JPWO2008090922A1 - 分析用チップ及び分析方法 - Google Patents
分析用チップ及び分析方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JPWO2008090922A1 JPWO2008090922A1 JP2008512626A JP2008512626A JPWO2008090922A1 JP WO2008090922 A1 JPWO2008090922 A1 JP WO2008090922A1 JP 2008512626 A JP2008512626 A JP 2008512626A JP 2008512626 A JP2008512626 A JP 2008512626A JP WO2008090922 A1 JPWO2008090922 A1 JP WO2008090922A1
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- substrate
- analysis chip
- fine particles
- test substance
- selective binding
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54393—Improving reaction conditions or stability, e.g. by coating or irradiation of surface, by reduction of non-specific binding, by promotion of specific binding
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01F—MIXING, e.g. DISSOLVING, EMULSIFYING OR DISPERSING
- B01F33/00—Other mixers; Mixing plants; Combinations of mixers
- B01F33/25—Mixers with loose mixing elements, e.g. loose balls in a receptacle
- B01F33/251—Mixers with loose mixing elements, e.g. loose balls in a receptacle using balls as loose mixing element
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01F—MIXING, e.g. DISSOLVING, EMULSIFYING OR DISPERSING
- B01F33/00—Other mixers; Mixing plants; Combinations of mixers
- B01F33/30—Micromixers
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J19/00—Chemical, physical or physico-chemical processes in general; Their relevant apparatus
- B01J19/0046—Sequential or parallel reactions, e.g. for the synthesis of polypeptides or polynucleotides; Apparatus and devices for combinatorial chemistry or for making molecular arrays
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6813—Hybridisation assays
- C12Q1/6834—Enzymatic or biochemical coupling of nucleic acids to a solid phase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6813—Hybridisation assays
- C12Q1/6834—Enzymatic or biochemical coupling of nucleic acids to a solid phase
- C12Q1/6837—Enzymatic or biochemical coupling of nucleic acids to a solid phase using probe arrays or probe chips
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J2219/00—Chemical, physical or physico-chemical processes in general; Their relevant apparatus
- B01J2219/00274—Sequential or parallel reactions; Apparatus and devices for combinatorial chemistry or for making arrays; Chemical library technology
- B01J2219/00277—Apparatus
- B01J2219/00279—Features relating to reactor vessels
- B01J2219/00306—Reactor vessels in a multiple arrangement
- B01J2219/00313—Reactor vessels in a multiple arrangement the reactor vessels being formed by arrays of wells in blocks
