KR102013309B1 - 리치 껍질 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품 - Google Patents

리치 껍질 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품 Download PDF

Info

Publication number
KR102013309B1
KR102013309B1 KR1020170114860A KR20170114860A KR102013309B1 KR 102013309 B1 KR102013309 B1 KR 102013309B1 KR 1020170114860 A KR1020170114860 A KR 1020170114860A KR 20170114860 A KR20170114860 A KR 20170114860A KR 102013309 B1 KR102013309 B1 KR 102013309B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
extract
rich
active ingredient
thrombosis
bark
Prior art date
Application number
KR1020170114860A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20190028004A (ko
Inventor
손호용
Original Assignee
안동대학교 산학협력단
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 안동대학교 산학협력단 filed Critical 안동대학교 산학협력단
Priority to KR1020170114860A priority Critical patent/KR102013309B1/ko
Publication of KR20190028004A publication Critical patent/KR20190028004A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102013309B1 publication Critical patent/KR102013309B1/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/77—Sapindaceae (Soapberry family), e.g. lychee or soapberry
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00—Function of food ingredients
    • A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)

Abstract

본 발명은 열대 과일 리치(Litchi chinensis Sonn.)의 껍질(Pericarp) 추출물을 유효성분으로 함유하는 항혈전 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는, 수세 정선된 리치의 껍질을 회수하고, 이를 에탄올로 추출한 후, 순차적 유기 용매 분획에 의하여 수득되는 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 함유하는 혈액 응고 저해를 통한 혈전증의 예방 또는 치료/개선용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품에 관한 것이다. 본 발명의 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품의 유효성분으로서의 리치 껍질 추출물은, 리치 과일의 식용 후 폐기되는 껍질의 추출물을 이용하므로 불용 자원의 재이용 및 환경보존에 기여할 수 있으며, 본 명세서의 실시예를 통해 증명된 바와 같이, 혈액 응고 인자의 저해에 의한 강력한 항혈전 활성을 나타냄과 동시에, 인간 적혈구에 대한 용혈 활성을 전혀 나타내지 않고, 열 안정성이 우수하고, pH 2의 산성 조건 및 혈장 내에서도 혈액 응고인자 저해 효과의 손실이 나타나지 않으므로, 혈행 개선을 통해 허혈성 뇌졸중 및 출혈성 뇌졸중과 같은 혈전증의 예방 및 치료용으로 사용할 수 있을 것으로 기대되며, 상기 유효성분은 추출액, 분말, 환, 정 등의 다양한 형태로 가공되어 상시 복용이 가능한 형태로 조제할 수 있는 뛰어난 효과가 있으므로 제약 산업 및 식품 산업상 매우 유용한 발명인 것이다.

