.21 mmol), BOP (88 ㎎, 0.2 mmol), HOBt (30 ㎎, 0.2 mmol) 및 N-메틸모르폴린 (0.11 ㎖, 1 mmol)의 혼합물을 3 시간 동안 교반시켰다. 혼합물을 EtOAc 15 ㎖로 희석하고, 물, NaHCO3용액 및 시트르산 용액으로 추출하였다. 용매를 건조하고 (MgSO4), 농축시켜 녹색 고체 82 ㎎ (94 %)를 얻었다. 이 물질 (100 ㎎, 0.13 mmol)을 디옥산 중의 EtOAc-4 N의 HCl로 처리하여 생성물 에스테르 54 ㎎ (75 %)를 얻었다. MS m/z = 653 (M+1)+.
실시예 15
ChAT 활성에 대한 인돌로카르바졸 에스테르의 효과
ChAT에 대한 본 발명의 인돌로카르바졸 에스테르의 효과는 태아 쥐로부터 제조된 분리된 척추 배양물로 분석하였다. ChAT는 신경 전달자의 합성에 촉매작용을 하는 효소이고, 콜린성 신경단위에 대한 특정 생화학 마커이다. 척추에서, 다수의 콜린성 신경단위는 모터 신경단위이다. 따라서, 이 효소의 분석은 콜린성 신경단위의 생존 및(또는) 분화에 대한 요소(들)의 효과 및(또는) 이 효소 조절의 표시로 사용할 수 있다. 분석에 사용된 과정은 국제 특허 공개 제94/02488호의 실시예 6에 기술된 과정이다. 14종의 에스테르를 척추 ChAT 분석으로 시험하여 그의 상대적인 효능을 측정하였고, 결과는 표 4에 요약되어 있다.
척추 배양물의 ChAT에 대한 화합물의 효과
화합물 실시예 척추 ChAT 활성 (대조물의 %)
500 nM 1000 nM
1 150 153
2 157 151
3 151 132
4 150 154
5* 137 139
6 149 150
7 132 151
8 불활성 138
9 158 143
10 128 170
11 138 149
12 155 150
13 168 142
14 121 147
* 이 화합물은 10 μM에서 대조물을 넘어 ChAT 활성 169 %로 증가하였다.
실시예 16
완충액 중 에스테르의 안정성
유용한 정맥내 투여액에 대한 조건은 24 시간에 걸쳐 인돌로카르바졸 Ⅰ-5 (화합물 Ⅰ-5)로의 전환율 1 % 미만을 갖는 인돌로카르바졸 에스테르의 농도 1 ㎎/㎖ 이상에 맞추었다. 바람직하게는, 에스테르는 포유동물의 투여에 가장 적용가능한 완충액 중에 용해시켰다. 가장 바람직한 에스테르 (실시예 8 및 14)는 인돌로카르바졸 Ⅰ-5로의 낮은 전환율을 갖는다. 인돌로카르바졸 에스테르를 물, 디메틸술폭시드 (DMSO), 이어서 완충액 중에 용해시켜 용해도를 측정하고 인돌로카르바졸 Ⅰ-5로의 전환율을 관찰하였다. 시료를 290 ㎚에서 UV 검출을 사용하는 HPLC로 분석하였다. 하기 실시예는 본 명세서에서 완충제의 제조, 인돌로카르바졸 에스테르의 용해에 사용된 과정, 및 24 시간 후 용액 안정성의 분석을 기술한다.
A. 완충액의 제조:
완충액을 하기와 같이 제조하였다.
용액 1은 물이었다.
용액 2는 나트륨 아세테이트·3H2O 0.68 g을 물 500 ㎖ 중으로 측량하여 아세트산으로 pH를 조정하여 제조한, pH 4에서 10 mM의 아세트산염 완충제이었다.
용액 3은 일염기성 인산 나트륨 0.30 g 및 이염기성 인산 나트륨 0.36 g을 물 500 ㎖ 중으로 측량하고, 완전히 용해될 때까지 교반시키고, 염산으로 pH를 조정하여 제조한 10 mM의 인산염 완충제, pH 7이었다.
용액 4는 트리스 (트리스(히드록시메틸)아미노메탄 히드로클로라이드) 0.79 g을 물 500 ㎖ 중으로 측량하고, 완전히 용해될 때까지 교반시키고, 수산화 나트륨으로 pH를 조정하여 제조한 10 mM의 트리스 완충제, pH 9이었다.
용액 5는 DMSO 대조물이었다. 시험된 인돌로카르바졸 에스테르 중 어느 것도 DMSO 중에 Ⅰ-5로의 전환을 나타내지 않았다.
B. 시료의 제조:
시료 용액을 인돌로카르바졸 에스테르 0.5-1 ㎎을 앰버 1.5 ㎖의 자동시료화 바이알 중으로 측량하고, 여기에 1종의 완충액 적당량을 가하여 최종 농도 1 ㎎/㎖를 성취하였다. 시료 용액을 10 분 동안 선회시키고 초음파 처리하였다. 분취량 50 ㎕를 1.5 ㎖의 앰버 자동시료화 바이알 중에 놓았다. 바이알에 DMSO 450 ㎕를 가하여 선택된 시간 간격에서 반응을 종결하였다. 이어서, 희석된 시료 용액을 역상 HHPLC (Hewlett Packard 1050 시리즈)로 분석하였다. HPLC 조건은 하기와 같다.
단계 시간 (분) % A % B % C 조건
1 15 70 20 10 평형
2 15 40 50 10 선형으로 성취됨
3 5 40 50 10
4 5 10 80 10 세척
A = 0.1 %의 TFA, 물
B = 0.1 %의 TFA, 아세토니트릴
C = 메탄올
파장: 290 ㎚
유속: 1 ㎖/분
주입 부피: 10 ㎕
칼럼: 조르박스 (Zorbax) Rx C18 4.6 x 250 ㎜, 입자 크기 5 μ,
공극 크기: 300A
칼럼 온도: 30 ℃
초기 스크리닝의 결과는 도 1에 나타난다. 물 중 화합물의 pH는 2 내지 5에서 변화하는 반면, 완충제는 10 mM의 아세트산염, 인산염 및 트리스 각각에 대해 3.6, 6.7 및 7.8에서 대략 동일하게 잔류하였다. 이들 데이터는 아세트산염 완충제가 최소의 가수분해를 위해 바람직하다는 것을 나타낸다.
인돌로카르바졸 에스테르 용해도 1 ㎎/㎖에 대한 본 발명자들의 기준으로, 하기 정보를 알 수 있다. 시료 용액을 제조할 때, 특정 에스테르가 모든 완충제 중에 완전히 용해되지 않고, 몇몇 불용성 잔류물이 용해되지 않고 잔류하였다는 것을 알았다. 도 1에 나타난 결과는 이들 제조의 용액 부분으로 얻었다. 예를 들어, 실시예 1B, 2 및 14의 에스테르는 시험된 모든 용액 중에 완전히 용해되었다. 실시예 10의 에스테르는 물, 아세트산염 및 트리스 완충제 중에 완전히 용해되었지만, 인산염 완충제 중에 완전히 용해되지 않았다. 실시예 3, 7, 8, 9 11 및 12의 에스테르는 물 및 아세트산염 완충제 중에 완전히 용해되었지만, 이들은 트리스 완충제 및 인산염 완충제 중에 완전히 용해되지 않았다. 실시예 4, 5, 6 및 13의 에스테르는 물 및 임의의 시험된 완충제 중에 용해되지 않았다. 본 발명의 인돌로카르바졸 에스테르가 시험된 각각의 용액 중에 완전히 용해되는 것이 바람직하지만, 1 종 이상의 용액 중에 완전히 용해되지 않는 인돌로카르바졸 에스테르는 그럼에도 불구하고 유리한 이용도를 가질 수 있다.
"pH 프로필"은 초기 스크리닝으로부터 아세트산염 완충제 중의 가장 큰 용해도를 나타내는 인돌로카르바졸 에스테르에 대해 형성되었다 (도 2). pH 2, 3, 4, 5 및 6에서 아세트산염 완충제를 하기와 같이 제조하였다. 나트륨 아세테이트 삼수화물 총 6.8 g을 물 1 ℓ에 가하고, 혼합물을 고체가 완전히 용해될 때까지 교반시켰다. 분취량 100 ㎖를 150 ㎖의 에를렌마이어 플라스 중으로 놓고, pH 값을 pH 2, 3, 4, 5 및 6까지 HCl로 조정하였다. 50 mM의 농도를 선택하여 화합물 첨가의 효과를 감소시켰다. 실시예 14의 인돌로카르바졸 에스테르를 단지 아세트산염 완충제로 조사하였다. pH 함수로 Ⅰ-5로의 전환율을 실시예 14, 8 및 11의 인돌로카르바졸 에스테르에 대해 각각 도 3, 4 및 5에 나타난다.
실시예 17
쥐 및 사람 혈정 및 간 S-9 단편 중의 인돌로카르바졸 Ⅰ-5 에스테르의 시험관내 대사
포유동물 체액 및 조직은 생체 이물의 에스테르 결합을 가수분해할 수 있는 다양한 수의 비특정 에스테라제를 함유한다. 이들 효소는 종에 따라 오버랩핑 선택성 및 다양한 활성을 갖는 것으로 나타나고, 시토졸 및 미크로솜 중에 발견된다. 전형적으로, 시토졸 에스테라제는 특정 반응과 관련되는 반면, 미크로솜 관련 에스테라제는 다수의 생체 이물의 에스테르를 대사시킨다. 따라서, 혈장, 조직 시토졸 및 조직 미크로솜과 같은 다양한 생물학적 매트릭스내의 에스테르 결합을 갖는 생체 이물의 배양을 사용하여 생체내 약물의 유효성을 예측하고 각각의 매트릭스 중의 가수분해 정도를 신속히 측정할 수 있다.
