KR101119414B1

KR101119414B1 - 막걸리박 가수분해물을 유효성분으로 포함하는 면역활성 증강용 조성물

Info

Publication number: KR101119414B1
Application number: KR1020100041047A
Authority: KR
Inventors: 배송환; 이학교
Original assignee: 한경대학교 산학협력단
Priority date: 2010-04-30
Filing date: 2010-04-30
Publication date: 2012-02-22
Also published as: KR20110121447A

Abstract

본 발명은 막걸리박의 효소 가수분해물을 유효성분으로 포함하는 면역활성 증강용 조성물 및 이를 첨가하여 제조한 막걸리에 대한 것이다. 본 발명의 조성물 및 막걸리는 생리활성 성분이 풍부할 뿐 아니라 항보체 활성이 뛰어나는 등 건강에 유익한 특징이 있다.

Description

막걸리박 가수분해물을 유효성분으로 포함하는 면역활성 증강용 조성물{Composition for enhancement of immune function which comprises rice wine lees as an active ingredient}

본 발명은 막걸리박 가수분해물을 유효성분으로 포함하는 면역활성 증강용 조성물 및 면역활성 증강용 막걸리에 대한 것이다.

막걸리는 우리나라 고유의 전통주로서 우리민족의 식생활에 지대한 영향을 미쳐왔다. 막걸리에는 Aspergillus, Rhizopus, Mucor속의 곰팡이와 Saccharomyces, Pichia, Candida, Torylopsis, Hansenula 속의 효모 및 Bacillus, Micorcoccus, Aerobacter, Pseudomonas sp.의 세균이 생육하고 있으며 이들의 상호작용에 따라 다양한 맛과 향이 형성된다.

막걸리박은 탁주(막걸리)를 빚은 후 술을 걸러내는 과정에서 나오는 부산물로, 술지게미, 주박 등으로도 불린다. 누룩 및 고두밥에 효모를 넣으면 효모가 번식하면서 생성한 효소에 의하여 녹말과 단백질이 분해됨과 동시에 효모에 의하여 알코올 발효가 일어난다. 알코올 발효가 끝난 후 술과 찌꺼기를 분리하는데, 이때 분리된 술이 막걸리이고, 찌꺼기가 막걸리박이다. 막걸리박은 원료인 쌀 중량의 약 20% 정도가 수득되는데도 불구하고 일부가 돼지 사료로 이용될 뿐 대부분의 막걸리박은 폐기되는 것이 현실이다.

이에 본 발명자들은 막걸리박을 활용하는 방법을 연구하던 중, 특정 효소로 분해할 경우 막걸리박의 면역활성 증강 기능이 증진되는 것을 발견하고, 이를 최적화하는 효소 및 그 조합을 확인하여 본 발명을 완성하였다.

본 발명의 목적은 막걸리박을 이용한 면역활성 증강용 조성물 및 면역활성 증강용 막걸리를 제공하는 것이다.

상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 막걸리박 효소 가수분해물을 유효성분으로 포함하는 면역활성 증강용 조성물 및 그 제조방법을 제공한다.

또한 본 발명은 상기 막걸리박 효소 가수분해물을 유효성분으로 포함하는 면역활성 증강용 조성물을 첨가하여 제조한 막걸리 및 그 제조방법을 제공한다.

본 발명의 면역활성 증강용 조성물 및 막걸리는 종래 양조 과정에서 버려지던 막걸리박을 이용함으로써 자원절감에 도움이 될 뿐 아니라, 건강에 유익한 성분의 함량이 높고 면역활성 증강 기능이 있다.

도 1은 양조 부산물 가수분해물의 활성성분을 나타낸다.
도 2는 양조 부산물 가수분해물의 면역활성 증진효과를 나타낸다.
도 3은 막걸리박 전분분해효소 가수분해물의 항보체활성을 보여준다.
도 4는 막걸리박 복합효소 가수분해물의 총당, 단백질 및 환원당의 함량 변화를 나타낸다.
도 5는 막걸리박 복합효소 가수분해물의 폴리페놀 및 산성당 함량 변화를 나타낸다.
도 6은 막걸리박 복합효소 가수분해물의 항보체활성을 나타낸다.
도 7은 막걸리박 복합효소 가수분해물의 농도에 따른 면역활성 증진효과를 나타낸다.

