KR100499228B1 - 습식박테리오신소독와이프및이의사용방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 알콜 함량이 낮으며, 표면의 신속한 1단계 소독 및 건조가 가능한 박테리오신 소독 제제를 함유한 신규한 습식 종이 또는 직물 와이프에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 상기 와이프를 사용하여 착유 전후의 소의 유두 피부 등 피부의 소독 및 건조 방법에 관한 것이다.

Description

습식 박테리오신 소독 와이프 및 이의 사용방법

습식 소독 와이프(wipes) 또는 타월렛(towelletes)은 현재 상업적으로 입수 가능하며, 다양한 형태로 생산된다. 현재 와이프는 손, 피부, 식품 라인 및 병원 외면의 소독 뿐아니라 낙농 산업에 적용하는 등 다양한 용도로 사용 가능하다.

현재 입수가능한 습식 소독 와이프는 전형적으로 클로르헥시딘, 클로르헥시딘 디글루코네이트와 같은 살균제 또는 소독제로서 포비돈-요오드 및/또는 알콜을 함유한다. 알콜 성분은 일반적으로 농도로 70% 이상이며, 건조제로서의 역할도 한다. 습식 와이프에 노출된 표면의 충분한 건조가 중요하나, 보통 사용되는 높은 농도의 알콜로 피부가 과잉 건조되거나 트는 문제가 있다. 또한, 이러한 높은 알콜 함량의 제제에서의 인화점(flashpoint)과도 관계가 있다. 또한, 보통 사용되는 소독제는 이상적인 효능을 가지지 못하며, 신뢰할만한 소독 성질을 얻기 위해 필요한 양은 독성을 가지거나, 민감성 문제를 일으킬 수 있다.

현재 알려진 소독 방법으로는 해결할 수 없는 문제가 있는 특정한 한 분야로 낙농 산업이 있다. 낙농산업에서는 유선염으로 인하여 미국 내에서만 연간 20억 달러 이상의 막대한 손해을 보고 있다. 유선염 감염을 규제하기 위해서는 착유(milking) 전, 중, 후에 적합한 유방 위생 작업을 하는 것이 바람직하다.

착유를 위하여 젖소를 준비시키는 것은 착유 과정 중 가장 힘들고, 시간이 많이 드는 일이다. 보통, 낙농업자들은 상이한 두가지 방법 중 하나를 사용한다. 가장 일반적으로 행하여지는 방법은 유방 세척이다. 이 방법은 유방 세척액, 각각의 종이 타월 및 물을 사용하여 이루어진다. 유방 세척액은 물 호스의 스트림에 주입되어 유방에 분무될 수 있다. 이와 달리, 타월을 유방 세척액 양동이에 담그고, 젖은 종이 타월을 사용하여 유방을 세척 및 마사지하는 방법이 있다. 각각의 경우, 처리후에 유방을 종이 타월로 건조시킨다.

약 40％의 미국 낙농목장에서 유방 세척 대신에 살균 티트 딥(germicidal teat dip)을 사용한 프리딥핑(pre-dipping)을 사용한다. 낙농업자는 티트 딥에 소의 유두(전체 유방에 반하여)를 담그거나 유두에 스프레이하여 딥이 15초 이상 유두와 계속 접촉하도록 한다. 그리고 나서, 티트 딥 용액을 종이 타월로 닦아낸다.

이러한 각각의 방법이 특정 장점을 가지고 있기는 하나, 이러한 환경에서 발생할 수 있는 모든 문제를 효과적으로 처리할 수 있는 방법은 없다. 이러한 문제 중에는 효과적인 세정 및 건조, 유방 세척 유거수(runoff) 및/또는 프리딥 잔유물에 의한 우유의 오염 문제 및 젖소를 준비시키는 데 있어서의 효과적인 노동 및 시간의 사용이 있다.

널리 퍼져 있으며, 비용이 많이 드는 우유의 박테리아 오염 구제에 많은 노력이 투입되었다. 유방의 착유-전 처치를 위한 향상된 다양한 방법과 소 유선염 예방법 및 치료법이 개시되어 있다(예를 들어, Neumann의 미합중국 특허 제4,206,529호; Sordillo 등의 제5,124,145호 및 제5,234,684호; Hoefelmayr의 제4,253,420호 및 Zighelboim의 제5,366,732호 참조). 특히 착유전 위생작업에 의한 오염 잔유물 문제에 대처한 향상된 항균 조성물(예를 들어, Schmidt의 미합중국 특허 제5,139,788호 참조) 또는 습식 와이프 송달을 위한 일반적인 적응의 향상된 시스템(예를 들어, Abba 등의 미합중국 특허 제4,775,582호 및 Win 등의 제4,853,281호 참조)이 개시되어 있다. 또한, 문헌들[Berg, et al., J. Dairy Sci. 68, 457-461(1985); Pankey, et al. Veterinary clinics of North America 9, 519-530, 1993; McKinnon, et al., J. Dairy Res. 50, 153-162, 1983, Murdough, et al., J. Dairy Sci. 76, 2033-2038, 1993 and Ansari, et al., Am. J. Infect. Control 19, 243-249, 1991]은 이러한 기술분야의 현황과, 착유-전 유두 살균을 위하여 보통 적용하는 방법들에 관한 유방 위생 처리의 진보된 방법을 다양한 견지에서 기재하고 있다.

따라서, 표면의 효과적인 단일 단계 소독 및 건조를 제공하면서도, 살균 성능이 우수하며, 바람직하지 못한 부작용의 가능성이 적은 습식 소독 와이프가 요구되고 있다. 또한, 향상된 와이프는 민감한 표면이 트는 등의 손상을 일으키지 않고, 효과적으로 건조시킬 수 있어야 한다.

