JPS6391090A - リン脂質誘導体の製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、リン脂質ｍＷ体またはその塩の製　　−進法
に関する。さらに詳しくは本発明は下記−般式（１） ％式％ （ただし、式中Ｒ，およびＲ２はアシル基または脂肪族
炭化水素基を示し、Ｒ３は ７Ｒ・ ｓ 整数、Ｒ，、Ｒ６はいずれも水素原子、またはＲ，、Ｒ
６は異なって水素原子、カルボキシル基、アミノ基、メ
チルアミノ基、ジメチルアミノ基、トリメチルアミノ基
、ヒドロキシル基、ヒドロキシメチル基、またはイノシ
トール基を示す）で表わされるグリセロリン脂質と下記
−般式（Ｉ＋） Ｎｓ−ＯＨ（１’ｌ） （ただし、Ｎｓは一級水酸基に結合した有機残基を示す
）で表わされる化合物、とをホスホリパーゼＤ−Ｐの存
在下に反応させることを特徴とする下記一般式ＣＩＩＩ
　） ＣＨ２−ＯＲ１ 晶 （ただし、ＲＩ、Ｒ１およびＮｓは前記と同じ基を示す
）で表わされるリン脂質誘導体またその塩の製造方法に
関する。

〔従来の技術〕

従来より、リン脂質、細胞内グリセロリン脂質の生合成
や膜の構成に重要な役割を演じていることから、種々の
活性を期待してリン脂質誘導体が化学的に合成されてい
た。また、ヌクレオシド系抗ｌｌ！ｌａ瘍剤の毒性等の
欠点を改善する目的で種々ヌクレオシドを含むリン脂質
誘導体が化学的に合成されてきた。（Ｂｉｏｃｈｉｍｉ
ｃａ　ｅｔＢｉｏｐｈｙｓｉｃａ　Ａｃｔａ、　６１９
　（１９８０）　６１９−６３１．　Ｊ。

Ｍｅｄ、　Ｃｈｅｍ、、　１９８２．２５．１３２２−
１３２９．特開昭６１−９１１９５号〕。一方、種々の
水酸基を有する化合物とホスファチジルコリン等のホス
ファチジル酸エステル類をホスホリパーゼ叶の存在下に
反応させてリン脂質誘導体が合成されている。

〔特開昭６１−８８８８６号、同６１−８８８８７号、
同６１−８８８８８号、同６１−８８８９０号、同６１
−８８８９１号〕。

〔発明が解決しようとする問題点〕

上述したようにリン脂質誘導体は化学的合成法で合成さ
れているために、その合成には官能基の保護、脱保護等
多段階反応工程を必要とし、従って、収率も低くしかも
工程も煩雑であった。

また、ホスホリパーゼＤＭを使用する方法は、目的のリ
ン脂質誘導体の生成率が低いため、高速液体クロマトグ
ラフィーをくり返して行うなど煩雑な分離手段を要し、
概して収率は悪く、微量のリン脂質誘導体しか得られず
、それらの生理活性等の有用性を調べることは困難であ
った。また−分子の中に一級、二級等水酸基を多く含む
場合、結合部位に対する反応性に選択性が無いため、−
級水酸基および二級水酸基のいずれも反応せしめるもの
であった。

〔問題点を解決するための手段〕

このような欠点を解決するための一手段としては、反応
条件に工夫を加え、原料化合物を選択したのであったが
、例えばリン脂質・ヌクレオシド誘導体を化学的に合成
するには多段階の合成工程を必要とし、反応条件も設定
し難く、合成は実質上困難であった。また、前記したよ
うに、ホスホリパーゼＤＭを使用する酵素的合成法では
、反応に選択性がなく、収率も低かった。

本発明者らは、このような欠点を有する合成法を改善し
、新たなリン脂質誘導体を合成しようとして研究を重ね
た結果、グリセロリン脂質と一級水酸基を有するペテロ
環化合物やヌクレオシドまたはアルコールをホスフォリ
パーゼＤ−Ｐの存在下反応させることにより、−級水酸
基とグリセロリン脂質とが簡便に反応して、−段階で一
級水酸基に特異的に結合した一般式（１）で表わされる
リン脂質誘導体を収率よく得たものである。この方法で
は、目的のリン脂質の生成率が高いため、分離も簡便で
あり、大量のリン脂質誘導体の合成が可能となったもの
である。

