KR101675607B1 - 치료제로서 이소옥사졸-3(2ｈ)-온 유사체 - Google Patents

치료제로서 이소옥사졸-3(2ｈ)-온 유사체 Download PDF

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Abstract

본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 약학적으로 적절한 염에 관한 것이다:
[화학식 I]
Figure 112011087177130-pct00016

상기 식 중,
R1과 R2는 독립적으로 수소, 중수소, 아릴, 헤테로아릴, C1-C8 알킬이고, 독립적으로 R3인 하나 이상의 치환체로 임의로 치환되며, 여기서
R3은 아릴, 헤테로아릴, 불소(들), 하나 이상의 불소를 함유하는 C1-C6 알킬, 하나 이상의 중수소를 함유하는 C1-C6 알킬, 히드록시를 함유하는 C1-C6 알킬이고, 상기 아릴과 헤테로아릴은 하나 이상의 할로겐, 불소화 알콕시, 불소화 알킬, 설포닐, 하나 이상의 중수소, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, 니트릴로 임의로 치환되며, 또는
R3은 다음의 기: COOR4, OCOR4, CONR5R6, NR5COR6, OR4 중 하나 이상으로 임의로 치환된 C1-6 알킬이고, 여기서
R4는 하나 이상의 불소, 중수소, 알콕시, 아릴카복실레이트, 알킬카복실레이트로 임의로 치환된 C1-10 알킬이며,
R5와 R6은 독립적으로 수소, 알킬로부터 선택되거나 또는 함께 4-8원 탄소 고리를 형성할 수 있고; 또는
R1과 R2는 O 또는 N을 임의로 포함하고, R3으로 임의로 치환된, C1-10 알킬 또는 아릴, 헤테로아릴로 임의로 치환되는 3-10원 탄소 고리를 형성한다.

Description

치료제로서 이소옥사졸-3(2Ｈ)-온 유사체{ISOXAZOL-3(2H)-ONE ANALOGS AS THERAPEUTIC AGENTS}
본 발명은 화학식 I의 화합물, 이를 포함하는 약학 조성물, 그리고 섬유소용해 연관 질병 또는 질환, 예를 들어 유전적 출혈성 질환, 발작, 월경 과다 및 간 질환 치료와 유전성 혈관부종의 치료를 위한 이의 용도에 관한 것이다.
출혈은 외상, 수술, 출혈성 질환, 발작, 월경 과다 및 간 질환에 있어서 임상적으로 흔한 문제 중 하나이다. 출혈의 처리는 1차 및 2차 지혈 제제와 섬유소용해 억제 제제를 사용하는 것을 포함한다.
섬유소용해계는 활성 효소 플라스민 (PLN)으로 활성화될 수 있는 불활성 지모겐, 플라스미노겐 (PLG)을 포함한다. PLN은 불용성 섬유소를 가용성 섬유소 단편들로 분해한다. 이러한 활성의 결과, 섬유소응괴가 용해된다. 플라스미노겐이 플라스민으로 활성화되는 과정은 섬유소에 결합된 후에 응괴 표면에서 일어난다. 활성화의 매개자로는 우로키나아제 플라스미노겐 활성제 (u-PA) 또는 조직형 플라스미노겐 활성제 (t-PA)를 들 수 있다.
섬유소용해 과정의 활성화는 혈전성 질환을 치료하는데 사용될 수 있다. 이와는 반대로, 섬유소용해의 억제는 출혈성 질환의 치료에 사용될 수 있으며, 현재 사용되고 있다. 섬유소용해의 억제를 위해 이용가능한 여러 가지 표적 대상들이 있다. 플라스미노겐 활성제 저해제 1 (PAI-1)의 활성, u-PA 및/또는 t-PA 활성의 억제, PLN 활성의 억제 및 항플라스민의 활성화가 그 예들이다. tPA, uPA 및 PLN의 단백질 가수분해 부위를 정확하게 억제하기는 어렵다. 그러나, 리신 유사체에 의한 플라스민(플라스미노겐) 섬유소 결합 억제를 통한 출혈 조절은 인간에게 있어서 안전하고 효율적인 작용 기전인 것으로 판명되었다.
리신 모방체를 통한 섬유소용해의 억제는, 예컨대 월경 과다, 혈우병 및 폰 빌레브란트 병에 대한 수술에 있어서 혈전으로 인한 합병증 위험의 증대됨이 없는 출혈 감소를 위해 입증된 개념이다.
이 화합물은 암, 그리고 심혈관 질환, 염증성 질환 및 여러 다른 질병들을 퍼뜨리는 보편적인 병리기전인 플라스민 유도성 단백질 가수 분해를 막는 용도로 쓰이게 될 것이다.
항섬유소용해제는 또한 유전성 혈관부종을 치료하는데에도 성공적으로 이용되어 왔다. 이러한 질병에서는 입, 목(구멍) 및 혀 주위의 피부 또는 점막이 빠르게 부풀어 오르게 된다. 이러한 부기는 팔다리 또는 생식기와 같은 다른 곳에서도 발생할 수 있다. 항섬유소용해제는 아직 잘 알려지지 않았기 때문에, 항섬유소용해제는 유전성 혈관부종의 예방 또는 급성기 치료에 이용될 수 있다.
월경 과다의 치료를 위해 현재 시판되고 있는 화합물인 트라넥삼산은 아주 많이 그리고 여러 번 복용해야 하므로, 위장에 부작용이 발생한다. 그 용도에 대해서는 문헌["Tranexamic acid. A review of its use in surgery and other indications"; Dunn, C.J.; Goa K.L.; Drugs 1999, June 57(6): 1005-1032]에 기술된 바 있다.
본 발명의 목적은 과도한 출혈을 예방 또는 치료하는 약학 화합물을 제공하는 것으로, 상기 치료 또는 예방 요법은 강화된 효험, 선택성, 투과성, 지속성, 부작용 감소 및 향상된 생물학적 이용 가능성과 같은 하나 이상의 개선점을 가진다.
본 발명은 하기 화학식 I의 화합물: 또는 그의 약학적으로 적절한 염을 제공한다:
[화학식 I]
Figure 112011087177130-pct00001
상기 식 중,
R1과 R2는 독립적으로 수소, 중수소, 아릴, 헤테로아릴, C1-C8 알킬이고, 이 독립적으로 R3인 하나 이상의 치환체로 임의로 치환되며, 여기서
R3은 아릴, 헤테로아릴, 불소(들), 하나 이상의 불소를 함유하는 C1-C6 알킬, 하나 이상의 중수소를 함유하는 C1-C6 알킬, 히드록시를 함유하는 C1-C6 알킬이고, 상기 아릴과 헤테로아릴은 하나 이상의 할로겐, 불소화 알콕시, 불소화 알킬, 설포닐, 하나 이상의 중수소, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, 니트릴로 임의로 치되며, 또는
R3은 다음의 기: COOR4, OCOR4, CONR5R6, NR5COR6, OR4 중 하나 이상으로 임의로 치환된 C1-6 알킬이고, 여기서
R4는 하나 이상의 불소, 중수소, 알콕시, 아릴카복실레이트, 알킬카복실레이트로 임의로 치환된 C1-10 알킬이며,
R5와 R6은 독립적으로 수소, 알킬로부터 선택되거나 또는 함께 4-8원 탄소 고리를 형성할 수 있고; 또는
R1과 R2는 O 또는 N을 임의로 포함하며, R3으로 임의로 치환된, C1-10 알킬 또는 아릴, 헤테로아릴로 임의로 치환되는 3-10원 탄소 고리를 형성한다.
본 발명의 실시 양태에 따르면, R1과 R2는 독립적으로 수소, 중수소, 헤테로아릴, C1-C8 알킬이고, 독립적으로 R3인 하나 이상의 치환체로 임의로 치환되며, 여기서
R3은 아릴, 헤테로아릴, 불소(들), 하나 이상의 불소를 함유하는 C1-C6 알킬, 하나 이상의 중수소를 함유하는 C1-C6 알킬, 히드록시를 함유하는 C1-C6 알킬이고, 상기 아릴과 헤테로아릴은 하나 이상의 할로겐, 불소화 알콕시, 불소화 알킬, 설포닐, 하나 이상의 중수소, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, 니트릴로 임의로 치환되며, 또는
R3은 다음의 기: COOR4, OCOR4, CONR5R6, NR5COR6, OR4 중 하나 이상으로 임의로 치환된 C1-6 알킬이고, 여기서
R4는 하나 이상의 불소, 중수소, 알콕시, 아릴카복실레이트, 알킬카복실레이트로 임의로 치환된 C1-10 알킬이며,
R5와 R6은 독립적으로 수소, 알킬로부터 선택되거나 또는 함께 4-8원 탄소 고리를 형성할 수 있고; 또는
R1과 R2는 O 또는 N을 포함하고, R3으로 임의로 치환된, C1-10 알킬 또는 아릴, 헤테로아릴로 임의로 치환되는 3-10원 탄소 고리를 형성한다.
알킬이라는 단어는 직쇄형 알킬, 분지쇄형 알킬 및 3-8원 고리로 형성된 알킬을 포함한다. 헤테로아릴이라는 단어는 하나 이상의 헤테로원자 (즉, C가 아닌 N,O 또는 S로부터 선택된 헤테로원자)를 가지는 5원 또는 6원 고리계의 변형체이다.
본 발명의 다른 측면에 따르면, 하기 화학식 Ia의 화합물 또는 그의 약학적으로 적절한 염이 제공된다:
[화학식 Ia]
Figure 112011087177130-pct00002
R1과 R2는 독립적으로 수소, C1-C8 알킬이고, R3으로 임의로 치환되며,
R3은 아릴이고, 상기 아릴은 하나 이상의 불소, 또는 OR4로 임의로 치환되고,
R4는 C1-C6 알킬이다.
본 발명의 다른 측면에 따르면, 하기 화합물들 중 하나 이상으로부터 선택된 화합물이 제공된다:
5-((2S,4S)-2-벤질피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4R)-2-벤질피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-벤질피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4R)-2-벤질피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-이소부틸피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4R)-2-이소부틸피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4S)-2-이소부틸피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-페네틸피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4R)-2-페네틸피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4S)-2-페네틸피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4S)-2-(4-tert-부틸벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(4-tert-부틸벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4S)-2-네오펜틸피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-네오펜틸피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-메틸피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4R)-2-메틸피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4S)-2-메틸피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4S)-2-(2-메틸-2-페닐프로필)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(2-메틸-2-페닐프로필)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(시클로헥실메틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4R)-2-(시클로헥실메틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4S)-2-(시클로헥실메틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(3,4-디플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-(3,4-디플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(4-플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-(4-플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(4-클로로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4R)-2-(4-클로로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-(4-클로로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(3-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4R)-2-(3-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-(3-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4R)-2-(4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-(4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(3-tert-부틸페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-(4-tert-부틸페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(4-(메틸설포닐)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((트랜스-2-(4-(메틸설포닐)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(6-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-(6-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(5-tert-부틸티오펜-2-일)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4R)-2-(5-tert-부틸티오펜-2-일)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(2,4-디플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(4-클로로-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-(4-클로로-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(2-클로로-4-플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-(2-클로로-4-플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(4-클로로-3-플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-(4-클로로-3-플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(2,4-디클로로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4R)-2-(2,4-디클로로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4S)-2-(2,4-디클로로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4R)-2-(2,4-디클로로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(3,5-디클로로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4R)-2-(3,5-디클로로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-(3,5-디클로로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(3,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4R)-2-(3,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-(3,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(2,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4S)-2-(2,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(4-클로로-3,5-디플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-(4-클로로-3,5-디플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(3-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4R)-2-(3-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-(3-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(3,5-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-(3,5-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(2-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4R)-2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-페닐피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4S)-2-페닐피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-시클로헥실피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4S)-2-시클로헥실피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(2-메틸-2H-테트라졸-5-일)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-(2-메틸-2H-테트라졸-5-일)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(1-메틸-1H-테트라졸-5-일)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(시클로헥실옥시메틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4R)-2-(시클로헥실옥시메틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-(시클로헥실옥시메틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(디플루오로메틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-(디플루오로메틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4S)-2-((4,4-디플루오로시클로헥실)메틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4R)-2-((4,4-디플루오로시클로헥실)메틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-((4,4-디플루오로시클로헥실)메틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4S)-2-(4-플루오로페네틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4R)-2-(4-플루오로페네틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-(4-플루오로페네틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4S)-2-(3,3-디메틸부틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(3,3-디메틸부틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(4-플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4S)-2-(4-플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(3-플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4S)-2-(3-플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(2-플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4S)-2-(2-플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4R)-2-(2-플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4S)-2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4R)-2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(3-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4R)-2-(3-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-(3-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(2-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4R)-2-(2-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-(2-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(4-(트리플루오로메톡시)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-(4-(트리플루오로메톡시)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(4-클로로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-(4-클로로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(4-(메틸설포닐)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4R)-2-(4-(메틸설포닐)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-(4-(메틸설포닐)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(3,4-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4R)-2-(3,4-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4S)-2-(3,4-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4R)-2-(3,4-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(2,5-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4R)-2-(2,5-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-(2,5-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(2,6-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4R)-2-(2,6-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-(2,6-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(3,5-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4R)-2-(3,5-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4S)-2-(3,5-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4R)-2-(3,5-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(2,4-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4R)-2-(2,4-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-(2,4-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4R)-2-(3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-(3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4R)-2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(3,4,5-트리플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4R)-2-(3,4,5-트리플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-(3,4,5-트리플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-(3,5-디-tert-부틸벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4R)-2-(3,5-디-tert-부틸벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-(3,5-디-tert-부틸벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2R,4S)-2-벤질-2,3,4,5,6-d5-피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-((2S,4R)-2-벤질-2,3,4,5,6-d5-피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
5-(트랜스-2-벤질-2,3,4,5,6-d5-피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온.
화학식 I의 화합물은 입체 이성체 및/또는 호변 이성체 형태로 존재할 수 있다. 이들의 모든 거울상 이성질체, 부분입체 이성질체, 라세미체, 호변체 및 이들의 혼합물은 본 발명의 범위에 포함된다.
서로 다른 이성질체들은 다른 생물학적 활성을 지닐 수 있다. 화학식 I의 서로 다른 화합물들이 서로 다른 배위에서 가장 높은 생물학적 활성을 나타낼 수 있다는 점이 그러한 경우가 될 수 있을 것이다. 예컨대 한 화합물에서는 (2R,4S) 배위가 최고의 생물학적 활성을 지닐 수 있으나, 또 다른 화합물에서는 (2S,4S) 배위가 가장 높은 활성을 지닐 수 있는 것이다.
본 발명의 한 측면에 따르면, 하기 배위를 가지는 하기 화학식 Ⅱ의 화합물이 제공된다:
[화학식 II]
Figure 112011087177130-pct00003
본 발명의 한 측면에 따르면, 하기 배위를 가지는 화학식 Ⅲ의 화합물이 제공된다:
[화학식 III]
Figure 112011087177130-pct00004
본 발명의 한 측면에 따르면, 하기 배위를 가지는 화학식 Ⅳ의 화합물이 제공된다:
[화학식 IV]
Figure 112011087177130-pct00005
본 발명의 한 측면에 따르면, 하기 배위를 가지는 화학식 V의 화합물이 제공된다:
[화학식 V]
Figure 112011087177130-pct00006
본 발명의 다른 측면에 따르면, 하나 이상의 화합물 및 약학적으로 허용가능한 담체 또는 희석제를 포함하는 약학 조성물이 제공된다.
본 발명의 다른 측면에 따르면, 섬유소용해의 조절이 유익한 과다 출혈, 선천적 또는 후천적 출혈성 질환, 발작, 월경 과다 및 간 질환과 같은 질병 또는 질환의 치료 또는 예방, 그리고 유전성 혈관부종의 치료를 위한 방법으로서, 이러한 치료를 필요로 하는 온혈 동물에게 하나 이상의 화학식 I의 화합물을 치료적 유효량으로 투여하는 단계를 포함하는 상기 질환의 치료 또는 예방 방법이 제공된다. 화학식 I에 따른 화합물의 다른 사용처로서는 상처를 치료하는 경우, 치과 수술을 비롯한 수술과 관련된 출혈을 감소시키는 경우, 그리고 예컨대 수술 준비에서 항응고제로 처리한 환자를 치료하기 위한 경우를 들 수 있다. 상기 화합물은 또한 다른 여러 상황들에서 필요한 수혈을 감소하는데 사용될 수도 있다. 상기 화합물은 추가로 폰 빌레브란트 병, 혈우병의 예방학적 치료의 경우 또는 항응고 환자의 경우에 사용될 수 있다.
본 발명의 다른 측면에 따르면, 상기 질병 또는 질환이 유전적 출혈성 질환, 발작, 월경 과다 또는 간 질환으로부터 선택되는 방법이 제공된다.
본 발명의 다른 측면에 따르면, 섬유소용해의 조절이 유익한 질병 또는 질환의 치료 또는 예방 방법이 제공된다.
본 발명의 다른 측면에 따르면, 상기 질병 또는 질환이 유전적 출혈성 질환, 발작, 월경 과다 또는 간 질환으로부터 선택되는 방법이 제공된다.
본 발명의 다른 측면에 따르면, 섬유소용해의 조절이 유익한 질병 또는 질환의 치료 또는 예방을 위한 약제의 제조에서 본 발명에 따른 화합물의 용도가 제공된다.
본 발명의 다른 측면에 따르면, 상기 질병이 유전적 출혈성 질환, 발작,월경 과다 또는 간 질환으로부터 선택되는 용도가 제공된다.
화학식 I-V의 화합물은 하기 경로에 의해 제조될 수 있다:
반응식 A. 중간체의 제조
Figure 112011087177130-pct00007

Figure 112011087177130-pct00008

Figure 112011087177130-pct00009

Figure 112011087177130-pct00010

Figure 112011087177130-pct00011
Figure 112011087177130-pct00012
Figure 112011087177130-pct00013
반응식 B. 5- 이소옥사졸 -3-온의 형성
Figure 112011087177130-pct00014
주: 별표로 표시된 입체 화학 배치는, 명확하게 달리 표현되지 않는 한, 표시된 탄소 원자의 절대 배위가 아닌 최적의 상대 배치인 것으로 보아야 한다.
당업자라면, 상기 기술한 공정들이 본 발명에 따른 화합물을 제조할 수 있는 유일한 방법이 아니라 당업자가 그 일련의 순서, 반응 조건 및 다른 매개변수들을 그에 맞춰 변화시킬 수 있다는 점을 명백히 알 수 있을 것이다. 다양한 매개변수의 예로서는 다른 용매, 산과 염기 및 온도를 사용하는 것, 더 나아가 아민을 보호하기 위하여 히드록실 또는 다른 유효한 반응기를 사용하는 것을 들 수 있다. 이러한 기들을 추가하고 제거하기 위한 적절한 보호기 및 공정들에 대한 상세한 설명은 일반적으로 당업계에 잘 알려져 있다. 예를 들어, 문헌 ["Protective groups on Organic Synthesis", 3rd edition (1999) by Greene and Wuts]을 참조한다.
거울상 이성질체의 분리는 예컨대 컬럼 분리, 키랄 산 또는 염기를 이용한 재결정화를 사용하여 어느 단계에서라도 수행할 수 있다. 또한, 상기 분리는 효소적 선택 반응에 의해 수행될 수도 있다. 다르게는, 상기 거울상 이성질체는 입체 특이적으로 합성될 수 있다.
본원에 언급된 용도, 방법, 약제 및 조성물에 있어서, 사용된 화학식 I-V 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 이들의 혼합물의 양과 투여량은 사용된 화학식 I-V 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 이들의 혼합물; 및/또는 소기의 투여 경로 및/또는 치료에 따라 다를 수 있다. 그러나, 일반적으로는, 화학식 I-V에 따른 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 이들의 혼합물의 하루 복용량을 동물 체중 1 kg 당 약 0.1　mg 내지 약 400　mg으로 투여했을 경우에 만족할 만한 결과가 얻어진다. 이러한 용량은 하루에 1회 내지 4회로 나눈 분할량으로 또는 서방형으로 제공될 수 있다. 성인 남자에 있어서, 총 하루 복용량은, 예를 들어, 약 5　mg 내지 약 7,000　mg 범위, 보다 구체적으로는 약 10　mg 내지 약 1500　mg 범위일 수 있다. 경구 투여로 적절한 단위 투여형은 일반적으로 예를 들어, 하나 이상의 화학식 I-V에 따른 화합물, 또는 약학적으로 허용가능한 염, 또는 하나 이상의 고형 및/또는 액상 약학 담체, 활택제, 및/또는 희석제와 혼합한 이들의 혼합물을 약 2 mg 내지 약 1,400 mg으로 포함한다.
그러나, 임의의 특정 개체에 대한 구체적인 용량 수준과 투여 빈도수는 다를 수 있으며, 일반적으로는 여러 가지 요인들, 예컨대 이에 제한되지는 않지만, 예를 들어, 투여형으로 된 특정 화학식 I-V 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 이들의 혼합물의 생물학적 이용 가능성; 특정 화학식 I-V 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 이들의 혼합물의 대사적 안정성 및 작용 지속 시간; 개체의 종, 나이, 체중, 평소 건강 상태, 성별 및 식이 습관; 투여 경로 및 시간; 배변 속도; 약물 조합; 및 구체적인 질환의 중증도에 따라 다르다.
화학식 I-V에 따른 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 이들의 혼합물은 치료할 질환 및 전달시킬 화학식 I-V 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 이들의 혼합물의 양에 적절한 임의의 방법에 의해 투여될 수 있다.
화학식 I-V에 따른 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 이들의 혼합물은, 이에 제한되지는 않지만, 예를 들어, 경구, 근육내, 피하, 국소, 비강내, 경막외, 복강내, 흉곽내, 정맥내, 척추 강내, 뇌실내, 자궁내 장치를 통해, 그리고 관절내 주입에 의하여, 패치, 또는 코피와 같은 국소 치료용의 틀어막는 마개와 같은 수단을 비롯한 임의의 경로에 의해서, 통상적인 약학 조성물의 형태로 투여될 수 있다.
한 실시 양태에서, 투여 경로는 경구, 정맥내, 자궁내 장치를 통한 투여 또는 근육내이다.
화학식 I-V의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 이들의 혼합물은 그 자체로 이용될 수 있거나, 또는 장내 혹은 비경구 투여를 위해 적절한 의약 제제의 형태로 사용될 수 있다.
허용가능한 고형 약학 조성물은, 이에 제한되지는 않지만, 예를 들어, 분말, 정제, 분산성 과립, 캡슐, 샤세트 및 좌제를 포함한다.
고형 약학 조성물에서, 약학적으로 허용가능한 담체는, 이에 제한되지는 않지만, 예를 들어, 하나 이상의 고체, 하나 이상의 액체 및 이들의 혼합물을 포함한다. 상기 고형 담체는 또한 희석제, 향미제, 가용화제, 활택제, 현탁제, 결합제, 캡슐화제 및/또는 정제 붕해제일 수 있다. 적절한 담체로서는, 이에 제한되지는 않지만, 예를 들어, 탄산마그네슘; 스테아린산 마그네슘; 탈크; 락토스; 당; 펙틴; 덱스트린; 전분; 트라가칸트; 메틸 셀룰로스; 나트륨 카복시메틸 셀룰로스; 저온 용융 왁스; 코코아 기름; 및 이들의 혼합물을 포함한다.
분말은 예를 들어, 미분화된 고체를 하나 이상의 미분화된 화학식 I-V의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 이들의 혼합물과 혼합함으로써 제조될 수 있다.
정제는 예를 들어, 하나 이상의 화학식 I-V에 따른 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 이들의 혼합물을, 필요한 결합 특성을 지닌 약학적으로 허용가능한 담체와 적절한 비율로 혼합한 후에 원하는 형태와 크기로 압축시킴으로써 제조될 수 있다.
좌제는 예를 들어, 하나 이상의 화학식 I-V의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 이들의 혼합물을, 직장 온도에서는 액체이나 직장 온도 미만의 온도에서는 고체인 하나 이상의 적절한 비자극성 부형제와 혼합함으로써 제조될 수 있는데, 여기서, 비자극성 부형제를 먼저 용융시킨 후 여기에 화학식 I의 화합물을 분산시킨다. 이후, 상기 용융된 균질한 혼합물을 적당한 크기의 주형에 부은 후 냉각시켜 고형화한다. 예시적인 비자극성 부형제로는, 이에 제한되지는 않지만, 예를 들어, 코코아 기름; 글리세린으로 처리된 젤라틴; 수소가 첨가된 식물성 기름; 다양한 분자량을 가진 폴리에틸렌 글리콜의 혼합물; 및 폴리에틸렌 글리콜의 지방산 에스테르를 포함한다.
허용가능한 액상 약학 조성물은, 이에 제한되지는 않지만, 예를 들어, 용액, 현탁액 및 에멀젼을 포함한다.
비경구 투여를 위해 적절한 예시적인 액상 약학 조성물로는, 이에 제한되지는 않지만, 예를 들어, 하나 이상의 화학식 I-V에 따른 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 이들의 혼합물의 멸균수 또는 프로필렌 글리콜 수용액; 및 하나 이상의 화학식 I-V에 따른 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 이들의 혼합물의 폴리에틸렌 글리콜 수용액을 포함한다.
경구 투여용 수용액은 하나 이상의 화학식 I-V에 따른 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 이들의 혼합물을 물에 용해시킨 후, 필요에 따라 적절한 착색제, 향미제, 안정제 및/또는 증점제를 첨가함으로써 제조될 수 있다.
경구 투여용 수성 현탁액은 하나 이상의 미분화된 화학식 I-V의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 이들의 혼합물을 예를 들어, 천연 또는 합성 검, 수지, 메틸 셀룰로스 및 나트륨 카복시메틸 셀룰로스와 같은 점성 물질과 함께 물에 분산시킴으로써 제조될 수 있다.
한 실시 양태에서, 상기 약학 조성물은 하나 이상의 화학식 I-V에 따른 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 이들의 혼합물을 약 0.05% 내지 약 99%wt (중량%)로 포함한다. 모든 중량%는 총 조성물을 기준으로 한다.
다른 실시 양태에서, 상기 약학 조성물은 하나 이상의 화학식 I-V에 따른 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 이들의 혼합물을 약 0.10% 내지 약 50%wt (중량%)로 포함한다. 모든 중량%는 총 조성물을 기준으로 한다.
또한, 성분들을 함께 혼합 또는 조합하고, 이 혼합된 성분들을 정제 또는 좌제로 형성하는 단계; 상기 성분들을 캡슐로 캡슐화하는 단계; 또는 상기 성분들을 용해시켜 주사가능한 용액을 형성하는 단계를 포함하는 약학 조성물의 제조 방법이 본원에 제공된다.
본 발명에 따른 화합물은 상기 개시한 질환들의 치료를 위해 다른 제제들과 조합하여 사용될 수 있다. 이러한 제제들의 예로서는 비스테로이드성 항염증제, 예컨대 NSAID 저해제 및 호르몬 치료제, 예컨대 프로게스테론 및/또는 에스트로겐, 부작용을 예방하기 위한 항혈소판제 또는 항응고제, 응고 인자, 예컨대 제7 응고 인자 (factor Ⅶ) 및 제8 응고 인자 (factor Ⅷ), 폰 빌레브란트 인자를 들 수 있다.
분석 방법
본 발명에 따른 화합물의 생물학적 활성을 평가하는데 사용한 분석 방법은 혈병 용해 버퍼 분석법 (Clot-lysis buffer assay)이었다.
플라스미노겐의 저해 측정은 15 mM HEPES (pH 7.4), 100 mM NaCl, 0.008% Tween-80, 13 ㎍/mL의 인간 Glu-플라스미노겐 [이탈리아 소재의 크로모제닉스(Chromogenix)], 1.7 mg/mL의 인간 피브리노겐 [미국 소재의 아니아라 (Aniara)], 0.02 nM 인간 단쇄 조직형 플라스미노겐 활성제 [스웨덴 소재의 바이오풀 (Biopool)], 1% DMSO 및 0.05 NIH U/mL의 인간 트롬빈 [미국 소재의 시그마 (Sigma)]을 포함하는 200 μL의 반응 혼합물 중에서 수행하였다.
시험 물질을 10% DMSO 중의 반응 혼합물에 첨가하였다. 트롬빈을 첨가하여 반응을 개시하였다.
이후, 섬유소 형성 및 분해를 37℃, 405 nm에서 15시간 동안 분광 광도계로 확인하였다.
생물학적 활성
상기 기술한 혈병 용해 버퍼 분석법에 따라 측정하였다.
실시예 1은 2.85 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 2는 169 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 3은 1.16 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 4는 150 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 5는 2.86 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 6은 47.5 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 7은 2.62 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 8은 2.36 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 9는 16.5 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 10은 1.46 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 11은 4.3 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 12는 2.25 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 13은 1.28 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 14는 1.15 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 15는 5.2 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 16은 56.2 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 17은 4.65 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 18은 1.6 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 19는 1.6 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 20은 5.1 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 21은 107 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 22는 1.2 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 23은 1 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 24는 42.8 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 25는 2.5 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 26은 73.8 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 27은 1.5 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 28은 283 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 29는 24 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 30은 0.7 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 31은 33.1 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 32는 23.6 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 33은 1.43 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 34는 150 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 35는 14.4 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 36은 1.9 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 37은 228 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 38은 1.5 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 39는 97.3 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 40은 1.5 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 41은 40.9 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 42는 34.9 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 43은 77.5 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 44는 2.3 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 45는 2.35 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 46은 90.7 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 47은 1.4 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 48은 44.3 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 49는 2 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 50은 5.3 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 51은 0.9 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 52는 1940 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 53은 72.9 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 54는 372 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 55는 0.6 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 56은 43.8 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 57은 40 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 58은 2.1 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 59는 70.7 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 60은 1.9 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 61은 858 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 62는 7.1 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 63은 3.22 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 64는 31.4 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 65는 2.2 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 66은 7.5 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 67는 1.3 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 68은 81.1 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 69는 92.5 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 70은 2.5 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 71은 11.6 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 72는 0.6 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 73은 1.54 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 74는 52.2 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 75는 3.1 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 76은 190 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 77은 8 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 78은 64.2 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 79는 3.3 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 80은 44 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 81은 1.6 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 82는 20.3 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 83은 42 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 84는 1.7 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 85는 173 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 86은 15.6 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 87은 10.7 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 88은 31.2 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 89는 1.5 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 90은 102 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 91은 5.9 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 92는 1.1 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 93은 69.8 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 94는 4.6 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 95는 1.04 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 96은 7.3 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 97은 0.7 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 98은 2.51 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 99는 0.81 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 100은 1.93 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 101은 4.7 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 102는 2.18 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 103은 94 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 104는 1.5 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 105는 7.2 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 106은 88.8 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 107은 1.7 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 108은 70.5 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 109는 5 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 110은 1.2 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 111은 31.3 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 112는 5.5 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 113은 1.1 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 114는 6.5 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 115는 0.8 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 116은 5.6 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 117은 0.8 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 118은 225 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 119는 10.7 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 120은 0.89 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 121은 120 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 122는 4.4 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 123은 147 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 124는 1.2 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 125는 92.9 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 126은 3.6 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 127은 1.4 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 128은 31.4 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 129는 10.2 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 130은 1.1 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 131은 128 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 132는 2.2 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 133은 120 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 134는 0.85 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 135는 69.1 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 136은 4.94 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 137은 1 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 138은 123 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 139는 2.9 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 140은 0.6 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 141은 69.5 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 142는 1.8 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 143은 0.9 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 144는 88.2 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 145는 4.3 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 146은 6.6 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 147은 44.6 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 148은 2.7 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 149는 0.9 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 150은 87 μM의 IC50 값을 나타냈다. 실시예 151은 7.7 μM의 IC50 값을 나타냈다.
X-선 분말 회절
X-선 분말 회절 (본원에서 XRPD 또는 XRD로 칭함) 패턴은, 단결정 실리콘인 제로 백그라운드 홀더 상에 샘플을 장착하고, 이 샘플을 얇은 층으로 도말하여 측정하였다. VÅNTEC-1 검출기를 구비한 브루커 D8 어드밴스 θ-2 θ 회절계 (Bruker D8 Advance theta-2 theta diffractometer)를 이용하여, 상기 샘플을 (계수 통계를 향상시키기 위해) 펼쳐놓고, 30kV 및 50mA에서 작동하는 구리관에 의해 발생하는 X-선으로 조사하였다. 자동화 가변 발산 슬릿을 사용하였다.
X-선 회절 분석은, 예를 들어 문헌 [Kitaigorodsky, A.I. (1973), Molecular Crystals and Molecules, Academic Press, New York]; [Bunn, C.W. (1948), Chemical Crystallography, Clarendon Press, London]; 또는 [Klug, H.P. & Alexander, L.E. (1974), X-ray Diffraction Procedures, John Wiley & Sons, New York]에서 볼 수 있는 표준 방법들에 따라 수행하였다. X-선 분말 회절 데이터는 내부 참조를 사용하여 보정하지 않았다. 가변 슬릿으로 측정을 수행하였다.
X-선 분말 회절 패턴의 2-θ 값은 기계마다 약간은 다를 수 있고, 또한 샘플 제조의 차이 및 배치 간 차이에 따라 다르므로, 인용된 값이 반드시 절대적인 것이라고 생각해서는 안 될 것이다. 또한, 피크의 상대적인 세기도 배향 효과에 따라 다를 수 있어서, 본원에 포함된 XRD 자취선에 나타난 강도는 예시적이며 절대적인 비교를 위해 사용되어서는 안 될 것이다.
상기 화합물은 비용매화물 또는 용매화물 (수화물 및 혼합된 용매화물)로 결정화할 수 있다. 용매 분자들은 구조 내에서 다소 강하게 결합될 수 있다. 비용매화물과 용매화물 간 또는 화학량론적 용매화물과 비화학량론적 용매화물 간에 변환이 나타날 수 있다. 변환은 가역성이거나 또는 비가역성일 수 있다. 상대 습도 또는 다른 용매의 존재는, 구조 내에 존재하는 용매의 양에 따라 다소간 X-선 분말 회절 패턴에 영향을 줄 수 있는 중요한 인자이다.
실시예 10, 14, 18, 55, 65, 104, 115 및 143의 전형적인 샘플의 X-선 분말 회절 패턴은 도 1-13에 나타나 있다.
실시예
실시예에서 사용된 약어 목록:
AcOH - 아세트산
CV - 컬럼 부피
DME - 1,2-디메톡시에탄
DEE - 디에틸 에테르
DMF - N,N-디메틸포름아미드
DIPEA - N,N-디이소프로필에틸아민
DCM - 디클로로메탄
dppf - 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센
DMAP - 4-디메틸아미노피리딘
EDC - 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카보디이미드
EtOH - 에탄올
FA - 포름산
h - 시간
min - 분
MTBE - 메틸 tert-부틸에테르
IPA - 이소프로필 알콜
LAH - 수소화 알루미늄리튬
TEA - 트리에틸아민
THF - 테트라히드로푸란
TBDMSCl - TERT-부틸디메틸클로로실란
TBAF - 테트라부틸암모늄 플루오라이드
MeOH - 메탄올
EtOAc - 에틸 아세테이트
Ph - 페닐
satd - 포화됨
참조 화합물의 제조
참조 화합물 1
2-벤질-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: tert -부틸 2-벤질-4- 시아노피페리딘 -1- 카복실레이트
질소 대기 하에서 DME (250 mL) 중의 2-벤질-4-옥소-피페리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 (15 g, 51.8 mmol) (SYNTECH) 용액에 톨루엔-4-설포닐메틸 이소시아니드 (15.2 g, 250 mL의 DME 중 77.7 mmol)와 칼륨 tert-부톡시드 (156 mL, tert-부탄올 중 1 M)를 동시에 1 시간에 걸쳐 첨가하여 온도를 -10℃ 미만으로 유지하였다. 상기 용액을 -10℃에서 2 시간 동안 교반한 후, 16 시간 동안 실온에 도달하도록 두었다. 상기 반응 혼합물에 H2O (400 mL)를 첨가하고 상기 용액을 20 분 동안 교반한 후, DEE (x 3)와 EtOAc (x 3)로 추출하였다. 상기 혼합된 유기상을 Na2SO4로 건조하여 증발시켰다. 잔류물을 EtOAc/헵탄 (10-60 % 농도구배 EtOAc)을 이용한 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 2-벤질-4-시아노피페리딘-1-카복실레이트 (11.85 g, 76 %)를 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.38 - 1.46 (m, 9H), 1.63 - 2.14 (m, 4H), 2.62 - 3.33 (m, 4H), 4.17 (m, 1H), 4.48 (m, 1H), 7.11 - 7.41 (m, 5H); MS m/z 301 (M+H)+.
단계 2: 메틸 2- 벤질피페리딘 -4- 카복실레이트
tert-부틸 2-벤질-4-시아노피페리딘-1-카복실레이트 (11.85 g, 39.5 mmol)에 농축 HCl (43 mL)을 첨가하였다. 20 분 교반 후, 상기 용액을 전자렌지용 반응 유리병에 옮겨 단일 노드 전자렌지용 반응기 중에서 140℃로 30 분 동안 가열하였다. 상기 용매를 증발시켰다. 잔류물을 HCl (MeOH 중 1.25 M, 50 mL) 중에 용해시키고 상기 현탁액을 환류 하에 1 시간 동안 가열하였다. 용매를 제거했더니 포화 NaHCO3 (약 80 mL) 중에 흡수된 오일이 생성되어, 이를 고형 NaHCO3로 추가로 중화시켰다. 상기 수상을 상 분리기를 이용해 건조된 DCM (x3)으로 추출하고 증발시켜 메틸 2-벤질피페리딘-4-카복실레이트 (7.36 g, 80%)를 오일로 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.18 - 2.40 (m, 5H), 2.47 - 3.15 (m, 5H), 3.66 - 2.69 (2 s, tot integral, 3H), 7.15 - 7.35 (m, 5H); MS m/z 234 (M+H) +.
단계 3: 2-벤질-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
DCM (200 mL) 중의 메틸 2-벤질피페리딘-4-카복실레이트 (7.36 g, 31.55 mmol) 및 DIPEA (11.02 mL, 63.09 mmol)의 용액에 100 mL DCM 중의 메틸 클로로포르메이트 (3.18 mL, 41.01 mmol)를 1 시간에 걸쳐 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 40 분 동안 교반한 후, 포화 NaHCO3로 세척하고 상 분리기를 사용하여 건조해 증발시켰다. 잔류물을 THF (80 mL)에 용해시킨 다음, LiOH (1.0 g, 42.0 mmol), MeOH (60 mL) 및 물 (60 mL)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 질소 대기 하의 실온에서 72 시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 물에 녹였다. HCl (10 %)을 첨가하여 pH를 < 2로 조절하였다. 이후, 상기 수상을 DCM (x5)로 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 상 분리기를 사용하여 건조, 증발시켜 2-벤질-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산을 오일로서 수득하였다. MS m/z 276 (M-H)-.
참조 화합물 2
2-이소부틸-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 3-( tert - 부톡시카보닐아미노 )-5- 메틸헥산산
0℃의 1N NaOH (1 L) 중의 DL-β-호모 루신 (45 g, 0.31 mol)의 용액에 1,4-디옥산 (500 mL) 중의 (Boc)2O (87.8 g, 0.403 mol)의 용액을 적가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고, 0℃로 냉각시킨 후 1 N HCl (약 1000 mL)로 중화시켰다. 고체를 여과하여 제거하고 진공 하에 건조시켜 3-(tert-부톡시카보닐아미노)-5-메틸헥산산 (48.0 g, 63 %)을 고체로서 수득하였다.
단계 2: tert -부틸 2-이소부틸-4,6- 디옥소피페리딘 -1- 카복실레이트
0℃의 DCM (800 mL) 중의 3-(tert-부톡시카보닐아미노)-5-메틸헥산산 (44.0 g, 0.179 mol)의 용액에 EDC 히드로클로라이드 (51.56 g, 0.269 mol), DMAP (32.8 g, 0.269 mol) 및 멜드럼산 (25.8 g, 0.179 mol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하고, 1 N KHSO4 (500 mL)로 세척한 후, Na2SO4로 건조시켜 농축하였다. 잔류물을 무수 에틸 아세테이트 (1.5 L)에 용해시키고 환류 하에 밤새 가열하였다. 상기 반응 혼합물을 1 N KHSO4 (500 mL), 식염수 (500 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조하여 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로서 석유 에테르와 EtOAc (65:35)를 사용하는 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 3-(tert-부톡시카보닐아미노)-5-메틸헥산산을 고체로서 수득하였다 (35 g, 72 %).
단계 3: 6-이소부 틸 -피페리딘-2,4- 디온
1,4 디옥산 (300 mL) 중의 tert-부틸 2-이소부틸-4,6-디옥소피페리딘-1-카복실레이트 (30 g, 0.114 mol)의 용액에 HCl (1,4 디옥산 중 3 M, 100 mL)을 첨가하고 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 농축하고 디에틸 에테르를 이용한 결정화 공정에 의해 정제하여 6-이소부틸-피페리딘-2,4-디온 (14 g, 74 %)을 백색의 고체로서 수득하였다.
단계 4: 2-이소부 틸 -피페리딘-4- 올
THF (100 mL) 중의 LAH (16.1 g, 0.414 mol)의 교반된 빙냉 현탁액에 THF (100 mL) 중의 6-이소부틸-피페리딘-2,4-디온 (14.0 g, 0.083 mol)의 용액을 N2 하에 적가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온으로 가온한 후 N2 하에서 48 시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 0℃로 냉각시킨 후 물 (16.1 mL), 1 N NaOH (16.1 mL) 및 물 (16.1 mL)로 반응을 중지시켰다. 상기 반응 혼합물을 여과시켜 고체를 가열한 THF (100 mL)로 세척하였다. 상기 여과물을 농축시켜 2-이소부틸-피페리딘-4-올을 고체로서 수득하였다 (9 g, 미정제).
단계 5: tert -부틸-4-히드록시-2- 이소부틸피페리딘 -1- 카복실레이트
2-이소부틸-피페리딘-4-올 (9.0 g, 0.057 mol)을 THF와 포화 NaHCO3 (100 mL)의 50:50 용액에 녹이고, 상기 혼합물을 0℃로 냉각시켰다. THF (50 mL) 중의 (Boc)2O (13.7 g, 0.063 mol)의 용액을 적가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 농축시키고 EtOAc (100 mL)로 추출하였다. 상기 유기상을 물 (100 mL), 식염수 (100 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조하여 농축시켰다. 상기 농축 생성물을 석유 에테르 중 20%의 EtOAc을 이용한 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 두 화합물의 혼합물을 수득하였다. 상기 혼합물을 분취형 HPLC로 추가 정제하여 tert-부틸-4-히드록시-2-이소부틸피페리딘-1-카복실레이트를 담황색 액체로서 수득하였다 (4.5 g, 39.5 %).
단계 6: 2-이소부 틸 -4-옥소-피페리딘-1- 카복실산 tert -부틸 에스테르
0℃에서 DCM (50 mL) 중의 tert-부틸-4-히드록시-2-이소부틸피페리딘-1-카복실레이트 (4.6 g, 0.018 mol)의 교반된 용액에 1,1,1-트리아세톡시-1,1-디히드로-1,2-벤지오독솔-3(1H)-온 (9.1 g, 0.02146 mol)을 여러 번으로 나누어 첨가하여 생성된 용액을 실온으로 가온한 후 N2 하에 밤새 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 포화 NaHCO3 용액 (50 mL)으로 반응을 중지시키고 Celite? 패드를 통해 여과하였다. 상기 여과물을 DCM (50 mL)로 여러 번 추출하고, 상기 혼합된 유기상을 물 (50 mL), 식염수 (50 mL)로 세척한 후, Na2SO4로 건조하여 농축시켰다. 상기 농축 생성물을 석유 에테르 중의 10 % EtOAc를 이용한 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 HPLC 순도 90%인 생성물을 수득하였다. 상기 불순물이 섞인 생성물을 분취형 HPLC로 추가 정제하여 2-이소부틸-4-옥소-피페리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르를 액체로서 수득하였다 (2.1 g, 46 %).
단계 7: tert -부틸 4- 시아노 -2- 이소부틸피페리딘 -1- 카복실레이트
참조 화합물 1, 단계 1에 기술된 바와 같이 2-이소부틸-4-옥소-피페리딘-1-카복실산 tert-부틸 에스테르 (4.55 g, 17.8 mmol), 톨루엔-4-설포닐메틸 이소시아니드 (5.2 g, 26.7 mmol) 및 칼륨 tert-부톡시드 (53.4 mL, tert-부탄올 중 1 M)로부터 화합물을 제조하여 미정제 tert-부틸 4-시아노-2-이소부틸피페리딘-1-카복실레이트를 수득하였다. MS m/z 267 (M+H)+.
단계 8: 2-이소부 틸 -피페리딘-4- 카복실산 메틸 에스테르
참조 화합물 1, 단계 2에 기술된 바와 같이 미정제 tert-부틸-4-시아노-2-이소부틸피페리딘-1-카복실레이트 (6.43 g, ca 24.2 mmol)로부터 화합물을 제조하여 미정제 2-이소부틸-피페리딘-4-카복실산 메틸 에스테르를 수득하였다. MS m/z 200 (M+H)+.
단계 9: 2-이소부 틸 -1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
참조 화합물 1, 단계 2에 기술된 바와 같이 미정제 2-이소부틸-피페리딘-4-카복실산 메틸 에스테르 (2.6 g, 13.0 mmol), DIPEA (4.55 mL, 26.1 mmol) 및 메틸 클로로포르메이트 (1.31 mL, 17.0 mmol), 그리고 이후에는 LiOH (1.3 당량)로부터 화합물을 제조하여 미정제 2-이소부틸-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산을 수득하였다. MS m/z 242 (M-H)-.
참조 화합물 3
1-( 메톡시카보닐 )-2- 페네틸피페리딘 -4- 카복실산
단계 1: 메틸 4-옥소-2- 페네틸 -3,4- 디히드로피리딘 -1(2H)- 카복실레이트
4-메톡시피리딘 (9.30 mL, 91.64 mmol)을 질소 대기 하에서 THF (150 mL) 중에서 용해시킨 후, -15℃로 냉각하였다. 염화페네틸마그네슘 (93 mL, 93.47 mmol, THF 중 1 M)을 적가하여 현탁액을 형성시켰다. -20℃에서 30 분간 교반한 후, 메틸 클로로포르메이트 (9.23 mL, 119.13 mmol)를 1 분 동안 첨가하였다. 교반을 -10℃에서 1 시간 동안 지속한 후에 HCl (10%)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 20 분간 교반한 후 농축하였다. 상기 수상을 에테르 (x2)로 추출하고, 상기 유기상을 건조(MgSO4) 및 증발시켜 메틸 4-옥소-2-페네틸-3,4-디히드로피리딘-1(2H)-카복실레이트 (21.7 g, 82 %)를 오일로서 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.98 (m, 2H), 2.54 (m, 2H), 2.69 (m, 1H), 2.81 (m, 1H), 3.83 (s, 3H), 4.62 (m, 1H), 5.33 (m, 1H), 7.12 - 7.38 (m, 5H), 7.72 (m, 1H); MS m/z 260 (M+H)+.
단계 2: 메틸 4-옥소-2- 페네틸피페리딘 -1- 카복실레이트
메틸 4-옥소-2-페네틸-3,4-디히드로피리딘-1(2H)-카복실레이트 (21.7 g, 약 75 mmol)를 EtOAc 중의 Pd/C (5%)을 이용하여 5 bar에서 20 시간 동안 수소를 첨가하였다. 상기 혼합물을 실리카 플러그를 통해 여과시킨 후 증발시켜 생성물을 오일로서 수득하였다 (19.8 g). 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.69 (m, 1H), 1.80 (m, 1H), 2.26 (m, 2H), 2.41 (m, 1H), 2.47 - 2.70 (m, 3H), 3.16 (m, 1H), 3.69 (m, 3H), 4.15 - 4,48 (br m, 2H), 7.14 - 7.30 (m, 5H). MS 262 m/z (M+H)+.
단계 3: 메틸 4- 시아노 -2- 페네틸피페리딘 -1- 카복실레이트
질소 대기 하의 DME (250 mL) 중의 메틸 4-옥소-2-페네틸피페리딘-1-카복실레이트 (19.8 g, 75.7 mmol)의 용액에 톨루엔-4-설포닐메틸 이소시아니드 (16.6 g, 250 mL의 DME 중 85.0 mmol)와 칼륨 tert-부톡시드 (197 mL, tert-부탄올 중 1 M)를 1 시간에 걸쳐 동시에 첨가하여, 온도를 -10℃ 미만으로 유지시켰다. 이후, 상기 혼합물을 -10℃에서 2 시간 동안 교반하고 주위 온도에 도달하도록 16 시간 동안 놓아두었다. 오렌지색의 반응 혼합물에 H2O (400 mL)를 첨가하고, 이를 20 분간 교반한 후, 에테르 (x3)와 EtOAc (x3)로 추출하였다. 상기 유기상을 혼합하고, Na2SO4로 건조한 후 증발시켜 24.8 g의 잔류물을 수득하였다. EtOAc/헵탄 (30-80% 농도구배 EtOAc)을 이용한 섬광 크로마토그래피로 생성물 (13.2 g, 64%)을 부분입체 이성질체 (주된 시스 이성질체)의 혼합물로서 수득하였다. MS m/z 273 (M+H)+. 트랜스 이성질체: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.71 (m, 2H), 1.84 - 2.09 (m, 4H), 2.47 - 2.68 (m, 2H), 2.71 - 2.92 (m, 2H), 3.70 (s, 3H), 4.12 (br m, 1H), 4.45 (br m, 1H), 7.01 - 7.40 (m, 5H). 시스 이성질체: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.76 (m, 1H), 1.88 (m, 1H), 1.92 - 2.07 (m, 2H), 2.07 - 2.15 (m, 1H), 2.24 - 2.38 (m, 1H), 2.55 - 2.72 (m, 2H), 2.96 (m, 1H), 3.16 - 3.29 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 4.10 (m, 1H), 4.35 (m, 1H), 7.15 - 7.35 (m, 5H).
단계 4: 1-( 메톡시카보닐 )-2- 페네틸피페리딘 -4- 카복실산
전자렌지용 반응 유리병 중에서 메틸 4-시아노-2-페네틸피페리딘-1-카복실레이트 (13.2 g, 48.5 mmol)에 6 M HCl을 첨가하였다. 상기 혼합물을 단일 노드 전자렌지용 반응기 중에서 100℃로 30 분간 가열하였다. 상기 수상을 EtOAc로 추출하고 이렇게 해서 생성된 유기상을 10% HCl로 한번 세척한 후, MgSO4로 건조한 후 증발시켜 미정제 생성물을 3.47 g으로 수득하였다. MS m/z 290 (M-H)-.
참조 화합물 4
2-(4- tert - 부틸벤질 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 4-(( tert - 부틸디메틸실릴옥시 ) 메틸 )피리딘
질소 대기 하에서 무수 DMF (300 mL) 및 무수 DCM (33 mL) 중의 피리딘-4-일메탄올 (25.7 g, 0.24 mol)과 이미다졸 (19.8 g, 0.29 mol)의 용액에 TBDMSCl (42.6 g, 0.29 mol)을 첨가하였다. 상기 용액을 침전물이 형성되는 시간인 18 시간 동안 교반하였다. 휘발성 물질 (약 100 mL)을 제거하여 상기 반응 혼합물을 농축시킨 후 물 (500 mL)을 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 1:1 헵탄:EtOAc (200 mL x3)로 추출하였다. 상기 혼합된 유기상을 식염수 (x2)로 세척하고, 건조(MgSO4)시킨 후, 여과 및 증발시켜 4-((tert-부틸디메틸실릴옥시)-메틸)피리딘 (51.70 g, 98%)을 오일로서 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ-0.01 (s, 6H), 0.82 (s, 9H), 4.63 (s, 2H), 7.14 (m, 2H), 8.43 (m, 2H).
단계 2: 메틸 2-(4- tert - 부틸벤질 )-4-(( tert - 부틸디메틸실릴옥시 ) 메틸 )피리딘-1(2H)- 카복실레이트
-30℃로 냉각된 THF (50 mL) 중의 4-(tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)피리딘 (5.33 g, 23.86 mmol)의 용액에 염화 (4-tert-부틸벤질)마그네슘 (105 mL, 26.25 mmol, THF 중 0.25 M)을 10 분간에 걸쳐 첨가하였다. 메틸 염화탄산 (2.443 mL, 31.02 mmol)을 10 분간에 걸쳐 적가하였다. 상기 반응 혼합물을 2 시간 동안 방치하여 0℃가 되도록 하였다. 상기 유기 용매를 증발시키고, 상기 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석한 후, 1 N HCl 및 식염수로 세척하였다. 상기 유기층을 MgSO4로 건조하고 증발시켜 9 g의 미정제 잔류물을 수득하고, 이를 2개 동일한 양으로 나누어 자동화 컬럼 크로마토그래피 [바이오타지 (Biotage), 340g KP-SIL, 용리액: 헵탄/EtOAc 농도구배 0-50%]로 정제하여 맑은 오일로서 생성물을 수득하였다 (6.5 g, 64 %). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) (복합체) δ-0.07 - 0.21 (m, 6H), 0.9 - 1.30 (m, 18H), 2.0 - 7.4 (m, 15H). MS m/z 431 (M+H)+.
단계 3: 메틸 2-(4- tert - 부틸벤질 )-4-(( tert - 부틸디메틸실릴옥시 ) 메틸 )피페리딘-1- 카복실레이트
에틸 아세테이트 (50 mL) 중의 메틸 2-(4-tert-부틸벤질)-4-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)-피리딘-1(2H)-카복실레이트 (6.5 g, 15.13 mmol)의 용액에 산화백금(Ⅳ) (0.07 g, 0.31 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 6 bar의 H2 대기에서 20 시간 동안 수소를 첨가하였다. 상기 혼합물을 셀라이트를 통해 여과시키고 용매를 증발시켜 생성물을 오일로서 수득하였다 (6.27 g, 96 %). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ-0.07 - 0.18 (m, 6H), 0.77 - 1.01 (m, 9H), 1.28 - 1.37 (m, 9H), 1.36 - 1.87 (m, 4H), 2.58 - 2.74 (m, 1H), 2.88 - 3.06 (m, 2H), 3.40 - 3.55 (m, 3H), 3.60 - 3.72 (m, 3H), 3.78 - 4.10 (m, 2H), 7.14 - 7.32 (m, 4H). MS m/z 434 (M+H)+.
단계 4: 메틸 2-(4- tert - 부틸벤질 )-4-( 히드록시메틸 )피페리딘-1- 카복실레이트
테트라히드로푸란 (15 mL) 중의 메틸 2-(4-tert-부틸벤질)-4-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)-피페리딘-1-카복실레이트 (6.27 g, 14.46 mmol)의 현탁액에 테트라부틸암모늄 플루오라이드 (18.79 mL, 18.79 mmol, THF 중 1 M)를 첨가하고 상기 반응 혼합물을 실온에서 90 분간 교반하였다. 용매를 증발시키고, 상기 잔류물을 에틸 아세테이트 중에 용해시킨 후, 포화 NaHCO3 (x1)으로 세척하고 이후에는 식염수 (x2)로 세척하였다. 상기 유기층을 MgSO4로 건조하여 증발시켰다. 잔류물을 자동화 컬럼 크로마토그래피 [바이오타지, (340 g KP-SIL) 용리액: EtOAc/헵탄, 농도구배 20-90% EtOAc]로 정제하여 생성물을 오일로서 수득하였다 (3.21 g, 70 %). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.30 (s, 9H), 1.42 - 1.50 (m, 2H), 1.65 - 1.91 (m, 2H), 2.68 (m, 1H), 2.89 - 3.07 (m, 2H), 3.39 - 3.62 (m, 3H), 3.67 (m, 3H), 3.87 (m 1H), 4.07 (m, 1H), 7.11 (m, 2H), 7.30 (m, 2H). MS m/z 320 (M+H)+.
단계 5: 2-(4- tert - 부틸벤질 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
사염화탄소 (18 mL) 중의 메틸 2-(4-tert-부틸벤질)-4-(히드록시메틸)피페리딘-1-카복실레이트 (2.9 g, 9.08 mmol)의 용액에 과요오드산나트륨 (5.83 g, 27.24 mmol)과 물 (27 mL)을 첨가하였다. 아세토니트릴 (18 mL)을 상기 혼합물에 첨가한 후, 염화루테늄(Ⅲ) (0.041 g, 0.20 mmol)을 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 2상 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 세게 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 물과 DCM으로 희석하고, 상기 수성층을 DCM (x3)으로 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 MgSO4로 건조한 후 증발시켜 생성물을 오일로서 수득하였다 (3.0 g, 98 %). MS m/z 332 (M-H)-.
참조 화합물 5
1-( 메톡시카보닐 )-2- 네오펜틸피페리딘 -4- 카복실산
단계 1: 메틸 4-(( tert - 부틸디메틸실릴옥시 ) 메틸 )-2- 네오펜틸피리딘 -1(2H)-카 복실 레이트
참조 화합물 4, 단계 1에 기술된 바와 같이 제조된 4-(tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)피리딘, 염화네오펜틸마그네슘 (40.5 mL, 40.5 mmol, THF 중 1 M) 및 메틸 염화탄산 (3.77 mL, 47.9 mmol)으로부터 참조 화합물 4, 단계 2에 기술된 바와 같이 화합물을 제조하였다. 잔류물을 바이오타지 (Biotage?) KP-SIL 340g 컬럼 상에서 자동화 섬광 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 15:1 내지 10:1인 헵탄:EtOAc의 농도구배를 이동상으로 사용하여 표제 화합물을 수득하였다 (9.3 g, 71 %): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ-0.00 (s, 3H), 0.09 (s, 3H), 0.87 (s, 18H), 1.09 - 1.81 (m, 2H), 1.94 - 2.44 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 4.22 - 4.90 (m, 2H), 5.12 - 5.61 (m, 1H), 5.69 - 5.97 (m, 1H), 6.25 - 6.79 (m, 1H). MS m/z 354 (M+H)+.
단계 2: 메틸 4-(( tert - 부틸디메틸실릴옥시 ) 메틸 )-2- 네오펜틸피페리딘 -1-카복실레이트
메틸 4-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)-2-네오펜틸피리딘-1(2H)-카복실레이트로부터 참조 화합물 4, 단계 3에 기술된 바와 같이 화합물을 제조하여 표제 화합물을 얻었다. MS m/z 358 (M+H)+.
단계 3: 메틸 4-( 히드록시메틸 )-2- 네오펜틸피페리딘 -1- 카복실레이트
메틸 4-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)-2-네오펜틸피페리딘-1-카복실레이트 및 TBAF (34.2 mL, 34.2 mmol, THF 중 1 M)로부터 참조 화합물 4, 단계 4에 기술된 바와 같이 화합물을 제조하였다. 잔류물을 바이오타지 (Biotage?) KP-SIL 340g 컬럼 상에서 자동화 섬광 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 헵탄 중의 30% 내지 100% EtOAc의 농도구배를 용리액으로 사용하여 표제 화합물을 얻었다.
단계 4: 1-( 메톡시카보닐 )-2- 네오펜틸피페리딘 -4- 카복실산
메틸 4-(히드록시메틸)-2-네오펜틸피페리딘-1-카복실레이트, 과요오드산나트륨 (15.0 g, 70.3 mmol) 및 염화루테늄(Ⅲ) (0.11 g, 0.52 mmol)으로부터 참조 화합물 4, 단계 5에 기술된 바와 같이 화합물을 제조하여 표제 화합물을 얻었다. MS m/z 256 (M-H)-.
참조 화합물 6
1-( 메톡시카보닐 )-2- 메틸피페리딘 -4- 카복실산
단계 1: 메틸 4-(( tert - 부틸디메틸실릴옥시 ) 메틸 )-2- 메틸피리딘 -1(2H)- 카복실레이트
참조 화합물 4, 단계 1에 기술된 바와 같이 제조된 4-(tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)피리딘, 염화메틸마그네슘 (THF 중 3 M) (13.1 mL, 39.4 mmol, THF 중 1 M) 및 메틸 염화탄산 (3.61 mL, 46.7 mmol)으로부터 참조 화합물 4, 단계 2에 기술된 바와 같이 화합물을 제조하였다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (농도구배 0-15% EtOAc를 이용한 바이오타지 헵탄:EtOAc; 스냅 360 컬럼)로 정제하여 담황색 오일로서 표제 화합물을 수득하였다 (2.48 g, 23 %): 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ-0.03 (d, 6H), 0.66 - 1.04 (m, 12H), 1.84 (m, 1H), 2.20 - 2.70 (m, 1H), 3.62 (s, 3H), 4.31 (m, 1H), 5.63 (m, 1H), 5.83 (m, 1H), 6.50 (m, 1H). MS m/z 298 (M+H)+.
단계 2: 메틸 4-(( tert - 부틸디메틸실릴옥시 ) 메틸 )-2- 메틸피페리딘 -1- 카복실레이트
메틸 4-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)-2-메틸피리딘-1(2H)-카복실레이트로부터 참조 화합물 4, 단계 3에 기술된 바와 같이 화합물을 제조하여 표제 화합물을 얻었다. MS m/z 302 (M+H)+.
단계 3: 메틸 4-( 히드록시메틸 )-2- 메틸피페리딘 -1- 카복실레이트
메틸 4-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)-2-메틸피페리딘-1-카복실레이트 및 TBAF (10.65 mL, 10.65 mmol, THF 중 1 M)로부터, 참조 화합물 4, 단계 4 에 기술된 바와 같이 화합물을 제조하였다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (바이오타지 헵탄 중 40%-90% 농도구배 EtOAc, 340 스냅 컬럼)로 정제하여 표제 화합물을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ0.95 - 1.42 (m, 3H), 1.68 - 1.95 (m, 3H), 3.08 (m, 1H), 3.39 - 3.53 (m, 2H), 3.61 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.71 - 3.87 (m, 1H), 3.87 - 4.08 (m, 1H), 4.30 - 4.62 (m, 1H).
단계 4: 1-( 메톡시카보닐 )-2- 메틸피페리딘 -4- 카복실산
메틸 4-(히드록시메틸)-2-메틸피페리딘-1-카복실레이트, 과요오드산나트륨 (3.53 g, 16.5 mmol) 및 염화루테늄(Ⅲ) (0.025 g, 0.12 mmol)으로부터, 참조 화합물 4, 단계 5에 기술된 바와 같이 화합물을 제조하여 표제 화합물을 얻었다. MS m/z 200 (M-H)-.
참조 화합물 7
1-( 메톡시카보닐 )-2-(2- 메틸 -2- 페닐프로필 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 4-(( tert - 부틸디메틸실릴옥시 ) 메틸 )-2-(2- 메틸 -2- 페닐프로필 )피리딘-1(2H)- 카복실레이트
참조 화합물 4, 단계 1에 기술된 바와 같이 제조된 4-(tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)피리딘, 염화(2-메틸-2-페닐프로필)마그네슘 (THF 중 0.5 M, 93 mL, 46.6 mmol) 및 메틸 염화탄산 (3.61 mL, 46.7 mmol)으로부터, 참조 화합물 4, 단계 2에 기술된 바와 같이 화합물을 제조하여 생성물을 수득하였다 (17.5 g). MS m/z 416 (M+H)+.
단계 2: 메틸 4-(( tert - 부틸디메틸실릴옥시 ) 메틸 )-2-(2- 메틸 -2- 페닐프로필 )-피페리딘-1- 카복실레이트
미정제 메틸 4-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)-2-(2-메틸-2-페닐프로필)피리딘-1(2H)-카복실레이트 (17.5 g)로부터, 참조 화합물 4, 단계 3에 기술된 바와 같이 화합물을 제조하여 표제 화합물을 얻었다 (16.5 g). MS m/z 420 (M+H)+.
단계 3: 메틸 4-( 히드록시메틸 )-2-(2- 메틸 -2- 페닐프로필 )피페리딘-1- 카복실레이트
미정제 메틸 4-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)-2-(2-메틸-2-페닐프로필)피페리딘-1-카복실레이트 (16.5 g) 및 TBAF (46.5 mL, 46.6 mmol, THF 중 1 M)로부터, 참조 화합물 4, 단계 4 에 기술된 바와 같이 화합물을 제조하였다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (바이오타지 헵탄 중 40-65% 농도구배 EtOAc, 340 스냅 컬럼, 러닝 2 회)로 정제하여 표제 화합물을 얻었다. MS m/z 306 (M+H)+.
단계 4: 1-( 메톡시카보닐 )-2-(2- 메틸 -2- 페닐프로필 )피페리딘-4- 카복실산
메틸 4-(히드록시메틸)-2-(2-메틸-2-페닐프로필)피페리딘-1-카복실레이트 (8.0 g, 26.2 mmol), 과요오드산나트륨 (16.8 g, 78.6 mmol) 및 염화루테늄(Ⅲ) (0.12 g, 0.58 mmol)으로부터, 참조 화합물 4, 단계 5에 기술된 바와 같이 화합물을 제조하여 표제 화합물을 수득하였다 (7.24 g, 87 %). MS m/z 318 (M-H)-.
참조 화합물 8
2-( 시클로헥실메틸 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 2- 벤질이소니코티네이트
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (4.29 g, 25 mmol)와 Pd(PPh3)4 (1.156 g, 1.00 mmol)를 THF (60 mL) 중에 용해시켜 황색 용액을 얻었다. 이후, 브롬화벤질아연(Ⅱ) (THF 중 0.5 M) (75 mL, 37.50 mmol)을 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 갈색 혼합물을 오일조 중에서 60℃로 18 시간 동안 가온하였다. 상기 반응 혼합물을 메탄올을 첨가해 반응을 중지시킨 후, 에틸 아세테이트로 희석시키고 포화 NH4Cl 및 물로 세척하였다. 상기 혼합된 유기층을 MgSO4로 건조시키고 증발시켰다. 잔류물을 바이오타지 [톰슨(Thompsson) 160 g 실리카, 용리액: 등용매 헵탄/에틸 아세테이트 9:1 (1 CV), 이후 선형 농도구배 9:1-75:25 (6 CV)]를 통해 정제하였다. 분획들을 포함하는 생성물을 증발시켜 메틸 2-벤질이소니코티네이트를 오렌지색 액체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ3.91 (s, 3H), 4.22 (s, 2H), 7.19 - 7.34 (m, 5H), 7.66 (dd, 1H), 7.69 (d, 1H), 8.70 (d, 1H).
단계 2: 메틸 2-( 시클로헥실메틸 )피페리딘-4- 카복실레이트
메틸 2-벤질이소니코티네이트 (1.29 g, 5.67 mmol)와 PtO2 (0.13 g, 0.57 mmol)를 아세트산 (50 mL)에 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 8 bar, 실온에서 3 일간 뷔치(Buchi) 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 메탄올 (100 mL)을 첨가하고 촉매를 여과로 제거하였다. 용매는 증발시켰다. 상기 미정제 생성물을 Na2CO3 (aq)와 에틸 아세테이트 사이에 구분시켜 놓았다. 상기 유기상을 분리하여 Na2SO4로 건조시키고, 셀라이트(Celite?)를 통해 여과하고 용매는 증발시켰다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ0.78 - 0.91 (m, 2H), 1.04 - 1.27 (m, 5H), 1.27 - 1.38 (m, 1H), 1.48 (ddd, 2H), 1.63 (dd, 5H), 1.80 - 1.93 (m, 2H), 2.36 (tt, 1H), 2.51 - 2.57 (m, 1H), 2.61 (td, 1H), 3.11 (ddd, 1H), 3.64 (s, 3H).
단계 3: 디메틸 2-( 시클로헥실메틸 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(시클로헥실메틸)피페리딘-4-카복실레이트 (1.79 g, 7.48 mmol), 메틸 염화탄산 (1.06 g, 11.2 mmol)과 DIPEA (1.93 g, 15.0 mmol)를 실온에서 디클로로메탄 (60 mL)에 첨가하고 2 시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 디에틸 에테르로 희석한 후 물로 세척하였다. 상기 유기상을 MgSO4로 건조시키고 셀라이트를 통해 여과시킨 후 용매는 증발시켰다. 미정제 생성물 2.2 g을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ0.71 - 0.97 (m, 2H), 1.02 - 1.28 (m, 5H), 1.38 (dt, 1H), 1.69 (ddd, 6H), 1.98 (ddd, 3H), 2.52 - 2.61 (m, 1H), 3.01 - 3.16 (m, 1H), 3.67 (s, 3H), 3.69 (s, 3H), 3.81 - 3.94 (m, 1H), 4.13 - 4.31 (m, 1H).
단계 4: 2-( 시클로헥실메틸 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(시클로헥실메틸)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (2.20 g, 7.40 mmol)를 THF (25 mL)와 물 (25 mL)에 용해시켰다. LiOH (0.266 g, 11.1 mmol)를 첨가하여 상기 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후 환류 하에 30 분간 가열하였다. 상기 반응 혼합물을 1 M KHSO4와 디에틸 에테르 사이에 구분시켜 놓았다. 상기 유기상을 건조시키고 (Na2SO4), 셀라이트를 통해 여과시킨 후 용매는 증발시켰다. 상기 미정제 생성물을 THF (25 mL)와 물 (25 mL) 중에 다시 용해시켰다. LiOH (0.23 g)를 반응 플라스크에 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 밤새 교반하였다. 반응을 위에서와 같이 후처리하여 생성물을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ0.85 (ddd, 2H), 1.19 (dddd, 5H), 1.38 - 1.48 (m, 1H), 1.61 (d, 4H), 1.72 (tt, 2H), 1.97 (qd, 3H), 2.56 - 2.65 (m, 1H), 3.02 - 3.14 (m, 1H), 3.67 (d, 3H), 3.88 (d, 1H), 4.22 (s, 1H).
참조 화합물 9
2-(3,4- 디플루오로페닐 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 2-(3,4- 디플루오로페닐 ) 이소니코티네이트
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (5 g, 29.14 mmol), 3,4-디플루오로페닐보론산 (5.06 g, 32.05 mmol), 탄산칼륨 (2.416 g, 17.48 mmol) 및 PdCl2(dppf) (1.066 g, 1.46 mmol)의 혼합물을 메탄올 (30 mL) 중에서 교반하고 단일 노드의 전자렌지용 반응기 중에서 100℃로 30 분간 가열하였다. 용매를 진공 속에서 증발시켰다. DCM (400 mL)과 8 % NaHCO3 (aq) (400 mL)를 첨가하고 흔들어서 상들을 분리시켰다. 상기 수상을 DCM (400 mL)으로 추출하였다. 상기 혼합된 유기상을 상 분리기로 건조시킨 후 진공 속에서 증발시켰다. 잔류물을 3개의 바이오타지 KP-SIL 100g 컬럼 상에서 자동화 섬광 크로마토그래피로 정제하였다. 헵탄 중 5 % EtOAc (2 CV) 이후에 헵탄 중 5 % 내지 20 %의 EtOAc (9 CV)의 농도구배를 이동상으로 사용하였다. 메틸 2-(3,4-디플루오로페닐)이소니코티네이트 (5.82 g, 80 %)를 백색 고체로 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ4.00 (s, 3H), 7.23 - 7.33 (m, 1H), 7.76 - 7.84 (m, 2H), 7.90 - 8.00 (m, 1H), 8.21 - 8.27 (m, 1H), 8.82 (dd, 1H).
단계 2: 메틸 2-(3,4- 디플루오로페닐 )피페리딘-4- 카복실레이트 히드로클로라이드
메틸 2-(3,4-디플루오로페닐)이소니코티네이트 (5.821 g, 23.36 mmol)를 염화수소 (MeOH 중 1.25 M) (37.4 mL, 46.72 mmol)에 용해시키고 실온에서 30 분간 교반하였다. 용매는 진공 속에서 증발시켰다. 잔류하는 HCl 염을 MeOH (20 mL)에 재용해시킨 후, 산화백금(Ⅳ) (0.159 g, 0.70 mmol)을 첨가하고 상기 반응 혼합물을 5 bar 및 실온에서 6 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 촉매를 여과하여 제거하고, MeOH로 세척한 후 이 여과물을 진공 속에서 증발시켜 메틸 2-(3,4-디플루오로페닐)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (6.10 g, 90 %)를 옅은 색의 고체로서 수득하였다. MS m/z 256 (M+H)+.
단계 3: 디메틸 2-(3,4- 디플루오로페닐 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(3,4-디플루오로페닐)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (6.1 g, 20.91 mmol)와 DIPEA (9.13 mL, 52.28 mmol)를 DCM (30 mL) 중에 용해시켰다. 메틸 클로로포르메이트 (1.944 mL, 25.09 mmol)를 첨가하고 상기 반응물을 실온에서 1.5 시간 동안 교반하였다. DCM (170 mL)을 첨가하였다. 상기 유기상을 0.1 M HCl (2 x 200 mL), 포화 NaHCO3 (200 mL)로 세척하고, 상 분리기로 건조 및 진공 속에서 증발시켜 디메틸 2-(3,4-디플루오로페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (6.58 g, 100 %)를 어두운 색의 오일로서 수득하였다. MS m/z 314 (M+H)+.
단계 4: 2-(3,4- 디플루오로페닐 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(3,4-디플루오로페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (6.578 g, 21.00 mmol)를 THF (40 mL)와 물 (0.800 mL)에 용해시켰다. 브롬화리튬 (14.59 g, 167.97 mmol)과 TEA (11.71 mL, 83.98 mmol)를 첨가하고 상기 반응물을 80℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고 일부 용매를 진공 속에서 증발시켰다. EtOAc (150 mL)와 물 (150 mL)을 첨가하고 흔들어서 상들을 분리시켰다. 상기 유기상을 물 (150 mL)로 추출하였다. 상기 혼합된 수상을 3 M HCl을 사용해 pH 1로 산성화하고 EtOAc (2x300 mL)로 추출하였다. 상기 혼합된 유기상을 Na2SO4로 건조하고 여과한 후, 진공 속에서 증발시켜 2-(3,4-디플루오로페닐)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (5.66 g, 90 %)을 담갈색의 오일로서 수득하였다. MS m/z 298 (M+H)+.
참조 화합물 10
2-(4- 플루오로페닐 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 2-(4- 플루오로페닐 ) 이소니코티네이트 히드로클로라이드
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (4.5 g, 26.23 mmol), 4-플루오로페닐보론산 (4.51 g, 32.26 mmol), 탄산칼륨 (2.247 g, 16.26 mmol) 및 PdCl2(dppf) (0.380 g, 0.52 mmol)를 두 개의 20 mL의 전자렌지용 유리병의 메탄올 (30 mL) 중에 혼합하였다. 상기 유리병들의 뚜껑을 덮고 단일 노드 전자렌지용 반응기 중에서 100℃로 10 분간 가열하였다. 고체를 여과로 제거하고 여과물을 증발시켜 어두운 색의 슬러리를 수득하였다. 상기 잔류물에 HCl (메탄올 중 1.25 M, 100 mL)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 45℃에서 4 시간 동안 교반한 후, 농축시켰다. 포화 NaHCO3 (100 mL)를 빙냉 하에 첨가하고 DCM (3 x 100 mL)으로 추출하였다. 상기 혼합된 유기상을 식염수로 세척하고, 상 분리기 통과 후 증발시켜 갈색 고체를 수득하였다. 상기 미정제 생성물을 MTBE (180 mL) 중에 용해시킨 후 일부 고체들을 여과로 제거하였다. 얼음물로 냉각시키고, 염화수소 (디옥산 중 4 M, 10 mL, 40 mmol)를 교반 중에 적가하여 현탁액을 형성시켰다. 상기 현탁액을 0℃에서 10 분간 교반하였다. 고체를 여과에 의해 수집하고 MTBE로 세척하여 메틸 2-(4-플루오로페닐)이소니코티네이트 히드로클로라이드 (6.4 g, 91 %)를 베이지색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ4.07 (s, 3H), 7.37 - 7.51 (m, 2H), 8.02 - 8.13 (m, 2H), 8.37 (dd, 1H), 8.71 (d, 1H), 8.97 (dd, 1H). MS m/z 232 (M+H)+
단계 2: 메틸 2-(4- 플루오로페닐 )피페리딘-4- 카복실레이트
메틸 2-(4-플루오로페닐)이소니코티네이트 히드로클로라이드 (6.4 g, 23.91 mmol)를 메탄올 (100 mL) 중에 용해시킨 후, 산화백금(Ⅳ) (0.271 g, 1.20 mmol)을 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 5 bar, 실온에서 21 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 촉매를 여과하여 제거하고, MeOH로 세척한 후 여과물을 증발시켰다. DCM과 포화 NaHCO3를 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 유기층을 식염수로 세척하고, 상 분리기 통과 후 증발시켜 갈색 오일을 수득하였다. 잔류물을 바이오타지? KP-SIL 100g 컬럼 상에서 자동화 섬광 크로마토그래피로 정제하였다. DCM 중 0 % 내지 5%의 MeOH의 농도구배 (1 % Et3N 포함) (10 CV)를 이동상으로 사용한 후, DCM 중 5%의 MeOH (1% Et3N 포함)로 등용매 용리하였다. 메틸 2-(4-플루오로페닐)피페리딘-4-카복실레이트 (4.2 g, 74 %)를 분리하였다. MS m/z 238 (M+H)+
단계 3: 디메틸 2-(4- 플루오로페닐 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(4-플루오로페닐)피페리딘-4-카복실레이트 (7.4 g, 31.19 mmol)를 DCM (100 mL) 중에 용해시키고 DIPEA (6.52 mL, 37.43 mmol)를 첨가한 후 메틸 클로로포르메이트 (2.95 mL, 37.43 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 상기 용액을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 0.1 M HCl 및 포화 NaHCO3로 세척하였다. 상기 유기상은 상 분리기 통과 후 증발시켜 디메틸 2-(4-플루오로페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (8.07 g, 97 %)를 갈색 오일로서 수득하였다. MS m/z 296 (M+H)+
단계 4: 2-(4- 플루오로페닐 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(4-플루오로페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (8.97 g, 30.38 mmol)를 아세토니트릴 (60 mL)과 물 (1.200 mL)에 용해시킨 후, 브롬화리튬 (21.10 g, 243.00 mmol)을 첨가하였다. 트리에틸아민 (16.84 mL, 121.50 mmol)을 첨가하여 생성된 갈색 현탁액을 환류 하에 1 시간 동안 가열하였다. 물 (120 mL)과 MTBE (120 mL)를 첨가하였다. 상기 유기상을 물 (2 x 25 mL)로 추출하였다. 6 M HCl로 모아진(pool) 수성층을 pH 1로 산성화하고 MTBE (2 x 150 mL)로 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 물 (25 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시킨 후 증발시켰다. 2-(4-플루오로페닐)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (8.4 g, 98 %)을 갈색 오일로서 분리하였다.
참조 화합물 11
2-(4- 클로로페닐 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 2-(4- 클로로페닐 ) 이소니코티네이트 히드로클로라이드
메틸 2-브로모이소니코티네이트 (3.39 g, 15.69 mmol), 4-클로로페닐보론산 (3.68 g, 23.54 mmol), 탄산칼륨 (3.25 g, 23.54 mmol) 및 PdCl2(dppf) (0.341 g, 0.47 mmol)를 별도의 두 20 mL의 전자렌지용 유리병의 메탄올 (30 mL)중에 혼합하였다. 상기 유리병들의 뚜껑을 덮고 단일 노드 전자렌지용 반응기 중에서 100℃로 10 분간 가열하였다. 물과 DCM을 첨가하고 상들을 분리하였다. 상기 수상 (pH 9)을 DCM으로 추출하고, 상기 혼합된 유기상을 식염수로 세척하여 상 분리기 통과 후 증발시켜서 오렌지색 고체를 수득하였다. 상기 고체를 MTBE에 용해시킨 후, HCl (디옥산 중 4 M)을 첨가하여 미정제 메틸 2-(4-클로로페닐)이소니코티네이트 히드로클로라이드를 수득하였다 (4.3 g). MS m/z 248 (M+H)+
단계 2: 메틸 2-(4- 클로로페닐 )피페리딘-4- 카복실레이트
메틸 2-(4-클로로페닐)이소니코티네이트 히드로클로라이드 (4.46 g, 15.69 mmol)를 MeOH (40 mL)에 용해시킨 후 산화백금(Ⅳ) (0.356 g, 1.57 mmol)을 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 실온 및 5 bar에서 1 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 촉매를 여과하여 제거하고 MeOH로 세척한 후, 용출액을 증발시켜 갈색 고체를 수득하였다. 상기 고체를 DCM에 용해시킨 후 1 M K2CO3 및 식염수로 세척하였다. 상기 유기층을 상 분리기를 통해 건조한 후 증발시켰다. 잔류물을 DCM 중에 용해시키고 SCX-2 양이온 교환 컬럼 (4x10 g 컬럼) 상에 첨가하였다. 각 컬럼을 DCM, MeOH로 세척한 후, NH3/MeOH로 용리시켰다 (각각 1 CV). 상기 NH3/MeOH 층을 증발시켜 메틸 2-(4-클로로페닐)피페리딘-4-카복실레이트 (3.13 g, 79 %)를 수득하였다. MS m/z 254 (M+H)+
단계 3: 디메틸 2-(4- 클로로페닐 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(4-클로로페닐)피페리딘-4-카복실레이트 (3.13 g, 12.34 mmol)를 DCM (50 mL) 중에 용해시킨 후, DIPEA (5.39 mL, 30.84 mmol)를 첨가하였다. 메틸 염화탄산 (1.360 mL, 17.27 mmol)을 상기 용액에 적가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 0.1 M HCl (2x100 mL) 및 포화 NaHCO3 (100 mL)로 세척한 후, 상 분리기를 통해 건조한 후 증발시켜 디메틸 2-(4-클로로페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (3.97 g, 정량 분석)를 오렌지색 오일로서 수득하였다. MS m/z 312 (M+H)+
단계 4: 2-(4- 클로로페닐 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(4-클로로페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (3.97 g, 12.73 mmol)를 아세토니트릴 (55 mL)과 물 (1.1 mL)에 용해시킨 후, 브롬화리튬 (8.85 g, 101.87 mmol)을 첨가하였다. Et3N (7.10 mL, 50.94 mmol)을 첨가하여 생성된 황색 현탁액을 환류로 2 시간 동안 가열하였다. 물 (100 mL)과 MTBE (150 mL)를 첨가하였다. 상기 상들을 분리한 후 상기 유기층을 물 (2x)로 추출하였다. 모아진 수층을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화하고 MTBE (2x)로 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 Na2SO4로 건조한 후, 여과 및 증발시켜 2-(4-클로로페닐)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (3.49 g, 92 %)을 황색 반고체로서 수득하였다. MS m/z 298 (M+H)+
참조 화합물 12
1-( 메톡시카보닐 )-2-(3-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 2-(3-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 ) 이소니코티네이트
메틸 2-브로모이소니코티네이트 (2.71 g, 12.57 mmol), 3-(트리플루오로메틸)페닐보론산 (3.58 g, 18.85 mmol), 탄산칼륨 (2.61 g, 18.85 mmol) 및 PdCl2(dppf) (0.162 g, 0.25 mmol)를 두 개의 20 mL의 전자렌지용 유리병의 메탄올 (30 mL) 중에 혼합하였다. 상기 유리병들의 뚜껑을 덮고 단일 노드 전자렌지용 반응기 중에서 100℃로 10 분간 가열하였다. DCM과 물을 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 수상 (pH 9)을 DCM으로 추출한 후, 상기 혼합된 유기상을 식염수로 세척하여 상 분리기 통과 후 증발시켜 갈색 고체를 수득하였다. 잔류물을 DCM 중에 용해시킨 후 SCX-2 양이온 교환 컬럼 상에 첨가하였다. 상기 컬럼을 DCM, MeOH로 세척한 후, NH3/MeOH로 용리시켰다 (각각 1 CV). 상기 NH3/MeOH 층을 증발시켜 메틸 2-(3-(트리플루오로메틸)페닐)이소니코티네이트 (2.6 g, 73 %)를 수득하였다. MS m/z 282 (M+H)+
단계 2: 메틸 2-(3-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4- 카복실레이트
메틸 2-(3-(트리플루오로메틸)페닐)이소니코티네이트 (2.6 g, 9.25 mmol)를 아세트산 (40 mL)에 용해시킨 후 산화백금(Ⅳ) (0.210 g, 0.92 mmol)을 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 실온 및 5 bar에서 3 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 촉매를 여과하여 제거한 후, MeOH로 세척하고 용출액을 증발시켰다. DCM 및 1 M K2CO3를 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 유기층을 식염수로 세척하고, 상 분리기 통과 후 증발시켜 메틸 2-(3-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-카복실레이트 (1.4 g, 52 %)를 담갈색 오일로서 수득하였다. MS m/z 288 (M+H)+
단계 3: 디메틸 2-(3-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(3-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-카복실레이트 (1.4 g, 4.87 mmol)를 DCM (50 mL) 중에 용해시킨 후, DIPEA (2.128 mL, 12.18 mmol)를 첨가하였다. 메틸 클로로포르메이트 (0.537 mL, 6.82 mmol)를 상기 용액에 적가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 4 시간 동안 교반한 후, 0.1 M HCl (100 mL) 및 포화 NaHCO3 (100 mL)로 세척하고, 상 분리기를 통해 건조한 후 증발시켜 디메틸 2-(3-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (1.7 g, 정량 분석)를 오렌지색 오일로서 수득하였다. MS m/z 346 (M+H)+
단계 4: 1-( 메톡시카보닐 )-2-(3-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(3-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (1.7 g, 4.92 mmol)를 아세토니트릴 (22 mL)과 물 (0.440 mL)에 용해시킨 후, 브롬화리튬 (3.42 g, 39.38 mmol)을 첨가하였다. Et3N (2.74 mL, 19.69 mmol)을 첨가하여 생성된 황색 현탁액을 환류 하에 2 시간 동안 가열하였다. 물 (50 mL)과 MTBE (150 mL)를 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 상기 유기층을 물로 추출하였다 (2 회). 모아진 수층을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화하고 MTBE로 추출하였다 (2 회). 상기 혼합된 유기층을 Na2SO4로 건조하여 여과한 후 증발시켜 1-(메톡시카보닐)-2-(3-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-카복실산 (1.48 g, 91 %)을 담황색 반고체로서 수득하였다. MS m/z 332 (M+H)+
참조 화합물 13
1-( 메톡시카보닐 )-2-(4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 2-(4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 ) 이소니코티네이트
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (5 g, 29.14 mmol), 4-(트리플루오로메틸)페닐보론산 (8.30 g, 43.71 mmol), 탄산칼륨 (6.04 g, 43.71 mmol) 및 PdCl2(dppf) (0.633 g, 0.87 mmol)를 두 개의 20 mL의 전자렌지용 유리병의 메탄올 (30 mL) 중에서 혼합하였다. 두 방울의 물을 하나의 유리병에 첨가한 후, 상기 유리병들의 뚜껑을 덮고 단일 노드 전자렌지용 반응기 중에서 100℃로 10 분간 가열하였다. 고체를 여과로 제거하고 여과물을 증발시켜 어두운 색의 슬러리를 수득하였다. DCM과 물을 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 수상 (pH 9)을 DCM으로 추출하여 상기 혼합된 유기상을 식염수로 세척하고, 상 분리기 통과 후 증발시켜 갈색 고체를 수득하였다. 상기 미정제 생성물을 MTBE (180 mL) 중에 용해시킨 후 고체를 여과하여 제거하였다. 염화수소 (디옥산 중 4 M, 7.29 mL, 29.14 mmol)를 교반 중에 적가하여 현탁액을 형성시켰다. 상기 현탁액을 실온에서 2.5 시간 동안 교반하였다. 고체를 여과에 의해 수집하고 MTBE로 세척하였다. MTBE와 포화 NaHCO3를 상기 고체에 첨가하고, 상기 유기상을 건조 (Na2SO4), 여과 및 증발시켜 메틸 2-(4-(트리플루오로메틸)페닐)이소니코티네이트 (5.75 g, 70 %)를 베이지색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ4.00 (s, 3H), 7.75 (d, 2H), 7.84 (dd, 1H), 8.18 (d, 2H), 8.33 (s, 1H), 8.87 (dd, 1H). MS m/z 282 (M+H)+
단계 2: 메틸 2-(4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4- 카복실레이트
메틸 2-(4-(트리플루오로메틸)페닐)이소니코티네이트 (4.985 g, 17.73 mmol)를 아세트산 (45 mL) 중에 용해시키고 산화백금(Ⅳ) (0.232 g, 1.02 mmol)을 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 실온 및 5 bar에서 5 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 산화백금(Ⅳ) (0.116 g, 0.51 mmol)을 더 첨가하고 수소화를 5 bar에서 1 시간 동안 지속하였다. 촉매를 여과하여 제거한 후 MeOH로 세척하고 용출액을 증발시켰다. DCM 및 10 % K2CO3를 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 유기층을 식염수로 세척하고, 상 분리기 통과 후 증발시켜 메틸 2-(4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-카복실레이트 (5.04 g, 99 %)를 갈색 오일로서 수득하였다. MS m/z 288 (M+H)+
단계 3: 디메틸 2-(4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-카복실레이트 (4.973 g, 17.31 mmol)를 DCM (100 mL) 중에 용해시키고 DIPEA (3.62 mL, 20.77 mmol)를 첨가한 후 메틸 염화탄산 (1.636 mL, 20.77 mmol)을 첨가하였다. 상기 용액을 실온에서 1 시간 45 분 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 0.1 M HCl과 포화 NaHCO3으로 세척하였다. 상기 유기상은 상 분리기 통과 후 증발시켜 미정제 디메틸 2-(4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (6.05 g, 101 %)를 갈색 오일로서 수득하였다. MS m/z 346 (M+H)+
단계 4: 1-( 메톡시카보닐 )-2-(4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (5.996 g, 17.36 mmol)를 아세토니트릴 (60 mL)과 물 (1.200 mL)에 용해시킨 후, 브롬화리튬 (12.06 g, 138.91 mmol)을 첨가하였다. 트리에틸아민 (9.63 mL, 69.46 mmol)을 첨가하고 생성된 갈색 현탁액을 환류 하에 1 시간 동안 가열하였다. 물과 MTBE를 첨가하였다. 상기 유기상을 물로 추출하였다 (x2). 상기 혼합된 수층을 3.8 M aq HCl을 사용하여 pH 1로 산성화한 후, MTBE로 추출하였다 (x2). 상기 혼합된 유기층을 물로 세척한 후 증발시켰다. 미량의 물을 MeCN에 의해 공비 제거하였다. 1-(메톡시카보닐)-2-(4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-카복실산 (5.71 g, 99 %)을 갈색 오일로서 분리하였다. MS m/z 332 (M+H)+
참조 화합물 14
2-(3- tert - 부틸페닐 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 2-(3- tert - 부틸페닐 )-4,4,5,5- 테트라메틸 -1,3,2- 디옥사보롤란
1-브로모-3-tert-부틸벤젠 (4.48 g, 21 mmol)을 DMSO (150 mL)에 용해시킨 후, 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-비(1,3,2-디옥사보롤란) (5.87 g, 23.10 mmol), 아세트산 칼륨 (6.18 g, 63.00 mmol) 및 Pd(PPh3)4 (1.213 g, 1.05 mmol)을 첨가하였다. 상기 생성된 갈색 현탁액을 질소 하에서 80℃로 가열하였다. 9 시간 후, 물과 디에틸 에테르를 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 유기상을 증발시킨 후 물을 MeCN에 의해 공비 제거하였다. 잔류물을 바이오타지를 통해 2 회의 러닝 (헵탄 중 0 => 20 % EtOAc, 5 CV; 바이오타지? KP-SIL 340 g 컬럼)으로 정제하여 황색 오일을 수득하였다. 바이오타지를 통해 다시 정제하였다 (헵탄 중 0 => 20 % EtOAc, 8 CV; 바이오타지? KP-SIL 340 g 컬럼). 2-(3-tert-부틸페닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (3.39 g, 62 %)을 황색 오일로서 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.32 (s, 9H), 1.33 (s, 12H), 7.29 (t, 1H), 7.47 - 7.50 (m, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.81 (s, 1H).
단계 2: 메틸 2-(3- tert - 부틸페닐 ) 이소니코티네이트 히드로클로라이드
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (1.7 g, 9.91 mmol), 2-(3-tert-부틸페닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (3.393 g, 13.04 mmol), 탄산칼륨 (2.054 g, 14.86 mmol) 및 PdCl2(dppf) (0.215 g, 0.30 mmol)를 20 mL의 전자렌지용 유리병의 메탄올 (14 mL) 중에서 혼합하였다. 상기 유리병의 뚜껑을 덮고 단일 노드 전자렌지용 반응기 중에서 100℃로 10 분간 가열하였다. 상기 반응 혼합물을 메탄올에 현탁시키고, 고체들을 여과로 제거한 후 여과물을 증발시켜 어두운 색의 슬러리를 수득하였다. DCM과 물을 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 수상 (pH 9)을 DCM으로 추출한 후 상기 혼합된 유기상을 식염수로 세척하고, 상 분리기 통과 후 증발시켜 갈색 고체를 수득하였다. 상기 고체를 MTBE (100 mL)에 용해시키고 고체들을 여과하여 제거하였다. 염화수소(디옥산 중 4 M, 3.50 mL, 13.99 mmol)를 교반 중에 적가하여 현탁액을 형성시켰다. 상기 현탁액을 실온에서 3 일간 교반하였다. 고체를 여과에 의해 수집하고 MTBE로 세척하여 메틸 2-(3-tert-부틸페닐)이소니코티네이트 히드로클로라이드 (2.14 g, 70 %)를 담갈색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ1.41 (s, 9H), 4.07 (s, 3H), 7.62 (t, 1H), 7.77 - 7.80 (m, 2H), 8.00 - 8.02 (m, 1H), 8.37 - 8.40 (m, 1H), 8.69 - 8.71 (m, 1H), 8.94 - 8.97 (m, 1H).
