KR100395300B1 - 피롤구조를 갖는 파네실 전이효소 억제제 및 그의 제조방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 피롤구조를 포함하며 파네실 전이효소를 억제할 수 있는 하기화학식 1의 화합물, 그의 약제학적으로 허용되는 염, 그의 제조방법에 관한 것이다 :

상기식에서 A, B, D, E, F, 및 G는 명세서에서 정의된 바와 같다.

Description

피롤구조를 갖는 파네실 전이효소 억제제 및 그의 제조방법 {Pyrrole derivatives useful for inhibition of farnesyl transferase and process for preparation thereof}

본 발명은 피롤구조를 포함하며 파네실 전이효소를 억제할 수 있는 하기 화학식 1의 화합물, 그의 약제학적으로 허용되는 염 또는 이성체에 관한 것이다 :

[화학식 1]

상기식에서,

A는 저급알킬, 또는 하기 구조식의 그룹 중 선택된 어느 하나를 나타내며,

여기에서

m 및 n 은 각각 독립적으로 0 내지 4 의 정수이고,

R₁및 R₅는 각각 독립적으로 수소, 저급알킬, 저급알콕시 또는 할로겐을 나타내며,

R₂및 R₄는 각각 독립적으로 수소, 저급알킬, 저급알콕시, 할로겐 또는 하이드록시를 나타내고,

R₃은 수소, 저급알킬, 저급알콕시, 하이드록시, 저급알킬로 치환된 2차아민, C₃-C₆사이클로알킬, C₃-C₆사이클로알킬로 치환된 저급알킬, 할로겐, 페닐 또는 페녹시를 나타내며,

R₆는 수소 또는 저급알킬을 나타내고,

R₇은 저급알킬, 방향족 또는 할로겐화합물이 치환된 방향족 화합물을 나타내며,

B 는 수소, 저급알킬, 저급알킬로 치환된 티오 또는 NH₂를 나타내고,

D 는 수소(단, B 가 수소인 경우는 D에서 수소를 제외함), 저급알킬, 할로겐, 저급알킬로 치환된 티오, NO₂또는 NH₂를 나타내며,

E 는 나프틸 또는 페닐을 나타내고,

F 는 하기식으로 나타내어지는 그룹중에 선택된 어느하나를 나타내며,

여기에서,

R₈은 저급알킬 또는 저급알콕시를 나타내고,

R₉는 저급알킬을 나타내며,

R₁₀은 수소 또는 저급알킬을 나타내고,

G 는 수소, 저급알킬, 저급알킬이 치환된 티오 또는 페닐을 나타낸다.

본 발명에는 또한 상기 화학식 1의 화합물을 제조하는 방법도 포함되어 있으며, 이 제조방법도 본 발명의 대상이다.

또한, 본 발명은 화학식 1의 화합물을 활성성분으로서 함유하는 항암제 조성물, 혈관협착 재발증 방지제 조성물, 고지혈증 방지제 조성물 또는 항 바이러스제 조성물 등의 약제학적 조성물도 제공한다.

Ras 단백질은 세포의 성장과 분화에 중요한 역할을 하는 21 kda 의 단백질로서 구아닌(guanine) 뉴클레오타이드와 결합하며 구아노신트리포스페이트(GTP)를 구아노신다이포스페이트(GDP)로 가수분해하는 효소로서 세포내에서 특이적인 GTPase 회로를 조절하는 분자 스위치로 작용하는 것으로 알려져 있다(참조 : Bourne, H.R ; Sanders, D.A ; McCormick, F.Nature1991, 349, 117).

Ras 단백질은 포유동물세포에서 3 가지의 Ras 유전자에 의해 아미노산 188개의 K-Ras-4B 또는 189개의 H-Ras, K-ras4A 와 N-Ras 로 생성된다. 이 단백질의 12, 13, 61 번의 위치에 있는 아미노 산들은 GTP의 인산기와 근접하여 있어, 이 아미노산 잔기들은 GTP의 가수 분해에 관여하는 물 분자의 공간적 위치에 영향을 미침으로써 GTP 효소 활성을 저해한다. 인체에서 발생하는 암의 경우, 이 위치의 아미노 산의 돌연 변이가 관찰되는데, 이 돌연 변이가 결국 Ras 단백질 고유의 GTPase 활성을 저해하여 GTP 결합 상태를 지속시킴으로써 비정상적인 성장 신호를 지속적으로 전달하여 발암성을 나타내는 것으로 알려져 있다. 이와 같이 발암성인 Ras 유전자는 특이적으로 췌장암, 방광암, 폐암 및 피부암등에 밀접한 관련이 있는것으로 알려져 있다(참조 : Bos, J.L.,Cancer Res., 1989, 49, 4682).

Ras 단백질이 생물학적으로 활성화 상태에 있기 위해서는 세포막 내에 부착되어야 하는데 이를 위해서는 Ras 파네실 전이 효소, Ras 단백질 카복시 말단의 3 개 AAX 펩타이드 절단효소, 메틸 전이효소 및 팔미토일 전이효소에 의한, 단백질 전이 후의 탄소 말단의 변형이 요구된다. 이 단계중 첫번째인 파네실화는 파네실 전이효소 (FTase) 에 의해 이루어진다. 파네실 전이효소의 기질은 Ras 단백질의 카복시 말단에 있는 CA1A2X라는 네 개의 펩타이드이며, 여기서 A1, A2는 전기적 부하를 띄지 않는 지방족 아미노산이고 X는 메티오닌, 알라닌 및 세린 등이다. 파네실 반응은 시스테인에서 일어나 황에테르 결합을 형성하며, H-Ras와 N-Ras의 경우는 칼복시 말단 근처의 또 다른 시스테인에 팔미토일화가 일어난다. 이러한 파네실화의 결과로 Ras 단백질은 친소성이 증가되어 세포막 내에 부착되게되며, 파네실화된 Ras 단백질은 카르복시 말단으로 부터 연이어 3개의 AAX 펩타이드가 절단 효소에 의해 제거되고 메틸화되어 파네실기가 세포막 내의 지질층 또는 다른 수용체와의 결합을 용이하게 해주는 것으로 알려져 있다. 한편, k-Ras-4B의 경우는 H-Ras, N-Ras와는 달리 팔미토일화에 필요한 시스테인 대신 폴리베이직(Poly basic) 도메인이라 불리는 여러 개의 라이신 염기가 배열된 부위를 가지고 있으며, 이를 통해 세포막내의 음이온성 지질과의 결합을 용이하게 해주는 것으로 알려져 있다. Ras 단백질의 세포막 내에서의 부착을 위해 모든 변형 단계가 최적조건을 필요로 하나, Ras 단백질의 활성은 파네실화 자체만으로 충분한 것으로 알려져 이 파네실화를 차단함으로서 돌연 변이에 의한 Ras 발암성의 활성을 저해하기 위한 연구가 활발히 진행되고 있다(참조 : Buss, J.E. et al.,Chemistry Biology, 1995, 2, 787).

그간의 연구 결과, Ras로 형질 전환된 세포의 성장저해가 파네실 전이효소를 저해했을 때 관찰되어졌으며, Ras에 의해 변형된 세포 형질을 개선하는 것으로 나타났다.

실제로 파네실 전이 효소의 몇몇 저해제들은 Ras발암성 유전인자의 세포내 프레닐기에 의한 반응을 선택적으로 저해하는 것으로 밝혀졌다(참조 : Kohl, N.E.et al, Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 91 : 9141(1994), Kohl, N.E.et al, Nature Medicine, 1 : 792(1995)). 개발된 전이효소 저해제로는 시스테인 티올(thiol)기를 함유하며 CAAX와 유사한 구조를 갖는 펩타이드 변형체 및 이를 개선한 저해제(참조 : US patent 5,141.851 ; Kohl, N.E.et al, Science260 : 1934(1993), Grahamet al.,PCT/US95/12224), 페닐기로 변형된 펩타이드(참조 : Sebti, S. M.,J. Biol. Chem.270 : 26802, 1995), 향정신성 의약품의 골격구조 중 벤조다이아제핀을 펩타이드의 턴(turn) 모사 구조로 활용한 변형체(참조 : James,G.LScience260 : 1937, 1993), 펩타이드 구조에서 벗어나 트리사이클릭 유기화합물을 골격으로 한 저해제(참조 : Bishop W.R.,J. Biol. Chem.270 : 30611, 1995)를 들 수 있다. 또한, 파네실 전이효소가 프레닐기를 전이시키는 작용기전이 전자 친화적 치환반응 (Electrophilic Displacement)이므로 반응의 트랜지션 상태(transition state)에 양성부하를 요구함에 착안하여 프레닐기에 트랜지션 상태의 양성 부하를 연결시킨 새로운 형태의 저해제가 제시되었다(참조 : Poulter C.D.et al, J. Am. Chem. Soc. 118:8761, 1996).

그러나, 많은 경우의 인체암에서 K-Ras활성화가 주요 원인으로 작용하며, 지금까지 개발된 대부분의 프레닐 전이효소 저해제들은 K-Ras를 활성화시킨다. 따라서, K-ras에 의해 형질전환된 세포의 성장저해 정도가 H-Ras, N-Ras에 의해 형질전환된 세포 성장 저해에 비해 떨어지므로 K-Ras 활성을 효과적으로 저해할 수 있는 새로운 저해제의 연구가 주목받고 있다.

이에 본 발명자들은 K-Ras기질에 대한 효소활성 저해능 및 세포내 K-Ras 프레닐화 저해능을 평가할수 있는 평가체계를 확립하고 이를 활용, K-Ras 뿐만 아니라 H-Ras, N-Ras 기질의 파네실화를 저해하는 신규한 화합물을 합성하고 그 저해능을 평가하였다. 그 결과, 본 발명자들은 상기 화학식 1의 화합물이 본 발명의 소기 목적에 부합되어 이들이 항암제로서 유용하게 사용될 수 있음을 발견하고 본 발명을 완성하게 되었다. 특히, 본 발명에 따른 화합물은 지금까지 알려진 파네실 전이효소 억제제와 상이한 특이구조를 가지고 있을 뿐만 아니라 티올기도 전혀 포함하고 있지 않은 신규한 화합물이다.

따라서, 본 발명의 목적은 우수한 항암효과를 갖는 화학식 1의 화합물, 그의 약제학적으로 허용되는 염 또는 이성체, 그의 제조 방법 및 그를 함유하는 약제학적 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명은 피롤구조를 포함하며 파네실 전이효소를 억제할 수 있는 하기 화학식 1의 화합물, 그의 약제학적으로 허용되는 염 또는 이성체에 관한 것이다 :

[화학식 1]

상기식에서,

A는 저급알킬, 또는 하기 구조식의 그룹 중 선택된 어느 하나를 나타내며,

여기에서

m 및 n 은 각각 독립적으로 0 내지 4 의 정수이고,

R₁및 R₅는 각각 독립적으로 수소, 저급알킬, 저급알콕시 또는 할로겐을 나타내며,

R₂및 R₄는 각각 독립적으로 수소, 저급알킬, 저급알콕시, 할로겐 또는 하이드록시를 나타내고,

R₃은 수소, 저급알킬, 저급알콕시, 하이드록시, 저급알킬로 치환된 2차아민, C₃-C₆사이클로알킬, C₃-C₆사이클로알킬로 치환된 저급알킬, 할로겐, 페닐 또는 페녹시를 나타내며,

R₆는 수소 또는 저급알킬을 나타내고,

R₇은 저급알킬, 방향족 또는 할로겐화합물이 치환된 방향족 화합물을 나타내며,

B 는 수소, 저급알킬, 저급알킬로 치환된 티오 또는 NH₂를 나타내고,

D 는 수소(단, B 가 수소인 경우는 D에서 수소를 제외함), 저급알킬, 할로겐, 저급알킬로 치환된 티오, NO₂또는 NH₂를 나타내며,

E 는 나프틸 또는 페닐을 나타내고,

F 는 하기식으로 나타내어지는 그룹중에 선택된 어느하나를 나타내며,

여기에서,

R₈은 저급알킬 또는 저급알콕시를 나타내고,

R₉는 저급알킬을 나타내며,

R₁₀은 수소 또는 저급알킬을 나타내고,

G 는 수소, 저급알킬, 저급알킬이 치환된 티오 또는 페닐을 나타낸다.

본 발명에 따른 화학식 1의 화합물의 대표적인 예는 하기 표 1 에 나타낸 바와 같다.

[표 1] 대표적인 화합물의 예

본 발명은 또한 화학식(1)의 화합물, 그의 약제학적으로 허용되는 염 또는 이성체를 제조하는 방법에 관한 것이다.

본 발명에 따른 화학식 1의 화합물은 하기 화학식 2의 화합물을 용매 중에서 염기 존재하에 하기 화학식 3의 화합물과 반응시키거나, 하기 화학식 1a의 화합물을 염기 존재하에서 반응시킴을 특징으로 하여 제조할 수 있다 :

상기식에서,

A, B, D, E, F 및 G 는 앞에서 정의한 바와 같고 이하 동일한 의미로 사용된다.

본 발명에 따른 화학식 1의 화합물을 제조하는 상기방법에서 용매로서는 디메틸포름아마이드(DMF), 테트라하이드로퓨란(THF) 및 디메틸아세트아마이드 중에서 선택된 1종 이상을 사용할 수 있으며, 염기로서는 소듐하이드라이드, 포타슘 t-부톡사이드, 수소 비스(트리메틸실릴)아마이드, 소듐아마이드 및 포타슘 비스(트리메틸실릴)아마이드 중에서 선택된 1종 이상을 사용할 수 있다.

