KR102014395B1 - 블랙커민（Ｎｉｇｅｌｌａ ｓａｔｉｖａ）추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 블랙커민(Nigella sativa) 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따른 화장료 조성물은 피부 pH 조절인자인 나트륨/수소 이온통로(Na+/H+ Exchanger 1)의 활성을 높임으로써, 보다 본질적이고, 지속적으로 피부 pH를 약산성으로 유지시키며, 피부장벽 기능을 개선하고, 피부의 유연성 및 보습에 우수한 효과를 보인다.

Description

블랙커민（Ｎｉｇｅｌｌａ ｓａｔｉｖａ）추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물{Cosmetic compositions comprising Nigella sativa}

본 발명은 블랙커민(Nigella sativa) 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다.

피부의 최외각층인 각질층(Stratum Corneum, SC)은 외부환경에 직접 접하고 있기 때문에 인체에서 매우 중요한 부분으로 각질세포와 세포 사이사이를 채우는 라멜라 액정구조의 세포 간 지질성분으로 구성되어 있다. 이러한 특유의 구조는 피부의 주요 기능인 피부장벽기능을 발휘하여 피부를 보호하며 피부의 유연성 및 보습 기능을 담당한다.

정상적인 피부 각질층의 pH는 약산성을 유지하며, 피부의 pH는 항균방어 작용, 피부 장벽의 항상성 유지 및 각질세포의 성숙과 박리에 관여하는 중요한 인자이다 (Skin Pharmacol Physiol 2006; 19:296-302).

내/외부의 원인에 의해 피부의 pH가 중성화되면, 각질층을 형성하는데 관여하는 각종 효소들의 최적 pH에 영향을 주어 각질층이 정상적으로 형성되지 못하고 세균 증식이나 감염에도 취약하게 되어 피부장벽기능의 약화를 가져온다(Arch Dermatol Res 1998; 290:215-22). 피부의 각질층은 두 가지 주요 pH 조절 메커니즘으로 피부 pH를 약산성으로 유지하는데, 포스포리파아제라고하는 지질가수분해 효소가 인지질을 지방산으로 분해하여 pH를 낮추거나 나트륨/수소 이온통로를 통해 세포 밖으로 수소이온을 내보내 pH를 낮춘다(J Invest Dermatol 2001; 117:44-51, J Biol Chem 2002; 277:47399-406).

피부 pH의 약산성화를 목적으로, 공개특허 제2011-0140096는 비교적 낮은 ｐＨ를 갖는 저자극성의 투명한 세정 조성물을 개시하고, 공개특허 제2010-0051450는 약산성의 저방부 및 저자극성 피부 외용제 조성물을 개시하고, 공개특허 제2010-0082598는 강황 추출물과 폴리사카라이드를 포함하는 약산성 비누 조성물 및 그 제조방법을 개시하고, 공개특허 제2007-0095640는 산성 이온수를 함유하는 화장료 조성물을 개시하고 있다. 하지만 이는 외용제 조성물의 pH를 약산성으로 한 경우로 일시적으로 피부 pH를 낮춰 주는데 도움을 줄 수는 있으나 장기적으로 피부 pH조절 능력과 이를 통한 피부 장벽개선에는 한계가 있다.

이에, 본 발명은 피부 pH 조절, 피부장벽기능 개선 및 보습 효과가 뛰어날 뿐만 아니라, 피부에도 안전하고, 화장료 조성물 및 피부 외용제로 제형화도 용이한 천연식물 소재를 발굴하고, 이를 포함한 화장료 조성물을 제공하고자 한다.

본 발명자들은 피부 pH 조절, 피부장벽기능 개선 및 보습에 효과적인 천연식물 소재를 발굴하는 과정에서 블랙커민(Nigella sativa) 추출물이 피부 세포의 피부 pH 조절인자인 각질형성세포 내에서 발현되는 나트륨/수소 이온통로인 NHE1의 활성을 높여, 피부 pH를 약산성화 시킴으로써, 피부장벽의 기능을 개선시키고, 피부의 유연성 및 보습에도 우수한 효과가 있음을 알게 되어, 본 발명을 완성하였다.