Description

리치 껍질 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품{PHARMACEUTICAL COMPOSITION COMPRISING THE PERICARP EXTRACT OF LITCHI AS AN EFFECTIVE COMPONENT FOR PREVENTION OR TREATMENT OF THROMBOSIS AND HEALTH FUNCTIONAL FOOD COMPRISING THE SAME}
본 발명은 열대 과일 리치(Litchi chinensis Sonn.)의 껍질(Pericarp) 추출물을 유효성분으로 함유하는 항혈전 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는, 수세 정선된 리치의 껍질을 회수하고, 이를 에탄올로 추출한 후, 순차적 유기용매 분획에 의하여 수득되는 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 함유하는 혈액 응고 저해를 통한 혈전증의 예방 또는 치료/개선용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품에 관한 것이다.
인체 구성 성분으로서의 혈액은 산소, 영양분, 노폐물의 운반 기능과 완충 작용, 체온 유지, 삼투압 조절 및 이온 평형 유지, 수분 일정 유지, 액성 조절 작용, 혈압의 유지 및 조절, 생체 방어 등 다양한 중요 기능들을 가지고 있다. 정상적인 혈액 순환은 체내에서의 혈액 응고 반응계와 혈전 용해 반응계가 상호 보완적으로 조절되면서 혈액 순환을 용이하게 하며, 이들 중 혈액 응고 반응계의 기작은 혈관벽에 혈소판이 점착, 응집하여 혈소판 혈전을 형성한 후, 혈액 응고계가 활성화되어 혈소판 응집괴를 중심으로 피브린 혈전이 형성되는 것으로 보고되어 있다.
피브린 혈전의 생성은 수많은 혈액 응고 인자들의 여러 단계 반응을 거쳐 피브린 응고에 관여하는 트롬빈이 활성화되어, 최종적으로 피브리노겐으로부터 피브린 단량체를 생성하게 하며, 피브린 단량체들은 칼슘에 의해 중합되어, 혈소판과 내피세포에 결합하게 되며, XIII 인자에 의해 교차 결합된 피브린 폴리머를 형성하면서 영구적인 혈전을 생성하게 된다. 또한, 트롬빈은 혈소판, V 인자, VII 인자들을 활성화시켜 혈액 응고 반응을 촉진시키는 등 혈전 생성에 중추적 역할을 하게 된다. 따라서, 트롬빈의 활성 저해 물질은 과다한 혈액 응고 이상으로 발생하는 다양한 혈전성 질환에 매우 유용한 예방 및 치료제로 사용될 수 있다. 한편, 내인성 혈전 생성 경로에는 XII 인자, XI 인자, XII 인자, IX 인자, X 인자의 순차적 활성화에 이은 프로트롬빈의 활성화가 최종적으로 트롬빈을 활성화하는 것으로 알려져 상기의 혈액 응고 인자의 특이적 저해 역시 중요한 혈전성 질환 치료제의 개발 타겟이 되고 있으며, 외인성 혈전 생성 경로의 경우, II 인자(prothrombin), V 인자, VII 인자, X 인자의 활성화에 따른 혈전 생성이 알려져 있다. 현재까지, 혈전성 질환의 예방과 치료에 헤파린, 쿠마린, 아스피린, 유로키네이즈 등의 다양한 혈액 응고 억제제, 항혈소판제, 혈전용해제 등이 사용되고 있으나, 이들은 가격이 매우 높을 뿐 아니라, 출혈성 부작용과 위장 장해 및 과민 반응 등으로 그 사용이 한정되고 있는 실정이다.
한편, 인구의 증가로 과일 소비는 급격히 증가되고 있으며, 이에 따라 대량의 과일 껍질과 씨앗이 쓰레기로 발생하고 있다. 따라서, 폐기되고 있는 껍질 등의 효율적인 재이용 연구가 절실하다(Cheok CY 등, 2016, Critical Reviews in Food Science and Nutrition, http://dx.doi.org/10.1080/ 10408398.2016.1176009). 리치(Litchi chinensis sonn.)는 쌍떡잎식물 무환자나무목 무환자나무과의 상록교목으로서, 나무의 크기는 높이 10~15m까지 자라며, 여지, 라이치(Lychee, Lichee, water lychee), 중국체리(Chinese cherry)라고도 불리며, 열매를 식용으로 사용하고 있다. 리치는 아열대 지방의 습윤한 산성 토양에서 잘 자라고, 뿌리에는 뿌리혹박테리아가 공생하며, 중국 화남이 원산지이며, 그밖에 복건, 광동, 광서, 운남, 사천과 대만 등지에서 광범위하게 재배되고 있다.
리치 열매는 붉고 단단한 껍질 속에 즙이 많은 흰색 속살이 있으며, 그 안에 초콜릿 색깔의 둥근 씨앗을 가지고 있으며, 씨앗과 껍질은 버리게 된다. 중국 최고미녀 양귀비가 즐겨 먹었다고 해서 미용에 효과가 있다고 알려져 있으며(대한제과협회, 2004, 9: 118-119), 국내에서도 소비가 증가하고 있는 실정이다. 민간에서 리치는 위장 장애, 소화 장애, 변비를 예방하고, 소화 기능을 증대하며, 풍부한 비타민 C 및 칼륨 함유로 항산화 효과 및 혈압 유지에 도움을 준다고 알려져 있으며, 종기, 연주창, 혈당 강하, 진통, 산기, 고환종통, 위통, 울체 및 진해약 등에 효능이 우수한 것으로 알려져 있다. 실제 리치 과육에는 사포닌과 탄닌이 다량 함유되어 있고, 포도당, 자당, 단백질, 지방, 엽산(folic acid), 비타민 A, B, C, 구연산, 능금산 및 유기산 등이 함유되어 있어 영양적으로도 우수하다고 알려져 있다. 그러나, 리치에는 profilin이라는 알러지 유발 물질이 포함되어 있어, 과다 복용시, 매우 드물게 저혈압, 발작, 실신, 알러지 반응이 나타나는 경우도 있다고 알려져 있다(Fah, J. 등 1995. Clin. Exp. Allergy, 25: 1018-1023).
리치에 대한 생리 활성 연구로는 항산화, 항염증, 항당뇨, 항비만, 간독성 보호, 면역증강 활성, 혈당 강하, 항암, 항세균, 항바이러스 및 고지혈증 예방 효과가 알려져 있다(Xu, X 등, 2011, J. Agric. Food Chem. 59: 1205-1209; Ibrahim S. 등, 2015. J. Ethnopharmacology, 174: 492-513). 또한, 혈소판 응집 저해 활성 및 미약한 혈액 응고 저해도 보고되어 있다(Sung, YY, 2012. Mol. Med. Rep., 5:721-724). 혈소판 응집 저해를 보고한 상기 논문의 경우, 리치의 사용 부위는 한방에서 여지육이라 불리는 리치 과육 부분을 건조하여 말린 것이다.
