KR101113432B1 - 인플루엔자 바이러스 벡터의 패키징을 위한 신호 - Google Patents
인플루엔자 바이러스 벡터의 패키징을 위한 신호 Download PDFInfo
- Publication number
- KR101113432B1 KR101113432B1 KR1020107011520A KR20107011520A KR101113432B1 KR 101113432 B1 KR101113432 B1 KR 101113432B1 KR 1020107011520 A KR1020107011520 A KR 1020107011520A KR 20107011520 A KR20107011520 A KR 20107011520A KR 101113432 B1 KR101113432 B1 KR 101113432B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- virus
- sequence
- vector
- vrna
- incorporation
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
- C12N15/86—Viral vectors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/145—Orthomyxoviridae, e.g. influenza virus
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/525—Virus
- A61K2039/5254—Virus avirulent or attenuated
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/525—Virus
- A61K2039/5256—Virus expressing foreign proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/525—Virus
- A61K2039/5258—Virus-like particles
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
- A61K2039/541—Mucosal route
- A61K2039/543—Mucosal route intranasal
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
- C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
- C12N2760/16122—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
- C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
- C12N2760/16141—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
- C12N2760/16143—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
- C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
- C12N2760/16161—Methods of inactivation or attenuation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
- C12N2760/16211—Influenzavirus B, i.e. influenza B virus
- C12N2760/16222—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
- C12N2760/16211—Influenzavirus B, i.e. influenza B virus
- C12N2760/16241—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
- C12N2760/16243—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
- C12N2760/16211—Influenzavirus B, i.e. influenza B virus
- C12N2760/16261—Methods of inactivation or attenuation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/20011—Rhabdoviridae
- C12N2760/20211—Vesiculovirus, e.g. vesicular stomatitis Indiana virus
- C12N2760/20234—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Virology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
도 2: AL3(MaKS)-13 및 K4(MaKS)-13 돌연변이체의 NA 유전자의 구조. (A) AL3(MaKS)-13은 NA 유전자 코딩 서열의 많은 부분을 제거하는 936 개 뉴클레오티드 결실 (220 내지 1253 개 염기)을 함유한다. 이러한 돌연변이는 또한 TAG 정지 코돈을 결실 밖의 이염기 프레임으로 가져와, 유전자가 NA의 세포질 꼬리, 막횡단 영역, 자루 및 머리부에 상응하는 66-아미노-산 펩티드만을 암호화하도록 한다. (B) K4(MaKS)-13 NA 유전자는 NA 유전자 코딩 서열의 많은 부분을 제거하는 1,066 개 뉴클레오티드 결실 (130 내지 1193 개 염기)을 함유한다. 이러한 돌연변이는 또한 TAG 정지 코돈을 결실 밖의 사염기 프레임으로 가져와, 유전자가 NA 유전자의 세포질 꼬리 및 막횡단 영역에 상응하는 38-아미노-산 펩티드만을 암호화하도록 한다.
도 3: 부모 AM2AL3 바이러스, 부모 K4 바이러스, AL3(MaKS)-13 돌연변이체 및 K4(MaKS)-13 돌연변이체의 시알리다제 활성. 각각의 샘플에 있어서, 바이러스 (5 × 102 PFU)를 형광 시알리다제 기질 (4-메틸엄벨리페릴-α-N-아세틸뉴라민산)의 존재하에 37 ℃에서 1 시간 동안 2배로 배양시켰다. 방출된 4-메틸엄벨리페론의 형광을 360 nm에서 여기되고 460 nm에서 방출되는 형광측정기 (랩시스템즈 (Labsystems) 플로오로스캔 (Fluoroskan) II)로 측정하였다.
도 4a: 야생형 및 NAFLAG 벡터의 개략도.
도 4b: NAFLAG 바이러스 제조 방법의 개략도.
도 4c: NAFLAGWT 바이러스 또는 NA(-) 바이러스에 감염된 MDCK 세포의 면역염색. 상기 세포들을 항-FLAG 모노클로날 항체 (MAb) M2 또는 항-WSN 폴리클로날 항체로 염색하였다.
도 5: 재조합 7 개 절편 인플루엔자 바이러스 및 NAFLAG 바이러스를 위한 경쟁 분석의 개략도.
도 6a: NAFLAG 및 NAFLAGM(-) ("-ATG") 벡터의 개략도.
도 6b: NAFLAGM(-) 바이러스로 감염된 MDCK 세포의 면역염색. 상기 세포들을 항-FLAG 모노클로날 항체 M2 또는 항-WSN 폴리클로날 항체로 염색하였다.
도 7a: FLAG 서열용 NAFLAG 및 NAFLAGM(-)로 감염된 세포의 동일계내 혼성화 분석.
도 7b: NAFLAGWT 바이러스 또는 NAFLAGM(-) 바이러스의 복제 효율.
도 8a: NA 결실 바이러스의 개략도.
도 8b: NA 결실 바이러스의 패키징율.
도 9: 6, 7 또는 8개 절편의 인플루엔자 바이러스의 시간에 따른 바이러스 역가.
도 10: 인플루엔자 바이러스 절편용 혼입 시그널 (점각)을 나타내는 개략도.
도 11a: 인플루엔자 비리온의 전자 현미경 단층촬영도.
도 11b 내지 11f: 인플루엔자 비리온의 전자 현미경 단층촬영도로 발견한 막대균의 컬러 이미지.
