JPS636070B2

JPS636070B2 -

Info

Publication number: JPS636070B2
Application number: JP1637082A
Authority: JP
Inventors: Sada Myasaka; Seigo Sawada; Kenichiro Nogata; Masahiko Mutai
Original assignee: Yakult Honsha Co Ltd
Current assignee: Yakult Honsha Co Ltd
Priority date: 1982-02-05
Filing date: 1982-02-05
Publication date: 1988-02-08
Also published as: JPS58134095A

Description

【発明の詳細な説明】本発明は新規なカンプトテシン誘導体に関する
ものである。更に詳細に説明すると、本発明は、
一般式〔式中、Ｘはニトロ基、アミノ基又はハロゲン原
子である〕で表わされる新規なカンプトテシン誘
導体に関するものである。カンプトテシンは落葉喬木喜樹
（Camptotheca acuminata Nyssaceae）等から
抽出・単離されるアルカロイドで、強力な核酸合
成阻害作用を有し、その作用は迅速かつ可逆性を
示すことが特徴で、既存の制癌剤と交叉耐性を示
さないという独特な作用機作をもつ抗腫瘍性物質
であり、マウス白血病L1210、ラツトウオーカー
256肉腫など実験移植癌に対して、強力な制ガン
効果を示すことが認められているが、毒性作用を
有するために、医薬品としての有用性がおのずか
ら、制限されている現状にある。そこで、このカンプトテシンを化学的に他の物
質に変換することすなわち、カンプトテシン誘導
体に変えることにより、制ガン活性を保持しなが
ら、毒性の低下を図るという試みが従来なされて
来た。しかしながら、カンプトテシンそれ自体が各種
有機溶剤に難溶であることや、カンプトテシンが
その化学構造中に有するヘテロ環に由来して親電
子置換反応に対する抵抗性を有することなどの理
由で、誘導体に変換するのにも、種々の障害があ
り、机上で企画するほどに新規な誘導体を得るこ
とは容易ではないのが実情である。本発明者らは先にカンプトテシンの10−位の修
飾について種々検討し、選択的に10−位に対し、
酸素原子、イオウ原子に係る官能基を導入するこ
とに成功したが、この方法では、窒素原子及びハ
ロゲン原子の導入は困難であり、また生成物の分
離、精製等においても、解決さるべき問題が存在
するため、さらに窒素原子、ハロゲン原子導入の
ための方法につき研究を行つたところ、驚くべき
ことにはカンプトテシンを酢酸中で、またはジオ
キサン−酢酸などの溶媒中で白金触媒により接触
還元し、得られる１・２・６・７−テトラヒドロ
カンプトテシンの１−位をアシル化し、次いで硫
硝酸により処理すると10位がニトロ化し得ること
そして、得られた１−アシル−10−ニトロ−１・
２・６・７−テトラヒドロカンプトテシンを出発
原料にして、前記の一般式で表わされる種々の新
規な10−置換カンプトテシン誘導体が得られるこ
とを見出した。本発明は、かかる知見に基いてなされたもので
ある。以下に、本発明は詳細に説明する。まず、本発
明に係る１−アシル−10−ニトロ−１・２・６・
７−テトラヒドロカンプトテシンは以下の方法に