본 발명은 막걸리박 효소 가수분해물을 유효성분으로 포함하는 면역활성 증강용 조성물을 제공한다.

아울러 본 발명은 막걸리박 효소 가수분해물을 포함하는 면역활성 증강용 조성물을 첨가하여 제조한 막걸리를 제공한다. 또한 본 발명은 막걸리박 효소 가수분해물을 첨가하여 제조한 막걸리를 제공한다.

본 발명은 1) 막걸리박을 준비하는 단계;및

2) 막걸리 박에 효소를 처리하여 가수분해시키는 단계를 포함하는 면역활성 증강용 조성물의 제조 방법을 제공한다.

또한 본 발명은 1) 막걸리박을 준비하는 단계;

2) 막걸리 박에 효소를 처리하여 가수분해시키는 단계;및

3) 상기 단계 2)에서 제조한 막걸리박 효소 가수분해물을 막걸리에 첨가하는 단계를 포함하는 면역활성 증강용 막걸리의 제조 방법을 제공한다.

이하 본 발명을 자세히 설명한다.

본 발명의 막걸리박은 막걸리의 제조과정에서 나오는 부산물이며, 막걸리는 막걸리, 동동주 등 탁주를 의미한다.

상기 효소는 전분가수분해효소, 단백질 분해효소, 셀룰레이즈 등이며, 바람직하게는 1,4-alpha-D-glucan glucano-hydrolase, beta-glucanase, arabinase, cellulase, hemicellulase, xylanase, pectinase, polygalacturonase, alpha-amylase, gluco-amylase이다. 더욱 바람직하게는 상기 효소는, 1, 4-alpha-D-glucan glucano-hydrolase, pectinase, cellulase, alpha-amylase 또는 gluco-amylase이다.

상기 효소들은 단독으로 처리할 수 있으며, 복수 개의 효소를 복합 처리할 수도 있다. 효소를 복합 처리하는 경우 동시에 또는 순차적으로 처리할 수 있다. 바람직하게는 상기 효소는 alpha-amylase 또는 gluco-amylase을 처리한 후, 1, 4-alpha-D-glucan glucano-hydrolase, pectinase 또는 cellulase을 처리하는 것이다. 더욱 바람직하게는 상기 효소는 alpha-amylase의 처리 후 pectinase를 처리하는 것이다.

또한 본 발명은 막걸리박 효소 가수분해물을 첨가하여 제조한 면역활성 증강용 막걸리를 제공한다. 이때 막걸리박 효소 가수분해물은 막걸리의 제조 과정 중 어느 단계에서든 첨가할 수 있다. 즉, rice koji 제조 과정, 누룩 제조 과정, yeast starter 제조 과정, 고두밥 제조 과정 또는 물 첨가 과정 등 어느 단계에나 첨가할 수 있으며, 이러한 원료 제조 과정뿐 아니라 1차 담금 또는 2차 담금 단계에서 첨가할 수도 있다.

이하, 본 발명을 다음의 실시예 및 실험예에 의해 보다 상세하게 설명한다. 단, 하기 실시예 및 실험예는 본 발명의 내용을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 범위가 실시예 및 실험예에 의해 한정되는 것은 아니다.

<실시예 1>

<1-1> 백세주 및 막걸리 가수분해물 제조

백세주(배상면주가), 참살이 막걸리(참살이탁주)의 주정 후의 양조 부산물로 백세주박 및 참살이 막걸리박을 해당 업체로부터 제공받았다. 양조 부산물(백세주박 및 막걸리박) 10%(W/V)를 함유한 현탁액 50 mL에 효소를 각각 0.5%(250 μL) 가하여 40℃에서 12시간 반응시킨 후 효소 불활성을 위하여 100 ℃에서 10분간 가열처리하였다. 가열 처리후 3,000 rpm에서 20 분간 원심분리하여 상징액을 회수한 후 이를 동결건조하여 항보체 활성을 측정하였다.

