KR102076395B1 - 작약 또는 단삼 추출물을 포함하는 혈행 개선용 조성물 - Google Patents
작약 또는 단삼 추출물을 포함하는 혈행 개선용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 작약(Paeonia lactiflora), 단삼(Salvia miltiorrhiza), 비파(Eriobotrya japonica), 당귀(Angelicae Gigantis Radix) 및 황칠(Dendropanax morbifera)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 혈행 개선용 약학 조성물 및 이의 다양한 용도에 관한 것이다. 본 발명의 작약, 단삼, 비파, 당귀 및 황칠로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 이용 시, 평활근 세포의 이동 및 증식을 효과적으로 억제하고, 혈소판 응집을 억제하여 혈전 생성을 저해하며, 혈행을 개선하는 효과가 존재하므로, 관련 약학 및 식품 산업에 유용하게 이용될 수 있다.
Description
본 발명은 작약(Paeonia lactiflora), 단삼(Salvia miltiorrhiza), 비파(Eriobotrya japonica), 당귀(Angelicae Gigantis Radix) 및 황칠(Dendropanax morbifera)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 혈행 개선용 약학 조성물 및 이의 다양한 용도에 관한 것이다.
생체 내에서 혈액은 응고와 용해작용이 항상 평형을 이루고 있으며 정상적으로 순환하고 있는 동안에는 혈전이 생성되지 않는데, 이러한 혈전의 형성은 어떠한 원인으로 인해 혈관이 손상을 입은 경우 손상 부위로부터 혈액이 누출되는 것을 방지하기 위한 기전이며 이는 혈액 성분의 변화, 혈류의 이상 및 혈관 벽의 성상의 변화와 밀접하게 연관되어 있다. 즉, 혈관이 어떠한 이유로 손상을 입은 경우, 혈소판이 손상 부분에 점착, 응집되어 응집물을 형성함으로써 출혈을 방지하는데, 혈소판은 혈소판 스스로 응집됨으로써 혈액 내에 존재하는 응고인자를 활성화시키는 물질을 방출시켜 보다 견고한 혈전의 형성을 유발하는 혈전 형성을 촉진한다.
혈액순환 또는 혈전 질환은 정상 혈관에서 지혈기전의 활성화 반응과 억제 반응이 균형을 이루면서 항상성을 유지하는데 과도한 지혈 작용 또는 혈괴의 생성은 혈류의 흐름을 방해하여 그로 인해 혈전이 유발된다. 혈전의 초기단계는 상처부위의 과도한 지혈작용과 혈관 내피세포의 손상 등의 원인에 의해 혈소판이 점착 활성화 응집되면서 시작되며, 혈액 응고계를 활성화시키면서 급속히 진행된다. 정상의 혈관 내피세포에서는 일산화질소(NO)와 프로스타시클린(prostacyclin, PGI2)과 같은 억제 인자를 방출하여 혈관벽을 보호함으로써 혈소판의 부착과 활성화를 억제하는 작용을 하지만, 내피세포가 손상되면 혈관내피 세포 아래쪽에 위치하고 있는 콜라겐이 노출되어 폰빌레브란트인자(von Willebrand factor)들이 먼저 콜라겐에 붙고 혈소판이 GPIb/IX라는 수용체를 이용하여 그 위에 달라붙는다. 이 과정에서 혈소판은 활성화되고 혈소판내의 과립(granule)으로부터 ADP와 트롬복산 A2(TXA2) 등이 분비되어 혈소판은 더욱 활성화된 혈소판의 막에 존재하는 GP IIb/IIIa 수용체와 피브리노겐(fibrinogen)이 결합하여 혈소판 응고가 촉진된다. 이 중 뇌혈관이 막히면 뇌혈전증이 일어나 반신불수가 되며, 심장혈관이 막히면 심부전증이나 심장마비가 되어 사망하게 되는데, 이러한 심근경색, 뇌경색, 폐경색등처럼 혈전이 혈관을 막아 일어나는 병을 통틀어 혈전증이라 한다.
혈관 내의 혈전(fibrin clot)은 동맥경화를 비롯한 심혈관질환의 주요 원인이 되며 혈전의 제거는 심혈관 질환의 예방과 치료에 중요한 요소이다. 일반적으로 혈전은 인체의 혈관이 손상을 받아 출혈이 일어난 후 혈액이 혈관 또는 조직 내에서 응고됨으로서 생성되며, 이러한 혈전의 생성은 최종적으로 활성화된 트롬빈(thrombin)에 의하여 혈장 단백질인 피브리노겐(fibrinogen)이 피브린(fibrin)으로 전환됨으로써 유도되는데(Wolberg A.S., et al., Thrombin generation, fibrin clot formation and hemostasis. Transfusion and Apheresis Science, 38(1), pp.15-23, 2008), 정상적인 경우 혈전은 플라즈민(plasmin) 등과 같은 혈전용해효소(fibrinolytic enzyme)에 의해 체내에서 자연적으로 분해된다.