- B01J2219/00315—Microtiter plates
- B01J2219/00317—Microwell devices, i.e. having large numbers of wells
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J2219/00—Chemical, physical or physico-chemical processes in general; Their relevant apparatus
- B01J2219/00274—Sequential or parallel reactions; Apparatus and devices for combinatorial chemistry or for making arrays; Chemical library technology
- B01J2219/00277—Apparatus
- B01J2219/00351—Means for dispensing and evacuation of reagents
- B01J2219/00387—Applications using probes
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J2219/00—Chemical, physical or physico-chemical processes in general; Their relevant apparatus
- B01J2219/00274—Sequential or parallel reactions; Apparatus and devices for combinatorial chemistry or for making arrays; Chemical library technology
- B01J2219/00277—Apparatus
- B01J2219/00479—Means for mixing reactants or products in the reaction vessels
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J2219/00—Chemical, physical or physico-chemical processes in general; Their relevant apparatus
- B01J2219/00274—Sequential or parallel reactions; Apparatus and devices for combinatorial chemistry or for making arrays; Chemical library technology
- B01J2219/00277—Apparatus
- B01J2219/00497—Features relating to the solid phase supports
- B01J2219/00504—Pins
- B01J2219/00509—Microcolumns
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J2219/00—Chemical, physical or physico-chemical processes in general; Their relevant apparatus
- B01J2219/00274—Sequential or parallel reactions; Apparatus and devices for combinatorial chemistry or for making arrays; Chemical library technology
- B01J2219/00583—Features relative to the processes being carried out
- B01J2219/00596—Solid-phase processes
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J2219/00—Chemical, physical or physico-chemical processes in general; Their relevant apparatus
- B01J2219/00274—Sequential or parallel reactions; Apparatus and devices for combinatorial chemistry or for making arrays; Chemical library technology
- B01J2219/00583—Features relative to the processes being carried out
- B01J2219/00603—Making arrays on substantially continuous surfaces
- B01J2219/00605—Making arrays on substantially continuous surfaces the compounds being directly bound or immobilised to solid supports
- B01J2219/00608—DNA chips
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J2219/00—Chemical, physical or physico-chemical processes in general; Their relevant apparatus
