JPS638539A - 蛍光測定装置 - Google Patents
蛍光測定装置Info
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- JPS638539A JPS638539A JP15256486A JP15256486A JPS638539A JP S638539 A JPS638539 A JP S638539A JP 15256486 A JP15256486 A JP 15256486A JP 15256486 A JP15256486 A JP 15256486A JP S638539 A JPS638539 A JP S638539A
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- excitation light
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- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims description 15
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 5
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- 239000000523 sample Substances 0.000 description 30
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
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Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/6408—Fluorescence; Phosphorescence with measurement of decay time, time resolved fluorescence
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2201/00—Features of devices classified in G01N21/00
- G01N2201/06—Illumination; Optics
- G01N2201/064—Stray light conditioning
- G01N2201/0648—Shutters
Landscapes
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- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
(産業上の利用分野)
本発明は生化学や医学の分野で広く応用される蛍光測定
装置に関するものである。
装置に関するものである。
蛍光a1q定装置は、励起光や蛍光の分光に分光器を使
用するかフィルタを使用するかにより、慣習上、蛍光光
度計、蛍光分光光度計及び分光蛍光光度計の3種類に分
類される0本発明の蛍光測定装置はこれらの何れをも含
む意味で使用する。
用するかフィルタを使用するかにより、慣習上、蛍光光
度計、蛍光分光光度計及び分光蛍光光度計の3種類に分
類される0本発明の蛍光測定装置はこれらの何れをも含
む意味で使用する。
(従来の技術)
蛍光g1g定装置は吸光分析製値に比べて感度が高く1
選択性が優れているというような優れた特徴をもってい
る。
選択性が優れているというような優れた特徴をもってい
る。
第7図に蛍光測定装置の一例として分光蛍光光度計の基
本構成を示す。
本構成を示す。
2は光源であり、例えばキセノンランプが使用される6
光源2がらの光は集光ミラー4で集められて励起分光器
6に入射させられる。励起分光器6で分光された特定波
長の励起光は、ビームスプリッタ用石英板8で分割され
て、一方はレンズ10を経て試料セル12に入射する。
光源2がらの光は集光ミラー4で集められて励起分光器
6に入射させられる。励起分光器6で分光された特定波
長の励起光は、ビームスプリッタ用石英板8で分割され
て、一方はレンズ10を経て試料セル12に入射する。
ビームスプリッタ用石英板8で分割された他方の光はモ
ニタ用光電子増倍管14に入射し、励起光強度がモニタ
される。励起分光器6がら試料セル12に至る光路には
、励起光シャッタ16が設けられ、蛍光測定を行なう場
合だけシャッタ16が開けられて試料セル12に励起光
が入射する。試料セル12中の試料から放出された蛍光
は、レンズ18及びミラー20を経て蛍光分光器22に
入射し、蛍光分光器22で分光された後、測光用光電子
増倍管24で検出される。
ニタ用光電子増倍管14に入射し、励起光強度がモニタ
される。励起分光器6がら試料セル12に至る光路には
、励起光シャッタ16が設けられ、蛍光測定を行なう場
合だけシャッタ16が開けられて試料セル12に励起光
が入射する。試料セル12中の試料から放出された蛍光
は、レンズ18及びミラー20を経て蛍光分光器22に
入射し、蛍光分光器22で分光された後、測光用光電子
増倍管24で検出される。
(発明が解決しようとする問題点)
蛍光測定を行なう試料によっては、励起光が入射するこ
とによって光化学反応を起し、蛍光が出なくなる性質を
もっているものがある。一般に。
とによって光化学反応を起し、蛍光が出なくなる性質を
もっているものがある。一般に。
多くの蛍光試料は光照射によって蛍光量が減少する傾向
がある。したがって、定量分析を行なうときは、試料室
に試料セル12を設定した後、一定時間後、例えば数秒
後、の蛍光強度を測定するように測定者は努力を払って
いる。
がある。したがって、定量分析を行なうときは、試料室
