KR102510870B1 - 펩타이드를 포함하는 육모촉진용 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 카퍼트리펩타이드-1 및 아세틸헥사펩타이드-8을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물을 제공한다.

Description

펩타이드를 포함하는 육모촉진용 조성물{Composition for promoting hair growth containing peptides}
본 발명은 펩타이드를 포함하는 육모촉진용 조성물에 관한 것이다.
대부분의 동물 세포는 다양한 크기와 성분을 갖는 세포 내 기원의 세포외 소낭(extracellular vesicle)을 분비할 수 있는 능력을 가지고 있으며, 이러한 세포외 소낭은 혈액, 소변, 타액 및 세포 배양액을 포함하는 모든 생물학적 유체(biological fluids)에서 발견된다(Loyer X, Vion AC, Tedgui A, Boulanger CM. Microvesicles as cell-cell messengers in cardiovascular diseases. Circ Res 2014;114:345-53)(Ohno S, Ishikawa A, Kuroda M. Roles of exosomes and microvesicles in disease pathogenesis. Adv Drug Deliv Rev 2013;65:398-401).
세포외 소낭은 작게는 직경 약 20 nm부터 크게는 직경 약 5 ㎛의 크기를 갖는 막 구조 소낭체로서, 그 크기와 구성에서 이질성이 있고, 엑소좀(exosome, 약 30~100 nm), 엑토좀(ectosome), 마이크로소낭(microvesicle, 약 100~1,000 nm), 마이크로입자(microparticle) 등의 다수의 상이한 종을 포함한다.
상기 세포외 소낭의 상이한 유형은 이의 기원, 직경, 수크로즈에서의 밀도, 형상, 침강 속도, 지질 조성물, 단백질 마커 또는 분비 방식(즉, 신호(유도성)에 의한 것인지 자발적(구성적)인 것인지) 등에 기초하여 구별된다.
예컨대, 마이크로소낭은 약 100 내지 1,000 nm의 불규칙한 형상을 갖는 막 소낭으로서 원형질막 바깥쪽을 향하여 출아(원형질막에서 기원)되며, 인테그린, 셀렉틴, CD40 리간드를 포함하는 마커, 포스파티딜세린을 포함하는 지질을 갖는 것으로 알려져 있다. 한편, 엑소좀은 약 30 내지 100 nm(<200 nm)의 컵 형상을 갖는 가장 작은 막소낭으로서 후기 엔도좀의 안쪽에서 출아(엔도좀에서 기원)되며, CD63, CD9의 테트라스파닌, TSG101, ESCRT을 포함하는 마커, 콜레스테롤, 스핑고미엘린, 세라마이드, 포스파티딜세린을 포함하는 지질을 갖는 것으로 알려져 있다.
세포외 소낭은 분비하는 기원 세포(공여 세포)의 상태를 반영하며, 어떤 세포에서 분비되었는가에 따라 다양한 생물학적 활성을 나타내고, 세포들 사이에 유전 물질과 단백질을 옮기면서 세포 간 상호작용에 중요한 역할을 한다.
식물에서도 원형질막과 다포체의 융합은 세포외 공간으로 작은 소낭들의 방출을 야기하며, 다양한 식물 종의 다양한 식물 세포에서 다포체 내부 소낭이 세포외 공간에서 관찰된다(Marchant R, Peat A, Banbury GH. The ultrastructural basis of hyphal growth. New Phytol. 1967;66:623-629)(Halperin W, Jensen WA. Ultrastructural changes during growth and embryogenesis in carrot cell cultures. J Ultrastruct Res. 1967;18:428-443)(Marchant R, Robards AW. Membrane systems associated with the plasmalemma of plant cells. Ann Bot. 1968;32:457-471). 또한, 최근 연구에서 식물 세포에서 유래된 엑소좀-유사 나노 입자(exosome-like nanoparticle)는 포유동물 세포에서 유래된 엑소좀과 나노 크기의 소낭 구조 및 나노 입자 조성물이 유사한 것으로 보고된 바 있다(An, Q, Huckelhoven, R, Kogel, KH and van Bel, AJ (2006). Multivesicular bodies participate in a cell wall-associated defence response in barley leaves attacked by the pathogenic powdery mildew fungus. Cell Microbiol 8: 1009-1019)(Regente, M, Pinedo, M, Elizalde, M and de la Canal, L (2012). Apoplastic exosomelike vesicles: a new way of protein secretion in plants? Plant Signal Behav 7: 544-546).
종래 엑소좀은 주로 바이오마커로 사용되어 왔고, 엑소좀 자체의 효능을 이용하여 엑소좀을 특정 용도로 사용하는 기술은 아직 개발이 미흡한 실정이다. 특히, 식물 세포에서 유래된 엑소좀 유사의 막 구조 소낭체의 특정 용도에 대해서는 알려진 바가 거의 없고, 또한, 두피에 효과적으로 침투하는 저분자 펩타이드가 두피 및 모발에 작용하는 것에 대해 자세히 살펴볼 필요가 있다.
본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위해 안출된 것으로서, 본 발명의 목적은 생체 안정성이 우수하며, 발모 촉진 및 피부 상태 개선 효과가 우수한 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 과제는 이상에서 언급한 과제들로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명은
카퍼트리펩타이드-1 및 아세틸헥사펩타이드-8을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물을 제공한다.
또한, 상기 조성물은 인삼 유래 엑소좀 1-5 중량부, 소자 유래 엑소좀 1-5 중량부, 카퍼트리펩타이드-1 0.3-3 중량부, 아세틸헥사펩타이드-8 0.3-3 중량부, 옥타펩타이드 0.3-3 중량부, 히알루론산 3-7 중량부, 과라나씨 오일 0.5-4 중량부, 바실씨 오일 0.5-4 중량부, 미강 발효추출물 0.5-4 중량부, 검은깨 추출물 0.5-4 중량부, 잎새버섯 발효분말 0.5-4 중량부, 글리세린 1-5 중량부, 스쿠알란 0.5-4 중량부, 살리실릭애씨드 0.5-4 중량부, 리모넨 0.5-4 중량부, 리날룰 0.5-4 중량부, 이소퀘르시트린 0.5-4 중량부, 나이아신아마이드 0.1-1 중량부, 폴리글리세릴-6스테아레이트 0.1-1 중량부, 폴리글리세릴-2스테아레이트 0.1-1 중량부, 프로필렌글라이콜 2-6 중량부, 세테아릴알코올 1-5 중량부, 글리세릴스테아레이트 0.5-4 중량부, 스테아릴알코올 0.1-1 중량부, 프로판다이올 1-5 중량부, 카보머 3-7 중량부, 알란토인 0.1-1 중량부, 만니톨 0.1-1 중량부, 트로메타민 0.1-1 중량부, 폴리글리세릴-6베헤네이트 0.1-1 중량부 및 정제수 38-42 중량부를 포함하는 것을 특징으로 한다.
