KR19980083587A

KR19980083587A - 플루오르비닐기를 갖는 신규의 프로페노익 에스테르 및 아미드 유도체

Info

Publication number: KR19980083587A
Application number: KR1019970018957A
Authority: KR
Inventors: 박창식; 김범태; 박노균; 김흥태
Original assignee: 이서봉; 재단법인 한국화학연구소
Priority date: 1997-05-16
Filing date: 1997-05-16
Publication date: 1998-12-05
Also published as: KR100229440B1

Abstract

본 발명은 살균 활성이 강력하고 독성이 낮으며 약효의 지속성이 개선된 하기 일반식 (I)의 플루오르비닐기를 갖는 신규의 프로페노익 에스테르 및 아미드 유도체 및 이를 함유하는 살균제 조성물에 관한 것이다.

[화학식 1]

(상기 식에서, X는 CH 또는 N을 나타내고, Y는 O 또는 S를 나타내고, Z는 O 또는 NH를 나타내며, R은 수소, 탄소수 1-4개의 알킬 또는 알콕시, 페녹시, 할로겐으로 치환된 페닐 또는 나프틸기를 나타낸다.)

Description

플루오르비닐기를 갖는 신규의 프로페노익 에스테르 및 아미드 유도체

본 발명은 살균 활성을 갖는 플루오르비닐기를 가진 신규의 프로페노익 에스테르 및 아미드 유도체에 관한 것이다.

현재 사용되고 있는 살균제들은 우수한 살균효과에도 불구하고 같은 구조의 유사체가 지속적으로 개발, 사용되어 대상 균류들이 해당 농약에 대한 내성 발현이 문제화되고 있다.

이러한 문제점을 해결하기 위한 지속적인 노력의 일환으로 최근 담자균류의 균사에서 얻을 수 있고 고활성의 침투 이행성 살균 활성을 갖는 천연물 스트로빌루린(strobilurin)으로부터 구조 변환된 새로운 유형의 살균제인 프로페노익 에스테르 화합물들이 등장하게 되었다. 이러한 화합물은 예를 들면 제네카(Zeneca)사의 유럽 특허 제 472, 300호 및 미국 특허 4, 994, 495호, BASF사의 WO 94/19331호, 유럽 특허 제 581, 095호, 유럽 특허 제 422, 597호 및 미국 특허 5, 003, 101호, 시바가이기(Ciba-Geigy)사의 유럽 특허 제 460, 575호 등에 공지되어 있다. 그러나, 상기 특허에서 언급된 살균제들은 기존의 약제보다 약효가 약하거나 항균범위 등이 넓지 못하며, 약효의 지속성이 짧다는 점 등 개선의 여지가 있었다.

본 발명자들은 기존의 살균제 보다 살균 활성이 강력하고 독성이 낮으며 약효의 지속성이 개선된 경제성이 큰 화합물을 개발하기 위하여 플로오르비닐기를 도입한 새로운 프로페노익 에스테르 및 아미드계 화합물을 합성하였다.

따라서, 본 발명의 목적은 종래와는 달리 프로페노익 에스테르 및 아미드 유도체에 플로오로비닐기가 도입되어 새로운 구조를 나타내며, 제조 공정이 간편하고 살균력이 탁월할 뿐만 아니라 살균 스펙트럼이 넓어 여러 종류의 균류들을 동시에 구제할 수 있는 신규 프로페노익 에스테르 및 아미드 유도체를 제공하는 것이다.

본 발명의 목적은 또한 그러한 신규한 프로페노익 에스테르 및 아미드 유도체를 유효성분으로 하는 살균제 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명에 따라 하기 일반식 (I)로 표시되는 플루오르비닐기를 함유한 프로페노익 에스테르 및 아미드 유도체가 제공된다:

[화학식 1]

상기 일반식 (I)의 화합물 중에서 X가 CH 또는 N이고, Z가 산소이며, R이 Cl 또는 F로 치환된 페닐인 경우 가장 바람직하다.

본 발명에 따르면, 상기 일반식 (I)로 표시되는 신규 프로페노익 에스테르 및 아미드 유도체는 하기 반응식 1에 도시한 바와 같은 방법에 의해 제조할 수 있다.

[반응식 1]

(상기 반응식에서, X, Y, Z 및 R은 각각 상기에서 정의한 바와 같다)

구체적으로, 본 발명의 화합물 (I)은 하기 일반식(IV)의 브롬화물:

[화학식 2]

(상기식에서, X, Y 및 Z은 각각 상기에서 정의한 바와 같다)

을 염기 존재하에서 3-히드록시페놀(레소시놀)과 반응시켜 하기 일반식 (II)의 페놀성 화합물:

[화학식 3]

(상기식에서, X, Y 및 Z은 각각 상기에서 정의한 바와 같다)

을 제조하고, 이를 하기 일반식(III)의 불소화비닐계 화합물:

[화학식 4]

(상기 식에서, R은 각각 상기에서 정의한 바와 같다)

과 염기 존재하에 반응시킴으로써 고수율로 제조할 수 있다.

본 발명에서 출발 물질로서 사용되는 상기 일반식 (IV)의 브롬화물은 바람직하게는, X, Y, Z에 해당하는 원소에 따라 하기 구조식(IV-a)(X=CH, Y=O, Z=O), 하기 구조식 (IV-b)(X=N, Y=O, Z=O), 하기 구조식 (IV-c)(X=CH, Y=S, Z=O)의 화합물을 포함한다.

[화학식 5]

[화학식 6]

[화학식 7]

우선, 상기 구조식 (IV-a)로 표시되는 (2E)-메틸 3-메톡시-2-(2'-브로모메틸)페닐-2-프로페노에이트는 잘 알려진 공지된 방법에 의해 하기 반응식 2에 도시한 바와 같이 o-톨릴아세트산으로부터 에스테르화 및 포밀화, 메틸화, 브롬화 반응을 통해 합성할 수 있다[참고:Yamada, K. 등, Tetrahedron Lett, 2745(1973); Vyas, G. N. 등, Org. Syn. Coll. Vol 4, 836(1963); 및 Kalir, A., Org. Syn. Coll. Vol 5, 825(1973)].

[반응식 2]

상기 구조식 (IV-b)로 표시되는 (2E)-메틸 3-메톡시이미노-2-(2'-브로모메틸)페닐아세테이트는 잘 알려진 공지된 방법에 의해 하기 반응식 3에 도시한 바와 같이 o-브로모톨루엔으로부터 옥살산화 및 축합, 브롬화 반응을 통해 합성할 수 있다[참고: Rambaud, M. 등, Synthesis, 564(1988); 대한민국 특허 제88673호; 및 대한민국특허출원 제 94-5088호(PCT/KR95/00020)].

[반응식 3]

상기 구조식 (IV-c)로 표시되는 (2E)-메틸 3-티오메톡시-2-(2'-브로모메틸)페닐-2-프로페노에이트는 잘 알려진 공지된 방법에 의해 하기 반응식 4에 도시한 바와 같이 메틸 3-히드록시-2-(2'-메틸)페닐-2-프로페노에이트로부터 술포닐화, 친핵성치환 반응 및 브롬화 반응을 통해 합성할 수 있다 [참고: 대한민국 특허 출원 제 95-37559호].