수컷 스프라그-다우레일 (Sprague-Dawley) 쥐 및 추정가능하게 건강한 약물 남자로부터 신선하게 수거된 혈장을 모으고 즉시 동결시켰다. 혈장을 -90 ℃에서 동결시키고, 각각의 분취량을 배양에 사용하기 위해 단지 1회만에 해동시켰다. 인돌로카르바졸 에스테르의 스톡 용액을 DMSO 중에 제조하고, 이를 사용하여 2 분 동안 비등시킨 혈정 중에 표준 곡선을 제조하였다. 비등된 혈장을 분취량 500 ㎕ 중으로 나누고, 내부 표준의 분취량과 혼합하고, 각각의 스톡 인돌로카르바졸 에스테르 용액과 스파이크시켜 표준 곡선을 제조하였다. 해동된 혈장을 분취량 500 ㎕로 나누고, 스크루 캡 바이알 중에 놓고, 내부 표준과 혼합하고, 각각의 인돌로카르바졸 에스테르 스톡 용액과 스파이크시켜 명목상 농도 5000 ng/㎖를 생성하였다.
쥐 및 사람 간 S-9 단편 (시토졸 및 미크로솜의 혼합물)을 제조한 후 즉시 동결시켰다. 각각의 분취량을 배양에 사용하기 위해 1회 해동시켰다. 인돌로카르바졸 에스테르의 스톡 용액을 DMSO 중에 제조하였다. 이들을 사용하여 0.2 M의 인산염 완충제, pH 7.4로 희석하여 단백질 농도 2 ㎎/㎖를 제조한 열 불활성화된 S-9 단편의 표준 곡선을 제조하였다. 열 불활성화된 S-9를 분취량 500 ㎕로 나누고, 내부 표준의 분취량과 혼합하고, 각각의 스톡 에스테르 용액과 스파이크시켜 표준 곡선을 제조하였다. 간 S-9 단편을 함유하는 배양물을 0.2 M의 인산염 완충제, pH 7.4 중에 희석시킴으로써 제조하여 단백질 농도 2 ㎎/㎖를 생성하였다. 시료 (500 ㎕)를 스크루 캡 바이알 중에 놓고, 내부 표준의 분취량과 혼합하고, 각각의 에스테르 스톡 용액과 스파이크시켜 명목상 농도 5000 ng/㎖를 생성하였다.
이어서, 배양을 혼합수 배치 중에 37 ℃에서 0, 0.5, 1, 2, 5, 10, 15, 30 및 60 분 동안 수행하고, 염화 메틸렌 5 ㎖를 가하여 종료시켰다. 모든 관 (표준 및 실험)을 흔들어 15 분 동안 추출시키고, 원심분리하였다. 염화 메틸렌층을 제거하고, 질소 기류하에 건조시키고, DMSO 중에 재조성하였다. 재조성된 추출물 50 ㎕를 290 ㎚에서 검출을 갖는 역상 HPLC로 분석하였다. 이동상 및 경사 조건은 하기와 같다.
단계 시간 (분) ACN-0.1 %의 TFA (%) 물-0.1 %의 TFA (%) 조건
1 10 20 80 평형
2 30 70 30 선형 경사
상이한 6종의 인돌로카르바졸 Ⅰ-5의 에스테르를 쥐 혈장 (히스티디네이트 디히드로클로라이드, 알라니네이트 히드로클로라이드, 리시네이트 디히드로클로라이드, 아르기니네이트 디히드로클로라이드, 글리시네이트 히드로클로라이드 및 디메틸아미노부티레이트 히드로클로라이드)와 배양시켰다. 5종의 인돌로카르바졸 에스테르의 경우, 인돌로카르바졸 Ⅰ-5의 방출을 일으키는 에스테르 결합의 신속한 가수분해가 있었다 (도 6). 6종 중 5종의 에스테르의 가수분해의 선형 속도는 배양의 제1 5 분 동안 유사하였고, 아르기니네이트의 가수분해는 제1 시료화 기간 전에 완결되었다. 가수분해의 최대 속도는 알라니네이트 히드로클로라이드 및 글리시네이트 히드로클로라이드가 히스티디네이트 디히드로클로라이드, 알라니네이트 히드로클로라이드, 리시네이트 디히드로클로라이드, 아르기니네이트 디히드로클로라이드 또는 디메틸아미노부티레이트 히드로클로라이드 (DMAB)보다 더 넓게 가수분해되는 몇몇 효소 선택성을 나타내었다.
또한, 동일한 6종의 에스테르를 사람 혈장과 배양시켰다. 아르기니네이트 디히드로클로라이드 및 리시네이트 히드로클로라이드를 신속히 가수분해되었고, 인돌로카르바졸Ⅰ-5의 형성 속도는 최대량이 에스테르의 첨가하고 즉시 검출되었기 때문에 측정할 수 없었다 (도 7). 알라니네이트 히드로클로라이드의 가수분해 속도는 Ⅰ-5로의 전환이 검출될 수 없었기 때문에 정량화할 수 없었다. 잔류 인돌로카르바졸 에스테르의 가수분해 속도는 측정할 수 있지만, 쥐에서 관찰되는 가수분해 속도보다 휠씬 낮았다.
3종의 인돌로카르바졸 에스테르를 쥐 간 S-9 단편과의 배양에 위해 선택하였다. DMAB의 경우 (도 8), 에스테르의 신속한 가수분해가 인돌로카르바졸 Ⅰ-5 중의 부수물 증가를 일으켰다. 그러나, β-알라니네이트의 경우, 가수분해 속도는 현저하게 감소하였다 (도 9). 리실-β-알라니네이트는 선행 조사된 임의의 에스테르와는 달리 대사 프로필을 나타냈다. 2개의 아미노산 간의 아미드 결합의 초기 가수분해는 에스테르 결합의 가수분해에 의해 이어지는 제1 대사작용이 되는 것으로 나타났다 (도 10).
DMAB 및 β-알라니네이트의 대사를 사람 간 S-9 단편으로 지도되는 유사한 배양으로 조사하였다. 상기 2종의 인돌로카르바졸 에스테르의 가수분해 속도는 유사하였다 (도 11 및 12).
실시예 18
수컷 스프라그-다우레일 쥐의 화합물 Ⅰ-5 에스테르의 생체내 대사 및 약물 동력학
생체내 배양은 생체내 관찰할 수 있는 대사의 형태에 대한 예측되는 정보 뿐 아니라, 후보 생체 이물에 대한 효소 특이성에 관련되는 정보를 생성할 수 있지만, 생체내 계는 그럼에도 불구하고 흡수, 분포, 대사 및 동물 모델에게 그의 투여에 따른 약물의 제거를 한정하는 그의 능력에서 제한된다. 따라서, 인돌로카르바졸 에스테르에 대한 약물 동력학적 정보와 함께 생체내 대사를 개발하였다.
12 마리 수컷 스프라그-다우레일 쥐 군에게 20 %의 폴리에틸렌 글리콜을 함유한 0.05 M의 아세트산염 완충제, pH 5.0로 구성되는 비히클 중에 측면 꼬리 정맥을 통하여 DMAB 디히드로클로라이드 또는 β-알라니네이트 히드로클로라이드를 투여하였다. 투여 용액의 부피를 각각의 인돌로카르바졸 에스테르의 가수분해를 완결시킨 후 인돌로카르바졸 Ⅰ-5의 투여량 5 ㎎/㎏을 전달하도록 체중을 기준으로 조정하였다. 주입하고 5, 30, 60 및 120 분 후, 동물을 이산화 탄소로 마취시키고, 전체 혈액의 시료를 심장 천공으로 얻었다. 혈액을 50 %의 플루오로화 칼륨 (혈장 에스테라제의 억제제) 100 ㎕를 함유하는 10 ㎖의 헤파린화된 관 중으로 넣었다. 이어서, 원심 분리하여 생성된 혈장을 건식 빙/이소프로판올 조 중에 동결시키고, 분석 전 -90 ℃에서 동결을 유지하였다.
분석을 위해, 시료를 해동시키고, 내부 표준을 가하고, 혼합물을 염화 메틸렌 5 ㎖로 추출하였다. 쥐 혈장 중의 표준을 상기한 바와 같이 제조하였다. 모든 관 (표준 및 실험)을 흔들어 15 분 동안 추출하고, 원심 분리하였다. 염화 메틸렌층을 제거하고, 질소 기류하에 건조시키고, DMSO 중에 재조성하였다. 재조성된 추출물 50 ㎕를 290 ㎚에서 검출을 갖는 역상 HPLC로 분석하였다. 이동상 및 경사 조건은 실시예 17의 조건과 동일하다.
수컷 스프라그-다우레일 쥐 군에게 투여할 때, DMAB 히드로클로라이드 또는 β-알라니네이트 히드로클로라이드는 인돌로카르바졸 Ⅰ-5로 신속히 가수분해되었다 (도 13 및 14). DMAB는 투여하고 2 시간 동안 혈장 중에 검출할 수 있었고, β-알라니네이트는 투여 후 1 시간 동안만 검출할 수 있었다. 두 경우에, 검출된 인돌로카르바졸 Ⅰ-5의 양을 투여량의 대략 0.2 내지 0.3 %로 비교적 일정하게 잔류하였다.
실시예 19
리실-β-알라니네이트로부터 인돌로카르바졸 Ⅰ-5 형성의 경로 대 경로의 비교
12 마리 수컷 스프라그-다우레일 쥐 군에게 리실-β-알라니네이트 디히드로클로라이드를 8.01 ㎎/㎏으로 정맥내 또는 피하 주입 뿐 아니라 구강 위관 영양법을 통하여 투여하였다. 이 투여량은 인돌로카르바졸 에스테르의 가수분해를 완결한 후 인돌로카르바졸 Ⅰ-5의 동일한 투여량 5 ㎎/㎏을 전달하도록 고안하였다. 투여 용액의 부피는 체중을 기준으로 조정하였다. 정맥내 주입하고 5, 30, 60 및 120 분 후 및 피하 주입 또는 구강 위관 영양법하고 30, 60, 120 및 240 분 후, 동물을 이산화 탄소로 마취시키고, 전체 혈액의 시료를 심장 천공으로 얻었다. 혈액을 50 %의 플루오로화 칼륨 (혈장 에스테라제의 억제제) 100 ㎕ 및 페닐메틸술포닐플루오라이드 (혈장 아미다제의 억제제) 10 ㎕를 함유하는 10 ㎖의 헤파린화된 용기 중으로 넣었다. 이어서 원심 분리하여, 생성된 혈장을 건식 빙/이소프로판올 조 중에 동결시키고, 분석 전 -90 ℃에서 동결 유지하였다.
