KR100309888B1 - 골다공증 예방 및 치료제 조성물 - Google Patents
골다공증 예방 및 치료제 조성물 Download PDFInfo
- Publication number
- KR100309888B1 KR100309888B1 KR1019990031532A KR19990031532A KR100309888B1 KR 100309888 B1 KR100309888 B1 KR 100309888B1 KR 1019990031532 A KR1019990031532 A KR 1019990031532A KR 19990031532 A KR19990031532 A KR 19990031532A KR 100309888 B1 KR100309888 B1 KR 100309888B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- osteoclasts
- bone
- osteoporosis
- medium
- destruxin
- Prior art date
Links
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 title claims abstract description 25
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title description 10
- 230000002265 prevention Effects 0.000 title description 7
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 5
- 125000002914 sec-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 23
- 125000000896 monocarboxylic acid group Chemical group 0.000 claims description 5
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims 3
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 claims 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 claims 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 18
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 12
- 210000002997 osteoclast Anatomy 0.000 description 56
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 37
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 24
- 208000006386 Bone Resorption Diseases 0.000 description 19
- 230000024279 bone resorption Effects 0.000 description 19
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 18
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 12
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 12
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 9
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 102000003982 Parathyroid hormone Human genes 0.000 description 7
- 108090000445 Parathyroid hormone Proteins 0.000 description 7
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 description 7
- 239000000199 parathyroid hormone Substances 0.000 description 7
- 229960001319 parathyroid hormone Drugs 0.000 description 7
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 6
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 6
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 5
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 5
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 5
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 5
- XENVCRGQTABGKY-ZHACJKMWSA-N chlorohydrin Chemical group CC#CC#CC#CC#C\C=C\C(Cl)CO XENVCRGQTABGKY-ZHACJKMWSA-N 0.000 description 5
- 239000000512 collagen gel Substances 0.000 description 5
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 5
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 4
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 description 4
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 3
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 3
- 230000011164 ossification Effects 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- 210000002303 tibia Anatomy 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NIAYGGCQOYIHAF-OHOJESAGSA-N Destruxin E Chemical compound C([C@@H]1C(=O)N2CCC[C@H]2C(=O)N[C@H](C(N(C)[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H](C)C(=O)NCCC(=O)O1)=O)[C@@H](C)CC)[C@H]1CO1 NIAYGGCQOYIHAF-OHOJESAGSA-N 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- 208000029725 Metabolic bone disease Diseases 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000012050 conventional carrier Substances 0.000 description 2
- 108010056126 destruxin E Proteins 0.000 description 2
- NIAYGGCQOYIHAF-UHFFFAOYSA-N destruxin E Natural products O1C(=O)CCNC(=O)C(C)N(C)C(=O)C(C(C)C)N(C)C(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C2CCCN2C(=O)C1CC1CO1 NIAYGGCQOYIHAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010007093 dispase Proteins 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 230000030991 negative regulation of bone resorption Effects 0.000 description 2
- 230000000361 pesticidal effect Effects 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 2
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GZRXQMYGOOOMFR-KYUXFNSZSA-N (3r,10s,13s,16s,19s,20s)-16-[(2s)-butan-2-yl]-10,11,14,20-tetramethyl-13-propan-2-yl-3-prop-2-enyl-4-oxa-1,8,11,14,17-pentazabicyclo[17.3.0]docosane-2,5,9,12,15,18-hexone Chemical compound O=C1[C@@H](CC=C)OC(=O)CCNC(=O)[C@H](C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H]2[C@@H](C)CCN21 GZRXQMYGOOOMFR-KYUXFNSZSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SARKXLKWFKNUMR-UHFFFAOYSA-N 4-benzamido-5-chloro-2-methylbenzenediazonium;chloride Chemical compound [Cl-].C1=C([N+]#N)C(C)=CC(NC(=O)C=2C=CC=CC=2)=C1Cl SARKXLKWFKNUMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010003694 Atrophy Diseases 0.000 description 1
