KR100826723B1 - 식물세포 유래 펙틴 - Google Patents
식물세포 유래 펙틴 Download PDFInfo
- Publication number
- KR100826723B1 KR100826723B1 KR1020067021673A KR20067021673A KR100826723B1 KR 100826723 B1 KR100826723 B1 KR 100826723B1 KR 1020067021673 A KR1020067021673 A KR 1020067021673A KR 20067021673 A KR20067021673 A KR 20067021673A KR 100826723 B1 KR100826723 B1 KR 100826723B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- pectin
- acid
- culture
- weight
- molecular weight
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/0006—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid
- C08B37/0045—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid alpha-D-Galacturonans, e.g. methyl ester of (alpha-1,4)-linked D-galacturonic acid units, i.e. pectin, or hydrolysis product of methyl ester of alpha-1,4-linked D-galacturonic acid units, i.e. pectinic acid; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
- A61K8/73—Polysaccharides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
- A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
- A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
- A61K8/9789—Magnoliopsida [dicotyledons]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/16—Emollients or protectives, e.g. against radiation
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/04—Polysaccharides, i.e. compounds containing more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic bonds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q1/00—Make-up preparations; Body powders; Preparations for removing make-up
- A61Q1/02—Preparations containing skin colorants, e.g. pigments
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q1/00—Make-up preparations; Body powders; Preparations for removing make-up
- A61Q1/02—Preparations containing skin colorants, e.g. pigments
- A61Q1/08—Preparations containing skin colorants, e.g. pigments for cheeks, e.g. rouge
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Birds (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Botany (AREA)
- Mycology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Cosmetics (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
본 발명의 과제는, 종래부터 식물로부터의 추출에 의해 얻어지고 있는 펙틴에 비하여 분자량이 더 높은 펙틴의 특성을 알아내서, 다량으로 공급할 수 있는 방법을 제공하는 것이다.
식물로부터 칼루스를 유도하고, 얻어진 칼루스를 더 배양함으로써, 배양물 또는 배양액 중에 고분자량의 펙틴을 생산한다. 그 후, 얻어진 배양물 또는 배양액으로부터 분리 정제하여 목적의 펙틴을 얻는다. 이와 같이 하여 얻어진 본 발명의 펙틴은 보습제로서 우수한 성질을 가져서, 화장품 소재로서 우수하다.
펙틴, 보습제, 칼루스
Description
본 발명은 세포 배양물로부터 얻어지는 펙틴과 그것을 함유하는 화장료에 관한 것이다. 더욱 상세하게는, 니겔라속 식물의 세포 배양물로부터 얻어지는 펙틴과 보습제로서 사용되는 고분자량의 펙틴에 관한 것이다.
많은 식물의 각 기관에는 펙틴질이라 불리는 다당류가 포함되어 있고, 분열 조직이나 유조직에 많이 존재하고 있다. 펙틴질이란 식물체내 또는 식물체로부터 얻어지는 콜로이드 상태의 탄수화물로, 갈락투론산기를 많이 함유하고, 그것이 쇄상 결합하고 있는 1군의 물질이다. 그 존재 형태는 식물의 세포벽 성분으로서 셀룰로오스, 헤미셀룰로오스, 리그닌, 단백질, 무기질 등과 결합하여, 물에 불용의 프로토 펙틴으로 불리는 형태이다. 펙틴질 중에서 수용성이고, 적당한 조건에서 당 및 산과 겔화 하는 물질이 펙틴으로 불리어진다.
펙틴의 일반적인 제조는 (1) 식물 출발 재료로부터의 고온 산성하에서의 추출, (2) 액체 추출물의 정제, 및 (3) 액체로부터의 추출 펙틴의 단리 공정으로 이루어진다. 그 중에서, 산추출 단계에서는, 식물 재료를 질산, 황산, 염화수소산 또는 다른 무기 혹은 유기산과 같은 희석산을 사용하여, 통상 pH 1 ~ 2, 온도 80℃ ~ 100℃의 조건에서 처리한다. 일반적으로 사용되는 식물 출발 재료는, 쥬스의 제조 에서 얻어지는 감귤류의 과피 및 사과 쥬스 및 사과주 제조에서 얻어지는 사과의 압착 찌꺼기가 사용되고 있지만, 그들의 식물 출발 재료로부터 얻어지는 펙틴의 분자량은 6×104 ~ 2×105에 지나지 않는다.
식물세포를 액체 배양기 중에서 배양함으로써, 펙틴이 얻어짐은 알려져 있다. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, vol. 85, p. 2618-2622 (1988년)에는, 다이즈 배양 세포로부터 분자량 1.8×104의 펙틴이 액체 중에 방출되는 것이 보고되고 있지만, 그 생산량은 13.4 mg/l로 약간이다. 또한, 상기의 감귤류 등의 목본성 식물은 세포벽 중의 페놀성 물질의 함량이 많고, 딱딱한 조직이기 때문에 조직배양이 곤란하여, 펙틴의 생산에는 적합하지 않다. 그 때문에, 배양에 의해 펙틴을 다량으로 생산할 수 있는 식물은 알려져 있지 않다.
WO 9636693호 공보에는, 많은 식물세포에 DNA 메틸화 저해제로 자극을 주어, 펙틴 단편이 얻어짐이 개시되어 있다. 그러나, 동 공보에는, 얻어지는 펙틴의 분자량이나 생산량에 대해서는 어느 것도 개시되어 있지 않다.
펙틴은 에스테르화도, 분자량의 차이에 따라, 다양한 특성을 가지고 있고, 겔화제, 증점제, 안정제 등으로서, 대부분은 식품 분야에 이용되고 있다. 에스테르화의 정도를 나타내는 에스테르화도 (DE)는, 전체 갈락투론산 (전체 카르복실기) 중에 차지하는 에스테르화된 갈락투론산 (카르복실기)의 비율을 나타내는 수치 (%)이고, 메틸 에스테르화도의 고저에 따라, 고메톡실 펙틴 (HM 펙틴)과 저메톡실 펙틴 (LM 펙틴)으로 분류된다. 통상, DE가 50%보다 높은 것을 HM 펙틴, 50% 이하의 것을 LM 펙틴이라 불리고 있다. 일반적으로, 상기한, 식물 출발 재료로부터의 고온 산성 조건하에서 추출되는 펙틴의 다수는 HM 펙틴이고, LM 펙틴을 얻기 위해서는 산, 알칼리, 효소 혹은 암모니아를 더 사용하여 탈메틸화할 필요가 있다. 감귤류의 과피로부터의 펙틴을 추출할 때, 추출시의 고온 산성 조건이나 탈메틸화 처리에 의해 에스테르의 가수분해와 동시에 당쇄가 절단되어 분자량이 저하하는 결점이 있었다. 그 결과, 고분자량의 펙틴에는 다양한 특성을 가지고 있는 것이 기대되지만, 그러한 펙틴을 안정적으로 제조하는 방법은 알려지지 않았다.
펙틴을 화장료의 1성분으로서 사용하는 것은 이미 알려져 있다. 화장료에 이용되는 펙틴은 오로지 분자량이 6×104 ~ 2×105의 펙틴이고, 그들은 겔화제, 증점제, 안정제로서, 유효 화장 성분의 보조제로서 첨가되고 있을 뿐이고, 펙틴을 보습제의 유효 성분으로서 이용하는 것은 알려지지 않았다.
[특허 문헌 1] WO 9636693호
[비특허 문헌 1] Y. Hayashi, K. Yoshida, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, vol. 85, p. 2618-2622 (1988년)
[발명의 개시]
[발명이 해결 하려고 하는 과제]
상술한 바와 같이 종래의 식물 조직으로부터 추출하여 얻어지는 시판 펙틴의 분자량은 6×104 ~ 2×105이다. 발명이 해결하려고 하는 과제는 분자량이 더 높은 펙틴의 특성을 알아내서, 분자량이 높은 펙틴을 다량으로 공급할 수 있는 방법을 제공하는 것이다.
[과제를 해결하기 위한 수단]
상기 과제를 해결하기 위하여 본 발명자들은, 종래의 펙틴에 비하여 분자량이 더 높은 펙틴을 얻기 위해서, 여러 식물이 산출하는 펙틴을 조사하고, 또 상기 펙틴을 대량으로 제조하는 방법을 예의 검토한 결과, 니겔라속 식물을 원료 식물로 하여 칼루스를 유도하고, 세포를 더 배양함으로써, 종래의 시판 펙틴에 비하여, 보다 고분자량의 펙틴이 얻어짐과 대량으로 제조할 수 있음을 알아냈다. 그리고, 얻어진 보다 고분자량의 펙틴은 수분 유지 능력이 우수하여 보습제로서 이용할 수 있음을 알아냈다. 이들 지견에 의거하여 본 발명을 완성했다. 즉, 본 발명은 이하와 같다.
[1] 구성당으로서 갈락투론산을 70 ~ 90 몰% 함유하고, 또한, 겔여과 크로마토그래피에 의해 측정한 분자량의 범위가 1×104 ~ 5×107이고, 또 피크를 나타내는 분자량이 2×105 ~ 1×107의 범위인 것을 특징으로 하는 펙틴.
[2] 구성당의 몰비가 갈락투론산: 아라비노스: 갈락토오스: 글루쿠론산: 글루코오스: 자일로오스: 람노스: 만노스: 프록토오스= 7 ~ 9 : 0.4 ~ 0.7 : 0.4 ~ 0.6 : 0.1 ~ 0.6 : 0.05 ~ 0.5 : 0.04 ~ 0.4 : 0 ~ 0.1 : 0 ~ 0.08 : 0 ~ 0.05인 것을 특징으로 하는 [1] 기재의 펙틴.
[3] 니겔라속 식물의 세포를 배양함으로써 얻어지는 배양물 또는 배양액으로부터 분리, 회수되는 펙틴인 것을 특징으로 하는 [1] 또는 [2] 기재의 펙틴.
[4] 니겔라속 식물이 크로타네소우 (Nigella damascena) 또는 니겔라·사티바 (Nigella sativa)인 것을 특징으로 하는 [3] 기재의 펙틴.
[5] [1] 내지 [4] 중 어느 하나에 기재된 펙틴의 보습제로서의 사용.
[6] [1] 내지 [4] 중 어느 하나에 기재된 펙틴을 함유하는 화장료.
[7] 니겔라속 식물의 세포를 배양함으로써 얻어지는 배양물 또는 배양액으로부터 [1] 내지 [4]의 어느 하나에 기재된 펙틴을 분리, 회수하여 얻어지는 것을 특징으로 하는, [1] 내지 [4]의 어느 하나에 기재된 펙틴의 제조 방법.
[발명의 효과]
본 발명의 식물세포 유래의 펙틴은 종래의 방법으로 얻어지는 시판 펙틴에 비하여, 분자량이 더 높다. 그 때문에, 본 발명의 펙틴은 수분 유지 능력이 우수하다. 또한, 겔 강도도 우수하고 또 점성은 낮다. 본 발명의 펙틴을 화장료 소재로서 사용했을 경우, 양호한 사용감을 발휘하고, 화장료의 보습제로서 최적이다.
