KR101625476B1 - 압출성형 천마를 유효성분으로 포함하는 혈행 개선용 조성물 - Google Patents
압출성형 천마를 유효성분으로 포함하는 혈행 개선용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 압출성형 천마 추출물을 유효성분으로 포함하는 혈행 개선용 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따른 압출성형 천마 추출물은 혈소판 응집 억제 및 트롬복산 B2의 생성을 저해하고, 출혈 시간을 연장시켜 우수한 혈행 개선 효과 및 항혈소판 효과를 나타내므로, 혈전 질환의 예방 또는 치료에 유용한 의약품 또는 건강기능식품으로 이용될 수 있다.
Description
본 발명은 압출성형 천마(Gastrodia elata Blume)를 유효성분으로 포함하는 혈행 개선용 조성물에 관한 것이다.
최근 선진국뿐 아니라 우리나라에서도 동맥경화증, 뇌출혈, 고혈압, 심장병, 뇌졸중, 뇌경색 등의 순환기 질환이 사망원인 1, 2위를 차지하고 있다. 이러한 성인병은 현대사회로 발전하면서 식생활 양식의 변화 및 내, 외부적인 환경 스트레스로 인해 중, 장년층에서 빈번하게 발생하고 있다. 다양한 원인에 의해 혈관이 막혀 상기 질병들이 발생할 수 있는데, 심장 혈관이 막힐 경우 심근 경색증이 일어날 수 있고, 뇌의 혈관이 막혔을 경우 뇌경색이 발병될 수 있다. 뇌경색의 경우 질병이 계속 진행되어 뇌졸중 증세가 나타나 목숨을 잃게 될 수 있다. 미국의 경우 뇌졸중이 성인의 사망 원인 중 3번째로 높은 순위를 차지하고 있으며 운동성이 무력하게 되는 가장 큰 요인으로 알려져 있다. 이들 질환의 주요 발병원인으로는 혈전(thrombus)으로 알려져 있는데, 혈전이란 과잉된 혈소판 응집에 의해 매개되는 병리현상으로 인식되고 있다. 또한, 이로 인해 혈액순환의 장애도 발생하게 된다.
지혈은 원래의 형태가 파괴된 혈관으로부터 출혈을 막기 위한 기전으로 혈소판의 활성화 과정, 혈소판과 혈관성분과의 부착, 그에 수반된 혈액응고인자들의 복잡한 상호작용을 거쳐 이루어지며 손상된 혈관을 복원한다. 한편, 혈소판은 혈관 손상시 콜라겐(collagen), 아라키도닉산(arachidonic acid) 및 ADP(adenosine diphosphate) 등과 같은 각종 응집유도체(agonist)의 자극에 의해 활성화되어 접착 반응(adhesion), 방출 반응(secretion) 및 응집 반응(aggregation)을 일으킨다. 이러한 반응들은 지혈(haemostasis)에 관련되어 있으며, 혈전증(thrombosis) 등을 포함하는 순환계 질환의 발병에도 관여된다고 알려져 있다.
혈소판은 휴지기(resting) 상태에서 특징적인 원형(discoid) 형태를 가지지만 활성화되면 고유의 모양을 상실하고 허족을 가진 불규칙한 모양을 띄는 모양 변형을 거치게 되며, 세포골격(cytoskeleton)류의 중합(polymerization), 포스포릴레이션(phosphorylation) 및 이에 따른 상호작용의 결과를 나타낸다.
지금까지 개발된 항혈소판제로는 데오필린(theopylline), 몰시도민(molsidomin), 베라파밀(verapamil), 니페디핀(nifedipine) 등이 있다. 이들은 cAMP와 cGMP의 생성을 촉진하여 Ca2 +의 동원을 억제하는 것으로 알려져 있다. 또한 아스피린, 이미다졸, 인도메타신 등의 비스테로이드계 화합물들은 트롬복산 A2의 생성을 저해함으로써 항혈소판 작용을 가지는 약물들로 알려져 있다. 그러나, 상기 화학물질로 이루어진 약물들은 인체에 지혈 과다 억제, 불임, 소화기 장애 등의 여러 부작용을 야기하는 문제점이 있다. 이에 따라, 상기 화학물질로 이루어진 약물의 부작용을 줄이면서도, 동일한 효과를 보이는 물질을 찾기 위하여, 천연물로부터 혈액순환 개선 작용을 하는 물질에 대한 탐색연구가 많이 진행되고 있다.
