JPWO2014171477A1 - ラクトバチルス属菌 - Google Patents
ラクトバチルス属菌 Download PDFInfo
- Publication number
- JPWO2014171477A1 JPWO2014171477A1 JP2015512500A JP2015512500A JPWO2014171477A1 JP WO2014171477 A1 JPWO2014171477 A1 JP WO2014171477A1 JP 2015512500 A JP2015512500 A JP 2015512500A JP 2015512500 A JP2015512500 A JP 2015512500A JP WO2014171477 A1 JPWO2014171477 A1 JP WO2014171477A1
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- bacteria
- lactic acid
- lactobacillus
- intestinal tract
- intestinal
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 title claims description 15
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 title claims description 15
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 claims abstract description 22
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 abstract description 83
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 70
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 abstract description 35
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 abstract description 35
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 9
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 abstract description 8
- 241000186684 Lactobacillus pentosus Species 0.000 abstract description 7
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 abstract description 7
- 230000037213 diet Effects 0.000 abstract description 7
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 abstract description 5
- 210000002429 large intestine Anatomy 0.000 abstract description 4
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 abstract description 4
- 230000037396 body weight Effects 0.000 abstract description 3
- 238000005303 weighing Methods 0.000 abstract description 2
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 20
- 235000009200 high fat diet Nutrition 0.000 description 16
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 15
- 239000000047 product Substances 0.000 description 10
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 9
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 6
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 5
- 239000006872 mrs medium Substances 0.000 description 5
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 5
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 description 4
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 description 4
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 description 4
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 4
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 235000021590 normal diet Nutrition 0.000 description 4
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 4
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 4
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 4
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 4
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 3
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
- 210000003736 gastrointestinal content Anatomy 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 101150079601 recA gene Proteins 0.000 description 3
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011746 C57BL/6J (JAX™ mouse strain) Methods 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000001046 Lactobacillus acidophilus Species 0.000 description 2