도 1은 다양한 노출 시간에 따라 다양한 농도의 메티오닌이 종이 타월 중 니신의 안정성에 미치는 효과를 나타낸다.

도 2는 니신을 보호하는 데 있어서, 노출 6일 경과후 다양한 농도의 메티오닌의 효능을 나타낸다.

도 3은 메티오닌 및/또는 NaCl이 니신의 분해에 미치는 효과를 나타낸다.

본 발명은 표면의 신속한 단일단계 소독 및 건조가 가능한 신규한, 습식 종이 또는 직물 와이프에 관한 것이다. 상기 와이프는 보통 소독제로서 박테리오신, 박테리오신의 안정화제, 킬레이트화제, 계면활성제, 염, 피부 컨디셔너 또는 습윤제 및 신속한 건조를 촉진시키는 용제를 포함하는 액체 소독 제제를 함유한다. 박테리오신 소독제는 또한 보통 사용되는 살균제와 적절히 조합될 수 있다. 본 발명의 와이프에 있어서, 상기 살균제는 독성 및 민감성 문제를 완화시킬 만큼 상당히 적은 양으로 사용될 수 있다. 본 발명의 와이프는 박테리오신, 즉, 고효능의 살균제를 사용하기 때문에, 알콜 성분은 주로 건조제로서만 필요하고, 따라서 살균작용에 필요한 알콜농도에 비하여, 필요한 알콜농도가 실질적으로 감소된다. 그러므로, 알콜 함량이 높은 제제에 의하여 민감한 표면이 트게 되는 전형적인 문제가 구제된다.

본 발명의 와이프는 위생 처리가 요구되는 어떤 표면의 소독 및 건조에도 적합하다. 본 발명의 와이프의 특정한 한 적용으로 소 유두의 신속하고 효과적인 소독 및 건조를 들 수 있다. 또한, 본 발명은 신규한 와이프를 사용하여 젖소의 유선염 감염 발생율을 감소시키는 방법에 관한 것이다.

미합중국 특허 제5,135,910호; 제5,217,950호; 제5,260,271호; 제5,304,540호 및 제5,334,582호에는 모두 니신 등의 란티신(란티오닌-함유 박테리오신)과 킬레이트화제를 포함하는 광범위 살균조성물이 개시되어 있다. 또한, 상기 특허들은 이들의 살균 성질에 기초한 조성물을 사용하는 많은 방법을 개시한다. 인용된 특허들에 개시된 조성물 범주에 속하는 니신-함유 제제, 컨셉(Consept)이 수년 동안 시판되어 왔다. 본 발명의 와이프는 전형적으로 상기에 인용된 특허들에 개시되어 있는 이러한 조성물을 포함하며, 이들은 본 명세서에 참조로 병합되어 있다.

본 발명은 전형적으로 박테리오신계 제제를 포함하며, 킬레이트화제, 염성분, 안정화제, 건조제 및 계면활성제를 더욱 포함하는 종이 또는 직물으로 된 일회용 와이프를 제공한다. 본 발명의 와이프는 표면의 효과적인 단일 단계 소독 및 건조를 제공하며, 표면의 위생처리가 요구되는 어느 표면에든 적용할 수 있다. 본 발명의 와이프의 특정한 한 적용으로 소 유두의 소독 및 건조를 들 수 있다.

본 발명의 와이프는 전형적으로 활성 성분으로 염성분과 조합된 박테리오신을 함유하는 소독 제제를 함유한다. 활성 성분으로는 니신, 서브틸린, 에피더민, 갈리더민, 신나마이신, 듀라마이신, 안코베닌 또는 Pep 5와 같은 란토신(란티오닌-함유 박테리오신)이 바람직하다. 리소스타핀과 같은 다른 펩티드 박테리오신의 사용도 적절하다. 본 발명의 박테리오신제는 보통 사용되는 살균제보다 상당히 큰 효능이 있으며, 바람직하지 못한 부작용을 나타내지 않는다. 본 발명에 따른 제제의 활성 성분은 펩티드 박테리오신으로 제한되지 않으며; 클로르헥시딘과 같은 다른 항박테리아제를 본 발명의 박테리오신과 조합하여 적절히 사용할 수 있다. 박테리오신 성분이 존재하므로, 클로르헥시딘 또는 박테리오신이 아닌 살균 성분을 매우 낮은 농도로 사용할 수 있어, 바람직하지 못한 부작용에 대한 문제가 제거된다. 또한, 활성 성분은 두가지 이상의 박테리오신을 조합하거나, 박테리오신과 다른 항박테리아제를 조합하여 포함할 수 있다. 본 발명의 가장 바람직한 실시형태는 활성 성분으로 니신을 포함한다.

종이 또는 직물 와이프와 함께 니신과 같은 박테리오신을 사용하는 데는 활성성분의 펩티드 성질로 인하여 근본적으로 문제가 있다. 이러한 경우, 와이프에 흡수된 이러한 화합물은 와이프로부터 소독이 필요한 부위로 쉽게 방출되지 않을 것으로 예상된다. 따라서, 본 발명의 제제는 이온 세기를 증가시켜, 살균제와 와이프 표면간의 결합을 느슨하게 하는 역할을 하는 성분을 더욱 포함하여 이루어진다. 이러한 성분은 또한 와이프와 접촉하는 동안 활성 성분의 안정성을 증가시키는 인자로서 알려져 있다. 이온세기를 증가시키기에 적합한 물질로는 카르복실레이트의 할라이드염, 히드록시산 염, 살리실레이트, 글리코레이트, 포스페이트 및 폴리포스페이트가 있다. 이러한 성분으로는 10 내지 100mM 농도 범위의 NaCl이 바람직하다. NaCl은 50mM의 농도가 바람직하다. 다른 성분으로 1 내지 10mM의 시트르산 나트륨이 바람직하다. 시트레이트는 5mM의 농도가 바람직하다.