또한, 현재까지 알려진 리치와 관련된 특허로는 대한민국 등록특허 제10-1393007호에 [람부탄 및 리치 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부노화 방지용 및 피부주름 개선용 화장료 조성물]이, 등록특허 제10-0969170호에 [여지핵 추출물을 포함하는 지방간 또는 비만의 예방 또는 치료용 조성물](이때 여지핵은 리치 씨앗을 말함)이, 등록특허 제10-1117563호에 [여지 추출물을 함유하는 항산화용 조성물]이 개시되어 있으며, 공개특허 제10-2014-0118531호 및 국제공개특허 WO-2014-157865는 [여지핵 및 한인진 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방, 개선 또는 치료용 조성물]이 공개되어 있다.
한편, 일본공개특허로는 JP-2007-0215492호에 [리치 껍질로부터 폴리페놀을 회수하는 방법 및 그 조성물]이, JP-2010-0189444호 및 미국공개특허 US-2004-0101508에는 [리치 껍질 추출물을 이용한 피부, 헤어 스트레스 방어용 화장품 이용 등의 용도]가 알려져 있다. 또한, 국제공개특허 WO-2009-062804호에는 [HAIR TREATMENT AGENT HAVING LYCHEE EXTRACT AND TAURINE]이 알려져 있으며, 일본공개특허 JP-2009-0079018에는 [두피 화장품]이 알려져 있다. 특히, 리치 씨앗과 관련하여, 리치 씨앗의 glycosylation 저해 효과(일본공개특허 JP-2008-0088102호), urease 저해 효과(일본공개특허 JP-2011-0006333호) 및 aldose reduction 효소의 저해 효과(일본공개특허 JP-2006-0335752호)가 알려져 있다. 그러나, 현재까지 어떠한 학술연구나 특허문헌에도 리치 껍질 추출물 및 이의 분획물의 강력한 혈액 응고 인자 저해에 의한 항혈전 효과는 알려진 바 없다.
JP 2007-0215492 A JP 2010-0189444 A
Sung, YY, 2012. Mol. Med. Rep., 5:721-724. Antiplatelet, anticoagulant and fibrinolytic effects of Litchi chinensis Sonn. extract.
본 발명은 상기와 같은 종래 기술의 문제점을 해결하기 위하여 안출된 것으로서, 본 발명에서 해결하고자 하는 과제는 폐기되고 있는 리치 과일의 껍질로부터 에탄올 추출물을 조제하고, 이의 순차적 유기용매 분획을 통해 얻어지는 활성 분획물을 유효성분으로 함유하는 항혈전성 조성물을 제공하고자 하는 것이다.
상기와 같은 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 리치(Litchi chinensis Sonn.) 껍질 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
상기 리치 껍질 추출물은 리치 껍질 에탄올 추출물의 에틸아세테이트 분획물인 것이 바람직하다.
또한, 본 발명은 리치(Litchi chinensis Sonn.) 껍질 에탄올 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 함유하는 혈액 응고 억제제를 제공한다.
또한, 본 발명은 리치(Litchi chinensis Sonn.) 껍질 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 개선용 건강 기능 식품을 제공한다.
상기 리치 껍질 추출물은 리치 껍질 에탄올 추출물의 에틸아세테이트 분획물인 것이 바람직하다.
본 발명의 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품의 유효성분으로서의 리치 껍질 추출물은, 리치 과일의 식용 후 폐기되는 껍질의 추출물을 이용하므로 불용 자원의 재이용 및 환경보존에 기여할 수 있으며, 본 명세서의 실시예를 통해 증명된 바와 같이, 혈액 응고 인자의 저해에 의한 강력한 항혈전 활성을 나타냄과 동시에, 인간 적혈구에 대한 용혈 활성을 전혀 나타내지 않고, 열 안정성이 우수하고, pH 2의 산성 조건 및 혈장 내에서도 혈액 응고인자 저해 효과의 손실이 나타나지 않으므로, 혈행 개선을 통해 허혈성 뇌졸중 및 출혈성 뇌졸중과 같은 혈전증의 예방 및 치료용으로 사용할 수 있을 것으로 기대되며, 상기 유효성분은 추출액, 분말, 환, 정 등의 다양한 형태로 가공되어 상시 복용이 가능한 형태로 조제할 수 있는 뛰어난 효과가 있으므로 제약 산업 및 식품 산업상 매우 유용한 발명인 것이다.
도 1 내지 도 4는 실험에 사용된 리치 과일, 껍질, 과육 및 씨앗을 각각 나타낸 것이다.
이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.
본 발명의 발명자들은 리치 추출물을 대상으로 항혈전 효능을 검정하기 위하여, 일정 방법으로 제조한 리치 과일의 과육 추출물, 껍질 추출물을 조제하고, 상기 추출물의 항혈전 활성을 평가하여 리치 껍질 추출물의 우수한 항혈전 활성을 확인하였으며, 이후 리치 껍질 추출물로부터 헥센 분획물, 에틸아세테이트 분획물, 부탄올 분획물 및 유기용매 분획 후의 물 잔류물을 회수하여 그 활성을 분석한 결과, 에틸아세테이트 분획물에서 가장 우수한 항혈전 활성을 확인하였으며, 헥센 분회물을 제외한 상기 추출물 및 분획물들은 인간 적혈구에 대해 용혈 활성은 전혀 나타내지 않으면서도, 열 안정성과 산 안정성이 우수한 특징을 가짐을 확인함으로써 상기 추출물을 혈전증의 예방 또는 치료/개선용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품으로 활용하고자 하였다.
구체적으로, 본 발명자들은 민간에서 다양한 생리 활성이 있다고 알려진 리치를 이용하여 혈전증의 예방 또는 치료/개선용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품을 개발하기 위하여, 리치의 과육 및 껍질을 대상으로 에탄올 추출물을 각각 조제하고, 이들 추출물을 대상으로 항혈전 활성을 트롬빈 저해(Thrombin Time), 프로트롬빈 저해(Prothrombin Time) 및 혈액응고인자 저해(활성부분 트롬보플라스틴 타임, activated Partial Thromboplastin Time: aPTT)를 평가하여, 리치 껍질 추출물이 항응고 저해에 따른 항혈전 활성이 우수함을 확인하였다. 리치 껍질 추출물은 리치 껍질 100g당 14.2g을 회수할 수 있어 과육 추출물보다 매우 경제적으로 항응고제를 제조할 수 있으며, 추출물은 5mg/ml 농도에서 무첨가구에 비해 1.48배의 트롬빈 타임 및 1.23배의 에이피티 타임 연장효과를 나타내며, 7mg/ml 농도에서는 무첨가구에 비해 각각 1.92배 및 1.38배의 연장효과를 나타내어 농도의존적인 항혈전 활성을 나타내었다.
