KR102303079B1 - 마유 리포좀을 함유한 탈모방지 및 발모촉진용 조성물 - Google Patents

마유 리포좀을 함유한 탈모방지 및 발모촉진용 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 마유 리포좀을 함유하는 탈모방지 및 발모촉진 효과를 가지는 조성물에 대한 것이다.

Description

마유 리포좀을 함유한 탈모방지 및 발모촉진용 조성물{Composition for preventing hair loss and promoting hair growth containing horse oil liposome}
본 발명은 마유 리포좀을 함유하는 탈모방지 및 발모촉진 효과를 가지는 조성물에 대한 것이다.
탈모는 DNA 등 선천적 요인과, 안드로겐의 불균형, 스트레스, 외상, 감염, 음주, 흡연 등 후천적 요인에 의해 발생하는데, 최근 탈모 인구가 급증하고 있다. 탈모 인구의 증가뿐만 아니라 남성의 미용에 대한 관심 증가로, 탈모 관리하고 치료하는 시장 또한 급속한 성장이 이루어지고 있다. 이에 따라 탈모 방지를 위해 하기의 특허문헌에 기지재된 바와 같은 탈모방지 및 발모촉진 조성물이 개발되고 있다.
<특허문헌>
특허 제10-1727477호(2017. 04. 11. 등록) "탈모방지 및 발모촉진 조성물"
하지만, 종래의 탈모방지 및 발모촉진 조성물은 식물에서 추출한 성분을 유효 성분으로 이용하므로, 유효 성분이 모공 깊숙이 침투하는 것이 불가능하여 탈모 방지 및 발모촉진 효과 떨어지는 문제가 있다.
본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위해 안출된 것으로,
본 발명은 마유를 사용하여 탈모를 방지하고 발모를 촉진할 수 있는 조성물을 제공하는데 그 목적이 있다.
또한, 본 발명은 마유를 정제한 고순도의 정제 마유가 사용되고, 상기 정제 마유를 리포좀 형태로 제형화한 마유 리포좀을 사용하므로, 탈모 방지 및 발모 촉진 효과를 더욱 향상시킬 수 있는 조성물을 제공하는데 그 목적이 있다.
본 발명은 앞서 본 목적을 달성하기 위하여 다음과 같은 구성을 가진 실시예에 의해 구현된다.
본 발명의 일 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 탈모방지 및 발모촉진용 조성물은 마유 리포좀을 함유하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 다른 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 탈모방지 및 발모촉진용 조성물에 있어서 상기 마유 리포좀은 정제 마유, 레시틴, 유화 보조제 및 물을 포함하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 또 다른 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 탈모방지 및 발모촉진용 조성물에 있어서 상기 마유 리포좀은 정제 마유 15 내지 40중량부, 레시틴 2 내지 4중량부, 유화 보조제 0.5 내지 2중량부 및 물 60 내지 70중량부를 포함하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 또 다른 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 마유 리포좀의 제조방법은 말생지로부터 정제 마유를 수득하는 정제마유수득단계와, 상기 정제마유수득단계에서 수득한 정제 마유를 이용하여 마유 리포좀을 형성하는 마유리포좀형성단계를 포함하며, 상기 정제마유수득단계는 말생지에 열수를 가한 후 여과하여 불순물이 제거된 조마유를 추출하는 조마유추출단계와, 상기 조마유를 정제하여 산가 및 과산화물가를 조절하고 무색 및 무취의 정제마유를 수득하는 조마유정제단계를 포함하고, 상기 조마유정제단계는 조마유 100중량부, 달소브 1.5 내지 2.5중량부, 활성백토 1.5 내지 2.5중량부, 활성탄 5 내지 7중량부, 및 BHT 0.1 내지 0.2중량부를 혼합하여 제1조마유혼합물을 형성하고 제1조마유혼합물을 80 내지 120℃에서 35 내지 45분동안 교반하는 제1교반단계와, 상기 제1교반단계후 제1조마유혼합물에 셀라이트 4 내지 6중량부를 추가로 혼합하여 제2조마유혼합물을 형성하고 제2조마유혼합물을 80 내지 120℃에서 15 내지 25분동안 교반하는 제2교반단계와, 상기 제2교반단계 후 제2마유혼합물을 여과하여 정제마유를 수득하는 수득단계를 포함하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 또 다른 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 마유 리포좀의 