도 1은 실시예 12 (2)의 결과를 나타내는 도면 (그래프)이다. 도면 중, A는 분자량의 범위, B는 분자량의 피크를 나타낸다.
도 2는 시험예 2의 결과를 나타내는 도면 (그래프)이다. 도면 중, 삼각은 본 발명 펙틴, 사각은 히알루론산 나트륨, 원은 시판 펙틴, x는 물을 나타낸다.
발명을 실시하기 위한 최선의 형태
본 발명의 펙틴은 식물의 세포를 배양함으로써 얻어지는 배양물 또는 배양액으로부터 분리, 회수하여 얻어지는 펙틴이다. 바람직하게는, 니겔라속 식물 세포를 배양함으로써 얻어지는 배양물 또는 배양액으로부터 분리, 회수해 얻어지는 펙틴이다.
니겔라속 식물은 킨포우게과에 속하고, 지중해, 서아시아, 북아프리카를 원산지로 하여 약 20종이 존재한다. 종으로는 크로타네소우 (Nigella damascena), 니겔라·사티바 (Nigella sativa), 니겔라·히스파니카 (Nigella hispanica), 니겔라·아벤시스 (Nigella arvensis)가 대표적이다. 본 발명에서는 니겔라속에 속하는 식물의 어느 식물을 사용해도 좋지만, 크로타네소우 (Nigella damascena), 니겔라·사티바 (Nigella sativa)를 사용하는 것이 바람직하다.
본 발명의 펙틴은, 칼루스 (탈분화 세포)를 유도하고, 얻어진 칼루스를 더욱 증식시키는 2 단계의 배양으로 제조할 수 있다.
먼저, 칼루스를 유도하는 배양에서는, 니겔라속 식물의 종자, 잎, 줄기, 뿌리 등의 조직을 30 ~ 95% 에탄올, 0.01 ~ 0.1% 염화벤잘코늄, 0.1 ~ 5% 차아염소산 나트륨 등에 의해 그 식물체의 표면을 살균하여, 칼루스를 유도하고, 배양한다. 칼루스를 유도하는 배지는 무라시게·스크그, 린스마이야·스크그, 화이트, 니치, 간보그, WPM (Woody Plant Medium) 등의, 식물 조직배양에 일반적으로 이용되는 배지 성분에 탄소원 및 식물 호르몬을 첨가하고, 121℃, 15분간의 조건으로 증기 가열 멸균하여 사용한다. 탄소원은 글루코오스, 프록토오스 등의 단당 또는 그들을 구성당으로 하는 자당, 말토스 등의 이당류나 올리고당을 0.1 ~ 10%의 범위에서 첨가하여 사용하지만, 그 중에서 자당을 0.5 ~ 5%의 범위에서 사용하는 것이 바람직하다. 식물 호르몬으로는 옥신류, 사이토카이닌, 지베렐린, 아브시딘 산, 브라시노스테로이드 등을 0 ~ 10-4M의 농도 범위에서 단독, 또는 조합하여 사용한다. 옥신류로서 인돌 초산, 인돌 낙산, α-나프탈렌 초산, 2,4-디클로로페녹시 초산, 2,6-디클로로벤조산, 또한, 사이토카이닌의 예로서 제아틴, 푸르프릴아미노 퓨린 (카이네틴), 벤질아데닌, 이소펜테닐 아데닌, 디메틸아미노 퓨린 등을 들 수 있다. 지베렐린은 활성형인 GA1, GA3, GA4, GA7가 바람직하고, 브라시노스테로이드는 브라시노라이드가 바람직하다. 칼루스의 유도에 사용하는 배지에 첨가하는 성분 중, 가열에 의해 분해하는 물질은, 그 이외의 성분을 증기 가열 멸균한 후에 별도, 0.2㎕의 필터를 사용한 여과 멸균을 하여 첨가한다. 배지의 pH는 제조시에 수산화 나트륨이나 수산화 칼륨 등의 희알칼리 용액에 의해 pH 5 ~ 7, 바람직하게는 5.5 ~ 6으로 한다.
칼루스 유도는 고체 배지에서도, 액체 배지에서도 가능하지만, 통상, 상기 배지를 0.4 ~ 2% 한천이나 0.1 ~ 0.5% 겔라이트 등에 의해 고화한 고체 배지상에서 배양하는 것이 바람직하다. 배양은 15 ~ 30℃, 바람직하게는 23 ~ 27℃의 온도로 배양하고, 그 때, 명소에도 암소에도 어느 조건하에서 배양해도 좋다. 통상, 배양 5 ~ 60일 후에, 1 ~ 30mm 직경의 세포덩어리로서 칼루스를 얻을 수 있다.
다음에, 칼루스를 새로운 배지에 이식하여 배양함으로써 칼루스를 증식시킨다. 본 배양은 고체 배양, 액체 배양의 어느 것이라도 좋지만, 경제성, 대량 생산성을 감안하여 액체 배양으로 행하는 것이 바람직하다. 배양은 칼루스를 유도할 때의 배지와 같거나, 또는 염 농도를 줄이는 등의 변화를 가한 배지에서 배양을 행한 다. 염 농도를 줄이는 변화를 가한 배지란 배지 성분 중의 질산칼륨, 질산나트륨, 질산암모늄, 인산 2수소나트륨, 염화칼슘, 황산마그네슘 등의 주요 무기염 중 1종 또는 2종 이상의 성분을 펙틴의 생산에 영향을 미치지 않을 정도로 줄인 배지다. 또한, 배지 중에 공지의 첨가제로서 알려진 카자미노산 등의 유기산, 아미노산 등의 질소원, 코코넛 밀크, 효모 엑기스, 폴리펩톤을 0.01 ~ 10 g/l의 농도로 첨가할 수도 있다.
칼루스를 증식 시키는 배양의 배양 온도, 광 조건, 배양 기간은 칼루스 유도시의 배양 조건과 같은 조건으로, 배양을 2 ~ 5회 반복함으로써 수세포로부터 수백의 세포에 의해 만들어지는 세포덩어리로서 배양 세포가 얻어진다. 계속적으로 배양 세포를 더 증식 시킴으로써, 펙틴을 배양물 또는 배양액 중에 콜로이드 상태 또는 가용화한 상태로 생산할 수 있다. 대량으로 펙틴을 제조하기 위해서는 액체 배양이 바람직하고, 그 배양 방식은 5 ~ 30일 마다 배양물 및 배양액을 전량 회수하는 배치식 배양, 5 ~ 30일 마다 일부의 배양물 및 배양액을 회수하고, 신선 배지를 첨가하여 배양하는 반배치식 배양, 배양물 및 배양액의 회수와 신선 배지의 첨가를 일정한 비율로 항상 행하는 연속 배양의 어느 방식이라도 좋다. 초기의 세포 밀도는 1 ~ 300 g/l의 범위에서 배양이 가능하지만, 고밀도화에 의해 단기간에 고농도의 펙틴을 생산할 수도 있다. 액체 배양시의 산소 공급은 왕복 및 선회 진탕이나, 배양액으로의 직접 통기 또는 포로 파이버를 사용한 간접적인 방법의 어느 방법이라도 가능하다. 펙틴 생산량을 향상시키기 위해서는, 산소 공급량을 증대하는 것이 유효하고, 예를 들면, 선회 진탕 배양에서는 진탕 횟수를 100회전/분 이상, 200회 전/분 이하로 하는 것이나, 플라스크 용기 정도의 배지 양을 용량의 5% 이상, 30% 이하로 하여 기액 계면을 증대하는 것이 바람직하고, 배양액으로 직접 통기하는 경우에는 배양액 정도의 통기량이 매분 5 용적% 이상, 20 용적% 이하로 하는 것이 적합하다. 산소 공급량의 증대는 세포의 증식 속도를 조속히 하는 것에 대해서도 유효하다.
이렇게 하여 얻어진 배양물 또는 배양액 중에 펙틴은 콜로이드 상태 또는 가용화한 상태로 존재한다.
식물세포의 배양에서, 니겔라속 식물의 세포를 배양하는 생산 방법이 특히 펙틴 생산량이 많다.
배양물 또는 배양액 중으로부터 펙틴을 회수하기 위해서는, 콜로이드 상태 또는 가용화한 상태의 펙틴을 먼저 가용화한다. 가용화할 때에, 펙틴 농도가 3 g/l 이하로 되도록 그 배양물 및 배양액에 물, 킬레이트제, 산성 완충제, 탄산염과 같은 희박 알칼리 용액을 첨가하고, 0 ~ 40℃, 바람직하게는 15 ~ 35℃의 온화한 온도 조건에서 펙틴을 가용화한다. 킬레이트제로서는 옥살산, 옥살산 암모늄, 중합 인산염 (헥사메타인산 나트륨 또는 식품첨가물의 카르곤), 에틸렌디아민 4초산 또는 그 염류 등을 들 수 있다. 산성 완충제로서는 인산, 구연산 등을 사용할 수가 있고, 탄산염으로는 탄산나트륨, 탄산칼륨 등을 들 수 있다.
펙틴을 가용화한 후, 펙틴을 함유한 용액으로부터 세포 등의 고형물을 여과나 원심분리에 의해 제거한다. 그 후, 0.5 ~ 5배 용량, 바람직하게는 1 ~ 3배 용량의 에탄올, 아세톤 등의 유기용매를 첨가하고 펙틴을 침전시켜 회수한다. 회수한 침전물을 다시 물에 용해함으로써 펙틴을 임의의 농도로 농축할 수 있다. 또한, 필요에 따라서, 적당한 분자량의 분획이 가능한 투석막 및 한외 여과막을 사용하여 저분자 성분을 제거함으로써, 임의의 분자량을 갖는 펙틴이 얻어진다. 농축된 펙틴 용액은 동결건조에 의해 백색 또는 미황색 분말로서 펙틴을 얻을 수 있다.
이렇게 하여 얻어진 펙틴은 분자량의 범위가 1×104 ~ 5×107에 있고, 또한, 피크를 나타내는 분자량이 2×105 ~ 1×107의 펙틴이다. 더욱 바람직하게는, 분자량의 범위가 1×105 ~ 1×107에 있고, 또한 피크를 나타내는 분자량이 1×106 ~ 5×106의 펙틴이다. 본 발명에서 말하는 펙틴의 분자량이란 겔여과 크로마토그래피에 의해 측정한 분자량을 의미한다. 분자량의 범위란, 겔여과 크로마토그래피에 의해 측정한 펙틴의 분자량 분포의 하한치와 상한치를 의미한다. 또한, 피크를 나타내는 분자량이란, 겔여과 크로마토그래피에 의해 측정한 펙틴의 분자량 분포에서 가장 빈도가 높은 점의 분자량을 의미한다.
펙틴의 분자량은 겔여과 크로마토그래피의 측정의 결과 얻어지는 펙틴의 분포 곡선과, 분자량이 이미 알려져 있는 표준 물질의 겔여과 크로마토그래피의 측정의 결과 얻어지는 분포 곡선을 비교하여, 결정한다. 본 발명에서 말하는 펙틴의 분자량을 측정하는 겔여과 크로마토그래피는 이하의 조건으로 측정한다.