혈전 질환의 예방과 치료에는 항응고제, 항혈소판제, 혈전 용해제 등이 있으며, 현재 개발된 항혈소판 제제로는 몰시도민, 베라파밀, 니페디핀, 데오필린, 비스테로이드계 아스피린, 이미다졸, 인도메타신 등이 있다. 이중 가장 대표적인 항혈소판 제제인 아스피린은 위장출혈, 소화성 장애 등의 부작용을 야기하는 문제가 있으며, 그 외 항응고제나 고지혈증 치료제로 쓰이는 약물들은 가격이 고가라는 문제점이 있다. 이에 따라, 상기 약물의 부작용을 줄이면서도, 동일한 효과를 보이는 물질을 찾기 위하여, 천연물로부터 혈액순환 개선 작용을 하는 물질에 대한 탐색연구가 많이 진행되고 있다.
이에 본 발명자들은 혈관 평활근세포의 증식 및 이동에 기인하는 질환 또는 혈관내막 증식에 기인하는 질환을 효과적으로 예방 또는 치료하고, 혈행을 원활하게 하는 소재들을 탐색한 결과, 작약, 단삼, 비파, 당귀 및 황칠로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물이 in vitro 또는 in vivo 상에서, 평활근 세포의 이동 및 증식을 효과적으로 억제하고, 혈소판 응집을 억제하여 혈전 생성을 저해하여, 혈행을 개선하는 효과를 나타냄을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
1. J. Ethnopharmacol. 67, 111-119, 1999), 혈소판응집억제효과(Planta Med, 65, 595-599, 1999), 항혈전효과(Chem. Pharm. Bull, 35(2), 849-852, 1987
2. Planta Med, 65, 595-599, 1999
3. Fitoterapia, 75(1), 45-49, 2004
4. Chem. Pharm. Bull, 35(2), 849-852, 1987
본 발명의 목적은 작약(Paeonia lactiflora), 단삼(Salvia miltiorrhiza), 비파(Eriobotrya japonica), 당귀(Angelicae Gigantis Radix) 및 황칠(Dendropanax morbifera)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 혈행 개선용 약학 조성물을 제공할 수 있다.
또한, 본 발명의 목적은 작약, 단삼, 비파, 당귀 및 황칠로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 혈행 개선용 식품 조성물을 제공할 수 있다.
또한, 본 발명의 목적은 작약, 단삼, 비파, 당귀 및 황칠로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 혈전 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공할 수 있다.
또한, 본 발명의 목적은 작약, 단삼, 비파, 당귀 및 황칠로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 혈전 질환 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공할 수 있다.
또한, 본 발명의 목적은 작약, 단삼, 비파, 당귀 및 황칠로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 평활근 세포 증식 억제용 조성물을 제공할 수 있다.
본 발명은 작약(Paeonia lactiflora), 단삼(Salvia miltiorrhiza), 비파(Eriobotrya japonica), 당귀(Angelicae Gigantis Radix) 및 황칠(Dendropanax morbifera)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 혈행 개선용 약학 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 작약, 단삼, 비파, 당귀 및 황칠로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 혈행 개선용 식품 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 작약, 단삼, 비파, 당귀 및 황칠로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 혈전 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 작약, 단삼, 비파, 당귀 및 황칠로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 혈전 질환 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 작약, 단삼, 비파, 당귀 및 황칠로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 평활근 세포 증식 억제용 조성물을 제공한다.
본 발명의 작약, 단삼, 비파, 당귀 및 황칠로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 이용 시, 평활근 세포의 이동 및 증식을 효과적으로 억제하고, 혈소판 응집을 억제하여 혈전 생성을 저해하며, 혈행을 개선하는 효과가 존재하므로, 관련 약학 및 식품 산업에 유용하게 이용될 수 있다.
도 1은 본 발명에 따른 제조방법의 개략도이다.
도 2는 PDGF-BB로 유도된 렛드 대동맥의 평활근 세포의 이동 및 증식을 억제하는 것을 확인하기 위해 세포 수를 측정한 결과를 나타낸 도이다.
도 3은 PDGF-BB로 유도된 렛드 대동맥의 평활근 세포의 이동을 억제하는 것을 확인하기 위해 세포 수를 측정한 결과를 나타낸 도이다.
도 4는 PDGF-BB로 유도된 렛드 대동맥의 평활근 세포의 증식을 억제한 결과를 나타낸 도이다.
도 5는 혈소판 응집유도물질(콜라켄(collagen), 아라키돈산(arachidonic acid, AA), 트롬빈(thrombin))로 유도된 혈소판 응집을 억제한 결과를 나타낸 도이다.