제조방법에 있어서 상기 마유 리포좀은 탈모방지 및 발모촉진용 조성물에 사용되는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 또 다른 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 마유 리포좀의 제조방법에 있어서 상기 조마유추출단계는 말생지를 일정 크기로 분쇄하는 분쇄단계와, 분쇄된 말생지에 활성탄 및 규조토를 혼합하여 말생지혼합물을 형성하는 혼합단계와, 상기 말생지혼합물을 천으로 감싸 밀봉한 후 물에 담가 물혼합물을 형성하고 물혼합물을 가열하는 열수처리단계와, 상기 열수처리단계 후 물혼합물을 여과하여 여과액을 얻는 여과단계와, 상기 여과단계에서 얻은 여과액을 정치하여 기름층과 물층으로 층분리한 후 물층의 물을 제거하여 조마유를 수득하는 분리단계를 포함하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 또 다른 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 마유 리포좀의 제조방법에 있어서 상기 혼합단계에서 활성탄은 말생지 100중량부에 대하여 3 내지 5중량부가 사용되며, 규조토는 말생지 100중량부에 대하여 0.5 내지 2중량부가 사용되고, 상기 열수처리단계에서 물은 말생지 100중량부에 대하여 800 내지 1000중량부가 사용되며, 물혼합물은 85 내지 95℃의 온도에서 50 내지 70분 동안 가열되고, 상기 여과단계는 물혼합물을 68 내지 70℃로 냉각한 후 수행되는 것을 특징으로 하한다.
본 발명의 또 다른 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 마유 리포좀의 제조방법에 있어서 상기 마유리포좀형성단계는 정제 마유 15 내지 40중량부, 레시틴 2 내지 4중량부, 유화 보조제 0.5 내지 2중량부 및 물 60 내지 70중량부를 혼합하여 마유혼합물을 형성하는 혼합단계와, 상기 혼합단계에서 형성된 마유혼합물을 유화기에 투입하여 유화작업을 진행하여 마유 리포좀을 형성하는 유화단계를 포함하는 것을 특징으로 한다.
본 발명은 앞서 본 실시예에 의해 다음과 같은 효과를 얻을 수 있다.
본 발명은 마유를 사용하여 탈모를 방지하고 발모를 촉진할 수 있는 효과가 있다.
또한, 본 발명은 마유를 정제한 고순도의 정제 마유가 사용되고, 상기 정제 마유를 리포좀 형태로 제형화한 마유 리포좀을 사용하므로, 탈모 방지 및 발모 촉진 효과를 더욱 향상시킬 수 있는 효과과 있다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 조성물에 사용되는 마유리포좀의 모식도.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 조성물에 사용되는 정제 마유를 나타내는 사진.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 조성물에 사용되는 마유리포좀의 입자분석기 분석 결과를 나타내는 도표.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 조성물을 도포한 마우스 피부를 절개하여 얻은 피부 절편을 H&E 염색 후 측정한 결과를 나타내는 현미경 이미지.
이하에서는 본 발명에 따른 마유 리포좀을 함유한 탈모방지 및 발모촉진용 조성물을 도면을 참조하여 상세히 설명한다. 특별한 정의가 없는 한 본 명세서의 모든 용어는 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 기술자가 이해하는 당해 용어의 일반적 의미와 동일하고 만약 본 명세서에 사용된 용어의 의미와 충돌하는 경우에는 본 명세서에 사용된 정의에 따른다. 또한, 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있는 공지 기능 및 구성에 대해 상세한 설명은 생략한다. 명세서 전체에서, 어떤 부분이 어떤 구성요소를 "포함"한다고 할 때 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 조성물에 사용되는 마유리포좀의 모식도이며, 도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 조성물에 사용되는 정제 마유를 나타내는 사진이고, 도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 조성물에 사용되는 마유리포좀의 입자분석기 분석 결과를 나타내는 도표이며, 도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 조성물을 도포한 마우스 피부를 절개하여 얻은 피부 절편을 H&E 염색 후 측정한 결과를 나타내는 현미경 이미지이다.