본 발명의 펙틴의 분자량을 구하기 위한 겔여과 크로마토그래피의 측정 조건은 이하와 같다. 또한, 하기 조건에서, 검출기로서 사용되는 시차 굴절계란, 이동상과의 굴절률 차이에 의해 물질을 검출하는 검출기로서, 여기서는 시마즈세이사쿠 쇼 제품 RID-10A 혹은 동등품을 사용한다.
컬럼: 토소 제품 TSKgel PW 시리즈 혹은 동등품
(내경: 7.8mm × 길이: 300mm)
충전제: 친수성 비닐 폴리머 겔
이동상: 0.1M 질산나트륨 수용액
유속: 0.5ml/분
온도: 40℃
시료 농도: 1g/l 농도의 수용액
시료 주입량: 10㎕
검출기: 시차굴절계
상술한 조건으로 펙틴을 함유하는 시료 및 표준 물질의 겔여과 크로마토그래피를 측정한다. 표준 물질의 측정 결과를 사용하여 검량선을 작성한다. 시료중의 펙틴의 분자량은, 시료의 측정 결과를 그 검량선에 적용시켜, 표준 물질 환산의 상대치로서 구한다.
측정치로부터 분자량을 구하는 방법은 구체적으로 이하와 같다.
표준 물질로서 사용되는 것은, 폴리에틸렌 글리콜 (분자량: 2×106, 와코쥰야쿠 사제 시약), 폴리에틸렌 옥사이드 (분자량: 1×106, 5×105, 2×105, 5×104, 지엘사이언스 사제 시약), 풀란 (분자량: 1.6×106, 8×105, 4×105, 2×105, 쇼와덴코 사제 시약)이다. 상기 표준 물질 중에서 분자량이 다른 적어도 3 종류의 표준 물질을 적당히 선택하여 사용한다.
상기 조건으로 펙틴의 겔여과 크로마토그래피를 측정하면, 유지 시간 축에 대한 펙틴 특유의 분포 곡선이 얻어진다. 또한, 분자량이 이미 알려져 있는 표준 물질의 겔여과 크로마토그래피를 동일 조건으로 측정하면, 유지 시간 축에 대한 표준 물질 특유의 분포 곡선이 얻어진다. 또한, 이 경우, 유지 시간이란 이동상 (용리액)의 용출량과 동일한 의미이다. 시료 또는 표준 물질의 분포 곡선에서, 피크를 나타내는 위치의 유지 시간을 각각의 물질에 고유의 유지 시간으로서 특정한다.
표준 물질 고유의 유지 시간과 표준 물질의 분자량의 관계로부터 검량선을 작성하고, 그 검량선에 시료의 펙틴 고유의 유지 시간을 적용시킴으로써 상기 펙틴의 분자량을 결정한다. 분자량이 2×106 이상, 또는 5×104 이하의 펙틴을 측정하는 경우는, 상기의 검량선을 외삽, 또는 내삽하여 그 펙틴의 분자량을 결정한다.
펙틴중의 구성당 내, 탄소쇄 말단의 하이드록시메틸기가 카르복실기로 산화된 우론산은 공지의 카르바졸 황산법에 의해 비색 정량 (530nm 흡수)할 수 있다. 본 발명의 펙틴은 70 ~ 96몰%의 우론산을 함유한다. 본 발명에서 얻어진 펙틴의 구성당의 조성은 염산, 황산, 초산 또는 트리플루오르 초산에 의해 50 ~ 100℃의 조건하에 30분간 ~ 6시간, 산가수분해된 후에 유리하는 중성당과 우론산을 고속 액체 크로마토그래피로 정량함으로써 조사할 수 있다. 본 발명의 펙틴은 갈락투론산, 아라비노스, 갈락토오스, 글루크론산, 글루코오스, 자일로오스, 람노스, 만노스, 프록토오스 등으로 구성되며, 주된 성분의 몰비는 갈락투론산: 아라비노스: 갈락토오 스: 글루쿠론산: 글루코오스: 자일로오스: 람노스: 만노스: 프록토오스 = 7 ~ 9: 0.4 ~ 0.7: 0.4 ~ 0.6: 0.1 ~ 0.6: 0.05 ~ 0.5: 0.04 ~ 0.4: 0 ~ 0.1: 0 ~ 0.08: 0 ~ 0.05이다. 즉, 본 발명의 펙틴은 주요한 구성당으로서 갈락투론산을 70 ~ 90몰% 함유하는 펙틴이다.
펙틴의 에스테르화도는 비누화 (검화)된 카르복실기를 정량하는 방법으로 조사할 수 있다. 본 발명 펙틴의 에스테르화도는 0 ~ 60% 이다.
본 발명의 펙틴은 종래 얻어지고 있는 시판 펙틴과 비교하여, 더욱 고분자량의 펙틴이다. 본 발명의 펙틴의 새로운 특징은, 종래의 시판의 펙틴에 비하여, 높은 수분 유지 능력을 갖는 펙틴이다. 또한, 종래의 시판의 펙틴이 갖는 성질, 즉, 수용성이고, 칼슘 이온 등의 2가 이상의 금속염이나 당 및 산과 접촉하여 겔화 하는 성질을 갖는 펙틴이다.
본 발명의 펙틴은 종래의 시판의 펙틴과 비교하여, 분자량이 높고, 수분 유지 능력이 높은 특징을 가지고 있다. 그 때문에, 보습제의 유효 성분으로서 화장료에 사용할 수 있다. 여기서 말하는 보습제란 피부로부터 수분 증발을 막고, 피부 표면의 수분 조절 및 촉촉한 감을 주기 위해서 주로 화장료에 배합되는 물질이다. 공지의 페이퍼 디스크법에 의한 수분 유지 시험이나 피표각층 수분 측정 장치에 의한 생체각층 수분 부하 시험에서, 본 발명의 펙틴은 어느 시험에서도, 일반적으로 보습제로서 사용되고 있는 히알루론산 나트륨보다 높은 수분 유지 능력을 나타내고 있다. 본 발명의 펙틴은 특히, 초기의 수분 유지 능력이 우수하기 때문에, 피부 침투성이나 피부로의 친화성이 우수하다. 또한, 본 발명의 펙틴은 히알루론산 나트륨 과 동일한 정도의 고분자량 임에도 불구하고, 히알루론산 나트륨보다 점도가 낮다. 그 때문에, 사용자에게 촉촉한 감이나 매끄러운 감을 주고, 또한 끈적끈적한 감이 적은 사용감을 준다. 본 발명의 펙틴은 촉촉한 감이나 매끄러운 감이 우수한 화장료용의 소재로서, 화장수 등의 용액상, 클렌싱 폼 등의 젤상, 유액 등의 유화상, 비누, 루즈와 같은 고형상, 프레스트 파우더와 같은 분체상, 파운데이션과 같은 페이스트상, 팩과 같은 피막상, 헤어 스프레이와 같은 에어졸상의 형상을 갖는 여러 가지의 화장료를 제공할 수 있다.
본 발명의 화장료에는 본 발명의 펙틴 외에, 통상 화장품이나 의약품 등에 사용되는 성분, 예를 들면, 분말 성분, 액체 유지, 고체 유지, 로우, 탄화수소유, 고급 지방산, 에스테르유, 실리콘유, 음이온 계면활성제, 양이온 계면활성제, 양성 계면활성제, 비이온 계면활성제, 수용성 고분자, 증점제, 자외선 흡수제, 금속 이온 봉쇄제, 알코올류, 당류, 아미노산, 유기 아민, 고분자 에멀젼, pH 조절제, 비타민류, 산화 방지제, 산화 방지 조제, 물 등을 필요에 따라서 적당히 배합하여, 용액상, 젤상, 유화상, 고형상, 분체상, 페이스트상, 피막상, 에어졸상의 화장료 등, 목적으로 하는 제형에 따라 일반적으로 알려진 방법에 의해 제조할 수 있다. 이하에 구체적인 배합 가능 성분을 열거하지만, 본 발명의 펙틴과 하기 성분의 임의의 1종 또는 2종 이상을 배합해 본 발명의 화장료를 제조할 수 있다.
분말 성분으로는, 예를 들면, 무기 분말 (예를 들면, 탈크, 카올린, 운모, 견운모 (셀리사이트), 백운모, 금운모, 합성 운모, 홍운모, 흑운모, 파미큐라이트, 탄산마그네슘, 탄산칼슘, 규산 알루미늄, 규산 바륨, 규산 칼슘, 규산 마그네슘, 규산 스트론튬, 텅스텐산 금속염, 마그네슘, 실리카, 제올라이트, 황산바륨, 소성 황산칼슘 (소석고), 인산칼슘, 불소 아파타이트, 하이드록시 아파타이트, 세라믹 파우더, 금속 비누 (예를 들면, 미리스틴산 아연, 팔미틴산 칼슘, 스테아린산 알루미늄), 질화붕소 등);유기 분말 (예를 들면, 폴리아미드 수지 분말 (나일론 분말), 폴리에틸렌 분말, 폴리 메타크릴산 메틸 분말, 폴리스티렌 분말, 스티렌과 아크릴산의 공중합체 수지 분말, 벤조구아나민 수지 분말, 폴리4불화 에틸렌 분말, 셀룰로오스 분말 등);무기 백색 안료 (예를 들면, 이산화티탄, 산화아연 등);무기 적색계 안료 (예를 들면, 산화철 (벵갈라), 티탄산철 등);무기 갈색계 안료 (예를 들면, γ-산화철 등);무기 황색계 안료 (예를 들면, 황산화철, 황토 등);무기 흑색계 안료 (예를 들면, 흑산화철, 저차 산화티탄 등);무기 자색계 안료 (예를 들면, 망간 바이올렛, 코발트 바이올렛 등);무기 녹색계 안료 (예를 들면, 산화크롬, 수산화크롬, 티탄산 코발트 등);무기 청색계 안료 (예를 들면, 군청, 감청 등);펄 안료 (예를 들면, 산화티탄 코티드 (coated) 마이카, 산화티탄 코티드 옥시염화비스머스, 산화티탄 코티드 탈크, 착색 산화티탄 코티드 마이카, 옥시염화비스머스, 어린박 등);금속 분말 안료 (예를 들면, 알루미늄 파우더, 카퍼 파우더 등);지르코늄, 바륨 또는 알루미늄 레이크 등의 유기안료 (예를 들면, 적색 201호, 적색 202호, 적색 204호, 적색 205호, 적색 220호, 적색 226호, 적색 228호, 적색 405호, 등색 203호, 등색 204호, 황색 205호, 황색 401호, 및 청색 404호 등의 유기안료, 적색 3호, 적색 104호, 적색 106호, 적색 227호, 적색 230호, 적색 401호, 적색 505호, 등색 205호, 황색 4호, 황색 5호, 황색 202호, 황색 203호, 녹 색 3호 및 청색 1호 등);천연색소 (예를 들면, 클로로필, β-카로틴 등) 등을 들 수 있다.