[반응식 4]

또한, 본 발명에서 중간체로 생성되는 상기 일반식 (II)의 페놀성 화합물은 출발 물질로 사용된 상기 구조식 (IV-a), (IV-b) 및 (IV-c)의 화합물에 각각 상응하게, 하기 구조식(II-a)(X=CH, Y=O, Z=O), 하기 구조식 (II-b)(X=N, Y=O, Z=O) 및 하기 구조식 (II-c)(X=CH, Y=S, Z=O)의 화합물을 포함할 수 있다:

[화학식 8]

[화학식 9]

[화학식 10]

상기 구조식 (II-a), (II-b) 및 (II-c)의 화합물은, 상기 반응식 1에 도시한 바와 같이, 각각 상기 서술된 방법에 의해 제조된 상기 구조식 (IV-a), (IV-b) 및 (IV-c)의 화합물과 3-히드록시페놀(레소시놀)을 염기 존재하에 반응시킴으로써 고수율로 얻을 수 있다. 상기 반응에서 상기 구조식 (IV)의 화합물과 3-히드록시페놀(레소시놀)의 사용량은 등몰량이며, 염기는 이들 화합물에 대하여 2 당량을 사용하는 것이 바람직하다. 이때 사용할 수 있는 염기로는 수소화나트륨, t-부톡시화칼륨, 탄산나트륨, 탄산칼륨 등의 무기 염기 및 트리에틸아민, 피리딘 등의 유기염기가 사용가능하다. 또한, 용제로서 아세톤, 벤젠, 톨루엔, 테트라히드로푸란, 아세토니트릴, 디클로로메탄 또는 디메틸포름아미드 등을 사용할 수 있으며, 반응 온도는 실온에서부터 100℃ 이내의 온도가 적당하고, 반응의 종료 시점은 상기 구조식 (IV)의 화합물이 모두 소비된 때이며 이 시기는 박막 크로마토그래피 (TLC)에 의해 쉽게 확인할 수 있다.

본 발명의 목적은 화합물인 상기 일반식 (I)의 제조에 필요한 상기 일반식 (III)의 불소화비닐계 화합물은 하기 반응식 5에 도시한 바와 같이 할로겐화물을 원료로하여 그리니아 반응, 환원 반응, 할로겐화, 탈할로겐화 등 공지된 방법을 경유하여 합성할 수 있다 [참고: Herkes, F. E. 등, J. Org. Chem., 32, 1311(1967); 및 Nemeth, G. 등, J. Fluorine Chem., 76, 91(1996)].

[반응식 5]

(상기 식에서 R은 상기에서 정의한 바와 같다)

상기 서술된 제조 방법들에 의해 제조된 일반식 (II)의 페놀성 화합물과 일반식 (III)의 불소치환 비닐계 화합물을 상기 반응식 1에 도시한 바와 같이 염기 존재하에 반응시켜 본 발명의 목적 화합물인 상기 일반식 (I)의 화합물을 제조할 수 있다.

상기 반응에서 일반식 (II)의 화합물과 일반식 (III)의 화합물과의 사용량은 등몰량이며, 염기는 이들 화합물에 대하여 1-2 당량 사용하는 것이 바람직하다. 또한, 이 때 용제로서 벤젠, 톨루엔, 테트라히드로푸란, 아세토니트릴, 디클로메탄 또는 디메틸포름아미드 등을 사용할 수 있다. 사용가능한 염기로는 수소화나트륨, t-부톡시화칼륨 등의 무기 염기 및 트리에틸 아민, 피리딘 등의 유기 염기가 있다. 반응 온도는 실온에서부터 100℃ 이내의 온도가 적당하며, 반응의 종료 시점은 반응물이 전부 소비된 때이며 이는 TLC 등에 의해 쉽게 확인할 수 있다.

본 발명의 목적 화합물인 상기 일반식 (I)의 화합물은 분자내의 두곳에 이중 결합을 가지고 있으며 따라서 치환기 Y가 이중 결합에 대하여 어떠한 입체적 배치를 갖는냐에 따라, 또한 불소와 수소가 이중 결합에 대하여 어떠한 입체적 배치를 갖느냐에 따라, 이론적으로 각각 하기 식(I-a), (I-b), (I-c) 및 (I-d)의 트란스, 트란스(E, E) 이성체, 트란스, 시스(E,Z) 이성체, 시스, 트란스(Z, E) 이성체 및 시스, 시스(Z, Z) 이성체의 네가지 이성질체가 존재할 수 있다:

[화학식 11]

[화학식 12]

[화학식 13]

[화학식 14]

(상기 식에서 X, Y, Z 및 R은 각각 상기에서 정의한 바와 같다)

상기 일반식 (I)의 화합물을 제조하는데 있어서, 상기 일반식 (IV)의 브롬화물의 제조시 생성되는 이성질체를 정제하지 않고 혼합물 상태로 원료로서 사용할 경우 트란스, 트란스(E, E) 이성체(I-a)와 트란스, 시스(E,Z) 이성체(I-b)를 주생성물로 하고 부생성물로서 시스, 트란스(Z, E) 이성체 (I-c)와 시스, 시스(Z, Z) 이성체(I-d)를 포함하는 혼합생성물을 얻을 수 있다.

그러나, 본 발명에서는, 상기 일반식 (I)의 화합물 가운데 X=CH, Y=O, Z=O인 화합물은 합성 중간체인 메틸 3-메톡시-2-(2'-메틸)페닐-2-프로페노에이트(IV-4a)의 합성시 (반응식 2 참조) 생성되는 이성질체 가운데 트란스 이성질체만을 분리하여 다음 반응에 사용하였으며, 또한 X=N, Y=O, Z=O인 일반식 (I)의 화합물은 합성 중간체인 2-메톡시이미노-2-(2'-메틸)페닐아세테이트 (IV-3b)의 합성시 (반응식 3 참조) 액상과 고상의 두가지 이성질체가 1:1 로 생성되나 고상의 이성질체를 X-선결정법으로 구조결정한 결과 트란스 이성질체임이 밝혀져 이들 이성질체만을 분리하여 다음 반응에 사용하였으며, 상기 일반식 (I)의 화합물 가운데 X=CH, Y=S, Z=O인 화합물은 합성 중간체인 메틸 3-티오메톡시-2-(2'-메틸)페닐-2-프로페노에이트 (IV-3c)의 합성시 (반응식 4 참조) 생성되는 이성질체 가운데 트란스 이성질체가 주생성물로 얻어져 이를 분리정제하여 다음 반응에 사용함으로써, 본 발명의 최종 생성물은, 상기 트란스 이성질체와 불소화비닐계 화합물(III)과의 반응으로부터 생성되는 E, E-이성질체 (I-a)와 E, Z-이성질체 (I-b)의 두가지 이성질체의 혼합물로서 얻어지며, 이들 이성질체는¹H-NMR 분석 결과 비닐기에 치환된 수소의 화학적 이동(chemical shift) 및 수소와 불소의 커플링 상수(coupling constant)에 의해 확인되었다. 즉, E, E-이성질체 (I-a)의 경우 비닐기에 치환된 수소는 5.5 내지 5.8 ppm 위치에 5 내지 6 Hz 의 커플링 상수를 가지는 이중선으로 나타나며, E, Z-체 (I-b)의 경우 비닐기에 치환된 수소는 5.0 내지 5.4 ppm 위치에 약 30 Hz의 커플링 상수를 가지는 이중선으로 나타나는 것을 확인하였다. 한편, E, E-체(I-a)와 E, Z-(I-b)의 비율은 약 3.5:1로서¹H-NMR 상의 H 적분치로 계산되어 진다.