- 229940078581 Bone resorption inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 108010001789 Calcitonin Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100038520 Calcitonin receptor Human genes 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 102000003951 Erythropoietin Human genes 0.000 description 1
- 108090000394 Erythropoietin Proteins 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000030136 Marchiafava-Bignami Disease Diseases 0.000 description 1
- 241000223201 Metarhizium Species 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- GZRXQMYGOOOMFR-UHFFFAOYSA-N Roseotoxin-B Natural products O=C1C(CC=C)OC(=O)CCNC(=O)C(C)N(C)C(=O)C(C(C)C)N(C)C(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C2C(C)CCN21 GZRXQMYGOOOMFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000011731 Vacuolar Proton-Translocating ATPases Human genes 0.000 description 1
- 108010037026 Vacuolar Proton-Translocating ATPases Proteins 0.000 description 1
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 1
- 239000003929 acidic solution Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- HSFWRNGVRCDJHI-UHFFFAOYSA-N alpha-acetylene Natural products C#C HSFWRNGVRCDJHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000037444 atrophy Effects 0.000 description 1
- 230000037182 bone density Effects 0.000 description 1
- 210000002805 bone matrix Anatomy 0.000 description 1
- 230000004097 bone metabolism Effects 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000002371 cardiac agent Substances 0.000 description 1
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229940105423 erythropoietin Drugs 0.000 description 1
- 125000002534 ethynyl group Chemical group [H]C#C* 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 210000000629 knee joint Anatomy 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000003071 parasitic effect Effects 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- -1 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N potassium;[2-butyl-5-chloro-3-[[4-[2-(1,2,4-triaza-3-azanidacyclopenta-1,4-dien-5-yl)phenyl]phenyl]methyl]imidazol-4-yl]methanol Chemical compound [K+].CCCCC1=NC(Cl)=C(CO)N1CC1=CC=C(C=2C(=CC=CC=2)C2=N[N-]N=N2)C=C1 OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 108700038288 rhodamine-phalloidin Proteins 0.000 description 1
- 108010083864 roseotoxin B Proteins 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 210000003625 skull Anatomy 0.000 description 1
- 238000007447 staining method Methods 0.000 description 1
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 210000000623 ulna Anatomy 0.000 description 1
- 210000001364 upper extremity Anatomy 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
- QYSXJUFSXHHAJI-YRZJJWOYSA-N vitamin D3 Chemical compound C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C\C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-YRZJJWOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/12—Cyclic peptides, e.g. bacitracins; Polymyxins; Gramicidins S, C; Tyrocidins A, B or C
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/15—Depsipeptides; Derivatives thereof
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
본 발명은 데스트룩신(destruxin) 유도체를 유효성분으로 함유하는 골다공증 예방 및 치료제 조성물에 관한 것으로 본 발명 곰팡이 유래의 사이클로뎁시펩타이드(cyclodepsipeptide)는 파골세포에서 부갑상선호르몬(PTH)의 존재와 관계없이 파골세포 활성저해능이 매우 뛰어난 효과가 있다.
Description
본 발명은 골다공증 예방 및 치료제 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는, 본 발명은 데스트룩신(destruxin) 유도체를 유효성분으로 함유하는 골다공증 의 예방 및 치료제로 유용한 약제조성물에 관한 것이다.
골다공증은 노령화되면서 골밀도가 감소되어 생기는 질환으로 대사성 골질환중 가장 흔한 질병이다. 이같은 골다공증은 선진국에서 이미 큰 사회문제로 대두되어 그 치료를 위해서 많은 연구가 진행되고 있으며, 최근 우리나라에서도 노년사회로 접어들면서 중요한 노인질환의 하나로 대두되고 있다. 미국에서는 약 1,000만명이 골다공증 환자이며 약 1,800만명이 낮은 골밀도를 가지고 있어 골다공증의 예방 및 치료가 시급한 사회적과제로 알려져 있다. 미국의 경우 일생동안 여성 2명중 1명 그리고 백인 남성 8명중 1명이 골다공증과 관련된 골절을 경험할 것으로 예상하고 있으며 이미 2백만 명이상의 미국 남성들이 골다공증으로 고생하고 있으며 매년 9만명의 미국 남성이 골반골절로 고생하고 그중 1/3이 1년내에 사망하고있다. 이미 노령화 사회가된 유럽의 선진국에서도 골다공증치료제의 수요가 최근 매년 약 10%의 급격한 증가세를 보이고 있다.
골조직은 골아세포에 의한 형성과 파골세포에 의한 파괴 흡수가 끊임없이 반복되는 동적인 조직이다. 이러한 골흡수와 골형성의 기전에는 불명확한 점이 많으나 골다공증은 골흡수와 골형성의 발란스가 무너져 발생하는 것으로 골흡수가 골형성보다 항진되는데 기인한 질환으로, 현재 파골세포에 대해 강력한 저해활성을 갖는 골흡수억제제의 개발이 활발히 행해지고 있다.
한편,데스트룩신 유도체는 곤충에 기생하는 곰팡이인 메타르히지움 아니소플리에(Metarhizium anisopliae)를 비롯한 여러 곰팡이들에서 분리된 사이클로뎁시펩타이드(cyclodepsipeptides)로서 살충활성을 갖는 것으로 잘 알려져 있는 물질이며, 최근에는 항바이러스 활성, 류케미아 세포에 대한 세포독성도 있다는 것이 공지되었으며(F. Cavelieret al.,J. Peptide Res.,50,1997, 94-101), 강심제 또는 에리트로포이에틴의 유도물질 등으로 사용할 수 있음도 알려졌다. 그러나, 지금까지 데스트룩신 유도체가 골다공증 예방 및 치료에 유효하다는데 대하여는 전혀 알려진 바는 없으며 또한, 이 물질의 세포 생리활성 작용 기전은 데스트룩신 유도체가 곤충의 Na+-ATPase의 기능을 저해함으로써 살충 효과를 나타내는 것으로 알려져 있다.
뼈대사에 있어서, 석회화된 뼈성분은 골흡수(bone resorotion)에 관여하며 이때 파골세포는 뼈표면에 존재하면서 골흡수를 담당하며 이 과정에서 형성된 세포 찌꺼기를 제거한다( Ross 등, 1995). 또, 골흡수를 담당하는 상기 파골세포는 여러가지 호르몬 작용을 받게되는데 이때 부갑상선 호르몬(parathyroid hormone;PTH)은 뼈기질의 흡수를 촉진시키는 파골세포의 수를 증가시키고 활성화시켜 칼슘을 유리시킨다.