분석을 위해, 시료를 해동시키고, 내부 표준을 가하고, 혼합물을 염화 메틸렌 5 ㎖로 추출하였다. 쥐 혈장의 표준을 상기한 바와 같이 제조하였다. 모든 관 (표준 및 실험)을 흔들어 15 분 동안 추출하고, 원심 분리하였다. 염화 메틸렌층을 제거하고, 질소 기류하에 건조시키고, DMSO 중에 재조성하였다. 재조성된 추출물 50 ㎕를 290 ㎚에서 검출을 갖는 역상 HPLC로 분석하였다. 이동상 및 경사 조건은 실시예 17의 조건과 동일하다.
리실-β-알라니네이트는 정맥내 및 피하 경로에 의해 투여한 후, 혈장 중의 Ⅰ-5의 검출가능한 수준을 생성하였다. 구강 투여를 한 후 혈장 중의 Ⅰ-5의 수준을 검출할 수 있었지만, 수준은 정량화의 한계 (50 ng/㎖) 이하이었다. 이어서, 정맥 투여 후, 인돌로카르바졸 Ⅰ-5의 혈장 수준은 투여하고 5 분 후 대략 600 ng/㎖이었고, 점차적으로 투여하고 2 시간 후 대략 80 ng/㎖까지 감소하였다 (도 15). 리실-β-알라니네이트 디히드로클로라이드의 피하 투여는 조사된 모든 순간에 대략 70 ng/㎖로 비교적 일정하게 잔류하는 혈장 수준을 생성하였다.
실시예 20
안드로겐 독립성 AT-2 쥐 전립선 종양에 대한 항 종양 효능의 경우 인돌로카르바졸 Ⅰ-5 및 (Ⅰ-5)-리실-β-알라니네이트의 비교
인돌로카르바졸 Ⅰ-5는 생체내에서 안드로겐 독립성 두닝 R-3327 AT-2 쥐 전립선 종양에 대한 성장 억제 특성을 갖는 것으로 증명된 강력한 단백질 티로신 키나제 억제제이다 (국제 특허 공개 제94/27982 참조), 제공된 선행 데이터는 (Ⅰ-5)-리실-β-알라니네이트는 생체내에서 Ⅰ-5로 신속히 전환된다는 것을 나타내는 약물 동력학 실험으로부터 유도되었지만, Ⅰ-5 및 그의 리실-β-알라니네이트 에스테르의 동일한 생물 활성은 가능성이었다. 따라서, 두닝 R-3327 AT-2 종양 모델의 Ⅰ-5 및 그의 리실-β-알라니네이트 에스테르의 상대적인 항 종양 효능을 조사하였다.
재료 및 방법
세포 주:
쥐 전립선 암 두닝 R-3327 AT-2.1 세포 (Isaacs et al., Prostate 9: 261-281, 1986)을 10 %의 태아 소 혈청, 250 nM의 덱사메타손, 2 mM의 글루타민, 페니실린 (100 I.U./㎖) 및 스트렙토마이신 (100 ㎕/㎖) 및 1 mM의 나트륨 피루베이트를 함유하는 RPMI-1640 배지 중의 공기 95 %/CO2대기 5 %를 갖는 습윤된 배양기 중에 37 ℃에서 성장시켰다. 세포를 미생물학적 관계 (Microbiological Association)에 의해 미코플라스마 및 침식성 비루스 (MAP 시험)이 없도록 측정하였다. 지수적으로 성장하는 세포를 가온된 트립신 6 ㎖를 사용하여 수확하였다. 총부피를 배지로 10 ㎖까지 트립신을 중화하도록 하고, 세포를 카운트하였다. 이어서, 세포를 간단한 원심 분리에 의해 수거하고, 세포 펠렛을 행스 균형된 염 용액 (Hanks' Balanced Salt Solution) 중에 재현탁시켜 최종 농도 1 x 107 생존 세포/㎖를 성취하였다.
동물:
할란 스프라그-다우레일 (Harlan Sprague-Dawley, 인디아나주 인디아나폴리스)로부터 얻은 수컷 동종번식의 코펜하겐 (Copenhagen) 쥐 (200-225 g)을 우리 당 3마리 쥐를 유지시키고, 시판용 음식 (Purina Formulab 5001) 및 물을 수시로 제공하였다. 동물을 습기 및 온도 조절된 조건하에 사육하고, 명/암 사이클을 12 시간 간격으로 맞추었다. 쥐들을 실험 조작 전 1 주일 동안 격리시켰다.
종양 세포 이식 및 성장:
50 마리 성체 수컷 코펜하겐 쥐를 살아있는 AT-2 세포 (1 x 106 세포/쥐)와 함께 그의 오른쪽 옆구리 중으로 접종시켰다. 7 일 후, AT-2 종양 (부피 중의 대략 0.5-0.7 ㎤)을 함유하는 쥐를 각각 10 마리 쥐의 5개 군으로 나누었다. 실험 군은 하기에 설명된다. Ⅰ-5 또는 그의 리실-β-알라니네이트 에스테르의 투여 부피 (1㎖/㎏)은 각각의 투여 군의 동물의 평균 중량을 기준으로 하고, 1 주일에 2회 필요에 따라 조정하였다. 처리 계획은 표 5에 제공된다. 종양은 버니어 캘리퍼스 (Vernier caliper)를 사용하여 매 3-4 일마다 마취된 동물 (대략 1-2 분 동안 이소플루오란 증기)에서 측정하였다. 종양 부피는 방정식: V (㎝) = 0.5236 x 길이 (㎝) x 너비 (㎝) [(길이 (㎝) +너비 (㎝)/2]을 사용하여 계산하였다.
약물 용액:
인돌로카르바졸 Ⅰ-5를 40 %의 PEG 1000 (Spectrum, 캘리포니아주 로스 앤젤레스), 10 %의 PVP C30 (ISP, 뉴 저지주 바운드브록), 2 %의 벤질 알콜 (Spectrum, 캘리포니아주 로스 앤젤레스), 물 (Milli Q 또는 HPLC 급, Fisher Scientific, 펜실베니아주 피츠버그)로 한정된 비히클 중에 용해시켰다.
모든 시약은 USP 급이었다.
(Ⅰ-5)-리실-β-알라니네이트를 50 mM의 나트륨 아세트산염 완충제, pH 5.5 중에 용해시켰다.
처리 계획
처리 군 쥐의 # 처리 투여량 계획
1. Ⅰ-5 비히클 10 비히클 1 ㎖/㎏, sc 매일
2. Ⅰ-5 10 Ⅰ-5 1 ㎖/㎏, sc 9.2 ㎎/㎖ 매일
3. (Ⅰ-5)-리실-β-알라니네이트 비히클 10 비히클 1 ㎖/㎏, sc 매일
4. (Ⅰ-5)-리실-β-알라니네이트 10 (Ⅰ-5)-리실-β-알라니네이트 1 ㎖/㎏, sc 16 ㎎/㎖ 매일
5. 처리 않함 10 없음 없음 없음
결과
인돌로카르바졸 Ⅰ-5 및 (Ⅰ-5)-리실-β-알라니네이트는 둘다 성체 수컷 코펜하겐 쥐 중의 AT-2 종양의 성장을 억제하는데 효과적이었다 (표 6). 항 종양 효능은 먼저 투여 6일부터 있었고, 투여 13일까지 종양 성장의 53 % (Ⅰ-5) 및 72 % ((Ⅰ-5)-리실-β-알라니네이트) 억제의 값에 도달하였고, 이 순간에 종양 측정을 중지하였다.
군 0일 3일 6일 9일 13일
Ⅰ-5, 비히클 0.6±0.1 (N=10) 2.3±0.2 (N=10) 5.0±0.4 (N=10) 13.4±2.5 (N=10) 24.6±3.9 (N=10)
Ⅰ-5, 10 ㎎/㎏, 매일 0.7±0.1 (N=10) 0.6±0.2 (N=10)* 2.1±0.1 (N=10)*** 5.4±0.7 (N=10)** 11.6±1.8 (N=9)**
(Ⅰ-5)-리실-β-알라니네이트, 비히클 0.7±0.1 (N=10) 2.1±0.3 (N=10) 4.6±0.6 (N=10) 12.6±1.6 (N=8) 29.7±3.7 (N=8)
(Ⅰ-5)-리실-β-알라니네이트, 10 ㎎/㎏, 매일 0.6±0.1 (N=10) 1.5±0.2 (N=10) 2.1±0.2 (N=10)*** 4.8±0.8 (N=10)*** 8.3±0.5 (N=10)***
대조물, 처리 없음 0.7±0.1 (N=10) 3.1±0.3 (N=10) 6.7±0.6 (N=10) 15.3±2.0 (N=9) 34.2±5.4 (N=9)
두네트 (Duunett) 시험을 팜 (Pharm)/PCS 버전 4.2 (Springer-Verlag, 뉴욕)을 사용하여 통계학적 분석을 적용하였다. 결과는 평균 ± SE이다; N=쥐의 수, 그의 비히클 처리된 군 (짝지지 않은 학생들 t 시험)에 대해*=p<0.05;**=p<0.001,***p<0.001
본 명세서에 언급된 공개 문서 각각은 전체적으로 여기서 참고로 채택된다.
당업계의 숙련자는 수많은 변화 및 변형이 본 발명의 바람직한 실시양태로 만들어지고 이러한 변화 및 변형이 본 발명의 목적으로부터 멀어지지 않고 만들 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 따라서, 첨부된 청구범위는 본 발명의 진정한 목적 및 범주내에 있도록 모든 동일한 변형을 포함한다.