하기 실시예를 통해, 본 발명자들은 블랙커민 추출물의 각질형성세포(HaCaT) 내 pH조절인자인 NHE1 mRNA 발현 효과가 대조군 대비 약 3.3배 우수함을 확인하였다(실시예 1). 또한 블랙커민 추출물의 농도가 증가함에 따라 NHE1 단백질 발현이 증가함을 확인하였으며, 대조군 대비 블랙커민 추출물 1%의 NHE1 단백질 발현 효과가 약 2.4배 우수함을 확인하였다(실시예 2). 또한, 블랙커민 추출물을 함유한 본 발명에 따른 화장료 조성물을 이용해, 인체 임상실험 결과 1주차 이후부터 피부손상으로 인해 피부 pH가 중성화된 피부가 유의한 수준으로 피부 pH 및 보습 수치가 개선되었음을 확인하였다(실시예 3, 4),

상기 블랙커민(Nigella sativa)은 아시아와 중동 전역에서 자생하고 있는 한해살이 식물로서, 열매가 열리는데 이 검은 씨 부분을 건조 분쇄하여 향신료로 이용하거나 씨에서 추출한 정유를 향수나 립스틱에 사용한다. 블랙커민의 씨앗은 다양한 필수지방산을 포함하고 있으며, 면역질환, 천식, 알레르기 개선에 도움을 주는 것으로 알려져 있으며, 염증이나 습진과 같은 피부 질환을 위해 사용되었다고 하나 현재까지 블랙커민 추출물의 pH조절, 피부장벽기능 개선 및 보습 효능에 대해서는 연구된 바가 없었다.

따라서 본 발명은 블랙커민 추출물을 유효성분으로 포함하는 pH 조절용 화장료 조성물, 피부장벽기능 개선용 화장료 조성물 및 보습용 화장료 조성물을 제공하고자 한다.

본 발명에 있어서, "피부 pH"란, 피부 각질층의 pH를 의미하며, 정상적인 피부의 pH 범위는 약 4.5~6.5이고, 보다 바람직하게는 4.5 내지 5.5로 약산성이다.

피부의 pH 조절 메커니즘은 첫째, 포스포리파아제라고 하는 지질가수분해 효소가 인지질을 지방산으로 분해하여 pH를 낮추거나, 둘째, 나트륨/수소 이온 통로를 통해 세포 밖으로 수소이온을 내보내 pH를 낮추는 것으로 알려져 있다.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 상기 피부의 pH 조절 메커니즘 중 각질형성세포(HaCaT) 내 pH조절인자인 나트륨/수소 이온통로(Na+/H+ Exchanger 1)의 유전자 및 단백질 활성을 증가시킴으로써, 단순히 약산성의 물질을 피부에 바름으로써, 일시적인 pH 조절 효과를 나타내는 종래의 피부 pH 조절용 조성물과 비교하여, 보다 본질적이고, 지속적으로 피부 pH를 약산성으로 유지시키는 효과가 있다.

본 발명에 있어서, "피부장벽기능"이란, 각질세포와 각질세포를 둘러싼 세포간 지질의 라멜라 구조에 의해, 외부에서의 이물질의 침입을 막고, 동시에 체내의 수분 및 전해질 등을 체외로 상실하는 것을 막는 능력을 말하는 것이다.

즉, 피부장벽기능은 세포간 지질과 밀접한 연관이 있으며, 상기 세포간 지질은 세라마이드를 주요 성분으로 하며, 피부의 pH가 약산성일 때, 세라마이드의 합성과정에 관여하는 각종 효소의 활성이 증가되어 세라마이드 및 세포간 지질의 합성이 촉진됨으로써, 피부장벽기능을 개선한다. 또한, 피부의 pH는 약산성일 때, 항균 작용, 피부의 결합력과 응집력, 피부 장벽의 항상성 유지 및 각질세포의 성숙과 박리 등 피부장벽기능과 밀접히 관련된 요소들이 활성화된다.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 각질형성세포(HaCaT) 내 pH조절인자인 나트륨/수소 이온통로(Na+/H+ Exchanger 1)의 유전자 및 단백질 활성을 증가시켜, 안정적으로 피부 pH를 조절함으로써, 세라마이드의 합성을 촉진, 항균 작용, 피부의 결합력과 응집력, 피부 장벽의 항상성 유지 및 각질세포의 성숙과 박리 등을 활성화시켜 피부장벽기능 개선에 효과적이다.

