KR102108751B1 - 오이 순도검정 및 품종판별을 위한 단일염기다형성 탐침 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 오이 순도검정 및 품종판별을 위한 단일염기다형성 탐침, 상기 탐침을 포함하는 조성물, 상기 조성물을 포함하는 오이 분석용 키트, 및 오이 분석 방법에 관한 것으로, 구체적으로 오이 계통간 유전자형이 다른 총 62,378개의 단일염기다형성 중에서 순도검정 혹은 품종판별 등의 분석에 적합한 50개의 단일염기다형성을 선별한 것이다.
본 발명의 단일염기다형성 탐침을 활용하여 오이 F1 조합을 판별할 수 있고, F1 종자 순도를 검정하여 양친을 통한 교배 여부를 정확히 판단할 수 있으며, 오이 품종을 판별 가능하고, 부가적으로 종묘회사 간에 발생하는 종자 분쟁 시 중재할 수 있는 수단을 제공할 수 있다.
본 발명의 단일염기다형성 탐침을 활용하여 오이 F1 조합을 판별할 수 있고, F1 종자 순도를 검정하여 양친을 통한 교배 여부를 정확히 판단할 수 있으며, 오이 품종을 판별 가능하고, 부가적으로 종묘회사 간에 발생하는 종자 분쟁 시 중재할 수 있는 수단을 제공할 수 있다.
Description
본 발명은 오이 순도검정 및 품종판별을 위한 단일염기다형성 탐침에 관한 것으로, 구체적으로 오이 계통간 유전자형이 다른 총 62,378개의 단일염기다형성 중에서 순도검정 혹은 품종판별 등의 분석에 적합한 50개의 단일염기다형성을 선별한 것이다.
오이는 박과에 속하는 1년생 덩굴식물로 동서양을 막론하고 다양하게 이용되는 채소이다. 오이의 식품적 가치는 맛과 향기에 있어, 독특한 향미과 씹히는 식감 때문에 주로 녹색의 미숙과 상태로 생식하게 된다. 오이 과일의 발육은 온도, 광, 수분, 영양 등의 외적요인이 관여하는데 특히 온도, 광조건의 영향이 크다. 온도가 높고 일조가 좋은 조건에서 발육이 촉진된다. 과일 발육에 미치는 내적요인은 꽃의 소질(씨방 크기), 엽면적, 한 포기당 달린 과일 수(과일상호간의 양분경쟁), 과일의 옥신함량 등에 의해 발육속도는 크게 달라진다. 개화로부터 수확까지 고온기는 8~10일, 저온기는 14~20일이 필요한데 오이 품종에 따라 차이가 있어 자라는 속도 예측이 중요하다. 또한 오이 과일의 발육은 오이 클로스테로바이러스 감염증, 또는 오이 흰가루병과 같은 질병에도 영향을 많이 받는다. 특히 오이 흰가루병은 오이 잎 전체가 흰가루로 뒤덮히고 병든 잎은 고사하는데, 분생포자가 공기전염되어 지속적으로 발생하므로, 오이 흰가루병에 내성이 있는 품종의 연구가 요구되고 있다.
이에 최근들어 이러한 문제를 해소하기 위해 유전적인 정보를 이용하여 오이의 생장 환경을 이롭게 하고자 하는 방법들이 개발되고 있다. 예를 들어, 한국등록특허 제10-1388281호에는 단일 뉴클레오티드 다형 마커를 이용하여 오이 클로스테로바이러스 및 오이 흰가루병균에 대해 내성인 식물체를 선별하는 방법이 개시되어 있고, 한국등록특허 제10-1608576호에는 오이 노균병원체 검출용 단일염기다형성 마커 및 이를 이용한 오이 노균병원체 검출방법이 개시되어 있다. 또한 오이 순도확인 및 품종판별과 관련해서는 한국등록특허 제10-1361730호에 오이의 품종을 식별하기 위한 다형성 마커 기술이 개시되어 있고, 한국등록특허 제10-1174409호에 초위성체 마커를 이용한 오이 품종 식별 기술이 기재되어 있으나, 상기 기술들은 SNP가 아닌 SSR에 기반을 둔 마커이고, 단일마커 분석으로서 대량 분석이 어려우며, 특정 품종에만 적용 가능하다는 단점이 있었다.
따라서 본 발명은 오이 순도검정 및 품종판별을 위한 단일염기다형성 탐침에 관한 것으로, 본 발명은 ① SSR 마커가 아닌 SNP에 기반을 둔 마커이고, ② 단일마커 분석이 아닌, KASP 마커형태로 다수의 샘플에 대한 다수의 마커에 대해 고속대량으로 분석이 가능하며, ③ 개발된 마커를 시판품종뿐만 아니라, SNP 마커 정보를 획득하기 위한 재료인 핵심계통과 시판품종 31품종의 양친 계통에도 적용하여 효용성을 확인한 마커(탐침)세트;라는 특징이 있다. 그러므로 본 발명의 단일염기다형성 탐침을 활용하여 오이 F1 조합을 판별할 수 있고, F1 종자 순도를 검정하여 양친을 통한 교배 여부를 정확히 판단할 수 있으며, 오이 품종을 판별 가능하고, 부가적으로 종묘회사 간에 발생하는 종자 분쟁 시 중재할 수 있는 수단을 제공할 수 있다.
본 발명은 상기와 같은 종래의 기술상의 문제점을 해결하기 위해 안출된 것으로, 오이 순도검정 및 품종판별을 위한 단일염기다형성 탐침에 관한 것이다.
본 발명은 주된 목적은 오이의 침색깔(백, 흑), 내서성(고, 중, 저), 절성성(고, 중, 저), 자화/절(1,2,3,4), 과장, 과색(담록, 녹, 농록, 반백), 및 흰가루병 저항성(유, 무) 등 오이 특성을 판별 가능한 단일염기다형성 탐침을 제공하는 데 있다.
본 발명의 다른 목적은 상기 단일염기다형성 탐침을 이용한 오이 순도검정 방법, 또는 품종판별 방법을 제공하는 데 있다. 보다 구체적으로, 본 발명의 단일염기다형성 탐침을 활용하여 오이 F1 조합을 판별할 수 있고, F1 종자 순도를 검정하여 양친을 통한 교배 여부를 정확히 판단할 수 있으며, 오이 품종을 판별 가능하고, 부가적으로 종묘회사 간에 발생하는 종자 분쟁 시 중재할 수 있는 수단을 제공할 수 있다.
그러나 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 과제에 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당 업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
이하, 본원에 기재된 다양한 구체예가 도면을 참조로 기재된다. 하기 설명에서, 본 발명의 완전한 이해를 위해서, 다양한 특이적 상세사항, 예컨대, 특이적 형태, 조성물 및 공정 등이 기재되어 있다. 그러나, 특정의 구체예는 이들 특이적 상세 사항 중 하나 이상 없이, 또는 다른 공지된 방법 및 형태와 함께 실행될 수 있다. 다른 예에서, 공지된 공정 및 제조 기술은 본 발명을 불필요하게 모호하게 하지 않게 하기 위해서, 특정의 상세사항으로 기재되지 않는다. "한 가지 구체예" 또는 "구체예"에 대한 본 명세서 전체를 통한 참조는 구체예와 결부되어 기재된 특별한 특징, 형태, 조성 또는 특성이 본 발명의 하나 이상의 구체예에 포함됨을 의미한다. 따라서, 본 명세서 전체에 걸친 다양한 위치에서 표현된 "한 가지 구체예에서" 또는 "구체예"의 상황은 반드시 본 발명의 동일한 구체예를 나타내지는 않는다. 추가로, 특별한 특징, 형태, 조성, 또는 특성은 하나 이상의 구체예에서 어떠한 적합한 방법으로 조합될 수 있다.
명세서에서 특별한 정의가 없으면 본 명세서에 사용된 모든 과학적 및 기술적인 용어는 본 발명이 속하는 기술분야에서 당업자에 의하여 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가진다.
본 발명의 일 구체예에서, 오이 단일염기다형성 CsaSPT001 내지 CsaSPT050으로 구성되는 그룹으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 단일염기다형성을 검출하기 위한 오이 분석용 탐침을 제공한다.
상기의 오이 단일염기다형성 CsaSPT001 내지 CsaSPT050은 본 발명의 상세한 설명 중 표 5 내지 표 10으로 정의될 수 있다.
상기의 탐침이란 중합효소연쇄반응용 올리고뉴클레오티드 프라이머, 또는 올리고뉴클레오티드 프로브인 것을 특징으로 하는 것이나, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기의 올리고뉴클레오티드 프라이머는 특정 유전자 서열에 대하여 상보적인 짧은 단선의 유전자 서열 즉, 올리고뉴클레오티드(oligonucleotide)로 PCR진단, DNA 시퀀싱(sequencing) 등에 이용할 목적으로 합성된 것을 의미한다. DNA 중합효소에 의해 상보적인 유전자 서열이 합성될때 전체 유전자 서열 중에서 프라이머로부터 합성이 시작되는 기시점으로 작용하며, 일반적으로 20∼30 bp(base-pair)의 길이로 합성하여 사용한다. 포스포릴라아제의 작용에 의해 글루코오스-1-인산에서 녹말이 생성될 때의 미량의 녹말이나 글리코겐의 작용, 카텝신 C에 의한 폴리펩티드 합성 반응에서의 올리고펩티드의 작용, 리보뉴클레오티드피로포스포릴라아제에 의한 폴리뉴클레오티드 생성 때의 폴리뉴클레오티드의 작용, 데옥시리보뉴클레오티드피로포스포릴라아제에 의한 폴리데옥시리보뉴클레오티드의 생성 반응에서의 데옥시리보핵산(DNA)의 작용 등을 예로 들 수 있다. 또한 상기의 프로브란 DNA 또는 RNA와 특이적 결합을 이룰 수 있는 짧게는 수개 내지 길게는 수백 염기에 해당하는 핵산 단편을 의미하며, 라벨링 되어 있어서 특정 DNA 또는 RNA의 존재 유무를 확인할 수 있다. 본 발명의 프로브는 올리고뉴클레오티드(oligonucleotide) 프로브, 단쇄 DNA(single stranded DNA) 프로브, 이중쇄 DNA(double stranded DNA) 프로브, RNA 프로브 등의 형태로 제작될 수 있고, 비오틴, FITC, 로다민, DIG 등으로 표지되거나 방사선 동위원소 등으로 표지될 수 있다.
본 발명의 중합효소연쇄반응용 올리고뉴클레오티드 프라이머, 또는 올리고뉴클레오티드 프로브인 오이 분석용 탐침은 다형성 위치의 염기를 포함하는 10개 이상의 연속 염기로 이루어지는 올리고뉴클레오티드, 또는 이의 상보적인 올리고뉴클레오티드인 것이 바람직하고, 본 발명의 서열번호 1 내지 100으로 구성되는 그룹으로부터 선택되는 어느 하나를 포함하는 것이 더욱 바람직하나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한 본 발명의 중합효소연쇄반응용 올리고뉴클레오티드 프라이머, 또는 올리고뉴클레오티드 프로브인 오이 분석용 탐침은 검출 가능한 물질로 표지될 수 있고, 상기의 물질이란 방사선 동위원소, 형광물질, HRP(Horseradish Peroxidase)와 같은 화합물, 또는 항체를 포함한다.
