JPWO2017195268A1 - miRNAをマーカーとする歯周炎検査キット、及び検査方法 - Google Patents
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Abstract
Description
(1)歯毎に採取された歯肉溝滲出液からmiRNAを抽出し、得られた試料中のhsa−miR−223−3p、及びhsa−miR−200c−3pのmiRNA量と、hsa−miR−101−3p、hsa−miR−374a−5p、hsa−miR−582−5p、hsa−miR−145−5p、hsa−miR−20a−3p、hsa−miR−194−5p、hsa−miR−26b−5p、hsa−miR−301a−3p、hsa−miR−140−5p、hsa−miR−590−5p、hsa−miR−30e−5p、hsa−miR−19a−3p、hsa−miR−338−3p、hsa−miR−126−5p、hsa−miR−144−5p、hsa−miR−144−3p、hsa−miR−30e−3p、hsa−miR−20a−5p、hsa−miR−16−5p、hsa−miR−19b−3p、hsa−miR−15a−5p、hsa−miR−142−5p、hsa−miR−143−3p、hsa−miR−106b−5pからなる群から選択される少なくとも1つ、及びhsa−miR−31−3p、hsa−miR−181b−5p、hsa−miR−203a、hsa−miR−200c−5p、hsa−miR−187−3p、hsa−miR−200b−5p、hsa−miR−99a−5p、hsa−miR−320a、hsa−miR−210−3p、hsa−miR−125a−5p、hsa−let−7i−5p、hsa−miR−100−5p、hsa−miR−155−5p、hsa−miR−21−3p、hsa−miR−200a−5p、hsa−miR−200b−3p、hsa−let−7e−5p、hsa−miR−222−3p、hsa−miR−125b−5p、hsa−miR−205−5p、hsa−let−7b−5p、hsa−miR−193b−3p、hsa−miR−221−3p、hsa−miR−365a−3p、hsa−miR−22−3pからなる群から選択される少なくとも1つのmiRNA量を検出し、参照標準に対して比較解析することを特徴とする歯周炎の検査方法。
(2)歯毎に採取された歯肉溝滲出液からmiRNAを抽出し、hsa−miR−223−3p、hsa−miR−101−3p、hsa−miR−374a−5p、hsa−miR−582−5p、hsa−miR−145−5p、hsa−miR−20a−3p、hsa−miR−194−5p、hsa−miR−26b−5p、hsa−miR−301a−3p、hsa−miR−140−5p、hsa−miR−590−5p、hsa−miR−30e−5p、hsa−miR−19a−3p、hsa−miR−338−3p、hsa−miR−126−5p、hsa−miR−144−5p、hsa−miR−144−3p、hsa−miR−30e−3p、hsa−miR−20a−5p、hsa−miR−200c−3p、hsa−miR−31−3p、hsa−miR−181b−5p、hsa−miR−203a、hsa−miR−200c−5p、hsa−miR−187−3p、hsa−miR−200b−5p、hsa−miR−99a−5p、hsa−miR−320a、hsa−miR−210−3p、hsa−miR−125a−5p、hsa−let−7i−5p、hsa−miR−100−5p、hsa−miR−155−5p、hsa−miR−21−3p、hsa−miR−200a−5p、hsa−miR−200b−3p、hsa−let−7e−5p、hsa−miR−222−3p、hsa−miR−125b−5p、hsa−miR−205−5pからなるmiRNA量を検出し、参照標準に対して比較解析することを特徴とする歯周炎の検査方法。
(3)前記参照標準として、hsa−miR−324−5p、hsa−miR−29c−5p、hsa−miR−107、hsa−miR−324−3p、hsa−miR−30d−5pの少なくとも1つ以上を用いることを特徴とする(1)又は(2)に記載の検査方法。