이처럼 골다공증 유발에 중요한 역할을 하는 파골세포는 그 특성상 뼈를 분해하기 위하여 강한 산을 분비하는데 이것을 위하여 많은 H+-ATPase를 사용하고 있다. 본 발명자들은 Na+-ATPase와 H+-ATPase는 유전자수준에서 상이한 부분도 있지만같은 공포성 에티피아제 계열 ( vacuolar ATPase family)로서 공통적인 부분도 갖고 있음에 착안하여 데스트룩신 유도체에 대한 연구를 계속한 결과 데스트룩신 유도체가 파골세포 증가 및 활성화의 저해능을 가지고 있을 뿐만 아니라 파골세포 저해능이 매우 우수함을 확인하게 되었고 이에 의하여 본 발명을 완성하게 되었다.
따라서, 본 발명의 목적은 파골세포의 저해능이 있는 덱스트룩스 유도체를 함유하는 골다공증 예방 및 치료용 약제조성물을 제공함에 있다.
상기 본 발명의 목적은 골다공증 유발 억제 활성을 갖는 데스트룩신 유도체를 조사하고 이와 같은 유도체를 유효성분으로 함유하고 있는 약제 조성물을 조제한 다음 이들 유도체가 골다공증 예방 및 치료제에 유용한지 어떤지 확인하기 위하여 파골세포를 준비하여 골흡수능을 검정하고 칼슘유리 저해능과 파골세포 저해능을 각각 조사하므로써 달성하였다.
도 1은 TRAP 염색한 성숙한 파골세포를 나타낸다.
도 2의 (A)는 정상적인 파골세포 모양을 나타내고, (B)는 골표면에서 파골세포의 골흡수작용으로 형성된 피트를 나타내며 (C)는 데스트룩신 E로 처리한 후 파골세포가 변형되어 위축된 모습을 나타낸다. 또 (D)는 데스트룩신 E 처리한 후 감소된 피트를 나타낸다.
도 3의 (A)는 데스트룩신 E가 포함된 배지의 농도에 따라서 이 배지에서 성장한 파골세포가 생성한 피트의 수가 크게 감소하고 있음을 보여주는 그래프를 나타내고 (B)는 데스트룩신 E로 처리한 파골세포 액틴링의 정상여부를 정상적인 파골세포와 상대적으로 비교한 그래프를 나타낸다.
도 4는 골흡수작용을 유발하는 부갑상선호르몬(PTH)를 첨가하였으나 데스트룩신 E에 의해 골흡수작용이 다시 감소되었음을 나타내는 그래프이다.
본 발명은 하기 화학식(I)로 표시되는 데스트룩신(destruxin) 유도체를 유효성분으로 함유하는 약제조성물을 그 특징으로 한다.
단, 상기 식에서 R1는 CH3,CH2-CH=CH2, CH2CH(CH3)2, CH2CH(CH3)CH2OH,, CH2CH(CH3)COOH, CH2CH(OH)CH2Cl, CH2-C≡CH 또는 CH2CH(OCOCH3)CH2Cl이고, R2, R4및 R6는 H 또는 CH3이고, R3와 R5는 CH(CH3)CH2CH3또는 CH(CH3)2이며, n는 2 또는 3이다.
데스트룩신 유도체는 공지된 방법(Phytochemistry, Vol. 20, pp. 715-723, 1981 ;J. Chem. Soc. Perkin. Trans. I, 2347-2357, 1989 ; J. Peptide Res. 50, 1997, 94-101 ; J. Antibiotics, Vol. 50, 1007- 1013, 1997 ; J. Nat. Prod., 61, 290-293, 1998 등)에 기술된 방법 1에 따라서 제조될 수 있다. 이에 의하면 많이 알려져 있는 데스트룩신 유도체인 데스트룩신 A, B, C, D, E, A1,A2,B1,B2,C2,D1,D2,E1및 E2등 뿐만 아니라 로제오톡신 B, 로제오카르딘, 데스메틸데스트룩신 B 그리고 R1이 클로로하이드린 또는 아세틸화클로로하이드린 등으로 치환된 각종 데스트룩신 유도체들의 제조방법, 분리방법과 그의 용도 등이 공지되어 있다. 본 발명의 데스트룩신 유도체는 약제학적으로 허용되는 염으로 사용될 수도 있는데 통상의 무기산 또는 유기산과의 염일 수 있다.