- B01J2219/00274—Sequential or parallel reactions; Apparatus and devices for combinatorial chemistry or for making arrays; Chemical library technology
- B01J2219/00583—Features relative to the processes being carried out
- B01J2219/00603—Making arrays on substantially continuous surfaces
- B01J2219/00605—Making arrays on substantially continuous surfaces the compounds being directly bound or immobilised to solid supports
- B01J2219/0061—The surface being organic
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J2219/00—Chemical, physical or physico-chemical processes in general; Their relevant apparatus
- B01J2219/00274—Sequential or parallel reactions; Apparatus and devices for combinatorial chemistry or for making arrays; Chemical library technology
- B01J2219/00583—Features relative to the processes being carried out
- B01J2219/00603—Making arrays on substantially continuous surfaces
- B01J2219/00605—Making arrays on substantially continuous surfaces the compounds being directly bound or immobilised to solid supports
- B01J2219/00614—Delimitation of the attachment areas
- B01J2219/00621—Delimitation of the attachment areas by physical means, e.g. trenches, raised areas
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J2219/00—Chemical, physical or physico-chemical processes in general; Their relevant apparatus
- B01J2219/00274—Sequential or parallel reactions; Apparatus and devices for combinatorial chemistry or for making arrays; Chemical library technology
- B01J2219/00583—Features relative to the processes being carried out
- B01J2219/00603—Making arrays on substantially continuous surfaces
- B01J2219/00605—Making arrays on substantially continuous surfaces the compounds being directly bound or immobilised to solid supports
- B01J2219/00623—Immobilisation or binding
- B01J2219/00626—Covalent
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J2219/00—Chemical, physical or physico-chemical processes in general; Their relevant apparatus
- B01J2219/00274—Sequential or parallel reactions; Apparatus and devices for combinatorial chemistry or for making arrays; Chemical library technology
- B01J2219/00583—Features relative to the processes being carried out
- B01J2219/00603—Making arrays on substantially continuous surfaces
- B01J2219/00659—Two-dimensional arrays
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J2219/00—Chemical, physical or physico-chemical processes in general; Their relevant apparatus
- B01J2219/00274—Sequential or parallel reactions; Apparatus and devices for combinatorial chemistry or for making arrays; Chemical library technology
- B01J2219/00718—Type of compounds synthesised
- B01J2219/0072—Organic compounds