본 발명에 따른 제조 방법에서 출발물질로 사용되는 화합물들은 하기 반응식 1 내지 7 에 도시된 방법에 따라 제조할 수 있다.

먼저 화학식 2의 화합물 중 2번 위치에 치환된 이미다졸은 하기 반응식 1 에 나타낸 바와 같이 아민을 사용하여 디하이드록시아세톤 존재 하에서 이미다졸-2-티올 유도체를 제조한 후 탈황, 메틸화 및 할로겐화 반응을 거쳐 합성할 수 있다(참조: J. Med. Chem., 33, 1312-1329, 1990). 화학식 2의 화합물 중 4번 위치에 치환된 화합물은 반응식 2 또는 반응식 3 의 방법으로 합성할 수 있다 :

B가 메틸이고 D가 수소인 경우

B가 수소이고 D가 메틸인 경우

B가 수소이고 D가 NO₂인 경우

상기식에서,

A 는 앞에서 정의한 바와 같고,

TBDMS는 t-부틸디메틸실릴을 나타내며,

TBAF 는 테트라부틸암포늄플루오라이드를 나타낸다.

화학식 3의 화합물중 G가 수소인 경우 방향족알데하이드로부터 하기 반응식 4 에 도시한 방법에 따라 합성할 수 있다. 기타 저급알킬티오, 저급알킬의 경우 각각 반응식 5 또는 반응식 6 의 방법으로 합성할 수 있다 :

G가 수소인 경우

G가 저급알킬티오인 경우(참고문헌 : Tetrahedron Letter, 6155 (1992))

G가 저급알킬인 경우

상기식에서,

E, F 및 G 는 앞에서 정의한 바와 같고

R₁₁및 R₁₂는 저급알킬을 나타내며,

DBU 는 1,8-디아자바이사이클[5,4,0]운데센을 나타내고,

TosMIC 은 토실메틸이소시아나이드를 나타내며,

EDC 는 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카보디이미드 하이드로클로라이드를 나타내고,

HOBT 는 1-하이드록시벤조트리아졸 하이드레이트를 나타내며,

TEA 는 트리에틸아민을 나타낸다.

화학식 1a의 화합물은 반응식 7 의 방법으로 합성할 수 있다. 용매로서는 디메틸포름아마이드, 테트라하이드로퓨란 및 디메틸아세트아마이드 중에서 선택된 1 종이상을 사용할 수 있으며, 염기로서는 소듐하이드라이드, 포타슘 t-부톡사이드, 수소 비스(트리메틸실릴)아마이드, 소듐 아마이드 및 포타슘 비스(트리메틸실릴)아마이드 중에서 선택된 1종 이상을 사용할 수 있다.

상기식에서 A, D, E, F, 및 G 는 명세서에서 정의된 바와 같다.

본 발명의 제조방법에서 반응물의 사용량, 반응온도, 반응시간 등을 포함한 반응조건은 특정의 반응물질에 따라 당업계의 통상의 지식을 가진 자에 의하여 용이하게 결정될 수 있다.

또한, 상기의 반응에서 생성된 화학식 1의 화합물은 당해 기술분야에서 공지된 통상적인 방법에 따라 염으로 전환시킬 수 있다.

본 발명에 따르는 방법에서 반응이 완결된 후에 생성물은 통상적인 후처리 방법, 예를 들면 크로마토그래피, 재결정화 등의 방법에 의해 분리 및 정제할 수 있다.

본 발명, 특히 상기 설명한 제조방법들을 하기 제조예, 실시예에 의거하여보다 구체적으로 설명한다.

그러나, 본 발명에 따른 화합물의 제조방법이 상기 및 하기에 설명한 것으로만 한정되는 것은 아니며, 본 명세서에서 기재되거나 선행문헌에 게시된 여러가지 합성방법을 임의로 조합함으로써 용이하게 제조할 수 있고, 이러한 조합은 본 발명이 속하는 기술 분야의 당업자에게 범용화된 통상의 기술이다.

상기한 바와 같은 방법에 따라 제조되는 본 발명의 화합물은 상술한 바와 같이 파네실 전이효소에 대한 저해작용을 가지고 있으므로 항암제로 유용하게 사용될 수 있으며, 또한, 혈관협착 재발증 방지제, 고지혈증 방지제 또는 항 바이러스제로도 사용될 수도 있다. 따라서, 본 발명의 또 다른 목적은 약제학적으로 허용되는 담체와 함께 활성성분으로서 화학식 1의 화합물, 약제학적으로 허용되는 그의 염 또는 이성체를 함유하는 항암제 조성물, 혈관협착 재발증 방지제 조성물, 고지혈증 방지제 조성물 또는 항 바이러스제 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 화합물을 임상적인 목적으로 투여시에 단일용량 또는 분리용량으로 숙주에게 투여될 총 일일용량은 체중 1kg 당 2 내지 100 mg 범위가 바람직하나, 특정 환자에 대한 특이 용량 수준은 사용될 특정 화합물, 환자의 체중, 성, 건강상태, 식이, 약제의 투여시간, 투여방법, 배설률, 약제혼합 및 질환의 중증도 등에 따라 변화될 수 있다.

본 발명의 화합물은 목적하는 바에 따라 주사용 제제 및 경구용 제제로 투여 할 수 있다. 주사용 제제, 예를들면 멸균 주사용 수성 또는 유성 현탁액은 공지된 기술에 따라 적합한 분산제, 습윤제, 또는 현탁제를 사용하여 제조할 수 있다.이를 위해 사용될 수 있는 용매에는 물, 링거액 및 등장성 NaCl 용액이 있으며, 멸균 고정오일도 통상적으로 용매 또는 현탁 매질로서 사용한다. 모노-, 디-글리세라이드를 포함하여 어떠한 무자극성 고정오일도 이러한 목적으로 사용될 수 있으며, 또한 올레산과 같은 지방산도 주사용 제제에 사용할 수 있다.

경구투여용 고체투여 형태로는 캅셀제, 정제, 환제, 산제 및 입제가 있으며, 특히 캅셀제와 정제가 유용하다. 정제 및 환제는 장피제로 제조하는 것이 바람직하다. 고체투여 형태는 본 발명에 따른 화학식 1의 활성화합물을 슈크로오즈, 락토오즈, 전분 등과 같은 하나 이상의 불활성 희석제 및 마그네슘 스테아레이트와 같은 윤활제, 붕해제, 결합제 등과 같은 담체와 혼합시킴으로서 제조할 수 있다.

다음 제조예에서는 최종화합물을 만들기 위한 중간체의 합성방법을 설명하고 있다. 실시예에서는 제조예의 화합물과의 반응을 통하여 최종화합물을 합성하는 과정을 기술하고 있다. 다음의 실시예들은 본 발명의 신규화합물의 제조방법을 더 자세히 설명하기 위해 제공된 것이나, 본 발명의 범위가 이들로 제한되는 것은 아니다.

제조예 1 : 5-클로로메틸-2-메틸-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-1H-이미다졸 하이드로클로라이드의 제조

1-1) 5-하이드록시메틸-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-1H-이미다졸의 제조

디하이드록시아세톤 다이머와 피페로닐아민을 출발물질로 하여 문헌(참조 :J. Med. Chem., 33, 1312-1329, 1990)에 기술된 방법을 변형하여 제조하였다. 피페로닐아민 1.37g (10 밀리몰), 디하이드록시아세톤 다이머 1.08 g (6 밀리몰), 칼륨티오시아나이드 1.15 g (11 밀리몰)을 이소프로필알콜 10 mL에 넣은 후 아세트산 2 mL를 첨가하여 상온에서 48 시간 반응시켰다. 반응액을 여과한 후 남은 고체를 이소프로필알콜 5 ml 로 2번, 물 5 ml로 2번 세척하였다. 여과된 고체를 100 mL 플라스크에 넣고 10% 질산 수용액 12.5 ml 를 0℃에서 서서히 적가하였다. 반응액에 소듐나이트라이트 10 mg을 가하여 상온에서 1 시간 반응시켰다. 에틸아세테이트 10 mL로 수용액을 세척하고 수용액을 염기화하여 결정화하여 표제화합물 1.16 g (수율 : 50%)을 얻었다.

¹H NMR(DMSO) δ 4.34(d, 2H), 5.10(s, 2H), 5.14(t, 1H), 5.99(s, 2H), 6.70(d, 1H), 6.79(s, 2H), 6.88(d, 1H), 7.65(s, 1H)

FAB 233 (M+1), C₁₂H₁₂N₂O₃(M)

1-2) 5-(t-부틸디메틸실록시메틸)-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-1H-이미다졸의 제조

제조예 1-1)의 화합물 1.40 g (5.65 밀리몰)을 디메틸포름아마이드 20 mL에 녹인 후 t-부틸디메틸실릴클로라이드 1.63 g (5.94 밀리몰)을 적가하고 3시간 후 용매를 감압 증류한 후 에틸아세테이트 20 mL로 녹였다. 유기층을 포화 탄산수소나트륨 20 mL로 씻어낸 후 무수황산 마그네슘으로 건조하여 농축한 후 디클로로메탄/메탄올(95/5, v/v)로 컬럼크로마토그라피를 실시하여 표제 화합물 1.16 g (3.35밀리몰, 59%)을 제조하였다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 0.01(s, 6H), 0.86(s, 9H), 4.53(s, 2H), 5.08(s, 2H), 5.94(s, 2H), 6.59(s, 1H), 6.61(d, 1H), 6.74(d, 1H), 6.92(d, 1H), 7.42(s, 1H)

FAB 347 (M+1), C₁₈H₂₆N₂O₃Si(M)

1-3) 5-(t-부틸디메틸실록시메틸)-2-메틸-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-1H-이미다졸의 제조

제조예 1-2)의 화합물 1.14 g (3.3 밀리몰)을 테트라하이드로퓨란 20 mL에 녹인 후 n-부틸리튬 1.71 mL (2.5 M 용액)를 -78℃에서 주사기를 이용하여 30분에 걸쳐서 첨가하였다. 디메틸설페이트 457 mg (3.6 밀리몰)을 첨가하고 1시간 교반하였다. 반응 종결 후 용매를 제거하고 에틸아세테이트 15 mL, 포화 탄산수소나트륨 10 mL를 첨가한 후 유기층을 분리하였다. 유기층을 무수황산 마그네슘으로 건조하여 농축한 후 디클로로메탄/메탄올 (95/5, v/v)로 컬럼크로마토그라피를 실시하여 표제 화합물 448 mg (1.24 밀리몰, 38%)을 합성하였다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 0.00(s, 6H), 0.80(s, 9H), 2.23(s, 3H), 4.18(s, 2H), 5.02(s, 2H), 5.85(s, 2H), 6.42(m, 2H), 6.67(d, 1H), 6.78(s, 1H).

FAB 361 (M+H), C₁₉H₂₈N₂O₃Si(M)

1-4) 5-(하이드록시메틸)-2-메틸-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-1H-이미다졸의 제조

제조예 1-3)의 화합물 448 mg (1.24 밀리몰)을 테트라하이드로퓨란 10 mL에 녹인 후 테트라부틸암모니움 플루오라이드 0.96 mL (2.5 M 용액)을 첨가하고 1시간 교반하였다. 반응 종결 후 용매를 제거하여 농축한 후 디클로로메탄/메탄올 (95/5, v/v)로 컬럼크로마토그라피를 실시하여 표제 화합물 190 mg (0.77 밀리몰, 62%)을 합성하였다.

¹H NMR(CDCl₃+CH₃OD) δ 2.17(s, 3H), 3.72(br, 1H), 4.36(d, 2H), 5.02(s, 2H), 5.85(s, 2H), 5.36(m, 2H), 6.65(d, 1H), 6.72(s, 1H)

FAB 247 (M+H), C₁₃H₁₄N₂O₃(M)

1-5) 5-클로로메틸-2-메틸-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-1H-이미다졸 하이드로클로라이드의 제조

제조예 1-4)의 화합물 190 mg (0.77 밀리몰)을 클로로포름 3 mL 에 녹인후 티오닐클로라이드 181 mg (1.54 밀리몰)을 0℃에서 천천히 적가하였다. 2시간 교반후 용매를 감압증류하에서 제거한 후 잔존하는 하이드로클로라이드를 제거하여 표제화합물을 95% 수율로 얻었다. 수득된 화합물은 정제하지 않고 바로 반응에 사용하였다.

제조예 2 : 5-클로로메틸-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-1-H-이미다졸 하이드로클로라이드의 제조

제조예 1-1)의 화합물을 이용하여 제조예 1-5)의 방법(참고문헌 : PCT/KR 98/00377)으로 합성하여 표제 화합물 1.5 g을 92% 수율로 얻었다.