본 발명의 일 실시예에 따른 조성물은 마유 리포좀을 함유하여 탈모 방지 및 발모촉진 효과를 제공한다. 상기 마유 리포좀은 정제 마유를 리포좀 형태로 제형화한 것으로, 정제 마유, 레시틴, 유화보조제 및 물 등을 혼합하여 유화시켜 형성되게 된다. 상기 마유(Horse oil)는 사람의 피지와 지방산의 구성비, 유분, 수분의 밸런스가 상당히 유사하여 인간의 피부와 친화성이 높으며 불포화지방산이 60%이상 포함되어 있어 피부에 불포화지방산을 공급할 수 있는 물질이며, 보습효과를 나타내는 올레인산, 항아토피 효능을 갖는 리놀레인산, 세포재생촉진 효능을 갖는 팔미토올레인산이 다량 함유되어 항아토피 효능 및 화상 시 피부장벽 복원의 효능이 있는 것으로 알려져 있다. 상기 레시틴은 마유를 안정적으로 포접시켜 안정화된 지질막을 형성한다. 상기 유화보조제는 리포좀의 안정성뿐만 아니라, 다층 라멜라 구조의 형성에 기여하며, 일반적으로는 고급지방알코올이 사용될 수 있으며, 바람직하게는 세틸알코올, 스테아릴알코올, 또는 세토스테아릴알코올 등을 사용할 수 있고, 또는 탄소수 6~22의 지방산(예: 카프릴산, 카프르산, 라우르산, 미르스트산, 팔미트산, 스테아르산, 올레산, 리놀산, 아라키돈산, 도코사헥사엔산)이나 그의 의약상 허용되는 염(예: 나트륨염, 칼륨염, 칼슘염), 알부민, 텍스트란 등을 사용할 수 있다. 본 발명은 마유을 조성물에 바로 사용하는 것이 아니라, 마유를 정제한 고순도의 정제 마유가 사용되고, 상기 정제 마유를 리포좀 형태로 제형화한 마유 리포좀을 사용하므로, 탈모 방지 및 발모 촉진 효과를 더욱 향상시킬 수 있게 된다. 상기 마유 리포좀을 함유하는 조성물은 탈모 방지 및 발모 촉진을 위한 화장료 조성물 또는 약학적 조성물로 사용될 수 있다..
본 발명의 다른 실시예에 따른 탈모 방지 및 발모촉진용 조성물은 정제 마유 15 내지 40중량부, 레시틴 2 내지 4중량부, 유화보조제 0.5 내지 2중량부 및 물 60 내지 70중량부로 이루어지는 마유리포좀을 포함하는 것을 특징으로 한다. 상기 마유리포좀은 조성물 총중량에 대하여 1 내지 90중량%로 포함하는 것이 바람직하다.
본 발명의 또 다른 실시예에 따른 마유리포좀의 제조방법은 정제 마유 수득단계와, 마유리포좀 형성단계를 포함한다. 상기 마유리포좀의 제조방법에 의해 제조된 마유리포좀은 탈모방지 및 발모촉진용 조성물에 사용되게 된다.
상기 정제마유수득단계는 말생지로부터 정제 마유를 수득하는 단계로, 말생지에 열수를 가한 후 여과하여 불순물이 제거된 조마유를 추출하는 조마유추출단계와, 상기 조마유를 정제하여 산가 및 과산화물가를 조절하고 무색 및 무취의 정제마유를 수득하는 조마유정제단계 등을 포함한다.
상기 조마유추출단계는 말생지에 열수를 가한 후 여과하여 불순물이 제거된 조마유를 추출하는 단계로, 말생지를 일정 크기로 분쇄하는 분쇄단계와, 분쇄된 말생지에 활성탄 및 규조토를 혼합하여 말생지혼합물을 형성하는 혼합단계와, 상기 말생지혼합물을 천으로 감싸 밀봉한 후 물에 담가 물혼합물을 형성하고 물혼합물을 가열하는 열수처리단계와, 상기 열수처리단계 후 물혼합물을 여과하여 여과액을 얻는 여과단계와, 상기 여과단계에서 얻은 여과액을 정치하여 기름층과 물층으로 층분리한 후 물층의 물을 제거하여 조마유(기름층)를 수득하는 분리단계 등을 포함한다.