本発明は、上記の知見に基づいて完成されたもので、下
記一般式（１） ％式％ （ただし、式中Ｒ１、Ｒ２およびＲ８は前記と同じ基を
示す）で表わされるグリセロリン脂質と下記一般式〔Ｉ
Ｉ〕 Ｎｓ−ＯＨ（ＩＩ） （ただし、Ｎｓは前記と同じ基を示す）で表ねされる化
合物、とをホスフォリパーゼＤ−Ｐの存在下に反応させ
ることを特徴とする下記一般式（ＩＩＩ　） ＣＨ２−０−Ｒ１ ＣＨＯＲｚ　　　　　　　（ＩＩＩ） ＣＨｚ　　　ＯＰ　　　ＯＮｓ 昌 （ただし、Ｒ，、ＲｚおよびＮｓは前記と同じ基を示す
）で表わされるリン脂質誘導体またはその塩の製造法に
関する。

まず、本発明の一般式（Ｉｌｌ　）で表わされるリン脂
質誘導体を得るに用いられるグリセロリン脂質としては
、下記一般式（１）で表わされるＬ型、Ｄ型またはＤＬ
混合物のいずれのグリセロリン脂質も使用できる。

ＣＨ２−０−Ｒ。

■ ＣＨ〜ＯＲ２（１） ＣＨｚ　　　ＯＰ　　　ＯＲ３ Ｈ （ただし式中、Ｒ＋　、ＲｚおよびＲ２は前記と同じ基
を示す） さらに、−Ｃ式（Ｔ）で表わされるグリセロリン脂質に
おいて、基Ｒ，、Ｒ２は同一または異なったアシル基ま
たはアルキル基を示すものであるが、例えば、炭素数１
〜２４のアシル基またはアルキル基であり、詳細には、
例えばアセチル、プロピオニル、ブチロイル、ペンチニ
ル、ヘキシニル、ペブチニル、ラワリル、ミリスチル、
バルミトイル、ステアロイル、ドデカノイルなどの飽和
脂アシル基、パルミトオレオイル、オレオイル、リルオ
イル、リルノイル、アラキトニルなどの１〜４つの不飽
和結合ををする不飽和アシル基が挙げられ、　また脂肪
族炭化水素基としては、メチル、エチル、プロピル、ブ
チル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル
、ドデシル、テトラデシル、ペンタデシル、ヘキサデシ
ル、ペンタデシル、オクタデシル、ノナデシル、エイコ
シル等のアルキル基や３−へキセニル、４−デセニル、
６−テトラデセニル−９−オクタデセニル、オレイル、
リルイル等のアルケニル基が挙げられる。また基Ｒ３と
しては、 （ＣＨｚ）ｎ　　ＣＨで示され、ｎは１〜５ｓ の整数、Ｒ，、Ｒ，はいずれも水素原子、またはＲ，、
Ｒ，は異なって水素原子、カルボキシル基、アミノ基、
メチルアミノ基、ジメチルアミノ基、トリメチルアミノ
基、ヒドロキシル基、ヒドロキシル基、ヒドロキシメチ
ル基、またはイノシトール基が挙げられる。具体的には
、これらのリン脂質は、例えばレシチン（ホスファチジ
ルコリン）、ケファリン、ホスファチジルセリン、ホス
ファチジルグリセロール、ホスファチジルイノシトール
、ホスファチジルエタノールアミンとしての市販品を使
用すればよく、さらに好ましくはＲ１およびＲ２がとも
に長鎖アシル基であるバルミトイル基で示されるホスフ
ァチジルコリン、Ｒ１およびＲ，がともにオレオイル基
で示されるホスファチジルコリン、Ｒ５およびＲ２がと
もにリルオイル基で示されるホスファチジルコリンなど
の飽和または不飽和長鎖アシル基を有するホスファチジ
ル・コリンでもよく、さらにＲ２およびＲ２が炭素数１
６〜２４の長鎖脂肪酸の混合体であるラジール（Ｒａｄ
ｙｌ　）基で示される天然のホスファチジルコリンでも
よい。また、これらのＲ１およびＲ２の基を有するホス
ファチジルコリンは、適宜炭素数１〜２４の脂肪酸を用
いて合成して得たものでもよく、市販のものを用いても
よい。同様にＲ３およびＲ２がペンタデシル、ヘキサデ
シル、ペンタデシル琢のアルキルまたはアルケニル誘導
体を用いてもよい。