한편, 천마 (天麻, Gastrodia Rhizoma)는 한국, 일본, 중국 등지에 자생하는 난초목 난초과(Orchidaceae)에 속하는 다년생 초본인 수자해좆(천마, Gastrodia elata Blume)의 뿌리를 지칭하는 것으로서 잎이 없고 엽록소를 거의 함유하고 있지 않으므로 기생하는 곰팡이로부터 영양을 공급받아 생장하는 특성을 지닌 약용 작물로써 덩이 줄기는 감자와 같으며 표면에 윤상인편이 배열되어 있어 줄기는 황적색의 원주형으로 높이는 1m정도이며 6~7월경에 노랑꽃이 피는 식물이다. 천마의 근경을 말린것을 천마라 하며 적근(赤根), 귀독우(鬼督郵), 난모(難母), 신초(神草), 정풍초(定風草) 등의 다른 명칭으로 부르기도 한다. 천마의 주성분으로는 gastrodin, p-hydroxybenzaldehyde (HBAD), p-hydroxybenzyl alcohol (HBA), vanillyl alcohol (VA), vanillin, parishins B,C, 4,4-dihydroxybenzyl sulfoxide, gastrol등이 밝혀져 있다. 신,농본초경(神農本草經)에는 천마가 중품(中品)으로 분류되어 있으며, 약성이 평무독(平無毒)한 약재로 알려져 있다. 천마의 임상적 효능은 본초강목, 동의보감등의 여러 본초문헌들에서 찾아볼 수 있는데 주로 고혈압, 두통, 마비, 신경성질환, 당뇨병 등의 성인병과 스트레스, 피로등의 증상에 효능이 있는 것으로 알려져 있다.
압출성형 공정은 혼합, 절단, 파쇄 성형, 팽화, 살균과 같은 단위조작이 단시간에 일어나는 단일공정으로, 다른 열처리 가공공정과 비교하여 효율적이고 경제적인 공정으로, 전분의 수화, 팽윤, 호화, 무정형화 및 덱스트린화, 단백질의 변성, 효소의 불활성화, 미생물의 사멸 및 살균, 냄새의 제거, 조직 팽화, 밀도 조절 및 갈색화 반응, 유효 성분의 추출 수율의 증가 등이 보고되어 있다. 또한 원료의 투입속도, 수분함량, 스크루 회전속도, 사출구의 구조, 스크루 배열에 따라 목적하는 제품의 특성을 조절할 수 있기 때문에 다양한 특성을 가지는 제품을 생산할 수 있다.
상기한 바와 같이 천마의 다양한 약리효과에 대해 알려져 있지만, 압출성형 천마가 혈행 개선 효과를 갖는지에 대해서는 아직까지 규명되지 않았고 이에 대한 연구도 전무한 상태이다. 이에 본 발명자들은 혈행개선 효과를 갖는 새로운 약물을 개발하기 위해 압출성형 천마를 이용하여 연구를 수행한 결과 압출성형 천마의 추출물이 우수한 혈행개선 효과가 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 압출성형 천마 추출물을 유효성분으로 포함하는 혈행 개선용 조성물을 제공하는 것이다.
또한, 본 발명의 목적은 압출성형 천마 추출물을 유효성분으로 포함하는 혈전 질환의 예방 또는 치료용 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위해, 본 발명은 압출성형 천마 추출물을 유효성분으로 포함하는 혈행 개선용 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 압출성형 천마 추출물을 유효성분으로 포함하는 혈전 질환의 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 압출성형 천마 추출물은 혈소판 응집 억제 및 트롬복산 B2의 생성을 저해하고, 출혈 시간을 연장시켜 우수한 혈행 개선 효과 및 항혈소판 효과를 나타내므로, 혈전 질환의 예방 또는 치료에 유용한 의약품 또는 건강기능식품으로 이용될 수 있다.