결국 본 발명의 제조방법에 의해 제조된 상기 일반식 (I)의 화합물은 실제로 E, E-체 (I-a)를 주생성물로 하고 E, Z-체 (I-b)가 부생성물인 혼합물로서 얻어진다.

또한, 본 발명에 따르면, 일반식 (I)에서 Z가 NH인 프로페노익 아미드 유도체는 일반식 (I)에서 Z가 O인 프로페노익 에스테르를 아민과 통상적인 방법에 의해 반응시킴으로써 얻을 수 있다.

예를 들면, 프로페노익 에스테르 화합물을 메탄올과 같은 알콜 중에서 메틸아민과 같은 알킬 아민과 반응시켜 프로페노익 아미드 화합물을 합성할 수 있으며, 아민은 상기 에스테르 화합물에 대하여 과량 사용하는 것이 바람직하다. 또한, 이때 사용될 수 있는 용제로는 메탄올을 비롯한 알콜류외에 아세토니트릴, 디클로로메탄 또는 디메틸포름아미드 등이 포함되며, 반응에 사용할 수 있는 아민류로는 메틸아민 및 1급 알킬아민이 포함될 수 있으며, 이로써 다양한 아미드를 제조할 수 있다. 반응 온도는 실온에서부터 용제의 비점 이내의 온도가 적당하다.

한편, 본 발명은 상기 일반식 (I)의 플로오르비닐기를 갖는 신규의 프로페노익 에스테르 및 아미드 화합물을 유효 성분으로 하는 살균제 조성물을 제공한다. 본 발명에 따른 조성물은 우선 1 종 이상의 상기 일반식 (I)의 화합물을 적당한 담체, 희석제와 혼합하여 적당한 제형, 예를 들면, 유제, 수화제, 분제, 입제 등의 형태로 조제하여 사용할 수 있는데, 이때 유효 성분의 함유 비율은 예를 들어 그 조제가 유제나 수화제인 경우에는 1-90- 중량%, 분제일 경우에는 0.1-10 중량%, 그리고 입제인 경우에는 1-30 중량%로 하는 것이 바람직하지만, 그 조제의 사용 목적에 따라 다소의 변화도 가능하다.

본 발명에 따른 조성물에 사용하기에 적당한 담체는 액체 담체 및 고체 담체가 사용가능하다. 액체 담체로는 물, 알콜류(메탄올 등 1가 알콜, 에틸렌 글리콜 등 2가 알콜, 글리세린 등 3가 알콜), 케톤류(아세톤, 메틸에틸케톤 등), 에테르류(디옥산, 테트라히드로푸란, 셀로솔브 등), 지방족 탄화수소류(가솔린, 케로센 등), 할로겐화 탄화수소류(클로로포름, 사염화탄소 등), 산 아미드 류(디메틸포름 아미드 등), 에스테르류(에틸 아세테트, 부틸 아세테이트, 지방산 글리세린 에스테르 등), 아세토니트릴 등이 있으며 본 발명에서는 이들을 단독으로 또는 2 종 이상 혼합하여 사용할 수 있다. 또한 고체 담체로는 광물성 입자(카올린, 점도, 벤토나이트, 산성백토, 활석, 규석, 실리카, 모래 등), 식물성 분말(목본 등) 등의 기타 광물질 입자를 사용할 수 있다. 또한 본 발명의 조성물에는 유화제, 접착제, 분산제 또는 침윤제 등을 사용할 수 있는데, 예를 들면 지방산 소오다 폴리옥시 알킬에스테르류, 알킬 설포네이트류, 폴라에틸렌글리콜에스테르류 등과 같은 비이온성, 음이온성 또는 양이온성 계면활성제를 사용할 수 있다.

그 밖에도 본 발명의 조성물에는 다른 종류의 농화학적 활성 성분, 예를 들면 살충제, 제초제, 식물생장조절제, 살균제 등을 혼합하여 사용할 수 있고, 필요에 따라서는 비료 등을 함께 혼합하여 사용할 수도 있다.

이상과 같은 방법에 의해 제조된 본 발명의 목적 화합물인 상기 구조식 (I)의 플루오르비닐기를 갖는 신규 프로페노익 에스테르 및 아미드 유도체들의 제조 방법에 관하여 하기 제조실시예 및 실시예를 통하여 보다 상세히 설명한다.

본 발명에서 상기 입체이성질체 화합물 중 분리가 가능한 경우에는 분리하여 각각의 화합물에 대한 생리 활성을 평가하였으며, 분리할 수 없는 경우에는 혼합물 형태로 활성을 평가하였다.

제조 실시예 1: (2E)-메틸 3-메톡시-2-(2'-브로모메틸)페닐-2-프로페노에이트(IV-a)의 제조

제 1 단계: 메틸 o-톨릴아세테이트의 제조

o-톨릴아세테산(30.0g, 0.2mol)을 메탄올 (100ml)에 용해시킨 뒤 산 촉매로서 진한 황산(5ml)을 가하고, 생성 혼합물을 6 내지 12 시간 교반하며 가열시켰다. 반응액을 냉각시킨 뒤 용매를 감압하에 제거하고, 물로 2 내지 3회 세척한 후 에틸아세테이트로 추출하였다. 유기층을 건조시킨 뒤, 용매를 감압 하에 제거하고, 실리카겔 칼럼크로마토그래피 (용리제:n-헥산: 에틸 아세테이트=4:1)로 정제하여 무색 액상의 화합물로 메틸 o-톨릴아세테이트 32. 15g을 얻었다(수율 98%).

¹H-NMR(CDCl₃, TMS)(ppm): 7.21-7.01(m, 4H), 3.61(s, 3H), 3.60(s, 2H), 2.35(s, 3H)

MS(m/e): 164 (M^＋，42), 133(100), 31(82)

제 2 단계: 메틸 3-히드록시-2-(2'-메틸)페닐-2-프로페노에이트의 제조

상기 제 1 단계에서 얻은 메틸 o-톨릴아세테이트(24, 6g, 0.15mol)을 메톡시화 나트륨 (24, 3g, 0.45mol)과 혼합한 뒤, 톨루엔(300ml)을 가하고, 냉각하에 포름산메틸(28, 8g, 0.45mol)을 30분 내지 1시간에 걸쳐 적가하며 교반하였다. 반응액을 상온에서 12 시간 교반시킨 뒤 물로 2 내지 3회 추출하였다. 수층을 진한 염산용액으로 산성화한 뒤에 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 건조시킨 뒤 용매를 감압 제거하고 실리카겔 칼럼크로마토그래피(용리제: n-헥산:에틸 아세테이트=9:1)로 정제하여 무색 액상의 화합물로 메틸 3-히드록시-2-(2'-메틸)페닐-2-프로페노에이트 27. 36g을 얻었다(수율 95%).

