KR101671961B1 - 으름 추출물의 제조 방법 및 이 추출물을 이용한 기능성 식품 - Google Patents

으름 추출물의 제조 방법 및 이 추출물을 이용한 기능성 식품 Download PDF

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Abstract

본 발명은 으름 종자에 으름 과육을 첨가하여 a) 숙성하는 단계;와 b) 알코올 추출하는 단계를 순차적으로 거쳐 으름의 생리활성 성분인 사포닌을 고효율로 추출하는 방법 및 생강을 첨가하여 사포닌 추출효율을 더욱더 향상시키는 방법에 관한 것으로, 이 방법에 의해 추출된 추출물을 함유하는 식품조성물에 관한 것이다. 사포닌의 추출 시 활용하지 않았던 으름 과육을 이용하여 으름 종자의 사포닌 추출효율을 향상시킴으로써 더 높은 부가가치를 창출할 수 있다.

Description

으름 추출물의 제조 방법 및 이 추출물을 이용한 기능성 식품{Manufacturing method of akebia quinata extract and functional food using the same}
본 발명은 으름 종자에 함유된 유효성분을 향상된 효율로 추출할 수 있는 추출방법 및 이를 이용한 기능성 식품에 관한 것이다.
현대인들은 오염된 대기질 및 서구화된 식생활, 음주, 스트레스, 불규칙적인 식사 등의 원인으로 인하여 암, 면역력약화, 성인병, 위장질환, 고혈압, 당뇨, 심혈관 질환, 피로누적 등 다양한 질병에 시달리고 있다. 이에 따라 위 질병의 예방, 치료에 대한 관심이 높아지면서 이를 위한 건강 기능 식품의 수요가 증가하고 있다. 특히, 최근에는 비타민, 미네랄 제제 뿐 아니라, 장기간 복용하여도 부작용이 없는 천연물질을 가공한 식품이나, 천연물질 추출물을 이용한 건강 기능 식품에 대한 관심이 더욱 증가하고 있다.
이러한 건강 기능 식품의 유효 성분 중에서도 특히 주목받는 것은 사포닌(saponin)이다. 사포닌은 식물계에 분포하는 트리털펜 또는 스테로이드계 배당체의 총칭으로 거품을 내는 특성이 있는 천연계면활성물질이다. 사포닌은 흔히 인삼, 홍삼의 유효성분으로 알려져 있지만 콩, 파, 더덕, 도라지, 미나리, 마늘, 양파, 칡 등 많은 식물에 존재하며 으름 종자에도 다량 함유되어 있다. 사포닌(saponin)은 콜레스테롤을 감소시키고 면역력을 증가시키는 기능을 하며 심혈관 질환의 예방 및 치료, 면역력증강작용, 항암작용, 염증완화, 당뇨억제, 동맥경화 및 고혈압의 예방, 간 기능 촉진, 피로 회복, 항산화 작용, 항염활성, 면역증강 작용 등의 다양한 약리 활성 효과를 나타내는 것으로 알려져 있다.
으름은 쌍떡잎식물강 미나리아재목 으름덩굴과 으름속에 속하는 만목으로 우리나라 전역, 일본, 중국 등에 분포한다. 학명은 akebia quinata이고 임하부인(林下婦人), 목통(木通), 통초(通草)라고도 하며, 으름열매는 연복자(燕覆子)라고 부르기도 한다. 골짜기나 계곡에 주로 서식하며 이웃나무에 감아 올라가거나 바위에 기대어 자란다. 잎과 열매의 모양이 특이해 조경용으로도 이용되며 뿌리와 줄기, 열매 모두 식용 가능하다. 열매는 9 월이나 10 월에 열리며 과육은 굽어진 타원형이고 길이는 6 내지 10 ㎝ 정도로 매우 두꺼운 껍질을 가지고 있다. 완전히 익은 경우 열매 껍질이 갈라져 하얗고 무른 속과 검은 씨앗들이 나오는 특징이 있다. 줄기와 뿌리는 가을에 채취하여 그늘에 말린 후 차를 끓여서 마시기도 하며, 열매는 가을에 성숙한 것을 채취하여 생으로 쓰거나 그늘에 말려서 차를 끓여 마시기도 했다. 또한 어린잎은 데쳐서 나물로 먹고, 익은 열매는 과실로 먹기도 하였다.