- B01J2219/00722—Nucleotides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2527/00—Reactions demanding special reaction conditions
- C12Q2527/125—Specific component of sample, medium or buffer
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2563/00—Nucleic acid detection characterized by the use of physical, structural and functional properties
- C12Q2563/155—Particles of a defined size, e.g. nanoparticles
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
2 微粒子
3A カバー部材凸部
3、3B カバー部材
10 凹部
11 凸部
12 選択結合性物質が固定化された領域(凹凸部)
13 平坦部
14 基板凸部
26 発生した気泡の例
30、30C 接着部材
30A、30B 仕切り構造の接着部材
31 空隙又は空間
32 貫通孔
33 液面駐止用チャンバー
34 封止部材(テープ)
35 基板とカバー部材との間隙
40 マイクロアレイを治具に突き当てるためのバネ
41 治具
42 治具突き当て面
43 対物レンズ
44 レーザー励起光
45 基板に固定化された選択結合性物質
L1 凸部ピッチ
(1)分析用チップの基板の作製
公知の方法であるLIGA(Lithographie Galvanoformung Abformung)プロセスを用いて、射出成形用の型を作製し、射出成型法により後述するような形状を有するポリメチルメタクリレート(PMMA)製の基板を得た。用いたPMMAの平均分子量は5万であり、PMMA中には1重量%の割合で、カーボンブラック(三菱化学製 #3050B)を含有させて、基板を黒色にした。この黒色基板の分光反射率と分光透過率を測定したところ、分光反射率は、可視光領域(波長が400nmから800nm)のいずれの波長でも5%以下であり、また、同範囲の波長で、透過率は0.5%以下であった。分光反射率、分光透過率とも、可視光領域において特定のスペクトルパターン(ピークなど)はなく、スペクトルは一様にフラットであった。なお、分光反射率は、JIS Z 8722の条件Cに適合した照明・受光光学系を搭載した装置(ミノルタカメラ製、CM−2002)を用いて、基板からの正反射光を取り込んだ場合の分光反射率を測定した。
(2)選択結合性物質の固定化
基板Aに対し、以下の条件で、それぞれ選択結合性物質(プローブDNA)としてオリゴヌクレオチドを固定化した。オリゴヌクレオチドとしては、オペロン社製DNAマイクロアレイ用オリゴヌクレオチドセット“Homo sapiens (human) AROS V4.0(各60塩基)”を用いた。このオリゴヌクレオチドを、純水に0.3nmol/μLの濃度となるよう溶解させて、ストック溶液とした。このストック溶液を基板にスポット(点着)する際は、PBS(8gのNaCl、2.9gのNa2HPO4・12H2O、0.2gのKCl、及び0.2gのKH2PO4を合わせて純水に溶かし、1Lにメスアップしたものに、塩酸を加えてpH5.5に調整したもの)で10倍希釈して、プローブDNAの終濃度を0.03nmol/μLとし、かつ、PMMA製基板表面に生成させたカルボキシル基とプローブDNAの末端アミノ基とを縮合させるため、1−エチル−3−(3−ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド(EDC)を加え、この終濃度を50mg/mLとした。この溶液をアレイヤー(スポッター)(日本レーザー電子製;Gene Stamp−II)を用いて、基板Aの全ての凸部上面にスポットした。次いで、スポットした基板を密閉したプラスチック容器に入れて、37℃、湿度100%の条件で20時間程度インキュベートした。最後に純水で基板を洗浄し、スピンドライヤーで遠心して乾燥した。
選択結合性物質を固定化した上記基板Aに対し、次のようにカバー部材を貼付した。
直径180μmのジルコニア製微粒子(東レ(株)製)10gを、ステンレス製バット(10cm×10cm×5cm)に入れ、これに界面活性剤として0.1%ドデシル硫酸ナトリウム(SDS)水溶液50mlを加えた。これを10分間超音波処理したのち、上清(SDS成分)を除去し、オーブンを用いて微粒子を70℃にて、12時間乾燥させた。なお、処理前の微粒子の表面粗さを測定したところ、表面の中心線平均粗さ(Ra値)は165nmであった。微粒子表面のRa値の測定は、その表面をAuで真空蒸着した後、走査型電子顕微鏡(株式会社エリオニクス製、型式ESA−2000)で測定した。中心線平均粗さは、観察倍率を10,000倍、カットオフ値を0とし、任意の10個について測定し、その平均値を求めた。
上記(3)でカバー部材を貼りつけた基板Aに、上記(4)で界面活性剤をコーティングしたジルコニア製微粒子120mgを、基板Aとカバー部材とで形成される空隙(基板A表面の凹凸構造の凹部)に注入(格納)した。微粒子の注入は、カバー部材の貫通孔(図7又は図12に例示される貫通孔32)から行った。以上のようにして得られた分析用チップを、「分析用チップ1」とした。
被験物質としては、マイクロアレイの被験物質として一般的な、aRNA(antisense RNA)を用いた。市販のヒト培養細胞由来total RNA(CLONTECH社製Human Reference RNA)5μgから、Ambion社製aRNA調製キットを使用して、5μgのCy3標識aRNAを得た。