란토신을 킬레이트화제와 조합하면 살균제로서의 효능이 증가되고, 더 넓어진다는 것이 개시되어 있다[본 명세서에 참조로 병합되어 있는 미합중국 특허 제5,135,910호;제5,217,950호; 계류중인 미합중국 특허출원 제08/386,122호, 미합중국 특허 제5,260,271호;제5,304,540호 및 5,334,582호 참조]. 따라서, 본 발명의 제제는 전형적으로 킬레이트화제 성분을 함유한다. 적합한 킬레이트화제로는 예를 들어, EDTA, CaEDTA, CaNa₂EDTA 및 다른 알킬디아민 테트라아세테이트와 EGTA 및 시트레이트가 있다. 킬레이트화제로는 EDTA(1-10mM) 및/또는 시트레이트(1-30mM)가 바람직하다. EDTA 및 시트레이트의 농도는 각각 3mM 및 5mM이 가장 바람직하다. 킬레이트화제는 단독 또는 조합하여 사용할 수 있다.

본 발명의 바람직한 펩티드 박테리오신은 다소 불안정하며, 박테리오신이 와이프와 접촉하는 경우 분해로 인한 손실을 초래할 수 있다. 메티오닌 및 관련 티오에테르 화합물이 박테리오신, 특히 니신을 분해되지 않도록 보호하는 것으로 알려져있다[본 발명에 참조로 병합되어 있는 계류중인 미합중국 특허출원 제08/386,122호]. 따라서, 메티오닌은 본 발명의 제제의 전형적인 성분이다. 메티오닌은 1-10mM의 농도 범위로 사용할 수 있으며, 2mM의 농도가 가장 바람직하다. EDTA와 시트레이트의 조합물이 또한 상기한 킬레이트화제에 대한 성질에 더하여, 추가로 박테리오신 성분의 안정성도 증가시키는 것으로 밝혀졌다.

또한, 활성 성분의 안정성에 있어서, 존재할 가능성이 있는 과산화물을 분해하기 위하여 제제에 카탈라아제를 첨가할 수 있다. 카탈라아제는 전형적으로 6 내지 600 units/ml의 농도범위로 사용될 수 있다. 카탈라아제의 농도는 60 units/ml가 가장 바람직하다.

제제의 다른 중요 성분으로 건조제가 있다. 너무 "습"한 제제와 너무 "건조"한 제제 사이의 미세한 균형이 이루어져야 한다. 상기한 바와 같이, 소독 과정 중의 지나친 습기는 소독 처리를 방해할 수 있으며; 교차 오염의 기회를 증가시키고; 특히, 피부나 유두와 같이 민감한 표면에는 자극을 일으킬 수 있다. 다른 한편으로, 박테리오신 성분이 최적으로 작용할 수 있도록 "습기"의 최소량이 유지되어야 하며, 본 발명에 따른 와이프는 "습기 활성화"되는 것은 아니지만, 바람직한 효과를 보장하기 위해서는 최소로 습한 환경이 유지되어야 한다. 또한, 너무 신속히 또는 완전히 건조된 제제는 민감성 표면에 자극을 촉진할 수 있다. 따라서, 본 발명의 조성물은 전형적으로 알콜과 같은 건조제를 더욱 포함하여 이루어진다. 본 발명의 와이프에 사용되는 박테리오신 성분 때문에, 알콜 성분은 소독용이 아니라 건조제용으로만 필요하다. 따라서, 본 발명의 제제는 공지의 와이프 제제에서 전형적으로 요구되는 것보다 훨씬 적은 양의 알콜을 함유한다. 따라서, 높은 알콜함량과 관련된 표면 민감성 및 인화점에 대한 전형적인 문제가 없다. 본 발명의 와이프에 사용하기에 적합한 알콜 중에는 메탄올, 에탄올, 1-프로판올, 2-프로판올 및 벤질알콜이 있다. 건조 성분으로는 10 내지 20％ w/v의 1-프로판올이 바람직하다. 1-프로판올의 농도는 12％ w/v가 가장 바람직하다.

니신-킬레이트화제 조성물에 대하여 상기에 인용한 특허들은 계면활성제 성분이 또한 란토신-함유 살균 조성물의 효능 및 활성 범위를 증가시킬 수 있음을 개시하고 있다. 본 발명의 제제는 또한 이러한 성분을 포함할 수 있다. 이러한성분은 비이온성 및 양쪽성 계면활성제와 유화제, 4급 화합물, 모노글리세라이드 및 지방산을 포함한다. 이러한 성분은 특히 글리세롤모노라우레이트(0.03 내지 0.3％ w/v); 폴리소르베이트 20(0.1 내지 3％ w/v), 아르라솔브 200(0.1 내지 3％ w/v) 및 트리톤 X-100(0.1 내지 3％ w/v)과 같은 비이온성 계면활성제, 라우라민 옥사이드(0.1 내지 3％ w/v)와 같은 양이온성 물질; 또는 코코아미도프로필 베타인과 같은 양쪽성(zwitterionic) 물질(0.1 내지 3％ w/v) 중에서 선택될 수 있다. 현재 알려진 계면활성제 성분으로는 1％ w/v 농도의 비이온성 계면활성제 폴리소르베이트 20가 바람직하다.