으름 줄기와 뿌리는 한의학에서 약재로 쓰이기도 했으며 이뇨작용, 항균작용, 항염작용이 있다고 알려져 있다. 으름 열매에는 사포닌, 올레아놀릭산(oleanolic acid)과 같은 유효성분이 함유되어 있으며, 특히 사포닌은 줄기, 뿌리 보다는 종자에 많이 함유되어 있다.
대한민국 등록특허 10-0573375에서는 으름 종자 추출물을 활용하여 항암활성을 가지는 조성물을 제공하기도 하였으나, 이는 으름 종자에 함유된 사포닌을 충분히 활용하지 못하는 문제점이 있었다. 또한, 으름 줄기와 뿌리의 경우 한의학의 영향을 받아 이를 활용하기 위한 연구가 활발했으나, 으름 열매의 경우 으름 줄기나 뿌리보다 연구가 부족한 실정이었다. 이에 본 발명자들은 으름 종자의 사포닌 추출 효율을 다양한 연구를 통해 향상시켜 이를 이용한 기능성 식품을 개발하기에 이르렀다.
대한민국 등록특허 10-0573375
본 발명의 목적은 사포닌 추출 효율을 향상시킨 으름 종자 추출물 제조방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 사포닌 함량이 높아 기능성이 더욱 향상된 으름 추출물을 이용한 식품을 제공하는 것이다.
본 발명에 의한 으름 추출물의 제조방법은
a) 으름 종자 및 으름 과육이 포함된 원료를 숙성하는 단계;및
b) 알코올 추출액을 이용하여 숙성된 상기 원료로부터 사포닌이 유효성분으로 함유된 추출물을 추출하는 단계;
를 포함할 수 있다.
상기 원료는 으름 종자 1 중량부에 대하여 으름 과육 0.5 내지 5 중량부를 포함할 수 있다.
상기 숙성 단계에서 온도는 20 내지 60℃일 수 있다.
상기 원료는 으름 종자 1 중량부에 대하여 생강 0.05 내지 0.2 중량부를 포함할 수 있다.
상기 원료는 인삼, 산삼, 도라지, 더덕, 칡 및 마로 이루어진 군에서 선택되는 1 또는 2 이상의 첨가물을 더 포함할 수 있다.
본 발명에 의한 추출에서 상기 b)는 보다 상세하게는
b1) 상기 a)에서 숙성된 원료에 알코올 추출액을 첨가하여 초음파를 조사하는 단계; 및
b2) 상기 b1)의 생성물을 원심분리 후 상등액을 회수하여 제 1 추출물을 제조하는 단계;
로 이루어질 수 있다.
또한 상기 b2)에서 상등액이 제거된 잔류물을 상기 a) 단계의 원료로 하여, 상기 b1) 및 b2) 단계를 2회 이상 반복할 수 있다.
상기 b1) 단계에서 초음파 조사는 20 내지 60분일 수 있다.
또한 본 발명의 방법에 따라 제조된 추출물을 이용한 기능성 식품을 제공할 수 있다.
본 발명에 의한 으름 추출방법은 으름의 과육을 이용하여 으름 종자의 사포닌 추출효율을 향상시키는 장점이 있으며, 생강을 이용하여 으름 종자의 사포닌 추출효율을 더욱 향상시키는 장점이 있다. 또한, 이에 따라 기능성이 향상된 건강기능식품을 제공할 수 있는 장점이 있다.
도 1은 으름 추출물의 활력 증진 효과를 나타낸 것이다.
도 2는 으름 추출물의 감기 예방 또는 감기 증상완화 효과를 나타낸 것이다.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예, 제조예 및 도면은 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명이 하기 실시예, 제조예 및 도면에 한정되는 것은 아니다. 또한 본 발명에서 사용하는 용어는 본 발명에 특별히 다른 정의가 없는 한 이 분야의 통상의 기술자의 일반적인 지식수준을 기준으로 하며, 발명의 본질을 흐리게 하는 널리 알려진 기술에 대한 설명은 생략한다.