よつて製造することができる。第一に行われるカンプトテシンのＢ環の還元
は、カンプトテシンを酢酸中で又はジオキサン−
塩酸中において、白金触媒の存在下に、常圧、常
温で水素添加することにより効率よく行うことが
できる。次に得られた１・２・６・７−テトラヒ
ドロカンプトテシンは、通常のアシル化剤で処理
すると、それを１−アシル化誘導体へ定量的に導
くことができる。得られた１−アシル−１・２・
６・７−テトラヒドロカンプトテシンを、濃硫酸
中硝酸を用いて処理しニトロ化すると、１−アシ
ル−10−ニトロ−１・２・６・７−テトラヒドロ
カンプトテシンが高収率で得られる。この１−アシル−10−ニトロ−１・２・６・７
−テトラヒドロカンプトテシンを出発原料に、以
下の方法により種々の新規な10−置換カンプトテ
シン又は10−置換テトラヒドロカンプトテシン誘
導体を製造することができる。１−アシル−10−ニトロ−１・２・６・７−テ
トラヒドロカプトテシンを酸又は塩基の存在下に
加水分解処理し、その加水分解生成物を酸化（芳
香核生成）することにより10−ニトロカンプトテ
シンが得られる。この酸化（芳香核生成）は、通
常の酸化法例えば、DDQ酸化、空気酸化又は硝
酸酸化等の方法により効率よく達成することがで
きる。このような方法によりカンプトテシンその
ものの硫・硝酸によるニトロ化では得ることので
きない10−ニトロカンプトテシンを、カンプトテ
シンから算出して、約50％の収率で得ることがで
きる。次に、10−ニトロ−１・２・６・７−テト
ラヒドロカンプトテシン又はその１−アシル体及
び10−ニトロカンプトテシンを塩酸中で鉄、又は
錫等金属を用いて還元又は接触還元の操作を行う
ことにより定量的にそのニトロ基を対応するアミ
ノ基に変換することができる。得られた10−アミ
ノ体はそのアミノ基をアシル化及びアルキル化す
ることにより10−アシルアミノ体又はアルキルア
ミノ体へ容易に導くことができる。こうして得ら
れた10−アミノ体はまたそのアミノ基をジアゾニ
ウム化してジアゾニウム塩へ導き、そのジアゾニ
ウム基をさらに種々の官能基に変換することがで
きる。例えば、硫酸水溶液中で10−アミノ体をジ
アゾ化し、次いで加温することにより10−ヒドロ
キシ置換体を得ることができ、また、ジアゾニウ
ム塩をメタノールで処理することにより10−メト
キシ置換体を得ることができる。10−ニトロカン
プトテシンより得た10−ヒドロキシカンプトテシ
ン及び10−メトキシカンプトテシンは、喜樹より
単離した標品とその各種スペクトルを比較するこ
とにより同定される。前記の10−アミノ体を、塩
酸又は臭化水素酸を用いてジアゾ化し、塩化第一
銅又は臭化第一銅で処理することにより、10−ク
ロロカンプトテシン又は10−ブロモカンプトテシ
ンを得ることができる。本発明方法によれば、喜樹等の植物から比較的
豊富に得ることのできるカンプトテシンを出発物
質として、元来微量成分であるところの10−ヒド
ロキシカンプトテシン等の薬理学的に興味深い各
種の10−位置換体を、カンプトテシンのＢ環の還
元体を経由して効率よく得ることができる。以下
に実施例を掲げ、本発明を更に具体的に説明する
が、本発明はかかる実施例に限定されるものでは
ない。実施例１ 10−ニトロカンプトテシン１−アセチル−10−ニトロ−１・２・６・７−
テトラヒドロカンプトテシン（373mg、0.937ｍ
mol）をジオキサン（30ml）に溶解し、DDQ
（446mg、1.968ｍmol）を加え、１時間煮沸還流