또한, 본 발명은
인삼을 세척하여 18-22℃의 온도에서 140-160 MPa의 압력으로 3-7분 동안 전처리하는 단계; 전처리된 인삼을 착즙하여 인삼 착즙액을 제조하는 단계; 상기 인삼 착즙액을 원심분리하여 엑소좀을 포함하는 상층액을 수득하는 단계; 상기 엑소좀을 포함하는 상층액을 동결건조하여 동결건조물을 제조하는 단계; 상기 동결건조물에 폴리에틸렌글리콜/덱스트란을 사용하여 수성 2상계를 형성하는 단계; 및 상기 수성 2상계 내 엑소좀이 농축된 하층액을 수득하는 단계;를 포함하는 인삼 유래 엑소좀을 제조하는 단계;
소자를 세척하여 28-32℃의 온도에서 290-310 MPa의 압력으로 1-5분 동안 전처리하는 단계; 전처리된 소자를 착즙하여 소자 착즙액을 제조하는 단계; 상기 소자 착즙액을 원심분리하여 엑소좀을 포함하는 상층액을 수득하는 단계; 상기 엑소좀을 포함하는 상층액을 동결건조하여 동결건조물을 제조하는 단계; 상기 동결건조물에 폴리에틸렌글리콜/덱스트란을 사용하여 수성 2상계를 형성하는 단계; 및 상기 수성 2상계 내 엑소좀이 농축된 하층액을 수득하는 단계;를 포함하는 소자 유래 엑소좀을 제조하는 단계;
과라나씨 및 바실씨를 분쇄하여 과라나씨분말 및 바실씨분말을 준비하는 단계; 상기 과라나씨분말 및 바실씨분말을 1:1의 중량비율로 혼합하여 제1 혼합분말을 준비하는 단계; 상기 제1 혼합분말 및 헥산을 혼합하고, 33-37℃의 온도에서 2-4일 동안 교반하여 추출물을 제조하는 단계; 및 상기 추출물을 여과하고 감압농축한 후 원심분리하여 이물질을 제거한 후, 감압증류하는 단계;를 포함하는 과라나씨 오일 및 바실씨 오일을 제조하는 단계;
미강을 끓인 물로 세척하고, 분쇄하여 미강분말을 준비하는 단계; 미강분말 및 물을 혼합하여 제1 혼합물을 제조하고, 상기 제1 혼합물에 효모균으로 사카로미케스 케레비시아이(Saccharomyces cerevisiae)를 첨가한 후 33-37℃의 온도에서 22-26시간 동안 발효시키는 단계; 발효된 제1 혼합물 및 부틸렌글리콜을 혼합하고, 28-32℃의 온도에서 6-8일 동안 교반하여 추출물을 제조하는 단계; 및 상기 추출물을 여과 및 감압농축한 후 동결건조하는 단계;를 포함하는 미강 발효추출물을 제조하는 단계;
검은깨를 세척하고 동결건조시킨 후 믹서기로 갈아서 검은깨 분말을 준비하는 단계; 준비된 검은깨 분말을 아세톤 및 에탄올을 1:1의 부피비로 혼합한 혼합 용매와 1:9의 중량비율로 혼합하고, 28-32℃의 온도에서 22-26시간 동안 추출하여 추출액을 제조하는 단계; 및 상기 추출액을 여과지로 여과하고, 여과된 여과액을 영하 50℃에서 감압농축 및 동결건조하는 단계;를 포함하는 검은깨 추출물을 제조하는 단계;
잎새버섯을 세척한 후 멸균기에 넣어 123-127℃의 온도로 멸균하는 단계; 멸균된 잎새버섯을 98-100℃의 온도에서 볶는 단계; 볶아진 잎새버섯 98-102 중량부 및 농도 10 중량%의 소금물 98-102 중량부를 혼합한 후, 여기에 락토바실러스 아시도필루스 1 중량부를 첨가하여 제2 혼합물을 제조하는 단계; 상기 제2 혼합물을 항온 발효조에 넣어 40-44℃의 온도에서 22-26시간 동안 발효시키는 단계; 및 발효시킨 후 제2 혼합물을 여과하고, 여과되어 얻어지는 잎새버섯을 건조시킨 후 분쇄하는 단계;를 포함하는 잎새버섯 발효분말을 제조하는 단계;
상기 인삼 유래 엑소좀 1-5 중량부, 상기 소자 유래 엑소좀 1-5 중량부, 상기 미강 발효추출물 0.5-4 중량부, 상기 검은깨 추출물 0.5-4 중량부, 상기 잎새버섯 발효분말 0.5-4 중량부, 글리세린 1-5 중량부, 스쿠알란 0.5-4 중량부, 살리실릭애씨드 0.5-4 중량부, 리모넨 0.5-4 중량부, 리날룰 0.5-4 중량부, 나이아신아마이드 0.1-1 중량부, 폴리글리세릴-6스테아레이트 0.1-1 중량부, 폴리글리세릴-2스테아레이트 0.1-1 중량부, 프로필렌글라이콜 0.5-4 중량부, 카보머 0.5-4 중량부 및 정제수 18-22 중량부를 혼합하고, 38-42℃의 온도에서 58-62분 동안 교반하여 제1 혼합조성물을 제조하는 단계;
카퍼트리펩타이드-1 0.3-3 중량부, 아세틸헥사펩타이드-8 0.3-3 중량부, 옥타펩타이드 0.3-3 중량부, 히알루론산 3-7 중량부, 상기 과라나씨 오일 0.5-4 중량부, 상기 바실씨 오일 0.5-4 중량부, 이소퀘르시트린 0.5-4 중량부, 프로필렌글라이콜 0.5-4 중량부, 세테아릴알코올 1-5 중량부, 글리세릴스테아레이트 0.5-4 중량부, 스테아릴알코올 0.1-1 중량부, 프로판다이올 1-5 중량부, 카보머 1-5 중량부, 알란토인 0.1-1 중량부, 만니톨 0.1-1 중량부, 트로메타민 0.1-1 중량부, 폴리글리세릴-6베헤네이트 0.1-1 중량부 및 정제수 18-22 중량부를 혼합하고, 68-72℃의 온도에서 38-42분 동안 교반하여 제2 혼합조성물을 제조하는 단계; 및
상기 제1 혼합조성물 및 상기 제2 혼합조성물을 혼합하고, 48-52℃의 온도에서 18-22분 동안 교반하는 단계;를 포함하는 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물의 제조방법을 제공한다.
본 발명에 따른 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물은 생체 안정성이 우수하며, 발모 촉진 및 피부 상태 개선 효과가 우수하다.
도 1은 본 발명의 일 측면에서 제공되는 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물의 제조방법을 순서도로 나타낸 것이다.
이하에서는 첨부된 도면을 참조하여 다양한 실시예를 보다 상세하게 설명한다. 본 명세서에 기재된 실시예는 다양하게 변형될 수 있다. 특정한 실시예가 도면에서 묘사되고 상세한 설명에서 자세하게 설명될 수 있다. 그러나 첨부된 도면에 개시된 특정한 실시 예는 다양한 실시예를 쉽게 이해하도록 하기 위한 것일 뿐이다. 따라서 첨부된 도면에 개시된 특정 실시예에 의해 기술적 사상이 제한되는 것은 아니며, 발명의 사상 및 기술 범위에 포함되는 모든 균등물 또는 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다.
1차, 2차, 제1, 제2 등과 같이 서수를 포함하는 용어는 다양한 구성요소들을 설명하는데 사용될 수 있지만, 이러한 구성요소들은 상술한 용어에 의해 한정되지는 않는다. 상술한 용어는 하나의 구성요소를 다른 구성요소로부터 구별하는 목적으로만 사용된다.