본 발명에 의한 “으름”은 학명이 akebia quinata인 것을 의미하며, 으름 열매, 과육, 과피, 종자는 수확기에 성숙한 것을 채취한 것을 의미한다.
본 출원인은 으름 종자에 함유된 사포닌 추출의 추출 효율을 향상시키고자 장기간 연구를 수행한 결과, 사포닌을 거의 함유하지 않는 으름 과육과 으름 종자를 함께 숙성하여 추출하는 경우, 으름 종자의 사포닌 추출효율이 현저히 높아지는 것을 발견하였다. 나아가, 으름 종자와 으름 과육을 함께 숙성하여 추출물을 제조하는 경우, 쓴맛의 감소, 청량감 향상 등 관능도가 향상되었다.
본 발명에 의한 으름 추출물의 제조 방법은
a) 으름 종자 및 으름 과육을 포함하는 원료를 숙성하는 단계;및
b) 알코올 추출액을 첨가하여 숙성된 상기 원료로부터 사포닌이 유효성분으로 함유된 추출물을 추출하는 단계;를 포함할 수 있다.
상술한 바와 같이, 으름의 종자, 과피, 껍질, 과육 등에서, 으름의 종자에 사포닌이 존재하며, 나머지 부분에는 사포닌 함량이 거의 미미한 것으로 알려져 있다. 이에 따라, 으름에 함유된 사포닌을 추출하고자 할 때, 으름 종자를 대상으로 추출이 이루어진 것이 통상적이다.
그러나 으름의 종자를 이용하여 사포닌을 추출하는 경우, 그 추출 효율에는 한계가 있어, 비록 으름 종자에 다량의 사포닌이 존재한다 하더라도 낮은 추출 효율로 인해 으름 종자에 함유된 사포닌을 충분히 활용하지 못하고 버리게 되는 문제점이 있다.
상술한 바와 같이 본 출원인은 으름 종자에 함유된 사포닌 추출의 추출 효율을 향상시키고자 장기간 연구를 수행한 결과, 놀랍게도 으름 과육에는 사포닌이 거의 존재하지 않음에도 불구하고 으름 종자에 으름 과육을 첨가하여 숙성을 하는 경우, 으름 종자에 함유된 사포닌의 추출 효율을 현저하게 향상시킬 수 있다. 실질적으로, 으름 종자에 으름 과육을 첨가하고 숙성한 후 추출하는 경우, 단지 으름 종자를 숙성하여 추출한 경우 대비 최대 170%에 이르는 추출효율 향상이 이루어질 수 있다. 이러한 현상의 원인에 대해 명확히 밝혀진 것은 아니나 으름 과육의 일정한 성분이 으름 종자의 세포막을 파괴하여 사포닌의 추출효율을 향상시킨 것으로 추측된다.
본 발명의 으름 종자 또는 으름 과육은 건조 분말, 분쇄된 것 또는 편으로 절단한 것일 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다. 또한 본 발명에 의한 으름의 추출은 으름 종자, 과육을 혼합하거나 으름 열매 자체를 이용할 수 있다.
본 발명의 일실시예에 의하면 상기 원료는 으름 종자 1 중량부 대비 으름 과육 0.5 내지 5 중량부가 포함될 수 있으며, 바람직하게는 0.7 내지 2 중량부, 더욱 바람직하게는 0.9 내지 1.5 중량부 포함될 수 있다. 사포닌의 추출효율 향상을 나타내기 위해서는 으름 과육을 으름종자 1 중량부 대비 0.5 중량부 이상 첨가하는 것이 바람직하며, 과육이 너무 많이 첨가되는 경우 으름 종자의 추출효율이 더 이상 향상되지 않고 추출에 방해가 될 수 있으므로 으름 종자 1 중량부 대비 5 중량부 보다 적게 첨가하는 것이 바람직하다.