단계 3: 메틸 2-(3- tert - 부틸페닐 )피페리딘-4- 카복실레이트
메틸 2-(3-tert-부틸페닐)이소니코티네이트 히드로클로라이드 (3 g, 9.81 mmol)를 메탄올 (100 mL)에 용해시킨 후 산화백금(Ⅳ) (0.111 g, 0.49 mmol)을 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 실온 및 5 bar에서 13 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 상기 혼합물에 산화백금(Ⅳ) (40 mg)을 첨가하고, 상기 혼합물을 실온 및 5 bar에서 1 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 촉매를 여과하여 제거한 후 MeOH로 세척하고 용출액을 증발시켰다. DCM과 포화 NaHCO3를 첨가하고 상들을 분리시켰다. 식염수로 세척하고, 상 분리기 통과 후 증발시켜 메틸 2-(3-tert-부틸페닐)피페리딘-4-카복실레이트 (2.56 g, 95 %)를 갈색 오일로서 수득하였다.
단계 4: 디메틸 2-(3- tert - 부틸페닐 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(3-tert-부틸페닐)피페리딘-4-카복실레이트 (2.56 g, 9.30 mmol)를 DCM (100 mL)에 용해시키고 DIPEA (2.429 mL, 13.94 mmol)를 첨가한 후 메틸 염화탄산 (0.9 mL, 11.43 mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 상기 용액을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 1 M aq HCl (pH 4), 이후에는 식염수, 포화 NaHCO3로 세척하였다. 상기 유기상은 상 분리기 통과 후 증발시켜 디메틸 2-(3-tert-부틸페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (3.17 g, 정량 분석)를 갈색 오일로서 수득하였다.
단계 5: 2-(3- tert - 부틸페닐 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(3-tert-부틸페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (3.17 g, 9.51 mmol)를 아세토니트릴 (60 mL)과 물 (1.200 mL)에 용해시킨 후, 브롬화리튬 (6.61 g, 76.06 mmol)을 한번에 첨가하였다. 트리에틸아민 (5.27 mL, 38.03 mmol)을 첨가하고 상기 생성된 갈색 현탁액을 환류 하에 1.5 시간 동안 가열하였다. 물 (120 mL)과 MTBE (120 mL)를 첨가하였다. 상기 유기상을 물 (2 x 25 mL)로 추출하였다. 모아진 수성층을 0.5 M HCl (30 mL)을 사용하여 pH 1로 산성화하고 MTBE (2 x 150 mL)로 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 물 (25 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조한 후 증발시켰다. 2-(3-tert-부틸페닐)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (2.73 g, 90 %)을 폼으로서 분리하였다.
참조 화합물 15
2-(4- tert - 부틸페닐 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 2-(4- tert - 부틸페닐 ) 이소니코티네이트 히드로클로라이드
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (7 g, 40.80 mmol), 4-tert-부틸페닐보론산 (10 g, 56.17 mmol), 탄산칼륨 (3.5 g, 25.32 mmol) 및 PdCl2(dppf) (0.9 g, 1.24 mmol)를 20 mL의 전자렌지용 유리병의 두 동일한 분율의 메탄올 (30 mL) 중에서 혼합하였다. 상기 유리병들의 뚜껑을 덮고 단일 노드 전자렌지용 반응기 중에서 100℃로 10 분간 가열하였다. 고체를 여과로 제거하고 여과물을 증발시켜 암적색의 슬러리를 수득하였다. DCM과 식염수를 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 수상 (pH 9)을 DCM으로 추출한 후, 상기 혼합된 유기상을 MgSO4로 건조한 후 증발시켰다. 상기 미정제 생성물을 MTBE (180 mL) 중에 용해시킨 후 고체를 여과하여 제거하였다. 염화수소 (디옥산 중 4 M, 10.20 mL, 40.80 mmol)를 교반 중에 적가하여 현탁액을 형성시켰다. 상기 현탁액을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 고체를 여과에 의해 수집하고 MTBE로 세척하였다. 메틸 2-(4-tert-부틸페닐)이소니코티네이트 히드로클로라이드 (9.6 g, 77 %)를 암갈색 고체로서 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, dmso) δ1.30 (s, 9H), 3.92 (s, 3H), 7.53 (d, 2H), 7.80 (dd, 1H), 8.04 (d, 2H), 8.29 (s, 1H), 8.85 (d, 1H), 9.86 (br, 1H). MS m/z 270 (M+H)+
단계 2: 메틸 2-(4- tert - 부틸페닐 )피페리딘-4- 카복실레이트 히드로클로라이드
MeOH (100 mL) 중의 메틸 2-(4-tert-부틸페닐)이소니코티네이트 히드로클로라이드 (9.6 g, 31.39 mmol)의 용액에 산화백금(Ⅳ) (0.713 g, 3.14 mmol)을 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 5 bar의 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 8 시간 후, 상기 반응 혼합물은 규조토 필터 곽을 통해 여과하고, 잔류물을 메탄올로 세척한 후, 여과물을 증발시켰다. 메틸 2-(4-tert-부틸페닐)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (9.66 g, 99 %)를 갈색 고체로서 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, dmso) δ1.26 (s, 9H), 1.88 - 2.15 (m, 4H), 2.82 - 2.92 (m, 1H), 3.03 - 3.16 (m, 1H), 3.27 - 3.38 (m, 1H), 3.61 (s, 3H), 4.22 - 4.29 (m, 1H), 7.42 - 7.53 (m, 4H), 9.43 (br, 2H). MS m/z 276 (M+H)+
단계 3: 디메틸 2-(4- tert - 부틸페닐 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
디클로로메탄 (100 mL) 중의 메틸 2-(4-tert-부틸페닐)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (9.66 g, 30.98 mmol)의 현탁액에 DIPEA (12 mL, 68.89 mmol)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 얼음조에서 냉각시키고 메틸 염화탄산 (2.8 mL, 35.56 mmol)을 5 분간에 걸쳐 적가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반하고 3.8 N HCl로 세척하였다. 상기 수성층은 DCM으로 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 MgSO4로 건조한 후 증발시켰다. 디메틸 2-(4-tert-부틸페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (10.6 g, 정량 분석)를 암갈색 오일로서 분리하였다. MS m/z 334 (M+H)+
단계 4: 2-(4- tert - 부틸페닐 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
MeCN (100 mL) 중의 디메틸 2-(4-tert-부틸페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (10.937 g, 32.80 mmol)의 용액에 브롬화리튬 (6.58 mL, 262.42 mmol), 트리에틸아민 (18.19 mL, 131.21 mmol) 및 물 (2 mL)을 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 환류 하에 3 시간 동안 가열한 후, 실온으로 냉각시켰다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 물에 용해시켰다. 상기 수성층을 MTBE로 세척한 후, 3.8 N HCl을 첨가하여 산성화하였다. 상기 수성층을 DCM으로 3회 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 MgSO4로 건조한 후 증발시켰다. 2-(4-tert-부틸페닐)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (9.5 g, 91%)을 담갈색 폼으로서 분리하였다. MS m/z 320 (M+H)+
참조 화합물 16
1-( 메톡시카보닐 )-2-(4-( 메틸설포닐 ) 페닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 2-(4-( 메틸설포닐 ) 페닐 ) 이소니코티네이트
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (5 g, 29.14 mmol), 4-(메틸설포닐)페닐보론산 (7.58 g, 37.88 mmol), 탄산칼륨 (2.416 g, 17.48 mmol) 및 PdCl2(dppf) (0.633 g, 0.87 mmol)를 메탄올 (30 mL) 중에 용해시키고 두 개의 전자렌지용 유리병에 나누어 담았다. 각 유리병을 단일 노드 전자렌지용 반응기 중에서 100℃로 35 분간 가열하였다. DCM (250 mL)과 물 (250 mL)을 첨가하고 흔들어서 상들을 분리시켰다. 상기 수상을 DCM (250 mL)으로 추출하였다. 상기 혼합된 유기상을 식염수 (500 mL)로 세척하고, 상 분리기로 건조시킨 후 진공 속에서 증발시켰다. 잔류물을 두 개의 바이오타지? KP-SIL 340g 컬럼 상에서 자동화 섬광 크로마토그래피로 정제하였다. 헵탄 중 20 - 70 % EtOAc (10 CV) 이후 헵탄 중 70 % EtOAc (5 CV)의 농도 구배를 이동상으로 사용하였다. 생성물을 파장 253 nm를 이용하여 수집하였다. 상기 생성물 분획들을 수집하고 진공 속에서 증발시켜 메틸 2-(4-(메틸설포닐)페닐)-이소니코티네이트 (5.66 g, 66.7 %)를 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ3.09 (s, 3H), 3.98 (s, 3H), 7.85 (dd, 1H), 8.05 (d, 2H), 8.25 (d, 2H), 8.34 (s, 1H), 8.86 (t, 1H).
단계 2: 메틸 2-(4-( 메틸설포닐 ) 페닐 )피페리딘-4- 카복실레이트 히드로클로라이드
메틸 2-(4-(메틸설포닐)페닐)이소니코티네이트 (5.663 g, 19.44 mmol)를 MeOH (20 mL) 중에 현탁시키고 염화수소 (MeOH 중 1.25 M, 40 mL, 50.00 mmol)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 20 분간 교반한 후, 진공 속에서 증발시켰다. HCl 염을 MeOH (100 mL) 중에 현탁시키고 산화백금(Ⅳ) (0.221 g, 0.97 mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온 및 5 bar에서 2 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 촉매를 여과하여 제거한 후 MeOH로 세척하였다. 여과물을 진공 속에서 증발시켜 메틸 2-(4-(메틸설포닐)페닐)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (5.84 g, 90 %)를 백색 고체로서 수득하였다. MS m/z 298 (M+H)+
단계 3: 디메틸 2-(4-( 메틸설포닐 ) 페닐 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(4-(메틸설포닐)페닐)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (5.2 g, 15.58 mmol) 및 DIPEA (6.78 mL, 38.94 mmol)를 DCM (40 mL)에 용해시키고 메틸 염화탄산 (1.472 mL, 18.69 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응물을 실온에서 50 분간 교반하였다. DCM (160 mL)을 첨가하였다. 상기 유기상을 0.1 M HCl (2x200 mL), 포화 NaHCO3 (200 mL)로 세척하고, 상 분리기로 건조시킨 후 진공 속에서 증발시켜 미정제 디메틸 2-(4-(메틸설포닐)페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (5.95 g, 108 %)를 수득하였다. MS m/z 356 (M+H)+
단계 4: 1-( 메톡시카보닐 )-2-(4-( 메틸설포닐 ) 페닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(4-(메틸설포닐)페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (5.952 g, 16.75 mmol)를 아세토니트릴 (50 mL)과 물 (1.000 mL)에 용해시킨 후, 브롬화리튬 (11.64 g, 133.98 mmol)을 첨가하였다. 트리에틸아민 (9.29 mL, 66.99 mmol)을 첨가하고 반응 혼합물 환류 하에 1.5 시간 동안 가열하였다. MTBE (150 mL) 와 물 (150 mL)을 첨가하고 흔들어서 상들을 분리시켰다. 상기 유기상을 물 (2x200 mL)로 추출하였다. 상기 혼합된 수상을 3 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화하고 MTBE (2x500 mL)로 추출하였다. 상기 혼합된 유기상을 Na2SO4로 건조하고 여과한 후 진공 속에서 증발시켜 1-(메톡시카보닐)-2-(4-(메틸설포닐)페닐)피페리딘-4-카복실산을 수득하였다 (4.76 g, 83 %). MS m/z 342 (M+H)+
참조 화합물 17
1-( 메톡시카보닐 )-2-(6-( 트리플루오로메틸 )피리딘-3-일)피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 6'-( 트리플루오로메틸 )-2,3'- 비피리딘 -4- 카복실레이트 히드로클로라이드
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (3 g, 17.48 mmol), 6-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일 보론산 (5.01 g, 26.23 mmol), 탄산칼륨 (1.450 g, 10.49 mmol) 및 PdCl2(dppf) (0.380 g, 0.52 mmol)를 별도의 두 20 mL의 전자렌지용 유리병의 메탄올 (30 mL) 중에서 혼합하였다. 상기 유리병들의 뚜껑을 덮고 단일 노드 전자렌지용 반응기 중에서 100℃로 10 분간 가열하였다. 물과 DCM을 첨가하고 상들을 분리하였다. 상기 수상 (pH 9)을 DCM으로 추출한 후, 상기 혼합된 유기상을 식염수로 세척하고, 상 분리기 통과 후 증발시켜 오렌지색 고체를 수득하였다. 상기 고체를 MTBE로 희석한 후, HCl (디옥산 중 4 M)을 첨가하여 현탁액을 만들었다. 상기 고체들을 여과로 수집하여 메틸 6'-(트리플루오로메틸)-2,3'-비피리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드를 수득하였다 (3.2 g, 57 %). MS m/z 283 (M+H)+
단계 2: 메틸 2-(6-( 트리플루오로메틸 )피리딘-3-일)피페리딘-4- 카복실레이트 히드로클로라이드
메틸 6'-(트리플루오로메틸)-2,3'-비피리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (2.5 g, 7.86 mmol)를 MeOH (20 mL)에 용해시키고 산화백금(Ⅳ) (0.036 g, 0.16 mmol)을 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 실온 및 5 bar에서 1 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 추가의 촉매를 첨가하고 상기 수소화를 1 시간 동안 지속하였다. 촉매를 여과하여 제거하고 MeOH로 세척한 후 용출액을 증발시켜 메틸 2-(6-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (2.2 g, 86 %)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS m/z 289 (M+H)+
단계 3: 디메틸 2-(6-( 트리플루오로메틸 )피리딘-3- 일 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(6-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (3 g, 9.24 mmol)를 DCM (50 mL)과 DIPEA (4.03 mL, 23.10 mmol)에 용해시키셨다. 메틸 염화탄산 (1.019 mL, 12.93 mmol)을 상기 용액에 적가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 10 분간 교반하였다. 상기 혼합물을 0.1 M HCl (2x100 mL) 및 포화 NaHCO3 (100 mL)로 세척한 후, 상 분리기를 통해 건조한 후 증발시켜 미정제 디메틸 2-(6-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (3 g, 94 %)를 암갈색 오일로서 수득하였다. MS m/z 347 (M+H)+
단계 4: 1-( 메톡시카보닐 )-2-(6-( 트리플루오로메틸 )피리딘-3-일)피페리딘-4-카 복실 산
미정제 디메틸 2-(6-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (2.9 g, 8.38 mmol)를 아세토니트릴 (35 mL)과 물 (0.700 mL)에 용해시킨 후, 브롬화리튬 (2.91 g, 33.50 mmol)을 첨가하였다. Et3N (2.334 mL, 16.75 mmol)을 첨가하고 생성된 황색 현탁액을 환류 하에 1 시간 동안 가열하였다. 물 (100 mL)과 MTBE (150 mL)을 첨가하였다. 상기 상들을 분리한 후 상기 유기층을 물로 추출하였다 (2 회). 모아진 수층을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화하고 MTBE 내로 추출하였다 (2 회). 상기 혼합된 유기층을 Na2SO4로 건조하고 여과한 후 증발시켜 미정제 1-(메톡시카보닐)-2-(6-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)피페리딘-4-카복실산 (2.5 g, 90 %)을 담황색 고체로서 수득하였다. MS m/z 333 (M+H)+
참조 화합물 18
2-(5- tert - 부틸티오펜 -2-일)-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 2-(5- tert - 부틸티오펜 -2-일) 이소니코티네이트
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (175 mg, 1.02 mmol), 2-(5-tert-부틸티오펜-2-일)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (300 mg, 1.13 mmol), K2CO3 (85 mg, 0.61 mmol) 및 PdCl2(dppf) (37.3 mg, 0.05 mmol)를 메탄올 (2 mL) 중에서 교반하고 단일 노드 전자렌지용 반응기 중에서 100℃로 30 분간 가열하였다. DCM (50 mL)과 물 (50mL)을 첨가하고 흔들어서 상들을 분리시켰다. 상기 수상을 DCM (50 mL)으로 추출하였다. 상기 혼합된 유기상을 상 분리기로 건조시킨 후 진공 속에서 증발시켰다. 잔류물을 바이오타지? KP-SIL 50g 컬럼 상에서 자동화 섬광 크로마토그래피로 정제하였다. 헵탄 중 5 % EtOAc (2 CV) 이후 헵탄 중 5 % 내지 20 %의 EtOAc (9 CV)의 농도구배를 이동상으로 사용하였다. 생성물을 파장 295 nm를 사용하여 수집하였다. 상기 생성물 분획들을 수집하고 진공 속에서 증발시켜 메틸 2-(5-tert-부틸티오펜-2-일)이소니코티네이트 (213 mg, 76 %)를 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.41 (s, 9H), 3.96 (s, 3H), 6.85 (d, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.61 (d, 1H), 8.13 (s, 1H), 8.64 (d, 1H). MS m/z 276 (M+H)+
단계 2: 메틸 2-(5- tert - 부틸티오펜 -2-일)피페리딘-4- 카복실레이트 히드로클로라이드
메틸 2-(5-tert-부틸티오펜-2-일)이소니코티네이트 (2.02 g, 7.34 mmol)를 염화수소 (MeOH 중 1.25 M, 11.74 mL, 14.67 mmol)에 용해시키고, 실온에서 30 분간 교반하였다. 용매를 진공 속에서 증발시켰다. 잔류물을 MeOH (20 mL)에 용해시키고, 산화백금(Ⅳ) (0.050 g, 0.22 mmol)을 첨가한 후 상기 반응 혼합물을 5 bar 및 실온에서 3 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 추가의 산화백금(Ⅳ) (0.050 g, 0.22 mmol)을 첨가하고 상기 수소화를 3 시간 동안 지속하였다. 상기 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, MeOH로 세척한 후 여과물을 진공 속에서 증발시켰다. 잔류물을 MeOH (15 mL) 중에 재용해시키고 산화백금(Ⅳ) (0.167 g, 0.73 mmol)을 첨가하였다. 수소화를 3 시간 동안 지속하였다. 추가의 산화백금(Ⅳ) (0.167 g, 0.73 mmol)을 첨가하고 상기 수소화를 2 시간 동안 지속하였다. 상기 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, MeOH로 세척한 후 이 여과물을 진공 속에서 증발시켜 메틸 2-(5-tert-부틸티오펜-2-일)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (2.360 g, 101 %)를 검은색 오일로서 수득하였다. MS m/z 282 (M+H)+
단계 3: 디메틸 2-(5- tert - 부틸티오펜 -2- 일 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(5-tert-부틸티오펜-2-일)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (2.36 g, 7.42 mmol)와 DIPEA (3.24 mL, 18.56 mmol)를 DCM (30 mL) 중에 용해시켰다. 메틸 클로로포르메이트 (0.690 mL, 8.91 mmol)를 첨가하고 상기 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. DCM (170 mL)을 첨가하였다. 상기 유기상을 0.1 M HCl (2 x 200 mL), 포화 NaHCO3 (200 mL)로 세척하고, 상 분리기로 건조시킨 후 진공 속에서 증발시켜 디메틸 2-(5-tert-부틸티오펜-2-일)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (2.490 g, 99 %)를 어두운 색의 오일로서 수득하였다. MS m/z 340 (M+H)+
단계 4: 2-(5- tert - 부틸티오펜 -2-일)-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(5-tert-부틸티오펜-2-일)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (2.49 g, 7.34 mmol)를 아세토니트릴 (20 mL)에 용해시켰다. 물 (0.400 mL)과 브롬화리튬 (5.10 g, 58.68 mmol)을 첨가하였다. 5 분후, TEA (4.09 mL, 29.34 mmol)를 첨가하고 상기 반응물을 환류에서 1 시간 동안 가열하였다. MTBE (150 mL)와 물 (150 mL)을 첨가하고 흔들어서 상들을 분리시켰다. 상기 유기상을 물 (150 mL)로 추출하였다. 상기 혼합된 수상을 3 M HCl을 사용해 pH 1로 산성화하고 MTBE (2 x 300 mL)로 추출하였다. 상기 혼합된 유기상을 Na2SO4로 건조하고 여과한 후, 진공 속에서 증발시켜 2-(5-tert-부틸티오펜-2-일)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (1.125 g, 47.1 %)을 백색 폼으로서 수득하였다. MS m/z 326 (M+H)+
참조 화합물 19
2-(2,4- 디플루오로페닐 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 2-(2,4- 디플루오로페닐 ) 이소니코티네이트 히드로클로라이드
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (3 g, 17.48 mmol), 2,4-디플루오로페닐보론산 (4.14 g, 26.23 mmol), 탄산칼륨 (1.812 g, 13.11 mmol) 및 PdCl2(dppf) (0.380 g, 0.52 mmol)를 별도의 두 20 mL의 전자렌지용 유리병의 메탄올 (30 mL) 중에서 혼합하였다. 상기 유리병들의 뚜껑을 덮고 단일 노드 전자렌지용 반응기 중에서 100℃로 10 분간 가열하였다. 물과 DCM을 첨가하고 상들을 분리하였다. 상기 수상 (pH 9)을 DCM으로 추출한 후, 상기 혼합된 유기상을 식염수로 세척하여 상 분리기 통과 후 증발시켜 갈색 고체를 수득하였다. 상기 고체를 MTBE 중에서 용해시키고 15 분 동안 교반한 후 여과하였다. 오렌지색의 MTBE 층을 염화수소 (디옥산 중 4 M, 4.37 mL, 17.48 mmol)로 처리하고 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 상기 형성된 고체를 여과로 수집하였다. 메틸 2-(2,4-디플루오로페닐)이소니코티네이트 히드로클로라이드 (4.0 g, 80 %)를 옅은 오렌지색의 고체로서 분리하였다. MS m/z 250 (M+H)+
단계 2: 메틸 2-(2,4- 디플루오로페닐 )피페리딘-4- 카복실레이트 히드로클로라이드
메틸 2-(2,4-디플루오로페닐)이소니코티네이트 히드로클로라이드 (3.93 g, 13.76 mmol)를 MeOH (40 mL) 중에 용해시키고 산화백금(Ⅳ) (0.312 g, 1.38 mmol)을 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 실온 및 5 bar에서 2 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 촉매를 여과하여 제거한 후, MeOH로 세척하고 용출액을 증발시켜 메틸 2-(2,4-디플루오로페닐)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (2.34 g, 58 %)를 담황색 고체로서 수득하였다. MS m/z 256 (M+H)+
단계 3: 디메틸 2-(2,4- 디플루오로페닐 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(2,4-디플루오로페닐)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (2.34 g, 8.02 mmol)를 DCM (50 mL) 중에 용해시킨 후, DIPEA (3.50 mL, 20.05 mmol)를 첨가하였다. 메틸 염화탄산 (0.884 mL, 11.23 mmol)을 상기 용액에 적가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 4 시간 동안 교반한 후, 0.1 M HCl (100 mL) 및 포화 NaHCO3 (100 mL)로 세척한 후, 상 분리기를 통해 건조한 후 증발시켜 디메틸 2-(2,4-디플루오로페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (2.38 g, 95 %)를 오렌지색 오일로서 수득하였다.
단계 4: 2-(2,4- 디플루오로페닐 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(2,4-디플루오로페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (2.38 g, 7.60 mmol)를 아세토니트릴 (35 mL)과 물 (0.700 mL)에 용해시킨 후, 브롬화리튬 (5.28 g, 60.77 mmol)을 첨가하였다. Et3N (4.24 mL, 30.39 mmol)을 첨가하고 생성된 황색 현탁액을 환류 하에 2 시간 동안 가열하였다. 물 (50 mL)과 MTBE (150 mL)를 첨가하였다. 상기 상들을 분리한 후 상기 유기층을 물로 추출하였다 (2 회). 모아진 수층을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화하고 MTBE로 추출하였다 (2 회). 상기 혼합된 유기층을 Na2SO4로 건조하고 여과시킨 후 증발시켜 2-(2,4-디플루오로페닐)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (2.27, 정량 분석)을 담황색 반고체로서 수득하였다. MS m/z 300 (M+H)+
참조 화합물 20
2-(4- 클로로 -2- 플루오로페닐 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 2-(4- 클로로 -2- 플루오로페닐 ) 이소니코티네이트 히드로클로라이드
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (4 g, 23.31 mmol), 4-클로로-2-플루오로페닐보론산 (6.10 g, 34.97 mmol), 탄산칼륨 (2.416 g, 17.48 mmol) 및 PdCl2(dppf) (0.506 g, 0.70 mmol)를 별도의 두 20 mL의 전자렌지용 유리병의 메탄올 (30 mL) 중에서 혼합하였다. 상기 유리병들의 뚜껑을 덮고 단일 노드 전자렌지용 반응기 중에서 100℃로 10 분간 가열하였다. 물과 DCM을 첨가하고 상들을 분리하였다. 상기 수상 (pH 9)을 DCM으로 추출한 후, 상기 혼합된 유기상을 식염수로 세척하고 상 분리기 통과 후 증발시켜 어두운 오렌지색의 고체를 수득하였다. 상기 고체를 MTBE 중에서 용해시키고 15 분 동안 교반한 후, 여과하였다. 오렌지색의 MTBE 층을 염화수소 (디옥산 중 4 M, 5.83 mL, 23.31 mmol)로 처리하고, 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 상기 침전물을 여과로 수집하여 메틸 2-(4-클로로-2-플루오로페닐)이소니코티네이트 히드로클로라이드 (7.22 g, 정량 분석)를 옅은 오렌지색의 고체로서 수득하였다. MS m/z 266 (M+H)+
단계 2: 메틸 2-(4- 클로로 -2- 플루오로페닐 )피페리딘-4- 카복실레이트
메틸 2-(4-클로로-2-플루오로페닐)이소니코티네이트 히드로클로라이드 (7.26 g, 24.03 mmol)를 MeOH (100 mL) 중에 용해시키고 산화백금(Ⅳ) (0.546 g, 2.40 mmol)을 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 실온 및 5 bar에서 1 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 촉매를 여과하여 제거한 후 MeOH로 세척하고 용출액을 증발시켜 메틸 2-(4-클로로-2-플루오로페닐)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (7.45 g, 정량 분석)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS m/z 272 (M+H)+
단계 3: 디메틸 2-(4- 클로로 -2- 플루오로페닐 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(4-클로로-2-플루오로페닐)피페리딘-4-카복실레이트 (7.45 g, 27.42 mmol)를 DCM (120 mL)에 용해시킨 후 DIPEA (11.97 mL, 68.55 mmol)를 첨가하였다. 메틸 염화탄산 (3.02 mL, 38.39 mmol)을 상기 용액에 적가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 0.1 M HCl (2x100 mL) 및 포화 NaHCO3 (100 mL)로 세척한 후, 상 분리기를 통해 건조한 후 증발시켜 디메틸 2-(4-클로로-2-플루오로페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (7.77 g, 86 %)를 오렌지색 오일로서 수득하였다. MS m/z 330 (M+H)+
단계 4: 2-(4- 클로로 -2- 플루오로페닐 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(4-클로로-2-플루오로페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (7.77 g, 23.56 mmol)를 아세토니트릴 (100 mL)과 물 (2.000 mL)에 용해시킨 후, 브롬화리튬 (16.37 g, 188.51 mmol)을 첨가하였다. Et3N (13.14 mL, 94.25 mmol)을 첨가하고 생성된 황색 현탁액을 환류 하에 2 시간 동안 가열하였다. 물 (200 mL)과 MTBE (300 mL)를 첨가하였다. 상기 상들을 분리한 후 상기 유기층을 물로 추출하였다 (2 회). 모아진 수층을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화하고 MTBE로 추출하였다 (2 회). 상기 혼합된 유기층을 MgSO4로 건조하고 여과한 후 증발시켜 2-(4-클로로-2-플루오로페닐)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (7.28 g, 98 %)을 황색 반고체로서 수득하였다. MS m/z 316 (M+H)+
참조 화합물 21
2-(2- 클로로 -4- 플루오로페닐 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 2-(2- 클로로 -4- 플루오로페닐 ) 이소니코티네이트 히드로클로라이드
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (3.5 g, 20.40 mmol), 2-클로로-4-플루오로페닐보론산 (3.91 g, 22.44 mmol), 탄산칼륨 (2.114 g, 15.30 mmol) 및 PdCl2(dppf) (0.443 g, 0.61 mmol)를 별도의 두 20 mL의 전자렌지용 유리병의 메탄올 (30 mL) 중에서 혼합하였다. 상기 유리병들의 뚜껑을 덮고 단일 노드 전자렌지용 반응기 중에서 100℃로 10 분간 가열하였다. 물과 DCM을 첨가하고 상들을 분리하였다. 상기 수상 (pH 9)을 DCM으로 추출한 후, 상기 혼합된 유기상을 식염수로 세척하고, 상 분리기 통과 후 증발시켜 암갈색 고체를 수득하였다. 상기 고체를 MTBE 중에서 용해시키고 15 분 동안 교반한 후, 여과하였다. 상기 MTBE 층을 염화수소 (디옥산 중 4 M, 5.10 mL, 20.40 mmol)로 처리하고 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 침천물을 여과로 수집하였다. 메틸 2-(2-클로로-4-플루오로페닐)이소니코티네이트 (2.350 g, 38.1 %)를 담황색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ4.13 (s, 3H), 7.24 - 7.33 (m, 1H), 7.36 (d, 1H), 7.82 - 8.03 (m, 1H), 8.34 (s, br., 1H), 8.56 (s, br., 1H), 9.08 (s, br., 1H). MS m/z 266 (M+H)+
단계 2: 메틸 2-(2- 클로로 -4- 플루오로페닐 )피페리딘-4- 카복실레이트 히드로클로라이드
메틸 2-(2-클로로-4-플루오로페닐)이소니코티네이트 히드로클로라이드 (2.35 g, 7.78 mmol)를 메탄올 (50 mL)에 용해시키고 산화백금(Ⅳ) (0.177 g, 0.78 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 5 bar 및 실온에서 9 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 촉매를 여과로 제거하고 용매는 증발시켰다. 잔류물을 메탄올 (50.0 mL)에 용해시키고 산화백금(Ⅳ) (144 mg, 0.63 mmol)을 첨가하였다. 수소화는 5 bar 및 실온에서 4 시간 동안 지속하였다. 촉매를 여과로 제거하고 용매는 증발시켰다. 미정제 메틸 2-(2-클로로-4-플루오로페닐)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (2.4 g, 100 %)를 황색 고체로서 수득하였다. MS m/z 272 (M+H)+
단계 3: 디메틸 2-(2- 클로로 -4- 플루오로페닐 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(2-클로로-4-플루오로페닐)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (2.4 g, 7.79 mmol)를 디클로로메탄 (50 mL) 중에 용해시켜 무색의 용액을 만들었다. DIPEA (3.39 mL, 19.47 mmol)와 메틸 염화탄산 (0.736 mL, 9.35 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 실온에서 14 시간 동안 교반하였다. 0.1 M HCl을 첨가하고 상기 수상을 DCM으로 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 상 분리기를 통해 여과하고 증발시켰다. 미정제 2-(2-클로로-4-플루오로페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (2.5 g, 97 %)를 황색 오일로서 수득하였다. MS m/z 330 (M+H)+
단계 4: 2-(2- 클로로 -4- 플루오로페닐 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(2-클로로-4-플루오로페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (2.5 g, 7.58 mmol)를 아세토니트릴 (50 mL)과 물 (1 mL)에 용해시킨 후, 브롬화리튬 (5.27 g, 60.65 mmol)을 첨가하였다. 트리에틸아민 (4.20 mL, 30.33 mmol)을 첨가하여 생성된 현탁액을 환류 하에 7 시간 동안 가열하였다. MTBE (170 mL)와 물 (90 mL)을 첨가하고, 상들을 분리한 후 상기 유기층을 물로 추출하였다. 상기 혼합된 수성층을 3.8 M HCl로 산성화하고 EtOAc로 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 Na2SO4로 건조하고 증발시켰다. 2-(2-클로로-4-플루오로페닐)-1-(메톡시카보닐)-피페리딘-4-카복실산 (2.130 g, 89 %)을 갈색 고체로서 분리하였다. MS m/z 316 (M+H)+
참조 화합물 22
2-(4- 클로로 -3- 플루오로페닐 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 2-(4- 클로로 -3- 플루오로페닐 )-4,4,5,5- 테트라메틸 -1,3,2- 디옥사보롤란
4-브로모-1-클로로-2-플루오로벤젠 (4 g, 19.10 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-비(1,3,2-디옥사보롤란) (5.63 g, 22.15 mmol), PdCl2(dppf) (0.691 g, 0.95 mmol) 및 아세트산 칼륨 (3.75 g, 38.20 mmol)을 DMSO (40 mL) 중에 현탁시키고 이를 80℃로 4 시간 동안 가열하였다. 상기 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. EtOAc (400 mL)로 희석한 후 셀라이트로 여과하였다. 상기 유기상을 물 (3x500 mL), 식염수 (500 mL)로 세척하고, 상 분리기로 건조시킨 후 진공 속에서 증발시켰다. 잔류물을 2 개의 바이오타지? KP-SIL 100g 컬럼 상에서 자동화 섬광 크로마토그래피로 정제하였다. 헵탄 중 0 % 내지 30 %의 EtOAc (15 CV)의 농도구배를 이동상으로 사용하였다. 생성물을 파장 258 nm를 사용하여 수집하였다. 2-(4-클로로-3-플루오로페닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (2.100 g, 42.9 %)을 무색의 오일로서 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.32 (s, 12H), 7.37 (t, 1H), 7.48 (d, 1H), 7.52 (d, 1H).
단계 2: 메틸 2-(4- 클로로 -3- 플루오로페닐 ) 이소니코티네이트
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (1.2 g, 6.99 mmol), 탄산칼륨 (0.580 g, 4.20 mmol) 및 PdCl2(dppf) (0.122 g, 0.17 mmol)를 전자렌지용 유리병 중에서 혼합하였다. MeOH (15 mL) 중에 용해된 2-(4-클로로-3-플루오로페닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (2.1 g, 8.19 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 단일 노드 전자렌지용 반응기 중에서 100℃로 15 분간 가열하였다. DCM (125 mL)과 물 (125 mL)을 첨가하고 흔들어서 상들을 분리시켰다. 상기 수상을 DCM (125 mL)으로 추출하였다. 상기 혼합된 유기상을 식염수 (250 mL)로 세척하고, 상 분리기로 건조시킨 후 진공 속에서 증발시켰다. 잔류물을 바이오타지? KP-SIL 100g 컬럼 상에서 자동화 섬광 크로마토그래피로 정제하였다. 헵탄 중 10 % EtOAc (3 CV) 이후 헵탄 중 10 내지 50 % EtOAc (12 CV)의 농도구배를 이동상으로 사용하였다. 상기 생성물을 파장 253 nm를 이용하여 수집하였다. 메틸 2-(4-클로로-3-플루오로페닐)이소니코티네이트 (1.473 g, 79 %)를 백색 고체로서 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ4.00 (s, 3H), 7.48 - 7.54 (m, 1H), 7.76 - 7.83 (m, 2H), 7.88 - 7.94 (m, 1H), 8.24 - 8.27 (m, 1H), 8.83 (dd, 1H).
단계 3: 메틸 2-(4- 클로로 -3- 플루오로페닐 )피페리딘-4- 카복실레이트 히드로클로라이드
메틸 2-(4-클로로-3-플루오로페닐)이소니코티네이트 (1.473 g, 5.54 mmol)를 MeOH (30 mL) 중에 현탁시키고 교반하는 중에 염화수소 (MeOH 중 1.25 M, 9.86 mL, 11.09 mmol)를 적가하였다. 용매를 15 분후에 증발시키고 HCl 염을 MeOH (10 mL) 중에 재용해시킨 후, 산화백금(Ⅳ) (0.063 g, 0.28 mmol)을 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 실온 및 5 bar에서 1.5 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 산화백금(Ⅳ) (0.038 g, 0.17 mmol)을 첨가하고 상기 수소화를 1 시간 동안 지속하였다. 촉매를 여과하여 제거한 후 MeOH로 세척하였다. 용매를 진공 속에서 증발시켜 메틸 2-(4-클로로-3-플루오로페닐)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (1.639 g, 96 %)를 백색 고체로서 수득하였다. MS m/z 272 (M+H)+
단계 4: 디메틸 2-(4- 클로로 -3- 플루오로페닐 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(4-클로로-3-플루오로페닐)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (1.639 g, 5.32 mmol)와 DIPEA (2.316 mL, 13.30 mmol)를 DCM (10 mL) 중에 용해시켰다. 메틸 염화탄산 (0.503 mL, 6.38 mmol)을 적가하고 상기 반응물을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 DCM (100 mL)으로 희석시키고 0.1 M HCl (2 x 75 mL), 포화 NaHCO3 (100 mL)로 세척한 후, 상 분리기를 통해 건조시키고 진공 속에서 증발시켜 디메틸 2-(4-클로로-3-플루오로페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (1.625 g, 93 %)를 무색의 오일로서 수득하였다. MS m/z 330 (M+H)+
단계 5: 2-(4- 클로로 -3- 플루오로페닐 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(4-클로로-3-플루오로페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (1.625 g, 4.93 mmol)를 아세토니트릴 (20 mL)과 물 (0.400 mL)에 용해시켰다. 브롬화리튬 (3.42 g, 39.42 mmol)을 첨가하였다. 이후, 트리에틸아민 (2.73 mL, 19.71 mmol)을 첨가하고 상기 반응물을 환류 하에 1.5 시간 동안 가열하였다. 물 (200 mL)과 MTBE (150 mL)를 첨가하고 흔들어서 상들을 분리시켰다. 상기 유기상을 물 (2x200 mL)로 추출하였다. 상기 혼합된 수상을 3 M HCl을 사용해 pH 1로 산성화한 후, MTBE (2x500 mL)로 추출하였다. 상기 혼합된 유기상을 Na2SO4로 건조시키고 여과한 후 진공 속에서 증발시켜 2-(4-클로로-3-플루오로페닐)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (1.430 g, 92 %)을 수득하였다. MS m/z 314 (M-H)-
참조 화합물 23
2-(2,4- 디클로로페닐 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 2-(2,4- 디클로로페닐 ) 이소니코티네이트
탄산칼륨 (1.812 g, 13.11 mmol), 메틸 2-클로로이소니코티네이트 (3 g, 17.48 mmol), 2,4-디클로로페닐보론산 (5.00 g, 26.23 mmol), PdCl2(dppf) (0.380 g, 0.52 mmol) 및 MeOH (30.6 mL)를 두 개의 20 mL의 전자렌지용 유리병에 나누어 담고 이를 단일 노드 전자렌지용 반응기 중에서 100℃로 35 분간 가열하였다. 상기 반응 혼합물을 물과 DCM으로 희석한 후, DCM으로 추출하고 증발시켰다. 280 nm에서 헵탄 중 5% EtOAc -> 30% EtOAc (15 CV)를 이용한 자동화 섬광 크로마토그래피로 정제하였다. 메틸 2-(2,4-디클로로페닐)이소니코티네이트 (2.3 g, 47 %)를 백색 고체로서 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ3.98 (s, 3H), 7.37 (dd, 1H), 7.53 (d, 1H), 7.57 (d, 1H), 7.86 (dd, 1H), 8.20 (s, 1H), 8.87 (d, 1H). MS m/z 282 (M+H)+
단계 2: 메틸 2-(2,4- 디클로로페닐 )피페리딘-4- 카복실레이트 히드로클로라이드
메틸 2-(2,4-디클로로페닐)이소니코티네이트 히드로클로라이드 (2.60 g, 8.15 mmol)를 MeOH (50 mL) 중에 용해시키고, 산화백금(Ⅳ) (0.019 g, 0.08 mmol)을 첨가한 후, 5 bar에서 90 분간 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 상기 반응 혼합물을 여과 후 증발시켜 미정제 메틸 2-(2,4-디클로로페닐)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (2.8 g)를 백색 고체로서 수득하였다. MS m/z 288 (M+H)+
단계 3: 디메틸 2-(2,4- 디클로로페닐 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(2,4-디클로로페닐)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (2.8 g, 8.63 mmol)를 DCM (24.18 mL)으로 희석하였다. DIPEA (3.76 mL, 21.56 mmol) 및 메틸 염화탄산 (0.815 mL, 10.35 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 30 분간 교반한 후, 0.1 M HCl (3x) 및 식염수로 세척하였다. 상 분리기를 통해 여과하였다. 이를 증발시켜 디메틸 2-(2,4-디클로로페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (2.78 g, 93 %)를 오일로서 수득하였다. MS m/z 346 (M+H)+
단계 4: 2-(2,4- 디클로로페닐 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(2,4-디클로로페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (2.78 g, 8.03 mmol)를 아세토니트릴 (27.1 mL)과 물 (0.542 mL) 중에 용해시켰다. 브롬화리튬 (5.58 g, 64.24 mmol)과 트리에틸아민 (4.48 mL, 32.12 mmol)을 첨가하여 생성된 혼합물을 환류 하에 4 시간 동안 가열하고, 물과 MTBE로 희석한 후 상기 유기층을 물로 추출하였다. 상기 혼합된 수성층을 3 M HCl로 산성화하고, MTBE로 추출, MgSO4로 건조 및 여과 후 증발시켜 2-(2,4-디클로로페닐)-1-(메톡시-카보닐)피페리딘-4-카복실산 (2.440 g, 91 %)을 폼으로서 수득하였다. MS m/z 332 (M+H)+
참조 화합물 24
2-(3,5- 디클로로페닐 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 2-(3,5- 디클로로페닐 ) 이소니코티네이트
탄산칼륨 (2.416 g, 17.48 mmol), 메틸 2-클로로이소니코티네이트 (5 g, 29.14 mmol), 2-(3,5-디클로로페닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (10.34 g, 37.88 mmol), PdCl2(dppf) (0.633 g, 0.87 mmol) 및 MeOH (45.7 mL)를 3 개의 20 mL의 전자렌지용 유리병에 나누어 담고 단일 노드 전자렌지용 반응기 중에서 100℃로 20 분간 가열하였다. 상기 반응 혼합물을 물과 DCM으로 희석한 후, 상기 수성층을 DCM으로 추출한 후, 상기 혼합된 유기층을 증발시켰다. 280 nm에서 헵탄 중 5% EtOAc -> 30% EtOAc (15 CV)를 이용한 자동화 섬광 크로마토그래피로 정제하였다. 메틸 2-(3,5-디클로로페닐)이소니코티네이트 (6.1 g, 74 %)를 백색 분말로서 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ4.01 (s, 3H), 7.44 (t, 1H), 7.84 (dd, 1H), 7.96 (d, 2H), 8.23 - 8.28 (m, 1H), 8.85 (dd, 1H).
단계 2: 메틸 2-(3,5- 디클로로페닐 )피페리딘-4- 카복실레이트 히드로클로라이드
메틸 2-(3,5-디클로로페닐)이소니코티네이트 히드로클로라이드 (6.88 g, 21.6 mmol)를 MeOH (50 mL) 중에 용해시키고, 산화백금(Ⅳ) (0.049 g, 0.22 mmol)을 첨가한 후, 5 bar에서 4 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 반응 혼합물을 모든 생성물이 용해될 때까지 여과시키고, MeOH로 세척한 후, 증발시켰다. 메틸 2-(3,5-디클로로페닐)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (4.8 g, 69 %)를 누르스름한 색의 고체로서 분리하였다. MS m/z 288 (M+H)+
단계 3: 디메틸 2-(3,5- 디클로로페닐 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(3,5-디클로로페닐)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (4.8 g, 14.79 mmol)를 DCM (41.5 mL)과 DIPEA (6.46 mL, 36.97 mmol) 중에 용해시켰다. 메틸 클로로포르메이트 (1.374 mL, 17.74 mmol)를 첨가하고 상기 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반한 후, DCM으로 희석하고 0.3 M HCl 및 식염수로 세척하였다. 상기 유기층을 상 분리기를 통해 여과한 후 증발시켜 디메틸 2-(3,5-디클로로페닐)-피페리딘-1,4-디카복실레이트 (5.3 g)를 오일로서 수득하였다. MS m/z 346 (M+H)+
단계 4: 2-(3,5- 디클로로페닐 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(3,5-디클로로페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (5.3 g, 15.31 mmol)를 아세토니트릴 (51.7 mL)에 용해시켰다. 물 (1.033 mL), 브롬화리튬 (10.64 g, 122.47 mmol) 및 트리에틸아민 (8.53 mL, 61.24 mmol)을 첨가하고 상기 생성된 혼합물을 환류 하에 2.5 시간 동안 가열하였다. 이를 물과 MTBE로 희석하였다. 상기 수성층을 물로 추출하였다. 상기 혼합된 수성층을 3 M HCl로 산성화하고, MTBE로 추출, MgSO4로 건조, 여과 후 증발시켜 2-(3,5-디클로로페닐)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (4.60 g, 90 %)을 녹색을 띤 폼으로서 수득하였다. MS m/z 330 (M-H)-
참조 화합물 25
2-(2- 플루오로 -4-( 트리플루오로메톡시 ) 페닐 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4-카 복실 산
단계 1: 2-(2- 플루오로 -4-( 트리플루오로메톡시 ) 페닐 )-4,4,5,5- 테트라메틸 -1,3,2-디 옥사 보롤란
1-브로모-2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)벤젠 (7.41 g, 28.61 mmol)을 DMSO (50 mL) 중에 용해시켰다. 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-비(1,3,2-디옥사보롤란) (8.43 g, 33.19 mmol), PdCl2(dppf) (1.035 g, 1.43 mmol) 및 아세트산 칼륨 (5.62 g, 57.22 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 80℃의 오일조 중에서 15 시간 동안 가열하였다. 상기 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고 물로 세척하였다. 상기 유기층을 Na2SO4로 건조한 후 증발시켰다. 잔류물을 바이오타지? KP-SIL 340g 컬럼 상에서 자동화 섬광 크로마토그래피로 정제하였다. 헵탄 중 0 % 내지 25 %의 EtOAc (10 CV)의 농도구배를 이동상으로 사용하였다. 2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (5.38 g, 61.4 %)을 무색의 고체로서 수득하였다.
단계 2: 메틸 2-(2- 플루오로 -4-( 트리플루오로메톡시 ) 페닐 ) 이소니코티네이트
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (3 g, 17.48 mmol), 2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (5.37 g, 17.55 mmol), 탄산칼륨 (1.812 g, 13.11 mmol) 및 PdCl2(dppf) (0.380 g, 0.52 mmol)를 별도의 두 20 mL의 전자렌지용 유리병의 메탄올 (30 mL) 중에서 혼합하였다. 상기 유리병들의 뚜껑을 덮고 단일 노드 전자렌지용 반응기 중에서 100℃로 10 분간 가열하였다. 물과 DCM을 첨가하고 상들을 분리하였다. 상기 수상을 DCM으로 추출한 후, 상기 혼합된 유기층을 상 분리기를 통해 여과한 후 증발시켜 암갈색 고체를 수득하였다. 잔류물을 바이오타지? KP-SIL 340g 컬럼 상에서 자동화 섬광 크로마토그래피로 정제하였다. 헵탄 중 8:1 내지 3:1의 EtOAc (10 CV)의 농도구배를 이동상으로 사용하였다. 메틸 2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)이소니코티네이트 (4.48 g, 81 %)를 무색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ3.96 (s, 3H), 7.07 (d, 1H), 7.14 (d, 1H), 7.79 - 7.84 (m, 1H), 8.03 - 8.09 (m, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.82 - 8.88 (m, 1H). MS m/z 316 (M+H)+
단계 3: 메틸 2-(2- 플루오로 -4-( 트리플루오로메톡시 ) 페닐 )피페리딘-4- 카복실레이트 히드로클로라이드
메틸 2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)이소니코티네이트 (4.47 g, 14.18 mmol)를 메탄올 중에 용해시키고 염화수소 (메탄올 중 1.25 M, 17.02 mL, 21.27 mmol)를 첨가하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 메탄올 (50 mL) 중에 재용해하였다. 산화백금(Ⅳ) (0.322 g, 1.42 mmol)을 첨가한 후, 상기 혼합물을 5 bar 및 실온에서 5 시간 동안 수소화하였다. 촉매를 여과하여 제거한 후 용매를 증발시켰다. 미정제 메틸 2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (4.97 g, 98 %)를 무색의 고체로서 수득하였다. MS m/z 322 (M+H)+
단계 4 : 디메틸 2-(2- 플루오로 -4-( 트리플루오로메톡시 ) 페닐 )피페리딘-1,4-디 카복실레 이트
메틸 2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (4.97 g, 13.89 mmol)를 디클로로메탄 (50 mL) 및 DIPEA (6.05 mL, 34.73 mmol) 중에 용해시켰다. 메틸 염화탄산 (1.313 mL, 16.67 mmol)을 첨가하고 상기 반응 혼합물을 실온에서 4 시간 동안 교반하였다. 0.1 M HCl을 첨가하고 상기 수성층을 DCM으로 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 상 분리기를 통해 여과한 후 증발시켰다. 미정제 디메틸 2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (5.39 g, 102 %)를 황색 오일로서 수득하였다. MS m/z 380 (M+H)+
단계 5: 2-(2- 플루오로 -4-( 트리플루오로메톡시 ) 페닐 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (5.35 g, 14.10 mmol)를 아세토니트릴 (100 mL)과 물 (2.000 mL)에 용해시킨 후, 브롬화리튬 (9.80 g, 112.84 mmol)을 첨가하였다. 트리에틸아민 (7.82 mL, 56.42 mmol)을 첨가하고 생성된 현탁액을 환류 하에 7 시간 동안 가열하였다. MTBE (350 mL)와 물 (180 mL)을 첨가하고, 상들을 분리한 후 상기 유기층을 물로 추출하였다. 상기 혼합된 수성층을 3.8 M HCl로 산성화하고 EtOAc로 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 Na2SO4로 건조한 후 증발시켰다. 2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산(5.09 g, 99 %)을 무색 고체로서 수득하였다. MS m/z 364 (M-H)-
참조 화합물 26
1-( 메톡시카보닐 )-2-(3,4,5- 트리플루오로페닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 2-(3,4,5- 트리플루오로페닐 ) 이소니코티네이트
메틸 2-브로모이소니코티네이트 (4 g, 18.52 mmol), 3,4,5-트리플루오로페닐보론산 (4.89 g, 27.77 mmol), 탄산칼륨 (3.84 g, 27.77 mmol) 및 PdCl2(dppf) (0.402 g, 0.56 mmol)를 별도의 두 20 mL의 전자렌지용 유리병의 메탄올 (30 mL) 중에서 혼합하였다. 상기 유리병들의 뚜껑을 덮고 단일 노드 전자렌지용 반응기 중에서 100℃로 10 분간 가열하였다. 물과 DCM을 첨가하고 상들을 분리하였다. 상기 수상 (pH 9)을 DCM으로 추출, 상기 혼합된 유기상을 식염수로 세척하고, 상 분리기 통과 후 증발시켜 갈색 고체를 수득하였다. 잔류물을 DCM 중에 용해시킨 후, SCX-2 양이온 교환 크로마토그래피로 정제하였다. 메틸 2-(3,4,5-트리플루오로페닐)이소니코티네이트 (2.62 g, 52 %)를 담황색 고체로서 분리하였다. MS m/z 268 (M+H)+
단계 2: 메틸 2-(3,4,5- 트리플루오로페닐 )피페리딘-4- 카복실레이트 히드로클로라이드
메틸 2-(3,4,5-트리플루오로페닐)이소니코티네이트 (2.62 g, )를 MTBE 중에 용해시킨 후, HCl (디옥산 중 4 M, 15 mL)을 첨가하였다. 용매를 증발시켜 메틸 2-(3,4,5-트리플루오로페닐)이소니코티네이트 히드로클로라이드 (2.94 g, 9.68 mmol)를 얻고, 이를 MeOH (40 mL) 중에 용해시키고 산화백금(Ⅳ) (0.220 g, 0.97 mmol)을 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 실온 및 5 bar에서 1 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 촉매를 여과하여 제거한 후, MeOH로 세척하고 용출액을 증발시켜 메틸 2-(3,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (2.75 g, 92 %)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS m/z 274 (M+H)+
단계 3: 디메틸 2-(3,4,5- 트리플루오로페닐 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(3,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (2.75 g, 8.88 mmol)DCM (50 mL) 중에 용해시킨 후, DIPEA (3.88 mL, 22.20 mmol)를 첨가하였다. 메틸 염화탄산 (0.979 mL, 12.43 mmol)을 상기 용액에 적가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 4 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 HCl (0.1 M, 100 mL) 및 포화 NaHCO3 (100 mL)로 세척한 후, 상 분리기를 통해 건조한 후 증발시켜 디메틸 2-(3,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (2.77 g, 94 %)를 오렌지색 오일로서 수득하였다.
단계 4: 1-( 메톡시카보닐 )-2-(3,4,5- 트리플루오로페닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(3,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (2.77 g, 8.36 mmol)를 아세토니트릴 (35 mL)과 물 (0.700 mL)에 용해시킨 후, 브롬화리튬 (5.81 g, 66.89 mmol)을 첨가하였다. Et3N (4.66 mL, 33.45 mmol)을 첨가하고 생성된 황색 현탁액을 환류 하에 2 시간 동안 가열하였다. 물 (50 mL)과 MTBE (150 mL)를 첨가하였다. 상기 상들을 분리한 후 상기 유기층을 물로 추출하였다 (2 회). 모아진 수성층을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화하고 MTBE로 추출하였다 (2 회). 상기 혼합된 유기층을 Na2SO4로 건조, 여과한 후 증발시켜 1-(메톡시카보닐)-2-(3,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-4-카복실산 (2.23 g, 84 %)을 담황색 반고체로서 수득하였다. MS m/z 316 (M-H)-
참조 화합물 27
1-( 메톡시카보닐 )-2-(2,4,5- 트리플루오로페닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 2-(2,4,5- 트리플루오로페닐 ) 이소니코티네이트
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (3.25 g, 18.94 mmol), 2,4,5-트리플루오로페닐보론산 (5.00 g, 28.41 mmol), 탄산칼륨 (3.93 g, 28.41 mmol) 및 PdCl2(dppf) (0.411 g, 0.57 mmol)를 두 개의 20 mL의 전자렌지용 유리병의 메탄올 (20 mL) 중에서 혼합하였다. 상기 유리병들의 뚜껑을 덮고 단일 노드 전자렌지용 반응기 중에서 100℃로 10 분간 가열하였다. 상기 반응 혼합물을 메탄올에 현탁시키고, 여과한 후 여과물을 증발시켜 어두운 색의 슬러리를 수득하였다. DCM과 물을 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 수상 (pH 9)을 DCM으로 추출한 후, 상기 혼합된 유기상을 식염수로 세척하고, 상 분리기 통과 후 증발시켜 갈색 고체를 수득하였다. 상기 미정제 갈색 고체를 MTBE (120 mL)에 용해시키고 고체를 여과하여 제거하였다. 염화수소 (디옥산 중 4 M, 4.74 mL, 18.94 mmol)를 적가하고 현탁액을 형성시켰다. 상기 현탁액을 실온에서 45 분간 교반하였다. 고체를 여과에 의해 수집하고 MTBE로 세척하였다. MTBE 및 포화 NaHCO3를 첨가하였다. 상기 유기상을 Na2SO4로 건조, 여과 및 증발시켜 메틸 2-(2,4,5-트리플루오로페닐)이소니코티네이트 (1.676 g, 33 %)를 베이지색 고체로서 수득하였다. MTBE-여과물을 포화 NaHCO3로 세척하고, Na2SO4로 건조, 여과 및 증발시켜 갈색 고체를 수득하였다. 잔류물을 바이오타지 (헵탄 중 0 => 20 % EtOAc, 6 CV; 바이오타지? KP-SIL 100g 컬럼)를 통해 정제하여 메틸 2-(2,4,5-트리플루오로페닐)-이소니코티네이트 (0.86 g, 17 %)를 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ3.97 (s, 3H), 7.00 - 7.07 (m, 1H), 7.81 (dd, 1H), 7.90 - 7.97 (m, 1H), 8.32 - 8.33 (m, 1H), 8.83 (dd, 1H). MS m/z 268 (M+H)+
단계 2: 메틸 2-(2,4,5- 트리플루오로페닐 )피페리딘-4- 카복실레이트
메틸 2-(2,4,5-트리플루오로페닐)이소니코티네이트 (2.509 g, 9.39 mmol)를 아세트산 (25 mL)에 용해시키고 산화백금(Ⅳ) (0.107 g, 0.47 mmol)을 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 실온 및 5 bar에서 6 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 촉매를 여과하여 제거하고, MeOH로 세척하고 용출액을 증발시켰다. DCM과 10 % K2CO3를 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 유기층을 식염수로 세척하고, 상 분리기 통과 후 증발시켜 메틸 2-(2,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-4-카복실레이트 (2.434 g, 95 %)를 갈색 오일로서 수득하였다. MS m/z 274 (M+H)+
단계 3: 디메틸 2-(2,4,5- 트리플루오로페닐 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(2,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-4-카복실레이트 (2.232 g, 8.17 mmol)를 DCM (50 mL)과 DIPEA (1.707 mL, 9.80 mmol)에 용해시킨 후, 메틸 염화탄산 (0.965 mL, 12.25 mmol)을 첨가하였다. 상기 용액을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 0.1 M HCl 및 포화 NaHCO3로 세척하고, 상 분리기 통과 후 증발시켜 미정제 디메틸 2-(2,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (2.971 g, 정량 분석)를 갈색 오일로서 수득하였다. MS m/z 332 (M+H)+
단계 4: 1-( 메톡시카보닐 )-2-(2,4,5- 트리플루오로페닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(2,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (2.971 g, 8.97 mmol)를 아세토니트릴 (30 mL)과 물 (0.600 mL)에 용해시킨 후, 브롬화리튬 (6.23 g, 71.74 mmol)을 첨가하였다. 트리에틸아민 (4.97 mL, 35.87 mmol)을 첨가하고 상기 생성된 갈색 현탁액을 환류 하에 가열하였다. 물과 MTBE를 첨가하였다. 상기 유기상을 물로 추출하였다 (x2). 모아진 수성층을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화한 후, MTBE로 추출하였다 (x2). 상기 혼합된 유기층을 물로 세척한 후 증발시켰다. 미량의 물을 MeCN에 의해 공비 제거하였다. 1-(메톡시카보닐)-2-(2,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-4-카복실산 (2.388 g, 84 %)을 황색 오일로서 분리하였다. MS m/z 318 (M+H)+
참조 화합물 28
2-(4- 클로로 -3,5- 디플루오로페닐 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 2-(4- 클로로 -3,5- 디플루오로페닐 )-4,4,5,5- 테트라메틸 -1,3,2- 디옥사보롤란
DMSO (40 mL)에 용해시킨 5-브로모-2-클로로-1,3-디플루오로벤젠 (4.8 g, 21.11 mmol)에 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-비(1,3,2-디옥사보롤란) (6.22 g, 24.48 mmol), PdCl2(dppf) (0.764 g, 1.06 mmol) 및 아세트산 칼륨 (4.14 g, 42.21 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 80℃의 오일조에서 10 시간 동안 가열한 후, 에틸 아세테이트로 희석하고 물로 세척하였다. 상기 유기층을 Na2SO4로 건조한 후 증발시켰다. 잔류물을 바이오타지? KP-SIL 340g 컬럼 상에서 자동화 섬광 크로마토그래피로 정제하였다. 헵탄 중 0 % 내지 30 %의 EtOAc (10 CV)의 농도구배를 이동상으로 사용하였다. 2-(4-클로로-3,5-디플루오로페닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (4.01 g, 69 %)을 분리하였다.
단계 2: 메틸 2-(4- 클로로 -3,5- 디플루오로페닐 ) 이소니코티네이트 히드로클로라이드
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (3.01 g, 17.53 mmol), PdCl2(dppf) (0.317 g, 0.44 mmol) 및 탄산칼륨 (1.322 mL, 21.91 mmol)을 3 개의 전자렌지용 반응 유리병에 동일한 양으로 나누어 담았다. 2-(4-클로로-3,5-디플루오로페닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (4.01 g, 14.61 mmol)을 메탄올 (45 mL) 중에 용해시켜 무색의 용액을 만들었다. 상기 용액을 3 개의 동일한 분획으로 나누어 상기 유리병에 첨가하였다. 상기 유리병들의 뚜껑을 덮고 이들을 각각 단일 노드 전자렌지용 반응기 중에서 100℃로 10 분간 가열하였다. 유리병들의 내용물을 혼합한 후 용매를 증발시켰다. 잔류물을 DCM 중에 용해시키고 물로 세척하였다. 상기 유기상을 상 분리기를 통해 여과하고 증발시켰다. 잔류물을 MTBE 중에 용해시키고 고체를 여과하여 제거하였다. 염화수소 (디옥산 중 4 M, 3.65 mL, 14.61 mmol)를 첨가하고 침전물을 수집하여 메틸 2-(4-클로로-3,5-디플루오로페닐)이소니코티네이트 히드로클로라이드 (1.72 g, 42 %)를 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ4.06 (s, 3H), 7.86 (d, 2H), 8.09 (d, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.96 (d, 1H). MS m/z 284 (M+H)+
단계 3: 메틸 2-(4- 클로로 -3,5- 디플루오로페닐 )피페리딘-4- 카복실레이트
메틸 2-(4-클로로-3,5-디플루오로페닐)이소니코티네이트 히드로클로라이드 (1.94 g, 6.06 mmol)를 메탄올 중에 용해시켰다. 산화백금(Ⅳ) (0.138 g, 0.61 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 뷔치 수소발생장치 중에서 5 bar 및 실온에서 7 시간 동안 수소화하였다. 촉매를 여과로 제거하고 용매를 증발시켰다. 메틸 2-(4-클로로-3,5-디플루오로-페닐)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (1.820 g, 92 %)를 무색의 오일로서 수득하였다. MS m/z 290 (M+H)+
단계 4: 디메틸 2-(4- 클로로 -3,5- 디플루오로페닐 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(4-클로로-3,5-디플루오로페닐)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (1.82 g, 5.58 mmol)를 디클로로메탄 (50 mL) 중에 용해시켰다. DIPEA (2.430 mL, 13.95 mmol)와 메틸 염화탄산 (0.527 mL, 6.70 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 0.1 M HCl을 첨가하고 수성층을 DCM으로 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 상 분리기를 통해 여과한 후 증발시켜 디메틸 2-(4-클로로-3,5-디플루오로페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (1.83 g, 94 %)를 수득하였다. MS m/z 348 (M+H)+
단계 5: 2-(4- 클로로 -3,5- 디플루오로페닐 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4-카복실산
디메틸 2-(4-클로로-3,5-디플루오로페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (1.83 g, 5.26 mmol)를 아세토니트릴 (30 mL)과 물 (0.600 mL)에 용해시킨 후, 브롬화리튬 (3.66 g, 42.10 mmol)을 첨가하였다. 트리에틸아민 (2.92 mL, 21.05 mmol)을 첨가하여 생성된 현탁액을 환류 하에 4 시간 동안 가열하였다. MTBE (100 mL)와 물 (50 mL)을 첨가하고, 상들을 분리한 후 상기 유기층을 물로 추출하였다. 상기 혼합된 수성층을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화하고 MTBE로 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 Na2SO4로 건조한 후 증발시켜 2-(4-클로로-3,5-디플루오로-페닐)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (1.600 g, 91 %)을 담황색 고체로서 수득하였다. MS m/z 332 (M-H)-
참조 화합물 29
1-( 메톡시카보닐 )-2-(3- 메틸 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 4,4,5,5- 테트라메틸 -2-(3- 메틸 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )-1,3,2-디 옥사 보롤란
4-브로모-2-메틸-1-(트리플루오로메틸)벤젠 (3.3 g, 13.8 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-비(1,3,2-디옥사보롤란) (4.07 g, 16.01 mmol), 아세트산 칼륨 (2.71 g, 27.61 mmol) 및 PdCl2(dppf) (0.5 g, 0.69 mmol)를 DMF (60 mL) 중에 혼합하고 3 개의 전자렌지용 유리병에 나누어 담았다. 상기 반응 혼합물을 단일 노드 전자렌지용 반응기 중에서 100℃로 10 분간 가열하였다. 상기 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고 셀라이트를 통해 여과하였다. 여과물을 물 (3x) 및 식염수로 세척하였다. 상기 유기층을 분리하고, Na2SO4로 건조시킨 후 셀라이트를 통해 여과시키고 용매를 증발시켰다. 바이오타지 장치를 이용하여 자동화 컬럼 크로마토그래피를 수행하였다. 헵탄 - 에틸 아세테이트 (에틸 아세테이트는 0% 에서 개시하여 30% 까지)를 이용한 농도구배 용출을 수행하였다. 4,4,5,5-테트라메틸-2-(3-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,2-디옥사보롤란 (1.66 g, 42%)을 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.33 (s, 12H), 2.47 (s, 3H), 7.57 (d, 1H), 7.66 - 7.70 (m, 2H).
단계 2: 메틸 2-(3- 메틸 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 ) 이소니코티네이트
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (0.996 g, 5.80 mmol), 탄산칼륨 (1.042 g, 7.54 mmol), 4,4,5,5-테트라메틸-2-(3-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1,3,2-디옥사보롤란 (1.66 g, 5.80 mmol) 및 PdCl2(dppf) (0.105 g, 0.15 mmol)를 두 전자렌지용 유리병의 메탄올 (20 mL) 중에서 혼합하였다. 상기 유리병들의 뚜껑을 덮고 단일 노드 전자렌지용 반응기 중에서 100℃로 10 분간 가열하였다. 상기 용액을 물과 에틸 아세테이트 사이에 구분시켜 놓았다. 상기 유기층을 분리하고, Na2SO4로 건조한 후 셀라이트를 통해 여과시키고 용매는 증발시켰다. 바이오타지 장비를 이용한 자동화 컬럼 크로마토그래피를 수행하였다. 헵탄 - 에틸 아세테이트 (0% 내지 50%)를 이용한 농도구배 용출을 수행하였다. 메틸 2-(3-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)-이소니코티네이트 (1.22 g, 71 %)를 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ2.57 (s, 3H), 3.99 (s, 3H), 7.70 (d, 1H), 7.81 (dd, 1H), 7.91 (d, 1H), 7.98 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.84 (d, 1H).
단계 3: 메틸 2-(3- 메틸 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4- 카복실레이트
메틸 2-(3-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)이소니코티네이트 (2.32 g, 7.86 mmol)를 아세트산 (150 mL)에 용해시키고 산화백금(Ⅳ) (36 mg, 0.16 mmol)을 첨가하였다. 실온 및 6 bar에서 2 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 촉매를 여과하여 제거하고. 산화백금(Ⅳ)을 더 첨가하고 출발 물질이 소진될 때까지 수소화를 지속하였다. 촉매를 여과하여 제거하고 용매를 증발시켜 미정제 메틸 2-(3-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-카복실레이트 (2.60 g, 110 %)를 수득하였다.
단계 4: 디메틸 2-(3- 메틸 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-카복실레이트 (2.9 g, 9.62 mmol)를 DIPEA (1.866 g, 14.44 mmol)와 디클로로메탄 (50 mL) 중에 용해시켰다. 메틸 염화탄산 (1.091 g, 11.55 mmol)을 적가하고 상기 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 1 M KHSO4 및 디에틸 에테르를 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 유기층을 Na2CO3로 세척, MgSO4로 건조, 셀라이트를 통해 여과 후 증발시켜 디메틸 2-(3-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)-피페리딘-1,4-디카복실레이트 (3.09 g, 89 %)를 수득하였다.
단계 5: 1-( 메톡시카보닐 )-2-(3- 메틸 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4-카 복실 산
디메틸 2-(3-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (3.09 g, 8.60 mmol)를 아세토니트릴 (30 mL)과 물 (0.6 mL)에 용해시키고, 브롬화리튬 (5.97 g, 68.79 mmol)을 첨가하였다. 트리에틸아민 (3.48 g, 34.40 mmol)을 첨가하고 생성된 현탁액을 환류 하에 1 시간 동안 가열하였다. 물 (60 mL)과 MTBE를 첨가하였다. 상기 유기상을 물로 추출하였다 (x 2). 모아진 수성층에 MTBE를 첨가하고, 상기 용액을 HCl로 pH 1로 산성화시킨 후, MTBE로 추출하였다 (x 2). 상기 유기층을 Na2SO4로 건조하고, 셀라이트를 통해 여과시키고 용매를 증발시켜 1-(메톡시카보닐)-2-(3-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-카복실산 (2.65 g, 7.67 mmol)을 수득하였다.
참조 화합물 30
2-(3,5- 디플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4-카 복실 산
단계 1: 2-(3,5- 디플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )-4,4,5,5- 테트라메틸 -1,3,2- 디옥사보롤란
5-브로모-1,3-디플루오로-2-(트리플루오로메틸)벤젠 (4.7 g, 18.01 mmol), PdCl2(dppf) (0.652 g, 0.90 mmol) 및 아세트산 칼륨 (3.53 g, 36.02 mmol)을 MeOH (20 mL) 중에 현탁시키고, 두 개의 전자렌지용 유리병에 나누어 담아 이를 단일 노드 전자렌지용 반응기 중에서 120℃로 20 분간 가열하였다. 상기 반응 혼합물을 EtOAc (400 mL)로 희석, 물 (400 mL), 식염수 (400 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조 및 여과한 후 진공 속에서 증발시켰다. 잔류물을 2 개의 바이오타지? KP-SIL 100g 컬럼 상에서 자동화 섬광 크로마토그래피로 정제하였다. 헵탄 중 0 % 내지 30 %의 EtOAc (12 CV)의 농도구배를 이동상으로 사용하였다. 생성물을 파장 265 nm를 이용하여 수집하였다. 2-(3,5-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (3.30 g, 59.5 %)을 백색 고체로서 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.32 (s, 12H), 7.37 (d, 2H).
단계 2: 메틸 2-(3,5- 디플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 ) 이소니코티네이트
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (1,838 g, 10,71 mmol), 탄산칼륨 (0.888 g, 6.43 mmol) 및 PdCl2(dppf) (0.233 g, 0.32 mmol)를 전자렌지용 유리병에 첨가하였다. MeOH (15 mL)에 용해된 2-(3,5-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (3.3 g, 10.71 mmol)을 첨가하고 상기 반응물을 단일 노드 전자렌지용 반응기 중에서 100℃로 총 40 분간 가열하였다. DCM (100 mL)과 물 (100 mL)을 첨가하고 흔들어서 상들을 분리시켰다. 상기 수상을 DCM (100 mL)으로 추출하였다. 상기 혼합된 유기상을 식염수 (200 mL)로 세척하고, 상 분리기로 건조시킨 후 진공 속에서 증발시켰다. 잔류물을 바이오타지? KP-SIL 100g 컬럼 상에서 자동화 섬광 크로마토그래피로 정제하였다. 헵탄 중 5 % EtOAc (3 CV) 이후 헵탄 중 5 % 내지 30 %의 EtOAc (9 CV)의 농도구배를 이동상으로 사용하였다. 생성물을 파장 250 nm를 이용하여 수집하였다. 메틸 2-(3,5-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)이소니코티네이트 (1.810 g, 53 %)를 백색 고체로서 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ3.99 (s, 3H), 7.74 (d, 2H), 7.86 - 7.89 (m, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.86 (d, 1H).
단계 3: 메틸 2-(3,5- 디플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드
메틸 2-(3,5-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)이소니코티네이트 (3.147 g, 9.92 mmol)를 MeOH (20 mL)에 용해시키고 염화수소 (MeOH 중 1.25 M, 23.81 mL, 29.76 mmol)를 첨가하였다. 상기 반응물을 실온에서 2 시간 동안 교반한 후 증발시켰다. 메탄올 (20 mL)과 산화백금(Ⅳ) (0.113 g, 0.50 mmol)을 첨가하고 이 용액을 5 bar 및 실온에서 4.5 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 산화백금(Ⅳ) (0.113 g, 0.50 mmol)을 첨가한 후 수소화를 4 시간 동안 지속하였다. 촉매를 여과하여 제거한 후 MeOH로 세척하였다. 여과물을 진공 속에서 증발시켜 메틸 2-(3,5-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (3.12 g, 87 %)를 백색 고체로서 수득하였다. MS m/z 324 (M+H)+
단계 4: 디메틸 2-(3,5- 디플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-1,4-디 카복실레 이트
메틸 2-(3,5-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (3.118 g, 8.67 mmol)와 DIPEA (3.02 mL, 17.34 mmol)를 DCM (30 mL) 중에 용해시켰다. 메틸 염화탄산 (1.024 mL, 13.00 mmol)을 첨가하고 상기 반응물을 실온에서 1.5 시간 동안 교반하였다. 추가의 메틸 염화탄산 (0.341 mL, 4.33 mmol)을 첨가하고 0.5 시간 동안 교반을 지속하였다. DCM (170 mL)을 첨가하였다. 상기 유기상을 0.1 M HCl (2x200 mL), 포화 NaHCO3 (200 mL)로 세척하고, 상 분리기로 건조시킨 후 진공 속에서 증발시켜 디메틸 2-(3,5-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-피페리딘-1,4-디카복실레이트 (2.85 g, 86 %)를 무색의 오일로서 수득하였다. MS m/z 382 (M+H)+
단계 5: 2-(3,5- 디플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(3,5-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (2.851 g, 7.48 mmol)를 아세토니트릴 (25 mL)과 물 (2.5 mL)에 용해시킨 후, 브롬화리튬 (5.19 g, 59.82 mmol)를 첨가하고 이후 트리에틸아민 (4.15 mL, 29.91 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 환류 하에 1 시간 동안 가열하였다. MTBE (150 mL)와 물 (150 mL)을 첨가하고 흔들어서 상들을 분리시켰다. 상기 유기상을 물로 추출하였다 (2x150 mL). 상기 혼합된 수상을 3 M HCl을 사용해 pH 1로 산성화하고 MTBE (2x450 mL)로 추출하였다. 상기 혼합된 유기상을 Na2SO4로 건조하고 여과 후 진공 속에서 증발시켜 2-(3,5-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1-(메톡시-카보닐)피페리딘-4-카복실산 (2.363 g, 86 %)을 수득하였다. MS m/z 368 (M+H)+
참조 화합물 31
1-( 메톡시카보닐 )-2-(2- 메틸 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 2-(2- 메틸 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 ) 이소니코티네이트 히드로클로라이드
탄산칼륨 (2.66 g, 19.23 mmol), 메틸 2-클로로이소니코티네이트 (5.5 g, 32.05 mmol), 2-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐보론산 (8.50 g, 41.67 mmol), PdCl2(dppf) (0.696 g, 0.96 mmol) 및 MeOH (50.3 mL)를 3 개의 전자렌지용 유리병에 나누어 담고 이를 단일 노드 전자렌지용 반응기 중에서 100℃로 20 분간 가열하였다. DCM으로 희석하고, 여과 후 증발시켰다. 280 nm에서 헵탄 중 5% EtOAc -> 20% EtOAc (10 CV)를 이용한 섬광 크로마토그래피로 정제하였다. 잔류물을 에테르 중에 용해시키고 염화수소 (디옥산 중 4 M, 8.01 mL, 32.05 mmol)를 첨가한 후 용매를 증발시켜 메틸 2-(2-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)이소니코티네이트 히드로클로라이드 (9.15 g, 86 %)를 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ2.41 (s, 3H), 4.03 (s, 3H), 7.63 - 7.76 (m, 3H), 8.27 (dd, 1H), 8.33 (dd, 1H), 8.99 (dd, 1H). MS m/z 296 (M+H)+
단계 2: 메틸 2-(2- 메틸 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4- 카복실레이트 히드로클로라이드
메틸 2-(2-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)이소니코티네이트 히드로클로라이드 (9 g, 27.13 mmol)를 MeOH (50 mL) 중에 용해시키고, 산화백금(Ⅳ) (0.185 g, 0.81 mmol)을 첨가한 후 생성된 혼합물을 5 bar에서 5 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 촉매를 여과하여 제거한 후 여과물을 증발시켜 메틸 2-(2-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)-피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (8 g, 87 %)를 누르스름한 색의 고체로서 수득하였다. MS m/z 302 (M+H)+
단계 3: 디메틸 2-(2- 메틸 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(2-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (8.2 g, 24.28 mmol)와 DIPEA (10.60 mL, 60.69 mmol)를 디클로로메탄 (100 mL) 중에 용해시켰다. 메틸 염화탄산 (2.257 mL, 29.13 mmol)을 첨가하고 상기 반응물을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. DCM (100 mL)을 첨가하였다. 상기 유기상을 1 M HCl과 물로 2 회 세척하고, Na2SO4로 건조 후 증발시켜 디메틸 2-(2-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (8.9 g, 정량 분석)를 수득하였다. MS m/z 360 (M+H)+
단계 4: 1-( 메톡시카보닐 )-2-(2- 메틸 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4-카 복실 산
디메틸 2-(2-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (8.9 g, 24.77 mmol)를 아세토니트릴 (80 mL) 중에 용해시켰다. 물 (1.6 mL), 브롬화리튬 (17.21 g, 198.14 mmol) 및 트리에틸아민 (13.73 mL, 99.07 mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 환류에서 2.5 시간 동안 가열하였다. 냉각 후 물로 희석하고 EtOAc로 2 회 추출한 후 상기 혼합된 유기층을 물로 세척하였다. 상기 혼합된 수층을 2 M HCl로 산성화하고 EtOAc로 3 회 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 Na2SO4로 건조하고 여과 후 증발시켜 미정제 1-(메톡시카보닐)-2-(2-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-카복실산 (7.79 g, 91 %)을 수득하였다. MS m/z 344 (M-H)-
참조 화합물 32
2-(2- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4-카복실산
단계 1: 메틸 2-(2- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 ) 이소니코티네이트 히드로클로라이드
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (2.8 g, 16.32 mmol), 2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐보론산 (5.09 g, 24.48 mmol), 탄산칼륨 (1.692 g, 12.24 mmol) 및 PdCl2(dppf) (0.354 g, 0.49 mmol)를 별도의 두 20 mL의 전자렌지용 유리병의 메탄올 (30 mL) 중에서 혼합하였다. 상기 유리병들의 뚜껑을 덮고 단일 노드 전자렌지용 반응기 중에서 100℃로 10 분간 가열하였다. 물과 DCM을 첨가하고 상들을 분리하였다. 상기 수상 (pH 9)을 DCM으로 추출하고, 상기 혼합된 유기상을 식염수로 세척하고, 상 분리기 통과 후 증발시켜 어두운 오렌지색의 고체를 수득하였다. 상기 고체를 MTBE 중에서 용해시키고 15 분 동안 교반한 후, 여과하였다. 오렌지색의 MTBE 층을 염화수소 (디옥산 중 4 M, 4.08 mL, 16.32 mmol)로 처리한 후 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 침천물을 여과로 수집하였다. 메틸 2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)이소니코티네이트 히드로클로라이드 (5.4 g, 99 %)를 옅은 오렌지색의 고체로서 분리하였다. MS m/z 300 (M+H)+
단계 2: 메틸 2-(2- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4- 카복실레이트 히드로클로라이드
메틸 2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)이소니코티네이트 히드로클로라이드 (5.4 g, 16.09 mmol)를 MeOH (40 mL) 중에 용해시키고 산화백금(Ⅳ) (0.365 g, 1.61 mmol)을 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 실온 및 5 bar에서 2 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 촉매를 여과하여 제거한 후 MeOH로 세척하고 용출액을 증발시켜 메틸 2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (5.1 g, 93 %)를 담갈색 고체로서 수득하였다. MS m/z 306 (M+H)+
단계 3: 디메틸 2-(2- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-1,4-디카복실레이트
메틸 2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (5.50 g, 16.09 mmol)를 DCM (100 mL) 중에 용해시킨 후, DIPEA (7.03 mL, 40.23 mmol)를 첨가하였다. 메틸 염화탄산 (1.774 mL, 22.53 mmol)을 상기 용액에 적가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 4 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 0.1 M HCl (100 mL)과 포화 NaHCO3 (100 mL)로 세척한 후, 상 분리기를 통해 건조한 후 증발시켜 디메틸 2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (5.33 g, 91 %)를 갈색 오일로서 수득하였다.
단계 4: 2-(2- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (5.33 g, 14.67 mmol)를 아세토니트릴 (35 mL)과 물 (0.700 mL)에 용해시킨 후, 브롬화리튬 (10.19 g, 117.37 mmol)을 첨가하였다. Et3N (8.18 mL, 58.68 mmol)을 첨가하고 생성된 황색 현탁액을 환류 하에 1 시간 동안 가열하였다. 물 (50 mL)과 MTBE (150 mL)를 첨가하였다. 상기 상들을 분리한 후 상기 유기층을 물로 추출하였다 (2 회). 모아진 수층을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화하고 MTBE로 추출하였다 (2 회). 상기 혼합된 유기층을 Na2SO4로 건조하고 여과한 후 증발시켜 2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (4.82 g, 94 %)을 담황색 고체로서 수득하였다. MS m/z 348 (M-H)-
참조 화합물 33
2-(3- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4-카복실산
단계 1: 2-(3- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )-4,4,5,5- 테트라메틸 -1,3,2-디 옥사 보롤란
4-브로모-2-플루오로-1-(트리플루오로메틸)벤젠 (5.08 g, 20.91 mmol)을 DMSO (40 mL) 중에 용해시킨 후, 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-비(1,3,2-디옥사보롤란) (6.16 g, 24.25 mmol), PdCl2(dppf) (0.756 g, 1.05 mmol) 및 아세트산 칼륨 (4.10 g, 41.81 mmol)을 첨가하고, 상기 혼합물을 80℃의 오일조 중에서 10 시간 동안 가열하였다. 상기 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고 물로 세척하였다. 상기 유기층을 Na2SO4로 건조한 후 증발시켰다. 잔류물을 바이오타지? KP-SIL 340g 컬럼 상에서 자동화 섬광 크로마토그래피로 정제하였다. 헵탄 중 0 % 내지 20 %의 EtOAc (10 CV)의 농도구배를 이동상으로 사용하였다. 2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (3.72 g, 61 %)을 분리하였다.
단계 2: 메틸 2-(3- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 ) 이소니코티네이트
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (2.86 g, 16.67 mmol), PdCl2(dppf) (0.278 g, 0.38 mmol) 및 탄산칼륨 (1.161 mL, 19.24 mmol)을 3 개의 전자렌지용 반응 유리병에 동일한 양으로 나누어 담았다. 메탄올 (45 mL) 중에 용해된 2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (3.72 g, 12.82 mmol)을 3 개의 동일한 분량으로 나누어 상기 유리병에 첨가하였다. 상기 유리병들의 뚜껑을 덮고 이를 단일 노드 전자렌지용 반응기 중에서 100℃로 각각 10 분간 가열하였다. 유리병의 내용물을 혼합한 후 용매를 증발시켰다. 잔류물을 DCM 중에 용해시키고 물로 세척하였다. 상기 유기상을 상 분리기를 통해 여과하고 증발시켰다. 잔류물을 바이오타지? KP-SIL 340g 컬럼 상에서 자동화 섬광 크로마토그래피로 정제하였다. 7:1의 헵탄:EtOAc (10 CV)를 이동상으로 사용하였다. 미정제 메틸 2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)이소니코티네이트 (2.92 g, 76 %)를 분리하였다. MS m/z 300 (M+H)+
단계 3: 메틸 2-(3- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4- 카복실레이트
메틸 2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)이소니코티네이트 (2.9 g, 9.69 mmol)를 메탄올 중에 용해시킨 후 염화수소 (메탄올 중 1.25 M, 11.63 mL, 14.54 mmol)를 첨가하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 메탄올 (50 mL) 중에 재용해시킨 후, 산화백금(Ⅳ) (0.220 g, 0.97 mmol)을 첨가하고 상기 반응 혼합물을 5 bar 및 실온에서 2 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 촉매를 여과로 제거하고 용매를 증발시켜 메틸 2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (3.12 g, 94 %)를 수득하였다. MS m/z 306 (M+H)+
단계 4: 디메틸 2-(3- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-1,4-디카복실레이트
2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (3.12 g, 10.22 mmol)를 디클로로메탄 (50 mL) 중에 용해시킨 후, DIPEA (4.45 mL, 25.55 mmol)와 메틸 염화탄산 (0.966 mL, 12.26 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 0.1 M HCl을 첨가하고 상기 수성층을 DCM으로 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 상 분리기를 통해 여과한 후 증발시켜 디메틸 2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (3.2 g, 86 %)를 수득하였다. MS m/z 364 (M+H)+
단계 5: 2-(3- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (3.2 g, 8.81 mmol)를 아세토니트릴 (40 mL)과 물 (0.800 mL) 중에 용해시킨 후, 브롬화리튬 (6.12 g, 70.46 mmol)을 첨가하였다. 트리에틸아민 (4.88 mL, 35.23 mmol)을 첨가하고 이렇게 해서 생성된 용액을 환류 하에 5 시간 동안 가열하였다. MTBE (110 mL)와 물 (60 mL)을 첨가하고, 상들을 분리한 후 상기 유기층을 물로 추출하였다. 상기 혼합된 수성층을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화하고 MTBE로 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 Na2SO4로 건조한 후 증발시켜 2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (3.07 g, 정량 분석)을 수득하였다. MS m/z 348 (M-H)-
참조 화합물 34
1-( 메톡시카보닐 )-2- 페닐피페리딘 -4- 카복실산
단계 1: 메틸 2- 페닐이소니코티네이트
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (2.5 g, 14.57 mmol), 페닐보론산 (2.66 g, 21.86 mmol), 탄산칼륨 (3.02 g, 21.86 mmol) 및 PdCl2(dppf) (0.316 g, 0.44 mmol)를 20 mL의 전자렌지용 유리병의 메탄올 (15 mL) 중에 혼합하였다. 두 방울의 물을 첨가하고 상기 유리병의 뚜껑을 덮고 단일 노드 전자렌지용 반응기 중에서 100℃로 10 분간 가열하였다. 고체를 여과로 제거하고 여과물을 부분적으로 증발시켜 어두운 색의 슬러리를 수득하였다. DCM과 물을 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 수상 (pH 9)을 DCM으로 추출한 후 상기 혼합된 유기상을 식염수로 세척하고, 상 분리기 통과 후 증발시켜 어두운 색의 오일을 수득하였다. 화합물을 바이오타지 [SNAP 340g KP-SIL, 용리액: 등용매 헵탄/에틸 아세테이트 9:1 (2 CV), 이후 선형 농도구배 헵탄/에틸 아세테이트 9:1 내지 6:4 (5 CV)]를 통해 정제하여 메틸 2-페닐이소니코티네이트 (1.83 g, 58 %)를 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ3.98 (s, 3H), 7.39 - 7.54 (m, 3H), 7.76 (dd, 1H), 8.01 - 8.09 (m, 2H), 8.29 (s, 1H), 8.82 (d, 1H). MS m/z 214 (M+H)+
단계 2: 메틸 2- 페닐피페리딘 -4- 카복실레이트
메틸 2-페닐이소니코티네이트 (1.83 g, 8.58 mmol)를 아세트산 (20 mL)에 용해시키고 산화백금(Ⅳ) (0.097 g, 0.43 mmol)을 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 실온 및 5 bar에서 2.5 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 촉매를 여과하여 제거한 후 MeOH로 세척하고 용출액을 증발시켰다. DCM과 10 % K2CO3를 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 수상을 DCM으로 추출한 후 상기 혼합된 유기상을 식염수로 세척하고, 상 분리기 통과 후 증발시켜 미정제 메틸 2-페닐피페리딘-4-카복실레이트 (2.131 g)를 황색 오일로서 수득하였다. MS m/z 220 (M+H)+
단계 3: 디메틸 2- 페닐피페리딘 -1,4- 디카복실레이트
메틸 2-페닐피페리딘-4-카복실레이트 (4.33 g, 19.75 mmol)를 DCM (150 mL) 및 DIPEA (3.78 mL, 21.72 mmol) 중에 용해시킨 후, 메틸 염화탄산 (1.710 mL, 21.72 mmol)을 첨가하였다. 상기 용액을 실온에서 1 시간 45 분 동안 교반하였다. DIPEA (1.720 mL, 9.87 mmol)와 메틸 염화탄산 (0.777 mL, 9.87 mmol)을 더 첨가하고 상기 반응물을 실온에서 30 분간을 더 지속하였다. 상기 반응 혼합물을 0.1 M HCl 및 포화 NaHCO3로 세척하였다. 상기 유기상은 상 분리기 통과 후 증발시켜 디메틸 2-페닐피페리딘-1,4-디카복실레이트 (5.88 g, 정량 분석)를 황색 오일로서 수득하였다. MS m/z 278 (M+H)+
단계 4: 1-( 메톡시카보닐 )-2- 페닐피페리딘 -4- 카복실산
디메틸 2-페닐피페리딘-1,4-디카복실레이트 (5.88 g, 21.20 mmol)를 아세토니트릴 (60 mL)과 물 (1.2 mL)에 용해시킨 후, 브롬화리튬 (4.25 mL, 169.63 mmol)을 첨가하였다. 트리에틸아민 (11.76 mL, 84.81 mmol)을 첨가하고 생성된 황색 현탁액을 환류에서 1 시간 동안 가열하였다. 물 (60 mL)과 MTBE를 첨가하였다. 상기 유기상을 물로 추출하였다 (x2). 모아진 수성층에 MTBE를 첨가한 후, 상기 용액을 3.8 M aq HCl을 사용하여 pH 1로 산성화한 후, MTBE로 추출하였다 (x2). 상기 혼합된 유기층을 물로 세척한 후 증발시켰다. 미량의 물을 MeCN에 의해 공비 제거하였다. 1-(메톡시카보닐)-2-페닐피페리딘-4-카복실산 (5.25 g, 94 %)을 담황색 반고체로서 분리하였다. MS m/z 264 (M+H)+
참조 화합물 35
2- 시클로헥실 -1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 2- 시클로헥실피페리딘 -4- 카복실레이트 히드로클로라이드
메틸 2-페닐이소니코티네이트 (3.182 g, 14.92 mmol) (참조 화합물 34, 단계 1)를 MeOH (30 mL)에 용해시키고 염화수소 (MeOH 중 1.25 M, 14.33 mL, 17.91 mmol)를 첨가하였다. 용매를 증발시켜 담황색 고체를 수득하였다. 잔류물을 MeOH (60 mL)에 용해시키고 산화백금(Ⅳ) (0.102 g, 0.45 mmol)을 첨가하였다. 이후, 상기 생성된 혼합물을 8 bar에서 5 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 산화백금(Ⅳ) (121 mg)을 더 첨가하고 상기 수소화를 8 bar에서 밤새 지속하였다 (15 h). 산화백금(Ⅳ) (120 mg)을 첨가하고 상기 수소화를 60℃에서 5 시간 동안 지속하였다. 산화백금(Ⅳ) (120 mg)을 첨가하고 상기 수소화를 60℃에서 밤새 지속하였다 (15 h). 상기 반응 혼합물을 규조토를 함유하는 필터 곽을 통해 여과한 후 메탄올로 세척하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 진공 속에서 건조시켜 백색 고체를 수득하였다. 잔류물을 MeOH (60 mL)에 재용해시켰다. 산화백금(Ⅳ) (340 mg)을 첨가하고 수소화를 8 bar, 60℃에서 밤새 지속하였다 (22 h). 상기 반응 혼합물을 규조토를 함유하는 필터 곽을 통해 여과한 후 메탄올로 세척하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 진공 속에서 건조시켜 메틸 2-시클로헥실피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (3.50 g, 89 %)를 백색 고체로서 수득하였다. MS m/z 226 (M+H)+
단계 2: 디메틸 2- 시클로헥실피페리딘 -1,4- 디카복실레이트
DCM (50 mL) 중의 메틸 클로로포르메이트 (1.344 mL, 17.36 mmol)를 DCM (100 mL) 중의 메틸 2-시클로헥실피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (3.50 g, 13.35 mmol)와 DIPEA (1.88 mL, 10.76 mmol)의 용액에 첨가하였다. 상기 반응 용액을 3 시간 동안 교반하였다. 1.88 mL의 DIPEA와 1.345 mL의 메틸 클로로포르메이트를 첨가하고 상기 반응을 밤새 지속하였다 (16 h). 상기 유기상을 포화 NaHCO3로 세척하였다. 상기 상들을 분리한 후, 상기 유기상을 상 분리기를 사용해 건조시켜 미정제 디메틸 2-시클로헥실피페리딘-1,4-디카복실레이트 (4.90 g)를 수득하였다. MS m/z 284 (M+H)+
단계 3: 2- 시클로헥실 -1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-시클로헥실피페리딘-1,4-디카복실레이트 (4.90 g, 미정제)를 아세토니트릴 (30 mL)과 물 (0.600 mL)에 용해시켰다. 브롬화리튬 (9.28 g, 106.80 mmol)과 트리에틸아민 (7.40 mL, 53.40 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 환류 하에 2 시간 동안 가열하였다. 물 (60 mL)과 MTBE를 첨가하였다. 상기 유기상을 물로 추출하였다 (x2). MTBE를 모아진 수성층에 첨가하고 상기 용액을 2 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화한 후 MTBE로 추출하였다 (x2). 상기 혼합된 유기층을 Na2SO4로 건조한 후 증발시켜 2-시클로헥실-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (3.28 g, 91 % (2 단계를 거친 결과))을 담황색 반고체로서 수득하였다. MS m/z 270 (M+H)+
참조 화합물 36
1-( 벤질옥시카보닐 )-2-(2- 메틸 -2H- 테트라졸 -5-일)피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 에틸 2- 카바모일이소니코티네이트
포름아미드 (80 mL, 2012.41 mmol) 중의 에틸 이소니코티네이트 (10 g, 66.15 mmol)와 농축 황산 (3.53 mL, 66.15 mmol)의 용액에, 30% 과산화수소 (2.399 mL, 99.23 mmol)와 분말화된 황산 제1철 칠수화물 (27.6 g, 99.23 mmol)을 적절히 교반하고 얼음조에서 냉각하면서 각기 개별적으로 동시에 15 분간에 걸쳐 첨가하였다. 첨가가 완료된 후 상기 얼음조를 제거하고 교반을 2 시간 동안 지속하였다. 나트륨 2-히드록시프로판-1,2,3-트리카복실레이트 (132 mL, 132.31 mmol) (시트르산삼나트륨)를 첨가하고 상기 혼합물을 포화 NaHCO3를 첨가해 pH 8로 하였다. 상기 반응 혼합물을 DCM으로 3 회 추출하고 혼합된 유기 추출물을 냉수로 세척한 후, Na2SO4로 건조한 후 증발시켰다. 상기 고체 잔류물은 소량의 생성물을 포함하고 있다. EtOH로부터 재결정화된 미정제 생성물 중에 다량의 목적하는 생성물이 존재하기 전에, 상기 미정제 생성물에 대해 위와 같이 동일한 처리를 2 회 더 수행하였다. 수율: 4.3 g. 헵탄/EtOAc 80/20 - 10/90을 이용한 바이오타지 상에서 모액을 정제하여 다시 0.8 g의 생성물을 수득하였다. 에틸 2-카바모일이소니코티네이트 (5.1 g, 40 %)를 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, dmso) δ1.34 (t, 3H), 4.37 (q, 2H), 7.79 (s, 1H), 8.00 (d, 1H), 8.22 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.83 (d, 1H). MS m/z 195 (M+H)+
단계 2: 에틸 2- 카바모일피페리딘 -4- 카복실레이트 히드로클로라이드
에틸 2-카바모일이소니코티네이트 (4.24 g, 21.83 mmol)를 MeOH (50 mL)와 MeOH (17.47 mL, 21.83 mmol) 중의 HCl에서 슬러리화하고 산화백금(Ⅳ) (0.248 g, 1.09 mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 뷔치 수소발생장치 중, 5 bar에서 수소화하였다. 3 시간 후에도 여전히 출발 물질은 남아있었다. 산화백금(Ⅳ) (0.14 g, 0.62 mmol)을 첨가하여 상기 반응을 2 시간 동안 지속하고, 산화백금(Ⅳ) (0.387 g, 1.70 mmol)을 첨가하여 상기 반응물을 밤새 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 여과 후 증발시켜 에틸 2-카바모일피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (3.93 g, 90 %)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, dmso) δ1.16 (t, 3H), 1.31 - 1.63 (m, 2H), 1.86 (d, 1H), 2.26 (d, 1H), 2.54 - 2.66 (m, 1H), 2.74 - 2.88 (m, 1H), 3.10 - 3.19 (m, 1H), 3.47 - 3.56 (m, 1H), 4.06 (q, 2H), 7.38 (s, 1H), 7.71 (s, 1H). MS m/z 201 (M+H)+
단계 3: 1-벤질 4-에틸 2- 카바모일피페리딘 -1,4- 디카복실레이트
에틸 2-카바모일피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (2 g, 7.86 mmol)를 디클로로메탄 (25 mL) 중에서 슬러리화 하고 DIPEA (3.43 mL, 19.65 mmol)를 첨가한 후 벤질 염화탄산 (1.161 mL, 8.25 mmol)을 적가하였다. 상기 반응물을 1 시간 동안 교반한 후 25 mL의 2 M HCl 및 물로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 후 증발시켰다. 상기 미정제 생성물을 헵탄/EtOAc (4 CV) 이후 100% EtOAc (10 CV)를 이용한 100 g 바이오타지 컬럼 상에서 정제하였다. 1-벤질 4-에틸 2-카바모일피페리딘-1,4-디카복실레이트 (1.99 g, 76 %)를 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, dmso) δ1.16 (t, 3H), 1.57 - 1.69 (m, 1H), 1.81 - 1.92 (m, 1H), 1.95 - 2.07 (m, 1H), 2.21 - 2.32 (m, 1H), 2.58 - 2.67 (m, 1H), 3.29 - 3.45 (m, 1H), 3.69 - 3.77 (m, 1H), 3.92 - 4.06 (m, 2H), 4.34 (t, 1H), 4.99 - 5.08 (m, 2H), 6.95 (s, 1H), 7.25 - 7.38 (m, 6H). MS m/z 335 (M+H)+
단계 4: 1-벤질 4-에틸 2- 시아노피페리딘 -1,4- 디카복실레이트
1-벤질 4-에틸 2-카바모일피페리딘-1,4-디카복실레이트 (2.4 g, 7.18 mmol)를 피리딘 (50 mL, 618.21 mmol) 중에 용해하였다. 상기 혼합물을 얼음조에서 냉각하고 SOCl2 (3.14 mL, 43.07 mmol)를 적가해 실온에서 밤새 방치하였다. 상기 반응 혼합물을 증발시킨 후 희석된 HCl과 DCM 사이에 구분시켜 놓았다. 상기 수성층을 DCM으로 추출한 후, 상기 혼합된 유기층을 물로 세척한 후, Na2SO4로 건조하고 증발시켰다. 미정제 1-벤질 4-에틸 2-시아노피페리딘-1,4-디카복실레이트 (2.25 g, 99 %)를 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, dmso) δ1.21 (t, 3H), 1.54 - 1.66 (m, 1H), 1.98 - 2.12 (m, 2H), 2.29 - 2.37 (m, 1H), 2.83 - 2.91 (m, 1H), 3.04 - 3.16 (m, 1H), 3.83 - 3.91 (m, 1H), 4.02 - 4.18 (m, 2H), 5.13 (s, 2H), 5.25 - 5.31 (m, 1H), 7.28 - 7.40 (m, 5H).