본 발명의 와이프 제제는 컨디셔너/습윤제 성분 및 농후제를 더욱 포함하여 이루어질 수 있다. 와이프를 쉽게 자극을 받는 피부 표면에 적용하는 경우에, 컨디셔너가 특히 유용하다. 전형적으로 이러한 성분은 각각 1 내지 10％ w/v 농도범위의 프로필렌글리콜, 글리세롤, 소르비톨 및 락틸레이트 중에서 선택할 수 있다. 컨디션너로는 10％ w/v 농도의 프로필렌글리콜이 바람직하다. 농후제는 각각 0.1 내지 1％ w/v 농도 범위의 히드록시에틸 셀룰로오즈, 메틸셀룰로오즈, 폴리비닐 피롤리돈 또는 이러한 물질들의 혼합물 중에서 선택할 수 있다. 0.35％ w/v의 히드록시에틸 셀룰로오즈는 본 발명에 따른 바람직한 성분이다. 와이프 제제의 성분으로 농후제가 포함되는 경우, 와이프의 액체-운송 성능이 증가될 수 있다.

제제의 pH는 3.0 내지 5.0의 범위로 조절된다. 제제의 최종 pH는 pH 3.5가 바람직하다.

상기에 인용한 특허들 '910, '950, '271, '540 및 '582는 본 제제의 설명 중에서 상기에 열거한 성분의 다양한 조합을 포함하는 많은 조성물 및 제제를 개시하고 있다. 상기 특허들은 본 발명의 와이프에 사용될 수 있는 조성물인 니신 킬레이트화제 조성물의 생산을 설명하기 위하여 참조로 병합되어 있다.

본 발명을 성공적으로 시행하기 위해서는 니신계 제제와 함께 사용하기 위한 종이 와이프의 선택이 또한 중요하다. 예를 들어, 어떤 종이는 활성 성분을 흡착하는 데 유리하지 않다. 그 결과, 와이프에 의한 활성 성분의 흡착이 불충분하거나, 와이프로부터 표적 부위로의 활성 성분의 방출이 어려워진다. 이점에 관하여 고려해야할 다른 것으로는 비용, 직물의 피부 충격, 타월렛당 액체 수용능, 피부에 남는 액체 잔유물 및 젖었을 때의 종이의 인장 강도가 있다. 최근 본 발명자들이 알아낸 최적의 종이로 하이드로엔탱글드 셀룰로오즈가 있다.

본 발명에 따르면, 다양한 방법으로 와이프를 분배할 수 있으며, 이들 방법은 모두 미사용 와이프를 더럽히지 않고 완전하게 보전하고, 와이프의 사용전 건조를 방지하도록 고안된다. 롤로 된 센터-풀 디스펜서, 적층방식으로, 접혀져/끼워진 방법 또는 캐니스터로부터의 팝업 방법으로 분배할 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서는 재활용가능한, 일회용, 밀봉 플라스틱 백으로부터 와이프를 분배한다.

디스펜서는 사용자의 편이를 위하여 벨트 케이스의 형태를 취하거나, 각 작업위치 가까이에 설치될 수 있다. "일회용 백"형 디스펜서는 사용영역 전체에 걸쳐 설치하기에 적합하다. 본 발명의 한 실시형태에서는 폐기물 처리 문제를 해결하는 개념에서 재사용가능한 디스펜서를 다룬다. 포장된 생산품은 타월렛과 액체제제가 모두 미리 채워진 패키지, 마른 타월렛과 분배되기 직전에 첨가되는 액체성분을 함유하는 캐니스터, 적당한 시기에 타월렛과 액체가 추가될 수 있는 재사용 가능한 캐니스터 또는 사용하기 전 적절한 시기에 물이나 조제된 액체 성분을 첨가하는, 시약이 스며든 마른 타월렛을 포함하는 패키지를 포함하여, 많은 형태를 적합하게 취할 수 있다. 본 발명의 와이프의 한 적용으로, 유방 세척의 장점과(과잉 목초의 제거, 우유 "하강(let-down)"을 촉진하는 유방의 기계적 자극); 살균제로 프리딥핑하는 장점을(유두 피부 및 유두 말단을 위생적으로 하고, 종이 타월로 과잉의 잔유물을 제거하며, 건조시킴); 속도와 경제성을 겸비하는 단일 단계로 결합시킨 착유-전 소 유두의 준비방법이 제공된다. 농장이 대규모화되고, 하루에 세번 착유하는 것이 더욱 일반적으로 행해짐에 따라, 시간을 절약하여 착유 효율을 증가시키는 방법의 중요성이 증대되고 있다. 본 발명의 일회용 습식 와이프 및 본 발명에 따른 단일 단계 과정은 국립 유선염 회의(the National Mastitis Council, NMC)의 지침에 설정된 착유-전 준비에 관한 일차적인 문제점을 처리한다. 본 발명에 따른 처치는 가축을 준비하는 데 드는 시간 및 노동을 감소시키며, 착유 효율을 증가시킨다. 위생적인 착유-전 처리의 실행은 다년간 연구의 초점이면서, 가장 중요한 점인 우유의 박테리아 감염의 감소를 촉진한다.