도 6은 FeCl3로 유도된 랫드의 동맥혈전 생성 시간을 지연한 결과를 나타낸 도이다.
도 2는 PDGF-BB로 유도된 렛드 대동맥의 평활근 세포의 이동 및 증식을 억제하는 것을 확인하기 위해 세포 수를 측정한 결과를 나타낸 도이다.
도 3은 PDGF-BB로 유도된 렛드 대동맥의 평활근 세포의 이동을 억제하는 것을 확인하기 위해 세포 수를 측정한 결과를 나타낸 도이다.
도 4는 PDGF-BB로 유도된 렛드 대동맥의 평활근 세포의 증식을 억제한 결과를 나타낸 도이다.
도 5는 혈소판 응집유도물질(콜라켄(collagen), 아라키돈산(arachidonic acid, AA), 트롬빈(thrombin))로 유도된 혈소판 응집을 억제한 결과를 나타낸 도이다.
도 6은 FeCl3로 유도된 랫드의 동맥혈전 생성 시간을 지연한 결과를 나타낸 도이다.
이하 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 실시예들을 상세히 설명한다. 이하의 설명에 있어, 당업자에게 주지 저명한 기술에 대해서는 그 상세한 설명을 생략할 수 있다. 또한, 본 발명을 설명함에 있어서, 관련된 공지 기능 또는 구성에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있다고 판단되는 경우에는 그 상세한 설명을 생략할 수 있다. 또한, 본 명세서에서 사용되는 용어(terminology)들은 본 발명의 바람직한 실시예를 적절히 표현하기 위해 사용된 용어들로서, 이는 사용자, 운용자의 의도 또는 본 발명이 속하는 분야의 관례 등에 따라 달라질 수 있다.
따라서 본 용어들에 대한 정의는 본 명세서 전반에 걸친 내용을 토대로 내려져야 할 것이다. 명세서 전체에서, 어떤 부분이 어떤 구성요소를 "포함"한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성 요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다.
본 발명은 작약(Paeonia lactiflora), 단삼(Salvia miltiorrhiza), 비파(Eriobotrya japonica), 당귀(Angelicae Gigantis Radix) 및 황칠(Dendropanax morbifera)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 혈행 개선용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명에서 용어 “작약(Paeonia lactiflora)”은 미나리아재비과의 여러해살이풀이며, 뿌리는 한방에서 사용하는 약재(백작약, 적작약)로. 백작약과 적작약은 껍질의 유무로 결정하고 있으며, 껍질이 있는 것을 적작약, 껍질을 벗겨낸 것을 백작약이라고 한다. 성분은 주성분으로 피어니플로린(paeoniflorin)이 함유되어 있고, 정유, 지방유, 수지, 탄닌, 당, 전분, 점액질 등이 함유되어 있다.
본 발명에서 용어 “단삼(Salvia miltiorrhiza)”은 살비아과에 속하는 다년생 초본인 살비아로부터 기원한 것이다. 단삼의 건조된 뿌리는 혈액순환의 개선과 울혈의 치료를 위해 전통적으로 사용되어왔다. 혈액 순환을 활성화시켜 혈액 울혈을 제거하며, 혈액을 강화하고, 마음을 진정시키며, 혈액을 냉하게 하며, 종기를 제거하고, 독소를 제거하여 조직 재생을 촉진시키는 효능이 있다.
본 발명에서 용어 “비파(Eriobotrya japonica)”는 높이가 5m 내외로 자라는 나무로 열매에는 10％의 당분과 0.6％의 능금산 및 0.3％의 펩신이 들어 있으며 비타민A, 비타민B, 비타민C도 많이 함유하고 있다. 잎에는 진해, 거담, 건위 등의 효능이 있다고 하여 기관지염, 딸꾹질, 부종 등의 증상 시에 잎을 달여 마시기도 한다.
본 발명에서 용어 “당귀(Angelicae Gigantis Radix)”는 참당귀(Angelica gigas Nakai)(산형과 Umbelliferae)의 뿌리이며, 당귀의 기원식물로는 현재 참당귀, 중국당귀 및 일당귀가 유통되고 있다. 함유성분으로 보면 중국당귀와 일당귀는 비슷하지만 참당귀는 상이하고, 우리나라에서는 참당귀를 정품으로 보고 있다.
본 발명에서 용어 “황칠(Dendropanax morbifera)”은 한국 특산종으로 일본에는 혼슈 남부, 오키나와까지 분포한다. 일본종인 Dendropanax morbiferus H. Lev.와 수액의 색이 상이하고, 천연 도료로 고품격의 화장도료로 적격이고, 금속공예에도 사용되고 있다.