また、本発明に使用される一般式（［）％式％（） で表わされる化合物としては、−級水酸基を有するヘテ
ロ環化合物、ヌクレオシド化合物および置換基を有して
いてもよい炭化水素などが挙げられる。

使用されるヘテロ環化合物としては、−級水酸基を有す
るフラン環、テトラヒドロフラン環、チオフェン環、ピ
ロリジン環、イミダゾール環、イミダゾリジン環、オキ
サゾール環、チアゾール環、ビラン環、オキサン環、ピ
リジン環、ピペラジン環、ピリミジン環、トリアジン環
、モルホリン環、インドール環、プリン環等のへテロ環
を有するヘテロ環−級アルコール化合物が挙げられる。

使用されるヌクレオシド化合物としては、例えば５−フ
ルオロウリジン（５−Ｆｌｕｏｒｏｕｒｉｄｉｎｅ；以
下ＦＵＲと略す〕、５−フルオロ−２°−デオキシウリ
ジン（５−Ｆｌｕｏｒｏ　−２゜−ｄｅｏｘｙｕｒｉｄ
ｉｎｅ　；以下１’ＵＤＲと略す〕、プレディニン（Ｂ
ｒｅｄｉｎｉｎ　；　４−Ｃａｒｂａｍｏｙｌ　−１−
β−り−ｒｉｂｏｆｕｒａｎｏｓｙｌ　−ｉｍｉｄａｚ
ｏｌｉｕｍ　−５−ｏｌａＬｃ　）　、ツベルクリン（
Ｔｕｂｅｒｃｉｄｉｎ　；　７−Ｄ−ｅａｚａ−ａｄｅ
ｎｏｓｉｎｅ）　、ネブラノシンＡ　（Ｎｅｐｌａｎｏ
−ｃｉｎ　　Ａ；　ｌ−β−（６ａｍｉｎｏ−９Ｈ−９
Ｙ　　Ｉ）−４−ｈｙｄｒｏｘｙｍｅｔｈｙｌ　　−４
−ｃｙｃｏｌｏｐｅｎｔｅｎｅ　　−２ｃｘ、　　３　
ａ　−ｄｉｏｌ　；以下ＮｅｐＡと略す〕、５−フルオ
ロシチジン（５−Ｆｌｕｏｒｏｃｙｔｉｄｉｎｅ；以下
ＦＣＲと略す）、アデノシン、２′　−デオキシアデノ
シン、２−デオキシチミジン、ウリジン、シチジン、５
−ブロモウリジン等のへテロ環塩基を置換基として有す
るペントース化合物が挙げられる。

また本発明に使用される別のヌクレオシドの例としては
、例えば、アラビノシルシトシン（以下Ａｒａ　Ｃと略
す〕、アラビノシル−５−フルオロシトシン〔以下Ａｒ
ａ　ＦＣと略す〕、アラビノシル−５−フルオロウラシ
ル、アラビノシルアデニンまたはアラビノシルチミン等
のへテロ環塩基を置換基として有するデヒドロキシペン
トース化合物が挙げられる。さらに置換基を有してもよ
い炭化水素としては例えば脂肪族アルコール、芳香族ア
ルコール、脂環式アルコール、ヒドロキシ含有カルボン
酸、カルボキシル基、アミノ基含有アルコール、ヒドロ
キシ基含有アミノ酸、アミノ酸のアルコール誘導体が挙
げられ、具体的にはエタノール、プロパツール、イソブ
チルアルコール、ヘキサノール、シクロヘキサノール、
アミノエタノール、ヒドロキシプロピオン酸、セリン、
ホモセリン等が挙げられる。