<1-2> 양조 부산물 효소 가수분해물 성분 측정

폴리페놀 화합물의 함량은 Folin-Ciocalteu (Waterman and Mole, 1994) 방법에 준하여 측정하였다. 1.5 ml Eppendorf tube에 0.79 ml 증류수, 0.01 ml 시료와 Folin-Ciocalteu 시약 0.05 ml을 가하고, 1분후 20% sodium carbonate 0.15 ml를 가하여 혼합하였다. 120분간 방치한 후 750 nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준물질로는 gallic acid를 사용하였다.

총당 함량은 glucose를 표준 물질로 하여 phenol-sulfuric acid 법으로, 산성당(uronic acid) 함량은 beta-D-galacturonic acid를 표준 물질로 하여 m-hydroxybiphenyl 법으로, total solid(건물량)은 105℃ 건조법으로 각각 성분의 함량을 구하였다.

<1-3> 항보체 활성 측정

정상인 혈청( normal human serum , NHS )의 제조

실험실의 건강한 성인의 혈액을 채취하여 실온 및 4℃에서 각각 30분씩 방치하여 응고시켰다. 그 후, 원심분리(3000 rpm, 20 min)하여 혈청을 분리한 뒤 미량 원심분리용 튜브에 1 ㎖씩 분주하여 -70℃에서 냉동 보관하면서 실험에 사용하였다.

항보체 활성의 측정

항보체 활성은 Mayer법을 이용하여 시료에 의한 보체 소비(complement comsumption) 후 잔존하는 보체에 의한 적혈구 용혈 정도에 근거를 둔 complement fixation test로 측정하였다. 즉, 여러 농도(100, 500, 1000 ㎍/㎖)로 증류수에 녹인 시료에 정상인의 혈청과 2% gelatin, 500μM Ca⁺⁺, 2 mM Mg⁺⁺이 함유된 GVB⁺⁺ (gelatin veronal buffered saline, pH 7.4) 완충액을 각각 50 ㎕씩 혼합하여 37℃에서 30분간 1차 반응시키고 GVB⁺⁺를 350 ㎕를 가 한 후 이를 10-160배로 연속 희석하였다. 여기에 다시 750 ㎕의 GVB⁺⁺를 가한 후 양의 감작적혈구(IgM-sensitization sheep erythrocyte, EA Cell, 1×10⁸ cell/㎖)를 250 ㎕를 가해 37℃에서 60분간 2차 반응시키고 PBS 2.5 ㎖을 넣어 반응을 정지시켰다. 반응액을 2500 rpm에서 약 10분간 원심분리하여 얻어진 상등액을 412 nm에서 흡광도를 측정하여 잔존 용혈활성을 측정하였다. 항보체 활성은 NHS 와 buffer, 증류수만을 반응시킨 대조군의 총보체 용혈(50% total complement hemolysis, TCH₅₀, %)에 대한 저지율(inhibition of 50% total complement hemolysis, ITCH₅₀, %)로 나타내었다.

<식 1>

ITCH₅₀(%)={(TCH₅₀ of control - TCH₅₀ of sample)/TCH₅₀ of control} × 100

<1-4> 통계 분석

자료 처리는 SPSS program(10.0 버젼)을 이용하여 시료간의 차이는 p=0.05 수준에서 one-way ANOVA로, 구체적인 사후 검정은 Duncan's multiple range test로 유의성을 검증하였다.

<실시예 2>

<2-1> 양조 부산물의 가수분해

막걸리(탁주)박 및 백세주박을 상업용 효소들로 가수분해하였다. 이때 사용한 효소의 특성은 표 1과 같다.