(4)hsa−miR−223−3p、hsa−miR−101−3p、hsa−miR−374a−5p、hsa−miR−582−5p、hsa−miR−145−5p、hsa−miR−20a−3p、hsa−miR−194−5p、hsa−miR−26b−5p、hsa−miR−301a−3p、hsa−miR−140−5p、hsa−miR−590−5p、hsa−miR−30e−5p、hsa−miR−19a−3p、hsa−miR−338−3p、hsa−miR−126−5p、hsa−miR−144−5p、hsa−miR−144−3p、hsa−miR−30e−3p、hsa−miR−20a−5p、hsa−miR−16−5p、hsa−miR−19b−3p、hsa−miR−15a−5p、hsa−miR−142−5p、hsa−miR−143−3p、hsa−miR−106b−5pからなる群から選択される少なくとも1つ、及びhsa−miR−200c−3p、hsa−miR−31−3p、hsa−miR−181b−5p、hsa−miR−203a、hsa−miR−200c−5p、hsa−miR−187−3p、hsa−miR−200b−5p、hsa−miR−99a−5p、hsa−miR−320a、hsa−miR−210−3p、hsa−miR−125a−5p、hsa−let−7i−5p、hsa−miR−100−5p、hsa−miR−155−5p、hsa−miR−21−3p、hsa−miR−200a−5p、hsa−miR−200b−3p、hsa−let−7e−5p、hsa−miR−222−3p、hsa−miR−125b−5p、hsa−miR−205−5p、hsa−let−7b−5p、hsa−miR−193b−3p、hsa−miR−221−3p、hsa−miR−365a−3p、hsa−miR−22−3pからなる群から選択される少なくとも1つのmiRNAを含む歯周炎バイオマーカー。
(5)少なくともhsa−miR−223−3p、及びhsa−miR−200c−3pを含むことを特徴とする(4)記載の歯周炎バイオマーカー。
(6)hsa−miR−223−3p、hsa−miR−101−3p、hsa−miR−374a−5p、hsa−miR−582−5p、hsa−miR−145−5p、hsa−miR−20a−3p、hsa−miR−194−5p、hsa−miR−26b−5p、hsa−miR−301a−3p、hsa−miR−140−5p、hsa−miR−590−5p、hsa−miR−30e−5p、hsa−miR−19a−3p、hsa−miR−338−3p、hsa−miR−126−5p、hsa−miR−144−5p、hsa−miR−144−3p、hsa−miR−30e−3p、hsa−miR−20a−5p、hsa−miR−200c−3p、hsa−miR−31−3p、hsa−miR−181b−5p、hsa−miR−203a、hsa−miR−200c−5p、hsa−miR−187−3p、hsa−miR−200b−5p、hsa−miR−99a−5p、hsa−miR−320a、hsa−miR−210−3p、hsa−miR−125a−5p、hsa−let−7i−5p、hsa−miR−100−5p、hsa−miR−155−5p、hsa−miR−21−3p、hsa−miR−200a−5p、hsa−miR−200b−3p、hsa−let−7e−5p、hsa−miR−222−3p、hsa−miR−125b−5p、hsa−miR−205−5pからなるmiRNAであることを特徴とする(4)又は(5)記載の歯周炎バイオマーカー。
(7)参照標準として、hsa−miR−324−5p、hsa−miR−29c−5p、hsa−miR−107、hsa−miR−324−3p、hsa−miR−30d−5pの少なくとも1つ以上を含むことを特徴とする(4)〜(6)のいずれか1つ記載の歯周炎バイオマーカー。
(8)hsa−miR−223−3p、hsa−miR−101−3p、hsa−miR−374a−5p、hsa−miR−582−5p、hsa−miR−145−5p、hsa−miR−20a−3p、hsa−miR−194−5p、hsa−miR−26b−5p、hsa−miR−301a−3p、hsa−miR−140−5p、hsa−miR−590−5p、hsa−miR−30e−5p、hsa−miR−19a−3p、hsa−miR−338−3p、hsa−miR−126−5p、hsa−miR−144−5p、hsa−miR−144−3p、hsa−miR−30e−3p、hsa−miR−20a−5p、hsa−miR−16−5p、hsa−miR−19b−3p、hsa−miR−15a−5p、hsa−miR−142−5p、hsa−miR−143−3p、hsa−miR−106b−5pからなる群から選択される少なくとも1つ、及びhsa−miR−200c−3p、hsa−miR−31−3p、hsa−miR−181b−5p、hsa−miR−203a、hsa−miR−200c−5p、hsa−miR−187−3p、hsa−miR−200b−5p、hsa−miR−99a−5p、hsa−miR−320a、hsa−miR−210