도 12: a) A형 인플루엔자 바이러스 및 HA 코딩 서열을 B HA형으로 대체한 A형 바이러스용 바이러스 절편. b) A형 인플루엔자 바이러스 및 HA 코딩 서열을 B HA형으로 대체한 A형 바이러스용 비리온.
도 13: A/B 키메라 HA 구조물의 도면. 뉴만 (Neumann) 등 (1999)이 기재한 바와 같이 pPolI 기재 플라스미드 (pHH21) 중 야생형 A/WSN 바이러스 HA (pPolI-WSN-HA) 및 야생형 B/Lee 바이러스 HA (pPolI-B-HA) 사이에서 키메라 HA 구조물을 제조하였다.
도 14: A/B HA 키메라 바이러스에 의한 B HA형의 표현. 각각의 바이러스로 감염된 MDCK 세포를 감염후 제24시간 고정시키고, 항-A/HA, 항-B/HA 또는 항-A/NP 항체로 면역염색하였다.
도 15: A/B HA 키메라 바이러스의 성장 특성. MDCK 세포를 0.01 TCID50의 MOI에서 각각의 바이러스로 감염시키고, 바이러스의 성장을 모니터링하였다. 유사한 결과를 갖는 두 개의 독립된 실험 중 하나를 나타내었다.
도 16: A/B HA 키메라 바이러스를 접종한 마우스의 B형 바이러스에 대한 항체 반응. a) 마우스 (마우스 3 마리/군)를 각각의 바이러스 (103 TCID50)로 비강 접종시켰다. 접종후 제3주, 코/기관을 세척하고, 혈청 샘플을 마우스로부터 뽑아서 ELISA 측정 중 항-B 바이러스 특이 IgA (코/기관 세척) 또는 IgG (혈청) 항체를 시험하였다. b) 혈청 샘플내 HI 역가도 시험하였다. 각각의 바아는 키메라 바이러스로 감염된 개별적인 마우스를 나타낸다.
도 17: HA vRNA 돌연변이체 및 그의 비리온 혼입 효율의 개략도. 모든 HA RNA 돌연변이체는 (-) 센스 방향을 나타낸다. 각각의 돌연변이체는 HA vRNA (검정 바아)의 정지 코돈, 3' 비코딩 영역의 33 개 뉴클레오티드 및 5' 비코딩 영역의 45 개 뉴클레오티드로 플랭킹된 GFP 오픈 리딩 프레임 (HA 오픈 리딩 프레임을 갖는 프레임내 삽입)을 함유한다. 돌연변이체는 HA 코딩 영역으로부터 유도된 뉴클레오티드의 개수에 따라 명명하였다. HA 코딩 영역은 회색 바아로 나타내었다. 수평 점선은 결실을 나타낸다. 영역의 길이는 비례하지 않는다. HA vRNA 돌연변이체의 VLP로의 혼입 효율은 접종후 제16시간 고정되고 VLP로 감염된 세포 중 GFP로 표현되는 세포의 개수를 NP로 표현되는 세포의 개수로 나누어 측정하였다.
도 18: 플라스미드 발현 돌연변이체 HA vRNA로 형질감염된 293T 세포 중 vRNA 농도. 293T 세포를 pPolIHA(0)GFP(0) 또는 pPolIHA(9)GFP(80) 및 플라스미드 발현 PA, PB1, PB2 및 NP로 형질감염시켰다.
도 19: VSVG(HA)GFP(NA) 바이러스 감염된 세포의 VSV G 및 GFP 발현. MDCK 세포를 VSVG(HA)GFP(NA) 바이러스 또는 WSN 바이러스로 감염시키고 1.0 % 아가로오즈로 오버레이시켰다. 감염된 세포를 37 ℃에서 48 시간 동안 배양하고 플라크를 정상광 하에서 (A, B), 그리고 플라크를 식별하기 위한 한정된 정상광 및 형광 하에서 (C, D) 사진촬영하였다. 세포를 고정시키고 3 % 포름알데히드 중 0.1 % 트리톤-X100 (Triton-X100) 용액이 스며들게 하였다. 벡타스테인 ABC 키트 (Vectastain ABC kit; 미국 캘리포니아주 벌링게임에 소재하는 벡터 (Vector) 제품)를 사용하여 1차 항체 및 바이오티닐화 2차 항체로서 항-VSV G 모노클로날 항체 (E, F), 항-HA 모노클로날 항체 (G, H) 또는 항-NP 모노클로날 항체 (I, J)로 면역 염색하여 바이러스 단백질을 검출하였다.
도 20: VSVG(HA)GFP(NA) 바이러스로의 VSV G 단백질의 혼입. 샘플 완충액 중에서 농축 WNS, VSVG(HA)GFP(NA) 및 VSV 바이러스를 용균하였다. 바이러스 단백질을 2-메르캅토에탄올로 처리하고, 10 % SDS-PAGE로 분리한 후 PVDF 멤브레인으로 이송하여 항-VSV G 모노클로날 항체 또는 항-WSN-HA 모노클로날 항체와 배양하였다. 마커 단백질의 분자량을 좌측에 나타내었다.
도 21: BHK, CHO 및 MDCK 세포 중 VSVG(HA)GFP(NA) 바이러스의 성장 곡선. BHK(a), CHO (b) 및 MDCK (c) 세포를 0.001의 MOI에서 바이러스로 감염시켰다. 감염 후 소정 시점에서 MDCK세포를 사용하여 상등액 중 바이러스 역가를 측정하였다. 이 값은 2회 실험의 평균값이다.