- 235000013956 Lactobacillus acidophilus Nutrition 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 108010019160 Pancreatin Proteins 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 2
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 229940039695 lactobacillus acidophilus Drugs 0.000 description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 229940055695 pancreatin Drugs 0.000 description 2
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 2
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 241001134770 Bifidobacterium animalis Species 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000186606 Lactobacillus gasseri Species 0.000 description 1
- 241001311696 Lactobacillus pentosus IG1 Species 0.000 description 1
- 241000917009 Lactobacillus rhamnosus GG Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 238000010306 acid treatment Methods 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 229940118852 bifidobacterium animalis Drugs 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 235000015140 cultured milk Nutrition 0.000 description 1
- 238000002224 dissection Methods 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 230000001815 facial effect Effects 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 210000004051 gastric juice Anatomy 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000012263 liquid product Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000012533 medium component Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 1
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 1
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 description 1
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 235000021127 solid diet Nutrition 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- DCXXMTOCNZCJGO-UHFFFAOYSA-N tristearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC DCXXMTOCNZCJGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
- A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/225—Lactobacillus
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Abstract
腸管内に到達後、小腸及び／又は大腸内、好ましくは小腸内での増殖能を有することを特徴とするラクトバチルス・ペントーサス ＴＵＡ４３３７Ｌ株（受託番号ＮＩＴＥ ＢＰ-１４７９）。本発明の乳酸菌は、腸管内での増殖能を有することから、体内に摂取すると、該乳酸菌が腸管内に到達して増殖することで、持続的に脂肪吸収を抑制したり、効果的に体重増加を抑制したりすることができ、ダイエット効果を目的として好適に用いられる。
Description
本発明は、ラクトバチルス属菌に関する。より詳しくは、新規なラクトバチルス・ペントーサス（Lactobacillus pentosus）に関する。
乳酸菌やビフィズス菌には、整腸効果や免疫賦活効果等の優れた生理活性を有するものがあり、菌種の特性に応じて各種用途に用いられている。なかでも、近年、これらの菌を摂取することによるダイエット効果について研究が進められており、多くの報告が挙げられている。
例えば、特許文献１では、ラクトバチルス・ラムノーサス ＡＴＣＣ５３１０３株が、肥満の原因となる脂質（トリアシルグリセロール）を分解して、体内への吸収を抑制することを報告している。また、植物性乳酸菌の一種であるＬ．ｂｒｅｖｉｓ ＫＢ２９０が、生きたまま腸内に到達し、腸内生存率ならびに腸管到達性に優れることも知られている（但し、摂取菌数より排泄菌数の方が少ない）（非特許文献１参照）。また、非特許文献２は、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ Ｌ−９２について、摂取菌数の９３％が糞便から回収されていることによって、該菌株の腸管到達性が優れているとしており、非特許文献３は、Ｌ．ｇａｓｓｅｒｉ ＳＢＴ２０５５の腸管生存性を調べ、１×１０６〜５×１０６ｃｆｕ／ｇを含む発酵乳１００ｇを投与したところ、糞便中から最大で１×１０５ｃｆｕ／ｇ程度検出されたと報告している。
一方、ビフィズス菌については、ビフィドバクテリウム・アニマリス・サブスピーシーズ・ラクティス ＧＣＬ２５０５株が、経口摂取後に生きて腸に到達する腸管到達性を備えるとともに、顕著な腸管内増殖性を示すことが報告されている（特許文献２参照）。非特許文献４は、Ｂ．ａｎｉｍａｌｉｓ ｓｓｐ． ｌａｃｔｉｓ ＤＮ−１７３ ０１０を成人に投与したところ、摂取した菌数に比べて糞便中からＤＮ−１７３ ０１０が２０％程度検出されたと報告している。
「乳酸菌の保健機能と応用」２００７年８月３１日 シーエムシー出版 １６０−１６２頁
日本乳酸菌学会誌 ２００１年１２号「ヒト腸管内で生残性の良いＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ Ｌ−９２株の単離とその性質」２８−３５頁
Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． ２００６年５０号「Ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ ａｎｄ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｏｆ Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｇａｓｓｅｒｉ ＳＢＴ２０５５ ｉｎ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｔｒａｃｔ．」８６７−８７０頁
Ｊ． Ｍｏｌ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ． Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ． ２００８年１４号「Ｓｕｒｖｉｖａｌ ｏｆ Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｎｉｍａｌｉｓ ＤＮ−１７３ ０１０ ｉｎ ｔｈｅ ｆａｅｃａｌ ｍｉｃｒｏｂｉｏｔａ ａｆｔｅｒ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ ｉｎ ｌｙｏｐｈｉｌｉｚｅｄ ｆｏｒｍ ｏｒ ｉｎ ｆｅｒｍｅｎｔｅｄ ｐｒｏｄｕｃｔ − ａ ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ ｓｔｕｄｙ ｉｎ ｈｅａｌｔｈｙ ａｄｕｌｔｓ．」１２８−１３６頁
従来、このように種々のプロバイオティクス菌においてその腸管到達性が調べられているが、乳酸菌についてはいずれも摂取した菌数と同等かそれ以下の菌数が腸管に到達したことが報告されるに止まるか、もしくは腸管に到達した菌数が測定されていない。
また、脂肪の吸収は主に小腸で行なわれるために、通常大腸で増殖するビフィズス菌が腸管内増殖性を示したとしても、脂肪吸収の抑制は十分ではない。さらに、乳酸菌は大腸より上流で作用することが知られているが、腸管内で増殖性を示す菌種の報告は未だない。
本発明の課題は、腸管内増殖性を示す乳酸菌を提供することにある。
本発明は、腸管内での増殖能を有することを特徴とするラクトバチルス・ペントーサス ＴＵＡ４３３７Ｌ株（受託番号ＮＩＴＥ ＢＰ-１４７９）に関する。
本発明の乳酸菌は、腸管内で増殖するという優れた効果を奏する。また、本発明の乳酸菌を摂取すると、該乳酸菌が腸管内に到達して増殖することで、脂肪吸収抑制効果が持続する等、菌体の生理活性が増強され、ひいては、高いダイエット効果が得られるという優れた効果が奏される。
本発明の乳酸菌は、ラクトバチルス・ペントーサス ＴＵＡ４３３７Ｌ株であり、腸管内での増殖能を有することを特徴とする。なお、本明細書において、「腸管内での増殖能を有する」又は「腸管内で増殖する」とは、腸管内に到達後、小腸及び／又は大腸内、好ましくは小腸内で増殖することであり、増殖能の程度は、人工腸液において３７℃で６ｈｒ培養した際に、植菌時のＯＤ６６０に対して１０倍以上の数値を示す場合に、「増殖能あり」と評価することができる。
本発明者らは、本発明者らが保有する約４８０種類の乳酸菌について、人工腸液中での増殖能を調べ、その中から選択したラクトバチルス・ペントーサスに属する菌の懸濁液を動物に投与したところ、ラクトバチルス・ペントーサス ＴＵＡ４３３７Ｌ株が、投与菌数に比べて排出された菌数が有意に多くなることを見出し、本発明を完成させるに至った。
ラクトバチルス・ペントーサス ＴＵＡ４３３７Ｌ株は、識別の表示ＮＲＩＣ ０８８３、受託番号ＮＩＴＥ ＢＰ−１４７９として、国際受託日２０１２年１２月１０日付で、独立行政法人 製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター（日本国千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８）に寄託されたものである。以下、ラクトバチルス・ペントーサス ＴＵＡ４３３７Ｌ株のことを、ＴＵＡ４３３７Ｌ株と略記する。
ＴＵＡ４３３７Ｌ株の菌学的性質を表１及び表２に示す。表２の糖資化性は細菌同定キットＡＰＩ ５０ＣＨ（ＢＩＯＭＥＴＲＩＥＵＸ）を用いて測定した結果である。なお、表２における「＋」は資化される糖であることを、「−」は資化されない糖であることを意味する。
ＴＵＡ４３３７Ｌ株は、後述の実施例にて詳述するが、摂取された菌数に対して排出される菌数が多くなる特徴、すなわち腸管内増殖性を有する。また、腸管内増殖性としては、例えば、人工腸液中にて３７℃で６時間培養後には、培養開始時の菌数を基準とすると、好ましくは１０倍以上、より好ましくは１５倍以上、さらに好ましくは２０倍以上、さらにより好ましくは２５倍以上の菌数を示す。
また、ＴＵＡ４３３７Ｌ株より抽出したＤＮＡから解読されたrecA遺伝子の配列（配列番号１）は、Lactobacillus pentosus IG1株のrecA遺伝子の配列と９９％の相同性を有する。なお、本明細書において、相同性は、例えば、Ａｌｔｓｃｈｕｌら（Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，２１５，４０３−４１０（１９９０））の開発したアルゴリズムを使用した検索プログラムＢＬＡＳＴを用いることにより、スコアで類似度が示される。
ＴＵＡ４３３７Ｌ株を培養するための培地としては、特に制限されず、通常の、炭素源、窒素源、無機塩類、有機栄養素などを含む培地が挙げられる。また、寒天培地や液体培地での培養も可能である。培養温度は、好ましくは１０〜４５℃、より好ましくは１５〜４２℃、さらに好ましくは２８〜３８℃、さらに好ましくは３５〜３７℃であり、増殖可能ｐＨは、好ましくはｐＨ３．０〜１２．５、より好ましくはｐＨ３．５〜１２．０である。
本発明の菌株としては、乳酸菌（生菌及び死菌）そのもの、乳酸菌含有物、乳酸菌処理物等の各種形態を挙げることができる。生菌は当該乳酸菌培養液等の乳酸菌含有物から得ることができる。死菌は、例えば、生菌に対して加熱、紫外線照射、ホルマリン処理、酸処理などを行うことにより得ることができる。得られた生菌、死菌は、さらに磨砕や破砕等により、処理物とすることができる。なお、前記各形態における乳酸菌は、腸管内で十分に増殖する効果を発揮する観点から、生菌であることが好ましいが、死菌が混在していてもよい。
前記乳酸菌としては、例えば、生菌体、湿潤菌、乾燥菌等を挙げることができる。前記乳酸菌含有物としては、例えば、乳酸菌懸濁液、乳酸菌培養物（菌体、培養上清、培地成分を含む）、乳酸菌培養液（菌培養物から固形分を除去したもの）を挙げることができる。また、前記乳酸菌処理物としては、例えば、磨砕物、破砕物、液状物（抽出液等）、濃縮物、ペースト化物、乾燥物（噴霧乾燥物、凍結乾燥物、真空乾燥物、ドラム乾燥物等）、希釈物等を挙げることができる。
以下、実施例を示して本発明を具体的に説明するが、本発明は下記実施例に制限されるものではない。
実施例１＜人工腸液における増殖能を指標にしたスクリーニング＞
本発明者らが保有する乳酸菌のうち、主に植物性乳酸菌である約４８０株（ＪＣＭ株を含む）について、人工腸液における増殖能を評価した。
本発明者らが保有する乳酸菌のうち、主に植物性乳酸菌である約４８０株（ＪＣＭ株を含む）について、人工腸液における増殖能を評価した。