する。反応混合物は減圧で乾固し、残留物をクロ
ロホルム（300ml）に溶解し、それを水（200ml×
２）で洗い、クロロホルム層を硫酸マグネシウム
で乾燥し、過し、減圧で乾固すると、標記の化
合物が黄色の結晶として340mg（92.3％収率）得
られる。 m.p.（分解）243〜245℃〔CHCl₃より〕 NMR（DMSO−d₆中）δ：0.89（3H、ｔ、Ｊ＝７
Hz、−CH₂ ＣH₃）、1.87（2H、ｑ、Ｊ＝７Hz、−
CH₂CH₃）、5.28（2H、ｓ、Ｃ−５−Ｈ）、5.42
（2H、ｓ、Ｃ−17−Ｈ）、6.51（1H、ｓ、Ｃ−
20−OH）、7.33（1H、ｓ、Ｃ−14−Ｈ）、7.83
（1H、ｄ・ｄ、Ｊ＝９Hz、２Hz、Ｃ−11−Ｈ）、
8.16（1H、ｄ、Ｊ＝９Hz、Ｃ−12−Ｈ）、8.25
（1H、ｄ、Ｊ＝２Hz、Ｃ−９−Ｈ）、8.64（1H、
ｓ、Ｃ−７−Ｈ）。 IR^KBr _naxνcm^-1：3430、1742、1656、1618、1592、
1530、1342、1158。 MSm／e393〔M⁺〕C₂₀H₁₅N₃O₆＝393として。実施例２ 10−アミノカンプトテシン 10−ニトロカンプトテシン（108mg、0.275ｍ
mol）をエタノール（30ml）−ジオキサン（20ml）
に溶解し、酸化白金（20mg）を加え、室温で30分
間、常圧で接触還元する。触媒を去し、反応混
合物を減圧で乾固すると10−アミノカンプトテシ
ンが黄褐色の固体として96mg（96.2％収率）が得
られる。 NMR（DMSO−d₉中）δ：0.88（3H、ｔ、Ｊ＝７
Hz、−CH₂ CH ₃）、1.86（2H、ｑ、Ｊ＝７Hz、−
CH₂CH₃）、5.17（2H、ｓ、Ｃ−５−Ｈ）、5.36
（2H、ｓ、Ｃ−17−Ｈ）、6.90（1H、ｄ、Ｊ＝
２Hz、Ｃ−９−Ｈ）、7.19（1H、ｓ、Ｃ−14−
Ｈ）、7.26（1H、ｄ・ｄ、Ｊ＝９Hz、２Hz、Ｃ
−11−Ｈ）、7.84（1H、ｄ、Ｊ＝９Hz、Ｃ−12
−Ｈ）、8.20（1H、ｓ、Ｃ−７−Ｈ）。 MSm／e363〔M⁺〕C₂₀H₁₇N₃O₄＝363として。実施例３ 10−クロロカンプトテシン１−アセチル−10−ニトロ−１・２・６・７−
テトラヒドロカンプトテシン（439mg、1.00ｍ
mol）をエタノール（30ml）−ジオキサン（20ml）
に溶かし、酸化白金（60mg）を加え、室温下、30
分間常圧接触還元する。触媒を去し、反応混合
物を減圧で乾固すると、１−アセチル−10−アミ
ノ−１・２・６・７−テトラヒドロカンプトテシ
ン（MS：ｍ／e409〔M⁺〕C₂₂H₂₃N₃O₅＝409とし
て）が得られる。これを12％塩酸（８ml）に溶か
し、その溶液に氷塩浴下に、亜硝酸ナトリウム
（104mg、1.50ｍmol）の水溶液を徐々に滴下して
いく。その滴下が終了した後、さらに氷塩浴中で
冷却下に、15分間撹拌する。その反応混合物を60
〜70℃に加温した塩化第一銅（521mg、5.00ｍ
mol）の17％塩酸（10ml）の溶液に滴下してゆ
く。滴下が終了した後、さらに60〜70℃で１時間
撹拌を続ける。その反応混合物を氷水（300ml）
で希釈し、クロロホルム（200ml×２）で抽出す
る。このクロロホルム層を硫酸マグネシウムで乾
燥し、過し、減圧で乾固すると、１−アセチル
−10−クロロ−１・２・６・７−テトラヒドロカ
ンプトテシン（MS：ｍ／e428〔M⁺〕、430〔Ｍ＋
２〕C₂₂H₂₁N₂O₅Cl＝428.5として）が得られる。