본 발명에 따른 추출물은 당업계에 공지된 추출 및 분리방법을 사용하여 천연으로부터 추출 및 분리하여 수득한 것을 사용할 수 있으며, 본 발명에서 정의된 "추출물"은 적절한 용매를 이용하여 작약, 단삼, 비파, 당귀 및 황칠로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 약재로부터 추출한 것이며, 예를 들어, 조추출물, 극성용매 가용 추출물 또는 비극성용매 가용 추출물을 모두 포함한다. 상기 추출물을 추출하기 위한 적절한 용매로는 약학적으로 허용되는 유기용매라면 어느 것을 사용해도 무방하며, 물 또는 유기용매를 사용할 수 있으며, 이에 제한되지는 않으나, 예를 들어, 정제수, 메탄올(methanol), 에탄올(ethanol), 프로판올(propanol), 이소프로판올(isopropanol), 부탄올(butanol) 등을 포함하는 탄소수 1 내지 4의 알코올, 아세톤(acetone), 에테르(ether), 벤젠(benzene), 클로로포름(chloroform), 에틸아세테이트(ethyl acetate), 메틸렌클로라이드(methylene chloride), 헥산(hexane) 및 시클로헥산(cyclohexane) 등의 각종 용매를 단독으로 혹은 혼합하여 사용할 수 있다. 추출 방법으로는 열수추출법, 냉침추출법, 환류냉각추출법, 용매추출법, 수증기증류법, 초음파추출법, 용출법, 압착법 등의 방법 중 어느 하나를 선택하여 사용할 수 있다. 또한, 목적하는 추출물은 추가로 통상의 분획 공정을 수행할 수도 있으며, 통상의 정제 방법을 이용하여 정제될 수도 있다.
본 발명의 추출물의 제조방법에는 제한이 없으며, 공지되어 있는 어떠한 방법도 이용될 수 있다. 예를 들면, 본 발명의 조성물에 포함되는 추출물은 상기한 열수 추출 또는 용매 추출법으로 추출된 1차 추출물을, 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말상태로 제조할 수 있다. 또한 상기 1차 추출물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(silica gel column chromatography), 박층 크로마토그래피(thin layer chromatography), 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography) 등과 같은 다양한 크로마토그래피를 이용하여 추가로 정제된 분획을 얻을 수도 있다. 따라서 본 발명에 있어서 작약, 단삼, 비파, 당귀 및 황칠로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물은 추출, 분획 또는 정제의 각 단계에서 얻어지는 모든 추출액, 분획 및 정제물, 그들의 희석액, 농축액 또는 건조물을 모두 포함하는 개념이다.
상기 추출물은 도 1에 나타낸 바와 같이, 주정(에탄올)을 추출용매로 하여 환류 냉각 방법으로 추출하고, 이를 감압 농축 건조하여 추출물을 수득하나, 본 발명의 작약, 단삼, 비파, 당귀 및 황칠로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 유효성분을 추출하기 위한 추출 용매 및 추출 방법이라면, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 약학 조성물에는 추출물 이외에 보조제(adjuvant)를 추가로 포함할 수 있다. 상기 보조제는 당해 기술분야에 알려진 것이라면 어느 것이나 제한 없이 사용할 수 있으나, 예를 들어 프로인트(Freund)의 완전 보조제 또는 불완전 보조제를 더 포함하여 그 효과를 증가시킬 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물은 유효성분을 약학적으로 허용된 담체에 혼입시킨 형태로 제조될 수 있다. 여기서, 약학적으로 허용된 담체는 제약 분야에서 통상 사용되는 담체, 부형제 및 희석제를 포함한다. 본 발명의 약학 조성물에 이용할 수 있는 약학적으로 허용된 담체는 이들로 제한되는 것은 아니지만, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로스, 메틸 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀전, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 또는 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
제제화할 경우에는 통상 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 그러한 고형 제제는 유효성분에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면 전분, 칼슘 카르보네이트, 수크로스, 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데, 일반적으로 사용되는 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수용성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제 및 좌제가 포함된다. 비수용성용제, 현탁제로는 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브유와 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물은 개체에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식이 예상될 수 있는데, 예를 들면 경구, 정맥, 근육, 피하, 복강내 주사에 의해 투여될 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물의 투여량은 개체의 연령, 체중, 성별, 신체 상태 등을 고려하여 선택된다. 상기 약학 조성물 중 포함되는 작약, 단삼, 비파, 당귀 및 황칠로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물의 농도는 대상에 따라 다양하게 선택할 수 있음은 자명하며, 바람직하게는 약학 조성물에 0.01 ~ 5,000 ㎍/ml의 농도로 포함되는 것이다. 그 농도가 0.01 ㎍/ml 미만일 경우에는 약학 활성이 나타나지 않을 수 있고, 5,000 ㎍/ml를 초과할 경우에는 인체에 독성을 나타낼 수 있다.