具体的には、先ず、各乳酸菌をグリセロールストックからＭＲＳ培地（Ｄｉｆｃｏ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）（１０ｍＬ）へ１ｖ／ｖ％ずつとなるよう植菌し、３５℃で１６〜１７ｈｒ培養した。次に、各培養液のＯＤ６６０（６６０ｎｍにおける吸光度）を分光光度計 ＵＶ−１６００（島津製作所）を用いて測定し、各培養液のＯＤ６６０が１０となるようＭＲＳ培地で調製したもの１００μＬを下記に示す組成の人工腸液（１０ｍＬ）へ植菌した。その後、ゆるやかに振とうしながら３７℃で６ｈｒ培養した後、ＯＤ６６０を測定し、増殖倍率（６ｈｒ後のＯＤ６６０／植菌時のＯＤ６６０）を求めた。代表的なスクリーニング結果を表３及び図１に示す。
＜人工腸液（ｐＨ６．４５）＞
ＭＲＳ培地 ９ｍＬ
１０ｗ／ｖ％胆汁（和光純薬工業株式会社）溶液 １ｍＬ
１ｗ／ｖ％パンクレアチン（from Porcine：SIGMA） １００μＬ
なお、胆汁溶液及びパンクレアチン溶液は０．２２μｍのフィルター（ＰＶＤＦ ｍｅｍｂｒａｎｅ、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ社製）で処理することにより無菌にしたものを用いた。
＜人工腸液（ｐＨ６．４５）＞
ＭＲＳ培地 ９ｍＬ
１０ｗ／ｖ％胆汁（和光純薬工業株式会社）溶液 １ｍＬ
１ｗ／ｖ％パンクレアチン（from Porcine：SIGMA） １００μＬ
なお、胆汁溶液及びパンクレアチン溶液は０．２２μｍのフィルター（ＰＶＤＦ ｍｅｍｂｒａｎｅ、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ社製）で処理することにより無菌にしたものを用いた。
結果、ラクトバチルス・ペントーサス及びラクトバチルス・プランタラムで増殖倍率が高い傾向にあり、その中でもラクトバチルス・ペントーサス ＴＵＡ４３３７Ｌ株は特に増殖倍率が高く、腸管内での増殖性に優れることが分かる。
実施例２＜in vivo 腸管増殖能評価＞
高脂肪食を自由摂取させたマウスに以下のように調製したＴＵＡ４３３７Ｌ株を投与して、排泄される菌数を定量した。具体的には、以下のように調製した投与サンプルを用いて、乳酸菌約１０億ｃｅｌｌｓ（１．０×１０９ｃｅｌｌｓ）分（菌体懸濁液２５０μＬに相当）をＣ５７ＢＬ／６Ｊマウス（１０週齢、雄）に午前１０時ごろに１回投与した（ｎ＝５）。
＜投与サンプル（生菌含有サンプル）の調製＞
〔１〕ＴＵＡ４３３７Ｌ株のグリセロールストックから、ＭＲＳ培地（３０ｍＬ）へ１ｖ／ｖ％植菌
〔２〕培養（３５℃、２０ｈｒ）
〔３〕培養液を遠心（８０００ｒｐｍ、５ｍｉｎ）して上清除去後、ＰＢＳ（−）３０ｍＬで懸濁
〔４〕〔３〕の懸濁液を遠心（８０００ｒｐｍ、５ｍｉｎ）して上清除去後、ＰＢＳ（−）５ｍＬで再懸濁
〔５〕顕微鏡で菌数カウント
〔６〕１５ｍＬの遠心管に２００億ｃｅｌｌｓ分の溶液を分取し、遠心（８０００ｒｐｍ、５ｍｉｎ）して上清除去後、液状飼料（高脂肪食 ６０ｋｃａｌ％ＦＡＴ：Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｄｉｅｔ）５ｍＬに懸濁して菌体懸濁液を調製（液状飼料はＰＢＳ（−）で調製）
高脂肪食を自由摂取させたマウスに以下のように調製したＴＵＡ４３３７Ｌ株を投与して、排泄される菌数を定量した。具体的には、以下のように調製した投与サンプルを用いて、乳酸菌約１０億ｃｅｌｌｓ（１．０×１０９ｃｅｌｌｓ）分（菌体懸濁液２５０μＬに相当）をＣ５７ＢＬ／６Ｊマウス（１０週齢、雄）に午前１０時ごろに１回投与した（ｎ＝５）。
＜投与サンプル（生菌含有サンプル）の調製＞
〔１〕ＴＵＡ４３３７Ｌ株のグリセロールストックから、ＭＲＳ培地（３０ｍＬ）へ１ｖ／ｖ％植菌
〔２〕培養（３５℃、２０ｈｒ）
〔３〕培養液を遠心（８０００ｒｐｍ、５ｍｉｎ）して上清除去後、ＰＢＳ（−）３０ｍＬで懸濁
〔４〕〔３〕の懸濁液を遠心（８０００ｒｐｍ、５ｍｉｎ）して上清除去後、ＰＢＳ（−）５ｍＬで再懸濁
〔５〕顕微鏡で菌数カウント
〔６〕１５ｍＬの遠心管に２００億ｃｅｌｌｓ分の溶液を分取し、遠心（８０００ｒｐｍ、５ｍｉｎ）して上清除去後、液状飼料（高脂肪食 ６０ｋｃａｌ％ＦＡＴ：Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｄｉｅｔ）５ｍＬに懸濁して菌体懸濁液を調製（液状飼料はＰＢＳ（−）で調製）
その後、２日分の全糞便を４回に分けて回収し（試験開始日の午後、翌日の午前と午後、翌々日の午前）、以下の方法で全糞便当りの菌数を定量し、各マウスにおけるＴＵＡ４３３７Ｌ株の腸内増加率(全糞便当りの菌数／投与菌数)を算出した。結果を表４に示す。
＜リアルタイムＰＣＲによる菌数測定法＞
〔１〕糞便１００ｍｇ（湿重量）に対してＰＢＳ（−）１ｍＬを添加後、スパチュラーを用いて解砕
〔２〕糞便１００ｍｇ分をエッペンチューブ（登録商標）に採取後、遠心（１５０００ｒｐｍ、５ｍｉｎ）して上清除去後、ＰＢＳ（−）１ｍＬで懸濁（遠心から懸濁までの操作を２回繰り返す）
〔３〕〔２〕の懸濁液から上清除去後、キット（ＱＩＡａｍｐ ＤＮＡ Ｓｔｏｏｌ Ｍｉｎｉ Ｋｉｔ：キアゲン）を用いてＤＮＡを抽出
（細胞破砕は、Ｇｌａｓｓ ｂｅａｄｓ（１５０〜２１２μｍ：ＳＩＧＭＡ）３００ｍｇ、ｐｈｅｎｏｌ／ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ／ｉｓｏａｍｙｌａｌｃｏｈｏｌ（２５：２４：１）３００μＬ、及びｂｕｆｆｅｒ ＡＳＬ（キット中の試薬）９００μＬを添加し、ＭＵＬＴＩ−ＢＥＡＤＳ ＳＨＯＣＫＥＲ ＭＢ−２００（ＹＡＳＵＩ ＫＩＫＡＩ）で３０００ｒｐｍ、１ｍｉｎ遠心後、氷上１ｍｉｎ静置の操作を３回繰り返すことで行う）
〔４〕下記に示す条件のリアルタイムＰＣＲにより腸管内容物中の乳酸菌を定量
（（リアルタイムＰＣＲ条件））
（１） ＳＹＢＲ Ｐｒｅｍｉｘ Ｅｘ Ｔａｑ ｌｌ（Ｔａｋａｒａ Ｂｉｏ）１０μＬ、ｅａｃｈ ｐｒｉｍｅｒ（１０μＭ）０．８μＬ、ＲＯＸ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ＤｙｅＩＩ ０．４μＬ、滅菌水６μＬ、ＤＮＡ溶液２μＬを混合してＰＣＲ反応液を調製する。プライマーはラクトバチルス・ペントーサス及びラクトバチルス・プランタラムの１６Ｓ ｒＤＮＡを特異的に検出する以下のプライマーを用いる（ラクトバチルス・ペントーサスとラクトバチルス・プランタラムの１６Ｓ ｒＤＮＡの配列は１００％同一である）。
ｐｒｉｍｅｒ１：5’-GCAAGTCGAACGAACTCTGGTATT-3’（配列番号２）
ｐｒｉｍｅｒ２：5’-CGGACCATGCGGTCCAA-3’（配列番号３）
（２） ＰＣＲは７５００ Ｒｅａｌ Ｔｉｍｅ ＰＣＲ Ｓｙｓｔｅｍ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を用いて、９５℃ ３０秒の後、９５℃ ５秒、６０℃ ３４秒を１サイクルとして、合計６０サイクル反応を行い、得られた蛍光強度と腸管内容物合計量と希釈倍率から腸管内容物１ｇ当りのコピー数を求める。
（３） 別途１ｃｅｌｌ当たりの１６Ｓ ｒＤＮＡのコピー数を求め、菌数に換算する。なお、乳酸菌を投与していないマウスにおいては、前記リアルタイムＰＣＲによりラクトバチルス・ペントーサス及びラクトバチルス・プランタラムのいずれも検出されないことを確認する。
＜リアルタイムＰＣＲによる菌数測定法＞
〔１〕糞便１００ｍｇ（湿重量）に対してＰＢＳ（−）１ｍＬを添加後、スパチュラーを用いて解砕
〔２〕糞便１００ｍｇ分をエッペンチューブ（登録商標）に採取後、遠心（１５０００ｒｐｍ、５ｍｉｎ）して上清除去後、ＰＢＳ（−）１ｍＬで懸濁（遠心から懸濁までの操作を２回繰り返す）