도 22: 돌연변이체 NS vRNA 및 이들의 혼입 효율의 개략도.
도 23: 돌연변이체 M vRNA 및 이들의 혼입 효율의 개략도.
도 24: 두 이종 단백질을 발현하는 A) 바이러스 절편 및 B) 비리온의 개략도.
도 25: 두 이종 단백질 HIV gp160 및 gag의 바이러스 절편과 인플루엔자 바이러스의 개략도.
도 26: Cre/lox를 사용한 불능 바이러스 복제 생산 개략도.
렉틴-내성 세포주에서 인플루엔자 바이러스의 복제* | ||
세포주 | 역가 (TCID50/ml) | |
AM2AL3 | K4 | |
MDCK | 1.8 x 109 | 5.6 x 104 |
MDCK-Sn10 | 5.6 x 108 | 3.2 x 104 |
MDCK-Ma | 1.8 x 108 | 5.6 x 103 |
* AM2AL3 또는 K4 바이러스로 세포를 감염시키고 조직 배양 세포의 50%를 감염시키기 위해 요구되는 투여량 (TCID50)을 결정함으로써 각 세포주의 감수성을 결정하였다. |
렉틴-선택된 세포에서 성장에 적응된 바이러스의 복제* | ||||
세포주 | 역가 (TCID50/ml) | |||
AM2AL3 | AL3(MaKS)-13 | K4 | K4(MaKS)-13 | |
MDCK | 1.8 x 109 | 5.6 x 104 | 5.6 x 104 | 5.6 x 104 |
MaKS | 5.6 x 106 | 5.6 x 104 | 1.8 x 103 | 1.8 x 103 |
수지, MDCK 역가/MaKS 역가 | 321 | 1 | 31 | 0.3 |
* AM2AL3 (나에서 성장됨), K4 (MDCK 세포에서 성장됨), AL3(MaKS)-13 (MaK3 세포에서 성장됨), 또는 K4(MaKS)-13 (MaKs 세포에서 성장됨) 원액 바이러스로 세포를 감염시키고 조직 배양 세포의 50%를 감염시키기 위해 요구되는 투여량 (TCID50)을 결정함으로써 각 세포주의 민감성을 결정하였다. MaKS 세포에서 적응된 두 바이러스 모두 상기 세포에서는 MDCK 세포에서 만큼 [AL3(MaKS)-13] 또는 그보다 더욱 양호하게 [K4(MaKS)-13] 성장하나, 원래의 바이러스는 MDCK 세포에서 더욱 양호하게 성장함을 주지한다. |
HA 구조물 | 세포 배양물에서의 특성a) | 상기 유전자를 보유하는 바이러스의 생성b) | 감염된 세포의 상청액 중의 바이러스 역가b) (TCID50/ml) | 원액의 바이러스 역가c)(TCID50/ml) | ||
세포 표면 발현 | 혈구흡착 | 융합 | ||||
야생형 HA | ||||||
WSN-HA | + | + | + | + | 3.2x107 | 6.3 x 107 |
B-HA | + | + | + | - | NAd ) | |
A/B 키메라 HA | ||||||
ANBH | + | + | + | + | 2.0 x 10 | 6.3 x 102 |
ANSBH | + | + | + | + | 1.1 x 102 | 2.0 x 106 |
ANTBH | + | + | + | + | 2.0 x 104 | 6.3 x 106 |
ANSTBH | + | + | + | + | 1.1 x 106 | 3.6 x 106 |
ANBW | + | - | - | - | NA | |
ANSBW | + | - | - | - | NA | |
a) 각각의 HA 구조물을 A형 폴리머라제- 및 NP-발현 플라스미드와 함께 COS-7 세포 내에서 형질감염시켰다. 형질감염후 48시간째에, 각각의 HA의 생물학적 특성을 분석하였다. b) 야생형 또는 키메라 HA 유전자를 다른 인플루엔자 A 바이러스 유전자와 함께 보유하는 바이러스의 생성을 플라스미드계 역 유전학 시스템에 의해 수행하였다. 형질감염후 48시간째에, 형질감염된 294T 세포의 상청액을 수거하고 감염도에 대해 적정하였다. c) 바이러스 원액을 MDCK 세포로 제조하였다. 세포병변 효과가 개선될 때 바이러스를 수거하였다. d) NA: 이용불가능 |
야생형 바이러스 | 기관내 복제b) | 체중 변화율 (%)C) | 치사율 (%)(사멸수/시험된 수) | ||
비개골 | 폐 | 제5일 | 제14일 | ||
A/WSN-R | 5.0±0.3 | 8.2±0.1 | -27.4±1.1 | NAc ) | 100 (8/8) |
B/Lee-R | 4.7±0.1 | 5.6±0.1 | -19.3±7.9 | NA | 87.5 (7/8) |
A/B 키메라 바이러스 | |||||
ANSBH | 4.0±0.3 | 2.8±0.3 | 2.6±1.0 | 4.6±1.2 | 0 (0/8) |
ANTBH | 5.3±0.3 | 4.9±0.1 | -17.3±0.7 | -8.3±0.4 | 0 (0/8) |