상기 말생지는 도축한 말에서 정육을 통해 얻은 지방덩어리를 의미한다. 상기 혼합단계에서 활성탄은 말생지 100중량부에 대하여 3 내지 5중량부가 사용되는 바람직하고, 규조토는 말생지 100중량부에 대하여 0.5 내지 2중량부가 사용되는 것이 바람직하다. 상기 열수처리단계에서 천은 부직포, 면포 등이 사용될 수 있으며, 물은 말생지 100중량부에 대하여 800 내지 1000중량부가 사용되는 것이 바람직하고, 물혼합물은 85 내지 95℃의 온도에서 50 내지 70분 동안 가열되는 것이 바람직하다. 상기 여과단계는 물혼합물을 68 내지 70℃로 냉각하여 수행되며, 공지의 다양한 추출기, 여과기 등을 이용하여 수행될 수 있다.
상기 조마유정제단계는 상기 조마유를 정제하여 산가 및 과산화물가를 조절하고 무색 및 무취의 정제마유를 수득하는 단계로, 조마유 100중량부, 달소브(dalsorb, 규산마그네슘) 1.5 내지 2.5중량부, 활성백토 1.5 내지 2.5중량부, 활성탄 5 내지 7중량부, BHT(디부틸하이드록시톨루엔) 0.1 내지 0.2중량부를 혼합하여 제1조마유혼합물을 형성하고 제1조마유혼합물을 80 내지 120℃에서 35 내지 45분동안 교반하는 제1교반단계와, 상기 제1교반단계후 제1조마유혼합물에 셀라이트(celite) 4 내지 6중량부를 추가로 혼합하여 제2조마유혼합물을 형성하고 제2조마유혼합물을 80 내지 120℃에서 15 내지 25분동안 교반하는 제2교반단계와, 상기 제2교반단계 후 제2마유혼합물을 여과하여 정제마유를 수득하는 수득단계 등을 포함한다. 상기 수득단계를 통해 얻은 정제마유는 도 2에 도시된 바와 같이 무색 및 무취를 가지게 되며 상온에서 액체 상태를 유지하게 된다.
상기 달소브가 1.5중량부보다 적게 사용되는 경우 과산화물가를 낮출 수 없고 달소브가 2.5중량부보다 많이 사용되는 경우 과산화물가 감소폭은 크지 않으면서 오히려 산가가 증가시키게 되며, 상기 셀라이트를 사용하지 않거나 처음에 혼합하여 제1조마유혼합물을 형성하는 경우 과산화물가를 낮출 수 없고, 활성백토와 활성탄이 함께 사용되고 특정 범위(활성백토 1.5 내지 2.5중량부 및 활성탄 5 내지 7중량부)에서 사용될 때 과산화물가 및 산가를 효과적으로 낮출 수 있으며, BHT를 추가로 혼합한 경우 오랜 기간 동안 과산화물가를 낮게 유지할 수 있고, 본 발명을 통해 얻은 정제마유는 보존제의 유무와 상관없이 산가를 낮게 유지할 수 있다. 상기 조마유혼합물은 80 내지 120℃의 온도에서 교반되어 정제마유 수득량을 늘일 수 있으며, 특히 80℃의 온도에서 교반되는 경우 정제마유 수득량을 늘일 수 있을 뿐만 아니라 얻은 투명한 정제마유를 얻을 수 있게 된다.
상기 마유리포좀 형성단계는 상기 정제 마유 수득단계에서 수득한 정제 마유를 이용하여 마유리포좀을 형성하는 단계로, 정제 마유 15 내지 40중량부, 레시틴 2 내지 4중량부, 유화보조제 0.5 내지 2중량부 및 물 60 내지 70중량부를 혼합하여 마유혼합물을 형성하는 혼합단계와, 상기 혼합단계에서 형성된 마유혼합물을 유화기에 투입하여 유화작업을 진행하여 입자 형태의 리포좀 제형의 마유리포좀을 형성하는 유화단계 등을 포함한다. 었다. 상기 정제 마유는 혼합전 40 내지 45℃로 가열하여 사용하는 것이 바람직하고, 유화기를 통한 유화 횟수는 3 내지 6-pass로 설정하는 것이 바람직하며, 유화기의 압력은 20,000 내지 30,000psi로 설정되는 것이 바람직하다.