효소	주된 활성	source	최적 조건
효소	주된 활성	source	pH	온도(℃)
Termamyl 120 L	1,4- alpha-D-glucan glucano-hydrolase	Bacillus licheniformis	5.5-7.0	105-110
Ultraflo L	beta-glucanase	Humicola insolens	6	40
Viscozyme	arabinase, cellulase, beta-glucanase, hemicellulase, xylanase	Asp. Sp.	3.3-5.5	40-50
Cytolase PCL	Pectinase	Asp. Niger	2.5-5.0	10-55
Celluclast 1.5L	Cellulase	T. reesei	4.5-6.0	50-60
Rapidase	pectinase, hemicellulase, cellulase	Asp. Niger & T. longibrachiatum	4.0-5.0	10-55
Pectinex 5XL	Polygalacturonase	Asp. Niger & Asp. aculeatus	4.5-5.0	50
Econitase CE	Cellulase	Trichoderma sp.	4.0-5.5	55

<2-2> 양조 부산물 가수분해물의 활성성분 변화

amylase, pectinase, arabinase, cellulase, beta-glucanase, hemicellulase, xylanase 활성을 가지는 termamyl, pectinex등 효소를 처리한 양조 부산물 가수분해물의 total polyphenols, total sugar, uronic acid와 건물량을 측정하였다. (도 1), 총당, 산성당, 폴리페놀 및 고형분 함량에서 백세주박의 효소 가수분해물이 막걸리박 가수분해물에 비하여 높은 함량을 보였으며, 산성당 함량에서 cytolase 가수분해시 백세주박 가수분해물보다는 막걸리 가수분해물의 함량이 높았다. 대조군(control)은 백세주박과 막걸리박을 각각 100 ℃에서 3시간 열수추출한 추출물로 추출물의 총당, 산성당, 폴리페놀 및 고형분의 함량은 효소 가수분해물에 비하여 낮은 수준을 보였다. 즉, 효소 가수분해시 백세주박이나 막걸리박에서 많은 양의 분해산물이 유리되며, 이 과정에서 총당, 산성당, 폴리페놀과 고형분의 함량 증가되는 것을 확인하였다

<2-3> 양조 부산물 가수분해물의 면역활성 증진효과

가수분해물의 활성 성분 함량이 높았던 백세주박에서의 면역증진효과는 낮았으나, 막걸리박의 termamyl, cytolase, celluclast, econase 가수분해물은 positive control인 PSK에 비하여 높은 항보체활성을 보였는바, 면역증진활성이 높은 것으로 확인되었다. 특히 cytolase에 의한 항보체활성이 우수하였다. 또한 단순 열수추출물인 대조군(control)의 항보체활성도 positive control인 PSK와 유사한 활성을 보였다(도 2).

<실시예 3>

<3-1>

면역증진활성이 높은 막걸리박을 전분 분해효소로 가수분해하였다. 막걸리박을 전분 분해효소인 termamyl, spezyme prime와 optidex L-400으로 가수분해한 후, 막걸리박 가수분해물의 항보체 활성을 측정하였다. 이때 사용한 효소의 특성은 표 2와 같다.

효소	주된 활성	source	최적 조건
효소	주된 활성	source	pH	온도(℃)
Termamyl 120 L	Alpha-amylase	Bacillus licheniformis	5.5-7.0	105-110
Spezyme Prime	Alpha-amylase	Geobacillus stearothemophilus	6.2-6.5	85-90
Optidex L-400	gluco-amylase	Asp. niger	4.0-4.5	58-65

<3-2> 막걸리박 전분분해효소 가수분해물의 면역활성 증진효과

막걸리박 가수분해물의 전분 분해효소에 따른 항보체활성을 측정한 결과(도 3), positive control인 PSK의 활성이 다른 가수분해물에 비하여 다소 높았으나, 유의적인 차이는 없었다. 또한 전분가수분해효소를 처리한 막걸리박 가수분해물은 열수 추출물에 비하여 높은 활성을 보였다. 전분분해효소 작용방식에 따른 항보체 활성, 즉, alpha-amylase 및 gluco-amylase에 의한 가수분해물의 항보체활성을 측정한 결과, alpha-amylase 효소의 가수분해물인 spezyme prime와 termamyl에서의 항보체 활성은 gluco-amylase에 해당되는 Optidex L-400가수분해물의 항보체 활성보다 높았으나 유의적인 차이는 없었다.