본 발명은 A는 용해화 기이고, L은 산소이며, Q는 하기 화학식 Ⅰ의 인돌로카르바졸 잔기인 화학식 Q-L-C(=O)-A를 갖는 신규의 인돌로카르바졸 에스테르를 제공한다.
<화학식 Ⅰ>
상기 식에서,
R1은 수소, 카르바모일, 저급 알킬, 아미노, 저급 알카노일, -CH2R5또는 -CH2CH2R5(식 중, R5는 할로겐, 아미노, 디-저급 알킬아미노, 히드록실, -L-C(=O)-A에 결합된 단일 결합, 또는 히드록실 또는 -L-C(=O)-A에 결합된 단일 결합으로 임의로 치환되는 저급 알킬아미노임)이고,
R2및 R3은 독립적으로 수소, 히드록실, 시아노, 저급 알콕시, 할로겐, 히드록시메틸, 저급 알콕시메틸, 치환되거나 비치환된 저급 알킬티오메틸, 저급 알킬술피닐메틸, 아릴티오메틸, 헤테로아릴티오메틸, 아릴술피닐메틸, 헤테로아릴술피닐메틸, 아릴메틸티오메틸, 헤테로아릴메틸티오메틸, CH=NNHC(=NH)NH2, 니트로, 저급 알카노일, 저급 알카노일옥시, 술폰산, -SO2NR8R9, -OC(=O)NR8R9, -CH=NNR8R9, -NR6R7, -OCO2R10, -NHC(=O)NHR11, -CH2OC(=O)NHR11, -NHCO2R11, 저급 알킬 술포닐메틸, (디알킬아미노)알킬티오메틸, -L-C(=O)-A에 결합된 단일 결합, 또는 히드록실 또는 -L-C(=O)-A에 결합된 단일 결합으로 임의로 치환되는 저급 알킬 (식 중, R6및 R7중 하나는 수소이고 나머지는 수소, 저급 알킬, 카르바모일, 저급 알킬아미노카르보닐, 저급 알카노일 또는 페닐아미노카르보닐이거나, R6및 R7은 둘다 저급 알킬이고, R8및 R9는 독립적으로 수소, 저급 알킬, 아릴, 헤테로아릴 또는 인접 질소 원자와 함께 헤테로시클을 형성하는 기이며, R10은 저급 알킬 또는 치환되거나 비치환 페닐이고, R11은 수소 또는 저급 알킬임)이며,
R4는 수소, 아미노 또는 -NHC(=O)NHC2H5이고,
W1및 W2중 하나는 수소이고 나머지는 수소, 히드록실, 저급 알킬, 저급 알킬티오 및 -L-C(=O)-A에 결합된 단일 결합이거나, 함께 결합된 W1및 W2는 산소이며,
X는 수소, -CH2-NHC(=O)O-C6H5, 포르밀, 카르복실, 탄소 2 내지 13개를 갖는 알콕시카르보닐, 탄소 4 내지 11개를 갖는 시클로알콕시카르보닐, -(CH2)nCH2N(R11) (n은 0 내지 5의 정수임), -C(=O)NR12R13, -CH2B, NR14R15, -N=CHN(CH3)2, -OCOCH2CH2CO2H, 저급 알킬히드라지노카르보닐, -CH=N-R16, -CONHR17, 화학식
의 기 또는 -CH2E (식 중, E는 화학식
또는
(여기서, W는 수소, 메틸, 에틸, 벤질, 아세틸 또는 트리플루오로아세틸임)을 갖는 당 잔기를 나타냄) (식 중, R12및 R13은 독립적으로 수소, 저급 알킬, 페닐, 히드록실 또는 -L-C(=O)-A에 결합된 단일 결합으로 임의로 치환되는 저급 알킬이거나, R12및 R13은 함께 결합하여 하나 이상의 O, S 및(또는) 추가의 N 헤테로원자를 임의로 함유하는 탄소 3-6개의 헤테로시클릭 고리를 형성하거나, R12는 수소이고 R13은 히드록실, -L-C(=O)-A에 결합된 단일 결합 또는 페닐이고; B는 히드록실, 저급 알콕시, 저급 알카노일옥시, 아지도, 저급 알킬티오, 아릴티오, 헤테로아릴티오, 저급 알킬술피닐, 아릴술피닐, 헤테로아릴술피닐 또는 -L-C(=O)-A에 결합된 단일 결합이며; R14또는 R15중 하나는 수소이고 나머지는 수소, 저급 알킬, 알릴, 카르복실 치환 저급 알킬, 카르바모일, 저급 알킬- 또는 아릴- 치환된 카르바모일, 카르복실레이트 수소가 제거된 α-아미노산의 잔기, 또는 저급 알콕시카르보닐- 치환된 저급 알킬이거나, R14및 R15는 둘다 저급 알킬 또는 염소 치환된 저급 알킬이거나, R14및 R15는 함께 결합하여 -CH2CH2DCH2CH2- (여기서, D는 -CH2-, -NH-, -S- 또는 -O-임)을 형성하고; R16은 히드록실, 카르바모일아미노, -NR8R9구아니디노, 2-이미다졸릴아미노 또는 -L-C(=O)-A에 결합된 단일 결합이며; R17은 α-아미노산의 카르복실기가 저급 알킬 알콜 또는 벤질 알콜에 의해 임의로 에스테르화된, 그의 아미노기를 제거한 후의 α-아미노산의 잔기임)이고,
Y는 히드록실, 저급 알카노일옥시, 카르바모일옥시, 저급 알콕시, 또는 -L-C(=O)-A에 결합된 단일 결합이거나,
X 또는 Y는 함께 -CH2OC(CH3)2O-, O=, -CH2O-, -CH2OCO2-. -CH2OC(=S)O-, -CH2N(R18)CO2-, -CH2NHC(=S)O-, -CH2OS(=O)O-, -OC(=S)NHCH2- 또는 -O-C(R19)=N-CH2- (식 중, R18은 수소, 저급 알킬, 알릴, 포르밀메틸, -CH2CH=NNHC(=NH)NH2, -CH2CH(-G)CH2-J (여기서, G 및 J는 독립적으로 히드록실이거나 그들 중 하나는 -L-C(=O)-A에 결합된 단일 결합임)이고; R19는 저급 알킬 또는 저급 알킬티오임)일 수 있는데,
단, R2, R3, R5, W1, W2, X 및 Y 중 하나는 -L-C(=O)-A에 결합된 단일 결합을 함유하고;
R1, R2, R3, R4, W1및 W2가 H인 경우 X가 -CH2-O-C(=O)CH2NH2또는 -CH2-O-C(=O)CH2NH-cbz일 때 Y는 히드록실일 수 없고;
용해화 기 A는 숙신산 잔기 이외의 것이다.
용해화 기 A는 아미노산 잔기, 디펩티드 잔기, -(CH2)mZ, -(CH2)mC(=O)NH(CH2)mZ, -(CH2)mC(=O)NH-Z, -(CH2)mZ(CH2)mZ, 분지쇄 -(CH2)nCH[(CH2)mZ]2, -(CH2)m-Z[(CH2)mZ]2, -(CH2)n-A1, -(CH2)n-헤테로아릴 및 -NH(CH2)mN(CH3)2(식 중, n은 0 내지 5의 정수이고, m은 1-6 의 정수이며, Z는 염기성 기, -C(=NH)NH2, 시클릭 아미딘, -NHC(NH2)=NR11, 시클릭 구아니딘 및 산성 기로 구성되는 군으로부터 선택되는데, 단 용해화 기 A는 숙신산 잔기가 아니고; A1은 아릴, 또는 화학식 -(CH2)nZ의 치환체 1 내지 3개에 의해 치환된 헤테로아릴인데, 헤테로아릴은 하나 이상의 염기성 질소 원자 및 O, S 및 N으로부터 선택되는 헤테로원자 0-4개를 함유하는 아릴 잔기를 의미함)일 수 있다.
바람직하게는, R1은 수소이다. 바람직한 R2및 R3기는 독립적으로 H, NH2, 히드록실, 할로겐, 치환되거나 비치환된 저급 알킬티오메틸, 저급 알킬술피닐메틸, 아릴티오메틸, 저급 알킬 술포닐메틸, (디알킬아미노)알킬티오메틸, 헤테로아릴메틸티오메틸 또는 헤테로아릴티오메틸일 수 있다.
특히 바람직한 R2및 R3기에는 H, NH2, OH, 할로겐, CH2S(=O)C2H5, CH2SC2H5, CH2SC6H5, CH2S(=O)2C2H5, CH2S(CH2)2N(CH3)2, CH2SCH2-(2-푸릴) 및 CH2S-3-(1,2,4-트리아졸릴)이 포함되고, H 및 치환되거나 비치환된 저급 알킬티오메틸 기가 특히 바람직하다.
바람직하게는, Y는 히드록실 또는 저급 알콕시, 특히 메톡시 또는 -L-C(=O)-A에 결합된 단일 결합이다. 바람직하게는, X는 메톡시카르보닐, -CH2-S(=O)CH3, -CH2N(CH3)2, 히드록시메틸, 글루코실티오메틸, 특히 -CH2-S-1-글루코실, -CH2-NHC(=O)O-C6H5또는 -C(=O)NH(CH2)2-OH이다.
바람직하게는, R4는 H, -NH2또는 -NHC(=O)NHC2H5이다.
몇몇 특히 바람직한 실시양태에서, R2및 R3은 둘다 H이고, Y는 저급 알콕시, 특히 메톡시이며, X는 B가 -L-C(=O)-A에 결합된 단일 결합인 CH2-B이다.
다른 특히 바람직한 실시양태에서, R2및 R3은 둘다 저급 알킬티오메틸, 특히 -CH2SC2H5이고, Y는 -L-C(=O)-A에 결합된 단일 결합이며, X는 메톡시카르보닐이다.
바람직한 실시양태에서, 인돌로카르바졸 에스테르의 인돌로카르바졸 (Q-OH)은 표 1의 화학식 중 하나를 갖는다.
화합물(1) R R3 Y X
1-1 H H OH CO2CH3