マイクロピペットを用いて、分析用チップ1の基板Aとカバー部材との空隙(反応槽)に、Cy3標識aRNA200ngを含むハイブリダイゼーション被験物質溶液165μLを貫通孔より注入した。このとき、容易に溶液を注入でき、気泡が混入することはなかった。封止材としてカプトンテープ(アズワン)を用い、4つの貫通孔を塞いだ。ハイブリダイゼーションチャンバー(Takara Hybridization chamber(タカラバイオ(株)製)を、シート振盪台(東京理化器械(株)製 MMS FIT−S)に密着させて固定し、分析用チップ1をハイブリダイゼーションチャンバー内にセットした。このとき、分析用チップ1をセットする位置の両端の凹みに、15μLずつ超純水を滴下した。ハイブリダイゼーションチャンバー蓋を閉めた後、6本の固定ネジを締めて固定し、42℃に設定した恒温チャンバー(東京理化器械(株)製 FMS−1000)内に据え付けた振盪機(東京理化器械(株)製 MMS−310)の上に載せて固定した。恒温チャンバーの前面をアルミホイルで遮光して、250回転/分で旋回振盪しながら、42℃で16時間インキュベートした。インキュベート後、ハイブリダイゼーションチャンバーから分析用チップ1を取り出した。
分析用チップ1の基板Aに接着したカバー部材と両面テープを脱離した後、基板Aを洗浄、乾燥した。DNAチップ用のスキャナー(Axon Instruments社製 GenePix 4000B)に上記処理後の基板Aをセットし、レーザー出力33%、フォトマルチプライヤーの電圧設定を500にした状態において、ハイブリダイゼーション反応した被験物質の標識体シグナル値(蛍光強度)、バックグラウンドノイズを測定した。全9248個のスポットのうち、32個をバックグラウンド蛍光値測定用のネガティブコントロールスポットとし、個々のシグナル値からバックグラウンドシグナル値を差し引いて各スポットの真のシグナル値を算出した。
実施例1(6)で調製した被験物質溶液を次のように脱気処理を行ったこと以外は、実施例1と同様に分析用チップ1を用いた評価を実施した。
実施例1において、微粒子として、界面活性剤のコーティング(実施例1(4))を行わずにジルコニア製微粒子をそのまま用いたことのみを変更して、「分析用チップ2」を作成した。この分析用チップ2用いて、実施例1と同様に評価を実施した。
実施例2において、分析用チップ1の代わりに、比較例1で作成した分析用チップ2を用いた以外は実施例2と同様にして、被験物質溶液を脱気処理して評価を実施した。
実施例1(4)において、界面活性剤として、ドデシル硫酸ナトリウム(SDS)の代わりにデオキシコール酸ナトリウム(陰イオン界面活性剤の1種)を用いて、同様の手順で界面活性剤のコーティング処理を行った微粒子を120mg注入して「分析用チップ3」を作成した。この分析用チップ3を用い、実施例2と同様に被験物質溶液を脱気処理して、評価を実施した。
実施例1(4)において、界面活性剤として、ドデシル硫酸ナトリウム(SDS)の代わりにプルロニックF68(非イオン界面活性剤の1種)を用いて、次の手順で界面活性剤のコーティング処理を行った微粒子を使用して「分析用チップ4」を作成した。すなわち、ジルコニア製微粒子に対して実施例1(4)と同様の手順で処理を行った後、さらに、脱イオン水(ミリQ水)400mLで1回洗浄し、70℃で4時間乾燥した。この微粒子を分析用チップに120mg注入して分析用チップ4を作成した。
実施例1(4)において、界面活性剤として、ドデシル硫酸ナトリウム(SDS)の代わりにプルロニックF127(非イオン界面活性剤の1種)を用いて、次の手順で界面活性剤のコーティング処理を行った微粒子を使用して「分析用チップ5」を作成した。すなわち、ジルコニア製微粒子に対して実施例1(4)と同様の手順で処理を行った後、さらに、脱イオン水(ミリQ水)400mLで1回洗浄し、70℃で4時間乾燥した。この微粒子を分析用チップに120mg注入して分析用チップ5を作成した。
実施例1(4)において、界面活性剤として、ドデシル硫酸ナトリウム(SDS)の代わりにTriton X−100(非イオン界面活性剤の1種)を用いて、次の手順で界面活性剤のコーティング処理を行った微粒子を使用して「分析用チップ6」を作成した。すなわち、ジルコニア製微粒子に対して実施例1(4)と同様の手順で処理を行った後、さらに、脱イオン水(ミリQ水)400mL中で30秒間超音波洗浄し、70℃で4時間乾燥した。この微粒子を分析用チップに120mg注入して分析用チップ6を作成した。
実施例1(4)において、界面活性剤として、ドデシル硫酸ナトリウム(SDS)の代わりにTween 20(非イオン界面活性剤の1種)を用いて、次の手順で界面活性剤のコーティング処理を行った微粒子を使用して「分析用チップ7」を作成した。すなわち、ジルコニア製微粒子に対して実施例1(4)と同様の手順で処理を行った後、さらに、脱イオン水(ミリQ水)400mLで1回洗浄し、70℃で4時間乾燥した。この微粒子を分析用チップに120mg注入して分析用チップ7を作成した。
実施例1(4)において、界面活性剤として、ドデシル硫酸ナトリウム(SDS)の代わりに3−[(3−コールアミドプロピル)ジメチルアンモニオ]−2−ヒドロキシプロパンスルホナート(CHAPSO;両性イオン界面活性剤の1種)を用いて、次の手順で界面活性剤のコーティング処理を行った微粒子を使用して「分析用チップ8」を作成した。すなわち、ジルコニア製微粒子に対して実施例1(4)と同様の手順で処理を行った後、さらに、脱イオン水(ミリQ水)400mLで1回洗浄し、70℃で4時間乾燥した。この微粒子を分析用チップに120mg注入して分析用チップ8を作成した。
実施例1(4)において、界面活性剤として、ドデシル硫酸ナトリウム(SDS)の代わりに臭化セチルトリメチルアンモニウム(Cetyltrimethylammonium Bromide、CTAB;陽イオン界面活性剤の1種)を用いて、次の手順で界面活性剤のコーティング処理を行った微粒子を使用して「分析用チップ9」を作成した。すなわち、ジルコニア製微粒子に対して実施例1(4)と同様の手順で処理を行った後、さらに、脱イオン水(ミリQ水)400mLで1回洗浄し、70℃で4時間乾燥した。この微粒子を分析用チップに120mg注入して分析用チップ9を作成した。