제조예 3 : 5-클로로메틸-4-메틸-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-1H-이미다졸 하이드로클로라이드의 제조

3-1) 5-(t-부틸디페닐실록시메틸)-4-메틸이미다졸 의 제조

메틸-5-이미다졸메탄올 하이드로클로라이드 2.0 g (13.5 밀리몰)과 탄산칼륨 1.95 g (14.17 밀리몰)을 디메틸포름아마이드 20 mL에 녹인 후 t-부틸디페닐실릴클로라이드 3.88 g (14.17 밀리몰)을 적가하고 3시간 동안 반응시켰다. 반응 후 용매를 감압하에서 제거하고 에틸아세테이트 20 mL로 녹였다. 유기층을 포화 탄산수소나트륨 20 mL로 씻어낸 후 무수황산마그네슘으로 건조하여 농축한 후 디클로로메탄/메탄올 (95/5, v/v)로 컬럼크로마토그라피를 실시하여 표제 화합물 1.22 g (3.44 밀리몰,26%)을 합성하였다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 1.03(s, 9H), 2.02(s, 3H), 4.66(s, 2H), 7.34-7.47(m, 7H), 7.62-7.71(m, 4H)

FAB 351 (M+H), C₂₁H₂₆N₂OSi(M)

3-2) 5-(t-부틸디페닐실록시메틸)-4-메틸-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-1H-이미다졸

제조예 3-1) 의 화합물 610 mg (1.74 밀리몰), 피페로닐브로마이드 380 mg (1.58 밀리몰), 탄산칼륨 250 mg (1.81 밀리몰)을 디메틸포름아마이드 7 mL에 넣어 2시간동안 교반하면서 반응시켰다. 반응 후 용매를 감압하에서 제거하여 농축한 후 디클로로메탄/메탄올 (95/5, v/v)로 컬럼크로마토그라피를 실시하여 표제의 화합물 260 mg (0.54 밀리몰, 31%)을 합성하였다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 1.04(s, 9H), 1.96(s, 3H), 4.48(s, 2H), 5.13(s, 2H), 5.89(s, 2H), 6.57(m, 2H), 6.72(d, 1H), 7.30-7.43(m, 7H), 7.61-7.70(m, 4H)

FAB 485 (M+H), C₂₉H₃₂N₂O₃Si(M)

3-3) 5-(하이드록시메틸)-4-메틸-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-1H-이미다졸

제조예 3-2의 화합물 120 mg(0.25 밀리몰)을 테트라하이드로퓨란 5 mL에 녹인 후 테트라부틸암모늄 플루오라이드 0.2 mL(2.5 M 용액)을 첨가하고 1시간 교반하였다. 반응 종결 후 용매를 제거하여 농축한 후 에틸아세테이트 10 mL와 포화 탄산수소나트륨수용액 5 mL를 넣어 유기층을 분리하여 무수황산마그네슘으로 건조하였다. 건조한 유기층을 농축한 후 디클로로메탄/메탄올 (95/5, v/v)로 컬럼크로마토그라피를 실시하여 표제의 화합물 34 mg (0.14 밀리몰, 28%)을 합성하였다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 2.13(s, 3H), 2.45(br, 1H), 4.71(s, 2H), 5.05(s, 2H), 5.93(s, 2H), 6.58(m, 1H), 6.62(m, 1H), 6.74(d, 1H), 7.33(s, 1H)

FAB 247 (M+H), C₁₃H₁₄N₂O₃(M)

3-4) 5-클로로메틸-4-메틸-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-1H-이미다졸 하이드로클로라이드의 제조

제조예 3-3)의 화합물 19mg (0.08 밀리몰)을 클로로포름 3 mL 에 녹인후 티오닐클로라이드 18 mg (0.15 밀리몰)을 0℃ 에서 천천히 적가하였다. 2시간 교반후 용매를 감압증류하에서 제거후 잔존 하이드로클로라이드를 제거하여 표제화합물을 90% 수율로 얻었다. 수득된 화합물은 정제하지 않고 바로 반응에 사용하였다.

제조예 4 : 5-클로로메틸-4-요오드-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-1H-이미다졸 하이드로클로라이드의 제조

4-1) 4,5-디요오드이미다졸 의 제조

문헌에 보고된 방법과 동일한 방법으로 제조하였다.(참조: Naidu, M.S.R.; Bensusan, H.B.; J. Org. Chem., 33, 1307(1968))

¹H NMR(DMSO-d6) δ 7.77(s, 1H)

4-2) 4,5-디요오드-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-1H-이미다졸의 제조

제조예 4-1)의 화합물과 피페로닐브로마이드를 사용하여 제조예 3-2)의 방법으로 표제화합물 1. 55 g 을 수율 60%로 얻었다.

¹H NMR(DMSO-d6) δ 5.14(s, 2H), 6.00(s, 2H), 6.66(d, 1H), 6.80(s, 1H), 6.89(d, 1H), 8.04(s, 1H)

FAB 455 (M+H), C₁₁H₈I₂N₂O₂(M)

4-3)4-요오드-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-5-이미다졸카르복스알데히드의 제조

제조예 4-2) 의 화합물 1.45 g (3.20 밀리몰)을 테트라하이드로퓨란 10 mL에 녹이고 에틸마그네슘브로마이드 3.53 mL (1.0 M 테트라하이드로퓨란용액)을 가하였다. 반응액에 디메틸포름아마이드 0.49 mL (6.40 밀리몰)을 첨가하여 교반하면서 3시간 정도 반응시켰다. 용매를 감압하에서 농축한 메틸렌클로라이드 10 mL를 넣어 녹인 후 포화암모늄클로라이드로 씻어내었다. 유기층을 분리하여 무수황산마그네슘으로 건조 후 용매를 농축하고 컬럼크로마토그래피하여 (디클로로메탄/메탄올 = 95/5, v/v) 표제의 화합물 800 mg (2.23밀리몰)을 70% 수율로 얻었다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 5.38(s, 2H), 6.95(s, 2H), 6.68-6.90(m, 3H), 7.56(s, 1H), 9.61(s, 1H)

FAB 357 (M+H), C₁₂H₉IN₂O₃(M)

4-4) 5-하이드록시메틸-4-요오드-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-1H-이미다졸의 제조

제조예 4-3) 의 화합물 360 mg (1 밀리몰)을 메탄올 10 mL에 녹이고 소듐보로하이드라이드 45 mg (1.2 밀리몰)을 넣고 1시간 반응시켰다. 반응 후 용매를 제거하고 메틸렌클로라이드 10 mL를 넣어 녹인 후 포화암모늄클로라이드로 씻어내었다. 유기층을 분리하여 무수황산마그네슘으로 건조 후 용매를 농축하고 컬럼크로마토그래피하여 (디클로로메탄/메탄올=95/5, v/v) 표제의 화합물 200 mg (0.56밀리몰)을 58% 수율로 얻었다.

¹H NMR(CH₃OD) δ 4.47(s, 2H), 5.22(s, 2H), 5.93(s, 2H), 6.70-6.81(m, 3H), 7.69(s, 1H)

FAB 359 (M+H), C₁₂H₁₁I₂N₂O₃(M)

4-5) 5-클로로메틸-4-요오드-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-1H-이미다졸 하이드로클로라이드의 제조

제조예 4-4의 화합물 69 mg (0.19 밀리몰)을 클로로포름 3 mL 에 녹인후 티오닐클로라이드 45 mg (0.38 밀리몰)을 0℃ 에서 천천히 적가하였다. 2시간 교반후 용매를 감압증류하에서 제거후 잔존 하이드로클로라이드를 제거하여 표제화합물을 91% 수율로 얻었다. 수득된 화합물은 정제하지 않고 바로 반응에 사용하였다.

제조예 5 : 5-클로로메틸-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-4-니트로-1H-이미다졸의 제조

5-1) 1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-4-니트로-1H-이미다졸의 제조

4-니트로 이미다졸 3.39 g (30 밀리몰), 피페로닐브로마이드 6.45 g (30 밀리몰), 탄산칼륨 8.28 g (60 밀리몰)을 디메틸포름아마이드 100 mL 에 녹이고 6시간동안 반응시켰다. 반응 후 용매를 제거한 후 에틸아세테이트 100 mL를 첨가한 후 물 100 mL 로 2번 씻어내었다. 유기층을 분리하여 농축시킨 후 컬럼크로마토그래피하여 (헥산/에틸아세테이트=2/1, v/v) 표제의 화합물 6.17g (1.52밀리몰)을 83% 수율로 얻었다.

¹H NMR(CDCl₃)δ 5.05(s, 2H), 6.00(s, 2H), 6.68(s, 1H), 6.74(d, 1H), 6.82 (d, 1H), 7.46(s, 1H), 7.70(s, 1H)

FAB 248 (M+H), C₁₁H₉N₃O₄(M)

5-2) t-부틸-1-클로로-1-[1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-4-니트로-1H-이미다졸-5-일]아세테이트

포타슘t-부톡사이드(3.84g, 34.2 밀리몰) 을 테트라하이드로퓨란(20 mL)에 녹인 후 -78℃로 냉각시켰다. 제조예 5-1)의 화합물 (1.69g, 6.84밀리몰) 과 t-부틸 디클로로아세테이트 (1.27g, 6.86 밀리몰)을 디메틸포름아마이드(10mL)에 녹인 용액을 30분간 천천히 적가하였다. 5분간 교반 후 반응액을 묽은 염산 수용액에붓고 감압하에서 유기용매를 제거하였다. 잔액을 디클로로메탄으로 추출한 후 유기층을 무수 황산마그네슘 건조하고 농축하였다. 컬럼크로마토그래피하여 (디클로로메탄/메탄올=98/2, v/v) 표제의 화합물 600mg (1.52밀리몰)을 22% 수율로 얻었다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 1.45(s, 9H), 5.15(dd, 2H), 5.99(s, 2H), 6.54(s, 1H), 6.71(s, 1H), 6.76(d, 1H), 6.81 (d, 1H), 7.24(s, 1H)

FAB 396 (M+H), C₁₇H₁₈ClN₃O₆(M)

5-3) 5-클로로메틸-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-4-니트로-1H-이미다졸의 제조

제조예 5-2)의 화합물 (360mg, 0.910밀리몰)을 아세트산 (5mL)에 녹이고 30분간 환류하였다. 반응액을 얼음(20g)에 붓고 디클로로메탄으로 추출하였다(20 mL × 3). 유기층을 무수 포타슘카보네이트로 건조하고 감압하에서 농축하였다. 컬럼크로마토그래피하여 (디클로로메탄/메탄올=99/1, v/v) 표제의 화합물 150mg (0.507밀리몰)을 56% 수율로 얻었다

¹H NMR(CDCl₃) δ 4.94(s, 2H), 5.17(s, 2H), 5.99(s, 2H), 6.65(s, 1H), 6.72(d, 1H), 6.81(d, 1H), 7.43(s, 1H)

FAB 296 (M+H), C₁₂H₁₀ClN₃O₄(M)

제조예 6 : 5-클로로메틸-1-(2-메톡시펜에틸)-2-메틸-1H-이미다졸 하이드로 클로라이드의 제조

6-1) 5-(t-부틸디메틸실록시메틸)-1-(2-메톡시펜에틸)-1-H-이미다졸 의 제조

제조예 1-1)과 같은 방법으로 합성한 5-하이드록시메틸-1-(2-메톡시펜에틸)-2-메틸-1H-이미다졸 248 mg (1.09 밀리몰)을 디메틸포름아마이드 3 mL에 녹인 후 t-부틸디메틸실릴 클로라이드 170 mg (1.13 밀리몰)을 첨가하였다. 1시간 동안 반응한 후 용매를 감압하에 제거하고 메틸렌디클로라이드/메탄올 (95/5, v/v)로 컬럼크로마토그라피를 실시하여 표제의 화합물 248 mg (0.72 밀리몰, 66%)을 합성하였다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 0.03(s, 6H), 0.86(s, 9H), 3.04(t, 2H), 3.80(s, 3H), 4.17(t, 2H), 4.54(s, 2H), 6.80-6.95(m, 4H), 7.20-7.35(m, 2H)

FAB 347 (M+H), C₁₉H₃₀N₂O₂Si(M)

6-2) 5-(t-부틸디메틸실록시메틸)-2-메틸-1-(2-메톡시펜에틸)--1-H-이미다졸의 제조

제조예 6-1)의 화합물을 사용하여 제조예 1-2의 방법을 실시하여 표제의 화합물 80 mg 을 수율 50%로 합성하였다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 0.04(s, 6H), 0.86(s, 9H), 2.19(s, 3H), 2.97(t, 2H),3.78(s, 3H), 4.05(t, 2H), 4.49(s, 2H), 6.72-7.00(m, 4H), 7.15-7.31(m, 1H)

FAB 361 (M+H), C₂₀H₃₂N₂O₂Si(M)

6-3) 5-(하이드록시메틸)-1-(2-메톡시펜에틸)-2-메틸-1-H-이미다졸 의 제조

제조예 1-4)의 방법으로 제조예 6-2의 화합물로부터 표제화합물 30 mg을 56%로 얻었다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 2.19(s, 3H), 2.99(t, 2H), 3.65(br, 1H), 3.82(s, 3H), 4.09(t, 2H), 4.48(s, 2H), 6.70(s, 1H), 6.83(m, 2H), 6.97(d, 1H), 7.21(m, 1H)

FAB 247 (M+H), C₁₄H₁₈N₂O₂(M)

6-4) 5-클로로메틸-1-(2-메톡시펜에틸)-2-메틸-1-H-이미다졸 하이드로클로라이드의 제조

제조예 1-4) 와 동일한 방법으로 표제화합물을 95% 수율로 얻었다. 수득된 화합물은 정제하지 않고 바로 반응에 사용하였다.