본 발명에 따라 사용될 수 있는 데스트룩신 유도체는 다음 표 1과 같다
종류 | R1 | R2 | R3 | R4 | R5 | R6 | n |
A | CH2-CH=CH2 | H | CH(CH3)CH2CH3 | CH3 | CH(CH3)2 | CH3 | 2 |
B | CH2-CH(CH3)2 | H | CH(CH3)CH2CH3 | CH3 | CH(CH3)2 | CH3 | 2 |
C | CH2CH(CH3)CH2OH | H | CH(CH3)CH2CH3 | CH3 | CH(CH3)2 | CH3 | 2 |
D | CH2CH(CH3)COOH | H | CH(CH3)CH2CH3 | CH3 | CH(CH3)2 | CH3 | 2 |
E | H | CH(CH3)CH2CH3 | CH3 | CH(CH3)2 | CH3 | 2 | |
A1 | CH2CH=CH2 | H | CH(CH3)CH2CH3 | CH3 | CH(CH3)2 | CH3 | 3 |
A2 | CH2CH=CH2 | H | CH(CH3)2 | CH3 | CH(CH3)2 | CH3 | 2 |
B1 | CH2CH(CH3)2 | H | CH(CH3)CH2CH3 | CH3 | CH(CH3)2 | CH3 | 3 |
B2 | CH2CH(CH3)2 | H | CH(CH3)2 | CH3 | CH(CH3)2 | CH3 | 2 |
C2 | CH2CH(CH3)CH2OH | H | CH(CH3)2 | CH3 | CH(CH3)2 | CH3 | 2 |
D1 | CH2CH(CH3)COOH | H | CH(CH3)CH2CH3 | CH3 | CH(CH3)2 | CH3 | 3 |
D2 | CH2CH(CH3)COOH | H | CH(CH3)2 | CH3 | CH(CH3)2 | CH3 | 2 |
E1 | H | CH(CH3)CH2CH3 | CH3 | CH(CH3)2 | CH3 | 3 | |
E2 | H | CH(CH3)2 | CH3 | CH(CH3)2 | CH3 | 2 | |
로제오톡신 B | CH2CH=CH2 | CH3 | CH(CH3)CH2CH3 | CH3 | CH(CH3)2 | CH3 | 2 |
로제오카르딘 | CH2CH(CH3)2 | CH3 | CH(CH3)CH2CH3 | CH3 | CH(CH3)2 | CH3 | 2 |
데스메틸데스트룩신B | CH2CH(CH3)2 | H | CH(CH3)CH2CH3 | H | CH(CH3)2 | CH3 | 2 |
클로로하이드린 | CH2CH(OH)CH2Cl | H | CH(CH3)CH2CH3 | CH3 | CH(CH3)2 | CH3 | 2 |
아세틸화클로로하이드린 | CH2CH(OCOCH3)CH2Cl | H | CH(CH3)CH2CH3 | CH3 | CH(CH3)2 | CH3 | 2 |
A4 클로로하이드린 | CH2CH(OH)CH2Cl | H | CH(CH3)CH2CH3 | CH3 | CH(CH3)CH2CH3 | CH3 | 2 |
A4 | CH2CH=CH2 | H | CH(CH3)CH2CH3 | CH3 | CH(CH3)CH2CH3 | CH3 | 2 |
호모데스트룩신 B | CH2CH(CH3)2 | H | CH(CH3)CH2CH3 | CH3 | CH(CH3)CH2CH3 | CH3 | 2 |
Lac-6덱스트룩신 E | CH3 | H | CH(CH3)CH2CH3 | CH3 | CH(CH3)2 | CH3 | 2 |
2-하이드록시-4-펜티노익애시드 | CH2-C≡CH | H | CH(CH3)CH2CH3 | CH3 | CH(CH3)2 | CH3 | 2 |
프로토데스트룩신 | CH2CH(CH3)2 | H | CH(CH3)CH2CH3 | H | CH(CH3)2 | H | 2 |
본 발명에 따른 상기 화학식(I)로 표시되는 데스트룩신 유도체는 파골세포에 대한 억제효과가 매우 강력하므로 임상적으로 유용한 골다공증 예방 및 치료제로서 사용될 수 있다. 따라서, 본 발명은 상기 화학식(I)로 표시되는 데스트룩신 유도체와 그의 약제학적으로 허용 가능한 염을 활성성분으로 함유하는 약제조성물에 관한 것이다.
본 발명의 약제조성물을 임상적으로 이용할 때에는 약제학적 분야에서 통상적인 담체와 함께 배합하여 통상적인 제제, 예컨대 정제, 캅셀제, 트로키제, 액제, 현탁제 등의 경구투여용 제제 그리고 주사용 용액 또는 현탁액, 또는 주사시에 주사용 증류수로 제조하여 사용할 수 있는 즉시 사용형 주사용 건조분말 등의 형태인 주사용 제제, 기타 스프레이로 사용할수 있는 액제 더 나아가 좌제 또는 패취제 등의 다양한 제제로 제형화 할 수 있다.
통상적인 담체를 사용하여 제조된 약제학적 제제는 경구로 투여하거나, 비경구로 예를들면 정맥내, 피하, 복강내, 비강 또는 구강 등의 체강 또는 국소로 투여할 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 데스트룩신 유도체의 인체에 대한 투여량은 일반적으로 성인에게 1일에 0.1㎍ ~ 100㎎, 바람직하게는 100㎍ ~ 1㎎의 양이 투여되도록 하며 의사 또는 약사의 판단에 따라 일정시간 간격으로 1일 수회, 바람직하기로는 1회 내지는 6회 분할투여할 수 있다.
