JPH0312069B2

JPH0312069B2 -

Info

Publication number: JPH0312069B2
Application number: JP57160944A
Authority: JP
Inventors: Sada Myasaka; Seigo Sawada; Kenichiro Nogata; Masahiko Mutai
Original assignee: Yakult Honsha Co Ltd
Current assignee: Yakult Honsha Co Ltd
Priority date: 1982-09-17
Filing date: 1982-09-17
Publication date: 1991-02-19
Also published as: JPS5951288A

Description

【発明の詳細な説明】本発明は新規なカンプトテシン誘導体及びその
製造法に関する。更に詳しく言えば、本発明は、式、で表わされる新規物質９−ニトロカンプトテシン
を提供するものであり、また、カンプトテシンを
濃硫酸中、室温で小過剰の濃硝酸で処理すること
を特徴とする上記式で表わされる新規物質、９−
ニトロカンプトテシンの製造法を提供するもので
ある。カンプトテシンは落葉喬木喜樹
（Camptotheca acuminata Nyssaceae）等から
抽出・単離されるアルカロイドで、強力な核酸合
成阻害作用を有し、その作用は迅速且つ可逆性を
示すことが特徴で、既存の制癌剤と交叉耐性を示
さないという独特な作用機作をもつ抗腫瘍性物質
であり、マウス白血病L1210、ラツトウオーカー
256肉腫など実験移植癌に対して、強力な制ガン
効果を示すことが認められているが、毒性作用を
有するために、医薬品としての有用性がおのずか
ら、制限されている現状にある。そこで、このカンプトテシンを化学的に他の物
質に変換することすなわち、カンプトテシン誘導
体に変えることにより、制ガン活性を保持しなが
ら、毒性の低下を図るという試みが従来なされて
来た。しかしながら、カンプトテシンそれ自体が各種
有機溶剤に難溶であることや、カンプトテシンが
その化学構造中に有するヘテロ環に由来して親電
子置換反応に対する抵抗性を有することなどの理
由で、誘導体に変換するのにも、種々の障害があ
り、机上で企画するほどに新規な誘導体を得るこ
とは容易ではないのが実情である。本発明者らは先に、カンプトテシンを出発原料
に用いてその化学的修飾による種々の誘導体の合
成を試み、カンプトテシンの接触還元で得られる
１，２，６，７−テトラヒドロカンプトテシンを
用いることによりカンプトテシンの通常のニトロ
化では得ることのできない10−ニトロ−又は11−
ニトロ−カンプトテシンを製造することに成功し
た。これらの化合物の有するニトロ基は還元反応
によりアミノ基に変換することができ、またこの
アミノ基をジアゾ化反応に付し、ヒドロキシル
基、ハロゲン等に変換することが可能であり、そ
れにより、種々の置換基を10位または11位に導入
したカンプトテシン誘導体を合成することに成功
した。カンプトテシンのニトロ化体に関しては、この
ほか、中国の潘百川（pan Pei−chuan）らによ
り硫硝酸による12−ニトロカンプトテシンの合成
が報告されているが、９−ニトロカンプトテシン
については、いまだ報告例はない。カンプトテシンの９位置換誘導体としては天然
より単離された９−メトキシカンプトテシンが知
られているのみであつて、これは、カンプトテシ
ンと同程度の強い制ガン活性を示すが天然物にお
ける微量成分であるため、これについては充分な
検討はされていない。本発明者らは、カンプトテシンの９位置換誘導
体の活性の興味から９位の化学的修飾について実