본 발명의 타월렛으로 유두를 착유-전 처리하면 유두의 착유-단위-접촉-표면으로부터 잔유물이나 목초가 제거되고, 유방을 맛사지하여 옥시토닌의 분비가 자극되므로, 우유 "하강"을 증가시키고, 유두에서 유선염을 일으키는 박테리아를 죽이는 살균작용을 하며, 신속히 건조되는 최소의 액체 잔유물만을 유두에 남기므로, 별도의 단계로 유두를 건조할 필요가 없다. 본 발명의 일회용 와이프를 적용하여, 맨손으로 식품을 취급하는 동안 피부를 세정하고, 위생적으로 하는 데 사용하면 또한 시간과 노동이 절약되는 잇점이 있다(살균제 잔유물이 식품을 오염시키는 위험을 최소화하면서). 식품이 접촉하는 딱딱한 표면이나 식품이 접촉하는 다른 무생물 표면을 세정하고 위생적으로 하는 데, 본 발명을 적용하면 상기와 유사한 잇점이 제공된다. 본 발명에 따른 일회용 와이프를 머리, 목 및 얼굴의 피부 또는 다른 피부 표면을 세정하는 데 적용하면, 또한 시간 및 노동을 절약하는 잇점이 제공되며, 신속하게 건조되는 습기 잔유물을 남기는 습식 와이프를 사용하여 세정 및 위생을 겸비함으로써 이익을 얻을 수 있다. 본 와이프는 사용자에게 신선한 느낌을 주거나 세정하는 잇점을 제공할 수 있을 정도의 세정력이 있다. 또한, 사소한 외과 처리 전후 또는 피하주사용 바늘을 적용하는 동안 발생하는 정도로 뚫어진 피부의 결함을 수반하는 다른 처리 전에 사용할 수 있을 만큼의 세정 및 살균력이 있다.

타월렛은 고정된 HDPE 플라스틱 용기 또는 이와 달리 중앙부가 끈으로 묶여진 벨트-탑재 디스펜서 내에 둘 수 있다. 타월렛은 실린더형 통 내에 센터-풀 롤의 형태로 되거나, 직사각형 용기에 삽입될 수 있으며, 본 발명에 따른 살균용액에 적셔 있을 수 있다. 풀-스루(pull-through) 메카니즘을 이용하는 디스펜서는 저장된 타월렛의 오손의 가능성을 최소화한다.

본 발명의 타월렛을 사용하면 현재 사용되는 방법들에 비하여 많은 장점을 얻을 수 있다. 장점들 중에는 적용의 관점에서, 세정과 위생이 단일 작업으로 달성되며, 시간과 노력을 절약할 수 있고, 매회 동시에 작업자의 손이 위생적으로 된다는 것을 들 수 있다. 낙농업자에 있어서, 현행 방법들은 먼지를 제거하고, 티트딥을 사용하여 위생처리하고, 종이 타월로 건조시키는 별도의 단계들을 포함하나, 본 발명에서는 단일 생산품으로 이러한 모든 단계를 완성할 수 있다. 또한, 단일-사용 종이 와이프는 교차-오염을 방지한다. 본 명세서에 개시된 처리 방법은 유두로 흘러내리는 과잉의 유방세척액을 방지하는 NMC 추천 시행규정을 효과적으로 다루어, 유두에 액체 잔유물이 최소로 남거나, 전혀 남지 않고, 공급되는 우유에도 최소로 들어가거나, 전혀 들어가지 않는다.

본 와이프를 적용하면 적절한 살균제를 가장 적절히 송달하고, 처치 부위를 최적으로 건조할 수 있다. 또한, 와이핑 작용은 물리적으로 표면의 부스러기를 제거할 뿐아니라 박테리아(>90％)를 제거하며, 젖소에 사용하는 경우, 맛사지 작용에 의한 우유 하강의 동시 자극을 제공한다. 컵 내의 오손된 살균용액에 의한 교차오염을 극복/방지하기 위하여 티트딥 컵에 있는 생산품을 자주 폐기할 필요가 없으므로, 필요한 살균제의 양이 감소된다.

본 발명에 따른 처치 방법은 또한 착유-후 섭생에 유익하게 사용할 수 있다. 이러한 형태의 처치에서는 추운 기후에 트거나 "동결"되는 위험으로부터 보호되는 "건조" 유두를 제공할 뿐아니라, "열린" 유두 오리피스로부터 잔류 우유를 기계적으로 제거하는 동시에 감염의 가능성이 감소된다. 착유-후 위생처리 또한 추가의 유선염 방지 기준을 충족시킨다.

실시예 1

니신이 종이 타월에 노출되었을 때, 메티오닌이 니신을 분해로부터 보호할 수 있는 지를 결정하기 위하여, 0 내지 100mM 농도의 메티오닌을 사용하여 니신-계 살균제 제제(PDF)를 준비하였다. 이러한 용액 중에 종이 타월의 새로운 부분을 배양하고, 6일에 걸쳐 간격을 두고 PDF 시료 중의 니신 함량을 분석하였다. HPLC로 분리한 후, 210nm에서의 흡광도로 니신 함량을 결정하였다. 메티오닌은 니신이 손실되는 것으로부터 보호하는 것으로 나타났다. 메티오닌이 없는 대조 시료 중에서 시료들의 크로마토그램은 니신이 복합성분으로 분해되는 것이 나타났으며, 메티오닌을 함유하는 시료들에서는 이러한 분해로부터 보호되었다.

프리딥 조성물 A (PDF-A)는 하기의 조성이었다.

1-프로판올 24ml

프로필렌 글리콜 6ml

10％ 폴리소르베이트 206ml

100mM EDTA 1.2ml

물 q.s. 60ml

pH는 3.5로 조절하였다.