ANTSTBH | 5.3±0.4 | 4.6±0.1 | -20.9±0.3 | -6.2±8.8 | 0 (0/8) |
대조군 (PBS)d) | NA | NA | 2.9±1.3 | 7.1±0.2 | 0 (0/8) |
a) 마우스에게 바이러스 (106 TCID50)로 비내 접종하여 14일 동안 모니터링하였다. 체중 변화를 평균치±표준 오차 (SD (n=3))로서 나타내었다. b) 바이러스 역가를 기관내에서 접종후 3일째에 측정하여 log10TCID50/g의 평균치±SD (n=3)로서 나타내었다. c) NA: 이용불가능 d) 대조군 마우스를 인산염-완충 염수로 모의 접종하였다. |
면역화에 사용된 바이러스a) | 챌린지 후b) | ||
체중 변화 (%) | 생존율 (%) | ||
제5일 | 제14일 | (생존자수/시험체수) | |
야생형 바이러스 | |||
A/WSN-R | -17.5±3.6 | NAc ) | 25(2/8) |
B/Lee-R | 1.8±0.9 | 1.4±0.6 | 100 (8/8) |
A/B 키메라 바이러스 | |||
ANSBH | -5.6±0.8 | -0.7±0.7 | 100 (8/8) |
ANSBH | 0.9±0.9 | 1.9±0.9 | 100 (8/8) |
ANSBH | 1.5±0.2 | 2.9±0.7 | 100 (8/8) |
대조군 (PBS)d) | -20.8±0.5 | NA | 0 (0/8) |
a) 마우스들을 나열된 각각의 바이러스로 비강내 감염시켰다. b) 면역화후 제4주에, 마우스를 야생형B/Lee-R 바이러스(50LD50)로 비강내 챌린지시키고, 챌린지후 14일 동안 모니터링하였다. 체중 변화를 평균값 SD (n=3)로 나타냈다. c) NA : 데이타 없음 d) 대조군 마우스를 PBS로 모의-면역화시키고 챌린지시켰다. |
Claims (34)
- 인플루엔자 바이러스 혼입 서열을 포함하는 인플루엔자 바이러스 벡터로서,
상기 벡터가 인플루엔자 바이러스 HA vRNA의 3' 비코딩 영역에 상응하는 서열, 3' HA 혼입 서열을 포함하는 HA 코딩 서열, 유전자 생성물을 코딩하는 이종 오픈 리딩 프레임에 대한 핵산 절편, 및 5' HA 혼입 서열 및 HA vRNA의 5' 비코딩 영역을 포함하는 HA 코딩 서열을 포함하며,
여기서, 3' HA 혼입 서열을 포함하는 HA 코딩서열은 5'HA 코딩서열의 3개 이상의 뉴클레오티드를 포함하고, 5' HA 혼입 서열을 포함하는 HA 코딩서열은 3'HA 코딩서열의 1011개 이하의 뉴클레오티드를 포함하며,
상기 벡터 내의 HA 코딩 서열은 기능적 HA를 코딩하지 않는 것인,
인플루엔자 바이러스 벡터. - 제1항에 있어서, 5' HA 혼입 서열이 HA에 대한 80개의 3' 코딩 뉴클레오티드에 상응하는 80개 이상의 뉴클레오티드를 포함하는 것인 벡터.
- 제1항에 있어서, 5' HA 혼입 서열이 HA에 대한 291개의 3' 코딩 뉴클레오티드에 상응하는 291개 이상의 뉴클레오티드를 포함하는 것인 벡터.
- 제1항에 있어서, 3' HA 혼입 서열이 HA에 대한 최초 9개의 코딩 뉴클레오티드에 상응하는 9개 이상의 뉴클레오티드를 포함하는 것인 벡터.
- 제1항에 있어서, 이종 핵산 절편이 내부 리보솜 진입 서열에 상응하는 서열을 포함하는 것인 벡터.
- 제1항에 있어서, 이종 핵산 절편이 마커 유전자, 병원체의 면역원성 단백질 또는 펩티드, 또는 치료용 단백질에 대한 오픈 리딩 프레임에 상응하는 서열을 포함하는 것인 벡터.
- 제1항에 있어서, 혼입 서열이 A형 인플루엔자 바이러스로부터 유래되는 것인 벡터.
- 제1항에 있어서, 혼입 서열이 B형 인플루엔자 바이러스로부터 유래되는 것인 벡터.
- 제1항에 있어서, 이종 핵산 절편이 또다른 핵산 절편에 융합되어 융합 단백질을 코딩하는 것인 벡터.
- 제1항의 벡터에 상응하는 vRNA를 포함하는 재조합 인플루엔자 바이러스.
- 제10항에 있어서, 이종 핵산 절편이 마커 유전자, 병원체의 면역원성 단백질 또는 펩티드, 또는 치료용 단백질에 대한 오픈 리딩 프레임에 상응하는 서열을 포함하는 것인 재조합 바이러스.
- 제11항에 있어서, 오픈 리딩 프레임이 인플루엔자 바이러스 NA 단백질을 코딩하는 것인 재조합 바이러스.
- 제11항에 있어서, 이종 핵산 절편이 막횡단 단백질, 막 융합 활성을 갖는 단백질, 또는 바이러스 캡시드 단백질에 대한 오픈 리딩 프레임에 상응하는 서열을 포함하는 것인 재조합 바이러스.
- 제11항에 있어서, 이종 핵산 절편이 수포성 구내염 바이러스 G 단백질 또는 HA 단백질에 대한 오픈 리딩 프레임에 상응하는 서열을 포함하는 것인 재조합 바이러스.