단계 5: 1-벤질 4-에틸 2-(1H- 테트라졸 -5-일)피페리딘-1,4- 디카복실레이트
1-벤질 4-에틸 2-시아노피페리딘-1,4-디카복실레이트 (2.5 g, 7.90 mmol)를 톨루엔 (50 mL) 중에 용해시킨 후, 아지드화 나트륨 (0.822 g, 12.64 mmol)과 트리에틸아민 히드로클로라이드 (1.740 g, 12.64 mmol)를 첨가하고 상기 혼합물을 95℃에서 밤새 가열하였다. 상기 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 2 M HCl로 세척하였다. 상기 수상을 EtOAc로 추출하고 상기 혼합된 유기상을 Na2SO4로 건조한 후 증발시켜 1-벤질 4-에틸 2-(1H-테트라졸-5-일)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (2.8 g, 99 %)를 수득하였다. MS m/z 360 (M+H)+
단계 6: 1-벤질 4-에틸 2-(2- 메틸 -2H- 테트라졸 -5-일)피페리딘-1,4- 디카복 실레이트 및 1-벤질 4-에틸 2-(1- 메틸 -1H- 테트라졸 -5-일)피페리딘-1,4- 디카복실레이트
1-벤질 4-에틸 2-(1H-테트라졸-5-일)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (3.45 g, 9.60 mmol)를 아세톤 (20 mL)에 용해시킨 후, 요오드메탄 (2.99 mL, 48.00 mmol)과 K2CO3 (3.98 g, 28.80 mmol)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 물과 EtOAc 사이에 구분시켜 놓았다. 상기 수성층을 EtOAc로 2 회 추출하고 상기 혼합된 유기상을 물로 세척한 후 증발시켰다. 상기 미정제 생성물을 헵탄/EtOAc 88/12 - 0/100 [12 컬럼 부피 (CV)]를 이용한 100 g 바이오타지 컬럼 상에서 정제하였다. 1-벤질 4-에틸 2-(2-메틸-2H-테트라졸-5-일)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (1.84 g, 51 %) 및 1-벤질 4-에틸 2-(1-메틸-1H-테트라졸-5-일)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (1.14 g, 32 %)를 분리하였다. 2-메틸-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.15 (t, 3H), 1.75 - 1.87 (m, 1H), 2.02 - 2.11 (m, 1H), 2.27 - 2.37 (m, 1H), 2.66 - 2.78 (m, 2H), 3.55 - 3.65 (m, 1H), 3.75 - 3.86 (m, 1H), 3.90 - 3.99 (m, 1H), 4.01 - 4.09 (m, 1H), 4.25 (s, 3H), 5.13 (q, 2H), 5.55 - 5.62 (m, 1H), 7.25 - 7.38 (m, 5H). MS m/z 374 (M+H)+. 3-메틸-이성질체: MS m/z 374 (M+H)+
단계 7: 1-( 벤질옥시카보닐 )-2-(2- 메틸 -2H- 테트라졸 -5-일)피페리딘-4- 카복실산
1-벤질 4-에틸 2-(2-메틸-2H-테트라졸-5-일)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (0.92 g, 2.36 mmol)를 THF (10 mL)와 물 (10 mL) 중에 용해시킨 후, LiOH (0.239 g, 9.98 mmol)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 1 시간 10 분 동안 교반한 후, 물로 희석하고 2 M HCl로 산성화하였다. 상기 수상을 EtOAc로 3 회 추출하고, 상기 혼합된 유기상을 Na2SO4로 건조 후 증발시켜 1-(벤질옥시카보닐)-2-(2-메틸-2H-테트라졸-5-일)피페리딘-4-카복실산 (828 mg, 정량 분석)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.80 - 1.91 (m, 1H), 2.01 - 2.11 (m, 1H), 2.34 (dt, 1H), 2.63 - 2.79 (m, 2H), 3.55 - 3.65 (m, 1H), 4.01 - 4.09 (m, 1H), 4.24 (s, 3H), 5.13 (d, 2H), 5.60 (dd, 1H), 7.27 - 7.39 (m, 5H). MS m/z 346 (M+H)+
참조 화합물 37
1-( 벤질옥시카보닐 )-2-(1- 메틸 -1H- 테트라졸 -5-일)피페리딘-4- 카복실산
1-벤질 4-에틸 2-(1-메틸-1H-테트라졸-5-일)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (1.14 g, 2.93 mmol) (참조 화합물 36, 단계 6)를 THF (10 mL)와 물 (10 mL) 중에 용해시키고 LiOH (0.280 g, 11.69 mmol)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 30 분간 교반한 후, 물로 희석하고 2 M HCl로 산성화하였다. 수성층을 EtOAc로 3 회 추출하고, 상기 혼합된 유기상을 Na2SO4로 건조 후 증발시켜 1-(벤질옥시카보닐)-2-(1-메틸-1H-테트라졸-5-일)피페리딘-4-카복실산 (990 mg, 98 %)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.89 - 2.01 (m, 1H), 2.15 - 2.24 (m, 1H), 2.27 - 2.36 (m, 1H), 2.50 - 2.61 (m, 1H), 2.78 (p, 1H), 3.68 - 3.80 (m, 1H), 3.91 - 4.09 (m, 4H), 5.08 (q, 2H), 5.44 (t, 1H), 7.23 - 7.39 (m, 5H). MS m/z 346 (M+H)+
참조 화합물 38
2-( 시클로헥실옥시메틸 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 2-( 히드록시메틸 ) 이소니코티네이트
상기 반응은 별도의 두 1000 mL 둥근 바닥 플라스크 중에서 수행하였다. 환류 하에 MeOH (700 mL) 중의 메틸 이소니코티네이트 (70 g, 510.44 mmol)와 황산 (2.340 mL, 43.90 mmol)의 용액에, 물 (350 mL) 중의 과황산 암모늄 (210 g, 918.80 mmol)의 용액을 20 분간에 걸쳐 첨가하였다. 상기 반응물을 20 분간 환류시킨 후 실온으로 냉각시켰다. 고체를 여과하여 제거하고 MeOH로 세척하였다. MeOH를 감압 하에 여과물로부터 제거한 후, 빙냉 하에 고체 Na2CO3를 조심스럽게 단계적으로 첨가하여 중화시켰다. 상기 수용액을 에틸 아세테이트로 추출하고 상기 혼합된 유기층을 Na2SO4로 건조한 후 증발시켰다. 암갈색 잔류물을 시클로헥산 (3 x 300 mL)으로 처리하고 상기 시클로헥산 상을 따라 내었다. 상기 잔류하고 있는 암갈색 잔류물을 2 개의 바이오타지? KP-SIL 340g 컬럼 상에서 자동화 섬광 크로마토그래피로 정제하였다. 헵탄 중 25 % 내지 100 %의 EtOAc (10 CV) 농도구배를 이동상으로 사용하였다. 메틸 2-(히드록시메틸)이소니코티네이트 (27.5 g, 32 %)를 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ3.90 (s, 3H), 4.78 (s, 2H), 7.57 - 7.90 (m, 2H), 8.64 (s, 1H). MS m/z 168 (M+H)+
단계 2: 메틸 2-( 페녹시메틸 ) 이소니코티네이트
THF (15 mL)와 페놀 (1.426 mL, 16.02 mmol) 중에 용해된 메틸 2-(히드록시메틸)이소니코티네이트 (2.232 g, 13.35 mmol) 및 트리페닐포스핀 (3.71 mL, 16.02 mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 0℃로 냉각시켰다. (E)-디이소프로필 디아젠-1,2-디카복실레이트 (3.24 g, 16.02 mmol)를 적가하고, 얼음조를 제거한 후 상기 반응물을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 바이오타지? KP-SIL 340g 컬럼 상에서 자동화 섬광 크로마토그래피로 정제하였다. 4:1의 EtOAc (10 CV)를 이동상으로 사용하였다. 메틸 2-(페녹시메틸)이소니코티네이트 (2.65 g, 82 %)를 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ3.96 (s, 3H), 5.26 (s, 2H), 6.95 - 7.04 (m, 3H), 7.27 - 7.34 (m, 2H), 7.76 - 7.80 (m, 1H), 8.10 (s, 1H), 8.75 (d, 1H). MS m/z 244 (M+H)+
단계 3: 메틸 2-( 시클로헥실옥시메틸 )피페리딘-4- 카복실레이트
메틸 2-(페녹시메틸)이소니코티네이트 (2.6 g, 10.69 mmol)를 아세트산 (50 mL)에 용해시킨 후, 산화백금(Ⅳ) (0.243 g, 1.07 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 5 bar 및 실온에서 6 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 촉매를 여과로 제거하고 용매를 증발시켰다. 잔류물을 DCM에 녹이고 상기 유기상을 포화 NaHCO3로 세척하였다. 상기 수상을 DCM으로 추출한 후, 상기 혼합된 유기상을 상 분리기를 통해 여과한 후 증발시켰다. 메틸 2-(시클로헥실옥시메틸)피페리딘-4-카복실레이트 (2 g, 73 %)를 분리하였다.
단계 4: 디메틸 2-( 시클로헥실옥시메틸 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(시클로헥실옥시메틸)피페리딘-4-카복실레이트 (2.13 g, 8.34 mmol)를 디클로로메탄 (50 mL) 중에 용해시켰다. DIPEA (2.034 mL, 11.68 mmol)와 메틸 염화탄산 (0.788 mL, 10.01 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 0.1 M NH4Cl을 첨가하고 상기 수성층을 DCM으로 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 상 분리기를 통해 여과한 후 증발시켰다. 디메틸 2-(시클로헥실옥시메틸)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (2.54 g, 97 %)를 분리하였다. MS m/z 314 (M+H)+
단계 5: 2-( 시클로헥실옥시메틸 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(시클로헥실옥시메틸)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (2.54 g, 8.1 mmol)를 아세토니트릴 (35 mL)과 물 (0.7 mL)에 용해한 후, 브롬화리튬 (5.63 g, 64.80 mmol)을 첨가하였다. 트리에틸아민 (4.49 mL, 32.40 mmol)을 첨가하고 생성된 현탁액을 환류 하에 4 시간 동안 가열하였다. MTBE (100 mL)와 물 (50 mL)을 첨가하고, 상들을 분리한 후 상기 유기층을 물로 추출하였다. 상기 혼합된 수성층을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화하고 MTBE로 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 Na2SO4로 건조한 후 증발시켰다. 2-(시클로헥실옥시메틸)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (2.43 g, 정량 분석)을 분리하였다. MS m/z 300 (M+H)+
참조 화합물 39
2-( 디플루오로메틸 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 2- 포르밀이소니코티네이트
메틸 2-(히드록시메틸)이소니코티네이트 (8.36 g, 50 mmol) (참조 화합물 38, 단계 1)를 디클로로메탄 (150 mL)에 용해시켰다. 데스 마틴(Dess-Martin) 과요오드화물 (periodinane) (25 g, 58.94 mmol)을 첨가한 후, 상기 혼합물을 실온에서 2 시간 30 분간 교반하였다. 나트륨 설포티오에이트 (59.3 g, 375.00 mmol)를 포화 NaHCO3에 용해시켜 상기 반응 혼합물에 첨가하였다. 상기 현탁액을 실온에서 15 분간 세게 교반하고, DCM을 첨가한 후 상들을 분리하였다. 상기 수상을 DCM으로 추출한 후, 상기 혼합된 유기층을 MgSO4로 건조한 후 증발시켰다. 잔류물을 바이오타지? KP-SIL 340g 컬럼 상에서 자동화 섬광 크로마토그래피로 정제하였다. 헵탄 / EtOAc 80:20 내지 65:35 (5 CV)의 농도구배를 이동상으로 사용하였다. 메틸 2-포르밀이소니코티네이트 (7 g, 85 %)를 황백색 고체로서 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ4.00 (s, 3H), 8.09 (dd, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.95 (d, 1H), 10.15 (s, 1H). MS m/z 165 (M)+
단계 2: 메틸 2-( 디플루오로메틸 ) 이소니코티네이트
메틸 2-포르밀이소니코티네이트 (2.51 g, 15.20 mmol)를 디클로로메탄 (50 mL) 중에 용해시킨 후 0℃로 냉각하였다. 디에틸아미노황 트리플루오라이드 (DAST) (2.61 mL, 19.76 mmol)를 적가하였다. 냉각 장치를 제거하고 상기 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 포화 NaHCO3를 0℃에서 첨가한 후 상들을 분리하였다. 상기 수상을 DCM으로 추출하였다. 상기 혼합된 유기상을 상 분리기를 통해 여과하고 증발시켰다. 잔류물을 바이오타지? KP-SIL 50g 컬럼 상에서 자동화 섬광 크로마토그래피로 정제하였다. 5:1의 EtOAc (10 CV)를 이동상으로 사용하였다. 메틸 2-(디플루오로메틸)이소니코티네이트 (2.4 g, 84 %)를 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ4.00 (s, 3H), 6.70 (t, 1H), 7.97 (d, 1H), 8.19 (s, 1H), 8.82 (d, 1H).
단계 3: 메틸 2-( 디플루오로메틸 )피페리딘-4- 카복실레이트
메틸 2-(디플루오로메틸)이소니코티네이트 (2.4 g, 12.82 mmol)를 아세트산 (40 mL) 중에 용해시켰다. 산화백금(Ⅳ) (0.291 g, 1.28 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 5 bar 및 실온에서 7 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 촉매를 여과로 제거하고, 새로운 산화백금(Ⅳ) (210 mg, 0.92 mmol)을 첨가하고 상기 수소화를 5 bar 및 실온에서 6 시간 동안 지속하였다. 촉매를 여과로 제거하고 용매를 증발시켰다. 잔류물을 DCM에 녹이고 상기 유기상을 포화 NaHCO3로 세척하였다. 상기 수상을 DCM으로 추출한 후, 상기 혼합된 유기상을 상 분리기를 통해 여과하고 증발시켰다. 메틸 2-(디플루오로메틸)피페리딘-4-카복실레이트 (1.85 g, 75 %)를 분리하였다. MS m/z 194 (M+H)+
단계 4: 디메틸 2-( 디플루오로메틸 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(디플루오로메틸)피페리딘-4-카복실레이트 (1.85 g, 9.58 mmol)를 디클로로메탄 (50 mL) 중에 용해시킨 후, DIPEA (2.335 mL, 13.41 mmol)와 메틸 염화탄산 (0.905 mL, 11.49 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 0.1 M NH4Cl을 첨가하고 상기 수성층을 DCM으로 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 상 분리기를 통해 여과하고 증발시켰다. 미정제 디메틸 2-(디플루오로메틸)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (2.35 g, 98 %)를 분리하였다.
단계 5: 2-( 디플루오로메틸 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(디플루오로메틸)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (2.35 g, 9.35 mmol)를 THF (35 mL)에 용해시킨 후 물 중의 1 M 수산화리튬 (12.16 mL, 12.16 mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반한 후, 1 M HCl과 DCM을 첨가하고 상들을 분리하였다. 상기 수상을 DCM으로 추출한 후, 상기 혼합된 유기층을 상 분리기를 통한 여과로 건조한 후 증발시켰다. 2-(디플루오로메틸)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (2.2 g, 99 %)을 분리하였다. MS m/z 275 (M-H)-
참조 화합물 40
2-((4,4- 디플루오로시클로헥실 ) 메틸 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: (4,4- 디플루오로시클로헥실 )메탄 올
에틸 4,4-디플루오로시클로헥산카복실레이트 (10 g, 52.03 mmol)를 THF (100 mL) 중에 용해시킨 후, 질소 대기 하에 1℃로 냉각하였다. LAH (57.2 mL, 57.23 mmol)를 10℃ 미만의 온도를 유지되는 속도로 상기 용액에 적가하였다. 상기 생성된 혼합물을 20℃에 도달하도록 한 후, 그 온도에서 약 1 시간 동안 교반하였다. 다음으로, 상기 반응 혼합물을 10℃로 냉각하고, 2.2 mL의 물, 2.2 mL의 15 w/v% 수성 NaOH 및 6.6 mL의 물을 순차적으로 천천히 첨가하여 조심스럽게 반응을 중지시킨 후, 20℃에서 30 분간 교반시켰다. 고체를 여과로 제거하고 THF로 세척하였다. 상기 반응 용액을 MgSO4로 건조한 후 진공 속에서 증발시켜 미정제 (4,4-디플루오로-시클로헥실)메탄올 (7.22 g, 92 %)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.21 - 1.38 (m, 2H), 1.44 (s, 1H), 1.51 - 1.90 (m, 5H), 2.04 - 2.18 (m, 2H), 3.52 (d, 2H).
단계 2: 4-( 브로모메틸 )-1,1- 디플루오로시클로헥산
(4,4-디플루오로시클로헥실)메탄올 (7.22 g, 48.08 mmol)과 트리페닐포스핀 (25.2 g, 96.16 mmol)을 DCM (75 mL) 중에 용해시킨 후 질소 대기 하에 0℃로 냉각하였다. 사브롬화탄소 (31.9 g, 96.16 mmol)를 DCM (75 mL) 중에 용해시킨 후 상기 반응 혼합물에 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매는 증발시켰다. 펜탄 (250 mL)을 오렌지색 잔류물에 첨가하여, 트리페닐포스핀옥사이드를 침전시켰다. 황백색의 고체를 여과하여 제거하였다. 여과물을 증발시킨 후 ISOLUTE 실리카 섬광 컬럼 (50 g) 상에서 정제하였다. 펜탄 이후 EtOAc:펜탄 (1% EtOAc)을 용리액으로 사용하였다. 4-(브로모메틸)-1,1-디플루오로시클로헥산 (5.48 g, 54 %)을 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.32 - 1.46 (m, 2H), 1.64 - 1.84 (m, 3H), 1.90 - 1.99 (m, 2H), 2.05 - 2.18 (m, 2H), 3.31 (d, 2H).
단계 3: ((4,4- 디플루오로시클로헥실 ) 메틸 )아연( Ⅱ ) 브롬화물
아연 분말 (1.43 g, 21.87 mmol)을 건조된 플라스크에 첨가한 후, 진공 하에 70℃에서 30 분간 가열하였다. 무수 DMA (29 mL)와 요오드 (0.092 g, 0.37 mmol)를 첨가한 후, 상기 혼합물을 적갈색이 사라질 때까지 (약 5 분간) 70℃에서 가열하였다. 4-(브로모메틸)-1,1-디플루오로시클로헥산 (3.1 g, 14.55 mmol)을 첨가하고 약 42 시간 동안 가열을 지속하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 차후 변환 반응에서 사용하였다.
단계 4: 메틸 2-((4,4- 디플루오로시클로헥실 ) 메틸 ) 이소니코티네이트
질소 하에 메틸-2-클로로이소니코티네이트 (1.664 g, 9.7 mmol) 및 비스(트리-tert-부틸포스핀)팔라듐(0) (198 mg, 0.38 mmol)에 테트라히드로푸란 (10 mL)을 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액에 새로 제조된 ((4,4-디플루오로시클로헥실)메틸)아연(Ⅱ) 브롬화물 (14.55 mmol, 29 mL DMA 중 0.5 M)을 첨가한 후 여기서 생성된 갈색 혼합물을 60℃로 4 시간 동안 가열하였다. 상기 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고 포화 NaHCO3 (2 회), 포화 NH4Cl 및 식염수로 세척하였다. 상기 유기층을 MgSO4로 건조하고 여과 후 증발시켰다. 잔류물을 DCM 중에 용해시키고 SCX-2 양이온 교환 컬럼 상에 첨가하였다. 상기 컬럼을 DCM, MeOH로 세척한 후, NH3/MeOH로 용리시켰다. 상기 NH3/MeOH 층을 증발시켜 메틸 2-((4,4-디플루오로시클로헥실)메틸)이소니코티네이트 (2 g, 67%)를 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.30 - 1.46 (m, 2H), 1.58 - 1.79 (m, 4H), 1.87 - 2.14 (m, 3H), 2.82 (d, 2H), 3.96 (s, 3H), 7.65 - 7.73 (m, 2H), 8.70 (d, 1H). MS m/z 270 (M+H)+
단계 5: 메틸 2-((4,4- 디플루오로시클로헥실 ) 메틸 )피페리딘-4- 카복실레이트 히드로클로라이드
메틸 2-((4,4-디플루오로시클로헥실)메틸)이소니코티네이트 (5 g, 18.6 mmol)를 HCl (디옥산 중 4 M)로 처리한 후 증발시켜 메틸 2-((4,4-디플루오로시클로헥실)메틸)-이소니코티네이트 히드로클로라이드 (5.6 g, 18.32 mmol)를 수득하고 이를 MeOH (100 mL)에 녹인 후, 산화백금(Ⅳ) (0.416 g, 1.83 mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 5 bar에서 뷔치 수소발생장치 중 수소화하였다. 촉매를 여과하여 제거한 후 용매를 증발시켜 메틸 2-((4,4-디플루오로시클로헥실)메틸)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (5.1 g, 89 %)를 수득하였다. MS m/z 276 (M+H)+
단계 6: 디메틸 2-((4,4- 디플루오로시클로헥실 ) 메틸 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-((4,4-디플루오로시클로헥실)메틸)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (5.1 g, 16.36 mmol)를 DCM (150 mL) 중에 용해한 후, DIPEA (7.14 mL, 40.89 mmol)를 첨가하였다. 메틸 염화탄산 (1.803 mL, 22.90 mmol)을 상기 용액에 적가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 0.1 M HCl (100 mL) 및 포화 NaHCO3 (100 mL)로 세척한 후, 상 분리기를 통해 건조하고 증발시켜 미정제 디메틸 2-((4,4-디플루오로시클로헥실)메틸)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (5.7 g, 105 %)를 수득하였다.
단계 7: 2-((4,4- 디플루오로시클로헥실 ) 메틸 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4-카 복실 산
디메틸 2-((4,4-디플루오로시클로헥실)메틸)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (5.7 g, 17.10 mmol)를 아세토니트릴 (75 mL)과 물 (1.5 mL)에 용해시킨 후, 브롬화리튬 (11.88 g, 136.78 mmol)을 첨가하였다. Et3N (9.53 mL, 68.39 mmol)을 상기 용액에 첨가하였다. 생성된 황색 현탁액을 환류로 2 시간 동안 가열하였다. 물 (100 mL)과 MTBE (300 mL)를 첨가하였다. 상기 상들을 분리한 후 상기 유기층을 물로 추출하였다 (2 회). 모아진 수층을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화하고 MTBE로 추출하였다 (2 회). 상기 혼합된 유기층을 Na2SO4로 건조하고 여과한 후 증발시켜 2-((4,4-디플루오로시클로헥실)메틸)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (4.82 g, 88 %)을 백색 고체로서 수득하였다.
참조 화합물 41
2-(4- 플루오로페네틸 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: (E)- 메틸 2-(4- 플루오로스티릴 ) 이소니코티네이트
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (5.5 g, 32.05 mmol), (E)-4-플루오로스티릴보론산 (7.98 g, 48.08 mmol), 인산칼륨 (3.93 mL, 48.08 mmol) 및 PdCl2(dppf) (0.464 g, 0.64 mmol)를 5 개의 동일한 양으로 나누어 담고, 이 각 분율을 전자렌지용 반응 용기에 담았다. 상기 용기를 비우고 질소로 다시 채웠다. 메탄올 (15 mL)을 각 용기에 첨가하고, 이 용기들을 밀봉한 후 단일 노드 전자렌지용 반응기 중에서 각각 100℃로 10 분간 가열하였다. 용기의 내용물을 모으고 여기에 물과 DCM을 첨가하고, 상들을 분리한 후 상기 수성층을 DCM으로 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 상 분리기를 통해 여과하고 증발시켰다. 잔류물을 바이오타지? KP-SIL 340g 컬럼 상에서 자동화 섬광 크로마토그래피로 정제하였다. 헵탄 중 6:1 내지 4:1의 EtOAc (15 CV)의 농도구배를 이동상으로 사용하였다. (E)-메틸 2-(4-플루오로스티릴)이소니코티네이트 (3.88 g, 47 %)를 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ3.98 (s, 3H), 7.04 - 7.18 (m, 3H), 7.52 - 7.62 (m, 2H), 7.63 - 7.71 (m, 2H), 7.93 (s, 1H), 8.74 (d, 1H). MS m/z 258 (M+H)+
단계 2: 메틸 2-(4- 플루오로페네틸 ) 이소니코티네이트
(E)-메틸 2-(4-플루오로스티릴)이소니코티네이트 (3.6 g, 13.99 mmol)를 메탄올 (200 mL)에 용해시켰다. 활성탄에 흡착된 팔라듐 (0.149 g, 1.40 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 대기압 및 실온에서 18 시간 동안 수소화하였다. 촉매를 여과하여 제거한 후 여과물을 증발시켰다. 메틸 2-(4-플루오로페네틸)이소니코티네이트 (3.63 g, 99 %)를 분리하였다. MS m/z 260 (M+H)+
단계 3: 메틸 2-(4- 플루오로페네틸 )피페리딘-4- 카복실레이트
메틸 2-(4-플루오로페네틸)이소니코티네이트 (3.8 g, 14.66 mmol)를 아세트산 (150 mL)에 용해시키고 산화백금(Ⅳ) (0.25 g, 1.10 mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 5 bar 및 실온에서 5 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 촉매를 여과로 제거하고 용매는 증발시켰다. 잔류물을 DCM에 녹이고 포화 NaHCO3로 세척하였다. 상기 유기상을 상 분리기를 통해 여과하고 증발시켰다. 메틸 2-(4-플루오로페네틸)피페리딘-4-카복실레이트 (3.89 g, 정량 분석)를 분리하였다. MS m/z 266 (M+H)+
단계 4: 디메틸 2-(4- 플루오로페네틸 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(4-플루오로페네틸)피페리딘-4-카복실레이트 (3.89 g, 14.65 mmol)를 디클로로메탄 (150 mL)에 용해시켰다. DIPEA (3.06 mL, 17.58 mmol)를 첨가한 후, 메틸 염화탄산 (1.615 mL, 20.51 mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 0.1 HCl과 DCM을 첨가하였다. 상기 상들을 분리한 후 상기 수상을 DCM으로 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 포화 NaHCO3로 세척한 후, 상 분리기를 통해 여과하고 증발시켰다. 디메틸 2-(4-플루오로페네틸)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (3.19 g, 67 %)를 분리하였다. MS m/z 324 (M+H)+
단계 5: 2-(4- 플루오로페네틸 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(4-플루오로페네틸)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (3.18 g, 9.83 mmol)를 아세토니트릴 (35 mL)과 물 (0.7 mL)에 용해시킨 후, 브롬화리튬 (6.83 g, 78.67 mmol)을 첨가하였다. 트리에틸아민 (5.45 mL, 39.34 mmol)을 첨가하고 생성된 현탁액을 환류 하에 5 시간 동안 가열하였다. MTBE와 물을 첨가하고, 상들을 분리한 후 상기 유기층을 물로 추출하였다. 상기 혼합된 수성층을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화하고 MTBE로 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 물로 세척한 후, Na2SO4로 건조하고 증발시켰다. 미정제 2-(4-플루오로페네틸)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (4.37 g)을 분리하였다. MS m/z 310 (M+H)+
참조 화합물 42
2-(3,3- 디메틸부틸 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 4-(( tert - 부틸디메틸실릴옥시 ) 메틸 )-2-(3,3- 디메틸부틸 )피리딘-1(2H)- 카복실레이트
4-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)피리딘 (5.58 g, 25 mmol) (참조 화합물 4, 단계 1)을 질소 하에 무수 THF (50 mL)에 용해시킨 후, 이 혼합물을 -15℃로 냉각하였다. 염화(3,3-디메틸부틸)마그네슘 (THF 중 0.5 M) (50 mL, 25 mmol)을 20 분 동안 적가하여 황색 용액을 만들고 이를 -15℃에서 30 분간 교반하였다. 다음으로, 메틸 염화탄산 (2.5 mL, 32 mmol)을 1 분 동안 첨가하였다. 상기 반응을 -15℃에서 30 분간 지속시킨 후, 상기 혼합물을 -60℃로 냉각하였다. 2 시간 후, 온도는 실온에 도달하였다. 물 (20 mL)을 첨가하고 용매를 증발시켰다. 상기 수상을 DCM으로 추출하고 (x2), 상기 혼합된 유기상을 상 분리기를 통해 통과시켰다. 용매를 증발시켜 황색 오일을 수득하였다. 잔류물을 바이오타지 (헵탄 중 0 => 10 % EtOAc)를 통해 정제하여 메틸 4-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)-2-(3,3-디메틸부틸)피리딘-1(2H)-카복실레이트 (3.67 g, 44 %)를 무색 오일로서 수득하였다. MS m/z 368 (M+H)+
단계 2: 메틸 4-(( tert - 부틸디메틸실릴옥시 ) 메틸 )-2-(3,3- 디메틸부틸 )피페리딘-1- 카복실레이트
에틸 아세테이트 (60 mL) 중의 메틸 4-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)-2-(3,3-디메틸부틸)-피리딘-1(2H)-카복실레이트 (3.63 g, 9.87 mmol)의 용액에 산화백금 (Ⅳ) (224 mg, 1 mmol)을 첨가하였다. 6 bar의 뷔치 수소발생장치 중에서 3.5 시간 동안 수소화하였다. 촉매를 여과하여 제거한 후 여과물을 증발시켜 메틸 4-((tert-부틸-디메틸실릴옥시)메틸)-2-(3,3-디메틸부틸)피페리딘-1-카복실레이트 (3.62 g, 99 %)를 무색 오일로서 수득하였다. MS m/z 372 (M+H)+
단계 3: 메틸 2-(3,3- 디메틸부틸 )-4-( 히드록시메틸 )피페리딘-1- 카복실레이트
메틸 4-((tert-부틸디메틸실릴옥시)메틸)-2-(3,3-디메틸부틸)피페리딘-1-카복실레이트 (3.606 g, 9.7 mmol)를 THF (50 mL)에 용해시킨 후, TBAF (THF 중 1M) (13 mL, 13 mmol)를 첨가하였다. 실온에서 3.5 시간 동안 교반하였다. 용매는 증발시켰다. DCM 중에 재용해시킨 후 포화 NaHCO3로 세척하였다. 상기 유기상은 상 분리기 통과 후 증발시켜 오일을 수득하였다. 잔류물을 바이오타지 (용리액: 헵탄 중 30-70% EtOAc)를 통해 정제하여 메틸 2-(3,3-디메틸부틸)-4-(히드록시메틸)피페리딘-1-카복실레이트 (2.45 g, 98 %)를 무색 오일로서 수득하였다. MS m/z 258 (M+H)+
단계 4: 2-(3,3- 디메틸부틸 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
메틸 2-(3,3-디메틸부틸)-4-(히드록시메틸)피페리딘-1-카복실레이트 (2.44 g, 9.49 mmol)를 CCl4 (20 mL)과 아세토니트릴 (20 mL) 중에 용해시켰다. 과요오드산나트륨 (6.09 g, 28.5 mmol)을 첨가한 후, 물 (30 mL)과 염화 루테늄 (Ⅲ) (43 mg, 0.21 mmol)을 첨가하였다. 생성된 현탁액을 실온에서 3 시간 50 분 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 DCM (100 mL)과 물 (100 mL)로 희석하였다. 상기 수성층을 DCM으로 추출하고 (x3) 상기 혼합된 유기상은 상 분리기 통과 후 증발시켜 미정제 2-(3,3-디메틸부틸)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (2.42 g, 94 %)을 검은색 고체로서 수득하였다. MS m/z 272 (M+H)+
참조 화합물 43
2-(4- 플루오로벤질 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 2-(4- 플루오로벤질 ) 이소니코티네이트
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (5.6 g, 32.64 mmol) 및 Pd(PPh3)4 (0.754 g, 0.65 mmol)를 질소 하에 THF (100 mL) 중에 용해시킨 후, (4-플루오로벤질)염화아연(Ⅱ) (THF 중 0.5 M) (100 mL, 50.00 mmol)을 첨가하였다. 상기 갈색 용액을 60℃에서 19 시간 동안 교반하였다. 메탄올 (50.0 mL)을 첨가하여 상기 반응을 중지시켰다. 상기 용액을 EtOAc로 희석하고 NH4Cl (aq) 및 물로 세척하였다. 상기 유기층을 증발시키고, DCM 중에 용해시킨 후, NH4Cl (aq)로 세척하고, 이어서 상 분리기를 통과시켜 건조하였다. 용매를 증발시켜 갈색 오일을 수득하였다. 상기 화합물을 바이오타지 [SNAP 340g KP-SIL, 용리액: 등용매 헵탄/에틸 아세테이트 8:2 (2 CV), 이후 선형 농도구배 헵탄/에틸 아세테이트 8:2 내지 5:5 (5 CV)]를 이용한 2 회 러닝으로 정제하여 메틸 2-(4-플루오로벤질)이소니코티네이트 7.08 g (88%)을 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ3.92 (s, 3H), 4.18 (s, 2H), 6.94 - 7.02 (m, 2H), 7.19 - 7.27 (m, 2H), 7.65 - 7.69 (m, 2H), 8.68 - 8.71 (m, 1H). MS m/z 246 (M+H)+
단계 2: 메틸 2-(4- 플루오로벤질 )피페리딘-4- 카복실레이트
메틸 2-(4-플루오로벤질)이소니코티네이트 (5.06 g, 20.63 mmol)를 아세트산 (50 mL)에 용해한 후, 산화백금(Ⅳ) (0.234 g, 1.03 mmol)을 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 실온 및 5 bar에서 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 촉매를 여과하여 제거한 후 MeOH로 세척하고 용출액을 증발시켰다. DCM과 10 % K2CO3를 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 수상을 DCM으로 추출한 후 상기 혼합된 유기상을 식염수로 세척하고, 상 분리기 통과 후 증발시켜 메틸 2-(4-플루오로벤질)피페리딘-4-카복실레이트 (3.816 g, 73.6 %)를 황색 오일로서 수득하였다. MS m/z 252 (M+H)+
단계 3: 디메틸 2-(4- 플루오로벤질 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(4-플루오로벤질)피페리딘-4-카복실레이트 (4.981 g, 19.82 mmol)를 DCM (150 mL) 및 DIPEA (4.14 mL, 23.79 mmol)에 용해시킨 후, 메틸 염화탄산 (1.873 mL, 23.79 mmol)을 첨가하였다. 상기 용액을 실온에서 50 분간 교반하였다. 메틸 염화탄산 (몇 방울)을 더 첨가하고 상기 반응을 실온에서 1 시간 동안 지속하였다. 상기 반응 혼합물을 0.1 M HCl과 포화 NaHCO3으로 세척하였다. 상기 유기상은 상 분리기 통과 후 증발시켜 디메틸 2-(4-플루오로벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (5.82 g, 95 %)를 황색 오일로서 수득하였다. MS m/z 310 (M+H)+
단계 4: 2-(4- 플루오로벤질 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(4-플루오로벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (5.797 g, 18.74 mmol)를 아세토니트릴 (60 mL)과 물 (1.2 mL)에 용해시킨 후, 브롬화리튬 (13.02 g, 149.92 mmol)을 첨가하였다. 트리에틸아민 (10.39 mL, 74.96 mmol)을 첨가하고 생성된 황색 현탁액을 환류에서 1.5 시간 동안 가열하였다. 물 (60 mL)과 MTBE (120 mL)를 첨가하였다. 상기 유기상을 물로 추출하였다 (x2). 모아진 수성층을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화한 후, MTBE로 추출하였다 (x2). 상기 혼합된 유기층을 물로 세척한 후 증발시켰다. 미량의 물을 MeCN에 의해 공비 제거하였다. 2-(4-플루오로벤질)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (4.43 g, 80 %)을 베이지색 고체로서 분리하였다. MS m/z 296 (M+H)+
참조 화합물 44
2-(3- 플루오로벤질 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 2-(3- 플루오로벤질 ) 이소니코티네이트
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (5.6 g, 32.64 mmol) 및 Pd(PPh3)4 (0.754 g, 0.65 mmol)를 질소 하에 THF (100 mL) 중에 용해시킨 후, (3-플루오로벤질)염화아연(Ⅱ) (THF 중 0.5 M) (100 mL, 50.00 mmol)을 첨가하였다. 상기 갈색 용액을 60℃에서 4 시간 동안 교반하였다. 메탄올 (50 mL)을 첨가하여 상기 반응을 중지시킨 후, EtOAc로 희석하고 NH4Cl로 세척하였다. 상기 유기층을 Na2SO4로 건조한 후 여과 및 증발시켜 황색 오일을 수득하였다. 상기 화합물을 바이오타지 [SNAP 340g KP-SIL, 용리액: 등용매 헵탄/에틸 아세테이트 8:2 (2 CV), 이후 선형 농도구배 헵탄/에틸 아세테이트 8:2 내지 5:5 (5 CV)]를 이용한 2 회 러닝으로 정제하여 메틸 2-(3-플루오로벤질)이소니코티네이트 (6.766 g, 85%)를 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ3.93 (s, 3H), 4.21 (s, 2H), 6.88 - 7.00 (m, 2H), 7.02 - 7.07 (m, 1H), 7.22 - 7.30 (m, 1H), 7.66 - 7.73 (m, 2H), 8.68 - 8.73 (m, 1H). MS m/z 246 (M+H)+
단계 2: 메틸 2-(3- 플루오로벤질 )피페리딘-4- 카복실레이트
메틸 2-(3-플루오로벤질)이소니코티네이트 (6.766 g, 27.59 mmol)를 아세트산 (70 mL)에 용해시킨 후, 산화백금(Ⅳ) (0.313 g, 1.38 mmol)을 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 실온 및 5 bar에서 4.5 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 산화백금(Ⅳ) (0.313 g, 1.38 mmol)을 더 첨가하고 상기 수소화를 5 bar에서 2 시간 40 분 동안 지속하였다. 촉매를 여과하여 제거한 후, MeOH로 세척하고 용출액을 증발시켰다. DCM과 10 % K2CO3를 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 수상을 DCM으로 추출한 후 상기 혼합된 유기상을 식염수로 세척하고, 상 분리기 통과 후 증발시켜 미정제 메틸 2-(3-플루오로벤질)피페리딘-4-카복실레이트 (7.6 g, 110%)를 갈색 오일로서 수득하였다. MS m/z 252 (M+H)+
단계 3: 디메틸 2-(3- 플루오로벤질 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(3-플루오로벤질)피페리딘-4-카복실레이트 (7.6 g, 30.24 mmol)를 DCM (200 mL)과 DIPEA (6.32 mL, 36.29 mmol)에 용해시킨 후, 메틸 염화탄산 (3.3 mL, 41.91 mmol)을 첨가하였다. 상기 용액을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 0.1 M HCl과 포화 NaHCO3로 세척하였다. 상기 유기상은 상 분리기 통과 후 증발시켜 디메틸 2-(3-플루오로벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (9.30 g, 99%)를 갈색 오일로서 수득하였다. MS m/z 310 (M+H)+
단계 4: 2-(3- 플루오로벤질 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(3-플루오로벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (9.153 g, 29.59 mmol)를 아세토니트릴 (100 mL)과 물 (2 mL)에 용해시킨 후, 브롬화리튬 (20.56 g, 236.72 mmol)을 첨가하였다. 트리에틸아민 (16.41 mL, 118.36 mmol)을 첨가하고 상기 생성된 갈색 현탁액을 환류로 2 시간 동안 가열하였다. 물 (100 mL)과 MTBE (300 mL)를 첨가하였다. 상기 유기상을 물로 추출하였다 (x2). 모아진 수성층을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화한 후, MTBE로 추출하였다 (x2). 상기 혼합된 유기층을 물로 세척한 후, Na2SO4로 건조하고 셀라이트를 함유하는 필터를 통해 여과한 후 증발시켰다. 2-(3-플루오로벤질)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (7.07 g, 81%)을 황색 고체로서 분리하였다. MS m/z 296 (M+H)+
참조 화합물 45
2-(2- 플루오로벤질 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 2-(2- 플루오로벤질 ) 이소니코티네이트
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (5.2 g, 30.31 mmol) 및 Pd(PPh3)4 (0.700 g, 0.61 mmol)를 질소 하의 THF (100 mL) 중에서 용해시킨 후, (2-플루오로벤질)염화아연(Ⅱ) (THF 중 0.5 M) (90 mL, 45.00 mmol)을 첨가하고 상기 갈색 용액을 60℃에서 18 시간 동안 교반하였다. 메탄올 (50.0 mL)을 첨가하여 상기 반응을 중지하였다. 상기 용액을 EtOAc로 희석한 후, NH4Cl (aq)로 세척하고 Na2SO4로 건조한 후 증발시켰다. 상기 화합물을 바이오타지 [SNAP 340g KP-SIL, 용리액: 등용매 헵탄/에틸 아세테이트 8:2 (2 CV), 이후 선형 농도구배 헵탄/에틸 아세테이트 8:2 내지 5:5 (5 CV)]를 이용한 러닝 2 회로 정제하여 메틸 2-(2-플루오로벤질)이소니코티네이트 (5.42 g, 73%)를 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 3.92 (s, 3H), 4.25 (s, 2H), 7.00 - 7.13 (m, 2H), 7.18 - 7.30 (m, 2H), 7.64 - 7.74 (m, 2H), 8.69 (d, 1H). MS m/z 246 (M+H)+
단계 2: 메틸 2-(2- 플루오로벤질 )피페리딘-4- 카복실레이트
메틸 2-(2-플루오로벤질)이소니코티네이트 (5.42 g, 22.08 mmol)를 아세트산 (50 mL) 중에 용해시킨 후, 산화백금(Ⅳ) (0.251 g, 1.10 mmol)을 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 실온 및 5 bar에서 4 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 촉매를 여과하여 제거한 후 MeOH로 세척하고 용출액을 증발시켰다. DCM과 10 % K2CO3를 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 수상을 DCM으로 추출한 후, 상기 혼합된 유기상을 물로 세척한 후, 상 분리기 통과 후 증발시켜 메틸 2-(2-플루오로벤질)피페리딘-4-카복실레이트 (4.49 g, 81 %)를 수득하였다. MS m/z 252 (M+H)+
단계 3: 디메틸 2-(2- 플루오로벤질 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
DCM (100 mL) 중의 메틸 2-(2-플루오로벤질)피페리딘-4-카복실레이트 (4.49 g, 17.85 mmol) 및 DIPEA (9.35 mL, 53.55 mmol)의 용액에, DCM (50 mL) 중의 메틸 클로로포르메이트 (1.798 mL, 23.21 mmol)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 1.5 시간 동안 교반하였다. 상기 유기상을 포화 NaHCO3로 세척하였다. 상기 상들을 분리한 후, 상기 유기상을 상 분리기를 이용해 건조하여 미정제 디메틸 2-(2-플루오로벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (6.16 g, 112 %)를 수득하였다. MS m/z 310 (M+H)+
단계 4: 2-(2- 플루오로벤질 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(2-플루오로벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (6.16 g, 미정제)를 아세토니트릴 (45 mL)과 물 (0.9 mL) 중에 용해시켰다. 브롬화리튬 (13.84 g, 159.39 mmol)과 트리에틸아민 (11.05 mL, 79.69 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 환류에서 밤새 가열하였다. 물 (90 mL)과 MTBE를 첨가하였다. 상기 유기상을 물로 추출하였다 (x2). 모아진 수성층에 MTBE를 첨가한 후, 상기 용액을 2 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화한 후 MTBE로 추출하였다 (x2). 상기 혼합된 유기층을 Na2SO4로 건조하고 증발시켜 2-(2-플루오로벤질)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (4.48 g, 76 %)을 담황색 반고체로서 수득하였다. MS m/z 296 (M+H)+
참조 화합물 46
시스 -1-( 메톡시카보닐 )-2-(4-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 2-(4-( 트리플루오로메틸 )벤질) 이소니코티네이트
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (18 g, 104.91 mmol) 및 Pd(PPh3)4 (2.43 g, 2.10 mmol)를 THF (300 mL) 중에 용해시켰다. (4-트리플루오로메틸)벤질)염화아연(Ⅱ) (THF 중 0.5 M) (273 mL, 137 mmol)을 상기 황색 용액에 첨가한 후, 플라스크를 60℃로 밤새 가온하였다. 메탄올을 첨가하여 상기 반응 혼합을 중지시켰다. 상기 용액을 에틸 아세테이트로 희석한 후, NH4Cl (aq) 및 물로 세척하였다. 상기 유기층을 Na2SO4로 건조하고 셀라이트를 통해 여과한 후, 용매는 증발시켰다. 상기 미정제 생성물에 대해 바이오타지 장비를 이용하여 크로마토그래피를 수행하였다. 용리액인 에틸 아세테이트-헵탄은 0-100 그리고 선형 농도구배로부터 시작하여 100-0까지 설정하였다. 메틸 2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)이소니코티네이트 (11.5 g, 37.1%)를 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ3.91 (s, 3H), 4.25 (s, 2H), 7.36 (d, 2H), 7.54 (d, 2H), 7.66 - 7.70 (m, 2H), 8.68 (d, 1H).
단계 2: 메틸 2-(4-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4- 카복실레이트
메틸 2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)이소니코티네이트 (11.5 g, 38.95 mmol)를 아세트산 (200 mL)과 메탄올 (100 mL) 중에 용해시켰다. 산화백금(Ⅳ) (0.177 g, 0.78 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 실온 및 7 bar에서 6 시간 동안 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 촉매를 여과하여 제거하였다. 새로운 산화백금(Ⅳ) (0.18 g, 0.78 mmol)을 첨가하고 상기 수소화를 9 bar에서 7 시간 동안 지속하였다. 촉매를 여과하여 제거하고, 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 에틸 아세테이트와 Na2CO3 (aq) 사이로 구분시켜 놓았다. 상기 유기층을 MgSO4로 건조하고 셀라이트를 통해 여과시킨 후 용매를 증발시켰다. 메틸 2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-카복실레이트 (9.5 g, 81 %)를 분리하였다.
단계 3: 디메틸 2-(4-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-카복실레이트 (9.5 g, 31.53 mmol)를 DIPEA (8.24mL, 47.29 mmol)와 디클로로메탄 (150 mL) 중에 용해시켰다. 메틸 염화탄산 (3.58 g, 37.50 mmol)을 적가하고 상기 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하고 에테르로 희석한 후, 1 M HCl로 세척하였다. 상기 유기층을 Na2CO3 (aq)로 세척하고, MgSO4로 건조한 후, 셀라이트를 통해 여과시키고 용매를 증발시켜 디메틸 2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (10.9 g , 96 %)를 수득하였다.
단계 4: 1-( 메톡시카보닐 )-2-(4-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (10.9 g, 30.33 mmol)를 아세토니트릴 (80 mL)과 물 (1.6 mL)에 용해시킨 후, 브롬화리튬 (21.07 g, 242.67 mmol)과 트리에틸아민 (16.82 mL, 121.33 mmol)을 첨가하고 생성된 황색 현탁액을 환류에서 가열하였다. 물 (60 mL)과 MTBE를 첨가하였다. 상기 유기상을 물로 추출하였다 (x2). 모아진 수성층에 MTBE를 첨가하고, 상기 용액을 HCl로 pH 1로 산성화시킨 후, MTBE로 추출하였다 (x2). 상기 유기층을 Na2SO4로 건조한 후, 셀라이트를 통해 여과시키고 용매를 증발시켜 1-(메톡시카보닐)-2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-카복실산 (9.14 g, 87 %)을 수득하였다.
단계 5: 시스 -1-( 메톡시카보닐 )-2-(4-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4-카 복실 산
1-(메톡시카보닐)-2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-카복실산 (14.65 g, 42.43 mmol)을 MTBE (150 mL) 중에 현탁시키고 환류 하에 1 분간 가열한 후, 실온에서 3 일간 교반하였다. 상기 고체를 분리하고 진공 하에 건조시켰다. 시스-1-(메톡시카보닐)-2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-카복실산 (9.3 g, 63.5 %)을 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ1.68 - 1.77 (m, 1H), 1.90 - 1.97 (m, 1H), 1.99 - 2.10 (m, 2H), 2.58 - 2.64 (m, 1H), 2.83 - 2.89 (m, 1H), 2.93 - 3.00 (m, 1H), 3.16 - 3.31 (m, 1H), 3.43 (s, 3H), 3.86 - 3.92 (m, 1H), 4.31 - 4.36 (m, 1H), 7.36 (d, 2H), 7.53 (d, 2H).
참조 화합물 47
1-( 메톡시카보닐 )-2-(4-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 4- 시아노 -2-(4-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-1- 카복실레이트
질소 하의 DME (100 mL) 중의 메틸 4-옥소-2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (8.75 g, 27.75 mmol) [신진(Syngene)사 제조]의 용액에, 100 mL DME 중의 1-(이소시아노메틸설포닐)-4-메틸벤젠 (8.13 g, 41.63 mmol)과 칼륨 tert-부톡시드 (83 mL, 83.26 mmol) (1 M)를 -20℃ 내지 -10℃에서 30 분간에 걸쳐 동시에 첨가하였다. 상기 용액을 -20℃에서 2 시간 동안 교반한 후, 실온으로 밤새 가온하였다. 상기 오렌지색의 반응 혼합물에 물 (200 mL)을 첨가하고, 상기 용액을 20 분간 교반한 후, 디에틸 에테르 (3x) 및 EtOAc (3x)로 추출하였다. 상기 혼합된 유기상을 식염수로 1 회 세척한 후, Na2SO4로 건조하고 증발시켜 갈색 오일을 수득하였다. 상기 오일을, 용리액으로서 헵탄 중 20-60 % EtOAc의 농도구배를 사용한 실리카 겔 상에서의 섬광 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 메틸 4-시아노-2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (7.96 g, 87.9 %)를 황색 오일로서 분리하였다.
단계 2: 1-( 메톡시카보닐 )-2-(4-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4- 카복실산
물 (50 mL) 중의 메틸 4-시아노-2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (2.1 g, 6.44 mmol), 과산화수소 (5 mL, 206.78 mmol) 및 수산화칼륨 (3.61 g, 54.36 mmol)을 80℃로 밤새 가열하였다. 1 M HCl과 EtOAc를 상기 반응 혼합물에 첨가하였다. 상기 유기상을 분리하고, Na2SO4로 건조한 후 셀라이트를 통해 여과시키고 용매를 증발시켜 1-(메톡시카보닐)-2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)-피페리딘-4-카복실산 (1.67 g, 75 %)을 수득하였다.
참조 화합물 48
1-( 메톡시카보닐 )-2-(3-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 2-(3-( 트리플루오로메틸 )벤질) 이소니코티네이트
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (8.1 g, 47.21 mmol) 및 Pd(PPh3)4 (1.091 g, 0.94 mmol)를 질소 하에 THF (150 mL) 중에서 용해시켰다. (3-트리플루오로메틸)벤질)염화아연(Ⅱ) (THF 중 0.5 M) (142 mL, 71 mmol)을 상기 오렌지색 용액에 첨가하고 플라스크를 60℃로 밤새 가온하였다. 메탄올 (50 mL)을 첨가하여 상기 반응 혼합을 중지시킨 후, 증발에 의해 대부분의 용매를 제거하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트로 희석한 후 NH4Cl (aq) 및 물로 세척하였다. 상기 유기층을 Na2SO4로 건조시킨 후, 셀라이트를 통해 여과하고 용매는 증발시켰다. 상기 미정제 생성물에 대해 바이오타지 장비를 이용한 크로마토그래피를 수행하였다. 용리액인 에틸 아세테이트-헵탄은 20-80 및 선형 농도구배로부터 시작하여 40-60까지 설정하였다. 메틸 2-(3-(트리플루오로메틸)벤질)이소니코티네이트 (12.83 g, 92 %)를 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ3.93 (s, 3H), 4.27 (s, 2H), 7.37 - 7.56 (m, 4H), 7.66 - 7.75 (m, 2H), 8.67 - 8.76 (m, 1H).
단계 2: 메틸 2-(3-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4- 카복실레이트
메틸 2-(3-(트리플루오로메틸)벤질)이소니코티네이트 (12.83 g, 43.45 mmol)와 산화백금(Ⅳ) (0.197 g, 0.87 mmol)을 아세트산 (150 mL)에 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온 및 5 bar에서 6 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 촉매를 여과하여 제거한 후 새로운 산화백금(Ⅳ) (0.26 g)을 첨가하였다. 상기 수소화를 6 bar에서 밤새 지속하였다. 촉매를 여과하여 제거한 후 용매는 증발시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트에 용해시킨 후, Na2CO3 (aq)로 세척하였다. 상기 유기층을 분리하고 MgSO4로 건조한 후, 셀라이트를 통해 여과시키고 용매를 증발시켰다. 미정제 메틸 2-(3-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-카복실레이트 (14. 4 g, 110%)를 분리하였다.
단계 3: 디메틸 2-(3-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(3(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-카복실레이트 (6.0 g, 19.91 mmol)를 DIPEA (6.94 mL, 39.83 mmol)와 디클로로메탄 (150 mL) 중에 용해시켰다. 메틸 염화탄산 (2.258 g, 23.90 mmol)을 적가하였다. 에테르를 첨가하고 상기 반응 혼합물을 1 M HCl 및 Na2CO3 (aq)로 세척하였다. 상기 유기층을 MgSO4로 건조시킨 후, 셀라이트를 통해 여과시키고 용매를 증발시켜 디메틸 2-(3-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (6.1 g, 85 %)를 수득하였다.
단계 4: 1-( 메톡시카보닐 )-2-(3-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(3-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (6.1 g, 16.98 mmol)와 LiBr (11.79 g, 135.8 mmol)을 아세토니트릴 (60 mL)과 물 (1.2 mL)에 용해시켰다. 트리에틸아민 (9.41 mL, 67.90 mmol)을 첨가하고 생성된 현탁액을 환류에서 1 시간 동안 가열한 후, 실온으로 냉각하고 밤새 교반하였다. 에틸 아세테이트와 3 M HCl을 넣는 사이에 용해를 마쳤다. 수층을 에틸 아세테이트로 1 회 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 Na2SO4로 건조시킨 후, 셀라이트를 통해 여과시키고 용매를 증발시켜 1-(메톡시카보닐)-2-(3-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-카복실산 (5.8 g, 99%)을 수득하였다.
참조 화합물 49
1-( 메톡시카보닐 )-2-(2-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4- 카복실산
단계 1: (2-( 트리플루오로메틸 )벤질) 아연 ( Ⅱ ) 브롬화물
건조된 플라스크 중에서, 아연 분말 (2.489 g, 38.07 mmol)을 질소 하에 무수 테트라히드로푸란 (50 mL) 중에 현탁시켰다. 생성된 현탁액을 60℃로 가온한 후, 1,2-디브로모에탄 (0.126 mL, 1.46 mmol)을 첨가하고 이 온도에서 15 분간 교반하였다. 이를 실온으로 냉각한 후, 클로로트리메틸실란 (0.149 mL, 1.17 mmol)을 첨가하고 20 분간 교반하였다. THF (2 mL) 중의 1-(브로모메틸)-2-(트리플루오로메틸)벤젠 (4.46 mL, 29.28 mmol)을 적가하고 교반을 실온에서 4 시간 동안 지속시켰다. 교반을 중지하고 침전물이 가라앉도록 두었다. 상기 상청액을 다음 변환 반응에서 사용하였다.
단계 2: 메틸 2-(2-( 트리플루오로메틸 )벤질) 이소니코티네이트
새로 제조한 테트라히드로푸란 (50 mL) 중의 (2-(트리플루오로메틸)벤질)아연(Ⅱ) 브롬화물 (8.91 g, 29.28 mmol)을 건조된 플라스크 중에서 질소 하에 테트라히드로푸란 (50 mL) 중의 메틸 2-클로로이소니코티네이트 (3.35 g, 19.52 mmol) 및 비스(트리-tert-부틸포스핀)Pd(0) (0.399 g, 0.78 mmol)의 용액에 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 적색 혼합물을 60℃로 밤새 교반하였다 (16 h). 실온으로 냉각시킨 후, 10 % aq NH4Cl을 첨가하여 상기 반응을 중지시킨 후, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 상 분리 후, 상기 유기층을 식염수로 세척하고, MgSO4로 건조시킨 후 증발시켰다. 잔류물을 100 mL의 MTBE에 용해시켰다. 녹지 않은 물질들을 여과로 제거하고 여과물을 증발시켰다. 바이오타지 [SNAP 340g KP-SIL, 용리액: 등용매 헵탄/에틸 아세테이트 8:2 (1 CV), 이후 선형 농도구배 헵탄/에틸 아세테이트 8:2 내지 5:5 (6 CV)]를 통해 정제하여 메틸 2-(2-(트리플루오로메틸)벤질)이소니코티네이트 (4.61 g, 80 %)를 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ3.91 (s, 3H), 4.43 (s, 2H), 7.28 - 7.40 (m, 2H), 7.47 (t, 1H), 7.54 - 7.65 (m, 1H), 7.65 - 7.72 (m, 2H), 8.71 (d, 1H). MS m/z 296 (M+H)+
단계 3: 메틸 2-(2-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4- 카복실레이트
메틸 2-(2-(트리플루오로메틸)벤질)이소니코티네이트 (4.613 g, 15.62 mmol)를 아세트산 (40 mL)에 용해시킨 후 산화백금(Ⅳ) (0.26 g, 1.14 mmol)을 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 실온 및 5 bar에서 3 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 산화백금(Ⅳ) (160 mg)을 더 첨가하고 상기 수소화를 실온, 5 bar에서 2 시간 동안 지속시켰다. 촉매를 여과하여 제거한 후 MeOH로 세척하고 용출액을 증발시켰다. DCM과 10 % K2CO3를 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 수상을 DCM으로 추출한 후, 상기 혼합된 유기상을 물로 세척하고 상 분리기 통과 후 증발시켜 메틸 2-(2-(트리플루오로메틸)벤질)-피페리딘-4-카복실레이트 (4.20 g, 89%)를 황색 오일로서 수득하였다. MS m/z 302 (M+H)+
단계 4: 디메틸 2-(2-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-1,4- 디카복실레이트
DCM (40 mL) 중의 메틸 클로로포르메이트 (1.399 mL, 18.07 mmol)를 DCM (60 mL) 중의 메틸 2-(2-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-카복실레이트 (4.19 g, 13.9 mmol) 및 DIPEA (7.28 mL, 41.69 mmol)의 용액에 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 1.5 시간 동안 교반한 후, 포화 NaHCO3로 세척하였다. 상기 상들을 분리한 후, 상기 유기상을 상 분리기를 사용해 건조시켜 미정제 디메틸 2-(2-(트리플루오로메틸)-벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (5.42 g, 109%)를 수득하였다. MS m/z 360 (M+H)+
단계 5: 1-( 메톡시카보닐 )-2-(2-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4- 카복실산
미정제 디메틸 2-(2-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (5.42 g, 15.15 mmol)를 아세토니트릴 (40 mL)과 물 (0.800 mL) 중에 용해시켰다. 브롬화리튬 (9.66 g, 111.20 mmol)과 트리에틸아민 (7.71 mL, 55.60 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 환류에서 1 시간 45 분간 가열하였다. 물 (90 mL)과 MTBE를 첨가하였다. 상기 유기상을 물로 추출하였다. 모아진 수성층에 MTBE를 첨가한 후, 2 M HCl을 사용하여 상기 용액을 pH 1로 산성화한 후 MTBE로 추출하였다 (x2). 상기 혼합된 유기층을 Na2SO4로 건조시킨 후, 증발시켜 1-(메톡시카보닐)-2-(2-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-카복실산 (4.72 g, 98%)을 담황색 반고체로서 수득하였다. MS m/z 346 (M+H)+
참조 화합물 50
1-( 메톡시카보닐 )-2-(4-( 트리플루오로메톡시 )벤질)피페리딘-4- 카복실산
단계 1: (4-( 트리플루오로메톡시 )벤질) 아연 ( Ⅱ ) 브롬화물
건조된 플라스크 중에서, 아연 분말 (0.769 g, 11.76 mmol)을 질소 하에 무수 테트라히드로푸란 (20 mL) 중에 현탁시켰다. 생성된 현탁액을 60℃로 가온한 후, 1,2-디브로모에탄 (0.042 mL, 0.49 mmol)을 첨가하고 이 온도에서 15 분간 교반하였다. 이를 실온으로 냉각한 후, 클로로트리메틸실란 (0.050 mL, 0.39 mmol)을 첨가하고 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 이후, 테트라히드로푸란 (5 mL) 중의 1-(브로모메틸)-4-(트리플루오로메톡시)벤젠 (2.5 g, 9.80 mmol)을 2 분간에 걸쳐 첨가한 후, 교반을 실온에서 22 시간 동안 지속하였다. 상기 교반을 중지하여 고체가 가라앉도록 두었다. 상기 상청액을 다음 변환 반응에서 사용하였다.
단계 2: 메틸 2-(4-( 트리플루오로메톡시 )벤질) 이소니코티네이트
건조된 플라스크 중에서, 질소 하의 테트라히드로푸란 (50 mL) 중의 메틸 2-클로로이소니코티네이트 (4.80 g, 28 mmol) 및 Pd(PPh3)4 (0.647 g, 0.56 mmol)의 용액에, 테트라히드로푸란 (90 mL) 중에서 새로 제조된 (4-(트리플루오로메톡시)벤질)아연(Ⅱ) 브롬화물 (12.56 g, 39.20 mmol)의 용액을 첨가하였다. 생성된 밝은 황색의 혼합물을 60℃로 2 시간 30 분 동안 가열한 후, 실온으로 냉각시켰다. 10 % 수성 NH4Cl을 첨가하여 상기 반응을 중지시켰다. 이를 에틸 아세테이트로 희석하였다. 상 분리 후, 상기 유기층을 식염수로 세척하고, MgSO4로 건조한 후 증발시켰다. 잔류물을 50 mL의 MTBE에 현탁시키고 초음파 처리 후, 상기 황색의 녹지 않은 물질들을 여과로 제거하고 MTBE로 세척하였다. 상기 여과물의 부피를 약 150 mL로 증대시키고 5 mL의 MeOH를 첨가한 후, 염화수소 (디옥산 중 4 M) (7.00 mL, 28.00 mmol)를 첨가하였다. 무색의 침전물이 형성된 후, 이를 다시 용해시켰다. 상기 용매를 증발시켰다. 잔류물을 약 15 mL의 DCM에 용해시킨 후, MTBE와 헵탄을 첨가하였다. 연마된 오일이 형성되고 나서 몇 분 후에 고체가 형성되기 시작하였다. 이를 초음파로 처리한 후, 실온에서 20 분간 교반하였다. 상기 형성된 고체를 수집하여 MTBE로 세척한 후 건조시켰다. 상기 고체를 DCM에 용해시킨 후 10% K2CO3로 세척하였다. 상 분리 후, 상기 수성층을 DCM으로 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 MgSO4로 건조한 후 증발시켰다. 메틸 2-(4-(트리플루오로메톡시)벤질)이소니코티네이트 (8.04 g, 92 %)를 담황색 오일로서 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ3.93 (s, 3H), 4.22 (s, 2H), 7.11 - 7.17 (m, 2H), 7.24 - 7.31 (m, 2H), 7.67 - 7.72 (m, 2H), 8.68 - 8.72 (m, 1H). MS m/z 312 (M+H)+
단계 3: 메틸 2-(4-( 트리플루오로메톡시 )벤질)피페리딘-4- 카복실레이트
아세트산 (40 mL) 중의 메틸 2-(4-(트리플루오로메톡시)벤질)이소니코티네이트 (8.04 g, 25.83 mmol)의 용액에 산화백금(Ⅳ) (0.343 g, 1.51 mmol)을 첨가하여 생성된 혼합물을 5 bar에서 5 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 상기 반응 혼합물을 규조토 필터 곽을 통해 여과시킨 후, 촉매를 메탄올로 세척하였다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 DCM 중에 용해시킨 후 10% Na2CO3로 세척하였다. 상 분리 후, 상기 수성층을 DCM으로 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 MgSO4로 건조한 후 증발시켰다. 메틸 2-(4-(트리플루오로메톡시)벤질)피페리딘-4-카복실레이트 (8.19 g, 100%)를 암갈색 오일로서 분리하였다. MS m/z 318 (M+H)+
단계 4: 디메틸 2-(4-( 트리플루오로메톡시 )벤질)피페리딘-1,4- 디카복실레이트
DCM (100 mL) 중의 메틸 2-(4-(트리플루오로메톡시)벤질)피페리딘-4-카복실레이트 (8.19 g, 25.81 mmol)의 용액에 DIPEA (5.40 mL, 30.97 mmol)를 첨가한 후, 메틸 염화탄산 (2.236 mL, 28.39 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 30 분간 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 에틸 아세테이트와 3.8 M HCl 사이로 구분시켜 놓았다. 상 분리 후, 상기 수성층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 MgSO4로 건조한 후 증발시켜 황색 오일을 수득하였다. 디메틸 2-(4-(트리플루오로메톡시)벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (9.72 g, 100 %)를 분리하였다. MS m/z 376 (M+H)+
단계 5: 1-( 메톡시카보닐 )-2-(4-( 트리플루오로메톡시 )벤질)피페리딘-4- 카복실산
MeCN (80 mL)과 물 (1.6 mL) 중의 디메틸 2-(4-(트리플루오로메톡시)벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (9.72 g, 25.90 mmol)의 용액에 브롬화리튬 (18.2 g, 209.57 mmol)과 트리에틸아민 (15 mL, 108.21 mmol)을 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 환류 하에 3 시간 동안 가열한 후, 실온으로 냉각시켰다. 물과 MTBE를 첨가하였다. 상기 유기상을 물로 2 회 추출하였다. 모아진 수성층을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 조절한 후, DCM으로 추출하였다 (3 x). 상기 혼합물을 규조토 필터 곽을 통해 여과하였다. 상기 혼합된 유기층을 MgSO4로 건조한 후 증발시켰다. 1-(메톡시카보닐)-2-(4-(트리플루오로메톡시)벤질)피페리딘-4-카복실산 (8.75 g, 94 %)을 담황색 고체로서 분리하였다. MS m/z 360 (M-H)-
참조 화합물 51
2-(4- 클로로벤질 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: tert -부틸 2-(4- 클로로벤질 )-4- 시아노피페리딘 -1- 카복실레이트
질소 하의 DME (200 mL) 중의 tert-부틸 2-(4-클로로벤질)-4-옥소피페리딘-1-카복실레이트 (8.737 g, 26.98 mmol)의 용액에, 200 mL DME 중의 1-(이소시아노메틸-설포닐)-4-메틸벤젠 (7.90 g, 40.47 mmol)과 칼륨 tert-부톡시드 (81 mL, 80.94 mmol)를 1 시간에 걸쳐 동시에 첨가하여 온도가 절대 0℃를 초과하여 상승하지 않도록 하였다. 상기 용액을 -20℃에서 2 시간 동안 교반한 후, 실온으로 가온되도록 밤새 놓아두었다. 물 (200 mL)을 상기 오렌지색의 반응 혼합물에 첨가하고 상기 용액을 20 분간 교반한 후, 3x 디에틸 에테르 및 3x EtOAc로 추출하였다. 상기 유기상을 혼합하고 Na2SO4로 건조한 후 증발시켜 갈색 잔류물을 수득하였다. 바이오타지 (340 g 컬럼, 3 회의 러닝, 헵탄/EtOAc, 농도구배 20-60% EtOAc) 상에서 추가의 정제를 수행하여 tert-부틸 2-(4-클로로벤질)-4-시아노피페리딘-1-카복실레이트 (5.54 g, 61 %)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.21 - 1.50 (m, 9H), 1.58 - 2.14 (m, 4H), 2.55 - 3.27 (m, 4H), 4.06 - 4.25 (m, 1H), 4.34-4.60 (m, 1H), 7.02 - 7.34 (m, 4H). MS m/z 235, 237 (M-C5H8O2+H)+
단계 2: 2-(4- 클로로벤질 )피페리딘-4- 카복실산 히드로클로라이드
농축 HCl (20 mL, 651.11 mmol)을 tert-부틸 2-(4-클로로벤질)-4-시아노피페리딘-1-카복실레이트 (5.54 g, 16.55 mmol)에 첨가한 후, 상기 혼합물을 20 분간 교반하였다. 상기 혼합물을 20 mL의 전자렌지용 유리병에 옮겨 담았다. 상기 유리병의 뚜껑을 덮고 단일 노드 전자렌지용 반응기 중에서 140℃로 30 분간 가열하였다. 상기 반응 용액을 농축시켜 미정제 2-(4-클로로벤질)피페리딘-4-카복실산 히드로클로라이드 (5.34 g, 111 %)를 수득하였다. MS m/z 254, 256 (M+H)+
단계 3: 메틸 2-(4- 클로로벤질 )피페리딘-4- 카복실레이트
미정제 2-(4-클로로벤질)피페리딘-4-카복실산 히드로클로라이드 (5.34 g, 20.9 mmol)에 HCl (MeOH 중 1.25 M, 60 mL)을 첨가하였다. 생성된 현탁액을 2 시간 동안 환류시킨 뒤 농축하여 담황색 고체를 수득하였다. 잔류물을 포화 NaHCO3 (100 mL)에 녹였다. 상기 수상을 DCM (x3)으로 추출하고, 상기 혼합된 유기상을 상 분리기로 건조시킨 후 증발시켜 메틸 2-(4-클로로벤질)피페리딘-4-카복실레이트 (3.85 g, 87 %)를 갈색 오일로서 수득하였다. MS m/z 268, 270 (M+H)+
단계 4: 디메틸 2-(4- 클로로벤질 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
DCM (100 mL) 중의 메틸 2-(4-클로로벤질)피페리딘-4-카복실레이트 (3.72 g, 13.2 mmol) 및 DIPEA (4.85 mL, 27.78 mmol)의 용액에, DCM (50 mL) 중의 메틸 클로로포르메이트 (1.431 mL, 18.48 mmol)를 30 분간에 걸쳐 첨가하였다. 상기 반응 용액을 밤새 교반하였다 (16 h). 상기 유기상을 포화 NaHCO3로 세척하고 상 분리기를 이용하여 건조한 후 증발시켜 디메틸 2-(4-클로로벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (4.74 g, 110 %)를 황색 오일로서 수득하였다. MS m/z 326, 328 (M+H)+
단계 5: 2-(4- 클로로벤질 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(4-클로로벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (4.74 g, 14.55 mmol)를 테트라히드로푸란 (15 mL) 중에 용해시킨 후, LiOH (0.430 g, 17.97 mmol), MeOH (10 mL) 및 물 (10 mL)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 물에 녹였다. 2 M HCl을 첨가하여 pH를 < 2로 조절하였다. 상기 생성물은 가용성이 좋지 못했기 때문에, DCM과 에틸 아세테이트를 이용하여 수성상을 추출해내려는 시도는 실패하였다. 대신에, 상기 혼합물을 농축시킨 후, 여과하고 물로 세척한 후 건조시켜 황색 고체 물질을 수득하였다. 상기 수성상은 일부의 생성물도 포함하고 있지 않아 DCM (x3)으로 추출하고 상 분리기를 사용해 건조시켜 약 500 mg을 수득하였다. 미정제 2-(4-클로로벤질)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (4.27 g, 정량 분석)을 분리하였다. MS m/z 312, 314 (M+H)+
참조 화합물 52
1-( 메톡시카보닐 )-2-(4-( 메틸설포닐 )벤질)피페리딘-4- 카복실산
단계 1: (4-( 메틸설포닐 )벤질) 아연 ( Ⅱ ) 브롬화물
아연 분말 (2.81 g, 42.97 mmol)을 질소 하에 THF (50 mL) 중에 현탁시킨 후 60℃로 가열하였다. 1,2-디브로모에탄 (0.336 g, 1.79 mmol)을 첨가하고 60℃에서 15 분간 교반하였다. 이를 주위 온도로 냉각시킨 후, TMSCl (0.156 g, 1.43 mmol)을 첨가하고 주위 온도에서 15 분간 교반하였다. THF (50mL) 중에 용해된 1-(브로모메틸)-4-(메틸설포닐)벤젠 (8.92 g, 35.81 mmol)을 15 분간 첨가하고, 상기 생성된 혼합물을 주위 온도에서 밤새 교반하였다. 교반을 중지하고 상기 상청액을 다음 반응에서 사용하였다.
단계 2: 메틸 2-(4-( 메틸설포닐 )벤질) 이소니코티네이트
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (5.12 g, 29.84 mmol) 및 Pd(PPh3)4 (1.379 g, 1.19 mmol)를 질소 하의 THF (50 mL) 중에서 용해시켰다. THF (100 mL) 중에서 새로 제조한 4-(메틸설포닐)벤질)아연(Ⅱ) 브롬화물 (11.26 g, 35.81 mmol)을 첨가하고 상기 반응 혼합물 60℃로 3 시간 동안 가열하였다. 물 (20 mL)을 첨가하였다. 이를 NaHCO3 (aq)로 희석한 후 디에틸 에테르로 추출하였다. 상기 유기층을 NaCl (aq)로 세척, Na2SO4로 건조하고, 여과시킨 후 증발시켰다. 바이오타지 장비를 이용하여 정제하였다. 에틸 아세테이트와 헥산을 용리액으로 사용하였다. 0% 내지 100%의 에틸 아세테이트 농도구배를 사용하였다. 메틸 2-(4-(메틸설포닐)벤질)-이소니코티네이트 (8.0 g, 88 %)를 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ3.00 (s, 3H), 3.92 (s, 3H), 4.28 (s, 2H), 7.45 (d, 2H), 7.68 - 7.72 (m, 2H), 7.85 (d, 2H), 8.69 (d, 1H). MS m/z 306 (M+H)+
단계 3: 메틸 2-(4-( 메틸설포닐 )벤질)피페리딘-4- 카복실레이트
메틸 2-(4-(메틸설포닐)벤질)이소니코티네이트 (8.0 g, 26.2 mmol)를 아세트산 (250 mL)에 용해시켰다. 활성탄을 첨가하고 30 분간 교반하였다. 상기 활성탄을 여과로 제거하였다. 상기 용액에 PtO2 (0.119 g, 0.52 mmol)를 첨가하고 상기 반응 혼합물 실온 및 9 bar에서 밤새 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 촉매를 여과하여 제거하였다. 용매는 증발시켰다. 상기 미정제 생성물을 Na2CO3 (aq)와 에틸 아세테이트 사이로 구분시켜 놓았다. 상기 유기층을 Na2SO4로 건조하고 셀라이트를 통해 여과시킨 후, 증발시켜 메틸 2-(4-(메틸설포닐)벤질)피페리딘-4-카복실레이트 (5.38 g, 65.9%)를 수득하였다.
단계 4: 디메틸 2-(4-( 메틸설포닐 )벤질)피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(4-(메틸설포닐)벤질)피페리딘-4-카복실레이트 (5.88 g, 18.88 mmol)를 DIPEA (4.93 mL, 28.32 mmol)와 디클로로메탄 (150 mL) 중에 용해시켰다. 메틸 염화탄산 (2.141 g, 22.66 mmol)을 적가하고 상기 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 1 M KHSO4와 디에틸 에테르 사이로 구분시켜 놓았다. 상기 유기층을 Na2SO4로 건조하고 셀라이트를 통해 여과시킨 후, 증발시켜 디메틸 2-(4-(메틸설포닐)벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (5.5 g, 79 %)를 수득하였다.
단계 5: 1-( 메톡시카보닐 )-2-(4-( 메틸설포닐 )벤질)피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(4-(메틸설포닐)벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (5.5 g, 14.89 mmol)를 아세토니트릴 (50 mL)과 물 (1 mL) 중에 용해시킨 후, 브롬화리튬 (10.34 g, 119.10 mmol)과 트리에틸아민 (8.25 mL, 59.55 mmol)을 첨가하고 생성된 현탁액을 환류로 2 시간 동안 가열하였다. 물과 MTBE를 첨가하였다. 상기 유기상을 물로 추출하였다 (x2). 모아진 수성층에 에틸 아세테이트를 첨가하고 상기 용액을 HCl로 pH 1로 산성화시킨 후, 에틸 아세테이트로 2 회 추출하였다. 상기 유기층을 건조하고 (Na2SO4), 셀라이트를 통해 여과시킨 후, 증발시켜 1-(메톡시카보닐)-2-(4-(메틸설포닐)벤질)피페리딘-4-카복실산 (4.2 g, 79 %)을 수득하였다. MS m/z 354 (M-H)-
참조 화합물 53
2-(3,4- 디플루오로벤질 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 2-(3,4- 디플루오로벤질 ) 이소니코티네이트
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (5.6 g, 32.64 mmol) 및 Pd(PPh3)4 (0.754 g, 0.65 mmol)를 질소 하에 THF (100 mL) 중에서 용해시켰다. (3,4-디플루오로벤질)아연(Ⅱ) 브롬화물 (THF 중 0.5 M) (100 mL, 50.00 mmol)을 첨가하고 상기 갈색 용액을 60℃에서 밤새 교반하였다. 메탄올 (50 mL)을 첨가하여 상기 반응을 중지시켰다. 상기 용액을 EtOAc로 희석하고 NH4Cl (aq)로 세척하였다. 상기 유기층을 MgSO4로 건조하고, 여과한 후 증발시켜 황색 오일을 수득하였다. 상기 화합물을 바이오타지 [SNAP 340g KP-SIL, 용리액: 등용매 헵탄/에틸 아세테이트 8:2 (2 CV), 이후 선형 농도구배 헵탄/에틸 아세테이트 8:2 내지 5:5 (6 CV)]를 사용해 정제하여 메틸 2-(3,4-디플루오로벤질)이소니코티네이트 (7.7 g, 90%)를 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ3.93 (s, 3H), 4.16 (s, 2H), 6.94 - 7.01 (m, 1H), 7.02 - 7.12 (m, 2H), 7.66 - 7.71 (m, 2H), 8.70 (dd, 1H). MS m/z 264 (M+H)+
단계 2: 메틸 2-(3,4- 디플루오로벤질 )피페리딘-4- 카복실레이트
메틸 2-(3,4-디플루오로벤질)이소니코티네이트 (7.7 g, 29.25 mmol)를 아세트산 (75 mL) 중에 용해시킨 후 산화백금(Ⅳ) (0.332 g, 1.46 mmol)을 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 실온 및 5 bar에서 4 시간 45 분간 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 산화백금(Ⅳ) (0.166 g, 0.73 mmol)을 더 첨가하고 상기 수소화를 5 bar에서 2 시간 동안 지속하였다. 산화백금(Ⅳ) (0.166 g, 0.73 mmol)을 더 첨가하고 상기 수소화를 5 bar에서 1 시간 20 분간 지속하였다. 촉매를 여과하여 제거한 후 MeOH로 세척하고 용출액을 증발시켰다. DCM과 10 % K2CO3를 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 유기층을 식염수로 세척하고, 상 분리기 통과 후 증발시켜 미정제 메틸 2-(3,4-디플루오로벤질)피페리딘-4-카복실레이트 (8.133 g, 103 %)를 갈색 오일로서 수득하였다. MS m/z 270 (M+H)+
단계 3: 디메틸 2-(3,4- 디플루오로벤질 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(3,4-디플루오로벤질)피페리딘-4-카복실레이트 (8.115 g, 30.14 mmol)를 DCM (200 mL)과 DIPEA (6.30 mL, 36.16 mmol) 중에 용해시킨 후, 메틸 염화탄산 (3.3 mL, 41.91 mmol)을 첨가하였다. 상기 용액을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 0.1 M HCl, 포화 NaHCO3로 세척하였다. 상기 유기상을 상 분리기를 통과시킨 후 증발시켰다. 잔류물을 에테르/펜탄, 80/20 중에 재용해시키고, 상기 용액을 1 M HCl로 5 회 세척한 후, 포화 NaHCO3 및 식염수로 세척하고, MgSO4로 건조한 후 여과 및 증발시켜 디메틸 2-(3,4-디플루오로벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (7.05 g, 71 %)를 수득하였다. MS m/z 328 (M+H)+
단계 4: 2-(3,4- 디플루오로벤질 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(3,4-디플루오로벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (7.010 g, 21.42 mmol)를 아세토니트릴 (75 mL)과 물 (1.5 mL)에 용해시켰다. 브롬화리튬 (14.88 g, 171.33 mmol)과 트리에틸아민 (11.87 mL, 85.66 mmol)을 첨가하고 생성된 황색 현탁액을 환류에서 3 시간 동안 가열하였다. 물 (100 mL)과 MTBE (300 mL)를 첨가하였다. 상기 유기상을 물로 추출하였다 (x2). 모아진 수성층을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화한 후, MTBE로 추출하였다 (x2). 상기 혼합된 유기층을 물로 세척하고, Na2SO4로 건조한 후, 여과 및 증발시켜 2-(3,4-디플루오로벤질)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (6.62 g, 99 %)을 황색 고체로서 수득하였다. MS m/z 314 (M+H)+
참조 화합물 54
2-(2,5- 디플루오로벤질 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 2-(2,5- 디플루오로벤질 ) 이소니코티네이트
무수 THF (100 mL) 중의 메틸 2-클로로이소니코티네이트 (5.6 g, 32.64 mmol) 및 Pd(PPh3)4 (0.754 g, 0.65 mmol)의 용액에, 질소 하에 (2,5-디플루오로벤질)아연(Ⅱ) 브롬화물 (THF 중 0.5 M) (100 mL, 50.00 mmol)을 적가하였다. 상기 반응 혼합물을 60℃에서 15 시간 동안 가열하였다. 메탄올 (50 mL)을 첨가하여 상기 반응 혼합을 중지시킨 후, 여과하였다. 용매를 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트에 용해시키고, 포화 NH4Cl 용액 및 식염수로 세척한 후, 건조시켰다. 용매를 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 에탄올에 현탁시키고, 여과한 후 고체를 에탄올로 세척하였다. 여과물을 농축시켰다. 잔류물을 MTBE (150 mL)에 용해시킨 후, HCl (디옥산 중 4 M, 8.15 mL)과 MeOH (7.5 mL)를 첨가하였다. 생성된 현탁액을 20 분간 교반하고, 고체를 수집하고, MTBE로 세척한 후 (x2), 통풍 건조시켰다. 상기 고체를 DCM (200 mL) 중에 용해시킨 후, 포화 NaHCO3로 세척하였다. 상기 유기상을 상 분리기를 이용하여 건조한 후 증발시켜 메틸 2-(2,5-디플루오로벤질)이소니코티네이트 (6.8 g, 79 %)를 수득하였다. MS m/z 264 (M+H)+
단계 2: 메틸 2-(2,5- 디플루오로벤질 )피페리딘-4- 카복실레이트
아세트산 (68 mL) 중의 메틸 2-(2,5-디플루오로벤질)이소니코티네이트 (6.8 g, 25.83 mmol)와 산화백금(Ⅳ) (0.293 g, 1.29 mmol)의 혼합물을 실온 및 5 bar에서 5 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. PtO2 (190 mg)를 더 첨가하고 상기 수소화를 실온 및 5 bar에서 추가로 80 분간 지속하였다. 상기 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과시킨 후, 촉매를 메탄올로 세척하였다. 여과물을 농축한 후, 잔류물을 DCM 중에 용해시키고, 포화 NaHCO3로 세척한 후 상기 유기층을 상 분리기를 이용하여 건조하였다. 용매를 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 이소헥산/에테르 중에 용해시킨 후 여과하였다. 용매를 진공 속에서 증발시켜 메틸 2-(2,5-디플루오로벤질)피페리딘-4-카복실레이트 (6.65 g, 96%)를 수득하였다. MS m/z 270 (M+H)+
단계 3: 디메틸 2-(2,5- 디플루오로벤질 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
DCM (100 mL) 및 DIPEA (5.16 mL, 29.63 mmol) 중의 메틸 2-(2,5-디플루오로벤질)피페리딘-4-카복실레이트 (6.65 g, 24.69 mmol)의 용액에, 메틸 염화탄산 (2.53 mL, 32.10 mmol)을 질소 하, 실온에서 적가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 0.15 M HCl (250 mL)을 사용하여 상기 반응을 중지시켰다. 상기 유기상을 분리하고, 포화 NaHCO3로 세척하고, 상 분리기를 이용하여 건조한 후 증발시켜 디메틸 2-(2,5-디플루오로벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (8.1 g, 100%)를 수득하였다. MS m/z 328 (M+H)+
단계 4: 2-(2,5- 디플루오로벤질 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
아세토니트릴 (85 mL)과 물 (1.7 mL) 중의 디메틸 2-(2,5-디플루오로벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (8.08 g, 24.69 mmol)의 용액에, 브롬화리튬 (4.95 mL, 197.48 mmol)과 트리에틸아민 (13.69 mL, 98.74 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 환류로 2.5 시간 동안 가열한 후, 실온으로 냉각시켰다. 물 (150 mL)과 MTBE (300 mL)를 첨가하였다. 상기 수상을 분리시키고 상기 유기상을 물로 2 회 추출하였다. 상기 수상을 혼합하고 pH 1이 얻어질 때까지 4.0 M HCl을 첨가하였다. 상기 수성상을 MTBE로 추출하였다 (300 mL x2). 상기 유기상을 혼합하고, 식염수로 세척하고, Na2SO4로 건조한 후, 감압 하에 증발시켜 2-(2,5-디플루오로벤질)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (7.4 g, 96%)을 수득하였다. MS m/z 314 (M+H)+
참조 화합물 55
2-(2,6- 디플루오로벤질 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 2-(2,6- 디플루오로벤질 ) 이소니코티네이트
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (5.600 g, 32.64 mmol) 및 Pd(PPh3)4 (0.754 g, 0.65 mmol)를 질소 하에 THF (100 mL) 중에 용해시킨 후, (2,6-디플루오로벤질)아연(Ⅱ) 브롬화물 (THF 중 0.5 M, 100 mL, 50.00 mmol)을 첨가하고 이렇게 해서 생성된 용액을 실온으로 냉각하고 메탄올 (50.0 mL)을 사용해 반응을 중지시키기 전에 60℃에서 4 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 EtOAc로 희석하고 포화 NH4Cl로 세척하였다. 상기 유기상을 MgSO4로 건조하고, 여과한 후 증발시켰다. 상기 미정제 생성물을 MTBE (200 mL) 중에 용해시키고, 고체를 여과로 제거한 후, HCl (디옥산 중 4 M, 8.16 mL, 32.64 mmol)을 적가하였다. 침전물을 여과하여 제거하기 전에 상기 혼합물을 10 분간 교반하고, MTBE로 세척한 후, MTBE / 포화 NaHCO3에 용해시켰다. 상기 유기층을 MgSO4로 건조시키고, 여과 후 증발시켜 메틸 2-(2,6-디플루오로벤질)이소니코티네이트 (5.03 g, 58.6 %)를 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ3.92 (s, 3H), 4.29 (s, 2H), 6.87 - 6.97 (m, 2H), 7.18 - 7.29 (m, 1H), 7.61 - 7.73 (m, 2H), 8.63 - 8.70 (m, 1H). MS m/z 264 (M+H)+
단계 2: 메틸 2-(2,6- 디플루오로벤질 )피페리딘-4- 카복실레이트
메틸 2-(2,6-디플루오로벤질)이소니코티네이트 (5.031 g, 19.11 mmol)를 아세트산 (49 mL) 중에 용해시킨 후, 산화백금(Ⅳ) (0.217 g, 0.96 mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온 및 5 bar에서 5 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 산화백금(Ⅳ) (0.108 g, 0.48 mmol)을 더 첨가하고 상기 수소화를 1 시간 동안 지속하였다. 추가의 산화백금(Ⅳ) (0.108 g, 0.48 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 다시 1.5 시간 동안 수소화하였다. 산화백금(Ⅳ) (0.108 g, 0.48 mmol)을 더 첨가하였다. 총 8.5 시간 후, 상기 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과시키고 촉매를 MeOH로 세척하였다. 용출액을 농축시키고 DCM와 1 M K2CO3를 첨가하였다. 상기 상들을 분리한 후, 상기 유기상을 건조시키기 전에 식염수로 세척한 후 농축시켜 메틸 2-(2,6-디플루오로벤질)피페리딘-4-카복실레이트 (5.01 g, 97 %)를 수득하였다. MS m/z 270 (M+H)+
단계 3: 디메틸 2-(2,6- 디플루오로벤질 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(2,6-디플루오로벤질)피페리딘-4-카복실레이트 (5.008 g, 18.60 mmol)를 DCM (121 mL)과 DIPEA (3.89 mL, 22.32 mmol)에 용해시킨 후, 메틸 염화탄산 (2.050 mL, 26.04 mmol)을 첨가하였다. 3.5 시간 후 실온에서 상기 용액을 0.1 M HCl과 포화 NaHCO3로 세척하였다. 상기 유기상을 건조한 후 농축시켜 디메틸 2-(2,6-디플루오로벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (5.98 g, 98 %)를 수득하였다. MS m/z 328 (M+H)+
단계 4: 2-(2,6- 디플루오로벤질 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(2,6-디플루오로벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (5.98 g, 18.27 mmol)를 아세토니트릴 (50 mL)과 물 (1 mL) 중에 용해시킨 후, 브롬화리튬 (12.69 g, 146.16 mmol)과 트리에틸아민 (10.13 mL, 73.08 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 환류로 3.5 시간 동안 가열한 후, 물 (60 mL)과 MTBE (180 mL)를 첨가하였다. 상기 유기상을 물로 추출하였다 (x2). 상기 혼합된 수상을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화하고 MTBE로 추출하였다 (x2). 상기 혼합된 유기상을 물로 세척한 후, MgSO4로 건조시키고 셀라이트를 통해 여과시킨 후 농축시켜 2-(2,6-디플루오로벤질)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (4.72 g, 82 %)을 담황색 고체로서 수득하였다. MS m/z 314 (M+H)+
참조 화합물 56
2-(3,5- 디플루오로벤질 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 2-(3,5- 디플루오로벤질 ) 이소니코티네이트
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (5.600 g, 32.64 mmol) 및 Pd(PPh3)4 (0.754 g, 0.65 mmol)를 질소 하에 THF (100 mL) 중에 용해시킨 후, (3,5-디플루오로벤질)염화아연(Ⅱ) (THF 중 0.5 M, 100 mL, 50.00 mmol)을 첨가하고, 이렇게 해서 생성된 용액을 실온으로 냉각하기 전에 60℃에서 3 시간 동안 교반한 후, 메탄올 (50.0 mL)로 반응을 중지시켰다. 상기 혼합물을 EtOAc로 희석하고 포화 NH4Cl로 세척하였다. 상기 유기상을 건조하고 농축시켰다. 잔류물을 바이오타지? [KP-SIL 340g 컬럼, 용리액: 등용매 헵탄/EtOAc 8:2 (2 CV)] 상에서 자동화 섬광 크로마토그래피로 정제하고, 이후 헵탄 중 20 % 내지 50 %의 EtOAc (6 CV)의 농도구배를 이동상으로 사용하였다. 메틸 2-(3,5-디플루오로벤질)이소니코티네이트 (7.42 g, 86 %)를 오일로서 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ3.94 (s, 3H), 4.18 (s, 2H), 6.66 (tt, 1H), 6.74 - 6.82 (m, 2H), 7.67 - 7.75 (m, 2H), 8.67 - 8.75 (m, 1H). MS m/z 264 (M+H)+
단계 2: 메틸 2-(3,5- 디플루오로벤질 )피페리딘-4- 카복실레이트
메틸 2-(3,5-디플루오로벤질)이소니코티네이트 (7.417 g, 28.18 mmol)를 아세트산 (72 mL) 중에 용해시킨 후, 산화백금(Ⅳ) (0.320 g, 1.41 mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온 및 5 bar에서 5 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 상기 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과시키고 촉매를 MeOH로 세척하였다. 용출액을 농축시키고 DCM과 1 M K2CO3를 첨가하였다. 상기 상들을 분리한 후, 상기 유기상을 건조하기 전 식염수로 세척한 후, 농축시켜 메틸 2-(3,5-디플루오로벤질)피페리딘-4-카복실레이트 (7.08 g, 93 %)를 수득하였다. MS m/z 270 (M+H)+
단계 3: 디메틸 2-(3,5- 디플루오로벤질 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(3,5-디플루오로벤질)피페리딘-4-카복실레이트 (7.082 g, 26.30 mmol)를 DCM (170 mL)과 DIPEA (5.50 mL, 31.56 mmol)에 용해시킨 후, 메틸 염화탄산 (2.88 mL, 36.58 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반한 후, 추가의 메틸 염화탄산 (0.7 mL, 8.89 mmol)을 첨가하였다. 상기 용액을 30 분간 교반한 후, 0.1 M HCl과 포화 NaHCO3로 세척하였다. 상기 유기상을 건조한 후 농축시켜 디메틸 2-(3,5-디플루오로벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (8.55 g, 99 %)를 수득하였다. MS m/z 328 (M+H)+
단계 4: 2-(3,5- 디플루오로벤질 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(3,5-디플루오로벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (8.459 g, 25.84 mmol)를 아세토니트릴 (85 mL)과 물 (1.7 mL) 중에 용해시켰다. 브롬화리튬 (17.95 g, 206.74 mmol)과 트리에틸아민 (14.33 mL, 103.37 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 환류로 1.5 시간 동안 가열한 후, 물 (100 mL)과 MTBE (300 mL)를 첨가하였다. 상기 유기상을 물로 추출하였다 (x2). 상기 혼합된 수상을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화하고 MTBE로 추출하였다 (x2). 상기 혼합된 유기상을 물로 세척한 후, MgSO4로 건조하고 셀라이트를 통해 여과한 후 농축시켰다. 상기 미정제 생성물을 MTBE 중에 재용해시키고 0.1 M HCl (x2) 및 물로 세척하였다. 상기 유기상을 MgSO4로 건조시킨 후 농축하여 2-(3,5-디플루오로벤질)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (6.88 g, 85 %)을 수득하였다. MS m/z 314 (M+H)+
참조 화합물 57
2-(2,4- 디플루오로벤질 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 메틸 2-(2,4- 디플루오로벤질 ) 이소니코티네이트
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (5.2 g, 30.31 mmol) 및 Pd(PPh3)4 (0.700 g, 0.61 mmol)를 질소 하에 THF (100 mL) 중에 용해시킨 후, (2,4-디플루오로벤질)염화아연(Ⅱ) (THF 중 0.5 M, 90 mL, 45.00 mmol)을 첨가하고, 상기 갈색 용액을 60℃에서 밤새 교반하였다 (18 h). 메탄올 (50.0 mL)을 첨가하여 상기 반응을 중지시켰다. 상기 용액을 EtOAc로 희석하고 NH4Cl (aq)과 식염수로 세척한 후, Na2SO4로 건조시켜 적색 오일을 수득하였다. 상기 미정제 생성물을 MTBE (200 mL)에 재용해시킨 후 고체를 여과하여 제거하였다. 염화수소 (디옥산 중 4 M, 7.58 mL, 30.31 mmol)를 교반 중에 적가하여 현탁액을 형성시켰다. 상기 현탁액을 실온에서 15 분간 교반하였다. 고체를 여과에 의해 수집하고 MTBE로 세척하였다. 상기 고체를 MTBE / 포화 NaHCO3에 용해시켰다. 상기 상들을 분리하고, 상기 유기상을 Na2SO4로 건조시킨 후, 여과 및 증발시켜 메틸 2-(2,4-디플루오로벤질)이소니코티네이트 (7.011 g, 88 %)를 적색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ3.93 (s, 3H), 4.20 (s, 2H), 6.77 - 6.88 (m, 2H), 7.18 - 7.25 (m, 1H), 7.62 - 7.73 (m, 2H), 8.69 (dd, 1H). MS m/z 264 (M+H)+
단계 2: 메틸 2-(2,4- 디플루오로벤질 )피페리딘-4- 카복실레이트
메틸 2-(2,4-디플루오로벤질)이소니코티네이트 (7.011 g, 26.63 mmol)를 아세트산 (50 mL) 중에 용해시킨 후, 산화백금(Ⅳ) (0.302 g, 1.33 mmol)을 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 실온 및 5 bar에서 4.5 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 산화백금(Ⅳ) (174 mg)을 첨가하고 상기 수소화를 실온, 5 bar에서 2 시간 동안 지속시켰다. 추가의 산화백금(Ⅳ) (185 mg)을 첨가하고 수소화를 실온, 5 bar에서 2 시간 동안 지속하였다. 촉매를 여과하여 제거한 후 MeOH로 세척하고 용출액을 증발시켰다. DCM와 10 % K2CO3를 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 수상을 DCM으로 추출한 후, 상기 혼합된 유기상을 물로 세척하고, 상 분리기 통과 후 증발시켜 메틸 2-(2,4-디플루오로벤질)-피페리딘-4-카복실레이트 (7.103 g, 99%)를 황색 오일로서 수득하였다. MS m/z 270 (M+H)+
단계 3: 디메틸 2-(2,4- 디플루오로벤질 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
DCM (100 mL) 중의 메틸 2-(2,4-디플루오로벤질)피페리딘-4-카복실레이트 (7.1 g, 26.37 mmol)의 용액에 DIPEA (6.5 mL, 37.32 mmol)를 첨가한 후, 메틸 염화탄산 (2.3 mL, 29.21 mmol)을 적가하였다. 첨가를 완료한 후에, 상기 반응 혼합물을 실온에서 4 시간 동안 교반한 후, 2 M HCl을 첨가하였다. 상기 유기층을 MTBE로 희석한 후, 상기 2상 혼합물을 여과하여 녹지 않은 물질을 제거하고, 상 분리 후, 상기 유기층을 식염수 및 포화 NaHCO3로 세척하고 MgSO4로 건조한 후 증발시켜 디메틸 2-(2,4-디플루오로벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (8.51 g, 99 %)를 어두운 색의 오일로서 수득하였다. MS m/z 328 (M+H)+
단계 4: 2-(2,4- 디플루오로벤질 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
아세토니트릴 (80 mL)과 물 (1.6 mL) 중의 브롬화리튬 (18.06 g, 207.99 mmol)의 현탁액에 트리에틸아민 (14.42 mL, 104.00 mmol)을 첨가한 후, 아세토니트릴 (40 mL) 중의 디메틸 2-(2,4-디플루오로벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (8.51 g, 26.00 mmol)를 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 환류 하에 2 시간 30분 동안 가열한 후, 실온으로 냉각하고 물과 MTBE를 첨가하였다. 상기 유기상을 물로 2 회 추출하였다. 모아진 수성층을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 조절한 후, DCM으로 추출하였다 (3 x). 상기 혼합된 유기층을 MgSO4로 건조한 후 증발시켜 2-(2,4-디플루오로벤질)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (7.48 g, 92%)을 오렌지색 고체로서 수득하였다. MS m/z 314 (M+H)+
참조 화합물 58
2-(3- 플루오로 -5-( 트리플루오로메틸 )벤질)-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4-카복실산
단계 1: (3- 플루오로 -5-( 트리플루오로메틸 )벤질) 아연 ( Ⅱ ) 브롬화물
건조된 플라스크 중에서, 질소 하에 아연 분말 (1.526 g, 23.34 mmol)을 무수 THF (12.5 mL) 중에 현탁시켰다. 생성된 현탁액을 60℃로 가온한 후, 1,2-디브로모에탄 (0.084 mL, 0.97 mmol)을 첨가하고 이 온도에서 15 분간 교반하였다. 이를 실온으로 냉각한 후, 클로로트리메틸실란 (0.099 mL, 0.78 mmol)을 첨가하고 실온에서 20 분간 교반하였다. 이후, 무수 THF (12.5 mL)에 용해된 1-(브로모메틸)-3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤젠 (5 g, 19.45 mmol)을 7 분간에 걸쳐 첨가하고 교반을 실온에서 1 시간 동안 지속한 후, 교반을 중지하여 고체가 가라앉도록 놓아두었다. 상기 상청액을 다음 변환 반응에서 사용하였다.