이렇게 하여, 하기의 PDF-A 실험 용액을 제조하였다.

50 ml 폴리프로필렌 튜브에 100cm²(10cm× 10cm) 종이 타월 조각 및 소정 실험 용액 분취량 9 ml를 가하였다. 그리고 나서, 이 튜브를 실온에서 부드럽게 흔들면서, 니신 분석을 위하여 다양한 시간에 400㎕ 분취량을 취하였다. 그 결과를 도 1 및 도 2에 나타내었다.

이러한 데이터는 메티오닌의 존재가 분해로 인한 니신의 손실로부터 보호한다는 것을 시사한다. 종이 와이프에 노출된 니신의 안정성에 관한 연구들은 또한 해당 분해산물이 나타나지 않고 니신이 손실됨을 나타내었다. 이러한 손실은 습식 와이프 제품 중에 니신 불안정성의 원인이 더 존재하며, 메티오닌은 이러한 두 번째 종류의 손실에 대해서는 보호할 수 없음을 시사한다.

실시예 2

와이프 제제 중의 니신은 메티오닌에 의해서 분해로부터 안정화되며, 염의 첨가에 의해서 흡착성 손실로부터 안정화된다.

도 3에 나타낸 결과는 염화나트륨의 존재가 니신의 흡착성 손실을 감소시키며, 메티오닌 및 염화나트륨이 함께 와이프 제제 중의 니신을 안정화시켜, 실온에서 6일 경과후 시료 중 >90％의 니신이 회수 가능하다는 것을 보여준다.

실시예 3

와이프 제제 중의 니신은 메티오닌 첨가에 의해 분해로부터 안정화되며, 염의 첨가에 의해 흡착성 손실로부터 안정화된다. 일정 범위의 조성물, 중량, 감촉 및 인장강도를 포함하는 다양한 공급원의 종이 타입을 와이프 제제에 대한 안정성에 대하여 평가하였다.

표 1에 나타낸 바와 같이 PDF(25㎍/ml이 니신)을 준비하였다. 각각의 실험 조건에 있어서, 타월의 부분 100cm²를 50ml 원추형 폴리프로필렌 튜브에 넣고, 시험용액 9ml를 가한 후, 튜브를 상온에서 로커 테이블에 놓았다. 3일 후에 분석을 위하여 액체 시료(1ml)를 회수하였다(표 2).

표 2에 나타낸 데이터는 체제에 염 및 메티오닌을 첨가하면 와이프 제제 중의 니신이 안정화된다는 것을 확인시켜 준다. 이 데이터는 또한 광범위한 종류의 종이를 사용할 수 있으며, 하이드로엔탱글드 셀룰로오즈가 종이의 선택에 있어서 가장 적합하다는 것을 나타낸다.

[표 1]

PDF 제제

[표 2]

실온에서 3일 경과 후, 부드러움, 강도 및 액체상 중의 잔여 니신 농도에 대한 타월 시료의 평가

실시예 4

E. 콜라이 종 ATCC 8739 및 S. 아우레우스 종 ATCC 6538의 박테리아 현탁액에 대한 와이프 제제의 살균 성능을 평가하였다. 제제 조성은 12％ 1-프로판올을 사용하고, 10％ 프로필렌 글리콜 대신에 5％ 글리세롤을 사용한 점을 제외하고는 표 1과 동일하다. 추가로, 일정 농도 범위의 벤질 알콜 및/또는 시트레이트를 제제에 추가하였다. 또한, 유기 부하로 작용하는 50 부피％ 전유의 존재하에서 시험 제제에 대하여 살균 성능을 평가하였다. 우유의 존재 하에서 제제를 2시간 미리 배양한 다음, 37℃에서 박테리아 현탁액으로 1분 배양한 후의 살균 성능을 평가하였다.

표 3 및 표4의 데이터는 특히, 우유에 의해 제공되는 유기 부하의 존재하에서, 시트레이트를 첨가하면 니신계 제제의 살균 성능이 향상된다는 것을 나타낸다. 제제 중의 킬레이트화제, 시트레이트 및 EDTA의 조합은 우유에 존재하는 2가 양이온을 극복하는 데 놀랄만큼 효과적이다. 또한, 벤질 알콜을 병합하면 제제의 살균 성능이 더욱 향상된다.

[표 3]

[표 4]

실시예 5

폴리소르베이트 20 대신에 아르라솔브 200를 사용한 점을 제외하고는 표 1과 동일한 PDF를 사용하여 와이프를 제조하였다. NaCl 300mM, 시트레이트 1％ 존재하에 니신 농도는 50㎍/ml이었다. 다양한 와이프 제제를 다양한 공급원의 종이에 사용하였다. 실온에서 와이프 제제를 저장한 후 니신 안정성을 HPLC로 모니터하였다. 그 결과를 표 5 및 표 6에 나타내었다.

이러한 데이터는 상기 제제가 니신의 분해를 방지하기 위하여 메티오닌을 함유하고, 이외에 니신의 흡착성 손실을 방지하기 위하여 NaCl 또는 시트레이트를 함유하는 경우, 하이드로엔탱글드 셀룰로오즈(HEC)를 포함하여 몇가지 종이가 적합하다는 것을 확인시켜준다.

[표 5]

[표 6]

실시예 6

이 연구는 와이프 제품으로 사용하기 위한 타월렛을 적시기에 충분한 액체의 양을 결정하기 위하여 수행되었다. 측정된 면적의 각 종이 시료를 칭량한 후, 방울이 떨어지지 않으면서 완전히 젖도록 PDF로 적신 다음, 다시 칭량하여 이러한 조건에서 요구되는 제제의 양을 결정하였다. 그 결과를 표 7에 나타내었다.