이하, 실시예를 통해서 본 발명을 보다 상세히 설명하기로 한다. 하지만, 이들은 본 발명을 보다 상세하게 설명하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 권리범위가 이에 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1> 정제 마유의 제조 및 특성 확인
1. 조마유 추출
말생지 4kg을 믹서기로 분쇄하고, 분쇄된 말생지에 160g의 활성탄 및 40g의 규조토를 혼합하여 말생지혼합물을 형성하고, 상기 말생지혼합물을 부직포에 넣고 면포로 밀봉한 후 추출기에 넣고 상기 추출기에 물 36L를 추가로 넣어 물혼합물을 형성하였다. 상기 추출기 내의 물혼합물을 90℃에서 1시간 가열한 후 72℃까지 냉각하고 추출기를 작동시켜 여과하여 여과액을 얻고, 상기 여과액을 통에 담아 정치시킨 후 아래 물층을 제거하여 조마유를 얻었다. 이를 통해, 조마유 2.5L를 얻었으며, 부직포 내의 잔여물은 1.3kg이었다.
2. 정제 마유의 추출
(1) 정제마유 1
상기 조마유 100중량부당 달소브(dalsorb 2500M) 2중량부, 활성백토 2중량부, 활성탄 6중량부를 혼합하여 조마유혼합물을 형성하고 상기 조마유혼합물을 80℃에서 60분동안 교반하였다. 위 교반 과정에서 40분이 지난 지점에 셀라이트(celite) 5중량부를 추가로 혼합하였다. 60분 교반이 끝난 후 여과기를 이용하여 조마유혼합물을 여과하여 정제마유 1(도 2)을 수득하였다.
(2) 정제마유 2
달소브 2중량부 대신에 1중량부를 사용한 것을 제외하고는 다른 조건을 실시예 1의 2의 (1)과 동일하게 하여 정제마유 2를 얻었다.
(3) 정제마유 3
달소브 2중량부 대신에 3중량부를 사용한 것을 제외하고는 다른 조건을 실시예 1의 2의 (1)과 동일하게 하여 정제마유 3을 얻었다.
(4) 정제마유 4
셀라이트를 사용하지 않은 것을 제외하고는 다른 조건을 실시예 1의 2의 (1)과 동일하게 하여 정제마유 4를 얻었다.
(5) 정제마유 5
40분이 지난 시점이 아니라 처음에 셀라이트 5중량부를 추가로 첨가하여 조마유혼합물을 형성한 것을 제외하고는 다른 조건을 실시예 1의 2의 (1)과 동일하게 하여 정제마유 5를 얻었다.
(6) 정제마유 6
80℃가 아니라 100℃에서 교반한 것을 제외하고는 다른 조건을 실시예 1의 2의 (1)과 동일하게 하여 정제마유 6을 얻었다.
(7) 정제마유 7
활성백토 2중량부 및 활성탄 6중량부가 사용되지 않고 활성백토 8중량부가 사용된 것을 제외하고는 다른 조건을 실시예 1의 2의 (1)과 동일하게 하여 정제마유 7을 얻었다.
(8) 정제마유 8
활성백토 2중량부 및 활성탄 6중량부가 사용되지 않고 활성탄 8중량부가 사용된 것을 제외하고는 다른 조건을 실시예 1의 2의 (1)과 동일하게 하여 정제마유 8을 얻었다.
(9) 정제마유 9
활성백토 2중량부 및 활성탄 6중량부가 사용되지 않고 활성백토 4중량부 및 활성탄 4중량부가 사용된 것을 제외하고는 다른 조건을 실시예 1의 2의 (1)과 동일하게 하여 정제마유 9를 얻었다.
(10) 정제마유 10
BHT 0.2중량부가 추가로 혼합되어 조마유혼합물을 형성한 것을 제외하는 다른 조건을 실시예 1의 2의 (1)과 동일하게 하여 정제마유 10을 얻었다.
(11) 정제마유 11
BHT 0.5중량부가 추가로 혼합되어 조마유혼합물을 형성한 것을 제외하는 다른 조건을 실시예 1의 2의 (1)과 동일하게 하여 정제마유 11을 얻었다.
3. 정제 마유의 산가 및 과산화물가의 측정
(1) 실시예 1의 1 및 2에서 얻은 조마유 및 정제마유에 대하여 산가와 과산화물가를 측정하여, 제조 시점의 결과를 표 1에 나타내었고, 제조한 후 30일 상온에서 보관한 후 결과를 표 2에 나타내었다. 산값은 0.1N KOH/Methanol 용액을 사용하는 기준 유지 분석법에 따라 측정하였고, 과산화물값은 포화요오드 칼륨 용액을 사용하는 AOAC법에 따라 측정하였다.