¹H-NMR(CDCl₃, TMS)(ppm): 11.92(d, 1H), 7.32-7.01(m, 4H), 3.71(s, 3H), 2.21(s, 3H)

MS(m/e): 192 (M^＋，26), 160(52), 132(48), 84(100)

제 3 단계: 메틸 3-메톡시-2-(2'-메틸)페닐-2-프로페노에이트의 제조

상기 제 2 단계에서 얻은 메틸 3-메톡시-2-(2'-메틸)페닐-2-프로페노에이트(19.2g, 0.1mol)를 디메틸설페이트(15.12g, 0.12mol)와 탄산칼륨(13.82g, 0.1mol)을 아세톤(200ml)과 혼합한 뒤 반응액을 12시간 교반하며 가열시켰다. 용매를 제거하고 에틸 에세테이트로 추출하였다. 유기층을 건조시킨 뒤 용매를 감압제거하고 실리카겔 칼럼크로마토그래피(용리제: n-헥산:에틸 아세테이트=4:1)로 정제하여 무색 액상의 화합물로 메틸 3-히드록시-2-(2'-메틸)페닐-2-프로페노에이트 17.1g을 얻었다(수율 83%).

생성물은 두가지 이성질체의 혼합물로서 이를 분리한 결과 성분비는 각각 E(트란스) 이성체 (upper spot) 82%, Z (시스) 이성체(down spot) 18%로 E체가 주생성물로 얻어졌으며, E체만을 분리하여 다음 단계에 사용하였다.

E체(upper spot): 무색 액상의 화합물, 수율 82%

¹H-NMR(CDCl₃, TMS)(ppm): 7.51(s, 1H), 7.35-6.98(m, 4H), 3.79(s, 3H), 3.68(s, 3H), 2.21(s, 3H)

MS(m/e): 206 (M^＋，10), 176(73), 117(100), 77(57)

Z체(down spot): 무색 액상의 화합물, 수율 18%

¹H-NMR(CDCl₃, TMS)(ppm): 7.34-6.98(m, 4H), 6.50(s, 1H), 3.85(s, 3H), 3.68(s, 3H), 2.21(s, 3H)

MS(m/e): 206 (M^＋，8), 176(100), 117(92), 77(30)

제 4 단계: (2E)-메틸 3-메톡시-2-(2'-브로모메틸)페닐-2-프로페노에이트(IV-a)의 제조

상기 제 3 단계에서 분리하여 얻은 (2E)-메틸 3-메톡시-2-(2'-메틸)페닐-2-프로페노에이트(18.54g, 0.09mol)과 N-브로모숙신미이드(NBS, 16.0g, 0.09mol)을 사염화탄소(100ml)와 혼합한 뒤 반응액에 라디칼 개시제로 2,2'-아조비스이소부티로니트릴(AIBN, 0.16g, 1mmol)을 가하고 12 시간 교반하면서 가열시켰다. 반응액을 냉각시켜 숙신이미드를 여과하여 제거하고, 용매를 감압 하에 제거하여 얻은 유상의 생성물을 실리카겔 칼럼크로마토그래피(용리제: n-헥산:에틸 아세테이트=4:1)로 정제하여 무색 고상의 화합물로서 (2E)-메틸 3 메톡시-2-(2'-브로모메틸)페닐-2-프로페노에이트 21.73g을 얻었다(수율 85%, 융점: 64-65℃)

¹H-NMR(CDCl₃, TMS)(ppm): 7.63(s, 1H), 7.51-7.09(m, 4H), 4.40(s, 2H), 3.82(s, 3H), 3.69(s, 3H)

MS(m/e): 284 (M^＋，10), 253(12), 205(21), 173(38), 145(100)

제조 실시예 2: (2E)-메틸 2-메톡시이미노-2-(2'-브로모메틸)페닐아세테이트(IV-b)의 제조

제 1 단계: 메틸 o-메틸벤조일포메이트의 제조

질소기류하에서 건조시킨 에테르와 마그네슘(5.1g, 0.21mol)을 혼합 교반하면서 o-브로모톨루엔(34.18g, 0.2mol)을 서서히 가하여 그리니아 시약을 제조하였다. 마그네슘과 o-브로모톨루엔이 완전히 반응한 것을 확인한 후에 반응액을 -78℃로 냉각하여 디메틸 옥살레이트(23.6g, 0.2mol)를 서서히 적가하였다. 0.5 시간 교반한 뒤 반응액을 얼음과 혼합하고, 20% 염산 수용액으로 산성화한 후 에테르로 추출하였다. 유기층을 물로 2-3회 세척하여 건조시킨 뒤 용매를 감압 제거하고 실리카겔 칼럼크로마토그래피 (용리제: n-헥산:에틸 아세테이트=9:1)로 정제하여 무색 액상의 화합물로 메틸 o-메틸벤조일포메이트 24.2g을 얻었다(수율 68%)

¹H-NMR(CDCl₃, TMS)(ppm): 7.88-7.01(m, 4H), 3.98(s, 3H), 2.65(s, 3H)

MS(m/e): 178 (M^＋，21), 119(100), 91(71), 65(37)

제 2 단계: 2-메톡시이미노-2-(2'-메틸)페닐아세테이트의 제조

o-메틸히드록실아민 염산염(8.35g, 0.1mol)과 피리딘(8.1ml 0.1mol)을 메틸알콜(100ml)와 혼합한 뒤 상기 제 1 단계에서 얻은 메틸 o-메틸벤조일포메이트(17.8g, 0.1mol)를 가하고 12시간 교반하며 가열시켰다. 반응액을 감압 하에 건조한 뒤 물과 혼합하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 건조시킨 뒤 용매를 감압 하에 제거하고 실리카겔 칼럼크로마토그래피(용리제: n-헥산:에틸 아세테이트=4:1)로 정제하여 무색 액상의 화합물로서 2-메톡시이미노-2-(2'-메틸)페닐아세테이트 19.04g을 얻었다(수율 92%).

생성물은 두가지 이성질체의 혼합물로서 이를 분리한 결과 성분비는 각각 액상의 생성물(upper spot) 50%, 고상의 생성물(down spot) 50%로 1:1의 비율로 얻어졌으며, 이를 분리하여 고상의 생성물만을 n-헥산으로 재결정하여 융점 63 내지 64℃의 생성물을 X-선 결정법으로 구조결정한 결과 E체 임을 확인하였다. 이후의 반응단계에서는 E체만 사용하였다.