제조예 7 : 1-(3-벤질옥시프로필)-5-클로로메틸-4-메틸-1H-이미다졸의 제조

7-1) 3-벤질옥시프로판올의 제조

1,3-프로판디올(38.05g, 0.50몰) 을 디메틸포름아마이드 400 mL 에 녹이고 0℃로 냉각하였다. 미네랄 기름에 분산된 60% 소듐하이드라이드 (20.0g, 0.5 몰) 을 천천히 첨가하였다. 10분간 교반 후 벤질브로마이드 (51.31g, 0.30 몰)을 디메틸포름아마이드(100 mL)에 녹여 천천히 가하였다. 상온에서 1시간 교반 후 디메틸포름아마이드를 감압하에서 제거하고 에틸아세테이트 500 mL를 넣은 후 소금물로 씻어주었다(200 mL x3). 유기층을 무수 황산마그네슘 건조하고 농축한 후 컬럼크로마토그래피 하여 표제의 화합물 33.80g(0.203몰)을 68% 수율로 얻었다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 1.83-1.92(m, 2H), 2.31(brs, 1H), 3.65(t, 2H), 3.77(t, 2H), 4.51(s, 2H), 7.25-7.37(m, 5H)

FAB 167 (M+H), C₁₀H₁₄O₂(M)

7-2) 3-벤질옥시프로필 메탄설포네이트의 제조

제조예 7-1)의 화합물 (33.80g, 0.203몰)을 디클로로메탄(500 mL)에 녹이고 0℃로 냉각시켰다. 메탄설폰닐클로라이드 (24.46g, 0.214몰)를 첨가한 후 연속적으로 트리에틸아민 (21.60g, 0.214몰)을 첨가하였다. 상온에서 1시간 교반 후 물로 반응액을 씻어준 후(300 mLx3) 유기층을 무수 황산마그네슘 건조하고 농축하여 표제의 화합물 49.40g(0.202 몰)을 99.5% 수율로 얻었다. 이 화합물은 별도의 정제과정 없이 다음 반응에 사용하였다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 2.04(m, 2H), 2.95(s, 3H), 3.57(t, 2H), 4.36(t, 2H),4.51(s, 2H), 7.25-7.37(m, 5H)

FAB 245 (M+H), C₁₁H₁₆O₄S(M)

7-3) 5-(t-부틸디메틸실록시메틸)-4-메틸이미다졸의 제조

4-메틸-5-이미다졸메탄올 하이드로클로라이드 (13.0g, 87.5밀리몰), t-부틸클로로디메틸실란 (13.5g, 89.6밀리몰) 과 포타슘카보네이트 (14.5g, 105밀리몰)을 디메틸포름아마이드 (200 mL)에 넣고 3일간 교반하였다. 디메틸포름아마이드를 감압하에서 제거하고 에틸 아세테이트 (500 mL)를 넣은 후 소금물로 씻어주었다(200 mL ×3). 유기층을 무수 황산마그네슘 건조하고 농축하여 표제의 화합물 5.4g(23.9밀리몰)을 27% 수율로 얻었다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 0.07(s, 6H), 0.89(s, 9H), 2.21(s, 3H), 4.65(s, 2H), 7.47(s, 1H)

7-4) 1-(3-벤질옥시프로필)-5-(t-부틸디메틸실록시메틸)-4-메틸-1H-이미다졸의 제조

제조예 7-3)의 화합물 (3.10g, 13.7밀리몰)을 디메틸포름아마이드 (20mL) 에 녹이고 0℃로 냉각하였다. 미네랄기름에 분산된 60% 소듐하이드라이드 (0.66g, 16.5 밀리몰)을 천천히 첨가하였다. 5분간 교반 후 제조예 7-2)의 3-벤질옥시프로필 메탄설포네이트 (3.35g, 13.7밀리몰)을 천천히 가하였다. 상온에서 2시간 교반후 디메틸포름아마이드를 감압하에서 제거하고 에틸 아세테이트 200 mL를 넣은 후 소금물로 씻어주었다(100 mL ×3). 유기층을 무수 황산마그네슘 건조하고 농축한 후 컬럼크로마토그래피 하여(디클로로메탄/메탄올=95/5, v/v) 표제의 화합물 2.00g (5.34밀리몰) 과 1-(3-벤질옥시프로필)-3-(t-부틸디메틸실록시메틸)-2-메틸-1H-이미다졸 1.34g (3.58밀리몰)을 각각 39%, 26% 수율로 얻었다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 0.03(s, 6H), 0.88(s, 9H), 2.05(m, 2H), 2.19(s, 3H), 3.43(t, 2H), 4.06(t, 2H), 4.48(s, 2H), 4.58(s, 2H), 7.28-7.34(m, 6H)

FAB 375 (M+H), C₂₁H₃₄N₂O₂Si(M)

1-(3-벤질옥시프로필)-3-(t-부틸디메틸실록시메틸)-2-메틸-1H-이미다졸

¹H NMR(CDCl₃) δ 0.08(s, 6H), 0.90(s, 9H), 1.96(m, 2H), 2.20(s, 3H), 3.42(t, 2H), 3.93(t, 2H), 4.48(s, 2H), 4.63(s, 2H), 7.28-7.35(m, 6H)

7-5) 1-(3-벤질옥시프로필)-5-(하이드록시메틸)-4-메틸-1H-이미다졸의 제조

제조예 7-4)의 화합물 (1.20g, 3.20밀리몰)을 테트라하이드로퓨란 (10 mL)에 녹이고 테트라부틸암모늄 플로라이드 (6.4mL, 1M 테트라하이드로퓨란 용액)을 가하였다. 상온에서 3시간 교반 후 감압하에서 용매를 제거하였다. 물 (50 mL)를 가하고 에틸 아세테이트로 추출한 후 유기층을 무수 황산마그네슘 건조하고 농축한후 컬럼크로마토그래피하여(디클로로메탄/메탄올=95/5, v/v) 표제의 화합물 650mg(2.50밀리몰) 을 각각 78% 수율로 얻었다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 2.02(m, 2H), 2.07(s, 3H), 3.41(t, 2H), 4.04(t, 2H), 4.45(s, 2H), 4.51(s, 2H), 7.29-7.33(m, 6H)

FAB 261 (M+H), C₁₅H₂₀N₂O₂(M)

7-6) 1-(3-벤질옥시프로필)-5-클로로메틸-4-메틸-1H-이미다졸의 제조

제조예 7-5)의 화합물 (650 mg, 2.50밀리몰)을 클로로포름 (10 mL)에 녹이고 0℃로 냉각시킨 후 티오닐클로라이드 (450 mg, 3.78밀리몰)을 가하였다. 상온에서 2시간 교반 후 감압하에서 유기용매 및 잔류 티오닐클로라이드를 제거하여 표제의 화합물 780 mg (2.47밀리몰)을 99% 수율로 얻었다. 이 화합물은 별도의 정제과정 없이 다음 반응에 사용하였다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 2.24(m, 2H), 2.43(s, 3H), 3.52(t, 2H), 4.36(t, 2H), 4.47(s, 2H), 4.52(s, 2H), 7.25-7.43(m, 5H), 9.18(s, 1H)

제조예 8 : 1-[3-(2-클로로벤질옥시)프로필]-5-클로로메틸-4-메틸-1H-이미다졸의 제조

8-1) 3-(2-클로로벤질옥시)프로판올의 제조

1,3-프로판디올(3.7g, 49밀리몰)을 디메틸포름아마이드 50mL에 녹이고 0℃로 냉각하였다. 미네랄 기름에 분산된 60% 소듐하이드라이드(2g, 50 밀리몰)을 천천히 첨가하였다. 10분간 교반 후 2-클로로벤질브로마이드(10g, 49밀리몰)을 디메틸포름아마이드 10 mL에 녹여 천천히 가하였다. 상온에서 1시간 교반 후 디메틸포름아마이드를 감압하에서 제거하고 에틸아세테이트 100mL를 넣은 후 소금물로 씻어주었다(100mL x3). 유기층을 무수 황산마그네슘 건조하고 농축한 후 컬럼크로마토그래피하여(노르말헥산/에틸아세테이트=4/1, v/v) 표제의 화합물 3.52g을 35.8% 수율로 얻었다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 1.91(m, 2H), 3.75(m, 2H), 3.81(t, 2H), 4.62(s, 2H), 7.20-7.29(m, 2H), 7.34(t, 1H), 7.43(t, 1H)

FAB 201 (M+H), C₁₀H₁₃ClO₂(M)

8-2) 3-(2-클로로벤질옥시)프로필 메탄설포네이트의 제조

제조예 8-1)의 화합물(3.52g, 17.5밀리몰)을 디클로로메탄 100 mL에 녹이고 0℃로 냉각시켰다. 메탄설포닐클로라이드(1.63 mL, 21밀리몰)를 첨가한 후 연속적으로 트리에틸아민(4.9mL, 35밀리몰)을 첨가하였다. 상온에서 1시간 교반 후 물로 반응액을 씻어준 후(100 mL x3) 유기층을 무수 황산마그네슘 건조하고 농축하여 표제의 화합물 4.51g을 92.5% 수율로 얻었다. 이 화합물은 별도의 정제과정 없이 다음 반응에 사용하였다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 2.08(m, 2H), 2.98(s, 3H), 3.66(t, 2H), 4.38(t, 2H), 4.60(s, 2H), 7.20-7.29(m, 2H), 7.34(t, 1H), 7.43(t, 1H)

FAB 279 (M+H), C₁₁H₁₅ClO₄S(M)

8-3) 5-(t-부틸디메틸실록시메틸)-1-[3-(2-클로로벤질옥시)프로필]-4-메틸-1H-이미다졸의 제조

제조예 7-3)의 화합물(3.0 g, 13밀리몰)을 디메틸포름아마이드 50 mL에 녹이고 0℃로 냉각하였다. 미네랄 기름에 분산된 60%소듐하이드라이드(1.0g, 25 밀리몰)를 천천히 첨가하였다. 5분간 교반 후 제조예 8-2)의 화합물(4.51 g, 16.2밀리몰)을 천천히 가하였다. 상온에서 2시간 교반 후 디메틸포름아마이드를 감압하에서 제거하고 에틸아세테이트 100 mL를 넣은 후 소금물로 씻어주었다(100 mL x3). 유기층을 무수 황산마그네슘 건조하고 농축한 후 컬럼크로마토그래피하여(디클로로메탄/메탄올=98/2, v/v) 표제의 화합물 1.9 g (4.6밀리몰)과 1-[3-(2-클로로벤질옥시)프로필]-3-(t-부틸디메틸실록시메틸)-2-메틸-1H-이미다졸 1.5 g (3.7밀리몰)을 각각 35%, 28%수율로 얻었다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 0.03(s, 6H), 0.86(s, 9H), 2.09(m. 2H), 2.18(s, 3H), 3.51(t, 2H), 4.08(t, 2H), 4.57(s, 2H), 4.59(s, 2H), 7.20-7.29(m, 2H), 7.32(s, 1H), 7.34(t, 1H), 7.43(t, 1H)

FAB 410 (M+H), C₂₁H₃₃ClN₂O₂Si(M)

8-4) 1-[3-(2-클로로벤질옥시)프로필]-5-(하이드록시메틸)-4-메틸-1H-이미다졸의 제조

제조예 8-3)의 화합물(1.9 g, 4.6밀리몰)을 테트라하이드로퓨란 100 mL에 녹이고 테트라부틸암모늄 플로라이드(5.0mL, 1M 테트라하이드로퓨란 용액)를 가하였다. 상온에서 3시간 교반 후 감압하에서 용매를 제거하였다. 물(100 mL)을 가하고 에틸아세테이트(100 mL x3)로 추출한 후 유기층을 무수 황산마그네슘 건조하고 농축한 후 컬럼크로마토그래피하여 (디클로로메탄/메탄올=95/5, v/v) 표제의 화합물 640 mg (2.2밀리몰)을 47%의 수율로 얻었다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 2.00(s, 3H), 2.02(m. 2H), 3.42(t, 2H), 4.03(t, 2H), 4.46(s, 2H), 4.48(s, 2H), 7.10-7.20(m, 2H), 7.19(s, 1H), 7.25(t, 1H), 7.35(t, 1H)

FAB 295 (M+H), C₁₅H₁₉ClN₂O₂(M)

8-5) 1-[3-(2-클로로벤질옥시)프로필]-5-클로로메틸-4-메틸-1H-이미다졸의 제조

제조예 8-4)의 화합물(640 mg, 2.2밀리몰)을 클로로포름 40 mL에 녹이고 0℃로 냉각시킨후 티오닐클로라이드(0.32 mL, 4.3밀리몰)를 가하였다. 상온에서 2시간교반 후 감압하에서 유기용매 및 잔류 티오닐클로라이드를 제거하여 표제의 화합물 740 mg(21밀리몰)을 98%의 수율로 얻었다. 이 화합물은 별도의 정제과정없이 다음 반응에 사용되었다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 2.27(m, 2H), 2.44(s, 3H), 3.60(t, 2H), 4.38(t, 2H), 4.55(s, 2H), 4.58(s, 2H), 7.24-7.32(m, 2H), 7.37(m, 2H), 9.04(s, 1H)

제조예 9 : 5-클로로메틸-1-[3-에톡시프로필] -4-메틸-1H-이미다졸

9-1) 3-에톡시프로필-1-메틸설포네이트의 제조

에톡시프로판올(950mg, 9.1밀리몰)을 디클로로메탄 100mL에 녹이고 0℃로 냉각시켰다. 메탄설포닐클로라이드(0.86mL, 11밀리몰)를 첨가한 후 연속적으로 트리에틸아민(1.9mL, 14밀리몰)을 첨가하였다. 상온에서 1시간 교반 후 물로 반응액을 씻어준 후(100mL x3) 유기층을 무수 황산마그네슘 건조하고 농축하여 표제의 화합물 1.3g을 78% 수율로 얻었다. 이 화합물은 별도의 정제과정 없이 다음 반응에 사용하였다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 1.14(t, 3H), 1.77(m, 2H), 2.97(s, 3H), 3.44(q, 2H), 3.55(t, 2H), 4.38(t, 2H)

FAB 183 (M+H), C₆H₁₄O₄S(M)