단계 2: 메틸 2-(3- 플루오로 -5-( 트리플루오로메틸 )벤질) 이소니코티네이트
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (3.0 g, 17.48 mmol) 및 Pd(PPh3)4 (0.606 g, 0.52 mmol)를 질소 하에 THF (50 mL) 중에 용해시켰다. 새로 제조한 THF (25 mL) 중의 (3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질)아연(Ⅱ) 브롬화물 (5.41 g, 19.45 mmol)을 상기 황색 용액에 첨가한 후, 플라스크를 60℃로 밤새 가온하였다. 메탄올을 첨가하여 상기 반응 혼합을 중지시켰다. 상기 용액을 에틸 아세테이트로 희석하고 NH4Cl 및 물로 세척하였다. 상기 유기층을 Na2SO4로 건조하고, 셀라이트를 통해 여과한 후, 용매는 증발시켰다. 잔류물을 바이오타지 장비를 이용한 크로마토그래피를 수행하였다. 용리액인 에틸 아세테이트-헵탄은, 20-80 및 선형 농도구배로부터 시작하여 60-40까지 설정하였다. 메틸 2-(3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질)이소니코티네이트 (4.1 g, 75 % 수율)를 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ3.94 (s, 3H), 4.25 (s, 2H), 7.13 - 7.22 (m, 2H), 7.33 (s, 1H), 7.69 - 7.75 (m, 2H), 8.70 - 8.74 (m, 1 H). MS m/z 314 (M+H)+
단계 3: 메틸 2-(3- 플루오로 -5-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4- 카복실레이트
아세트산 (50 mL) 중의 메틸 2-(3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질)이소니코티네이트 (4.5 g, 14.37 mmol)의 용액에 산화백금(Ⅳ) (0.36 g, 1.59 mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 5 bar에서 3 시간 45 분간 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 상기 반응 혼합물을 규조토 필터 곽을 통해 여과시킨 후, 촉매를 메탄올로 세척하였다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 DCM 중에 용해시킨 후, 10% Na2CO3로 세척하였다. 상 분리 후, 상기 수성층을 DCM으로 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 MgSO4로 건조시킨 후 증발시켰다. 메틸 2-(3-플루오로-5-(트리플루오로-메틸)벤질)피페리딘-4-카복실레이트 (4.11 g, 90 %)를 담황색 오일로서 분리하였는데, 이는 가만히 두었을 때 부분적으로 고형화되어 있었다. MS m/z 320 (M+H)+
단계 4: 디메틸 2-(3- 플루오로 -5-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트
얼음조에서 냉각된 DCM (50 mL) 중의 메틸 2-(3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-카복실레이트 (4.10 g, 12.84 mmol)의 용액에, DIPEA (3.5 mL, 20.09 mmol)를 첨가한 후, 메틸 염화탄산 (1.112 mL, 14.12 mmol)을 첨가하였다. 첨가를 완료한 후, 상기 반응 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 에틸 아세테이트와 3.8 M HCl 사이로 구분시켜 놓았다. 상 분리 후, 상기 유기층을 식염수로 세척한 후, MgSO4로 건조하고 증발시켜 미정제 디메틸 2-(3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (4.94 g, 102 %)를 담황색 오일로서 수득하였다. MS m/z 378 (M+H)+
단계 5: 2-(3- 플루오로 -5-( 트리플루오로메틸 )벤질)-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
아세토니트릴 (60 mL)과 물 (1.2 mL) 중의 디메틸 2-(3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (4.94 g, 13.09 mmol)의 용액에 브롬화리튬 (9.10 g, 104.74 mmol)과 트리에틸아민 (7.26 mL, 52.37 mmol)을 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 환류 하에 2 시간 동안 가열한 후, 실온으로 냉각시켰다. 물을 첨가하고 아세토니트릴을 증발시켜 제거하였다. 상기 수성층을 물로 추가 희석한 후, MTBE로 세척하였다. 상기 유기층을 물로 추출하였다. 상기 혼합된 수성층을 3.8 M HCl로 산성화하여 무색의 침전물을 형성시켰다. 상기 수성층을 DCM으로 3 회 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 MgSO4로 건조한 후, 증발시켰다. 2-(3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (4.58 g, 96 %)을 담황색 점성 오일로서 수득하였다. MS m/z 364 (M+H)+
참조 화합물 59
2-(3- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 )벤질)-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4-카복실산
단계 1: (3- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 )벤질) 아연 ( Ⅱ ) 브롬화물
건조된 플라스크 중에서, 아연 분말 (3.05 g, 46.69 mmol)을 질소 하에 무수 테트라히드로푸란 (25 mL) 중에 현탁시켰다. 생성된 현탁액을 60℃로 가온한 후, 1,2-디브로모에탄 (0.168 mL, 1.95 mmol)을 첨가하고 이 온도에서 15 분간 교반하였다. 이를 실온으로 냉각한 후, 클로로트리메틸실란 (0.2 mL, 1.58 mmol)을 첨가하고 실온에서 1 시간 15 분간 교반하였다. 이후, 테트라히드로푸란 (5 mL) 중의 4-(브로모메틸)-2-플루오로-1-(트리플루오로메틸)벤젠 (10 g, 38.91 mmol)을 6 개의 동량으로 나누어 10 분 간격으로 빙냉 하에 첨가하였다. 첨가가 완료된 후, 얼음조를 제거하고 상기 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 이후, 교반을 중지하고 고체가 가라앉도록 놓아두었다. 상기 상청액을 다음 변환 반응에서 사용하였다.
단계 2: 메틸 2-(3- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 )벤질) 이소니코티네이트
건조된 플라스크 중에서, 질소 하에 테트라히드로푸란 (40 mL) 중의 메틸 2-클로로이소니코티네이트 (5.15 g, 30 mmol) 및 Pd(PPh3)4 (0.693 g, 0.60 mmol)의 용액에, 새로 제조된 테트라히드로푸란 (50 mL) 중의 (3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)벤질)아연(Ⅱ) 브롬화물 (12.55 g, 38.91 mmol)을 첨가하였다. 생성된 밝은 황색의 혼합물을 60℃로 2 시간 20 분 동안 가열한 후, 실온으로 냉각시켰다. 10 % NH4Cl을 첨가하여 상기 반응을 중지시켰다. 이를 에틸 아세테이트로 희석하였다. 상 분리 후, 상기 유기층을 식염수로 세척하고, MgSO4로 건조한 후 증발시켰다. 잔류물을 150 mL의 MTBE에 현탁시키고 초음파 처리 후, 상기 황색의 녹지 않은 물질들을 여과로 제거하고 MTBE로 세척하였다. 상기 여과물의 부피를 약 200 mL로 증대시킨 후, 염화수소 (7.50 mL, 30.00 mmol) (디옥산 중 4M)를 적가하였다. 무색의 침전물을 형성시켰다. 생성된 현탁액을 약 1 시간 동안 교반시킨 후, 2 분간 초음파 처리하였다. 상기 형성된 고체를 수집하여 MTBE로 세척한 후 건조시켰다. 상기 고체를 DCM에 용해시킨 후 10% K2CO3로 세척하였다. 상 분리 후, 상기 수성층을 DCM으로 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 MgSO4로 건조한 후 증발시켰다. 메틸 2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)벤질)이소니코티네이트 (8.26 g, 88 %)를 옅은 오렌지색 오일로서 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ3.94 (s, 3H), 4.24 (s, 2H), 7.06 - 7.18 (m, 2H), 7.52 (t, 1H), 7.69 - 7.75 (m, 2H), 8.68 - 8.75 (m, 1H). MS m/z 314 (M+H)+
단계 3: 메틸 2-(3- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4- 카복실레이트
아세트산 (50 mL) 중의 메틸 2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)벤질)이소니코티네이트 (8.26 g, 26.37 mmol)의 용액에 산화백금(Ⅳ) (0.44 g, 1.94 mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 5 bar에서 8 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 상기 반응 혼합물을 규조토 필터 곽을 통해 여과시킨 후, 촉매를 메탄올로 세척하였다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 DCM 중에 용해시킨 후, 10% Na2CO3로 세척하였다. 상 분리 후, 상기 수성층을 DCM으로 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 MgSO4로 건조 후 증발시켰다. 메틸 2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)-벤질)피페리딘-4-카복실레이트 (8.4 g, 100 %)를 담황색 오일로서 분리하였는데, 이는 가만히 두었을 때 부분적으로 고형화되어 있었다. MS m/z 320 (M+H)+
단계 4: 디메틸 2-(3- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트
얼음조에서 냉각된 DCM (100 mL) 중의 메틸 2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-카복실레이트 (5.96 g, 18.67 mmol)의 용액에, DIPEA (4 mL, 22.96 mmol)를 첨가한 후, 메틸 염화탄산 (1.617 mL, 20.53 mmol)을 첨가하였다. 첨가를 완료한 후, 상기 반응 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 에틸 아세테이트와 3.8 M HCl 사이로 구분시켜 놓았다. 상 분리 후, 상기 유기층을 식염수로 세척한 후, MgSO4로 건조하고 증발시켰다. 디메틸 2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (7.17 g, 102 %)를 담황색 오일로서 분리하였다.
단계 5: 2-(3- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 )벤질)-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
아세토니트릴 (60 mL)과 물 (1.2 mL) 중의 디메틸 2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (7.17 g, 19.00 mmol)의 용액에, 브롬화리튬 (13.20 g, 152.02 mmol)과 트리에틸아민 (10.54 mL, 76.01 mmol)을 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 환류 하에 2 시간 동안 가열한 후, 실온으로 냉각시켰다. 물을 첨가하고 아세토니트릴을 증발시켜 제거하였다. 상기 수성층을 물로 추가 희석한 후, MTBE로 세척하였다. 상기 유기층을 물로 추출하였다. 상기 혼합된 수성층을 3.8 M HCl로 산성화하고, 무색의 침전물을 형성시켰다. 상기 고체를 DCM으로 6 회 추출하였다. 상기 수성층을 다시 DCM으로 2 회 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 MgSO4로 건조시킨 후 증발시켰다. 2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)벤질)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (6.56 g, 95 %)을 황백색 고체로서 분리하였다. MS m/z 364 (M+H)+
참조 화합물 60
1-( 메톡시카보닐 )-2-(3,4,5- 트리플루오로벤질 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: (3,4,5- 트리플루오로벤질 ) 아연 ( Ⅱ ) 브롬화물
아연 분말 (2.62 g, 40.00 mmol)과 염화리튬 (1.696 g, 40.00 mmol)을 건조된 플라스크에 첨가하고 진공 속에서 150℃로 30 분간 가열하였다. 상기 플라스크를 실온에 도달하도록 놓아두었다. THF (20 mL)와 1,2-디브로모에탄 (0.115 mL, 1.33 mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 끓을 때까지 가열한 후, 플라스크를 실온에 도달하도록 놓아두었다. 클로로트리메틸실란 (0.034 mL, 0.27 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 다시 끓을 때까지 가열하였다. 상기 플라스크를 얼음조로 냉각시킨 후, THF (5 mL) 중에 용해된 5-(브로모메틸)-1,2,3-트리플루오로벤젠 (6 g, 26.67 mmol)을 적가하였다. 얼음조를 제거하고 상기 반응물을 실온에서 20 분간 교반하였다. 고체가 가라앉도록 두고 상기 상청액을 다음 변환 반응에서 사용하였다.
단계 2: 메틸 2-(3,4,5- 트리플루오로벤질 ) 이소니코티네이트 히드로클로라이드
메틸 2-클로로이소니코티네이트 (3.5 g, 20.40 mmol)를 질소 대기 하에서 THF (30 mL) 중에 용해시켰다. 비스(트리-tert-부틸포스핀)Pd(0) (0.208 g, 0.41 mmol)를 첨가하였다. 이후, 새로 제조한 (3,4,5-트리플루오로벤질)아연(Ⅱ) 브롬화물 (THF 중 1.06 M) (25.1 mL, 26.65 mmol)을 첨가하고, 상기 반응 혼합물 60℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 물 (15 mL)을 첨가하고 THF를 증발시켰다. 상기 반응 혼합물을 포화 NaHCO3로 희석하고 EtOAc로 추출하였다 (3x). 상기 혼합된 유기상을 포화 NaHCO3, 물, NH4Cl 및 식염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 여과한 후 진공 속에서 증발시켜 적색 오일을 수득하였다 (5 g). MTBE (70 mL)를 첨가하고, 녹지 않은 물질들을 여과로 제거한 후, MTBE (10 mL)로 세척하였다. 여과물에 염화수소 (디옥산 중 4 M, 5.10 mL, 20.40 mmol)를 적가하여 오렌지색의 침전물을 형성시켰다. 상기 혼합물을 얼음조로 냉각시켰다. 상기 침전물을 여과로 제거하고, 차가운 MTBE로 세척한 후, 진공 속에서 건조시켜 메틸 2-(3,4,5-트리플루오로벤질)이소니코티네이트 히드로클로라이드 (4.00 g, 61.7 %)를 오렌지색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ4.02 (s, 3H), 4.45 (s, 2H), 7.13 - 7.22 (m, 2H), 8.24 - 8.32 (m, 2H), 8.87 - 8.93 (m, 1H). MS m/z 282 (M+H)+
단계 3: 메틸 2-(3,4,5- 트리플루오로벤질 )피페리딘-4- 카복실레이트 히드로클로라이드
메틸 2-(3,4,5-트리플루오로벤질)이소니코티네이트 히드로클로라이드 (4 g, 12.59 mmol)를 MeOH (45 mL) 중에 용해시키고 산화백금(Ⅳ) (0.143 g, 0.63 mmol)을 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 실온 및 5 bar에서 3 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 추가의 산화백금(Ⅳ) (0.029 g, 0.13 mmol)을 첨가하고 수소화를 20 분간 지속하였다. 촉매를 여과하여 제거한 후 MeOH로 세척하였다. 여과물을 진공 속에서 증발시켜 메틸 2-(3,4,5-트리플루오로벤질)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (3.96 g, 97 %)를 갈색 고체로서 수득하였다. MS m/z 288 (M+H)+
단계 4: 디메틸 2-(3,4,5- 트리플루오로벤질 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(3,4,5-트리플루오로벤질)피페리딘-4-카복실레이트 히드로클로라이드 (3.957 g, 12.22 mmol)와 DIPEA (4.68 mL, 26.89 mmol)를 DCM 중에 용해시키고 (20 mL), 메틸 염화탄산 (1.059 mL, 13.45 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응물을 실온에서 18 시간 동안 교반한 후, DCM (200 mL)으로 희석하고, 0.1 M HCl (2 x 200 mL), 포화 NaHCO3 (200 mL)로 세척한 후, 상 분리기를 통해 건조하고 진공 속에서 증발시켜 디메틸 2-(3,4,5-트리플루오로벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (4.01 g, 95 %)를 갈색 오일로서 수득하였다. MS m/z 346 (M+H)+
단계 5: 1-( 메톡시카보닐 )-2-(3,4,5- 트리플루오로벤질 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(3,4,5-트리플루오로벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (4.01 g, 11.61 mmol)를 아세토니트릴 (40 mL)과 물 (0.8 mL)에 용해시켰다. 브롬화리튬 (2.329 mL, 92.90 mmol)을 첨가한 후 트리에틸아민 (6.44 mL, 46.45 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응물을 2 시간 동안 환류시켰다. 상기 반응물을 실온으로 냉각시켰다. 물 (200 mL)과 MTBE (150 mL)를 첨가하고 흔들어서 상들을 분리시켰다. 상기 유기상을 물 (2x150 mL)로 추출하였다. 상기 혼합된 수상을 3 M HCl을 사용해 pH 1로 산성화한 후, MTBE (2x400 mL)로 추출하였다. 상기 혼합된 유기상을 Na2SO4로 건조시키고 여과한 후 진공 속에서 증발시켜 1-(메톡시카보닐)-2-(3,4,5-트리플루오로-벤질)피페리딘-4-카복실산 (3.42 g, 89 %)을 밝은 갈색의 폼으로서 수득하였다. MS m/z 330 (M-H)-
참조 화합물 61
2-(3,5-디- tert - 부틸벤질 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: (3,5-디- tert - 부틸벤질 )아연( Ⅱ ) 브롬화물
건조된 플라스크 중에서, 아연 분말 (2.493 g, 38.13 mmol)을 질소 하에 무수 테트라히드로푸란 (23 mL) 중에 현탁시켰다. 생성된 현탁액을 60℃로 가온한 후, 1,2-디브로모에탄 (0.137 mL, 1.59 mmol)을 첨가하고 이 온도에서 15 분간 교반하였다. 이를 실온으로 냉각한 후, 클로로트리메틸실란 (0.161 mL, 1.27 mmol)을 첨가하고 실온에서 45 분간 교반하였다. 이후, 무수 테트라히드로푸란 (23.00 mL) 중에 용해된 1-(브로모메틸)-3,5-디-tert-부틸벤젠 (9 g, 31.77 mmol)을 10 분간에 걸쳐 첨가하였다. 교반을 실온에서 16 시간 동안 지속한 후, 교반을 중지하여 고체가 가라앉도록 놓아두었다. 상기 상청액을 다음 변환 반응에서 사용하였다.
단계 2: 메틸 2-(3,5-디- tert - 부틸벤질 ) 이소니코티네이트
건조된 플라스크 중에서, 질소 하에 테트라히드로푸란 (120 mL) 중의 메틸 2-클로로이소니코티네이트 (4 g, 23.31 mmol) 및 Pd(PPh3)4 (0.539 g, 0.47 mmol)의 용액에, 새로 제조한 테트라히드로푸란 (46 mL) 중의 (3,5-디-tert-부틸벤질)아연(Ⅱ) 브롬화물 (11.08 g, 31.78 mmol)을 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 밝은 황색의 용액을 60℃로 35 분간 가열한 후, 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 메탄올 (50 mL)을 첨가하여 상기 반응을 중지시켰다. 상기 용액을 EtOAc로 희석하고 NH4Cl로 세척하였다. 상기 유기층을 MgSO4로 건조한 후 여과 및 증발시켜 갈색 오일을 수득하였다. 상기 미정제 생성물을 MTBE (180 mL) 중에 재용해시킨 후 고체를 여과하여 제거하였다. 염화수소 (디옥산 중 4 M, 6.42 mL, 25.66 mmol)를 교반 중에 적가하여 현탁액을 형성시켰다. 상기 현탁액을 실온에서 10 분간 교반하였다. 고체를 여과에 의해 수집하고 MTBE로 세척하였다. MTBE / 포화 NaHCO3 중에 재용해시켰다. 상기 상들을 분리하고, 상기 유기상을 Na2SO4로 건조한 후, 여과 및 증발시켜 메틸 2-(3,5-디-tert-부틸벤질)이소니코티네이트 (7.132 g, 90 %)를 갈색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.28 (s, 18H), 3.89 (s, 3H), 4.19 (s, 2H), 7.11 (d, 2H), 7.27 (t, 1H), 7.64 (dd, 1H), 7.71 (s, 1H), 8.68 (d, 1H). MS m/z 340 (M+H)+
단계 3: 메틸 2-(3,5-디- tert - 부틸벤질 )피페리딘-4- 카복실레이트
메틸 2-(3,5-디-tert-부틸벤질)이소니코티네이트 (3.538 g, 10.42 mmol)를 아세트산 (30 mL)에 용해시키고 산화백금(Ⅳ) (0.118 g, 0.52 mmol)을 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 실온 및 5 bar에서 5 시간 45 분 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 촉매를 여과하여 제거한 후 MeOH로 세척하고 용출액을 증발시켰다. DCM과 10 % K2CO3를 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 유기층을 식염수로 세척하고, 상 분리기 통과 후 증발시켜 미정제 메틸 2-(3,5-디-tert-부틸벤질)피페리딘-4-카복실레이트 (3.80 g, 106%)를 베이지색 오일로서 수득하였다. MS m/z 346 (M+H)+
단계 4: 디메틸 2-(3,5- 디 - tert - 부틸벤질 )피페리딘-1,4- 디카복실레이트
메틸 2-(3,5-디-tert-부틸벤질)피페리딘-4-카복실레이트 (3.691 g, 10.68 mmol)를 DCM (80 mL) 중에 용해시키고, DIPEA (2.233 mL, 12.82 mmol)를 첨가한 후 메틸 염화탄산 (1.262 mL, 16.02 mmol)을 첨가하였다. 상기 용액을 실온에서 1.5 시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 0.1 M HCl 및 포화 NaHCO3로 세척하였다. 상기 유기상은 상 분리기 통과 후 증발시켜 디메틸 2-(3,5-디-tert-부틸벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (3.91 g, 91 %)를 황색 오일로서 수득하였다. MS m/z 404 (M+H)+
단계 5: 2-(3,5-디- tert - 부틸벤질 )-1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-(3,5-디-tert-부틸벤질)피페리딘-1,4-디카복실레이트 (3.886 g, 9.63 mmol)를 아세토니트릴 (40 mL)과 물 (0.8 mL)에 용해시킨 후, 브롬화리튬 (6.69 g, 77.04 mmol)과 트리에틸아민 (5.34 mL, 38.52 mmol)을 첨가하고 생성된 황색 현탁액을 환류에서 가열하였다. 5 시간 후, 물 (100 mL)과 MTBE (250 mL)를 첨가하였다. 상기 유기상을 물로 추출하였다 (x2). 모아진 수성층을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화한 후, MTBE로 추출하였다 (x3). 상기 혼합된 유기층을 물로 세척한 후, Na2SO4로 건조하고 여과 및 증발시켜 2-(3,5-디-tert-부틸벤질)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (3.723 g, 99%)을 황색 검으로서 수득하였다. MS m/z 390 (M+H)+
참조 화합물 62
2-벤질-2,3,4,5,6- d 5 -1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
단계 1: 벤질-2,3,4,5,6- d 5 아연 ( Ⅱ ) 브롬화물
건조된 플라스크 중에서, 아연 분말 (2.4 g, 36.70 mmol)을 질소 하에 무수 테트라히드로푸란 (40 mL) 중에 현탁시켰다. 생성된 현탁액을 60℃로 가온한 후, 1,2-디브로모에탄 (0.125 mL, 1.45 mmol)을 첨가하고 실온에서 20 분간 교반하였다. 이를 실온으로 냉각한 후, 클로로트리메틸실란 (0.15 mL, 1.18 mmol)을 첨가하고 실온에서 30 분간 교반하였다. 이후, 벤질-2,3,4,5,6-d5 브롬화물 (5 g, 28.40 mmol) (99.2 % 중수소화)을 30 분간에 걸쳐 나누어 첨가한 후, 교반을 실온에서 18 시간 동안 지속하였다. 교반을 중지하여 침전물이 가라앉도록 하였다. 상기 상청액을 다음 변환 반응에서 사용하였다.
단계 2: 메틸 2-벤질-2,3,4,5,6- d 5 이소니코티네이트
건조된 플라스크 중에서, 질소 하에 테트라히드로푸란 (40 mL) 중의 메틸 2-클로로이소니코티네이트 (3.95 g, 23 mmol) 및 Pd(PPh3)4 (0.532 g, 0.46 mmol)의 용액에, 새로 제조된 테트라히드로푸란 (50 mL) 중의 벤질-2,3,4,5,6-d5 아연(Ⅱ) 브롬화물 (6.86 g, 28.4 mmol)을 첨가하였다. 생성된 밝은 황색의 혼합물을 60℃로 2 시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 10 % NH4Cl을 첨가하여 상기 반응을 중지시켰다. 이를 에틸 아세테이트로 희석하였다. 상 분리 후, 상기 유기층을 식염수로 세척하고, MgSO4로 건조한 후 증발시켰다. 잔류물을 MTBE (50 mL) 중에 현탁시킨 후, 초음파로 처리하고, 상기 황색의 녹지 않은 물질들을 여과로 제거하고 MTBE로 세척하였다. 상기 여과물의 부피를 약 150 mL로 증대시킨 후, 5 mL의 MeOH를 첨가한 후, 염화수소 (5.75 mL, 23.00 mmol) (디옥산 중 4M)를 첨가하였다. 무색의 침전물을 형성시켰다. 상기 혼합물을 10 분간 교반하고, 5 분간 초음파로 처리한 후, 상기 고체를 수집하고 MTBE로 세척하였다. 상기 고체를 MeOH와 함께 분별 깔때기로 옮기고 MTBE로 희석하였다. 이후, 10% Na2CO3을 첨가하고 세게 흔들었다. 상 분리 후, 상기 유기층을 식염수로 세척하고, MgSO4로 건조시킨 후 증발시켰다. 메틸 2-벤질-2,3,4,5,6-d5 이소니코티네이트 (4.78 g, 89 %)를 담황색 오일로서 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ3.92 (s, 3H), 4.23 (s, 2H), 7.65 - 7.71 (m, 2H), 8.66 - 8.74 (m, 1H). MS m/z 233 (M+H)+
단계 3: 메틸 2-벤질-2,3,4,5,6- d 5 피페리딘-4- 카복실레이트
메틸 2-벤질-2,3,4,5,6-d5 이소니코티네이트 (4.69 g, 20.19 mmol)를 아세트산 (3 mL) 중에 용해시키고 산화백금(Ⅳ) (0.364 g, 1.60 mmol)을 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 4 bar에서 4 시간 동안 뷔치 수소발생장치 중에서 수소화하였다. 상기 반응 혼합물을 규조토 필터 곽을 통해 여과하고, 메탄올로 세척한 후, 용매를 증발시켰다. 잔류물을 MTBE 중에 용해시키고 포화 NaHCO3로 세척하였다. 상 분리 전에, 10 % K2CO3를 첨가하여 상기 수성상을 pH 9로 조절하였다. 상기 유기상을 MgSO4로 건조한 후 증발시켜 메틸 2-벤질-2,3,4,5,6-d5 피페리딘-4-카복실레이트 (4.6 g, 96 %)를 황색 오일로서 수득하였다. MS m/z 239 (M+H)+
단계 4: 디메틸 2-벤질-2,3,4,5,6- d 5 피페리딘-1,4- 디카복실레이트
DCM (75 mL) 중의 메틸 2-벤질-2,3,4,5,6-d5 피페리딘-4-카복실레이트 (4.6 g, 19.30 mmol) 및 DIPEA (5 mL, 28.71 mmol)의 용액에 메틸 염화탄산 (1.8 mL, 22.86 mmol)을 적가하였다. 교반을 실온에서 45 분간 지속한 후, 용매를 증발시켰다. 잔류물을 MTBE와 1 N HCl 사이로 구분시켜 놓았다. 유기층을 식염수 및 포화 NaHCO3로 세척한 후, MgSO4로 건조하고 증발시켜 디메틸 2-벤질-2,3,4,5,6-d5 피페리딘-1,4-디카복실레이트 (5.55 g, 97 %)를 담황색 오일로서 수득하였다. MS m/z 297 (M+H)+
단계 5: 2-벤질-2,3,4,5,6- d 5 -1-( 메톡시카보닐 )피페리딘-4- 카복실산
디메틸 2-벤질-2,3,4,5,6-d5 피페리딘-1,4-디카복실레이트 (5.55 g, 18.73 mmol)를 아세토니트릴 (60 mL)과 물 (1.2 mL) 중에 용해시킨 후, 브롬화리튬 (13.01 g, 149.81 mmol)과 트리에틸아민 (10.38 mL, 74.91 mmol)을 첨가하였다. 생성된 황색 현탁액을 환류 하에 가열하였다. 2 시간 10 분 후, 상기 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 후, 물과 MTBE를 첨가하였다. 상기 유기상을 물로 2 회 추출하였다. 모아진 수성층을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 조절한 후, DCM으로 추출하였다 (3 x). 상기 혼합된 유기층을 MgSO4로 건조한 후 증발시켜 2-벤질-2,3,4,5,6-d5-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (5.16 g, 98 %)을 황백색 고체로서 수득하였다. MS m/z 283 (M+H)+
화합물의 제조예 : 5- 이소옥사졸 -3-온의 형성
실시예 1
5-((2S,4S)-2- 벤질피페리딘 -4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-벤질-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 2-벤질-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )피페리딘-1- 카복실레 이트
무수 THF (70 mL) 중의 염화마그네슘 (3.11 g, 32.66 mmol)과 말론산 에틸 칼륨 (8.34 g, 48.99 mmol)의 현탁액을 질소 대기 하에서 50℃로 4 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 또 다른 플라스크에는, 5℃, 질소 대기 하에서 무수 THF (70 mL) 중의 2-벤질-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (9.057 g, 32.66 mmol) (참조 화합물 1)의 현탁액에 카보닐디이미다졸 (6.35 g, 39.19 mmol)을 일정량을 첨가하는 방식으로 분할 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 5℃에서 1 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 이후, 플라스크 2의 내용물을 플라스크 1에 적가하고 상기 생성된 혼합물을 24 시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 농축시키고 잔류물을 EtOAc와 H2O 사이로 구분시켜 놓았다. 상기 수성상을 EtOAc로 1 회 추출하고 상기 혼합된 유기상을 H2O, 포화 Na2CO3로 세척한 후, Na2SO4로 건조하고 증발시켜 11.02 g의 오일을 수득하였다. 자동화 컬럼 크로마토그래피 (바이오타지) (러닝 2 회 - 340 g 컬럼, 농도구배 10-60% EtOAc/헵탄)를 이용하여 정제해 트랜스-메틸 2-벤질-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (6.35 g): 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.27 (m, 3H), 1.41 - 1.66 (m, 3H), 1.70 - 2.11 (m, 2H), 2.53 - 3.10 (m, 4H), 3.55 (d, 4H), 4.19 (dd, 3H), 4.42 - 4.99 (m, 1H), 7.08 - 7.37 (m, 5H); MS m/z 348 (M+H)+ 및 시스-메틸 2-벤질-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (2.15 g)를 수득하였다: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.25 (m, 3H), 1.61 - 1.96 (m, 4H), 2.64 - 2.79 (m, 2H), 2.80 - 3.10 (m, 2H), 3.44 (s, 2H), 3.63 (s, 3H), 3.84 - 4.00 (m, 1H), 4.03 - 4.25 (m, 3H), 7.15 - 7.42 (m, 5H); MS m/z 348 (M+H)+.
단계 2: 트랜스- 메틸 2-벤질-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
MeOH (2 mL) 중의 트랜스-메틸 2-벤질-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (6.35 g, 18.3 mmol)의 용액을, -30℃에서 MeOH/H2O (15 mL/0.9 mL) 중의 NaOH (0.77 g, 19.4 mmol)의 용액에 첨가하였다. 10 분후, MeOH (18 mL)와 H2O (18 mL) 중의 히드록실아민 히드로클로라이드 (2.54 g, 36.6 mmol)와 NaOH (1.46 g, 36.6 mmol)의 용액을 첨가하였다. 교반을 -30℃에서 30 분간 지속하였다. 이후, 상기 반응 혼합물을 80℃로 유지된 농축 HCl (20 mL)에 부었다. 상기 용액을 30 분간 교반하였다. 상기 유기 용매를 증발시킨 후, 상기 수성상을 DEE로 추출하였다 (x3). 상기 유기상을 Na2SO4로 건조 후 증발시켜 고체 3.68 g을 수득하고, 이를 H2O/MeCN/FA 95/5/0.2 버퍼 (18 분간, 19 mL/분의 유속) 중 20-70% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실(Kromasil) C8 컬럼 (10 ㎛, 250x20 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 트랜스-메틸-2-벤질-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (2.54 g, 54.6 %)를 고체로서 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.50 - 2.21 (m, 4H), 2.91 (m, 2H), 3.10 (m, 2H), 3.58 (d, 3H), 4.04 - 4.41 (m, 1H), 4.43 - 4.82 (m, 1H), 5.55 - 5.84 (m, 1H), 7.15 - 7.30 (m, 5H); MS m/z 317 (M+H)+.
단계 3: (2S,4S)- 메틸 2-벤질-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
라세미체 트랜스-메틸 2-벤질-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (2.54 g, 8.04 mmol)에 대해 키랄셀 (Chiralcel) IA, 이동상 헵탄/EtOH/FA 80/20/0.4/0.1을 이용한 키랄 분리를 수행하여, (2S,4S)-메틸 2-벤질-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트를 얻었다 (0.99 g).
단계 4: 5-((2S,4S)-2- 벤질피페리딘 -4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4S)-메틸 2-벤질-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.99 g)에 HBr (HOAc 중 33%, 20 mL)을 첨가한 후, 상기 용액을 8 시간 동안 교반하였다. 휘발성 물질을 농축시키고 잔류물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (15 분간, 100 mL/분의 유속) 중 0-40 % 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 표제 화합물을 분리하였다 (0.62 g, 30%). 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.47 (m, 1H), 1.67 - 1.83 (m, 3H), 2.51 - 2.67 (m, 3H), 2.74 - 2.89 (m, 2H), 3.04 - 3.15 (m, 1H), 5.67 (s, 1H), 7.21 (m, 5H); [α]20 D = +47.0 (MeOH/H2O 1:1, c = 1); [C15H19N2O2]+에 대한 HRMS 계산값: 259.1447; 측정값: 259.1449.
실시예 2
5-((2R,4R)-2- 벤질피페리딘 -4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: (2R,4R)- 메틸 2-벤질-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
표제 화합물을 실시예 1, 단계 3의 제조 단계에서 수득하였다 (0.93 g).
단계 2: 5-((2R,4R)-2- 벤질피페리딘 -4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
실시예 1, 단계 4에 기술된 것과 동일한 절차에 따라, ((2R,4R)-메틸 2-벤질-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트를 사용하여 표제 화합물 (0.55 g, 27%)을 수득하였다. [α]20 D = -43.0 (MeOH/H2O 1:1, c = 1); [C15H19N2O2]+에 대한 HRMS 계산값: 259.1447; 측정값: 259.1449.
실시예 3
5-((2R,4S)-2- 벤질피페리딘 -4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 시스 - 메틸 2-벤질-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
MeOH (0.75 mL) 중의 시스-메틸 2-벤질-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (2,15 g, 6.18 mmol) (실시예 1, 단계 1)의 용액을 -30℃에서 MeOH/H2O (5 mL/0.3 mL) 중의 NaOH (0.26 g, 6.55 mmol)의 용액에 첨가하였다. 10 분후, MeOH (6.1 mL)와 H2O (6.1 mL) 중의 히드록실아민 히드로클로라이드 (0.86 g, 12.4 mmol)와 NaOH (0.49 g, 12.4 mmol)의 용액을 첨가하였다. 교반을 -30℃에서 30 분간 지속하였다. 이후, 상기 반응 혼합물을 80℃로 유지된 농축 HCl (7 mL)에 부었다. 상기 용액을 30 분간 교반하였다. 상기 유기 용매를 증발시킨 후 상기 수성상을 에테르로 추출하였다 (x3). 상기 혼합된 유기상을 Na2SO4로 건조한 후 증발시켜 고체 2.2 g을 얻었다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/FA 95/5/0.2 버퍼 (18 분간, 19 mL/분의 유속) 중의 20-70% 아세토니트릴의 농도구배를 사용한 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x20 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 표제 화합물을 분리하였다 (1.1 g, 57%). 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.76 - 2.15 (m, 4H), 2.63 (m, 1H), 2.82 (m, 1H), 2.87 - 3.03 (m, 1H), 3.03 - 3.22 (m, 1H), 3.61 (s, 3H), 3.99 (m, 1H), 4.19 - 4.33 (m, 1H), 5.71 (s, 1H), 7.01 - 7.37 (m, 5H). MS m/z 317 (M+H)+.
단계 2: (2R,4S)- 메틸 2-벤질-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
라세미체 시스-메틸 2-벤질-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.1 g)에 대해, 40℃에서 키랄셀 OD, 이동상 헵탄/EtOH/FA 90/10/0.1를 이용한 키랄 분리를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-벤질-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.47 g)를 수득하였다.
단계 3: 5-((2R,4S)-2- 벤질피페리딘 -4- 일 ) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-벤질-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.47 g)에 HBr (HOAc 중 33%, 10 mL)를 첨가한 후, 상기 용액을 16 시간 동안 교반하였다. 휘발성 물질을 농축시키고 잔류물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (15 분간, 100 mL/분의 유속) 중의 0-40% 아세토니트릴의 농도구배를 사용한 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 표제 화합물을 분리하였다 (0.26 g, 29 %): 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.07 (m, 1H), 1.26 - 1.45 (m, 1H), 1.75 (m, 2H), 2.53 (m, 2H), 2.58 - 2.67 (m, 2H), 2.69 (m, 1H), 2.97 (m, 1H), 5.66 (s, 1H), 7.08 - 7.34 (m, 5H); [α]20 D = +67.8 (MeOH/H2O 1:1, c = 1); [C15H19N2O2]+에 대한 HRMS 계산값: 259.1447; 측정값: 259.1442.
실시예 4
5-((2S,4R)-2- 벤질피페리딘 -4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: (2S,4R)- 메틸 2-벤질-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
표제 화합물을 실시예 3, 단계 2에서 수득하였다 (0.47 g).
단계 2: 5-((2S,4R)-2- 벤질피페리딘 -4- 일 ) 이소옥사졸 -3(2H)-온
실시예 3, 단계 3에 기술된 것과 동일한 절차에 따라, (2S,4R)-메틸 2-벤질-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트를 사용하여 표제 화합물 (0.23 g, 26%)을 수득하였다; [C15H19N2O2]+에 대한 HRMS 계산값: 259.1447; 측정값: 259.1433.
실시예 5
5-((2R,4S)-2- 이소부틸피페리딘 -4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-이소부틸-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )피페리딘-1-카 복실레이 트 및 시스 - 메틸 2-이소부틸-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )피페리딘-1- 카복실레이트
미정제 2-이소부틸-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (2.28 g, 9.4 mmol) (참조 화합물 2), 염화마그네슘 (0.95 g, 9.95 mmol), 말론산 에틸 칼륨 (2.5 g, 14.9 mmol) 및 카보닐디이미다졸 (1.98 g, 12.2 mmol)로부터, 실시예 1, 단계 1에 기술된 바와 같이 화합물을 제조하여 트랜스-메틸 2-이소부틸-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.60 g, 54 %) 및 시스-메틸 2-이소부틸-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.59 g, 20 %)를 수득하였다. 트랜스 이성질체: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ0.91 (m, 6H), 1.29 (t, 3H), 1.42 - 1.98 (m, 6H), 2.48 - 2.84 (m, 3H), 3.48 (s, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.98 - 4.28 (m, 3H), 4.30-4-60 (m, 1H); MS m/z 314 (M+H)+. 시스 이성질체: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ0.80 (d, 3H), 0.83 (d, 3H), 1.09 (m, 1H), 1.20 (t, 3H), 1.31 - 1.54 (m, 2H), 1.60 (m, 1H), 1.69 - 1.86 (m, 2H), 1.98 (m, 1H), 2.56 - 2.68 (m, 1H), 2.91 - 3.04 (m, 1H), 3.44 (s, 2H), 3.60 (s, 3H), 3.78 (m, 1H), 4.00 - 4.17 (m, 3H); MS m/z 314 (M+H)+.
단계 2: 트랜스- 메틸 2-이소부틸-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 2-이소부틸-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.60 g, 5.0 mmol)로부터, 실시예 1, 단계 2에 기술된 바와 같이 화합물을 제조하여 생성물을 수득하였다 (1.02 g, 71 %): 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ0.95 (m, 6H), 1.32 (m, 1H), 1.54 (s, 2H), 1.71 (m, 2H), 1.84 - 2.05 (m, 2H), 3.04 (m, 2H), 3.72 (s, 3H), 4.23 (s, 1H), 4.44 (s, 1H), 5.65 (s, 1H); MS m/z 283 (M+H)+.
단계 3: 트랜스-5-(2- 이소부틸피페리딘 -4- 일 ) 이소옥사졸 -3(2H)-온
라세미체 트랜스-메틸 2-이소부틸-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.39 g, 1.3 mmol)를 HBr (HOAc 중 33%) 중에서 16 시간 동안 교반하였다. 휘발성 물질을 농축시키고 잔류물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (10 분간, 100 mL/분의 유속) 중의 0-25% 아세토니트릴의 농도구배를 이용한 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 표제 화합물 (0.26 g)을 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, d2o) δ0.76 (d, 3H), 0.79 (d, 3H), 1.14 (m, 1H), 1.33 - 1.41 (m, 1H), 1.45 (m, 1H), 1.59 (m, 1H), 1.76 (m, 1H), 1.98 (m, 1H), 2.06 (m, 1H), 2.21 (m, 1H), 3.04 (m, 2H), 3.14 - 3.31 (m, 4H), 5.67 (s, 1H).
단계 4: 5-((2R,4S)-2- 이소부틸피페리딘 -4- 일 ) 이소옥사졸 -3(2H)-온
트랜스-5-(2-이소부틸피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온의 라세미체 혼합물에 대해 키랄셀 IC, 이동상 헵탄/EtOH/FA/TEA 60/40/0.4/0.2를 사용한 키랄 분리를 수행하여 표제 화합물을 수득하였다 (117 mg, 40%). [α]20 D = +21.1 (H2O, c = 1); [C12H21N2O2]+에 대한 HRMS 계산값: 225.1603; 측정값: 225.1599.
실시예 6
5-((2S,4R)-2- 이소부틸피페리딘 -4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
표제 화합물을 실시예 5, 단계 4로부터 수득하였다 (113 mg, 39%). [C12H21N2O2]+에 대한 HRMS 계산값: 225.1603; 측정값: 225.1596.
실시예 7
5-((2S,4S)-2- 이소부틸피페리딘 -4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 시스 - 메틸 2-이소부틸-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
실시예 5, 단계 1에서 얻어진 시스-메틸 2-이소부틸-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.59 g, 1.9 mmol)로부터, 실시예 5, 단계 2에 기술된 바와 같이 화합물을 제조하여 표제 화합물을 수득하였다 (0.29 g, 51%). 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ0.85 (2 d, 6H), 1.15 (m, 1H), 1.29 - 1.40 (m, 1H), 1.50 (m, 1H), 1.82 - 1.93 (m, 2H), 2.04 (m, 2H), 2.91 - 3.05 (m, 1H), 3.06 - 3.20 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.93 (m, 1H), 4.17 (m, 1H), 5.70 (s, 1H). MS m/z 283 (M+H)+.
단계 2: 시스 -5-(2- 이소부틸피페리딘 -4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
라세미체 시스-메틸 2-이소부틸-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.29 g, 1.03 mmol)를 HBr (12 mL, HOAc 중 33%) 중에서 24 시간 동안 교반하였다. 휘발성 물질을 농축시키고 잔류물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (10 분간, 100 mL/분의 유속) 중의 0-25% 아세토니트릴의 농도구배를 사용한 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 표제 화합물 (160 mg)을 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, d2o) δ0.79 (2 d, 6H), 1.34 - 1.51 (m, 3H), 1.54 - 1.72 (m, 2H), 2.13 (m, 1H), 2.25 (m, 1H), 2.99 (m, 2H), 3.21 (m, 1H), 3.38 (m, 1H), 5.61 (s, 1H).
단계 3: 5-((2S,4S)-2- 이소부틸피페리딘 -4- 일 ) 이소옥사졸 -3(2H)-온
시스-5-(2-이소부틸피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온의 라세미체 혼합물에 대해 키랄팍(Chiralpak) IC, 이동상 헵탄/EtOH/FA/TEA 60/40/0.4/0.2를 이용한 키랄 분리를 수행하여 표제 화합물을 수득하였다 (85 mg, 37%). [α]20 D = +19.5 (H2O, c = 1); [C12H21N2O2]+에 대한 HRMS 계산값: 225.1603; 측정값: 225.1593
실시예 8
5-((2R,4S)-2- 페네틸피페리딘 -4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2- 페네틸피페리딘 -1-카 복실레이 트 및 시스 - 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2- 페네틸피페리딘 -1-카 복실레이 트
미정제 1-(메톡시카보닐)-2-페네틸피페리딘-4-카복실산 (5.7 g, 19.6 mmol) (참조 화합물 3), 염화마그네슘 (1.86 g, 19.6 mmol), 말론산 에틸 칼륨 (4.99 g, 29.3 mmol) 및 카보닐디이미다졸 (3.81 g, 23.5 mmol)로부터, 실시예 1, 단계 1에 기술된 바와 같이 화합물을 제조하여 트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-페네틸피페리딘-1-카복실레이트 (2.56 g, 36 %) 및 시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-페네틸피페리딘-1-카복실레이트 (0.29 g, 4 %)를 수득하였다. 트랜스 이성질체: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.28 (m, 3H), 1.49 (m, 1H), 1.60 - 1.93 (m, 4H), 2.01 (m, 1H), 2.57 (m, 2H), 2.84 (m, 2H), 3.42 (m, 2H), 3.69 (s, 3H), 4.00 - 4.63 (m, 4H), 7.08 - 7.41 (m, 5H). MS m/z 362 (M+H)+. 시스 이성질체: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.25 (t, 3H), 1.63 - 1.82 (m, 3H), 1.91 (m, 3H), 2.00 - 2.12 (m, 1H), 2.53 - 2.66 (m, 2H), 2.71 (m, 1H), 3.09 (m, 1H), 3.49 (s, 2H), 3.69 (s, 3H), 3.89 (m, 1H), 4.08 (m, 1H), 4.17 (q, 2H), 7.15 - 7.31 (m, 5H). MS m/z 362 (M+H)+.
단계 2: 트랜스- 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2- 페네틸피페리딘 -1- 카복실레이트
트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-페네틸피페리딘-1-카복실레이트 (2.53 g, 7.0 mmol)로부터, 실시예 1, 단계 2에 기술된 바와 같이 화합물을 제조하여 표제 화합물을 수득하였다 (1.35 g, 58%). 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.55 (m, 1H), 1.79 (m, 2H), 2.03 (m, 3H), 2.58 (m, 2H), 3.01 (m, 2H), 3.70 (s, 3H), 4.01 - 4.60 (m 2H), 5.62 (s, 1H), 7.05 - 7.40 (m, 5H). MS m/z 331 (M+H)+.
단계 3: (2R,4S)- 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2- 페네틸피페리딘 -1- 카복실레이트
실시예 1, 단계 3에 기술된 바와 같이, 라세미체 트랜스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-페네틸피페리딘-1-카복실레이트 (1.35 g, 4.09 mmol)에 대해 키랄팍 AD, 이동상 헵탄/EtOH/TEA 80/20을 이용한 키랄 분리를 30℃에서 수행하여 (2R,4S)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-페네틸피페리딘-1-카복실레이트 (0.53 g, 1.6 mmol)를 수득하였다.
단계 4: 5-((2R,4S)-2- 페네틸피페리딘 -4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-페네틸피페리딘-1-카복실레이트 (0.53 g)로부터, 실시예 1, 단계 4의 절차에 따라 표제 화합물을 수득하였다 (0.30 g, 28%). 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.47 (m, 1H), 1.55 (m, 1H), 1.62 (m, 1H), 1.70 (m, 2H), 1.86 (m, 1H), 2.58 (m, 4H), 2.76 (m, 1H), 3.06 (m, 1H), 5.70 (s, 1H), 7.15 - 7.32 (m, 5H). [α]20 D = +24.6 (MeOH/H2O 1:1, c = 1); [C16H21N2O2]+에 대한 HRMS 계산값: 273.1603; 측정값: 273.1598.
실시예 9
5-((2S,4R)-2- 페네틸피페리딘 -4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: (2S,4R)- 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2- 페네틸피페리딘 -1- 카복실레이트
표제 화합물을 실시예 8, 단계 3의 제조 단계에서 수득하였다 (0.62 g, 1.87 mmol).
단계 2: 5-((2S,4R)-2- 페네틸피페리딘 -4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
실시예 8, 단계 4에 기술된 것과 동일한 절차에 따라 (2S,4R)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-페네틸피페리딘-1-카복실레이트로부터 표제 화합물을 수득하였다 (0.62 g, 24%): [α]20 D = -23.0 (MeOH/H2O 1:1, c = 1); [C16H21N2O2]+에 대한 HRMS 계산값: 273.1603; 측정값: 273.1592.
실시예 10
5-((2S,4S)-2-페네틸피페리딘-4- 일 )이소옥사졸-3(2H)-온
단계 1: 시스 - 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2- 페네틸피페리딘 -1- 카복실레이트
실시예 8, 단계 1의 시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-페네틸피페리딘-1-카복실레이트 (0.29 g, 0.82 mmol)로부터, 실시예 1, 단계 2에 기술된 바와 같이 화합물을 제조하여 표제 화합물을 수득하였다 (0.07 g, 26%). 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.65 (m, 1H), 1.79 - 2.14 (m, 5H), 2.60 (m, 2H), 3.00 (m, 1H), 3.20 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.92 (m, 1H), 4.10 (m, 1H), 5.71 (s, 1H), 7.10 - 7.29 (m, 5H); MS m/z 331 (M+H)+.
단계 2: (2S,4S)- 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2- 페네틸피페리딘 -1- 카복실레이트
실시예 1, 단계 3에 기술된 절차에 따라, 라세미체 시스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-페네틸피페리딘-1-카복실레이트 (0.07 g, 0.22 mmol)에 대해 키랄셀 IC, 이동상 헵탄/IPA 80/20을 이용한 키랄 분리를 40℃에서 수행하여 (2S,4S)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-페네틸피페리딘-1-카복실레이트 (0.032 g, 0.1 mmol) 및 (2R,4R)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-페네틸피페리딘-1-카복실레이트 (0.03 g, 0.09 mmol)를 수득하였다.
단계 3: 5-((2S,4S)-2- 페네틸피페리딘 -4- 일 ) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4S)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-페네틸피페리딘-1-카복실레이트 (0.032 g)로부터, 실시예 1, 단계 4에 기술된 절차에 따라 표제 화합물을 수득할 수 있었다 (12.6 mg, 21%): 1H NMR (400 MHz, dmso) δ1.15 (m, 1H), 1.38 (m, 1H), 1.60 (m, 2H), 1.79 (m, 1H), 1.95 (m, 1H), 2.45 - 2.75 (m, 5H), 3.05 (m, 1H), 5.77 (s, 1H), 7.15 - 7.30 (m, 5H). [α]20 D = +54.1 (MeOH/H2O 1:1, c = 1); [C16H21N2O2]+에 대한 HRMS 계산값: 273.1603; 측정값: 273.1601.
실시예 11
5-((2S,4S)-2-(4- tert - 부틸벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(4- tert - 부틸벤질 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노 일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 2-(4- tert - 부틸벤질 )-4-(3- 에톡시 -3-옥소프로파노일)피페리딘-1- 카복실레이트
미정제 2-(4-tert-부틸벤질)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (3.07 g, 9.2 mmol) (참조 화합물 4), 염화마그네슘 (0.88 g, 9.2 mmol) 및 말론산 에틸 칼륨 (2.35 g, 13.8 mmol), 그리고 이어서 카보닐디이미다졸 (1.98 g, 12.2 mmol)로부터, 실시예 1, 단계 1에 기술된 바와 같이 화합물을 제조하여 트랜스-메틸 2-(4-tert-부틸벤질)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.55 g, 15 %) 및 시스-메틸 2-(4-tert-부틸벤질)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.65 g, 44%)를 수득하였다. 트랜스 이성질체: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.08 - 1.32 (m, 12H), 1.32 - 1.78 (m, 4H), 2.53 - 3.06 (m, 4H), 3.30 - 3.62 (m, 5H), 3.93 - 4.61 (m, 4H), 7.03 - 7.36 (m, 4H); MS m/z 404 (M+H)+. 시스 이성질체: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.21 - 1.35 (m, 12H), 1.59 - 1.79 (m, 1H), 1.79 - 1.99 (m, 3H), 2.69 (m, 2H), 2.84 - 2.94 (m, 1H), 2.94 - 3.07 (m, 1H), 3.45 (s, 2H), 3.61 (m, 3H), 3.92 (m, 1H), 4.08 - 4.22 (m, 3H), 7.09 (m, 2H), 7.25 - 7.32 (m, 2H); MS m/z 404 (M+H)+.
단계 2: 트랜스- 메틸 2-(4- tert - 부틸벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 2-(4-tert-부틸벤질)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.54 g, 1.34 mmol)로부터, 실시예 1, 단계 2에 기술된 바와 같이 화합물을 제조하여 트랜스-메틸 2-(4-tert-부틸벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.24 g, 48 %)를 수득하였다; 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.29 (s, 9H), 1.41 - 1.60 (m, 2H), 1.89 - 2.09 (m, 2H), 2.87 (m, 2H), 3.03 - 3.20 (m, 2H), 3.42 - 3.73 (m, 3H), 4.06 - 4.32 (m, 1H), 4.45 - 4.77 (m, 1H), 5.63 (s, 1H), 7.02 - 7.17 (m, 2H), 7.31 (m, 2H); MS m/z 373 (M+H)+.
단계 3: (2S,4S)- 메틸 2-(4- tert - 부틸벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
실시예 1, 단계 3에 기술된 절차에 따라, 라세미체 트랜스-메틸 2-(4-tert-부틸벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.24 g, 0.64 mmol)에 대해 키랄셀 AD, 이동상 헵탄/EtOH/FA 80/20/0.1을 이용한 키랄 분리를 수행하여 (2S,4S)-메틸 2-(4-tert-부틸벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.106 g, 0.28 mmol)를 수득하였다.
단계 4: 5-((2S,4S)-2-(4- tert - 부틸벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4S)-메틸 2-(4-tert-부틸벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.106 g, 0.28 mmol)로부터, 실시예 1, 단계 4에 기술된 절차에 따라 표제 화합물 (50.3 mg, 25 %)을 수득하였다: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.29 (s, 9H), 1.43 - 1.74 (m, 1H), 1.81 - 2.07 (m, 3H), 2.60 (m, 3H), 2.82 (m, 2H), 3.11 (m, 1H), 5.71 (s, 1H), 7.08 (d, 2H), 7.27 (d, 2H); [α]20 D = +56.7 (MeOH/H2O 1:1, c = 1); [C19H27N2O2]+에 대한 HRMS 계산값: 315.2072; 측정값: 315.2069.
실시예 12
5-((2R,4S)-2-(4- tert - 부틸벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 시스 - 메틸 2-(4- tert - 부틸벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(4-tert-부틸벤질)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.64 g, 4.06 mmol)로부터, 실시예 1, 단계 2에 기술된 바와 같이 화합물을 제조하여 시스-메틸 2-(4-tert-부틸벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-피페리딘-1-카복실레이트 (0.69 g, 47 %)를 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ1.31 (s, 9H), 1.84 - 1.93 (m, 2H), 1.96 (m, 1H), 2.10 (m, 1H), 2.62 (m, 1H), 2.82 (m, 2H), 2.97 (m, 1H), 3.08 - 3.24 (m, 1H), 3.62 (s, 3H), 4.02 (m, 1H), 4.18 - 4.34 (m, 1H), 5.73 (s, 1H), 7.06 (m, 2H), 7.23 - 7.38 (m, 2H). MS m/z 373 (M+H)+.
단계 2: (2R,4S)- 메틸 2-(4- tert - 부틸벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
실시예 1, 단계 3에 기술된 절차에 따라, 라세미체 시스-메틸 2-(4-tert-부틸벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.69 g, 1.85 mmol)에 대해 키랄셀 AD, 이동상 헵탄/EtOH/FA 80/20/0.1을 이용한 키랄 분리를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(4-tert-부틸벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.32 g, 0.86 mmol)를 수득하였다.
단계 3: 5-((2R,4S)-2-(4- tert - 부틸벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(4-tert-부틸벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.32 g, 0.86 mmol)를 사용하여, 실시예 1, 단계 4에 기술된 절차에 따라 표제 화합물을 수득할 수 있었다 (0.125 g, 22 %). 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.05 (m, 1H), 1.23 (m, 9H), 1.34 (m, 1H), 1.74 (m, 2H), 2.50 - 2.80 (m, 5H), 2.96 (m, 1H), 5.63 (s, 1H), 7.08 (m, 2H), 7.27 (m, 2H). [α]20 D = -7.5 (CHCl3, c = 0.2). [C19H27N2O2]+에 대한 HRMS 계산값: 315.2072; 측정값: 315.2058.
실시예 13
5-((2S,4S)-2- 네오펜틸피페리딘 -4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2- 네오펜틸피페리딘 -1-카 복실레이 트
미정제 1-(메톡시카보닐)-2-네오펜틸피페리딘-4-카복실산 (4.95 g, 19.2 mmol) (참조 화합물 5), 염화마그네슘 (2.381 g, 25.01 mmol), 말론산 에틸 칼륨 (5.57 g, 32.70 mmol) 및 카보닐디이미다졸 (3.74 g, 23.08 mmol)로부터, 실시예 1, 단계 1에 기술된 바와 같이 화합물을 제조하여 시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-네오펜틸피페리딘-1-카복실레이트 (2.40 g, 38 %) 및 트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-네오펜틸피페리딘-1-카복실레이트 (1.2 g, 19 %)를 수득하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ0.93 (m, 9H), 1.18 (m, 1H), 1.28 (t, 3H), 1.52 - 1.65 (m, 1H), 1.65 - 1.83 (m, 2H), 1.89 (m, 1H), 2.12 (m, 1H), 2.69 (m, 1H), 3.11 (m, 1H), 3.52 (s, 2H), 3.69 (s, 3H), 3.87 (m, 1H), 4.15 - 4.24 (m, 2H), 4.27 (m, 1H); MS m/z 328 (M+H)+.
단계 2: 트랜스- 메틸 2- 네오펜틸 -4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-네오펜틸피페리딘-1-카복실레이트 (4.49 g, 13.7 mmol)로부터, 실시예 1, 단계 2에 기술된 바와 같이 화합물을 제조하여 트랜스-메틸 2-네오펜틸-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.26 g, 31 %)를 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ0.94 (s, 9H), 1.34 (m, 1H), 1.40 - 1.62 (m, 1H), 1.71 (m, 2H), 1.83 (m, 1H), 1.97 (m, 1H), 3.05 (m, 2H), 3.70 (s, 3H), 4.01 - 4.31 (m, 1H), 4.44 - 4.74 (m, 1H), 5.62 (s, 1H). MS m/z 297 (M+H)+.
단계 3: (2S,4S)- 메틸 2- 네오펜틸 -4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
실시예 1, 단계 3에 기술된 절차에 따라, 라세미체 트랜스-메틸 2-네오펜틸-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.26 g, 4.26 mmol)에 대해 키랄셀 OD, 이동상 헵탄/IPA/FA 80/20/0.1을 이용한 키랄 분리를 수행하여 (2S,4S)-메틸 2-네오펜틸-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.64 g, 2.16 mmol)를 수득하였다.
단계 4: (2S,4S)-5-(2- 네오펜틸피페리딘 -4- 일 ) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4S)-메틸 2-네오펜틸-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.64 g, 2.16 mmol)로부터, 실시예 1, 단계 4에 기술된 절차에 따라 표제 화합물 (0.44 g, 85 %)을 수득하였다: 1H NMR (600 MHz, dmso) δ0.86 (s, 9H), 1.17 (dd, 1H), 1.27 (dd, 1H), 1.45 (m, 1H), 1.68 (m, 2H), 1.81 (m, 1H), 2.59 (m, 1H), 2.67 (m, 1H), 2.73 (m, 1H), 3.04 (m, 2H), 5.71 (s, 1H); [α]20 D = +18.4 (MeOH/H2O 1:1, c = 1); [C13H23N2O2]+에 대한 HRMS 계산값: 239.1759; 측정값: 239.1742.
실시예 14
5-((2R,4S)-2- 네오펜틸피페리딘 -4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 시스 - 메틸 2- 네오펜틸 -4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-네오펜틸피페리딘-1-카복실레이트 (2.68 g, 8.19 mmol)로부터, 실시예 1, 단계 2에 기술된 바와 같이 화합물을 제조하여 시스-메틸 2-네오펜틸-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.60 g, 66 %)를 수득하였다: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ0.89 (s, 9H), 1.18 (dd, 1H), 1.45 (dd, 1H), 1.80 - 1.92 (m, 2H), 1.97 - 2.17 (m, 2H), 2.94 - 3.02 (m, 1H), 3.11 - 3.23 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.88 - 3.99 (m, 1H), 4.22 - 4.32 (m, 1H), 5.72 (s, 1H); m/z (MH+) 297.
단계 2: (2R,4S)- 메틸 2- 네오펜틸 -4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
실시예 1, 단계 3에 기술된 절차에 따라, 라세미체 시스-메틸 2-네오펜틸-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.60 g, 5.4 mmol)에 대해, 키랄셀 IC 이동상 헵탄/IPA/FA 60/40/0.1을 사용한 키랄 분리를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-네오펜틸-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.8 g, 2.7 mmol)를 수득하였다.
단계 3: 5-((2R,4S)-2- 네오펜틸피페리딘 -4- 일 ) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-네오펜틸-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.8 g, 2.7 mmol)로부터, 실시예 1, 단계 4에 기술된 절차에 따라 표제 화합물을 수득하였다 (0.44 g, 69 %): 1H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ0.89 (s, 9H), 1.18 (m, 2H), 1.50 (m, 2H), 1.82-1.90 (m, 2H), 2.70-2.85 (m, 3H), 3.08 (m, 1H), 5.71 (s, 1H). [α]20 D = +43.8 (MeOH/H2O 1:1, c = 1); [C13H23N2O2]+에 대한 HRMS 계산값: 239.1759; 측정값: 239.1753.
실시예 15
5-((2R,4S)-2- 메틸피페리딘 -4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2- 메틸피페리딘 -1-카복실레이트 및 시스 - 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2- 메틸피페리딘 -1-카복실레이트
미정제 1-(메톡시카보닐)-2-메틸피페리딘-4-카복실산 (0.90 g, 4.47 mmol) (참조 화합물 6), 염화마그네슘 (0.42 g, 4.47 mmol) 및 말론산 에틸 칼륨 (1.14 g, 6.71 mmol), 그리고 이어서 카보닐디이미다졸 (0.87 g, 5.47 mmol)로부터, 실시예 1, 단계 1에 기술된 바와 같이 화합물을 제조하여 트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-메틸피페리딘-1-카복실레이트 (0.31 g, 26 %) 및 시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-메틸피페리딘-1-카복실레이트 (0.50 g, 41 %)를 수득하였다. 트랜스 이성질체: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.18 (dd, 3H), 1.23 - 1.31 (m, 3H), 1.47 (m, 1H), 1.65 - 1.78 (m, 2H), 1.85 (m, 1H), 2.82 (m, 1H), 2.91 (m, 1H), 3.48 (s, 2H), 3.68 (s, 3H), 3.99 - 4.14 (m, 1H), 4.15 - 4.23 (m, 2H), 4.57 (m, 1H). 시스 이성질체: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.13 (d, 3H), 1.22 - 1.32 (m, 3H), 1.63 - 1.73 (m, 1H), 1.78 - 1.94 (m, 2H), 1.95 - 2.07 (m, 1H), 2.67 - 2.76 (m, 1H), 3.04 - 3.16 (m, 1H), 3.50 (s, 2H), 3.68 (s, 3H), 3.79 - 3.91 (m, 1H), 4.12 (m, 1H), 4.15 (m, 2H).
단계 2: 트랜스- 메틸 2- 메틸 -4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-메틸피페리딘-1-카복실레이트 (0.31 g, 1.15 mmol)로부터, 실시예 1, 단계 2에 기술된 바와 같이 화합물을 제조하여 트랜스-메틸 2-메틸-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.149 g, 54 %)를 수득하였다: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.21 (m, 3H), 1.49 - 1.59 (m, 1H), 1.76 (m, 1H), 1.86 (m, 1H), 1.99 (m, 1H), 3.02 (m, 2H), 3.69 (m, 3H), 4.13 (m, 1H), 4.59 (m, 1H), 5.64 (s, 1H). MS m/z 241 (M+H)+.
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2- 메틸 -4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
실시예 1, 단계 3에 기술된 절차에 따라, 라세미체 트랜스-메틸 2-메틸-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.149 g, 0.62 mmol)에 대해 키랄셀 OJ, 이동상 헵탄/EtOH 80/20을 이용한 키랄 분리를 22℃에서 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-메틸-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.051 g, 0.21 mmol)를 수득하였다.
단계 4: 5-((2R,4S)-2- 메틸피페리딘 -4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-메틸-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.051 g, 0.21 mmol)로부터, 실시예 1, 단계 4에 기술된 절차에 따라 표제 화합물을 수득하였다 (32 mg, 84 %). 1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ1.31 (d, 3H), 1.79 - 1.89 (m, 1H), 2.02 - 2.25 (m, 3H), 3.04 - 3.13 (m, 1H), 3.26 (d, 2H), 3.38 (m, 1H), 5.66 (s, 1H); [α]20 D = +8.4 (MeOH/H2O 1:1, c = 1)
실시예 16
5-((2S,4R)-2- 메틸피페리딘 -4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: (2S,4R)- 메틸 2- 메틸 -4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
표제 화합물을 실시예 15, 단계 3으로부터 수득하였다 (62 mg, 0.26 mmol).
단계 2: 5-((2S,4R)-2- 메틸피페리딘 -4- 일 ) 이소옥사졸 -3(2H)-온
실시예 1, 단계 4에 기술된 바와 동일한 절차를 사용하여, (2S,4R)-메틸 2-메틸-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (62 mg, 0.26 mmol)로부터 표제 화합물을 수득하였다 (30 mg, 64 %).
실시예 17
5-((2S,4S)-2- 메틸피페리딘 -4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 시스 - 메틸 2- 메틸 -4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-메틸피페리딘-1-카복실레이트 (0.49 g, 1.83 mmol)로부터, 실시예 1, 단계 2에 기술된 바와 같이 화합물을 제조하여 시스-메틸 2-메틸-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.23 g, 52%)를 수득하였다: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.08 (d, 3H), 1.86 (m, 2H), 2.05 (m, 2H), 2.96 - 3.02 (m, 1H), 3.12 - 3.30 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.83 - 3.99 (m, 1H), 4.19 (m, 1H), 5.70 (s, 1H); MS m/z 241 (M+H)+.
단계 2: (2S,4S)- 메틸 2- 메틸 -4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
실시예 1, 단계 3에 기술된 절차에 따라, 라세미체 시스-메틸 2-메틸-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.23 g, 0.96 mmol)에 대해 키랄셀 IC, 이동상 헵탄/IPA 70/30을 이용한 키랄 분리를 수행하여 (2S,4S)-메틸 2-메틸-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.101 g, 0.42 mmol)를 수득하였다.
단계 3: 5-((2S,4S)-2- 메틸피페리딘 -4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4S)-메틸 2-메틸-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.101 g, 0.42 mmol)로부터, 실시예 1, 단계 4에 기술된 절차에 따라 표제 화합물을 수득하였다 (0.046 g, 60 %): 1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ1.32 - 1.44 (d, 3H), 1.65 (m, 1H), 1.84 (m, 1H), 2.24 (m, 2H), 3.08 - 3.23 (m, 2H), 3.34 - 3.52 (m, 2H), 5.82 (s, 1H).; [α]20 D = +0 (MeOH/H2O 1:1, c = 1).
실시예 18
5-((2S,4S)-2-(2- 메틸 -2- 페닐프로필 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(2- 메틸 -2- 페닐프 로필)피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(2-메틸-2- 페닐프로필 )-피페리딘-1- 카복실레이트
미정제 1-(메톡시카보닐)-2-(2-메틸-2-페닐프로필)피페리딘-4-카복실산 (7.24 g, 22.7 mmol) (참조 화합물 7), 염화마그네슘 (2.16 g, 22.7 mmol) 및 말론산 에틸 칼륨 (5.79 g, 34 mmol), 그리고 이어서 카보닐디이미다졸 (4.41 g, 27.2 mmol)로부터, 실시예 1, 단계 1에 기술된 바와 같이 화합물을 제조하여 트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(2-메틸-2-페닐프로필)피페리딘-1-카복실레이트 (1.59 g, 18 %) 및 시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(2-메틸-2-페닐프로필)피페리딘-1-카복실레이트 (2.38 g, 27 %)를 수득하였다. 트랜스 이성질체: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.20 - 1.50 (m, 10H), 1.59 - 1.84 (m, 2H), 1.90 (m, 2H), 2.50 - 2.89 (m, 2H), 3.16 (m, 2H), 3.58 (m, 4H), 4.17 (m, 4H), 7.06 - 7.51 (m, 5H). 시스 이성질체: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.20 - 1.41 (m, 10H), 1.57 - 1.74 (m, 3H), 1.79 (d, 1H), 2.03 (m, 1H), 2.53 (m, 1H), 2.83 - 3.02 (m, 1H), 3.40 (m, 2H), 3.48 - 3.68 (m, 4H), 4.03 (m, 1H), 4.12 - 4.22 (m, 2H), 7.18 - 7.44 (m, 5H).
단계 2: 트랜스- 메틸 2-(2- 메틸 -2- 페닐프로필 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(2-메틸-2-페닐프로필)피페리딘-1-카복실레이트 (1.58 g, 4.06 mmol)로부터, 실시예 1, 단계 2에 기술된 바와 같이 화합물을 제조하여 트랜스-메틸 2-(2-메틸-2-페닐프로필)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.82 g, 56 %)를 수득하였다: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.29 - 1.65 (m, 6H), 1.67 - 1.98 (m, 4H), 2.10 (m, 2H), 2.88 (m, 2H), 3.57 (s, 3H), 3.70 - 4.18 (m, 1H), 4.18 - 4.67 (m, 1H), 5.45 (s, 1H), 7.17-7.31 (m, 5H); MS m/z 359 (M+H)+.
단계 3: (2S,4S)- 메틸 2-(2- 메틸 -2- 페닐프로필 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-피페리딘-1- 카복실레이트
라세미체 트랜스-메틸 2-(2-메틸-2-페닐프로필)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-피페리딘-1-카복실레이트 (0.82 g, 2.28 mmol)에 대해 키랄셀 IC, 이동상 헵탄/IPA 80/20을 이용한 키랄 분리를 40℃에서 수행하여 (2S,4S)-메틸 2-(2-메틸-2-페닐프로필)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.361 g, 1.01 mmol)를 수득하였다.
단계 4: 5-((2S,4S)-2-(2- 메틸 -2- 페닐프로필 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4S)-메틸 2-(2-메틸-2-페닐프로필)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.361 g, 1.01 mmol)로부터, 실시예 1, 단계 4에 기술된 절차에 따라 표제 화합물을 수득하였다 (0.21 g, 69 %). 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.24 (m, 7H), 1.45 (m, 1H), 1.59 (m, 2H), 1.69 (m, 2H), 2.42 (m, 1H), 2.59 (m, 2H), 2.87 (m, 1H), 5.36 (s, 1H), 7.12 (m, 1H), 7.21 - 7.36 (m, 4H); [α]20 D = +66.7 (MeOH/H2O 1:1, c = 1); [C18H25N2O2]+에 대한 HRMS 계산값: 301.1916; 측정값: 301.1888.
실시예 19
5-((2R,4S)-2-(2- 메틸 -2- 페닐프로필 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 시스 - 메틸 2-(2- 메틸 -2- 페닐프로필 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(2-메틸-2-페닐프로필)피페리딘-1-카복실레이트 (2.38 g, 6.11 mmol)로부터, 실시예 1, 단계 2에 기술된 바와 같이 화합물을 제조하여 시스-메틸 2-(2-메틸-2-페닐프로필)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.93 g, 42 %)를 수득하였다: 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ1.31 (s, 3H), 1.37 (s, 3H), 1.53 - 1.67 (m, 2H), 1.77 (m, 2H), 1.90 - 2.01 (m, 2H), 2.80 - 2.91 (m, 1H), 2.95 - 3.06 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.69 (m, 1H), 4.01 - 4.15 (m, 1H), 5.63 (s, 1H), 7.17 (m, 1H), 7.30 (m, 4H); MS m/z 359 (M+H)+.
단계 2: (2R,4S)- 메틸 2-(2- 메틸 -2- 페닐프로필 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
라세미체 시스-메틸 2-(2-메틸-2-페닐프로필)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-피페리딘-1-카복실레이트 (0.93 g, 2.59 mmol)에 대해 키랄셀 IC, 이동상 헵탄/IPA 80/20를 이용한 키랄 분리 40℃의 온도에서 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(2-메틸-2-페닐프로필)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.432 g, 1.21 mmol)를 수득하였다.
단계 3: 5-((2R,4S)-2-(2- 메틸 -2- 페닐프로필 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(2-메틸-2-페닐프로필)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.432 g, 1.21 mmol)로부터, 실시예 1, 단계 4에 기술된 절차에 따라 표제 화합물을 수득하였다 (0.16 g, 43 %): 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.08 (m, 1H), 1.28 (s, 3H), 1.34 (m, 4H), 1.46 (m, 1H), 1.76 - 1.83 (m, 1H), 1.83 - 1.97 (m, 2H), 2.73 (m, 1H), 2.86 (m, 1H), 2.97 (m, 1H), 3.17 (m, 1H), 5.46 (s, 1H), 7.16 (m, 1H), 7.28 (m, 2H), 7.35 (m, 2H); [α]20 D = +57.9 (MeOH/H2O 1:1, c = 1); [C18H25N2O2]+에 대한 HRMS 계산값: 301.1916; 측정값: 301.1892.
실시예 20
5-((2R,4S)-2-( 시클로헥실메틸 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 메틸 2-( 시클로헥실메틸 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )피페리딘-1- 카복실레이트
말론산 에틸 칼륨 (1.75 g, 10.3 mmol)과 MgCl2 (0.665 g, 6.88 mmol)를 무수 THF (50 mL)에 첨가하였다. 반응 플라스크를 50℃에서 4 시간 동안 세게 교반하였다 (플라스크 1). 2-(시클로헥실메틸)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (1.95 g, 6.88 mmol) (참조 화합물 8) 및 카보닐디이미다졸 (1.34 g, 8.26 mmol)을 5℃에서 무수 THF (50 mL)에 첨가하였다 (플라스크 2). 플라스크 2의 내용물을 실온에서 플라스크 1에 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 증발시켜 대부분의 THF를 제거하였다. 상기 미정제 생성물을 물과 디에틸 에테르 사이로 구분시켜 놓았다. 상기 유기상을 분리한 후, MgSO4로 건조하고 셀라이트를 통해 여과시킨 후 용매는 증발시켰다. 잔류물을 바이오타지 장비를 이용한 자동화 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 15-85로부터 시작하여 40-60에서 종료하는 에틸 아세테이트-헵탄을 이용한 농도구배 용출로 트랜스-메틸 2-(시클로헥실메틸)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.38 g, 16 %) 및 시스-메틸 2-(시클로헥실메틸)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.28 g, 53 %)를 수득하였다. 트랜스-이성질체: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ0.88 (d, 2H), 0.99 - 1.32 (m, 8H), 1.38 - 1.56 (m, 2H), 1.68 (dd, 8H), 2.80 (t, 2H), 3.45 (s, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.93 - 4.21 (m, 3H), 4.47 (d, 1H). 시스-이성질체 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ0.72 - 0.95 (m, 2H), 1.04 - 1.31 (m, 8H), 1.38 - 1.49 (m, 1H), 1.53 - 1.69 (m, 6H), 1.70 - 1.92 (m, 3H), 2.02 (dt, 1H), 2.61 - 2.71 (m, 1H), 2.95 - 3.07 (m, 1H), 3.48 (s, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.85 (dd, 1H), 4.09 - 4.21 (m, 3H).
단계 2: (2R,4S)- 메틸 2-( 시클로헥실메틸 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
MeOH (4 mL) 중의 메틸 2-(시클로헥실메틸)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.5 g, 4.2 mmol)의 용액을 -30℃의 MeOH/H2O (4 mL/ 0.25 mL) 중의 NaOH (221 mg, 5.5 mmol)의 용액에 첨가하였다. 10 분후, MeOH (5 mL)와 H2O (5 mL) 중의 히드록실아민-HCl (0.59 g, 8.5 mmol)과 NaOH (0.339 g, 8.5 mmol)를 첨가하였다. 교반을 -30℃에서 30 분간 지속하였다. 상기 반응 용액을 80℃의 6M HCl (6 mL)에 부어 30 분간 가열하였다. 상기 반응 혼합물을 물과 아세테이트 사이로 구분시켜 놓았다. 상기 유기상을 분리한 후, Na2SO4로 건조하고 셀라이트를 통해 여과시킨 후 용매는 증발시켰다. 미정제 화합물 1.7 g을 얻었다. 역상 크로마토그래피를 사용해 정제하여, 0.3 g (수율 22%)를 얻었다. 키랄셀 OJ, 이동상 헵탄/에탄올 80/20을 이용한 키랄 분리를 40℃에서 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(시클로헥실메틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.11 g)를 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ0.91 (d, 2H), 1.06 - 1.39 (m, 5H), 1.68 (dt, 7H), 1.85 (s, 2H), 1.94 (s, 1H), 2.99 (t, 2H), 3.68 (s, 3H), 4.11 (d, 1H), 4.50 (d, 1H), 5.60 (s, 1H). [α]20 D = +3.2 (MeCN, c = 1).
단계 3: 5-((2R,4S)-2-( 시클로헥실메틸 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
HBr (아세트산 중 33 %) (7 mL)을 (2R,4S)-메틸 2-(시클로헥실메틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.11 g, 0.34 mmol)를 포함하는 반응 플라스크에 첨가하였다. 상기 반응물을 밤새 세게 교반하였다. 용매는 증발시켰다. 분취형 HPLC (pH=11, 작은 컬럼, 메탄올/물 (50/50)에 용해된 샘플, 농도구배 0-40, 20 분)를 이용한 정제로 표제 화합물을 수득하였다 (62 mg, 수율 69 %). 1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ0.94 (s, 2H), 1.18 (s, 1H), 1.27 (s, 2H), 1.35 - 1.55 (m, 3H), 1.57 - 1.80 (m, 6H), 2.01 (s, 1H), 2.13 (s, 1H), 2.24 (s, 1H), 3.09 (s, 1H), 3.22 (s, 3H), 5.53 (s, 1H).
실시예 21
5-((2R,4R)-2-( 시클로헥실메틸 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: (2R,4R)- 메틸 2-( 시클로헥실메틸 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥 사졸-5-일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 (2S,4S)- 메틸 2-( 시클로헥실메틸 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-피페리딘-1- 카복실레이트
MeOH (3 mL) 중의 시스-메틸 2-(시클로헥실메틸)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (실시예 20, 단계 1에서 제조) (1.28 g, 3.62 mmol)의 용액을 -30℃의 MeOH/H2O (3 mL/0.2 mL) 중의 NaOH (0.159 g)의 용액에 적가하였다. 10 분 동안 교반한 후, 메탄올/물 (5 mL/5 mL) 중의 히드록실아민 히드로클로라이드 (0.50 g, 7.24 mmol) 및 NaOH (0.29 g, 7.24 mmol)의 용액을 -30℃에서 첨가하였다. 교반을 -30℃에서 30 분간 지속하였다. 상기 용액을 80℃의 HCl (6M)에 적가하였다. 80℃에서 30 분간 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 물과 아세테이트 사이로 구분시켜 놓았다. 상기 유기상을 분리한 후, Na2SO4로 건조하고 셀라이트를 통해 여과시킨 후 용매는 증발시켰다. 산성 역상 크로마토그래피 (35% 내지 75% 아세토니트릴의 농도구배)로 시스-메틸 2-(시클로헥실메틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.62 g, 53.1 %)를 수득하였다. 키랄팍 IC, 이동상 헵탄/이소프로필 알콜 80/20을 이용한 키랄 분리를 40℃의 온도에서 수행하여 (2R,4R)-메틸 2-(시클로헥실메틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.28g) (e.e. 98.5%) 및 (2S,4S)-메틸 2-(시클로헥실메틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.27 g) (e.e 98.5%)를 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3, RR) δ0.67 - 0.88 (m, 2H), 0.98 - 1.20 (m, 5H), 1.28 (dd, 1H), 1.56 (dd, 5H), 1.75 - 1.86 (m, 2H), 1.92 - 2.06 (m, 2H), 2.87 - 2.99 (m, 1H), 3.02 - 3.15 (m, 1H), 3.65 (s, 3H), 3.88 (dd, 1H), 4.15 (p, 1H), 5.65 (d, 1H). [α]20 D = -30.7 (MeCN, c = 1); 1H NMR (600 MHz, CDCl3, SS) δ0.70 - 0.87 (m, 2H), 0.97 - 1.20 (m, 5H), 1.28 (dd, 1H), 1.51 - 1.65 (m, 5H), 1.77 - 1.85 (m, 2H), 1.96 - 2.05 (m, 2H), 2.87 - 2.96 (m, 1H), 3.03 - 3.14 (m, 1H), 3.65 (s, 3H), 3.88 (dd, 1H), 4.15 (p, 1H), 5.65 (d, 1H) [α]20 D = +29.9 (MeCN, c = 1).
단계 2: 5-((2R,4R)-2-( 시클로헥실메틸 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
HBr (아세트산 중 33 % ) (5 mL)을 (2R,4R)-메틸 2-(시클로헥실메틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.28 g, 0.87 mmol)에 첨가하였다. 상기 반응물을 밤새 세게 교반하였다. 용매는 증발시켰다. PrepLC (pH=11, 작은 컬럼, 샌드위칭 없음, 메탄올/물 (50/50) 중에 용해된 샘플, 농도구배 15-55, 20 분)를 이용하여 정제하였다. 표제 화합물 (57 mg, 25 %)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ0.78 - 0.95 (m, 2H), 1.17 (dd, 3H), 1.28 - 1.48 (m, 4H), 1.63 (dd, 6H), 2.04 (d, 1H), 2.12 (d, 1H), 2.85 (t, 1H), 2.96 (dd, 1H), 3.13 (s, 1H), 3.31 (d, 1H), 5.40 (s, 1H).
실시예 22
5-((2S,4S)-2-( 시클로헥실메틸 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
HBr (아세트산 중 33 %) (5 mL)을 (2S,4S)-메틸 2-(시클로헥실메틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (실시예 21, 단계 1에서 제조) (0.27g, 0.85 mmol)에 첨가하였다. 상기 반응물을 밤새 세게 교반하였다. 용매는 증발시켰다. PrepLC (pH=11, 작은 컬럼, 아세토니트릴/물 (40/60) 중에 용해된 샘플, 농도구배 15-55, 20 분)를 이용해 정제하여 표제 화합물 (75 mg, 33 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ0.80 - 0.95 (m, 2H), 1.03 - 1.27 (m, 3H), 1.29 - 1.47 (m, 4H), 1.53 - 1.72 (m, 6H), 2.05 (d, 1H), 2.13 (d, 1H), 2.82 - 2.90 (m, 1H), 2.97 (td, 1H), 3.13 (s, 1H), 3.31 (d, 1H), 5.40 (s, 1H).