[표 7]

실시예 7

300mM NaCl을 사용한 점을 제외하고는 표 1에 나타낸 것과 같이 제조된 와이프에 대하여, 하기의 프로토콜 A에 따라 살아있는 소 유두 피부에 대한 살균 성능을 평가하였다.

프로토콜 A

프로토콜 A를 위하여 10마리의 소를 준비하여 세정하였다. 이 과정은 유방 아래부분을 제모하고, 일련의 세척을 시행하는 것을 포함한다. 소의 유두를 테라텍(0.5％ 요오도포르)[Theratec(0.5％ iodophor)]로 세척하고, 물로 완전히 씻어낸 후, 알콜 스웝으로 닦았다. 수집컵에 라벨을 붙이고, 소 1마리당 4개씩 각각의 소 옆에 놓았다. 각각의 유두를 약 10⁸ 세포/ml의 박테리아 현탁액 15mm에 담갔다. 10분 후에, 유두를 적합한 시험용액에 30mm 깊이로 담그거나, 타월렛 한 개로 닦았다. 와이핑 실행은 유두를 기부에서 잡고, 아래로 당겨 빼고, 손을 90- 돌려, 다시 한번 유두를 기부에서 잡고, 아래로 당겨 빼는 것으로 이루어진다. 1분 후에, 실린지를 이용하여 살아있는 세포를 수확하고, 퀀칭 용액 10 ㎖를 채워 니신의 작용을 중화하고, 유두의 표면에서 박테리아를 수집컵에 수집하였다. 수집컵은 즉시 뚜껑을 닫아, 냉각기의 얼음에 보관하였다. 약 1시간 후, 80개의 시료를 희석하여 혈액 아가 플래이트 상에 2번씩 플래이트하였다. 플래이트를 37℃에서 24-48시간 동안 배양하였다. 단위를 형성하는 콜로니(cfu)를 세어, 대조구 유두에서 회수된 cfu에 대한 cfu의 감소를 계산하였다. 각각의 소에서 4개의 유두를 모두 시험하였으며, 총 20마리의 소를 시험하였다. 뒤쪽 두 개의 유두를 대조구로 하여, 이들은 물에 담그었다. 앞쪽 두 개의 유두는 살균 제품 중 하나로 시험하였다.

log cfu 감소로 나타낸 S. 아우레우스에 대한 결과를 표 8에 나타내었다. 두 개의 (뒤쪽)유두의 평균 log cfu에서 두 개의 시험 (앞쪽)유두의 평균 log cfu를 빼어 소 1마리당 log 감소를 계산하였다. 또한, 각각의 시험조건에서 5마리의 소에 대한 총평균 log 감소를 표 8에 나타내었다.

PDF 와이프에 대해서도 PDF 딥과 동일하게 실시하였다. 오직 물 와이프 만을 사용한 와이핑에서는 1.7-log 감소를 얻었다.

[표 8]

실시예 8

폴리소르베이트 20 대신에 1％ 아르라솔브 200를, NaCl 대신 1％ 시트레이트를 사용하고, 50㎍/ml 농도의 니신을 사용한 점을 제외하고는 표 1에 기재된 바와 같이 와이프 제제(PDF)를 제조하였다. 본 실시예에서 1-프로판올의 농도는 20％이었다. 시험 제제, 1-프로판올을 함유하는 ＃1과 함유하지 않는 ＃2에 대하여, 프로토콜 A(상기)에 따라 살아있는 소 유두 피부상의 S. 아우레우스에 대한 살균 성능을 평가하고, 테라텍(0.5％ 요오도포르) 및 PDF 티트 딥의 성능과 비교하였다.

그 결과를 표 9에 나타내었다. 이러한 결과는 두가지 와이프 제제가 S. 아우레우스에 대하여 동일한 성능을 나타내며, 이들의 성능이 0.5％ 요오도포르의 성능과 동일하다는 것을 증명한다.

[표 9]

실시예 9

실시예 8에 기재한 바와 같이 와이프 제제(PDF)를 제조하여, 와이프(6 in × 6.75 in)당 액체 함량이 3g, 5g 및 7g인 습식 종이 와이프를 제조하는 데 사용하였다. 이러한 와이프에 대하여 프로토콜 A(상기)에 따라 살아있는 소 유두 피부 상의 E. 콜라이에 대한 살균 활성을 평가하고, 테라텍(0.5％ 요오도포르)의 성능과 비교하였다.

그 결과를 표 10에 나타내었다. 이러한 결과는 7g 액체/와이프가 이보다 낮은 액체 함량의 와이프보다 우수한 살균 활성을 제공함을 증명한다.

[표 10]

실시예 10

실시예 8에 기재된 바와 같이 와이프 제제(PDF)를 제조하여, 습식 종이 와이프를 제조하였다. 이러한 와이프에 대하여, 프로토콜 A(상기)에 따라 살아있는 소 유두 피부 상의 일정 범위의 유기체에 대하여 살균 활성을 평가하고, 양성 대조구인 몇가지 티트 딥의 성능과 비교하였다.

그 결과를 표 11에 나타내었다. 이러한 결과는 PDF로 제조된 와이프가 소의 유두 상에서 유선염 감염과 관련된 주요 병원성 유기체에 대하여 효과적인 살균 활성을 가진다는 것을 증명한다.