또한 본 발명의 상기 원료는 으름 종자, 으름 과육에 추출 효율 향상을 위한 첨가제로 생강을 더 포함할 수 있다. 으름 종자의 사포닌 추출 효율을 보다 더 향상시키고자 다양한 첨가제들을 첨가하여 첨가제가 으름 종자의 추출 효율에 미치는 영향을 검토한 결과, 놀랍게도 생강을 더 첨가하여 숙성 및 추출하는 경우, 으름 종자의 사포닌 추출 효율이 보다 더 향상되는 것을 발견하였다. 상술한 바와 같이, 으름 과육을 으름 종자와 함께 숙성 및 추출함으로써 으름 종자만을 이용한 경우 대비 170%에 이르는 추출효율 향상이 이루어질 수 있으며, 나아가, 으름 과육, 으름 종자와 함께 생강을 첨가제로 더 첨가하여 숙성하는 경우, 으름 종자 및 으름 과육을 추출하는 경우 보다 최대 120%에 이르는 추출효율 향상이 이루어질 수 있다. 즉, 원료가 으름 과육, 으름 종자 및 생강을 함유하는 경우, 으름 종자만을 이용한 경우 대비 최대 200%에 이르는 추출효율 향상이 이루어질 수 있는 것이다. 이러한 현상의 원인 또한 명확히 밝혀진 것은 아니나 생강의 일정한 성분이 으름 종자의 세포막을 파괴하여 사포닌의 추출효율을 향상시킨 것으로 추측된다. 원료로 함유되는 생강은 생강 건조 분말, 생강 편, 분쇄한 생강 또는 생강즙 등을 들 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 일실시예에 의하면 상기 원료는 으름 종자 1 중량부 대비 생강 0.05 내지 0.2 중량부가 포함될 수 있으며, 바람직하게는 0.07 내지 0.13 중량부가 포함될 수 있고, 더욱 바람직하게는 0.08 내지 0.12 중량부가 첨가될 수 있다. 으름 종자의 사포닌 추출효율 향상을 나타내기 위해서는 으름 종자 1 중량부 대비 생강 0.05 중량부 이상 첨가하는 것이 바람직하며, 생강을 너무 많이 첨가하는 경우 추출효율이 더 이상 향상되지 않고 오히려 추출에 방해가 될 수 있으므로 0.2 중량부 이하로 첨가하는 것이 바람직하다.
또한 본 발명의 숙성단계에 있어서 숙성 온도는 20 내지 60 ℃일 수 있으며, 바람직하게는 30 내지 50 ℃일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 35 내지 45 ℃일 수 있다. 으름을 포함한 원료의 숙성온도가 40 ℃인 경우 20 ℃ 미만에서 숙성하는 경우보다 200%이상 추출 효율 향상이 이루어질 수 있다. 이를 통해, 으름 과육이나 생강이 으름 종자에 미치는 작용이 온도에 따라 현저하게 영향을 받음을 알 수 있다.
본 발명의 숙성은 원료의 2 내지 10 배 중량의 정제수에서 이루어질 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 또한 본 발명의 알코올 추출액은 C1 내지 4의 알코올 또는 C1 내지 4의 알코올 50 내지 95 중량%와 나머지 부분은 물로 이루어진 용액을 의미한다. 바람직하게는 에탄올 또는 메탄올 50 내지 90 중량%와 나머지 부분은 물로 이루어진 용액을 의미하며, 더욱 바람직하게는 에탄올 70 내지 90 중량%와 나머지 부분은 물로 이루어진 용액일 수 있다.
본 발명의 다른 일실시예에 의한 으름의 추출에서 상기 b)는
b1) 상기 a)의 숙성된 원료에 알코올 추출액을 첨가한 후 초음파를 조사하는 단계;
b2) 상기 b1) 단계의 생성물을 원심분리 후 상등액을 회수하여 추출물을 제조하는 단계;
일 수 있으며, b2)의 상등액이 제거된 잔류물을 상기 b1)의 원료로 하여 알코올 추출액 첨가 후 b1) 및 b2) 단계를 1회 또는 2회 이상 반복이 가능하다. 바람직하게는 2회 반복할 수 있다.