실시예 23
5-((2R,4S)-2-(3,4- 디플루오로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(3,4- 디플루오로페닐 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파 노일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 2-(3,4- 디플루오로페닐 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )피페리딘-1- 카복실레이트
2-(3,4-디플루오로페닐)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (5.655 g, 18.90 mmol) (참조 화합물 9)을 THF (60 mL) 중에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (4.60 g, 28.34 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 질소 하, 실온에서 5 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 3-에톡시-3-옥소프로판산, 칼륨염 (6.47 g, 37.79 mmol) 및 염화마그네슘 (3.60 g, 37.79 mmol)을 THF (60 mL) 중에 현탁시키고, 질소 하, 50℃에서 5 시간 동안 특대의 교반 막대로 교반하였다. 이후, 플라스크 2의 백색 현탁액을 플라스크 1에 첨가하였다. 상기 걸쭉한 백색의 현탁액을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 3 M HCl을 첨가하여 상기 반응 혼합물을 pH 1로 산성화하였다. 용매를 진공 속에서 증발시켰다. EtOAc (250 mL)와 물을 첨가하고 흔들어서 상들을 분리시켰다. 상기 유기상을 물 (200 mL), 포화 NaHCO3 (200 mL), 식염수 (200 mL)로 세척하고, 상 분리기로 건조시킨 후 진공 속에서 증발시켰다. 잔류물을 바이오타지? KP-SIL 100g 컬럼 상에서 자동화 섬광 크로마토그래피로 정제하였다. 헵탄 중 10 % EtOAc (2 CV) 이후 헵탄 중 10 % 내지 40 %의 EtOAc (9 CV)의 농도구배를 이동상으로 사용하였다. 시스-메틸 2-(3,4-디플루오로페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (5.23 g, 74.9 %) 및 트랜스-메틸 2-(3,4-디플루오로페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.502 g, 7.19 %)를 수득하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.23 - 1.30 (m, 3H), 1.74 - 2.18 (m, 3H), 2.22 - 2.30 (m, 1H), 2.82 - 2.91 (m, 1H), 3.24 - 3.37 (m, 1H), 3.44 (d, 2H), 3.65 (s, 3H), 4.05 - 4.22 (m, 1H), 4.18 (q, 2H), 4.85 - 4.98 (m, 1H), 6.90 - 6.97 (m, 1H), 6.98 - 7.05 (m, 1H), 7.05 - 7.14 (m, 1H). MS m/z 370 (M+H)+. 트랜스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.23 - 1.32 (m, 3H), 1.51 - 2.02 (m, 3H), 2.42 - 2.53 (m, 1H), 2.59 - 2.71 (m, 1H), 2.77 - 2.88 (m, 1H), 3.47 (d, 2H), 3.76 (s, 3H), 4.19 (q, 2H), 4.14 - 4.33 (m, 1H), 5.47 - 5.66 (m, 1H), 6.90 - 6.97 (m, 1H), 6.99 - 7.07 (m, 1H), 7.11 - 7.20 (m, 1H). MS m/z 370 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 2-(3,4- 디플루오로페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(3,4-디플루오로페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (5.23 g, 14.16 mmol)를 MeOH (50 mL) 중에 용해시킨 후, -40℃로 냉각시켰다. 물 (5.00 mL)에 용해된 수산화나트륨 (3.73 mL, 14.16 mmol)을 첨가하고 상기 반응물을 -40℃에서 40 분간 교반하였다. 히드록실아민 (0.868 mL, 14.16 mmol)을 첨가하고 교반을 -40℃에서 3.5 시간 동안 지속하였다. 이후, 상기 반응 혼합물을 미리 가온한 80℃의 6 M 염화수소의 용액 (73.2 mL, 438.95 mmol)에 첨가하고 20 분간 교반하였다. 용매를 진공 속에서 농축시켰다. DCM (200 mL)과 물 (150 mL)을 첨가하고 흔들어서 상들을 분리시켰다. 상기 수상을 DCM (150 mL)으로 추출하였다. 상기 혼합된 유기상을 상 분리기로 건조시킨 후 진공 속에서 증발시켰다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/AcOH 95/5/0.2 버퍼 (25 분간, 100 mL/분의 유속) 중 20-60% 아세토니트릴의 농도구배를 이용한 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 2-(3,4-디플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (3.41 g, 71.2 %)를 백색 고체로서 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.81 - 1.88 (m, 1H), 2.08 - 2.18 (m, 1H), 2.19 - 2.28 (m, 1H), 2.30 - 2.38 (m, 1H), 3.02 - 3.11 (m, 1H), 3.32 - 3.40 (m, 1H), 3.67 (s, 3H), 4.09 - 4.18 (m, 1H), 5.02 - 5.08 (m, 1H), 5.56 (s, 1H), 6.86 - 6.92 (m, 1H), 6.95 - 7.01 (m, 1H), 7.03 - 7.10 (m, 1H). MS m/z 339 (M+H)+.
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-(3,4- 디플루오로페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(3,4-디플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (3.41 g, 10 mmol)에 대하여 키랄 분취형 HPLC [컬럼: Lux Cell2 (250x30), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: CO2 중 15% MeOH (175 bar), 유속 130 mL/분, 온도 40℃]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(3,4-디플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.70 g, 50 %)를 수득하였다. 키랄 순도 99.0 %ee, 광회전 [α]20 D = +49.9 (아세토니트릴, c=1). 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.81 - 1.87 (m, 1H), 2.09 - 2.17 (m, 1H), 2.20 - 2.28 (m, 1H), 2.31 - 2.37 (m, 1H), 3.02 - 3.09 (m, 1H), 3.32 - 3.41 (m, 1H), 3.67 (s, 3H), 4.10 - 4.16 (m, 1H), 5.03 - 5.08 (m, 1H), 5.56 (s, 1H), 6.87 - 6.92 (m, 1H), 6.95 - 7.01 (m, 1H), 7.03 - 7.09 (m, 1H).
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(3,4- 디플루오로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(3,4-디플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.7 g, 5.03 mmol)를 브롬화수소산 (AcOH 중 33%, 25 mL, 151.92 mmol)에 용해시킨 후 실온에서 20 시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 속에서 증발시켰다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (25 분간, 100 mL/분의 유속) 중 5-30% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (25 분간, 100 mL/분의 유속) 중 0-30% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 다시 정제하였다. 5-((2R,4S)-2-(3,4-디플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (0.923 g, 65.5 %)을 백색 고체로 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ1.66 - 1.76 (m, 2H), 2.09 (d, 1H), 2.19 (d, 1H), 2.96 - 3.07 (m, 2H), 3.28 - 3.35 (신호 누락), 3.90 - 3.95 (m, 1H), 5.65 (s, 1H), 7.20 - 7.29 (m, 2H), 7.34 - 7.39 (m, 1H). [C14H14F2N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 281.1101. 측정값: 281.1106.
실시예 24
5-(트랜스-2-(3,4- 디플루오로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(3,4- 디플루오로페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 2-(3,4-디플루오로페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (502 mg, 1.36 mmol) (실시예 23, 단계 1)MeOH (5 mL)에 용해시킨 후, -40℃로 냉각시켰다. 물 (0.500 mL) 중에 용해된 수산화나트륨 (0.358 mL, 1.36 mmol)을 첨가하고 상기 반응물을 -40℃에서 20 분간 교반하였다. 히드록실아민 (0.083 mL, 1.36 mmol)을 첨가하고 교반을 -40℃에서 3.5 시간 동안 지속하였다. 이후, 상기 반응 혼합물을 미리 가온한 80℃의 염화수소 (7.02 mL, 42.13 mmol)에 첨가하고 20 분간 교반하였다. 용매를 진공 속에서 증발시켰다. DCM (50 mL)과 물 (50 mL)을 첨가하고 흔들어서 상들을 분리시켰다. 상기 수상을 DCM (50 mL)으로 추출하였다. 상기 혼합된 유기상을 상 분리기로 건조시킨 후 진공 속에서 증발시켰다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/AcOH 95/5/0.2 버퍼 (25 분간, 100 mL/분의 유속) 중 20-60% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 트랜스-메틸 2-(3,4-디플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (242 mg, 52.6 %)를 백색 고체로 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.60 - 1.72 (m, 1H), 1.94 (d, 1H), 1.98 - 2.07 (m, 1H), 2.60 (d, 1H), 2.78 - 2.94 (m, 2H), 3.77 (s, 3H), 4.25 (s, 1H), 5.51 - 5.71 (m, 2H), 6.94 - 6.99 (m, 1H), 7.02 - 7.09 (m, 1H), 7.17 (dd, 1H). MS m/z 337 (M-H)-.
단계 2: 5-(트랜스-2-(3,4- 디플루오로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
트랜스-메틸 2-(3,4-디플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (242 mg, 0.72 mmol)를 브롬화수소산 (AcOH 중 33%, 4 mL, 24.31 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 20 시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 속에서 증발시켰다. 잔류물을 분취형 HPLC [장비: 애질런트(Agilent), 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm]로 정제하여 5-(트랜스-2-(3,4-디플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (137 mg, 68 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.74 - 1.81 (m, 2H), 1.84 - 1.89 (m, 1H), 1.98 - 2.03 (m, 1H), 2.65 - 2.71 (m, 1H), 2.81 (dt, 1H), 3.09 - 3.13 (m, 1H), 3.70 (dd, 1H), 5.96 (s, 1H), 7.18 - 7.22 (m, 1H), 7.30 - 7.36 (m, 1H), 7.39 - 7.44 (m, 1H). [C14H14F2N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 281.1101. 측정값: 281.1114.
실시예 25
5-((2R,4S)-2-(4- 플루오로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(4- 플루오로페닐 )피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(4- 플루오로페닐 )피페리딘-1- 카복실레이트
2-(4-플루오로페닐)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (8.4 g, 29.86 mmol) (참조 화합물 10)을 메틸 THF (120 mL)에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (7.26 g, 44.80 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 질소 하, 실온에서 2 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (9.15 g, 53.75 mmol)를 메틸 THF (120 mL)에 현탁시키고 염화마그네슘 (5.12 g, 53.75 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 특대의 교반 막대를 이용하여 50℃, 질소 하에서 3 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 플라스크 1의 베이지색 현탁액을 이제 플라스크 2의 백색 현탁액에 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 베이지색 현탁액을 질소 하, 실온에서 23 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 3 M HCl (50 mL)을 사용하여 pH 1로 산성화한 후, MTBE (200 mL)와 물 (70 mL)을 첨가하였다. 상기 상들을 분리한 후 유기상을 물 (30 mL), 포화 NaHCO3 (30 mL) 및 물 (30mL)로 추출하고, 무수 Na2SO4로 건조한 후 증발시켰다. 부분입체 이성질체들을 바이오타지 (헵탄 중 20 % => 55 % EtOAc, 8 CV; 바이오타지? KP-SIL 340g 컬럼) 상에서 분리하여 트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(4-플루오로페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (1.26 g, 12 %) 및 시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(4-플루오로페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (6.58 g, 62 %)를 무색의 오일로서 수득하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.27 (t, 3H), 1.83 - 2.14 (m, 3H), 2.27 (ddd, 1H), 2.80 - 2.93 (m, 1H), 3.26 - 3.50 (m, 3H), 3.64 (s, 3H), 4.10 - 4.22 (m, 3H), 4.93 - 5.01 (m, 1H), 6.95 - 7.05 (m, 2H), 7.14 - 7.22 (m, 2H). MS m/z 352 (M+H)+. 트랜스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.18 - 1.33 (m, 3H), 1.50 - 1.89 (m, 2H), 1.90 - 2.02 (m, 1H), 2.47 - 2.59 (m, 1H), 2.59 - 2.72 (m, 1H), 2.79 - 2.91 (m, 1H), 3.47 (s, 2H), 3.76 (s, 3H), 4.08 - 4.30 (m, 3H), 5.50 - 5.69 (s, br., 1H), 6.98 - 7.10 (m, 2H), 7.10 - 7.23 (m, 2H). MS m/z 350 (M-H)-
단계 2: 시스 - 메틸 2-(4- 플루오로페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(4-플루오로페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (6.58 g, 18.7 mmol)를 MeOH (50 mL) 중에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (5.00 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.749 g, 18.73 mmol)을 10 분 동안 첨가하고 이 무색의 용액을 -40℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 1.148 mL, 18.73 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 3 시간 20 분 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (94 mL, 561.80 mmol)에 옮겨 담고, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 DCM/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 5.8 g의 황색 고체를 수득하였다. 2.9 g의 이 고체를 H2O/MeCN/HOAc 95/5/0.2 버퍼 (15 분간, 100 mL/분의 유속) 중 30-75 % 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 3회 주입하여 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 2-(4-플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.7 g, 28 %)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.79 - 1.90 (m, 1H), 2.08 - 2.40 (m, 3H), 3.01 - 3.12 (m, 1H), 3.32 - 3.44 (m, 1H), 3.67 (s, 3H), 4.15 (ddd, 1H), 5.05 - 5.14 (m, 1H), 5.54 (s, 1H), 6.92 - 7.02 (m, 2H), 7.10 - 7.18 (m, 2H). MS m/z 321 (M+H)+.
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-(4- 플루오로페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(4-플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.7 g, 5.3 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄셀 OJ (250x50), 20 ㎛의 입자 크기, 이동상: EtOH, 유속 118 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(4-플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (860 mg, 50 %)를 수득하였다. 키랄 순도 99.9 %ee, 광회전 [α]20 D = +57.0 (아세토니트릴, c=1).
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(4- 플루오로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(4-플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.86 g, 2.68 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 15.52 mL, 88.60 mmol)에 용해시킨 후, 이 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: 애질런트, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)에 의해, 그리고 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (20 분간, 19 mL/분의 유속) 중 0 - 30 % 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x19 ID mm) 상에서 정제하였다. 5-((2R,4S)-2-(4-플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (167 mg, 23 %)을 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, dmso) δ1.27 - 1.53 (m, 2H), 1.81 - 1.98 (m, 2H), 2.67 - 2.77 (m, 1H), 2.78 - 2.91 (m, 1H), 3.10 (d, 1H), 3.63 (d, 1H), 5.67 - 5.77 (m, 1H), 7.04 - 7.16 (m, 2H), 7.34 - 7.45 (m, 2H). [C14H15FN2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 263.1196. 측정값: 263.1201
실시예 26
5-(트랜스-2-(4- 플루오로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(4- 플루오로페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(4-플루오로페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (1.26 g, 3.59 mmol) (실시예 25, 단계 1)를 MeOH (50 mL) 중에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (5.00 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.143 g, 3.59 mmol)을 5 분 동안 첨가한 후, 이 무색의 용액을 -40℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.220 mL, 3.59 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 3 시간 20 분 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (17.93 mL, 107.58 mmol)에 옮겨 담고, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 DCM/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 트랜스-메틸 2-(4-플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.1 g, 95 %)를 갈색 고체로서, 1.1 g을 수득하였다. MS m/z 321 (M+H)+.
단계 2: 5-(트랜스-2-(4- 플루오로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
트랜스-메틸 2-(4-플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.3 g, 0.94 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 6 mL, 34.26 mmol)에 용해시킨 후, 이 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: 애질런트, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하였다. 5-(트랜스-2-(4-플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (54 mg, 22 %)을 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, dmso) δ1.75 - 2.10 (m, 4H), 2.67 - 2.77 (m, 1H), 2.80 - 2.89 (m, 1H), 3.11 - 3.18 (m, 1H), 3.70 (d, 1H), 5.94 (s, 1H), 7.07 - 7.15 (m, 2H), 7.36 - 7.43 (m, 2H). [C14H15FN2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 263.1196. 측정값: 263.1201
실시예 27
5-((2R,4S)-2-(4- 클로로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(4- 클로로페닐 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 2-(4- 클로로페닐 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )피페리딘-1- 카복실레이트
2-(4-클로로페닐)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (3.49 g, 11.72 mmol) (참조 화합물 11)을 메틸 THF (120 mL) 중에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (2.85 g, 17.58 mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 질소 하, 실온에서 3 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (3.59 g, 21.10 mmol)를 메틸 THF (120 mL) 중에 현탁시킨 후, 염화마그네슘 (2.009 g, 21.10 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 큰 자성 교반 막대를 이용하여 질소 하, 50℃에서 3 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 플라스크 1의 내용물을 플라스크 2로 옮겨 담았다. 이렇게 해서 생성된 백색 현탁액을 질소 하, 실온에서 밤새 교반하였다. 상기 혼합물을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화한 후, MTBE (50 mL)와 물 (50 mL)을 첨가하였다. 상기 상들을 분리한 후 상기 유기층을 물, 포화 NaHCO3 및 식염수로 세척하였다. 상기 유기층을 Na2SO4로 건조하고 여과한 후 증발시켜 옅은 황색의 오일을 수득하였다. 잔류물에 대해 n-헵탄 중 20-60% EtOAc의 농도구배 (8 CV)를 사용한 바이오타지 (340 g) 상에서 자동화 컬럼 크로마토그래피를 수행하여 트랜스-메틸 2-(4-클로로페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (205 mg, 5 %) 및 시스-메틸 2-(4-클로로페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (2.27 g, 53 %)를 수득하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.21 - 1.32 (m, 3H), 1.82 - 2.15 (m, 3H), 2.22 - 2.31 (m, 1H), 2.81 - 2.92 (m, 1H), 3.26 - 3.49 (m, 3H), 3.63 (s, 3H), 4.06 - 4.22 (m, 3H), 4.91 - 4.99 (m, 1H), 7.11 - 7.18 (m, 2H), 7.24 - 7.31 (m, 2H). MS m/z 366 (M-H)-. 트랜스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.16 - 1.33 (m, 3H), 1.47 - 2.02 (m, 3H), 2.43 - 2.70 (m, 2H), 2.75 - 2.91 (m, 1H), 3.42 - 3.48 (m, 2H), 3.74 (s, 3H), 4.00 - 4.39 (m, 3H), 5.45 - 5.71 (s, br., 1H), 7.14 (d, 2H), 7.29 - 7.35 (m, 2H). MS m/z 368 (M+H)+.
단계 2: 시스 - 메틸 2-(4- 클로로페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(4-클로로페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (2.11 g, 5.74 mmol)를 MeOH (24 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 수산화나트륨 (1.687 mL, 5.74 mmol)을 10 분 동안 첨가하고 이 황색 오일을 -40℃에서 20 분간 계속 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.352 mL, 5.74 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 이후, 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (29.5 mL, 177.26 mmol)에 신속하게 부어 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 DCM/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 백색 고체를 수득하였다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/AcOH 95/5/0.2 버퍼 (30 분간, 100 mL/분의 유속) 중 10-60% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 2-(4-클로로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (923 mg, 47 %)를 분리하였다. MS m/z 337 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-(4- 클로로페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사 졸-5-일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 (2S,4R)- 메틸 2-(4- 클로로페닐 )-4-(3-옥소-2,3-디 히드로이소옥 사졸-5-일)-피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(4-클로로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (923 mg, 2.75 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 레프로실 (ReproSil) (250x50), 8 ㎛의 입자 크기, 이동상: EtOH, 유속 100 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(4-클로로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (447 mg, 48 %)를, 키랄 순도 99.9 %ee, 광회전 [α]20 D = +67.7 (아세토니트릴, c=1)로, 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.79 - 1.89 (m, 1H), 2.07 - 2.40 (m, 3H), 3.01 - 3.11 (m, 1H), 3.33 - 3.43 (m, 1H), 3.66 (s, 3H), 4.10 - 4.19 (m, 1H), 5.07 (dd, 1H), 5.55 (s, 1H), 7.08 - 7.14 (m, 2H), 7.23 - 7.28 (m, 2H), 그리고 (2S,4R)-메틸 2-(4-클로로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-피페리딘-1-카복실레이트 (458 mg, 49 %)를, 키랄 순도 99.6 %ee, 광회전 [α]20 D = -67.6 (아세토니트릴, c=1)으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.79 - 1.88 (m, 1H), 2.07 - 2.38 (m, 3H), 3.02 - 3.10 (m, 1H), 3.33 - 3.43 (m, 1H), 3.66 (s, 3H), 4.11 - 4.18 (m, 1H), 5.04 - 5.09 (m, 1H), 5.54 (s, 1H), 7.09 - 7.13 (m, 2H), 7.23 - 7.28 (m, 2H).
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(4- 클로로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(4-클로로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.447 g, 1.33 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 10.46 mL, 59.73 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(4-클로로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (233 mg, 63 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.32 (q, 1H), 1.44 (dq, 1H), 1.82 - 1.88 (m, 1H), 1.90 - 1.97 (m, 1H), 2.71 (dt, 1H), 2.80 - 2.88 (m, 1H), 3.06 - 3.12 (m, 1H), 3.63 (dd, 1H), 5.70 (s, 1H), 7.31 - 7.35 (m, 2H), 7.35 - 7.40 (m, 2H). [C14H15ClN2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 279.0900. 측정값: 279.0905
실시예 28
5-((2S,4R)-2-(4- 클로로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4R)-메틸 2-(4-클로로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.458 g, 1.36 mmol) (실시예 27, 단계 3)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 10.72 mL, 61.20 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2S,4R)-2-(4-클로로-페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (198 mg, 52 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.32 (q, 1H), 1.44 (dq, 1H), 1.83 - 1.88 (m, 1H), 1.91 - 1.96 (m, 1H), 2.71 (dt, 1H), 2.84 (tt, 1H), 3.07 - 3.11 (m, 1H), 3.63 (dd, 1H), 5.70 (s, 1H), 7.31 - 7.40 (m, 4H). [C14H15ClN2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 279.0900. 측정값: 279.0887
실시예 29
5-(트랜스-2-(4- 클로로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(4- 클로로페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 2-(4-클로로페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (184 mg, 0.50 mmol) (실시예 27, 단계 1)를 MeOH (2 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 수산화나트륨 (0.147 mL, 0.50 mmol)을 10 분 동안 첨가하고 이 황색 오일을 -40℃에서 20 분간 계속 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.031 mL, 0.50 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 이후, 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (2.58 mL, 15.46 mmol)에 신속하게 부어 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 DCM/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 미정제 트랜스-메틸 2-(4-클로로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (155 mg, 92 %)를 옅은 황색의 오일로서 수득하였다. MS m/z 337 (M+H)+
단계 2: 5-(트랜스-2-(4- 클로로페닐 )피페리딘-4- 일 ) 이소옥사졸 -3(2H)-온
트랜스-메틸 2-(4-클로로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (155 mg, 0.46 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 3.63 mL, 20.71 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-(트랜스-2-(4-클로로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (23.5 mg, 18 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.74 - 1.83 (m, 2H), 1.84 - 1.91 (m, 1H), 1.96 - 2.03 (m, 1H), 2.70 (dt, 1H), 2.79 - 2.86 (m, 1H), 3.09 - 3.15 (m, 1H), 3.69 (dd, 1H), 5.89 - 5.98 (m, 1H), 7.32 - 7.36 (m, 2H), 7.36 - 7.41 (m, 2H). [C14H15ClN2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 279.0900. 측정값: 279.0889
실시예 30
5-((2R,4S)-2-(3-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(3-( 트리플루오로 메틸) 페닐 )피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(3-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )-피페리딘-1- 카복실레이트
1-(메톡시카보닐)-2-(3-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-카복실산 (1.479 g, 4.46 mmol) (참조 화합물 12)을 메틸 THF (50 mL)에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (1.086 g, 6.70 mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 질소 하, 실온에서 3 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (1.368 g, 8.04 mmol)를 메틸 THF (50.0 mL)에 현탁시킨 후, 염화마그네슘 (0.765 g, 8.04 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 큰 자성 교반 막대를 이용하여 질소 하, 50℃에서 3 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 플라스크 1의 내용물을 플라스크 2로 옮겨 담았다. 이렇게 해서 생성된 백색 현탁액을 질소 하, 실온에서 밤새 교반하였다. 상기 혼합물을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화한 후, MTBE (50 mL)와 물 (50 mL)을 첨가하였다. 상기 상들을 분리한 후 상기 유기층을 물, 포화 NaHCO3 및 식염수로 세척하였다. 상기 유기층을 Na2SO4로 건조하고, 여과 및 증발시켜 옅은 황색의 오일을 수득하였다. 잔류물을 n-헵탄 중 20-55% EtOAc의 농도구배 (8 CV)를 이용하는 바이오타지 (340g) 상에서 자동화 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3-(트리플루오로메틸)페닐)-피페리딘-1-카복실레이트 (157 mg, 9 %) 및 시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (679 mg, 38 %)를 수득하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.19 - 1.27 (m, 3H), 1.75 - 2.20 (m, 3H), 2.23 - 2.32 (m, 1H), 2.82 - 2.94 (m, 1H), 3.26 - 3.48 (m, 3H), 3.61 (s, 3H), 4.05 - 4.21 (m, 3H), 4.91 - 5.04 (m, 1H), 7.35 - 7.50 (m, 4H). MS m/z 402 (M+H)+. 트랜스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.16 - 1.32 (m, 3H), 1.46 - 2.09 (m, 4H), 2.48 - 2.90 (m, 2H), 3.40 - 3.50 (m, 2H), 3.75 (s, 3H), 4.02 - 4.42 (m, 3H), 5.65 (s, br., 1H), 7.36 - 7.56 (m, 4H). MS m/z 402 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2-(3-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )-피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (679 mg, 1.69 mmol)를 MeOH (8 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (0.800 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.498 mL, 1.69 mmol)을 10 분 동안 첨가한 후, 이 황색 오일을 -40℃에서 20 분간 계속 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.104 mL, 1.69 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (8.71 mL, 52.27 mmol)에 신속하게 붓고, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 DCM/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 백색 고체를 수득하였다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/AcOH 95/5/0.2 버퍼 (30 분간, 100 mL/분의 유속) 중 10-60% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(3-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (311 mg, 50 %)를 분리하였다. MS m/z 371 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2-(3-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )-피페리딘-1- 카복실레이트 및 (2S,4R)- 메틸 4-(3-옥소-2,3-디 히드로이소옥 사졸-5-일)-2-(3-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(3-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (311 mg, 0.84 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄팍 IC (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/IPA 40/60, 유속 12 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(3-(트리플루오로메틸)-페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (155 mg, 50 %)를, 키랄 순도 99.9 %ee, 광회전 [α]20 D = +54.4 (아세토니트릴, c=1)로, 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.78 - 1.90 (m, 1H), 2.08 - 2.42 (m, 3H), 3.01 - 3.13 (m, 1H), 3.34 - 3.48 (m, 1H), 3.65 (s, 3H), 4.09 - 4.22 (m, 1H), 5.08 - 5.19 (m, 1H), 5.53 (s, 1H), 7.31 - 7.50 (m, 4H), 그리고 (2S,4R)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(3-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (152 mg, 49 %)를, 키랄 순도 99.9 %ee, 광회전 [α]20 D = -55.7 (아세토니트릴, c=1)로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.80 - 1.90 (m, 1H), 2.11 - 2.32 (m, 2H), 2.33 - 2.42 (m, 1H), 3.02 - 3.12 (m, 1H), 3.36 - 3.47 (m, 1H), 3.66 (s, 3H), 4.12 - 4.21 (m, 1H), 5.11 - 5.17 (m, 1H), 5.53 (s, 1H), 7.33 - 7.48 (m, 4H).
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(3-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(3-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (0.155 g, 0.42 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 3.30 mL, 18.83 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(3-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (43 mg, 33 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.35 (q, 1H), 1.47 (dq, 1H), 1.87 (d, 1H), 2.00 (d, 1H), 2.69 - 2.77 (m, 1H), 2.83 - 2.91 (m, 1H), 3.08 - 3.14 (m, 1H), 3.75 (d, 1H), 5.74 (s, 1H), 7.50 - 7.55 (m, 1H), 7.55 - 7.59 (m, 1H), 7.64 - 7.68 (m, 1H), 7.71 (s, 1H). [C15H15F3N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 313.1164. 측정값: 313.1144
실시예 31
5-((2S,4R)-2-(3-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4R)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(3-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (0.152 g, 0.42 mmol) (실시예 30, 단계 3)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 3.30 mL, 18.83 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2S,4R)-2-(3-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (28 mg, 22 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.35 (q, 1H), 1.47 (qd, 1H), 1.87 (d, 1H), 2.00 (d, 1H), 2.73 (dt, 1H), 2.84 - 2.91 (m, 1H), 3.09 - 3.14 (m, 1H), 3.75 (d, 1H), 5.74 (s, 1H), 7.50 - 7.54 (m, 1H), 7.55 - 7.58 (m, 1H), 7.66 (d, 1H), 7.71 (s, 1H). [C15H15F3N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 313.1164. 측정값: 313.1158
실시예 32
5-(트랜스-2-(3-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2-(3-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )-피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (157 mg, 0.39 mmol) (실시예 30, 단계 1)를 MeOH (2 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (0.200 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.115 mL, 0.39 mmol)을 10 분 동안 첨가하고 이 황색 오일을 -40℃에서 20 분간 계속 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.024 mL, 0.39 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 3 시간 15 분 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (2.014 mL, 12.09 mmol)에 신속하게 붓고, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 DCM/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 미정제 트랜스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(3-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (128 mg, 88 %)를 백색 고체로서 수득하였다. MS m/z 371 (M+H)+
단계 2: 5-(트랜스-2-(3-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
트랜스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(3-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (0.128 g, 0.35 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 2.72 mL, 15.55 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-(트랜스-2-(3-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (31 mg, 28 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.77 - 1.86 (m, 2H), 1.86 - 1.93 (m, 1H), 2.01 - 2.08 (m, 1H), 2.71 (dt, 1H), 2.81 - 2.87 (m, 1H), 3.11 - 3.16 (m, 1H), 3.76 - 3.83 (m, 1H), 5.99 (s, 1H), 7.50 - 7.55 (m, 1H), 7.55 - 7.59 (m, 1H), 7.64 - 7.68 (m, 1H), 7.72 (s, 1H). [C15H15F3N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 313.1164. 측정값: 313.1153
실시예 33
5-((2R,4S)-2-(4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(4-( 트리플루오로 메틸) 페닐 )피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )-피페리딘-1- 카복실레이트
1-(메톡시카보닐)-2-(4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-카복실산 (5.629 g, 16.99 mmol) (참조 화합물 13)메틸 THF (120 mL)에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (4.13 g, 25.49 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 질소 하, 실온에서 3 시간 45 분 동안 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (5.21 g, 30.58 mmol)를 메틸 THF (120 mL)에 현탁시킨 후, 염화마그네슘 (2.91 g, 30.58 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 특대의 교반 막대를 사용하여 질소 하, 50℃에서 3.5 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 플라스크 1의 베이지색 현탁액을 이제 플라스크 2의 백색 현탁액에 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 베이지색 현탁액을 질소 하, 실온에서 23 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화하고 MTBE와 물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리한 후 유기상을 물, 포화 NaHCO3 및 물로 추출하였다. 상기 유기층을 증발시킨 후 미량의 물을 MeCN으로 공비 제거하여 갈색 오일을 수득하였다. 부분입체 이성질체를 바이오타지 (헵탄 중 20 % => 55 % EtOAc, 8 CV; 바이오타지? KP-SIL 340g 컬럼)를 이용한 2 회 러닝으로 분리하였다. 트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (0.474 g, 7 %) 및 시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(4-(트리플루오로메틸)페닐)-피페리딘-1-카복실레이트 (3.532 g, 52 %)를 무색의 오일로서 수득하였다. 시스-이성질체:1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.26 (t, 3H), 1.72 - 2.22 (m, 3H), 2.29 (ddd, 1H), 2.83 - 2.96 (m, 1H), 3.29 - 3.49 (m, 3H), 3.64 (s, 3H), 4.07 - 4.23 (m, 3H), 4.92 - 5.06 (m, 1H), 7.32 (d, 2H), 7.58 (d, 2H). MS m/z 402 (M+H)+. 트랜스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.13 - 1.26 (m, 3H), 1.43 - 1.60 (m, 1H), 1.64 - 1.85 (m, 1H), 1.95 (dt, 1H), 2.44 - 2.61 (m, 2H), 2.73 - 2.85 (m, 1H), 3.39 (s, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.99 - 4.36 (m, 3H), 5.59 (br. s, 1H), 7.28 (d, 2H), 7.56 (d, 2H). MS m/z 402 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2-(4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )-피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (2.307 g, 5.75 mmol)를 MeOH (20 mL)에 용해시키고 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (2 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.230 g, 5.75 mmol)을 10 분 동안 첨가하고 이 무색의 용액을 -40℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.352 mL, 5.75 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 3 시간 20 분 동안 교반하였다. 이후, 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (30 mL, 180.00 mmol)으로 옮기고 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 DCM/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 황색 고체를 수득하였다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (20 분간, 100 mL/분의 유속) 중 0-25 % 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 3 회 주입하여 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (1.682 g, 79 %)를 백색 고체로 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ1.83 - 1.94 (m, 1H), 2.16 - 2.29 (m, 2H), 2.34 - 2.43 (m, 1H), 3.06 - 3.18 (m, 1H), 3.51 (ddd, 1H), 3.64 (s, 3H), 4.12 (ddd, 1H), 5.10 - 5.22 (m, 1H), 5.57 (s, 1H), 7.40 (d, 2H), 7.58 (d, 2H). MS m/z 371 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2-(4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )-피페리딘-1- 카복실레이트 및 (2R,4S)- 메틸 4-(3-옥소-2,3-디 히드로이소옥 사졸-5-일)-2-(4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (1.682 g, 4.54 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄팍 IA (250x30), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: CO2 (175 bar) 중 15% MeOH, 유속 130 mL/분, 온도 40℃]로 정제하여 (2R,4S)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (580 mg, 34 %)를, 키랄 순도 99.9 %ee, 광회전 [α]20 D = +53.3 (아세토니트릴, c=1)으로, 그리고 (2S,4R)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (591 mg, 35 %)를, 키랄 순도 98.8 %ee, 광회전 [α]20 D = -74.2 (아세토니트릴, c=1)로 수득하였다.
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (580 mg, 1.57 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 12 mL, 68.52 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 17 시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (341 mg, 70 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ1.68 - 1.79 (m, 2H), 2.10 (d, 1H), 2.21 (d, 1H), 2.98 - 3.10 (m, 2H), 3.35 (d, 1H), 3.99 - 4.07 (m, 1H), 5.64 (s, 1H), 7.60 (d, 2H), 7.66 (d, 2H). [C15H15F3N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 313.1164. 측정값: 313.1150
실시예 34
5-((2S,4R)-2-(4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4R)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (591 mg, 1.60 mmol) (실시예 33, 단계 3)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 12 mL, 68.52 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 교반하였다. 24 시간 후, 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 5 mL, 28.55 mmol)을 더 첨가하고 상기 반응물을 실온에서 총 1.5 일 동안 지속하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅲ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2S,4R)-2-(4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (337 mg, 67 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ1.69 - 1.78 (m, 2H), 2.09 (d, 1H), 2.21 (d, 1H), 2.99 - 3.09 (m, 2H), 3.32 - 3.38 (m, 1H), 4.01 - 4.04 (m, 1H), 5.63 (s, 1H), 7.59 (d, 2H), 7.66 (d, 2H). [C15H15F3N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 313.1164. 측정값: 313.1156
실시예 35
5-(트랜스-2-(4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2-(4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )-피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (0.467 g, 1.16 mmol) (실시예 33, 단계 1)를 MeOH (4 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (0.4 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.047 g, 1.16 mmol)을 10 분 동안 첨가하고 이 무색의 용액을 -40℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.071 mL, 1.16 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 3.5 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (6 mL, 36.00 mmol)에 옮겨 담고, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 DCM/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 미정제 트랜스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (0.432 g, 정량 분석)를 황색 오일로서 수득하였다. MS m/z 371 (M+H)+
단계 2: 5-(트랜스-2-(4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
트랜스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (148 mg, 0.40 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 3 mL, 17.13 mmol)에 용해시킨 후, 이 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-(트랜스-2-(4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (50 mg, 40 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.75 - 1.83 (m, 2H), 1.84 - 1.92 (m, 1H), 2.00 - 2.06 (m, 1H), 2.70 (dt, 1H), 2.79 - 2.86 (m, 1H), 3.09 - 3.15 (m, 1H), 3.77 (d, 1H), 5.95 (s, 1H), 7.59 (d, 2H), 7.64 (d, 2H). [C15H15F3N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 313.1164. 측정값: 313.1166
실시예 36
5-((2R,4S)-2-(3- tert - 부틸페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 메틸 2-(3- tert - 부틸페닐 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )피페리딘-1- 카복실레이트
2-(3-tert-부틸페닐)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (2.73 g, 8.55 mmol) (참조 화합물 14)을 메틸 THF (40 mL)에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (2.079 g, 12.82 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 질소 하, 실온에서 2 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (2.62 g, 15.39 mmol)를 메틸 THF (60 mL)에 현탁시키고, 염화마그네슘 (1.465 g, 15.39 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 특대의 교반 막대를 이용하여 50℃, 질소 하에서 3 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 플라스크 1의 베이지색 현탁액을 이제 플라스크 2의 백색 현탁액에 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 베이지색 현탁액을 질소 하, 실온에서 23 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 0.5 M HCl (100 mL)을 사용하여 pH 1로 산성화한 뒤, MTBE (200 mL)를 첨가하였다. 상기 상들을 분리한 후 유기상을 물 (30 mL), 포화 NaHCO3 (30 mL) 및 물 (30 mL)로 추출하고, 무수 Na2SO4로 건조한 후 증발시켜 미정제 메틸 2-(3-tert-부틸페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-피페리딘-1-카복실레이트 (3.14 g, 95 %)를 갈색 오일로서 수득하였다.
단계 2: 시스 - 메틸 2-(3- tert - 부틸페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
메틸 2-(3-tert-부틸페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (3.14 g, 8.06 mmol)를 MeOH (50 mL) 중에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (5.00 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.322 g, 8.06 mmol)을 5 분 동안 첨가한 후, 상기 무색의 혼합물을 -40℃에서 20 분 동안 교반을 지속하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.494 mL, 8.06 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -55℃에서 6 시간 30 분 동안 교반하였다. 이후, 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (60 mL, 360.00 mmol)으로 옮겨 담고, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 DCM/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 갈색 오일을 수득하였다. 상기 미정제 생성물을 H2O/MeCN/HOAc 95/5/0.2 버퍼 (25 분간, 100 mL/분의 유속) 중 40-85 % 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 3회 주입하여 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 2-(3-tert-부틸페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (690 mg, 24 %)를 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.29 (s, 9H), 1.81 - 1.88 (m, 1H), 2.14 - 2.21 (m, 1H), 2.22 - 2.31 (m, 1H), 2.35 - 2.42 (m, 1H), 3.03 - 3.10 (m, 1H), 3.37 - 3.44 (m, 1H), 3.66 (s, 3H), 4.16 - 4.22 (m, 1H), 5.12 - 5.16 (m, 1H), 5.48 (s, 1H), 6.97 - 7.01 (m, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.21 - 7.25 (m, 2H). MS m/z 359 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-(3- tert - 부틸페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(3-tert-부틸페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (690 mg, 1.93 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 레프로실 (250x50), 8 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH 40/60, 유속 118 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(3-tert-부틸페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-피페리딘-1-카복실레이트 (340 mg, 49 %)를, 키랄 순도 99.9 %ee, 광회전 [α]20 D = +55.8 (아세토니트릴, c=1)로 수득하였다.
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(3- tert - 부틸페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(3-tert-부틸페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.340 g, 0.95 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 5.49 mL, 31.35 mmol)에 용해시킨 후, 이 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(3-tert-부틸페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (107 mg, 37 %)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, dmso) δ1.26 (s, 9H), 1.32 - 1.43 (m, 1H), 1.43 - 1.54 (m, 1H), 1.81 - 1.90 (m, 1H), 1.90 - 1.99 (m, 1H), 2.68 - 2.78 (m, 1H), 2.80 - 2.91 (m, 1H), 3.08 - 3.16 (m, 1H), 3.59 - 3.66 (m, 1H), 5.72 (s, 1H), 7.13 - 7.29 (m, 3H), 7.37 (s, 1H). [C18H24N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 301.1916. 측정값: 301.1909.
실시예 37
5-(트랜스-2-(4- tert - 부틸페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(4- tert - 부틸페닐 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )피페리딘-1- 카복실레이트
염화마그네슘 (5.38 g, 56.51 mmol)과 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (9.62 g, 56.51 mmol)를 메틸 THF (100 mL) 중에 현탁시키고, 특대의 교반 막대를 사용하여 질소 하, 50℃로 18 시간 동안 가열한 후, 실온으로 냉각시켰다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 메틸 THF (100 mL) 중의 2-(4-tert-부틸페닐)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (9.5 g, 29.74 mmol) (참조 화합물 15)의 현탁액에 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (7.23 g, 44.62 mmol)을 질소 하에 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 실온에서 4 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 이후, 플라스크 2의 내용물을 트랜스퍼 니들을 사용하여 플라스크 1로 옮겼다. 메틸 THF (30 mL)로 세척하였다. 이렇게 해서 생성된 현탁액을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 3.8 M HCl (약 150 mL)을 첨가하여 생성된 2상 혼합물을 2 시간 동안 세게 교반하였다. 상들을 분리하였다. 상기 유기상을 물, 포화 NaHCO3 및 식염수로 세척한 후, MgSO4로 건조하고 증발시켰다. 잔류물을 동량의 두 바이오타지 [바이오타지? KP-SIL 340g 컬럼, 헵탄 중 20% EtOAc (1 CV) 이후 20% => 60% (7 CV)]를 사용해 정제하였다. 트랜스-메틸 2-(4-tert-부틸페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.09 g, 9.4 %)를 담황색 오일로서 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.22 - 1.31 (m, 3H), 1.31 (s, 9H), 1.50 - 1.99 (m, 4H), 2.50 - 2.96 (m, 2H), 3.47 (s, 2H), 3.74 (s, 3H), 4.08 - 4.23 (m, 3H), 5.46 - 5.71 (m, 1H), 7.09 - 7.16 (m, 2H), 7.34 - 7.40 (m, 2H).
단계 2: 트랜스- 메틸 2-(4- tert - 부틸페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 2-(4-tert-부틸페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.09 g, 2.80 mmol)를 MeOH (10 mL)에 용해시킨 후, -40℃로 냉각시켰다. 물 (1.2 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.112 g, 2.80 mmol)를 1 분간에 걸쳐 첨가하고, 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 20 분간 교반하였다. 이후, 히드록실아민 (물 중 50 %, 0.178 mL, 2.91 mmol)을 1 분간에 걸쳐 첨가하고, 교반을 -40℃에서 3 시간 동안 지속하였다. 이후, 상기 반응 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6M 염화수소 (30 mL, 180.00 mmol)의 용액에 옮겨 담고, 상기 혼합물을 80℃에서 1 시간 동안 교반을 지속하였다. 이후, 실온으로 냉각시켰다. 메탄올을 증발시킨 후, 물을 첨가하였다. DCM으로 3회 추출하였다. 혼합된 유기층을 MgSO4로 건조한 후 증발시켰다. 미정제 트랜스-메틸 2-(4-tert-부틸페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (910 mg, 90 %)를 황백색의 폼으로서 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.32 (s, 9H), 1.46 - 2.23 (m, 3H), 2.46 - 3.05 (m, 3H), 3.74 (s, 3H), 3.98 - 4.43 (m, 1H), 5.48 - 5.72 (m, 2H), 7.10 - 7.22 (m, 2H), 7.35 - 7.45 (m, 2H). MS m/z 359 (M+H)+
단계 3: 5-(트랜스-2-(4- tert - 부틸페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
트랜스-메틸 2-(4-tert-부틸페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.26 g, 0.73 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 5 mL, 71.37 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-(트랜스-2-(4-tert-부틸페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (182 mg, 84 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.23 (s, 9H), 1.76 - 1.85 (m, 2H), 1.86 - 1.93 (m, 1H), 1.96 - 2.03 (m, 1H), 2.71 (td, 1H), 2.81 - 2.88 (m, 1H), 3.10 - 3.15 (m, 1H), 3.65 (dd, 1H), 5.90 (s, 1H), 7.24 - 7.33 (m, 4H). [C18H24N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 301.1916. 측정값: 301.1919
실시예 38
5-((2R,4S)-2-(4-( 메틸설포닐 ) 페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(4-( 메틸설포닐 )페닐)피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(4-(메 틸설 포닐) 페닐 )-피페리딘-1- 카복실레이트
1-(메톡시카보닐)-2-(4-(메틸설포닐)페닐)피페리딘-4-카복실산 (4.756 g, 13.93 mmol)을 메틸 THF (70 mL) 중에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (3.39 g, 20.90 mmol)을 첨가하였다. 걸쭉한 백색의 침전물이 형성되었다. 메틸 THF (70.0 mL)을 첨가하고 상기 현탁액을 질소 하, 실온에서 6 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (4.74 g, 27.86 mmol)를 메틸 THF (70.0 mL) 중에 현탁시키고, 염화마그네슘 (2.65 g, 27.86 mmol)을 첨가하였다. 질소 하, 50℃에서 6 시간 동안 가열하였다 (플라스크 2). 이후, 플라스크 2의 백색 현탁액을 상기 플라스크 1의 걸쭉한 현탁액에 첨가하였다. 상기 현탁액을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 온도를 50℃로 6 시간 동안 상승시켰다. MeTHF (15 mL) 중의 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (4.74 g, 27.86 mmol) 및 염화마그네슘 (2.65 g, 27.86 mmol)을 디옥산 (60 mL)과 함께 더 첨가하였다. 상기 반응물을 50℃에서 18 시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 3 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화하였다. 상기 유기상을 물 (2x400 mL), 포화 NaHCO3 (400 mL), 식염수 (400 mL)로 세척한 후, Na2SO4로 건조하고 여과한 후 진공 속에서 증발시켰다. 잔류물을 바이오타지? KP-SIL 100g 컬럼 상에서 자동화 섬광 크로마토그래피로 정제하였다. 헵탄 중 50 % EtOAc (2 CV) 이후 헵탄 중 50 % 내지 80 %의 EtOAc (10 CV)의 농도구배를 이동상으로 사용하였다. 시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(4-(메틸설포닐)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (2.70 g, 47.1 %) 및 트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(4-(메틸설포닐)페닐)-피페리딘-1-카복실레이트 (0.505 g, 8.81 %)를 분리하였다. 시스-이성질체: NMR: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.25 (t, 3H), 1.80 - 1.95 (m, 2H), 2.04 - 2.16 (m, 1H), 2.23 - 2.32 (m, 1H), 2.84 - 2.95 (m, 1H), 3.02 (s, 3H), 3.29 - 3.38 (m, 1H), 3.38 - 3.48 (m, 2H), 3.63 (s, 3H), 4.10 - 4.21 (m, 3H), 4.95 - 5.04 (m, 1H), 7.40 (d, 2H), 7.88 (d, 2H). MS m/z 410 (M-H)-. 트랜스-이성질체: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.23 (t, 3H), 1.12 - 2.26 (m, 3H), 2.51 - 2.62 (m, 2H), 2.83 (td, 1H), 3.04 (s, 3H), 3.40 - 3.48 (s, 2H), 3.75 (s, 3H), 4.07 - 4.38 (m, 1H), 4.15 (q, 2H), 5.49 - 5.77 (m, 1H), 7.41 (d, 2H), 7.93 (d, 2H). MS m/z 412 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 2-(4-( 메틸설포닐 ) 페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(4-(메틸설포닐)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (2.6 g, 6.32 mmol)를 MeOH (100 mL)에 현탁시켰다. DCM (40 mL)을 첨가하고 상기 반응물을 -40℃로 냉각시켰다. 물 (10.00 mL) 중의 3.8 M 수산화나트륨 (1.663 mL, 6.32 mmol)을 첨가하고 상기 반응물을 -40℃에서 20 분간 교반하였다. 히드록실아민 (물 중 50 %, 0.387 mL, 6.32 mmol)을 첨가하고 상기 반응물을 -40℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 이후, 상기 반응 혼합물을 미리 가온한 80℃의 6 M 염화수소의 용액 (63.2 mL, 379.13 mmol)에 첨가하고, 상기 반응물을 30 분간 교반하였다. 용매를 진공 속에서 증발시켰다. DCM (250 mL)과 물 (250 mL)을 첨가하고 흔들어서 상들을 분리시켰다. 상기 유기상을 상 분리기로 건조시킨 후 진공 속에서 증발시켰다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/AcOH 95/5/0.2 버퍼 (30 분간, 100 mL/분의 유속) 중 15-45% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 2-(4-(메틸설포닐)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.200 g, 49.9 %)를 백색 고체로 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.85 - 1.91 (m, 1H), 2.18 - 2.29 (m, 2H), 2.35 - 2.41 (m, 1H), 2.98 (s, 3H), 3.00 - 3.13 (m, 1H), 3.38 - 3.44 (m, 1H), 3.67 (s, 3H), 4.13 - 4.19 (m, 1H), 5.20 (t, 1H), 5.47 (s, 1H), 7.34 (d, 2H), 7.83 (d, 2H). MS m/z 381 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-(4-( 메틸설포닐 ) 페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(4-(메틸설포닐)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.200 g, 3.16 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 레프로실 (250x50), 8 ㎛의 입자 크기, 이동상: EtOH, 유속 120 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(4-(메틸설포닐)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (536 mg, 45%)를, 키랄 순도 99.9 %ee, 광회전 [α]20 D = +59.5 (아세토니트릴, c=1)로 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.78 - 1.85 (m, 1H), 2.12 - 2.23 (m, 2H), 2.29 - 2.37 (m, 1H), 2.93 (s, 3H), 3.02 - 3.08 (m, 1H), 3.33 - 3.41 (m, 1H), 3.61 (s, 3H), 4.07 - 4.13 (m, 1H), 5.14 (t, 1H), 5.44 (s, 1H), 7.31 (d, 2H), 7.77 (d, 2H).
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(4-( 메틸설포닐 ) 페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(4-(메틸설포닐)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (536 mg, 1.41 mmol)를 수소 브롬화물 (AcOH 중 33%, 5 mL, 71.37 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 20 시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅲ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(4-(메틸설포닐)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (309 mg, 68 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.39 (q, 1H), 1.49 (dq, 1H), 1.87 - 1.93 (m, 1H), 2.01 (d, 1H), 2.76 (t, 1H), 2.87 - 2.94 (m, 1H), 3.11 - 3.19 (m, 1H), 3.17 (s, 3H), 3.80 (d, 1H), 5.74 (s, 1H), 7.64 (d, 2H), 7.85 (d, 2H). [C15H18N2O4S+H]+에 대한 HRMS 계산값 : 323.1065. 측정값: 323.1042.
실시예 39
5-((트랜스-2-(4-( 메틸설포닐 ) 페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(4-( 메틸설포닐 ) 페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(4-(메틸설포닐)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (505 mg, 1.23 mmol) (실시예 38, 단계 1)를 MeOH (5 mL)에 현탁시킨 후, -40℃로 냉각시켰다. 물 중의 3.8 M 수산화나트륨 (0.323 mL, 1.23 mmol)을 첨가하였다. 20 분 후, 히드록실아민 (물 중 50 %, 0.075 mL, 1.23 mmol)을 첨가하고 교반을 -40℃에서 3 시간 동안 지속하였다. 이후, 상기 반응 혼합물을 미리 가온한 80℃의 6 M 염화수소의 용액 (6.14 mL, 36.82 mmol)에 첨가한 후 20 분간 교반하였다. 용매를 진공 속에서 증발시켰다. DCM (50 mL)과 물 (50 mL)을 첨가하고 흔들어서 상들을 분리시켰다. 상기 유기상을 상 분리기로 건조시킨 후 진공 속에서 증발시켰다. 잔류물을 H2O/MeCN/AcOH 95/5/0.2 버퍼 (25 분간, 19 mL/분의 유속) 중의 15-40% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x20 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 트랜스-메틸 2-(4-(메틸설포닐)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (301 mg, 64.5 %)를 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.61 - 1.73 (m, 1H), 1.91 - 1.99 (m, 1H), 2.05 - 2.14 (m, 1H), 2.66 - 2.82 (m, 2H), 2.91 (t, 1H), 3.05 (s, 3H), 3.77 (s, 3H), 4.12 - 4.46 (m, 1H), 5.60 - 5.80 (m, 2H), 7.44 (d, 2H), 7.95 (d, 2H). MS m/z 381 (M+H)+
단계 2: 5-(트랜스-2-(4-( 메틸설포닐 ) 페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
트랜스-메틸 2-(4-(메틸설포닐)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (301 mg, 0.79 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 2 mL, 28.55 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 20 시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-(트랜스-2-(4-(메틸설포닐)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (119 mg, 47 %)을 수득하였다. [C15H18N2O4S+H]+에 대한 HRMS 계산값: 323.1065. 측정값: 323.1054.
실시예 40
5-((2R,4S)-2-(6-( 트리플루오로메틸 )피리딘-3-일)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(6-( 트리플루오로 메틸)피리딘-3-일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(6-( 트리플루오로 - 메틸 )피리딘-3-일)피페리딘-1- 카복실레이트
1-(메톡시카보닐)-2-(6-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)피페리딘-4-카복실산 (2.5 g, 3.76 mmol) (참조 화합물 17)을 메틸 THF (80 mL)에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (1.098 g, 6.77 mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 질소 하, 실온에서 3 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (1.153 g, 6.77 mmol)를 메틸 THF (80 mL)에 현탁시킨 후, 염화마그네슘 (0.645 g, 6.77 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 큰 자성 교반 막대를 이용하여 질소 하, 50℃에서 3 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 3 시간 후, 플라스크 1의 내용물을 플라스크 2로 옮겨 담았다. 이렇게 해서 생성된 백색 현탁액을 질소 하, 실온에서 밤새 교반하였다. 상기 혼합물을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화한 후, MTBE (50 mL)와 물 (50 mL)을 첨가하였다. 상기 상들을 분리한 후 상기 유기층을 물, 포화 NaHCO3 및 식염수로 세척하였다. 상기 유기층을 Na2SO4로 건조한 후, 여과하고 증발시켜 옅은 황색의 오일을 수득하였다. 상기 생성물에 대해 바이오타지 (340g) [n-헵탄 중 20 % EtOAc (1 CV) 이후 20-60% EtOAc (8 CV)의 농도구배를 사용] 상에서 섬광 크로마토그래피를 수행하였다. 트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(6-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)피페리딘-1-카복실레이트 (70 mg, 5 %) 및 시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(6-(트리플루오로-메틸)피리딘-3-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.085 g, 72 %)를 분리하였다. 시스-이성질체: MS m/z 403 (M+H)+. 트랜스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.18 - 1.31 (m, 3H), 1.53 - 1.72 (m, 1H), 1.82 - 1.93 (m, 1H), 2.00 - 2.13 (m, 1H), 2.49 - 2.69 (m, 2H), 2.82 (dt, 1H), 3.46 (d, 2H), 3.76 (s, 3H), 4.10 - 4.40 (m, 3H), 5.72 (s, br., 1H), 7.64 - 7.77 (m, 2H), 8.63 (s, 1H). MS m/z 403 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2-(6-( 트리플루오로메틸 )피리딘-3-일)-피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(6-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.085 g, 2.70 mmol)를 MeOH (12 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -45℃로 냉각하였다. 수산화나트륨 (0.793 mL, 2.70 mmol)을 10 분 동안 첨가한 후, 상기 황색 용액을 -45℃에서 20 분간 계속 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.165 mL, 2.70 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -45℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (13.89 mL, 83.32 mmol)에 신속하게 붓고, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 DCM/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 백색 고체를 수득하였다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/AcOH 95/5/0.2 버퍼 (30 분간, 100 mL/분의 유속) 중의 10-60% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(6-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)피페리딘-1-카복실레이트 (160 mg, 16 %)를 분리하였다. MS m/z 372 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2-(6-( 트리플루오로메틸 )피리딘-3-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(6-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)피페리딘-1-카복실레이트 (160 mg, 0.43 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: CelluCoat (250x50 mm), 10 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH 50/50, 유속 120 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(6-(트리플루오로-메틸)피리딘-3-일)피페리딘-1-카복실레이트 (74.5 mg, 47 %)를, 키랄 순도 99.9 %ee, 광회전 [α]20 D = +32.0 (아세토니트릴, c=0.1)로 수득하였다.
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(6-( 트리플루오로메틸 )피리딘-3-일)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(6-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-피페리딘-1-카복실레이트 (74.5 mg, 0.20 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 1.58 mL, 9.03 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(6-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (43 mg, 68 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.36 - 1.53 (m, 2H), 1.89 (d, 1H), 2.04 (d, 1H), 2.70 - 2.78 (m, 1H), 2.90 (tt, 1H), 3.09 - 3.16 (m, 1H), 3.83 (d, 1H), 5.75 (s, 1H), 7.84 (d, 1H), 8.04 (dd, 1H), 8.75 (d, 1H). [C14H14F3N3O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 314.1116. 측정값: 314.1134
실시예 41
5-(트랜스-2-(6-( 트리플루오로메틸 )피리딘-3-일)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2-(6-( 트리플루오로메틸 )피리딘-3-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(6-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)피페리딘-1-카복실레이트 (70 mg, 0.17 mmol) (실시예 40, 단계 1)를 MeOH (1 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -45℃로 냉각하였다. 수산화나트륨 (0.051 mL, 0.17 mmol)을 10 분 동안 첨가하고 상기 황색 용액을 -45℃에서 20 분간 계속 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 10.66 μL, 0.17 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -45℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (0.896 mL, 5.38 mmol)에 신속하게 붓고, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 DCM/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 미정제 트랜스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(6-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)피페리딘-1-카복실레이트 (60 mg, 정량 분석)를 옅은 황색의 오일로서 수득하였다. MS m/z 372 (M+H)+
단계 2: 5-(트랜스-2-(6-( 트리플루오로메틸 )피리딘-3-일)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온
트랜스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(6-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)-피페리딘-1-카복실레이트 (60 mg, 0.16 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 1.27 mL, 7.27 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-(트랜스-2-(6-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (11.4 mg, 23 %)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, dmso) δ1.77 - 1.99 (m, 3H), 2.06 - 2.16 (m, 1H), 2.69 - 2.80 (m, 1H), 2.83 - 2.94 (m, 1H), 3.07 - 3.59 (m, 1H), 3.94 (d, 1H), 6.03 (s, 1H), 7.86 (d, 1H), 8.08 (d, 1H), 8.78 (s, 1H). [C14H14F3N3O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 314.1116. 측정값: 314.1122
실시예 42
5-((2R,4S)-2-(5- tert - 부틸티오펜 -2-일)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 시스 - 메틸 2-(5- tert - 부틸티오펜 -2-일)-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )피페리딘-1- 카복실레이트
2-(5-tert-부틸티오펜-2-일)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (1.125 g, 3.46 mmol) (참조 화합물 18)을 THF (30 mL)에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (0.911 g, 5.62 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 질소 하, 실온에서 6 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 3-에톡시-3-옥소프로판산, 칼륨염 (1.509 g, 8.82 mmol) 및 염화마그네슘 (0.84 g, 8.82 mmol)을 THF (30 mL)에 현탁시킨 후, 특대의 교반 막대를 사용하여 질소 하, 50℃에서 20 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 플라스크 2의 백색 현탁액을 플라스크 1에 첨가하였다. 상기 걸쭉한 백색의 현탁액을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 3 M HCl을 첨가하여 상기 반응 혼합물을 pH 1로 산성화하였다. 용매를 진공 속에서 증발시켰다. MTBE (250 mL)와 물을 첨가하고 흔들어서 상들을 분리시켰다. 상기 유기상을 물 (200 mL), 포화 NaHCO3 (200 mL), 식염수 (200 mL)로 세척하고, 상 분리기로 건조시킨 후 진공 속에서 증발시켰다. 잔류물을 바이오타지? KP-SIL 100g 컬럼 상에서 자동화 섬광 크로마토그래피로 정제하였다. 헵탄 중 10 % EtOAc (2 CV) 이후 헵탄 중 10 % 내지 40 %의 EtOAc (9 CV)의 농도구배를 이동상으로 사용하였다. 시스-메틸 2-(5-tert-부틸티오펜-2-일)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.963 g, 70.4 %)를 분리하였다. 시스-이성질체: MS m/z 396 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 2-(5- tert - 부틸티오펜 -2-일)-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(5-tert-부틸티오펜-2-일)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (963 mg, 2.43 mmol)를 메탄올 (15 mL)에 용해시킨 후, -40℃로 냉각시켰다. 물 (1 mL)에 용해된 NaOH (0.641 mL, 2.43 mmol)를 첨가하고 20 분간 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.149 mL, 2.43 mmol)을 첨가하고 상기 반응물을 -40℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 이후, 상기 반응 혼합물을 미리 가온한 80℃의 6 M HCl (12.58 mL, 75.48 mmol)의 용액에 첨가하고 20 분간 교반하였다. 용매를 진공 속에서 증발시켰다. DCM (150 mL)과 물 (150 mL)을 첨가하고 흔들어서 상들을 분리시켰다. 상기 수상을 DCM (150 mL)으로 추출하였다. 상기 혼합된 유기상을 상 분리기로 건조시킨 후 진공 속에서 증발시켰다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/AcOH 95/5/0.2 버퍼 (25 분간, 100 mL/분의 유속) 중의 35-75% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 2-(5-tert-부틸티오펜-2-일)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (436 mg, 49.1 %)를 백색 고체로 분리하였다. MS m/z 363 (M-H)-
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-(5- tert - 부틸티오펜 -2-일)-4-(3-옥소-2,3- 디히드 로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 (2S,4R)- 메틸 2-(5- tert - 부틸티오펜 -2-일)-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(5-tert-부틸티오펜-2-일)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (436 mg, 1.2 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: CelluCoat (250x20 mm), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH 80/20, 유속 18 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(5-tert-부틸티오펜-2-일)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (212 mg, 49 %)를, 키랄 순도 98.7 %ee, 광회전 [α]20 D = +3.0 (아세토니트릴, c=1.0)으로, 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.34 (s, 9H), 1.55 - 1.68 (m, 1H), 1.90 - 2.04 (m, 2H), 2.49 (d, 1H), 3.12 (s, br., 2H), 3.76 (s, 3H), 4.19 (d, br., 1H), 5.60 - 5.87 (m, 2H), 6.59 - 6.69 (m, 2H), 그리고 (2S,4R)-메틸 2-(5-tert-부틸티오펜-2-일)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (210 mg, 48 %)를, 키랄 순도 99.3 %ee, 광회전 [α]20 D = -1.1 (아세토니트릴, c=1.0)로 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.33 (s, 9H), 1.54 - 1.66 (m, 1H), 1.88 - 2.03 (m, 2H), 2.48 (d, 1H), 3.11 (s, br., 2H), 3.74 (s, 3H), 4.17 (d, br., 1H), 5.58 - 5.85 (m, 2H), 6.58 - 6.67 (m, 2H).
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(5- tert - 부틸티오펜 -2-일)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(5-tert-부틸티오펜-2-일)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (50 mg, 0.14 mmol)를 브롬화수소산 (아세트산 중 33 %, 1 mL, 6.08 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 24 시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 속에서 증발시켜 잔류물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (25 분간, 19 mL/분의 유속) 중의 10-50% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x19 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 5-((2R,4S)-2-(5-tert-부틸티오펜-2-일)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (4.00 mg, 9.52 %)을 백색 고체로 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ1.36 (s, 9H), 1.99 - 2.17 (m, 2H), 2.20 - 2.31 (m, 1H), 2.36 - 2.44 (m, 1H), 3.05 - 3.21 (m, 2H), 3.28 - 3.37 (m, 1H), 4.37 (dd, 1H), 5.70 (d, 1H), 6.77 (d, 1H), 6.93 (d, 1H). [C16H22N2O2S+H]+에 대한 HRMS 계산값: 307.1480. 측정값: 307.1502
실시예 43
5-((2S,4R)-2-(5- tert - 부틸티오펜 -2-일)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4R)-메틸 2-(5-tert-부틸티오펜-2-일)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (50 mg, 0.14 mmol) (실시예 42, 단계 3)를 브롬화수소산 (AcOH 중 33%, 1 mL, 6.08 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 20 시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 속에서 증발시켰다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (25 분간, 19 mL/분의 유속) 중의 10-50% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x19 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 5-((2S,4R)-2-(5-tert-부틸티오펜-2-일)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (7.00 mg, 16.65 %)을 백색 고체로 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ1.36 (s, 9H), 2.03 - 2.12 (m, 1H), 2.12 - 2.19 (m, 1H), 2.26 - 2.33 (m, 1H), 2.40 - 2.46 (m, 1H), 3.09 - 3.17 (m, 1H), 3.18 - 3.24 (m, 1H), 3.34 - 3.40 (m, 1H), 4.38 - 4.44 (m, 1H), 5.75 (s, 1H), 6.78 (d, 1H), 6.96 (d, 1H).
실시예 44
5-((2R,4S)-2-(2,4- 디플루오로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 시스 - 메틸 2-(2,4- 디플루오로페닐 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )피페리딘-1- 카복실레이트
2-(2,4-디플루오로페닐)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (2.20 g, 7.35 mmol) (참조 화합물 19)을 메틸 THF (70 mL)에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (2.146 g, 13.23 mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 질소 하, 실온에서 5 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (2.252 g, 13.23 mmol)를 메틸 THF (70.0 mL) 중에 현탁시킨 후, 염화마그네슘 (1.260 g, 13.23 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 큰 자성 교반 막대를 이용하여 질소 하, 50℃에서 5 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 3 시간 후, 플라스크 1의 내용물을 플라스크 2로 옮겨 담았다. 이렇게 해서 생성된 백색 현탁액을 질소 하, 실온에서 밤새 교반하였다. 상기 혼합물을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화한 후, MTBE (50 mL)와 물 (50 mL)을 첨가하였다. 상기 상들을 분리한 후 상기 유기층을 물, 포화 NaHCO3 및 식염수로 세척하였다. 상기 유기층을 Na2SO4로 건조하고 여과한 후 증발시켜 옅은 황색의 오일을 수득하였다. 상기 생성물에 대해 바이오타지 (340g) [헵탄 중 EtOAc (20%) (1 CV) 이후 n-헵탄 중 20-60% EtOAc (8 CV)의 농도구배를 사용] 상에서 섬광 크로마토그래피를 수행하였다. 상기 컬럼을 -n-헵탄 중 20% EtOAc (1 CV)로 컨디셔닝하였다. 시스-메틸 2-(2,4-디플루오로페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (870 mg, 32 %)를 분리하였다. MS m/z 370 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 2-(2,4- 디플루오로페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(2,4-디플루오로페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (870 mg, 2.36 mmol)를 MeOH (9 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -45℃로 냉각하였다. 수산화나트륨 (0.693 mL, 2.36 mmol)을 10 분 동안 첨가하고 상기 황색 용액을 -45℃에서 20 분간 계속 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.144 mL, 2.36 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -45℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (12.13 mL, 72.78 mmol)에 신속하게 붓고, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 계속 교반하였다. 용매를 증발시킨 후 DCM/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 백색 고체를 수득하였다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/AcOH 95/5/0.2 버퍼 (30 분간, 100 mL/분의 유속) 중의 10-60% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 2-(2,4-디플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (397 mg, 49 %)를 분리하였다 . MS m/z 339 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-(2,4- 디플루오로페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(2,4-디플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (397 mg, 1.17 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: CelluCoat (250x50 mm), 10 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH 60/40, 유속 120 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(2,4-디플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (187 mg, 47 %)를, 키랄 순도 99.1 %ee, 광회전 [α]20 D = +65.0 (아세토니트릴, c=0.5)으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.82 - 1.92 (m, 1H), 2.02 - 2.14 (m, 1H), 2.23 - 2.40 (m, 2H), 3.01 - 3.13 (m, 1H), 3.44 - 3.55 (m, 1H), 3.63 (s, 3H), 4.11 - 4.21 (m, 1H), 5.16 (dd, 1H), 5.61 (s, 1H), 6.74 - 6.83 (m, 2H), 7.06 - 7.15 (m, 1H).
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(2,4- 디플루오로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(2,4-디플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (187 mg, 0.55 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 4.36 mL, 24.87 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(2,4-디플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (93 mg, 60 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.36 (q, 1H), 1.46 (dq, 1H), 1.83 - 1.89 (m, 1H), 1.90 - 1.95 (m, 1H), 2.72 (dt, 1H), 2.89 (tt, 1H), 3.06 - 3.12 (m, 1H), 3.89 (dd, 1H), 5.73 (s, 1H), 7.03 (dt, 1H), 7.11 - 7.17 (m, 1H), 7.52 - 7.59 (m, 1H). [C14H14F2N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 281.1101. 측정값: 281.1106
실시예 45
5-((2R,4S)-2-(4- 클로로 -2- 플루오로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(4- 클로로 -2- 플루오로페닐 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프 로파노일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 2-(4- 클로로 -2- 플루오로페닐 )-4-(3-에톡시-3- 옥소프로파노일 )-피페리딘-1- 카복실레이트
2-(4-클로로-2-플루오로페닐)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (6.49 g, 20.56 mmol) (참조 화합물 20)을 메틸 THF (250 mL)에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (5.00 g, 30.83 mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 질소 하, 실온에서 3 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (6.30 g, 37.00 mmol)를 메틸 THF (250 mL)에 현탁시킨 후, 염화마그네슘 (3.52 g, 37.00 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 큰 자성 교반 막대를 이용하여 질소 하, 50℃에서 3 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 3 시간 후, 플라스크 1의 내용물을 플라스크 2로 옮겨 담았다. 이렇게 해서 생성된 백색 현탁액을 질소 하, 실온에서 밤새 교반하였다. 상기 혼합물을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화한 후, MTBE (50 mL)와 물 (50 mL)을 첨가하였다. 상기 상들을 분리한 후 상기 유기층을 물, 포화 NaHCO3 및 식염수로 세척하였다. 상기 유기층을 Na2SO4로 건조하고 여과한 후 증발시켜 옅은 황색의 오일을 수득하였다. 상기 생성물에 대해 바이오타지 (340g) [헵탄 중 EtOAc (20%) (1 CV) 이후 -n-헵탄 중 20-60% EtOAc (8 CV)의 농도구배를 사용] 상에서 섬광 크로마토그래피를 수행하였다. 상기 컬럼을 -n-헵탄 중 20% EtOAc (1 CV)로 컨디셔닝하였다. 트랜스-메틸 2-(4-클로로-2-플루오로페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.5 g, 6 %) 및 시스-메틸 2-(4-클로로-2-플루오로페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (2.31 g, 29 %)를 분리하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.27 (t, 3H), 1.79 - 1.99 (m, 2H), 2.03 - 2.21 (m, 1H), 2.23 - 2.32 (m, 1H), 2.84 - 2.95 (m, 1H), 3.33 - 3.51 (m, 3H), 3.62 (s, 3H), 4.12 - 4.23 (m, 3H), 4.98 - 5.21 (m, 1H), 6.98 - 7.24 (m, 3H). MS m/z 386 (M+H)+. 트랜스-이성질체:1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.22 (t, 3H), 1.57 - 1.69 (m, 1H), 1.86 - 2.01 (m, 2H), 2.36 - 2.62 (m, 2H), 3.07 - 3.18 (m, 1H), 3.44 (s, 2H), 3.70 (s, 3H), 4.10 - 4.21 (m, 2H), 4.32 (br, 1H), 5.67 (br, 1H), 7.02 - 7.14 (m, 3H). MS m/z 386 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 2-(4- 클로로 -2- 플루오로페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(4-클로로-2-플루오로페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (2.31 g, 5.99 mmol)를 MeOH (24 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 수산화나트륨 (1.761 mL, 5.99 mmol)을 10 분 동안 첨가하고 이 황색 오일을 -40℃에서 20 분간 계속 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.367 mL, 5.99 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (30.8 mL, 185.01 mmol)에 신속하게 붓고, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 계속 교반하였다. 용매를 증발시킨 후 DCM/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 담황색 고체를 수득하였다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (30 분간, 100 mL/분의 유속) 중의 10-55% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 이후, 시스-메틸 2-(4-클로로-2-플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1 g, 47 %)를 분리하였다. MS m/z 355 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-(4- 클로로 -2- 플루오로페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(4-클로로-2-플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1g, 2.82 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: CelluCoat (250x50), 10 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/IPA 50/50, 유속 120 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(4-클로로-2-플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-피페리딘-1-카복실레이트 (504 mg, 50 %)를, 키랄 순도 99.7 %ee. 광회전 [α]20 D = +65.5 (아세토니트릴, c=1)로 수득하였다.
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(4- 클로로 -2- 플루오로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(4-클로로-2-플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.504 g, 1.42 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 11.20 mL, 63.93 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(4-클로로-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (313 mg, 74 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.35 (q, 1H), 1.46 (dq, 1H), 1.86 (d, 1H), 1.94 (d, 1H), 2.73 (dt, 1H), 2.90 (tt, 1H), 3.10 (td, 1H), 3.91 (d, 1H), 5.73 (s, 1H), 7.25 (dd, 1H), 7.34 (dd, 1H), 7.55 (t, 1H). [C14H14ClFN2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 297.0806. 측정값: 297.0786.
실시예 46
5-(트랜스-2-(4- 클로로 -2- 플루오로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(4- 클로로 -2- 플루오로페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 2-(4-클로로-2-플루오로페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (500 mg, 1.30 mmol) (실시예 45, 단계 1)를 MeOH (6 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 수산화나트륨 (0.381 mL, 1.30 mmol)을 10 분 동안 첨가하고 이 황색 오일을 -40℃에서 20 분간 계속 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.079 mL, 1.30 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (6.67 mL, 40.05 mmol)에 신속하게 붓고, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 DCM/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 미정제 트랜스-메틸 2-(4-클로로-2-플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.45 g, 98 %)를 옅은 황색의 무수막으로서 수득하였다. MS m/z 355 (M+H)+
단계 2: 5-(트랜스-2-(4- 클로로 -2- 플루오로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4S)-메틸 2-(4-클로로-2-플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.45 g, 1.27 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 10.00 mL, 57.08 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-(트랜스-2-(4-클로로-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (82 mg, 22 %)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, dmso) δ1.66 - 1.77 (m, 1H), 1.77 - 1.90 (m, 1H), 1.92 - 2.00 (m, 1H), 2.02 - 2.10 (m, 1H), 2.63 - 2.79 (m, 1H), 2.88 - 2.97 (m, 1H), 3.03 - 3.86 (신호 누락), 3.95 (d, 1H), 5.88 (s, 1H), 7.27 (dd, 1H), 7.35 (dd, 1H), 7.56 (t, 1H). [C14H14ClFN2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 297.0806. 측정값: 297.0806.
실시예 47
5-((2R,4S)-2-(2- 클로로 -4- 플루오로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 메틸 2-(2- 클로로 -4- 플루오로페닐 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )피페리딘-1- 카복실레이트
2-(2-클로로-4-플루오로페닐)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (2.13 g, 6.75 mmol) (참조 화합물 21)을 질소 대기 하에서 메틸 THF (50 mL)에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (1.641 g, 10.12 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (2.067 g, 12.14 mmol)를 메틸 THF (25 mL) 중에 현탁시킨 후, 염화마그네슘 (1.156 g, 12.14 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 특대의 교반 막대를 사용하여 질소 하, 50℃에서 15 시간 동안 교반하였다. 플라스크 1의 내용물을 플라스크 2에 첨가하여 생성된 백색 현탁액을 실온에서 20 시간 동안 교반하였다. 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (1.033 g, 6.07 mmol)를 메틸 THF (25 mL) 중에 현탁시킨 후, 염화마그네슘 (0.578 g, 6.07 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 50℃에서 15 시간 동안 교반한 후, 상기 반응 혼합물에 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 15 시간 동안 교반하였다. 0.1 M HCl과 DCM을 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 수상을 DCM으로 추출하고, 상기 혼합된 유기상을 상 분리기를 통해 여과하고 증발시켰다. 잔류물을 바이오타지 (농도구배 2:1->1:1 헵탄:EtOAc, 바이오타지? KP-SIL 340g 컬럼, 10 CV)를 통해 정제하였다. 메틸 2-(2-클로로-4-플루오로페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.655 g, 63.6 %)를 무색의 오일로서 분리하였다. MS m/z 386 (M+H)+
단계 2: 메틸 2-(2- 클로로 -4- 플루오로페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
메틸 2-(2-클로로-4-플루오로페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.655 g, 4.29 mmol)를 MeOH (22 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (2.200 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.180 g, 4.50 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 -40℃에서 15 분간 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.276 mL, 4.50 mmol)을 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 1 시간 동안 교반하였다. 이후, 상기 혼합물을 피펫을 사용하여 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (22.16 mL, 132.98 mmol)에 옮겨 담고, 상기 혼합물을 80℃에서 15 분간 교반하였다. 물과 DCM을 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 수상을 DCM으로 추출한 후, 상기 혼합된 유기층을 상 분리기를 통해 여과하고 증발시켰다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/FA 95/5/0.2 버퍼 (25 분간, 100 mL/분의 유속) 중 15-55% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다 (3 회의 러닝). 메틸 2-(2-클로로-4-플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.995 g, 65.4 %)를 백색 고체로서 수득하였다. MS m/z 355 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-(2- 클로로 -4- 플루오로페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 트랜스- 메틸 2-(2- 클로로 -4-플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
메틸 2-(2-클로로-4-플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.995 g, 2.81 mmol)에 대해 키랄 크로마토그래피를 수행하였다. 분리 1: 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄팍 IA (250x50 mm), 20 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH 70/30, 유속 120 mL/분]. 분리 2: 키랄 분취형 HPLC [컬럼: CelluCoat (250x50 mm), 10 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH 90/10, 유속 120 mL/분]. (2R,4S)-메틸 2-(2-클로로-4-플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (382 mg, 38 %)를, 키랄 순도: 98.9 %ee. 광회전 [α]20 D = +71.2 (아세토니트릴, c=0.5)로 분리하였다. 트랜스-메틸 2-(2-클로로-4-플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트를 분리하였다 (130 mg, 13 %).
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(2- 클로로 -4- 플루오로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(2-클로로-4-플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (382 mg, 1.08 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 8.5 mL, 48.46 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 속에서 제거한 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(2-클로로-4-플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (304 mg, 95 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.24 (q, 1H), 1.47 (dq, 1H), 1.85 - 1.91 (m, 1H), 1.97 - 2.02 (m, 1H), 2.75 (dt, 1H), 2.87 (tt, 1H), 3.09 - 3.14 (m, 1H), 3.97 (d, 1H), 5.73 (d, 1H), 7.19 (dt, 1H), 7.37 (dd, 1H), 7.66 (dd, 1H). [C14H14ClFN2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 297.0806. 측정값: 297.0834
실시예 48
5-(트랜스-2-(2- 클로로 -4- 플루오로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
트랜스-메틸 2-(2-클로로-4-플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (130 mg, 0.37 mmol) (실시예 47, 단계 3)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 2.9 mL, 16.49 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 제거한 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-(트랜스-2-(2-클로로-4-플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (94 mg, 86 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.50 - 1.60 (m, 1H), 1.79 - 1.88 (m, 1H), 1.95 - 2.01 (m, 1H), 2.06 - 2.12 (m, 1H), 2.70 (t, 1H), 2.88 - 2.96 (m, 1H), 3.20 - 3.24 (m, 1H), 4.01 (d, 1H), 5.95 (d, 1H), 7.21 (dt, 1H), 7.37 (dd, 1H), 7.68 (dd, 1H). [C14H14ClFN2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 297.0806. 측정값: 297.0823
실시예 49
5-((2R,4S)-2-(4- 클로로 -3- 플루오로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(4- 클로로 -3- 플루오로페닐 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프 로파노일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 2-(4- 클로로 -3- 플루오로페닐 )-4-(3-에톡시-3- 옥소프로파노일 )-피페리딘-1- 카복실레이트
2-(4-클로로-3-플루오로페닐)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (1.430 g, 4.53 mmol) (참조 화합물 22)을 메틸 THF (20 mL)에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (1.102 g, 6.79 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응물을 실온에서 6 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (1.388 g, 8.15 mmol)를 메틸 THF (20.00 mL)에 현탁시킨 후, 염화마그네슘 (0.776 g, 8.15 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 50℃에서 6 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 플라스크 2의 백색 현탁액을 플라스크 1에 첨가하였다. 백색 현탁액을 형성시켰다. 상기 현탁액을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 상기 현탁액을 3 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화하였다. MTBE (100 mL)와 물 (150 mL)을 첨가하고 흔들어서 상들을 분리시켰다. 상기 유기상을 물 (150 mL), 포화 NaHCO3 (150 mL) 및 식염수 (150 mL)로 세척한 후, Na2SO4로 건조하고 여과한 후 진공 속에서 증발시켰다. 잔류물을 바이오타지? KP-SIL 100g 컬럼 상에서 자동화 섬광 크로마토그래피로 정제하였다. 헵탄 중 20% EtOAc (2 CV) 이후 헵탄 중 20-60 %의 EtOAc (10 CV)의 농도구배를 이동상으로 사용하였다. 시스-메틸 2-(4-클로로-3-플루오로페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.153 g, 66.0 %) 및 트랜스-메틸 2-(4-클로로-3-플루오로페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.107 g, 6.12 %)를 무색의 오일로서 수득하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.19 - 1.30 (m, 3H), 1.73 - 1.97 (m, 2H), 2.00 - 2.16 (m, 1H), 2.20 - 2.27 (m, 1H), 2.81 - 2.89 (m, 1H), 3.24 - 3.48 (m, 3H), 3.60 - 3.65 (m, 3H), 4.04 - 4.20 (m, 3H), 4.84 - 4.98 (m, 1H), 6.86 - 7.01 (m, 2H), 7.28 - 7.34 (m, 1H). MS m/z 386 (M+H)+. 트랜스-이성질체: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.19 - 1.29 (m, 3H), 1.38 - 2.98 (m, 6H), 3.39 - 3.49 (m, 2H), 3.63 - 3.82 (m, 3H), 4.00 - 4.37 (m, 3H), 5.56 (s, br., 1H), 6.86 - 7.02 (m, 2H), 7.33 - 7.39 (m, 1H). MS m/z 386 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 2-(4- 클로로 -3- 플루오로페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(4-클로로-3-플루오로페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.731 g, 4.49 mmol)를 MeOH (20 mL)에 용해시키고 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (2 mL)에 용해된 수산화나트륨 (1.181 mL, 4.49 mmol)을 첨가하고 상기 반응물을 -40℃에서 20 분간 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.247 mL, 4.49 mmol)을 적가하고 교반을 3 시간 동안 지속하였다. 이후, 상기 혼합물을 미리 가온시킨 80℃의 6 M 염화수소의 용액 (23.18 mL, 139.09 mmol)에 옮겨 담은 후, 교반을 80℃에서 20 분간 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 DCM (200 mL)과 물 (200 mL)을 첨가하였다. 상기 상들을 흔들어 분리하고, 유기상을 상 분리기로 건조시킨 후 진공 속에서 증발시켰다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/AcOH 95/5/0.2 버퍼 (30 분간, 100 mL/분의 유속) 중 10-60% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 2-(4-클로로-3-플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-피페리딘-1-카복실레이트 (0.921 g, 57.9 %)를 백색 고체로 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.79 - 1.87 (m, 1H), 2.06 - 2.15 (m, 1H), 2.19 - 2.28 (m, 1H), 2.30 - 2.37 (m, 1H), 3.00 - 3.09 (m, 1H), 3.31 - 3.40 (m, 1H), 3.66 (s, 3H), 4.07 - 4.16 (m, 1H), 5.00 - 5.07 (m, 1H), 5.56 (s, 1H), 6.87 - 6.91 (m, 1H), 6.95 (dd, 1H), 7.29 (t, 1H). MS m/z 355 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-(4- 클로로 -3- 플루오로페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(4-클로로-3-플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.921 g, 2.6 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: CelluCoat (250x50 mm), 10 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH 1/1, 유속 120 mL/분]로 정제하여 (2R,4S)-메틸 2-(4-클로로-3-플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (446 mg, 48 %)를 수득하였다. 키랄 순도 99.9 %ee, 광회전 [α]20 D = +61.8 (아세토니트릴, c=0.5).
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(4- 클로로 -3- 플루오로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(4-클로로-3-플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (446 mg, 1.26 mmol)를 수소 브롬화물 (AcOH 중 33%, 6.8 mL, 38.97 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 20 시간 동안 교반하였다. 이후, 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(4-클로로-3-플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (266 mg, 71 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.31 (q, 1H), 1.44 (dq, 1H), 1.82 - 1.89 (m, 1H), 1.94 - 2.00 (m, 1H), 2.70 (dt, 1H), 2.84 (tt, 1H), 3.06 - 3.12 (m, 1H), 3.66 (dd, 1H), 5.72 (s, 1H), 7.23 (dd, 1H), 7.38 (dd, 1H), 7.49 (t, 1H). HRMS 계산값 [C14H14ClFN2O2+H]+: 297.0806. 측정값: 297.0795
실시예 50
5-(트랜스-2-(4- 클로로 -3- 플루오로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(4- 클로로 -3- 플루오로페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 2-(4-클로로-3-플루오로페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (171 mg, 0.44 mmol) (실시예 49, 단계 1)를 MeOH (2 mL)에 용해시킨 후, -40℃로 냉각시켰다. 물 (0.200 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.117 mL, 0.44 mmol)을 적가하고 이 용액을 20 분간 교반하였다. 이후, 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.024 mL, 0.44 mmol)을 첨가한 후, 교반을 3.5 시간 동안 지속하였다. 이후, 상기 혼합물을 미리 가온시킨 80℃의 6 M 염화수소의 용액 (2.290 mL, 13.74 mmol)에 옮겨 담고, 교반을 80℃에서 20 분간 지속하였다. 용매를 진공 속에서 증발시켜 DCM (50 mL)과 물 (50 mL)을 첨가하였다. 상기 상들을 흔들어 분리하고, 유기상을 상 분리기로 건조시킨 후 진공 속에서 증발시켰다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/AcOH 95/5/0.2 버퍼 (30 분간, 19 mL/분의 유속) 중 10-60% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x20 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. (2S,4S)-메틸 2-(4-클로로-3-플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (49.0 mg, 31.2 %)를 백색 고체로 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.58 - 1.70 (m, 1H), 1.85 - 2.06 (m, 2H), 2.60 (d, 1H), 2.73 - 2.96 (m, 2H), 3.73 (s, 3H), 4.04 - 4.44 (m, 1H), 5.42 - 5.78 (m, 2H), 6.92 - 7.05 (m, 2H), 7.38 (t, 1H). MS m/z 355 (M+H)+
단계 2: 5-(트랜스-2-(4- 클로로 -3- 플루오로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
트랜스-메틸 2-(4-클로로-3-플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (49 mg, 0.14 mmol)를 수소 브롬화물 (AcOH 중 33%, 2 mL, 11.42 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 5 시간 동안 교반하였다. 상기 반응물을 50℃로 3 시간 동안 가열하였다. 상기 반응 혼합물을 진공 속에서 증발시켜 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-(트랜스-2-(4-클로로-3-플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (23 mg, 56 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.72 - 1.81 (m, 2H), 1.82 - 1.89 (m, 1H), 1.97 - 2.04 (m, 1H), 2.64 - 2.71 (m, 1H), 2.77 - 2.83 (m, 1H), 3.06 - 3.12 (m, 1H), 3.72 (dd, 1H), 5.96 (s, 1H), 7.23 (dd, 1H), 7.40 (dd, 1H), 7.49 (t, 1H). [C14H14ClFN2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값 : 297.0806. 측정값: 297.0807
실시예 51
5-((2R,4S)-2-(2,4- 디클로로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 메틸 2-(2,4- 디클로로페닐 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )피페리딘-1- 카복실레이트
2-(2,4-디클로로페닐)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (2.44 g, 7.35 mmol) (참조 화합물 23)을 메틸 THF (36.7 mL)에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (1.787 g, 11.02 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 질소 하, 실온에서 6 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (2.250 g, 13.22 mmol)를 메틸 THF (36.7 mL)에 현탁시킨 후, 염화마그네슘 (1.259 g, 13.22 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 질소 하에 6 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 이후, 플라스크 2의 백색 현탁액을 플라스크 1의 갈색 현탁액에 첨가하였다. 생성된 현탁액을 실온에서 40 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 3 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화하였다. 물과 메틸 THF를 첨가하고, 상들을 분리시켰다. 상기 유기층을 물, 포화 NaHCO3, 식염수로 세척한 후, MgSO4로 건조하고 여과시킨 후 증발시켰다. 헵탄 중 20% EtOAc -> 50% EtOAc (10 CV), 50% (3 CV)를 사용한 섬광 크로마토그래피로 정제하였다. EtOAc 중 20% EtOAc -> 30% EtOAc (12 CV)를 사용한 섬광 크로마토그래피로 재정제하였다. 메틸 2-(2,4-디클로로페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.55g, 52 %)를 분리하였다.
단계 2: 메틸 2-(2,4- 디클로로페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
메틸 2-(2,4-디클로로페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.55 g, 3.85 mmol)를 MeOH (15.79 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (1.579 mL) 중의 수산화나트륨 (1.014 mL, 3.85 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 -40℃에서 20 분간 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.236 mL, 3.85 mmol)을 첨가하고 교반을 -40℃에서 3.5 시간 동안 지속하였다. 이후, 상기 반응 혼합물을 미리 가온시킨 80℃의 6 M 염화수소의 용액 (19.91 mL, 119.45 mmol)에 옮겨 담고, 20 분간 가열을 지속하였다. 이후, 용매를 증발시켰다. DCM과 물을 첨가하고 흔들어서 상들을 분리시켰다. 상기 유기상을 상 분리기로 건조시킨 후 진공 속에서 증발시켰다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/AcOH 95/5/0.2 버퍼 (30 분간, 100 mL/분의 유속) 중의 25-65% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 메틸 2-(2,4-디클로로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.870 g, 60.8 %)를 백색 고체로 분리하였다. MS m/z 371 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-(2,4- 디클로로페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트 , (2S,4R)- 메틸 2-(2,4- 디클로로페닐 )-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트, (2S,4S)-메틸 2-(2,4- 디클로로페닐 )-4-(3-옥소-2,3-디히드로-이소옥사졸-5-일)피페리딘-1- 카 복실레이트 및 (2R,4R)- 메틸 2-(2,4- 디클로로페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
메틸 2-(2,4-디클로로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.870 g, 2.34 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC를 수행하였다: 분리 1: 거울상 이성질체를 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 레프로실 (250x50 mm), 8 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH/FA 60/40/0.1, 유속 120 mL/분]를 사용하여 분리해, 하나의 시스-거울상 이성질체와 하나의 트랜스-거울상 이성질체의 혼합물을 수득하였다. 분리 2: 거울상 이성질체를 키랄 분취형 HPLC [컬럼: CelluCoat (250x20 mm), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/IPA/FA 80/20/0.1, 유속 18 mL/분]를 사용하여 분리하였다. (2R,4S)-메틸 2-(2,4-디클로로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (334 mg, 38 %)를 분리하였다. 키랄 순도 99.7 %de, 광회전 [α]20 D = +64.0 (아세토니트릴, c=1.0), 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.79 - 1.92 (m, 2H), 2.25 - 2.48 (m, 2H), 3.02 - 3.13 (m, 1H), 3.53 - 3.64 (m, 4H), 4.12 - 4.21 (m, 1H), 5.16 (dd, 1H), 5.64 (s, 1H), 7.12 - 7.22 (m, 2H), 7.36 (d, 1H). (2S,4R)-메틸 2-(2,4-디클로로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (340 mg, 39 %)를 분리하였다. 키랄 순도 99.9 %de, 광회전 [α]20 D = -65.1 (아세토니트릴, c=1.0), 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.79 - 1.92 (m, 2H), 2.26 - 2.38 (m, 1H), 2.39 - 2.48 (m, 1H), 3.03 - 3.13 (m, 1H), 3.53 - 3.64 (m, 4H), 4.12 - 4.22 (m, 1H), 5.16 (dd, 1H), 5.64 (s, 1H), 7.13 - 7.22 (m, 2H), 7.36 (d, 1H). (2S,4S)-메틸 2-(2,4-디클로로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (67 mg, 8%)를 분리하였다. 키랄 순도 98.7 %de, 광회전 [α]20 D = +11.5 (아세토니트릴, c=1.0), 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.72 (dq, 1H), 2.01 - 2.19 (m, 2H), 2.40 - 2.49 (m, 1H), 2.74 (tt, 1H), 3.43 (dt, 1H), 3.66 (s, 3H), 4.40 (d, br., 1H), 5.61 - 5.71 (m, 2H), 7.14 - 7.24 (m, 2H), 7.40 (d, 1H). (2R,4R)-메틸 2-(2,4-디클로로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (75 mg, 9 %)를 분리하였다. 키랄 순도 98.5 %de, 광회전 [α]20 D = -10.9 (아세토니트릴, c=1.0), 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.72 (dq, 1H), 2.01 - 2.19 (m, 2H), 2.40 - 2.49 (m, 1H), 2.74 (tt, 1H), 3.43 (dt, 1H), 3.68 (s, 3H), 4.40 (d, br., 1H), 5.61 - 5.71 (m, 2H), 7.14 - 7.24 (m, 2H), 7.41 (d, 1H).