Z체(upper spot): 무색 액상의 화합물

¹H-NMR(CDCl₃, TMS)(ppm): 7.41-7.15(m, 4H), 4.01(s, 3H), 3.85(s, 3H), 2.45(s, 3H)

MS(m/e): 206 (M^＋，8), 176(41), 116(100), 89(62)

E체(down spot): 무색 고상의 화합물

¹H-NMR(CDCl₃, TMS)(ppm): 7.38-7.05(m, 4H), 4.04(s, 3H), 3.85(s, 3H), 2.19(s, 3H)

MS(m/e): 207 (M^＋，11), 176(82), 116(100), 89(70)

제 3 단계: (2E)-메틸 2-메톡시이미노-2-(2'-브로모메틸)페닐아세테이트(IV-b)의 제조

상기 제 2 단계에서 분리하여 얻은 (2E)-메틸 3-메톡시이미노-2-(2'-메틸)페닐 아세테이트(9.0g, 0.0435mol)과 N-브로모숙신이미드(NBS, 7.74g, 0.0435mol)을 사염화탄소(50ml)와 혼합한 뒤 반응액에 라디칼 개시제로 2,2'-아조비스이소부티로니트릴(AIBN, 0.16g, 1mmol)을 가하고 12 시간 교반하며 가열시켰다. 반응액을 냉각시키고 숙신이미드를 여과하여 제거하고 용매를 감압 하에 제거하여 얻은 유상의 생성물을 실리카겔 칼럼크로마토그래피(용리제: n-헥산:에틸 아세테이트=4:1)로 정제하여 무색 액상의 화합물로서 (2E)-메틸 2-메톡시이미노-2-(2'-브로모메틸)페닐아세테이트 11.08g을 얻었다(수율 90%)

¹H-NMR(CDCl₃, TMS)(ppm): 7.62-7.01(m, 4H), 4.39(s, 3H), 4.04(s, 3H), 3.85(s, 3H)

MS(m/e): 284 (M^＋，46), 253(35), 175(100), 146(94), 116(78)

제조 실시예 3: (2E)-메틸 3-티오메톡시-2-(2'-브로모메틸)페닐-2-프로페노에이트(IV-c)의 제조

제 1 단계: 메틸 3-메탄술포닐-2-(2'-메틸)페닐-2-프로페노에이트의 제조

질소기류하에서 상기 제조예 1의 제 2 단계에서 얻은 메틸 3-히드록시-2-(2'-메틸)페닐-2-프로페노에이트(17g, 0.089mol)를 건조시킨 에틸아세테이트(400ml)에 용해시킨 후 트리에틸아민(14ml 0.1mol)을 가했다. 반응액에 메탄술포닐 클로리드(7.74ml 0.1mol)를 상온에서 30분에 걸쳐 적가하고 교반하였다. 1-3 시간 교반 후에 반응액을 물로 2-3회 세척하여 건조시킨 뒤 용매를 감압 제거하고 실리카겔 칼럼크로마토그래피 (용리제: n-헥산:에틸 아세테이트=4:1)로 정제하여 메틸 3-메탄술포닐-2-(2'-메틸)페닐-2-프로페노에이트 21.34g을 무색 액상의 화합물로서 얻었다 (수율 88.8%).

¹H-NMR(CDCl₃, TMS)(ppm): 8.01(s, 1H), 7.49-7.01(m, 4H), 3.81(s, 3H), 3.09(s, 3H), 2.23(s, 3H)

MS(m/e): 270 (M^＋，51), 174(100), 159(96), 103(89)

제 2 단계: 메틸 3-티오메톡시-2-(2'-메틸)페닐-2-프로페노에이트의 제조

티오메톡시화 나트륨(4.9g, 0.07mol)과 상기 제 1 단계에서 얻은 메틸 3-메탄술포닐-2-(2'-메틸)페닐-2-프로페노에이트(16.2g, 0.06mol)를 메탄올(150ml)과 혼합한 뒤 가하고 상온에서 4시간 교반하였다. 반응액을 감압 하에 건조시킨 뒤 물과 혼합하여 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 건조시킨 뒤 용매를 감압 제거하고 실리카겔 칼럼크로마토그래피(용리제: n-헥산:에틸 아세테이트=9:1)로 정제하여 무색 액상의 화합물로 메틸 3-티오메톡시-2-(2'-메틸)페닐-2-프로페노에이트 10.3g을 얻었다(수율 77.3%).

생성물은 두가지 이성질체의 혼합물로서 이를 분리한 결과 성분비는 각각 E체(upper spot) 90%, Z체(down spot) 8%로 E체가 주생성물로 얻어졌으며 E체만을 분리하여 다음 단계에 사용하였다.

E체(upper spot): 무색 액상의 화합물

¹H-NMR(CDCl₃, TMS)(ppm): 7.85(s, 1H), 7.38-6.91(m, 4H), 3.75(s, 3H), 2.35(s, 3H), 2.16(s, 3H)

MS(m/e): 222 (M^＋，20), 175(21), 147(36), 115(100)

제 3 단계: (2E)-메틸 3-티오메톡시-2-(2'-브로모메틸)페닐-2-프로페노에이트(IV-c)의 제조

상기 제 2 단계에서 분리하여 얻은 (2E)-메틸 3-티오메톡시-2-(2'-메틸)페닐-2-프로페노에이트 (10.2g, 0.046mol)과 N-브로모숙신이미드(NBS, 9.25g, 0.052mol)을 사염화탄소(150ml)와 혼합한 뒤 반응액에 라디칼 개시제로 2,2'-아조비스이소부티로니트릴(AIBN, 0.16g, 1mmol)을 가하고 12 시간 교반하며 가열시켰다. 반응액을 냉각시켜 숙신이미드를 여과하여 제거하고 용매를 감압 하에 제거하여 얻은 유상의 생성물을 실리카겔 칼럼크로마토그래피(용리제: n-헥산:에틸 아세테이트=9:1)로 정제하여 무색 액상의 화합물로서 (2E)-메틸 3-티오메톡시-2-(2'-브로모메틸)페닐-2-프로페노에이트 8.58g을 얻었다(수율 62.0%)

¹H-NMR(CDCl₃, TMS)(ppm): 7.98(s, 1H), 7.69-7.01(m, 4H), 4.45(s, 2H), 3.73(s, 3H), 2.45(s, 3H)

MS(m/e): 300 (M^＋，14), 161(100), 145(30), 115(79)

제조 실시예 4: (2E)-메틸 3-메톡시-2-{2'-(3-히드록시)페녹시메틸}페닐-2-프로페노에이트 (II-a)의 제조

제조 실시예 1 에서 생성된 (2E)-메틸 3-메톡시-2-(2'-브로모메틸)페닐-2-프로페노에이트 (IV-a) (5.7g, 0.02mol), 3-히드록시페놀(레소시놀)(2.2g, 0.02mol), 및 탄산칼륨(2.76g, 0.02mol)을 아세톤(100ml)과 혼합한 후 반응액을 24시간 가열환류시켰다. 용매를 제거하고 에틸아세테이트로 추출하였다. 유기층을 건조한 후 용매를 감압하에 제거하고 실리카겔 칼럼크로마토그래피(용리제: n-헥산:에틸 아세테이트=2:1)로 정제하여 표제 화합물 4.52g을 무색 액상의 화합물로서 얻었다(수율 72%).