9-2) 5-(t-부틸디메틸실록시메틸)-1-[3-에톡시프로필]-4-메틸-1H-이미다졸의 제조

제조예 7-3)의 화합물(1.24g, 5.5밀리몰)을 디메틸포름아마이드 50 mL에 녹이고 0℃로 냉각하였다. 미네랄기름에 분산된 60% 소듐하이드라이드(420mg, 10.5 밀리몰)를 천천히 첨가하였다. 5분간 교반 후 제조예9-1)의 화합물(1.3g, 7.1밀리몰)을 천천히 가하였다. 상온에서 2시간 교반 후 디메틸포름아마이드를 감압하에서 제거하고 에틸아세테이트 100 mL를 넣은 후 소금물로 씻어주었다(100 mL x3). 유기층을 무수 황산마그네슘 건조하고 농축한 후 컬럼크로마토그래피하여(디클로로메탄/메탄올=98/2, v/v) 표제의 화합물 350 mg (1.1밀리몰)과 1-[3-에톡시프로필]-3-(t-부틸디메틸실록시메틸)-2-메틸-1H-이미다졸 320 mg (1.0밀리몰)을 각각 20%, 18%수율로 얻었다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 0.04(s, 6H), 0.87(s, 9H), 1.19(t, 3H), 2.01(m, 2H), 2.19(s, 3H), 3.35(t, 2H), 3.44(q, 2H), 4.04(t, 2H), 4.59(s, 2H), 7.34(s, 1H)

FAB 313 (M+H), C₁₆H₃₂N₂O₂Si(M)

9-3) 1-[3-에톡시프로필]-5-하이드록시메틸-4-메틸-1H-이미다졸의 제조

제조예 9-2)의 화합물(350 mg, 1.1밀리몰)을 테트라하이드로퓨란 60 mL에 녹이고 테트라부틸암모늄 플로라이드(1.2 mL, 1M 테트라하이드로퓨란 용액)를 가하였다. 상온에서 3시간 교반 후 감압하에서 용매를 제거하였다. 탄산수소나트륨 수용액(100 mL)을 가하고 에틸아세테이트(100 mL x3)로 추출한 후 유기층을 무수 황산마그네슘 건조하고 농축한 후 컬럼크로마토그래피하여 (디클로로메탄/메탄올=98/2, v/v) 표제의 화합물 110 mg (0.55밀리몰)을 50%의 수율로 얻었다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 1.18(t, 3H), 2.03(m, 2H), 2.19(s, 3H), 3.36(t, 2H), 3.44(q, 2H), 4.07(t, 2H), 4.57(s, 2H), 7.39(s, 1H)

FAB 199 (M+H), C₁₀H₁₈N₂O₂(M)

9-4) 5-클로로메틸-1-[3-에톡시프로필] -4-메틸-1H-이미다졸의 제조

9-3)의 화합물(110mg, 0.55밀리몰)을 클로로포름 40 mL에 녹이고 상온에서 티오닐클로라이드(0.1 mL, 1.4밀리몰)를 가하였다. 상온에서 2시간 교반 후 감압하에서 유기용매 및 잔류 티오닐클로라이드를 제거하여 표제의 화합물 130 mg (0.53밀리몰)을 96%의 수율로 얻었다. 이 화합물은 별도의 정제과정없이 다음 반응에 사용되었다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 1.57(t, 3H), 2.20(brm, 2H), 2.45(s, 3H), 3.37-3.56(tq, 4H), 4.38(brt, 2H), 4.61(s, 2H), 9.36(s, 1H)

제조예10 : 3-[N-(2-메톡시에틸)-N-메틸]카바모일-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤의 제조

10-1) 3-(나프탈렌-1-일)-아크릴산 에틸에스테르의 제조.

트리에틸포스포노아세테이트 22.4 g (0.10 몰)을 500 mL 의 아세토나이트릴에 녹인 후 1,8-디아자바이사이클[5.4.0]운데스-7-엔(1,5-5)(DBU) 30.4 g (2 몰)을 서서히 첨가하였다. 이용액에 1-나프탈데히드 15.6 g (0.10 몰) 을 20 mL 의 테트라하이드로퓨란 에 녹여 서서히 가한 후 8 시간 동안 교반하였다. 유기용매를 감압증류하여 제거한 후 에틸 아세테이트에 녹이고 물로 2번 씻어주었다. 마그네슘 설페이트로 건조하여 농축한 후 헥산/에틸 아세테이트 (95/5, v/v)로 컬럼크로마토그라피를 실시하여 표제의 화합물 20.3 g (0.090 몰, 90%)을 합성하였다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 1.33 (t, 3H), 4.10 (q, 2H), 6.75 (q, 1H), 7.50 (m, 3H), 7.73 (d, 1H), 7.85 (m, 2H), 8.10 (d, 1H), 8.21 (d, 1H),

FAB 227 (M+H).

10-2) 에틸 4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤-3-카르복실레이트의 제조

제조예 10-1)의 화합물 5 g (18.9 밀리몰) 과 토실메틸이소시아나이드 3.68 g (18.9 밀리몰)을 테트라하이드로퓨란 100 mL 에 녹였다. 여기에 포타슘 t-부톡사이드 2.55 g (22.7 밀리몰) 의 테트라하이드로퓨란 (100 mL) 용액을 천천히 첨가하고 30분간 환류하였다. 물 100 mL를 넣어 반응을 중지 시키고 감압하에서 용매를 제거하였다. 에테르로 추출하고 소금물로 씻어준 후 마그네슘 설페이트로 건조하였다. 용매를 감압하에서 제거하고, 에틸아세테이트/헥산(1/3) 혼합용액으로 크로마토그래피를 실시 하여 표제의 화합물 3. 85 g (14.5 밀리몰, 77%)을 합성하였다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 1.27 (t, 3H), 4.07 (q, 2H), 6.76 (s, 1H), 7.28-7.47 (m, 5H), 7.59 (s, 1H), 7.82 (m, 2H), 9.99 (s, 1H),

FAB 266 (M+H).

10-3) 4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤-3-카르복실산의 제조

제조예 10-2)의 화합물 2.64 g (10 밀리몰) 을 50 % 에탄올 50 mL 에 녹이고 수산화 칼륨 2.24 g (40 밀리몰) 을 가한후 7 시간동안 환류하였다. 상온으로 냉각시킨후 pH를 4-5로 맞추고 에틸아세테이트로 추출하였다. 소듐설페이트로 건조하고 감압하여 용매를 제거한후 표제화합물 1.62 g (8.1 밀리몰, 81 %)을 얻었다. 이 화합물은 정제하지 않고 다음 반응에 사용하였다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 6.60 (s, 1H), 7.32 7.49 (m, 5H), 7.54 (s, 1H), 7.84 (m, 2H), 9.92 (s, 1H)

FAB 236 (M+H).

10-4) 3-[N-(2-메톡시에틸)-N-메틸]카바모일-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤의 제조

제조예 10-3) 의 화합물 234 mg (1 밀리몰)을 디메틸포름아미드 2 mL 에 녹이고 EDC 230mg (1.2 밀리몰), 트리에틸아민 101 mg (1 밀리몰) 과 HOBT 162 mg (1.7밀리몰)을 넣어준뒤 0℃에서 5 분간 교반시켰다. N-(2-메톡시 에틸)메틸아민하니드로클로라이드 124 mg (1 밀리몰)을 넣고 실온에서 5 시간 교반하였다. 용매를 감압하에서 제거하고 탄산칼륨 포화 수용액 10 mL 를 넣은 후 에틸아세테이트 20 mL로 추출한후, 1N 염산 수용액 10 mL로 씻어 주었다. 소금물과 물로 씻어주고 소듐설페이트로 건조한 후 농축하여 표제화합물 246 mg (0.79 밀리몰, 수율 79%)을 었었다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 2.46 (s, 2H), 2.80-3.40 (m, 8H), 3.40 (s, 1H), 6.80 (s, 1H), 7.00 (s, 1H), 7.42 (m, 4H), 7.73 (d, 1H), 7.81 (d, 1H), 8.17 (d, 1H), 10.66 (s, 1H),

FAB 309 (M+H).

제조예 11: 3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤의 제조

제조예 10-3)에서 수득한 화합물과 4-메틸피페라진으로부터 제조예 10-4)의 방법에 따라 실시하여 75 % 수율로 표제 화합물을 수득하였다.

¹H NMR (CDCl₃) δ 1.15 (br, 2H), 1.87 (br, 2H), 1.92 (s, 3H), 2.96 (br, 2H), 3.41 (br, 2H), 6.83 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 7.36-7.42 (m, 4H), 7.73 (d, 1H), 7.75 (d, 1H), 8.10 (d, 1H), 10.52 (s, 1H)

FAB (M+H): 320

제조예 12: 3-메톡시카보닐-2-메틸--4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤의 제조

메틸 3-옥소부타노에이트 0.69 g (5.9 밀리몰)과 1-[(E)-2-나이트로에텐일]나프탈렌 1.08g (5.9 밀리몰)을 소듐메톡사이드 2.37 mL (0.5 M 메탄올용액) 에 녹인 후 0℃에서 2시간동안 교반하였다. 차가운 메탄올을 10 mL넣어 희석한 후 암모니아 가스를 통과시켰다. 0℃에서 12시간 교반하며 반응시켰다. 반응 종결 후 용매를 감압증류한 후 에틸아세테이트/헥산 (90/10,v/v)와 에틸아세테이트/헥산 (70/30,v/v)로 컬럼크로마토그라피를 실시하여 표제의 화합물 936 mg (3.53밀리몰, 59%)을 합성하였다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 2.49(s, 3H), 3.36(s, 3H), 6.44(d, 1H), 7.28-7.57(m, 4H), 7.75-7.95(m, 3H), 8.66(s, 1H)

FAB 266 (M+H), C₁₇H₁₅NO₂(M)

제조예 13: 2-에틸티오-3-에톡시카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤의 제조

13-1) 에틸[4-메틸페닐]설포닐]메틸카르보노클로라이드이미도티오익산

에탄티올 6.22 g (100 밀리몰)과 트리에틸아민 200 mg을 사염화탄소30 mL에 녹이고 온도를 0℃로 냉각시켰다. 반응액에 설퍼릴클로라이드13.35 g (100 밀리몰)을 서서히 적가하고 30분 동안 교반하면서 반응시켰다. 용매를 제거하고 테트라하이드로퓨란 15 mL를 첨가하고 TosMIC 23.4 g (120 밀리몰)이 녹아있는 테트라하이드로퓨란용액 15 mL를 서서히 첨가하였다. 반응액을 2시간동안 교반하면서 반응시켰다. 용매를 제거하여 표제화합물 28 g (수율, 96%)을 얻었다.

FAB(M+H) 292

13-2) 2-에틸티오-3-에톡시카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

제조예 13-1)의 화합물 370 mg (1.27 밀리몰)과 제조예 10-1)의 화합물 288 mg(0.85 밀리몰)을 테트라하이드로퓨란 2 mL에 녹였다. 반응액에 알루미늄하이드록사이드 170 mg (1.7 밀리몰), 수산화칼륨 190 mg (3.4 밀리몰)을 넣어 4 시간동안 교반하면서 반응시켰다. 용매를 제거하고 에틸아세테이트 10 mL 와 포화 탄산수소나트륨 10 mL를 첨가하여 유기층을 분리하였다. 분리한 유기층을 무수황산마그네슘으로 건조한 후 용매를 감압하에 제거하여 컬럼크로마토그래피하여 (헥산/에틸아세테이트=70/30, v/v) 표제의 화합물 69 g (0.21밀리몰,25 %)을 합성하였다.

¹H NMR(CDCl₃) δ1.07(t, 3H), 1.23(t, 3H), 3.00(q, 2H), 4.09(q, 2H), 7.10-7.45(m, 5H), 7.60-8.05(m, 4H)

FAB 326 (M+H), C₁₉H₁₉NO₂S(M)

제조예 14 : 1-하이드록시 피페라진 디하이드로클로라이드의 제조

문헌(참고문헌:J. Heterocyclic Chem., 1989, 26, 393)에 언급된 방법으로 1-포밀피페라진으로부터 합성하였다.