본 발명에서는 데스트룩신 유도체가 골흡수를 억제하는 정도를 측정하여 이를 골다공증 억제활성으로 조사하기 위하여 파골세포의 골흡수 억제능 시험법을 확립하여 검색에 사용하였다. 시험법은 뼈절편에 생성된 파골세포의 골흡수 흔적인 피트(pit)의 수와 면적을 측정하는 것이며, 이때 골흡수가 억제된 만큼 피트의 면적이 줄게 됨으로 대조군과 구별될 수 있다. 또한 다른 시험법은 파골세포의 골격을 유지하는 기능을 가지고 있는 액틴링(actin ring)을 관찰하는 것이며, 이때 파골세포가 저해받은 만큼 액틴링이 정상적인 구조를 가지지 못하게 됨으로 대조군과 구별될 수 있다.
본 발명의 구체적인 구성 및 작용을 다음의 실시예에 의거 더욱 상세히 설명하지만 본 발명의 권리범위가 이들 실시예에만 한정되는 것은 아니며 당업자간에 용이하게 실시할 수 있는 어떠한 변경이 가능하다.
실시예 1: 파골세포의 준비
본 실시예에서는 골아세포와 골수세포의 공존배양에 의하여 파골세포를 다음과 같이 준비하였다.
실험예 1: 골아세포의 준비
생후 1일된 마우스 50마리를 70%에탄올에 익사시킨 후 각 마우스로부터 두개골(calvaria)를 얻고 이를 α-MEM 배지(Gibco사 제품)에 디스파아제(dispase, 베링거만하임사 제품)와 콜라게나아제(collagenase, Wako사 제품)를 각각 0.2%, 0.1%가 되도록 용해한 배지 10mL가 담긴 50mL 원심분리용 튜브에 넣는다. 37℃에서 5분 동안 200rpm으로 진탕한 후 배지를 회수하고 배지가 제거된 시험관에 다시 0.2% 디스파아제, 0.1% 콜라게나아제가 포함된 α-MEM배지 10mL을 넣고 37℃에서 10분간 200rpm으로 진탕한 후 또 배지를 회수하였다. 이 조작을 3회 반복 실시하여 골아세포가 포함된 배지 40mL을 회수하였다. 이 액을 1000rpm 으로 5분간 원심분리 한 후 배지는 버리고 침전된 골아세포에 혈청(FCS: Fetal Calf Serum)이 10% 포함된 α-MEM(10%FCS)배지 10mL를 넣어 현탁시키고 다시 α-MEM(10%FCS)배지 15mL를 넣어 25mL로 만들었다. 상기 용액 5mL를 미리 α-MEM(10%FCS)배지 10mL이 포함된 100 x 20mm 배양접시 5개에 각각 넣고 37C, 5% CO2에서 배양하였다. 2일간 배양 후 세포를 관찰하고 회수하였다. 이때 파골세포의 회수는 배양접시의 배지를 제거하고 0.2% 콜라게나아제가 포함된 α-MEM (10%FCS(-))배지를 2mL씩 넣고 약 20분간 37℃, 5% CO2에 방치한 후 표면에 부착된 세포를 떼어내고 떼어낸 배지는 모두 모아서 1000rpm에서 원심분리하여 완료하였다. 상기 골아세포의 세포액을 다시 α-MEM(10%FCS)배지로 현탁하여 준비하고 다음실험에 공시재료로 사용하였다.
실험예 2: 골수세포의 준비
ddY 마우스(6-9주령 수컷)를 척추탈구로 희생시킨 후 70%에탄올로 소독한 후[이하, 조작은 크린벤치(Clean Bench)에서 수행하였다] 대퇴골 및 경골부분의 피층을 절개하고 부착근육을 제거하였다. 경골원심부를 절단하고 무릎관절을 탈구시켜 경골 및 대퇴골을 적출하였다. 적출된 골 끝을 절단 하고 25게이지(Gage)의 주사기를 이용하여 대퇴골 및 경골의 원심 말단부분에 α-MEM(10%FCS) 배지 1-2mL을주입하여 골수세포를 모았으며 2-3마리씩 각각 이 조작을 수행하였다. 1000rpm에서 원심분리하여 세포를 모은 후 배지를 제거하고 침전된 세포중 적혈구를 제거하기 위해 0.83% NH4Cl가 포함된 10mM Tris HCl 완충액(pH7.5) 3mL을 첨가하였다. 다시, 1000rpm으로 원심분리한 후 상층용액을 제거하였다. 이렇게 하여 경골 한 개당 약1 × 107개의 골수세포를 얻었으며 이 골수세포는 하기 실험예 3의 공존배양에 바로 사용되었다.