<실시예 4>

<4-1> 막걸리박 복합효소 가수분해물의 제조

막걸리박 가수분해물중 항보체활성이 높았던 cytolase와 전분분해효소인 spezyme prime와 optidex L-400을 각각 혼합사용시 막걸리박 가수분해물의 항보체활성 증진효과를 측정하고자 표 3의 조건에 따라 막걸리박 가수분해물을 제조하였다.

막걸리박 10% 현탁액 50 mL에 spezyme prime 0.25% (125 μL)를 가하여 80℃에서 12시간 가수분해하였으며, 복합효소 처리를 위하여 spezyme 가수분해물에 optidex 125 μL, cytolase 125 μL, 또는 cytolse/optidex(125 μL + 125 μL)를 각각 첨가하여 50℃에서 6시간 가수분해하여 원심분리후 상징액을 시료로 사용하였다.

Sample	Remark	Enzyme treatment procedure
E-1	spezyme control	spezyme treatment at 70 ℃ for 12 h
E-2	spezyme→opidex	spezyme treatment at 70℃ for 12 h →opidex treatment(0.25% 첨가) at 50 ℃ for 6 h
E-3	spezyme→cytolase	spezyme treatment at 70 ℃ for 12 h →cytolase treatment at 50 ℃ for 6 h
E-4	spezyme →opidex/cytolase	spezyme treatment at 70 ℃ for 12 h →opidex & cytolase treatment at 50 ℃ for 6 h
E-5	no enzyme control	no enzyme(heating treatment)

<4-2> 막걸리박 복합효소 가수분해물의 활성성분 변화

복합효소 가수분해시의 성분 변화량을 각각 측정하였다. 총당, 단백질 및 환원당의 양을 측정한 결과(도 4), 대조군인 E-5의 함량이 가장 낮았으며, 총당과 환원당의 함량은 E-3, 즉 spezyme처리후 cytolase에 의한 가수분해물의 함량이 가장 높은 31.4 mg/mL이었다. 반면, 단백질의 함량은 E-4인 spezyme 처리후 optidex/cytolase를 혼합 사용한 가수분해한물이 가장 높은 3.2 mg/mL의 함량을 보인 반면 E-3는 2.3 mg/mL로 다소 낮은 함량을 보였다.

생리활성물질로 널리 알려진 산성당과 폴리페놀성분의 함량을 측정한 결과(도 5), 대조군인 E-5의 함량이 가장 낮았으며, 폴리페놀 함량은 E-3에서 가장 높은 205.2 μg/mL의 함량을 보인 반면, E-4는 다소 낮은 172.0 μg/mL을 보였다. 전분분해효소인 spezyme만 처리하였을 경우 126.2 μg/mL이었다.

산성당의 함량은 E-3와 E-4가 각각 842.5 μg/mL과 814.9 μg/mL으로 다소 차이를 보였으나 유의적인 차이는 없었다. 전분분해효소만 처리한 E-1은 641.9 μg/mL여서, 전분분해효소 처리후 cytolase 또는 cytoase/opdex를 처리하는 것이 효과가 더 좋은 것으로 확인되었다.

이를 종합하여 보면 Spezyme을 처리한 후 cytolase를 처리한 E-3와 Spezyme의 처리 후 cytoalase/optidex 병용 처리한 E4의 유용성분이 효과적으로 증가한 것으로 보인다.