실시예 1: 1-[2-메틸-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

제조예 11)의 화합물 320 mg (1 밀리몰)을 디메틸포름아마이드 (5 mL)에 녹이고 0℃로 냉각 시킨 후 미네랄 기름에 분산된 60% 소듐하이드라이드 80 mg (2 밀리몰)을 첨가하였다. 10분 후 제조예 1-5)의 화합물 300 g(1.1 밀리몰)을 첨가하고 상온에서 2시간 교반하였다. 감압하에서 용매를 제거하고 에틸아세테이트 (20 mL)에 녹인 후 소금물로 씻어 주었다. 유기층을 농축한 후 컬럼크로마토그래피하여 (디클로로메탄/메탄올=93/7, v/v) 표제의 화합물 411g (0.75 밀리몰, 75%)을 합성하였다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 1.07(br, 2H), 1.70-2.10(br+s, 5H), 2.33(s, 3H), 2.88(br, 2H), 3.30(br, 1H), 4.88(s, 2H), 4.93(s, 2H), 5.88(s, 2H), 6.31(s, 1H), 6.33(d, 1H), 6.65(d, 1H), 6.69(d, 1H), 7.04(d, 1H), 7.10(s, 1H), 7.25(s, 1H), 7.29(d, 1H), 7.38-7.50(m, 3H), 7.74(d, 1H), 7.82(d, 1H), 7.97(d, 1H)

FAB 548 (M+H). C₃₃H₃₃N₅O₃(M)

실시예 2 : 1-[4-메틸-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

제조예 11의 화합물 320 mg (1 밀리몰)과 제조예 3의 화합물 300 mg(1.1 밀리몰)을 사용하여 실시예 1과 동일한 방법을 사용하여 표제의 화합물 270 mg (0.5 밀리몰, 50%)을 합성하였다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 1.11(br, 1H), 1.70-1.90(br, 4H), 1.89(s, 3H), 2.34(s, 3H), 2.97(br, 2H), 3.31(br, 1H), 4.87(s, 2H), 4.94(s, 2H), 5.89(s, 2H), 3.31(br, 1H), 4.87(s, 2H), 4.94(s, 2H), 5.89(s, 2H), 6.44(s, 1H), 6.51(d, 1H), 6.58(d, 1H), 6.72(d, 1H), 7.01(m, 1H), 7.31(d, 1H), 7.40-7.49(m, 3H), 7.51(s, 1H), 7.76(d, 1H), 7.84(d, 1H), 8.00(d, 1H)

FAB 548 (M+H). C₃₃H₃₃N₅O₃(M)

실시예 3 : 1-[2-아미노-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

3-1) 1-[1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

제조예 11 화합물 640 mg (2 밀리몰)을 디메틸포름아마이드 20 mL에 녹이고 미네랄 기름에 분산된 60%소듐하이드라이드 264 mg (6.6 밀리몰) 서서히 넣어준 후 10분 동안 교반하였다. 반응액에 제조예 2의 화합물 500 mg (2.2 밀리몰)을 0℃에서 서서히 첨가하고 3시간동안 반응시켰다. 용매를 제거하고 30 mL의 물과 에틸아세테이트 100 mL를 첨가하여 교반한 후 유기층을 분리하여 무수황산나트륨으로 건조하였다. 유기용매를 감압하에서 제거하고 컬럼 크로마토그래피(용매 : 디클로로메탄/메탄올(90/10) 하여 표제의 화합물 730 mg (0.574 밀리몰)을 67% 수율로 얻었다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 1.09(br, 2H), 1.70-2.00(br+s, 5H), 2.90(br, 2H), 3.30(br, 2H), 4.89(s, 2H), 4.95(s, 2H), 5.89(s, 2H), 6.43(s, 1H), 6.51(d, 1H), 6.63(d, 1H), 6.71(d, 1H), 7.04(d, 1H), 7.20(s, 1H), 7.31(d, 1H), 7.30-7.44(m, 3H), 7.55(s, 1H), 7.78(d, 1H), 7.83(d, 1H), 8.01(d, 1H)

FAB 534 (M+H).

3-2) 1-[2-아지도-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

실시예 3-1)의 화합물 (1.00g, 1.87밀리몰) 을 테트라하이드로퓨란 (40 mL)에 녹였다. 질소대기 하에서 -78℃로 냉각하고 n-부틸리튬 (0.83 mL, 2.5M 헥산 용액)을 천천히 가하였다. 10분간 교반 후 TosMIC (480mg, 2.43 밀리몰) 을 테트라하이드로퓨란 (10 mL)에 녹여 첨가하였다. -78℃ 항온조를 제거하고 상온으로 온도를 올려 주었다. 물(1mL) 를 첨가하여 반응을 중지시키고 감압하에서 유기용매를 제거하였다. 잔액에 물 (20 mL)를 넣고 에틸 아세테이트로 추출하였다 (20 mLx 3). 유기층을 무수 황산마그네슘 건조하고 감압하에서 용매를 제거한 후 컬럼 크로마토그래피(용매 : 디클로로메탄/메탄올(98/2)) 하여 표제의 화합물 330 mg (0.574 밀리몰)을 31% 수율로 얻었다.

¹H NMR (CDCl₃) δ 1.10 (brs, 2H), 1.82(brs, 2H), 1.87(s, 3H), 2.93(brs, 2H), 3.33(brs, 2H), 4.74(s, 2H), 4.89(s, 2H), 5.90(s, 2H), 6.48(s, 1H), 6.49(d, 1H), 6.65(s, 1H), 6.71(d, 1H), 7.04(s, 1H), 7.05(d, 1H), 7.32(d, 1H), 7.40-7.48(m, 3H), 7.77(d, 1H), 7.83(d, 1H), 7.99(d, 1H)

FAB 577 (M+H), C₃₂H₃₂N₈O₃(M)

3-3) 1-[2-아미노-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

실시예 3-2)의 화합물 32 mg(0.057 밀리몰)을 메탄올 (3mL)에 녹였다. 10% Pd/C(5mg)을 첨가한 후 수소 대기하에서 30분간 교반 하였다. 용액을 셀라이트로 여과하고 농축하여 표제의 화합물 28 mg (0.051밀리몰)을 89% 수율로 얻었다.

¹H NMR (CDCl₃+DMSO-d6)) 1.04 (brs, 2H), 1.72(brs, 2H), 1.80(s, 3H), 2.92(brs, 2H), 3.23(brs, 2H), 4.51(brs, 2H), 4.74(s, 2H), 4.87(s, 2H), 5.80(s, 2H), 6.35(s, 1H), 6.40(d, 1H), 6.61(d, 1H), 6.66(s, 1H), 6.75(s, 1H), 7.01(s, 1H), 7.21(d, 1H), 7.30-7.48(m, 3H), 7.69(d, 1H), 7.75(d, 1H), 7.89(d,1H)

FAB 549(M+H). C₃₂H₃₂N₆O₃(M)

실시예 4 : 1-[1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-2-메틸티오-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

실시예 3-1)의 화합물 (5.05g, 9.46밀리몰)을 테트라하이드로퓨란 (100 mL)에 녹였다. 질소대기 하에서 -78℃로 냉각하고 n-부틸리튬 (4.2 mL, 2.5M 헥산 용액)을 천천히 가하였다. 10분간 교반 후 디메틸디설파이드(1.34g, 14.2 밀리몰) 을 테트라하이드로퓨란 (10 mL)에 녹여 첨가하였다. -78℃ 항온조를 제거하고 상온으로 온도를 올려 주었다. 물(1mL) 를 첨가하여 반응을 중지시키고 감압하에서 유기용매를 제거하였다. 잔액에 물 (20 mL)를 넣고 에틸 아세테이트로 추출하였다 (20mL x 3). 유기층을 무수 황산마그네슘 건조하고 감압하에서 용매를 제거한 후 컬럼 크로마토그래피(용매 : 디클로로메탄/메탄올 (98/2))하여 1-[1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-2-메틸티오-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤 2.05 g (3.54 밀리몰)을 37% 수율로 얻었다.

1-[1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-2-메틸티오-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

¹H NMR(CDCl₃) δ 1.10(brs, 2H), 1.82(brs, 2H), 1.87(s, 3H), 2.62(s, 3H), 2.90(brs, 2H), 3.34(brs, 2H), 4.93(s, 4H), 5.90(s, 2H), 6.44(s, 1H), 6.46(d, 1H), 6.65(s, 1H), 6.70(d, 1H), 7.05(s, 1H), 7.22(s, 1H), 7.32(d, 1H), 7.40-7.53(m, 3H), 7.77(s, 1H), 7.82(d, 1H), 8.00(d, 1H)

FAB 580 (M+H). C₃₃H₃₃N₅O₃S(M)

실시예 5 : 1-[4-아이오도-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

제조예 11)의 화합물과 제조예 4-5)의 화합물을 사용하여 실시예 1의 방법으로 표제화합물 56 mg 을 65 % 수율로 얻었다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 1.09(br, 2H), 1.75-2.00(br+s, 5H), 2.90(br, 2H), 3.33(br, 2H), 4.94(s, 2H), 4.97(s, 2H), 5.90(s, 2H), 6.41(s, 1H), 6.50(s, 1H), 6.66(d, 1H), 6.72(d, 1H), 7.07(s, 1H), 7.32(d, 1H), 7.40-7.50(m, 3H), 7.53(s, 1H), 7.76(d, 1H), 7.84(d, 1H), 8.02(d, 1H)

FAB 660 (M+H). C₃₂H₃₀IN₅O₃(M)

실시예 6 : 1-[1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-4-나이트로-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

제조예 11)의 화합물 (162mg, 0.507밀리몰)을 디메틸포름아마이드(5mL)에 녹이고 0℃로 냉각 시킨 후 미네랄기름에 분산된 60%소듐하이드라이드(70 mg, 1.75밀리몰)를 첨가하였다. 10분간 교반 후 제조예 5-3)의 화합물 (150 mg, 0.507 밀리몰)을 첨가하였다. 상온에서 2시간 교반 후 용매를 제거하고 컬럼크로마토그래피하여(디클로로메탄/메탄올=97/3, v/v) 표제의 화합물60 mg (0.104 밀리몰, 20%)을 얻었다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 1.12(brs, 2H), 1.83(brs, 2H), 1.88(s, 3H), 2.91(brs, 2H), 3.33(brs, 2H), 5.01(s, 2H), 5.49(s, 2H), 5.93(s, 2H), 6.47(s, 1H),6.55(d, 1H), 6.75(d, 1H), 6.75(s, 1H), 7.12(s, 1H), 7.33(d, 1H), 7.40-7.55(m, 4H), 7.78(d, 1H), 7.83(d, 1H), 8.00(d, 1H)

FAB 579 (M+H). C₃₂H₃₀N₆O₃(M)

실시예 7 : 1-[4-아미노-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

실시예 6)의 화합물 (25mg, 0.043밀리몰) 을 에탄올 2 mL 에 녹이고 10% Pd-C (4mg)을 첨가한 후 수소대기 하(55-60 psi)에서 3 시간 흔들어 주었다. 반응액을 셀라이트로 여과하여 촉매를 제거하고 농축하여 표제의 화합물 15 mg (0.027밀리몰)을 63% 수율로 얻었다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 1.12(brs, 2H), 1.84(brs, 2H), 1.89(s, 3H), 2.99(brs, 2H), 3.35(brs, 2H), 4.84(s, 2H), 4.89(s, 2H), 5.88(s, 2H), 6.48(s, 1H), 6.53(d, 1H), 6.60(d, 1H), 6.71(s, 1H), 7.03(s, 1H), 7.26(d, 1H), 7.30(d, 1H), 7.40-7.55(m, 3H), 7.77(d, 1H), 7.82(d, 1H), 8.01(d, 1H)

FAB 549 (M+H). C₃₂H₃₂N₆O₃(M)

실시예 8 : 3-(4-메톡시피페라진-1-일)카보닐-1-[4-메틸-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-1H-이미다졸-5-일메틸]-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

8-1) 3-에톡시카보닐-1-[4-메틸-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-1H-이미다졸-5-일메틸]-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

제조예 10-2)의 화합물 (430 mg, 1.62밀리몰)을 디메틸포름아미드 30 mL에 녹이고 0℃로 냉각하였다. 미네랄 기름에 분산된 60% 소듐하이드라이드(200 mg, 5.00 밀리몰)를 천천히 첨가하였다. 5분간 교반 후 제조예 3-4)의 화합물 (510 mg, 1.69밀리몰)을 천천히 가하였다. 상온에서 2시간 교반 후 디메틸포름아마이드를 감압하에서 제거하고 에틸아세테이트 200 mL를 넣은 후 소금물로 씻어주었다(100 mL x3). 유기층을 무수 황산마그네슘 건조하고 농축한 후 컬럼크로마토그래피하여(디클로로메탄/메탄올=98/2, v/v) 표제의 화합물 672 mg (1.36밀리몰)을 84%의 수율로 얻었다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 0.67(t, 3H), 2.32(s, 3H), 3.85(q, 2H), 4.85(s, 2H), 4.91(s, 2H), 5.88(s, 2H), 6.43(s, 1H), 6.49-6.60(sd, 2H), 6.72(d, 1H), 7.20(d, 1H), 7.30-7.46(m, 4H), 7.51(s, 1H), 7.73(d, 1H), 7.78(d, 1H), 7.82(d, 1H)

FAB 480 (M+H), C₂₉H₂₅N₃O₄(M)

8-2) 3-하이드록시카보닐-1-[4-메틸-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-1H-이미다졸-5-일메틸]-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

실시예 8-1)의 화합물 (550mg, 1.1밀리몰)를 에탄올/물(50 mL/50 mL) 혼합 용매에 녹이고 수산화 칼륨(185 mg, 3.3밀리몰)을 첨가하였다. 8시간동안 가열환류시킨 후, 에탄올을 감압 하에서 제거하고 6N 염산수용액으로 pH 7-8 정도로 조정한 후 에틸아세테이트(100 mL x3)로 추출하였다. 유기층을 무수 황산마그네슘으로 건조하고 농축한 후 컬럼크로마토그래피하여(디클로로메탄/메탄올=93/7, v/v) 표제의 화합물 370 mg(0.79밀리몰)을 72%의 수율로 얻었다.