실험예 3: 파골세포의 준비
파골세포의 형성과 분리는 콜라겐 겔용액이 코팅된 배지 위에서 이루어졌으며 콜라겐 겔용액 코팅배지의 제조는 다음과 같이 하였다. 콜라겐 겔, 5배농도의 α-MEM배지(NaHCO3를 포함함), 2.2% NaHCO3또는 200mM HEPES를 포함한 0.05M NaOH 완충액(pH7.4)을 각각 7 : 2 : 1의 비율로 저온에서 혼합한 후 약 4-5mL를 100mL 배양접시에 붓고 콜라겐 용액이 배양접시 전체면에 고루 도포 되도록 잘 흔든 후 37℃에서 5분간 겔화 시키고 4℃에 보관하였다. 도포된 콜라겐 겔용액 배지에 상기 실험예 1과 2에서 준비한 골아세포( 약 1x105세포) 와 골수세포(약 1x107세포)를 활성비타민 D3(10-8M)이 포함된 α-MEM(10% FCS)배지에서 2일마다 배지를 교환하면서 6∼8일간 공존배양을 수행하였다. 배양액을 제거하고 디스파아제와 콜라게나아제가 포함된 α-MEM배지(10% FCS가 포함되지 않음)를 3mL 첨가한 후 37℃에서 약 300rpm으로 진탕시켜 콜라겐 겔이 용해되게 하였다.
입구가 넓은 폴리프로필렌 피펫으로 세포를 혼탁시킨 후 50mL 원심관으로 옮기고 200rpm으로 5분간 원심분리 한 후 α-MEM배지(10% FCS 포함)로 현탁하여 파골세포 용액을 준비하였다.
파골세포의 전형적인 특징은 TRAP(tartrate-resistant acid phospatase)활성, 다량의 칼시토닌 수용체 및 골흡수능을 가진다는 점이다. 따라서, 본 발명에서는 파골세포를 다른 세포와 구분하기 위하여 TRAP 염색을 수행함으로써 쉽게 확인하였다.
실시예 2: 파골세포의 생성 확인
실험예 1: TRAP(tartrate-resistant acid phospatase) 반응액 조제
기질 나프톨(Naphtol) AS-MX 포스페이트(sigma사 제품) 5mg을 N,N-디메틸포름아마이드 0.5mL에 용해한 다음 50mM 타르타르산(sigma사 제품)을 포함한 0.1N NaHCO3완충액(pH 5)을 50mL이 되게 첨가하고 색소( Fast red violet LB salt(sigma사 제품)) 30mg을 넣어 용해시켰다.
실험예 2: TRAP 염색
파골세포가 형성된 플레이트로부터 배지를 제거하고 10%포르말린을 넣어 5-10분 고정한 후 건조하였다. 상기 실험예 1에서 조제한 에탄올/아세톤(1/1)용액에 재차 고정한 후 또다시 건조하였다. TRAP 용액을 넣고 실온에서 10-15분간 방치한 후 반응액을 제거하였으며 이를 수세 건조하고 현미경으로 관찰한 결과 다량의 파골세포가 생성되었음이 도 1가 같이 확인되었다.
실시예 3: 파골세포의 골흡수능 검정
실험예 1: 피트 측정법
파골세포의 가장 중요한 특성은 뼈를 분해하는 것이므로 뼈표면에서 성장하고 있는 파골세포가 뼈표면의 골흡수 흔적(피트, pit)을 측정함으로써 파골세포의 골흡수능의 유무를 조사하였다.
뼈절편을 1mm두께로 절단하여 메탄올에 넣고 U.V 살균등이 켜진 상기 크린벤치에서 살균시킨 후 준비된 뼈절편을 96well plate에 하나씩 넣고 α-MEM배지(10% FCS 포함) 100ul를 넣었다. 파골세포의 피트 형성 저해활성을 측정할 데스트룩신 E(Destruxin E)를 최고 3ul 넣은 후 준비된 파골세포 용액을 100ul 넣고 잘 흔들어 혼합한 뒤 37℃, 5% CO2하에서 1일간 배양하였다. 배양 후 현미경으로 뼈절편 주변의 파골세포 상태를 관찰하고 4℃에서 보관하였다.
뼈절편에 생성된 피트의 수 와 면적을 측정하여 대조군과 비교하면 활성을 측정할 수 있는 것이므로 피트를 현미경으로 관찰하기 위해서 뼈절편을 파골세포가 성장한 부분을 위로 가게 하여 96well plate로부터 꺼내서 종이타올에 놓고 염색액 헤마톡신용액(Sigma)을 6ul 뼈절편 위에 첨가하였다. 3-5분 후에 상기 헤마톡신 용액(sigma)을 제거하고 산성용액에서 염색액을 완전히 제거한 후 뼈절편을 현미경으로 관찰하여 피트의 수를 측정한 결과, 도 2 및 도 3(A)와 같았다. 도 2(A)는 정상적인 파골세포의 모양을 나타내고 (B)는 골표면에서 파골세포의 골흡수작용으로 인하여 형성된 피트의 모습이며 (C)는 데스트룩신 E로 처리한 후 파골세포가 변형되어 위축된 모습을 나타내고, (D)는 데스트룩신 E를 처리한 후 파골세포의 골흡수작용 결과 감소된 피트모양을 나타내고 있다. 도 3(A)는 데스트룩신 E가 처리된 배지에서 성장한 파골세포가 생성한 피트수와 정상배지에서 성장한 파골세포수를 수치화한 그래프인 바 데스트룩신 E의 농도가 증가할 수록 피트수가 감소하고 있음을 알 수 있었다. 또한, 데스트룩신 E는 다음 표 2에서 볼 수 있듯이 10nM에서 50%의 저해활성(IC50)을 갖는 것으로 확인되었다.