−3p、hsa−miR−125a−5p、hsa−let−7i−5p、hsa−miR−100−5p、hsa−miR−155−5p、hsa−miR−21−3p、hsa−miR−200a−5p、hsa−miR−200b−3p、hsa−let−7e−5p、hsa−miR−222−3p、hsa−miR−125b−5p、hsa−miR−205−5p、hsa−let−7b−5p、hsa−miR−193b−3p、hsa−miR−221−3p、hsa−miR−365a−3p、hsa−miR−22−3pからなる群から選択される少なくとも1つのmiRNAの発現量を検出するための配列を有する核酸を固定したアレイを含む歯周炎検査キット。
(9)前記アレイが少なくともhsa−miR−223−3p、及びhsa−miR−200c−3pの発現量を検出するための配列を有する核酸を固定したものであることを特徴とする(8)記載の歯周炎検査キット。
(10)前記アレイが、少なくともhsa−miR−223−3p、hsa−miR−101−3p、hsa−miR−374a−5p、hsa−miR−582−5p、hsa−miR−145−5p、hsa−miR−20a−3p、hsa−miR−194−5p、hsa−miR−26b−5p、hsa−miR−301a−3p、hsa−miR−140−5p、hsa−miR−590−5p、hsa−miR−30e−5p、hsa−miR−19a−3p、hsa−miR−338−3p、hsa−miR−126−5p、hsa−miR−144−5p、hsa−miR−144−3p、hsa−miR−30e−3p、hsa−miR−20a−5p、hsa−miR−200c−3p、hsa−miR−31−3p、hsa−miR−181b−5p、hsa−miR−203a、hsa−miR−200c−5p、hsa−miR−187−3p、hsa−miR−200b−5p、hsa−miR−99a−5p、hsa−miR−320a、hsa−miR−210−3p、hsa−miR−125a−5p、hsa−let−7i−5p、hsa−miR−100−5p、hsa−miR−155−5p、hsa−miR−21−3p、hsa−miR−200a−5p、hsa−miR−200b−3p、hsa−let−7e−5p、hsa−miR−222−3p、hsa−miR−125b−5p、hsa−miR−205−5pの発現量を検出するための配列を有する核酸を固定したアレイであることを特徴とする(8)又は(9)記載の歯周炎検査キット。
(11)参照標準として、hsa−miR−324−5p、hsa−miR−29c−5p、hsa−miR−107、hsa−miR−324−3p、hsa−miR−30d−5pの少なくとも1つ以上をアレイに含むことを特徴とする(8)〜(10)のいずれか1つ記載の歯周炎検査キット。
(12)歯肉溝滲出液採取用ペーパーストリップ、miRNA抽出試薬、miRNA検出試薬を含むことを特徴とする(8)〜(11)いずれか1項記載の歯周炎検査キット。
(13)歯毎に採取された歯肉溝滲出液からmiRNAを抽出し、表3〜表6に記載されるmiRNAの群から選択される少なくとも1つ以上のmiRNA量を検出することを特徴とする歯周炎の検査方法。
以下にデータを示す試料は、東京医科歯科大学の倫理委員会で承認された研究に基づき、インフォームドコンセントを得たうえで患者、及び健常者のボランティアから得られたものである。歯周炎の診断は、歯周ポケットの深さ、プロービングの際の出血によって行った。なお、GCFの採取は、診断に先立って行っている。また、歯周炎患者の一人が、軽度の糖尿病を併発していた他は、全身性疾患を伴っていたものはいない。なお、糖尿病を併発していた歯周炎患者の糖尿病も軽度であり投薬治療は受けてはいない。
GCFを採取する前に、歯肉縁上の歯垢、及び歯の周辺の唾液は綿球で除去し、エアードライヤーによって、GCFを採取する歯の周辺を乾燥させた。コットンロールによって、周辺から隔離した後に、濾紙片(Oralflow社製)を歯周ポケットに穏やか挿入し、GCFを採取した。血液が付着している濾紙片は解析には用いなかった。
複数の濾紙片により、各対象者から約4.8μlのGCFを採取して解析に用いた。濾紙は60μlのリン酸緩衝液を含むチューブに集め、急速凍結し、RNAを単離するまで保存した。
以下のようにして、GCFからTrizol LS試薬(ライフテクノロジーズ社製)を用いてRNAを抽出した。GCFは、750μlのTrizol LS試薬に溶解し、RNase−free精製水により1mlになるように調整した。次に、0.2mlのクロロホルムを加え、水相を集め、イソプロパノールを加えた。遠心して沈殿を集め、乾燥してエタノールで洗浄後、50μlのnuclease−free精製水に溶解した。RNAの精製度と濃度はNanoDrop(サーモフィッシャーサイエンティフィック社製)を用いて測定した。A260/230の比が0.9〜1.6、A260/280の比が1.6〜1.8の試料をmiRNA解析に用いた。