본 발명에 있어서, "보습"이란, 건조한 대기와 자극에 의해 건조하고 거칠며 각질이 일어나는 피부에 수분을 공급하고 수분의 증발을 차단하여 피부의 유연성을 유지하고 균일한 각질 탈락을 유도하여 매끈한 표면을 유지하게 하는 것이다.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 종래의 수분 및 지질성분 공급형 보습제 또는 수분손실 방지를 위한 막형성 보습제와 차별화되는 것으로서, 각질형성세포(HaCaT) 내 pH조절인자인 나트륨/수소 이온통로(Na+/H+ Exchanger 1)의 유전자 및 단백질 활성을 증가시켜, 안정적으로 피부 pH를 약산성으로 조절함으로써, 피부장벽기능(skin barrier function)을 원할하게 하여, 결과적으로 피부의 탄력성, 유연성 및 보습감에 효과적이다.

본 발명에 따른 블랙커민 추출물은 시판품을 사용하거나, 통상의 식물 추출물의 제조방법에 따라 제조되거나 일 수 있다.

상기 블랙커민 추출물은 블랙커민의 꽃, 씨, 잎, 가지, 뿌리, 열매, 껍질 또는 이들의 혼합물을 통상의 용매로 추출한 것일 수 있다. 바람직하게는 블랙커민의 씨를 이용할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

상기 블랙커민 추출물의 제조를 위해 사용되는 추출용매는 이에 제한되는 것은 아니나, 물, 유기용매 또는 이들의 혼합물로부터 선택되는 용매일 수 있다. 상기 유기용매는 탄소수 1 내지 5의 알코올, 에틸아세테이트, 아세톤 등의 극성용매와 에테르, 클로로포름, 벤젠, 헥산, 디클로로메탄 등의 비극성용매 또는 이들의 혼합용매일 수 있다. 예를 들어, 상기 탄소수 1 내지 5의 알코올은 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 이소프로판올 등으로부터 선택될 수 있다.

본 발명에 있어서, 블랙커민 추출물은 상기 추출용매를 이용하여 추출된 1차 추출물을 극성이 다른 추출용매를 이용하여 다시 분획한 분획물을 포함한다. 예를 들어, 블랙커민 추출물은 탄소수 1 내지 5의 알코올로 추출한 후, 에테르, 벤젠, 헥산 등의 극성이 다른 용매로 다시 분획한 분획물 일 수 있다.

상기 분획 시 용매는 2종 이상 사용할 수 있으며, 용매의 극성에 따라 순차적으로 사용하거나 혼합하여 사용하여, 각 용매 추출물을 제조할 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다.

본 발명에 있어서, 상기 제조된 추출물 또는 상기 분획과정을 수행하여 수득한 분획물에 대해 여과하거나 농축 또는 건조과정을 수행하여 용매를 제거할 수 있으며, 여과, 농축 및 건조를 모두 수행할 수 있다. 구체적으로 상기 여과는 여과지를 이용하거나 감압여과기를 이용할 수 있으며, 상기 농축은 감압 농축기, 일 예로 회전 증발기를 이용하여 감압 농축할 수 있으며, 상기 건조는 일 예로 동결건조법으로 수행할 수 있다.

또한, 상기 제조된 추출물 또는 상기 분획과정을 수행하여 수득한 분획물에 대해 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(silica gel column chromatography), 박층 크로마토그래피(thin layer chromatography), 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography) 등과 같은 다양한 크로마토그래피를 이용하여 정제함으로써 추가로 정제된 분획을 얻을 수도 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 유효량의 블랙커민 추출물을 포함할 때, 바람직한 효과를 제공할 수 있다. 본 발명에 있어서, "유효량"이라 함은 충분한 나트륨/수소 이온통로(Na+/H+ Exchanger 1)의 활성을 나타낼 수 있는 양을 의미한다. 예컨대, 본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 상기 블랙커민 추출물의 유효량은 전체 조성물 100 중량부에 대하여, 0.01 내지 90 중량부로 포함할 수 있다. 예를 들어, 1 내지 90 중량부, 10 내지 90 중량부, 또는 20 내지 90 중량부일 수 있다. 이는 본 발명의 조성물이 상기 블랙커민 추출물을 0.01 중량부 미만으로 포함할 경우에는 충분한 피부장벽기능 개선 및 피부의 유연성, 보습 효과를 기대할 수 없고, 90 중량부를 초과하여 포함할 경우에는 알러지 등 원치 않는 반응이 발생하거나 피부 안전성에 문제가 있을 수 있으므로 이를 방지하기 위한 것이다. 상기와 같은 조성은 반드시 이에 한정되는 것은 아니고, 상기 조성물의 목적, 제품화되는 형태 및 적용 대상자의 상태에 따라 변할 수 있다.