또한 본 발명의 오이 분석용 탐침은 침색깔(백, 흑), 내서성(고, 중, 저), 절성성(고, 중, 저), 자화/절(1,2,3,4), 과장, 과색(담록, 녹, 농록, 반백), 또는 흰가루병 저항성(유, 무)을 포함하는 오이의 다양한 특성을 판별 가능한 것을 특징으로 한다. 상기의 침색깔은 오이 열매 표면의 침(가시)의 색깔을 의미하는 것이고, 상기의 내서성은 더위에 견디는 오이의 성질을 의미하는 것이며, 상기의 절성성은 암수의 성을 결정짓는 오이의 성질을 의미하는 것이다. 오이는 자웅이화 작물로서 단위결과성이 높다. 생태형과 품종에 따라 성표현이 다르지만 성표현(절성성)은 주로 일장과 온도의 영향을 많이 받는다. 외부 조건으로는 단일저온(일장 : 8~10시간, 저온 : 8~15℃) 조건에서 절성성이 높아지는 것으로 알려져 있고, 질소(N) 비료가 과다하게 되면 암꽃이 피는 절위가 높아지고 암꽃의 소질이 나쁘게 된다. 상기의 자화/절은 1절당 발화되는 꽃의 수를 의미하는 것이며, 과장은 오이 열매의 길이, 과색은 오이 열매의 색을 의미한다. 흰가루병 저항성은 오이 흰가루병에 대한 오이 품종의 내성을 의미한다. 오이 흰가루병(Powdery mildew)은 병원균(Sphaerotheca fusca)에 감염되어 발생하는 것으로, 오이 잎 전체가 흰가루로 뒤덮히고 병든 잎은 고사한다. 분생포자가 공기전염되어 지속적으로 발생하므로, 발병 이전에 예방이 더욱 중요하다.
본 발명의 다른 구체예에서, 오이 단일염기다형성 CsaSPT001 내지 CsaSPT050으로 구성되는 그룹으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 단일염기다형성을 검출하기 위한 오이 분석용 탐침을 포함하는 오이 분석용 조성물을 제공하고, 상기 오이 단일염기다형성 CsaSPT001 내지 CsaSPT050은 본 발명의 상세한 설명 중 표 5 내지 표 10으로 정의되는 오이 분석용 조성물을 제공하며, 상기 분석은 오이의 침색깔(백, 흑), 내서성(고, 중, 저), 절성성(고, 중, 저), 자화/절(1,2,3,4), 과장, 과색(담록, 녹, 농록, 반백), 또는 흰가루병 저항성(유, 무)을 판별하는 것인 오이 분석용 조성물을 제공한다.
본 발명의 또 다른 구체예에서, 오이 단일염기다형성 CsaSPT001 내지 CsaSPT050으로 구성되는 그룹으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 단일염기다형성을 검출하기 위한 오이 분석용 탐침을 포함하는 오이 분석용 조성물을 포함하는 오이 분석용 키트를 제공하고, 상기 분석은 오이의 침색깔(백, 흑), 내서성(고, 중, 저), 절성성(고, 중, 저), 자화/절(1,2,3,4), 과장, 과색(담록, 녹, 농록, 반백), 또는 흰가루병 저항성(유, 무)을 판별하는 것인 오이 분석용 키트를 제공하며, 상기 키트는 KASP(kompetitive allele speicific PCR) 탐침세트인 오이 분석용 키트를 제공한다.
본 발명의 또 다른 구체예에서, (a) 제 1 항의 탐침 세트를 이용하여 품종 또는 계통을 알고 있는 부모 오이의 단일염기다형성의 유전자형을 결정하는 단계;
(b) 제 1 항의 탐침 세트를 이용하여 상기 부모 오이의 자손인지 여부를 확인하고자 하는 오이의 단일염기다형성의 유전자형을 결정하는 단계; 및 (c) 상기 (a) 단계와 상기 (b) 단계에서 결정된 단일염기다형성의 유전자형을 비교하는 단계를 포함하는, 오이의 순도검정 방법을 제공한다.
(b) 제 1 항의 탐침 세트를 이용하여 상기 부모 오이의 자손인지 여부를 확인하고자 하는 오이의 단일염기다형성의 유전자형을 결정하는 단계; 및 (c) 상기 (a) 단계와 상기 (b) 단계에서 결정된 단일염기다형성의 유전자형을 비교하는 단계를 포함하는, 오이의 순도검정 방법을 제공한다.
본 발명의 또 다른 구체예에서, (a) 오이 단일염기다형성 CsaSPT001 내지 CsaSPT050로 구성되는 그룹으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 단일염기다형성을 검출하기 위한 오이 분석용 탐침을 준비하는 단계; 및 (b) 미지의 오이 시료로부터 상기 단일염기다형성 염기를 분석하는 단계;를 포함하는 오이 분석 방법을 제공하고, 상기의 오이 단일염기다형성 CsaSPT001 내지 CsaSPT050은 본 발명의 상세한 설명 중 표 5 내지 표 10으로 정의되는 오이 분석 방법을 제공하며, 상기 탐침은 중합효소연쇄반응용 올리고뉴클레오티드 프라이머, 또는 올리고뉴클레오티드 프로브인 것을 특징으로 하는 오이 분석 방법을 제공하며, 상기 탐침은 서열번호 1 내지 100으로 구성되는 그룹으로부터 선택되는 어느 하나를 포함하는 것인 오이 분석 방법을 제공하며, 상기 분석은 오이의 침색깔(백, 흑), 내서성(고, 중, 저), 절성성(고, 중, 저), 자화/절(1,2,3,4), 과장, 과색(담록, 녹, 농록, 반백), 또는 흰가루병 저항성(유, 무)을 판별하는 것인 오이 분석 방법을 제공한다.
이하 상기 본 발명을 단계별로 상세히 설명한다.
오이 과일의 발육은 온도, 광, 수분, 영양 등의 외적요인 뿐 아니라, 꽃의 소질(씨방 크기), 엽면적, 한 포기당 달린 과일 수(과일상호간의 양분경쟁), 과일의 옥신함량 등 내적요인에 따라서도 크게 달라진다. 따라서 우수한 품질의 오이 과육을 수득할 수 있는 품종의 순도검정 및 품종판별 기술이 요구된다.
본 발명은 오이 순도검정 및 품종판별을 위한 단일염기다형성 탐침에 관한 것으로, 오이 계통간 유전자형이 다른 총 62,378개의 단일염기다형성 중에서 순도검정 혹은 품종판별 등의 분석에 적합한 50개의 단일염기다형성을 제공하므로, 본 발명의 단일염기다형성 탐침을 이용하여 오이 F1 조합을 판별할 수 있고, F1 종자 순도를 검정하여 양친을 통한 교배 여부를 정확히 판단할 수 있으며, 오이 품종을 판별 가능하고, 부가적으로 종묘회사 간에 발생하는 종자 분쟁 시 중재할 수 있는 수단을 제공할 수 있을 것으로 기대된다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른, 다양한 형질을 고려하여 선별된 38개의 오이 핵심계통의 구조도이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른, 오이 전사체를 read mapping 결과를 나타낸 것이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른, 오이 핵심 SNP의 선발 과정을 나타낸 것이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른, 오이 371개 SNP와 그 중 50개 순도검정 마커의 위치를 나타낸 물리적지도이다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른, KASP 마커 시스템 원리의 모식도이다.
도 6은 본 발명의 일 실시예에 따른, KASP 마커로 분석한 F1 31개 조합과 그 양친 계통의 유전자형 분석 결과(일부결과, B01~B10)이다.
도 7은 본 발명의 일 실시예에 따른, KASP 마커로 분석한 핵심 육성계통 38개의 유전자형 분석 결과이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른, 오이 전사체를 read mapping 결과를 나타낸 것이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른, 오이 핵심 SNP의 선발 과정을 나타낸 것이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른, 오이 371개 SNP와 그 중 50개 순도검정 마커의 위치를 나타낸 물리적지도이다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른, KASP 마커 시스템 원리의 모식도이다.
도 6은 본 발명의 일 실시예에 따른, KASP 마커로 분석한 F1 31개 조합과 그 양친 계통의 유전자형 분석 결과(일부결과, B01~B10)이다.
도 7은 본 발명의 일 실시예에 따른, KASP 마커로 분석한 핵심 육성계통 38개의 유전자형 분석 결과이다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이들 실시예는 단지 본 발명을 예시하기 위한 것이므로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는다.
실시예 1. 오이 대표 계통 선정
침색깔(백, 흑), 내서성(고, 중, 저), 절성성(고, 중, 저), 자화/절(1,2,3,4), 과장, 과색(담록, 녹, 농록, 반백), 및 흰가루병 저항성(유, 무)의 원예적 형질(특성)을 고려하여 특성이 중복되지 않는 오이의 핵심 육성계통 38개를 수집하였다. 상기 선별된 육성계통 및 표현형 특징을 표 1에, 이의 구조도를 도 1에 나타내었다.
실시예 2. 오이 대표 계통의 전사체 염기 서열 분석
선발된 오이 계통으로부터 신초(어린잎)를 수집하고, GeneAll Hybrid-RTM 키트(한국)를 사용하여 고순도의 RNA를 분리한 후, Nanodrop을 이용하여 A260/280 값이 1.8 이상이고 농도가 400ng/㎕ 이상인 조건을 확인하였다. 상기 RNA 중 DNA 부분은 제거하여 순수한 RNA 조각을 수득하고, 역전사(reverse transcription)를 이용하여 cDNA 라이브러리를 제작하였다. 제작된 cDNA 조각을 대상으로 Illumina Hiseq 4000을 이용하여 오이 계통별로 시퀀싱(transcriptome resequencing)을 실시한 결과, 평균 35,990,890 reads를 얻었으며 평균 GC 함량은 45%, Q30은 96%임을 확인하였다(해당 수치는 adapter 염기서열을 제거하는 등의 trimming 작업을 완료한 후에 평균을 계산한 데이터임). 이를 표 2에 나타내었다.
상기 오이 전사체의 read mapping은 박과 유전체 데이터베이스(cucurbitgenomics.org) 사이트에 공개된 ChineseLong_v2 reference 데이터(cucurbitgenomics.org/pub/cucurbit/genome/cucumber)를 사용하여 수행하였고, 평균 overall read mapping rate는 92.8%인 것으로 나타났다. 이를 도 2에 나타내었다.
실시예 3. 오이 SNP 선별
계통 간의 품종판별을 위한 SNP는 SAMTools 프로그램을 이용하여 계통 간의 유전자형이 다르게 나타난 것으로 선별하였다.