본 명세서에서, '포함한다' 또는 '가지다' 등의 용어는 명세서상에 기재된 특징, 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것이 존재함을 지정하려는 것이지, 하나 또는 그 이상의 다른 특징들이나 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것들의 존재 또는 부가 가능성을 미리 배제하지 않는 것으로 이해되어야 한다. 어떤 구성요소가 다른 구성요소에 '연결되어' 있다거나 '접속되어' 있다고 언급된 때에는, 그 다른 구성요소에 직접적으로 연결되어 있거나 또는 접속되어 있을 수도 있지만, 중간에 다른 구성요소가 존재할 수도 있다고 이해되어야 할 것이다. 반면에, 어떤 구성요소가 다른 구성요소에 '직접 연결되어' 있다거나 '직접 접속되어' 있다고 언급된 때에는, 중간에 다른 구성요소가 존재하지 않는 것으로 이해되어야 할 것이다.
본 명세서에서 용어, '엑소좀(exosomes)'은 세포막의 구조와 동일한 이중인지질막으로 이루어진 수십 내지 수백나노미터(바람직하게는 대략 30~200 nm) 크기의 소포체를 의미한다(단, 분리 대상이 되는 세포 종류, 분리방법 및 측정방법에 따라 엑소좀의 입자 크기는 가변될 수 있음)(Vasiliy S. Chernyshev et al., "Size and shape characterization of hydrated and desiccated exosomes", Anal Bioanal Chem, (2015) DOI 10.1007/s00216-015-8535-3). 엑소좀에는 엑소좀 카고(cargo)라고 불리는 단백질, 핵산(mRNA, miRNA 등) 등이 포함되어 있다. 엑소좀 카고에는 광범위한 신호전달 요소들(signaling factors)이 포함되며, 이들 신호전달 요소들은 세포 타입에 특이적이고 분비세포의 환경에 따라 상이하게 조절되는 것으로 알려져 있다. 엑소좀은 세포가 분비하는 세포간 신호전달 매개체로서 이를 통해 전달된 다양한 세포 신호는 표적 세포의 활성화, 성장, 이동, 분화, 탈분화, 사멸(apoptosis), 괴사(necrosis)를 포함한 세포 행동을 조절한다고 알려져 있다.
본 명세서에서 용어, '탈모'는 두피로부터 모발이 탈락되는 현상 또는 모발이 성기거나 가늘어지는 현상를 의미하며, '탈모 방지'라 함은 상술한 바와 같은 탈모 현상을 예방하고 억제하는 것을 의미하고, '육모 촉진'이라 함은 새로운 모발을 생성하는 발모 기능, 또는 발모를 촉진시키는 기능뿐만 아니라 성장기에서 퇴행기로의 지연을 촉진하고 기존 모발이 건강하게 자라도록 하는 기능을 의미한다.
그 밖에도, 본 발명을 설명함에 있어서, 관련된 공지 기능 혹은 구성에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있다고 판단되는 경우, 그에 대한 상세한 설명은 축약하거나 생략한다.
본 발명은
카퍼트리펩타이드-1 및 아세틸헥사펩타이드-8을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물을 제공한다.
이하, 본 발명에 따른 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물에 대하여 상세히 설명한다.
상기 조성물은 인삼 유래 엑소좀 1-5 중량부, 소자 유래 엑소좀 1-5 중량부, 카퍼트리펩타이드-1 0.3-3 중량부, 아세틸헥사펩타이드-8 0.3-3 중량부, 옥타펩타이드 0.3-3 중량부, 히알루론산 3-7 중량부, 과라나씨 오일 0.5-4 중량부, 바실씨 오일 0.5-4 중량부, 미강 발효추출물 0.5-4 중량부, 검은깨 추출물 0.5-4 중량부, 잎새버섯 발효분말 0.5-4 중량부, 글리세린 1-5 중량부, 스쿠알란 0.5-4 중량부, 살리실릭애씨드 0.5-4 중량부, 리모넨 0.5-4 중량부, 리날룰 0.5-4 중량부, 이소퀘르시트린 0.5-4 중량부, 나이아신아마이드 0.1-1 중량부, 폴리글리세릴-6스테아레이트 0.1-1 중량부, 폴리글리세릴-2스테아레이트 0.1-1 중량부, 프로필렌글라이콜 2-6 중량부, 세테아릴알코올 1-5 중량부, 글리세릴스테아레이트 0.5-4 중량부, 스테아릴알코올 0.1-1 중량부, 프로판다이올 1-5 중량부, 카보머 3-7 중량부, 알란토인 0.1-1 중량부, 만니톨 0.1-1 중량부, 트로메타민 0.1-1 중량부, 폴리글리세릴-6베헤네이트 0.1-1 중량부 및 정제수 38-42 중량부를 포함하는 것이 바람직하고, 인삼 유래 엑소좀 2-4 중량부, 소자 유래 엑소좀 2-4 중량부, 카퍼트리펩타이드-1 0.5-1.5 중량부, 아세틸헥사펩타이드-8 0.5-1.5 중량부, 옥타펩타이드 0.5-1.5 중량부, 히알루론산 4-6 중량부, 과라나씨 오일 1-3 중량부, 바실씨 오일 1-3 중량부, 미강 발효추출물 1-3 중량부, 검은깨 추출물 1-3 중량부, 잎새버섯 발효분말 1-3 중량부, 글리세린 2-4 중량부, 스쿠알란 1-3 중량부, 살리실릭애씨드 1-3 중량부, 리모넨 1-3 중량부, 리날룰 1-3 중량부, 이소퀘르시트린 1-3 중량부, 나이아신아마이드 0.3-0.7 중량부, 폴리글리세릴-6스테아레이트 0.3-0.7 중량부, 폴리글리세릴-2스테아레이트 0.3-0.7 중량부, 프로필렌글라이콜 3-5 중량부, 세테아릴알코올 2-4 중량부, 글리세릴스테아레이트 1-3 중량부, 스테아릴알코올 0.3-0.7 중량부, 프로판다이올 2-4 중량부, 카보머 4-6 중량부, 알란토인 0.3-0.7 중량부, 만니톨 0.3-0.7 중량부, 트로메타민 0.3-0.7 중량부, 폴리글리세릴-6베헤네이트 0.3-0.7 중량부 및 정제수 39-41 중량부를 포함하는 것이 더욱 바람직하다.
인삼은 인삼속(Panax species) 식물의 종자, 뿌리, 줄기, 잎 및 열매로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상일 수 있으며, 구체적인 인삼속 식물로는 고려인삼(Panax ginseng), 화기삼(Panax quinquefolium), 전칠삼(Panax notoginseng), 죽절삼(Panax japonicum), 삼엽삼(Panax trifolium), 히말라야삼(Panax pseudoginseng) 또는 베트남삼(Panax vietnamensis) 등이 있고, 가공여부와 생육환경에 따른 홍삼, 수삼, 백삼, 재배삼, 장뇌삼 또는 산양산삼, 산삼배양근을 포함하는 산삼 등 품종이나 종류에 제한이 없이 사용 가능하다. 상기 인삼 유래 엑소좀을 조성물에 적용하여 두피에서 모발이 탈락되는 현상 또는 모발이 가늘어지는 현상을 예방하고 방지할 수 있다.
소자(Perillae Semen)는 꿀풀과(Labiatae)에 속하는 일년생 초본인 차조기(Perilla frutescens var. acuta)의 과실로서 거담, 변비치료 등의 목적으로 사용된다. 소자(Perillae Semem)는 차조기(소엽)의 씨를 말하는 것으로 발한, 진해, 건위, 이뇨, 진정 및 진통제로 사용한다. 상기 소자 유래 엑소좀을 조성물에 적용하여 두피에서 모발이 탈락되는 현상 또는 모발이 가늘어지는 현상을 예방하고 방지할 수 있다.