한편, 본 발명의 조성물은 공지된 피부 pH 조절, 피부장벽기능 개선 및 보습 효과를 나타내거나 증강시키는 성분을 1종 이상을 추가로 함유할 수 있다.

추가적인 피부 pH 조절, 피부장벽기능 개선 및 보습 성분을 포함하게 되면, 본 발명의 효과는 더욱 증진될 수 있을 것이다.

당업계에 공지된 pH 조절성분은 젖산 또는 그의 염, 피롤리돈 카르복시산 또는 그의 염 및 아미노산 군(라이신, 히스티딘, 아르기닌, 아스파르트산, 트레오닌, 세린, 글루탐산, 프롤린, 글리신, 알라닌, 발린, 메티오닌, 이소로이신, 로이신, 티로신, 페닐알라닌, 하프시스테인, 시스테인, 아스파라긴, 글루타민, 및 트립토판 등)이 있으며, 당업계에 공지된 피부장벽기능 개선성분은 스핑고신, 파이토스핑고신, 리소포스파디딜산 등의 기능성 인지질 및 그의 유도체, 세라마이드, 콜레스테롤, 지방산 등이 있으며, 당업계에 공지된 보습 성분은 페트로라툼 (바세린), 미네랄오일, 실리콘, 중성지방, 필수지방산(일예로써, 감마리놀렌산(달맞이꽃 종자유)), GGF, Amino acid, Provitamin B5, Hyaluronic acid, Poly-γ-Glutamic acid, Lipidure PMB, 세라마이드, 콜레스테롤, 지방산 등이 있다.

상기 추가된 피부 pH 조절, 피부장벽기능 개선 및 보습 성분들은 상기 나열한 성분으로 제한되지 않으며, 또한 이들과 동등한 효과를 나타내는 이들의 유사체 등을 모두 포함한다.

추가된 성분은 전체 조성물 100 중량부에 대하여 0.0001 내지 10 중량부로 포함될 수 있을 것이며, 상기 함량 범위는 피부 안전성, 제형화 시의 용이성 등의 요건에 따라 조절될 수 있을 것이다.

본 발명에 있어서, 상기 화장료 조성물을 제형화 시에는 International cosmetic ingredient dictionary, 6th ed., The cosmetic, Toiletry and Fragrance Association, Inc., Washington, 1995에 개시되어 있는 내용을 참조할 수 있을 것이다. 상기 문헌들은 본 명세서의 일부로서 포함된다.

이에 제한되는 것은 아니나, 상기 화장료 조성물은 일반적인 유화 제형 및 가용화 제형의 형태로 제조할 수 있다. 예컨대, 유연 화장수 또는 영양 화장수 등과 같은 화장수, 훼이셜 로션, 바디로션 등과 같은 유액, 영양 크림, 수분 크림, 아이 크림 등과 같은 크림, 에센스, 화장연고, 스프레이, 젤, 팩, 선크림, 메이크업 베이스, 액체 타입, 고체 타입 또는 스프레이 타입 등의 파운데이션, 파우더, 클렌징 크림, 클렌징 로션, 클렌징 오일과 같은 메이크업 제거제, 클렌징 폼, 비누, 바디워시, 등과 같은 세정제, 샴푸, 린스, 헤어 트리트먼트 헤어 무쓰, 헤어 리퀴드, 포마드, 헤어 칼라제, 헤어 블릿치제, 칼라 린스, 헤어 토닉 및 스칼프 트리트먼트 등의 헤어 용품 등의 제형을 가질 수 있다.

상기 제형에 따라 유효성분의 함량이 달라질 수 있다. 예로 들면, 유효성분이 단기간 내에 피부에 머무르게 되는 메이크업 제거제, 세정제 등과 같은 워시-오프(wash-off) 타입의 화장품의 경우에는 비교적 높은 농도일 수 있을 것이다. 반면, 유효성분이 장기간 동안 피부에 머무르게 되는 화장수, 유액, 크림, 에센스 등의 리브-온(leave-on) 타입의 화장품의 경우에는 워시-오프 타입의 화장품에 비해 낮은 농도를 포함해도 무방할 것이다.