1-2 OH H OH CO2CH3
1-3 H H OH CH2S(=O)CH3
1-4 H H OH CH2N(CH3)2
1-5 H H OCH3 CH2OH
1-6(2) H H OH CH2S-Glc
1-7(3) H H OH CO2CH3
1-8 CH2S(=O)C2H5 H OH CO2CH3
1-9(3) Br Br OH CO2CH3
1-10 CH2SC2H5 H OH CO2CH3
1-11 CH2SC6H5 H OH CO2CH3
1-12 H H OH CH2NHCO2C6H5
1-13 CH2S(=O)2C2H5 H OH CO2CH3
1-14 CH2SC2H5 CH2SC2H5 OH CO2CH3
1-15 CH2S(CH2)2N(CH3)2 H OH CO2CH3
1-16 CH2SCH2-2-푸릴 H OH CO2CH3
1-17 Br Br OH CH2OH
1-18 CH2S-3-(1,2,4-트리아졸릴) H OH CO2CH3
1-19 CH2S(CH2)2N(CH3)2 CH2S(CH2)2N(CH3)2 OH CO2CH3
1-20(4) H H OH CO2CH3
1-21(5) H NH2 OH CO2CH3
1-22 H H OH C(=O)NH(CH2)2OH
(1) W1및 W2는 둘다 수소이거나 함께 결합하여 주석 3에 지시된 산소를 나타낸다. R4는 주석 4 및 5에 나타낸 바를 제외하고는 수소이다.
(2) Glc는 글루코스이고, 1-위치를 통하여 결합된다.
(3) W1및 W2는 함께 결합하여 산소를 나타낸다.
(4) R4는 NHCONHC2H5이다.
(5) R4는 NH2이다.
특히 바람직한 인돌로카르바졸인 표 1의 인돌로카르바졸 Ⅰ-5 및 Ⅰ-14는 각각 화합물 Ⅱ-4 및 Ⅱ-51로 국제 특허 공개 제94/02488호 (표 1), 및 미국 특허 제5,461,146호에 개시되어 있다. 게다가, 인돌로카르바졸 Ⅰ-5는 화합물 Ⅰ-19로 국제 특허 공개 제94/27982호 (표 1)에 개시되어 있다.
본 발명의 신규 인돌로카르바졸 에스테르는 화학식 HO-Q의 히드록실 함유 인돌로카르바졸과 1종 이상의 선택된 용해화 기 (A)를 함유하는 산 AC(=O)OH과의 에스테르화에 의해 반응식:
에 따라 제조할 수 있다.
몇몇 바람직한 실시양태에서, 상기 반응식 중의 산은 표 2에 나타낸 화학식 중 하나, 특히 화학식 A1-A10중 하나를 갖고, A5및 A10이 더욱 바람직하며, A10이 특히 바람직하다.
화합물 번호 산
A1 리신
A2 글리신
A3 알라닌
A4 N,N-디메틸글리신
A5 3-디메틸아미노부티르산
A6 히스티딘
A7 아르기닌
A8 β-알라닌
A9 α-아미노이소부티르산
A10 리실-β-알라닌
A11 발린
A12 루신
A13 이소루신
A14 프롤린
A15 세린
A16 트레오닌
A17 시스틴
A18 아스파르트산
A19 모르폴린-1-아세트산
A20 4-메틸-1-피페라진아세트산
A21 β-알라닌-(2-아미노프로피온)산
A22 3-아미노부티르산
A23 2-디메틸아미노프로피온산
A24 N-(3-디메틸아미노에틸)숙신암산; HO2CCH2CH2CONHCH2CH2N(CH3)2
A25 N-(3-부탄산)-2,6-디아미노헥산아미드
A26 3-디메틸아미노벤조산
A27 3-구아나디노프로피온산
A28 HO2CCH2CH2CONHCH2CH2SO3H
A29 HO2CCH2CH2SO3H
A30 HO2CCH2CH2PO3H2
상기 반응식 중의 산이 표 2에 나타낸 화학식 중 하나를 갖는 경우, 산의 카르복실기는 화학식 Ⅰ의 인돌로카르바졸의 히드록실기와 에스테르화되고, 산 분자의 잔기 (표 2의 화학식 A1-A10의 잔기)는 생성된 에스테르의 용해화 기를 제공한다.
에스테르 제조는 하기 상세히 개시되는 방법을 포함하는 표준 방법에 의해 제조할 수 있다. 본 발명의 카르바메이트 에스테르는 적절한 HO-Q와 이소시아네이트와의 반응에 의해 제조할 수 있다. 이소시아네이트의 제조는 표준 기술에 의해 제조한다. 문헌 (March, J.,Advanced Organic Chemistry, 3rd Edition, Wiley, N.Y. 1985)을 참조하라.
바람직한 실시양태에서, 치환체 Y는 -L-C(=O)-A에 결합된 단일 결합이거나 X는 B가 -L-C(=O)-A에 결합된 단일 결합인 CH2-B이다. 다른 바람직한 실시양태에서, -L-C(=O)-A는 치환체 R2, R3, R5, W1또는 W2중 하나에 결합될 수 있다.
바람직한 용해화 기 (A)는 인돌로카르바졸 에스테르의 용해화에 보조하는 하나 이상의 관능기를 함유한다. 적절한 관능기에는 산성 또는 염기성 관능, 및 폴리-(에틸렌 글리콜)카르복실산과 같은 폴리에테르가 포함되고, 산성 또는 염기성 관능이 바람직하다. 아미노산, 특히 α-아미노산의 잔기, 디펩티드의 잔기 또는 N,N-디메틸글리신과 같은 그의 유도체가 용해화 기로 특히 바람직하다. 다른 바람직한 용해화 기에는 화학식 -(CH2)mZ, -(CH2)mC(=O)NH(CH2)mZ, -(CH2)mZ(CH2)mZ, 분지쇄 -(CH2)nCH[(CH2)mZ]2, -(CH2)n-A1, -(CH2)n-헤테로아릴 또는 -NH(CH2)mN(CH3)2(식 중, n은 0 내지 5의 정수이고, m은 1-6 의 정수이며, A1은 아릴, 또는 화학식 -(CH)nZ의 치환체 1 내지 3개에 의해 치환된 헤테로아릴이며, Z는 염기성 기, 예를 들어 아미노 또는 NR20R21(여기서, R20및 R21은 독립적으로 탄소 1 내지 6개의 저급 알킬 또는 2-히드록시에틸이거나, R20및 R21은 함께 결합하여 -CH2CH2MCH2CH2- (여기서, M은 -CH2-,-S-, -O- 또는 -N(R11)- (R11은 상기한 바와 같음)을 형성함)임) 중 하나를 갖는 기가 포함된다. 바람직하게는, Z는 또한 -C(=NH)NH2, 예를 들어 2-이미다졸리딜, -NHC(NH2)=NR11과 같은 시클릭 아미딘, 예를 들어 2-(2-아미노이미다졸리딜)과 같은 시클릭 구아니딘, 또는 예를 들어 CO2H, PO2H, PO3H2, SO3H2과 같은 산성 기, 테트라졸릴, 아미노산 잔기, 또는 SO2NHR11일 수 있다. 용해화 기가 -(CH2)n-A1일 경우, Z는 바람직하게는 -(CH2)n-3-디메틸아미노메틸이다.
본 명세서에 사용된, 치환체 군에 적용되는 경우 용어 "저급"은 탄소 원자 1 내지 6개를 의미한다. 따라서, 용어 저급 알킬은 탄소 원자 1 내지 6개를 갖는 직쇄 또는 분지쇄 알킬기, 예를 들어 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, sec-부틸, tert-부틸, 펜틸, 네오펜틸 및 헥실을 의미한다. 용어 "저급 알콕시메틸"은 탄소 원자 1 내지 6개를 갖는 알콕시메틸을 나타낸다.
할로겐에는 불소, 염소, 브롬 및 요오드가 포함된다. 본 명세서에 사용된 용어 "헤테로시클릭"은 하나 이상의 조성 원자가 탄소 이외의 것, 바람직하게는 N, O 또는 S인 시클릭 구조를 의미한다. 헤테로시클 기의 예에는 피롤릴, 피라닐, 티오피라닐, 피리딜, 티아졸릴, 트리아지닐, 인돌릴, 푸리닐 및 벤조티아졸릴이 포함된다. 본 발명의 화합물의 몇몇 바람직한 실시양태에서, 헤테로시클은 피리딘, 피리미딘, 퀴놀린, 이소퀴놀린 또는 이미다졸이다.
본 명세서에 사용된 용어 "아릴"은 예를 들어, 페닐, 나프틸, 크실릴, 피롤 및 푸릴 기를 포함하는 모노시클릭 및 폴리시클릭 방향족 기를 나타낸다. 아릴 기 (예를 들어, 이미다조 기)가 탄소 원자 3개 미만을 포함할 수 있고, 바람직한 아릴 기는 탄소 원자 6 내지 약 14개, 더욱 바람직하게는 탄소 원자 6 내지 약 10개를 갖는다. 본 명세서에 사용된 용어 "헤테로아릴"은 하나 이상의 염기성 질소 원자 또는 O, S 및 N으로부터 선택되는 0 내지 4개의 헤테로원자를 함유하는 아릴 잔기를 의미한다.
본 발명의 인돌로카르바졸 에스테르의 치환체 기는 추가로 치환될 수 있다. 예를 들어, R5가 저급 알킬아미노인 경우, 저급 알킬 기는 히드록실에 의해 추가로 치환될 수 있다. R10이 페닐인 경우, 페닐 기는 히드록실 또는 아미노에 의해 치환될 수 있다.
