PL185880B1

PL185880B1 - Wilgotna ściereczka dezynfekcyjna i jednoetapowy sWilgotna ściereczka dezynfekcyjna i jednoetapowy sposób dezynfekcji oraz osuszania powierzchniposób dezynfekcji oraz osuszania powierzchni

Info

Publication number: PL185880B1
Application number: PL96323717A
Authority: PL
Inventors: PeterBlackburn Peter Blackburn; La Harpe JonDe La Harpe Jon De
Original assignee: Ambi Inc
Priority date: 1995-06-07
Filing date: 1996-06-07
Publication date: 2003-08-29
Also published as: GR3033983T3; DK0830061T3; NO317736B1; EP0830061A1; KR100499228B1; US5762948A; CA2219924C; AU715384B2; SK164797A3; WO1996039842A1; CA2219924A1; DE69607958D1; JPH11507363A; CZ297052B6; KR19990022064A; PT830061E; AU7629696A; HUP9901082A2; TW340797B; NO975635D0

Abstract

1. Wilgotna sciereczka dezynfekcyjna na osnowie papierowej lub tkanej, nasaczona cieklym preparatem skladajacym sie ze srodka bakteriobójczego i substancji pomocni- czych, znamienna tym, ze preparat nasaczajacy, jako srodek bakteriobójczy, zawiera bak- teriocyne w stezeniu 25-500 µg/ml, a jako srodki pomocnicze zawiera srodek chelatujacy w stezeniu 0,1-10 mM, srodek stabilizujacy w stezeniu 0,1-10 mM, srodek powierzchnio- wo czynny w stezeniu 0,1-3% wagowo-objetosciowych i alkoholowy czynnik osuszajacy w stezeniu 10-20% wagowo objetosciowych oraz sól w stezeniu 10-300 mM. 14. Jednoetapowy sposób dezynfekcji oraz osuszania powierzchni skóry, a zwlaszcza brodawki mlecznej krowy przed lub po dojeniu lub powierzchni majacych kontakt z zywno- scia przez przemywanie tych powierzchni wilgotna sciereczka dezynfekcyjna na osnowie papierowej lub tkanej, nasaczonej cieklym preparatem skladajacym sie ze srodka bakterio- bójczego i substancji pomocniczych, znamienny tym, ze odpowiednia powierzchnie przecie- ra sie wilgotna sciereczka której preparat nasaczajacy, jako srodek bakteriobójczy, zawiera bakteriocyne w stezeniu 25-500 µ g/ml, a jako srodki pomocnicze zawiera srodek chelatujacy w stezeniu 0,1-10 mM, srodek stabilizujacy w stezeniu 1-3% mM, srodek powierzchniowo czynny w stezeniu 1-3% mM, wagowo-objetosciowych i alkoholowy czynnik osuszajacy w stezeniu 10-20% wagowo-objetosciowych oraz sól w stezeniu 10-300 mM. PL PL PL PL PL PL PL

Description

Przedmiotem wynalazku jest wilgotna ściereczka i jednoetapowy sposób dezynfekcji oraz osuszania powierzchni.

Wilgotne ściereczki lub serwetki dezynfekcyjne są obecnie dostępne w handlu i są produkowane pod różnymi postaciami. Ściereczki, które są dziś dostępne posiadają wiele zastosowań włącznie z dezynfekcją rąk, skóry, lini spożywczych czy też przeróżnych powierzchni w szpitalach. Znajdują one również zastosowanie w przemyśle mleczarskim.

Wilgotne ściereczki dezynfekcyjne znajdujące się obecnie na rynku zawierają takie środki bakteriobójcze jak chlorheksydyna, diglukonian chlorheksydyny lub jodyna powidonowa oraz/lub alkohol w charakterze czynników dezynfekcyjnych. Alkohol, którego stężenie

185 880 wynosi 70% lub więcej służy również jako czynnik osuszający. O ile skuteczne osuszenie powierzchni przetartej wilgotną ściereczką jest ważne to jednak stosowane wysokie stężenia alkoholu powodują problemy związane z nadmiernym wysuszaniem i pękaniem skóry. Są także zastrzeżenia dotyczące temperatury zapłonu preparatu o tak wielkiej zawartości alkoholu. Co więcej, powszechnie stosowane środki dezynfekcyjne nie mają idealnej siły w związku z czym ilości wymagane do uzyskania rozsądnego stopnia zdezynfekowania mogą powodować problemy związane z toksycznością lub uczuleniami.

Jedną z dziedzin, w których obecnie znane sposoby dezynfekcji nie rozwiązały całkowicie wszystkich problemów jest przemysł mleczarski. Przemysł mleczarski ponosi ogromne straty, w samych Stanach Zjednoczonych szacowane na blisko 2 miliardy dolarów rocznie, w wyniku zapalenia sutka. W celu opanowania infekcji zapalenia sutka polecana jest praktyka odpowiedniej higieny wymienia przed, podczas oraz po dojeniu.

Przygotowanie krowy mlecznej do dojenia postrzegane jest jako najbardziej pracochłonna oraz czasochłonna czynność związana z dojeniem. Farmerzy stosują zazwyczaj jeden z dwóch sposobów. Najbardziej rozpowszechnione jest mycie wymienia. Praktyka ta polega na stosowaniu roztworu do mycia wymienia, osobnych ręczników papierowych oraz wody. Roztwór do mycia wymienia może być podawany wężem i rozpylany na wymię. W sposobie alternatywnym moczy się ręcznik w roztworze do mycia wymienia znajdującym się w wiadrze, a mokry ręcznik papierowy używa się do mycia i masażu wymienia. W każdym z wymienionych sposobów wymię jest następnie suszone za pomocą papierowego ręcznika.

W przybliżeniu w około 40% amerykańskich farm mlecznych mycie wymienia zastąpiono zanurzaniem brodawek sutków w roztworze bakteriobójczym. Oborowy zanurza lub też spryskuje brodawki sutki krowy (w przeciwieństwie do całych wymion) roztworem do brodawek pozostawiając roztwór przez około 15 sekund w kontakcie z brodawkami. Roztwór ten jest następnie usuwany z brodawek za pomocą ręcznika papierowego.

O ile każda z tych metod ma pewne zalety to żadna z nich nie rozwiązuje skutecznie wszystkich kłopotów napotkanych w tym środowisku. Do problemów należą w dalszym ciągu: skuteczne mycie oraz suszenie, zanieczyszczanie mleka roztworem do mycia brodawek oraz pozostałościami sprzed mycia oraz efektywne wykorzystanie pracy oraz czasu w procesie przygotowania krowy do dojenia.

Znaczne wysiłki skierowane są na zwalczanie powszechnego oraz kosztownego zjawiska zakażeń bakteryjnych mleka. Opisano wiele usprawnionych procedur obróbki wymion przed dojeniem i metod zapobiegania oraz leczenia zapalenia sutka u krów (patrz np. opisy patentowe Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 4206529 przyznany Neumann'owi, nr 5124145 oraz nr 5234648 przyznane Sordilło i współpracownikom, nr 4253420 przyznany Hoefelmayfowi oraz nr 4366732 przynany Zighelboim'owi). Inne z kolei opisują usprawnione kompozycje przeciw mikrobom o szczególnym zastosowaniu w usuwaniu problemu zanieczyszczeń mleka pozostałościami z operacji higienicznych poprzedzających dojenie (patrz np. opis patentowy Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 5139788 przyznany Schmidtowi) lub też opisują usprawnione układy ogólnego stosowania i ich użycie do wilgotnych ściereczek (patrz np. opisy patentowe Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 4775582 przyznany Abba'ie i współpracownikom oraz nr 4853281 przyznany Win'owi i współpracownikom). Przedstawienia obecnego stanu rzeczy w powyższej dziedzinie wraz z opisem rozwoju higieny wymienia w odniesieniu do różnych aspektów powszechnie stosowanych poprzedzających dojenie zabiegów sanitarnych na sutkach dokonują również następujący autorzy: Berg i współpracownicy, J. Dairy Sci. 58, 457 - 461 (1985), Pankey i współpracownicy, Veterinary Clinics of North America 9, 519 - 530 (1993), McKinnon i współpracownicy, J. Dairy Res. 50, 153 - 162 (1983), Murdough i współpracownicy, J. Dairy Sci. 76, 2033-2038 (1993) oraz Ansari i współpracownicy, Am. J. Infect. Control, 19, 243 - 249 (1991).

Mamy więc do czynienia z potrzebą udostępnienia mokrych ściereczek odkażających, które zapewniłyby skuteczne odkażanie i osuszenie powierzchi w jednym etapie i które stosowałyby czynniki odkażające o większej mocy oraz mniejszej liczbie niepożądanych efektów ubocznych. Ulepszone ściereczki powinny również zapewnić skuteczne suszenie, któremu nie towarzyszy pękanie ani też innego typu utrata integralności wrażliwych powierzchni.

185 880

Wynalazek dotyczy wilgotnej ściereczki dezynfekcyjnej na osnowie papierowej lub tkanej, nasączonej ciekłym preparatem składającym się ze środka bakteriobójczego i substancji pomocniczych, której preparat nasączający, według wynalazku, jako środek bakteriobójczy, zawiera bakteriocynę w stężeniu 25-500 pg/ml, a jako środki pomocnicze zawiera środek chelatujący w stężeniu 0,1-10 mM, środek stabilizujący w stężeniu 1-10 mM, środek powierzchniowo czynny w stężeniu 0,1-3% wagowo-objętościowych i alkoholowy czynnik osuszający w stężeniu 10-20% wagowo-objętościowych oraz sól w stężeniu 10-300 mM.