miRNA発現解析は、miRCURY LNA(登録商標) Universal RT microRNA PCR System(Exiqon社製)を用いて解析した。一本鎖cDNAは8μlのRNAからuniversal cDNA Synthesis kit II(Exiqon社製)を用いて合成した。合成したcDNAは希釈し、ExiLET SYBR(登録商標)Green master mixと混合しHuman miRNome microRNA PCR panel(Exiqon社製)に分注し、定量的PCRをLightCycler 480 Real-Time PCR system(ロシュ社製)を用いて行った。
表1に示す5名の健常者、3名の歯周炎患者から採取したGCFのmiRNA(試料セット#1)を解析した。健常者のGCFを採取した部位は、歯周ポケット深さが3mm以下であり、プロービングによる出血は見られなかった。一方、歯周炎患者は歯周ポケット深さが3mmより大きく(ほとんどの歯周ポケット深さは4〜8mm)、多くの患者でプロービングによる出血が観察された。
(1)健常者、歯周炎患者で有意に差が認められるもの(できればp値が0.05より小さいもの)
(2)初期の発現レベルが高いと考えられるΔCq値が比較的小さいもの
(3)ΔCq値の差(ΔΔCq)が大きいもの
(4)標的遺伝子が機能的に重要であると示唆されているもの、又はこれまでの研究成果により確認されているもの
(5)歯周炎との関連が今までの研究により報告されているもの
Claims (13)
- 歯毎に採取された歯肉溝滲出液からmiRNAを抽出し、
得られた試料中のhsa−miR−223−3p、及びhsa−miR−200c−3pのmiRNA量と、
hsa−miR−101−3p、hsa−miR−374a−5p、hsa−miR−582−5p、hsa−miR−145−5p、hsa−miR−20a−3p、hsa−miR−194−5p、hsa−miR−26b−5p、hsa−miR−301a−3p、hsa−miR−140−5p、hsa−miR−590−5p、hsa−miR−30e−5p、hsa−miR−19a−3p、hsa−miR−338−3p、hsa−miR−126−5p、hsa−miR−144−5p、hsa−miR−144−3p、hsa−miR−30e−3p、hsa−miR−20a−5p、hsa−miR−16−5p、hsa−miR−19b−3p、hsa−miR−15a−5p、hsa−miR−142−5p、hsa−miR−143−3p、hsa−miR−106b−5pからなる群から選択される少なくとも1つ、
及びhsa−miR−31−3p、hsa−miR−181b−5p、hsa−miR−203a、hsa−miR−200c−5p、hsa−miR−187−3p、hsa−miR−200b−5p、hsa−miR−99a−5p、hsa−miR−320a、hsa−miR−210−3p、hsa−miR−125a−5p、hsa−let−7i−5p、hsa−miR−100−5p、hsa−miR−155−5p、hsa−miR−21−3p、hsa−miR−200a−5p、hsa−miR−200b−3p、hsa−let−7e−5p、hsa−miR−222−3p、hsa−miR−125b−5p、hsa−miR−205−5p、hsa−let−7b−5p、hsa−miR−193b−3p、hsa−miR−221−3p、hsa−miR−365a−3p、hsa−miR−22−3pからなる群から選択される少なくとも1つのmiRNA量を検出し、
参照標準に対して比較解析することを特徴とする歯周炎の検査方法。 - 歯毎に採取された歯肉溝滲出液からmiRNAを抽出し、