리치 껍질 추출물의 순차적 유기용매 분획으로 헥센 분획물, 에틸아세테이트 분획물, 부탄올 분획물 및 유기용매 분획 후의 물 잔류물을 조제한 후 각각의 항혈전 활성을 평가한 결과, 각각의 분획물 모두에서 양호한 항혈전 활성을 나타내었으며, 특히 에틸아세테이트 분획물에서는 5mg/ml 농도에서 무첨가구에 비해 1.66의 트롬빈 타임, 1.43배의 프로트롬빈 타임 및 15배 이상의 에이피티 타임 연장효과를 나타내며, 강력한 혈액응고 저해활성을 나타냄을 확인하였고, 이를 혈액 응고 억제제로서 임상에 적용할 수 있을 가능성을 제시하였다. 상기의 에틸아세테이트 분획물은 리치 껍질 100g당 0.27g을 회수할 수 있었다. 또한, 헥센 분획물을 제외한 다른 분획물들은 인간 적혈구에 대한 용혈 활성을 나타내지 않아 급성 독성을 유발하지 않음을 확인하였다.
따라서, 본 발명은 리치(Litchi chinensis Sonn.) 껍질 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
상기 약학적 조성물의 유효성분으로서 리치 껍질 추출물은 리치 껍질 에탄올 추출물의 에틸아세테이트 분획물인 것이 바람직하다.
또한, 본 발명은 리치(Litchi chinensis Sonn.) 껍질 에탄올 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 함유하는 혈액 응고 억제제를 제공한다.
또한, 본 발명은 리치(Litchi chinensis Sonn.) 껍질 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 개선용 건강 기능 식품을 제공한다.
상기 건강 기능 식품의 유효성분으로서 리치 껍질 추출물은 리치 껍질 에탄올 추출물의 에틸아세테이트 분획물인 것이 바람직하다.
이하에서는, 본 발명의 리치 껍질 추출물의 제조 방법 및 효능 실험 등을 보다 구체적으로 설명한다.
본 발명의 발명자들은, 본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 정선, 세척된 리치 과일로부터 껍질을 분리하는 단계; 껍질로부터 추출물을 조제하는 단계; 항혈전 활성을 나타내는 리치 껍질 추출물로부터 헥센, 에틸아세테이트, 부탄올의 순차적 유기용매 분획물 조제 및 이후 얻어지는 물 잔류물의 조제 단계; 상기 추출물 및 분획물의 항혈전 활성 평가 및 에틸아세테이트 분획의 활성물질의 안정성 평가 단계의 실험들을 수행하였다.
본 발명의 조성물에 포함되는 "리치 껍질 추출물"은 리치 과일로부터 껍질을 회수하는 단계, 껍질을 용매로 추출하는 단계 및 상기 추출액을 0.06mm 이하의 여과망을 사용하여 여과하고, 이를 감압농축하는 단계에 의해 수득될 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용매는 물(냉수, 열수), 주정, 탄소수 1~4의 무수 또는 함수 저급 알코올(메탄올, 에탄올, 주정, 프로판올, 부탄올 등), 상기 저급 알코올과 물과의 혼합용매 등을 이용할 수 있으며, 열수, 또는 95% 에탄올 추출이 가장 바람직하다.
본 발명의 리치 껍질 추출물은 추가적으로 헥센, 에틸아세테이트 및 부탄올의 유기용매로 순차 또는 각각 분획하여 헥센 분획물, 에틸아세테이트 분획물 및 부탄올 분획물 및 물 잔류물을 수득할 수 있다.
본 발명에서는, 리치 껍질 추출물을 5mg/ml의 농도로 하여 트롬빈 타임, 프로트롬빈 타임, 에이피티 타임을 측정한 결과, 무첨가구에 비해 각각 1.48배, 1.00배, 1.23배의 혈액응고 시간의 연장효과를 나타내며, 7mg/ml 농도에서는 무첨가구에 비해 각각 1.92배, 1.11배 및 1.38배의 연장효과를 나타내어 농도의존적인 항혈전 활성을 확인하였다. 이는 항혈전제로 임상에서 사용되고 있는 아스피린(상품명: 프로텍트)이 1.5mg/ml 농도에서 트롬빈 타임, 프로트롬빈 타임, 에이피티 타임을 각각 1.61배, 1.35배, 1.56배 연장시킴을 고려할 때 유의미한 항응고 활성임을 알 수 있다.
한편, 리치 껍질 추출물의 유기용매 분획물 및 물 잔류물을 대상으로 혈액응고 저해 활성을 평가한 결과, 모든 분획물에서 농도 의존적인 혈전 생성 저해활성을 확인하였으며, 특히 에틸아세테이트 분획물에서는 아스피린보다 매우 강력한 혈액응고인자 저해를 확인하여 혈액 응고 억제제로서 임상에 적용할 수 있는 가능성을 제시하였다. 따라서, 리치 껍질의 에탄올 추출물 및 이의 활성 분획물은, 위장장애와 같은 부작용 우려가 높은 아스피린을 대치할 수 있는 항혈전제로 개발 가능함을 확인하였다.
본 발명의 리치 껍질 추출물 및 이의 활성 분획 물질들은 감압건조 및 동결건조, 또는 분무건조 등과 같은 통상적인 분말화 과정을 거쳐 분말로 제조될 수 있다. 이들은 혈장 내의 다양한 분해효소에 분해되지 않으며, 100℃의 열처리와 pH 2의 인체 위 내의 pH에서도 활성을 유지한다.
본 발명의 유효성분은 혈전증과 관련된 다양한 질환들의 예방 또는 치료용으로 사용될 수 있다. 상기 질환들은, 예를 들어, 동맥 혈전증으로서, 급성 심근 경색증, 가슴 통증, 호흡 곤란, 의식 소실, 허혈성 뇌졸중, 출혈성 뇌졸중, 두통, 운동 이상, 감각 이상, 성격 변화, 시력 저하, 간질 발작, 폐 혈전증, 심부정맥 혈전증, 하지 부종, 통증 및 급성 말초 동맥 폐쇄증 등을 들 수 있고, 정맥 혈전증으로서, 심부정맥 혈전증, 간문맥 혈전증, 급성 신장정맥 폐쇄증, 뇌 정맥동 혈전증 및 중심 망막정맥 폐쇄 등을 들 수 있다.
본 발명의 유효 성분을 포함하는 약학적 조성물은 각각의 사용 목적에 맞게 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁제, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구 제형, 멸균 주사용액의 주사제 등 다양한 형태로 제형화하여 사용할 수 있으며, 경구 투여하거나 정맥 내, 복강 내, 피하, 직장, 국소 투여 등을 포함한 다양한 경로를 통해 투여될 수 있다.
이러한 약학적 조성물에는 추가적으로 담체, 부형제 또는 희석제 등이 더 포함될 수 있으며, 포함될 수 있는 적합한 담체, 부형제 또는 희석제의 예로는 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리쓰리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로스, 메틸 셀룰로스, 비정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸하이드록시벤조에이트, 프로필하이드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유 등을 들 수 있다. 또한, 본 발명의 약학적 조성물은 충전제, 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제, 방부제 등을 추가로 더 포함할 수도 있다.