으름 종자의 사포닌 추출 효율 향상을 위해 보다 연구한 결과, 으름 종자의 추출 효율 향상을 위한 방법으로 추출액을 이용한 추출 시 초음파를 조사하는 경우 으름 종자의 추출 효율이 향상 되었다. 통상 초음파를 이용한 식물의 추출 시 초음파의 조사는 3시간 내지 72시간까지 이루어지는 것이 일반적이다. 그러나 본 발명의 초음파 조사는 20 내지 60 분, 바람직하게는 30 내지 50 분인 것이 더 효과적이다. 구체적으로, 으름 종자의 추출 시 초음파를 조사하는 경우 초음파를 조사하지 않은 경우 보다 최대 330%의 효율 향상이 이루어졌다. 보다 상세하게는, 초음파를 20 분간 조사하는 경우 최대 270%의 추출 효율 향상이 이루어 졌으며, 40 분간 조사하는 경우 310%의 추출 효율 향상이 이루어 졌으며, 60분간 조사하는 경우 330%의 추출효율 향상이 이루어 졌다. 이를 통해 초음파의 조사 시간이 으름 종자의 사포닌 추출 효율에 현저한 영향을 미치는 것을 알 수 있다. 초음파를 10분 보다 적게 조사하는 경우 사포닌 추출효율 향상을 나타낼 수 없으며, 초음파를 60분 이상 조사하는 경우 추출물의 다른 유효성분이 파괴되는 문제점이 발생할 수 있다. 또한 본 발명의 일 실시예에 의한 초음파는 10 내지 50 ㎑일 수 있다. 초음파가 10 ㎑ 보다 작은 경우 추출효율의 향상효과가 나타나지 않으며, 50 ㎑보다 큰 경우 추출물 내의 다른 유효성분이 파괴될 가능성이 있다.
나아가, 원심 분리 후 상등액이 제거된 잔류물에 다시 알코올 추출액을 첨가하여 추출하는 경우, 잔류물에 남아있던 버려지는 사포닌을 활용할 수 있는 장점이 있다.
또한 본 발명에 의한 으름 추출물의 유효성분은 saponin D이며, 구체적으로는 하기 화학식 1의“Pulsatilla saponin D”이다.
[화학식 1]
Figure 112016035234985-pat00001
본 발명의 일 실시예에 의한 으름의 추출에서, 추가적으로 다른 식물을 더 포함하여 숙성 후 추출할 수 있음은 물론이다. 구체적으로, 인삼, 산삼, 도라지, 더덕, 칡 및 마로 이루어진 군에서 선택되는 1 또는 2 이상을 포함할 수 있다. 인삼, 산삼, 도라지, 더덕, 칡, 마와 같은 식물을 더 첨가하여 숙성 후 추출하는 경우, 위 식물들이 가진 유효성분을 으름 추출물과 함께 섭취할 수 있어 더욱 기능성이 향상된 식품의 제조가 가능하다.
본 발명에 의한 으름의 추출물은 추출물 그 자체로 섭취하거나 과립화, 캡슐화 하여 섭취하거나 다른 식품의 첨가물로 사용할 수 있으며, 다른 식품의 첨가물로 사용하는 경우 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 으름의 추출물이 첨가물로 사용되는 경우 으름 추출물은 식품 중 0.01 내지 50 중량%로 첨가될 수 있으나, 추출물의 첨가량은 사용목적에 따라 적절하게 조정될 수 있다.
본 발명에 따른 으름 추출물이 첨가되는 식품은 특별한 제한이 없으며, 구체적인 예로는 육류, 소시지, 햄 기타 가공육, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 빵, 피자, 라면 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 유제품, 음료수, 차, 드링크제, 알코올음료 및 비타민 복합제 등이 있다.
본 발명에 따른 건강기능 식품 중 음료는 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연탄수화물 등을 추가성분으로 함유할 수 있다. 천연탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드 및 덱스트린, 사이클로 덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자이리톨, 소리비톨 에리트리톨 등의 당알코올 일수 있다.
이하, 본 발명을 실시예를 통해 구체적으로 설명한다. 하기 실시예는 발명의 이해를 돕기 위한 구체적인 예시이며, 본 발명이 하기 실시예에 의해 제한되지 않는다.