보다 구체적으로, 실시예 2의 염기 서열 분석 결과로부터 Depth가 10x 이상에 해당되는 유전자형 결과를 선발하고 계통 간 유전자형이 다른 것들을 SNP로 분류하여 총 62,378개의 SNP를 선발하였다. 이로부터 일차로 2종류의 유전자형과 2종류의 대립유전자로 나타나는 58,436개의 SNP를 선별하였고(3종류 이상의 유전자형에 의한 SNP나 3종류 이상의 대립유전자가 관여하는 SNP는 제외함), 이차로 SNP 중 최소한 6계통 이상 구분할 수 있는 경우만 선발하여 51,435개의 SNP를 선별하였으며, 삼차로 SNP 중 두 유전자형의 계통 분리비가 균등하게 나타난 4,985개의 SNP를 선별하였으며(두 개의 유전자형에 대한 분산을 구하여 이 값이 1이 넘으면 제외), 사차로 탐침 디자인을 용이하게 하기 위해 하나의 SNP의 위치로부터 양 옆 60bp 구간에 다른 SNP가 없는 경우를 선발하여 2,462개의 SNP를 선별하였다. 마지막으로 선발된 SNP 중 최대한 순도검정 혹은 품종판별 등의 분석에 적합한 SNP를 발탁하기 위해 PIC(Polymorphism Information Content) 값이 약 0.5에 가까우며 38개의 오이 계통 중 35개 이상에서 공통적으로 확인된 371개의 SNP를 최종적으로 선발하였다. 상기 SNP 필터링 과정과 기준을 표 3, 및 도 3에 나타내었다.
Filtering criteria | No. of SNPs remaining | No. of fitered SNPs | Fitering percentage(%) |
Genotype/Allele | 58,436 | 3,942 | 6.3 |
Distinguishable species | 51,435 | 7,001 | 12.0 |
Segregation ratio | 4,985 | 46,450 | 90.3 |
Adjacent SNP | 2,462 | 2,523 | 50.6 |
QC/MAB suitable SNP | 371 | 2,091 | 84.9 |
SNP 선별 결과, 가장 많은 SNP가 선발된 염색체는 3번 염색체이고, 가장 적은 SNP가 선발된 염색체는 5번 염색체였다. SNP 밀도(SNP density, SNPs/Mb)는 7번 염색체가 2.77로 가장 높았으며, 1번 염색체가 1.63으로 가장 낮았고, 전체 염색체(약 161Mb)에 대한 371개의 SNP의 밀도는 2.3이었다. 상기 선발된 SNP의 염색체(7개) 상의 분포도를 표 4에 나타내었다.
Chromosome | SNPs | Size(Mbp) | SNP density | KASP markers |
C1 | 37 | 22.7 | 1.63 | 6 |
C2 | 48 | 20.6 | 2.33 | 7 |
C3 | 78 | 39.0 | 2.00 | 9 |
C4 | 60 | 22.6 | 2.65 | 8 |
C5 | 22 | 10.0 | 2.21 | 5 |
C6 | 74 | 27.4 | 2.70 | 8 |
C7 | 52 | 18.8 | 2.77 | 7 |
계 | 371 | 161.0 | 2.30 | 50 |
※ SNP density = SNP 수 / Chromosome size(Mbp) |
상기 표 3의 최종 선별 SNP 371개 중 품종판별 및 순도검정용으로 최소한의 분자마커 개수를 확보하기 위해, 오이 염색체별로 5~9개씩 고르게 선발하여 50개 SNP를 선별하였다. 상기 50개 SNP의 위치와 염기를 표 5에, 오이 371개 SNP와 그 중 50개 순도검정 마커의 위치를 나타낸 물리적지도를 도 4에 나타내었다.
SNP 마커 | 해당 염색체 | SNP위치 | SNP염기 |
CsaSPT001 | Chr.1 | 4385912 | A/G |
CsaSPT002 | Chr.1 | 5903955 | A/C |
CsaSPT003 | Chr.1 | 6810619 | A/G |
CsaSPT004 | Chr.1 | 21366049 | T/G |
CsaSPT005 | Chr.1 | 21408446 | T/C |
CsaSPT006 | Chr.1 | 21845944 | A/G |
CsaSPT007 | Chr.2 | 282138 | A/C |
CsaSPT008 | Chr.2 | 1165541 | T/C |
CsaSPT009 | Chr.2 | 1610793 | A/G |
CsaSPT010 | Chr.2 | 4460459 | T/G |
CsaSPT011 | Chr.2 | 14525253 | A/G |
CsaSPT012 | Chr.2 | 18788181 | T/C |
CsaSPT013 | Chr.2 | 20561070 | T/C |
CsaSPT014 | Chr.3 | 584237 | T/C |
CsaSPT015 | Chr.3 | 2327927 | T/C |
CsaSPT016 | Chr.3 | 4095591 | T/C |
CsaSPT017 | Chr.3 | 8334172 | A/G |
CsaSPT018 | Chr.3 | 15988559 | T/C |
CsaSPT019 | Chr.3 | 28195241 | A/G |
CsaSPT020 | Chr.3 | 29798410 | T/C |
CsaSPT021 | Chr.3 | 31011324 | A/G |
CsaSPT022 | Chr.3 | 33677983 | T/C |
CsaSPT023 | Chr.4 | 2729111 | T/C |
CsaSPT024 | Chr.4 | 3069256 | A/G |
CsaSPT025 | Chr.4 | 8654190 | A/G |
CsaSPT026 | Chr.4 | 15764533 | A/G |
CsaSPT027 | Chr.4 | 17191693 | T/C |
CsaSPT028 | Chr.4 | 21145598 | T/C |
CsaSPT029 | Chr.4 | 22149419 | A/G |
CsaSPT030 | Chr.4 | 22556731 | A/G |
CsaSPT031 | Chr.5 | 2349908 | T/C |
CsaSPT032 | Chr.5 | 3219085 | A/G |
CsaSPT033 | Chr.5 | 4230887 | T/G |
CsaSPT034 | Chr.5 | 4989671 | A/G |
CsaSPT035 | Chr.5 | 8129872 | A/G |
CsaSPT036 | Chr.6 | 1406894 | A/G |
CsaSPT037 | Chr.6 | 1607587 | T/G |
CsaSPT038 | Chr.6 | 3815947 | A/G |
CsaSPT039 | Chr.6 | 8859590 | A/G |
CsaSPT040 | Chr.6 | 16950033 | A/G |
CsaSPT041 | Chr.6 | 22174935 | T/C |
CsaSPT042 | Chr.6 | 22246107 | A/C |
CsaSPT043 | Chr.6 | 25692778 | A/G |
CsaSPT044 | Chr.7 | 1724000 | A/G |
CsaSPT045 | Chr.7 | 4575406 | A/G |
CsaSPT046 | Chr.7 | 4712188 | T/C |
CsaSPT047 | Chr.7 | 9495723 | T/C |
CsaSPT048 | Chr.7 | 13513970 | A/G |
CsaSPT049 | Chr.7 | 16529777 | A/G |
CsaSPT050 | Chr.7 | 18195273 | A/G |
선발된 50개 SNP는 SNP 위치에서 upstream 및 downstream 양방향으로 인접한 60bp 염기서열인 인접 염기서열(amplicon sequence) 정보를 바탕으로 KASP(Kompetitive Allele Specific PCR genotyping system) 프로브, 및 형광 탐침을 제작하고, 단시간내 많은 양의 샘플을 분석할 수 있도록 마커 세트로 구성하였다. 상기 50개 SNP 마커세트의 KASP 프로브 서열을 표 6 내지 표 10에 나타내었다.
SNP 마커 | 해당 염색체 | SNP위치 | 서열번호 | 프로브 서열(downstream 60bp, upstream 60bp) |
CsaSPT001 | Chr.1 | 4385912 | 1 | AAAAAAGAAAAAAGAAAAAAAAGAAAGCTCCTATTCAACTTATGAGCATGTAAAAATGTT A TAATCTGCTTTCATTGTGGCACAGCTCTGCCTCTAGTGATTGAGTTAATGGTTGAAATCA |
2 | AAAAAAGAAAAAAGAAAAAAAAGAAAGCTCCTATTCAACTTATGAGCATGTAAAAATGTT G TAATCTGCTTTCATTGTGGCACAGCTCTGCCTCTAGTGATTGAGTTAATGGTTGAAATCA | |||
CsaSPT002 | Chr.1 | 5903955 | 3 | CTATGATGCAGTTCATTAAAACCATTTAGTAAGGGCACTGACTCTATTTGACCATCTTTC A TTCTCATTTTCATATCATCATTAAGTTCATAACCTTAGTGTATCACGAGAGGTCATTAAG |
4 | CTATGATGCAGTTCATTAAAACCATTTAGTAAGGGCACTGACTCTATTTGACCATCTTTC C TTCTCATTTTCATATCATCATTAAGTTCATAACCTTAGTGTATCACGAGAGGTCATTAAG | |||
CsaSPT003 | Chr.1 | 6810619 | 5 | GCCACAAACATATTGGCCATCCACGCAAACCAAATATTCCACTTTCAGAAGAACAATTTA A AAGCCACCACGGAGACGAAGGACGAGGTGAAGGGTCGACTCCTTCTGAATGTTATAATCA |
6 | GCCACAAACATATTGGCCATCCACGCAAACCAAATATTCCACTTTCAGAAGAACAATTTA G AAGCCACCACGGAGACGAAGGACGAGGTGAAGGGTCGACTCCTTCTGAATGTTATAATCA | |||
CsaSPT004 | Chr.1 | 21366049 | 7 | GAAGATTTGAAATATCAGCAGAAACCGCACAAGGAATTCCCAAATTTGAAAGAGCACCTC T TATGATTCCGCATGGGAAATATAGATGCATGCTTGTTGCTTGAGCTACCTTGTTTTCACC |
8 | GAAGATTTGAAATATCAGCAGAAACCGCACAAGGAATTCCCAAATTTGAAAGAGCACCTC G TATGATTCCGCATGGGAAATATAGATGCATGCTTGTTGCTTGAGCTACCTTGTTTTCACC | |||
CsaSPT005 | Chr.1 | 21408446 | 9 | TAATCAATGTCATATTACCAAAACAAATACTCACAACGAAATACAAAAAACAAACCATAA T GATTTGTACCAAAAATAAGAGGGCAGCAAACAGGCAAGAGAGAATCAACAAATTCCATCA |
10 | TAATCAATGTCATATTACCAAAACAAATACTCACAACGAAATACAAAAAACAAACCATAA C GATTTGTACCAAAAATAAGAGGGCAGCAAACAGGCAAGAGAGAATCAACAAATTCCATCA | |||
CsaSPT006 | Chr.1 | 21845944 | 11 | AAAAAAAAAATACAAATACAAATACAAATACAACTAAGAACTTTATTATGTATTAAAAAT A TGTCCTCCGTCGCCGGCGGTAGCAATCTTTAATTGTATTTGGTCACCATCTGAGCTTTTC |
12 | AAAAAAAAAATACAAATACAAATACAAATACAACTAAGAACTTTATTATGTATTAAAAAT G TGTCCTCCGTCGCCGGCGGTAGCAATCTTTAATTGTATTTGGTCACCATCTGAGCTTTTC | |||
CsaSPT007 | Chr.2 | 282138 | 13 | TTATATGATTCCATATGCTAATTGTTTGAATAAAATTTTGCTTCTTACATTAGGACACAA A ACCTCGCATTAAACCTACCTTAAGAAATGCTCAACACAGTGTGGTAGAAAAGCAAACATC |
14 | TTATATGATTCCATATGCTAATTGTTTGAATAAAATTTTGCTTCTTACATTAGGACACAA C ACCTCGCATTAAACCTACCTTAAGAAATGCTCAACACAGTGTGGTAGAAAAGCAAACATC | |||
CsaSPT008 | Chr.2 | 1165541 | 15 | ATATTGACAAATATTTTCATCATAGCTCCAAACTAAATAAATCAAGATTGTTGAATTTTT T GCCTTCCCCTACAGTCTCCCGTTGTAGCTATGAGAATACAAAACGATTTAAGCGTAGCAT |
16 | ATATTGACAAATATTTTCATCATAGCTCCAAACTAAATAAATCAAGATTGTTGAATTTTT C GCCTTCCCCTACAGTCTCCCGTTGTAGCTATGAGAATACAAAACGATTTAAGCGTAGCAT | |||
CsaSPT009 | Chr.2 | 1610793 | 17 | AGCCCTTCATATCTTTAACAGGTTTCAATGGGGAGCTCGAGAAGGACCACTTTGTGATGA A CCCATTAGGAATGTTAAGTTCAAAATTGTTGATGCTAGAATTGCACCTGAGCCACTGCAT |
18 | AGCCCTTCATATCTTTAACAGGTTTCAATGGGGAGCTCGAGAAGGACCACTTTGTGATGA G CCCATTAGGAATGTTAAGTTCAAAATTGTTGATGCTAGAATTGCACCTGAGCCACTGCAT | |||
CsaSPT010 | Chr.2 | 4460459 | 19 | TCCTGTTCCTGCACCCAAAGAACAATATGGAGTGTCCTAATTCAACACCAGATTCTTTCA T AGCTAACCTTTCCTGCAAATAAAAATTAAAATGTAATAACGGGTTGATTTAATATAGTCT |
20 | TCCTGTTCCTGCACCCAAAGAACAATATGGAGTGTCCTAATTCAACACCAGATTCTTTCA G AGCTAACCTTTCCTGCAAATAAAAATTAAAATGTAATAACGGGTTGATTTAATATAGTCT |