상기 펩타이드(peptide)는 아미드 결합(또는 펩타이드 결합)으로 연결된 하나 이상의 아미노산으로 구성된 폴리머를 의미한다.
상기 카퍼트리펩타이드-1 및 아세틸헥사펩타이드-8은 콜라겐을 생성하여 모낭 고정을 개선하고, 두꺼운 모발 형성에 도움을 줄 수 있다.
상기 옥타펩타이드는 티모신 베타-4(Tβ-4)로부터 유래한 Lys-Leu-Lys-Lys-Thr-Glu-Thr-Gln(K-L-K-K-T-E-T-Q)의 아미노산 서열로 이루어진 모발 성장을 촉진하는 펩타이드이다. 천연의 Tβ-4와 동일한 기능을 나타내면서도, Tβ-4 보다 온도, 산, 알칼리 등에 안정성을 나타낼 뿐만 아니라, 장기보존성 등도 뛰어나다.
상기 히알루론산은 자연에 널리 존재하는 생친화성 또는 생체 적합성(biocompatible) 물질이다. 히알루론산은 세포외기질(extra-cellular matrix, ECM)에 필수적인 요소인 글리코사미노글리칸(glycosaminoglycan)으로서 단량체인 N-아세틸글루코사민(N-acetylglucosamine)과 D-글루쿠로닉산(D-glucuronic acid)이 연속적으로 연결된 선형 다당류(linear polysaccharide)이다. 히알루론산은 생체조직의 기본구성 성분으로 세포의 형태형성, 세포분화, 세포분열에 필수적인 물질이며, 상처를 회복시키는데 도움을 준다.
과라나(Guarana, Paullinia cupana)는 브라질 아마존 분지 원산의 무환자나무과 폴리니아속의 덩굴식물이다. 과라나는 커피 콩과 비슷한 크기의 열매가 잘 알려져 있다. 과라나 씨앗는 고농도의 카페인이 있어 식이 보충제로서 과라나는 효과적인 자극제이다. 상기 과라나는 카페인 함유량이 매우 높아 각성 효과가 뛰어나서 청량음료, 에너지 음료, 숙취 해소 음료, 강장제 등의 원료로 사용된다. 본 발명에서는 과라나씨 오일을 조성물에 적용하여 모발 성장을 촉진시키는 효능을 나타낼 수 있다.
바실(Ocimum basilicum)은 통화식물목 꿀풀과의 한해살이 풀로서 열대 아시아가 원산이며 이탈리아와 프랑스 요리에 많이 사용되어 왔다. 높이 20~70 cm이고 줄기는 사각형이며 부드러운 털이 나 있다. 잎은 가장자리에 물결 모양 톱니가 있는 달걀 모양 바소꼴로 마주나며 길이 5~10 cm이고 향기가 강하다. 꽃은 여름에 원줄기의 윗부분에서 이상 형태로 층층이 달리지만 돌려나고 입술처럼 생기며 자줏빛을 띤 흰색이다. 열매는 작은 견과로 달걀 모양 또는 긴 타원형이다. 바실은 오시멘(ocimene), 알파피넨(α-pinene)의 성분이 있으며 진해, 해열, 월경불순, 두통, 신경과민, 구내염, 살균, 불면증 해소 등의 약리적 효능이 있는 것으로 보고되어 있다. 본 발명에서는 바실씨 오일을 조성물에 적용하여 탈모 방지와 모발 건강에 도움을 준다.
미강은 리파아제(lipase)의 작용이 강하여 지방의 산가가 높아지기 때문에 저장 중 변질되기 쉬우며 기온이 높고 습도가 클 때는 더욱 심하다. 미강의 유효성분을 추출하기 위하여 미강을 미생물 발효시킨 발효 방식에 관한 다양한 연구가 진행되고 있다. 미강 발효추출물은 아스파라트산, 글르타민산, 세린등 여러 가지 아미노산이 풍부하며, 인체의 생리활성물질이 다량 포함하여 몸의 신진대사를 활발하게 해주는 기능성 재료로서 적용되어 탈모 방지에 도움을 준다.
검은깨(Sesamum indicum)는 거승, 검정깨, 흑임자 등이라고도 불리우며, 식용과 약용으로 이용되어 왔다. 상기 검은깨에는 다량의 단백질 및 지방이 포함되어 있고, 레시틴, 칼슘, 인, 철분, 비타민 B와 비타민 E, 섬유질, 철분 및 칼슘이 풍부하다. 상기 검은깨 추출물은 비타민 E 및 불포화 지방산을 다량 포함하므로, 혈관을 확장시켜 말초혈관의 혈액순환을 개선하여 모발의 생장을 촉진할 수 있다.
잎새버섯은 은행나무잎처럼 생긴 갓들이 여러겹 겹쳐져 자실체 다발을 이루고 색은 흑색, 흑갈색, 회갈색, 또는 백색을 가질 수 있다. 느타리버섯과 갓 모양이 비슷하나, 잎새버섯은 덩어리로 자생하는 특징이 있다. 잎새버섯은 면역력 개선, 혈압 강하에 효능이 있는 것으로 알려져 있다. 상기 잎새버섯 발효분말은 베타글루칸의 함량이 높아 두피 및 모근세포의 면역 기능을 향시키고, 혈액 순환을 촉진하여 탈모 방지 및 발모를 촉진할 수 있다.
또한, 상기 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물은 세라마이드를 더 포함할 수 있다. 상기 세라마이드는 상기 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물 100 중량부에 대하여 0.1-1 중량부를 포함할 수 있고, 0.3-0.7 중량부를 포함하는 것이 바람직하고, 0.5 중량부를 포함하는 것이 가장 바람직하다. 피부장벽 속 가장 풍부한 것은 세라마이드엔피로, 세라마이드를 적용하여 탈모 방지 효과를 높일 수 있다.