験研究したところ、カンプトテシンを硫酸中小過
剰の濃硝酸で注意深くニトロ化を行うと定量的に
ニトロ化が進行し、得られるモノニトロ体をシリ
カゲルカラムクロマトグラフイーで分離精製する
と、60〜70％の既知の12−ニトロカンプトテシン
と共に９−ニトロカンプトテシンが30〜40％の良
好な収率で得られることを見出した。本発明は、
かかる知見に基いてなされたものである。以下に本発明を詳細に説明する。まず、本発明
に係る９−ニトロカンプトテシンの製法につき述
べる。本発明の９−ニトロカンプトテシンの製造法
は、カンプトテシンを濃硫酸中で、小過剰の濃硝
酸で処理することを特徴とする。この製造法の好
ましい態様例を説明すると、まず、カンプトテシ
ンを濃硫酸に溶解し、氷冷下に、これに、カンプ
トテシンに対して数倍当量の濃硝酸をゆつくり加
える。次いで、これを室温で、撹拌する。反応は
24〜72時間で終了するが、生成した反応液を数倍
量の水にあけ、クロロホルムを用いて数回抽出す
る。このクロロホルム層を無水硫酸マグネシウム
で乾燥した後、溶媒を減圧乾固し、残留物を約
100倍量のシリカゲルクロマトグラフイー（クロ
ロホルム）で分離精製すると60〜70％の12−ニト
ロカンプトテシンと共に30〜40％の収率で９−ニ
トロカンプトテシンが得られる。この９−ニトロカンプトテシンは、種々の９−
置換カンプトテシン誘導体を合成するための重要
な中間体である。この９−ニトロカンプトテシン
を出発物質として用いて、既知のもしくは新規な
９−置換カンプトテシンを、例えば以下の如くし
て合成することができる。９−ニトロカンプトテシンは、これを塩酸中で
鉄、又は錫等の金属による還元又は接触還元に付
することにより、そのニトロ基をアミノ基に変換
し、定量的に対応する９−アミノ体に変換するこ
とができる。この９−アミノ体はそのアミノ基を
アシル化あるいはアルキル化することにより９−
アシルアミノ体又は９−アルキルアミノ体へ導く
ことができる。この９−アミノ体はまたジアゾニ
ウム塩に導くことによりそのアミノ基を種々の他
の官能基に変換することができる。例えば、この
９−アミノ体を硫酸水溶液中でジアゾ化し、次い
で加温することにより９−ヒドロキシ置換体に、
またそのヒドロキシル基をアシル化またはアルキ
ル化することにより９−アシロキシ体又は９−ア
ルコキシ体に変換することができる。又上記のジ
アゾニウム塩をメタノールで処理することにより
９−メトキシ置換体を得ることができる。また、
上記の９−アミノ体を塩酸中又は臭化水素酸中で
ジアゾ化し、次いで塩化第一銅又は臭化第一銅で
処理することにより９−クロロカンプトテシン又
は９−ブロモカンプトテシンを得ることができ
る。以下に本発明の実施例ならびに各種９−置換カ
ンプトテシン製造の参考例を掲げるが、本発明は
これら実施例に限定されるものではない。実施例９−ニトロカンプトテシンの製造カンプトテシン（3.00ｇ、8.62mmol）を濃硫
酸（150ml）に溶かし、氷冷下、61％硝酸（ｄ：
1.38）（3.23ml、43.10mmol）を撹拌しながら、ゆ
つくり滴下する。滴下終了後、室温で４日間撹拌
する。反応液を氷水（1500ml）で希釈し、クロロ
ホルムで抽出（1500ml×３）する。このクロロホ
ルム層を硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧乾
固し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフ
イー（CHCl₃）にて精製すると12−ニトロカンプ
トテシン（2.230mg、65.7％）とともに標記化合