¹H-NMR(CDCl₃, TMS)(ppm): 7.67(s, 1H), 7.65-6.21(m, 8H), 4.89(s, 2H), 3.78(s, 3H), 3.65(s, 3H)

MS(m/e): 314 (M^＋，21), 205(98), 174(28), 145(100)

제조 실시예 5: (E)-메틸 2-메톡시이미노-2-{2'-(3-히드록시)페녹시메틸}페닐아세테이트 (II-b)의 제조

제조 실시예 2 에서 생성된 (E)-메틸 3-메톡시이미노2-2(2'-브로모메틸)페닐아세테이트(IV-b) (5.66g, 0.02mol)를 출발물질로 사용하여 상기 제조실시예 4와 동일한 방법에 의해 표제 화합물 4.92g을 무색 액상의 화합물로 얻었다(수율 78%).

¹H-NMR(CDCl₃, TMS)(ppm): 7.54-7.01(m, 9H), 4.89(s, 3H), 4.01(s, 3H), 3.85(s, 3H)

MS(m/e): 315 (M^＋，28), 284(51), 206(86), 132(100), 116(89).

제조 실시예 6: (2E)-메틸 3-티오메톡시-2-{2'-(3-히드록시)페녹시메틸}페닐-2-프로페노에이트 (II-c)의 제조

제조 실시예 3 에서 생성된 (2E)-메틸 3-티오메톡시-2-(2'-브로모메틸)페닐-2-프로페노에이트(IV-c) (6.0g, 0.02mol)를 출발물질로 사용하여 상기 제조실시예 4와 동일한 방법에 의해 표제 화합물 3.23g을 무색 액상의 화합물로 얻었다(수율 49%).

¹H-NMR(CDCl₃, TMS)(ppm): 7.98(s, 1H), 7.71-6.28(m, 8H), 5.81(br, s, 2H), 4.89(s, 2H), 3.78(s, 3H), 2.35(s, 3H)

MS(m/e): 330 (M^＋，51), 221(77), 161(100), 145(22), 115(54)

제조 실시예 7: 2,2-디플루오르-4'-메톡시스티렌 (III)의 제조

제 1 단계: 2, 2, 2-트리플루오르메틸-4'-메톡시페닐케톤(III-1)의 제조

건조된 용기에 질소기류를 통과시키며 마그네슘(5.1g, 0.21mol)과 건조시킨 에테르 300ml를 가하고 p-브로모아니솔(37.4g, 0.2mol)을 서서히 적가하여 그리니아 시약을 제조하였다. 반응액을 -78℃로 냉각하에 에틸 트리플루오르아세테이트(28,3g, 0.2mol)를 적가하고 0.5-1 시간 교반하였다. 반응액을 얼음과 혼합하고 진한 염산을 산성화하여 에테르로 2-3회 추출하였다. 유기층을 건조시킨 뒤 용매를 감압 하에 제거하고 감압 증류하여 1 mmHg에서 61-62℃의 무색 유상의 생성물인 2, 2, 2-트리플루오르메틸-4'-메톡시페닐케톤 35.09g을 얻었다 (수율 86%).

¹H-NMR(CDCl₃, TMS)(ppm): 7.62-6.81(m, 4H), 3.86(s, 3H)

MS(m/e): 204 (M^＋，56), 135(100), 107(86), 92(66), 77(92)

제 2 단계: 1-히드록시-2, 2, 2-트리플루오르에틸-4'-메톡시벤젠(III-2)의 제조

상기 제 1 단계에서 생성된 2, 2, 2-트리플루오르메틸-4'-메톡시페닐케톤(14.28g, 0.07mol)을 메탄올(150ml)과 혼합한 후 수소화붕소나트륨 (1.32g, 0.035mol)을 30분에 걸쳐 적가하며 교반하였다. 반응액을 상온에서 1-2 시간 교반시킨 뒤 용매를 제거하고 에탈 아세테이트를 가하고 물로 2-3회 세척하였다. 유기층을 건조시킨 뒤 용매를 감압 하에 제거하고 실리카겔 칼럼크로마토그래피(용리제: n-헥산:에틸 아세테이트=4:1)로 정제하여 무색 액상의 화합물로 1-히드록시-2, 2, 2-트리플루오르메틸-4'-메톡시벤젠 14g을 얻었다(수율 97%).

¹H-NMR(CDCl₃, TMS)(ppm): 7.62-6.78(m, 4H), 4.92(q, 1H), 3.94(br. s, 3H), 3.86(s, 3H)

MS(m/e): 206 (M^＋，42), 191(62), 137(100), 107(26), 69(56)

제 3 단계: 1-클로로-2, 2, 2-트리플루오르에틸-4'-메톡시벤젠(III-3)의 제조

상기 제 2 단계에서 생성된 1-히드록시-2, 2, 2-트리플루오르메틸-4'-메톡시벤젠(14g, 0.068mol)과 티오닐클로리드(50g, 0.7mol)를 건조시킨 톨루엔(100ml)과 혼합한 뒤 반응액을 12시간 교반하며 가열시켰다. 반응액을 냉각하여 물로 세척한 후 얻은 유기층을 건조시킨 뒤 용매를 감압 하에 제거하고 실리카겔 칼럼크로마토그래피(용리제: n-헥산)로 정제하여 무색 액상의 화합물로 1-클로로-2, 2, 2-트리플루오르에틸-4'-메톡시벤젠 12g을 얻었다(수율 79%).

¹H-NMR(CDCl₃, TMS)(ppm): 7.62-6.81(m, 4H), 5.01(q, 1H), 3.86(s, 3H)

MS(m/e): 224 (M^＋，23), 189(100), 158(79), 120(56), 69(43)

제 4 단계: 2, 2-디플루오르-4'-메톡시스티렌(III)의 제조

상기 제 3 단계에서 생성된 1-클로로-2,2, 2-트리플루오르에틸-4'-메톡시벤젠(11.2g, 0.05mol)을 건조시킨 테트라히드로푸란(THF, 5 0ml)과 혼합한 뒤 활성화 아연(Zn, 3.27g, 0.05mol)을 가하고, 생생혼합물을 교반하면서 12시간 가열 환류시켰다. 반응액을 냉각하여 생성된 염을 여과하여 제거하고, 용매를 감압 제거시켜 얻은 유상의 생성물을 실리카겔 칼럼크로마토그래피(용리제: n-헥산)로 정제하여 무색 액상의 화합물로서 2, 2-디플루오르-4'-메톡시스티렌 6.8g을 얻었다(수율 80%).