W ściereczce według wynalazku, preparat nasączający, korzystnie, jako bakteriocynę, zawiera lantocynę, jako środek chelatujący zawiera substancję wybraną spośród jednego lub wielu związków obejmujących tetraoctan alkilodiaminy, kwas etylenoglikolobisbetaaminoetylo-N,N'-tetraoctowy (EGTA) oraz cytrynian, jako środek stabilizujący zawiera związek tioeterowy, jako środek powierzchniowo czynny zawiera środek wybrany z grupy obejmującej niejonowy środek powierzchniowo czynny, kationowy środek powierzchniowo czynny, monogliceryd lub kwas tłuszczowy, a jako sól zawiera NaCl.

W ściereczce według wynalazku, preparat nasączający, korzystnie, jako lantocynę zawiera nizynę, jako środek chelatujący zawiera kwas etylenodiaminotetraoctowy (EDTA), jako środek stabilizujący zawiera metioninę, jako środek powierzchniowo czynny zawiera polioksyetylenowany (20 moli tlenku etylenu) monooleinian sorbitanu (polysorbate 20), zaś jako czynnik osuszający zawiera 1-propanol.

W ściereczce według wynalazku, preparat nasączający, korzystnie, jako środek chelatujacy, zawiera kombinację kwasu etylenodiaminotetraoctowego (EDTA) oraz cytrynianu.

W ściereczce według wynalazku, preparat nasączający, korzystnie, jako środek bakteriobójczy zawiera nizynę w stężeniu 25-500 pg/ml, a NaCl w stężeniu 10-300 mM.

W ściereczce według wynalazku, preparat nasączający, korzystnie, jako środek chelatujacy, zawiera kwas etylenodiaminotetraoctowy (EDTA) w stężeniu 0,1-10 mM.

W ściereczce według wynalazku, preparat nasączający, korzystnie, zawiera kwas etylenodiaminotetraoctowy (EDTA) w stężeniu 0,1-10 mM, a cytrynian w stężeniu 1-30 mM.

W ściereczce według wynalazku, preparat nasączający, korzystnie, jako środek stabilizujący zawiera metioninę w stężeniu 1-10 mM.

W ściereczce według wynalazku, preparat nasączający, korzystnie, jako środek powierzchniowo czynny zawiera polioksyetylenowany (20 moli tlenku etylenu) monooleinian sorbitanu (polysorbate 20) w stężeniu 0,1-3% wagowo-objętościowych.

W ściereczce według wynalazku, preparat nasączający, korzystnie, jako środek osuszający zawiera 1-propanol w stężeniu 10-20% wagowo-objętościowych. .

W ściereczce według wynalazku, preparat nasączający, korzystnie, zawiera dodatkowo środek kondycjonujący oraz zagęszczający.

W ściereczce według wynalazku, preparat nasączający, korzystnie, dodatkowo zawiera chlorheksydynę.

W ściereczce według wynalazku, korzystnie, osnowę stanowi materiał włókninowy.

Jednoetapowy sposób dezynfekcji oraz osuszania powierzchni skóry, a zwłaszcza brodawki mlecznej krowy przed lub po dojeniu lub powierzchni mających kontakt z żywnością przez przemywanie tych powierzchni wilgotną ściereczką dezynfekcyjną na osnowie papierowej lub tkanej, nasączonej ciekłym preparatem składającym się ze środka bakteriobójczego i substancji pomocniczych, według wynalazku polega na tym, że odpowiednią powierzchnię przeciera się wilgotną ściereczką której preparat nasączający, jako środek bakteriobójczy, zawiera bakteriocynę w stężeniu 25-500 pg/ml, a jako środki pomocnicze zawiera środek chelatujący w stężeniu 0,1-10 mM, środek stabilizujący w stężeniu 1-10 mM, środek powierzchniowo czynny w stężeniu 0,1-3% wagowo-objętościowych i alkoholowy czynnik osuszający w stężeniu 10-20% wagowo-objętościowych oraz sól w stężeniu 10-300 mM.

W sposobie według wynalazku, korzystnie, stosuje się ściereczkę, której preparat nasączający, jako bakteriocynę, zawiera lantocynę, jako środek chelatujący zawiera substancję wybraną spośród jednego lub wielu związków obejmujących tetraoctan alkilodiaminy, kwas etylenoglikolobisbetaaminoetylo-N,N'-tetraoctowy (EGTA) oraz cytrynian, jako środek stabilizujący zawiera związek tioeterowy, jako środek powierzchniowo czynny zawiera środek

185 880 wybrany z grupy obejmującej niejonowy środek powierzchniowo czynny, kationowy środek powierzchniowo czynny, monogliceryd lub kwas tłuszczowy, a jako sól zawiera NaCl.

W sposobie według wynalazku, korzystnie, stosuje się ściereczkę, której preparat nasączający, jako lantocynę zawiera nizynę, jako środek chelatujący zawiera kwas etylenodiaminotetraoctowy (EDTA), jako środek stabilizujący zawiera metioninę, jako środek powierzchniowo czynny zawiera polioksyetylenowany (20 moli tlenku etylenu) monooleinian sorbitanu (polysorbate 20), zaś jako czynnik osuszający zawiera 1-propanol.

W sposobie według wynalazku, korzystnie, stosuje się ściereczkę, której preparat nasączający, jako środek chelatujący, zawiera kombinację kwasu etylenodiaminotetraoctowego (EDTA) oraz cytrynianu.

W sposobie według wynalazku, korzystnie, stosuje się ściereczkę, której preparat nasączający jako środek bakteriobójczy zawiera nizynę w stężeniu 25-500 μg/ml, a NaCl w stężeniu 10-300 mM.

W sposobie według wynalazku, korzystnie, stosuje się ściereczkę, której preparat nasączający jako środek chelatujący zawiera kwas etylenodiaminotetraoctowy (EDTA) w stężeniu 0,1-10 mM.

W sposobie według wynalazku, korzystnie, stosuje się ściereczkę, której preparat nasączający zawiera kwas etylenodiaminotetraoctowy (EDTA) w stężeniu 0,1-10 mM, a cytrynian w stężeniu 1-30 mM.

W sposobie według wynalazku, korzystnie, stosuje się ściereczkę, której preparat nasączający jako środek stabilizujący zawiera metioninę w stężeniu 1-10 mM.

W sposobie według wynalazku, korzystnie, stosuje się ściereczkę, której preparat nasączający jako środek powierzchniowo czynny zawiera polioksyetylenowany (20 moli tlenku etylenu) monooleinian sorbitanu (polysorbate 20) w stężeniu 0,1-3% wagowo-objętościowych.

W sposobie według wynalazku, korzystnie, stosuje się ściereczkę, której preparat nasączający jako środek osuszający zawiera 1-propanol w stężeniu 10-20% wagowo-objętościowych.

W sposobie według wynalazku, korzystnie, stosuje się ściereczkę, której preparat nasączający zawiera dodatkowo środek kondycjonujący oraz zagęszczający.

W sposobie według wynalazku, korzystnie, stosuje się ściereczkę, której preparat nasączający dodatkowo zawiera chlorheksydynę.

W sposobie według wynalazku, korzystnie, stosuje się ściereczkę, której osnowę stanowi materiał włókninowy.

Tak więc, przedmiotem niniejszego wynalazku są nowe wilgotne ściereczki wykonane z papieru lub z tkaniny, które zapewniają szybkie jednoetapowe odkażanie oraz osuszenie powierzchni. Ściereczki zawierają ciekły preparat dezynfekcyjny zazwyczaj składający się z bakteriocyny jako środka odkażającego, stabilizatora dla bakteriocyny, środka chelatującego, środka powierzchniowo czynnego, soli, środka kondycjonującego lub nawilżającego skórę oraz środka przyspieszajcego osuszanie. Jeśli jest to wskazane bakteriocynowy środek dezynfekcyjny może być również połączony z typowymi czynnikami bakteriobójczymi. W ściereczkach stanowiących przedmiot niniejszego wynalazku wymieniony czynnik bakteriobójczy może być użyty w znacznie niższych stężeniach zmniejszając tym samym obawy związane z jego działaniem toksycznym lub uczulającym. Ponieważ ściereczki stanowiące przedmiot niniejszego wynalazku zawierająbakteriocyny, tzn. znacznie silniejszy środek bakteriobójczy, to alkohol pełni w nich wyłącznie funkcję osuszającą i jego stężenie nie musi być aż tak wysokie jak w przypadku, gdy spełnia on także rolę środka bakteriobójczego. Jest to więc środek na typowo spotykany problem pękania wrażliwych powierzchni pod wpływem preparatów o wysokiej zawartości alkoholu.

Ściereczki będące przedmiotem niniejszego wynalazku są odpowiednie do dezynfekcji oraz osuszania jakiejkolwiek powierzchni o wysokich wymaganiach sanitarnych. Jednym ze szczególnych zastosowań ściereczek będących przedmiotem niniejszego wynalazku jest szybka oraz skuteczna dezynfekcja i osuszanie brodawek u krów. W wyniku zastosowania ściereczek według wynalazku obniża się częstość występowania zapalenia sutka u zwierząt mlecznych.