一般式（ＩＩＩ　）で表わされるリン脂質誘導体を得る
ためには、前記のグリセロリン脂質と一般式Ｎ　ｓ　−
ＯＨで表わされる化合物をホスフォリパーゼＤ−Ｐを用
いて溶媒中で反応せしめればよい。用いられるホスフォ
リパーゼＤ−Ｐとしては、例えばストレプトミセス属に
属するストレプトミセス・ニス・ピー・ＡＡＳ８６（Ｓ
ｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　５ｐ−Ａ　Ａ３８６　；　Ｆ
ＥＲＭ　Ｐ−６１００）由来のホスホリパーゼＤ−Ｐ　
（特開昭５８−１５２４８１号公報、東洋醸造社製カタ
ログ番号Ｐ−３９）が挙げられる。またその使用量は、
ホスファチジルコリン１ｇ当たりホスフォリパーゼＤ　
−Ｐｏ、０１単位以上、好ましくは１−１００単位であ
る。さらに用いられる溶媒としては、例えばエーテル、
ベンゼンまたはクロロホルムなどの有機溶媒とｐＨ３〜
９の緩衝液、好ましくはｐＨ４〜６の水層−有機溶媒層
の二層系溶媒が挙げられる。さらにまた金属イオン形成
のための水溶性塩類としては、通常塩化カルシウムが用
いられる。また反応温度は通常２０〜６０℃で、反応時
間は３０分〜３０時間、好ましくは１〜６時間である。

このようにして得られたリン脂質誘導体は、分液法およ
びシリカゲルクロマトグラフィーにより簡便に精製する
ことができる。

以上述べたような本発明のホスファチジルコリンを用い
てのリン脂質誘導体の一段工程合成法は、以下のように
示される。

ＣＩ＋□−〇−Ｒ１ Ｃ１ｌ　　−０−Ｒｚ　　　　　　　　　　　＋　Ｎ５
−０Ｈ（＋） Ｃ１＋□　−〇−Ｒ１ ７、ｙバー゛−Ｃ）Ｉ　−０−Ｒ２＋コリンＨ このようにして得られたリン脂質誘導体は、リン脂質の
リン酸基の部分と、用いたＮ５−ＯＨで表わされる化合
物の一級水酸基のみの部分が結合したものである。さら
に本発明方法によって得られた誘導体は、ナトリウム塩
、カリウム塩などの一般的な無毒性塩となすことができ
、−般に医薬用の場合は注射用莫溜水にＱ　ン蜀して投
与することができる。また、リポゾーム形成基剤、乳化
剤として利用され得る。

〔発明の効果〕

前記した本発明の方法に従って、ホスファチジルコリン
とＮ５−ＯＨをホスホリパーゼＤ−Ｐにより転移反応を
行うと、Ｎ５−ＯＨがヌクレオシド化合物、ホモセリン
などのような多官能基を有する化合物であっても、無保
護の状態で一級ヒドロキシル３１沢的にホスフォジエス
エル結合の形勢が効率よく起こり、分離も簡便である。

従って、得られたリン脂′Ｊｊ誘導体（ＩＩＩ　）の純
度がよく、また合成収率もよい。また大量合成も可能で
ある。

以下に本発明の実施例を挙げて本発明について具体的に
述べるが、本発明は何らこれらによって限定されるもの
ではない。

実施例１〜７１ 第１表に示す（Ｎ５−ＯＨ）を同じく第１表に示す緩衝
液に溶解または懸濁し、４５℃の水浴中で５分間攪拌し
た後、ホスフォリパーゼＤ−Ｐ（ＰＬＤＰ　）を加え溶
解した。これにＬ−ホスファチジルコリンまたはｌ−ア
ルキル−２−アルキル−５ｎ−グリセロ−３−ホスフォ
コリン０゜０５ｍＭを’ｌ　Ｑｍｊ！のＣＨＣ１３溶液
として加え、６時間撹拌した後放冷した。反応液にＩ　
Ｍ　Ｍ　Ｃ１５ｍｌ、ＣＨＣｌｚ　３０ｍ１１Ｍｅｎ）
［２５ｍｌを加え分液し、下層を２回水洗した後、減圧
乾固した。更に残渣にエタノールを加えて減圧乾固した
後、残渣を少量のクロロホルムに溶かして、シリカゲル
フラッシュカラム（２，５Ｘ１０ｃｍ）にかけて、ＣＨ
Ｃ１３、ＣＨＣＩＩ　ｚ−ＭｅＯＨ（２０：　１）　、
同（１５：１）、同（１２：１）、同（ｌ　Ｏ：　ｌ）
　、同（７：　ｌ）、同（５：　１）　、同（４：１）
および同（３：１）の順で溶出した。