SNP 마커 | 해당 염색체 | SNP위치 | 서열번호 | 프로브 서열(downstream 60bp, upstream 60bp) |
CsaSPT011 | Chr.2 | 14525253 | 21 | TGGCCAAATAATTAGTTGTGGAGGAGAGAGATATGATAGATGGTAGTATGTTATATTAAC A GTTGAGCCTCTGACTTGAGCTCTTTTGTAGTTACTCTTTCACTACTGGTTTCCACATCAA |
22 | TGGCCAAATAATTAGTTGTGGAGGAGAGAGATATGATAGATGGTAGTATGTTATATTAAC G GTTGAGCCTCTGACTTGAGCTCTTTTGTAGTTACTCTTTCACTACTGGTTTCCACATCAA | |||
CsaSPT012 | Chr.2 | 18788181 | 23 | AGCAGGGTTGAGGTGGCCACCGGAAATGTGGCCAGTAGAGATCATCACAGCCACAACAAA T GCATGTGCAACTGCTACGGCGAATAAACCGACGAGTGCGTTTGCCAATAATGCATCTAAA |
24 | AGCAGGGTTGAGGTGGCCACCGGAAATGTGGCCAGTAGAGATCATCACAGCCACAACAAA C GCATGTGCAACTGCTACGGCGAATAAACCGACGAGTGCGTTTGCCAATAATGCATCTAAA | |||
CsaSPT013 | Chr.2 | 20561070 | 25 | TCCATCGTCAGCAAATAACTATGCAAATTTCATTGAATAAACCTGATGTATGAGAGCTTA T TGTGACAGTAACTTTGAGTCACATGCTACTATTTTAATTCTTCCAACATTCTCACTGGAA |
26 | TCCATCGTCAGCAAATAACTATGCAAATTTCATTGAATAAACCTGATGTATGAGAGCTTA C TGTGACAGTAACTTTGAGTCACATGCTACTATTTTAATTCTTCCAACATTCTCACTGGAA | |||
CsaSPT014 | Chr.3 | 584237 | 27 | ATGTAGAGATCCTCCTTTTGGCAGGCTGAAACAGCGGCAGTTGAGAGAGAGCGTTTACTT T TGCGGAAAGTCTCTGAACTTCAAGCTAGGTGGGTTTGGTTTTGTAGAATTTTGTTGTGCA |
28 | ATGTAGAGATCCTCCTTTTGGCAGGCTGAAACAGCGGCAGTTGAGAGAGAGCGTTTACTT C TGCGGAAAGTCTCTGAACTTCAAGCTAGGTGGGTTTGGTTTTGTAGAATTTTGTTGTGCA | |||
CsaSPT015 | Chr.3 | 2327927 | 29 | GAAATGGTTTGCCATGCTTAAAGGGAAAGTGCTTCTCATCTGATCTACTTTTTGCCTTTT T GGCATATTAAAGTTTGTAATCTCTTGCATAGAATATGAAAAATGAATAGAGAAAGAAAAA |
30 | GAAATGGTTTGCCATGCTTAAAGGGAAAGTGCTTCTCATCTGATCTACTTTTTGCCTTTT C GGCATATTAAAGTTTGTAATCTCTTGCATAGAATATGAAAAATGAATAGAGAAAGAAAAA | |||
CsaSPT016 | Chr.3 | 4095591 | 31 | CATCAAGAAAAGGGGCCAAAATTCCATACATAATAGTCGTCTTAACCACGGAAGAATAGC T GGAACCTCCAGCTTTCAATATTTCGCCCATATTTTTGAGGACCTGTAAATTTCATTCACT |
32 | CATCAAGAAAAGGGGCCAAAATTCCATACATAATAGTCGTCTTAACCACGGAAGAATAGC C GGAACCTCCAGCTTTCAATATTTCGCCCATATTTTTGAGGACCTGTAAATTTCATTCACT | |||
CsaSPT017 | Chr.3 | 8334172 | 33 | CTTTTGCAACTTGTTGGCAGCCGTTCAACTGTTGTGCCCAGAAGCAGATATCAACTACAG A TTGTTGTTGTTCATTGAGATCGTCAAATCAAGCAAGAAAATTTATGTGCTTTTGTAAAAA |
34 | CTTTTGCAACTTGTTGGCAGCCGTTCAACTGTTGTGCCCAGAAGCAGATATCAACTACAG G TTGTTGTTGTTCATTGAGATCGTCAAATCAAGCAAGAAAATTTATGTGCTTTTGTAAAAA | |||
CsaSPT018 | Chr.3 | 15988559 | 35 | TTTTTCCATGGAAAGAGGCCCAAGGTACAGAGCCTACGCAGAGCTCAGAGAATCCAAGCT T CGCTTGAGAAACGCCATGTATCGCCACGATGAACACCCGGAGAAGTCCACCCCGCCGCCC |
36 | TTTTTCCATGGAAAGAGGCCCAAGGTACAGAGCCTACGCAGAGCTCAGAGAATCCAAGCT C CGCTTGAGAAACGCCATGTATCGCCACGATGAACACCCGGAGAAGTCCACCCCGCCGCCC | |||
CsaSPT019 | Chr.3 | 28195241 | 37 | TCTTTGACGATCTTCTTCTCAGCCTTCGGCTTCTTCTCCGCCGAGGAAGGGGTTTTCTCC A CTGGCTTCTTCTCTGCGGGCTTCTTTTCGGCTTTCGTTGGCGCCATTGTTGGAACTCAGA |
38 | TCTTTGACGATCTTCTTCTCAGCCTTCGGCTTCTTCTCCGCCGAGGAAGGGGTTTTCTCC G CTGGCTTCTTCTCTGCGGGCTTCTTTTCGGCTTTCGTTGGCGCCATTGTTGGAACTCAGA | |||
CsaSPT020 | Chr.3 | 29798410 | 39 | AAACCAGCCTCATATCCGCGGGCTAATTAACAGCTTGGTGAAATCCCAACAACTGCGTAT T CGTGGGAGACACTGTCATGATCTTGAAATCACAGAACTGCAAAAAAAAAAAAAGAAATAA |
40 | AAACCAGCCTCATATCCGCGGGCTAATTAACAGCTTGGTGAAATCCCAACAACTGCGTAT C CGTGGGAGACACTGTCATGATCTTGAAATCACAGAACTGCAAAAAAAAAAAAAGAAATAA |
SNP 마커 | 해당 염색체 | SNP위치 | 서열번호 | 프로브 서열(downstream 60bp, upstream 60bp) |
CsaSPT021 | Chr.3 | 31011324 | 41 | GGCCTGGGTCTTTGTGTTTCTTTTCTTTCCGCAGCTTTGGTCATCGTTAGTGACTTGAAA A AAAGAAAGGGAAACCCATGGATGCTTCAGAGCGTAGGTATTTGGAGGATGATGATACGTC |
42 | GGCCTGGGTCTTTGTGTTTCTTTTCTTTCCGCAGCTTTGGTCATCGTTAGTGACTTGAAA G AAAGAAAGGGAAACCCATGGATGCTTCAGAGCGTAGGTATTTGGAGGATGATGATACGTC | |||
CsaSPT022 | Chr.3 | 33677983 | 43 | AGTGAGGTCTCTTTGTTCTTAACAGCACTTTCTGCTATCAGCCTAGACTTAAAGAAGCTA T GGTTTGTTTTATTTACAAACAATTACACATTACAAATAAGAGGAAAAAAGGATTAAGTTC |
44 | AGTGAGGTCTCTTTGTTCTTAACAGCACTTTCTGCTATCAGCCTAGACTTAAAGAAGCTA C GGTTTGTTTTATTTACAAACAATTACACATTACAAATAAGAGGAAAAAAGGATTAAGTTC | |||
CsaSPT023 | Chr.4 | 2729111 | 45 | ATATCCTTACAACCACCTTGTTCTTCTTTCCTGCAGATAAAAGTAGAACTTTTCCATCAA T AATGTCTACAGCTTCAACCCTTTTACTCTCGGAATCCACTCTACCATTATTCAAATAAAG |
46 | ATATCCTTACAACCACCTTGTTCTTCTTTCCTGCAGATAAAAGTAGAACTTTTCCATCAA C AATGTCTACAGCTTCAACCCTTTTACTCTCGGAATCCACTCTACCATTATTCAAATAAAG | |||
CsaSPT024 | Chr.4 | 3069256 | 47 | AGCCTTCATCTGAAAGTTTGTATGTTTTACCATGCATGATGTATTCAAACTTATCAGCTA A AGATTTCTTCCCTTCCTGCCAAAAATTAAGTTCATTTGAAGGATATTACCACTAAAATTT |
48 | AGCCTTCATCTGAAAGTTTGTATGTTTTACCATGCATGATGTATTCAAACTTATCAGCTA G AGATTTCTTCCCTTCCTGCCAAAAATTAAGTTCATTTGAAGGATATTACCACTAAAATTT | |||
CsaSPT025 | Chr.4 | 8654190 | 49 | AGATTGATAACCACTGTTGATCGCATAAGAAATTCCAGCAACAACTCCAACTATGTTGAT A ATTAGGAGAGTAGTTGGGGGAATCAGAAGAGTGGTCCACTTGAACATGTAGAGCTCAGCA |
50 | AGATTGATAACCACTGTTGATCGCATAAGAAATTCCAGCAACAACTCCAACTATGTTGAT G ATTAGGAGAGTAGTTGGGGGAATCAGAAGAGTGGTCCACTTGAACATGTAGAGCTCAGCA | |||
CsaSPT026 | Chr.4 | 15764533 | 51 | CAAGGTGATCATCGAAGTCCACCACATCTTGCCATTTTTCAGATGATATGAAATCCAACA A GACCACGTTTGCTGAAGGTTCCTTCATCATCAGCTGGCTGCTTCCATCTGATCCAGCCAA |
52 | CAAGGTGATCATCGAAGTCCACCACATCTTGCCATTTTTCAGATGATATGAAATCCAACA G GACCACGTTTGCTGAAGGTTCCTTCATCATCAGCTGGCTGCTTCCATCTGATCCAGCCAA | |||
CsaSPT027 | Chr.4 | 17191693 | 53 | CCAAAAAGAAAAAATGCAGTCAGAAAAAGTAGCTAGAAACATACCAAAAGCAGAGGCCGA T TAGCACTATCAGTAGCACCAATCCTTTGCATCACAACAGATACCAACTCATCCAAGGTCT |
54 | CCAAAAAGAAAAAATGCAGTCAGAAAAAGTAGCTAGAAACATACCAAAAGCAGAGGCCGA C TAGCACTATCAGTAGCACCAATCCTTTGCATCACAACAGATACCAACTCATCCAAGGTCT | |||
CsaSPT028 | Chr.4 | 21145598 | 55 | ATTTCTCAGATGTGTTGAGTTTGATTTTATTTATGTATAGTATAGTCTTTATGATTGACG T CGTTTTCAACTGTAGATTAGAATCAATGTAATTTTAGCTTCTGAAATGGTTACTGATTCC |
56 | ATTTCTCAGATGTGTTGAGTTTGATTTTATTTATGTATAGTATAGTCTTTATGATTGACG C CGTTTTCAACTGTAGATTAGAATCAATGTAATTTTAGCTTCTGAAATGGTTACTGATTCC | |||
CsaSPT029 | Chr.4 | 22149419 | 57 | GATGGAGTTGAAGAGAATATTTGAAGAACTGAAGATCAACTACAATCTTCTGCCTCAAAC A GTTCATCTCTTCCCAGTTGAGGGGCACTGAAAGTCTACACAAAATCTTAAGCTTATGCTT |
58 | GATGGAGTTGAAGAGAATATTTGAAGAACTGAAGATCAACTACAATCTTCTGCCTCAAAC G GTTCATCTCTTCCCAGTTGAGGGGCACTGAAAGTCTACACAAAATCTTAAGCTTATGCTT | |||
CsaSPT030 | Chr.4 | 22556731 | 59 | AATGATGCACGAACAAACCATACATCCTGGGCCAGAAGGTGAGATGAGATGAGATGAGAA A AGAAGGGAGAAAGGGAATGGAGGGACGAGAAGAATGAGGCGTTAACAGATACAGAGTCTG |
60 | AATGATGCACGAACAAACCATACATCCTGGGCCAGAAGGTGAGATGAGATGAGATGAGAA G AGAAGGGAGAAAGGGAATGGAGGGACGAGAAGAATGAGGCGTTAACAGATACAGAGTCTG |
SNP 마커 | 해당 염색체 | SNP위치 | 서열번호 | 프로브 서열(downstream 60bp, upstream 60bp) |
CsaSPT031 | Chr.5 | 2349908 | 61 | CCCGTAAACCGGCTCTGCCACCAAGTATTGCTGGTACGACCACTGATTAGCCACAAGCGG T TCCACCATTTCATCAGCTGTGTCTGGATGTTCAAATTGCGATTGCGTTGAAGGCGGCAGA |
62 | CCCGTAAACCGGCTCTGCCACCAAGTATTGCTGGTACGACCACTGATTAGCCACAAGCGG C TCCACCATTTCATCAGCTGTGTCTGGATGTTCAAATTGCGATTGCGTTGAAGGCGGCAGA | |||
CsaSPT032 | Chr.5 | 3219085 | 63 | ATTTTACTGGGCAAAGTTATAATTGATAGATATGTTGGAATGTATGATTTTGATGATTCA A TTAATCCCTAGGCAGTGGGAATAAAAATGCAAACGATCCACAATTCTTAATTATAGTGCA |
64 | ATTTTACTGGGCAAAGTTATAATTGATAGATATGTTGGAATGTATGATTTTGATGATTCA G TTAATCCCTAGGCAGTGGGAATAAAAATGCAAACGATCCACAATTCTTAATTATAGTGCA | |||
