KR102123505B1 - 관절염 저감화 효능을 갖는 김치 유산균 락토바실러스 사케아이 wikim0109 - Google Patents

관절염 저감화 효능을 갖는 김치 유산균 락토바실러스 사케아이 wikim0109 Download PDF

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Abstract

본 발명은 김치로부터 분리된 신규한 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109(Lactobacillus sakei WIKIM0109) 및 이를 포함하는 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따른 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109는 혈중 IgG 및 IgG2a 생성 억제 활성과 IFN-γ, IL-17 및 TNF-α 생성을 억제 활성을 갖는, 유산균으로서 사람 또는 동물의 관절염의 예방 및 개선, 정장 등의 용도를 위해 다양하게 활용될 수 있다.

Description

관절염 저감화 효능을 갖는 김치 유산균 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109 {Lactobacillus sakei WIKIM0109 having anti-arthritis activity and composition for comprising the same}
본 발명은 신규한 락토바실러스 사케아이 균주 및 이를 포함하는 조성물에 관한 것이다.
류마티스 관절염은 1 내지 1.5%의 유병율을 가지고 있는 자가면역 질환이자 만성적인 염증 질환으로, 관절내 염증성 변화로 인해 전신 과절 부종과 통증이 유발되고 악화되면 관절의 변형 및 관절 굽힘이 어려운 장애 등의 심각한 결과를 초래할 수 있다.
현재까지 관절염이 유발되는 직접적인 원인은 아직 명확하게 밝혀지지 않았으며, 관절염의 치료를 위해 스테로이드, 비-스테로이드계 항염증제, 통풍 억제제, 면역 억제제 등의 다양한 치료제가 이용되고 있다. 하지만 이러한 치료제는 근본적인 치료 효과를 나타내지 못하며 다양한 부작용으로 인해 사용이 제한되고 있다. 또한, 몇몇 화학요법적 약제의 경우, 이미 발생한 관절염에 대한 효능 부족과 같은 결점을 가지고 있다.
따라서, 치료 부작용이 적으면서 염증성 증상과 통증 완화에 효과를 보이고 복용이 간편한 관절염 치료제 개발이 요망되고 있는 실정이다. 이에, 본 발명에서는 효과적으로 관절염 증상을 완화시키고, 혈액 내 염증 관련 인자의 생성을 억제시키는 김치 유래 유산균에 대해 연구하였다.
한국 공개특허 제10-2018-0104544호
본 발명은 관절염 개선 활성이 우수한 신규한 락토바실러스 속 유산균을 제공하고자 한다.
이에, 본 발명자들은 관절염 개선 효과를 나타내는 균주를 찾고자 노력한 결과, 신규한 락토바실러스 속 유산균 균주인 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109(Lactobacillus sakei WIKIM0109)을 분리, 동정하여 본 발명을 완성하게 되었다.
본 발명에 따른 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109(Lactobacillus sakei WIKIM0109)은 김치 유래의 락토바실러스 사케아이 신규 균주이다. 비록 본 발명에서의 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109을 김치에서 분리, 동정하기는 했으나, 이의 입수 경로가 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에의 실시예를 통해 분리된 전통발효식품으로부터의 유산균 균주는 미생물의 동정 및 분류를 위한 16S rRNA 염기서열 분석 결과, SEQ ID NO: 1의 핵산서열을 갖는 것으로 나타났다.
따라서, SEQ ID NO: 1의 16S rRNA 염기서열을 갖는 본 발명의 미생물을 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109(Lactobacillus sakei WIKIM0109)로 명명하였으며, 생물자원센터에 2019년 03월 07일자로 기탁하였다 (수탁번호 KCTC13818BP).
본 발명의 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109(Lactobacillus sakei WIKIM0109; 수탁번호 KCTC13818BP) 균주는 그람양성균이고 호기적 조건과 혐기적 조건에서 모두 성장이 가능한 통성 혐기성(facultative anaerobe)이며, 간균의 형태를 취하고 있다.
본 발명의 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109는, 유산균의 일반적인 정장 효과 및 면역 증강 효과를 갖는다. 락토바실러스 속의 유산균이 정장 효과 면역 증강 효과를 갖는다는 것은 잘 알려져 있는 사실이다.
하기 실시예에서는, 본 발명의 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109이 혈중 IgG 및 IgG2a의 생성을 억제시키고, IFN-γ, IL-17 및 TNF-α 생성을 억제시킴으로써 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109 균주가 관절염의 개선 효과를 나타내는 것을 확인하였다. 따라서, 본 발명에 따른 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109는 사람 또는 동물의 정장, 관절염의 개선, 면역강화 등의 용도를 위해 다양하게 활용될 수 있다.