<4-3> 막걸리박 복합효소 가수분해물의 면역활성 증진효과

Spezyme 가수분해후의 cytolase, optidex 사용한 가수분해물의 항보체활성을 측정한 결과(도 6), 유용성분의 함량이 가장 높았던 E-3의 항보체활성이 59.3%로 positive control인 PSK와 유사한 활성을 보였으며, E-2와 E-4 가수분해물의 항보체활성이 각각 50.7%와 50.2%로 유사하였다. Spezyme으로 가수분해후 cytolase처리가 cytolase/optidex와 optidex 효소처리보다 유용성분의 증가량과 더불어 항보체활성의 증진 효과가 우수하였다.

<4-4> 막걸리박 복합효소 가수분해물의 농도에 따른 면역활성 증진효과

spezyme처리후 cytolasea로 가수분해하여 제조한 막걸리 기수분해물의 농도에 다른 항보체활성을 측정한 결과 (도 7), 막걸리 가수분해물의 농도가 증가할수록 항보체 활성이 농도의존적으로 증가하는 것으로 확인되었다. 100 ㎕, 500 ㎕와 1000 ㎕에서의 항보체활성은 각각 27.8%, 42.9%와 56.4%로 농도가 증가할수록 항보체활성이 증가하는 경향을 보였다.

<실시예 5>

<5-1> 막걸리와 막걸리박의 면역활성

시판되는 막걸리들을 조사한 결과, 제조원 및 종류에 따라 0.15 ~ 1.18 g/L의 면역활성 다당을 포함하며, 이들은 1 mg/mL의 농도에서 PSK와 유사한 60% 정도의 면역활성을 보이는 것으로 확인되었다(ITCH₅₀). 그러므로 일반적인 막걸리에 존재하는 면역 활성의 총량은 막걸리 1 L 당 9,000 ~ 70,800 %/L 일 것으로(ITCH₅₀) 평가된다(표 4).

한편, 막걸리박은 막걸리 1 L의 제조시 250~400 g이 얻어지며, 이 중 수분을 제외한 건물은 50~80 g이었다. 또한 막걸리박의 면역활성 다당 역시 막걸리 내 면역활성 다당과 유사한 60 %의 활성을 보였다.

그러나 막걸리박을 본 발명의 효소로 처리할 경우, 막걸리박 내 다당류들이 가수분해되어 건물량의 약 20 %의 수용성 활성 다당을 얻을 수 있었다. 그러므로 이들을 면역활성 다당의 형태로 막걸리에 첨가할 경우, 리터 당 약 10-16 g(건물 기준)의 활성 물질을 얻으며, 이 경우 면역활성의 총량은 막걸리 1 L 제조시 얻어지는 막걸리박을 기준으로, 600,000 ~ 960,000 %/L로 예상된다(표 4).

	Content of Immunostimulating polysaccharide (A)	Anticomplementary activity (B)	Total anticomplementary activity (AxB)
막걸리	0.15 - 1.18 g/L	약 60%/mg	약 9,000 - 70,800 %/L
막거리박 가수분해물 (spezyme 및 cytolase)	10 - 16 g/L	약 60%/mg	약 600,000 - 960,000 %/L

본 발명의 막걸리박 가수분해물을 유효성분으로 포함하는 면역활성 증강용 조성물 및 막걸리는 건강에 유익한 성분들을 함유하고 있을 뿐 아니라 면역기능개선 효과가 있다.