¹H-NMR(CDCl₃, TMS)(ppm): 7.51-6.69(m, 4H), 5.21(dd, 1H, J=24Hz, J=4Hz), 3.86(s, 3H)

MS(m/e): 170 (M^＋，100), 155(68), 127(92), 84(21)

제조 실시예 8 내지 20

상기 제조 실시예 7에 기재한 바와 유사하게 실시하여 본 발명에 사용된 불소화비닐계 화합물(III)을 제조하였으며, 이들의 제조에 있어서 각각의 단계별 중간체 및 최종 생성물의 분석 결과를 하기 표 1 에 도시하였다.

[표 1a]

[표 1b]

[표 1c]

[표 1d]

실시예 1: (2E)-메틸 제조

건조시킨 용기중에 질소 가스를 통과시키며 상기 제조실시예 4에서 얻은 (2E)-메틸 3-메톡시-2-{2'-(3-히드록시)페녹시메틸}페닐-2-프로페노에이트(314mg, 1mmol)을 아세토니트릴(10mol)과 혼합한 뒤 수소화나트륨(40mg, 1mol, 60% 광유분산액)를 가하였다. 반응액을 30분간 교반시킨 후에 상기 제조실시예 7에서 얻은 2,2-디플루오르스티렌(140mg, 1mmol)를 서서히 가하고 2-4 시간 교반하며 가열시켰다. 반응액을 물과 혼합하여 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 건조시킨 뒤 용매를 감압 하에 제거하고 실리카겔 칼럼크로마토그래피(용리제: n-헥산:에틸 아세테이트=4:1)로 정제하여 무색 액상의 표제 화합물(화합물 1) 400mg을 얻었다(수율 92%).

¹H-NMR(CDCl₃, TMS)(ppm): 7.68(s, 1H), 7.62-6.62(m, 13H), 5.68(d, 1H), 4.98(s, 2H), 3.78(s, 3H), 3.69(s, 3H)

MS(m/e): 434 (M^＋，13), 205(87), 145(100)

실시예 2: (2E)-N-메틸 제조

상기 실시예 1에서 얻은 (2E)-메틸 0.5mmol)을 메탄올(5ml)과 혼합한 뒤 메틸 아민(2ml, 40% 수용액)을 가하였다. 12 시간 교반시킨 수에 용매를 감압 제거하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 건조시킨 뒤 용매를 감압 제거하고 실리카겔 칼럼크로마토그래피(용리제: n-헥산:에틸 아세테이트=4:1)로 정제하여 무색 액상의 표제 화합물(화합물 2) 206mg을 얻었다(수율 95%).

¹H-NMR(CDCl₃, TMS)(ppm): 8.12(br, 1H), 7.62-6.58(m, 14H), 5.62(d, 1H), 4.98(s, 2H), 3.69(s, 3H), 2.78(d, 3H)

MS(m/e): 433 (M^＋，6), 204(41), 144(100), 103(24)

실시예 3 내지 44

상기 제조 실시예 4 내지 20에서 제조한 화합물들을 사용하여 상기 실시예 1 및 2에 기재한 바와 유사하게 실시하여 하기 표 2 에 도시한 바와 같은 화합물들(화합물 3 내지 44)을 수득하였다.

[표 2a]

[표 2b]

[표 2c]

[표 2d]

[표 2e]

약효 시험

본 발명의 화합물 (I)의 식물 병원균에 대한 예방 효과 조사를 위하여, 10% 아세톤 용액에 본 발명 화합물을 녹인 후, 일정 크기의 여러가지 기주 식물에 50ml씩 엽면 살포하였다. 이때 용액에는 전착제(Tween-20) 성분이 2250 ppm 농도가 되도록 첨가하였다(벼의 경우 500ppm). 약제가 살포된 식물을 실내 온도에서 24 시간 동안 방치하여 용매 및 물을 휘산시킨 뒤, 각기 하기 시험예에서 언급한 병원균을 접종하였다. 모든 실험은 2회 반복으로 실시하였다. 이때 약액의 1차 시험 농도(250ppm)에서 방제가가 90% 이상인 경우에는 그 농도를 낮추어 실험하여 2차 시험 농도(50ppm)에서 각각의 균류에 대한 방제효과를 측정하였다.

실시예 1 내지 44 에서 수득한 화합물 모두에 대해 상기 방제효과를 시험하였으며, 방제 효과는 사용한 화합물 각각의 식물 병원균에 대한 방제가(Control Value; C. V.)로서 나타내었고, 방제가는 하기 수식에 따라 구하였다.

[수학식 1]

방제가(%)=

대조구의 이병면적률과 처리구의 이병면적률은 한국 화학연구소의 식물병병반 면적률 조사기준표(조광연, 1989, 신규 농약 개발을 유한 스크리닝체제 확립, 한국화학 연구소 연구보고서)에 의해서 산출하였다.

시험예 1: 벼도열병(Rice Blast, RCB)에 대한 시험

병원균인 피리쿨라리아 오라이제 카바라(Pyricularia oryzae Cavara) KA301 균주를 쌀겨 한천배지(쌀겨 20g, 덱스트로스 10g, 아가 15g, 증류수 1ℓ)에 접종하여 26℃ 배양기에서 1 주간 배양하였다. 병원균이 자란 배지를 고무 쓸개로 배지표면을 긁어 기중 균자를 제거하고, 형광등이 켜진 선반(25℃-28℃)에서 48 시간 동안 배양하여 포자를 형성시켰다. 병균접종을 형성시킨 분생포자를 살균 증류수를 이용하여 일정 농도의 포자 현탁액(포자 농도 1×10⁶개 포자/ml)을 제조한 뒤 벼 도열병에 감수성인 낙동벼(3-4엽기)에 흘러내릴 정도로 충분히 분무 접종하였다. 접종된 벼는 습실상에서 암상태로 24 시간 놓아둔 뒤에 상대 습도 80% 이상이며 온도가 26±2℃인 항온 항습실로 옮겨 5일간 발병을 유도한 후 발병 면적률의 조사를 실시하였다. 병조사는 3-4엽기의 벼유묘에서 최상엽 바로 밑의 완전 전개된 잎에 형성된 병반 면적율을 조사하여 약제 처리하지 않은 표준 이병면적률 대비표에 준하여 조사하였다.

시험예 2: 벼잎집얼룩병(Rice Sheath Blight, RSB)에 대한 시험

적당한 양의 밀기울을 1 ℓ배양병에 넣고 멸균한 후 PDA 평판에서 3일간 자란 병원균인 라이족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani)AG-1의 아가 디스크(Agar Disc)를 접종한 후 27±1℃ 항온기에서 7일간 배양하였다. 병접종은 배양된 균사 덩어리를 적당하게 잘게 마쇄하여 2-3엽기의 낙동벼(5cm)가 자란 폿트에 고르게 접종하여 습실상(28±1℃)에서 5 일간 발병을 유도한 후 발병면적률 조사를 실시하였다. 병조사는 2-3엽기의 벼유묘의 잎집에 발명된 병반 면적율을 잎집면적에 대한 병반 면적이 차지하는 비율을 기준으로하여 작성한 표준이병면적률 대비표에 준하여 조사하였다.