に試料セル12を設定した後、一定時間後、例えば数秒
後、の蛍光強度を測定するように測定者は努力を払って
いる。
しかしながら、そのような方法は測定者に負担を与える
ことになるし、また、正しく一定時間後に測定したとい
う保証もない。
ことになるし、また、正しく一定時間後に測定したとい
う保証もない。
本発明は、励起光の照射によって光化学反応の生じる試
料であっても、再現性よく測定できる機能をもつ蛍光測
定装置を提供することを目的とするものである。
料であっても、再現性よく測定できる機能をもつ蛍光測
定装置を提供することを目的とするものである。
(問題点を解決するための手段)
第1図は本発明の構成を表わす。
16はシャッタであり、試料セル12に入射する励起光
13を断続する。26はシャッタ16の開閉を制御する
シャッタ制御手段、28は蛍光測定実行の開始信号を出
力する実行命令手段、30は実行命令手段28の出力信
号により一定時間だけシャッタ制御手段26を作動させ
てシャッタ16を開とさせるタイマである。
13を断続する。26はシャッタ16の開閉を制御する
シャッタ制御手段、28は蛍光測定実行の開始信号を出
力する実行命令手段、30は実行命令手段28の出力信
号により一定時間だけシャッタ制御手段26を作動させ
てシャッタ16を開とさせるタイマである。
(実施例)
第2図は本発明の一実施例として、マイクロコンピュー
タによる信号系を表わすものである。
タによる信号系を表わすものである。
32はシャッタ16の開閉動作や、測定データの処理を
行なうCPU、34はCPU32が使用するプログラム
を記憶しているROM、36は検出したデータなどを記
憶するRAM、38は時間計開の基準となるクロック信
号を発生するクロック発生回路である。CPU32、R
OM34、RAM36、クロック発生回路38はそれぞ
れバス40により相互に接続されている。バス40には
また、測光用光電子増倍管24からの検出信号をデジタ
ル信号に変換してこのマイクロコンピュータシステムに
取り入れるためのA/D変換器42、分光器6.22
(第7図)中の波長モータやスリットモータを駆動する
ためのインタフェース44、シャッタ16を駆動するた
めのインタフェース46及び測定動作を開始するための
信号その他の信号を入力するためのキーボード48が接
続されている。第1図で示されるタイマー30と駆動手
段26はこのマイクロコンピュータシステムにおいて実
現されている。第2図のバス40にはまた、表示手段と
してCRT (図示略)も接続されている。
行なうCPU、34はCPU32が使用するプログラム
を記憶しているROM、36は検出したデータなどを記
憶するRAM、38は時間計開の基準となるクロック信
号を発生するクロック発生回路である。CPU32、R
OM34、RAM36、クロック発生回路38はそれぞ
れバス40により相互に接続されている。バス40には
また、測光用光電子増倍管24からの検出信号をデジタ
ル信号に変換してこのマイクロコンピュータシステムに
取り入れるためのA/D変換器42、分光器6.22
(第7図)中の波長モータやスリットモータを駆動する
ためのインタフェース44、シャッタ16を駆動するた
めのインタフェース46及び測定動作を開始するための
信号その他の信号を入力するためのキーボード48が接
続されている。第1図で示されるタイマー30と駆動手
段26はこのマイクロコンピュータシステムにおいて実
現されている。第2図のバス40にはまた、表示手段と
してCRT (図示略)も接続されている。
第3図にキーボード48とCRT50を示す。
キーボード48のキー52は測定モードを選択するため
のキーであり、CRT50上のメニューから本発明に関
する定量モードを選択することができる。キー54はシ
ャッタ16を開いている時間を設定するためのキーであ
り、CRT50との対話で時間を設定することができる
。また、キー56は本実施例の装置が定量モードに入っ
たときに、定量測定を実行するための実行命令キーであ
る。
のキーであり、CRT50上のメニューから本発明に関
する定量モードを選択することができる。キー54はシ
ャッタ16を開いている時間を設定するためのキーであ
り、CRT50との対話で時間を設定することができる
。また、キー56は本実施例の装置が定量モードに入っ
たときに、定量測定を実行するための実行命令キーであ
る。
次に、本実施例の動作について第4図のフローチャート
を参照して説明する。
を参照して説明する。
まず、キーボード48のキー52により定量モードにモ
ード選択を行なう(ステップSt)、次に実行命令キー
56が押されると(ステップS2)、シャッタ16が開
き(ステップS3)、A/D変換器42を経て測光用光
電子増倍管24からデータを取り込み、RAM36に記
憶していく(ステップS4)。そして設定された一定時
間が経過すると(ステップS 5) 、CPU32から
の信号によりシャッタ16が閉じられる(ステップS6
)。
ード選択を行なう(ステップSt)、次に実行命令キー
56が押されると(ステップS2)、シャッタ16が開
き(ステップS3)、A/D変換器42を経て測光用光
電子増倍管24からデータを取り込み、RAM36に記
憶していく(ステップS4)。そして設定された一定時
間が経過すると(ステップS 5) 、CPU32から
の信号によりシャッタ16が閉じられる(ステップS6
)。
その後、取り込んだ検出データの演算が行なわれる(ス
テップS7)。そして試料セルの試料を交換した後(ス
テップS8)、再び実行命令キー56を押すと(ステッ
プS2)、同様にして一定時間だけシャッタ16が開け
られて蛍光測定が行なわれる。
テップS7)。そして試料セルの試料を交換した後(ス
テップS8)、再び実行命令キー56を押すと(ステッ
プS2)、同様にして一定時間だけシャッタ16が開け
られて蛍光測定が行なわれる。
第5図に本実施例の動作を示す。