[실시예 1] 으름 과육 분말 비율에 따른 사포닌 추출 효율 향상
으름 종자 분말 1 g에 각각 으름 과육 분말 0 g(비교예 1), 0.3 g(실시예 1-1). 0.5 g(실시예 1-2), 0.7 g(실시예 1-3), 1.0 g(실시예 1-4), 1.5 g(실시예 1-5), 2.0 g(실시예 1-6)을 혼합한 후 정제수 10 ㎖에 넣고 45 ℃에서 5시간 동안 숙성한다. 여기에 에탄올 80 중량%, 물 20 중량%의 추출액 20 ㎖를 첨가하여 교반하면서 30 ㎑의 초음파를 30분간 조사한다. 이후 3000 rpm에서 20 분간 원심분리를 거쳐 상등액을 회수하여 제 1 추출물을 제조한다. 상기 상등액이 제거된 잔류물에 상기 추출액을 30 ㎖ 더 첨가하여 30 분간 교반하면서 30 ㎑의 초음파를 조사하여 원심분리 후 상등액을 회수하여 제 2 추출물을 제조한다. 상기 제 1 추출물과 제 2 추출물을 합하여 감압건고 후 정제수 100 ㎖에 녹여 동결 건조한다. 그 후 고성능 액체 크로마토그래피(Waters, Waters 2695 HPLC system)를 이용하여 사포닌의 함량을 측정하여 표 1로 나타내었다.
으름 종자 분말 으름 과육 분말 사포닌 함량
비교예 1 1 g 0 g 5.27 ㎎
실시예 1-1 1 g 0.3 g 6.52 ㎎
실시예 1-2 1 g 0.5 g 7.45 ㎎
실시예 1-3 1 g 0.7 g 8.26 ㎎
실시예 1-4 1 g 1.0 g 8.68 ㎎
실시예 1-5 1 g 1.5 g 8.49 ㎎
실시예 1-6 1 g 2.0 g 8.37 ㎎
실시예 1-7 1 g 3.0 g 8.21 ㎎
[실시예 2] 생강의 사포닌 추출 효율 향상
으름 종자 1 g, 으름 과육 1 g에 생강을 각각 0 g(실시예 2-1), 0.03 g(실시예 2-2), 0.05 g(실시예 2-3), 0.1 g(실시예 2-4), 0.15 g(실시예 2-5), 0.2 g(실시예 2-6), 0.3 g(실시예 2-7)을 혼합하여 실시예 1과 같은 방법으로 실험하여 사포닌의 함량을 측정 후 표 2로 나타내었다.
으름 종자 분말 으름 과육 분말 생강 분말 사포닌 함량
실시예 2-1 1 g 1 g 0 g 8.68 ㎎
실시예 2-2 1 g 1 g 0.03 g 8.79 ㎎
실시예 2-3 1 g 1 g 0.05 g 9.63 ㎎
실시예 2-4 1 g 1 g 0.10 g 9.75 ㎎
실시예 2-5 1 g 1 g 0.15 g 9.84 ㎎
실시예 2-6 1 g 1 g 0.20 g 9.56 ㎎
실시예 2-7 1 g 1 g 0.30 g 9.12 ㎎
[실시예 3] 숙성 온도에 따른 사포닌 추출 효율 향상
으름 종자 분말 5 g과 으름 과육 분말 5 g의 혼합물을 정제수 50 ㎖에 넣고 각각 20 ℃(실시예 3-1), 25 ℃(실시예 3-2), 30 ℃(실시예 3-3), 35 ℃(실시예 3-4), 40 ℃(실시예 3-5), 45 ℃(실시예 3-6), 50 ℃(실시예 3-7), 55 ℃(실시예 3-8), 60 ℃(실시예 3-9)에서 5 시간동안 숙성한다. 여기에 에탄올 80 중량%, 물 20 중량%의 추출액을 70 ㎖를 첨가하여 교반하면서 30 ㎑의 초음파를 30 분간 조사한다. 이후 3000 rpm에서 20 분간 원심 분리를 거쳐 상등액을 회수하여 제 1 추출물을 제조한다. 상기 상등액이 제거된 잔류물에 상기 추출액을 100 ㎖ 더 첨가하여 30 분간 교반하면서 30 ㎑의 초음파를 조사하여 원심분리 후 상등액을 회수하여 제 2 추출물을 제조한다. 상기 제 1 추출물과 제 2 추출물을 합하여 감압건고 후 정제수 400 ㎖에 녹여 동결 건조한다. 그 후 고성능 액체 크로마토그래피를 사용하여 사포닌의 함량을 측정하였다.