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(2,4- 디클로로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(2,4-디클로로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (334mg, 0.90 mmol)를 수소 브롬화물 (AcOH 중 33%, 4.7 mL, 26.99 mmol)로 희석한 후, 주위 온도에서 24 시간 동안 교반하였다. 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(2,4-디클로로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (173 mg, 61 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.22 (q, 1H), 1.47 (dq, 1H), 1.85 - 1.90 (m, 1H), 1.97 - 2.02 (m, 1H), 2.74 (dt, 1H), 2.87 (tt, 1H), 3.09 - 3.14 (m, 1H), 3.96 (dd, 1H), 5.73 (d, 1H), 7.40 (dd, 1H), 7.54 (d, 1H), 7.64 (d, 1H). [C14H14Cl2N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 313.0511. 측정값: 313.0493
실시예 52
5-((2S,4R)-2-(2,4- 디클로로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4R)-메틸 2-(2,4-디클로로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (340mg, 0.92 mmol) (실시예 51, 단계 3)를 수소 브롬화물 (AcOH 중 33%, 4812 μL, 27.48 mmol)로 희석한 후, 주위 온도에서 24 시간 동안 교반하였다. 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2S,4R)-2-(2,4-디클로로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 ()을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.22 (q, 1H), 1.47 (dq, 1H), 1.84 - 1.90 (m, 1H), 1.96 - 2.03 (m, 1H), 2.74 (dt, 1H), 2.87 (tt, 1H), 3.07 - 3.15 (m, 1H), 3.96 (dd, 1H), 5.73 (s, 1H), 7.40 (dd, 1H), 7.54 (d, 1H), 7.64 (d, 1H). [C14H14Cl2N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 313.0511. 측정값: 313.0490
실시예 53
5-((2S,4S)-2-(2,4- 디클로로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4S)-메틸 2-(2,4-디클로로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (67 mg, 0.18 mmol) (실시예 51, 단계 3)를 수소 브롬화물 (AcOH 중 33%, 948 μL, 5.41 mmol)로 희석한 후, 주위 온도에서 24 시간 동안 교반하였다. 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2S,4S)-2-(2,4-디클로로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (36 mg, 64 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.46 - 1.54 (m, 1H), 1.77 - 1.85 (m, 1H), 1.93 - 1.99 (m, 1H), 2.05 - 2.11 (m, 1H), 2.67 (dt, 1H), 2.86 - 2.92 (m, 1H), 3.18 - 3.22 (m, 1H), 3.98 (dd, 1H), 5.93 (d, 1H), 7.40 (dd, 1H), 7.53 (d, 1H), 7.66 (d, 1H). [C14H14Cl2N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 313.0511. 측정값: 313.0499
실시예 54
5-((2R,4R)-2-(2,4- 디클로로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4R)-메틸 2-(2,4-디클로로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (75mg, 0.20 mmol) (실시예 51, 단계 3)를 수소 브롬화물 (AcOH 중 33%, 1062 μL, 6.06 mmol)로 희석한 후, 주위 온도에서 24 시간 동안 교반하였다. 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4R)-2-(2,4-디클로로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (38 mg, 60 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.47 - 1.54 (m, 1H), 1.78 - 1.85 (m, 1H), 1.93 - 1.99 (m, 1H), 2.05 - 2.11 (m, 1H), 2.67 (dt, 1H), 2.86 - 2.92 (m, 1H), 3.18 - 3.22 (m, 1H), 3.98 (dd, 1H), 5.93 (d, 1H), 7.41 (dd, 1H), 7.53 (d, 1H), 7.66 (d, 1H). [C14H14Cl2N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 313.0511. 측정값: 313.0494
실시예 55
5-((2R,4S)-2-(3,5- 디클로로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(3,5- 디클로로페닐 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노 일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 2-(3,5- 디클로로페닐 )-4-(3- 에톡시 -3-옥 소프로파노 일)피페리딘-1- 카복실레이트
2-(3,5-디클로로페닐)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (4.6 g, 13.85 mmol) (참조 화합물 24)을 메틸 THF (69.2 mL)에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (3.37 g, 20.77 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 질소 하, 실온에서 밤새 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (4.24 g, 24.93 mmol)를 메틸 THF (69.2 mL)에 현탁시킨 후, 염화마그네슘 (2.373 g, 24.93 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 50℃, 질소 하에 밤새 교반하였다 (플라스크 2). 플라스크 2의 백색 현탁액을 플라스크 1의 갈색 현탁액에 첨가하였다. 생성된 현탁액을 실온에서 40 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 3 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화하였다. 물과 메틸 THF를 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고, 상기 유기층을 물, 포화 NaHCO3, 식염수로 세척한 후, MgSO4로 건조하고 여과한 후 증발시켰다. 헵탄 중 20% EtOAc -> 50% EtOAc (10 CV), 50% (3 CV)를 이용한 섬광 크로마토그래피로 정제하였다. 트랜스-메틸 2-(3,5-디클로로페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.6 g, 11 %) 및 시스-메틸 2-(3,5-디클로로페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (3.57 g, 64 %)를 분리하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.22 - 1.32 (m, 3H), 1.79 - 1.94 (m, 2H), 2.03 - 2.17 (m, 1H), 2.20 - 2.29 (m, 1H), 2.82 - 2.93 (m, 1H), 3.24 - 3.34 (m, 1H), 3.46 (d, 2H), 3.64 - 3.68 (m, 3H), 4.10 - 4.23 (m, 3H), 4.83 - 4.92 (m, 1H), 7.06 - 7.09 (m, 2H), 7.22 - 7.25 (m, 1H). MS m/z 402 (M+H)+. 트랜스-이성질체: MS m/z 402 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 2-(3,5- 디클로로페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(3,5-디클로로페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (3.57 g, 8.87 mmol)를 MeOH (36.4 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (3.64 mL) 중의 수산화나트륨 (2.335 mL, 8.87 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 -40℃에서 20 분간 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.544 mL, 8.87 mmol)을 첨가하고 교반을 -40℃에서 3.5 시간 동안 지속하였다. 이후, 상기 반응 혼합물을 미리 가온시킨 80℃의 6 M 염화수소의 용액 (45.9 mL, 275.11 mmol)에 옮겨 담고, 20 분간 가열을 지속하였다. 이후, 용매를 증발시켰다. DCM과 물을 첨가하고 흔들어서 상들을 분리시켰다. 상기 유기상을 상 분리기로 건조시킨 후 진공 속에서 증발시켰다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/AcOH 95/5/0.2 버퍼 (30 분간, 100 mL/분의 유속) 중의 25-65% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 2-(3,5-디클로로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (2.000 g, 60.7 %)를 백색 고체로 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ1.82 - 1.93 (m, 1H), 2.13 - 2.27 (m, 2H), 2.30 - 2.39 (m, 1H), 3.06 - 3.16 (m, 1H), 3.42 - 3.53 (m, 1H), 3.66 (s, 3H), 4.04 - 4.12 (m, 1H), 5.06 (dd, 1H), 5.64 (d, 1H), 7.14 - 7.18 (m, 2H), 7.27 (t, 1H). MS m/z 371 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-(3,5- 디클로로페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소 옥사졸-5-일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 (2S,4R)- 메틸 2-(3,5- 디클로로페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(3,5-디클로로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (2.000 g, 5.4 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: CelluCoat (250x50 mm), 10 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH 70/30, 유속 120 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(3,5-디클로로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.05 g, 50 %)를, 키랄 순도 99.6 %ee, 광회전 [α]20 D = +67.1 (아세토니트릴, c=1.0)로, 그리고 (2S,4R)-메틸 2-(3,5-디클로로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.06 g, 50 %)를, 키랄 순도 97.6 %ee, 광회전 [α]20 D = -58.4 (아세토니트릴, c=1.0)로 수득하였다.
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(3,5- 디클로로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(3,5-디클로로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1 g, 2.69 mmol)를 수소 브롬화물 (AcOH 중 33%, 4.67 mL, 80.82 mmol)에 용해시켰다. 밤새 교반하고 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(3,5-디클로로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (607 mg, 72 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.32 (q, 1H), 1.44 (dq, 1H), 1.84 - 1.89 (m, 1H), 1.97 - 2.03 (m, 1H), 2.70 (dt, 1H), 2.80 - 2.87 (m, 1H), 3.06 - 3.12 (m, 1H), 3.67 (dd, 1H), 5.75 (s, 1H), 7.42 (d, 2H), 7.44 (t, 1H). [C14H14Cl2N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 313.0511. 측정값: 313.0513
실시예 56
5-((2S,4R)-2-(3,5- 디클로로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4R)-메틸 2-(3,5-디클로로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1 g, 2.69 mmol) (실시예 55, 단계 3)를 수소 브롬화물 (AcOH 중 33%, 4.67 mL, 80.82 mmol)에 용해시킨 후, 밤새 교반하였다. 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2S,4R)-2-(3,5-디클로로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (509 mg, 60 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.32 (q, 1H), 1.44 (dq, 1H), 1.84 - 1.89 (m, 1H), 1.97 - 2.02 (m, 1H), 2.70 (dt, 1H), 2.84 (tt, 1H), 3.07 - 3.12 (m, 1H), 3.67 (dd, 1H), 5.75 (s, 1H), 7.42 (d, 2H), 7.44 (t, 1H). [C14H14Cl2N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 313.0511. 측정값: 313.0516
실시예 57
5-(트랜스-2-(3,5- 디클로로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(3,5- 디클로로페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 2-(3,5-디클로로페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.6 g, 1.49 mmol) (실시예 55, 단계 1)를 MeOH (6.11 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (0.611 mL) 중의 수산화나트륨 (0.393 mL, 1.49 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 -40℃에서 20 분간 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.091 mL, 1.49 mmol)을 첨가하고 교반을 -40℃에서 3.5 시간 동안 지속하였다. 이후, 상기 반응 혼합물을 미리 가온시킨 80℃의 6 M 염화수소의 용액 (7.71 mL, 46.24 mmol)에 옮겨 담고, 20 분간 가열을 지속하였다. 이후, 용매를 증발시켰다. DCM과 물을 첨가하고 흔들어서 상들을 분리시켰다. 상기 유기상을 상 분리기로 건조시킨 후 증발시켜 미정제 트랜스-메틸 2-(3,5-디클로로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (300 mg, 54 %)를 수득하였다. MS m/z 371 (M+H)+
단계 2: 5-(트랜스-2-(3,5- 디클로로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
트랜스-메틸 2-(3,5-디클로로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (300mg, 0.81 mmol)를 수소 브롬화물 (AcOH 중 33%, 4.3 mL, 24.24 mmol)로 희석한 후, 주위 온도에서 48 시간 동안 교반하였다. 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-(트랜스-2-(3,5-디클로로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (162 mg, 64 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.77 - 2.17 (m, 4H), 2.66 - 2.74 (m, 1H), 2.82 - 2.89 (m, 1H), 3.12 - 3.18 (m, 1H), 3.79 (d, 1H), 6.06 (s, 1H), 7.44 - 7.51 (m, 3H). [C14H14Cl2N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 313.0511. 측정값: 313.0513
실시예 58
5-((2R,4S)-2-(2- 플루오로 -4-( 트리플루오로메톡시 ) 페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(2- 플루오로 -4-(트 리플루오로메톡시 ) 페닐 )-피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 4-(3- 에톡시 -3-옥 소프로파노 일)-2-(2- 플루오로 -4-( 트리플루오로메톡시 ) 페닐 )피페리딘-1- 카복실레이트
2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (4.07 g, 11.14 mmol) (참조 화합물 25)을 질소 대기 하에 메틸 THF (100 mL)에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (2.71 g, 16.71 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 실온에서 5 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (3.41 g, 20.06 mmol)를 메틸 THF (50 mL) 중에 현탁시킨 후, 염화마그네슘 (1.910 g, 20.06 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 특대의 교반 막대를 사용하여 50℃, 질소 하에 15 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 플라스크 1의 내용물을 플라스크 2에 첨가하여 생성된 백색 현탁액을 실온에서 20 시간 동안 교반하였다. 0.1 M HCl과 DCM을 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 수상을 DCM으로 추출한 후, 상기 혼합된 유기상을 상 분리기를 통해 여과하고 증발시켰다. 잔류물을 바이오타지 (농도구배 3:1->1:1 헵탄:EtOAc, 바이오타지? KP-SIL 340g 컬럼, 10 CV)를 통해 정제하였다. 시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (3.44 g, 70.9 %) 및 트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (0.420 g, 8.66 %)를 무색의 오일로서 수득하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.23 - 1.28 (m, 3H), 1.77 - 1.96 (m, 2H), 2.03 - 2.14 (m, 1H), 2.24 - 2.31 (m, 1H), 2.84 - 2.93 (m, 1H), 3.32 - 3.48 (m, 3H), 3.57 - 3.65 (m, 3H), 4.08 - 4.20 (m, 3H), 5.03 - 5.12 (m, 1H), 6.89 - 6.98 (m, 2H), 7.13 - 7.21 (m, 1H). MS m/z 436 (M+H)+. 트랜스-이성질체: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.16 - 1.28 (m, 3H), 1.62 (dq, 1H), 1.85 - 2.00 (m, 2H), 2.37 - 2.60 (m, 2H), 3.12 (dt, 1H), 3.43 (s, 2H), 3.68 (s, br., 3H), 4.08 - 4.20 (m, 2H), 4.25 (s, br., 1H), 5.68 (s, br., 1H), 6.92 - 7.01 (m, 2H), 7.13 (t, 1H). MS m/z 436 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 2-(2- 플루오로 -4-( 트리플루오로메톡시 ) 페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (3.22 g, 7.40 mmol)를 MeOH (30 mL)에 용해시키고 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (3.00 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.311 g, 7.77 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 -40℃에서 15 분간 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.476 mL, 7.77 mmol)을 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 1 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (38.2 mL, 229.28 mmol)에 옮긴 후, 상기 혼합물을 80℃에서 15 분간 교반하였다. 물과 DCM을 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 수상을 DCM으로 추출한 후, 상기 혼합된 유기층을 상 분리기를 통해 여과하고 증발시켰다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/HOAc 95/5/0.2 버퍼 (25 분간, 100 mL/분의 유속) 중 25-65% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다 (4 회의 러닝). 시스-메틸 2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.82 g, 61 %)를 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.82 - 1.91 (m, 1H), 2.03 - 2.13 (m, 1H), 2.22 - 2.41 (m, 2H), 3.01 - 3.10 (m, 1H), 3.43 - 3.53 (m, 1H), 3.63 (s, 3H), 4.11 - 4.21 (m, 1H), 5.19 (dd, 1H), 5.59 (s, 1H), 6.89 - 6.95 (m, 2H), 7.14 (t, 1H). MS m/z 405 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-(2- 플루오로 -4-( 트리플루오로메톡시 ) 페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로 - 이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-피페리딘-1-카복실레이트 (1.82 g, 4.5 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: CelluCoat (250x50 mm), 10 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH 1/1, 유속 120 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (917 mg, 50 %)를 수득하였다. 키랄 순도 99.9 %ee, 광회전 [α]20 D = +49.7 (아세토니트릴, c=1.0).
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(2- 플루오로 -4-( 트리플루오로메톡시 ) 페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-피페리딘-1-카복실레이트 (458 mg, 1.13 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 8.93 mL, 50.98 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 속에서 제거한 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (246 mg, 63 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.37 (q, 1H), 1.47 (dq, 1H), 1.84 - 1.90 (m, 1H), 1.93 - 1.99 (m, 1H), 2.74 (dt, 1H), 2.87 - 2.94 (m, 1H), 3.07 - 3.13 (m, 1H), 3.94 (dd, 1H), 5.74 (s, 1H), 7.18 - 7.22 (m, 1H), 7.28 - 7.33 (m, 1H), 7.66 (t, 1H); [C15H14F4N2O3+H]+에 대한 HRMS 계산값: 347.1019. 측정값: 347.0995
실시예 59
5-(트랜스-2-(2- 플루오로 -4-( 트리플루오로메톡시 ) 페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(2- 플루오로 -4-( 트리플루오로메톡시 ) 페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)-피페리딘-1-카복실레이트 (420 mg, 0.96 mmol) (실시예 58, 단계 1)를 MeOH (4 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (0.400 mL) 중의 수산화나트륨 (40.5 mg, 1.01 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 -40℃에서 15 분간 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 62 μL, 1.01 mmol)을 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 1 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (4.98 mL, 29.91 mmol)으로 옮긴 후, 상기 혼합물을 80℃에서 15 분간 교반하였다. 물과 DCM을 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 수상을 DCM으로 추출한 후, 상기 혼합된 유기층을 상 분리기를 통해 여과하고 증발시켰다. 미정제 트랜스-메틸 2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (365 mg, 94 %)를 무색의 오일로서 수득하였다. MS m/z 405 (M+H)+
단계 2: 5-(트랜스-2-(2- 플루오로 -4-( 트리플루오로메톡시 ) 페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
트랜스-메틸 2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (365 mg, 0.90 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 7.115 mL, 40.62 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 속에서 제거한 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-(트랜스-2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)-피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (185 mg, 59 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.64 - 1.72 (m, 1H), 1.77 - 1.85 (m, 1H), 1.91 - 1.97 (m, 1H), 2.02 - 2.08 (m, 1H), 2.69 (dt, 1H), 2.86 - 2.92 (m, 1H), 3.17 - 3.22 (m, 1H), 3.95 (dd, 1H), 5.87 (d, 1H), 7.19 - 7.23 (m, 1H), 7.28 - 7.32 (m, 1H), 7.66 (t, 1H); [C15H14F4N2O3+H]+에 대한 HRMS 계산값: 347.1019. 측정값: 347.1002
실시예 60
5-((2R,4S)-2-(3,4,5- 트리플루오로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(3,4,5- 트리플루 오로페닐)피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(3,4,5- 트리플루오로페닐 )피페리딘-1- 카복실레이트
1-(메톡시카보닐)-2-(3,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-4-카복실산 (1.94 g, 6.11 mmol) (참조 화합물 26)을 메틸 THF (70 mL)에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (1.487 g, 9.17 mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 질소 하, 실온에서 3 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (1.873 g, 11.01 mmol)를 메틸 THF (70.0 mL)에 현탁시킨 후, 염화마그네슘 (1.048 g, 11.01 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 큰 자성 교반 막대를 이용하여 질소 하, 50℃에서 3 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 이후, 플라스크 1의 내용물을 플라스크 2로 옮겨 담았다. 이렇게 해서 생성된 백색 현탁액을 질소 하, 실온에서 밤새 교반하였다. 상기 혼합물을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화한 후, MTBE (50 mL)와 물 (50 mL)을 첨가하였다. 상기 상들을 분리한 후 상기 유기층을 물, 포화 NaHCO3 및 식염수로 세척하였다. 상기 유기층을 Na2SO4로 건조하고, 여과한 후 증발시켜 옅은 황색의 오일을 수득하였다. 상기 생성물에 대해 바이오타지 (340g) [n-헵탄 중 20-60% EtOAc (8 CV)의 농도구배를 사용] 상에서 섬광 크로마토그래피를 수행하였다. 상기 컬럼을 n-헵탄 중 20% EtOAc (1 CV)로 컨디셔닝하였다. 트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (59 mg, 2.5 %) 및 시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (810 mg, 34 %)를 분리하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.07 - 1.18 (m, 3H), 1.60 - 2.43 (m, 4H), 2.71 - 2.83 (m, 1H), 3.12 - 3.27 (m, 1H), 3.36 (s, 2H), 3.52 (s, 3H), 3.91 - 4.09 (m, 3H), 4.72 - 4.83 (m, 1H), 6.71 - 6.81 (m, 2H). MS m/z 388 (M+H)+. 트랜스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.20 - 1.30 (m, 3H), 1.47 - 2.01 (m, 3H), 2.35 - 2.47 (m, 1H), 2.55 - 2.68 (m, 1H), 2.79 (dt, 1H), 3.42 - 3.49 (m, 2H), 3.75 (s, 3H), 4.09 - 4.37 (m, 3H), 5.52 (s, br., 1H), 6.78 - 6.89 (m, 2H). MS m/z 388 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2-(3,4,5- 트리플루오로페닐 )피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (810 mg, 2.09 mmol)를 MeOH (8 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 수산화나트륨 (0.615 mL, 2.09 mmol)을 10 분 동안 첨가하고 이 황색 오일을 -40℃에서 20 분간 계속 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.128 mL, 2.09 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (10.77 mL, 64.62 mmol)에 신속하게 붓고, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 DCM/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 백색 고체를 수득하였다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/AcOH 95/5/0.2 버퍼 (30 분간, 100 mL/분의 유속) 중 10-60% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(3,4,5-트리플루오로-페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (355 mg, 48 %)를 분리하였다. MS m/z 357 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2-(3,4,5-트 리플루오 로페닐)-피페리딘-1- 카복실레이트 및 (2S,4R)- 메틸 4-(3-옥소-2,3-디 히드로이소옥 사졸-5-일)-2-(3,4,5- 트리플루오로페닐 )피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(3,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (355 mg, 1 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: CelluCoat (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH 60/40, 유속 18 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(3,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (164 mg, 46 %)를, 키랄 순도 98.7 %ee, 광회전 [α]20 D = +60.6 (아세토니트릴, c=0.5)으로, 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.80 - 1.90 (m, 1H), 1.99 - 2.40 (m, 3H), 3.00 - 3.13 (m, 1H), 3.29 - 3.42 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 4.07 - 4.19 (m, 1H), 4.97 - 5.07 (m, 1H), 5.60 (s, 1H), 6.75 - 6.85 (m, 2H), 그리고 (2S,4R)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(3,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (160 mg, 45 %)를, 키랄 순도 99.9 %ee, 광회전 [α]20 D = -52.9 (아세토니트릴, c=1)로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.81 - 1.90 (m, 1H), 2.05 - 2.15 (m, 1H), 2.19 - 2.38 (m, 2H), 3.02 - 3.11 (m, 1H), 3.30 - 3.40 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 4.09 - 4.18 (m, 1H), 4.99 - 5.05 (m, 1H), 5.60 (s, 1H), 6.76 - 6.84 (m, 2H).
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(3,4,5- 트리플루오로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(3,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (164 mg, 0.46 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 3.63 mL, 20.71 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(3,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (93 mg, 67 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.29 (q, 1H), 1.43 (dq, 1H), 1.82 - 1.89 (m, 1H), 1.96 - 2.02 (m, 1H), 2.70 (dt, 1H), 2.79 - 2.87 (m, 1H), 3.05 - 3.12 (m, 1H), 3.64 (dd, 1H), 5.72 (s, 1H), 7.26 - 7.34 (m, 2H). [C14H13F3N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 299.1007. 측정값: 299.1002
실시예 61
5-((2S,4R)-2-(3,4,5- 트리플루오로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4R)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(3,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (160 mg, 0.45 mmol) (실시예 60, 단계 3)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 3.54 mL, 20.21 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2S,4R)-2-(3,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (85 mg, 63 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.29 (q, 1H), 1.43 (qd, 1H), 1.83 - 1.88 (m, 1H), 1.97 - 2.02 (m, 1H), 2.70 (td, 1H), 2.80 - 2.87 (m, 1H), 3.06 - 3.12 (m, 1H), 3.64 (dd, 1H), 5.73 (s, 1H), 7.27 - 7.34 (m, 2H). [C14H13F3N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 299.1007. 측정값: 299.1037
실시예 62
5-(트랜스-2-(3,4,5- 트리플루오로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2-(3,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (59 mg, 0.15 mmol) (실시예 60, 단계 1)를 MeOH (1 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 수산화나트륨 (0.045 mL, 0.15 mmol)을 10 분 동안 첨가하고, 상기 황색 용액을 -40℃에서 20 분간 계속 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 9.33 μL, 0.15 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 3 시간 15 분 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (0.784 mL, 4.71 mmol)에 신속하게 붓고, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 DCM/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고, 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 미정제 트랜스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(3,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (53 mg, 정량 분석)를 옅은 황색의 오일로서 수득하였다. MS m/z 357 (M+H)+
단계 2: 5-(트랜스-2-(3,4,5- 트리플루오로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
트랜스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(3,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (53.4 mg, 0.15 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 1.18 mL, 6.75 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-(트랜스-2-(3,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (11 mg, 25 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.72 - 1.88 (m, 3H), 1.97 - 2.04 (m, 1H), 2.61 - 2.69 (m, 1H), 2.76 - 2.83 (m, 1H), 3.06 - 3.11 (m, 1H), 3.69 - 3.75 (m, 1H), 5.98 (s, 1H), 7.28 - 7.36 (m, 2H). [C14H13F3N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 299.1007. 측정값: 299.1031
실시예 63
5-((2R,4S)-2-(2,4,5- 트리플루오로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 시스 - 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(2,4,5- 트리플루오로페닐 )피페리딘-1- 카복실레이트
1-(메톡시카보닐)-2-(2,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-4-카복실산 (2.388 g, 7.53 mmol) (참조 화합물 27)을 메틸 THF (50 mL)에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (1.831 g, 11.29 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 질소 하, 실온에서 6 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (2.306 g, 13.55 mmol)를 메틸 THF (50.0 mL) 중에 현탁시킨 후, 염화마그네슘 (1.290 g, 13.55 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 특대의 교반 막대를 사용하여 질소 하, 50℃에서 5.5 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 플라스크 1의 현탁액을 이제 플라스크 2의 백색 현탁액에 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 베이지색 현탁액을 질소 하, 실온에서 밤새 교반하였다. 상기 혼합물을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화하고 MTBE와 물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고, 상기 유기상을 물, 포화 NaHCO3 및 물로 세척한 후 증발시켰다. 미량의 물을 MeCN에 의해 공비 제거하여 황색 오일을 수득하였다. 잔류물을 바이오타지 (헵탄 중 20 % => 50 % EtOAc, 8 CV; 바이오타지? KP-SIL 340g 컬럼) 상에서 정제하였다. 시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(2,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (1.877 g, 64 %)를 무색 오일로서 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.19 - 1.29 (m, 3H), 1.49 - 2.19 (m, 3H), 2.22 - 2.29 (m, 1H), 2.82 - 2.91 (m, 1H), 3.34 (ddd, 1H), 3.39 - 3.48 (m, 2H), 3.62 (s, 3H), 4.05 - 4.20 (m, 3H), 5.00 - 5.06 (m, 1H), 6.85 - 7.00 (m, 2H). MS m/z 388 (M+H)+.
단계 2: 시스 - 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2-(2,4,5- 트 리플루오로페닐)피페리딘-1- 카복실레이트 및 트랜스- 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2-(2,4,5- 트리플루오로페닐 )-피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(2,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (1.888 g, 4.87 mmol)를 MeOH (18 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (1.800 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.195 g, 4.87 mmol)을 10 분 동안 첨가하고, 이 무색의 용액을 -40℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.299 mL, 4.87 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 3 시간 20 분 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소 (24 mL, 144.00 mmol) and 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 DCM/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 황색 오일을 수득하였다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (20 분간, 100 mL/분의 유속) 중 5-30 % 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 3회 주입하여 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(2,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-1-카복실레이트와 트랜스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(2,4,5-트리플루오로페닐)-피페리딘-1-카복실레이트의 혼합물 (1.027 g, 59 %)을 동결 건조 후 백색 고체로 수득하였다. MS m/z 357 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2-(2,4,5-트 리플루오 로페닐)-피페리딘-1- 카복실레이트 및 (2S,4S)- 메틸 4-(3-옥소-2,3-디 히드로이소옥 사졸-5-일)-2-(2,4,5- 트리플루오로페닐 )피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(2,4,5-트리플루오로페닐)-피페리딘-1-카복실레이트와 트랜스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(2,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-1-카복실레이트의 혼합물 (1.027 g, 2.88 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: CelluCoat (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/IPA 80/20, 유속 18 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(2,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (259 mg, 25 %)를, 키랄 순도 A% 99.9, 광회전 [α]20 D = +50.3 (아세토니트릴, c=1)으로, 그리고 (2S,4S)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(2,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (203 mg, 20 %)를, 키랄 순도 A%: 99.9, 광회전 [α]20 D = +4.5 (아세토니트릴, c=1)로 수득하였다.
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(2,4,5- 트리플루오로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(2,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (259 mg, 0.73 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 4 mL, 22.84 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(2,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (161 mg, 74 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.36 (q, 1H), 1.45 (dq, 1H), 1.83 - 1.90 (m, 1H), 1.91 - 1.97 (m, 1H), 2.74 (dt, 1H), 2.90 (tt, 1H), 3.06 - 3.13 (m, 1H), 3.91 (d, 1H), 5.74 (d, 1H), 7.44 - 7.57 (m, 2H). [C14H13F3N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 299.1007. 측정값: 299.1021
실시예 64
5-((2S,4S)-2-(2,4,5- 트리플루오로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4S)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(2,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (203 mg, 0.57 mmol) (실시예 63, 단계 4)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 4 mL, 22.84 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2S,4S)-2-(2,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (138 mg, 81 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.62 - 1.70 (m, 1H), 1.80 (tt, 1H), 1.90 - 1.96 (m, 1H), 2.00 - 2.06 (m, 1H), 2.68 (dt, 1H), 2.85 - 2.91 (m, 1H), 3.20 (s, br., 1H), 3.90 (d, 1H), 5.86 (d, 1H), 7.43 - 7.56 (m, 2H). [C14H13F3N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 299.1007. 측정값: 299.1023
실시예 65
5-((2R,4S)-2-(4- 클로로 -3,5- 디플루오로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(4- 클로로 -3,5- 디플루오로페닐 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥 소프로파노일)-피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 2-(4- 클로로 -3,5- 디플루오로페닐 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )피페리딘-1- 카복실레이트
2-(4-클로로-3,5-디플루오로페닐)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (1.6 g, 4.79 mmol) (참조 화합물 28)을 질소 대기 하에서 메틸 THF (30 mL) 중에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (1.166 g, 7.19 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (1.469 g, 8.63 mmol)를 메틸 THF (15 mL)에 현탁시키고 염화마그네슘 (0.822 g, 8.63 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 특대의 교반 막대를 사용하여 질소 하, 50℃에서 7 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 플라스크 2에 플라스크 1의 내용물을 첨가하여 생성된 백색 현탁액을 실온에서 20 시간 동안 교반하였다. 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (0.734 g, 4.32 mmol)를 메틸 THF (15 mL)에 현탁시키고, 염화마그네슘 (0.411 g, 4.32 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 50℃에서 5 시간 동안 교반한 후, 상기 반응 혼합물에 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 15 시간 동안 교반하였다. 0.1 M HCl과 DCM을 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 수상을 DCM으로 추출한 후, 상기 혼합된 유기상을 상 분리기를 통해 여과하고 증발시켰다. 잔류물을 실리카 (2:1 헵탄:EtOAc, 바이오타지? KP-SIL 340g 컬럼, 10 CV) 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 시스-메틸 2-(4-클로로-3,5-디플루오로페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.448 g, 74.8 %) 및 트랜스-메틸 2-(4-클로로-3,5-디플루오로페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.178 g, 9.19 %)를 무색의 오일로서 수득하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.23 - 1.32 (m, 3H), 1.74 - 2.19 (m, 3H), 2.20 - 2.30 (m, 1H), 2.82 - 2.92 (m, 1H), 3.23 - 3.34 (m, 1H), 3.46 (s, 2H), 3.63 - 3.69 (m, 3H), 4.04 - 4.23 (m, 3H), 4.84 - 4.95 (m, 1H), 6.81 - 6.90 (m, 2H). MS m/z 404 (M+H)+. 트랜스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.20 - 1.33 (m, 3H), 1.48 - 1.92 (m, 2H), 1.92 - 2.04 (m, 1H), 2.36 - 2.51 (m, 1H), 2.54 - 2.70 (m, 1H), 2.82 (dt, 1H), 3.47 (d, 2H), 3.73 (s, 3H), 4.08 - 4.45 (m, 3H), 5.56 (s, br., 1H), 6.86 (d, 2H). MS m/z 404 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 2-(4- 클로로 -3,5- 디플루오로페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(4-클로로-3,5-디플루오로페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.445 g, 3.58 mmol)를 MeOH (14 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (1.4 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.150 g, 3.76 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 -40℃에서 15 분간 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.230 mL, 3.76 mmol)을 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 1 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (18.49 mL, 110.93 mmol)에 옮겨 담고, 상기 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반하였다. 물과 DCM을 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 수상을 DCM으로 추출한 후, 상기 혼합된 유기층을 상 분리기를 통해 여과하고 증발시켰다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/FA 95/5/0.2 버퍼 (30 분간, 100 mL/분의 유속) 중 15-55% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 이 화합물을 220 nm에서 UV로 검출하였다. 시스-메틸 2-(4-클로로-3,5-디플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.831 g, 62.3 %)를 무색 고체로 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.80 - 1.87 (m, 1H), 2.04 - 2.15 (m, 1H), 2.19 - 2.28 (m, 1H), 2.30 - 2.36 (m, 1H), 3.00 - 3.09 (m, 1H), 3.30 - 3.39 (m, 1H), 3.66 (s, 3H), 4.07 - 4.16 (m, 1H), 4.98 - 5.05 (m, 1H), 5.59 (s, br., 1H), 6.80 (d, 2H). MS m/z 273 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-(4- 클로로 -3,5- 디플루오로페닐 )-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(4-클로로-3,5-디플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (830 mg, 2.23 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: CelluCoat (250x50 mm), 10 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH 1/1, 유속 120 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(4-클로로-3,5-디플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (390 mg, 47 %)를, 키랄 순도 99.7 %ee, 광회전 [α]20 D = +55.9 (아세토니트릴, c=1.0)로 수득하였다.
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(4- 클로로 -3,5- 디플루오로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(4-클로로-3,5-디플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.39 g, 1.05 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33%, 10 mL, 142.75 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(4-클로로-3,5-디플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (272 mg, 83 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.29 (q, 1H), 1.43 (dq, 1H), 1.82 - 1.89 (m, 1H), 1.97 - 2.04 (m, 1H), 2.70 (dt, 1H), 2.84 (tt, 1H), 3.06 - 3.12 (m, 1H), 3.68 (dd, 1H), 5.73 (s, 1H), 7.31 (d, 2H). [C14H13ClF2N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 315.0712. 측정값: 315.0707
실시예 66
5-(트랜스-2-(4- 클로로 -3,5- 디플루오로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(4- 클로로 -3,5- 디플루오로페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 2-(4-클로로-3,5-디플루오로페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (178 mg, 0.44 mmol) (실시예 65, 단계 1)를 MeOH (2 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (0.200 mL)에 용해된 수산화나트륨 (18.51 mg, 0.46 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 -40℃에서 15 분간 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.028 mL, 0.46 mmol)을 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 1 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (2.278 mL, 13.67 mmol)에 옮겨 담고, 상기 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반하였다. 물과 DCM을 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 수상을 DCM으로 추출한 후, 상기 혼합된 유기층을 상 분리기를 통해 여과하고 증발시켰다. 미정제 트랜스-메틸 2-(4-클로로-3,5-디플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로-이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (158 mg, 96 %)를 담황색 오일로 분리하였다. MS m/z 273 (M+H)+
단계 2: 5-(트랜스-2-(4- 클로로 -3,5- 디플루오로페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
트랜스-메틸 2-(4-클로로-3,5-디플루오로페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (157 mg, 0.42 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 3.32 mL, 18.95 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-(트랜스-2-(4-클로로-3,5-디플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (26 mg, 19 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.75 - 2.11 (m, 4H), 2.66 - 2.77 (m, 1H), 2.81 - 2.95 (m, 1H), 3.14 (s, br., 1H), 3.86 (s, br., 1H), 6.03 (s, 1H), 7.32 - 7.42 (m, 2H). [C14H13ClF2N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 315.0712. 측정값: 315.0715
실시예 67
5-((2R,4S)-2-(3- 메틸 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(3- 메틸 -4-( 트리 플루오로메틸) 페닐 )-피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(3- 메틸 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-1- 카복실레이트
말론산 에틸 칼륨 (1.567 g, 9.21 mmol)과 MgCl2 (0.731 g, 7.67 mmol)를 무수 THF (50 mL)에 첨가하였다. 반응 플라스크를 50℃에서 4 시간 동안 세게 교반하였다 (플라스크 1). 1-(메톡시카보닐)-2-(3-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-카복실산 (2.65 g, 7.67 mmol) (참조 화합물 29) 및 카보닐디이미다졸 (1.867 g, 11.51 mmol)을 실온에서 무수 THF (50 mL)에 첨가하였다 (플라스크 2). 플라스크 2의 내용물을 플라스크 1에 첨가한 후, 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 물과 디에틸 에테르에 용해시켰다. 상기 유기상을 분리하고, Na2SO4로 건조한 후 셀라이트를 통해 여과시키고 용매는 증발시켰다. 바이오타지 장비를 사용하여 크로마토그래피를 수행하였다. 에틸 아세테이트-헵탄을 이용한 농도구배 용출은, 0-100에서 시작하여 100-0으로 종료하였다. 트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)-피페리딘-1-카복실레이트 (0.69 g, 22 %) 및 시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (1.40 g, 44 %)를 분리하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.25 (t, 3H), 1.00 - 2.29 (m, 4H), 2.44 (s, 3H), 2.47 - 2.95 (m, 1H), 3.27 - 3.34 (m, 1H), 3.37 - 3.48 (m, 2H), 3.62 (s, 3H), 3.66 - 4.20 (m, 3H), 4.88 - 4.96 (m, 1H), 7.05 - 7.11 (m, 2H), 7.50 - 7.54 (m, 1H). 트랜스-이성질체: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.22 (t, 3H), 1.47 - 2.03 (m, 4H), 2.47 (s, 3H), 2.49 - 2.89 (m, 2H), 3.40 - 3.47 (m, 2H), 3.74 (s, 3H), 4.15 (q, 2H), 4.11 - 4.36 (m, 1H), 5.37 - 5.75 (m, 1H), 7.06 - 7.13 (m, 2H), 7.57 (d, 1H).
단계 2: 시스 - 메틸 2-(3- 메틸 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (1.4 g, 3.37 mmol)를 MeOH (20 mL)에 용해시키고 -40℃로 냉각시켰다. 물 (2 mL)에 용해된 NaOH (0.135 g, 3.37 mmol)를 10 분 동안 첨가하여 생성된 무색 용액을 -40℃에서 20 분간 계속 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.223 g, 3.37 mmol)을 적가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 30 분간 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M HCl의 용액에 옮겨 담고, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 상기 혼합물을 디에틸 에테르와 물에 용해시켰다. 상기 상들을 분리한 후, 상기 유기상을 Na2SO4로 건조하고 셀라이트를 통해 여과시킨 후 용매를 제거하였다. 분취형 HPLC로 정제하였다. 아세토니트릴-산성 버퍼를 이용한 농도구배 용출은, 40-60에서 시작하여 55-45로 종료하였다. 시스-메틸 2-(3-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.37 g, 29 %)를 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.80 - 1.87 (m, 1H), 2.07 - 2.28 (m, 2H), 2.31 - 2.38 (m, 1H), 2.41 (s, 3H), 3.03 - 3.10 (m, 1H), 3.35 - 3.43 (m, 1H), 3.66 (s, 3H), 4.13 - 4.19 (m, 1H), 5.09 (t, 1H), 5.52 (s, 1H), 7.02 - 7.06 (m, 2H), 7.49 (d, 1H). MS m/z 385 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-(3- 메틸 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )-4-(3-옥소-2,3-디 히 드로- 이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 (2S,4R)- 메틸 2-(3-메틸-4-( 트리플루오로메틸 )- 페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(3-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-피페리딘-1-카복실레이트 (0.37 g, 0.96 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: CelluCoat OJ (250x50), 10 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH 50/50, 유속 120 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(3-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (177 mg, 48 %)를, 키랄 순도 99.2 %ee, 광회전 [α]20 D = +57.1 (아세토니트릴, c=1)로, 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.78 - 1.85 (m, 1H), 2.08 - 2.16 (m, 1H), 2.17 - 2.26 (m, 1H), 2.29 - 2.36 (m, 1H), 2.39 (s, 3H), 3.01 - 3.09 (m, 1H), 3.34 - 3.42 (m, 1H), 3.64 (s, 3H), 4.09 - 4.17 (m, 1H), 5.07 (t, 1H), 5.50 (s, 1H), 7.01 - 7.07 (m, 2H), 7.47 (d, 1H), 10.63 (br, 1H), 그리고 (2S,4R)-메틸 2-(3-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (168 mg, 45 %)를, 키랄 순도 99.9 %ee, 광회전 [α]20 D = -57.1 (아세토니트릴, c=1)로 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.79 - 1.86 (m, 1H), 2.10 - 2.18 (m, 1H), 2.19 - 2.27 (m, 1H), 2.31 - 2.37 (m, 1H), 2.41 (s, 3H), 3.02 - 3.09 (m, 1H), 3.35 - 3.42 (m, 1H), 3.65 (s, 3H), 4.11 - 4.18 (m, 1H), 5.08 (t, 1H), 5.51 (s, 1H), 7.02 - 7.07 (m, 2H), 7.48 (d, 1H).
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(3- 메틸 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(3-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-피페리딘-1-카복실레이트 (0.177 g, 0.46 mmol)를 HBr (아세트산 중 33 %, 5.6 g, 22.84 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(3-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (0.082 g, 55 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.31 - 1.39 (m, 1H), 1.41 - 1.50 (m, 1H), 1.84 - 1.90 (m, 1H), 1.95 - 2.00 (m, 1H), 2.40 (d, 3H), 2.57 - 2.59 (m, 1H), 2.83 - 2.90 (m, 1H), 3.08 - 3.13 (m, 1H), 3.68 (d, 1H), 5.72 (s, 1H), 7.35 (d, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.57 (d, 1H). [C16H17F3N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 327.1320. 측정값: 327.1311.
실시예 68
5-((2S,4R)-2-(3- 메틸 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4R)-메틸 2-(3-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-피페리딘-1-카복실레이트 (0.168 g, 0.44 mmol) (실시예 67, 단계 3)를 HBr (아세트산 중 33 %, 5.6g, 22.84 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2S,4R)-2-(3-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (0.068g, 48%)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.31 - 1.40 (m, 1H), 1.41 - 1.50 (m, 1H), 1.85 - 1.90 (m, 1H), 1.95 - 2.00 (m, 1H), 2.40 (s, 3H), 2.69 - 2.76 (m, 1H), 2.83 - 2.90 (m, 1H), 3.08 - 3.13 (m, 1H), 3.68 (d, 1H), 5.73 (s, 1H), 7.36 (d, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.57 (d, 1H). [C16H17F3N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 327.1320. 측정값: 327.1318.
실시예 69
5-(트랜스-2-(3- 메틸 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(3- 메틸 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )-4-(3-옥소-2,3-디 히드로이소옥 사졸-5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)-피페리딘-1-카복실레이트 (0.69 g, 1.66 mmol) (실시예 67, 단계 1)를 MeOH (8mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (0.7 mL)에 용해된 NaOH (0.066 g, 1.66 mmol)를 10 분 동안 첨가하고 생성된 무색 용액을 -40℃에서 20 분간 계속 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.110 g, 1.66 mmol)을 적가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 30 분간 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M HCl로 옮긴 후, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 상기 혼합물을 디에틸 에테르와 물에 용해시켰다. 상기 상들을 분리한 후, 상기 유기상을 Na2SO4로 건조하고 셀라이트를 통해 여과 후 증발시켜 미정제 트랜스-메틸 2-(3-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.54 g, 85 %)를 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.60 - 1.72 (m, 1H), 1.89 - 1.97 (m, 1H), 1.99 - 2.07 (m, 1H), 2.48 (s, 3H), 2.58 - 2.71 (m, 1H), 2.80 (s, 1H), 2.93 (t, 1H), 3.73 (s, 3H), 4.23 (s, 1H), 5.49 - 5.73 (m, 2H), 7.06 - 7.16 (m, 2H), 7.60 (d, 1H).
단계 2: 5-(트랜스-2-(3- 메틸 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온
트랜스-메틸 2-(3-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.139 g, 0.36 mmol)를 HBr (아세트산 중 33 %, 5.60 g, 22.84 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-(트랜스-2-(3-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (0.075 g, 64 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.76 - 1.85 (m, 2H), 1.85 - 1.93 (m, 1H), 1.99 - 2.07 (m, 1H), 2.40 (d, 2H), 2.67 - 2.75 (m, 1H), 2.80 - 2.89 (m, 1H), 3.10 - 3.17 (m, 1H), 3.68 - 3.78 (m, 1H), 5.96 (s, 1H), 7.36 (d, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.57 (d, 1H). [C16H17F3N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 327.1320. 측정값: 327.1298.
실시예 70
5-((2R,4S)-2-(3,5- 디플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(3,5- 디플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )-4-(3-에톡시-3- 옥소프로파노일 )피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 2-(3,5- 디 플루오로-4-( 트리플루오로메틸 )- 페닐 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )피페리딘-1-카 복실레이 트
2-(3,5-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (2.363 g, 6.43 mmol) (참조 화합물 30)을 메틸 THF (30 mL)에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (1.565 g, 9.65 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 질소 하, 실온에서 20 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (2.190 g, 12.87 mmol)와 염화마그네슘 (1.225 g, 12.87 mmol)을 메틸 THF (30.0 mL) 중에 현탁시킨 후, 특대의 교반 막대를 사용하여 질소 하, 50℃에서 20 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 플라스크 2의 백색 현탁액을 플라스크 1에 첨가하였다. 상기 걸쭉한 백색의 현탁액을 실온에서 24 시간 동안 교반하였다. 3 M HCl을 첨가하여 상기 반응 혼합물을 pH 1로 산성화하였다. MTBE (250 mL)와 물을 첨가하고 흔들어서 상들을 분리시켰다. 상기 유기상을 물 (200 mL), 포화 NaHCO3 (200 mL), 식염수 (200 mL)로 세척하고, 상 분리기로 건조시킨 후 진공 속에서 증발시켰다. 잔류물을 바이오타지? KP-SIL 100g 컬럼 상에서 자동화 섬광 크로마토그래피로 정제하였다. 헵탄 중 40 % EtOAc (2 CV) 이후 헵탄 중 40 % 내지 80 %의 EtOAc (10 CV)를 이동상으로 사용하였다. 시스-메틸 2-(3,5-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.489 g, 52.9 %) 및 트랜스-메틸 2-(3,5-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.110 g, 3.91 %)를 분리하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.25 (t, 3H), 1.49 - 2.28 (m, 4H), 2.80 - 2.91 (m, 1H), 3.23 - 3.31 (m, 1H), 3.44 (s, 2H), 3.65 (s, 3H), 4.07 - 4.14 (m, 1H), 4.17 (q, 2H), 4.86 - 4.95 (m, 1H), 6.83 (d, 2H). 트랜스-이성질체: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.24 (t, 3H), 1.54 - 1.60 (m, 1H), 1.73 - 1.89 (m, 1H), 1.96 - 2.03 (m, 1H), 2.38 - 2.47 (m, 1H), 2.53 - 2.62 (m, 1H), 2.76 - 2.84 (m, 1H), 3.40 - 3.49 (m, 2H), 3.75 (s, 3H), 4.17 (q, 2H), 4.15 - 4.42 (m, 1H), 5.40 - 5.71 (m, 1H), 6.87 (d, 2H).
단계 2: 시스 - 메틸 2-(3,5- 디플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(3,5-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-피페리딘-1-카복실레이트 (1.489 g, 3.40 mmol)를 MeOH (15 mL)에 용해시킨 후 -40℃로 냉각시켰다. 물 (1.500 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.896 mL, 3.40 mmol)을 첨가하고 상기 반응물을 -40℃에서 20 분간 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.209 mL, 3.40 mmol)을 첨가하고 교반을 -40℃에서 3.5 시간 동안 지속하였다. 이후, 상기 반응 혼합물을 미리 가온한 80℃의 염화수소의 용액 (17.59 mL, 105.54 mmol)에 첨가한 후 20 분간 교반하였다. 용매를 진공 속에서 증발시켰다. DCM (100 mL)과 물 (100 mL)을 첨가하고 흔들어서 상들을 분리시켰다. 상기 유기상을 상 분리기로 건조시킨 후 진공 속에서 증발시켰다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/AcOH 95/5/0.2 버퍼 (30 분간, 100 mL/분의 유속) 중 20-65% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 2-(3,5-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.594 g, 42.9 %)를 백색 고체로 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.82 - 1.89 (m, 1H), 2.08 - 2.16 (m, 1H), 2.19 - 2.27 (m, 1H), 2.32 - 2.38 (m, 1H), 3.04 - 3.11 (m, 1H), 3.34 - 3.41 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 4.09 - 4.15 (m, 1H), 5.04 - 5.08 (m, 1H), 5.57 (s, 1H), 6.80 (d, 2H).
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-(3,5- 디플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로 - 이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(3,5-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-피페리딘-1-카복실레이트 (465 mg, 1.14 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: CelluCoat (250x50), 10 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH 60/40, 유속 120 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(3,5-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (226 mg, 48 %)를, 키랄 순도 99.8 %ee, 광회전 [α]20 D = +48.2 (아세토니트릴, c=1)로 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.82 - 1.88 (m, 1H), 2.07 - 2.14 (m, 1H), 2.19 - 2.27 (m, 1H), 2.32 - 2.38 (m, 1H), 3.04 - 3.10 (m, 1H), 3.34 - 3.41 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 4.09 - 4.15 (m, 1H), 5.04 - 5.08 (m, 1H), 5.58 (s, 1H), 6.80 (d, 2H).
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(3,5- 디플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(3,5-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (226 mg, 0.56 mmol)를 브롬화수소산 (AcOH 중 33%, 5 mL, 30.38 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 20 시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(3,5-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (133 mg, 68 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.30 (q, 1H), 1.43 (dq, 1H), 1.84 - 1.89 (m, 1H), 2.02 - 2.07 (m, 1H), 2.70 (dt, 1H), 2.86 (tt, 1H), 3.07 - 3.13 (m, 1H), 3.75 (dd, 1H), 5.73 (s, 1H), 7.37 (d, 2H). [C15H13F5N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 349.0975. 측정값: 349.0972.
실시예 71
5-(트랜스-2-(3,5- 디플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(3,5- 디플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로 - 이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 2-(3,5-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-피페리딘-1-카복실레이트 (110 mg, 0.25 mmol) (실시예 70, 단계 1)를 MeOH (5 mL)에 용해시킨 후, -40℃로 냉각시켰다. 물 (0.500 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.066 mL, 0.25 mmol)을 첨가하였다. -40℃에서 20 분 후, 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 7.71 μL, 0.25 mmol)을 첨가하고 4 시간 동안 교반을 지속하였다. 이후, 상기 반응 혼합물을 미리 가온한 80℃의 6 M 염화수소의 용액 (1.299 mL, 7.80 mmol)에 첨가한 후 1 시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 속에서 증발시켰다. DCM (50 mL)과 물 (50 mL)을 첨가하고 흔들어서 상들을 분리시켰다. 상기 유기상을 상 분리기로 건조시킨 후 진공 속에서 증발시켰다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/AcOH 95/5/0.2 버퍼 (30 분간, 19 mL/분의 유속) 중 20-65% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x20 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 트랜스-메틸 2-(3,5-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (7.00 mg, 6.85 %)를 백색 고체로 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.61 - 1.73 (m, 1H), 1.90 - 2.01 (m, 1H), 2.06 (dt, 1H), 2.56 (d, 1H), 2.76 (t, 1H), 2.89 (t, 1H), 3.78 (s, 3H), 4.13 - 4.47 (m, 1H), 5.46 - 5.74 (m, 1H), 5.68 (s, 1H), 6.89 (d, 2H). MS m/z 407 (M+H)+
단계 2: 5-(트랜스-2-(3,5- 디플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
트랜스-메틸 2-(3,5-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (26 mg, 0.06 mmol)를 수소 브롬화물 (AcOH 중 33%, 2 mL, 0.06 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 20 시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-(트랜스-2-(3,5-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (7.00 mg, 31 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.73 - 1.88 (m, 3H), 2.02 - 2.08 (m, 1H), 2.64 - 2.70 (m, 1H), 2.77 - 2.83 (m, 1H), 3.06 - 3.11 (m, 1H), 3.83 - 3.86 (m, 1H), 6.02 (s, 1H), 7.42 (d, 2H). [C15H13F5N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값 : 349.0975. 측정값: 349.0983.
실시예 72
5-((2R,4S)-2-(2- 메틸 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 시스 - 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(2- 메틸 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 ) 피페리딘-1- 카복실레이트
1-(메톡시카보닐)-2-(2-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-카복실산 (7.79 g, 22.56 mmol) (참조 화합물 31)을 THF (60 mL) 중에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (5.49 g, 33.84 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (7.68 g, 45.12 mmol)와 무수 염화마그네슘 (4.30 g, 45.12 mmol)을 THF (60.0 mL)에 현탁시키고, 질소 하, 50℃에서 밤새 교반한 후, 실온으로 냉각시켰다 (플라스크 2). 플라스크 1의 내용물을 플라스크 2에 첨가한 후, 질소 하에 48 시간 동안 교반하였다. 상기 반응을 2 M HCl을 첨가하여 중지시켰다. 상기 혼합물을 EtOAc로 3 회 추출하고, 상기 혼합된 유기상을 증발시킨 후, 실리카 (100 g 바이오타지 컬럼, 헵탄/EtOAc 88/12 - 33/67 사용, 9 컬럼 부피) 상에서 컬럼 크로마토그래피를 수행하여 시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(2-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐) 피페리딘-1-카복실레이트 (6.28 g, 67 %)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.23 - 1.33 (m, 3H), 1.68 - 1.97 (m, 2H), 2.08 - 2.21 (m, 2H), 2.44 (s, 3H), 2.87 - 2.98 (m, 1H), 3.46 (s, 2H), 3.44 - 3.66 (m, 1H), 3.58 (s, 3H), 4.15 - 4.29 (m, 3H), 4.91 - 5.01 (m, 1H), 7.24 - 7.32 (m, 1H), 7.36 - 7.43 (m, 2H). MS m/z 416 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 2-(2- 메틸 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(2-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (6.28 g, 15.12 mmol)를 MeOH (60 mL)에 용해시킨 후 -40℃로 냉각시켰다. 3.8 M NaOH (3.98 mL, 15.12 mmol)를 물 (6 mL)에 용해시킨 후 상기 혼합물에 첨가하고 상기 반응물을 -40℃에서 40 분간 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.926 mL, 15.12 mmol)을 첨가하고 교반을 -40℃에서 3.5 시간 동안 지속하였다. 이후, 상기 반응 혼합물을 미리 가온시킨 80℃의 따뜻한 6 M HCl의 용액 (76 mL, 453.53 mmol)에 첨가한 후, 20 분간 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 물과 DCM 사이로 구분시켜 놓았다. 상기 수상을 DCM으로 2 회 추출한 뒤, 상기 혼합된 유기상을 건조하고 증발시켰다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/AcOH 95/5/0.2 버퍼 (30 분간, 100 mL/분의 유속) 중 35-75% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하는 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC를 사용하여 2 회의 러닝으로 정제하였다. 시스-메틸 2-(2-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (3.2 g, 55 %)를 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.81 - 1.93 (m, 2H), 2.21 - 2.42 (m, 2H), 2.44 (s, 3H), 3.03 - 3.13 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.63 - 3.75 (m, 1H), 4.12 - 4.20 (m, 1H), 5.02 (dd, 1H), 5.65 (s, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.37 - 7.44 (m, 2H). MS m/z 383 (M-H)-
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-(2- 메틸 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )-4-(3-옥소-2,3-디 히드로이소옥 사졸-5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(2-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-피페리딘-1-카복실레이트 (3.2 g, 8.33 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: CelluCoat (250x50), 10 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH 75/25, 유속 120 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(2-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.45 g, 45 %)를, 키랄 순도 99.3 %ee, 광회전 [α]20 D = +49.0 (아세토니트릴, c=1)으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.79 - 1.95 (m, 2H), 2.20 - 2.40 (m, 2H), 2.44 (s, 3H), 3.02 - 3.15 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.63 - 3.76 (m, 1H), 4.11 - 4.22 (m, 1H), 5.02 (dd, 1H), 5.65 (s, 1H), 7.24 - 7.32 (m, 1H), 7.36 - 7.43 (m, 2H).
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(2- 메틸 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(2-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-피페리딘-1-카복실레이트 (1.45 g, 3.77 mmol)를 수소 브롬화물 (HOAc 중 33%, 19.82 mL, 113.18 mmol)에 용해시킨 후 밤새 교반하였다. 상기 혼합물을 증발시킨 후 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (20 분간, 100 mL/분의 유속) 중 15-55% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 정제하였다. 5-((2R,4S)-2-(2-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (810 mg, 65 %)을 백색 분말로서 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.35 (q, 1H), 1.52 (dq, 1H), 1.88 - 2.01 (m, 2H), 2.42 (s, 3H), 2.75 - 2.85 (m, 1H), 2.89 - 3.00 (m, 1H), 3.12 - 3.18 (m, 1H), 3.93 (d, 1H), 5.76 (s, 1H), 7.49 - 7.54 (m, 2H), 7.73 (d, 1H). [C16H17F3N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 327.1320. 측정값: 327.1312.
실시예 73
5-((2R,4S)-2-(2- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(2- 플루오로 -4-(트 리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 4-(3- 에톡시 -3-옥소프로파노일)-2-(2- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-1- 카복실레이트
2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (4.82 g, 13.80 mmol)을 메틸 THF (120 mL)에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (4.03 g, 24.84 mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 질소 하, 실온에서 5 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (4.23 g, 24.84 mmol)를 메틸 THF (120 mL)에 현탁시킨 후, 염화마그네슘 (2.365 g, 24.84 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 큰 자성 교반 막대를 이용하여 질소 하, 50℃에서 5 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 플라스크 1의 내용물을 플라스크 2로 옮겨 담았다. 이렇게 해서 생성된 백색 현탁액을 질소 하, 실온에서 밤새 교반하였다. 상기 혼합물을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화한 후, MTBE (50 mL)와 물 (50 mL)을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 상기 유기층을 물, 포화 NaHCO3 및 식염수로 세척하였다. 상기 유기층을 Na2SO4로 건조하고 여과한 후 증발시켜 옅은 황색의 오일을 수득하였다. 잔류물을 실리카 [바이오타지 (340g), 1 CV에서 헵탄 중 EtOAc (20%) 이후 n-헵탄 중 20-60% EtOAc (8 CV)의 농도구배, 상기 컬럼은 -n-헵탄 중 20% EtOAc로 컨디셔닝함 (1 CV)] 상에서 크로마토그래피를 수행하여 정제하였다. 트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐) 피페리딘-1-카복실레이트 (413 mg, 7 %) 및 시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)-페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (2.83 g, 49 %)를 분리하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.22 - 1.32 (m, 3H), 1.81 - 1.96 (m, 2H), 2.06 - 2.18 (m, 1H), 2.27 - 2.36 (m, 1H), 2.87 - 2.97 (m, 1H), 3.34 - 3.51 (m, 3H), 3.58 - 3.66 (m, 3H), 4.14 - 4.23 (m, 3H), 5.15 (dd, 1H), 7.25 - 7.40 (m, 3H). MS m/z 420 (M+H)+. 트랜스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.18 - 1.31 (m, 3H), 1.58 - 1.72 (m, 1H), 1.87 - 2.06 (m, 2H), 2.40 - 2.60 (m, 2H), 3.17 (dt, 1H), 3.45 (s, 2H), 3.73 (s, br., 3H), 4.08 - 4.23 (m, 2H), 4.34 (s, br., 1H), 5.75 (s, br., 1H), 7.22 - 7.43 (m, 3H). MS m/z 420 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 2-(2- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )-4-(3-옥소-2,3-디 히드로이소옥 사졸-5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (3 g, 7.15 mmol)를 MeOH (25 mL)에 용해시킨 후 질소 하에 -45℃로 냉각하였다. 수산화나트륨 (2.104 mL, 7.15 mmol)을 10 분 동안 첨가한 후, 상기 황색 용액을 -45℃에서 20 분간 계속 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.438 mL, 7.15 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -45℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (36.8 mL, 221.05 mmol)에 신속히 붓고, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 DCM/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 담황색 고체를 수득하였다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (20 분간, 100 mL/분의 유속) 중 10-60% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (2.12 g, 76 %)를 무색 오일로서 분리하였다. MS m/z 389 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-(2- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일) 피페리딘-1-카복실레이트 (2.12 g, 5.46 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: CelluCoat (250x50 mm), 10 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH 50/50, 유속 120 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (958 mg, 45 %)를, 키랄 순도 99.9 %ee, 광회전 [α]20 D = +48.0 (아세토니트릴, c=1.0)으로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.84 - 1.95 (m, 1H), 2.04 - 2.15 (m, 1H), 2.24 - 2.45 (m, 2H), 3.04 - 3.15 (m, 1H), 3.47 - 3.58 (m, 1H), 3.65 (s, 3H), 4.14 - 4.23 (m, 1H), 5.25 (dd, 1H), 5.61 (s, 1H), 7.23 - 7.37 (m, 3H).
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(2- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일) 피페리딘-1-카복실레이트 (0.96 g, 2.47 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 19.48 mL, 111.25 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (687 mg, 84 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.36 (q, 1H), 1.48 (dq, 1H), 1.84 - 1.92 (m, 1H), 1.94 - 2.02 (m, 1H), 2.75 (dt, 1H), 2.92 (tt, 1H), 3.08 - 3.15 (m, 1H), 4.00 (d, 1H), 5.73 (s, 1H), 7.53 - 7.62 (m, 2H), 7.78 (t, 1H). [C15H14F4N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 331.1070. 측정값: 331.1086
실시예 74
5-(트랜스-2-(2- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(2- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (430 mg, 1.03 mmol) (실시예 73, 단계 1)를 MeOH (3 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -45℃로 냉각하였다. 수산화나트륨 (0.302 mL, 1.03 mmol)을 10 분 동안 첨가하고 상기 황색 용액을 -45℃에서 20 분간 계속 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.063 mL, 1.03 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -45℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (5.28 mL, 31.68 mmol)에 신속히 붓고, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 DCM/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 옅은 황색의 오일을 수득하였다. 미정제 트랜스-메틸 2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (398 mg, 정량 분석)를 분리하였다. MS m/z 387 (M-H)-
단계 2: 5-(트랜스-2-(2- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
트랜스-메틸 2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-피페리딘-1-카복실레이트 (400 mg, 1.03 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 8.12 mL, 46.35 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-(트랜스-2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (146 mg, 43 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.63 - 1.71 (m, 1H), 1.78 - 1.86 (m, 1H), 1.91 - 1.99 (m, 1H), 2.04 - 2.11 (m, 1H), 2.69 (dt, 1H), 2.87 - 2.93 (m, 1H), 3.19 - 3.23 (m, 1H), 4.00 (d, 1H), 5.88 (d, 1H), 7.53 - 7.61 (m, 2H), 7.77 (t, 1H). [C15H14F4N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 331.1070. 측정값: 331.1074
실시예 75
5-((2R,4S)-2-(3- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(3- 플루오로 -4-( 트리플루 오로메틸) 페닐 ) 피페리딘-1- 카복실레이트
2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (3.07 g, 8.8 mmol) (참조 화합물 33)을 질소 대기 하에서 메틸 THF (60 mL)에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (2.140 g, 13.20 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (2.70 g, 15.84 mmol)를 메틸 THF (30 mL) 중에 현탁시킨 후, 염화마그네슘 (1.508 g, 15.84 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 특대의 교반 막대를 사용하여 질소 하, 50℃에서 22 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 플라스크 1의 내용물을 플라스크 2로 옮긴 후, 생성된 백색 현탁액을 실온에서 20 시간 동안 교반하였다. 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (1.348 g, 7.92 mmol)를 메틸 THF (30 mL) 중에 현탁시킨 후, 염화마그네슘 (0.754 g, 7.92 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 50℃에서 5 시간 동안 교반한 후, 상기 반응 혼합물에 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 15 시간 동안 교반하였다. 0.1 M HCl과 DCM을 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 수상을 DCM으로 추출한 후, 상기 혼합된 유기상을 상 분리기를 통해 여과 후 증발시켰다. 잔류물을 바이오타지 (5:1 헵탄:EtOAc, 바이오타지? KP-SIL 340g 컬럼, 10 CV)로 정제하였다. 생성물인 메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (2.190 g, 59.3 %)를 무색의 오일로서 분리하였다. MS m/z 420 (M+H)+
단계 2: 메틸 2-(3- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-1-카복실레이트 (2.19 g, 5.22 mmol)를 MeOH (20 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (2.000 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.219 g, 5.48 mmol)을 첨가한 후, 상기 혼합물을 -40℃에서 15 분간 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.336 mL, 5.48 mmol)을 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 1 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (27.0 mL, 161.89 mmol)으로 옮긴 후, 상기 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반하였다. 물과 DCM을 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 수상을 DCM으로 추출한 후, 상기 혼합된 유기층을 상 분리기를 통해 여과 후 증발시켰다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/FA 95/5/0.2 버퍼 (25 분간, 100 mL/분의 유속) 중 15-55% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 메틸 2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.670 g, 33.0 %)를 무색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.82 - 1.93 (m, 1H), 2.12 - 2.44 (m, 3H), 3.04 - 3.16 (m, 1H), 3.35 - 3.46 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 4.11 - 4.21 (m, 1H), 5.09 - 5.18 (m, 1H), 5.56 (s, 1H), 6.97 - 7.09 (m, 2H), 7.52 (t, 1H). MS m/z 387 (M-H)-
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-(3- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 (2S,4R)- 메틸 2-(3-플 루오 로-4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
메틸 2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (670 mg, 1.73 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: CelluCoat (250x50), 10 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH 50/50, 유속 120 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (319 mg, 47 %)를, 키랄 순도 99.9 %ee, 광회전 [α]20 D = +53.4 (아세토니트릴, c=0.5)로, 그리고 (2S,4R)-메틸 2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (332 mg, 49 %)를, 키랄 순도 99.3 %ee, 광회전 [α]20 D = -47.6 (아세토니트릴, c=0.5)으로 수득하였다.
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(3- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (319 mg, 0.82 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 6.5 mL, 36.97 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 속에서 제거한 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (150 mg, 55 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.33 (q, 1H), 1.45 (dq, 1H), 1.84 - 1.90 (m, 1H), 1.99 - 2.05 (m, 1H), 2.72 (dt, 1H), 2.83 - 2.91 (m, 1H), 3.07 - 3.14 (m, 1H), 3.72 - 3.79 (m, 1H), 5.73 (s, 1H), 7.41 (d, 1H), 7.48 (d, 1H), 7.70 (t, 1H). [C15H14F4N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 331.1070. 측정값: 331.1058.
실시예 76
5-((2S,4R)-2-(3- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4R)-메틸 2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일) 피페리딘-1-카복실레이트 (332 mg, 0.85 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 6.74 mL, 38.47 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 속에서 제거한 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2S,4R)-2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (174 mg, 62 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.32 (q, 1H), 1.45 (dq, 1H), 1.85 - 1.90 (m, 1H), 2.00 - 2.04 (m, 1H), 2.72 (dt, 1H), 2.87 (tt, 1H), 3.08 - 3.13 (m, 1H), 3.73 - 3.77 (m, 1H), 5.73 (s, 1H), 7.41 (d, 1H), 7.48 (d, 1H), 7.70 (t, 1H). [C15H14F4N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 331.1070. 측정값: 331.1067.
실시예 77
5-((2R,4S)-2- 페닐피페리딘 -4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2- 페닐피페리딘 -1-카복실레이트 및 시스 - 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2- 페닐피페리딘 -1-카복실레이트
1-(메톡시카보닐)-2-페닐피페리딘-4-카복실산 (5.133 g, 19.50 mmol) (참조 화합물 34)을 메틸 THF (90 mL)에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (4.74 g, 29.24 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 질소 하에 실온에서 밤새 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (5.97 g, 35.09 mmol)를 메틸 THF (90 mL) 중에 현탁시킨 후, 염화마그네슘 (3.34 g, 35.09 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 질소 하에 실온에서 밤새 교반하였다 (플라스크 2). 이후, 플라스크 1의 담황색 현탁액을 플라스크 2의 백색 현탁액에 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 백색 현탁액을 질소 하, 실온에서 6 시간 30 분 동안 교반하였다. 그러는 동안, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (5.97 g, 35.09 mmol)를 메틸 THF (90 mL) 중에 현탁시킨 후, 염화마그네슘 (3.34 g, 35.09 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 질소 하, 50℃에서 2 시간 동안 교반한 후, 상기 반응 혼합물에 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 백색 현탁액을 질소 하, 실온에서 3 일간 교반하였다. 상기 혼합물을 1 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화한 후, MTBE를 첨가하였다. 상기 상들을 분리한 후, 상기 유기상을 물, 포화 NaHCO3 및 물로 세척하였다. 용매를 증발시킨 후 황색 오일을 수득하였다. 부분입체 이성질체를 실리카 (바이오타지, 농도구배는 헵탄 중 0% => 50 % EtOAc; 바이오타지? KP-SIL 340g 컬럼) 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-페닐피페리딘-1-카복실레이트 (1.14 g, 19 %) 및 시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-페닐피페리딘-1-카복실레이트 (3.77 g, 62 %)를 수득하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.22 - 1.31 (m, 3H), 1.84 - 2.11 (m, 3H), 2.26 - 2.35 (m, 1H), 2.82 - 2.92 (m, 1H), 3.28 - 3.48 (m, 3H), 3.63 (s, 3H), 4.12 - 4.21 (m, 3H), 4.96 - 5.04 (m, 1H), 7.17 - 7.35 (m, 5H). MS m/z 334 (M+H)+. 트랜스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.13 - 1.25 (m, 3H), 1.44 - 1.95 (m, 3H), 2.45 - 2.66 (m, 2H), 2.78 - 2.88 (m, 1H), 3.39 (s, 2H), 3.68 (s, 3H), 3.98 - 4.34 (m, 3H), 5.55 (s, br., 1H), 7.10 - 7.23 (m, 3H), 7.26 - 7.34 (m, 2H). MS m/z 334 (M+H)+.
단계 2: 시스 - 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2- 페닐피페리딘 -1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-페닐피페리딘-1-카복실레이트 (1.913 g, 5.74 mmol)를 MeOH (15 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (1.500 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.230 g, 5.74 mmol)을 5 분 동안 첨가한 후, 이 무색의 용액을 -40℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.352 mL, 5.74 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 2 시간 15 분 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (24 mL, 144.00 mmol)에 신속하게 붓고, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 MTBE/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리한 후 상기 유기상을 증발시켜 옅은 황색의 오일을 수득하였다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (20 분간, 100 mL/분의 유속) 중 0-30 % 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 2회 주입하여 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-페닐피페리딘-1-카복실레이트 (1.344 g, 77 %)를 백색 고체로 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.77 - 1.85 (m, 1H), 2.10 - 2.18 (m, 1H), 2.19 - 2.28 (m, 1H), 2.32 - 2.39 (m, 1H), 3.01 - 3.08 (m, 1H), 3.37 (ddd, 1H), 3.64 (s, 3H), 4.15 (ddd, 1H), 5.08 - 5.13 (m, 1H), 5.48 (s, 1H), 7.13 - 7.20 (m, 3H), 7.27 (t, 2H). MS m/z 303 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2- 페닐피페리딘 -1- 카복실레이트
라세미체 시스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-페닐피페리딘-1-카복실레이트 (1.34 g, 4.42 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 레프로실 (250x20), 8 ㎛의 입자 크기, 이동상: EtOH, 유속 100 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-페닐피페리딘-1-카복실레이트 (621 mg, 46 %)를 수득하였다. 키랄 순도 99.9 % ee. 광회전 [α]20 D = +65.8 (아세토니트릴, c=1).
단계 4: 5-((2R,4S)-2- 페닐피페리딘 -4- 일 ) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-페닐피페리딘-1-카복실레이트 (621 mg, 2.05 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 7 mL, 99.92 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 24 시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-페닐피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (306 mg, 61 %) (분리된 샘플은 DMSO를 포함하고 있음)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ1.76 - 2.02 (m, 2H), 2.11 - 2.30 (m, 2H), 3.05 - 3.21 (m, 2H), 3.41 - 3.49 (m, 1H), 4.14 (dd, 1H), 5.56 (s, 1H), 7.27 - 7.48 (m, 5H). [C14H16N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 245.1290. 측정값: 245.1270
실시예 78
5-((2S,4S)-2- 페닐피페리딘 -4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2- 페닐피페리딘 -1- 카복실레이트
트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-페닐피페리딘-1-카복실레이트 (1.104 g, 3.31 mmol) (실시예 77, 단계 1)를 MeOH (10 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (1.000 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.132 g, 3.31 mmol)을 10 분 동안 첨가한 후, 상기 무색의 용액을 -40℃에서 30 분간 교반을 지속하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.203 mL, 3.31 mmol)을 6 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 2 시간 30 분 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (14 mL, 84.00 mmol)에 신속하게 붓고, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 MTBE/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리한 후 상기 유기상을 증발시켜 갈색 오일을 수득하였다. 잔류물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (20 분간, 100 mL/분의 유속) 중 0-30 % 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 트랜스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-페닐피페리딘-1-카복실레이트 (722 mg, 72 %)를 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.66 (dq, 1H), 1.86 - 2.09 (m, 2H), 2.72 (d, 1H), 2.79 - 3.03 (m, 2H), 3.78 (s, 3H), 4.26 (br. s, 1H), 5.68 (br. s, 2H), 7.20 - 7.32 (m, 3H), 7.34 - 7.43 (m, 2H). MS m/z 303 (M+H)+
단계 2: (2S,4S)- 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2- 페닐피페리딘 -1- 카복실레이트
라세미체 트랜스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-페닐피페리딘-1-카복실레이트 (772 mg, 2.55 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄팍 AD (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH 75/25, 유속 15 mL/분]를 수행하여 (2S,4S)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-페닐피페리딘-1-카복실레이트 (249 mg, 32 %)를 수득하였다. 광회전 [α]20 D = +23.0 (아세토니트릴, c=1), 키랄 순도 99.7 %ee.
단계 3: 5-((2S,4S)-2- 페닐피페리딘 -4- 일 ) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4S)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-페닐피페리딘-1-카복실레이트 (249 mg, 0.82 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 3 mL, 42.82 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2S,4S)-2-페닐피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (255 mg, 127 %) (분리된 샘플은 DMSO를 포함하고 있음)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ2.10 - 2.43 (m, 4H), 3.21 (dt, 1H), 3.26 - 3.35 (m, 1H), 3.35 - 3.43 (m, 1H), 4.17 (dd, 1H), 5.73 (s, 1H), 7.34 - 7.48 (m, 5H). [C14H16N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 245.1290. 측정값: 245.1271.
실시예 79
5-((2R,4S)-2- 시클로헥실피페리딘 -4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2- 시클로헥실 -4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 2- 시클로헥실 -4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )피페리딘-1- 카복실레이트
무수 THF (80 mL) 중의 염화마그네슘 (2.085 g, 21.89 mmol)과 말론산 에틸 칼륨 (3.73 g, 21.89 mmol)의 현탁액을 질소 대기 하, 50℃에서 2.5 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 또 다른 플라스크에는, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (2.96 g, 18.24 mmol)을 0℃에서 무수 THF (20 mL) 중의 2-시클로헥실-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (3.28 g, 12.16 mmol) (참조 화합물 35)의 용액에 적가하고 질소 대기 하로 하였다. 상기 얼음조를 제거하고 상기 용액을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 이후, 플라스크 1의 내용물을 플라스크 2에 첨가한 후, 상기 생성된 혼합물을 밤새 교반하였다 (20 h). 상기 반응 혼합물을 농축시킨 후, 잔류물을 EtOAc와 H2O 중에 녹였다. 상기 수상을 EtOAc로 1 회 추출하고 상기 혼합된 유기상을 물, 10 % Na2CO3로 세척한 후, Na2SO4로 건조시켰다. 상기 유기상을 0.1 M NaOH로 세척하고 다시 건조한 후 증발시켜 황색 오일을 수득하였다. 상기 화합물을 바이오타지 [러닝 2 회, SNAP 340g KP-SIL, 선형 농도구배 헵탄/에틸 아세테이트 9:1 내지 1:1 (7 CV)]를 사용하여 추가로 정제하였다. 트랜스-메틸 2-시클로헥실-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (349 mg, 6.9%) 및 시스-메틸 2-시클로헥실-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (2.501 g, 49%)를 분리하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ0.90 - 1.29 (m, 5H), 1.26 (t, 3H), 1.37 - 2.05 (m, 10H), 2.57 - 2.70 (m, 1H), 2.85-3.02 (m, 1H), 3.48 (s, 2H), 3.67 (s, 3H), 3.71-3.84 (m, 1H), 3.86-3.99 (m, 1H), 4.18 (q, 2H). MS m/z 340 (M+H)+. 트랜스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ0.80 - 1.30 (m, 5H), 1.26 (t, 3H), 1.33 - 1.90 (m, 9H), 1,96-2.12 (m, 1H), 2.69 - 2.86 (m, 2H), 3.46 (s, 2H), 3.67 (s, 3H), 3.84-4.33 (m, 2H), 4.21 (q, 2H). MS m/z 340 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 2- 시클로헥실 -4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-시클로헥실-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.644 g, 4.84 mmol)를 MeOH (15 mL)에 용해시킨 후, -40℃로 냉각시켰다. 물 (1.500 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.194 g, 4.84 mmol)을 적가하고 상기 무색의 용액을 -40℃에서 30 분간 교반을 지속하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.297 mL, 4.84 mmol)를 적가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (21 mL, 126.00 mmol)에 신속하게 붓고, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 MTBE/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 상기 유기상을 Na2SO4로 건조한 후 증발시켜 담황색 폼을 수득하였다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/AcOH 95/5/0.2 버퍼 (30 분간, 100 mL/분의 유속) 중 15-75% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 2 회 주입하여 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 2-시클로헥실-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (814 mg, 55%)를 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ0.83-0.98 (m, 2H), 1.01-1.16 (m, 3H), 1.25-1.40 (m, 1H), 1.50 - 1.88 (m, 6H), 1.95 - 2.13 (m, 3H), 2.88-3.07 (m, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.79 - 3.89 (m, 1H), 3.95-4.07 (m, 1H), 5.70 (s, 1H). MS m/z 309 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2- 시클로헥실 -4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-시클로헥실-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (814 mg, 2.66 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄팍 IC (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/IPA 60/40, 유속 15 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-시클로헥실-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (427 mg, 50 %)를 수득하였다. 키랄 순도 99.9 %ee. 광회전 [α]20 D = +38.5 (아세토니트릴, c=1).
단계 4: 5-((2R,4S)-2- 시클로헥실피페리딘 -4- 일 ) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-시클로헥실-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.427 g, 1.38 mmol)를 HBr (AcOH 중 33%) 중에서 밤새 교반하였다 (19 시간). 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx I, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-시클로헥실피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (228 mg, 66%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ1.05-1.42 (m, 5H), 1.49-1.66 (m, 2H), 1.67 - 1.91 (m, 6H), 2.17-2.26 (m, 1H), 2.26-2.35 (m, 1H), 2.97 - 3.19 (m, 3H), 3.43-3.52 (m, 1H), 5.70 (s, 1H), 8.51 (s, 1H). [C14H22N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 251.1760. 측정값: 251.1750.
실시예 80
5-((2S,4S)-2- 시클로헥실피페리딘 -4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2- 시클로헥실 -4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 2-시클로헥실-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (349 mg, 1.03 mmol) (실시예 79, 단계 1)를 MeOH (5 mL)에 용해시킨 후, -40℃로 냉각시켰다. 물 (0.500 mL)에 용해된 수산화나트륨 (41.1 mg, 1.03 mmol)을 적가하고 상기 무색의 용액을 -40℃에서 30 분간 교반을 지속하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.063 mL, 1.03 mmol)을 적가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 2 시간 20 분 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (5 mL, 30.00 mmol)에 신속하게 붓고, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 MTBE/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리한 후, 상기 유기상을 Na2SO4로 건조하고, 증발시킨 후 황색 오일을 수득하였다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/AcOH 95/5/0.2 버퍼 (30 분간, 100 mL/분의 유속) 중 15-75% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 트랜스-메틸 2-시클로헥실-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (170 mg, 53%)를 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ0.82-1.08 (m, 2H), 1.08-1.32 (m, 3H), 1.45-1.83 (m, 8H), 1.89-2.02 (m, 1H), 2.12-2.23 (m, 1H), 2.79-3.04 (m, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.87-4.83 (m, 2H), 5.64 (s, 1H). MS m/z 309 (M+H)+
단계 2: (2S,4S)- 메틸 2- 시클로헥실 -4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 2-시클로헥실-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (212 mg, 0.69 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄셀 OJ (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: EtOH, 유속 12 mL/분]를 수행하여 (2S,4S)-메틸 2-시클로헥실-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (79 mg, 37 %)를 수득하였다. 키랄 순도 99.3 %ee. 광회전 [α]20 D = +5.1 (아세토니트릴, c=1).
단계 3: 5-((2S,4S)-2- 시클로헥실피페리딘 -4- 일 ) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4S)-메틸 2-시클로헥실-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (79 mg, 0.26 mmol)를 HBr (AcOH 중 33%) 중에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비:FractionLynx I, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼:Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2S,4S)-2-시클로헥실피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (22 mg, 35%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ1.00-1.39 (m, 5H), 1.51-1.64 (m, 1H), 1.64 - 1.93 (m, 6H), 1.96-2.11 (m, 1H), 2.15-2.25 (m, 1H), 2.26-2.35 (m, 1H), 2.92 - 3.02 (m, 1H), 3.03-3.16 (m, 1H), 3.22-3.33 (m, 2H), 5.57 (s, 1H). [C14H22N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 251.1760. 측정값: 251.1754.
실시예 81
5-((2R,4S)-2-(2- 메틸 -2H- 테트라졸 -5-일)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 벤질 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(2- 메틸 -2H- 테트라졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
1-(벤질옥시카보닐)-2-(2-메틸-2H-테트라졸-5-일)피페리딘-4-카복실산 (0.828 g, 2.40 mmol) (참조 화합물 36)을 THF (7 mL)에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (0.583 g, 3.60 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (0.816 g, 4.80 mmol)와 무수 염화마그네슘 (0.457 g, 4.80 mmol)을 THF (7.00 mL) 중에 현탁시키고, 50℃, 질소 하에 밤새 교반한 후, 실온으로 냉각시켰다 (플라스크 2). 플라스크 1의 내용물을 플라스크 2에 첨가한 후, 질소 하에 일주일 간 교반하였다 (72 h). 2 M HCl을 첨가하여 상기 반응을 중지시켰다. 상기 혼합물을 EtOAc로 3 회 추출하고, 상기 혼합된 유기상을 증발시킨 후 헵탄/EtOAc 88/12 - 100/0 (12 CV)을 사용하여 50 g 바이오타지 컬럼 상에서 정제하였다. 벤질 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(2-메틸-2H-테트라졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (499 mg, 59 %)를 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.22 - 1.31 (m, 3H), 1.72 - 1.83 (m, 1H), 2.00 - 2.08 (m, 1H), 2.41 (dt, 1H), 2.70 - 2.78 (m, 1H), 2.88 - 2.95 (m, 1H), 3.35 - 3.63 (m, 3H), 3.99 - 4.07 (m, 1H), 4.12 - 4.20 (m, 2H), 4.28 (s, 3H), 5.11 - 5.21 (m, 2H), 5.59 (t, 1H), 7.27 - 7.40 (m, 5H). MS m/z 416 (M+H)+
단계 2: 벤질 2-(2- 메틸 -2H- 테트라졸 -5-일)-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
벤질 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(2-메틸-2H-테트라졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.499 g, 1.20 mmol)를 MeOH (6 mL)에 용해시킨 후, -40℃로 냉각시켰다. 물 (0.6 mL)에 용해된 3.8 M NaOH (0.316 mL, 1.20 mmol)를 첨가한 후, 상기 반응물을 -40℃에서 40 분간 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.074 mL, 1.20 mmol)을 첨가하고 -40℃에서 3.5 시간 동안 교반을 지속하였다. 이후, 상기 반응 혼합물을 미리 가열한 80℃의 6 M HCl의 용액 (6.01 mL, 36.03 mmol)에 첨가하고 20 분간 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 물과 DCM 사이로 구분시켜 놓았다. 상기 수상을 DCM으로 2 회 추출한 뒤, 상기 혼합된 유기상을 건조하고 증발시켰다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (20 분간, 100 mL/분의 유속) 중 15-55% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 벤질 2-(2-메틸-2H-테트라졸-5-일)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (327 mg, 71 %)를 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.96 - 2.15 (m, 2H), 2.41 (dt, 1H), 2.64 - 2.74 (m, 1H), 3.12 - 3.19 (m, 1H), 3.61 - 3.72 (m, 1H), 4.07 - 4.20 (m, 4H), 5.13 (s, 2H), 5.43 (s, 1H), 5.58 - 5.64 (m, 1H), 7.25 - 7.41 (m, 5H). MS m/z 385 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)-벤질 2-(2- 메틸 -2H- 테트라졸 -5-일)-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-피페리딘-1- 카복실레이트 및 트랜스-벤질 2-(2- 메틸 -2H-테트라졸-5-일)-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
벤질 2-(2-메틸-2H-테트라졸-5-일)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (866 mg, 2.25 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC를 수행하였다: 시스 이성질체를 분취형 HPLC [컬럼: 키랄셀 OJ (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH/DEA 65/45/0.1, 유속 18 mL/분]를 사용하여 트랜스 이성질체로부터 분리하였다. 시스-거울상 이성질체를 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄팍 AD (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/IPA/DEA 50/50/0.1, 유속 15 mL/분]를 사용하여 (2R,4S)-벤질 2-(2-메틸-2H-테트라졸-5-일)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (301 mg, 35 %)를, 키랄 순도 99.1%ee, 광회전 [α]20 D = +28.9 (아세토니트릴, c=1), 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.96 - 2.13 (m, 2H), 2.39 (dt, 1H), 2.61 - 2.71 (m, 1H), 3.10 (p, 1H), 3.62 - 3.72 (m, 1H), 4.09 (dt, 1H), 4.18 (s, 3H), 5.12 (d, 2H), 5.33 (s, 1H), 5.56 (t, 1H), 7.21 - 7.36 (m, 5H)로 수득하였고, 그리고 트랜스-벤질 2-(2-메틸-2H-테트라졸-5-일)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (99 mg, 11 %)를 분리하였다.
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(2- 메틸 -2H- 테트라졸 -5-일)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-벤질 2-(2-메틸-2H-테트라졸-5-일)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (301 mg, 0.78 mmol)를 수소 브롬화물 (AcOH 중 33%) (4.1 mL, 23.49 mmol)에 용해시킨 후, 1 시간 동안 반응시켰다. 상기 혼합물을 증발시킨 후, 잔류물을 물과 EtOAc 사이에 구분시켜 놓았다. 상기 수상을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (20 분간, 100 mL/분의 유속) 중 0-15% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 5-((2R,4S)-2-(2-메틸-2H-테트라졸-5-일)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (143 mg, 73 %)을 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.70 (qd, 1H), 1.85 (q, 1H), 2.04 - 2.12 (m, 1H), 2.43 - 2.50 (m, 1H), 2.91 - 3.02 (m, 2H), 3.33 - 3.41 (m, 1H), 4.18 (dd, 1H), 4.32 (s, 3H), 5.68 (s, 1H). [C10H14N6O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 251.1256. 측정값: 251.1233.
실시예 82
5-(트랜스-2-(2- 메틸 -2H- 테트라졸 -5-일)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
트랜스-벤질 2-(2-메틸-2H-테트라졸-5-일)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (99 mg, 0.26 mmol) (실시예 81, 단계 3)를 수소 브롬화물 (HOAc 중 33%, 1.35 mL, 7.73 mmol)에 용해시킨 후, 1 시간 동안 반응시켰다. 상기 혼합물을 증발시킨 후, 잔류물을 물과 EtOAc 사이에 구분시켜 놓았다. 상기 수상을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (20 분간, 100 mL/분의 유속) 중 0-15% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 5-(트랜스-2-(2-메틸-2H-테트라졸-5-일)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (45 mg, 70 %)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ1.83 - 2.05 (m, 2H), 2.21 - 2.31 (m, 1H), 2.36 - 2.44 (m, 1H), 2.93 - 3.06 (m, 2H), 3.17 - 3.25 (m, 1H), 4.37 (s, 3H), 4.49 (t, 1H), 5.77 (s, 1H). [C10H14N6O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 251.1256. 측정값: 251.1262.
실시예 83
5-((2R,4S)-2-(1- 메틸 -1H- 테트라졸 -5-일)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 시스 -벤질 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(1- 메틸 -1H- 테트라졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
1-(벤질옥시카보닐)-2-(1-메틸-1H-테트라졸-5-일)피페리딘-4-카복실산 (0.495 g, 1.43 mmol) (참조 화합물 37)을 THF (4 mL)에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (0.349 g, 2.15 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (0.488 g, 2.87 mmol)와 무수 염화마그네슘 (0.273 g, 2.87 mmol)을 THF (4.00 mL)에 현탁시키고, 50℃, 질소 하에 밤새 교반한 후, 실온으로 냉각시켰다 (플라스크 2). 플라스크 1의 내용물을 플라스크 2에 첨가한 후, 질소 하에 일주일 간 교반하였다 (72 h). 2 M HCl을 첨가하여 상기 반응을 중지시켰다. 상기 혼합물을 EtOAc로 3 회 추출하고, 상기 혼합된 유기상을 증발시킨 후 헵탄/EtOAc 88/12 - 100/0 (12 CV)을 사용하여 50 g 바이오타지 컬럼 상에서 정제하였다. 시스-벤질 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(1-메틸-1H-테트라졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (482 mg, 81 %)를 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.25 (t, 3H), 1.89 - 1.97 (m, 1H), 2.05 - 2.12 (m, 1H), 2.28 - 2.34 (m, 1H), 2.59 - 2.66 (m, 1H), 2.93 (p, 1H), 3.35 - 3.41 (m, 1H), 3.62 (dd, 2H), 3.85 - 3.98 (m, 4H), 4.16 (q, 2H), 5.09 (q, 2H), 5.36 - 5.42 (m, 1H), 7.21 - 7.37 (m, 5H). MS m/z 416 (M+H)+
단계 2: 벤질 2-(1- 메틸 -1H- 테트라졸 -5-일)-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
벤질 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(1-메틸-1H-테트라졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.947 g, 2.28 mmol)를 MeOH (10 mL)에 용해시킨 후, -40℃로 냉각시켰다. 물 (1 mL)에 용해된 3.8 M NaOH (0.600 mL, 2.28 mmol)를 첨가하고 상기 반응물을 -40℃에서 40 분간 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.140 mL, 2.28 mmol)을 첨가하고 교반을 -40℃에서 3.5 시간 동안 지속하였다. 이후, 상기 반응 혼합물을 미리 가열한 80℃의 따뜻한 6 M HCl의 용액 (11.40 mL, 68.38 mmol)에 첨가한 후, 20 분간 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 물과 DCM 사이로 구분시켜 놓았다. 상기 수상을 DCM으로 2 회 추출한 뒤, 상기 혼합된 유기상을 건조하고 증발시켰다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (20 분간, 100 mL/분의 유속) 중 15-55% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 벤질 2-(1-메틸-1H-테트라졸-5-일)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (488 mg, 56 %)를 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.86 - 1.99 (m, 1H), 2.18 - 2.30 (m, 1H), 2.33 - 2.54 (m, 2H), 3.01 - 3.12 (m, 1H), 3.78 - 4.09 (m, 5H), 5.05 (s, 2H), 5.20 - 5.30 (m, 1H), 5.67 (s, 1H), 7.20 - 7.27 (m, 2H), 7.27 - 7.39 (m, 3H). MS m/z 385 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)-벤질 2-(1- 메틸 -1H- 테트라졸 -5-일)-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
벤질 2-(1-메틸-1H-테트라졸-5-일)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (488 mg, 1.27 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄팍 AS (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH/DEA 60/40/0.1, 유속 18 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-벤질 2-(1-메틸-1H-테트라졸-5-일)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (231 mg, 47 %)를 수득하였다. 키랄 순도 98%ee, 광회전 [α]20 D = +14.5 (아세토니트릴, c=1).
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(1- 메틸 -1H- 테트라졸 -5-일)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-벤질 2-(1-메틸-1H-테트라졸-5-일)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.231 g, 0.60 mmol)를 수소 브롬화물 (HOAc 중 33%, 5.26 mL, 30.05 mmol)에 용해시킨 후, 1 시간 동안 반응시켰다. 상기 혼합물을 증발시킨 후, 잔류물을 물과 EtOAc 사이에 구분시켜 놓았다. 상기 수상을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (20 분간, 100 mL/분의 유속) 중 0-10% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 화합물을 220 nm에서 UV로 검출하였다. 생성물 분획들 (이들은 DMSO를 포함하고 있음)을 수집하고 아세토니트릴을 증발시켰다. 상기 수상을 동결 건조시켰다. 대부분의 DMSO를 잔류시키고, 그 잔류물을 2 mL의 MeOH에 용해시킨 후 2 g SCX-2 컬럼 상에 로딩하고 상기 컬럼을 MeOH로 세척하였다. MeOH 중에서 10 mL의 10 % 트리에틸아민을 통해 러닝하여 아민을 유리시켰다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 물로부터 동결 건조시켜 5-((2R,4S)-2-(1-메틸-1H-테트라졸-5-일)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (100 mg, 67 %)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, dmso) δ1.47 (dq, 1H), 1.70 - 1.81 (m, 1H), 1.87 (d, 1H), 2.12 (d, 1H), 2.74 (dt, 1H), 2.92 - 3.02 (m, 1H), 3.04 - 3.13 (m, 1H), 4.09 (s, 3H), 4.18 (dd, 1H), 5.78 (s, 1H). [(2 x C10H14N6O2)+H]+에 대한 HRMS 계산값: 501.2435. 측정값: 501.2418.