또한, 본 발명은
인삼을 세척하여 18-22℃의 온도에서 140-160 MPa의 압력으로 3-7분 동안 전처리하는 단계; 전처리된 인삼을 착즙하여 인삼 착즙액을 제조하는 단계; 상기 인삼 착즙액을 원심분리하여 엑소좀을 포함하는 상층액을 수득하는 단계; 상기 엑소좀을 포함하는 상층액을 동결건조하여 동결건조물을 제조하는 단계; 상기 동결건조물에 폴리에틸렌글리콜/덱스트란을 사용하여 수성 2상계를 형성하는 단계; 및 상기 수성 2상계 내 엑소좀이 농축된 하층액을 수득하는 단계;를 포함하는 인삼 유래 엑소좀을 제조하는 단계;
소자를 세척하여 28-32℃의 온도에서 290-310 MPa의 압력으로 1-5분 동안 전처리하는 단계; 전처리된 소자를 착즙하여 소자 착즙액을 제조하는 단계; 상기 소자 착즙액을 원심분리하여 엑소좀을 포함하는 상층액을 수득하는 단계; 상기 엑소좀을 포함하는 상층액을 동결건조하여 동결건조물을 제조하는 단계; 상기 동결건조물에 폴리에틸렌글리콜/덱스트란을 사용하여 수성 2상계를 형성하는 단계; 및 상기 수성 2상계 내 엑소좀이 농축된 하층액을 수득하는 단계;를 포함하는 소자 유래 엑소좀을 제조하는 단계;
과라나씨 및 바실씨를 분쇄하여 과라나씨분말 및 바실씨분말을 준비하는 단계; 상기 과라나씨분말 및 바실씨분말을 1:1의 중량비율로 혼합하여 제1 혼합분말을 준비하는 단계; 상기 제1 혼합분말 및 헥산을 혼합하고, 33-37℃의 온도에서 2-4일 동안 교반하여 추출물을 제조하는 단계; 및 상기 추출물을 여과하고 감압농축한 후 원심분리하여 이물질을 제거한 후, 감압증류하는 단계;를 포함하는 과라나씨 오일 및 바실씨 오일을 제조하는 단계;
미강을 끓인 물로 세척하고, 분쇄하여 미강분말을 준비하는 단계; 미강분말 및 물을 혼합하여 제1 혼합물을 제조하고, 상기 제1 혼합물에 효모균으로 사카로미케스 케레비시아이(Saccharomyces cerevisiae)를 첨가한 후 33-37℃의 온도에서 22-26시간 동안 발효시키는 단계; 발효된 제1 혼합물 및 부틸렌글리콜을 혼합하고, 28-32℃의 온도에서 6-8일 동안 교반하여 추출물을 제조하는 단계; 및 상기 추출물을 여과 및 감압농축한 후 동결건조하는 단계;를 포함하는 미강 발효추출물을 제조하는 단계;
검은깨를 세척하고 동결건조시킨 후 믹서기로 갈아서 검은깨 분말을 준비하는 단계; 준비된 검은깨 분말을 아세톤 및 에탄올을 1:1의 부피비로 혼합한 혼합 용매와 1:9의 중량비율로 혼합하고, 28-32℃의 온도에서 22-26시간 동안 추출하여 추출액을 제조하는 단계; 및 상기 추출액을 여과지로 여과하고, 여과된 여과액을 영하 50℃에서 감압농축 및 동결건조하는 단계;를 포함하는 검은깨 추출물을 제조하는 단계;
잎새버섯을 세척한 후 멸균기에 넣어 123-127℃의 온도로 멸균하는 단계; 멸균된 잎새버섯을 98-100℃의 온도에서 볶는 단계; 볶아진 잎새버섯 98-102 중량부 및 농도 10 중량%의 소금물 98-102 중량부를 혼합한 후, 여기에 락토바실러스 아시도필루스 1 중량부를 첨가하여 제2 혼합물을 제조하는 단계; 상기 제2 혼합물을 항온 발효조에 넣어 40-44℃의 온도에서 22-26시간 동안 발효시키는 단계; 및 발효시킨 후 제2 혼합물을 여과하고, 여과되어 얻어지는 잎새버섯을 건조시킨 후 분쇄하는 단계;를 포함하는 잎새버섯 발효분말을 제조하는 단계;
상기 인삼 유래 엑소좀 1-5 중량부, 상기 소자 유래 엑소좀 1-5 중량부, 상기 미강 발효추출물 0.5-4 중량부, 상기 검은깨 추출물 0.5-4 중량부, 상기 잎새버섯 발효분말 0.5-4 중량부, 글리세린 1-5 중량부, 스쿠알란 0.5-4 중량부, 살리실릭애씨드 0.5-4 중량부, 리모넨 0.5-4 중량부, 리날룰 0.5-4 중량부, 나이아신아마이드 0.1-1 중량부, 폴리글리세릴-6스테아레이트 0.1-1 중량부, 폴리글리세릴-2스테아레이트 0.1-1 중량부, 프로필렌글라이콜 0.5-4 중량부, 카보머 0.5-4 중량부 및 정제수 18-22 중량부를 혼합하고, 38-42℃의 온도에서 58-62분 동안 교반하여 제1 혼합조성물을 제조하는 단계;
카퍼트리펩타이드-1 0.3-3 중량부, 아세틸헥사펩타이드-8 0.3-3 중량부, 옥타펩타이드 0.3-3 중량부, 히알루론산 3-7 중량부, 상기 과라나씨 오일 0.5-4 중량부, 상기 바실씨 오일 0.5-4 중량부, 이소퀘르시트린 0.5-4 중량부, 프로필렌글라이콜 0.5-4 중량부, 세테아릴알코올 1-5 중량부, 글리세릴스테아레이트 0.5-4 중량부, 스테아릴알코올 0.1-1 중량부, 프로판다이올 1-5 중량부, 카보머 1-5 중량부, 알란토인 0.1-1 중량부, 만니톨 0.1-1 중량부, 트로메타민 0.1-1 중량부, 폴리글리세릴-6베헤네이트 0.1-1 중량부 및 정제수 18-22 중량부를 혼합하고, 68-72℃의 온도에서 38-42분 동안 교반하여 제2 혼합조성물을 제조하는 단계; 및
상기 제1 혼합조성물 및 상기 제2 혼합조성물을 혼합하고, 48-52℃의 온도에서 18-22분 동안 교반하는 단계;를 포함하는 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물의 제조방법을 제공한다.
이때, 도 1에 본 발명의 일 측면에서 제공되는 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물의 제조방법을 순서도로 나타내었으며, 이하, 도 1을 참조하여 본 발명에 따른 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물의 제조방법을 각 단계별로 상세히 설명한다.
먼저, 본 발명에 따른 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물의 제조방법은 인삼 유래 엑소좀을 제조하는 단계를 포함한다. 상기 인삼 유래 엑소좀을 제조하는 단계는, 인삼을 세척하여 18-22℃의 온도에서 140-160 MPa의 압력으로 3-7분 동안 전처리하는 단계; 전처리된 인삼을 착즙하여 인삼 착즙액을 제조하는 단계; 상기 인삼 착즙액을 원심분리하여 엑소좀을 포함하는 상층액을 수득하는 단계; 상기 엑소좀을 포함하는 상층액을 동결건조하여 동결건조물을 제조하는 단계; 상기 동결건조물에 폴리에틸렌글리콜/덱스트란을 사용하여 수성 2상계를 형성하는 단계; 및 상기 수성 2상계 내 엑소좀이 농축된 하층액을 수득하는 단계;를 포함한다.
먼저, 인삼을 세척한 후 초고압기를 이용하여 상온에서 140-160 MPa의 압력으로 3-7분 동안 전처리한다. 더욱 바람직하게는 145-155 MPa의 압력으로 4-6분 동안 전처리한다.
다음, 인삼을 착즙하여 착즙액을 제조한다. 착즙은 스크류를 가진 착즙기를 이용하여 수행한다.
다음, 인삼 착즙액을 원심분리하여 상층액을 수득한다. 상기 상층액은 엑소좀을 포함한다. 상기 원심분리는 10,000 xg에서 수행한다.
다음, 상층액을 동결건조하여 동결건조물을 제조한다. 동결건조기를 이용하여 수행할 수 있다.
다음, 동결건조물에 폴리에틸렌글리콜염, 특히 폴리에틸렌글리콜 및 염으로는 덱스트란(dextran)을 사용하여 수성 2상계를 형성한다. 엑소좀을 효율적으로 분리 정제하기 위해 수성 2상분배법을 사용한다.