또한, 본 발명은 작약, 단삼, 비파, 당귀 및 황칠로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 혈행 개선용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 식품 조성물은 유효성분인 추출물을 함유하는 것 외에 통상의 식품 조성물과 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.
상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨,소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 향미제는 천연 향미제 (타우마틴), 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제 (사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 본 발명의 식품 조성물은 상기 약학적 조성물과 동일한 방식으로 제제화되어 기능성 식품으로 이용하거나, 각종 식품에 첨가할 수 있다. 본 발명의 조성물을 첨가할 수 있는 식품으로는 예를 들어, 음료류, 육류, 초코렛, 식품류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 사탕류, 아이스크림류, 알코올 음료류, 비타민 복합제 및 건강보조식품류 등이 있다.
또한 상기 식품 조성물은 유효성분인 추출물 외에 여러 가지 영양제, 비타민, 광물 (전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제 (치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 식품 조성물은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.
본 발명의 기능성 식품 조성물은 혈행 개선의 목적으로, 정제,캅셀, 분말, 과립, 액상, 환 등의 형태로 제조 및 가공될 수 있다. 본 발명에서 '건강기능성 식품 조성물'이라 함은 건강기능식품에 관한 법률 제6727호에 따른 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 말하며, 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건용도에 유용한 효과를 얻을 목적으로 섭취하는 것을 의미한다. 본 발명의 건강기능식품은 통상의 식품 첨가물을 포함할 수 있으며, 식품 첨가물로서의 적합 여부는 다른 규정이 없는 한, 식품의약품안전청에 승인된 식품 첨가물 공전의 총칙 및 일반시험법 등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 의하여 판정한다. 상기 '식품 첨가물 공전'에 수재된 품목으로는 예를 들어, 케톤류, 글리신, 구연산칼슘, 니코틴산, 계피산 등의 화학적 합성물; 감색소, 감초추출물, 결정셀룰로오스, 고량색소, 구아검 등의 천연첨가물; L-글루타민산나트륨 제제, 면류첨가알칼리제, 보존료 제제, 타르색소제제 등의 혼합제제류 등을 들 수 있다. 예를 들어, 정제 형태의 건강기능식품은 본 발명의 유효 성분인 작약, 단삼, 비파, 당귀 및 황칠로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 부형제, 결합제, 붕해제 및 다른 첨가제와 혼합한 혼합물을 통상의 방법으로 과립화한 다음, 활택제 등을 넣어 압축성형하거나, 상기 혼합물을 직접 압축 성형할 수 있다. 또한 상기 정제 형태의 건강기능식품은 필요에 따라 교미제 등을 함유할 수도 있다. 캅셀 형태의 건강기능식품 중 경질 캅셀제는 통상의 경질 캅셀에 본 발명의 작약, 단삼, 비파, 당귀 및 황칠로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 부형제 등의 첨가제와 혼합한 혼합물을 충진하여 제조할 수 있으며, 연질 캅셀제는 작약, 단삼, 비파, 당귀 및 황칠로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 부형제 등의 첨가제와 혼합한 혼합물을 젤라틴과 같은 캅셀기제에 충진하여 제조할 수 있다. 상기 연질 캅셀제는 필요에 따라 글리세린 또는 소르비톨 등의 가소제, 착색제, 보존제 등을 함유할 수 있다. 환 형태의 건강기능식품은 본 발명의 유효성분인 작약, 단삼, 비파, 당귀 및 황칠로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물과 부형제, 결합제, 붕해제 등을 혼합한 혼합물을 기존에 공지된 방법으로 성형하여 조제할 수 있으며, 필요에 따라 백당이나 다른 제피제로 제피할 수 있으며, 또는 전분, 탈크와 같은 물질로 표면을 코팅할 수도 있다. 과립 형태의 건강기능식품은 본 발명의 유효성분인 작약, 단삼, 비파, 당귀 및 황칠로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물과 부형제, 결합제, 붕해제 등을 혼합한 혼합물을 기존에 공지된 방법으로 입상으로 제조할 수 있으며, 필요에 따라 착향제, 교미제 등을 함유할 수 있다.
또한, 본 발명은 작약, 단삼, 비파, 당귀 및 황칠로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 혈전 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
상기 혈전질환은 동맥 혈전증, 정맥 혈전증, 폐동맥 색전증, 만성정맥 허혈, 하지 정맥류, 심부 정맥 혈전증, 동맥경화증, 뇌출혈, 뇌졸증 및 뇌경색으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상이나, 이에 제한되지 않는다.