実施例1(1)において、分析用チップの基板として、基板Aの代わりに、基板の中央部に縦39.4mm、横19.0mm、深さ0.05mmの凹部のみを設けた基板(図3及び図4に例示される形状の基板において、凸部11を有さないもの)である「基板B」を使用した。また、実施例1(2)の選択結合性物質の固定化は、凹部底面に、上下39.4mm、横19.0mmの方形に、基板Aと同様の間隔にて9248個スポットすることによって行った。
実施例1(1)において、分析用チップの基板として、基板Aの代わりに、凹部及び凸部のいずれも有さない平板(図3及び図4に例示される形状の基板において、凹部10及び凸部11を有さないもの)である「基板C」を使用した。また、実施例1(2)の選択結合性物質の固定化は、基板Cの平面上面に、上下39.4mm、左右の19.0mmの間隔を取った方形に、基板Aと同様の間隔にて9248個スポットすることによって行った。
実施例1(4)において、微粒子として、直径180μmのジルコニア製微粒子の代わりに、直径200μmの鉄製微粒子(三昌研磨株式会社製)を用い、実施例1(4)と同様にして界面活性剤としてドデシル硫酸ナトリウム(SDS)のコーティング処理を行った微粒子120mgを注入して「分析用チップ12」を作成した。
実施例12において、微粒子として、界面活性剤のコーティング処理(実施例1(4))を行わずに直径200μmの鉄製微粒子をそのまま用いたことのみを変更して、「分析用チップ13」を作成した。この分析用チップ13を用いて、実施例1と同様に評価を実施した。
実施例1(4)において、微粒子として、直径180μmのジルコニア製微粒子の代わりに、直径200μmのガラス製微粒子(株式会社バイオメディカルサイエンス製)を用い、実施例1(4)と同様にして界面活性剤としてドデシル硫酸ナトリウム(SDS)のコーティング処理を行った微粒子120mgを注入して「分析用チップ14」を作成した。
実施例13において、微粒子として、界面活性剤のコーティング処理(実施例1(4))を行わずに直径200μmのガラス製微粒子をそのまま用いたことのみを変更して、「分析用チップ15」を作成した。この分析用チップ15用いて、実施例1と同様に評価を実施した。
Claims (9)
- 選択結合性物質が表面に固定化された基板と、該基板と接着されたカバー部材とを備え、該基板と該カバー部材との間に空隙を有し、該空隙に微粒子が移動可能に格納又は注入された分析用チップであって、該微粒子表面に界面活性剤がコーティングされている分析用チップ。
- 微粒子の表面にコーティングされている界面活性剤が陰イオン界面活性剤又は非イオン界面活性剤である、請求項1に記載の分析用チップ。
- 前記基板が、その表面に凹部及び凸部からなる凹凸部を有し、該凸部の上端面に選択結合性物質が固定化された基板である、請求項1又は2に記載の分析用チップ。
- 界面活性剤がコーティングされている微粒子が、その材質としてセラミックを含む、請求項1〜3のいずれか一項に記載の分析用チップ。
- 前記カバー部材が、前記空隙に連通する1つ以上の貫通孔を有する、請求項1〜4のいずれか一項に記載の分析用チップ。
- 前記基板の選択結合性物質固定化面とカバー部材との間隔の最短距離が、微粒子の直径未満である、請求項1〜5のいずれか一項に記載の分析用チップ。
- 前記選択結合性物質が、DNA、RNA、蛋白質、ペプチド、糖、糖鎖又は脂質である、請求項1〜6のいずれか一項に記載の分析用チップ
- 請求項1〜6のいずれか一項に記載の分析用チップに被検物質を含む溶液を接触させて前記基板表面に固定化された選択結合性物質に該被検物質を選択的に結合させ、分析用チップ上に該選択結合性物質を介して結合した該被検物質量を測定する、被検物質の分析方法。
- 前記の被検物質を含む溶液を該分析用チップに接触させる前に、被検物質を含む溶液を脱気処理する、請求項8に記載の被検物質の分析方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2008512626A JP5396857B2 (ja) | 2007-01-24 | 2008-01-23 | 分析用チップ及び分析方法 |
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2007013770 | 2007-01-24 | ||
JP2007013770 | 2007-01-24 | ||
PCT/JP2008/050891 WO2008090922A1 (ja) | 2007-01-24 | 2008-01-23 | 分析用チップ及び分析方法 |
JP2008512626A JP5396857B2 (ja) | 2007-01-24 | 2008-01-23 | 分析用チップ及び分析方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPWO2008090922A1 true JPWO2008090922A1 (ja) | 2010-05-20 |
JP5396857B2 JP5396857B2 (ja) | 2014-01-22 |
Family
ID=39644496
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2008512626A Active JP5396857B2 (ja) | 2007-01-24 | 2008-01-23 | 分析用チップ及び分析方法 |
Country Status (10)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20100029503A1 (ja) |
EP (1) | EP2107373B1 (ja) |
JP (1) | JP5396857B2 (ja) |