도 1은 압출성형 천마 추출물을 랫트의 혈액에 처리한 후 혈소판 응집 억제 효과를 측정한 결과를 나타낸 도이다.
도 2는 압출성형 천마 추출물의 트롬복산 B2 생성 저해 효과를 측정한 결과를 나타낸 도이다.
도 3은 압출성형 천마 추출물을 먹인 랫트에서 혈소판 응집 억제 효과를 측정한 결과를 나타낸 도이다.
도 2는 압출성형 천마 추출물의 트롬복산 B2 생성 저해 효과를 측정한 결과를 나타낸 도이다.
도 3은 압출성형 천마 추출물을 먹인 랫트에서 혈소판 응집 억제 효과를 측정한 결과를 나타낸 도이다.
본 발명은 압출성형 천마(Gastrodia elata Blume) 추출물을 유효성분으로 포함하는 혈행 개선용 조성물을 제공한다.
상기 조성물은 약학적 조성물 또는 식품 조성물을 포함한다.
이하, 본 발명에 대하여 보다 상세히 설명한다.
본 발명의 조성물에서 유효성분인 압출성형 천마 추출물은 천마를 120~180℃의 온도 및 20~100bar의 압력에서 압출성형한 뒤, 압출성형 천마를 각각 물과 탄소수 1 내지 4의 알코올, 또는 이들의 혼합용매로부터 선택된 1종 이상의 용매를 이용하여 추출하여 얻을 수 있다. 이때 탄소수 1 내지 4의 알코올은 메탄올 또는 에탄올이며, 바람직하게는 에탄올이다. 추출 온도는 50 내지 100℃, 바람직하게는 열수추출, 환류냉각 추출 방법을 사용할 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서는 상기 압출성형 천마 추출물이 혈소판 응집과 트롬복산B2의 생성을 저해하는 방법으로 항혈소판 효과를 가지고 있음을 확인하였다.
항혈소판 효과를 통해 혈전 질환을 예방 또는 치료할 수 있으므로, 본 발명은 압출성형 천마 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전 질환의 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.
상기 조성물은 약학적 조성물 또는 식품 조성물을 포함한다.
상기 혈전 질환은 동맥 혈전증, 정맥 혈전증, 폐동맥 색전증, 만성정맥 허혈, 하지 정맥류, 심부 정맥 혈전증, 동맥경화증, 뇌출혈, 뇌졸증 또는 뇌경색을 포함하나 이에 한정하지 않는다.
본 발명에 따른 압출성형 천마 추출물은 혈소판 응집 억제 및 트롬복산 B2의 생성을 저해하고, 출혈 시간을 연장시켜 우수한 혈행 개선 효과 및 항혈소판 효과를 나타내므로, 혈전 질환의 예방 또는 치료에 유용하게 사용될 수 있다.
본 발명의 조성물은 압출성형 천마과 함께 혈행 개선 효과를 갖는 공지의 유효성분을 1종 이상 더 함유할 수 있다.
본 발명의 조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다. 또한 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 당해 기술 분야에 알려진 적합한 제제는 문헌 (Remington's Pharmaceutical Science, 최근, Mack Publishing Company, Easton PA)에 개시되어 있는 것을 사용하는 것이 바람직하다. 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 소르비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시 벤조에이트, 프로필히드록시 벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유 등이 있다. 상기 조성물을 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트 (calcium carbonate), 수크로오스, 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔 (witepsol), 마크로골, 트윈 (tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 "투여"는 임의의 적절한 방법으로 개체에게 소정의 본 발명의 조성물을 제공하는 것을 의미한다.
본 발명의 약학적 조성물의 바람직한 투여량은 개체의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 바람직한 효과를 위해서, 본 발명의 압출성형 천마의 일일투여량은 1 mg/ kg 내지 10000 mg/kg의 양으로 투여할 수 있으며 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수 회 나누어 투여할 수도 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 개체에게 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁 내 경막 또는 뇌혈관 내 주사에 의해 투여될 수 있다.
본 발명의 조성물은 혈행 개선 또는 혈전 질환의 예방 또는 치료를 위하여 단독으로, 또는 수술, 방사선 치료, 호르몬 치료, 화학 치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.