상기 약학 조성물은 상술한 추출물을 유효성분으로 포함하는 약학 제제를 포함하기 때문에, 상술한 본 발명의 조성물과 중복된 내용은 중복된 내용의 기재에 의한 본 명세서의 과도한 복잡성을 피하기 위하여 그 기재를 생략한다.
또한, 본 발명은 작약, 단삼, 비파, 당귀 및 황칠로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 혈전 질환 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
상기 식품 조성물은 상술한 추출물을 유효성분으로 포함하는 식품 제제를 포함하기 때문에, 상술한 본 발명의 조성물과 중복된 내용은 중복된 내용의 기재에 의한 본 명세서의 과도한 복잡성을 피하기 위하여 그 기재를 생략한다.
또한, 본 발명은 작약, 단삼, 비파, 당귀 및 황칠로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 평활근 세포 증식 억제용 조성물을 제공한다.
본 발명에서 용어 “평활근”은 인체 내부장기의 벽을 구성하는 근육계통으로서 인체의 무의식적인 생리현상, 특히 각종 내장(예컨대, 위장관, 혈관, 방광 또는 자궁 등)의 운동을 관장하는 조직이며, 평활근 세포는 상기 조직으로부터 분리한 세포를 의미한다.
본 발명의 이점 및 특징, 그리고 그것들을 달성하는 방법은 상세하게 후술되어 있는 실시예들을 참조하면 명확해질 것이다. 이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명하기로 한다. 그러나 이들 실시예들은 본 발명을 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
[실시예]
<제조예> 단삼, 비파, 당귀, 황칠 또는 작약을 포함하는 추출물 제조
도 1에 도시된 공정에 따라, 각 약재의 단독 또는 복합 추출 조건; 주정 농도(0, 30, 50 및 80 %)의 조건에 따라, 각 조건의 추출물을 제조하였다. 구체적으로 단계 1은 단삼, 비파, 당귀, 황칠 또는 작약을 포함하는 5종 약재를 각 중량 비율별로 각 조건에 따라 혼합하였다. 단계 2는 추출 용매를 이용한 추출 단계로서, 물 또는 10~90%의 주정을 각 조건에 따라 선택하여 추출하였다. 또한, 단계 3은 추출 단계로서, 멀티 히팅맨틀(WiseTherm)을 사용하여 추출액의 온도를 70℃로 유지하고, 환류 냉각장치를 저온 항온수조(A&D)와 연결하여 환류 냉각 추출하였다. 단계 4는 건조 단계로서, 상기 추출액은 진공회전농축기(EYELA)를 활용하여 45℃의 수욕 및 200mbar 이하의 압력에서 감압 농축하여 최종적으로 각 조건의 추출물을 수득하였다.
<실험예 1> 약재 단독 추출 및 주정 농도에 따른 수율, 평활근 세포 및 혈전 억제 효과 확인
약재 단독 추출 및 주정 농도에 따른 수율, 평활근 세포 및 혈전 억제 효과 확인하기 위하여, 단삼 단독, 비파 단독, 당귀 단독, 황칠 단독 또는 작약 단독 조건에 각 주정 농도(0, 30, 50 및 80 %)로 각 추출물을 상기 제조예의 방법으로 수득하였다. 그 후, 상기 각 조건에 따른 추출물의 수율(%)을 확인하였다. 또한, 평활근 세포의 세포 증식을 확인하기 위하여, PDGF-BB로 유도된 렛드 대동맥의 평활근 세포에 100μg/ml로 각 추출물을 처리한 후, 평활근 세포의 증식을 확인하였다. 또한, 혈전 억제 효과를 확인하기 위하여, 뉴질랜드 흰색토끼의 혈소판에 상기 각 추출물을 1000μg/ml로 처리한 후, 혈소판 응집 유도물질인 아라키돈 산(Arachidonic acid)을 처리하고, 유도된 혈소판 응집 억제정도를 혈장 응집측정기(platelet aggregometer)를 이용하여 측정하였으며, 이를 3회 반복하여 확인하였다. 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다.
표 1에 나타낸 바와 같이, 단삼 단독, 비파 단독 또는 작약 단독 조건에 주정 50%의 조건에서 수율이 높고, 평활근 세포의 증식 억제효과 나타나며, 아라키돈산에 의해 유발된 혈전을 효과적으로 억제함을 확인하였다.
<실험예 2> 약재 복합 추출 및 주정 농도에 따른 평활근 세포 및 혈전 억제 효과 확인
상기 실험예 1을 통하여, 주정 농도를 50%로 설정하고, 각 약재 복합 추출 조건에서의 평활근 세포 및 혈전 억제 효과를 확인하였다. 실험 조건은 상기 실험예 1과 동일하게 수행하였으며, 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.
단삼+작약 추출물(실시예 4), 단삼+비파+작약 추출물(실시예 13), 단삼+당귀+황칠 추출물(실시예 14), 단삼+당귀+작약 추출물(실시예 15), 단삼+황칠+작약 추출물(실시예 16) 및 비파+당귀+황칠 추출물(실시예 17)이 평활근 세포 증식을 억제하고 혈전을 억제함에 효과가 있음을 확인하였다.
따라서, 상기 실험예 1 및 2의 결과를 바탕으로, 상기 단삼 단독 추출물(비교예 1), 비파 단독 추출물(비교예 2) 및 작약 단독 추출물(비교예 3)을 비교예로 선발하였다. 또한, 단삼+작약 추출물(실시예 4), 단삼+비파+작약 추출물(실시예 13), 단삼+당귀+황칠 추출물(실시예 14), 단삼+당귀+작약 추출물(실시예 15), 단삼+황칠+작약 추출물(실시예 16) 및 비파+당귀+황칠 추출물(실시예 17)의 실시예를 선발하여, 이를 이후 실험에 이용하였다.
<실험예 3> 단독 또는 복합 추출물의 평활근 세포의 이동 및 증식 억제 효과 확인
상기 비교예 1-3과 실시예 4, 13-17의 각 추출물에 대한 평활근 세포의 이동 및 증식 억제 효과를 확인하였다. 구체적으로, 혈소판 유래 성장인자(PDGF-BB)로 유도된 렛드 대동맥의 평활근 세포가 있는 플레이트를 긁어 스크래치를 유도하였다. 상처가 복원되는 동안 세포의 이동 및 증식이 증가 되므로, 상처 영역(wound area)을 측정하였다. 상기 평활근 세포에 10, 30 또는 100μg/ml로 각 추출물을 처리하여, 단삼+비파+작약 추출물(실시예 13) 및 단삼+당귀+황칠 추출물(실시예 14)에 의한 세포의 이동 및 증식억제를 Real-time cell observer(Carl Zeiss)로 확인하였다. 또한, 무처리군을 100%로 하여 상기 비교예 1-3와 실시예 4, 13-17을 처리한 후, 평활근 세포의 상처 영역(%)을 확인하였다. 그 결과를 도 2에 나타내었다.
도 2에 나타낸 바와 같이, 각 단독 추출물이 처리된 비교예 1-3보다, 실시예 4, 13-17의 각 복합 추출물에서 상처 영역의 복원이 저해되어 평활근 세포의 이동 및 증식을 억제함을 확인하였다. 특히, 단삼+작약 추출물(실시예 4), 단삼+비파+작약 추출물(실시예 13), 단삼+당귀+작약 추출물(실시예 15), 단삼+황칠+작약 추출물(실시예 16)에서 더욱 평활근 세포의 이동 및 증식을 우수하게 억제함을 확인하였다.
<실험예 4> 단독 또는 복합 추출물의 평활근 세포의 이동 억제 효과 확인
상기 비교예 1-3과 실시예 4, 13-17의 각 추출물에 대한 평활근 세포의 이동 및 억제 효과를 확인하였다. 구체적으로, PDGF-BB로 유도된 렛드 대동맥의 평활근 세포에 10, 30 또는 100μg/ml로 각 추출물을 처리하여, 단삼+비파+작약 추출물(실시예 13) 및 단삼+당귀+황칠 추출물(실시예 14)의 세포 이동을 Real-time cell observer(Carl Zeiss)로 확인하였다. 또한, 무처리군을 100%로 하여 상기 비교예 1-3와 실시예 4, 13-17을 처리한 후, 평활근 세포의 이동 농도를 측정하여 이동 세포율(%)을 확인하였다. 그 결과를 도 3에 나타내었다.
도 3에 나타낸 바와 같이, 각 단독 추출물이 처리된 비교예 1-3보다, 실시예 4, 13-17의 각 복합 추출물에서 이동 세포율이 저해됨을 확인하였다. 특히, 단삼+작약 추출물(실시예 4), 단삼+비파+작약 추출물(실시예 13), 단삼+당귀+작약 추출물(실시예 15), 단삼+황칠+작약 추출물(실시예 16)에서 더욱 세포의 이동이 우수하게 저해됨을 확인하였다.
<실험예 5> 단독 또는 복합 추출물의 평활근 세포 증식 억제 평가
상기 비교예 1-3과 실시예 4, 13-17의 각 추출물에 대한 평활근 세포의 증식 억제 효과를 확인하였다. 구체적으로, PDGF-BB로 유도된 렛드 대동맥의 평활근 세포에 10, 30 또는 100μg/ml로 각 추출물을 처리한 후, 무처리군을 100%로 하여 평활근 세포의 증식율(%)을 확인하였다. 그 결과를 도 4에 나타내었다.