物（1.062mg、31.3％）が得られる。 m.p.190〜192℃（分解）（AcOEtより） MS：ｍ／e393〔M⁺〕（C₂₀H₁₅N₃O₆＝393） IRν^KBr _naxcm^-1：3400，1740，1655，1600，1525，
1460，1382，1340，1230，1150，1050 NMR（DMSO−d₆中）δ：0.89（3H，ｔ，Ｊ＝７
Hz，−CH₂CＨ ₃）、1.88（2H，ｑ，Ｊ＝７Hz，
−ＣＨ ₂CH₃）、5.34（2H，ｓ，Ｃ−５−Ｈ）、
5.43（2H，ｓ，Ｃ−17−Ｈ）、6.52（1H，ｓ，
Ｃ−20−OH）、7.39（1H，ｓ，Ｃ−14−Ｈ）、
8.02（1H，ｍ，Ｃ−11−Ｈ）、8.47〜8.57
（2H，ｍ，Ｃ−10−ＨおよびＣ−12−Ｈ）、
9.15（1H，ｓ，Ｃ−７−Ｈ）参考例１９−アミノカンプトテシンの製造９−ニトロカンプトテシン（100mg、
0.254mmol）をエタノール（30ml）、ジオキサン
（20ml）の混合溶媒に溶解し、酸化白金（20mg）
を加え、１時間、常温、常圧で接触還元する。触
媒を去し、溶媒を減圧乾固すると標記化合物が
定量的に得られる。 MS：ｍ／e363〔M⁺〕（C₂₀H₁₇N₃O₄＝363） IRν^KBr _naxcm^-1：3490，3390，1745，1650，1605，
1690，1685，1160，810 NMR（DMSO−d₆中）δppm；0.91（3H，ｔ，Ｊ
＝7.5Hz）、1.86（2H，ｑ，Ｊ＝7.5Hz）、5.23
（2H，ｓ）、5.38（2H，ｄ，Ｊ＝7.5Hz）、6.75
〜8.22（5H，ｍ）、7.33（1H，ｓ）、8.81（1H，
ｓ）。参考例２９−アセトアミノカンプトテシンの製造９−アミノカンプトテシン（10mg、
0.028mmol）をクロロホルム（20ml）に懸濁さ
せ、これにピリジン（0.5ml）と無水酢酸（0.1
ml）を加え、室温で１時間撹拌する。その後、溶
媒を減圧乾固すると標記化合物（９mg、79.4％）
が得られる。 MS ｍ／ｅ；405〔M⁺〕（C₂₂H₁₉N₃O₅＝405.） NMR（DMSO−d₆中）δppm；0.91（3H，ｔ，Ｊ
＝7.5Hz）、1.88（2H，ｑ，Ｊ＝7.5Hz）、2.11
（3H，ｓ）、5.22および5.41（two2H′s，ｓ）、
6.43（1H，ｓ）、7.22（1H，ｓ）、7.30〜7.80
（3H，ｍ）、8.85（1H，ｓ）、10.52（1H，ｓ）。参考例３９−ジメチルアミノカンプトテシンの製造９−アミノカンプトテシン（10mg、
0.028mmol）をアセトン（10ml）に懸濁させこれ
に無水炭酸カリウム（30mg）とヨウ化メチル（１
ml）を加え室温で30分撹拌する。その後、不溶物
を過して除き、液を乾固すると標記化合物
（８mg、72.9％）が得られる。 MS ｍ／ｅ；391（M⁺〕（C₂₂H₂₁N₃O₄＝391.）参考例４９−ヒドロキシカンプトテシンの製造９−ニトロカンプトテシン（100mg、0.254mmol）
を接触還元し、得られる９−アミノカンプトテシ
ンを10％硫酸に溶かし、これを氷塩浴下、撹拌し
ながら、亜硝酸ナトリウム（19mg、0.280mmol）
の水溶液をゆつくり加え、その後15分間撹拌し、
次に反応液を熱水（100ml）中に注ぎ、30分間煮
沸還流する。反応液を氷水（100ml）で希釈し、
クロロホルム（100ml）加え振とうする。析出し
た沈殿を取し、シリカゲルカラムクロマトグラ
フイーにて精製すると標記化合物（32mg、34.5
％）が得られる。 m.p.＞300℃（Pyridine−CH₃OHより） MS ｍ／ｅ；364〔M⁺〕（C₂₀H₁₆N₂O₅＝364.） NMR（DMSO−d₆中）δppm；0.92（3H，ｔ，Ｊ
＝7.5Hz）、1.87（2H，ｑ，Ｊ＝7.5Hz）、5.25お
よび5.40（two 2H′s，ｓ）、7.10〜7.75（3H，