액체 유지로는, 예를 들면, 아보가드유, 동백유, 터틀유, 마카데미아넛트유, 옥수수유, 밍크유, 올리브유, 유채유, 노른자유, 참깨유, 퍼식유, 밀배아유, 사잔카유, 피마자유, 아마니유, 사플라워유 (safflower oil), 면실유, 에노유, 대두유, 낙화생유, 다실유, 카야유 (kaya oil), 코메누카유 (rice bran oil), 시나 키리유, 일본 키리유, 호호바유, 배아유, 트리글리세린 등을 들 수 있다.
고체 유지로는, 예를 들면, 카카오 버터, 야자유, 경화 야자유, 팜유, 팜핵유, 모크로우핵유, 경화유, 모크로우 (Japan wax), 경화 피마자유 등을 들 수 있다.
로우로는, 예를 들면, 밀납 (beeswax), 칸데릴라로우, 솜로우, 카르나우바로우, 베이베리로우, 이보타로우, 고래 로우, 몬탄로우, 누카로우, 라놀린, 카폭크로우, 초산라놀린, 액상라놀린, 사토우키비로우, 라놀린 지방산 이소프로필, 라우린산 헥실, 환원 라놀린, 죠죠바로우, 경질 라놀린, 세락로우, POE 라놀린 알코올 에테르, POE 라놀린 알코올 아세테이트, POE 콜레스테롤 에테르, 라놀린 지방산 폴리에틸렌 글리콜, POE 수소 첨가 라놀린 알코올 에테르 등을 들 수 있다.
탄화수소유로는, 예를 들면, 유동 파라핀, 오조케라이트, 스쿠와란, 프리스탄, 파라핀, 세레신, 스쿠알렌, 바셀린, 마이크로크리스탈린 왁스 등을 들 수 있다.
고급 지방산으로는, 예를 들면, 라우린산, 미리스틴산, 팔미틴산, 스테아린 산, 베헤닌산, 올레인산, 운데시렌산, 톨유 지방산, 이소스테아린산, 리놀산, 리놀레인산, 에이코사 펜타엔산 (EPA), 도코사 헥사엔산 (DHA) 등을 들 수 있다.
에스테르유로는, 예를 들면, 미리스틴산 이소프로필, 옥탄산 세틸, 미리스틴산 옥틸도데실, 팔미틴산 이소프로필, 스테아린산 부틸, 라우린산 헥실, 미리스틴산 미리스틸, 올레인산 데실, 디메틸옥탄산 헥실데실, 유산 세틸, 유산 미리스틸, 초산 라놀린, 스테아린산 이소세틸, 이소스테아린산 이소세틸, 12-하이드록시스테아린산 콜레스테릴, 디-2-에틸헥산산 에틸렌글리콜, 디펜타에리트리톨 지방산 에스테르, 모노 이소스테아린산 N-알킬글리콜, 디카프린산 네오펜틸글리콜, 사과산 디이소스테아릴, 디-2-헵틸운데칸산 글리세린, 트리-2-에틸헥산산 트리메티롤프로판, 트리이소스테아린산 트리메티롤프로판, 테트라-2-에틸 헥산산 펜타에리트리톨, 트리-2-에틸헥산산 글리세린, 트리옥탄산 글리세린, 트리이소펄미틴산 글리세린, 트리이소스테아린산 트리메티롤프로판, 세틸 2-에틸헥사노에이트, 2-에틸헥실팔미테이트, 트리미리스틴산 글리세린, 트리-2-헵틸운데칸산 글리세라이드, 피마자유 지방산 메틸 에스테르, 올레인산 올레일, 아세트글리세라이드, 팔미틴산 2-헵틸 운데실, 아디핀산 디이소부틸, N-라우로일-L-글루타민산-2-옥틸도데실 에스테르, 아디핀산 디-2-헵틸 운데실, 에틸라우레이트, 세바신산 디-2-에틸헥실, 미리스틴산 2-헥실데실, 팔미틴산 2-헥실데실, 아디핀산 2-헥실데실, 세바신산 디이소프로필, 숙신산 2-에틸헥실, 구연산 트리에틸 등을 들 수 있다.
실리콘유로는, 예를 들면, 쇄상 폴리실록산 (예를 들면, 디메틸 폴리실록산, 메틸페닐 폴리실록산, 디페닐 폴리실록산 등); 환상 폴리실록산 (예를 들면, 옥타 메틸시클로테트라실록산, 데카메틸시클로펜타실록산, 도데카메틸시클로헥사실록산 등), 3차원 그물구조를 형성하고 있는 실리콘 수지, 실리콘 고무, 각종 변성 폴리실록산 (아미노 변성 폴리실록산, 폴리 에테르 변성 폴리실록산, 알킬 변성 폴리실록산, 불소 변성 폴리실록산 등) 등을 들 수 있다.
음이온 계면활성제로는, 예를 들면, 지방산 비누 (예를 들면, 라우린산 나트륨, 팔미틴산 나트륨 등);고급 알킬 황산 에스테르염 (예를 들면, 라우릴 황산나트륨, 라우릴 황산칼륨 등); 알킬 에테르 황산 에스테르염 (예를 들면, POE-라우릴 황산 트리에탄올아민, POE-라우릴 황산나트륨 등); N-아실사르코신산 (예를 들면, 라우로일 사르코신나트륨 등); 고급 지방산 아미드 설폰산염 (예를 들면, N-미리스토일-N-메틸타우린나트륨, 야자유 지방산 메틸타우린나트륨, 라우릴메틸타우린나트륨 등); 인산 에스테르염 (POE-올레일 에테르 인산나트륨, POE-스테아릴 에테르 인산 등); 설포 숙신산염 (예를 들면, 디-2-에틸헥실 설포숙신산 나트륨, 모노라우로일 모노에탄올아미드 폴리옥시에틸렌 설포숙신산 나트륨, 라우릴 폴리프로필렌글리콜 설포숙신산 나트륨 등); 알킬 벤젠 설폰산염 (예를 들면, 리니어 도데실벤젠 설폰산 나트륨, 리니어 도데실벤젠 설폰산 트리에탄올아민, 리니어 도데실벤젠 설폰산 등); 고급 지방산 에스테르 황산 에스테르염 (예를 들면, 경화 야자유 지방산 글리세린 황산나트륨 등); N-아실 글루타민산염 (예를 들면, N-라우로일글루타민산 모노나트륨, N-스테아로일글루타민산 디나트륨, N-미리스토일-L-글루타민산 모노나트륨 등); 황산화유 (예를 들면, 로트유 등); POE-알킬에테르 카르본산; POE-알킬아릴에테르 카르본산염; α-올레핀 설폰산염; 고급 지방산 에스 테르 설폰산염; 2급 알코올 황산 에스테르염; 고급 지방산 알키롤아미드 황산 에스테르염; 라우로일모노에탄올아미드 숙신산 나트륨; N-팔미토일아스파라긴산 디트리에탄올아민;카세인 나트륨 등을 들 수 있다.
양이온 계면활성제로는, 예를 들면, 알킬트리메틸 암모늄염 (예를 들면, 염화스테아릴 트리메틸 암모늄, 염화라우릴 트리메틸 암모늄 등); 알킬피리디늄염 (예를 들면, 염화세틸 피리디늄 등); 염화디스테아릴 디메틸암모늄 디알킬디메틸 암모늄염; 염화폴리 (N,N'-디메틸-3,5-메틸렌 피페리디늄); 알킬4급 암모늄염; 알킬디메틸벤질 암모늄염; 알킬이소퀴노리늄염; 디알킬모리포늄염; POE-알킬아민; 알킬아민염; 폴리아민 지방산 유도체; 아밀 알코올 지방산 유도체; 염화 벤잘코늄;염화 벤제토늄 등을 들 수 있다.
양성 계면활성제로는, 예를 들면, 이미다졸린계 양성 계면활성제 (예를 들면, 2-운데실-N,N,N-(하이드록시에틸 카복시메틸)-2-이미다졸린나트륨, 2-코코일-2-이미다졸리늄하이드록사이드-1-카복시에틸옥시 2나트륨염 등); 베타인계 계면활성제 (예를 들면, 2-헵타데실-N-카복시메틸-N-하이드록시에틸이미다졸리늄 베타인, 라우릴디메틸아미노 초산 베타인, 알킬 베타인, 아미드 베타인, 설포 베타인 등) 등을 들 수 있다.
비이온 계면활성제 중 친유성 비이온 계면활성제로는, 예를 들면, 솔비탄 지방산 에스테르류 (예를 들면, 솔비탄 모노올레이트, 솔비탄 모노이소스테아레이트, 솔비탄 모노라우레이트, 솔비탄 모노팔미테이트, 솔비탄 모노스테아레이트, 솔비탄 세스키올레이트, 솔비탄 트리올레이트, 펜타-2-에틸헥실산디글리세롤 솔비탄, 테트 라-2-에틸 헥실산디글리세롤 솔비탄 등); 글리세린 폴리 글리세린 지방산류 (예를 들면, 모노 면실유 지방산 글리세린, 모노엘카산 글리세린, 세스키올레인산 글리세린, 모노스테아린산 글리세린, α,α'-올레인산 피로글루타민산 글리세린, 모노스테아린산 글리세린 사과산 등); 프로필렌 글리콜 지방산 에스테르류 (예를 들면, 모노스테아린산 프로필렌글리콜 등); 경화 피마자유 유도체; 글리세린 알킬 에테르 등을 들 수 있다.
비이온 계면활성제 중 친수성 비이온 계면활성제로는, 예를 들면, POE-솔비탄 지방산 에스테르류 (예를 들면, POE-솔비탄 모노올레이트, POE-솔비탄 모노스테아레이트, POE-솔비탄 모노올레이트, POE-솔비탄 테트라올레이트 등); POE 솔비트 지방산 에스테르류 (예를 들면, POE-솔비트 모노라우레이트, POE-솔비트 모노올레이트, POE-솔비트 펜타올레이트, POE-솔비트 모노스테아레이트 등); POE-글리세린 지방산 에스테르류 (예를 들면, POE-글리세린 모노스테아레이트, POE-글리세린 모노이소스테아레이트, POE-글리세린 트리이소스테아레이트 등의 POE-모노올레이트 등); POE-지방산 에스테르류 (예를 들면, POE-디스테아레이트, POE-모노디올레이트, 디스테아린산 에틸렌글리콜 등); POE-알킬 에테르류 (예를 들면, POE-라우릴 에테르, POE-올레일 에테르, POE-스테아릴 에테르, POE-베헤닐 에테르, POE-2-옥틸도데실 에테르, POE-콜레스타놀 에테르 등); 플로닉형류 (예를 들면, 플로닉 등); POE·POP-알킬 에테르류 (예를 들면, POE·POP-세틸 에테르, POE·POP-2-데실테트라데실 에테르, POE·POP-모노부틸 에테르, POE·POP-수첨 라놀린, POE·POP-글리세린 에테르 등); 테트라 POE·테트라 POP-에틸렌디아민 축합물류 (예를 들면, 테트로닉 등); POE-피마자유 경화 피마자유 유도체 (예를 들면, POE-피마자유, POE-경화 피마자유, POE-경화 피마자유 모노이소스테아레이트, POE-경화 피마자유 트리이소스테아레이트, POE-경화 피마자유 모노피로글루타민산 모노이소스테아린산 디에스테르, POE-경화 피마자유 말레인산 등); POE-밀납·라놀린 유도체 (예를 들면, POE-솔비트 밀납 등); 알칸올 아미드 (예를 들면, 야자유 지방산 디에탄올 아미드, 라우린산 모노에탄올 아미드, 지방산 이소프로판올 아미드 등); POE-프로필렌 글리콜 지방산 에스테르; POE-알킬아민; POE-지방산 아미드; 자당 지방산 에스테르; 알킬에톡시디메틸아민 옥사이드; 트리올레일인산 등을 들 수 있다.