目的のフラクションを集め減圧乾固後、残渣をＣＨＣｌ
１ｓ　４０ｍ１．、ＭｅＯＨ２０ｍｌの混液に溶かし、
０．５ＮＨＣｊ’　１２ｍｌを加えて分液し、下層を２
回水洗した後、減圧乾固して目的物を得た。

口 Δ ＝　　　　　−肴　　憂 次いで、ＰＬＤＰによるリン脂質塩基交換反応が、ヌク
レオシドを反応受容体（Ａｃｃｅｐｔｏｒ）として用い
た時、ヌクレオシドの一級水酸基が選択的に反応し、５
゛　−ホスファチジルヌクレオシドを生成することを示
す論拠を以下に示す。

（１）転移反応によって得られたホスファチジルヌクレ
オシドは、”Ｃ−ＮＭＲにおいて、Ｃ−５゛位シグナル
が、ヌクレオシド自身に比べて、明らかに低磁場にシフ
トしているが、Ｃ−２゛又はＣ−３゛のシグナルには、
このような低磁場シフトは観察されない。例として実施
例７で得られたウリジン、リン脂質複合体の糖部分のケ
ミカルシフト値を示す。比較のため、ウリジン、５′　
−ＵＭＰ、３°−ＵＭＰ、２°　−ＵＭＰのケミカルシ
フト値を文献（Ｈ，Ｈ，Ｍａｎｔｓｃｈ　ｅｔ　ａｌ−
＋　Ｂｉｏｃ−ｈｅｍ、　Ｂｉｏｐｈｙｓ、　Ｒｅｓ、
　Ｃｏｍｍｕｎｉ、＋　４６　．８０８＋　（１９７２
）により転載した。

ｉ３４　８６　　６５　１３　８８ 電 ウリジン　　　　　　　　　〇− ２°　−ＵＭＰ ３’−ＵＭＰ　　　　　　　５°　−ＵＭＰ実施例　７ （２）リボヌクレオシド系リン脂質誘導体は、イソプロ
ピリデン誘導体へ導くことができる。イソプロピリデン
化は、隣接したジオールに特異的な反応 実施例　７ Ｒ１、Ｒ２：パルミトイル基 であることから、ヌクレオシド２”及び３゛イ立の水酸
基は、ＰＬＤＰによる転移反応Ｇこおし）で反応するこ
となく保存されていることを示す。

実施例　３３ 以下に図解１および２の実験例を記す。

実施例７の化合物→上 実施例７で得られたリン脂質誘導体８３ｍｇを２．２“
　−ジメトキシプロパン３ｍＡ及びアセトン３ｍｌに＝
、ｆｆｉし、ＴＳＯＩ（−ＨｚＯｌ　９ｍｇ　（１ｅｑ
）を加え、室温下、４時間攪拌した。反応液をＩＮ・）
！ａ）ＩＣＯ，で中和後、減圧乾固した。残渣をＣ）Ｉ
Ｃ−ｆ：＋　−ＭｅＯＨ（２−１）２５ｍＡ’にン容し
、０．２５ＮＬＣ１５ｍＡで分液後、水洗（５ｍｌＸ２
　　）して、減圧乾固し８４ｍｇの上を白色粉末とじて
得た。収率９１％。

ＭｅＯＨ ｕｖλｍａＸ　　２６０ｎａ＋　、　ＦＡＲｍａｓｓ　
（ｍ／ｅ）　９１５（Ｎｌｌ　）実施例３３の化合物−
→　１ 実施例３３で得られたリン脂質誘導体１５０ｍｇをアセ
トン５ｍｊ！２．２’　　−ジメトキシブロノぐン５　
ｍ　ｌに懸濁し、ＴＳＯＩＩ　・Ｒ２０２０ｍ　ｇを加
え、室温下、６時間攪拌した−　　Ｉ　ＮＮａＨＣＯｚ
で中和後、ＣｌＩＣＺ３　１０　ｍ　ｌを加えて、減圧
乾固、残渣にＭｅＯ）１１５ｍｊ２、水１５ｍｆＸＣＨ
Ｃｆｆｉ　２５ｍｆｆを加えて分液した。有機層をＩＰ
Ｓ濾祇にて濾過後、減圧乾固した。残渣を少量のＣｌＩ
Ｃら−ＭｅＯＩ！＝２−１？−Ｗ液としてＰ　−ｔ　（
ｌ　ｃ　＊　（ＣＨＣｊ！、　−ＭｅＯｌｌ−水＝６５
−２５−３で展開、ＣＩ　Ｃ１３−ＭｅＯＨ＝　１−１
で溶出）で精製して、２を１２４ｍｇの粉末として得た
。収率７９％。