〔３〕〔２〕の懸濁液から上清除去後、キット（ＱＩＡａｍｐ ＤＮＡ Ｓｔｏｏｌ Ｍｉｎｉ Ｋｉｔ：キアゲン）を用いてＤＮＡを抽出
（細胞破砕は、Ｇｌａｓｓ ｂｅａｄｓ（１５０〜２１２μｍ：ＳＩＧＭＡ）３００ｍｇ、ｐｈｅｎｏｌ／ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ／ｉｓｏａｍｙｌａｌｃｏｈｏｌ（２５：２４：１）３００μＬ、及びｂｕｆｆｅｒ ＡＳＬ（キット中の試薬）９００μＬを添加し、ＭＵＬＴＩ−ＢＥＡＤＳ ＳＨＯＣＫＥＲ ＭＢ−２００（ＹＡＳＵＩ ＫＩＫＡＩ）で３０００ｒｐｍ、１ｍｉｎ遠心後、氷上１ｍｉｎ静置の操作を３回繰り返すことで行う）
〔４〕下記に示す条件のリアルタイムＰＣＲにより腸管内容物中の乳酸菌を定量
（（リアルタイムＰＣＲ条件））
（１） ＳＹＢＲ Ｐｒｅｍｉｘ Ｅｘ Ｔａｑ ｌｌ（Ｔａｋａｒａ Ｂｉｏ）１０μＬ、ｅａｃｈ ｐｒｉｍｅｒ（１０μＭ）０．８μＬ、ＲＯＸ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ＤｙｅＩＩ ０．４μＬ、滅菌水６μＬ、ＤＮＡ溶液２μＬを混合してＰＣＲ反応液を調製する。プライマーはラクトバチルス・ペントーサス及びラクトバチルス・プランタラムの１６Ｓ ｒＤＮＡを特異的に検出する以下のプライマーを用いる（ラクトバチルス・ペントーサスとラクトバチルス・プランタラムの１６Ｓ ｒＤＮＡの配列は１００％同一である）。
ｐｒｉｍｅｒ１：5’-GCAAGTCGAACGAACTCTGGTATT-3’（配列番号２）
ｐｒｉｍｅｒ２：5’-CGGACCATGCGGTCCAA-3’（配列番号３）
（２） ＰＣＲは７５００ Ｒｅａｌ Ｔｉｍｅ ＰＣＲ Ｓｙｓｔｅｍ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を用いて、９５℃ ３０秒の後、９５℃ ５秒、６０℃ ３４秒を１サイクルとして、合計６０サイクル反応を行い、得られた蛍光強度と腸管内容物合計量と希釈倍率から腸管内容物１ｇ当りのコピー数を求める。
（３） 別途１ｃｅｌｌ当たりの１６Ｓ ｒＤＮＡのコピー数を求め、菌数に換算する。なお、乳酸菌を投与していないマウスにおいては、前記リアルタイムＰＣＲによりラクトバチルス・ペントーサス及びラクトバチルス・プランタラムのいずれも検出されないことを確認する。
結果、ラクトバチルス・ペントーサス ＴＵＡ４３３７Ｌ株の排泄物中における菌数は、摂取した菌数よりも多いことが分かった。これらのことから、ラクトバチルス・ペントーサス ４３３７Ｌ株が胃を生きた状態で通過後、腸管内で増殖して排出されていることが示唆された。
実施例３＜体重増加抑制効果＞
Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス（８週齢、雄）を、通常食群、高脂肪食群、高脂肪食＋生菌群、高脂肪食＋死菌群の４群に群分けし（各ｎ＝１０）、それぞれに以下の表５に示す食餌を３２日間続け、体重を毎日測定して平均値を算出した。平均値の推移を図２に示す。なお、群間比較は、有意水準０．０５によるｔ検定を用いて行った。
Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス（８週齢、雄）を、通常食群、高脂肪食群、高脂肪食＋生菌群、高脂肪食＋死菌群の４群に群分けし（各ｎ＝１０）、それぞれに以下の表５に示す食餌を３２日間続け、体重を毎日測定して平均値を算出した。平均値の推移を図２に示す。なお、群間比較は、有意水準０．０５によるｔ検定を用いて行った。
具体的には、食餌は、表５の各群にそれぞれの固形餌を自由摂取させた。高脂肪食＋生菌群は、実施例２と同様にして調製した投与サンプルを、高脂肪食＋死菌群は、以下のようにして調製した投与サンプルを、それぞれ、１日あたり乳酸菌約１０億ｃｅｌｌｓ分となる量を投与した。一方、通常食群には乳酸菌の入っていないＰＢＳ（−）２５０μＬ、高脂肪食群には乳酸菌の入っていない液状飼料２５０μＬを投与した。
＜投与サンプル（死菌含有サンプル）の調製＞
〔１〕ＴＵＡ４３３７Ｌ株のグリセロールストックから、ＭＲＳ培地（３０ｍＬ）へ１ｖ／ｖ％植菌
〔２〕培養（３５℃、２０ｈｒ）
〔３〕培養液を遠心（８０００ｒｐｍ、５ｍｉｎ）して上清除去後、ＰＢＳ（−）３０ｍＬで懸濁
〔４〕〔３〕の懸濁液を遠心（８０００ｒｐｍ、５ｍｉｎ）して上清除去後、ＰＢＳ（−）５ｍＬで再懸濁
〔５〕顕微鏡で菌数カウント
〔６〕１５ｍＬの遠心管に２００億ｃｅｌｌｓ分の溶液を分取し、遠心（８０００ｒｐｍ、５ｍｉｎ）して上清除去後、人工胃液（１２５ｍＭ ＮａＣｌ、７ｍＭ ＫＣｌ、ｐＨ１．０）５ｍＬを添加して攪拌後６０ｍｉｎ放置
〔７〕〔６〕の溶液を遠心（８０００ｒｐｍ、５ｍｉｎ）して上清除去後、液状飼料（６０ｋｃａｌ％ＦＡＴ）５ｍＬで懸濁して菌体懸濁液を調製
〔１〕ＴＵＡ４３３７Ｌ株のグリセロールストックから、ＭＲＳ培地（３０ｍＬ）へ１ｖ／ｖ％植菌
〔２〕培養（３５℃、２０ｈｒ）
〔３〕培養液を遠心（８０００ｒｐｍ、５ｍｉｎ）して上清除去後、ＰＢＳ（−）３０ｍＬで懸濁
〔４〕〔３〕の懸濁液を遠心（８０００ｒｐｍ、５ｍｉｎ）して上清除去後、ＰＢＳ（−）５ｍＬで再懸濁
〔５〕顕微鏡で菌数カウント
〔６〕１５ｍＬの遠心管に２００億ｃｅｌｌｓ分の溶液を分取し、遠心（８０００ｒｐｍ、５ｍｉｎ）して上清除去後、人工胃液（１２５ｍＭ ＮａＣｌ、７ｍＭ ＫＣｌ、ｐＨ１．０）５ｍＬを添加して攪拌後６０ｍｉｎ放置
〔７〕〔６〕の溶液を遠心（８０００ｒｐｍ、５ｍｉｎ）して上清除去後、液状飼料（６０ｋｃａｌ％ＦＡＴ）５ｍＬで懸濁して菌体懸濁液を調製
結果、コントロール（高脂肪食群）に対して、ＴＵＡ４３３７Ｌ生菌投与群で有意な体重増加抑制効果を示した。また生菌投与は死菌投与よりもより効果的であった。ラクトバチルス・ペントーサス ＴＵＡ４３３７Ｌ株が腸管で増殖したことにより効果的に宿主へ影響を与えたことが考えられる。
実施例４＜脂肪吸収抑制効果＞
実施例３における通常食群、高脂肪食群、高脂肪食＋生菌群の群構成で（各ｎ＝１２）、それぞれに実施例３と同じ内容の食餌を２週間続けた。その後、一晩絶食させた後、オリーブオイル（ｎａｃａｌａｉ ｔｅｓｑｕｅ）を投与し（５ｍＬ／ｋｇ）、さらに３時間後に解剖して大静脈から血清を採取した。血清中のトリグリセライド（ＴＧ）をトリグリセライド Ｅ−テストワコー（和光純薬工業株式会社）を用いて測定した。結果を図３に示す。なお、群間比較は、有意水準０．０５によるｔ検定による有意差判定を行った。
実施例３における通常食群、高脂肪食群、高脂肪食＋生菌群の群構成で（各ｎ＝１２）、それぞれに実施例３と同じ内容の食餌を２週間続けた。その後、一晩絶食させた後、オリーブオイル（ｎａｃａｌａｉ ｔｅｓｑｕｅ）を投与し（５ｍＬ／ｋｇ）、さらに３時間後に解剖して大静脈から血清を採取した。血清中のトリグリセライド（ＴＧ）をトリグリセライド Ｅ−テストワコー（和光純薬工業株式会社）を用いて測定した。結果を図３に示す。なお、群間比較は、有意水準０．０５によるｔ検定による有意差判定を行った。
結果、通常食群に対して高脂肪食群で、明らかに血中ＴＧの増加傾向が認められた。従って、高脂肪食を食べ続けると脂肪を吸収しやすい体になることが考えられる。また、コントロール（高脂肪食群）に対して、ＴＵＡ４３３７Ｌ生菌投与群で血中ＴＧの増加抑制が認められた。従って、体重増加抑制効果の１つのメカニズムとして脂肪吸収抑制が考えられ、ＴＵＡ４３３７Ｌ生菌投与から１日後であっても効果的であったことから持続的に効果を発揮すると考えられる。