ｍ）、7.36（1H，ｓ）、8.84（1H，ｓ）。参考例５９−アセトキシカンプトテシンの製造９−ヒドロキシカンプトテシン（10mg、
0.027mmol）をクロロホルム（20ml）に懸濁し、
これにピリジン（１ml）と無水酢酸（0.2ml）を
加え室温で２時間撹拌する。その後、溶媒を減圧
乾固すると標記化合物（９mg、82.1％）が得られ
る。 m.p.205〜207℃（CHCl₃−ｎ−hexaneより） MS ｍ／ｅ；406〔M⁺〕（C₂₂H₁₈N₂O₆＝406.） NMR（DMSO−d₆中）δppm；0.90（3H，ｔ，Ｊ
＝7.5Hz）、1.90（2H，ｑ，Ｊ＝7.5Hz）、2.12
（3H，ｓ）、5.27（2H，ｓ）、5.39（2H，ｓ）、
6.41（1H，ｓ）、7.40（1H，ｓ）、7.40〜8.23
（3H，ｍ）、8.71（1H，ｓ）。参考例６９−メトキシカンプトテシンの製造９−ヒドロキシカンプトテシン（20mg、
0.055mmol）をメタノールに懸濁させ、これに
0.6％ジアゾメタンエーテル溶液（10ml）を加え、
室温で３時間撹拌する。その後、溶媒を減圧乾固
すると標記化合物（21mg、100％）が得られる。 m.p.226〜228℃（分解）（CH₂Cl₂−CH₃OHより） MS：ｍ／e378〔M⁺〕（C₂₁H₁₈N₂O₅＝378） IRν^KBr _naxcm^-1：3400，1750，1655，1610，1590，
1365，1265，1230，1195，1155，1140，
1105，810 NMR（DMSO−d₆中）δ：0.89（3H，ｔ，Ｊ＝８
Hz，−CH₂CＨ ₃）、1.87（2H，ｑ，Ｊ＝８Hz，−Ｃ
Ｈ₂CH₃）、4.04（3H，ｓ，Ｃ−９−OCＨ ₃）、5.25
（2H，ｓ，Ｃ−５−Ｈ）、5.42（2H，ｓ，Ｃ−17
−Ｈ）、6.49（1H，ｓ，Ｃ−20−OH）、7.10〜7.19
（1H，ｍ，Ｃ−11−Ｈ）、7.32（1H，ｓ，Ｃ−14
−Ｈ）、7.73〜7.76（2H，ｍ，Ｃ−10−ＨおよびＣ
−12−Ｈ）、8.83（1H，ｓ，Ｃ−７−Ｈ）参考例７９−エトキシカンプトテシンの製造９−ヒドロキシカンプトテシン（50mg、
0.137mmol）をDMF（10ml）に溶解し、これに無
水炭酸カリウム（50mg）と臭化エチル（２ml）を
加え室温で５時間撹拌する。その後、過により
不溶物を除き、液を減圧乾固し残留物をシリカ
ゲルカラムクロマトグラフイーにより精製すると
標記化合物（35mg、65.2％）が得られる。 m.p.218〜221℃（CH₂Cl₂より） MS ｍ／ｅ；392〔M⁺〕（C₂₂H₂₀N₂O₅＝392） NMR（DMSO−d₆中）δppm；0.89（3H，ｔ，Ｊ
＝7.5Hz）、1.38（3H，ｔ，7.5Hz）、1.87（2H，
ｑ，Ｊ＝7.5Hz）、3.88（2H，ｑ，Ｊ＝7.5Hz）、
5.27および5.40（two 2H′s，ｓ）、6.45（1H，
ｓ）、7.33（1H，ｓ）、7.09〜7.78（3H，ｍ）、
8.82（1H，ｓ）。参考例８９−ｎ−ブトキシカンプトテシンの製造９−ヒドロキシカンプトテシン（50mg、
0.137mmol）をDMF（10ml）に溶解し、これに無
水炭酸カリウム（50mg）と臭化ｎ−ブチル（２
ml）を加え、室温で５時間撹拌する。その後、
過により不溶物を除き、液を減圧乾固し、残留
物をシリカゲルカラムクロマトグラフイーにより
精製すると標記化合物（42mg、73.0％）が得られ
る。 m.p.236〜238℃（CH₂Cl₂−CH₃OHより） ms ｍ／ｅ；420〔M⁺〕（C₂₄H₂₄N₂O₅＝420） NMR（DMSO−d₆中）δppm；0.91（3H，ｔ，Ｊ
＝7.5Hz）、1.02（3H，ｔ，7.5Hz）、1.10〜1.18