[표 11]

실시예 11

12% 1-프로판올, 3mM EDTA 및 5mM 시트레이트를 사용하는 점을 제외하고는 표 1에 나타낸 바와 같이 제조한 와이프를 NMC의 표준 프로토콜 후에 실험적 자극 시험에 사용하였다. 코넬 대학교 수의학대학에서 160 마리의 젖소 떼를 목초지에서의 PDF 와이프의 효능 시험에 사용하였다. 각각의 처치군에 40 마리의 소를 사용하는, 네가지 처치 조건을 표 12에 요약하였다. 유선염 감염의 가능성을 촉진하는 극단적인 감염 조건을 생성하기 위하여, 월요일부터 금요일까지 오후에 착유한 직후, 각각의 소의 유두를 S. 아우레우스 및 S. 아가락티아에(각 유기체 당 10⁸ cfu/ml)의 현탁액에 담갔다. 박테리아 자극에 이어 즉시 각 군에 적합한 착유후 위생이 이루어졌다.

표 12에 나타낸 데이터는 테라텍(0.5% 요오도포르) 티트 딥에 비하여, 컨셉티트 딥을 사용한 포스트-딥핑과 함께 착유-후 또는 착유-전 처치에 사용된 PDF 와이프가 유선염 감염의 발병율을 감소시킨다는 것을 나타낸다.

[표 12]

[

Claims (12)

1. 박테리오신으로 25-50㎍/ml의 니신, 서브틸린, 에피더민, 갈리더민, 신나마이신, 듀라마이신, 안코베닌 및 Pep 5 중에서 선택되는 화합물;

   킬레이트화제로 1-10mM의 EDTA, CaEDTA, CaNa₂EDTA와 같은 알킬디아민 테트라아세테이트 및 EGTA 중에서 선택되는 화합물 또는 1-30mM의 시트레이트;

   안정화제로 1-10mM의 메티오닌;

   계면활성제로 0.03-0.3％ w/v의 글리세롤모노라우레이트, 0.1-3％ w/v의 폴리소르베이트 20, 0.1-3％ w/v의 아르라솔브 200, 0.1-3％ w/v의 트리톤 X-100, 0.1-3％ w/v의 라우라민 옥사이드 및 0.1-3％ w/v의 코코아미도프로필 베타인 중에서 선택되는 화합물;

   염으로 10-300mM의 NaCl 또는 1-10mM의 시트르산 나트륨; 및

   알콜 건조제로 10-20％ w/v의 메탄올, 에탄올, 1-프로판올 및 2-프로판올 중에서 선택되는 화합물 또는 1.5％ w/v의 벤질알콜을 포함하여 이루어지는 액체 제제를 함유하는 습식 박테리오신 소독 와이프.
2. 제 1 항에 있어서,

   상기 킬레이트화제는 EDTA이고, 상기 안정화제는 메티오닌이고, 상기 계면활성제는 폴리소르베이트 20이고, 상기 알콜 건조제는 1-프로판올임을 특징으로 하는 습식 박테리오신 소독 와이프.
3. 제 1 항에 있어서,

   상기 킬레이트화제가 1-10mM의 EDTA 및 1-30mM의 시트레이트임을 특징으로 하는 습식 박테리오신 소독 와이프.
4. 제 1 항에 있어서,

   상기 액체 제재가 1-10％ w/v의 컨디셔너 및 0.1-1％ w/v의 농후제를 추가로 포함하여 이루어지는 것임을 특징으로 하는 습식 박테리오신 소독 와이프.
5. 제 1 항, 제 3 항 및 제 4 항 중의 어느 한 항에 있어서,

   상기 액체 제재가 부직물질에 흡수된 상태임을 특징으로 하는 습식 박테리오신 소독 와이프.
6. 제 1 항, 제 3 항 및 제 4 항 중의 어느 한 항에 따른 와이프를 사용하여 착유 전에 소의 유두를 와이핑 하는 것을 특징으로 하는 소의 유두를 소독 및 건조하는 방법.
7. 제 1 항, 제 3 항 및 제 4 항 중의 어느 한 항에 따른 와이프를 사용하여 착유 후에 소의 유두를 와이핑 하는 것을 특징으로 하는 소의 유두를 소독 및 건조하는 방법.
8. 제 1 항, 제 3 항 및 제 4 항 중의 어느 한 항에 따른 와이프를 사용하여 피부표면을 와이핑 하는 것을 특징으로 하는 피부표면을 소독 및 건조하는 방법.
9. 제 1 항, 제 3 항 및 제 4 항 중의 어느 한 항에 따른 와이프를 사용하여 피부표면을 와이핑 하는 것을 특징으로 하는 피부표면을 세정하는 방법,
10. 제 1 항, 제 3 항 및 제 4 항 중의 어느 한 항에 따른 와이프를 사용하여 식품 접촉면을 와이핑 하는 것을 특징으로 하는 식품 접촉면을 소독 및 건조하는 방법.
11. 제 1 항, 제 3 항 및 제 4 항 중의 어느 한 항에 따른 와이프를 사용하여 착유 후에 가축의 유두를 와이핑 하는 것을 특징으로 하는 낙농 가축에 있어서의 유선염 감염 발병율을 감소시키는 방법.
12. 니신계 티트 딥으로 포스트-딥핑하면서, 제 1 항, 제 3 항 및 제 4 항 중의 어느 한 항에 따른 와이프를 사용하여 착유 전에 가축의 유두를 와이핑 하는 것을 특징으로 하는 낙농 가축에 있어서의 유선염 감염 발병율을 감소시키는 방법.

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