これを30％硫酸水溶液（20ml）に溶かし、1.5時
間、煮沸還流し、その反応混合物を氷水（200ml）
で希釈し、クロロホルム（150ml×３）で、抽出
する。このクロロホルム層を硫酸マグネシウムで
乾燥し、過し、減圧で乾固すると、10−クロロ
−１・２・６・７−テトラヒドロカンプトテシン
が得られる。これをジオキサン（30ml）に溶か
し、その溶液にDDQ（288mg、0.634ｍmol）を加
え、1.5時間煮沸還流する。その反応混合物を減
圧で乾固し、残留物をクロロホルム（300ml）に
溶解し、水（100ml×２）で洗い、そのクロロホ
ルム層を硫酸マグネシウムで乾燥し、過し、減
圧で乾固すると、標記の化合物が白色の結晶とし
て、184mg（48.0％収率、１−アセチル−10−ニ
トロ−１・２・６・７−テトラヒドロカンプトテ
シンより）得られる。 m.p.（分解）279〜280℃〔CHCl₃より〕 NMR（DMSO−d₆中）δ：0.89（3H、ｔ、Ｊ＝７
Hz、−CH₂CＨ ₃）、1.87（2H、ｑ、Ｊ＝７Hz、−
ＣＨ ₂CH₃）、5.28（2H、ｓ、Ｃ−５−Ｈ）、5.42
（2H、ｓ、Ｃ−17−Ｈ）、6.51（1H、ｓ、Ｃ−
20−OH）、7.33（1H、ｓ、Ｃ−14−Ｈ）、7.83
（1H、ｄ・ｄ、Ｊ＝９Hz、２Hz、Ｃ−11−Ｈ）、
8.16（1H、ｄ、Ｊ＝９Hz、Ｃ−12−Ｈ）、8.25
（1H、ｄ、Ｊ＝２Hz、Ｃ−９−Ｈ）、8.64（1H、
ｓ、Ｃ−７−Ｈ） IR^KBr _naxνcm^-1：3400、1745、1650、1585、1490、
1225、1155 MS：ｍ／e382〔M⁺〕、384〔Ｍ＋２〕
C₂₀H₁₅N₂O₄Cl＝382として。実施例４ 10−ブロモカンプトテシン１−アセチル−10−ニトロ−１・２・６・７−
テトラヒドロカンプトテシン（439mg、1.00ｍ
mol）をエタノール（30ml）−ジオキサン（20ml）
に溶かし、酸化白金（60mg）を加え、室温下に、
30分間接触還元する。触媒を去し、反応混合物
を減圧で乾固すると、１−アセチル−10−アミノ
−１・２・６・７−テトラヒドロカンプトテシン
（MS：ｍ／e409〔M⁺〕C₂₂H₂₃N₃O₅＝409として）
が得られる。これを24％臭化水素水（10ml）に溶
かし、その溶液に氷塩浴下、亜硝酸ナトリウム
（104mg、1.50ｍmol）の水溶液を徐々に滴下して
ゆく。滴下が終了した後、氷塩浴中で冷却下に、
15分間撹拌を続ける。反応混合物を60〜70℃に加
温した臭化第一銅（717mg、5.00ｍmol）の24％
臭化水素水（10ml）溶液に滴下してゆく。滴下終
了後、60〜70℃でさらに１時間撹拌を続ける。反
応混合物を氷水（200ml）で希釈し、クロロホル
ム（200ml×３）で抽出する。クロロホルム層を
硫酸マグネシウムで乾燥し、過し、減圧で乾固
すると、１−アセチル−10−ブロモ−１・２・
６・７−テトラヒドロカンプトテシン（MS：
ｍ／e472〔M⁺〕、474〔Ｍ＋２〕C₂₂H₂₁N₂O₅Br＝
473として）が得られる。これを30％硫酸水溶液
（20ml）に溶かし、１時間煮沸還流する。反応液
を氷水（200ml）で希釈し、クロロホルム（200ml
×３）で抽出する。クロロホルム層を硫酸マグネ
シウムで乾燥し、過し、乾固し、セライトにま
ぶし、シリカゲルカラムクロマトグラフイー（１
％MeOH−CHCl₃）を行なうと、10−ブロモ−