숙성온도 사포닌 함량
실시예 3-1 20 ℃ 35.9 ㎎
실시예 3-2 25 ℃ 47.3 ㎎
실시예 3-3 30 ℃ 59.5 ㎎
실시예 3-4 35 ℃ 68.7 ㎎
실시예 3-5 40 ℃ 73.2 ㎎
실시예 3-6 45 ℃ 70.2 ㎎
실시예 3-7 50 ℃ 62.3 ㎎
실시예 3-8 55 ℃ 54.9 ㎎
실시예 3-9 60 ℃ 47.6 ㎎
[실시예 4] 초음파 조사 시간에 따른 사포닌 추출 효율 향상
숙성온도를 40 ℃로 하여 실시예 3과 같은 방법으로 하되, 제 1 추출물 제조과정 및 제 2 추출물 제조과정에서의 초음파 조사시간을 각각 0 분(실시예 4-1), 10 분(실시예 4-2), 20 분(실시예 4-3), 30 분(실시예 4-4), 40 분(실시예 4-5), 50 분(실시예 4-6), 60 분(실시예 4-7), 70 분(실시예 4-8)으로 하여 추출하였다. 각 실시예별 사포닌 함량을 표 4로 나타내었다.
초음파 조사 시간 사포닌 함량
실시예 4-1 0 분 24.4 ㎎
실시예 4-2 10 분 37.4 ㎎
실시예 4-3 20 분 67.0 ㎎
실시예 4-4 30 분 73.2 ㎎
실시예 4-5 40 분 75.8 ㎎
실시예 4-6 50 분 77.3 ㎎
실시예 4-7 60 분 81.5 ㎎
실시예 4-8 70 분 82.7 ㎎
[실험예 1] 으름 추출물의 관능검사
상기 추출물의 제조 방법에 의해 비교예 1, 실시예 1-4, 실시예 2-4 및 실시예 2-4에서 건조한 인삼 분말 0.5 g을 더 포함한 추출물(실시예 5)을 제조하여 20 내지 40대의 훈련된 평가원 50명에게 각각 100 ㎎씩 복용하게 하였다. 복용 후 각각 느낄 수 있는 향과 맛 특성에 대하여 5점 척도(1점 매우 싫다 또는 매우강하다; 2점, 싫다; 3점 보통; 4점 만족 또는 좋다; 5점 매우만족 또는 매우 좋다)로 표시하게 한 후 그 평균값을 구하여 표 5로 나타내었다.
전체 기호도 쓴맛 단맛 신맛 떫은맛 청량감 독특한 냄새
비교예 1 2 1 1.3 2 2.2 2.2 1.2
실시예 1-4 3.1 3 4 1.7 2.3 2.3 2.2
실시예 2-4 4.5 3.6 4.6 2.4 2.7 4.1 4.2
실시예 5 4.6 3.7 4.6 3 3 4.2 4.3
[실험예 2] 으름 추출물의 활력 증진 효과
상기 실시예 2-4에 의한 추출물을 남녀 각 15명씩 총 30명의 20 ~ 50대 일반인들에게 매일 하루 두 번 100 ㎎씩 10일간 복용하게 하였으며 활력 증진 효과를 비교하기 위해 피로 회복 정도를 5점 척도(5점 아주 우수함, 4점 우수함, 3점 차이 없음, 2점 나쁨, 1점 아주 나쁨)로 나타내게 하여 평균값을 구한 후 도 1로 나타내었다.
[실험예 3] 으름 추출물의 감기 예방 또는 감기 증상 완화 효과.
상기 실시예 2-4에 의한 추출물 10 ㎎을 매일 복용하는 실험군, 밀가루로 만든 위약 10 ㎎을 매일 복용하는 대조군을 정하여 1년 동안 실험을 진행했다. 실험군과 대조군의 1년간 감기 발병 횟수와 감기의 지속일을 표시하여 도 2로 나타내었다. 여기서 감기란 미열 또는 고열, 인후통, 기침, 근육통, 오한 등의 증상이 둘 이상 나타나는 상태로 정의하였다.