KR (1) | KR101421316B1 (ja) |
CN (2) | CN101578518A (ja) |
AU (1) | AU2008208342B2 (ja) |
CA (1) | CA2671866C (ja) |
DK (1) | DK2107373T3 (ja) |
ES (1) | ES2384745T3 (ja) |
WO (1) | WO2008090922A1 (ja) |
Families Citing this family (16)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP5568873B2 (ja) * | 2009-03-09 | 2014-08-13 | 住友ベークライト株式会社 | バイオチップの作製方法 |
CN102356319B (zh) * | 2009-03-16 | 2014-04-09 | 东丽株式会社 | 分析芯片、分析方法以及溶液的搅拌方法 |
KR20110106684A (ko) | 2010-03-23 | 2011-09-29 | 삼성전자주식회사 | 마이크로어레이 패키지 장치 및 이를 제조하는 방법 |
WO2012124508A1 (ja) * | 2011-03-16 | 2012-09-20 | コニカミノルタアドバンストレイヤー株式会社 | 蛍光検出シートおよび蛍光検出キット |
PL2821794T3 (pl) * | 2012-02-29 | 2017-08-31 | Toray Industries, Inc. | Sposób mieszania roztworu |
CN103018434B (zh) * | 2012-12-05 | 2016-01-20 | 博源诺信(北京)生物科技有限责任公司 | 一种多指标检测装置及一种试剂盒,及其应用 |
EP3096136A4 (en) * | 2014-01-16 | 2017-08-30 | Sumitomo Bakelite Co.,Ltd. | Composition, method for preparing sugar chain sample, and method for analyzing sugar chain |
JP6706355B2 (ja) * | 2017-02-15 | 2020-06-03 | 富士フイルム株式会社 | 免疫検査装置とその作動方法、情報処理装置とその作動方法および作動プログラム、並びに情報処理システム |
CN108693355B (zh) * | 2017-09-25 | 2021-02-09 | 广东睿碁生物科技有限公司 | 抗人球蛋白检测试剂卡及其制备方法 |
CN108693361B (zh) * | 2017-09-25 | 2021-03-09 | 广东睿碁生物科技有限公司 | 氧化锆微珠abo血型正反定型试剂卡及其制备方法 |
CN108693360B (zh) * | 2017-09-25 | 2021-03-09 | 广东睿碁生物科技有限公司 | 氧化锆微珠稀有血型检测试剂卡及其制备方法 |
CN108693346B (zh) * | 2017-09-25 | 2021-03-09 | 广东睿碁生物科技有限公司 | 外源凝集素a1血型检测试剂卡及其制备方法 |
CN108693359B (zh) * | 2017-09-25 | 2021-02-09 | 广东睿碁生物科技有限公司 | 氧化锆微珠Rh血型分型试剂卡及其制备方法 |
CN112114035A (zh) * | 2020-09-11 | 2020-12-22 | 东莞正扬电子机械有限公司 | 一种超声波传感器及其制备方法和应用 |
CN112592818A (zh) * | 2020-12-18 | 2021-04-02 | 覃日华 | 一种基因分型芯片的自动化检测设备 |
WO2023214516A1 (ja) * | 2022-05-02 | 2023-11-09 | 凸版印刷株式会社 | 検出キット、封止液、封止液の保存方法及び試料検出方法 |
Family Cites Families (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5954991A (en) * | 1997-04-04 | 1999-09-21 | Hong; Chin-Yih Rex | Ordered structures in homogeneous magnetic fluid thin films and method of preparation |
JP2003248008A (ja) * | 2001-12-18 | 2003-09-05 | Inst Of Physical & Chemical Res | 反応液の攪拌方法 |
JP3557419B2 (ja) * | 2002-05-24 | 2004-08-25 | 株式会社日立製作所 | ハイブリダイゼーション方法および装置 |
JP4244788B2 (ja) | 2002-11-22 | 2009-03-25 | 東レ株式会社 | 選択結合性物質が固定化された基材 |
US7163659B2 (en) * | 2002-12-03 | 2007-01-16 | Hewlett-Packard Development Company, L.P. | Free-standing nanowire sensor and method for detecting an analyte in a fluid |
EP1729136B1 (en) * | 2004-03-23 | 2012-02-22 | Toray Industries, Inc. | Method of agitating solution |
EP1845381A4 (en) * | 2005-06-23 | 2012-03-14 | Arkray Inc | ANALYTICAL TOOL |
-
2008