상기 폴리에틸렌글리콜은 중량평균분자량이 10,000-35,000인 것을 1-15 중량%, 바람직하게는 2-5 중량% 사용하고 덱스트란은 중량평균분자량이 300,000-650,000인 것을 1-8 중량%, 바람직하게는 1-3 중량% 사용하는 것을 특징으로 한다. 상기 폴리에틸렌글리콜과 덱스트란이 3.3 중량% : 1.7 중량%의 농도비율로 사용되는 경우에 엑소좀의 수율이 가장 높고, 안정성이 가장 우수하므로 더욱 바람직하다.
다음, 수성 2상계 내 엑소좀이 농축된 하층액을 수득한다.
다음으로, 본 발명에 따른 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물의 제조방법은 소자 유래 엑소좀을 제조하는 단계를 포함한다. 상기 소자 유래 엑소좀을 제조하는 단계는, 소자를 세척하여 28-32℃의 온도에서 290-310 MPa의 압력으로 1-5분 동안 전처리하는 단계; 전처리된 소자를 착즙하여 소자 착즙액을 제조하는 단계; 상기 소자 착즙액을 원심분리하여 엑소좀을 포함하는 상층액을 수득하는 단계; 상기 엑소좀을 포함하는 상층액을 동결건조하여 동결건조물을 제조하는 단계; 상기 동결건조물에 폴리에틸렌글리콜/덱스트란을 사용하여 수성 2상계를 형성하는 단계; 및 상기 수성 2상계 내 엑소좀이 농축된 하층액을 수득하는 단계;를 포함한다.
먼저, 소자를 세척한 후 초고압기를 이용하여 상온보다 다소 높은 온도에서 290-310 MPa의 압력으로 1-5분 동안 전처리한다. 더욱 바람직하게는 295-305 MPa의 압력으로 2-4분 동안 전처리한다.
다음, 소자를 착즙하여 착즙액을 제조한다. 착즙은 스크류를 가진 착즙기를 이용하여 수행한다.
다음, 소자 착즙액을 원심분리하여 상층액을 수득한다. 상기 상층액은 엑소좀을 포함한다. 상기 원심분리는 10,000 xg에서 수행한다.
다음, 상층액을 동결건조하여 동결건조물을 제조한다. 동결건조기를 이용하여 수행할 수 있다.
다음, 동결건조물에 폴리에틸렌글리콜염, 특히 폴리에틸렌글리콜 및 염으로는 덱스트란(dextran)을 사용하여 수성 2상계를 형성한다. 엑소좀을 효율적으로 분리 정제하기 위해 수성 2상분배법을 사용한다.
상기 폴리에틸렌글리콜은 중량평균분자량이 10,000-35,000인 것을 1-15 중량%, 바람직하게는 2-5 중량% 사용하고 덱스트란은 중량평균분자량이 300,000-650,000인 것을 1-8 중량%, 바람직하게는 1-3 중량% 사용하는 것을 특징으로 한다. 상기 폴리에틸렌글리콜과 덱스트란이 3.3 중량% : 1.7 중량%의 농도비율로 사용되는 경우에 엑소좀의 수율이 가장 높고, 안정성이 가장 우수하므로 더욱 바람직하다.
다음, 수성 2상계 내 엑소좀이 농축된 하층액을 수득한다.
다음으로, 본 발명에 따른 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물의 제조방법은 과라나씨 오일 및 바실씨 오일을 제조하는 단계를 포함한다. 상기 과라나씨 오일 및 바실씨 오일을 제조하는 단계는, 과라나씨 및 바실씨를 분쇄하여 과라나씨분말 및 바실씨분말을 준비하는 단계; 상기 과라나씨분말 및 바실씨분말을 1:1의 중량비율로 혼합하여 제1 혼합분말을 준비하는 단계; 상기 제1 혼합분말 및 헥산을 혼합하고, 33-37℃의 온도에서 2-4일 동안 교반하여 추출물을 제조하는 단계; 및 상기 추출물을 여과하고 감압농축한 후 원심분리하여 이물질을 제거한 후, 감압증류하는 단계;를 포함한다. 상기 감압증류는 일반적으로 오일을 제조하기 위한 공정을 적용한다.
다음으로, 본 발명에 따른 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물의 제조방법은 미강 발효추출물을 제조하는 단계를 포함한다. 상기 미강 발효추출물을 제조하는 단계는, 미강을 끓인 물로 세척하고, 분쇄하여 미강분말을 준비하는 단계; 미강분말 및 물을 혼합하여 제1 혼합물을 제조하고, 상기 제1 혼합물에 효모균으로 사카로미케스 케레비시아이(Saccharomyces cerevisiae)를 첨가한 후 33-37℃의 온도에서 22-26시간 동안 발효시키는 단계; 발효된 제1 혼합물 및 부틸렌글리콜을 혼합하고, 28-32℃의 온도에서 6-8일 동안 교반하여 추출물을 제조하는 단계; 및 상기 추출물을 여과 및 감압농축한 후 동결건조하는 단계;를 포함한다. 상기 발효를 효모균 중에서 사카로미케스 케레비시아이를 적용하여 효과적으로 발효시킬 수 있다.
다음으로, 본 발명에 따른 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물의 제조방법은 검은깨 추출물을 제조하는 단계를 포함한다. 상기 검은깨 추출물을 제조하는 단계는, 검은깨를 세척하고 동결건조시킨 후 믹서기로 갈아서 검은깨 분말을 준비하는 단계; 준비된 검은깨 분말을 아세톤 및 에탄올을 1:1의 부피비로 혼합한 혼합 용매와 1:9의 중량비율로 혼합하고, 28-32℃의 온도에서 22-26시간 동안 추출하여 추출액을 제조하는 단계; 및 상기 추출액을 여과지로 여과하고, 여과된 여과액을 영하 50℃에서 감압농축 및 동결건조하는 단계;를 포함한다.
다음으로, 본 발명에 따른 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물의 제조방법은 잎새버섯 발효분말을 제조하는 단계를 포함한다. 상기 잎새버섯 발효분말을 제조하는 단계는, 잎새버섯을 세척한 후 멸균기에 넣어 123-127℃의 온도로 멸균하는 단계; 멸균된 잎새버섯을 98-100℃의 온도에서 볶는 단계; 볶아진 잎새버섯 98-102 중량부 및 농도 10 중량%의 소금물 98-102 중량부를 혼합한 후, 여기에 락토바실러스 아시도필루스 1 중량부를 첨가하여 제2 혼합물을 제조하는 단계; 상기 제2 혼합물을 항온 발효조에 넣어 40-44℃의 온도에서 22-26시간 동안 발효시키는 단계; 및 발효시킨 후 제2 혼합물을 여과하고, 여과되어 얻어지는 잎새버섯을 건조시킨 후 분쇄하는 단계;를 포함한다.
다음으로, 본 발명에 따른 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물의 제조방법은 상기 인삼 유래 엑소좀 1-5 중량부, 상기 소자 유래 엑소좀 1-5 중량부, 상기 미강 발효추출물 0.5-4 중량부, 상기 검은깨 추출물 0.5-4 중량부, 상기 잎새버섯 발효분말 0.5-4 중량부, 글리세린 1-5 중량부, 스쿠알란 0.5-4 중량부, 살리실릭애씨드 0.5-4 중량부, 리모넨 0.5-4 중량부, 리날룰 0.5-4 중량부, 나이아신아마이드 0.1-1 중량부, 폴리글리세릴-6스테아레이트 0.1-1 중량부, 폴리글리세릴-2스테아레이트 0.1-1 중량부, 프로필렌글라이콜 0.5-4 중량부, 카보머 0.5-4 중량부 및 정제수 18-22 중량부를 혼합하고, 38-42℃의 온도에서 58-62분 동안 교반하여 제1 혼합조성물을 제조하는 단계를 포함한다.