이에 본 발명의 한 구체예에서는 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109, 이의 배양물, 이의 파쇄물 또는 이의 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 조성물에 포함되는 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109는 생균체로서 존재할 수 있으며, 또한 건조 또는 동결건조된 형태로 존재할 수도 있다. 다양한 조성물 내에 포함시키기 적합한 유산균의 형태 및 제제화 방법은 당업자에게 잘 알려져 있다.
한 구체예에서, 상기 조성물은 생균으로 존재하는 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109 균주를 포함하는 경구 투여용 조성물일 수 있다.
또한, 본 발명의 한 구체예에서는 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109, 이의 배양물, 이의 파쇄물 또는 이의 추출물을 유효성분으로 포함하는 정장제 조성물을 제공한다. 본 발명에 따른 정장제 조성물은 사람을 포함한 동물의 위장 질환의 예방, 치료, 개선에 이용될 수 있으며, 바람직하게는 상기 동물은 소, 말, 돼지와 같은 가축을 포함한다. 상기 '위장 질환'으로는 위장 위해 세균감염 및 염증성 장 질환을 모두 포함하며, 예를 들어 병원성 미생물(대장균, 살모넬라, 클로스트리디움 등)에 의한 감염성 설사, 위장염증, 염증성 장 질환, 신경성 장염 증후군, 소장 미생물 과성장증, 장 급이성 설사 등을 포함하지만, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 따른 정장제 조성물은 경구로 투여하는 것이 바람직하다. 투여량은 위장 질환의 종류, 질환의 정도, 연령, 성별, 인종, 치료 또는 예방 목적 등에 따라 달라질 수 있으나, 일반적으로 성인을 기준으로 하루에 1천만 마리에서 1,000억마리를 투여할 수 있다.
본 발명은 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109, 이의 배양물, 이의 파쇄물 또는 이의 추출물을 유효성분으로 포함하는 면역 증강용 조성물을 제공한다. 락토바실러스 속의 유산균이 면역 증강 효과를 갖는다는 것은 잘 알려져 있는 사실이다.
본 발명은 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109, 이의 배양물, 이의 파쇄물 또는 이의 추출물을 유효성분으로 포함하는 관절염의 예방 및 개선용 조성물을 제공한다. 상기 관절염은 류마티스 관절염, 강직성 척추염, 골관절염 또는 건선성 관절염으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 질환일 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다.
한 구체예에서, 상기 관절염은 류마티스 관절염일 수 있다.
본 발명에 따른 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109는 이러한 유리한 작용으로 인해 의약, 건강기능식품, 식품, 사료, 사료 첨가제 또는 유산균 스타터 내에 포함될 수 있다.
한 구체예에서, 본 발명의 조성물이 약제학적 조성물로 활용될 경우, 본 발명의 약제학적 조성물은 상기 유효성분 이외에 약제학적으로 적합하고 생리학적으로 허용되는 보조제를 사용하여 제조될 수 있으며, 상기 보조제로는 부형제, 붕해제, 감미제, 결합제, 피복제, 팽창제, 윤활제, 활택제 또는 향미제 등을 사용할 수 있다.
상기 약제학적 조성물은 투여를 위해서 상기 기재한 유효성분 이외에 추가로 약제학적으로 허용가능한 담체를 1종 이상 포함하여 약제학적 조성물로 바람직하게 제제화할 수 있다.
예를 들어, 정제 또는 캡슐제의 형태로의 제제화를 위해, 유효성분은 에탄올, 글리세롤, 물 등과 같은 경구, 무독성의 약제학적으로 허용가능한 불활성 담체와 결합될 수 있다. 또한, 원하거나 필요한 경우, 적합한 결합제, 윤활제, 붕해제 및 발색제 또한 혼합물로 포함될 수 있다. 적합한 결합제는 이에 제한되는 것은 아니나, 녹말, 젤라틴, 글루코스 또는 베타-락토오스와 같은 천연당, 옥수수감미제, 아카시아, 트래커캔스 또는 소듐올레이트와 같은 천연 및 합성검, 소듐 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 소듐 벤조에이트, 소듐아세테이트, 소듐 클로라이드등을 포함한다. 붕해제는 이에 제한되는 것은 아니나, 녹말, 메틸셀룰로스, 아가, 벤토니트, 잔탄검 등을 포함한다. 액상 용액으로 제제화되는 조성물에 있어서 허용가능한 약제학적 담체로는, 멸균 및 생체에 적합한 것으로서, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충식염수, 알부민 주사 용액, 덱스트로즈 용액, 말토덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 1 성분이상을 혼합하여 사용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다. 또한 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주사용 제형, 환약, 캡슐, 과립 또는 정제로 제제화할 수 있다.