실시예 84
5-((2R,4S)-2-( 시클로헥실옥시메틸 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-( 시클로헥실옥시메틸 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파 노일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 2-( 시클로헥실옥시메틸 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )피페리딘-1- 카복실레이트
2-(시클로헥실옥시메틸)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (2.425 g, 8.1 mmol) (참조 화합물 38)을 질소 대기 하에서 메틸 THF (60 mL)에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (1.970 g, 12.15 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (2.482 g, 14.58 mmol)를 메틸 THF (30 mL)에 현탁시킨 후, 염화마그네슘 (1.388 g, 14.58 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 특대의 교반 막대를 사용하여 질소 하, 50℃에서 22 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 플라스크 1의 내용물을 플라스크 2에 첨가하여 생성된 백색 현탁액을 실온에서 20 시간 동안 교반하였다. 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (1.241 g, 7.29 mmol)를 메틸 THF (30 mL)에 현탁시킨 후, 염화마그네슘 (0.694 g, 7.29 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 50℃에서 5 시간 동안 교반한 후, 상기 반응 혼합물에 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 15 시간 동안 교반하였다. 0.1 M HCl과 DCM을 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 수상을 DCM으로 추출한 후, 상기 혼합된 유기상을 상 분리기를 통해 여과하고 증발시켰다. 잔류물을 바이오타지 (5:1 헵탄:EtOAc, 바이오타지? KP-SIL 340g 컬럼, 10 CV)를 통해 정제하였다. 트랜스-메틸 2-(시클로헥실옥시메틸)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (210 mg, 7 %) 및 시스-메틸 2-(시클로헥실옥시메틸)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.13 g, 38 %)를 분리하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.14 - 2.14 (m, 17H), 2.70 - 2.79 (m, 1H), 3.11 - 3.30 (m, 2H), 3.34 - 3.62 (m, 4H), 3.69 (s, 3H), 3.82 - 3.91 (m, 1H), 4.07 - 4.24 (m, 3H). MS m/z 370 (M+H)+. 트랜스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.16 - 2.19 (m, 17H), 2.80 - 3.10 (m, 2H), 3.16 - 3.32 (m, 1H), 3.44 - 3.64 (m, 4H), 3.66 - 3.74 (m, 3H), 3.97 - 4.27 (m, 3H), 4.33 - 4.57 (m, 1H). MS m/z 370 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 2-( 시클로헥실옥시메틸 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(시클로헥실옥시메틸)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.13 g, 3.06 mmol)를 MeOH (14 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (1.400 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.128 g, 3.21 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 -40℃에서 15 분간 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.197 mL, 3.21 mmol)을 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 1 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (15.80 mL, 94.82 mmol)으로 옮긴 후, 상기 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반하였다. 물과 DCM을 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 수상을 DCM으로 추출한 후, 상기 혼합된 유기층을 상 분리기를 통해 여과하고 증발시켰다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/AcOH 95/5/0.2 버퍼 (25 분간, 100 mL/분의 유속) 중 15-55% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 2-(시클로헥실옥시메틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (423 mg, 41 %)를 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.12 - 2.15 (m, 14H), 2.93 - 3.04 (m, 1H), 3.10 - 3.31 (m, 2H), 3.35 - 3.50 (m, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.83 - 3.94 (m, 1H), 4.05 - 4.15 (m, 1H), 5.75 (s, 1H). MS m/z 339 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-( 시클로헥실옥시메틸 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이 소옥사졸-5-일)-피페리딘-1- 카복실레이트 및 (2S,4R)- 메틸 2-( 시클로헥실옥시메틸 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로 - 이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(시클로헥실옥시메틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (423 mg, 1.25 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄팍 IC (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH 70/30, 유속 18 mL/분]로 정제하여 (2R,4S)-메틸 2-(시클로헥실옥시메틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (190 mg, 45 %)를, 키랄 순도 98.3 %ee, 광회전 [α]20 D = +55.9 (아세토니트릴, c=1)로, 그리고 (2S,4R)-메틸 2-(시클로헥실옥시메틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (194 mg, 46 %)를, 키랄 순도 98.6 %ee, 광회전 [α]20 D = -55.4 (아세토니트릴, c=1)로 수득하였다.
단계 4: 5-((2R,4S)-2-( 시클로헥실옥시메틸 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(시클로헥실옥시메틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (190 mg, 0.56 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 4.43 mL, 25.27 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 속에서 제거한 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(시클로헥실옥시메틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (5 mg, 3 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.03 - 1.25 (m, 6H), 1.32 - 1.48 (m, 2H), 1.55 - 1.68 (m, 2H), 1.70 - 1.90 (m, 4H), 2.56 - 2.66 (m, 1H), 2.68 - 2.79 (m, 2H), 2.99 - 3.06 (m, 1H), 3.06 - 3.83 (m, 3H), 5.70 (s, 1H). [C15H24N2O3+H]+에 대한 HRMS 계산값: 281.1865. 측정값: 281.1860
실시예 85
5-((2S,4R)-2-( 시클로헥실옥시메틸 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4R)-메틸 2-(시클로헥실옥시메틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (194 mg, 0.57 mmol) (실시예 84, 단계 3)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 4.52 mL, 25.80 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 속에서 제거한 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2S,4R)-2-(시클로헥실옥시메틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (4.5 mg, 3 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.04 - 1.24 (m, 6H), 1.33 - 1.46 (m, 2H), 1.57 - 1.66 (m, 2H), 1.73 - 1.88 (m, 4H), 2.56 - 2.67 (m, 1H), 2.68 - 2.80 (m, 2H), 2.99 - 3.06 (m, 1H), 3.07 - 3.84 (m, 3H), 5.70 (s, 1H). [C15H24N2O3+H]+에 대한 HRMS 계산값: 281.1865. 측정값: 281.1893
실시예 86
5-(트랜스-2-( 시클로헥실옥시메틸 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-( 시클로헥실옥시메틸 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 2-(시클로헥실옥시메틸)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (210 mg, 0.57 mmol) (실시예 84, 단계 1)를 MeOH (3 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (0.300 mL)에 용해된 수산화나트륨 (23.87 mg, 0.60 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 -40℃에서 15 분간 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.037 mL, 0.60 mmol)을 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 1 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (2.94 mL, 17.62 mmol)에 옮긴 후, 상기 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반하였다. 물과 DCM을 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 수상을 DCM으로 추출한 후, 상기 혼합된 유기층을 상 분리기를 통해 여과하고 증발시켰다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/AcOH 95/5/0.2 버퍼 (20 분간, 100 mL/분의 유속) 중 15-55% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 트랜스-메틸 2-(시클로헥실옥시메틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (121 mg, 63 %)를 분리하였다. MS m/z 339 (M+H)+
단계 2: 5-(트랜스-2-( 시클로헥실옥시메틸 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
트랜스-메틸 2-(시클로헥실옥시메틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (121 mg, 0.36 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, (2.75 mL, 15.69 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 속에서 제거한 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-(트랜스-2-(시클로헥실옥시메틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (15 mg, 15 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.09 - 1.25 (m, 5H), 1.38 - 1.53 (m, 2H), 1.55 - 1.65 (m, 2H), 1.65 - 1.83 (m, 5H), 2.55 - 2.63 (m, 1H), 2.69 - 2.80 (m, 2H), 3.02 - 3.88 (m, 4H), 5.76 (s, 1H). [C15H24N2O3+H]+에 대한 HRMS 계산값: 281.1865. 측정값: 281.1879
실시예 87
5-((2R,4S)-2-( 디플루오로메틸 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-( 디플루오로메틸 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 2-( 디플루오로메틸 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )피페리딘-1- 카복실레이트
2-(디플루오로메틸)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (2.2 g, 9.27 mmol) (참조 화합물 39)을 질소 대기 하에서 메틸 THF (60 mL)에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (2.256 g, 13.91 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (2.84 g, 16.69 mmol)를 메틸 THF (60 mL)에 현탁시킨 후, 염화마그네슘 (1.590 g, 16.69 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 특대의 교반 막대를 사용하여 질소 하, 50℃에서 22 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 플라스크 1의 내용물을 플라스크 2에 첨가하여 생성된 백색 현탁액을 실온에서 20 시간 동안 교반하였다. 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (0.71 g, 4.17 mmol)를 질소 대기 하에서 메틸 THF (30 mL) 중에 현탁시킨 후, 염화마그네슘 (0.41 g, 4.31 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 50℃에서 6 시간 동안 세게 교반하였다. 상기 현탁액을 상기 반응 혼합물에 첨가하고 교반을 실온에서 17 시간 동안 지속하였다. 포화 NH4Cl과 DCM을 첨가하고 상들을 분리하였다. 상기 수상을 DCM으로 추출한 후, 상기 혼합된 유기층을 상 분리기를 통해 여과한 후 증발시켰다. 잔류물을 바이오타지? KP-SIL 340g 컬럼 상에서 자동화 섬광 크로마토그래피로 정제하였다. 헵탄 중 5:1 내지 1:1의 EtOAc의 농도구배 (15 CV)를 이동상으로 사용하였다. 트랜스-메틸 2-(디플루오로메틸)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (203 mg, 7 %) 및 시스-메틸 2-(디플루오로메틸)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-피페리딘-1-카복실레이트 (1.38 g, 48 %)를 분리하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.29 (t, 3H), 1.47 - 2.09 (m, 4H), 2.70 - 2.83 (m, 1H), 3.05 - 3.18 (m, 1H), 3.51 (d, 2H), 3.73 (s, 3H), 3.91 - 4.02 (m, 1H), 4.20 (q, 2H), 4.11 - 4.30 (m, 1H), 5.91 (dt, 1H). MS m/z 308 (M+H)+. 트랜스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.28 (t, 3H), 1.39 - 2.32 (m, 4H), 2.88 - 3.23 (m, 2H), 3.51 (s, 2H), 3.73 (s, 3H), 4.20 (q, 2H), 4.11 - 4.70 (m, 2H), 5.88 (t, 1H). MS m/z 308 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 2-( 디플루오로메틸 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(디플루오로메틸)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.38 g, 4.49 mmol)를 MeOH (20 mL)에 용해시키고 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (2.000 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.180 g, 4.49 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 -40℃에서 15 분간 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.275 mL, 4.49 mmol)을 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 1 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (23.20 mL, 139.22 mmol)에 옮긴 후, 상기 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반하였다. 물과 DCM을 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 수상을 DCM으로 추출한 후, 상기 혼합된 유기층을 상 분리기를 통해 여과한 후 증발시켰다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/AcOH 95/5/0.2 버퍼 (20 분간, 100 mL/분의 유속) 중 5-55% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 2-(디플루오로메틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (650 mg, 52 %)를 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.77 - 1.88 (m, 1H), 2.03 - 2.24 (m, 3H), 2.93 - 3.03 (m, 1H), 3.22 - 3.33 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.92 - 4.02 (m, 1H), 4.21 - 4.34 (m, 1H), 5.73 (s, 1H), 5.92 (dt, 1H). MS m/z 275 (M-H)-
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-( 디플루오로메틸 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(디플루오로메틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (650 mg, 2.35 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄팍 AD (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH 70/30, 유속 18 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(디플루오로메틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (278 mg, 43 %)를, 키랄 순도 99.5%ee, 광회전 [α]20 D = +73.7 (아세토니트릴, c=1)로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.75 - 1.86 (m, 1H), 2.01 - 2.21 (m, 3H), 2.91 - 3.01 (m, 1H), 3.20 - 3.30 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.89 - 4.01 (m, 1H), 4.18 - 4.33 (m, 1H), 5.72 (s, 1H), 5.88 (dt, 1H), 9.00 (br, 1H).
단계 4: 5-((2R,4S)-2-( 디플루오로메틸 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(디플루오로메틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (278 mg, 1.01 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 7.93 mL, 45.29 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 속에서 제거한 후, 상기 화합물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (20 분간, 19 mL/분의 유속) 중 0-10% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x19 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 5-((2R,4S)-2-(디플루오로메틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (224 mg)을 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ1.66 - 1.77 (m, 1H), 1.77 - 1.89 (m, 1H), 2.24 - 2.31 (m, 1H), 2.36 - 2.43 (m, 1H), 3.12 - 3.27 (m, 2H), 3.51 - 3.58 (m, 1H), 3.73 - 3.86 (m, 1H), 5.84 (s, 1H), 6.14 (dt, 1H). [C9H12F2N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 219.0945. 측정값: 219.0950.
실시예 88
5-(트랜스-2-( 디플루오로메틸 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-( 디플루오로메틸 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 2-(디플루오로메틸)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (203 mg, 0.66 mmol) (실시예 87, 단계 1)를 MeOH (3 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (0.300 mL)에 용해된 수산화나트륨 (26.4 mg, 0.66 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 -40℃에서 15 분간 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.040 mL, 0.66 mmol)을 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (3.41 mL, 20.48 mmol)에 옮긴 후, 상기 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반하였다. 물과 DCM을 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 수상을 DCM으로 추출한 후, 상기 혼합된 유기층을 상 분리기를 통해 여과한 후 증발시켰다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/AcOH 95/5/0.2 버퍼 (15 분간, 19 mL/분의 유속) 중 5-55% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x20 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 트랜스-메틸 2-(디플루오로메틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (122 mg, 67 %)를 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.35 - 1.65 (m, 1H), 1.68 - 1.82 (m, 1H), 1.87 - 2.12 (m, 1H), 2.30 - 2.45 (m, 1H), 2.70 - 3.22 (m, 2H), 3.74 (s, 3H), 4.10 - 4.74 (m, 2H), 5.69 (s, 1H), 5.75 - 6.09 (m, 1H). MS m/z 275 (M-H)-
단계 2: 5-(트랜스-2-( 디플루오로메틸 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
트랜스-메틸 2-(디플루오로메틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (122 mg, 0.44 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 8.21 mL, 46.87 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 속에서 제거한 후, 상기 화합물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (20 분간, 19 mL/분의 유속) 중 0-10% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x19 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 5-(트랜스-2-(디플루오로메틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (86 mg, 89 %)을 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ1.80 - 2.00 (m, 3H), 2.03 - 2.12 (m, 1H), 2.76 - 2.86 (m, 1H), 2.93 - 3.13 (m, 2H), 3.22 - 3.28 (m, 1H), 5.78 (s, 1H), 5.81 (dt, 1H). MS m/z 219 (M+H)+
실시예 89
5-((2S,4S)-2-((4,4- 디플루오로시클로헥실 ) 메틸 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-((4,4- 디플루오로시클로헥실 ) 메틸 )-4-(3- 에톡시 -3-옥 소프로파노 일)-피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 2-((4,4- 디플루오로시클로헥실 ) 메틸 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )피페리딘-1- 카복실레이트
2-((4,4-디플루오로시클로헥실)메틸)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (4.82 g, 15.09 mmol) (참조 화합물 40)을 메틸 THF (150 mL)에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (3.67 g, 22.64 mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 질소 하, 실온에서 3 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (4.62 g, 27.17 mmol)를 메틸 THF (150 mL)에 현탁시킨 후, 염화마그네슘 (2.59 g, 27.17 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 큰 자성 교반 막대를 이용하여 질소 하, 50℃에서 3 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 플라스크 1의 내용물을 플라스크 2로 옮겨 담았다. 생성된 황색 현탁액을 질소 하, 실온에서 밤새 교반하였다. 상기 혼합물을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화한 후, MTBE (100 mL)와 물 (100 mL)을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 상기 유기층을 물, 포화 NaHCO3 및 식염수로 세척하였다. 상기 유기층을 Na2SO4로 건조하고 여과 후 증발시켜 무색 오일을 수득하였다. 잔류물을 20-50%의 농도구배 (8 CV)를 사용하여 바이오타지 (340g) 상에서 자동화 섬광 크로마토그래피로 정제하였다. 상기 컬럼을 20%에서 컨디셔닝하였다 (1 CV). 트랜스-메틸 2-((4,4-디플루오로시클로헥실)메틸)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (300 mg, 5 %) 및 시스-메틸 2-((4,4-디플루오로-시클로헥실)메틸)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (2.66 g, 45 %)를 분리하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.15 - 2.11 (m, 18H), 2.66 - 2.76 (m, 1H), 2.98 - 3.09 (m, 1H), 3.50 (s, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.83 - 3.93 (m, 1H), 4.11 - 4.24 (m, 3H). MS m/z 390 (M+H)+. 트랜스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.15 - 2.13 (m, 18H), 2.77 - 2.94 (m, 2H), 3.49 (s, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.97 - 4.33 (m, 3H), 4.34 - 4.65 (m, 1H).
단계 2: 시스 - 메틸 2-((4,4- 디플루오로시클로헥실 ) 메틸 )-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-((4,4-디플루오로시클로헥실)메틸)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (2.66 g, 6.83 mmol)를 MeOH (20 mL)에 용해시키고 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (2.000 mL)에 용해된 수산화나트륨 (2.009 mL, 6.83 mmol)을 10 분 동안 첨가하고, 이 황색 오일을 -40℃에서 20 분간 계속 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.419 mL, 6.83 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (30 mL, 180.00 mmol)에 신속하게 붓고, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 DCM/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고, 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 백색 고체를 수득하였다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/FA 95/5/0.2 버퍼 (30 분간, 100 mL/분의 유속) 중 5-55% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 2-((4,4-디플루오로시클로헥실)메틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.6 g, 65 %)를 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.10 - 2.12 (m, 15H), 2.96 - 3.05 (m, 1H), 3.08 - 3.19 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.87 - 4.00 (m, 1H), 4.14 - 4.24 (m, 1H), 5.72 (s, 1H). MS m/z 357 (M-H)-
단계 3: (2S,4S)- 메틸 2-((4,4- 디플루오로시클로헥실 ) 메틸 )-4-(3-옥소-2,3-디 히드로이소옥 사졸-5-일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 (2R,4R)- 메틸 2-((4,4-디 플루오로시클 로헥실) 메틸 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-((4,4-디플루오로시클로헥실)메틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.6 g, 4.46 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: CelluCoat (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/IPA 80/20, 유속 18 mL/분]를 수행하여 (2S,4S)-메틸 2-((4,4-디플루오로시클로헥실)메틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로-이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (787 mg, 49 %)를, 키랄 순도 99.8 %ee, 광회전 [α]20 D = +28.8 (아세토니트릴, c=1)로, 그리고 (2R,4R)-메틸 2-((4,4-디플루오로시클로헥실)-메틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (752 mg, 47 %)를, 키랄 순도 99.9 %ee, 광회전 [α]20 D = -30.2 (아세토니트릴, c=1)로 수득하였다.
단계 4: 5-((2S,4S)-2-((4,4- 디플루오로시클로헥실 ) 메틸 )피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온
(2S,4S)-메틸 2-((4,4-디플루오로시클로헥실)메틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-피페리딘-1-카복실레이트 (0.787 g, 2.20 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 17.31 mL, 98.82 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2S,4S)-2-((4,4-디플루오로시클로헥실)메틸)-피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (424 mg, 64 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, DMSO) δ0.98 - 1.41 (m, 5H), 1.51 - 2.61 (m, 12H), 2.66 - 2.75 (m, 1H), 2.95 - 3.04 (m, 1H), 5.59 - 5.67 (m, 1H). [C15H22F2N2O2+H]+에 대한 MS 계산값: 301.1728. 측정값: 301.1713
실시예 90
5-((2R,4R)-2-((4,4- 디플루오로시클로헥실 ) 메틸 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4R)-메틸 2-((4,4-디플루오로시클로헥실)메틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-피페리딘-1-카복실레이트 (0.752 g, 2.10 mmol) (실시예 89, 단계 3)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 16.54 mL, 94.42 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4R)-2-((4,4-디플루오로시클로헥실)메틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (415 mg, 66 %)을 수득하였다. [C15H22F2N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 301.1728. 측정값: 301.1741
실시예 91
5-(트랜스-2-((4,4- 디플루오로시클로헥실 ) 메틸 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-((4,4- 디플루오로시클로헥실 ) 메틸 )-4-(3-옥소-2,3-디 히드로이소옥 사졸-5-일)-피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 2-((4,4-디플루오로시클로헥실)메틸)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (300 mg, 0.77 mmol) (실시예 89, 단계 1)를 MeOH (3 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (0.300 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.227 mL, 0.77 mmol)을 10 분 동안 첨가하고 이 황색 오일을 -40℃에서 20 분간 계속 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.047 mL, 0.77 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 3 시간 15 분 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (4 mL, 24.00 mmol)에 신속하게 붓고, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 DCM/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 미정제 트랜스-메틸 2-((4,4-디플루오로시클로헥실)메틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (267 mg, 97 %)를 담황색 고체로서 수득하였다. MS m/z 357 (M-H)-
단계 2: 5-(트랜스-2-((4,4- 디플루오로시클로헥실 ) 메틸 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
트랜스-메틸 2-((4,4-디플루오로시클로헥실)메틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-피페리딘-1-카복실레이트 (0.267 g, 0.75 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 5.87 mL, 33.53 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-(트랜스-2-((4,4-디플루오로시클로헥실)메틸)-피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (63 mg, 28 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ0.99 - 1.19 (m, 3H), 1.27 - 1.35 (m, 1H), 1.38 - 1.46 (m, 1H), 1.46 - 1.55 (m, 1H), 1.61 - 1.87 (m, 7H), 1.87 - 1.98 (m, 2H), 2.54 - 2.61 (m, 1H), 2.61 - 2.70 (m, 1H), 2.72 - 2.79 (m, 1H), 3.03 - 3.09 (m, 1H), 5.75 (s, 1H). [C15H22F2N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 301.1728. 측정값: 301.1751
실시예 92
5-((2S,4S)-2-(4- 플루오로페네틸 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(4- 플루오로페네 틸)피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(4-플 루오로페네 틸)피페리딘-1- 카복실레이트
2-(4-플루오로페네틸)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (4.34 g, 14.03 mmol) (참조 화합물 41)을 질소 대기 하에서 메틸 THF (100 mL)에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (3.41 g, 21.05 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 실온에서 4 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (4.30 g, 25.25 mmol)를 메틸 THF (100 mL)에 현탁시킨 후, 염화마그네슘 (2.404 g, 25.25 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 특대의 교반 막대를 사용하여 질소 하, 50℃에서 4 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 플라스크 1의 내용물을 플라스크 2에 첨가한 후, 상기 혼합물 (백색 현탁액)을 실온에서 19 시간 동안 교반하였다. 새로운 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (4.30 g, 25.25 mmol)를 메틸 THF (100 mL)에 현탁시킨 후, 염화마그네슘 (2.404 g, 25.25 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 특대의 교반 막대를 사용하여 질소 하, 50℃에서 4 시간 동안 교반한 후, 상기 반응 혼합물에 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 다시 16 시간 동안 교반하였다. 0.1 M HCl과 DCM을 첨가하고, 상들을 분리한 후 상기 수상을 DCM으로 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 포화 NaHCO3로 세척한 후, 상 분리기를 통해 여과하고 증발시켰다. 잔류물을 2개의 바이오타지? KP-SIL 340g 컬럼 상에서 자동화 섬광 크로마토그래피로 정제하였다. 이동상은, 2:1 헵탄:EtOAc (4 CV) 이후 2:1->1:1 헵탄:EtOAc (6 CV)의 농도구배를 사용하였다. 트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(4-플루오로페네틸)피페리딘-1-카복실레이트 (0.74 g, 14 %) 및 시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(4-플루오로페네틸)피페리딘-1-카복실레이트 (3.17 g, 60 %)를 분리하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.24 (t, 3H), 1.50 - 2.11 (m, 6H), 2.48 - 2.65 (m, 2H), 2.67 - 7.77 (m, 1H), 3.03 - 3.14 (m, 1H), 3.50 (s, 2H), 3.69 (s, 3H), 3.84 - 3.93 (m, 1H), 4.07 (p, 1H), 4.12 - 4.22 (m, 2H), 6.95 (t, 2H), 7.08 - 7.16 (m, 2H). MS m/z 380 (M+H)+. 트랜스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.23 - 1.32 (m, 3H), 1.41 - 2.11 (m, 6H), 2.42 - 2.66 (m, 2H), 2.76 - 2.96 (m, 2H), 3.45 (s, 2H), 3.69 (s, 3H), 4.01 - 4.65 (m, 4H), 6.97 (t, 2H), 7.13 (s, br., 2H). MS m/z 380 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 2-(4- 플루오로페네틸 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(4-플루오로페네틸)피페리딘-1-카복실레이트 (3.15 g, 8.30 mmol)를 MeOH (30 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (3.00 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.332 g, 8.30 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 -40℃에서 15 분간 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.509 mL, 8.30 mmol)을 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (42.9 mL, 257.36 mmol)에 옮긴 후, 상기 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반하였다. DCM과 물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기를 통과시킨 후 증발시켰다. 화합물 (4회의 러닝으로 나눔)을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (20 분간, 100 mL/분의 유속) 중 0-25% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 2-(4-플루오로페네틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.9 g, 66 %)를 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.53 - 2.14 (m, 6H), 2.46 - 2.64 (m, 2H), 2.98 - 3.07 (m, 1H), 3.12 - 3.24 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.87 - 3.99 (m, 1H), 4.05 - 4.16 (m, 1H), 5.72 (s, 1H), 6.85 - 6.94 (m, 2H), 7.04 - 7.11 (m, 2H). MS m/z 349 (M+H)+
단계 3: (2S,4S)- 메틸 2-(4- 플루오로페네틸 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소 옥사졸-5-일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 (2R,4R)- 메틸 2-(4- 플루오로페네틸 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(4-플루오로페네틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.4 g, 4 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄팍 AD (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH 80/20, 유속 18 mL/분]를 수행하여 (2S,4S)-메틸 2-(4-플루오로페네틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (582 mg, 42 %)를, 키랄 순도 99.9 %ee, 광회전 [α]20 D = +51.6 (아세토니트릴, c=1)로, 그리고 (2R,4R)-메틸 2-(4-플루오로페네틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (676 mg, 48 %)를, 키랄 순도 99.4 %ee, 광회전 [α]20 D = -45.0 (아세토니트릴, c=1)으로 수득하였다.
단계 4: 5-((2S,4S)-2-(4- 플루오로페네틸 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4S)-메틸 2-(4-플루오로페네틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (435 mg, 1.25 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 9.84 mL, 56.19 mmol)에 용해시켜 황색 용액을 얻었다. 상기 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하고 용매를 제거한 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2S,4S)-2-(4-플루오로페네틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (228 mg, 63 %)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ1.48 (dd, 1H), 1.64 - 1.97 (m, 3H), 2.13 (d, 1H), 2.30 (d, 1H), 2.66 - 2.80 (m, 2H), 2.84 - 3.10 (m, 3H), 3.34 - 3.43 (m, 1H), 5.51 (s, 1H), 6.97 - 7.05 (m, 2H), 7.19 - 7.28 (m, 2H). [C16H19FN2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 291.1509. 측정값: 291.1497
실시예 93
5-((2R,4R)-2-(4- 플루오로페네틸 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4R)-메틸 2-(4-플루오로페네틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (507 mg, 1.46 mmol) (실시예 92, 단계 3)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 11.5 mL, 65.49 mmol)에 용해시켜 황색 용액을 얻었다. 상기 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하고 용매를 제거한 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4R)-2-(4-플루오로페네틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (278 mg, 65%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ1.48 (q, 1H), 1.70 (dq, 1H), 1.78 - 1.96 (m, 2H), 2.09 - 2.17 (m, 1H), 2.26 - 2.34 (m, 1H), 2.66 - 2.80 (m, 2H), 2.86 - 3.09 (m, 3H), 3.35 - 3.43 (m, 1H), 5.52 (s, 1H), 6.98 - 7.05 (m, 2H), 7.21 - 7.26 (m, 2H). [C16H19FN2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 291.1509. 측정값: 291.1483
실시예 94
5-(트랜스-2-(4- 플루오로페네틸 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(4- 플루오로페네틸 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(4-플루오로페네틸)피페리딘-1-카복실레이트 (730 mg, 1.92 mmol) (실시예 92, 단계 1)를 MeOH (7 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (0.700 mL)에 용해된 수산화나트륨 (77 mg, 1.92 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 -40℃에서 15 분간 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.118 mL, 1.92 mmol)을 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (9.94 mL, 59.64 mmol)에 옮긴 후, 상기 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반하였다. DCM과 물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고, 상기 수성상을 DCM으로 추출하고, 상기 혼합된 유기상을 상 분리기를 통과시킨 후 증발시켰다. 잔류물을 바이오타지? KP-SIL 100g 컬럼 상에서 자동화 섬광 크로마토그래피로 정제하였다. DCM:MeOH:HCOOH=50:1:0.1 (10 CV)을 이동상으로 사용하였다. 트랜스-메틸 2-(4-플루오로페네틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (550 mg, 82 %)를 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.01 - 2.13 (m, 6H), 2.48 - 2.70 (m, 2H), 2.88 - 3.08 (m, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.98 - 4.69 (m, 2H), 5.64 (s, 1H), 6.91 - 7.02 (m, 2H), 7.06 - 7.21 (m, 2H). MS m/z 349 (M+H)+
단계 2: 5-(트랜스-2-(4- 플루오로페네틸 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
트랜스-메틸 2-(4-플루오로페네틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (137 mg, 0.39 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 3.1 mL, 17.70 mmol)에 용해시켜 황색 용액을 얻었다. 상기 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하고 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-(트랜스-2-(4-플루오로페네틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (80 mg, 70 %)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, dmso) δ1.42 - 1.78 (m, 5H), 1.82 - 1.95 (m, 1H), 2.52 - 2.68 (m, 4H), 2.74 - 2.84 (m, 1H), 3.05 - 3.13 (m, 1H), 5.73 (s, 1H), 7.01 - 7.10 (m, 2H), 7.15 - 7.25 (m, 2H). [C16H19FN2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 291.1509. 측정값: 291.1522
실시예 95
5-((2S,4S)-2-(3,3- 디메틸부틸 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(3,3- 디메틸부틸 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 2-(3,3- 디메틸부틸 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )피페리딘-1- 카복실레이트
무수 THF (40 mL) 중의 염화마그네슘 (0.852 g, 8.94 mmol)과 말론산 에틸 칼륨 (2.283 g, 13.42 mmol)의 현탁액을 질소 대기 하, 50℃에서 3.5 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 또 다른 플라스크에는, 0℃ 질소 대기 하에서, 무수 THF (40 mL) 중의 2-(3,3-디메틸부틸)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (2.427 g, 8.94 mmol) (참조 화합물 42)의 용액에 카보닐디이미다졸 (1.740 g, 10.73 mmol)을 적가하였다. 이 용액을 1.5 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 플라스크 1의 내용물을 10 분간에 걸쳐 플라스크 2에 첨가한 후, 상기 생성된 혼합물을 실온에서 20 시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 농축시키고 잔류물을 EtOAc와 H2O에 녹였다. 상기 수상을 EtOAc로 1 회 추출하고, 상기 혼합된 유기상을 H2O, 포화 NaHCO3로 세척한 후, Na2SO4로 건조하고 여과시킨 후 증발시켜 검은색 오일을 수득하였다. 바이오타지 (340g 컬럼, 농도구배: 헵탄 중 20-30% EtOAc, 7 CV)를 사용한 분리를 수행하여 트랜스-메틸 2-(3,3-디메틸부틸)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (574 mg, 24 %) 및 시스-메틸 2-(3,3-디메틸부틸)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.74 g, 72 %)를 황색 오일로서 수득하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ0.85 (s, 9H), 1.03 - 1.95 (m, 10H), 2.01 - 2.10 (m, 1H), 2.65 - 2.75 (m, 1H), 2.98 - 3.08 (m, 1H), 3.51 (s, 2H), 3.69 (s, 3H), 3.83 - 4.02 (m, 2H), 4.19 (q, 2H). MS m/z 342 (M+H)+. 트랜스-이성질체: MS m/z 342 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 2-(3,3- 디메틸부틸 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
MeOH (3.9 mL) 중의 시스-메틸 2-(3,3-디메틸부틸)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.78 g, 5.22 mmol)의 용액을 -30℃에서 MeOH/H2O (4.4 mL / 0.3 mL) 중의 NaOH (288 mg, 7.2 mmol)의 용액에 첨가하였다. 10 분후, MeOH (5.2 mL)와 H2O (5.2 mL) 중에 히드록실아민 히드로클로라이드 (726 mg, 10.45 mmol) 및 NaOH (418 mg, 10.45 mmol)를 첨가하였다. 교반을 -30℃에서 30 분간 지속하였다. 상기 반응 용액을 80℃에서 6 M HCl (7.7 mL)에 붓고, 80℃에서 1 시간 동안 가열하였다. 유기 용매를 농축하고 DCM (x2)로 추출한 후, 상 분리기를 사용하여 건조하고 증발시켜 오렌지색 오일을 수득하였다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/FA 95/5/0.2 버퍼 (30 분간, 100 mL/분의 유속) 중 30-60% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 2-(3,3-디메틸부틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (717 mg, 44 %)를 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ0.79 (s, 9H), 1.01 - 1.19 (m, 2H), 1.23 - 1.48 (m, 2H), 1.83 - 1.96 (m, 2H), 1.98 - 2.11 (m, 2H), 2.94 - 3.04 (m, 1H), 3.09 - 3.19 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.91 - 4.06 (m, 2H), 5.71 (d, 1H). MS m/z 311 (M+H)+
단계 3: (2S,4S)- 메틸 2-(3,3- 디메틸부틸 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(3,3-디메틸부틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (717 mg, 2.31 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄팍 IC (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/IPA 80/20, 유속 18 mL/분]를 수행하여 (2S,4S)-메틸 2-(3,3-디메틸부틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-피페리딘-1-카복실레이트 (341 mg, 48 %)를, 키랄 순도 99.9 %ee, 광회전 [α]20 D = +36.5 (아세토니트릴, c=1)로 수득하였다.
단계 4: 5-((2S,4S)-2-(3,3- 디메틸부틸 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4S)-메틸 2-(3,3-디메틸부틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (341 mg, 1.1 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 20 mL)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 24 시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 상기 화합물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (15 분간, 100 mL/분의 유속) 중 5-30% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 5-((2S,4S)-2-(3,3-디메틸부틸)피페리딘-4-일)-이소옥사졸-3(2H)-온 (235 mg, 85 %)을 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ0.90 (s, 9H), 1.22 - 1.34 (m, 2H), 1.43 - 1.78 (m, 4H), 2.10 (d, 1H), 2.22 (d, 1H), 2.85 - 2.94 (m, 1H), 2.98 - 3.07 (m, 2H), 3.40 (d, 1H), 5.46 (s, 1H). [C14H24N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 253.1916. 측정값: 253.1898
실시예 96
5-((2R,4S)-2-(3,3- 디메틸부틸 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(3,3- 디메틸부틸 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
MeOH (1.2 mL) 중의 시스-메틸 2-(3,3-디메틸부틸)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (549 mg, 1.61 mmol) (실시예 95, 단계 1)의 용액을 -30℃에서 MeOH/H2O (1.3 mL / 0.08 mL) 중의 NaOH (70 mg, 1.75 mmol)의 용액에 첨가하였다. 10 분후, MeOH (1.6 mL) 및 H2O (1.6 mL) 중에 히드록실아민히드로클로라이드 (223 mg, 3.22 mmol) 및 NaOH (129 mg, 3.22 mmol)를 첨가하였다. 교반을 -30℃에서 30 분간 지속하였다. 상기 반응 용액을 80℃에서 6 M HCl (2.4 mL)에 붓고, 80℃에서 1 시간 동안 가열하였다. 유기 용매를 농축하고, DCM (x2)으로 추출한 후, 상 분리기를 사용하여 건조하고 증발시켜 오렌지색 오일을 수득하였다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/FA 95/5/0.2 버퍼 (30 분간, 100 mL/분의 유속) 중 30-60% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 트랜스-메틸 2-(3,3-디메틸부틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (194 mg, 39 %)를 백색 고체로 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ0.89 (s, 9H), 1.02 - 1.78 (m, 6H), 1.89 - 2.03 (m, 2H), 2.83 - 3.09 (m, 2H), 3.71 (s, 3H), 3.99 - 4.51 (m, 2H), 5.65 (s, 1H). MS m/z 311 (M+H)+
단계 2: (2R,4S)- 메틸 2-(3,3- 디메틸부틸 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 2-(3,3-디메틸부틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (194 mg, 0.63 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄팍 IC (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/IPA 85/15, 유속 18 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(3,3-디메틸부틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-피페리딘-1-카복실레이트 (83 mg, 43 %)를, 키랄 순도 99.3 %ee, 광회전 [α]20 D = -12.3 (아세토니트릴, c=1)으로 수득하였다.
단계 3: 5-((2R,4S)-2-(3,3- 디메틸부틸 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(3,3-디메틸부틸)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (62 mg, 0.2 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 4 mL)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 상기 화합물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (15 분간, 19 mL/분의 유속) 중 5-30% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x19 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 5-((2R,4S)-2-(3,3-디메틸부틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (39.8 mg, 79 %)을 백색 고체로 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, cd3od) δ0.92 (s, 9H), 1.20 - 1.34 (m, 2H), 1.56 - 1.69 (m, 2H), 1.83 - 1.90 (m, 1H), 2.05 - 2.13 (m, 1H), 2.14 - 2.21 (m, 1H), 2.26 - 2.34 (m, 1H), 3.05 - 3.19 (m, 2H), 3.25 - 3.34 (m, 2H), 5.75 (s, 1H). [C14H24N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 253.1916. 측정값: 253.1925
실시예 97
5-((2R,4S)-2-(4- 플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(4- 플루오로벤질 )피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(4- 플루오로벤질 )피페리딘-1- 카복실레이트
2-(4-플루오로벤질)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (4.428 g, 14.99 mmol) (참조 화합물 43)을 메틸 THF (100 mL)에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (3.65 g, 22.49 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 질소 하, 실온에서 밤새 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (4.59 g, 26.99 mmol)를 메틸 THF (100 mL) 중에 현탁시킨 후, 염화마그네슘 (2.57 g, 26.99 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 질소 하, 50℃에서 3 시간 동안 교반하였다. (플라스크 2). 플라스크 1의 담황색 현탁액을 이제 플라스크 2의 백색 현탁액에 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 백색 현탁액을 질소 하, 실온에서 밤새 교반하였다. 상기 혼합물을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화하고 MTBE를 첨가하였다. 상기 상들을 분리한 후 유기상을 물, 포화 NaHCO3 및 물로 추출하였다. 유기 용매를 증발시켜 황색 오일을 수득하였다. 부분입체 이성질체들을 바이오타지 (헵탄 중 0% => 70 % EtOAc, 7 CV; 바이오타지? KP-SIL 340g 컬럼) 상에서 분리하였다. 혼합된 분획들을 바이오타지 (헵탄 중 30% => 65 % EtOAc, 10 CV; 바이오타지? KP-SIL 50g 컬럼) 상에서 다시 정제하였다. 트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(4-플루오로벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (0.458 g, 10.36 %) 및 시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(4-플루오로벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (2.531 g, 57.3 %)를 분리하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.20 - 1.25 (m, 3H), 1.61 - 1.68 (m, 1H), 1.77 - 1.91 (m, 3H), 2.64 - 2.73 (m, 2H), 2.82 - 2.87 (m, 1H), 2.94 - 3.00 (m, 1H), 3.43 (s, 2H), 3.60 (s, 3H), 3.90 (dd, 1H), 4.11 - 4.17 (m, 3H), 6.91 - 6.96 (m, 2H), 7.08 - 7.13 (m, 2H). MS m/z 366 (M+H)+. 트랜스-이성질체: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.15 - 1.26 (m, 3H), 1.39 - 1.94 (m, 4H), 2.59 - 3.00 (m, 4H), 3.32 - 3.66 (m, 5H), 3.96 - 4.28 (m, 3H), 4.50 (d, br., 1H), 6.88 - 6.95 (m, 2H), 6.99 - 7.18 (m, 2H). MS m/z 366 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 2-(4- 플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(4-플루오로벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (2.53 g, 6.92 mmol)를 MeOH (20 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (2.000 mL) 중에 용해된 수산화나트륨 (0.277 g, 6.92 mmol)을 10 분 동안 첨가하고, 이 무색의 용액을 -40℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.424 mL, 6.92 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (30 mL, 180.00 mmol)에 신속하게 붓고, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 DCM/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 황색 고체를 수득하였다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (20 분간, 100 mL/분의 유속) 중 0-35 % 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 3회 주입하여 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 2-(4-플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.516 g, 65.5%)를 백색 고체로 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.83 - 2.14 (m, 4H), 2.55 - 2.65 (m, 1H), 2.72 - 2.81 (m, 1H), 2.93 - 3.03 (m, 1H), 3.08 - 3.19 (m, 1H), 3.61 (s, 3H), 3.95 - 4.05 (m, 1H), 4.20 - 4.30 (m, 1H), 5.73 (s, 1H), 6.91 - 6.99 (m, 2H), 7.02 - 7.09 (m, 2H). MS m/z 335 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-(4- 플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(4-플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.516 g, 4.53 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄팍 IC (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/(MTBE/MeOH 95/5) 50/50, 유속 18 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(4-플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (647 mg, 43%)를, 키랄 순도 99.9 %ee, 광회전 [α]20 D = +17.8 (아세토니트릴, c=1)로 수득하였다.
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(4- 플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(4-플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (647 mg, 1.94 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 15 mL, 85.65 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(4-플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (360 mg, 67 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, DMSO) δ1.08 (q, 1H), 1.37 (dq, 1H), 1.73 - 1.81 (m, 2H), 2.44 - 2.73 (m, 5H), 2.96 - 3.03 (m, 1H), 5.70 (s, 1H), 7.07 - 7.14 (m, 2H), 7.21 - 7.27 (m, 2H). [C15H17FN2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 277.1352. 측정값: 277.1333
실시예 98
5-((2S,4S)-2-(4- 플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(4- 플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(4-플루오로벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (0.454 g, 1.24 mmol) (실시예 97, 단계 1)를 MeOH (5 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (1 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.050 g, 1.24 mmol)을 10 분 동안 첨가하고 이 무색의 용액을 -40℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.076 mL, 1.24 mmol)을 5 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (6 mL, 36.00 mmol)에 신속하게 붓고, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 DCM/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 옅은 황색의 오일을 수득하였다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (20 분간, 100 mL/분의 유속) 중 0-30 % 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 트랜스-메틸 2-(4-플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.268 g, 64.5 %)를 백색 고체로 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.47 - 1.75 (m, 2H), 1.85 - 2.14 (m, 2H), 2.71 - 3.00 (m, 2H), 3.02 - 3.16 (m, 2H), 3.40 - 3.76 (m, 3H), 4.22 (d, br., 1H), 4.59 (d, br., 1H), 5.64 (s, 1H), 6.95 - 7.03 (m, 2H), 7.15 (s, br., 2H). MS m/z 335 (M+H)+
단계 2: (2S,4S)- 메틸 2-(4- 플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 2-(4-플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.268 g,0.8 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄셀 OJ (250x30), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: CO2 중 10% EtOH (175 bar), 유속 150 mL/분]를 수행하여 (2S,4S)-메틸 2-(4-플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-피페리딘-1-카복실레이트 (81 mg, 30%)를, 키랄 순도 99.8 %ee, 광회전 [α]20 D = +29.3 (아세토니트릴, c=1)으로 수득하였다.
단계 3: 5-((2S,4S)-2-(4- 플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4S)-메틸 2-(4-플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (81 mg, 0.24 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 2 mL, 11.42 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 24 시간 동안 교반한 후, 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 0.5 mL)을 더 첨가하여 교반을 밤새 지속하고, 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 1 mL)을 더 첨가하고 교반을 밤새 지속하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: 애질런트, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2S,4S)-2-(4-플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (46.9 g, 70 %)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ1.73 - 1.83 (m, 1H), 1.98 - 2.17 (m, 3H), 2.81 - 3.10 (m, 3H), 3.20 - 3.28 (m, 2H), 3.32 - 3.41 (m, 1H), 5.48 (d, 1H), 7.01 - 7.09 (m, 2H), 7.20 - 7.27 (m, 2H). [C15H17FN2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 277.1352. 측정값: 277.1346
실시예 99
5-((2R,4S)-2-(3- 플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(3- 플루오로벤질 )피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(3- 플루오로벤질 )피페리딘-1- 카복실레이트
2-(3-플루오로벤질)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (7.112 g, 24.08 mmol) (참조 화합물 44)을 메틸 THF (150 mL)에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (5.86 g, 36.13 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 질소 하, 실온에서 3.5 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (7.38 g, 43.35 mmol)를 메틸 THF (150 mL) 중에 현탁시킨 후, 염화마그네슘 (4.13 g, 43.35 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 질소 하, 50℃에서 3 시간 동안 교반하였다. (플라스크 2). 플라스크 1의 오렌지색 현탁액을 이제 플라스크 2의 백색 현탁액에 첨가하였다. 생성된 황색 현탁액을 질소 하, 실온에서 3 일간 교반하였다. 상기 혼합물을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화하고 MTBE를 첨가하였다. 상기 상들을 분리한 후 유기상을 물, 포화 NaHCO3 및 물로 추출하였다. 용매를 증발시켜 오렌지색 오일을 수득하였다. 42 %의 오일을 바이오타지 (헵탄 중 20% => 50 % EtOAc, 6 CV + 50 %, 4 CV; 바이오타지? KP-SIL 340g 컬럼) 상에서 정제하여 트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3-플루오로벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (664 mg, 18 %) 및 시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3-플루오로벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (1.8 g, 49 %)를 수득하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.20 (t, 3H), 1.56 - 1.93 (m, 4H), 2.62 - 2.73 (m, 2H), 2.83 - 3.03 (m, 2H), 3.41 (s, 2H), 3.59 (s, 3H), 3.83 - 3.93 (m, 1H), 4.07 - 4.20 (m, 3H), 6.82 - 6.93 (m, 3H), 7.15 - 7.22 (m, 1H). MS m/z 366 (M+H)+. 트랜스-이성질체: MS m/z 366 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 2-(3- 플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3-플루오로벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (1.826 g, 5.00 mmol)를 MeOH (20 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (2.000 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.200 g, 5.00 mmol)을 20 분 동안 첨가한 후, 이 황색 오일을 -40℃에서 20 분간 계속 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.306 mL, 5.00 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 3.5 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (25 mL, 150.00 mmol)에 신속하게 붓고, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 DCM/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 갈색 반고체를 수득하였다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (20 분간, 100 mL/분의 유속) 중 0-25 % 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 2 회 주입하여 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 2-(3-플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.141 g, 68%)를 백색 고체로 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.83 - 2.15 (m, 4H), 2.58 - 2.67 (m, 1H), 2.77 - 2.86 (m, 1H), 2.93 - 3.03 (m, 1H), 3.10 - 3.21 (m, 1H), 3.63 (s, 3H), 3.96 - 4.05 (m, 1H), 4.22 - 4.32 (m, 1H), 5.73 (s, 1H), 6.81 - 6.95 (m, 3H), 7.18 - 7.27 (m, 1H). MS m/z 335 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-(3- 플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(3-플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.141 g, 3.42 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄팍 IC (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/THF 80/20, 유속 18 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(3-플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (545 mg, 48 %)를, 키랄 순도 99.7 %ee, 광회전 [α]20 D = +17.8 (아세토니트릴, c=1)로 수득하였다.
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(3- 플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(3-플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (545 mg, 1.63 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 10 mL, 57.10 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 23 시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비:FractionLynx I, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(3-플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (286 mg, 63.5%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, dmso) δ1.09 (q, 1H), 1.36 (dq, 1H), 1.71 - 1.81 (m, 2H), 2.50 - 2.79 (m, 5H), 2.95 - 3.03 (m, 1H), 5.66 (s, 1H), 6.95 - 7.07 (m, 3H), 7.26 - 7.34 (m, 1H). [C15H17FN2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 277.1352. 측정값: 277.1343
실시예 100
5-((2S,4S)-2-(3- 플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(3- 플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3-플루오로벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (0.663 g, 1.81 mmol) (실시예 99, 단계 1)를 MeOH (8 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (1 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.073 g, 1.81 mmol)을 20 분 동안 첨가한 후, 이 황색 오일을 -40℃에서 20 분간 계속 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.111 mL, 1.81 mmol)을 5 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 4 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (9 mL, 54.00 mmol)에 신속히 붓고, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 DCM/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 갈색 반고체를 수득하였다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (20 분간, 100 mL/분의 유속) 중 0-25 % 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 트랜스-메틸 2-(3-플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (214 mg, 35%)를 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.47 - 1.77 (m, 2H), 1.82 - 2.15 (m, 2H), 2.75 - 3.00 (m, 2H), 3.00 - 3.15 (m, 2H), 3.40 - 3.80 (m, 3H), 4.00 - 4.42 (m, 1H), 4.42 - 4.80 (m, 1H), 5.64 (s, 1H), 6.83 - 7.05 (m, 3H), 7.22 - 7.31 (m, 1H). MS m/z 335 (M+H)+
단계 2: (2S,4S)- 메틸 2-(3- 플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 2-(3-플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (214 mg, 0.64 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄셀 OJ (250x30), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: CO2 중 10% EtOH (175 bar), 유속 150 mL/분]를 수행하여 (2S,4S)-메틸 2-(3-플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (77 mg, 38.5%)를, 키랄 순도 99.6 %ee, 광회전 [α]20 D = +64.9 (아세토니트릴, c=1)로 수득하였다.
단계 3: 5-((2S,4S)-2-(3- 플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4S)-메틸 2-(3-플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (77 mg, 0.23 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 2 mL, 11.42 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: 애질런트, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2S,4S)-2-(3-플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (51.4 mg, 81%)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, cd3od) δ1.74 - 1.84 (m, 1H), 1.98 - 2.16 (m, 3H), 2.84 - 3.10 (m, 3H), 3.19 - 3.29 (m, 2H), 3.35 - 3.44 (m, 1H), 5.50 (s, 1H), 6.96 - 7.07 (m, 3H), 7.29 - 7.37 (m, 1H). [C15H17FN2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 277.1352. 측정값: 277.1357
실시예 101
5-((2R,4S)-2-(2- 플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(2- 플루오로벤질 )피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(2- 플루오로벤질 )피페리딘-1- 카복실레이트
무수 THF (80 mL) 중의 염화마그네슘 (2.60 g, 27.33 mmol)과 말론산 에틸 칼륨 (4.65 g, 27.33 mmol)의 현탁액을 질소 대기 하, 50℃에서 2.5 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 또 다른 플라스크에는, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (3.69 g, 22.77 mmol)을 0℃, 질소 대기 하에서 무수 THF (20 mL) 중의 2-(2-플루오로벤질)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (4.483 g, 15.18 mmol) (참조 화합물 45)의 용액에 적가하였다. 상기 얼음조를 제거하고 상기 용액을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 플라스크 1의 내용물을 플라스크 2에 천천히 첨가한 후, 상기 생성된 혼합물을 질소 하에서 19 시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 농축시키고 잔류물을 EtOAc와 H2O에 녹였다. 상기 수상을 EtOAc로 1 회 추출하고 상기 혼합된 유기상을 H2O, 10 % Na2CO3로 세척한 후, Na2SO4로 건조시켰다. 상기 화합물을 바이오타지 [러닝 2 회, SNAP 340g KP-SIL, 먼저 8:2 (2 CV) 이후에 선형 농도구배로 헵탄/에틸 아세테이트 8:2 내지 3:7을 사용 (7 CV)]를 통해 추가로 정제하였다. 트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(2-플루오로벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (1.145 g, 14%) 및 시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(2-플루오로벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (3.19 g, 58 %)를 분리하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.20-1.30 (m, 3H), 1.63 - 1.99 (m, 4H), 2.63-2.76 (m, 1H), 2.77 - 3.13 (m, 3H), 3.46 (s, 2H), 3.53 (s, 3H), 3.85-3.99 (m, 1H), 4.17 (q, 2H), 4.22 - 4.32 (m, 1H), 6.93 - 7.08 (m, 2H), 7.09 - 7.22 (m, 2H). MS m/z 366 (M+H)+. 트랜스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.19 - 1.32 (m, 3H), 1.39-1.99 (m, 4H), 2.52 - 3.12 (m, 4H), 3.37 - 3.71 (m, 5H), 4.18 (q, 2H), 4.02 - 4.32 (m, 1H), 4.48-4.71 (m, 1H), 6.94 - 7.24 (m, 4H). MS m/z 366 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 2-(2- 플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(2-플루오로벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (1.95 g, 5.34 mmol)를 MeOH (20 mL)에 용해시키고 -40℃로 냉각시켰다. 물 (2.000 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.213 g, 5.34 mmol)을 적가하고 상기 무색의 용액을 -40℃에서 30 분간 교반을 지속하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.327 mL, 5.34 mmol)을 적가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (25 mL, 150.00 mmol)에 신속하게 붓고, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 MTBE/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고, 상기 유기상을 Na2SO4로 건조한 후 증발시켜 담황색 폼을 수득하였다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/AcOH 95/5/0.2 버퍼 (30 분간, 100 mL/분의 유속) 중 15-75% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 2 회 주입하여 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 2-(2-플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.09 g, 61%)를 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.80 - 2.17 (m, 4H), 2.72 - 2.87 (m, 2H), 2.91 - 3.02 (m, 1H), 3.12 - 3.24 (m, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.95 - 4.05 (m, 1H), 4.29 - 4.40 (m, 1H), 5.72 (s, 1H), 6.94 - 7.12 (m, 3H), 7.12 - 7.20 (m, 1H). MS m/z 335 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-(2- 플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(2-플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.09 g, 3.26 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄팍 AS (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH 80/20, 유속 18 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(2-플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (492 mg, 45 %)를, 키랄 순도 98.2 %ee, 광회전 [α]20 D = -3 (아세토니트릴, c=1)으로 수득하였다.
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(2- 플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(2-플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (492 mg, 1.47 mmol)를 수소 브롬화물 (AcOH 중 33%) 중에서 밤새 교반하였다 (19 h). 용매를 증발시킨 후, 분취형 HPLC (장비: FractionLynx I, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(2-플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (504 mg, 124%)을 수득하였다. 상기 샘플은 DMSO와 아세트산을 포함하고 있다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ1.50 - 1.65 (m, 1H), 1.69-1.84 (m, 1H), 2.08-2.22 (m, 2H), 2.89 - 3.18 (m, 4H), 3.38-3.51 (m, 2H), 5.66 (s, 1H), 7.11 - 7.23 (m, 2H), 7.28 - 7.41 (m, 2H). [C15H17FN2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 277.1352. 측정값: 277.1344.
실시예 102
5-((2S,4S)-2-(2- 플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(2- 플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(2-플루오로벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (1.145 g, 3.13 mmol) (실시예 101, 단계 1)를 메탄올 (10 mL)에 용해시킨 후 -40℃로 냉각시켰다. 물 (1.000 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.194 g, 4.84 mmol)을 적가하고 -40℃에서 30 분간 교반을 지속하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.192 mL, 3.13 mmol)을 적가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (15 mL, 90.00 mmol)에 신속히 붓고, 상기 혼합물 80℃에서 55 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 MTBE/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 상기 유기상을 Na2SO4로 건조한 후 증발시켜 황색 폼을 수득하였다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/AcOH 95/5/0.2 버퍼 (30 분간, 100 mL/분의 유속) 중 15-75% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 트랜스-메틸 2-(2-플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-피페리딘-1-카복실레이트 (468 mg, 45 %)를 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.46-1.77 (m, 2H), 1.80-2.13 (m, 2H), 2.28-3.23 (m, 4H), 3.38-3.80 (m, 3H), 4.04 - 4.34 (m, 1H), 4.50 - 4.80 (m, 1H), 5.65 (s, 1H), 6.99-7.12 (m, 2H), 7.12-7.30 (m, 2H). MS m/z 335 (M+H)+
단계 2: (2S,4S)- 메틸 2-(2- 플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥 사졸-5-일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 (2R,4R)- 메틸 2-(2- 플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 2-(2-플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (468 mg, 1.4 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄셀 OJ (250x30), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: CO2 중 20 % EtOH (175 bar), 유속 130 mL/분, 온도 40℃]를 수행하여 (2S,4S)-메틸 2-(2-플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (199 mg, 43 %)를, 키랄 순도 98.5 %ee, 광회전 [α]20 D = +28.8 (아세토니트릴, c=1)로, 그리고 (2R,4R)-메틸 2-(2-플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (185 mg, 40 %)를, 키랄 순도 99.7 %ee, 광회전 [α]20 D = -28.9 (아세토니트릴, c=1)로 수득하였다.
단계 3: 5-((2S,4S)-2-(2- 플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4S)-메틸 2-(2-플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (199 mg, 0.60 mmol)를 수소 브롬화물 (AcOH 중 33%) 중에서 밤새 교반하였다 (17 h). 용매를 증발시킨 후, 분취형 HPLC (장비: FractionLynx I, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2S,4S)-2-(2-플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (115 mg, 70 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, DMSO) δ1.47 - 1.56 (m, 1H), 1.67 - 1.81 (m, 3H), 2.57 - 2.64 (m, 1H), 2.72 (d, 2H), 2.81 - 2.87 (m, 1H), 2.87 - 2.95 (m, 1H), 3.12 - 3.18 (m, 1H), 5.70 (s, 1H), 7.09 - 7.18 (m, 2H), 7.22 - 7.33 (m, 2H). [C15H17FN2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 277.1352. 측정값: 277.1352.
실시예 103
5-((2R,4R)-2-(2- 플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4R)-메틸 2-(2-플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (185 mg, 0.55 mmol) (실시예 102, 단계 2)를 수소 브롬화물 (AcOH 중 33%) 중에서 밤새 교반하였다 (17 h). 용매를 증발시킨 후, 분취형 HPLC (장비: FractionLynx I, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4R)-2-(2-플루오로벤질)-피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (75 mg, 49 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, DMSO) δ1.48 - 1.55 (m, 1H), 1.68 - 1.80 (m, 3H), 2.58 - 2.64 (m, 1H), 2.72 (d, 2H), 2.81 - 2.87 (m, 1H), 2.87 - 2.94 (m, 1H), 3.12 - 3.17 (m, 1H), 5.70 (s, 1H), 7.11 - 7.17 (m, 2H), 7.24 - 7.31 (m, 2H). [C15H17FN2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 277.1352. 측정값: 277.1357.
실시예 104
5-((2R,4S)-2-(4-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 시스 - 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(4-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-1- 카복실레이트
염화마그네슘 (7.39 g, 77.58 mmol)과 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (13.20 g, 77.58 mmol)질소 하에서 메틸 THF (100 mL) 중에 현탁시키고, 이렇게 해서 생성된 현탁액을 특대의 교반 막대로 교반하면서 50℃로 가열한 후, 실온으로 냉각시켰다(플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 메틸 THF (100 mL) 중의 시스-1-(메톡시카보닐)-2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-카복실산 (14.1 g, 40.83 mmol) (참조 화합물 46)에 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (10 g, 61.67 mmol)을 질소 하에 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 실온에서 4 시간 30 분 동안 교반하였다 (플라스크 2). 이후, 플라스크 2의 내용물을 트랜스퍼 니들을 사용해 플라스크 1로 옮겨 담고, 메틸 THF (40 mL)로 세척하였다. 생성된 현탁액을 실온에서 19 시간 30 분 동안 교반하였다. 메틸 THF (50 mL) 중의 추가의 염화마그네슘 (3.7 g, 38.86 mmol)과 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (6.6 g, 38.78 mmol)를 50℃에서 2 시간 30 분 동안 초음파 처리한 후, 상기 반응 혼합물에 첨가하였다. 실온에서 21 시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 2 M HCl (약 150 mL)과 MTBE 사이로 구분시켜 놓았다. 상들을 분리하였다. 상기 유기상을 식염수와 포화 NaHCO3로 세척하고 MgSO4로 건조한 후 증발시켰다. 미정제 시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (14.9 g, 88%)를 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.21 - 1.30 (m, 3H), 1.63 - 2.04 (m, 4H), 2.67 - 2.86 (m, 2H), 2.93 - 3.09 (m, 2H), 3.46 (s, 2H), 3.60 (s, 3H), 3.85 - 3.98 (m, 1H), 4.11 - 4.26 (m, 3H), 7.30 (d, 2H), 7.53 (d, 2H). MS m/z 416 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2-(4-( 트리플루오로메틸 )벤질)-피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (14.9 g, 35.87 mmol)를 MeOH (120 mL)에 용해시킨 후, -40℃로 냉각시켰다. 물 (14.4 mL)에 용해된 수산화나트륨 (1.495 g, 37.38 mmol)을 2 분간에 걸쳐 첨가한 후 생성된 용액을 -40℃에서 20 분간 교반하였다. 이후, 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 2.2 mL, 35.90 mmol)을 1 분간에 걸쳐 첨가하고, -40℃ 내지 -45℃의 온도에서 80 분간 계속 교반하였다. 이후, 상기 반응 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (400 mL, 2400.00 mmol)에 붓고, 상기 혼합물을 80℃에서 1 시간 동안 교반을 지속하였다. 이후, 실온으로 냉각시켰다. 메탄올을 증발시킨 후, 물을 첨가하였다. DCM으로 3회 추출하였다. 혼합된 유기층을 Na2SO4로 건조한 후 증발시켰다. 미정제 시스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (12.88 g, 94 %)를 분리하였다. MS m/z 385 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2-(4-( 트리플루오로메틸 )벤질)-피페리딘-1- 카복실레이트
미정제 시스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)-피페리딘-1-카복실레이트 (12.88 g, 33.54 mmol)를 분취형 HPLC [컬럼: 크로마실-C18 (250x20), 10 ㎛의 입자 크기, 이동상: MeCN/H2O/FA 50/50/0.1, 유속 120 mL/분]로 정제하여 순수한 시스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (8.7 g)를 수득하였고, 이후 이것을 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄팍 AD (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH/DEA 85/15, 유속 18 mL/분]로 정제하여 (2R,4S)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (3.90 g, 30 %)를, 키랄 순도 98.5%ee, 광회전 [α]20 D = +11.9 (아세토니트릴, c=1)로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.86 - 2.01 (m, 3H), 2.03 - 2.15 (m, 1H), 2.67 (dd, 1H), 2.85 (dd, 1H), 2.96 - 3.05 (m, 1H), 3.12 - 3.22 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.97 - 4.07 (m, 1H), 4.26 - 4.34 (m, 1H), 5.75 (s, 1H), 7.22 (d, 2H), 7.52 (d, 2H).
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(4-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (4.889 g, 12.72 mmol)를 수소 브롬화물 (AcOH 중 33%, 30 mL, 428.24 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (20 분간, 100 mL/분의 유속) 중 05-40% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC (2 회 동일한 양 주입)로 정제하였다. 분획들을 포함하는 생성물을 동결 건조시킨 후, 상기 기술된 바와 같이 수소 브롬화물로 다시 처리하였다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (20 분간, 100 mL/분의 유속) 중 05-40% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC (3 회 동일한 양 주입)로 정제하였다. 5-((2R,4S)-2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (3.34 g, 80 %)을 무색 고체로 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, dmso) δ1.04 - 1.15 (m, 1H), 1.35 (qd, 1H), 1.72 - 1.80 (m, 2H), 2.49 - 2.58 (m, 1H), 2.61 - 2.81 (m, 4H), 2.94 - 3.02 (m, 1H), 5.66 (s, 1H), 7.42 (d, 2H), 7.62 (d, 2H). [C16H17F3N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 327.1320. 측정값: 327.1305.
실시예 105
5-((2S,4S)-2-(4-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(4-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-1- 카복실레이트
말론산 에틸 칼륨 (1.065 g, 6.26 mmol)과 MgCl2 (0.496 g, 5.21 mmol)를 무수 THF (50 mL)에 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 50℃에서 4 시간 동안 세게 교반하였다 (플라스크 1). 1-(메톡시카보닐)-2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-카복실산 (1.8 g, 5.21 mmol) (참조 화합물 47)과 카보닐디이미다졸 (1.268 g, 7.82 mmol)을 5℃에서 무수 THF (50ml)에 첨가하였다 (플라스크 2). 플라스크 2의 내용물을 플라스크 1에 첨가한 후, 생성된 현탁액을 실온에서 밤새 교반하였다. THF를 증발시킨 후 상기 반응 혼합물을 물과 디에틸 에테르 사이에 구분시켜 놓았다. 상기 유기상을 분리한 후, Na2SO4로 건조하고 셀라이트를 통해 여과시킨 후 용매는 증발시켰다. 바이오타지 장비를 사용하여 크로마토그래피를 수행하였다. 에틸 아세테이트-헵탄을 이용한 농도구배 용출은, 15-85에서 시작하여 40-60으로 종료하였다. 트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (0.93 g, 42.9 %)를 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.20 - 1.29 (m, 3H), 1.46 - 1.99 (m, 4H), 2.74 - 3.04 (m, 4H), 3.34 - 3.70 (m, 5H), 4.01 - 4.32 (m, 3H), 4.60 (d, 1H), 7.22 - 7.38 (m, 2H), 7.51 - 7.56 (m, 2H). MS m/z 416 (M+H)+
단계 2: 트랜스- 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2-(4-( 트리플루오로메틸 )벤질)-피페리딘-1- 카복실레이트
메탄올 (3 mL) 중의 트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)-피페리딘-1-카복실레이트 (0.4 g, 0.96 mmol)의 용액을 -30℃에서 메탄올/물 (3 mL / 0.2 mL) 중의 NaOH (0.042g, 1.06 mmol)의 용액에 적가하였다. 10 분간 교반 후, 메탄올/물 (5 mL / 5 mL) 중 히드록실아민 히드로클로라이드 (0.134 g, 1.93 mmol)와 NaOH (0.077 g, 1.93 mmol)의 용액을 -30℃에서 첨가하였다. 교반은 -30℃에서 30 분간 지속하였다. 상기 용액을 80℃에서 6 M HCl에 적가하였다. 80℃에서 30 분 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 물과 에틸 아세테이트에 용해시켰다. 상기 유기상을 분리한 후, Na2SO4로 건조하고 셀라이트를 통해 여과시킨 후 용매는 증발시켰다. 산성 역상 크로마토그래피를 35% 내지 75% 아세토니트릴의 농도구배로 수행하였다. 트랜스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (205 mg, 55.4 %)를 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.63 (d, 2H), 1.98 (d, 2H), 2.81 - 3.14 (m, 4H), 3.55 (d, 3H), 4.21 (d, 1H), 4.63 (d, 1H), 5.63 (s, 1H), 7.22 - 7.37 (m, 2H), 7.54 (d, 2H). MS m/z 385 (M+H)+
단계 3: (2S,4S)- 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2-(4-( 트 리플루오로메틸)벤질)-피페리딘-1- 카복실레이트 및 (2R,4R)- 메틸 4-(3-옥소-2,3-디 히드로이소옥 사졸-5-일)-2-(4-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (205 mg, 0.53 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄팍 IC (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH/FA 90/10/0.1, 유속 18 mL/분]를 수행하여 (2S,4S)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (77 mg, 38.5 %)를, 키랄 순도 99.3%ee, 광회전 [α]20 D = +34.6 (아세토니트릴, c=1)으로, 그리고 (2R,4R)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (87 mg, 43.5%)를, 키랄 순도 99.9%ee, 광회전 [α]20 D = -30.2 (아세토니트릴, c=1)로 수득하였다.
단계 4: 5-((2S,4S)-2-(4-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 5 mL)을 (2S,4S)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (77 mg, 0.20 mmol)를 포함하고 있는 반응 플라스크에 첨가하였다. 상기 반응물을 밤새 세게 교반하였다. 용매는 증발시켰다. PrepLC (pH=11, 작은 컬럼, MeOH 중에 용해된 샘플, 농도구배 5-45, 20 분)로 정제하여 5-((2S,4S)-2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (50 mg, 76%)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ1.73 - 1.79 (m, 1H), 1.98 - 2.12 (m, 3H), 2.93 (dd, 1H), 2.97 - 3.04 (m, 2H), 3.17 - 3.25 (m, 2H), 3.35 - 3.41 (m, 1H), 5.48 (s, 1H), 7.41 (d, 2H), 7.61 (d, 2H). [C16H17F3N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 327.1320. 측정값: 327.1289.
실시예 106
5-((2R,4R)-2-(4-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 5 mL)을 (2R,4R)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (87 mg, 0.23 mmol)를 포함하는 반응 플라스크에 첨가하였다. 상기 반응물을 밤새 세게 교반하였다. 용매는 증발시켰다. PrepLC (pH=11, 작은 컬럼, MeOH에 용해된 샘플, 농도구배 5-45, 20 분)로 정제하여 5-((2R,4R)-2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (48 mg, 65 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ1.74 - 1.80 (m, 1H), 1.99 - 2.13 (m, 3H), 2.94 (dd, 1H), 2.98 - 3.05 (m, 2H), 3.19 - 3.26 (m, 2H), 3.36 - 3.42 (m, 1H), 5.50 (s, 1H), 7.42 (d, 2H), 7.62 (d, 2H). [C16H17F3N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 327.1320. 측정값: 327.1289.
실시예 107
5-((2R,4S)-2-(3-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(3-( 트리플루오로 메틸)벤질)피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(3-( 트리플루오로메틸 )벤질)-피페리딘-1- 카복실레이트
말론산 에틸 칼륨 (3.42g, 20.16 mmol)과 MgCl2 (1.599 g, 16.80 mmol)를 무수 THF (50ml)에 첨가하였다. 반응 플라스크를 50℃에서 밤새 세게 교반하였다 (플라스크 1). 1-(메톡시카보닐)-2-(3-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-카복실산 (5.8 g, 16.80 mmol) (참조 화합물 48)과 카보닐디이미다졸 (4.09 g, 25.19 mmol)을 5℃에서 무수 THF (50 mL)에 첨가한 후, 실온에서 밤새 교반하였다 (플라스크 2). 플라스크 2의 내용물을 실온에서 플라스크 1에 첨가한 후 3 일 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 물과 디에틸 에테르에 용해시켰다. 상기 유기상을 증발시켜 대부분의 THF를 제거하였다. 미정제물을 물과 디에틸 에테르에 다시 용해시켰다. 상기 유기상을 분리한 후, Na2SO4로 건조하고 셀라이트를 통해 여과시킨 후 용매는 증발시켰다. 바이오타지 장비를 사용하여 크로마토그래피를 수행하였다. 에틸 아세테이트-헵탄을 이용한 농도구배 용출은, 0-100에서 시작하여 100-0으로 종료하였다. 트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (1.8 g, 26 %) 및 시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (2.45 g, 35 %)를 분리하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.20 - 1.32 (m, 3H), 1.63 - 1.99 (m, 4H), 2.67 - 2.86 (m, 2H), 2.92 - 3.12 (m, 2H), 3.47 (s, 2H), 3.59 (s, 3H), 3.89 - 4.00 (m, 1H), 4.09 - 4.29 (m, 3H), 7.32 - 7.51 (m, 4H). MS m/z 416 (M+H)+. 트랜스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.19 - 1.35 (m, 3H), 1.42 - 2.08 (m, 4H), 2.51 - 3.09 (m, 4H), 3.35 - 3.78 (m, 5H), 4.04 - 4.38 (m, 3H), 4.47 - 4.79 (m, 1H), 7.23 - 7.56 (m, 4H). MS m/z 416 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2-(3-( 트리플루오로메틸 )벤질)-피페리딘-1- 카복실레이트
MeOH (7 mL) 중의 시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3-(트리플루오로메틸)벤질)-피페리딘-1-카복실레이트 (2.45 g, 5.90 mmol)의 용액을 -30℃에서 MeOH/H2O (8ml/ 0.5 mL) 중의 NaOH (307 mg, 7.67 mmol)의 용액에 첨가하였다. 10 분후, 히드록실아민 히드로클로라이드 (0.82 g, 11.80 mmol)와 NaOH (472mg, 11.80 mmol)를 MeOH (8 mL)와 H2O (8 mL) 중에 첨가하였다. 교반을 -30℃에서 30 분간 지속하였다. 상기 반응 용액을 80℃에서 6 M HCl (60 mL)에 붓고 30 분간 가열하였다. 상기 반응 혼합물을 물과 에틸 아세테이트에 용해시켰다. 상기 유기상을 분리한 후, Na2SO4로 건조하고 셀라이트를 통해 여과시킨 후 용매는 증발시켰다. prepLC (pH=3, 큰 컬럼, 40-55% MeCN, 20 분간)를 사용하여 정제하였다. 시스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(3-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (1.27 g, 56 %)를 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.86 - 2.15 (m, 4H), 2.68 (dd, 1H), 2.86 (dd, 1H), 2.96 - 3.06 (m, 1H), 3.12 - 3.25 (m, 1H), 3.58 (s, 3H), 3.95 - 4.08 (m, 1H), 4.25 - 4.37 (m, 1H), 5.75 (s, 1H), 7.23 - 7.32 (m, 1H), 7.35 - 7.41 (m, 2H), 7.43 - 4.49 (m, 1H). MS m/z 385 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2-(3-( 트리플루오로메틸 )벤질)-피페리딘-1- 카복실레이트 및 (2S,4R)- 메틸 4-(3-옥소-2,3-디 히드로이소옥 사졸-5-일)-2-(3-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(3-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (1.27 g, 3.31 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄팍 AD (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/IPA/FA 90/10/0.1, 유속 18 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(3-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (620 mg, 49%)를, 키랄 순도 99.7 %ee, 광회전 [α]20 D = +7.3 (아세토니트릴, c=1)으로, 그리고 (2S,4R)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(3-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (640 mg, 50%)를, 키랄 순도 99.3 %ee, 광회전 [α]20 D = -6.3 (아세토니트릴, c=1)으로 수득하였다.
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(3-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(3-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (0.62 g, 1.61 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 5 mL, 71.37 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 41 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 증발시킨 후 동일한 조건 하에 다시 시작하였다. 28 시간 후, 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx I, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(3-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (366 mg, 69%)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, DMSO) δ1.07 - 1.17 (m, 1H), 1.32 - 1.41 (m, 1H), 1.73 - 1.81 (m, 2H), 2.48 - 2.58 (m, 1H), 2.63 - 2.79 (m, 4H), 2.96 - 3.02 (m, 1H), 5.67 (s, 1H), 7.50 - 7.60 (m, 4H). [C16H17F3N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 327.1320. 측정값: 327.1328
실시예 108
5-((2S,4R)-2-(3-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4R)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(3-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (0.64 g, 1.67 mmol) (실시예 107, 단계 3)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 5 mL, 71.37 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 41 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 증발시킨 후 동일한 조건 하에 다시 시작하였다. 28 시간 후, 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx I, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2S,4R)-2-(3-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (368 mg, 68%)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, DMSO) δ1.07 - 1.15 (m, 1H), 1.36 (dq, 1H), 1.74 - 1.80 (m, 2H), 2.54 - 2.58 (m, 1H), 2.64 - 2.79 (m, 4H), 2.96 - 3.01 (m, 1H), 5.66 (s, 1H), 7.50 - 7.59 (m, 4H). [C16H17F3N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 327.1320. 측정값: 327.1333
실시예 109
5-(트랜스-2-(3-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2-(3-( 트리플루오로메틸 )벤질)-피페리딘-1- 카복실레이트
MeOH (7 mL) 중 트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3-(트리플루오로메틸)벤질)-피페리딘-1-카복실레이트 (1.8 g, 4.33 mmol) (실시예 107, 단계 1)의 용액을 -30℃에서 MeOH/H2O (8 mL/ 0.5 mL) 중 NaOH (225 mg, 5.63 mmol)의 용액에 첨가하였다. 10 분후, 히드록실아민 히드로클로라이드 (0.602 g, 8.67 mmol)와 NaOH (347mg, 8.67 mmol)를 MeOH (7 mL)와 H2O (7 mL) 중에 첨가하였다. 교반을 -30℃에서 30 분간 지속하였다. 상기 반응 용액을 80℃에서 6 M HCl (60 mL)에 붓고 30 분간 가열하였다. 상기 반응 혼합물을 물과 에틸 아세테이트에 용해시켰다. 상기 유기상을 분리한 후, Na2SO4로 건조하고 셀라이트를 통해 여과시킨 후 용매는 증발시켰다. prepLC (pH=3, 큰 컬럼, 25-55% MeCN, 20 분간)를 사용하여 정제하였다. 트랜스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(3-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (1.06 g, 63.6 %)를 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.49 - 2.17 (m, 4H), 2.80 - 3.22 (m, 4H), 3.34 - 3.76 (m, 3H), 4.07 - 4.40 (m, 1H), 4.52 - 4.84 (m, 1H), 5.65 (s, 1H), 7.28 - 7.54 (m, 4H). MS m/z 385 (M+H)+
단계 2: 5-(트랜스-2-(3-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 10 mL)을 트랜스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(3-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (0.25 g, 0.65 mmol)를 함유하고 있는 반응 플라스크에 첨가하였다. 상기 반응물을 밤새 세게 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-(트랜스-2-(3-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (91 mg, 43%)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ1.94 - 2.05 (m, 1H), 2.11 - 2.30 (m, 3H), 3.09 - 3.26 (m, 3H), 3.37 - 3.47 (m, 2H), 3.58 - 3.66 (m, 1H), 5.83 (s, 1H), 7.53 - 7.67 (m, 4H). [C16H17F3N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 327.1320. 측정값: 327.1322
실시예 110
5-((2R,4S)-2-(2-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(2-( 트리플루오로 메틸)벤질)피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(2-( 트리플루오로메틸 )벤질)-피페리딘-1- 카복실레이트
1-(메톡시카보닐)-2-(2-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-카복실산 (4.718 g, 13.66 mmol) (참조 화합물 49)을 메틸 THF (100 mL)에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (3.32 g, 20.49 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 질소 하에 실온에서 밤새 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (4.19 g, 24.59 mmol)를 메틸 THF (100 mL)에 현탁시킨 후, 염화마그네슘 (2.342 g, 24.59 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 특대의 교반 막대를 사용하여 질소 하, 50℃에서 밤새 교반하였다 (플라스크 2). 플라스크 1의 황색 현탁액을 이제 플라스크 2의 백색 현탁액에 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 백색 현탁액을 질소 하, 실온에서 3 일간 교반하였다. 상기 혼합물을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화하고 MTBE와 물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리한 후, 상기 유기상을 물과 포화 NaHCO3로 세척하였다. 용매를 증발시켜 황색 오일을 수득하였다. 부분입체 이성질체를 바이오타지 (헵탄 중 20 % => 50 % EtOAc, 8 CV; 바이오타지22502 KP-SIL 340 g 컬럼) 상에서 2 회의 러닝으로 분리하였다. 트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(2-(트리플루오로메틸)-벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (0.67 g, 12 %) 및 시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(2-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (2.11 g, 37 %)를 황색 오일로서 분리하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.22 (t, 3H), 1.65 - 1.99 (m, 4H), 2.65 - 2.73 (m, 1H), 2.85 - 2.91 (m, 1H), 2.95 - 3.02 (m, 1H), 3.15 (ddd, 1H), 3.35 (s, 3H), 3.46 (s, 2H), 4.01 (dd, 1H), 4.12 - 4.19 (m, 2H), 4.23 - 4.33 (m, 1H), 7.20 (d, 1H), 7.27 (t, 1H), 7.41 (t, 1H), 7.60 (d, 1H). MS m/z 416 (M+H)+. 트랜스-이성질체: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.13 - 1.27 (m, 3H), 1.41 - 1.97 (m, 5H), 2.79 - 3.67 (m, 8H), 4.01 - 4.33 (m, 3H), 4.64 (br. d, 1H), 7.07 - 7.50 (m, 3H), 7.53 - 7.62 (m, 1H). MS m/z 416 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2-(2-( 트리플루오로메틸 )벤질)-피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(2-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (2.062 g, 4.96 mmol)를 MeOH (16 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (1.600 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.199 g, 4.96 mmol)을 10 분 동안 첨가한 후, 이 무색의 용액을 -40℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.304 mL, 4.96 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 3.5 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (25 mL, 150.00 mmol)에 옮긴 후, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. DCM과 물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 황색 반고체를 수득하였다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (20 분간, 100 mL/분의 유속) 중 5-30 % 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 3 회 주입하여 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(2-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (1.30 g, 68%)를 백색 고체로 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.79 - 1.95 (m, 2H), 1.95 - 2.14 (m, 2H), 2.79 - 2.98 (m, 3H), 3.17 - 3.27 (m, 1H), 3.34 (s, 3H), 4.04 (dd, 1H), 4.30 - 4.41 (m, 1H), 5.68 (s, 1H), 7.14 (d, 1H), 7.19 - 7.28 (m, 1H), 7.39 (t, 1H), 7.57 (d, 1H). MS m/z 385 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2-(2-( 트리플루오로메틸 )벤질)-피페리딘-1- 카복실레이트 및 (2S,4R)- 메틸 4-(3-옥소-2,3-디 히드로이소옥 사졸-5-일)-2-(2-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(2-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (1.30 g, 3.39 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄셀 OJ (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH/FA 80/20/0.1, 유속 18 mL/분]로 정제하여 (2R,4S)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(2-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (597 mg, 46%)를, 키랄 순도 99.6 %ee, 광회전 [α]20 D = -4.0 (아세토니트릴, c=1)으로, 그리고 (2S,4R)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(2-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (624 mg, 48%)를, 키랄 순도 99.8 %ee, 광회전 [α]20 D = +6.1 (아세토니트릴, c=1)로 수득하였다.
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(2-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(2-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (597 mg, 1.55 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 10 mL, 57.10 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅲ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(2-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (358 mg, 71 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ1.68 (q, 1H), 1.84 (qd, 1H), 2.11 (d, 1H), 2.22 (d, 1H), 3.02 - 3.20 (m, 3H), 3.21 - 3.32 (m, 1H), 3.51 (d, 1H), 3.57 - 3.67 (m, 1H), 5.74 (s, 1H), 7.44 - 7.56 (m, 2H), 7.64 (t, 1H), 7.74 (d, 1H). [C16H17F3N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 327.1320. 측정값: 327.1328
실시예 111
5-((2S,4R)-2-(2-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4R)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(2-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (624 mg, 1.62 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 10 mL, 57.10 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅲ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2S,4R)-2-(2-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (359 mg, 68 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ1.68 (q, 1H), 1.84 (dq, 1H), 2.11 (d, 1H), 2.22 (d, 1H), 3.04 - 3.19 (m, 3H), 3.23 - 3.30 (m, 4H), 3.49 - 3.54 (m, 1H), 3.59 - 3.66 (m, 1H), 5.74 (s, 1H), 7.48 (t, 1H), 7.52 (d, 1H), 7.64 (t, 1H), 7.74 (d, 1H). [C16H17F3N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 327.1320. 측정값: 327.1321
실시예 112
5-(트랜스-2-(2-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2-(2-( 트리플루오로메틸 )벤질)-피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(2-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (0.661 g, 1.59 mmol)를 MeOH (5 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (0.500 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.064 g, 1.59 mmol)을 10 분 동안 첨가한 후, 이 무색의 용액을 -40℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.098 mL, 1.59 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 3.5 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (8 mL, 48.00 mmol)으로 옮긴 후, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. DCM과 물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 미정제 트랜스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(2-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (0.748 g, 122%)를 황색 반고체로서 수득하였다. MS m/z 385 (M+H)+
단계 2: 5-(트랜스-2-(2-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
트랜스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(2-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (157 mg, 0.41 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 3 mL, 17.13 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅲ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-(트랜스-2-(2-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (53 mg, 40 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ1.95 (ddd, 1H), 2.08 - 2.19 (m, 2H), 2.19 - 2.28 (m, 1H), 3.07 - 3.18 (m, 2H), 3.18 - 3.25 (m, 1H), 3.33 - 3.43 (m, 2H), 3.51 - 3.62 (m, 1H), 5.75 (d, 1H), 7.43 - 7.51 (m, 2H), 7.63 (t, 1H), 7.73 (d, 1H). [C16H17F3N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 327.1320. 측정값: 327.1297
실시예 113
5-((2R,4S)-2-(4-( 트리플루오로메톡시 )벤질)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(4-( 트리플루오로 메톡시)벤질)피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(4-( 트리플루오로메톡시 )벤질)-피페리딘-1- 카복실레이트
1-(메톡시카보닐)-2-(4-(트리플루오로메톡시)벤질)피페리딘-4-카복실산 (4.7 g, 13.01 mmol) (참조 화합물 50)을 메틸 THF (150 mL)에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (3.16 g, 19.51 mmol)을 한번에 첨가하였다. 상기 혼합물을 질소 하, 실온에서 3 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (3.99 g, 23.41 mmol)를 메틸 THF (150 mL)에 현탁시킨 후, 염화마그네슘 (2.229 g, 23.41 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 큰 자성 교반 막대를 이용하여 질소 하, 50℃에서 3 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 3 시간 후, 플라스크 1의 내용물을 플라스크 2로 옮겨 담았다. 생성된 황색 현탁액을 질소 하, 실온에서 밤새 교반하였다. 상기 혼합물을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화한 후, MTBE (100 mL)와 물 (100 mL)을 첨가하였다. 상기 상들을 분리한 후, 상기 유기층을 물, 포화 NaHCO3 및 식염수로 세척하였다. 상기 유기층을 Na2SO4로 건조하고 여과한 후 증발시켜 옅은 황색의 오일을 수득하였다. 생성물에 대해 n-헵탄 중 20-60% EtOAc (8 CV)의 농도구배를 사용하여 바이오타지 (340g) 상에서 섬광 크로마토그래피를 수행하였다. 상기 컬럼은 -n-헵탄 중 20% EtOAc (1 CV)로 컨디셔닝하였다. 트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(4-(트리플루오로메톡시)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (679 mg, 12.1%) 및 시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(4-(트리플루오로메톡시)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (2.457 g, 43.8 %)를 분리하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.19 - 1.32 (m, 3H), 1.64 - 1.98 (m, 4H), 2.67 - 2.78 (m, 2H), 2.86 - 3.11 (m, 2H), 3.47 (s, 2H), 3.59 (s, 3H), 3.87 - 3.98 (m, 1H), 4.07 - 4.23 (m, 3H), 7.09 - 7.16 (m, 2H), 7.16 - 7.23 (m, 2H). MS m/z 432 (M+H)+. 트랜스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.20 - 1.31 (m, 3H), 1.38 - 2.03 (m, 4H), 2.66 - 3.08 (m, 4H), 3.32 - 3.75 (m, 5H), 3.97 - 4.36 (m, 3H), 4.40 - 4.77 (m, 1H), 7.10 - 7.32 (m, 4H). MS m/z 432 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2-(4-( 트리플루오로메톡시 )벤질)-피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(4-(트리플루오로메톡시)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (2.475 g, 5.74 mmol)를 MeOH (20 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (2.000 mL)에 용해된 수산화나트륨 (1.687 mL, 5.74 mmol)을 10 분 동안 첨가한 후, 이 황색 오일을 -40℃에서 20 분간 계속 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.352 mL, 5.74 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (29.5 mL, 177.28 mmol)에 신속하게 붓고, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 DCM/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 백색 고체를 수득하였다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/AcOH 95/5/0.2 버퍼 (30 분간, 100 mL/분의 유속) 중 10-60% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(4-(트리플루오로메톡시)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (1.41 g, 61.4 %)를 분리하였다. MS m/z 401 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2-(4-( 트리플루오로메톡시 )벤질)-피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(4-(트리플루오로메톡시)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (1.41 g, 3.53 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄팍 AD (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH 90/10, 유속 18 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(4-(트리플루오로-메톡시)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (691 mg, 49 %)를, 키랄 순도 99.0 %ee, 광회전 [α]20 D = +9.4 (아세토니트릴, c=1)로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.84 - 2.14 (m, 4H), 2.56 - 2.66 (m, 1H), 2.72 - 2.82 (m, 1H), 2.94 - 3.04 (m, 1H), 3.09 - 3.21 (m, 1H), 3.57 (s, 3H), 3.96 - 4.06 (m, 1H), 4.21 - 4.32 (m, 1H), 5.74 (s, 1H), 7.06 - 7.15 (m, 4H).
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(4-( 트리플루오로메톡시 )벤질)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(4-(트리플루오로메톡시)벤질)-피페리딘-1-카복실레이트 (0.690 g, 1.72 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 13.58 mL, 77.56 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅲ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(4-(트리플루오로메톡시)벤질)-피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (55 mg, 9.4 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.07 (q, 1H), 1.34 (dq, 1H), 1.69 - 1.78 (m, 2H), 2.45 - 2.74 (m, 5H), 2.93 - 2.99 (m, 1H), 5.64 (s, 1H), 7.20 - 7.25 (m, 2H), 7.26 - 7.32 (m, 2H). [C16H17F3N2O3+H]+에 대한 HRMS 계산값: 343.1270. 측정값: 343.1241
실시예 114
5-(트랜스-2-(4-( 트리플루오로메톡시 )벤질)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2-(4-( 트리플루오로메톡시 )벤질)-피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(4-(트리플루오로메톡시)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (679 mg, 1.57 mmol) (실시예 113, 단계 1)를 MeOH (10 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (1.000 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.463 mL, 1.57 mmol)을 10 분 동안 첨가한 후, 이 황색 오일을 -40℃에서 20 분간 계속 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.096 mL, 1.57 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 3 시간 15 분 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (8.11 mL, 48.63 mmol)에 신속하게 붓고, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 DCM/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 백색 고체를 수득하였다. 미정제 트랜스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(4-(트리플루오로메톡시)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (603 mg, 96%)를 분리하였다. MS m/z 401 (M+H)+
단계 2: 5-(트랜스-2-(4-( 트리플루오로메톡시 )벤질)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
트랜스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(4-(트리플루오로메톡시)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (0.603 g, 1.51 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 11.87 mL, 67.78 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 상기 화합물을 H2O/AcN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (20 분간, 100 mL/분의 유속) 중 10-50% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 5-(트랜스-2-(4-(트리플루오로메톡시)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (200 mg, 38.8 %)을 백색 고체로 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, dmso) δ1.47 - 1.60 (m, 1H), 1.68 - 1.87 (m, 3H), 2.43 - 4.01 (m, 6H), 5.73 (s, 1H), 7.20 - 7.40 (m, 4H). [C16H17F3N2O3+H]+에 대한 HRMS 계산값: 343.1270. 측정값: 343.1260
실시예 115
5-((2R,4S)-2-(4- 클로로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 메틸 2-(4- 클로로벤질 )-4-((2,2-디메틸-4,6- 디옥소 -1,3-디옥산-5-일 리 덴)-(히드록시) 메틸 )피페리딘-1- 카복실레이트
디클로로메탄 (200 mL)을 2-(4-클로로벤질)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (4.27 g, 13.7 mmol) (참조 화합물 51)에 첨가하였다. 상기 혼합물을 얼음조를 사용하여 냉각시켰다. DMAP (2.008 g, 16.44 mmol), 2,2-디메틸-1,3-디옥산-4,6-디온 (2.96 g, 20.54 mmol) 및 DIPEA (5.25 mL, 30.13 mmol)를 첨가한 후, N1-((에틸이미노)메틸렌)-N3,N3-디메틸프로판-1,3-디아민 히드로클로라이드 (5.25 g, 27.39 mmol)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 0℃에서 15 분간 교반한 후, 상기 혼합물을 실온으로 가온하고 밤새 교반하였다. 상기 유기상을 1 M HCl로 세척하고 물로 한번 세척하였다. 상기 유기층을 상 분리기를 통해 여과한 후 증발시켜 미정제 메틸 2-(4-클로로벤질)-4-((2,2-디메틸-4,6-디옥소-1,3-디옥산-5-일리덴)(히드록시)메틸)-피페리딘-1-카복실레이트 (7.00 g, 117 %)를 수득하였다. MS m/z 438, 440 (M+H)+
단계 2: 트랜스- 메틸 2-(4- 클로로벤질 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 2-(4- 클로로벤질 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )피페리딘-1- 카복실레이트
메틸 2-(4-클로로벤질)-4-((2,2-디메틸-4,6-디옥소-1,3-디옥산-5-일리덴)(히드록시)-메틸)피페리딘-1-카복실레이트 (7.00 g, 16 mmol)를 EtOH (100 mL)에 용해시킨 후 황색 용액을 얻었다. 상기 혼합물을 환류에 가깝게 가온시킨 후 90 분간 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 바이오타지 (헵탄:에틸 아세테이트, 농도구배 20%->70% 에틸 아세테이트, 7 CV, 340 g 컬럼, 2 회의 러닝)로 정제하여 트랜스-메틸 2-(4-클로로벤질)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (780 mg, 13 %) 및 시스-메틸 2-(4-클로로벤질)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.45 g, 24 %)를 수득하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.14 - 1.31 (m, 3H), 1.56 - 1.95 (m, 4H), 2.59 - 3.08 (m, 4H), 3.43 (d, 2H), 3.59 (d, 3H), 3.80-3.95 (m, 1H), 4.00 - 4.22 (m, 3H), 7.05 - 7.11 (m, 2H), 7.18-7.24 (m, 2H). MS m/z 382, 384 (M+H)+. 트랜스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.26 (t, 3H), 1.39-1.99 (m, 4H), 2.46-3.06 (m, 4H), 3.35-3.72 (m, 5H), 3.95-4.32 (m, 3H), 4.40-4.72 (m, 1H), 6.99-7.37 (m, 4H). MS m/z 382, 384 (M+H)+
단계 3: 시스 - 메틸 2-(4- 클로로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
MeOH (10 mL) 중 시스-메틸 2-(4-클로로벤질)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.45 g, 3.80 mmol)의 용액을 -30℃에서 MeOH/H2O (2.981 mL/ 0.179 mL) 중 수산화나트륨 (3.16 mL, 3.80 mmol)의 용액에 첨가하였다. 10 분후, MeOH (10 mL) 및 H2O (10 mL) 중 히드록실아민 히드로클로라이드 (0.528 g, 7.59 mmol)와 수산화나트륨 (0.304 g, 7.59 mmol)의 용액을 첨가하였다. 교반을 -30℃에서 30 분간 지속하였다. 상기 반응 용액을 80℃에서 6 M HCl (6.33 mL, 37.97 mmol)에 붓고, 80℃에서 1 시간 동안 가열하였다. 유기 용매를 농축한 후 디에틸 에테르 (x3)로 추출하고, Na2SO4로 건조 후 증발시켜 황색 폼을 수득하였다. prepLC (2 회 주입, pH=3, 큰 컬럼, 20-80% MeCN, 30 분간)로 정제하여 시스-메틸 2-(4-클로로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (557 mg, 41 %)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.83 - 2.00 (m, 3H), 2.02 - 2.12 (m, 1H), 2.59 (dd, 1H), 2.77 (dd, 1H), 2.97 - 3.02 (m, 1H), 3.08 - 3.20 (m, 1H), 3.62 (s, 3H), 4.00 (dd, 1H), 4.21 - 4.29 (m, 1H), 5.73 (s, 1H), 7.04 (d, 2H), 7.21 - 7.25 (m, 2H). MS m/z 351, 353 (M+H)+
단계 4: (2R,4S)- 메틸 2-(4- 클로로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(4-클로로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (557 mg, 1.58 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄팍 IC (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/IPA/FA 50/50/0.1, 유속 15 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(4-클로로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (253 mg, 45 %)를, 키랄 순도 99.3 %ee, 광회전 [α]20 D = +16.2 (아세토니트릴, c=1)로 수득하였다.