인돌로카르바졸 에스테르의 관능기는 보호기를 포함할 수 있다. 보호기는 히드록실 기 및 카르복실 기와 같은 관능에 결합시키고 관능으로부터 제거할 수 있는 화학적 관능기로 그 자체로 공지되어 있다. 이들 기는 화합물이 노출되는 화학적인 반응 조건에 대해 상기 관능이 불활성이 되도록 화학적 화합물 중에 존재한다. 임의의 다양한 보호기를 본 발명에 사용할 수 있다. 상기 보호기 중 하나는 벤질옥시카르보닐 (Cbz) 기이다. 본 발명에 따른 다른 바람직한 보호기는 문헌 (Greene, T.W. and Wuts, P.G.M., "Protective Groups in Organic Synthesis", 2d. Ed., Wiley & Sons, 1991)에서 발견할 수 있다.
본 명세서에 사용된 용어 "아미노산"은 아미노 기 및 카르복실 기를 둘다 함유하는 분자를 나타낸다. 본 명세서에 사용된 용어 "α-아미노산"은 카르복실 기에 인접한 탄소 상에 아미노 관능을 포함하는 카르보실산, 즉 화학식 CH(COOH)(NH2)-(측쇄)로 그의 통상의 의미를 갖는다. 본 발명의 화합물에 유용한 α-아미노산 및 그로부터 유도된 잔기는 천연이거나 합성시킬 수 있다. 대표적인 α-아미노산 측쇄는 하기 표 3에 나타난다. "디펩티드"는 펩티드 결합으로 연결된 2개의 아미노산으로 본 명세서에 정의된다. 따라서, 디펩티드의 조성은 α-아미노산에 제한되지 않고, 아미노 기 및 카르복실 기를 둘다 함유하는 임의의 분자일 수 있다.
본 발명의 화합물을 위한 몇몇 바람직한 치환체에는 α-아미노산 ("α-아미노산 잔기") 또는 디펩티드의 잔기 ("디펩티드 잔기")가 포함된다. 예를 들어, 인돌로카르바졸 에스테르의 특정 바람직한 치환체에는 α-아미노 기를 제거한 후 α-아미노산의 잔기, 또는 카르복실레이트 수소가 포함된다. 본 발명의 화합물에 사용하기에 적절한 α-아미노산 잔기에는 아미노, 카르복실, 이미다졸릴, 또는 보호기 또는 마스크기로 임의로 보호된 다른 관능 잔기를 갖는 α-아미노산 잔기가 포함된다.
본 발명은 환자, 바람직하게는 포유동물의 전립선의 병리학적 질환을 치료 방법을 특징으로 한다. 방법은 제약적으로 유효량의 화학식 Q-L-C(=O)-A의 인돌로카르바졸 에스테르 (식 중, 특히 Q가 표 1의 화학식 잔기로부터 선택되는, 특히 Ⅰ-5이고, A가 표 2의 화학식 A1-A10중 하나의 잔기로부터 선택되며, A5및 A10이 더욱 바람직하고, A10가 특히 바람직함)을 환자에게 투여하는 것을 포함한다. 몇몇 바람직한 실시양태에서, 전립선의 병리학적 질환은 양성 전립선 비대 또는 전립선 암이다. 다른 암 질환은 인돌로카르바졸 에스테르의 사용으로부터 이익을 얻을 수 있다. 편리하게는, 본 발명 화합물의 항종양 활성은 당업계에 이용가능한 다양한 시험관내 또는 생체내 종양 분석에 의해 분석할 수 있다. 예를 들어, 전립선 암에 대해, 스크리닝은 쥐 전립선 암 두닝 (Dunning) R-3327 AT-2.1 세포로 접종된 쥐를 사용하여 성취할 수 있다 (하기 실시예 20 참조).
본 발명의 에스테르는 단독으로 또는 NGF와 같은 신경친화성 요소와 배합하여 신경계 질병, 특히 진행 축색 변성 또는 사망의 증가된 위험에서 상처입고, 손상된 신경 세포에 의해, 또는 손상된 콜린성 활성에 의해 특징지워 지는 신경계 질병을 위한 치료제로 유용하다. 편리하게는, 본 발명 화합물의 신경계 활성은 하기 및 국제 특허 공개 제94/02488호에 상세히 기술되어 있는 배양된 척추 콜린 아세틸 전이효소 (ChAT)에 의해 분석할 수 있다.
본 발명의 인돌로카르바졸 에스테르는 당업계에 공지된 인돌로카르바졸과 비교하여 수성 매질 중의 용해도를 개선하였다. 따라서, 용해성 인돌로카르바졸 에스테르는 포유동물에게 비경구 투여를 위한 제약 조성물에 특히 유용하다. 본 발명의 선택된 에스테르 용액의 안정성은 하기 상세히 기술되어 있다. 임의의 이론에 의해 제한되는 것을 원하지는 않지만, 본 발명의 인돌로카르바졸 에스테르를 생체내 가수분해시켜 유리 인돌로카르바졸을 생성한다는 것을 이해할 수 있다.
또한, 인돌로카르바졸 에스테르의 제약적으로 허용가능한 염은 본 명세서에 개시된 바와 같은 화합물의 범주내에 속한다. 본 명세서에 사용된 용어 "제약적으로 허용가능한 염"은 염화 수소, 황산염 및 인산염과 같은 무기산 부가 염 또는 아세테이트, 말레에이트, 푸마레이트, 타르트레이트 및 시트레이트와 같은 유기산 부가 염을 의미한다. 제약적으로 허용가능한 금속 염의 예는 나트륨 및 칼륨 염과 같은 알칼리 금속 염, 마그네슘 염 및 칼슘 염과 같은 알칼리 토금속 염, 알루미늄 염 및 아연 염이다. 제약적으로 허용가능한 암모늄 염의 예는 암모늄 염 및 테트라메틸암모늄 염이다. 제약적으로 허용가능한 유기 아민 부가 염의 예는 모르폴린 및 피페리딘과의 염이다. 제약적으로 허용가능한 아미노산 부가 염의 예는 리신, 글리신 및 페닐알라닌과의 염이다.
본 명세서에 제공된 화합물들을 제약적으로 허용가능한 비독성 부형제 및 담체와 혼합하여 제약 조성물로 조성시킬 수 있다. 상기한 바와 같이, 이러한 조성물은 비경구 투여, 특히 액체 용액 또는 현탁액의 형태로, 또는 경구 투여, 특히 정제 또는 캡슐의 형태로, 코 속으로, 특히 분말, 코용 점약제 또는 에어로졸의 형태로, 피부 투여, 비아, 예를 들어 트란스더말 패치로 사용하기 위해 제조하거나, 상기 용도를 위한 적절한 형태 및 당업계의 숙련자에게 분명할 것인 투여의 다른 형태로 제조할 수 있다.
편리하게는, 조성물은 단위 투여 형태로 투여할 수 있고 제약 업계에 잘 알려진 임의의 방법에 의해, 예를 들어 문헌 (Remington's pharmaceutial Sciences, Mack Pub. Co., Easton, 펜실바니아주, 1980)에 기술되어 있는 바와 같이 제조할 수 있다. 비경구 투여를 위한 제형은 통상의 부형제로 멸균수 또는 염수, 폴리에틸렌 글리콜과 같은 폴리알킬렌 글리콜, 식물성 유, 수소화된 나프탈렌 및 완충액 등을 함유할 수 있다. 특히, 생물 상용성, 생물 분해성 락티드 중합체, 락티드/글리콜리드 공중합체 또는 폴리옥시에틸렌-폴리옥시프로필렌 공중합체는 활성 화합물의 이형을 조절하기 위한 유용한 부형제일 수 있다. 이들 활성 화합물을 위한 다른 잠재적으로 유용한 비경구 전달계에는 에틸렌-비닐 아세테이트 공중합체 입자, 삼투성 펌프, 매몰식 흡입계 및 리포솜이 포함된다. 흡입 투여를 위한 제형은 부형제로, 예를 들어 락토스를 포함할 수 있거나, 예를 들어 폴리옥시에틸렌-9-라우릴 에테르, 글리코콜레이트 및 데옥시콜레이트를 함유한 수용액, 또는 코 점약제의 형태의 투여를 위한 유성액 또는 코 속으로 적용하기 위한 겔일 수 있다. 또한, 비경구 투여를 위한 제형은 구강 투여를 위한 글리코콜레이트, 직장 투여를 위한 살리실레이트, 또는 질 투여를 위한 시트르산을 포함할 수 있다. 아세트산염 완충된 용액이 바람직하다. 바람직하게는, 트란스더말 패치를 위한 제형은 친지질 유제이다.
본 발명의 물질을 제약에서 단독 활성제로 사용할 수 있거나, 다른 활성 성분, 예를 들어 질병에서 신경 생존 또는 축색 재생을 용이하게 할 수 있는 다른 성장 요소와 배합하여 사용할 수 있다.
치료 조성물 중의 본 명세서에 기술된 화합물의 농도는 투여되는 약물의 투여량, 사용되는 화합물의 화학적 특성 (예를 들어, 소수성) 및 투여 경로를 포함하는 많은 요소에 따라 변화시킬 수 있다. 일반적으로, 본 발명의 화합물은 비경구 투여를 위한 화합물 약 0.1 내지 33 w/v%를 함유하는 수성 생리적 완충액으로 제공할 수 있다. 전형적인 투여 범위는 1일 체중 ㎏ 당 약 1 ㎍ 내지 약 1 g이고, 바람직한 투여 범위는 1일 체중 ㎏ 당 약 0.01 ㎎ 내지 약 100 ㎎이다. 마찬가지로, 투여되는 약물의 바람직한 투여량은 질병의 형태 및 진행 정도, 특정 환자의 전체적인 건강 상태, 선택된 화합물의 상대적인 생물학적 효능, 화합물 부형제의 제형 및 투여 경로와 같은 변수에 의존한다.
또한, 본 발명은 하기 실시예로 기술된다. 이들 실시예는 단지 설명하기 위함이지 첨부된 청구범위를 제한하는 것으로 해석되면 안된다.