나아가 해당 분야의 적절한 방법으로 Remington's Pharmaceutical Science, Mack Publishing Company, Easton PA에 개시되어 있는 방법을 이용하여 각 질환에 따라 또는 성분에 따라 바람직하게 제제화할 수 있다.
다른 구체예에서, 본 발명은 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109, 이의 배양물, 이의 파쇄물 또는 이의 추출물을 유효성분으로 포함하는 관절염의 예방 및 개선용 식품일 수 있다. 상기 식품 조성물은 건강기능식품 또는 음료, 바 등의 형태를 포함할 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 균주를 유효성분으로 포함하는 식품 조성물은 발효유 등의 음료를 포함할 수 있다. 이에, 본 발명은 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109, 이의 배양물, 이의 파쇄물 또는 이의 추출물을 유효성분으로 이루어지는 발효용 유산균 스타터를 제공한다.
본 발명에 따른 식품 조성물은 상기 약제학적 조성물과 동일한 방식으로 제제화되어 기능성 식품으로 이용하거나, 각종 식품에 첨가할 수 있다. 본 발명의 조성물을 첨가할 수 있는 식품으로는 예를 들어, 음료류, 비타민복합제, 건강보조식품류 등이 있다.
본 발명의 식품 조성물은 식품 제조시에 통상적으로 첨가되는 성분을 포함할 수 있으며, 예를 들어, 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소, 조미제 및 향미제를 포함한다. 상술한 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스, 올리고당 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 사이클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 향미제로서 천연 향미제 [타우마틴, 스테비아추출물 (예를 들어 레바우디오시드A, 글리시르히진 등)] 및 합성향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 사용할 수 있다. 예컨대, 본 발명의 식품 조성물이 드링크제와 음료류로 제조되는 경우에는 구연산, 액상과당, 설탕, 포도당, 초산, 사과산, 과즙, 및 각종식물추출액 등을 추가로 포함시킬 수 있다.
상기 본 발명에 따른 조성물은 사료첨가제 또는 사료로서 이용될 수 있다.
사료 첨가제로서 이용될 경우, 상기 조성물은 20 내지 90% 고농축액이거나 분말 또는 과립 형태로 제조될 수 있다. 상기 사료첨가제는 구연산, 후말산, 아디픽산, 젖산, 사과산등의 유기산이나 인산 나트륨, 인산 칼륨, 산성 피로인산염, 폴리인산염(중합인산염) 등의 인산염이나, 폴리페놀, 카테킨, 알파-토코페롤, 로즈마리 추출물, 비타민 C, 녹차 추출물, 감초 추출물, 키토산, 탄닌산, 피틴산 등의 천연 항산화제 중 어느 하나 또는 하나 이상을 추가로 포함할 수 있다. 사료로서 이용될 경우, 상기 조성물은 통상의 사료 형태로 제제화 될 수 있으며, 통상의 사료성분을 함께 포함할 수 있다.
상기 사료첨가제 및 사료는 곡물, 예를 들면 분쇄 또는 파쇄된 밀, 귀리, 보리, 옥수수 및 쌀; 식물성 단백질 사료, 예를 들면 평지, 콩, 및 해바라기를 주성분으로 하는 사료; 동물성 단백질 사료, 예를 들면 혈분, 육분, 골분 및 생선분; 당분 및 유제품, 예를 들면 각종 분유 및 유장 분말로 이루어지는 건조성분 등을 더 포함할 수 있으며, 이외에도 영양보충제, 소화 및 흡수향상제, 성장촉진제 등을 더 포함할 수 있다.