바람직한 구체예로서, 경구 투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 상기 약학적 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스, 락토오스, 젤라틴 등을 혼합하여 제형화한다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 등과 같은 윤활제가 사용될 수도 있다.
바람직한 구체예로서, 경구용 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 예시될 수 있으며, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 액체 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면, 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
바람직한 구체예로서, 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액제, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제, 좌제 등을 예시할 수 있다. 비수성용제, 현탁제에는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 포함될 수 있다. 주사제에는 용해제, 등장화제, 현탁화제, 유화제, 안정화제, 방부제 등과 같은 종래의 첨가제가 포함될 수 있다.
본 발명의 유효 성분은 약제학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에서, "약제학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 환자의 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료 기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고, 종래의 치료제와 순차적으로 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
바람직한 구체예로서, 본 발명의 약학적 조성물에서 유효성분의 유효량은 환자의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으며, 일반적으로는 체중 ㎏ 당 1 내지 5,000mg, 바람직하게는 100 내지 3,000mg을 매일 또는 격일 투여하거나 1일 1 내지 3회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나, 투여 경로, 질병의 중증도, 성별, 체중, 연령 등에 따라서 증감될 수 있으므로 상기 투여량이 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 약학적 조성물은 다양한 경로를 통하여 대상에 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관 내(intracerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다.
본 발명에서 "투여"는 임의의 적절한 방법으로 환자에게 소정의 물질을 제공하는 것을 의미하며, 본 발명의 약학적 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 일반적인 모든 경로를 통하여 경구 또는 비경구 투여될 수 있다. 또한, 본 발명의 조성물은 유효성분을 표적 세포로 전달할 수 있는 임의의 장치를 이용해 투여될 수도 있다.
본 발명에서 "대상"은, 특별히 한정되는 것은 아니지만, 예를 들어, 인간, 원숭이, 소, 말, 양, 돼지, 닭, 칠면조, 메추라기, 고양이, 개, 마우스, 쥐, 토끼 또는 기니아 피그를 포함하고, 바람직하게는 포유류, 보다 바람직하게는 인간을 의미한다.
또한, 본 발명의 건강 기능 식품은 혈전증의 예방 또는 개선에 효과적인 식품 및 음료 등에 다양하게 이용될 수 있다. 본 발명의 유효성분을 포함하는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강 보조 식품류 등이 있고, 분말, 과립, 정제, 캡슐 또는 음료인 형태로 사용할 수 있다.
본 발명의 유효성분은 일반적으로 전체 식품 중량의 0.01 내지 15중량%로 가할 수 있으며, 건강음료 조성물은 100ml를 기준으로 0.02 내지 10g, 바람직하게는 0.3 내지 1g의 비율로 가할 수 있다.
본 발명의 건강 기능 식품은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 화합물을 함유하는 것 외에 식품학적으로 허용 가능한 식품보조 첨가제, 예컨대, 천연 탄수화물 및 다양한 향미제 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.
상기 천연 탄수화물의 예로는 포도당, 과당 등의 단당류, 말토오스, 수크로오스 등의 이당류 및 덱스트린, 시클로덱스트린 등의 다당류와 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리쓰리톨 등의 당알코올이 있다.
상기 향미제로는 타우마틴; 레바우디오시드 A 또는 글리시르히진과 같은 스테비아 등의 천연 향미제 및 사카린, 아스파르탐 등의 합성 향미제를 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 건강 기능 식품 100ml당 일반적으로 약 1 내지 20g, 바람직하게는 약 5 내지 12g을 사용한다. 상기 외에 본 발명의 건강 기능 식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물, 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 건강 기능 식품은 천연 과일 주스 및 과일 주스 음료 및 야채 음료 등의 제조를 위한 과육을 함유할 수도 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 본 발명의 유효성분 100중량부 당 0.01 내지 약 20중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
이하, 본 발명의 구체적인 방법을 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 하기 실시예는 본 발명의 바람직한 하나의 구체예일 뿐이며, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예의 범위로 한정되는 것은 아니다.
[실시예]