도 4에 나타낸 바와 같이, 각 단독 추출물이 처리된 비교예 1-3보다, 실시예 4, 13-17의 각 복합 추출물에서 평활근 세포의 증식이 저해됨을 확인하였다. 특히, 단삼+작약 추출물(실시예 4), 단삼+비파+작약 추출물(실시예 13), 단삼+당귀+작약 추출물(실시예 15), 단삼+황칠+작약 추출물(실시예 16)에서 더욱 세포의 증식이 우수하게 저해됨을 확인하였다.
<실험예 6> 단독 또는 복합 추출물의 혈전 생성 억제 평가
상기 비교예 1-3과 실시예 4, 13-17의 각 추출물에 대한 혈전 생성 억제 효과를 확인하였다. 구체적으로, 뉴질랜드 흰색토끼의 혈소판에 상기 각 추출물을 500 또는 1000μg/ml로 처리한 후, 혈소판 응집 유도물질인 콜라겐(Collagen), 아라키돈 산(Arachidonic acid) 또는 트롬빈(Thrombin)을 처리하고, 유도된 혈소판 응집 억제정도를 혈장 응집측정기(platelet aggregometer)를 이용하여 효과를 평가하였다. 그 결과를 도 5에 나타내었다.
도 5 에 나타난 바와 같이, 각 단독 추출물이 처리된 비교예 1-3보다, 실시예 4, 13-17의 각 복합 추출물에서 혈전 생성이 저해됨을 확인하였다. 특히, 단삼+작약 추출물(실시예 4), 단삼+비파+작약 추출물(실시예 13), 단삼+당귀+작약 추출물(실시예 15), 단삼+황칠+작약 추출물(실시예 16)에서 더욱 혈전의 생성이 우수하게 억제됨을 확인하였다.
<실험예 7> 단독 또는 복합 추출물의 동물 모델의 혈행 개선 평가
상기 비교예 1-3과 실시예 4, 13-17의 각 추출물에 대한 렛드의 혈행 개선 효과를 평가하였다. 구체적으로, 렛드에 상기 각 추출물 300mg/Kg을 7일간 복용 시킨 후 50% FeCl3를 적신 여과지를 동맥에 감싸 혈전 생성을 유도한 후 혈관의 혈액 흐름도를 측정하여 혈행 개선 효과를 평가하였다. 그 결과를 도 6에 나타내었다.
도 6 에 나타난 바와 같이, 각 단독 추출물이 처리된 비교예 1-3보다, 실시예 4, 13-17의 각 복합 추출물에서 렛드의 혈행이 개선됨을 확인하였다. 특히, 단삼+작약 추출물(실시예 4), 단삼+비파+작약 추출물(실시예 13), 단삼+당귀+작약 추출물(실시예 15), 단삼+황칠+작약 추출물(실시예 16)에서 더욱 혈행이 우수하게 개선됨을 확인하였다.
상기 일련의 결과를 통하여, 본 발명의 단삼 및 작약 추출물; 또는 상기 단삼 및 작약 추출믈에 추가적으로 비파, 당귀 또는 황칠을 선택적으로 포함하는 추출물을 유효성분으로 이용 시, in vitro 상에서는 평활근 세포의 이동 및 증식을 효과적으로 억제하고, 혈소판 응집을 억제하여 혈전 생성을 저해함을 확인하였다. 또한, in vivo 상에서는 상기 각 추출물을 복용 시, 렛드의 혈행을 개선하는 효과를 나타냄을 확인하였다.
Claims (8)
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- (1)1:1 중량비의 작약 및 단삼의 혼합 추출물 또는 (2) 작약; 단삼; 황칠, 비파 및 당귀로 이루어진 군에서 어느 하나;를 1:1:1중량비로 혼합 추출한 추출물을 유효성분으로 포함하는 혈행 개선용 식품 조성물.
- (1)1:1 중량비의 작약 및 단삼의 혼합 추출물 또는 (2) 작약; 단삼; 황칠, 비파 및 당귀로 이루어진 군에서 어느 하나;를 1:1:1중량비로 혼합 추출한 추출물을 유효성분으로 포함하는 혈전 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 제5항에 있어서,
상기 혈전 질환은 동맥 혈전증, 정맥 혈전증, 폐동맥 색전증, 만성정맥 허혈, 하지 정맥류, 심부 정맥 혈전증, 동맥경화증, 뇌출혈, 뇌졸증 및 뇌경색으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것을 특징으로 하는 혈전 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물. - (1)1:1 중량비의 작약 및 단삼의 혼합 추출물 또는 (2) 작약; 단삼; 황칠, 비파 및 당귀로 이루어진 군에서 어느 하나;를 1:1:1중량비로 혼합 추출한 추출물을 유효성분으로 포함하는 혈전 질환 예방 또는 개선용 식품 조성물.
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