- 제14항에 있어서, 인플루엔자 바이러스 HA 단백질이 B형 HA 단백질인 재조합 바이러스.
- 제10항의 재조합 바이러스와 세포를 접촉시키는 것, 및 이종 핵산 절편에 의해 코딩되는 생성물이 세포에서 발현되는지를 검출 또는 결정하는 것을 포함하는, 세포에서의 이종 핵산 절편의 발현 방법.
- 제1항에 있어서, 벡터에 상응하는 vRNA가, 세포 내에 존재하는 경우에, 상응하는 야생형 vRNA에 비해 10% 이상의 효율로 비리온 내에 패키징되는 것인 벡터.
- 제1항에 있어서, 벡터에 상응하는 vRNA가, 세포 내에 존재하는 경우에, 상응하는 야생형 vRNA에 비해 30% 이상의 효율로 비리온 내에 패키징되는 것인 벡터.
- 제1항에 있어서, 벡터에 상응하는 vRNA가, 세포 내에 존재하는 경우에, 상응하는 야생형 vRNA에 비해 60% 이상의 효율로 비리온 내에 패키징되는 것인 벡터.
- 인플루엔자 바이러스 HA vRNA의 3' 비코딩 영역에 상응하는 서열, 3' HA 혼입 서열을 포함하는 HA 코딩 서열, 유전자 생성물을 코딩하는 이종 오픈 리딩 프레임에 대한 핵산 절편, 및 5' HA 혼입 서열 및 HA vRNA의 5' 비코딩 영역을 포함하는 HA 코딩 서열을 포함하는 벡터로서,
여기서, 3' HA 혼입 서열을 포함하는 HA 코딩서열은, 5'HA 코딩서열의 3개 이상의 뉴클레오티드를 포함하고, 5' HA 혼입 서열을 포함하는 HA 코딩서열은 3'HA 코딩서열의 1011개 이하의 뉴클레오티드를 포함하며,
상기 벡터 내의 HA 코딩 서열은 기능적 HA를 코딩하지 않는 것인,
벡터. - 인플루엔자 바이러스 혼입 서열을 포함하는 인플루엔자 바이러스 벡터로서,
상기 벡터가 인플루엔자 바이러스 HA vRNA의 3' 비코딩 영역에 상응하는 서열, 3' HA 혼입 서열을 포함하는 HA 코딩 서열, 유전자 생성물을 코딩하는 이종 오픈 리딩 프레임에 대한 핵산 절편, 및 5' HA 혼입 서열 및 HA vRNA의 5' 비코딩 영역을 포함하는 HA 코딩 서열을 포함하며,
여기서, 3' HA 혼입 서열을 포함하는 HA 코딩서열은 5'HA 코딩서열의 966개 이하의 뉴클레오티드를 포함하고, 5' HA 혼입 서열을 포함하는 HA 코딩서열은 3'HA 코딩서열의 54개 이상의 뉴클레오티드를 포함하며,
상기 벡터 내의 HA 코딩 서열은 기능적 HA를 코딩하지 않는 것인,
인플루엔자 바이러스 벡터. - 인플루엔자 바이러스 HA vRNA의 3' 비코딩 영역에 상응하는 서열, 3' HA 혼입 서열을 포함하는 HA 코딩 서열, 유전자 생성물을 코딩하는 이종 오픈 리딩 프레임에 대한 핵산 절편, 및 5' HA 혼입 서열 및 HA vRNA의 5' 비코딩 영역에 상응하는 서열을 포함하는 벡터로서,
여기서, 3' HA 혼입 서열을 포함하는 HA 코딩서열은 5'HA 코딩서열의 966개 이하의 뉴클레오티드를 포함하고, 5' HA 혼입 서열을 포함하는 HA 코딩서열은 3'HA 코딩서열의 54개 이상의 뉴클레오티드를 포함하며,
상기 벡터 내의 HA 코딩 서열은 기능적 HA를 코딩하지 않는 것인,
벡터. - 제1항 또는 제20항에 있어서, 5' HA 혼입 서열이 3'HA 코딩서열의 513개 이하의 뉴클레오티드를 포함하는 것인, 벡터.
- 제21항 또는 제22항에 있어서, 3' HA 혼입 서열이 5'HA 코딩서열의 468 이하의 뉴클레오티드를 포함하는 것인, 벡터.