실시예 1: 리치 껍질 및 과육 추출물의 조제
태국산 리치 열매를 구입한 후 이물질을 제거하고, 껍질, 과육 및 씨앗으로 각각 구분(도 1 내지 도 4)하고, 이를 에탄올 추출물 제조에 사용하였다. 에탄올 추출물 조제시에는 각각의 시료에 대해 10배의 에탄올(95%, 덕산, 한국)을 가하고, 상온에서 1회 추출한 후 추출액을 모아 필터링한 후, 감압 농축하여 분말로 제조하였다. 조제된 추출물의 성분 분석으로 총 폴리페놀, 총 플라보노이드, 총 당 및 환원당 함량을 측정하였다. 총 폴리페놀 함량은 추출 검액 400μl에 50μl의 Folin-ciocalteau, 100μl의 Na2CO3 포화용액을 넣고 실온에서 1시간 방치한 후 725nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준시약으로는 tannic acid를 사용하였다. 총 플라보노이드 함량은 각각의 시료를 18시간 메탄올 교반 추출하고, 여과한 추출 검액 400μl에 90% diethylene glycol 4ml를 첨가하고 다시 1N NaOH 40μl를 넣고 37℃에서 1시간 반응 후 420nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준시약으로는 rutin을 사용하였다. 환원당은 DNS법으로, 총 당은 phenol-sulfuric acid법을 이용하여 정량하였다.
Figure 112017087251892-pat00001
상기 표 1에 나타낸 바와 같이, 리치 과일의 껍질의 추출 수율은 14.2%로 과육의 11.4%보다 높았으며, 총 폴리페놀 함량 분석 결과에서도, 껍질 추출물이 10.8mg/g로 과육 추출물보다 2배 이상 높게 나타났다. 또한, 총 플라보노이드 함량 분석 결과 역시, 껍질 추출물에서 1.7mg/g으로 과육의 0.7mg/g보다 높게 나타났다. 과육은 0.7mg/g의 매우 낮은 농도를 나타내었다. 반면, 총 당의 경우 껍질과 과육에서 유사하게 나타난 반면, 환원당 함량은 특이하게 껍질 > 과육의 순으로 나타났다.
실시예 2: 리치 과일 추출물의 혈액응고 저해활성 평가
실시예 1에서 제조된 리치 과일 추출물의 혈액응고 저해활성(혈전생성 억제활성)을 평가하였으며, 기존에 보고된 방법(Sohn et al., 2004. Kor. J. Pharmacogn 35. 52-61; Kwon et al., 2004. J. Life Science, 14. 509-513; 류 등 2010. J. Life Science, 20. 922-928)과 동일하게, 트롬빈 타임, 프로트롬빈 타임, 에이피티 타임을 측정하여 평가하였다. 혈장은 시판 control plasma(MD Pacific Technology Co., Ltd, Huayuan Industrial Area, China)를 사용하였으며 트롬빈 타임, 프로트롬빈 타임과 에이피티 타임 측정법은 다음과 같은 과정으로 수행되었다.
트롬빈 타임(Thrombin Time)
37℃에서 0.5U 트롬빈(Sigma Co., USA) 50μl와 20mM CaCl2 50μl, 다양한 농도의 시료 추출액 10μl를 Amelung coagulometer KC-1A(Japan)의 튜브에 혼합하여 2분간 반응시킨 후, 혈장 100μl를 첨가한 후 혈장이 응고될 때까지의 시간을 측정하였다. 대조로는 아스피린(Sigma Co., USA)을 사용하였으며, 용매 대조구로는 시료 대신 DMSO를 사용하였다. DMSO의 경우 22.4초의 응고시간을 나타내었다. 트롬빈 저해 효과는 3회 이상 반복한 실험의 평균치로 나타내었으며, 트롬빈 저해 활성은 시료 첨가시의 응고시간을 용매 대조구의 응고시간으로 나눈 값으로 나타내었다.
프로트롬빈 타임( prothrombin time)
표준혈장(MD Pacific Co., China) 70μl와 다양한 농도의 시료액 10μl를 Amelung coagulometer KC-1A(Japan)의 튜브에 첨가하여 37℃에서 3분간 가온 후, 130μl의 PT reagent를 첨가하고 혈장이 응고될 때까지의 시간을 3회 반복한 실험의 평균치로 나타내었다. 대조로는 아스피린(Sigma Co., USA)을 사용하였으며, 용매 대조구로는 시료 대신 DMSO를 사용하였다. DMSO의 경우 16.5초의 응고시간을 나타내었다. 프로트롬빈 저해활성은 시료 첨가시의 응고시간을 용매 대조구의 응고시간으로 나눈 값으로 나타내었다.
aPTT (activated Partial Thromboplastin Time)
혈장 100μl와 다양한 농도의 시료 추출액 10μl를 Amelung coagulometer KC-1A(Japan)의 튜브에 첨가하여 37℃에서 3분간 가온한 후, 50μl의 aPTT reagent(Sigma, ALEXINTM)를 첨가하고 다시 37℃에서 3분간 배양하였다. 이후 50μl CaCl2(35mM)을 첨가한 후 혈장이 응고될 때까지의 시간을 측정하였다. 용매 대조구로는 시료 대신 DMSO를 사용하였으며, 이 경우 50.4초의 응고시간을 나타내었다. aPTT의 결과는 3회 반복한 실험의 평균치로 나타내었으며, 혈액응고인자 저해활성은 시료 첨가시의 aPTT를 용매 대조구의 aPTT로 나눈 값으로 나타내었다.
Figure 112017087251892-pat00002
상기 표 2에 나타난 바와 같이, 항혈전제로 사용되고 있는 아스피린(상품명: 프로텍트)은 1.5mg/ml 농도에서 트롬빈 타임, 프로트롬빈 타임, 에이피티 타임을 각각 1.61배, 1.35배 및 1.56배 연장시켜 우수한 항혈전 활성을 확인하였다. 리치 과일의 껍질 및 과육 추출물은 농도 의존적인 양호한 항응고 활성을 나타내었으며, 과육보다는 껍질이 보다 우수한 항혈전 활성을 나타내었다.
한편, 리치 껍질 추출물은 0.5mg/ml 농도에서 과육 추출물의 3.5배의 DPPH 음이온 소거능을 나타내었으며, 4.7배의 ABTS 양이온 소거능, 5.4배의 환원력을 나타내어 강력한 항산화 활성도 확인되었다. 산화적 스트레스가 fibrinogen의 구조적 변화를 유발하고, 산화된 fibrinogen이 혈전 생성 및 다양한 심혈관계 질환과 밀접한 연관이 있다는 보고(Martinez M 등, 2013. Free Radic Biol. Med. 65: 411-418; Bijak M 등, Thrombosis Res. 130: 173-177; Bijak M 등, Fitoterapia 82: 811-817)를 고려한다면, 이러한 우수한 항산화 활성은, 혈전 생성 억제의 부가적인 기작으로 작용하리라 판단된다.
실시예 3: 리치 껍질 에탄올 추출물의 순차적 유기 용매 분획물의 조제 및 이들의 성분 분석