[실험예 4] 으름 추출물의 위장 불쾌감 완화 효과
상기 실시예 2-4에 의한 추출물을 속쓰림, 신물 등 위장의 불쾌감을 호소하는 10명의 일반인을 대상으로 하루 2번 0.1 g씩 한달간 복용 후 속쓰림, 헛구역질 및 위액 역류 증상의 개선 정도를 5점 척도(1,많이 악화; 2,악화; 3,변화 없음; 4,개선됨; 5,많이 개선됨)로 나타내도록 하였다. 그 결과 속쓰림의 경우 평균 4.4점 표준편차 0.69를 나타냈으며, 헛구역질 및 위액 역류는 평균 4.0점 표준편차 0.94로 나타났다.
[제조예 1] 으름 추출물 정제의 제조
실시예 2-4에 의한 추출물 150 ㎎, 결정성 셀룰로오스 50 ㎎, 유당 50 ㎎, 스테아린산마그네슘 3 ㎎ 및 에탄올을 혼합하여 과립을 제조한다.
[제조예 2] 으름 추출물 캡슐제의 제조
실시예 2-4에 의한 추출물 200 ㎎, 탈크 10 ㎎, 롬로이드실리카 5 ㎎, 유당 85 ㎎를 통상의 캡슐제 제조방법으로 제조한다.
[제조예 3] 으름 추출물 음료의 제조
실시예 2-4에 의한 추출물 4 g, 올리고당 0.5 g, 고프락토스콘시럽 1 g, 구연산 0.1 g, 비타민 C 0.2 g 및 정제수 50 ㎖를 혼합하여 통상의 음료 제조방법으로 제조한다.

Claims (10)

  1. a) 으름 종자 및 으름 종자 1 중량부에 대하여 으름 과육 1.0 내지 1.5 중량부를 포함 하는 원료를 숙성하는 단계;및
    b) 알코올 추출액을 이용하여 숙성된 상기 원료로부터 풀사틸라 사포닌 디(Pulsatilla saponin D) 가 유효성분으로 함유된 추출물을 추출하는 단계;
    를 포함하는 으름 추출물의 제조방법.
  2. 삭제
  3. 제 1항에 있어서,
    상기 숙성 단계에서 온도는 20 내지 60 ℃인 것을 특징으로 하는 으름 추출물의 제조방법.
  4. 제 1항에 있어서,
    상기 원료는 생강을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 으름 추출물 제조방법.
  5. 제 4항에 있어서,
    상기 원료는 으름 종자 1 중량부에 대하여 생강 0.05 내지 0.2 중량부를 포함하는 것을 특징으로 하는 으름 추출물 제조방법.
  6. 제 1항에 있어서,
    상기 원료는 으름 종자 1 중량부에 대하여 인삼, 산삼, 도라지, 더덕, 칡 및 마로 이루어진 군에서 선택되는 1 또는 2 이상의 첨가물을 0.1 내지 1 중량부 포함하는 것을 특징으로 하는 으름 추출물 제조방법.
  7. 제 1항에 있어서 상기 b) 단계는,
    b1) 상기 a) 단계의 숙성된 원료에 알코올 추출액을 첨가한 후 초음파를 조사하는 단계;및
    b2) 상기 b1)의 생성물을 원심분리 후 상등액을 회수하여 추출물을 제조하는 단계;
    로 이루어지는 것을 특징으로 하는 으름 추출물 제조방법.
  8. 제 7항에 있어서,
    상기 b2)에서 상등액이 제거된 잔류물을 상기 a) 단계의 원료로 하여, 상기 b1) 및 b2) 단계를 2회 이상 반복하는 것을 특징으로 하는 으름 추출물 제조방법.
  9. 제 7항에 있어서,
    상기 b1)에서 초음파 조사는 20 내지 60분인 것을 특징으로 하는 으름 추출물 제조방법.
  10. 제 1항 및 제 3항 내지 제 9항에서 선택되는 어느 한 항의 제조방법으로 제조된 으름 추출물을 포함 하는 기능성 식품 조성물.
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