본 발명의 조성물은 혈행 개선 또는 혈전 질환의 예방 또는 개선을 목적으로 건강기능식품에 첨가될 수 있다. 본 발명의 압출성형 천마 추출물을 식품 첨가물로 사용할 경우, 상기 압출성형 천마를 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 혼합양은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조 시에 본 발명의 압출성형 천마는 원료에 대하여 15중량 % 이하, 바람직하게는 10 중량 % 이하의 양으로 첨가된다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 수프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.
본 발명의 건강음료 조성물은 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 포함할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토오스, 수크로오스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ml 당 일반적으로 약 0.01 내지 10 g, 바람직하게는 약 0.01 내지 0.1 g 이다.
상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 포함할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일주스, 과일주스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 포함할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100중량부 당 0.01 내지 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
이하 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예, 실험예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예, 실험예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 실시예, 실험예 및 제조예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.
실시예 1. 압출성형 천마의 제조
천마 분말을 생산용 쌍출압출성형장치를 사용하여 120~180℃의 온도 및 20~100bar의 압력에서 지름이 2 mm인 원형사출구 하나를 열어 압출성형 하였다. 압출성형시 조건은 하기 표 1과 같다.
실시예 2. 압출성형 천마 추출물의 제조
상시 실시예 1에서 제조한 압출성형 천마의 분말 10 g을 환류추출장치를 통하여 2회 저가 에탄올로 반복 추출하여, 2 g (수율 20%)의 시료를 수득하였다.
실험예 1. 압출성형 천마 추출물의 지표성분 함량 분석
상기 실시예 2에서 제조한 압출성형 천마 추출물의 지표성분 함량을 HPLC(High-performance liquid chromatography)로 확인하였다. Waters SunFireTM C18 (Waters Corp., Milford, USA)을 이용하여 컬럼 온도 30℃로 설정하고, 모바일 페이스는 H3PO4와 아세토니트릴(acetonitrile)을 사용하여 디텍션 280 nm로 측정하였으며, 그 결과를 표 2에 나타내었다.
지표성분 | 함량 (mg/g) | |
천마 추출물 | 압출성형 천마 추출물 | |
가스트로딘(Gastrodin) | 6.34 | 3.68 |
p-히드록시벤질알코올(HBA) | 6.36 | 18.62 |
바닐릴 알코올(vanillyl alcohol) | 6.52 | 6.98 |
p-히드록시벤질알데히드(HBAD) | 1.54 | 1.32 |
바닐린(vanillin) | ND | 0.26 |
표 2에 나타낸 바와 같이, 5가지 지표성분을 분석한 결과 압출전과 후의 함량은 각각 가스트로딘(Gastrodin) 6.34 mg/g 및 3.68 mg/g, p-히드록시벤질알코올(HBA; p-hydroxybenzyl alcohol) 6.36 mg/g 및 18.62 mg/g, 바닐릴 알코올(vanillyl alcohol) 6.52 mg/g 및 6.98 mg/g, p-히드록시벤질알데히드(HBAD; p-Hydroxybenzaldehyde) 1.54 mg/g 및 1.32 mg/g 이었으며 바닐린(vanillin)은 압출 후 0.26 mg/g으로 확인되었다. 이를 통해, 압출성형 천마 추출물의 경우 p-히드록시벤질알코올, 바닐릴 알코올, p-히드록시벤질알데히드 및 바닐린의 함량이 일반 천마 추출물에 비해 더욱 높은 것을 확인하였다.
실험예 2: 압출성형 천마 추출물을 이용한 실험관 내 실험
2-1. 압출성형 천마 추출물의 독성 시험
혈소판의 활성화를 억제하는 압출성형 천마의 효과와 세포독성과의 연관성을 확인하기 위하여 젖산 탈수 효소(LDH) 방출 실험을 수행하였다. 혈소판에 압출성형 천마를 5 mg/ml 가한 후 37℃에서 인큐베이션한 후, 혈소판 100 ul를 취해 12,000×g 에서 1분간 원심분리하였다. 원심분리한 상등액 25 μl를 NADH 용액 100 μl에 가하고 340 nm의 파장에서 흡광도를 측정하여 LDH의 방출을 확인하였으며, 그 결과를 표 3에 나타내었다.