CsaSPT033 | Chr.5 | 4230887 | 65 | AAAACATGGTAAAAATCTTGCATTCCCACAACCTTCACAAACAGACCCAGCTTTGATTTT T GGTAACCCTTCAAGTAATTCCCCTAAAACTCCTTCTTCTACCATTTTCAATACCTTTTCT |
66 | AAAACATGGTAAAAATCTTGCATTCCCACAACCTTCACAAACAGACCCAGCTTTGATTTT G GGTAACCCTTCAAGTAATTCCCCTAAAACTCCTTCTTCTACCATTTTCAATACCTTTTCT | |||
CsaSPT034 | Chr.5 | 4989671 | 67 | AGTATTTTTTATACGAGTATAGCTTCCAGAATATCCATTCCTTTCCTCAATCCTCTATCA A TGACTCTCTGGTAGCCTGTGTCCAAATAGAAAACAAGTAAAAAAATATAATTAGAAAAAA |
68 | AGTATTTTTTATACGAGTATAGCTTCCAGAATATCCATTCCTTTCCTCAATCCTCTATCA G TGACTCTCTGGTAGCCTGTGTCCAAATAGAAAACAAGTAAAAAAATATAATTAGAAAAAA | |||
CsaSPT035 | Chr.5 | 8129872 | 69 | GTTTTTTTTTCCTTCTAGAATCTTCTTTGTTTTTACCAAGTTTGTAAAGTCAGCTTAACT A ATGGAGAAAATATCATCAAAATGTCTCCCACCATATGGCTCTTTAGTCTCATTTCCCAGA |
70 | GTTTTTTTTTCCTTCTAGAATCTTCTTTGTTTTTACCAAGTTTGTAAAGTCAGCTTAACT G ATGGAGAAAATATCATCAAAATGTCTCCCACCATATGGCTCTTTAGTCTCATTTCCCAGA | |||
CsaSPT036 | Chr.6 | 1406894 | 71 | GGTTGGATCATTCCGAAGTGGCAGGACAGTAAAAGGACGGAGGATGCCTCCTATCTGCAA A GAGGTATTTGCTTTCAAGCCTACTTTTCATCTTCAATAAGTTAACTTTCAAATTGTTGAA |
72 | GGTTGGATCATTCCGAAGTGGCAGGACAGTAAAAGGACGGAGGATGCCTCCTATCTGCAA G GAGGTATTTGCTTTCAAGCCTACTTTTCATCTTCAATAAGTTAACTTTCAAATTGTTGAA | |||
CsaSPT037 | Chr.6 | 1607587 | 73 | TCGAACAAACCGGATTCTTCTTCGCCGAGTGACCTGTGTTGAATCCCTTTTGTAGAGATT T GTAATAAGAAACCAAACTGGATTCATCCCAATTCTTCTTGGCCTTCTGATGGACATCTGA |
74 | TCGAACAAACCGGATTCTTCTTCGCCGAGTGACCTGTGTTGAATCCCTTTTGTAGAGATT G GTAATAAGAAACCAAACTGGATTCATCCCAATTCTTCTTGGCCTTCTGATGGACATCTGA | |||
CsaSPT038 | Chr.6 | 3815947 | 75 | TGCAGAGTAAATGACAAAGATAAGAACGATGTGTATGACATAGGAGCCATTTTATTGGAA A TCATCTTGGGAAGACAAATCACATCCCAAAACGAAGTTCATGTTTCAAGAGATCTTGTAA |
76 | TGCAGAGTAAATGACAAAGATAAGAACGATGTGTATGACATAGGAGCCATTTTATTGGAA G TCATCTTGGGAAGACAAATCACATCCCAAAACGAAGTTCATGTTTCAAGAGATCTTGTAA | |||
CsaSPT039 | Chr.6 | 8859590 | 77 | AAGTGGCAACAATTCTTTGACTGAGTCTCAGCGAGTGATAAACCCTAATCCTGCTGCAAA A TCTGTAACGTTTGCTGAAGTAAAAGAAAAGAATCAAACATTGCCTCCATCTACCAATCAG |
78 | AAGTGGCAACAATTCTTTGACTGAGTCTCAGCGAGTGATAAACCCTAATCCTGCTGCAAA G TCTGTAACGTTTGCTGAAGTAAAAGAAAAGAATCAAACATTGCCTCCATCTACCAATCAG | |||
CsaSPT040 | Chr.6 | 16950033 | 79 | CTCCATTCAGCTGGGTTGAGCAGTTCTAAAAATCGTTATTTGGTGGGAGAGAAGTTGAGC A ATGCTGATGGTTCATGAAGTGTATTCTGGTAAAGGATCGGATGTAGTTTGTAATTTAGGT |
80 | CTCCATTCAGCTGGGTTGAGCAGTTCTAAAAATCGTTATTTGGTGGGAGAGAAGTTGAGC G ATGCTGATGGTTCATGAAGTGTATTCTGGTAAAGGATCGGATGTAGTTTGTAATTTAGGT |
SNP 마커 | 해당 염색체 | SNP위치 | 서열번호 | 프로브 서열(downstream 60bp, upstream 60bp) |
CsaSPT041 | Chr.6 | 22174935 | 81 | AAAGACTCTAAATCACAGCTTTGGTCAACGATGCTCACTTGATGGTTTATAGTTTACACT T TTCCCGATGACTGTAAAGATGTGTAGTTAATTCAAAATACATTAATAATTCATCGCAAGC |
82 | AAAGACTCTAAATCACAGCTTTGGTCAACGATGCTCACTTGATGGTTTATAGTTTACACT C TTCCCGATGACTGTAAAGATGTGTAGTTAATTCAAAATACATTAATAATTCATCGCAAGC | |||
CsaSPT042 | Chr.6 | 22246107 | 83 | CCTTAATATTTGCCGTAAATGCATGCCAGATTCCTGAAGGTCTGGAAATTTGCATCCTTG A TGATTATGTTTTACGCAGATGAGGAGGGCTTTGAAAAATGGCACATTTTAGATTTATACT |
84 | CCTTAATATTTGCCGTAAATGCATGCCAGATTCCTGAAGGTCTGGAAATTTGCATCCTTG C TGATTATGTTTTACGCAGATGAGGAGGGCTTTGAAAAATGGCACATTTTAGATTTATACT | |||
CsaSPT043 | Chr.6 | 25692778 | 85 | CAAGAACATTGAAATTCATAAGAAAGGATTTATTCTCATTGCAGATGAAGCAAAAACACT A AAATAGATCACAAGATCCCAGAATTTACACACTACGACATGATCGTAATTCGTAACCAAG |
86 | CAAGAACATTGAAATTCATAAGAAAGGATTTATTCTCATTGCAGATGAAGCAAAAACACT G AAATAGATCACAAGATCCCAGAATTTACACACTACGACATGATCGTAATTCGTAACCAAG | |||
CsaSPT44 | Chr.7 | 1724000 | 87 | CATATTTCTGACCTTATCTTTGCAGGCAAGTGGATCAATGGATTTGGATGTGACGTCGCC A AAACAACTCAACCGTAGAGTATTTTTGAAACAGTTGGCAGTAGACTTGTGCACTAGTGAA |
88 | CATATTTCTGACCTTATCTTTGCAGGCAAGTGGATCAATGGATTTGGATGTGACGTCGCC G AAACAACTCAACCGTAGAGTATTTTTGAAACAGTTGGCAGTAGACTTGTGCACTAGTGAA | |||
CsaSPT045 | Chr.7 | 4575406 | 89 | AATGATAAAACTCTCAGACAGGTAAAAGTTCTAGGTAAAGCAGCACCTTAGATGAGAGAG A GCATATTGAAGATGCCATTGCCTGCATAACATCAACAGCTGAACCCACAGCATCTTTCAG |
90 | AATGATAAAACTCTCAGACAGGTAAAAGTTCTAGGTAAAGCAGCACCTTAGATGAGAGAG G GCATATTGAAGATGCCATTGCCTGCATAACATCAACAGCTGAACCCACAGCATCTTTCAG | |||
CsaSPT046 | Chr.7 | 4712188 | 91 | GAACAACTTTTTCTAACTTTCATATTTGCAGGCTTCTGCAAACACTATTCTCTCTCATTT T CTGGGGCTCGTTTTCTCCTTAGAGCTACTCCGCTCAGTGACATTACCTGCTACAGATAGT |
92 | GAACAACTTTTTCTAACTTTCATATTTGCAGGCTTCTGCAAACACTATTCTCTCTCATTT C CTGGGGCTCGTTTTCTCCTTAGAGCTACTCCGCTCAGTGACATTACCTGCTACAGATAGT | |||
CsaSPT047 | Chr.7 | 9495723 | 93 | CCCCATCTTTGGCCTTTTATTGGCATCCAAATCAATGCAGCGTAGACAAACAAGCAACAC T CTCTTTAGAGTTCTAGGAGAGGGTGGAATCTCAATCAATGGATCTACTACCTCTTCACCA |
94 | CCCCATCTTTGGCCTTTTATTGGCATCCAAATCAATGCAGCGTAGACAAACAAGCAACAC C CTCTTTAGAGTTCTAGGAGAGGGTGGAATCTCAATCAATGGATCTACTACCTCTTCACCA | |||
CsaSPT048 | Chr.7 | 13513970 | 95 | ACACAATTATCCTACTTGAATCCTTATTGGTTGTTGGAATTAAATCGTTAAAGACCGAGG A TTGGGAACTTTCATTGCATTTGTGTGGACGATGTCAGAGTAGAAACGTCAAATAAAGTGG |
96 | ACACAATTATCCTACTTGAATCCTTATTGGTTGTTGGAATTAAATCGTTAAAGACCGAGG G TTGGGAACTTTCATTGCATTTGTGTGGACGATGTCAGAGTAGAAACGTCAAATAAAGTGG | |||
CsaSPT049 | Chr.7 | 16529777 | 97 | CTATAGTATCTTTAACATATTTACCGTGGCTGATGGACTATTATTTTACAAGAAAGGTAA A TAATGGAGCATAAAGAGACAGGATGCCAAGCTCCTCCAGAAGCTCCCAAACTTTGTGCAA |
98 | CTATAGTATCTTTAACATATTTACCGTGGCTGATGGACTATTATTTTACAAGAAAGGTAA G TAATGGAGCATAAAGAGACAGGATGCCAAGCTCCTCCAGAAGCTCCCAAACTTTGTGCAA | |||
CsaSPT050 | Chr.7 | 18195273 | 99 | CACGGTGGGAGATGAGTTCTTTGCCCCACCAAGAATGCCTGTAGCCTTTACCCAAGTCTC A AGGTGTTTGTCCCACGTGTATTGTCTCATGAAATCGATGATTCCGATAACCAGTTCGTGT |
100 | CACGGTGGGAGATGAGTTCTTTGCCCCACCAAGAATGCCTGTAGCCTTTACCCAAGTCTC G AGGTGTTTGTCCCACGTGTATTGTCTCATGAAATCGATGATTCCGATAACCAGTTCGTGT |
실시예 3. SNP 마커 활용한 오이 품종판별 및 F
1
종자 순도검정
오이의 품종판별 및 F1 종자 순도검정을 실시하기 위해서 31개의 F1 조합과 해당 조합의 양친 계통을 수집하였고, genomic DNA 추출 및 정량한 후, LGC사의 Douglas scientific 고속대용량 마커분석 기기를 활용하여 수집한 핵심 육성계통 38개와 F1 31개 조합과 그 양친 계통에 대한 유전자형 분석을 진행하였다.
분석 결과, 상기 표 5의 50개 SNP 마커 중 47개의 SNP 마커로 38개 다양한 오이계통을 모두 판별할 수 있는 것으로 나타났으며, 또한 49개의 마커로 31개 F1 품종과 그에 대한 31개의 양친조합(모/부)의 유전자형을 확인할 수 있었다. 상기 결과를 표 11과 표 12, 및 도 5 내지 7에 나타내었다.
C01 | C02 | C03 | C04 | C05 | C06 | C07 | C08 | C09 | C10 | C11 | C12 | C13 | C14 | C15 | C16 | C17 | C18 | C19 | |
CsaSPT001 | AA | AA | AA | AA | AA | GG | GG | AA | AA | GG | GG | GG | AA | GG | GG | GG | GG | GG | AA |
CsaSPT002 | CC | AA | CC | CC | CC | AA | AA | CC | AA | AA | CC | AA | AA | AA | AA | AA | CC | CC | CC |
CsaSPT003 | GG | GG | GG | AA | AA | GG | GG | GG | GG | GG | AA | GG | AA | AA | GG | GG | AA | AA | AA |
CsaSPT004 | GG | GG | GG | TT | TT | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | TT | TT | TT |
CsaSPT005 | TT | TT | CC | CC | CC | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | CC | CC | CC |
CsaSPT006 | AA | AA | GG | GG | GG | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | GG | GG | GG |
CsaSPT007 | CC | CC | CC | AA | AA | AA | AA | AA | CC | AA | CC | AA | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC |
CsaSPT008 | TT | TT | TT | TT | TT | TT | CC | TT | CC | CC | TT | TT | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC |
CsaSPT009 | AA | AA | AA | GG | GG | GG | GG | GG | AA | AA | GG | GG | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA |
CsaSPT010 | GG | TT | TT | GG | GG | GG | GG | GG | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT |
CsaSPT011 | AA | GG | AA | GG | GG | AA | AA | GG | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | GG | GG | GG |
CsaSPT012 | CC | CC | CC | CC | CC | TT | TT | CC | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | CC | TT | CC |
CsaSPT013 | TT | TT | TT | CC | CC | TT | TT | TT | TT | TT | TT | CC | TT | TT | TT | TT | CC | CC | CC |
CsaSPT014 | TT | TT | TT | CC | CC | CC | CC | TT | CC | CC | TT | TT | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC |
CsaSPT015 | CC | CC | CC | TT | TT | TT | TT | CC | TT | TT | TT | CC | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT |
CsaSPT016 | CC | CC | TT | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | TT | CC |
CsaSPT017 | AA | AA | AA | AA | AA | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | AA | AA | AA |
CsaSPT018 | TT | TT | CC | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | CC | TT | TT | TT | CC | CC | CC |
CsaSPT019 | AA | GG | GG | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | GG | GG | AA | AA | AA | GG | GG | AA | AA |
CsaSPT020 | TT | TT | TT | TT | TT | TT | CC | TT | TT | TT | CC | CC | CC | TT | TT | CC | TT | TT | TT |
CsaSPT021 | AA | AA | AA | GG | GG | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | GG | AA | GG | AA | GG | GG | GG |
CsaSPT022 | CC | CC | CC | TT | TT | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | TT | CC | CC | CC | TT | TT | TT |
CsaSPT023 | TT | TT | TT | CC | CC | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | CC | CC | CC |
CsaSPT024 | GG | AA | GG | AA | AA | GG | GG | GG | GG | GG | AA | AA | GG | GG | GG | GG | AA | AA | AA |
CsaSPT025 | AA | AA | AA | GG | GG | GG | GG | AA | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | AA | AA | GG |
CsaSPT026 | GG | GG | GG | AA | AA | AA | AA | GG | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | GG | GG | GG |
CsaSPT027 | CC | TT | CC | TT | TT | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | TT | TT | TT |
CsaSPT028 | TT | CC | CC | CC | CC | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | CC | CC | CC |
CsaSPT029 | AA | AA | AA | AA | AA | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | AA | AA | AA |
CsaSPT030 | GG | AA | AA | AA | AA | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | AA | AA | AA |
CsaSPT031 | CC | CC | CC | TT | TT | CC | CC | CC | CC | CC | TT | CC | CC | CC | CC | CC | CC | TT | TT |
CsaSPT032 | AA | AA | AA | GG | GG | AA | GG | AA | AA | AA | GG | GG | GG | AA | AA | AA | AA | GG | GG |
CsaSPT033 | GG | GG | GG | TT | TT | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | TT | TT | TT |
CsaSPT034 | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | GG | AA | AA | GG | AA | AA | AA | AA | AA | GG | GG | GG |
CsaSPT035 | GG | GG | GG | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA |
CsaSPT036 | AA | AA | AA | AA | AA | AA | GG | AA | AA | AA | GG | GG | GG | GG | GG | AA | GG | GG | GG |
CsaSPT037 | TT | TT | TT | TT | TT | TT | GG | TT | TT | TT | GG | GG | GG | GG | GG | TT | GG | GG | GG |
CsaSPT038 | AA | GG | AA | GG | GG | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | GG | AA | AA | AA | GG | GG | GG |
CsaSPT039 | GG | GG | GG | GG | GG | AA | AA | GG | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | GG | AA | AA |
CsaSPT040 | AA | GG | AA | GG | GG | GG | AA | AA | AA | GG | AA | GG | AA | AA | AA | AA | GG | AA | AA |
CsaSPT041 | TT | TT | TT | CC | CC | TT | TT | CC | TT | TT | TT | TT | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC |
CsaSPT042 | AA | CC | AA | CC | CC | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC |
CsaSPT043 | GG | AA | GG | AA | AA | GG | GG | AA | GG | GG | GG | GG | GG | AA | AA | AA | GG | AA | AA |
CsaSPT044 | GG | GG | GG | GG | GG | AA | AA | GG | AA | AA | GG | AA | AA | AA | AA | AA | AA | GG | GG |
CsaSPT045 | GG | GG | GG | AA | AA | GG | GG | AA | GG | GG | AA | GG | AA | GG | GG | GG | AA | AA | AA |
CsaSPT046 | CC | CC | CC | TT | TT | CC | CC | TT | CC | CC | TT | CC | TT | CC | CC | CC | TT | TT | TT |
CsaSPT047 | CC | CC | TT | TT | TT | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | TT | TT | TT |
CsaSPT048 | GG | GG | GG | AA | AA | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | AA | AA | AA |
CsaSPT049 | AA | AA | AA | GG | GG | AA | GG | AA | GG | AA | GG | AA | GG | AA | AA | GG | GG | GG | GG |
CsaSPT050 | AA | AA | GG | AA | AA | AA | GG | GG | GG | AA | GG | GG | GG | GG | AA | GG | AA | AA | AA |
C20 | C21 | C22 | C23 | C24 | C25 | C26 | C27 | C28 | C29 | C30 | C31 | C32 | C33 | C34 | C35 | C36 | C37 | C38 | |
CsaSPT001 | GG | GG | GG | GG | GG | GG | AA | GG | GG | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA |
CsaSPT002 | AA | AA | AA | AA | CC | CC | AA | CC | CC | CC | AA | AA | AA | AA | CC | AA | CC | CC | CC |
CsaSPT003 | GG | GG | GG | GG | GG | GG | AA | GG | GG | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA |
CsaSPT004 | TT | TT | TT | GG | TT | GG | GG | GG | GG | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT |
CsaSPT005 | CC | CC | CC | TT | CC | TT | TT | TT | TT | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC |
CsaSPT006 | GG | GG | GG | AA | AA | AA | AA | AA | AA | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG |
CsaSPT007 | AA | AA | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA |
CsaSPT008 | TT | TT | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT |
CsaSPT009 | GG | GG | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG |
CsaSPT010 | GG | GG | TT | TT | TT | TT | GG | TT | TT | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG |
CsaSPT011 | GG | GG | GG | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG |
CsaSPT012 | TT | TT | TT | TT | TT | TT | CC | TT | TT | TT | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC |
CsaSPT013 | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | TT | TT | TT | TT | TT | TT | CC | TT | CC |
CsaSPT014 | TT | TT | CC | CC | CC | CC | TT | CC | CC | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT |
CsaSPT015 | CC | CC | TT | TT | TT | TT | CC | TT | TT | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC |
CsaSPT016 | TT | TT | CC | TT | CC | CC | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT |
CsaSPT017 | AA | AA | AA | GG | AA | AA | AA | GG | GG | AA | AA | AA | AA | AA | GG | AA | GG | GG | GG |
CsaSPT018 | CC | CC | TT | TT | CC | TT | CC | CC | CC | TT | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | TT |
CsaSPT019 | GG | GG | AA | AA | GG | AA | GG | AA | AA | AA | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG |
CsaSPT020 | CC | CC | TT | TT | TT | CC | CC | TT | TT | TT | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC |
CsaSPT021 | AA | AA | GG | GG | GG | GG | AA | GG | GG | GG | AA | AA | GG | GG | GG | GG | AA | AA | AA |
CsaSPT022 | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | CC | TT | CC | CC | TT | TT | CC | TT | CC | CC | CC |
CsaSPT023 | CC | CC | CC | TT | CC | TT | CC | TT | TT | TT | TT | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC |
CsaSPT024 | AA | AA | AA | AA | GG | GG | AA | GG | GG | GG | GG | AA | AA | GG | GG | GG | AA | AA | AA |
CsaSPT025 | AA | AA | GG | GG | AA | GG | AA | GG | GG | GG | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA |
CsaSPT026 | GG | GG | AA | AA | AA | AA | GG | AA | AA | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG |
CsaSPT027 | TT | TT | CC | CC | TT | CC | TT | CC | CC | CC | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT |
CsaSPT028 | CC | CC | TT | TT | TT | TT | CC | TT | TT | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC |
CsaSPT029 | AA | AA | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA |
CsaSPT030 | AA | AA | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA |
CsaSPT031 | TT | TT | TT | TT | TT | TT | CC | TT | CC | CC | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | CC |
CsaSPT032 | GG | GG | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG |
CsaSPT033 | TT | TT | GG | TT | GG | GG | TT | GG | GG | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT |
CsaSPT034 | GG | GG | GG | GG | AA | AA | GG | AA | AA | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG |
CsaSPT035 | GG | GG | GG | GG | AA | AA | AA | GG | GG | AA | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG |
CsaSPT036 | GG | GG | GG | GG | GG | GG | AA | GG | GG | GG | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA |
CsaSPT037 | GG | GG | GG | GG | GG | GG | TT | GG | GG | GG | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT |
CsaSPT038 | AA | AA | AA | AA | AA | AA | GG | AA | AA | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG |
CsaSPT039 | AA | AA | AA | AA | GG | AA | GG | AA | AA | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG |
CsaSPT040 | AA | AA | AA | AA | AA | GG | GG | AA | AA | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG |
CsaSPT041 | CC | CC | CC | CC | CC | TT | TT | CC | CC | CC | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT |
CsaSPT042 | CC | CC | CC | CC | CC | CC | AA | CC | CC | CC | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | CC | AA |
CsaSPT043 | AG | AG | GG | GG | GG | GG | AG | GG | GG | AG | AG | AG | AG | GG | AG | AG | AG | AG | AG |
CsaSPT044 | GG | GG | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG | GG |
CsaSPT045 | AA | AA | AG | AG | AG | AG | AA | AG | AG | AG | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA | AA |
CsaSPT046 | TT | TT | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | CC | TT | TT | TT | TT | TC | TT | TT | TT | TT |
CsaSPT047 | TT | TT | CC | CC | CC | TT | CC | CC | CC | CC | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT | TT |
CsaSPT048 | AA | AA | AA | AA | AA | GG | AA | GG | GG | GG | AA | AA | AA | AA | AG | AA | AA | AA | AA |
CsaSPT049 | GG | GG | GG | GG | AA | AA | AA | AA | AA | GG | GG | GG | AA | AA | AG | AA | GG | GG | GG |
CsaSPT050 | AA | AA | AG | AG | AG | AG | AG | AG | AA | AG | AG | AA | AG | AA | AG | AA | AA | AA | AA |
상기와 같은 결과를 통해 본 발명에서 제시한 SNP를 이용하여 오이 F1 종자의 순도검정, 및 품종판별을 효율적으로 수행할 수 있다는 것을 알 수 있다.
<110> REPUBLIC OF KOREA(MANAGEMENT : RURAL DEVELOPMENT ADMINISTRATION)
<120> Single nucleotide polymorphism probe for purity determination or
breed identification of cucumber
<130> 02
<160> 100
<170> KoPatentIn 3.0
<210> 1
<211> 121
<212> DNA
<213> Cucumis sativus
<400> 1
aaaaaagaaa aaagaaaaaa aagaaagctc ctattcaact tatgagcatg taaaaatgtt 60
ataatctgct ttcattgtgg cacagctctg cctctagtga ttgagttaat ggttgaaatc 120
a 121
<210> 2
<211> 121
<212> DNA
<213> Cucumis sativus
<400> 2
aaaaaagaaa aaagaaaaaa aagaaagctc ctattcaact tatgagcatg taaaaatgtt 60
gtaatctgct ttcattgtgg cacagctctg cctctagtga ttgagttaat ggttgaaatc 120
a 121
<210> 3
<211> 121
<212> DNA
<213> Cucumis sativus
<400> 3
ctatgatgca gttcattaaa accatttagt aagggcactg actctatttg accatctttc 60
attctcattt tcatatcatc attaagttca taaccttagt gtatcacgag aggtcattaa 120
g 121
<210> 4
<211> 121
<212> DNA
<213> Cucumis sativus
<400> 4
ctatgatgca gttcattaaa accatttagt aagggcactg actctatttg accatctttc 60
cttctcattt tcatatcatc attaagttca taaccttagt gtatcacgag aggtcattaa 120
g 121
<210> 5
<211> 121
<212> DNA
<213> Cucumis sativus
<400> 5
gccacaaaca tattggccat ccacgcaaac caaatattcc actttcagaa gaacaattta 60
aaagccacca cggagacgaa ggacgaggtg aagggtcgac tccttctgaa tgttataatc 120
a 121
<210> 6
<211> 121
<212> DNA
<213> Cucumis sativus
<400> 6
gccacaaaca tattggccat ccacgcaaac caaatattcc actttcagaa gaacaattta 60
gaagccacca cggagacgaa ggacgaggtg aagggtcgac tccttctgaa tgttataatc 120
a 121
<210> 7
<211> 121
<212> DNA
<213> Cucumis sativus
<400> 7
gaagatttga aatatcagca gaaaccgcac aaggaattcc caaatttgaa agagcacctc 60
ttatgattcc gcatgggaaa tatagatgca tgcttgttgc ttgagctacc ttgttttcac 120
c 121
<210> 8
<211> 121
<212> DNA
<213> Cucumis sativus
<400> 8
gaagatttga aatatcagca gaaaccgcac aaggaattcc caaatttgaa agagcacctc 60
gtatgattcc gcatgggaaa tatagatgca tgcttgttgc ttgagctacc ttgttttcac 120
c 121
<210> 9
<211> 121
<212> DNA
<213> Cucumis sativus
<400> 9
taatcaatgt catattacca aaacaaatac tcacaacgaa atacaaaaaa caaaccataa 60
tgatttgtac caaaaataag agggcagcaa acaggcaaga gagaatcaac aaattccatc 120
a 121
<210> 10
<211> 121
<212> DNA
<213> Cucumis sativus
<400> 10
taatcaatgt catattacca aaacaaatac tcacaacgaa atacaaaaaa caaaccataa 60
cgatttgtac caaaaataag agggcagcaa acaggcaaga gagaatcaac aaattccatc 120
a 121
<210> 11
<211> 121
<212> DNA
<213> Cucumis sativus
<400> 11
aaaaaaaaaa tacaaataca aatacaaata caactaagaa ctttattatg tattaaaaat 60
atgtcctccg tcgccggcgg tagcaatctt taattgtatt tggtcaccat ctgagctttt 120
c 121
<210> 12
<211> 121
<212> DNA
<213> Cucumis sativus
<400> 12
aaaaaaaaaa tacaaataca aatacaaata caactaagaa ctttattatg tattaaaaat 60
gtgtcctccg tcgccggcgg tagcaatctt taattgtatt tggtcaccat ctgagctttt 120
c 121
<210> 13
<211> 121
<212> DNA
<213> Cucumis sativus
<400> 13
ttatatgatt ccatatgcta attgtttgaa taaaattttg cttcttacat taggacacaa 60
aacctcgcat taaacctacc ttaagaaatg ctcaacacag tgtggtagaa aagcaaacat 120
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<213> Cucumis sativus
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<213> Cucumis sativus
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<213> Cucumis sativus
<400> 80
ctccattcag ctgggttgag cagttctaaa aatcgttatt tggtgggaga gaagttgagc 60
gatgctgatg gttcatgaag tgtattctgg taaaggatcg gatgtagttt gtaatttagg 120
t 121
<210> 81
<211> 121
<212> DNA
<213> Cucumis sativus
<400> 81
aaagactcta aatcacagct ttggtcaacg atgctcactt gatggtttat agtttacact 60