ＭｅＯＨ−ＣＨＣ１３ υＬＪｍａｘ　　２７６ｎｍ　、　ＦＡＢ　ｍａｓｓ　
（ｍ／ｅ）　９１４いｎ＋）ｍＭｅｒｋ社Ａｒｔ５７１
５シリカゲルプレート（３）５°−デオキシウリジン（
３）をウリジンの代わりに用い、実施例７と同様にして
ＰＬＤＰによる反応を試みたが、ユとリン脂質との複合
体の生成は観察されなかった。

（４）下記のような一級水酸基を有しない化合物は、Ｐ
ＬＤＰの触媒するリン脂質塩基交換反応の反応受容体と
ならなかった。

Ｏ イノシトール　　　　　し−スレオニンフコース　　　
　　　　　　　ラムノース手続補正書 昭和６２年８月　７日 昭和６１年　特許願第２３７５８６号 ２、発明の名称 リン脂質誘導体の製造法 ３、補正をする者 事件との関係　　特許出願人 住所　静岡県田方郡大仁町三福６３２番地の１名称　東
洋醸造株式会社 代表者高田哲男 ４、代理人 〒１７０　電話（９１７）１９１７ 東京都豊島区北大塚２−２５−１ 自発 ６、補正の対象 明細書の発明の詳細な説明の欄 ７、補正の内容 （１）明細書第６ページ下から９行目「リン脂質、」と
あるを「リン脂質が、」と訂正する。