또한 제형과 관련하여, 본 발명의 화장료 조성물은 통상적으로 화장료 조성물에 사용되는 안정화제, 용해제, 비타민, 안료 또는 향료 등의 보조제 및 담체를 추가로 포함할 수 있다. 예컨대 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온 봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 및 화장품 또는 피부 외용제에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 분야 또는 피부 과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 또한 상기 성분들은 화장품학 분야 또는 피부 과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입될 수 있다.

본 발명에 따른 블랙커민(Nigella sativa) 추출물은 피부 pH 조절인자인 나트륨/수소 이온통로(Na+/H+ Exchanger 1)의 활성을 높여 피부 pH를 약산성으로 유지시킴으로써, 피부장벽 기능을 개선하고, 피부의 유연성 및 보습에도 우수한 효과를 보인다.

도 1은 블랙커민 추출물의 NHE1의 mRNA 발현을 나타내는 도표이다.
도 2는 블랙커민 추출물의 NHE1의 단백질 발현을 나타내는 도표이다.
도 3은 블랙커민 추출물의 피부 pH 개선 정도를 나타내는 그래프이다.
도 4는 블랙커민 추출물의 피부 보습 개선 정도를 나타내는 그래프이다.
도 5는 블랙커민 추출물의 피부개선을 나타내는 그림이다.

본 발명의 이점 및 특징, 그리고 그것들을 달성하는 방법은 상세하게 후술되어 있는 실시예 및 제조예들을 참조하면 명확해질 것이다. 그러나 본 발명은 이하에서 개시되는 실시예 및 제조예에 한정되는 것이 아니라, 서로 다른 다양한 형태로 구현될 것이며, 단지 본 발명의 개시가 완전하도록 하고, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위해 제공되는 것이다.

[실시예 1] 블랙커민 추출물의 제조

블랙커민 분쇄물 100g을 70%(v/v) 에탄올 수용액 1L에 투입하고 냉각콘덴서가 달린 환류 추출기에서 3시간 동안 끓여 추출하였다. 상기 추출물을 100 메쉬 여과포로 여과한 후, 여과지에 남은 잔사를 상기와 동일한 방법으로 1회 더 환류 추출하여 추출하였다. 각각의 추출액을 합하여 상온에서 와트만(Whatman) 2번 여과지로 여과하여 불용성 물질을 제거한 후, 냉각콘덴서가 달린 증류장치에서 60℃로 감압 농축하여 100mL을 얻어 본 발명의 실험에 적용하였다.

[실험예1]

블랙커민 추출물의 NHE1 mRNA 발현에 미치는 영향

37℃, 5% CO₂의 조건에서 10% FBS(Gibco), 스트렙토마이신(streptomycin) 100 ㎍/㎖, 페니실린100 U/㎖, 암포테리신B (amphotericin B) 0.25 ㎍/mL가 첨가된 DMEM 배지를 사용하여 각질형성세포(HaCaT, Human keratinocyte)를 증식시킨다. 형성된 각질형성세포(HaCaT, Human keratinocyte)를 6웰에 5X10⁵ 세포/웰의 밀도로 3ml의 배지와 함께 분주한 뒤, 37℃, 5% CO₂ 배양기에서 24시간 배양한다. 배양된 상기 배지는 PBS로 씻어 FBS를 제거하였다. FBS가 제거된 배지에 증류수(대조군)와 블랙커민 추출물 1%를 각각 30ml씩 처리한 후 다시 배양하고, NHE1 mRNA양을 비교하였다. RNA는 RNA추출kit(RNeasy Mini Kit, Qiagen, USA) 를 사용하였고, cDNA는 SuperScript II reverse transcriptase (Invitrogen, USA)를 이용하여 합성하였으며, Platinum PCR supermix(Invitrogen, USA)와 제작된 프라이머(primer)를 사용하여 PCR을 수행하였다. cDNA 합성은 1㎍의 총 RNA(total RNA)로 50℃에서 1시간, 85℃에서 5분 동안 열을 가한 후, 반응을 중지시켰다. PCR 증폭은 94℃에서 50초 동안 변성(denaturation)시키고 60℃에서 50초 동안 어닐링(annealing)하고 72℃에서 50초 동안 익스텐션(extension) 시켰다. 이를 26 싸이클(cycle) 반복하고 마지막 익스텐션은 72℃에서 5분간 수행하였고, 증폭된 결과물은 2% 아가로스 겔(agarose gel)에서 전기영동하여 유전자 발현을 Fusion Fx5 detection system(Vilber Lourmat, Germany)으로 확인하였다. 그 결과는 하기 도 1에 나타내었다.