(2) 하기 표 1의 정제마유 2 및 3의 결과를 정제마유 1의 결과와 대비하면 달소브가 적게 사용되는 경우 과산화물가를 낮출 수 없고 달소브가 많이 사용되는 경우 과산화물가 감소폭은 크지 않으면서 오히려 산가가 증가하는 것을 알 수 있다. 또한, 정제마유 4 및 5의 결과를 정제마유 1의 결과와 대비하면 셀라이트를 사용하지 않거나 처음에 혼합하는 경우 과산화물가를 낮출 수 없을 알 수 있고, 정제마유 8 및 9의 결과를 정제마유 1의 결과와 대비하면 활성백토와 활성탄이 적정 범위에서 사용될 때 과산화물가 및 산가를 낮출 수 있음을 알 수 있다.
과산화물가
(meq/kg)
산가
(mgKOH/g)
과산화물가
(meq/kg)
산가
(mgKOH/g)
조마유 20 2.0 정제마유 6 0.38 0.35
정제마유 1 0.4 0.33 정제마유 7 1.4 0.43
정제마유 2 2.8 0.22 정제마유 8 1.2 0.40
정제마유 3 0.42 0.66 정제마유 9 0.8 0.37
정제마유 4 2.6 0.15 정제마유 10 0.6 0.26
정제마유 5 2.2 0.35 정제마유 11 1.2 0.30
(3) 표 2를 보면, BHT를 추가로 혼합한 경우 오랜 기간 동안 과산화물가를 낮게 유지할 수 있고, 본 발명에 따라 얻은 정제마유는 보존제의 유무와 상관없이 산가를 낮게 유지할 수 있음을 알 수 있다.
과산화물가(0일) 과산화물가(30일) 산가(0일) 산가(30일)
조마유 20 60 2.0 40
정제마유 1 0.4 35 0.33 0.46
정제마유 10 0.6 6 0.26 0.33
정제마유 11 1.2 5 0.30 0.35
4. 정제마유의 관능평가
(1) 실시예 1의 1 및 2에서 얻은 조마유 및 정제마유에 대하여 관능평가를 실시하여 그 결과를 하기의 표 3에 나타내었다. 관능평가는 냄새, 색상에 대하여 실시하였으며, 20명을 대상으로 5점 척도법으로 평가하였고, 무색 및 무취에 가까운 경우에 높은 점수를 부여하도록 하였다.
(3) 표 3을 보면, 정제마유는 조마유에 비하여 투명한 색상을 가지고 냄새가 나지 않음을 알 수 있으며, 정제마유 6은 노란색의 빛깔을 띄어 색상에서 낮은 점수를 받았는데 이를 통해 너무 높은 온도에서 조마유혼합물을 형성하는 경우 색상에 대한 관능성이 떨어짐을 알 수 있다.
조마유 정제마유 1 정제마유 6 정제마유 10
색상 2 5 3 5
냄새 1 5 5 5
<실시예 2> 마유 리포좀의 제조 및 특성 확인
1. 마유 리포좀의 제조
(1) 표 4에 기재된 중량 비율로 정제 마유 1, 레시틴, 유화보조제(아라셀 165) 및 정제수를 혼합하고 65 내지 70℃로 가열하여 형성한 혼합물을, 압력이 25,000psi로 설정된 유화기(Microfluidizer)에 투입하여 유화작업을 통해 마유 리포좀 1 내지 3을 얻었다. 상기 정제 마유는 1은 혼합전 40 내지 45℃로 가열하였고, 유화 횟수는 마유 리포좀 1의 경우 3-pass로, 마유 리포좀 2의 경우 4-pass로, 마유 리포좀 3의 경우 5-pass로 설정하였다.
(2) 정제 마유 1 대신에 조마유를 사용한 것을 제외하고는 다른 조건을 마유 리포좀 3과 동일하게 하여 마유 리포좀 4를 제조하였다.