상기 사료첨가제는 동물에게 단독으로 투여하거나 식용 담체 중에서 다른 사료첨가제와 조합하여 투여할 수도 있다. 또한, 상기 사료첨가제는 탑드레싱으로서 또는 이들을 동물사료에 직접 혼합하거나 또는 사료와 별도의 경구제형으로 용이하게 동물에게 투여할 수 있다. 상기 사료첨가제를 동물사료와 별도로 투여할 경우, 당해 기술분야에 잘 알려진 바와 같이 약제학적으로 허용가능한 식용 담체와 조합하여, 즉시 방출 또는 서방성 제형으로 제조할 수 있다. 이러한 식용 담체는 고체 또는 액체, 예를 들어 옥수수전분, 락토오스, 수크로오스, 콩플레이크, 땅콩유, 올리브유, 참깨유 및 프로필렌글리콜일 수 있다. 고체 담체가 사용될 경우, 사료첨가제는 정제, 캡슐제, 산제, 트로키제 또는 함당정제 또는 미분산성 형태의 탑 드레싱일 수 있다. 액체 담체가 사용될 경우, 사료첨가제는 젤라틴 연질 캡슐제, 또는 시럽제나 현탁액, 에멀젼제, 또는 용액제의 제형일 수 있다.
또한, 상기 사료첨가제 및 사료는 보조제, 예를 들어 보존제, 안정화제, 습윤제 또는 유화제, 용액촉진제 등을 함유할 수 있다. 상기 사료첨가제는 침주, 분무 또는 혼합하여 동물의 사료에 첨가하여 이용될 수 있다.
본 발명의 사료 또는 사료첨가제는 포유류, 가금 및 어류를 포함하는 다수의 동물식이에 적용할 수 있다.
상기 포유류로서 돼지, 소, 양, 염소, 실험용 설치동물, 및 실험용 설치동물뿐만 아니라, 애완동물(예: 개, 고양이) 등에게 사용할 수 있으며, 상기 가금류로서 닭, 칠면조, 오리, 거위, 꿩, 및 메추라기 등에도 사용할 수 있고, 상기 어류로서 송어 등에 이용될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 따른 조성물에 포함되는 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109 균주의 양은 1회를 기준으로 약 106 내지 1012 cfu/g일 수 있으며, 예컨대 107 내지 1011 cfu/g, 108 내지 1010 cfu/g일 수 있다. 균주를 투여할 경우에는 생균 상태로 투여하는 것이 바람직하며, 섭취 전에 사멸시키거나 감쇄(attenuation) 상태로 투여할 수 있다. 또한, 배양 상등액 등을 사용하여 제조할 경우에는 열처리 과정을 통한 멸균화 과정을 추가적으로 거칠 수 있다. 최소의 효능을 가지는데 필요한 균주량 및 일일 섭취 정도는 섭취자의 신체 또는 건강상태에 따라 달라질 수 있으나, 일반적으로 약 106 내지 1012 cfu/g일 수 있으며, 예컨대 107 내지 1011 cfu/g, 108 내지 1010 cfu/g일 수 있다.
본 발명의 이점 및 특징, 그리고 그것들을 달성하는 방법은 상세하게 후술되어있는 실시예들을 참조하면 명확해질 것이다. 그러나 본 발명은 이하에서 개시되는 실시예들에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 구현될 것이며, 단지 본 실시예들은 본 발명의 개시가 완전하도록 하고, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위해 제공되는 것이며, 본 발명은 청구항의 범주에 의해 정의될 뿐이다.
본 발명에 따른 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109는 혈중 IgG 및 IgG2a의 생성 억제 활성과 IFN-γ, IL-17 및 TNF-α 생성 억제 활성을 나타내므로, 유산균으로서 사람 또는 동물의 정장, 면역강화, 위장 질환 및 관절염의 예방 또는 개선 등의 용도를 위해 다양하게 활용될 수 있다. 나아가, 발효용 스타터로서 유용하게 사용할 수 있다.
본 발명에 따른 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109는 김치로부터 분리된 유산균으로서, 혈중 IgG 및 IgG2a의 생성 억제 활성과 IFN-γ, IL-17 및 TNF-α 생성 억제 활성을 나타내므로, 관절염의 예방 또는 개선 등의 용도를 위해 다양하게 활용될 수 있다. 나아가, 발효용 스타터로서 유용하게 사용할 수 있다.
도 1은 본 발명의 균주를 경구 투여한 마우스 모델의 관절염 발병율 및 관절염 지수를 나타낸 결과이다.
도 2는 본 발명의 균주를 경구 투여한 마우스 모델의 관절염 유발에 따른 발 두께를 측정한 결과이다.
도 3은 혈중 IgG 및 콜라겐 특이적 IgG(CII-IgG) 생성량을 측정한 결과이다.
도 4는 혈중 IgG2a 및 콜라겐 특이적 IgG2a(CII-IgG2a) 생성량을 측정한 결과이다.