시험예 3: 오이 잿빛 곰파이병(Cucumber Gray Mold Rot, CGM)에 대한 시험

오이 잿빛 곰팡이 병으로부터 분리한 보트라이티스 시너레아(Botrytis cinerea)를 감자 한천 배지(PEC)에 접종하고 25℃의 광암상태하에서 15 일간 배양하여 포자를 형성시켰다. 배지에 형성된 포자를 긁어 이를 가제로 걸러서 포자를 수확한 후 포자 농도가 1×10⁶개/ml가 되게 한 뒤 1 엽기 오이에 분무 접종하였다. 이를 20℃ 습실상에서 3일간 습실 처리한 후 본엽 1 엽의 병반 면적율을 조사하였다. 발병 조사는 오이의 잎에서 형성된 병반면적율을 조사하여 약제 처리하지 않은 표준이병면적률(대조구에 대한 방제가, Control Value; C. V.) 대비표에 준하여 조사하였다.

시험예 4: 토마토 역병(Tomato Late Blight, TLB)에 대한 시험

역병균(Phytophthora infestans)을 쥬스 한천(V-8 쥬스 200ml), CaCO₃4.5g, 한천 15g, 증류스 800ml) 배지에 올려놓고 20℃에서 16 시간 광처리와 8 시간 암처리하여 14일 배양한 후 포자를 수확하였다. 이때 플레이트에 살균 증류수를 넣고 흔들어서 유주자낭을 균총으로부터 떼어낸 후 4 겹 헝겊 조각을 사용하여 유주자낭만을 수확하였다. 수확한 유주자낭의 농도를 1×10⁵개/ml로 조정하였고, 이 접종원을 토마토 유묘에 분무 접종하여 20℃ 습실상에서 1일 동안 습실 처리한 후 20℃ 상대 습도 80% 이상의 항온 항습실로 옮겨 4일 동안 발병시킨 후 토마토 1 엽과 2엽의 병반 면적율(%)을 조사하였다. 발병조사는 토마토의 잎에 형성된 병반 면적율을 조사하여 약제 처리하지 않은 표준 이병면적률 대비표에 준하여 조사하였다.

시험예 5: 밀 붉은 녹병(Wheat Leaf Rust, WLR)에 대한 시험

병원균인 푹시니아 레콘디타(Puccinia recondita)는 실험실에서 식물체에 계대 배양하여 사용하였다. 균주의 계대 배양 및 약효 조사를 위하여 일회용 폿트(직경 6.5cm)에 15g 씩의 밀종자(은파밀)를 파종하여 온실에서 7 일간 재배한 1 엽기의 밀에 포자를 털어서 접종하였다. 접종한 1 엽기의 밀은 20℃의 습실 상에서 1 일간 습실 처리한 뒤에 상대 습도 70%이며 온도가 20℃인 항온 항습실로 옮겨 발병을 유도하고 접종 10일 후에 발병율을 조사하였다. 발병 조사는 밀의 잎에 형성된 병반 면적율을 조사하여 약제 처리하지 않은 표준이병면적률 대비표에 준하여 조사하였다.

시험예 6: 보리흰가루병(Barley Powdery Mildew, BPM)에 대한 시험

병원균인 에리시프 그라미니스(Erysiphe graminis)는 실험실에서 식물체에 계대배양하여 사용하였다. 균주의 계대 배양 및 약효 조사를 위하여 일회용 폿트(직경 6.5cm)에 15g씩의 보리종자(동보리 1호)를 파종하여 온실(25±5℃)에서 7 일간 재배한 1 엽기의 보리에 흰가루병 포자를 털어서 접종하였다. 접종한 보리를 상대 습도 50%이며 온도가 22-24℃인 항온 항습실로 옮겨 7일간 발병을 유도한 뒤 발병 면적률을 조사하였다. 발병조사는 보리의 잎에 형성된 병반 면적율을 조사하여 약제 처리하지 않은 표준이병면적률 대비표에 준하여 조사하였다.

상기의 시험예 1-6에서 1차 시험 농도 250ppm에서 90% 이상의 방제가를 나타낸 화합물들은 2차 시험 농도 50ppm에서 살균활성을 검정하였으며, 그 결과를 하기 표 3에 나타내었다.

표 3의 결과에서 알 수 있는 바와 같이 볼 발명에 따른 플루오르비닐기를 갖는 신규의 프로페노익 에스테르 및 아미드 화합물들(I)은 기존의 화합물에 비하여 표적 균주에 대한 방제 범위가 넓고 약효 역시 우수하고 바람직한 살균활성을 보여주고 있다. 특히 벼도열병, 벼잎집얼룩병, 밀녹병 및 보리흰가루병에 대하여는 50ppm의 농도에서도 탁월한 방제 효과를 나타내었다.

2차 시험 농도인 50ppm에서 90% 이상의 방제가를 나타낸 화합물들을 대상으로 보다 저농도인 10ppm의 농도에서 벼도열벙, 밀녹병 및 보리흰가루병에 대하여 살균활성을 검정한 결과를 표 4, 5 및 6에 각각 나타내었다.

[표 3a]

살균 활성 시험결과(처리 농도: 50ppm)

[표 3b]

살균 활성 시험결과(처리 농도: 50ppm)

[표 4]

벼도열병에 대한 살균활성 (처리농도: 10ppm)

[표 5]

밀녹병에 대한 살균활성 (처리농도: 10ppm)

[표 6]

보리흰가루병에 대한 살균활성 (처리농도: 10ppm)

상기 약효 시험 결과에서 알 수 있듯이, 본 발명에 따른 플루오르비닐기를 갖는 신규의 프로페노익 에스테르 및 아미드 유도체들은 낮은 농도에서도 우수한 살균 활성을 나타내며 항균범위가 매우 넓다.

Claims

하기 일반식 (I)의 플루오르비닐기를 갖는 신규의 프로페노익 에스테르 또는 아미드 유도체:

[화학식 1]

상기 식에서 X는 CH 또는 N을 나타내고, Y는 O 또는 S를 나타내고, Z는 O 또는 NH를 나타내며, R은 수소, 탄소수 1 내지 4개의 알킬 또는 알콕시, 페녹시, 할로겐으로 치환된 페닐 또는 나프틸기를 나타낸다.
제 1 항에 있어서,

상기 일반식 (I)에서 X가 CH 또는 N이고, Z가 산소이며, R이 Cl 또는 F로 치환된 페닐인 프로페노익 에스테르 또는 아미드 유도체.
하기 일반식 (IV)의 브롬화물을 염기 존재하에서 3-히드록시페놀과 반응시켜 하기 일반식 (II)페놀성 화합물을 얻고, 이를 하기 일반식 (III)의 불소화비닐계 화합물과 염기 존재하에 반응시킴을 포함하는 제 1 항에 따른 일반식 (I)의 화합물의 제조 방법:

[화학식 2]

[화학식 3]

[화학식 4]

상기식에서, X, Y, Z 및 R은 각각 제 1 항에서 정의한 바와 같다.
제 1 항에 따른 일반식 (I)의 플루오르비닐기를 갖는 프로페노익 에스테르 또는 아미드 유도체 유효량 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 살균제 조성물.