Claims

막걸리박 효소 가수분해물을 유효성분으로 포함하는 면역활성 증강용 조성물.
제 1항에 있어서,
상기 효소는 하기 a) 내지 c) 중 하나인 것을 특징으로 하는 면역활성 조성물:
a) 1,4-alpha-D-glucan glucano-hydrolase, beta-glucanase, arabinase, cellulase, hemicellulase, xylanase, pectinase 및 polygalacturonase로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 효소;
b) 1,4-alpha-D-glucan glucano-hydrolase, pectinase 또는 cellulase
c) alpha-amylase 또는 gluco-amylase.
제 1항에 있어서,
상기 효소 가수분해물은 막걸리박을 1,4-alpha-D-glucan glucano-hydrolase, beta-glucanase, arabinase, cellulase, hemicellulase, xylanase, pectinase 및 polygalacturonase로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 효소와 alpha-amylase 및 gluco-amylase로 구성되는 군으로부터 선택되는 하나의 효소를 순차적으로 또는 동시에 처리하여 제조하는 것을 특징으로 하는 면역활성 증강용 조성물.
제 1항에 있어서,
상기 효소 가수분해물은 막걸리박에 pectinase 및 alpha-amylase을 순차적으로 또는 동시에 처리하여 제조되는 것을 특징으로 하는 면역활성 증강용 조성물.
제 1항 내지 4항 중 어느 한 항의 면역활성 증강용 조성물을 첨가하여 제조한 막걸리.
1) 막걸리박을 준비하는 단계;및
2) 막걸리 박에 효소를 처리하여 가수분해시키는 단계를 포함하는 면역활성 증강용 조성물의 제조 방법.
제 6항에 있어서,
상기 단계 2)의 효소는 하기 a) 내지 c) 중 하나인 것을 특징으로 하는 면역활성 증강용 조성물의 제조 방법:
a) 1,4-alpha-D-glucan glucano-hydrolase, beta-glucanase, arabinase, cellulase, hemicellulase, xylanase, pectinase 및 polygalacturonase로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 효소;
b) 1,4-alpha-D-glucan glucano-hydrolase, pectinase 또는 cellulase
c) alpha-amylase 또는 gluco-amylase.
제 6항에 있어서,
상기 단계 2)는 막걸리박에 1,4-alpha-D-glucan glucano-hydrolase, beta-glucanase, arabinase, cellulase, hemicellulase, xylanase, pectinase 및 polygalacturonase로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 효소와 alpha-amylase 및 gluco-amylase로 구성되는 군으로부터 선택되는 하나의 효소를 순차적으로 또는 동시에 처리하여 가수분해하는 것을 특징으로 하는 면역활성 증강용 조성물의 제조 방법.
제 6항에 있어서,
상기 단계 2)는 막걸리박에 pectinase 및 alpha-amylase을 순차적으로 또는 동시에 처리하여 가수분해하는 것을 특징으로 하는 면역활성 증강용 조성물의 제조 방법.
1) 막걸리박을 준비하는 단계;
2) 막걸리 박에 효소를 처리하여 가수분해시키는 단계;및
3) 상기 단계 2)에서 제조한 막걸리박 효소 가수분해물을 막걸리에 첨가하는 단계를 포함하는 면역활성 증강용 막걸리의 제조 방법.
제 10항에 있어서,
상기 단계 2)의 효소는 하기 a) 내지 c) 중 하나인 것을 특징으로 하는 면역활성 증강용 막걸리의 제조 방법:
a) 1,4-alpha-D-glucan glucano-hydrolase, beta-glucanase, arabinase, cellulase, hemicellulase, xylanase, pectinase 및 polygalacturonase로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 효소;
b) 1,4-alpha-D-glucan glucano-hydrolase, pectinase 또는 cellulase
c) alpha-amylase 또는 gluco-amylase.
제 10항에 있어서,
상기 단계 2)는 막걸리박에 1,4-alpha-D-glucan glucano-hydrolase, beta-glucanase, arabinase, cellulase, hemicellulase, xylanase, pectinase 및 polygalacturonase로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 효소와 alpha-amylase 및 gluco-amylase로 구성되는 군으로부터 선택되는 하나의 효소를 순차적으로 또는 동시에 처리하여 가수분해하는 것을 특징으로 하는 면역활성 증강용 막걸리의 제조 방법.
제 10항에 있어서,
상기 단계 2)는 막걸리박에 pectinase 및 alpha-amylase을 순차적으로 또는 동시에 처리하여 가수분해하는 것을 특징으로 하는 면역활성 증강용 막걸리의 제조 방법.