Control | DMSO (0.5%) |
GE (2 mg/ml) |
EXGE (2 mg/ml) |
Digitonin (50 M) |
|
LDH 방출(%) | 7.61±0.18 | 8.12±0.08 | 7.43±0.25 | 7.74±0.04 | 81.02±0.06 |
표 3에 나타낸 바와 같이, 천마(GE)와 압출성형 천마(EXGE) 2 mg/ml의 경우 정상 대조군과 비교하여 큰 변화가 없는 것을 확인하였다. 이는 천마와 압출성형 천마의 혈소판 활성화 억제 작용은 혈소판에 미치는 세포 독성과는 관련이 없다는 것을 나타낸다.
2-2. 압출성형 천마 추출물의 혈소판 응집 억제 효과
압출성형 천마 추출물의 혈소판 응집 억제 효과를 확인하기 위해 혈소판 응집 실험을 수행하였다. 먼저, 혈소판을 얻기 위해 Sprague-Dawley(SD) 랫트를 디에틸 에테르로 마취시킨 후 복대 동맥에서 시트르산 나트륨(sodium citrate)(3.8%, 1:9 v/v)을 취한 실린지로 혈액을 채취하였다. 채취한 혈액을 140×g로 10분간 원심분리하여 혈소판 풍부 혈장(PRP; platelet rich plasma)을 얻은 후 다시 800×g 로 원심분리하여 혈소판이 거의 없는 혈장(PPP; platelet-poor plasma)을 수득하였다. PRP는 4×108 platelet/ml으로 고정하였다. 고정한 PRP에 천마와 압출성형 천마를 각각 0.5, 1 및 2 mg/ml로 처리한 후 37℃에서 10분간 인큐베이션한 후 콜라겐 또는 ADP로 각각 혈소판 응집을 유도하여 응집측정기(aggregometer)(Chrono-Log 700-2, USA)로 측정하였으며, 그 결과를 도 1에 나타내었다.
도 1에 나타낸 바와 같이, 콜라겐 또는 ADP로 혈소판 응집을 유도한 결과 대조군에 비해 천마와 압출성형 천마에서 통계적으로 유의하게 혈소판 응집을 억제하였으며, 특히, 천마에 비하여 압출성형 천마의 혈소판 응집 억제 효과가 우수함을 확인하였다.
2-3. 압출성형 천마 추출물의 aPTT 및 PT
압출성형 천마 추출물이 혈액 내 응고인자에 어떠한 효과를 보이는지 확인하기 위하여 내인성 경로 aPTT와 외인성 경로 PT를 통해 혈장 응고 시간을 코어귤로미터(coagulometer)(Coatron M4, Germany)로 측정하였다. 먼저, 인간 플라즈마에 압출성형 천마를 각각 0.5, 1 및 2 mg/ml로 처리한 후 37℃에서 1분간 인큐베이션하였다. aPTT는 샘플 100 μl에 aPTT 측정 시약 100 μl와 20 mM CaCl2 100 μl를 가한 후 측정하고, 외인성 경로인 PT는 샘플 100 μl에 PT 측정 시약 200 μl를 가한 후 측정하였으며, 그 결과를 표 4에 나타내었다.
시료 | 농도 | aPTT (sec) | PT (sec) |
대조군 | 48.87±0.55 | 16.43±0.35 | |
압출성형 천마추출물 |
0.5 mg/ml | 49.37±0.64 | 15.17±0.29 |
1 mg/ml | 50.27±0.06 | 15.37±0.06 | |
2 mg/ml | 52.83±0.71 | 17.50±0.10 | |
헤파린 | 0.5 IU | 133.60±3.12 | 19.30±0.35 |
표 4에 나타낸 바와 같이, 압출성형 천마가 응고 시간을 변화 시키지 않음을 확인하였다.