농도(nM) | 0 | 0.5 | 1 | 5 | 10 | 50 | 100 |
피트저해활성(%) | 0 | 2 | 5 | 34 | 50 | 95 | 100 |
실험예 2: 액틴링 검정법(Actin ring assay)
또한, 파골세포의 골격을 유지하는 기능을 갖고 있는 액틴링의 관찰을 위해서 상기 실험예 1의 TRAP 염색법 대신 액틴링 검정법을 수행하였다. 배지를 제거하고 포르말린으로 10분간 고정하고 Tween 20으로 1회 세척하여 메탄올에 용해된 300U 로드아민 팔로이딘(Rhodamine phalloidin(sigma사 제품))으로 30분간 빛이 들지 않는 암소에서 처리하고 UV광원 하에서 세포내 액틴링의 분포를 관찰하였다. 실험결과, 표 3에서 보듯이 8nM(IC50)에서 파골세포의 50%가 정상적인 액틴링의 구조를 가지지 못하는 것으로 확인되었다 . 도 3에서 (B)는 데스트룩신 E로 처리된 파골세포의 액틴링 정상유무를 정상적인 파골세포와 상대적으로 비교한 그래프인바,데스트룩신 E의 농도증가에 따라 정상적인 액틴링의 수가 감소하고 있음을 알 수 있었다.
농도(nM) | 0 | 0.5 | 1 | 5 | 10 | 50 | 100 |
액틴링저해활성(%) | 0 | 1 | 3 | 10 | 65 | 100 | 100 |
실시예 4: 마우스의 기관배양을 통한 데스트룩신 E의
45
Ca 유리 저해능 조사
임신 15-16일의 ddy 마우스에45Ca으로 라벨링된 염화칼슘용액을 피하주사해서 뼈에 라벨링을 한 후 1일 후에 마우스를 에테르(Ether)로 마취시키고 70% 에탄올로 전신을 소독하였다. 다음, 마우스의 배를 자르고 자궁을 잘라 태마우스를 적출하여 소독된 실험접시로 옮겼다. 적출된 태마우스의 앞다리를 잘라내어 뼈를 적출하였는데 이는 실체현미경 아래에서 수행하였으며 피층를 벗긴 후에 요골(radius)와 척골(ulna)에 붙어있는 근육을 떼어내고 각 뼈의 양쪽 말단에 있는 연골부를 잘라내었다. 이때, 뼈가 건조되지 않도록 하며 전배양을 하기 전에 BGJb배지(Gibco사 제품)를 0.5mL씩 24 well 접시에 넣고 스테인레스 스틸 막을 배지에 넣고 그 위에 준비된 뼈를 놓았다. 24시간 배양 후 데스트룩신 E가 포함된 배지로 옮겨서 72시간 배양하였다. 이때, 인체에서 칼슘 방출을 유도하는 부갑상선호르몬(PTH)을 같이 사용하여 그 저해활성을 측정하고자 하였다. 배양종료후에는 뼈만 건져서 5%의 TCA로 뼈 안에 존재하는45Ca량을 측정하고 동시에 배지 내에 존재하는45Ca양을 측정하였다. 이때 골흡수 활성은 다음과 같이 계산하였다.
골흡수활성= 배양액중의45Ca방출량 / (배양액중의45Ca방출량+뼈중의45Ca량) × 100
실험결과, 도 4에서 알 수 있듯이 본 발명에 따른 데스트룩신 E는 3nM에서 PTH에의한45Ca유리작용을 거의 완전히 저해하고 있음을 확인하였다.
실시예 5: 데스트룩신 B(Destruxcin B)의 파골세포 저해
본 발명에 따른 데스트룩신 B의 파골세포 저해활성 실험을 상기 실시예 4와 동일한 과정을 거쳐 실시하였다. 데스트룩신 B의 경우는 표 4에서 알 수 있듯이 IC50(피트저해활성)와 IC50(액틴링저해활성)가 각각 0.2μM, 0.6μM로서 데스트툭신 E보다 활성은 낮았지만 파골세포 저해활성은 매우 우수한 것으로 판명되었다.
농도(μM) | 0 | 0.1 | 0.5 | 1 | 5 |
피트저해활성(%) | 0 | 25 | 71 | 94 | 100 |
액틴링저해활성(%) | 0 | 12 | 41 | 92 | 100 |
이상, 실시예와 실험예를 통하여 알 수 있는 바와 같이, 본 발명에 따르면 데스트룩신 유도체의 골다공증과 관련된 질환의 예방 및 치료용 약제 조성물로서의 새로운 용도를 제공하는 효과가 있다. 또한 본 발명에 따르면 화합물 데스트룩신 유도체를 유효성분으로 함유한 골다공증의 예방 및 치료용 약제조성물을 제공하는 뛰어난 효과가 있으므로 화학 및 의약산업상 매우 유용한 발명인 것이다.
Claims (3)
- 하기 화학식(I)으로 표시되는 데스트룩신 유도체를 유효성분으로 함유하는 골다공증 예방 및 치료제 조성물.단, 상기 식에서 R1는 CH3,CH2-CH=CH2, CH2CH(CH3)2, CH2CH(CH3)CH2OH,, CH2CH(CH3)COOH, CH2CH(OH)CH2Cl, CH2-C≡CH 또는 CH2CH(OCOCH3)CH2Cl이고, R2, R4및 R6는 H 또는 CH3이고, R3와 R5는 CH(CH3)CH2CH3또는 CH(CH3)2이며, n는 2 또는 3이다.