実行命令キー56を入力すると、初期状態では閉じてい
て励起光を遮断しているシャッタ16が開き、設定され
たT1時間だけ試料に励起光を照射し、このT+待時間
うち一定間隔でA/D変換器42を介してCPU32に
データを取り込み、積算平均化した後、表示器及びプリ
ンタに測定値を印字出力する。T1時間が経過した後、
シャッタ16を閉じて試料に励起光を照射しないように
し、再び実行命令キー56が押されるのを待つ状態とな
る。
て励起光を遮断しているシャッタ16が開き、設定され
たT1時間だけ試料に励起光を照射し、このT+待時間
うち一定間隔でA/D変換器42を介してCPU32に
データを取り込み、積算平均化した後、表示器及びプリ
ンタに測定値を印字出力する。T1時間が経過した後、
シャッタ16を閉じて試料に励起光を照射しないように
し、再び実行命令キー56が押されるのを待つ状態とな
る。
なお、第3図ではCRT50が付属した装置を例示して
いるが、CRT50の付属していない装置であってもよ
い。
いるが、CRT50の付属していない装置であってもよ
い。
上記の実施例では試料交換を行なった後、実行命令キー
56を押すことによりシャッタ16が開き測定が行なわ
れるが、装置によっては試料交換を自動化したものもあ
る。その場合、実行命令スイッチ56が不要になり、試
料交換が行なわれたことを検出すると自動的にシャッタ
16が一定時間開き蛍光測定か行なわれていく。本発明
はそのような試料交換を自動化した装置に適用すること
も可能である。
56を押すことによりシャッタ16が開き測定が行なわ
れるが、装置によっては試料交換を自動化したものもあ
る。その場合、実行命令スイッチ56が不要になり、試
料交換が行なわれたことを検出すると自動的にシャッタ
16が一定時間開き蛍光測定か行なわれていく。本発明
はそのような試料交換を自動化した装置に適用すること
も可能である。
また、測定データを処理して印字したり出力する場合、
蛍光の強度として印字や出力を行なってもよいが、濃度
に変換して印字あるいは出力することもできる。その場
合、ブランク試料の蛍光強度をB、標準試料の蛍光強度
をSとし、標準試料濃度の入力値がCであるとすると、 (S−B)K=C となるKを求め、未知試料測定値FからCf= (F−
B)K を求め、このCfを未知試料濃度として印字又は出力す
ればよい。
蛍光の強度として印字や出力を行なってもよいが、濃度
に変換して印字あるいは出力することもできる。その場
合、ブランク試料の蛍光強度をB、標準試料の蛍光強度
をSとし、標準試料濃度の入力値がCであるとすると、 (S−B)K=C となるKを求め、未知試料測定値FからCf= (F−
B)K を求め、このCfを未知試料濃度として印字又は出力す
ればよい。
この場合の動作のフローは第6図に示されるようになる
。まず、ブランク試料を測定し、標準試料を測定した後
、標準試料濃度を入力する(ステップSLl〜513)
。その後、未知試料を測定し、濃度に変換して印字出力
する操作を繰り返す(ステップSL4〜515)。ブレ
ークキーによりこのプログラムから抜ける(ステップ8
16)。
。まず、ブランク試料を測定し、標準試料を測定した後
、標準試料濃度を入力する(ステップSLl〜513)
。その後、未知試料を測定し、濃度に変換して印字出力
する操作を繰り返す(ステップSL4〜515)。ブレ
ークキーによりこのプログラムから抜ける(ステップ8
16)。
濃度を印字又は出力する場合、vA$試料の一点につい
てKを求める方法の他に、複数の異なる濃度の標準試料
を測定し、それらのvA?Is試料濃度を入力して最小
自乗法により1次〜n次式検量線を求め、その検量線を
使用して未知試料の濃度を算出するようにすることもで
きる。
てKを求める方法の他に、複数の異なる濃度の標準試料
を測定し、それらのvA?Is試料濃度を入力して最小
自乗法により1次〜n次式検量線を求め、その検量線を
使用して未知試料の濃度を算出するようにすることもで
きる。
(発明の効果)
本発明によれば、まず試料室に試料をセットした後、励
起光のシャッタを閉じておき、実行命令信号を入力する
ことにより一定の時間だけシャッタを自動的に開けるよ
うにしたので、光照射により光化学反応を起こすような
試料であっても精度よく定量分析を行なうことができる
。
起光のシャッタを閉じておき、実行命令信号を入力する
ことにより一定の時間だけシャッタを自動的に開けるよ
うにしたので、光照射により光化学反応を起こすような
試料であっても精度よく定量分析を行なうことができる
。
第1図は本発明の構成を示すブロック図、第2図は本発
明の一実施例を示すブロック図、第3図は同実施例にお
けるキーボードとCRTを示す正面図、第4図は一実施
例の動作を示すフローチャート、第5図は一実施例の動
作を概略的に示すタイミング図、第6図は他の実施例の
動作を示すフローチャート、第7図は分光蛍光光度計の
基本構成を示す斜視図である。 12・・・・・・試料セル。 16・・・・・・シャッタ。 26・・・・・・シャッタ制御手段、 28・・・・・・実行命令手段、 30・・・・・・タイマ。
明の一実施例を示すブロック図、第3図は同実施例にお
けるキーボードとCRTを示す正面図、第4図は一実施
例の動作を示すフローチャート、第5図は一実施例の動
作を概略的に示すタイミング図、第6図は他の実施例の
動作を示すフローチャート、第7図は分光蛍光光度計の
基本構成を示す斜視図である。 12・・・・・・試料セル。 16・・・・・・シャッタ。 26・・・・・・シャッタ制御手段、 28・・・・・・実行命令手段、 30・・・・・・タイマ。
Claims (1)
- (1)試料セルに入射する励起光をシャッタにより断続
し、試料セル中の試料からの蛍光を分光して検出する蛍
光測定装置において、前記シャッタに設けられたシャッ
タ制御手段と、蛍光測定実行の開始信号を出力する実行