¹H NMR(DMSO) 2.26(s, 3H), 5.22(s, 2H), 5.31(s, 2H), 5.91(s, 2H), 6.60-6.70(m, 3H), 6.80(d, 2H), 7.23(d, 1H), 7.29(s, 1H), 7.31-7.49(m, 2H), 7.64(d, 1H), 7.81(d, 1H), 7.89(d, 1H), 8.44(brs, 1H)

FAB 452(M+H), C₂₇H₂₁N₃O₄(M)

8-3) 3-(4-하이드록시피페라진-1-일)카보닐-1-[ 4-메틸-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-1H-이미다졸-5-일메틸]-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

실시예 8-2)의 화합물 (90 mg, 0.20밀리몰)를 디메틸포름아미드 30 mL에 녹이고 상온에서 제조예 14의 화합물 (42 mg, 0.24밀리몰), 트리에틸아민(0.084mL, 0.60밀리몰), EDC(57mg, 0.30밀리몰), HOBT(40 mg, 0.30밀리몰)를 순서대로 첨가하였다. 8시간동안 교반한 후, 디메틸포름아미드를 감압하에서 제거하고 에틸아세테이트(150 mL)를 첨가하고 소금물(100 mL x3)로 씻어주었다. 유기층을 무수 황산마그네슘으로 건조하고 농축한 후 컬럼크로마토그래피하여 (디클로로메탄/메탄올 = 93/7, v/v) 표제의 화합물 59 mg(0.11밀리몰)을 55%의 수율로 얻었다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 1.25(brs, 2H), 1.72(brs, 2H), 2.33(s, 3H), 2.45-2.85(brs, 4H), 4.88(s, 2H), 4.94(s, 2H), 5.90(s, 2H), 6.45(s, 1H), 6.51(d, 1H), 6.59(s, 1H), 6.71(d, 1H), 7.04(s, 1H), 7.19-7.56(m, 5H), 7.81(d, 1H), 7.86(d, 1H), 8.00(d, 1H)

FAB 536 (M+H), C₃₁H₂₉N₅O₄(M)

8-4) 3-(4-메톡시피페라진-1-일)카보닐-1-[4-메틸-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질) -1H-이미다졸-5-일메틸]-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

실시예 8-3) 의 화합물 56 mg(0.11 밀리몰), 메틸아이오다이드 31 mg(0.22 밀리몰), 수산화칼륨 23 mg (0.44 밀리몰)을 디메틸설폭사이드 3 mL에 넣어 한시간 반응시켰다. 반응 후 에틸아세테이트 15 mL를 첨가하고 물 10 mL, 포화탄산수소나트륨 10 mL로 씻어주었다. 유기층을 무수황산나트륨으로 건조하였다. 유기용매를 감압하에서 제거하고 컬럼 크로마토그래피(용매 : 디클로로메탄/메탄올(93/7) 하여 표제의 화합물 11 mg (0.02밀리몰)을 19% 수율로 얻었다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 1.24(br, 2H), 1.68(br, 4H), 2.33(s, 3H), 2.59(br, 2H), 3.26(s, 3H), 4.81(s, 2H), 4.91(s, 2H), 5.90(s, 2H), 6.42(s, 1H), 6.49(d, 2H), 6.61(s, 1H), 6.69(d, 1H), 7.03(s, 1H), 7.18(s, 1H), 7.29(d, 1H), 7.30(d, 1H), 7.35-7.42(m, 2H), 7.39(s, 1H), 7.78(d, 1H), 7.82(d, 1H), 7.99(d, 1H)

FAB 564 (M+H). C₃₃H₃₃N₅O₄(M)

실시예 9 : 1-[1-(2-메톡시펜에틸)-2-메틸-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

제조예 6-4)의 화합물과 제조예 11의 화합물을 사용하여 실시예 1의 방법으로 75 % 수율로 표제화합물을 합성하였다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 1.09(br, 2H), 1.70-2.10(br+s, 5H), 2.30(s, 3H), 2.76(t, 2H), 3.00(br, 2H), 3.31(br, 2H), 3.39(s, 3H), 3.93(t, 2H), 4.79(s, 2H), 6.70(d, 1H), 6.84(m, 2H), 6.90(m, 1H), 6.94(d, 1H), 7.09(d, 1H), 7.25(m, 1H), 7.32(m, 1H), 7.30-7.50(m, 3H), 7.74(d, 1H), 7.81(d, 1H), 8.02(d, 1H)

FAB 748(M+H)

실시예 10 : 1-[1-(3-에톡시프로필)-2-메틸-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

문헌에 따라 합성한 1-[1-(3-에톡시프로필)-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤(참고문헌:PCT/KR 98/00377) 49 mg (0.1밀리몰)을 테트라하이드로퓨란 4 mL 에 녹이고 반응액을 -78℃로 냉각시켰다. n-부틸리튬용액 48 ㎕ (2.5 N 핵산용액, 0.12 밀리몰) 를 가하고 디메틸설페이트 16 mg (0.13 밀리몰)을 가하였다. 1시간 반응 후 용매를 제거한 후 HPLC로 분리하여 표제화합물의 트리플로로아세트산염 11 mg 을 얻었다.

¹H NMR(CDCl₃+CH₃OD) δ1.08(t, 3H), 1.74(br, 2H), 2.18(s, 3H), 2.61(s, 3H), 2.84(br, 2H), 3.37(t, 2H), 3.39(q, 2H), 3.49(br, 4H), 4.07(t, 2H),5.25(s, 2H), 6.84(s, 1H), 7.21(s, 1H), 7.31(d, 1H), 7.50-7.60(m, 4H), 7.75-7.91(m, 3H)

FAB 500 (M+H). C₃₀H₃₇N₅O₂(M)

실시예 11 : 1-[1-(3-에톡시프로필)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

제조예 11)의 화합물 (130mg, 0.407밀리몰)을 디메틸포름아미드 30 mL에 녹이고 0℃로 냉각하였다. 미네랄 기름에 분산된 60%소듐하이드라이드(60 mg, 0.60)를 천천히 첨가하였다. 5분간 교반 후 제조예 9-4)의 화합물 (130 mg, 0.53밀리몰) 을 천천히 가하였다. 상온에서 2시간 교반 후 디메틸포름아마이드를 감압하에서 제거하고 에틸아세테이트 200mL를 넣은 후 소금물로 씻어주었다(100 mL x3). 유기층을 무수 황산마그네슘 건조하고 농축한 후 컬럼크로마토그래피하여 (에틸아세테이트/디클로로메탄/메탄올 = 60/30/10, v/v) 표제의 화합물 115 mg (0.230밀리몰)을 57%의 수율로 얻었다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 1.15(brs, 2H), 1.16(t, 3H), 1.72(m, 2H), 1.81(brs, 2H), 1.87(s, 3H), 2.32(s, 3H), 2,95(brs, 2H), 3.27(t, 2H), 3.29(brs, 2H), 3.41(q, 2H), 3.94(t, 2H), 5.09(s, 2H), 6.68(s, 1H), 7.08(s, 1H), 7.32(d, 1H), 7.39-7.51(m, 4H), 7.76(d, 1H), 7.82(d, 1H), 8.02(d, 1H)

FAB 500 (M+H). C₃₀H₃₇N₅O₂(M)

실시예 12: 1-[1-(3-벤질옥시프로필)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

제조예 11의 화합물 (104mg, 0.326 밀리몰)을 디메틸포름아마이드 (3mL) 에 녹이고 0℃로 냉각하였다. 미네랄 기름에 분산된 60% 소듐하이드라이드 (40 mg, 1 밀리몰)을 가하였다. 5분간 교반 후 제조예 7-6)의 화합물 (94 mg, 0.298밀리몰)을 가하였다. 상온에서 2시간 교반 후 에틸아세테이트 50 mL를 넣은 후 소금물로 씻어주었다(20mL x3). 유기층을 무수 황산마그네슘으로 건조하고 농축한 후 컬럼크로마토그래피 하여 (디클로로메탄/메탄올=90/10, v/v) 표제의 화합물 110 mg (0.196밀리몰) 을 66% 수율로 얻었다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 1.10(brs, 2H), 1.63-1.95(m, 4H), 1.86(s, 3H), 2.31(s, 3H), 2.94(brs, 2H), 3.25-3.45(brs t, 4H), 3.94(t, 2H), 4.43(s, 2H), 5.05(s, 2H), 6.63(s, 1H), 7.04(s, 1H), 7.25-7.55(m, 10H), 7.77(d, 1H), 7.83(d, 1H), 8.00(d, 1H)

FAB 562 (M+H). C₃₅H₃₉N₅O₂(M)

실시예 13 : 1-[1-(3-벤질옥시프로필)-4메틸-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-[N-(2-메톡시에틸)-N-메틸]카바모일-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

제조예 10)의 화합물과 제조예 7-6)의 화합물을 사용하여 71%의 수율로 표제화합물을 합성하였다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 1.77(m, 3H), 2.31(s, 3H), 2.39(brs, 2H), 2.72(brs, 1H), 3.02(brs, 3H), 3.07(brs, 1H), 3.31(brs, 1H), 3.36(t, 2H), 3.94(t, 2H), 4.44(s, 2H), 5.05(s, 2H), 6.63(s, 1H), 6.99(s, 1H), 7.25-7.48(m, 10H), 7.75(d, 1H), 7.83(d, 1H), 8.04(d, 1H)

FAB 551 (M+H). C₃₄H₃₈N₄O₃(M)

실시예 14 : 1-{1-[3-(2-클로로벤질옥시)프로필]-4-메틸-1H-이미다졸-5-일메틸}-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

제조예 11)의 화합물(83 mg, 0.26밀리몰)을 디메틸포름아미드 30 mL에 녹이고 0℃로 냉각하였다. 미네랄 기름에 분산된 60% 소듐하이드라이드(20 mg, 0.50 밀리몰)를 천천히 첨가하였다. 5분간 교반 후 제조예 8-5)의 화합물(100 mg, 0.29밀리몰) 을 천천히 가하였다. 상온에서 2시간 교반 후 디메틸포름아마이드를 감압하에서 제거하고 에틸아세테이트 200 mL를 넣은 후 소금물로 씻어주었다(100 mL x3). 유기층을 무수 황산마그네슘 건조하고 농축한 후 컬럼크로마토그래피하여(에틸아세테이트/디클로로메탄/메탄올=60/30/10, v/v) 표제의 화합물(72 mg, 0.12밀리몰)을 46%의 수율로 얻었다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 1.09(brs, 2H), 1.63-1.95(m, 4H), 1.85(s, 3H), 2.31(s,3H), 2.92(brs, 2H), 3.40(brs, 2H), 3.43(t, 2H), 3.95(t, 2H), 4.52(s, 2H), 5.06(s, 2H), 6.63(s, 1H), 7.00(s, 1H), 7.15-7.55(m, 9H), 7.76(d, 1H), 7.82(d, 1H), 8.00(d, 1H)

FAB 597 (M+H). C₃₅H₃₈ClN₅O₂(M)

실시예 15 : 1-{1-[3-(2-클로로벤질옥시)프로필]-4-메틸-1H-이미다졸-5-일메틸}-3-[N-(2-메톡시에틸)-N-메틸]카바모일-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

제조예 10)의 화합물(91mg, 0.30밀리몰)을 디메틸포름아미드 30 mL에 녹이고 0℃로 냉각하였다. 미네랄 기름에 분산된 60% 소듐하이드라이드(35 mg, 0.88 밀리몰)를 천천히 첨가하였다. 5분간 교반 후 제조예 8-5)의 화합물(114mg, 0.33밀리몰) 을 천천히 가하였다. 상온에서 2시간 교반 후 디메틸포름아마이드를 감압하에서 제거하고 에틸아세테이트 200 mL를 넣은 후 소금물로 씻어주었다(100 mL x3). 유기층을 무수 황산마그네슘 건조하고 농축한 후 컬럼크로마토그래피하여(디클로로메탄/메탄올=98/2, v/v) 표제의 화합물(93 mg, 0.16밀리몰)을 53%의 수율로 얻었다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 1.80(m, 2H), 2.32(s, 3H), 2.39(brs, 2H), 2.71(brs, 1H), 3.02(brs, 3H), 3.08(brs, 1H), 3.32(brs, 1H), 3.32(t,2H), 3.98(t, 2H), 4.53(s, 2H), 5.06(s, 2H), 6.64(s, 1H), 7.00(s, 1H), 7.17(t, 2H), 7.50-7.26(m, 9H), 7.75(d, 1H), 7.83(d, 1H), 8.05(d, 1H)

FAB 586 (M+H). C₃₄H₃₇ClN₄O₃(M)

실시예 16 : 1-[1-(3-벤질옥시프로필)-2-메틸-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

문헌에 따라 합성한 1-[1-(3-벤질옥시프로필)-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤(참고문헌:PCT/KR 98/00377) 55 mg (0.1밀리몰)을 테트라하이드로퓨란 4 mL 에 녹이고 반응액을 -78℃로 냉각시켰다. n-부틸리튬용액 48 ㎕ (2.5 N 핵산용액, 0.12 밀리몰) 를 가하고 디메틸설페이트 16 mg (0.13 밀리몰)을 가하였다. 1시간 반응 후 용매를 제거한 후 HPLC로 분리하여 표제화합물의 트리플로로아세트산염 14 mg 을 얻었다.

¹H NMR(CH₃OD+CDCl₃) δ 1.84(m, 2H), 2.13(s, 3H), 2.60(s, 2H), 3.21(br, 4H), 3.37(t, 2H), 3.92(br, 4H), 4.12(t, 2H), 4.30(s, 2H), 5.14(s, 2H), 7.07-7.38(m, 12H), 7.76(m, 3H)

FAB 500 (M+H). C₃₀H₃₇N₅O₂(M)

실시예 17 : 1-[1-(3-벤질옥시프로필)-2-메틸-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-[N-(2-메톡시에틸)-N-메틸]카바모일-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

문헌에 따라 합성한 1-[1-(3-벤질옥시프로필)-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-[N-(2-메톡시에틸)-N-메틸]카바모일-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤(참고문헌:PCT/KR98/00377) 54 mg (0.1밀리몰)을 테트라하이드로퓨란 4 mL 에 녹이고 반응액을 -78℃로 냉각시켰다. n-부틸리튬용액 48 ㎕ (2.5 N 핵산용액, 0.12 밀리몰) 를 가하고 디메틸설페이트 16 mg (0.13 밀리몰)을 가하였다. 1시간 반응 후 용매를 제거한 후 HPLC로 분리하여 표제화합물의 트리플로로아세트산염 13 mg 을 얻었다.