185 880

Opisy patentowe Stanów Zjednoczonych Ameryki o numerach 5135910, 5217950, 5260271, 5304540 oraz 5334582 ujawniają szeroki wachlarz kompozycji bakteriobójczych zawierających lantycynę (bakteriocynę zawierającą lantioninę) taką jak nizyna oraz środek chelatujący. Opisy te wskazują również wiele zastosowań dla tych kompozycji w zależności od ich własności bakteriobójczych. Pośród wielu kompozycji ujawnionych w wymienionych opisach patentowych preparat zawierający nizynę o nazwie Consept od wielu lat znajduje się w handlu. Sciereczki stanowiące przedmiot niniejszego wynalazku typowo zawierają preparaty takie jak te, które są ujawnione w powyżej cytowanych patentach, które są przedstawione w niniejszym opisie w charakterze odnośnika literaturowego.

Wynalazek bliżej przedstawiono na rysunku, na którym:

Figura 1 przedstawia wpływ metioniny o różnych stężeniach na stabilność nizyny w ręcznikach papierowych przy różnych czasach ekspozycji.

Figura 2 przedstawia skuteczność metioniny o różnych stężeniach jako środka chroniącego nizynę po 6 dniach ekspozycji.

Figura 3 przedstawia wpływ metioniny oraz/lub NaCl na proces degradacji nizyny (stopień zachowania nizyny w preparacie Consept zawierającym ±100 mM NaCl) po 6 dniach kontaktu z ręcznikami papierowymi.

Tak więc, przedmiotem niniejszego wynalazku jest ściereczka jednorazowego użytku typowo nasączona preparatem zawierającym bakteriocyny oraz dodatkowo środek chelatujący, składnik solny, stabilizator, środek osuszający oraz środek powierzchniowo czynny. Ściereczki stanowiące przedmiot niniejszego wynalazku zapewniają skuteczną jednoetapową dezynfekcję przez osuszanie powierzchni oraz mają zastosowanie w każdej sytuacji wymagającej podwyższenia stanu sanitarnego powierzchni. Jednym ze szczególnych zastosowań jest dezynfekcja i osuszanie krowich brodawek.

Sciereczki stanowiące przedmiot niniejszego wynalazku nasączone są preparatem dezynfekcyjnym typowo zawierającym bakteriocynę jako składnik czynny w połączeniu ze składnikiem solnym. Zalecanym składnikiem czynnym jest lantycyna (bakteriocyna zawierająca lantioninę) taką jak na przykład nizyna, subtilina, epidermina, gallidermina, cynnamycyna, duramycyna, ankowenina lub też Pep 5. Można również użyć innych bakteriocyn peptydowych takich jak lizostafma. Czynniki bakteriocynowe użyte w niniejszym wynalazku są znacznie silniejsze niż zazwyczaj stosowane środki bakteriobójcze oraz nie wykazują niepożądanych skutków ubocznych. Czynniki bakteriocynowe użyte w preparatach stosowanych w niniejszym wynalazku nie są jednak ograniczone do bakteriocyn peptydowych; w połączeniu z bakteriocynami stanowiącymi przedmiot niniejszego wynalazku można również stosować inne środki przeciwbakteryjne takie jak chlorheksydyna. Obecność składnika bakteriocynowego pozwala na użycie chlorheksydyny lub innego niebakteriocynowego składnika bakteriobójczego w znacznie mniejszych stężeniach, co eliminuje niebezpieczeństwo występowania niepożądanych efektów ubocznych. Co więcej czynnik aktywny może zawierać kombinację dwóch lub większej liczby bakteriocyn lub też bakteriocynę w kombinacji z innym czynnikiem przeciwbakteryjnym. Najbardziej zalecanym wariantem wykonania niniejszego wynalazku znanym w chwili obecnej jest wariant zawierający nizynę jako czynnik aktywny.

Użycie bakteriocyn takich jak nizyna w połączeniu, ze ściereczkami wykonanymi z papieru lub tkaniny związane jest z nieodłącznymi trudnościami spowodownymi peptydową naturą składnika czynnnego. Należy się spodziewać, że związek tego typu raz zadsorbowany na ściereczce nie będzie łatwo z niej uwalniany, w tym przypadku na powierzchnię wymagającą dezynfekcji. W związku z tym preparaty stanowiące przedmiot niniejszego wynalazku zawierają również składnik mający na celu zwiększyć moc jonową roztworu i tym samym poluźnić siły oddziaływania między czynnikiem bakteriobójczym a powierzchnią ściereczki. Okazało się, że składnik ten stanowi również czynnik zwiększający stabilność środka czynnego w kontakcie ze ściereczką. Odpowiednimi czynnikami zwiększającymi moc jonową są halogenki, karboksylany, hydroksykarboksylany, salicylany, glikolany, fosforany oraz polifosforany. Zalecanym składnikiem jest NaCl o stężeniu w zakresie od 10 do 100 mM. Zalecane stężenie NaCl wynosi 50 mM. Innym zalecanym składnikiem jest cytrynian sodowy o stężeniu w zakresie od 1 do 10 mM. Zalecane stężenie cytrynianu sodowego wynosi 5 mM.

185 880

Stwierdzono (patrz opisy patentowe Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 5 135 910, 5 217 950, Stanów Zjednoczonych Ameryki zgłoszenie patentowe nr 08/386122 przytoczone tutaj jako odnośniki literaturowe, 5260271, 5304540 oraz 5334582, przytoczone tutaj jako odnośniki literaturowe), że lantocyny w połączeniu z czynnikiem chelatującym wykazują podwyższoną moc działania bakteriobójczego oraz zwiększony jego zakres. W związku z tym preparaty stanowiące przedmiot niniejszego wynalazku zawierają zazwyczaj składnik chelatujący. Odpowiednimi składnikami chelatującymi są na przykład, EDTA, CaEDTA, CaNa,EDTA oraz inne tetraoctany alkilodiaminowe, jak również EGTA oraz cytrynian. Zalecanym czynnikami chelatującymi są EDTA (1-10 mM) oraz/lub cytrynian (1-30 mM). Najbardziej zalecane stężenia EDTA oraz cytrynianu wynoszą odpowiednio 3 mM oraz 5 mM. Czynnik chelatujący może być stosowany pojedynczo lub też w połączeniu z innymi.

Zalecane bakteriocyny peptydowe stosowane w niniejszym wynalazku są nieco labilne i podczas kontaktu bakteriocyny ze ściereczką możemy mieć do czynienia ze stratami wynikającymi z degradacji. Stwierdzono (Stany Zjednoczone Ameryki zgłoszenie patentowe nr 08/386122 przytoczone tutaj jako odnośnik literaturowy), że metionina oraz jej pochodne związki tioeterowe wykazują działanie zabezpieczające bakteriocyny, a w szczególności nizynę przed degradacją. W związku z tym metionina jest zazwyczej stadnikiem preparatów stanowiących przedmiot niniejszego wynalazku. Metionina stosowana jest w zakresie stężeń 1-10 mM, przy czym najbardziej zalecane stężenie wynosi 2 mM. Stwierdzono, że kombinacja EDTA oraz cytrynianu nie tylko poprawia opisane powyżej własności chelatujące, ale również wzmacnia stabilność składnika bakteriocynowego.

Jeżeli chodzi o stabilizację czynnika aktywnego można również do preparatu dodać katalazę w celu zniszczenia wszystkich nadtlenków, które mogą być obecne. Katalaza stosowana jest w zakresie stężeń 6-600 jednostek/ml. Najbardziej zalecane stężenie katalazy wynosi 60 jednostek/ml.

Kolejnym istotnym składnikiem preparatu jest środek osuszający. Istotne jest aby osiągnąć delikatną równowagę pomiędzy środkami, które są zbyt „mokre” a środkami, które są zbyt „suche”. Jak zostało to opisane powyżej zbyt dużo wilgoci w procedurze dezynfekcji może zakłócić proces dezynfekcji, podnieść prawdopodobieństwo zanieczyszczenia oraz, w szczególnści w przypadku wrażliwych powierzchni takich jak skóra brodawki sutkowej, spowodować podrażnienie. Z drugiej jednak strony w celu optymalnego funkcjonowania składnika bakteriocynowego należy utrzymywać minimalną ilość „wilgotności”; ściereczki stanowiące przedmiot niniejszego wynalazku nie są „aktywowane wilgocią”, jednak minimum wilgotnego środowiska musi być utrzymane w celu zapewnienia pożądanej skuteczności. Co więcej, preparaty, które powodują zbyt szybkie lub całkowite wysuszenie mogą też powodować podrażnienie wrażliwych powierzchni. W związku z powyższym preparaty stanowiące przedmiot niniejszego wynalazku zawierają zazwyczaj środek osuszający jakim jest alkohol. Z powodu zastosowania bakteriocyn w ściereczkach stanowiących przedmiot niniejszego wynalazku alkohol wymagany jest wyłącznie w ilościach potrzebnych do osuszania nie zaś do dezynfekcji. W związku z tym preparaty stanowiące przedmiot niniejszego wynalazku zawierają znacznie mniej alkoholu niż to zazwyczaj wymagane jest w przypadku znanych preparatów do nasączania ściereczek. Omija się w ten sposób typowe kłopoty związane z wysoką zawartością alkoholu takie jak wrażliwość powierzchni oraz temperatura zapłonu. Pośród alkoholi odpowiednich do zastosowania w ściereczkach stanowiących przedmiot niniejszego wynalazku są metanol, etanol, 1-propanol, 2-propanol oraz alkohol benzylowy. Zalecanym składnikiem osuszającym jest 1-propanol przy stężeniach wagowo-objętościowych od 10 do 20% wagowo. Najbardziej zalecane stężenie 1-propanolu wynosi 12% wagowo-objętościowych.