상기 단계에서는 인삼 유래 엑소좀, 소자 유래 엑소좀, 미강 발효추출물, 검은깨 추출물, 잎새버섯 발효분말 등과 절반의 정제수를 이용하여 제1 혼합조성물을 제조하되 특정 온도 및 공정 시간 동안 교반하여 제조한다.
다음으로, 본 발명에 따른 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물의 제조방법은 카퍼트리펩타이드-1 0.3-3 중량부, 아세틸헥사펩타이드-8 0.3-3 중량부, 옥타펩타이드 0.3-3 중량부, 히알루론산 3-7 중량부, 상기 과라나씨 오일 0.5-4 중량부, 상기 바실씨 오일 0.5-4 중량부, 이소퀘르시트린 0.5-4 중량부, 프로필렌글라이콜 0.5-4 중량부, 세테아릴알코올 1-5 중량부, 글리세릴스테아레이트 0.5-4 중량부, 스테아릴알코올 0.1-1 중량부, 프로판다이올 1-5 중량부, 카보머 1-5 중량부, 알란토인 0.1-1 중량부, 만니톨 0.1-1 중량부, 트로메타민 0.1-1 중량부, 폴리글리세릴-6베헤네이트 0.1-1 중량부 및 정제수 18-22 중량부를 혼합하고, 68-72℃의 온도에서 38-42분 동안 교반하여 제2 혼합조성물을 제조하는 단계를 포함한다.
상기 단계에서는 펩타이드 성분, 과라나씨 오일, 바실씨 오일 등과 나머지의 정제수를 이용하여 제2 혼합조성물을 제조하되 특정 온도 및 공정 시간 동안 교반하여 제조한다.
다음으로, 본 발명에 따른 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물의 제조방법은 상기 제1 혼합조성물 및 상기 제2 혼합조성물을 혼합하고, 48-52℃의 온도에서 18-22분 동안 교반하는 단계를 포함한다.
상기 공정을 통해 최종적으로 조성물을 제조한다.
여기서, 상기 제1 혼합조성물 및 상기 제2 혼합조성물을 혼합하여 제3 혼합조성물을 형성하고, 상기 제3 혼합조성물 100 중량부에 대하여 세라마이드를 0.1-1 중량부 혼합하고, 48-52℃의 온도에서 18-22분 동안 교반하는 단계를 수행할 수 있다.
이하, 본 발명을 하기의 실시예에 의해 보다 상세하게 설명한다.
단, 하기 실시예는 본 발명의 내용을 예시하는 것일 뿐 발명의 범위가 실시예 및 실험예에 의해 한정되는 것은 아니다.
<제조예 1> 인삼 유래 엑소좀의 제조
인삼을 세척하여 초고압기에 넣고 20℃의 온도에서 150 MPa의 압력으로 5분 동안 전처리하였다. 전처리된 인삼을 착즙기를 이용해 착즙하여 인삼 착즙액을 제조하였다. 상기 인삼 착즙액을 10,000xg에서 10분 동안 원심분리한 후, 상층액을 수득하였다. 상기 상층액을 -50℃의 온도에서 8시간 동안 동결건조하여 동결건조물을 제조하였다. 상기 동결건조물에 중량평균분자량 10,000-35,000인 폴리에틸렌글리콜 3.3 중량%와 중량평균분자량 400,000-500,000인 덱스트란을 1.7 중량%의 농도인 수용액을 사용하여 수성 2상계를 형성하였다. 상기 수성 2상계 내 엑소좀이 농축된 하층액을 수득하여 인삼 유래 엑소좀을 제조하였다.
<제조예 2> 소자 유래 엑소좀의 제조
소자를 세척하여 초고압기에 넣고 30℃의 온도에서 300 MPa의 압력으로 3분 동안 전처리하였다. 전처리된 소자를 착즙기를 이용해 착즙하여 소자 착즙액을 제조하였다. 상기 소자 착즙액을 10,000xg에서 10분 동안 원심분리한 후, 상층액을 수득하였다. 상기 상층액을 -50℃의 온도에서 8시간 동안 동결건조하여 동결건조물을 제조하였다. 상기 동결건조물에 중량평균분자량 10,000-35,000인 폴리에틸렌글리콜 3.3 중량%와 중량평균분자량 400,000-500,000인 덱스트란을 1.7 중량%의 농도인 수용액을 사용하여 수성 2상계를 형성하였다. 상기 수성 2상계 내 엑소좀이 농축된 하층액을 수득하여 소자 유래 엑소좀을 제조하였다.
<제조예 3> 과라나씨 오일 및 바실씨 오일의 제조
과라나를 파쇄한 후 세척하여 과라나씨를 분리하고, 분리된 과라나씨와 바실씨를 분쇄하여 과라나씨분말 및 바실씨분말을 준비하였다. 상기 과라나씨분말 및 바실씨분말을 1:1의 중량비율로 혼합하여 혼합분말을 준비하였다. 상기 혼합분말 10 g 및 헥산 90 g을 혼합하고, 35℃의 온도에서 3일 동안 교반하여 추출물을 제조하였다. 이를 여과하고 감압 농축한 후 원심분리하여 이물질을 제거하는 과정을 반복하였다. 최후 감압 증류를 반복함으로써 잔류용매인 헥산을 0.1 ppm 이하로 제거하여 이를 통해 과라나씨 오일 및 바실씨 오일을 제조하였다.
<제조예 4> 미강 발효추출물의 제조
미강을 끓인 물로 3회 세척하고, 분쇄하여 미강분말을 준비하였다. 미강분말 10 g 및 물 300 g을 혼합하여 혼합물을 제조하고, 혼합물에 효모균으로 사카로미케스 케레비시아이(Saccharomyces cerevisiae)를 0.3 g 첨가한 후 35℃의 온도에서 24시간 동안 발효시켰다. 발효된 혼합물에 부틸렌글리콜 300 g을 혼합하고, 30℃의 온도에서 7일 동안 교반하여 추출물을 제조하였다. 상기 추출물을 여과 및 감압농축한 후 동결건조하여 미강 발효추출물을 제조하였다.
<제조예 5> 검은깨 추출물의 제조
검은깨를 세척하고 동결건조시킨 후 믹서기로 갈아서 검은깨 분말을 준비하고, 준비된 검은깨 분말을 아세톤 및 에탄올을 1:1의 부피비로 혼합한 혼합 용매와 1:9의 중량비율로 혼합하고, 30℃의 온도에서 24시간 동안 추출하여 추출액을 제조하였다. 이후, 상기 추출액을 여과지로 여과하고, 여과된 여과액을 영하 50℃에서 감압농축 및 동결건조하여 검은깨 추출물을 제조하였다.
<제조예 6> 잎새버섯 발효분말의 제조
잎새버섯을 세척한 후 멸균기에 넣어 125℃의 온도로 멸균한 후, 멸균된 잎새버섯을 98-100℃의 온도에서 볶아주고, 볶아진 잎새버섯 100 중량부 및 농도 10 중량%의 소금물 100 중량부를 혼합한 후, 여기에 락토바실러스 아시도필루스 1 중량부를 첨가하여 혼합물을 제조하였다. 상기 혼합물을 항온 발효조에 넣어 42℃의 온도에서 24시간 동안 발효시킨 후 혼합물을 여과하고, 여과되어 얻어지는 잎새버섯을 건조시킨 후 분쇄하여 잎새버섯 발효분말을 제조하였다.