수용성 고분자 중 천연의 수용성 고분자로는, 예를 들면, 식물계 고분자 (예를 들면, 아라비아검, 트라가칸트검, 가락탄, 구아검, 캬로브검, 카라야감, 카라기난, 칸텐, 퀸스시드 (말메로), 알루게콜로이드 (캇소엑기스), 전분 (쌀, 옥수수, 감자, 밀), 글리틸리틴산); 미생물계 고분자 (예를 들면, 크산탄검, 덱스트란, 석시노글루칸, 블루란 등); 동물계 고분자 (예를 들면, 콜라겐, 카세인, 알부민, 젤라틴 등) 등을 들 수 있다.
수용성 고분자 중 반합성의 수용성 고분자로는, 예를 들면, 전분계 고분자 (예를 들면, 카복시메틸 전분, 메틸하이드록시프로필 전분 등); 셀룰로오스계 고분자 (메틸 셀룰로오스, 에틸 셀룰로오스, 메틸 하이드록시프로필 셀룰로오스, 하이드록시에틸 셀룰로오스, 셀룰로오스 황산나트륨, 하이드록시프로필 셀룰로오스, 카복시메틸 셀룰로오스, 카복시메틸셀룰로오스 나트륨, 결정 셀룰로오스, 셀룰로오스 분말 등); 아르긴산계 고분자 (예를 들면, 아르긴산 나트륨, 아르긴산 프로필 렌글리콜 에스테르 등) 등을 들 수 있다.
수용성 고분자 중 합성 수용성 고분자로는, 예를 들면, 비닐계 고분자 (예를 들면, 폴리비닐 알코올, 폴리비닐메틸 에테르, 폴리비닐 피롤리돈, 카복시비닐 폴리머 등); 폴리옥시에틸렌계 고분자 (예를 들면, 폴리에틸렌글리콜 20,000, 40,000, 60,000의 폴리옥시에틸렌 폴리옥시프로필렌 공중합체 등); 아크릴계 고분자 (예를 들면, 폴리아크릴산 나트륨, 폴리에틸 아크릴레이트, 폴리아크릴 아미드 등); 폴리에틸렌이민; 양이온 폴리머 등을 들 수 있다.
증점제로는, 예를 들면, 아라비아검, 카라기난, 카라야검, 트라가칸트검, 캬로브검, 퀸스시드 (말메로), 카세인, 덱스트린, 젤라틴, 펙틴산 나트륨, 아라긴산 나트륨, 메틸 셀룰로오스, 에틸 셀룰로오스, CMC, 하이드록시에틸 셀룰로오스, 하이드록시프로필 셀룰로오스, PVA, PVM, PVP, 폴리아크릴산 나트륨, 카복시 비닐폴리머, 로카스트빈검, 구아검, 타마린트검, 디알킬디메틸암모늄 황산 셀룰로오스, 크산탄검, 규산 알루미늄 마그네슘, 벤토나이트, 헥토라이드, 규산 AlMg (비검), 라포나이트, 무수 규산 등을 들 수 있다.
자외선 흡수제로서는 하기 화합물을 들 수 있다.
(1) 벤조산계 자외선 흡수제
예를 들면, 파라아미노 벤조산 (이하, PABA라고 한다), PABA 모노글리세린 에스테르, N,N-디프로폭시 PABA 에틸 에스테르, N,N-디에톡시 PABA 에틸 에스테르, N,N-디메틸 PABA 에틸 에스테르, N,N-디메틸 PABA 부틸 에스테르, N,N-디메틸 PABA 에틸 에스테르 등.
(2) 엔트라닐산계 자외선 흡수제
예를 들면, 호모멘틸-N-아세틸 안트라닐레이트 등.
(3) 살리실산계 자외선 흡수제
예를 들면, 아밀살리실레이트, 멘틸살리실레이트, 호모멘틸살리실레이트, 옥틸살리실레이트, 페닐살리실레이트, 벤질살리실레이트, p-이소프로판올페닐살리실레이트 등.
(4) 계피산계 자외선 흡수제
예를 들면, 옥틸신나메이트, 에틸-4-이소프로필신나메이트, 메틸-2,5-디이소프로필신나메이트, 에틸-2,4-디이소프로필신나메이트, 메틸-2,4-디이소프로필신나메이트, 프로필-p-메톡시신나메이트, 이소프로필-p-메톡시신나메이트, 이소아밀-p-메톡시신나메이트, 옥틸-p-메톡시신나메이트 (2-에틸헥실-p-메톡시신나메이트), 2-에톡시에틸-p-메톡시신나메이트, 시클로헥실-p-메톡시신나메이트, 에틸-α-시아노-β-페닐신나메이트, 2-에틸헥실-α-시아노-β-페닐신나메이트, 글리세릴모노-2-에틸헥사노일-디파라메톡시신나메이트 등.
(5) 트리아진계 자외선 흡수제
예를 들면, 비스레졸시닐트리아진.
더욱 구체적으로는, 비스{[4-(2-에틸헥실옥시)-2-하이드록시]페닐}-6-(4-메톡시페닐)-1,3,5-트리아진, 2,4,6-트리스{4-(2-에틸헥실옥시카르보닐)아닐리노}-1,3,5-트리아진 등.
(6) 그 외의 자외선 흡수제
예를 들면, 3-(4'-메틸벤질리덴)-d,l-캠파, 3-벤질리덴-d,l-갬파, 2-페닐-5-메틸벤족사졸, 2,2'-하이드록시-5-메틸페닐벤조트리아졸, 2-(2'-하이드록시-5'-t-옥틸페닐)벤조트리아졸, 2-(2'-하이드록시-5'-메틸페닐벤조트리아졸, 디벤자라딘, 디아니솔메탄, 4-메톡시-4'-t-부틸디벤조일메탄, 5-(3,3-디메틸-2-노르보르닐리덴)-3-펜탄-2-온 등. 디몰포리노 피리다지논 등의 피리다진 유도체.
금속 이온 봉쇄제로는, 예를 들면, 1-하이드록시에탄-1,1-디포스폰산, 1-하이드록시에탄-1,1-디포스폰산 4나트륨염, 에데트산 2나트륨, 에데트산 3나트륨, 에데트산 4나트륨, 구연산나트륨, 폴리인산나트륨, 메타린산 나트륨, 글루콘산, 인산, 구연산, 아스코르빈산, 숙신산, 에데트산, 에틸렌디아민 하이드록시에틸 3초산 3나트륨 등을 들 수 있다.
알코올류 중 저급 알코올로는, 예를 들면, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 이소부틸 알코올, t-부틸 알코올 등을 들 수 있다.
알코올류 중 다가 알코올로는, 예를 들면, 2가의 알코올 (예를 들면, 에틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 트리메틸렌글리콜, 1,2-부틸렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 테트라메틸렌글리콜, 2,3-부틸렌글리콜, 펜타메틸렌글리콜, 2-부텐-1,4-디올, 헥실렌글리콜, 옥틸렌글리콜 등); 3가의 알코올 (예를 들면, 글리세린, 트리메티롤프로판 등);4가 알코올 (예를 들면, 1,2,6-헥산트리올 등의 펜타에리트리톨 등); 5가 알코올 (예를 들면, 자일리톨 등); 6가 알코올 (예를 들면, 솔비톨, 만니톨 등); 다가 알코올 중합체 (예를 들면, 디에틸렌글리콜, 디프로필렌글리콜, 트리에틸렌글리콜, 폴리프로필렌글리콜, 테트라에틸렌글리콜, 디글리세린, 폴리에틸렌글 리콜, 트리글리세린, 테트라글리세린, 폴리글리세린 등); 2가의 알코올 알킬 에테르류 (예를 들면, 에틸렌글리콜 모노메틸에테르, 에틸렌글리콜 모노에틸에테르, 에틸렌글리콜 모노부틸에테르, 에틸렌글리콜 모노페닐에테르, 에틸렌글리콜 모노헥실에테르, 에틸렌글리콜 모노2-메틸 헥실에테르, 에틸렌글리콜 이소아밀에테르, 에틸렌글리콜 벤질에테르, 에틸렌글리콜 이소프로필에테르, 에틸렌글리콜 디메틸에테르, 에틸렌글리콜 디에틸에테르, 에틸렌글리콜 디부틸에테르 등); 2가 알코올 알킬 에테르류 (예를 들면, 디에틸렌글리콜 모노메틸에테르, 디에틸렌글리콜 모노에틸에테르, 디에틸렌글리콜 모노부틸에테르, 디에틸렌글리콜 디메틸에테르, 디에틸렌글리콜 디에틸에테르, 디에틸렌글리콜 부틸에테르, 디에틸렌글리콜 메틸에틸에테르, 트리에틸렌글리콜 모노메틸에테르, 트리에틸렌글리콜 모노에틸에테르, 프로필렌글리콜 모노메틸에테르, 프로필렌글리콜 모노에틸에테르, 프로필렌글리콜 모노부틸에테르, 프로필렌글리콜 이소프로필에테르, 디프로필렌글리콜 메틸에테르, 디프로필렌글리콜 에틸에테르, 디프로필렌글리콜 부틸에테르 등); 2가 알코올 에테르 에스테르 (예를 들면, 에틸렌글리콜 모노메틸에테르 아세테이트, 에틸렌글리콜 모노에틸에테르 아세테이트, 에틸렌글리콜 모노부틸에테르 아세테이트, 에틸렌글리콜 모노페닐에테르 아세테이트, 에틸렌글리콜 디아디페이트, 에틸렌글리콜 디석시네이트, 디에틸렌글리콜 모노에틸에테르 아세테이트, 디에틸렌글리콜 모노부틸에테르 아세테이트, 프로필렌글리콜 모노메틸에테르 아세테이트, 프로필렌글리콜 모노에틸에테르 아세테이트, 프로필렌글리콜 모노프로필에테르 아세테이트, 프로필렌글리콜 모노페닐에테르 아세테이트 등); 글리세린 모노알킬에테르 (예를 들면, 퀴밀 알코 올, 세라킬 알코올, 바틸 알코올 등); 당 알코올 (예를 들면, 솔비톨, 멀티톨, 말트트리오스, 만니톨, 자당, 에리트리톨, 글루코오스, 프록토오스, 전분 분해당, 말토스, 자이리토스, 전분 분해당 환원 알코올 등); 글리소릿드; 테트라하이드로푸르프릴 알코올; POE-테트라하이드로푸르프릴 알코올; POP-부틸에테르; POP·POE-부틸에테르; 트리폴리옥시프로필렌글리세린 에테르; POP-글리세린에테르; POP-글리세린에테르 인산; POP·POE-펜탄에리트리톨 에테르, 폴리글리세린 등을 들 수 있다.