Cytowane powyżej patenty, nastawione na preparaty nizyna-związek chelatujący, mogą jeszcze bardziej podnieść moc oraz zakres bakteriobójczego działania kompozycji zawierających lantocyny. Preparaty stanowiące przedmiot niniejszego wynalazku mogą więc zawierać również i taki składnik. Składniki takie obejmują niejonowe oraz amfoteryczne środki powierzchniowo czynne, środki emulgujące, związki czwartorzędowe, monoglicerydy oraz kwasy tłuszczowe. Bardziej szczegółowo składniki te mogą być wybrane z grupy zawierającej: monolaurynian glicerolu (0,03 do 0,3% wagowo-objętościowych); niejonowe środki

185 880 powierzchniowo czynne takie jak polisorbat 20 (0,1 do 3% wagowo-objętościowych), Arlasove 200 (0,1 do 3% wagowo-objętościowych), Triton (0,1 do 3% wagowo-objętościowych); kationowe środki powierzchniowo czynne takie jak tlenek lauraminy (0,1 do 3% wagowo-objętościowych) czy też amfoteryczne środki powierzchniowo czynne takie jak kokoamidopropylobetainy (0,1 do 3% wagowo-objętościowych). Zalecanym środkiem powierzchniowo czynnym jest niejonowy środek powierzchniowo czynny polisorbat w stężeniu wagowo-objętościowym 1%.

Preparat do nasączania ściereczki stanowiący przedmiot niniejszego wynalazku może również zawierać składnik kondycjonująco/nawilżający oraz środek zagęszczający. Składnik kondycjonujący jest szczególnie użyteczny w przypadku kiedy ściereczki stosowane są na powierzchni skóry, która łatwo ulega podrażnieniu.

Składnik taki jest zazwyczaj wybrany spośród takich związków jak glikol propylenowy, gliceryną sorbit czy laktylan, każdy o stężeniu wagowo-objętościowym w zakresie od 1 do 10%. Zalecanym środkiem kondycjonującym jest glikol propylenowy o stężeniu wagowo-objętościowym wynoszącym 10%. Środek zagęszczający może być wybrany z grupy zawierającej hydroksyetylocelulozę, metylocelulozę, poliwinylopirolidon oraz mieszaniny tych składników, każdy o stężeniu wagowo-objętościowym w zakresie od 0,1 do 1%. Hydroksyetyloceluloza o stężeniu wagowo-objętościowym wynoszącym 0,35% jest składnikiem zalecanym w niniejszym wynalazku. W przypadku kiedy środek zagęszczający jest składnikiem preparatu do nasączania ściereczki jej zdolność absorbowania cieczy wzrasta.

Odczyn pH preparatu ustawiony jest w zakresie od 3,0 do 5,0. Zalecany końcowy odczyn pH preparatu wynosi 3,5.

Cytowane powyżej opisy patentowe o końcówkach numerów 910, 950, 271, 540 oraz 582 ujawniają pewną liczbę kompozycji oraz formuł, które zawierają różne kombinacje składników przedstawionych powyżej w opisie niniejszych preparatów. Opisy te przytaczane są w niniejszym opisie jako odnośniki literaturowe z powodu ujawnienia przez nie sposobu wytwarzania kompozycji nizyna-związek chelatujący, kompozycji które mogą być użyte w niniejszym wynalazku.

Wybór ściereczki papierowej, która ma być użyta w połączeniu z preparatem zawierającym nizynę jest także istotny jeżeli chodzi o pomyślną realizację wynalazku. Niektóre gatunki papieru nie pozwalają na przykład na wystarczającą adsorpcję składnika czynnego. Może to prowadzić albo do niewystarczającej adsorbcji składnika czynnego przez ściereczkę albo też do trudności w uwolnieniu składnika czynnego ze ściereczki na powierzchnię docelową. Innymi czynnikami, które muszą tutaj być brane pod uwagę są koszty, faktura.powierzchni i jej wpływ na skórę, pojemność jednej ściereczki w odniesieniu do cieczy, pozostałość ciekła na skórze oraz wytrzymałość na zerwanie papieru w stanie mokrym. Najlepszymi papierami, które są w chwili obecnej znane autorom v/ynalazku są papiery wykonane z hydroentanglowanej celulozy.

Zgodnie z niniejszym wynalazkiem ściereczki mogą być przechowywane i dozowane za pomocą wielu różnych środków, z których wszystkie mają na celu zabezpieczenie ściereczek przed zabrudzeniem oraz zapobieganie przedwczesnemu wyschnięciu ściereczek. Ściereczki mogą być nawinięte na rolkę i centralnie wyciągane z zasobniką mogą być składowane warstwami, układane warstwami w stanie złożonym lub też mogą samoczynnie wyskakiwać z dozownika. Innym aspektem niniejszego wynalazku jest podawanie ściereczek ze szczelnej plastikowej torby jednorazowego użytku wykonanej z dającego się recykłizować materiału.

Dla wygody użytkownika zasobnik może mieć postać futerału noszonego przy pasie lub też może być zamontowany pod ręką przy każdym stanowisku pracy. Zasobnik typu „torby jednorazowego użytku” będzie się nadawał do zamontowania na stanowisku pracy gdziekolwiek w zasięgu ręki. Jeden z aspektów niniejszego wynalazku dotyczy pojemników wielokrotnego użytku i jest to koncepcja związana z problemem usuwania odpadów.

Produkt zapakowany może również przybrać różne formy włącznie z osobnym pakowaniem ściereczek oraz preparatu ciekłego, na przykład pojemnik zawierający suche ściereczki plus ciekły składnik, który ma być dodany tuż przed rozpoczęciem używanią kanister wielokrotnego stosowanią do którego w odpowiednim czasie wkłada się ściereczki zalewając je

185 880 cieczą lub paczka zawierająca suche ręczniki nasączone reagentami do których w stosownym momencie przed użyciem dodaje się wodę lub też odpowiednio skomponowany składnik ciekły. Jednym z zastosowań wilgotnych ścierek stanowiących przedmiot niniejszego wynalazku jest sposób przygotowania brodawek wymion krowich do dojenia, łączący zalety mycia wymienia (usuwanie brudu oraz mechaniczna stymulacja wymienia mająca na celu spowodowanie „spłynięcia mleka w dół”) oraz zanurzania brodawki w środku bakteriobójczym (odkażanie skóry oraz końcówki brodawki, usunięcie nalotu oraz osuszenie ręcznikiem papierowym) przy czym czynność ta, prowadzona w jednym etapie, charakteryzuje się dużą prędkością i wysoką wydajnością. W miarę jak farmy mleczne stają się coraz większe, a praktyka trzykrotnego dojenia dziennie coraz częściej stosowana coraz większego też znaczenia nabierają procedury oszczędzające czas i zwiększające wydajność mleka. Wilgotne ściereczki stanowiące przedmiot niniejszego wynalazku oraz według tego wynalazku opracowana jednoetapowa procedura są odpowiedzią na problemy związane z przygotowaniem krów do dojenia przedstawione w swoich wytycznych przez Narodową Radę do Walki z Zapaleniem Sutka (NMC National Mastitis Council). Procedura będąca przedmiotem niniejszego wynalazku skraca czas i zmniejsza pracochłonność związaną z przygotowaniem zwierząt oraz poprawia wydajność dojenia. Praktyka higieny poprzedzającej dojenie pomaga obniżyć stopień bakteryjnego zanieczyszczenia mleka, które od wielu lat jest w centrum uwagi w dalszym ciągu pozostając jednym z ważniejszych problemów.

Przecieranie przed dojeniem brodawek wymienia za pomocą ściereczek stanowiących przedmiot niniejszego wynalazku usuwa wszelkie zanieczyszczenia z powierzchni brodawki, która wchodzi w kontakt z urządzeniem dojącym, stymuluje wydzielanie oksytocyny poprzez masaż wymienia wzmagając w ten sposób „wyciekanie” mleka, zapewnia działanie bakteriobójcze niszczące na brodawce bakterie powodujące zapalenie sutek oraz pozostawia na brodawce minimalną ilość szybkoschnącej pozostałości ciekłej eliminując tym samym potrzebę suszenia brodawki w oddzielnym etapie. Zastosowanie jednorazowych ściereczek stanowiących przedmiot niniejszego wynalazku do mycia i odkażania skóry rąk przy pracy bez rękawiczek w kontakcie z żywnością może w podobny sposób przynieść korzyści związane z oszczędnością czasu i pracy (przy jednoczesnym ograniczeniu ryzyka bakteryjnego zakażenia żywności). Zastosowanie niniejszego wynalazku do mycia i odkażania twardych i nieożywionych powierzchni pozostających w kontakcie z żywnością może podobnie przynieść korzyści. Zastosowanie jednorazowych ściereczek stanowiących przedmiot niniejszego wynalazku może również przynieść korzyści związane z oszczędnością czasu oraz pracy w przypadku ich użycia do przemywania skóry głowy, twarzy i szyi lub jakiejkolwiek powierzchni skóry wynikającą z faktu wykonania połączonej czynności przemywania i dezynfekcji, która jednocześnie zostawia na skórze szybkoschnącą wilgotną pozostałość. Własność przemywająca ściereczki dostracza użytkownikowi wrażenia umycia oraz odświeżenia. W podobny sposób przemywające oraz bakteriobójcze własności ściereczek mogą być wykorzystane przed oraz po niewielkich zabiegach chirurgicznych lub też przed innymi procedurami wymagającymi przerwania integralności skóry, takimi jak na przykład nakłucie wykonane podczas używania igły podskórnej.