<실시예 1> 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물의 제조-1
상기 제조예 1에서 제조된 인삼 유래 엑소좀 3 중량부, 상기 제조예 2에서 제조된 소자 유래 엑소좀 3 중량부, 상기 제조예 4에서 제조된 미강 발효추출물 2 중량부, 상기 제조예 5에서 제조된 검은깨 추출물 2 중량부, 상기 제조예 6에서 제조된 잎새버섯 발효분말 2 중량부, 글리세린 3 중량부, 스쿠알란 2 중량부, 살리실릭애씨드 2 중량부, 리모넨 2 중량부, 리날룰 2 중량부, 나이아신아마이드 0.5 중량부, 폴리글리세릴-6스테아레이트 0.5 중량부, 폴리글리세릴-2스테아레이트 0.5 중량부, 프로필렌글라이콜 2 중량부, 카보머 2 중량부 및 정제수 20 중량부를 혼합하고, 40℃의 온도에서 60분 동안 교반하여 제1 혼합조성물을 제조하였다.
카퍼트리펩타이드-1 1 중량부, 아세틸헥사펩타이드-8 1 중량부, 옥타펩타이드 1 중량부, 히알루론산 5 중량부, 상기 제조예 3에서 제조된 과라나씨 오일 및 바실씨 오일 4 중량부, 이소퀘르시트린 2 중량부, 프로필렌글라이콜 2 중량부, 세테아릴알코올 3 중량부, 글리세릴스테아레이트 2 중량부, 스테아릴알코올 0.5 중량부, 프로판다이올 3 중량부, 카보머 3 중량부, 알란토인 0.5 중량부, 만니톨 0.5 중량부, 트로메타민 0.5 중량부, 폴리글리세릴-6베헤네이트 0.5 중량부 및 정제수 20 중량부를 혼합하고, 70℃의 온도에서 40분 동안 교반하여 제2 혼합조성물을 제조하였다.
상기 제1 혼합조성물 및 상기 제2 혼합조성물을 혼합하고, 50℃의 온도에서 20분 동안 교반하여 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물을 제조하였다.
<실시예 2> 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물의 제조-2
상기 실시예 1과 동일하게 수행하되, 상기 제1 혼합조성물 및 상기 제2 혼합조성물을 혼합하여 제3 혼합조성물을 제조하고, 상기 제3 혼합조성물 100 중량부에 대하여 세라마이드를 0.5 중량부 혼합한 뒤, 50℃의 온도에서 20분 동안 교반하여 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물을 제조하였다.
<실험예 1> 피부 안전성 평가
상기 실시예 1 및 실시예 2에서 제조된 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물의 피부 안전성을 검증하기 위해, 섬유아세포(HDF)에 대한 MTT assay 실험을 수행하였다. 상기 실시예 1의 조성물을 정제수에 25, 50, 100, 200, 400 μg/mL의 농도별로 각각 현탁한 후, 세포 생존율을 측정하였다. 세포 독성은 MTT{3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2-5-diphenyltetrazolium bromide} 시약을 이용하여 세포 생존율을 측정하는 모스만(Mosmann)의 방법을 변형하여 수행하였다. 섬유아세포(HDF)를 각각 96-웰 플레이트에 1×104 cells/well의 농도로 분주하여 37℃, 5% CO2에서 48시간 동안 배양하였다. 배양 배지를 제거하고 시료를 농도별로 처리한 배지에 48시간 동안 배양한 후 배지를 제거하고 PBS(Phosphate buffered saline)로 반복 세척하였다. MTT를 5mg/mL로 PBS에 녹여 50 μL를 첨가하고 37℃, 5%의 CO2에서 48시간 동안 배양하였다. DMSO(Dimethyl sulfoxide)를 한 웰(well) 당 100 μL를 넣고, 10분 동안 교반한 후 540 nm에서 흡광도를 측정하였다.
측정 결과, 모든 농도에서 세포 독성은 확인되지 않았다. 상기 결과는 상기 시료가 인체에 무해할 뿐만 아니라 인체 안전성이 우수함을 시사한다.
<실험예 2> 탈모 방지 및 육모 촉진 평가
상기 실시예 1 및 실시예 2에서 제조된 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물의 탈모 방지 및 육모 촉진 효과를 확인하기 위하여 주사형 전자 현미경(SEM)으로 100,000배 확대하여 모발의 형상 및 크기를 확인 한 후, 10명의 지원자를 택하여 1일1회 각 시료당 4주간을 바른다. 실험 시작 전과 실험 후에 샴푸 및 헹굼시 버려지는 헤어를 체취하여 1일 저온 건조 후 헤어를 총 수득 갯수 및 성장기(anagen)-가늘고 작은크기(A), 이행기(catagen)-가늘고 긴머리(C), 휴지기(telogen)-굵고 긴머리(T)로 구분하여 확인하여 분산한 시료에 대하여 탈모 방지 효과 및 발모 효과에 대한 바르기전, 2주 및 4주 동안 평균량을 측정하여 하기 표 1에 나타내었다.
기간 A C T 육모효과
실시예 1 바르기 전 6 23 59 -
2주 6 18 46 효과있음
4주 5 16 38
실시예 2 바르기 전 7 25 62 -
2주 6 20 48 효과있음
4주 5 15 36
상기 표 1에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물은 탈모 방지 및 발묘 효과가 있음을 확인할 수 있었다.

Claims (2)

  1. 인삼 유래 엑소좀 1-5 중량부, 소자 유래 엑소좀 1-5 중량부, 카퍼트리펩타이드-1 0.3-3 중량부, 아세틸헥사펩타이드-8 0.3-3 중량부, 옥타펩타이드 0.3-3 중량부, 히알루론산 3-7 중량부, 과라나씨 오일 0.5-4 중량부, 바실씨 오일 0.5-4 중량부, 미강 발효추출물 0.5-4 중량부, 검은깨 추출물 0.5-4 중량부, 잎새버섯 발효분말 0.5-4 중량부, 글리세린 1-5 중량부, 스쿠알란 0.5-4 중량부, 살리실릭애씨드 0.5-4 중량부, 리모넨 0.5-4 중량부, 리날룰 0.5-4 중량부, 이소퀘르시트린 0.5-4 중량부, 나이아신아마이드 0.1-1 중량부, 폴리글리세릴-6스테아레이트 0.1-1 중량부, 폴리글리세릴-2스테아레이트 0.1-1 중량부, 프로필렌글라이콜 2-6 중량부, 세테아릴알코올 1-5 중량부, 글리세릴스테아레이트 0.5-4 중량부, 스테아릴알코올 0.1-1 중량부, 프로판다이올 1-5 중량부, 카보머 3-7 중량부, 알란토인 0.1-1 중량부, 만니톨 0.1-1 중량부, 트로메타민 0.1-1 중량부, 폴리글리세릴-6베헤네이트 0.1-1 중량부 및 정제수 38-42 중량부를 포함하고,
    상기 조성물 100 중량부에 대하여 세라마이드를 0.1-1 중량부 포함하는 것을 특징으로 하는 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물.
  2. 삭제
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