고급 알코올로는, 예를 들면, 직쇄 알코올 (예를 들면, 라우릴 알코올, 세틸 알코올, 스테아릴 알코올, 베헤닐 알코올, 미리스틸 알코올, 올레일 알코올, 세토스테아릴 알코올 등); 분지쇄 알코올 (예를 들면, 모노스테아릴글리세린 에테르 (바틸 알코올), 2-데실테트라데시놀, 라놀린 알코올, 콜레스테롤, 피토스테롤, 헥실도데카놀, 이소스테아릴 알코올, 옥틸도데카놀 등) 등을 들 수 있다.
당류중 단당으로는, 예를 들면, 3탄탕 (예를 들면, D-글리세릴알데히드, 디하이드록시아세톤 등); 4탄당 (예를 들면, D-에리트로스, D-에리트를로스, D-트레오스, 에리트리톨 등); 5탄당 (예를 들면, L-아라비노스, D-자일로스, L-리소오스, D-아라비노스, D-리보스, D-리블로스, D-자일를로스, L-자일루로스 등); 6탄당 (예를 들면, D-글루코스, D-타로스, D-부시코스, D-갈락토스, D-프록토스, L-갈락토오스, L-만노스, D-타가토스 등); 7탄당 (예를 들면, 알도헵토스, 헵로스 등); 8탄당 (예를 들면, 옥트로스 등); 데옥시당 (예를 들면, 2-데옥시-D-리보오스, 6-데옥시-L-갈락토오스, 6-데옥시-L-만노스 등); 아미노당 (예를 들면, D-글루코 사민, D-갈락토사민, 시알산, 아미노우론산, 무라민산 등); 우론산 (예를 들면, D-글루크론산, D-만누론산, L-글루론산, D-갈락투론산, L-이즈론산 등) 등을 들 수 있다.
당류 중 올리고당으로는, 예를 들면, 자당, 움베리페로스, 락토오스, 프란테오스, 이소리크노오스류, α,α-트레할로스, 라피노스, 리크노스류, 운비리신, 스타키오스, 베르바스코스류 등을 들 수 있다.
당류 중 다당으로는, 예를 들면, 셀룰로오스, 퀸스시드, 콘드로이틴 황산, 전분, 갈락탄, 텔마탄 황산, 글리코겐, 아라비아검, 헤파란 황산, 히알루론산, 트라간트검, 케라탄 황산, 콘드로이틴, 크산탄검, 무코이틴 황산, 구아검, 덱스트란, 케라트 황산, 로카스트빈검, 석시노글루칸, 카로닌산 등을 들 수 있다.
아미노산으로는, 예를 들면, 중성 아미노산 (예를 들면, 트레오닌, 시스테인 등); 염기성 아미노산 (예를 들면, 하이드록시 리신 등) 등을 들 수 있다. 또한, 아미노산 유도체로서 예를 들면, 아실사르코신 나트륨 (라우로일사르코신 나트륨), 아실글루타민산염, 아실 β-알라닌 나트륨, 글루타치온, 피롤리돈 카본산 등을 들 수 있다.
유기 아민으로는, 예를 들면, 모노에탄올아민, 디에탄올아민, 트리에탄올아민, 몰포린, 트리이소프로판올아민, 2-아미노-2-메틸-1,3-프로판디올, 2-아미노-2-메틸-1-프로판올 등을 들 수 있다.
고분자 에멀젼으로는, 예를 들면, 아크릴 수지 에멀젼, 폴리 아크릴산 에틸 에멀젼, 아크릴 레진액, 폴리아크릴 알킬 에스테르 에멀젼, 폴리초산비닐 수지 에 멀젼, 천연 고무 라텍스 등을 들 수 있다.
pH 조제제로는, 예를 들면, 유산-유산 나트륨, 구연산-구연산 나트륨, 숙신산-숙신산 나트륨 등의 완충제 등을 들 수 있다.
비타민류로는, 예를 들면, 비타민 A, B1, B2, B6, C, E 및 그 유도체, 판토텐산 및 그 유도체, 비오틴 등을 들 수 있다.
산화 방지제로는, 예를 들면, 토코페롤류, 디부틸하이드록시 톨루엔, 부틸하이드록시 아니졸, 갈릭산 에스테르류 등을 들 수 있다.
산화 방지조제로는, 예를 들면, 인산, 구연산, 아스코르빈산, 말레인산, 말론산, 숙신산, 푸말산, 케파린, 헥사메타포스페이트, 피틴산, 에틸렌디아민 4초산 등을 들 수 있다.
본 발명의 화장료에는 본 발명의 펙틴과 다른 보습제를 병용해도 좋고, 병용 가능한 보습제로서 예를 들면, 폴리에틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 글리세린, 1,3-부틸렌글리콜, 자일리톨, 솔비톨, 멀티톨, 콘드로이틴 황산, 히알루론산, 무코이틴 황산, 카로닌산, 아테로콜라겐, 콜레스테릴-12-하이드록시 스테아레이트, 유산나트륨, 담즙산염, dl-피롤리돈 카본산염, 단쇄가용성 콜라겐, 디글리세린 (EO) PO부가물, 이자요이바라 추출물, 세이요우노코기리소우 추출물, 멜리로트 추출물 등을 들 수 있다.
그 외의 배합 가능 성분으로는, 예를 들면, 방부제 (메틸파라벤, 에틸파라벤, 부틸파라벤, 페녹시에탄올 등); 소염제 (예를 들면, 글리틸리틴산 유도체, 글리틸레틴산 유도체, 살리실산 유도체, 히노키티올, 산화아연, 아란토인 등); 미백 제 (예를 들면, 유키노시타 추출물, 알부틴 등); 각종 추출물 (예를 들면, 오우백, 오우렌, 자근, 적작약, 센브리, 바치, 세이지, 비와, 당근, 알로에, 제니아오이, 아이리스, 포도, 요쿠이닌, 수세미, 백합, 사프론, 센큐우, 쇼우큐우, 오토기리소우, 오노니스, 마늘, 고추, 진피, 토우키, 해조 등), 부활제 (예를 들면, 로열 제리, 감광소, 콜레스테롤 유도체 등); 혈행 촉진제 (예를 들면, 니코틴산 벤질 에스테르, 니코틴산 β-부톡시에틸에스테르, 카프사이신, 진게론, 칸타리스틴키, 이크타몰, 탄닌산, α-보르네올, 니코틴산 토코페롤, 이노시톨 헥사니코티네이트, 시크란데레이트, 신나리딘, 토라졸린, 아세틸콜린, 베라파밀, 세파란틴,γ-오리자놀 등); 항지루제 (예를 들면, 유황, 티안톨 등); 항염증제 (예를 들면, 트라네키삼산, 티오타우린, 히포타우린 등); 생약 (예를 들면, 카르큐에쟈[carqueja (남미)], 팔로아줄[palo azul (남미)], 마셀라미스타[macelamista (남미)]) 등을 들 수 있다. 본 발명의 펙틴과 상기의 1종 이상의 성분을 조합하여 다기능 화장료로서 제공할 수도 있다.
본 발명의 펙틴은 화장료 전량에 대해서, 0.0001 ~ 50중량%, 바람직하게는, 0.001 ~ 20중량%, 더욱 바람직하게는 0.01 ~ 10중량%, 특히 바람직하게는 0.02 ~ 10중량%를 배합한다. 화장료에 대해서 0.0001중량% 미만의 배합량에서는, 보습 능력이 부족하고, 50중량%를 넘는 양을 배합해도 효과의 증가는 바랄 수 없다.
이렇게 하여 얻어지는 화장료는 보습 능력이 우수하고 또한, 사용자에게 촉촉한 감이나 매끄러운 감을 주고, 끈적끈적한 감이 적은 사용감을 주는 화장료이다.
또한, 본 발명의 펙틴은 상기의 보습제로서의 이용 이외에, 예를 들면, 식품 분야에서는 잼이나 마마레이드 (marmalade)의 점물질, 음료의 안정화제, 푸딩이나 크림의 겔화제 등에, 또한, 의약품 분야에서도 종래의 시판의 펙틴과 동일하게 사용할 수 있다.
이하, 본 발명에 대해서 실시예 등을 이용해 더욱 자세하게 설명하지만, 본 발명은 이들에 의해 제한을 받는 것은 아니다.
[실시예 1]
크로타네소우 (Nigella damascena)의 유묘를 70% 에탄올에 의해 표면을 살균하고, 계속해서 차아염소산 나트륨 (유효 염소 농도 1%)으로 15분간 처리한 후, 멸균수에 의해 3회 세정했다. 멸균수는 121℃, 15분의 증기가압 멸균에 의해 제작했다. 3% 자당과 식물호르몬으로서 10-5Mα-나프닐 초산을 함유하는 표 1에 나타내는 WPM 배지 (0.1M 수산화나트륨에 의해 pH 5.7로 조정)를 0.8% 한천에 의해 고화한 고체 배지상에, 표면 살균한 크로타네소우 유묘를 무균적으로 치상 (置床)했다. 25℃, 암소에서 1주간 배양 후, 부정형의 탈분화 세포 (칼루스)가 유도 되었다. 얻어진 칼루스의 일부를 분리하고, 칼루스 유도에 사용한 배지와 같은 조성의 고체 배지상에 치상하여 증식 시켰다. 이 공정을 3회 반복하는 것에 의하고, 안정되게 증식하는 세포주가 얻어졌다.
[표 1]
성분 중량농도 mg/l |
질산나트륨 1500 황산칼륨 495 염화칼슘·2H2O 96 질산칼슘 556 황산마그네슘·7H2O 370 인산2수소 칼륨 170 EDTA 나트륨철 42 붕산 6.2 황산망간·4H2O 22.3 황산아연·7H2O 8.6 몰리브덴산Na·2H2O 0.25 황산동·5H2O 0.25 이노시톨 100 니코틴산 0.5 L- 글리신 2 염산피리독신 0.5 염산티아민 1 α-나프탈렌초산 나트륨 2.08 자당 30000 |
[실시예 2]
실시예 1에 의해 유도된 세포를 표 1의 조성의 액체 배지에 현탁하여 배양했다. 배양 조건은 3L 용량의 플라스크에 배지량 300ml를 가하고, 25℃, 암소, 세포 밀도 9.6g/l, 100회전/분의 회전 진탕 배양 및, 배양 기간 3주간으로 했다. 배양액에 킬레이트제 CyDTA (트랜스-1,2-디아미노시클로헥산-N,N,N',N'-테트라초산 1수화물)를 25mM이 되도록 첨가하고, 고속 액체 크로마토그래피 (사용 컬럼: 토소 TSKgelG5000PWXL) 분석하여, 펙틴 농도 2.07g/l, 세포의 증식률 42.8배가 얻어졌다.