hsa−miR−223−3p、hsa−miR−101−3p、hsa−miR−374a−5p、hsa−miR−582−5p、hsa−miR−145−5p、hsa−miR−20a−3p、hsa−miR−194−5p、hsa−miR−26b−5p、hsa−miR−301a−3p、hsa−miR−140−5p、hsa−miR−590−5p、hsa−miR−30e−5p、hsa−miR−19a−3p、hsa−miR−338−3p、hsa−miR−126−5p、hsa−miR−144−5p、hsa−miR−144−3p、hsa−miR−30e−3p、hsa−miR−20a−5p、hsa−miR−200c−3p、hsa−miR−31−3p、hsa−miR−181b−5p、hsa−miR−203a、hsa−miR−200c−5p、hsa−miR−187−3p、hsa−miR−200b−5p、hsa−miR−99a−5p、hsa−miR−320a、hsa−miR−210−3p、hsa−miR−125a−5p、hsa−let−7i−5p、hsa−miR−100−5p、hsa−miR−155−5p、hsa−miR−21−3p、hsa−miR−200a−5p、hsa−miR−200b−3p、hsa−let−7e−5p、hsa−miR−222−3p、hsa−miR−125b−5p、hsa−miR−205−5pからなるmiRNA量を検出し、
参照標準に対して比較解析することを特徴とする歯周炎の検査方法。 - 前記参照標準として、hsa−miR−324−5p、hsa−miR−29c−5p、hsa−miR−107、hsa−miR−324−3p、hsa−miR−30d−5pの少なくとも1つ以上を用いることを特徴とする請求項1又は2に記載の検査方法。
- hsa−miR−223−3p、hsa−miR−101−3p、hsa−miR−374a−5p、hsa−miR−582−5p、hsa−miR−145−5p、hsa−miR−20a−3p、hsa−miR−194−5p、hsa−miR−26b−5p、hsa−miR−301a−3p、hsa−miR−140−5p、hsa−miR−590−5p、hsa−miR−30e−5p、hsa−miR−19a−3p、hsa−miR−338−3p、hsa−miR−126−5p、hsa−miR−144−5p、hsa−miR−144−3p、hsa−miR−30e−3p、hsa−miR−20a−5p、hsa−miR−16−5p、hsa−miR−19b−3p、hsa−miR−15a−5p、hsa−miR−142−5p、hsa−miR−143−3p、hsa−miR−106b−5pからなる群から選択される少なくとも1つ、
及びhsa−miR−200c−3p、hsa−miR−31−3p、hsa−miR−181b−5p、hsa−miR−203a、hsa−miR−200c−5p、hsa−miR−187−3p、hsa−miR−200b−5p、hsa−miR−99a−5p、hsa−miR−320a、hsa−miR−210−3p、hsa−miR−125a−5p、hsa−let−7i−5p、hsa−miR−100−5p、hsa−miR−155−5p、hsa−miR−21−3p、hsa−miR−200a−5p、hsa−miR−200b−3p、hsa−let−7e−5p、hsa−miR−222−3p、hsa−miR−125b−5p、hsa−miR−205−5p、hsa−let−7b−5p、hsa−miR−193b−3p、hsa−miR−221−3p、hsa−miR−365a−3p、hsa−miR−22−3pからなる群から選択される少なくとも1つのmiRNAを含む歯周炎バイオマーカー。 - 少なくともhsa−miR−223−3p、及びhsa−miR−200c−3pを含むことを特徴とする請求項4記載の歯周炎バイオマーカー。
- hsa−miR−223−3p、hsa−miR−101−3p、hsa−miR−374a−5p、hsa−miR−582−5p、hsa−miR−145−5p、hsa−miR−20a−3p、hsa−miR−194−5p、hsa−miR−26b−5p、hsa−miR−301a−3p、hsa−miR−140−5p、hsa−miR−590−5p、hsa−miR−30e−5p、hsa−miR−19a−3p、hsa−miR−338−3p、hsa−miR−126−5p、hsa−miR−144−5p、hsa−miR−144−3p、hsa−miR−30e−3p、hsa−miR−20a−5p、hsa−miR−200c−3p、hsa−miR−31−3p、hsa−miR−181b−5p、hsa−miR−203a、hsa−miR−200c−5p、hsa−miR−187−3p、hsa−miR−200b−5p、hsa−miR−99a−5p、hsa−miR−320a、hsa−miR−210−3p、hsa−miR−125a−5p、hsa−let−7i−5p、hsa−miR−100−5p、hsa−miR−155−5p、hsa−miR−21−3p、hsa−miR−200a−5p、hsa−miR−200b−3p、hsa−let−7e−5p、hsa−miR−222−3p、hsa−miR−125b−5p、hsa−miR−205−5pからなるmiRNAであることを特徴とする請求項4又は5記載の歯周炎バイオマーカー。