Ściereczki mogą być umieszczone w stacjonarnym pojemniku wykonanym z polietylenu o dużej gęstości lub, alternatywnie, w zamocowanym na pasie biodrowym przenośnym zasobniku. Omawiane ściereczki mogą być nawinięte na centralnie odwijaną rolkę umieszczoną w cylindrycznym pojemniku, mogą też być ułożone warstwami w prostopadłościennym zasobniku oraz nasączone roztworem bakteriobójczym stanowiącym przedmiot niniejszego wynalazku. Dozownik z mechanizmem przeciągającym zmniejszałby prawdopodobieństwo zabrudzenia całego zapasu ściereczek.

Używanie ściereczek stanowiących przedmiot niniejszego wynalazku w odróżnieniu od obecnie stosowanych procedur związane jest z pewną liczbą wymiernych korzyści. Jedną z nich jest fakt, że przemywanie i odkażanie prowadzone są za pomocą tej samej operacji, oszczędzając czas i wysiłek, przy czym za każdym użyciem jednocześnie odkażana jest również ręka operatora.

185 880

Obecne procedury obowiązujące pracowników farm mlecznych obejmują trzy osobne etapy: etap usuwania brudu, etap odkażania roztworem do brodawek oraz etap osuszania papierowym ręcznikiem. Teraz wszystkie te czynności dokonywane są jednocześnie za pomocą jednego produktu. Co więcej, ściereczka papierowa jednorazowego użytku eliminuje niebezpieczeństwo wtórnego zakażenia. Sposób postępowania ujawniony w niniejszym wynalazku skutecznie radzi sobie z zaleceniami Narodowej Rady do Walki z Zapaleniem Sutka dotyczącymi praktyki unikania nadmiaru płynu do przemywania sutka spływającego w dół brodawki; na brodawce pozostaje bowiem minimalna ilość płynu lub wręcz nie pozostaje nic co by mogło ewentualnie dostać się do mleka.

Ściereczki zapewniają odmierzoną, optymalną ilość odpowiedniego środka odkażającego oraz optymalne osuszenie traktowanej powierzchni. Dodatkowo, około 90% obecnych bakterii jak również w znacznej mierze cząstki pyłu usuwane są samym działaniem mechanicznym, które jednocześnie, w przypadku krów mlecznych zapewnia stymulację spływania mleka poprzez masaż. Wymagana ilość środka odkażającego jest zredukowana z powodu wyeliminowania potrzeby częstego odrzucania produktu pozostałego w naczyniu do zanurzania mającego na celu zapobieganie wtórnemu zakażeniu roztworu w naczyniu.

Procedura stanowiąca przedmiot niniejszego wynalazku może być również z korzyścią stosowana w reżimach technologicznych następujących po dojeniu. Takie postępowanie zapewnia mechaniczne usunięcie resztek mleka z „otwartej” brodawki i zmniejsza prawdopodobieństwo infekcji jak również wysusza brodawkę chroniąc ją w ten sposób przed ryzykiem pękania oraz „zamarzania” w niskich temperaturach. Odkażanie po dojeniu zapewnia również dodatkowy środek zapobiegawczy przeciw zapaleniu sutka.

Przykład 1

W celu ustalenia czy metionina może chronić nizynę przed degradacją w sytuacji kiedy nizyna znajduje się w kontakcie z papierowym ręcznikiem, przygotowano preparat odkażający na bazie nizyny (PDF) zawierający również metioninę o stężeniach od 0 do 100 mM. Świeże odcinki ręcznika papierowego inkubowane były w tych roztworach, a próbki PDF co 6 dni poddawane były analizie na zawartość nizyny. Chromatogramy próbek wykazywały degradację nizyny do wielu składników w próbkach kontrolnych nie zawierających metioniny oraz ochronę przeciwko degradacji w próbkach metioninę zawierających.

Preparat do zanurzania A (PDF-A) wykonany został z następujących składników:

1-propanol 24ml glikol propylenowy 16ml

10% roztwór polisorbatu 206ml

100 mM roztwór EDTA 1,2 ml woda 60ml pH ustalone pH=3,5

Wykonano następnie następujące roztwory testowe PDF-A:

Met (200 mM)	Nizyna (10 mg/ml)	PDF	H₂O
1.	0,0 ml	0,45 ml	8,96 ml	9,0 ml
2.	0,45 ml	0,45 ml	8,96 ml	8,55 ml
3.	0,9 ml	0,45 ml	8,96 ml	8,1 ml
4.	1,8 ml	0,45 ml	8,96 ml	7,2 ml
5.	4,5 ml	0,45 ml	8,96 ml	4,5 ml
6.	9,0 ml	0,45 ml	8,96 ml	0,0 ml

Do probówek polipropylenowych o pojemności 50 ml dodano kawałki ręcznika papierowego o powierzchni 100 cm² (10 cm x 10 cm) wraz z próbkami badanych roztworów o pojemności 9 ml. Następnie próbki delikatnie kołysano w temperaturze pokojowej pobierając

185 880 w różnych odstępach czasu po 40 pg w celu dokonania analizy na zawartość nizyny. Uzyskane wyniki przedstawione są na fig. 1 oraz fig. 2.

Przedstawione dane sugerują że obecność metioniny chroni przed utratą nizyny na drodze degradacji. Badania nad stabilnością nizyny w kontakcie z papierowymi ściereczkami wykazały utratę nizyny również bez towarzyszącego pojawienia się produktów degradacji. Ta utrata sugeruje, że jest także inne źródło niestabilności nizyny w produkcie stanowiącym wilgotne ściereczki oraz, że metionina nie chroni przeciwko tej drugiej formie.

Przykład 2

Nizyna w preparacie do ściereczek stabilizowana jest przeciwko degradacji za pomocą metioniny a przeciwko utracie związanej z adsoprcją przez dodatek soli.

Wyniki przedstawione na fig. 3 wskazują na to, że obecność chlorku sodowego zmniejsza stopień utraty związanej z adsoprcją oraz, że kombinacja metioniny i chlorku sodowego razem stabilizuje nizynę w preparacie do nasączania ściereczek i pozwala na zachowanie ponad 90% nizyny w próbkach przez okres 6 dni w temperaturze pokojowej.

Przykład 3

Nizyna w preparacie do nasączania ściereczek stabilizowana jest przeciwko degradacji za pomocą metioniny a przeciwko utracie związanej z adsoprcją przez dodatek soli. Pochodzące z różnych źródeł, różne rodzaje papieru charaktryzujące się się szerokim zakresem składu, wagi, własności w dotyku oraz wytrzymałości na zerwanie poddane są ewaluacji ze względu na ich przydatność do nasączania preparatem stanowiącym przedmiot niniejszego wynalazku.

Przygotowano preparat odkażający PDF (25 (pg/ml nizyny) według schematu przedstawionego w tabeli I. Dla każdych warunków eksperymentalnych w stożkowej probówce polipropylenowej o pojemności 50 ml umieszczono odcinek ręcznika papierowego o powierzchni 100 cm², po czym dodano 9 ml badanego roztworu a probówki umocowano na wytrząsarce w temperaturze pokojowej. Po upływie trzech dni próbki cieczy (1 ml) pobrano do analizy (tabela II).

Dane przedstawione w tabeli II potwierdzają fakt, że w preparatach do nasączania ściereczek nizyna stabilizowana jest przez dodatek soli i metioniny do preparatu. Dane te ilustrują również fakt, że stosować można szeroką gamę papierów lecz najlepszy jest papier wykonany z hydroentanglowanej celulozy.

Tabela I Przygotowanie preparatów PDF

	A zwykły	B + Met	C + Met + NaCl
1-propanol	(%)	20	20	20
glikol propylenowy	(%)	10	10	10
Polisorbat 20	(%)	1	1	1
EDTA	mM	1	1	1
Metionina	mM	-	10	10
NaCl	mM	-	-	100
Nizyna	pg/ml	25	25	25
Woda zdejonizowana		qs	qs	qs

185 880

Tabela Π

Oznaczenie miękkości oraz wytrzymałości ręczników papierowych, a także stężenia nizyny w fazie ciekłej po trzech dniach pozostawania w temperaturze pokojowej.

	Waga g/m²	miękkość*	wytrzymałość* *	Próbka kontrolna	+ Met	+ Met + NaCl
stężenie nizyny pg/ml
Poliester/celuloza	68	4	4	0	4	28
100% bawełna		3	1	7	12	23
Rayon/polipropylen	54	3	3	10	15	26
Rayon akrylowy	54	4	3	9	17	25
Gręplowany Ray on 100%	31	4	2	0	3	20
Gręplowany Rayon 100%	38	4	2	0	0	12
Rayon/celuloza form, na mokro	31	3	2	1	3	26
Papier marszczony	27,6 # / R	2	2	4	9	29
Próba Kontrolna				26	27	27
Rayon 70/30	36	4	3	6	10	19
Celuloza hydroentanglowana	37	3	3	22	26	28

* 1 = twardy 4 = miękki *♦ 1 = łatwo się drze 4 = odporny na rozdarcie

Przykład 4

Działanie bakteriobójcze preparatu do nasączania ściereczek oznaczane było względem zawiesin bakterii E. Coli, szczep ATCC 8739 oraz S. Aureus, szczep ATCC 6538. Kompozycje preparatów były identyczne z przedstawionymi w tabeli I, z tą jednak różnicą że 1-propanol o stężeniu 12% oraz glikol propylenowy o stężeniu 10% zastąpiono gliceryną o stężeniu 5%. Jako dodatek do preparatu dodano alkohol benzylowy oraz/lub cytrynian o różnych stężeniach. Działanie przeciwbakteryjne badanych preparatów testowane było dodatkowo w obecności 50% zawartości pełnego mleka, które spełniało rolę podkładu organicznego. Preparaty inkubowano wstępnie w obecności mleka przez 2 godziny, po czym ich działanie przeciwbakteryjne oznaczane było po dodatkowej 1 minucie inkubowania razem z zawiesiną bakteryjną w temperaturze 37°C.