[실시예 3, 4]
3L 용량의 플라스크에 대해서, 300ml의 배지량을 500ml 및 800ml로 하고 실시예 2와 같은 배양을 행하여, 각각, 펙틴을 얻었다. 결과를 표 2에 나타냈다.
[표 2]
실시예 번호 | 2 | 3 | 4 |
배지량 (ml) | 300 | 500 | 800 |
펙틴농도 (g/l) | 2.07 | 1.58 | 1.08 |
증식률 (배) | 42.8 | 29.0 | 28.0 |
[실시예 5]
실시예 1에서 유도된 세포를 표 1 조성의 액체 배지에 현탁하고 세포 밀도를 고밀도화한 조건에서 배양했다. 배양 조건은 300ml 용량의 플라스크에 배지량 40ml를 가하고, 25℃, 암소, 세포 밀도 200g/l, 100 회전/분의 회전 진탕 배양, 및 배양 기간 1주간으로 했다. 배양액을 실시예 2와 같은 방법으로 분석하여, 펙틴 농도는 1.51g/l, 세포의 증식률 1.87배가 얻어졌다.
[실시예 6 ~ 9]
실시예 5에서 40ml의 배지량을 60, 80, 100ml 및 120ml로 하고 실시예 5와 같은 배양을 행하여, 각각, 펙틴을 얻었다. 결과를 표 3에 나타냈다.
[표 3]
실시예 번호 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 |
배지량 (ml) | 40 | 60 | 80 | 100 | 120 |
펙틴농도 (g/l) | 1.51 | 1.24 | 0.86 | 0.66 | 0.51 |
증식률 (배) | 1.87 | 1.80 | 1.53 | 1.30 | 1.27 |
[실시예 10]
니겔라·사티바 (Nigella sativa)의 유묘를 실시예 1과 같은 방법으로 칼루스를 유도하고, 반복하여 3회 배양함으로써, 안정 증식하는 세포주를 얻었다. 얻어진 세포를 표 1 조성의 액체 배지에 현탁하고, 실시예 7과 같은 조건으로 배양했다. 배양액을 분석하여, 펙틴 농도 1.60g/l, 세포의 증식률 18.6배가 얻어졌다.
[실시예 11]
실시예 3에서 얻어진 배양액으로부터 세포 등의 고형물을 여과에 의해 제거한 액 2L (플라스크 5개)에 40ml의 0.5M 에틸렌디아민 4 초산 (pH8)을 첨가하여, 용액중의 펙틴을 가용화한 후, 미세한 고형물을 더욱 여과 분리했다. 여과액에 에탄올 6L를 가하고, 온화하게 교반함으로써 펙틴을 침전물로서 얻었다. 1일 냉장 후, 침전물을 여과 분리하고, 물 1L에 재용해하여 펙틴 용액을 얻었다. 용액으로부터 여과에 의해 불용성 성분을 제거하고 동결 건조함으로써, 백색 분말로서 펙틴 3.2 g이 얻어졌다.
[실시예 12]
(1) 검량선의 작성
폴리에틸렌글리콜 (분자량 2×106, 와코쥰야쿠 시약)을 1g/l농도가 되도록 물에 용해하고, 이하의 조건으로 겔여과 크로마토그래피를 측정했다.
컬럼:토소 제품 TSKgelG5000PWXL
이동상: 0.1M 초산나트륨 수용액
유속: 0.5ml/분
온도: 40℃
시료 농도: 1g/l농도의 수용액
시료 주입량: 10㎕
검출기: 시차굴절계 (시마즈세이사쿠쇼 제품 RID-10A)
얻어진 분포 곡선에서, 피크를 나타내는 유지 시간이 10.8분이었다. 마찬가지로 폴리에틸렌옥사이드 (분자량 1×106, 5×105, 2×105, 지엘사이언스 시약)를 겔여과 크로마토그래피로 측정하고, 피크를 나타내는 유지 시간이 각각, 11.3분, 11.8분, 13.2분이었다. 분자량과 유지 시간의 관계를 플롯하여, 검량선을 작성했다.
(2) 펙틴의 분자량의 측정
실시예 11에서 얻어진 펙틴을 1g/l 농도가 되도록 물에 용해하고, 상기의 조건으로 겔여과 크로마토그래피를 측정했다. 얻어진 분포 곡선은 유지 시간이 9.1분 ~ 13.2 분의 범위에 있고, 또, 피크를 나타내는 유지 시간이 10.8분이었다. 검량선으로부터, 실시예 11에서 얻어진 펙틴은 분자량의 범위가 2×105 ~ 1×107이고, 피크를 나타내는 분자량이 2.0×106이었다 (도 1).
[시험예 1]
실시예 11에서 얻어진 본 발명의 펙틴을 페이퍼 디스크법으로 수분 유지 능력을 조사했다. 즉, 본 발명의 펙틴의 농도 1g/l의 수용액을 제조하고, 직경 8mm의 여과지에 샘플 10㎕를 함침시키고, 온도 25℃, 상대습도 20%의 조건하에 두고, 경 시적으로 중량 변화 (수분 잔존율)를 측정했다. 대조구로서 물, 1g/l 농도의 히알루론산 나트륨 (와코쥰야쿠, 분자량의 범위가 1×105 ~ 5×106이고, 분자량 피크는 1.7×106) 수용액, 및, 1g/l 농도의 시판 펙틴 (감귤 유래의 펙틴, 토쿄카세이, 분자량의 범위가 1×104 ~ 8×105이고, 분자량 피크는 1.0×105) 수용액을 이용했다. 결과를 표 4에 나타냈다. 본 발명의 펙틴은 대조구와 비교하여, 수분 잔존율이 높아서, 높은 수분 유지 능력을 가짐을 알았다.
[표 4]
시간 (분) | 수분 잔존율 (%) | |||
물 | 시판 펙틴 | 히알루론산 나트륨 | 본발명 펙틴 | |
0 2.5 5 7.5 10 | 100.0 87.1 74.2 62.4 51.5 | 100.0 87.7 76.9 65.3 54.7 | 100.0 90.1 79.2 69.3 59.4 | 100.0 91.4 81.6 72.0 62.2 |
[시험예 2]
실시예 11에서 얻어진 본 발명의 펙틴의 1g/l 농도의 수용액을 제조하고, 피표각층 수분량 측정 장치 SKICON-200 (아이·비·에스)을 사용한 생체각층 수부하 시험을 행하였다. 시험 방법은 온도 25℃, 상대습도 20%의 환경에서, 어깨위 내쪽의 피부상에 샘플 20㎕를 적하하고, 10초 후에 닦아내고, 그 후의 피부각층의 수분량을 전기 전도도의 변화에 의해 측정했다. 대조구로서 시험예 1에서 사용한, 물, 1g/l 농도의 히알루론산 나트륨 수용액, 1g/l 농도의 시판 펙틴 수용액을 사용했다. 결과를 도 1에 나타냈다. 본 발명의 펙틴은 시판의 펙틴 및 히알루론산 나트륨 보다 피부상의 수분을 유지하는 능력이 높고, 특히 초기 수분량이 높으므로 피부 침투성, 친화성이 우수함을 알았다.
[시험예 3]
실시예 11에서 얻어진 본 발명의 펙틴의 1g/l 농도의 수용액을 제조하고, 레오미터 (REOLOGICA)를 사용하여, 온도 35℃, 응력 1Pa에서의 점도를 측정했다. 대조구로서 글리세린 (와코쥰야쿠), 히알루론산 나트륨 (와코쥰야쿠)의 1g/l 농도의 수용액을 사용했다. 결과를 표 5에 나타냈다. 본 발명의 펙틴은 글리세린보다 높은 점성을 주지만, 히알루론산 나트륨보다 점도가 낮았다. 이것은, 화장품 소재로서 촉촉한 감이나 매끈매끈한 감은 유지하면서, 끈적끈적함이 적은 사용감을 줄 수 있다.
[표 5]
점도 (mPa·s) | |
본 발명 펙틴 | 11.8 |
히알루론산 나트륨 | 44.6 |
글리세린 | 2.5 |
[제조예 1]
실시예 11에서 얻어진 펙틴 0.1중량%, 1,3-부틸렌글리콜 2.5중량%, 글리세롤 (86%) 0.5중량%, 폴리옥시에틸렌 경화 피마자유 0.5중량%, 유산 0.05중량%, 유산나트륨 0.7중량%, 에탄올 7.0중량%, 파라옥시벤조산 메틸 0.1중량%, 향료 0.05중량%, 정제수 88.5중량%의 처방에 의해 화장수를 제조했다.
[제조예 2]
실시예 11에서 얻어진 펙틴 0.2중량%, 유동 파라핀 4.0중량%, 스쿠와란 4.0중량%, 세타놀 0.5중량%, 스테아린산 1.5중량%, 모노올레인산 솔비탄 1.0중량%, 모노올레인산 폴리옥시에틸렌솔비탄 1.0중량%, 모노스테아린산 글리세롤 0.5중량%, 파라옥시벤조산 에틸 0.2중량%, 글리세롤 (86%) 3.0중량%, 1,3-부틸렌글리콜 5.0중량%, 향료 0.05중량%, 정제수 79.05중량%의 처방에 의해 유액을 제조했다.
[제조예 3]
실시예 11에서 얻어진 펙틴 0.5중량%, 바셀린 8.0중량%, 라놀린 2.0중량%, 스쿠와란 20.0중량%, 세타놀 5.0중량%, 모노스테아린산 글리세롤 2.0중량%, 폴리옥시에틸렌 모노라우린산 솔비탄 2.0중량%, 파라옥시벤조산 에틸 0.2중량%, 글리세롤 (86%) 5.0중량%, 1,3-부틸렌글리콜 5.0중량%, 향료 0.1중량%, 정제수 50.2중량%의 처방에 의해 크림을 제조했다.
[제조예 4]
실시예 7에서 얻어진 배양액을 실시예 11과 같은 방법으로 처리해 얻어진 펙틴 0.3중량%, 폴리비닐알코올 18.0중량%, 폴리에틸렌글리콜 2.0중량%, 1,3-부틸렌글리콜 5.0중량%, 에탄올 8.0중량%, 파라옥시벤조산 메틸 0.1중량%, 향료 0.05중량%, 정제수 66.55중량%의 처방에 의해 팩을 제조했다.
[제조예 5]
실시예 10에서 얻어진 배양액을 실시예 11과 같은 방법으로 처리해 얻어진 펙틴 1.0중량%, 1,3-부틸렌글리콜 20.0중량%, 글리세롤 (86%) 15.0중량%, 폴리에틸렌글리콜 5.0중량%, 폴리옥시에틸렌 헥사데실에테르 0.1중량%, 구연산 0.05중량%, 구연산나트륨 0.5중량%, 파라옥시벤조산 메틸 0.2중량%, 향료 0.1중량%, 정제수 58.05중량%의 처방에 의해 엣센스를 제조했다.