도 5는 콜라겐 항원 특이적 IFN-γ, IL-17 및 TNF-α 생성량을 측정한 결과이다.
이하, 본 발명을 실시예를 통해 상세히 설명한다. 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 범위가 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
[실시예]
실시예 1: 균주의 분리 및 동정
김치 추출물의 원액을 MRS 배지에 도말하여 얻은 균단일집락을 루프로 수거하여 MRS broth에 배양하였다. DNA 추출은 QIAamp DNA Mini Kit(QIAgen, Germany)를 사용하여 추출하였다. 추출된 DNA는 1% 아가로스 겔을 이용하여 확인하였으며, 16S rRNA gene을 증폭하기 위하여 추출된 genomic DNA를 주형으로 하여 PCR을 진행하였고, PCR 조건은 denaturation 95℃1분, annealing 45℃1 분, extension 72℃1 분 30초로 30 사이클을 수행하였다. 얻어진 PCR 산물은 마크로젠(Seoul, Korea)에 의뢰하여 서열을 분석하였다. 세균의 동정은 16SrRNA 서열을 National Center for Biotechnology Information(NCBI, www.ncbi.nlm.nih.gov)의 Basic Local Alignment Search Tool (BLAST) 검색엔진의 유사도 분석을 통해 수행하였다.
본 발명의 실시예를 통해 분리된 균주는 미생물의 동정을 위한 16S r RNA 염기서열 분석 결과, SEQ ID NO: 1의 핵산서열을 갖는 것으로 나타났다.
이에, 본 발명의 미생물을 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109(Lactobacillus sakei WIKIM0109)으로 명명하였으며, 생물자원센터에 2019년 03월 07일자로 기탁하였다(수탁번호 KCTC13818BP).
실시예 2: 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109의 관절염 개선 효능 확인
상기 실시예 1에서 분리한 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109 균주는 MRS 배지에서 30℃, 24시간동안 배양하고, 배양된 균체를 8,000rpm에서 5분동안 원심분리하여 PBS로 헹군 후 남아있는 배지성분을 제거하였다. 이후, PBS를 이용하여 1ⅹ1010 CFU/ml 균수로 정량하였으며, 0.1㎖(1ⅹ109 CFU)씩 존대를 이용하여 콜라겐 유도 관절염 마우스 모델에 주 5회 경구 투여하였다. 이때 음성 및 양성 대조군에는 멸균된 PBS를 투여하였다.
1) 콜라겐 유도 관절염 마우스 모델에서의 관절염 발생율 및 지수 측정
콜라겐 유도 관절염 마우스 모델에 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109 균주를 경구투여한 12주동안 관절염 지수(arthritic score)와 발병율을 도 1에 나타내었다.
그 결과, 콜라겐 유도 관절염 유발 대조군(CIA-No LAB)에서 가장 높은 발병율과 관절염 지수가 나타났으며, 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109 처리군(WIKIM0109)에서 발병율과 관절염 지수가 유의한 수준으로 감소한 것을 확인하였다.
2) 관능평가 및 발 두께 측정
락토바실러스 사케아이 WIKIM0109 균주를 실험 동물에 경구투여하여 4주 후 관절염의 양상을 임상적인 육안 평가법을 이용하여 관능평가와 발 두께를 측정하였다.
그 결과, 도 2에서 보는 것과 같이 정상군(Naive)에 비해 콜라겐 유도 관절염 유발 대조군(CIA-No LAB)에서 관능평가시 기준이 되는 관절 및 손가락에서 홍반, 부풀어 오름 등의 증상을 확인할 수 있으며, 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109 처리군(WIKIM0109)에서는 홍반 및 관절의 부풀어 오름 현상이 완화되고 발 두께가 대조군에 비해 감소하는 것을 확인하였다.
3) 혈중 IgG 및 IgG2a 농도 측정
실험 동물의 혈액을 채취하여 혈액 내 IgG와 콜라겐 항원 특이적 IgG 및 IgG2a와 콜라겐 항원 특이적 IgG2a의 농도를 측정하였다. 도 3은 IgG 및 콜라겐 항원 특이적 IgG(CII-IgG)의 농도를 측정한 결과이며, 도 4는 IgG2a 및 콜라겐 항원 특이적 IgG2a(CII-IgG2a)의 농도를 측정한 결과이다.