Dane przedstawione w tabelach ΠΙ oraz IV obrazują jak obecność cytrynianu wzmaga działanie przeciwbakteryjne preparatów opartych na nizynie, szczególnie w obecności podkładu organicznego jakim jest mleko. Obecna w preparacie kombinacja środka chelatującego, cytrynianu oraz EDTA była zaskakująco skuteczna w neutralizowaniu dwuwartościowych kationów obecnych w mleku. Działanie przeciwbakteryjne preparatów zostało w dalszym ciągu wzmocnione dodaniem alkoholu benzylowego.

Tabela ΠΙ

%alk. benzyl.	% cytrynianu	E Coli (cfu/ml)*
1	2	3	4
		-	50% mleka
1,5	3,0	<5	<5
1,5	2,5	<5	<5
1,5	2,0	<5	<5
1,5	1,5	<5	<5

185 880 cd. tabeli

1	2	3	4
1,5	1,0	<5	<5
1,5	0,5	<5	<5
1,5	0,0	<5	<5
	3,0	<5	5
	2,5	<5	<5
	2,0	<5	170
	1,5	<5	<5
	1,0	<5	10
	0,5	<5	3,75 χ 10⁶
	0,0	<5	5,70 χ 10⁷

♦ Początkowa liczba zdolnych do życia 3,7 χ 10⁹ cfu/ml

Tabela IV

% alk. benzyl.	% cytrynianu	5. Auerus (cfu/ml) *
		-	50% mleka
1,5	3,0	<5	20
1,5	2,5	<5	10
1,5	2,0	<5	70
1,5	1,5	<5	330
1,5	1,0	<5	6,45 χ 10³
1,5	0,5	<5	4, 00 χ 10⁵
1,5	0,0	<5	9,65 χ 10⁷
	3,0	<5	1,30 χ 10³
	2,5	<5	6,15 χ 10⁵
	2,0	<5	5,04 χ 10⁶
	1,5	<5	2,68 χ 10⁷
	1,0	<5	1,72 χ 10⁸
	0,5	<5	4,40 χ 10⁷
	0,0	<5	2,74 χ 10⁸

♦ Początkowa liczba zdolnych do życia 2,35 χ 10⁸ cfu/ml

Przykład 5

Kompozycje preparatów do nasączania ściereczek przygotowane były w sposób identyczny z przedstawionymi w tabeli I, z tą jednak różnicą, że polisorbat 20 zastąpiono środkiem Arlasolve 200, stężenie nizyny wynosiło 50 pg/ml oraz obecne były NaCl o stężeniu 300 mM i cytrynian o stężeniu 1%. Przy różnych sposobach formułowania ściereczek używano papieru o różnym pochodzeniu. Stabilność nizyny kontrolowana była po przechowywaniu preparatu do nasączania w temperaturze pokojowej za pomocą chromatografii cieczowej o wysokiej rozdzielczości (HPLC). Wyniki przedstawiono w tabelach V oraz VI.

Prezentowane poniżej dane potwierdzają fakt, że w przypadku kiedy preparaty zawierają metioninę w celu zapobiegania przed degradacją nizyny oraz NaCl lub cytrynian w celu

185 880 zapobiegania stratom nizyny związanym z adsoprpcją to postawionym w niniejszym wynalazku wymaganiom względem ściereczek odpowiada wiele gatunków papieru włącznie z papierem wytworzonym z hydroentanglowanej celulozy (HEC - hydroksyetyloceluloza).

Tabela V

Nr. MA3-16	Typ Papieru	NaCl +/-	Met +/-	1 dnia	Stężenie nizyny pg/ml	28 dnia
6 dnia	18 dnia
1	Chubbs	+	-	22,2	35,6	30,6	26,6
2	Chubbs	-	+	45,4	46,9	43,1	43,2
3	New Chubbs	+	+	49,2	49,0	47,1	42,1
4	New Chubbs	+	-	42,1	37,4	29,7	25,2
5	New Chubbs	-	+	52,5	53,6	50,6	44,9
6	New Chubbs	-	-	44,5	35,2	25,3	21,1
7	AMBI #546	+	+	49,6	52,9	53,0	40,8
8	AMBI #546	+	-	52,7	43,7	37,9	36,0
9	AMBI #546	-	+	46,7	56,9	60,2	48,2
10	AMBI #546	-	-	45,6	42,2	34,5	26,2
11	HEC	+	+	50,6	53,4	56,6	46,8
12	HEC	+	-	41,5	42,5	45,1	33,9
13	HEC	-	4-	53,2	55,2	61,8	48,8
14	HEC	-	-	44,2	40,4	38,0	29,2
15	Scott 1480	+	+	49,6	56,1	61,4	51,0
16	Scott 1480	+	-	43,8	44,4	43,5	33,1
17	Scott 1480	-	+	53,1	56,9	60,5	49,3
18	Scott 1480	-	-	43,5	38,0	27,4	22,6
19	Scott 129	+	+	49,4	52,1	55,9	31,7
20	Scott 129	+	-	46,0	44,9	45,2	35,5
21	Scott 129	-	+	44,1	41,7	29,1	26,7
22	Scott 129	-	-	35,9	29,3	16,5	16,1
Roztwór podstawowy
23	MA3-15-1	+	+	52,1	49,3	48,7	39,0
24	MA3-15-2	+	-	45,6	37,6	30,8	26,0
25	MA3-15-3	-	+	55,1	52,3	48,6	39,6
26	MA3-15-4	-	-	45,6	36,3	25,6	25,5

185 880

T a b e 1 a VI

Nr. MA3-29	Typ papieru	Cytr + /-	Met + /-	Stężenie nizyny pg/ml
1 dnia	14 dnia	28 dnia
1	New Chubbs	+	+	38,5	31,4	42,0
2	New Chubbs	+	-	21,0	17,8	23,6
3	New Chubbs	-	+	34,6	26,3	21,8
4	New Chubbs	-	-	13,5	28,0	27,3
5	AMBI #546	+	+	42,1	39,2	48,2
6	AMBI #546	+	-	24,0	20,8	30,2
7	AMBI #546	-	+	34,9	7,4	7,6
8	AMBI #546	-	-	13,5	3,8	6,3
9	papier HEC*	+	+	40,0	38,2	46,9
10	papier HEC	+	-	22,0	24,9	37,9
11	papier HEC	-	+	33,3	17,8	15,9
12	papier HEC	-	-	16,3	4,8	11,3
13	MA3 - 29 - 1 podstawowy	+	+	40,8	37,1	41,9
14	MA3 -29 - 2 podstawowy	+	-	22,6	17,2	23,0
15	MA3 - 29 - 3 podstawowy	-	+	39,6	33,5	39,9
16	MA3 - 29 - 4 podstawowy	-	-	19,3	30,2	36,5

* Papier z celulozy hydroentanglowanej

Przykład 6

Poniższe badanie zostało przeprowadzone w celu określenia ilości cieczy wystarczającej do nawilgocenia ściereczki stanowiącej przedmiot niniejszego wynalazku. Zważono odmierzone powierzchnie każdej próbki papieru, nawilgocono je za pomocą PDF, tak aby były całkowicie mokre jednak bez upuszczania kropli po czym ponownie zważono w celu określenia ilości preparatu potrzebnego do uzyskania takiego stanu. Wyniki zostały przedstawione w tabeli VII.

T a b e 1 a VII

Papier	Powierzchnia	Waga papieru	Waga papieru na mokro	Dodano cieczy	ml cieczy/cm²papieru
New Chubbs	344,0 cm²	1,92 g	8,20 g	6,4 ml	0,019
Nr. 546	310,0 cm²	1,17 g	3,60 g	2,3 ml	0, 007
Nr. 565 celuloza hydroent.	288, 5 cm²	1,13 g	4,50 g	3,3 ml	0,011

Przykład 7

Ściereczki sformułowane tak jak przedstawiono w tabeli I, lecz zawierające dodatkowo 300 ml NaCl zostały przetestowane na działanie bakteriobójcze na skórze brodawki wymienia żywej krowy zgodnie z następującym protokołem A.

Protokół A

Dziesięć krów zostało przygtowanych i umytych w celu przeprowadzenia protokołu A. Wymagało to usunięcia włosów z dolnej części wymienia oraz serii kąpieli. Brodawki krów

185 880 przemyto następnie za pomocą preparatu Theratac (0,5% jodofor), dokładnie wypłukano wodą i przetarto gazikiem zanurzonym w alkoholu. Zaetykietowano po cztery naczynia zbiorcze na każdą krowę i umieszczono je w pobliżu krowy. Każdą brodawkę zanurzono na głębokość około 15 mm w zawiesinie bakteryjnej o stężeniu około 10⁸ komórek na ml. Na przecieranie brodawki ściereczką składały się następujące czynności: uchwycenie brodawki u jej podstawy, przeciągnięcie w dół i na zewnątrz, następnie obrót ręki o 90 i ponowne uchwycenie brodawki u jej podstawy, przeciągnięcie w dół i na zewnątrz.