[제조예 6]
실시예 7에서 얻어진 배양액을 실시예 11과 같은 방법으로 처리하여 얻어진 펙틴 0.3중량%, 탈크 30.0중량%, 세리사이트 25.0중량%, 산화티탄 10.0중량%, 변성 실리콘 7.0중량%, 폴리에틸렌 분말 4.0중량%, 스쿠와란 2.0중량%, 파라옥시벤조산 메틸 0.1중량%, 향료 0.05중량%, 정제수 21.55중량%의 처방에 의해 파운데이션을 제조했다.
[제조예 7]
실시예 10에서 얻어진 배양액을 실시예 11과 같은 방법으로 처리해 얻어진 펙틴 0.3중량%, 변성 실리콘 45.0중량%, 캐데리라왁스 20.0중량%, 파라핀 왁스 10.0중량%, 카르바나왁스 10.0중량%, 이소팔미틴산 이소부틸 4.0중량%, 사과산 디이소스테아릴 3.7중량%, 이소노난산 이소노닐 2.0중량%, 적색 202호 2.0중량%, 적색 101호 1.0중량%, 산화티탄 1.0중량%, 황색 4호 1.0중량%의 처방에 의해 루즈를 제조했다.
실시예에서 상술한 바와 같이, 본 발명의 식물의 세포 배양에 의해 고분자량의 펙틴을 제공할 수 있다. 얻어진 고분자량의 펙틴은 높은 수분 유지 능력과 낮은 점성을 가지고 있기 때문에, 화장품 소재, 특히, 보습제로서의 이용이 가능해진다.
Claims (7)
- 니겔라속 식물의 세포를 배양함으로써 얻어지는 배양물 또는 배양액으로부터 분리, 회수되고, 구성당으로서 갈락투론산을 70 ~ 90몰% 함유하고, 또한, 겔여과 크로마토그래피에 의해 측정한 분자량의 범위가 1×104 ~ 5×107이고, 또한, 피크를 나타내는 분자량이 2×105 ~ 1×107의 범위인 것을 특징으로 하는 펙틴.
- 제1항에 있어서,구성당의 몰비가 갈락투론산: 아라비노스: 갈락토오스: 글루쿠론산: 글루코오스: 자일로오스: 람노스: 만노스: 프록토오스 = 7 ~ 9 : 0.4 ~ 0.7 : 0.4 ~ 0.6 : 0.1 ~ 0.6 : 0.05 ~ 0.5 : 0.04 ~ 0.4 : 0 ~ 0.1 : 0 ~ 0.08 : 0 ~ 0.05인 것을 특징으로 하는 펙틴.
- 삭제
- 제1항에 있어서,니겔라속 식물이 크로타네소우 (Nigella damascena) 또는 니겔라·사티바 (Nigella sativa)인 것을 특징으로 하는 펙틴.
- 제1항, 제2항 및 제4항 중 어느 한 항에 기재된 펙틴의 보습제로서의 사용방법.
- 제1항, 제2항 및 제4항 중 어느 한 항에 기재된 펙틴을 함유하는 화장료.
- 니겔라속 식물의 세포를 배양함으로써 얻어지는 배양물 또는 배양액으로부터 제1항, 제2항 및 제4항 중 어느 한 항에 기재된 펙틴을 분리, 회수하여 얻는 것을 특징으로 하는, 제1항, 제2항 및 제4항 중 어느 한 항에 기재된 펙틴의 제조 방법.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JPJP-P-2004-00087499 | 2004-03-24 | ||
JP2004087499 | 2004-03-24 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
KR20060133038A KR20060133038A (ko) | 2006-12-22 |
KR100826723B1 true KR100826723B1 (ko) | 2008-04-30 |
Family
ID=34993644
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020067021673A KR100826723B1 (ko) | 2004-03-24 | 2005-02-21 | 식물세포 유래 펙틴 |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20070202233A1 (ko) |
EP (1) | EP1739096A1 (ko) |
JP (1) | JP4430668B2 (ko) |
KR (1) | KR100826723B1 (ko) |
WO (1) | WO2005090410A1 (ko) |
Families Citing this family (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
BRPI0504797B1 (pt) * | 2005-10-27 | 2020-02-04 | Pele Nova Biotecnologia S A | formulação tópica, método de tratamento cosmético para rejuvenescimento da pele, método de tratamento cosmético e uso de uma formulação |
JP4649569B2 (ja) * | 2007-12-12 | 2011-03-09 | 三重県 | 増粘安定剤 |
JP5975453B2 (ja) * | 2008-11-14 | 2016-08-23 | 株式会社 アスキー | 多糖類の抽出方法 |
CA2829614A1 (en) * | 2011-03-15 | 2012-09-20 | Adil HASEEB | Process for producing melanin using cultures of the genus nigella |
US8592575B2 (en) | 2011-06-06 | 2013-11-26 | Cp Kelco Aps | Process for extraction of pectin |
JP5772678B2 (ja) * | 2012-03-26 | 2015-09-02 | 国立大学法人北見工業大学 | 保水性、吸水性およびヒアルロニダーゼ阻害活性を有する化粧品素材および機能性食品素材 |
EP2931376B1 (en) | 2012-12-17 | 2017-07-26 | Unilever N.V. | Topical composition |
KR102014395B1 (ko) * | 2013-06-05 | 2019-08-26 | 주식회사 엘지생활건강 | 블랙커민(Nigella sativa)추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물 |
JP6829983B2 (ja) * | 2016-11-18 | 2021-02-17 | 株式会社マンダム | 化粧料 |
CN110013449B (zh) * | 2019-04-11 | 2021-10-19 | 涿州皓原箔业有限公司 | 一种美甲油及其制备方法 |
CN111019010B (zh) * | 2019-12-31 | 2021-10-29 | 河南大学 | Nigella sativa种籽多糖、提取方法和制备治疗2型糖尿病药物的应用 |
CN114456246A (zh) * | 2022-02-25 | 2022-05-10 | 瀚科(浙江)生物科技有限责任公司 | 一种提高刺梨蛋白抑菌活性和热稳定性的方法和应用 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1999003892A1 (en) * | 1997-07-16 | 1999-01-28 | Coöperatie Cosun U.A. | Novel pectin |
JP2003199534A (ja) * | 2002-01-05 | 2003-07-15 | Nihon Shokken Co Ltd | リパーゼ活性阻害作用を有する中分子ペクチン含有飲食品 |
Family Cites Families (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE4003172A1 (de) * | 1990-02-03 | 1991-08-08 | Basf Ag | Pfropfcopolymerisate von monosacchariden, oligosacchariden, polysacchariden und modifizierten polysacchariden, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung |
US5368840A (en) * | 1990-04-10 | 1994-11-29 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Natural polymers as contrast media for magnetic resonance imaging |
JPH07149627A (ja) * | 1993-11-30 | 1995-06-13 | Shiseido Co Ltd | ケロイド治療剤 |
US20020168429A1 (en) * | 1998-04-30 | 2002-11-14 | Mann Douglas G. | Nutritional supplement and method of delivery |
JP3569234B2 (ja) * | 2000-02-08 | 2004-09-22 | 利光 服部 | 化粧料 |
TWI320713B (ko) * | 2001-06-01 | 2010-02-21 | Neochemir Inc |
-
2005
- 2005-02-21 KR KR1020067021673A patent/KR100826723B1/ko active IP Right Grant
- 2005-02-21 US US10/593,648 patent/US20070202233A1/en not_active Abandoned
- 2005-02-21 EP EP05719325A patent/EP1739096A1/en not_active Withdrawn
- 2005-02-21 WO PCT/JP2005/002706 patent/WO2005090410A1/ja not_active Application Discontinuation
- 2005-02-21 JP JP2006511138A patent/JP4430668B2/ja active Active
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1999003892A1 (en) * | 1997-07-16 | 1999-01-28 | Coöperatie Cosun U.A. | Novel pectin |
JP2003199534A (ja) * | 2002-01-05 | 2003-07-15 | Nihon Shokken Co Ltd | リパーゼ活性阻害作用を有する中分子ペクチン含有飲食品 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2005090410A1 (ja) | 2005-09-29 |
KR20060133038A (ko) | 2006-12-22 |
EP1739096A1 (en) | 2007-01-03 |
US20070202233A1 (en) | 2007-08-30 |
JPWO2005090410A1 (ja) | 2008-01-31 |
JP4430668B2 (ja) | 2010-03-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
KR100826723B1 (ko) | 식물세포 유래 펙틴 | |
KR102402508B1 (ko) | 고형 분말 화장료 | |
CN102046141B (zh) | 皮肤外用剂 | |
KR102280926B1 (ko) | 피부용 화장료 조성물, 피부용 화장료용 항균제 및 디올 화합물이 갖는 항균효과의 증강방법 | |
CN105407868A (zh) | 化妆品用凝胶状组合物 | |
JP2008247839A (ja) | カルコン配糖体を含む抗酸化剤 | |
JP2018512148A (ja) | 紅藻アクロカエティウム・モニリフォルメ(Acrochaetium moniliforme)の細胞を培養するための方法、そのバイオマスの抽出物を得るための方法および化粧料におけるその使用 | |
JP2022163692A (ja) | アルキルグリセリルエーテルの製造方法、アルキルグリセリルエーテル及び該アルキルグリセリルエーテルを含有する化粧料組成物又は洗浄剤組成物 | |
CN108778231A (zh) | 水包油型组合物 | |
JP2007161681A (ja) | しわ防止および皮膚状態改善剤 | |
JP4800870B2 (ja) | マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤 | |
JP2011001313A (ja) | バイオサーファクタント及び界面活性剤を含有する組成物 | |
JP2009149566A (ja) | バイオサーファクタントを含有する化粧品組成物 | |
US20240197602A1 (en) | Dermatological topical agent composition containing useful component-including taurine crystals | |
JP2009242344A (ja) | ケラチノサイト増殖促進剤 | |
JP2010150173A (ja) | 美白剤、メラニン産生抑制剤、及び美白用皮膚外用剤 | |
CN110891547A (zh) | 含有粉体的水系组合物和皮肤外用剂 | |
JP4203325B2 (ja) | 皮膚外用剤及び皮膚外用剤組成物 | |
JP5201723B2 (ja) | ケラチノサイト増殖促進剤 | |
JP2011001312A (ja) | バイオサーファクタント及び多価アルコールを含有する組成物 | |
JP2010018559A (ja) | バイオサーファクタントを含有する化粧品組成物 | |
JP2010222273A (ja) | 養毛剤組成物 | |
JP2011001314A (ja) | バイオサーファクタント及び抗炎症剤を含有する組成物 | |
JP2007238444A (ja) | ケラチノサイト増殖促進剤 | |
JP5291369B2 (ja) | ケラチノサイト増殖促進剤 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A201 | Request for examination | ||
N231 | Notification of change of applicant | ||
E902 | Notification of reason for refusal | ||
E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
GRNT | Written decision to grant | ||
FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20130404 Year of fee payment: 6 |
|
FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20140411 Year of fee payment: 7 |
|
FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20150422 Year of fee payment: 8 |
|
FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20180413 Year of fee payment: 11 |