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US35653802P | 2002-02-13 | 2002-02-13 | |
US60/356,538 | 2002-02-13 | ||
US43867903P | 2003-01-07 | 2003-01-07 | |
US60/438,679 | 2003-01-07 | ||
PCT/US2003/004233 WO2003068923A2 (en) | 2002-02-13 | 2003-02-12 | Signal for packaging of influenza virus vectors |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020047012647A Division KR101011410B1 (ko) | 2002-02-13 | 2003-02-12 | 인플루엔자 바이러스 벡터의 패키징을 위한 신호 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
KR20100065405A KR20100065405A (ko) | 2010-06-16 |
KR101113432B1 true KR101113432B1 (ko) | 2012-02-29 |
Family
ID=34380774
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020107011520A KR101113432B1 (ko) | 2002-02-13 | 2003-02-12 | 인플루엔자 바이러스 벡터의 패키징을 위한 신호 |
Country Status (13)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US7226774B2 (ko) |
EP (2) | EP1572910B1 (ko) |
JP (1) | JP4430942B2 (ko) |
KR (1) | KR101113432B1 (ko) |
CN (1) | CN103540614B (ko) |
AU (2) | AU2003219745B8 (ko) |
BR (1) | BRPI0307679A2 (ko) |
CA (1) | CA2492097C (ko) |
ES (2) | ES2806412T3 (ko) |
HU (2) | HUE027448T2 (ko) |
IL (2) | IL163546A (ko) |
MX (1) | MXPA04007914A (ko) |
WO (1) | WO2003068923A2 (ko) |
Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US8298805B2 (en) | 2002-02-13 | 2012-10-30 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Signal for packaging of influenza virus vectors |
US10494613B2 (en) | 2015-08-28 | 2019-12-03 | Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) | Generation of infectious influenza viruses from virus-like particles |
US10513692B2 (en) | 2011-08-26 | 2019-12-24 | Wisconsin Alumni Research Foundation (“WARF”) | Influenza viruses with mutant PB2 segment as live attenuated vaccines |
US11802273B2 (en) | 2014-06-20 | 2023-10-31 | Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) | Mutations that confer genetic stability to additional genes in influenza viruses |
US11807872B2 (en) | 2019-08-27 | 2023-11-07 | Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) | Recombinant influenza viruses with stabilized HA for replication in eggs |
US11851648B2 (en) | 2019-02-08 | 2023-12-26 | Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) | Humanized cell line |
Families Citing this family (45)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2002068632A2 (en) | 2001-02-23 | 2002-09-06 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Methods to identify mutant cells with altered sialic acid |
WO2004112831A2 (en) * | 2003-05-28 | 2004-12-29 | Wisconsin Alumni Research Foundation | High titer recombinant influenza viruses for vaccines and gene therapy |
US7968101B2 (en) | 2004-11-19 | 2011-06-28 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Recombinant influenza vectors with tandem transcription units |
US7959929B2 (en) | 2005-04-21 | 2011-06-14 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | Materials and methods for respiratory disease control in canines |
US11865172B2 (en) | 2005-04-21 | 2024-01-09 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | Materials and methods for respiratory disease control in canines |
KR20080025171A (ko) * | 2005-06-21 | 2008-03-19 | 메드이뮨 백신즈 인코포레이티드 | 이종성 프로테아제를 발현시키기 위한 방법 및 조성물 |
US7790434B2 (en) * | 2005-06-21 | 2010-09-07 | Medimmune, Llc | Methods and compositions for expressing negative-sense viral RNA in canine cells |
CN104017775B (zh) * | 2005-10-19 | 2023-05-30 | 佛罗里达大学研究基金公司 | 能够感染犬科动物的流感病毒及其用途 |
US9254318B2 (en) | 2006-03-31 | 2016-02-09 | Wisconsin Alumni Research Foundation | High titer recombinant influenza viruses for vaccines |
DK2016194T3 (en) | 2006-04-19 | 2015-06-15 | Medimmune Llc | METHODS AND COMPOSITIONS FOR EXPRESSION OF VIRAL NEGATIVE SENSE RNA IN DOG CELLS |
US8778353B2 (en) * | 2006-05-01 | 2014-07-15 | Technovax, Inc. | Influenza virus-like particle (VLP) compositions |
US9101578B2 (en) * | 2006-05-01 | 2015-08-11 | Technovax, Inc. | Polyvalent influenza virus-like particle (VLP) compositions |
KR100702034B1 (ko) * | 2006-05-12 | 2007-03-30 | 삼성전자주식회사 | 반도체 장치, 이 장치의 전원 노이즈 감소 방법 및 인쇄회로 기판 |
WO2008147496A2 (en) * | 2007-05-04 | 2008-12-04 | Warf - Wisconsin Alumni Research Foundation | Neuraminidase-deficient live influenza vaccines |
WO2008148104A1 (en) * | 2007-05-25 | 2008-12-04 | Novavax, Inc. | Novel vlps derived from cells that do not express a viral matrix or core protein |
PT2155880T (pt) * | 2007-06-15 | 2016-11-18 | Medicago Inc | Modificação da produção de glicoproteína em plantas |
US9474798B2 (en) | 2007-06-18 | 2016-10-25 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Influenza M2 protein mutant viruses as live influenza attenuated vaccines |
CA2615372A1 (en) | 2007-07-13 | 2009-01-13 | Marc-Andre D'aoust | Influenza virus-like particles (vlps) comprising hemagglutinin |
CN103122354B (zh) | 2007-11-27 | 2018-03-23 | 麦迪卡格公司 | 表达血凝素之转基因植物中生产的重组流感病毒样颗粒(vlp) |
WO2010003235A1 (en) | 2008-07-08 | 2010-01-14 | Medicago Inc. | Soluble recombinant influenza antigens |
DK2318530T3 (en) * | 2008-07-18 | 2016-10-03 | Medicago Inc | Ny epitope to immunization against influenza |
EP2413962A1 (en) | 2009-03-30 | 2012-02-08 | Mount Sinai School of Medicine | Influenza virus vaccines and uses thereof |