¹H NMR(CDCl₃) δ 1.86(m, 2H), 2.42(s, 2H), 2.60-2.82(m+s, 5H), 3.00-3.05(m+s, 4H), 3.10(s, 2H), 3.34(s, 2H), 3.43(t, 2H), 4.03(t, 2H), 4.43(s, 2H), 5.14(s, 2H), 6.63(s, 1H), 7.03(s, 1H), 7.15-7.31(m, 5H), 7.43(m, 5H), 7.79(d, 1H), 7.85(d, 1H), 7.93(d, 1H)

FAB 551 (M+H). C₃₄H₃₈N₄O₃(M)

실시예 18: 1-[1-(펜에틸)-2-메틸-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

문헌에 따라 합성한 1-[1-(펜에틸)-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤(참고문헌:PCT/KR 98/00377) 64 mg (0.13 밀리몰)을 테트라하이드로퓨란 4 mL 에 녹이고 반응액을 -78℃로 냉각시켰다. n-부틸리튬용액 66 ㎕ (2.5 N 핵산용액, 0.16 밀리몰) 를 가하고 디메틸설페이트 21 mg (0.16 밀리몰)을 가하였다. 1시간 반응 후 용매를 제거한 후 HPLC로 분리하여 표제화합물의 트리플로로아세트산염 13 mg 을 얻었다.

¹H NMR(CH₃OD+CDCl₃) δ 2.00-2.30(br+s, 5H), 2.39(t, 2H0, 2.70-3.10(br, 6H), 4.13(t, 2H), 4.65(s, 2H), 6.98(m, 2H), 7.10-7.60(m, 10H), 7.89(m, 3H)

FAB 518 (M+H). C₃₃H₃₅N₅O (M)

실험예 1 : Ras 파네실 전이효소 억제능 분석

본 실험에서는 폼프리아노 등의 방법(참조:Pompliano et al., Biochemistry 31.3800(1992)) 등의 개선된 방법을 이용하였다. 즉, 유전자 재조합 기술에 의해 제조된 Ras 파네실 전이효소를 사용하였으며, 기질로서는 H-Ras(H-Ras-CVLS)와 K-Ras의 카복시 말단 다염기성 라이신 도메인을 치환시킨 H-Ras와의 결합단백질(참조:특허출원 제97-14409호)을 기 보고된 방법(참조: Chung et al., Bichimica et Biophysica Acta 1129, 278(1992)) 에 따라 정제하여 사용하였다.

효소 반응은 염화칼륨25 mM, 염화마그네슘 25 mM, 디티티(DTT)10 mM 디티티 및 염화아연 50 mM을 함유하는 50 ㎕의 50 mM 소듐 히피스 완충용액에서 수행하였으며, Ras 기질 단백질 1.5 μM, 트리튬-파네실 피로 포스페이트 0.15 mM 및 파네실 전이효소4.5 nM이 사용되었다. 파네실 전이효소를 첨가하고 37℃에서 30분간 반응을 지속시킨 후 1몰의 염산을 함유한 에탄올 용액 1밀리리터를 첨가하여 반응을 정지시켰다. 생성된 침전물을 필터바인딩을 위한 호퍼 하베스터(호퍼 #FH 225V)를 사용하여 GF/B 필터에 흡착시킨후, 에탄올을 사용하여 세척하고, 건조시킨필터의 방사능을 LKB 베타 카운터를 사용하여 측정하였다. 효소 역가검정은 Ras 기질 단백질과 파네실 효소의 농도가 정량적 역가를 나타내는 기질 불포화 상태에서 측정되었으며 합성된 화합물은 디메틸 설폭사이드(DMSO) 용매에 용해하여 전체 반응액의 5 % 이내에서 첨가하여 효소 저해능을 평가하였다. 효소 저해능은 시료가 없는 상태에서 Ras 기질 단백질에 도입된 파네실량에 대해 시험화합물 존재하에서 측정된 파네실 도입량을 백분율로 표시하였으며, 50%의 효소활성을 저해하는 농도를 각 시험화합물의 IC₅₀으로 결정하였다. 시험화합물의 선택적 저해능을 평가하기 위한 제라닐제라닐 전이효소는, 샤버 등의 방법(참조: Schaber etal. J. Biol chem. 265:14701(1990))을 변형하여 소뇌로부터 정제하여 사용하였으며, 파네실 전이효소 반응과 유사 조건에서 제라닐제라닐 전이 효소의 특이적 기질인 제라닐 제라닐 피로 포스페이트와 Ras-CVIL 기질 단백질을 사용하여 실험을 수행하였다.

실험예 2 : 세포내 Ras 파네실 전이효소의 억제효능 분석

본 실험에서는 돌연 변이에 의해 형질 전환 활성을 갖는 C-Harvey-Ras 단백질을 발현하는 Rat2 세포주와 K-Ras의 카복시 말단의 다염기성 라이신 도메인으로 치환한 H-Ras와 결합 단백질로 형질전환된 Rat2세포주(참조: 특허출원 제97-14409호)를 사용하였으며, 실험 방법은 드크루등의 방법 (참조: Declue. J. E. et al., Cancer Research 51:712(1991))을 변형시켜 다음과 같이 수행하였다.

형질 전환된 Rat2 섬유아세포 (fibroblast) 세포주를 60mm 세포 배양 디쉬에 3x105 세포를 분주하여 37℃ 세포 배양기에서 48시간 배양함으로써 50%이상 밀도로성장시킨 후 시험화합물로 처리하였다. 이때 시료용매는 디메틸설폭사이드(DMSO)를 사용하였으며 대조군, 시험군 모두 디메칠설폭사이드 농도를 1%로 사용하였다. 시료를 처리한 뒤 4시간 후에 배지 1 ml당 150 μCi의 방사성 동위원소[³⁵S]로 표지된 메치오닌을 첨가하고 20시간 배양한 후 생리적 식염수로 세포를 세척하였다. 냉각된 세포 용해 완충 용액 ( 염화마그네슘5mM , 디티티 1mM , NP40 1%, EDTA 1mM , PMSF 1mM, 루펩틴 2 mM, 펩스타틴에이2 mM 및 안티페인2 mM을 포함하는 소듐히피스50 mM) 1 ml를 가하여 세포를 용해시킨 후 세포가 용해된 상등액을 고속원심분리(12,000g x 5분)에 의해 수득하였다. 상등액의 방사성 동이원소 표지량을 측정하여 면역 침전 반응시 정량적 결과를 얻을수 있도록 표준화하였다. 그후 반응액에 Ras 단백질에 특이적 결합을 하는 단일클론 항체, Y13-259(참조: Furth, M.E. et al., J. Virol 43:294(1982))를 가하고 4℃에서 15시간동안 반응시켰다. 이 용액에 다시 고트에서 유래된 쥐의 면역글로블린에 대한 항체가 결합된 Protein A-아가로즈 현탁액을 넣어 1시간 4℃에서 반응시킨 후 면역 반응 침전물을 비특이적 결합물을 제거하기 위해 완충용액(염화나트륨50 mM, 소듐 디옥시 콜레이트 0.5%, 엔피 40 0.5% 및 엔피 40 0.1% 를 포함하는 트리스 클로라이드 50 mM 완충용액)으로 세척하였다. 전기영동 방법을 사용하여, 침전물을 전기영동 시료 완충액에 끓인 후 13.5%의 SDS 폴리아크릴아마이드 젤을 사용 전기영동을 수행하였다. 전기영동후 젤을 고정하고 건조시킨후 X-ray 필름에 감광시킨 후 현상 인화하였다. 세포내 Ras 파네실 전이효소의 억제 효능은 Ras 단백질의 파네실이 결합된 밴드와 결합되지 않은 밴드의 강도를 측정하여 50%의 파네실 결합이 저해된 시험화합물의농도(IC₅₀)로 나타내었다.

하기 표 2 에는 본 발명에 다른 대표적인 화합물들의 억제효능을 나타내었다. 여기서 IC₅₀는 실험예 1을 수행한 결과 얻어진 데이터이고 CIC₅₀은 실험예 2를 수행한 결과 얻어진 데이터이다.

[표 2] 대표적인 화합물들의 억제 효능

Claims (8)

1. 하기 화학식 1의 화합물, 그의 약제학적으로 허용되는 염 또는 이성체 :

   [화학식 1]

   상기식에서,

   A는 저급알킬, 또는 하기 구조식의 그룹 중 선택된 어느 하나를 나타내며,

   여기에서

   m 및 n 은 각각 독립적으로 0 내지 4 의 정수이고,

   R₁및 R₅는 각각 독립적으로 수소, 저급알킬, 저급알콕시 또는 할로겐을 나타내며,

   R₂및 R₄는 각각 독립적으로 수소, 저급알킬, 저급알콕시, 할로겐 또는 하이드록시를 나타내고,

   R₃은 수소, 저급알킬, 저급알콕시, 하이드록시, 저급알킬로 치환된 2차아민, C₃-C₆사이클로알킬, C₃-C₆사이클로알킬로 치환된 저급알킬, 할로겐, 페닐 또는 페녹시를 나타내며,

   R₆는 수소 또는 저급알킬을 나타내고,

   R₇은 저급알킬, 방향족 또는 할로겐화합물이 치환된 방향족 화합물을 나타내며,

   B 는 수소, 저급알킬, 저급알킬로 치환된 티오 또는 NH₂를 나타내고,

   D 는 수소(단, B 가 수소인 경우는 D에서 수소를 제외함), 저급알킬, 할로겐, 저급알킬로 치환된 티오, NO₂또는 NH₂를 나타내며,

   E 는 나프틸 또는 페닐을 나타내고,

   F 는 하기 식으로 나타내어지는 그룹중에 선택된 어느 하나를 나타내며,

   여기에서,

   R₈은 저급알킬 또는 저급알콕시를 나타내고,

   R₉는 저급알킬을 나타내며,

   R₁₀은 수소 또는 저급알킬을 나타내고,

   G 는 수소, 저급알킬, 저급알킬이 치환된 티오 또는 페닐을 나타낸다.
2. 제 1 항에 있어서,

   A는 하기 구조식의 그룹 중 선택된 어느 하나를 나타내며,

   여기에서

   m 은 1 또는 2 의 정수이고,

   n 은 3 의 정수이며,

   R₁및 R₅는 각각 독립적으로 수소 또는 저급알콕시를 나타내고,

   R₂, R₃, R₄및 R₆은 각각 수소를 나타내며,

   R₇은 저급알킬, 방향족 또는 할로겐화합물이 치환된 방향족 화합물을 나타내고,

   B 는 수소, 저급알킬, 저급알킬로 치환된 티오 또는 NH₂를 나타내며,

   D 는 수소(단, B 가 수소인 경우는 D에서 수소를 제외함), 저급알킬, 할로겐, 저급알킬로 치환된 티오, NO₂또는 NH₂를 나타내고,

   E 는 나프틸 또는 페닐을 나타내며,

   F 는 하기식으로 나타내어지는 그룹중에 선택된 어느하나를 나타내고,

   여기에서,

   R₈은 저급알킬 또는 저급알콕시를 나타내며,

   R₉및 R₁₀은 각각 저급알킬을 나타내고,

   G 는 수소, 저급알킬, 저급알킬이 치환된 티오 또는 페닐을 나타내는 화학식 1의 화합물, 그의 약제학적으로 허용되는 염 또는 이성체.
3. 제 2 항에 있어서, 화학식 1의 화합물이

   1-[2-메틸-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

   1-[4-메틸-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

   1-[2-아미노-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

   1-[1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-2-메틸티오-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

   1-[4-아이오도-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

   1-[1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-4-나이트로-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

   1-[4-아미노-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

   3-(4-메톡시피페라진-1-일)카보닐-1-[4-메틸-1-(3,4-메틸렌디옥시벤질)-1H-이미다졸-5-일메틸]-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

   1-[1-(2-메톡시펜에틸)-2-메틸-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

   1-[1-(3-에톡시프로필)-2-메틸-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

   1-[1-(3-에톡시프로필)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

   1-[1-(3-벤질옥시프로필)-4-메틸-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

   1-[1-(3-벤질옥시프로필)-4메틸-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-[N-(2-메톡시에틸)-N-메틸]카바모일-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

   1-{1-[3-(2-클로로벤질옥시)프로필]-4-메틸-1H-이미다졸-5-일메틸}-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

   1-{1-[3-(2-클로로벤질옥시)프로필]-4-메틸-1H-이미다졸-5-일메틸}-3-[N-(2-메톡시에틸)-N-메틸]카바모일-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

   1-[1-(3-벤질옥시프로필)-2-메틸-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤

   1-[1-(3-벤질옥시프로필)-2-메틸-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-[N-(2-메톡시에틸)-N-메틸]카바모일-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤, 또는

   1-[1-(펜에틸)-2-메틸-1H-이미다졸-5-일메틸]-3-(4-메틸피페라진-1-일)카보닐-4-(나프탈렌-1-일)-1H-피롤인 화학식 1의 화합물, 그의 약제학적으로 허용되는 염 또는 이성체
4. (1) 하기 화학식 2의 화합물을 용매 중에서 염기의 존재하에 하기 화학식 3의 화합물과 반응시켜 하기 화학식 1a 또는 화학식 1b 의 화합물을 수득하거나

   (2) 상기 수득한 화학식 1a 의 화합물을 염기 존재하에서 반응시켜 하기 화학식 1b 의 화합물을 수득함을

   특징으로 하여 하기 화학식 1의 화합물, 그의 약제학적으로 허용되는 염 또는 이성체를 제조하는 방법 :

   [화학식 2]

   [화학식 3]

   [화학식 1a]

   [화학식 1]

   상기식에서,

   A, B, D, E, F, 및 G는 제 1 항에서 정의된 바와 같고

   B' 은 저급알킬, 저급알킬로 치환된 티오 또는 NH₂를 나타낸다.
5. 약제학적으로 허용되는 담체와 함께 유효성분으로 제 1 항에 따르는 화학식 1의 화합물, 그의 약제학적으로 허용되는 염 또는 이성체를 함유하는 항암제 조성물.
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