Po upływie jednej minuty za pomocą strzykawki zebrano ocalałe komórki do naczyń zbiorczych, które napełniono 10 ml roztworu mającego na celu zneutralizowanie działania nizyny. Naczynia zbiorcze natychmiast zamknięto i umieszczono w zamrażalniku na lodzie. Po upływie około jednej godziny 80 próbek zostało rozcieńczonych i rozłożonych po dwie na płytkach zawierających agar krwi. Płytki te następnie inkubowano w temperaturze 37°C przez 24 do 48 godzin. Policzono jednostki tworzące kolonie (cfu) i obliczono zmniejszenie się ich liczby względem próbek kontrolnych. Przebadano 20 krów, a u każdej krowy testowi poddane były wszystkie cztery brodawki. Dwie tylne brodawki pełniły rolę brodawek kontrolnych, to znaczy zanurzane były w wodzie. Dwie przednie brodawki testowane były za pomocą jednego z produktów bakteriobójczych.

Wyniki, wyrażone jako logarytm obniżenia ilości cfu dla bakterii S. Aureus podane są w tabeli VIII. Wielkość logarytmu obniżenia na krowę liczona była przez odjęcie średniego logarytmu cfu dla dwóch przednich, testowanych brodawek od średniego logarytmu cfu dla dwóch tylnich, kontrolnych brodawek. Całkowite Średnie Obniżenie Logarytmu dla pięciu krów dla każdych testowanych warunków przedstwione jest również w tabeli VIII.

Przecieranie ściereczkami nasączonymi preparatem PDF działało podobnie jak zanurzanie w preparacie PDF. Samo wycieranie ściereczkami zanurzonymi w wodzie dawało około 1,7 obniżenia logarytmu.

Tabela VIII

krowa	Theratec (0,5% Jodofor)	krowa	PDF (25 ąg/ml nizyny)	krowa	chusteczki z PDF	krowa	chusteczki z wodą
Nr. 1	0,5	Nr. 6	3,3	Nr. 11	3,6	Nr. 16	1,7
Nr. 2	0,7	Nr. 7	3,2	Nr. 12	2,7	Nr. 17	1,9
Nr. 3	0,4	Nr. 8	2,7	Nr. 13	1,9	Nr. 18	1,8
Nr. 4	0,5	Nr. 9	4,2	Nr. 14	2,4	Nr. 19	1,6
Nr. 5	0,8	Nr. 10	1,6	Nr. 15	2,2	Nr. 20	1,4
całkowite średnie obniżenie log	0,6	całkowite średnie obniżenie log	3,0	całkowite średnie obniżenie log	2,6	całkowite średnie obniżenie log	1,7

Przykład 8

Kompozycje preparatów do nasączania ściereczek (PDF) przygotowane były w sposób identyczny z przedstawionymi w tabeli I, z tąjednak różnicą że polisorbat 20 zastąpiono środkiem Arlasolve 200 o stężeniu 1%, NaCl zastąpiono cytrynianem o stężeniu 1%, a stężenie nizyny wynosiło 50 pg/ml. Jeżeli obecny był 1-propanol to jego stężenie wynosiło 20%. Badane preparaty, nr 1 zawierający 1-propanol oraz nr 2 1-propanolu nie zawierający, poddane były ocenie pod względem ich działania bakteriobójczego względem bakterii S. Aureus na skórze brodawki wymienia żywej krowy zgodnie z przedstawionym powyżej protokołem A, a ich działanie porównane do działania roztworów do zanurzania brodawek takich jak Theratec (0,5% jodofor) oraz PDF.

Wyniki przedstawione w tabeli IX pokazują że oba preparaty do nasączania ściereczek wykazują porównywalne działanie przeciw bakterii S. Aureus, które jest porównywalne do działania 0,5% jodoforu.

185 880

T a b e 1 a IX

krowa	ścierki # 1 50 pg/ml nizyny	krowa	ścierki #2 50 μg/Inl nizyny	krowa	Theratec (0,5% Jodofor)	krowa	PDF (25 pg/ml nizyny)
Nr. 1	1,9	Nr. 6	2,4	Nr. 11	2,4	Nr. 16	4,3
Nr. 2	3,4	Nr. 7	2,4	Nr. 12	3,1	Nr. 17	2,3
Nr 3	3,4	Nr. 8	3,9	Nr. 13	1,7	Nr. 18	2,5
Nr. 4	2,3	Nr. 9	2,6	Nr. 14	2,2	Nr. 19	4,7
Nr. 5	2,9	Nr. 10	3,1	Nr. 15	2,7	Nr. 20	4,7
całkowite średnie obniżenie log	2,8	całkowite średnie obniżenie log	2,9	całkowite średnie obniżenie log	2,4	całkowite średnie obniżenie log	3,7

Przykład 9

Preparat do nasączania ściereczek przygotowany był zgodnie z procedurą opisaną w przykładzie 8 i użyty do nasączania ściereczek przy zawartości cieczy odpowiednio 3g, 5g oraz 7g na ściereczkę (152,4 mm x 171,45 mm). Sciereczki te poddane były ocenie pod względem ich działania bakteriobójczego względem bakterii E. Coli na skórze brodawki wymienia żywej krowy zgodnie z przedstawionym powyżej protokołem A, a ich działanie porównane do działania preparatu Theratec (0,5% jodofor).

Wyniki przedstawione w tabeli X pokazują, że ściereczki z zawartością 7 g cieczy na ściereczkę wykazują działanie bakteriobójcze przewyższające ściereczki o niższej zawartości.

Tabela X

data	preparat	cel	logarytm obniżenia	wzorzec dodatni
2/2/97	PDF, 3 g na ściereczkę	E. Coli	2,2	3,2
	PDF, 5g na ściereczkę		3,4
	PDF, 7g na ściereczkę		3,7

Przykład 10

Preparat do nasączania ściereczek przygotowany był zgodnie z procedurą opisaną w przykładzie 8 i użyty do nasączania ściereczek. Sciereczki te poddane były ocenie pod względem ich działania bakteriobójczego względem różnych mikroorganizmów na skórze brodawki wymienia żywej krowy zgodnie z przedstawionym powyżej protokołem A, a ich działanie porównane do działania różnych płynów do dezynfekcji wymion przez zanurzanie.

Wyniki przedstawione w tabeli XI pokazują, że ściereczki z zawartością PDF wykazują na powierzchni wymion krowich skuteczne działanie bakteriobójcze skierowane przeciw większości patogennych organizmów związanych z zakażeniem wywołującym zapalenie sutka.

Tabela XI

liczba brodawek (n=)	cel	logarytm obniżenia	wzorzec dodatni
1	2	3	4
10	S Auerus	2,5	0,2*
10	S Agalactiae	4,3	0,7*
10	S Uberis	3,0	3,3*
10	Klebsiella	2,6	3,2*
10	E. Coli	2,3

185 880 cd. tabeli

1	2	3	4
10	S. Auerus	3,4
10	S. Uberis	22,8	2,5$
10	K. Pneumoniae	3,1	4,1$
10	S Auerus	3,4	3,0$
10	E. Coli	2,0	4,0$

* Płyn do dezynfekcji wymion przez zanurzanie Consept $ Płyn do dezynfekcji wymion przez zanurzanie Teat Guard 1% jodofor

Przykład 11

Kompozycje preparatów do nasączania ściereczek, przygotowane w sposób identyczny jak przedstawione w tabeli I z 12% zawartością 1-propanolu, 3 mM EDTA oraz 5 mM cytrynianu, użyte zostały w Próbie Doświadczalnej zgodnej ze standardami protokołu ustanowionego przez Narodową Radę do Walki z Zapaleniem Sutka (NMC). Do zbadania skuteczności ścierek nasączonych PDF użyto stado 160 mlecznych krów należące do Kolegium Weterynarii Uniwersytetu Comell. Cztery grupy krów po 40 sztuk poddane zostały czterem różnym procedurom przedstawionym w tabeli XII. W celu stworzenia ekstremalnych warunków infekcji, maksymalnie zwiększających prawdopodobieństwo zakażenia zapaleniem sutka, od poniedziałku do piątku bezpośrednio po południowym dojeniu brodawki każdej z krów zanurzano w zawiesinie S. Aureus oraz S. Agalactiae (108 cfu/ml dla każdego z tych mikroorganizmów). Natychmiast po zakażeniu w każdej z grup dokonywano stosownych dla danej grupy podojeniewych zabiegów odkażających.

Dane przedstawione w tabeli XII pokazują że stosowanie ścierek nasączonych PDF po dojeniu lub też używanie ich przed dojeniem w połączeniu po dojeniu z zanurzaniem w roztworze Consept zmniejsza ilość przypadków zakażenia zapalenia sutka w sposób porównywalny do wynikającego z zastosowania roztworu do zanurzania brodawek Theratec (5% jodofor).