- 参照標準として、hsa−miR−324−5p、hsa−miR−29c−5p、hsa−miR−107、hsa−miR−324−3p、hsa−miR−30d−5pの少なくとも1つ以上を含むことを特徴とする請求項4〜6のいずれか1項記載の歯周炎バイオマーカー。
- hsa−miR−223−3p、hsa−miR−101−3p、hsa−miR−374a−5p、hsa−miR−582−5p、hsa−miR−145−5p、hsa−miR−20a−3p、hsa−miR−194−5p、hsa−miR−26b−5p、hsa−miR−301a−3p、hsa−miR−140−5p、hsa−miR−590−5p、hsa−miR−30e−5p、hsa−miR−19a−3p、hsa−miR−338−3p、hsa−miR−126−5p、hsa−miR−144−5p、hsa−miR−144−3p、hsa−miR−30e−3p、hsa−miR−20a−5p、hsa−miR−16−5p、hsa−miR−19b−3p、hsa−miR−15a−5p、hsa−miR−142−5p、hsa−miR−143−3p、hsa−miR−106b−5pからなる群から選択される少なくとも1つ、
及びhsa−miR−200c−3p、hsa−miR−31−3p、hsa−miR−181b−5p、hsa−miR−203a、hsa−miR−200c−5p、hsa−miR−187−3p、hsa−miR−200b−5p、hsa−miR−99a−5p、hsa−miR−320a、hsa−miR−210−3p、hsa−miR−125a−5p、hsa−let−7i−5p、hsa−miR−100−5p、hsa−miR−155−5p、hsa−miR−21−3p、hsa−miR−200a−5p、hsa−miR−200b−3p、hsa−let−7e−5p、hsa−miR−222−3p、hsa−miR−125b−5p、hsa−miR−205−5p、hsa−let−7b−5p、hsa−miR−193b−3p、hsa−miR−221−3p、hsa−miR−365a−3p、hsa−miR−22−3pからなる群から選択される少なくとも1つのmiRNAの発現量を検出するための配列を有する核酸を固定したアレイを含む歯周炎検査キット。 - 前記アレイが少なくともhsa−miR−223−3p、及びhsa−miR−200c−3pの発現量を検出するための配列を有する核酸を固定したものであることを特徴とする請求項8記載の歯周炎検査キット。
- 前記アレイが、
少なくともhsa−miR−223−3p、hsa−miR−101−3p、hsa−miR−374a−5p、hsa−miR−582−5p、hsa−miR−145−5p、hsa−miR−20a−3p、hsa−miR−194−5p、hsa−miR−26b−5p、hsa−miR−301a−3p、hsa−miR−140−5p、hsa−miR−590−5p、hsa−miR−30e−5p、hsa−miR−19a−3p、hsa−miR−338−3p、hsa−miR−126−5p、hsa−miR−144−5p、hsa−miR−144−3p、hsa−miR−30e−3p、hsa−miR−20a−5p、hsa−miR−200c−3p、hsa−miR−31−3p、hsa−miR−181b−5p、hsa−miR−203a、hsa−miR−200c−5p、hsa−miR−187−3p、hsa−miR−200b−5p、hsa−miR−99a−5p、hsa−miR−320a、hsa−miR−210−3p、hsa−miR−125a−5p、hsa−let−7i−5p、hsa−miR−100−5p、hsa−miR−155−5p、hsa−miR−21−3p、hsa−miR−200a−5p、hsa−miR−200b−3p、hsa−let−7e−5p、hsa−miR−222−3p、hsa−miR−125b−5p、hsa−miR−205−5pの発現量を検出するための配列を有する核酸を固定したアレイであることを特徴とする請求項8又は9記載の歯周炎検査キット。 - 参照標準として、hsa−miR−324−5p、hsa−miR−29c−5p、hsa−miR−107、hsa−miR−324−3p、hsa−miR−30d−5pの少なくとも1つ以上をアレイに含むことを特徴とする請求項8〜10のいずれか1項記載の歯周炎検査キット。
- 歯肉溝滲出液採取用ペーパーストリップ、
miRNA抽出試薬、
miRNA検出試薬を含むことを特徴とする請求項8〜11いずれか1項記載の歯周炎検査キット。 - 歯毎に採取された歯肉溝滲出液からmiRNAを抽出し、