NZ597401A (en) * | 2009-06-24 | 2013-09-27 | Medicago Inc | Chimeric influenza virus-like particles comprising hemagglutinin |
JP5845180B2 (ja) * | 2009-07-30 | 2016-01-20 | モウント シナイ スクール オフ メディシネ | インフルエンザウイルス及びそれらの使用 |
KR20180026562A (ko) | 2009-09-22 | 2018-03-12 | 메디카고 인코포레이티드 | 식물-유래 단백질의 제조방법 |
JP2013507990A (ja) | 2009-10-26 | 2013-03-07 | ダブリュエーアールエフ−ウィスコンシン アラムナイ リサーチ ファウンデーション | ベロ細胞において増強された複製を有する高力価の組換えインフルエンザウイルス |
EP2536425B1 (en) | 2010-02-18 | 2019-06-19 | Icahn School of Medicine at Mount Sinai | Vaccines for use in the prophylaxis and treatment of influenza virus disease |
US10130697B2 (en) | 2010-03-23 | 2018-11-20 | Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) | Vaccines comprising mutant attenuated influenza viruses |
KR20130075732A (ko) | 2010-03-30 | 2013-07-05 | 마운트 시나이 스쿨 오브 메디슨 | 인플루엔자 바이러스 백신 및 이의 용도 |
WO2011156273A1 (en) * | 2010-06-06 | 2011-12-15 | Mount Sinai School Of Medicine | Recombinant rna viruses and uses thereof |
TWI620816B (zh) | 2011-03-23 | 2018-04-11 | 苜蓿股份有限公司 | 植物衍生蛋白回收方法 |
EP2758075B1 (en) | 2011-09-20 | 2023-05-03 | Icahn School of Medicine at Mount Sinai | Influenza virus vaccines and uses thereof |
AU2013362935B2 (en) | 2012-12-18 | 2018-10-04 | Icahn School Of Medicine At Mount Sinai | Influenza virus vaccines and uses thereof |
WO2014159960A1 (en) | 2013-03-14 | 2014-10-02 | Icahn School Of Medicine At Mount Sinai | Antibodies against influenza virus hemagglutinin and uses thereof |
US9950057B2 (en) | 2013-07-15 | 2018-04-24 | Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) | High titer recombinant influenza viruses with enhanced replication in MDCK or vero cells or eggs |
US10736956B2 (en) | 2015-01-23 | 2020-08-11 | Icahn School Of Medicine At Mount Sinai | Influenza virus vaccination regimens |
US10633422B2 (en) | 2015-06-01 | 2020-04-28 | Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) | Influenza virus replication by inhibiting microRNA lec7C binding to influenza viral cRNA and mRNA |
WO2017007839A1 (en) | 2015-07-06 | 2017-01-12 | Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) | Improved influenza virus replication for vaccine development |
CN109477074B (zh) | 2016-02-19 | 2023-01-24 | 威斯康星旧生研究基金会 | 用于疫苗开发的改进的乙型流感病毒复制 |
WO2017218624A1 (en) | 2016-06-15 | 2017-12-21 | Icahn School Of Medicine At Mount Sinai | Influenza virus hemagglutinin proteins and uses thereof |
US11254733B2 (en) | 2017-04-07 | 2022-02-22 | Icahn School Of Medicine At Mount Sinai | Anti-influenza B virus neuraminidase antibodies and uses thereof |
JP2022527235A (ja) | 2019-01-23 | 2022-06-01 | 義裕 河岡 | インフルエンザウイルスにおける付加的遺伝子に遺伝的安定性を付与する突然変異 |
US11390649B2 (en) | 2019-05-01 | 2022-07-19 | Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) | Influenza virus replication for vaccine development |
CN114908122B (zh) * | 2021-02-07 | 2024-05-07 | 广州恩宝生物医药科技有限公司 | 一种用于表达外源蛋白的新型流感病毒载体及其构建方法 |
CN113069540B (zh) * | 2021-03-15 | 2022-02-22 | 广州恩宝生物医药科技有限公司 | 一种基于流感病毒载体的新型冠状病毒疫苗及其制备方法 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2001079273A2 (en) * | 2000-04-14 | 2001-10-25 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Viruses comprising mutated ion channel protein |
Family Cites Families (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5786199A (en) * | 1989-08-28 | 1998-07-28 | The Mount Sinai School Of Medicine Of The City University Of New York | Recombinant negative strand RNA virus expression systems and vaccines |
US5854037A (en) * | 1989-08-28 | 1998-12-29 | The Mount Sinai School Of Medicine Of The City University Of New York | Recombinant negative strand RNA virus expression systems and vaccines |
US5166057A (en) | 1989-08-28 | 1992-11-24 | The Mount Sinai School Of Medicine Of The City University Of New York | Recombinant negative strand rna virus expression-systems |
US6001634A (en) * | 1989-08-28 | 1999-12-14 | Palese; Peter | Recombinant negative strand RNA viruses |
US5658772A (en) | 1989-12-22 | 1997-08-19 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Site-specific recombination of DNA in plant cells |
US6843996B1 (en) * | 1995-06-05 | 2005-01-18 | Medimmune Vaccines, Inc. | Immunogenic composition comprising an influenza virus with a temperature sensitive PB2 mutation |
US6271011B1 (en) * | 1996-10-15 | 2001-08-07 | The University Of Georgia Research Foundation, Inc. | Pasteurella neuraminidase coding sequences and diagnostic methods |
ES2290024T3 (es) * | 1999-04-06 | 2008-02-16 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Virus de la gripe recombinantes para vacunas y terapia genica. |
ATE353370T1 (de) | 1999-07-14 | 2007-02-15 | Sinai School Medicine | In vitro-rekonstitution von segmentierten, negativstrang-rna-viren |
US20040241139A1 (en) * | 2000-07-20 | 2004-12-02 | Gerd Hobom | Recombinant influenza viruses with bicistronic vRNAs coding for two genes in tandem arrangement |
EP1201760A1 (en) | 2000-10-30 | 2002-05-02 | ARTEMIS Pharmaceuticals GmbH | Influenza virus vector for human dendritic cells |
US7226774B2 (en) | 2002-02-13 | 2007-06-05 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Signal for packaging of influenza virus vectors |
EP1812564A2 (en) | 2004-11-11 | 2007-08-01 | Solvay Pharmaceuticals B.V. | Defective influenza virus particles |