（２）明細書第１１ページ下から７行目「ペプチニル、
ラワリル」とあるを「ベプタノイル、ラウロイル」と訂
正する。

（３）同ページ下から７行目および６行目「ミリスチル
」とあるを「ミリストイル」と訂正する。

（４）同ページ下から５行目「飽和能アシル基」とある
を「飽和アシル基」と訂正する。

（５）同ページ下から３行目「アラキトニル」とあるを
「アラキトノイル」と訂正する。

（６）明細書第１２ページ下から５行目「ヒドロキシル
基、」とあるを削除する。

（７）明細書第１５ページ下から３行目および２行目「
デヒドロキシペントース化合物」とあるを「アラビノー
ス誘導体」と訂正する。

（８）明細占第１６ページ上から２行目「カルボキシル
基、」とあるを「カルボキシル基・」と訂正する。

（９）明細書第１７ページ上から２行目「１−１００」
とあるをｒｌ−ＩＱＯＯＪと訂正する。

００）明細書第１９ページ上から８行目「ホスフォジエ
スエル」とあるを「ホスフォジン酸ニスエル」と訂正す
る。

Ｏｌ）明細書第２０ページ上から２行目および３行目ｒ
ｏ、０５ｍＭＪとあるをｒＯ，５ｍｍ　ｏ　ｌ相当量」
と訂正する。

叩　明細書第２１ページ第１表中の最上欄の左端に「化
合物」とあるを「実施例番号」と訂正する。

Ｑ３）　　明細書第３３ページ下から６行目「ウリジン
、リン脂質」とあるを「ウリジン・リン脂質」と訂正す
る。

圓　明細書第３５ページ中ｒ２’　−ＵＭＰＪの構造式
を下記の通り訂正する。

ａ９　　同ページ中ｒ３’　−ＵＭＰＪの構造式を下記
の通り訂正する。

−０」 ０Ｑ　　明細書第３５ページ中「５°−ＵＭＰＪの構造
式を下記の通り訂正する。

」 ＯＤ　　明細書第３６ページ「実施例７」の構造式を下
記の通り訂正する。

ＭＯ（ＪＭＪ ０１）明細書第３６ページ下から１行目「実施例７」と
あるを「実施例７で得られた化合物」と訂正する。

Ｑｌ　　明細書第３７ページ下欄の構造式を下記の通り
訂正する。

実施例３３で得られた化合物　」 Ｑω　明細書第３８ページの構造式を下記の通り（２１
）　　明細書第４０ページ上欄の構造式を下記の通り訂
正する。

０ＯＨＪ （２２）　　明細書第４０ページ下欄左側の「イノシト
ール」の構造式を下記の通り訂正する。

（２３）　　明細書第４１ページ左側の「フコース」の
構造式を下記の通り訂正する。

（２４）　　同ページ中右側の「ラムノース」の構造式
を下記の通り訂正する。

ＨＯＯＨＪ （２５）　　明細書第４２ページ第２表中最上（聞の左
端に「化合物」とあるを「実施例番号」と訂正する。

（２６）　　明細書第４４ページ第３表中最上欄の左端
に「化合物」とあるを「実施例番号」と訂正する。

以上

Claims (7)

【特許請求の範囲】
1. （１）下記一般式〔 I 〕 ▲数式、化学式、表等があります▼〔 I 〕 （ただし、式中Ｒ＿１およびＲ＿２はアシル基または脂
   肪族炭化水素基を示し、 Ｒ＿３は ▲数式、化学式、表等があります▼を示し、 ｎは１〜５の整数、 Ｒ＿４、Ｒ＿５はいずれも水素原子、またはＲ＿４、Ｒ
   ＿５は異なって水素原子、カルボキシル基、アミノ基、
   メチルアミノ基、ジメチルアミノ基、トリメチルアミノ
   基、ヒドロキシル基、ヒドロキシメチル基、またはイノ
   シトール基を示す）で表わされるグリセロリン脂質と下
   記一般式〔II〕 Ｎｓ−ＯＨ〔II〕 （ただし、Ｎｓは一級水酸基に結合した有機残基を示す
   ）で表わされる化合物、とをホスホリパーゼＤ−Ｐの存
   在下に反応させることを特徴とする下記一般式〔III〕 ▲数式、化学式、表等があります▼〔III〕 （ただし、Ｒ＿１、Ｒ＿２およびＮｓは前記と同じ基を
   示す）で表わされるリン脂質誘導体またはその塩の製造
   法。
2. （２）ＮｓＯＨが、一級水酸基を結合したヘテロ環化合
   物、ヌクレオシド化合物、または置換基を有してもよい
   炭化水素化合物である特許請求の範囲第１項記載のリン
   脂質誘導体またはその塩の製造法。
3. （３）一般式〔III〕において、Ｒ＿１およびＲ＿２が
   アシル基、Ｎｓが５−フルオロウリジン−５′−イル基
   、５−フルオロ−２′−デオキシウリジン−５′−イル
   基、ブレデイニン−５′−イル基、ツベルシジン−５′
   −イル基、ネプラノシンＡ−６′−イル基および５−フ
   ルオロシチジン−５′−イル基からなる群より選ばれた
   ヌクレオシド残基である特許請求の範囲第１項記載のリ
   ン脂質誘導体またその塩の製造法。
4. （４）一般式〔III〕において、Ｒ＿１およびＲ＿２が
   Ｃ＿２＿−＿２＿０のアシル基、Ｎｓがアラビノシルシ
   トシン残基、アラビノシル−５−フルオリロシトシン残
   基、アラビノシルアデニン残基およびアラビノシルチミ
   ン残基からなる群より選ばれたヌクレオシド残基である
   特許請求の範囲第１項記載のリン脂質誘導体またはその
   塩の製造法。
5. （５）一般式〔III〕において、Ｒ＿１またはＲ＿２が
   炭素数１〜２４のアシル基であり、 ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ または−ＣＨ＿２−ＣＨ＿２−ＣＨ＿３ である特許請求の範囲第１項記載のリン脂質誘導体また
   はその塩の製造法。
6. （６）一般式〔III〕において、Ｒ＿１またはＲ＿２が
   炭素数１〜２４の脂肪族炭化水素基である特許請求の範
   囲第１項記載のリン脂質誘導体またはその塩の製造法。
7. （７）ホスホリパーゼＤ−ＰがＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅ
   ｓ　ｓｐ．ＡＡ５８６　ＦＥＲＭ　Ｐ−６１００により
   生産される酵素である特許請求の範囲第１項記載のリン
   脂質誘導体またはその塩の製造法。