本発明の乳酸菌は、腸管内での増殖能を有することから、体内に摂取すると、該乳酸菌が腸管内に到達して増殖することで、持続的に脂肪吸収を抑制したり、効果的に体重増加を抑制したりすることができ、ダイエット効果を目的として好適に用いられる。
配列表の配列番号１は、ラクトバチルス・ペントーサス ＴＵＡ４３３７ＬのrecAの塩基配列である。
配列表の配列番号２は、ラクトバチルス・ペントーサス／プランタラム特異的プライマーの塩基配列である。
配列表の配列番号３は、ラクトバチルス・ペントーサス／プランタラム特異的プライマーの塩基配列である。
配列表の配列番号２は、ラクトバチルス・ペントーサス／プランタラム特異的プライマーの塩基配列である。
配列表の配列番号３は、ラクトバチルス・ペントーサス／プランタラム特異的プライマーの塩基配列である。
Claims (1)
- 腸管内での増殖能を有することを特徴とするラクトバチルス・ペントーサス ＴＵＡ４３３７Ｌ株（受託番号ＮＩＴＥ ＢＰ-１４７９）。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2015512500A JP5866115B2 (ja) | 2013-04-17 | 2014-04-16 | ラクトバチルス属菌 |
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2013086575 | 2013-04-17 | ||
| JP2013086575 | 2013-04-17 | ||
| JP2015512500A JP5866115B2 (ja) | 2013-04-17 | 2014-04-16 | ラクトバチルス属菌 |
| PCT/JP2014/060811 WO2014171477A1 (ja) | 2013-04-17 | 2014-04-16 | ラクトバチルス属菌 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP5866115B2 JP5866115B2 (ja) | 2016-02-17 |
| JPWO2014171477A1 true JPWO2014171477A1 (ja) | 2017-02-23 |
Family
ID=51731414
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2015512500A Active JP5866115B2 (ja) | 2013-04-17 | 2014-04-16 | ラクトバチルス属菌 |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20160115559A1 (ja) |
| EP (1) | EP2987853B1 (ja) |
| JP (1) | JP5866115B2 (ja) |
| KR (1) | KR20150143804A (ja) |
| CN (1) | CN105143438B (ja) |
| AU (1) | AU2014254812B2 (ja) |
| CA (1) | CA2908031A1 (ja) |
| ES (1) | ES2633495T3 (ja) |
| HK (1) | HK1213010A1 (ja) |
| MY (1) | MY174136A (ja) |
| NZ (1) | NZ712617A (ja) |
| WO (1) | WO2014171477A1 (ja) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP6588742B2 (ja) * | 2015-06-16 | 2019-10-09 | サントリーホールディングス株式会社 | 免疫機能亢進剤 |
| JP6785141B2 (ja) * | 2016-12-09 | 2020-11-18 | サントリーホールディングス株式会社 | 基礎代謝亢進剤 |
| JP2021020944A (ja) * | 2020-10-26 | 2021-02-18 | サントリーホールディングス株式会社 | 基礎代謝亢進剤 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH07250649A (ja) * | 1994-01-13 | 1995-10-03 | Soc Prod Nestle Sa | 食品の脂肪カロリー含量の低減方法 |
| JP2004073178A (ja) * | 2002-08-09 | 2004-03-11 | Bioneer Corp | 肥満および糖尿病の予防・治療用微生物 |
| JP2007135596A (ja) * | 2002-10-30 | 2007-06-07 | Korea Food Developing Res Inst | コレステロールを低下および同化する能力を有する酸および胆汁酸塩耐性のＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ分離株 |
| JP2007284360A (ja) * | 2006-04-13 | 2007-11-01 | Mitsukan Group Honsha:Kk | 乳酸菌由来のｐｐａｒ依存的遺伝子転写活性化組成物 |
| JP2008179595A (ja) * | 2006-12-28 | 2008-08-07 | Nisshin Pharma Inc | 新規乳酸菌および脂肪細胞分化促進用乳酸菌発酵産物 |
| JP2011217715A (ja) * | 2010-04-08 | 2011-11-04 | Snowden Co Ltd | ラクトバシラスジョンソニイＮｏ．１０８８のコレステロール抑制効果を有する各種製品 |
Family Cites Families (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6417179B1 (en) * | 1998-10-13 | 2002-07-09 | Craig G. Burkhart | Ear wax solution |
| TW552827B (en) * | 2002-06-28 | 2003-09-11 | Ritdisplay Corp | Apparatus of repairing organic light-emitting element defect |
| US7517681B2 (en) * | 2003-01-29 | 2009-04-14 | Biogaia Ab | Selection and use of lactic acid bacteria for reducing dental caries and bacteria causing dental caries |
| KR101196036B1 (ko) * | 2003-07-01 | 2012-10-31 | 에센티스 에이비 | 영양실조 또는 높은 혈장 글루코스 상태를 치료하기 위한알파-케토글루타르산의 용도 |
| US7842495B2 (en) * | 2003-08-21 | 2010-11-30 | Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. | Lactic acid bacteria capable of stimulating mucosal immunity |
| JP4515157B2 (ja) * | 2004-05-28 | 2010-07-28 | サントリーホールディングス株式会社 | 免疫調節作用を有する乳酸菌 |