US9254318B2 (en) * | 2006-03-31 | 2016-02-09 | Wisconsin Alumni Research Foundation | High titer recombinant influenza viruses for vaccines |
WO2008147496A2 (en) | 2007-05-04 | 2008-12-04 | Warf - Wisconsin Alumni Research Foundation | Neuraminidase-deficient live influenza vaccines |
-
2003
- 2003-02-12 US US10/366,630 patent/US7226774B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-02-12 CN CN201310400039.8A patent/CN103540614B/zh not_active Expired - Lifetime
- 2003-02-12 BR BRPI0307679A patent/BRPI0307679A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2003-02-12 WO PCT/US2003/004233 patent/WO2003068923A2/en active Application Filing
- 2003-02-12 KR KR1020107011520A patent/KR101113432B1/ko active IP Right Grant
- 2003-02-12 HU HUE03716017A patent/HUE027448T2/en unknown
- 2003-02-12 HU HUE15197386A patent/HUE050222T2/hu unknown
- 2003-02-12 EP EP03716017.3A patent/EP1572910B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-02-12 AU AU2003219745A patent/AU2003219745B8/en not_active Expired
- 2003-02-12 JP JP2003568038A patent/JP4430942B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2003-02-12 ES ES15197386T patent/ES2806412T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2003-02-12 CA CA2492097A patent/CA2492097C/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-02-12 ES ES03716017.3T patent/ES2563402T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2003-02-12 EP EP15197386.4A patent/EP3009507B1/en not_active Expired - Lifetime
-
2004
- 2004-08-13 MX MXPA04007914A patent/MXPA04007914A/es active IP Right Grant
- 2004-08-15 IL IL163546A patent/IL163546A/en active IP Right Grant
-
2006
- 2006-08-24 US US11/509,249 patent/US7585657B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2008
- 2008-07-17 AU AU2008203186A patent/AU2008203186B2/en not_active Expired
-
2009
- 2009-05-21 US US12/470,287 patent/US8298805B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2011
- 2011-02-20 IL IL211324A patent/IL211324A0/en active IP Right Grant
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2001079273A2 (en) * | 2000-04-14 | 2001-10-25 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Viruses comprising mutated ion channel protein |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
Developments in Biological Standardization, 1994, 82:237-246* |
Journal of Virology, 1993, 67(11):6762-6767 |
Journal of Virology, 1994, 68(6):3486-3490 |
Cited By (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US8298805B2 (en) | 2002-02-13 | 2012-10-30 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Signal for packaging of influenza virus vectors |
US10513692B2 (en) | 2011-08-26 | 2019-12-24 | Wisconsin Alumni Research Foundation (“WARF”) | Influenza viruses with mutant PB2 segment as live attenuated vaccines |
US11384339B2 (en) | 2011-08-26 | 2022-07-12 | Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) | Influenza viruses with mutant PB2 gene segment as live attenuated vaccines |
US11802273B2 (en) | 2014-06-20 | 2023-10-31 | Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) | Mutations that confer genetic stability to additional genes in influenza viruses |
US10494613B2 (en) | 2015-08-28 | 2019-12-03 | Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) | Generation of infectious influenza viruses from virus-like particles |
US11180737B2 (en) | 2015-08-28 | 2021-11-23 | Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) | Generation of infectious influenza viruses from virus-like particles |
US11851648B2 (en) | 2019-02-08 | 2023-12-26 | Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) | Humanized cell line |
US11807872B2 (en) | 2019-08-27 | 2023-11-07 | Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) | Recombinant influenza viruses with stabilized HA for replication in eggs |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
KR101113432B1 (ko) | 인플루엔자 바이러스 벡터의 패키징을 위한 신호 | |
US20210252130A1 (en) | Vaccines comprising mutant attenuated influenza viruses | |
US10119124B2 (en) | Influenza M2 protein mutant viruses as live influenza attenuated vaccines | |
US20080009031A1 (en) | Mutant cells with altered sialic acid | |
JP2018530314A (ja) | ウイルス様粒子からの感染性インフルエンザウイルスの生成 | |
CA2816242C (en) | Signal for packaging of influenza virus vectors | |
JP4456169B2 (ja) | インフルエンザウイルスベクターのパッケージングのためのシグナル |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A107 | Divisional application of patent | ||
A201 | Request for examination | ||
E902 | Notification of reason for refusal | ||
E902 | Notification of reason for refusal | ||
E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
GRNT | Written decision to grant | ||
FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20150116 Year of fee payment: 4 |
|
FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20160104 Year of fee payment: 5 |
|
FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20170102 Year of fee payment: 6 |
|
FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20180103 Year of fee payment: 7 |
|
FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20190103 Year of fee payment: 8 |
|
FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20200103 Year of fee payment: 9 |