T a b e 1 a XII

grupa	Czynności przed dojeniem	Czynności po dojeniu	Liczba zakażeń zapaleniem sutka po 2 tygodniach
A Wzorzec ujemny	przemywanie ręcznikiem papierowym nasączonym wodą, suszenie osobnym ręcznikiem papierowym	brak	13
B Wzorzec dodatni	przemywanie ręcznikiem papierowym nasączonym wodą i zanurzonym w roztworze Theratec zawierającym 0,5% jodofor, suszenie osobnym ręcznikiem papierowym	zanurzenie brodawek w roztworze Theratec zawierającym 0,5% jodofor	5
C	przecieranie i odkażanie ściereczkami z PDF	zanurzenie brodawek w roztworze Consept zawierającym nizynę	6
D	przemywanie ręcznikiem papierowym nasączonym wodą, suszenie osobnym ręcznikiem papierowym	odkażanie ściereczkami z PDF	7

185 880

—1------------'-------------1------------'-------------1------------1------------1------------'------------1-----------1------------1

3 4 5 6 7

Dni

Metionina o 0 mM □ 5 mM △ lOmM <>20mM + 50mM χ lOOmM

25i

22.5· £ 20N

- 175-

2.5· °0 20 40 60 80 100 120

Metionina (mM)

FIG. 2

185 880

Stopień zachowania nizyny

FIG. 3

Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 60 egz. Cena 4,00 zł.

Claims

Zastrzeżenia patentowe

1. Wilgotna ściereczka dezynfekcyjna na osnowie papierowej lub tkanej, nasączona ciekłym preparatem składającym się ze środka bakteriobójczego i substancji pomocniczych, znamienna tym, że preparat nasączający, jako środek bakteriobójczy, zawiera bakteriocynę w stężeniu 25-500 μg/ml, a jako środki pomocnicze zawiera środek chelatujący w stężeniu 0,1-10 mM, środek stabilizujący w stężeniu 0,1-10 mM, środek powierzchniowo czynny w stężeniu 0,1-3% wagowo-objętościowych i alkoholowy czynnik osuszający w stężeniu 10-20% wagowo objętościowych oraz sól w stężeniu 10-300 mM.
2. Ściereczka według zastrz. 1, znamienna tym, że preparat nasączający, jako bakteriocynę, zawiera lantocynę, jako środek chelatujący zawiera substancję wybraną spośród jednego lub wielu związków obejmujących tetraoctan alkilodiaminy, kwas etylenoglikolobisbetaaminoetylo-N,N'-tetraoctowy (EGTA) oraz cytrynian, jako środek stabilizujący zawiera związek tioeterowy, jako środek powierzchniowo czynny zawiera środek wybrany z grupy obejmującej niejonowy środek powierzchniowo czynny, kationowy środek powierzchniowo czynny, monogliceryd lub kwas tłuszczowy, a jako sól zawiera NaCl.
3. Ściereczka według zastrz. 2, znamienna tym, że preparat nasączający, jako lantocynę zawiera nizynę, jako środek chelatujący zawiera kwas etylenodiaminotetraoctowy (EDTA), jako środek stabilizujący zawiera metioninę, jako środek powierzchniowo czynny zawiera polioksyetylenowany (20 moli tlenku etylenu) monooleinian sorbitanu (polysorbate 20), zaś jako czynnik osuszający zawiera 1-propanol.
4. Ściereczka według zastrz. 2, znamienna tym, że preparat nasączający, jako środek chelatujący, zawiera kombinację kwasu etylenodiaminotetraoctowego (EDTA) oraz cytrynianu.
5. Ściereczka według zastrz. 3, znamienna tym, że preparat nasączający, jako środek bakteriobójczy zawiera nizynę w stężeniu 25-500 pg/ml, a NaCl w stężeniu 10-300 mM.
6. Ściereczka według zastrz. 3, znamienna tym, że preparat nasączający jako środek chelatujący, zawiera kwas etylenodiaminotetraoctowy (EDTA) w stężeniu 0,1-10 mM.
7. Ściereczka według zastrz. 2, znamienna tym, że preparat nasączający zawiera kwas etylenodiaminotetraoctowy (EDTA) w stężeniu 0,1-10 mM, a cytrynian w stężeniu 1-30 mM.
8. Ściereczka według zastrz. 3, znamienna tym, że preparat nasączający jako środek stabilizujący zawiera metioninę w stężeniu 1-10 mM.
9. Ściereczka według zastrz. 3, znamienna tym, że preparat nasączający, jako środek powierzchniowo czynny zawiera polioksyetylenowany (20 moli tlenku etylenu) monooleinian sorbitanu (polysorbate 20) w stężeniu 0,1-3% wagowo-objętościowych.
10. Ściereczka według zastrz. 3, znamienna tym, że preparat nasączający jako środek osuszający zawiera 1-propanol w stężeniu 10-20% wagowo-objętościowych.
11. Ściereczka według zastrz. 1, znamienna tym, że preparat nasączający zawiera dodatkowo środek kondycjonujący oraz zagęszczający.
12. Ściereczka według zastrz. 1, znamienna tym, że preparat nasączający dodatkowo zawiera chlorheksydynę.
13. Ściereczka według zastrz. 1, znamienna tym, że osnowę ściereczki stanowi materiał włókninowy.
14. Jednoetapowy sposób dezynfekcji oraz osuszania powierzchni skóry, a zwłaszcza brodawki mlecznej krowy przed lub po dojeniu lub powierzchni mających kontakt z żywnością, przez przemywanie tych powierzchni wilgotną ściereczką dezynfekcyjną na osnowie papierowej lub tkanej, nasączonej ciekłym preparatem składającym się ze środka bakteriobójczego i substancji pomocniczych, znamienny tym, że odpowiednią powierzchnię przeciera się wilgotną ściereczką której preparat nasączający, jako środek bakteriobójczy, zawiera bakteriocynę w stężeniu 25-500 pg/ml, a jako środki pomocnicze zawiera środek chelatujący

185 880 w stężeniu 0,1-10 mM, środek stabilizujący w stężeniu 1-3% mM, środek powierzchniowo czynny w stężeniu 1-3% mM, wagowo-objętościowych i alkoholowy czynnik osuszający w stężeniu 10-20% wagowo-objętościowych oraz sól w stężeniu 10-300 mM.
15. Sposób według zastrz. 14, znamienny tym, że stosuje się ściereczkę, której preparat nasączający, jako bakteriocynę, zawiera lantocynę, jako środek chelatujący zawiera substancję wybraną spośród jednego lub wielu związków obejmujących tetraoctan alkilodiaminy, kwas etylenoglikolobisbetaaminoetylo-N,N'-tetraoctowy (EGTA) oraz cytrynian, jako środek stabilizujący zawiera związek tioeterowy, jako środek powierzchniowo czynny zawiera środek wybrany z grupy obejmującej niejonowy środek powierzchniowo czynny, kationowy środek powierzchniowo czynny, monogliceryd lub kwas tłuszczowy, a jako sól zawiera NaCl.
16. Sposób według zastrz. 15, znamienny tym, że stosuje się ściereczkę, której preparat nasączający, jako lantocynę zawiera nizynę, jako środek chelatujący zawiera kwas etylenodiaminotetraoctowy (EDTA), jako środek stabilizujący zawiera metioninę, jako środek powierzchniowo czynny zawiera polioksyetylenowany (20 moli tlenku etylenu) monooleinian sorbitanu (polysorbate 20), zaś jako czynnik osuszający zawiera 1-propanol.
17. Sposób według zastrz. 15, znamienny tym, że stosuje się ściereczkę, której preparat nasączający, jako środek chelatujący, zawiera kombinację kwasu etylenodiaminotetraoctowego (EDTA) oraz cytrynianu.
18. Sposób według zastrz. 16, znamienny tym, że stosuje się ściereczkę, której preparat nasączający jako środek bakteriobójczy zawiera nizynę w stężeniu 25-500 pg/ml, a NaCl w stężeniu 10-300 mM.
19. Sposób według zastrz. 16, znamienny tym, że stosuje się ściereczkę, której preparat nasączający jako środek chelatujący zawiera kwas etylenodiaminotetraoctowy (EDTA) w stężeniu 0,1-10 mM.
20. Sposób według zastrz. 15, znamienny tym, że stosuje się ściereczkę, której preparat nasączający zawiera kwas etylenodiaminotetraoctowy (EDTA) w stężeniu 0,1-10 mM, a cytrynian w stężeniu 1-30 mM.
21. Sposób według zastrz. 16, znamienny tym, że stosuje się ściereczkę, której preparat nasączający jako środek stabilizujący zawiera metioninę w stężeniu 1-10 mM.
22. Sposób według zastrz. 16, znamienny tym, że stosuje się ściereczkę, której preparat nasączający jako środek powierzchniowo czynny zawiera polioksyetylenowany (20 moli tlenku etylenu) monooleinian sorbitanu (polysorbate 20) w stężeniu 0,1-3% wagowo-objętościowych.
23. Sposób według zastrz. 16, znamienny tym, że stosuje się ściereczkę, której preparat nasączający jako środek osuszający zawiera 1-propanol w stężeniu 10-20%· wagowo-objętościowych.
24. Sposób według zastrz. 14, znamienny tym, że stosuje się ściereczkę, której preparat nasączający zawiera dodatkowo środek kondycjonujący oraz zagęszczający.
25. Sposób według zastrz. 14, znamienny tym, że stosuje się ściereczkę, której preparat nasączający dodatkowo zawiera chlorheksydynę.
26. Sposób według zastrz. 14, znamienny tym, że stosuje się ściereczkę, której osnowę stanowi materiał włókninowy.

* * *