단계 5: 5-((2R,4S)-2-(4- 클로로벤질 )피페리딘-4- 일 ) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(4-클로로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (253 mg, 0.72 mmol)를 HBr (AcOH 중 33%) 중에서 밤새 교반하였다 (24 시간). 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (20 분간, 100 mL/분의 유속) 중 5% 내지 45% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 5-((2R,4S)-2-(4-클로로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (150 mg, 71%)을 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ1.37 - 1.50 (m, 1H), 1.61 - 1.77 (m, 1H), 2.01 - 2.13 (m, 2H), 2.78 - 2.98 (m, 4H), 3.18 - 3.28 (m, 1H), 3.28 - 3.36 (m, 1H), 5.51 (s, 1H), 7.24 (d, 2H), 7.34 (d, 2H). [C15H17ClN2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 293.1057. 측정값: 293.1043.
실시예 116
5-(트랜스-2-(4- 클로로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(4- 클로로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
MeOH (5 mL) 중 메틸 2-(4-클로로벤질)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (780 mg, 2.04 mmol) (실시예 115, 단계 2)의 용액을 -30℃에서 MeOH/H2O (1.608 mL/ 0.097 mL) 중 수산화나트륨 (1.705 mL, 2.05 mmol)의 용액에 첨가하였다. 10 분후, MeOH (5 mL)와 H2O (5 mL) 중 히드록실아민 히드로클로라이드 (284 mg, 4.09 mmol)와 수산화나트륨 (163 mg, 4.09 mmol)의 용액을 첨가하였다. 교반을 -30℃에서 30 분간 지속하였다. 상기 반응 용액을 80℃에서 6 M HCl (3.40 mL, 20.43 mmol)에 붓고, 80℃에서 30 분간 가열하였다. 유기 용매를 농축한 후, 디에틸 에테르 (x3)로 추출하고, Na2SO4로 건조한 후 증발시켜 황색 폼을 수득하였다. prepLC (pH=3, 큰 컬럼, 20-80% MeCN, 30 분간)로 정제하여 트랜스-메틸 2-(4-클로로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (272.5 mg, 38 %)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.44 - 2.18 (m, 4H), 2.70 - 3.01 (m, 2H), 3.02-3.14 (m, 2H), 3.42 - 3.76 (m, 3H), 4.04 - 4.37 (m, 1H), 4.39 - 4.79 (m, 1H), 5.64 (s, 1H), 7.05 - 7.31 (m, 4H). MS m/z 351, 353 (M+H)+
단계 2: 5-(트랜스-2-(4- 클로로벤질 )피페리딘-4- 일 ) 이소옥사졸 -3(2H)-온
메틸 2-(4-클로로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (347 mg, 0.99 mmol)를 HBr (AcOH 중 33%) 중에서 밤새 교반하였다 (19 시간). 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-(트랜스-2-(4-클로로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (151 mg, 52 %)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, tfa) δ2.25 - 2.60 (m, 4H), 3.06 - 3.20 (m, 2H), 3.35 - 3.52 (m, 1H), 3.55 - 3.75 (s, 2H), 3.77 - 3.96 (m, 1H), 6.59 (s, 1H), 7.15 - 7.22 (m, 2H), 7.22 - 7.41 (m, 2H). [C15H17ClN2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 293.1057. 측정값: 293.1031.
실시예 117
5-((2R,4S)-2-(4-( 메틸설포닐 )벤질)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(4-( 메틸설포닐 )벤질)피페리딘-1- 카복실레이트
말론산 에틸 칼륨 (2.414 g, 14.18 mmol)과 MgCl2 (1.125 g, 11.82 mmol)를 무수 THF (75 mL)에 첨가하였다. 반응 플라스크를 50℃에서 4 시간 동안 세게 교반하였다 (플라스크 1). 1-(메톡시카보닐)-2-(4-(메틸설포닐)벤질)피페리딘-4-카복실산 (4.2 g, 11.82 mmol) (참조 화합물 51) 및 카보닐디이미다졸 (2.87 g, 17.73 mmol)을 실온에서 무수 THF (75 mL)에 첨가하였다 (플라스크 2). 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (0.5g)을 더 첨가한 후, 2 시간 후 플라스크 2의 내용물을 실온에서 플라스크 1에 첨가한 후 밤새 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 물과 디에틸 에테르에 용해시켰다. 상기 유기상을 분리한 후, Na2SO4로 건조하고 셀라이트를 통해 여과시킨 후 용매는 증발시켰다. 바이오타지 장비를 사용하여 크로마토그래피를 수행하였다. 에틸 아세테이트-헵탄을 이용한 농도구배 용출은, 10-90으로부터 시작하여 100-0으로 종료하였다. 메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(4-(메틸설포닐)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (3.99 g, 79 %)를 분리하였다.
단계 2: 메틸 2-(4-( 메틸설포닐 )벤질)-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(4-(메틸설포닐)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (3.99 g, 9.38 mmol)를 MeOH (70 mL)에 용해시킨 후 -30℃로 냉각시켰다. 물 (7 mL)에 용해된 NaOH (0.375 g, 9.38 mmol)를 10 분 동안 첨가하여 생성된 무색의 용액을 -30℃에서 20 분간 계속 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.575 mL, 9.38 mmol)을 적가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -30℃에서 30 분간 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M HCl의 용액 (30 mL, 180 mmol)에 옮긴 후, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 상기 혼합물을 에틸 아세테이트와 물에 용해시켰다. 상기 수성층을 에틸 아세테이트로 3 회 더 추출하였다. 상기 혼합된 유기층을 Na2SO4로 건조하고 셀라이트를 통해 여과시킨 후 용매는 증발시켰다. 잔류물을 역상 크로마토그래피 (농도구배: 산 버퍼 및 아세토니트릴은, 35%로 시작하여 40%로 종료함)를 사용하여 정제하였다. 메틸 2-(4-(메틸설포닐)벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.05 g, 28.4%)를 분리하였다.
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-(4-( 메틸설포닐 )벤질)-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트 , (2S,4R)- 메틸 2-(4-( 메틸설포닐 )벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로 이소옥사졸 -5- 일 )피페리딘-1-카복실레이트 및 트랜스- 메틸 2-(4-( 메틸설포닐 )-벤질)-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
메틸 2-(4-(메틸설포닐)벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1 g, 2.54 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC를 두 단계 [먼저 하기의 컬럼: 키랄셀 OJ (250x50), 20 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/IPA/FA 30/70/0.1, 유속 120 mL/분을 사용한 후, 하기의 컬럼: 키랄팍 AD (250x50), 20 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH/FA 40/60/0.1, 유속 120 mL/분을 사용함]로 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(4-(메틸설포닐)벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (231 mg, 23 %)를, 키랄 순도 99.5 %ee, 광회전 [α]20 D = +10.1 (아세토니트릴, c=1), 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.87 - 1.97 (m, 3H), 2.02 - 2.11 (m, 1H), 2.68 (dd, 1H), 2.88 (dd, 1H), 2.96 - 3.06 (m, 4H), 3.12 - 3.22 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.96 - 4.02 (m, 1H), 4.27 - 4.35 (m, 1H), 5.74 (s, 1H), 7.30 (d, 2H), 7.82 (d, 2H)로 수득하였고; (2S,4R)-메틸 2-(4-(메틸설포닐)벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (225 mg, 22.5 %)를, 키랄 순도 98.4 %ee, 광회전 [α]20 D = -11.4 (아세토니트릴, c=1), 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.86 - 1.97 (m, 3H), 2.02 - 2.10 (m, 1H), 2.67 (dd, 1H), 2.87 (dd, 1H), 2.96 - 3.05 (m, 4H), 3.12 - 3.20 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.95 - 4.02 (m, 1H), 4.27 - 4.34 (m, 1H), 5.74 (s, 1H), 7.29 (d, 2H), 7.81 (d, 2H)로, 그리고 트랜스-메틸 2-(4-(메틸설포닐)벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (185 mg, 18.5 %)를 수득하였다.
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(4-( 메틸설포닐 )벤질)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(4-(메틸설포닐)벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (231 mg, 0.59 mmol)를 HBr (아세트산 중 33 %, 5 mL, 28.55 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(4-(메틸설포닐)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (171 mg, 87 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.06 - 1.15 (m, 1H), 1.30 - 1.39 (m, 1H), 1.76 (d, 2H), 2.43 - 2.56 (신호 누락), 2.62 - 2.81 (m, 4H), 2.95 - 3.00 (m, 1H), 3.16 (s, 3H), 5.68 (s, 1H), 7.46 (d, 2H), 7.80 (d, 2H). [C16H20N2O4S+H]+에 대한 HRMS 계산값: 337.1222. 측정값: 337.1198
실시예 118
5-((2S,4R)-2-(4-( 메틸설포닐 )벤질)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4R)-메틸 2-(4-(메틸설포닐)벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (225 mg, 0.57mmol)를 HBr (아세트산 중 33 %, 5 mL, 28.55 mmol) 중에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2S,4R)-2-(4-(메틸설포닐)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (91 mg, 47.4%)을 수득하였다.1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.05 - 1.14 (m, 1H), 1.30 - 1.38 (m, 1H), 1.72 - 1.79 (m, 2H), 2.39 - 2.56 (신호 누락), 2.62 - 2.80 (m, 4H), 2.94 - 3.00 (m, 1H), 3.16 (s, 3H), 5.68 (s, 1H), 7.46 (d, 2H), 7.80 (d, 2H). [C16H20N2O4S+H]+에 대한 HRMS 계산값: 337.1222. 측정값: 337.1198
실시예 119
5-(트랜스-2-(4-( 메틸설포닐 )벤질)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
트랜스-메틸 2-(4-(메틸설포닐)벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (185 mg, 0.47 mmol)를 HBr (아세트산 중 33 %, 4 mL, 22.84 mmol) 중에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-(트랜스-2-(4-(메틸설포닐)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (161 mg, 102%)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.65 - 1.97 (m, 4H), 2.34 - 2.63 (신호 누락), 2.80 - 3.15 (m, 5H), 3.18 (s, 3H), 5.84 (s, 1H), 7.51 (d, 2H), 7.87 (d, 2H). [C16H20N2O4S+H]+에 대한 HRMS 계산값: 337.1222. 측정값: 337.1236
실시예 120
5-((2R,4S)-2-(3,4- 디플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(3,4- 디플루오로벤질 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파 노일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 2-(3,4- 디플루오로벤질 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )피페리딘-1- 카복실레이트
2-(3,4-디플루오로벤질)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (6.62 g, 21.13 mmol) (참조 화합물 53)를 메틸 THF (150 mL)에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (5.14 g, 31.70 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 질소 하, 실온에서 3.5 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (6.47 g, 38.03 mmol)를 메틸 THF (150 mL) 중에 현탁시킨 후, 염화마그네슘 (3.62 g, 38.03 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 특대의 교반 막대를 이용하여 50℃, 질소 하에서 3 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 플라스크 1의 황색 현탁액을 이제 플라스크 2의 백색 현탁액에 첨가하였다. 생성된 황색 현탁액을 질소 하, 실온에서 4 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화하고 MTBE와 물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리한 후 유기상을 물, 포화 NaHCO3 및 물로 추출하였다. 용매를 증발시켜 오렌지색 오일을 수득하였다. 부분입체 이성질체를 바이오타지 (헵탄 중 20 % => 50 % EtOAc, 8 CV; 바이오타지? KP-SIL 340g 컬럼) 상에서 2 회의 러닝으로 분리하였다. 트랜스-메틸 2-(3,4-디플루오로벤질)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.278 g, 3.4 %) 및 시스-메틸 2-(3,4-디플루오로벤질)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (2.233 g, 27.6 %)를 황색 오일로서 분리하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.21 - 1.29 (m, 3H), 1.61 - 1.98 (m, 4H), 2.63 - 2.78 (m, 2H), 2.82 - 3.11 (m, 2H), 3.47 (s, 2H), 3.64 (s, 3H), 3.86 - 3.97 (m, 1H), 4.12 - 4.23 (m, 3H), 6.85 - 6.92 (m, 1H), 6.95 - 7.13 (m, 2H). MS m/z 384 (M+H)+. 트랜스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.22 - 1.29 (m, 3H), 1.40 - 2.00 (m, 4H), 2.63 - 3.03 (m, 4H), 3.37 - 3.75 (m, 5H), 4.00 - 4.31 (m, 3H), 4.55 (d, br., 1H), 6.77 - 7.12 (m, 3H). MS m/z 384 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 2-(3,4- 디플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(3,4-디플루오로벤질)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (2.233 g, 5.82 mmol)를 MeOH (20 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (2.000 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.233 g, 5.82 mmol)을 10 분 동안 첨가한 후, 이 황색 오일을 -40℃에서 20 분간 계속 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.357 mL, 5.82 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (30 mL, 180.00 mmol)에 신속하게 붓고, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 DCM/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 황색 반고체를 수득하였다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (20 분간, 100 mL/분의 유속) 중 0-25 % 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 3 회 주입하여 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 2-(3,4-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.361 g, 66 %)를 백색 고체로 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.84 - 2.14 (m, 4H), 2.52 - 2.62 (m, 1H), 2.71 - 2.80 (m, 1H), 2.95 - 3.05 (m, 1H), 3.09 - 3.20 (m, 1H), 3.64 (s, 3H), 3.95 - 4.06 (m, 1H), 4.20 - 4.30 (m, 1H), 5.74 (s, 1H), 6.77 - 6.83 (m, 1H), 6.90 - 6.98 (m, 1H), 6.98 - 7.09 (m, 1H). MS m/z 353 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-(3,4- 디플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이 소옥사졸-5-일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 (2S,4R)- 메틸 2-(3,4- 디플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(3,4-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.36 g, 3.87 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄팍 AD (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH/FA 90/10/0.2, 유속 18 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(3,4-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (550 mg, 40 %)를, 키랄 순도 98.2 %ee, 광회전 [α]20 D = +15.0 (아세토니트릴, c=1)으로, 그리고 (2S,4R)-메틸 2-(3,4-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (596 mg, 44 %)를, 키랄 순도 99.4 %ee, 광회전 [α]20 D = -13.2 (아세토니트릴, c=1)로 수득하였다.
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(3,4- 디플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(3,4-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (550 mg, 1.56 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 15 mL, 85.65 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx I, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(3,4-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (183 mg, 40 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ1.41 (q, 1H), 1.67 (dq, 1H), 1.99 - 2.08 (m, 2H), 2.77 - 2.95 (m, 4H), 3.17 - 3.24 (m, 1H), 3.26 - 3.34 (m, 1H), 5.49 (s, 1H), 7.00 - 7.05 (m, 1H), 7.14 - 7.22 (m, 2H). [C15H16F2N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 295.1258. 측정값: 295.1253
실시예 121
5-((2S,4R)-2-(3,4- 디플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4R)-메틸 2-(3,4-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (596 mg, 1.69 mmol) (실시예 120, 단계 3)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 15 mL, 85.65 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx I, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2S,4R)-2-(3,4-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (136 mg, 27%). 1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ1.42 (q, 1H), 1.68 (dq, 1H), 2.04 (t, 2H), 2.78 - 2.95 (m, 4H), 3.19 - 3.25 (m, 1H), 3.29 - 3.35 (m, 1H), 5.49 (s, 1H), 7.00 - 7.05 (m, 1H), 7.14 - 7.22 (m, 2H). [C15H16F2N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 295.1258. 측정값: 295.1264
실시예 122
5-((2S,4S)-2-(3,4- 디플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(3,4- 디플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 2-(3,4-디플루오로벤질)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.278 g, 0.73 mmol) (실시예 120, 단계 1)를 MeOH (3 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (0.300 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.029 g, 0.73 mmol)을 10 분 동안 첨가하고 이 황색 오일을 -40℃에서 20 분간 계속 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.044 mL, 0.73 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 3 시간 15 분 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (4 mL, 24.00 mmol)에 신속하게 붓고, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 DCM/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 황색 반고체를 수득하였다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (20 분간, 100 mL/분의 유속) 중 0-25 % 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 트랜스-메틸 2-(3,4-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (83 mg, 34 %)를 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.47 - 2.14 (m, 4H), 2.71 - 3.14 (m, 4H), 3.43-3.75 (m, 3H), 4.01 - 4.78 (m, 2H), 5.65 (s, 1H), 6.78-7.14 (m, 3H). MS m/z 353 (M+H)+
단계 2: (2S,4S)- 메틸 2-(3,4- 디플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이 소옥사졸-5-일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 (2R,4R)- 메틸 2-(3,4- 디플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 2-(3,4-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (83 mg, 0.24 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 레프로실 (250x20), 8 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/(MTBE/MeOH 95/5) 70/30, 유속 18 mL/분]를 수행하여 (2S,4S)-메틸 2-(3,4-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (45 mg, 54 %)를, 키랄 순도 99.6 %ee로, 그리고 (2R,4R)-메틸 2-(3,4-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (32 mg, 38%)를, 키랄 순도 99.9 %ee로 수득하였다.
단계 3: 5-((2S,4S)-2-(3,4- 디플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4S)-메틸 2-(3,4-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (45 mg, 0.13 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 1 mL, 5.71 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 교반하였다. 17 시간 후, 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 0.5 mL, 2.85 mmol)을 더 첨가하고 상기 반응을 실온에서 총 24 시간 동안 지속하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅲ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2S,4S)-2-(3,4-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (8.5 mg, 22%)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ1.71 - 1.79 (m, 1H), 1.96 - 2.04 (m, 1H), 2.04 - 2.12 (m, 2H), 2.79 - 2.92 (m, 2H), 2.95 - 3.03 (m, 1H), 3.14 - 3.36 (m, 3H), 5.51 (s, 1H), 7.00 - 7.04 (m, 1H), 7.13 - 7.24 (m, 2H). [C15H16F2N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 295.1258. 측정값: 295.1276
실시예 123
5-((2R,4R)-2-(3,4- 디플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4R)-메틸 2-(3,4-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (32.5 mg, 0.09 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 0.8 mL, 4.57 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅲ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4R)-2-(3,4-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (10.4 mg, 38%)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ1.71 - 1.78 (m, 1H), 1.96 - 2.04 (m, 1H), 2.05 - 2.12 (m, 2H), 2.80 - 2.92 (m, 2H), 2.96 - 3.03 (m, 1H), 3.15 - 3.25 (m, 2H), 3.26 - 3.35 (m, 1H), 5.50 (s, 1H), 6.99 - 7.05 (m, 1H), 7.13 - 7.23 (m, 2H). [C15H16F2N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 295.1258. 측정값: 295.1267
실시예 124
5-((2R,4S)-2-(2,5- 디플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(2,5- 디플루오로벤질 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파 노일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 2-(2,5- 디플루오로벤질 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )피페리딘-1- 카복실레이트
무수 메틸-THF (150 mL) 중 2-(2,5-디플루오로벤질)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (7.4 g, 23.62 mmol) (참조 화합물 54)의 혼합물에 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (5.74 g, 35.43 mmol)을 질소 하, 실온에서 첨가하였다. 상기 현탁액을 실온에서 4 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 무수 메틸-THF (150 mL) 중 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (7.24 g, 42.52 mmol)의 혼합물에 염화마그네슘 (4.05 g, 42.52 mmol)을 질소 하, 실온에서 첨가하였다. 상기 혼합물을 50℃에서 4 시간 동안 가열한 후, 실온으로 냉각시켰다 (플라스크 2). 플라스크 1의 현탁액을 플라스크 2의 현탁액에 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 48 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 4 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화한 후, 물과 MTBE를 첨가하였다. 상기 유기상을 분리하고 물, 포화 NaHCO3로 세척한 후 건조하고 증발시켰다. 부분입체 이성질체를, 용리액으로 이소헥산/EtOAc (100:15 내지 100:50)를 사용한 섬광 크로마토그래피 실리카겔로 분리하였다. 트랜스-메틸 2-(2,5-디플루오로벤질)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.6 g, 18 %) 및 시스-메틸 2-(2,5-디플루오로벤질)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (6.2 g, 69 %)를 오일로 분리하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.20 - 1.32 (m, 3H), 1.64 - 2.00 (m, 4H), 2.67 - 3.15 (m, 4H), 3.48 (s, 2H), 3.58 (s, 3H), 3.87 - 3.99 (m, 1H), 4.07 - 4.32 (m, 3H), 6.82 - 7.01 (m, 3H). 트랜스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.22 - 1.32 (m, 3H), 1.45 - 2.01 (m, 4H), 2.52 - 3.12 (m, 4H), 3.41 - 3.74 (m, 5H), 4.04 - 4.34 (m, 3H), 4.48 - 4.74 (m, 1H), 6.82 - 7.06 (m, 3H). MS m/z 384 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 2-(2,5- 디플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(2,5-디플루오로벤질)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (2.241 g, 5.85 mmol)를 MeOH (20 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (2.000 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.234 g, 5.85 mmol)을 10 분 동안 첨가한 후, 이 무색의 용액을 -40℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.358 mL, 5.85 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (30 mL, 180.00 mmol)에 옮긴 후, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 DCM/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 황색 반고체를 수득하였다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (20 분간, 100 mL/분의 유속) 중 0-20 % 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 3 회 주입하여 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 2-(2,5-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.259 g, 61 %)를 백색 고체로 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ1.88 - 2.13 (m, 4H), 2.63 - 2.83 (m, 2H), 2.99 - 3.10 (m, 1H), 3.23 - 3.34 (m, 1H), 3.45 (s, 3H), 3.88 - 4.00 (m, 1H), 4.35 - 4.46 (m, 1H), 5.85 (d, 1H), 6.88 - 7.06 (m, 3H). MS m/z 353 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-(2,5- 디플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이 소옥사졸-5-일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 (2S,4R)- 메틸 2-(2,5- 디플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(2,5-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.259 g, 3.58 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄팍 AD (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH/FA 90/10/0.2, 유속 18 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(2,5-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (505 mg, 40 %)를, 키랄 순도 98.8 %ee, 광회전 [α]20 D = -5.7 (아세토니트릴, c=1)로, 그리고 (2S,4R)-메틸 2-(2,5-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (499 mg, 39.6 %)를, 키랄 순도 98.8 %ee, 광회전 [α]20 D = +3.5 (아세토니트릴, c=1)로 수득하였다.
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(2,5- 디플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(2,5-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (505 mg, 1.43 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 10 mL, 57.10 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 22 시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅲ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(2,5-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (299 mg, 71%)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ1.49 (q, 1H), 1.71 (dq, 1H), 1.99 - 2.08 (m, 2H), 2.82 - 3.00 (m, 4H), 3.24 - 3.31 (m, 1H), 3.31 - 3.37 (m, 1H), 5.50 (s, 1H), 6.99 - 7.13 (m, 3H). [C15H16F2N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 295.1258. 측정값: 295.1244
실시예 125
5-((2S,4R)-2-(2,5- 디플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4R)-메틸 2-(2,5-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (499 mg, 1.42 mmol) (실시예 124, 단계 3)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 10 mL, 57.10 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 22 시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅲ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2S,4R)-2-(2,5-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (292 mg, 70 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ1.49 (q, 1H), 1.71 (dq, 1H), 2.00 - 2.08 (m, 2H), 2.83 - 2.91 (m, 2H), 2.93 - 3.00 (m, 2H), 3.25 - 3.31 (m, 1H), 3.33 - 3.37 (m, 1H), 5.50 (s, 1H), 6.99 - 7.12 (m, 3H). [C15H16F2N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 295.1258. 측정값: 295.1254
실시예 126
5-(트랜스-2-(2,5- 디플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(2,5- 디플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 2-(2,5-디플루오로벤질)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.611 g, 1.59 mmol) (실시예 124, 단계 1)를 MeOH (5 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (0.500 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.064 g, 1.59 mmol)을 10 분 동안 첨가한 후, 이 무색의 용액을 -40℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.098 mL, 1.59 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (8 mL, 48.00 mmol)에 옮긴 후, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 DCM/물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 미정제 트랜스-메틸 2-(2,5-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.552 g, 98%)를 황색 반고체로서 수득하였다. MS m/z 353 (M+H)+
단계 2: 5-(트랜스-2-(2,5- 디플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
트랜스-메틸 2-(2,5-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (148 mg, 0.42 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 3 mL, 17.13 mmol)에 용해시킨 후, 이 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-(트랜스-2-(2,5-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (54.7 mg, 44 %)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ1.90 - 2.00 (m, 1H), 2.10 - 2.25 (m, 3H), 3.05 (d, 2H), 3.09 - 3.19 (m, 1H), 3.34 - 3.45 (m, 2H), 3.51 - 3.61 (m, 1H), 5.81 (d, 1H), 7.02 - 7.21 (m, 3H). [C15H16F2N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 295.1258. 측정값: 295.1278
실시예 127
5-((2R,4S)-2-(2,6- 디플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(2,6- 디플루오로벤질 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파 노일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 2-(2,6- 디플루오로벤질 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )피페리딘-1- 카복실레이트
2-(2,6-디플루오로벤질)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (4.72 g, 15.07 mmol) (참조 화합물 55)을 메틸 THF (108 mL)에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (3.66 g, 22.60 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 질소 하,실온에서 3 시간 45 분 동안 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 메틸 THF (108 mL) 중 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (4.62 g, 27.12 mmol)의 현탁액에 염화마그네슘 (2.58 g, 27.12 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 큰 교반 막대를 사용하여 질소 하, 50℃에서 3.5 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 플라스크 1의 현탁액을 플라스크 2의 현탁액에 첨가한 후, 상기 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 2 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화하였다. MTBE와 물을 첨가하고 상들을 분리하였다. 상기 유기상을 건조하고 농축시키기 전에, 물, 포화 NaHCO3 및 물로 세척하였다. 잔류물을 바이오타지? KP-SIL 340g 컬럼 상에서 자동화 섬광 크로마토그래피를 사용하여 2회의 러닝으로 정제하였다. 8 CV (3 CV 초기 폐기물 + 5 CV 수집물)에 걸쳐 헵탄 중 15 % 내지 50 %의 EtOAc를 이동상으로 사용하였다. 트랜스-메틸 2-(2,6-디플루오로벤질)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.405 g, 7 %) 및 시스-메틸 2-(2,6-디플루오로벤질)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (2.404 g, 41 %)를 분리하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.20 - 1.33 (m, 3H), 1.68 - 2.05 (m, 4H), 2.65 - 2.89 (m, 2H), 2.93 - 3.16 (m, 2H), 3.49 (s, 5H), 3.96 (dd, 1H), 4.14 - 4.22 (m, 2H), 4.27 - 4.40 (m, 1H), 6.77 - 6.89 (m, 2H), 7.09 - 7.20 (m, 1H). MS m/z 384 (M+H)+. 트랜스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.22 - 1.34 (m, 3H), 1.41 - 2.01 (m, 4H), 2.75 - 3.20 (m, 4H), 3.37 - 3.70 (m, 5H), 4.02 - 4.32 (m, 3H), 4.55 - 4.85 (m, 1H), 6.81 - 6.92 (m, 2H), 7.11 - 7.23 (m, 1H). MS m/z 384 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 2-(2,6- 디플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(2,6-디플루오로벤질)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (2.404 g, 6.27 mmol)를 MeOH (21 mL)에 용해시킨 후, 질소 대기 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (2.100 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.251 g, 6.27 mmol)을 8 분간에 걸쳐 첨가하였다. 교반 20 분 후, 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.384 mL, 6.27 mmol)을 6 분간에 걸쳐 첨가하고, 상기 용액을 -40℃에서 3.5 시간 동안 교반하였다. 이후, 상기 반응 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (32.3 mL, 193.76 mmol)에 신속하게 붓고, 상기 혼합물 80℃에서 25 분 동안 계속 교반하였다. 용매를 증발시킨 후 상기 미정제 혼합물을 DCM/물 중에 다시 용해시켰다. 상기 유기상을 건조한 후 농축시켰다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (20 분간, 100 mL/분의 유속) 중 0-20% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 2-(2,6-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.232 g, 55.8 %)를 백색 고체로 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ1.94 - 2.04 (m, 2H), 2.08 - 2.16 (m, 2H), 2.63 - 2.73 (m, 1H), 2.81 - 2.91 (m, 1H), 2.98 - 3.09 (m, 1H), 3.24 - 3.37 (m, 4H), 3.88 - 3.99 (m, 1H), 4.41 - 4.54 (m, 1H), 5.81 (s, 1H), 6.82 - 6.92 (m, 2H), 7.16 - 7.26 (m, 1H). MS m/z 353 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-(2,6- 디플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이 소옥사졸-5-일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 (2S,4R)- 메틸 2-(2,6- 디플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(2,6-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.232 g, 3.5 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄팍 AD (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH/FA 90/10/0.2, 유속 18 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(2,6-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로-이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (370 mg, 30 %)를, 키랄 순도 99.2 %ee, 광회전 [α]20 D = -24.4 (아세토니트릴, c=1)로, 그리고 (2S,4R)-메틸 2-(2,6-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (344 mg, 28 %)를, 키랄 순도 97.6 %ee, 광회전 [α]20 D = +22.9 (아세토니트릴, c=1)로 수득하였다.
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(2,6- 디플루오로벤질 )피페리딘-4- 일 )이소옥사졸-3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(2,6-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (370 mg, 1.05 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 8 mL, 45.68 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 24 시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅲ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(2,6-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (254 mg, 82 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ1.47 (q, 1H), 1.67 (qd, 1H), 2.02 (dd, 2H), 2.78 - 3.02 (m, 4H), 3.16 - 3.24 (m, 1H), 3.27 - 3.33 (m, 1H), 5.49 (s, 1H), 6.98 (t, 2H), 7.27 - 7.37 (m, 1H). [C15H16F2N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 295.1258. 측정값: 295.1248
실시예 128
5-((2S,4R)-2-(2,6- 디플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4R)-메틸 2-(2,6-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (344 mg, 0.98 mmol) (실시예 127, 단계 3)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 8 mL, 45.68 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 24 시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅲ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2S,4R)-2-(2,6-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (222 mg, 77 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ1.47 (q, 1H), 1.68 (dq, 1H), 1.96 - 2.07 (m, 2H), 2.79 - 3.02 (m, 4H), 3.18 - 3.25 (m, 1H), 3.27 - 3.34 (m, 1H), 5.49 (s, 1H), 6.95 - 7.01 (m, 2H), 7.28 - 7.36 (m, 1H). [C15H16F2N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 295.1258. 측정값: 295.1240
실시예 129
5-(트랜스-2-(2,6- 디플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(2,6- 디플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 2-(2,6-디플루오로벤질)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.399 g, 1.04 mmol) (실시예 127, 단계 1)를 MeOH (3.5 mL)에 용해시킨 후, 질소 대기 하에 -40℃로 냉각시켰다. 수산화나트륨 (0.306 mL, 1.04 mmol)을 5 분간에 걸쳐 첨가하였다. 교반 45 분 후, 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.064 mL, 1.04 mmol)을 1 분간에 걸쳐 첨가한 후, 상기 용액을 -40℃에서 3.5 시간 동안 교반하였다. 이후, 상기 반응 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (5.36 mL, 32.16 mmol)에 신속하게 붓고, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시킨 후 상기 미정제 혼합물을 DCM에 다시 용해시킨 후 물로 세척하였다. 상기 유기상을 건조한 후 농축시켜 미정제 트랜스-메틸 2-(2,6-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.331 g, 90 %)를 수득하였다. MS m/z 353 (M+H)+
단계 2: 5-(트랜스-2-(2,6- 디플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
트랜스-메틸 2-(2,6-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.329 g, 0.93 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 7.5 mL, 42.82 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-(트랜스-2-(2,6-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (4.6 mg, 1.7 %)을 수득하였다. [C15H16F2N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 295.1258. 측정값: 295.1257
실시예 130
5-((2R,4S)-2-(3,5- 디플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(3,5- 디플루오로벤질 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파 노일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 2-(3,5- 디플루오로벤질 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )피페리딘-1- 카복실레이트
2-(3,5-디플루오로벤질)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (6.87 g, 21.93 mmol) (참조 화합물 56)을 메틸 THF (150 mL)에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (5.33 g, 32.89 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 질소 하,실온에서 3 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 메틸 THF (150 mL) 중의 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (6.72 g, 39.47 mmol)에 염화마그네슘 (3.76 g, 39.47 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 큰 교반 막대를 사용하여 50℃에서 3 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 플라스크 1의 현탁액을 플라스크 2의 현탁액에 첨가한 후, 상기 반응 혼합물을 실온에서 3 일간 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 2 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화하였다. MTBE와 물을 첨가하고 상들을 분리하였다. 상기 유기상을 건조 및 농축시키기 전에 물, 포화 NaHCO3 및 물로 세척하였다. 60 %의 잔류물을 바이오타지? KP-SIL 340g 컬럼 상에서 자동화 섬광 크로마토그래피로 2 회의 러닝으로 정제하였다. 8 CV (3 CV 초기 폐기물 + 5 CV 수집물)에 걸쳐서 헵탄 중 20 % 내지 60 %의 EtOAc를 이동상으로 사용하였다. 트랜스-메틸 2-(3,5-디플루오로벤질)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.92 g, 20 %) 및 시스-메틸 2-(3,5-디플루오로벤질)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (2.66 g, 57 %)를 수득하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.19 - 1.33 (m, 3H), 1.62 - 2.00 (m, 4H), 2.65 - 2.78 (m, 2H), 2.86 - 3.14 (m, 2H), 3.47 (s, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.86 - 3.98 (m, 1H), 4.13 - 4.24 (m, 3H), 6.60 - 6.77 (m, 3H). MS m/z 384 (M+H)+. 트랜스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.21 - 1.34 (m, 3H), 1.43 - 2.02 (m, 4H), 2.68 - 3.06 (m, 4H), 3.46 (s, 2H), 3.51 - 3.75 (m, 3H), 4.03 - 4.34 (m, 3H), 4.45 - 4.73 (m, 1H), 6.61 - 6.83 (m, 3H). MS m/z 384 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 2-(3,5- 디플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(3,5-디플루오로벤질)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (2.662 g, 6.94 mmol)를 MeOH (24 mL)에 용해시킨 후, 질소 대기 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (2.400 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.278 g, 6.94 mmol)을 13 분간에 걸쳐 첨가하였다. 교반 20 분 후, 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.425 mL, 6.94 mmol)을 9 분간에 걸쳐 첨가한 후, 상기 용액을 -40℃에서 3.5 시간 동안 교반하였다. 이후, 상기 반응 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (35.8 mL, 214.55 mmol)에 신속하게 붓고, 상기 혼합물을 80℃에서 25 분 동안 계속 교반하였다. 용매를 증발시킨 후 상기 미정제 혼합물을 DCM/물 중에 다시 용해시켰다. 상기 유기상을 건조한 후 농축시켰다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (20 분간, 100 mL/분의 유속) 중 0-25% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 2 회 주입하여 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 2-(3,5-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.604 g, 65.6 %)를 백색 고체로 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ1.91 - 2.07 (m, 4H), 2.62 - 2.80 (m, 2H), 2.97 - 3.04 (m, 1H), 3.23 - 3.34 (m, 1H), 3.54 (s, 3H), 3.89 - 3.99 (m, 1H), 4.26 - 4.36 (m, 1H), 5.73 (s, 1H), 6.69 - 6.79 (m, 3H). MS m/z 353 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-(3,5- 디플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이 소옥사졸-5-일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 (2S,4R)- 메틸 2-(3,5- 디플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(3,5-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.604 g, 4.56 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄팍 AD (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH 90/10, 유속 18 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(3,5-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (645 mg, 40 %)를, 키랄 순도 99.2 %ee, 광회전 [α]20 D = +13.1 (MeOH, c=1)로, 그리고 (2S,4R)-메틸 2-(3,5-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (789 mg, 49%)를, 키랄 순도 99.6 %ee, 광회전 [α]20 D = -10.1 (MeOH, c=1)로 수득하였다.
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(3,5- 디플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(3,5-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.645 g, 1.83 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 14.43 mL, 82.38 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅲ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(3,5-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (153 mg, 28%)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.01 - 1.11 (m, 1H), 1.26 - 1.38 (m, 1H), 1.68 - 1.78 (m, 2H), 2.41 - 2.77 (m, 5H), 2.91 - 2.99 (m, 1H), 5.67 (s, 1H), 6.92 (d, 2H), 6.99 (s, 1H). [C15H16F2N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 295.1258. 측정값: 295.1249
실시예 131
5-((2S,4R)-2-(3,5- 디플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4R)-메틸 2-(3,5-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.789 g, 2.24 mmol) (실시예 130, 단계 3)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 17.65 mL, 100.77 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅲ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2S,4R)-2-(3,5-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (123 mg, 19%)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.07 (q, 1H), 1.33 (dq, 1H), 1.71 - 1.78 (m, 2H), 2.49 - 2.56 (m, 1H), 2.57 - 2.71 (m, 3H), 2.72 - 2.78 (m, 1H), 2.94 - 2.99 (m, 1H), 5.67 (s, 1H), 6.89 - 6.94 (m, 2H), 7.00 (tt, 1H). [C15H16F2N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 295.1258. 측정값: 295.1248
실시예 132
5-((2S,4S)-2-(3,5- 디플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(3,5- 디플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 2-(3,5-디플루오로벤질)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.927 g, 2.42 mmol) (실시예 130, 단계 1)를 MeOH (8 mL)에 용해시킨 후, 질소 대기 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (0.800 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.097 g, 2.42 mmol)을 7 분간에 걸쳐 첨가하였다. 교반 20 분 후, 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.148 mL, 2.42 mmol)을 4.5 분간에 걸쳐 첨가한 후, 상기 용액을 -40℃에서 3.5 시간 동안 교반하였다. 이후, 상기 반응 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (12.45 mL, 74.71 mmol)에 신속하게 붓고, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 용매를 증발시키고 상기 미정제 혼합물을 DCM에 다시 용해시킨 후 물로 세척하였다. 상기 유기상을 건조한 후 농축시켰다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (20 분간, 100 mL/분의 유속) 중 0-25% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 트랜스-메틸 2-(3,5-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.648 g, 76 %)를 백색 고체로 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ1.45 - 2.12 (m, 4H), 2.80 - 3.35 (m, 4H), 3.35 - 3.70 (m, 3H), 4.12 (s, br., 1H), 4.62 (s, br., 1H), 5.71 (s, 1H), 6.77 (t, 1H), 6.87 (s, br., 2H). MS m/z 353 (M+H)+
단계 2: (2S,4S)- 메틸 2-(3,5- 디플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이 소옥사졸-5-일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 (2R,4R)- 메틸 2-(3,5- 디플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 2-(3,5-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.648 g, 1.84 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄팍 AD (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH 70/30, 유속 18 mL/분]를 수행하여 (2S,4S)-메틸 2-(3,5-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 249 mg (38%)를, 키랄 순도 99.9 %ee, 광회전 [α]20 D = +27.1 (아세토니트릴, c=1)로, 그리고 (2R,4R)-메틸 2-(3,5-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (244 mg, 37%)를, 키랄 순도 99.9 %ee, 광회전 [α]20 D = -26.4 (아세토니트릴, c=1)로 수득하였다.
단계 3: 5-((2S,4S)-2-(3,5- 디플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4S)-메틸 2-(3,5-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.249 g, 0.71 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 5.57 mL, 31.80 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2S,4S)-2-(3,5-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (34 mg, 16 %)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ1.70 - 2.16 (m, 4H), 2.84 - 3.43 (m, 6H), 5.57 (s, 1H), 6.81 - 7.02 (m, 3H). [C15H16F2N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 295.1258. 측정값: 295.1254
실시예 133
5-((2R,4R)-2-(3,5- 디플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4R)-메틸 2-(3,5-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.244 g, 0.69 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 5.46 mL, 31.16 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4R)-2-(3,5-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (51 mg, 25 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.44 - 1.51 (m, 1H), 1.65 - 1.80 (m, 3H), 2.52 - 2.60 (m, 1H), 2.65 - 2.70 (m, 2H), 2.76 - 2.83 (m, 1H), 2.86 - 2.94 (m, 1H), 3.09 - 3.14 (m, 1H), 5.74 (s, 1H), 6.90 - 6.95 (m, 2H), 7.00 (tt, 1H). [C15H16F2N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 295.1258. 측정값: 295.1276
실시예 134
5-((2R,4S)-2-(2,4- 디플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(2,4- 디플루오로벤질 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파 노일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 2-(2,4- 디플루오로벤질 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )피페리딘-1- 카복실레이트
염화마그네슘 (4.55 g, 47.75 mmol)과 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (8 g, 47.00 mmol)를 질소 하에서 메틸 THF (100 mL) 중에 용해시켜 생성된 현탁액을 특대의 교반 막대를 사용하여 50℃에서 6 시간 30 분 동안 교반한 후, 실온으로 냉각시켰다(플라스크 1). 메틸 THF (100 mL) 중의 2-(2,4-디플루오로벤질)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (7.48 g, 23.88 mmol) (참조 화합물 57)의 현탁액에 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (5.81 g, 35.81 mmol)을 질소 하에 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 실온에서 1 시간 20 분 동안 교반하였다 (플라스크 2). 플라스크 2의 내용물을 트랜스퍼 니들을 사용하여 플라스크 1로 옮겼다. 메틸 THF (30 mL)로 세척하였다. 생성된 현탁액을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 3.8 M HCl (약 200 mL)을 첨가하여 생성된 2상 혼합물을 30 분간 세게 교반하였다. 물과 MTBE를 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 유기상을 물, 포화 NaHCO3 및 물로 세척한 후, MgSO4로 건조시키고 증발시켰다. 잔류물을 바이오타지 [바이오타지? KP-SIL 340g 컬럼, 헵탄 중 20% EtOAc (1 CV), 이후 20% => 60% (7 CV)]를 통해 정제하였다. 트랜스-메틸 2-(2,4-디플루오로벤질)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.18 g, 13 %) 및 시스-메틸 2-(2,4-디플루오로벤질)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (4.17 g, 45 %)를 황색 오일로서 분리하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.20 - 1.32 (m, 3H), 1.59 - 1.99 (m, 4H), 2.66 - 3.12 (m, 4H), 3.48 (s, 2H), 3.55 (s, 3H), 3.89 - 3.98 (m, 1H), 4.07 - 4.29 (m, 3H), 6.71 - 6.83 (m, 2H), 7.05 - 7.17 (m, 1H). MS m/z 384 (M+H)+. 트랜스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.19 - 1.35 (m, 3H), 1.42 - 2.02 (m, 4H), 2.65 - 3.11 (m, 4H), 3.38 - 3.75 (m, 5H), 4.02 - 4.34 (m, 3H), 4.45 - 4.70 (m, 1H), 6.73 - 6.89 (m, 2H), 7.03 - 7.34 (m, 1H). MS m/z 384 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 2-(2,4- 디플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(2,4-디플루오로벤질)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (2.46 g, 6.42 mmol)를 MeOH (20 mL)에 용해시킨 후, -40℃로 냉각시켰다. 물 (2 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.257 g, 6.42 mmol)을 5 분간에 걸쳐 첨가한 후, 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 20 분간 교반하였다. 이후, 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.4 mL, 6.53 mmol)을 1 분간에 걸쳐 첨가하고, -40℃에서 1 시간 15 분간 계속 교반하였다. 이후, 상기 반응 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (30 mL, 180.00 mmol)으로 옮긴 후, 상기 혼합물을 80℃에 35 분간 교반을 지속하였다. 이후, 실온으로 냉각시켰다. 메탄올을 증발시킨 후, 물을 첨가하였다. DCM으로 3회 추출하였다. 혼합된 유기층을 MgSO4로 건조시킨 후 증발시켰다. 잔류물을 H2O/MeCN/아세트산 95/5/0.2 버퍼 (30 분간, 100 mL/분의 유속) 중 15-60% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 2-(2,4-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.62 g, 72 %)를 무색 폼으로 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ1.90 - 2.10 (m, 4H), 2.65 - 2.80 (m, 2H), 3.04 (p, 1H), 3.19 - 3.34 (m, 1H), 3.44 (s, 3H), 3.94 (ddd, 1H), 4.32 - 4.44 (m, 1H), 5.85 (s, 1H), 6.78 - 6.90 (m, 2H), 7.09 - 7.20 (m, 1H). MS m/z 353 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-(2,4- 디플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이 소옥사졸-5-일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 (2S,4R)- 메틸 2-(2,4- 디플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(2,4-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.62 g, 4.6 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄팍 AD (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH/FA 90/10/0.2, 유속 18 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(2,4-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (799 mg, 49 %)를, 키랄 순도 99.9 %ee, 광회전 [α]20 D = -4.0 (아세토니트릴, c=1)으로, 그리고 (2S,4R)-메틸 2-(2,4-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (734 mg, 45 %)를, 키랄 순도 99.5 %ee, 광회전 [α]20 D = +4.5 (아세토니트릴, c=1)로 수득하였다.
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(2,4- 디플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(2,4-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (399 mg, 1.13 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 8.2 mL, 46.87 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 속에서 제거한 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅲ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(2,4-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (146 mg, 44 %)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ1.43 (q, 1H), 1.67 (dq, 1H), 1.99 - 2.12 (m, 2H), 2.79 - 2.97 (m, 4H), 3.14 - 3.24 (m, 1H), 3.27 - 3.35 (m, 1H), 5.52 (s, 1H), 6.91 - 7.02 (m, 2H), 7.27 - 7.36 (m, 1H). [C15H16F2N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 295.1258. 측정값: 295.1252
실시예 135
5-((2S,4R)-2-(2,4- 디플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4R)-메틸 2-(2,4-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 367 mg, 1.04 mmol) (실시예 134, 단계 3)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 8.2 mL, 46.87 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 속에서 제거한 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅲ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2S,4R)-2-(2,4-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (144 mg, 47 %)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ1.43 (q, 1H), 1.67 (dq, 1H), 2.01 - 2.11 (m, 2H), 2.79 - 2.96 (m, 4H), 3.14 - 3.23 (m, 1H), 3.27 - 3.35 (m, 1H), 5.52 (s, 1H), 6.92 - 7.01 (m, 2H), 7.28 - 7.35 (m, 1H). [C15H16F2N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 295.1258. 측정값: 295.1259
실시예 136
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(2,4- 디플루오로벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 2-(2,4-디플루오로벤질)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.18 g, 3.08 mmol) (실시예 134, 단계 1)를 MeOH (15 mL)에 용해시킨 후, -40℃로 냉각시켰다. 물 (1.7 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.123 g, 3.08 mmol)을 1 분간에 걸쳐 첨가하고, 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 20 분간 교반하였다. 이후, 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.2 mL, 3.26 mmol)을 1 분간에 걸쳐 첨가하고, -40℃에서 2 시간 동안 교반을 지속하였다. 이후, 상기 반응 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (30 mL, 180.00 mmol)으로 옮긴 후, 상기 혼합물을 80℃에서 1 시간 동안 교반을 지속하였다. 이후, 실온으로 냉각시켰다. 메탄올을 증발시킨 후, 물을 첨가하였다. DCM으로 3회 추출하였다. 혼합된 유기층을 MgSO4로 건조한 후 증발시켰다. 미정제 트랜스-메틸 2-(2,4-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.1 g, 101 %)를 옅은 오렌지색 폼으로 분리하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ1.43 - 2.15 (m, 4H), 2.66 - 3.23 (m, 4H), 3.39 - 3.79 (m, 3H), 4.04 - 4.41 (m, 1H), 4.45 - 4.78 (m, 1H), 5.67 (s, 1H), 6.73 - 6.90 (m, 2H), 7.03 - 7.37 (m, 1H). MS m/z 353 (M+H)+
단계 2: 5-(트랜스-2-(2,4- 디플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
트랜스-메틸 2-(2,4-디플루오로벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.25 g, 0.71 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 6.21 mL, 35.48 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-(트랜스-2-(2,4-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (94.6 mg, 45%)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.43 - 1.51 (m, 1H), 1.63 - 1.78 (m, 3H), 2.52 - 2.60 (m, 1H), 2.65 (d, 2H), 2.76 - 2.87 (m, 2H), 3.08 - 3.13 (m, 1H), 5.67 (s, 1H), 6.98 (td, 1H), 7.12 (td, 1H), 7.27 - 7.34 (m, 1H). [C15H16F2N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 295.1258. 측정값: 295.1265
실시예 137
5-((2R,4S)-2-(3- 플루오로 -5-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(3- 플루오로 -5-(트 리플루오로메틸 )벤질)-피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 4-(3- 에톡시 -3-옥 소프로파노 일)-2-(3- 플루오로 -5-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-1- 카복실레이트
염화마그네슘 (2.3 g, 24.16 mmol)과 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (4 g, 23.50 mmol)를 질소 하에서 메틸 THF (70 mL) 중에 현탁시켜 생성된 현탁액을 특대의 교반 막대를 사용하여 50℃에서 18 시간 동안 교반한 후, 실온으로 냉각시켰다 (플라스크 1). 메틸 THF (70.0 mL) 중 2-(3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (4.58 g, 12.61 mmol) (참조 화합물 58)의 현탁액에 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (3.36 g, 20.72 mmol)을 질소 하에 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 플라스크 2의 내용물을 트랜스퍼 니들을 사용하여 플라스크 1로 옮겼다. 메틸 THF (30 mL)로 세척하였다. 이렇게 해서 생성된 현탁액을 실온에서 72 시간 동안 교반하였다. 3.8 M HCl (약 200 mL)을 첨가하여 생성된 2상 혼합물을 30 분간 세게 교반하였다. MTBE를 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 유기상을 물, 포화 NaHCO3 및 물로 세척한 후, MgSO4로 건조하고 증발시켰다. 잔류물을 바이오타지 [바이오타지? KP-SIL 340g 컬럼, 헵탄 중 20% EtOAc (1 CV), 이후 20% => 60% (7 CV)]를 통해 정제하였다. 트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질)-피페리딘-1-카복실레이트 (758 mg, 14 %) 및 시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (2.52 g, 46 %)를 분리하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.20 - 1.28 (m, 3H), 1.64 - 1.95 (m, 4H), 2.68 - 2.81 (m, 2H), 2.95 (dd, 1H), 3.02 (ddd, 1H), 3.45 (s, 2H), 3.59 (s, 3H), 3.84 - 3.96 (m, 1H), 4.06 - 4.23 (m, 3H), 7.04 - 7.11 (m, 1H), 7.15 (d, 1H), 7.19 - 7.24 (m, 1H). MS m/z 434 (M+H)+. 트랜스-이성질체: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.20 - 1.29 (m, 3H), 1.43 - 1.99 (m, 4H), 2.75 - 2.89 (m, 1H), 2.89 - 3.04 (m, 3H), 3.36 - 3.72 (m, 5H), 4.03 - 4.33 (m, 3H), 4.49 - 4.72 (m, 1H), 6.98 - 7.20 (m, 2H), 7.20 - 7.28 (m, 1H).
단계 2: 시스 - 메틸 2-(3- 플루오로 -5-( 트리플루오로메틸 )벤질)-4-(3-옥소-2,3-디 히드로이소옥 사졸-5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (2.52 g, 5.81 mmol)를 MeOH (20 mL)에 용해시킨 후 -40℃로 냉각시켰다. 물 (2.2 mL)에 용해된 수산화나트륨 (.246 g, 6.15 mmol)을 1 분간에 걸쳐 첨가하고, 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 20 분간 교반하였다. 이후, 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.38 mL, 6.20 mmol)을 1 분간에 걸쳐 첨가하고, -40℃에서 2 시간 20 분 동안 교반을 지속하였다. 이후, 상기 반응 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (40 mL, 240.00 mmol)으로 옮긴 후, 상기 혼합물을 80℃에서 1 시간 동안 교반을 지속하였다. 이후, 실온으로 냉각시켰다. 메탄올을 증발시킨 후, 물을 첨가하였다. DCM으로 3회 추출하였다. 혼합된 유기층을 MgSO4로 건조한 후 증발시켰다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (25 분간, 100 mL/분의 유속) 중 0-35 % 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 3 회 주입하여 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 2-(3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.52 g, 65 %)를 무색 폼으로 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.87 - 2.10 (m, 4H), 2.61 - 2.67 (m, 1H), 2.80 - 2.87 (m, 1H), 2.97 - 3.04 (m, 1H), 3.13 - 3.21 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.96 - 4.04 (m, 1H), 4.26 - 4.32 (m, 1H), 5.74 (s, 1H), 7.00 (d, 1H), 7.11 - 7.16 (m, 2H). MS m/z 403 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-(3- 플루오로 -5-( 트리플루오로메틸 )벤질)-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 (2S,4R)- 메틸 2-(3-플 루오 로-5-( 트리플루오로메틸 )벤질)-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-피페리딘-1-카복실레이트 (1.47 g, 3.66 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄셀 OJ (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH 90/10, 유속 18 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (703 mg, 47.8 %)를, 키랄 순도 99.3 %ee, 광회전 [α]20 D = +5.5 (아세토니트릴, c=1)로, 그리고 (2S,4R)-메틸 2-(3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (675 mg, 45.9 %)를, 키랄 순도 99.7 %ee, 광회전 [α]20 D = -5.1 (아세토니트릴, c=1)로 수득하였다.
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(3- 플루오로 -5-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.703 g, 1.75 mmol)를 수소 브롬화물 (AcOH 중 33%, 5 mL, 71.37 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 농도구배 5-95% MeCN, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (375 mg, 62 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.08 (q, 1H), 1.31 (dq, 1H), 1.71 - 1.80 (m, 2H), 2.48 - 2.54 (m, 1H), 2.63 - 2.80 (m, 4H), 2.92 - 2.99 (m, 1H), 5.65 (s, 1H), 7.37 - 7.46 (m, 3H). [C16H16F4N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 345.1226. 측정값: 345.1228
실시예 138
5-((2S,4R)-2-(3- 플루오로 -5-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4R)-메틸 2-(3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.675 g, 1.68 mmol) (실시예 137, 단계 3)를 수소 브롬화물 (AcOH 중 33%, 5 mL, 71.37 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 농도구배 5-95% MeCN, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2S,4R)-2-(3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질)-피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (443 mg, 77 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.08 (q, 1H), 1.31 (qd, 1H), 1.75 (t, 2H), 2.48 - 2.54 (m, 1H), 2.64 - 2.79 (m, 4H), 2.96 (d, 1H), 5.65 (s, 1H), 7.38 - 7.46 (m, 3H). [C16H16F4N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 345.1226. 측정값: 345.1212.
실시예 139
5-(트랜스-2-(3- 플루오로 -5-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(3- 플루오로 -5-( 트리플루오로메틸 )벤질)-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (0.75 g, 1.73 mmol) (실시예 137, 단계 1)를 MeOH (15 mL)에 용해시킨 후 -40℃로 냉각시켰다. 물 (1 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.073 g, 1.82 mmol)을 1 분간에 걸쳐 첨가하고, 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 20 분간 교반하였다. 이후, 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.115 mL, 1.88 mmol)을 1 분간에 걸쳐 첨가하고, -40℃에서 2 시간 20 분 동안 교반을 지속하였다. 이후, 상기 반응 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (30 mL, 180.00 mmol)으로 옮긴 후, 상기 혼합물을 80℃에서 1 시간 동안 교반을 지속하였다. 이후, 실온으로 냉각시켰다. 메탄올을 증발시킨 후, 물을 첨가하였다. DCM으로 3회 추출하였다. 혼합된 유기층을 MgSO4로 건조한 후 증발시켰다. 트랜스-메틸 2-(3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (658 mg, 95 %)를 황백색 고체로서 분리하였다. MS m/z 403 (M+H)+
단계 2: 5-(트랜스-2-(3- 플루오로 -5-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
트랜스-메틸 2-(3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.255 g, 0.63 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33%, 5 mL, 71.37 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 1 주일간 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅲ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼:Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-(트랜스-2-(3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (172 mg, 79 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.43 - 1.51 (m, 1H), 1.62 - 1.80 (m, 3H), 2.51 - 2.58 (m, 1H), 2.71 - 2.82 (m, 3H), 2.86 - 2.94 (m, 1H), 3.07 - 3.14 (m, 1H), 5.72 (s, 1H), 7.37 - 7.46 (m, 3H). [C16H16F4N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 345.1226. 측정값: 345.1241
실시예 140
5-((2R,4S)-2-(3- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(3- 플루오로 -4-(트 리플루오로메틸 )벤질)-피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 4-(3- 에톡시 -3-옥 소프로파노 일)-2-(3- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-1- 카복실레이트
염화마그네슘 (3.25 g, 34.13 mmol)과 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (5.82 g, 34.19 mmol)를 질소 대기 하에서 메틸 THF (100 mL) 중에 현탁시키고, 특대의 교반 막대를 사용하여 50℃에서 18 시간 동안 교반한 후, 실온으로 냉각시켰다 (플라스크 1). 메틸 THF (100 mL) 중 2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)벤질)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (6.56 g, 18.06 mmol) (참조 화합물 59)의 현탁액에 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (4.77 g, 29.42 mmol)을 질소 하에 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 플라스크 2의 내용물을 트랜스퍼 니들을 사용하여 플라스크 1로 옮겼다. 메틸 THF (30 mL)로 세척하였다. 이렇게 해서 생성된 현탁액을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 3.8 M HCl (약 200 mL)을 첨가하고 이렇게 생성된 2상 혼합물을 30 분간 세게 교반하였다. MTBE를 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 유기상을 물, 포화 NaHCO3 및 물로 세척한 후, MgSO4로 건조하고 증발시켰다. 잔류물을 바이오타지 [바이오타지? KP-SIL 340g 컬럼, 헵탄 중 20% EtOAc (1 CV), 이후 20% => 60% (7 CV)]를 통해 정제하였다. 트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (0.794 g, 10 %) 및 시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)-벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (3.57 g, 45 %)를 담황색 오일로 분리하였다. 시스-이성질체: MS m/z 434 (M+H)+. 트랜스-이성질체: MS m/z 434 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 2-(3- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 )벤질)-4-(3-옥소-2,3-디 히드로이소옥 사졸-5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (2.033 g, 4.69 mmol)를 MeOH (20 mL)에 용해시킨 후 -40℃로 냉각시켰다. 물 (2.4 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.188 g, 4.69 mmol)을 1 분간에 걸쳐 첨가하고, 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 20 분간 교반하였다. 이후, 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.3 mL, 4.90 mmol)을 1 분간에 걸쳐 첨가하고, -40℃에서 2 시간 20 분 동안 교반을 지속하였다. 이후, 상기 반응 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (40 mL, 240.00 mmol)으로 옮긴 후, 상기 혼합물을 80℃에서 1 시간 동안 교반을 지속하였다. 이후, 실온으로 냉각시켰다. 메탄올을 증발시킨 후, 물을 첨가하였다. DCM으로 3회 추출하였다. 혼합된 유기층을 MgSO4로 건조한 후 증발시켰다. 생성물은 담황색 오일이었다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (25 분간, 100 mL/분의 유속) 중 0-35 % 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 3 회 주입하여 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-피페리딘-1-카복실레이트 (1.32 g, 70%)를 무색 폼으로 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.84 - 1.99 (m, 3H), 1.99 - 2.10 (m, 1H), 2.62 (dd, 1H), 2.82 (dd, 1H), 2.92 - 3.06 (m, 1H), 3.10 - 3.19 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.93 - 4.03 (m, 1H), 4.19 - 4.34 (m, 1H), 5.73 (s, 1H), 6.91 - 6.99 (m, 2H), 7.46 (t, 1H). MS m/z 403 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-(3- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 )벤질)-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 (2S,4R)- 메틸 2-(3-플 루오 로-4-( 트리플루오로메틸 )벤질)-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-피페리딘-1-카복실레이트 (1.32 g, 3.28 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄팍 AD (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH 85/15, 유속 18 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (594 mg, 46 %)를, 키랄 순도 99.5 %ee, 광회전 [α]20 D = +9.1 (아세토니트릴, c=1)로, 그리고 (2S,4R)-메틸 2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (589 mg, 45 %)를, 키랄 순도 99.2 %ee, 광회전 [α]20 D = -8.8 (아세토니트릴, c=1)로 수득하였다.
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(3- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (594 mg, 1.48 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 10 mL, 57.10 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅲ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)벤질)-피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (338 mg, 66 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.08 (q, 1H), 1.32 (qd, 1H), 1.71 - 1.79 (m, 2H), 2.45 - 2.72 (m, 4H), 2.72 - 2.80 (m, 1H), 2.96 (d, 1H), 5.68 (s, 1H), 7.23 (d, 1H), 7.35 (d, 1H), 7.65 (t, 1H). [C16H16F4N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 345.1226. 측정값: 345.1232
실시예 141
5-((2S,4R)-2-(3- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4R)-메틸 2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (589 mg, 1.46 mmol) (실시예 140, 단계 3)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 10 mL, 57.10 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅲ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2S,4R)-2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (329 mg, 65 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ1.66 (q, 1H), 1.81 (dq, 1H), 2.17 - 2.25 (m, 2H), 3.00 - 3.15 (m, 4H), 3.47 - 3.52 (m, 1H), 3.56 - 3.62 (m, 1H), 5.76 (s, 1H), 7.28 (dd, 2H), 7.67 (t, 1H). [C16H16F4N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 345.1226. 측정값: 345.1225
실시예 142
5-(트랜스-2-(3- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(3- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 )벤질)-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (0.781 g, 1.80 mmol) (실시예 140, 단계 1)를 MeOH (15 mL)에 용해시킨 후, -40℃로 냉각시켰다. 물 (1 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.072 g, 1.80 mmol)을 1 분간에 걸쳐 첨가하고, 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 20 분간 교반하였다. 이후, 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.12 mL, 1.96 mmol)을 1 분간에 걸쳐 첨가하고, -40℃에서 2 시간 15 분 동안 교반을 지속하였다. 이후, 상기 반응 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (30 mL, 180.00 mmol)으로 옮긴 후, 상기 혼합물을 80℃에서 1 시간 동안 교반을 지속하였다. 이후, 실온으로 냉각시켰다. 메탄올을 증발시킨 후, 물을 첨가하였다. DCM으로 3회 추출하였다. 혼합된 유기층을 MgSO4로 건조한 후 증발시켰다. 미정제 트랜스-메틸 2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)-벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (678 mg, 94 %)를 황백색의 폼으로 분리하였다. MS m/z 403 (M+H)+
단계 2: 5-(트랜스-2-(3- 플루오로 -4-( 트리플루오로메틸 )벤질)피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
트랜스-메틸 2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-피페리딘-1-카복실레이트 (0.224 g, 0.56 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33%, 5 mL, 71.37 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 1 주일간 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅲ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼:Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-(트랜스-2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (160 mg, 83%)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.48 (ddd, 1H), 1.63 - 1.81 (m, 3H), 2.51 - 2.59 (m, 1H), 2.70 - 2.82 (m, 3H), 2.88 - 2.95 (m, 1H), 3.07 - 3.14 (m, 1H), 5.72 (s, 1H), 7.21 (d, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.63 (t, 1H). [C16H16F4N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 345.1226. 측정값: 345.1241
실시예 143
5-((2R,4S)-2-(3,4,5- 트리플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(3,4,5- 트리플루 오로벤질)피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노일 )-2-(3,4,5- 트리플루오로벤질 )피페리딘-1- 카복실레이트
1-(메톡시카보닐)-2-(3,4,5-트리플루오로벤질)피페리딘-4-카복실산 (3.42 g, 10.32 mmol) (참조 화합물 60)을 메틸 THF (60 mL)에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (2.51 g, 15.49 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 질소 하, 실온에서 6 시간 동안 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (3.16 g, 18.58 mmol)를 메틸 THF (60.0 mL) 중에 현탁시킨 후, 염화마그네슘 (1.769 g, 18.58 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 질소 하에 6 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 플라스크 2의 백색 현탁액을 플라스크 1의 갈색 현탁액에 첨가하였다. 생성된 현탁액을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 3 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화하였다. MTBE (250 mL)와 물 (250 mL)을 첨가하고 흔들어서 상들을 분리시켰다. 상기 유기상을 물 (250 mL), 포화 NaHCO3 (250 mL) 및 식염수 (250 mL)로 세척한 후, Na2SO4로 건조시키고 여과한 후 진공 속에서 증발시켰다. 잔류물을 바이오타지? KP-SIL 100g 컬럼 상에서 자동화 섬광 크로마토그래피로 정제하였다. 헵탄 중 20 % EtOAc (2 CV) 이후 헵탄 중 20 % 내지 60 %의 EtOAc (8 CV)의 농도구배를 이동상으로 사용하였다. 트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3,4,5-트리플루오로벤질)-피페리딘-1-카복실레이트 (0.309 g, 7.46 %) 및 시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3,4,5-트리플루오로벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (1.967 g, 47.5 %)를 분리하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.19 - 1.30 (m, 3H), 1.62 - 1.96 (m, 4H), 2.61 - 2.68 (m, 1H), 2.68 - 2.76 (m, 1H), 2.80 - 2.87 (m, 1H), 2.96 - 3.04 (m, 1H), 3.46 (s, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.83 - 3.94 (m, 1H), 4.09 - 4.20 (m, 3H), 6.76 - 6.84 (m, 2H). MS m/z 402 (M+H)+. 트랜스-이성질체: MS m/z 402 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2-(3,4,5- 트리플루오로벤질 )피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3,4,5-트리플루오로벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (1.967 g, 4.90 mmol)를 MeOH (20 mL)에 용해시킨 후 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (2.000 mL)에 용해된 수산화나트륨 (1.290 mL, 4.90 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 -40℃에서 20 분간 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.300 mL, 4.90 mmol)을 첨가하고 교반을 -40℃에서 3.5 시간 동안 지속하였다. 이후, 상기 반응 혼합물을 미리 가온시킨 80℃의 6 M 염화수소의 용액 (25.3 mL, 151.92 mmol)으로 옮긴 후, 20 분간 가열을 지속하였다. 이후, 용매를 증발시켰다. DCM (150 mL)과 물 (150 mL)을 첨가하고 흔들어서 상들을 분리시켰다. 상기 유기상을 상 분리기로 건조시킨 후 진공 속에서 증발시켰다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/AcOH 95/5/0.2 버퍼 (30 분간, 100 mL/분의 유속) 중 10-55% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(3,4,5-트리플루오로벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (1.354 g, 74.6 %)를 백색 고체로 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.84 - 2.10 (m, 4H), 2.48 - 2.54 (m, 1H), 2.69 - 2.76 (m, 1H), 2.96 - 3.03 (m, 1H), 3.10 - 3.18 (m, 1H), 3.64 (s, 3H), 3.94 - 4.01 (m, 1H), 4.18 - 4.25 (m, 1H), 5.73 (s, 1H), 6.69 - 6.75 (m, 2H). MS m/z 369 (M-H)-
단계 3: (2R,4S)- 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2-(3,4,5-트 리플루오 로벤질)-피페리딘-1- 카복실레이트 및 (2S,4R)- 메틸 4-(3-옥소-2,3-디 히드로이소옥 사졸-5-일)-2-(3,4,5- 트리플루오로벤질 )피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(3,4,5-트리플루오로벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (1.354 g, 3.68 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄팍 AD (250x20 mm), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH/FA 80/20/0.1, 유속 18 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(3,4,5-트리플루오로벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (584 mg, 43 %)를, 키랄 순도 99.3 %ee, 광회전 [α]20 D = +13.0 (아세토니트릴, c=1.0)으로, 그리고 (2S,4R)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(3,4,5-트리플루오로벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (598 mg, 44 %)를, 키랄 순도 99.2 %ee, 광회전 [α]20 D = -12.5 (아세토니트릴, c=1.0)로 수득하였다.
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(3,4,5- 트리플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(3,4,5-트리플루오로벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (584 mg, 1.58 mmol)를 수소 브롬화물 (AcOH 중 33%, 7 mL, 302.80 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 20 시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(3,4,5-트리플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (325 mg, 66 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.05 (q, 1H), 1.31 (dq, 1H), 1.71 - 1.78 (m, 2H), 2.34 - 3.78 (m, 6H), 5.68 (s, 1H), 7.12 - 7.20 (m, 2H). [C15H15F3N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 313.1164. 측정값: 313.1172
실시예 144
5-((2S,4R)-2-(3,4,5- 트리플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4R)-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(3,4,5-트리플루오로벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (598 mg, 1,61 mmol) (실시예 143, 단계 3)를 수소 브롬화물 (AcOH 중 33%, 7 mL, 99,92 mmol)에 용해시킨 후, 실온에서 20 시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 속에서 증발시켜 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2S,4R)-2-(3,4,5-트리플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (357 mg, 70.8 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.05 (q, 1H), 1.32 (dq, 1H), 1.70 - 1.78 (m, 2H), 2.33 - 3.58 (m, 6H), 5.68 (s, 1H), 7.12 - 7.19 (m, 2H). [C15H15F3N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 313.1164. 측정값: 313.1158
실시예 145
5-(트랜스-2-(3,4,5- 트리플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)-2-(3,4,5-트리플루오로벤질)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)-2-(3,4,5-트리플루오로벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (309 mg, 0.77 mmol) (실시예 143, 단계 1)를 MeOH (5 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (0.500 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.203 mL, 0.77 mmol)을 첨가하고 상기 혼합물을 -40℃에서 20 분간 교반하였다. 히드록실아민 (물 중 50 %, 0.047 mL, 0.77 mmol)을 첨가하고 -40℃에서 3 시간 동안 교반을 지속하였다. 이후, 상기 반응 혼합물을 미리 가온시킨 80℃의 6 M 염화수소의 용액 (3.98 mL, 23.87 mmol)으로 옮긴 후, 20 분간 가열을 지속하였다. 이후, 용매를 증발시켰다. DCM (50 mL)과 물 (50 mL)을 첨가하고 흔들어서 상들을 분리시켰다. 상기 유기상을 상 분리기로 건조시킨 후 진공 속에서 증발시켰다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/AcOH 95/5/0.2 버퍼 (30 분간, 19 mL/분의 유속) 중 10-55% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 크로마실 C8 컬럼 (10 ㎛, 250x20 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 정제하였다. 트랜스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(3,4,5-트리플루오로벤질)-피페리딘-1-카복실레이트 (111 mg, 38.9 %)를 분리하였다. MS m/z 371 (M+H)+
단계 2: 5-(트랜스-2-(3,4,5- 트리플루오로벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
트랜스-메틸 4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)-2-(3,4,5-트리플루오로벤질)피페리딘-1-카복실레이트 (111 mg, 0.3 mmol)를 수소 브롬화물 (AcOH 중 33%, 2 mL, 86.51 mmol) 중에서 18 시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 진공 속에서 증발시켜 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-(트랜스-2-(3,4,5-트리플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (20.17 mg, 21.5 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, dmso) δ1.43 - 1.49 (m, 1H), 1.65 - 1.79 (m, 3H), 2.33 - 3.75 (m, 6H), 5.75 (s, 1H), 7.12 - 7.19 (m, 2H). [C15H15F3N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 313.1164. 측정값: 313.1147
실시예 146
5-((2R,4S)-2-(3,5-디- tert - 부틸벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(3,5-디- tert - 부틸벤질 )-4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로 파노일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 2-(3,5-디- tert - 부틸벤질 )-4-(3-에톡시-3- 옥소프로파노일 )-피페리딘-1- 카복실레이트
2-(3,5-디-tert-부틸벤질)-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (3.723 g, 9.56 mmol) (참조 화합물 61)을 메틸 THF (70 mL) 중에 용해시킨 후, 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (2.325 g, 14.34 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 질소 하에 실온에서 밤새 교반하였다 (플라스크 1). 별도의 다른 플라스크 중에서, 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (2.93 g, 17.20 mmol)를 메틸 THF (70.0 mL) 중에 현탁시키고, 염화마그네슘 (1.638 g, 17.20 mmol)을 첨가하였다. 상기 현탁액을 특대의 교반 막대를 사용하여 질소 하, 50℃에서 밤새 교반하였다 (플라스크 2). 플라스크 1의 황색 현탁액을 이제 플라스크 2의 백색 현탁액에 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 백색 현탁액을 질소 하, 실온에서 2 일 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 3.8 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화한 후, MTBE와 물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리한 후, 상기 유기상을 물, 포화 NaHCO3 및 물로 세척하였다. 용매를 증발시켜 황색 오일을 수득하였다. 부분입체 이성질체를 바이오타지 (헵탄 중 0 % => 40 % EtOAc, 8 CV; 바이오타지? KP-SIL 340g 컬럼) 상에서 2 회의 러닝으로 분리하였다. 트랜스-메틸 2-(3,5-디-tert-부틸벤질)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.734 g, 17 %) 및 시스-메틸 2-(3,5-디-tert-부틸벤질)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (2.027 g, 46 %)를 무색의 오일로서 수득하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.19 - 1.35 (m, 21H), 1.63 - 1.99 (m, 4H), 2.62 - 3.05 (m, 4H), 3.46 (s, 2H), 3.57 - 3.64 (m, 3H), 3.88 - 3.97 (m, 1H), 4.07 - 4.26 (m, 3H), 6.97 - 7.01 (m, 2H), 7.24 - 7.28 (m, 1H). MS m/z 460 (M+H)+. 트랜스-이성질체: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.11 - 1.39 (m, 21H), 1.40 - 2.02 (m, 4H), 2.52 - 3.14 (m, 4H), 3.33 - 3.55 (m, 3H), 3.64 (s, br., 2H), 3.98 - 4.35 (m, 3H), 4.37-4.80 (m, 1H), 6.91 - 7.12 (m, 2H), 7.24 - 7.30 (m, 1H). MS m/z 460 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 2-(3,5-디- tert - 부틸벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(3,5-디-tert-부틸벤질)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (2.03 g, 4.42 mmol)를 MeOH (16 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (1.600 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.177 g, 4.42 mmol)을 10 분 동안 첨가한 후, 이 무색의 용액을 -40℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.271 mL, 4.42 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 3.5 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (20 mL, 120.00 mmol)으로 옮긴 후, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. DCM과 물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 황색 반고체를 수득하였다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (20 분간, 100 mL/분의 유속) 중 10-50 % 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 3 회 주입하여 분취형 HPLC로 정제하였다. 시스-메틸 2-(3,5-디-tert-부틸벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.358 g, 72 %)를 백색 고체로 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.22 - 1.33 (m, 18H), 1.80 - 2.10 (m, 4H), 2.59 - 2.67 (m, 1H), 2.71 - 2.78 (m, 1H), 2.92 - 2.98 (m, 1H), 3.07 - 3.15 (m, 1H), 3.55 (s, 3H), 3.97 (dd, 1H), 4.18 - 4.27 (m, 1H), 5.68 (s, 1H), 6.92 (d, 2H), 7.22 (s, 1H). MS m/z 429 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-(3,5-디- tert - 부틸벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로 이소옥사졸-5-일)-피페리딘-1- 카복실레이트 및 (2S,4R)- 메틸 2-(3,5-디- tert - 부틸벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-(3,5-디-tert-부틸벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.358 g, 3.16 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄셀 OJ (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH/FA 90/10/0.1, 유속 18 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-(3,5-디-tert-부틸벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (550 mg, 40 %)를, 키랄 순도 99.6 %ee, 광회전 [α]20 D = +14.7 (아세토니트릴, c=1)로, 그리고 (2S,4R)-메틸 2-(3,5-디-tert-부틸벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (619 mg, 45 %)를, 키랄 순도 99.7 %ee, 광회전 [α]20 D = -11.2 (아세토니트릴, c=1)로 수득하였다.
단계 4: 5-((2R,4S)-2-(3,5-디- tert - 부틸벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-(3,5-디-tert-부틸벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (550 mg, 1.28 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 10 mL, 57.10 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅲ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-(3,5-디-tert-부틸벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (315 mg, 66%)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ1.30 (s, 18H), 1.58 - 1.67 (m, 1H), 1.80 (dq, 1H), 2.17 - 2.27 (m, 2H), 2.85 - 3.14 (m, 4H), 3.41 - 3.51 (m, 2H), 5.73 (s, 1H), 7.07 - 7.13 (m, 2H), 7.36 - 7.40 (m, 1H). [C23H34N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값 : 371.2698. 측정값: 371.2714
실시예 147
5-((2S,4R)-2-(3,5-디- tert - 부틸벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4R)-메틸 2-(3,5-디-tert-부틸벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (619 mg, 1.44 mmol) (실시예 146, 단계 3)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 10 mL, 57.10 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅲ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm )로 정제하여 5-((2S,4R)-2-(3,5-디-tert-부틸벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (330 mg, 61 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ1.30 (s, 18H), 1.63 (q, 1H), 1.80 (dq, 1H), 2.19 - 2.27 (m, 2H), 2.86 - 3.18 (m, 4H), 3.43 - 3.56 (m, 2H), 5.73 (s, 1H), 7.10 (d, 2H), 7.37 - 7.40 (m, 1H). [C23H34N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 371.2698. 측정값: 371.2693
실시예 148
5-(트랜스-2-(3,5-디- tert - 부틸벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-(3,5-디- tert - 부틸벤질 )-4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 2-(3,5-디-tert-부틸벤질)-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.734 g, 1.60 mmol)를 MeOH (5 mL)에 용해시킨 후, 질소 하에 -40℃로 냉각시켰다. 물 (0.500 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.064 g, 1.60 mmol)을 10 분 동안 첨가한 후, 이 무색의 용액을 -40℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.098 mL, 1.60 mmol)을 8 분 동안 첨가하였다. 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 4 시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (8 mL, 48.00 mmol)으로 옮긴 후, 이 혼합물을 80℃에서 20 분간 교반을 지속하였다. DCM과 물을 첨가하였다. 상기 상들을 분리하고 유기상을 상 분리기 통과 후 증발시켜 미정제 트랜스-메틸 2-(3,5-디-tert-부틸벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.723 g, 106 %)를 황색 반고체로서 수득하였다. MS m/z 429 (M+H)+
단계 2: 5-(트랜스-2-(3,5-디- tert - 부틸벤질 )피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
트랜스-메틸 2-(3,5-디-tert-부틸벤질)-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (155 mg, 0.36 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33 %, 3 mL, 17.13 mmol)에 용해시킨 후, 상기 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅲ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-(트랜스-2-(3,5-디-tert-부틸벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (69 mg, 51 %)을 수득하였다. 1H NMR (600 MHz, DMSO) δ1.26 (s, 18H), 1.45 - 1.53 (m, 1H), 1.69 - 1.87 (m, 3H), 2.58 - 2.72 (m, 3H), 2.83 - 2.93 (m, 2H), 3.09 - 3.16 (m, 1H), 5.64 (s, 1H), 6.99 (d, 2H), 7.18 - 7.23 (m, 1H). [C23H34N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 371.2698. 측정값: 371.2688
실시예 149
5-((2R,4S)-2-벤질-2,3,4,5,6- d 5 -피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-벤질-2,3,4,5,6- d 5 -4-(3- 에톡시 -3- 옥소프로파노 일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 시스 - 메틸 2-벤질-2,3,4,5,6- d 5 -4-(3- 에톡시 -3-옥소프로파노일)피페리딘-1- 카복실레이트
THF (100 mL) 중에 현탁시킨 염화마그네슘 (3.13 g, 32.90 mmol)과 칼륨 3-에톡시-3-옥소프로파노에이트 (5.60 g, 32.90 mmol)를 특대의 교반 막대를 사용하여 질소 하, 50℃에서 18 시간 동안 교반한 후, 실온으로 냉각시켰다 (플라스크 1). 메틸 THF (100 mL) 중의 2-벤질-2,3,4,5,6-d5-1-(메톡시카보닐)피페리딘-4-카복실산 (5.16 g, 18.28 mmol) (참조 화합물 62)의 현탁액에 디(1H-이미다졸-1-일)메탄온 (4.77 g, 29.42 mmol)을 질소 하에 첨가하였다. 상기 생성된 혼합물을 실온에서 19 시간 동안 교반하였다 (플라스크 2). 플라스크 2의 내용물을 트랜스퍼 니들을 사용하여 플라스크 1로 옮겼다. THF (35 mL)로 세척하였다. 이렇게 해서 생성된 현탁액을 실온에서 24 시간 동안 교반하였다. 3.8 M HCl (약 200 mL)을 첨가하여 생성된 2상 혼합물을 30 분간 세게 교반하였다. MTBE를 첨가하고 상들을 분리시켰다. 상기 수성상을 MTBE로 한번 더 추출하였다. 상기 혼합된 유기상을 MgSO4로 건조한 후 증발시켰다. 잔류물을 바이오타지 [바이오타지? KP-SIL 340g 컬럼, 헵탄 중 20% EtOAc (1 CV), 이후 20% => 60% (7 CV)]를 통해 정제하였다. 트랜스-메틸 2-벤질-2,3,4,5,6-d5-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.15 g, 18 %) 및 시스-메틸 2-벤질-2,3,4,5,6-d5-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (2.27 g, 35 %)를 담황색 오일로 분리하였다. 시스-이성질체: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.19 - 1.28 (m, 3H), 1.60 - 1.92 (m, 4H), 2.63 - 2.77 (m, 2H), 2.85 - 3.04 (m, 2H), 3.42 (s, 2H), 3.61 (s, 3H), 3.85 - 3.94 (m, 1H), 4.05 - 4.22 (m, 3H). MS m/z 353 (M+H)+. 트랜스-이성질체: 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.19 - 1.31 (m, 3H), 1.39 - 1.66 (m, 2H), 1.67 - 1.98 (m, 2H), 2.71 - 3.07 (m, 4H), 3.33 - 3.73 (m, 5H), 3.99 - 4.33 (m, 3H), 4.57 (d, br., 1H). MS m/z 353 (M+H)+
단계 2: 시스 - 메틸 2-벤질-2,3,4,5,6- d 5 -4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
시스-메틸 2-벤질-2,3,4,5,6-d5-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (2.27 g, 6.44 mmol)를 MeOH (20 mL)에 용해시킨 후 -40℃로 냉각시켰다. 물 (2 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.258 g, 6.44 mmol)을 2 분간에 걸쳐 첨가하고, 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 25 분간 교반하였다. 이후, 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.41 mL, 6.69 mmol)을 1 분간에 걸쳐 첨가하고, -50℃ 내지 -40℃에서 1 시간 40 분 동안 교반을 지속하였다. 이후, 상기 반응 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (30 mL, 180.00 mmol)으로 옮긴 후, 상기 혼합물을 80℃에서 30 분간 교반을 지속하였다. 이후, 실온으로 냉각시켰다. 메탄올을 증발시킨 후, 물을 첨가하였다. DCM으로 3회 추출하였다. 혼합된 유기층을 MgSO4로 건조한 후 증발시켰다. 상기 화합물을 H2O/MeCN/NH3 95/5/0.2 버퍼 (23 분간, 100 mL/분의 유속) 중 0-25% 아세토니트릴의 농도구배를 사용하여 XBridge C18 컬럼 (10 ㎛, 250x50 ID mm) 상에서 분취형 HPLC로 3 회 주입하여 정제하였다. 시스-메틸 2-벤질-2,3,4,5,6-d5-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.458 g, 70 %)를 무색 고체로 분리하였다. 1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ1.79 - 1.97 (m, 3H), 1.99 - 2.12 (m, 1H), 2.62 (dd, 1H), 2.81 (dd, 1H), 2.89 - 2.99 (m, 1H), 3.07 - 3.17 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.98 (dd, 1H), 4.20 - 4.30 (m, 1H), 5.69 (s, 1H). MS m/z 322 (M+H)+
단계 3: (2R,4S)- 메틸 2-벤질-2,3,4,5,6- d 5 -4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트 및 (2S,4R)- 메틸 2-벤질-2,3,4,5,6- d 5 -4-(3-옥소-2,3-디히드로 이소옥사졸 -5- 일 )피페리딘-1-카복실레이트
시스-메틸 2-벤질-2,3,4,5,6-d5-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.25 g, 3.89 mmol)에 대해 키랄 분취형 HPLC [컬럼: 키랄셀 OD (250x20), 5 ㎛의 입자 크기, 이동상: 헵탄/EtOH/FA 90/10/0.1, 유속 18 mL/분]를 수행하여 (2R,4S)-메틸 2-벤질-2,3,4,5,6-d5-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (502 mg, 40 %)를, 키랄 순도 98.9 %ee, 광회전 [α]20 D = +23.7 (아세토니트릴, c=1)로, 그리고 (2S,4R)-메틸 2-벤질-2,3,4,5,6-d5-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (512 mg, 41 %)를, 키랄 순도 99.1 %ee, 광회전 [α]20 D = -22.2 (아세토니트릴, c=1)로 수득하였다.
단계 4: 5-((2R,4S)-2-벤질-2,3,4,5,6- d 5 -피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2R,4S)-메틸 2-벤질-2,3,4,5,6-d5-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.502 g, 1.56 mmol)를 수소 브롬화물 (AcOH 중 33%, 10 mL, 142.75 mmol)에 용해시키고 실온에서 20 시간 동안 교반한 후, 용매를 증발시켜 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2R,4S)-2-벤질-2,3,4,5,6-d5-피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온을 수득하였다. [C15H13D5N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 264.1760. 측정값: 264.1751
실시예 150
5-((2S,4R)-2-벤질-2,3,4,5,6- d 5 -피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
(2S,4R)-메틸 2-벤질-2,3,4,5,6-d5-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.512 g, 1.59 mmol) (실시예 149, 단계 3)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33%, 10 mL, 142.75 mmol)에 용해시키고 실온에서 20 시간 동안 교반한 후, 용매를 증발시켜 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-((2S,4R)-2-벤질-2,3,4,5,6-d5-피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온을 수득하였다. [C15H13D5N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 264.1760. 측정값: 264.1749
실시예 151
5-(트랜스-2-벤질-2,3,4,5,6- d 5 -피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
단계 1: 트랜스- 메틸 2-벤질-2,3,4,5,6- d 5 -4-(3-옥소-2,3- 디히드로이소옥사졸 -5-일)피페리딘-1- 카복실레이트
트랜스-메틸 2-벤질-2,3,4,5,6-d5-4-(3-에톡시-3-옥소프로파노일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.15 g, 3.26 mmol) (실시예 149, 단계 1)를 MeOH (20 mL)에 용해시킨 후 -40℃로 냉각시켰다. 물 (2 mL)에 용해된 수산화나트륨 (0.131 g, 3.26 mmol)을 1 분간에 걸쳐 첨가하고, 이렇게 해서 생성된 용액을 -40℃에서 20 분간 교반하였다. 히드록실아민 (물 중에서 50 중량%, 0.208 mL, 3.39 mmol)을 1 분간에 걸쳐 첨가하고, -50℃ 내지 -40℃에서 1 시간 동안 교반을 지속하였다. 이후, 상기 반응 혼합물을 미리 가온시킨 (80℃) 6 M 염화수소의 용액 (30 mL, 180.00 mmol)으로 옮긴 후, 상기 혼합물을 80℃에서 40 분 동안 교반을 지속하였다. 이후, 실온으로 냉각시켰다. 메탄올을 증발시킨 후, 물을 첨가하였다. DCM으로 3회 추출하였다. 혼합된 유기층을 MgSO4로 증발시켜 미정제 시스-메틸 2-벤질-2,3,4,5,6-d5-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (1.06 g, 101 %)를 오렌지색 폼으로 수득하였다. MS m/z 322 (M+H)+
단계 2: 5-(트랜스-2-벤질-2,3,4,5,6- d 5 -피페리딘-4-일) 이소옥사졸 -3(2H)-온
시스-메틸 2-벤질-2,3,4,5,6-d5-4-(3-옥소-2,3-디히드로이소옥사졸-5-일)피페리딘-1-카복실레이트 (0.204 g, 0.63 mmol)를 수소 브롬화물 (아세트산 중 33%, 6 mL, 34.26 mmol)에 용해시키고 실온에서 20 시간 동안 교반한 후, 용매를 증발시켜 잔류물을 분취형 HPLC (장비: FractionLynx Ⅱ, 이동상: 0.2% NH3 중 5-95% MeCN의 농도구배, pH 10, 컬럼: Xbridge Prep C18 5㎛ OBD 19x150 mm)로 정제하여 5-(트랜스-2-벤질-2,3,4,5,6-d5-피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 (29 mg, 23 %)을 수득하였다. [C15H13D5N2O2+H]+에 대한 HRMS 계산값: 264.1760. 측정값: 264.1747
실시예의 결정형 제조를 위한 일반 절차
방법 A - 중성형
재료 물질을 실온에서 장시간 동안 물 중에 슬러리화한 후, 여과로 수집한다.
방법 B - 중성형
재료 물질을 메탄올과 디클로로메탄의 혼합물 중에 슬러리화한다. 용매를 천천히 증발시킨다.
방법 C - HCl 염
재료 물질을 실온에서 1 M HCl에 용해시킨다. 형성된 HCl 염을 여과로 수집한다.
방법 D - HCl 염
재료 물질을 메탄올 중의 1.25 M HCl에 용해시킨다. 용매를 천천히 증발시킨다.
실시예 14 및 104의 결정형을 방법 A에 따라 제조하였다. 실시예 55, 65, 115 및 143의 결정형을 방법 B에 따라 제조하였다. 실시예 14 및 104의 HCl 염의 결정형을 방법 C에 따라 제조하였다. 실시예 10, 18, 55, 65 및 143의 HCl 염의 결정형을 방법 D에 따라 제조하였다.

Claims (10)

  1. 하기 화합물들 중 하나 이상의 화합물로부터 선택되는 것인 화합물 또는 그의 약학적으로 허용되는 염:
    5-((2S,4S)-2-벤질피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4R)-2-벤질피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-벤질피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4R)-2-벤질피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-이소부틸피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4R)-2-이소부틸피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4S)-2-이소부틸피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-페네틸피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4R)-2-페네틸피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4S)-2-페네틸피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4S)-2-(4-tert-부틸벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(4-tert-부틸벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4S)-2-네오펜틸피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-네오펜틸피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-메틸피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4R)-2-메틸피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4S)-2-메틸피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4S)-2-(2-메틸-2-페닐프로필)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(2-메틸-2-페닐프로필)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(시클로헥실메틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4R)-2-(시클로헥실메틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4S)-2-(시클로헥실메틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(3,4-디플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-(3,4-디플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(4-플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-(4-플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(4-클로로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4R)-2-(4-클로로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-(4-클로로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(3-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4R)-2-(3-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-(3-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4R)-2-(4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-(4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(3-tert-부틸페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-(4-tert-부틸페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(4-(메틸설포닐)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((트랜스-2-(4-(메틸설포닐)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(6-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-(6-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(5-tert-부틸티오펜-2-일)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4R)-2-(5-tert-부틸티오펜-2-일)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(2,4-디플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(4-클로로-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-(4-클로로-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(2-클로로-4-플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-(2-클로로-4-플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(4-클로로-3-플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-(4-클로로-3-플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(2,4-디클로로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4R)-2-(2,4-디클로로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4S)-2-(2,4-디클로로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4R)-2-(2,4-디클로로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(3,5-디클로로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4R)-2-(3,5-디클로로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-(3,5-디클로로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(3,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4R)-2-(3,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-(3,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(2,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4S)-2-(2,4,5-트리플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(4-클로로-3,5-디플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-(4-클로로-3,5-디플루오로페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(3-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4R)-2-(3-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-(3-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(3,5-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-(3,5-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(2-메틸-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-(2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4R)-2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-페닐피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4S)-2-페닐피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-시클로헥실피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4S)-2-시클로헥실피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(2-메틸-2H-테트라졸-5-일)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-(2-메틸-2H-테트라졸-5-일)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(1-메틸-1H-테트라졸-5-일)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(시클로헥실옥시메틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4R)-2-(시클로헥실옥시메틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-(시클로헥실옥시메틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(디플루오로메틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-(디플루오로메틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4S)-2-((4,4-디플루오로시클로헥실)메틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4R)-2-((4,4-디플루오로시클로헥실)메틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-((4,4-디플루오로시클로헥실)메틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4S)-2-(4-플루오로페네틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4R)-2-(4-플루오로페네틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-(4-플루오로페네틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4S)-2-(3,3-디메틸부틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(3,3-디메틸부틸)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(4-플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4S)-2-(4-플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(3-플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4S)-2-(3-플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(2-플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4S)-2-(2-플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4R)-2-(2-플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4S)-2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4R)-2-(4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(3-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4R)-2-(3-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-(3-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(2-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4R)-2-(2-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-(2-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(4-(트리플루오로메톡시)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-(4-(트리플루오로메톡시)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(4-클로로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-(4-클로로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(4-(메틸설포닐)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4R)-2-(4-(메틸설포닐)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-(4-(메틸설포닐)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(3,4-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4R)-2-(3,4-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4S)-2-(3,4-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4R)-2-(3,4-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(2,5-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4R)-2-(2,5-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-(2,5-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(2,6-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4R)-2-(2,6-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-(2,6-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(3,5-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4R)-2-(3,5-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4S)-2-(3,5-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4R)-2-(3,5-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(2,4-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4R)-2-(2,4-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-(2,4-디플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4R)-2-(3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-(3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4R)-2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-(3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(3,4,5-트리플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4R)-2-(3,4,5-트리플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-(3,4,5-트리플루오로벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-(3,5-디-tert-부틸벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4R)-2-(3,5-디-tert-부틸벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-(트랜스-2-(3,5-디-tert-부틸벤질)피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2R,4S)-2-벤질-2,3,4,5,6-d5-피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온;
    5-((2S,4R)-2-벤질-2,3,4,5,6-d5-피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온; 및
    5-(트랜스-2-벤질-2,3,4,5,6-d5-피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온.
  2. 5-((2R,4S)-2-네오펜틸피페리딘-4-일)이소옥사졸-3(2H)-온 또는 그의 약학적으로 허용되는 염.
  3. 제1항 또는 제2항에 따른 하나 이상의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용되는 염과, 약학적으로 허용가능한 담체 또는 희석제를 포함하는, 섬유소용해의 조절이 유익한 질병 또는 질환 치료용 약학 조성물로서, 상기 질병 또는 질환은 유전적 출혈성 질환, 발작, 월경 과다 또는 간 질환으로부터 선택되는 것인 약학 조성물.
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