2-4. 압출성형 천마 추출물의 트롬복산 B
2
생성 저해 효과
압출성형 천마 추출물이 트롬복산 B2 생성에 미치는 효과를 확인하기 위하여 트롬복산 B2 효소면역분석법((EIA; enzyme immunoassay) 키트를 사용하여 생성량을 측정하였다. 랫트 PRP에 압출성형 천마 추출물을 각각 0.5, 1 및 2 mg/ml로 처리한 후 37℃에서 10분간 인큐베이션하였다. 그 후 PRP에 EDTA(2mM) 및 인도메타신(indomethacin)(50uM)을 처리하여 트롬복산 B2의 생성을 정지하고 15,000×g로 원심분리후 상층액을 트롬복산 B2 효소면역분석법 키트로 측정하여 트롬복산 B2의 생성량을 확인하였으며, 그 결과를 도 2에 나타내었다.
도 2에 나타낸 바와 같이, 대조군과 비교하여 천마 추출물과 압출성형 천마 추출물 모두 통계적으로 유의하게 트롬복산 B2의 생성을 저해하였으며, 천마 추출물보다 압출성형 천마 추출물의 트롬복산 B2 생성 저해 효과가 더욱 우수함을 확인하였다.
실험 예 3: 압출성형 천마 추출물을 이용한 동물 실험
3-1. 압출성형 천마 추출물의 혈소판 응집 억제 효과
압출성형 천마 추출물의 혈소판 응집 억제 효과를 확인하기 위하여 혈소판 응집을 유도하였다. 먼저, 천마와 압출성형 천마 20, 100 또는 500 mg/kg/day를 랫트에 일주일간 경구투여하고 실험 당일 절식하였다. 랫트의 혈액에서 분리한 PRP를 인큐베이션한 후 콜라겐으로 혈소판 응집을 유도하고 응집측정기(aggregometer)(Chrono-Log 700-2, USA)로 측정하였으며, 그 결과를 도 3에 나타내었다.
도 3에 나타낸 바와 같이, 대조군에 비해 천마와 압출성형 천마 모두 통계적으로 유의하게 혈소판 응집을 억제함을 확인하였으며, 천마 추출물보다 압출성형 천마 추출물의 혈소판 응집 억제 효과가 더욱 우수함을 확인하였다.
3-2. 압출성형 천마 추출물의 aPTT 및 PT
압출성형 천마 추출물이 혈액 내 응고인자에 어떠한 효과를 보이는지 확인하기 위하여 일주일간 압출성형 천마 추출물 20, 100 또는 500 mg/kg/day를 랫트에 경구투여하였다. 그 후 랫트의 혈액에서 분리한 PPP를 인큐베이션한 후, aPTT는 PPP 100 μl에 aPTT 분석 시약 100 μl 및 20 mM CaCl2 100 μl를 가하여 측정하고, PT는 PPP 100 μl에 PT 분석 시약 200 μl를 가하여 측정하였으며, 그 결과를 표 5에 나타내었다.
Group | 투여량 (mg/kg) | aPTT (sec) | PT (sec) |
Normal | 17.11±0.83 | 25.15±1.21 | |
압출성형 천마 추출물 | 20 | 15.90±0.76 | 26.93±1.20 |
100 | 17.49±0.26 | 26.27±2.38 | |
500 | 17.84±0.51 | 26.29±0.44 | |
아스피린 | 20 | 16.60±0.36 | 24.14±0.11 |
표 5에 나타낸 바와 같이, aPTT와 PT에서 압출성형 천마 추출물은 혈장 응고 시간을 변화시키지 않음을 확인하였다.
3-3. 압출성형 천마 추출물 처리시 출혈 시간
혈소판과 혈장인자들의 이상 여부를 확인하기 위하여, 압출성형 천마 추출물이 출혈 시간에 미치는 영향을 측정하였다. 출혈 시간은 Hornstra법에 의하여 측정하였다. 케타민과 럼푼을 섞어 복강에 주사하여 마취시킨 후에 랫트 꼬리의 3 mm를 잘라 37℃로 유지된 0.9% 생리 식염수에 담구어 지혈될 때까지 시간을 측정하였으며, 그 결과를 표 6에 나타내었다.