[표 1]
Figure 112019030812503-pat00001
도 3 및 표 1에서 보는 것과 같이, 정상군에 비해 관절염 유발시 혈액 내 IgG 및 IgG2a의 생성이 촉진되는 것을 확인할 수 있으며, 실험 동물에 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109를 투여하였을 때 IgG 및 IgG2a의 농도가 감소하는 것을 확인할 수 있었다. 특히 콜라겐 항원 특이적 IgG2a(CII-IgG2a)의 경우 대조군에 비해 약 30.4%의 생성을 유의적으로 억제시키는 것을 알 수 있었다.
4) 콜라겐 항원 특이적 IFN-γ, IL-17 및 TNF-α 생성 농도 측정
실험 동물의 관절 주위 림프절을 채취하여 단일 세포를 얻고, 각각 5ⅹ105 의 세포를 96 well plate에 분주한 후 48 시간 동안 콜라겐(50 ㎍/ml) 처리한 상층액을 이용하여 항원 특이적 IFN-γ, IL-17 및 TNF-α 생성 농도를 측정하였다. 도 5에서 보는 것과 같이 정상군에 비해 관절염 유발군에서 항원 특이적 IFN-γ, IL-17 및 TNF-α 생성이 증가하는 것을 볼 수 있으며, 실험 동물에 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109을 투여 했을 때 항원 특이적 IFN-γ, IL-17 및 TNF-α 생성이 유의적으로 감소하는 것을 확인할 수 있었다.
생물자원센터(국제) KCTC13818BP 20190307
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Claims (16)

  1. 수탁번호 KCTC13818BP의 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109{Lactobacillus sakei WIKIM0109}.
  2. 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109(Lactobacillus sakei WIKIM0109; 수탁번호 KCTC13818BP), 이의 배양물, 이의 파쇄물 또는 이의 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증성 관절염의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  3. 제2항에 있어서,
    염증성 관절염은 류마티스 관절염, 강직성 척추염, 골관절염 또는 건선성 관절염인 약학 조성물.
  4. 제2항에 있어서,
    상기 조성물은 혈중 IgG 및 IgG2a의 생성 억제에 의해 과민성 염증 반응을 저감시키는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  5. 제2항에 있어서,
    상기 조성물은 콜라겐 항원 특이적 IFN-γ, IL-17 및 TNF-α 생성 억제에 의해 과민성 염증 반응을 저감시키는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  6. 제2항에 있어서,
    상기 조성물은 경구 투여용 조성물인 약학 조성물.
  7. 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109(Lactobacillus sakei WIKIM0109; 수탁번호 KCTC13818BP), 이의 배양물, 이의 파쇄물 또는 이의 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증성 관절염의 예방 및 개선용 식품 조성물.
  8. 제7항에 있어서,
    염증성 관절염은 류마티스 관절염, 강직성 척추염, 골관절염 또는 건선성 관절염인 식품 조성물.
  9. 제7항에 있어서,
    상기 조성물은 혈중 IgG 및 IgG2a의 생성 억제에 의해 과민성 염증 반응을 저감시키는 것을 특징으로 하는 식품 조성물.
  10. 제7항에 있어서,
    상기 조성물은 콜라겐 항원 특이적 IFN-γ, IL-17 및 TNF-α 생성 억제에 의해 과민성 염증 반응을 저감시키는 것을 특징으로 하는 식품 조성물.
  11. 제7항에 있어서,
    상기 식품은 건강기능식품인, 식품 조성물.
  12. 제7항에 있어서,
    상기 식품은 음료, 바 또는 발효유인, 식품 조성물.
  13. 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109(Lactobacillus sakei WIKIM0109; 수탁번호 KCTC13818BP), 이의 배양물, 이의 파쇄물 또는 이의 추출물을 유효성분으로 포함하는 면역증강용 조성물.
  14. 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109(Lactobacillus sakei WIKIM0109; 수탁번호 KCTC13818BP), 이의 배양물, 이의 파쇄물 또는 이의 추출물을 유효성분으로 포함하는 정장제 조성물.
  15. 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109(Lactobacillus sakei WIKIM0109; 수탁번호 KCTC13818BP), 이의 배양물, 이의 파쇄물 또는 이의 추출물로 이루어지는 것인 식품 발효용 유산균 스타터.
  16. 락토바실러스 사케아이 WIKIM0109(Lactobacillus sakei WIKIM0109; 수탁번호 KCTC13818BP), 이의 배양물, 이의 파쇄물 또는 이의 추출물을 유효성분으로 포함하는 사료 또는 사료 첨가제 조성물.
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