NHE1의 올리고뉴크레오티드(oligonucleotide) 서열은 다음과 같다.

Sense: 5'-CTCCACCGTCTCCATGCAGAACATCC - 3'

Antisense: 5'-CCTTCAGCTCCTCATTCACCAGGTCC- 3'

하기 도 1에서 알 수 있듯이, 블랙커민 추출물 1% 함량에서 각질형성세포(HaCaT, Human keratinocyte) 내 pH 조절인자인 NHE1의 mRNA 발현이 대조군에 비해 약 3.3배 높음을 확인할 수 있었다

[실험예2]

블랙커민 추출물의 NHE1 단백질 생합성에 미치는 영향

37℃, 5% CO₂의 조건에서 10% FBS(Gibco), 스트렙토마이신(streptomycin) 100 ㎍/㎖, 페니실린100 U/㎖, 암포테리신B (amphotericin B) 0.25 ㎍/mL가 첨가된 DMEM 배지를 사용하여 각질형성세포(HaCaT, Human keratinocyte)를 증식시킨다. 형성된 각질형성세포(HaCaT, Human keratinocyte)를 6웰에 5X10⁵ 세포/웰의 밀도로 3ml의 배지와 함께 분주한 뒤, 37℃, 5% CO₂ 배양기에서 24시간 배양한다. 배양된 상기 배지는 PBS로 씻어 FBS를 제거하였다. FBS가 제거된 배지에 증류수(대조군), 1N NaOH(양성대조군), 블랙커민 추출물 0.1%, 블랙커민 추출물 0.5%, 블랙커민 추출물 1%를 각각 30ml씩 처리한 후 다시 48시간 배양하였다. 상기의 방법으로 배양된 각질형성세포를 M-Per mammalian protein extraction reagent(Thermo Scientific, USA)를 통해 용해하고 원심분리하였다. 상층액을 회수하고 단백질 정량 후 12% SDS-PAGE를 이용하여 전기영동하고, 이를 니트로셀룰로오스 멤브레인으로 옮겼다. 5% 스킴 밀크(skim milk)로 blocking 후, 1차 항체(NHE1 항체, sc-136239) 와 반응시키고, 2차 항체(HRP 항체)를 가하는 항원항체반응을 실시한 후 Fusion Fx5 detection system(Vilber Lourmat, Germany)으로 확인하였다. 하기 도 2에서 알 수 있듯이, 블랙커민 추출물의 농도가 증가함에 따라 NHE1 단백질 발현이 증가하며, 블랙커민 추출물 1% 함량에서 NHE1단백질 발현이 대조군과 대비하여 약 2.4배 높음을 확인할 수 있었다.

[제조예1]

하기의 조성에 따라 통상의 방법을 이용하여, 제조예 1과 비교예 1의 제형을 제조하였다.

표 1의 조성에 따라 먼저 검믹서에 원료 7-9을 서서히 투입하여 충분히 용해시키고, 수상믹서에는 원료 10-15를 충분히 용해시키고, 유상믹서에는 원료 1-6을 투입하여 45도에서 충분히 용해시킨다. 검믹서와 수상믹서를 메인믹서로 이송한 후 충분히 교반하고 유상을 서서히 투입하여 충분히 용해시킨 후 원료 16을 넣어 중화 한 후 탈포 및 냉각하여 제조하였다.

제조예1 및 비교예1

순번	원료명	함량 (%)
		제조예 1	비교예 1
1	디프로필렌글라이콜	5.00	5.00
2	1,2-헥산디올	2.00	2.00
3	에탄올	4.00	4.00
4	피이지-8	5.00	5.00
5	피이지-40하이드로제네이티드캐스터오일	1.00	1.00
6	하이드로제네이티드레시틴	2.00	2.00
7	정제수	40.00	40.00
8	셀룰로오스검	0.50	0.50
9	카보머	0.40	0.40
10	정제수	To 100	To 100
11	글리세린	5.00	5.00
12	판테놀	2.00	2.00
13	알라닐글루타민	1.00	1.00
14	비스-피이지-18메칠에텔디메칠실란	3.00	3.00
15	블랙커민씨추출물	2.00	0.00
16	포타슘하이드록사이드	0.12	0.12

[실험예 3]