Group | 투여량 (mg/kg) | 출혈 시간 (sec) |
Normal | 647.67±63.69 | |
압출성형 천마 추출물 |
20 | 698.00±28.79 |
100 | 917.67±107.198* | |
500 | 1027.33±66.73** | |
아스피린 | 20 | 1200.00±0.00** |
표 6에 나타낸 바와 같이, 압출성형 천마 추출물 처리시 대조군에 비하여 출혈 시간이 통계적으로 유의하게 연장되었음을 확인하였다.
이하 본 발명의 약학적 조성물 및 식품 조성물의 제제예를 설명하나, 이는 본 발명을 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
제제예 1. 약학적 제제
1-1. 산제의 제조
압출성형 천마 20 mg
유당 100 mg
탈크 10 mg
상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.
1-2. 정제의 제조
압출성형 천마 10 mg
옥수수전분 100 mg
유당 100 mg
스테아린산 마그네슘 2 mg
상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.
1-3. 캡슐제의 제조
압출성형 천마 10 mg
결정성 셀룰로오스 3 mg
락토오스 14.8 mg
마그네슘 스테아레이트 0.2 mg
통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.
1-4. 주사제의 제조
압출성형 천마 10 mg
만니톨 180 mg
주사용 멸균 증류수 2974 mg
Na2HPO4·2H2O 26 mg
통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플당 (2 ml) 상기의 성분 함량으로 제조한다.
1-5. 액제의 제조
압출성형 천마 20 mg
이성화당 10 g
만니톨 5 g
정제수 적량
통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체를 정제수를 가하여 전체 100 ml로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조한다.
제제예 2. 식품 제제
2-1. 건강식품의 제조
압출성형 천마 100 mg
비타민 혼합물 적량
비타민 A 아세테이트 70 μg
비타민 E 1.0 mg
비타민 B1 0.13 mg
비타민 B2 0.15 mg
비타민 B6 0.5 mg
비타민 B12 0.2 μg
비타민 C 10 mg
비오틴 10 μg
니코틴산아미드 1.7 mg
엽산 50 μg
판토텐산 칼슘 0.5 mg
무기질 혼합물 적량
황산제1철 1.75 mg
산화아연 0.82 mg
탄산마그네슘 25.3 mg
제1인산칼륨 15 mg
제2인산칼슘 55 mg
구연산칼륨 90 mg
탄산칼슘 100 mg
염화마그네슘 24.8 mg
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
2-2. 건강음료의 제조
압출성형 천마 100 mg
비타민 C 15 g
비타민 E(분말) 100 g
젖산철 19.75 g
산화아연 3.5 g
니코틴산아미드 3.5 g
비타민 A 0.2 g
비타민 B1 0.25 g
비타민 B2 0.3 g
물 적량
통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간 동안 85 ℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2 l 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강음료 조성물 제조에 사용한다.
상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만 수요계층이나, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.
Claims (9)
120~180℃의 온도 및 20~100bar의 압력에서 압출성형된 천마(Gastrodia elata Blume)를 탄소수 1 내지 4의 알코올로 반복 추출한 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈행 개선용 약학적 조성물.
삭제
삭제
제1항에 있어서, 상기 알코올은 메탄올 또는 에탄올인 것을 특징으로 하는 혈행 개선용 약학적 조성물.
제1항에 있어서, 상기 조성물은 혈소판 응집을 저해하는 것을 특징으로 하는 혈행 개선용 약학적 조성물.
120~180℃의 온도 및 20~100bar의 압력에서 압출성형된 천마를 탄소수 1 내지 4의 알코올로 반복 추출한 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈행 개선용 식품 조성물.
120~180℃의 온도 및 20~100bar의 압력에서 압출성형된 천마를 탄소수 1 내지 4의 알코올로 반복 추출한 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제7항에 있어서, 상기 혈전질환은 동맥 혈전증, 정맥 혈전증, 폐동맥 색전증, 만성정맥 허혈, 하지 정맥류, 심부 정맥 혈전증, 동맥경화증, 뇌출혈, 뇌졸증 및 뇌경색으로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 혈전 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
120~180℃의 온도 및 20~100bar의 압력에서 압출성형된 천마를 탄소수 1 내지 4의 알코올로 반복 추출한 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전 개선용 식품 조성물.
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