| JP5144263B2 (ja) | 2005-07-26 | 2013-02-13 | ネステク ソシエテ アノニム | 抗肥満剤および抗肥満食品 |
| CN1769426B (zh) * | 2005-10-08 | 2010-04-14 | 中国农业大学 | 一种戊糖乳杆菌细菌素及其专用生产菌株与应用 |
| US8304383B2 (en) * | 2005-11-22 | 2012-11-06 | Atheronova Operations, Inc. | Dissolution of arterial plaque |
| IT1397566B1 (it) * | 2009-05-27 | 2013-01-16 | Probiotical Spa | Lactobacillus pentosus produttore di batteriocine, composizioni alimentari e farmaceutiche contenenti lo stesso e relativo uso |
| US8338389B2 (en) * | 2009-06-17 | 2012-12-25 | Kao Corporation | Agent for preventing or ameliorating obesity |
| JP2011172506A (ja) | 2010-02-24 | 2011-09-08 | Glico Dairy Products Co Ltd | プロバイオティクス用のビフィドバクテリウム・アニマリス・サブスピーシーズ・ラクティス菌株及びこれを用いたプロバイオティクス乳酸菌発酵食品又はその他のプロバイオティクス経口食品。 |
| US8956590B2 (en) * | 2011-07-22 | 2015-02-17 | Altera International, Ltd. | Compositions and methods for reducing the incidence of equine digestive disorders |
| ES2684074T3 (es) * | 2013-04-17 | 2018-10-01 | Suntory Holdings Limited | Composición que contiene una bacteria que pertenece al género Lactobacillus |
-
2014
- 2014-04-16 ES ES14785480.6T patent/ES2633495T3/es active Active
- 2014-04-16 NZ NZ712617A patent/NZ712617A/en unknown
- 2014-04-16 JP JP2015512500A patent/JP5866115B2/ja active Active
- 2014-04-16 CA CA2908031A patent/CA2908031A1/en not_active Abandoned
- 2014-04-16 MY MYPI2015703666A patent/MY174136A/en unknown
- 2014-04-16 US US14/784,345 patent/US20160115559A1/en not_active Abandoned
- 2014-04-16 AU AU2014254812A patent/AU2014254812B2/en active Active
- 2014-04-16 KR KR1020157032783A patent/KR20150143804A/ko not_active Application Discontinuation
- 2014-04-16 WO PCT/JP2014/060811 patent/WO2014171477A1/ja active Application Filing
- 2014-04-16 EP EP14785480.6A patent/EP2987853B1/en active Active
- 2014-04-16 CN CN201480021892.1A patent/CN105143438B/zh active Active
-
2016
- 2016-01-26 HK HK16100872.5A patent/HK1213010A1/zh unknown
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH07250649A (ja) * | 1994-01-13 | 1995-10-03 | Soc Prod Nestle Sa | 食品の脂肪カロリー含量の低減方法 |
| JP2004073178A (ja) * | 2002-08-09 | 2004-03-11 | Bioneer Corp | 肥満および糖尿病の予防・治療用微生物 |
| JP2007135596A (ja) * | 2002-10-30 | 2007-06-07 | Korea Food Developing Res Inst | コレステロールを低下および同化する能力を有する酸および胆汁酸塩耐性のＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ分離株 |
| JP2007284360A (ja) * | 2006-04-13 | 2007-11-01 | Mitsukan Group Honsha:Kk | 乳酸菌由来のｐｐａｒ依存的遺伝子転写活性化組成物 |
| JP2008179595A (ja) * | 2006-12-28 | 2008-08-07 | Nisshin Pharma Inc | 新規乳酸菌および脂肪細胞分化促進用乳酸菌発酵産物 |
| JP2011217715A (ja) * | 2010-04-08 | 2011-11-04 | Snowden Co Ltd | ラクトバシラスジョンソニイＮｏ．１０８８のコレステロール抑制効果を有する各種製品 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| J. MED. INVEST., vol. 56, JPN6014022394, 2009, pages 42 - 8, ISSN: 0003215022 * |
| 前川敏宏 他: "Lactobacillus pentosus S‐PT84株による抗肥満効果", 日本農芸化学会大会講演要旨集, vol. p.67, JPN6014022393, 2011, ISSN: 0003215024 * |
| 周涌衛 他: "ラットにおける乳酸菌の食後高トリアシルグリセロール血症改善作用", 日本農芸化学会大会講演要要旨集, JPN6014022397, 2011, pages 67, ISSN: 0003215023 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN105143438A (zh) | 2015-12-09 |
| CN105143438B (zh) | 2017-10-31 |
| NZ712617A (en) | 2020-02-28 |
| EP2987853B1 (en) | 2017-05-31 |
| AU2014254812B2 (en) | 2019-06-13 |
| WO2014171477A1 (ja) | 2014-10-23 |
| MY174136A (en) | 2020-03-10 |