tttcccgatg actgtaaaga tgtgtagtta attcaaaata cattaataat tcatcgcaag 120
c 121
<210> 82
<211> 121
<212> DNA
<213> Cucumis sativus
<400> 82
aaagactcta aatcacagct ttggtcaacg atgctcactt gatggtttat agtttacact 60
cttcccgatg actgtaaaga tgtgtagtta attcaaaata cattaataat tcatcgcaag 120
c 121
<210> 83
<211> 121
<212> DNA
<213> Cucumis sativus
<400> 83
ccttaatatt tgccgtaaat gcatgccaga ttcctgaagg tctggaaatt tgcatccttg 60
atgattatgt tttacgcaga tgaggagggc tttgaaaaat ggcacatttt agatttatac 120
t 121
<210> 84
<211> 121
<212> DNA
<213> Cucumis sativus
<400> 84
ccttaatatt tgccgtaaat gcatgccaga ttcctgaagg tctggaaatt tgcatccttg 60
ctgattatgt tttacgcaga tgaggagggc tttgaaaaat ggcacatttt agatttatac 120
t 121
<210> 85
<211> 121
<212> DNA
<213> Cucumis sativus
<400> 85
caagaacatt gaaattcata agaaaggatt tattctcatt gcagatgaag caaaaacact 60
aaaatagatc acaagatccc agaatttaca cactacgaca tgatcgtaat tcgtaaccaa 120
g 121
<210> 86
<211> 121
<212> DNA
<213> Cucumis sativus
<400> 86
caagaacatt gaaattcata agaaaggatt tattctcatt gcagatgaag caaaaacact 60
gaaatagatc acaagatccc agaatttaca cactacgaca tgatcgtaat tcgtaaccaa 120
g 121
<210> 87
<211> 121
<212> DNA
<213> Cucumis sativus
<400> 87
catatttctg accttatctt tgcaggcaag tggatcaatg gatttggatg tgacgtcgcc 60
aaaacaactc aaccgtagag tatttttgaa acagttggca gtagacttgt gcactagtga 120
a 121
<210> 88
<211> 121
<212> DNA
<213> Cucumis sativus
<400> 88
catatttctg accttatctt tgcaggcaag tggatcaatg gatttggatg tgacgtcgcc 60
gaaacaactc aaccgtagag tatttttgaa acagttggca gtagacttgt gcactagtga 120
a 121
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<211> 121
<212> DNA
<213> Cucumis sativus
<400> 89
aatgataaaa ctctcagaca ggtaaaagtt ctaggtaaag cagcacctta gatgagagag 60
agcatattga agatgccatt gcctgcataa catcaacagc tgaacccaca gcatctttca 120
g 121
<210> 90
<211> 121
<212> DNA
<213> Cucumis sativus
<400> 90
aatgataaaa ctctcagaca ggtaaaagtt ctaggtaaag cagcacctta gatgagagag 60
ggcatattga agatgccatt gcctgcataa catcaacagc tgaacccaca gcatctttca 120
g 121
<210> 91
<211> 121
<212> DNA
<213> Cucumis sativus
<400> 91
gaacaacttt ttctaacttt catatttgca ggcttctgca aacactattc tctctcattt 60
tctggggctc gttttctcct tagagctact ccgctcagtg acattacctg ctacagatag 120
t 121
<210> 92
<211> 121
<212> DNA
<213> Cucumis sativus
<400> 92
gaacaacttt ttctaacttt catatttgca ggcttctgca aacactattc tctctcattt 60
cctggggctc gttttctcct tagagctact ccgctcagtg acattacctg ctacagatag 120
t 121
<210> 93
<211> 121
<212> DNA
<213> Cucumis sativus
<400> 93
ccccatcttt ggccttttat tggcatccaa atcaatgcag cgtagacaaa caagcaacac 60
tctctttaga gttctaggag agggtggaat ctcaatcaat ggatctacta cctcttcacc 120
a 121
<210> 94
<211> 121
<212> DNA
<213> Cucumis sativus
<400> 94
ccccatcttt ggccttttat tggcatccaa atcaatgcag cgtagacaaa caagcaacac 60
cctctttaga gttctaggag agggtggaat ctcaatcaat ggatctacta cctcttcacc 120
a 121
<210> 95
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<212> DNA
<213> Cucumis sativus
<400> 95
acacaattat cctacttgaa tccttattgg ttgttggaat taaatcgtta aagaccgagg 60
attgggaact ttcattgcat ttgtgtggac gatgtcagag tagaaacgtc aaataaagtg 120
g 121
<210> 96
<211> 121
<212> DNA
<213> Cucumis sativus
<400> 96
acacaattat cctacttgaa tccttattgg ttgttggaat taaatcgtta aagaccgagg 60
gttgggaact ttcattgcat ttgtgtggac gatgtcagag tagaaacgtc aaataaagtg 120
g 121
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<212> DNA
<213> Cucumis sativus
<400> 97
ctatagtatc tttaacatat ttaccgtggc tgatggacta ttattttaca agaaaggtaa 60
ataatggagc ataaagagac aggatgccaa gctcctccag aagctcccaa actttgtgca 120
a 121
<210> 98
<211> 121
<212> DNA
<213> Cucumis sativus
<400> 98
ctatagtatc tttaacatat ttaccgtggc tgatggacta ttattttaca agaaaggtaa 60
gtaatggagc ataaagagac aggatgccaa gctcctccag aagctcccaa actttgtgca 120
a 121
<210> 99
<211> 121
<212> DNA
<213> Cucumis sativus
<400> 99
cacggtggga gatgagttct ttgccccacc aagaatgcct gtagccttta cccaagtctc 60
aaggtgtttg tcccacgtgt attgtctcat gaaatcgatg attccgataa ccagttcgtg 120
t 121
<210> 100
<211> 121
<212> DNA
<213> Cucumis sativus
<400> 100
cacggtggga gatgagttct ttgccccacc aagaatgcct gtagccttta cccaagtctc 60
gaggtgtttg tcccacgtgt attgtctcat gaaatcgatg attccgataa ccagttcgtg 120
t 121
Claims (15)
- 서열번호 1 내지 100의 탐침을 포함하는,
오이의 품종 및 순도 검정용 탐침 세트.
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 제 1항에 있어서,
상기 탐침은 검출 가능한 물질로 표지되어 있는 것을 특징으로 하는,
탐침 세트.
- 삭제
- 제 1항의 탐침 세트를 포함하는,
오이의 품종 및 순도 검정용 조성물.
- 삭제
- 제 7항의 조성물을 포함하는,
오이의 품종 및 순도 검정용 키트.
- 삭제
- 제 9항에 있어서,
상기 키트는 KASP(kompetitive allele speicific PCR)의 탐침을 위한 것인,
오이의 품종 및 순도 검정용 키트.
- (a) 제 1 항의 탐침 세트를 이용하여 품종 또는 계통을 알고 있는 부모 오이의 단일염기다형성의 유전자형을 결정하는 단계;
(b) 제 1 항의 탐침 세트를 이용하여 상기 부모 오이의 자손인지 여부를 확인하고자 하는 오이의 단일염기다형성의 유전자형을 결정하는 단계; 및
(c) 상기 (a) 단계와 상기 (b) 단계에서 결정된 단일염기다형성의 유전자형을 비교하는 단계를 포함하는,
오이의 순도검정 방법.
- 삭제
- 삭제
- 삭제
Priority Applications (1)
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Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20220086085A (ko) | 2020-12-16 | 2022-06-23 | 대한민국(농촌진흥청장) | 딸기 순도검정 및 품종 판별용 마커 세트 및 이의 용도 |
KR20230041159A (ko) * | 2021-09-16 | 2023-03-24 | 대한민국(농촌진흥청장) | 오이의 오렌지색 과육 판별용 프라이머 세트 및 이의 용도 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20080077140A (ko) * | 2005-11-04 | 2008-08-21 | 드 루이터 씨즈 알 앤 디 비.브이. | 질병 내성 오이 식물체 |
KR101174409B1 (ko) | 2010-04-02 | 2012-08-22 | 대한민국 | 초위성체 마커를 이용한 오이 품종 식별 방법 |
KR101361730B1 (ko) | 2013-06-18 | 2014-02-13 | 동국대학교 산학협력단 | 오이의 품종을 식별하기 위한 다형성 마커 |
KR101608576B1 (ko) | 2014-04-16 | 2016-04-04 | 세종대학교산학협력단 | 오이 노균병원체 검출용 단일염기다형성 마커 및 이를 이용한 오이 노균병원체 검출방법 |
JP2018518948A (ja) * | 2015-05-07 | 2018-07-19 | ヌンヘムス、ベスローテン、フェンノートシャップNunhems B.V. | キュウリ(Cucumis sativus)植物における収量QTLの遺伝子移入 |
-
2018
- 2018-12-11 KR KR1020180159249A patent/KR102108751B1/ko active IP Right Grant
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20080077140A (ko) * | 2005-11-04 | 2008-08-21 | 드 루이터 씨즈 알 앤 디 비.브이. | 질병 내성 오이 식물체 |
KR101388281B1 (ko) | 2005-11-04 | 2014-04-22 | 드 루이터 씨즈 알 앤 디 비.브이. | 질병 내성 오이 식물체 |
KR101174409B1 (ko) | 2010-04-02 | 2012-08-22 | 대한민국 | 초위성체 마커를 이용한 오이 품종 식별 방법 |
KR101361730B1 (ko) | 2013-06-18 | 2014-02-13 | 동국대학교 산학협력단 | 오이의 품종을 식별하기 위한 다형성 마커 |
KR101608576B1 (ko) | 2014-04-16 | 2016-04-04 | 세종대학교산학협력단 | 오이 노균병원체 검출용 단일염기다형성 마커 및 이를 이용한 오이 노균병원체 검출방법 |
JP2018518948A (ja) * | 2015-05-07 | 2018-07-19 | ヌンヘムス、ベスローテン、フェンノートシャップNunhems B.V. | キュウリ(Cucumis sativus)植物における収量QTLの遺伝子移入 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
Han et al, Theor Appl Genet. 2018 Feb;131(2):449-460 * |
Hao et al, Theor Appl Genet. 131(8), pp.1659-1669, 2018 Aug.* * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20220086085A (ko) | 2020-12-16 | 2022-06-23 | 대한민국(농촌진흥청장) | 딸기 순도검정 및 품종 판별용 마커 세트 및 이의 용도 |
KR20230041159A (ko) * | 2021-09-16 | 2023-03-24 | 대한민국(농촌진흥청장) | 오이의 오렌지색 과육 판별용 프라이머 세트 및 이의 용도 |
KR102567328B1 (ko) | 2021-09-16 | 2023-08-28 | 대한민국(농촌진흥청장) | 오이의 오렌지색 과육 판별용 프라이머 세트 및 이의 용도 |
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