１・２・６・７−テトラヒドロカンプトテシン
（MS：ｍ／e430〔M⁺〕、432〔Ｍ＋２〕
C₂₀H₁₉N₂O₄Br＝431として）が得られる。これ
をジオキサン（20ml）に溶かし、その溶液に
DDQ（264mg、0.58ｍmol）を加え、40分間煮沸還
流する。その反応混合物を減圧で乾固し、残留物
をクロロホルム（300ml）に溶解し、水（200ml×
２）で洗い、クロロホルム層を硫酸マグネシウム
で乾燥し、過し、減圧で乾固し、セライトにま
ぶし、シリカゲルカラムクロマトグラフイー（１
％ピリジン−CHCl₃）により精製すると、標記の
化合物が白色の結晶として、155mg（36.3％収率、
１−アセチル−10−ニトロ−１・２・６・７−テ
トラヒドロカンプトテシンより計算）が得られ
る。 m.p.（分解）273〜275℃〔CHCl₃より〕 NMR（DMSO−d₆中）δ：0.89（3H、ｔ、Ｊ＝７
Hz、−CH₂CＨ ₃）、1.87（2H、ｑ、Ｊ＝７Hz、−
ＣＨ ₂CH₃）、5.28（2H、ｓ、Ｃ−５−Ｈ）、5.41
（2H、ｓ、Ｃ−17−Ｈ）、6.48（1H、ｓ、Ｃ−
20−OH）、7.34（1H、ｓ、Ｃ−14−Ｈ）、7.93
（1H、ｄ・ｄ、Ｊ＝９Hz、２Hz、Ｃ−11−Ｈ）、
8.09（1H、ｄ、Ｊ＝９Hz、Ｃ−12−Ｈ）、8.41
（1H、ｄ、Ｊ＝２Hz、Ｃ−９−Ｈ）、8.63（1H、
ｓ、Ｃ−７−Ｈ） IR^KBr _naxνcm^-1：3400、1750、1655、1590、1225、
1160。 MSｍ／e426〔M⁺〕、428〔Ｍ＋２〕C₂₀H₁₅N₂O₄Br
＝426として。参考例１ 10−ヒドロキシカンプトテシン 10−アミノカンプトテシン（50mg、0.138ｍ
mol）を10％硫酸水溶液（５ml）に溶解し、氷塩
浴下、亜硝酸ナトリウム（9.5mg、0.138ｍmol）
の水溶液を徐々に滴下していく。滴下終了後、氷
塩浴中で冷却下に、10分間撹拌を続ける。反応混
合物に濃硫酸（１ml）を加え、２時間煮沸還流す
る。反応混合物を氷水（200ml）で希釈し、クロ
ロホルム（200ml）を加え、分液ロートを用いて
振とうする。生じた乳濁状の溶液をセライト上に
取する。クロロホルム層には副反応により生じ
たカンプトテシンが抽出されるが、それは硫酸マ
グネシウムで乾燥し、過し、減圧乾固すること
により、カンプトテシン（８mg）が回収される。
一方、セライト上のクロロホルム−水不溶物を20
％MeOH−CHCl₃（200ml）で溶出し、減圧乾固
すると、標記の化合物が淡黄色結晶として、28mg
（66.5％収率）得られる。 m.p.（分解）270〜272℃〔Pyridine−MeOHか
ら〕 NMR（DMSO−d₆中）δ：0.88（3H、ｔ、Ｊ＝７
Hz、−CH₂CＨ ₃）、1.86（2H、ｑ、Ｊ＝７Hz、−
ＣＨ ₂CH₃）、5.22（2H、ｓ、Ｃ−５−Ｈ）、5.40
（2H、ｓ、Ｃ−17−Ｈ）、6.47（1H、ｓ、Ｃ−
20−OH）、7.2（2H、ｍ、Ｃ−９−Ｈ and Ｃ
−14−Ｈ）、7.41（1H、ｄ・ｄ、Ｊ＝９Hz、２
Hz、Ｃ−11−Ｈ）、8.01（1H、ｄ、Ｊ＝９Hz、
Ｃ−12−Ｈ）、8.43（1H、ｓ、Ｃ−７−Ｈ） IR^KBr _naxνcm^-1：3450、1720、1655、1590、1505、
1265

Claims

【特許請求の範囲】１一般式〔式中、Ｘはニトロ基、アミノ基又はハロゲン原
子である〕で表わされる新規なカンプトテシン誘
導体。