命令手段と、この実行命令手段の出力信号により一定時
間だけ前記シャッツタ制御手段を作動させてシャッタを
開とさせるタイマとを備えたことを特徴とする蛍光測定
装置。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP15256486A JPS638539A (ja) | 1986-06-27 | 1986-06-27 | 蛍光測定装置 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP15256486A JPS638539A (ja) | 1986-06-27 | 1986-06-27 | 蛍光測定装置 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS638539A true JPS638539A (ja) | 1988-01-14 |
Family
ID=15543239
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP15256486A Pending JPS638539A (ja) | 1986-06-27 | 1986-06-27 | 蛍光測定装置 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS638539A (ja) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0355738A2 (en) * | 1988-08-26 | 1990-02-28 | Hitachi, Ltd. | Fluorophotometer for use in automatic equipment of chemical analysis for measuring the intensity of fluorescence in the automatic equipment |
JP2005513497A (ja) * | 2002-01-03 | 2005-05-12 | カール ツァイス イエナ ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング | 試料担体上および/または試料担体中の蛍光性、ルミネセンス発光性および/または吸光性物質の同定のための方法および/または装置 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5649943A (en) * | 1979-09-21 | 1981-05-06 | Varian Associates | Method of and apparatus for measuring fluorescense |
US4291230A (en) * | 1979-03-07 | 1981-09-22 | Baxter Travenol Laboratories, Inc. | Fluorometric analyzer including shutter means for simultaneously shielding sample and photodetector during sample change |
-
1986
- 1986-06-27 JP JP15256486A patent/JPS638539A/ja active Pending
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4291230A (en) * | 1979-03-07 | 1981-09-22 | Baxter Travenol Laboratories, Inc. | Fluorometric analyzer including shutter means for simultaneously shielding sample and photodetector during sample change |
JPS5649943A (en) * | 1979-09-21 | 1981-05-06 | Varian Associates | Method of and apparatus for measuring fluorescense |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0355738A2 (en) * | 1988-08-26 | 1990-02-28 | Hitachi, Ltd. | Fluorophotometer for use in automatic equipment of chemical analysis for measuring the intensity of fluorescence in the automatic equipment |
EP0355738A3 (en) * | 1988-08-26 | 1991-02-27 | Hitachi, Ltd. | Fluorophotometer for use in automatic equipment of chemical analysis for measuring the intensity of fluorescence in the automatic equipment |
JP2005513497A (ja) * | 2002-01-03 | 2005-05-12 | カール ツァイス イエナ ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング | 試料担体上および/または試料担体中の蛍光性、ルミネセンス発光性および/または吸光性物質の同定のための方法および/または装置 |
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