（4H，ｍ）、1.90（2H，ｑ，Ｊ＝7.5Hz）、3.70
（2H，ｔ，Ｊ＝7.5Hz）、5.26および5.39（two
2H′s，ｓ）、6.42（1H，ｓ）、7.31（1H，ｓ）、
7.00〜7.80（3H，ｍ）、8.75（1H，ｓ）。参考例９９−クロロカンプトテシンの製造９−ニトロカンプトテシン（100mg、
0.254mmol）を接触還元して得られる９−アミノ
カンプトテシンを14％塩酸（８ml）に溶かし、氷
塩浴下、撹拌しながら、亜硝酸ナトリウム（19
mg、0.250mmol）の水溶液を徐々に加えていく。
滴下終了後、15分間撹拌したのち、このジアゾニ
ウム塩水溶液を、60〜70℃に加温した塩化第一銅
（125mg、1.270mmol）の18％塩酸水溶液（10ml）
中に徐々に滴下していく。滴下終了後、１時間撹
拌を続ける。反応液を氷水（200ml）で希釈し、
クロロホルムで抽出（150ml×３）する。このク
ロロホルム層を硫酸マグネシウムで乾燥したの
ち、減圧留去すると、標記化合物（37.5mg、38.5
％収率）が得られる。 m.p.257〜260℃（分解）（AcOEtより） MS：ｍ／e382〔M⁺〕、384〔Ｍ＋２〕
（C₂₀H₁₅N₂O₄Cl＝382） IRν^KBr _naxcm^-1：3430，1735，1655，1605，1585，
1230，1150，1045 NMR（DMSO−d₆中）δ：0.88（3H，ｔ，Ｊ＝７
Hz、−CH₂CＨ ₃）、1.87（2H，ｑ，Ｊ＝７Hz，
−ＣＨ ₂CH₃）、5.32（2H，ｓ，Ｃ−５−Ｈ）、
5.43（2H，ｓ，Ｃ−17−Ｈ）、6.51（1H，ｓ，
Ｃ−20−OH）、7.37（1H，ｓ，Ｃ−14−Ｈ）、
7.83〜7.89（2H，ｍ，Ｃ−10−ＨおよびＣ−
12−Ｈ）、8.12〜8.24（1H，ｍ，Ｃ−11−Ｈ）、
8.93（1H，ｓ，Ｃ−７−Ｈ）参考例 10 ９−ブロモカンプトテシンの製造９−ニトロカンプトテシン（100mg、
0.254mmol）を接触還元して得られる９−アミノ
カンプトテシンを15％臭化水素水（８ml）に溶か
し、氷塩浴下、撹拌しながら、亜硝酸ナトリウム
（19mg、0.280mmol）の水溶液を徐々に加えてい
く。滴下終了後、15分間撹拌したのち、このジア
ゾニウム塩水溶液を、60〜70℃に加温した臭化第
一銅（182mg、1.270mmol）の24％臭化水素水溶
液（10ml）中に徐々に滴下していく。滴下終了
後、１時間撹拌を続ける。反応液を氷水（200ml）
で希釈し、クロロホルムで抽出（150ml×３）す
る。このクロロホルム層を硫酸マグネシウムで乾
燥したのち、減圧留去すると、標記化合物（63
mg、58.0％収率）が得られる。 m.p.260〜262℃（分解）（AcOEtより） MS：ｍ／e426〔M⁺〕、428〔Ｍ＋２〕
（C₂₀H₁₅N₂O₄Br＝426） IRν^KBr _naxcm^-1：3430，1735，1655，1605，1585，
1235，1160，1045 NMR（DMSO−d₆中）δ：0.89（3H，ｔ，Ｊ＝７
Hz，−CH₂CH₃）、1.87（2H，ｑ，Ｊ＝７Hz，
−ＣＨ ₂CH₃）、5.33（2H，ｓ，Ｃ−５−Ｈ）、
5.43（2H，ｓ，Ｃ−17−Ｈ）、6.52（1H，ｓ，
Ｃ−20−OH）、7.37（1H，ｓ，Ｃ−14−Ｈ）、
7.78（1H，ｔ，Ｊ＝８Hz，Ｃ−11−Ｈ）、8.03
〜8.87（2H，ｍ，Ｃ−10−ＨおよびＣ−12−
Ｈ）、8.88（1H，ｓ，Ｃ−７−Ｈ）【特許請求の範囲】１一般式［式中Ｘはアミノ基、アルキルアミノ基、アル
カノイルアミノ基、ヒドロキシル基、−OR基
（Ｒはアルカノイル基、又は低級アルキル基（た
だし、メチル基を除く）を示す）又はハロゲン原
子］で表わされる新規なカンプトテシン誘導体。