마유 리포좀 1 마유 리포좀 2 마유 리포좀 3 마유 리포좀 4
정제 마유 정제마유 1 20 정제마유 1 25 정제마유 1 30 조마유 30
레시틴 3 3 3 3
유화보조제 1.3 1.3 1.3 1.3
정제수 잔량 잔량 잔량 잔량
합계 100 100 100 100
(3) 상기 마유 리포좀 1 내지 4에 대하여, 입자분석기(Particle Analyzer)를 이용하여 입도 분포를 확인하였으며, 입도 평균을 표 5에 나타내었다(도 3은 마유 리포좀 3의 입도 분포를 나타내는 그래프임). 입도 분포 분석 결과 결과 정제마유 1을 사용한 경우 리포좀 제형의 균일한 입자를 형성할 수 있음을 확인하였고, 마유 리포좀 4보다 마유 리포좀 3이 작은 사이즈의 균일한 입자 형태를 가짐을 확인할 수 있어 마유 리포좀 형성 시 마유의 품질이 마유 리포좀 형성에 영향을 미칠 수 있음을 확인할 수 있었다.
마유 리포좀 1 마유 리포좀 2 마유 리포좀 3 마유 리포좀 4
입도 평균(nm) 230 190 180 250
<실시예 3> 도포용 조성물의 제조 및 상기 도포용 조성물의 동물에의 적용
1. 상기 마유 리포좀 3 100중량부, 글리세린 5중량부 및 비타민 E 1.5중량부를 혼합하여 도포용 조성물 1을 제조하였다.
2. 정제마유 1 30중량부, 레시틴 3중량부, 유화보조제 1.3중량부, 정제수 6.57중량부, 글리세린 5중량부 및 비타민 E 1.5중량부를 혼합하여 도포용 조성물 2를 제조하였다.
3. 마유 리포좀 3 대신에 마유 리포좀 4를 사용한 것을 제외하고는 다른 조건을 실시예 3의 1과 동일하게 하여 도포용 조성물 3을 제조하였다.
4. 7주령 C57BL/6 mouse의 등에서 털을 제모하고, 등 피부에 도포용 조성물 1 내지 3 각각을 동일 량으로 매일 도포하고, 15일이 지난후 등 피부를 채취하고 일부 피부는 조직검사용 10% 포르말린 고정액에 보관하고, 나머 피부는 antibody array 분석용 냉동 시료로 보관하였다.
<실시예 4> 조직 검사를 통한 육모 효능 평가
1. 상기 포르말린 고정액에 보관된 마우스 피부를 paraffin block으로 만들고 sectioning한 뒤 헤마톡실린(hematoxylin)과 에오신(eosin)으로 염색(H&E staining)을 진행한 후, 광학 현미경으로 관찰하고 모낭수를 계산하여 그 결과를 표 6에 나타내었다(컨트롤 대비, 100% 이상 증가하는 경우 ++로 표기하고, 200% 이상 증가하는 경우 +++로 표기함). 도 4에서 (a)는 컨트롤의 광학 현미경 이미지이며, (b)는 도포용 조성물 1을 적용한 피부 절편의 광학 현미경 이미지이다.
2. 표 6을 보면, 도포용 조성물이 사용된 경우 모낭수가 증가됨을 알 수 있어 마유가 육모 효과를 가짐을 알 수 있고, 도포용 조성물 1을 사용한 경우 도포용 조성물 2 및 3을 사용한 경우보다 모낭수가 많음을 알 수 있어, 마유를 리포좀 제형으로 사용하는 경우 육모 효과를 향상시킬 수 있고, 사용되는 마유의 품질에 따라 육모 효과에 영향을 미침을 알 수 있다.
컨트롤 도포용 조성물 1 도포용 조성물 2 도포용 조성물 3
모낭수 + +++ ++ ++
<실시예 5> Antibody array를 이용한 육모 효능 평가
1. 발모관련 유전자 증감 분석을 통해 마유 리포좀의 육모 효과를 관찰하기 위하여 antibody array 분석을 실시하여, 발모를 촉진시키는 agnage factors의 분석 결과를 표 7에 나타내었다. 상기 antibody array 분석은 상기 냉동 시료를 절단하여 단백질 샘플을 준비하고 단백질 샘플을 비오티닐레이션(biotinylation)화 시킨 후, antibody array를 가지고 비오티닐레이션화된 단백질 샘플을 배양한 후, 형광을 검출하여 수행되었으며, 상기 antibody array 분석에서 label로 Cy3을 사용하였고, antibody array로 Raybiotech Mouse L308을 사용하였고, Scanner로 GenePix 4100A(Agilent)을 사용하였고, Image Analysis로 GenePix Pro 7.0(Agilent)을 사용하였다.