- 2008-01-23 ES ES08703723T patent/ES2384745T3/es active Active
- 2008-01-23 AU AU2008208342A patent/AU2008208342B2/en not_active Ceased
- 2008-01-23 US US12/524,058 patent/US20100029503A1/en not_active Abandoned
- 2008-01-23 DK DK08703723.0T patent/DK2107373T3/da active
- 2008-01-23 CA CA2671866A patent/CA2671866C/en active Active
- 2008-01-23 KR KR1020097017547A patent/KR101421316B1/ko active IP Right Grant
- 2008-01-23 CN CNA2008800017005A patent/CN101578518A/zh active Pending
- 2008-01-23 CN CN201410476168.XA patent/CN104297467A/zh active Pending
- 2008-01-23 WO PCT/JP2008/050891 patent/WO2008090922A1/ja active Application Filing
- 2008-01-23 EP EP08703723A patent/EP2107373B1/en active Active
- 2008-01-23 JP JP2008512626A patent/JP5396857B2/ja active Active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP2107373A4 (en) | 2010-03-17 |
AU2008208342A1 (en) | 2008-07-31 |
US20100029503A1 (en) | 2010-02-04 |
EP2107373A1 (en) | 2009-10-07 |
KR101421316B1 (ko) | 2014-07-18 |
WO2008090922A1 (ja) | 2008-07-31 |
CA2671866A1 (en) | 2008-07-31 |
CN101578518A (zh) | 2009-11-11 |
DK2107373T3 (da) | 2012-08-20 |
EP2107373B1 (en) | 2012-05-23 |
ES2384745T3 (es) | 2012-07-11 |
AU2008208342B2 (en) | 2013-02-07 |
CN104297467A (zh) | 2015-01-21 |
KR20090113306A (ko) | 2009-10-29 |
CA2671866C (en) | 2014-03-25 |
JP5396857B2 (ja) | 2014-01-22 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5396857B2 (ja) | 分析用チップ及び分析方法 | |
JP5696477B2 (ja) | 分析チップ、分析方法及び溶液の攪拌方法 | |
JPWO2005090997A1 (ja) | 溶液を攪拌する方法 | |
JP5504587B2 (ja) | 分析用チップ | |
JP4857882B2 (ja) | 検体溶液の撹拌方法 | |
JP4797619B2 (ja) | 分析チップおよび被検物質の分析方法 | |
JP5092405B2 (ja) | 選択結合性物質固定化担体 | |
WO2015147004A1 (ja) | 分析用チップ | |
JP2007304094A (ja) | 分析チップ | |
JP2007171144A (ja) | カバーを有するマイクロアレイ | |
JP2011106897A (ja) | 分析チップおよび溶液の攪拌方法 | |
JP5145752B2 (ja) | 分析チップ | |
JP4946044B2 (ja) | マイクロロッドを用いた分析用担体、及び該分析用担体を利用した分析方法 | |
JP2007114191A (ja) | 分析チップ、分析方法及び分析キット | |
JP6187259B2 (ja) | 溶液の攪拌方法 | |
JP2008249677A (ja) | 液体導入用デバイス、固定ホルダおよび分析キット | |
JP2007285927A (ja) | 選択結合性物質固定化基材 | |
JP5087898B2 (ja) | 分析チップ | |
JP2010117250A (ja) | 検体溶液の攪拌方法および検体の分析方法 | |
JP2015045579A (ja) | 溶液の攪拌方法 | |
JP2012233752A (ja) | 分析チップ |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20110106 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20110106 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20130521 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20130924 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20131007 |
|
R151 | Written notification of patent or utility model registration |
Ref document number: 5396857 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R151 |