상기 실시예 1에서 제조한 리치 껍질 에탄올 추출물을 대량 조제한 후, 이를 대상으로 헥센, 에틸아세테이트, 부탄올로 순차적 유기용매 분획하였으며, 최종적으로 물 잔류물을 회수하였다. 에탄올 추출의 추출 효율과 유기용매 분획 효율, 추출물/분획물의 성분 분석 결과는 표 3에 나타내었다.
Figure 112017087251892-pat00003
상기 표 3에 나타낸 바와 같이, 리치 껍질 에탄올 추출물은 대부분이 부탄올 분획물로 이행(추출물의 84.3%)되었으며, 물 잔류물은 7.2%를 차지하였다. 반면, 헥센 분획물과 에틸아세테이트 분획물은 각각 2.6% 및 1.9%를 차지하였다. 이러한 결과는 리치 껍질의 에탄올 추출물이 극성이 다양한 물질들을 다양하게 함유하고 있음을 의미하며, 100g 껍질로부터 에틸아세테이트 분획물은 0.27g을 회수할 수 있음을 의미한다.
한편, 총 폴리페놀 함량 분석 결과, 에틸아세테이트 분획물에서 47.9mg/g 함량을 나타내어 분획물 중 가장 높은 함량을 보였으며, 총 플라보노이드 함량 분석에서도 에틸아세테이트 분획물에서 11.2mg/g의 가장 높은 함량을 나타내었다. 반면, 총 당 및 환원당 함량 분석 결과, 부탄올 및 물 잔류물에서 각각 653~692mg/g, 605~618mg/g을 나타내어 일반적인 천연물의 분획물의 특성과는 상당히 차별화되었다. 따라서, 리치 껍질 추출물의 다양한 생리활성은 에틸아세테이트 분획물에서 나타나리라 예상되었으며, 아래 실시예 4에서 설명되는 바와 같이, 실제 분석 결과, 상기 에틸아세테이트 분획물에서 강력한 항혈전 활성을 확인하였다.
실시예 4: 리치 껍질 에탄올 추출물의 순차적 유기 용매 분획물의 혈액응고저해활성 평가
실시예 3에서 얻어진 리치 껍질 추출물 및 이의 분획물의 혈액응고 저해활성을 실시예 2의 방법과 동일하게 평가하였으며, 그 결과를 표 4에 나타내었다.
Figure 112017087251892-pat00004
표 4에 나타낸 바와 같이, 아스피린은 1.5mg/ml 농도에서 트롬빈 타임, 프로트롬빈 타임 및 에이피티 타임을 각각 1.61배, 1.35배 및 1.56배 연장시켜 우수한 혈액응고 저해활성을 나타내었다. 한편, 리치 껍질 추출물은 농도의존적인 항혈전 활성을 나타내었으며, 7mg/ml 농도에서 트롬빈 타임, 프로트롬빈 타임, 에이피티 타임을 무첨가구에 비해 각각 1.92배, 1.11배, 1.38배 연장시켰다. 리치 껍질 추출물의 분획물들 역시 농도의존적인 항혈전 활성을 나타내었으며, 특히 에틸아세테이트 분획물은 5mg/ml 농도에서 트롬빈 타임, 프로트롬빈 타임, 에이피티 타임을 무첨가구에 비해 각각 1.66배, 1.43배 및 15배 이상 연장시켰다. 이러한 결과는 리치 껍질 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 강력한 혈액응고인자 저해를 통한 항혈전제, 특히 혈액 응고 억제제로서 개발 가능하리라 판단되며, 위장 장애 등의 부작용을 나타내는 기존의 항혈전제인 아스피린 등을 대치할 수 있을 것으로 판단된다. 또한, 상기 분획물은 특이적 혈액응고인자 저해 기작 연구에도 기여하리라 예상되어 관련 연구 시약(reagent)으로서도 사용 가능할 것으로 예상되며, 에틸아세테이트 분획물의 우수한 항산화 활성, 발암억제 활성을 나타내어 혈행개선 및 항혈전 활성에 부가적으로 기여하리라 예상된다.
실시예 5: 리치 과일 껍질 추출물 및 분획물의 인간 적혈구 용혈 활성 평가
리치 껍질은 식용으로 사용되고 있지 않으나, 중국에서는 껍질을 우린 차를 천연두와 설사를 치료하는 데 사용하여 왔다. 따라서, 리치 껍질 추출물 및 이의 분획물은 특이한 독성은 없을 것으로 판단된다. 리치 껍질 추출물 및 분획물의 잠재적 급성 독성을 평가하기 위해 인간 적혈구 용혈 활성을 평가하였으며, 그 결과는 표 5에 나타내었다. 이때 용혈 활성은 기존의 보고(손호용, 2014년, Korean J. Microbiol. Biotechnol. 42: 285~292)에 준해 평가하였으며, 간단하게는 PBS로 3회 수세한 인간 적혈구 100μl를 96-well microplate에 가하고 다양한 농도의 시료용액 100μl를 가한 다음 37℃에서 30분간 반응시켰으며, 이후, 반응액을 10분간 원심분리(1,500rpm)하여 상등액 100μl를 새로운 microtiter plate로 옮긴 후 용혈에 따른 헤모글로빈 유출 정도를 414nm에서 측정하였다. 시료의 용매 대조구로는 DMSO(2%)를 사용하였으며, 적혈구 용혈을 위한 실험 대조구로는 Triton X-100(1mg/ml)를 사용하였다. 용혈 활성은 다음의 수식을 이용하여 계산하였다.
(%)Hemolysis=[(Abs.S-Abs.C)/(Abs.T-Abs.C)]×100
Abs. S : 시료 첨가구의 흡광도,
Abs. C : DMSO 처가구의 흡광도,
Abs . T : Triton X-100 첨가구의 흡광도.
Figure 112017087251892-pat00005
먼저, 대조구로 사용된 DMSO와 증류수는 적혈구 용혈 활성이 없었으며, Triton X-100은 1mg/ml 농도에서 적혈구를 100% 용혈시킴을 확인하였다. 항암제로 사용되고 있는 엠포테리신 B는 0.07mg/ml 농도에서도 83%의 용혈활성을 나타내었다. 한편, 리치 껍질 추출물의 경우에는 1mg/ml 농도에서 7.1%의 적혈구 용혈은 나타내어 용혈 활성은 없는 것으로 판단되었다. 분획물들 역시 용혈 활성은 나타나지 않았으나, 헥센 분획물에서는 1mg/ml 농도에서 80%의 용혈 활성을 확인되었다. 헥센 분획물을 농도별로 용혈 활성을 평가한 결과, 농도의존적인 용혈 활성을 나타내었으며, 0.25mg/ml 농도에서 약 47.5%, 0.125mg/ml 농도에서는 17.1%의 적혈구 용혈을 나타내었다. 따라서, 헥센 분획물의 경우에는 사용 농도를 조정하는 것이 바람직하다고 판단되었다.
실시예 6: 리치 껍질 추출물 및 에틸아세테이트 분획물의 혈장, 산 및 열 안정성 평가
상기 실시예 3에서 얻은 리치 껍질 추출물 및 이의 에틸아세테이트 분획물의 혈액응고인자 저해 활성에 대한 혈장 안정성, 열 안정성 및 산 안정성을 확인하였다. 상기 추출물 및 에틸아세테이트 분획물은 100℃에서 1시간 열 처리, pH 2(0.01M HCl)에서의 1시간 처리, 혈장에서 1시간 처리시에도 항응고 활성의 소실이 없이 우수한 활성을 유지하였다. 따라서, 실시예 3의 성분 분석 결과와 유기용매 분획 특성 및 상기의 안정성 결과를 고려할 때, 리치 껍질 추출물의 활성 물질은 페놀성 화합물, 또는 이의 배당체로 예상된다. 이상의 결과는 리치 껍질 추출물 및 이의 활성 분획물이 항혈전제로 실제적 이용이 가능함을 제시하고 있으며, 위장 장애 등의 부작용이 보고된 아스피린을 보완, 대치할 수 있으리라 판단된다.