| EP2987853A4 (en) | 2016-09-14 |
| ES2633495T3 (es) | 2017-09-21 |
| CA2908031A1 (en) | 2014-10-23 |
| EP2987853A1 (en) | 2016-02-24 |
| AU2014254812A1 (en) | 2015-10-22 |
| KR20150143804A (ko) | 2015-12-23 |
| JP5866115B2 (ja) | 2016-02-17 |
| US20160115559A1 (en) | 2016-04-28 |
| HK1213010A1 (zh) | 2016-06-24 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5891337B2 (ja) | ラクトバチルス属菌含有組成物 | |
| Nath et al. | In vitro screening of probiotic properties of Lactobacillus plantarum isolated from fermented milk product | |
| Gaudana et al. | Probiotic attributes of Lactobacillus strains isolated from food and of human origin | |
| Heravi et al. | Screening of lactobacilli bacteria isolated from gastrointestinal tract of broiler chickens for their use as probiotic | |
| CN110582290A (zh) | 用于治疗微生物群失调的活细菌聚生体 | |
| Choudhary et al. | Evaluation of probiotic potential and safety assessment of Lactobacillus pentosus MMP4 isolated from mare’s lactation | |
| MX2013014340A (es) | Cepas/celulas de lactobacillus secadas por aspersion, y el uso de las mismas contra helicobacter pylori. | |
| JP2007189973A (ja) | 血中コレステロール低減作用を有する新規乳酸菌 | |
| Gao et al. | Screening of lactic acid bacteria with cholesterol-lowering and triglyceride-lowering activity in vitro and evaluation of probiotic function | |
| JP5866115B2 (ja) | ラクトバチルス属菌 | |
| Esawy et al. | Evaluation of honey as new reservoir for probiotic bacteria | |
| Alfano et al. | Lactobacillus plantarum: microfiltration experiments for the production of probiotic biomass to be used in food and nutraceutical preparations | |
| JP5610472B2 (ja) | 新規乳酸菌及び新規乳酸菌含有組成物 | |
| Sourabh et al. | Diversity of bacterial probiotics in traditional fermented foods of Western Himalayas | |
| JP2009100692A (ja) | 新規なラクトバチルス属微生物および哺乳動物用乳酸菌製剤 | |
| JP2008271931A (ja) | 新規な乳酸菌及び当該乳酸菌を使用して加工した各種製品 | |
| Widodo et al. | Human origin Lactobacillus casei isolated from Indonesian infants demonstrating potential characteristics as probiotics in vitro | |
| Ebrahimi et al. | Native chicken-derived Lactobacillus spp. strains with high probiotic, cholesterol-assimilation and aflatoxin-degradation capabilities | |
| Zavišić et al. | Characterisation and preliminary lipid-lowering evaluation of Lactobacillus isolated from a traditional Serbian dairy product | |
| Orike et al. | PROBIOTIC POTENTIALS OF LACTIC ACID BACTERIA ISOLATED FROM FERMENTING CASSAVA. | |
| Kim et al. | In vitro characterization study of Bacillus mojavensis KJS-3 for a potential probiotic | |
| JP2022117889A (ja) | 酸化ストレス抵抗性付与能（ｉｌ－８抑制能）及び小腸幹細胞遺伝子調節機能を有する乳酸菌 | |
| Mahmoud et al. | Bioprospecting for Novel Probiotic Strains from Human Milk and Infants: Molecular, Biochemical, and Ultrastructural Evidence. Biology 2022, 11, 1405 | |
| Kusmiyati et al. | Nova Biotechnologica et Chimica | |
| Sharma et al. | Identification and characterization of bile salt hydrolyzing Lactobacillus isolates |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A975 | Report on accelerated examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971005 Effective date: 20151117 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20151210 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20151229 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5866115 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |