KR100349818B1 - 항바이러스분말,항바이러스엑스및이분말및/또는엑스를함유하는제제 - Google Patents
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Abstract
항바이러스 작용을 가진 약용식물을 채취후 즉시 급속가열하여 효소활성을 실활시킨 다음 더욱 저온건조하고, 급속가열후 혹은 저온 건조후에 분말화하여 수득되는 약용식물 유래의 항바이러스 분말을 제공한다. 더욱이 이 분말을 열수 혹은 저급 알코올로 추출하여 항바이러스 엑스 (extract) 로 할 수가 있다.
이들 분말 및 엑스를 유효량 함유하는 제제, 특히 분말제로 하여 이용된다.
약용식물로서는 옻나무의 어린 잎 및 당느릅 나무의 꽃부분을 처리하여 얻어지는 분말과, 엑스가 특히 유효하다.
Description
옛날부터 여러가지 세균과 바이러스 감염으로 고통을 받아온 인간의 역사에 있어서 항생물질의 발견과 바이러스에 대한 백신의 개발이 금세기의 의료에 있어서 큰 발전을 가져왔다. 그러나 아직까지 수많은 만성 질활과 감염성 질환이 심각한 사회적 문제로 되어있다.
즉, 인간의 성인 T 세포 백혈병 (HALT 로 약칭되고 있음) 을 유발하는 인간 면역결핍 바이러스 (HIV 로 약칭되고 있음 ; Barre-Sinoussi et al., 1983 ; Gallo et al., 1984) 와 후천성 면역결핍 증후군 (AIDS 로 약칭되고 있음) 을 유발하는 인간 T 세포 임파영양성 바이러스 (HTLV 로 약칭되고 있음; Yoshida et al., 1984) 등의 바이러스에 의한 감염예방과 이들 질환의 치료가 오늘날 최대의 과제로 되어있다.
한약과 이 한약을 구성하는 생약의 일부에 종래부터 항바이러스 작용이 있는것으로 이제까지 믿고 있는데, 근래에 와서 항바이러스 작용을 가진 생약에 대해 많은 연구와 보고가 있다. 생약의 약 절반정도에 대하여 항바이러스 활성이 해명되어 있으나 활성이 해명되지 아니한 생약도 아직 많이 있다. 항바이러스 작용 메카니즘에 대해서는 현재 구체적인 연구가 진행되고 있다. 면역조절 활성계를 통하여 항바이러스 작용을 한다는 몇가지 보고가 있다.
한편, 분자생물학상의 중심적인 정설, 즉 데옥시리보오스 헥산 (DNA 로 약칭되오 있음) → 메신저 리보핵산 (mRNA 로 약칭되고 있음) → 단백질의 흐름을 따라 항바이러스제의 개발 가능성이 있다.
즉, 위에 나온 방향과는 역방향으로 리보핵산 (RNA 로 약칭되고 있음) 으로 부터 데옥시리보핵산으로의 역방향으로 일어나는 전사 (transcription) 가 자연계에서 일어나고 있는데, 이것은 1970 년에 Temin 과 Baltimore 의 역전사 효소 (reverse transcriptase ; RTV 로 약칭되고 있음) 의 발견에 의해 지지되었다 (Baltimore, 1970; Temin and Mizutani, 1970).
레트로바이러스 (retrovirus; reverse transcriptase containing oncovirus) 는 그 이름으로 부터 자명하다시피 역전사 효소를 가진 바이러스이다.
레트로바이러스는 1980 년대에 와서 인간의 성인 T 세포 백혈병과 그 전파가 우려되고 있는 AIDS 를 유발하는 것으로 인정되었기 때문에 특히 주목을 받고 있다.
그 후, 레트로바이러스에 대해 많은 연구가 수행되어 왔고, 현재 유전자 레벨의 상세한 정보도 보고되어 있어, 바이러스의 라이프 사이클도 명백하게 되어 있다 (Meek et al., 1990a).
항바이러스제 개발에 있어서의 목표는 바이러스의 세포에 대한 결합과 바이러스 리보핵산으로 부터 데옥시리보핵산으로의 역전사 활성을 억제하는 방법이 고려되고 있다. 역전사 저해활성을 가진 것으로 보고된 대표적인 화합물로서는 뉴클레오티드, 항생물질, 천연물 등이 있다.
이들 중에서 뉴클레오티드 유도체가 그 수가 가장 많은데 역전사 효소기질의 경쟁적 저해 작용을 목적으로 합성되고 있다 (Mitsuya and Broder, 1987).
아지도티미딘 (azidothymidine), 2' , 3' -디데옥시시티딘 및 2', 3' -디데옥시노신은 이들 역전사효소 저해제의 대표적인 것들인데 AIDS 치료약으로 인가된 몇 안되는 의약이다.
발명의 개시
본 발명의 목적은 역전사 효소의 효소활성을 저해할 수 있는 것으로서 약용 식물에서 유래하는 항바이러스 분말 및 이 분말로 부터 저해성분을 추출한 항바이러스 엑스를 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 AIDS 의 병원체인 HIV-I 역전사 효소와 마우스 백혈병 바이러스 유래의 역전사 효소에 대한 저해작용을 가진 항바이러스 분말 및 바이러스 엑스를 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 위에 나온 분말 및/또는 엑스를 함유하는 항바이러스 제제를 제공하는 것이다.
본 발명의 약용 식물 유래의 항바이러스 분말은 아래의 방법으로 제조된다.즉, 항바이러스 작용을 가진 출발원료인 약용식물을 채취하는 즉시 원료중의 효소활성을 실활시키기에 충분한 조건하에서 급속 가열한 다음, 상기 급속 가열된 식물을 -5℃ ∼ +10℃의 저온에서 수분함량 10% 이하가 될때까지 건조하여 약용식물의 분말을 얻는다. 분말을 얻기 위해서는 급속 가열후 또는 저온건조의 어느 단계에서 약용식물을 분말화한다.
항바이러스 엑스를 제조하기 위해서는 약용식물의 분말을 열수 (熱水) 또는 저급 알코올로 추출하고, 필요한 경우에는 이 엑스를 적당히 농축하여도 좋다.
본 발명의 실시에 있어서 이 분말 및/또는 엑스를 유효성분으로 함유한 체제도 제공된다. 이 체제를 에멀젼제, 유제(油劑), 수화제, 분말제 등으로 제제화하여도 좋은데, 분말제가 바람직하다.
본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명의 항바이러스 분말 또는 엑스를 제조하는데 사용되는 항바이러스 작용을 가진 약용식물원료는 항바이러스 작용을 가진 약용식물이면 어느 것이나 사용할 수 있다. 약용식물의 잎, 줄기, 뿌리, 꽃 등을 포함하여 항바이러스 작용 성분을 함유한 부위라면 모두 사용할 수 있다. 특히 일본 옻나무 (Rhus vernicitlua) 의 잎, 바람직하게는 어린 잎과 당느릅 나무 (Ulmus davidianavar. japonica) 의 꽃 부분이 현저한 역전사 효소 저해 작용을 가지고 있어 바람직하게 사용된다. 여기서 옻나무의 "어린 잎" 이라 함은 잎이 유연한 상태의 것으로서 일반적으로 8 주령 이하의 것을 말하는데, 바람직하게는 4 주령 이하이다. 그런데 어린 잎에 관한 위의 정의는 일본 옻나무가 산지에 따라 생장속도가 크게 다르므로 한정적인 것으로 해석해서는 안된다.
항바이러스 분말을 얻자면 약용식물의 필요부분을 채취 후 즉시 급속가열한다. "채취후 즉시" 라는 것은 채취후 3분 내지 약 30 분내에 급속가열하는 것을 의미한다. 즉시 급속가열함으로써 효소에 의해 유효성분의 분해를 어느 정도 방지할 수 있다. "효소활성을 실활시키기에 충분한 조건하에서의 급속가열" 이라 함은 예컨대 가압식 드럼 가열장치를 사용할 경우 80 ∼ 140℃의 온도 범위에서 2 분이내, 바람직하게는 약 1 분정도, 보다 바람직하게는 40 ∼ 50 초 동안 원료를 가열 처리하는 것이다. 또는 전자 레인지 등의 가열 장치도 사용할 수 있다. 이 경우에 있어서, 예컨대 원료의 양에 따라 달라지겠으나 600 W의 출력에서 20 ∼ 50 초 동안 가열하면 활성효소를 실활시킬 수 있다. 이러한 급속가열은 원료중의 성분분해 효소를 실활시키는 조건하에서 실시해야 하며 약용식물의 다른 성분을 가열에 의해 분해하는 조건은 피해야 한다. 성분분해 효소의 실활 또는 파괴로 인하여 분해효소에 의한 다른 식물 성분의 분해를 방지할 수 있어 유효성분 함량의 저하를 방지할 수 있다. 이렇게 하여 급속가열된 원료를 저온건조 처리한다.
저온건조 처리는 -5 ∼ 10℃의 범위에서 한다. 저온건조에 의해 유효성분을 함유한 약용식물 성분의 건조 공정에서의 분해를 방지할 수 있으므로 유효성분 함유량의 저하를 방지할 수 있다. 저온건조는 원료중의 수분함량이 10 wt.% 이하, 바람직하게는 2 ∼ 5 wt.% 가 될 때까지 실시한다.
저온 건조 초리를 위해서 열풍 또는 통풍 건조 장치 및 얼음온도 건조 장치(ice temperature dryer) 중의 한가지 또는 두가지 모두를 사용하여 위에 나온온도 범위에서 원료를 건조시킨다.
얼음 온도 건조 장치는 예컨대 일본국 日本輕金屬 (주) 에서 시판하고 있는 아래의 규격을 가진 것을 사용할 수 있다.
온도 범위 : -5℃ ∼ +10℃
습도 범위 : 50 ∼ 80 % (온도 0℃ ∼ -5℃)
풍속 : 1 ∼ 8 m/초
이 건조기의 얼음 온도 건조실의 칫수는 96 cm × 53 cm × 59 cm 이고, 냉동기의 용량은 2.2 kW 이며 냉매는 예컨대 Flon Q22 이다.
열풍 건조 장치의 예로서는 원적외선 건조 장치가 있는데, 이 원적외선 건조 장치를 사용하면 원료를 원적외선 처리완료후에 얼음온도 건조처리를 한다.
이렇게 하여 건조된 원료를 통상적인 분쇄 장치, 예컨대 콜로이드 밀 등으로 50 ∼ 100 메쉬 ㎛ 의 크기로 분말화 한다. 또는 원료를 잘게 절단하여 분말화해도 좋다.
분쇄 또는 절단은 저온건조 처리후에는 반드시 실시할 필요는 없으나 급속 가열후에는 분말로 하여도 좋은데, 분쇄단계를 필요에 따라 적절히 변경해도 좋다.
이렇게 하여 수득한 항바이러스 분말을 그대로 사용해도 좋고, 또는 유효성분을 열수 또는 저급 알코올로 추출해도 좋다. 추출의 경우에는 저온건조를 반드시 할 필요는 없고 급속가열후에 추출해도 좋다. 추출시에 속슬레 (Soxhlet) 추출기 등의 통상적인 추출기를 사용하여 열수 또는 저급 알코올을 환류시킨다. 저급 알코올의 예로서는 30 ∼ 50 % 의 메틸 알코올 또는 에틸 알코올의 수용액을 들 수 있다. 추출은 일반적으로 환류하에 30 ∼ 60 분 동안 실시한다. 수득한 추출액을 약 0.1 wt.% 의 농도가 될때까지 농축할 수 있다.
농축 엑스는 연한 엑스로서 그대로는 취급이 곤란하므로 묽게하여 사용하는 것이 바람직하다.
즉, 본 발명의 분말 혹은 엑스는 전술한 바와 같이 여러가지 제형으로 하여 사용할 수 있는데 분말제 혹은 수화제로 하여 사용하는 것이 바람직하다.
분말제 혹은 수화제로 하여 항바이러스 분말 또는 엑스를 사용할 경우 전분, 락토오스 덱스트린 등을 보조제로 사용한다. 이 경우에 있어서 항바이러스 분말 및/또는 엑스를 유효량 함유시킨다. 바람직하게는 제제 조성물의 1 wt.% 이상, 보다 바람직하게는 10 wt.% 이상의 함유량으로 하여 함유시킨다. 이 함유량은 다른 제형에도 적용할 수 있다. 본 발명의 항바이러스 분말 및/또는 엑스의 역전사 효소에 대한 저해작용은 실시예에도 있는 바와 같이 여러가지 약용식물을 사용하여 앞서 나온 처리를 하고, 닭의 골수 아구증 바이러스 (avian myeloblastosis virus, 통상적으로 AMV 로 약칭되고 있음) 유래의 역전사 효소를 사용하여 스크리닝한 다음, AIDS 의 병원체인 HIV-1 역전사 효소 및 역전사 효소에 대한 저해 성분에 대해 검토하였다. 더욱이 마우스 백혈병 바이러스 (murine leukemia virus, MULV 로 약칭되고 있음) 유래의 역전사 효소에 대한 저해작용의 비교검토를 한 결과, 옻나무 8 주령 이하, 특히 바람직하게는 4 ∼ 5 주령 이하의 어린 잎, 및 당느릅 나무의 꽃 부분이 특히 저해효과가 양호함을 확인하였다.
이하, 본 발명을 실시예와 제제예에 의해 더욱 상세히 설명한다.
실시예 1
옻나무과 옻나무속 식물의 역전사 효소 저해 효과를 검토하였다. 옻나무 (Rhus vernicitlua), 산옻나무 (Rhus trichocarpa), 양치옻나무 (Rhus ambigna), 백교목 (白膠木) (Rhus javanica), 산황로 (Rhus sylvestris)의 어린 잎을 채취한후 즉시 600 W 의 전자 레인지에서 50 초 동안 가열하는 급속가열처리를 하였다. 이어서 10℃에서 저온건조하고 분쇄하여 각 원료의 분말을 얻었다. 이렇게 하여 얻은 각각의 분말 10 mg 을 열수 10㎖ 로 1 시간 동안 추출하였다. 열수 추출액을 아래의 방법에 따라 역전사 효소 저해 작용에 대해 조사하였다. 즉, 각각의 추출액을 원심분리하여 상청액을 얻어 반응계의 최종 농도가 50.5 ㎍/㎖ 되도록 조정한 다음 RT (역전사 효소) 저해 시험을 하였다. 그 결과는 표 1 에 나와 있다. 이 표는 각 시료의 잎 부분의 RT 저해 작용을 나타내는 것으로서 수치가 작을 수록 저해 작용이 양호하다.
위의 결과로 부터 옻나무 잎부분의 열수 추출액은 강한 역전사 효소 저해 효과를 나타내었으나 기타의 옻나무과 옻나무 식물의 열수 추출액은 현저한 역전사 효소 저해작용이 없음을 알 수 있다.
실시예 2
옻나무의 어린 잎, 옻나무의 고엽 및 당느릅 나무의 어린 잎, 고엽, 꽃 부분을 사용하고, 열수와 에틸 알코올의 30 % 수용액을 사용하여 추출을 한 것 외에는 실시예 1 과 마찬가지 방법으로 처리하였다. 그 결과는 표 2 에 나와 있다.
(주 1) 옻나무 고엽은 일본국의 石川현 Wajima 시에서 3 월 중순에 채취한 것으로서 길이가 5 ∼ 6 cm 의 것임
위의 결과로 부터 옻나무 어린 잎의 급속가열 처리후에 얻은 분말의 열수 추출액과 저급 알코올 추출액 (30% 에틸 알코올) 에서 역전사 효소작용이 나타났으나 옻나무 고엽의 각 추출액에서 역전사 효소 저해 작용이 나타나지 않았음을 알 수있다.
한편 당느릅 나무의 꽃부분에서는 약하기는 하지만 역전사 효소 저해 작용이 있음이 밝혀졌다.
실시예 3
이 실시예에 있어서 옻나무 어린 잎과 당느릅 나무 꽃부분의 혼합물을 사용하여 역전사 효소 저해효과를 조사하였다.
즉, 채취한 옻나무 어린 잎과 당느릅 나무 꽃부분을 즉시 600 W 의 전자레인지에서 급속가열 처리하고 상기 옻나무 어린 잎과 당느릅 나무 꽃부분을 중량으로 1 : 1 (시료 1), 2 : 1 (시료 2) 및 1 : 3 (시료 3) 의 비율로 혼합하여 각 시료를 건조장치로 저온건조후 이것을 분말화하였다.
분말시료를 열수 및 30 % 에틸 알코올로 추출한 추출액 각각을 실시예 1 과 마찬가지로 역전사 효소 저해작용을 측정하였다.
그 결과는 표 3 에 나와 있다.
위대 결과로 부터 옻나무 어린 잎과 당느릅 나무 꽃부분의 혼합물의 엑스는 이 혼합물의 어떠한 상승작용에 의하여 저해 효과가 향상시킴을 알 수 있다.
따라서 이 혼합 엑스는 본 발명의 바람직한 것이다.
본 발명의 항바이러스 분말의 1 : 10 희석물, 혹은 항바이러스 분말을 30 % 에틸 알코올로 가열추출하고 이 추출액을 농축하여 얻은 점성의 엑스로부터 제조한 항바이러스 엑스의 1 : 100 희석물은 역전사 효소 저해작용의 저하를 나타내지 않았으므로 그 효과를 확인할 수 있다.
본 발명은 항 (技) 바이러스 작용을 가진 약용식물로 부터 제조한 항바이러스 분말, 이 분발로 부터 수득되는 항바이러스 엑스 (artiviral extract) 및 이 분말 및/또는 엑스를 함유하는 제제에 관한 것이다.
Claims (9)
- 옻나무의 잎부분 및 당느릅 나무의 꽃부분으로 된 군으로부터 선택되는, 항바이러스 작용을 가진 약용 식물원료를 채취하여 즉시 80 ∼ 140℃에서 급속가열하여 원료 중의 효소활성을 실활시키고, 급속가열된 원료를 -5℃ ∼ +10℃의 저온에서 건조하여 수분함량이 10 % 이하가 되게 하고, 이 원료를 급속 가열후 또는 저온 건조후에 분말화하여 수득되는 약용식물 유래의 항바이러스 분말.
- 제 1 항에 있어서, 상기 원료를 채취후 30 분 이내에 급속가열하는 약용식물 유래의 항바이러스 분말.
- 제 1 항에 있어서, 상기 원료를 2 분 이내에 급속가열하여 효소활성을 실활시키는 약용식물 유래의 항바이러스 분말.
- 제 1 항에 기재된 분말을 유효량 함유하는 항바이러스 제제.
- 제 4 항에 있어서, 유효량이 1 wt.% 이상인 제제.
- 옻나무의 어린 잎, 당느릅 나무의 꽃부분 및 이들의 혼합물로 된 군으로부터 선택되는, 항바이러스 작용을 가진 약용 식물원료를 채취하여 즉시 80 ∼ 140℃에서 급속가열하여 원료 중의 효소활성을 실활시키고, 급속가열된 원료를 -5℃ ∼ +10℃의 저온에서 건조하여 수분함량이 10 % 이하가 되게 하고, 이 원료를 급속 가열후 또는 저온 건조후에 분말화하여 수득되는 약용식물 유래의 항바이러스 분말을 열수 혹은 메틸 알코올 또는 에틸 알코올로 추출하여 얻어지는 약용식물 유래의 항바이러스 엑스.
- 제 6 항에 있어서, 추출후 약 0.1 wt.%의 농도까지 더욱 농축하여 얻어지는 항바이러스 엑스.
- 제 6 항에 기재된 엑스를 유효량 함유하는 항바이러스 제제.
- 제 6 항에 있어서, 유효량이 1 wt.% 이상인 제제.
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