Claims (5)

  1. 리치(Litchi chinensis Sonn.) 껍질 에탄올 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  2. 삭제
  3. 리치(Litchi chinensis Sonn.) 껍질 에탄올 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 함유하는 혈액 응고 억제제.
  4. 리치(Litchi chinensis Sonn.) 껍질 에탄올 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 개선용 건강 기능 식품.
  5. 삭제
KR1020170114860A 2017-09-08 2017-09-08 리치 껍질 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품 KR102013309B1 (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020170114860A KR102013309B1 (ko) 2017-09-08 2017-09-08 리치 껍질 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020170114860A KR102013309B1 (ko) 2017-09-08 2017-09-08 리치 껍질 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20190028004A KR20190028004A (ko) 2019-03-18
KR102013309B1 true KR102013309B1 (ko) 2019-08-23

Family

ID=65949045

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020170114860A KR102013309B1 (ko) 2017-09-08 2017-09-08 리치 껍질 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR102013309B1 (ko)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN117694533B (zh) * 2023-12-26 2024-08-02 中国热带农业科学院农产品加工研究所 一种荔枝膜植物功能饮料及其制备方法

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1247527A1 (de) 2001-04-03 2002-10-09 Cognis France S.A. Kosmetische und/oder pharmazeutische Zubereitungen enthaltend Extrakte der Pflanze Litchi chinensis Sonn
JP4571081B2 (ja) 2006-02-17 2010-10-27 株式会社アミノアップ化学 ライチポリフェノール含有組成物、その製造方法及び用途

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Mol Med Rep. 5(3):721-724(2012.03.)*

Also Published As

Publication number Publication date
KR20190028004A (ko) 2019-03-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101854658B1 (ko) 왕귀뚜라미 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품
KR101404168B1 (ko) 참당귀 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품
KR101602190B1 (ko) 우엉 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품
KR101845160B1 (ko) 함초 씨 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품
KR101976202B1 (ko) 패션후르츠 과피 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품
KR102013309B1 (ko) 리치 껍질 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품
KR101870952B1 (ko) 람부탄 껍질 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품
KR102084503B1 (ko) 생강잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품
KR102013312B1 (ko) 아피오스 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품
KR101883181B1 (ko) 모링가 올레이페라 지하부 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품
KR102305606B1 (ko) 헴프씨드의 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품
KR102318970B1 (ko) 푸룬 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품
KR102254421B1 (ko) 패션후르츠 과육과 씨의 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품
KR102013297B1 (ko) 리치 씨앗 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품
KR101497818B1 (ko) 우슬의 유기용매 분획물을 유효성분으로 함유하는 혈전증 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품
KR102128622B1 (ko) 깻잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품
KR102022119B1 (ko) 볶은 우절 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품
KR102453857B1 (ko) 엉겅퀴 에탄올 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품
KR20140106875A (ko) 감송향 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품
KR102037530B1 (ko) 옥미수 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품
KR101422250B1 (ko) 눈개승마 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품
KR102216221B1 (ko) 송화분 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품
KR101976203B1 (ko) 망고스틴의 과경 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품
KR102216218B1 (ko) 연자방 에탄올 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품
KR101801612B1 (ko) 흑생강 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right