hsa−miR−223−3p、hsa−miR−200c−3p、hsa−miR−101−3p、hsa−miR−374a−5p、hsa−miR−582−5p、hsa−miR−145−5p、hsa−miR−20a−3p、hsa−miR−194−5p、hsa−miR−26b−5p、hsa−miR−301a−3p、hsa−miR−140−5p、hsa−miR−590−5p、hsa−miR−30e−5p、hsa−miR−19a−3p、hsa−miR−338−3p、hsa−miR−126−5p、hsa−miR−144−5p、hsa−miR−144−3p、hsa−miR−30e−3p、hsa−miR−20a−5p、hsa−miR−16−5p、hsa−miR−19b−3p、hsa−miR−15a−5p、hsa−miR−142−5p、hsa−miR−143−3p、hsa−miR−106b−5p、hsa−miR−199b−5p、hsa−miR−628−5p、hsa−miR−194−3p、hsa−miR−636、hsa−miR−450b−5p、hsa−miR−192−5p、hsa−miR−338−5p、hsa−miR−215−5p、hsa−miR−548e−3p、hsa−miR−16−1−3p、hsa−miR−30c−5p、hsa−miR−340−3p、hsa−miR−30a−5p、hsa−miR−374b−3p、hsa−miR−611、hsa−miR−454−3p、hsa−miR−340−5p、hsa−miR−616−3p、hsa−miR−590−3p、hsa−miR−374b−5p、hsa−miR−545−3phsa−miR−525−5p、hsa−miR−301b、hsa−miR−646、hsa−miR−216b−5p、hsa−miR−582−3p、hsa−miR−1256、hsa−miR−518c−5p、hsa−miR−627−5p、hsa−miR−142−3p、hsa−miR−124−3p、hsa−miR−934、hsa−miR−510−5p、hsa−miR−298、hsa−miR−1181、hsa−miR−31−3p、hsa−miR−181b−5p、hsa−miR−203a、hsa−miR−200c−5p、hsa−miR−187−3p、hsa−miR−200b−5p、hsa−miR−99a−5p、hsa−miR−320a、hsa−miR−210−3p、hsa−miR−125a−5p、hsa−let−7i−5p、hsa−miR−100−5p、hsa−miR−155−5p、hsa−miR−21−3p、hsa−miR−200a−5p、hsa−miR−200b−3p、hsa−let−7e−5p、hsa−miR−222−3p、hsa−miR−125b−5p、hsa−miR−205−5p、hsa−let−7b−5p、hsa−miR−193b−3p、hsa−miR−221−3p、hsa−miR−365a−3p、hsa−miR−22−3p、hsa−miR−511−5p、hsa−miR−382−3phsa−miR−1247−5p、hsa−miR−125b−1−3p、hsa−miR−549a、hsa−miR−155−3p、hsa−miR−30b−3p、hsa−miR−205−3p、hsa−miR−449a、hsa−miR−135−3p、hsa−miR−222−5p、hsa−miR−641、hsa−miR−193b−5p、hsa−miR−1260a、hsa−miR−27b−5p、hsa−miR−335−3p、hsa−miR−125−2−3p、hsa−miR−92a−1−5p、hsa−miR−99b−5p、hsa−miR−99b−3p、hsa−miR−99a−3p、hsa−miR−151a-5p、hsa−miR−152−3p、hsa−miR−615−3p、hsa−let−7e−3p、hsa−miR−34c−3p、hsa−miR−663a、hsa−miR−150−5p、hsa−miR−671−3p、hsa−miR−1972、hsa−miR−181a−3p、hsa−miR−34b−3p、hsa−miR−30d−3p、hsa−miR−151a−3p、hsa−miR−320c、hsa−miR−320b、hsa−miR−455−5p、hsa−miR−593−3p、hsa−miR−95−3p、hsa−miR−193a−3p、hsa−miR−877−5p、hsa−miR−34c−5p、hsa−miR−342−5p、hsa−miR−26a−5p、hsa−miR−424−5pからなる群から選択される少なくとも1つ以上のmiRNA量を検出することを特徴とする歯周炎の検査方法。
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