2. 표 7을 보면, 발현이 증감된 단백질을 중심으로 발모를 촉진시키는 anagen factors에 대한 분석 결과, 도포용 조성물 1을 사용한 경우 도포용 조성물 2 및 3을 사용한 경우보다 대체적으로 anagen factors의 발현 양이 많음을 알 수 있다.
도포용 조성물 1/
컨트롤
도포용 조성물 2/
컨트롤
도포용 조성물 3/
컨트롤
beta-Catenin 1.0788 1.035 1.019
DKK-1 1.066 1.024 1.016
FGF R3 1.230 1.112 1.085
b FGF 1.141 1.142 1.121
Prolactin 1.150 1.123 1.124
VEGF 0.950 0.965 0.944
Shh-N 1.293 1.187 1.176
이상에서, 출원인은 본 발명의 바람직한 실시예들을 설명하였지만, 이와 같은 실시예들은 본 발명의 기술적 사상을 구현하는 일 실시예일 뿐이며 본 발명의 기술적 사상을 구현하는 한 어떠한 변경예 또는 수정예도 본 발명의 범위에 속하는 것으로 해석되어야 한다.

Claims (8)

  1. 삭제
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 말생지로부터 정제 마유를 수득하는 정제마유수득단계와, 상기 정제마유수득단계에서 수득한 정제 마유를 이용하여 마유 리포좀을 형성하는 마유리포좀형성단계를 포함하고, 상기 마유리포좀형성단계에서 형성된 마유 리포좀은 탈모방지 및 발모촉진용 조성물에 사용되며,
    상기 정제마유수득단계는 말생지에 열수를 가한 후 여과하여 불순물이 제거된 조마유를 추출하는 조마유추출단계와, 상기 조마유를 정제하여 산가 및 과산화물가를 조절하고 무색 및 무취의 정제마유를 수득하는 조마유정제단계를 포함하고,
    상기 조마유추출단계는 말생지를 일정 크기로 분쇄하는 분쇄단계와, 분쇄된 말생지에 활성탄 및 규조토를 혼합하여 말생지혼합물을 형성하는 혼합단계와, 상기 말생지혼합물을 천으로 감싸 밀봉한 후 물에 담가 물혼합물을 형성하고 물혼합물을 가열하는 열수처리단계와, 상기 열수처리단계 후 물혼합물을 여과하여 여과액을 얻는 여과단계와, 상기 여과단계에서 얻은 여과액을 정치하여 기름층과 물층으로 층분리한 후 물층의 물을 제거하여 조마유를 수득하는 분리단계를 포함하며,
    상기 혼합단계에서 활성탄은 말생지 100중량부에 대하여 3 내지 5중량부가 사용되며, 규조토는 말생지 100중량부에 대하여 0.5 내지 2중량부가 사용되고, 상기 열수처리단계에서 물은 말생지 100중량부에 대하여 800 내지 1000중량부가 사용되며, 물혼합물은 85 내지 95℃의 온도에서 50 내지 70분 동안 가열되고, 상기 여과단계는 물혼합물을 68 내지 70℃로 냉각한 후 수행되고,
    상기 조마유정제단계는 조마유 100중량부, 달소브 1.5 내지 2.5중량부, 활성백토 1.5 내지 2.5중량부, 활성탄 5 내지 7중량부, 및 BHT 0.1 내지 0.2중량부를 혼합하여 제1조마유혼합물을 형성하고 제1조마유혼합물을 80 내지 120℃에서 35 내지 45분동안 교반하는 제1교반단계와, 상기 제1교반단계후 제1조마유혼합물에 셀라이트 4 내지 6중량부를 추가로 혼합하여 제2조마유혼합물을 형성하고 제2조마유혼합물을 80 내지 120℃에서 15 내지 25분동안 교반하는 제2교반단계와, 상기 제2교반단계 후 제2마유혼합물을 여과하여 정제마유를 수득하는 수득단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 마유 리포좀의 제조방법.
  5. 삭제
  6. 삭제
  7. 삭제
  8. 삭제
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