피부 pH 개선 효과

상기 제조예 1에 따라 제조된 화장료 조성물인 제조예 1 및 비교예 1을 이용하여 피부 pH개선 정도를 측정하였다. 건강한 남, 여를 각각 22명씩 선정하여 양팔의 하박부에 각각 두 개씩 1.2×1.2 cm² 크기로 라우릴황산나트륨(Sodium Lauryl Sulfate) 1%를 12시간 도포하여 피부를 손상시켜 피부 pH 를 중성화시켰다. 그 후 상기 표 1의 제조예 1 및 비교예 1을 각각 중성화된 피부에 150ml씩, 하루에 2회 도포하고 1주, 2주차에 피부 pH를 pH Meter기기 (Mettler Toledo, Swiss)를 이용하여 측정하였다.

그 결과 하기 도 3 및 도 5에서 알 수 있듯이, 1주차 이후에 제조예 1이 비교예 1과 비교하여, 통계적으로 유의한 수준으로 pH가 개선됨을 확인할 수 있었다.

[실험예 4]

피부 보습 개선 효과

상기 실험예 3의 실험과 동일한 방법으로 건강한 남·여 22명씩을 선정하여 양팔의 하박부에 각각 두 개씩 1.2×1.2 cm² 크기로 라우릴황산나트륨(Sodium Lauryl Sulfate) 1%를 12시간 도포하여 피부를 손상시켜 피부 pH 를 중성화시킨 후, 피시험자를 대상으로 다음과 같은 실험을 실시하였다. 상기 표 1의 제조예 1 및 비교예 1을 각각 중성화된 피부에 150ml씩, 하루에 2회 도포하고 1주, 2주차에 피부 수분 함유 정도를 Corneometer CM 825(Courage+Khazaka, Germany)를 이용하여 측정하였다. 그 결과 하기 도 4 및 도 5에서 알 수 있듯이, 1주차 이후에 제조예 1이 비교예 1과 비교하여, 통계적으로 유의한 수준으로 보습 수치가 증가함을 알 수 있었다.

Claims (13)

1. 블랙커민(Nigella sativa)) 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 pH 조절용 화장료 조성물.
   
2. 제 1 항에 있어서,
   상기 피부 pH를 4.5 내지 5.5의 범위로 조절하는 것인 피부 pH 조절용 화장료 조성물.
   
3. 제 1 항에 있어서,
   상기 블랙커민(Nigella sativa) 추출물은 전체 화장료 조성물 100 중량부에 대하여, 0.01 내지 90 중량부로 포함되는 피부 pH 조절용 화장료 조성물.
   
4. 제 1 항에 있어서,
   상기 화장료 조성물은 에센스, 화장수, 크림, 로션, 팩, 영양 크림, 마사지 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 클렌징 오일, 유액, 비누, 액체 세정제, 입욕제, 선크림, 선 오일, 샴푸, 린스, 헤어 트리트먼트, 헤어 무쓰, 헤어 리퀴드, 포마드, 헤어 칼라제, 헤어 블릿치제, 칼라 린스, 헤어 토닉 및 스칼프 트리트먼트로 이루어진 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 피부 pH 조절용 화장료 조성물.
   
5. 제 1 항에 있어서,
   상기 화장료 조성물은 보습제, pH조절제 및 피부장벽기능 개선제로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 첨가제를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 pH 조절용 화장료 조성물.
   
6. 블랙커민(Nigella sativa) 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부장벽 개선용 화장료 조성물.
   
7. 제 6 항에 있어서,
   상기 블랙커민(Nigella sativa) 추출물은 전체 화장료 조성물 100 중량부에 대하여, 0.01 내지 90 중량부로 포함되는 피부장벽 개선용 화장료 조성물.
   
8. 제 6 항에 있어서,
   상기 화장료 조성물은 에센스, 화장수, 크림, 로션, 팩, 영양 크림, 마사지 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 클렌징 오일, 유액, 비누, 액체 세정제, 입욕제, 선크림, 선 오일, 샴푸, 린스, 헤어 트리트먼트, 헤어 무쓰, 헤어 리퀴드, 포마드, 헤어 칼라제, 헤어 블릿치제, 칼라 린스, 헤어 토닉 및 스칼프 트리트먼트로 이루어진 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 피부장벽 개선용 화장료 조성물.
   
9. 제 6 항에 있어서,
   상기 화장료 조성물은 보습제, pH조절제 및 피부장벽기능 개선제로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 첨가제를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 피부장벽 개선용 화장료 조성물.
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