Claims (38)

  1. 화학식 Q-L-C(=O)-A의 인돌로카르바졸 에스테르.
    화학식 Ⅰ
    상기 식에서,
    A는 용해화 기이고,
    L은 산소이며,
    Q는 하기 화학식 Ⅰ의 인돌로카르바졸 잔기이고,
    R1은 수소, 카르바모일, 저급 알킬, 아미노, 저급 알카노일, -CH2R5또는 -CH2CH2R5(식 중, R5는 할로겐, 아미노, 디-저급 알킬아미노, 히드록실, -L-C(=O)-A에 결합된 단일 결합, 또는 히드록실 또는 -L-C(=O)-A에 결합된 단일 결합으로 임의로 치환되는 저급 알킬아미노임)이고,
    R2및 R3은 독립적으로 수소, 히드록실, 시아노, 저급 알콕시, 할로겐, 히드록시메틸, 저급 알콕시메틸, 치환되거나 비치환된 저급 알킬티오메틸, 저급 알킬술피닐메틸, 아릴티오메틸, 헤테로아릴티오메틸, 아릴술피닐메틸, -C(=O)NR12R13, -CH2B, NR14R15, -N=CHN(CH3)2, -OCOCH2CH2CO2H, 저급 알킬히드라지노카르보닐, -CH=N-R16, -CONHR17, 화학식
    의 기 또는 -CH2E (식 중, E는 화학식
    또는
    (여기서, W는 수소, 메틸, 에틸, 벤질, 아세틸 또는 트리플루오로아세틸임)을 갖는 당 잔기를 나타냄) (식 중, R12및 R13은 독립적으로 수소, 저급 알킬, 페닐, 히드록실 또는 -L-C(=O)-A에 결합된 단일 결합으로 임의로 치환되는 저급 알킬이거나, R12및 R13은 함께 결합하여 하나 이상의 O, S 및(또는) 추가의 N 헤테로원자를 임의로 함유하는 탄소 3-6개의 헤테로시클릭 고리를 형성하거나, R12는 수소이고 R13은 히드록실, 페닐 또는 -L-C(=O)-A에 결합된 단일 결합이고; B는 히드록실, 저급 알콕시, 저급 알카노일옥시, 아지도, 저급 알킬티오, 아릴티오, 헤테로아릴티오, 저급 알킬술피닐, 아릴술피닐, 헤테로아릴술피닐 또는 -L-C(=O)-A에 결합된 단일 결합이며; R14또는 R15중 하나는 수소이고 나머지는 수소, 저급 알킬, 알릴, 카르복실 치환 저급 알킬, 카르바모일, 저급 알킬 또는 아릴 치환된 카르바모일, 카르복실레이트 수소가 제거된 α-아미노산의 잔기, 또는 저급 알콕시카르보닐 치환된 저급 알킬이거나 R14및 R15는 둘다 저급 알킬 또는 염소 치환된 저급 알킬이거나, R14및 R15는 함께 결합하여 -CH2CH2DCH2CH2- (여기서, D는 -CH2-, -NH-, -S- 또는 -O-임)을 형성하고; R16은 히드록실, 카르바모일아미노, -NR8R9구아니디노, 2-이미다졸릴아미노 또는 -L-C(=O)-A에 결합된 단일 결합이며; R17은 α-아미노산의 카르복실기가 저급 알킬 알콜 또는 벤질 알콜에 의해 임의로 에스테르화된, 그의 아미노기를 제거한 후의 α-아미노산의 잔기임)이고,
    Y는 히드록실, 저급 알카노일옥시, 카르바모일옥시, 저급 알콕시, 또는 -L-C(=O)-A에 결합된 단일 결합이거나,
    X 및 Y는 함께 -CH2OC(CH3)2O-, O=, -CH2O-, -CH2OCO2-. -CH2OC(=S)O-, -CH2N(R18)CO2-, -CH2NHC(=S)O-, -CH2OS(=O)O-, -OC(=S)NHCH2- 또는 -O-C(R19)=N-CH2- (식 중, R18은 수소, 저급 알킬, 알릴, 포르밀메틸, -CH2CH=NNHC(=NH)NH2, -CH2CH(-G)CH2-J (여기서, G 및 J는 독립적으로 히드록실이거나 그들 중 하나는 -L-C(=O)-A에 결합된 단일 결합임)이고; R19는 저급 알킬 또는 저급 알킬티오임)일 수 있는데,
    단, R2, R3, R5, W1, W2, X 및 Y 중 하나는 -L-C(=O)-A에 결합된 단일 결합을 함유하고;
    R1, R2, R3, R4, W1및 W2가 H인 경우 X가 -CH2-O-C(=O)CH2NH2또는 -CH2-O-C(=O)CH2NH-cbz일 때 Y는 히드록실일 수 없고;
    용해화 기 A는 숙신산 잔기 이외의 것이다.
  2. 제1항에 있어서, 용해화 기는 아미노산 잔기, 디펩티드 잔기, -(CH2)mZ, -(CH2)mC(=O)NH(CH2)mZ, -(CH2)mC(=O)NH-Z, -(CH2)mZ(CH2)mZ, 분지쇄 -(CH2)nCH[(CH2)mZ]2, -(CH2)m-Z[(CH2)mZ]2, -(CH2)n-A1, -(CH2)n-헤테로아릴 및 -NH(CH2)mN(CH3)2(식 중, n은 0 내지 5의 정수이고, m은 1-6 의 정수이며, Z는 염기성 기, -C(=NH)NH2, 시클릭 아미딘, -NHC(NH2)=NR11, 시클릭 구아니딘 및 산성 기로 구성되는 군으로부터 선택되고, A1은 아릴 또는 화학식 -(CH2)nZ의 치환체 1개 내지 3개로 치환된 헤테로아릴임)으로 구성되는 군으로부터 선택되는 화합물.
  3. 제1항에 있어서, R1이 수소, 카르바모일, 저급 알킬, 아미노, 저급 알카노일 또는 -CH2CH2R5인 화합물.
  4. 제1항에 있어서, R1이 -CH2R5인 화합물.
  5. 제2항에 있어서, 용해화 기가 α-아미노산 잔기인 아미노산 잔기인 화합물.
  6. 제2항에 있어서, 용해화 기가 디펩티드 잔기인 화합물.
  7. 제2항에 있어서, Z가 아미노 및 NR20R21(여기서, R20및 R21은 독립적으로 탄소 1 내지 6개를 갖는 저급 알킬 및 2-히드록시에틸로 구성되는 군으로부터 선택되거나, R20및 R21이 함께 결합하여 -CH2CH2MCH2CH2- (여기서, M은 -CH2-,-S-, -O- 또는 -N(R11)-임)을 형성함)으로 구성된 군으로부터 선택되는 화합물.
  8. 제2항에 있어서, Z가 -C(=NH)NH2, 시클릭 아미딘, -NHC(NH2)=NR11및 시클릭 구아니딘으로 구성된 군으로부터 선택되는 화합물.
  9. 제8항에 있어서, 시클릭 아미딘이 2-이미다졸리딜인 화합물.
  10. 제8항에 있어서, 시클릭 구아니딘이 2-(2-아미노이미다졸리딜)인 화합물.
  11. 제2항에 있어서, Z가 CO2H, PO2H, PO3H2, SO3H2로 구성된 군으로부터 선택되는 산성기, 테트라졸릴, 아미노산 잔기 및 SO2NHR11인 화합물.
  12. 제2항에 있어서, A1이 화학식 -(CH2)n-3-디메틸아미노메틸의 치환체 1 내지 3개에 의해 치환된 페닐인 화합물.
  13. 제2항에 있어서, 용해화 기가 헤테로아릴 부분이 피리딘, 피리미딘, 퀴놀린, 이소퀴놀린 또는 이미다졸인 화학식 -(CH2)n-헤테로아릴인 화합물.
  14. 제14항에 있어서, 용해화 기가 표 2의 화학식 중 하나의 잔기인 화합물.
  15. 제2항에 있어서, 용해화 기가 표 2의 화학식 A1-A10중 하나의 잔기인 화합물.
  16. 제1항에 있어서, R1이 수소인 화합물.
  17. 제1항에 있어서, R2및 R3이 독립적으로 H, NH2, 히드록실, 할로겐, 치환되거나 비치환된 저급 알킬티오메틸, 저급 알킬술피닐메틸, 아릴티오메틸, 저급 알킬술포닐메틸, (디알킬아미노)알킬티오메틸, 헤테로아릴메틸티오메틸, 헤테로아릴티오메틸및 -L-C(=O)-A에 결합된 단일 결합으로 구성된 군으로부터 선택되는 화합물.
  18. 제17항에 있어서, R2및 R3이 독립적으로 H, NH2, 히드록실, 할로겐, CH2S(=O)C2H5, CH2SC2H5, CH2SC6H5, CH2S(=O)2C2H5, CH2S(CH2)2N(CH3)2, CH2SCH2-(2-푸릴), CH2S-3-(1,2,4-트리아졸릴) 및 -L-C(=O)-A에 결합된 단일 결합으로 구성된 군으로부터 선택되는 화합물.
  19. 제18항에 있어서, R2및 R3이 독립적으로 수소, 치환되거나 비치환된 저급 알킬티오메틸로 구성된 군으로부터 선택되는 화합물.
  20. 제1항에 있어서, Y가 히드록실, 저급 알콕시 또는 -L-C(=O)-A에 결합된 단일 결합인 화합물.
  21. 제1항에 있어서, X가 메톡시카르보닐, -CH2-S-(=O)CH3, -CH2N(CH3)2, 히드록시메틸, B가 -L-C(=O)-A에 결합된 단일 결합인 -CH2-B, 글루코실티오메틸, -CH2-NHC(=O)O-C6H5및 -C(=O)NH(CH2)2-OH로 구성된 군으로부터 선택되는 화합물.
  22. 제21항에 있어서, X가 메톡시카르보닐, 히드록시메틸, 및 B가 -L-C(=O)-A에 결합된 단일 결합인 -CH2-B로 구성된 군으로부터 선택되는 화합물.
  23. 제1항에 있어서, R1, R2, R3, R4, W1및 W2가 각각 H이고, Y가 저급 알콕시이며, X는 B가 -L-C(=O)-A에 결합된 단일 결합인 -CH2-B인 화합물.
  24. 제23항에 있어서, Y가 메톡시인 화합물.
  25. 제1항에 있어서, R1, R4, W1및 W2가 H이고, R2및 R3은 둘다 저급 알킬티오메틸이며, X는 메톡시카르보닐이고, Y는 -L-C(=O)-A에 결합된 단일 결합인 화합물.
  26. 제25항에 있어서, R2및 R3이 각각 -CH2SC2H5인 화합물.
  27. 제1항에 있어서, Q가 표 1의 화학식 중 하나의 잔기인 화합물.
  28. 제27항에 있어서, Q가 표 1의 화학식 Ⅰ-5의 잔기이고, 용해화 기가 표 2의 화학식 A1-A30의 잔기로 구성된 군으로부터 선택되는 화합물.
  29. 제27항에 있어서, Q가 표 1의 화학식 Ⅰ-14의 잔기인 화합물.
  30. 제27항에 있어서, Q가 표 1의 화학식 Ⅰ-14의 잔기이고, 용해화 기가 표 2의 화학식 A1-A30의 잔기로 구성된 군으로부터 선택되는 화합물.
  31. 제28항에 있어서, Q가 표 1의 화학식 Ⅰ-15의 잔기이고, 용해화 기가 표 2의 화학식 A1-A10의 잔기로 구성되는 군으로부터 선택되는 화합물.
  32. 제31항에 있어서, 용해화 기가 표 2의 화학식 A5의 잔기인 화합물.
  33. 제31항에 있어서, 용해화 기가 표 2의 화학식 A10의 잔기인 화합물.
  34. 제30항에 있어서, Q가 표 1의 화학식 Ⅰ-14의 잔기이고, 용해화 기가 표 2의 화학식 A1-A10의 잔기로 구성되는 군으로부터 선택되는 화합물.
  35. 제1항의 화합물의 치료 유효량을 환자에게 투여하는 것으로 이루어지는 전립선의 병리학적 질환의 치료 방법.
  36. 제35항에 있어서, 화합물이 제약적으로 허용가능한 담체와 함께 투여되는 방법.
  37. L이 산소이고, A가 리실-β-알라니닌의 잔기이며, Q는 화학식 Ⅰ-5의 잔기인 화학식 Q-L-C(=O)-A의 인돌로카르바졸 에스테르.
  38. L이 산소이고, A가 3-디메틸아미노부티르산의 잔기이며, Q는 화학식 Ⅰ-5의 잔기인 화학식 Q-L-C(=O)-A의 인돌로카르바졸 에스테르.
KR1019970706993A 1995-04-05 1996-04-03 선택된용해성히드록실함유인돌로카르바졸의에스테르 KR100429117B1 (ko)