- 제 1 항에 있어서, 상기 데스트룩신 유도체가 데스트룩신 E인 골다공증 예방 및 치료제 조성물.
- 제 1항에 있어서, 데스트룩신 유도체가 데스트록신 B인 골다공증예방 및 치료제 조성물
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1019990031532A KR100309888B1 (ko) | 1999-07-31 | 1999-07-31 | 골다공증 예방 및 치료제 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1019990031532A KR100309888B1 (ko) | 1999-07-31 | 1999-07-31 | 골다공증 예방 및 치료제 조성물 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
KR20010011926A KR20010011926A (ko) | 2001-02-15 |
KR100309888B1 true KR100309888B1 (ko) | 2001-11-01 |
Family
ID=19605913
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1019990031532A KR100309888B1 (ko) | 1999-07-31 | 1999-07-31 | 골다공증 예방 및 치료제 조성물 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
KR (1) | KR100309888B1 (ko) |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH0827183A (ja) * | 1994-07-08 | 1996-01-30 | Riyoushiyoku Kenkyukai | 環状デプシペプチド |
JPH09315996A (ja) * | 1996-05-27 | 1997-12-09 | Meiji Milk Prod Co Ltd | 強心剤 |
US5801143A (en) * | 1994-05-26 | 1998-09-01 | Nisshin Flour Milling Co., Ltd. | Cyclic depsipeptides useful for treatment of hyperlipemia |
-
1999
- 1999-07-31 KR KR1019990031532A patent/KR100309888B1/ko not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5801143A (en) * | 1994-05-26 | 1998-09-01 | Nisshin Flour Milling Co., Ltd. | Cyclic depsipeptides useful for treatment of hyperlipemia |
JPH0827183A (ja) * | 1994-07-08 | 1996-01-30 | Riyoushiyoku Kenkyukai | 環状デプシペプチド |
JPH09315996A (ja) * | 1996-05-27 | 1997-12-09 | Meiji Milk Prod Co Ltd | 強心剤 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
KR20010011926A (ko) | 2001-02-15 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP4047275B2 (ja) | 4−[(4−チアゾリル)フェノキシ]アルコキシ−ベンズアミジン誘導体の骨粗しょう症治療剤としての用途 | |
WO2019196420A1 (zh) | 一种多肽及其皮肤修复功能的应用 | |
KR20080094950A (ko) | 플라바논 유도체를 포함하는 피부 외용제 | |
SK287223B6 (sk) | Použitie komplexu kyseliny hyalurónovej a zinku pri liečení artritického ochorenia | |
US4919931A (en) | Method for producing ossein hydroxyapatite compound | |
CN1111403C (zh) | 继发性白内障抑制剂 | |
KR20170137201A (ko) | 근육 위축 치료에 사용되는 유도체 | |
KR100309888B1 (ko) | 골다공증 예방 및 치료제 조성물 | |
JPH09505804A (ja) | 抗ウイルス剤としてのフラビン誘導体 | |
US20040102365A1 (en) | Pharmaceutical composition for prevention and remedy of osteoporosis | |
HU202104B (en) | Process for producing immunstimulating pharmaceutical compositions containing 1-carboxy-3,4-methylenedioxi-8-methoxy-phenantrene | |
CN111920791A (zh) | 枯茗醛在制备治疗细粒棘球蚴病药物中的应用 | |
DE69916571T2 (de) | Hemmer der angiogenese und der urokinase produktion und seine medizinische anwendung | |
EP4049724A1 (en) | Pharmaceutical composition for protecting cartilage | |
KR100718030B1 (ko) | 변형성 관절증 치료제 | |
JP4607264B2 (ja) | ヒアルロン酸を有効成分とする異所性石灰化抑制剤 | |
KR100705173B1 (ko) | 엔,엔-디이소프로필-4-[7-(4-아미노페녹시)헵톡시]-3-메톡시벤즈아미드의 골다공증 예방 및 치료제로서의 용도 | |
CN116919932A (zh) | 成骨剂及其用途 | |
CN109793747A (zh) | 王不留行黄酮苷在制备预防治疗骨溶解性疾病的药物方面的应用 | |
CN118146347A (zh) | 一种多肽化合物及其在骨关节炎中的应用 | |
CN117883439A (zh) | 吲哚-3-丙酸在制备抑制破骨细胞分化药物中的应用 | |
CN115006382A (zh) | 肉豆蔻酸在制备用于抗老年性骨质疏松药物中的应用 | |
KR20030024763A (ko) | 골다공증 예방 및 치료용 화합물 | |
KR20050045770A (ko) | 메트릭스 메탈로프로테이나제-9의 발현과 파골세포 형성을억제하는 에피갈로카테친 갈레이트 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A201 | Request for examination | ||
E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
GRNT | Written decision to grant | ||
FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20070704 Year of fee payment: 7 |
|
LAPS | Lapse due to unpaid annual fee |