Applications Claiming Priority (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US08/417,611 1995-04-05
US8/417,611 1995-04-05
US08/417,611 US5650407A (en) 1995-04-05 1995-04-05 Selected soluble esters of hydroxyl-containing indolocarbazoles
US08/624,707 1996-03-26
US08/624,707 US5686444A (en) 1995-04-05 1996-03-26 Selected soluble esters of hydroxyl-containing indolocarbazoles
US8/624,707 1996-03-26

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR19980703588A true KR19980703588A (ko) 1998-11-05
KR100429117B1 KR100429117B1 (ko) 2004-07-19

Family

ID=27023791

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1019970706993A KR100429117B1 (ko) 1995-04-05 1996-04-03 선택된용해성히드록실함유인돌로카르바졸의에스테르

Country Status (16)

Country Link
US (2) US5686444A (ko)
EP (1) EP0827505B1 (ko)
JP (1) JPH11504623A (ko)
KR (1) KR100429117B1 (ko)
AT (1) ATE225793T1 (ko)
AU (1) AU700658B2 (ko)
BR (1) BR9608044A (ko)
CA (1) CA2215111A1 (ko)
DE (1) DE69624236T2 (ko)
DK (1) DK0827505T3 (ko)
ES (1) ES2183941T3 (ko)
HK (1) HK1009370A1 (ko)
NO (1) NO311575B1 (ko)
NZ (1) NZ306205A (ko)
PT (1) PT827505E (ko)
WO (1) WO1996031515A1 (ko)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5686444A (en) 1995-04-05 1997-11-11 Cephalon, Inc. Selected soluble esters of hydroxyl-containing indolocarbazoles
AU2012199A (en) * 1997-12-24 1999-07-19 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Prodrugs of aspartyl protease inhibitors
US6200968B1 (en) * 1998-08-06 2001-03-13 Cephalon, Inc. Particle-forming compositions containing fused pyrrolocarbazoles
EP1126855B1 (en) * 1998-09-25 2007-05-09 Cephalon, Inc. Use of fused pyrrolocarbazoles for preventing/treating damage to sensory hair cells and cochlear neurons
US7129250B2 (en) 2000-05-19 2006-10-31 Aegera Therapeutics Inc. Neuroprotective and anti-proliferative compounds

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR1500989A (fr) * 1966-08-30 1967-11-10 Produits cosmétiques pour les soins de la peau
GB1317185A (en) * 1969-06-20 1973-05-16 Glaxo Lab Ltd Acyloxy-3alpha-hydroxy-pregnones
US4534899A (en) * 1981-07-20 1985-08-13 Lipid Specialties, Inc. Synthetic phospholipid compounds
US4894226A (en) * 1986-11-14 1990-01-16 Cetus Corporation Solubilization of proteins for pharmaceutical compositions using polyproline conjugation
JPH0826036B2 (ja) * 1987-01-22 1996-03-13 協和醗酵工業株式会社 生理活性物質ｋ−２５２の誘導体
EP0303697B1 (en) * 1987-03-09 1997-10-01 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Derivatives of physiologically active substance k-252
JPH07113027B2 (ja) * 1987-12-24 1995-12-06 協和醗酵工業株式会社 Ｋ−２５２誘導体
AU3064992A (en) * 1991-11-08 1993-06-07 University Of Southern California Compositions containing k-252 compounds for potentiation of neurotrophin activity
US5461146A (en) * 1992-07-24 1995-10-24 Cephalon, Inc. Selected protein kinase inhibitors for the treatment of neurological disorders
US5674867A (en) * 1992-09-21 1997-10-07 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Indolocarbazole derivatives and therapeutic method for stimulating megakaicyocyte production
EP0643966A4 (en) * 1993-03-03 1995-08-09 Kyowa Hakko Kogyo Kk SENSITIVITY BOOSTER FOR ANTINEOPLASTIC AGENT.
US5516771A (en) * 1993-05-28 1996-05-14 Cephalon, Inc. Use of indolocarbazole derivatives to treat a pathological condition of the prostate
US5686444A (en) 1995-04-05 1997-11-11 Cephalon, Inc. Selected soluble esters of hydroxyl-containing indolocarbazoles
US5650407A (en) 1995-04-05 1997-07-22 Cephalon, Inc. Selected soluble esters of hydroxyl-containing indolocarbazoles

Also Published As

Publication number Publication date
JPH11504623A (ja) 1999-04-27
NO311575B1 (no) 2001-12-10
CA2215111A1 (en) 1996-10-10
EP0827505A1 (en) 1998-03-11
US5686444A (en) 1997-11-11
DE69624236D1 (de) 2002-11-14
NO974580L (no) 1997-11-27
HK1009370A1 (en) 1999-06-04
DE69624236T2 (de) 2003-09-11
EP0827505A4 (en) 1998-08-12
KR100429117B1 (ko) 2004-07-19
USRE38332E1 (en) 2003-11-25
WO1996031515A1 (en) 1996-10-10
DK0827505T3 (da) 2003-02-17
NZ306205A (en) 2000-01-28
BR9608044A (pt) 1999-01-26
ES2183941T3 (es) 2003-04-01
MX9707632A (es) 1998-06-30
PT827505E (pt) 2003-01-31
NO974580D0 (no) 1997-10-03
ATE225793T1 (de) 2002-10-15
EP0827505B1 (en) 2002-10-09
AU700658B2 (en) 1999-01-14
AU5440896A (en) 1996-10-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4885283A (en) Phosphinic acid derivatives
US6500802B1 (en) Peptidyl-2-amino-1-hydroxyalkanesulfonic acid cysteine protease inhibitors
JP2000501694A (ja) 複素環置換シクロペンタン化合物
MX2007007228A (es) Profarmaco de amida de gemcitabina, composiciones y uso del mismo.
CN107118249B (zh) 18β-甘草次酸衍生物及其应用
EP2021334B1 (en) Synthesis and uses of pyroglutamic acid derivatives
KR100429117B1 (ko) 선택된용해성히드록실함유인돌로카르바졸의에스테르
CN114555607B (zh) 一类靶向蛋白质水解通路的功能分子及其制备和应用
US5650407A (en) Selected soluble esters of hydroxyl-containing indolocarbazoles
JPH0892090A (ja) 医薬組成物
CN113461563B (zh) Nqo1激活型6-重氮基-5-氧代-l-正亮氨酸前药及其制备方法和应用
JPH06329678A (ja) 多環式化合物及びその製造方法
EP4265275A1 (en) Trop2 targeting antibody-drug conjugate, and preparation method and use therefor
WO2014197775A1 (en) Thiourea compounds and their use as inhibitors of sirt2 or sirt5
CN115417877B (zh) 组蛋白去乙酰化酶抑制剂及其制备和在制备抗癌症药物上的应用
JP2578044B2 (ja) フェニルアラニン−グリシン誘導体、その製造方法、及びその誘導体を含有する抗腫瘍剤
KR100437670B1 (ko) (s)-이성체형태의인돌린설포닐우레아유도체
MXPA97007632A (en) Soluble stereo selected from indolocarbazoles containing hidrox
HU204070B (en) Process for producing dipeptide derivatvies having renin inhibiting effect and pharmaceutical compositions comprising same
WO2015158306A1 (zh) 一类乙二醛酶i不可逆抑制剂及其制备方法和用途
CN116354892A (zh) 一类sirt5蛋白抑制剂及其用途
JPH0121815B2 (ko)
CN111100086A (zh) 1,3,4-噁二唑-2-环丁基类化合物及其制备方法
JPH0834788A (ja) ピロロベンゾカルバゾール誘導体及びその製造方法
JPH0834787A (ja) ピロロカルバゾール誘導体及びその製造方法

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant
G170 Re-publication after modification of scope of protection [patent]
FPAY Annual fee payment

Payment date: 20090409

Year of fee payment: 6

LAPS Lapse due to unpaid annual fee